TW202233634A - 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑 - Google Patents

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Abstract

本發明提供囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白(Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator；CFTR)之調節劑、含有至少一種此類調節劑之醫藥組成物、使用此類調節劑及醫藥組成物來治療囊腫纖維化之方法及製備此類調節劑之方法。

Description

囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
本發明係關於囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白(Transmembrane Conductance Regulator；CFTR)之調節劑；含有該等調節劑之醫藥組成物；使用此類調節劑及醫藥組成物來治療囊腫纖維化及CFTR介導之病症之方法；及用於製備此類調節劑之方法。
囊腫纖維化(Cystic fibrosis；CF)為影響全世界大致83,000名兒童及成人之隱性遺傳疾病。儘管CF之治療有進展，但無法治癒。
在患有CF之患者中，在呼吸上皮中內源性表現之CFTR的突變引起頂端陰離子分泌減少，引起離子及流體輸送不平衡。所引起之陰離子輸送減少引起肺中之黏液累積增加及伴隨的微生物感染，最終導致CF患者之死亡。除呼吸疾病之外，CF患者典型地遭遇腸胃問題及胰臟功能不全，若不進行治療，則會引起死亡。另外，大部分患有囊腫纖維化之男性不育，且患有囊腫纖維化之女性的生育力降低。
CFTR基因之序列分析已揭示多種致病突變(Cutting, G. R.等人(1990) Nature 346:366-369; Dean, M.等人(1990) Cell 61:863:870；以及Kerem, B-S等人(1989) Science 245:1073-1080; Kerem, B-S等人(1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447-8451)。迄今為止，已識別出CF基因之大於2000個突變；當前，CFTR2資料庫含有關於僅322種此等經識別突變之資訊，具有足夠證據將281種突變定義為疾病的。最普遍致病突變為CFTR胺基酸序列之位置508處之苯丙胺酸的刪除且通常被稱為F508del突變。此突變發生在囊腫纖維化之許多病例中，且與嚴重疾病相關。
CFTR為在包括吸收性及分泌性上皮細胞之多種細胞類型中表現的cAMP/ATP介導之陰離子通道，其中其調控跨膜之陰離子通量，以及其他離子通道及蛋白質之活性。在上皮細胞中，CFTR之功能正常對維持包括呼吸道及消化組織之全身電解質輸送為至關重要的。CFTR由編碼由串聯重複跨膜域組成之蛋白質的約1480個胺基酸構成，該等域各自含有六個跨膜螺旋及核苷酸結合域。兩個跨膜域由具有調節通道活性及細胞遷移的多個磷酸化位點之大型極性調節(R)-域連接。
氯離子輸送藉由存在於頂端膜上之上皮鈉離子通道(epithelial sodium channel；ENaC)及CFTR，及在細胞底外側表面上表現之Na +-K +-ATP酶泵及Cl -通道的協調活性發生。來自內腔側之氯離子的二級主動輸送導致胞內氯離子累積，其可接著經由Cl -通道被動離開細胞，引起向量輸送。Na +/2Cl -/K +共轉運體、Na +-K +-ATP酶泵及底外側表面上之底外側膜K +通道及內腔側上之CFTR之配置協調氯離子分泌。因為水絕不可能自己主動輸送，所以其跨上皮之流動視鈉及氯離子總體流動產生的微小經上皮滲透梯度而定。
最近已鑑別出多種CFTR調節劑。此等調節劑之特徵可為例如增效劑、校正劑、增效劑增強劑/輔增效劑、擴增劑、通讀藥劑及核酸療法。增加上皮細胞表面處之突變型及野生型CFTR之通道閘控活性之CFTR調節劑被稱為增效劑。校正劑改良錯誤的蛋白質加工且引起向上皮細胞表面運輸。Ghelani及Schneider-Futschik (2020) ACS Pharmacol. Transl. Sci. 3:4-10。存在三種經美國FDA批准用於治療囊腫纖維化之CFTR校正劑。然而，尚未發現利用一些CFTR校正劑之單一療法足夠有效，且因此需要與增效劑的組合療法來增強CFTR活性。當前僅存在一種經批准用於治療囊腫纖維化之CFTR增效劑。因此，儘管囊腫纖維化之治療已藉由此等新的小分子CFTR調節劑轉型，但需要新的且更佳的調節劑來預防疾病進展、降低囊腫纖維化之嚴重程度及其他CFTR介導之疾病，以及治療此等疾病之更嚴重形式。
本發明之一個態樣提供新穎化合物，其包括式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 及 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及前述中之任一者的醫藥學上可接受之鹽。
舉例而言，式 I化合物可描繪為：
Figure 02_image003
I， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N( R X1 )-及
Figure 02_image004
； 環 A為4至6員雜環基，其視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基及側氧基之基團取代； R X1 係選自H、C 1-C 6烷基((視情況經1-3個獨立地選自羥基、側氧基、-O R X2 及-N( R X2 ) 2之基團取代)及C 3-C 8環烷基； 各 R X2 係獨立地選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-、-O-、-CO-、-N R YN -及
Figure 02_image006
，其中各 R YN 係獨立地選自H、C 1-C 4烷基及CO 2 R YN1 ，其中各 R YN1 係獨立地選自C 1-C 4烷基及C 3-C 6環烷基； 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-O R Y1 、-CO 2 R Y1 、-CO R Y1 、-CON( R Y1 ) 2及-N( R Y1 ) 2； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基； 環 B係選自： ▪  C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、C 1-C 6烷基及C 1-C 6烷氧基之基團取代)， ▪  C 3-C 8環烷基， ▪  5至10員雜芳基，及 ▪  3至6員雜環基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)； 各 Q係獨立地選自： ▪  C 1-C 6烷基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o 側氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及-OCF 3之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 3-C 8環烷基，其視情況經1-3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、-NH 2及-NHCOMe之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 6-C 10芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及羥基之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基，其視情況經1-4個獨立地選自以下之基團取代： ▪  鹵素， ▪  C 3-C 8環烷基(視情況經CF 3取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、CF 3、OCF 3及C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 6-C 10芳基， ▪  5至10員雜芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個CF 3基團取代)，及 o 3至10員雜環基， ▪  3至10員雜環基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自側氧基及C 3-C 8環烷基之基團取代)，及 o 側氧基； 各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自羥基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)、3至6員雜環基、-B(O R 2 ) 2、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 、-PO(O R 2 ) 2及-PO( R 2 ) 2； 各 R 2 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1至6個獨立地選自鹵素之基團取代)、C 1-C 6氟烷基及C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷基及C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)； Z係選自
Figure 02_image008
、
Figure 02_image010
、
Figure 02_image012
及
Figure 02_image014
；其中 環 C係選自C 6-C 10芳基及5至10員雜芳基； R Z1 係選自氫、-CN、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基； R Z2 係選自氫、鹵素、羥基、NH 2、NH(CO)(C 1-C 6烷基)及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團； 各 R Z3 係獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷基及C 6-C 10芳基；或兩個 R Z3 一起形成3至6員雜環基； n係選自4、5、6、7及8；及 m係選自0、1、2及3。
在式 I之一些實施例中， X為-N( R X1 )-。
在式 I之一些實施例中， X為
Figure 02_image016
。
在式 I之一些實施例中， X係選自： -NH-、-N(CH 3)-、-N(CH 2CH 3)-、
Figure 02_image018
、
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、
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、
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、
Figure 02_image060
、
Figure 02_image062
及
Figure 02_image064
。
在式 I之一些實施例中， 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-CO 2 R Y1 及-CON( R Y1 ) 2； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環； 或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。
在式 I之一些實施例中，各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基。
在式 I之一些實施例中，各 Q係獨立地選自C 6-C 10芳基。
在式 I之一些實施例中，各 Q為苯基。
在式 I之一些實施例中， 各 R Y 係獨立地選自： 氫、羥基、-CH 3、-CD 3、-CH 2CH 3、
Figure 02_image066
、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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及
Figure 02_image090
； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自環丁基、環戊基、環己基、四氫吡咯基(tetrahydropyryl)及四氫呋喃基之環； 或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。
在式 I之一些實施例中， 環 B係選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及5至10員雜芳基。
在式 I之一些實施例中， 環 B係選自苯基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及吡啶基。
在式 I之一些實施例中， 環 B係選自：
Figure 02_image092
、
Figure 02_image094
、
Figure 02_image096
、
Figure 02_image098
、
Figure 02_image100
及
Figure 02_image102
。
在式 I之一些實施例中， n係選自4、5、6及7。
在式 I之一些實施例中，-( Y) n-為選自以下之基團：
Figure 02_image104
、
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Figure 02_image210
、
Figure 02_image212
、
Figure 02_image214
、
Figure 02_image216
、
Figure 02_image218
、
Figure 02_image220
、
Figure 02_image222
、
Figure 02_image224
、
Figure 02_image226
、
Figure 02_image228
、
Figure 02_image230
、
Figure 02_image232
、
Figure 02_image234
、
Figure 02_image236
、
Figure 02_image238
、
Figure 02_image240
、
Figure 02_image242
、
Figure 02_image244
及
Figure 02_image246
。
在式 I之一些實施例中，各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自C 6-C 10芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)、3至6員雜環基、-B(O R 2 ) 2、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 及-PO( R 2 ) 2。
在式 I之一些實施例中，各 R 2 係獨立地選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)。
在式 I之一些實施例中，各 R 1 係獨立地選自-Br、-CF 3、-NH 2、-CH 3、-CH(CH 3) 2、-CN、-OH、-OCH 3、-NH(CH 3)、-NH(CH 2CH 3)、-CONH 2、-CO 2CH 3、-SO 2CH 3、-SO 2Ph、PO(CH 3) 2、B(OH) 2、苯基、吡啶基、四氫哌喃基、四氫呋喃基、環丙基、環己基、咪唑基、
Figure 02_image248
、
Figure 02_image250
、
Figure 02_image252
及
Figure 02_image254
。
在式 I之一些實施例中， Z係選自
Figure 02_image256
、
Figure 02_image258
及
Figure 02_image260
；其中 環 C係選自C 6-C 10芳基。
在式 I之一些實施例中，基團：
Figure 02_image262
係選自：
Figure 02_image263
、
Figure 02_image265
、
Figure 02_image267
、
Figure 02_image269
,
Figure 02_image271
、
Figure 02_image273
、
Figure 02_image275
、
Figure 02_image277
、
Figure 02_image279
、
Figure 02_image281
、
Figure 02_image283
、
Figure 02_image285
及
Figure 02_image287
。
在式 I之一些實施例中，基團：
Figure 02_image289
為
Figure 02_image291
。
在式 I之一些實施例中， R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基。
在式 I之一些實施例中， R Z2 係選自氫、鹵素、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)。
在式 I之一些實施例中， R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基及C 6-C 10芳基；及 R Z2 係選自氫、鹵素及羥基； 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團。
在式 I之一些實施例中， R Z1 係選自氫、CH 3、CF 3、CH 2OH、苯基、環丙基及四氫哌喃基；及 R Z2 係選自氫、鹵素及羥基； 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團。
在式 I之一些實施例中， R Z2 為羥基。
在式 I之一些實施例中， Z係選自：
Figure 02_image293
、
Figure 02_image295
、
Figure 02_image297
、
Figure 02_image299
、
Figure 02_image301
、
Figure 02_image303
、
Figure 02_image305
、
Figure 02_image307
、
Figure 02_image309
、
Figure 02_image311
、
Figure 02_image313
、
Figure 02_image315
、
Figure 02_image317
、
Figure 02_image319
、
Figure 02_image321
、
Figure 02_image323
及
Figure 02_image325
。
在式 I之一些實施例中， Z為
Figure 02_image327
。在式 I之一些實施例中， Z為
Figure 02_image329
。在式 I之一些實施例中， Z為
Figure 02_image331
。在式 I之一些實施例中， Z為
Figure 02_image333
，其中( R)係指根據Cahn-Ingold-Prelog規約，中心碳原子之立體化學名稱。在式 I之一些實施例中， Z為
Figure 02_image335
，其中( S)係指根據Cahn-Ingold-Prelog規約，中心碳原子之立體化學名稱。
在式 I之一些實施例中， m係選自1及2。
在一些實施例中，本發明化合物由式 I '涵蓋：
Figure 02_image337
I'， 且包括其氘化衍生物，及彼等化合物與氘化衍生物之醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N( R X1 )-及
Figure 02_image339
； 環 A為4至6員雜環基，其視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基及側氧基之基團取代； R X1 係選自H、C 1-C 6烷基((視情況經1-3個獨立地選自羥基、側氧基、-O R X2 及-N( R X2 ) 2之基團取代)及C 3-C 8環烷基； 各 R X2 係獨立地選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-、-O-、-CO-、-N R YN -及
Figure 02_image341
，其中各 R YN 係獨立地選自H、C 1-C 4烷基及CO 2Me； 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-O R Y1 、-CO 2 R Y1 、-CO R Y1 、-CON( R Y1 ) 2及-N( R Y1 ) 2； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基； 環 B係選自： ▪  C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、C 1-C 6烷基及C 1-C 6烷氧基之基團取代)， ▪  C 3-C 8環烷基， ▪  5至10員雜芳基，及 ▪  3至6員雜環基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)； 各 Q係獨立地選自： ▪  C 1-C 6烷基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o 側氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及-OCF 3之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 3-C 8環烷基，其視情況經1-3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、-NH 2及-NHCOMe之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 6-C 10芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及羥基之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基，其視情況經1-4個獨立地選自以下之基團取代： ▪  鹵素， ▪  C 3-C 8環烷基(視情況經CF 3取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、CF 3、OCF 3及C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 6-C 10芳基， ▪  5至10員雜芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個CF 3基團取代)，及 o 3至10員雜環基， ▪  3至10員雜環基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自側氧基及C 3-C 8環烷基之基團取代)，及 o 側氧基； 各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)3至6員雜環基、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 、-PO(O R 2 ) 2及-PO( R 2 ) 2； 各 R 2 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1至6個獨立地選自鹵素之基團取代)、C 1-C 6氟烷基及C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷基及C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)； Z係選自
Figure 02_image343
、
Figure 02_image345
、
Figure 02_image347
及
Figure 02_image349
； R Z1 係選自氫、-CN、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基； R Z2 係選自氫、鹵素、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團； 各 R Z3 係獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷基及C 6-C 10芳基；或兩個 R Z3 一起形成3至6員雜環基； n係選自4、5、6及7；及 m係選自0、1、2及3。
在一些實施例中，式 I化合物係選自式 I''化合物：
Figure 02_image351
I''， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如對於式 I所定義。
在式 I''之一些實施例中，由：
Figure 02_image353
表示之化合物之部分為
Figure 02_image355
，其中( R)係指根據Cahn-Ingold-Prelog規約，中心碳原子之立體化學名稱。在式 I''之一些實施例中，由
Figure 02_image357
表示之化合物之部分為
Figure 02_image358
，其中( S)係指根據Cahn-Ingold-Prelog規約，中心碳原子之立體化學名稱。
本發明化合物亦包括式 Ia 、 IIa、 IIb、 IIc、 IId 、 IIe、 IIf、 IIg及 IIh 之化合物：
Figure 02_image360
Ia、
Figure 02_image362
IIa、
Figure 02_image364
IIb、
Figure 02_image366
IIc、
Figure 02_image368
IId、
Figure 02_image370
IIe、
Figure 02_image372
IIf、
Figure 02_image374
IIg及
Figure 02_image376
IIh， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如對於式 I '所定義。
本發明化合物亦包括式 Ia ' 、 IIa '、 IIb '、 IIc '、 IId ' 、 IIe '、 IIf '、 IIg '及 IIh ' 之化合物：
Figure 02_image378
Ia '、
Figure 02_image380
IIa '、
Figure 02_image382
IIb '、
Figure 02_image384
IIc '、
Figure 02_image386
IId '、
Figure 02_image388
IIe '、
Figure 02_image390
IIf '、
Figure 02_image392
IIg '及
Figure 02_image394
IIh '， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如對於式 I所定義。
在式 Ia ' 、 IIa '、 IIb '、 IIc '、 IId ' 、 IIe '、 IIf '、 IIg '及 IIh '之一些實施例中，由：
Figure 02_image396
表示之化合物之部分為
Figure 02_image397
，其中( R)係指根據Cahn-Ingold-Prelog規約，中心碳原子之立體化學名稱。在式 I ''之一些實施例中，由
Figure 02_image398
表示之化合物之部分為
Figure 02_image399
，其中( S)係指根據Cahn-Ingold-Prelog規約，中心碳原子之立體化學名稱。
本發明之另一態樣提供醫藥組成物，其包含至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 及 IIh '之化合物的化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽，及至少一種醫藥學上可接受之載體，該組成物可進一步包括至少一種額外活性醫藥成分。因此，本發明之另一態樣提供治療CFTR介導之疾病囊腫纖維化之方法，其包含向有需要之個體投與至少一種選自以下之化合物： I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 及 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽，及至少一種醫藥學上可接受之載體，視情況作為包含至少一種額外組分之醫藥組成物的一部分。
在某些實施例中，本發明之醫藥組成物包含至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 及 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222的化合物、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，包含至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 及 IIh '、化合物1至213、化合物214至222的化合物、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽的化合物的組成物可視情況進一步包含至少一種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣提供治療CFTR介導之疾病囊腫纖維化之方法，其包含向有需要之患者投與至少一種選自本文揭示之新穎化合物的化合物、其醫藥學上可接受之鹽及前述中之任一者的氘化衍生物，且視情況進一步投與一或多種選自以下的額外CFTR調節劑：( R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)- N-(1-(2,3-二羥丙基l)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1 H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物 II)、 N-[2,4-雙(1,1-二甲基乙基)-5-羥基苯基]-1,4-二氫-4-側氧基喹啉-3-甲醯胺(化合物 III)或 N-(2-(三級丁基)-5-羥基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-側氧基-1,4-二氫喹啉-3-甲醯胺(化合物 III-d)、3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)環丙烷甲醯胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化合物 IV)、 N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺醯基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 V)、 N-(苯磺醯基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基) 環丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 VI)、(14 S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1 H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ 6-硫雜-3,9,11,18,23-五氮雜四環[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮(化合物 VII)、(11 R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧雜-2λ 6-硫雜-3,5,12,19-四氮雜三環[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物 VIII)、 N-(苯磺醯基)-6-(3-氟-5-異丁氧基-苯基)-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 IX)及 N-[(6-胺基-2-吡啶基)磺醯基]-6-(3-氟-5-異丁氧基-苯基)-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 X)。
本發明之另一態樣提供治療CFTR介導之疾病囊腫纖維化之方法，其包含向有需要之患者投與至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 及 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222的化合物、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽，且視情況進一步投與一或多種選自以下的額外CFTR調節劑：
Figure 02_image400
(ASP-11)，其揭示於 Journal of Cystic Fibrosis(2018), 17(5), 595-606中，及：
Figure 02_image402
(樂利卡福特(nesolicaftor)或PTI-428)，其揭示於WO 2016/105485中。在一個實施例中，額外CFTR調節劑為ASP-11。在一個實施例中，額外CFTR調節劑包含PTI-428。
本發明之另一態樣提供治療CFTR介導之疾病囊腫纖維化之方法，其包含向有需要之患者投與至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 及 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222的化合物、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽，且視情況進一步投與一或多種選自以下的額外CFTR調節劑：
Figure 02_image404
(伽利卡福特(galicaftor)或ABBV-2222)，其揭示於美國專利申請公開案第2016-0120841號中；
Figure 02_image406
(ABBV-3221)，其揭示於WO 2018/065921中；
Figure 02_image408
(魄森卡福特(posenacaftor)或PTI-801)，其揭示於WO 2017/062581中；ABBV-2851，其揭示於WO 2017/009804中；GLPG2737，其揭示於美國專利申請公開案第2017-0101405號中；ABBV-3748；ABBV-3903；及ABBV-119。
本申請案主張2020年11月18日提交之美國臨時申請案第63/115,552號的權益，其內容以全文引用的方式併入本文中。 定義
如本文所用，「化合物 II」係指( R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)- N-(1-(2,3-二羥丙基l)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1 H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺，其可用以下結構來描繪：
Figure 02_image410
化合物 II。 化合物 II可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 II及製備及使用化合物 II之方法揭示於WO 2010/053471、WO 2011/119984、WO 2011/133751、WO 2011/133951及WO 2015/160787中，其各自以引用之方式併入本文中。
如在貫穿本發明使用時，「化合物 III」係指 N-(5-羥基-2,4-二-三級丁基-苯基)-4-側氧基-1 H-喹啉-3-甲醯胺，其用以下結構描繪：
Figure 02_image412
化合物 III。 化合物 III亦可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 III及製備及使用化合物 III之方法揭示於WO 2006/002421、WO 2007/079139、WO 2010/108162及WO 2010/019239中，其各自以引用之方式併入本文中。
在一些實施例中，本文揭示之組成物及方法中採用化合物 III之氘化衍生物(化合物 III-d)。化合物 III-d之化學名稱為 N-(2-(三級丁基)-5-羥基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-側氧基-1,4-二氫喹啉-3-甲醯胺，如由以下描繪：
Figure 02_image414
化合物 III-d。 化合物 III-d可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 III-d及製備及使用化合物 III-d之方法揭示於WO 2012/158885、WO 2014/078842及美國專利案第8,865,902號中，其以引用之方式併入本文中。
如本文所用，「化合物 IV」係指3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)環丙烷甲醯胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸，其用以下化學結構描繪：
Figure 02_image416
化合物 IV。 化合物 IV可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 IV及製備及使用化合物 IV之方法揭示於WO 2007/056341、WO 2009/073757及WO 2009/076142中，其以引用之方式併入本文中。
如本文所用，「化合物 V」係指 N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺醯基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺，其用以下化學結構描繪：
Figure 02_image418
化合物 V。 化合物 V可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 V及製備及使用化合物 V之方法揭示於WO 2018/107100及WO 2019/113476中，其以引用之方式併入本文中。
如本文所用，「化合物 VI」係指 N-(苯磺醯基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基) 環丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺，其用以下化學結構描繪：
Figure 02_image420
化合物 VI。 化合物 VI可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 VI及製備及使用化合物 VI之方法揭示於WO 2018/064632中，其以引用之方式併入本文中。
如本文所用，「化合物 VII」係指(14 S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1 H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ 6-硫雜-3,9,11,18,23-五氮雜四環[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮，其用以下化學結構描繪：
Figure 02_image422
化合物 VII。 化合物 VII可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 VII及製備及使用化合物 VII之方法揭示於WO 2019/161078、WO 2020/102346及PCT申請案第PCT/US2020/046116號中，其以引用之方式併入本文中。
如本文所用，「化合物 VIII」係指(11 R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧雜-2λ 6-硫雜-3,5,12,19-四氮雜三環[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，其用以下化學結構描繪：
Figure 02_image424
化合物 VIII。 化合物 VIII可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 VIII及製備及使用化合物 VIII之方法揭示於WO 2020/206080中，其以引用之方式併入本文中。
如本文所用，「化合物 IX」係指 N-(苯磺醯基)-6-(3-氟-5-異丁氧基-苯基)-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺，其用以下化學結構描繪：
Figure 02_image426
化合物 IX。 化合物 IX可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 IX及製備及使用化合物 IX之方法揭示於WO 2016/057572中，其以引用之方式併入本文中。
如本文所用，「化合物 X」係指 N-[(6-胺基-2-吡啶基)磺醯基]-6-(3-氟-5-異丁氧基-苯基)-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺，其用以下化學結構描繪：
Figure 02_image428
化合物 X。 化合物 X可呈醫藥學上可接受之鹽形式。化合物 X及製備及使用化合物 X之方法揭示於WO 2016/057572中，其以引用之方式併入本文中。
如本文所用，術語「烷基」係指含有碳原子(諸如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個碳原子)之飽和的分支或未分支脂族烴。烷基可經取代或未經取代。
如本文所用，術語「π鍵」係指藉由相鄰原子之p軌道形成之共價鍵。在兩個原子之間存在多重鍵，亦即雙鍵或參鍵之情況下，π鍵存在。舉例而言，碳-碳雙鍵由一個π鍵組成，且碳-碳參鍵由兩個π鍵組成。
如本文所用，術語「鹵烷基」係指經一或多個鹵素原子取代之烷基。
如本文所用，術語「氟烷基」係指經一或多個氟原子取代之烷基。在一些實施例中，氟烷基經1-6個氟原子取代。在一些實施例中，氟烷基為全氟化的。
如本文所用，術語「烷氧基」係指共價鍵結至氧原子之烷基或環烷基。烷氧基可經取代或未經取代。
如本文所使用，術語「鹵烷氧基」係指經一或多個鹵素原子取代之烷氧基。
如本文所用，術語「氟烷氧基」係指經一或多個氟原子取代之烷氧基。在一些實施例中，氟烷氧基經1-6個氟原子取代。在一些實施例中，氟烷氧基為全氟化的。
如本文所用，「環烷基」係指具有3至12個碳(諸如3-10個碳)之環狀、雙環、三環 、 或多環非芳族烴基。「環烷基」涵蓋單環、雙環、三環、橋連環、稠合環及螺環，包括單螺環及二螺環。環烷基之非限制性實例為環丙基、環丁基、環戊基、環己基、金剛烷基、降莰基及二螺[2.0.2.1]庚烷。環烷基可經取代或未經取代。
如本文所用，術語「雜芳環」係指包含至少一個為諸如O、N或S之雜原子之環原子的芳族環。
如本文所用，術語「雜環」及「雜環基」係指環中含有3至12個原子(諸如3-10個原子)之非芳族烴，其包含至少一個為諸如O、N、S或Si之雜原子的環原子。「雜環基」環涵蓋單環、雙環、三環、多環、橋連環、稠合環及螺環，包括單螺環及二螺環。
「經取代」指示「經取代」之基團之至少一個氫經取代基置換。除非另外指示，否則「視情況經取代之」基團可在該基團之每一可取代位置處具有適合之取代基，且當任何給定結構中之超過一個位置可經超過一個選自指定群組之取代基取代時，在每一位置處之取代基可相同或不同。
氮之保護基之實例包括例如胺基甲酸三級丁酯(Boc)、苯甲基(Bn)、 對甲氧基苯甲基(PMB)、四氫哌喃基(THP)、胺基甲酸9-茀基甲酯(Fmoc)、胺基甲酸苯甲酯(Cbz)、胺基甲酸甲酯、胺基甲酸乙酯、胺基甲酸2,2,2-三氯乙酯(Troc)、胺基甲酸2-三甲基矽基乙酯(Teoc)、胺基甲酸烯丙酯(Aloc或Alloc)、甲醯胺、乙醯胺、苯甲醯胺、烯丙胺、三氟乙醯胺、三苯基甲胺、苯亞甲基胺及對甲苯磺醯胺。氮保護基之全面清單可見於Wuts, P. G. M. 「Greene's Protective Groups in Organic Synthesis: Fifth Edition,」 2014, John Wiley and Sons。
如本文所用，「氘化衍生物」意謂相同化學結構，其中一或多個氫原子經氘原子置換。
如本文所使用，「CFTR」意謂囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白。
如本文所用，術語「CFTR調節劑」係指增加CFTR活性之化合物。由CFTR調節劑引起之活性增加包括但不限於校正、強化、穩定及/或擴增CFTR之化合物。
如本文所用，術語「CFTR校正劑」係指有助於CFTR之加工及運輸以增加細胞表面處CFTR之量的化合物。
如本文所用，術語「CFTR增效劑」係指增加位於細胞表面處之CFTR蛋白之通道活性，從而增強離子輸送之化合物。本文揭示之新穎化合物為CFTR增效劑。
如本文所用，術語「CFTR增效劑增強劑」、術語「CFTR增效作用增強劑」及「CFTR輔增效劑」可互換使用且係指增強CFTR增效作用之化合物。
如本文所用，術語「活性醫藥成分」 (「API」)或「治療劑」係指生物活性化合物。
術語「患者」及「個體」可互換使用且係指包括人類之動物。
術語「有效劑量」及「有效量」在本文中可互換使用且係指產生其投與所期望之效果(例如改善CF或CF症狀，或減輕CF或CF症狀之嚴重度)之化合物的量。有效劑量之精確量將視治療目的而定且將可由熟悉本技藝者使用已知技術確定(參見例如Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding)。
如本文所用，術語「治療(treatment/treating)」及其類似術語一般意謂改善個體之CF之一或多個症狀或減輕CF或CF之一或多個症狀的嚴重程度。如本文所使用，「治療」包括(但不限於)以下：個體生長增加、增加之重量增加、肺中黏液減少、改善胰臟及/或肝功能、減少胸部感染情況及/或減少咳嗽或呼吸短促。改善此等症狀中之任一者或減輕其嚴重程度可容易地根據此項技術中已知之標準方法及技術評定。
如本文所使用，在提及兩個或更多個化合物、藥劑或額外活性醫藥成分時之術語「與……組合」意謂在彼此之前、彼此同時或在彼此之後向患者投與兩個或更多個化合物、藥劑或活性醫藥成分。
當與組成物或劑型的成分之劑量、量或重量百分比結合使用時，術語「約」和「大約」包括指定劑量、量或重量百分比之值，或該劑量、量或重量百分比之範圍，其為本領域普通技術人員所公認的，以提供等效於由該指定劑量、量或重量百分比獲得之藥理學作用。術語「約(about)」及「大致(approximately)」可指如藉由熟習此項技術者所測定之特定值之可接受誤差，其部分視如何量測或測定該等值而定。在一些實施例中，術語「約」及「大致」意謂在既定值或範圍之20%、15%、10%、5%、4%、3%、2%、1%或0.5%內。如本文所用，緊接在數值之前出現之符號「~」與術語「約」及「大致」具有相同含義。
如本文所使用，術語「溶劑」係指其中產物為至少部分可溶(產物之溶解度＞1 g/L)的任何液體。
如本文所使用，術語「室溫」或「周圍溫度」意謂15℃至30 ℃。
應瞭解，某些本發明化合物可以單獨立體異構物或鏡像異構物及/或彼等立體異構物或鏡像異構物之混合物之形式存在。如本文揭示之化學結構中所用，與立體源原子之「楔狀物」 (
Figure 02_image430
)或「散列(hash)」 (
Figure 02_image432
)鍵指示已知絕對立體化學之對掌性中心(亦即一種立體異構物)。如本文揭示之化學結構中所用，與立體源原子之「波浪」鍵(
Figure 02_image434
)指示未知絕對立體化學之對掌性中心(亦即一種立體異構物)。如本文揭示之化學結構中所用，與雙鍵碳之「波浪」鍵(
Figure 02_image436
)指示 E/ Z異構物之混合物。如本文揭示之化學結構中所用，與立體源原子之
Figure 02_image437
(「直線」)鍵指示其中存在混合物(例如外消旋物或富集)。如本文所用，與雙鍵碳之兩個
Figure 02_image439
(「直線」)鍵指示雙鍵具有如所繪製之 E/ Z立體化學。如本文揭示之化學結構中所用，
Figure 02_image441
(亦即，垂直於與基團「A」之「直線」鍵之「波浪」線)指示基團「A」為其連接點位於以「波浪」線終止之鍵的末端的取代基。
本文所揭示之某些化合物可以互變異構物之形式存在，且預期兩種互變異構形式，即使僅描繪單個互變異構結構。舉例而言，化合物A之描述應理解為包括其互變異構物化合物B，且反之亦然，以及其混合物： 化合物A                           化合物B
Figure 02_image443
。
如本文所使用，「最小功能(MF)突變」係指與最小CFTR功能(幾乎無功能CFTR蛋白質)相關的CFTR基因突變且包括例如與嚴重缺乏打開及關閉CFTR通道之能力相關之突變，被稱為有缺陷的通道閘控或「閘控突變」；與嚴重缺乏CFTR之細胞處理及其至細胞表面之遞送相關的突變；與無(或最少) CFTR合成相關之突變；及與嚴重缺乏通道傳導率相關之突變。
如本文所使用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指本發明之化合物的鹽形式，其中該鹽為無毒性的。本發明化合物的醫藥學上可接受之鹽包括衍生自適合之無機酸及有機酸以及無機鹼及有機鹼的鹽。舉例而言，化合物之「游離鹼」形式不含以離子方式鍵結之鹽。
片語「及其醫藥學上可接受之鹽及氘化衍生物」可與「及其醫藥學上可接受之鹽及前述中之任一者之氘化衍生物」互換使用以指代本發明之一或多種化合物或式。此等片語意欲涵蓋所提及之化合物中之任一者的醫藥學上可接受之鹽、所提及之化合物中之任一者的氘化衍生物及彼等氘化衍生物之醫藥學上可接受之鹽。
一般熟習此項技術者將認識到，當揭示「化合物或其醫藥學上可接受之鹽」之量時，該化合物之醫藥學上可接受之鹽形式之該量為等效於該化合物之游離鹼之濃度的量。應注意，本文中所揭示之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的量係基於其游離鹼形式。
合適之醫藥學上可接受之鹽係揭示於例如S. M. Berge 等人 J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19之中。舉例而言，該論文中之表1提供以下醫藥學上可接受之鹽： 表 1 ：
乙酸鹽 碘鹽 苄星青黴素(Benzathine)
苯磺酸鹽 羥乙磺酸鹽 氯普魯卡因(Chloroprocaine)
苯甲酸鹽 乳酸鹽 膽鹼
碳酸氫鹽 乳糖酸鹽 二乙醇胺
酒石酸氫鹽 蘋果酸鹽 乙二胺
溴鹽 順丁烯二酸鹽 葡甲胺
乙二胺四乙酸鈣 杏仁酸鹽 普魯卡因(Procaine)
樟腦磺酸鹽 甲磺酸鹽 鋁鹽
碳酸鹽 甲基溴 鈣鹽
氯化物 甲基硝酸鹽 鋰鹽
檸檬酸鹽 甲基硫酸鹽 鎂鹽
二鹽酸鹽 半乳糖二酸鹽 鉀鹽
乙二胺四乙酸鹽 萘磺酸鹽 鈉鹽
乙二磺酸鹽 硝酸鹽 鋅鹽
依託酸鹽 雙羥萘酸鹽(恩波酸鹽)   
乙磺酸鹽 泛酸鹽   
反丁烯二酸鹽 磷酸鹽/二磷酸鹽   
葡庚糖酸鹽 聚半乳糖醛酸鹽   
葡糖酸鹽 水楊酸鹽   
麩胺酸鹽 硬脂酸鹽   
乙內醯胺苯胂酸鹽 次乙酸鹽   
己基間苯二酚酸鹽 丁二酸鹽   
海卓胺(hydrabamine) 硫酸鹽   
氫溴酸鹽 丹寧酸鹽(tannate)   
鹽酸鹽 酒石酸鹽   
羥基萘甲酸鹽 8-氯茶鹼鹽(teociate)   
   三乙碘化物   
醫藥學上可接受之酸加成鹽的非限制性實例包括：由無機酸，諸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸或過氯酸形成之鹽；由有機酸，諸如乙酸、草酸、順丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸形成之鹽；及藉由使用此項技術中所用之其他方法，諸如離子交換形成之鹽。醫藥學上可接受之鹽的非限制性實例包括己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘化物、2-羥基-乙烷磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽及戊酸鹽。衍生自適當鹼之醫藥學上可接受之鹽包括鹼金屬、鹼土金屬、銨及N +(C 1-4烷基) 4鹽。本發明亦涵蓋本文所揭示化合物之任何鹼性含氮基團之四級銨化。鹼金屬及鹼土金屬鹽之合適非限制性實例包括鈉、鋰、鉀、鈣及鎂。醫藥學上可接受之鹽之其他非限制性實例包括銨離子、四級銨離子以及胺陽離子，其使用相對離子(例如鹵離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低級烷基磺酸根及芳基磺酸根)形成。醫藥學上可接受之鹽的其他合適非限制性實例包括苯磺酸鹽及葡糖胺鹽。
如本文所用，術語「非晶形」係指在其分子之位置中不具有長程有序之固體材料。非晶形固體一般為過冷液體，其中分子以隨機方式排列，使得不存在界限分明的排列(例如分子封裝)且不存在長程有序。非晶形固體一般為各向同性的，亦即在所有方向上展現類似特性且不具有明確熔點。舉例而言，非晶形材料為在其X射線粉末繞射(XRPD)圖案中不具有急劇特徵結晶峰(亦即，如由XRPD所測定不為結晶)的固體材料。實際上，其XRPD圖案中出現一個或若干個寬峰(例如，暈圈)。寬峰為非晶形固體之特徵。關於非晶形材料及結晶材料之XRPD之比較，參見US 2004/0006237。在一些實施例中，固體材料可包含非晶形化合物，且材料之特徵可在於例如在其XRPD譜中缺乏急劇特徵結晶峰值(亦即，材料不為結晶但為非晶形，如藉由XRPD所測定)。實際上，在材料之XRPD圖中可出現一個或若干個寬峰(例如暈圈)。關於非晶形材料及結晶材料之XRPD之比較，參見US 2004/0006237。包含非晶形化合物之固體材料之特徵可在於例如玻璃轉移溫度低於純結晶固體之熔點。亦可使用諸如固態NMR之其他技術來表徵結晶或非晶形式。
如本文所用，術語「結晶形式(crystal form/crystalline form)」及「形式(Form)」可互換地指在晶格中具有特定分子封裝排列之晶體結構(或多晶型物)。結晶形式可藉由一或多種表徵技術來鑑別及彼此區分，包括例如X射線粉末繞射(X-ray powder diffraction；XRPD)、單晶X射線繞射及 13C固態核磁共振( 13C SSNMR)。因此，如本文所用，術語「化合物( I)之結晶形式[X]」係指可藉由一或多種表徵技術，包括例如XRPD、單晶X射線繞射及 13C SSNMR鑑別及區別於其他結晶形式之獨特結晶形式。在一些實施例中，新穎結晶形式之特徵在於在一或多個規定2θ值(º2 θ)處具有一或多個信號之X射線粉末繞射圖。
如本文所用，術語「游離形式」係指呈固態之化合物之非離子化形式。游離形式之實例包括游離鹼及游離酸。
如本文所用，術語「溶劑合物」係指包含一或多個本發明化合物分子及以化學計量或非化學計量量將一或多個一或多種溶劑分子併入晶格中的結晶形式。當溶劑為水時，溶劑合物稱為「水合物」。
在一些實施例中，固體材料可包含結晶固體及非晶形固體之混合物。包含非晶形化合物之固體材料亦可例如含有至多30%之結晶固體。在一些實施例中，經製備以包含非晶形化合物之固體材料亦可例如含有至多25%、20%、15%、10%、5%或2%之結晶固體。在其中固體材料含有結晶固體及非晶形固體之混合物之實施例中，表徵資料(諸如XRPD)可含有結晶及非晶形固體之指示物。在一些實施例中，本發明之結晶形式可含有至多30%非晶形化合物。在一些實施例中，式 I化合物之結晶製劑可含有至多25%、20%、15%、10%、5%或2%之非晶形固體。
如本文所用，術語「實質上非晶形」係指其分子位置中具有很少或沒有長程有序之固體材料。舉例而言，實質上非晶形材料具有小於15%結晶度(例如小於10%結晶度、小於5%結晶度或小於2%結晶度)。亦應注意，術語「實質上非晶形」包括描述詞「非晶形」，其係指不具有(0%)結晶度之材料。
如本文所用，術語「實質上結晶」係指具有很少或沒有非晶形分子之固體材料。舉例而言，實質上結晶材料具有小於15%非晶形分子(例如小於10%非晶形分子、小於5%非晶形分子或小於2%非晶形分子)。亦應注意，術語「實質上結晶」包括描述詞「結晶」，其係指100%結晶形式之材料。
如本文所用，當如藉由根據此項技術之方法(諸如定量XRPD)所測定，結晶形式佔等於或大於90重量%之量之樣本中的所有固體形式總和時，該結晶形式為「實質上純的」。在一些實施例中，當固體形式佔等於或大於95重量%之量之樣本中之所有固體形式的總和時，該固體形式為「實質上純的」。在一些實施例中，當固體形式佔等於或大於99重量%之量之樣本中之所有固體形式的總和時，該固體形式為「實質上純的」。亦應注意，術語「實質上純」包括描述詞「純」。
如本文所用，術語「XRPD」係指X射線粉末繞射之分析表徵方法。本文揭示之XRPD圖係使用繞射儀在環境條件下在透射或反射幾何結構中記錄。
如本文所用，術語「環境條件」意指室溫、開放大氣條件及未經控制之濕度條件。術語「室溫」及「環境溫度」意謂15℃至30℃。
如本文所用，術語「X射線粉末繞射圖(X-ray powder diffractogram/X-ray powder diffraction pattern)」、「XRPD圖」、「XRPD譜」可互換地指以實驗方式獲得的繪製信號位置(在橫座標上)相對於信號強度(在縱座標上)的圖案。對於非晶形材料，X射線粉末繞射圖可包括一或多個寬峰信號；且對於結晶材料，X射線粉末繞射圖可包括一或多個信號，各信號藉由如以度2θ (º 2θ)量測之其角度值標識，描繪於X射線粉末繞射圖之橫座標上，其可表述為「在…度2θ處之信號」、「在…之[a]2θ值處之信號」及/或「在選自…之至少…2θ值處之信號」。
如本文所用，「信號」或「峰」係指在XRPD圖中如以計數形式量測之強度處於局部最大值處的點。一般熟習此項技術者應認識到，XRPD圖中之一或多個信號(或峰)可重疊且可例如不為裸眼顯而易見的。實際上，一般熟習此項技術者應認識到，一些此項技術中公認的方法能夠且適合於測定信號是否在圖案中存在，諸如雷特韋德精修(Rietveld refinement)。
如本文所用，「在…度2θ處之信號」係指如X射線粉末繞射實驗中所量測且觀測到之X射線反射位置(º 2θ)。
角度值之可重複性在± 0.2° 2θ之範圍內，亦即角度值可在所敍述角度值+ 0.2度2θ、角度值- 0.2度2θ或彼等兩個端點(角度值+ 0.2度2θ及角度值- 0.2度2θ)之間的任何值處。
術語「信號強度」及「峰強度」可互換地指在既定X射線粉末繞射圖內之相對信號強度。可影響相對信號或峰強度之因素包括樣本厚度及較佳取向(例如結晶顆粒不隨機分佈)。
如本文所用，當兩個繞射圖中之至少90%，諸如至少95%、至少98%或至少99%之信號重疊時，X射線粉末繞射圖「實質上類似於[特定]圖中之彼X射線粉末繞射圖」。在判定「實質上相似性」中，一般熟習此項技術者應理解，XRPD繞射圖中之強度及/或信號位置可存在變化，即使對於相同結晶形式。因此，一般熟習此項技術者應理解，XRPD繞射圖中之信號最大值(以度2θ為單位)一般意謂，值標識為所報導值之±0.2度2θ，此為此項技術中公認的偏差。
如本文所用，當兩個譜中至少90%，諸如至少95%、至少98%或至少99%之信號重疊時，固態核磁共振(SSNMR)譜「實質上類似於[特定]圖中之彼固態核磁共振譜」。在判定「實質上相似性」中，一般熟習此項技術者應理解，SSNMR光譜中之強度及/或信號位置上可存在變化，即使對於相同結晶形式。因此，一般熟習此項技術者應理解，SSNMR譜中之化學位移(以本文所提及之每百萬份數(ppm)為單位)一般意謂，值標識為所報導值之± 0.2 ppm，此為此項技術中公認的偏差。
術語「在…2θ值處具有信號之X射線粉末繞射圖」係指含有如在X射線粉末繞射實驗中所量測及觀測到之X射線反射位置(º 2θ)的XRPD圖。
如本文所用，術語「DSC」係指差示掃描熱量測定之分析方法。
如本文所用，術語「分解起始」係指在轉移之前基線與交涉(interflection)切線之交叉點。
如本文所用，術語「玻璃轉移溫度」或「Tg」係指高於該溫度硬及脆性「玻璃態」非晶形固體變得黏稠或有彈性的溫度。
如本文所用，術語「熔融溫度」、「熔點」或「Tm」係指材料自固相過渡至液相時之溫度。
如本文所用，術語「TGA」係指熱重(Thermo Gravimetric/thermogravimetric)分析之分析方法。 實施例之詳細描述
除式 I化合物、其醫藥學上可接受之鹽及彼等化合物及鹽之氘化衍生物以外，本發明提供式 I ' 、 I ''、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 及 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽。
舉例而言，在一些實施例中，式 I化合物係選自式 Ia 、 IIa、 IIb、 IIc、 IId 、 IIe、 IIf、 IIg及 IIh 中之任一者之化合物：
Figure 02_image445
Ia、
Figure 02_image447
IIa、
Figure 02_image449
IIb、
Figure 02_image451
IIc、
Figure 02_image453
IId、
Figure 02_image455
IIe、
Figure 02_image457
IIf、
Figure 02_image459
IIg及
Figure 02_image461
IIh， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如對於式 I '所定義。
在一些實施例中，式 I化合物係選自式 I ''化合物：
Figure 02_image463
I''， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如對於式 I所定義。
在一些實施例中，式 I化合物係選自式 Ia ' 、 IIa '、 IIb '、 IIc '、 IId ' 、 IIe '、 IIf '、 IIg '及 IIh ' 中之任一者之化合物：
Figure 02_image465
Ia '、
Figure 02_image467
IIa '、
Figure 02_image469
IIb '、
Figure 02_image471
IIc '、
Figure 02_image473
IId '、
Figure 02_image475
IIe '、
Figure 02_image477
IIf '、
Figure 02_image479
IIg '及
Figure 02_image481
IIh '， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如對於式 I所定義。
本文亦揭示具有選自表10中描繪之任一式之式的化合物、其氘化衍生物及彼等化合物及氘化衍生物中之任一者的醫藥學上可接受之鹽。 固體形式
本發明之另一態樣提供固體形式之式 I化合物(例如式 I ' 、 I ''、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、及 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽)，其可用於本文所描述之治療方法及醫藥組成物中。 非晶形化合物4 (純形式)
在一些實施例中，本發明提供化合物4之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供一種化合物4之純非晶形形式。在一些實施例中，本發明提供非晶形化合物4 (純形式)。 圖 1提供在室溫下非晶形化合物4 (純形式)之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物4 (純形式)為實質上純的。在一些實施例中，非晶形化合物4 (純形式)為實質上非晶形的。在一些實施例中，非晶形化合物4 (純形式)之特徵在於藉由使用Cu Kα輻射之入射光束之X射線粉末繞射分析產生的X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物4 (純形式)之特徵在於實質上類似於 圖 1之X射線粉末繞射圖。 結晶化合物5形式A (純)
在一些實施例中，本發明提供化合物5之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供化合物5之純結晶形式。在一些實施例中，本發明提供結晶化合物5形式A (純)。
在一些實施例中，結晶化合物5形式A (純)為實質上純的。在一些實施例中，結晶化合物5形式A (純)為實質上結晶的。
在一些實施例中，結晶化合物5形式A (純)之特徵在於四方晶系統、I4 1空間群及利用Cu K α輻射(λ=1.54178 Å)在Bruker繞射儀上在100 K量測之以下單位晶胞尺寸：
a 18.1 ± .1 Å α 90 º
b 18.1 ± .1 Å β 90 º
c 13.1 ± .1 Å γ 90 º。
非晶形化合物19 (純形式)
在一些實施例中，本發明提供化合物19之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供一種化合物19之純非晶形式。在一些實施例中，本發明提供非晶形化合物19 (純形式)。 圖 4提供在室溫下非晶形化合物19 (純形式)之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物19 (純形式)為實質上純的。在一些實施例中，非晶形化合物19 (純形式)為實質上非晶形的。在一些實施例中，非晶形化合物19 (純形式)之特徵在於藉由利用Cu Kα輻射之入射光束之X射線粉末繞射分析產生之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物19 (純形式)之特徵在於實質上類似於 圖 4之X射線粉末繞射圖。 結晶化合物41形式A
在一些實施例中，本發明提供化合物41之固體形式。在一些實施例中，本發明提供化合物41之結晶形式。在一些實施例中，本發明提供結晶化合物41形式A。 圖 7提供結晶化合物41形式A之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，結晶化合物41形式A為實質上純的。在一些實施例中，結晶化合物41形式A為實質上結晶的。在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於藉由利用Cu Kα輻射之入射光束之X射線粉末繞射分析產生之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於在以下中之一或多者處具有信號的X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ及21.2 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於在以下中之兩者或更多者處具有信號的X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ及21.2 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於在以下處具有信號的X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ及21.2 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於在以下中之三者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ、21.2 ± 0.2度2θ、18.0 ± 0.2度2θ、16.6 ± 0.2度2θ及20.7 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於在以下中之四者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ、21.2 ± 0.2度2θ、18.0 ± 0.2度2θ、16.6 ± 0.2度2θ及20.7 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於在以下中之五者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ、21.2 ± 0.2度2θ、18.0 ± 0.2度2θ、16.6 ± 0.2度2θ及20.7 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於在以下處具有信號之X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ、21.2 ± 0.2度2θ、18.0 ± 0.2度2θ、16.6 ± 0.2度2θ及20.7 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於在以下中之一者、兩者、三者、四者、五者、六者、七者、八者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、16.6 ± 0.2度2θ、18.0 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ、20.3 ± 0.2度2θ、20.7 ± 0.2度2θ、21.2 ± 0.2度2θ、22.2 ± 0.2度2θ及25.1 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物41形式A之特徵在於實質上類似於 圖 7之X射線粉末繞射圖。 結晶化合物52形式A (純)
在一些實施例中，本發明提供化合物52之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供化合物52之純結晶形式。在一些實施例中，本發明提供結晶化合物52形式A (純)。 圖 9提供結晶化合物52形式A (純)之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)為實質上純的。在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)為實質上結晶的。在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於藉由利用Cu Kα輻射之入射光束之X射線粉末繞射分析產生之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於在以下中之一或多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ及18.6 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於在以下中之兩者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ及18.6 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於在以下處具有信號之X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ及18.6 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於在以下中之三者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、12.7 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ、18.6 ± 0.2度2θ、20.6 ± 0.2度2θ及21.4 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於在以下中之四者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、12.7 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ、18.6 ± 0.2度2θ、20.6 ± 0.2度2θ及21.4 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於在以下中之五者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、12.7 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ、18.6 ± 0.2度2θ、20.6 ± 0.2度2θ及21.4 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於在以下處具有信號之X射線粉末繞射圖：12.7 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ、18.6 ± 0.2度2θ、20.6 ± 0.2度2θ及21.4 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於在以下中之一者、兩者、三者、四者、五者、六者、七者、八者、九者、十者、十一者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、12.7 ± 0.2度2θ、15.1 ± 0.2度2θ、15.5 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ、18.6 ± 0.2度2θ、19.2 ± 0.2度2θ、19.7 ± 0.2度2θ、20.4 ± 0.2度2θ、20.6 ± 0.2度2θ、21.4 ± 0.2度2θ及27.2 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物52形式A (純)之特徵在於實質上類似於 圖 9之X射線粉末繞射圖。 非晶形化合物60 (純形式)
在一些實施例中，本發明提供化合物60之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供一種化合物60之純非晶形式。在一些實施例中，本發明提供非晶形化合物60 (純形式)。 圖 12提供在室溫非晶形化合物60 (純形式)之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物60 (純形式)為實質上純的。在一些實施例中，非晶形化合物60 (純形式)為實質上非晶形的。在一些實施例中，非晶形化合物60 (純形式)之特徵在於藉由利用Cu Kα輻射之入射光束之X射線粉末繞射分析產生之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物60 (純形式)之特徵在於實質上類似於 圖 12之X射線粉末繞射圖。 非晶形化合物70 (純形式)
在一些實施例中，本發明提供化合物70之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供一種化合物70之純非晶形式。在一些實施例中，本發明提供非晶形化合物70 (純形式)。 圖 15提供在室溫非晶形化合物70 (純形式)之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物70 (純形式)為實質上純的。在一些實施例中，非晶形化合物70 (純形式)為實質上非晶形的。在一些實施例中，非晶形化合物70 (純形式)之特徵在於藉由利用Cu Kα輻射之入射光束之X射線粉末繞射分析產生之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物70 (純形式)之特徵在於實質上類似於 圖 15之X射線粉末繞射圖。 結晶化合物163形式A (純)
在一些實施例中，本發明提供化合物163之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供化合物163之純結晶形式。在一些實施例中，本發明提供結晶化合物163形式A (純)。 圖 16提供結晶化合物163形式A (純)之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)為實質上純的。在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)為實質上結晶的。在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於藉由利用Cu Kα輻射之入射光束之X射線粉末繞射分析產生之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在7.4 ± 0.2度2θ處具有信號之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在以下中之一或多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ及15.0 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在以下中之兩者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ及15.0 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在以下處具有信號之X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ及15.0 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在以下中之三者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ、14.1 ± 0.2度2θ、15.0 ± 0.2度2θ、19.1 ± 0.2度2θ及25.8 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在以下中之四者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ、14.1 ± 0.2度2θ、15.0 ± 0.2度2θ、19.1 ± 0.2度2θ及25.8 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在以下中之五者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ、14.1 ± 0.2度2θ、15.0 ± 0.2度2θ、19.1 ± 0.2度2θ及25.8 ± 0.2度2θ。在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在以下處具有信號之X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ、14.1 ± 0.2度2θ、15.0 ± 0.2度2θ、19.1 ± 0.2度2θ及25.8 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於在以下中之一者、兩者、三者、四者、五者、六者、七者、八者、九者、十者或更多者處具有信號之X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ、14.1 ± 0.2度2θ、14.6 ± 0.2度2θ、15.0 ± 0.2度2θ、16.9 ± 0.2度2θ、19.1 ± 0.2度2θ、20.0 ± 0.2度2θ、22.5 ± 0.2度2θ、25.6 ± 0.2度2θ及25.8 ± 0.2度2θ。
在一些實施例中，結晶化合物163形式A (純)之特徵在於實質上類似於 圖 16之X射線粉末繞射圖。 非晶形化合物173 (純形式)及結晶化合物173形式A (純)
在一些實施例中，本發明提供化合物173之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供一種化合物173之純非晶形式。在一些實施例中，本發明提供非晶形化合物173 (純形式)。 圖 18提供在室溫非晶形化合物173 (純形式)之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物173 (純形式)為實質上純的。在一些實施例中，非晶形化合物173 (純形式)為實質上非晶形的。在一些實施例中，非晶形化合物173 (純形式)之特徵在於藉由利用Cu Kα輻射之入射光束之X射線粉末繞射分析產生之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，非晶形化合物173 (純形式)之特徵在於實質上類似於 圖 18之X射線粉末繞射圖。
在一些實施例中，本發明提供化合物173之純結晶形式。在一些實施例中，本發明提供結晶化合物173形式A (純)。
在一些實施例中，結晶化合物173形式A (純)為實質上純的。在一些實施例中，結晶化合物173形式A (純)為實質上結晶的。
在一些實施例中，結晶化合物173形式A (純)之特徵在於三斜晶系統、P1空間群及利用Cu K α輻射(λ=1.54178 Å)在Bruker繞射儀上在150 K下量測之以下單位晶胞尺寸：
a 6.7 ± .1 Å α 76.0 ± .1 º
b 11.9 ± .1 Å β 82.2 ± .1 º
c 13.1 ± .1 Å γ 85.4 ± .1 º。
結晶化合物175形式A (純)
在一些實施例中，本發明提供化合物175之純固體形式。在一些實施例中，本發明提供化合物175之純結晶形式。在一些實施例中，本發明提供結晶化合物175形式A (純)。
在一些實施例中，結晶化合物175形式A (純)為實質上純的。在一些實施例中，結晶化合物175形式A (純)為實質上結晶的。
在一些實施例中，結晶化合物175形式A (純)之特徵在於斜方晶系統、 P2 12 12 1空間群及利用Cu K α輻射(λ=1.54178 Å)在Bruker繞射儀上在100 K下量測之以下單位晶胞尺寸：
a 9.8 ± .1 Å α 90 º
b 10.1 ± .1 Å β 90 º
c 20.5 ± .1 Å γ 90 º。
結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A
在一些實施例中，本發明提供化合物188之溶劑化結晶形式。在一些實施例中，溶劑化結晶形式為二氯甲烷溶劑合物。在一些實施例中，本發明提供結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A。
在一些實施例中，結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A為實質上純的。在一些實施例中，結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A為實質上結晶的。
在一些實施例中，結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A之特徵在於單斜晶系統、 P2 1空間群及利用Cu K α輻射(λ=1.54178 Å)在Bruker繞射儀上在100 K下量測之以下單位晶胞尺寸：
a 16.2 ± .1 Å α 90 º
b 13.3 ± .1 Å β 99.7 ± .1 º
c 23.2 ± .1 Å γ 90 º.
治療方法
本文揭示之新穎化合物及固體形式中之任一者，諸如式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽，可充當CFTR調節劑，亦即其調節體內之CFTR活性。罹患編碼CFTR之基因之突變的個體可受益於接受CFTR調節劑。CFTR突變可能影響CFTR數量，亦即細胞表面上之CFTR通道之數目，或其可能影響CFTR功能，亦即各通道打開及輸送離子之功能性能力。影響CFTR數量之突變包括引起缺陷性合成(I類缺陷)之突變、引起缺陷性處理及遷移(II類缺陷)之突變、引起CFTR之合成減少(V類缺陷)之突變及降低CFTR之表面穩定性(VI類缺陷)之突變。影響CFTR功能之突變包括引起缺陷性閘控(III類缺陷)之突變及引起缺陷性傳導(IV類缺陷)之突變。一些CFTR突變展現出多個類別之特性。CFTR基因之某些突變引起囊腫纖維化。
因此，在一些實施例中，本發明提供治療患者之囊腫纖維化、減輕其嚴重程度或對症治療該囊腫纖維化之方法，其包含單獨或與另一活性成分(諸如另一CFTR調節劑)組合，向患者投與有效量之本文揭示之新穎化合物及固體形式中之任一者，諸如式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，患者具有F508del/最小功能(MF)基因型、F508del/F508del基因型(F508del突變同型接合)、F508del/閘控基因型或F508del/殘餘功能(RF)基因型。在一些實施例中，患者為異型接合的且具有一個F508del突變。在一些實施例中，對於N1303K突變而言，患者為同型接合的。
在一些實施例中，每天投與1 mg至1000 mg之本文所揭示化合物、其氘化衍生物或該化合物或氘化衍生物之醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，患者為異型接合的，且在一個對偶基因上具有F508del突變且在另一對偶基因上具有選自表2之突變： 表 2 ： CFTR 突變
突變              
Q2X L218X Q525X R792X E1104X  
S4X Q220X G542X E822X W1145X  
W19X Y275X G550X W882X R1158X  
G27X C276X Q552X W846X R1162X  
Q39X Q290X R553X Y849X S1196X  
W57X G330X E585X R851X W1204X  
E60X W401X G673X Q890X L1254X  
R75X Q414X Q685X S912X S1255X  
L88X S434X R709X Y913X W1282X  
E92X S466X K710X Q1042X Q1313X  
Q98X S489X Q715X W1089X Q1330X  
Y122X Q493X L732X Y1092X E1371X  
E193X W496X R764X W1098X Q1382X  
W216X C524X R785X R1102X Q1411X  
185+1G→T 711+5G→A 1717-8G→A 2622+1G→A 3121-1G→A  
296+1G→A 712-1G→T 1717-1G→A 2790-1G→C 3500-2A→G  
296+1G→T 1248+1G→A 1811+1G→C 3040G→C (G970R) 3600+2insT  
405+1G→A 1249-1G→A 1811+1.6kbA→G 3850-1G→A  
405+3A→C 1341+1G→A 1811+1643G→T 3120G→A 4005+1G→A  
406-1G→A 1525-2A→G 1812-1G→A 3120+1G→A 4374+1G→T  
621+1G→T 1525-1G→A 1898+1G→A 3121-2A→G     
711+1G→T    1898+1G→C        
182delT 1078delT 1677delTA 2711delT 3737delA  
306insA 1119delA 1782delA 2732insA 3791delC  
306delTAGA 1138insG 1824delA 2869insG 3821delT  
365-366insT 1154insTC 1833delT 2896insAG 3876delA  
394delTT 1161delC 2043delG 2942insT 3878delG  
442delA 1213delT 2143delT 2957delT 3905insT  
444delA 1259insA 2183AA→G 3007delG 4016insT  
457TAT→G 1288insTA 2184delA 3028delA 4021dupT  
541delC 1343delG 2184insA 3171delC 4022insT  
574delA 1471delA 2307insA 3171insC 4040delA  
663delT 1497delGG 2347delG 3271delGG 4279insA  
849delG 1548delG 2585delT 3349insT 4326delTC  
935delA 1609del CA 2594delGT 3659delC     
CFTRdele1 CFTRdele16-17b 1461ins4  
CFTRdele2 CFTRdele17a,17b 1924del7  
CFTRdele2,3 CFTRdele17a-18 2055del9→A  
CFTRdele2-4 CFTRdele19 2105-2117del13insAGAAA  
CFTRdele3-10,14b-16 CFTRdele19-21 2372del8  
CFTRdele4-7 CFTRdele21 2721del11  
CFTRdele4-11 CFTRdele22-24 2991del32  
CFTR50kbdel CFTRdele22,23 3667ins4  
CFTRdup6b-10 124del23bp 4010del4  
CFTRdele11 602del14 4209TGTT→AA  
CFTRdele13,14a 852del22     
CFTRdele14b-17b 991del5     
A46D V520F Y569D N1303K   
G85E A559T L1065P      
R347P R560T R1066C      
L467P R560S L1077P      
I507del A561E M1101K      
                
在一些實施例中，本揭示案亦係關於使用上文所提及之化合物的經同位素標記之化合物或其醫藥學上可接受之鹽進行之治療方法，其中此類化合物及鹽之式及變項各自且獨立地如上文或上文所描繪之任何其他實施例所描繪，其限制條件為其中之一或多個原子已經原子質量或質量數不同於通常天然存在之原子(經同位素標記)之原子質量或質量數的一或多個原子置換。市售及適用於本揭示案之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，例如分別 2H、 3H、 13C、 14C、 15N、 18O、 17O、 31P、 32P、 35S、 18F及 36Cl。
同位素標記之化合物及鹽可以許多有益方式使用。其可適用於藥劑及/或各種類型之分析，諸如受質組織分佈分析。舉例而言，氚( 3H)及/或碳-14 ( 14C)標記之化合物因製備相對簡單及極佳可偵測性而特別適用於各種類型之分析，諸如受質組織分佈分析。舉例而言，氘( 2H)標記之化合物相對於非 2H標記之化合物因潛在治療優勢而在治療上有用。一般而言，相較於未同位素標記之化合物，氘( 2H)標記之化合物及鹽因下文描述之動力學同位素效應而可能具有較高代謝穩定性。更高代謝穩定性直接轉化成提高的活體內半衰期或更低劑量，其可為所需的。同位素標記之化合物及鹽通常可藉由進行本發明正文中實例部分及製備部分中合成流程及相關描述中所揭示之程序，用容易獲得之同位素標記之反應物替換非同位素標記反應物來製備。
在一些實施例中，同位素標記之化合物及鹽為氘( 2H)標記之化合物及鹽。在一些特定實施例中，同位素標記之化合物及鹽經氘( 2H)標記，其中當中之一或多個氫原子已由氘置換。在化學結構中，氘表示為「 2H」或「D」。
當發現及研發治療劑時，熟習此項技術者嘗試在保留所需活體外特性同時使藥物動力學參數最佳化。可合理地假設許多具有不良藥物動力學概況之化合物易於氧化代謝。
氘( 2H)標記之化合物及鹽可藉助於一級動力學同位素效應調節化合物之氧化代謝。一級動力學同位素效應為由同位素核交換產生的化學反應之速率改變，同位素核交換又由此同位素交換後共價鍵形成所需之基態能量改變引起。較重的同位素之交換通常引起化學鍵之基態能量之降低且因此引起限速鍵斷裂之減少。若鍵斷裂發生在沿著多產物反應座標的鞍點區域中或附近，則可實質上改變產物分佈比率。解釋：若氘鍵結至不可交換位置處之碳原子，則k M/k D= 2-7之速率差異為典型的。關於其他論述，參見S. L. Harbeson及R. D. Tung, Deuterium In Drug Discovery and Development, Ann. Rep. Med. Chem. 2011, 46, 403-417，其以引用的方式併入本文中。
併入同位素標記之本發明化合物及鹽中的同位素(例如氘)之濃度可藉由同位素富集因子定義。如本文所使用，術語「同位素富集因子」意謂指定同位素之同位素豐度與天然豐度之間的比率。在一些實施例中，若本發明之化合物中的取代基標示為氘，則此類化合物所具有的各指定氘原子之同位素富集因數為至少3500 (在各指定氘原子處52.5%氘併入)、至少4000 (60%氘併入)、至少4500 (67.5%氘併入)、至少5000 (75%氘併入)、至少5500 (82.5%氘併入)、至少6000 (90%氘併入)、至少6333.3 (95%氘併入)、至少6466.7 (97%氘併入)、至少6600 (99%氘併入)或至少6633.3 (99.5%氘併入)。 組合療法
本文揭示之一個態樣提供使用本文揭示之新穎化合物及固體形式中之任一者與至少一種額外活性醫藥成分組合來治療囊腫纖維化及其他CFTR介導之疾病的方法，該等新穎化合物及固體形式諸如式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh ' 之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及前述中之任一者之醫藥學上可接受之鹽。
因此，在一些實施例中，本發明提供治療患者之囊腫纖維化、減輕其嚴重程度或對症治療之方法，其包含單獨或與至少一種額外活性醫藥成分(諸如CFTR調節劑)組合，向患者投與有效量之本文揭示之新穎化合物及固體形式中之任一者，諸如式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物及彼等化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分係選自黏液溶解劑、支氣管擴張劑、抗生素、抗感染劑及消炎劑。
在一些實施例中，額外治療劑為抗生素。適用於本文中之例示性抗生素包括托普黴素(tobramycin)(包括托普黴素吸入粉末(TIP))、阿奇黴素(azithromycin)、安曲南(aztreonam)(包括安曲南之氣溶膠化形式)、阿米卡星(amikacin)(包括其脂質體調配物)、環丙沙星(ciprofloxacin)(包括其適合於藉由吸入投與之調配物)、左氧氟沙星(levoflaxacin)(包括其氣溶膠化調配物)及兩種抗生素，例如磷黴素(fosfomycin)與托普黴素之組合。
在一些實施例中，額外藥劑為黏液溶解劑。適用於本文中之例示性黏液溶解劑包括Pulmozyme®。
在一些實施例中，額外藥劑為支氣管擴張劑。例示性支氣管擴張劑包括沙丁胺醇(albuterol)、硫酸奧西那林(metaprotenerol sulfate)、乙酸吡布特羅(pirbuterol acetate)、沙美特羅(salmeterol)或硫酸特布林(tetrabuline sulfate)。
在一些實施例中，額外藥劑為消炎劑，亦即可降低肺中之炎症的藥劑。適用於本文中之例示性此類藥劑包括布洛芬(ibuprofen)、二十二碳六烯酸(docosahexanoic acid，DHA)、西地那非(sildenafil)、吸入型麩胱甘肽、吡格列酮(pioglitazone)、羥基氯奎(hydroxychloroquine)或辛伐他汀(simavastatin)。
在一些實施例中，額外藥劑為營養劑。例示性營養劑包括胰脂肪酶(胰臟酶替換物)，包括Pancrease®、Pancreacarb®、Ultrase®或Creon®、Liprotomase® (先前為Trizytek®)、Aquadeks®或麩胱甘肽吸入劑。在一個實施例中，額外營養劑為胰脂肪酶。
在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分係選自CFTR調節劑。在一些實施例中，CFTR調節劑為CFTR校正劑。在一些實施例中，CFTR調節劑為CFTR增效劑增強劑/輔增效劑(例如ASP-11)。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR擴增劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR通讀藥劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR核酸療法。
在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為ENaC抑制劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為TMEM16A調節劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為GPR39促效劑。
在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分係選自(a)化合物 II及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)化合物 IV及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(c)化合物 V及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(d)化合物 VI及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(e)化合物 VII及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；及(f)化合物 VIII及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽。因此，在一些實施例中，本文提供之組合療法包含選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽；及至少一種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，本文提供之組合療法包含(a)至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II、化合物 IV 、的化合物及其醫藥學上可接受之鹽及氘化衍生物；及(c)至少一種選自化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，本文提供之組合療法包含(a)至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II的化合物及其醫藥學上可接受之鹽及氘化衍生物；及(c)至少一種選自化合物 VII的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，本文提供之組合療法包含(a)選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；及(c)至少一種選自以下中揭示之化合物的化合物：WO 2016/105485、美國專利申請公開案第2016-0120841號、美國專利申請公開案第2017-0101405號、WO 2017/009804、WO 2018/065921、WO 2017/062581；Phuan, P.-W.等人 J. Cyst. Fibros. 2018, 17(5), 595-606；Pedemonte, N.等人 Sci. Adv. 2020, 6(8), eaay9669；Phuan, P.-W.等人 Sci. Rep. 2019, 9(1), 17640；Bose, S.等人 J. Cyst. Fibros. 2020, 19 增刊 1, S25-S32；Crawford, D.K. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374(2), 264-272；Brasell, E.J.等人 PLoS One 2019, 14(12), e0223954；Smith, N.J, Solovay, C.F., Pharm. Pat. Anal. 2017, 6(4), 179-188；Kunzelmann, K.等人, Front. Pharmacol. 2019, 10, 3；或Son, J.-H.等人, Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888。
在一些實施例中，本文提供之組合療法包含(a)選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；及(c)至少一種選自PTI-428、ASP-11、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766、PTI-801、FDL-176、PTI-808、GLPG1837、GLPG2451/ABBV-2451 (艾森卡福特(Icenticaftor))、GLPG3067/ABBV-3067 (納沃卡福特(Navocaftor))、ABBV-191、ELX-02、MRT5005、Lunar-CF、RCT223、胺氯吡脒、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037 (VX-371)、P-1055 (VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5 Rx、BI 1265162、AZ5634、ARO-ENaC1001、ETD002及DS-1039的化合物。
在一些實施例中，本文提供之組合療法包含(a)選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽；及(b)至少兩種選自以下中揭示之化合物的化合物：WO 2019/195739、WO 2019/200246、WO 2021/030555、WO 2021/030556、WO 2010/053471、WO 2011/119984、WO 2011/133751、WO 2011/133951、WO 2015/160787、WO 2007/056341、WO 2009/073757、WO 2009/076142、WO 2018/107100、WO 2019/113476、WO 2018/064632、WO 2019/152940、WO 2016/057572、WO 2021/030554、WO 2020/206080、WO 2016/105485、美國專利申請公開案第2016-0120841號、美國專利申請公開案第2017-0101405號、WO 2017/009804、WO 2018/065921、WO 2017/062581；Phuan、P.-W.等人 J. Cyst. Fibros. 2018, 17(5), 595-606；Pedemonte, N.等人 Sci. Adv. 2020, 6(8), eaay9669；Phuan, P.-W.等人. Sci. Rep. 2019, 9(1), 17640；Bose, S.等人 J. Cyst. Fibros. 2020, 19 增刊 1, S25-S32；Crawford, D.K. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374(2), 264-272；Brasell, E.J.等人 PLoS One 2019, 14(12), e0223954；Smith, N.J, Solovay, C.F., Pharm. Pat. Anal. 2017, 6(4), 179-188；Kunzelmann, K.等人, Front. Pharmacol. 2019, 10, 3；或Son, J.-H.等人, Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888。
在一些實施例中，本文提供之組合療法包含(a)選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽；(b)至少兩種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X、PTI-428、ASP-11、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766、PTI-801、FDL-176、PTI-808、GLPG1837、GLPG2451/ABBV-2451 (艾森卡福特)、GLPG3067/ABBV-3067 (納沃卡福特)、ABBV-191、ELX-02、MRT5005、Lunar-CF、RCT223、胺氯吡脒、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037 (VX-371)、P-1055 (VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5 Rx、BI 1265162、AZ5634、ARO-ENaC1001、ETD002及DS-1039及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽係與至少一種選自化合物 II的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽組合投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及彼等化合物及氘化衍生物之醫藥學上可接受之鹽係與至少一種選自化合物 IV的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽組合投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及彼等化合物及氘化衍生物之醫藥學上可接受之鹽係與至少一種選自化合物 V的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽組合投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及彼等化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽係與至少一種選自化合物 VI的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽組合投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽係與至少一種選自化合物 VII的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽組合投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物、彼等化合物之氘化衍生物以及前述化合物及氘化衍生物中之任一者之醫藥學上可接受之鹽係與至少一種選自化合物 VIII的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽組合投與。
式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222、化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X及其氘化衍生物及其醫藥學上可接受之鹽中之每一者可獨立地每天一次、每天兩次或每天三次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 II的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 II的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 IV的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 IV的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 V及其醫藥學上可接受之鹽的化合物係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 V的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 VI的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自 VI化合物的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 VII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 VII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 VIII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種選自化合物 VIII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。
在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；至少一種選自化合物 II 、化合物 IV的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及至少一種選自化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；至少一種選自化合物 II 、化合物 IV的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及至少一種選自化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；至少一種選自化合物 II的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及至少一種選自化合物 VII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天一次投與。在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；至少一種選自化合物 II的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及至少一種選自化合物 VII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係每天兩次投與。
式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222、化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X以及其氘化衍生物及其醫藥學上可接受之鹽可以單一醫藥組成物或單獨醫藥組成物形式投與。該等醫藥組成物可每天一次或每天多次，諸如每天兩次投與。如本文所用，片語每天(daily/per day)一次或兩次投與既定量之API (例如化合物 II、化合物 VII或其醫藥學上可接受之鹽)意謂，每劑量投與該既定量，其可每天一次或兩次進行。
在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽係以第一醫藥組成物形式投與；及至少一種選自化合物 VII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係以第二醫藥組成物形式投與。
在一些實施例中，至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽係以第一醫藥組成物形式投與；至少一種選自化合物 II的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係以第二醫藥組成物形式投與；及至少一種選自化合物 VII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽係以第三醫藥組成物形式投與。
此項技術中已知之任何合適的醫藥組成物可用於式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222、化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽。用於化合物 II及其醫藥學上可接受之鹽之一些例示性醫藥組成物可見於WO 2011/119984及WO 2014/014841中，該等文獻以引用之方式併入本文中。用於化合物 III及其醫藥學上可接受之鹽之一些例示性醫藥組成物可見於WO 2007/134279、WO 2010/019239、WO 2011/019413、WO 2012/027731及WO 2013/130669中，且用於化合物 III-d及其醫藥學上可接受之鹽之一些例示性醫藥組成物可見於US 8,865,902、US 9,181,192、US 9,512,079、WO 2017/053455及WO 2018/080591中，以上所有案均以引用之方式併入本文中。用於化合物 IV及其醫藥學上可接受之鹽之一些例示性醫藥組成物可見於WO 2010/037066、WO 2011/127421及WO 2014/071122中，該等文獻以引用之方式併入本文中。用於化合物 V及其醫藥學上可接受之鹽之一些例示性醫藥組成物可見於WO 2019/152940中，該文獻以引用之方式併入本文中。用於化合物 VI及其醫藥學上可接受之鹽之一些例示性醫藥組成物可見於WO 2019/079760中，該文獻以引用之方式併入本文中。 醫藥組成物
本發明之另一態樣提供一種醫藥組成物，其包含至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，及至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本發明提供醫藥組成物，其包含至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，以及至少一種額外活性醫藥成分。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR調節劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR校正劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR增效劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為增強CFTR增效作用之化合物，亦即CFTR增效劑增強劑/輔增效劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR擴增劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR通讀藥劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為CFTR核酸療法。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為ENaC抑制劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為TMEM16A調節劑。在一些實施例中，至少一種額外活性醫藥成分為GPR39促效劑。在一些實施例中，醫藥組成物包含至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；及至少兩種額外活性醫藥成分，其中之每一者為CFTR校正劑。在一些實施例中，醫藥組成物包含至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；及至少兩種額外活性醫藥成分，其中之一者為CFTR校正劑且其中之一者為CFTR增效劑增強劑。
在一些實施例中，本發明提供一種醫藥組成物，其包含(a)至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及(c)至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本發明提供一種醫藥組成物，其包含(a)至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及(c)至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本發明提供一種醫藥組成物，其包含(a)至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 VII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及(c)至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本發明提供一種醫藥組成物，其包含(a)至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II、化合物 IV的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；(c)至少一種選自化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及(d)至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本發明提供一種醫藥組成物，其包含(a)至少一種選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；(c)至少一種選自化合物 VII的化合物及其醫藥學上可接受之鹽；及(d)至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本文所提供之醫藥組成物包含(a)選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(c)至少一種選自以下中揭示之化合物的化合物：WO 2016/105485、美國專利申請公開案第2016-0120841號、美國專利申請公開案第2017-0101405號、WO 2017/009804、WO 2018/065921、WO 2017/062581；Phuan, P.-W.等人 J. Cyst. Fibros. 2018, 17(5), 595-606；Pedemonte, N.等人 Sci. Adv. 2020, 6(8), eaay9669；Phuan, P.-W.等人 Sci. Rep. 2019, 9(1), 17640; Bose, S.等人 J. Cyst. Fibros. 2020, 19 增刊 1, S25-S32；Crawford, D.K. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374(2), 264-272；Brasell, E.J.等人 PLoS One 2019, 14(12), e0223954；Smith, N.J, Solovay, C.F., Pharm. Pat. Anal. 2017, 6(4), 179-188；Kunzelmann, K.等人, Front. Pharmacol. 2019, 10, 3；或Son, J.-H.等人, Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888；及(d)至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本文所提供之醫藥組成物包含(a)選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少一種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X的化合物以及其醫藥學上可接受之鹽及氘化衍生物；(c)至少一種選自PTI-428、ASP-11、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766、PTI-801、FDL-176、PTI-808、GLPG1837、GLPG2451/ABBV-2451 (艾森卡福特)、GLPG3067/ABBV-3067 (納沃卡福特)、ABBV-191、ELX-02、MRT5005、Lunar-CF、RCT223、胺氯吡脒、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037 (VX-371)、P-1055 (VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5 Rx、BI 1265162、AZ5634、ARO-ENaC1001、ETD002及DS-1039的化合物；及(d)至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本文所提供之醫藥組成物包含(a)選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少兩種選自以下中揭示之化合物的化合物：WO 2019/195739、WO 2019/200246、WO 2021/030555、WO 2021/030556、WO 2010/053471、WO 2011/119984、WO 2011/133751、WO 2011/133951、WO 2015/160787、WO 2007/056341、WO 2009/073757、WO 2009/076142、WO 2018/107100、WO 2019/113476、WO 2018/064632、WO 2019/152940、WO 2016/057572、WO 2021/030554、WO 2020/206080 、WO 2016/105485、美國專利申請公開案第2016-0120841號、美國專利申請公開案第2017-0101405號、WO 2017/009804、WO 2018/065921、WO 2017/062581；Phuan, P.-W.等人 J. Cyst. Fibros. 2018, 17(5), 595-606；Pedemonte, N.等人 Sci. Adv. 2020, 6(8), eaay9669；Phuan, P.-W.等人 Sci. Rep. 2019, 9(1), 17640；Bose, S.等人 J. Cyst. Fibros. 2020, 19 增刊 1, S25-S32；Crawford, D.K. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374(2), 264-272；Brasell, E.J.等人 PLoS One 2019, 14(12), e0223954；Smith, N.J, Solovay, C.F., Pharm. Pat. Anal. 2017, 6(4), 179-188；Kunzelmann, K.等人, Front. Pharmacol. 2019, 10, 3；或Son, J.-H.等人, Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888；及(c)至少一種醫藥學上可接受之載體。
在一些實施例中，本文所提供之醫藥組成物包含(a)選自式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物及固體形式、化合物1至213、化合物214至222的化合物以及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽；(b)至少兩種選自化合物 II、化合物 IV、化合物 V、化合物 VI、化合物 VII、化合物 VIII、化合物 IX、化合物 X、PTI-428、ASP-11、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766、PTI-801、FDL-176、PTI-808、GLPG1837、GLPG2451/ABBV-2451 (艾森卡福特)、GLPG3067/ABBV-3067 (納沃卡福特)、ABBV-191、ELX-02、MRT5005、Lunar-CF、RCT223、胺氯吡脒、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037 (VX-371)、P-1055 (VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5 Rx、BI 1265162、AZ5634、ARO-ENaC1001、ETD002及DS-1039的化合物以及其醫藥學上可接受之鹽及氘化衍生物；及(c)至少一種醫藥學上可接受之載體。
本文所揭示之任何醫藥組成物可包含至少一種醫藥學上可接受之載體。在一些實施例中，該至少一醫藥學上可接受之載體係選自於醫藥學上可接受之載體和醫藥學上可接受之佐劑。在一些實施例中，該至少一醫藥學上可接受之係選自於醫藥學上可接受之填充劑、崩解劑、界面活性劑、黏合劑、潤滑劑。
本文所描述之醫藥組成物適用於治療囊腫纖維化及其他CFTR介導之疾病。
如上文所描述，本文所揭示之醫藥組成物可視情況進一步包含至少一種醫藥學上可接受之載體。該至少一醫藥學上可接受之載體可選自佐劑及載體。如本文所用之該至少一醫藥學上可接受之載體包括任何及所有溶劑、稀釋劑、其他液體載體、分散助劑、懸浮助劑、界面活性試劑、等滲劑、增稠劑、乳化劑、防腐劑、固體黏合劑及潤滑劑，如適用於所期望之特定劑型。Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第21版，2005，D.B. Troy編，Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia，以及 Encyclopedia of Pharmaceutical Technology，J. Swarbrick及J. C. Boylan編，1988-1999, Marcel Dekker, New York揭示了用於配製醫藥組成物之多種載體及已知用於製備該醫藥組成物之技術。除非任何習用載體與本發明之化合物不相容，例如因產生任何不期望之生物效應或者以有害方式與醫藥組成物之任何其他成分相互作用，否則認為其使用落於本發明之範圍內。合適之醫藥學上可接受之載體之非限制性實例包括但不限於離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白(例如人類血清白蛋白)、緩衝物質(例如磷酸鹽、甘胺酸、山梨酸及山梨酸鉀)、飽和植物脂肪酸、水、鹽及電解質(例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉及鋅鹽)之偏甘油酯混合物、膠體二氧化矽、三矽酸鎂、聚乙烯吡咯啶酮、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、羊毛脂、糖(例如乳糖、葡萄糖及蔗糖)、澱粉(例如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉)、纖維素及其衍生物(例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素)、粉末狀黃蓍膠、麥芽、明膠、滑石、賦形劑(例如可哥脂及栓劑蠟)、油(例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油)、二醇(例如丙二醇及聚乙二醇)、酯(例如油酸乙酯及月桂酸乙酯)、瓊脂、緩衝劑(例如氫氧化鎂及氫氧化鋁)、海藻酸、無致熱原水、等滲生理食鹽水、林格氏液、乙醇、磷酸鹽緩衝溶液、無毒相容性潤滑劑(例如月桂基硫酸鈉及硬脂酸鎂)、著色劑、釋放劑、塗覆劑、甜味劑、矯味劑、芳香劑、防腐劑及抗氧化劑。 非限制性例示性實施例  1. 一種選自式 I化合物之化合物：
Figure 02_image483
I， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N( R X1 )-及
Figure 02_image485
； 環 A為4至6員雜環基，其視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基及側氧基之基團取代； R X1 係選自H、C 1-C 6烷基((視情況經1-3個獨立地選自羥基、側氧基、-O R X2 及-N( R X2 ) 2之基團取代)及C 3-C 8環烷基； 各 R X2 係獨立地選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-、-O-、-CO-、-N R YN -及
Figure 02_image487
，其中各 R YN 係獨立地選自H、C 1-C 4烷基及CO 2 R YN1 ，其中各 R YN1 係獨立地選自C 1-C 4烷基及C 3-C 6環烷基； 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-O R Y1 、-CO 2 R Y1 、-CO R Y1 、-CON( R Y1 ) 2及-N( R Y1 ) 2； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基； 環 B係選自： ▪  C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、C 1-C 6烷基及C 1-C 6烷氧基之基團取代)， ▪  C 3-C 8環烷基， ▪  5至10員雜芳基，及 ▪  3至6員雜環基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)； 各 Q係獨立地選自： ▪  C 1-C 6烷基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o 側氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及-OCF 3之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 3-C 8環烷基，其視情況經1-3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、-NH 2及-NHCOMe之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 6-C 10芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及羥基之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基，其視情況經1-4個獨立地選自以下之基團取代： ▪  鹵素， ▪  C 3-C 8環烷基(視情況經CF 3取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、CF 3、OCF 3及C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 6-C 10芳基， ▪  5至10員雜芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個CF 3基團取代)，及 o 3至10員雜環基， ▪  3至10員雜環基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自側氧基及C 3-C 8環烷基之基團取代)，及 o 側氧基； 各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自羥基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)、3至6員雜環基、-B(O R 2 ) 2、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 、-PO(O R 2 ) 2及-PO( R 2 ) 2； 各 R 2 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1至6個獨立地選自鹵素之基團取代)、C 1-C 6氟烷基及C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷基及C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)； Z係選自
Figure 02_image489
、
Figure 02_image491
、
Figure 02_image493
及
Figure 02_image495
；其中 環 C係選自C 6-C 10芳基及5至10員雜芳基； R Z1 係選自氫、-CN、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基； R Z2 係選自氫、鹵素、羥基、NH 2、NH(CO)(C 1-C 6烷基)及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團； 各 R Z3 係獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷基及C 6-C 10芳基；或兩個 R Z3 一起形成3至6員雜環基； n係選自4、5、6、7及8；及 m係選自0、1、2及3。 2. 如實施例1之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N( R X1 )-及
Figure 02_image497
； 環 A為4至6員雜環基，其視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基及側氧基之基團取代； R X1 係選自H、C 1-C 6烷基((視情況經1-3個獨立地選自羥基、側氧基、-O R X2 及-N( R X2 ) 2之基團取代)及C 3-C 8環烷基； 各 R X2 係獨立地選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-、-O-、-CO-、-N R YN -及
Figure 02_image499
，其中各 R YN 係獨立地選自H、C 1-C 4烷基及CO 2Me； 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-O R Y1 、-CO 2 R Y1 、-CO R Y1 、-CON( R Y1 ) 2及-N( R Y1 ) 2； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基； 環 B係選自： ▪  C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、C 1-C 6烷基及C 1-C 6烷氧基之基團取代)， ▪  C 3-C 8環烷基， ▪  5至10員雜芳基，及 ▪  3至6員雜環基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)； 各 Q係獨立地選自： ▪  C 1-C 6烷基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o 側氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及-OCF 3之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 3-C 8環烷基，其視情況經1-3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、-NH 2及-NHCOMe之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 6-C 10芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及羥基之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基，其視情況經1-4個獨立地選自以下之基團取代： ▪  鹵素， ▪  C 3-C 8環烷基(視情況經CF 3取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、CF 3、OCF 3及C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 6-C 10芳基， ▪  5至10員雜芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個CF 3基團取代)，及 o 3至10員雜環基， ▪  3至10員雜環基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自側氧基及C 3-C 8環烷基之基團取代)，及 o 側氧基； 各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)、3至6員雜環基、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 、-PO(O R 2 ) 2及-PO( R 2 ) 2； 各 R 2 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1至6個獨立地選自鹵素之基團取代)、C 1-C 6氟烷基及C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷基及C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)； Z係選自
Figure 02_image501
、
Figure 02_image503
、
Figure 02_image504
及
Figure 02_image505
； R Z1 係選自氫、-CN、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基； R Z2 係選自氫、鹵素、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團； 各 R Z3 係獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷基及C 6-C 10芳基；或兩個 R Z3 一起形成3至6員雜環基； n係選自4、5、6及7；及 m係選自0、1、2及3。 3. 如實施例1或2之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X為-N R X1 。 4. 如實施例1至3中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X係選自：
Figure 02_image507
、
Figure 02_image509
、
Figure 02_image511
、
Figure 02_image513
、
Figure 02_image515
、
Figure 02_image517
、
Figure 02_image519
及
Figure 02_image521
。 5. 如實施例1或2之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X為
Figure 02_image523
。 6. 如實施例1、2或5之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 環 A係選自吡咯啶、哌嗪、嗎啉及異噻唑啶。 7. 如實施例1、2、5或6之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X係選自：
Figure 02_image525
、
Figure 02_image527
、
Figure 02_image529
、
Figure 02_image531
、
Figure 02_image533
、
Figure 02_image535
及
Figure 02_image537
。 8. 如實施例1至7中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R Y 係獨立地選自： 氫、羥基、甲基、
Figure 02_image539
、
Figure 02_image541
、
Figure 02_image543
、
Figure 02_image545
、
Figure 02_image547
、
Figure 02_image549
、
Figure 02_image551
、
Figure 02_image553
、
Figure 02_image555
、
Figure 02_image557
、
Figure 02_image559
、
Figure 02_image561
、
Figure 02_image563
及
Figure 02_image565
；或 其中同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃基及四氫哌喃基之環；或 其中兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。 9. 如實施例1至8中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Q係獨立地選自C 6-C 10芳基，其視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷基之基團取代。 10.   如實施例1至9中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Q為苯基。 11.   如實施例1至10中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 環 B係獨立地選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及5至10員雜芳基。 12.   如實施例1至11中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 環 B係獨立地選自：
Figure 02_image567
、
Figure 02_image569
、
Figure 02_image571
、
Figure 02_image573
及
Figure 02_image575
。 13.   如實施例1至12中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中-( Y) n-為選自以下之基團：
Figure 02_image577
、
Figure 02_image579
、
Figure 02_image581
、
Figure 02_image583
、
Figure 02_image585
、
Figure 02_image587
、
Figure 02_image589
、
Figure 02_image591
、
Figure 02_image593
、
Figure 02_image595
、
Figure 02_image597
、
Figure 02_image599
、
Figure 02_image601
、
Figure 02_image603
、
Figure 02_image605
、
Figure 02_image607
、
Figure 02_image609
、
Figure 02_image611
及
Figure 02_image613
。 14.   如實施例1至13中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中-( Y) n-為選自以下之基團：
Figure 02_image615
、
Figure 02_image617
、
Figure 02_image619
、
Figure 02_image621
、
Figure 02_image623
、
Figure 02_image625
、
Figure 02_image627
、
Figure 02_image629
、
Figure 02_image631
、
Figure 02_image633
、
Figure 02_image635
、
Figure 02_image637
、
Figure 02_image639
、
Figure 02_image641
、
Figure 02_image643
、
Figure 02_image645
、
Figure 02_image647
、
Figure 02_image649
、
Figure 02_image651
、
Figure 02_image653
、
Figure 02_image655
、
Figure 02_image657
、
Figure 02_image659
、
Figure 02_image661
、
Figure 02_image663
、
Figure 02_image665
、
Figure 02_image667
、
Figure 02_image669
、
Figure 02_image671
、
Figure 02_image673
、
Figure 02_image675
、
Figure 02_image677
、
Figure 02_image679
、
Figure 02_image681
、
Figure 02_image683
、
Figure 02_image685
、
Figure 02_image687
、
Figure 02_image689
、
Figure 02_image691
、
Figure 02_image693
、
Figure 02_image695
、
Figure 02_image697
、
Figure 02_image699
、
Figure 02_image701
、
Figure 02_image703
及
Figure 02_image705
。 15.   如實施例1至14中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Y為-C( R Y ) 2-。 16.   如實施例15之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Y係獨立地選自-CH 2-及-C(Me) 2-。 17.   如實施例1至16中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自C 1-C 6氟烷基及-N( R 2 ) 2。 18.   如實施例1至16中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自Br、-CH 3、-CF 3、-CHF 2、-OH、-OCH 3、-CN、-NH 2、
Figure 02_image707
、
Figure 02_image709
、
Figure 02_image711
、
Figure 02_image713
、
Figure 02_image715
、
Figure 02_image717
、
Figure 02_image719
、
Figure 02_image721
Figure 02_image723
、
Figure 02_image725
、
Figure 02_image727
、
Figure 02_image729
、
Figure 02_image731
、
Figure 02_image733
、
Figure 02_image735
、
Figure 02_image737
、
Figure 02_image739
、
Figure 02_image741
、
Figure 02_image743
、
Figure 02_image745
、
Figure 02_image747
及
Figure 02_image749
。 19.   如實施例1至18中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自-CF 3及-NH 2。 20.   如實施例1至19中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z係選自：
Figure 02_image751
、
Figure 02_image753
及
Figure 02_image755
。 21.   如實施例1至20中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中： R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基及C 6-C 10芳基， R Z2 係選自氫、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團； 22.   如實施例1至21中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z為
Figure 02_image757
。 23.   如實施例1至22中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中
Figure 02_image759
為
Figure 02_image761
。 24.   如實施例1至23中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z1 係選自C 1-C 6氟烷基。 25.   如實施例1至24中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z1 為-CF 3。 26.   如實施例1至25中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z2 為羥基。 27.   如實施例1至21中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z係選自：
Figure 02_image763
、
Figure 02_image765
、
Figure 02_image767
、
Figure 02_image769
、
Figure 02_image771
、
Figure 02_image773
、
Figure 02_image775
、
Figure 02_image777
、
Figure 02_image779
、
Figure 02_image781
、
Figure 02_image783
、
Figure 02_image785
及
Figure 02_image787
。 28.   如實施例1至21中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中
Figure 02_image789
係選自：
Figure 02_image791
、
Figure 02_image793
、
Figure 02_image795
、
Figure 02_image797
、
Figure 02_image799
、
Figure 02_image801
、
Figure 02_image803
、
Figure 02_image805
、
Figure 02_image807
、
Figure 02_image809
、
Figure 02_image811
、
Figure 02_image813
及
Figure 02_image815
。 29.   如實施例1至28中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 n係選自4、5及6。 30.   如實施例1至29中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 n為5。 31.   如實施例1至29中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 n為6。 32.   如實施例1至31中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 m係選自1及2。 33.   如實施例1至32中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 m為2。 34.   一種選自式 Ia化合物之化合物：
Figure 02_image817
Ia， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N R X1 -及
Figure 02_image819
； 環 A為4至6員雜環基，其視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基及側氧基之基團取代； R X1 係選自H、C 1-C 6烷基((視情況經1-3個獨立地選自羥基、側氧基、-O R X2 及-N( R X2 ) 2之基團取代)及C 3-C 8環烷基； 各 R X2 係獨立地選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-、-O-、-CO-、-N R YN -及
Figure 02_image821
，其中各 R YN 係獨立地選自H、C 1-C 4烷基及CO 2Me； 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-O R Y1 、-CO 2 R Y1 、-CO R Y1 、-CON( R Y1 ) 2及-N( R Y1 ) 2-； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基； 環 B係選自： ▪  C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、C 1-C 6烷基及C 1-C 6烷氧基之基團取代)， ▪  C 3-C 8環烷基， ▪  5至10員雜芳基，及 ▪  3至6員雜環基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)； 各 Q係獨立地選自： ▪  C 1-C 6烷基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o 側氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及-OCF 3之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 3-C 8環烷基，其視情況經1-3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、-NH 2及-NHCOMe之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 6-C 10芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及羥基之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基，其視情況經1-4個獨立地選自以下之基團取代： ▪  鹵素， ▪  C 3-C 8環烷基(視情況經CF 3取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、CF 3、OCF 3及C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 6-C 10芳基， ▪  5至10員雜芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個CF 3基團取代)，及 o 3至10員雜環基， ▪  3至10員雜環基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自側氧基及C 3-C 8環烷基之基團取代)，及 o 側氧基； 各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)3至6員雜環基、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 、-PO(O R 2 ) 2及-PO( R 2 ) 2； 各 R 2 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1至6個獨立地選自鹵素之基團取代)、C 1-C 6氟烷基及C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷基及C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)； Z係選自
Figure 02_image823
、
Figure 02_image824
、
Figure 02_image826
及
Figure 02_image828
； R Z1 係選自氫、-CN、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基； R Z2 係選自氫、鹵素、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團； 各 R Z3 係獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷基及C 6-C 10芳基；或兩個 R Z3 一起形成3至6員雜環基；及 n係選自4、5、6及7。 35.   如實施例34之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X為-N R X1 。 36.   如實施例34或35之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X係選自：
Figure 02_image830
、
Figure 02_image832
、
Figure 02_image834
、
Figure 02_image836
、
Figure 02_image838
、
Figure 02_image840
、
Figure 02_image842
及
Figure 02_image844
。 37.   如實施例34之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X為
Figure 02_image846
。 38.   如實施例34或37之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 環 A係選自吡咯啶、哌嗪、嗎啉及異噻唑啶。 39.   如實施例34、37或38之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X係選自：
Figure 02_image848
、
Figure 02_image850
、
Figure 02_image852
、
Figure 02_image854
、
Figure 02_image856
、
Figure 02_image858
及
Figure 02_image860
。 40.   如實施例34至39中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R Y 係獨立地選自： 氫、羥基、甲基、
Figure 02_image862
、
Figure 02_image864
、
Figure 02_image866
、
Figure 02_image868
、
Figure 02_image870
、
Figure 02_image872
、
Figure 02_image874
、
Figure 02_image876
、
Figure 02_image878
、
Figure 02_image880
、
Figure 02_image882
、
Figure 02_image884
、
Figure 02_image886
及
Figure 02_image888
；或 其中同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃基及四氫哌喃基之環；或 其中兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。 41.   如實施例34至40中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Q係獨立地選自C 6-C 10芳基，其視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷基之基團取代。 42.   如實施例34至41中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Q為苯基。 43.   如實施例34至42中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 環 B係獨立地選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及5至10員雜芳基。 44.   如實施例34至43中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 環 B係獨立地選自：
Figure 02_image890
、
Figure 02_image892
、
Figure 02_image894
、
Figure 02_image896
及
Figure 02_image898
。 45.   如實施例34至44中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中-( Y) n-為選自以下之基團：
Figure 02_image900
、
Figure 02_image902
、
Figure 02_image904
、
Figure 02_image906
、
Figure 02_image908
、
Figure 02_image910
、
Figure 02_image912
、
Figure 02_image914
、
Figure 02_image916
、
Figure 02_image918
、
Figure 02_image920
、
Figure 02_image922
、
Figure 02_image924
、
Figure 02_image926
、
Figure 02_image928
、
Figure 02_image930
、
Figure 02_image932
、
Figure 02_image934
及
Figure 02_image936
。 46.   如實施例34至45中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中-( Y) n-為選自以下之基團：
Figure 02_image938
、
Figure 02_image940
、
Figure 02_image942
、
Figure 02_image944
、
Figure 02_image946
、
Figure 02_image948
、
Figure 02_image950
、
Figure 02_image952
、
Figure 02_image954
、
Figure 02_image956
、
Figure 02_image958
、
Figure 02_image960
、
Figure 02_image962
、
Figure 02_image964
、
Figure 02_image966
、
Figure 02_image968
、
Figure 02_image970
、
Figure 02_image972
、
Figure 02_image974
、
Figure 02_image976
、
Figure 02_image978
、
Figure 02_image980
、
Figure 02_image982
、
Figure 02_image984
、
Figure 02_image986
、
Figure 02_image988
、
Figure 02_image989
、
Figure 02_image991
、
Figure 02_image993
、
Figure 02_image995
、
Figure 02_image997
、
Figure 02_image999
、
Figure 02_image1001
、
Figure 02_image1003
、
Figure 02_image1005
、
Figure 02_image1007
、
Figure 02_image1009
、
Figure 02_image1011
、
Figure 02_image1013
、
Figure 02_image1015
、
Figure 02_image1017
、
Figure 02_image1019
、
Figure 02_image1021
、
Figure 02_image1023
、
Figure 02_image1025
及
Figure 02_image1027
。 47.   如實施例34至45中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Y為-C( R Y ) 2-。 48.   如實施例47之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Y係獨立地選自-CH 2-及-C(Me) 2-。 49.   如實施例34至48中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自C 1-C 6氟烷基及-N( R 2 ) 2。 50.   如實施例34至48中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自Br、-CH 3、-CF 3、-CHF 2、-OH、-OCH 3、-CN、-NH 2、
Figure 02_image1029
、
Figure 02_image1031
、
Figure 02_image1033
、
Figure 02_image1035
、
Figure 02_image1037
、
Figure 02_image1039
、
Figure 02_image1041
、
Figure 02_image1043
Figure 02_image1045
、
Figure 02_image1047
、
Figure 02_image1049
、
Figure 02_image1051
、
Figure 02_image1053
、
Figure 02_image1055
、
Figure 02_image1057
、
Figure 02_image1059
、
Figure 02_image1061
、
Figure 02_image1063
、
Figure 02_image1065
、
Figure 02_image1067
、
Figure 02_image1069
及
Figure 02_image1071
。 51.   如實施例34至50中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自-CF 3及-NH 2。 52.   如實施例34至51中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z係選自：
Figure 02_image1073
、
Figure 02_image1075
及
Figure 02_image1076
。 53.   如實施例34至52中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中： R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基及C 6-C 10芳基， R Z2 係選自氫、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團。 54.   如實施例34至53中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z為
Figure 02_image1078
。 55.   如實施例34至54中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中
Figure 02_image1080
為
Figure 02_image1082
。 56.   如實施例34至55中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z1 係選自C 1-C 6氟烷基。 57.   如實施例34至56中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z1 為-CF 3。 58.   如實施例34至57中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z2 為羥基。 59.   如實施例34至53中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z係選自：
Figure 02_image1084
、
Figure 02_image1086
、
Figure 02_image1088
、
Figure 02_image1090
、
Figure 02_image1092
、
Figure 02_image1094
、
Figure 02_image1096
、
Figure 02_image1098
、
Figure 02_image1100
、
Figure 02_image1102
、
Figure 02_image1104
、
Figure 02_image1106
及
Figure 02_image1107
。 60.   如實施例34至53中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中
Figure 02_image1109
係選自：
Figure 02_image1111
、
Figure 02_image1113
、
Figure 02_image1115
、
Figure 02_image1117
、
Figure 02_image1119
、
Figure 02_image1121
、
Figure 02_image1123
、
Figure 02_image1125
、
Figure 02_image1127
、
Figure 02_image1129
、
Figure 02_image1131
、
Figure 02_image1133
及
Figure 02_image1135
。 61.   如實施例34至60中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 n係選自4、5及6。 62.   如實施例34至61中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 n為5。 63.   如實施例34至62中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 n為6。 64.   一種選自式 IIa、 IIb、 IIc及 IId之化合物的化合物：
Figure 02_image1137
IIa、
Figure 02_image1139
IIb、
Figure 02_image1141
IIc及
Figure 02_image1143
IId， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N R X1 -及
Figure 02_image1145
； 環 A為4至6員雜環基，其視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基及側氧基之基團取代； R X1 係選自H、C 1-C 6烷基((視情況經1-3個獨立地選自羥基、側氧基、-O R X2 及-N( R X2 ) 2之基團取代)及C 3-C 8環烷基； 各 R X2 係獨立地選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-、-O-、-CO-、-N R YN -及
Figure 02_image1147
，其中各 R YN 係獨立地選自H、C 1-C 4烷基及CO 2Me； 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-O R Y1 、-CO 2 R Y1 、-CO R Y1 、-CON( R Y1 ) 2及-N( R Y1 ) 2-； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基； 環 B係選自： ▪  C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、C 1-C 6烷基及C 1-C 6烷氧基之基團取代)， ▪  C 3-C 8環烷基， ▪  5至10員雜芳基，及 ▪  3至6員雜環基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)； 各 Q係獨立地選自： ▪  C 1-C 6烷基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o 側氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及-OCF 3之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 3-C 8環烷基，其視情況經1-3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、-NH 2及-NHCOMe之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 6-C 10芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及羥基之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基，其視情況經1-4個獨立地選自以下之基團取代： ▪  鹵素， ▪  C 3-C 8環烷基(視情況經CF 3取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、CF 3、OCF 3及C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 6-C 10芳基， ▪  5至10員雜芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個CF 3基團取代)，及 o 3至10員雜環基， ▪  3至10員雜環基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自側氧基及C 3-C 8環烷基之基團取代)，及 o 側氧基； 各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)、3至6員雜環基、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 、-PO(O R 2 ) 2及-PO( R 2 ) 2； 各 R 2 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1至6個獨立地選自鹵素之基團取代)、C 1-C 6氟烷基及C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷基及C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)； Z係選自
Figure 02_image1149
、
Figure 02_image1151
、
Figure 02_image1153
及
Figure 02_image1155
； R Z1 係選自氫、-CN、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基； R Z2 係選自氫、鹵素、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團； 各 R Z3 係獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷基及C 6-C 10芳基；或兩個 R Z3 一起形成3至6員雜環基；及 m係選自0、1、2及3。 65.   如實施例64之化合物，其中 m係選自1及2。 66.   如實施例64或65之化合物，其中 m為2。 67.   一種選自式 IIe、 IIf、 IIg及 IIh之化合物之化合物：
Figure 02_image1156
IIe、
Figure 02_image1158
IIf、
Figure 02_image1160
IIg及
Figure 02_image1162
IIh， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N R X1 -及
Figure 02_image1164
； 環 A為4至6員雜環基，其視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基及側氧基之基團取代； R X1 係選自H、C 1-C 6烷基((視情況經1-3個獨立地選自羥基、側氧基、-O R X2 及-N( R X2 ) 2之基團取代)及C 3-C 8環烷基； 各 R X2 係獨立地選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-、-O-、-CO-、-N R YN -及
Figure 02_image1166
，其中各 R YN 係獨立地選自H、C 1-C 4烷基及CO 2Me； 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-O R Y1 、-CO 2 R Y1 、-CO R Y1 、-CON( R Y1 ) 2及-N( R Y1 ) 2-； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基； 環 B係選自： ▪  C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、C 1-C 6烷基及C 1-C 6烷氧基之基團取代)， ▪  C 3-C 8環烷基， ▪  5至10員雜芳基，及 ▪  3至6員雜環基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)； 各 Q係獨立地選自： ▪  C 1-C 6烷基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o 側氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及-OCF 3之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 3-C 8環烷基，其視情況經1-3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、-NH 2及-NHCOMe之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基， o C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 3-C 8環烷基， ▪  C 6-C 10芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o CN， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及羥基之基團取代)， o C 1-C 6烷氧基，其視情況經1-4個獨立地選自以下之基團取代： ▪  鹵素， ▪  C 3-C 8環烷基(視情況經CF 3取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、CF 3、OCF 3及C 1-C 6烷基之基團取代)，及 o C 6-C 10芳基， ▪  5至10員雜芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o 鹵素， o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， o C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個CF 3基團取代)，及 o 3至10員雜環基， ▪  3至10員雜環基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： o C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自側氧基及C 3-C 8環烷基之基團取代)，及 o 側氧基； 各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)3至6員雜環基、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 、-PO(O R 2 ) 2及-PO( R 2 ) 2； 各 R 2 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1至6個獨立地選自鹵素之基團取代)、C 1-C 6氟烷基及C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷基及C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)； Z係選自
Figure 02_image1168
、
Figure 02_image1170
、
Figure 02_image1172
及
Figure 02_image1173
； R Z1 係選自氫、-CN、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基； R Z2 係選自氫、鹵素、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團；及 各 R Z3 係獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷基及C 6-C 10芳基；或兩個 R Z3 一起形成3至6員雜環基。 68.   如實施例64至67中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X為-N R X1 。 69.   如實施例64至68中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X係選自：
Figure 02_image1175
、
Figure 02_image1177
、
Figure 02_image1179
、
Figure 02_image1181
、
Figure 02_image1183
、
Figure 02_image1185
、
Figure 02_image1187
及
Figure 02_image1189
。 70.   如實施例64至67中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X為
Figure 02_image1191
。 71.   如實施例64至67或70中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 環 A係選自吡咯啶、哌嗪、嗎啉及異噻唑啶。 72.   如實施例64至67、70或71中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 X係選自：
Figure 02_image1193
、
Figure 02_image1195
、
Figure 02_image1197
、
Figure 02_image1199
、
Figure 02_image1201
、
Figure 02_image1203
及
Figure 02_image1205
。 73.   如實施例64至72中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R Y 係獨立地選自： 氫、羥基、甲基、
Figure 02_image1207
、
Figure 02_image1209
、
Figure 02_image1211
、
Figure 02_image1213
、
Figure 02_image1215
、
Figure 02_image1217
、
Figure 02_image1219
、
Figure 02_image1221
、
Figure 02_image1223
、
Figure 02_image1225
、
Figure 02_image1227
、
Figure 02_image1229
、
Figure 02_image1231
及
Figure 02_image1233
；或 其中同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃基及四氫哌喃基之環；或 其中兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。 74.   如實施例64至73中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Q係獨立地選自C 6-C 10芳基，其視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷基之基團取代。 75.   如實施例64至74中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Q為苯基。 76.   如實施例64至75中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 環 B係獨立地選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及5至10員雜芳基。 77.   如實施例64至76中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 環 B係獨立地選自：
Figure 02_image1235
、
Figure 02_image1237
、
Figure 02_image1239
、
Figure 02_image1241
及
Figure 02_image1243
。 78.   如實施例64至77中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中(-Y-Y-Y-Y-Y-Y-Y-)為選自以下之基團：
Figure 02_image1245
、
Figure 02_image1247
、
Figure 02_image1249
、
Figure 02_image1251
。 79.   如實施例78之化合物、氘化衍生物或鹽，其中(-Y-Y-Y-Y-Y-Y-Y-)為
Figure 02_image1253
， 80.   如實施例64至77中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中(-Y-Y-Y-Y-Y-Y-)為選自以下之基團：
Figure 02_image1255
、
Figure 02_image1257
、
Figure 02_image1259
、
Figure 02_image1261
、
Figure 02_image1263
、
Figure 02_image1265
、
Figure 02_image1267
、
Figure 02_image1269
及
Figure 02_image1271
。 81.   如實施例80之化合物、氘化衍生物或鹽，其中(-Y-Y-Y-Y-Y-Y-)為選自以下之基團：
Figure 02_image1273
、
Figure 02_image1275
、
Figure 02_image1277
、
Figure 02_image1279
、
Figure 02_image1281
、
Figure 02_image1283
、
Figure 02_image1285
、
Figure 02_image1287
、
Figure 02_image1289
、
Figure 02_image1291
、
Figure 02_image1293
、
Figure 02_image1295
、
Figure 02_image1297
、
Figure 02_image1299
、
Figure 02_image1301
、
Figure 02_image1303
、
Figure 02_image1305
、
Figure 02_image1307
、
Figure 02_image1309
、
Figure 02_image1311
、
Figure 02_image1313
、
Figure 02_image1315
、
Figure 02_image1317
、
Figure 02_image1319
、
Figure 02_image1321
、
Figure 02_image1323
、
Figure 02_image1325
,
Figure 02_image1327
、
Figure 02_image1329
、
Figure 02_image1331
、
Figure 02_image1333
、
Figure 02_image1335
、
Figure 02_image1337
及
Figure 02_image1339
。 82.   如實施例64至77中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中(-Y-Y-Y-Y-Y-)為選自以下之基團：
Figure 02_image1341
、
Figure 02_image1343
及
Figure 02_image1345
。 83.   如實施例82中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中(-Y-Y-Y-Y-Y-)為選自以下之基團：
Figure 02_image1347
及
Figure 02_image1349
。 84.   如實施例64至77中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中(-Y-Y-Y-Y-)為選自以下之基團：
Figure 02_image1351
、
Figure 02_image1353
及
Figure 02_image1355
。 85.   如實施例84之化合物、氘化衍生物或鹽，其中(-Y-Y-Y-Y-)為選自以下之基團：
Figure 02_image1357
、
Figure 02_image1359
、
Figure 02_image1361
、
Figure 02_image1363
、
Figure 02_image1365
、
Figure 02_image1367
、
Figure 02_image1369
、
Figure 02_image1371
及
Figure 02_image1373
。 86.   如實施例64至77中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Y為-C( R Y ) 2-。 87.   如實施例86之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 Y係獨立地選自-CH 2-及-C(Me) 2。 88.   如實施例64至87中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自C 1-C 6氟烷基及-N( R 2 ) 2。 89.   如實施例64至87中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自Br、-CH 3、-CF 3、-CHF 2、-OH、-OCH 3、-CN、-NH 2、
Figure 02_image1375
、
Figure 02_image1376
、
Figure 02_image1378
、
Figure 02_image1380
、
Figure 02_image1382
、
Figure 02_image1384
、
Figure 02_image1386
、
Figure 02_image1388
Figure 02_image1390
、
Figure 02_image1392
、
Figure 02_image1394
、
Figure 02_image1396
、
Figure 02_image1398
、
Figure 02_image1400
、
Figure 02_image1402
、
Figure 02_image1404
、
Figure 02_image1406
、
Figure 02_image1408
、
Figure 02_image1410
、
Figure 02_image1412
、
Figure 02_image1414
及
Figure 02_image1416
。 90.   如實施例64至89中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中各 R 1 係獨立地選自-CF 3及-NH 2。 91.   如實施例64至90中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z係選自：
Figure 02_image1418
、
Figure 02_image1420
及
Figure 02_image1422
。 92.   如實施例64至91中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中： R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基及C 6-C 10芳基， R Z2 係選自氫、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團。 93.   如實施例64至92中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z為
Figure 02_image1423
。 94.   如實施例64至93中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中
Figure 02_image1425
為
Figure 02_image1427
。 95.   如實施例64至94中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z1 係選自C 1-C 6氟烷基。 96.   如實施例64至95中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z1 為-CF 3。 97.   如實施例64至96中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 R Z2 為羥基。 98.   如實施例64至92中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中 Z係選自：
Figure 02_image1429
、
Figure 02_image1431
、
Figure 02_image1433
、
Figure 02_image1435
、
Figure 02_image1437
、
Figure 02_image1439
、
Figure 02_image1441
、
Figure 02_image1443
、
Figure 02_image1445
、
Figure 02_image1447
、
Figure 02_image1449
、
Figure 02_image1451
及
Figure 02_image1452
。 99.   如實施例64至92中任一項之化合物、氘化衍生物或鹽，其中
Figure 02_image1454
係選自：
Figure 02_image1455
、
Figure 02_image1457
、
Figure 02_image1459
、
Figure 02_image1461
、
Figure 02_image1463
、
Figure 02_image1465
、
Figure 02_image1467
、
Figure 02_image1469
、
Figure 02_image1471
、
Figure 02_image1473
、
Figure 02_image1475
、
Figure 02_image1477
及
Figure 02_image1479
。 100.  如實施例1之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 X為-N( R X1 )-。 101.  如實施例1之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 X為
Figure 02_image1481
。 102.  如實施例1之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 X係選自： -NH-、-N(CH 3)-、-N(CH 2CH 3)-、
Figure 02_image1483
、
Figure 02_image1485
、
Figure 02_image1487
、
Figure 02_image1489
、
Figure 02_image1491
、
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、
Figure 02_image1495
、
Figure 02_image1497
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、
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、
Figure 02_image1503
、
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、
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、
Figure 02_image1511
、
Figure 02_image1513
、
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、
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、
Figure 02_image1521
、
Figure 02_image1523
、
Figure 02_image1525
、
Figure 02_image1527
、
Figure 02_image1529
及
Figure 02_image1531
。 103.  如實施例1及100至102中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-CO 2 R Y1 及-CON( R Y1 ) 2； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環； 或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。 104.  如實施例1及100至103中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基。 105.  如實施例1及100至104中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 Q係獨立地選自C 6-C 10芳基。 106.  如實施例1及100至105中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 Q為苯基。 107.  如實施例1及100至106中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： 各 R Y 係獨立地選自： 氫、羥基、-CH 3、-CD 3、-CH 2CH 3、
Figure 02_image1533
、
Figure 02_image1535
、
Figure 02_image1537
、
Figure 02_image1539
、
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、
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、
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、
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、
Figure 02_image1551
、
Figure 02_image1553
、
Figure 02_image1555
及
Figure 02_image1557
； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自環丁基、環戊基、環己基、四氫吡咯基及四氫呋喃基之環； 或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。 108.  如實施例1及100至107中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 B係選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及5至10員雜芳基。 109.  如實施例1及100至108中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 B係選自苯基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及吡啶基。 110.  如實施例1及100至109中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 B係選自：
Figure 02_image1559
、
Figure 02_image1561
、
Figure 02_image1563
、
Figure 02_image1565
、
Figure 02_image1567
及
Figure 02_image1569
。 111.  如實施例1及100至110中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 n係選自4、5、6及7。 112.  如實施例1及100至111中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中-( Y) n-為選自以下之基團：
Figure 02_image1571
、
Figure 02_image1573
、
Figure 02_image1575
、
Figure 02_image1577
、
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、
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、
Figure 02_image1583
、
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、
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、
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、
Figure 02_image1591
、
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、
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、
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、
Figure 02_image1599
、
Figure 02_image1601
、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
Figure 02_image1633
、
Figure 02_image1635
、
Figure 02_image1637
、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
Figure 02_image1653
、
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、
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、
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、
Figure 02_image1661
、
Figure 02_image1663
、
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、
Figure 02_image1667
、
Figure 02_image1669
、
Figure 02_image1671
、
Figure 02_image1673
、
Figure 02_image1675
、
Figure 02_image1677
、
Figure 02_image1679
、
Figure 02_image1681
、
Figure 02_image1683
、
Figure 02_image1685
、
Figure 02_image1687
、
Figure 02_image1689
、
Figure 02_image1691
、
Figure 02_image1693
、
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、
Figure 02_image1697
、
Figure 02_image1699
、
Figure 02_image1701
、
Figure 02_image1703
、
Figure 02_image1705
、
Figure 02_image1707
、
Figure 02_image1709
、
Figure 02_image1711
及
Figure 02_image1713
。 113.  如實施例1及100至112中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自C 6-C 10芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)、3至6員雜環基、-B(O R 2 ) 2、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 及-PO( R 2 ) 2。 114.  如實施例1及100至113中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R 2 係獨立地選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)。 115.  如實施例1及100至114中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R 1 係獨立地選自-Br、-CF 3、-NH 2、-CH 3、-CH(CH 3) 2、-CN、-OH、-OCH 3、-NH(CH 3)、-NH(CH 2CH 3)、-CONH 2、- CO 2CH 3、-SO 2CH 3、-SO 2Ph、PO(CH 3) 2、B(OH) 2、苯基、吡啶基、四氫哌喃基、四氫呋喃基、環丙基、環己基、咪唑基、
Figure 02_image1715
、
Figure 02_image1717
、
Figure 02_image1719
及
Figure 02_image1721
。 116.  如實施例1及100至115中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 Z係選自
Figure 02_image1723
、
Figure 02_image1725
及
Figure 02_image1727
；其中 環 C係選自C 6-C 10芳基。 117.  如實施例1及100至116中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中基團：
Figure 02_image1729
係選自：
Figure 02_image1731
、
Figure 02_image1733
、
Figure 02_image1735
、
Figure 02_image1737
,
Figure 02_image1739
、
Figure 02_image1741
、
Figure 02_image1743
、
Figure 02_image1745
、
Figure 02_image1747
、
Figure 02_image1749
、
Figure 02_image1751
、
Figure 02_image1753
及
Figure 02_image1755
。 118.  如實施例1及100至117中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中基團：
Figure 02_image1757
為
Figure 02_image1759
。 118A.     如實施例1及100至117中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基。 118B.     如實施例1及100至117中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 R Z2 係選自氫、鹵素、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)。 119.  如實施例1及100至118中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基及C 6-C 10芳基；及 R Z2 係選自氫、鹵素及羥基； 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團。 120.  如實施例1及100至119中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： R Z1 係選自氫、CH 3、CF 3、CH 2OH、苯基、環丙基及四氫哌喃基；及 R Z2 係選自氫、鹵素及羥基； 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團。 121.  如實施例1及100至120中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 R Z2 為羥基。 122.  如實施例1及100至121中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 Z係選自：
Figure 02_image1761
、
Figure 02_image1763
、
Figure 02_image1765
、
Figure 02_image1767
、
Figure 02_image1769
、
Figure 02_image1771
、
Figure 02_image1773
、
Figure 02_image1775
、
Figure 02_image1777
、
Figure 02_image1779
、
Figure 02_image1781
、
Figure 02_image1783
、
Figure 02_image1785
、
Figure 02_image1787
、
Figure 02_image1789
、
Figure 02_image1791
及
Figure 02_image1793
。 123.  如實施例1及100至122中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 m係選自1及2。 124.  如實施例1及100至123中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N( R X1 )-及
Figure 02_image1795
； 環 A為4至6員雜環基； R X1 係選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-及
Figure 02_image1797
； 各 R Y 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基及C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 環 B為C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， 各 R 1 係獨立地選自C 1-C 6氟烷基及-NH 2； Z為
Figure 02_image1799
； R Z1 為C 1-C 6氟烷基； R Z2 為羥基， n係選自4、5及6；及 m為2。 125.  如實施例1及100至124中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 A為吡咯啶。 126.  如實施例1及100至125中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 X係選自： -NH-、-N(CH 3)-、
Figure 02_image1801
、
Figure 02_image1803
及
Figure 02_image1805
。 127.  如實施例1及100至126中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： 各 R Y 係獨立地選自： 氫、-CH 3、-CD 3、
Figure 02_image1807
、
Figure 02_image1809
及
Figure 02_image1811
； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自環丁基、環戊基、環己基及四氫吡咯基之環； 或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。 128.  如實施例1及100至127中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 B為苯基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)。 129.  如實施例1及100至128中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 B為
Figure 02_image1813
。 130.  如實施例1及100至129中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中-( Y) n-為選自以下之基團：
Figure 02_image1815
、
Figure 02_image1817
、
Figure 02_image1819
、
Figure 02_image1821
、
Figure 02_image1823
、
Figure 02_image1825
、
Figure 02_image1827
、
Figure 02_image1829
、
Figure 02_image1831
、
Figure 02_image1833
、
Figure 02_image1835
、
Figure 02_image1837
、
Figure 02_image1839
、
Figure 02_image1841
、
Figure 02_image1843
及
Figure 02_image1845
。 131.  如實施例1及100至130中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R 1 係獨立地選自CF 3及-NH 2。 132.  如實施例1及100至131中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 R Z1 為CF 3。 133.  如實施例1及100至132中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 Z係選自：
Figure 02_image1847
、
Figure 02_image1848
、
Figure 02_image1850
及
Figure 02_image1851
。 134.  一種選自表10之化合物的化合物、其醫藥學上可接受之鹽及前述中之任一者之氘化衍生物。 135.  如實施例134之化合物，其中該化合物係選自：
化合物編號 結構
4
Figure 02_image1853
19
Figure 02_image1855
32
Figure 02_image1857
138
Figure 02_image1859
163
Figure 02_image1861
173
Figure 02_image1863
176
Figure 02_image1865
177
Figure 02_image1867
178
Figure 02_image1869
182
Figure 02_image1871
192
Figure 02_image1873
193
Figure 02_image1875
205
Figure 02_image1877
136.  一種醫藥組成物，其包含如實施例1至135中任一項之化合物、鹽或氘化衍生物，及醫藥學上可接受之載體。 137.  如實施例136之醫藥組成物，其進一步包含一或多種額外治療劑。 138.  如實施例137之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含具有CFTR調節活性之化合物或其鹽或氘化衍生物。 139.  如實施例137或138之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR校正劑。 140.  如實施例137至139中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含( R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)- N-(1-(2,3-二羥丙基l)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1 H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物 II)：
Figure 02_image1879
II。 141.  如實施例137至140中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)環丙烷甲醯胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化合物 IV)：
Figure 02_image1881
化合物 IV。 142.  如實施例137至141中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含 N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺醯基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 V)：
Figure 02_image1883
V。 143.  如實施例137至142中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含 N-(苯磺醯基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基)環丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 VI)：
Figure 02_image1885
化合物 VI。 144.  如實施例137至143中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含(14 S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1 H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ 6-硫雜-3,9,11,18,23-五氮雜四環[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮(化合物 VII)：
Figure 02_image1887
化合物 VII。 145.  如實施例137至144中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含(11 R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧雜-2λ 6-硫雜-3,5,12,19-四氮雜三環[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物 VIII)：
Figure 02_image1889
化合物 VIII。 146.  如實施例137至145中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自以下之化合物：PTI-428、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766及PTI-801。 147.  如實施例137至146中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR增效劑增強劑。 148.  如實施例137至147中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含ASP-11。 149.  如實施例137至148中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR增效劑。 150.  如實施例137至149中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含選自以下之化合物： N-(5-羥基-2,4-二-三級丁基-苯基)-4-側氧基-1 H-喹啉-3-甲醯胺(化合物 III)：
Figure 02_image412
化合物 III， 及 N-(2-(三級丁基)-5-羥基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-側氧基-1,4-二氫喹啉-3-甲醯胺(化合物 III-d)：
Figure 02_image1892
化合物 III-d。 151.  如實施例137至150中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自以下之化合物：FDL-176、PTI-808、GLPG1837、GLPG2451/ABBV-2451 (艾森卡福特)、GLPG3067/ABBV-3067 (納沃卡福特)及ABBV-191。 152.  如實施例137至151中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR擴增劑。 153.  如實施例137至152中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含PTI-428。 154.  如實施例137至153中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR通讀藥劑。 155.  如實施例137至154中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含ELX-02。 156.  如實施例137至155中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含核酸療法。 157.  如實施例137至156中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自以下之藥劑：MRT5005、Lunar-CF及RCT223。 158.  如實施例137至157中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含ENaC抑制劑。 159.  如實施例137至158中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含胺氯吡脒、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037 (VX-371)、P-1055 (VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5 Rx、BI 1265162、AZ5634及ARO-ENaC1001。 160.  如實施例137至159中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含TMEM16A調節劑。 161.  如實施例137至160中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含ETD002。 162.  如實施例137至161中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含GPR39促效劑。 163.  如實施例137至162中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含DS-1039。 164.  一種治療囊腫纖維化之方法 ，其包含向有需要之患者投與有效量之如實施例1至135中任一項之化合物、鹽或氘化衍生物或如實施例136至163中任一項之醫藥組成物。 165.  如實施例164之方法，其進一步包含投與一或多種額外治療劑。 166.  如實施例165之方法，其中該一或多種額外治療劑包含具有CFTR調節活性之化合物或其鹽或氘化衍生物。 167.  如實施例165或166之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR校正劑。 168.  如實施例165至167中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含( R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)- N-(1-(2,3-二羥丙基l)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1 H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物 II)：
Figure 02_image1894
化合物 II。 169.  如實施例165至168中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)環丙烷甲醯胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化合物 IV)：
Figure 02_image1896
化合物 IV。 170.  如實施例165至169中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含 N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺醯基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 V)：
Figure 02_image1898
化合物 V。 171.  如實施例165至170中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含 N-(苯磺醯基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基) 環丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 VI)：
Figure 02_image1900
化合物 VI。 172.  如實施例165至171中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含(14 S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1 H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ 6-硫雜-3,9,11,18,23-五氮雜四環[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮(化合物 VII)：
Figure 02_image1902
化合物 VII。 173.  如實施例165至172中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含(11 R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧雜-2λ 6-硫雜-3,5,12,19-四氮雜三環[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物 VIII)：
Figure 02_image1904
化合物 VIII。 174.  如實施例165至173中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自以下之化合物：PTI-428、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、ABBV-2851、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766及PTI-801。 175.  如實施例165至174中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR增效劑增強劑。 176.  如實施例165至175中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含ASP-11。 177.  如實施例165至176中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR增效劑。 178.  如實施例165至177中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含選自以下之化合物： N-(5-羥基-2,4-二-三級丁基-苯基)-4-側氧基-1 H-喹啉-3-甲醯胺(化合物 III)：
Figure 02_image412
化合物 III， 及 N-(2-(三級丁基)-5-羥基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-側氧基-1,4-二氫喹啉-3-甲醯胺(化合物 III-d)：
Figure 02_image1907
化合物 III-d。 179.  如實施例165至178中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自以下之化合物：FDL-176、PTI-808、GLPG1837、GLPG2451/ABBV-2451 (艾森卡福特)、GLPG3067/ABBV-3067 (納沃卡福特)及ABBV-191。 180.  如實施例165至179中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR擴增劑。 181.  如實施例165至180中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含PTI-428。 182.  如實施例165至181中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR通讀藥劑。 183.  如實施例165至182中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含ELX-02。 184.  如實施例165至183中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含核酸療法。 185.  如實施例165至184中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自以下之藥劑：MRT5005、Lunar-CF及RCT223。 186.  如實施例165至185中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含ENaC抑制劑。 187.  如實施例165至186中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含胺氯吡脒、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037 (VX-371)、P-1055 (VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5 Rx、BI 1265162、AZ5634及ARO-ENaC1001。 188.  如實施例165至187中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含TMEM16A調節劑。 189.  如實施例165至188中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含ETD002。 190.  如實施例165至180中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含GPR39促效劑。 191.  如實施例165至190中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含DS-1039。 192.  如實施例1至135中任一項之化合物、鹽或氘化衍生物或如實施例136至163中任一項之醫藥組成物，其用於治療囊腫纖維化。 193.  一種如實施例1至135中任一項之化合物、鹽或氘化衍生物或如實施例136至163中任一項之醫藥組成物之用途，其用於製造用於治療囊腫纖維化之藥物。 194.  實質上非晶形化合物4 (純形式) (亦即，其中小於15%之化合物4 呈結晶形式，其中小於10%之化合物4呈結晶形式，其中小於5%之化合物4呈結晶形式)。 195.  如實施例194之實質上非晶形化合物4 (純形式)，其中化合物4為100%非晶形。 196.  如實施例194或195之實質上非晶形化合物4 (純形式)，其特徵在於實質上類似於 圖 1之X射線粉末繞射圖。 197.  實質上結晶化合物5形式A (純) (亦即，其中小於15%之化合物5 呈非晶形式，其中小於10%之化合物5呈非晶形式，其中小於5%之化合物5呈非晶形式)。 198.  如實施例197之實質上結晶化合物5形式A 純)，其中化合物5形式A (純)為100%結晶。 199.  如實施例197或198之實質上結晶化合物5形式A (純)，其特徵在於四方晶系統、I4 1空間群、及利用Cu K α輻射(λ=1.54178 Å)在Bruker繞射儀上在100 K下量測之以下單位晶胞尺寸：
a 18.1 ± .1 Å α 90 º
b 18.1 ± .1 Å β 90 º
c 13.1 ± .1 Å γ 90 º。
200.  實質上非晶形化合物19 (純形式) (亦即，其中小於15%之化合物19 呈結晶形式，其中小於10%之化合物19呈結晶形式，其中小於5%之化合物19呈結晶形式)。 201.  如實施例200之實質上非晶形化合物19 (純形式)，其中化合物19為100%非晶形。 202.  如實施例200或201之實質上非晶形化合物19 (純形式)，其特徵在於實質上類似於 圖 4之X射線粉末繞射圖。 203.  實質上結晶化合物41形式A (亦即，其中小於15%之化合物41呈非晶形式，其中小於10%之化合物41呈非晶形式，其中小於5%之化合物41呈非晶形式)。 204.  如實施例203之實質上結晶化合物41形式A，其中化合物41形式A為100%結晶。 205.  如實施例203或204之實質上結晶化合物41形式A，其特徵在於具有一個、兩個或三個選自14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ及21.2 ± 0.2度2θ之信號的X射線粉末繞射圖。 206.  如實施例203至205中任一項之實質上結晶化合物41形式A，其特徵在於具有一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下之信號的X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ、21.2 ± 0.2度2θ、18.0 ± 0.2度2θ、16.6 ± 0.2度2θ及20.7 ± 0.2度2θ。 207.  如實施例203至206中任一項之實質上結晶化合物41形式A，其特徵在於具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個或九個選自以下之信號的X射線粉末繞射圖：14.2 ± 0.2度2θ、16.6 ± 0.2度2θ、18.0 ± 0.2度2θ、19.5 ± 0.2度2θ、20.3 ± 0.2度2θ、20.7 ± 0.2度2θ、21.2 ± 0.2度2θ、22.2 ± 0.2度2θ及25.1 ± 0.2度2θ。 208.  如實施例203至207中任一項之實質上結晶化合物41形式A，其特徵在於實質上類似於 圖 7之X射線粉末繞射圖。 209.  實質上結晶化合物52形式A (純) (亦即，其中小於15%之化合物52呈非晶形式，其中小於10%之化合物52呈非晶形式，其中小於5%之化合物52呈非晶形式)。 210.  如實施例209之實質上結晶化合物52形式A (純)，其中化合物52形式A (純)為100%結晶。 211.  如實施例209或210之實質上結晶化合物52形式A (純)，其特徵在於具有一個、兩個或三個選自以下之信號的X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ及18.6 ± 0.2度2θ。 212.  如實施例209至211中任一項之實質上結晶化合物52形式A (純)，其特徵在於具有一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下之信號的X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、12.7 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ、18.6 ± 0.2度2θ、20.6 ± 0.2度2θ及21.4 ± 0.2度2θ。 213.  如實施例209至212中任一項之實質上結晶化合物52形式A (純)，其特徵在於具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個、十個、十一個或十二個選自以下之信號的X射線粉末繞射圖：6.8 ± 0.2度2θ、12.7 ± 0.2度2θ、15.1 ± 0.2度2θ、15.5 ± 0.2度2θ、17.3 ± 0.2度2θ、18.6 ± 0.2度2θ、19.2 ± 0.2度2θ、19.7 ± 0.2度2θ、20.4 ± 0.2度2θ、20.6 ± 0.2度2θ、21.4 ± 0.2度2θ及27.2 ± 0.2度2θ。 214.  如實施例209至213中任一項之實質上結晶化合物52形式A (純)，其特徵在於實質上類似於 圖 9之X射線粉末繞射圖。 215.  實質上非晶形化合物60 (純形式) (亦即，其中小於15%之化合物60呈結晶形式，其中小於10%之化合物60呈結晶形式，其中小於5%之化合物60呈結晶形式)。 216.  如實施例215之實質上非晶形化合物60 (純形式)，其中化合物60為100%非晶形。 217.  如實施例215或216之實質上非晶形化合物60 (純形式)，其特徵在於實質上類似於 圖 12之X射線粉末繞射圖。 218.  實質上非晶形化合物70 (純形式) (亦即，其中小於15%之化合物70呈結晶形式，其中小於10%之化合物70呈結晶形式，其中小於5%之化合物70呈結晶形式)。 219.  如實施例218之實質上非晶形化合物70 (純形式)，其中化合物70為100%非晶形。 220.  如實施例218或219之實質上非晶形化合物70 (純形式)，其特徵在於實質上類似於 圖 15之X射線粉末繞射圖。 221.  實質上結晶化合物163形式A (純) (亦即，其中小於15%之化合物163呈非晶形式，其中小於10%之化合物163呈非晶形式，其中小於5%之化合物163呈非晶形式)。 222.  如實施例221之實質上結晶化合物163形式A (純)，其中化合物163形式A (純)為100%結晶。 223.  如實施例221或222之實質上結晶化合物163形式A (純)，其特徵在於在7.4 ± 0.2度2θ處具有信號的X射線粉末繞射圖。 224.  如實施例221至223中任一項之實質上結晶化合物163形式A (純)，其特徵在於具有一個、兩個或三個選自之信號的X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ及15.0 ± 0.2度2θ。 225.  如實施例221至224中任一項之實質上結晶化合物163形式A (純)，其特徵在於具有一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下之信號的X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ、14.1 ± 0.2度2θ、15.0 ± 0.2度2θ、19.1 ± 0.2度2θ及25.8 ± 0.2度2θ。 226.  如實施例221至225中任一項之實質上結晶化合物163形式A (純)，其特徵在於具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個、十個或十一個選自以下之信號的X射線粉末繞射圖：7.4 ± 0.2度2θ、8.4 ± 0.2度2θ、14.1 ± 0.2度2θ、14.6 ± 0.2度2θ、15.0 ± 0.2度2θ、16.9 ± 0.2度2θ、19.1 ± 0.2度2θ、20.0 ± 0.2度2θ、22.5 ± 0.2度2θ、25.6 ± 0.2度2θ及25.8 ± 0.2度2θ。 227.  如實施例221至226中任一項之實質上結晶化合物163形式A (純)，其特徵在於實質上類似於 圖 16之X射線粉末繞射圖。 228.  實質上非晶形化合物173 (純形式) (亦即，其中小於15%之化合物173呈結晶形式，其中小於10%之化合物173呈結晶形式，其中小於5%之化合物173呈結晶形式)。 229.  如實施例228之實質上非晶形化合物173 (純形式)，其中化合物173為100%非晶形。 230.  如實施例228或229之實質上非晶形化合物173 (純形式)，其特徵在於實質上類似於 圖 18之X射線粉末繞射圖。 231.  實質上結晶化合物173 (純形式) (亦即，其中小於15%之化合物173呈非晶形式，其中小於10%之化合物173呈非晶形式，其中小於5%之化合物173呈非晶形式)。 232.  如實施例231之實質上結晶化合物173形式A (純)，其中化合物173形式A (純)為100%結晶。 233.  如實施例231或232之實質上結晶化合物173形式A (純)，其特徵在於三斜晶系統、P1空間群及利用Cu K α輻射(λ=1.54178 Å)在Bruker繞射儀上在150 K下量測之以下單位晶胞尺寸：
a 6.7 ± .1 Å α 76.0 ± .1 º
b 11.9 ± .1 Å β 82.2 ± .1 º
c 13.1 ± .1 Å γ 85.4 ± .1 º。
234.  實質上結晶化合物175形式A (純) (亦即，其中小於15%之化合物175呈非晶形式，其中小於10%之化合物175呈非晶形式，其中小於5%之化合物175呈非晶形式)。 235.  如實施例234之實質上結晶化合物175形式A (純)，其中化合物175形式A (純)為100%結晶。 236.  如實施例234或235之實質上結晶化合物175形式A (純)，其特徵在於斜方晶系統、 P2 12 12 1空間群、及利用Cu K α輻射(λ=1.54178 Å)在Bruker繞射儀上在100 K下量測之以下單位晶胞尺寸：
a 9.8 ± .1 Å α 90 º
b 10.1 ± .1 Å β 90 º
c 20.5 ± .1 Å γ 90 º。
237.  實質上結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A (亦即，其中小於15%之化合物188二氯甲烷溶劑合物呈非晶形式，其中小於10%之化合物188二氯甲烷溶劑合物呈非晶形式，其中小於5%之化合物188二氯甲烷溶劑合物呈非晶形式)。 238.  如實施例237之實質上結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A，其中化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A為100%結晶。 239.  如實施例237或238之實質上結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A，其特徵在於單斜晶系統、 P2 1空間群、及利用Cu K α輻射(λ=1.54178 Å)在Bruker繞射儀上在100 K下量測之以下單位晶胞尺寸：
a 16.2 ± .1 Å α 90 º
b 13.3 ± .1 Å β 99.7 ± .1 º
c 23.2 ± .1 Å γ 90 º。
實例 通用實驗程序 縮寫AcOH：乙酸 Boc酸酐((Boc) 2O)：二碳酸二-三級丁酯 Boc：丁氧羰基 BOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲胺基)鏻 t-BuOH：三級丁醇 CDCl 3：氯仿- dCDI：1,1´-羰基二咪唑 CD 3OD：甲基- d 4 醇- dCH 2Cl 2：二氯甲烷 CH 3CN：乙腈 CO 2：二氧化碳 Cs 2CO 3：碳酸銫 CuI：碘化銅(I) DCE：1,2-二氯乙烷 DCM：二氯甲烷 DIEA：(DIPEA； N,N-二異丙基乙胺) DMAP：4-二甲基胺基吡啶 DMF： N,N-二甲基甲醯胺 DMP：戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin periodinane) DMSO：二甲亞碸 DMSO -d6：二甲亞碸 -d6EDCI：1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺 ESI-MS：電噴霧電離質譜 Et 2O：二乙醚 Et 3N或TEA：三乙胺 EtOAc：乙酸乙酯 EtOH：乙醇 Et 2O：二乙醚 ESI-MS：電噴霧電離質譜 第2代Grubbs催化劑：[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基]-二氯-[(2-異丙氧基苯基)亞甲基]釕 H 2：氫氣 HATU：六氟磷酸 N-[(二甲胺基)-1 H-1,2,3-三唑并-[4,5-b]吡啶-1-基亞甲基]- N-甲基甲銨 N-氧化物 HCl：鹽酸 HOBT：羥基苯并三唑 HPLC：高效液相層析 H 2：氫氣 H 2O 2：過氧化氫 KHSO 4：硫酸氫鉀 KOH：氫氧化鉀 K 2CO 3：碳酸鉀 KMnO 4：高錳酸鉀 KHCO 3：碳酸氫鉀 LC：液相層析 LiAlH 4：氫化鋰鋁 LiOH：氫氧化鋰 MeMgCl：氯化甲基鎂 MeTHF或2-MeTHF或2-Me-THF：2-甲基四氫呋喃 MeOH：甲醇 MTBE：甲基三級丁基醚 MgSO 4：硫酸鎂 MS: 質譜 n-Bu 4NF·H 2O：四 正丁基氟化銨一水合物 Na：鈉 NaH：氫化鈉 NaHCO 3：碳酸氫鈉 NaOAc：乙酸鈉 NaOH：氫氧化鈉 Na 2SO 4：硫酸鈉 NBS： N-溴丁二醯亞胺 NH 3：氨 NH 4Cl：氯化銨 NH 4HCO 3：碳酸氫銨 NMP： N-甲基-2-吡咯啶酮 NMR：核磁共振 N 2：氮氣 Pd/C：鈀/碳 Pd 2(dba) 3：參(二亞苄基丙酮)二鈀(0) Pd(dppf)Cl 2：1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵氯化鈀(II) Pd(OAc) 2：乙酸鈀(II) PhI(OAc) 2：(二(乙醯氧)碘基)苯 POCl 3：磷醯氯 PtO 2：氧化鉑 RT或rt：室溫 SFC：超臨界流體層析 Silica Cat Pd：鈀/矽 SiO 2：矽膠 TBAF：四- 正丁基氟化銨 TBAI：碘化四丁銨 TBDPS-Cl或TBDPSCl：三級丁基二苯基氯矽烷 TEA：三乙胺 TEMPO：2,2,6,6-四甲基哌啶基氧基 TFA：三氟乙酸 THF：四氫呋喃 Ti(OEt) 4：乙醇鈦(IV) TMEDA：四甲基乙二胺 TMSCF 3：三氟甲基三甲基矽烷 p-TsCl或甲苯磺醯氯： 對甲苯磺醯氯化或4-甲苯磺醯氯 T 3P：1-丙烷膦酸酐 UPLC：超高效液相層析 Xantphos：4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃 Zhan催化劑-1B：二氯[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑啶亞基][[5-[(二甲胺基)磺醯基]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亞甲基-C]釕(II) 通用 UPLC-MS/HPLC-MS/GC 分析方法：
LC 方法 A：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(50 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002350)，及自1%至99%移動相B運行3.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.2 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 B ：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex C 18管柱(4.6 × 50 mm，2.6 μm粒徑)。溫度：45℃；流速：2.0 mL/min；運行時間：3 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續2.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持1.0 min。
LC 方法 C：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex Polar C 18管柱(3.0 × 50 mm，2.6 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.2 mL/min；運行時間：6 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續4.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持2.0 min。
LC 方法 D：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之UPLC-MS BEH C 18管柱(50 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002350)，及自1%至99%移動相B運行5.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.2 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 E：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex Polar C 18管柱(3.0 × 50 mm，2.6 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.2 mL/min；運行時間：3 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續2.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持1.0 min。
LC 方法 F：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex C 18管柱(4.6 × 50 mm，2.6 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：2.0 mL/min；運行時間：6 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續4.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持2.0 min。
LC 方法 G ：分析型反相HPLC-MS，其使用Merckmillipore Chromolith SpeedROD C 18管柱(50 × 4.6 mm)，及自5%至100%移動相B運行6分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.1%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.1%三氟乙酸)。
LC 方法 H：分析型反相HPLC-MS，其使用Waters製造之Waters Cortex C 18管柱(3.0 × 50 mm，2.7 μm粒徑) (pn：186007370)，溫度：55℃；流速：1.2 mL/min；移動相A：水(+ 0.1%三氟乙酸)。移動相B: 乙腈(+ 0.1%三氟乙酸)。梯度：5%至100% B持續4 min，其中在100% B下平衡0.5 min，歷經1.5 min平衡至5% B。
LC 方法 I：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(30 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002349)，及自1%至99%移動相B運行1.2分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.5 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 J：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(50 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002350)，及自30%至99%移動相B運行3.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.2 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 K：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex EVO C 18管柱(4.6 × 50 mm，2.6 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：2.0 mL/min；運行時間：4 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續2.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持2.0 min。
LCMS 方法 L：分析型反相HPLC-MS，其使用X-Terra MS C 18管柱(4.6 × 150 mm，5 µm粒徑)，溫度：40℃；流速：1.5 mL/min；運行時間：10 min。移動相：初始95%水(+ 10 mM碳酸氫銨)及5%乙腈線性梯度至95%乙腈持續6.5 min，接著在95%乙腈下保持3.5 min。
LC 方法 M ：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(50 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002350)，及自50%至99%移動相B運行3.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.2 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 N ：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(50 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002350)，及自1%至99%移動相B運行3.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(0.05%甲酸銨)。移動相B =乙腈。流速= 1.2 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 O：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex Polar C 18管柱(3.0 × 50 mm，2.6 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.2 mL/min；運行時間：4 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續3.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持1.0 min。
LC 方法 P：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(100 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002352)，及自1%至99%移動相B運行13.5分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 0.8 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 Q：分析型反相HPLC-MS，其使用Phenomenex銷售之Onyx Monolithic C 18管柱(50 × 4.6 mm) (pn：CH0-7644)，及自1%至99%移動相B運行2.9分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 12 mL/min，注射體積= 50 μL，及管柱溫度= 25℃。
LC 方法 R：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(30 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002349)，及自30%至99%移動相B運行1.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.2 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 S ：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(30 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002349)，及自1%至99%移動相B運行1.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.5 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 T ：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(30 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002349)，及自50%至99%移動相B運行1.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.2 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 U ：分析型反相UPLC-MS，其使用Waters製造之Acquity UPLC-MS BEH C 18管柱(30 × 2.1 mm，1.7 μm粒徑) (pn：186002349)，及自75%至99%移動相B運行1.0分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.05%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.035%三氟乙酸)。流速= 1.2 mL/min，注射體積= 1.5 μL，及管柱溫度= 60℃。
LC 方法 V ：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex EVO C 18管柱(2.1 × 50 mm 2.6 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.0 mL/min；運行時間：1.5 min。移動相：初始98%之移動相A (10 mM甲酸銨/水:乙腈95:5，pH 9)及2%移動相B (乙腈)線性梯度至98%乙腈持續1.15 min，接著在98%乙腈下保持0.2 min，接著返至98%水及10 mM甲酸銨持續0.05 min，且保持0.1 min。
LC 方法 W：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex Polar C 18管柱(3.0 × 50 mm，2.6 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.2 mL/min；運行時間：4 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續3.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持1.0 min。
LC 方法 X：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex Polar C 18管柱(3.0 × 50 mm，2.6 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.2 mL/min；運行時間：5 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續4.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持1.0 min。
LC 方法 Y：分析型反相HPLC-MS，其使用Luna C 18管柱(3.0 × 50 mm，3 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.5 mL/min；運行時間：3.5 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續1.3 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持2.2 min。
LC 方法 Z：分析型反相HPLC-MS，其使用Luna C 18管柱(3.0 × 50 mm，3 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.5 mL/min；運行時間：2.5 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續1.3 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持1.2 min。
LC 方法 AA：分析型反相HPLC-MS，其使用SunFire C 18管柱(4.6 × 75 mm，3.5 μm粒徑)，溫度：45℃；流速：1.5 mL/min；運行時間：6 min。移動相：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續4.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持2.0 min。
LC 方法 BB：分析型反相HPLC-MS，其使用XBridge C 18管柱(4.6 × 75 mm，5 μm粒徑)；流速：1.5 mL/min；運行時間：6 min。移動相：初始95%水(+ 10 mM碳酸氫銨)及5%乙腈至5%水(+ 10 mM碳酸氫銨)及95%乙腈持續3 min，接著在95%乙腈及5%水(+ 10 mM碳酸氫銨)下保持3 min。
LC 方法 CC：分析型GC，其使用Phenomenex ZB-1MS管柱(0.25 × 30 mm，0.25 μm粒徑)；開始溫度50℃，以20℃/min上升至300℃且保持5 min。
LC 方法 DD ：分析型反相HPLC-MS，其使用Merckmillipore Chromolith SpeedROD C 18管柱(50 × 4.6 mm)，及自5%至100%移動相B運行12分鐘之雙重梯度。移動相A =水(+ 0.1%三氟乙酸)。移動相B =乙腈(+ 0.1%三氟乙酸)。
LC 方法 EE ：分析型反相HPLC-MS，其使用Kinetex EVO C 18管柱(4.6 × 50 mm，2.6 μm粒徑)，溫度：45℃，流速：2.0 ml/min，運行時間：3分鐘。移動相條件：初始95%水(+ 0.1%甲酸)及5%乙腈(+ 0.1%甲酸)線性梯度至95%乙腈(+ 0.1%甲酸)持續2.0 min，接著在95%乙腈(+ 0.1%甲酸)下保持1.0 min。 通用 X 射線粉末繞射 (XRPD) 方法
使用PANalytical Empyrean X射線繞射儀(Almelo, The Netherlands)以連續模式在室溫記錄X射線粉末繞射(XRPD)圖。使用在45kV及40 mA下操作之Cu管產生X射線。像素1d偵測器與防散射狹縫P8一起使用。發散光學件為具有10 mm光罩、1/8發散狹縫及½防散射狹縫之Bragg Brentano High Definition (BBHD)。連續掃描模式採用0.0131度步長及每步13.77秒之計數時間，對4至40度2θ之範圍內進行積分。將粉末樣本置於零背景持有者內之凹陷區域上且用載玻片壓扁。 通用熱重分析 (TGA) 方法
使用TGA來研究所表徵批次中殘餘溶劑之存在，且鑑別樣本發生分解之溫度。除非在以下實例中另外提供，否則在Mettler Toledo TGA/DSC 3+ STARe系統上收集TGA資料。在具有TRIOS系統之TA儀器探索系列上收集化合物4之TGA資料。 通用差示掃描熱量測定 (Differential Scanning Calorimetry ； DSC) 方法
除非在以下實例中另外提供，否則使用Mettler Toledo TGA/DSC 3+ STARe系統來量測材料之熔點或玻璃轉移點。在具有TRIOS系統之TA儀器探索系列上收集化合物4之DSC資料。 通用合成流程：
本發明之另一態樣提供用於製備以下之方法：式 I、 I ' 、 I '' 、 Ia、 Ia '、 IIa、 IIa '、 IIb、 IIb '、 IIc、 IIc '、 IId、 IId '、 IIe、 IIe '、 IIf、 IIf '、 IIg、 IIg '、 IIh 、 IIh '之化合物、化合物1至213、化合物214至222、其氘化衍生物以及彼等化合物及氘化衍生物之醫藥學上可接受之鹽，以及用於製備前述中之任一者的中間物。在以下流程及實例之一些實施例中，除指定可變取代基以外或代替可變取代基，各氮及氧原子可視情況具有一或多個選自本文揭示之保護基範圍的保護基。在以下流程及實例之一些實施例中，各化合物可經其氘化衍生物置換。 流程 1 ：
Figure 02_image1909
流程 1係指自式 1-1化合物製備式 1-7之中間化合物之方法。 Alk係選自C 1-C 6直鏈或分支鏈烷基。 X 1 係選自鹵素，諸如Cl、I或Br。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a為選自2、3、4及5之整數。 Y如上文對於式 I所定義。
Grignard類型加成之任何合適的條件可用於使式 1-1化合物與式 1-2化合物反應以形成式 1-3化合物。舉例而言，式 1-1化合物與式 1-2化合物之Grignard加成可在Et 2O中在-78℃進行，隨後添加1 N HCl水溶液，得到式 1-3化合物。式 1-3化合物轉化為式 1-4化合物可藉由用於安設氧保護基之任何合適的程序來實現。式 1-4之酯轉化為式 1-5之羧酸可藉由任何合適的水解條件來實現。舉例而言，式 1-5之羧酸轉化為式 1-6化合物可藉由在DMF中使式 1-5化合物與HATU及Et 3N反應，隨後添加 N-胺基胺基甲酸三級丁酯來實現。任何合適的水解條件可用於將式 1-6之胺基甲酸酯轉化為式 1-7之醯肼。舉例而言，可藉由在環境溫度，在CH 2Cl 2中使式 1-6化合物與HCl反應來得到式 1-7化合物。 流程 2 ：
Figure 02_image1911
流程 2係指自式 2-1化合物製備式 2-3之中間化合物之方法。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a為選自2、3、4及5之整數。 R 1 、 m及 Y如上文對於式 I所定義。
形成醯胺鍵之任何合適的條件可用於自式 2-1化合物及式 1-7化合物產生式 2-3化合物。舉例而言，可使式 2-1化合物在乙腈及DMF中與CDI反應，隨後添加式 1-7化合物，得到式 S2-2化合物。可使用適合於噁二唑形成之任何條件，將式 2-2化合物轉化為式 2-3化合物。舉例而言，可使式 2-2化合物在乙腈中與DIPEA反應，隨後添加 對甲苯磺醯氯，得到式 2-3之噁二唑。 流程 3 ：
Figure 02_image1913
流程 3係指自式 3-1化合物製備式 3-8化合物之方法。 Alk係選自C 1-C 6直鏈或分支鏈烷基。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a為選自1、2、3及4之整數，且 b為選自0、1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 環 A、 R 1 、 m及 Y如上文對於式 I所定義。
式 3-1化合物與式 3-2化合物反應得到式 3-3化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。將式 3-3之酯轉化為式 3-4之羧酸可藉由任何合適的水解條件來實現。可使用任何合適的醯胺鍵形成條件，由式 3-4化合物及式 1-7化合物，製備式 3-5化合物。式 3-5化合物可使用任何適合於噁二唑形成之條件轉化為式 3-6化合物。舉例而言，可使式 3-5化合物在乙腈中與DIPEA反應，隨後添加 對甲苯磺醯氯，得到式 3-6之噁二唑。式 3-6化合物之巨環化可藉由任何合適的閉環置換(metathesis)條件來實現。舉例而言，式 3-6化合物可在DCE中在Grubbs第2代催化劑存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1915
鍵表示)之混合物的式 3-7之巨環。不飽和的式 3-7化合物轉化為式 3-8之巨環可使用烯烴還原及醇去保護之任何合適的程序來實現。 流程 4 ：
Figure 02_image1917
流程 4係指自式 2-3化合物製備式 4-3化合物之方法。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。環 A、 R 1 、 m及 Y如對於上文 I所定義。
式 2-3化合物與式 3-2化合物反應得到式 4-1化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。式 4-1化合物之巨環化以得到式 4-2化合物，可藉由任何合適的閉環置換條件來實現。舉例而言，式 4-1化合物可在DCE中在Zhan催化劑-1B 存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1919
鍵表示)之混合物之式 4-2的巨環。不飽和的式 4-2化合物轉化為式 4-3之巨環可使用任何合適的烯烴還原及醇去保護之程序來實現。 流程 5 ：
Figure 02_image1920
流程 5係指自式 2-3化合物製備式 5-5化合物之方法。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 PG 2 係選自合適的氮保護基，諸如Boc及Fmoc。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 環 A、 R 1 、 m及 Y如上文對於式 I所定義。
式 2-3化合物與式 5-1化合物反應得到式 5-2化合物可藉由任何交叉置換條件來實現。舉例而言，含末端烯烴之式 2-3化合物可在DCE中在Grubbs第2代催化劑存在下與含末端烯烴之式 5-1化合物反應，得到式 5-2之交叉置換產物。不飽和的式 5-2化合物轉化為式 5-3化合物可使用任何合適的烯烴還原及胺去保護之程序來實現。式 5-3化合物之巨環化以得到式 5-4化合物可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。式 5-4化合物轉化為式 5-5之醇可使用任何合適的醇去保護程序來實現。 流程 6 ：
Figure 02_image1922
流程 6係指自式 3-1化合物製備式 6-7化合物之方法。 Alk係選自C 1-C 6直鏈或分支鏈烷基。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 Y及 R X1 如對於上文式 I所定義。
式 3-1化合物與式 6-1化合物反應得到式 6-2化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。式 6-2之酯轉化為式 6-3之羧酸可藉由任何合適的水解條件來實現。可使用任何合適的醯胺鍵形成條件，由式 6-3化合物及式 1-7化合物，製備式 6-4化合物。式 6-4化合物可使用任何適合於噁二唑形成之條件轉化為式 6-5化合物。舉例而言，式 6-4化合物可在乙腈中與DIEA反應，隨後添加 對甲苯磺醯氯，得到式 6-5之噁二唑。式 6-5化合物之巨環化以得到式 6-6化合物，可藉由任何合適的閉環置換條件來實現。舉例而言，式 6-5化合物可在DCE中在Zhan催化劑-1B 存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1924
鍵表示)之混合物之式 6-6的巨環。不飽和的式 6-6化合物轉化為式 6-7之巨環可使用任何合適的烯烴還原及醇去保護之程序來實現。 流程 7 ：
Figure 02_image1925
流程 7係指自式 3-1化合物製備式 7-7化合物之方法。 Alk係選自C 1-C 6直鏈或分支鏈烷基。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自0、1、2及3之整數，其限制條件為 a+ b不超過4。 R 1 、 m、 Y、 R X1 及 R Y 如對於上文式 I所定義。
式 3-1化合物與式 7-1化合物反應得到式 7-2化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。式 7-2之酯轉化為式 7-3之羧酸可藉由任何合適的水解條件來實現。可使用任何合適的醯胺鍵形成條件，由式 7-3化合物及式 1-7化合物，製備式 7-4化合物。式 7-4化合物可使用任何適合於噁二唑形成之條件轉化為式 7-5化合物。舉例而言，式 7-4化合物可在乙腈中與DIEA反應，隨後添加 對甲苯磺醯氯，得到式 7-5之噁二唑。式 7-5化合物之巨環化以得到式 7-6化合物，可藉由任何合適的閉環置換條件來實現。舉例而言，式 7-5化合物可在DCE中在Zhan催化劑-1B 存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1927
鍵表示)之混合物之式 7-6的巨環。不飽和的式 7-6化合物轉化為式 7-7之巨環可使用任何合適的烯烴還原及醇去保護之程序來實現。 流程 8 ：
Figure 02_image1928
流程 8係指自式 2-3化合物製備式 8-3化合物之方法。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 Y及 R X1 如上文對於式 I所定義。
式 2-3化合物與式 6-1化合物反應得到式 8-1化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。舉例而言，式 2-3化合物可在乙腈中與DIEA反應且加熱，得到式 8-1化合物。式 8-1化合物之巨環化以得到式 8-2化合物可藉由任何合適的閉環置換條件來實現。舉例而言，式 8-1化合物可在DCE中在Zhan催化劑-1B 存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1930
鍵表示)之混合物之式 8-2的巨環。不飽和的式 8-2化合物轉化為式 8-3之巨環可使用任何合適的烯烴還原及醇去保護之程序來實現。 流程 9 ：
Figure 02_image1931
流程 9係指自式 9-1化合物製備式 9-5化合物之方法。 L X 係選自鹵素，諸如Cl、I或Br。 c為獨立地選自1、2、3及4之整數。 環 A、 環 B、 R 1 、 m及 Y如對於上文式 I所定義。
式 9-1化合物與式 9-2化合物反應以得到式 9-3化合物,可藉由任何合適的噁二唑形成條件來實現。舉例而言，式 9-2化合物可在DCM中與( N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷反應，隨後逐滴添加式 9-1化合物，得到式 9-3化合物。式 9-3化合物之巨環化以得到式 9-4化合物，可藉由任何合適的鈀催化之烯烴偶合條件來實現。舉例而言，含式 9-3化合物之乙腈可與 三鄰甲苯基膦及Pd(OAc) 2反應，隨後添加三乙胺，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1933
鍵表示)之混合物之式 9-4的巨環。不飽和的式 9-4化合物轉化為式 9-5之巨環可使用任何合適的烯烴還原之程序來實現。 流程 10 ：
Figure 02_image1934
流程 10係指自式 10-1化合物製備式 10-8化合物之方法。 Alk係選自C 1-C 6直鏈或分支鏈烷基。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 環 A、 R 1 及 Y如對於上文式 I所定義。
式 10-1化合物與式 3-2化合物反應得到式 10-2化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。舉例而言，式 10-1化合物可在乙腈中與式 3-2化合物及DIEA反應，得到式 10-2化合物。式 10-2之酯轉化為式 10-3之羧酸可藉由任何合適的水解條件來實現。可使用任何合適的醯胺鍵形成條件，由式 10-3化合物及式 1-7化合物，製備式 10-4化合物。式 10-4化合物可使用任何適合於噁二唑形成之條件轉化為式 10-5化合物。舉例而言，式 10-4化合物可在乙腈中與DIEA反應，隨後添加 對甲苯磺醯氯，得到式 10-5之噁二唑。式 10-5化合物之巨環化以得到式 10-6化合物可藉由任何合適的閉環置換條件來實現。舉例而言，式 10-5化合物可在DCE中在Zhan催化劑-1B 存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1936
鍵表示)之混合物之式 10-6的巨環。式 10-7化合物轉化為式 10-8化合物可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。不飽和的式 10-7化合物轉化為式 10-8之巨環可使用任何合適的烯烴還原及醇去保護之程序來實現。 流程 11 ：
Figure 02_image1937
流程 11係指自式 2-3化合物製備式 11-4化合物之方法。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 Y、 R X1 及 R YN 如對於上文式 I所定義。
式 2-3化合物與式 11-1化合物反應得到式 11-2化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。舉例而言，式 2-3化合物及式 11-1化合物可在DMSO中在加熱存在下反應，得到式 11-2化合物。含末端烯烴之式 11-2化合物轉化為式 11-3之羧酸可藉由任何氧化(oxiditative)裂解條件來實現。舉例而言，式 11-2化合物可在二噁烷及水之混合物中在四氧化鋨及高碘酸鈉存在下反應，得到式 11-3化合物。式 11-3化合物之巨環化以得到式 11-4化合物可藉由任何合適的醯胺鍵形成條件來實現。舉例而言，式 11-3化合物可在DMF中與IDEA反應，隨後添加HATU，得到式 11-4化合物。 流程 12 ：
Figure 02_image1939
流程 12係指自式 2-3化合物製備式 12-4化合物之方法。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a為選自3、4、5及6之整數。 環 A、 R 1 、 m及 Y如對於上文式 I所定義。
含末端烯烴之式 2-3化合物轉化為式 12-1之羧酸可藉由任何合適的氧化條件來實現。舉例而言，式 2-3化合物可藉由硼氫化/氧化轉化為醇，隨後醇氧化為羧酸，得到式 12-1化合物。式 12-1化合物與式 12-2化合物反應得到式 12-3化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。舉例而言，式 12-1化合物可在微波中與式 12-2化合物及二異丙基乙胺反應，得到式 12-3化合物。式 12-3化合物之巨環化以得到式 12-4化合物，可藉由任何合適的醯胺鍵形成條件來實現。舉例而言，式 12-3化合物可在DMF中與DIEA反應，隨後添加HATU，得到式 12-4化合物。 流程 13 ：
Figure 02_image1941
流程 13係指自式 3-1化合物製備式 13-7化合物之方法。各 Alk係獨立地選自C 1-C 6直鏈或分支鏈烷基。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 X、 Y、 R X1 及 R Y 如對於上文式 I所定義。
式 3-1化合物與式 13-1化合物反應得到式 13-2化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。舉例而言，可將式 3-1化合物及式 13-1化合物攪拌於乙腈中，隨後逐滴添加二異丙基乙胺且加熱，得到式 13-2化合物。式 13-2之二酯轉化為式 13-3或式 13-4之羧酸，可藉由任何合適的水解條件，隨後合適的醯胺鍵形成條件來實現。舉例而言，式 13-2化合物可在甲醇中與一水合肼反應，得到式 13-3或式 13-4之化合物。式 13-3或式 13-4之化合物轉化為式 13-5化合物，可藉由任何合適的醯胺鍵形成條件來實現。式 13-5化合物轉化為式 13-6化合物，可使用任何適合於噁二唑形成之條件來實現。舉例而言，式 13-5化合物可在乙腈中與 N, N-二異丙基乙胺反應，隨後添加4-甲基苯磺醯氯，得到式 13-6之噁二唑。式 13-6化合物轉化為式 13-7之醇，可藉由任何合適的醇去保護程序實現。 流程 14 ：
Figure 02_image1943
流程 14係指自式 14-1化合物製備式 14-7化合物之方法。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 PG 2 係選自合適的氮保護基，諸如Boc及Fmoc。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 X、 Y及 R X1 如對於上文式 I所定義。
式 14-1化合物與式 14-2化合物反應得到式 14-3化合物，可藉由任何合適的醯胺鍵形成條件來實現。式 14-3化合物轉化為式 14-4化合物，可藉由任何合適的將醇轉化為離去基之程序來實現。舉例而言，式 14-3化合物可與三苯基膦反應，隨後在無水THF中與2,2,2-三氯乙腈反應，得到式 14-4化合物。式 14-4化合物轉化為式 14-5化合物，可藉由任何合適的胺去保護條件來實現。式 14-5化合物之巨環化以得到式 14-6化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。舉例而言，式 14-5化合物可在DCM中與TFA反應，得到式 14-6化合物。式 14-6化合物轉化為式 14-7之醇，可藉由任何合適的醇去保護程序來實現。 流程 15 ：
Figure 02_image1945
流程 15係指自式 7-6化合物製備式 15-4化合物之方法。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自0、1、2及3之整數，其限制條件為 a+ b不超過4。 R 1 、 m、 Y、 R X1 及 R Y 如對於上文式 I所定義。
式 7-6化合物轉化為式 15-1之醇，可藉由任何合適的烯烴氧化程序來實現。式 15-1化合物轉化為式 15-2化合物，可藉由任何合適的醇去保護條件來實現。式 15-2之醇轉化為式 15-3之含羰基化合物，可藉由任何合適的氧化程序來實現。式 15-3之含羰基化合物之轉化以得到式 15-4化合物，可藉由任何合適的還原條件來實現。 流程 16 ：
Figure 02_image1947
流程 16係指自式 3-1化合物製備式 16-10及式 16-11之化合物之方法。 Alk係選自C 1-C 6直鏈或分支鏈烷基。 LG係選自基於鹵素及氧之離去基，諸如OTf及OTs。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 X、 Y及 R Z1 如對於上文式 I所定義。
式 3-1化合物與式 16-1化合物反應得到式 16-2化合物，可藉由任何合適的芳香族取代條件來實現。式 16-2之酯轉化為式 16-3之羧酸，可藉由任何合適的水解條件來實現。可使用任何合適的醯胺鍵形成條件，由式 16-3化合物及式 16-4化合物，製備式 16-5化合物。式 16-5化合物可使用任何適合於噁二唑形成之條件轉化為式 16-6化合物。舉例而言，式 16-5化合物可在乙腈中與DIEA反應，隨後添加 對甲苯磺醯氯，得到式 16-6之噁二唑。式 16-6化合物之巨環化以得到式 16-7化合物，可藉由任何合適的閉環置換條件來實現。舉例而言，式 16-6化合物可在DCE中在Zhan催化劑-1B 存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1949
鍵表示)之混合物之式 16-7的巨環。式 16-7化合物轉化為式 16-8化合物，可使用任何合適的烯烴還原及醇去保護之程序來實現。式 16-8化合物轉化為式 16-9之含羰基化合物，可使用任何合適的氧化條件來實現。式 16-9之含羰基化合物轉化為式 16-10之肟，可使用任何合適的肟形成程序來實現。式 16-9之含羰基化合物轉化為式 16-11之醇，可使用任何合適的親核加成羰基之程序來實現。 流程 17 ：
Figure 02_image1951
流程 17係指自式 17-1化合物製備式 17-7化合物之方法。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 X、 Y及 R Z1 如對於上文式 I所定義。
式 17-1之羧酸與式 17-2之醛反應得到式 17-3化合物，可使用任何適合於噁二唑形成之條件來實現。舉例而言，式 17-1化合物可在DCM中與式 17-2化合物及 N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷反應，得到式 17-3化合物。式 17-3之醇轉化為式 17-4之含羰基化合物，可藉由任何合適的氧化條件來實現。式 17-4之含羰基化合物轉化為式 17-5之醇，可使用任何合適的親核加成羰基之程序來實現。式 17-5化合物之巨環化以得到式 17-6化合物，可藉由任何合適的閉環置換條件來實現。舉例而言，式 17-5化合物可在DCE中在[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基]-二氯-[(2-異丙氧基-5-硝基-苯基)亞甲基]釕存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1953
鍵表示)之混合物之式 17-6的巨環。式 17-6化合物轉化為式 17-7化合物，可使用任何合適的烯烴還原程序來實現。 流程 18 ：
Figure 02_image1954
流程 18係指自式 17-1化合物製備式 18-5化合物之方法。 PG 1 係選自合適的氧保護基，諸如苯甲基及矽基部分(例如TBDPS、TBS及TMS)。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 X及 Y如對於上文式 I所定義。
式 17-1化合物與式 18-1化合物反應得到式 18-2化合物，可使用任何合適的醯胺鍵形成條件來實現。式 18-2化合物可使用任何適合於噁二唑形成之條件來轉化為式 18-3化合物。舉例而言，式 18-2化合物可與二異丙基乙胺及 對甲苯磺醯氯反應，得到式 18-3之噁二唑。式 18-3化合物之巨環化以得到式 18-4化合物，可藉由任何合適的閉環置換條件來實現。舉例而言，式 18-3化合物可在DCE中在Zhan催化劑-1B 存在下反應，得到呈 E/ Z異構物(如由
Figure 02_image1956
鍵表示)之混合物之式 18-4的巨環。式 18-4化合物轉化為式 18-5化合物，可使用任何合適的烯烴還原及醇去保護之程序來實現。 流程 19 ：
Figure 02_image1957
流程 19係指自式 13-7化合物製備式 19-2化合物之方法。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 X及 Y如對於上文式 I所定義。
式 13-7之醇轉化為式 19-1之烯烴，可使用任何合適的脫水程序來實現。式 19-1化合物轉化為式 19-2化合物，可使用任何合適的烯烴還原條件來實現。 流程 20 ：
Figure 02_image1959
流程 20係指自式 20-1化合物製備式 20-2化合物之方法。 a及 b中之每一者為獨立地選自1、2、3及4之整數，其限制條件為 a+ b不超過5。 R 1 、 m、 X、 Y、 R Z1 及 R 2 如對於上文式 I所定義。
式 20-1之胺轉化為式 20-2之胺，可使用任何合適的胺化程序來實現。舉例而言，式 20-1之胺可在雙(三甲基矽基)胺基]鈉存在下與烷基鹵反應，得到式 20-2化合物。 製備中間物 中間物 1 ：製備 3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image1961
步驟 1 ： 3-( 二苯亞甲基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image1963
藉由鼓泡通入氮氣30分鐘，將3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(47.3 g，197.43 mmol)、二苯基甲亞胺(47 g，259.33 mmol)、Xantphos (9.07 g，15.675 mmol)及碳酸銫(131 g，402.06 mmol)於二噁烷(800 mL)中之混合物脫氣。添加Pd(OAc) 2(3.52 g，15.679 mmol)且用氮氣吹掃該系統三次。在100℃下加熱反應混合物18 h。使反應物冷卻至室溫且經由矽藻土墊過濾。濾餅用EtOAc洗滌，且減壓蒸發溶劑，得到呈黃色固體狀之3-(二苯亞甲基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(90 g，84%)。ESI-MS m/z計算值384.10855，實驗值385.1 (M+1) +；滯留時間：2.24分鐘(LC方法B)。 步驟 2 ： 3- 胺基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image1965
向3-(二苯亞甲基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(65 g，124.30 mmol)於甲醇(200 mL)中之懸浮液中添加HCl (3 M於甲醇中) (146 mL，3 M，438.00 mmol)。在室溫下攪拌混合物1.5小時，接著減壓移除溶劑。使殘餘物溶解於乙酸乙酯(2 L)及二氯甲烷(500 mL)中。有機相用5%碳酸氫鈉水溶液(3 × 500 mL)及鹽水(2 × 500 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，且減壓移除溶劑。殘餘物用庚烷(2 × 50 mL)濕磨，且丟棄母液。所得固體用二氯甲烷與庚烷之混合物(1:1，40 mL)濕磨且過濾，得到呈黃色固體狀之3-胺基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(25.25 g，91%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.24 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.98 (br. s, 2H), 4.00 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -63.23 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值220.046，實驗值221.1 (M+1) +；滯留時間：1.62分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 3- 胺基 -6- 溴 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image1967
向在0℃下之3-胺基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(18.75 g，80.91 mmol)於乙腈(300 mL)中之溶液中逐份添加 N-溴丁二醯亞胺(18.7 g，105.3 mmol)。在25℃下攪拌混合物隔夜。添加乙酸乙酯(1000 mL)。有機層用10%硫代硫酸鈉溶液(3 × 200 mL)洗滌，其用乙酸乙酯(2 × 200 mL)反萃取。經合併之有機萃取物用飽和碳酸氫鈉溶液(3 × 200 mL)、鹽水(200 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮，得到3-胺基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(25.46 g，98%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 3.93-4.03 (m, 3H), 6.01 (br. s., 2H), 7.37 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -64.2 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值297.9565，實驗值299.0 (M+1) +；滯留時間：2.55分鐘(LC方法F)。 步驟 4 ： 3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image1969
在室溫下攪拌3-胺基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(5 g，15.549 mmol)、(Boc) 2O (11 g，11.579 mL，50.402 mmol)、DMAP (310 mg，2.5375 mmol)及CH 2Cl 2(150 mL)之混合物隔夜。減壓濃縮反應混合物且藉由矽膠層析(0%至15%乙酸乙酯/庚烷)純化，得到呈淺黃色固體狀之3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(6.73 g，87%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 1.42 (s, 18H), 3.96 (s, 3H), 7.85 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -63.9 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值498.06134，滯留時間：2.34分鐘(LC方法B)。 中間物 2 ： 製備 6-(2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 )-3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image1971
步驟 1 ： 2- 烯丙基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1973
在-78℃下，向吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(3.5 g，20.44 mmol)及四甲基乙二胺(2.8675 g，3.7 mL，24.676 mmol)於二乙醚(80 mL)中之溶液中逐滴添加二級丁基鋰(20.4 mL，1.4 M於環己烷中，28.56 mmol)，且攪拌混合物2 h。接著，在-78℃下緩慢添加氯化鋅(57 mL，0.5 M於THF中，28.5 mmol)，且攪拌混合物90 min。在-78℃下，緩慢添加氰化銅(I) (2.2 g，24.564 mmol)於氯化鋰(82 mL，0.5 M於THF中，41 mmol)中之溶液，且攪拌混合物90 min，接著在-78℃下緩慢添加3-溴丙-1-烯(7.4094 g，5.3 mL，61.247 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。添加氫氧化銨水溶液(60 mL)，且在室溫下攪拌混合物1 h。分離各相，且水相用二乙醚(2 × 60 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(60 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(梯度為0%至20%之乙酸乙酯/庚烷)純化，得到呈透明油狀之2-烯丙基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(2.9 g，67%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 1.46 (s, 9H), 1.66-1.95 (m, 4H), 1.99-2.23 (m, 1H), 2.33-2.62 (m, 1H), 3.22-3.46 (m, 2H), 3.67-3.94 (m, 1H), 4.97-5.11 (m, 2H), 5.62-5.84 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值211.1572，實驗值234.2 (M+Na) +；滯留時間：2.17分鐘(LC方法B)。 步驟 2 ： 2- 烯丙基吡咯啶 ( 三氟乙酸鹽 )
Figure 02_image1975
在0℃下，將三氟乙酸(13.468 g，9.1 mL，118.12 mmol)緩慢添加至含2-烯丙基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.6 g，7.5721 mmol)之二氯甲烷(12 mL)中。在室溫下攪拌混合物3 h，接著濃縮。添加甲苯(10 mL)，且濃縮混合物(重複4次)，得到呈琥珀色油狀之2-烯丙基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (1.9 g，99%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 1.57-1.85 (m, 1H), 1.89-2.31 (m, 3H), 2.35-2.71 (m, 2H), 3.32 (br. s., 2H), 3.61 (br. s., 1H), 4.95-5.35 (m, 2H), 5.51-5.91 (m, 1H), 8.27 (br. s., 1H), 9.31 (br. s., 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -75.9 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值111.1048，實驗值112.2 (M+1) +；滯留時間：0.36分鐘(LC方法B)。 步驟 3 ： 6-(2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 )-3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image1977
在密封管中，將2-烯丙基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (338 mg，1.5008 mmol)添加至含3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(500 mg，1.0015 mmol)及DIPEA (964.60 mg，1.3 mL，7.4635 mmol)之乙腈(10 mL)中。將管密封，且在80℃下加熱混合物隔夜。添加飽和碳酸氫鈉溶液(25 mL)且用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(25 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(梯度為0%至20%之乙酸乙酯/庚烷)純化，得到呈黃色油狀之6-(2-烯丙基吡咯啶-1-基)-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(480 mg，91%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 1.42 (s, 18H), 1.65-1.90 (m, 2H), 1.94-2.18 (m, 2H), 2.24-2.40 (m, 1H), 2.51-2.65 (m, 1H), 3.41-3.52 (m, 1H), 3.55-3.69 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 4.46-4.60 (m, 1H), 4.95-5.11 (m, 2H), 5.65-5.87 (m, 1H), 7.63 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -56.0 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值529.24，實驗值530.3 (M+1) +；滯留時間：2.63分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 6-(2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 )-3-( 三級 丁氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image1979
向6-(2-烯丙基吡咯啶-1-基)-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(13.1 g，24.74 mmol)於THF (156 mL)中之溶液中添加甲醇(125 mL)及水(100 mL)。分三份，將無水氫氧化鋰(2.116 g，86.6 mmol)添加至混合物中。在60℃下攪拌混合物3.5 h。減壓移除THF及甲醇，且接著添加70 mL 10% HCl水溶液，且所得混合物用EtOAc (3 × 100 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(梯度為0%至50% EtOAc/己烷)純化，得到呈黃色固體狀之6-(2-烯丙基吡咯啶-1-基)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(7.85 g，76%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 1.52 (s, 9H), 1.74-1.81 (m, 2H), 1.98-2.01 (m, 1H), 2.15-2.26 (m, 2H), 2.44-2.50 (m, 1H), 3.38-3.43 (m, 1H), 3.63-3.69 (m, 1H), 4.25-4.32 (m, 1H), 5.04-5.08 (m, 2H), 5.70-5.80 (m, 1H), 9.13 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 11.11 (br. s, 1H). ESI-MS m/z計算值415.1719，實驗值416.3 (M+1) +；滯留時間：2.01分鐘(LC方法A)。 中間物 3 ：製備 (2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 ( 三氟乙酸鹽 )
Figure 02_image1981
步驟 1 ： (2 S)-2-( 碘甲基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1983
歷經30 min，向在0℃下之咪唑(16.9 g，248.2 mmol)及三苯基磷烷(35.8 g，136.5 mmol)於2-甲基四氫呋喃(300 mL)中之溶液中逐份添加碘(34.8 g，137.1 mmol)。將反應溫度保持在＜ 6℃，且混合物變成深橙色太妃糖狀(taffy)，其接著在攪拌時變成淺黃色及顆粒。將混合物升溫至環境溫度，且逐份添加(2 S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(25 g，124.2 mmol)於2-甲基四氫呋喃(150 mL)中之溶液。在環境溫度下攪拌混合物16 h，得到淺黃色漿液。經由矽藻土過濾漿液以移除鹽，且真空濃縮濾液。將殘餘物溶解於150 mL EtOAc中。向混合物中添加150 mL己烷，得到油狀物。在添加EtOAc (~ 300 mL)時，此油狀物將不會溶解。藉由抽吸移除油狀物，且藉由分析發現為三苯基氧化膦。真空濃縮在移除油狀物之後保留之溶劑相。在靜置後形成沈澱，且將其攪拌於100 mL MTBE中。藉由過濾移除沈澱且用MTBE洗滌。真空濃縮濾液且藉由矽膠層析(0%至40% EtOAc/己烷)純化，得到呈淺黃色油狀之(2 S)-2-(碘甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(36.5 g，94%)。 1H NMR (499 MHz, 氯仿-d) δ 3.89 (d, J =14.0 Hz, 1H), 3.42 (d, J =34.7 Hz, 4H), 2.06 (s, 1H), 2.00 - 1.86 (m, 2H), 1.82 (q, J =6.9 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值311.0382，實驗值312.0 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法A)。 步驟 2 ： (2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1985
在氮氣下，將碘化亞銅(103 g，540.8 mmol)懸浮於THF (525 mL)中，且在攪拌下冷卻至-40℃。在將內部溫度保持在-40℃與-45℃之間下，經由加料漏斗歷經40分鐘緩慢添加溴(乙烯基)鎂(1 L，1 M，1.000 mol)。攪拌黏稠懸浮液1 h，使其升溫至-10℃。將黑色懸浮液冷卻至-40℃，且在將內部溫度保持在-40℃與-45℃之間下，歷經30 min逐滴添加(2 S)-2-(碘甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(105 g，337.4 mmol)於THF (260 mL)中之溶液。額外攪拌黏稠懸浮液3 h，同時緩慢升溫至18℃。減壓濃縮黑色懸浮液且用飽和氯化銨水溶液(300 mL)及MTBE (300 mL)處理。藉由過濾移除固體，且分離各相。有機相再次用飽和氯化銨水溶液(2 × 100 mL)洗滌兩次，且水相用MTBE (100 mL)反萃取一次。經合併之有機相經乾燥，過濾且蒸發。藉由矽膠層析(己烷至5%丙酮/己烷(產物在200-210 nm下吸收))純化，得到(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(32 g，45%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 5.74 (ddt, J =17.3, 10.3, 7.2 Hz, 1H), 5.13 - 4.97 (m, 2H), 3.70 (s, 1H), 3.23 (dq, J =19.2, 11.3, 9.4 Hz, 2H), 2.46 - 1.52 (m, 6H), 1.40 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值211.15723，實驗值212.0 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法A)。 步驟 3 ： (2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 ( 三氟乙酸鹽 )
Figure 02_image1987
向(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(17 g，80.45 mmol)於DCM (120 mL)中之溶液中逐滴添加TFA (30 mL，389.4 mmol)。在環境溫度下攪拌混合物24 h。真空移除溶劑，且產物用甲苯(200 mL)共沸物處理3次。真空乾燥產物16 h，得到呈深色油狀之(2 S)-2-烯丙基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (17 g，94%)。ESI-MS m/z計算值111.1048，實驗值112.1 (M+1) +；滯留時間：0.4分鐘(LC方法A)。 中間物 4 ：製備 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image1989
步驟 1 ： 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image1991
向3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(31.6 g，63.29 mmol)及(2 S)-2-烯丙基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (17 g，75.49 mmol)於乙腈(400 mL)中之溶液中添加DIEA (45 mL，258.4 mmol)，且在80℃下加熱混合物2 h。添加更多DIEA (10 mL，57.41 mmol)且在80℃下攪拌18 h。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用EtOAc (700 mL)稀釋且用250 mL鹽水洗滌兩次，經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠層析(梯度為0%至30% EtOAc/己烷)純化，得到6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(15 g，45%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.63 (s, 1H), 5.78 (ddt, J =17.3, 10.2, 7.2 Hz, 1H), 5.15 - 4.91 (m, 2H), 4.54 (qd, J =7.5, 3.1 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.61 (t, J =8.6 Hz, 1H), 3.48 (d, J =8.4 Hz, 1H), 2.69 - 2.53 (m, 1H), 2.32 (dt, J =13.7, 7.5 Hz, 1H), 2.07 (d, J =5.6 Hz, 1H), 2.02 - 1.94 (m, 1H), 1.86 - 1.69 (m, 2H), 1.43 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z計算值529.24，實驗值530.3 (M+1) +；滯留時間：2.06分鐘(LC方法A)。 步驟 2 ： 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image1993
將6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-[雙 (三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(20.5 g，38.71 mmol)溶解於THF (150 mL)及MeOH (150 mL)中(黃色溶液)，接著用水(150 mL)處理(黃色乳液)，隨後用LiOH (3.5 g，146.1 mmol)處理。將混合物加熱至60℃且攪拌3.5 h。減壓濃縮黃色混合物以移除大部分THF及MeOH，得到黃色乳液，在冰浴中將其冷卻，得到黃色黏性懸浮液(pH = 14)。懸浮液藉由減緩添加HCl (160 mL，1 M，160 mmol)酸化，將內部溫度保持在約10℃ (起泡)，且接著在冷水浴中攪拌1 h。藉由過濾收集固體且用冷水洗滌且乾燥隔夜。固體藉由矽膠層析純化，用100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之線性梯度溶離，得到呈鮮黃色固體狀之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(13.4 g，83%) 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.11 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 5.83 - 5.67 (m, 1H), 5.12 - 5.02 (m, 2H), 4.29 (qd, J =7.8, 3.1 Hz, 1H), 3.66 (q, J =9.0 Hz, 1H), 3.41 (t, J =8.5 Hz, 1H), 2.47 (ddd, J =13.8, 7.6, 3.2 Hz, 1H), 2.29 - 2.17 (m, 1H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 2.06 - 1.93 (m, 1H), 1.87 - 1.69 (m, 2H), 1.53 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值415.1719，實驗值416.0 (M+1) +；滯留時間：1.38分鐘(LC方法M)。 中間物 5 ：製備 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯肼 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image1995
步驟 1 ： 2- 羥基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯酸乙酯
Figure 02_image1997
歷經1.5 h時段(內部溫度-72℃至-76℃)，向在-78℃下之3,3,3-三氟-2-側氧基-丙酸乙酯(25.15 g，147.87 mmol)於Et 2O (270 mL)中之溶液中逐滴添加含溴(丁-3-烯基)鎂之THF (190 mL，0.817 M，155.23 mmol)。在-78℃下攪拌混合物20 min。移除乾冰-丙酮浴。在1 h期間將混合物緩慢升溫至5℃，將其添加至1 N HCl水溶液(170 mL)與碎冰(150 g)之混合物(pH = 4)中。分離兩層。濃縮有機層，且將殘餘物與水相合併且用EtOAc (2 × 150 mL)萃取。經合併之有機相用5% NaHCO 3水溶液(50 mL)及鹽水(20 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。過濾混合物且濃縮且與THF (2 × 40 mL)一起共蒸發，得到呈無色油狀之2-羥基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(37.44 g，96%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 5.77 (ddt, J =17.0, 10.4, 6.4 Hz, 1H), 5.15 - 4.93 (m, 2H), 4.49 - 4.28 (m, 2H), 3.88 (s, 1H), 2.35 - 2.19 (m, 1H), 2.17 - 1.89 (m, 3H), 1.34 (t, J =7.0 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -78.74 (s, 3F) ppm。 步驟 2 ： 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯酸乙酯
Figure 02_image1999
向在0℃下之2-羥基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(24.29 g，87.6%純度，94.070 mmol)於DMF (120 mL)中之溶液中逐份添加NaH (60%於礦物油中，5.64 g，141.01 mmol)。在0℃下攪拌混合物10 min。添加溴甲苯(24.13 g，141.08 mmol)及TBAI (8.68 g，23.500 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。添加NH 4Cl (3 g，0.6 eq)。攪拌混合物10 min。添加30 mL EtOAc，接著添加冰水(400 g)。混合物用CH 2Cl 2萃取，且濃縮經合併之有機層。藉由矽膠層析(0%至20% CH 2Cl 2/庚烷)純化，得到呈粉紅色油狀之2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(26.05 g，88%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 1.34 (t, J=7.2 Hz, 3H), 2.00-2.19 (m, 3H), 2.22-2.38 (m, 1H), 4.33 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.64 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.84 (d, J=10.9 Hz, 1H), 4.91-5.11 (m, 2H), 5.62-5.90 (m, 1H), 7.36 (s, 5H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -70.5 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/zcalc. 316.12863，實驗值317.1 (M+1) +；滯留時間：2.47分鐘(LC方法B)。 步驟 3 ： 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯酸
Figure 02_image2001
將氫氧化鈉(7.86 g，196.51 mmol)於水(60 mL)之溶液添加至2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(24.86 g，78.593 mmol)於甲醇(210 mL)中之溶液中。在50℃下加熱反應物隔夜。濃縮反應物以移除甲醇，用水(150 mL)稀釋，且羧酸鈉鹽用庚烷(1 × 100 mL)洗滌。水溶液用3 N HCl水溶液酸化至pH = 2。羧酸用二氯甲烷(3 × 100 mL)萃取且經硫酸鈉乾燥。過濾溶液且濃縮，得到呈淡黃色油狀之2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(22.57 g，97%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 14.31 (br. s., 1H), 7.55 - 7.20 (m, 5H), 5.93 - 5.70 (m, 1H), 5.17 - 4.91 (m, 2H), 4.85 - 4.68 (m, 1H), 4.67 - 4.55 (m, 1H), 2.32 - 1.94 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -70.29 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值288.09732，實驗值287.1 (M-1)；滯留時間：3.1分鐘(LC方法C)。 步驟 4 ： N- [[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2003
向2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(21.92 g，92.4%純度，70.263 mmol)於DMF (130 mL)中之溶液中添加HATU (37.2 g，97.836 mmol)及Et 3N (15 g，148.24 mmol)。攪拌混合物10分鐘，接著添加 N-胺基胺基甲酸三級丁酯(12.2 g，92.312 mmol)。在25℃下攪拌混合物隔夜且在40℃下攪拌1 h。混合物用冰水(500g)稀釋，且用CH 2Cl 2萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。藉由矽膠層析(0%至30% EtOAc/庚烷)純化，得到呈白色固體狀之 N-[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺基甲酸三級丁酯(26.08 g，92%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 1.46 (s, 9H), 2.10-2.31 (m, 3H), 2.34-2.51 (m, 1H), 4.60-4.72 (m, 1H), 4.73-4.86 (m, 1H), 4.95-5.19 (m, 2H), 5.83 (ddt, J=16.7, 10.4, 6.1 Hz, 1H), 6.28 (br. s., 1H), 7.30-7.51 (m, 5H), 8.34 (d, J=2.6 Hz, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -73.6 (s, 3F) ppm。 步驟 5 ： 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯肼 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2005
向 N-[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺基甲酸三級丁酯(43.12 g，107.2 mmol)於CH 2Cl 2(200 mL)中之溶液中添加HCl (100 mL，4 M，400.0 mmol)，且在環境溫度下攪拌混合物7 h。真空移除溶劑，殘餘物用庚烷剝離(stripped) 2次，且使用高真空真空乾燥所得固體20 h，得到2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (35 g，96%) 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 9.92 (s, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 2H), 7.30 - 7.24 (m, 2H), 7.24 - 7.16 (m, 1H), 5.72 - 5.57 (m, 1H), 5.02 - 4.87 (m, 2H), 4.71 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.62 (d, J =11.0 Hz, 1H), 3.70 (s, 2H), 2.34 - 1.85 (m, 4H). ESI-MS m/z計算值302.1242，實驗值303.2 (M+1) +；滯留時間：1.5分鐘(LC方法A)。 中間物 6 ：製備 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯肼
Figure 02_image2007
步驟 1 ： 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯肼
Figure 02_image2009
將2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽)溶解於乙酸乙酯(500 mL)中，且用NaHCO 3飽和水溶液(500 mL)小心處理且攪拌0.5 h。分離各相，且有機相用1:1 NaHCO 3飽和水溶液/水(500 mL)洗滌一次，用1:4 NaHCO 3飽和水溶液/水(500 mL)洗滌一次，用水(500 mL)洗滌一次且用鹽水(300 mL)洗滌一次。水相用乙酸乙酯(200 mL)反萃取一次，且經合併之有機相經乾燥，過濾，蒸發且接著與甲苯一起共蒸發，且在真空下進一步乾燥，得到呈黃色油狀之2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(50 g，99%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.33 (s, 1H), 7.53 - 7.27 (m, 5H), 5.81 (ddt, J =16.6, 10.2, 6.3 Hz, 1H), 5.10 - 4.93 (m, 2H), 4.71 (s, 2H), 4.57 - 4.28 (m, 2H), 2.27 - 1.84 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值302.1242，實驗值303.0 (M+1) +；滯留時間：1.5分鐘(LC方法A)。 中間物 7 ：製備 N- [2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2011
步驟 1 ： N- [2-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2013
向在環境溫度之6-溴-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(239.2 g，621.1 mmol)及2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (230.1 g，761.2 mmol)於EtOAc (2.2 L)中之混合物中添加吡啶(200 mL，2.473 mol)，得到沈澱。向混合物中添加1-丙烷膦酸酐(500 g，50% w/w，785.7 mmol)，且在環境溫度下攪拌反應混合物12 h。反應物藉由減緩添加含NaOH (149 g，50% w/w，1.863 mol)之水(2 L)淬滅，且攪拌混合物15 min。分離有機相，且水相用EtOAc (1 L)萃取。經合併之有機相用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮。在移除一半溶劑之後，有機相用HCl水溶液(1000 mL，1 M，1.000 mol)洗滌2次。有機相經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮。粗產物在溫熱庚烷(2.5 L)及MTBE (0.25 L)中製成漿液，且在環境溫度下攪拌混合物12 h，得到淺黃色漿液。過濾漿液，且所得濾餅用1 L 10% MTBE/庚烷洗滌2次。將灰白色固體風乾2 h，接著在40℃下真空乾燥20 h，得到 N-[2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(379.9 g, 91 %) 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 11.09 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 10.35 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 7.50 (d, J =7.4 Hz, 2H), 7.36 (dt, J =24.4, 7.2 Hz, 3H), 5.87 (ddt, J =16.0, 10.4, 5.2 Hz, 1H), 5.09 (d, J =16.9 Hz, 1H), 5.02 (d, J =10.1 Hz, 1H), 4.84 (q, J =11.4 Hz, 2H), 2.35 - 2.12 (m, 4H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值668.1069，實驗值670.9 (M+3, Br同位素) +；滯留時間：3.5分鐘(LC方法D)。 步驟 2 ： N- [2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2015
將 N-[2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(102 g，150.8 mmol)溶解於無水乙腈(1000 mL)中，且添加DIPEA (92 mL，528.2 mmol)。將所得橙色溶液加熱至70℃ (內部溫度)，製得透明黃色溶液。接著，以12.47 g之3等份，相隔10分鐘，添加 對 -甲苯磺醯氯(37.4 g，196.2 mmol)，且接著另外加熱反應物30 min。將反應物冷卻至室溫，且減壓濃縮乙腈。向混合物中添加1000 mL MTBE，接著添加800 mL水，且攪拌混合物，且分離各層。有機層用檸檬酸(36.3 g，188.9 mmol)於700 mL水中之溶液洗滌，接著用400 mL飽和NaHCO 3洗滌，接著用300 mL鹽水洗滌。接著，有機層經無水MgSO 4乾燥且減壓濃縮。材料使用梯度為15%至50%之8%EtOAc/己烷溶液至純己烷之矽膠層析純化，得到 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(91.7 g，93%)， 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 10.18 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.55 - 7.47 (m, 2H), 7.45 - 7.37 (m, 2H), 7.36 - 7.28 (m, 1H), 5.83 - 5.68 (m, 1H), 5.10 - 4.93 (m, 2H), 4.82 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.69 (d, J =10.5 Hz, 1H), 2.59 - 2.13 (m, 4H), 1.56 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值650.0963，實驗值651.0 (M+1) +；滯留時間：3.81分鐘(LC方法D)。 中間物 8 ：製備 N- [2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2017
步驟 1 ： N- [2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2019
向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(30 g，41.910 mmol)於MTBE (300 mL)中之溶液中添加DIEA (6.6780 g，9 mL，51.670 mmol)、DMAP (0.28 g，2.2919 mmol)及Boc酸酐(20.1 g，21.158 mL，92.097 mmol)。在35℃下攪拌所得黃色混濁溶液隔夜。冷卻至室溫後，蒸發溶劑。接著，將黃色油性殘餘物溶解於300 mL DCM中，且用水(300 mL)洗滌，隨後用鹽水(300 mL)洗滌。分離有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(0%至20% EtOAc/己烷)純化，得到呈白色固體狀之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(28.68 g，87%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 8.89 (s, 1H), 7.51 (d, J =7.4 Hz, 2H), 7.43 (t, J =7.5 Hz, 2H), 7.35 (t, J =7.3 Hz, 1H), 5.96 – 5.76 (m, 1H), 5.11 (d, J =17.2 Hz, 1H), 5.01 (d, J =10.1 Hz, 1H), 4.73 (d, J =10.7 Hz, 1H), 4.66 (d, J =10.6 Hz, 1H), 2.65 – 2.51 (m, 2H), 2.36 – 2.17 (m, 2H), 1.27 (d, J =23.5 Hz, 18H) ppm. ESI-MS m/z計算值750.1488，實驗值751.6 (M+1) +；滯留時間：3.9分鐘(LC方法G)。 中間物 9 ：製備 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯肼 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2021
步驟 1 ： 2- 羥基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯酸乙酯
Figure 02_image2023
歷經3小時時段(內部溫度：-74℃至-76℃)，向在-78℃下之3,3,3-三氟-2-側氧基-丙酸乙酯(30 g，176.38 mmol)於二乙醚(300 mL)中之溶液中逐滴添加烯丙基(溴)鎂(185 mL，1 M，185.00 mmol)。在-78℃下攪拌混合物45 min。移除乾冰-丙酮浴。歷經1 h時段將混合物升溫至約10℃，且將其添加至1N HCl水溶液(210 mL)與碎冰(400 g)之混合物(pH 4)中。混合物用EtOAc萃取，用5% NaHCO 3水溶液、鹽水洗滌，且經無水Na 2SO 4乾燥。過濾混合物，濃縮且與己烷一起共蒸發，得到呈淺黃色油狀之2-羥基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯(42.2 g，90%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 1.33 (t, J =7.1 Hz, 3H), 2.60 - 2.79 (m, 2H), 3.84 (br. s., 1H), 4.24 - 4.48 (m, 2H), 5.09 - 5.33 (m, 2H), 5.59 - 5.82 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -78.5 (s, 3F) ppm。 步驟 2 ： 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯酸乙酯
Figure 02_image2025
在0℃下，向2-羥基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯(18.56 g，83.105 mmol)於DMF (100 mL)中之溶液中添加NaH (5.3 g，60% w/w, 132.51 mmol)。攪拌反應物15分鐘，且添加溴甲苯(21.14 g，15 mL，121.12 mol)及四丁基碘化銨(8.5 g，23.012 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應物用水(300 mL)淬滅且用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(500 mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。藉由矽膠層析(20%至60% DCM/己烷)純化，得到呈無色油狀之2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯(22.01 g，70%)。 1H NMR (250 MHz, CDCl 3) δ 7.55 - 7.25 (m, 5H), 6.00 - 5.80 (m, 1H), 5.30 - 5.10 (m, 2H), 4.86 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.68 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.33 (q, J =7.0 Hz, 2H), 2.81 (d, J =7.0 Hz, 2H), 1.34 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm.ESI-MS m/z計算值302.113，實驗值303.5 (M+1) +；滯留時間：4.14分鐘(LC方法G)。 步驟 3 ： 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯酸
Figure 02_image2027
向2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯(28.99 g，95.902 mmol)於甲醇(150 mL)中之溶液中添加NaOH (7.6714 g，191.80 mmol)於水(50 mL)中之溶液。在40℃下攪拌反應混合物3小時。真空濃縮反應混合物，殘餘物用水(200 mL)稀釋且用二乙醚(200 mL)洗滌。水層用濃HCl酸化至pH 1且用二乙醚(3 × 200 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且真空濃縮，得到呈淺黃色液體狀之2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸(28.04 g，99%)。 1H NMR (250 MHz, CDCl 3) δ 7.55 - 7.28 (m, 5H), 5.97 - 5.69 (m, 1H), 5.33 - 5.17 (m, 2H), 4.95 - 4.66 (m, 2H), 2.91 (d, J =7.1 Hz, 2H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 步驟 4 ： N- [[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2029
向2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸(300 g，1.094 mol)於DMF (2 L)中之溶液中添加HATU (530 g，1.394 mol)及DIEA (400 mL，2.296 mol)，且在環境溫度下攪拌混合物10 min。向混合物中添加 N-胺基胺基甲酸三級丁酯(152 g，1.150 mol)，且在環境溫度下攪拌混合物36 h。反應物用冷水(4 L)淬滅，且混合物用EtOAc (2 × 2 L)萃取。有機相用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠層析(0%至40% EtOAc/己烷)純化，得到呈油狀之 N-[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺基甲酸三級丁酯(386.49 g，91%)，其緩慢結晶為灰白色固體。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.00 (d, J =37.9 Hz, 1H), 8.93 (s, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.29 (m, 3H), 6.01 - 5.64 (m, 1H), 5.32 (d, J =17.1 Hz, 1H), 5.17 (d, J =10.1 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 2.96 (qd, J =15.4, 6.8 Hz, 2H), 1.39 (d, J =17.3 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值388.16098，實驗值389.0 (M+1) +；滯留時間：2.51分鐘(LC方法D)。 步驟 5 ： 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯肼 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2031
向 N-[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺基甲酸三級丁酯(98.5 g，240.94 mmol)於DCM (400 mL)中之溶液中添加含HCl之二噁烷(200 mL，4 M，800.00 mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時，濃縮且與DCM及己烷一起共蒸發，得到呈灰白色固體之2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(鹽酸鹽) (81.15 g，97%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 11.07 (s, 1H), 7.70 – 7.16 (m, 5H), 5.87 – 5.61 (m, 1H), 5.45 – 5.09 (m, 2H), 4.79 (s, 2H), 3.6 – 3.4 (m, 2H), 3.23 – 3.07 (m, 1H), 3.04 – 2.87 (m, 1H) ppm.ESI-MS m/z計算值288.10855，實驗值289.2 (M+1) +；滯留時間：2.0分鐘(LC方法H)。 中間物 10 ：製備 3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-6- 溴 -5- 甲基磺醯基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2033
步驟 1 ： 3- 胺基 -5- 溴 -吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2035
將硫酸(10 mL，187.6 mmol)添加至3-胺基-5-溴-吡啶-2-甲酸(10 g，43.77 mmol)於甲醇(250 mL)中之溶液中。在75℃下加熱反應物3天。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除約2/3溶劑。將所得混合物倒至鹽水(200 mL)與冰(200 mL)之混合物上。水層用EtOAc (3 × 200 mL)萃取。合併有機層且用水(70 mL)、5% NaHCO 3(70 mL)及鹽水(70 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發，得到呈黃色固體狀之3-胺基-5-溴-吡啶-2-甲酸甲酯(4.56 g，45%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 3.96 (s, 3H), 5.82 (br. s, 2H), 7.24 (d, J =1.8 Hz, 1 H), 8.06 (d, J =1.8 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值229.96909，實驗值231.1 (M+1) +；滯留時間：1.51分鐘(LC方法EE)。 步驟 2 ： 3- 胺基 -5- 甲基磺醯基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2037
在130℃下加熱在氮氣下之3-胺基-5-溴-吡啶-2-甲酸甲酯(9.79 g，42.372 mmol)、甲基亞磺醯氧基鈉(8.8 g，86.2 mmol)、碘化銅(I) (8.8 g，46.206 mmol)、 L-脯胺酸(34 mg，0.2953 mmol)及DMF (195 mL)之混合物3 h。將混合物冷卻至室溫且在攪拌下添加至EtOAc (1.2 L)中。經由矽藻土過濾混合物且用EtOAc洗滌。濾液用28% NH 3水溶液(1 × 100 mL，接著1 × 50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至約160 mL，產生沈澱。沈澱藉由過濾收集且經乾燥，得到呈黃色固體狀之3-胺基-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸甲酯(6.35 g，65%)。 11H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 8.23 (d, J =2.1 Hz, 1H), 7.73 (d, J =2.1 Hz, 1H), 7.09 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.29 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值230.03613，實驗值231.1 (M+1) +；滯留時間：1.22分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 3- 胺基 -6- 溴 -5- 甲基磺醯基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2039
向3-胺基-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸甲酯(8 g，34.746 mmol)於乙腈(515 mL)中之溶液中添加NBS (12.7 g，71.355 mmol)。在35℃下攪拌混合物64 h。濃縮混合物以移除大部分乙腈。殘餘物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋且用10%硫代硫酸鈉水溶液(100 mL)處理。在室溫下攪拌10 min之後，添加碳酸氫鈉飽和水溶液(100 mL)。在攪拌5 min之後，所得沈澱藉由過濾收集，用水及乙酸乙酯洗滌，接著乾燥，得到呈黃色固體狀之3-胺基-6-溴-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸甲酯(6.2 g，55%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.99 (s, 1H), 7.25 (br. s., 2H), 3.83 (s, 3H), 3.42 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值307.94666，實驗值308.8 (M+1) +；滯留時間：1.57分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-6- 溴 -5- 甲基磺醯基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2041
在室溫下攪拌3-胺基-6-溴-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸甲酯(6.2 g，19.153 mmol)、碳酸三級丁氧基羰基酯三級丁酯(12.825 g，13.5 mL，58.764 mmol)、DMAP (373 mg，3.0532 mmol)及DCM (185 mL)之混合物隔夜。減壓濃縮反應混合物。藉由矽膠層析(梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷)純化，得到呈黃色固體狀之3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-溴-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸甲酯(8.72 g，89%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.33 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 1.43 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z計算值508.0515，實驗值352.8 (M-155) +；滯留時間：2.08分鐘(LC方法E)。 中間物 11 ： 製備 6- 氯 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2043
步驟 1 ： 1- 氧離子基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -1- 鎓 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2045
在0℃下，將過氧化脲(62.7 g，646.53 mmol)逐份添加至5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(40 g，191.09 mmol)於1,2-二氯乙烷(300 mL)中之攪拌溶液中。接著歷經30分鐘，在-10℃之溫度下，在冷卻浴(CO 2/丙酮浴)下，添加三氟乙酸酐(107.70 g，72 mL，507.65 mmol)。接著在0℃之溫度下再攪拌反應混合物30分鐘，且接著在環境溫度下攪拌1小時。接著將反應混合物倒入冷卻的冰水(600 mL)中。混合物用二氯甲烷(300 mL)稀釋，接著分離各層。水相用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取。經合併之有機相用水(2 × 300 mL)及鹽水(1 × 200 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈淺黃色固體狀之1-氧離子基-5-(三氟甲基)吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯(47.6 g，90%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 8.89 (s, 1H), 8.02 - 7.90 (m, 1H), 7.86 - 7.72 (m, 1H), 3.89 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -62.00 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值221.02998，實驗值222.1 (M+1) +；滯留時間：1.24分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 6- 羥基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2047
在0℃下，將三氟乙酸酐(291.62 g，193 mL，1.3885 mol)逐滴添加至1-氧離子基-5-(三氟甲基)吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯(51.058 g，230.66 mmol)於DMF (305 mL)中之混合物中。接著在室溫下攪拌混合物隔夜。減壓濃縮混合物以移除過量三氟乙酸。將殘餘DMF溶液逐滴倒入0℃冷卻且攪拌的水體積(1000 mL)。所沈澱之固體藉由過濾收集且接著用水(300 mL)洗滌。真空乾燥固體，得到呈白色固體狀之6-羥基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(45.24 g，86%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 7.90 (d, J =7.2 Hz, 1H), 7.03 (d, J =7.2 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -66.39 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值221.03，實驗值222.1 (M+1) +；滯留時間：1.43分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2049
向6-羥基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(33.04 g，149.41 mmol)於硫酸(200 mL，18.4 M，3.6800 mol)中之冰冷溶液中逐滴添加硝酸(13 mL，15.8 M，205.40 mmol)。在5 min之後，移除冰浴，且在38℃下攪拌反應混合物隔夜。反應不完全，在室溫下逐滴添加硝酸(3 mL，15.8 M，47.400 mmol)，且在38℃下加熱反應物4.5小時。將反應物緩慢倒在冰-冷水(900 mL)上，且在0℃下冷卻混合物15分鐘。接著，所得固體藉由過濾分離且用水(600 mL)洗滌。真空乾燥固體隔夜，得到呈白色固體狀之6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(39.49 g，99 %). 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 8.54 (s, 1H), 3.95 (s, 3H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -64.56 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值266.0151，實驗值267.1 (M+1) +；滯留時間：1.64分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 6- 氯 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2051
在170℃下加熱6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(10 g，37.575 mmol)及二氯磷酸苯酯(48.008 g，34 mL，227.55 mmol)之混合物90分鐘。冷卻至室溫後，混合物用乙酸乙酯(400 mL)稀釋且用鹽水(2 × 200 mL)洗滌。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(0%至15%乙酸乙酯/庚烷)純化，得到呈黃色固體狀之6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(5.45 g，50%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.75 (s, 1H), 4.07 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -64.12 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值283.9812，實驗值285.0 (M+1) +；滯留時間：1.95分鐘(LC方法E)。 中間物 12 ：製備 6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2053
步驟 1 ： 6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2055
6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(32 g，120.24 mmol)於THF (180 mL)及水(180 mL)中之混合物用一水合氫氧化鋰(15.14 g，360.79 mmol)處理，且在27℃下攪拌隔夜。在室溫下冷卻粗反應混合物，且用0.5 M鹽酸水溶液(380 mL)將pH調整至2，接著轉移至具有2-甲基THF之1-L分液漏斗且萃取。分離各層，且接著有機層用水(150 mL)、鹽水(150 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈灰白色固體狀之6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(29.61 g，96%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 8.45 (s, 1H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -64.53 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值251.9994，實驗值253.0 (M+1) +；滯留時間：0.79分鐘(LC方法E)。 中間物 13 ：製備三氟甲烷磺酸 [6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶酯 ]
Figure 02_image2057
步驟 1 ： N ' - [2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2059
向6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(29.92 g，102.66 mmol)於乙腈(300 mL)及DMF (60 mL)中之溶液中添加CDI (17.48 g，107.80 mmol)。在室溫下攪拌混合物0.5 h，接著分數份添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (33.04 g，97.534 mmol)。在26℃下攪拌反應混合物19小時。將反應混合物轉移至萃取漏斗，用水(300 mL)及2-Me THF (400 mL)沖洗。混合物用2-Me THF (3 × 400 mL)萃取。經合併之有機層用0.5 N HCl水溶液(3 × 300 mL)、鹽水(3 × 250 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且藉由減壓蒸發濃縮。接著，將其溶解於二氯甲烷(2 × 300 mL)中兩次，且藉由減壓蒸發移除揮發物，得到呈棕色泡沫狀之殘餘物 N '-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(58.5 g，94%)。ESI-MS m/z計算值536.11304，實驗值537.2 (M+1) +。滯留時間：2.03分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ：三氟甲烷磺酸 [6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶酯 ]
Figure 02_image2061
向 N '-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(9.76 g，16.922 mmol)於二氯甲烷(190 mL)中之0℃溶液中添加DIPEA (8.0136 g，10.8 mL，62.004 mmol)，隨後添加三氟甲烷磺酸三氟甲基磺醯酯(12.410 g，7.4 mL，43.985 mmol)。在20 min之後移除冰冷浴，且在室溫下攪拌反應物2.5小時。將混合物轉移至具有冰冷1.0 N HCl水溶液及EtOAc (300 mL)之分液漏斗。分離有機層，且水相用乙酸乙酯(2 × 150 mL)萃取。經合併之有機層同樣用冰冷HCl 1.0 N水溶液(60 mL)及鹽水(3 × 40 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(0%至10% EtOAc/庚烷)純化，得到呈橙色油狀之三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (5.334 g，40%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.74 (s, 1H), 7.50 - 7.27 (m, 5H), 5.87 - 5.68 (m, 1H), 5.12 - 4.96 (m, 2H), 4.88 (d, J =10.6 Hz, 1H), 4.67 (d, J =10.9 Hz, 1H), 2.60 - 2.16 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -62.68 (s, 3F), -71.80 (s, 3F), -73.04 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值650.0518，實驗值651.1 (M+1) +；滯留時間：3.94分鐘(LC方法C)。 中間物 14 ：製備 6- 氯 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2063
步驟 1 ： 6- 氯 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2065
向在0℃下之6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.14 g，4.006 mmol)於THF (48.51 mL)及水(24.26 mL)中之溶液中添加一水合氫氧化鋰(201.7 mg，4.807 mmol)。將反應物升溫至室溫，接著攪拌2小時。藉由添加1N HCl將溶液酸化至pH ~2 - 3，接著用EtOAc萃取。有機相用水及鹽水洗滌，接著經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到呈透明糊漿狀之6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.05 g，97%)。ESI-MS m/z計算值269.9655，實驗值271.0 (M+1) +；滯留時間：0.37分鐘(LC方法S)。 中間物 15 ：製備 N- [2-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2067
步驟 1 ： N- [2-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2069
向 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(222 g，340.8 mmol)於MTBE (1.333 L)中之溶液中添加DIPEA (65.3 mL，374.9 mmol)，隨後添加DMAP (2.09 g，17.11 mmol)。歷經8分鐘添加二碳酸二三級丁酯(111.6 g，511.3 mmol)於MTBE (250 mL)中之溶液(不放熱)，且額外攪拌反應物30 min 。添加1 L水且分離各層。有機層用KHSO 4(886 mL，0.5 M，443.0 mmol)、300 mL鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，且大部分(＞95%) MTBE藉由在45℃下旋轉蒸發而蒸發，留下黏稠油狀物。添加1.125 L庚烷，在45℃旋轉蒸發器浴中旋轉直至溶解，接著藉由旋轉蒸發蒸發出325 mL溶劑。使旋轉蒸發器浴溫度降至室溫，且產物在蒸發期間開始結晶出。接著將燒瓶置於-20℃冰箱中隔夜。過濾所得固體且用冷庚烷洗滌且在室溫下乾燥3天，得到 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(240.8 g，94%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.95 (s, 1H), 7.52 - 7.45 (m, 2H), 7.44 - 7.36 (m, 2H), 7.36 - 7.29 (m, 1H), 5.83 - 5.67 (m, 1H), 5.08 - 5.00 (m, 1H), 5.00 - 4.94 (m, 1H), 4.79 (d, J =10.4 Hz, 1H), 4.64 (d, J =10.4 Hz, 1H), 2.57 - 2.26 (m, 3H), 2.26 - 2.12 (m, 1H), 1.41 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z計算值750.14874，實驗值751.1 (M+1) +；滯留時間：3.76分鐘(LC方法D)。 中間物 16 ：製備 (2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯肼及 (2 S)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯肼
Figure 02_image2071
步驟 1 ： 2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯肼
Figure 02_image2073
將 N-[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺基甲酸三級丁酯(386.49 g，995.1 mmol)溶解於DCM (1.25 L)及甲苯(250 mL)中，且在室溫下用HCl (750 mL，4 M，3.000 mol)處理，且在室溫下攪拌黃色溶液18 h。真空濃縮混合物且用EtOAc (2 L)稀釋。混合物用NaOH (600 mL，2 M，1.200 mol)處理，且在環境溫度下攪拌10 min。分離有機相，用1 L鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮且直接用於隨後步驟(存在微量甲苯)，2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(286 g，100%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.34 (s, 1H), 7.40 - 7.22 (m, 5H), 5.69 (ddt, J =17.1, 10.3, 6.9 Hz, 1H), 5.33 - 5.23 (m, 1H), 5.15 (dd, J =10.3, 1.8 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 3.05 - 2.87 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值288.10855，實驗值289.0 (M+1) +；滯留時間：1.32分鐘(LC方法B)。 步驟 2 ： (2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯肼及 (2 S)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯肼
Figure 02_image2075
外消旋2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(5.0 g，17.35 mmol)藉由對掌性SFC分離，其使用ChiralPak IG管柱(250 × 21.2 mm；5 μm)，在40℃下，使用之移動相為7% MeOH (+ 20 mM NH 3)/93% CO 2，流速為70 mL/min，且樣本之濃度為111 mg/mL於甲醇中(無調節劑)，注射體積=160 μL (出口壓力為136巴)，偵測波長為210 nm，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為(2 S)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(1.79 g，72%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.31 (s, 1H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.26 (m, 3H), 5.77 - 5.62 (m, 1H), 5.28 (dq, J =17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.15 (dq, J =10.2, 1.3 Hz, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.44 (d, J =4.2 Hz, 2H), 2.99 (dd, J =7.4, 1.3 Hz, 1H), 2.91 (dd, J =15.4, 6.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值288.10855，實驗值289.2 (M+1) +；滯留時間：1.28分鐘(LC方法J)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈白色固體狀之(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(1.7 g，68%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.31 (s, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 2H), 7.39 - 7.25 (m, 3H), 5.77 - 5.62 (m, 1H), 5.28 (dq, J =17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.15 (dq, J =10.2, 1.5 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 3.00 (dd, J =15.3, 7.5 Hz, 1H), 2.91 (dd, J =15.3, 6.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值288.10855，實驗值289.2 (M+1) +；滯留時間：1.28分鐘(LC方法J)。 中間物 17 ：製備三氟甲烷磺酸 [6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶酯 ]
Figure 02_image2077
步驟 1 ： N ' - [2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ]-6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2079
向6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(8.5 g，29.165 mmol)於乙腈(90 mL)及DMF (18 mL)中之溶液中添加CDI (5 g，30.836 mmol)。在室溫下攪拌混合物0.5 h，接著添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(鹽酸鹽) (9 g，27.716 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。將反應混合物轉移至萃取漏斗，用水(300 mL)及2-Me THF (400 mL)沖洗。混合物用2-甲基四氫呋喃(3 × 400 mL)萃取。經合併之有機層用0.5 N HCl水溶液(3 × 300 mL)、鹽水(3 × 250 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。接著將其溶解於二氯甲烷(2 × 300 mL)中兩次，且減壓移除揮發物，得到呈黃色固體狀之 N '-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(14.7 g，75%)。ESI-MS m/z計算值522.0974，實驗值523.1 (M+1) +；滯留時間：2.08分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ：三氟甲烷磺酸 [6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶酯 ]
Figure 02_image2081
在0℃下，將三氟甲烷磺酸三氟甲基磺醯酯(14.758 g，8.8 mL，52.308 mmol)添加至含 N '-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(14.7 g，20.712 mmol)及DIPEA (9.79 g，13.2 mL，75.783 mmol)之二氯甲烷(175 mL)中。在20 min之後移除冰冷浴，且在室溫下攪拌反應物2.5 h。將混合物轉移至具有冰冷1.0 N HCl水溶液(180 mL)及EtOAc (500 mL)之分液漏斗。分離有機層，且水相用乙酸乙酯(2 × 120 mL)萃取。經合併之有機層再次用冰冷HCl 1.0 N水溶液(120 mL)及鹽水(3 × 120 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且藉由減壓蒸發濃縮。藉由矽膠層析(0%至20%乙酸乙酯/庚烷)純化，得到呈橙色黏稠油狀之三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (5.425 g，40%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.65 (s, 1H), 7.36 - 7.21 (m, 5H), 5.93 - 5.74 (m, 1H), 5.28 - 5.10 (m, 2H), 4.78 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.60 (d, J =10.6 Hz, 1H), 3.21 - 3.05 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -62.69 (s, 3F), -71.82 (s, 3F), -73.32 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值636.03613，實驗值637.1 (M+1) +；滯留時間：4.0分鐘(LC方法C)。 中間物 18 ：製備 (2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯肼
Figure 02_image2083
步驟 1 ： N- [[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2085
向(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(365 g，1.266 mol)於DMF (2 L)中之溶液中添加HATU (612 g，1.610 mol)及DIEA (450 mL，2.584 mol)，且在環境溫度下攪拌混合物10 min。向混合物中添加 N-胺基胺基甲酸三級丁酯(200 g，1.513 mol) (在添加時略微放熱)，且在環境溫度下攪拌混合物16 h。將反應物倒入冰水(5 L)中。所得沈澱藉由過濾來收集且用水洗滌。使固體溶解於EtOAc (2 L)中且用鹽水洗滌。有機相經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮。油狀物用EtOAc (500 mL)，繼而庚烷(3 L)稀釋，且在環境溫度下攪拌若干小時，獲得黏稠漿液。漿液用額外庚烷稀釋且過濾，以收集蓬鬆白色固體(343 g)。濃縮濾液且藉由矽膠層析(0-40% EtOAc/己烷)純化，得到 N-[[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺基甲酸三級丁酯(464 g，91%，與自結晶之產物合併)。ESI-MS m/z計算值402.17664，實驗值303.0 (M+1-Boc) +；滯留時間：2.68分鐘(LC方法D)。 步驟 2 ： (2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯肼
Figure 02_image2087
向 N-[[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺基甲酸三級丁酯(464 g，1.153 mol)於DCM (1.25 L)中之溶液中添加HCl (925 mL，4 M，3.700 mol)，且在環境溫度下攪拌混合物20 h。真空濃縮混合物，移除大部分DCM。混合物用乙酸異丙酯(1 L)稀釋且用含NaOH (140 g，50% w/w，1.750 mol)之1 L冰水鹼化至pH = 6。分離有機相且用1 L鹽水洗滌，且經合併之水相用乙酸異丙酯(1 L)萃取。經合併之有機相經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮，得到深黃色油狀物。(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(358 g，定量) 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.02 (s, 1H), 7.44 - 7.29 (m, 5H), 5.81 (ddt, J =16.8, 10.1, 6.4 Hz, 1H), 5.13 - 4.93 (m, 2H), 4.75 (dd, J =10.5, 1.5 Hz, 1H), 4.61 (d, J =10.5 Hz, 1H), 3.78 (s, 2H), 2.43 (ddd, J =14.3, 11.0, 5.9 Hz, 1H), 2.26 - 1.95 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值302.1242，實驗值303.0 (M+1) +；滯留時間：2.0分鐘(LC方法D)。 中間物 19 ：製備 2-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-5-[6- 氯 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑
Figure 02_image2089
步驟 1 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ]-6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2091
將6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(28.8 g，114.24 mmol)及(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(30 g，104.07 mmol)溶解於乙酸乙酯(300 mL)及三乙胺(42.108 g，58 mL，416.13 mmol)之混合物中。在室溫(20℃至25 ℃)下添加丙基膦酸酐(106 g，50% w/w，166.57 mmol)，且攪拌反應物2 h。接著，反應物用1 M氯化銨水溶液(400 mL)淬滅，分離各相，且有機相用1 M氯化銨水溶液(400 mL)及接著1 M碳酸氫鉀(2 × 300 mL)洗滌。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，接著添加庚烷(250 mL)，且將混合物蒸發至乾燥，得到呈黃色固體狀之 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(63 g，61%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.12 (s, 1H), 7.48 (d, J =7.1 Hz, 2H), 7.42 - 7.33 (m, 3H), 5.96 - 5.83 (m, 1H), 5.35 (d, J =16.6 Hz, 1H), 5.20 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.90 - 4.81 (m, 2H), 3.12 - 2.94 (m, 2H) ppm. 在NMR中未觀測到三個可交換質子。ESI-MS m/z計算值522.0974，實驗值523.1 (M+1) +；滯留時間：3.102分鐘(LC方法C)。 步驟 2 ： 2-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-5-[6- 氯 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑
Figure 02_image2093
將 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(45 g，80.979 mmol)溶解於磷醯氯(90 mL)及乙腈(90 mL)之混合物中，且添加二甲基甲醯胺(45 mL)。在70℃下加熱混合物2 h。接著，反應物用1 M碳酸氫鉀水溶液(1.3 L)淬滅，同時監測pH且用6 M氫氧化鈉(300 mL)調節。接著產物用乙酸乙酯(3 × 500 mL)萃取。將有機相合併且經硫酸鈉(150 g)乾燥，接著過濾且濃縮。接著，產物使用125 g矽膠乾燥封裝且在用庚烷(2 L)及接著10% MTBE/庚烷(8 L)溶離之600 g矽膠墊上純化，得到一些純產物及一些受污染之產物。此受污染之產物使用50 g矽膠乾燥封裝，且在用庚烷(1 L)溶離及接著再次用10% MTBE之庚烷(6 L)溶離之400 g矽膠墊上純化，得到純產物及一些受污染之產物。此受污染之產物藉由逆相層析進一步純化，其使用100 g C 18管柱且用0.1%甲酸水溶液至甲醇之梯度(產物在~80%甲醇處溶離)溶離。將含有產物之級分合併，真空蒸發甲醇，且接著水溶液用乙酸乙酯(2 × 50 mL)萃取。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且接著蒸發至乾燥，得到更多所需純產物。將所有批次之來自各純化之所需產物合併，得到呈淺黃色油狀之2-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(13.5 g，30%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.26 (s, 1H), 7.46 - 7.31 (m, 5H), 5.92 (dd, J =16.9, 9.5 Hz, 1H), 5.39 (d, J =16.6 Hz, 1H), 5.26 (d, J =10.3 Hz, 1H), 4.79 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.63 (d, J =10.8 Hz, 1H), 3.31 (d, J =6.8 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值522.053，實驗值523.0 (M+1) +；滯留時間：3.784分鐘(LC方法C)。 中間物 20 ：製備 6- 氯 -5-( 二氟甲基 )-3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2095
步驟 1 ： 5-( 二氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2097
在高壓釜中添加2-溴-5-(二氟甲基)吡啶(25 g，120.19 mmol)、甲醇(250 mL)、三乙胺(29.04 g，40 mL，286.98 mmol)及[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II) (2.6 g，3.5533 mmol)。高壓釜用氮氣吹掃，接著用一氧化碳吹掃。在130℃下加熱混合物，且將一氧化碳壓力調整至120 psi。在130℃下攪拌混合物3 h，接著冷卻至25℃。混合物用氮氣吹掃且真空濃縮。所得固體用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，接著添加水(200 mL)及碳酸鈉(20 g)。劇烈攪拌混合物10分鐘且分離各層。有機層用水(200 mL)及鹽水(200 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓蒸發。殘餘物藉由矽膠層析純化，其使用之梯度為20%至50%乙酸乙酯/庚烷，得到呈灰白色固體狀之5-(二氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(11.41 g，51%)。ESI-MS m/z計算值187.0445，實驗值188.2 (M+1) +；滯留時間：1.48分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 5-( 二氟甲基 )-1- 氧離子基 - 吡啶 -1- 鎓 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2099
將過氧化脲(13.7 g，145.64 mmol)添加至5-(二氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(8.1 g，43.282 mmol)於DCE (70 mL)中之溶液中。在-10℃之溫度下，歷經20分鐘，在冷卻浴(CO 2/丙酮浴)中添加三氟乙酸酐(24.025 g，15.9 mL，114.39 mmol)。在0℃下再攪拌反應混合物30分鐘，且接著在環境溫度下攪拌1小時。將反應混合物倒入冰水(150 mL)中且用~150 mL 1 N氫氧化鈉水溶液調整至pH = 2至3。混合物用二氯甲烷(200 mL)稀釋，且分離各層。水相用二氯甲烷(2 × 150 mL)萃取。經合併之有機相用鹽水(150 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色固體狀之5-(二氟甲基)-1-氧離子基-吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯(8.39 g，87%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.41 (s, 1H), 7.72 (d, J =8.1 Hz, 1H), 7.43 - 7.36 (m, 1H), 6.84 - 6.47 (m, 1H), 4.03 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -115.27 (d, J =55.9 Hz, 2F) ppm. ESI-MS m/z計算值203.0394，實驗值204.1 (M+1) +；滯留時間：0.73分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 5-( 二氟甲基 )-6- 羥基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2101
在0℃下，歷經30分鐘，將三氟乙酸酐(84.616 g，56 mL，402.87 mmol)逐滴添加至5-(二氟甲基)-1-氧離子基-吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯(11.63 g，47.060 mmol)於DMF (130 mL)中之混合物中。在48℃下攪拌混合物4 h，接著在室溫下攪拌反應物隔夜。減壓濃縮反應混合物以移除三氟乙酸酐。在0℃下，歷經30分鐘，將殘餘DMF溶液倒入水(1 L)中。沈澱之固體藉由過濾收集且用水(200 mL)洗滌。真空乾燥固體，得到呈灰白色固體狀之5-(二氟甲基)-6-羥基-吡啶-2-甲酸甲酯(5.74 g，60%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 12.29 (br. s., 1H), 7.88 (d, J =7.3 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.07 - 6.76 (m, 1H), 3.87 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -118.60 (br. s., 2F) ppm. ESI-MS m/z計算值203.0394，實驗值204.1 (M+1) +；滯留時間：1.34分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 5-( 二氟甲基 )-6- 羥基 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2103
向5-(二氟甲基)-6-羥基-吡啶-2-甲酸甲酯(7.43 g，36.575 mmol)於硫酸(48 mL，18.4 M，883.2 mmol)中之冰冷溶液中逐滴添加硝酸(2.5 mL，15.8 M，39.5 mmol)。在5 min之後，移除冰浴，且在45℃下攪拌反應混合物隔夜。在冰水(300 mL)中沈澱反應物。溶液在0℃下冷卻15分鐘，接著固體藉由過濾分離且用水(200 mL)洗滌。真空乾燥固體隔夜，得到呈灰白色固體狀之5-(二氟甲基)-6-羥基-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(5.47 g，56%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.41 (s, 1H), 7.19 - 6.75 (m, 1H), 3.94 (s, 3H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -118.87 (d, J =54.5 Hz, 2F) ppm. ESI-MS m/z計算值248.0245，實驗值249.1 (M+1) +；滯留時間：1.6分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： 6- 氯 -5-( 二氟甲基 )-3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2105
在0℃下，將5-(二氟甲基)-6-羥基-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(2 g，8.06 mmol)溶解於磷醯氯(6.58 g，4 mL，42.914 mmol)及乙腈(4 mL)之混合物中(放熱)。在0℃下逐滴添加DMF (1.888 g，2 mL，25.83 mmol) (放熱)。在70℃ (預加熱油浴)下攪拌所得黃乳色混合物4 h。添加更多磷醯氯(3.29 g，2 mL，21.457 mmol)。在70℃下攪拌橙色溶液隔夜。冷卻至0℃且添加甲醇(30 mL)。在0℃下逐滴添加50%碳酸氫鈉飽和溶液(50 mL)。添加碳酸鉀(10 g)於水(50 mL)、甲醇(50 mL)及乙酸乙酯(150 mL)中之溶液。分離水層且用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到橙色油，其藉由使用梯度為5%至30% MTBE之庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色油狀之6-氯-5-(二氟甲基)-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(1.92 g，79%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.70 (s, 1H), 7.16 - 6.76 (m, 1H), 4.06 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -117.39 (d, J =53.1 Hz, 2F) ppm. ESI-MS m/z計算值265.9906，實驗值267.1 (M+1) +；滯留時間：1.84分鐘(LC方法E)。 中間物 21 ：製備 2- 甲基己 -5- 烯 -2- 胺 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2107
步驟 1 ： 2,2- 二甲基氮丙啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2109
在0℃下，向 N-(2-羥基-1,1-二甲基-乙基)胺基甲酸三級丁酯(30 g，155.35 mmol)於二乙醚(750 mL)中之溶液中添加 p-TsCl (35.6 g，186.73 mmol)及粉末狀KOH (103 g，1.5605 mol)。將反應溫度升高至回流溫度且攪拌16小時。添加另一份KOH (17 g，303 mmol)，且使反應物另外回流2小時。將反應物冷卻至室溫且用乙醚(500 mL)稀釋。藉由經由玻璃燒結漏斗進行過濾移除所形成固體且用更多乙醚(100 mL)洗滌。經合併之醚濾液用水(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈透明油狀之2,2-二甲基氮丙啶-1-甲酸三級丁酯(24.602 g，88%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 2.04 (s, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.28 (s, 6H) ppm。 步驟 2 ： N -(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2111
向反應燒瓶中饋入含烯丙基(氯)鎂之THF (205 mL，2 M，410 mmol)及無水THF (200 mL)。將溶液冷卻至-30℃，且添加溴化銅(I) (二甲基硫醚錯合物) (28 g，136.2 mmol)。在相同溫度下攪拌反應混合物30 min，接著冷卻至-78℃。將2,2-二甲基氮丙啶-1-甲酸三級丁酯(24.602 g，136.49 mmol)於無水THF (200 mL)中之溶液逐滴添加至反應混合物中。在相同溫度下攪拌反應物30 min，且接著移至-20℃冰箱且儲存3小時。反應物在0℃下用氯化銨飽和水溶液(200 mL)淬滅。在室溫下攪拌反應物10分鐘，接著用二乙醚(200 mL)稀釋。溶液經由矽藻土墊過濾且用乙醚(100 mL)洗滌。分離兩個層，且水層用二乙醚(2 × 200 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(200 mL)洗滌，經無水硫酸鎂乾燥且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%二乙醚/己烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色液體狀之 N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)胺基甲酸三級丁酯(18.6 g，61%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 5.82 (ddt, J =16.8, 10.2, 6.6, 6.6 Hz, 1H), 5.09 – 4.87 (m, 2H), 4.38 (s, 1H), 2.11 – 1.98 (m, 2H), 1.79 – 1.64 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.26 (s, 6H) ppm。 步驟 3 ： 2- 甲基己 -5- 烯 -2- 胺 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2113
在室溫下攪拌 N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)胺基甲酸三級丁酯(26.6 g，124.7 mmol)及HCl於二乙醚(350 mL，2 M，700 mmol)中之溶液2天。移除溶劑，且殘餘物用己烷濕磨，得到呈白色固體狀之2-甲基己-5-烯-2-胺(鹽酸鹽) (15.198 g，77%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 8.08 (s, 3H), 5.92 – 5.64 (m, 1H), 5.15 – 4.87 (m, 2H), 2.21 – 1.96 (m, 2H), 1.72 – 1.49 (m, 2H), 1.23 (s, 6H) ppm。 製備化合物 1-213 及化合物 214 至 222 實例 1 ：製備 20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 (4 種立體異構物之混合物 ) ( 化合物 1)
Figure 02_image2115
步驟 1 ： N -[6-(2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 )-2-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2117
向6-(2-烯丙基吡咯啶-1-基)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(200 mg，0.4815 mmol)於乙腈(5 mL)中之溶液中依次添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (180 mg，0.5314 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(鹽酸鹽) (140 mg，0.7303 mmol)、1-羥基苯并三唑(一水合物) (100 mg，0.653 mmol)及三乙胺(101.64 mg，0.14 mL，1.0044 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋，且用1 N HCl水溶液(30 mL)、碳酸氫鈉飽和水溶液(30 mL)、鹽水(30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-(2-烯丙基吡咯啶-1-基)-2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(300 mg，89%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 1.51 (s, 9H), 1.65-1.81 (m, 2H), 1.88-2.00 (m, 1H), 2.07-2.34 (m, 5H), 2.37-2.59 (m, 2H), 3.27-3.43 (m, 1H), 3.56-3.71 (m, 1H), 4.25-4.40 (m, 1H), 4.66-4.77 (m, 1H), 4.78-4.91 (m, 1H), 4.93-5.19 (m, 4H), 5.69-5.91 (m, 2H), 7.32-7.51 (m, 5H), 9.01 (br. s., 1H), 9.16 (dd, J=18.8, 5.9 Hz, 1H), 9.85-10.01 (m, 1H), 10.05 (br. s., 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -75.2至-72.1 (m, 3F), -57.8 (d, J=9.2 Hz, 1F) ppm. 滯留時間：2.82分鐘(LC方法B)。 步驟 2 ： N -[6-(2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 )-2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2119
在50℃下加熱 N-[6-(2-烯丙基吡咯啶-1-基)-2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(2.45 g，3.5016 mmol)及DIPEA (1.1872 g，1.6 mL，9.1858 mmol)於乙腈(50 mL)中之溶液，接著在50℃下逐份添加 對-甲苯磺醯氯(815 mg，4.2749 mmol)。在70℃下攪拌所得混合物2小時。將反應混合物冷卻，用碳酸氫鈉飽和溶液(200 mL)鹼化且用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為70%至100%乙腈/水+ 0.1%甲酸之逆相層析來純化，得到呈黃色膠狀之材料 N-[6-(2-烯丙基吡咯啶-1-基)-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(2.2 g，92%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 1.51 (s, 9H), 1.64-1.78 (m, 2H), 1.86-2.08 (m, 2H), 2.16-2.57 (m, 6H), 3.32-3.44 (m, 1H), 3.53-3.69 (m, 1H), 4.35-4.49 (m, 1H), 4.58-4.69 (m, 1H), 4.71-4.87 (m, 1H), 4.88-5.10 (m, 4H), 5.60-5.84 (m, 2H), 7.24-7.43 (m, 5H), 8.99 (s, 1H), 9.55 (br. s., 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -73.0 (s, 3F), -57.3 (s, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值681.27496，實驗值682.5 (M+1) +；滯留時間：3.19分鐘(LC方法K)。 步驟 3 ： N -6-( 苯甲氧基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2121
向 N-[6-(2-烯丙基吡咯啶-1-基)-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(155 mg，0.2274 mmol)於1,2-二氯乙烷(15 mL)中之脫氣溶液中添加第2代Grubbs催化劑(40 mg，0.047 mmol)。在80℃下攪拌所得混合物0.75 h。將反應混合物冷卻至0℃，且添加二(乙二醇)乙烯基醚(125.84 mg，0.13 mL，0.9522 mmol)以淬滅催化劑，接著在室溫下攪拌10 min且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈綠-黃色固體狀之 N-6-(苯甲氧基)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/ Z混合物) (125 mg，84%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 1.46 (s, 9H), 1.60-1.79 (m, 2H), 1.86-2.00 (m, 1H), 2.00-2.25 (m, 3H), 2.26-2.53 (m, 2H), 2.58-2.82 (m, 1H), 3.39-3.67 (m, 3H), 3.83-4.05 (m, 1H), 4.51-4.65 (m, 1H), 4.89-5.00 (m, 1H), 5.36-5.55 (m, 2H), 7.11-7.28 (m, 5H), 8.81-8.98 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -75.0及-74.1 (2s, 3F), -55.5 (s, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值653.24365，實驗值654.4 (M+1) +；滯留時間：2.94分鐘(LC方法K)。 步驟 4 ： N -[6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2123
向 N-6-(苯甲氧基)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/ Z混合物) (30 mg，0.0459 mmol)於甲醇(4 mL)中之經氮氣脫氣溶液中添加SiliaCat Pd 0(73 mg，0.24 mmol/g，0.0175 mmol)，且在室溫下在氫氣氣球下攪拌反應物64小時。經由矽藻土過濾反應混合物，用甲醇洗滌且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色膠狀之 N-[6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(15 mg，58%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 1.20-1.27 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.48-1.59 (m, 5H), 1.85-1.98 (m, 1H), 1.99-2.65 (m, 4H), 3.30-3.62 (m, 3H), 3.87-4.18 (m, 2H), 8.75-8.97 (m, 2H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -80.8及-77.4 (s, 3F), -55.4至-54.9 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值565.2124，實驗值566.4 (M+1) +；滯留時間：2.73分鐘(LC方法K)。 步驟 5 ： 20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 (4 種立體異構物之混合物 ) ( 化合物 1)
Figure 02_image2125
在室溫下，將TFA (1.4800 g，1 mL，12.98 mmol)添加至含 N-[6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(30 mg，0.053 mmol)之DCM (2 mL)中，且攪拌混合物2 h。將混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)中且用DCM (3 × 10 mL)萃取。將有機相合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(4種立體異構物之混合物) (10 mg，39%)。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 0.80-1.01 (m, 2H), 1.13-1.36 (m, 3H), 1.42-1.68 (m, 4H), 1.71-1.87 (m, 1H), 1.91-2.08 (m, 1H), 2.12-2.29 (m, 1H), 2.36-2.75 (m, 2H), 3.31-3.47 (m, 1H), 3.52-3.75 (m, 1H), 3.86-4.23 (m, 1H), 7.62 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CD 3OD) δ -82.0及-78.8 (s, 3F), -58.1 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值465.15994，實驗值466.2 (M+1) +；滯留時間：3.84分鐘(LC方法F)。 實例 2 ：製備 20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) ( 化合物 2) 及 20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 2) ( 化合物 3)
Figure 02_image2127
步驟 1 ： N -[6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 非鏡像異構物對 1) 及 N -[6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 非鏡像異構物對 2)
Figure 02_image2129
向 N-6-(苯甲氧基)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/ Z混合物) (675 mg，1.0327 mmol)於甲醇(60 mL)中之經氮氣脫氣溶液中添加SiliaCat Pd 0(1.6 g，0.24 mmol/g，0.384 mmol)，且在室溫下在氫氣氣球下攪拌反應物24小時。經由矽藻土過濾反應混合物，用甲醇洗滌且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀且呈溶離之第一非鏡像異構物對之 N-[6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對1) (190 mg，33%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 0.79-0.91 (m, 1H), 0.94-1.10 (m, 1H), 1.25 (br. s., 1H), 1.41-1.68 (m, 13H), 1.70-1.84 (m, 1H), 1.85-2.07 (m, 2H), 2.08-2.27 (m, 2H), 2.28-2.44 (m, 1H), 2.54-2.74 (m, 1H), 3.40-3.71 (m, 3H), 3.94-4.14 (m, 1H), 8.80-9.10 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -77.4 (s, 3F), -55.1 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值565.2124，實驗值566.3 (M+1) +；滯留時間：8.407分鐘(LC方法L)。
繼續溶離，得到呈黃色固體狀且呈溶離之第二非鏡像異構物對之 N-[6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對2) (165 mg，28%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 0.81-0.98 (m, 2H), 1.41-1.60 (m, 13H), 1.61-1.89 (m, 3H), 1.93-2.25 (m, 3H), 2.35-2.62 (m, 2H), 3.46-3.69 (m, 3H), 3.95-4.13 (m, 1H), 8.91 (br. s., 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -80.8 (s, 3F), -55.1 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值565.2124，實驗值566.4 (M+1) +；滯留時間：8.426分鐘(LC方法L)。 步驟 2 ： 20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) ( 化合物 2)
Figure 02_image2131
在室溫下，將TFA (2.9600 g，2 mL，25.96 mmol)添加至含 N-[6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對1) (190 mg，0.336 mmol)之DCM (4 mL)中，且攪拌混合物2 h。將混合物倒入碳酸氫鈉飽和水溶液(20 mL)中且用DCM (3 × 10 mL)萃取。將有機相合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(非鏡像異構物對1) (117 mg，71%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 0.71-0.91 (m, 1H), 1.32-1.62 (m, 6H), 1.65-1.80 (m, 1H), 1.81-2.00 (m, 2H), 2.02-2.16 (m, 1H), 2.18-2.36 (m, 1H), 2.38-2.62 (m, 2H), 3.18-3.31 (m, 1H), 3.39-3.56 (m, 1H), 3.78-3.94 (m, 1H), 6.10 (s, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.69 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -79.3 (s, 3F), -55.8 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值465.15994，實驗值466.2 (M+1) +；滯留時間：3.82分鐘(LC方法F)。 步驟 3 ： 20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 2) ( 化合物 3)
Figure 02_image2133
在室溫下，將TFA (2.9600 g，2 mL，25.96 mmol)添加至含N-[6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對2) (165 mg，0.2918 mmol)之DCM (4 mL)中，且攪拌混合物2 h。將混合物倒入碳酸氫鈉飽和溶液(20 mL)中且用DCM (3 × 10 mL)萃取。將有機相合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(非鏡像異構物對2) (90 mg，65%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 0.72-0.94 (m, 1H), 1.21-1.54 (m, 5H), 1.55-1.79 (m, 3H), 1.81-1.93 (m, 1H), 1.94-2.18 (m, 2H), 2.19-2.41 (m, 2H), 3.17-3.30 (m, 1H), 3.41-3.60 (m, 1H), 3.88-4.09 (m, 1H), 6.10 (br. s., 2H), 7.53 (s, 1H), 7.69 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -76.5 (s, 3F), -55.9 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值465.15994，實驗值466.2 (M+1) +；滯留時間：3.78分鐘(LC方法F)。 實例 3 ：製備 (6 R,12 R)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 4) 及 (6 S,12 R)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 5)
Figure 02_image2135
步驟 1 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2137
向6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(7.8 g，18.78 mmol)於NMP (70 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (6.4 g，18.89 mmol)及DIEA (8.5 g，65.77 mmol)，隨後添加HATU (10.7 g，28.14 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2.5 h，接著混合物用水(100 mL)稀釋且用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。將有機相合併且經MgSO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至5% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(10.2 g，78%)。 1H (400 MHz, 氯仿-d) δ1.52 (s, 9H), 1.67-1.79 (m, 2H), 1.95-1.97 (m, 1H), 2.14-2.29 (m, 5H), 2.43-2.53 (m, 2H), 3.34-3.38 (m, 1H), 3.61-3.67 (m, 1H), 4.31-4.36 (m, 1H), 4.71-4.75 (m, 1H), 4.84-4.87 (m, 1H), 4.99-5.14 (m, 4H), 5.75-5.88 (m, 2H), 7.38-7.43 (m, 5H), 9.01 (d, J =2.5 Hz, 1H), 9.12-9.20 (m, 1H), 9.92-9.99 (m, 1H), 10.06 (d, J =2.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值699.2855，實驗值700.4 (M+1) +；滯留時間：2.39分鐘(LC方法A)。 步驟 2 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2139
將 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(19.3 g，27.58 mmol)溶解於乙腈(385 mL)中，接著添加DIEA (14.5 mL，83.25 mmol)，且加熱至50℃。向此黃色溶液中緩慢添加 對-甲苯磺醯氯(7.9 g，41.44 mmol)，且在70℃下加熱橙色溶液6 h。添加另一份 對-甲苯磺醯氯(0.8 g，4.196 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。深橙色溶液用碳酸氫鈉飽和溶液(400 mL)洗滌，且碳酸氫鹽相用乙酸乙酯(2 × 150 mL)反萃取兩次。經合併之有機相用碳酸氫鈉飽和溶液(200 mL)及鹽水(200 mL)再洗滌一次。經合併之有機相經乾燥，過濾且蒸發，得到深橙色油狀物。殘餘物藉由使用梯度為0%至5%乙酸乙酯及己烷之矽膠層析純化，得到 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(16.5 g，88%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 9.58 (d, J =3.4 Hz, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.48 - 7.20 (m, 5H), 5.75 (dddd, J =17.6, 15.4, 7.0, 4.6 Hz, 2H), 5.10 - 4.93 (m, 4H), 4.82 (dd, J =31.7, 10.9 Hz, 1H), 4.67 (dd, J =10.9, 6.4 Hz, 1H), 4.45 (d, J =8.0 Hz, 1H), 3.64 (q, J =8.7 Hz, 1H), 3.40 (t, J =8.4 Hz, 1H), 2.61 - 2.17 (m, 6H), 2.14 - 1.87 (m, 2H), 1.84 - 1.64 (m, 2H), 1.57 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值681.27496，實驗值682.0 (M+1) +；滯留時間：2.52分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： N -[(12 S)-6- 苯甲氧基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,9,17(21),18- 六烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2141
在氮氣氛圍下，將 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(10.47 g，14.131 mmol)於DCE (2000 mL)中之脫氣溶液加熱至50℃持續15 min。接著添加Zhan催化劑-1B (2 g，2.722 mmol)，且將混合物加熱至70℃且保持在此溫度下隔夜。添加更多Zhan催化劑-1B (0.5 g，0.6805 mmol)，且繼續加熱4 h。使反應混合物冷卻，且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到呈強烈黃綠色泡沫狀之 N-[(12 S)-6-苯甲氧基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (5.87 g，61%)。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 9.01 (s, 1H), 8.98 (d, J =6.8 Hz, 1H), 7.38 – 7.21 (m, 5H), 5.64 – 5.47 (m, 2H), 5.02 (q, J =11.3 Hz, 1H), 4.68 (q, J =11.0 Hz, 1H), 4.15 – 3.92 (m, 1H), 3.75 – 3.42 (m, 3H), 2.92 – 2.81 (m, 1H), 2.79 – 2.64 (m, 1H), 2.58 – 2.48 (m, 1H), 2.48 – 2.35 (m, 1H), 2.31 – 2.16 (m, 2H), 2.10 – 1.99 (m, 1H), 1.82 – 1.71 (m, 2H), 1.55 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值653.2437，實驗值654.1 (M+1) +；滯留時間：4.29分鐘(LC方法G)。 步驟 4 ： (6 R,12 R)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 4) 及 (6 S,12 R)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 5)
Figure 02_image2143
向Pd/C (250 mg，10% w/w，0.2349 mmol)中添加含 N-[(12 S)-6-苯甲氧基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (1.4 g，2.142 mmol)之脫氣MeOH (10 mL)，且在H 2(10 mg，4.961 mmol)氣球下攪拌混合物3天。經由矽藻土過濾混合物且用MeOH洗滌。蒸發濾液，且在用梯度為0%至25% EtOAc/己烷溶離之40 g矽膠管柱上對粗產物進行層析，得到呈非鏡像異構物之混合物之N-Boc保護的產物中間物。接下來，將此材料溶解於DCM (10 mL)中，且添加TFA (1 mL，12.98 mmol)。在環境溫度下攪拌混合物20 h。真空移除溶劑，且粗油狀物藉由使用C 18管柱，用梯度為30%至100%乙腈/水溶離之逆相管柱層析進行層析，得到650 mg非鏡像異構物之混合物。此混合物經受對掌性SFC，其使用ChiralPak AS-H管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，使用10% 甲醇/CO 2移動相，6分鐘(流速= 70 mL/min)，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為(6R,12R)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(261.4 mg，52%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.46 (s, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.01 (q, J =9.8, 9.1 Hz, 2H), 3.65 (d, J =8.8 Hz, 1H), 3.51 - 3.38 (m, 1H), 2.57 - 2.40 (m, 2H), 2.18 (dtd, J =12.5, 6.3, 3.5 Hz, 1H), 2.12 - 1.95 (m, 2H), 1.84 (p, J =10.0, 9.5 Hz, 1H), 1.77 - 1.37 (m, 8H), 0.94 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值465.15994，實驗值466.1 (M+1) +；滯留時間：3.17分鐘(LC方法D)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為(6S,12R)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(256.4 mg，51%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.59 (s, 1H), 4.04 (s, 1H), 3.62 (t, J =8.6 Hz, 1H), 3.43 (s, 1H), 2.61 (s, 1H), 2.36 (t, J =12.4 Hz, 1H), 2.28 - 2.09 (m, 2H), 2.07 - 1.71 (m, 3H), 1.61 (d, J =22.0 Hz, 6H), 1.01 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值465.15994，實驗值466.0 (M+1) +；滯留時間：3.12分鐘(LC方法D)。 步驟 5 ：非晶形化合物 4 ( 純形式 ) 之固體形式表徵A.     X射線粉末繞射
藉由步驟4產生之非晶形化合物4 (純形式)之XRPD繞射圖係使用通用X射線粉末繞射(XRPD)方法獲得，且提供於 圖 1中。 B.     熱重分析(TGA)
非晶形化合物4 (純形式)之TGA資料係在具有TRIOS系統之TA儀器探索系列上收集。非晶形化合物4 (純形式)之TGA曲線提供於 圖 2中。TGA曲線顯示在~40至155℃ 1.69%重量損失，其中以10.00℃/min上升至350.00℃。 C.     差示掃描熱量測定分析
非晶形化合物4 (純形式)之DSC資料係在具有TRIOS系統之TA儀器探索系列上收集。DSC使用以下經調變之DSC方法進行： 1. 在-20.00℃下平衡， 2. 每60秒藉由+/- 1.00℃調變， 3. 等溫5.00 min，接著 4. 以2.00℃/min上升至250.00℃。
非晶形化合物4 (純形式)之DSC熱分析圖提供於 圖 3中。熱分析圖顯示在77.6℃處之Tg中點。 步驟 6 ：結晶化合物 5 形式 A ( 純 ) 之固體形式表徵A.     單晶X射線繞射
使結晶化合物5形式A (純)之單晶自乙醇及戊烷生長。X射線繞射資料係在配備有Cu Kα輻射(λ=1.54178 Å)及CCD偵測器之Bruker繞射儀上在100 K下獲得。使用SHELX程式(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)解析結構且進行精細化，且結果概述於下 表 3中。 表 3 ：結晶化合物 5 形式 A ( 純 ) 之單晶說明
晶體系統 四方晶
空間群 I4 1
a (Å) 18.1053(4)
b (Å) 18.1053(4)
c (Å) 13.1201(3)
α (°) 90
β (°) 90
γ (°) 90
V (Å3) 4300.8(2)
Z/Z′ 8/1
溫度 100 K
實例 4 ：製備 (6 S,12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 6)
Figure 02_image2145
步驟 1 ： (6 S,12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 6)
20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(非鏡像異構物對1) (96.7 mg，0.2078 mmol)經受對掌性SFC，其使用ChiralPak AS-H管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑)，使用8% 甲醇/CO 2移動相，6分鐘，(流速= 10 mL/min)，得到呈溶離之第二單一鏡像異構物(6 S,12 S)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(30.8 mg，64%) ESI-MS m/z計算值465.15994，實驗值466.0 (M+1) +；滯留時間：2.13分鐘(LC方法N)。 實例 5 ：製備 (6 R,12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 7)
Figure 02_image2147
步驟 1 ： (6 R,12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 7)
20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(非鏡像異構物對2) (80 mg，0.1719 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用ChiralPak AS-H (250 × 10 mm) 5μm管柱；40℃，且8% MeOH (無調節劑)/CO 2作為溶離劑，使用流速10.0 mL/min，注射體積為70 µL，得到第一溶離鏡像異構物(6 R,12 S)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(19.9 mg，50%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.73 (s, 1H), 7.58 (d, J =2.1 Hz, 1H), 6.12 (s, 2H), 4.02 (d, J =8.2 Hz, 1H), 3.52 (t, J =8.5 Hz, 1H), 3.30 (d, J =9.0 Hz, 2H), 2.35 (ddd, J =25.1, 14.1, 6.2 Hz, 2H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 2.10 - 2.00 (m, 1H), 1.94 (d, J =9.0 Hz, 1H), 1.79 - 1.68 (m, 2H), 1.64 (s, 1H), 1.58 - 1.46 (m, 2H), 1.46 - 1.33 (m, 2H), 0.88 (q, J =5.7, 4.9 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值465.15994，實驗值466.0 (M+1) +；滯留時間：2.1分鐘(LC方法A)。 實例 6 ：製備 16- 胺基 -10,18- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -2,12,13,19- 四氮雜四環 [13.3.1.12,5.111,14] 二十一碳 -1(19),11,13,15,17- 五烯 -10- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) ( 化合物 8) 及 16- 胺基 -10,18- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -2,12,13,19- 四氮雜四環 [13.3.1.12,5.111,14] 二十一碳 -1(19),11,13,15,17- 五烯 -10- 醇 ( 非鏡像異構物對 2) ( 化合物 9)
Figure 02_image2149
步驟 1 ： 3- 乙烯基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2151
在0℃下，將正丁基鋰(26.6 mL，2.5 M於己烷中，66.5 mmol)緩慢添加至甲基三苯基溴化鏻(23.8 g，66.625 mmol)於四氫呋喃(100 mL)中之懸浮液中。在0℃下攪拌所得橙色溶液5分鐘。使用加料漏斗緩慢添加3-甲醯基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(12.5 g，62.736 mmol)於四氫呋喃(75 mL)中之溶液，將反應混合物保持在0℃下。在0℃下攪拌15分鐘之後，歷經2.5小時將反應物升溫至室溫。再次將反應混合物冷卻至0℃且用飽和氯化銨水溶液(200 mL)淬滅，且使用二乙醚(3 × 150 mL)萃取。合併有機層，經硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至15% EtOAc/庚烷之矽膠層析純化，得到呈透明液體狀之3-乙烯基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(10.18 g，82%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 1.45 (s, 9H), 1.60-1.77 (m, 1H), 1.99 (dtd, J=12.5, 6.4, 3.4 Hz, 1H), 2.69-2.85 (m, 1H), 2.96-3.12 (m, 1H), 3.19-3.36 (m, 1H), 3.38-3.63 (m, 2H), 4.97-5.15 (m, 2H), 5.76 (dt, J=17.1, 8.6 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值197.14159，實驗值142.2 (M- t Bu+1) +；滯留時間：2.08分鐘(LC方法B)。 步驟 2 ： 3- 乙烯基吡咯啶 ( 三氟乙酸鹽 )
Figure 02_image2153
在0℃下，將三氟乙酸(47.360 g，32 mL，415.35 mmol)緩慢添加至含3-乙烯基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(8 g，40.553 mmol)之二氯甲烷(32 mL)中。在室溫下攪拌混合物2小時，接著濃縮。添加甲苯(40 mL)且濃縮，得到呈棕色油狀之3-乙烯基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (13.3 g，93%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.87 (br. s., 2H), 5.81 - 5.64 (m, 1H), 5.28 - 5.09 (m, 2H), 3.56 - 3.40 (m, 2H), 3.39 - 3.25 (m, 1H), 3.10 - 2.91 (m, 2H), 2.32 - 2.16 (m, 1H), 1.96 - 1.79 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -75.96 (s, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值97.08915，實驗值98.2 (M+1) +；滯留時間：0.33分鐘(LC方法O)。 步驟 3 ： 3- 乙烯基吡咯啶 -1- 甲酸 9 H- 茀 -9- 基甲酯
Figure 02_image2155
在室溫下，將氯甲酸9 H-茀-9-基甲酯(550 mg，2.126 mmol)添加至含3-乙烯基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (500 mg，1.4206 mmol)及二異丙基乙胺(556.50 mg，0.75 mL，4.3058 mmol)之二氯甲烷(20 mL)中。攪拌溶液2天，接著添加水(20 mL)，且用DCM (2 × 20 mL)萃取混合物。將有機相合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈透明油狀之3-乙烯基吡咯啶-1-甲酸9 H-茀-9-基甲酯(458 mg，100%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 1.54-1.75 (m, 1H), 1.84-2.04 (m, 1H), 2.66-2.85 (m, 1H), 2.90-3.05 (m, 1H), 3.13-3.27 (m, 1H), 3.28-3.49 (m, 2H), 4.15-4.37 (m, 3H), 4.93-5.18 (m, 2H), 5.69-5.87 (m, 1H), 7.21-7.47 (m, 4H), 7.62 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.88 (d, J=7.6 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值319.15723，實驗值320.2 (M+1) +；滯留時間：2.36分鐘(LC方法B)。 步驟 4 ： 3-[5- 苯甲氧基 -5-[5-[6- 溴 -3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6,6,6- 三氟 - 己 -1- 烯基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸 9 H- 茀 -9- 基甲酯 ( E/ Z 混合物 )
Figure 02_image2157
向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(1.63 g，2.5023 mmol)及3-乙烯基吡咯啶-1-甲酸9 H-茀-9-基甲酯(3.6 g，11.271 mmol)於1,2-二氯乙烷(8 mL)中之脫氣溶液中添加第2代Grubbs催化劑(129 mg，0.1516 mmol)。在40℃下攪拌所得混合物隔夜。將反應混合物冷卻至室溫且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈灰白色固體狀之3-[5-苯甲氧基-5-[5-[6-溴-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6,6,6-三氟-己-1-烯基]吡咯啶-1-甲酸9 H-茀-9-基甲酯( E/ Z混合物) (1.3 g，47%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 1.56 (s, 9H), 1.60-1.76 (m, 1H), 1.90-2.03 (m, 1H), 2.10-2.23 (m, 1H), 2.28-2.55 (m, 3H), 2.65-2.85 (m, 1H), 3.01-3.14 (m, 1H), 3.29-3.43 (m, 1H), 3.47-3.64 (m, 2H), 4.18-4.29 (m, 1H), 4.31-4.41 (m, 2H), 4.63-4.74 (m, 1H), 4.76-4.88 (m, 1H), 5.37-5.56 (m, 2H), 7.28-7.45 (m, 7H), 7.47-7.55 (m, 2H), 7.57-7.65 (m, 2H), 7.73-7.81 (m, 2H), 9.35 (s, 1H), 10.16-10.22 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.5 (br. s., 3F), -63.8 (br. s., 3F) ppm. 滯留時間：2.96分鐘(LC方法K)。 步驟 5 ： 3-[5- 苯甲氧基 -5-[5-[6- 溴 -3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6,6,6- 三氟 - 己基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸 9 H- 茀 -9- 基甲酯
Figure 02_image2159
向3-[5-苯甲氧基-5-[5-[6-溴-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6,6,6-三氟-己-1-烯基]吡咯啶-1-甲酸9 H-茀-9-基甲酯( E/ Z混合物) (205 mg，0.2175 mmol)於乙酸乙酯(16 mL)中之經氮氣脫氣溶液中添加鈀/碳(46 mg，0.0216 mmol)，且在室溫下在氫氣球下攪拌反應物2 h。反應混合物經由矽藻土過濾，用乙酸乙酯洗滌，且蒸發濾液，得到呈琥珀色膠狀之3-[5-苯甲氧基-5-[5-[6-溴-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6,6,6-三氟-己基]吡咯啶-1-甲酸9 H-茀-9-基甲酯(190 mg，92%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 1.34-1.46 (m, 4H), 1.56 (s, 9H), 1.91-2.18 (m, 3H), 2.25-2.50 (m, 3H), 2.85-2.99 (m, 1H), 3.25-3.40 (m, 1H), 3.44-3.66 (m, 3H), 4.18-4.29 (m, 1H), 4.30-4.41 (m, 2H), 4.63-4.74 (m, 1H), 4.75-4.85 (m, 1H), 7.26-7.44 (m, 7H), 7.46-7.54 (m, 2H), 7.56-7.65 (m, 2H), 7.72-7.80 (m, 2H), 9.34 (s, 1H), 10.19 (br. s., 1H) ppm。 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.5 (br. s., 3F), -63.8 (br. s., 3F) ppm. 滯留時間：2.97分鐘(LC方法K)。 步驟 6 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -5- 吡咯啶 -3- 基 -1-( 三氟甲基 ) 戊基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2161
將哌啶(172.20 mg，0.2 mL，2.0224 mmol)添加至含3-[5-苯甲氧基-5-[5-[6-溴-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6,6,6-三氟-己基]吡咯啶-1-甲酸9 H-茀-9-基甲酯(75 mg，0.0794 mmol)之THF (5 mL)中，且在室溫下攪拌混合物隔夜，接著減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為5%至70%至100%甲醇/水+ 0.1%甲酸之反相(C 18管柱)層析來純化，得到呈透明油狀之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-5-吡咯啶-3-基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(27 mg，43%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 1.31-1.47 (m, 4H), 1.49-1.71 (m, 10H), 1.96-2.25 (m, 4H), 2.26-2.44 (m, 2H), 2.62-2.74 (m, 1H), 3.07-3.19 (m, 1H), 3.22-3.42 (m, 2H), 4.64-4.73 (m, 1H), 4.74-4.83 (m, 1H), 7.29-7.44 (m, 3H), 7.44-7.53 (m, 2H), 8.42 (br. s, 1H), 9.35 (s, 1H), 10.18 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.5 (br. s., 3F), -63.8 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值721.16986，實驗值722.2 (M+1) +；滯留時間：2.01分鐘(LC方法K)。 步驟 7 ： N -[10-( 苯甲氧基 )-10,18- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -2,12,13,19- 四氮雜四環 [13.3.1.12,5.111,14] 二十一碳 -1(18),11,13,15(19),16- 五烯 -16- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2163
將DIPEA (51.940 mg，0.07 mL，0.4019 mmol)添加至含 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-5-吡咯啶-3-基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(32 mg，0.0443 mmol)之乙腈(7 mL)中，且在80℃下加熱混合物隔夜。將混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液(50 mL)中且用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(50 mL)洗滌，在無水硫酸鈉上乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈綠黃色膠狀之 N-[10-(苯甲氧基)-10,18-雙(三氟甲基)-20-氧雜-2,12,13,19-四氮雜四環[13.3.1.12,5.111,14]二十一碳-1(18),11,13,15(19),16-五烯-16-基]胺基甲酸三級丁酯(23 mg，79%)。 1H NMR (300MHz, 氯仿-d)：δ 9.03-9.32 (m, 1H), 8.90-9.01 (m, 1H), 7.19-7.30 (m, 5H), 4.61-4.83 (m, 2H), 4.44-4.59 (m, 1H), 4.10-4.19 (m, 1H), 3.28-3.51 (m, 2H), 3.09-3.26 (m, 1H), 2.52-2.68 (m, 1H), 2.20-2.38 (m, 1H), 1.93-2.17 (m, 3H), 1.73-1.92 (m, 1H), 1.39-1.60 (m, 9H), 1.22-1.37 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -60.41 (s, 1.5F), -60.90 (s, 1.5F), -74.03 (s, 1.5F), -74.94 (br. s., 1.5F) ppm. ESI-MS m/z計算值641.24365，實驗值642.2 (M+1) +；滯留時間：3.14分鐘(LC方法O)。 步驟 8 ： 10-( 苯甲氧基 )-10,18- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -2,12,13,19- 四氮雜四環 [13.3.1.12,5.111,14] 二十一碳 -1(18),11,13,15(19),16- 五烯 -16- 胺
Figure 02_image2165
在室溫下，將TFA (1.4800 g，1 mL，12.98 mmol)添加至含 N-[10-(苯甲氧基)-10,18-雙(三氟甲基)-20-氧雜-2,12,13,19-四氮雜四環[13.3.1.12,5.111,14]二十一碳-1(18),11,13,15(19),16-五烯-16-基]胺基甲酸三級丁酯(60 mg，0.0935 mmol)之DCM (2 mL)中，且攪拌混合物2 h。將混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)中且用DCM (3 × 10 mL)萃取。將有機相合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到呈綠黃色膠狀之10-(苯甲氧基)-10,18-雙(三氟甲基)-20-氧雜-2,12,13,19-四氮雜四環[13.3.1.12,5.111,14]二十一碳-1(18),11,13,15(19),16-五烯-16-胺(36 mg，71%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.34 (s, 1H), 7.29 - 7.13 (m, 5H), 5.51 - 5.06 (m, 2H), 4.85 - 4.72 (m, 1H), 4.71 - 4.60 (m, 1H), 4.59 - 4.43 (m, 1H), 3.53 - 3.27 (m, 1H), 3.25 - 2.84 (m, 2H), 2.70 - 2.50 (m, 1H), 2.43 - 2.21 (m, 1H), 2.14 - 1.91 (m, 3H), 1.66 - 1.28 (m, 6H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d)：δ -62.15至-60.08 (m, 3F), -75.57至-73.50 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值541.1912，實驗值542.1 (M+1) +；滯留時間：2.65分鐘(LC方法O)。 步驟 9 ： 16- 胺基 -10,18- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -2,12,13,19- 四氮雜四環 [13.3.1.12,5.111,14] 二十一碳 -1(19),11,13,15,17- 五烯 -10- 醇
Figure 02_image2167
向10-(苯甲氧基)-10,18-雙(三氟甲基)-20-氧雜-2,12,13,19-四氮雜四環[13.3.1.12,5.111,14]二十一碳-1(18),11,13,15(19),16-五烯-16-胺(42 mg，0.0776 mmol)於甲醇(6 mL)中之經氮氣脫氣溶液中添加SiliaCat Pd 0(120 mg，0.24 mmol/g，0.0288 mmol)，且在室溫下在氫氣球下攪拌反應物2天。反應混合物經由矽藻土過濾，用甲醇洗滌，且蒸發濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀且呈4種立體異構物之外消旋混合物之16-胺基-10,18-雙(三氟甲基)-20-氧雜-2,12,13,19-四氮雜四環[13.3.1.12,5.111,14]二十一碳-1(19),11,13,15,17-五烯-10-醇(17 mg，48%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.70 - 7.64 (m, 1H), 7.60 - 7.54 (m, 1H), 6.52 (br. s, 1H), 6.36 (br. s, 1H), 4.49 - 4.32 (m, 1H), 4.19 - 4.04 (m, 1H), 3.04 - 2.83 (m, 2H), 2.21 - 1.82 (m, 5H), 1.65 - 1.25 (m, 6H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -59.86 (br. s., 1.5F), -60.32 (br. s., 1.5F), -77.43 (br. s., 1.5F), -78.51 (br. s., 1.5F) ppm. ESI-MS m/z計算值451.1443，實驗值452.2 (M+1) +；滯留時間：3.52分鐘(LC方法C)。 步驟 10 ： 16- 胺基 -10,18- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -2,12,13,19- 四氮雜四環 [13.3.1.12,5.111,14] 二十一碳 -1(19),11,13,15,17- 五烯 -10- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) ( 化合物 8) 及 16- 胺基 -10,18- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -2,12,13,19- 四氮雜四環 [13.3.1.12,5.111,14] 二十一碳 -1(19),11,13,15,17- 五烯 -10- 醇 ( 非鏡像異構物對 2) ( 化合物 9)
Figure 02_image2169
4種立體異構物之外消旋混合物16-胺基-10,18-雙(三氟甲基)-20-氧雜-2,12,13,19-四氮雜四環[13.3.1.12,5.111,14]二十一碳-1(19),11,13,15,17-五烯-10-醇(14 mg，0.03102 mmol)藉由反相製備型層析來純化，其使用C 18管柱及梯度30%至65%乙腈/水+ 5 mM鹽酸，30 min，得到單獨兩對非鏡像異構物：
溶離之第一對非鏡像異構物分離為16-胺基-10,18-雙(三氟甲基)-20-氧雜-2,12,13,19-四氮雜四環[13.3.1.12,5.111,14]二十一碳-1(19),11,13,15,17-五烯-10-醇(非鏡像異構物對1) (5.6 mg，78%)。ESI-MS m/z計算值451.1443，實驗值452.0 (M+1) +；滯留時間：1.58分鐘(LC方法A)。
溶離之第二對非鏡像異構物分離為16-胺基-10,18-雙(三氟甲基)-20-氧雜-2,12,13,19-四氮雜四環[13.3.1.12,5.111,14]二十一碳-1(19),11,13,15,17-五烯-10-醇(非鏡像異構物對2) (1.7 mg，24%)。ESI-MS m/z計算值451.1443，實驗值452.0 (M+1) +；滯留時間：1.62分鐘(LC方法A)。 實例 7 ：製備 (6 E,12 R)-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,6,17,19- 六烯 -20- 胺 ( 化合物 10)
Figure 02_image2171
步驟 1 ： N -[(12 R)-6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2173
向氫化容器中之 N-[(12 S)-6-苯甲氧基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (6.87 g，10.090 mmol)於MeOH (150 mL)中之溶液中添加10% Pd/C (2.7 g，2.5371 mmol)。反應混合物用氮氣吹掃三次，接著用氫氣回填兩次，之後其經受60 psi氫化67 h。反應混合物經由矽藻土床過濾，且濾床用MeOH (3 × 100 mL)洗滌。經合併之濾液藉由旋轉蒸發濃縮，得到呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(5.71 g，95%)。ESI-MS m/z計算值565.2124，實驗值566.5 (M+1) +；滯留時間：3.92分鐘。此材料未經進一步純化即用於後續步驟中(LC方法G)。 步驟 2 ： N -[(6 E,12 R)-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,6,17,19- 六烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2175
將 N-[(12 R)-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(14 mg，0.02476 mmol)溶解於吡啶(1.5 mL)中，且向溶液中緩慢添加POCl 3(105 µL，1.126 mmol)。將混合物密封且在50℃下加熱20 h。接著將反應混合物冷卻至室溫且用甲醇稀釋，接著過濾。所得材料藉由反相製備型層析來純化，其利用C 18管柱，用50%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)溶離，運行15分鐘，得到呈黃色固體狀之 N-[(6 E,12 R)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,6,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(6.4 mg，47%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 9.13 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 7.41 (t, J =9.1 Hz, 1H), 4.26 (q, J =8.7 Hz, 1H), 3.59 (q, J =8.6, 8.2 Hz, 1H), 3.50 – 3.40 (m, 1H), 3.04 (d, J =12.4 Hz, 1H), 2.44 (t, J =12.7 Hz, 1H), 2.26 – 2.17 (m, 1H), 2.13 – 2.08 (m, 1H), 1.99 (s, 1H), 1.78 (t, J =11.1 Hz, 2H), 1.70 (d, J =11.6 Hz, 1H), 1.63 – 1.56 (m, 1H), 1.51 (s, 9H), 1.48 (s, 1H), 1.25 (s, 1H), 1.18 – 1.08 (m, 1H) ppm.ESI-MS m/z計算值547.2018，實驗值548.1 (M+1) +；滯留時間：1.84分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： (6 E,12 R)-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,6,17,19- 六烯 -20- 胺 ( 化合物 10)
Figure 02_image2177
向 N-[(6 E,12 R)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,6,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(17 mg，0.03105 mmol)於DCM (0.50 mL)中之溶液中緩慢添加TFA (0.4 mL，5.192 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1 h。蒸發溶劑，且殘餘物藉由使用DCM (15 mL)之矽膠層析純化，得到(6 E,12 R)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,6,17,19-六烯-20-胺(11 mg，78%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.43 (s, 1H), 7.16 - 6.96 (m, 1H), 4.59 (bs, 2H), 4.24 (q, J =7.8 Hz, 1H), 3.40 (t, J =9.1 Hz, 1H), 3.00 (qd, J =11.5, 4.2 Hz, 1H), 2.67 - 2.39 (m, 1H), 2.23 (dtd, J =12.5, 6.4, 3.1 Hz, 1H), 2.07 (dd, J =12.4, 6.1 Hz, 1H), 1.96 (dq, J =13.3, 4.8, 4.4 Hz, 2H), 1.81 - 1.66 (m, 3H), 1.64 - 1.48 (m, 2H), 1.26 (s, 1H), 1.15 (td, J =12.1, 6.0 Hz, 1H). ESI-MS m/z計算值447.14938，實驗值448.1 (M+1) +；滯留時間：0.43分鐘(LC方法M)。 實例 8 ：製備 (12 R)-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 胺 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 11) 及 (12 R)-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 胺 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 12)
Figure 02_image2179
步驟 1 ： N -[(12 R)-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2181
向 N-[(6 E,12 R)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,6,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(17 mg，0.03105 mmol)於MeOH (2 mL)中之溶液中添加PtO 2(1.7 mg，0.007486 mmol)。燒瓶用橡膠隔膜密封。將所有空氣抽成真空且用氮氣填充3次。最後，移除所有氮氣，且將燒瓶與氫氣球連接。攪拌反應物90分鐘，經由矽藻土過濾且濃縮，得到 N-[(12 R)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(14 mg，82%)。ESI-MS m/z計算值549.21747，實驗值550.2 (M+1) +；滯留時間：0.88分鐘(LC方法M)。 步驟 2 ： (12 R)-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 胺 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 11) 及 (12 R)-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 胺 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 12)
Figure 02_image2183
在室溫下，向 N-[(12 R)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(18 mg，0.03276 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL，12.98 mmol)。攪拌混合物45分鐘且濃縮。溶解於1 mL甲醇中之殘餘物經受製備型對掌性SFC，其經由製備型ChiralCel ODAD管柱(10 Χ 250 mm，5 μm粒子)用70 µL注射，用14% MeOH/溶CO 2離，得到兩種單一鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為(12 R)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-胺(鏡像異構物1) (4.2 mg，56%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.43 (s, 1H), 3.99 (d, J =8.4 Hz, 1H), 3.82 (ddd, J =11.9, 8.1, 3.0 Hz, 1H), 3.61 (t, J =8.5 Hz, 1H), 3.55 (bs, 2H), 3.43 (t, J =9.3 Hz, 1H), 2.55 (t, J =11.4 Hz, 1H), 2.39 (q, J =12.6 Hz, 1H), 2.17 (dtd, J =12.3, 6.3, 3.5 Hz, 1H), 1.98 (ddt, J =9.8, 6.8, 3.5 Hz, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 1H), 1.57 (m, J =28.4, 17.2, 6.4 Hz, 7H), 0.89 (q, J =9.9, 9.2 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值449.16504，實驗值450.1 (M+1) +；滯留時間：10.21分鐘(LC方法P)。
溶離之第二鏡像異構物分離為(12 R)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-胺(鏡像異構物2) (5.0 mg，65%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.42 (s, 1H), 4.16 (q, J =8.7, 8.2 Hz, 1H), 4.00 (td, J =8.4, 4.4 Hz, 1H), 3.63 (q, J =8.5 Hz, 1H), 3.40 (t, J =9.3 Hz, 1H), 2.78 (bs, 2H), 2.45 - 2.37 (m, 1H), 2.23-2.1 (m, 3H), 2.03 - 1.92 (m, 1H), 1.86 - 1.72 (m, 3H), 1.71 - 1.57 (m, 2H), 1.52-1.45 (m, 3H), 1.04 - 0.98 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值449.16504，實驗值450.1 (M+1) +；滯留時間：10.03分鐘(LC方法P)。 實例 9 ： 製備 (6 R,12 R)-20-( 甲基胺基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 13)
Figure 02_image2185
步驟 1 ： (6 R,12 R)-20-( 甲基胺基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 13)
Figure 02_image2187
向在室溫下之(6 R,12 R)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(30 mg，0.06446 mmol)於DMF (0.6 mL)中之溶液中添加[雙(三甲基矽基)胺基]鈉(142 µL，1 M，0.142 mmol)，且接著添加含碘甲烷(71 µL，1 M，0.071 mmol)之THF。在室溫下攪拌混合物1 h。反應物用乙醚稀釋且用1 M NH 4Cl水溶液洗滌。有機層經乾燥(MgSO 4)，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為10%至35% EtOAc/己烷(12 g管柱)之矽膠層析純化，得到呈橙色固體狀之(6 R,12 R)-20-(甲基胺基)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(13.3 mg，43%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.31 (q, J =5.4 Hz, 1H), 3.91 (q, J =8.3 Hz, 1H), 3.54 (q, J =8.7 Hz, 1H), 3.32 - 3.24 (m, 1H), 2.97 (d, J =4.9 Hz, 3H), 2.29 (t, J =13.0 Hz, 1H), 2.14 (s, 1H), 2.02 - 1.89 (m, 3H), 1.85 - 1.68 (m, 1H), 1.51 (d, J =24.3 Hz, 7H), 0.84 (d, J =12.2 Hz, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, DMSO -d6) δ -55.43, -79.24 ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.1 (M+1) +；滯留時間：1.94分鐘(LC方法Q)。 實例 10 ：製備 (6 R,12 R)-20-( 乙基胺基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 14)
Figure 02_image2189
步驟 1 ： (6 R,12 R)-20-( 乙基胺基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 14)
Figure 02_image2191
向在室溫下之(6 R,12 R)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(30 mg，0.06446 mmol)於DMF (0.6 mL)中之溶液中添加[雙(三甲基矽基)胺基]鈉(142 µL，1 M，0.142 mmol)，且接著添加含溴乙烷(71 µL ，1 M，0.071 mmol)之THF。在室溫下攪拌混合物1 h，用乙醚稀釋，且用1 M NH 4Cl水溶液洗滌，且有機層經MgSO 4乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為10%至35% EtOAc/己烷(12 g管柱)之矽膠層析純化，得到呈橙色固體狀之(6 R,12 R)-20-(乙基胺基)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(18.4 mg，58%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.60 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.23 (t, J =5.7 Hz, 1H), 3.98 - 3.85 (m, 1H), 3.54 (q, J =8.6 Hz, 1H), 3.37 (m, 3H), 2.29 (t, J =13.7 Hz, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.03 - 1.88 (m, 2H), 1.83 - 1.70 (m, 1H), 1.65 - 1.36 (m, 8H), 1.22 (t, J =7.0 Hz, 3H), 0.84 (s, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, DMSO -d6) δ -55.40, -79.25 ppm. ESI-MS m/z計算值493.19125，實驗值494.1 (M+1) +；滯留時間：2.03分鐘(LC方法Q)。 實例 11 ：製備 (6 S,12 R)-20-( 甲基胺基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 15)
Figure 02_image2193
步驟 1 ： (6 S,12 R)-20-( 甲基胺基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 15)
Figure 02_image2195
向在室溫下之(6 S,12 R)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(30 mg，0.06446 mmol)於DMF (0.6 mL)中之溶液中添加[雙(三甲基矽基)胺基]鈉(142 µL，1 M，0.142 mmol)，且接著添加含碘甲烷(71 µL，1 M，0.071 mmol)之THF。在室溫下攪拌混合物1 h，用乙醚稀釋，且用1 M NH 4Cl水溶液洗滌，且有機層經乾燥(MgSO 4)，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為10%至35% EtOAc/己烷(12 g管柱)之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之(6 S,12 R)-20-(甲基胺基)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(15.5 mg，50%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.33 (q, J =5.0 Hz, 1H), 4.03 (q, J =7.3, 6.8 Hz, 1H), 3.55 (q, J =8.6 Hz, 1H), 3.31 - 3.22 (m, 1H), 2.97 (d, J =4.9 Hz, 3H), 2.44 - 2.25 (m, 1H), 2.17 (d, J =7.3 Hz, 1H), 2.05 (q, J =8.5 Hz, 1H), 1.93 (s, 1H), 1.82 - 1.62 (m, 4H), 1.49 (ddd, J =34.0, 18.0, 7.7 Hz, 5H), 0.97 - 0.83 (m, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, DMSO -d6) δ -55.57, -76.40 ppm。ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.2 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法Q)。 實例 12 ：製備 (6 S,12 R)-20-( 乙基胺基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 16)
Figure 02_image2197
步驟 1 ： (6 S,12 R)-20-( 乙基胺基 )-6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 16)
Figure 02_image2199
向在室溫下之含(6 S,12 R)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(30 mg，0.06446 mmol)之DMF (0.6 mL)中添加[雙(三甲基矽基)胺基]鈉(142 µL，1 M，0.142 mmol)，且接著添加含溴乙烷(71 µL，1 M，0.071 mmol)之THF。在室溫下攪拌混合物1 h，接著用乙醚及1 M NH 4Cl水溶液稀釋。分離各層，且有機層經乾燥(MgSO4)，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為10%至35% EtOAc/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(6 S,12 R)-20-(乙基胺基)-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(16.6 mg，52%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) d 7.55 (s, 2H), 6.24 (t, J =5.7 Hz, 1H), 4.03 (q, J =8.7 Hz, 1H), 3.55 (q, J =9.0, 8.5 Hz, 1H), 3.21-3.40 (m, 3H), 2.44 - 2.26 (m, 1H), 2.18 (t, J =7.2 Hz, 1H), 2.03 (td, J =13.8, 12.6, 7.4 Hz, 1H), 1.94 (d, J =11.7 Hz, 1H), 1.72 (dq, J =21.7, 13.1, 11.4 Hz, 3H), 1.47 (ddt, J =41.4, 15.4, 9.5 Hz, 6H), 1.24 (t, J =7.1 Hz, 3H), 0.91 (td, J =11.8, 6.0 Hz, 1H). 19F NMR (376 MHz, DMSO -d6) d -55.55, -76.42. ESI-MS m/z計算值493.19125，實驗值494.1 (M+1) +；滯留時間：2.02分鐘(LC方法Q)。 實例 13 ：製備 19- 胺基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) ( 化合物 17) 及 19- 胺基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 2) ( 化合物 18)
Figure 02_image2201
步驟 1 ： 3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-6-(2- 乙烯基吡咯啶 -1- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2203
於250 mL密封容器中，將2-乙烯基吡咯啶(879 mg，9.047 mmol)、DIEA (4.75 mL，27.27 mmol) 及3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.5 g，5.007 mmol)合併於乙腈(28 mL)中，且在80℃下加熱混合物18小時。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用EtOAc (50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈茶色固體狀之3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)-6-(2-乙烯基吡咯啶-1-基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.93 g，75%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.04 (s, 1H), 5.74 (ddd, J =16.7, 10.3, 6.1 Hz, 1H), 5.16 - 5.06 (m, 1H), 5.03 - 4.90 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.65 (p, J =8.6 Hz, 1H), 3.43 (t, J =8.3 Hz, 1H), 2.14 (dq, J =11.9, 6.5 Hz, 1H), 2.02 - 1.92 (m, 1H), 1.90 - 1.78 (m, 1H), 1.71 (ddt, J =11.9, 9.2, 7.0 Hz, 1H), 1.35 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z計算值515.2243，實驗值516.2 (M+1) +；滯留時間：1.79分鐘(LC方法J)。 步驟 2: 3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 )-6-(2- 乙烯基吡咯啶 -1- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2205
向3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)-6-(2-乙烯基吡咯啶-1-基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.93 g，3.744 mmol)於THF (20 mL)、甲醇(19 mL)及水(15 mL)中之溶液中添加無水氫氧化鋰(350 mg，14.32 mmol)。在60℃下攪拌混合物4 h。藉由蒸發移除THF及甲醇，接著添加30 mL 10% HCl水溶液且用EtOAc (2 × 50 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(10 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)-6-(2-乙烯基吡咯啶-1-基)吡啶-2-甲酸(1.35 g，90%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 13.46 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 5.71 (ddd, J =16.9, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.18 (ddd, J =17.1, 2.1, 1.1 Hz, 1H), 5.00 – 4.88 (m, 2H), 3.61 (q, J =8.5 Hz, 1H), 3.29 (s, 1H), 2.12 (dtd, J =11.2, 6.5, 3.7 Hz, 1H), 1.93 (dtd, J =13.3, 6.7, 3.2 Hz, 1H), 1.85 – 1.75 (m, 1H), 1.73 – 1.62 (m, 1H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值401.15625，實驗值402.2 (M+1) +；滯留時間：1.72分鐘(LC方法A)。 步驟 3 ： N -[2-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5-( 三氟甲基 )-6-(2- 乙烯基吡咯啶 -1- 基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2207
向3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)-6-(2-乙烯基吡咯啶-1-基)吡啶-2-甲酸(1.3 g，3.239 mmol)於NMP (16.5 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (1.10 g，3.247 mmol)及DIEA (2.25 mL，12.92 mmol)，隨後添加HATU (1.7 g，4.471 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物18 h。反應物用乙酸乙酯稀釋，且用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-6-(2-乙烯基吡咯啶-1-基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(1.75 g，79%)。ESI-MS m/z計算值685.2699，實驗值686.2 (M+1) +；滯留時間：2.3分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-6-(2- 乙烯基吡咯啶 -1- 基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2209
將 N-[2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-6-(2-乙烯基吡咯啶-1-基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(1.75 g，2.552 mmol)及DIEA (1.55 mL，8.899 mmol)於乙腈(40 mL)中之溶液加熱至50℃，接著分3份添加 對-甲苯磺醯氯(760 mg，3.986 mmol)。在70℃下加熱所得混合物2小時。將反應混合物冷卻，且用碳酸氫鈉飽和溶液(50 mL)淬滅，且用乙酸乙酯萃取。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色殘餘物之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-6-(2-乙烯基吡咯啶-1-基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(1.69 g，99%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.49 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.45 – 7.31 (m, 5H), 5.86 (m, J =19.1, 16.7, 10.1, 6.4 Hz, 1H), 5.64 (m, J =17.1, 10.2, 6.9, 5.0 Hz, 1H), 5.22 – 5.12 (m, 1H), 5.12 – 4.94 (m, 2H), 4.90 (dddd, J =19.0, 10.2, 1.9, 0.8 Hz, 1H), 4.83 – 4.70 (m, 2H), 4.65 (dd, J =11.0, 6.9 Hz, 1H), 3.65 (q, J =8.5 Hz, 1H), 3.39 (t, J =8.7 Hz, 1H), 2.57 (m, J =15.7, 10.8, 5.7 Hz, 1H), 2.48 – 2.37 (m, 1H), 2.35 – 2.20 (m, 2H), 2.10 (dt, J =11.6, 5.8 Hz, 1H), 2.03 – 1.93 (m, 1H), 1.85 – 1.75 (m, 1H), 1.75 – 1.65 (m, 1H), 1.46 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值667.25934，實驗值668.2 (M+1) +；滯留時間：2.23分鐘(LC方法M)。 步驟 5 ： N -[6-( 苯甲氧基 )-6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,9,16,18- 六烯 -19- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/ Z 混合物 )
Figure 02_image2211
在150 mL圓底燒瓶中，在氮氣氛圍下，將 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-6-(2-乙烯基吡咯啶-1-基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(1.67 g，2.501 mmol)於DCE (400 mL)中之脫氣溶液加熱至50℃。接著，歷經10分鐘，分兩份添加Zhan催化劑-1B (300 mg，0.4089 mmol)。在70℃下加熱所得混合物2 h，接著在80℃下加熱3 h。添加更多Zhan催化劑-1B (300 mg，0.4089 mmol)，且在85℃下額外加熱18 h以完成反應。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物使用反相製備型層析純化，其利用C 18管柱及50%至99%乙腈/水(5 mM HCl作為調節劑)之梯度，15分鐘，得到呈黃色殘餘物之 N-[6-(苯甲氧基)-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,9,16,18-六烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯 (E/ Z混合物) (45 mg，3%)。ESI-MS m/z計算值639.228，實驗值640.2 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法M)。 步驟 6 ： N -[6- 羥基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -19- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 非鏡像異構物對 1) 及 N -[6- 羥基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -19- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 非鏡像異構物對 2)
Figure 02_image2213
向 N-[6-(苯甲氧基)-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,9,16,18-六烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯( E/ Z混合物) (45 mg，0.07036 mmol)於AcOH (2.5 mL)中之溶液中添加Pd/C (9.1 mg，10% w/w，0.008551 mmol)。將混合物置於Parr振盪器中且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣將反應器加壓至60 psi。振盪混合物17 h。此後，使反應器減壓，且過濾反應物且真空濃縮。殘餘物藉由反相製備型層析來純化，其利用C 18管柱及30%至99%乙腈及水(5 mM HCl作為調節劑)之梯度，15分鐘，得到呈黃色殘餘物之兩對非鏡像異構物產物：
溶離之第一非鏡像異構物對分離為 N-[6-羥基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對1) (15 mg，77%)。ESI-MS m/z計算值551.1967，實驗值552.2 (M+1) +；滯留時間：1.88分鐘(LC方法J)。
溶離之第二非鏡像異構物對分離為 N-[6-羥基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對2) (16 mg，82%)。ESI-MS m/z計算值551.1967，實驗值552.1 (M+1) +；滯留時間：1.95分鐘(LC方法J)。 步驟 7 ： 19- 胺基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) ( 化合物 17)
Figure 02_image2215
將 N-[6-羥基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對1) (15 mg，0.0272 mmol)溶解於DCM (250 µL)中，且向混合物中添加TFA (50 µL，0.649 mmol)，且在室溫下攪拌所得溶液30 min。將混合物蒸發至乾燥，接著用乙醚稀釋且再濃縮。接著，殘餘物使用反相製備型層析純化，其利用C 18管柱及10%至99%乙腈/水(5 mM HCl)之梯度，運行30分鐘，得到呈黃色固體狀之19-胺基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-6-醇(非鏡像異構物對1) (1.4 mg，11%)。ESI-MS m/z計算值451.1443，實驗值452.2 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法A)。 步驟 8 ： 19- 胺基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 2) ( 化合物 18)
Figure 02_image2217
將 N-[6-羥基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對2) (16 mg，0.02901 mmol)溶解於DCM (250 µL)中，且向混合物中添加TFA (50 µL，0.649 mmol)，且在室溫下攪拌混合物30 min。蒸發混合物，且殘餘物使用反相製備型層析純化，其利用C 18管柱及30%至99%乙腈/水(5 mM HCl)之梯度，運行15分鐘，得到呈黃色固體狀之19-胺基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-6-醇(非鏡像異構物對2) (2.7 mg，21%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.57 (s, 1H), 4.10 (s, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.47 (s, 1H), 2.42 - 2.31 (m, 1H), 2.23 (s, 1H), 2.20 - 2.08 (m, 3H), 2.01 (q, J =5.9 Hz, 1H), 1.90 - 1.82 (m, 1H), 1.76 - 1.63 (m, 3H), 1.49 (d, J =7.5 Hz, 1H), 1.30 - 1.15 (m, 1H) ppm. 未觀察到兩個可交換質子。ESI-MS m/z計算值451.1443，實驗值452.2 (M+1) +；滯留時間：2.01分鐘(LC方法A)。 實例 14 ：製備 17- 胺基 -13- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 19) 及 17- 胺基 -13- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 20)
Figure 02_image2219
步驟 1 ： 3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2221
在5 mL密封微波小瓶中，將 N-甲基丁-3-烯-1-胺(鹽酸鹽) (375 mg，3.084 mmol)、DIEA (2.001 mL，11.49 mmol)及3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.0 g，2.003 mmol)合併於乙腈(15 mL)中，且將混合物加熱至70℃持續18小時。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用EtOAc (50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈黃色油狀之3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(565 mg，56%)。ESI-MS m/z計算值503.22433，實驗值504.2 (M+1) +；滯留時間：1.73分鐘(LC方法J)。 步驟 2 ： 6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2223
向3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(360 mg，0.715 mmol)於THF (3.6 mL)中之溶液中添加甲醇(3.6 mL)及水(1.8 mL)。添加無水氫氧化鋰(327.8 mg，13.69 mmol)，且在60℃下加熱混合物1 h。減壓移除THF及甲醇。添加1 M HCl水溶液直至混合物呈酸性，接著用乙酸乙酯(3 × 75 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(75 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色固體狀之6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(270 mg，97%)。ESI-MS m/z計算值389.15625，實驗值390.3 (M+1) +；滯留時間：0.7分鐘(LC方法R)。 步驟 3 ： N -[2-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2225
向6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(415 mg，1.066 mmol)於NMP (5.5 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(325 mg，1.075 mmol)及DIEA (750 µL，4.306 mmol)，隨後添加HATU (560 mg，1.473 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物18 h。反應物用乙酸乙酯稀釋且用碳酸氫鈉溶液洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之 N-[2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(580 mg，81%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 10.54 (d, J =5.1 Hz, 2H), 10.32 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 7.53 - 7.47 (m, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 5.92 - 5.81 (m, 1H), 5.81 - 5.70 (m, 1H), 5.12 - 5.00 (m, 3H), 4.95 (dd, J =10.2, 2.0 Hz, 1H), 4.86 (t, J =9.4 Hz, 2H), 3.36 (dd, J =8.6, 6.1 Hz, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.33 - 2.28 (m, 2H), 2.26 (d, J =7.3 Hz, 2H), 2.19 (d, J =10.0 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值673.2699，實驗值674.2 (M+1) +；滯留時間：2.23分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2227
將 N-[2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(575 mg，0.8536 mmol)及DIEA (550 µL，3.158 mmol)於乙腈(14 mL)中之溶液加熱至50℃，接著分3份添加 對-甲苯磺醯氯(255 mg，1.338 mmol)。在70℃下加熱所得混合物3小時。將反應混合物冷卻，且用碳酸氫鈉飽和溶液(50 mL)淬滅，且用乙酸乙酯萃取。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈黃色殘餘物之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(540 mg，97%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.59 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 7.48 – 7.41 (m, 2H), 7.38 – 7.30 (m, 3H), 5.89 – 5.68 (m, 2H), 5.13 – 4.92 (m, 4H), 4.73 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.65 (d, J =10.9 Hz, 1H), 3.47 – 3.36 (m, 2H), 2.95 (d, J =1.4 Hz, 3H), 2.44 (td, J =14.6, 13.1, 6.8 Hz, 1H), 2.38 – 2.23 (m, 5H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值655.25934，實驗值655.2 (M+1) +；滯留時間：2.15分鐘(LC方法M)。 步驟 5 ： N -[6- 苯甲氧基 -13- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2229
在50℃下在氮氣氛圍下，歷經10分鐘，分兩份向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(540 mg，0.8236 mmol)於DCE (130 mL)中之脫氣溶液中添加Zhan催化劑-1B (91 mg，0.124 mmol)。在70℃下加熱所得混合物2 h。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈黃色殘餘物之 N-[6-苯甲氧基-13-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (395 mg，76%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.09 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 4H), 5.67 - 5.56 (m, 1H), 5.43 (q, J =8.3 Hz, 1H), 4.76 (d, J =11.0 Hz, 1H), 4.68 (d, J =11.0 Hz, 1H), 3.45 - 3.33 (m, 2H), 3.10 - 3.02 (m, 3H), 2.62 (d, J =8.3 Hz, 2H), 2.45 (s, 2H), 2.24 (dt, J =15.6, 6.5 Hz, 2H), 1.47 (d, J =4.9 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值627.228，實驗值628.2 (M+1) +；滯留時間：1.94分鐘(LC方法M)。 步驟 6 ： N -[6- 羥基 -13- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2231
向 N-[6-苯甲氧基-13-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (390 mg，0.6214 mmol)於AcOH (22 mL)中之溶液中添加Pd/C (67 mg，10% w/w，0.06296 mmol)。使混合物在真空下脫氣且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣將反應器加壓至60 psi。在Parr振盪器中振盪混合物4 h。使反應器減壓，且添加額外0.2 eq Pd/C (134 mg，10% w/w)。使混合物返至Parr振盪器且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣將反應器加壓至55 psi。振盪混合物3小時。此後，使反應器減壓，且添加額外0.7 eq Pd/C (465 mg，10% w/w)。使混合物返至Parr振盪器且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣將反應器加壓至45 psi。再振盪混合物6 h。此後，使反應器減壓且過濾，接著真空濃縮。向EtOAc (25 mL)添加額外AcOH (5 mL)，接著在氮氣下吹掃混合物，且添加1.0當量之新鮮Pd/C (665 mg，10% w/w，0.6214 mmol)。將混合物置於Parr振盪器中且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣將反應器加壓至35 psi。再振盪混合物3 h。此後，使反應器減壓，且過濾反應物且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-羥基-13-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(209 mg，62%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.10 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 3.44 (td, J =14.1, 13.3, 4.3 Hz, 1H), 3.34 (d, J =4.8 Hz, 1H), 3.31 - 3.25 (m, 1H), 3.03 (d, J =2.0 Hz, 3H), 2.15 (d, J =8.6 Hz, 2H), 1.89 (dd, J =12.1, 5.3 Hz, 1H), 1.72 - 1.65 (m, 1H), 1.65 - 1.55 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.46 - 1.35 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值539.1967，實驗值540.2 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法J)。 步驟 7 ： 17- 胺基 -13- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2233
向 N-[6-羥基-13-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(185 mg，0.3429 mmol)於DCM (3.0 mL)中之溶液中添加TFA (1.25 mL，16.22 mmol)，且在室溫下攪拌2小時。蒸發混合物，且殘餘物藉由逆相HPLC來純化，其使用C 18管柱及1%至99%乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度，15.0分鐘，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(130 mg，86%)。ESI-MS m/z計算值439.1443，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：1.95分鐘(LC方法A)。 步驟 8 ： 17- 胺基 -13- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1 ) ( 化合物 19) 及 17- 胺基 -13- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 20)
Figure 02_image2235
外消旋17-胺基-13-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(130 mg，0.2959 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Phenomenex LUX-4管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，用12% 甲醇/88% CO 2溶離，流速為70.0 mL/min (注射體積為500 µL)，得到兩種單一鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-13-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (45.0 mg，69%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.59 (d, J =16.9 Hz, 1H), 4.97 (d, J =36.3 Hz, 2H), 3.30 - 3.13 (m, 2H), 2.87 (d, J =1.5 Hz, 3H), 2.14 (t, J =7.3 Hz, 2H), 1.93 (dt, J =12.6, 6.3 Hz, 1H), 1.72 - 1.65 (m, 1H), 1.55 (ddt, J =37.4, 14.8, 7.4 Hz, 4H), 1.40 (td, J =14.2, 12.9, 6.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.1443，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：2.03分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-13-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (44.9 mg，68%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.60 (d, J =16.1 Hz, 1H), 4.86 (d, J =51.0 Hz, 2H), 3.22 (dtd, J =34.7, 13.0, 4.4 Hz, 2H), 2.87 (d, J =1.4 Hz, 3H), 2.14 (t, J =7.3 Hz, 2H), 1.94 (td, J =12.1, 5.6 Hz, 1H), 1.73 – 1.65 (m, 1H), 1.55 (ddt, J =37.4, 14.2, 7.3 Hz, 4H), 1.38 (dt, J =14.6, 7.7 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.1443，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：2.03分鐘(LC方法A)。 步驟 9 ：非晶形化合物 19 ( 純形式 ) 之固體形式表徵A.     X射線粉末繞射
非晶形化合物19 (純形式)之XRPD繞射圖係使用通用X射線粉末繞射(XRPD)方法獲得，且提供於 圖 4中。 B.     熱重分析(TGA)
非晶形化合物19 (純形式)之TGA曲線提供於 圖 5中。TGA曲線顯示在~40至198.6℃ 5.71%重量損失，其中以10.00℃/min上升至350.00℃。 C.     差示掃描熱量測定分析
非晶形化合物19 (純形式)之DSC資料係使用以下方法收集： 1. 25℃至200.00℃，10℃/min, 2. 200℃至-20℃，-50℃/min，接著 3. -20℃至150℃，10℃/min。
非晶形化合物19 (純形式)之DSC熱分析圖提供於 圖 6中。熱分析圖顯示在69.6℃處之Tg中點。 實例 15 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 21) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 22)
Figure 02_image2237
步驟 1 ： 2- 側氧基己 -5- 烯酸乙酯
Figure 02_image2239
將2 L燒瓶中在氮氣下在機械攪拌下之草酸二乙酯(58.5 g，400.3 mmol)於THF (290 mL)中之溶液在乾冰浴中冷卻，且歷經1.5 h逐滴添加溴(丁-3-烯基)鎂(800 mL，0.5 M，400 mmol)，將內部溫度保持在-70℃下。攪拌所得混濁乳膏溶液2 h，接著藉由添加檸檬酸(400 mL，1 M，400 mmol)淬滅，自冷浴移出且攪拌0.5 h。分離各相，且有機相用飽和NaHCO 3(3 × 250 mL)及鹽水(2 × 250 mL)洗滌。水相用MTBE (300 mL)反萃取一次，且經合併之有機相經乾燥，過濾且蒸發。藉由用梯度為0%至100% DCM/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色液體狀之2-側氧基己-5-烯酸乙酯(49 g，78%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 5.82 (ddt, J =16.8, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.07 (dq, J =17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.02 (dq, J =10.2, 1.4 Hz, 1H), 4.32 (q, J =7.1 Hz, 2H), 2.95 (t, J =7.3 Hz, 2H), 2.45 - 2.34 (m, 2H), 1.37 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm。 步驟 2 ： 2- 羥基己 -5- 烯酸乙酯
Figure 02_image2241
向2-側氧基己-5-烯酸乙酯(12.4 g，79.4 mmol)於二氯甲烷(317.6 mL)中之溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉(33.66 g，158.8 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。反應物藉由添加NaHCO 3飽和水溶液小心地淬滅。分離所得層，且水層進一步用DCM (2 × 150 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到呈淡黃色油狀之2-羥基己-5-烯酸乙酯(12.2 g，97%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 5.99 - 5.63 (m, 1H), 5.36 (d, J =5.9 Hz, 1H), 5.21 - 4.76 (m, 2H), 4.09 (qd, J =7.1, 1.3 Hz, 2H), 3.99 (dt, J =7.9, 4.9 Hz, 1H), 2.08 (tdd, J =8.1, 6.6, 1.5 Hz, 2H), 1.82 - 1.49 (m, 2H), 1.19 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm。 步驟 3 ： 2- 苯甲氧基己 -5- 烯酸乙酯
Figure 02_image2243
向在0℃下之2-羥基己-5-烯酸乙酯(12.3 g，77.75 mmol)於DMF (65.89 mL)中之溶液中逐份添加氫化鈉(3.9 g，60% w/w，97.51 mmol)。在0℃下攪拌混合物(乳膏懸浮液)30 min。向混合物中添加溴甲基苯(11.61 mL，97.61 mmol)，且將混合物升溫至環境溫度且攪拌18 h。反應物藉由減緩添加200 mL NH 4Cl飽和水溶液淬滅，且在環境溫度下攪拌所得混合物10 min。混合物用MTBE (415.2 mL)稀釋，且分離有機相。有機相用水(166.2 mL)、鹽水(50 mL)洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈橙色油狀之2-苯甲氧基己-5-烯酸乙酯(19 g，98%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.39 - 7.27 (m, 5H), 6.01 - 5.50 (m, 1H), 5.05 - 4.91 (m, 2H), 4.65 - 4.34 (m, 2H), 4.14 (qd, J =7.1, 3.6 Hz, 2H), 3.97 (dd, J =7.2, 5.4 Hz, 1H), 2.10 (dtd, J =8.0, 6.7, 1.4 Hz, 2H), 1.74 (dtd, J =12.6, 7.1, 6.3, 3.1 Hz, 2H), 1.21 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. 滯留時間：0.75分鐘(LC方法S)。 步驟 4 ： 2- 苯甲氧基己 -5- 烯酸
Figure 02_image2245
向2-苯甲氧基己-5-烯酸 乙酯(19.3 g，77.72 mmol)於MeOH (112.6 mL)及THF (38.6 mL)中之溶液中添加NaOH (72.2 mL，2 M，144.4 mmol)，且在環境溫度下攪拌混合物6 h。真空移除有機溶劑，且殘餘物用1 M NaOH (25 mL)稀釋且用MTBE (2 × 300 mL)萃取。有機相用100 mL 1 N NaOH反萃取一次，且經合併之水相用10% HCl水溶液酸化至pH = 1。水相用乙酸乙酯(2 × 150 mL)萃取，且將有機相合併且用鹽水(150 mL)洗滌。有機相經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈橙色油狀之2-苯甲氧基己-5-烯酸(13.5 g，79%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 12.61 (s, 1H), 7.67 - 6.71 (m, 5H), 5.79 (ddt, J =16.9, 10.2, 6.6 Hz, 1H), 5.07 - 4.81 (m, 2H), 4.49 (dd, J =103.0, 11.7 Hz, 2H), 3.88 (dd, J =7.8, 4.7 Hz, 1H), 2.18 - 2.04 (m, 2H), 1.75 (tqd, J =14.9, 7.3, 2.9 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值220.10994，實驗值221.1 (M+1) +；滯留時間：0.57分鐘(LC方法S)。 步驟 5 ： N -(2- 苯甲氧基己 -5- 烯醯基胺基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2247
向2-苯甲氧基己-5-烯酸(13.5 g，61.29 mmol)於DMF (112.2 mL)中之溶液中添加HATU (30.71 g，80.77 mmol)及DIEA (22.83 mL，131.1 mmol)，且在環境溫度下攪拌混合物10 min。向混合物中添加 N-胺基胺基甲酸三級丁酯(8.424 g，63.74 mmol) (在添加時略微放熱)，且在環境溫度下攪拌混合物3 h。反應物用水稀釋且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。有機層用鹽水(25 mL)洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮，得到橙色油狀物。接著粗材料在使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)上純化，得到呈無色油狀之 N-(2-苯甲氧基己-5-烯醯基胺基)胺基甲酸三級丁酯(20 g，76%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.71 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.52 - 7.11 (m, 5H), 5.91 - 5.69 (m, 1H), 5.06 - 4.88 (m, 2H), 4.48 (dd, J =110.1, 11.7 Hz, 2H), 3.82 (t, J =6.3 Hz, 1H), 2.69 (s, 9H), 2.22 - 2.01 (m, 2H), 1.81 - 1.62 (m, 2H) ppm。 步驟 6 ： 2- 苯甲氧基己 -5- 烯醯肼 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2249
向 N-(2-苯甲氧基己-5-烯醯基胺基)胺基甲酸三級丁酯(515 mg，1.54 mmol)於二氯甲烷(2.962 mL)中之溶液中添加HCl (1.782 mL，4 M於二噁烷中，7.128 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，濃縮且與二氯甲烷及庚烷一起共蒸發，得到呈白色固體狀之2-苯甲氧基己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (417 mg，99%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 11.04 (s, 1H), 10.20 (s, 2H), 7.43 - 7.26 (m, 5H), 5.79 (ddt, J =16.9, 10.3, 6.6 Hz, 1H), 5.12 - 4.76 (m, 2H), 4.49 (dd, J =67.3, 11.7 Hz, 2H), 4.01 (t, J =6.2 Hz, 1H), 2.15 - 2.00 (m, 2H), 1.75 (td, J =7.9, 6.0 Hz, 2H) ppm。 步驟 7 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[(2- 苯甲氧基己 -5- 烯醯基胺基 ) 胺甲醯基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2251
向6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(3.5 g，8.425 mmol)於NMP (44.87 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (2.313 g，8.543 mmol)、DIEA (4.457 mL，25.59 mmol)及HATU (4.475 g，11.77 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。反應物用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著粗材料藉由使用梯度為0%至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[(2-苯甲氧基己-5-烯醯基胺基)胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(2.65 g，50%)。ESI-MS m/z計算值631.29816，實驗值632.5 (M+1) +；滯留時間：0.76分鐘(LC方法T)。 步驟 8 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-(1- 苯甲氧基戊 -4- 烯基 )-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2253
將 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[(2-苯甲氧基己-5-烯醯基胺基)胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(2.53 g，4.005 mmol)及DIEA (2.425 mL，13.92 mmol)於乙腈(57.84 mL)中之溶液加熱至50℃，接著分2份添加 對-甲苯磺醯氯(840 mg，4.406 mmol)。在70℃下加熱混合物2小時。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和水溶液(25 mL)淬滅且用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取。經合併之有機物經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈黃色半固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-(1-苯甲氧基戊-4-烯基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(1.75 g，71%)。ESI-MS m/z計算值613.2876，實驗值614.5 (M+1) +；滯留時間：0.9分鐘(LC方法T)。 步驟 9 ： N -[(12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2255
在50℃下在氮氣氛圍下，分兩份歷經10分鐘向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-(1-苯甲氧基戊-4-烯基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(2.0 g，3.259 mmol)於DCE (481.2 mL)中之脫氣溶液中添加Zhan催化劑-1B (358.7 mg，0.4889 mmol)。在70℃下加熱所得混合物20 h。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色殘餘物之 N-[(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (110 mg，6%)。ESI-MS m/z計算值585.2563，實驗值586.4 (M+1) +；滯留時間：0.85分鐘(LC方法T)。 步驟 10 ： N -[(12 R)-6- 羥基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 鏡像異構物 1) 及 N -[(12 R)-6- 羥基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 鏡像異構物 2)
Figure 02_image2257
向 N-[(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (200 mg，0.3415 mmol)於AcOH (5.4 mL)中之溶液中添加Pd/C (145.4 mg，10% w/w，0.1366 mmol)。使用Parr振盪器，使混合物在氫氣氛圍下在45 psi下振盪隔夜。反應混合物經由矽塞過濾，用乙酸乙酯充分洗滌，且接著濃縮濾液，得到黃色殘餘物 N-[(12 R)-6-羥基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯。此材料藉由使用梯度為0%至10%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24 g管柱)進行20分鐘純化，分離出兩種非鏡像異構物，其各自分離為單一鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (50 mg，59%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.90 (s, 2H), 5.26 (dd, J =8.8, 4.2 Hz, 1H), 4.22 (ddt, J =9.8, 7.5, 3.9 Hz, 1H), 4.04 - 3.66 (m, 1H), 3.69 - 3.42 (m, 2H), 2.44 - 2.30 (m, 1H), 2.29 - 2.12 (m, 2H), 2.00 (tdd, J =6.8, 4.5, 2.7 Hz, 2H), 1.92 - 1.73 (m, 2H), 1.71 - 1.57 (m, 3H), 1.54 (s, 9H), 1.46 (qt, J =8.7, 3.8 Hz, 3H), 1.11 - 0.94 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值497.22498，實驗值498.42 (M+1) +；滯留時間：0.59分鐘(LC方法T)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (30 mg，35%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.95 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 5.05 (dd, J =10.2, 3.4 Hz, 1H), 4.10 - 4.02 (m, 1H), 3.69 - 3.43 (m, 2H), 3.37 - 2.79 (m, 1H), 2.56 (dddd, J =10.4, 8.4, 5.9, 2.3 Hz, 1H), 2.35 - 2.12 (m, 2H), 1.99 (ddt, J =14.2, 6.5, 3.9 Hz, 2H), 1.86 - 1.45 (m, 17H), 1.05 - 0.90 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值497.22498，實驗值498.42 (M+1) +；滯留時間：0.6分鐘(LC方法T)。 步驟 11 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 21)
Figure 02_image2259
向 N-[(12 R)-6-羥基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (7 mg，0.01407 mmol)於DCM (129.8 µL)中之溶液中添加TFA (58.6 µL，0.7606 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2 h。濃縮反應物，接著將其溶解於DCM中且用NaHCO 3飽和水溶液洗滌。濃縮有機層，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (4.1 mg，73%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.16 (dd, J =8.7, 4.2 Hz, 1H), 4.20 - 4.03 (m, 1H), 3.61 - 3.50 (m, 1H), 3.38 - 3.28 (m, 1H), 2.27 (ddt, J =9.8, 5.1, 2.6 Hz, 1H), 2.22 - 2.09 (m, 2H), 1.90 (dqd, J =16.7, 7.1, 6.7, 3.5 Hz, 2H), 1.83 - 1.66 (m, 2H), 1.64 - 1.46 (m, 4H), 1.45 - 1.29 (m, 4H), 0.93 (ddt, J =17.2, 11.2, 5.5 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值397.17255，實驗值398.3 (M+1) +；滯留時間：0.31分鐘(LC方法T)。 步驟 12 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 22)
Figure 02_image2261
向 N-[(12 R)-6-羥基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (7 mg，0.01407 mmol)於DCM (129.8 µL)中之溶液中添加TFA (58.6 µL，0.7606 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2 h。濃縮反應物，接著將其溶解於二氯甲烷中且用NaHCO 3飽和水溶液洗滌。濃縮有機層，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (3.0 mg，54%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.19 (s, 1H), 4.97 (dd, J =10.2, 3.4 Hz, 1H), 3.96 (dd, J =7.8, 2.2 Hz, 1H), 3.66 - 3.46 (m, 1H), 3.42 - 3.26 (m, 1H), 2.58 - 2.39 (m, 1H), 2.26 - 2.03 (m, 2H), 1.91 (ddt, J =14.1, 6.5, 3.3 Hz, 2H), 1.79 - 1.31 (m, 8H), 0.90 - 0.67 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值397.17255，實驗值398.3 (M+1) +；滯留時間：0.31分鐘(LC方法T)。 實例 16 ：製備 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 23) 、 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 24) 、 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 25) 及 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 26)
Figure 02_image2263
步驟 1 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-(2- 丁 -3- 烯基吡咯啶 -1- 基 )-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2265
在微波小瓶中，向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(250.3 mg，0.3331 mmol)於DMSO (2 mL)中之溶液中添加2-丁-3-烯基吡咯啶(74 mg，0.591 mmol)及Cs 2CO 3(342 mg，1.05 mmol)。在微波照射下在120℃下加熱反應物30 min。接著，反應混合物用乙酸乙酯稀釋，用飽和氯化銨溶液接著鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得棕色殘餘物藉由使用0%至30% EtOAc/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈無色糊漿狀之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2-丁-3-烯基吡咯啶-1-基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(174 mg，66%)。ESI-MS m/z計算值695.29065，實驗值696.37 (M+1) +；滯留時間：1.51分鐘(LC方法U)。少量產物仍含有第二種 N-Boc保護基，此材料直接用於隨後步驟中。 步驟 2 ： N -[6-( 苯甲氧基 )-6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,9,18,20- 六烯 -21- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/ Z 混合物 )
Figure 02_image2267
向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2-丁-3-烯基吡咯啶-1-基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(170 mg，0.2444 mmol) (混雜有一些具有雙- N-Boc保護之起始材料，參見前一步驟)於DCE (50 mL)中之脫氣溶液中添加Zhan催化劑-1B (47 mg，0.05848 mmol)，且在70℃下加熱反應物隔夜。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。用1:4EtOAc/己烷稀釋混合物且經由矽藻土過濾。濃縮濾液，且所得棕色殘餘物藉由使用0%至30% EtOAc/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈鮮黃色油狀之 N-[6-(苯甲氧基)-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,9,18,20-六烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯( E/ Z混合物) (87 mg，53%)。ESI-MS m/z 計算值667.25934，實驗值668.38 (M+1) +；滯留時間：2.37分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： N -[6- 羥基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -21- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2269
向 N-[6-(苯甲氧基)-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,9,18,20-六烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (68 mg，0.1019 mmol)於AcOH (5 mL)中之溶液中添加Pd/C (62 mg，10% w/w，0.05826 mmol，50%水)。將燒瓶置於氫氣Parr振盪器上且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣將反應器加壓至50 psi且振盪2天。使燒瓶減壓，且經由矽藻土過濾混合物，且濃縮濾液。所得棕色殘餘物藉由使用0%至100% EtOAc/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到 N-[6-羥基-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,18,20-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(38 mg，64%)。ESI-MS m/z計算值579.228，實驗值580.4 (M+1) +；滯留時間：0.86分鐘(LC方法R)。 步驟 4 ： 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2271
在室溫下攪拌含 N-[6-羥基-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,18,20-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(38 mg，0.06557 mmol)之TFA (250 µL，3.245 mmol)與二氯甲烷(750 µL)之預製備溶液約1 h。藉由蒸發移除溶劑，接著將殘餘物稀釋於1 mL DMSO中且藉由使用40%至80% 乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,18,20-五烯-6-醇(28 mg，83%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.48 - 7.35 (m, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.16 (dt, J =43.9, 7.8 Hz, 1H), 3.54 (q, J =8.9 Hz, 2H), 3.14 (t, J =9.0 Hz, 1H), 2.38 - 2.25 (m, 1H), 2.16 (dd, J =14.6, 8.1 Hz, 1H), 1.97 (dd, J =8.8, 4.3 Hz, 1H), 1.94 - 1.79 (m, 2H), 1.73 (q, J =9.8, 8.8 Hz, 1H), 1.61 (s, 1H), 1.52 - 1.26 (m, 5H), 1.23 - 1.11 (m, 2H), 1.07 - 0.92 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.2 (M+1) +；滯留時間：0.69分鐘(LC方法R)。 步驟 5 ： 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 23) 、 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 24) 、 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 25) 及 21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-23- 氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.013,17] 二十三碳 -1(22),2,4,18,20- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 26)
Figure 02_image2273
21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,18,20-五烯-6-醇(48.01 mg，0.09306 mmol)之混合物藉由正相SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 10 mm，5 µm粒徑)，及以10%至90%移動相B (移動相A = CO 2，移動相B =甲醇(無調節劑)，流速為10 mL/min，注射體積為70 μL)運行之雙重梯度。此等條件產生4種如下文所描述之鏡像異構產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,18,20-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (4.8 mg，43%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.41 (s, 2H), 4.20 (t, J =8.4 Hz, 1H), 3.54 (q, J =8.3 Hz, 1H), 3.12 (t, J =9.0 Hz, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 2.11 (dt, J =13.7, 8.1 Hz, 1H), 1.95 - 1.70 (m, 3H), 1.61 (d, J =10.6 Hz, 2H), 1.51 - 1.29 (m, 4H), 1.27 - 1.12 (m, 3H), 0.95 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.1 (M+1) +；滯留時間：1.87分鐘(LC方法J)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,18,20-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (4.3 mg，39%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.41 (s, 2H), 4.21 (q, J =8.3 Hz, 1H), 3.54 (q, J =8.4 Hz, 1H), 3.12 (t, J =9.0 Hz, 1H), 2.29 (t, J =9.8 Hz, 1H), 2.22 - 2.15 (m, 1H), 2.11 (dt, J =14.8, 8.0 Hz, 1H), 1.94 - 1.80 (m, 2H), 1.79 - 1.70 (m, 1H), 1.61 (d, J =9.3 Hz, 2H), 1.52 - 1.28 (m, 4H), 1.19 (q, J =7.9, 6.7 Hz, 3H), 0.95 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.2 (M+1) +；滯留時間：1.87分鐘(LC方法J)。
溶離之第三鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,18,20-五烯-6-醇(鏡像異構物3) (9.4 mg，84%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.39 (s, 2H), 4.09 (d, J =8.7 Hz, 1H), 3.54 (q, J =8.5 Hz, 1H), 3.21 - 3.08 (m, 1H), 2.31 (dt, J =15.0, 7.1 Hz, 1H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 1.97 (t, J =10.8 Hz, 2H), 1.88 (dt, J =8.3, 4.8 Hz, 2H), 1.72 (h, J =10.5, 9.6 Hz, 1H), 1.58 - 1.50 (m, 1H), 1.47 (dt, J =10.7, 5.3 Hz, 2H), 1.42 (s, 3H), 1.15 (d, J =15.9 Hz, 2H), 0.99 (dq, J =12.0, 6.3 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.3 (M+1) +；滯留時間：1.87分鐘(LC方法J)。
溶離之第四鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-23-氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.013,17]二十三碳-1(22),2,4,18,20-五烯-6-醇(鏡像異構物4) (9.4 mg，84%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.76 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.40 (s, 2H), 4.10 (d, J =8.6 Hz, 1H), 3.54 (q, J =8.4 Hz, 1H), 3.15 (t, J =9.0 Hz, 1H), 2.31 (dt, J =14.9, 7.2 Hz, 1H), 2.16 (dd, J =11.7, 6.7 Hz, 1H), 1.97 (d, J =12.5 Hz, 2H), 1.88 (dt, J =8.4, 4.3 Hz, 2H), 1.80 - 1.65 (m, 1H), 1.54 (d, J =6.8 Hz, 1H), 1.46 (dt, J =11.9, 6.2 Hz, 2H), 1.34 (ddt, J =33.8, 12.9, 6.5 Hz, 3H), 1.16 (d, J =16.0 Hz, 2H), 1.02 - 0.94 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.1 (M+1) +；滯留時間：1.85分鐘(LC方法J)。 實例 17 ：製備 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 27) 、 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 28) 、 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 29) 及 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 30)
Figure 02_image2275
步驟 1 ： 2-( 羥基甲基 )-4,4- 二甲基 - 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2277
在室溫下，向(4,4-二甲基吡咯啶-2-基)甲醇(3 g，23.22 mmol)於四氫呋喃(40 mL)中之溶液中添加三乙胺(7.1148 g，9.8 mL，70.311 mmol)，隨後添加二碳酸二三級丁酯(6 g，27.492 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜且真空濃縮。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(150 mL)中，且接著混合物用1 N HCl (150 mL)、鹽水(150 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈透明油狀之2-(羥基甲基)-4,4-二甲基-吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(4.95 g，92%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 4.08 - 3.94 (m, 1H), 3.71 - 3.51 (m, 2H), 3.32 (d, J =10.9 Hz, 1H), 2.97 (d, J =10.9 Hz, 1H), 1.92 - 1.69 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.38 - 1.22 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 1.01 (s, 3H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 步驟 2 ： 2-( 碘甲基 )-4,4- 二甲基 - 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2279
歷經30 min，向在0℃下之咪唑(2.9 g，42.599 mmol)及三苯基膦(6.2 g，23.638 mmol)於2-甲基四氫呋喃(75 mL)中之溶液中逐份添加碘(6.5 g，25.61 mmol)。將反應溫度保持在＜ 6℃，且混合物變成深橙色太妃糖狀，其在攪拌時變成淺黃色及顆粒。使混合物升溫至室溫，且逐滴添加2-(羥基甲基)-4,4-二甲基-吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(4.9 g，21.368 mmol)於2-甲基四氫呋喃(25 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物20小時，得到淺黃色漿液。經由矽藻土過濾漿液且用二乙醚(75 mL)洗滌，且真空濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈淺黃色油狀之2-(碘甲基)-4,4-二甲基-吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(6.7 g，92%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 3.85 - 3.68 (m, 1H), 3.68 - 3.27 (m, 3H), 3.05 (d, J =10.6 Hz, 1H), 2.05 - 1.83 (m, 1H), 1.59 - 1.44 (m, 10H), 1.11 (s, 3H), 1.00 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值339.0695，實驗值284.1 (M-55) +；滯留時間：2.29分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 2- 烯丙基 -4,4- 二甲基 - 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2281
將碘化銅(4.8 g，25.203 mmol)於脫氣的2-甲基四氫呋喃(56 mL)中之懸浮液冷卻至-50℃，且逐滴添加含乙烯基溴化鎂(50 mL，1 M，50 mmol)之四氫呋喃，保持反應溫度在＜-40℃。在添加(20 min)之後，攪拌黏稠懸浮液30分鐘，使溫度上升至-10℃，此時其變成較稀的黑色懸浮液。將黑色懸浮液冷卻至-60℃，且逐滴添加2-(碘甲基)-4,4-二甲基-吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(5.6 g，16.509 mmol)於2-甲基四氫呋喃(14 mL)中之溶液，保持反應溫度在＜-50℃。攪拌混合物30 min，使反應溫度上升至-15℃。反應物用飽和氯化銨(25 mL)淬滅，且分離有機相且用飽和氯化銨(75 mL)洗滌。水相用二乙醚(75 mL)萃取，且經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。所得淺橙色油狀物藉由使用梯度為0%至20%二氯甲烷/己烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈淺黃色油狀之2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.6 g，40%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 5.84 - 5.59 (m, 1H), 5.14 - 4.98 (m, 2H), 4.01 - 3.73 (m, 1H), 3.51 - 3.19 (m, 1H), 2.90 (d, J =10.6 Hz, 1H), 2.79 - 2.45 (m, 1H), 2.36 - 2.15 (m, 1H), 1.76 (ddd, J =12.6, 7.3, 1.8 Hz, 1H), 1.51 - 1.44 (m, 10H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H) ppm。 步驟 4 ： 2- 烯丙基 -4,4- 二甲基 - 吡咯啶 ( 三氟乙酸鹽 )
Figure 02_image2283
在-20℃下，在冷浴中，歷經15分鐘將三氟乙酸(13.320 g，9 mL，116.82 mmol)添加至2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(2.35 g，9.8181 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中。存在一些放熱，且達到之最大溫度為-10℃。移除冷浴，在室溫下攪拌所得混合物2小時，且接著真空移除溶劑。真空乾燥殘餘物隔夜，得到呈深色油狀之2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶(三氟乙酸鹽) (3.4 g，94)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 9.13 (br. s., 1H), 8.16 (br. s., 1H), 5.81 - 5.62 (m, 1H), 5.32 - 5.08 (m, 2H), 3.93 - 3.77 (m, 1H), 3.08 (t, J =5.4 Hz, 2H), 2.64 - 2.38 (m, 2H), 2.09 - 1.86 (m, 1H), 1.74 - 1.53 (m, 1H), 1.22 (s, 3H), 1.19 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -75.94 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值139.1361，實驗值140.3 (M+1) +；滯留時間：0.69分鐘(LC方法C)。 步驟 5 ： N -[6-(2- 烯丙基 -4,4- 二甲基 - 吡咯啶 -1- 基 )-2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2285
向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(1 0 g，1.331 mmol)於DMSO (5 mL)中之溶液中添加碳酸銫(2.2 g，6.752 mmol)及2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶(三氟乙酸鹽) (685 mg，2.705 mmol)，且在微波反應器中在100℃下加熱反應混合物30 min。將反應混合物倒在碎冰上且在冰融化之後，傾析水，且將所得糊狀材料溶解於乙酸乙酯中，用鹽水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得棕色殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到 N-[6-(2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-基)-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(654 mg，69%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.46 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.40 (dt, J =7.6, 1.8 Hz, 2H), 7.38 - 7.30 (m, 3H), 5.84 (dddt, J =19.6, 16.7, 10.1, 6.4 Hz, 1H), 5.75 - 5.61 (m, 1H), 5.15 - 4.89 (m, 4H), 4.78 - 4.61 (m, 2H), 4.54 (d, J =8.1 Hz, 1H), 3.35 (d, J =10.3 Hz, 1H), 3.03 (d, J =9.7 Hz, 1H), 2.49 - 2.39 (m, 3H), 2.38 - 2.18 (m, 3H), 1.79 (dd, J =12.2, 6.6 Hz, 1H), 1.55 (t, J =11.5 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.12 (s, 3H), 0.85 (d, J =2.2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值709.3063，實驗值710.4 (M+1) +；滯留時間：2.36分鐘(LC方法M)。少量產物仍含有第二種 N-Boc保護基，此材料直接用於隨後步驟中。 步驟 6 ： N -[6-( 苯甲氧基 )-14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/ Z 混合物 )
Figure 02_image2287
向 N-[6-(2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-基)-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(650 mg，0.9159 mmol) (混雜有一些具有雙- N-Boc保護之起始材料，參見前一步驟)於DCE (200 mL)中之脫氣溶液中添加Zhan催化劑-1B (192 mg，0.2389 mmol)，且在70℃下加熱反應物隔夜。將反應混合物冷卻至室溫且濃縮。用1:4EtOAc/己烷稀釋混合物且經由矽藻土過濾。濃縮濾液，且所得棕色殘餘物藉由使用0%至30%乙酸乙酯/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈鮮黃色油狀之 N-[6-(苯甲氧基)-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (420 mg，67%)。ESI-MS m/z計算值681.27496，實驗值682.5 (M+1) +；滯留時間：2.18分鐘(LC方法M)。少量產物仍含有第二種 N-Boc保護基，此材料直接用於隨後步驟中。 步驟 7 ： N -[6- 羥基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2289
向 N-[6-(苯甲氧基)-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (420 mg，0.6161 mmol) (混雜有一些具有雙- N-Boc保護之起始材料，參見前一步驟)於AcOH (5 mL)中之溶液中添加Pd/C (174 mg，10% w/w，0.1635 mmol，50%水潤濕)。將燒瓶置於氫氣Parr振盪器上且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且將反應器加壓至40 psi氫氣且振盪隔夜。使燒瓶減壓，且添加額外Pd/C (182 mg，0.171 mmol，10% w/w，50%水潤濕)及幾滴1 M HCl。將混合物置於氫氣Parr振盪器上且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣將反應器加壓至60 psi且振盪隔夜。使燒瓶減壓，且經由矽藻土過濾混合物，且濃縮濾液。所得棕色殘餘物藉由使用0%至50%乙酸乙酯/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到 N-[6-羥基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(170 mg，46%)。ESI-MS m/z計算值593.24365，實驗值594.36 (M+1) +；滯留時間：1.92分鐘(LC方法M)。
自此純化，亦分離出雙- N-Boc產物 N-[(三級丁氧基)羰基]- N-[6-羥基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(84 mg，20%)。ESI-MS m/z計算值693.2961，實驗值694.34 (M+1) +；滯留時間：1.74分鐘(LC方法M)。 步驟 8 ： 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) 及 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 2)
Figure 02_image2291
將 N-[6-羥基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(170 mg，0.2864 mmol)溶解於TFA (200 µL，2.596 mmol)及二氯甲烷(800 µL)之預製備溶液中，且在室溫下攪拌約1 h。減壓移除溶劑。單獨地，在室溫下攪拌含 N-[(三級丁氧基)羰基]- N-[6-羥基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(84 mg，0.1211 mmol)之TFA (200 µL，2.596 mmol)與二氯甲烷(800 µL)之預製備溶液約1 h。接著減壓移除溶劑。將獲自兩個反應之粗產物合併且溶解於5 mL DMSO中，且藉由逆相HPLC來純化，其使用85%至90%乙腈/水(+5 mM HCl) 運行之雙重梯度，進行30分鐘，得到兩個單獨非鏡像異構物對：
溶離之第一非鏡像異構物對分離為呈黃色固體狀之20-胺基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物對1) (40 mg，67%)。ESI-MS m/z計算值493.19125，實驗值494.3 (M+1) +；滯留時間：1.26分鐘(LC方法M)。
溶離之第二非鏡像異構物對分離為呈黃色固體狀之20-胺基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物對2) (46 mg，77%)。ESI-MS m/z計算值493.19125，實驗值494.1 (M+1) +；滯留時間：1.3分鐘(LC方法M)。 步驟 9 ： 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 27) 及 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 28)
Figure 02_image2293
20-胺基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物對1) (47 mg，0.09525 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用正相及Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 10 mm，5 µm粒徑)，及10%至90% MeOH/CO 2之梯度，使用10 mL/min之流速，使用70 µL之注射體積，得到兩種單一鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈鮮黃色固體狀之20-胺基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (19.4 mg，83%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.12 (s, 2H), 4.33 - 4.22 (m, 1H), 3.32 (d, J =9.6 Hz, 1H), 3.00 (d, J =9.6 Hz, 1H), 2.31 (dt, J =14.6, 7.3 Hz, 2H), 2.04 (ddd, J =14.5, 8.8, 5.8 Hz, 1H), 1.93 (dd, J =11.9, 6.2 Hz, 1H), 1.71 (dt, J =46.2, 8.5 Hz, 2H), 1.41 (tt, J =18.8, 7.7 Hz, 5H), 1.12 (s, 3H), 0.96 - 0.89 (m, 1H), 0.88 (s, 3H ppm). ESI-MS m/z計算值493.19125，實驗值494.1 (M+1) +；滯留時間：1.26分鐘(LC方法M)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈鮮黃色固體狀之20-胺基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (17.9 mg，76%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.12 (s, 2H), 4.27 (q, J =10.2 Hz, 1H), 3.32 (d, J =9.6 Hz, 1H)), 3.00 (d, J =9.6 Hz, 1H), 2.32 (dq, J =14.9, 6.6 Hz, 2H), 2.04 (ddd, J =14.5, 9.0, 6.0 Hz, 1H), 1.93 (dd, J =11.9, 6.2 Hz, 1H), 1.75 (q, J =8.8, 8.4 Hz, 1H), 1.67 (d, J =7.6 Hz, 1H), 1.52 - 1.31 (m, 5H), 1.12 (s, 3H), 0.93 (d, J =6.7 Hz, 1H), 0.88 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值493.19125，實驗值494.0 (M+1) +；滯留時間：1.25分鐘(LC方法M)。 步驟 10 ： 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 29) 及 20- 胺基 -14,14- 二甲基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 30)
Figure 02_image2295
20-胺基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物對2) (46 mg，0.09322 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用正相及Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 10 mm，5 µm粒徑)，及10%至90% MeOH/CO 2之梯度，使用10 mL/min之流速，使用70 µL之注射體積，得到兩種單一鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈鮮黃色固體狀之20-胺基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物3) (14.6 mg，63%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.71 (s, 1H), 6.11 (s, 2H), 4.12 (q, J =9.3 Hz, 1H), 3.31 (d, J =10.0 Hz, 2H), 3.00 (d, J =9.6 Hz, 1H), 2.45 (dt, J =12.8, 6.7 Hz, 1H), 2.25 (dq, J =9.4, 5.8, 4.7 Hz, 1H), 1.97 (dt, J =13.7, 8.7 Hz, 1H), 1.88 (dd, J =11.9, 6.2 Hz, 1H), 1.56 (t, J =7.6 Hz, 2H), 1.50 - 1.34 (m, 5H), 1.11 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.84 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值493.19125，實驗值494.1 (M+1) +；滯留時間：1.3分鐘(LC方法M)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈鮮黃色固體狀之20-胺基-14,14-二甲基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物4) (13.7 mg，60%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.72 (s, 1H), 6.11 (s, 2H), 4.12 (q, J =9.3 Hz, 1H), 3.31 (s, 2H), 3.00 (d, J =9.6 Hz, 1H), 2.45 (d, J =12.2 Hz, 1H), 2.23 (d, J =10.9 Hz, 1H), 1.97 (dt, J =13.4, 8.5 Hz, 1H), 1.89 (dd, J =11.9, 6.2 Hz, 1H), 1.55 (s, 2H), 1.42 (q, J =12.3, 10.9 Hz, 5H), 1.11 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.82 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值493.19125，實驗值494.0 (M+1) +；滯留時間：1.3分鐘(LC方法M)。 實例 18 ：製備 (12 R)-6-( 羥基亞胺基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 胺 ( 化合物 31)
Figure 02_image2297
步驟 1 ： N -[(12 R)-6- 側氧基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸 三級丁 酯
Figure 02_image2299
向 N-[(12 R)-6-羥基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(100 mg，0.201 mmol)於DCM (1.628 mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(102.3 mg，0.2412 mmol)，且在室溫下攪拌反應物30 min。經由矽藻土過濾反應混合物且濃縮。藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)進行10 min純化，得到呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-側氧基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(70 mg，70%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.98 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 4.00 - 3.88 (m, 1H), 3.64 - 3.51 (m, 1H), 3.51 - 3.41 (m, 1H), 3.22 - 3.10 (m, 1H), 2.75 - 2.62 (m, 1H), 2.57 (td, J =11.8, 7.1 Hz, 1H), 2.20 - 1.88 (m, 4H), 1.83 - 1.56 (m, 6H), 1.48 (s, 10H) ppm. ESI-MS m/z計算值495.20935，實驗值496.4 (M+1) +；滯留時間：0.67分鐘(LC方法T)。 步驟 2 ： (12 R)-6-( 羥基亞胺基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 胺 ( 化合物 31)
Figure 02_image2301
向 N-[(12 R)-6-側氧基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(18 mg，0.03544 mmol)於二氯甲烷(400 µL)中之溶液中添加TFA (27.30 µL，0.3543 mmol)，且攪拌混合物2 h。濃縮反應混合物，溶解於EtOH (200 µL)中，且接著添加羥胺(鹽酸鹽) (3.773 mg，0.05429 mmol)，隨後添加NaOAc (4.858 mg，0.05922 mmol)。在75℃下加熱混合物5 h。將反應混合物冷卻至室溫，過濾，且藉由使用梯度為30%至99%乙腈/水(+5 mM HCl)之逆相HPLC來純化。將第二溶離及主要非鏡像異構物之級分合併，且蒸發。將所得固體溶解於乙酸乙酯中且用飽和NaHCO 3洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到呈橙色固體狀之(12 R)-6-(羥基亞胺基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-胺(10 mg，69%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.51 (s, 1H), 3.91 - 3.76 (m, 1H), 3.52 (d, J =8.8 Hz, 1H), 3.28 (dd, J =17.8, 8.8 Hz, 1H), 3.20 - 3.08 (m, 1H), 2.52 (d, J =11.9 Hz, 1H), 2.37 (ddd, J =13.8, 9.7, 4.3 Hz, 1H), 2.20 - 2.01 (m, 1H), 1.88 (dd, J =6.9, 3.3 Hz, 1H), 1.85 - 1.61 (m, 3H), 1.60 - 1.29 (m, 5H), 0.95 - 0.84 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值410.16782，實驗值411.3 (M+1) +；滯留時間：1.99分鐘(LC方法A)。產物為具有未知的肟立體化學之單一鏡像異構物。 實例 19 ：製備 (11 R)-19- 胺基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 32) 及 (11 R)-19- 胺基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 33)
Figure 02_image2303
步驟 1 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2305
向6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.3 g，5.537 mmol)於NMP (32 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(鹽酸鹽) (1.89 g，5.820 mmol)、DIEA (3.2 mL，18.37 mmol)及HATU (2.59 g，6.812 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物18 h。反應物用乙酸乙酯稀釋，且用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(3.16 g，83%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 10.38 (s, 1H), 10.28 (d, J =18.9 Hz, 2H), 8.88 (s, 1H), 7.46 (d, J =7.4 Hz, 2H), 7.38 (t, J =7.4 Hz, 2H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 5.98 - 5.84 (m, 1H), 5.83 - 5.69 (m, 1H), 5.38 (d, J =17.1 Hz, 1H), 5.23 (d, J =10.3 Hz, 1H), 5.04 - 4.91 (m, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.70 (ddt, J =18.2, 6.9, 3.3 Hz, 1H), 3.55 (q, J =8.6 Hz, 1H), 3.36 - 3.32 (m, 1H), 3.09 (dd, J =15.7, 7.5 Hz, 1H), 2.99 (d, J =15.8 Hz, 1H), 2.36 - 2.27 (m, 1H), 2.18 (dd, J =17.9, 4.5 Hz, 1H), 2.07 - 1.98 (m, 1H), 1.93 (t, J =8.9 Hz, 1H), 1.75 (dt, J =17.8, 8.3 Hz, 1H), 1.66 (dt, J =10.3, 7.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值685.2699，實驗值686.2 (M+1) +；滯留時間：1.91分鐘(LC方法M)。 步驟 2 ： N -[6-[(2 S) -2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2307
在50℃下加熱 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(3.16 g，4.609 mmol)及DIEA (3 mL，17.22 mmol)於乙腈(100 mL)中之溶液，接著一次性添加 對-甲苯磺醯氯(1.4 g，7.343 mmol)。在70℃下加熱所得混合物2小時。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和水溶液(50 mL)淬滅，且攪拌15分鐘。混合物用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取，且經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(2.59 g，84%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.45 (s, 1H), 8.65 (d, J =3.7 Hz, 1H), 7.35 (ddd, J =21.4, 7.6, 5.2 Hz, 5H), 5.91 (ddd, J =17.5, 12.8, 7.6 Hz, 1H), 5.79 - 5.62 (m, 1H), 5.41 - 5.29 (m, 1H), 5.23 (t, J =11.8 Hz, 1H), 5.06 - 4.97 (m, 1H), 4.94 (d, J =10.2 Hz, 1H), 4.76 (dd, J =14.1, 10.9 Hz, 1H), 4.62 (dd, J =10.9, 6.5 Hz, 1H), 4.42 - 4.31 (m, 1H), 3.60 - 3.50 (m, 1H), 3.45 - 3.35 (m, 1H), 3.27 (t, J =8.2 Hz, 2H), 2.23 (t, J =11.8 Hz, 1H), 2.03 (d, J =11.3 Hz, 1H), 1.95 (s, 1H), 1.71 (ddd, J =18.8, 15.4, 8.1 Hz, 2H), 1.51 - 1.44 (m, 9H), 1.23 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值667.25934，實驗值668.3 (M+1) +；滯留時間：2.3分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： N -[(11 S)-6-( 苯甲氧基 )-6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,8,16,18- 六烯 -19- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2309
在50℃下在氮氣氛圍下，分兩份歷經10分鐘向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(2.59 g，3.879 mmol)於DCE (600 mL)中之脫氣溶液中添加Zhan催化劑-1B (465 mg，0.6337 mmol)。在70℃下加熱所得混合物14小時。再次添加Zhan催化劑-1B (465 mg，0.6337 mmol)，且在80℃下加熱混合物22小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至10%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈鮮黃色固體狀之 N-[(11 S)-6-(苯甲氧基)-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,8,16,18-六烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (160 mg，6.5%)。ESI-MS m/z計算值639.228，實驗值640.2 (M+1) +；滯留時間：2.01分鐘(LC方法M)。 步驟 4 ： N -[(11 R)-6- 羥基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -19- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 鏡像異構物 1) 及 N -[(11 R)-6- 羥基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -19- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 鏡像異構物 2)
Figure 02_image2311
向 N-[(11 S)-6-(苯甲氧基)-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,8,16,18-六烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (240 mg，0.3752 mmol)於AcOH (6 mL)及乙酸乙酯(6 mL)中之溶液中添加Pd/C (400 mg，10% w/w，0.3759 mmol)。將混合物放入Parr振盪器中且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣對反應器加壓。在80 psi下振盪混合物三小時，接著在100 psi下再振盪四小時。使反應器減壓，且過濾反應物且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到兩種鏡像異構產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色殘餘物之 N-[(11 R)-6-羥基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (58.7 mg，57%)。ESI-MS m/z計算值551.1967，實驗值552.2 (M+1) +；滯留時間：1.42分鐘(LC方法M)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色殘餘物之 N-[(11 R)-6-羥基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (58.5 mg，57%)。ESI-MS m/z計算值551.1967，實驗值552.2 (M+1) +；滯留時間：1.32分鐘(LC方法M)。 步驟 5 ： (11 R)-19- 胺基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 32)
Figure 02_image2313
向 N-[(11 R)-6-羥基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (55 mg，0.09973 mmol)於DCM (1000 µL)中之溶液中添加TFA (750 µL，9.735 mmol),且在室溫下攪拌混合物2小時。蒸發混合物且藉由逆相HPLC來純化，其使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度，進行15.0分鐘，得到呈黃色固體狀之(11 R)-19-胺基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (23.0 mg，51%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.68 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 5.75 (s, 2H), 3.83 (q, J =7.8 Hz, 1H), 3.51 (q, J =8.2 Hz, 2H), 2.35 - 2.21 (m, 2H), 2.12 (dq, J =11.6, 6.0 Hz, 1H), 2.00 (q, J =7.9 Hz, 1H), 1.96 - 1.88 (m, 2H), 1.84 - 1.72 (m, 1H), 1.69 - 1.50 (m, 3H), 1.48 - 1.36 (m, 1H), 1.16 (ddd, J =13.0, 10.0, 6.1 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值451.1443，實驗值452.2 (M+1) +；滯留時間：2.05分鐘(LC方法A)。 步驟 6 ： (11 R)-19- 胺基 -6,17- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -3,4,15,20- 四氮雜四環 [14.3.1.12,5.011,15] 二十一碳 -1(20),2,4,16,18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 33)
Figure 02_image2315
向 N-[(11 R)-6-羥基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-19-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (55 mg，0.09973 mmol)於DCM (1000 µL)中之溶液中添加TFA (750 µL，9.735 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2小時。蒸發混合物且藉由逆相HPLC來純化，其使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度，進行15.0分鐘，得到呈黃色固體狀之(11 R)-19-胺基-6,17-雙(三氟甲基)-21-氧雜-3,4,15,20-四氮雜四環[14.3.1.12,5.011,15]二十一碳-1(20),2,4,16,18-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (23.8 mg，52%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.67 (s, 1H), 7.62 (d, J =10.0 Hz, 1H), 5.59 (s, 2H), 3.97 (q, J =8.1 Hz, 1H), 3.54 (d, J =8.2 Hz, 2H), 2.41 – 2.32 (m, 1H), 2.15 (dt, J =11.8, 5.9 Hz, 1H), 2.04 (d, J =10.8 Hz, 1H), 1.97 – 1.90 (m, 1H), 1.90 – 1.74 (m, 2H), 1.74 – 1.48 (m, 4H), 1.39 (dd, J =18.2, 11.8 Hz, 1H), 1.11 (td, J =11.3, 7.0 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值451.1443，實驗值452.2 (M+1) +；滯留時間：1.98分鐘(LC方法A)。 實例 20 ：製備 17- 胺基 -13-(2- 甲氧基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 34) 及 17- 胺基 -13-(2- 甲氧基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 35)
Figure 02_image2317
步驟 1 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 (2- 甲氧基乙基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]- N- 三級丁氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2319
在250 mL密封容器中，將 N-(2-甲氧基乙基)丁-3-烯-1-胺(180 mg，1.393 mmol)、DIEA (1000 µL，5.741 mmol)及 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(600 mg，0.7984 mmol)合併於乙腈(15 mL)中，且在80℃下加熱混合物36小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(2-甲氧基乙基)胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(269 mg，42%)。ESI-MS m/z計算值799.33795，實驗值800.2 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法M)。 步驟 2 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 (2- 甲氧基乙基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2321
向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(2-甲氧基乙基)胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(241 mg，0.3013 mmol)於THF (2.5 mL)中之溶液中添加MeOH (2.5 mL)及水(2 mL)，隨後添加氫氧化鋰(26 mg，1.086 mmol)。在60℃下攪拌混合物7 h。減壓移除THF及甲醇，添加10% HCl (10 mL)，且產物用EtOAc (2 × 50 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(5 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。接著，殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(2-甲氧基乙基)胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(138 mg，65%)。ESI-MS m/z計算值699.2855，實驗值700.2 (M+1) +；滯留時間：2.2分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： N -[6- 苯甲氧基 -13-(2- 甲氧基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2323
在500 mL圓底燒瓶中，在50℃下在氮氣氛圍下，加熱 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(2-甲氧基乙基)胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(180 mg，0.2573 mmol)於DCE (80 mL)中之脫氣溶液。接著，歷經10分鐘分兩份添加Zhan催化劑-1B (35 mg，0.04770 mmol)。在70℃下加熱所得混合物3小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色殘餘物之 N-[6-苯甲氧基-13-(2-甲氧基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (103 mg，60%)。ESI-MS m/z計算值671.2542，實驗值672.2 (M+1) +；滯留時間：2.0分鐘(LC方法M)。 步驟 4 ： N -[6- 羥基 -13-(2- 甲氧基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2325
向 N-[6-苯甲氧基-13-(2-甲氧基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (103 mg，0.1534 mmol)於AcOH (2.5 mL)及乙酸乙酯(2.5 mL)中之溶液中添加Pd/C (165 mg，10% w/w，0.1550 mmol)。將混合物置於Parr振盪器上且在真空下脫氣，且用氮氣填充三次。接著，移除所有氮氣，且用氫氣對反應器加壓。在80 psi下振盪混合物3小時，且在100 psi下另外振盪4小時。使反應器減壓，且過濾反應物且濃縮且置於高真空下30分鐘，得到呈黃色殘餘物之 N-[6-羥基-13-(2-甲氧基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(64 mg，72%)。ESI-MS m/z計算值583.22296，實驗值584.2 (M+1) +；滯留時間：1.39分鐘(LC方法J)。 步驟 5 ： 17- 胺基 -13-(2- 甲氧基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2327
向 N-[6-羥基-13-(2-甲氧基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(64 mg，0.1097 mmol)於DCM (1.0 mL)中之溶液中添加TFA (750 µL，9.735 mmol)，且在室溫下攪拌混合物1 h。蒸發混合物，且殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-(2-甲氧基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(50 mg，94%)。ESI-MS m/z計算值483.1705，實驗值484.2 (M+1) +；滯留時間：1.35分鐘(LC方法A)。 步驟 6 ： 17- 胺基 -13-(2- 甲氧基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 34) 及 17- 胺基 -13-(2- 甲氧基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 35)
Figure 02_image2329
外消旋17-胺基-13-(2-甲氧基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(49 mg，0.1014 mmol) 藉由對掌性SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 x 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用14% MeOH (+ 20 mM NH 3)/86% CO 2溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相製備型HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-(2-甲氧基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (13.4 mg，54%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.71 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 3.51 (d, J =6.3 Hz, 2H), 3.30 (s, 1H), 3.29 - 3.23 (m, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.14 (t, J =7.1 Hz, 2H), 1.89 (dq, J =17.4, 5.5, 4.9 Hz, 1H), 1.66 - 1.50 (m, 4H), 1.42 (ddd, J =28.9, 14.6, 7.3 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值483.1705，實驗值484.2 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相製備型HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-(2-甲氧基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (13.8 mg，56%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.71 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.31 (s, 2H), 3.52 (t, J =6.3 Hz, 2H), 3.35 - 3.29 (m, 1H), 3.29 - 3.23 (m, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.14 (t, J =7.2 Hz, 2H), 1.93 - 1.84 (m, 1H), 1.67 - 1.50 (m, 4H), 1.50 - 1.35 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值483.1705，實驗值484.2 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法A)。 實例 21 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 酮 ( 化合物 36)
Figure 02_image2331
步驟 1 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 酮 ( 化合物 36)
Figure 02_image2333
將 N-[(12 R)-6-側氧基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(8 mg，0.01615 mmol)之溶液溶解於二氯甲烷(137 µL)中，且添加TFA (62.09 µL，0.8059 mmol)。在室溫下攪拌混合物2 h。濃縮反應物，溶解於二氯甲烷中且用飽和NaHCO 3溶液洗滌。濃縮有機層，得到呈橙色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-酮(3 mg，47%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.49 (s, 1H), 4.00 (q, J =8.3 Hz, 1H), 3.66 (q, J =8.5 Hz, 1H), 3.48 (s, 1H), 3.28 (td, J =11.6, 2.5 Hz, 1H), 2.72 (d, J =11.9 Hz, 1H), 2.64 (dt, J =11.9, 5.9 Hz, 1H), 2.30 - 2.00 (m, 4H), 1.96 - 1.67 (m, 6H), 1.01 (d, J =11.7 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值395.15692，實驗值396.1 (M+1) +；滯留時間：1.67分鐘(LC方法A)。在 1H NMR中未觀測到兩個可交換NH 2質子。 實例 22 ：製備 5- 胺基 -11- 羥基 -3,11- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -1,8,9,16,22- 五氮雜四環 [14.2.2.12,6.17,10] 二十二碳 -2,4,6(22),7,9- 五烯 -15- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 37) 及 5- 胺基 -11- 羥基 -3,11- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -1,8,9,16,22- 五氮雜四環 [14.2.2.12,6.17,10] 二十二碳 -2,4,6(22),7,9- 五烯 -15- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 38)
Figure 02_image2335
步驟 1 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -5- 羥基 -1-( 三氟甲基 ) 戊基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2337
向在0℃下之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(330 mg，0.5066 mmol)於THF (2.533 mL)中之溶液中逐滴添加硼烷-二甲基硫醚錯合物(380 µL，2 M，0.76 mmol)，且在0℃下攪拌混合物15 min。將反應物升溫至室溫且攪拌1 h。將反應物冷卻至0℃，之後用NaOH (1.35 mL，2 M，2.7 mmol)淬滅，隨後添加過氧化氫(300 µL，9.79 mmol)。在室溫下攪拌混合物30 min，之後用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取。合併有機層，用鹽水(25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由使用0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(4 g管柱)純化濾液，得到呈無色半固體狀之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-5-羥基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(200 mg，59%)。ESI-MS m/z計算值668.1069，實驗值670.4 (M+1) +；滯留時間：0.6分鐘(LC方法T)。 步驟 2 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -5- 側氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6- 溴 -5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2339
向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-5-羥基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(135 mg，0.2017 mmol)於二氯甲烷(2.0 mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(102.6 mg，0.2419 mmol)。在15 min之後，反應完成。用NaHCO 3飽和水溶液淬滅反應物。用二氯甲烷萃取(2 × 25 mL)，接著合併有機層且用鹽水洗滌，接著經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。經由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)進行10 min純化濾液，得到呈白色固體狀之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-5-側氧基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(100 mg，74%)。ESI-MS m/z計算值666.09125，實驗值667.3 (M+1) +；滯留時間：0.66分鐘(LC方法T)。 步驟 3 ： 5- 苯甲氧基 -5-[5-[6- 溴 -3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6,6,6- 三氟 - 己酸
Figure 02_image2341
向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-5-側氧基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(450 mg，0.6743 mmol)及2-甲基-2-丁烯(1.389 mL，13.11 mmol)於三級丁醇(5.44 mL)中之溶液中添加亞氯酸鈉(126.3 mg，1.396 mmol)及一水合磷酸二氫鈉(651.7 mg，4.723 mmol)於水(5.44 mL)中之溶液。在室溫下攪拌反應混合物2 h。在減壓下部分濃縮反應混合物。添加水(20 mL)，且水層用1 N HCl酸化直至pH呈~ 1-2，且用二氯甲烷(2 × 50 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈粗白色固體狀之5-苯甲氧基-5-[5-[6-溴-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6,6,6-三氟-己酸(455 mg，99%)。ESI-MS m/z計算值682.0862，實驗值683.2 (M+1) +；滯留時間：0.57分鐘。此材料未經進一步純化即直接用於隨後步驟中(LC方法T)。 步驟 4 ： 5- 苯甲氧基 -5-[5-[3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-6- 哌嗪 -1- 基 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6,6,6- 三氟 - 己酸
Figure 02_image2343
在微波密封小瓶中，將5-苯甲氧基-5-[5-[6-溴-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6,6,6-三氟-己酸(160 mg，0.2341 mmol)、二異丙基乙胺(244.7 µL，1.405 mmol)及哌嗪(100.8 mg，1.17 mmol)添加至乙腈(1 mL)中，且在90℃下加熱混合物9 h。用水稀釋反應物且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。合併有機層且用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮成黃色固體5-苯甲氧基-5-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-6-哌嗪-1-基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6,6,6-三氟-己酸(150 mg，93%)。ESI-MS m/z計算值688.2444，實驗值689.3 (M+1) +；滯留時間：0.69分鐘。此材料未經進一步純化即直接用於隨後步驟中(LC方法S)。 步驟 5 ： N -[11-( 苯甲氧基 )-15- 側氧基 -3,11- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -1,8,9,16,22- 五氮雜四環 [14.2.2.12,6.17,10] 二十二碳 -2,4,6(22),7,9- 五烯 -5- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2345
向5-苯甲氧基-5-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-6-哌嗪-1-基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6,6,6-三氟-己酸(125 mg，0.1815 mmol)於DMF (12.5 mL)中之溶液中添加DIEA (158.1 µL，0.9077 mmol)，隨後添加HATU (151.8 mg，0.3992 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min。反應物用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[11-(苯甲氧基)-15-側氧基-3,11-雙(三氟甲基)-21-氧雜-1,8,9,16,22-五氮雜四環[14.2.2.12,6.17,10]二十二碳-2,4,6(22),7,9-五烯-5-基]胺基甲酸三級丁酯(115 mg，80%)。ESI-MS m/z計算值670.2338，實驗值671.2 (M+1) +；滯留時間：0.9分鐘(LC方法S)。 步驟 6 ： N -[11- 羥基 -15- 側氧基 -3,11- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -1,8,9,16,22- 五氮雜四環 [14.2.2.12,6.17,10] 二十二碳 -2,4,6(22),7,9- 五烯 -5- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2347
向 N-[11-(苯甲氧基)-15-側氧基-3,11-雙(三氟甲基)-21-氧雜-1,8,9,16,22-五氮雜四環[14.2.2.12,6.17,10]二十二碳-2,4,6(22),7,9-五烯-5-基]胺基甲酸三級丁酯(115 mg，0.1458 mmol)於乙酸(2.639 mL)中之氮氣沖洗溶液中添加Pd/C (53.11 mg，10% w/w，0.04991 mmol)。將混合物抽成真空且接著在使用氫氣填充氣球之氫氣氛圍下在室溫下攪拌20 h。經由矽膠塞過濾溶液，用乙酸乙酯充分洗滌，且接著減壓濃縮濾液。藉由使用C 18管柱與30%至99%乙腈/水之梯度的製備型逆相HPLC純化殘餘物。合併所需級分，得到灰白色固體 N-[11-羥基-15-側氧基-3,11-雙(三氟甲基)-21-氧雜-1,8,9,16,22-五氮雜四環[14.2.2.12,6.17,10]二十二碳-2,4,6(22),7,9-五烯-5-基]胺基甲酸三級丁酯(25 mg，30%)。ESI-MS m/z計算值580.1869，實驗值581.4 (M+1) +；滯留時間：0.76分鐘(LC方法S)。 步驟 7 ： 5- 胺基 -11- 羥基 -3,11- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -1,8,9,16,22- 五氮雜四環 [14.2.2.12,6.17,10] 二十二碳 -2,4,6(22),7,9- 五烯 -15- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 37) 及 5- 胺基 -11- 羥基 -3,11- 雙 ( 三氟甲基 )-21- 氧雜 -1,8,9,16,22- 五氮雜四環 [14.2.2.12,6.17,10] 二十二碳 -2,4,6(22),7,9- 五烯 -15- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 38)
Figure 02_image2349
將 N-[11-羥基-15-側氧基-3,11-雙(三氟甲基)-21-氧雜-1,8,9,16,22-五氮雜四環[14.2.2.12,6.17,10]二十二碳-2,4,6(22),7,9-五烯-5-基]胺基甲酸三級丁酯(20 mg，0.03445 mmol)溶解於二氯甲烷(342.4 µL)中，且向混合物中添加TFA (132.4 µL，1.719 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2 h。真空濃縮反應物，接著溶解於二氯甲烷中且用NaHCO 3飽和水溶液洗滌。真空濃縮有機層，得到淡黃色固體，其經受對掌性SFC，該對掌性SFC使用ChiralPak OD管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑)，使用18% 甲醇(20 mM NH 3)/CO 2移動相進行5分鐘(流速= 10 mL/min，管柱溫度= 35℃)。此等條件產生2種如下文所描述之鏡像異構產物：
濃縮峰1，得到呈淡黃色固體狀之5-胺基-11-羥基-3,11-雙(三氟甲基)-21-氧雜-1,8,9,16,22-五氮雜四環[14.2.2.12,6.17,10]二十二碳-2,4,6(22),7,9-五烯-15-酮(鏡像異構物1) (2.9 mg，35%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.15 (dq, J =14.8, 7.2 Hz, 1H), 3.73 (dd, J =10.7, 5.4 Hz, 1H), 3.48 (ddd, J =16.9, 10.5, 6.5 Hz, 2H), 3.32 (tq, J =13.1, 6.7, 5.8 Hz, 4H), 3.03 (dq, J =12.8, 5.7 Hz, 1H), 2.65 - 2.46 (m, 3H), 2.28 (t, J =7.8 Hz, 1H), 1.94 - 1.81 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值480.13446，實驗值481.2 (M+1) +；滯留時間：1.34分鐘(LC方法A)。
濃縮峰2，得到呈淡黃色固體狀之5-胺基-11-羥基-3,11-雙(三氟甲基)-21-氧雜-1,8,9,16,22-五氮雜四環[14.2.2.12,6.17,10]二十二碳-2,4,6(22),7,9-五烯-15-酮(鏡像異構物2) (2.9 mg，35%)； 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.61 (d, J =39.0 Hz, 2H), 4.14 (dt, J =13.6, 7.1 Hz, 1H), 3.74 (q, J =5.2 Hz, 1H), 3.52 - 3.25 (m, 6H), 3.02 (dt, J =12.8, 6.0 Hz, 1H), 2.64 - 2.47 (m, 3H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.00 - 1.86 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值480.13446，實驗值481.2 (M+1) +；滯留時間：1.34分鐘(LC方法A)。 實例 23 ：製備 17- 胺基 -13- 甲基 -15- 甲基磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 39) 及 17- 胺基 -13- 甲基 -15- 甲基磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2)    ( 化合物 40)
Figure 02_image2351
步驟 1 ： 3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-5- 甲基磺醯基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2353
將 N-甲基丁-3-烯-1-胺(鹽酸鹽) (370 mg，3.043 mmol)、DIEA (1.5 mL，8.612 mmol)及3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-溴-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸甲酯(860 mg，1.688 mmol)合併於乙腈(12 mL)中，且在70℃下加熱混合物20小時。將反應混合物冷卻至環境溫度，且減壓移除溶劑。殘餘物用EtOAc (50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈淡黃色殘餘物之3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸甲酯(820 mg，95%)。ESI-MS m/z計算值513.2145，實驗值514.2 (M+1) +；滯留時間：1.89分鐘(LC方法A)。 步驟 2 ： 6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5- 甲基磺醯基 - 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2355
向3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸甲酯(810 mg，1.577 mmol)於THF (8.5 mL)中之溶液中添加甲醇(7.5 mL)及水(6.5 mL)，隨後添加無水氫氧化鋰(150 mg，6.138 mmol)。在65℃加熱下攪拌混合物3 h。減壓移除THF及甲醇，且接著添加10 mL 10% HCl水溶液，且產物用EtOAc (2 × 50 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(5 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸(485 mg，77%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 13.82 (s, 1H), 10.08 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 5.78 (ddt, J =17.0, 10.2, 6.8 Hz, 1H), 5.05 (dq, J =17.2, 1.7 Hz, 1H), 4.97 (ddt, J =10.2, 2.4, 1.2 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 3.21 (t, J =7.5 Hz, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.30 (q, J =7.0 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值399.1464，實驗值400.2 (M+1) +；滯留時間：1.72分鐘(LC方法A)。 步驟 3 ： N -[2-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-5- 甲基磺醯基 -3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2357
向6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-甲基磺醯基-吡啶-2-甲酸(480 mg，1.202 mmol)於NMP (7 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(380.9 mg，1.260 mmol) 及DIEA (850 µL，4.880 mmol)，隨後添加HATU (565 mg，1.486 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物18 h。反應物用乙酸乙酯稀釋，且用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色油狀之 N-[2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-甲基磺醯基-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(720 mg，88%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 10.75 (s, 1H), 10.66 (s, 1H), 10.33 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 2H), 7.41 - 7.37 (m, 2H), 7.35 - 7.31 (m, 1H), 5.82 - 5.74 (m, 1H), 5.15 - 5.04 (m, 2H), 5.04 - 4.98 (m, 2H), 4.97 (dd, J =10.1, 2.1 Hz, 1H), 4.85 (d, J =7.2 Hz, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.27 (t, J =7.6 Hz, 2H), 2.84 (s, 3H), 2.34 - 2.27 (m, 4H), 2.19 (d, J =9.6 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值683.2601，實驗值684.2 (M+1) +；滯留時間：1.91分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-5- 甲基磺醯基 -3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2359
在50℃下加熱 N-[2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-甲基磺醯基-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(720 mg，1.053 mmol)及DIEA (750 µL，4.306 mmol)於乙腈(20 mL)中之溶液，接著一次性添加 對-甲苯磺醯氯(320 mg，1.678 mmol)。在70℃下加熱所得混合物2小時。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和水溶液(50 mL)淬滅，且攪拌15分鐘。接著，混合物用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。將有機相合併，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-甲基磺醯基-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(640 mg，91%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.80 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.44 (d, J =6.7 Hz, 2H), 7.39 - 7.30 (m, 3H), 5.91 - 5.72 (m, 2H), 5.10 (dd, J =17.1, 1.8 Hz, 1H), 5.07 - 4.98 (m, 2H), 4.96 (dd, J =10.2, 2.0 Hz, 1H), 4.74 (d, J =11.0 Hz, 1H), 4.66 (d, J =10.9 Hz, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.29 (d, J =7.7 Hz, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.48 - 2.36 (m, 2H), 2.33 (t, J =8.6 Hz, 4H), 1.50 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值665.2495，實驗值666.2 (M+1) +；滯留時間：2.22分鐘(LC方法J)。 步驟 5 ： N -[6- 苯甲氧基 -13- 甲基 -15- 甲基磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2361
在500 mL圓底燒瓶中，在50℃下在氮氣氛圍下加熱 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-5-甲基磺醯基-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(600 mg，0.9013 mmol)於DCE (225 mL)中之脫氣溶液。接著，歷經10分鐘分兩份添加Zhan催化劑-1B (212 mg，0.2889 mmol)。在70℃下加熱所得混合物4小時。添加更多Zhan催化劑-1B (106 mg，0.144 mmol)，且在70℃下再加熱混合物10小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-苯甲氧基-13-甲基-15-甲基磺醯基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (235 mg，41%)。ESI-MS m/z計算值637.2182，實驗值638.2 (M+1) +；滯留時間：2.0分鐘(LC方法J)。 步驟 6 ： N -[6- 羥基 -13- 甲基 -15- 甲基磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2363
N-[6-苯甲氧基-13-甲基-15-甲基磺醯基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (235 mg，0.3685 mmol)於AcOH (5.0 mL)及乙酸乙酯(5 mL)中之溶液用氮氣吹掃。接著，添加Pd/C (355 mg，10% w/w，0.3336 mmol)，且混合物經氮氣脫氣5分鐘，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓下攪拌混合物5 h，接著過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至55%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-羥基-13-甲基-15-甲基磺醯基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(145 mg，72%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.19 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.31 - 3.24 (m, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.15 (d, J =9.2 Hz, 2H), 1.92 (dd, J =11.8, 6.5 Hz, 1H), 1.70 (t, J =6.1 Hz, 1H), 1.59 (s, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.40 (s, 1H), 1.29 - 1.23 (m, 2H), 0.85 (dt, J =10.9, 6.6 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值549.1869，實驗值550.1 (M+1) +；滯留時間：1.98分鐘(LC方法A)。 步驟 7 ： 17- 胺基 -13- 甲基 -15- 甲基磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2365
向 N-[6-羥基-13-甲基-15-甲基磺醯基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(140 mg，0.2547 mmol)於DCM (2.5 mL)中之溶液中添加TFA (2.0 mL，25.96 mmol)，且在室溫下攪拌混合物3小時。將混合物蒸發至乾燥，接著用乙醚稀釋且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-甲基-15-甲基磺醯基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(85 mg，74%)。ESI-MS m/z計算值449.13446，實驗值450.2 (M+1) +；滯留時間：1.62分鐘(LC方法A)。 步驟 8 ： 17- 胺基 -13- 甲基 -15- 甲基磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 39) 及 17- 胺基 -13- 甲基 -15- 甲基磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 40)
Figure 02_image2367
外消旋17-胺基-13-甲基-15-甲基磺醯基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(90 mg，0.2002 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 x 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用25% MeOH (+ 20 mM NH 3)/75% CO 2溶離，進行6 min，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相製備型HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-甲基-15-甲基磺醯基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (38.8 mg，85%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.97 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.56 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.17 (t, J =7.8 Hz, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.12 (d, J =7.7 Hz, 2H), 1.94 (tt, J =16.5, 8.5 Hz, 1H), 1.70 - 1.62 (m, 1H), 1.62 - 1.55 (m, 2H), 1.55 - 1.44 (m, 2H), 1.40 (dd, J =15.3, 7.0 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值449.13446，實驗值450.2 (M+1) +；滯留時間：1.61分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+5 mM HCl) 之梯度進行15分鐘之逆相製備型HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-甲基-15-甲基磺醯基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (38.6 mg，85%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.97 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.56 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.17 (t, J =7.8 Hz, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.12 (d, J =7.5 Hz, 2H), 1.95 (td, J =13.1, 7.4 Hz, 1H), 1.72 - 1.64 (m, 1H), 1.64 - 1.56 (m, 2H), 1.56 - 1.44 (m, 2H), 1.44 - 1.34 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值449.13446，實驗值450.2 (M+1) +；滯留時間：1.61分鐘(LC方法A)。 實例 24 ：製備 17- 胺基 -13-(2- 羥基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 41) 及 17- 胺基 -13-(2- 羥基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 42)
Figure 02_image2369
步驟 1 ： N -(2- 苯甲氧基乙基 ) 丁 -3- 烯 -1- 胺
Figure 02_image2371
在500 mL密封容器中，在50℃下加熱4-碘丁-1-烯(12.5 g，68.68 mmol)、2-苯甲氧基乙胺(12.5 g，82.67 mmol)及DIEA (42 mL，241.1 mmol)於乙腈(180 mL)中之混合物90小時。接著，在水浴中不使用加熱藉由旋轉蒸發將混合物濃縮成殘餘物，且殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈淡琥珀色油狀之 N-(2-苯甲氧基乙基)丁-3-烯-1-胺(6.69 g，47%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.39 - 7.24 (m, 5H), 5.79 (ddt, J =17.1, 10.2, 6.7 Hz, 1H), 5.04 (dq, J =17.2, 1.7 Hz, 1H), 4.99 (ddt, J =10.2, 2.4, 1.2 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.49 (t, J =5.6 Hz, 2H), 2.74 (d, J =5.6 Hz, 2H), 2.71 (d, J =7.1 Hz, 1H), 2.60 (t, J =7.1 Hz, 2H), 2.17 (qt, J =7.0, 1.4 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值205.14667，實驗值206.2 (M+1) +；滯留時間：0.74分鐘(LC方法A)。 步驟 2 ： 6-[2- 苯甲氧基乙基 ( 丁 -3- 烯基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2373
向 N-(2-苯甲氧基乙基)丁-3-烯-1-胺(3.1 g，15.10 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.11 g，7.415 mmol)於乙腈(41.0 mL)中之溶液中添加DIEA (6.5 mL，37.32 mmol)，且在室溫下攪拌混合物16小時。減壓濃縮反應混合物，且殘餘物藉由使用在兩個管柱中梯度均為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化兩次，得到呈黃色殘餘物之6-[2-苯甲氧基乙基(丁-3-烯基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.23 g，96%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.60 (s, 1H), 7.32 - 7.19 (m, 3H), 7.19 - 7.11 (m, 2H), 5.72 (ddt, J =17.1, 10.2, 6.8 Hz, 1H), 5.08 - 4.96 (m, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.84 (t, J =5.2 Hz, 2H), 3.72 (t, J =7.1 Hz, 2H), 3.66 (t, J =5.2 Hz, 2H), 2.37 (q, J =7.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值453.15115，實驗值454.2 (M+1) + ；滯留時間：2.15分鐘(LC方法A)。 步驟 3 ： 6-[2- 苯甲氧基乙基 ( 丁 -3- 烯基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2375
向6-[2-苯甲氧基乙基(丁-3-烯基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.23 g，7.124 mmol)於THF (38 mL)中之溶液中添加MeOH (38 mL)及水(30 mL)，隨後添加氫氧化鋰(737.8 mg，30.81 mmol)。在60℃加熱下攪拌混合物2 h。減壓移除THF及甲醇，且添加10 mL 10% HCl水溶液以酸化至pH ~ 4，且混合物用EtOAc (2 × 50 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(5 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-[2-苯甲氧基乙基(丁-3-烯基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.71 g，87%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.27 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.28 (dd, J =8.0, 6.1 Hz, 2H), 7.25 - 7.19 (m, 1H), 7.19 - 7.13 (m, 2H), 5.72 (ddt, J =17.1, 10.2, 6.7 Hz, 1H), 5.15 - 4.96 (m, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.83 (t, J =5.2 Hz, 2H), 3.71 (t, J =7.2 Hz, 2H), 3.66 (t, J =5.2 Hz, 2H), 2.37 (q, J =7.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.1355，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：1.88分鐘(LC方法A)。 步驟 4 ： 6-[2- 苯甲氧基乙基 ( 丁 -3- 烯基 ) 胺基 ]- N ' -[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2377
向6-[2-苯甲氧基乙基(丁-3-烯基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.6 g，3.641 mmol)於NMP (28 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(1.98 g，6.550 mmol)及DIEA (3 mL，17.22 mmol)，隨後添加HATU (2.9 g，7.627 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物18 h。反應物用乙酸乙酯稀釋，且用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-[2-苯甲氧基乙基(丁-3-烯基)胺基]- N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.0 g，38%)。ESI-MS m/z計算值723.24915，實驗值724.2 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法J)。 步驟 5 ： N -(2- 苯甲氧基乙基 )-6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N- 丁 -3- 烯基 -5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image2379
將6-[2-苯甲氧基乙基(丁-3-烯基)胺基]- N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(833 mg，1.151 mmol)及DIEA (1000 µL，5.741 mmol)於乙腈(25 mL)中之溶液加熱至50℃，接著一次性添加 對-甲苯磺醯氯(350 mg，1.836 mmol)。在70℃下加熱所得混合物2小時。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和水溶液(50 mL)淬滅，且攪拌15分鐘。混合物用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色油狀之 N-(2-苯甲氧基乙基)-6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-丁-3-烯基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(650 mg，80%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.73 (s, 1H), 7.40 - 7.27 (m, 5H), 7.27 - 7.16 (m, 3H), 7.17 - 7.09 (m, 2H), 5.84 (ddt, J =16.8, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.71 (ddt, J =17.1, 10.2, 6.8 Hz, 1H), 5.10 (dq, J =17.2, 1.6 Hz, 1H), 5.05 - 4.94 (m, 3H), 4.76 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.61 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.85 (t, J =5.2 Hz, 2H), 3.76 - 3.61 (m, 4H), 2.60 - 2.51 (m, 2H), 2.38 (q, J =7.2 Hz, 2H), 2.31 - 2.18 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值705.2386，實驗值706.2 (M+1) +；滯留時間：1.79分鐘(LC方法M)。 步驟 6 ： 6- 苯甲氧基 -13-(2- 苯甲氧基乙基 )-17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2381
在500 mL圓底3頸燒瓶中，在50℃下加熱Zhan催化劑-1B (165 mg，0.2249 mmol)於DCE (290 mL)中之不斷 經由氮氣管脫氣之溶液，且藉由注射器逐滴添加 N-(2-苯甲氧基乙基)-6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-丁-3-烯基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(640 mg，0.9070 mmol)於DCE (40 mL)中之溶液。在75℃下加熱所得混合物2小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-苯甲氧基-13-(2-苯甲氧基乙基)-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (360 mg，59%)。ESI-MS m/z計算值677.2073，實驗值678.2 (M+1) +；滯留時間：1.53分鐘(LC方法M)。 步驟 7 ： 17- 胺基 -13-(2- 羥基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2383
6-苯甲氧基-13-(2-苯甲氧基乙基)-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (355 mg，0.5239 mmol)於AcOH (5.5 mL)及乙酸乙酯(5.5 mL)中之溶液用氮氣吹掃，且添加Pd/C (85 mg，10% w/w，0.07987 mmol)。混合物經氮氣脫氣5分鐘，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓下攪拌混合物1 h。添加更多Pd/C (475 mg，10% w/w，0.4453 mmol)，且再攪拌3小時。經由矽藻土塞過濾反應物且用乙腈及乙酸乙酯洗滌，且接著濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-(2-羥基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(166 mg，68%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.56 (d, J =48.2 Hz, 1H), 4.11 (d, J =13.4 Hz, 2H), 3.58 (t, J =6.8 Hz, 2H), 3.54 - 3.31 (m, 1H), 3.26 (t, J =7.8 Hz, 2H), 3.17 (dq, J =14.3, 6.8 Hz, 2H), 2.14 (t, J =7.2 Hz, 2H), 1.94 - 1.85 (m, 1H), 1.70 - 1.50 (m, 4H), 1.50 - 1.34 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值469.15485，實驗值470.1 (M+1) +；滯留時間：1.58分鐘(LC方法A)。 步驟 8 ： 17- 胺基 -13-(2- 羥基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1)   ( 化合物 41) 及 17- 胺基 -13-(2- 羥基乙基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 42)
Figure 02_image2385
外消旋17-胺基-13-(2-羥基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(165 mg，0.3515 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用18% MeOH (+ 20 mM NH 3)/82% CO 2溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl) 之梯度進行15分鐘之逆相製備型HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-(2-羥基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (53.7 mg，64%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.29 (s, 2H), 3.58 (t, J =6.7 Hz, 3H), 3.31 - 3.13 (m, 4H), 2.14 (t, J =7.6 Hz, 2H), 1.90 (h, J =6.9, 4.2 Hz, 1H), 1.72 - 1.51 (m, 4H), 1.51 - 1.34 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值469.15485，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：1.58分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相製備型HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-(2-羥基乙基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (51.4 mg，62%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 3.58 (t, J =6.7 Hz, 3H), 3.29 - 3.14 (m, 4H), 2.13 (d, J =7.4 Hz, 2H), 1.95 - 1.84 (m, 1H), 1.69 - 1.49 (m, 4H), 1.48 - 1.27 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值469.15485，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：1.58分鐘(LC方法A)。 步驟 9 ：結晶化合物 41 形式 A 之固體形式表徵A.     X射線粉末繞射
藉由步驟8產生之結晶化合物41形式A之XRPD繞射圖係使用通用X射線粉末繞射(XRPD)方法獲得。結晶化合物41形式A之XRPD繞射圖提供於 圖 7中，且XRPD資料概述於下文 表 4 中。 表 4 ：結晶化合物 41 形式 A 之 XRPD 信號
XRPD峰編號 角度(度2θ ± 0.2) 強度%
1 14.1607 100
2 16.5689 27.78
3 18.0078 52.19
4 19.5231 79.81
5 20.2639 25.32
6 20.6598 26.89
7 21.2483 67.04
8 22.1718 16.32
9 25.1431 10.6
B.     熱重分析(TGA)
結晶化合物41形式A之TGA曲線提供於 圖 8中。TGA曲線顯示在~30至181.8℃ 3.89%重量損失，其中以10.00℃/min上升至350.00℃。 實例 25 ：製備 17- 胺基 -6- 羥基 -10,13- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,10,13,18- 五氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -9- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 43) 及 17- 胺基 -6- 羥基 -10,13- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,10,13,18- 五氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -9- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 44)
Figure 02_image2387
步驟 1 ： N -[2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-[ 甲基 -[2-( 甲基胺基 ) 乙基 ] 胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2389
向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(250 mg，0.3327 mmol)於DMSO (2 mL)中之溶液中添加 N, N´-二甲基乙烷-1,2-二胺(360 µL，3.381 mmol)，且在100℃下攪拌反應混合物2 h。接著，將反應物冷卻至室溫且在逆相C 18管柱上純化，其使用10%至99%移動相B運行之雙重梯度進行15.0分鐘(移動相A = H 2O (5 mM HCl)，移動相B = CH 3CN)，得到 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[甲基-[2-(甲基胺基)乙基]胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(174 mg，79%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.67 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.44 - 7.32 (m, 5H), 5.87 (ddt, J =16.9, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.11 (dq, J =17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.01 (dd, J =10.3, 1.7 Hz, 1H), 4.77 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.66 (d, J =11.0 Hz, 1H), 3.59 (t, J =6.9 Hz, 2H), 3.52 (t, J =7.0 Hz, 2H), 3.14 (t, J =6.2 Hz, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.50 (d, J =2.0 Hz, 3H), 2.31 (dq, J =11.0, 5.8 Hz, 2H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值658.2702，實驗值659.5 (M+1) +；滯留時間：0.54分鐘(LC方法R)。 步驟 2 ： 4- 苯甲氧基 -4-[5-[3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-6-[ 甲基 -[2-( 甲基胺基 ) 乙基 ] 胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5,5,5- 三氟 - 戊酸
Figure 02_image2391
在0℃下，向 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[甲基-[2-(甲基胺基)乙基]胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(100 mg，0.1518 mmol)於二噁烷(3 mL)水(1 mL)之3:1混合物中之溶液中添加四氧化鋨(50 µL，2.5%於2-甲基-2-丙醇中，0.03737 mmol)及高碘酸鈉(106 mg，0.4956 mmol)之溶液。在25℃下攪拌反應物隔夜。添加水(25 mL)且用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至100%EtOAc之淺梯度之矽膠管柱層析純化，得到4-苯甲氧基-4-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-6-[甲基-[2-(甲基胺基)乙基]胺基]-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5,5,5-三氟-戊酸(62 mg，60%)。ESI-MS m/z計算值676.2444，實驗值677.3 (M+1) +；滯留時間：0.44分鐘(LC方法R)。 步驟 3 ： N -[6- 苯甲氧基 -10,13- 二甲基 -9- 側氧基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,10,13,18- 五氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2393
向4-苯甲氧基-4-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-6-[甲基-[2-(甲基胺基)乙基]胺基]-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5,5,5-三氟-戊酸(62 mg，0.09163 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加DIEA (60 µL，0.3445 mmol)，隨後添加HATU (65 mg，0.1709 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物且在3 h之後，所有起始材料消失。混合物用水稀釋且用乙酸乙酯(3 ×)萃取。將有機相合併且經MgSO 4乾燥，過濾且真空濃縮。所得棕色殘餘物藉由逆相HPLC-MS方法來純化，其使用30%至99%移動相B運行之雙重梯度進行15.0分鐘(移動相A = H 2O (5 mM HCl)，移動相B = CH 3CN)，得到呈棕色油狀之 N-[6-苯甲氧基-10,13-二甲基-9-側氧基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,10,13,18-五氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(42 mg，70%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.89 (s, 1H), 8.51 (d, J =16.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.27 (m, 5H), 4.73 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.57 - 4.53 (m, 1H), 4.14 (s, 1H), 4.02 (d, J =13.9 Hz, 1H), 3.81 (s, 1H), 3.69 (s, 1H), 3.14 (d, J =2.2 Hz, 2H), 3.03 (d, J =40.3 Hz, 3H), 2.92 - 2.78 (m, 2H), 2.69 - 2.58 (m, 3H), 1.51 - 1.39 (m, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值658.2338，實驗值659.2 (M+1) +；滯留時間：0.74分鐘(LC方法R)。 步驟 4 ： 17- 胺基 -6- 羥基 -10,13- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,10,13,18- 五氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -9- 酮
Figure 02_image2395
向 N-[6-苯甲氧基-10,13-二甲基-9-側氧基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,10,13,18-五氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(40 mg，0.06074 mmol)於EtOH (5 mL)中之溶液中添加Pd/C (35 mg，10% w/w，0.03289 mmol)，且配備有3通活栓及氫氣球。使反應混合物經受真空且用氮氣回填三次，接著經受真空。用來自氣球之氫氣填充燒瓶且攪拌混合物15 h。使混合物經受真空且用氮氣回填三次，接著用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土過濾。濃縮濾液且真空乾燥，得到呈棕色油狀之30 mg N-[6-羥基-10,13-二甲基-9-側氧基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,10,13,18-五氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯。將此材料溶解於TFA (100 µL，1.298 mmol)預製溶液及二氯甲烷(400 µL)之1:4混合物中，且在室溫下攪拌1 h。移除溶劑且真空乾燥，得到呈棕色油狀之17-胺基-6-羥基-10,13-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,10,13,18-五氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-酮(25 mg，88%)。ESI-MS m/z計算值468.13446，實驗值469.0 (M+1) +；滯留時間：0.58分鐘(LC方法S)。 步驟 5 ： 17- 胺基 -6- 羥基 -10,13- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,10,13,18- 五氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -9- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 43) 及 17- 胺基 -6- 羥基 -10,13- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,10,13,18- 五氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -9- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 44)
Figure 02_image2397
17-胺基-6-羥基-10,13-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,10,13,18-五氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-酮(20 mg，0.0427 mmol) (~23 mg/mL於MeOH中)之外消旋混合物藉由對掌性SFC來純化，其使用ChiralCel OJ-3管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑)，使用12% 甲醇/CO 2移動相進行5分鐘(流速= 10 mL/min，管柱溫度= 35℃)。此等條件產生2種如下文所描述之鏡像異構產物：
濃縮峰1，得到呈黏稠棕色油狀之17-胺基-6-羥基-10,13-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,10,13,18-五氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-酮(鏡像異構物1) (鹽酸鹽) (1.8 mg，17%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.74 - 7.66 (m, 1H), 6.43 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.01 (ddd, J =13.5, 10.0, 4.3 Hz, 2H), 3.73 (t, J =4.4 Hz, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.78 (d, J =4.1 Hz, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.59 (d, J =6.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值468.13446，實驗值469.09 (M+1) +；滯留時間：1.5分鐘(LC方法A)。
濃縮峰2，得到呈黏稠棕色油狀之17-胺基-6-羥基-10,13-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,10,13,18-五氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-酮(鏡像異構物2)    (鹽酸鹽) (2.3 mg，21%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.69 (d, J =2.7 Hz, 1H), 6.43 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.02 (dq, J =10.1, 6.1, 5.4 Hz, 2H), 3.71 (d, J =10.2 Hz, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.80 (d, J =8.0 Hz, 2H), 2.63 (d, J =6.9 Hz, 3H), 2.58 (d, J =9.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值468.13446，實驗值469.2 (M+1) +；滯留時間：1.5分鐘(LC方法A)。 實例 26 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -6- 甲基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 45)
Figure 02_image2399
步驟 1 ： N -[(12 R)-6- 羥基 -6- 甲基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2401
將 N-[(12 R)-6-側氧基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(30 mg，0.06055 mmol)於THF (605.4 µL)中之溶液冷卻至-78℃，接著在氮氣氛圍下逐滴添加MeMgCl (60.53 µL，3 M，0.1816 mmol)，且攪拌所得混合物30 min。用1 M HCl淬滅反應物且接著用乙酸乙酯(2 × 30 mL)萃取。合併有機層且用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-6-甲基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(20 mg，65%)。ESI-MS m/z計算值511.24063，實驗值512.2 (M+1) +；滯留時間：0.82分鐘(LC方法R)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -6- 甲基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 45)
Figure 02_image2403
向 N-[(12 R)-6-羥基-6-甲基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(20 mg，0.0391 mmol)於DCM (342.4 µL)中之溶液中添加TFA (150.3 µL，1.951 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物2 h。濃縮反應物，接著溶解於DCM中，用飽和NaHCO 3溶液洗滌，且濃縮有機層，得到黃色固體。此固體藉由正相SFC方法來純化，其使用ChiralPak IG管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑)，使用40%甲醇(+ 20 mM NH 3)/CO 2移動相進行5分鐘(流速= 10 mL/min，管柱溫度= 35℃)，得到呈黃色固體狀且呈溶離之第二鏡像異構物之(12 R)-20-胺基-6-甲基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (1.6 mg，10%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.47 (s, 1H), 4.06 (q, J =8.6 Hz, 1H), 3.68 (d, J =8.9 Hz, 1H), 3.44 (t, J =9.2 Hz, 1H), 2.64 - 2.50 (m, 1H), 2.23 (ddd, J =14.5, 10.6, 3.5 Hz, 2H), 2.02 (s, 2H), 1.90 (ddd, J =14.4, 10.3, 6.8 Hz, 2H), 1.81 (s, 3H), 1.73 - 1.62 (m, 3H), 1.62 - 1.43 (m, 4H) ppm. 在質子NMR中未觀測到兩個可交換NH 2質子及一個可交換OH質子。ESI-MS m/z計算值411.1882，實驗值412.2 (M+1) +；滯留時間：1.95分鐘(LC方法A)。 實例 27 ：製備 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ] 乙酸乙酯 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 46) 及 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ] 乙酸乙酯 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 47)
Figure 02_image2405
步驟 1 ： 2-[[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]- 丁 -3- 烯基 - 胺基 ] 乙酸乙酯及 2-[[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三級丁氧基羰基胺基 )-3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]- 丁 -3- 烯基 - 胺基 ] 乙酸乙酯
Figure 02_image2407
在250 mL密封容器中，將2-(丁-3-烯基胺基)乙酸乙酯(1 g，6.361 mmol)、DIEA (1.5 mL，8.612 mmol)及 N-[2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(860 mg，1.144 mmol)合併於乙腈(25 mL)中，且在90℃下加熱混合物48小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-丁-3-烯基-胺基]乙酸乙酯(245 mg，26%)。ESI-MS m/z計算值827.3329，實驗值828.2 (M+1) +；滯留時間：1.88分鐘(LC方法M)。
亦自矽膠管柱分離出單-boc產物2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三級丁氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-丁-3-烯基-胺基]乙酸乙酯(116 mg，14%)。ESI-MS m/z計算值727.28046，實驗值728.2 (M+1) +；滯留時間：2.09分鐘(LC方法M)。 步驟 2 ： 2-[6- 苯甲氧基 -17-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -13- 基 ] 乙酸乙酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2409
在500 mL圓底3頸燒瓶中，在氮氣氛圍下將Zhan催化劑-1B (110 mg，0.1499 mmol)於DCE (250 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液加熱至50℃。接著，經由注射器逐滴添加2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-丁-3-烯基-胺基]乙酸乙酯(355 mg，0.4288 mmol)及2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三級丁氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-丁-3-烯基-胺基]乙酸乙酯(156 mg，0.2144 mmol)於DCE (30 mL)中之溶液。在75℃下加熱所得混合物2 h。接著將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。粗材料藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到2-[6-苯甲氧基-17-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-13-基]乙酸乙酯( E/Z混合物) (314 mg，92%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.39 - 7.25 (m, 5H), 5.61 (q, J =8.1 Hz, 1H), 5.41 (q, J =8.5 Hz, 1H), 4.76 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.69 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.13 (q, J =7.1 Hz, 2H), 3.60 (d, J =11.8 Hz, 1H), 3.49 (t, J =12.7 Hz, 1H), 2.71 - 2.52 (m, 3H), 2.43 - 2.34 (m, 1H), 2.33 - 2.23 (m, 1H), 1.33 (s, 9H), 1.28 (s, 9H), 1.26 - 1.21 (m, 1H), 1.18 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值799.3016，實驗值800.2 (M+1) +；滯留時間：1.69分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： 2-[17-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ] 乙酸乙酯
Figure 02_image2411
2-[6-苯甲氧基-17-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-13-基]乙酸乙酯( E/Z混合物) (310 mg，0.3876 mmol)於AcOH (5 mL)及乙酸乙酯(5 mL)中之溶液用氮氣吹掃。接著添加Pd/C (64 mg，10% w/w，0.06014 mmol)。混合物經氮氣脫氣5分鐘，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物1 h。添加更多Pd/C (350 mg，10% w/w，0.3289 mmol)且再攪拌3小時。經由矽藻土塞過濾反應物，用乙腈、乙酸乙酯洗滌，且接著濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈淡黃色固體狀之2-[17-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]乙酸乙酯(228 mg，83%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.27 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 4.35 (d, J =2.8 Hz, 2H), 4.11 (q, J =7.1 Hz, 2H), 3.65 - 3.49 (m, 2H), 2.23 - 2.08 (m, 2H), 1.85 (td, J =10.2, 9.2, 4.2 Hz, 1H), 1.73 - 1.55 (m, 3H), 1.55 - 1.38 (m, 4H), 1.35 (s, 9H), 1.27 (s, 9H), 1.16 (d, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值711.27026，實驗值712.2 (M+1) +；滯留時間：1.16分鐘(LC方法M)。 步驟 4 ： 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ] 乙酸乙酯
Figure 02_image2413
向2-[17-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]乙酸乙酯(56 mg，0.07869 mmol)於DCM (1.5 mL)中之溶液中添加TFA (250 µL，3.245 mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。將混合物蒸發至乾燥，接著用乙醚稀釋且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(4公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之2-[17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]乙酸乙酯(26.8 mg，67%) ppm。ESI-MS m/z計算值511.16544，實驗值512.2 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法A)。 步驟 5 ： 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ] 乙酸乙酯 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 46) 及 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ] 乙酸乙酯 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 47)
Figure 02_image2415
外消旋2-[17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]乙酸乙酯(26.8 mg，0.05240 mmol)藉由對掌性SFC純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 x 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用14% MeOH (+ 20 mM NH 3)/86% CO 2溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相製備型HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之2-[17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]乙酸乙酯(鏡像異構物1) (11.4 mg，84%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.69 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.13 - 4.03 (m, 4H), 3.42 - 3.32 (m, 2H), 2.14 (t, J =7.3 Hz, 2H), 1.91 (dt, J =12.8, 6.1 Hz, 1H), 1.59 (ddd, J =25.0, 17.2, 9.1 Hz, 4H), 1.47 (q, J =7.6, 6.1 Hz, 1H), 1.36 (q, J =8.2, 7.0 Hz, 2H), 1.14 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm.ESI-MS m/z計算值511.16544，實驗值512.1 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相製備型HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之2-[17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]乙酸乙酯(鏡像異構物2) (11.1 mg，82%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.13 - 4.03 (m, 4H), 3.44 - 3.32 (m, 2H), 2.14 (t, J =7.4 Hz, 2H), 1.98 - 1.86 (m, 1H), 1.59 (tt, J =16.8, 8.1 Hz, 4H), 1.50 - 1.43 (m, 1H), 1.43 - 1.32 (m, 2H), 1.14 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值511.16544，實驗值512.1 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法A)。 實例 28 ：製備 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ]- N- 甲基 - 乙醯胺 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 48) 及 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ]- N- 甲基 - 乙醯胺 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 49)
Figure 02_image2417
步驟 1 ： 2-[17-( 三級 丁氧基羰基胺基 )-6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -13- 基 ] 乙酸
Figure 02_image2419
向2-[17-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]乙酸乙酯(72 mg，0.1012 mmol)於THF (900 µL)中之溶液中添加甲醇(900 µL)及水(630 µL)，隨後添加氫氧化鋰(11.3 mg，0.4719 mmol)。在65℃加熱下攪拌混合物4 h。減壓移除THF及甲醇，且接著添加10 mL HCl水溶液(10%)酸化至pH ~ 4，且產物用乙酸乙酯(2 × 5 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(1 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(4公克管柱)純化，得到殘餘物，將該殘餘物置放在真空下2小時，得到呈黃色固體狀之2-[17-(三級丁氧基羰基胺基)-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-13-基]乙酸(51 mg，86%)。ESI-MS m/z計算值583.1865，實驗值584.2 (M+1) +；滯留時間：1.41分鐘(LC方法J)。 步驟 2 ： N- [6- 羥基 -13-[2-( 甲基胺基 )-2- 側氧基 - 乙基 ]-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2421
向在室溫下之2-[17-(三級丁氧基羰基胺基)-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-13-基]乙酸(51 mg，0.08741 mmol)於NMP (1 mL)中之溶液中添加甲胺(鹽酸鹽) (15 mg，0.2222 mmol)及DIEA (125 µL，0.7176 mmol)，隨後添加HATU (42 mg，0.1105 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。有機材料用乙酸乙酯(3 × 5 mL)萃取。分離有機物，經硫酸鈉乾燥且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷(化合物在60%乙酸乙酯處溶離)之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到黃色殘餘物，將該黃色殘餘物置於真空下2小時，得到呈淡黃色固體狀之 N-[6-羥基-13-[2-(甲基胺基)-2-側氧基-乙基]-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(43.7 mg，84%)。ESI-MS m/z計算值596.2182，實驗值597.2 (M+1) +；滯留時間：1.31分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ]- N- 甲基 - 乙醯胺
Figure 02_image2423
將 N-[6-羥基-13-[2-(甲基胺基)-2-側氧基-乙基]-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(43 mg，0.07208 mmol)溶解於二氯甲烷(2 mL)中，且向混合物中添加TFA (150 µL，1.947 mmol)，且在室溫下攪拌混合物。在1小時之後，反應完成。將混合物蒸發至乾燥，接著用乙醚稀釋且再濃縮。粗材料藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯(化合物在85%乙酸乙酯處溶離)之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到黃色殘餘物，接著將該黃色殘餘物置於真空下2小時，得到呈黃色固體狀之2-[17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]- N-甲基-乙醯胺(30.6 mg，86%)。ESI-MS m/z計算值496.16577，實驗值497.2 (M+1) +；滯留時間：1.46分鐘(LC方法A)。 步驟 4 ： 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ]- N- 甲基 - 乙醯胺 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 48) 及 2-[17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -13- 基 ]- N- 甲基 - 乙醯胺 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 49)
Figure 02_image2425
使外消旋2-[17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]- N-甲基-乙醯胺(30.6 mg，0.06164 mmol)經受正相SFC方法，其使用ChiralPak IG管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑)，使用22% 甲醇(20 mM NH 3)/CO 2移動相進行5分鐘(流速= 5 mL/min，管柱溫度= 35℃)。此等條件產生2種如下文所描述之鏡像異構產物：
溶離之第一鏡像異構物獲得為呈黃色固體狀之2-[17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]- N-甲基-乙醯胺(鏡像異構物1) (10.3 mg，67%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.73 (d, J =4.9 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 3.78 - 3.67 (m, 2H), 3.23 (ddd, J =15.2, 11.4, 3.9 Hz, 2H), 2.62 (d, J =4.5 Hz, 3H), 2.18 - 2.10 (m, 2H), 1.91 (d, J =13.3 Hz, 1H), 1.58 (dq, J =19.3, 10.5, 9.3 Hz, 4H), 1.48 (d, J =7.1 Hz, 1H), 1.37 (s, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值496.16577，實驗值497.1 (M+1) +；滯留時間：1.45分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物獲得為呈黃色固體狀之2-[17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-基]- N-甲基-乙醯胺(鏡像異構物2) (11.2 mg，72%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.73 (d, J =4.9 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 3.78 - 3.67 (m, 2H), 3.23 (ddt, J =19.5, 12.8, 5.8 Hz, 2H), 2.62 (d, J =4.5 Hz, 3H), 2.14 (q, J =5.8, 4.9 Hz, 2H), 1.90 (s, 1H), 1.58 (dq, J =28.5, 11.4, 10.0 Hz, 4H), 1.48 (d, J =6.9 Hz, 1H), 1.37 (s, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值496.16577，實驗值497.1 (M+1) +；滯留時間：1.45分鐘(LC方法A)。 實例 29 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 50) 及 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 51)
Figure 02_image2427
步驟 1 ： 5- 溴 -1- 氧離子基 - 吡啶 -1- 鎓 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2429
在0℃下，將三氟乙酸酐(41.869 g，28.1 mL，199.35 mmol)逐滴添加至含5-溴吡啶-2-甲酸甲酯(21.5 g，99.522 mmol)及過氧化脲(20 g，212.61 mmol)之乙腈(140 mL)中，同時將溫度保持在低於10℃。使混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。將混合物倒入0.5 N鹽酸水溶液(200 mL)中且用DCM (2 × 100 mL)萃取。將有機相合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色固體狀之5-溴-1-氧離子基-吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯(26.2 g，98%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.65 (s, 1H), 7.85 - 7.69 (m, 2H), 4.00 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值230.9531，實驗值232.0 (M+1) +；滯留時間：1.05分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 5- 溴 -6- 羥基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2431
在0℃下，歷經1小時將三氟乙酸酐(298.00 g，200 mL，1.4188 mol)逐滴添加至5-溴-1-氧離子基-吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯(40 g，151.70 mmol)於DMF (240 mL)中之混合物中(溫度應保持在低於10℃)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。接著，減壓濃縮混合物以移除過量三氟乙酸。歷經30分鐘，將殘餘DMF溶液逐漸倒入在0℃下冷卻之攪拌水(1.5 L)中。固體沈澱藉由過濾收集且接著用水(400 mL)洗滌。固體藉由凍乾來乾燥，得到呈白色固體狀之5-溴-6-羥基-吡啶-2-甲酸甲酯(27.2 g，77%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.27 (br. s., 1H), 7.89 (d, J =7.3 Hz, 1H), 6.88 (d, J =7.3 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值230.9531，實驗值232.0 (M+1) +；滯留時間：1.31分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 5- 溴 -6- 羥基 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2433
向在冰浴中冷卻之5-溴-6-羥基-吡啶-2-甲酸甲酯(10.9 g，46.976 mmol)於硫酸(65 mL)中之溶液中逐滴添加硝酸(4.2280 g，4 mL，46.968 mmol)。在5 min之後，移除冰浴，且在30℃下攪拌反應混合物隔夜。添加硝酸(528.5 mg，0.5 mL，5.871 mmol)，且在30℃下攪拌反應混合物隔夜。將反應混合物冷卻且添加至冰冷水(500 mL)中。所得沈澱藉由過濾收集，用額外水沖洗且乾燥，得到呈黃色固體狀之5-溴-6-羥基-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(8.15 g，58%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.29 - 9.81 (m, 1H), 8.46 (s, 1H), 4.07 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值275.93817，實驗值277.0 (M+1) +；滯留時間：1.55分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 5- 溴 -6- 氯 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2435
在170℃下加熱5-溴-6-羥基-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(7.5 g，26.802 mmol)及二氯磷酸苯酯(32.476 g，23 mL，153.93 mmol)之混合物90分鐘。冷卻至室溫後，混合物用乙酸乙酯(350 mL)稀釋且用鹽水(350 mL)洗滌。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(330 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之5-溴-6-氯-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(7 g，87%)。ESI-MS m/z計算值293.9043，實驗值294.9 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-5- 溴 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2437
向5-溴-6-氯-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(25 g，84.61 mmol)及(2 S)-2-烯丙基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (31 g，107.37 mmol)於乙腈(250 mL)中之溶液中添加DIEA (75.684 g，102 mL，585.59 mmol)，且使混合物回流3 h。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋且用鹽水(2 × 200 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。粗產物藉由用0%至35% EtOAc/己烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到呈棕色油狀之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-5-溴-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(22.01 g，69%)。ESI-MS m/z計算值369.0324，實驗值370.0 (M+1) +；滯留時間：3.9分鐘(LC方法G)。 步驟 6 ： 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-5- 溴 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2439
向6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-5-溴-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(1.4 g，3.5511 mmol)於四氫呋喃(7 mL)中之溶液中添加LiOH (400 mg，9.5321 mmol)於水(7 mL)中之溶液。在50℃下攪拌所得混合物4小時。蒸發溶劑，接著用H 2O (50 mL)稀釋，且用1 N HCl (pH 3)酸化。混合物用EtOAc (3 × 50 mL)萃取，且經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色油狀之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-5-溴-3-硝基-吡啶-2-甲酸(1.34 g，100%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.47 (s, 1H), 6.69 - 6.39 (m, 1H), 5.88 - 5.66 (m, 1H), 5.20 - 5.02 (m, 2H), 4.78 - 4.62 (m, 1H) , 4.09 - 3.98 (m, 1H), 3.93 - 3.81 (m, 1H), 2.65 - 2.52 (m, 1H), 2.33 - 2.18 (m, 1H), 2.14 - 2.05 (m, 2H), 1.95 - 1.82 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值355.01675，實驗值356.0 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]- N ' -[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-5- 溴 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2441
向在室溫下之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-5-溴-3-硝基-吡啶-2-甲酸(5.41 g，14.232 mmol)於CH 2Cl 2(90 mL)中之溶液中添加乙二醯氯(2.5463 g，1.75 mL，20.061 mmol)，隨後逐滴添加DMF (1.3 g，1.3771 mL，17.785 mmol)。在室溫下攪拌混合物1 h，且歷經15 min逐滴添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (5.82 g，17.181 mmol)及DIPEA (2.8938 g，3.9 mL，22.390 mmol)於CH 2Cl 2(60 mL)中之溶液。在室溫下攪拌所得混合物20 min，且添加更多DIPEA (222.60 mg，0.3 mL，1.7223 mmol)。在室溫下攪拌混合物10 min，冷卻至0℃，且添加5% NaHCO 3水溶液(200 mL)。分離兩層，且水層用CH 2Cl 2(2 × 100 mL)萃取。經合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30% EtOAc/庚烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]- N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-5-溴-3-硝基-吡啶-2-碳醯肼(8.56 g，94%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 9.28 (d, J =6.2 Hz, 1H), 9.03 (t, J =6.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.59 - 7.28 (m, 5H), 5.92 - 5.63 (m, 2H), 5.19 - 4.94 (m, 4H), 4.89 - 4.77 (m, 1H), 4.75 - 4.68 (m, 1H), 4.66 - 4.51 (m, 1H), 4.09 - 3.93 (m, 1H), 3.85 - 3.71 (m, 1H), 2.62 - 2.35 (m, 2H), 2.32 - 1.95 (m, 6H), 1.91 - 1.73 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -73.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值639.13043，實驗值640.2 (M+1) +；滯留時間：2.34分鐘(LC方法E)。 步驟 8 ： 2-[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-5- 溴 -3- 硝基 -2- 吡啶基 ]-5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑
Figure 02_image2443
向在50℃下之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]- N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-5-溴-3-硝基-吡啶-2-碳醯肼(13.3 g，20.767 mmol)及二異丙基乙胺(8.0136 g，10.8 mL，62.004 mmol)於乙腈(340 mL)中之溶液中逐份添加 對-甲苯磺醯氯(4.15 g，21.768 mmol)。在70℃下攪拌混合物1.5小時且冷卻至環境溫度且濃縮。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(125 mL)中，用5% NaHCO 3水溶液(25 mL)、水(2 × 25 mL)、鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且過濾。揮發物藉由減壓蒸發移除，且殘餘物藉由使用梯度為0%至15%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(220 g管柱純化，得到呈紅色油狀之2-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-5-溴-3-硝基-2-吡啶基]-5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑(11.54 g，89%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.56 (s, 1H), 7.49 - 7.27 (m, 5H), 5.91 - 5.58 (m, 2H), 5.23 - 4.89 (m, 4H), 4.79 (dd, J =10.6, 4.1 Hz, 1H), 4.72 - 4.54 (m, 2H), 4.13 - 3.95 (m, 1H), 3.94 - 3.76 (m, 1H), 2.69 - 1.62 (m, 10H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -73.13 (br. s., 3F), -73.26 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值621.1199，實驗值622.2 (M+1) +；滯留時間：2.69分鐘(LC方法E)。 步驟 9 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18- 溴 -20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2445
在1.0 L烘箱乾燥的圓底燒瓶中，在氮氣氛圍下，將2-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-5-溴-3-硝基-2-吡啶基]-5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑(1.9 g，2.7259 mmol)於二氯乙烷(475 mL)中之脫氣溶液加熱至50℃。接著，歷經15分鐘，分兩份添加Zhan催化劑-1B (300 mg，0.4089 mmol)。在70℃下加熱所得混合物3小時。將混合物冷卻且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (1.2 g，73%)。ESI-MS m/z計算值593.08856，實驗值594.1 (M+1) +；滯留時間：2.48分鐘(LC方法E)。 步驟 10 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18- 甲基 -20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2447
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (100 mg，0.1682 mmol)於二噁烷(2 mL)中之溶液中添加甲基硼酸(30 mg，0.5012 mmol)、乙酸鈀(II)(5 mg，0.0223 mmol)、Xantphos (30 mg，0.0518 mmol)及碳酸鉀(70 mg，0.5065 mmol)，且反應混合物用氮氣吹掃5分鐘。在100℃下攪拌反應混合物16 h，接著經由矽藻土墊過濾，用EtOAc (3 × 10 mL)洗滌。減壓濃縮濾液且藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-甲基-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (62 mg，70%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.09 (s, 1H), 7.42 - 7.28 (m, 5H), 5.64 - 5.43 (m, 2H), 5.24 (d, J =10.9 Hz, 1H), 5.02 - 4.91 (m, 1H), 4.10 - 3.96 (m, 1H), 3.95 - 3.85 (m, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 3.44 - 3.25 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.45 - 2.25 (m, 2H), 2.23 - 2.06 (m, 4H), 1.92 - 1.73 (m, 2H), 1.54 - 1.44 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -73.06 (s, 3F), -73.53 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值529.19366，實驗值530.2 (M+1) +；滯留時間：2.53分鐘(LC方法E)。 步驟 11 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 甲基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 50) 及 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 51)
Figure 02_image2449
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-甲基-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (62 mg，0.1171 mmol)於甲醇(7 mL)中之溶液中添加5%鈀/碳(37 mg，0.0174 mmol)。向所得混合物鼓泡通入氫氣5 min，且在氫氣球下在室溫下攪拌4小時。添加更多5%鈀/碳(15 mg，0.007 mmol)，且在氫氣氛圍下再攪拌混合物兩小時。經由矽藻土墊過濾混合物，用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-18-甲基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (8 mg，15%)。此材料藉由對掌性SFC進一步純化，其使用Chiral Technologies銷售之OD-H管柱(250 × 21.2 mm，5μm粒徑)，且用15%至35% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離14.5分鐘，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-甲基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (3.7 mg，56%)。ESI-MS m/z計算值411.1882，實驗值412.0 (M+1) +；滯留時間：1.99分鐘(LC方法D)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-甲基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (8.9 mg，75%)。ESI-MS m/z計算值411.1882，實驗值412.0 (M+1) +；滯留時間：1.90分鐘(LC方法D)。 實例 30 ：製備 17- 胺基 -13- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 52) 及 17- 胺基 -13- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 53)
Figure 02_image2451
步驟 1 ： N - 異丙基丁 -3- 烯 -1- 胺
Figure 02_image2453
在暗處在42℃下在油浴中加熱丙-2-胺(44.032 g，64 mL，744.91 mmol)及4-溴丁-1-烯(10 g，74.073 mmol)之混合物15.5小時。蒸餾出大部分過量異丙胺，且將所得固體殘餘物溶解於水(20 mL)中。逐份添加氫氧化鈉(3.05 g，76.256 mmol)，接著用乙醚(2 × 75 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮(浴溫度≤ 25℃，壓力≤ 250托)，得到呈淡黃色液體狀之 N-異丙基丁-3-烯-1-胺(7.99 g，83%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 5.78 (ddt, J =17.1, 10.2, 6.9 Hz, 1H), 5.16 - 4.99 (m, 2H), 4.85 (br. s., 1H), 2.86 - 2.72 (m, 1H), 2.66 (t, J =6.9 Hz, 2H), 2.25 (q, J =6.9 Hz, 2H), 1.05 (d, J =6.2 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值113.12045，實驗值114.3 (M+1) +；滯留時間：0.34分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 6-[ 丁 -3- 烯基 ( 異丙基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2455
向6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2 g，7.0280 mmol)及 N-異丙基丁-3-烯-1-胺(1.9 g，10.406 mmol)於乙腈(20 mL)中之溶液中添加二異丙基乙胺(2.7454 g，3.7 mL，21.242 mmol)，且使混合物回流1小時。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(75 mL)稀釋且用鹽水(2 × 50 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%二氯甲烷/庚烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-[丁-3-烯基(異丙基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.85 g，71%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.61 (s, 1H), 5.75 (dtd, J =14.6, 9.9, 7.0 Hz, 1H), 5.15 - 4.94 (m, 2H), 4.29 (m, J =6.5 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.56 (dd, J =8.2, 6.8 Hz, 2H), 2.31 (q, J =7.1 Hz, 2H), 1.27 (d, J =6.5 Hz, 6H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -58.38 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值361.12494，實驗值362.1 (M+1) +；滯留時間：3.58分鐘(LC方法C)。 步驟 3 ： 6-[ 丁 -3- 烯基 ( 異丙基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2457
向6-[丁-3-烯基(異丙基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.75 g，4.843 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加MeOH (20 mL)及水(16.5 mL)，隨後添加氫氧化鋰(500 mg，20.88 mmol)。在60℃下攪拌混合物2 h。減壓移除THF及甲醇，且添加10 mL HCl (10%)以酸化至pH ~ 4，且產物用EtOAc (2 × 50 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(5 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-[丁-3-烯基(異丙基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.13 g，67%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.25 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 5.76 (ddt, J =18.9, 9.5, 6.9 Hz, 1H), 5.07 - 4.93 (m, 2H), 4.15 (h, J =6.6 Hz, 1H), 3.55 (dd, J =8.3, 6.3 Hz, 2H), 2.26 (q, J =7.2 Hz, 2H), 1.23 (d, J =6.5 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值347.10928，實驗值348.2 (M+1) +；滯留時間：1.75分鐘(LC方法A)。 步驟 4 ： N ' -[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-6-[ 丁 -3- 烯基 ( 異丙基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2459
向在0℃下之6-[丁-3-烯基(異丙基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.13 g，3.254 mmol)於NMP (20 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(1.1 g，3.639 mmol)及DIEA (2.75 mL，15.79 mmol)，隨後添加HATU (1.35 g，3.55 mmol)。使反應混合物升溫至室溫，且攪拌18 h。反應物用乙酸乙酯稀釋，且用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之 N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-[丁-3-烯基(異丙基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.65 g，80%)。ESI-MS m/z計算值631.22296，實驗值632.2 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法J)。 步驟 5 ： 6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N- 丁 -3- 烯基 - N- 異丙基 -5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image2461
在50℃下加熱 N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-[丁-3-烯基(異丙基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(800 mg，1.267 mmol)及DIEA (675 µL，3.875 mmol)於乙腈(24 mL)中之溶液，接著一次性添加 對-甲苯磺醯氯(340 mg，1.783 mmol)且在70℃下加熱1小時。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和水溶液(50 mL)淬滅，且攪拌15分鐘。有機材料用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-丁-3-烯基- N-異丙基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(686 mg，88%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.79 (s, 1H), 7.40 - 7.30 (m, 5H), 5.85 (ddt, J =16.8, 10.3, 6.4 Hz, 1H), 5.76 - 5.66 (m, 1H), 5.10 (dq, J =17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.03 - 4.92 (m, 3H), 4.76 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.61 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.18 (h, J =6.5 Hz, 1H), 3.56 (dd, J =8.4, 6.2 Hz, 2H), 2.60 - 2.51 (m, 2H), 2.27 (q, J =7.1 Hz, 3H), 2.24 - 2.16 (m, 1H), 1.25 (d, J =6.5 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值613.2124，實驗值614.2 (M+1) +；滯留時間：1.71分鐘(LC方法M)。 步驟 6 ：苯甲氧基 -13- 異丙基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2463
在1 L圓底3頸燒瓶中，在50℃下在氮氣氛圍下加熱Zhan催化劑-1B (205 mg，0.2794 mmol)於DCE (400 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液。接著，經由注射器逐滴添加6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-丁-3-烯基- N-異丙基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(682 mg，1.112 mmol)於DCE (40 mL)中之溶液。在75℃下加熱所得混合物3小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-苯甲氧基-13-異丙基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (550 mg，84%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.77 (d, J =14.6 Hz, 1H), 7.46 - 7.26 (m, 5H), 5.65 - 5.57 (m, 1H), 5.57 - 5.31 (m, 1H), 4.88 - 4.79 (m, 2H), 4.13 (tt, J =13.0, 6.5 Hz, 1H), 3.55 (t, J =6.7 Hz, 1H), 3.43 (t, J =8.5 Hz, 1H), 2.39 (t, J =9.5 Hz, 2H), 2.33 (d, J =1.9 Hz, 1H), 2.22 (q, J =9.4, 6.5 Hz, 2H), 2.09 (d, J =16.2 Hz, 1H), 1.28 (q, J =7.0 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值585.1811，實驗值586.2 (M+1) +；滯留時間：1.46分鐘(LC方法M)。 步驟 7 ： 17- 胺基 -13- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2465
6-苯甲氧基-13-異丙基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (550 mg，0.9394 mmol)於AcOH (8.5 mL)及乙酸乙酯(8.5 mL)中之溶液用氮氣吹掃，且添加Pd/C (155 mg，10% w/w，0.1456 mmol)。混合物經氮氣脫氣5分鐘，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物1 h。添加更多Pd/C (850 mg，10% w/w，0.7987 mmol)，且再攪拌3小時。經由矽藻土塞過濾反應物，用乙腈及乙酸乙酯洗滌，且濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-異丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(349 mg，79%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.34 (d, J =6.3 Hz, 2H), 3.64 (p, J =6.6 Hz, 1H), 3.17 (t, J =11.3 Hz, 1H), 3.04 (d, J =11.8 Hz, 1H), 2.12 (t, J =7.2 Hz, 2H), 1.71 - 1.63 (m, 1H), 1.59 (d, J =12.5 Hz, 1H), 1.54 - 1.37 (m, 6H), 1.09 (dd, J =9.0, 6.6 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值467.1756，實驗值468.2 (M+1) +；滯留時間：2.16分鐘(LC方法A)。 步驟 8 ： 17- 胺基 -13- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 52) 及 17- 胺基 -13- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 53)
Figure 02_image2467
外消旋17-胺基-13-異丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(349 mg，0.7467 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用8% MeOH (+ 20 mM NH 3)/92% CO 2溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-13-異丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (129.0 mg，73%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.35 (s, 2H), 3.65 (p, J =6.6 Hz, 1H), 3.17 (t, J =10.5 Hz, 1H), 3.11 – 3.01 (m, 1H), 2.12 (t, J =7.1 Hz, 2H), 1.66 (d, J =11.2 Hz, 1H), 1.60 – 1.52 (m, 1H), 1.52 – 1.28 (m, 6H), 1.09 (dd, J =8.8, 6.6 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值467.1756，實驗值468.2 (M+1) +；滯留時間：2.16分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-13-異丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (132.6 mg，75%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.34 (d, J =6.3 Hz, 2H), 3.64 (p, J =6.6 Hz, 1H), 3.20 – 3.12 (m, 1H), 3.04 (d, J =11.1 Hz, 1H), 2.12 (t, J =7.0 Hz, 2H), 1.67 – 1.61 (m, 1H), 1.61 – 1.55 (m, 1H), 1.45 (qd, J =17.8, 15.8, 8.8 Hz, 6H), 1.09 (dd, J =9.0, 6.6 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值467.1756，實驗值468.2 (M+1) +；滯留時間：2.16分鐘(LC方法A)。 步驟 9 ：結晶化合物 52 形式 A ( 純 ) 之固體形式表徵A.     X射線粉末繞射
藉由步驟8產生之結晶化合物52形式A (純)之XRPD繞射圖係使用通用X射線粉末繞射(XRPD)方法獲得。結晶化合物52形式A (純)之XRPD繞射圖提供於 圖 9中，且XRPD資料概述於下 表 5 中。 表 5 ：結晶化合物 52 形式 A ( 純 ) 之 XRPD 信號
XRPD峰編號 角度(度2θ ± 0.2) 強度%
1 6.7649 77.6
2 12.7426 30.37
3 15.1429 11.8
4 15.467 12
5 17.2558 100
6 18.6449 74.23
7 19.1863 15.25
8 19.7446 10.42
9 20.3974 10.55
10 20.5788 16.53
11 21.4448 27.71
12 27.2406 14.77
B.     熱重分析(TGA)
結晶化合物52形式A (純)之TGA曲線提供於 圖 10中。TGA曲線顯示直至213.9℃無重量損失，其中以10.00℃/min上升至350.00℃。 C.     差示掃描熱量測定分析
DSC資料係在以10.00℃/min上升至220.00℃之情況下收集。結晶化合物52形式A (純)之DSC熱分析圖提供於 圖 11中。熱分析圖顯示191.94℃之Tm起點，其中Tm峰在194.42℃處，78.59 J/g。 實例 31 ：製備 (12 R)-21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 54) 及 (12 R)-21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 55)
Figure 02_image2469
步驟 1 ： [(3 R)-4-[(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ] 嗎啉 -3- 基 ] 甲醇
Figure 02_image2471
向[(3 R)-嗎啉-3-基]甲醇(鹽酸鹽) (4.4 g，28.645 mmol)於CH 2Cl 2(400 mL)中之懸浮液中添加Et 3N (5.8080 g，8 mL，57.397 mmol)及4-甲氧基苯甲醛(4.1 g，30.114 mmol)。在室溫下攪拌混合物30 min，直至其變成澄清溶液。接著，添加乙酸(2.1 g，1.9886 mL，34.970 mmol)及三乙醯氧基硼氫化鈉(18.2 g，85.873 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。將混合物冷卻至0℃，且添加KHCO 3(57 g)於水(200 mL)中之溶液。分離兩層，且水層用CH 2Cl 2(2 × 200 mL)萃取。經合併之有機層用5% NaHCO 3水溶液(50 mL)洗滌，經Na 2SO4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至5% MeOH/二氯甲烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈淡黃色油狀之[(3 R)-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]嗎啉-3-基]甲醇(6.45 g，95%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.25 - 7.16 (m, 2H), 6.93 - 6.80 (m, 2H), 4.06 (d, J =12.9 Hz, 1H), 3.97 (dd, J =11.4, 4.4 Hz, 1H), 3.88 - 3.77 (m, 4H), 3.77 - 3.70 (m, 1H), 3.65 (dd, J =11.4, 9.4 Hz, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 2H), 3.20 (d, J =13.2 Hz, 1H), 2.72 (dt, J =11.9, 2.9 Hz, 1H), 2.63 - 2.46 (m, 2H), 2.31 (ddd, J =12.0, 10.0, 3.2 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值237.13649，實驗值238.2 (M+1) +；滯留時間：0.69分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (3 S)-3-( 碘甲基 )-4-[(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ] 嗎啉
Figure 02_image2473
向[(3 R)-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]嗎啉-3-基]甲醇(6.45 g，27.181 mmol)於CH 2Cl 2(250 mL)中之溶液中添加三苯基膦(8.12 g，30.959 mmol)及咪唑(2.78 g，40.836 mmol)。在0℃下攪拌混合物5 min。逐份添加碘(8.06 g，31.756 mmol)，且在0℃下攪拌混合物1 h。濃縮混合物至約100 mL且藉由使用梯度為0%至10% MeOH/乙酸乙酯之急驟層析(120 g管柱)純化，得到呈淡黃色油狀之(3 S)-3-(碘甲基)-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]嗎啉(8.76 g，93%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.30 - 7.24 (m, 2H), 6.90 - 6.81 (m, 2H), 3.85 (d, J =12.9 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.77 - 3.72 (m, 2H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.51 - 3.41 (m, 1H), 3.38 - 3.29 (m, 1H), 3.24 (d, J =12.9 Hz, 1H), 2.70 - 2.58 (m, 1H), 2.42 - 2.21 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值347.0382，實驗值348.1 (M+1) +；滯留時間：1.43分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： (3 R)-3- 烯丙基 -4-[(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ] 嗎啉
Figure 02_image2475
在氮氣下，將碘化銅(I) (404 mg，2.1213 mmol)懸浮於THF (3 mL)中，且在攪拌下冷卻至-40℃。歷經10分鐘緩慢添加含溴(乙烯基)鎂之THF (4 mL，1 M，4 mmol)，且進一步攪拌黏稠懸浮液30 min，接著升溫至-10℃。將黑色懸浮液冷卻至-40℃，且歷經20 min逐滴添加(3 S)-3-(碘甲基)-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]嗎啉(460 mg，1.3249 mmol)於THF (1.5 mL)中之溶液。額外攪拌黏稠懸浮液1 h，同時減緩升溫至15℃。添加EtOAc (10 mL)及飽和NH 4Cl (20 mL)。在室溫下攪拌混合物5 min。接著，添加28% NH 3水溶液(15 mL)。混合物用EtOAc (3 × 30 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40% EtOAc/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈無色油狀之(3 R)-3-烯丙基-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]嗎啉(265 mg，81%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.23 (d, J =8.5 Hz, 2H), 6.85 (d, J =8.5 Hz, 2H), 5.83 (ddt, J =17.1, 10.1, 7.0 Hz, 1H), 5.18 - 5.01 (m, 2H), 4.00 (d, J =13.2 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.76 - 3.64 (m, 2H), 3.62 - 3.52 (m, 1H), 3.46 (dd, J =11.2, 7.9 Hz, 1H), 3.14 (d, J =12.9 Hz, 1H), 2.60 (dt, J =12.0, 3.4 Hz, 1H), 2.46 (td, J =7.6, 3.7 Hz, 1H), 2.41 - 2.27 (m, 2H), 2.18 (ddd, J =12.0, 8.9, 3.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值247.15723，實驗值248.2 (M+1) +；滯留時間：1.34分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： (3 R)-3- 烯丙基嗎啉
Figure 02_image2477
向(3 R)-3-烯丙基-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]嗎啉(3.25 g，13.14 mmol)於1,2-二氯乙烷(60 mL)中之溶液中添加氯甲酸1-氯乙酯(7.5525 g，5.7 mL，52.826 mmol)。在78℃下攪拌混合物18 h，冷卻至室溫且濃縮，以移除溶劑。將殘餘物溶解於MeOH (60 mL)中且在80℃下加熱1 h。濃縮混合物且自EtOAc (2 × 20 mL)共蒸發。將殘餘物懸浮於30 mL之EtOAc及庚烷之1:1混合物中，且所得沈澱藉由過濾收集且用EtOAc及庚烷之1:1混合物洗滌，得到呈白色固體狀之(3 R)-3-烯丙基嗎啉(鹽酸鹽) (1.515 g，70%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 9.41 (br. s., 2H), 5.87 - 5.69 (m, 1H), 5.23 - 5.09 (m, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.68 (td, J =11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.46 (dd, J =12.2, 10.1 Hz, 1H), 3.34 - 3.12 (m, 2H), 3.11 - 2.95 (m, 1H), 2.46 - 2.23 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值127.09972，實驗值128.2 (M+1) +；滯留時間：0.32分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： 6-[(3 R)-3- 烯丙基嗎啉 -4- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2479
向(3 R)-3-烯丙基嗎啉(鹽酸鹽) (1.51 g，9.2273 mmol)於乙腈(22 mL)中之懸浮液中添加DIPEA (3.7100 g，5 mL，28.706 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.2 g，11.245 mmol)。在80℃下攪拌混合物1 h，冷卻至環境溫度且濃縮。將殘餘物溶解於CH 2Cl 2(100 mL)中，且用KHCO 3(3.6 g)於水(50 mL)中之溶液洗滌。水層用CH 2Cl 2(50 mL)反萃取。經合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30% EtOAc/庚烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈紅色油狀之6-[(3 R)-3-烯丙基嗎啉-4-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.64 g，100%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.61 (s, 1H), 5.64 (ddt, J =17.1, 10.0, 7.3 Hz, 1H), 5.18 - 4.97 (m, 2H), 4.70 - 4.53 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.99 - 3.86 (m, 2H), 3.75 - 3.52 (m, 4H), 2.62 (t, J =7.3 Hz, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -57.41 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值375.10422，實驗值376.1 (M+1) +；滯留時間：2.12分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： 6-[(3 R)-3- 烯丙基嗎啉 -4- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2481
向在0℃下之6-[(3 R)-3-烯丙基嗎啉-4-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.6 g，9.5923 mmol)於THF (40 mL)中之溶液中添加氫氧化鈉(762 mg，19.051 mmol)於水(10 mL)中之溶液，且在室溫下攪拌混合物隔夜。將混合物冷卻至0℃，且逐滴添加HCl水溶液(1 N，18.35 mL)。濃縮混合物，且殘餘物用EtOAc (3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈紅色泡沫狀之6-[(3 R)-3-烯丙基嗎啉-4-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(3.59 g，99%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.63 (s, 1H), 6.30 (br. s., 1H), 5.66 (ddt, J =17.1, 10.0, 7.1 Hz, 1H), 5.22 - 4.99 (m, 2H), 4.67 (td, J =7.3, 1.8 Hz, 1H), 4.05 - 3.88 (m, 2H), 3.80 - 3.54 (m, 4H), 2.64 (t, J =7.3 Hz, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -57.40 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值361.08856，實驗值362.1 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： 6-[(3 R)-3- 烯丙基嗎啉 -4- 基 ]-N ' -[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2483
向在0℃下之6-[(3 R)-3-烯丙基嗎啉-4-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(3.38 g，9.3558 mmol)於CH 2Cl 2(55 mL)中之懸浮液中逐滴添加草醯氯(1.6 g，1.0997 mL，12.606 mmol)及DMF (690 mg，0.7309 mL，9.4399 mmol)。在室溫下攪拌混合物1 h，隨後歷經20 min添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (3.7 g，10.922 mmol)及DIPEA (1.71 g，2.3046 mL，13.231 mmol)於CH 2Cl 2(40 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物1 h且冷卻至0℃，且添加5% NaHCO 3水溶液(100 mL)。混合物用CH 2Cl 2(3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30% EtOAc/庚烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之6-[(3 R)-3-烯丙基嗎啉-4-基]- N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(4.9 g，81%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 9.37 - 8.82 (m, 2H), 8.54 - 8.40 (m, 1H), 7.55 - 7.28 (m, 5H), 5.93 - 5.74 (m, 1H), 5.72 - 5.54 (m, 1H), 5.20 - 4.96 (m, 4H), 4.90 - 4.66 (m, 2H), 4.58 - 4.38 (m, 1H), 4.03 - 3.83 (m, 2H), 3.79 - 3.53 (m, 4H), 2.61 (t, J =7.2 Hz, 2H), 2.49 - 2.12 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值645.2022，實驗值646.2 (M+1) +；滯留時間：2.25分鐘(LC方法E)。 步驟 8 ： (3 R)-3- 烯丙基 -4-[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 嗎啉
Figure 02_image2485
向在50℃下之6-[(3 R)-3-烯丙基嗎啉-4-基]- N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(340 mg，0.5267 mmol)及DIPEA (186 mg，0.2507 mL，1.4391 mmol)於乙腈(8 mL)中之溶液中逐份添加 對-甲苯磺醯氯(126 mg，0.6609 mmol)。在70℃下攪拌混合物2 h，冷卻至0℃，且用EtOAc (50 mL)及5% NaHCO 3水溶液(15 mL)稀釋。分離兩層，且有機層用鹽水(5 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25% EtOAc/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色油狀之(3 R)-3-烯丙基-4-[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]嗎啉(272 mg，82%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.70 (s, 1H), 7.45 - 7.29 (m, 5H), 5.90 - 5.73 (m, 1H), 5.72 - 5.55 (m, 1H), 5.17 - 4.97 (m, 4H), 4.81 (dd, J =10.6, 6.2 Hz, 1H), 4.72 - 4.60 (m, 2H), 4.02 - 3.86 (m, 2H), 3.79 - 3.53 (m, 4H), 2.63 (t, J =7.2 Hz, 2H), 2.46 (d, J =10.0 Hz, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值627.19165，實驗值628.2 (M+1) +；滯留時間：2.45分鐘(LC方法E)。 步驟 9 ： (12 R)-6-( 苯甲氧基 )-21- 硝基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,9,18(22),19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2487
向在氮氣下之經乾燥250 mL燒瓶中添加DCE (25 mL)，且對溶劑鼓泡通入氮氣5 min。在氮氣流下添加Zhan催化劑-1B (47 mg，0.0641 mmol)。在70℃下，歷經1 h逐滴添加(3 R)-3-烯丙基-4-[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]嗎啉(270 mg，0.4303 mmol)於DCE (2 mL)中之溶液。向混合物鼓泡通入氮氣且在70℃下加熱2.5 h，接著將混合物冷卻至室溫且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20% EtOAc/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色油狀之(12 R)-6-(苯甲氧基)-21-硝基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,9,18(22),19-六烯( E/Z混合物) (171 mg，56%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.68 (s, 1H), 7.41 - 7.26 (m, 5H), 5.69 - 5.43 (m, 2H), 5.13 - 4.88 (m, 2H), 4.12 - 3.86 (m, 3H), 3.82 - 3.56 (m, 4H), 2.83 - 2.52 (m, 2H), 2.52 - 2.31 (m, 2H), 2.28 - 2.15 (m, 1H), 2.14 - 1.98 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -58.28 (s, 3F), -73.62 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值599.16034，實驗值600.2 (M+1) +；滯留時間：2.37分鐘(LC方法E)。 步驟 10 ： (12 R)-21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2489
向(12 R)-6-(苯甲氧基)-21-硝基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,9,18(22),19-六烯( E/Z混合物) (550 mg，0.6606 mmol)於EtOAc (10 mL)及MeOH (10 mL)中之溶液中添加10%鈀/碳(250 mg，0.1175 mmol，50%潤濕)。在室溫下在氫氣球下攪拌混合物3天，在30℃下，接著在50℃下攪拌4 h。經由矽藻土過濾混合物，用EtOAc洗滌。濃縮濾液且藉由使用梯度為0%至15% EtOAc/二氯甲烷之矽膠層析(80 g管柱)，隨後自二氯甲烷及己烷再結晶來純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-6-醇(255 mg，80%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.41 (s, 1H), 5.37 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 3.90 - 3.68 (m, 5H), 3.47 - 3.09 (m, 3H), 2.62 - 1.94 (m, 3H), 1.90 - 1.60 (m, 2H), 1.58 - 1.40 (m, 5H) ppm. ESI-MS m/z計算值481.15485，實驗值482.2 (M+1) +；滯留時間：3.29分鐘(LC方法C)。 步驟 11 ： (12 R)-21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 54) 及 (12 R)-21- 胺基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 55)
Figure 02_image2491
外消旋(12 R)-21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-6-醇(100 mg，0.2075 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4 管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用20% MeOH/CO 2溶離6 min，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (54 mg，53%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.41 (s, 1H), 5.31 (s, 2H), 3.90 - 3.70 (m, 5H), 3.47 - 3.37 (m, 1H), 3.30 (ddd, J =12.8, 9.4, 3.1 Hz, 1H), 3.19 - 3.09 (m, 1H), 2.51 - 2.36 (m, 1H), 2.27 (t, J =10.4 Hz, 1H), 2.17 - 2.02 (m, 1H), 1.82 - 1.62 (m, 3H), 1.58 - 1.42 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -60.26 (s, 3F), -80.82 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值481.15485，實驗值482.2 (M+1) +；滯留時間：3.3分鐘(LC方法C)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-21-胺基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (43 mg，41%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.42 (s, 1H), 5.36 (s, 2H), 3.91 - 3.63 (m, 5H), 3.34 (ddd, J =13.1, 10.4, 2.9 Hz, 1H), 3.26 - 3.11 (m, 2H), 2.65 - 2.47 (m, 1H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.24 - 2.09 (m, 1H), 2.06 - 1.79 (m, 2H), 1.77 - 1.65 (m, 1H), 1.62 - 1.52 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -60.58 (s, 3F), -77.24 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值481.1549，實驗值482.2 (M+1) +；滯留時間：3.3分鐘(LC方法C)。 實例 32 ：製備 17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 56) 及 17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 57)
Figure 02_image2493
步驟 1 ： N- 苯 甲基 -6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N- 丁 -3- 烯基 -5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image2495
在100 mL燒瓶中，將三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (200 mg，0.3075 mmol)溶解於乙腈(6 mL)中且冷卻至0℃，隨後添加DIEA (300 µL，1.722 mmol)及 N-苯甲基丁-3-烯-1-胺(110 mg，0.6822 mmol)，且接著攪拌混合物90分鐘，使其升溫至室溫。濃縮反應物。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/己烷(產物在22%乙酸乙酯處溶離)之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之 N-苯甲基-6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-丁-3-烯基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(199 mg，98%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.83 (s, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 9H), 7.26 (dt, J =8.3, 3.5 Hz, 1H), 5.84 (ddt, J =16.9, 10.3, 6.5 Hz, 1H), 5.67 (ddt, J =17.1, 10.3, 6.8 Hz, 1H), 5.14 - 4.94 (m, 4H), 4.88 (s, 2H), 4.75 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.60 (d, J =10.8 Hz, 1H), 3.61 (t, J =7.4 Hz, 2H), 2.54 (s, 1H), 2.45 (d, J =5.9 Hz, 1H), 2.37 (q, J =7.4 Hz, 2H), 2.31 - 2.13 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值661.2124，實驗值662.2 (M+1) +；滯留時間：1.75分鐘(LC方法M)。 步驟 2 ： 13- 苯甲基 -6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2497
在500 mL圓底3頸燒瓶中，在氮氣氛圍下，將Zhan催化劑-1B (55 mg，0.07496 mmol)於DCE (150 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液加熱至50℃。接著，經由注射器逐滴添加 N-苯甲基-6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-丁-3-烯基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(199 mg，0.3008 mmol)於DCE (20 mL)中之溶液。在75℃下加熱所得混合物3 h。接著將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。粗材料藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到黃色殘餘物，將該黃色殘餘物置於真空下14小時，得到呈淡黃色固體狀之13-苯甲基-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (130 mg，68%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.79 (s, 1H), 7.43 – 7.30 (m, 8H), 7.29 – 7.25 (m, 2H), 5.55 (t, J =8.5 Hz, 1H), 5.31 (q, J =8.6 Hz, 1H), 4.86 (s, 2H), 4.82 (d, J =1.8 Hz, 2H), 3.45 (t, J =8.4 Hz, 2H), 2.49 – 2.25 (m, 4H), 2.24 (d, J =4.9 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值633.1811，實驗值634.2 (M+1) +；滯留時間：1.49分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： 17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2499
在250 mL燒瓶中，用氮氣吹掃13-苯甲基-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (130 mg，0.2052 mmol)於AcOH (2 mL)及乙酸乙酯(2 mL)中之溶液。接著，添加Pd/C (35 mg，10% w/w，0.03289 mmol)。混合物經氮氣脫氣5分鐘，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物4 h。添加額外Pd/C (大致185.6 mg，10% w/w，0.1744 mmol)且再攪拌一小時。過濾且濃縮混合物且經受具有新鮮Pd/C (35 mg，10% w/w，0.03289 mmol)及AcOH (2.008 mL)以及乙酸乙酯(2.008 mL)之不鏽鋼壓力反應器。用氮氣吹掃容器，接著用氫氣沖洗且在140 psi氫氣下攪拌2小時。過濾反應物，用過量乙腈及乙酸乙酯洗滌矽藻土塞，且接著濃縮有機濾液。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(76 mg，87%)。ESI-MS m/z計算值425.12863，實驗值426.2 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法A)。 步驟 4 ： 17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 56) 及 17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 57)
Figure 02_image2501
外消旋17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(75 mg，0.1763 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Phenomenex LUX-4管柱(250 × 10 mm，5µm粒徑) ，在40℃，用10% MeOH (+ 20 mM NH 3)/90% CO 2溶離，流速為70 mL/min，注射體積為500 μL，分離出兩種鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (23.8 mg，63%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.57 (d, J =15.4 Hz, 2H), 6.29 (t, J =4.9 Hz, 1H), 5.95 (s, 2H), 3.23 (td, J =8.1, 5.3 Hz, 2H), 2.13 (dq, J =10.9, 6.6, 6.2 Hz, 2H), 1.84 (d, J =12.9 Hz, 1H), 1.67 - 1.60 (m, 2H), 1.59 (d, J =10.0 Hz, 2H), 1.52 (s, 1H), 1.39 (d, J =8.2 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值425.12863，實驗值426.2 (M+1) +；滯留時間：1.77分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (24.0 mg，63%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.57 (d, J =15.4 Hz, 2H), 6.29 (t, J =5.0 Hz, 1H), 5.95 (s, 2H), 3.23 (td, J =8.2, 5.4 Hz, 2H), 2.14 (dq, J =11.6, 6.8, 6.3 Hz, 2H), 1.86 (p, J =6.9 Hz, 1H), 1.68 - 1.60 (m, 2H), 1.60 - 1.54 (m, 2H), 1.51 (d, J =14.0 Hz, 1H), 1.38 (d, J =8.9 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值425.12863，實驗值426.2 (M+1) +；滯留時間：1.77分鐘(LC方法A)。 實例 33 ：製備 17- 胺基 -13- 甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 酮 ( 化合物 58)
Figure 02_image2503
步驟 1 ： 6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2505
向6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.92 g，13.77 mmol)於乙腈(58.8 mL)中之溶液中添加 N-甲基丁-3-烯-1-胺(鹽酸鹽) (1.662 g，13.67 mmol)、DIEA (6.224 mL，35.73 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2 h。真空移除溶劑。殘餘物用EtOAc (50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.89 g，84%)。ESI-MS m/z計算值333.09363，實驗值334.1 (M+1) +；滯留時間：0.73分鐘(LC方法S)。 步驟 2 ： 6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2507
向6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(4.2 g，12.60 mmol)於乙醇(84 mL)中之溶液中添加肼(5.932 mL，189.0 mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物30 min。用水(150 mL)稀釋反應混合物且用DCM (3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，接著藉由使用梯度為0%至10% MeOH/二氯甲烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(4.05 g，96%)。ESI-MS m/z計算值333.1049，實驗值334.2 (M+1) +；滯留時間：0.52分鐘(LC方法S)。 步驟 3 ： 2-[ 三級丁 基 ( 二苯基 ) 矽基 ] 氧基己 -5- 烯酸乙酯
Figure 02_image2509
向在氮氣下之2-羥基己-5-烯酸乙酯(8 g，48.04 mmol)於DMF (96.08 mL)中之溶液中添加咪唑(6.543 g，96.11 mmol)及DMAP (1.467 g，12.01 mmol)，隨後緩慢添加TBDPSCl (15.0 mL，57.68 mmol)。在環境溫度下攪拌溶液隔夜。反應物用二氯甲烷(150 mL)稀釋，用飽和氯化銨溶液(2 × 100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(220 g管柱)純化，得到呈無色油狀之2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基己-5-烯酸乙酯(15.6 g，82%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.68 - 7.54 (m, 4H), 7.52 - 7.28 (m, 6H), 5.72 (ddt, J =16.9, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.05 - 4.79 (m, 2H), 4.21 (t, J =5.7 Hz, 1H), 3.88 (q, J =7.1 Hz, 2H), 2.22 - 1.89 (m, 2H), 1.85 - 1.65 (m, 2H), 1.02 (d, J =11.7 Hz, 12H) ppm. 滯留時間：0.88分鐘(LC方法R)。 步驟 4 ： 2-[ 三級丁 基 ( 二苯基 ) 矽基 ] 氧基己 -5- 烯酸
Figure 02_image2511
向2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基己-5-烯酸乙酯(17 g，42.86 mmol)於MeOH (99.16 mL)及THF (34 mL)中之溶液中添加NaOH (39.82 mL，2 N，79.64 mmol)，且在環境溫度下攪拌混合物隔夜。移除有機溶劑，且殘餘物用1 N NaOH (20 mL)稀釋，且用MTBE (500 mL)萃取兩次。有機相用1 N NaOH (1 × 50 mL)反萃取，且經合併之水相用10% HCl水溶液酸化至pH = 1。水相用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取，且有機相用鹽水(1 × 100 mL)洗滌。經合併之乙酸乙酯相經MgSO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈白色固體狀之2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基己-5-烯酸(10.2 g，65%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 12.22 (s, 1H), 7.66 - 7.56 (m, 4H), 7.52 - 7.35 (m, 6H), 5.75 - 5.62 (m, 1H), 4.94 - 4.83 (m, 2H), 4.16 (t, J =5.5 Hz, 1H), 2.17 - 2.04 (m, 2H), 1.71 (qd, J =8.8, 7.4, 3.0 Hz, 2H), 1.03 (s, 9H) ppm. 滯留時間：0.86分鐘(LC方法S)。 步驟 5 ： 6-[ 丁 -3- 烯基 ( 甲基 ) 胺基 ]- N ' -[2-[ 三級丁 基 ( 二苯基 ) 矽基 ] 氧基己 -5- 烯醯基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2513
向2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基己-5-烯酸(3.344 g，9.074 mmol)及6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(2.88 g，8.642 mmol)於DMF (37.01 mL)中之溶液中添加DIEA (4.573 mL，26.25 mmol)，隨後添加HATU (3.943 g，10.37 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。反應物用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色黏性固體狀之6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]- N'-[2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(4.5 g，76%)。ESI-MS m/z計算值683.2751，實驗值684.5 (M+1) +；滯留時間：0.83分鐘(LC方法R)。 步驟 6 ： N - 丁 -3- 烯基 -6-[5-[1-[ 三級丁 基 ( 二苯基 ) 矽基 ] 氧基戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N- 甲基 -5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image2515
在50℃下加熱6-[丁-3-烯基(甲基)胺基]- N'-[2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(5.87 g，8.584 mmol)及DIEA (5.194 mL，29.82 mmol)於乙腈(134.2 mL)中之溶液，接著添加 對-甲苯磺醯氯(2.557 g，13.41 mmol)。在70℃下加熱所得混合物15 min。將反應混合物冷卻至室溫，用碳酸氫鈉飽和溶液(250 mL)淬滅且用乙酸乙酯(3 × 125 mL)萃取。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈白色泡沫固體狀之 N-丁-3-烯基-6-[5-[1-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-甲基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(5.61 g，98%)。ESI-MS m/z計算值665.2645，實驗值666.4 (M+1) +；滯留時間：0.83分鐘(LC方法T)。 步驟 7 ：三級丁基 -[[13- 甲基 -17- 硝基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -6- 基 ] 氧基 ]- 二苯基 - 矽烷 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2517
在1 L圓底3頸燒瓶中，在氮氣氛圍下，將 N-丁-3-烯基-6-[5-[1-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-甲基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.2 g，1.802 mmol)於DCE (600 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液加熱至50℃。接著，經由注射器添加[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基]-二氯-[(2-異丙氧基苯基)亞甲基]釕(282.3 mg，0.4505 mmol)於DCE (50 mL)中之溶液。在50℃下加熱所得混合物2小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24公克管柱)純化，得到呈灰白色固體狀之三級丁基-[[13-甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-6-基]氧基]-二苯基-矽烷( E/Z混合物) (780 mg，68%)。ESI-MS m/z計算值637.2332，實驗值638.4 (M+1) +；滯留時間：0.77分鐘(LC方法T)。 步驟 8 ： 13- 甲基 -17- 硝基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -6- 醇 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2519
在0℃下，向三級丁基-[[13-甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-6-基]氧基]-二苯基-矽烷( E/Z混合物) (490 mg，0.7684 mmol)於THF (8.1 mL)中之攪拌溶液中添加TBAF (1.537 mL，1 M，1.537 mmol)。移除冰浴，且在室溫下攪拌反應物15 min。減壓濃縮反應混合物且藉由使用梯度為0%己烷至30% EtOAc/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之13-甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-6-醇( E/Z混合物) (180 mg，59%)。ESI-MS m/z計算值399.11545，實驗值400.8 (M+1) +；滯留時間：1.65分鐘(LC方法A)。 步驟 9 ： 13- 甲基 -17- 硝基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -6- 酮 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2521
向13-甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-6-醇( E/Z混合物) (260 mg，0.6511 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加DMP (359.0 mg，0.8464 mmol)，且攪拌反應物30 min。用飽和NaHCO 3淬滅反應物且用DCM (2 × 25 mL)萃取。合併有機層，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色固體狀之13-甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-6-酮( E/Z混合物) (260 mg，100%)。ESI-MS m/z計算值397.0998，實驗值398.1 (M+1) +；滯留時間：0.69分鐘(LC方法S)。 步驟 10 ： 17- 胺基 -13- 甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 酮 ( 化合物 58)
Figure 02_image2523
向13-甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-6-酮( E/Z混合物) (50 mg，0.107 mmol)於乙酸乙酯(1.148 mL)中之氮氣沖洗溶液中添加Pd/C (38.98 mg，10% w/w，0.03663 mmol)。將混合物抽成真空，且接著在使用氫氣球之氫氣氛圍下在室溫下攪拌1小時。過濾反應混合物且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈鮮橙色固體狀之17-胺基-13-甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-酮(30.0 mg，76%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.37 (s, 1H), 3.27 (dd, J =9.1, 6.3 Hz, 2H), 2.92 (d, J =1.5 Hz, 3H), 2.90 - 2.79 (m, 2H), 1.95 - 1.83 (m, 4H), 1.59 (p, J =7.1, 6.5 Hz, 2H), 1.48 (tdd, J =9.3, 5.8, 3.3 Hz, 2H) ppm.  未觀察到兩個可交換質子。ESI-MS m/z計算值369.14127，實驗值370.1 (M+1) +；滯留時間：1.88分鐘(LC方法A)。 實例 34 ：製備 (6 S,15 R)-23- 胺基 -8- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 59) 及 (6 R,15 R)-23- 胺基 -8- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 60)
Figure 02_image2525
步驟 1 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[2,2,2- 三氟 -1-(2- 氟 -5- 碘 - 苯基 )-1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2527
向2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)乙酮(583 mg，1.833 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中添加含( N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(552 mg，1.826 mmol)之DCM (5 mL)，且在室溫下攪拌30 min。接著，緩慢逐滴添加含6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(500 mg，1.204 mmol)之DCM (5 mL)。在室溫下攪拌混合物隔夜。濃縮反應混合物，且所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至50% EtOAc/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(582 mg，64%)。ESI-MS m/z計算值757.0996，實驗值758.2 (M+1) +；滯留時間：0.66分鐘(LC方法T)。 步驟 2 ： N -[(15 S)-8- 氟 -6- 羥基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -23- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2529
向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(2.0 g，2.640 mmol)於乙腈(200 mL)中之攪拌溶液中鼓泡通入N 25 min。接著，添加 三- 鄰-甲苯基膦(167 mg，0.5487 mmol)及Pd(OAc) 2(64 mg，0.2851 mmol)，隨後添加三乙胺(2.0 mL，14.35 mmol)，且在80℃下加熱溶液6 h。將混合物冷卻至室溫，濃縮至約5 mL體積且經由矽藻土過濾，且濃縮濾液。所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至50% EtOAc/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到 N-[(15 S)-8-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (1.04 g，63%)。ESI-MS m/z計算值629.1873，實驗值630.3 (M+1) +；滯留時間：1.73分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： (6 S,15 R)-23- 胺基 -8- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 59) 及 (6 R,15 R)-23- 胺基 -8- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 60)
Figure 02_image2531
在使用3通轉接器之配備有H 2氣球之圓底燒瓶中，向 N-[(15 S)-8-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (354 mg，0.5623 mmol)於乙醇(5 mL)中之溶液中添加Pd/C (64 mg，10% w/w，0.06014 mmol)。經受真空且用氮氣回填三次，接著經受真空。用氫氣填充燒瓶且接著攪拌15 h。經受真空且用氮氣回填三次，接著用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土過濾。濃縮濾液，且將殘餘物溶解於4 mL之1:3 TFA/二氯甲烷中。在室溫下攪拌此反應混合物~ 1 h且濃縮。殘餘物藉由使用30%至99%乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀且呈溶離之第一鏡像異構物之(6 S,15 R)-23-胺基-8-氟-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(鹽酸鹽) (9.1 mg，39%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.90 (d, J =7.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.35 (m, 1H), 7.22 (ddd, J =8.4, 4.6, 2.3 Hz, 1H), 7.02 (dd, J =12.5, 8.4 Hz, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.87 (t, J =4.9 Hz, 1H), 3.66 - 3.57 (m, 1H), 3.31 (t, J =8.6 Hz, 1H), 2.98 (dd, J =14.6, 6.6 Hz, 1H), 2.58 - 2.49 (m, 1H), 2.45 (t, J =13.5 Hz, 1H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 1.95 (td, J =12.2, 11.1, 5.9 Hz, 2H), 1.69 - 1.59 (m, 3H), 1.04 (dd, J =12.0, 6.5 Hz, 1H) ppm. 未觀測到三個可交換質子。ESI-MS m/z計算值531.1505，實驗值532.1 (M+1) +；滯留時間：1.67分鐘(LC方法J)。 溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R,15 R)-23-胺基-8-氟-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(鹽酸鹽) (7.7 mg，33%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.88 (s, 1H), 8.15 (dd, J =7.7, 2.3 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.33 (ddd, J =8.4, 4.5, 2.3 Hz, 1H), 7.12 (dd, J =12.4, 8.4 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 3.98 (dt, J =9.9, 5.3 Hz, 1H), 3.70 (br. s, 1H), 3.24 (d, J =9.0 Hz, 1H), 3.04 (d, J =15.2 Hz, 1H), 2.55 (m, 2H), 2.24 (dt, J =11.8, 5.9 Hz, 1H), 2.18 - 2.04 (m, 1H), 2.00 - 1.83 (m, 3H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.59 (qd, J =11.3, 6.1 Hz, 1H), 0.90 - 0.74 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值531.1505，實驗值532.0 (M+1) +；滯留時間：1.73分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ：非晶形化合物 60 ( 純形式 ) 之固體形式表徵A.     X射線粉末繞射
藉由步驟3產生之非晶形化合物60 (純形式)之XRPD繞射圖係使用通用X射線粉末繞射(XRPD)方法獲得且提供於 圖 12中。 B.     熱重分析(TGA)
非晶形化合物60 (純形式)之TGA曲線提供於 圖 13中。TGA曲線顯示在40℃至229.15℃ 1.60%重量損失，其中以10.00℃/min上升至350.00℃。 C.     差示掃描熱量測定分析
藉由加熱及冷卻方法，使用DSC產生化合物60之純非晶形游離形式。在DSC盤上將材料加熱至240℃且接著冷卻至室溫。接著，將材料再加熱至240℃以查看非晶形材料之玻璃轉移溫度。
DSC分析使用以下方法進行： 1. 25.0至240.0℃，10.00℃/min，N 250.0 ml/min， 2. 240.0至-20.0℃，-50.00℃/min，N 250.0 ml/min，接著 3. -20.0至240.0℃，10.00℃/min，N 250.0 ml/min。
非晶形化合物60 (純形式)之DSC熱分析圖提供於 圖 14中。未觀測到Tg。 實例 35 ：製備 17- 胺基 -6,13- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 61) 及 17- 胺基 -6,13- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 62)
Figure 02_image2533
步驟 1 ： 17- 胺基 -6,13- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 61) 及 17- 胺基 -6,13- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 62)
Figure 02_image2535
在氮氣下，將17-胺基-13-甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-酮(25 mg，0.06769 mmol)於THF (504.5 µL)中之溶液冷卻至-78℃，接著逐滴添加MeMgCl (67.70 µL，3 M，0.2031 mmol)，且攪拌所得混合物30 min。反應混合物用1 M HCl淬滅且接著用EtOAc (2 × 30 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之外消旋混合物，該外消旋混合物進一步藉由正相SFC來純化，其使用Chiral Technologies銷售之AS-H管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑) (零件編號= 20945)，且用45%至80% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離(流速= 40 mL/min，管柱溫度= 40℃)，得到兩種單一鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6,13-二甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (5 mg，38%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.35 (s, 1H), 3.36 - 3.19 (m, 2H), 2.92 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.06 (dt, J =14.6, 7.9 Hz, 2H), 1.84 (dtd, J =28.4, 12.8, 11.3, 6.1 Hz, 4H), 1.70 (s, 3H), 1.55 - 1.47 (m, 2H), 1.44 - 1.34 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值385.17255，實驗值386.2 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6,13-二甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (5 mg，36%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.53 (d, J =6.5 Hz, 1H), 3.41 (d, J =37.2 Hz, 2H), 3.04 (s, 3H), 2.76 - 2.30 (m, 3H), 2.26 - 2.07 (m, 2H), 1.98 (dd, J =14.5, 7.6 Hz, 3H), 1.79 (s, 3H), 1.66 - 1.41 (m, 5H) ppm. ESI-MS m/z計算值385.17255，實驗值386.2 (M+1) +；滯留時間：1.77分鐘(LC方法A)。 實例 36 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 丙 -2- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 63) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-( 丙 -2- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 64)
Figure 02_image2537
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -18-( 丙 -1- 烯 -2- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2539
藉由鼓泡通入氮氣，將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯(330 mg，0.5063 mmol)於甲苯(14 mL)中之溶液脫氣20 min。添加異丙烯基三氟硼酸鉀(106 mg，0.7163 mmol)以及1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵氯化鈀(II)與二氯甲烷之錯合物(23 mg，0.0282 mmol)，隨後添加碳酸銫之經氮氣脫氣之水溶液(0.6 mL，2 M，1.2000 mmol)。在90℃下攪拌反應混合物隔夜。將反應混合物冷卻至室溫，經由矽藻土墊過濾且用乙酸乙酯(2 × 25 mL)沖洗。濾液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈紅色泡沫狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (210 mg，71%)。ESI-MS m/z計算值555.20935，實驗值556.2 (M+1) +；滯留時間：2.56分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 丙 -2- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 63) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-( 丙 -2- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 64)
Figure 02_image2541
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (210 mg，0.3591 mmol)於甲醇(21 mL)中之溶液中鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(160 mg，0.0752 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物且用甲醇(25 mL)洗滌，接著減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀且呈溶離之第一鏡像異構物之(12 R)-20-胺基-18-(丙-2-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (54 mg，32%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.01 (s, 1H), 5.02 (br. s., 2H), 4.03 - 3.80 (m, 1H), 3.79 - 3.58 (m, 2H), 3.35 - 3.20 (m, 1H), 3.15 (td, J =9.0, 3.1 Hz, 1H), 2.56 - 2.34 (m, 2H), 2.30 - 2.14 (m, 1H), 2.12 - 1.92 (m, 2H), 1.90 - 1.76 (m, 1H), 1.73 - 1.42 (m, 8H), 1.33 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.15 (d, J =6.2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.2195，實驗值440.3 (M+1) +；滯留時間：3.3分鐘(LC方法C)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(丙-2-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (29 mg，18%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.01 (s, 1H), 5.47 - 4.58 (m, 2H), 4.04 - 3.83 (m, 1H), 3.81 - 3.67 (m, 1H), 3.65 - 3.51 (m, 1H), 3.33 - 3.17 (m, 1H), 3.16 - 2.99 (m, 1H), 2.67 - 2.48 (m, 1H), 2.45 - 2.29 (m, 1H), 2.28 - 2.10 (m, 2H), 2.06 - 1.87 (m, 2H), 1.86 - 1.72 (m, 1H), 1.70 - 1.45 (m, 7H), 1.34 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.14 (d, J =6.5 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.2195，實驗值440.3 (M+1) +；滯留時間：3.22分鐘(LC方法C)。 實例 37 ：製備 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 65) 、 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 66) 、 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 67) 及 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 68)
Figure 02_image2543
步驟 1 ： 6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-(1- 甲基丁 -3- 烯基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image2545
在40 mL密封小瓶中，在室溫下，將三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (425 mg，0.6534 mmol)溶解於乙腈(11 mL)中，隨後添加DIEA (750 µL，4.306 mmol)及戊-4-烯-2-胺(鹽酸鹽) (220 mg，1.809 mmol)，且接著攪拌混合物90分鐘。濃縮反應物。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯之矽膠層析純化，得到呈黃色泡沫狀之6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1-甲基丁-3-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(266 mg，70%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.54 (s, 1H), 7.78 (d, J =8.1 Hz, 1H), 7.38 - 7.31 (m, 5H), 5.85 (ddt, J =16.8, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.78 - 5.63 (m, 1H), 5.13 - 4.94 (m, 4H), 4.76 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.60 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.48 (dq, J =8.2, 5.9 Hz, 1H), 2.59 - 2.51 (m, 2H), 2.47 - 2.40 (m, 1H), 2.33 - 2.19 (m, 3H), 1.22 (d, J =6.6 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值585.1811，實驗值586.2 (M+1) +；滯留時間：2.01分鐘(LC方法J)。 步驟 2 ： 6- 苯甲氧基 -12- 甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2547
在500 mL圓底燒瓶中，在50℃下在氮氣氛圍下，加熱Zhan催化劑-1B (82 mg，0.1118 mmol)於DCE (200 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液。接著，經由注射器逐滴添加6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1-甲基丁-3-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(260 mg，0.4441 mmol)於DCE (40 mL)中之溶液。在75℃下加熱所得混合物3 h。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈淡黃色固體狀之6-苯甲氧基-12-甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (150 mg，61%)。ESI-MS m/z計算值557.1498，實驗值558.2 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法J)。 步驟 3 ： 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2549
在250 mL圓底燒瓶中，用氮氣吹掃6-苯甲氧基-12-甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (145 mg，0.2601 mmol)於AcOH (2.5 mL)及乙酸乙酯(2.5 mL)中之溶液。接著添加Pd/C (275 mg，10% w/w，0.2584 mmol)。混合物經氮氣脫氣5分鐘，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物4 h。過濾反應物，且用過量乙腈及乙酸乙酯洗滌矽藻土塞，接著濃縮濾液。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀且呈4種立體異構物之混合物之17-胺基-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(95 mg，83%)。ESI-MS m/z計算值439.1443，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：1.34分鐘(LC方法A)。 步驟 4 ： 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 65) 、 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 66) 、 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 67) 及 17- 胺基 -12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 68)
Figure 02_image2551
外消旋17-胺基-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(93 mg，0.2117 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Phenomenex LUX-4管柱(250 × 21.2 mm，5µm粒徑)，在40℃下，用10% MeOH (+ 20 mM NH 3)/90% CO 2溶離，使用70 mL/min之流速，用500 μL之注射體積，分離出四種鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (18.8 mg，80%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.59 (d, J =15.2 Hz, 2H), 6.01 (s, 2H), 5.10 (d, J =4.5 Hz, 1H), 3.69 - 3.59 (m, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 2.01 (ddd, J =13.9, 10.7, 7.0 Hz, 1H), 1.61 (d, J =9.8 Hz, 2H), 1.50 (d, J =9.2 Hz, 3H), 1.44 (d, J =9.1 Hz, 2H), 1.24 (d, J =6.7 Hz, 3H), 0.84 (td, J =14.7, 11.1, 6.0 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.1443，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：1.98分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (16.0 mg，68%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.00 (d, J =7.6 Hz, 2H), 5.13 (d, J =4.9 Hz, 1H), 3.78 - 3.65 (m, 1H), 2.43 - 2.26 (m, 2H), 2.07 - 1.99 (m, 1H), 1.69 (s, 2H), 1.43 (s, 4H), 1.24 (d, J =6.7 Hz, 3H), 0.90 (ddt, J =18.2, 12.2, 5.9 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.1443，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：1.95分鐘(LC方法A)。
溶離之第三鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物3) (18.3 mg，78%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.59 (d, J =15.1 Hz, 2H), 6.00 (d, J =7.6 Hz, 2H), 5.10 (d, J =4.6 Hz, 1H), 3.67 – 3.59 (m, 1H), 2.47 (s, 1H), 2.28 – 2.19 (m, 1H), 2.00 (ddd, J =13.8, 8.8, 5.7 Hz, 1H), 1.66 – 1.57 (m, 2H), 1.53 – 1.50 (m, 1H), 1.44 (d, J =11.0 Hz, 3H), 1.24 (d, J =6.7 Hz, 3H), 0.89 – 0.81 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.1443，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：1.98分鐘(LC方法A)。
溶離之第四鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物4) (16.4 mg，70%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.00 (d, J =7.8 Hz, 2H), 5.13 (d, J =4.9 Hz, 1H), 3.76 - 3.67 (m, 1H), 2.42 - 2.26 (m, 2H), 2.08 (s, 2H), 1.71 - 1.67 (m, 1H), 1.49 - 1.38 (m, 4H), 1.24 (d, J =6.7 Hz, 3H), 0.96 - 0.86 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值439.1443，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：1.95分鐘(LC方法A)。 實例 38 ：製備 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 69) 及 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 70)
Figure 02_image2553
步驟 1 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[1-(3- 溴苯基 )-2,2,2- 三氟 -1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2555
向( N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(4.843 g，16.02 mmol)及1-(3-溴苯基)-2,2,2-三氟-乙酮(4.053 g，16.02 mmol)於DMF (79.83 mL)中之攪拌溶液中添加6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(3.2453 g，6.406 mmol)。將混合物加蓋且在室溫下攪拌15 min。用EtOAc稀釋混合物且用飽和NaHCO 3(1×)、飽和NH 4Cl (1×)及鹽水(1×)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮成橙色油，該橙色油藉由使用100%己烷至100%乙酸乙酯之淺梯度矽膠層析純化，得到呈黃色/橙色糊漿狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(3-溴苯基)-2,2,2-三氟-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(4.4 g，99%)。ESI-MS m/z計算值691.12286，實驗值692.2 (M+1) +；滯留時間：0.82分鐘(LC方法T)。 步驟 2 ： N -[(15 S)-6- 羥基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -23- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2557
向配備有回流冷凝器之圓底燒瓶中之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(3-溴苯基)-2,2,2-三氟-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(4.4 g，6.354 mmol)於脫氣NMP (264 mL)中之攪拌溶液中添加二乙醯氧基鈀(427.9 mg，1.906 mmol)，隨後添加 三- 鄰-甲苯基膦(1.16 g，3.811 mmol)及TEA (708.4 µL，5.083 mmol)，且向溶液鼓泡通入N 25 min，接著在油浴中在140℃下加熱100 min。添加二乙醯氧基鈀(142.7 mg，0.6356 mmol)，隨後添加 三- 鄰-甲苯基膦(386.8 mg，1.271 mmol)，且在140℃下繼續攪拌15 min，接著添加TEA 221.3 µL，1.588 mmol)，且在140℃下攪拌15 min，接著冷卻至室溫且濃縮。用EtOAc稀釋殘餘物且用飽和NaHCO 3(1×)、飽和NH 4Cl (1×)、水(1×)及鹽水(1×)洗滌，接著經MgSO 4乾燥，經由矽藻土過濾，且濃縮濾液。殘餘物藉由使用100%己烷至100%乙酸乙酯之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈黃色/橙色泡沫狀之 N-[(15 S)-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (1.62 g，35%)。ESI-MS m/z計算值611.1967，實驗值612.2 (M+1) +；滯留時間：0.64分鐘(LC方法T)。 步驟 3 ： N -[(15 R)-6- 羥基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -23- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2559
向 N-[(15 S)-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (30.7 mg，0.04418 mmol)於乙醇(1.689 mL)中之溶液中添加Pd/C (25.03 mg，10% w/w，0.02352 mmol)，且向溶液鼓泡通入氫氣5 min，接著燒瓶用氫氣球封蓋且攪拌16 h。向溶液鼓泡通入氮氣5 min，接著經由矽藻土過濾，用甲醇洗滌，得到黃色溶液，濃縮該黃色溶液，得到呈黃色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之產物 N-[(15 R)-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯(29.9 mg，100%)。ESI-MS m/z計算值613.2124，實驗值614.4 (M+1) +；滯留時間：0.75分鐘(LC方法T)。 步驟 4 ： (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 69)
Figure 02_image2561
向 N-[(15 R)-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯(29.9 mg，0.04415 mmol)於DCM (541.8 µL)中之溶液中添加TFA (204.2 µL，2.65 mmol)。在環境溫度下攪拌混合物4 h，接著藉由旋轉蒸發移除揮發物，溶解於DMSO中，過濾，且藉由使用40%至80%乙腈/水(+5 mM HCl)之梯度進行15.0分鐘之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀且呈溶離之第一單一鏡像異構物之(15 R)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(鹽酸鹽) (鏡像異構物1) (6.5 mg，51%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.60 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.33 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.27 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 3.94 - 3.84 (m, 1H), 3.50 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.18 (s, 1H), 2.98 (dd, J = 14.2, 5.9 Hz, 1H), 2.51 (s, 1H), 2.28 (td, J = 11.8, 9.6, 5.6 Hz, 1H), 2.18 - 2.11 (m, 1H), 1.87 (dq, J = 12.4, 6.2 Hz, 2H), 1.84 - 1.74 (m, 1H), 1.69 - 1.59 (m, 1H), 1.53 (dd, J = 11.5, 6.4 Hz, 1H), 0.83 (dd, J = 11.2, 5.9 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值513.16，實驗值514.1 (M+1) +；滯留時間：1.06分鐘(LC方法M)。 步驟 5 ： (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 70)
Figure 02_image2563
向 N-[(15 R)-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯(1.1 g，1.149 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (15 mL，194.7 mmol)。在環境溫度下攪拌混合物15分鐘，接著在不加熱之情況下藉由旋轉蒸發移除揮發物，且藉由添加NaHCO 3飽和水溶液淬滅殘餘酸。此混合物用EtOAc (2×)萃取，將有機層合併，經MgSO 4乾燥且過濾，且濃縮濾液成黃色泡沫，該黃色泡沫藉由用50%至100%乙腈/水之梯度溶離之275 g C 18管柱上之逆相層析來純化，得到仍含有一些雜質之呈溶離的第二單一鏡像異構物的產物。將不純級分合併且再次藉由用50%至100%乙腈/水之梯度溶離之100 g C 18管柱上之逆相層析來純化，得到純產物，將該純產物與來自第一管柱的純產物合併且濃縮，得到呈黃色固體狀之(15 R)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(鏡像異構物2) (234 mg, 79 %) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.70 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.63 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 4.16 (dt, J = 10.6, 5.3 Hz, 1H), 3.60 - 3.48 (m, 1H), 3.23 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 2.90 (dd, J = 15.9, 8.0 Hz, 1H), 2.75 - 2.65 (m, 1H), 2.40 (dt, J = 10.9, 5.6 Hz, 1H), 2.22 (dt, J = 11.9, 6.0 Hz, 1H), 1.92 (dd, J = 12.8, 6.8 Hz, 2H), 1.83 - 1.67 (m, 2H), 1.58 (dt, J = 11.6, 5.8 Hz, 1H), 0.85 (dt, J = 16.2, 6.1 Hz, 1H), 未觀測到一個可交換質子。ESI-MS m/z計算值513.16，實驗值514.0 (M+1) +；滯留時間：2.34分鐘(LC方法A)。 步驟 6 ：非晶形化合物 70 ( 純形式 ) 之固體形式表徵A.     X射線粉末繞射
藉由步驟5產生之非晶形化合物70 (純形式)之XRPD繞射圖係使用通用X射線粉末繞射(XRPD)方法獲得，且提供於 圖 15中。 實例 39 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 71) 及 (12 R)-20- 胺基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 72)
Figure 02_image2565
步驟 1 ： (12 R)-20- 胺基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 71) 及 (12 R)-20- 胺基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 72)
Figure 02_image2567
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (300 mg，0.4396 mmol)於甲醇(15 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加三乙胺(217.8 mg，0.3 mL，2.1524 mmol)，隨後添加鈀/碳(325 mg，0.1527 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌5小時。經由矽藻土墊過濾混合物，用甲醇(40 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈橙色固體狀且呈溶離之第一非鏡像異構物之(12 R)-20-胺基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (90 mg，49%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.06 (d, J =8.8 Hz, 1H), 6.51 (d, J =8.8 Hz, 1H), 5.30 - 4.06 (m, 2H), 3.97 - 3.81 (m, 1H), 3.54 - 3.37 (m, 1H), 3.30 - 3.11 (m, 1H), 2.73 - 2.54 (m, 1H), 2.50 - 2.35 (m, 1H), 2.31 - 1.84 (m, 5H), 1.82 - 1.48 (m, 7H), 1.02 - 0.79 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值397.1726，實驗值398.2 (M+1) +；滯留時間：3.22分鐘(LC方法C)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈橙色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (60 mg，33.9%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.08 (d, J =8.8 Hz, 1H), 6.53 (d, J =8.8 Hz, 1H), 4.85 (br. s., 2H), 4.00 - 3.87 (m, 1H), 3.54 - 3.36 (m, 1H), 3.26 - 3.07 (m, 1H), 2.75 - 2.55 (m, 1H), 2.36 - 2.12 (m, 3H), 2.11 - 1.92 (m, 3H), 1.84 - 1.75 (m, 1H), 1.73 - 1.34 (m, 6H), 1.10 - 0.95 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值397.1726，實驗值398.2 (M+1) +；滯留時間：3.22分鐘(LC方法C)。 實例 40 ：製備 17- 胺基 -13- 環丁基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 73) 及 17- 胺基 -13- 環丁基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 74)
Figure 02_image2569
步驟 1 ： 6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N- 丁 -3- 烯基 - N- 環丁基 -5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image2571
向三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (300 mg，0.4612 mmol)於THF (6 mL)中之混合物中添加 N-丁-3-烯基環丁胺(296 µL，1.844 mmol)及二異丙基乙胺(241 µL，1.384 mmol)，且在50℃下攪拌混合物30 min。混合物用EtOAc稀釋，用水、接著鹽水洗滌，經乾燥(MgSO 4)，過濾且蒸發。殘餘物藉由矽膠層析(0%至10% EtOAc/己烷，15 min)純化，得到6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-丁-3-烯基- N-環丁基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(127 mg，44%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.66 (s, 1H), 7.45 - 7.29 (m, 5H), 5.80 (ddt, J =16.6, 10.2, 6.3 Hz, 1H), 5.64 (ddt, J =17.1, 10.3, 6.9 Hz, 1H), 5.14 - 4.95 (m, 5H), 4.81 (d, J =10.6 Hz, 1H), 4.65 (d, J =10.6 Hz, 1H), 4.33 (p, J =8.2 Hz, 1H), 3.74 - 3.64 (m, 2H), 2.59 - 2.44 (m, 2H), 2.42 - 2.20 (m, 5H), 2.20 - 2.07 (m, 2H), 1.80 - 1.62 (m, 2H) ppm; 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -58.50, -73.15 ppm. ESI-MS m/z計算值625.2124，實驗值626.2 (M+1) +；滯留時間：0.61分鐘(LC方法T)。 步驟 2 ： 6- 苯甲氧基 -13- 環丁基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2573
向在氮氣鼓泡下在120℃下之苯亞甲基-[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基]-二氯-釕;三環己基磷烷(25 mg，0.02945 mmol)於甲苯(9 mL)中之溶液中逐滴添加6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-丁-3-烯基- N-環丁基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(121 mg，0.1934 mmol)於甲苯(9 mL)中之溶液，且在120℃下在氮氣鼓泡下攪拌混合物1 h。蒸發溶劑，且殘餘物藉由矽膠層析(0%至20% EtOAc/己烷，15 min)純化，得到6-苯甲氧基-13-環丁基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (45 mg，35%)。ESI-MS m/z計算值597.1811，實驗值598.1 (M+1) +；滯留時間：0.54分鐘(LC方法T)。 步驟 3 ： 17- 胺基 -13- 環丁基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 73) 及 17- 胺基 -13- 環丁基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 74)
Figure 02_image2575
在氫氣(200 psi，在不鏽鋼壓力容器中)下，在室溫下攪拌6-苯甲氧基-13-環丁基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (45 mg，0.06778 mmol)及Pd/C (22 mg，10% w/w, 0.02067 mmol)於乙酸(700 µL)中之混合物24 h。接著，過濾混合物，且蒸發濾液。殘餘物藉由使用0%至35% EtOAc/己烷之梯度進行15 min之矽膠層析純化，得到外消旋6-苯甲氧基-13-環丁基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-胺。以20 mg/mL將此外消旋材料溶解於乙腈中，且鏡像異構物藉由對掌性SFC分離，其使用AS-3管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，使用5%至15% 甲醇(5 mM NH 3)/CO 2移動相之梯度，10 min。此等條件產生2種如下文所描述之鏡像異構產物：
濃縮峰1，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-環丁基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (6.7 mg，21%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.38 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.07 (tt, J =9.5, 7.3 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.49 - 3.26 (m, 2H), 2.43 - 2.23 (m, 3H), 2.21 - 2.04 (m, 4H), 1.76 (td, J =12.4, 5.3 Hz, 1H), 1.62 (d, J =9.6 Hz, 2H), 1.53 (s, 6H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -58.82, -79.80 ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.1 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法Q)。 濃縮峰2，得到呈黃色固體狀之17-胺基-13-環丁基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (6.5 mg，20%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.39 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.07 (tt, J =9.6, 7.3 Hz, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.46 - 3.28 (m, 2H), 2.43 - 2.23 (m, 3H), 2.21 - 2.03 (m, 4H), 1.76 (td, J =12.4, 5.2 Hz, 1H), 1.68 - 1.41 (m, 8H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -58.82, -79.80 ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.1 (M+1) +；滯留時間：1.83分鐘(LC方法Q)。 實例 41 ：製備 17- 胺基 -13- 甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -6- 酮 ( E/Z 混合物 ) ( 化合物 75)
Figure 02_image2577
步驟 1 ： 17- 胺基 -13- 甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -6- 酮 ( E/Z 混合物 ) ( 化合物 75)
Figure 02_image2579
在55℃下攪拌13-甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-6-酮( E/Z混合物) (250 mg，0.6292 mmol)及二水合氯化錫(II) (568 mg，2.517 mmol)於乙酸乙酯(6.292 mL)中之混合物30 min，接著用EtOAc稀釋，且將2 N NaOH添加至混合物中直至混合物變得黏稠。經由矽藻土過濾混合物，且濾液用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈橙色固體狀之17-胺基-13-甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-6-酮( E/Z混合物) (185 mg，80%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.37 (s, 1H), 5.67 - 5.51 (m, 1H), 5.46 - 5.31 (m, 1H), 3.37 - 3.26 (m, 2H), 2.97 (d, J =1.9 Hz, 3H), 2.92 - 2.83 (m, 2H), 2.66 (dq, J =16.5, 8.4, 7.9 Hz, 4H) ppm.  未觀察到兩個可交換質子。ESI-MS m/z計算值367.1256，實驗值368.2 (M+1) +；滯留時間：0.76分鐘(LC方法S)。 實例 42 ：製備 17- 胺基 -13- 甲基 -6- 苯基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 76) 及 17- 胺基 -13- 甲基 -6- 苯基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 77)
Figure 02_image2581
步驟 1 ： 17- 胺基 -13- 甲基 -6- 苯基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 76) 及 17- 胺基 -13- 甲基 -6- 苯基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 77)
Figure 02_image2583
在氮氣下，使17-胺基-13-甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-酮(19 mg，0.05144 mmol)於THF (383.4 µL)中之溶液在0℃下冷卻，接著逐滴添加溴(苯基)鎂(113.2 µL，1 M，0.1132 mmol)，且在0℃下攪拌混合物30 min。反應混合物用水及1 N HCl淬滅，用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取，且經合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾且濃縮。藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之外消旋混合物。接著，此外消旋材料藉由對掌性SFC來純化，其使用Chiral Technologies銷售之OD-H管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用50%至80% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離14.5分鐘，得到兩種單一鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-13-甲基-6-苯基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (4 mg，16%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.50 (s, 1H), 7.31 - 7.15 (m, 5H), 2.95 - 2.82 (m, 3H), 2.26 - 2.07 (m, 2H), 1.96 - 1.77 (m, 2H), 1.71 - 1.08 (m, 8H) ppm. ESI-MS m/z計算值447.1882，實驗值448.3 (M+1) +；滯留時間：2.15分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-13-甲基-6-苯基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (4 mg，16%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.50 (s, 1H), 7.29 - 7.18 (m, 5H), 2.91 - 2.81 (m, 3H), 2.26 - 2.08 (m, 2H), 1.92 - 1.81 (m, 2H), 1.71 - 1.20 (m, 8H) ppm. ESI-MS m/z計算值447.1882，實驗值448.3 (M+1) +；滯留時間：2.15分鐘(LC方法A)。 實例 43 ：製備 17- 胺基 -6- 環丙基 -13- 甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 78) 及 17- 胺基 -6- 環丙基 -13- 甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 79)
Figure 02_image2585
步驟 1 ： 17- 胺基 -6- 環丙基 -13- 甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 78) 及 17- 胺基 -6- 環丙基 -13- 甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 79)
Figure 02_image2587
在氮氣下，使17-胺基-13-甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-酮(30 mg，0.08123 mmol)於THF (605.4 µL)中之溶液在0℃下冷卻，接著逐滴添加溴(環丙基)鎂(178.7 µL，1 M，0.1787 mmol)，且在0℃下攪拌30 min。反應混合物用水及1 N HCl淬滅，用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取，用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾且濃縮。藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到外消旋混合物，該外消旋混合物藉由對掌性SFC分離，其使用Chiral Technologies銷售之OD-H管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，用5%至15% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2溶離14.5分鐘，得到兩種單一鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6-環丙基-13-甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (3 mg，9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.48 (s, 1H), 2.85 (s, 3H), 1.97 (td, J =9.4, 5.3 Hz, 2H), 1.83 (dd, J =11.5, 5.9 Hz, 2H), 1.71 - 1.32 (m, 7H), 1.29 - 1.18 (m, 2H), 0.63 (dtd, J =9.4, 5.4, 3.7 Hz, 1H), 0.52 - 0.36 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值411.1882，實驗值412.3 (M+1) +；滯留時間：2.02分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6-環丙基-13-甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (3 mg，9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.49 (s, 1H), 2.86 (s, 3H), 1.98 (td, J =9.3, 5.3 Hz, 2H), 1.89 - 1.74 (m, 2H), 1.69 - 1.45 (m, 4H), 1.44 - 1.33 (m, 2H), 1.32 - 1.05 (m, 3H), 0.68 - 0.59 (m, 1H), 0.55 - 0.35 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值411.1882，實驗值412.3 (M+1) +；滯留時間：2.02分鐘(LC方法A)。 實例 44 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲腈 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 80) 及 (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲腈 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 81)
Figure 02_image2589
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -18- 甲腈 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2591
將在微波小瓶中之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (400 mg，0.6662 mmol)於DMF (6 mL)中之溶液經氮氣脫氣5分鐘，且接著添加氰化銅(I) (298 mg，3.3273 mmol)。在90℃下在氮氣下攪拌所得懸浮液隔夜。將混合物冷卻至室溫且接著用EtOAc (75 mL)稀釋，且經由矽藻土墊過濾。濾液用NH 4OH水溶液(10% v/v，3 × 20 mL)洗滌。有機層用鹽水(2 × 30 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-18-甲腈( E/Z混合物) (310 mg，86%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.71 - 8.54 (m, 1H), 7.48 - 7.20 (m, 5H), 5.69 - 5.36 (m, 2H), 5.22 (d, J =11.2 Hz, 1H), 5.04 - 4.89 (m, 1H), 4.31 - 3.90 (m, 3H), 3.34 - 3.10 (m, 1H), 2.55 - 1.87 (m, 8H), 1.72 - 1.60 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值540.1733，實驗值541.0 (M+1) +；滯留時間：2.4分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲腈
Figure 02_image2593
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-18-甲腈( E/Z混合物) (230 mg，0.4043 mmol)溶解於甲醇(6 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加10%鈀/碳(260 mg，0.1222 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，用甲醇(25 mL)洗滌。減壓濃縮所得濾液，得到呈紅色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲腈(130 mg，76%)。ESI-MS m/z計算值422.16782，實驗值423.2 (M+1) +；滯留時間：2.14分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲腈 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 80) 及 (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲腈 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 81)
Figure 02_image2595
(12 R)-20-胺基-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲腈(162 mg，0.3835 mmol)之非鏡像異構混合物藉由對掌性SFC來純化，其使用Lux Cellulose-5管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，用40% MeOH/60% CO 2溶離，得到兩種單一鏡像異構物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈橙色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲腈(鏡像異構物1) (47 mg，28%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.34 (br. s., 1H), 4.25 - 3.85 (m, 3H), 3.83 - 3.71 (m, 1H), 2.58 - 2.38 (m, 2H), 2.19 - 1.90 (m, 5H), 1.79 - 1.65 (m, 2H), 1.64 - 1.37 (m, 6H), 0.97 - 0.82 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -80.74 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值422.1678，實驗值423.2 (M+1) +；滯留時間：3.29分鐘(LC方法C)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈橙色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲腈(鏡像異構物2) (35 mg，21%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.35 (s, 1H), 4.98 (br. s., 2H), 4.07 - 3.88 (m, 2H), 3.85 - 3.64 (m, 2H), 2.68 - 2.49 (m, 1H), 2.41 - 2.15 (m, 2H), 2.14 - 1.88 (m, 4H), 1.81 - 1.69 (m, 1H), 1.67 - 1.50 (m, 5H), 1.09 - 0.93 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值422.1678，實驗值423.2 (M+1) +；滯留時間：3.28分鐘(LC方法C)。 實例 45 ：製備 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24,25- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 82) 及 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24,25- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 83)
Figure 02_image2597
步驟 1 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[1-(6- 溴 -2- 吡啶基 )-2,2,2- 三氟 -1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2599
在室溫下攪拌1-(6-溴-2-吡啶基)-2,2,2-三氟-乙酮(146.8 mg，0.5779 mmol)及( N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(174.7 mg，0.5779 mmol)於DCM (2 mL)中之混合物30 min。接著，向DCM (2 mL)中逐滴添加6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(300 mg，0.7222 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。接著，混合物用EtOAc (50 mL)稀釋，用水及鹽水連續洗滌，接著經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至100% EtOAc之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(6-溴-2-吡啶基)-2,2,2-三氟-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(107 mg，21%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.43 (d, J =16.4 Hz, 1H), 8.99 (d, J =9.6 Hz, 1H), 8.67 (d, J =8.6 Hz, 1H), 8.05 - 7.94 (m, 2H), 7.85 - 7.75 (m, 1H), 5.55 - 5.39 (m, 1H), 4.96 - 4.78 (m, 2H), 4.20 (ddd, J =15.2, 10.7, 6.3 Hz, 1H), 3.53 (d, J =9.0 Hz, 1H), 3.35 (s, 1H), 2.33 (s, 1H), 2.09 (dd, J =13.8, 6.9 Hz, 1H), 2.01 (d, J =7.2 Hz, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.72 (s, 1H), 1.64 - 1.58 (m, 1H), 1.48 (d, J =2.5 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值692.11816，實驗值693.15 (M+1) +；滯留時間：0.67分鐘(LC方法T)。 步驟 2 ： N -[(15 S)-6- 羥基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24,25- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -23- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2601
向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(6-溴-2-吡啶基)-2,2,2-三氟-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(60 mg，0.08653 mmol)於乙腈(8 mL)中之攪拌溶液中添加乙酸鈀(II) (6 mg，0.02672 mmol)，隨後添加 三- 鄰-甲苯基膦(16 mg，0.05257 mmol)及三乙胺(100 µL，0.7175 mmol)，且向溶液鼓泡通入N 21 min。在150℃下用微波輻射加熱混合物1 h。將混合物冷卻至室溫，接著用EtOAc稀釋，且用飽和NH 4Cl (1×)及鹽水(1×)洗滌，接著經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮成黃色油，將該黃色油溶解於DMSO中且藉由使用40%至80%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15.0分鐘之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之 N-[(15 S)-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24,25-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (27 mg，51%)。ESI-MS m/z計算值612.19196，實驗值613.2 (M+1) +；滯留時間：0.59分鐘(LC方法T)。 步驟 3 ： (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24,25- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 82) 及 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24,25- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 83)
Figure 02_image2603
在使用3通轉接器之配備有氫氣球之圓底燒瓶中，向 N-[(15 S)-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24,25-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (27 mg，0.04408 mmol)於乙醇(5 mL)中之溶液中添加鈀/碳(12 mg，10% w/w，0.01128 mmol)。使混合物經受真空且用氮氣回填三次，接著經受真空。用氫氣填充燒瓶，接著攪拌混合物15小時。使混合物經受真空且用氮氣回填三次，接著用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土過濾。濃縮濾液且溶解於400 µL之1:3 TFA/二氯甲烷混合物中。攪拌反應物約1 h，且蒸發溶劑。將所得殘餘物溶解於2 mL MeOH中，且藉由使用30%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC來純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色非晶形固體狀之(15 R)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24,25-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(鹽酸鹽) (鏡像異構物1) (5.1 mg，40%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 8.79 (s, 2H), 7.75 (t, J =7.8 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.59 (d, J =7.8 Hz, 1H), 7.24 (d, J =7.7 Hz, 1H), 3.93 (tdd, J =9.8, 5.9, 3.0 Hz, 1H), 3.49 (q, J =8.8 Hz, 1H), 3.23 (t, J =9.0 Hz, 1H), 3.10 - 3.00 (m, 1H), 2.74 - 2.67 (m, 1H), 2.43 (dd, J =14.2, 10.6 Hz, 1H), 2.23 (dqd, J =19.9, 7.3, 2.7 Hz, 2H), 1.90 (dt, J =12.6, 6.6 Hz, 1H), 1.69 (dtd, J =28.3, 11.9, 7.9 Hz, 2H), 1.58 - 1.50 (m, 1H), 0.82 (qd, J =11.5, 4.6 Hz, 1H) ppm. 未觀測到一個可交換質子峰且假定與NMR中之DMSO峰重疊。ESI-MS m/z計算值514.1552，實驗值515.1 (M+1) +；滯留時間：1.76分鐘(LC方法J)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色非晶形固體狀之(15 R)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24,25-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(鹽酸鹽) (鏡像異構物2) (6.7 mg，55%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.27 (s, 2H), 7.83 (t, J =7.8 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.51 (d, J =7.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J =7.7 Hz, 1H), 3.75 (d, J =5.6 Hz, 1H), 3.48 (d, J =8.2 Hz, 1H), 3.20 - 3.13 (m, 1H), 3.13 - 3.06 (m, 1H), 2.69 - 2.57 (m, 3H), 2.17 - 2.03 (m, 2H), 1.87 (q, J =9.1, 6.1 Hz, 2H), 1.55 (dtd, J =28.5, 12.1, 11.4, 3.9 Hz, 2H), 0.94 (tt, J =10.8, 5.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值514.1552，實驗值515.1 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法J)。 實例 46 ：製備 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 84) 、 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 85) 、 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 異構物 3) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 86) 及 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 異構物 4) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 87)
Figure 02_image2605
步驟 1 ： 1-(4- 溴 -2- 吡啶基 )-2,2,2- 三氟 - 乙烷 -1,1- 二醇
Figure 02_image2607
在0℃下，分數份將戴斯-馬丁高碘烷(14.2 g，33.48 mmol)添加至1-(4-溴-2-吡啶基)-2,2,2-三氟-乙醇(7.095 g，27.71 mmol)於DCM (100 mL)中之攪拌溶液中，且歷經18小時將反應物升溫至環境溫度。反應混合物藉由添加1:1 NaHCO 3飽和水溶液/硫代硫酸鈉(20 mL)淬滅，攪拌10分鐘，且分離各層。水層用DCM (3 ×)萃取，且經合併之有機萃取物用1:1 NaHCO 3飽和水溶液/硫代硫酸鈉(3 × 50 mL)及鹽水(一次)洗滌，藉由穿過相分離筒柱使混合物乾燥，過濾且真空濃縮。然而，嘗試將殘餘物溶解於DCM中，析出(crashed out)白色不可溶固體，過濾，且真空濃縮濾液，得到淡黃色油狀物。油狀物藉由用0%至30% EtOAc/庚烷之梯度溶離之矽膠層析來純化。將相關級分合併且蒸發至乾燥，得到1-(4-溴-2-吡啶基)-2,2,2-三氟-乙烷-1,1-二醇(7.5 g, 100 %) 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 8.54 (d, J =5.3 Hz, 1H), 7.90 (d, J =1.8 Hz, 1H), 7.79 (dd, J =5.3, 1.9 Hz, 1H), 7.72 (s, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值270.9456，實驗值271.8 (M+1) +；滯留時間：0.6分鐘(LC方法V)。 步驟 2 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[1-(4- 溴 -2- 吡啶基 )-2,2,2- 三氟 -1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2609
向在75℃下在氮氣氛圍下之1-(4-溴-2-吡啶基)-2,2,2-三氟-乙烷-1,1-二醇(344.1 mg，1.265 mmol)及6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(300 mg，0.6326 mmol)於DMF (5.256 mL)中之攪拌溶液中添加( N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(382.4 mg，1.265 mmol)，且對所得混合物加蓋且攪拌15分鐘，接著冷卻至室溫。用EtOAc稀釋混合物，且用NaHCO 3飽和水溶液洗滌一次，用NH 4Cl飽和水溶液洗滌一次且用鹽水洗滌一次。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮成橙色油狀物，該橙色油狀物藉由使用100%己烷至100% EtOAc之淺梯度之矽膠層析純化，得到主要受MW=439副產物污染之產物。此材料藉由使用100% DCM至20% MeOH/DCM之淺梯度之矽膠層析進一步純化，得到 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(4-溴-2-吡啶基)-2,2,2-三氟-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(259.8 mg，59%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 9.56 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.51 (dd, J =5.3, 3.2 Hz, 1H), 8.15 - 8.08 (m, 1H), 7.70 (td, J =5.4, 1.7 Hz, 1H), 7.10 (d, J =5.5 Hz, 1H), 5.89 - 5.70 (m, 1H), 5.12 - 4.96 (m, 2H), 4.50 - 4.40 (m, 1H), 3.64 (dd, J =9.6, 6.7 Hz, 1H), 3.40 (t, J =8.2 Hz, 1H), 2.68 - 2.51 (m, 1H), 2.29 - 2.14 (m, 1H), 2.14 - 2.03 (m, 1H), 1.97 (ddt, J =11.3, 5.5, 2.7 Hz, 1H), 1.81 - 1.66 (m, 2H), 1.54 (d, J =1.4 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值692.11816，實驗值693.4 (M+1) +；滯留時間：0.79分鐘(LC方法T)。 步驟 3 ： (15 S)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -6- 醇
Figure 02_image2611
向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(4-溴-2-吡啶基)-2,2,2-三氟-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(288.7 mg，0.4163 mmol)於乙腈(17.32 mL)中之攪拌溶液中添加二乙醯氧基鈀(28.04 mg，0.1249 mmol)，隨後添加三鄰甲苯基膦(76.03 mg，0.2498 mmol)及三乙胺(46.42 µL，0.333 mmol)，且向溶液鼓泡通入氮氣1 min，接著在150℃下藉由微波輻射加熱2 h。將混合物冷卻至室溫，接著用EtOAc稀釋，且用NH 4Cl飽和水溶液洗滌一次且用鹽水洗滌一次，接著經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮成黃色油狀物。將此油狀物溶溶解於DCM/MeOH中，與矽藻土一起攪拌5分鐘，接著經由矽藻土墊過濾，用MeOH溶離。濃縮濾液成黃色泡沫，將該黃色泡沫溶解於DCM (3 mL)中且在室溫下攪拌。添加TFA (1.282 mL，16.64 mmol)，且在室溫下攪拌所得溶液4 h。藉由旋轉蒸發將溶液濃縮成殘餘物，接著溶解於DMSO中，過濾且藉由逆相HPLC來純化，其使用Phenomenex銷售之Luna C 18管柱(75 × 30 mm，5 μm粒徑) (pn：00C-4252-U0-AX)，且以50%至99%移動相B運行之雙重梯度進行15.0分鐘(移動相A = H 2O (5 mM HCl)，移動相B =乙腈，流速= 50 mL/min，注射體積=950 μL，且管柱溫度=25℃)，得到呈淺黃色固體狀之(15 S)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,8,19,24-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-6-醇( E/Z非鏡像異構物之混合物) (94.1 mg，44%)。ESI-MS m/z計算值512.1395，實驗值513.3 (M+1) +；滯留時間：0.46分鐘(LC方法T)。 步驟 4 ： (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 84) 、 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 85) 、 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 異構物 3) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 86) 及 (15 R)-23- 胺基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,8,19,24- 五氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 異構物 4) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 87)
Figure 02_image2613
向(15 S)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,8,19,24-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-6-醇( E/Z非鏡像異構物之混合物) (94 mg，0.1834 mmol)於乙醇(5.875 mL)中之溶液中添加鈀/碳(58.55 mg，10% w/w，0.05502 mmol)，且向溶液鼓泡通入氫氣5 min，接著燒瓶用氫氣球封蓋且攪拌4 h。向溶液鼓泡通入氮氣5 min，接著經由矽藻土過濾，用甲醇溶離，得到黃色溶液，濃縮該黃色溶液，得到黃色固體，將該黃色固體溶解於DMSO中，過濾且藉由逆相HPLC來純化，其使用Phenomenex銷售之Luna C 18管柱(75 × 30 mm，5 μm粒徑) (pn：00C-4252-U0-AX)，及以50%至99%移動相B運行之雙重梯度進行15.0分鐘(移動相A = H 2O (5 mM HCl)，移動相B =乙腈，流速= 50 mL/min，注射體積=950 μL，且管柱溫度=25℃)，得到呈黃色泡沫狀之4種異構產物：
峰1：(15 R)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,8,19,24-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(異構物1) (鹽酸鹽) (5.4 mg，4%)。ESI-MS m/z計算值514.1552，實驗值515.4 (M+1) +；滯留時間：0.78分鐘(LC方法M)。
峰2：(15 R)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,8,19,24-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(異構物2) (鹽酸鹽) (31.9 mg，24%)。ESI-MS m/z計算值514.1552，實驗值515.4 (M+1) +；滯留時間：0.85分鐘(LC方法M)。
峰3：(15 R)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,8,19,24-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(異構物3) (鹽酸鹽) (5.8 mg，5%)。ESI-MS m/z計算值514.1552，實驗值515.4 (M+1) +；滯留時間：0.98分鐘(LC方法M)。
峰4：(15 R)-23-胺基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,8,19,24-五氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(異構物4) (鹽酸鹽) (22.1 mg，16%)。ESI-MS m/z計算值514.1552，實驗值515.4 (M+1) +；滯留時間：1.06分鐘(LC方法M)。 假定各產物為單一非鏡像異構物/滯轉異構體組合。 實例 47 ：製備 (12 R )-20- 胺基 -6-( 噁烷 -4- 基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 88) 及 (12 R)-20- 胺基 -6-( 噁烷 -4- 基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 89)
Figure 02_image2615
步驟 1 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[ 羥基 ( 四氫哌喃 -4- 基 ) 甲基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2617
向四氫哌喃-4-甲醛(197.8 mg，1.733 mmol)於DCM (1.872 mL)中之溶液中添加6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(180 mg，0.4333 mmol)，隨後添加 N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(131 mg，0.4333 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。濃縮反應混合物，且藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之層析(12 g胺管柱)來純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[羥基(四氫哌喃-4-基)甲基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(150 mg，63%)。ESI-MS m/z計算值553.2512，實驗值554.4 (M+1) +；滯留時間：0.72分鐘(LC方法R)。 步驟 2 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-( 四氫哌喃 -4- 羰基 )-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2619
向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[羥基(四氫哌喃-4-基)甲基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(150 mg，0.2710 mmol)於DCM (2.076 mL)中之溶液中添加DMP (127.8 mg，0.3013 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物15分鐘且用NaHCO 3飽和水溶液淬滅。用DCM (2 × 25 mL)萃取，合併有機層，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-(四氫哌喃-4-羰基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(110 mg，74%)。ESI-MS m/z計算值551.23553，實驗值552.4 (M+1) +；滯留時間：0.88分鐘(LC方法R)。 步驟 3 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-(1- 羥基 -1- 四氫哌喃 -4- 基 - 戊 -4- 烯基 )-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2621
向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-(四氫哌喃-4-羰基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(56 mg，0.1015 mmol)於THF (1.3 mL)中之冰浴冷卻溶液逐滴添加溴(丁-3-烯基)鎂(670 µL，0.5 M，0.3350 mmol)。攪拌溶液20 min，接著藉由添加檸檬酸水溶液(101.4 µL，1 M，0.1014 mmol)淬滅，同時仍在冰浴中。用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取混合物，合併有機層，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-(1-羥基-1-四氫哌喃-4-基-戊-4-烯基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(20 mg，32%)。ESI-MS m/z計算值607.29816，實驗值608.5 (M+1) +；滯留時間：0.88分鐘(LC方法R)。 步驟 4 ： N -[(12 S)-6- 羥基 -6-( 噁烷 -4- 基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,9,17(21),18- 六烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2623
在100 mL圓底3頸燒瓶中，在50℃下在氮氣氛圍下加熱 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-(1-羥基-1-四氫哌喃-4-基-戊-4-烯基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(35 mg，0.05760 mmol)於DCE (17.5 mL)中之不斷 經由氮氣管脫氣之溶液。接著， 經由注射器添加[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基]-二氯-[(2-異丙氧基苯基)亞甲基]釕(8.9 mg，0.0142 mmol)於DCE (50 mL)中之溶液。在60℃下加熱所得混合物2 h。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色半固體狀之 N-[(12 S)-6-羥基-6-(噁烷-4-基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (25 mg，75%)。ESI-MS m/z計算值579.26685，實驗值580.48 (M+1) +；滯留時間：0.74分鐘(LC方法R)。 步驟 5 ： N -[(12 R)-6- 羥基 -6-( 噁烷 -4- 基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2625
向 N-[(12 S)-6-羥基-6-(噁烷-4-基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (22 mg，0.03796 mmol)於AcOH (594 µL)中之溶液中添加Pd/C (16 mg，10% w/w，0.01503 mmol)。混合物用氮氣沖洗，抽成真空且在氫氣球下攪拌4 h。經由矽膠塞過濾反應混合物，用乙酸乙酯充分洗滌，且接著濃縮濾液，得到呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-6-(噁烷-4-基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(18 mg，82%)。ESI-MS m/z計算值581.28253，實驗值582.5 (M+1) +；滯留時間：0.85分鐘(LC方法R)。 步驟 6 ： (12 R)-20- 胺基 -6-( 噁烷 -4- 基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 88) 及 (12 R)-20- 胺基 -6-( 噁烷 -4- 基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 89)
Figure 02_image2627
向 N-[(12 R)-6-羥基-6-(噁烷-4-基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(15.00 mg，0.02579 mmol)於DCM (308.2 µL)中之溶液中添加TFA (119.1 µL，1.546 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2 h。濃縮反應混合物，接著藉由對掌性SFC來純化，其使用Chiral Technologies銷售之OD-H管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用5%至15% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離，得到兩種單一非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-(噁烷-4-基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (4 mg，32%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.49 (s, 1H), 4.14 - 4.00 (m, 1H), 3.89 (dd, J =10.6, 5.1 Hz, 2H), 3.52 (q, J =8.6 Hz, 1H), 3.37 - 3.22 (m, 3H), 2.48 (dtt, J =9.1, 6.0, 2.9 Hz, 1H), 2.12 (ddt, J =12.1, 6.3, 3.2 Hz, 1H), 2.05 - 1.25 (m, 16H), 0.90 (ddd, J =12.2, 10.5, 5.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值481.23007，實驗值482.4 (M+1) +；滯留時間：3.02分鐘(LC方法A)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-(噁烷-4-基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (4 mg，32%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.49 (s, 1H), 4.16 - 4.02 (m, 1H), 3.89 (dd, J =10.6, 5.1 Hz, 2H), 3.52 (q, J =8.6 Hz, 1H), 3.39 - 3.21 (m, 5H), 2.48 (dtt, J =9.1, 6.0, 2.9 Hz, 1H), 2.12 (ddt, J =12.1, 6.3, 3.2 Hz, 1H), 2.06 - 1.29 (m, 14H), 0.90 (ddd, J =12.2, 10.5, 5.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值481.23007，實驗值482.4 (M+1) +；滯留時間：2.03分鐘(LC方法A)。 實例 48 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18- 環丙基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1 ) ( 化合物 90) 及 (12 R)-20- 胺基 -18- 環丙基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 91)
Figure 02_image2629
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18- 環丙基 -20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2631
藉由鼓泡通入氮氣將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (100 mg，0.1465 mmol)於甲苯(2.0 mL)及水(0.2 mL)中之溶液脫氣10分鐘。向此混合物中添加磷酸鉀(96 mg，0.4523 mmol)、四氟硼酸三環己基膦(11.4 mg，0.0310 mmol)、乙酸鈀(II)(3.3 mg，0.0147 mmol)及環丙基硼酸(33 mg，0.3842 mmol)，接著將小瓶加蓋且在設定為100℃之油浴中加熱21小時。將反應混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土過濾，用乙酸乙酯(15 mL)洗滌。將濾液移轉至具有碳酸氫鈉飽和水溶液(30 mL)之60 mL分液漏斗，且用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(~15 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(4 g管柱)純化，得到呈琥珀色油狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-環丙基-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (69 mg，85%)。ESI-MS m/z計算值555.20935，實驗值556.2 (M+1) +；滯留時間：2.47分鐘(LC方法W)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 環丙基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2633
在氮氣下吹掃(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-環丙基-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (104 mg，0.1872 mmol)於甲醇(6 mL)中之溶液四次。添加10%鈀/碳(132 mg，0.062 mmol)，接著在氫氣下吹掃三次。接著，在室溫下劇烈攪拌反應物6.5 h。添加更多10%鈀/碳(131 mg，0.0615 mmol)且再攪拌6.5 h。在氮氣下吹掃之後，經由矽藻土過濾反應混合物，用甲醇(40 mL)洗滌。減壓濃縮濾液，得到呈螢光黃色泡沫固體狀之(12 R)-20-胺基-18-環丙基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(75 mg，82%)。ESI-MS m/z計算值437.20386，實驗值438.2 (M+1) +；滯留時間：2.17分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 環丙基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 90) 及 (12 R)-20- 胺基 -18- 環丙基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 91)
Figure 02_image2635
外消旋(12 R)-20-胺基-18-環丙基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(97 mg，0.2217 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Chiral Technologies銷售之OD-H管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，用10%至25% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-環丙基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (28.9 mg，59%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.51 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.82 (s, 2H), 3.87 (q, J =8.0 Hz, 1H), 3.76 (d, J =7.9 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.27 (d, J =11.4 Hz, 1H), 2.12 (d, J =7.9 Hz, 1H), 2.03 - 1.83 (m, 3H), 1.80 - 1.67 (m, 1H), 1.49 (t, J =12.4 Hz, 6H), 1.07 (q, J =9.7, 7.6 Hz, 1H), 0.99 - 0.88 (m, 1H), 0.87 - 0.69 (m, 2H), 0.62 (dd, J =9.6, 5.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值437.20386，實驗值438.0 (M+1) +；滯留時間：2.1分鐘(LC方法D)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-環丙基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (29.0 mg，60%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.48 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.82 (s, 2H), 4.11 - 3.72 (m, 2H), 3.36 (dd, J =9.0, 3.7 Hz, 1H), 2.43 - 2.23 (m, 2H), 2.15 (dddd, J =11.7, 9.0, 5.9, 2.6 Hz, 1H), 2.10 - 1.94 (m, 2H), 1.90 (ddt, J =10.9, 7.2, 3.6 Hz, 1H), 1.83 - 1.58 (m, 3H), 1.58 - 1.28 (m, 5H), 1.09 (tdd, J =9.2, 5.9, 3.8 Hz, 1H), 1.01 - 0.81 (m, 2H), 0.81 - 0.68 (m, 1H), 0.62 (dtd, J =9.3, 5.8, 3.9 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值437.20386，實驗值438.0 (M+1) +；滯留時間：2.1分鐘(LC方法D)。 實例 49 ：製備 (15 R)-23- 胺基 -8- 甲氧基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 92) 及 (15 R)-23- 胺基 -8- 甲氧基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 93)
Figure 02_image2637
步驟 1 ： 1-(5- 溴 -2- 甲氧基 - 苯基 )-2,2,2- 三氟 - 乙醇
Figure 02_image2639
向5-溴-2-甲氧基苯甲醛(12.0 g，55.8 mmol)及Me 3SiCF 3(9.9 mL，67 mmol)於140 mL THF中之冰冷溶液中添加22.9 mL n Bu 4NF·H 2O (1.0 M於THF中，22.9 mmol)。將金色溶液升溫至環境溫度且攪拌10 h。緩慢添加4.4 M HCl水溶液(25.8 mL，111.6 mmol)。攪拌混合物1 h，接著用30 mL EtOAc稀釋，且小心地添加固體Na 2CO 3。一旦發泡停止，溶液經MgSO 4乾燥，過濾且減壓濃縮呈橙色油性殘餘物。此材料藉由矽膠層析(梯度溶離，10:1至4:1 己烷/EtOAc)純化，得到呈無色油狀之1-(5-溴-2-甲氧基-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇(4.8 g，30%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.47 (d, J =2.3 Hz, 1H), 7.38 (dd, J =8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.74 (d, J =8.8 Hz, 1H), 5.22 (q, J =6.8 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 步驟 2 ： 1-(5- 溴 -2- 甲氧基 - 苯基 )-2,2,2- 三氟 - 乙酮
Figure 02_image2641
向1-(5-溴-2-甲氧基-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇(4.8 g，16.84 mmol)於DCM (168.4 mL)中之溶液中添加TEMPO (大致131.6 mg，0.842 mmol)，隨後添加PhI(OAc) 2(大致10.85 g，33.68 mmol)。在室溫下攪拌反應物隔夜，接著用125 mL 1 M硫代硫酸鈉溶液淬滅。分離混合物，且水層用二氯甲烷萃取三次。將經合併之有機物合併且濃縮至乾燥。粗材料經由用0%至30% EtOAc/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化。將純級分合併且濃縮，得到1-(5-溴-2-甲氧基-苯基)-2,2,2-三氟-乙酮(3.8 g，80%)，其直接用於下一步驟中。 步驟 3 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[1-(5- 溴 -2- 甲氧基 - 苯基 )-2,2,2- 三氟 -1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2643
向在75℃下在氮氣氛圍下之1-(5-溴-2-甲氧基-苯基)-2,2,2-三氟-乙酮(298.3 mg，1.054 mmol)及6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(250 mg，0.5272 mmol)於DMF (4.38 mL)中之攪拌溶液中添加( N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(378.6 mg，1.252 mmol)，且將所得混合物加蓋且攪拌15分鐘，接著冷卻至室溫。用EtOAc稀釋混合物，且用NaHCO 3飽和水溶液洗滌一次，接著用NH 4Cl飽和水溶液洗滌一次且用鹽水洗滌一次。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮成橙色油狀物。粗橙色油狀物藉由逆相HPLC來純化，其使用Phenomenex銷售之Luna C 18管柱(75 × 30 mm，5 μm粒徑) (pn：00C-4252-U0-AX)，且以50%至99%移動相B運行之雙重梯度進行15.0分鐘(移動相A = H 2O (5 mM HCl)，移動相B =乙腈，流速=50 mL/min，注射體積= 950 μL，且管柱溫度=25℃)，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(5-溴-2-甲氧基-苯基)-2,2,2-三氟-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(230.7 mg，61%)。ESI-MS m/z計算值721.1334，實驗值724.4 (M+1) +；滯留時間：0.76分鐘(LC方法T)。 步驟 4 ： (15 S)-23- 胺基 -8- 甲氧基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -6- 醇 ( E/Z 非鏡像異構物之混合物 )
Figure 02_image2645
向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(5-溴-2-甲氧基-苯基)-2,2,2-三氟-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(229.6 mg，0.3178 mmol)於乙腈(13.78 mL)中之攪拌溶液中添加二乙醯氧基鈀(21.4 mg，0.09532 mmol)，隨後添加三鄰甲苯基膦(58.04 mg，0.1907 mmol)及三乙胺(35.43 µL，0.2542 mmol)，且向溶液鼓泡通入N 21 min，接著在150℃下藉由微波輻射加熱2 h。將混合物冷卻至室溫，接著與矽藻土一起攪拌5分鐘，且經由矽藻土過濾，用EtOAc溶離。濾液用NH 4Cl飽和水溶液洗滌一次且用鹽水洗滌一次，接著經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮呈黃色固體，將其溶解於DCM (2.386 mL)中且在室溫下攪拌。添加TFA (979.1 µL，12.71 mmol)，且在室溫下攪拌所得溶液1 h。混合物用DCM稀釋且用1 N NaHCO 3洗滌(小心：氣體釋放)，接著用DCM反萃取水相兩次。合併有機層，經MgSO 4乾燥，過濾且濃縮成橙色糊漿。橙色粗材料藉由使用100%己烷至100% EtOAc之淺梯度之矽膠層析純化，得到(15 S)-23-胺基-8-甲氧基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-6-醇( E/Z非鏡像異構物之混合物) (55.5 mg，32%)。ESI-MS m/z計算值541.15485，實驗值542.4 (M+1) +；滯留時間：0.55分鐘(LC方法T)。 步驟 5 ： (15 R)-23- 胺基 -8- 甲氧基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 92) 及 (15 R)-23- 胺基 -8- 甲氧基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 93)
Figure 02_image2647
向(15 S)-23-胺基-8-甲氧基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-6-醇( E/Z非鏡像異構物之混合物) (55.5 mg，0.1025 mmol)於乙醇(3.469 mL)中之溶液中添加鈀/碳(32.72 mg，10% w/w，0.03075 mmol)，且向溶液鼓泡通入氫氣5 min，接著燒瓶用氫氣球封蓋且攪拌1 h。添加鈀/碳(32.72 mg，10% w/w，0.03075 mmol)，且繼續在氫氣下攪拌1 h。添加鈀/碳(32.72 mg，10% w/w，0.03075 mmol)，接著在100 psi壓力之氫氣下攪拌50分鐘。釋放壓力且用氮氣回填，接著添加矽藻土且攪拌5 min，接著經由矽藻土墊過濾，用甲醇溶離。濃縮濾液，溶解於DMSO中，接著過濾。材料藉由逆相HPLC來純化，其使用Phenomenex銷售之Luna C 18管柱(75 × 30 mm，5 μm粒徑) (pn：00C-4252-U0-AX)，且以50%至99%移動相B運行之雙重梯度進行15.0分鐘(移動相A = H 2O (5 mM HCl)，移動相B =乙腈，流速= 50 mL/min，注射體積=950 μL且管柱溫度= 25℃)，得到兩種產物峰：
峰1仍混雜有MW =541雜質，因此其藉由使用100%己烷至100% EtOAc之淺梯度之矽膠層析進一步純化，得到呈黃色固體狀之(15 R)-23-胺基-8-甲氧基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(鏡像異構物1) (6.2 mg，17%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.35 (s, 1H), 8.04 (d, J =2.2 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.13 (dd, J =8.3, 2.2 Hz, 1H), 6.85 (d, J =8.3 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 3.89 - 3.78 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.47 (d, J =8.1 Hz, 1H), 3.17 (t, J =8.9 Hz, 1H), 2.97 (d, J =14.6 Hz, 1H), 2.44 - 2.36 (m, 1H), 2.16 (dt, J =11.7, 5.6 Hz, 1H), 1.97 - 1.90 (m, 1H), 1.89 - 1.82 (m, 2H), 1.79 (d, J =6.6 Hz, 1H), 1.60 (t, J =10.3 Hz, 1H), 1.52 (dt, J =11.3, 5.5 Hz, 1H), 0.70 (dd, J =10.8, 5.2 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值543.17053，實驗值544.4 (M+1) +；滯留時間：1.09分鐘(LC方法M)。
峰2分離為呈黃色固體狀之(15 R)-23-胺基-8-甲氧基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(鏡像異構物2) (4.7 mg，12%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.66 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.20 (dd, J =8.5, 2.1 Hz, 1H), 6.98 (d, J =8.5 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 3.82 (dt, J =9.5, 5.0 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.47 (q, J =9.3, 8.7 Hz, 1H), 3.18 (t, J =8.8 Hz, 1H), 2.97 - 2.89 (m, 1H), 2.45 (d, J =3.0 Hz, 1H), 2.15 (dt, J =12.0, 5.9 Hz, 1H), 1.96 (dt, J =7.9, 4.0 Hz, 1H), 1.85 (q, J =5.9 Hz, 2H), 1.66 (t, J =12.5 Hz, 2H), 1.52 (dt, J =11.2, 5.7 Hz, 1H), 0.73 (dq, J =11.1, 6.0 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值543.17053，實驗值544.4 (M+1) +；滯留時間：1.28分鐘(LC方法M)。 實例 50 ：製備 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 94) 、 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 95) 、 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 96) 及 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 97)
Figure 02_image2649
步驟 1 ： 6-(1- 乙氧基羰基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2651
在20 mL密封小瓶中，在室溫下，將6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(725 mg，2.68 mmol)溶解於乙腈(7.25 mL)及DMSO (7.25 mL)中，隨後添加DIEA (2.75 mL，15.79 mmol)及2-胺基己-5-烯酸乙酯(850 mg，5.407 mmol)，且接著攪拌混合物18 h。濃縮反應物，且接著粗材料藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯，隨後100% DCM至20%甲醇/DCM之矽膠層析純化，得到呈深橙色泡沫狀之6-(1-乙氧基羰基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(757 mg，72%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.20 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.07 (d, J =7.1 Hz, 1H), 5.80 (ddt, J =16.6, 10.4, 6.1 Hz, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 2H), 4.64 (ddd, J =9.1, 7.0, 4.2 Hz, 1H), 4.09 (qd, J =7.1, 2.3 Hz, 2H), 2.19 - 2.08 (m, 2H), 2.08 - 1.91 (m, 2H), 1.15 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值391.09912，實驗值392.2 (M+1) +；滯留時間：1.53分鐘(LC方法A)。 步驟 2 ： 2-[[6-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ] 己 -5- 烯酸乙酯
Figure 02_image2653
向冷卻至0℃之6-(1-乙氧基羰基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(52 mg，0.1329 mmol)於NMP (3.5 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(鹽酸鹽) (53 mg，0.1632 mmol)，隨後添加HATU (65 mg，0.1709 mmol)。接著，添加DIEA (150 µL，0.8612 mmol)，且攪拌反應混合物，使其升溫至室溫持續18 h。反應物用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100% DCM至20%甲醇/DCM之矽膠層析純化，得到呈黃色泡沫狀之2-[[6-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]己-5-烯酸乙酯(42.6 mg，48%)。ESI-MS m/z計算值661.19714，實驗值662.2 (M+1) +；滯留時間：1.57分鐘(LC方法J)。 步驟 3 ： 2-[[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ] 己 -5- 烯酸乙酯
Figure 02_image2655
將2-[[6-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]己-5-烯酸乙酯(573 mg，0.8661 mmol)及DIEA (500 µL，2.871 mmol)於乙腈(18 mL)中之溶液加熱至50℃，接著一次性添加 對-甲苯磺醯氯(250 mg，1.311 mmol)。在70℃下加熱所得混合物90分鐘。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和水溶液(50 mL)淬滅，且攪拌15分鐘。接著，有機材料用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。有機物經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]己-5-烯酸乙酯(400 mg，72%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.64 (s, 1H), 8.31 (t, J =7.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J =3.5 Hz, 5H), 5.94 - 5.72 (m, 2H), 5.38 (dt, J =17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.25 (dt, J =10.4, 1.5 Hz, 1H), 4.99 - 4.89 (m, 2H), 4.80 (d, J =10.6 Hz, 1H), 4.63 (td, J =9.4, 8.9, 2.7 Hz, 1H), 4.53 (dd, J =10.5, 1.6 Hz, 1H), 4.02 (q, J =7.1 Hz, 2H), 3.31 (s, 1H), 2.49 - 2.45 (m, 1H), 2.10 (td, J =9.4, 7.7, 4.9 Hz, 3H), 2.03 - 1.94 (m, 1H), 1.04 (td, J =7.1, 2.2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值643.1865，實驗值644.2 (M+1) +；滯留時間：1.92分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ： 6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 -12- 甲酸乙酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2657
在250 mL圓底燒瓶中，將Zhan 1B (110 mg，0.1499 mmol)之不斷經由氮氣管脫氣之溶液溶解於DCE (200 mL)中，且在氮氣氛圍下將混合物加熱至50℃。接著，經由注射器添加2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]己-5-烯酸乙酯(400 mg，0.6216 mmol)於DCE (10 mL)中之溶液。在75℃下加熱所得混合物2小時。濃縮殘餘物且藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈灰白色固體狀之6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-12-甲酸乙酯( E/Z混合物) (315 mg，82%)。ESI-MS m/z計算值615.1553，實驗值616.2 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法J)。 步驟 5 ： 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯
Figure 02_image2659
在50 mL圓底燒瓶中，用氮氣吹掃6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-12-甲酸乙酯( E/Z混合物) (45 mg，0.07311 mmol)於AcOH (780 µL)及乙酸乙酯(800 µL)中之溶液。接著添加Pd/C (78 mg，10% w/w，0.07329 mmol)。混合物經氮氣脫氣，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物4 h。過濾反應物，且材料藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲酸乙酯(32 mg，88%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.68 (d, J =1.7 Hz, 1H), 7.58 (d, J =3.4 Hz, 1H), 6.15 (d, J =6.7 Hz, 2H), 5.60 (t, J =5.1 Hz, 1H), 4.45 - 4.29 (m, 1H), 4.22 (dddd, J =17.9, 10.8, 7.1, 3.7 Hz, 2H), 2.29 (ddt, J =24.4, 14.2, 8.1 Hz, 2H), 2.14 - 2.02 (m, 1H), 1.81 (dt, J =13.9, 7.7 Hz, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.43 (dt, J =20.9, 7.9 Hz, 3H), 1.25 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值497.14978，實驗值498.2 (M+1) +；滯留時間：1.32分鐘(LC方法J)。 步驟 6 ： 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 94) 、 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 95) 、 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 96) 及 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸乙酯 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 97)
Figure 02_image2661
外消旋17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲酸乙酯(32 mg，0.06434 mmol)藉由正相SFC純化以分離三種單獨級分(鏡像異構物1；一起溶離之鏡像異構物2及3；及鏡像異構物4)，其使用Chiral Technologies銷售之IC管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑) (pn：83445)，且等度運行12% MeOH [+ 20 mM NH 3]/88% CO 2，流速為10 mL/min (注射體積= 70 μL，濃度為22 mg/mL於無調節劑之MeOH中，管柱溫度= 40℃)。接著，鏡像異構物2及3藉由正相SFC分離，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑) (pn：00G-4491-P0-AX)，且等度運行10% MeOH [+ 20 mM NH 3]/90% CO 2，流速為10 mL/min (注射體積= 70 μL，濃度為12 mg/mL於無調節劑之MeOH中，管柱溫度= 40℃)。自此等兩種SFC純化分離出四種個別鏡像異構物：
鏡像異構物1：黃色固體，17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲酸乙酯(鏡像異構物1) (3.1 mg，38%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.77 - 5.63 (m, 1H), 4.43 (dd, J =9.4, 3.9 Hz, 1H), 4.30 (qd, J =7.1, 5.2 Hz, 2H), 3.74 (d, J =51.8 Hz, 2H), 3.50 (s, 1H), 2.50 - 2.40 (m, 2H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 1.85 (ddt, J =10.4, 6.9, 3.6 Hz, 1H), 1.77 - 1.65 (m, 3H), 1.53 - 1.40 (m, 3H), 1.36 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值497.14978，實驗值498.1 (M+1) +；滯留時間：1.92分鐘(LC方法A)。
鏡像異構物2：黃色固體，17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲酸乙酯(鏡像異構物2) (1.2 mg，15%)。ESI-MS m/z計算值497.14978，實驗值498.2 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法A)。
鏡像異構物3：黃色固體，17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲酸乙酯(鏡像異構物3) (1.5 mg，19%)。ESI-MS m/z計算值497.14978，實驗值498.1 (M+1) +；滯留時間：1.92分鐘(LC方法A)。
鏡像異構物4：黃色固體，17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲酸乙酯(鏡像異構物4) (3.1 mg，38%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.42 - 7.32 (m, 1H), 5.65 (d, J =3.9 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.39 (dt, J =9.7, 3.5 Hz, 1H), 4.34 - 4.22 (m, 2H), 3.77 (s, 1H), 2.51 (ddt, J =10.5, 7.4, 3.1 Hz, 1H), 2.36 (t, J =12.4 Hz, 1H), 2.30 - 2.20 (m, 1H), 2.03 - 1.89 (m, 1H), 1.75 (ddt, J =17.9, 12.0, 6.0 Hz, 3H), 1.58 - 1.45 (m, 3H), 1.34 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值497.14978，實驗值498.1 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法A)。 實例 51 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 二甲基磷醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 98) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-( 二甲基磷醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 99)
Figure 02_image2663
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18-( 二甲基磷醯基 )-20- 胺基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2665
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-胺( E/Z混合物) (120 mg，0.2126 mmol)、二甲基膦氧化物(50 mg，0.6406 mmol)、Xantphos (13 mg，0.0225 mmol)及磷酸三鉀(160 mg，0.7538 mmol)於經脫氣之 N, N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之懸浮液中添加乙酸鈀(II) (5 mg，0.0223 mmol)。將混合物加熱至120℃隔夜。冷卻至室溫後，混合物用乙酸乙酯(10 mL)稀釋且經由矽藻土過濾。減壓濃縮濾液且用二甲基亞碸(3 mL)稀釋。所得混合物藉由使用梯度為5%至90%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色泡沫狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(二甲基磷醯基)-20-胺基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (20 mg，17%)。ESI-MS m/z計算值561.2117，實驗值562.2 (M+1) +；滯留時間：2.32分鐘(LC方法W)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 二甲基磷醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2667
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(二甲基磷醯基)-20-胺基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (20 mg，0.0338 mmol)於甲醇(1 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加5%鈀/碳(22 mg，0.0103 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液。所得混合物藉由使用梯度為5%至95%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(二甲基磷醯基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(9 mg，50%)。ESI-MS m/z計算值473.1804，實驗值474.2 (M+1) +；滯留時間：3.08分鐘(LC方法C)。 步驟 3 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 二甲基磷醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 98) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-( 二甲基磷醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 99)
Figure 02_image2669
(12 R)-20-胺基-18-(二甲基磷醯基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(8.2 mg，0.01732 mmol)藉由SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用30%至50% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(二甲基磷醯基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (2.7 mg，33%)。ESI-MS m/z計算值473.18036，實驗值474.0 (M+1) +；滯留時間：2.33分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(二甲基磷醯基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (0.9 mg，11%)。ESI-MS m/z計算值473.18036，實驗值474.0 (M+1) +；滯留時間：2.31分鐘(LC方法A)。 實例 52 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -6-( 羥基甲基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 100) 及 (12 R)-20- 胺基 -6-( 羥基甲基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 101)
Figure 02_image2671
步驟 1 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-(2- 苯甲氧基 -1- 羥基 - 乙基 )-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2673
向2-苯甲氧基乙醛(355.7 µL，2.532 mmol)於DCM (2.735 mL)中之溶液中添加6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(263 mg，0.6331 mmol)，隨後添加 N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(191.4 mg，0.6331 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。濃縮反應混合物，且藉由使用梯度為0%至30% EtOAc/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-(2-苯甲氧基-1-羥基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(300 mg，80%)。ESI-MS m/z計算值589.2512，實驗值590.4 (M+1) +；滯留時間：0.87分鐘(LC方法R)。 步驟 2 ： N -(2-{5-[2-( 苯甲氧基 ) 乙醯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 }-6-[(2 S)-2-( 丙 -2- 烯 -1- 基 ) 吡咯啶 -1- 基 ]-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2675
向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-(2-苯甲氧基-1-羥基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(270 mg，0.3892 mmol)於DCM (3.176 mL)中之溶液中添加DMP (215.9 mg，0.509 mmol)，且攪拌混合物15 min。反應物用NaHCO 3飽和水溶液淬滅且用DCM (2 × 25 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈橙色固體狀之 N-(2-{5-[2-(苯甲氧基)乙醯基]-1,3,4-噁二唑-2-基}-6-[(2 S)-2-(丙-2-烯-1-基)吡咯啶-1-基]-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯(180 mg，79%)。ESI-MS m/z計算值587.23553，實驗值588.4 (M+1) +；滯留時間：0.92分鐘(LC方法R)。 步驟 3 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[1-( 苯甲氧基甲基 )-1- 羥基 - 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2677
將 N-(2-{5-[2-(苯甲氧基)乙醯基]-1,3,4-噁二唑-2-基}-6-[(2 S)-2-(丙-2-烯-1-基)吡咯啶-1-基]-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯(180 mg，0.3063 mmol)於THF (4.0 mL)中之溶液在冰浴中冷卻，且逐滴添加溴(丁-3-烯基)鎂(2.02 mL，0.5 M，1.010 mmol)，且攪拌溶液20分鐘。反應物藉由添加檸檬酸(306 µL，1 M，0.306 mmol)淬滅，同時仍在冰浴中，且用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。藉由使用梯度為0%至30% EtOAc/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(苯甲氧基甲基)-1-羥基-戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(60 mg，30%)。ESI-MS m/z計算值643.29816，實驗值644.5 (M+1) +；滯留時間：0.83分鐘(LC方法T)。 步驟 4 ： N -[(12 S)-6-[( 苯甲氧基 ) 甲基 ]-6- 羥基 -18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,9,17(21),18- 六烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2679
在100 mL圓底3頸燒瓶中，在氮氣氛圍下，將 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[1-(苯甲氧基甲基)-1-羥基-戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(60 mg，0.09321 mmol)於DCE (30.0 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液加熱至50℃。接著，經由注射器添加[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基]-二氯-[(2-異丙氧基苯基)亞甲基]釕(14.40 mg，0.02298 mmol)於DCE (5 mL)中之溶液。在60℃下加熱所得混合物2 h。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。接著，殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24公克管柱)純化，得到呈黃色半固體狀之 N-[(12 S)-6-[(苯甲氧基)甲基]-6-羥基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (22 mg，38%)。ESI-MS m/z計算值615.26685，實驗值616.5 (M+1) +；滯留時間：0.74分鐘(LC方法T)。 步驟 5 ： N -[(12 R)-6- 羥基 -6-( 羥基甲基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 鏡像異構物 1) 及 N -[(12 R)-6- 羥基 -6-( 羥基甲基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 鏡像異構物 2)
Figure 02_image2681
向 N-[(12 S)-6-[(苯甲氧基)甲基]-6-羥基-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (25 mg，0.04061 mmol)於AcOH (432.0 µL)中之溶液中添加Pd/C (11.07 mg，10% w/w，0.0104 mmol)。在室溫下在氫氣球下攪拌混合物4 h。經由矽藻土過濾反應混合物，用乙酸乙酯充分洗滌，且接著濃縮濾液。藉由使用梯度為0%至20% EtOAc/己烷之矽膠層析(12 g管柱)進行20分鐘純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-6-(羥基甲基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (9 mg，42%)。ESI-MS m/z計算值527.23553，實驗值528.4 (M+1) +；滯留時間：0.67分鐘(LC方法R)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-6-(羥基甲基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (9 mg，42%)。ESI-MS m/z計算值527.23553，實驗值528.4 (M+1) +；滯留時間：0.66分鐘(LC方法R)。 步驟 6 ： (12 R)-20- 胺基 -6-( 羥基甲基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 100)
Figure 02_image2683
向 N-[(12 R)-6-羥基-6-(羥基甲基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (9 mg，0.01706 mmol)於DCM (82.2 µL)中之溶液中添加TFA (35.01 µL，0.4544 mmol)，且在室溫下攪拌混合物20 min。濃縮反應混合物，用乙酸乙酯稀釋且用NaHCO 3飽和水溶液洗滌。分離有機層且經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-(羥基甲基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (5 mg，65%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.67 (s, 1H), 4.20 - 4.12 (m, 1H), 3.91 (dd, J =94.4, 11.6 Hz, 2H), 3.70 - 3.60 (m, 1H), 3.42 (s, 1H), 2.58 (s, 1H), 2.30 - 2.19 (m, 2H), 2.03 - 1.94 (m, 2H), 1.88 - 1.80 (m, 1H), 1.71 - 1.60 (m, 3H), 1.59 - 1.48 (m, 3H), 1.03 - 0.87 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值427.18314，實驗值428.3 (M+1) +；滯留時間：1.76分鐘(LC方法A)。 步驟 7 ： (12 R)-20- 胺基 -6-( 羥基甲基 )-18-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 101)
Figure 02_image2685
向 N-[(12 R)-6-羥基-6-(羥基甲基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (8.5 mg，0.01611 mmol)於DCM (174.7 µL)中之溶液中添加TFA (74.39 µL，0.9656 mmol)，且在室溫下攪拌混合物20 min。濃縮反應混合物，用乙酸乙酯稀釋且用NaHCO 3飽和水溶液洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-(羥基甲基)-18-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (5 mg，69%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.70 (s, 1H), 4.11 (t, J =7.1 Hz, 1H), 3.89 (dd, J =79.9, 10.7 Hz, 2H), 3.65 (s, 1H), 3.43 (d, J =9.3 Hz, 1H), 2.66 (d, J =10.2 Hz, 1H), 2.43 (dd, J =12.5, 10.1 Hz, 1H), 2.31 - 2.16 (m, 1H), 2.02 (ddt, J =10.0, 6.7, 3.3 Hz, 1H), 1.92 - 1.71 (m, 3H), 1.70 - 1.58 (m, 5H), 0.95 (td, J =11.3, 9.4, 5.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值427.18314，實驗值428.3 (M+1) +；滯留時間：1.74分鐘(LC方法A)。 實例 53 ：製備 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 102) 、 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 103) 、 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 104) 及 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 105)
Figure 02_image2687
步驟 1 ： 2-[[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ] 戊 -4- 烯 -1- 醇
Figure 02_image2689
在20 mL小瓶中，在室溫下，將三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (350 mg，0.5381 mmol)溶解於乙腈(6 mL)中，隨後添加2-胺基戊-4-烯-1-醇(鹽酸鹽) (225 mg，1.635 mmol)，接著添加DIEA (500 µL，2.871 mmol)，且接著攪拌混合物16小時。混合物用乙酸乙酯稀釋，用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。材料在使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)上純化，得到呈黃色固體狀之2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]戊-4-烯-1-醇(180 mg，56%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.56 (s, 1H), 7.51 (d, J =7.9 Hz, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 5.85 (ddt, J =16.8, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.78 - 5.63 (m, 1H), 5.10 (dq, J =17.2, 1.7 Hz, 1H), 5.05 - 4.97 (m, 2H), 4.92 (ddd, J =10.4, 8.1, 3.5 Hz, 2H), 4.76 (dd, J =11.0, 1.5 Hz, 1H), 4.60 (d, J =10.7 Hz, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.55 (dtd, J =16.3, 11.0, 5.6 Hz, 2H), 2.58 - 2.51 (m, 2H), 2.38 (t, J =6.7 Hz, 2H), 2.30 - 2.17 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值601.17596，實驗值602.2 (M+1) +；滯留時間：1.69分鐘。 O-連接的區位異構副產物較晚溶離出(LC方法J)。 步驟 2 ： [6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12- 基 ] 甲醇
Figure 02_image2691
在150 mL燒瓶中，將0.25 eq之Zhan催化劑-1B：二氯[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑啶亞基][[5-[(二甲基胺基)磺醯基]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亞甲基-C]釕(II) (53 mg，0.07223 mmol)溶解於DCE (100 mL)中。接著，經由注射器添加2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]戊-4-烯-1-醇(190 mg，0.3159 mmol)於DCE (5 mL)中之溶液。將所得混合物加熱至70℃持續2 h。濃縮殘餘物，且藉由使用梯度為100%己烷至75%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈茶色固體狀之[6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-基]甲醇(58 mg，32%)。ESI-MS m/z計算值573.1447，實驗值574.0 (M+1) +；滯留時間：1.4分鐘(LC方法J)。 步驟 3 ： 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2693
在50 mL圓底燒瓶中，用氮氣吹掃[6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-基]甲醇(58 mg，0.1011 mmol)於乙酸乙酯(4 mL)中之溶液。接著添加Pd/C (110 mg，10% w/w，0.1034 mmol)。混合物經氮氣脫氣，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物6 h。過濾反應物，且材料藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到未完全分開之兩個峰。因此，將經合併之4種立體異構物之混合物一起濃縮，得到黃色固體17-胺基-12-(羥基甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(34.5 mg，75%)。ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.46分鐘(LC方法A)。 步驟 4 ： 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 102) 、 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 103) 、 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 104) 及 17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 105)
Figure 02_image2695
使外消旋17-胺基-12-(羥基甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(31 mg，0.06808 mmol)經受兩種單獨SFC純化以拆分所有四種單一鏡像異構物。第一種製備型分離採用正相SFC方法，其使用Phenomenex銷售之Phenomenex LUX-4 (250 × 10 mm，5 μm粒徑) (pn：00G-4491-P0-AX)，且等度運行12% MeOH [+ 20 mM NH 3]/88% CO 2(流速= 10 mL/min，注射體積= 70 μL，濃度為22 mg/mL於無調節劑之MeOH中，且管柱溫度= 35℃)，從而拆分鏡像異構物1 (與雜質一起共溶離)、鏡像異構物2、鏡像異構物3及鏡像異構物4。第二製備型正相SFC分離採用ChiralCel銷售之ChiralCel OJ管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑) (pn：17335)，且等度運行10% MeOH [+ 20 mM NH 3]/90% CO 2(流速= 10 mL/min，注射體積=70 μL，濃度為12 mg/mL於無調節劑之MeOH中，且管柱溫度= 35℃)，從而拆分(resolving)鏡像異構物1。以上純化條件引起分離出所有四種下文描述之單一鏡像異構物：
鏡像異構物1分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-(羥基甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (0.9 mg，12%)。ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.41分鐘(LC方法A)。
鏡像異構物2分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-(羥基甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (1.7 mg，22%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.53 (s, 1H), 5.26 (s, 1H), 3.85 (dd, J =11.0, 3.3 Hz, 1H), 3.73 (td, J =7.1, 3.5 Hz, 1H), 3.61 (ddd, J =11.1, 7.4, 2.1 Hz, 1H), 2.50 - 2.43 (m, 1H), 2.38 (d, J =12.9 Hz, 1H), 2.14 (ddd, J =14.7, 9.9, 6.3 Hz, 1H), 1.87 - 1.71 (m, 2H), 1.64 (q, J =8.1, 7.3 Hz, 1H), 1.59 - 1.45 (m, 3H), 1.29 (s, 1H), 1.19 - 1.11 (m, 1H), 0.91 (dd, J =16.8, 10.6 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.51分鐘(LC方法A)。
鏡像異構物3分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-(羥基甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物3) (2.2 mg，28%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.53 (d, J =0.8 Hz, 1H), 5.27 (s, 1H), 3.86 (dd, J =10.9, 3.1 Hz, 1H), 3.70 - 3.63 (m, 1H), 3.60 (ddd, J =10.9, 7.7, 2.0 Hz, 1H), 2.52 (td, J =10.8, 9.7, 4.4 Hz, 1H), 2.45 - 2.35 (m, 1H), 2.13 - 2.03 (m, 1H), 1.69 (dt, J =9.8, 4.8 Hz, 2H), 1.60 (d, J =6.2 Hz, 3H), 1.56 - 1.49 (m, 1H), 1.29 (s, 1H), 1.06 (d, J =10.4 Hz, 1H), 0.97 - 0.80 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.42分鐘(LC方法A)。
鏡像異構物4分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-(羥基甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物4) (1.9 mg，24%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.33 (s, 1H), 5.09 (s, 2H), 3.96 (d, J =7.5 Hz, 1H), 3.71 (d, J =8.0 Hz, 2H), 2.52 (dt, J =14.4, 7.7 Hz, 1H), 2.33 (t, J =12.3 Hz, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 1.99 (d, J =10.5 Hz, 1H), 1.62 (d, J =7.4 Hz, 2H), 1.56 - 1.50 (m, 2H), 1.26 (s, 2H), 1.21 (d, J =6.1 Hz, 1H), 1.15 (dd, J =14.0, 7.3 Hz, 1H), 0.92 - 0.82 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.52分鐘(LC方法A)。 實例 54 ：製備 18- 胺基 -6- 羥基 -6,16- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -3,4,14,19- 四氮雜三環 [13.3.1.12,5] 二十碳 -1(19),2,4,15,17- 五烯 -13- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 106) 及 18- 胺基 -6- 羥基 -6,16- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -3,4,14,19- 四氮雜三環 [13.3.1.12,5] 二十碳 -1(19),2,4,15,17- 五烯 -13- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 107)
Figure 02_image2697
步驟 1 ： 6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image2699
向三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (6 mg，0.009225 mmol)於二噁烷中之混合物中添加氨水(184 µL，0.5 M，0.092 mmol)，隨後添加THF (0.4 mL)，且在50℃下攪拌混合物90 min。混合物用EtOAc稀釋，用水、接著鹽水洗滌，經乾燥(MgSO 4)，過濾且蒸發，得到6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(4.3 mg，90%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.63 (s, 1H), 8.33 (s, 2H), 7.42 - 7.29 (m, 5H), 5.92 (s, 1H), 5.79 (ddd, J =20.3, 10.1, 3.7 Hz, 1H), 5.15 - 4.94 (m, 1H), 4.80 (d, J =10.6 Hz, 1H), 4.73 - 4.56 (m, 1H), 2.65 - 2.04 (m, 4H) ppm; 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -64.72, -73.14 ppm. ESI-MS m/z計算值517.11847，實驗值518.1 (M+1) +；滯留時間：0.75分鐘(LC方法S)。 步驟 2 ： N -[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 戊 -4- 烯醯胺
Figure 02_image2701
向二氯甲烷(1.2 mL)中添加6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(59 mg，0.114 mmol)、DIPEA (60 µL，0.3445 mmol)及DMAP (114 µL，0.25 M，0.0285 mmol)。在冰浴冷卻下，向此混合物中添加呈於DCM中之溶液之戊-4-烯醯氯(131 µL，1 M，0.131 mmol)。接著，在室溫下攪拌溶液30 min，且混合物用1 M NaHCO 3水溶液、0.5 M HCl水溶液、水及鹽水洗滌，接著經乾燥(MgSO 4)，過濾且蒸發。粗殘餘物藉由矽膠層析(4 g管柱，梯度為0%至25% EtOAc/己烷，15 min)純化，得到 N-[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]戊-4-烯醯胺(69.5 mg，定量)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.68 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 6.00 - 5.73 (m, 2H), 5.17 - 4.97 (m, 4H), 4.84 (d, J =10.7 Hz, 1H), 4.65 (d, J =10.6 Hz, 1H), 2.99 (t, J =7.3 Hz, 2H), 2.61 - 2.12 (m, 6H) ppm; 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -62.60, -73.06 ppm. ESI-MS m/z計算值599.16034，實驗值600.2 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法Q)。 步驟 3 ： 6- 苯甲氧基 -18- 硝基 -6,16- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -3,4,14,19- 四氮雜三環 [13.3.1.12,5] 二十碳 -1(18),2,4,9,15(19),16- 六烯 -13- 酮 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2703
在20 mL密封小瓶中，向 N-[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]戊-4-烯醯胺(55 mg，0.09175 mmol)及1,3-雙(鄰甲苯基)-4,5-二氫咪唑;二氯-[(2-異丙氧基苯基)亞甲基]釕(8 mg，0.01402 mmol)於甲苯(8 mL)中之溶液鼓泡通入N 21 min，且接著在120℃下加熱45 min，且接著蒸發溶劑。殘餘物藉由矽膠層析(12 g管柱，0%至25% EtOAc/己烷，15 min)純化，得到6-苯甲氧基-18-硝基-6,16-雙(三氟甲基)-20-氧雜-3,4,14,19-四氮雜三環[13.3.1.12,5]二十碳-1(18),2,4,9,15(19),16-六烯-13-酮( E/Z混合物) (32.6 mg，62%)。ESI-MS m/z計算值571.129，實驗值572.1 (M+1) +；滯留時間：0.74分鐘(LC方法S)。 步驟 4 ： 18- 胺基 -6- 羥基 -6,16- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -3,4,14,19- 四氮雜三環 [13.3.1.12,5] 二十碳 -1(19),2,4,15,17- 五烯 -13- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 106) 及 18- 胺基 -6- 羥基 -6,16- 雙 ( 三氟甲基 )-20- 氧雜 -3,4,14,19- 四氮雜三環 [13.3.1.12,5] 二十碳 -1(19),2,4,15,17- 五烯 -13- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 107)
Figure 02_image2705
在不鏽鋼壓力容器中，在室溫下在200 psi氫氣下攪拌6-苯甲氧基-18-硝基-6,16-雙(三氟甲基)-20-氧雜-3,4,14,19-四氮雜三環[13.3.1.12,5]二十碳-1(18),2,4,9,15(19),16-六烯-13-酮( E/Z混合物) (32.6 mg，0.05705 mmol)及鈀/碳(18 mg，10% w/w, 0.01691 mmol)於AcOH (700 µL)中之混合物18 h。接著，過濾混合物且蒸發。殘餘物藉由矽膠層析(4 g管柱，0%至35% EtOAc/己烷，15 min)純化，得到外消旋18-胺基-6-羥基-6,16-雙(三氟甲基)-20-氧雜-3,4,14,19-四氮雜三環[13.3.1.12,5]二十碳-1(19),2,4,15,17-五烯-13-酮。將此材料溶解於1:1乙腈/甲醇中，且藉由製備型SFC來純化，其用甲醇(5 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離(20%至45%歷經10 min)，用21.2 × 250 mm LUX-4管柱(5μm粒徑)，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈白色結晶固體狀之18-胺基-6-羥基-6,16-雙(三氟甲基)-20-氧雜-3,4,14,19-四氮雜三環[13.3.1.12,5]二十碳-1(19),2,4,15,17-五烯-13-酮(鏡像異構物1) (6.9 mg，27%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.51 (s, 2H), 5.92 (s, 2H), 3.90 (s, 1H), 2.69 - 2.48 (m, 2H), 2.30 (td, J =13.1, 11.7, 4.1 Hz, 1H), 2.19 (dq, J =15.1, 6.1, 4.9 Hz, 2H), 2.02 - 1.77 (m, 2H), 1.56 - 1.32 (m, 4H), 0.99 - 0.78 (m, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -62.85, -79.25 ppm. ESI-MS m/z計算值453.12357，實驗值454.1 (M+1) +；滯留時間：1.07分鐘(LC方法Q)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈白色結晶固體狀之狀18-胺基-6-羥基-6,16-雙(三氟甲基)-20-氧雜-3,4,14,19-四氮雜三環[13.3.1.12,5]二十碳-1(19),2,4,15,17-五烯-13-酮(鏡像異構物2) (7.2 mg，28%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.54 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 5.94 (s, 2H), 4.10 (s, 1H), 2.57 (dtd, J =24.0, 12.0, 5.5 Hz, 2H), 2.30 (td, J =13.1, 11.9, 3.3 Hz, 1H), 2.23 - 2.12 (m, 2H), 1.92 (d, J =32.4 Hz, 1H), 1.72 - 1.30 (m, 6H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -62.85, -79.25 ppm. ESI-MS m/z計算值453.12357，實驗值454.1 (M+1) +；滯留時間：1.07分鐘(LC方法Q)。 實例 55 ：製備 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 108) 及 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 109)
Figure 02_image2707
步驟 1 ： N -[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 丁 -3- 烯醯胺
Figure 02_image2709
向二氯甲烷(2 mL)中添加6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100 mg，0.1933 mmol)、DIPEA (102 µL，0.5856 mmol)及DMAP (193 µL，0.25 M，0.04825 mmol)。在冰浴冷卻下，向此混合物中添加呈於DCM中之溶液之丁-3-烯醯氯(232 µL，1 M，0.232 mmol)。在0℃下攪拌15 min之後，添加更多丁-3-烯醯氯(116 µL，1 M，0.116 mmol)。在0℃下攪拌15 min之後，添加更多丁-3-烯醯氯(145 µL，1 M，0.145 mmol)。在0℃下另外攪拌15 min之後，混合物用DCM稀釋，且用1 M NaHCO 3水溶液、0.5 M HCl水溶液、水及鹽水洗滌，接著經乾燥(MgSO 4)，過濾且蒸發。殘餘物藉由矽膠層析(4 g管柱，0%至25% EtOAc/己烷，15 min)純化，得到 N-[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]丁-3-烯醯胺(24 mg，21%)。ESI-MS m/z計算值585.1447，實驗值586.2 (M+1) +；滯留時間：1.53分鐘(LC方法J)。 步驟 2 ： 6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12- 酮 ( 異構物 1) 及 6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12- 酮 ( 異構物 2)
Figure 02_image2711
在20 mL密封小瓶中，向 N-[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]丁-3-烯醯胺(23.4 mg，0.03997 mmol)及1,3-雙(鄰甲苯基)-4,5-二氫咪唑;二氯-[(2-異丙氧基苯基)亞甲基]釕(4.5 mg，0.007888 mmol)於甲苯(3.5 mL)中之溶液鼓泡通入N 21 min，且接著在120℃下加熱45 min。添加更多催化劑1,3-雙(鄰甲苯基)-4,5-二氫咪唑;二氯-[(2-異丙氧基苯基)亞甲基]釕(4.5 mg，0.007888 mmol)，且在120℃下加熱30 min，且接著蒸發溶劑。殘餘物藉由矽膠層析(12 g管柱，0%至20% EtOAc/己烷，20 min)純化，得到兩種異構產物。
溶離之第一異構物分離為6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-酮(異構物1) (6.6 mg，15%) ESI-MS m/z計算值557.1134，實驗值558.0 (M+1) +；滯留時間：1.35分鐘(LC方法J)。
溶離之第二異構物分離為6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-酮(異構物2) (2.4 mg，8%) ESI-MS m/z計算值557.1134，實驗值558.1 (M+1) +；滯留時間：1.29分鐘(LC方法J)。 步驟 3 ： 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 108) 及 17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 109)
Figure 02_image2713
反應1：將6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-酮(異構物1) (6.6 mg，0.006157 mmol)及鈀/碳(3.2 mg，10% w/w, 0.003007 mmol)添加至AcOH (200 µL)中，且在不鏽鋼壓力容器中在200 psi H 2下在室溫下攪拌混合物18 h。接著，過濾混合物，且蒸發濾液。
反應2：將6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-酮(異構物2) (2.4 mg，0.003014 mmol)及鈀/碳(3.2 mg，10% w/w，0.003007 mmol)添加至AcOH (200 µL)中，且在不鏽鋼壓力容器中在200 psi H 2下在室溫下攪拌混合物18 h。接著，過濾混合物，且蒸發濾液。
將來自反應1及反應2之粗產物合併，且所得殘餘物藉由矽膠層析(4 g管柱，0%至35% EtOAc/己烷，20 min)純化，得到2.4 mg外消旋17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮。將此材料溶解於1:1乙腈/甲醇中，且藉由製備型SFC來純化，其用甲醇(5 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離(20%至45%歷經10 min)，用21.2 × 250 mm LUX-4管柱(5μm粒徑)，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈白色固體狀之17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(鏡像異構物1) (1.1 mg，41%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.61 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 5.63 (s, 2H), 3.91 - 3.32 (m, 1H), 2.89 (td, J =11.9, 3.9 Hz, 1H), 2.41 (dtd, J =14.5, 11.2, 9.8, 4.8 Hz, 2H), 2.23 (ddt, J =16.3, 12.9, 7.7 Hz, 2H), 2.04 (q, J =4.2 Hz, 1H), 1.87 - 1.71 (m, 1H), 1.65 (d, J =24.3 Hz, 1H), 1.48 (s, 1H), 0.87 (dd, J =11.5, 4.4 Hz, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -62.71, -79.79 ppm。ESI-MS m/z計算值439.1079，實驗值440.1 (M+1) +；滯留時間：1.02分鐘(LC方法Q)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈白色固體狀之17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(鏡像異構物2) (1.2 mg，44%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.61 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 5.63 (s, 2H), 3.65 (s, 1H), 2.99 - 2.81 (m, 1H), 2.41 (ddt, J =19.2, 9.8, 4.8 Hz, 2H), 2.23 (ddt, J =16.5, 12.9, 7.7 Hz, 2H), 2.12 - 1.96 (m, 1H), 1.84 - 1.71 (m, 1H), 1.66 - 1.60 (m, 1H), 1.50 - 1.35 (m, 1H), 0.95 - 0.74 (m, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -62.71, -79.79 ppm. ESI-MS m/z計算值439.1079，實驗值440.2 (M+1) +；滯留時間：1.01分鐘(LC方法Q)。 實例 56 ：製備 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 110) 、 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 111) 、 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 112) 及 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 113)
Figure 02_image2715
步驟 1 ： 3- 烯丙基 -1,2- 噻唑啶 1,1- 二氧化物
Figure 02_image2717
將4,5-二氫異噻唑1,1-二氧化物(150 mg，1.1331 mmol)溶解於四氫呋喃(7.5 mL)中。將混合物冷卻至0℃，且接著在0℃下在氮氣氛圍下添加烯丙基(氯)鎂(3 mL，2 M於四氫呋喃中，6 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3 h。在耗盡亞胺中間物(TLC/染色KMnO 4)後，使反應物在0℃下冷卻，且接著用飽和NH 4Cl (20 mL)淬滅。攪拌所得混合物10分鐘，且接著用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。粗材料藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色油狀之3-烯丙基-1,2-噻唑啶1,1-二氧化物(90 mg，49%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 5.88 - 5.67 (m, 1H), 5.27 - 5.14 (m, 2H), 4.22 (br s., 1H), 3.78 - 3.60 (m, 1H), 3.29 - 3.06 (m, 2H), 2.62 - 2.45 (m, 1H), 2.38 (t, J =6.8 Hz, 2H), 2.14 (dq, J =13.5, 8.6 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值161.051，實驗值162.1 (M+1) +；滯留時間：0.89分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 3- 烯丙基 -2-[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,2- 噻唑啶 1,1- 二氧化物
Figure 02_image2719
在0℃下，將氫化鈉(60%於礦物油中，142 mg，3.5503 mmol)添加至含3-烯丙基-1,2-噻唑啶1,1-二氧化物(620 mg，3.8456 mmol)之DMF (21 mL)中，且在室溫下攪拌混合物30 min。將懸浮液冷卻至0℃，且添加含三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (2.1 g，3.2286 mmol)之DMF (13 mL)，且在0℃下攪拌混合物30分鐘。添加水(40 mL)及乙酸乙酯(30 mL)，且分離各相。水相用乙酸乙酯(2 × 30 mL)萃取。將有機相合併，用水(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。所得殘餘物藉由用0%至40%乙酸乙酯庚烷溶離之矽膠層析(80 g管柱)來純化，得到呈黃色膠狀之3-烯丙基-2-[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,2-噻唑啶1,1-二氧化物(1.4 g，65%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.76 (s, 1H), 7.43 - 7.29 (m, 5H), 5.89 - 5.55 (m, 2H), 5.15 - 4.95 (m, 4H), 4.89 - 4.80 (m, 1H), 4.69 - 4.61 (m, 1H), 3.49 - 3.38 (m, 1H), 3.17 - 3.01 (m, 1H), 2.73 - 2.59 (m, 1H), 2.58 - 2.16 (m, 8H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -59.63 (s, 3F), -73.09 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值661.143，實驗值662.2 (M+1) +；滯留時間：2.32分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 6- 苯甲氧基 -20- 硝基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15λ6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,9,17(21),18- 六烯 15,15- 二氧化物 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2721
藉由鼓泡氮氣將含Zhan催化劑-1B (133 mg，0.1813 mmol)之二氯乙烷(168 mL)脫氣且加熱至60℃。接著，歷經1 h逐滴添加含3-烯丙基-2-[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,2-噻唑啶1,1-二氧化物(1.05 g，1.5871 mmol)之二氯乙烷(168 mL)。將所得混合物加熱至75℃且攪拌5 h。將混合物冷卻且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈綠色固體狀之6-苯甲氧基-20-硝基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯15,15-二氧化物( E/Z混合物) (195 mg，19%)。ESI-MS m/z計算值633.1117，實驗值634.2 (M+1) +；滯留時間：2.3分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 非鏡像異構物對 1) 及 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 非鏡像異構物對 2)
Figure 02_image2723
將6-苯甲氧基-20-硝基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,9,17(21),18-六烯15,15-二氧化物( E/Z混合物) (30 mg，0.0426 mmol)溶解於甲醇(3 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(10%，潤濕) (20 mg，0.0094 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物且用甲醇(25 mL)洗滌，接著減壓濃縮。殘餘物藉由用0%至80%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析(4 g管柱)純化，得到兩種不同的非鏡像異構產物：
溶離之第一產物分離為呈黃色固體狀之20-胺基-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-15,15-二酮(非鏡像異構物對1) (4 mg，18%)。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 7.72 (s, 1H), 4.69 - 4.52 (m, 1H), 3.46 - 3.35 (m, 1H), 3.28 - 3.18 (m, 2H), 2.72 - 2.55 (m, 1H), 2.36 - 2.17 (m, 2H), 2.14 - 2.02 (m, 1H), 1.97 - 1.68 (m, 3H), 1.66 - 1.44 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CD 3OD) δ -60.96 (s, 3F), -81.11 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.1062，實驗值516.1 (M+1) +；滯留時間：1.9分鐘(LC方法E)。
溶離之第二產物分離為呈黃色固體狀之20-胺基-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-15,15-二酮(非鏡像異構物對2) (4 mg，18%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 7.45 (s, 1H), 5.68 (br s, 2H), 4.70 - 4.56 (m, 1H), 4.49 - 4.37 (m, 1H), 3.66 - 3.57 (m, 1H), 3.38 - 3.04 (m, 3H), 2.62 - 1.99 (m, 6H), 1.94 - 1.59 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -59.90 (s, 3F), -78.75 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.1062，實驗值516.1 (M+1) +；滯留時間：1.9分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 110) 、 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 111) 、 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 112) 及 20- 胺基 -6- 羥基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -15 λ 6- 硫雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -15,15- 二酮 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 113)
Figure 02_image2725
20-胺基-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-15,15-二酮(非鏡像異構物對1)及20-胺基-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-15,15-二酮(非鏡像異構物對2) (121 mg，0.235 mmol)之混合物藉由矽膠管柱層析(12 g管柱)純化，其用0%至20%，接著至60%乙酸乙酯/庚烷溶離；隨後再次藉由矽膠管柱層析(12 g管柱)純化混合級分，其用0%至20%至60%乙酸乙酯/庚烷溶離，得到兩種非鏡像異構物對產物。
藉由對掌性SFC (纖維素5管柱；20%甲醇/CO 2；流速= 75 mL/min；40℃)純化第一非鏡像異構物對以分離鏡像異構物，得到兩種呈單一鏡像異構物之產物。
第一鏡像異構物分離為呈灰白色固體狀之20-胺基-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-15,15-二酮(鏡像異構物1) (14 mg，11%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.79 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.96 (br. s, 2H), 4.52 - 4.38 (m, 1H), 3.54 - 3.41 (m, 1H), 3.27 - 3.18 (m, 1H), 2.21 - 2.05 (m, 2H), 2.02 - 1.88 (m, 1H), 1.79 - 1.67 (m, 2H), 1.63 - 1.37 (m, 4H), 1.27 - 1.02 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -58.50 (s, 3F), -78.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.1062，實驗值516.1 (M+1) +；滯留時間：2.93分鐘(LC方法C)。
第二鏡像異構物分離為呈灰白色固體狀之20-胺基-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-15,15-二酮(鏡像異構物2) (12 mg，10%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.79 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.96 (br. s., 2H), 4.52 - 4.38 (m, 1H), 3.53 - 3.41 (m, 1H), 3.27 - 3.18 (m, 1H), 2.20 - 2.08 (m, 2H), 2.03 - 1.90 (m, 1H), 1.78 - 1.67 (m, 2H), 1.63 - 1.37 (m, 4H), 1.25 - 1.03 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -58.50 (s, 3F), -78.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.1062，實驗值516.1 (M+1) +；滯留時間：2.93分鐘(LC方法C)。
藉由對掌性SFC (直鏈澱粉1管柱；10%甲醇/CO 2；流速= 75 mL/min；40℃)純化第二非鏡像異構物對以分離鏡像異構物，得到兩種呈單一鏡像異構物之產物。
第一鏡像異構物分離為呈灰白色固體狀之20-胺基-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-15,15-二酮(鏡像異構物3) (12 mg，9%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.78 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.87 (br. s., 2H), 4.72 - 4.58 (m, 1H), 3.58 - 3.46 (m, 1H), 3.26 - 3.20 (m, 1H), 2.69 - 2.56 (m, 1H), 2.18 - 2.01 (m, 3H), 1.70 - 1.57 (m, 2H), 1.53 - 1.40 (m, 3H), 1.36 - 1.19 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -58.16 (s, 3F), -77.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.1062，實驗值516.1 (M+1) +；滯留時間：2.93分鐘(LC方法C)。
第二鏡像異構物分離為呈灰白色固體狀之20-胺基-6-羥基-6,18-雙(三氟甲基)-22-氧雜-15λ6-硫雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-15,15-二酮(鏡像異構物4) (10 mg，8%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.78 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.87 (br. s., 2H), 4.72 - 4.58 (m, 1H), 3.59 - 3.46 (m, 1H), 3.26 - 3.19 (m, 1H), 2.68 - 2.57 (m, 1H), 2.16 - 2.00 (m, 3H), 1.72 - 1.57 (m, 2H), 1.54 - 1.40 (m, 3H), 1.36 - 1.19 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -58.16 (s, 3F), -77.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.1062，實驗值516.1 (M+1) +；滯留時間：2.93分鐘(LC方法C)。 實例 57 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 114) 及 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 115)
Figure 02_image2727
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18- 溴 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -20- 胺 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2729
在室溫下，向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (1.7 g，2.4282 mmol)於乙醇(68 mL)及水(17 mL)中之溶液中添加鐵(1.6 g，28.651 mmol)及氯化銨(170 mg，3.1781 mmol)。在80℃下加熱混合物2小時，接著冷卻至室溫。經由矽藻土過濾反應物，濾液用NH 4Cl 飽和水溶液(50 mL)及水(50 mL)稀釋。用EtOAc (3 × 50 mL)萃取，且經合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-胺( E/Z混合物) (1.1 g，80%)。ESI-MS m/z計算值563.1144，實驗值564.1 (M+1) +；滯留時間：2.55分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -20- 胺 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2731
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-胺( E/Z混合物) (150 mg，0.2658 mmol)於二甲基甲醯胺(2 mL)中之溶液中添加碘化銅(I) (25 mg，0.1313 mmol)及甲醇鈉(0.5 mL，25% w/v，2.3138 mmol)於甲醇中之溶液，且在105℃下攪拌混合物4小時。將混合物冷卻至室溫且用水(25 mL)稀釋且經由矽藻土過濾。濾液用乙酸乙酯(2 × 25 mL)萃取，且經合併之有機層用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。所得殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈紅色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-甲氧基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-胺( E/Z混合物) (55 mg，38%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.51 - 7.26 (m, 5H), 6.49 (s, 1H), 5.66 - 5.46 (m, 2H), 5.21 - 4.91 (m, 3H), 4.75 - 4.60 (m, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.82 - 3.73 (m, 1H), 3.72 - 3.54 (m, 1H), 3.47 - 3.32 (m, 1H), 3.10 - 2.88 (m, 1H), 2.59 - 2.39 (m, 1H), 2.35 - 2.10 (m, 3H), 2.06 - 1.90 (m, 1H), 1.87 - 1.67 (m, 2H), 1.57 - 1.41 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -75.31 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.2144，實驗值516.3 (M+1) +；滯留時間：2.57分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2733
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-甲氧基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-胺( E/Z混合物) (50 mg，0.097 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加10%鈀/碳(90 mg，0.0423 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物且用甲醇(25 mL)洗滌。減壓濃縮所得濾液。將殘餘物溶解於二甲基亞碸(2 mL)中，且接著藉由使用梯度為5%至95%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈深綠色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-18-甲氧基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(30 mg，60%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 6.46 (br. s., 1H), 5.26 - 4.82 (m, 2H), 3.97 - 3.75 (m, 4H), 3.45 - 3.30 (m, 1H), 2.75 - 2.31 (m, 2H), 2.30 - 1.89 (m, 4H), 1.84 - 1.45 (m, 8H), 1.37 - 1.27 (m, 1H), 0.97 - 0.81 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -77.28 (br. s., 3F, 次要非鏡像異構物), -80.82 (br. s., 3F, 主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值427.1831，實驗值428.2 (M+1) +；滯留時間：3.12分鐘(LC方法X)。 步驟 4 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 114) 及 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 115)
Figure 02_image2735
(12 R)-20-胺基-18-甲氧基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(29 mg，0.06785 mmol)藉由SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且以15%至40% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2運行之雙重梯度進行14.5分鐘，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-甲氧基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (9.2 mg，62%)。ESI-MS m/z計算值427.18314，實驗值428.0 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法D)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-甲氧基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (5.4 mg，37%)。ESI-MS m/z計算值427.18314，實驗值428.0 (M+1) +；滯留時間：1.86分鐘(LC方法D)。 實例 58 ：製備 (12 R)-21- 胺基 -6- 羥基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -16- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 116) 及 (12 R)-21- 胺基 -6- 羥基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -16- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 117)
Figure 02_image2737
步驟 1 ： (5 R)-5- 烯丙基嗎啉 -3- 酮
Figure 02_image2739
A部分：歷經60 min，向在0℃下之(2 R)-2-胺基戊-4-烯酸(3.97 g，34.483 mmol)於THF (150 mL)中之懸浮液中逐滴添加含LiAlH 4之THF (46 mL，1 M，46 mmol)，保持內部溫度在0至5℃。在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用THF (200 mL)稀釋且冷卻至0℃，接著用1.82 mL水、1.82 mL 25%   NaOH水溶液及5.46 mL水淬滅。在室溫下攪拌混合物1 h，過濾且用THF洗滌，且保留濾液。將所得固體懸浮於THF (200 mL)中且在回流下加熱1 h，冷卻至室溫，接著過濾。濃縮所有合併之濾液，得到呈淡黃色油狀之(2 R)-2-胺基戊-4-烯-1-醇(4.25 g，100%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 5.93 - 5.63 (m, 1H), 5.22 - 5.00 (m, 2H), 3.60 (dd, J =10.6, 3.8 Hz, 1H), 3.32 (dd, J =10.6, 7.6 Hz, 1H), 2.99 - 2.85 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 2.11 - 1.94 (m, 1H), 1.92 - 1.73 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值101.08406，實驗值102.3 (M+1) +；滯留時間：0.27分鐘(LC方法E)。
B部分：向在-78℃下之(2 R)-2-胺基戊-4-烯-1-醇(3.48 g，34.405 mmol)及Et 3N (19.602 g，27 mL，193.71 mmol)於CH 2Cl 2(50 mL)中之溶液中逐滴添加2-氯乙醯氯(10 g，88.54 mmol)，且歷經1 h使混合物升溫至室溫。混合物用CH 2Cl 2(100 mL)及水(100 mL)稀釋。分離兩層，且水層用CH 2Cl 2(2 × 50 mL)萃取。經合併之有機層用5%   NaHCO 3水溶液(50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈白色固體狀之2-氯乙酸[(2 R)-2-[(2-氯乙醯基)胺基]戊-4-烯基酯] (2.23 g，26%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 6.62 (d, J =5.9 Hz, 1H), 5.88 - 5.65 (m, 1H), 5.27 - 5.08 (m, 2H), 4.39 - 4.18 (m, 3H), 4.09 (s, 2H), 4.05 (s, 2H), 2.45 - 2.28 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值253.02725，實驗值254.1 (M+1) +；滯留時間：1.62分鐘(LC方法E)。
C部分：向2-氯乙酸[(2 R)-2-[(2-氯乙醯基)胺基]戊-4-烯基酯] (2.23 g，8.7757 mmol)於丙酮(50 mL)中之溶液中添加Na 2CO 3(1.39 g，13.115 mmol)於水(30 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物隔夜且濃縮以移除丙酮。殘餘物用EtOAc (4 × 40 mL)萃取，且經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用100%乙酸乙酯之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之2-氯- N-[(1 R)-1-(羥基甲基)丁-3-烯基]乙醯胺(1.55 g，99%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 6.78 (br. s., 1H), 5.79 (ddt, J =17.1, 10.1, 7.3 Hz, 1H), 5.29 - 5.05 (m, 2H), 4.08 - 3.97 (m, 3H), 3.77 - 3.65 (m, 2H), 2.46 - 2.28 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值177.05565，實驗值178.1 (M+1) +；滯留時間：0.95分鐘(LC方法E)。
D部分：向在0℃下之2-氯- N-[(1 R)-1-(羥基甲基)丁-3-烯基]乙醯胺(1.46 g，8.2194 mmol)於THF (60 mL)中之溶液中添加含60% NaH之礦物油(380 mg，9.5009 mmol)。在室溫下攪拌混合物10 min且用NH 4Cl飽和水溶液(10 mL)淬滅。濃縮混合物以移除THF且用CH 2Cl 2(3 × 20 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由用100% EtOAc溶離之矽膠層析純化，得到呈白色固體狀之(5 R)-5-烯丙基嗎啉-3-酮(806 mg，69%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 6.22 (br. s., 1H), 5.72 (dddd, J =16.8, 10.4, 8.1, 6.3 Hz, 1H), 5.30 - 5.13 (m, 2H), 4.27 - 4.05 (m, 2H), 3.92 (dd, J =11.4, 3.8 Hz, 1H), 3.67 - 3.54 (m, 1H), 3.52 - 3.41 (m, 1H), 2.41 - 2.27 (m, 1H), 2.23 - 2.09 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值141.07898，實驗值142.2 (M+1) +；滯留時間：0.83分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 6-[(3 R)-3- 烯丙基 -5- 側氧基 - 嗎啉 -4- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2741
向在氮氣下之6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.34 g，4.7087 mmol)、(5 R)-5-烯丙基嗎啉-3-酮(666 mg，4.7178 mmol)、Cs 2CO 3(1.84 g，5.6473 mmol)、Xantphos (546 mg，0.9436 mmol)及Pd 2dba 3(432 mg，0.4718 mmol)之混合物中添加1,4-二噁烷(20 mL)。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，接著在氮氣下在80℃下攪拌5.5 h。歷經15 h逐滴添加6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.2 g，4.2168 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之溶液。添加之後，在80℃下攪拌混合物4 h且冷卻至室溫。添加水(30 mL)，且混合物用EtOAc (3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淡黃色油狀之6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(760 mg，41%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.75 (s, 1H), 5.71 - 5.41 (m, 1H), 5.20 - 4.94 (m, 2H), 4.84 - 4.56 (m, 1H), 4.52 - 4.37 (m, 1H), 4.34 - 4.18 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 4.03 - 3.93 (m, 2H), 2.80 - 2.08 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -61.08 to -62.72 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值389.08347，實驗值390.1 (M+1) +；滯留時間：1.97分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 6-[(3 R)-3- 烯丙基 -5- 側氧基 - 嗎啉 -4- 基 ]-3- 胺基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2743
在80℃下在氮氣下加熱6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(114 mg，0.2928 mmol)、NH 4Cl (20 mg，0.3739 mmol) 及鐵(166 mg，2.9725 mmol)於EtOH (5 mL)及H 2O (1 mL)中之混合物2 h，且接著冷卻至室溫。在攪拌下，添加EtOAc (30 mL)及28%  NH 3水溶液。分離兩層，且水層用EtOAc (3 × 30 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為50%至80%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈白色固體狀之6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-胺基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(80 mg，76%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.38 - 7.27 (m, 1H), 6.38 - 5.98 (m, 2H), 5.77 - 5.47 (m, 1H), 5.24 - 4.99 (m, 2H), 4.42 - 4.27 (m, 2H), 4.26 - 3.43 (m, 6H), 2.99 - 2.10 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -61.14 to -63.58 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值359.10928，實驗值360.2 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 6-[(3 R)-3- 烯丙基 -5- 側氧基 - 嗎啉 -4- 基 ]-3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2745
向6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-胺基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(40 mg，0.1113 mmol)於CH 2Cl 2(1.5 mL)中之溶液中添加二碳酸二三級丁酯(62 mg，0.2841 mmol)及DMAP (3.5 mg，0.0286 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，且減壓移除溶劑。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈油狀之6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(62 mg，100%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.03 - 7.82 (m, 1H), 5.79 - 5.41 (m, 1H), 5.24 - 4.91 (m, 2H), 4.68 - 4.16 (m, 2H), 4.07 - 3.50 (m, 6H), 2.97 - 2.12 (m, 2H), 1.42 (s, 18H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -61.07 to -62.72 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值559.2142，實驗值582.2 (M+Na) +；滯留時間：2.22分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： 6-[(3 R)-3- 烯丙基 -5- 側氧基 - 嗎啉 -4- 基 ]-3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2747
A部分：在80℃下加熱在氮氣下之6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(900 mg，1.6085 mmol)及矽膠(15 g，249.65 mmol)於EtOAc (100 mL)中之混合物4 h且在70℃下加熱隔夜。濃縮混合物且藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈白色泡沫狀之6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(653 mg，88%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.36 - 10.12 (m, 1H), 9.41 - 9.25 (m, 1H), 5.81 - 5.45 (m, 1H), 5.26 - 4.96 (m, 2H), 4.49 - 4.23 (m, 2H), 4.08 - 3.49 (m, 6H), 2.91 - 2.11 (m, 2H), 1.54 (s, 9H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -61.17 to -62.94 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值459.1617，實驗值460.2 (M+1) +；滯留時間：2.23分鐘(LC方法E)。
B部分：向在0℃下之6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(50 mg，0.1088 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加NaOH (9.9 mg，0.2475 mmol)於H 2O (0.5 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物2 h且冷卻至0℃。用1 N  HCl (238 mg)水溶液酸化且濃縮以移除THF。殘餘物用EtOAc (3 × 20 mL)萃取，經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈無色油狀之6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(48 mg，99%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.46 - 10.15 (m, 1H), 9.55 - 9.37 (m, 1H), 5.75 - 5.41 (m, 1H), 5.24 - 4.98 (m, 2H), 4.48 - 4.20 (m, 2H), 4.07 - 3.88 (m, 2H), 3.80 - 3.56 (m, 1H), 2.83 - 2.09 (m, 2H), 1.55 (s, 9H) ppm. 未觀測到一個可交換質子。 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -61.03 to -62.82 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值445.14606，實驗值468.1 (M+Na) +；滯留時間：2.13分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： N -[6-[(3 R)-3- 烯丙基 -5- 側氧基 - 嗎啉 -4- 基 ]-2-[[[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2749
向在0℃下之6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(632 mg，1.419 mmol)於CH 2Cl 2(25 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(536 mg，1.7731 mmol)、EDCI (鹽酸鹽) (390 mg，2.0344 mmol)、1-羥基苯并三唑(水合物) (55 mg，0.3592 mmol)及DIPEA (150 mg，1.1606 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用5%   NaHCO 3水溶液(10 mL)處理，且用CH 2Cl 2(3 × 30 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淡黃色油狀之 N-[6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(966 mg，93%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.83 - 10.58 (m, 1H), 9.83 (br. s., 1H), 9.43 - 9.31 (m, 1H), 9.10 (br. s., 1H), 7.53 - 7.28 (m, 5H), 5.96 - 5.43 (m, 2H), 5.22 - 4.97 (m, 4H), 4.92 - 4.67 (m, 2H), 4.44 - 4.19 (m, 2H), 4.06 - 3.55 (m, 3H), 2.77 - 2.10 (m, 6H), 1.53 (s, 9H) ppm. 滯留時間：2.47分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： N -[6-[(3 R)-3- 烯丙基 -5- 側氧基 - 嗎啉 -4- 基 ]-2-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2751
向在0℃下之 N-[6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-2-[[[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(906 mg，1.2417 mmol)於CH 2Cl 2(30 mL)中之溶液中添加DIPEA (1.2614 g，1.7 mL，9.7599 mmol)，隨後逐滴添加三氟甲磺酸酐(550 mg，1.9494 mmol)。在0℃下攪拌混合物20 min，且接著添加嗎啉(120 mg)以淬滅過量三氟甲磺酸酐，且攪拌所得混合物2 min。反應物用5%   NaHCO 3水溶液(10 mL)淬滅，且用CH 2Cl 2(3 × 30 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之 N-[6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(694 mg，79%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.31 - 10.13 (m, 1H), 9.49 - 9.33 (m, 1H), 7.46 - 7.26 (m, 5H), 5.88 - 5.32 (m, 2H), 5.21 - 4.93 (m, 4H), 4.91 - 4.63 (m, 2H), 4.43 - 4.25 (m, 2H), 4.09 - 3.52 (m, 3H), 2.93 - 2.08 (m, 6H), 1.57 (s, 9H) ppm. 滯留時間：2.62分鐘(LC方法E)。 步驟 8 ： N -[(12 R)-6-( 苯甲氧基 )-16- 側氧基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,9,18(22),19- 六烯 -21- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2753
向經乾燥1 L燒瓶中饋入Zhan催化劑-1B (100 mg，0.1363 mmol)。空氣經由真空用氮氣置換3次。藉由導管添加DCE (260 mL)。向混合物鼓泡通入氮氣10 min且加熱至75℃。歷經2.5 h逐滴添加 N-[6-[(3 R)-3-烯丙基-5-側氧基-嗎啉-4-基]-2-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(692 mg，0.9724 mmol)於DCE (30 mL)中之溶液。在添加期間，每40 min向混合物鼓泡通入氮氣5 min。在添加完成之後，向混合物鼓泡通入氮氣15 min。接著在75℃下攪拌混合物1.5 h，冷卻至室溫且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之 N-[(12 R)-6-(苯甲氧基)-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,9,18(22),19-六烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (483 mg，73%)。此材料直接用於隨後步驟中。 步驟 9 ： N -[(12 R)-6-( 苯甲氧基 )-16- 側氧基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -21- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 鏡像異構物 1) 及 N -[(12 R)-6-( 苯甲氧基 )-16- 側氧基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -21- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 鏡像異構物 2)
Figure 02_image2755
向在0℃下之 N-[(12 R)-6-(苯甲氧基)-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,9,18(22),19-六烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (483 mg，0.7066 mmol)於EtOAc (15 mL)及MeOH (15 mL)中之溶液中添加10%鈀/碳(120 mg，50%潤濕，0.0564 mmol)。在氫氣球下在10℃至15℃下攪拌混合物4 h，經由矽藻土過濾且用EtOAc洗滌。濃縮濾液，且殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈無色油狀之 N-[(12 R)-6-(苯甲氧基)-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (259 mg，48%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 9.61 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 7.34 - 7.22 (m, 5H), 4.90 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.72 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.40 - 4.25 (m, 2H), 4.06 - 3.92 (m, 2H), 3.70 (d, J =6.2 Hz, 1H), 2.66 - 2.37 (m, 2H), 2.12 - 1.95 (m, 2H), 1.91 - 1.70 (m, 3H), 1.56 (s, 9H), 1.42 - 1.30 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -62.31 (s, 3F), -74.51 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值685.2335，實驗值630.2 (M-55) +；滯留時間：2.58分鐘(LC方法E)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈白色固體狀之 N-[(12 R)-6-(苯甲氧基)-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (201 mg，41%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 9.47 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 7.39 - 7.26 (m, 5H), 4.94 - 4.82 (m, 1H), 4.82 - 4.69 (m, 1H), 4.36 - 4.26 (m, 2H), 4.08 - 3.94 (m, 2H), 3.66 (d, J =7.0 Hz, 1H), 2.60 - 2.20 (m, 3H), 2.15 - 1.64 (m, 4H), 1.56 (s, 9H), 1.39 - 1.27 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -62.39 (s, 3F), -74.40 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值685.2335，實驗值630.2 (M-55) +；滯留時間：2.55分鐘(LC方法E)。 步驟 10 ： (12 R)-21- 胺基 -6- 羥基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -16- 酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 116)
Figure 02_image2757
A部分：向 N-[(12 R)-6-(苯甲氧基)-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (259 mg，0.34 mmol)於EtOAc (4 mL)及MeOH (4 mL)中之溶液中添加10%鈀/碳(123 mg，50%潤濕，0.0578 mmol)。在氫氣球下在30℃至50℃下攪拌混合物5 h，且在室溫下攪拌隔夜。再次添加10%鈀/碳(150 mg，50%潤濕，0.0705 mmol)，且在30℃至50℃下攪拌混合物6 h且在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土過濾反應混合物且用EtOAc洗滌。濃縮濾液，且殘餘物藉由使用梯度為0%至35%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈白色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (178 mg，88%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 9.34 - 9.16 (m, 2H), 4.42 - 4.21 (m, 2H), 4.08 - 3.89 (m, 2H), 3.86 - 3.64 (m, 2H), 2.74 (t, J =12.3 Hz, 1H), 2.33 - 2.12 (m, 2H), 2.01 - 1.68 (m, 4H), 1.56 (s, 9H), 1.53 - 1.29 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -62.24 (s, 3F), -80.04 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值595.1865，實驗值596.2 (M+1) +；滯留時間：2.29分鐘(LC方法E)。
B部分：向在0℃下之 N-[(12 R)-6-羥基-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物1) (178 mg，0.2989 mmol)於CH 2Cl 2(4 mL)中之溶液中逐滴添加TFA (1.4800 g，1 mL，12.98 mmol)。在室溫下攪拌混合物2 h，濃縮，且接著與MeOH及EtOAc之1:2混合物(3 × 2 mL)一起共蒸發。殘餘物藉由使用梯度為0%至60%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈白色固體狀之(12 R)-21-胺基-6-羥基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-16-酮(鏡像異構物1) (132 mg，89%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.31 (s, 1H), 5.86 (s, 2H), 5.43 (s, 1H), 4.46 - 4.22 (m, 2H), 4.07 - 3.87 (m, 2H), 3.80 - 3.63 (m, 1H), 2.52 - 2.21 (m, 2H), 2.03 - 1.51 (m, 7H), 1.41 - 1.32 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -62.66 (s, 3F), -79.06 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值495.13412，實驗值496.2 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法E)。 步驟 11 ： (12 R)-21- 胺基 -6- 羥基 -6,19- 雙 ( 三氟甲基 )-14,23- 二氧雜 -3,4,17,22- 四氮雜四環 [16.3.1.12,5.012,17] 二十三碳 -1(21),2,4,18(22),19- 五烯 -16- 酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 117)
Figure 02_image2759
A部分：向 N-[(12 R)-6-(苯甲氧基)-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (209 mg，0.3048 mmol)於EtOAc (4 mL)及MeOH (4 mL)中之溶液中添加10%鈀/碳(150 mg，50%潤濕，0.0705 mmol)。在氫氣球下在30℃至50℃下攪拌混合物5 h，且在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土過濾混合物且用EtOAc洗滌。濃縮濾液，且殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈白色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (148 mg，82%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 9.36 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 4.33 (s, 2H), 4.05 - 3.92 (m, 3H), 3.68 - 3.54 (m, 1H), 2.52 - 2.12 (m, 3H), 2.01 - 1.73 (m, 3H), 1.68 - 1.61 (m, 1H), 1.57 (s, 9H), 1.51 - 1.37 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -62.46 (s, 3F), -78.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值595.1866，實驗值540.3 (M-55) +；滯留時間：2.21分鐘(LC方法E)。
B部分：向在0℃下之 N-[(12 R)-6-羥基-16-側氧基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-21-基]胺基甲酸三級丁酯(鏡像異構物2) (148 mg，0.2485 mmol)於CH 2Cl 2(3 mL)中之溶液中添加TFA (1.4800 g，1 mL，12.98 mmol)。在室溫下攪拌混合物2 h且濃縮，接著與MeOH及EtOAc之1:3混合物(3 × 4 mL)一起共蒸發。殘餘物藉由使用梯度為0%至60%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，且自CH 3CN (1 mL)及H 2O (2 mL)中凍乾產物，得到呈白色固體狀之(12 R)-21-胺基-6-羥基-6,19-雙(三氟甲基)-14,23-二氧雜-3,4,17,22-四氮雜四環[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(21),2,4,18(22),19-五烯-16-酮(鏡像異構物2) (101 mg，81%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.78 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 6.94 (br. s., 2H), 4.18 (s, 2H), 4.02 - 3.82 (m, 2H), 3.72 - 3.53 (m, 1H), 2.32 - 1.93 (m, 3H), 1.88 - 1.52 (m, 4H), 1.43 - 1.20 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -61.51 (s, 3F), -78.17 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值495.1341，實驗值496.3 (M+1) +；滯留時間：2.72分鐘(LC方法E)。 實例 59 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18- 苯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 118)
Figure 02_image2761
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -18- 苯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2763
向壓力管中饋入(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (150 mg，0.2524 mmol)、苯基硼酸頻哪醇(pinacol)酯(67 mg，0.3283 mmol)、碳酸銫(198 mg，0.6077 mmol)及甲苯(6 mL)。向混合物鼓泡通入氮氣5 min。添加Pd(dppf)Cl 2(13 mg，0.0159 mmol)。向混合物鼓泡通入氮氣3 min，且將管密封。在100℃下加熱混合物隔夜，冷卻至室溫且用水(10 mL)處理。混合物用EtOAc (3 × 20 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至15%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-苯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (149 mg，100%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.26 (s, 1H), 7.53 - 7.27 (m, 10H), 5.65 - 5.39 (m, 2H), 5.35 - 4.91 (m, 2H), 4.08 - 3.93 (m, 1H), 3.65 - 3.48 (m, 1H), 2.98 - 2.71 (m, 2H), 2.59 - 2.06 (m, 6H), 1.89 - 1.77 (m, 1H), 1.76 - 1.61 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.83至-73.65 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值591.2093，實驗值592.3 (M+1) +；滯留時間：2.7分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 苯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 118)
Figure 02_image2765
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-苯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (149 mg，0.2519 mmol)於EtOAc (4 mL)及MeOH (4 mL)中之溶液中添加10%鈀/碳(107 mg，50%潤濕，0.0503 mmol)。在氫氣球下在30℃至50℃下攪拌混合物4 h，且在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土過濾混合物且用EtOAc洗滌。濃縮濾液，且殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-18-苯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (91 mg，75%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.55 - 7.49 (m, 1H), 7.48 - 7.31 (m, 5H), 7.18 - 7.14 (m, 1H), 5.93 (s, 2H), 3.98 - 3.65 (m, 1H), 2.78 - 2.54 (m, 2H), 2.34 - 2.20 (m, 1H), 2.13 - 1.93 (m, 2H), 1.84 - 1.27 (m, 10H), 1.02 - 0.70 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -76.08至-79.41 (m, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值473.2039，實驗值474.2 (M+1) +；滯留時間：3.96分鐘(LC方法E)。 實例 60 ：製備 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 119) 、 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 120) 、 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 121) 及 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 122)
Figure 02_image2767
步驟 1 ： 6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 - N-(1- 苯基丁 -3- 烯基 )-3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image2769
向三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (600 mg，0.9225 mmol)於乙腈(8 mL)中之溶液中添加1-苯基丁-3-烯-1-胺(410 mg，2.785 mmol)及DIEA (850 µL，4.88 mmol)，且在室溫下攪拌混合物120分鐘。濃縮反應物，且殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基- N-(1-苯基丁-3-烯基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(459 mg，77%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.54 (s, 1H), 8.30 (dd, J =7.8, 3.2 Hz, 1H), 7.42 - 7.31 (m, 7H), 7.26 - 7.21 (m, 2H), 7.21 - 7.15 (m, 1H), 5.91 - 5.80 (m, 1H), 5.79 - 5.67 (m, 1H), 5.45 - 5.33 (m, 1H), 5.17 - 5.06 (m, 2H), 5.02 (ddd, J =10.3, 5.5, 2.0 Hz, 2H), 4.77 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.60 (dd, J =10.8, 8.0 Hz, 1H), 2.94 (ddd, J =14.3, 9.2, 7.1 Hz, 1H), 2.58 (ddd, J =25.3, 11.9, 4.7 Hz, 3H), 2.35 - 2.17 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值647.1967，實驗值648.2 (M+1) +；滯留時間：2.08分鐘(LC方法J)。 步驟 2 ： 6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2771
在500 mL 3頸燒瓶中，將苯亞甲基-[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基]-二氯-釕;三環己基磷烷(125 mg，0.1472 mmol)溶解於甲苯(135 mL)中。接著， 經由注射器添加6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基- N-(1-苯基丁-3-烯基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(380 mg，0.5868 mmol)於甲苯(5 mL)中之溶液。在110℃下加熱所得混合物30 min。使反應混合物冷卻，且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至75%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈茶色油狀之6-苯甲氧基-17-硝基-12-苯基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (147 mg，40%)。ESI-MS m/z計算值619.1654，實驗值620.2 (M+1) +；滯留時間：1.39分鐘(LC方法J)。 步驟 3 ： 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image2773
在100 mL圓底燒瓶中，用氮氣吹掃6-苯甲氧基-17-硝基-12-苯基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (147 mg，0.2373 mmol)於乙酸乙酯(8 mL)及AcOH (2 mL)中之溶液。接著添加Pd/C (250 mg，10% w/w，0.2349 mmol)。混合物經氮氣脫氣，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物7 h。過濾反應物，且濾液藉由使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)運行之移動梯度進行30分鐘之逆相製備型HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-12-苯基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(50 mg，42%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.67 (s, 1H), 7.59 (d, J =5.3 Hz, 1H), 7.47 (t, J =6.6 Hz, 2H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.34 (t, J =7.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.81 (dd, J =24.4, 3.9 Hz, 1H), 4.70 (dd, J =29.0, 10.3 Hz, 1H), 2.81 (d, J =54.8 Hz, 1H), 2.27 (t, J =12.5 Hz, 1H), 2.07 (s, 1H), 1.82 - 1.57 (m, 2H), 1.50 (s, 1H), 1.40 (s, 2H), 1.26 (d, J =24.2 Hz, 1H), 1.15 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值501.15994，實驗值502.2 (M+1) +；滯留時間：2.12分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ： 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 119) 、 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 120) 、 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 121) 及 17- 胺基 -12- 苯基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 122)
Figure 02_image2775
17-胺基-12-苯基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(50 mg，0.09972 mmol)藉由SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之Lux-4管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用5%至80% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2運行之雙重梯度溶離，得到4種異構產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-苯基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (6.6 mg，52%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.37 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.48 (d, J =7.2 Hz, 2H), 7.41 (t, J =7.4 Hz, 2H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.78 (d, J =3.6 Hz, 1H), 4.67 (dt, J =10.6, 2.9 Hz, 1H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.27 (t, J =12.4 Hz, 1H), 2.08 - 1.99 (m, 1H), 1.73 (d, J =10.5 Hz, 1H), 1.56 (ddd, J =26.6, 13.0, 6.8 Hz, 2H), 1.39 (d, J =8.3 Hz, 2H), 1.35 - 1.29 (m, 1H), 1.13 (d, J =11.6 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值501.15994，實驗值502.2 (M+1) +；滯留時間：2.12分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-苯基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (4.8 mg，38%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.36 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.47 (d, J =7.0 Hz, 2H), 7.41 (dd, J =8.4, 6.4 Hz, 2H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.84 (d, J =4.1 Hz, 1H), 4.74 (dt, J =10.9, 3.2 Hz, 1H), 2.78 - 2.69 (m, 1H), 2.34 (t, J =10.9 Hz, 1H), 2.09 (ddd, J =14.6, 8.9, 6.0 Hz, 1H), 1.81 (d, J =9.6 Hz, 1H), 1.70 (dd, J =14.4, 7.7 Hz, 1H), 1.52 - 1.37 (m, 3H), 1.27 (dd, J =16.0, 8.6 Hz, 1H), 1.13 (dd, J =13.8, 6.8 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值501.15994，實驗值502.2 (M+1) +；滯留時間：2.12分鐘(LC方法A)。
溶離之第三鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-苯基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物3) (6.4 mg，50%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.39 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.48 (d, J =7.5 Hz, 2H), 7.41 (t, J =7.4 Hz, 2H), 7.34 (t, J =7.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.78 (d, J =3.6 Hz, 1H), 4.66 (dd, J =8.6, 5.4 Hz, 1H), 2.86 (d, J =12.2 Hz, 1H), 2.27 (t, J =12.4 Hz, 1H), 2.08 - 1.99 (m, 1H), 1.74 (s, 1H), 1.59 (q, J =6.0 Hz, 1H), 1.53 (d, J =20.4 Hz, 1H), 1.38 (d, J =18.7 Hz, 2H), 1.31 (d, J =7.6 Hz, 1H), 1.12 (d, J =15.1 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值501.15994，實驗值502.2 (M+1) +；滯留時間：2.12分鐘(LC方法A)。
溶離之第四鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12-苯基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物4) (7.0 mg，55%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.42 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.47 (d, J =7.1 Hz, 2H), 7.41 (t, J =7.4 Hz, 2H), 7.34 (dd, J =8.4, 6.0 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.83 (d, J =4.1 Hz, 1H), 4.74 (dt, J =10.8, 3.2 Hz, 1H), 2.75 (q, J =9.4, 8.9 Hz, 1H), 2.38 – 2.27 (m, 1H), 2.09 (ddd, J =14.9, 8.9, 5.9 Hz, 1H), 1.82 (dt, J =12.0, 4.6 Hz, 1H), 1.69 (dt, J =14.7, 7.5 Hz, 1H), 1.49 (dq, J =11.5, 6.2 Hz, 1H), 1.45 – 1.34 (m, 2H), 1.27 (dd, J =16.0, 8.2 Hz, 1H), 1.13 (dt, J =14.1, 8.1 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值501.15994，實驗值502.2 (M+1) +；滯留時間：2.12分鐘(LC方法A)。 實例 61 ：製備 (12R)-20- 胺基 -18-( 噁烷 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 123)
Figure 02_image2777
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18-(3,6- 二氫 -2H- 哌喃 -4- 基 )-20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2779
藉由鼓泡通入氮氣15分鐘將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (200 mg，0.3365 mmol)於甲苯(8 mL)中之溶液脫氣。添加2-(3,6-二氫-2H-哌喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(107 mg，0.5093 mmol)以及1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵氯化鈀(II)與二氯甲烷之錯合物(30 mg，0.0367 mmol)，隨後在氮氣下添加碳酸銫之脫氣水溶液(0.45 mL，2 M，0.9 mmol)。在90℃下攪拌反應混合物隔夜。冷卻至室溫後，反應混合物用乙酸乙酯(30 mL)稀釋，經由矽藻土墊過濾且用乙酸乙酯(2 × 20 mL)沖洗。濾液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用0%至95%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC來純化，得到呈紅色泡沫狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(3,6-二氫-2H-哌喃-4-基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (152 mg，76%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.13 (s, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 5.90 - 5.77 (m, 1H), 5.67 - 5.38 (m, 2H), 5.32 (d, J =10.9 Hz, 1H), 5.03 - 4.91 (m, 1H), 4.46 - 4.23 (m, 2H), 4.06 - 3.85 (m, 3H), 3.66 - 3.34 (m, 3H), 2.57 - 2.00 (m, 8H), 1.90 - 1.66 (m, 2H), 1.56 - 1.46 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.96 (s, 3F), -73.62 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值597.2199，實驗值598.2 (M+1) +；滯留時間：2.56分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 噁烷 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 123)
Figure 02_image2781
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(3,6-二氫-2H-哌喃-4-基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (150 mg，0.251 mmol)溶解於甲醇(15 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(160 mg，5% w/w，0.0752 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且在氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物且用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮。所得殘餘物藉由使用梯度為5%至90%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈淺黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(噁烷-4-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (78 mg，64%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.00 (s, 1H), 5.42 - 4.68 (m, 2H), 4.22 - 4.10 (m, 1H), 4.05 (dd, J =11.4, 3.5 Hz, 1H), 3.99 - 3.81 (m, 1H), 3.79 - 3.66 (m, 1H), 3.61 - 3.46 (m, 2H), 3.19 - 2.99 (m, 2H), 2.62 - 2.30 (m, 2H), 2.27 - 2.18 (m, 1H), 2.12 - 1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.72 (m, 4H), 1.66 - 1.45 (m, 9H), 1.02 - 0.75 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -77.42 (br. s., 3F, 次要非鏡像異構物), -80.82 (br. s., 3F, 主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值481.2301，實驗值482.3 (M+1) +；滯留時間：3.14分鐘(LC方法C)。 實例 62 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 吡啶 -3- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 124)
Figure 02_image2783
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -18-( 吡啶 -3- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2785
藉由氮氣鼓泡15 min將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (200 mg，0.3365 mmol)於甲苯(8 mL)中之溶液脫氣。添加3-吡啶基硼酸(60 mg，0.4881 mmol)以及1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵氯化鈀(II)與二氯甲烷之錯合物(30 mg，0.0367 mmol)，隨後在氮氣下添加碳酸銫之脫氣水溶液(450μL，2 M，0.9 mmol)。在90℃下攪拌反應混合物隔夜。冷卻至室溫後，反應混合物用乙酸乙酯(25 mL)稀釋，經由矽藻土墊過濾且用乙酸乙酯(2 × 15 mL)沖洗。濾液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得混合物藉由使用梯度為0%至95%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈紅色泡沫狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(吡啶-3-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (190 mg，95%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.78 - 8.59 (m, 2H), 8.29 (s, 1H), 7.78 - 7.68 (m, 1H), 7.54 - 7.27 (m, 6H), 5.67 - 5.40 (m, 2H), 5.32 (d, J =10.9 Hz, 1H), 5.04 - 4.89 (m, 1H), 4.12 - 3.96 (m, 1H), 3.63 - 3.47 (m, 1H), 3.01 - 2.83 (m, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 1H), 2.54 - 2.11 (m, 5H), 1.95 - 1.82 (m, 1H), 1.78 - 1.61 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.95 (br. s., 3F), -73.60 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值592.2046，實驗值593.3 (M+1) +；滯留時間：2.32分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 吡啶 -3- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 124)
Figure 02_image2787
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(吡啶-3-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (190 mg，0.3206 mmol)溶解於甲醇(19 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(275 mg，5% w/w，0.1292 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且在氫氣下在室溫下攪拌混合物隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物且用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮。所得殘餘物藉由使用梯度為5%至90%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(吡啶-3-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (45 mg，29%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.94 - 8.43 (m, 2H), 7.89 - 7.64 (m, 1H), 7.50 - 7.30 (m, 1H), 7.18 - 6.90 (m, 1H), 5.26 - 4.67 (m, 2H), 4.05 - 3.77 (m, 1H), 2.98 - 2.69 (m, 2H), 2.64 - 2.49 (m, 1H), 2.39 - 2.00 (m, 3H), 1.81 - 1.37 (m, 10H), 1.11 - 0.79 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -77.34 (br. s., 3F,主要非鏡像異構物), -80.73 (br. s., 3F,次要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值474.1991，實驗值475.2 (M+1) +；滯留時間：3.08分鐘(LC方法C)。 實例 63 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 吡啶 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 125)
Figure 02_image2789
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -18-( 吡啶 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2791
藉由鼓泡通入氮氣15 min將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (200 mg，0.3365 mmol)於甲苯(8 mL)中之溶液脫氣。添加4-吡啶基硼酸(60 mg，0.4881 mmol)以及1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵氯化鈀(II)與二氯甲烷之錯合物(30 mg，0.0367 mmol)，隨後添加碳酸銫之經氮氣脫氣之水溶液(450 μL，2 M，0.9 mmol)。在90℃下攪拌反應混合物隔夜。冷卻至室溫後，反應混合物經由矽藻土墊過濾且用乙酸乙酯(2 × 25 mL)沖洗。濾液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得混合物藉由使用梯度0%至90%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)為之逆相HPLC來純化，得到呈黃色泡沫狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (180 mg，90%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.75 (br. s., 2H), 8.33 (s, 1H), 7.50 - 7.28 (m, 7H), 5.68 - 5.44 (m, 2H), 5.34 (d, J =10.9 Hz, 1H), 5.05 - 4.90 (m, 1H), 4.12 - 3.96 (m, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 1H), 3.05 - 2.88 (m, 1H), 2.79 - 2.63 (m, 1H), 2.54 - 2.13 (m, 5H), 1.97 - 1.83 (m, 1H), 1.81 - 1.55 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.92 (br. s., 3F), -73.61 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值592.2046，實驗值593.3 (M+1) +；滯留時間：2.32分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 吡啶 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 125)
Figure 02_image2793
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (180 mg，0.3038 mmol)溶解於甲醇(18 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(194 mg，5% w/w，0.0911 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌混合物隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至95%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈橙色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (60 mg，41%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.66 (br. s., 2H), 7.48 - 7.32 (m, 2H), 7.14 - 6.98 (m, 1H), 5.52 - 4.47 (m, 2H), 4.05 - 3.78 (m, 1H), 2.97 - 2.78 (m, 1H), 2.76 - 2.58 (m, 1H), 2.57 - 2.33 (m, 2H), 2.32 - 1.88 (m, 3H), 1.80 - 1.44 (m, 9H), 1.02 - 0.85 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -77.32 (br. s., 3F, 次要非鏡像異構物), -80.70 (br. s., 3F, 主要非鏡像異構物) ppm. ESI-MS m/z計算值474.1991，實驗值475.2 (M+1) +；滯留時間：2.76分鐘(LC方法C)。 實例 64 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 氧雜環戊 -3- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 126)
Figure 02_image2795
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18-(2,5- 二氫呋喃 -3- 基 )-20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2797
向壓力管中饋入(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (100 mg，0.1682 mmol)、2-(2,5-二氫呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(50 mg，0.255 mmol)、碳酸銫(132 mg，0.4051 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(12 mg，0.0147 mmol)、甲苯(3 mL)及H 2O (0.2 mL)。向混合物鼓泡通入氮氣3 min且密封。在90℃下攪拌反應混合物22 h，冷卻至室溫且用鹽水(5 mL)處理。混合物用EtOAc (320 mL)萃取，且有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(2,5-二氫呋喃-3-基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (98 mg，100%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.16 (s, 1H), 7.40 - 7.27 (m, 5H), 5.97 - 5.88 (m, 1H), 5.63 - 5.41 (m, 2H), 5.36 - 4.69 (m, 6H), 4.07 - 3.92 (m, 1H), 3.62 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.18 (m, 1H), 2.46 - 2.06 (m, 6H), 1.88 - 1.68 (m, 2H), 1.56 - 1.46 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.79至-73.78 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值583.2043，實驗值584.2 (M+1) +；滯留時間：2.5分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 氧雜環戊 -3- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 126)
Figure 02_image2799
在氫氣球下在30℃至50℃下攪拌(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(2,5-二氫呋喃-3-基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (98 mg，0.1679 mmol)、10%鈀/碳(100 mg，50%潤濕，0.047 mmol)、EtOAc (4 mL)及MeOH (4 mL)之混合物5 h，且接著在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土過濾混合物且用EtOAc洗滌。濃縮濾液，且殘餘物藉由使用梯度為20%至50%乙酸乙酯/庚烷之急驟層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(氧雜環戊-3-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (29 mg，35%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.57 - 7.46 (m, 1H), 7.33 - 7.21 (m, 1H), 6.10 - 5.85 (m, 2H), 4.13 - 3.87 (m, 2H), 3.85 - 3.67 (m, 3H), 3.61 - 3.48 (m, 2H), 3.14 - 2.96 (m, 1H), 2.47 - 1.60 (m, 9H), 1.58 - 1.32 (m, 6H), 0.93 - 0.73 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -76.50 (s, 3F, 次要非鏡像異構物), -79.35 (s, 3F, 主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值467.2144，實驗值468.1 (M+1) +；滯留時間：3.23分鐘(LC方法C)。 實例 65 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 127)
Figure 02_image2801
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2803
藉由鼓泡通入氮氣20 min將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (200 mg，0.3365 mmol)於甲苯(8 mL)及碳酸銫(0.45 mL，2 M於水中，0.9 mmol)中之溶液脫氣。添加1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)吡唑(105 mg，0.5046 mmol)及Pd(dppf)Cl 2(28 mg，0.0343 mmol)。在90℃下攪拌反應混合物隔夜。冷卻至室溫後，反應混合物經由矽藻土墊過濾且用乙酸乙酯(2 × 25 mL)沖洗。濾液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為5%至100%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (110 mg，55%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.19 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.52 - 7.47 (m, 1H), 7.42 - 7.27 (m, 5H), 5.60 - 5.41 (m, 2H), 5.33 - 4.90 (m, 2H), 4.05 - 3.93 (m, 4H), 3.55 - 3.40 (m, 1H), 3.24 - 3.07 (m, 1H), 3.05 - 2.90 (m, 1H), 2.50 - 2.02 (m, 5H), 1.99 - 1.82 (m, 1H), 1.79 - 1.59 (m, 2H), 1.49 - 1.26 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.98 (s, 3F) (次要非鏡像異構物), -73.62 (s, 3F) (主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值595.2155，實驗值596.2 (M+1) +；滯留時間：2.44分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 127)
Figure 02_image2805
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (100 mg，0.1679 mmol)溶解於甲醇(5 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加10%鈀/碳(20 mg，0.0094 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌3天。經由矽藻土墊過濾混合物，且用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為5%至100%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (34 mg，42%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.70 - 7.61 (m, 1H), 7.59 - 7.49 (m, 1H), 7.09 - 6.97 (m, 1H), 5.04 (br. s, 2H), 4.16 - 3.82 (m, 4H), 3.21 (br. s, 1H), 2.81 - 2.01 (m, 5H), 1.88 - 1.77 (m, 1H), 1.75 - 1.44 (m, 9H), 1.09 - 0.87 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -77.40 (s, 3F) (次要非鏡像異構物), -80.72 (s, 3F) (主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值477.21，實驗值478.1 (M+1) +；滯留時間：3.26分鐘(LC方法C)。 實例 66 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-(1H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 128)
Figure 02_image2807
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -18-(1 H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2809
在密封管中，藉由鼓泡通入氮氣20 min將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (200 mg，0.3365 mmol)於二噁烷(8 mL)、水(1.5 mL)及碳酸銫(0.5 mL，2 M，1 mmol)中之溶液脫氣，且添加4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1H-吡唑(98 mg，0.5051 mmol)及Pd(dppf)Cl 2(28 mg，0.0343 mmol)。在120℃下攪拌反應混合物隔夜。冷卻至室溫後，反應混合物經由矽藻土墊過濾且用乙酸乙酯(2 × 25 mL)沖洗。濾液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得殘餘物藉由使用梯度為5%至100%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(1 H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (18 mg，9%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.27 - 8.18 (m, 1H), 7.76 - 7.67 (m, 2H), 7.42 - 7.28 (m, 5H), 5.63 - 5.43 (m, 2H), 5.33 - 4.90 (m, 2H), 4.08 - 3.93 (m, 1H), 3.57 - 3.40 (m, 1H), 3.17 - 3.03 (m, 1H), 3.02 - 2.89 (m, 1H), 2.50 - 1.44 (m, 10H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.98 (s, 3F) (次要非鏡像異構物), -73.60 (s, 3F) (主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值581.1998，實驗值582.2 (M+1) +；滯留時間：2.35分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-(1 H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 128)
Figure 02_image2811
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(1 H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (20 mg，0.0344 mmol)溶解於甲醇(3 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加10%鈀/碳(4 mg，0.0019 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，且用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為5%至100%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(1 H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (3 mg，14%)。ESI-MS m/z計算值463.1944，實驗值464.2 (M+1) +；滯留時間：3.11分鐘(LC方法C)。 實例 67 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18- 環己基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 129)
Figure 02_image2813
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-18-( 環己 -1- 烯 -1- 基 )-20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2815
在密封管中，藉由鼓泡通入氮氣20 min將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (200 mg，0.3365 mmol)於甲苯(8 mL)及碳酸銫(0.5 mL，2 M，1 mmol)中之溶液脫氣，且添加環己烯-1-基硼酸(64 mg，0.5081 mmol)及Pd(dppf)Cl 2(28 mg，0.0343 mmol)。在90℃下攪拌反應混合物隔夜。冷卻至室溫後，反應混合物經由矽藻土墊過濾且用乙酸乙酯(2 × 25 mL)沖洗。濾液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得殘餘物藉由使用梯度為5%至100%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(環己-1-烯-1-基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (136 mg，68%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.05 (s, 1H), 7.50 - 7.26 (m, 5H), 5.78 (br. s., 1H), 5.60 - 5.42 (m, 2H), 5.34 - 4.86 (m, 2H), 4.05 - 3.89 (m, 1H), 3.57 - 3.37 (m, 2H), 2.48 - 1.95 (m, 9H), 1.87 - 1.45 (m, 9H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.98 (s, 3F) (次要非鏡像異構物), -73.61 (s, 3F) (主要非鏡像異構物) ppm。滯留時間：2.89分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 環己基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 129)
Figure 02_image2817
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-(環己-1-烯-1-基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (136 mg，0.2283 mmol)溶解於甲醇(5 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加10%鈀/碳(25 mg，0.0117 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在1個大氣壓之氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為5%至100%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-環己基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (49 mg，44%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 7.52 (br. s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.93 (br. s., 2H), 3.94 - 3.64 (m, 2H), 3.14 - 3.01 (m, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 1H), 2.48 - 2.23 (m, 2H), 2.22 - 2.07 (m, 1H), 2.04 - 1.83 (m, 4H), 1.81 - 1.70 (m, 4H), 1.65 - 1.09 (m, 12H), 0.94 - 0.74 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -76.47 (s, 3F) (次要非鏡像異構物), -79.36 (s, 3F) (主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值479.2508，實驗值480.3 (M+1) +；滯留時間：3.82分鐘(LC方法C)。 實例 68 ：製備 (15 R)-23- 胺基 -10- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7,9,11(25),20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 130) 及 (15 R)-23- 胺基 -10- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7,9,11(25),20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 131)
Figure 02_image2819
步驟 1 ： 2,2,2- 三氟 -1-(4- 氟 -3- 碘 - 苯基 ) 乙醇
Figure 02_image2821
向小瓶中饋入含4-氟-3-碘-苯甲醛(1.5 g，5.9998 mmol)及TMSCF 3(1.1544 g，1.2 mL，8.1184 mmol)之THF (6 mL)，接著冷卻至0℃。在10 min之後，逐滴添加TBAF (0.06 mL，1 M於THF中，0.06 mmol)，保持溫度在＜ 5℃。攪拌反應物10 min，接著升溫至室溫且攪拌隔夜。接著將反應物冷卻至0℃，且添加水(0.75 mL，41.631 mmol)，隨後在相同溫度逐滴添加TBAF (0.66 mL，1 M於THF中，0.66 mmol)。在0℃下攪拌反應物10 min，接著升溫至室溫且攪拌3 h。將反應物倒入水(100 mL)及DCM (100 mL)中，接著分離有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈棕色油狀之2,2,2-三氟-1-(4-氟-3-碘-苯基)乙醇(2 g，99%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.88 (dd, J =6.0, 2.2 Hz, 1H), 7.48 – 7.36 (m, 1H), 7.14 – 6.99 (m, 1H), 5.01 – 4.87 (m, 1H), 3.15 (s, 1H) ppm。 步驟 2 ： 2,2,2- 三氟 -1-(4- 氟 -3- 碘 - 苯基 ) 乙酮
Figure 02_image2823
在室溫下，向2,2,2-三氟-1-(4-氟-3-碘-苯基)乙醇(2 g，5.9371 mmol)於DCM (40 mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(4 g，9.4308 mmol)。在相同溫度下攪拌反應物3 h。反應物用200 mL之10%硫代硫酸鈉溶液淬滅。分離有機層且用飽和NaHCO 3溶液(200 mL)洗滌，接著用鹽水(200 mL)洗滌。有機物經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%二乙醚/己烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈琥珀色液體狀之2,2,2-三氟-1-(4-氟-3-碘-苯基)乙酮(1.485 g，75%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 8.38 (dd, J =6.0, 2.3 Hz, 1H), 8.14 – 8.06 (m, 1H), 7.55 (dd, J =8.7,7.8 Hz, 1H) ppm.ESI-MS m/z計算值317.9165，實驗值318.9 (M+1) +；滯留時間：2.14分鐘(LC方法H)。 步驟 3 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[2,2,2- 三氟 -1-(4- 氟 -3- 碘 - 苯基 )-1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2825
向2,2,2-三氟-1-(4-氟-3-碘-苯基)乙酮(587 mg，1.846 mmol)及6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-(三級丁氧基羰基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(500 mg，1.204 mmol)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中一次性全部添加( N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(568 mg，1.879 mmol)。在室溫下攪拌混合物1 h。接著，混合物用EtOAc (50 mL)稀釋，用水、接著鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至50% EtOAc/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(4-氟-3-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(580 mg，64%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.46 (d, J =10.8 Hz, 1H), 8.87 (d, J =8.7 Hz, 1H), 8.67 (d, J =16.3 Hz, 1H), 8.06 (dd, J =5.9, 2.3 Hz, 1H), 7.60 (dddd, J =29.6, 7.4, 4.7, 2.4 Hz, 1H), 7.36 (dt, J =19.0, 8.3 Hz, 1H), 5.55 (dddt, J =50.3, 17.5, 10.7, 7.2 Hz, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 1H), 4.89 - 4.80 (m, 1H), 4.26 (dtd, J =15.0, 8.4, 4.1 Hz, 1H), 3.58 - 3.49 (m, 1H), 3.36 (d, J =8.9 Hz, 1H), 2.37 (tdd, J =12.2, 7.9, 2.5 Hz, 1H), 2.12 (dt, J =13.3, 7.9 Hz, 1H), 2.03 - 1.91 (m, 2H), 1.75 - 1.59 (m, 2H), 1.48 (d, J =3.2 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值757.0996，實驗值758.0 (M+1) +；滯留時間：2.34分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ： N -[(15 S)-10- 氟 -6- 羥基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -23- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2827
向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(4-氟-3-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(575 mg，0.7591 mmol)於乙腈(70 mL)中之攪拌溶液中添加乙酸鈀(II) (19 mg，0.08463 mmol)，隨後添加三( 鄰-甲苯基)膦(52 mg，0.1708 mmol)及三乙胺(550 µL，3.946 mmol)，且向溶液鼓泡通入N 22 min，接著在80℃下加熱22 h。將混合物冷卻至室溫，濃縮至約5 mL體積且經由矽藻土過濾，且濃縮濾液。所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[(15 S)-10-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (162 mg，34%)。ESI-MS m/z計算值629.1873，實驗值630.1 (M+1) +；滯留時間：1.7分鐘(LC方法M)。 步驟 5 ： N -[(15 R)-10- 氟 -6- 羥基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -23- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2829
在使用3通轉接器之配備有H 2氣球之圓底燒瓶中，向 N-[(15 S)-10-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (160 mg，0.2542 mmol)於乙酸乙酯(5 mL)中之溶液中添加Pd/C (32 mg，10% w/w，0.03007 mmol)。經受真空且用氮氣回填三次，接著經受真空。用氫氣填充燒瓶，接著攪拌混合物15小時。經受真空且用氮氣回填三次，接著用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土過濾。濃縮濾液且經乾燥，得到呈黃色固體狀之 N-[(15 R)-10-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯(160 mg，100%)。ESI-MS m/z計算值631.20294，實驗值632.0 (M+1) +；滯留時間：1.83分鐘(LC方法M)。 步驟 6 ： (15 R)-23- 胺基 -10- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7,9,11(25),20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1)( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 130) 及 (15 R)-23- 胺基 -10- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7,9,11(25),20,22- 八烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2)( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 131)
Figure 02_image2831
在室溫下攪拌 N-[(15 R)-10-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯(150 mg，0.2375 mmol)於TFA (500 µL，6.49 mmol)及二氯甲烷(2 mL)之預製備溶液中之溶液約1 h。移除溶劑，且殘餘物藉由使用50%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC來純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(15 R)-23-胺基-10-氟-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7,9,11(25),20,22-八烯-6-醇(鏡像異構物1) (鹽酸鹽) (50.1 mg，74%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.67 (s, 1H), 8.05 (dd, J =7.3, 2.5 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.42 (t, J =7.3 Hz, 1H), 7.20 - 7.12 (m, 1H), 6.24 (s, 2H), 3.90 (dq, J =10.5, 5.1 Hz, 1H), 3.52 (q, J =8.7 Hz, 1H), 3.19 (t, J =8.9 Hz, 1H), 2.85 (dd, J =15.6, 6.2 Hz, 1H), 2.62 (dd, J =15.1, 12.1 Hz, 1H), 2.40 - 2.32 (m, 1H), 2.15 (dt, J =12.1, 6.0 Hz, 1H), 1.90 (dt, J =12.2, 6.8 Hz, 2H), 1.77 - 1.62 (m, 2H), 1.55 (qd, J =11.2, 6.2 Hz, 1H), 0.91 (qd, J =10.8, 6.1 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值531.1505，實驗值532.1 (M+1) +；滯留時間：1.75分鐘(LC方法J)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(15 R)-23-胺基-10-氟-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7,9,11(25),20,22-八烯-6-醇(鏡像異構物2) (鹽酸鹽) (24.2 mg，36%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.84 (s, 1H), 8.01 (d, J =6.9 Hz, 1H), 7.74 - 7.66 (m, 2H), 7.29 - 7.23 (m, 1H), 6.25 (s, 2H), 4.16 (dt, J =10.7, 5.4 Hz, 1H), 3.55 (q, J =9.0 Hz, 1H), 3.23 (d, J =9.0 Hz, 1H), 2.77 (d, J =8.1 Hz, 2H), 2.23 (dt, J =11.7, 5.7 Hz, 1H), 1.92 (q, J =5.9 Hz, 1H), 1.84 (s, 2H), 1.75 (t, J =9.0 Hz, 1H), 1.60 (td, J =11.5, 6.3 Hz, 1H), 1.25 - 1.11 (m, 1H), 0.90 (d, J =12.3 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值531.1505，實驗值532.0 (M+1) +；滯留時間：1.87分鐘(LC方法J)。 實例 69 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 吡啶 -2- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 132)
Figure 02_image2833
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -18-( 吡啶 -2- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2835
向微波小瓶中饋入(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (160 mg，0.2692 mmol)、三丁基(2-吡啶基)錫烷(160 mg，0.4346 mmol)、Pd(PPh 3) 4(40 mg，0.0346 mmol)及甲苯(2 mL)。管用氮氣沖洗且密封。在126℃下攪拌混合物21 h，冷卻至室溫且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至60%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (80 mg，50%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.71 (d, J =4.1 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.81 (td, J =7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.47 - 7.27 (m, 7H), 5.63 - 5.41 (m, 2H), 5.35 - 4.87 (m, 2H), 4.09 - 3.96 (m, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 1H), 3.03 - 2.87 (m, 1H), 2.72 (ddd, J =10.7, 7.3, 2.8 Hz, 1H), 2.52 - 2.08 (dd, J =5.4, 3.4 Hz, 5H), 1.92 - 1.61 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.22至-73.82 (m, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值592.2046，實驗值593.0 (M+1) +；滯留時間：2.46分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 吡啶 -2- 基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 132)
Figure 02_image2837
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-18-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (86 mg，0.1451 mmol)、10%鈀/碳(60 mg，0.0282 mmol)、EtOAc (3 mL)及MeOH (1 mL)之混合物置放在氫氣球下於室溫下3天，接著在50℃下置放5 h。經由矽藻土過濾混合物且用EtOAc洗滌。濃縮濾液且藉由使用梯度為50%至90%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃橙色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (22 mg，31%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 8.65 (d, J =4.4 Hz, 1H), 7.85 (t, J =7.8 Hz, 1H), 7.57 - 7.45 (m, 2H), 7.44 - 7.30 (m, 2H), 5.95 (br. s., 2H), 3.97 - 3.74 (m, 1H), 2.82 - 2.68 (m, 1H), 2.43 - 1.92 (m, 5H), 1.85 - 1.29 (m, 9H), 1.05 - 0.81 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -76.34 (s, 3F, 主要非鏡像異構物), -79.21 (s, 3F, 次要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值474.1991，實驗值475.1 (M+1) +；滯留時間：3.18分鐘(LC方法C)。 實例 70 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 苯磺醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 133)
Figure 02_image2839
步驟 1 ： (12 S)-18- 溴 -20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -6- 醇 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2841
在0℃下在氮氣下，向(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (1 g，1.6824 mmol)於二氯甲烷(40 mL)中之溶液中逐滴添加氯化鈦(IV) (3.1832 g，1.84 mL，16.782 mmol)。移除冷浴，接著在室溫下攪拌反應混合物隔夜。反應混合物用二氯甲烷(150 mL)稀釋，冷卻至0℃，且接著緩慢添加飽和碳酸氫鈉溶液(100 mL)。在0℃下劇烈攪拌所得混合物15 min，且接著分離各相。水相用二氯甲烷(3 × 100 mL)萃取。將所有有機層合併且用鹽水(100 mL)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%二氯甲烷/乙酸乙酯之矽膠層析純化，得到呈棕色固體狀之(12 S)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-6-醇( E/Z混合物) (674 mg，79%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.54 – 8.40 (m, 1H), 7.34 – 7.20 (m, 1H), 5.63 – 5.27 (m, 2H), 4.06 – 3.75 (m, 3H), 3.38 – 3.01 (m, 1H), 2.33 – 1.54 (m, 9H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ 80.14 (br. s., 3F), -80.37 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值503.0416，實驗值503.9 (M+1) +；滯留時間：2.3分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 S)-20- 胺基 -18- 溴 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -6- 醇 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2843
向(12 S)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-6-醇( E/Z混合物) (193 mg，0.3827 mmol)於乙醇(8 mL)及水(2 mL)中之溶液中添加鐵(86 mg，1.54 mmol)及氯化銨(62 mg，1.1591 mmol)。在100℃下攪拌反應物1.5小時。將深色溶液冷卻至室溫且經由矽藻土過濾，用二氯甲烷(100 mL)洗滌。減壓濃縮濾液。添加水(20 mL)，且所得混合物用二氯甲烷(2 × 50 mL)萃取。經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。真空乾燥所得材料，得到呈黃色油狀之(12 S)-20-胺基-18-溴-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-6-醇( E/Z混合物) (180 mg，99%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.39 (d, J =2.1 Hz, 1H), 5.65 - 5.43 (m, 2H), 4.92 (br. s., 2H), 4.09 - 3.94 (m, 1H), 3.90 - 3.74 (m, 1H), 3.65 - 3.42 (m, 2H), 3.39 - 3.25 (m, 1H), 2.98 - 2.75 (m, 1H), 2.56 - 1.93 (m, 6H), 1.80 - 1.67 (m, 1H), 1.55 - 1.39 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ 77.58 (s, 3F), -80.75 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值473.0674，實驗值473.9 (M+1) +；滯留時間：2.31分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： N -[(12 S)-18- 溴 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -20- 基 ]- N-[( 三級丁 氧基 ) 羰基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2845
在室溫下攪拌(12 S)-20-胺基-18-溴-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-6-醇( E/Z混合物) (2 g，3.4115 mmol)、二碳酸二三級丁酯(3.69 g，16.907 mmol)、二異丙基乙胺(2.1295 g，2.87 mL，16.477 mmol)、DMAP (76 mg，0.6221 mmol)及二氯甲烷(90 mL)之混合物3天。濃縮反應物，且殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈米色固體狀之 N-[(12 S)-18-溴-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (2.21 g，96%)。ESI-MS m/z計算值673.1723，實驗值618.2 (M-55) +；滯留時間：2.59分鐘(LC方法Y)。 步驟 4 ： N -[(12 R)-18- 溴 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ]- N-[( 三級丁 氧基 ) 羰基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2847
將 N-[(12 S)-18-溴-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (294 mg，0.4359 mmol)於乙酸乙酯(15 mL)中之溶液置於氮氣氛圍下。添加銠/鋁(89 mg，5% w/w，0.0432 mmol)，接著在氫氣(氣球)氛圍下攪拌反應物1.5小時。將反應物置於氮氣氛圍下，接著經由矽藻土過濾且濃縮，得到呈黃色油狀之 N-[(12 R)-18-溴-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯(280 mg，95%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.68 - 7.63 (m, 1H), 4.07 - 3.90 (m, 2H), 3.86 - 3.75 (m, 1H), 2.83 - 2.57 (m, 1H), 2.45 – 2.27 (m, 1H), 2.22 – 2.08 (m, 2H), 2.01 – 1.94 (m, 1H), 1.52 – 1.32 (m, 28H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -74.85 (br. s., 3F), -77.76 (s, 3F) ppm. 滯留時間：2.99分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： N -[(12 R)-18-( 苯磺醯基 )-6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ]- N-[( 三級丁 氧基 ) 羰基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2849
向壓力管中饋入 N-[(12 R)-18-溴-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯(69 mg，0.102 mmol)、苯亞磺酸鈉(47 mg，0.2863 mmol)、CuI (24 mg，0.126 mmol)、 L-脯胺酸(0.7 mg，0.0061 mmol)及DMSO (0.8 mL)。管用氮氣沖洗2 min且密封。在112℃下攪拌混合物2.5 h，冷卻至室溫且添加至28% NH 3水溶液(6 mL)中。混合物用MTBE (3 × 20 mL)萃取，且經合併之有機層用28% NH 3水溶液(4 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色油狀之 N-[(12 R)-18-(苯磺醯基)-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯(80 mg，定量)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟中。 步驟 6 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 苯磺醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 133)
Figure 02_image2851
向 N-[(12 R)-18-(苯磺醯基)-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯(75 mg，0.1019 mmol)於CH 2Cl 2(2 mL)中之溶液中添加TFA (2.9600 g，2 mL，25.96 mmol)。在室溫下攪拌混合物30 min且濃縮，接著與MeOH (3 × 3 mL)一起共蒸發。將殘餘物分配於CH 2Cl 2(20 mL)與5% NaHCO 3水溶液(15 mL)之間。分離兩層，且水層用CH 2Cl 2(2 × 20 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，且自CH 3CN (1 mL)及H 2O (2 mL)中凍乾產物，得到呈黃色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-18-(苯磺醯基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(30 mg，55%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 8.08 - 7.99 (m, 1H), 7.86 - 7.77 (m, 2H), 7.76 - 7.68 (m, 1H), 7.67 - 7.52 (m, 3H), 6.41 - 6.23 (m, 2H), 3.93 - 3.69 (m, 2H), 3.09 - 2.92 (m, 1H), 2.23 - 1.74 (m, 5H), 1.66 - 1.18 (m, 8H), 0.50 - 0.33 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值537.1658，實驗值537.9 (M+1) +；滯留時間：3.54分鐘(LC方法C)。 實例 71 ：製備 (16 R)-24- 胺基 -22-( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,20,25- 四氮雜五環 [19.3.1.12,5.06,11.016,20] 二十六碳 -1(25),2,4,6(11),7,9,21,23- 八烯 -7- 醇 ( 化合物 134)
Figure 02_image2853
步驟 1 ： 6-[(2S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2855
向6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1 g，3.514 mmol)及(2 S)-2-烯丙基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (1 g，4.4403 mmol)於乙腈(10 mL)中之溶液中添加二異丙基乙胺(2.3002 g，3.1 mL，17.797 mmol)，且使混合物回流2 h。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由用0%至20%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠管柱層析純化，得到呈黃色油狀之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.3 g，100%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.62 (s, 1H), 5.79 - 5.58 (m, 1H), 5.14 - 4.97 (m, 2H), 4.72 - 4.59 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.73 - 3.57 (m, 2H), 2.63 - 2.47 (m, 1H), 2.43 - 2.26 (m, 1H), 2.17 - 1.99 (m, 2H), 1.94 - 1.75 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl 3) δ -54.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值359.1093，實驗值360.1 (M+1) +；滯留時間：2.29分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2857
向6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(22 g，61.23 mmol)220 mL)中之溶液中添加甲醇(220 mL)及水(110 mL)。添加無水氫氧化鋰(21.99 g，918.2 mmol)，且在室溫下攪拌0.5 h。減壓移除THF及甲醇。添加3M HCl水溶液直至混合物呈酸性，接著用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取水層。將有機相合併，用鹽水(200 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色固體狀之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(19.7 g，93%)。ESI-MS m/z計算值345.09363，實驗值346.06 (M+1) +；滯留時間：0.67分鐘(LC方法R)。 步驟 3 ： 2- 苯甲氧基 -6- 羥基 - 苯甲酸甲酯
Figure 02_image2859
在油浴中在60℃下加熱2,6-二羥基苯甲酸甲酯(1.68 g，9.9913 mmol)、碳酸鉀(2.76 g，19.97 mmol)及溴甲基苯(1.8694 g，1.3 mL，10.93 mmol)於乙腈(30 mL)中之混合物23小時。一旦冷卻至室溫，反應混合物經由矽藻土過濾，用乙酸乙酯洗滌且減壓濃縮。將殘餘物轉移至具有水(75 mL)及少量1 N HCl水溶液(以使pH達到約1至2)之250 mL分液漏斗，且用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈白色固體狀之2-苯甲氧基-6-羥基-苯甲酸甲酯(478 mg，18%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.52 (s, 1H), 7.54 - 7.46 (m, 2H), 7.45 - 7.29 (m, 4H), 6.63 (dd, J =8.4, 1.0 Hz, 1H), 6.50 (d, J =7.6 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.96 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值258.0892，實驗值257.2 (M-1) -；滯留時間：2.06分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 2- 苯甲氧基 -6-( 三氟甲基磺醯基氧基 ) 苯甲酸甲酯
Figure 02_image2861
在0℃下，將三氟甲烷磺酸三氟甲基磺醯酯(7.3788 g，4.4 mL，26.153 mmol)緩慢添加至含2-苯甲氧基-6-羥基-苯甲酸甲酯(5.45 g，19.941 mmol)及吡啶(3.2274 g，3.3 mL，40.802 mmol)之DCM (50 mL)中。在室溫下攪拌混合物2 h，接著倒入飽和碳酸氫鈉溶液(100 mL)中且用DCM (3 × 50 mL)萃取。將有機相合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈透明油狀之2-苯甲氧基-6-(三氟甲基磺醯基氧基)苯甲酸甲酯(7.45 g，93%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.47 - 7.29 (m, 6H), 7.05 - 6.89 (m, 2H), 5.17 (s, 2H), 3.94 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -73.76 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值390.0385，實驗值413.0 (M+Na) +；滯留時間：2.24分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： 2- 烯丙基 -6- 苯甲氧基 - 苯甲酸甲酯
Figure 02_image2863
向在室溫下之四(三苯基膦)鈀(0) (1.1 g，0.9519 mmol)及氯化鋰(2.35 g，55.432 mmol)於無水脫氣THF (35 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-6-(三氟甲基磺醯基氧基)苯甲酸甲酯(7.45 g，18.514 mmol)於無水脫氣THF (25 mL)中之溶液及烯丙基(三丁基)錫烷(6.75 g，20.385 mmol)。使所得反應混合物回流隔夜。將反應混合物冷卻至室溫且用MTBE (300 mL)稀釋。所得溶液用水(300 mL)、10%氫氧化銨水溶液(100 mL)及鹽水(200 mL)洗滌。減壓蒸發溶劑，且殘餘物藉由使用梯度為0%至5%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈透明油狀之2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲酸甲酯(5.4 g，100%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.44 - 7.18 (m, 6H), 6.90 - 6.78 (m, 2H), 6.01 - 5.81 (m, 1H), 5.16 - 4.99 (m, 4H), 3.88 (s, 3H), 3.38 (d, J =6.8 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值282.1256，實驗值305.1 (M+Na) +；滯留時間：2.2分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： 2- 烯丙基 -6- 苯甲氧基 - 苯甲酸
Figure 02_image2865
在室溫下，將氫氧化鉀溶液(10.6 mL，5 M，53 mmol)添加至含2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲酸甲酯(3 g，10.626 mmol)之THF (25 mL)及乙醇(25 mL)中。在50℃下攪拌混合物4天，接著在60℃下攪拌4天。將混合物倒入水(250 mL)中且用MTBE (2 × 100 mL)洗滌。水相使用3 N HCl溶液酸化至pH = 2，且用MTBE (3 × 100 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈橙色膠狀之2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲酸(2.44 g，83%)。ESI-MS m/z計算值268.1099，實驗值269.1 (M+1) +；滯留時間：1.98分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： N -[(2- 烯丙基 -6- 苯甲氧基 - 苯甲醯基 ) 胺基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2867
向2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲酸(2.4 g，8.945 mmol)於DMF (25 mL)中之溶液中添加三乙胺(1.8876 g，2.6 mL，18.654 mmol)及HATU (4.75 g，12.492 mmol)。攪拌混合物10 min。接著添加 N-胺基胺基甲酸三級丁酯(1.5 g，11.35 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，接著用水(200 mL)稀釋且用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層用碳酸氫鈉飽和水溶液(100 mL)、水(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌。有機層藉由減壓蒸發而濃縮，且接著藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈白色固體狀之 N-[(2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲醯基)胺基]胺基甲酸三級丁酯(2.89 g，73%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.54 - 7.46 (m, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 6H), 6.93 - 6.77 (m, 2H), 6.72 - 6.58 (m, 1H), 6.33 - 5.91 (m, 1H), 5.18 - 5.01 (m, 4H), 3.56 - 3.48 (m, 1H), 1.90 - 1.87 (m, 1H), 1.50 (d, J =2.3 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值382.1893，實驗值405.1 (M+Na) +；滯留時間：2.09分鐘(LC方法E)。 步驟 8 ： 2- 烯丙基 -6- 苯甲氧基 - 苯甲醯肼 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2869
向 N-[(2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲醯基)胺基]胺基甲酸三級丁酯(2.89 g，6.559 mmol)於CH 2Cl 2(15 mL)中之溶液中添加含HCl之Et 2O (15 mL，2 M，30 mmol)。在室溫下攪拌混合物6 h。再次添加含HCl之Et 2O (5 mL，2 M，10 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜，接著用庚烷(120 mL)稀釋且濃縮。將殘餘物在二乙醚中濕磨，過濾且乾燥，得到呈白色固體狀之2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲醯肼(鹽酸鹽) (2.05 g，98%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 11.40 (d, J =6.8 Hz, 1H), 10.67 (br. s, 2H), 7.47 - 7.27 (m, 6H), 7.06 - 6.96 (m, 1H), 6.91 - 6.80 (m, 1H), 6.42 - 6.32 (m, 1H), 6.00 - 5.73 (m, 1H), 5.22 - 4.96 (m, 4H), 3.29 (d, J =6.8 Hz, 1H), 1.83 (d, J =4.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值282.1368，實驗值283.1 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法E)。 步驟 9 ： N ' -(2- 烯丙基 -6- 苯甲氧基 - 苯甲醯基 )-6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image2871
向在0℃下之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(730 mg，2.1143 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之懸浮液中逐滴添加草醯氯(390 mg，0.26 mL，3.0727 mmol)及DMF (188.80 mg，0.2 mL，2.583 mmol)。在室溫下攪拌混合物1 h，隨後逐滴添加2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲醯肼(鹽酸鹽) (810 mg，2.5408 mmol)及DIPEA (497.14 mg，0.67 mL，3.8466 mmol)於二氯甲烷(13 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物1小時，且添加碳酸氫鈉飽和水溶液(200 mL)。混合物用DCM (3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N'-(2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲醯基)-6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.16 g，89%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 9.56 - 9.38 (m, 1H), 8.96 - 8.77 (m, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.48 - 7.28 (m, 5H), 7.20 - 6.50 (m, 3H), 6.37 - 5.90 (m, 1H), 5.87 - 5.65 (m, 1H), 5.24 - 4.97 (m, 5H), 4.79 - 4.57 (m, 1H), 3.79 - 3.58 (m, 2H), 3.50 (d, J =6.5 Hz, 1H), 2.70 - 2.51 (m, 1H), 2.45 - 2.26 (m, 1H), 2.20 - 1.99 (m, 2H), 1.97 - 1.73 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -54.77 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值609.2199，實驗值610.0 (M+1) +；滯留時間：2.33分鐘(LC方法E)。 步驟 10 ： 2-(2- 烯丙基 -6- 苯甲氧基 - 苯基 )-5-[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑
Figure 02_image2873
向在50℃下之 N'-(2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯甲醯基)-6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.16 g，1.9029 mmol)及二異丙基乙胺(742 mg，1.0 mL，5.7411 mmol)於乙腈(20 mL)中之溶液中逐份添加 對-甲苯磺醯氯(381 mg，1.9985 mmol)。在70℃下攪拌混合物3.5小時。接著，將反應混合物冷卻，濃縮，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(125 mL)中。有機層用5%碳酸氫鈉水溶液(25 mL)、水(2 × 25 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且過濾。揮發物藉由減壓蒸發移除，且殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色膠狀之2-(2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯基)-5-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(680 mg，57%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.69 (d, J =2.6 Hz, 1H), 7.38 (dd, J =7.9, 3.2 Hz, 1H), 7.33 - 7.18 (m, 5H), 7.01 - 6.82 (m, 2H), 6.49 - 6.18 (m, 1H), 5.72 - 5.52 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 5.08 - 4.91 (m, 3H), 4.71 - 4.58 (m, 1H), 3.76 - 3.58 (m, 2H), 3.55 - 3.45 (m, 1H), 2.54 - 2.42 (m, 1H), 2.40 - 2.29 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 2H), 1.93 - 1.73 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -54.68 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值591.2093，實驗值592.0 (M+1) +；滯留時間：2.61分鐘(LC方法E)。 步驟 11 ： (16 S)-7-( 苯甲氧基 )-24- 硝基 -22-( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,20,25- 四氮雜五環 [19.3.1.12,5.06,11.016,20] 二十六碳 -1(25),2,4,6(11),7,9,13,21,23- 壬烯 ( E/ Z 混合物 )
Figure 02_image2875
在氮氣氛圍下，將2-(2-烯丙基-6-苯甲氧基-苯基)-5-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(300 mg，0.5071 mmol)於二氯乙烷(70 mL)中之脫氣溶液加熱至50℃。接著，歷經15分鐘分兩份添加Zhan催化劑-1B (45 mg，0.0613 mmol)。在70℃下加熱所得混合物5小時。將混合物冷卻且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(16 S)-7-(苯甲氧基)-24-硝基-22-(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,20,25-四氮雜五環[19.3.1.12,5.06,11.016,20]二十六碳-1(25),2,4,6(11),7,9,13,21,23-壬烯( E/ Z混合物) (77 mg，26%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.74 - 8.63 (m, 1H), 7.49 - 7.28 (m, 6H), 7.15 - 6.89 (m, 2H), 5.90 - 5.33 (m, 2H), 5.30 - 5.07 (m, 2H), 4.46 - 4.12 (m, 1H), 3.79 - 3.33 (m, 3H), 3.26 - 2.88 (m, 1H), 2.30 - 1.62 (m, 6H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -53.50至-53.77 (m, 3F) ppm. 滯留時間：2.53分鐘(LC方法E)。 步驟 12 ： (16 R)-24- 胺基 -22-( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,20,25- 四氮雜五環 [19.3.1.12,5.06,11.016,20] 二十六碳 -1(25),2,4,6(11),7,9,21,23- 八烯 -7- 醇 ( 化合物 134)
Figure 02_image2877
將(16 S)-7-(苯甲氧基)-24-硝基-22-(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,20,25-四氮雜五環[19.3.1.12,5.06,11.016,20]二十六碳-1(25),2,4,6(11),7,9,13,21,23-壬烯( E/ Z混合物) (70 mg，0.1242 mmol)溶解於甲醇(5 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(10%潤濕，30 mg，0.0141 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物且用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(16 R)-24-胺基-22-(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,20,25-四氮雜五環[19.3.1.12,5.06,11.016,20]二十六碳-1(25),2,4,6(11),7,9,21,23-八烯-7-醇(43 mg，74%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 10.46 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.45 - 7.31 (m, 1H), 7.01 - 6.86 (m, 2H), 6.16 (s, 2H), 4.24 - 4.05 (m, 1H), 3.61 - 3.50 (m, 1H), 3.21 - 3.06 (m, 2H), 2.42 - 2.30 (m, 2H), 2.28 - 2.11 (m, 2H), 1.98 - 1.81 (m, 1H), 1.74 - 1.45 (m, 5H), 1.12 - 0.99 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO -d6) δ -55.68 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值445.1726，實驗值446.0 (M+1) +；滯留時間：4.35分鐘(LC方法C)。 實例 72 ：製備 23- 胺基 -8- 氟 -17,17- 二甲基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 135) 及 23- 胺基 -8- 氟 -17,17- 二甲基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 136)
Figure 02_image2879
步驟 1 ： 6-(2- 烯丙基 -4,4- 二甲基 - 吡咯啶 -1- 基 )-3-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2881
在5 mL密封微波小瓶中，將3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.2 g，2.403 mmol)及2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶(三氟乙酸鹽) (876 mg，3.459 mmol)以及DIEA (2 mL，11.48 mmol)合併於乙腈(10 mL)中，且在70℃下加熱混合物18小時。將反應混合物冷卻至環境溫度且移除溶劑。將所得棕色殘餘物溶解於乙酸乙酯中且用飽和氯化銨溶液洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。所得棕色殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到6-(2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-基)-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(830 mg，62%)。ESI-MS m/z計算值557.27124, 實驗值558.3 (M+1) +；滯留時間：0.8分鐘(LC方法R)。
將上文描述之材料6-(2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-基)-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯溶解於THF (4 mL)及MeOH (4 mL)之1:1混合物中，且添加LiOH (8 mL，1 M，8 mmol)。在室溫下攪拌混合物4 h。減壓移除THF及MeOH。向殘餘物中添加水(5 mL)，且將所得混合物冷卻至0℃。溶液用HCl (8 mL，1 M，8 mmol)酸化且用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(25 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到6-(2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-基)-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(530 mg，41%)。ESI-MS m/z計算值543.2556，實驗值444.2 (M-100 (Boc)) +；滯留時間：0.8分鐘(LC方法R)。 步驟 2 ： N -[6-(2- 烯丙基 -4,4- 二甲基 - 吡咯啶 -1- 基 )-2-[5-[2,2,2- 三氟 -1-(2- 氟 -5- 碘 - 苯基 )-1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2883
向6-(2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-基)-3-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(500 mg，0.9198 mmol)及2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)乙酮(457 mg，1.437 mmol)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中添加( N-異氰基亞胺基)三苯基磷烷(432 mg，1.429 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。接著，混合物用EtOAc (50 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至100%乙酸乙酯之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈鮮黃色黏稠油狀之 N-[6-(2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(512 mg，63%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 9.52 (d, J =21.6 Hz, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.21 (td, J =7.4, 2.3 Hz, 1H), 7.78 (tdd, J =8.6, 4.6, 2.3 Hz, 1H), 6.85 (td, J =11.6, 8.7 Hz, 1H), 5.63 - 5.41 (m, 1H), 4.97 - 4.80 (m, 2H), 4.52 - 4.37 (m, 2H), 3.37 (d, J =10.2 Hz, 1H), 3.02 (s, 1H), 2.54 - 2.35 (m, 1H), 2.12 (dq, J =21.7, 7.6 Hz, 1H), 1.75 (dd, J =12.4, 6.9 Hz, 1H), 1.59 (s, 9H), 1.53 (s, 9H), 1.11 (d, J =3.9 Hz, 3H), 0.85 (d, J =5.8 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值885.18335，實驗值786.1 (M-100 (Boc)) +；滯留時間：2.03及2.06，非鏡像異構混合物(LC方法M)。 步驟 3 ： N -[8- 氟 -6- 羥基 -17,17- 二甲基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -23- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2885
向 N-[6-(2-烯丙基-4,4-二甲基-吡咯啶-1-基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(500 mg，0.5646 mmol)於乙腈(80 mL)中之攪拌溶液中添加乙酸鈀(II) (18 mg，0.08017 mmol)及三( 鄰-甲苯基)膦(47 mg，0.1544 mmol)，隨後添加三乙胺(500 µL，3.587 mmol)，且向溶液鼓泡通入N 21 min，接著在80℃下加熱22 h。將反應混合物冷卻至室溫，濃縮至約5 mL體積且經由矽藻土過濾，且濃縮濾液。所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至100%乙酸乙酯之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[8-氟-6-羥基-17,17-二甲基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (216 mg，58%)。ESI-MS m/z計算值657.2186，實驗值658.2 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法M)。 步驟 4 ： 23- 胺基 -8- 氟 -17,17- 二甲基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇
Figure 02_image2887
在使用3通轉接器之配備有H 2氣球之燒瓶中，向 N-[8-氟-6-羥基-17,17-二甲基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (500 mg，0.7604 mmol)於乙醇(10 mL)中之溶液中添加Pd/C (157 mg，10% w/w，0.1475 mmol)。使容器經受真空且用氮氣回填三次，接著 經受真空。用氫氣填充燒瓶，接著攪拌混合物15小時。經受真空且用氮氣回填三次，接著用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土過濾。濃縮濾液，且將所得殘餘物溶解於TFA(2 mL，25.96 mmol)及二氯甲烷(6 mL)之預製備溶液中，且在室溫下攪拌反應混合物約1 h。移除溶劑，且殘餘物藉由使用50%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15.0分鐘之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀且呈4種立體異構物之混合物之23-胺基-8-氟-17,17-二甲基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(127 mg，30%)。ESI-MS m/z計算值559.1818，實驗值560.0 (M+1) +；滯留時間：1.91分鐘(LC方法J)。 步驟 5 ： 23- 胺基 -8- 氟 -17,17- 二甲基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 135) 及 23- 胺基 -8- 氟 -17,17- 二甲基 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,20,22- 八烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物對 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 136)
Figure 02_image2889
23-胺基-8-氟-17,17-二甲基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(80 mg，0.143 mmol)藉由使用40%至85%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC來純化，分離出兩個非鏡像異構物對：
溶離之第一非鏡像異構物對分離為呈黃色固體狀之23-胺基-8-氟-17,17-二甲基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24- 四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(非鏡像異構物對1) (鹽酸鹽) (1.8 mg，4%)。ESI-MS m/z計算值559.1818，實驗值560.5 (M+1) +；滯留時間：1.79分鐘(LC方法J)。
溶離之 第二非鏡像異構物對分離為呈黃色固體狀之23-胺基-8-氟-17,17-二甲基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-八烯-6-醇(非鏡像異構物對2) (鹽酸鹽) (3.2 mg，8%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.53 (s, 1H), 7.73 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.30 (d, J =8.9 Hz, 1H), 7.13 (dd, J =12.6, 8.4 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 4.22 - 4.11 (m, 1H), 3.28 (s, 1H), 2.88 (t, J =12.1 Hz, 2H), 2.58 (s, 1H), 2.11 (d, J =9.0 Hz, 1H), 1.88 (dd, J =12.0, 6.2 Hz, 1H), 1.72 (d, J =32.5 Hz, 2H), 1.46 (t, J =11.5 Hz, 1H), 1.10 (s, 3H), 0.96 - 0.86 (m, 1H), 0.83 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值559.1818，實驗值560.11 (M+1) +；滯留時間：1.85分鐘(LC方法J)。 實例 73 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18- 苯甲基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 137)
Figure 02_image2891
步驟 1 ： (12 S)-18- 苯甲基 -6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2893
藉由鼓泡通入氮氣15分鐘將(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (55 mg，0.0925 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之溶液脫氣。添加2-苯甲基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(60 mg，0.2751 mmol)以及1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵氯化鈀(II)與二氯甲烷之錯合物(12 mg，0.0147 mmol)，隨後在氮氣下添加碳酸銫(120 μL，2 M，0.24 mmol)之脫氣水溶液。在90℃下加熱反應混合物隔夜。冷卻至室溫後，反應混合物用乙酸乙酯(15 mL)稀釋且經由矽藻土墊過濾，用乙酸乙酯(2 × 15 mL)洗滌。濾液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。所得混合物藉由使用梯度為0%至95%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈棕色泡沫狀之(12 S)-18-苯甲基-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (50 mg，89%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.03 (s, 1H), 7.48 - 7.28 (m, 8H), 7.08 (d, J =6.8 Hz, 2H), 5.66 - 5.35 (m, 2H), 5.33 - 5.14 (m, 1H), 5.03 - 4.89 (m, 1H), 4.29 - 4.16 (m, 2H), 4.13 - 4.02 (m, 1H), 3.83 - 3.59 (m, 2H), 3.48 - 3.23 (m, 1H), 2.54 - 2.21 (m, 2H), 2.19 - 1.90 (m, 4H), 1.84 - 1.60 (m, 2H), 1.55 - 1.43 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -73.02 (s, 3F), 73.54 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值605.225，實驗值606.3 (M+1) +；滯留時間：2.65分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 苯甲基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 137)
Figure 02_image2895
向(12 S)-18-苯甲基-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (50 mg，0.0826 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣5分鐘，且接著添加鈀/碳(88 mg，5% w/w，0.0413 mmol)。接著用氣球向反應物鼓泡通入氫氣5分鐘，且在氫氣下在室溫下攪拌反應混合物隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，用 甲醇(25 mL)洗滌且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為5%至95%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-18-苯甲基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(21 mg，52%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.35 - 7.19 (m, 3H), 7.09 (d, J =6.5 Hz, 2H), 6.61 (br. s., 1H), 5.52 - 4.38 (m, 2H), 4.18 - 3.78 (m, 3H), 3.75 - 3.57 (m, 1H), 3.27 - 3.01 (m, 1H), 2.62 - 2.22 (m, 2H), 2.20 - 2.09 (m, 1H), 2.04 - 1.80 (m, 2H), 1.78 - 1.29 (m, 9H), 1.04 - 0.63 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值487.2195，實驗值488.2 (M+1) +；滯留時間：3.79分鐘(LC方法C)。 實例 74 ：製備 (6 R,15 S)-23- 胺基 -8- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -6- 醇 ( E/Z 混合物 ) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 138) 及 (6 S,15 S)-23- 胺基 -8- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -6- 醇 ( E/Z 混合物 ) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 139)
Figure 02_image2897
步驟 1 ： N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[(1 R)-2,2,2- 三氟 -1-(2- 氟 -5- 碘 - 苯基 )-1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯及 N -[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-2-[5-[(1 S)-2,2,2- 三氟 -1-(2- 氟 -5- 碘 - 苯基 )-1- 羥基 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2899
將 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(200 mg，0.264 mmol)溶解於甲醇(6 mL)中，且藉由使用C 18管柱及70%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行20分鐘之逆相HPLC來純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[(1 R)-2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(78 mg，78%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.18 (dd, J =7.1, 2.3 Hz, 1H), 7.96 (ddd, J =8.6, 4.6, 2.3 Hz, 1H), 7.15 (dd, J =11.4, 8.6 Hz, 1H), 5.40 (ddt, J =14.3, 10.9, 7.2 Hz, 1H), 5.01 - 4.86 (m, 2H), 4.34 (d, J =4.4 Hz, 1H), 4.04 (dt, J =11.0, 8.4 Hz, 1H), 3.77 (m, J =6.1, 4.2 Hz, 1H), 3.53 (q, J =8.0, 7.2 Hz, 1H), 3.44 (qd, J =7.0, 5.0 Hz, 1H), 2.03 - 1.88 (m, 2H), 1.73 - 1.58 (m, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值757.0996，實驗值758.4 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法M)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[(1 S)-2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(67 mg，60%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.45 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.18 (dd, J =7.1, 2.3 Hz, 1H), 7.91 (ddd, J =8.7, 4.6, 2.3 Hz, 1H), 7.07 (dd, J =11.4, 8.6 Hz, 1H), 5.37 (ddt, J =17.2, 10.2, 7.1 Hz, 1H), 4.90 - 4.77 (m, 2H), 4.34 (t, J =5.1 Hz, 1H), 4.26 - 4.11 (m, 1H), 3.53 (q, J =9.0 Hz, 1H), 3.44 (qd, J =7.0, 5.0 Hz, 2H), 2.36 - 2.27 (m, 1H), 1.98 - 1.89 (m, 1H), 1.76 - 1.52 (m, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值757.0996，實驗值758.2 (M+1) +；滯留時間：1.98分鐘(LC方法M)。 步驟 2 ： (6 R,15 S)-23- 胺基 -8- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -6- 醇 ( E/Z 混合物 )( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 138)
Figure 02_image2901
A部分：向 N-[6-[(2S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[(1 R)-2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(180 mg，0.2376 mmol)於乙腈(25 mL)中之攪拌溶液中添加乙酸鈀(II) (5.947 mg，0.02649 mmol)，隨後添加三( 鄰-甲苯基)膦(18 mg，0.05914 mmol)及三乙胺(300 µL，1.251 mmol)，且向溶液鼓泡通入N 22 min，接著在80℃下加熱22 h。將反應混合物冷卻至室溫，濃縮至約5 mL體積，且所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[(6 R,15 S)-8-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (87 mg，58%)。ESI-MS m/z計算值629.1873，實驗值630.2 (M+1) +；滯留時間：1.68分鐘(LC方法M)。
B部分：將 N-[(6 R,15 S)-8-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (25 mg，0.03971 mmol)溶解於TFA (100 µL，1.298 mmol)及二氯甲烷(400 µL)之預製備溶液中，且在室溫下攪拌反應混合物約1 h。移除溶劑，且殘餘物藉由使用0%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(6 R,15 S)-23-胺基-8-氟-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-6-醇( E/Z混合物) (鹽酸鹽) (8.2 mg，36%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.63 (s, 1H), 8.15 - 8.04 (m, 1H), 7.76 (d, J =27.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J =7.4 Hz, 1H), 7.23 (ddd, J =25.4, 12.6, 8.4 Hz, 1H), 6.53 (d, J =12.1 Hz, 0.5 H), 6.39 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 5.83 (td, J =12.1, 5.2 Hz, 0.5 H), 5.71 - 5.54 (m, 1H), 4.66 (d, J =10.0 Hz, 0.5 H), 3.99 (t, J =5.4 Hz, 0.5 H), 3.63 (tt, J =17.3, 7.8 Hz, 2H), 3.23 (dd, J =16.5, 8.5 Hz, 2H), 2.26 - 2.12 (m, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.71 (t, J =10.7 Hz, 1H), 1.58 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值529.1349，實驗值530.0 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法J)。 步驟 3 ： (6 S,15 S)-23- 胺基 -8- 氟 -6,21- 雙 ( 三氟甲基 )-26- 氧雜 -3,4,19,24- 四氮雜五環 [18.3.1.12,5.17,11.015,19] 二十六碳 -1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22- 壬烯 -6- 醇 ( E/Z 混合物 )( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 139)
Figure 02_image2903
A部分：向 N-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-2-[5-[(1 S)-2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘-苯基)-1-羥基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(180 mg，0.2376 mmol)於乙腈(25 mL)中之攪拌溶液中添加乙酸鈀(II) (8 mg，0.03563 mmol)，隨後添加三( 鄰-甲苯基)膦(17 mg，0.05585 mmol)及三乙胺(200 µL，0.435 mmol)，且向溶液鼓泡通入N 22 min，接著在80℃下加熱22 h。將反應混合物冷卻至室溫，濃縮至約5 mL體積，且所得棕色殘餘物藉由使用100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之淺梯度之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[(6 S,15 S)-8-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (84 mg，56%)。ESI-MS m/z計算值629.1873，實驗值630.2 (M+1) +；滯留時間：1.68分鐘(LC方法M)。
B部分：將 N-[(6 S,15 S)-8-氟-6-羥基-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-23-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (25 mg，0.03971 mmol)溶解於TFA (100 µL，1.298 mmol)及二氯甲烷(400 µL)之預製備溶液中，且在室溫下攪拌反應混合物約1 h。移除溶劑，且殘餘物藉由使用0%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之(6 S,15 S)-23-胺基-8-氟-6,21-雙(三氟甲基)-26-氧雜-3,4,19,24-四氮雜五環[18.3.1.12,5.17,11.015,19]二十六碳-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-壬烯-6-醇( E/Z混合物) (鹽酸鹽) (6.2 mg，28%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.64 (s, 1H), 7.91 (dd, J =7.8, 2.2 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.30 (ddd, J =8.3, 4.4, 2.3 Hz, 1H), 7.13 (dd, J =12.5, 8.3 Hz, 1H), 6.29 (s, 2H), 5.85 - 5.77 (m, 1H), 5.71 (dd, J =16.1, 4.2 Hz, 1H), 4.54 - 4.34 (m, 1H), 3.57 (s, 1H), 3.41 - 3.34 (m, 1H), 3.30 - 3.22 (m, 2H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 1.92 (d, J =8.4 Hz, 1H), 1.84 - 1.63 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值529.1349，實驗值530.0 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法J)。 實例 75 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-( 苯磺醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 140) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-( 苯磺醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 141)
Figure 02_image2905
步驟 1 ： (12 R)-20- 胺基 -18-( 苯磺醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 140) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-( 苯磺醯基 )-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 141)
Figure 02_image2907
將(12 R)-20-胺基-18-(苯磺醯基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(17 mg，0.03162 mmol)溶解於MeOH (2 mL)中，且藉由使用30%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC來純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈橙色非晶形固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(苯磺醯基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (鹽酸鹽) (7.2 mg，79%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.04 (s, 1H), 7.81 (d, J =7.8 Hz, 2H), 7.72 (t, J =7.4 Hz, 1H), 7.60 (t, J =7.6 Hz, 2H), 3.89 - 3.76 (m, 2H), 2.98 (dt, J =9.1, 4.5 Hz, 1H), 2.20 (q, J =7.0, 6.5 Hz, 1H), 2.03 (q, J =8.5, 8.0 Hz, 2H), 1.91 - 1.76 (m, 2H), 1.60 (dddd, J =36.7, 29.0, 14.5, 7.0 Hz, 3H), 1.42 - 1.33 (m, 2H), 1.26 (h, J =9.5, 8.2 Hz, 3H), 0.42 (dp, J =10.7, 5.2 Hz, 1H) ppm. 未觀測到三個可交換質子。ESI-MS m/z計算值537.1658，實驗值538.2 (M+1) +；滯留時間：1.37分鐘(LC方法J)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈橙色非晶形固體狀之(12 R)-20-胺基-18-(苯磺醯基)-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (鹽酸鹽) (7.4 mg，82%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.02 (s, 1H), 7.81 (d, J =7.7 Hz, 2H), 7.72 (t, J =7.4 Hz, 1H), 7.61 (t, J =7.6 Hz, 2H), 3.76 (d, J =8.4 Hz, 2H), 3.02 (td, J =9.1, 3.7 Hz, 1H), 2.18 (t, J =12.1 Hz, 1H), 2.09 (t, J =5.7 Hz, 1H), 1.99 (d, J =10.2 Hz, 2H), 1.83 - 1.73 (m, 1H), 1.59 (q, J =10.0 Hz, 1H), 1.41 (ddd, J =29.4, 23.4, 7.4 Hz, 6H), 1.26 (dd, J =12.1, 4.0 Hz, 1H), 0.42 (d, J =11.4 Hz, 1H) ppm. 未觀測到三個可交換質子。ESI-MS m/z計算值537.1658，實驗值538.2 (M+1) +；滯留時間：1.48分鐘(LC方法J)。 實例 76 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲醯胺 ( 化合物 142)
Figure 02_image2909
步驟 1 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -18- 甲腈 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2911
將在微波小瓶中之(12 S)-6-(苯甲氧基)-18-溴-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (330 mg，0.5496 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液經氮氣脫氣5分鐘，且添加氰基銅(349 mg，3.8967 mmol)。在90℃下在氮氣下攪拌所得懸浮液隔夜。將混合物冷卻至室溫，用水(25 mL)稀釋且經由矽藻土墊過濾。濾液用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取，且經合併之有機層用鹽水(2 ×30 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-18-甲腈( E/Z混合物) (182 mg，61%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.62 (s, 1H), 7.46 - 7.27 (m, 5H), 5.71 - 5.34 (m, 2H), 5.30 - 5.16 (m, 1H), 5.08 - 4.87 (m, 1H), 4.30 - 3.89 (m, 3H), 3.39 - 3.10 (m, 1H), 2.57 - 1.84 (m, 8H), 1.79 - 1.46 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -73.07 (s, 3F), -73.59 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值540.1733，實驗值541.2 (M+1) +；滯留時間：2.44分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 -18- 甲醯胺 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2913
向(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-18-甲腈( E/Z混合物) (50 mg，0.0925 mmol)於EtOH (4.5 mL)及水(0.5 mL)中之溶液中添加Ghaffar-Parkins催化劑(PtHiPMe 2OH) (2 mg，0.0047 mmol)。在70℃下加熱反應物4小時且冷卻至室溫。濃縮反應物，且殘餘物藉由使用梯度為0%至60%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(4 g管柱)純化，得到(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-18-甲醯胺( E/Z混合物) (32 mg，62%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.44 - 8.27 (m, 1H), 7.52 - 7.20 (m, 5H), 6.89 - 6.60 (m, 1H), 5.76 (br. s., 1H), 5.64 - 5.31 (m, 2H), 5.28 - 5.09 (m, 1H), 5.01 - 4.81 (m, 1H), 3.99 (d, J =6.8 Hz, 1H), 3.83 - 3.57 (m, 1H), 3.52 - 3.14 (m, 2H), 2.64 - 1.68 (m, 8H), 1.16 - 0.98 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -72.96 (br. s., 3F), -73.46 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值558.18384，實驗值559.0 (M+1) +；滯留時間：2.21分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲醯胺 ( 化合物 142)
Figure 02_image2915
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯-18-甲醯胺( E/Z混合物) (32 mg，0.0573 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液置於氮氣氛圍下，且添加鈀/碳(30 mg，5% w/w，0.0141 mmol)。將反應物置於氫氣氛圍下且攪拌隔夜。將反應物置於氮氣氛圍下且經由矽藻土過濾。濃縮濾液，且殘餘物藉由使用梯度為40%至100%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(12 g管柱)純化。殘餘物藉由使用30%至50%乙腈/水(+ 10 mM NH 4HCO 3)之梯度進行19分鐘之逆相HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲醯胺(11 mg，43%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.63 - 7.37 (m, 1H), 6.97 - 6.59 (m, 1H), 6.28 - 5.82 (m, 1H), 5.08 (br. s., 2H), 4.52 - 4.11 (m, 1H), 4.04 - 3.80 (m, 1H), 3.79 - 3.56 (m, 1H), 3.13 - 2.86 (m, 1H), 2.75 - 1.32 (m, 12H), 1.18 - 0.77 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -77.35 (br. s., 3F, 次要非鏡像異構物), -80.65 (s, 3F, 主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值440.17838，實驗值441.0 (M+1) +；滯留時間：2.72分鐘(LC方法C)。 實例 77 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 143)
Figure 02_image2917
步驟 1 ： N -[(12 R)-6- 羥基 -18-{[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 硫烷基 }-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2919
向 N-[(12 R)-18-溴-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯(100 mg，0.1478 mmol)於二噁烷(2 mL)中之溶液中添加碳酸銫(100 mg，0.3069 mmol)，且混合物用氮氣脫氣10分鐘。將4-(三氟甲氧基)苯硫酚(70 mg，0.3605 mmol)添加至反應混合物中，且混合物再次用氮氣脫氣5分鐘。將Xantphos (18 mg，0.0311 mmol)及接著Pd 2(dba) 3(14 mg，0.0153 mmol)添加至反應混合物中，接著用氮氣脫氣2分鐘，且在100℃下加熱混合物隔夜。將反應混合物冷卻至室溫，且添加水(25 mL)。此混合物用二氯甲烷(2 × 25 mL)萃取，且經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且蒸發溶劑。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化。殘餘物藉由使用5%至100%乙腈/水(+0.1%甲酸)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC進一步純化，得到呈黃色泡沫狀之 N-[(12 R)-6-羥基-18-{[4-(三氟甲氧基)苯基]硫烷基}-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(48 mg，47%)。滯留時間：2.97分鐘(LC方法W)。 步驟 2 ： N -[(12 R)-6- 羥基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯亞磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2921
在0℃下在氮氣下，向 N-[(12 R)-6-羥基-18-{[4-(三氟甲氧基)苯基]硫烷基}-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(20 mg，0.029 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(7 mg，0.0312 mmol)，且在0℃下在氮氣下攪拌所得混合物1小時。在0℃下混合物用碳酸氫鈉水溶液(15 mL)淬滅。混合物用二氯甲烷(2 × 15 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之 N-[(12 R)-6-羥基-18-[4-(三氟甲氧基)苯亞磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(19 mg，93%)。滯留時間：2.53分鐘(LC方法W)。 步驟 3 ： N -[(12 R)-6- 羥基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2923
在0℃下在氮氣下，向 N-[(12 R)-6-羥基-18-[4-(三氟甲氧基)苯亞磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(55 mg，0.0779 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(18 mg，0.0803 mmol)，且接著在室溫下攪拌所得混合物2小時。混合物用碳酸氫鈉水溶液(15 mL)淬滅。混合物用二氯甲烷(2 × 15 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至5%甲醇/二氯甲烷之矽膠層析純化 。殘餘物藉由使用梯度為5%至90%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相HPLC來純化，得到呈黃色泡沫狀之 N-[(12 R)-6-羥基-18-[4-(三氟甲氧基)苯磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(43 mg，55%)。ESI-MS m/z計算值721.2005，實驗值722.0 (M+1) +；滯留時間：1.8分鐘(LC方法Z)。 步驟 4 ： (12 R)-20- 胺基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 143)
Figure 02_image2925
在室溫下攪拌 N-[(12 R)-6-羥基-18-[4-(三氟甲氧基)苯磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(10 mg，0.0139 mmol)於TFA (0.5 mL)及二氯甲烷(0.5 mL)之預製備溶液中之溶液1小時。混合物在室溫下在緩慢添加下用碳酸氫鈉水溶液(15 mL)淬滅，且接著其用二氯甲烷(2 × 15 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至5%甲醇/二氯甲烷之矽膠層析(4 g管柱)純化，呈淡黃色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-18-[4-(三氟甲氧基)苯磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(7 mg，53%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.11 (br. s., 1H), 8.05 (d, J =8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J =7.6 Hz, 2H), 6.46 - 5.84 (m, 2H), 4.86 - 4.03 (m, 2H), 3.74 - 3.64 (m, 1H), 2.76 - 2.50 (m, 1H), 2.35 - 2.14 (m, 4H), 1.90 - 1.42 (m, 9H), 0.95 - 0.83 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -57.76 (br. s., 3F, 兩種非鏡像異構物之-OCF3), -77.56 (br. s., 3F, 次要非鏡像異構物), -80.53 (s, 3F, 主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值621.1481，實驗值620.0 (M-1) +；滯留時間：3.08分鐘(LC方法AA)。 實例 78 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18- 溴 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 144)
Figure 02_image2927
步驟 1 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 溴 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 144)
Figure 02_image2929
在室溫下攪拌 N-[(12 R)-18-溴-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯(25 mg，0.037 mmol)於三氟乙酸(0.5 mL)及二氯甲烷(0.5 mL)之1:1混合物中之溶液2小時。混合物在緩慢添加下用碳酸氫鈉水溶液(15 mL)淬滅，且接著其用二氯甲烷(2 × 15 mL)萃取。接著，經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(4 g管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-溴-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(12 mg，68%). 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.63 - 7.61 (m, 1H), 4.04 - 3.82 (m, 2H), 3.80 - 3.39 (m, 3H), 3.36 - 3.26 (m, 1H), 2.45 - 2.19 (m, 2H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 2.07 - 1.84 (m, 2H), 1.79 - 1.66 (m, 1H), 1.65 - 1.29 (m, 7H), 0.93 - 0.77 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -76.40 (s, 3F, 次要非鏡像異構物), -79.30 (s, 3F, 主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值475.08307，實驗值476.1 (M+1) +；滯留時間：4.93分鐘(LC方法AA)。 實例 79 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯亞磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 145)
Figure 02_image2931
步驟 1 ： (12 R)-20- 胺基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯亞磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 145)
Figure 02_image2933
在室溫下攪拌 N-[(12 R)-6-羥基-18-[4-(三氟甲氧基)苯亞磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(17 mg，0.0241 mmol)於三氟乙酸(0.5 mL)及二氯甲烷(0.5 mL)之1:1混合物中之溶液2小時。混合物在緩慢添加下用碳酸氫鈉水溶液(15 mL)淬滅，且接著其用二氯甲烷(2 × 15 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淺橙色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(12 R)-20-胺基-18-[4-(三氟甲氧基)苯亞磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(11 mg，75%)。ESI-MS m/z計算值605.15314，實驗值606.2 (M+1) +；滯留時間：4.8分鐘(LC方法AA)。 實例 80 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-{[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 硫烷基 }-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 146)
Figure 02_image2935
步驟 1 ： (12 R)-20- 胺基 -18-{[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 硫烷基 }-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 146)
Figure 02_image2937
在室溫下攪拌 N-[(12 R)-6-羥基-18-{[4-(三氟甲氧基)苯基]硫烷基}-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(26 mg，0.0377 mmol)於三氟乙酸(0.5 mL)及二氯甲烷(0.5 mL)之1:1混合物中之溶液2小時。混合物在緩慢添加下用碳酸氫鈉水溶液(15 mL)淬滅，且接著其用二氯甲烷(2 × 15 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-{[4-(三氟甲氧基)苯基]硫烷基}-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(15 mg，67%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.65 - 7.45 (m, 1H), 7.44 - 7.35 (m, 4H), 7.21 - 7.09 (m, 1H), 4.08 - 3.57 (m, 3H), 3.39 - 3.20 (m, 1H), 2.40 - 2.19 (m, 2H), 2.16 - 1.91 (m, 2H), 1.89 - 1.79 (m, 1H), 1.77 - 1.58 (m, 2H), 1.55 - 1.33 (m, 5H), 1.30 - 1.18 (m, 2H), 0.85 - 0.71 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -56.84至-56.86 (m, 3F, 兩種非鏡像異構物之-CF3), -76.38 (br s, 3F, 次要非鏡像異構物), -79.27 (br s, 3F, 主要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值589.1582，實驗值590.2 (M+1) +；滯留時間：5.43分鐘(LC方法AA)。 實例 81 ：製備 (12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-10,22- 二氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 147)
Figure 02_image2939
Figure 02_image2941
步驟 1 ： (2 S)-2-[(3- 三級丁 氧基 -3- 側氧基 - 丙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2943
(2 S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(4.03 g，20.024 mmol)於乙腈(50 mL)中之溶液依次用丙-2-烯酸三級丁酯(13.125 g，15 mL，102.4 mmol)及苯甲基三甲基氫氧化銨水溶液(1.952 g，40% w/w，4.6685 mmol)處理，且在室溫下攪拌。在3小時之後，將反應混合物轉移至具有水(250 mL)之1.0 L分液漏斗且用MTBE (3 × 250 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(150 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之(2 S)-2-[(3-三級丁氧基-3-側氧基-丙氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(5.88 g，89%)。 1H NMR (300 MHz, DMSO -d6) δ 3.75 (br. s., 1H), 3.67 - 3.48 (m, 2H), 3.42 (d, J =9.1 Hz, 1H), 3.26 (dd, J =9.1, 7.6 Hz, 1H), 3.22 - 3.12 (m, 2H), 2.40 (t, J =5.9 Hz, 2H), 1.91 - 1.66 (m, 4H), 1.39 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z計算值329.2202，實驗值352.2 (M+23) +；滯留時間：2.23分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (2 S)-2-(3- 羥基丙氧基甲基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2945
使(2 S)-2-[(3-三級丁氧基-3-側氧基-丙氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(362 mg，1.0989 mmol)於THF (6 mL)中之溶液在冰浴中冷卻，且用二異丁基氫化鋁之二氯甲烷溶液(3.4 mL，1 M，3.4 mmol)緩慢處理。在20分鐘之後，將燒瓶自冰浴移出，且在室溫下攪拌混合物約2小時。再次在冰浴中冷卻，且反應物用羅謝爾鹽(Rochelle's salt)水溶液(20 mL)緩慢淬滅。添加一些MTBE (25 mL)，且在室溫下劇烈攪拌1小時。轉移至125 mL分液漏斗且分離各層。接著，水層再次用MTBE (2 × 25 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至70%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之(2 S)-2-(3-羥基丙氧基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(191 mg，67%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 4.01 - 3.89 (m, 1H), 3.76 (t, J =5.6 Hz, 2H), 3.65 (t, J =5.7 Hz, 2H), 3.57 (dd, J =9.5, 4.0 Hz, 1H), 3.42 - 3.28 (m, 3H), 2.27 (br. s., 1H), 1.98 - 1.75 (m, 6H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值259.1784，實驗值282.2 (M+23) +；滯留時間：1.71分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： (2 S)-2-(3- 溴丙氧基甲基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2947
使(2 S)-2-(3-羥基丙氧基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(191 mg，0.7365 mmol)及三苯基膦(215 mg，0.8197 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液在冰浴中冷卻，且用四溴化碳(272 mg，0.8202 mmol)處理。將反應物逐漸升溫至室溫，同時保持在冷浴中持續4小時時段，接著在室溫下攪拌隔夜(16 h)。接著，粗反應混合物用矽膠處理且減壓濃縮。藉由使用梯度為0%至15%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈透明無色油狀之(2 S)-2-(3-溴丙氧基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(172 mg，70%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 4.02 - 3.81 (m, 1H), 3.68 - 3.44 (m, 5H), 3.42 - 3.19 (m, 3H), 2.09 (quin, J =6.2 Hz, 2H), 1.97 - 1.77 (m, 4H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值321.094，實驗值344.1 (M+23) +；滯留時間：2.2分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ：溴 -[3-[[(2 S)-1- 三級丁 氧基羰基吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 ] 丙基 ] 鎂
Figure 02_image2949
使雙頸10 mL燒瓶在氮氣下火焰乾燥且向其中饋入鎂(132 mg，5.431 mmol)。藉由用熱風槍加熱在氮氣下使燒瓶中之鎂活化。冷卻後，添加碘(1 mg，0.0039 mmol)，隨後以使反應混合物不斷沸騰之方式逐滴添加(2 S)-2-(3-溴丙氧基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(500 mg，1.5516 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之溶液。在添加之後，在室溫下攪拌深色反應混合物1 h。終止攪拌以使任何細粒沈降。所得溴-[3-[[(2 S)-1-三級丁氧基羰基吡咯啶-2-基]甲氧基]丙基]鎂以於THF中之溶液形式直接用於下一步驟中。 步驟 5 ： (2 S)-2-[(4- 乙氧基羰基 -5,5,5- 三氟 -4- 羥基 - 戊氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2951
歷經5分鐘時段，向在-78℃下之3,3,3-三氟-2-側氧基-丙酸乙酯(384.90 mg，0.4 mL，1.6972 mmol)於二乙醚(6 mL)中之溶液中逐滴添加溴-[3-[[(2S)-1-三級丁氧基羰基吡咯啶-2-基]甲氧基]丙基]鎂(3 mL，0.517 M，1.551 mmol)之THF溶液。在-78℃下攪拌混合物。在1小時之後移除乾冰-丙酮浴。使反應混合物歷經30分鐘緩慢升溫至-30℃。向反應混合物中添加NH 4Cl飽和水溶液(2 mL)及碎冰(10 g)。分離兩層。濃縮有機層，且將殘餘物與水相合併且用MTBE (3 × 60 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(2 × 20 mL)洗滌且經無水硫酸鈉乾燥。過濾混合物且濃縮，得到730 mg淺黃色粗油狀物。藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之(2 S)-2-[(4-乙氧基羰基-5,5,5-三氟-4-羥基-戊氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(380 mg，46%)。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 4.41 - 4.29 (m, 2H), 4.17 - 4.00 (m, 1H), 3.99 - 3.80 (m, 1H), 3.64 - 3.19 (m, 6H), 2.20 - 2.06 (m, 1H), 2.00 - 1.65 (m, 6H), 1.47 (s, 9H), 1.35 (t, J =7.0 Hz, 3H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -78.57 (s, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值413.2025，實驗值436.2 (M+23) +；滯留時間：2.17分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： (2 S)-2-[(4- 苯甲氧基 -4- 乙氧基羰基 -5,5,5- 三氟 - 戊氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2953
向在0℃下之(2 S)-2-[(4-乙氧基羰基-5,5,5-三氟-4-羥基-戊氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(380 mg，0.7905 mmol)於DMF (4 mL)中之溶液中逐份添加氫化鈉(45 mg，於礦物油中之60%分散液，1.1251 mmol)，在添加期間保持溫度在低於10℃。在冰水浴中攪拌30分鐘之後，逐滴添加溴甲基苯(201.32 mg，0.14 mL，1.1771 mmol)，接著將反應物逐漸升溫至室溫且攪拌20小時。在0℃下添加呈固體狀之氯化銨(72 mg，1.346 mmol)，且攪拌混合物10分鐘，接著添加15 mL之庚烷/MTBE之1:3溶液以及水(5 mL)。將混合物轉移至萃取漏斗，用庚烷/MTBE (1:3，40 mL)及水(20 mL)沖洗。分離有機層，且水相再次用庚烷/MTBE溶液(1:3，2 × 60 mL)萃取。經合併之有機層用水(1 × 20 mL)、鹽水(2 × 20 mL)洗滌，接著經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之(2 S)-2-[(4-苯甲氧基-4-乙氧基羰基-5,5,5-三氟-戊氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(365 mg，87%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 7.46 - 7.28 (m, 5H), 4.82 (d, J =10.6 Hz, 1H), 4.64 (d, J =10.6 Hz, 1H), 4.34 (q, J =7.1 Hz, 2H), 3.99 - 3.76 (m, 1H), 3.58 - 3.47 (m, 1H), 3.43 (t, J =6.0 Hz, 2H), 3.38 - 3.16 (m, 3H), 2.18 - 1.97 (m, 2H), 1.96 - 1.73 (m, 5H), 1.69 - 1.59 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.34 (t, J =7.0 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -70.43至-70.82 (m, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值503.2495，實驗值526.3 (M+23) +；滯留時間：2.55分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： 2- 苯甲氧基 -5-[[(2 S)-1- 三級丁 氧基羰基吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 ]-2-( 三氟甲基 ) 戊酸
Figure 02_image2955
向(2 S)-2-[(4-苯甲氧基-4-乙氧基羰基-5,5,5-三氟-戊氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(0.75 g，1.4254 mmol)於甲醇(6.5 mL)中之溶液中添加氫氧化鈉(110 mg，2.7502 mmol)於水(2 mL)中之溶液，且在40℃下攪拌混合物隔夜。減壓濃縮混合物以移除大部分甲醇。添加水(30 mL)，且混合物用Et 2O (2 × 80 mL)萃取。合併有機層且用水(2 × 30 mL)洗滌，且經合併之水相用1 N HCl水溶液(2.9 mL)處理且接著用DCM (3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈無色黏稠油狀之2-苯甲氧基-5-[[(2 S)-1-三級丁氧基羰基吡咯啶-2-基]甲氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(657 mg，95%)。ESI-MS m/z計算值475.2182，實驗值498.2 (M+23) +；滯留時間：2.25分鐘(LC方法E)。 步驟 8 ： 2- 苯甲氧基 -5-[[(2 S)- 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 ]-2-( 三氟甲基 ) 戊酸 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2957
在0℃下，將於1,4-二噁烷中之鹽酸(12 mL，4 M，48 mmol)溶液逐滴添加至2-苯甲氧基-5-[[(2 S)-1-三級丁氧基羰基吡咯啶-2-基]甲氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(1.787 g，3.7544 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)中之攪拌溶液中。在添加後5分鐘，移除冷卻浴，且在室溫下攪拌反應混合物23 h。藉由減壓蒸發移除揮發物。將固體溶解於二氯甲烷(30 mL)中，且接著減壓濃縮且真空乾燥，得到呈淺黃色泡沫狀之2-苯甲氧基-5-[[(2 S)-吡咯啶-2-基]甲氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(鹽酸鹽) (1.58 g，98%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.26 (br s, 1 H), 9.28 (br s, 1H), 8.66 (br s, 1H), 7.48 - 7.26 (m, 5H), 4.77 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.60 (d, J =10.9 Hz, 1H), 3.69 - 3.59 (m, 1H), 3.58 - 3.53 (m, 1H), 3.52 - 3.40 (m, 3H), 3.18 - 3.03 (m, 2H), 2.15 - 1.77 (m, 5H), 1.76 - 1.49 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值375.16574，實驗值376.2 (M+1) +；滯留時間：1.4分鐘(LC方法Z)。 步驟 9 ： 2- 苯甲氧基 -5-[[(2 S)-1-[6- 甲氧基羰基 -5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 ]-2-( 三氟甲基 ) 戊酸
Figure 02_image2959
向2-苯甲氧基-5-[[(2 S)-吡咯啶-2-基]甲氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(鹽酸鹽) (50 mg，0.1117 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(45 mg，0.1542 mmol)於乙腈(2 mL)中之溶液中添加二異丙基乙胺(74.2 mg，0.1 mL，0.5741 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物1小時。減壓移除溶劑，接著用乙酸乙酯(70 mL)稀釋且轉移至具有30 mL水之萃取漏斗。混合物用乙酸乙酯(3 × 70 mL)萃取。經合併之有機層用0.5 N鹽酸水溶液(2 × 10 mL)及鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%甲醇/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色固體狀之2-苯甲氧基-5-[[(2 S)-1-[6-甲氧基羰基-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]吡咯啶-2-基]甲氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(53 mg，75%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.66 - 8.52 (m, 1H), 7.43 - 7.19 (m, 5H), 4.82 - 4.69 (m, 2H), 4.63 - 4.53 (m, 1H), 4.06 - 3.89 (m, 3H), 3.73 - 3.29 (m, 6H), 2.14 - 1.92 (m, 5H), 1.91 - 1.76 (m, 1H), 1.72 - 1.53 (m, 2H). 在NMR ppm中未觀測到一個可交換質子。 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -54.31至-54.66 (m, 3F), -71.70 (s, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值623.1702，實驗值646.0 (M+23) +；滯留時間：2.34分鐘(LC方法E)。 步驟 10 ： 6-[(2 S)-2-[[4- 苯甲氧基 -4-[( 三級丁氧基羰基胺基 ) 胺甲醯基 ]-5,5,5- 三氟 - 戊氧基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2961
向2-苯甲氧基-5-[[(2 S)-1-[6-甲氧基羰基-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]吡咯啶-2-基]甲氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(53 mg，0.0839 mmol)於DMF (1.5 mL)中之溶液中添加三乙胺(18.15 mg，0.025 mL，0.1794 mmol)及HATU (44 mg，0.1157 mmol)。攪拌混合物10 min，且添加 N-胺基胺基甲酸三級丁酯(14 mg，0.1059 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用冷水稀釋且用乙酸乙酯(3 × 40 mL)萃取，接著用NaHCO 3飽和水溶液(2 × 10 mL)、水(1 × 10 mL)及鹽水(3 × 10 mL)洗滌。減壓濃縮有機層。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色固體狀之6-[(2 S)-2-[[4-苯甲氧基-4-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5,5,5-三氟-戊氧基]甲基]吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(52 mg，83%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.66 - 8.53 (m, 1H), 8.33 (d, J =3.2 Hz, 1H), 7.47 - 7.28 (m, 5H), 6.32 (br. s, 1H), 4.90 - 4.78 (m, 1H), 4.78 - 4.56 (m, 2H), 4.05 - 3.92 (m, 3H), 3.72 - 3.33 (m, 6H), 2.32 - 2.17 (m, 2H), 2.13 - 1.99 (m, 3H), 1.93 - 1.79 (m, 1H), 1.73 - 1.63 (m, 2H), 1.49 - 1.42 (m, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值737.2496，實驗值736.2 (M-1) -；滯留時間：2.41分鐘(LC方法E)。 步驟 11 ： 6-[(2 S)-2-[[4- 苯甲氧基 -4-[( 三級丁 氧基羰基胺基 ) 胺甲醯基 ]-5,5,5- 三氟 - 戊氧基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image2963
在室溫下，向6-[(2 S)-2-[[4-苯甲氧基-4-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5,5,5-三氟-戊氧基]甲基]吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(433 mg，0.547 mmol)及氫氧化鋰(一水合物) (73 mg，1.7396 mmol)之混合物中添加THF (13 mL)及水(13 mL)。接著在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物藉由減壓蒸發而濃縮，且接著轉移至分液漏斗，用水(25 mL)及DCM (40 mL)沖洗。pH用1 M鹽酸水溶液調整至2。混合物用DCM (3 × 60 mL)萃取。經合併之有機層用水(10 mL)、鹽水(10 mL)洗滌，且經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色泡沫狀之6-[(2 S)-2-[[4-苯甲氧基-4-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5,5,5-三氟-戊氧基]甲基]吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(410 mg，98%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.77 - 8.52 (m, 2H), 7.44 - 7.27 (m, 5H), 6.65 (br. s, 1H), 4.88 - 4.56 (m, 3H), 3.79 - 3.36 (m, 6H), 2.18 - 1.84 (m, 6H), 1.80 - 1.61 (m, 2H), 1.54 - 1.43 (m, 9H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。滯留時間：2.31分鐘(LC方法E)。 步驟 12 ： 6-[(2 S)-2-[[4- 苯甲氧基 -4-[( 三級丁 氧基羰基胺基 ) 胺甲醯基 ]-5,5,5- 三氟 - 戊氧基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸 (2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基酯 )
Figure 02_image2965
向6-[(2 S)-2-[[4-苯甲氧基-4-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5,5,5-三氟-戊氧基]甲基]吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(410 mg，0.5383 mmol)於CH 2Cl 2(3.6 mL)中之溶液中添加 N-羥基丁二醯亞胺(69 mg，0.5995 mmol)及DCC (114 mg，0.5525 mmol)。在0℃下攪拌混合物2 h且接著在室溫下攪拌隔夜。將反應混合物冷卻至0℃，且過濾出所形成沈澱且用二乙醚沖洗，且丟棄固體，接著濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色泡沫狀之6-[(2 S)-2-[[4-苯甲氧基-4-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5,5,5-三氟-戊氧基]甲基]吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯) (400 mg，85%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.69 - 8.58 (m, 1H), 8.36 - 8.27 (m, 1H), 7.46 - 7.29 (m, 5H), 6.28 (br. s, 1H), 4.93 - 4.78 (m, 1H), 4.78 - 4.60 (m, 2H), 3.76 - 3.38 (m, 6H), 2.89 (s, 4H), 2.32 - 2.18 (m, 2H), 2.17 - 2.06 (m, 3H), 1.97 - 1.84 (m, 1H), 1.75 - 1.61 (m, 2H), 1.45 (s, 9H) ppm. 滯留時間：2.30分鐘(LC方法E)。 步驟 13 ： 6-[(2 S)-2-[[4- 苯甲氧基 -5,5,5- 三氟 -4-( 肼羰基 ) 戊氧基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸 (2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基酯 ) ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image2967
向6-[(2 S)-2-[[4-苯甲氧基-4-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5,5,5-三氟-戊氧基]甲基]吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯) (849 mg，0.9631 mmol)於1,4-二噁烷(34 mL)中之溶液中逐滴添加鹽酸(11 mL，4 M於二噁烷中，44 mmol)。在油浴中在32℃下攪拌混合物超過20 h。減壓移除揮發物。自1,2-二氯乙烷(2 × 15 mL)中蒸發出殘餘物且真空乾燥，得到呈淺黃色油狀之6-[(2 S)-2-[[4-苯甲氧基-5,5,5-三氟-4-(肼羰基)戊氧基]甲基]吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯) (鹽酸鹽) (828 mg，100%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.66 - 8.53 (m, 1H), 7.45 - 7.26 (m, 5H), 4.95 - 4.52 (m, 3H), 3.85 - 3.33 (m, 7H), 2.94 - 2.52 (m, 4H), 2.31 - 1.76 (m, 6H), 1.69 - 1.47 (m, 2H) ppm. 在NMR中未觀測到三個可交換質子。ESI-MS m/z計算值720.1979，實驗值721.2 (M+1) +；滯留時間：1.9分鐘(LC方法Z)。 步驟 14 ： (6 S)-12- 苯甲氧基 -18- 硝基 -12,20- 雙 ( 三氟甲基 )-8- 氧雜 -2,14,15,21- 四氮雜三環 [15.3.1.02,6] 二十一碳 -1(21),17,19- 三烯 -13,16- 二酮
Figure 02_image2969
歷經1分鐘向6-[(2 S)-2-[[4-苯甲氧基-5,5,5-三氟-4-(肼羰基)戊氧基]甲基]吡咯啶-1-基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸((2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯) (鹽酸鹽) (828 mg，0.9625 mmol)於1,2-二氯乙烷(140 mL)中之懸浮液中逐滴添加三乙胺(943.8 mg，1.3 mL，9.327 mmol)。接著在70℃下攪拌混合物2小時。將混合物冷卻，且減壓移除揮發物。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色固體狀之(6 S)-12-苯甲氧基-18-硝基-12,20-雙(三氟甲基)-8-氧雜-2,14,15,21-四氮雜三環[15.3.1.02,6]二十一碳-1(21),17,19-三烯-13,16-二酮(364 mg，61%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.78 - 8.48 (m, 1H), 8.30 - 8.13 (m, 1H), 7.48 - 7.28 (m, 3H), 7.23 - 7.01 (m, 2H), 4.81 - 4.53 (m, 2H), 4.39 - 4.23 (m, 1H), 4.02 - 3.08 (m, 6H), 2.25 - 1.78 (m, 5H), 1.53 - 1.29 (m, 1H), 1.00 - 0.87 (m, 1H), 0.77 - 0.51 (m, 1H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。 19F NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ -54.07 (s, 3F, 次要非鏡像異構物之Ar-CF 3), -59.20 (s, 3F, 主要非鏡像異構物之Ar-CF 3), -73.96 (s, 3F, 次要非鏡像異構物之Alk-CF 3), -74.09 (s, 3F, 主要非鏡像異構物之Alk-CF 3) ppm。ESI-MS m/z計算值605.1709，實驗值606.2 (M+1) +；滯留時間：1.93分鐘(LC方法Z)。 步驟 15 ： (12 S)-6-( 苯甲氧基 )-20- 硝基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-10,22- 二氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯
Figure 02_image2971
向在0℃下之(6 S)-12-苯甲氧基-18-硝基-12,20-雙(三氟甲基)-8-氧雜-2,14,15,21-四氮雜三環[15.3.1.02,6]二十一碳-1(21),17,19-三烯-13,16-二酮(17 mg，0.0275 mmol)於乙腈(2 mL)及 N, N-二異丙基乙胺(14.692 mg，0.02 mL，0.1125 mmol)中之溶液中添加4-甲基苯磺醯氯(7 mg，0.036 mmol)。接著在50℃下攪拌混合物2 h，接著在70℃下攪拌24小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(80 mL)中，且有機層用5%碳酸氫鈉水溶液(2 × 15 mL)、水(2 × 15 mL)、鹽水(15 mL)洗滌，接著經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6,18-雙(三氟甲基)-10,22-二氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯(9 mg，55%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 8.72 - 8.66 (m, 1H), 7.41 - 7.23 (m, 5H), 5.34 - 4.62 (m, 2H), 4.55 - 4.44 (m, 1H), 4.10 - 4.02 (m, 1H), 3.81 - 3.55 (m, 3H), 3.50 - 3.38 (m, 1H),3.07 - 2.97 (m, 1H), 2.94 - 2.62 (m, 1H), 2.35 - 2.22 (m, 1H), 2.21 - 2.00 (m, 4H), 1.69 - 1.59 (m, 1H), 1.55 - 1.46 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 氯仿-d) δ -53.19 (s, 3F, 次要非鏡像異構物之Ar-CF 3), -53.26 (s, 3F, 主要非鏡像異構物之Ar-CF 3), -72.58 (s, 3F, 次要非鏡像異構物之Alk-CF3), -72.79 (s, 3F, 主要非鏡像異構物之Alk-CF3) ppm。ESI-MS m/z計算值587.16034，實驗值588.2 (M+1) +；滯留時間：2.12分鐘(LC方法Z)。 步驟 16 ： (12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-10,22- 二氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 147)
Figure 02_image2973
將(12 S)-6-(苯甲氧基)-20-硝基-6,18-雙(三氟甲基)-10,22-二氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯(9 mg，0.0151 mmol)溶解於無水甲醇(2 mL)中。將氮氣鼓泡通入混合物5分鐘，且接著添加鈀/碳(17 mg，5% w/w，0.008 mmol)。接著用氣球鼓泡通入氫氣5分鐘，且在氫氣下在室溫下攪拌反應混合物隔夜。氫氣球用氮氣置換，且使用針口(needle exit)用氮氣吹掃混合物。經由矽藻土墊過濾混合物，用甲醇(5 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到淺黃色泡沫，其自乙腈/水中凍乾，得到呈黃色固體狀之(12 S)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-10,22-二氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(4.8 mg，63%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.64 - 7.41 (m, 1H), 4.47 - 4.08 (m, 2H), 3.87 - 3.36 (m, 4H), 3.06 - 2.68 (m, 2H), 2.29 - 1.99 (m, 3H), 1.98 - 1.83 (m, 2H), 1.66 - 1.54 (m, 1H), 1.38 - 1.28 (m, 1H), 0.96 - 0.80 (m, 1H) ppm. 在NMR中未觀測到兩個可交換質子或被溶劑峰遮蔽。 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -54.52至-56.24 (m, 3F, 兩種非鏡像異構物之-CF 3), -76.97 (s, 3F, 主要非鏡像異構物), -81.17 (s, 3F, 次要非鏡像異構物) ppm。ESI-MS m/z計算值467.13922，實驗值468.2 (M+1) +；滯留時間：4.37分鐘(LC方法AA)。 實例 82 ：製備 17- 胺基 -6- 羥基 - N, N- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲醯胺 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 148) 、 17- 胺基 -6- 羥基 - N, N- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲醯胺 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 149) 、 17- 胺基 -6- 羥基 - N, N- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲醯胺 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 150) 及 17- 胺基 -6- 羥基 - N, N- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲醯胺 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 151)
Figure 02_image2975
步驟 1 ： 2-[[6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ] 戊 -4- 烯酸乙酯
Figure 02_image2977
在20 mL微波小瓶中，在室溫下，將三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (1.35 g，2.076 mmol)溶解於乙腈(10 mL)中，隨後添加2-胺基戊-4-烯酸乙酯(900 mg，6.286 mmol)，接著添加DIEA (1.75 mL，10.05 mmol)，且接著攪拌混合物16小時。濃縮混合物，且殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈淡黃色固體狀之2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]戊-4-烯酸乙酯(900 mg，67%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.64 (s, 1H), 8.14 (t, J =6.9 Hz, 1H), 7.40 - 7.24 (m, 5H), 5.81 (dddt, J =40.2, 17.2, 10.2, 6.7 Hz, 2H), 5.16 - 4.98 (m, 4H), 4.76 (d, J =10.7 Hz, 1H), 4.69 (dddd, J =9.1, 7.2, 5.3, 1.9 Hz, 1H), 4.59 (dd, J =10.7, 2.0 Hz, 1H), 4.03 (q, J =7.1 Hz, 2H), 2.82 - 2.63 (m, 2H), 2.55 (dd, J =12.4, 7.4 Hz, 1H), 2.47 (s, 1H), 2.34 - 2.15 (m, 2H), 1.04 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值643.1865，實驗值644.2 (M+1) +；滯留時間：2.05分鐘(LC方法J)。 步驟 2 ：乙基 -6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -12- 甲酸酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2979
在1L 3頸燒瓶中，Zhan催化劑-1B (250 mg，0.3407 mmol)於1,2-二氯乙烷(400 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液，且在氮氣氛圍下加熱至50℃。接著，經由注射器添加2-[[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]戊-4-烯酸乙酯(900 mg，1.399 mmol)於1,2-二氯乙烷(10 mL)中之溶液。在75℃下加熱所得混合物2 h。濃縮殘餘物且藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈灰白色固體狀之乙基-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12-甲酸酯( E/Z混合物) (310 mg，36%)。ESI-MS m/z計算值615.1553，實驗值616.0 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法J)。 步驟 3 ：乙基 -17- 胺基 -6- 苯甲氧基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -12- 甲酸酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2981
在55℃下攪拌乙基-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12-甲酸酯( E/Z混合物) (160 mg，0.26 mmol)及二水合氯化錫(II) (235 mg，1.041 mmol)於乙酸乙酯(7 mL)中之混合物90 min。在30 min之後，添加額外二水合氯化錫(II) (235 mg，1.041 mmol)。混合物用EtOAc稀釋，且將2 N NaOH添加至混合物中直至其變得黏稠，接著經由矽藻土過濾。濾液用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，混合物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之乙基-17-胺基-6-苯甲氧基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12-甲酸酯( E/Z混合物) (125 mg，82%)。ESI-MS m/z計算值585.1811，實驗值586.2 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ：乙基 -6- 苯甲氧基 -17-( 三級丁氧基羰基胺基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -12- 甲酸酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2983
向乙基-17-胺基-6-苯甲氧基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12-甲酸酯( E/Z混合物) (125 mg，0.2135 mmol)於二噁烷(6 mL)中之溶液中添加二碳酸二三級丁酯(175 mg，0.8018 mmol)、三乙胺(220 µL，1.578 mmol)及DMAP (3.5 mg，0.02865 mmol)，且攪拌反應混合物3 h。混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。有機層用水(5 mL)、碳酸氫鈉飽和水溶液(5 mL)及鹽水(5 mL)洗滌，接著經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用100%己烷至40% EtOAc/己烷之淺梯度之矽膠層析(24公克管柱)純化，得到呈鮮黃色泡沫狀之乙基-6-苯甲氧基-17-(三級丁氧基羰基胺基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12-甲酸酯( E/Z混合物) (110 mg，75%)。ESI-MS m/z計算值685.2335，實驗值686.2 (M+1) +；滯留時間：2.29分鐘。此產物混雜有少量雙Boc保護之副產物(ESI-MS m/z計算值785.28595，實驗值786.2 (M+1) +;滯留時間：2.37分鐘(LC方法J)。 步驟 5 ： 6- 苯甲氧基 -17-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12- 甲酸 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2985
向乙基-6-苯甲氧基-17-(三級丁氧基羰基胺基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12-甲酸酯( E/Z混合物) (135 mg，0.1969 mmol) (混雜有自前一步驟攜帶之少量類似雙Boc保護之化合物)於THF (2 mL)中之溶液中添加MeOH (2 mL)及H 2O (3 mL)，隨後添加氫氧化鋰(30 mg，1.253 mmol)。在65℃下攪拌混合物2 h。減壓移除THF及甲醇，且接著添加10% HCl水溶液(10 mL)以酸化至pH ~ 4，且產物用EtOAc (2 × 150 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之6-苯甲氧基-17-(三級丁氧基羰基胺基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-甲酸( E/Z混合物) (61 mg，47%)。ESI-MS m/z計算值657.2022，實驗值658.2 (M+1) +；滯留時間：2.03分鐘(LC方法J)。 步驟 6 ： N -[6- 苯甲氧基 -12-( 二甲基胺甲醯基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image2987
向在室溫下之6-苯甲氧基-17-(三級丁氧基羰基胺基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-甲酸( E/Z混合物) (61 mg，0.09277 mmol)於NMP (2.0 mL)中之溶液中添加 N-甲基甲胺(鹽酸鹽) (38 mg，0.466 mmol)及DIEA (250 µL，1.435 mmol)，隨後添加HATU (55 mg，0.1446 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。有機材料用乙酸乙酯(3 × 5 mL)萃取。有機物經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(4公克管柱)純化，得到呈淡黃色固體狀之 N-[6-苯甲氧基-12-(二甲基胺甲醯基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (49 mg，77%)。ESI-MS m/z計算值684.2495，實驗值685.2 (M+1) +；滯留時間：2.15分鐘(LC方法J)。 步驟 7: N-[12-( 二甲基胺甲醯基 )-6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁 酯 ( 非鏡像異構物對 1) 及 N -[12-( 二甲基胺甲醯基 )-6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( 非鏡像異構物對 2)
Figure 02_image2989
在100 mL圓底燒瓶中，用氮氣吹掃 N-[6-苯甲氧基-12-(二甲基胺甲醯基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (39 mg，0.05697 mmol)於AcOH (1 mL)及乙酸乙酯(1 mL)中之溶液。接著添加Pd/C (65 mg，10% w/w，0.06108 mmol)。混合物經氮氣脫氣，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物2 h。經由矽藻土過濾混合物，用過量乙酸乙酯洗滌，且濃縮濾液。殘餘物藉由使用30%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相HPLC來純化，分離出兩個非鏡像異構物對：
溶離之第一非鏡像異構物對分離為呈黃色固體狀之 N-[12-(二甲基胺甲醯基)-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對1) (8.7 mg，51%)。ESI-MS m/z計算值596.2182，實驗值597.2 (M+1) +；滯留時間：1.53分鐘(LC方法J)。
溶離之第二非鏡像異構物對分離為呈黃色固體狀之 N-[12-(二甲基胺甲醯基)-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對2) (6.7 mg，39%)。ESI-MS m/z計算值596.2182，實驗值597.2 (M+1) +；滯留時間：1.61分鐘(LC方法J)。 步驟 8 ： 17- 胺基 -6- 羥基 - N, N- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲醯胺 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 148) 及 17- 胺基 -6- 羥基 - N, N- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲醯胺 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 149)
Figure 02_image2991
向 N-[12-(二甲基胺甲醯基)-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對1) (8.7 mg，0.01458 mmol)於DCM (750 µL)中之溶液中添加TFA (100 µL，1.298 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物45 min。濃縮混合物，且藉由使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15 min之逆相HPLC來純化，得到一對非鏡像異構物產物。此混合物藉由對掌性SFC來純化，其使用ChiralPak IG管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑)，用14% MeOH (+ 20 mM NH 3)/86% CO 2溶離，流速為10 mL/min，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6-羥基- N, N-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲醯胺(鏡像異構物1) (2.1 mg，55%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.33 (s, 1H), 5.80 (d, J =6.0 Hz, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.96 (q, J =5.7 Hz, 1H), 3.58 (s, 1H), 3.13 (s, 3H), 3.04 (s, 3H), 2.38 - 2.29 (m, 1H), 2.28 - 2.16 (m, 2H), 2.04 (s, 1H), 1.77 (dt, J =13.5, 6.6 Hz, 1H), 1.60 (d, J =6.0 Hz, 2H), 1.54 - 1.48 (m, 2H), 1.44 - 1.37 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值496.16577，實驗值497.2 (M+1) +；滯留時間：1.56分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6-羥基- N, N-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲醯胺(鏡像異構物2) (1.1 mg，30%)。ESI-MS m/z計算值496.16577，實驗值497.2 (M+1) +；滯留時間：1.56分鐘(LC方法A)。 步驟 9 ： 17- 胺基 -6- 羥基 - N, N- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲醯胺 ( 鏡像異構物 3) ( 化合物 150) 及 17- 胺基 -6- 羥基 - N, N- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲醯胺 ( 鏡像異構物 4) ( 化合物 151)
Figure 02_image2993
向 N-[12-(二甲基胺甲醯基)-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(非鏡像異構物對2) (9.1 mg，0.01526 mmol)於DCM (750 µL)中之溶液中添加TFA (100 µL，1.298 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物45分鐘。濃縮混合物，且藉由使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15 min之逆相HPLC來純化，得到一對非鏡像異構物產物。此混合物藉由對掌性SFC來純化，其使用ChiralPak IG管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑)，用14% MeOH (+ 20 mM NH 3)/86% CO 2溶離，流速為10 mL/min，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6-羥基- N, N-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲醯胺(鏡像異構物3) (1.7 mg，44%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.71 (d, J =6.0 Hz, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.97 (q, J =6.2 Hz, 1H), 3.59 (s, 1H), 3.08 (s, 3H), 3.03 (s, 3H), 2.41 (dt, J =15.4, 8.0 Hz, 1H), 2.27 (dt, J =11.9, 6.1 Hz, 1H), 2.20 (s, 1H), 2.04 (s, 1H), 1.82 (s, 1H), 1.65 (dd, J =12.5, 6.2 Hz, 2H), 1.51 (s, 2H), 1.26 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值496.16577，實驗值497.2 (M+1) +；滯留時間：1.59分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-6-羥基- N, N-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲醯胺(鏡像異構物4) (1.5 mg，39%)。ESI-MS m/z計算值496.16577，實驗值497.2 (M+1) +；滯留時間：1.59分鐘(LC方法A)。 實例 83 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 152) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 153)
Figure 02_image2995
步驟 1 ： (12 R)-20- 胺基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 152) 及 (12 R)-20- 胺基 -18-[4-( 三氟甲氧基 ) 苯磺醯基 ]-6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(20),2,4,17(21),18- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 153)
Figure 02_image2997
(12 R)-20-胺基-18-[4-(三氟甲氧基)苯磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(15 mg，0.02413 mmol)藉由使用30%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行30分鐘之逆相HPLC來純化，得到兩種單一非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-[4-(三氟甲氧基)苯磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (鹽酸鹽) (5.8 mg，69%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.15 - 8.11 (m, 1H), 8.05 (dt, J =8.7, 2.6 Hz, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.33 (m, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.02 (d, J =11.1 Hz, 1H), 2.80 (s, 1H), 2.55 (s, 1H), 2.47 - 2.22 (m, 4H), 2.10 (s, 1H), 1.67 (s, 5H), 1.50 (d, J =13.3 Hz, 3H) ppm. 未觀測到一個可交換質子或被溶劑峰遮蔽。ESI-MS m/z計算值621.1481，實驗值622.3 (M+1) +；滯留時間：1.26分鐘(LC方法A)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-[4-(三氟甲氧基)苯磺醯基]-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(20),2,4,17(21),18-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (鹽酸鹽) (2.4 mg，28%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.20 (d, J =9.7 Hz, 1H), 8.04 (t, J =9.0 Hz, 2H), 7.32 (dd, J =13.5, 8.2 Hz, 3H), 5.26 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.38 (d, J =9.8 Hz, 2H), 2.60 (d, J =36.9 Hz, 1H), 2.35 (d, J =37.6 Hz, 2H), 2.22 - 2.04 (m, 1H), 1.76 - 1.43 (m, 8H) ppm. 未觀測到兩個可交換質子或被溶劑峰遮蔽。ESI-MS m/z計算值621.1481，實驗值622.4 (M+1) +；滯留時間：1.4分鐘(LC方法A)。 實例 84 ：製備 [(6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 基 ]- 吡咯啶 -1- 基 - 甲酮 ( 化合物 154)
Figure 02_image2999
步驟 1 ： 2-( 三級丁 氧基羰基胺基 ) 戊 -4- 烯酸乙酯
Figure 02_image3001
向溶解於二噁烷(7.5 mL)中之2-胺基戊-4-烯酸乙酯(1.3 g，9.079 mmol)之溶液中添加二碳酸二三級丁酯(2.5 g，11.45 mmol)及三乙胺(4.5 mL，32.29 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物16 h。蒸發二噁烷至一半體積且添加水。此混合物用乙酸乙酯萃取，且經合併之有機物用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由使用100%己烷至100% EtOAc之淺梯度之矽膠層析(440公克管柱)純化所得殘餘物，得到呈透明油狀之2-(三級丁氧基羰基胺基)戊-4-烯酸乙酯(1.68 g，76%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.21 (d, J =7.8 Hz, 1H), 5.76 (ddt, J =17.1, 10.1, 6.9 Hz, 1H), 5.12 - 5.01 (m, 2H), 4.12 - 4.02 (m, 2H), 3.97 (td, J =8.2, 5.6 Hz, 1H), 2.35 (tt, J =14.4, 7.2 Hz, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.17 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值243.14706，實驗值244.1 (M+1) +；滯留時間：1.56分鐘(LC方法A)。 步驟 2: 2-( 三級丁 氧基羰基胺基 ) 戊 -4- 烯酸
Figure 02_image3003
向2-(三級丁氧基羰基胺基)戊-4-烯酸乙酯(1.68 g，6.905 mmol)於THF (25 mL)中之溶液中添加MeOH (25 mL)及H 2O (35 mL)，隨後添加氫氧化鋰(990 mg，41.34 mmol)。在室溫下攪拌混合物2 h。減壓移除THF及甲醇，且接著添加10% HCl水溶液(10 mL)以酸化至pH ~ 4，且產物用EtOAc (2 × 150 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。接著，殘餘物藉由使用100%己烷至100%乙酸乙酯之淺梯度之矽膠層析(24公克管柱)純化，得到呈黏稠油狀之2-(三級丁氧基羰基胺基)戊-4-烯酸(1.48 g，100%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 12.38 (s, 1H), 7.03 (d, J =8.1 Hz, 1H), 5.89 - 5.58 (m, 1H), 5.09 (dd, J =17.2, 2.0 Hz, 1H), 5.03 (dd, J =10.2, 2.1 Hz, 1H), 3.93 (td, J =8.6, 5.1 Hz, 1H), 2.47 - 2.25 (m, 2H), 1.38 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值215.11575，實驗值216.2 (M+1) +；滯留時間：1.11分鐘(LC方法A)。 步驟 3 ： N -[1-( 吡咯啶 -1- 羰基 ) 丁 -3- 烯基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3005
向在室溫下之2-(三級丁氧基羰基胺基)戊-4-烯酸(1.35 g，6.272 mmol)於THF (48 mL)及NMP (48 mL)中之溶液中添加吡咯啶(1.85 mL，22.16 mmol)及DIEA (6.5 mL，37.32 mmol)，隨後添加HATU (3.69 g，9.705 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物16 h。接著，反應混合物用水、檸檬酸溶液稀釋，且用乙酸乙酯(2 × 50 mL)萃取。將有機相合併，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用100%己烷至100%乙酸乙酯之淺梯度之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈白色固體狀之 N-[1-(吡咯啶-1-羰基)丁-3-烯基]胺基甲酸三級丁酯(1.45 g，86%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 6.90 (d, J =8.2 Hz, 1H), 5.74 (ddt, J =17.1, 10.1, 7.0 Hz, 1H), 5.09 (dd, J =17.2, 2.0 Hz, 1H), 5.01 (dd, J =10.1, 2.2 Hz, 1H), 4.20 (td, J =8.3, 5.6 Hz, 1H), 3.52 (dt, J =10.1, 6.8 Hz, 1H), 3.41 (dt, J =10.0, 6.8 Hz, 1H), 3.25 (td, J =13.5, 12.0, 7.2 Hz, 2H), 2.32 (dt, J =13.1, 6.2 Hz, 1H), 2.22 (dd, J =14.3, 7.6 Hz, 1H), 1.87 (p, J =6.7 Hz, 2H), 1.81 - 1.71 (m, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值268.17868，實驗值269.2 (M+1) +；滯留時間：1.3分鐘(LC方法A)。 步驟 4 ： 2- 胺基 -1- 吡咯啶 -1- 基 - 戊 -4- 烯 -1- 酮 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image3007
向 N-[1-(吡咯啶-1-羰基)丁-3-烯基]胺基甲酸三級丁酯(1.45 g，5.403 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液中添加HCl (4 N於二噁烷中，7 mL，28 mmol)，且在室溫下攪拌1 h。將混合物蒸發至乾燥，接著用乙醚稀釋且濃縮。將殘餘物置放在真空隔夜，得到呈灰白色固體狀之2-胺基-1-吡咯啶-1-基-戊-4-烯-1-酮(鹽酸鹽) (750 mg，68%)。ESI-MS m/z計算值168.12627，實驗值169.2 (M+1) +；滯留時間：0.52分鐘(LC方法A)。 步驟 5 ： N -[2-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-[1-( 吡咯啶 -1- 羰基 ) 丁 -3- 烯基胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3009
在20 mL微波容器中，將2-胺基-1-吡咯啶-1-基-戊-4-烯-1-酮(鹽酸鹽) (550 mg，2.687 mmol)、DIEA (900 µL，5.167 mmol)及 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(700 mg，0.9315 mmol)合併於乙腈(12 mL)及DMSO (3.5 mL)中，且在90℃下加熱混合物14 h。接著，在105℃下額外加熱24小時。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[1-(吡咯啶-1-羰基)丁-3-烯基胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(159 mg，23%)。ESI-MS m/z計算值738.29645，實驗值739.2 (M+1) +；滯留時間：1.91分鐘(LC方法M)。 步驟 6 ： N -[(6 R)-6- 苯甲氧基 -12-( 吡咯啶 -1- 羰基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3011
在500 mL 3頸燒瓶中，在氮氣氛圍下將Zhan催化劑-1B (40 mg，0.05451 mmol)於1,2-二氯乙烷(100 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液加熱至50℃。接著，經由注射器添加 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[1-(吡咯啶-1-羰基)丁-3-烯基胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(155 mg，0.2098 mmol)於1,2-二氯乙烷(50 mL)中之溶液。在75℃下加熱所得混合物2 h。濃縮混合物，且接著藉由使用梯度為100%己烷至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24公克管柱)純化，得到呈淺黃色固體狀之 N-[(6 R)-6-苯甲氧基-12-(吡咯啶-1-羰基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (98 mg，66%)。ESI-MS m/z計算值710.26514，實驗值711.2 (M+1) +；滯留時間：1.62分鐘(LC方法M)。 步驟 7 ： [(6 R)-17- 胺基 -6- 苯甲氧基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12- 基 ]- 吡咯啶 -1- 基 - 甲酮 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3013
將TFA (750 µL，9.735 mmol)添加至 N-[(6 R)-6-苯甲氧基-12-(吡咯啶-1-羰基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (98 mg，0.138 mmol)於1,2-二氯乙烷(100 mL)中之溶液中，且攪拌所得混合物20分鐘。將反應混合物濃縮至乾燥，接著用己烷及DCM稀釋且再次濃縮，接著真空乾燥隔夜，得到呈淺綠色固體狀之[(6 R)-17-胺基-6-苯甲氧基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-基]-吡咯啶-1-基-甲酮( E/Z混合物) (105 mg，82%)。ESI-MS m/z計算值610.2127，實驗值611.0 (M+1) +；滯留時間：1.67分鐘(LC方法J)。 步驟 8 ： [(6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 基 ]- 吡咯啶 -1- 基 - 甲酮 ( 化合物 154)
Figure 02_image3015
在50 mL圓底燒瓶中，用氮氣吹掃[(6 R)-17-胺基-6-苯甲氧基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-基]-吡咯啶-1-基-甲酮( E/Z混合物) (98 mg，0.1605 mmol)於AcOH (2.5 mL)及乙酸乙酯(5 mL)中之溶液。接著添加Pd/C (185 mg，10% w/w，0.1738 mmol)。混合物經氮氣脫氣，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物5 h。經由矽藻土過濾混合物，用過量乙酸乙酯洗滌，且濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至100%乙酸乙酯之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之[(6 R)-17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-吡咯啶-1-基-甲酮(48.3 mg，58%)。ESI-MS m/z計算值522.1814，實驗值523.1 (M+1) +；滯留時間：1.68分鐘(LC方法A)。 實例 85 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 155) 及 (6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 156)
Figure 02_image3017
步驟 1 ： 2-[[6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-[ 雙 ( 三級丁 氧基羰基 ) 胺基 ]-3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ] 戊 -4- 烯酸乙酯及 2-[[6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ] 戊 -4- 烯酸乙酯
Figure 02_image3019
藉由鼓泡通入氮氣1 min將 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(2.1 g，2.794 mmol)、2-胺基戊-4-烯酸乙酯(1.2 g，8.381 mmol)、(1 E,4 E)-1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮;鈀(128 mg，0.1398 mmol)、Xantphos (165 mg，0.2852 mmol)及碳酸銫(3.7 g，11.36 mmol)於二噁烷(32 mL)中之混合物脫氣，接著密封，且在95℃下攪拌16 h。過濾反應物且用乙酸乙酯稀釋，接著用水及鹽水洗滌，且接著有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色固體狀之2-[[6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三級丁氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]戊-4-烯酸乙酯(66 mg，3%)。ESI-MS m/z計算值713.26483，實驗值714.2 (M+1) +；滯留時間：2.13分鐘(LC方法M)。
亦自矽膠管柱純化分離出2-[[6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]戊-4-烯酸乙酯(167 mg，7%)。ESI-MS m/z計算值813.31726，實驗值814.2 (M+1) +；滯留時間：1.91分鐘(LC方法J)。 步驟 2 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -17-( 三級丁氧基羰基胺基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12- 甲酸 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3021
在500 mL 3頸燒瓶中，將0.25 eq Zhan催化劑-1B (52 mg，0.07087 mmol)之不斷經由氮氣管脫氣之溶液溶解於DCE (150 mL)中，且在氮氣氛圍下加熱至50℃。接著，經由注射器添加2-[[6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]戊-4-烯酸乙酯(167 mg，0.2052 mmol)與2-[[6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三級丁氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]戊-4-烯酸乙酯(66 mg，0.09248 mmol)合併於DCE (150 mL)中之溶液。將所得混合物加熱至75℃持續2 h。濃縮混合物，且殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈灰白色固體狀之149 mg以下之混合物：(6 R)-6-苯甲氧基-17-[雙(三級丁氧基羰基)胺基]-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12-甲酸乙酯及(6 R)-6-苯甲氧基-17-(三級丁氧基羰基胺基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12-甲酸酯。向此混合物於THF (2.5 mL)中之溶液中添加MeOH (2.5 mL)及H 2O (2.5 mL)，隨後添加氫氧化鋰(45 mg，1.879 mmol)。在50℃下攪拌混合物4 h。減壓移除THF及甲醇，且接著添加5 mL 10% HCl水溶液以酸化至pH ~4，且產物用EtOAc (2 × 25 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(25 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷80%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之(6 R)-6-苯甲氧基-17-(三級丁氧基羰基胺基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-甲酸( E/Z混合物) (63.3 mg，21%，80%純度), ESI-MS m/z計算值657.2022，實驗值658.2 (M+1) +；滯留時間：2.03分鐘(LC方法J)。 步驟 3 ： (6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 155) 及 (6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 甲酸 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 156)
Figure 02_image3023
向(6 R)-6-苯甲氧基-17-(三級丁氧基羰基胺基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12-甲酸( E/Z混合物) (20 mg，0.03042 mmol)於AcOH (540 µL)中之溶液中添加Pd/C (12.95 mg，10% w/w，0.01217 mmol)。在氫氣填充氣球下在室溫下攪拌混合物3 h。經由矽膠塞過濾反應混合物，用乙酸乙酯充分洗滌，且接著濃縮濾液。向殘餘物中添加TFA (500 µL)，且在室溫下攪拌此混合物3 min。濃縮混合物且藉由使用梯度為1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之逆相HPLC來純化，得到兩種鏡像異構產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲酸(鏡像異構物1) (5 mg，43%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.57 (s, 1H), 4.34 (dd, J =9.4, 3.1 Hz, 1H), 2.58 - 2.44 (m, 1H), 2.44 - 2.34 (m, 1H), 2.14 (dt, J =13.7, 8.0 Hz, 1H), 1.95 - 1.86 (m, 1H), 1.79 (d, J =9.0 Hz, 1H), 1.69 (d, J =6.9 Hz, 2H), 1.55 (d, J =9.4 Hz, 1H), 1.49 - 1.39 (m, 1H), 1.36 - 1.29 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值469.11847，實驗值470.05 (M+1) +；滯留時間：1.29分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物收集為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-甲酸(鏡像異構物2) (4 mg，28%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.57 (s, 1H), 4.43 (dd, J =9.2, 3.6 Hz, 1H), 2.51 - 2.32 (m, 2H), 2.19 (ddd, J =14.8, 9.3, 6.4 Hz, 1H), 1.97 - 1.67 (m, 4H), 1.61 - 1.55 (m, 1H), 1.48 (t, J =6.6 Hz, 1H), 1.33 (d, J =6.2 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值469.11847，實驗值470.02 (M+1) +；滯留時間：1.39分鐘(LC方法A)。 實例 86 ：製備 [(6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 基 ]- 吡咯啶 -1- 基 - 甲酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 157) 及 [(6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 基 ]- 吡咯啶 -1- 基 - 甲酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 158)
Figure 02_image3025
步驟 1 ： [(6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 基 ]- 吡咯啶 -1- 基 - 甲酮 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 157) 及 [(6 R)-17- 胺基 -6- 羥基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12- 基 ]- 吡咯啶 -1- 基 - 甲酮 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 158)
Figure 02_image3027
[(6 R)-17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-吡咯啶-1-基-甲酮(42 mg，0.08039 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用ChiralPak IC管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，用14% MeOH (+ 20 mM NH 3)/86% CO 2溶離，流速為70 mL/min，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為黃色固體狀，且藉由使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之[(6 R)-17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-吡咯啶-1-基-甲酮(鏡像異構物1) (7.7 mg，36%)。ESI-MS m/z計算值522.1814，實驗值523.0 (M+1) +；滯留時間：1.68分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物藉由使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15分鐘之逆相HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之[(6 R)-17-胺基-6-羥基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-吡咯啶-1-基-甲酮(鏡像異構物2) (5.3 mg，25%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.33 (s, 1H), 5.65 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.77 (d, J =6.0 Hz, 1H), 3.61 – 3.45 (m, 4H), 2.41 (dt, J =15.4, 8.1 Hz, 1H), 2.30 (dd, J =13.2, 6.8 Hz, 1H), 2.21 (s, 1H), 1.95 (ddd, J =27.7, 12.5, 6.3 Hz, 4H), 1.88 – 1.83 (m, 1H), 1.67 (dd, J =12.7, 5.9 Hz, 3H), 1.55 (q, J =9.1, 6.7 Hz, 3H) ppm. 在NMR中未觀測到可交換芳基NH 2質子。ESI-MS m/z計算值522.1814，實驗值523.0 (M+1) +；滯留時間：1.69分鐘(LC方法A)。 實例 87 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -19- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 159) 及 (12 R)-20- 胺基 -19- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2)( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 160)
Figure 02_image3029
步驟 1 ： 2,6- 二氯 -4- 甲氧基 -3- 硝基 - 吡啶
Figure 02_image3031
在0℃下，向2,6-二氯-4-甲氧基-吡啶(21.17 g，118.92 mmol)於硫酸(127 mL)中之溶液中添加硝酸(17.898 g，18.8 mL，193.15 mmol)。將反應加熱至100℃持續2小時。將反應混合物倒入冰水(350 mL)中。過濾懸浮液且用水(80 mL)洗滌，得到呈白色固體狀之2,6-二氯-4-甲氧基-3-硝基-吡啶(24.5 g，91%)。 1H NMR (250 MHz, DMSO -d6) δ 7.74 (s, 1H), 4.06 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值221.9599，實驗值223.0 (M+1) +；滯留時間：2.91分鐘(LC方法G)。 步驟 2 ： 2-(6- 氯 -4- 甲氧基 -3- 硝基 -2- 吡啶基 )-2- 氰基 - 乙酸乙酯
Figure 02_image3033
向2,6-二氯-4-甲氧基-3-硝基-吡啶(208 mg，0.914 mmol)及CsCO 3(446.6 mg，1.3707 mmol)於DMF (9 mL)中之溶液中添加2-氰基乙酸乙酯(119.78 mg，113 μL，1.0589 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。將水(20 mL)及HCl水溶液(2 M，7 mL)添加至反應混合物中，接著用EtOAc (3 × 20 mL)萃取。經合併之有機層用水(2 × 15 mL)、接著鹽水(20 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮。粗產物藉由矽膠層析(乾燥負載於具有最小DCM之25 g SiO 2上)純化且用0%至100% EtOAc/己烷之梯度溶離，得到呈深黃色油狀之2-(6-氯-4-甲氧基-3-硝基-2-吡啶基)-2-氰基-乙酸乙酯(153.8 mg，56%)。 1H NMR (250 MHz, CDCl 3) δ 7.10 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.37 – 4.26 (m, 2H), 4.05 (s, 3H), 1.33 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值299.0309，實驗值300.4 (M+1) +；滯留時間：2.85分鐘(LC方法G)。 步驟 3 ： 6- 氯 -4- 甲氧基 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3035
向2-(6-氯-4-甲氧基-3-硝基-2-吡啶基)-2-氰基-乙酸乙酯(50.7 mg，0.1658 mmol)於水(0.3 mL)及DMSO (0.1 mL)中之混合物中添加NaOAc (33.8 mg，0.412 mmol)。在60℃下攪拌反應混合物，且逐滴添加H 2O 2(3.4015 g，0.1 mL，30% w/w，30 mmol)。在60℃下攪拌反應混合物1小時。將反應混合物冷卻至室溫，且添加HCl水溶液(0.5 M，5 mL)，接著用EtOAc (3 × 5 mL)萃取。經合併之有機層用水(2 × 5 mL)、鹽水(10 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮。粗產物藉由矽膠層析(負載至具有最小DCM之12 g SiO 2上)純化且用0%至15% MeOH/DCM之梯度溶離，得到呈淺黃色固體狀之6-氯-4-甲氧基-3-硝基-吡啶-2-甲酸(22.8 mg，59%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.44 (s, 1H), 3.97 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值231.9887，實驗值233.3 (M+1) +；滯留時間：1.75分鐘(LC方法G)。 步驟 4 ： 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-4- 甲氧基 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3037
向6-氯-4-甲氧基-3-硝基-吡啶-2-甲酸(0.4 g，1.7199 mmol)及(2 S)-2-烯丙基吡咯啶(三氟乙酸鹽) (0.8 g，3.5523 mmol)於DMF (45 mL)中之溶液中添加碳酸鉀(1.23 g，8.8998 mmol)，且攪拌混合物且在110℃下加熱隔夜。冷卻至室溫後，反應混合物用100 mL水稀釋。混合物用DCM (3 × 100 mL)洗滌。接著，鮮黃色水溶液用1 N HCl水溶液(20 mL)酸化至pH = 3。溶液用DCM (3 × 100 mL)萃取。經合併之有機溶液用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，且蒸發濾液。真空乾燥殘餘物，得到呈棕色油狀之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-4-甲氧基-3-硝基-吡啶-2-甲酸(0.84 g，64%)。ESI-MS m/z計算值307.11682，實驗值308.5 (M+1) +；滯留時間：2.44分鐘(LC方法G)。此材料未經進一步純化即用於下一步驟中。 步驟 5 ： 6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]- N ' -[2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-4- 甲氧基 -3- 硝基 - 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3039
向6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-4-甲氧基-3-硝基-吡啶-2-甲酸(3.55 g，7.649 mmol)於EtOAc (130 mL)中之溶液中添加2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(鹽酸鹽) (3.93 g，11.601 mmol)及吡啶(3.7164 g，3.8 mL，46.984 mmol)，且溶液變得混濁。接著添加丙基膦酸酐於EtOAc中之溶液(9.6218 g，9.0007 mL，50% w/w，15.12 mmol)，且在50℃下加熱混合物2 h。將反應混合物冷卻至室溫，且藉由攪拌15 min用1 M NaHCO 3水溶液(250 mL)淬滅。分離各層，且水層用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(300 mL)洗滌，乾燥(Na 2SO 4)，過濾且蒸發。將油性殘餘物乾燥負載至矽膠上且藉由矽膠管柱層析(220 g管柱，0%至40% EtOAc/己烷)純化，得到呈泡沫黃色固體狀之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]- N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-4-甲氧基-3-硝基-吡啶-2-碳醯肼(2.3 g，50%)。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 10.07 – 9.99 (m, 1H), 9.40 – 9.31 (m, 1H), 7.43 – 7.32 (m, 5H), 5.92 (s, 1H), 5.87 – 5.75 (m, 2H), 5.16 – 4.99 (m, 4H), 4.81 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.68 (d, J =10.6 Hz, 1H),4.19 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.56 (s, 1H), 3.40 (s, 1H), 2.58 – 2.37 (m, 2H), 2.29 – 1.90 (m, 8H) ppm. ESI-MS m/z計算值591.2305，實驗值592.5 (M+1) +；滯留時間：3.4分鐘(LC方法G)。 步驟 6 ： 2-[6-[(2 S)-2- 烯丙基吡咯啶 -1- 基 ]-4- 甲氧基 -3- 硝基 -2- 吡啶基 ]-5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑
Figure 02_image3041
向在50℃下之6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]- N'-[2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-4-甲氧基-3-硝基-吡啶-2-碳醯肼(0.4 g，0.4402 mmol)及DIEA (296.80 mg，0.4 mL，2.2964 mmol)於乙腈(20 mL)中之溶液中添加甲苯磺醯氯(0.14 g，0.7343 mmol)。使溫度升高至70℃且在此溫度下攪拌混合物隔夜。添加更多甲苯磺醯氯(0.14 g，0.7343 mmol)及DIEA (296.80 mg，0.4 mL，2.2964 mmol)，且繼續加熱6 h。添加額外甲苯磺醯氯(0.42 g，2.203 mmol)及DIEA (890.40 mg，1.2 mL，6.8893 mmol)，且繼續加熱隔夜。在冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(100 mL)中。有機層用5% NaHCO 3水溶液(100 mL)、水(2 × 100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(粗物質乾燥負載至25 g管柱上，自0%至40% EtOAc/己烷溶離)純化，得到呈黃綠色固體狀之2-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-4-甲氧基-3-硝基-2-吡啶基]-5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑(0.23 g，89%)。ESI-MS m/z計算值573.2199，實驗值574.5 (M+1) +；滯留時間：3.87分鐘(LC方法G)。 步驟 7 ： (12 S)-6- 苯甲氧基 -19- 甲氧基 -20- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,9,17,19- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3043
向在50℃下在氮氣氛圍下之2-[6-[(2 S)-2-烯丙基吡咯啶-1-基]-4-甲氧基-3-硝基-2-吡啶基]-5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑(1 g，1.7116 mmol)於DCE (250 mL)中之脫氣溶液中添加Zhan催化劑-1B (200 mg，0.2722 mmol)。將所得混合物加熱至70℃且攪拌5 h。使反應混合物冷卻，且減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析(乾燥負載至25 g矽膠上，且用0%至40% EtOAc/己烷之梯度溶離)純化，得到呈綠色固體狀之(12 S)-6-苯甲氧基-19-甲氧基-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (320 mg，29%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.40 – 7.21 (m, 5H), 6.33 (s, 1H), 5.70 – 5.36 (m, 2H), 4.70 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.60 (d, J =11.1 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.95 – 3.85 (m, 1H), 3.53 (t, J =7.7 Hz, 1H), 3.38 (t, J =10.3 Hz, 2H), 2.45 – 2.34 (m, 2H), 2.17 – 1.90 (m, 6H), 1.62 – 1.49 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值545.1886，實驗值546.1 (M+1) +；滯留時間：3.46分鐘(LC方法H)。 步驟 8 ： (12 R)-20- 胺基 -19- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 159) 及 (12 R)-20- 胺基 -19- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 160)
Figure 02_image3045
向(12 S)-6-苯甲氧基-19-甲氧基-20-硝基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,17,19-六烯( E/Z混合物) (226 mg，0.3503 mmol)於MeOH (15 mL)中之溶液中添加鈀/碳(226 mg，0.2124 mmol)。燒瓶用氮氣填充，抽成真空，且用氫氣回填。重複此三次。混合物在60 psi下氫化2天。經由矽藻土墊過濾混合物，且濾餅用MeOH (2 × 100 mL)洗滌。蒸發經合併之濾液，接著藉由使用15%至75%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行30 min與30 mL/min之流速之HPLC純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為(12 R)-20-胺基-19-甲氧基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (鹽酸鹽) (10.6 mg，6%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.52 (br, 2H), 6.28 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.85 (s, 1H), 3.51 - 3.37 (m, 2H), 3.29 - 3.13 (m, 1H), 2.20 - 1.84 (m, 6H), 1.80 - 1.65 (m, 2H), 1.65 - 1.52 (m, 2H), 1.50 - 1.34 (m, 3H), 0.98 - 0.81 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值427.1831，實驗值428.2 (M+1) +；滯留時間：2.0分鐘(LC方法H)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為(12 R)-20-胺基-19-甲氧基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (鹽酸鹽) (21.3 mg，12%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.52 (br, 2H), 6.21 (s, 1H), 4.05 - 3.78 (m, 4H, OH及CH3), 3.47 (m, 2H), 3.20 (m, 1H), 2.27 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.14 - 2.04 (m, 1H), 2.04 - 1.64 (m, 7H), 1.54 - 1.28 (m, 4H), 1.03 - 0.80 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值427.1831，實驗值428.2 (M+1) +；滯留時間：2.0分鐘(LC方法H)。 實例 88 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲烷磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 161) 及 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲烷磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 162)
Figure 02_image3047
步驟 1 ： N -[( 三級丁 氧基 ) 羰基 ]- N-[(12 R)-6- 羥基 -18- 甲烷磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -20- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3049
向微波小瓶中饋入 N-[(12 R)-18-溴-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯(100 mg，0.1478 mmol)、甲烷亞磺酸鈉(46 mg，0.4506 mmol)、碘化銅(I) (33 mg，0.1733 mmol)、 L-脯胺酸(1.3 mg，0.0113 mmol)及DMSO (1.2 mL)。管用氮氣沖洗2 min且密封。在112℃下攪拌混合物3 h，冷卻至室溫，且接著添加28% NH 3水溶液(2 mL)及水(10 mL)。混合物用MTBE (3 × 20 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色油狀之 N-[(三級丁氧基)羰基]- N-[(12 R)-6-羥基-18-甲烷磺醯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(48 mg，48%)。ESI-MS m/z計算值675.255，實驗值676.2 (M+1) +；滯留時間：1.99分鐘(LC方法Y)。產物混雜有少量單Boc保護之類似產物。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 甲烷磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image3051
向 N-[(三級丁氧基)羰基]- N-[(12 R)-6-羥基-18-甲烷磺醯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]胺基甲酸三級丁酯(74 mg，0.1095 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加TFA (4.44 g，3 mL，38.94 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物3 h。濃縮材料，且殘餘物藉由使用梯度為20%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈黃色油狀之(12 R)-20-胺基-18-甲烷磺醯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(40 mg，77%)。ESI-MS m/z計算值475.15012，實驗值476.2 (M+1) +；滯留時間：1.89分鐘(LC方法Z)。 步驟 3 ： (12 R)-20- 胺基 -18- 甲烷磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 161) 及 (12 R)-20- 胺基 -18- 甲烷磺醯基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 162)
Figure 02_image3053
(12 R)-20-胺基-18-甲烷磺醯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(66.2 mg，0.1392 mmol)之非鏡像異構混合物藉由SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-4管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，且用30%至45% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2之梯度溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-甲烷磺醯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (25.3 mg，76%). 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.99 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.31 (s, 2H), 3.88 (p, J =7.7 Hz, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.30 - 3.24 (m, 1H), 2.35 (d, J =13.0 Hz, 1H), 2.30 - 2.20 (m, 1H), 2.14 (dt, J =12.9, 7.4 Hz, 1H), 2.06 - 1.94 (m, 1H), 1.94 - 1.84 (m, 1H), 1.79 - 1.67 (m, 1H), 1.63 - 1.37 (m, 7H), 0.95 - 0.78 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值475.15012，實驗值476.0 (M+1) +；滯留時間：2.43分鐘(LC方法D)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-18-甲烷磺醯基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (17.3 mg，52%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.99 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.33 (d, J =6.5 Hz, 2H), 4.02 (q, J =8.1 Hz, 1H), 3.88 (q, J =7.9 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.22 (dd, J =18.3, 3.9 Hz, 1H), 2.30 - 2.13 (m, 3H), 2.11 - 1.99 (m, 1H), 1.97 - 1.84 (m, 1H), 1.75 (dq, J =19.5, 11.3, 9.2 Hz, 2H), 1.53 (ddd, J =29.0, 16.3, 7.5 Hz, 4H), 1.43 - 1.30 (m, 2H), 0.95 (dt, J =10.7, 5.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值475.15012，實驗值476.0 (M+1) +；滯留時間：2.31分鐘(LC方法D)。 實例 89 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 163) 及 (6 R)-12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,17- 二醇 ( 化合物 164)
Figure 02_image3055
步驟 1 ： 6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3057
將2-甲基己-5-烯-2-胺(鹽酸鹽) (69.4 g，463.7 mmol)懸浮於乙腈(960 mL)中，且用DIEA (220 mL，1.263 mol)處理。向所形成之棕色溶液中一次性添加6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(120 g，421.7 mmol)。歷經2.5 h將橙色溶液緩慢加熱至65℃ (注意：反應在加熱時顯示放熱)。在40℃下蒸發深橙色溶液，且向殘餘物中添加MTBE (1 L)及水(1 L)，且分離各層。深橙色有機相用NH 4Cl飽和水溶液/水之1:1溶液混合物(2 × 600 mL)洗滌，用鹽水(400 mL)洗滌一次，且有機相經乾燥，過濾且蒸發，得到6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(152.7 g，100%)。ESI-MS m/z計算值361.12494，實驗值362.0 (M+1) +；滯留時間：3.02分鐘(LC方法D)。 步驟 2 ： 6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3059
將6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(152.4 g，421.7 mmol)溶解於甲醇(750 mL)中且在攪拌下用NaOH (750 mL，2 M，1.500 mol)處理(一次性全部添加，在30℃至40℃略微放熱)。在室溫下攪拌溶液18 h。在42℃下減壓濃縮深紅色溶液，且所得橙紅色溶液用甲苯(1 L)處理。在冰浴中攪拌乳液且藉由添加HCl (260 mL，6 M，1.560 mol)酸化至pH = 1，保持內部溫度在低於15℃。分離各相，且將有機相用水(2 × 500 mL)洗滌兩次且用鹽水(400 mL)洗滌一次。有機相經MgSO 4乾燥，過濾，蒸發且真空乾燥，得到137 g深橙色固體塊。自乙腈(~1 L，以移除殘餘甲苯)中蒸發此材料，且將其溶解於乙腈(600 mL)中且升溫至~60℃。在攪拌下向深紅色熱溶液中添加 N-環己基環己胺(79 mL，396.5 mmol)(注意到自60℃至70℃放熱)，且熱溶液形成晶種(seeded)。材料在~ 60℃之內部溫度下變成固體塊，其可在碎裂之後進行磁性攪拌。在冷卻熱水浴中攪拌黏稠懸浮液隔夜，且接著在冰浴中攪拌3 h。固體藉由過濾收集，用冷乙腈洗滌直至濾液呈無色，且經乾燥過週末，得到呈黃色固體狀之6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(二環己基胺鹽) (172 g，77%)。將此鹽懸浮於MTBE (1 L)中且用檸檬酸(1.2 L，1 M，1.200 mol)處理。攪拌混合物且分離各相。有機相再用1 M檸檬酸(2 × 400 mL)洗滌兩次且用0.5M KHSO 4(4 × 400 mL)洗滌4次。接著，有機相用鹽水(200 mL)洗滌一次，乾燥，過濾且蒸發，得到呈黃橙色油狀之6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(113.4 g，77%)，其在靜置後結晶。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.21 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 6.20 - 6.00 (m, 1H), 5.82 - 5.57 (m, 1H), 5.13 - 4.74 (m, 2H), 1.97 (d, J =2.9 Hz, 4H), 1.45 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值347.10928，實驗值348.0 (M+1) +；滯留時間：2.49分鐘(LC方法D)。 步驟 3 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ]-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3061
將6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(100 g，285.1 mmol)及(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(86.3 g，299.4 mmol)溶解於DMF (600 mL)中，且在冰浴中冷卻。在3.1℃之內部溫度下，一次性添加HATU (114 g，299.8 mmol) (未觀測到放熱)。接著，歷經0.5 h緩慢添加DIEA (100 mL，574.1 mmol) (放熱)，將內部溫度保持在3與10℃之間。在添加之後，移除冰浴，且另外攪拌反應物0.5 h，使其升溫至室溫。將橙色溶液添加至冰-水(3 L)以及MTBE (1 L)之攪拌溶液中。攪拌混合物10分鐘，且分離各相。有機相用水(2 × 1 L)洗滌兩次，用0.2 M KHSO 4(3 × 1 L)洗滌，且用鹽水(250 mL)洗滌一次。有機相經乾燥，過濾且蒸發，得到呈橙色塊之 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(181 g，定量產量)。ESI-MS m/z計算值617.2073，實驗值618.0 (M+1) +；滯留時間：3.25分鐘(LC方法D)。此材料直接用於下一步驟中。 步驟 4 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3063
將 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(176.1 g，285.2 mmol)溶解於乙腈(1.4 L)中，且加熱至55℃。黃橙色溶液用DIEA (124 mL，711.9 mmol)處理，隨後歷經15 min逐份添加甲苯磺醯氯(54.4 g，285.3 mmol)(放熱，藉由移除加熱罩及緩慢添加將內部溫度保持在55℃與60℃之間)，且在55-60℃下攪拌反應物45 min。在40℃下減壓濃縮反應溶液，且殘餘物用MTBE/庚烷1:1 (1.4 L)及水(1.4 L)萃取。有機相再用水(1.5 L)洗滌一次，用0.2M KHSO 4(2 × 1 L)洗滌兩次，且用鹽水(0.5 L)洗滌一次。有機相經乾燥，過濾且蒸發，得到172 g橙色油狀物，將該橙色油狀物溶解於100 mL甲苯及300 mL庚烷中。將溶液負載至3 kg矽膠管柱(管柱體積= 4800 mL，流速= 900 mL/min上)。用100%己烷溶離1 min，接著進行0%至10%乙酸乙酯/己烷之初始梯度106 min (2個管柱體積)。產物在~4%乙酸乙酯處開始溶離，因此等度保持4.3%乙酸乙酯直至產物完成溶離，得到6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(139.1 g，80%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 8.51 (s, 1H), 7.40 - 7.27 (m, 5H), 6.03 - 5.87 (m, 1H), 5.80 - 5.66 (m, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.31 - 5.16 (m, 2H), 5.03 - 4.95 (m, 1H), 4.95 - 4.89 (m, 1H), 4.81 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.64 (d, J =10.5 Hz, 1H), 3.28 - 3.13 (m, 2H), 2.08 - 1.99 (m, 2H), 1.99 - 1.89 (m, 2H), 1.47 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值599.1967，實驗值600.0 (M+1) +；滯留時間：3.71分鐘(LC方法D)。 步驟 5 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3065
此反應以三個46.3 g批次平行進行，各自在12 L 3頸圓底燒瓶中。以下實驗描述此等批次中之一者。
將充氣管、具有氣體鼓泡器及頂置式攪拌器之回流冷凝器與置放於熱毯中之12 L容器連接。將6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(46.3 g，76.22 mmol)溶解於DCE (8.23 L)中。對該系統充入重的氮氣流。將熱毯設定為50℃。當容器達到53℃時，一次性全部添加二氯[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑啶亞基][[5-[(二甲基胺基)磺醯基]-2-(1-甲基乙氧基- O)苯基]亞甲基-C]釕(II) (Zhan催化劑-1B，11.2 g，15.26 mmol)。用DCE沖洗催化劑容器，且將沖洗液添加至反應物中。在完成催化劑添加後，將毯溫度提高至73℃。一旦內部溫度達到72℃，繼續攪拌2 h 28 min，接著將熱毯溫度降至45℃。在2 h 27 min之後，內部溫度達到50℃。在15 min之後，添加固體2-硫烷基吡啶-3-甲酸(12 g，77.33 mmol)及三乙胺(11 mL，78.92 mmol)。攪拌12 h，接著使混合物冷卻至室溫。將100 g SiO 2及10 g活性碳(20-40網目，顆粒)添加至反應物中。攪拌1 h，接著經由矽藻土過濾，且蒸發濾液，得到粗產物混合物。合併來自所有三個平行反應之材料，得到71.2 g粗產物混合物。此材料在兩個單獨3 kg矽膠管柱上純化，其使用100%己烷至10%乙酸乙酯/己烷之梯度進行110 min，隨後10%乙酸乙酯/己烷至100%乙酸乙酯之梯度進行10分鐘。在合併兩個單獨純化批次之後，得到(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (51.88 g，40%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.55 (d, J =0.8 Hz, 1H), 7.49 - 7.21 (m, 5H), 6.58 (s, 1H), 5.79 (dt, J =13.7, 6.5 Hz, 1H), 5.58 (ddd, J =15.0, 8.8, 5.6 Hz, 1H), 4.83 (d, J =11.1 Hz, 1H), 4.55 (d, J =11.1 Hz, 1H), 3.13 (dd, J =14.2, 5.4 Hz, 1H), 2.77 (dd, J =14.3, 8.8 Hz, 1H), 2.38 - 2.24 (m, 1H), 2.14 - 1.93 (m, 3H), 1.58 - 1.32 (m, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值571.1654，實驗值572.1 (M+1) +；滯留時間：3.46分鐘及3.49分鐘(LC方法D)。產物形成為雙鍵異構物之3:1混合物。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 163) 及 (6 R)-12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,17- 二醇 ( 化合物 164)
Figure 02_image3067
將(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (50.8 g，88.89 mmol)溶解於250 mL乙醇中，且在28℃水浴下藉由旋轉蒸發部分濃縮以移除任何殘餘溶劑，接著將其溶解於5 L燒瓶中之另外乙醇(720 mL)中。用氮氣回填，使用5個室內真空循環使溶液脫氣。在氮氣下將二羥基鈀(15.2 g，10% w/w，10.824 mmol)添加至受質溶液中。用氫氣回填重複室內真空6個循環以用氫氣置換氮氣氛圍。最後，使用氣球將容器保持在1個大氣壓之氫氣下。用電磁攪拌器劇烈攪拌此混合物隔夜，接著移除氫氣球。經由70 g矽藻土在中等燒結漏斗上過濾混合物。在28℃水浴下，藉由旋轉蒸發濃縮綠色濾液溶液。得到42.65 g呈黃色固體狀之粗產物，其中41.5 g藉由逆相層析來純化(溶解於125 mL甲醇及2.55 mL DMF (2% DMF/甲醇溶液)中且負載至3.8 kg C 18管柱上(管柱體積= 3.3 L，流速= 375 mL/min)。進行40%至70%乙腈/水之初始梯度176分鐘(20管柱體積)，接著歷經接下來之~ 20 min使溶離劑至100%乙腈)。自管柱分離混合級分及純級分。濃縮純級分，得到呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(28.17 g，70%)。將此材料與藉由類似方法製備之若干較小批次(80 mg，340 mg，360 mg，1.46 g及1.63 g)合併為於乙腈中之溶液，接著將其濃縮，得到黃色固體。將此固體溶解於二氯甲烷中，且添加庚烷，接著在暗處在40℃下真空濃縮該溶液隔夜，得到31.95 g之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.61 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 5.96 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 2.90 - 2.71 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 1H), 1.91 - 1.74 (m, 1H), 1.73 - 1.57 (m, 1H), 1.56 - 1.38 (m, 5H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H). ESI-MS m/z計算值453.15994，實驗值454.2 (M+1) +；滯留時間：3.03分鐘(LC方法D)。
一種來自上文描述之逆相純化之混合級分含有顯示質量高於上文描述之預期產物一個單位之雜質。濃縮此級分，且將殘餘物溶解於3.6 mL甲醇中，接著藉由逆相製備型HPLC來純化，其用C 18管柱，使用1-99%乙腈/水(+ HCl調節劑)之梯度，得到呈黃色固體狀之(6 R)-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,17-二醇(105 mg，0.003%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 10.43 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 2.91 - 2.74 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 2.10 - 1.96 (m, 1H), 1.85 - 1.68 (m, 1H), 1.68 - 1.54 (m, 1H), 1.53 - 1.37 (m, 5H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值454.14395，實驗值455.2 (M+1) +；滯留時間：2.87分鐘(LC方法D)。 步驟 7 ：結晶化合物 163 形式 A ( 純 ) 之固體形式表徵A.     X射線粉末繞射
藉由步驟6且由EtOH再結晶產生之結晶化合物163形式A (純)之XRPD繞射圖係使用通用X射線粉末繞射(XRPD)方法獲得。結晶化合物163形式A (純)之XRPD繞射圖提供於 圖 16中，且XRPD資料概述於下 表 6 中。 表 6 ：結晶化合物 163 形式 A ( 純 ) 之 XRPD 信號
XRPD峰編號 角度(度2θ ± 0.2) 強度%
1 7.4271 100
2 8.4377 7.56
3 14.1039 4.84
4 14.5744 2.53
5 14.962 7.2
6 16.9424 2.49
7 19.0503 5.71
8 19.9711 2.4
9 22.4778 2.31
10 25.5622 2.19
11 25.7502 3.64
B.     差示掃描熱量測定分析
DSC資料係在以10.00℃/min上升至250.00℃之情況下收集。藉由步驟6產生之結晶化合物163形式A (純)之DSC熱分析圖提供於 圖 17中。熱分析圖顯示180.8℃之Tm起點，其中Tm峰在183.18℃處，62.32 J/g。 實例 90 ：製備 (6 S)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 165)
Figure 02_image3069
步驟 1 ： 3- 胺基 -6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3071
向2 L 3頸圓底燒瓶中饋入6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(28.4 g，78.6 mmol)，且將深紅油溶解於乙醇(140 mL)及THF (140 mL)中。將反應容器置於水浴中。將500 mL加料漏斗與燒瓶連接。將二硫磺酸鈉(二鈉鹽) (50 g，287.2 mmol)溶解於水(330 mL)中，且將水溶液添加至加料漏斗。以將內部溫度維持在28℃或低於28℃之速率，將二硫磺酸鈉溶液緩慢添加至受質溶液中。在添加期間，發生沈澱，且反應混合物之顏色開始變淺，自深紫色變為橙色。在~1 h之後完成添加。反應混合物自非均勻相變成均相，此時完成添加。橙色反應溶液用2-甲基四氫呋喃(600 mL)稀釋且攪拌20 min。添加200 mL鹽水且繼續攪拌。分離各相，且用1 M HCl水溶液(3 × 200 mL)洗滌有機物。最後，用鹽水(1 × 200 mL)洗滌，接著有機物經MgSO 4乾燥，過濾且減壓濃縮且進一步真空乾燥，得到3-胺基-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(24.59 g，92%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.25 (d, J =0.8 Hz, 1H), 5.92 - 5.68 (m, 1H), 5.51 (s, 2H), 5.07 - 4.80 (m, 2H), 4.29 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 2.07 - 1.94 (m, 4H), 1.42 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值331.15076，實驗值332.2 (M+1) +；滯留時間：2.96分鐘(LC方法D)。 步驟 2 ： 3- 胺基 -6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3073
向500 mL 2頸圓底燒瓶中饋入3-胺基-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(23.6 g，71.23 mmol)及THF (120 mL)且攪拌以進行溶解。連接125 mL加料漏斗及熱毯。將氫氧化鉀(21 g，374.3 mmol)溶解於水(120 mL)中，且將此水溶液添加至加料漏斗中。歷經12 min將KOH水溶液添加至受質中(在添加期間內部溫度自19℃增加至27℃)。將內部溫度維持在45℃與50℃之間。用空氣冷卻的回流冷凝器在N 2下劇烈攪拌。在約5 h之後終止加熱，且使反應物冷卻至環境溫度。將反應混合物置於500 mL分液漏斗中，且分離各相。將有機相置於500 mL燒瓶中且濃縮以移除大部分THF。將粗殘餘物再溶解於300 mL乙酸異丙酯中。用1 M HCl水溶液(1 × 200 mL)及鹽水(1 × 100 mL)洗滌有機溶液。有機層經乾燥，過濾且減壓濃縮且進一步真空乾燥，得到呈橙色固體狀之3-胺基-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(21.47 g，95%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.26 (s, 3H), 7.49 (s, 1H), 5.89 - 5.61 (m, 1H), 5.05 - 4.75 (m, 2H), 4.24 (s, 1H), 1.94 (s, 4H), 1.37 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值317.1351，實驗值318.2 (M+1) +；滯留時間：2.58分鐘(LC方法D)。 步驟 3: 3-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3075
將3-胺基-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(12.4 g，39.08 mmol)溶解於THF (100 mL)中。在N 2氛圍下攪拌溶液。將二碳酸二三級丁酯(10 mL，43.53 mmol)溶解於THF (20 mL)中，且經由注射器將此溶液添加至反應溶液中。接下來，歷經15分鐘經由注射器將三乙胺(8.01 g，79.16 mmol)添加至反應溶液中。在17 h之後，減壓濃縮反應物以移除THF。將粗產物再溶解於200 mL乙酸異丙酯中。將溶液置於500 mL分液漏斗中，且用1 M HCl水溶液(1 × 80 mL，1 × 20 mL)及鹽水(30 mL)洗滌有機溶液。有機物經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮且進一步高真空乾燥，得到呈深紅色油狀之3-(三級丁氧基羰基胺基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(16.3 g，99%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 13.59 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 5.87 - 5.63 (m, 1H), 5.00 - 4.85 (m, 2H), 4.82 - 4.76 (m, 1H), 1.97 (s, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.41 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值417.18753，實驗值418.4 (M+1) +；滯留時間：3.42分鐘(LC方法D)。 步驟 4 ： N -[2-[[[(2 S)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ]-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3077
在N 2氛圍下，向3-(三級丁氧基羰基胺基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(16.3 g，38.66 mmol)及(2 S)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(12.4 g，43.02 mmol)於2-甲基四氫呋喃(200 mL)中之攪拌溶液中添加固體2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(8 g，45.57 mmol)。歷經一小時將4-甲基嗎啉(5.24 g，50.77 mmol)於2-甲基四氫呋喃(50 mL)中之溶液逐漸添加至反應混合物中，且在室溫下攪拌反應物2 h。反應混合物用乙酸異丙酯(250 mL)稀釋，用水(1 × 50 mL)、NaHCO 3飽和水溶液(2 × 100 mL)及用鹽水(1 × 30 mL)洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析(220 g管柱)純化，得到 N-[2-[[[(2 S)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(21.92 g，82%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 10.53 (s, 1H), 9.95 (s, 1H), 9.63 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.51 - 7.42 (m, 2H), 7.42 - 7.27 (m, 3H), 5.99 - 5.68 (m, 2H), 5.45 - 5.12 (m, 2H), 5.03 - 4.87 (m, 2H), 4.88 - 4.84 (m, 3H), 3.22 - 2.85 (m, 2H), 2.13 - 1.79 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.42 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值687.2855，實驗值688.5 (M+1) +；滯留時間：0.82分鐘(LC方法D)。 步驟 5 ： N -[2-[5-[(1 S)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3079
向 N-[2-[[[(2 S)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺甲醯基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(14 g，20.36 mmol)於乙腈(120 mL)中之溶液中添加DIEA (7.94 g，61.43 mmol)，且將溶液加熱至50℃。歷經約1 h，經由加料漏斗緩慢逐滴添加 p-TsCl (4.33 g，22.71 mmol)於乙腈(50 mL)中之溶液。加熱所得深棕色溶液6.5 h。再次添加 p-TsCl (~1 g，分3份，其中間隔為6 h)，同時在50℃下加熱。將反應混合物冷卻至室溫，用乙酸異丙酯(250 mL)稀釋，且在攪拌下緩慢添加NaHCO 3飽和水溶液(50 mL)。攪拌混合物10分鐘，且分離各層。有機層用NaHCO 3飽和水溶液(1 × 50 mL)及鹽水(1 × 50 mL)洗滌，接著經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈深紫色油狀之 N-[2-[5-[(1 S)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(16.4 g，定量)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.35 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 6.03 - 5.82 (m, 1H), 5.80 - 5.62 (m, 1H), 5.41 - 5.29 (m, 1H), 5.22 (dd, J =10.3, 1.8 Hz, 1H), 5.05 - 4.88 (m, 2H), 4.89 - 4.83 (m, 1H), 4.84 - 4.73 (m, 2H), 4.63 (d, J =10.9 Hz, 1H), 3.27 (d, J =7.1 Hz, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.18 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值669.27496，實驗值670.6 (M+1) +；滯留時間：1.36分鐘(LC方法D)。 步驟 6 ： N -[2-[5-[(1 S)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3081
向 N-[2-[5-[(1 S)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(13 g，19.41 mmol)於乙腈(100 mL)中之溶液中添加DMAP (473 mg，3.872 mmol)，且在室溫下攪拌混合物使其呈均勻溶液。緩慢添加二碳酸二三級丁酯(5.51 g，25.25 mmol)於乙腈(20 mL)中之溶液，且攪拌反應混合物40分鐘。減壓濃縮混合物以移除CH 3CN，接著與甲苯一起共沸以移除殘餘 t BuOH。將所得材料溶解於二氯甲烷/甲苯之1:1混合物(40 mL)中且經由燒結漏斗過濾以移除殘餘固體。濃縮濾液，且殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈橙色糊漿狀之 N-[2-[5-[(1 S)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(12 g，80%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.58 (s, 1H), 7.42 - 7.26 (m, 5H), 6.01 - 5.82 (m, 1H), 5.82 - 5.60 (m, 1H), 5.27 - 5.11 (m, 2H), 5.00 - 4.83 (m, 3H), 4.71 (dd, J =73.3, 10.6 Hz, 2H), 3.18 (d, J =7.0, 2.1 Hz, 2H), 2.04 - 1.95 (m, 4H), 1.46 (s, 6H), 1.41 (d, J =3.6 Hz, 18H) ppm. ESI-MS m/z計算值769.3274，實驗值670.6 (M+1-Boc) +；滯留時間：0.44分鐘(LC方法S)。 步驟 7 ： N -[(6 S)-6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 -17- 基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3083
向 N-[2-[5-[(1 S)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(18 g，23.38 mmol)於甲苯(2.7 L)中之攪拌溶液中劇烈通入N 2，接著開始加熱溶液至70℃。當內部溫度達到50℃時，添加Zhan催化劑-1B (2.6 g，3.543 mmol)，且在70℃下加熱混合物3小時。將反應容器冷卻至環境溫度，且添加2-硫烷基吡啶-3-甲酸(2.23 g，14.37 mmol)，隨後添加三乙胺(2 mL，14.35 mmol)。在環境溫度下攪拌混合物隔夜，且添加矽膠(40 g，230至400網目)。在環境溫度下攪拌混合物20分鐘，且接著經由矽藻土墊過濾。用200 mL EtOAc沖洗濾餅，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用100%己烷至25% EtOAc/己烷之梯度進行40 min之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之 N-[(6 S)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (11.87 g，62%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.12 (s, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 5H), 6.00 (dt, J =15.0, 7.4 Hz, 1H), 5.62 - 5.54 (m, 1H), 5.55 - 5.17 (m, 1H), 4.81 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.42 (d, J =11.2 Hz, 1H), 3.31 - 3.18 (m, 1H), 2.84 (dd, J =14.3, 7.6 Hz, 1H), 2.42 - 2.29 (m, 1H), 2.25 (dt, J =12.9, 5.4 Hz, 1H), 2.18 - 2.01 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.28 (s, 9H), 1.22 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值741.2961，實驗值742.6 (M+1) +；滯留時間：3.84分鐘(LC方法D)。 步驟 8 ： N - 三級丁 氧基羰基 - N-[(6 S)-6- 羥基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -17- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3085
用5個循環之真空，將 N-[(6 S)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (10.85 g，14.63 mmol)於乙醇(160 mL)中之溶液脫氣以移除空氣，N 2回填，且接著使燒瓶保持在N 2下。添加鈀/碳(4.3 g，5% w/w，2.02 mmol)及氨水(2.12 mL，7 M，14.84 mmol)，且重複脫氣，接著保持在N 2氛圍下。使用氫氣袋及氣孔針，在1個大氣壓之氫壓下攪拌反應混合物隔夜。用N 2置換氫氣氛圍，且經由矽藻土墊過濾混合物，用EtOH (200 mL)充分沖洗濾餅。減壓濃縮濾液，得到呈無色油狀之 N-三級丁氧基羰基- N-[(6 S)-6-羥基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(9.35 g，88%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.60 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.29 - 3.03 (m, 1H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 2.11 - 1.97 (m, 1H), 1.95 - 1.60 (m, 2H), 1.58 - 1.39 (m, 25H), 1.39 (s, 2H), 1.34 - 1.17 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值653.26483，實驗值654.4 (M+1) +；滯留時間：3.41分鐘(LC方法D)。 步驟 9 ： (6 S)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 165)
Figure 02_image3087
在0℃下，向 N-三級丁氧基羰基- N-[(6 S)-6-羥基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]胺基甲酸三級丁酯(8.49 g，12.99 mmol)於異丙醇(85 mL)中之溶液中添加甲磺酸(8.43 mL，129.9 mmol)。將反應混合物緩慢升溫至環境溫度，且在環境溫度下攪拌超過3天。反應混合物用乙酸乙酯(250 mL)稀釋，用NaHCO 3飽和水溶液(3 × 50 mL)及鹽水(60 mL)洗滌，接著經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用100%己烷至90% EtOAc/己烷之淺梯度之矽膠層析(750 g管柱)純化，得到呈鮮黃色固體狀之(6 S)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(2.48 g，42%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 5.96 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 2.91 - 2.71 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 2.15 - 1.97 (m, 1H), 1.92 - 1.74 (m, 1H), 1.73 - 1.57 (m, 1H), 1.55 - 1.38 (m, 5H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值453.15994，實驗值454.3 (M+1) +；滯留時間：2.99分鐘(LC方法D)。 實例 91 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12-(2- 吡啶基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 166)
Figure 02_image3089
步驟 1 ： ( E)-2- 甲基 - N-(2- 吡啶基亞甲基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image3091
向吡啶-2-甲醛(10 g，93.362 mmol)於二氯甲烷(125 mL)中之溶液中添加硫酸鎂(52 g，432.01 mmol)、 對甲苯磺酸吡啶鎓(780 mg，3.1038 mmol)及2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(7.5 g，61.881 mmol)，且在室溫下攪拌反應物隔夜。經由矽藻土過濾反應混合物，用二氯甲烷(50 mL)洗滌。減壓蒸發濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至35%乙酸乙酯/二氯甲烷之矽膠層析(330 g管柱)純化，得到呈棕色油狀之( E)-2-甲基- N-(2-吡啶基亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(9.2 g，71%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.81 - 8.72 (m, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.01 (d, J =7.8 Hz, 1H), 7.81 (td, J =7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.39 (ddd, J =7.6, 4.9, 1.2 Hz, 1H), 1.28 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值210.0827，實驗值211.2 (M+1) +；滯留時間：1.51分鐘(LC方法Z)。 步驟 2 ： 2- 甲基 - N-[1-(2- 吡啶基 ) 丁 -3- 烯基 ] 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image3093
向在-78℃下之( E)-2-甲基- N-(2-吡啶基亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(10 g，47.552 mmol)於四氫呋喃(182 mL)中之冷卻溶液中逐滴添加烯丙基(溴)鎂(80 mL，1 M於二乙醚中，80 mmol)。將反應物保持在-78℃下直至藉由HPLC分析觀測到起始材料完全耗盡。反應物用飽和氯化銨(100 mL)緩慢淬滅，接著用二氯甲烷(2 × 50 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且減壓移除溶劑。殘餘物藉由使用梯度為0%至5%甲醇/二氯甲烷之矽膠層析(220 g管柱)純化，得到呈淺黃色固體狀之2-甲基- N-[1-(2-吡啶基)丁-3-烯基]丙烷-2-亞磺醯胺(7.5 g，62%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.67 - 8.41 (m, 1H), 7.65 (td, J =7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 1H), 7.18 (ddd, J =7.6, 4.9, 1.0 Hz, 1H), 5.92 - 5.51 (m, 1H), 5.19 - 4.98 (m, 2H), 4.84 (br d, J =6.8 Hz, 1H), 4.65 - 4.35 (m, 1H), 2.86 - 2.49 (m, 2H), 1.33 - 1.06 (m, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值252.1296，實驗值253.2 (M+1) +；滯留時間：1.35分鐘(LC方法Z)。 步驟 3 ： 1-(2- 吡啶基 ) 丁 -3- 烯 -1- 胺 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image3095
在室溫下，向2-甲基- N-[1-(2-吡啶基)丁-3-烯基]丙烷-2-亞磺醯胺(7 g，27.736 mmol)於甲醇(60 mL)中之溶液中逐滴添加鹽酸(70 mL，2 M於二乙醚中，140 mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物1小時。將混合物冷卻至0℃，接著添加二乙醚(100 mL)，且攪拌45分鐘。過濾所得沈澱，用二乙醚(75 mL)洗滌，且真空乾燥固體，得到呈灰白色固體狀之1-(2-吡啶基)丁-3-烯-1-胺(鹽酸鹽) (4.75 g，90%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.06 - 8.77 (m, 3H), 8.75 - 8.58 (m, 1H), 8.14 - 7.90 (m, 1H), 7.84 - 7.64 (m, 1H), 7.60 - 7.39 (m, 1H), 5.79 - 5.49 (m, 1H), 5.08 - 4.85 (m, 2H), 4.65 - 4.52 (m, 1H), 2.88 - 2.75 (m, 1H), 2.73 - 2.57 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值148.1，實驗值149.2 (M+1) +；滯留時間：2.02分鐘(LC方法BB)。 步驟 4 ： N -[2-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-6-[1-(2- 吡啶基 ) 丁 -3- 烯基胺基 ]-5-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3097
在100 mL氮氣吹掃的容器中，將1-(2-吡啶基)丁-3-烯-1-胺(鹽酸鹽) (760 mg，4.116 mmol)、DIEA (1.5 mL，8.612 mmol)、3Å 分子篩及 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(1 g，1.331 mmol)合併於DMSO (20 mL)中。藉由向溶液鼓泡通入氮氣5分鐘將混合物脫氣，接著將容器加蓋，且在90℃下加熱混合物16 h。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。接著，材料用水稀釋，且添加乙酸乙酯(50 mL)。接著，添加檸檬酸溶液，且所得混合物用乙酸乙酯(2 × 50 mL)萃取。將有機相合併，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用100%己烷至100%乙酸乙酯之淺梯度之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色固體狀之 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[1-(2-吡啶基)丁-3-烯基胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(98 mg，9%)。ESI-MS m/z計算值818.32263，實驗值819.0 (M+1) +；滯留時間：1.94分鐘(LC方法J)。 步驟 5 ： N -[(6 R)-6- 苯甲氧基 -12-(2- 吡啶基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -17- 基 ]- N- 三級丁 氧基羰基 - 胺基甲酸三級丁酯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3099
在100 mL 3頸燒瓶中，將Zhan催化劑-1B (23 mg，0.03135 mmol)之不斷經由氮氣管脫氣之溶液溶解於1,2-二氯乙烷(75 mL)中，且在氮氣氛圍下將混合物加熱至50℃。接著，經由注射器添加 N-[2-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[1-(2-吡啶基)丁-3-烯基胺基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯(98 mg，0.1197 mmol)於1,2-二氯乙烷(5 mL)中之溶液。在85℃下加熱所得混合物12 h。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到 N-[(6 R)-6-苯甲氧基-12-(2-吡啶基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (23 mg，24%)。ESI-MS m/z計算值790.2914，實驗值791.2 (M+1) +；滯留時間：1.82分鐘(LC方法J)。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -12-(2- 吡啶基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -6- 醇 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3101
向 N-[(6 R)-6-苯甲氧基-12-(2-吡啶基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]- N-三級丁氧基羰基-胺基甲酸三級丁酯( E/Z混合物) (23 mg，0.02909 mmol)中添加TFA (3.0 mL，38.94 mmol)，且在室溫下攪拌反應物2 h，隨後在60℃下加熱2 h。蒸發溶劑，接著用DCM稀釋殘餘物且再濃縮，且接著真空乾燥殘餘物1 h，得到呈粗黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-(2-吡啶基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-6-醇( E/Z混合物) (10 mg，69%)。ESI-MS m/z計算值500.13956，實驗值501.0 (M+1) +；滯留時間：1.14分鐘(LC方法J)。此材料直接用於隨後步驟中。 步驟 7 ： (6 R)-17- 胺基 -12-(2- 吡啶基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鹽酸鹽 ) ( 化合物 166)
Figure 02_image3103
在50 mL圓底燒瓶中，用氮氣吹掃(6 R)-17-胺基-12-(2-吡啶基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-6-醇( E/Z混合物) (10 mg，0.01998 mmol)於乙酸乙酯(500 µL)中之溶液。接著添加Pd/C (8 mg，10% w/w，0.007517 mmol)。混合物經氮氣脫氣，接著用填充有氫氣之氣球吹掃。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物1 h。接著過濾反應物且濃縮。殘餘物藉由使用100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之梯度的矽膠層析(4 g管柱)、隨後使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15分鐘的逆相HPLC純化，得到呈黃色固體狀且呈非鏡像異構物之混合物之(6 R)-17-胺基-12-(2-吡啶基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鹽酸鹽) (3.16 mg，29%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.66 (d, J =4.9 Hz, 1H), 7.86 (s, 2H), 7.68 (s, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.49 (d, J =9.2 Hz, 1H), 7.40 (s, 2H), 6.12 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 2.73 (s, 1H), 1.62 (s, 1H), 1.46 (d, J =9.9 Hz, 4H), 1.25 (d, J =16.5 Hz, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值502.15518，實驗值503.2 (M+1) +；滯留時間：1.76分鐘(LC方法A)。 實例 92 ：製備 (12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-10,22- 二氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 167) 及 (12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-10,22- 二氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 168)
Figure 02_image3105
步驟 1 ： (12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-10,22- 二氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 167) 及 (12 S)-20- 胺基 -6,18- 雙 ( 三氟甲基 )-10,22- 二氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 168)
Figure 02_image3107
(12 S)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-10,22-二氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(250 mg，0.5349 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用LUX-4管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，用12% MeOH (+ 20 mM NH 3)/88% CO 2溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物。
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 S)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-10,22-二氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (65.5 mg，52%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.50 (s, 1H), 4.43 - 4.36 (m, 1H), 4.14 (d, J =7.3 Hz, 1H), 4.00 - 3.24 (m, 5H), 3.02 - 2.73 (m, 2H), 2.37 - 1.75 (m, 4H), 1.61 (s, 2H), 1.26 (s, 2H), 1.01 - 0.71 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值467.13922，實驗值468.1 (M+1) +；滯留時間：1.84分鐘(LC方法A)。 溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 S)-20-胺基-6,18-雙(三氟甲基)-10,22-二氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (105.5 mg，84%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.56 (s, 1H), 4.35 (d, J =8.0 Hz, 2H), 3.79 (t, J =11.3 Hz, 1H), 3.70 - 3.38 (m, 3H), 2.99 (s, 1H), 2.77 (t, J =12.7 Hz, 1H), 2.38 - 1.78 (m, 6H), 1.58 (s, 1H), 1.25 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值467.13922，實驗值468.1 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法A)。 實例 93 ：製備 (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲酸甲酯 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 169) 及 (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲酸甲酯 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 170)
Figure 02_image3109
步驟 1 ： (12 R)-20-{ 雙 [( 三級丁 氧基 ) 羰基 ] 胺基 }-6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲酸甲酯
Figure 02_image3111
向高壓釜中添加 N-[(12 R)-18-溴-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-20-基]- N-[(三級丁氧基)羰基]胺基甲酸三級丁酯(200 mg，0.2956 mmol)、甲醇(5 mL)、三乙胺(72.6 mg，0.1 mL，0.7175 mmol)及[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II) (6 mg，0.0082 mmol)。高壓釜用氮氣吹掃，接著用一氧化碳吹掃。在130℃下加熱混合物，且將一氧化碳壓力調整至120 psi。在130℃下攪拌混合物3 h，接著冷卻至25℃。混合物用氮氣吹掃且真空濃縮。所得固體用乙酸乙酯(50 mL)稀釋，接著添加水(20 mL)及碳酸鈉(1.5 g)，且劇烈攪拌混合物20分鐘。分離各層，且有機層用水(10 mL)及鹽水(10 mL)洗滌，接著經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈粗棕色固體狀之(12 R)-20-{雙[(三級丁氧基)羰基]胺基}-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲酸甲酯(189 mg)，其直接用於下一步驟中。ESI-MS m/z計算值655.2829，實驗值556.4 (M+H-Boc) +；滯留時間：2.15分鐘(LC方法Z)。 步驟 2 ： (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲酸甲酯 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 169) 及 (12 R)-20- 胺基 -6- 羥基 -6-( 三氟甲基 )-22- 氧雜 -3,4,16,21- 四氮雜四環 [15.3.1.12,5.012,16] 二十二碳 -1(21),2,4,17,19- 五烯 -18- 甲酸甲酯 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 170)
Figure 02_image3113
向(12 R)-20-{雙[(三級丁氧基)羰基]胺基}-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲酸甲酯(189 mg，0.2883 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加TFA (4.44 g，3 mL，38.94 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物3小時。濃縮混合物，且殘餘物藉由使用50%至60%乙腈/水(+0.1%甲酸)之梯度進行16 min之逆相HPLC來純化，分離出兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲酸甲酯(鏡像異構物1) (11 mg，8%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.49 (s, 1H), 4.92 (br. s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.61 - 3.45 (m, 2H), 2.93 - 2.77 (m, 2H), 2.38 - 2.17 (m, 3H), 2.16 - 2.01 (m, 1H), 2.01 - 1.90 (m, 1H), 1.76 - 1.47 (m, 8H), 1.15 - 1.02 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -77.36 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值455.178，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：4.4分鐘(LC方法AA)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(12 R)-20-胺基-6-羥基-6-(三氟甲基)-22-氧雜-3,4,16,21-四氮雜四環[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,17,19-五烯-18-甲酸甲酯(鏡像異構物2) (11 mg，8%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.37 (s, 1H), 4.84 (br s, 2H), 4.11 (br s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.55 - 3.41 (m, 1H), 2.92 (br t, J =8.1 Hz, 1H), 2.72 (br t, J =11.2 Hz, 1H), 2.44 (br t, J =12.8 Hz, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 2.17 - 2.05 (m, 1H), 2.02 - 1.90 (m, 1H), 1.85 - 1.41 (m, 9H), 1.07 - 0.91 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -80.68 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值455.17804，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：4.55分鐘(LC方法AA)。 實例 94 ：製備 17- 胺基 -11,11- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 171) 及 17- 胺基 -11,11- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 172)
Figure 02_image3115
步驟 1 ： 6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-(2,2- 二甲基戊 -4- 烯基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3117
在150 mL密封小瓶中，在室溫下，將三氟甲烷磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (900 mg，1.414 mmol)溶解於乙腈(35 mL)中，且添加2,2-二甲基戊-4-烯-1-胺(鹽酸鹽) (675 mg，4.51 mmol)，隨後添加DIEA (1.75 mL，10.05 mmol)。在80℃下加熱反應混合物16 h，接著冷卻至室溫。濃縮混合物，且殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈深橙色泡沫狀之6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(2,2-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(570 mg，67%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.55 (s, 1H), 8.02 (t, J =6.3 Hz, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 5H), 5.97 - 5.72 (m, 2H), 5.38 (dd, J =17.0, 1.8 Hz, 1H), 5.25 (dd, J =10.3, 1.8 Hz, 1H), 4.99 - 4.89 (m, 2H), 4.80 (d, J =10.7 Hz, 1H), 4.55 (d, J =10.6 Hz, 1H), 3.47 (d, J =6.1 Hz, 2H), 2.63 - 2.49 (m, 2H), 1.92 (d, J =7.4 Hz, 2H), 0.81 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值599.1967，實驗值600.2 (M+1) +；滯留時間：1.72分鐘(LC方法M)。 步驟 2 ： 6- 苯甲氧基 -11,11- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3119
在1 L 3頸燒瓶中，在氮氣氛圍下將Zhan催化劑-1B (180 mg，0.2453 mmol)於DCE (400 mL)中之不斷經由氮氣管脫氣之溶液加熱至50℃。接著，經由注射器添加6-[5-[1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(2,2-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(570 mg，0.9508 mmol)於DCE (75 mL)中之溶液。在80℃下加熱所得混合物16 h。接著，移除加熱浴，且將反應混合物冷卻至室溫。添加丁-2,3-二烯酸乙酯(450 µL，3.877 mmol)於DCM (28 mL)中之溶液，且在室溫下攪拌混合物一小時。蒸發溶劑，且殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈淺黃色固體狀之6-苯甲氧基-11,11-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (112 mg，14%)。ESI-MS m/z計算值571.1654，實驗值572.2 (M+1) +；滯留時間：1.46分鐘(LC方法M)。 步驟 3 ： 17- 胺基 -11,11- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image3121
在不鏽鋼壓力容器中，用氮氣吹掃6-苯甲氧基-11,11-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (112 mg，0.1372 mmol)於AcOH (3 mL)中之溶液。接著添加Pd/C (150 mg，10% w/w，0.141 mmol)。混合物經氮氣脫氣，接著經受真空(3 ×)，接著用氫氣吹掃，且在240 psi之氫氣下攪拌16 h。過濾反應物，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用1%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15 min之逆相HPLC來純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-11,11-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(21 mg，34%)。ESI-MS m/z計算值453.15994，實驗值454.2 (M+1) +；滯留時間：2.02分鐘(LC方法A)。 步驟 4 ： 17- 胺基 -11,11- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 171) 及 17- 胺基 -11,11- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 172)
Figure 02_image3123
17-胺基-11,11-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(21 mg，0.04632 mmol)藉由SFC來純化，其使用OJ管柱(250 × 4.6 mm，5 μm粒徑)，用8% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-11,11-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (4.6 mg，43%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.27 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.72 (t, J =6.7 Hz, 1H), 3.77 (s, 1H), 3.66 (s, 1H), 3.03 (s, 1H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 2.20 (dt, J =15.0, 5.0 Hz, 1H), 2.03 - 1.96 (m, 1H), 1.77 (s, 1H), 1.50 - 1.38 (m, 1H), 1.26 - 1.17 (m, 2H), 0.91 (s, 6H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。ESI-MS m/z計算值453.15994，實驗值454.2 (M+1) +；滯留時間：2.02分鐘(LC方法A)。
較遲溶離鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-11,11-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (4.5 mg，42%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.29 (s, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.80 – 4.65 (m, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.01 (d, J =14.3 Hz, 1H), 2.38 (dt, J =14.7, 8.3 Hz, 1H), 2.21 (dt, J =14.9, 5.0 Hz, 1H), 2.04 – 1.97 (m, 1H), 1.77 (d, J =15.4 Hz, 1H), 1.50 – 1.39 (m, 1H), 1.26 – 1.17 (m, 2H), 0.91 (s, 6H) ppm.  在NMR中未觀測到一個可交換質子。ESI-MS m/z計算值453.15994，實驗值454.2 (M+1) +；滯留時間：2.02分鐘(LC方法A)。 實例 95 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,1 ' - 環丁烷 ]-6- 醇 ( 化合物 173)
Figure 02_image3125
步驟 1 ： 6-[(1- 烯丙基環丁基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3127
在125 mL密封容器中，將1-烯丙基環丁基胺(鹽酸鹽) (673 mg，3.655 mmol)、DIEA (3.0 mL，17.22 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.1 g，3.479 mmol)合併於乙腈(20 mL)中，且在80℃下加熱混合物1 h。將反應混合物冷卻至環境溫度，且減壓濃縮。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈淡黃色固體狀之6-[(1-烯丙基環丁基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.15 g，92%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.42 (d, J =0.8 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 5.78 (ddt, J =17.3, 10.2, 7.1 Hz, 1H), 5.08 - 4.94 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.69 (dt, J =7.2, 1.3 Hz, 2H), 2.30 (qd, J =9.7, 2.7 Hz, 2H), 2.20 - 2.09 (m, 2H), 1.77 (dtd, J =9.7, 7.5, 6.9, 4.5 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值359.10928，實驗值360.2 (M+1) +；滯留時間：1.98分鐘(LC方法A)。 步驟 2 ： 6-[(1- 烯丙基環丁基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3129
向6-[(1-烯丙基環丁基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.15 g，3.201 mmol)於THF (20 mL)、甲醇(20 mL)及水(10 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰(1.17 g，48.86 mmol)，且在室溫下攪拌混合物1 h。減壓移除THF及甲醇。添加3 M HCl水溶液直至混合物呈酸性，接著用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。將有機相合併，用鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。接著，將殘餘物置於真空下16 h，得到呈淡黃色固體狀之6-[(1-烯丙基環丁基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.04 g，94%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.06 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 5.79 (ddt, J =17.3, 10.2, 7.1 Hz, 1H), 5.16 - 4.86 (m, 2H), 2.71 (d, J =7.1 Hz, 2H), 2.31 (qd, J =9.7, 2.7 Hz, 2H), 2.21 - 2.10 (m, 2H), 1.84 - 1.71 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值345.09363，實驗值346.2 (M+1) +；滯留時間：1.61分鐘(LC方法A)。 步驟 3 ： 6-[(1- 烯丙基環丁基 ) 胺基 ]- N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3131
向6-[(1-烯丙基環丁基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(875 mg，2.534 mmol)於DMF (20 mL)中之溶液中添加DIEA (2 mL，11.48 mmol)及HATU (955 mg，2.512 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物10 min，接著逐滴添加溶解於DMF (5 mL)中之(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(845 mg，2.795 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物2 h。反應物用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%二氯甲烷至15%甲醇/二氯甲烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到呈黃色泡沫狀之6-[(1-烯丙基環丁基)胺基]- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.2 g，75%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 10.51 (d, J =1.3 Hz, 1H), 10.39 (d, J =1.3 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 2H), 7.41 - 7.30 (m, 3H), 5.92 - 5.73 (m, 2H), 5.10 - 5.04 (m, 2H), 5.03 - 4.98 (m, 2H), 4.84 (q, J =11.4 Hz, 2H), 2.74 (d, J =7.2 Hz, 2H), 2.36 - 2.17 (m, 8H), 1.82 - 1.70 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值629.2073，實驗值630.2 (M+1) +；滯留時間：1.74分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ： N -(1- 烯丙基環丁基 )-6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3133
將6-[(1-烯丙基環丁基)胺基]- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.2 g，1.906 mmol)及DIEA (1.1 mL，6.315 mmol)於乙腈(23 mL)中之溶液加熱至60℃，接著添加 對甲苯磺醯氯(440 mg，2.308 mmol)。在60℃下攪拌所得混合物90 min。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和溶液(100 mL)淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取。將有機相合併，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80公克管柱)純化，得到 N-(1-烯丙基環丁基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.02 g，87%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.52 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 5H), 5.81 (dddt, J =30.8, 17.3, 10.2, 6.8 Hz, 2H), 5.10 (dq, J =17.2, 1.6 Hz, 1H), 5.04 - 4.90 (m, 3H), 4.76 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.59 (d, J =10.8 Hz, 1H), 2.65 (d, J =7.2 Hz, 2H), 2.62 - 2.51 (m, 2H), 2.28 (pd, J =11.0, 10.0, 3.9 Hz, 4H), 2.10 (ddt, J =12.2, 7.6, 3.8 Hz, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值611.1967，實驗值612.2 (M+1) +；滯留時間：1.66分鐘(LC方法M)。 步驟 5 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 -12,1 ' - 環丁烷 ] ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3135
在1 L 3頸燒瓶中，將Zhan催化劑-1B (350 mg，0.477 mmol)之不斷經由氮氣管脫氣之溶液溶解於DCE (450 mL)中，且在氮氣氛圍下將混合物加熱至50℃。接著，經由注射器添加 N-(1-烯丙基環丁基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1 g，1.635 mmol)於DCE (50 mL)中之溶液。在85℃下加熱所得混合物5小時，接著濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(120公克管柱)純化，得到呈淡黃色殘餘物之(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12,1'-環丁烷] ( E/Z混合物) (650 mg，68%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.54 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.35 (d, J =4.6 Hz, 4H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 5.89 - 5.79 (m, 1H), 5.79 - 5.68 (m, 1H), 4.86 (s, 2H), 2.73 (t, J =10.8 Hz, 1H), 2.57 - 2.53 (m, 1H), 2.37 - 2.27 (m, 4H), 2.27 - 2.10 (m, 4H), 1.74 (td, J =9.9, 9.3, 4.3 Hz, 1H), 1.61 (q, J =9.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值583.1654，實驗值584.2 (M+1) +；滯留時間：1.35分鐘(LC方法M)。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,1 ' - 環丁烷 ]-6- 醇 ( 化合物 173)
Figure 02_image3137
在250 mL圓底燒瓶中，用氮氣吹掃(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-12,1'-環丁烷] ( E/Z混合物) (630 mg，1.08 mmol)於AcOH (14 mL)及乙酸乙酯(5 mL)中之溶液。接著添加Pd/C (1.15 g，10% w/w，1.081 mmol)。混合物經氮氣脫氣，接著經受真空(3 ×)，接著經由通入溶液之連續針用氫氣吹掃，且在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物3 h。過濾反應物，且材料藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到黃色固體。此材料藉由使用30%至99%乙腈/水(+ 5 mM HCl)之梯度進行15 min之逆相HPLC進一步純化，得到呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-環丁烷]-6-醇(381.6 mg, 75 %), 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.58 (d, J =6.6 Hz, 2H), 5.95 (s, 2H), 5.48 (s, 1 H ), 2.44 – 2.33 (m, 2H ), 2.32 – 2.21 (m, 2H), 2.15 – 2.04 (m, 2H), 2.02 – 1.82 (m, 2H), 1.82 – 1.60 (m, 5H), 1.57 – 1.41 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值465.15994，實驗值466.2 (M+1) +；滯留時間：2.13分鐘(LC方法A)。 步驟 7 ：非晶形化合物 173 ( 純形式 ) 及結晶化合物 173 形式 A ( 純 ) 之固體形式表徵A.     X射線粉末繞射
藉由步驟6產生之非晶形化合物173 (純形式)之XRPD繞射圖係使用通用X射線粉末繞射(XRPD)方法獲得。非晶形化合物173 (純形式)之XRPD繞射圖提供於 圖 18中。 B.     熱重分析(TGA)
藉由步驟6產生之非晶形化合物173 (純形式)之TGA曲線提供於 圖 19中。TGA曲線顯示自39℃至224.6℃ 3.98%重量損失，其中以10.00℃/min上升至350.00℃。 C.     差示掃描熱量測定分析
DSC分析使用以下經調變之DSC方法進行： 1. 在-20.00℃下平衡， 2. 每60秒藉由+/- 1.00℃調變， 3. 等溫5.00 min，接著 4. 以2.00℃/min上升至250.00℃。
藉由步驟6產生之非晶形化合物173 (純形式)之DSC熱分析圖提供於 圖 20中。熱分析圖顯示在96.3℃處再結晶且在161.53℃處熔融，59.89 J/g。未觀測到Tg。 D.     單晶X射線繞射
自二氯甲烷及己烷生長結晶化合物173形式A (純)之單晶。X射線繞射資料係在配備有Cu Kα輻射(λ=1.54178 Å)及CPAD偵測器之Bruker繞射儀上在150 K下獲得。使用SHELX程式(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)解析結構且進行精細化，且結果概述於下 表 7中。 表 7 ：結晶化合物 173 形式 A ( 純 ) 之單晶說明
晶體系統 三斜晶
空間群 P1
a (Å) 6.7418(4)
b (Å) 11.9477(7)
c (Å) 13.0827(7)
α (°) 76.0210(10)
β (°) 82.2150(10)
γ (°) 85.4220(10)
V (Å3) 1011.95(10)
Z/Z′ 1/2
溫度 150 K
實例 96 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 174) 及 (6 R)-17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 175)
Figure 02_image3139
步驟 1 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3141
在室溫下，將1,1'-羰基二咪唑(1.35 g，8.3257 mmol)添加至6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2 g，7.8856 mmol)於乙腈(20 mL)及DMF (4 mL)中之無色溶液中。在室溫下攪拌混合物0.5 h，接著逐滴添加含(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(2.42 g，7.7253 mmol)之乙腈(10 mL)。在室溫下攪拌混合物隔夜，在40℃下平緩地加熱20 h，接著冷卻回至室溫，且用水及2-甲基四氫呋喃淬滅。混合物用2-甲基四氫呋喃(3 × 200 mL)萃取。經合併之有機層用0.5 N HCl水溶液(2 × 120 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且藉由減壓蒸發濃縮，得到呈黃色油狀之 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(4.8 g，94%)。產物未經純化即用於隨後步驟中。 步驟 2 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 醇
Figure 02_image3143
向在0℃下之 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(6.47 g，8.4557 mmol)及 N, N-二異丙基乙胺(5.8618 g，7.9 mL，45.355 mmol)於乙腈(200 mL)中之溶液中逐份添加4-甲基苯磺醯氯(3.71 g，19.46 mmol)。在添加之後，移除冷卻浴，且在26℃下攪拌反應物超過44 h。藉由減壓蒸發移除揮發物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(180 mL)中，且用0.5 N鹽酸水溶液(3 × 25 ml)及鹽水(2 × 15 ml)洗滌。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且藉由減壓蒸發濃縮，得到呈棕色黏性殘餘物之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-醇(6.67 g，70%)。ESI-MS m/z計算值518.1025，實驗值519.1 (M+1) +；滯留時間：3.1分鐘(LC方法BB)。 步驟 3 ： ( E)- N-(1-( 苯甲氧基 ) 丙 -2- 亞基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image3145
向1-苯甲氧基丙-2-酮(9.5 g，52.07 mmol)及2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(6.7 g，55.28 mmol)於THF (140 mL)中之溶液中添加Ti(OEt) 4(30.464 g，28 mL，133.55 mmol)。在70℃下攪拌反應混合物4小時。將反應混合物冷卻至室溫且倒入鹽水(300 mL)中。經由矽藻土過濾所得懸浮液，且濾餅用EtOAc (300 mL)洗滌。分離有機層，且水層用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(350 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至45%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色油狀之( E)- N-(1-(苯甲氧基)丙-2-亞基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(6.85 g，42%)。ESI-MS m/z計算值267.1293，實驗值268.2 (M+1) +；滯留時間：2.56分鐘(LC方法G)。 步驟 4 ： N -[1-( 苯甲氧基甲基 )-1- 甲基 - 丁 -3- 烯基 ]-2- 甲基 - 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image3147
向在-78℃下之( E)- N-(1-(苯甲氧基)丙-2-亞基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(5.3 g，18.236 mmol)於甲苯(120 mL)中之溶液中緩慢添加烯丙基(溴)鎂(26.8 mL，1 M，26.8 mmol)。在-78℃下攪拌反應混合物2 h。反應物用飽和NH 4Cl (200 mL)淬滅且升溫至室溫。分離有機層，且水層用EtOAc (3 × 200 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色油狀之 N-[1-(苯甲氧基甲基)-1-甲基-丁-3-烯基]-2-甲基-丙烷-2-亞磺醯胺(5.32 g，80%)。ESI-MS m/z計算值309.1762，實驗值310.5 (M+1) +；滯留時間：3.31分鐘(LC方法G)。 步驟 5 ： 1- 苯甲氧基 -2- 甲基 - 戊 -4- 烯 -2- 胺
Figure 02_image3149
向 N-[1-(苯甲氧基甲基)-1-甲基-丁-3-烯基]-2-甲基-丙烷-2-亞磺醯胺(5.32 g，14.612 mmol)於1,4-二噁烷(85 mL)中之溶液中添加含HCl之二乙醚(42 mL，2 M，84 mmol)，且接著在室溫下攪拌混合物1小時。在真空下蒸發溶劑。殘餘物用EtOAc (150 mL)及飽和NaHCO 3(150 mL)稀釋。分離有機層，且水層用乙酸乙酯(2 × 150 mL)萃取。經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10% MeOH/DCM之矽膠層析純化，得到呈淺棕色油狀之1-苯甲氧基-2-甲基-戊-4-烯-2-胺(1.9749 g，63%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.38 – 7.29 (m, 4H), 7.30 – 7.23 (m, 1H),5.86 – 5.76 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.99 (d, J =7.8 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.13 (s, 2H), 2.08 (d, J =7.4 Hz, 2H), 1.61 (s, 2H), 0.94 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值205.1467，實驗值206.2 (M+1) +；滯留時間：1.49分鐘(LC方法H)。 步驟 6 ： N -[1-( 苯甲氧基甲基 )-1- 甲基 - 丁 -3- 烯基 ]-6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3151
向6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-醇(300 mg，0.5084 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之0℃溶液中添加DIPEA (200.34 mg，0.27 mL，1.5501 mmol)，隨後添加三氟甲烷磺酸三氟甲基磺醯酯(184.47 mg，0.11 mL，0.6538 mmol)。在20 min之後移除冰浴，且在室溫下攪拌反應物40分鐘。將混合物再冷卻至0℃。向混合物中添加含1-苯甲氧基-2-甲基-戊-4-烯-2-胺(125 mg，0.6089 mmol)之(0.5 mL)及DIPEA (200.34 mg，0.27 mL，1.5501 mmol)。在20 min之後移除冰浴，且在室溫下攪拌反應物隔夜。減壓濃縮反應混合物，且殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈橙色油狀之 N-[1-(苯甲氧基甲基)-1-甲基-丁-3-烯基]-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(78 mg，20%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.47 (s, 1H), 7.43 - 7.23 (m, 10H), 6.26 (br s, 1H), 5.86 - 5.69 (m, 2H), 5.13 - 4.96 (m, 4H), 4.84 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.66 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.57 - 4.45 (m, 2H), 3.66 - 3.53 (m, 2H), 2.74 - 2.17 (m, 6H), 1.48 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -64.68 (s, 3F), -73.15 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值705.2386，實驗值706.3 (M+1) +；滯留時間：4.54分鐘(LC方法BB)。 步驟 7 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -12-( 苯甲氧基甲基 )-12- 甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 ( E/ Z 混合物 )
Figure 02_image3153
將 N-[1-(苯甲氧基甲基)-1-甲基-丁-3-烯基]-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(248 mg，0.3393 mmol)於1,2-二氯乙烷(120 mL)中之溶液經氮氣脫氣20分鐘。向在60℃下之該溶液中添加第一份Zhan催化劑-1B (15 mg，0.0204 mmol)，且在此溫度下攪拌反應物40分鐘。接著，添加等量之Zhan催化劑-1B (15 mg，0.0204 mmol)，且在60℃下繼續攪拌2.5小時。一旦冷卻至室溫，催化劑用~5至6滴DMSO淬滅，且減壓濃縮反應物。殘餘物藉由使用梯度為0%至90%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色泡沫狀之(6 R)-6-苯甲氧基-12-(苯甲氧基甲基)-12-甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/ Z混合物) (174 mg，75%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.54 - 8.48 (m, 1H), 7.40 - 7.21 (m, 10H), 6.49 - 6.14 (m, 1H), 5.65 - 5.53 (m, 1H), 5.42 - 5.29 (m, 1H), 5.26 - 5.12 (m, 1H), 4.97 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.69 - 4.60 (m, 1H), 4.59 - 4.43 (m, 1H), 3.78 - 3.62 (m, 1H), 3.62 - 3.28 (m, 2H), 2.71 - 2.08 (m, 5H), 1.44 - 1.39 (m, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -64.15至-64.22 (m, 3F), -73.15至-73.40 (m, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值677.2073，實驗值678.2 (M+1) +；滯留時間：4.3分鐘(LC方法C)。 步驟 8 ： (6 R)-17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image3155
將(6 R)-6-苯甲氧基-12-(苯甲氧基甲基)-12-甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/ Z混合物) (174 mg，0.2542 mmol)溶解於無水甲醇(8.7 mL)中。向混合物中鼓泡通入氮氣5分鐘，且接著添加鈀/碳(165 mg，5% w/w，0.0775 mmol)。接著用氣球向混合物鼓泡通入氫氣5分鐘，且在氫氣下在室溫下攪拌反應混合物隔夜。氫氣球用氮氣置換，且使用針口用氮氣吹掃混合物。經由矽藻土墊過濾混合物，用乙酸乙酯(15 mL)洗滌且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色泡沫狀之(6 R)-17-胺基-12-(羥基甲基)-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(68 mg，56%)。ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.1 (M+1) +；滯留時間：3.04分鐘(LC方法C)。 步驟 9 ： (6 R)-17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 174) 及 (6 R)-17- 胺基 -12-( 羥基甲基 )-12- 甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 175)
Figure 02_image3157
(6 R)-17-胺基-12-(羥基甲基)-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(59.3 mg，0.1249 mmol)之非鏡像異構混合物藉由在40℃下之纖維素1管柱(21.2 mm × 250 mm，5 μm粒徑)上之SFC分離，其用10%甲醇/CO 2溶離，流速為75 mL/min，得到兩種個別鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色蓬鬆固體狀之(6 R)-17-胺基-12-(羥基甲基)-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (21 mg，35%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.62 - 7.56 (m, 2H), 5.98 (s, 2H), 5.12 (s, 1H), 5.10 (t, J =5.0 Hz, 1H), 3.51 (dd, J =10.5, 5.6 Hz, 1H), 3.36 (dd, J =10.4, 4.8 Hz, 1H), 2.94 - 2.82 (m, 1H), 2.38 - 2.26 (m, 1H), 2.08 - 1.96 (m, 1H), 1.75 - 1.60 (m, 2H), 1.60 - 1.49 (m, 2H), 1.46 - 1.32 (m, 3H), 1.30 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.72 (s, 3F), -76.81 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.1 (M+1) +；滯留時間：2.98分鐘(LC方法C)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色蓬鬆固體狀之(6 R)-17-胺基-12-(羥基甲基)-12-甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (30 mg，51%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.62 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 5.95 (s, 2H), 5.26 (s, 1H), 5.19 (t, J =5.0 Hz, 1H), 3.38 (d, J =5.1 Hz, 2H), 2.43 - 2.15 (m, 1H), 1.99 - 1.85 (m, 1H), 1.73 - 1.57 (m, 1H), 1.55 - 1.26 (m, 9H), 1.22 - 1.12 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.78 (s, 3F), -79.04 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.1 (M+1) +；滯留時間：3.04分鐘(LC方法C)。 步驟 10 ：結晶化合物 175 形式 A ( 純 ) 之固體形式表徵A.     單晶X射線繞射
自二氯甲烷及己烷生長結晶化合物175形式A (純)之單晶。X射線繞射資料係在配備有Cu Kα輻射(λ=1.54178 Å)及CPAD偵測器之Bruker繞射儀上在100 K下獲得。使用SHELX程式(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)解析結構且進行精細化，且結果概述於下 表 8中。 表 8 ：結晶化合物 175 形式 A ( 純 ) 之單晶說明
晶體系統 斜方晶
空間群 P2 12 12 1
a (Å) 9.7635(2)
b (Å) 10.0499(2)
c (Å) 20.5163(5)
α (°) 90
β (°) 90
γ (°) 90
V (Å3) 2013.10(8)
Z/Z′ 4/1
溫度 100 K
實例 97 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 雙 ( 三氘甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 176)
Figure 02_image3159
步驟 1 ： 1,1,1- 三氘 -2-( 三氘甲基 ) 戊 -4- 烯 -2- 胺
Figure 02_image3161
在室溫下攪拌無水氯化鈰(III) (130 g，527 mmol)於四氫呋喃(1 L)中之混合物3小時，接著加熱至40℃持續18小時。將混合物冷卻至-78℃，歷經一小時時段添加呈三氘甲基鋰與碘化鋰之錯合物於二乙醚中之溶液(0.5 M，1050 mL，525 mmol)。混合物變成黃色且保持在-78℃下持續45分鐘。歷經20分鐘時段添加戊-4-烯腈(21 mL，210 mmol)於四氫呋喃(125 mL)中之溶液。混合物變成棕色且保持在-78℃下持續額外3小時。歷經1小時將反應物升溫至0℃，添加濃氫氧化銨(65 mL)，且將反應混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。將硫酸鈉(500 g)添加至反應混合物中。在攪拌15分鐘之後，經由矽藻土墊過濾混合物，用二乙醚(1 L)沖洗。減壓濃縮濾液至最小體積。添加二氯甲烷(200 mL)，使得立即形成白色固體沈澱。過濾固體，且濾液用二氯甲烷(700 mL)稀釋。二氯甲烷溶液用2 N氫氧化鈉(500 mL)及鹽水(200 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。混合物藉由用0%至15%之(濃氫氧化銨/甲醇之1:1混合物)/二氯甲烷之梯度溶離的矽膠層析(350 g管柱)純化，得到呈深色油狀之1,1,1-三氘-2-(三氘甲基)戊-4-烯-2-胺(5 g，20%產率)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 5.83 (tdd, J =6.5, 10.3, 17.0 Hz, 1H), 5.02 (qd, J =1.7, 17.1 Hz, 1H), 4.97 – 4.89 (m, 1H), 2.14 – 2.03 (m, 2H), 1.47 – 1.40 (m, 2H), 1.27 (br s, 2H) ppm. 2H NMR (61.4 MHz, 氯仿) δ 1.07 (s, 6D) ppm. ESI-MS m/z計算值119.24，實驗值120.2 (M+H) +；滯留時間：1.1分鐘(LC方法CC)。 步驟 2 ： 6-[1,1- 雙 ( 三氘甲基 ) 丁 -3- 烯基胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3163
在500 mL密封容器中，將1,1,1-三氘-2-(三氘甲基)戊-4-烯-2-胺(8.8 g，66.42 mmol)、DIEA (22.75 mL，130.24 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(18.53 g，65.12 mmol)合併於乙腈(148 mL)中，且在70℃下加熱混合物110分鐘。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至5%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈紅棕色油狀之6-[1,1-雙(三氘甲基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(18.77 g，78%)。ESI-MS m/z計算值367.16，實驗值368.267 (M+1) +；滯留時間：2.91分鐘(LC方法D)。 步驟 3 ： 6-[1,1- 雙 ( 三氘甲基 ) 丁 -3- 烯基胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3165
向6-[1,1-雙(三氘甲基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(18.77 g，51.1 mmol)於甲醇(93.85 mL)中之溶液中添加NaOH水溶液(120.87 mL，2 M，241.74 mmol)。在攪拌8 h之後，減壓移除甲醇。使混合物在冰浴中冷卻，且添加6 M HCl溶液(50 mL)，接著用MTBE (120 mL)萃取。將有機相合併，用水(3 × 50 mL)、鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈米色固體狀之6-[1,1-雙(三氘甲基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(17.57, 97%)。ESI-MS m/z計算值353.15，實驗值354.207 (M+1) +；滯留時間：2.395分鐘(LC方法D)。 步驟 4 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-6-[1,1- 雙 ( 三氘甲基 ) 丁 -3- 烯基胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3167
在4.9℃之內部溫度下，向6-[1,1-雙(三氘甲基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(17.57 g，49.73 mmol)及(2 R)-2-(苯甲氧基)-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(15.05 g，52.21 mmol)於DMF (105.42 mL)中之溶液中一次性添加HATU (19.85 g，52.21 mmol)。接著逐滴添加DIEA (17.32 mL，99.453 mmol)，將內部溫度保持在低於10℃。在室溫下攪拌反應混合物2 h。將反應混合物添加至冷水(527.1 mL)及MTBE (175.7 mL)之攪拌溶液中。攪拌混合物10 min，且分離各相。有機層用水(2 × 175 mL)、0.2 M KHSO 4(3 × 175 mL)及鹽水(44 mL)洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，蒸發且乾燥，得到呈紅色黏稠油狀之 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-[1,1-雙(三氘甲基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(32.7 g，100%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟中。ESI-MS m/z計算值623.24，實驗值624.422 (M+1) +；滯留時間：3.158分鐘(LC方法D)。 步驟 5 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-[1,1- 雙 ( 三氘甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3169
向 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-[1,1-雙(三氘甲基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(31.01 g，49.73 mmol)及DIEA (17.32 mL，99.45 mmol)於CH 3CN (248.07 mL)中之溶液中逐份添加 對甲苯磺醯氯(10.43 g，54.7 mmol)，將溫度保持在低於50℃。在60℃下加熱混合物30 min，且接著將反應混合物冷卻至環境溫度。減壓移除大部分溶劑，且將剩餘材料分配在MTBE (250 mL)與水(250 mL)之間。分離各相，有機層用水(250 mL)、0.2 M KHSO 4(2 × 150 mL)、鹽水(75 mL)洗滌，接著經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈紅色油狀之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-[1,1-雙(三氘甲基)丁-3-烯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(24.65 g，82%)。ESI-MS m/z計算值605.23，實驗值606.357 (M+1) +；滯留時間：3.60分鐘(LC方法D)。 步驟 6 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -12,12- 雙 ( 三氘甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3171
在5 L 3頸燒瓶中，在氮氣氛圍下在75℃下加熱6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-[1,1-雙(三氘甲基)丁-3-烯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(21.17 g，34.96 mmol)及Zhan催化劑-1B (6.41 g，8.74 mmol)於DCE (3.18 L)中之不斷經氮氣脫氣之溶液3 h。將2-硫烷基吡啶-3-甲酸(5.56 g，35.83 mmol)及三乙胺(5.1 mL，36.252 mmol)添加至反應混合物中，繼續在N 2下在45℃下攪拌隔夜。將反應混合物冷卻至環境溫度，接著添加45 g SiO 2(230-400網目)，且攪拌混合物1 h。經由矽藻土過濾反應混合物，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至10% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-12,12-雙(三氘甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (7.64 g，37.8%)。ESI-MS m/z計算值577.20，實驗值578.335 (M+1) +；滯留時間：3.36-3.38分鐘(LC方法D)。 步驟 7 ： (6 R)-17- 胺基 -12,12- 雙 ( 三氘甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 176)
Figure 02_image3173
向(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-12,12-雙(三氘甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (6.47 g，11.2 mmol)於EtOH (97.05 mL)及EtOAc (32.35 mL)中之溶液中添加鈀/碳(1.908 g，5 w/w%，0.896 mmol)。用真空/氮氣回填5次，接著真空/氫氣球回填5次來使攪拌溶液脫氣。在氫氣氛圍下添加氨水於甲醇中之溶液(1.6 mL，7 M，11.203 mmol)。在氫氣氛圍下在環境溫度下攪拌反應混合物隔夜。經由矽藻土過濾反應混合物。減壓濃縮濾液，且殘餘物用庚烷處理且濃縮。向所得固體中添加DCM/庚烷(3 mL/18 mL)。收集所形成固體，且在N 2排放下在40℃下在真空烘箱下乾燥隔夜，得到呈鮮黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12,12-雙(三氘甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(5.26 g，85%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.60 (d, J =8.3 Hz, 2H), 5.96 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 2.80 (dt, J =14.5, 7.5 Hz, 1H), 2.29 – 2.15 (m, 1H), 2.06 (t, J =12.4 Hz, 1H), 1.88 – 1.75 (m, 1H), 1.65 (dd, J =12.6, 8.0 Hz, 1H), 1.55 – 1.36 (m, 5H) ppm. ESI-MS m/z計算值459.20，實驗值460.339 (M+1) +；滯留時間：2.918分鐘(LC方法D)。 實例 98 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,1 ' - 環戊烷 ]-6- 醇 ( 化合物 177)
Figure 02_image3175
步驟 1 ： 6-[(1- 烯丙基環戊基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3177
在125 mL密封容器中，將1-烯丙基環戊胺(460 mg，3.674 mmol)、DIEA (3 mL，17.22 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.1 g，3.479 mmol)合併於乙腈(20 mL)中，且在75℃下加熱混合物2小時。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠管柱層析(80公克管柱)純化，得到呈淡黃色固體狀之6-[(1-烯丙基環戊基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.19 g，92%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.47 (d, J =0.8 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 5.84 - 5.69 (m, 1H), 5.06 - 4.99 (m, 1H), 4.95 (ddt, J =17.0, 2.5, 1.4 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.68 (dt, J =7.3, 1.2 Hz, 2H), 2.17 - 2.06 (m, 2H), 1.86 - 1.74 (m, 2H), 1.72 - 1.58 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值373.12494，實驗值374.2 (M+1) +；滯留時間：1.55分鐘(LC方法J)。 步驟 2 ： 6-[(1- 烯丙基環戊基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3179
向6-[(1-烯丙基環戊基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.19 g，3.188 mmol)於THF (12 mL)中之溶液中添加甲醇(12 mL)及水(5 mL)。添加無水氫氧化鋰(1.3 g，54.28 mmol)，且在室溫下攪拌90 min。減壓移除THF及甲醇，接著添加3M HCl溶液直至酸性。用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取水層。將有機相合併，用鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，接著真空乾燥隔夜，得到呈淡黃色膠狀之6-[(1-烯丙基環戊基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.02 g，89%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.22 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 5.84 – 5.69 (m, 1H), 5.02 (dd, J =10.2, 2.4 Hz, 1H), 4.99 – 4.92 (m, 1H), 2.69 (dd, J =7.0, 1.3 Hz, 2H), 2.19 – 2.07 (m, 2H), 1.85 – 1.74 (m, 2H), 1.73 – 1.58 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值359.10928，實驗值360.2 (M+1) +；滯留時間：1.78分鐘(LC方法A)。 步驟 3 ： 6-[(1- 烯丙基環戊基 ) 胺基 ]- N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3181
向6-[(1-烯丙基環戊基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(250 mg，0.6958 mmol)於DMF (6 mL)中之溶液中添加DIEA (550 µL，3.158 mmol)及HATU (263 mg，0.6917 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物10分鐘，接著逐滴添加溶解於DMF (1.5 mL)中之(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(212.0 mg，0.7013 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物1 h。反應物用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層用10%檸檬酸水溶液進一步洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%二氯甲烷至15%甲醇/二氯甲烷(產物在5%甲醇/二氯甲烷處溶離)之矽膠層析(40公克管柱)純化，且濃縮所需材料，接著將其置放在真空下4小時，得到呈淡黃色泡沫狀之6-[(1-烯丙基環戊基)胺基]- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(399.7 mg，89%)。ESI-MS m/z計算值643.22296，實驗值644.2 (M+1) +；滯留時間：1.88分鐘(LC方法J)。 步驟 4 ： N -(1- 烯丙基環戊基 )-6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3183
向6-[(1-烯丙基環戊基)胺基]- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(330.1 mg，0.5129 mmol)及DIEA (330.19 mg，445 μL，2.5548 mmol)於乙腈(8 mL)中之溶液中添加甲苯磺醯氯(122.3 mg，0.6415 mmol)。在70℃下攪拌反應物2小時。真空移除溶劑。將殘餘物直接負載至矽膠管柱上且藉由使用0%至20%乙酸乙酯/己烷梯度之矽膠層析純化，得到呈黃色凝膠狀之 N-(1-烯丙基環戊基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(318.5 mg，99%)。ESI-MS m/z計算值625.2124，實驗值626.4 (M+1) +；滯留時間：4.55分鐘(LC方法G)。 步驟 5 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12,1 ' - 環戊烷 ] ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3185
向在50℃下在氮氣氛圍下之 N-(1-烯丙基環戊基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(315.1 mg，0.5037 mmol)於DCE (80 mL)中之溶液中添加Zhan催化劑-1B (155.3 mg，0.2114 mmol)，且接著用氮氣鼓泡1分鐘。在70℃下加熱所得混合物2.5 h。使反應混合物冷卻，且減壓濃縮。殘餘物藉由管柱層析(24 g矽膠管柱)純化且用0%至25%乙酸乙酯/己烷之梯度溶離)，得到呈淡黃色油狀之(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12,1'-環戊烷] ( E/Z混合物) (82.3 mg，27%)。ESI-MS m/z計算值597.1811，實驗值598.3 (M+1) +；滯留時間：4.4分鐘(LC方法G)。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,1 ' - 環戊烷 ]-6- 醇 ( 化合物 177)
Figure 02_image3187
向(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12,1'-環戊烷] ( E/Z混合物) (82.3 mg，0.1377 mmol)於乙酸乙酯(8 mL)中之溶液中添加Pd/C (120 mg，10% w/w，0.1128 mmol)。反應混合物經氮氣脫氣且用氫氣回填三次。在室溫下攪拌反應混合物40小時。催化劑藉由經由矽藻土墊過濾移除，且用乙酸乙酯(30 mL)洗滌，接著真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色粉末狀之(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-環戊烷]-6-醇(51.5 mg，75%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.58 (s, 2H), 5.97 (s, 2H), 4.68 (s, 1H), 2.69 – 2.60 (m, 1H), 2.19 (t, J =12.8, 12.8 Hz, 1H), 2.14 – 2.06 (m, 1H), 2.03 – 1.94 (m, 1H), 1.91 – 1.72 (m, 4H), 1.68 – 1.38 (m, 10H) ppm. ESI-MS m/z計算值479.1756，實驗值480.1 (M+1) +；滯留時間：3.86分鐘(LC方法H)。 實例 99 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 178) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 179)
Figure 02_image3189
步驟 1 ： 6-(1- 異丙基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3191
在125 mL密封容器中，將2-甲基庚-6-烯-3-胺(鹽酸鹽) (1.0 g，6.109 mmol)、DIEA (3.75 mL，21.53 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.7 g，5.376 mmol)合併於乙腈(40 mL)中，且將混合物加熱至80℃持續1小時。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠管柱層析(120公克管柱)純化，得到呈淡黃色油狀之6-(1-異丙基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.0 g，99%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.44 (s, 1H), 7.55 (d, J =8.7 Hz, 1H), 5.81 - 5.73 (m, 1H), 4.96 - 4.90 (m, 1H), 4.88 (q, J =1.5, 1.1 Hz, 1H), 4.29 - 4.17 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.06 - 1.97 (m, 1H), 1.97 - 1.85 (m, 2H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.72 - 1.63 (m, 1H), 0.89 (d, J =6.8 Hz, 3H), 0.82 (d, J =6.7 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值375.1406，實驗值376.2 (M+1) +；滯留時間：2.11分鐘(LC方法A)。 步驟 2 ： 6-(1- 異丙基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3193
向6-(1-異丙基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.75 g，4.662 mmol)於THF (17 mL)中之溶液中添加甲醇(17 mL)及水(8.5 mL)。添加無水氫氧化鋰(1.7 g，70.99 mmol)，且在室溫下攪拌2 h。減壓移除THF及甲醇。添加3 M HCl溶液直至混合物呈酸性，接著用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取水層。將有機相合併，用鹽水(100 mL)洗滌，接著經無水硫酸鈉乾燥。過濾混合物且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至50%乙酸乙酯/己烷之矽膠管柱層析(120公克管柱)純化，得到呈淡黃色固體狀之6-(1-異丙基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1 g，59%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.12 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.43 (d, J =8.7 Hz, 1H), 5.78 (ddt, J =16.9, 10.2, 6.6 Hz, 1H), 4.97 - 4.85 (m, 2H), 4.30 - 4.18 (m, 1H), 2.06 - 1.85 (m, 3H), 1.85 - 1.63 (m, 2H), 0.89 (d, J =6.7 Hz, 3H), 0.83 (d, J =6.7 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值361.12494，實驗值362.2 (M+1) +；滯留時間：1.77分鐘(LC方法A)。 步驟 3 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ]-6-(1- 異丙基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3195
向6-(1-異丙基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(300 mg，0.828 mmol)、(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(290 mg，1.006 mmol)及吡啶(342.3 mg，0.35 mL，4.3274 mmol)於EtOAc (3 mL)中之溶液中添加丙基膦酸酐於乙酸乙酯中之溶液(600 mg，50% w/w，0.9429 mmol)，且在50℃下攪拌反應混合物4 h。使反應物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(25 mL)稀釋，用10%氯化銨水溶液、鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。所得黃色油狀物藉由矽膠層析(40 g管柱，使用DCM負載，用20%乙酸乙酯/己烷溶離)純化。將所需產物級分合併且真空濃縮，得到呈白色固體狀之 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-(1-異丙基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(510 mg，93%)。ESI-MS m/z計算值631.2229，實驗值632.5 (M+1) +；滯留時間：7.51分鐘(LC方法DD)。 步驟 4 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-(1- 異丙基戊 -4- 烯基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3197
在50℃下，向 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-(1-異丙基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(510 mg，0.7424 mmol)及DIEA (296.8 mg，0.4 mL，2.2964 mmol)於乙腈(10 mL)中之攪拌溶液中添加甲苯磺醯氯(200 mg，1.0491 mmol)。將反應混合物加熱至70℃且攪拌2 h。反應混合物用乙酸乙酯(25 mL)稀釋。有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。所得棕色黏稠油狀物藉由矽膠層析(40 g管柱，負載於DCM中，用5%乙酸乙酯/己烷溶離)純化。將所需產物級分合併且真空濃縮，得到呈淡黃色油狀之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1-異丙基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(398 mg，85%)。ESI-MS m/z計算值613.2124，實驗值614.3 (M+1) +；滯留時間：8.38分鐘(LC方法DD)。 步驟 5 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -12- 異丙基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3199
向6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1-異丙基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(398 mg，0.6162 mmol)於DCE (40 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣十五分鐘，隨後添加Zhan催化劑-1B (120 mg，0.1633 mmol)。將反應混合物加熱至70℃且攪拌隔夜。真空濃縮反應混合物，且藉由矽膠層析(40 g管柱，負載於DCM中，用5%乙酸乙酯/己烷溶離)純化。將所需產物級分合併且真空濃縮，得到呈淡黃色黏性固體狀之(6 R)-6-苯甲氧基-12-異丙基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (180 mg，47%)。ESI-MS m/z計算值585.1811，實驗值586.7 (M+1) +；滯留時間：8.17分鐘(LC方法DD)。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -12- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image3201
用氮氣吹掃具有(6 R)-6-苯甲氧基-12-異丙基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (180 mg，0.3013 mmol)及Pd/C (210 mg，10% w/w，0.1973 mmol)於EtOH (10 mL)中之混合物之燒瓶且抽成真空。燒瓶裝配有氫氣(0.6074 mg，6.7489 mL，0.3013 mmol)氣球且抽成真空。裝配另外氫氣(0.6074 mg，6.7489 mL，0.3013 mmol)氣球，且在室溫下攪拌反應混合物20 h。經由矽藻土過濾反應混合物。濾餅用甲醇洗滌。真空濃縮濾液，且所得螢光綠色油狀物藉由矽膠層析(40 g管柱，用DCM負載，用20%乙酸乙酯/己烷溶離)純化。將所需產物級分合併且真空濃縮，得到呈鮮黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-異丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(80 mg，56%)。ESI-MS m/z計算值467.1756，實驗值468.3 (M+1) +；滯留時間：7.66分鐘(LC方法DD)。 步驟 7 ： (6 R)-17- 胺基 -12- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 178) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 異丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 179)
Figure 02_image3203
(6 R)-17-胺基-12-異丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(78 mg，0.1669 mmol)之兩種非鏡像異構物藉由對掌性超臨界流體層析(纖維素4管柱；10%乙醇(含有0.1%二乙胺)/CO 2；流速= 4 mL/min；100巴；40℃)分離。接著減壓濃縮含有各非鏡像異構物之級分，得到兩個分離的峰。
峰1：獲自峰1之材料藉由矽膠層析(24 g管柱，用20%至30% EtOAc/二氯甲烷之梯度溶離)進一步純化且冷凍乾燥，得到呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-異丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (34 mg，43%). 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.63 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.05 (s, 2H), 4.51 (d, J =4.9 Hz, 1H), 3.59 - 3.50 (m, 1H), 2.27 - 2.14 (m, 2H), 2.11 - 1.94 (m, 2H), 1.68 - 1.55 (m, 3H), 1.53 - 1.37 (m, 3H), 1.25 - 1.14 (m, 1H), 0.97 (d, J =6.8 Hz, 3H), 0.91 (d, J =6.8 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.69 (s, 3F), -79.09 (s, 3F) ppm.  ESI-MS m/z計算值467.1756，實驗值468.0 (M+1) +；滯留時間：3.64分鐘(LC方法C)。
峰2：獲自峰2之材料藉由矽膠層析(24 g管柱，用20%至30% EtOAc/二氯甲烷之梯度溶離)進一步純化且冷凍乾燥，得到呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-異丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (26 mg，33%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.63 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.03 (s, 2H), 4.55 (d, J =5.6 Hz, 1H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.14 - 1.95 (m, 3H), 1.85 - 1.73 (m, 1H), 1.62 - 1.34 (m, 5H), 1.31 - 1.21 (m, 1H), 0.97 (d, J =6.8 Hz, 3H), 0.91 (d, J =7.1 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.69 (s, 3F), -76.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值467.1756，實驗值468.0 (M+1) +；滯留時間：3.61分鐘(LC方法C)。 實例 100 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12- 苯甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 180) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 苯甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 181)
Figure 02_image3205
步驟 1 ： 6-(1- 苯甲基丁 -3- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3207
在125 mL密封容器中，將1-苯基戊-4-烯-2-胺(690 mg，4.279 mmol)、DIEA (2 mL，11.48 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.1 g，3.479 mmol)合併於乙腈(28 mL)中，且在80℃下加熱混合物15分鐘。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠管柱層析(40公克管柱)純化，得到呈白色固體狀之6-(1-苯甲基丁-3-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.25 g，88%)。ESI-MS m/z計算值409.12494，實驗值410.53 (M+1) +；滯留時間：0.78分鐘(LC方法S)。 步驟 2 ： 6-(1- 苯甲基丁 -3- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3209
將6-(1-苯甲基丁-3-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.25 g，3.054 mmol)與氫氧化鋰(718 mg，29.98 mmol)合併於甲醇(12.5 mL)、THF (12.5 mL)及水(6.2 mL)中，且在室溫下劇烈攪拌5分鐘。接著，將反應混合物冷卻且添加1M HCl直至水層呈酸性。用乙酸乙酯稀釋，且分離各層。水層用額外乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取。經合併之有機物用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且未經進一步純化即濃縮，得到呈黏性淡黃色固體狀之6-(1-苯甲基丁-3-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.2 g，99%)。ESI-MS m/z計算值395.10928，實驗值396.16 (M+1) +；滯留時間：0.69分鐘。此材料直接用於隨後步驟中(LC方法S)。 步驟 3 ： 6-(1- 苯甲基丁 -3- 烯基胺基 )- N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3211
向6-(1-苯甲基丁-3-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(375 mg，0.9486 mmol)於DMF (14 mL)中之溶液中添加DIEA (660 µL，3.789 mmol)及HATU (360 mg，0.9468 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物10分鐘，接著逐滴添加含(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(320 mg，1.059 mmol)之DMF (3 mL)。在室溫下攪拌反應物1小時。用鹽水及水稀釋反應物，且攪拌5分鐘。反應物用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈白色固體狀之6-(1-苯甲基丁-3-烯基胺基)- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(522 mg，81%)。ESI-MS m/z計算值679.22296，實驗值680.55 (M+1) +；滯留時間：0.67分鐘(LC方法R)。 步驟 4 ： N -(1- 苯甲基丁 -3- 烯基 )-6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3213
將6-(1-苯甲基丁-3-烯基胺基)- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(520 mg，0.7651 mmol)及DIEA (460 µL，2.641 mmol)於乙腈(10 mL)中之溶液加熱至60℃，接著添加 對甲苯磺醯氯(166 mg，0.8707 mmol)。在60℃下攪拌所得混合物15分鐘。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和溶液淬滅。用乙酸乙酯(3 × 40 mL)萃取。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到呈黃色半固體狀之 N-(1-苯甲基丁-3-烯基)-6-[5-[(1R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(425 mg，84%)。ESI-MS m/z計算值661.2124，實驗值662.6 (M+1) +；滯留時間：0.82分鐘(LC方法R)。 步驟 5 ： (6 R)-12- 苯甲基 -6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,9,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3215
向 N-(1-苯甲基丁-3-烯基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(425 mg，0.6424 mmol)於DCE (70 mL)中之淺黃色溶液鼓泡通入氮氣隔夜。接著分三份添加Zhan催化劑-1B (95 mg，0.1295 mmol)，第一份係在室溫下，且鼓泡通入氮氣5 min。接著，在75℃ (預加熱油浴)下攪拌淺綠色溶液2 h，同時各相隔30 min添加其他兩份。將棕色溶液冷卻至室溫，接著添加DMSO (10滴)以淬滅催化劑。真空移除溶劑，且將殘餘物乾燥封裝在具有二氯甲烷之矽膠上。藉由在24 g矽膠管柱(1%至40% MTBE/庚烷)上層析來純化，得到呈淺黃色油狀之(6 R)-12-苯甲基-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (76 mg，19%)。此材料直接用於隨後步驟。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -12- 苯甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 180) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 苯甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 181)
Figure 02_image3217
在室溫下，將鈀/碳(30 mg，10% w/w，0.0282 mmol)添加至(6 R)-12-苯甲基-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯( E/Z混合物) (75 mg，0.0829 mmol)於甲醇(8 mL)中之脫氣溶液中。黑色懸浮液用氮氣吹掃5 min，接著向懸浮液鼓泡通入氫氣5 min。接著，在室溫下在氫氣氛圍下攪拌混合物隔夜。經由矽藻土過濾黑色懸浮液且真空濃縮，得到螢光黃色油狀物(59 mg)。此油狀物藉由在12 g矽膠管柱(1%至40% MTBE/庚烷)上層析純化，得到黃色固體(48 mg)。藉由在15 g C 18管柱(5%至95%乙腈/水+ 0.02% HCl)上層析進一步純化，得到黃色固體(22 mg)。此固體藉由SFC (纖維素3管柱；30%甲醇/CO 2；流速= 4 mL/min；100巴；40℃)純化，分離出兩種非鏡像異構物。
溶離之第一峰分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-苯甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (10.35 mg，23%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.58 (s, 1H), 7.53 (br. s, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 4H), 7.21 - 7.15 (m, 1H), 6.00 (s, 2H), 4.98 (d, J =4.2 Hz, 1H), 3.80 - 3.61 (m, 1H), 3.07 (dd, J =13.9, 2.9 Hz, 1H), 2.75 (dd, J =13.9, 10.8 Hz, 1H), 2.55 - 2.41 (m, 1H), 2.36 - 2.21 (m, 1H), 2.11 - 1.96 (m, 1H), 1.75 - 1.41 (m, 6H), 1.16 - 1.00 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.70 (s, 3F), -79.11 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.1756，實驗值516.0 (M+1) +；滯留時間：3.57分鐘(LC方法C)。
溶離之第二峰分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-苯甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (8.02 mg，19%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.55 (s, 1H), 7.54 (br. s, 1H), 7.28 - 7.26 (m, 4H), 7.21 - 7.13 (m, 1H), 5.99 (s, 2H), 5.06 (d, J =4.8 Hz, 1H), 3.88 - 3.66 (m, 1H), 3.06 (dd, J =13.9, 3.1 Hz, 1H), 2.77 (dd, J =13.9, 10.8 Hz, 1H), 2.43 - 2.30 (m, 2H), 2.13 - 2.01 (m, 1H), 1.83 - 1.40 (m, 6H), 1.21 - 1.09 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.67 (s, 3F), -76.35 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值515.1756，實驗值516.0 (M+1)+；滯留時間：3.59分鐘(LC方法C)。 實例 101 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12-(4- 氟苯基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 182) 及 (6 R)-17- 胺基 -12-(4- 氟苯基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 183)
Figure 02_image3219
步驟 1 ： 6-[1-(4- 氟苯基 ) 丁 -3- 烯基胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3221
在燒瓶中，將1-(4-氟苯基)丁-3-烯-1-胺(515 mg，3.117 mmol)、DIEA (1.5 mL，8.612 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(800 mg，2.53 mmol)合併於乙腈(20 mL)中，且在80℃下加熱混合物15分鐘。將反應混和物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠管柱層析(40公克管柱)純化，得到呈白色固體狀之6-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(980 mg，94%)。ESI-MS m/z計算值413.09988，實驗值414.09 (M+1) +；滯留時間：0.76分鐘(LC方法S)。 步驟 2 ： 6-[1-(4- 氟苯基 ) 丁 -3- 烯基胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3223
將6-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(980 mg，2.371 mmol)與氫氧化鋰(555 mg，23.18 mmol)合併於甲醇(10 mL)、THF (10 mL)及水(5 mL)中，且在室溫下劇烈攪拌5分鐘。接著，將反應混合物冷卻，且添加1 M HCl直至水層呈酸性。用乙酸乙酯稀釋，且分離所得各層，且水層用乙酸乙酯(15 mL)額外萃取兩次。經合併之有機物用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且未經進一步純化即濃縮，得到呈橙色固體狀之6-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(940 mg，99%)。ESI-MS m/z計算值399.08423，實驗值400.8 (M+1) +；滯留時間：0.67分鐘(LC方法S)。 步驟 3 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-6-[1-(4- 氟苯基 ) 丁 -3- 烯基胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3225
向6-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(412 mg，1.032 mmol)於DMF (16 mL)中之溶液中添加DIEA (720 µL，4.134 mmol)及HATU (392 mg，1.031 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物10分鐘，接著逐滴添加含(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(350 mg，1.158 mmol)之DMF (4 mL)。在室溫下攪拌反應物30分鐘。用鹽水及水稀釋反應物，且攪拌5分鐘。反應物用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24公克管柱)純化，得到呈灰白色固體狀之 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(624 mg，88%)。ESI-MS m/z計算值683.1979，實驗值684.59 (M+1) +；滯留時間：0.83分鐘(LC方法S)。 步驟 4 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-[1-(4- 氟苯基 ) 丁 -3- 烯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3227
將 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯基胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(624 mg，0.9129 mmol)及DIEA (550 µL，3.158 mmol)於乙腈(13 mL)中之溶液加熱至60℃，接著添加 對甲苯磺醯氯(198 mg，1.039 mmol)。在60℃下攪拌所得混合物15分鐘。將反應混合物冷卻且用碳酸氫鈉飽和溶液淬滅。用乙酸乙酯(3 × 40 mL)萃取。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料藉由使用梯度為100%己烷至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(24 g金管柱)純化，得到呈黃色半固體狀之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(526 mg，87%)。ESI-MS m/z計算值665.1873，實驗值666.5 (M+1) +；滯留時間：0.82分鐘(LC方法R)。 步驟 5 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -12-(4- 氟苯基 )-17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3229
藉由鼓泡通入氮氣將6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(500 mg，0.7512 mmol)於1,2-二氯乙烷(224 mL)中之攪拌溶液脫氣20小時。向在65℃下之溶液中添加Zhan催化劑-1B (25 mg，0.0341 mmol)，接著在此溫度下攪拌反應物30分鐘。接著，添加等量之Zhan催化劑-1B (25 mg，0.0341 mmol)，且在65℃下繼續攪拌30分鐘。接著，添加等量之Zhan催化劑-1B (25 mg，0.0341 mmol)，且在65℃下繼續攪拌2小時。一旦在室溫下冷卻，催化劑用幾滴DMSO (約5-6)淬滅，且減壓濃縮反應物。殘餘物藉由自0%至90%乙酸乙酯/庚烷溶離之在40 g管柱上矽膠層析純化，得到呈灰白色泡沫狀之(6 R)-6-苯甲氧基-12-(4-氟苯基)-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (235 mg，41%)。ESI-MS m/z計算值637.156，實驗值638.1 (M+1) +；滯留時間：2.59分鐘(LC方法E)。產物難以與起始材料分離且直接以~83%純度用於隨後步驟中。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -12-(4- 氟苯基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 182) 及 (6 R)-17- 胺基 -12-(4- 氟苯基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 183)
Figure 02_image3231
將(6 R)-6-苯甲氧基-12-(4-氟苯基)-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (240 mg，0.3765 mmol) 溶解於無水甲醇(12 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5分鐘，且接著添加鈀/碳(245 mg，5% w/w，0.1151 mmol)。接著用氣球鼓泡通入氫氣5分鐘，且在氫氣下在室溫下攪拌反應混合物隔夜。氫氣球經氮氣球置換，且接著該系統對空氣開放，且經由矽藻土墊過濾反應混合物，用乙酸乙酯(3 × 5 mL)洗滌濾餅，且藉由減壓蒸發濃縮濾液。將殘餘物乾燥負載至10 g矽膠上且藉由用乙酸乙酯(0-30%)/庚烷溶離之在24 g矽膠管柱上層析來純化，得到黃色泡沫固體(135 mg，藉由LCMS為97.5%純度，67.3%產率)。此產物藉由對掌性SFC (纖維素4管柱；10%甲醇/CO 2；流速= 3 mL/min；100巴；40℃)來純化，分離出兩種非鏡像異構物。所分離之第一峰為呈黃色固體泡沫狀之(6 R)-17-胺基-12-(4-氟苯基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (54 mg，27%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.66 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 2H), 7.27 - 7.14 (m, 2H), 6.14 (s, 2H), 4.84 (d, J =3.9 Hz, 1H), 4.76 - 4.61 (m, 1H), 2.92 - 2.80 (m, 1H), 2.32 - 2.21 (m, 1H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.80 - 1.66 (m, 1H), 1.65 - 1.20 (m, 5H), 1.19 - 1.06 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.26 (s, 3F), -79.09 (s, 3F), -114.87至-114.98 (m, 1F) ppm。ESI-MS m/z計算值519.1505，實驗值520.1 (M+1) +；滯留時間：3.73分鐘(LC方法C)。
所分離之第二非鏡像異構物為呈黃色固體泡沫狀之(6 R)-17-胺基-12-(4-氟苯基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(44 mg，22%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.66 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.56 - 7.47 (m, 2H), 7.29 - 7.15 (m, 2H), 6.13 (s, 2H), 4.91 (d, J =4.2 Hz, 1H), 4.82 - 4.69 (m, 1H), 2.79 - 2.65 (m, 1H), 2.40 - 2.25 (m, 1H), 2.15 - 2.00 (m, 1H), 1.87 - 1.75 (m, 1H), 1.74 - 1.62 (m, 1H), 1.54 - 1.32 (m, 3H), 1.31 - 1.18 (m, 1H), 1.18 - 1.05 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.23 (s, 3F), -76.30 (s, 3F), -114.88至-115.03 (m, 1F) ppm。ESI-MS m/z計算值519.1505，實驗值520.1 (M+1) +；滯留時間：3.76分鐘(LC方法C)。 實例 102 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12- 噁唑 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 184) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 噁唑 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 185)
Figure 02_image3233
步驟 1 ： ( Z)-2- 甲基 - N-( 噁唑 -2- 基亞甲基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image3235
向噁唑-2-甲醛(10 g，103.02 mmol)於二氯甲烷(250 mL)中之溶液中添加硫酸鎂(74 g，614.78 mmol)、 對甲苯磺酸吡啶鎓(1.3 g，5.1731 mmol)及2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(16.5 g，136.14 mmol)，且在室溫下攪拌反應物隔夜。經由矽藻土過濾反應混合物且用二氯甲烷(150 mL)洗滌。減壓移除溶劑。粗混合物藉由矽膠管柱層析(300 g管柱，乙酸乙酯/二氯甲烷，0%至30%)純化，得到油狀物，其在靜置時結晶，得到淺黃色固體( Z)-2-甲基- N-(噁唑-2-基亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(13.2 g，64%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.51 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 1.28 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值200.0619，實驗值201.4 (M+1) +；滯留時間：1.46分鐘(LC方法Z)。 步驟 2 ： 2- 甲基 - N-(1- 噁唑 -2- 基戊 -4- 烯基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image3237
向在-78℃下之( Z)-2-甲基- N-(噁唑-2-基亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(500 mg，2.4968 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之冷卻溶液中逐滴添加含三甲基鋁(2.5 mL，2 M，5 mmol)之庚烷。在-78℃下攪拌混合物30分鐘，且接著逐滴添加含溴(丁-3-烯基)鎂(7.5 mL，0.5 M，3.75 mmol)之二乙醚。將反應物保持在-78℃下直至藉由HPLC分析觀測到起始材料完全耗盡。反應物用飽和氯化銨(25 mL)緩慢淬滅，用乙酸乙酯(2 × 25 mL)萃取，用鹽水(25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，且減壓移除溶劑，得到呈粗淺棕色油狀之亞磺醯胺2-甲基- N-(1-噁唑-2-基戊-4-烯基)丙烷-2-亞磺醯胺(450 mg，70%) ESI-MS m/z計算值256.1245，實驗值257.4 (M+1) +；滯留時間：1.57分鐘(LC方法Z)。 步驟 3 ： 1- 噁唑 -2- 基戊 -4- 烯 -1- 胺 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image3239
在室溫下，向2-甲基- N-(1-噁唑-2-基戊-4-烯基)丙烷-2-亞磺醯胺(1.01 g，3.9397 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液中逐滴添加含鹽酸(10 mL，2 M，20 mmol)之二乙醚，且在室溫下攪拌混合物1小時。真空移除溶劑，且接著將所得灰色固體懸浮於二乙醚/甲醇9/1 (50 mL)中，接著在0℃下攪拌1小時。過濾灰色懸浮液，用二乙醚(25 mL)洗滌且真空乾燥，得到呈淺黃色粉末狀之1-噁唑-2-基戊-4-烯-1-胺(鹽酸鹽) (700 mg，94%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.95 (br s, 3H), 8.24 (d, J =0.7 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 5.83 - 5.65 (m, 1H), 5.09 - 4.91 (m, 2H), 4.52 (br s, 1H), 2.12 - 1.97 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值152.095，實驗值153.1 (M+1) +；滯留時間：2.11分鐘(LC方法BB)。 步驟 4 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 - N-(1- 噁唑 -2- 基戊 -4- 烯基 )-3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3241
在室溫下，向2-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(420 mg，0.8034 mmol)及1-噁唑-2-基戊-4-烯-1-胺(鹽酸鹽) (170 mg，0.9011 mmol)於乙腈(8.4 mL)中之溶液中添加二異丙胺(404.32 mg，560 μL，3.9957 mmol)。使混合物回流2小時。將反應混合物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 50 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。粗產物藉由矽膠管柱層析(40 g管柱，梯度為庚烷/二氯甲烷，0%至20%)純化。收集所需級分，且減壓濃縮溶劑，得到呈淺棕色油狀且呈兩種非鏡像異構物之混合物之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基- N-(1-噁唑-2-基戊-4-烯基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(370 mg，72%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.63 (s, 1H), 8.58 (dd, J =7.5, 6.2 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.49 - 7.22 (m, 5H), 7.13 (s, 1H), 5.96 - 5.69 (m, 2H), 5.63 - 5.49 (m, 1H), 5.36 (dd, J =17.0, 0.9 Hz, 1H), 5.23 (dd, J =10.3, 1.5 Hz, 1H), 4.95 - 4.85 (m, 2H), 4.78 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.53 (dd, J =10.6, 8.4 Hz, 1H), 3.32 - 3.25 (m, 2H), 2.31 - 2.16 (m, 2H), 2.16 - 1.97 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值638.1712，實驗值639.1 (M+1) +；滯留時間：2.43分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -12- 噁唑 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,8,14(18),15- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3243
在500 mL烘箱乾燥的圓底燒瓶中，在氮氣氛圍下將6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基- N-(1-噁唑-2-基戊-4-烯基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(370 mg，0.5795 mmol)於二氯乙烷(200 mL)中之脫氣溶液加熱至70℃。接著，歷經15分鐘分兩份添加Zhan催化劑-1B (52 mg，0.0709 mmol)。將所得混合物加熱至70℃且攪拌4小時。使混合物冷卻，且減壓濃縮。粗產物藉由矽膠管柱層析(12 g管柱，等度運行2%乙酸乙酯/二氯甲烷)純化。收集所需級分，且減壓濃縮溶劑，得到呈淺黃色泡沫狀且呈兩種非鏡像異構物之混合物之(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-12-噁唑-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (162 mg，46%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.70 - 8.56 (m, 2H), 8.22 - 8.16 (m, 1H), 7.39 - 7.22 (m, 6H), 6.03 - 5.78 (m, 1H), 5.75 - 5.47 (m, 2H), 4.87 - 4.45 (m, 2H), 3.31 - 3.11 (m, 1H), 2.94 - 2.75 (m, 1H), 2.41 - 2.04 (m, 3H), 1.98 - 1.74 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.83 (s, 3F), -62.92 (s, 3F), -73.60 (s, 3F), -73.70 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值610.1399，實驗值611.1 (M+1) +；滯留時間：2.52分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -12- 噁唑 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 184) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 噁唑 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 185)
Figure 02_image3245
將(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-12-噁唑-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (160 mg，0.2621 mmol)溶解於甲醇(10 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(170 mg，5% w/w，0.0799 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌混合物隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物且用甲醇(25 mL)洗滌，且減壓濃縮。所得混合物藉由逆相C 18層析(15.5 g管柱，梯度為5%至95%乙腈(0.1%甲酸)/水(0.1%甲酸)))來純化，得到兩種非鏡像異構物之混合物。此等非鏡像異構物藉由在40℃下之在纖維素1管柱(21.2 mm × 250 mm，5μm粒徑)上對掌性SFC分離，其用10%甲醇/CO 2溶離，流速為4 mL/min，得到兩種個別鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色油狀之(6 R)-17-胺基-12-噁唑-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (17 mg，13%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.13 (d, J =0.7 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.25 (d, J =1.0 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 5.99 (d, J =4.9 Hz,1H), 5.08 - 4.97 (m, 1H), 2.38 - 2.26 (m, 1H), 2.16 - 2.04 (m, 1H), 1.87 - 1.68 (m, 2H), 1.68 - 1.34 (m, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.35 (s, 3F), -76.50 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值492.1345，實驗值492.9 (M+1) +；滯留時間：3.1分鐘(LC方法C)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色油狀之(6 R)-17-胺基-12-噁唑-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (18 mg，14%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.14 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.98 (d, J =4.2 Hz, 1H), 4.99 - 4.88 (m, 1H), 2.72 - 2.59 (m, 1H), 2.34 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.66 - 1.45 (m, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.39 (s, 3F), -79.05 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值492.1345，實驗值492.9 (M+1) +；滯留時間：3.08分鐘(LC方法C)。 實例 103 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -11,11- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 186)
Figure 02_image3247
步驟 1 ： 2,2- 二甲基氮丙啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image3249
向 N-(2-羥基-1,1-二甲基-乙基)胺基甲酸三級丁酯(5.010 g，25.943 mmol)於二乙醚(100 mL)中之溶液中添加 p-TsCl (5.959 g，31.257 mmol)。溶液在冰浴中冷卻。分數批將氫氧化鉀(17.302 g，262.13 mmol)添加至反應混合物中。接著將反應物加熱至回流且攪拌1小時。形成大量白色沈澱。將反應混合物冷卻至室溫，且用二乙醚(100 mL)稀釋。將混合物倒入冰水(100 mL)中。分離兩層，且有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮(35℃浴溫度，110托真空)，得到呈透明液體狀之2,2-二甲基氮丙啶-1-甲酸三級丁酯(4.49 g，94%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 2.03 (s, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.27 (s, 6H) ppm。 步驟 2 ： N -[[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ] 胺基 ] 胺基甲酸苯甲酯
Figure 02_image3251
在0℃下，向(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(4.914 g，17.047 mmol)及NaHCO 3(4.31 g，51.305 mmol)於二噁烷(50 mL)及水(50 mL)中之溶液中添加氯甲酸苯甲酯(8.7235 g，7.3 mL，51.136 mmol)。在冰浴中攪拌反應混合物1小時且在室溫下攪拌隔夜。分離兩層，且水層用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。真空濃縮經合併之有機層。殘餘物藉由使用梯度為0%至60%乙醚/己烷之矽膠層析純化，得到呈透明凝膠狀之 N-[[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺基甲酸苯甲酯(9.2 g，100%)。ESI-MS m/z計算值422.1453，實驗值423.1 (M+1) +；滯留時間：3.43分鐘(LC方法G)。 步驟 3 ： N -[[(2 R)-2- 苯甲氧基 -5- 羥基 -2-( 三氟甲基 ) 戊醯基 ] 胺基 ] 胺基甲酸苯甲酯
Figure 02_image3253
在室溫下，向 N-[[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]胺基]胺基甲酸苯甲酯(9.2 g，16.989 mmol)於無水THF (100 mL)中之溶液中逐滴添加9-硼雙環[3.3.1]壬烷(170 mL，0.5 M於THF中，85 mmol)。在室溫下攪拌反應物1小時。將反應物冷卻至0℃。將1 N NaOH (85 mL，85 mmol)及H 2O 2(6.66 g，20 mL，30% w/w, 58.739 mmol)之水溶液添加至反應混合物中。在室溫下攪拌反應物0.5 h。反應物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋且用飽和硫代硫酸鈉(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌。有機溶液經無水硫酸鎂乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈白色泡沫狀之 N-[[(2 R)-2-苯甲氧基-5-羥基-2-(三氟甲基)戊醯基]胺基]胺基甲酸苯甲酯(6.405 g，86%)。ESI-MS m/z計算值440.1559，實驗值441.2 (M+1) +；滯留時間：2.95分鐘(LC方法G)。 步驟 4: N-[2-[(4 R)-4- 苯甲氧基 -4-( 苯甲氧基羰基胺基胺甲醯基 )-5,5,5- 三氟 - 戊氧基 ]-2- 甲基 - 丙基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3255
向反應瓶中饋入 N-[[(2 R)-2-苯甲氧基-5-羥基-2-(三氟甲基)戊醯基]胺基]胺基甲酸苯甲酯(6.405 g，14.543 mmol)及2,2-二甲基氮丙啶-1-甲酸三級丁酯(21.2 g，123.81 mmol)。將反應加熱至80℃且攪拌14小時。將反應物冷卻至室溫且直接藉由使用0%至40%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈透明液體狀之 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-4-(苯甲氧基羰基胺基胺甲醯基)-5,5,5-三氟-戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(2.868 g，32%)。ESI-MS m/z計算值611.2818，實驗值612.4 (M+1) +；滯留時間：3.72分鐘(LC方法G)。 步驟 5 ： N -[2-[(4 R)-4- 苯甲氧基 -5,5,5- 三氟 -4-( 肼羰基 ) 戊氧基 ]-2- 甲基 - 丙基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3257
向N-[2-[(4R)-4-苯甲氧基-4-(苯甲氧基羰基胺基胺甲醯基)-5,5,5-三氟-戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(1.912 g，3.126 mmol)於乙酸乙酯(100 mL)中之溶液中添加10% Pd/C (630 mg，10% w/w，0.592 mmol)。在1個大氣壓之氫氣(氫氣球)下攪拌反應物3小時。藉由過濾移除催化劑。真空濃縮濾液，且殘餘物藉由使用梯度為0%至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈透明凝膠狀之 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-5,5,5-三氟-4-(肼羰基)戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(1.083 g，73%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.95 (s, 1H), 7.51 – 7.31 (m, 5H), 4.81 (s, 1H), 4.75 (d, J =10.3 Hz, 1H), 4.66 (d, J =10.4 Hz, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.45 – 3.37 (m, 1H), 3.37 – 3.27 (m, 1H), 3.13 (d, J =5.9 Hz, 2H), 2.43 – 2.15 (m, 2H), 1.65 – 1.36 (m, 11H), 1.15 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值477.2451，實驗值478.2 (M+1) +；滯留時間：3.07分鐘(LC方法G)。 步驟 6 ： N -[2-[(4 R)-4- 苯甲氧基 -5,5,5- 三氟 -4-[[[6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 羰基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ] 戊氧基 ]-2- 甲基 - 丙基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3259
向 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-5,5,5-三氟-4-(肼羰基)戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(147.5 mg，0.3089 mmol)及6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(92 mg，0.3649 mmol)於無水DMF (4.5 mL)中之溶液中添加TEA (312.18 mg，0.43 mL，3.0851 mmol)，隨後添加丙基膦酸酐於乙酸乙酯中之溶液(197.76 mg，0.37 mL，50% w/w，0.3108 mmol)。在室溫下攪拌反應物2 h。反應物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用1 N HCl (10 mL)、鹽水(3 × 20 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%丙酮/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色凝膠狀之 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-5,5,5-三氟-4-[[[6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-羰基]胺基]胺甲醯基]戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(201 mg，91%)。ESI-MS m/z計算值711.2339，實驗值712.6 (M+1) +；滯留時間：3.56分鐘(LC方法G)。 步驟 7 ： N -[2-[(4 R)-4- 苯甲氧基 -5,5,5- 三氟 -4-[5-[6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ] 戊氧基 ]-2- 甲基 - 丙基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3261
向 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-5,5,5-三氟-4-[[[6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-羰基]胺基]胺甲醯基]戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(201 mg，0.2825 mmol)及DIEA (363.58 mg，0.49 mL，2.8132 mmol)於乙腈(4 mL)中之溶液中添加 p-TsCl (59 mg，0.3095 mmol)。在室溫下攪拌反應物2 h。反應物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋，且用飽和氯化銨水溶液(2 × 10 mL)及鹽水(10 mL)洗滌。有機溶液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至100%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈棕色固體狀之 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-5,5,5-三氟-4-[5-[6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(86.6 mg，41%)。ESI-MS m/z計算值693.2233，實驗值694.4 (M+1) +；滯留時間：3.84分鐘(LC方法G)。 步驟 8 ： N -[2-[(4 R)-4- 苯甲氧基 -4-[5-[6- 氯 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5,5,5- 三氟 - 戊氧基 ]-2- 甲基 - 丙基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3263
向 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-5,5,5-三氟-4-[5-[6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(86.6 mg，0.1149 mmol)於無水THF (1 mL)中之溶液中添加三苯基膦(122 mg，0.4651 mmol)，隨後在0℃下逐滴添加2,2,2-三氯乙腈(33.120 mg，0.023 mL，0.2294 mmol)。在室溫下攪拌反應物2 h。反應物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(15 mL)洗滌。有機層經無水硫酸鈉乾燥且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色凝膠狀之 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-4-[5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5,5,5-三氟-戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(21.3 mg，26%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 8.70 (s, 1H), 7.46 – 7.39 (m, 2H), 7.39 – 7.33 (m, 2H), 7.33 – 7.28 (m, 1H), 4.82 (d, J =10.7 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.63 (d, J =10.6 Hz, 1H), 3.42 – 3.30 (m, 2H), 3.11 (d, J =6.0 Hz, 2H), 2.55 – 2.38 (m, 2H), 1.87 – 1.77 (m, 1H), 1.77 – 1.65 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.13 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值711.1894，實驗值712.6 (M+1) +；滯留時間：4.12分鐘(LC方法G)。 步驟 9 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -11,11- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯
Figure 02_image3265
在室溫下，向 N-[2-[(4 R)-4-苯甲氧基-4-[5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5,5,5-三氟-戊氧基]-2-甲基-丙基]胺基甲酸三級丁酯(21.3 mg，0.0299 mmol)於無水DCM (1 mL)中之溶液中添加TFA (740 mg，0.5 mL，6.4899 mmol)。在室溫下攪拌反應物1小時。反應物用DCM (30 mL)稀釋，且用碳酸氫鈉飽和水溶液(20 mL)及鹽水(20 mL)洗滌。有機相經無水硫酸鈉乾燥。過濾出乾燥試劑。將DIEA (14.840 mg，0.02 mL，0.1148 mmol)添加至DCM溶液中，且在室溫下攪拌反應物1小時。真空移除所有揮發物，得到呈黃色凝膠狀之(6 R)-6-苯甲氧基-11,11-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯(18 mg，99%)。ESI-MS m/z計算值575.1603，實驗值576.4 (M+1) +；滯留時間：3.8分鐘。粗產物未經純化即用於下一步驟反應中(LC方法G)。 步驟 10 ： (6 R)-17- 胺基 -11,11- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 186)
Figure 02_image3267
向(6 R)-6-苯甲氧基-11,11-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯(18 mg，0.0297 mmol)於乙醇(5 mL)中之溶液中添加10% Pd/C (20 mg，10% w/w，0.0188 mmol)。在1個大氣壓之氫氣下攪拌反應物3天。藉由經由矽藻土墊過濾移除催化劑，且蒸發濾液。殘餘物直接藉由使用梯度為0%至100%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-11,11-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-6-醇(7.3 mg，53%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.29 (s, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.75 (q, J =7.6, 7.6, 7.5 Hz, 1H), 3.69 – 3.55 (m, 2H), 3.18 (s, 1H), 2.53 – 2.36 (m, 1H), 2.36 – 2.17 (m, 1H), 1.96 – 1.77 (m, 1H), 1.45 – 1.35 (m, 1H), 1.25 (s, 3H), 1.18 (s, 3H) ppm. 在NMR中未觀測到兩個可交換質子。ESI-MS m/z計算值455.1392，實驗值456.4 (M+1) +；滯留時間：1.79分鐘(LC方法H)。 實例 104 ：製備 (6 R,8 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,8- 二醇 ( 化合物 187) 、 (6 R,8 S)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,8- 二醇 ( 化合物 188) 、 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,9- 二醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 189) 及 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,9- 二醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 190)
Figure 02_image3269
步驟 1 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -8- 醇及 (6 R)-6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -9- 醇 ( 區位異構非鏡像異構物之混合物 )
Figure 02_image3271
在0℃下攪拌(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (200 mg，0.35 mmol)於甲硼烷四氫呋喃複合物(2.5 mL，於THF中之1 M溶液，2.5 mmol)中之溶液30 min。在0℃下逐滴添加水(1.3 mL) (放熱)。在0℃下添加氫氧化鈉水溶液(0.4 mL，2 M，0.8 mmol)及含之過氧化氫之水(524.48 mg，1.35 mL，5.3967 mmol)。在室溫下攪拌混合物15 min，接著用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈黃色固體狀且呈非鏡像異構物之區位異構混合物之(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-8-醇及(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-醇(區位異構非鏡像異構物之混合物) (305 mg，67%)。ESI-MS m/z計算值589.176，實驗值589.9 (M+1) +；滯留時間：2.26分鐘(LC方法C)。 步驟 2 ： (6 R,8 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,8- 二醇 ( 化合物 187) 、 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,9- 二 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) 及 (6 R,8 S)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,8- 二 醇 ( 化合物 188)
Figure 02_image3273
向在室溫下之(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-8-醇及(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-醇(區位異構非鏡像異構物之混合物) (200 mg，0.2701 mmol)於甲醇(6 mL)中之混合物之脫氣溶液中添加10%鈀/碳(60 mg，0.5638 mmol)。黑色懸浮液用氮氣吹掃5 min，接著向懸浮液鼓泡通入氫氣5 min。接著，在氫氣氛圍下在室溫下攪拌混合物隔夜。黑色懸浮液用氮氣吹掃，接著經由矽藻土過濾，用DCM (3 × 10 mL)洗滌，且真空濃縮濾液。藉由使用梯度為1%至85%乙腈/水(+ 0.02%HCl)之逆相HPLC (管柱1) (50 g C 18管柱)純化，得到三種產物：
自管柱1溶離之第一區位異構物/鏡像異構物仍混雜有雜質且藉由使用梯度為1%至85%乙腈/水(+ 0.02% HCl)之逆相HPLC (管柱2) (50 g C 18管柱)進一步純化，得到呈黃色固體狀之(6 R,8 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,8-二醇(4.4 mg，34%)。ESI-MS m/z計算值469.15485，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：2.85分鐘(LC方法C)。
自管柱1溶離之第二產物峰藉由使用梯度為5%至80%乙腈/水(+ 0.02% HCl)之逆相HPLC (管柱3) (15 g，C 18管柱)進一步純化，得到14.5 mg黃色固體且為(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,9-二醇(非鏡像異構物之混合物)之不可分離的混合物。此材料直接用於隨後步驟中。
自管柱1溶離之第三區位異構物/鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R,8 S)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,8-二醇(66 mg，52%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.50 (s, 1H), 4.40 (td, J =9.2, 4.9 Hz, 1H), 3.54 (td, J =12.5, 4.5 Hz, 1H), 2.66 (d, J =14.5 Hz, 1H), 2.11 (dd, J =14.8, 10.0 Hz, 1H), 1.77 - 1.46 (m, 4H), 1.43 (s, 3H), 1.41 - 1.35 (m, 1H), 1.31 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz,氯仿-d) δ -63.87 (s, 3F), -81.07 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.0 (M+1) +；滯留時間：3.21分鐘(LC方法C)。 步驟 3 ： (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,9- 二醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 189) 及 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,9- 二醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 190)
Figure 02_image3275
(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,9-二醇(非鏡像異構物之混合物) (38 mg，0.0672 mmol)之非鏡像異構混合物藉由SFC來純化，其使用Lux纖維素1管柱(150 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，用7% MeOH/CO 2溶離，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,9-二醇(鏡像異構物1) (18.9 mg，60%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.43 (s, 1H), 4.96 - 4.77 (m, 1H), 3.40 (t, J =12.0 Hz, 1H), 2.56 (dd, J =13.4, 5.1 Hz, 1H), 2.28 - 2.13 (m, 1H), 2.21 (dd, J =13.4, 9.8 Hz, 1H), 1.97 - 1.83 (m, 1H), 1.66 - 1.47 (m, 5H), 1.46 - 1.35 (m, 1H), 1.26 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -65.52 (s, 3F), -79.65 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：3.11分鐘(LC方法C)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,9-二醇(鏡像異構物2) (10.3 mg, 32%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.43 (s, 1H), 4.78 - 4.65 (m, 1H), 3.40 (t, J =12.5 Hz, 1H), 3.02 (dd, J =14.1, 6.2 Hz, 1H), 2.21 - 2.08 (m, 1H), 2.08 - 1.98 (m, 1H), 1.96 - 1.80 (m, 1H), 1.66 - 1.36 (m, 6H), 1.26 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -65.54 (s, 3F), -82.01 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：3.14分鐘(LC方法C)。 步驟 4 ：結晶化合物 188 二氯甲烷溶劑合物形式 A 之固體形式表徵A.     單晶X射線繞射
自二氯甲烷生長結晶化合物188二氯甲烷溶劑合物形式A之單晶。X射線繞射資料係在配備有Cu Kα輻射(λ=1.54178 Å)及CPAD偵測器之Bruker繞射儀上在100 K下獲得。使用SHELX程式(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)解析結構且進行精細化，且結果概述於下 表 9中。 表 9 ：結晶化合物 188 二氯甲烷溶劑合物形式 A 之單晶說明
晶體系統 單斜晶
空間群 P2 1
a (Å) 16.1454(10)
b (Å) 13.2069(7)
c (Å) 23.1642(15)
α (°) 90
β (°) 99.687(2)
γ (°) 90
V (Å3) 4868.9(5)
Z/Z′ 2/4
溫度 100 K
實例 105 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12- 環丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 191) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 環丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 192)
Figure 02_image3277
步驟 1 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-(1- 環丙基戊 -4- 烯基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3279
向2-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(158 mg，0.3022 mmol)於乙腈(6 mL)中之溶液中添加 N, N-二異丙基乙胺(150 mg，0.2022 mL，1.1606 mmol)，隨後添加1-環丙基戊-4-烯-1-胺(50 mg，0.3993 mmol)於乙腈(1 mL)中之溶液。在30℃下攪拌混合物2 h且冷卻至室溫。將混合物乾燥負載至矽膠(約1 g)上，且藉由急驟層析(24 g矽膠，用10%至30%乙酸乙酯/庚烷溶離)純化，得到呈無色油狀之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1-環丙基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(183 mg，99%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.57 (s, 1H), 7.42 - 7.30 (m, 5H), 6.05 - 5.91 (m, 1H), 5.84 - 5.70 (m, 2H), 5.35 - 5.21 (m, 2H), 5.05 - 4.92 (m, 2H), 4.82 (d, J =10.3 Hz, 1H), 4.65 (dd, J =10.4, 3.3 Hz, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 3.31 - 3.17 (m, 2H), 2.23 - 2.12 (m, 2H), 1.93 - 1.76 (m, 2H), 1.02 - 0.89 (m, 1H), 0.68 - 0.59 (m, 1H), 0.57 - 0.48 (m, 1H), 0.45 - 0.28 (m, 2H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.59 (s, 3F), -73.44至-73.58 (m, 3F) ppm。NMR顯示1:1 非鏡像異構物之混合物。在LCMS上產物未電離。滯留時間：2.41分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -12- 環丙基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,8,14(18),15- 六烯
Figure 02_image3281
向乾燥的250 mL燒瓶中饋入1,2-二氯乙烷(100 mL)。向溶劑鼓泡通入氮氣30 min。在平緩氮氣速下添加Zhan催化劑-1B (27 mg，0.0368 mmol)。向混合物鼓泡通入氮氣10 min且加熱至66℃。歷經1 h逐滴添加6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1-環丙基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(183 mg，0.2992 mmol)於1,2-二氯乙烷(20 mL)中之氮氣鼓泡的溶液。在完成添加之後，向混合物鼓泡通入氮氣6 min。繼續在66℃下攪拌混合物0.5 h，冷卻至室溫，接著添加5滴DMSO以淬滅催化劑。在矽膠(3 g)上濃縮混合物且藉由急驟層析(40 g矽膠，用5%至25%乙酸乙酯/庚烷溶離)純化，得到呈淡黃色油狀之(6 R)-6-苯甲氧基-12-環丙基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯(132 mg，76%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.52 - 8.43 (m, 1H), 7.45 - 7.28 (m, 5H), 5.95 - 5.69 (m, 2H), 5.63 - 5.38 (m, 1H), 5.02 - 4.85 (m, 1H), 4.72 - 4.51 (m, 1H), 3.45 - 3.27 (m, 1H), 3.19 - 2.63 (m, 2H), 2.49 - 2.15 (m, 2H), 2.13 - 1.89 (m, 1H), 1.80 - 1.65 (m, 1H), 1.19 - 0.92 (m, 2H), 0.69 - 0.44 (m, 2H), 0.34 - 0.17 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -63.83至-64.98 (m, 3F), -72.69至-74.13 (m, 3F) ppm。 步驟 3 ： (6 R)-17- 胺基 -12- 環丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image3283
在氫氣氛圍(氣球)下在室溫下攪拌(6 R)-6-苯甲氧基-12-環丙基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯(132 mg，0.2262 mmol)、10%鈀/碳(50%潤濕) (41 mg，0.0193 mmol)及甲醇(6 mL)之混合物隔夜。經由矽藻土過濾混合物且用乙酸乙酯洗滌。濃縮濾液，且殘餘物再次在氫氣氛圍(氣球)下在室溫下用10%鈀/碳(51 mg，0.024 mmol)及甲醇(6 mL)氫化隔夜。經由矽藻土過濾混合物且用乙酸乙酯洗滌。濃縮濾液且藉由急驟層析(40 g管柱，用10%至30%乙酸乙酯/庚烷溶離)純化，得到呈淡黃色油狀之(6 R)-17-胺基-12-環丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(100 mg，95%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.33 - 7.29 (m, 1H), 4.81 (d, J =15.2 Hz, 1H), 3.93 (br. s, 1H), 2.85 - 2.60 (m, 2H), 2.48 - 1.98 (m, 3H), 1.87 - 1.46 (m, 7H), 1.39 - 1.31 (m, 1H), 1.04 - 0.92 (m, 1H), 0.78 - 0.68 (m, 1H), 0.56 - 0.40 (m, 2H), 0.24 - 0.10 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.12 (s, 3F), -76.49至-81.49 (m, 3F) ppm。ESI-MS m/z計算值465.1599，實驗值466.0 (M+1) +；滯留時間：3.49分鐘(LC方法C)。 步驟 4 ： (6 R)-17- 胺基 -12- 環丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 191) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 環丙基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 192)
Figure 02_image3285
(6 R)-17-胺基-12-環丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(130 mg，0.2793 mmol)之兩種非鏡像異構物藉由對掌性SFC方法分離，其使用直鏈澱粉1管柱，用8%甲醇/CO 2移動相(流速= 4 mL/min，管柱溫度=40℃)。接著減壓濃縮含有各非鏡像異構物之級分且凍乾(乙腈/水混合物)，得到兩種非鏡像異構物。
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈淡黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-環丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (31 mg，24%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.62 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.07 (d, J =3.4 Hz, 1H), 2.89 - 2.80 (m, 1H), 2.49 - 2.41 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 1H), 2.13 - 2.02 (m, 1H), 1.79 - 1.58 (m, 3H), 1.56 - 1.36 (m, 3H), 1.34 - 1.21 (m, 1H), 1.09 - 0.97 (m, 1H), 0.73 - 0.63 (m, 1H), 0.48 - 0.33 (m, 2H), 0.14 - 0.04 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.73 (s, 3F), -76.29 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值465.1599，實驗值466.0 (M+1) +；滯留時間：3.49分鐘(LC方法C)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈淡黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-環丙基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (28 mg，21%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.62 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.03 (s, 2H), 4.99 (d, J =2.9 Hz, 1H), 2.81 - 2.71 (m, 1H), 2.63 - 2.53 (m, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 2.07 - 1.94 (m, 1H), 1.71 - 1.39 (m, 6H), 1.23 - 1.13 (m, 1H), 1.08 - 0.96 (m, 1H), 0.71 - 0.60 (m, 1H), 0.48 - 0.36 (m, 2H), 0.15 - 0.05 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.73 (s, 3F), -79.14 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值465.1599，實驗值466.0 (M+1) +；滯留時間：3.5分鐘(LC方法C)。 實例 106 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,1 ' - 環己烷 ]-6- 醇 ( 化合物 193)
Figure 02_image3287
步驟 1 ： 6-[(1- 烯丙基環己基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3289
在燒瓶中，將1-烯丙基環己胺(515 mg，3.699 mmol)、DIEA (1.7 mL，9.76 mmol)及6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(950 mg，3.004 mmol)合併於乙腈(23 mL)中，且將混合物加熱至80℃持續15分鐘。將反應混合物冷卻至環境溫度，且真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至30%乙酸乙酯/己烷之矽膠管柱層析(40公克管柱)純化，得到呈白色固體狀之6-[(1-烯丙基環己基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(899 mg，77%)。ESI-MS m/z計算值387.1406，實驗值388.53 (M+1) +；滯留時間：0.83分鐘(LC方法S)。 步驟 2 ： 6-[(1- 烯丙基環己基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3291
將6-[(1-烯丙基環己基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(899 mg，2.321 mmol)與LiOH (500 mg，20.88 mmol)合併於MeOH (9 mL)、THF (9 mL)及水(4.5 mL)中，且在室溫下劇烈攪拌5分鐘。接著，將反應混合物冷卻，且添加1 M HCl直至水層呈酸性。用乙酸乙酯稀釋，且分離各層，且水溶液用額外乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取。經合併之有機物用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且未經進一步純化即濃縮，得到呈灰白色固體狀之6-[(1-烯丙基環己基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(860 mg，99%)。ESI-MS m/z計算值373.12494，實驗值374.1 (M+1) +；滯留時間：0.74分鐘(LC方法S)。 步驟 3 ： 6-[(1- 烯丙基環己基 ) 胺基 ]- N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3293
向6-[(1-烯丙基環己基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(390 mg，1.045 mmol)於DMF (14.5 mL)中之溶液中添加DIEA (720 µL，4.134 mmol)及HATU (397 mg，1.044 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物10分鐘，接著逐滴添加含(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(352 mg，1.164 mmol)之DMF (3 mL)。在室溫下攪拌反應物10分鐘。用鹽水及水稀釋反應物，且攪拌5分鐘。反應物用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。接著，粗材料經由使用梯度為100%己烷至70%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(12公克管柱)純化，得到呈黏性淺橙色固體狀之6-[(1-烯丙基環己基)胺基]- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(575 mg，84%)。ESI-MS m/z計算值657.2386，實驗值658.3 (M+1) +；滯留時間：0.76分鐘(LC方法R)。 步驟 4 ： (9 R)-9- 苯甲氧基 -15- 硝基 -9,17- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [2,11,12,18- 四氮雜雙環 [12.3.1] 十八碳 -1(18),5,14,16- 四烯 -3,1 ' - 環己烷 ]-10,13- 二酮 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3295
向6-[(1-烯丙基環己基)胺基]- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(575 mg，0.899 mmol)於DCE (180 mL)中之淺黃色溶液鼓泡通入氮氣隔夜。接著分三份添加Zhan催化劑-1B (130 mg，0.1772 mmol)，第一係在室溫下，且鼓泡氮氣3 min。接著在60℃下(預加熱油浴)攪拌淺綠色溶液，同時各自相隔30分鐘添加其他兩份。在最後一次添加催化劑之後，在60℃下攪拌混合物1 h。將棕色溶液冷卻至室溫，接著添加DMSO (10滴)以淬滅催化劑。真空移除溶劑，且殘餘物藉由在24 g矽膠管柱(1%至40% MTBE/庚烷)上正相層析來純化，得到呈淺黃色油狀之(9 R)-9-苯甲氧基-15-硝基-9,17-雙(三氟甲基)螺[2,11,12,18-四氮雜雙環[12.3.1]十八碳-1(18),5,14,16-四烯-3,1'-環己烷]-10,13-二酮( E/Z混合物) (446 mg，70%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.57 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.49 - 7.29 (m, 4H), 7.09 - 6.98 (m, 2H), 5.70 - 5.41 (m, 2H), 5.18 (br. s., 1H), 4.63 (d, J =9.7 Hz, 1H), 4.37 (d, J =10.4 Hz, 1H), 3.27 (dd, J =14.2, 10.9 Hz, 1H), 2.88 (d, J =13.9 Hz, 1H), 2.32 - 2.15 (m, 1H), 2.09 - 1.97 (m, 1H), 1.91 (dd, J =14.2, 5.1 Hz, 1H), 1.79 - 1.47 (m, 4H), 1.45 - 1.12 (m, 7H) ppm。ESI-MS m/z計算值629.2073，實驗值629.9 (M+1) +；滯留時間：3.64分鐘(LC方法C)。 步驟 5 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12,1 ' - 環己烷 ] ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3297
在室溫下，(9 R)-9-苯甲氧基-15-硝基-9,17-雙(三氟甲基)螺[2,11,12,18-四氮雜雙環[12.3.1]十八碳-1(18),5,14,16-四烯-3,1'-環己烷]-10,13-二酮( E/Z混合物) (260 mg，0.3717 mmol)及1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(60 mg，0.5349 mmol)於DCM (3.6 mL)中之溶液用25% 2-氯-1,3-二甲基-4,5-二氫咪唑-1-鎓;氯化物(73 mg，0.4318 mmol)於DCM (2.6 mL)中之溶液處理。咪唑鎓中間物之形成在10 min內完成。蒸發DCM，且將殘餘物溶解於甲苯(8 mL)中。在100℃下攪拌混合物隔夜。深色混合物用水(3 mL)淬滅且用MTBE (3 × 10 mL)萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈粗棕色油狀之(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12,1'-環己烷] ( E/Z混合物) (320 mg，115%，材料為粗物質且含有雜質)。ESI-MS m/z計算值611.1967，實驗值612.2 (M+1) +；滯留時間：4.4分鐘。此材料直接用於隨後步驟中(LC方法BB)。 步驟 6 ： (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,1 ' - 環己烷 ]-6- 醇 ( 化合物 193)
Figure 02_image3299
在室溫下，將鈀/碳(10 mg，0.0094 mmol)添加至粗物質(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12,1'-環己烷] ( E/Z混合物) (40 mg，0.0515 mmol)於甲醇(2 mL)中之棕色脫氣溶液中。向黑色混合物鼓泡通入氮氣，接著向混合物鼓泡通入氫氣(1個大氣壓) 5 min。在氫氣氛圍下，在室溫下攪拌混合物隔夜。接著，黑色懸浮液用氮氣吹掃5 min，且接著經由矽藻土過濾。濾餅用DCM (3 × 10 mL)洗滌。真空濃縮螢光黃色濾液，得到粗黃色固體。將以類似方式製備之第二批粗產物與此批次合併，得到粗物質(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-環己烷]-6-醇(242 mg，0.4071 mmol)，接著其藉由在50 g C 18管柱(5%至85%乙腈/水+ 0.02% HCl)上逆相層析來純化，得到呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-環己烷]-6-醇(162 mg，79%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.54 (s, 1H), 3.10 - 2.89 (m, 1H), 2.46 - 2.28 (m, 2H), 2.18 - 2.05 (m, 1H), 1.94 - 1.84 (m, 1H), 1.83 - 1.44 (m, 13H), 1.44 - 1.33 (m, 1H), 1.30 - 1.17 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -65.27 (s, 3F), -80.95 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值493.1912，實驗值494.0 (M+1) +；滯留時間：3.77分鐘(LC方法C)。 實例 107 ：製備 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇 ( 鏡像異構物 1 ， 順式二醇 ) ( 化合物 194) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇 ( 鏡像異構物 2 ， 順式二醇 ) ( 化合物 195)
Figure 02_image3301
步驟 1 ： 3- 三級丁 氧基 -2- 羥基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯酸乙酯 ( 順式 二醇 )
Figure 02_image3303
向火焰乾燥的燒瓶中饋入2-烯丙基氧基-2-甲基丙烷(359 mg，2.7982 mmol)、THF (6.5 mL)及TMEDA (286.75 mg，0.37 mL，2.4676 mmol)。接著，使燒瓶在乾冰-丙酮浴中冷卻，且用二級丁基鋰之環己烷溶液(1.76 mL，1.4 M，2.464 mmol)逐滴處理。在45分鐘之後，添加三甲基鋁(1.23 mL，2 M庚烷溶液，2.46 mmol)，且另外攪拌反應物45分鐘。添加3,3,3-三氟-2-側氧基-丙酸乙酯(333.58 mg，0.26 mL，1.9612 mmol)，且在冷浴中另外攪拌反應物4小時。反應物用1 N HCl水溶液(約40 mL)淬滅，且在室溫下劇烈攪拌幾分鐘。混合物用二乙醚(1 × 40 mL，2 × 20 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(2 × 20 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由自0%至20%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈無色油狀且呈主要外消旋 順式異構物之3-三級丁氧基-2-羥基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯( 順式二醇) (341 mg，57%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 5.87 (ddd, J =17.6, 10.0, 8.1 Hz, 1H), 5.31 - 5.20 (m, 2H), 4.55 (d, J =8.1 Hz, 1H), 4.38 - 4.23 (m, 2H), 3.85 (s, 1H), 1.33 (t, J =7.2 Hz, 3H), 1.23 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -73.35 (s, 3F) ppm. 此產物混雜有~ 6.5%之外消旋反式二醇異構物。 步驟 2 ： 2- 苯甲氧基 -3- 三級丁 氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯酸乙酯 ( 順式 二醇 )
Figure 02_image3305
使3-三級丁氧基-2-羥基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯( 順式二醇) (3.24 g，11.398 mmol)於DMF (50 mL)中之溶液在冰浴中冷卻，且用氫化鈉(563 mg，60% w/w於礦物油中，14.076 mmol)處理。在40分鐘之後，添加溴甲基苯(2.6459 g，1.84 mL，15.47 mmol)，且使反應物逐漸升溫至室溫且攪拌隔夜。向反應混合物中添加水(450 mL)，且水層用MTBE (4 × 150 mL)萃取。經合併之有機層用水(2 × 150 mL)、鹽水(150 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由自0%至20%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析(220 g管柱)純化，得到呈無色油狀之2-苯甲氧基-3-三級丁氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯( 順式二醇) (3.86 g，83%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.46 - 7.41 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 1H), 5.98 (ddd, J =17.9, 9.3, 8.6 Hz, 1H), 5.27 - 5.22 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.92 - 4.85 (m, 1H), 4.79 - 4.73 (m, 1H), 4.59 (d, J =8.1 Hz, 1H), 4.28 (q, J =7.1 Hz, 2H), 1.32 (t, J =7.1 Hz, 3H), 1.20 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -65.50 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值374.1705，實驗值397.2 (M+Na) +；滯留時間：2.45分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 2- 苯甲氧基 -3- 三級丁 氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯酸 ( 順式 二醇 )
Figure 02_image3307
將氫氧化鈉(1.13 g，28.252 mmol)於水(10 mL)中之溶液添加至2-苯甲氧基-3-三級丁氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯( 順式二醇) (3.4 g，8.6908 mmol)於甲醇(30 mL)中之溶液中，且在70℃下攪拌混合物4天。將反應混合物冷卻至室溫且減壓濃縮以移除大部分甲醇。添加水(100 mL)，且用1 N HCl水溶液酸化至pH = 2。水層用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色油狀之2-苯甲氧基-3-三級丁氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸( 順式二醇) (3.29 g，97%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 14.11 (br. s., 1H), 7.45 - 7.26 (m, 5H), 5.86 (ddd, J =17.6, 10.0, 8.1 Hz, 1H), 5.34 - 5.20 (m, 2H), 4.88 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.67 - 4.56 (m, 2H), 1.15 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -64.77 (s, 3F) ppm. 滯留時間：2.15分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： 2- 苯甲氧基 -3- 三級丁 氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯肼 ( 順式 二醇 )
Figure 02_image3309
2-苯甲氧基-3-三級丁氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸( 順式二醇) (3.29 g，8.4354 mmol)及三乙胺(2.5410 g，3.5 mL，25.111 mmol)於DMF (50 mL)中之溶液用HATU (6.46 g，16.99 mmol)處理，且在室溫下攪拌混合物20分鐘。在冰浴中冷卻，且添加水合肼(6.708 g，10 mL，87.099 mmol)。在約10分鐘之後，移除冰浴，且在室溫下攪拌反應物約18小時。向反應混合物中添加水(450 mL)，且水層用乙酸乙酯(4 × 150 mL)萃取。經合併之有機層用水(2 × 250 mL)、鹽水(200 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由自0%至50%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析(220 g管柱)純化，得到呈無色油狀之2-苯甲氧基-3 -三級丁氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼( 順式二醇) (2.836 g，91%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 9.08 (br. s., 1H), 7.45 - 7.25 (m, 5H), 5.81 (ddd, J =17.4, 10.5, 7.1 Hz, 1H), 5.27 (d, J =17.1 Hz, 1H), 5.21 (d, J =10.5 Hz, 1H), 5.11 - 4.99 (m, 2H), 4.90 (d, J =7.3 Hz, 1H), 4.36 (d, J =4.4 Hz, 2H), 1.18 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -67.28 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值360.1661，實驗值305.1 (M-55) +；滯留時間：2.13分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： N ' -[2- 苯甲氧基 -3- 三級丁 氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ]-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼 ( 順式 二醇 )
Figure 02_image3311
使6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(775 mg，2.2316 mmol)及2-苯甲氧基-3-三級丁氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼( 順式二醇) (750 mg，2.025 mmol)於DMF (15 mL)中之溶液在冰浴中冷卻，且依次用HATU (933 mg，2.4538 mmol)及DIPEA (534.24 mg，0.72 mL，4.1336 mmol)處理。在5分鐘之後，移除冰浴，且在室溫下攪拌反應物隔夜。向反應混合物中添加水(100 mL)，且水層用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層用水(2 × 50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由自0%至20%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黏稠琥珀色油狀之 N'-[2-苯甲氧基-3-三級丁氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼( 順式二醇) (1.136 g，81%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 9.61 (d, J =6.6 Hz, 1H), 8.89 (d, J =6.1 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.49 - 7.31 (m, 5H), 6.02 - 5.88 (m, 1H), 5.85 - 5.70 (m, 1H), 5.50 - 5.29 (m, 3H), 5.27 - 5.12 (m, 2H), 5.09 - 4.91 (m, 3H), 2.13 - 1.93 (m, 4H), 1.56 (s, 3H), 1.52 (s, 3H), 1.27 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -64.51 (s, 3F), -68.75 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值689.2648，實驗值634.2 (M-55) +；滯留時間：2.59分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： 6-[5-[1- 苯甲氧基 -2- 三級丁 氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺 ( 順式 二醇 )
Figure 02_image3313
將 N'-2-苯甲氧基-3-三級丁氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼( 順式二醇) (335 mg，0.4858 mmol)及DIPEA (222.60 mg，0.3 mL，1.7223 mmol)於乙腈(8 mL)中之溶液加熱至60℃，接著添加 對甲苯磺醯氯(106 mg，0.556 mmol)。在60℃下攪拌所得混合物90分鐘。將反應混合物冷卻，且濃縮溶液至1/4體積，且用碳酸氫鈉飽和水溶液(5 mL)淬滅，且接著用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取。分離有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由自0%至20%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈淡黃色油狀之6-[5-[1-苯甲氧基-2-三級丁氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺( 順式二醇) (312 mg，96%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.52 (s, 1H), 7.49 - 7.28 (m, 5H), 6.02 (ddd, J =17.5, 9.7, 8.1 Hz, 1H), 5.83 - 5.67 (m, 1H), 5.57 (br. s., 1H), 5.36 - 5.18 (m, 2H), 5.08 - 4.67 (m, 5H), 2.14 - 1.89 (m, 4H), 1.56 (s, 3H), 1.49 (s, 3H), 1.11 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -64.58 (s, 3F), -66.62 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值671.2542，實驗值616.2 (M-55) +；滯留時間：4.53分鐘(LC方法BB)。 步驟 7 ： 4- 苯甲氧基 -4-[5-[6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5,5,5- 三氟 - 戊 -1- 烯 -3- 醇 ( 順式 二醇 )
Figure 02_image3315
在室溫下攪拌6-[5-[1-苯甲氧基-2-三級丁氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺( 順式二醇) (1.4 g，2.0845 mmol)於二氯甲烷(14 mL)及TFA (10.360 g，7 mL，90.859 mmol)中之溶液1小時。減壓濃縮反應物，且殘餘物用二氯甲烷(50 mL)稀釋且用碳酸氫鈉飽和水溶液(25 mL)、鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由自0%至30%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色油狀之4-苯甲氧基-4-[5-[6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5,5,5-三氟-戊-1-烯-3-醇( 順式二醇) (1.05 g，82%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.58 (s, 1H), 7.55 - 7.21 (m, 5H), 6.24 (s, 1H), 6.00 (ddd, J =17.1, 10.3, 6.6 Hz, 1H), 5.75 - 5.65 (m, 1H), 5.33 - 5.17 (m, 2H), 4.99 - 4.74 (m, 5H), 4.52 - 4.10 (m, 1H), 2.05 - 1.82 (m, 4H), 1.43 (s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.79 (s, 3F), -67.37 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值615.1916，實驗值616.03 (M+1) +；滯留時間：4.07分鐘(LC方法BB)。 步驟 8 ： 6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 -7- 醇 ( E/Z 烯烴混合物， 順式二醇 )
Figure 02_image3317
在250 mL烘箱乾燥的圓底燒瓶中，在氮氣氛圍下，將4-苯甲氧基-4-[5-[6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5,5,5-三氟-戊-1-烯-3-醇( 順式二醇) (150 mg，0.2437 mmol)之脫氣溶液加熱至70℃。接著，歷經15分鐘分兩份添加Zhan催化劑-1B (30 mg，0.0409 mmol)。將所得混合物加熱至70℃且攪拌4小時。將混合物冷卻且減壓濃縮。殘餘物藉由自5%至90%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)溶離之在50 g C 18管柱上逆相層析來純化，得到呈灰白色固體狀之6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-7-醇( E/Z烯烴混合物， 順式二醇) (70 mg，49%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.55 (s, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.40 - 7.28 (m, 3H), 6.59 (s, 1H), 6.03 (d, J =7.3 Hz, 1H), 5.77 - 5.57 (m, 2H), 4.85 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.71 (d, J =11.0 Hz, 1H), 4.42 (t, J =7.5 Hz, 1H), 2.39 - 2.25 (m, 1H), 2.14 - 1.95 (m, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.39 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.43 (s, 3F), -66.71 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值587.1603，實驗值588.2 (M+1) +；滯留時間：3.78分鐘(LC方法BB)。 步驟 9 ： 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇 ( 鏡像異構物 1 ， 順式二醇 ) ( 化合物 194) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇 ( 鏡像異構物 2 ， 順式二醇 ) ( 化合物 195)
Figure 02_image3319
6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-7-醇( E/Z烯烴混合物， 順式二醇) (46 mg，0.0776 mmol)於甲醇(2.5 mL)中之溶液依序在氮氣氛圍下及真空下吹掃三次。添加10 wt%鈀/碳(45 mg，0.0211 mmol)，接著依序在氫氣氛圍下及真空下吹掃兩次，且在室溫下在氫氣氛圍下攪拌反應物17小時。在氮氣氛圍下吹掃反應物，且經由矽藻土墊過濾混合物且用甲醇洗滌。減壓濃縮混合物，且殘餘物藉由自0%至40%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析(24 g管柱)純化，得到27 mg黃色固體。藉由SFC (樣本以18 mg/mL溶解於甲醇中)純化，其使用Phenomenex Lux i-纖維素(250 × 21.2 mm，5 μM管柱)，一10% MeOH (0.1%二乙胺)/90% CO 2之梯度，流速為75 mL/min，得到兩種鏡像異構物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈濃郁黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,7-二醇(鏡像異構物1， 順式二醇) (10.2 mg，27%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 5.91 (s, 2H), 5.37 (d, J =8.6 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.37 (t, J =9.9 Hz, 1H), 1.84 - 1.62 (m, 2H), 1.50 - 1.10 (m, 12H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.31 (s, 3F), -73.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：3.47分鐘(LC方法BB)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈濃郁黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,7-二醇(鏡像異構物2， 順式二醇) (10.2 mg，27%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 5.91 (br. s., 2H), 5.37 (d, J =6.4 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.44 - 4.31 (m, 1H), 1.85 - 1.61 (m, 2H), 1.49 - 1.11 (m, 12H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.32 (s, 3F), -73.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：3.47分鐘(LC方法BB)。 實例 108 ：製備 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-8,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 196)
Figure 02_image3321
步驟 1 ： N -(4- 羥基 -1,1- 二甲基 - 丁基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3323
將4-胺基-4-甲基-戊-1-醇(8 g，64.853 mmol)溶解於THF (160 mL)中，且將碳酸氫鈉(20 g，238.08 mmol)添加至其中，隨後添加二碳酸二三級丁酯(21.5 g，22.632 mL，98.512 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 h。接著，反應物用水(300 mL)及EtOAc (400 ml)稀釋。水層用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(200 ml)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%丙酮/己烷之矽膠層析純化，得到呈白色蠟狀之 N-(4-羥基-1,1-二甲基-丁基)胺基甲酸三級丁酯(13.7 g，92%)。 1H NMR(500 MHz, 氯仿-d) δ 4.47 (s, 1H), 3.62 (t, J =6.5 Hz, 2H), 1.82 (s, 1H), 1.75 – 1.65 (m, 2H), 1.61 – 1.48 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.24 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值217.1678，實驗值218.4 (M+1) +；滯留時間：2.26分鐘(LC方法G)。 步驟 2 ： 2-( 三氟甲基 ) 環氧乙烷 -2- 甲酸苯甲酯
Figure 02_image3325
在0℃下，向2-(三氟甲基)丙-2-烯酸苯甲酯(25.5 g，110.78 mmol)於二噁烷(550 mL)及水(110 mL)中之溶液中添加碳酸氫鈉(47 g，559.48 mmol)。歷經80 min，在劇烈攪拌下，向此混合物中逐份添加過硫酸氫鉀(68.5 g，222.85 mmol)。在0℃下額外攪拌反應物20 min，接著升溫至室溫，且另外攪拌1.5 h。接著，反應物用EtOAc (500 mL)及水(500 mL)稀釋，用EtOAc (2 × 300 mL)萃取。合併有機層，接著用鹽水(300 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之2-(三氟甲基)環氧乙烷-2-甲酸苯甲酯(24 g，81%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.43 – 7.32 (m, 5H), 5.49-5.10 (m, 2H), 3.28 – 3.24 (m, 1H), 3.23 – 3.18 (m, 1H) ppm. 滯留時間：3.1分鐘(LC方法G)。 步驟 3 ： 2-[[4-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-4- 甲基 - 戊氧基 ] 甲基 ]-3,3,3- 三氟 -2- 羥基 - 丙酸苯甲酯
Figure 02_image3327
向2-(三氟甲基)環氧乙烷-2-甲酸苯甲酯(5 g，19.904 mmol)於無水乙腈(21.5 mL)中之溶液中添加 N-(4-羥基-1,1-二甲基-丁基)胺基甲酸三級丁酯(5.05 g，22.077 mmol)及過氯酸鎂(2.22 g，9.946 mmol)，且在75℃下加熱混合物21 h。將反應物冷卻至室溫，且用EtOAc (50 mL)及水(25 mL)稀釋。水層用EtOAc (3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%丙酮/己烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之2-[[4-(三級丁氧基羰基胺基)-4-甲基-戊氧基]甲基]-3,3,3-三氟-2-羥基-丙酸苯甲酯(1.5 g，16%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.48 – 7.30 (m, 5H), 5.51 – 4.90 (m, 2H), 4.44 (br. s, 1H), 4.05 (br. s, 1H), 3.95 (d, J =9.8 Hz, 1H), 3.72 (d, J =9.8 Hz, 1H), 3.56 – 3.44 (m, 1H), 3.43 – 3.34 (m, 1H), 1.61 – 1.53 (m, 2H), 1.52 – 1.45 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.22 (d, J =3.3 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值463.21817，實驗值464.2 (M+1) +；滯留時間：3.81分鐘(LC方法G)。 步驟 4 ： 2- 苯甲氧基 -2-[[4-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-4- 甲基 - 戊氧基 ] 甲基 ]-3,3,3- 三氟 - 丙酸苯甲酯
Figure 02_image3329
在氬氣下，向烘箱乾燥的燒瓶中饋入NaH (730 mg，60% w/w，18.252 mmol)，用己烷(3 × 10 mL)洗滌，且添加DMF (8 mL)。將懸浮液冷卻至0℃，逐滴添加含2-[[4-(三級丁氧基羰基胺基)-4-甲基-戊氧基]甲基]-3,3,3-三氟-2-羥基-丙酸苯甲酯(3.1 g，6.0196 mmol)之DMF (2.5 mL) (歷經2 min)。在相同溫度下攪拌反應物30分鐘，接著添加溴甲基苯(2.3824 g，1.7 mL，13.651 mmol)及TBAI (241 mg，0.6525 mmol)。在0℃下攪拌反應物7 h，接著緩慢升溫至室溫且攪拌13 h。反應物在0℃下用飽和氯化銨(25 mL)淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(80 mL)洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%二乙醚/己烷之矽膠層析(120 g管柱)純化，得到呈無色油狀之2-苯甲氧基-2-[[4-(三級丁氧基羰基胺基)-4-甲基-戊氧基]甲基]-3,3,3-三氟-丙酸苯甲酯(1.7 g，49%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.38 – 7.27 (m, 10H), 5.31 (s, 2H), 4.80 (s, 2H), 4.35 (s, 1H), 4.01 (d, J =10.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J =10.5 Hz, 1H), 3.50 – 3.26 (m, 2H), 1.61 – 1.55 (m, 2H), 1.52 – 1.44 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.21 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值553.26514，實驗值554.5 (M+1) +；滯留時間：3.64分鐘(LC方法H)。 步驟 5 ： 2- 苯甲氧基 -2-[[4-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-4- 甲基 - 戊氧基 ] 甲基 ]-3,3,3- 三氟 - 丙酸
Figure 02_image3331
向2-苯甲氧基-2-[[4-(三級丁氧基羰基胺基)-4-甲基-戊氧基]甲基]-3,3,3-三氟-丙酸苯甲酯(2.4 g，4.3352 mmol)於THF (7.2 mL)中之溶液中添加LiOH (913 mg，21.757 mmol)，隨後添加H 2O (2.4 mL)及MeOH (2.4 mL)，且在室溫下攪拌反應物5 h。混合物用TBME (50 mL)稀釋，用水(25 mL)、HCl (26 mL，1 M，26 mmol)、水(50 mL)、鹽水(2 × 50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈淡黃色油狀之2-苯甲氧基-2-[[4-(三級丁氧基羰基胺基)-4-甲基-戊氧基]甲基]-3,3,3-三氟-丙酸(2.115 g，100%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.43 – 7.29 (m, 5H), 4.87 (s, 2H), 4.71 (s, 1H), 4.05 (d, J =10.3 Hz, 1H), 3.97 (d, J =9.4 Hz, 1H), 3.52 (dd, J =11.2, 5.5 Hz, 2H), 1.75 – 1.50 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.24 (s, 6H) ppm. 在質子NMR場中未觀測到酸性質子。ESI-MS m/z計算值463.21817，實驗值464.5 (M+1) +；滯留時間：6.37分鐘(LC方法DD)。 步驟 6 ： N -[4-[2- 苯甲氧基 -3,3,3- 三氟 -2-( 肼羰基 ) 丙氧基 ]-1,1- 二甲基 - 丁基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3333
在室溫下，向2-苯甲氧基-2-[[4-(三級丁氧基羰基胺基)-4-甲基-戊氧基]甲基]-3,3,3-三氟-丙酸(2 g，4.0994 mmol)於DMF (17.8 mL)中之溶液中添加HATU (2.34 g，6.1542 mmol)及Et 3N (1.2342 g，1.7 mL，12.197 mmol)，且攪拌所得黃色溶液42 min，冷卻至0℃，接著歷經10 min逐滴添加肼(3.0630 g，3 mL，95.584 mmol)。在0℃下攪拌反應混合物45 min且升溫至室溫。反應物用NH 4Cl溶液(40 mL)淬滅，用EtOAc (3 × 40 mL)萃取，用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用0%至30% EtOAc/己烷之梯度進行45分鐘之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈無色油狀之 N-[4-[2-苯甲氧基-3,3,3-三氟-2-(肼羰基)丙氧基]-1,1-二甲基-丁基]胺基甲酸三級丁酯(564.2 mg，27%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.99 (s, 1H), 7.43 – 7.31 (m, 5H), 4.88 – 4.79 (m, 2H), 4.42 (s, 1H), 4.17 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.08 (d, J =10.7 Hz, 1H), 3.92 (d, J =4.5 Hz, 2H), 3.56 – 3.49 (m, 2H), 1.70 (s,1H), 1.66 – 1.61 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.24 (d, J =4.8 Hz, 6H) ppm. 在 1H NMR中未觀測到兩個可交換質子。ESI-MS m/z計算值477.24506，實驗值478.6 (M+1) +；滯留時間：5.5分鐘(LC方法DD)。 步驟 7 ： N -[4-[2- 苯甲氧基 -3,3,3- 三氟 -2-[[[6- 羥基 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 羰基 ] 胺基 ] 胺甲醯基 ] 丙氧基 ]-1,1- 二甲基 - 丁基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3335
向 N-[4-[2-苯甲氧基-3,3,3-三氟-2-(肼羰基)丙氧基]-1,1-二甲基-丁基]胺基甲酸三級丁酯(564.2 mg，1.1815 mmol)於EtOAc (5 mL)中之溶液中添加吡啶(547.68 mg，0.56 mL，6.9239 mmol)、6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(313 mg，1.2416 mmol)及T 3P (1.25 g，1.9643 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物6 h。反應物用NH 4Cl (40 mL)淬滅且用EtOAc (3 × 40 mL)萃取。經合併之有機層用水(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至100% EtOAc/己烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈黃色玻璃狀材料之 N-[4-[2-苯甲氧基-3,3,3-三氟-2-[[[6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-羰基]胺基]胺甲醯基]丙氧基]-1,1-二甲基-丁基]胺基甲酸三級丁酯(300 mg，34%)。ESI-MS m/z計算值711.2339，實驗值712.6 (M+1) +；滯留時間：6.87分鐘(LC方法DD)。 步驟 8 ： 4- 甲基苯磺酸 [6-[5-[1- 苯甲氧基 -1-[[4-( 三級丁 氧基羰基胺基 )-4- 甲基 - 戊氧基 ] 甲基 ]-2,2,2- 三氟 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶酯 ]
Figure 02_image3337
向 N-[4-[2-苯甲氧基-3,3,3-三氟-2-[[[6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-羰基]胺基]胺甲醯基]丙氧基]-1,1-二甲基-丁基]胺基甲酸三級丁酯(142 mg，0.1995 mmol)於CH 3CN (2.15 mL)中之溶液中添加DIPEA (133.56 mg，0.180 mL，1.0334 mmol)，接著添加 p-TsCl (115 mg，0.6032 mmol)，且在室溫下攪拌混合物50 h。反應混合物用NH 4Cl溶液(15 mL)淬滅且用EtOAc (3 × 30 mL)萃取。經合併之有機層用NaHCO 3(20 mL)、鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30% EtOAc/己烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈淡黃色固體狀之4-甲基苯磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-[[4-(三級丁氧基羰基胺基)-4-甲基-戊氧基]甲基]-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (124 mg，70%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 8.60 (s, 1H), 8.08 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.41 – 7.27 (m, 7H), 4.88 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.82 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.35 – 4.28 (m, 2H), 3.57 (t, J =6.2 Hz, 2H), 2.39(s, 3H), 1.66 – 1.60 (m, 2H), 1.59 – 1.52 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.20 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值847.2322，實驗值848.6 (M+1) +；滯留時間：8.48分鐘(LC方法DD)。 步驟 9 ： 4- 甲基苯磺酸 [6-[5-[1-[(4- 胺基 -4- 甲基 - 戊氧基 ) 甲基 ]-1- 苯甲氧基 -2,2,2- 三氟 - 乙基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶酯 ]
Figure 02_image3339
向4-甲基苯磺酸[6-[5-[1-苯甲氧基-1-[[4-(三級丁氧基羰基胺基)-4-甲基-戊氧基]甲基]-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (25 mg，0.0295 mmol)於DCM中之溶液中添加TFA (740 mg，0.5 mL，6.4899 mmol)，且在室溫下攪拌混合物30 min。反應混合物用DCM (20 mL)稀釋，用NaHCO 3(20 mL)淬滅，用鹽水(20 mL)洗滌，經K 2CO 3乾燥且過濾，得到4-甲基苯磺酸[6-[5-[1-[(4-胺基-4-甲基-戊氧基)甲基]-1-苯甲氧基-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (22 mg，99%)，其直接用於下一反應中。ESI-MS m/z計算值747.1798，實驗值748.5 (M+1) +；滯留時間：6.05分鐘(LC方法DD)。 步驟 10 ： 6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-8,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯
Figure 02_image3341
向4-甲基苯磺酸[6-[5-[1-[(4-胺基-4-甲基-戊氧基)甲基]-1-苯甲氧基-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶酯] (22 mg，0.0294 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液中添加DIPEA (74.200 mg，0.100 mL，0.5741 mmol)，且攪拌混合物1 h。真空移除揮發物，且殘餘物藉由使用梯度為0%至20% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到呈琥珀色油狀之6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-8,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯(8 mg，45%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 8.52 (d, J =0.7 Hz, 1H), 7.42 – 7.25 (m, 5H), 5.56 (s, 1H), 4.94 (d, J =11.3 Hz, 1H), 4.82 (d, J =11.3 Hz, 1H), 4.16 (d, J =10.1 Hz, 1H), 4.08 (dd, J =10.1, 1.2 Hz, 1H), 3.62 –3.54 (m, 1H), 3.45 – 3.36 (m, 1H), 2.64 – 2.54 (m, 1H), 2.37 – 2.27 (m, 1H), 1.64 – 1.49 (m, 2H), 1.40 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值575.16034，實驗值576.4 (M+1) +；滯留時間：7.66分鐘(LC方法DD)。 步驟 11 ： 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-8,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 196)
Figure 02_image3343
向在氮氣下之6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-8,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯(10 mg，0.0174 mmol)於EtOH (3.1 mL)中之溶液中添加Pd/C (7 mg，10% w/w，0.0066 mmol)，接著用氫氣1 min吹掃，且在室溫下在1個大氣壓氫氣下攪拌5.5 h。反應混合物用氮氣回填且用EtOH (20 mL)稀釋，經由矽藻土墊過濾且用EtOH (3 × 20 mL)沖洗，且濃縮濾液。殘餘物藉由逆相C 18(15.5 g管柱)來純化，其使用0%至95%乙腈/水(0.1%甲酸)之移動相，得到呈黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-8,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(7 mg，76%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.47 (s, 1H), 4.08 (d, J =9.5 Hz, 1H), 3.87 (d, J =9.5 Hz, 1H), 3.75 - 3.64 (m, 1H), 3.61 - 3.49 (m, 1H), 3.07 - 2.90 (m, 1H), 2.46 - 2.31 (m, 1H), 1.83 - 1.60 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 1.34 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -65.22 (s, 3F), -78.99 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值455.1392，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：3.19分鐘(LC方法C)。 實例 109 ：製備 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-8,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 197) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-8,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 198)
Figure 02_image3345
步驟 1 ： 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-8,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 197) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-8,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 198)
Figure 02_image3347
外消旋17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-8,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(10 mg，0.02196 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Chiral Technologies銷售之AS-H管柱(250 × 10 mm，5 μm粒徑)，且用8% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2溶離，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-8,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (3.3 mg，65%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.27 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.43 (s, 1H), 4.11 (d, J =9.4 Hz, 2H), 3.85 (dd, J =9.5, 1.2 Hz, 1H), 3.67 (ddd, J =9.3, 6.0, 3.2 Hz, 1H), 3.59 (td, J =9.6, 9.1, 2.8 Hz, 1H), 3.03 (ddd, J =13.0, 10.6, 4.6 Hz, 1H), 2.27 (ddd, J =13.3, 10.5, 6.1 Hz, 1H), 1.83 - 1.71 (m, 1H), 1.67 (dtd, J =11.1, 6.0, 2.7 Hz, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.85分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-8,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (4.1 mg，81%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.26 (s, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.43 (s, 1H), 4.11 (d, J =9.5 Hz, 2H), 3.85 (dd, J =9.5, 1.4 Hz, 1H), 3.67 (ddd, J =9.3, 6.1, 3.2 Hz, 1H), 3.59 (td, J =9.4, 9.0, 2.8 Hz, 1H), 3.03 (ddd, J =13.2, 10.7, 4.6 Hz, 1H), 2.27 (ddd, J =13.2, 10.5, 6.1 Hz, 1H), 1.74 (ddd, J =10.4, 6.7, 3.3 Hz, 1H), 1.66 (ddd, J =11.4, 6.1, 3.0 Hz, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.85分鐘(LC方法A)。 實例 110 ：製備 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 199) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 200)
Figure 02_image3349
步驟 1 ： 2-( 二苯甲基胺基 )-2- 甲基 - 丙 -1- 醇
Figure 02_image3351
向2-胺基-2-甲基-丙-1-醇(20.548 g，22 mL，230.52 mmol)於丙酮(250 mL)及水(50 mL)之混合物中之溶液中添加碳酸鉀(64 g，463.08 mmol)，隨後添加溴甲基苯(79.200 g，55 mL，463.07 mmol)，且在回流下加熱反應物72 h。將反應物冷卻至室溫且真空濃縮。將殘餘物分配於二氯甲烷(400 mL)與水(500 mL)之間，收集有機層，用水(500 mL)、鹽水(500 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至5%甲醇/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到呈白色固體狀之2-(二苯甲基胺基)-2-甲基-丙-1-醇(34 g，55%)； 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.26 (d, J =6.8 Hz, 4H), 7.17 (t, J =7.5 Hz, 4H), 7.11 - 7.03 (m, 2H), 4.43 (t, J =5.4 Hz, 1H), 3.75 (s, 4H), 3.37 (d, J =5.4 Hz, 2H), 1.03 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值269.178，實驗值270.2 (M+1) +；滯留時間：1.51分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： N , N- 二苯甲基 -1-[3-[ 三級 丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基丙氧基 ]-2- 甲基 - 丙 -2- 胺
Figure 02_image3353
向在0℃下之2-(二苯甲基胺基)-2-甲基-丙-1-醇(20 g，74.244 mmol)於二甲基甲醯胺(105 mL)中之溶液中逐份添加氫化鈉(60% w/w) (4.1 g，102.51 mmol)。在0℃下攪拌30 min之後，將3-溴丙氧基-三級丁基-二甲基-矽烷(24.046 g，22 mL，94.949 mmol)添加至以上溶液中。為了稀釋混合物，添加二甲基甲醯胺(21 mL)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，且用飽和氯化銨(200 mL)淬滅。混合物用乙酸乙酯(2 × 200 mL)萃取，接著經合併之有機物用水(2 × 200 mL)及鹽水(200 mL)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。粗產物藉由使用梯度為0%至15%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之 N, N-二苯甲基-1-[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基丙氧基]-2-甲基-丙-2-胺(16.4 g，50%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.25 (d, J =7.1 Hz, 4H), 7.16 (t, J =7.5 Hz, 4H), 7.11 - 6.98 (m, 2H), 3.76 (s, 4H), 3.68 (t, J =6.4 Hz, 2H), 3.38 (t, J =6.1 Hz, 2H), 3.34 (s, 2H), 1.69 (五重峰, J =6.2 Hz, 2H), 1.06 (s, 6H), 0.86 (s, 9H), 0.03 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值441.3063，實驗值442.3 (M+1) +；滯留時間：2.17分鐘(LC方法E)。 步驟 3 ： 3-[2-( 二苯甲基胺基 )-2- 甲基 - 丙氧基 ] 丙 -1- 醇
Figure 02_image3355
在0℃下，在氮氣下，向 N, N-二苯甲基-1-[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基丙氧基]-2-甲基-丙-2-胺(16.3 g，36.901 mmol)於無水四氫呋喃(163 mL)中之溶液中添加氟化四丁銨(1.0 M於THF中) (60 mL，1 M，60 mmol)。在0℃下攪拌1 h之後，移除冷浴。在室溫下攪拌混合物隔夜，接著添加氯化銨飽和水溶液(100 mL)以淬滅反應物。在分離之後，水相用二乙醚(2 × 75 mL)萃取。經合併之有機溶液用鹽水(100 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，且殘餘物藉由使用梯度為5%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之3-[2-(二苯甲基胺基)-2-甲基-丙氧基]丙-1-醇(8.25 g，68%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.26 (d, J =7.1 Hz, 4H), 7.17 (t, J =7.5 Hz, 4H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 4.38 (t, J =5.0 Hz, 1H), 3.76 (s, 4H), 3.53 - 3.45 (m, 2H), 3.38 (t, J =6.2 Hz, 2H), 3.34 (s, 2H), 1.66 (五重峰, J =6.4 Hz, 2H), 1.06 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值327.2198，實驗值328.2 (M+1) +；滯留時間：1.55分鐘(LC方法E)。 步驟 4 ： N , N- 二苯甲基 -1-(3- 溴丙氧基 )-2- 甲基 - 丙 -2- 胺
Figure 02_image3357
向在0℃下之3-[2-(二苯甲基胺基)-2-甲基-丙氧基]丙-1-醇(8.2 g，25.041 mmol)於無水二氯甲烷(250 mL)中之攪拌溶液中依次添加四溴化碳(10 g，30.154 mmol)及三苯基膦(9 g，34.314 mmol)。在0℃下攪拌反應物3 h，且接著在室溫下攪拌隔夜。減壓蒸發混合物，且接著藉由使用梯度為0%至10%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之 N, N-二苯甲基-1-(3-溴丙氧基)-2-甲基-丙-2-胺(6.8 g，70%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.26 (d, J =7.1 Hz, 4H), 7.17 (t, J =7.3 Hz, 4H), 7.11 - 7.01 (m, 2H), 3.76 (s, 4H), 3.59 (t, J =6.5 Hz, 2H), 3.43 (t, J =5.9 Hz, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.03 (五重峰, J =6.2 Hz, 2H), 1.07 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值389.1354，實驗值390.2 (M+1) +；滯留時間：1.79分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： 5-[2-( 二苯甲基胺基 )-2- 甲基 - 丙氧基 ]-2- 羥基 -2-( 三氟甲基 ) 戊酸乙酯
Figure 02_image3359
向在氮氣下之配備有回流冷凝器之乾燥的5 mL雙頸燒瓶中饋入鎂(640 mg，26.332 mmol)及碘(166 mg，0.654 mmol)，且在室溫下純攪拌10分鐘。接著，逐滴添加含 N, N-二苯甲基-1-(3-溴丙氧基)-2-甲基-丙-2-胺(5.1 g，13.065 mmol)之二乙醚(7.5 mL)。在40℃下加熱混合物10分鐘且接著在30℃下加熱1小時。將所得混合物冷卻至室溫，接著添加二乙醚(7.5 mL)。在-78℃下，將混合物逐滴添加至3,3,3-三氟-2-側氧基-丙酸乙酯(2.4377 g，1.9 mL，14.332 mmol)於四氫呋喃(51 mL)中之冷卻溶液中。在-78℃下攪拌混合物10分鐘。移除乾冰-丙酮冷卻浴。將反應混合物緩慢升溫至室溫且攪拌1 h。將反應混合物冷卻至0℃，且接著其用飽和氯化銨溶液(250 mL)淬滅。所得混合物用二乙醚(2 × 250 mL)萃取。經合併之有機相用鹽水(250 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。粗殘餘物藉由使用梯度為0%至10%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之5-[2-(二苯甲基胺基)-2-甲基-丙氧基]-2-羥基-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(3.23 g，51%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.26 (d, J =7.3 Hz, 4H), 7.16 (t, J =7.5 Hz, 4H), 7.11 - 6.99 (m, 2H), 6.81 (s, 1H), 4.23 (q, J =7.1 Hz, 2H), 3.76 (s, 4H), 3.41 - 3.25 (m, 4H), 2.08 (td, J =12.8, 4.3 Hz, 1H), 1.84 (td, J =12.8, 4.4 Hz, 1H), 1.75 - 1.60 (m, 1H), 1.44 - 1.30 (m, 1H), 1.21 (t, J =7.1 Hz, 3H), 1.05 (s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -76.77 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值481.244，實驗值482.2 (M+1) +；滯留時間：1.83分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： 5-(2- 胺基 -2- 甲基 - 丙氧基 )-2- 羥基 -2-( 三氟甲基 ) 戊酸乙酯
Figure 02_image3361
5-[2-(二苯甲基胺基)-2-甲基-丙氧基]-2-羥基-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(3.4 g，7.0606 mmol)於乙醇(102 mL)中之溶液經氮氣脫氣15分鐘，且接著添加20%氫氧化鈀/碳(500 mg，20% w/w，0.7121 mmol)。向混合物鼓泡通入氮氣10分鐘，且接著向混合物鼓泡通入氫氣15分鐘。在氫氣球下在室溫下攪拌混合物18 h且接著過濾。減壓移除溶劑，得到呈無色黏稠油狀之5-(2-胺基-2-甲基-丙氧基)-2-羥基-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(2.09 g，98%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.43 - 4.29 (m, 2H), 3.54 - 3.42 (m, 2H), 3.16 (s, 2H), 2.72 - 2.20 (m, 2H), 2.20 - 2.04 (m, 2H), 1.96 (ddd, J =13.9, 10.6, 5.3 Hz, 1H), 1.78 (ddt, J =19.3, 11.1, 5.6 Hz, 1H), 1.55 - 1.40 (m, 1H), 1.35 (t, J =7.1 Hz, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.10 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -78.50 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值301.1501，實驗值302.2 (M+1) +；滯留時間：1.44分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： 6-[[2-(4- 乙氧基羰基 -5,5,5- 三氟 -4- 羥基 - 戊氧基 )-1,1- 二甲基 - 乙基 ] 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3363
向6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.8 g，6.3252 mmol)及5-(2-胺基-2-甲基-丙氧基)-2-羥基-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(2.05 g，6.8038 mmol)於乙腈(25 mL)中之室溫攪拌溶液中逐滴添加二異丙基乙胺(4.0810 g，5.5 mL，31.576 mmol)。在70℃下加熱所得混合物3 h。藉由減壓蒸發移除溶劑，接著用乙酸乙酯(100 mL)稀釋，且轉移至具有150 mL水之萃取漏斗。分離各相，且接著水相用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(150 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。粗產物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淺棕色油狀之6-[[2-(4-乙氧基羰基-5,5,5-三氟-4-羥基-戊氧基)-1,1-二甲基-乙基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.15 g，91%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.48 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.22 (q, J =7.1 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.60 - 3.39 (m, 4H), 2.03 - 1.87 (m, 1H), 1.78 - 1.60 (m, 2H), 1.43 (s, 6H), 1.40 - 1.30 (m, 1H), 1.20 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -63.57 (s, 3F), -76.95 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值549.1546，實驗值550.1 (M+1) +；滯留時間：2.29分鐘(LC方法E)。 步驟 8 ： 6-[[2-(4- 苯甲氧基 -4- 乙氧基羰基 -5,5,5- 三氟 - 戊氧基 )-1,1- 二甲基 - 乙基 ] 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3365
向在0℃下之6-[[2-(4-乙氧基羰基-5,5,5-三氟-4-羥基-戊氧基)-1,1-二甲基-乙基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.1 g，5.6423 mmol)於DMF (31 mL)中之溶液中逐份添加呈於礦物油中之60%分散液之氫化鈉(460 mg，11.501 mmol)，在添加期間不允許溫度上升至高於10℃。在冰/冰水浴中攪拌30分鐘之後，逐滴添加溴甲基苯(1.5818 g，1.1 mL，9.2485 mmol)，接著在冰浴中歷經2 h將反應物逐漸升溫至室溫。在0℃下添加呈固體狀之氯化銨(910 mg，17.012 mmol)。攪拌混合物10分鐘，接著添加MTBE/庚烷(3:1，100 mL)，隨後添加水(100 mL)。將混合物轉移至萃取漏斗，用MTBE/庚烷(3:1，100 mL)及水(100 mL)沖洗。分離有機層，且水相用MTBE/庚烷(3:1，2 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用水(150 mL)及鹽水(2 × 100 mL)洗滌，且經無水硫酸鈉乾燥。過濾混合物且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之6-[[2-(4-苯甲氧基-4-乙氧基羰基-5,5,5-三氟-戊氧基)-1,1-二甲基-乙基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.25 g，90%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.47 (s, 1H), 7.44 - 7.26 (m, 5H), 6.45 (s, 1H), 4.70 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.62 - 4.57 (m, 1H), 4.29 (q, J =7.1 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.58 - 3.41 (m, 4H), 2.11 - 1.97 (m, 2H), 1.76 - 1.63 (m, 1H), 1.62 - 1.49 (m, 1H), 1.42 (s, 6H), 1.23 (t, J =7.1 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -63.54 (s, 3F), -70.73 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值639.2015，實驗值640.2 (M+1) +；滯留時間：2.58分鐘(LC方法E)。 步驟 9 ： 2- 苯甲氧基 -5-[2-[[6-( 肼羰基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-2- 甲基 - 丙氧基 ]-2-( 三氟甲基 ) 戊酸乙酯
Figure 02_image3367
將6-[[2-(4-苯甲氧基-4-乙氧基羰基-5,5,5-三氟-戊氧基)-1,1-二甲基-乙基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.2 g，5.0036 mmol)溶解於甲醇(60 mL)中，且接著添加一水合肼(2.0580 g，2 mL，41.110 mmol)。將所得混合物加熱至80℃隔夜。減壓移除溶劑，且接著將混合物溶解於乙酸乙酯(50 mL)中。所得混合物用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈淺棕色黏稠粗油狀之2-苯甲氧基-5-[2-[[6-(肼羰基)-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-2-甲基-丙氧基]-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(3.15 g，98%)。ESI-MS m/z計算值639.2128，實驗值640.2 (M+1) +；滯留時間：2.29分鐘。此材料直接用於隨後步驟中(LC方法E)。 步驟 10 ： 2- 苯甲氧基 -5-[2-[[6-[[ 雙 ( 三級 丁氧基羰基 ) 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-2- 甲基 - 丙氧基 ]-2-( 三氟甲基 ) 戊酸乙酯
Figure 02_image3369
向2-苯甲氧基-5-[2-[[6-(肼羰基)-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-2-甲基-丙氧基]-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(3.1 g，4.8472 mmol)及碳酸三級丁氧基羰基酯三級丁酯(2.65 g，12.142 mmol)於二氯甲烷(110 mL)中之混合物中添加二異丙基乙胺(1.5582 g，2.1 mL，12.056 mmol)，隨後添加4-(二甲基胺基)吡啶(60 mg，0.4911 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物隔夜。將所得混合物溶解於二氯甲烷中，且在減壓下預吸附於矽膠上。藉由使用梯度為0%至15%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈微棕色油狀之2-苯甲氧基-5-[2-[[6-[[雙(三級丁氧基羰基)胺基]胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-2-甲基-丙氧基]-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(2.16 g，53%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.55 (s, 1H), 7.53 - 7.19 (m, 5H), 6.47 (br. s., 1H), 4.75 - 4.67 (m, 1H), 4.64 - 4.54 (m, 1H), 4.28 (q, J =7.1 Hz, 2H), 3.58 - 3.39 (m, 4H), 2.13 - 1.97 (m, 2H), 1.76 - 1.52 (m, 3H), 1.48 (s, 18H), 1.41 (s, 6H), 1.24 - 1.21 (m, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -63.15 (br. s., 3F), -70.64至-70.77 (m, 3F) ppm; ESI-MS m/z計算值839.3176，實驗值784.3 (M - 55) +；滯留時間：4.62分鐘(LC方法BB)。 步驟 11 ： 2- 苯甲氧基 -5-[2-[[6-[( 三級 丁氧基羰基胺基 ) 胺甲醯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-2- 甲基 - 丙氧基 ]-2-( 三氟甲基 ) 戊酸
Figure 02_image3371
將氫氧化鈉(300 mg，7.5005 mmol)於水(10 mL)中之溶液添加至2-苯甲氧基-5-[2-[[6-[[雙(三級丁氧基羰基)胺基]胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-2-甲基-丙氧基]-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(2.1 g，2.4596 mmol)於甲醇(40 mL)中之溶液中。在50℃下加熱反應物隔夜。濃縮反應物以移除甲醇，且將粗材料稀釋於水(75 mL)中，且接著用庚烷(75 mL)及MTBE (75 mL)洗滌。水溶液用3 N鹽酸水溶液酸化至pH = 2。水性混合物用二氯甲烷(4 × 50 mL)萃取，且經合併之有機層經硫酸鈉乾燥。過濾溶液且濃縮，得到呈微棕色油狀之2-苯甲氧基-5-[2-[[6-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-2-甲基-丙氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(1.58 g，90%)。ESI-MS m/z計算值711.2339，實驗值656.1 (M - 55) +；滯留時間：2.23分鐘(LC方法E)。 步驟 12 ： 2- 苯甲氧基 -5-[2-[[6-( 肼羰基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-2- 甲基 - 丙氧基 ]-2-( 三氟甲基 ) 戊酸 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image3373
將2-苯甲氧基-5-[2-[[6-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-2-甲基-丙氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(350 mg，0.4918 mmol)溶解於二噁烷(9 mL)中，且接著在室溫下逐滴添加鹽酸(3.5 mL，4 M於二噁烷中，14 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物48 h。真空濃縮混合物，得到呈粗淺黃色泡沫狀之2-苯甲氧基-5-[2-[[6-(肼羰基)-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-2-甲基-丙氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(鹽酸鹽) (318 mg，100%)。ESI-MS m/z計算值611.1815，實驗值612.0 (M+1) +；滯留時間：1.88分鐘(LC方法Z)。此材料直接用於下一步驟中。 步驟 13 ： 9- 苯甲氧基 -3,3- 二甲基 -15- 硝基 -9,17- 雙 ( 三氟甲基 )-5- 氧雜 -2,11,12,18- 四氮雜雙環 [12.3.1] 十八碳 -1(17),14(18),15- 三烯 -10,13- 二酮
Figure 02_image3375
向2-苯甲氧基-5-[2-[[6-(肼羰基)-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-2-甲基-丙氧基]-2-(三氟甲基)戊酸(鹽酸鹽) (360 mg，0.5556 mmol)於二甲基甲醯胺(DMF) (200 mL)中之室溫攪拌溶液中添加BOP (300 mg，0.6783 mmol)及HOBt (115 mg，0.8511 mmol)，隨後添加二異丙基乙胺(371 mg，0.5 mL，2.8706 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物24 h。在50℃下真空移除溶劑。將殘餘物乾燥負載至矽膠上，且藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到呈透明黏稠油狀之9-苯甲氧基-3,3-二甲基-15-硝基-9,17-雙(三氟甲基)-5-氧雜-2,11,12,18-四氮雜雙環[12.3.1]十八碳-1(17),14(18),15-三烯-10,13-二酮(92 mg，28%)。ESI-MS m/z計算值593.1709，實驗值594.0 (M+1) +；滯留時間：1.94分鐘(LC方法Z)。 步驟 14 ： 6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯
Figure 02_image3377
向在室溫下之9-苯甲氧基-3,3-二甲基-15-硝基-9,17-雙(三氟甲基)-5-氧雜-2,11,12,18-四氮雜雙環[12.3.1]十八碳-1(17),14(18),15-三烯-10,13-二酮(90 mg，0.1516 mmol)及 N, N-二異丙基乙胺(148.40 mg，200 μL，1.1482 mmol)於乙腈(25 mL)中之溶液中添加4-甲基苯磺醯氯(40 mg，0.2098 mmol)。接著將混合物加熱至70℃且在此溫度下攪拌2 h。接著，將反應混合物冷卻，且藉由減壓蒸發濃縮。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(25 mL)中。此溶液用5%碳酸氫鈉水溶液(2 × 25 mL)及鹽水(25 mL)洗滌，接著經無水硫酸鈉乾燥且過濾。藉由減壓蒸發移除揮發物。將殘餘物乾燥負載至矽膠上，且藉由使用梯度為0%至15%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈透明黏稠油狀之6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯(47 mg，54%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.46 (s, 1H), 7.34 - 7.18 (m, 5H), 5.39 (br. s., 1H), 5.13 (d, J =11.0 Hz, 1H), 4.89 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.01 (d, J =8.1 Hz, 1H), 3.56 - 3.44 (m, 3H), 2.56 - 2.32 (m, 2H), 1.61 - 1.51 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.46 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -63.91 (s, 3F), -73.26 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值575.1603，實驗值576.0 (M+1) +；滯留時間：2.14分鐘(LC方法Z)。 步驟 15 ： 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image3379
將6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯(52 mg，0.0904 mmol)溶解於甲醇(3 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(35 mg，5% w/w，0.0164 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在氫氣下在室溫下攪拌混合物隔夜。使用注射器微過濾器過濾反應混合物，用甲醇(10 mL)洗滌，且減壓濃縮所得溶液。將殘餘物再次溶解於甲醇(3 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5分鐘，且接著添加鈀/碳(35 mg，5% w/w，0.0164 mmol)。接著用氣球向混合物鼓泡通入氫氣5分鐘，且接著在氫氣下在室溫下攪拌反應混合物6 h。使用注射器微過濾器過濾反應混合物，用甲醇(5 mL)洗滌，且減壓濃縮所得溶液。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析，隨後用0%至70%乙腈/0.1% NH 4HCO 3水溶液溶離之逆相層析純化，得到呈黃色油狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(25 mg，60%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.49 (s, 1H), 4.66 (d, J =7.8 Hz, 1H), 3.75 - 3.57 (m, 2H), 3.38 (d, J =7.8 Hz, 1H), 2.70 - 2.55 (m, 1H), 2.20 (td, J =13.0, 5.6 Hz, 1H), 1.90 - 1.76 (m, 1H), 1.75 - 1.64 (m, 1H), 1.54 (s, 3H), 1.41 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -65.19 (s, 3F), -81.21 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值455.1392，實驗值456.1 (M+1) +；滯留時間：3.52分鐘(LC方法BB)。 步驟 16 ： 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 199) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-10,19- 二氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 200)
Figure 02_image3381
外消旋17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(13.0 mg，0.02855 mmol )藉由對掌性正相SFC來純化，其使用ChiralPak AS管柱(250 × 10 mm; 5μm) ，在50℃下，用8% MeOH (+ 20 mM NH 3)/CO 2溶離，流速為10 mL/min (樣本之濃度為20.6 mg/mL於甲醇中，注射體積= 70 μL，出口壓力為152巴，且偵測波長為229 nm)，分離出兩種單一鏡像異構物： 溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (4.6 mg，70%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.27 (s, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.67 (d, J =7.8 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.71 (ddd, J =12.2, 9.5, 4.4 Hz, 1H), 3.54 (dt, J =12.3, 3.8 Hz, 1H), 3.20 (d, J =7.8 Hz, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 1.73 (ddt, J =14.9, 10.3, 4.5 Hz, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.40 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.63分鐘(LC方法A)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-10,19-二氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (4.2 mg，64%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.27 (s, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.66 (d, J =7.8 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.71 (ddd, J =12.3, 9.8, 4.3 Hz, 1H), 3.54 (dt, J =12.3, 3.8 Hz, 1H), 3.20 (d, J =7.8 Hz, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 1.80 - 1.68 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.40 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值455.13922，實驗值456.2 (M+1) +；滯留時間：1.64分鐘(LC方法A)。 實例 111 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12- 嘧啶 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 201) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 嘧啶 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 202)
Figure 02_image3383
步驟 1 ： ( E)-2- 甲基 - N-( 嘧啶 -2- 基亞甲基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image3385
在50℃下加熱嘧啶-2-甲醛(10 g，92.509 mmol)、2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(11.3 g，93.234 mmol)及硫酸氫鉀(13 g，95.470 mmol)於甲苯(50 mL)中之混合物隔夜。在傾析溶液之後，固體殘餘物用二氯甲烷洗滌3次，將洗滌液與傾析溶液合併，且真空蒸發溶劑。粗混合物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到呈灰白色固體狀之( E)-2-甲基- N-(嘧啶-2-基亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(7.85 g，40%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.93 (d, J =4.9 Hz, 2H), 8.72 (s, 1H), 7.38 (t, J =4.9 Hz, 1H), 1.30 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值211.0779，實驗值212.2 (M+1) +；滯留時間：1.31分鐘(LC方法Z)。 步驟 2 ： 2- 甲基 - N-(1- 嘧啶 -2- 基丁 -3- 烯基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image3387
向在-78℃下之( E)-2-甲基- N-(嘧啶-2-基亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(2 g，9.4659 mmol)於四氫呋喃(40 mL)中之冷卻溶液中逐滴添加含三甲基鋁(14 mL，2 M，28 mmol)之庚烷。在-78℃下攪拌混合物10分鐘，且接著逐滴添加烯丙基(溴)鎂(14 mL，1 M於二乙醚中，14 mmol)。將反應物保持在-78℃下直至藉由HPLC分析觀測到起始材料完全耗盡。在-78℃下，反應物用飽和氯化銨水溶液(150 mL)緩慢淬滅。移除冷浴，且接著混合物接著在室溫下劇烈攪拌30分鐘。混合物用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取，用鹽水(200 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且減壓移除溶劑。粗殘餘物藉由使用梯度為0%至5%甲醇/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色油狀之2-甲基- N-(1-嘧啶-2-基丁-3-烯基)丙烷-2-亞磺醯胺(1.67 g，70%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.71 (d, J =4.9 Hz, 2H), 7.18 (t, J =4.9 Hz, 1H), 5.74 (ddt, J =17.0, 10.3, 7.0 Hz, 1H), 5.10 - 4.99 (m, 2H), 4.96 (br d, J =7.3 Hz, 1H), 4.72 - 4.65 (m, 1H), 2.84 - 2.59 (m, 2H), 1.29 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z計算值253.1249，實驗值254.2 (M+1) +；滯留時間：1.49分鐘(LC方法Z)。 步驟 3 ： 1- 嘧啶 -2- 基丁 -3- 烯 -1- 胺 ( 鹽酸鹽 )
Figure 02_image3389
在室溫下，向2-甲基- N-(1-嘧啶-2-基丁-3-烯基)丙烷-2-亞磺醯胺(2 g，7.8938 mmol)於甲醇(19 mL)中之溶液中逐滴添加鹽酸(19 mL，2 M於二乙醚中，38 mmol)，且接著在室溫下攪拌所得混合物1小時。將混合物冷卻至0℃，接著添加二乙醚(75 mL)，且在此溫度下攪拌所得粉紅色懸浮液30分鐘。過濾所得沈澱，且用二乙醚(50 mL)洗滌，得到呈粉紅色粉末狀之1-嘧啶-2-基丁-3-烯-1-胺(鹽酸鹽) (1.45 g，96%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.89 (d, J =5.1 Hz, 2H), 8.87 - 8.74 (m, 3H), 7.53 (t, J =4.9 Hz, 1H), 5.71 (ddt, J =17.0, 10.1, 7.1 Hz, 1H), 5.08 - 4.96 (m, 2H), 4.53 - 4.37 (m, 1H), 2.87 - 2.66 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值149.0953，實驗值150.1 (M+1) +；滯留時間：1.74分鐘(LC方法BB)。 步驟 4 ： 3- 硝基 -6-(1- 嘧啶 -2- 基丁 -3- 烯基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3391
在反應瓶中，將6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(270 mg，0.9488 mmol)與含1-嘧啶-2-基丁-3-烯-1-胺(鹽酸鹽) (253 mg，1.139 mmol)及DIEA (785 µL，4.507 mmol)之乙腈(7.8 mL)混合。在80℃下加熱反應物1 h，接著真空移除溶劑。殘餘物用乙酸乙酯稀釋，且用NaHCO 3飽和水溶液(3 ×)洗滌，隨後用鹽水洗滌。分離有機層，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且蒸發至乾燥。粗材料藉由使用梯度為10%至60%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到灰色固體。將此灰色固體溶解於THF (4.8 mL)、MeOH (4.8 mL)及水(2.4 mL)中，且添加LiOH (340.8 mg，14.23 mmol)。在室溫下攪拌反應物2 h，接著蒸發至乾燥。固體殘餘物用1 N HCl酸化且用乙酸乙酯萃取。分離有機層，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且蒸發至乾燥。粗材料藉由自乙酸乙酯/己烷再結晶來純化，得到呈茶色固體狀之3-硝基-6-(1-嘧啶-2-基丁-3-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(203 mg，47%)。ESI-MS m/z計算值383.08414，實驗值384.2 (M+1) +；滯留時間：0.55分鐘(LC方法S)。 步驟 5 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 己 -5- 烯醯基 ]-3- 硝基 -6-(1- 嘧啶 -2- 基丁 -3- 烯基胺基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3393
使3-硝基-6-(1-嘧啶-2-基丁-3-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(202 mg，0.4691 mmol)及(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯肼(184 mg，0.5886 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在冰浴中冷卻，且依次用HATU (255 mg，0.6706 mmol)及DIPEA (140.98 mg，0.19 mL，1.0908 mmol)處理。在5分鐘之後，移除冰浴，且在室溫下攪拌反應物19 h。將反應物轉移至具有水(50 mL)之125 mL分液漏斗，且水性混合物用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取。經合併之有機層用水(2 × 25 mL)、接著鹽水(25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到黃色油且為 N '-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-6-(1-嘧啶-2-基丁-3-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼非鏡像異構物之~ 1:1混合物(215 mg，63%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.57 (d, J =17.1 Hz, 1H), 9.41 - 9.16 (m, 1H), 8.73 (dd, J =4.9, 2.7 Hz, 2H), 8.21 (d, J =6.6 Hz, 1H), 7.48 - 7.31 (m, 5H), 7.23 (t, J =4.9 Hz, 1H), 7.03 - 6.86 (m, 1H), 5.84 (ddt, J =16.9, 10.4, 6.1 Hz, 1H), 5.70 (ddt, J =17.3, 9.8, 7.2 Hz, 1H), 5.57 - 5.43 (m, 1H), 5.16 - 5.00 (m, 4H), 4.88 - 4.81 (m, 1H), 4.77 - 4.71 (m, 1H), 2.99 - 2.86 (m, 1H), 2.86 - 2.76 (m, 1H), 2.51 - 2.35 (m, 1H), 2.32 - 2.16 (m, 3H) ppm. 滯留時間：2.4分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 - N-(1- 嘧啶 -2- 基丁 -3- 烯基 )-3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3395
在設定為60℃之油浴中加熱 N '-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-3-硝基-6-(1-嘧啶-2-基丁-3-烯基胺基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(215 mg，0.2969 mmol)及DIPEA (133.56 mg，0.18 mL，1.0334 mmol)於乙腈(5 mL)中之溶液，且用甲苯磺醯氯(70 mg，0.3672 mmol)處理。在90分鐘之後，將反應物冷卻至室溫且減壓濃縮以移除大部分乙腈。轉移至含有碳酸氫鈉飽和水溶液(50 mL)之125 mL分液漏斗，且水層用乙酸乙酯(2 × 40 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(40 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈黏稠琥珀色油狀且呈約1:1非鏡像異構物之混合物之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基- N-(1-嘧啶-2-基丁-3-烯基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(176 mg，85%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.75 (d, J =4.9 Hz, 2H), 8.60 (s, 1H), 7.66 (br. s., 1H), 7.45 - 7.28 (m, 5H), 7.25 (td, J =4.9, 1.0 Hz, 1H), 5.88 - 5.76 (m, 1H), 5.72 - 5.65 (m, 1H), 5.58 (ddtd, J =17.1, 9.9, 7.4, 2.3 Hz, 1H), 5.10 (dt, J =17.1, 1.5 Hz, 1H), 5.05 - 4.92 (m, 3H), 4.83 (dd, J =10.6, 6.2 Hz, 1H), 4.67 (dd, J =10.5, 4.9 Hz, 1H), 3.02 - 2.92 (m, 1H), 2.85 - 2.75 (m, 1H), 2.59 - 2.22 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z計算值649.1872，實驗值650.2 (M+1) +；滯留時間：4.16分鐘(LC方法BB)。 步驟 7 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -12- 嘧啶 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3397
向配備有回流冷凝器之100 mL三頸燒瓶(在頂部具有轉接器，其利用管道與玻璃鼓泡器連接)中饋入二氯乙烷(40 mL)，且用氮氣吹掃，同時在設定為50℃之油浴中加熱45至60分鐘。添加Zhan催化劑-1B (22 mg，0.0300 mmol)，攪拌5分鐘，接著歷經~5分鐘時段添加6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基- N-(1-嘧啶-2-基丁-3-烯基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(84 mg，0.1199 mmol)於二氯乙烷(5 mL)中之溶液。加熱提高至83℃ (油浴溫度)，且攪拌反應物16 h，同時繼續鼓泡通入氮氣。冷卻至室溫後，反應混合物用DMSO (3滴)淬滅且減壓濃縮。將殘餘物直接吸附至矽膠上，且藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈琥珀色油狀之(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-12-嘧啶-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (39 mg，49%)。ESI-MS m/z計算值621.1559，實驗值622.2 (M+1) +；滯留時間：4.0分鐘(LC方法BB)。 步驟 8 ： (6 R)-17- 胺基 -12- 嘧啶 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image3399
將(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-12-嘧啶-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯( E/Z混合物) (32 mg，0.0477 mmol)溶解於無水甲醇(3 mL)中。向混合物鼓泡通入氮氣5分鐘，且接著添加鈀/碳(35 mg，5% w/w，0.0164 mmol)。接著用氣球向混合物鼓泡通入氫氣5分鐘，且在氫氣下在室溫下攪拌反應混合物隔夜。使用耐綸0.45微米過濾器(在注射器上)過濾混合物，用甲醇(2× 0.4 mL)沖洗。藉由減壓蒸發濃縮濾液，得到呈深黃色油狀之(6 R)-17-胺基-12-嘧啶-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(30 mg，86%，69%純度)。ESI-MS m/z計算值503.1504，實驗值503.9 (M+1) +；滯留時間：3.13分鐘(LC方法C)。 步驟 9 ： (6 R)-17- 胺基 -12- 嘧啶 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 201) 及 (6 R)-17- 胺基 -12- 嘧啶 -2- 基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 202)
Figure 02_image3401
將外消旋(6 R)-17-胺基-12-嘧啶-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(45 mg，0.0614 mmol，69%純度)直接吸附至矽膠上，且藉由使用梯度為0%至50%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到28 mg富集至89%純度之材料。接著，將此材料吸附至矽膠上，且再次藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到19.5 mg富集至95.9%純度之材料。此非鏡像異構混合物經受SFC分離，其使用Lux纖維素1管柱(150 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，在40℃下，用20% MeOH/CO 2溶離，流速：75 mL/min，注射體積：1500 μL，壓力：100巴，波長：210 nm，得到兩種單一鏡像異構物產物：
溶離之第一鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-嘧啶-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (4 mg，12%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.82 (d, J =4.9 Hz, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.44 (t, J =5.0 Hz, 1H), 6.22 (d, J =5.4 Hz, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.02 - 4.95 (m, 1H), 2.31 - 2.22 (m, 1H), 2.13 - 2.02 (m, 1H), 1.96 - 1.85 (m, 1H), 1.71 - 1.31 (m, 7H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.80 (s, 3F), -76.54 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值503.1504，實驗值504.2 (M+1) +；滯留時間：3.17分鐘(LC方法C)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-嘧啶-2-基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (3.5 mg，11%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 8.82 (d, J =4.9 Hz, 2H), 7.63 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.44 (t, J =4.9 Hz, 1H), 6.27 (d, J =4.4 Hz, 1H), 6.06 (s, 2H), 4.91 - 4.84 (m, 1H), 2.60 - 2.50 (m, 1H), 2.24 - 2.13 (m, 1H), 2.12 - 1.99 (m, 1H), 1.74 - 1.47 (m, 5H), 1.46 - 1.25 (m, 2H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.81 (s, 3F), -79.02 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值503.1504，實驗值504.2 (M+1) +；滯留時間：3.12分鐘(LC方法C)。 實例 112 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,11- 二醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 203) 及 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,11- 二醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 204)
Figure 02_image3403
步驟 1 ： N -(2- 羥基 -1,1- 二甲基 - 乙基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3405
歷經10 min，向2-胺基-2-甲基-丙-1-醇(13.45 g，16 mL，135.8 mmol)及三乙胺(13.794 g，19 mL，136.32 mmol)於二氯甲烷(70 mL)中之溶液中添加二碳酸二三級丁酯(27 g，123.71 mmol)，且在室溫下攪拌混合物3 h。減壓濃縮反應混合物，且用10%檸檬酸水溶液(200 mL)稀釋，隨後用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取。有機層用水(150 mL)及鹽水(150 mL)洗滌，接著經無水硫酸鎂乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈白色固體狀之 N-(2-羥基-1,1-二甲基-乙基)胺基甲酸三級丁酯(19.5 g，83%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 4.71 (br s, 1H), 4.27 - 3.96 (m, 1H), 3.57 (d, J =5.4 Hz, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.25 (s, 6H) ppm。 步驟 2 ： N -(1,1- 二甲基 -2- 側氧基 - 乙基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3407
N-(2-羥基-1,1-二甲基-乙基)胺基甲酸三級丁酯(5 g，26.42 mmol)於DMSO (80 mL)及Et 3N (8.02 g，11.05 mL，79.26 mmol)中之溶液用三氧化硫吡啶錯合物(12.62 g，6.573 mL，79.26 mmol)於DMSO (66 mL)中之溶液處理。接著，在室溫下攪拌反應混合物1 h，接著倒入Et 2O中。有機物用10%檸檬酸、飽和NaHCO 3及鹽水洗滌。接著，有機物經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈固體狀之 N-(1,1-二甲基-2-側氧基-乙基)胺基甲酸三級丁酯(6.0269 g)，其直接用於下一步驟中。 步驟 3 ： N -(2- 羥基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3409
將 N-(1,1-二甲基-2-側氧基-乙基)胺基甲酸三級丁酯(1 g，5.3409 mmol)之溶液冷卻至-78℃，且歷經5分鐘用氯化烯丙基鎂(5.4 mL，2 M，10.8 mmol)逐滴處理，且接著保持在此溫度下持續額外5分鐘。移除乾冰浴，且將燒瓶置放於冰水浴(0℃至5℃)中。在此溫度下攪拌溶液1 h，且接著倒入NH 4Cl水溶液(100 mL)於冰(100 g)上之混合物中。混合物用EtOAc (5 × 75 mL)萃取，且經合併之有機層用鹽水(25 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用0%至20% EtOAc/己烷之梯度進行10分鐘之矽膠層析(80 g管柱)純化，得到呈無色固體之 N-(2-羥基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基甲酸三級丁酯(980 mg，80%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 6.00 – 5.89 (m, 1H), 5.15 – 5.08 (m, 2H), 4.67 (s, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.57 (d, J =10.1 Hz, 1H), 2.39 – 2.30 (m, 1H), 2.11 – 2.01 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.37 (s, 3H), 1.23 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值229.1678，實驗值230.7 (M+1) +；滯留時間：4.15分鐘(LC方法DD)。 步驟 4 ： N -(2- 苯甲氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3411
在氬氣下，向燒瓶中饋入含NaH之礦物油(2.12 g，60% w/w，53.005 mmol)，且用己烷(55 mL)洗滌，且經由針及注射器傾析上清液層(53 mL)。固體用THF (23 mL)處理且冷卻至0℃。接著，在0℃下，歷經35分鐘，該漿液用 N-(2-羥基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基甲酸三級丁酯(4.06 g，17.705 mmol)於THF (26 mL)中之溶液逐滴處理，且額外攪拌30 min。接著，歷經10分鐘反應物用苯甲基溴(7.4776 g，5.2 mL，43.72 mmol)逐滴處理，隨後一次性用TBAI (654 mg，1.7706 mmol)處理，且在0℃下額外攪拌3 h。移除冰浴，且歷經90 min將反應物升溫至室溫，且額外攪拌1 h。混合物用Et 2O (50 mL)稀釋，且將所得混合物小心地(5 mL份)添加至NH 4Cl飽和水溶液(300 mL)於冰(300 g)中之攪拌混合物中。反應物用EtOAc (400 mL)稀釋，且分離各層。水相用EtOAc (4 × 150 mL)萃取，且經合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。粗殘餘物藉由使用梯度為100%己烷至5%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈無色液體狀之 N-(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基甲酸三級丁酯(4.47 g，78%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.36 – 7.31 (m, 4H), 7.31 – 7.26 (m, 1H), 5.99 – 5.89 (m, 1H), 5.13 (dq, J =17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.06 – 5.02 (m, 1H), 4.71 – 4.64 (m, 2H), 4.54 (d, J =11.1 Hz, 1H), 3.95 – 3.76 (m, 1H), 2.44 – 2.35 (m, 1H), 2.30 – 2.23 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.31 (d, J =9.4 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值319.2147，實驗值320.4 (M+1) +；滯留時間：7.06分鐘(LC方法DD)。 步驟 5 ： 3- 苯甲氧基 -2- 甲基 - 己 -5- 烯 -2- 胺 ( 三氟乙酸鹽 )
Figure 02_image3413
在氮氣下，將 N-(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基甲酸三級丁酯(400 mg，1.2522 mmol)於DCM (7 mL)中之溶液冷卻至0℃，且歷經5分鐘用TFA (888 mg，0.6 mL，7.7879 mmol)於DCM (4 mL)中之冷卻(0℃至5℃)溶液逐滴處理。移除浴，且將反應物升溫至室溫持續150分鐘。在室溫下濃縮反應物且真空乾燥5天，得到呈無色脆性固體狀之3-苯甲氧基-2-甲基-己-5-烯-2-胺(三氟乙酸鹽) (431 mg，100%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 7.81 (s, 3H), 7.42 – 7.32 (m, 4H), 7.34 – 7.26 (m, 1H), 5.96 – 5.84 (m, 1H), 5.21 – 5.12 (m, 1H), 5.07 (d, J =9.8 Hz, 1H), 4.64 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.55 (d, J =11.3 Hz, 1H), 3.50(dd, J =7.4, 4.0 Hz, 1H), 2.48 – 2.42 (m, 1H), 2.30 – 2.23 (m, 1H), 1.24 (d, J =19.7 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值219.1623，實驗值220.6 (M+1) +；滯留時間：3.18分鐘(LC方法DD)。 步驟 6 ： 6-[(2- 苯甲氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3415
在室溫下，向在氬氣下之6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(4.65 g，16.34 mmol)及3-苯甲氧基-2-甲基-己-5-烯-2-胺(三氟乙酸鹽) (6.11 g，18.329 mmol)於DCM (43 mL)中之溶液中添加Et 3N (6.534 g，9 mL，64.572 mmol)，且攪拌反應物160 min。歷經3分鐘反應物用額外Et 3N (3.993 g，5.5 mL，39.46 mmol)逐滴處理且在40℃下加熱，接著在30℃下18 h。反應物用DCM (150 ml)稀釋且用鹽水(20 ml)洗滌。鹽水層用DCM (30 mL)萃取。合併有機層且經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至5% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到呈黏稠黃色油狀之6-[(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(6.18 g，76%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 8.40 (s, 1H), 7.34 – 7.25 (m, 5H), 6.27 (s, 1H), 5.98 – 5.85 (m, 1H), 5.19 – 5.11 (m, 1H), 5.08 (d, J =10.3 Hz, 1H), 4.76 (d, J =11.3 Hz, 1H), 4.49 (d, J =11.4 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.81 – 3.75 (m, 1H), 2.55 – 2.46 (m, 1H), 2.42 – 2.32 (m, 1H), 1.53 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值467.1668，實驗值468.2 (M+1) +；滯留時間：7.64分鐘(LC方法DD)。 步驟 7 ： 6-[(2- 苯甲氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3417
向6-[(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(6.18 g，12.428 mmol)於THF (30 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰(一水合物) (5.2 g，123.92 mmol)，隨後添加水(6 mL)及MeOH (2.8 mL)。接著，在油浴中在30℃下攪拌反應混合物5 h。接著，反應物用MTBE (300 mL)稀釋，用水(200 mL)及1 M NaOH (100 mL)洗滌。有機層進一步用鹽水(200 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈淺黃色泡沫狀之6-[(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(5.5 g，93%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO -d6) δ 8.26 (s, 1H), 7.36 – 7.24 (m, 5H), 6.00 (s, 1H), 5.97 – 5.85 (m, 1H), 5.14 (dd, J =17.1, 2.0 Hz, 1H), 5.03 (d, J =10.1 Hz, 1H), 4.70 (d, J =11.4 Hz, 1H), 4.49 (d, J =11.4 Hz, 1H), 3.91 (dd, J =7.1, 3.9 Hz, 1H), 3.30 (s, 1H), 2.30 (dt, J =14.7, 7.2 Hz, 1H), 1.49 (s, 6H) ppm. 在NMR中未觀測到一個可交換質子。ESI-MS m/z計算值453.15115，實驗值454.4 (M+1) +；滯留時間：6.61分鐘(LC方法DD)。 步驟 8 ： 6-[(2- 苯甲氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ) 胺基 ]- N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3419
向6-[(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(349 mg，0.7697 mmol)及2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(222 mg，0.7701 mmol)於無水EtOAc (2.8 mL)中之溶液中添加丙基膦酸酐溶液(686 mg，50%於EtOAc中，1.078 mmol)，接著添加吡啶(273.84 mg，0.280 mL，3.462 mmol)，且在室溫下攪拌混合物6 h。反應物用EtOAc (20 mL)稀釋，用NH 4Cl (20 mL)淬滅且用EtOAc (2 × 20 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(2 × 40 mL)洗滌，經Na 2SO4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至15% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到呈白色泡沫狀之6-[(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基]- N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(385 mg，68%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 9.23 – 9.16 (m, 1H), 8.58 (dd, J =28.2, 5.4 Hz, 1H), 8.24 (d, J =1.5 Hz, 1H), 7.44 – 7.34 (m, 5H), 7.28 – 7.26 (m, 1H), 7.26 – 7.20 (m, 3H), 6.09 (s, 1H), 6.00 – 5.77 (m, 2H), 5.40 – 5.25 (m, 2H), 5.14 (dt, J =17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.07 (d, J =10.1 Hz, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.75 (d, J =11.6 Hz, 1H), 4.51 (d, J =11.6 Hz, 1H), 3.85 (dd, J =6.6, 4.3 Hz, 1H), 3.21 – 3.11 (m, 1H), 3.02 (ddd, J =15.3,7.8, 3.5 Hz, 1H), 2.50 (t, J =10.6 Hz, 1H), 2.38 (dt, J =14.6, 7.1 Hz, 1H), 1.54 – 1.50 (m, 6H) ppm. 在NMR中未觀測到一個質子或被溶劑遮蔽。ESI-MS m/z計算值723.24915，實驗值724.6 (M+1) +；滯留時間：7.9分鐘(LC方法DD)。 步驟 9 ： N -(2- 苯甲氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 )-6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3421
向6-[(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基]- N '-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(385 mg，0.5267 mmol)於CH 3CN (5 mL)中之溶液中添加 p-TsCl (115 mg，0.6032 mmol)，接著添加DIPEA (204.05 mg，0.275 mL，1.5788 mmol)，且在室溫下攪拌混合物30分鐘。反應物用EtOAc (30 mL)稀釋，接著用NH 4Cl (30 mL)及鹽水(30 mL)洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至100% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到呈淡綠色油狀之 N-(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(293 mg，78%)。 1H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 8.44 (d, J =2.6 Hz, 1H), 7.41 – 7.25 (m, 8H), 7.27 – 7.19 (m, 2H), 6.33 (d, J =7.1 Hz, 1H), 6.02 – 5.84 (m, 2H), 5.32 – 5.18 (m, 2H), 5.18 – 5.03 (m, 2H), 4.78 (ddd, J =34.0,11.0, 1.9 Hz, 2H), 4.68 – 4.60 (m, 1H), 4.46 (dd, J =11.4, 4.1 Hz, 1H), 3.76 (dt, J =6.5, 4.0 Hz, 1H), 3.30 – 3.15 (m, 2H), 2.54 – 2.44 (m, 1H), 2.37 (dt, J =14.6, 7.1 Hz, 1H), 1.49 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z計算值705.2386，實驗值706.4 (M+1) +；滯留時間：8.79分鐘(LC方法DD)。 步驟 10 ： (6 R)-6,11- 二苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3423
藉由充入氬氣將 N-(2-苯甲氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100 mg，0.1417 mmol)於1,2-二氯乙烷(60 mL)中之溶液脫氣，且接著添加Zhan催化劑-1B (12.491 mg，0.017 mmol)，且進一步脫氣1 h。在70℃下加熱混合物18 h。將反應物冷卻至室溫且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至10% EtOAc/己烷之矽膠層析純化，得到呈白色泡沫狀之(6 R)-6,11-二苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (77 mg，76%)。ESI-MS m/z計算值677.2073，實驗值678.5 (M+1) +；滯留時間：8.16分鐘(LC方法DD)。 步驟 11 ： (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,11- 二醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 203) 及 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,11- 二醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 204)
Figure 02_image3425
在N 2下，向(6 R)-6,11-二苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (69 mg，0.0967 mmol)於EtOH (3.5 mL)中之溶液中添加Pd/C (7 mg，10% w/w，0.0066 mmol)，且攪拌混合物15分鐘。反應容器用氫氣吹掃，且使用氫氣球在1個大氣壓之氫氣下在室溫下攪拌36 h。添加額外Pd/C (7 mg，10% w/w，0.0066 mmol)，且在室溫下另外攪拌混合物48 h。混合物用EtOH (14 mL)稀釋，經由矽藻土塞過濾，且在N 2下向濾液中添加Pd/C (39 mg，10% w/w，0.0366 mmol)，接著將其添加至反應容器中，該反應容器用氫氣吹掃，且在1個大氣壓之氫氣(氣球)下在室溫下攪拌1.5 h。接著，經由矽藻土墊過濾反應物，且濃縮濾液 。殘餘物藉由使用梯度為0%至30% EtOAc/ 正戊烷之矽膠層析純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色玻璃狀材料之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,11-二醇(鏡像異構物1) (11.2 mg，49%)。 1H NMR (500 MHz, CD 3OD) δ 7.50 (d, J =0.8 Hz, 1H), 5.79 (dd, J =10.4, 2.0 Hz, 1H), 2.61 – 2.49 (m, 1H), 2.08 – 1.97 (m, 1H), 1.83 – 1.68 (m, 4H), 1.65 – 1.58 (m, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.46 – 1.37 (m, 1H),1.23 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.5 (M+1) +；滯留時間：2.33分鐘(LC方法H)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈黃色泡沫狀之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,11-二醇(鏡像異構物2) (10 mg，44%)。 1H NMR (500 MHz, CD 3OD) δ 7.49 (s, 1H), 5.83 – 5.77 (m, 1H), 2.52 (td, J =13.8, 2.4 Hz, 1H), 1.98 – 1.85 (m, 2H), 1.81 – 1.72 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.53 – 1.36 (m, 3H), 1.22 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.5 (M+1) +；滯留時間：2.62分鐘(LC方法H)。 實例 113 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,4 ' - 四氫哌喃 ]-6- 醇 ( 化合物 205) 及 (6 R)-17-( 甲基胺基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -12,4 ' - 四氫哌喃 ]-6- 醇 ( 化合物 206)
Figure 02_image3427
步驟 1 ： 2-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-5-[6- 氯 -3- 硝基 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ]-1,3,4- 噁二唑
Figure 02_image3429
將 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯醯基]-6-羥基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(30 g，42.507 mmol)溶解於磷醯基氯(60 mL)及乙腈(60 mL)之混合物中。接著添加二甲基甲醯胺(30 mL)，且在70℃下加熱混合物1 h。接著，混合物在1M碳酸氫鉀水溶液(900 mL)中在20℃與40℃之間淬滅，在淬滅期間監測pH且使用氫氧化鈉(6 M溶液，總共240 mL)調整。接著，水相用乙酸乙酯(2 × 450 mL)萃取，且將有機相合併，經硫酸鈉(100 g)乾燥，過濾且蒸發。接著，將殘餘物溶解於乙酸乙酯中且使用矽膠(100 g)乾燥封裝。將乾燥封裝的矽膠添加在用庚烷潤濕之矽膠(500 g，以乾重計)上，且接著用庚烷(2 L)溶離，隨後用10%甲基三級丁基醚/庚烷(4 L)溶離，接著用20%甲基三級丁基醚/庚烷(2 L)溶離，且最後用乙酸乙酯(2L)溶離。蒸發含有純產物之級分，且合併，得到呈淺黃色油狀之2-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(12.5 g，54%)。ESI-MS m/z計算值536.0686，實驗值537.0 (M+1) +；滯留時間：3.898分鐘(LC方法C)。 步驟 2 ： N -(4- 烯丙基四氫哌喃 -4- 基 )-6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3431
在設定為65℃之油浴中攪拌2-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(222 mg，0.4136 mmol)、4-烯丙基四氫哌喃-4-胺(92 mg，0.6515 mmol)及DIPEA (148.40 mg，0.2 mL，1.1482 mmol)於乙腈(5 mL)中之溶液~ 4 h。一旦冷卻，將反應混合物轉移至具有碳酸氫鈉飽和水溶液(40 mL)之125 mL分液漏斗，且水層用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至25%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到深紅色油性殘餘物。此材料藉由自5%至80%乙腈/水(+ 10 mM碳酸氫銨/氫氧化銨緩衝液，pH = 10)溶離之逆相C 18層析進一步純化，得到呈橙色油狀之 N-(4-烯丙基四氫哌喃-4-基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(60.4 mg，23%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.55 (s, 1H), 7.44 - 7.29 (m, 5H), 5.87 - 5.74 (m, 1H), 5.67 (ddt, J =17.1, 9.9, 7.4 Hz, 1H), 5.43 (br. s., 1H), 5.13 - 4.95 (m, 4H), 4.84 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.66 (d, J =10.5 Hz, 1H), 3.80 (dt, J =11.9, 3.6 Hz, 2H), 3.65 - 3.53 (m, 2H), 2.77 (d, J =7.3 Hz, 2H), 2.58 - 2.16 (m, 6H), 1.93 - 1.81 (m, 2H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.52 (s, 3F), -73.15 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值641.2073，實驗值642.2 (M+1) +；滯留時間：4.14分鐘(LC方法BB)。 步驟 3 ： (6 ' R )-6 ' -( 苯甲氧基 )-17 ' - 硝基 -6 ' ,15 ' - 雙 ( 三氟甲基 )-19 ' - 氧雜 -3 ' ,4 ' ,13 ' ,18 ' - 四氮雜螺 [ 噁烷 -4,12 ' - 三環 [12.3.1.12,5] 十九烷 ]-1 ' (18 ' ),2 ' ,4 ' ,9 ' ,14 ' ,16 ' - 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3433
向 N-(4-烯丙基四氫哌喃-4-基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(60.4 mg，0.0940 mmol)於二氯乙烷(30 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣60分鐘。接著,將溶液置放於設定為60℃之油浴中，且添加第一份Zhan催化劑-1B (4.6 mg，0.0063 mmol)。在45分鐘之後，添加第二批Zhan催化劑-1B (4.5 mg，0.0061 mmol)，且另外繼續加熱3小時。一旦冷卻至室溫，反應物用DMSO (2滴)淬滅，減壓移除揮發物，且將殘餘物直接吸附在矽膠上。材料藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈灰白色固體狀之(6' R)-6'-(苯甲氧基)-17'-硝基-6',15'-雙(三氟甲基)-19'-氧雜-3',4',13',18'-四氮雜螺[噁烷-4,12'-三環[12.3.1.12,5]十九烷]-1'(18'),2',4',9',14',16'-六烯( E/Z混合物) (46.4 mg，80%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.59 (s, 1H), 7.41 - 7.28 (m, 5H), 5.74 - 5.64 (m, 1H), 5.61 - 5.47 (m, 2H), 5.18 (d, J =11.0 Hz, 1H), 4.98 (d, J =10.8 Hz, 1H), 3.91 - 3.81 (m, 2H), 3.57 - 3.43 (m, 2H), 3.10 (dd, J =13.6, 8.9 Hz, 1H), 2.86 (dd, J =13.6, 7.7 Hz, 1H), 2.44 - 1.85 (m, 8H) ppm. ESI-MS m/z計算值613.176，實驗值614.2 (M+1) +；滯留時間：3.96分鐘(LC方法BB)。 步驟 4 ： (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,4 ' - 四氫哌喃 ]-6- 醇 ( 化合物 205) 及 (6 R)-17-( 甲基胺基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -12,4 ' - 四氫哌喃 ]-6- 醇 ( 化合物 206)
Figure 02_image3435
(6' R)-6'-(苯甲氧基)-17'-硝基-6',15'-雙(三氟甲基)-19'-氧雜-3',4',13',18'-四氮雜螺[噁烷-4,12'-三環[12.3.1.12,5]十九烷]-1'(18'),2',4',9',14',16'-六烯( E/Z混合物) (46.4 mg，0.0748 mmol)於甲醇(3 mL)中之溶液用氮氣吹掃三次。添加鈀/碳(48.5 mg，5% w/w，0.0228 mmol)，接著反應物用氫氣吹掃兩次，且在一個大氣壓之氫氣下攪拌反應物~19小時。反應物用氮氣吹掃兩次，接著經由矽藻土墊過濾，且濾餅用甲醇(~30 mL)洗滌。減壓移除揮發物，且殘餘物藉由用5%至70%乙腈/水(+ 10 mM碳酸氫銨/氫氧化銨緩衝液，pH =10)之梯度溶離之逆相C 18層析來純化，得到兩種產物：
溶離之第一產物分離為呈黃色固體之(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,4'-四氫哌喃]-6-醇(16.7 mg，44%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.62 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 6.01 (s, 2H), 4.79 (s, 1H), 3.70 - 3.56 (m, 2H), 3.55 - 3.38 (m, 2H), 2.75 - 2.62 (m, 1H), 2.23 - 2.03 (m, 3H), 2.00 - 1.86 (m, 2H), 1.86 - 1.61 (m, 3H), 1.60 - 1.37 (m, 5H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.21 (s, 3F), -78.07 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值495.1705，實驗值496.2 (M+1) +；滯留時間：3.52分鐘(LC方法BB)。
溶離之第二產物分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-(甲基胺基)-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,4'-四氫哌喃]-6-醇(7.4 mg，19%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.60 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.16 (q, J =4.6 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 2H), 3.56 - 3.39 (m, 2H), 2.95 (d, J =5.1 Hz, 3H), 2.74 - 2.63 (m, 1H), 2.24 - 2.04 (m, 3H), 2.01 - 1.87 (m, 2H), 1.86 - 1.61 (m, 3H), 1.59 - 1.37 (m, 5H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -61.86 (s, 3F), -78.05 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值509.1862，實驗值510.2 (M+1) +；滯留時間：3.79分鐘(LC方法BB)。 實例 114 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,3 ' - 四氫呋喃 ]-6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 207) 及 (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,3 ' - 四氫呋喃 ]-6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 208)
Figure 02_image3437
步驟 1 ： N -(3- 烯丙基四氫呋喃 -3- 基 )-6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3439
在65℃下攪拌2-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(234 mg，0.4359 mmol)、3-烯丙基四氫呋喃-3-胺(鹽酸鹽) (99 mg，0.605 mmol)及DIPEA (222.6 mg，0.3 mL，1.7223 mmol)於乙腈(5 mL)中之溶液2 h，接著在室溫下攪拌19 h。將反應混合物轉移至具有碳酸氫鈉飽和水溶液(50 mL)之125 mL分液漏斗，且水層用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(25 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈橙紅色油狀之 N-(3-烯丙基四氫呋喃-3-基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(220 mg，80%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.55 (s, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 5H), 5.87 - 5.66 (m, 3H), 5.14 (dd, J =10.0, 1.2 Hz, 1H), 5.12 - 5.08 (m, 1H), 5.07 - 5.04 (m, 1H), 5.02 (dd, J =10.1, 1.3 Hz, 1H), 4.84 (d, J =10.8 Hz, 1H), 4.67 (dd, J =10.6, 1.6 Hz, 1H), 4.02 (d, J =9.5 Hz, 1H), 3.98 - 3.92 (m, 2H), 3.85 (dd, J =9.5, 1.5 Hz, 1H), 2.79 (d, J =7.3 Hz, 2H), 2.58 - 2.21 (m, 5H), 2.20 - 2.09 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -64.46 (s, 3F), -73.13 (s, 3F, 非鏡像異構物A), -73.17 (s, 3F, 非鏡像異構物B) ppm。ESI-MS m/z計算值627.1916，實驗值628.2 (M+1) +；滯留時間：4.09分鐘(LC方法BB)。 步驟 2 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,9,14(18),15- 六烯 -12,3 ' - 四氫呋喃 ] ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3441
向 N-(3-烯丙基四氫呋喃-3-基)-6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(220 mg，0.3485 mmol)於二氯乙烷(110 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣22 h。在60℃下加熱溶液，且添加第一份Zhan催化劑-1B (17.9 mg，0.0244 mmol)。在45分鐘之後，添加第二份Zhan催化劑-1B (18.2 mg，0.0248 mmol)，且繼續另外加熱3 h。將反應混合物冷卻至室溫且用DMSO (8滴)淬滅。減壓濃縮混合物，且殘餘物藉由使用梯度為0%至35%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淡琥珀色半固體狀之(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12,3'-四氫呋喃] ( E/Z混合物) (173.9 mg，82%)。ESI-MS m/z計算值599.1603，實驗值600.2 (M+1) +；滯留時間：3.88分鐘(LC方法BB)。 步驟 3 ： (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,3 ' - 四氫呋喃 ]-6- 醇
Figure 02_image3443
(6 R)-6-苯甲氧基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-12,3'-四氫呋喃] (E/Z混合物) (131.7 mg，0.2171 mmol)於乙醇(9 mL)中之溶液用氮氣吹掃三次。添加鈀/碳(131.5 mg，5% w/w，0.0618 mmol)，接著反應物用氫氣吹掃兩次，且在一個大氣壓之氫氣下攪拌反應物約22 h。反應物用氮氣吹掃兩次，接著經由矽藻土墊過濾，且濾餅用乙醇(約30 mL)洗滌。減壓移除濾液之揮發物，得到呈濃郁黃色油狀且呈非鏡像異構物之混合物之(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,3'-四氫呋喃]-6-醇(103 mg，96%)。ESI-MS m/z計算值481.1549，實驗值482.2 (M+1) +；滯留時間：3.39分鐘(LC方法BB)。 步驟 4 ： (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,3 ' - 四氫呋喃 ]-6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 207) 及 (6 R)-17- 胺基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 ) 螺 [19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -12,3 ' - 四氫呋喃 ]-6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 208)
Figure 02_image3445
(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,3'-四氫呋喃]-6-醇(103 mg)藉由逆相層析來純化，其使用AQ C 18管柱(50 g)，且用5%至70%乙腈/鹼性水(10 mM碳酸氫銨/氫氧化銨緩衝液，pH = 10)之梯度溶離。所得黃色固體藉由SFC進一步純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-5管柱(250 × 21.2 mm，5 um粒徑)，使用7% EtOH (+ 0.1% 二乙胺)/CO 2之梯度，得到兩種非鏡像異構產物：
分離出溶離之第一非鏡像異構物，接著將其溶解於乙酸乙酯(10 mL)中，且有機層依次用1 NHCl水溶液(10 mL)、碳酸氫鈉飽和水溶液(10 mL)及鹽水(10 mL)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，接著自乙腈/水中凍乾，得到呈濃郁黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,3'-四氫呋喃]-6-醇(鏡像異構物1) (44.5 mg，33%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.41 (s, 1H), 4.11 (d, J =9.5 Hz, 1H), 3.81 (td, J =8.4, 3.5 Hz, 1H), 3.71 - 3.58 (m, 2H), 2.74 (t, J =11.1 Hz, 1H), 2.31 - 2.15 (m, 2H), 2.13 - 1.95 (m, 2H), 1.80 - 1.59 (m, 2H), 1.57 - 1.35 (m, 5H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.26 (s, 3F), -78.52 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值481.1549，實驗值482.2 (M+1) +；滯留時間：3.0分鐘(LC方法C)。
分離出溶離之第二非鏡像異構物，接著將其溶解於乙酸乙酯(10 mL)中，且有機層依次用1 N HCl水溶液(10 mL)、碳酸氫鈉飽和水溶液(10 mL)及鹽水(10 mL)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，且自乙腈/水中凍乾，得到呈濃郁黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-6,15-雙(三氟甲基)螺[19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,3'-四氫呋喃]-6-醇(鏡像異構物2) (45.5 mg，34%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.26 (s, 1H), 3.90 (d, J =9.3 Hz, 1H), 3.81 - 3.65 (m, 3H), 2.46 - 2.35 (m, 1H), 2.23 - 2.06 (m, 5H), 1.68 - 1.36 (m, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.32 (s, 3F), -77.72 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值481.1549，實驗值482.2 (M+1) +；滯留時間：3.06分鐘(LC方法C)。 實例 115 ：製備 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇 ( 鏡像異構物 1 ， 反式二醇 ) ( 化合物 209) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇 ( 鏡像異構物 2 ， 反式二醇 ) ( 化合物 210)
Figure 02_image3447
步驟 1 ： 6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 -7- 酮 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3449
向在0℃下之6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-7-醇( E/Z烯烴混合物， 順式二醇) (22 mg，0.0374 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(25 mg，0.0589 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物10分鐘，且接著回流2 h。將混合物冷卻至室溫，過濾，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淡色固體狀之6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-7-酮( E/Z混合物) (20 mg，91%)。ESI-MS m/z計算值585.1447，實驗值586.2 (M+1) +；滯留時間：1.94分鐘(LC方法BB)。 步驟 2 ： 17- 胺基 -6- 羥基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -7- 酮
Figure 02_image3451
向6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-7-酮( E/Z混合物) (120 mg，0.205 mmol)於甲醇(12 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣5 min，且接著添加鈀/碳(131 mg，5% w/w，0.0615 mmol)。用氫氣球向所得混合物鼓泡5 min，且接著在1個大氣壓之氫氣下在室溫下攪拌混合物隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，用甲醇(25 mL)洗滌且減壓濃縮。所得殘餘物藉由使用梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈螢光黃色固體狀之17-胺基-6-羥基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-7-酮(66 mg，69%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.31 (s, 1H), 5.22 (br. s., 1H), 5.08 (br. s., 2H), 4.40 (br. s., 1H), 3.48 (ddd, J =19.6, 8.4, 5.0 Hz, 1H), 3.06 - 2.92 (m, 1H), 2.71 (dt, J =19.3, 5.1 Hz, 1H), 2.22 - 2.07 (m, 1H), 1.78 - 1.60 (m, 3H), 1.53 - 1.41 (m, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.30 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -63.91 (s, 3F), -74.29 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值467.1392，實驗值468.1 (M+1) +；滯留時間：4.65分鐘(LC方法AA)。 步驟 3 ： 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇
Figure 02_image3453
向在0℃下之17-胺基-6-羥基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-7-酮(36 mg，0.077 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液中添加四甲基硼氫化銨(28 mg，0.3147 mmol)。攪拌混合物隔夜，同時自0℃升溫至室溫。將混合物冷卻至0℃，且接著添加丙酮(5 mL)。在0℃下攪拌混合物10 min，且接著用碳酸氫鈉飽和水溶液(25 mL)處理。混合物用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到呈微棕色油狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,7-二醇(33 mg，80%) (87.1%純度)。ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：3.52分鐘(LC方法BB)。 步驟 4 ： 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇 ( 鏡像異構物 1 ， 反式二醇 ) ( 化合物 209) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,7- 二醇 ( 鏡像異構物 2 ， 反式二醇 ) ( 化合物 210)
Figure 02_image3455
17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,7-二醇(72 mg，0.1534 mmol)藉由SFC來純化，其使用Phenomenex銷售之LUX-5管柱(250 × 21.2 mm，5 µm粒徑)，使用10%乙醇(+ 0.1% 二乙胺)/CO 2之梯度，得到兩種單一鏡像異構物產物：
第一鏡像異構物分離為呈濃郁黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,7-二醇(鏡像異構物1， 反式二醇) (16 mg，22%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.59 (s, 1H), 7.40 (br. s., 1H), 6.00 (s, 2H), 5.45 (d, J =6.6 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.17 (q, J =6.8 Hz, 1H), 3.17 - 3.03 (m, 1H), 2.02 - 1.89 (m, 2H), 1.70 - 1.52 (m, 2H), 1.47 - 1.34 (m, 6H), 1.24 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.36 (s, 3F), -72.91 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.1 (M+1) +；滯留時間：3.51分鐘(LC方法BB)。
溶離之第二鏡像異構物分離為呈濃郁黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,7-二醇(鏡像異構物2, 反式二醇) (15.5 mg，22%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.59 (s, 1H), 7.41 (br. s., 1H), 6.00 (s, 2H), 5.45 (d, J =6.8 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.17 (q, J =6.4 Hz, 1H), 3.16 - 3.03 (m, 1H), 2.01 - 1.90 (m, 2H), 1.69 - 1.52 (m, 2H), 1.49 - 1.34 (m, 6H), 1.24 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.36 (s, 3F), -72.91 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.1 (M+1) +；滯留時間：3.51分鐘(LC方法BB)。 實例 116 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12-( 甲氧基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 211) 及 (6 R)-17- 胺基 -12-( 甲氧基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 212)
Figure 02_image3457
步驟 1 ： 1- 甲氧基己 -5- 烯 -2- 酮
Figure 02_image3459
在室溫下，歷經7 min，將2-甲氧基乙腈(1.434 g，1.5 mL，20.175 mmol)逐滴添加至溴(丁-3-烯基)鎂(40.35 mL，0.5 M，20.175 mmol)中。在回流下攪拌深紅色反應混合物2 h。接著，將混合物冷卻且用氯化銨飽和水溶液(20 mL)淬滅。產物用二乙醚(2 × 30 mL)萃取。經合併之有機層用水、鹽水洗滌，且經無水硫酸鈉乾燥，接著過濾。減壓移除濾液，得到呈棕色殘餘物之1-甲氧基己-5-烯-2-酮(1.4 g，44%)，其直接用於後續步驟中。 步驟 2 ： 1- 甲氧基己 -5- 烯 -2- 胺
Figure 02_image3461
在室溫下，向1-甲氧基己-5-烯-2-酮(1.4 g，8.8695 mmol)於甲醇(40 mL)中之溶液中添加乙酸銨(12.44 g，161.39 mmol)及氰基硼氫化鈉(761 mg，12.11 mmol)。攪拌混合物48 h，且小心地添加濃HCl直至達到pH ＜ 2，且減壓移除溶劑。將殘餘物溶解於水(15 mL)中且用二乙醚(20 mL)萃取。用固體KOH使水溶液達到pH ＞ 12，且接著用二乙醚(3 × 20 mL)萃取。經合併之有機萃取物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%甲醇/二氯甲烷之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之1-甲氧基己-5-烯-2-胺(60 mg，4%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 5.89 - 5.72 (m, 1H), 5.11 - 4.92 (m, 2H), 3.43 - 3.32 (m, 4H), 3.26 - 3.18 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.43 - 2.24 (m, 2H), 2.24 - 2.07 (m, 2H), 1.63 - 1.37 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z計算值129.1154，實驗值130.2 (M+1) +；滯留時間：2.0分鐘(LC方法BB)。 步驟 3 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-[1-( 甲氧基甲基 ) 戊 -4- 烯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3463
向1-甲氧基己-5-烯-2-胺(60 mg，0.3947 mmol)及2-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-5-[6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3,4-噁二唑(253 mg，0.5089 mmol)於乙腈(2 mL)中之溶液中逐滴添加DIPEA (296.8 mg，0.4 mL，2.2964 mmol)，且在室溫下攪拌混合物18 h。減壓移除揮發物。殘餘物藉由使用梯度為5%至80%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相層析來純化，得到呈淺黃色油狀之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-[1-(甲氧基甲基)戊-4-烯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(80 mg，32%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.57 (s, 1H), 7.41 - 7.27 (m, 5H), 6.14 (d, J =8.3 Hz, 1H), 6.04 - 5.90 (m, 1H), 5.82 - 5.68 (m, 1H), 5.34 - 5.20 (m, 2H), 5.02 - 4.88 (m, 2H), 4.81 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.64 (dd, J =10.5, 5.1 Hz, 1H), 4.60 - 4.51 (m, 1H), 3.55 - 3.45 (m, 2H), 3.40 - 3.37 (m, 3H), 3.28 - 3.20 (m, 2H), 2.13 - 2.04 (m, 2H), 1.84 - 1.73 (m, 2H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -64.72 (s, 3F), -73.49 (s, 3F, 非鏡像異構物A), -73.60 (s, 3F, 非鏡像異構物B) ppm。ESI-MS m/z計算值615.1916，實驗值616.2 (M+1) +；滯留時間：3.82分鐘(LC方法AA)。 步驟 4 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -12-( 甲氧基甲基 )-17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3465
向6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-[1-(甲氧基甲基)戊-4-烯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(80 mg，0.1261 mmol)於1,2-二氯乙烷(40 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣20 h。接著，將溶液置放於設定為60℃之油浴中，且添加第一份Zhan-1B催化劑(6.5 mg，0.0089 mmol)。在45分鐘之後，添加第二份Zhan-1B催化劑(6.5 mg，0.0089 mmol)，且另外繼續加熱5 h。一旦冷卻至室溫，反應物用DMSO (3滴)淬滅，減壓移除揮發物，且殘餘物藉由使用梯度為0%至35%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淡黃色泡沫狀之(6 R)-6-苯甲氧基-12-(甲氧基甲基)-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (37 mg，48%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.52 - 8.43 (m, 1H), 7.41 - 7.28 (m, 5H), 6.40 - 6.24 (m, 1H), 5.85 - 5.75 (m, 1H), 5.74 - 5.56 (m, 1H), 4.90 (d, J =11.0 Hz, 1H), 4.72 - 4.52 (m, 1H), 4.27 - 4.18 (m, 1H), 3.66 - 3.56 (m, 2H), 3.49 - 3.43 (m, 3H), 3.17 - 2.64 (m, 2H), 2.32 - 2.17 (m, 1H), 1.85 - 1.76 (m, 1H), 1.70 - 1.61 (m, 1H), 1.48 - 1.37 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z計算值587.1603，實驗值588.2 (M+1) +；滯留時間：3.7分鐘(LC方法C)。 步驟 5 ： (6 R)-17- 胺基 -12-( 甲氧基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 211) 及 (6 R)-17- 胺基 -12-( 甲氧基甲基 )-6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 212)
Figure 02_image3467
向(6 R)-6-苯甲氧基-12-(甲氧基甲基)-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (37 mg，0.0608 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之溶液鼓泡通入氮氣5分鐘。添加鈀/碳(39 mg，5% w/w，0.0183 mmol)，且向反應混合物鼓泡通入氫氣5分鐘，且接著在一個大氣壓之氫氣下攪拌反應物96 h。經由矽藻土墊過濾混合物，且濾餅用乙酸乙酯(30 mL)洗滌。減壓濃縮濾液。黃色殘餘物藉由用19%乙酸乙酯/庚烷溶離之矽膠層析純化，得到兩種非鏡像異構產物：
溶離之第一非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-(甲氧基甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (5.67 mg，19%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.64 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.09 (s, 2H), 5.11 (d, J =2.4 Hz, 1H), 3.74 - 3.65 (m, 1H), 3.61 - 3.55 (m, 1H), 3.53 - 3.46 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.44 - 2.35 (m, 1H), 2.29 - 2.19 (m, 1H), 2.08 - 1.96 (m, 1H), 1.68 - 1.56 (m, 2H), 1.55 - 1.37 (m, 4H), 1.07 - 0.95 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.76 (s, 3F), -79.12 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：4.55分鐘(LC方法AA)。
溶離之第二非鏡像異構物分離為呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12-(甲氧基甲基)-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (4.97 mg，17%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.64 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.08 (s, 2H), 5.13 (d, J =3.2 Hz, 1H), 3.80 - 3.72 (m, 1H), 3.61 - 3.55 (m, 1H), 3.54 - 3.47 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.39 - 2.23 (m, 2H), 2.12 - 2.00 (m, 1H), 1.75 - 1.61 (m, 2H), 1.58 - 1.35 (m, 4H), 1.12 - 1.01 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -62.75 (s, 3F), -76.32 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：4.56分鐘(LC方法AA)。 實例 117 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -15-( 二氟甲基 )-12,12- 二甲基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 213)
Figure 02_image3469
步驟 1 ： 5-( 二氟甲基 )-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3471
在密封管中在80℃下攪拌2-甲基己-5-烯-2-胺(鹽酸鹽) (1.40 g，9.3544 mmol)、6-氯-5-(二氟甲基)-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(1.9 g，6.293 mmol)及DIPEA (4.081 g，5.5 mL，31.576 mmol)於乙腈(28 mL)中之溶液1 h。使深色溶液冷卻至室溫。蒸發溶劑，且將殘餘物溶解於MTBE (40 mL)及0.5 M鹽酸溶液(60 mL)中。水溶液用MTBE (3 × 30 mL)萃取。經合併之有機層用50%氯化銨飽和水溶液(1 × 40 mL)、水(30 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，接著經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈橙色薄膜狀之5-(二氟甲基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(2.4 g，76%)。ESI-MS m/z計算值343.1344，實驗值344.2 (M+1) +；滯留時間：2.16分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 5-( 二氟甲基 )-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 - 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3473
在室溫下，將氫氧化鋰(一水合物) (2.8 g，66.725 mmol)於水(18 mL)中之溶液添加至5-(二氟甲基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(2.4 g，4.7815 mmol)於THF (18 mL)及甲醇(9 mL)中之橙色溶液中。在室溫下攪拌黃色懸浮液1 h。將所得紅色深色溶液冷卻至室溫，且真空移除有機溶劑。將殘餘甲醇與乙腈(20 mL)一起共蒸發，接著添加MTBE (60 mL)及鹽酸溶液(1 M，80 mL)，且攪拌混合物10 min。分離水溶液且用MTBE (3 × 30 mL)萃取。濃縮經合併之有機層，且殘餘物藉由使用梯度為5%至90%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相層析來純化，得到呈橙色固體狀之5-(二氟甲基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-吡啶-2-甲酸(1.4 g，60%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.23 (s, 1H), 6.75 - 6.39 (m, 1H), 6.18 (br. s., 1H), 5.86 - 5.74 (m, 1H), 5.73 - 5.65 (m, 1H), 5.10 - 4.99 (m, 1H), 4.96 (d, J =10.1 Hz, 1H), 2.14 - 1.96 (m, 4H), 1.53 (br. s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -115.13至-115.65 (m, 2F) ppm。ESI-MS m/z計算值329.1187，實驗值328.6 (M-1) -；滯留時間：1.94分鐘(LC方法C)。 步驟 3 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ]-5-( 二氟甲基 )-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 - 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3475
在室溫下，將HATU (2.0 g，5.2600 mmol)添加至5-(二氟甲基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-吡啶-2-甲酸(1.4 g，2.8697 mmol)、(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(1.45 g，5.0301 mmol)及DIPEA (2.6712 g，3.6 mL，20.668 mmol)於DMF (7 mL)中之橙色溶液中。在室溫下攪拌溶液1.5 h。DMF溶液直接藉由使用梯度為5%至75%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相層析來純化，得到呈淺黃色固體狀之 N '-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-5-(二氟甲基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-吡啶-2-碳醯肼(2.26 g，定量)。 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -73.76 (s, 3F), -115.07至-116.18 (m, 2F) ppm。ESI-MS m/z計算值599.2167，實驗值600.3 (M+1) +；滯留時間：3.75分鐘(LC方法BB)。 步驟 4 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-3-( 二氟甲基 )- N-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基 )-5- 硝基 - 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3477
在室溫下， N '-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯基]-5-(二氟甲基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-吡啶-2-碳醯肼(2.26 g，3.7695 mmol)及1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(715 mg，6.3741 mmol)於DCM (100 mL)中之溶液用2-氯-1,3-二甲基-4,5-二氫咪唑-1-鎓;氯化物(895 mg，5.2942 mmol)於DCM (80 mL)中之溶液處理。咪唑鎓中間物之形成係在15 min內完成。蒸發DCM，且將殘餘物溶解於甲苯(250 mL)中。在100℃下攪拌混合物隔夜。深棕色混合物用水(150 mL)淬滅，且分離水溶液且接著用MTBE (3 × 80 mL)萃取。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到橙色油狀物(2.39 g)。此油狀物藉由使用梯度為1%至35% MTBE/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色固體狀之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(二氟甲基)- N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-吡啶-2-胺(1.75 g，80%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.30 (s, 1H), 7.44 - 7.23 (m, 5H), 6.81 - 6.44 (m, 1H), 6.05 - 5.89 (m, 1H), 5.83 - 5.63 (m, 2H), 5.30 - 5.18 (m, 2H), 5.04 - 4.88 (m, 2H), 4.82 (d, J =10.5 Hz, 1H), 4.65 (d, J =10.5 Hz, 1H), 3.22 (d, J =6.4 Hz, 2H), 2.12 - 1.86 (m, 4H), 1.48 (s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -73.46 (s, 3F), -115.13至-116.66 (m, 2F) ppm。ESI-MS m/z計算值581.2061，實驗值582.3 (M+1) +；滯留時間：2.43分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -15-( 二氟甲基 )-12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3479
向6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(二氟甲基)- N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-吡啶-2-胺(1.75 g，3.0063 mmol)於DCE (530 mL)中之淺黃色溶液鼓泡通入氮氣隔夜。在室溫下添加Zhan催化劑-1B (60 mg，0.0818 mmol)，且鼓泡通入氮氣5 min。接著，在65℃下攪拌淺綠色溶液30 min，且在65℃下以30 min間隔，分兩份再次添加Zhan催化劑-1B (120 mg，0.1696 mmol)，且攪拌混合物3.5 h。將棕色溶液冷卻至室溫，接著添加DMSO (6 mL)以淬滅催化劑。減壓移除溶劑，且殘餘物藉由使用梯度為1%至100% MTBE/庚烷之矽膠層析純化，得到粗產物，該粗產物藉由使用梯度為5%至100%乙腈/水(+ 0.1%甲酸)之逆相層析進一步純化，得到呈黃色固體狀之(6 R)-6-苯甲氧基-15-(二氟甲基)-12,12-二甲基-17-硝基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (341 mg，20%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.27 (s, 1H), 7.45 - 7.24 (m, 5H), 6.82 - 6.41 (m, 1H), 5.79 - 5.57 (m, 3H), 4.86 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.54 (d, J =11.0 Hz, 1H), 3.08 (dd, J =14.1, 3.7 Hz, 1H), 2.70 (dd, J =14.2, 8.5 Hz, 1H), 2.60 - 2.48 (m, 1H), 2.22 - 2.08 (m, 1H), 2.05 - 1.91 (m, 2H), 1.44 (d, J =9.4 Hz, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 氯仿-d) δ -73.01 (s, 3F), -115.34 (dd, J =53.1, 12.3 Hz, 2F) ppm. ESI-MS m/z計算值553.1748，實驗值554.2 (M+1) +；滯留時間：2.34分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -15-( 二氟甲基 )-12,12- 二甲基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -17- 胺
Figure 02_image3481
將鈀/碳(66 mg，5% w/w，0.062 mmol)添加至(6 R)-6-苯甲氧基-15-(二氟甲基)-12,12-二甲基-17-硝基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (340 mg，0.6112 mmol)於THF (7 mL)中之脫氣溶液中。黑色懸浮液用氮氣吹掃5 min，接著向懸浮液鼓泡通入氫氣5 min。接著，在氫氣氛圍下在室溫下攪拌混合物兩夜。再次添加鈀/碳(85 mg，5% w/w，0.7987 mmol)，且在氫氣氛圍下再攪拌混合物兩夜。黑色懸浮液用氮氣吹掃，且接著經由矽藻土塞過濾。濾餅用DCM (3 × 5 mL)洗滌，且減壓濃縮濾液，得到呈螢光黃色油狀之(6 R)-6-苯甲氧基-15-(二氟甲基)-12,12-二甲基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-胺(290 mg，24%)。ESI-MS m/z計算值525.22，實驗值526.4 (M+1) +；滯留時間：2.40分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： (6 R)-17- 胺基 -15-( 二氟甲基 )-12,12- 二甲基 -6-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 213)
Figure 02_image3483
在室溫下，將鈀/碳(160 mg，5% w/w，0.1503 mmol)添加至(6 R)-6-苯甲氧基-15-(二氟甲基)-12,12-二甲基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-胺(290 mg，0.4304 mmol)於THF (8 mL)中之脫氣溶液中。黑色懸浮液用氮氣吹掃5 min，接著向懸浮液鼓泡通入氫氣5 min。在氫氣氛圍下在室溫下攪拌混合物隔夜。黑色懸浮液用氮氣吹掃，且接著經由矽藻土塞過濾，且濾餅用DCM (3 × 5 mL)洗滌。真空濃縮濾液，得到螢光黃色油，該螢光黃色油藉由使用梯度為5%至80%乙腈/水(+ 0.02% HCl)之逆相層析來純化，在凍乾之後得到呈黃色固體狀之預期產物(45mg，94.5%純度)。此固體藉由使用梯度為1%至10% EtOAc/DCM之矽膠層析進一步純化，得到呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-15-(二氟甲基)-12,12-二甲基-6-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(29 mg，15%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ 7.58 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.18 (t, J =53.7 Hz, 1H), 5.86 (s, 2H), 5.20 (s, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 1H), 2.27 - 2.14 (m, 1H), 2.12 - 1.98 (m, 1H), 1.89 - 1.75 (m, 1H), 1.71 - 1.57 (m, 1H), 1.54 - 1.37 (m, 5H), 1.34 (s, 3H), 1.29 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO -d6) δ -78.22 (s, 3F), -114.57至-115.76 (m, 1F), -115.76至-116.87 (m, 1F) ppm。ESI-MS m/z計算值435.1694，實驗值436.3 (M+1) +；滯留時間：3.21分鐘(LC方法C)。 實例 118 ：製備 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,10- 二醇 ( 非鏡像異構物 1) ( 化合物 214) 及 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,10- 二醇 ( 非鏡像異構物 2) ( 化合物 215)
Figure 02_image3485
步驟 1 ： N -(3- 羥基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image3487
在氮氣氛圍下，將 N-(1,1-二甲基-3-側氧基-丙基)胺基甲酸三級丁酯(3.29 g，14.712 mmol)之溶液冷卻至-78℃，且歷經30分鐘用溴(乙烯基)鎂(35 mL，1 M，35 mmol)逐滴處理。將反應混合物保持在此溫度下30 min，且接著轉移至0℃冰浴，且保持在此溫度下3 h。接著，混合物用200 mL NH 4Cl飽和水溶液淬滅。混合物用二乙醚(3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(200 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析(120 g，乾燥負載，用0%至45%二乙醚/己烷溶離40分鐘)純化，得到呈透明液體狀之 N-(3-羥基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基甲酸三級丁酯(1.9 g，47%)。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 5.96 – 5.81 (m, 1H), 5.30 – 5.19 (m, 2H (乙烯質子及OH )), 5.12 – 5.05 (m, 1H), 4.39 – 4.31 (m, 1H), 1.84 – 1.71 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (s, 3H)。 步驟 2: 4-[ 三級丁 基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -2- 甲基 - 己 -5- 烯 -2- 胺
Figure 02_image3489
將 N-(3-羥基-1,1-二甲基-戊-4-烯基)胺基甲酸三級丁酯(2.23 g，9.7246 mmol)及2,6-二甲基吡啶(4.2559 g，4.6 mL，39.718 mmol)於無水DCM (60 mL)中之溶液冷卻至0℃。接著歷經15 min逐滴添加三氟甲烷磺酸三級丁基二甲基矽酯(15.539 g，13.5 mL，58.785 mmol)。將反應混合物升溫至室溫且攪拌2 h，接著用二氯甲烷(100 mL)稀釋，且添加飽和碳酸氫鈉溶液(150 mL)。攪拌二相混合物15 min，且分離各層。水層用二氯甲烷(3 × 100 mL)進一步萃取，且經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且蒸發。殘餘物藉由逆相層析(緩衝液A：用0.05% TFA緩衝之水；緩衝液B：用0.05% TFA緩衝之乙腈，自30%緩衝液B至90%緩衝液B溶離40分鐘)來純化，得到呈透明黃色油狀之4-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-2-甲基-己-5-烯-2-胺(0.91 g，38%)。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 5.88 (ddd, J = 17.2, 10.2, 7.0 Hz, 1H), 5.23 – 5.14 (m, 1H), 5.08 – 5.00 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 12.2, 6.6 Hz, 1H), 1.61 (dd, J = 14.0, 7.2 Hz, 1H), 1.47 (dd, J = 14.0, 4.9 Hz, 1H), 1.09 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.11 (s, 3H), 0.06 (s, 3H). ESI-MS m/z計算值243.2018，實驗值244.4 (M+1) +；滯留時間：2.82分鐘(LC方法G)。 步驟 3 ： 6-[[3-[ 三級丁 基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ] 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3491
向6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1 g，3.514 mmol)於乙腈(40 mL)中之溶液中添加4-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-2-甲基-己-5-烯-2-胺(0.91 g，3.7378 mmol)及DIEA (1.4098 g，1.9 mL，10.908 mmol)。在室溫下攪拌所得黃色溶液24 h，且接著在40℃下加熱隔夜。冷卻至室溫後，減壓移除溶劑，且殘餘物藉由矽膠層析(120 g，乾燥負載，自0%至10%二乙醚/己烷溶離45分鐘)純化，得到呈白色固體狀之6-[[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(0.96 g，56%)。ESI-MS m/z計算值491.2063，實驗值492.0 (M+1) +；滯留時間：4.56分鐘(LC方法G)。 步驟 4 ： 6-[[3-[ 三級丁 基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ] 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3493
向6-[[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(0.96 g，1.9529 mmol)於THF (30 mL)及MeOH (9 mL)中之溶液中添加LiOH (0.6 g，25.054 mmol)於水(15 mL)中之溶液。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，且用5%檸檬酸水溶液酸化至pH = 2。水層用二乙醚(3 × 75 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且真空濃縮，得到呈黃色固體狀之6-[[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(0.95 g，100%)。ESI-MS m/z計算值477.1907，實驗值477.9 (M+1) +；滯留時間：4.18分鐘(LC方法G)。 步驟 5 ： N ' -[(2 R)-2- 苯甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 戊 -4- 烯醯基 ]-6-[[3-[ 三級丁 基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ] 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3495
向(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯醯肼(0.7 g，2.4283 mmol)及6-[[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(0.95 g，1.9495 mmol)於EtOAc (30 mL)中之混合物中添加吡啶(782.4 mg，0.8 mL，9.8913 mmol)及丙基膦酸酐溶液(2.5656 g，2.4 mL，50% w/w於EtOAc中，4.0316 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。向反應混合物中添加1 M NaHCO 3水溶液(200 mL)且攪拌15 min。混合物用EtOAc (3 × 100 mL)萃取，且經合併之有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經乾燥(Na 2SO 4)，過濾且濃縮。油性殘餘物藉由矽膠層析(40 g，乾燥負載，自0%至45%二乙醚/己烷溶離30分鐘)純化，得到呈黃色固體狀之 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基) 戊-4-烯醯基]-6-[[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1 g，69%)。ESI-MS m/z計算值747.2887，實驗值748.4 (M+1) +；滯留時間：4.52分鐘(LC方法G)。 步驟 6 ： 6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-[3-[ 三級丁 基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -1,1- 二甲基 - 戊 -4- 烯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3497
向 N'-[(2 R)-2-苯甲氧基-2-(三氟甲基) 戊-4-烯醯基]-6-[[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基]胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(0.32 g，0.4279 mmol)及DIEA (185.5 mg，0.25 mL，1.4353 mmol)於乙腈(7 mL)中之溶液中添加TsCl (125 mg，0.6557 mmol)，且在室溫下攪拌混合物1 h。濃縮反應混合物，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(75 mL)中。有機層用5% NaHCO 3水溶液(2 × 75 mL)、水(2 × 75 mL)、鹽水(75 mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾且濃縮。殘餘物藉由矽膠層析(12 g，乾燥負載，且用0%至15%二乙醚/己烷溶離30分鐘)純化，得到呈透明黃色油狀之6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(311 mg，100%)。ESI-MS m/z計算值729.2781，實驗值730.4 (M+1) +；滯留時間：4.9分鐘(LC方法G)。 步驟 7 ： 5-[[6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-5- 甲基 - 己 -1- 烯 -3- 醇
Figure 02_image3499
在室溫下，向6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-[3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-1,1-二甲基-戊-4-烯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(790 mg，1.0825 mmol)於甲醇(25 mL)中之溶液中添加1 N HCl水溶液(1.6 mL，1 M，1.6 mmol)。在室溫下攪拌反應物6 h。反應混合物用飽和碳酸氫鈉溶液(100 mL)稀釋且用二乙醚(3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈黃色固體狀之5-[[6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-5-甲基-己-1-烯-3-醇(0.67 g，100%)。ESI-MS m/z計算值615.1916，實驗值616.3 (M+1) +；滯留時間：4.06分鐘(LC方法G)。 步驟 8 ：乙酸 [3-[[6-[5-[(1 R)-1- 苯甲氧基 -1-( 三氟甲基 ) 丁 -3- 烯基 ]-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-3- 甲基 -1- 乙烯基 - 丁酯 ]
Figure 02_image3501
向5-[[6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-5-甲基-己-1-烯-3-醇(146.5 mg，0.238 mmol)於無水二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加吡啶(58.68 mg，60 μL，0.7418 mmol)、乙酸酐(43.28 mg，40 μL，0.4239 mmol)及催化量之DMAP (7.9 mg，0.0647 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物24 h，且接著真空濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析純化，得到呈淺黃色凝膠狀之乙酸[3-[[6-[5-[(1 R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-3-甲基-1-乙烯基-丁酯] (154.5 mg，99%)。ESI-MS m/z計算值657.2022，實驗值658.7 (M+1) +；滯留時間：4.11分鐘(LC方法G)。 步驟 9 ：乙酸 [(6 R)-6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,8,14(18),15- 六烯 -10- 基酯 ] ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3503
在室溫下將Zhan催化劑-1B (145 mg，0.1973 mmol)混合於甲苯(40 mL)中，且用N 2脫氣30分鐘。單獨地，含乙酸[3-[[6-[5-[(1R)-1-苯甲氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-3-甲基-1-乙烯基-丁酯] (353 mg，0.5315 mmol)之甲苯(10 mL)用N 2脫氣15分鐘，且接著在有效攪拌下將其逐份添加至含有含催化劑之甲苯的預加熱(110℃)燒瓶中。在110℃下加熱混合物16 h。添加更多Zhan催化劑-1B (64 mg，0.0871 mmol)，且在相同溫度下另外繼續反應3 h。將反應混合物冷卻至室溫，且接著添加EtOAc (50 ml)及鹽水(40 ml)。分離有機層，且經無水MgSO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由使用梯度為0%至20%乙酸乙酯/己烷之矽膠層析(40 g管柱)純化，得到呈棕色油狀之乙酸[(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-10-基酯] ( E/Z混合物) (149 mg，20%)。ESI-MS m/z計算值629.1709，實驗值630.5 (M+1) +；滯留時間：3.96分鐘(LC方法G)。 步驟 10 ： (6 R)-6- 苯甲氧基 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 -10- 醇 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3505
向在室溫下之乙酸[(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-10-基酯] ( E/Z混合物) (12 mg，0.0191 mmol)於MeOH (0.5 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(14 mg，0.1013 mmol)，且在室溫下攪拌混合物3 h。添加鹽水(15 mL)及二氯甲烷(20 ml)，且分離各層。濃縮有機層。殘餘物藉由使用梯度為0%至40% EtOAc/己烷之矽膠層析(12 g管柱)純化，得到呈無色油狀之(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-10-醇( E/Z混合物) (11 mg，93%)。ESI-MS m/z計算值587.1603，實驗值588.5 (M+1) +；滯留時間：4.12分鐘(LC方法G)。 步驟 11 ： (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,10- 二醇
Figure 02_image3507
向(6 R)-6-苯甲氧基-12,12-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-10-醇( E/Z混合物) (110 mg，0.1779 mmol)於EtOH (5 mL)中之溶液中添加5% Pd/C (180 mg，0.0846 mmol)。混合物用氫氣吹掃若干次，且接著在Parr振盪器上在50 psi下氫化6 h。經由矽藻土墊過濾反應混合物，用甲醇洗滌。濃縮濾液，得到呈綠黃色泡沫狀之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,10-二醇(77 mg，88%)。ESI-MS m/z計算值469.1549，實驗值470.5 (M+1) +；滯留時間：3.61分鐘(LC方法G)。 步驟 12 ： (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,10- 二醇 ( 非鏡像異構物 1) ( 化合物 214) 及 (6 R)-17- 胺基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6,10- 二醇 ( 非鏡像異構物 2) ( 化合物 215)
Figure 02_image3509
外消旋(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,10-二醇(75 mg，0.1358 mmol)藉由對掌性SFC來純化，其使用Chiral Cel OJ管柱(250 × 21.2 mm，5 μm粒徑)，用12% MeOH (20 mM NH 3)/88% CO 2溶離，流速為70 mL/min，得到呈黃色固體狀且呈溶離之第一峰之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,10-二醇(非鏡像異構物1) (19.9 mg，62%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.63 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 5.97 (s, 2H), 4.47 (s, 1H), 4.28 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 3.89 – 3.76 (m, 1H), 3.60 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.37 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 1.95 (tt, J = 11.3, 5.6 Hz, 1H), 1.75 – 1.60 (m, 1H), 1.59 – 1.47 (m, 3H), 1.47 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.03 (dd, J = 13.7, 9.8 Hz, 1H). ESI-MS m/z計算值469.15485，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：1.52分鐘(LC方法A)。
溶離之第二峰提供呈黃色固體狀之(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,10-二醇(非鏡像異構物2) (25.5 mg，79%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.60 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.00 (s, 2H), 4.48 (s, 1H), 4.31 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 3.76 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.65 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.44 (t, J = 12.9 Hz, 2H), 1.97 (dd, J = 13.6, 9.5 Hz, 1H), 1.70 - 1.52 (m, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.11 (dd, J = 13.8, 8.9 Hz, 1H). ESI-MS m/z計算值469.15485，實驗值470.2 (M+1) +；滯留時間：1.49分鐘(LC方法A)。 實例 119 ：製備 17- 胺基 -7- 氟 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 216) 、 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 217) 、 17- 胺基 -7,7- 二氟 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 218) 及 17- 胺基 -7,7- 二氟 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 219)
Figure 02_image3511
步驟 1 ： 6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3513
向壓力管中之6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.72 g，7.5280 mmol) 於MeOH (60 mL)中之溶液中添加一水合肼(3.35 g，66.919 mmol)。在85℃下攪拌混合物4 h，冷卻至室溫且濃縮。將殘餘物與甲苯(2 × 20 mL)一起共蒸發，且藉由用20%至60% EtOAc/庚烷之梯度溶離)之矽膠急驟層析來純化，得到呈淡黃色油狀之6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(2.7 g，99%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.34 (s, 1H), 5.84 - 5.71 (m, 1H), 5.44 (br. s, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 2H), 3.39 (br. s, 3H), 2.09 - 1.93 (m, 4H), 1.49 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.45 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值361.1362，實驗值362.2 (M+1) +；滯留時間：1.96分鐘(LC方法E)。 步驟 2 ： 3,3- 二氟 -2- 羥基 - 戊 -4- 烯酸乙酯
Figure 02_image3515
向在10℃下之3-溴-3,3-二氟-丙-1-烯(4.8 g，30.582 mmol)及含2-側氧基乙酸乙酯之甲苯(5.9 mL，50% w/v，28.896 mmol)於DMF (60 mL)及水(18 mL)中之溶液中添加銦(7 g，60.966 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，接著添加冰水(200 mL)。攪拌所得混合物30 min，用三級丁基甲基醚(100 mL)稀釋，經由矽藻土過濾，且濾餅用三級丁基甲基醚洗滌。水相用 t BuOCH 3(2 × 100 mL)反萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物(5.8 g)藉由矽膠急驟層析(50%至100%二氯甲烷/戊烷)來純化，得到呈無色油狀之3,3-二氟-2-羥基-戊-4-烯酸乙酯(4.283 g，82%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 6.10 - 5.93 (m, 1H), 5.82 - 5.72 (m, 1H), 5.58 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.43 - 4.27 (m, 3H), 3.22 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -107.00至-107.85 (m, 1F), -108.89至-109.75 (m, 1F)。ESI-MS m/z計算值180.0598，實驗值181.2 (M+1) +；滯留時間：1.47分鐘。(LC方法E)。 步驟 3 ： 2- 苯甲氧基 -3,3- 二氟 - 戊 -4- 烯酸乙酯
Figure 02_image3517
向在0℃下之3,3-二氟-2-羥基-戊-4-烯酸乙酯(2.45 g，11.832 mmol)於二氯甲烷(19 mL)及無水庚烷(38 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氯乙醯亞胺苯甲酯(7 g，27.72 mmol)。在0℃下攪拌混合物5 min，且逐滴添加三氟甲磺酸(400 mg，2.6653 mmol)，得到白色沈澱。將混合物緩慢升溫至室溫，且在室溫(5至19℃)下攪拌隔夜，且接著冷卻至0℃，且用二氯甲烷(50 mL)稀釋。添加NaHCO 3飽和水溶液(20 mL)，且分離兩層，且水層用二氯甲烷(2 × 30 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(梯度：0%至10% EtOAc/庚烷)純化，得到呈透明油狀之2-苯甲氧基-3,3-二氟-戊-4-烯酸乙酯(1.56 g，46%)。在LCMS上產物不可電離。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.45 - 7.31 (m, 5H), 6.16 - 6.00 (m, 1H), 5.80 - 5.71 (m, 1H), 5.56 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.33 - 4.16 (m, 3H), 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -102.91至-103.81 (m, 1F), -106.39至-107.27 (m, 1F)。滯留時間：4.4分鐘(LC方法AA)。 步驟 4 ： 2- 苯甲氧基 -3,3- 二氟 - 戊 -4- 烯酸
Figure 02_image3519
向2-苯甲氧基-3,3-二氟-戊-4-烯酸乙酯(1.55 g，5.735 mmol)於DCE (60 mL)中之溶液中添加三甲基氫氧化錫(1.88 g，10.397 mmol)。在82℃下攪拌混合物30 h且冷卻至室溫。添加矽膠(8 g)。減壓濃縮混合物。藉由矽膠層析(梯度為0%至15% MeOH/二氯甲烷)純化，得到呈無色油狀之2-苯甲氧基-3,3-二氟-戊-4-烯酸(1.14 g，78%)。在LCMS上產物不可電離。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.42 - 7.31 (m, 5H), 6.13 - 5.97 (m, 1H), 5.77 (dt, J = 17.4, 2.2 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.83 - 4.70 (m, 2H), 4.25 (t, J = 9.4 Hz, 1H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -103.47至-104.44 (m, 1F), -106.04至-106.95 (m, 1F)。滯留時間：1.86分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： N ' -(2- 苯甲氧基 -3,3- 二氟 - 戊 -4- 烯醯基 )-6-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基胺基 )-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 碳醯肼
Figure 02_image3521
向250 mL乾燥燒瓶中饋入2-苯甲氧基-3,3-二氟-戊-4-烯酸(806 mg，3.3276 mmol)及二氯甲烷(20 mL)。添加草醯氯(573 mg，0.3938 mL，4.5144 mmol)，隨後逐滴添加DMF (292 mg，0.3093 mL，3.9949 mmol)。在室溫下攪拌混合物1 h。歷經15 min逐滴添加6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.80 g，4.9817 mmol)及DIEA (1.3 g，1.752 mL，10.059 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液。在添加之後，在室溫下攪拌反應混合物1 h。添加NaHCO 3飽和水溶液(15 mL)及水(15 mL)。分離兩層，且水層用二氯甲烷(2 × 30 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟層析(自5%至40% EtOAc/庚烷溶離)及第二矽膠急驟層析(用5% EtOAc/二氯甲烷溶離)來純化，得到呈淡黃色固體狀之 N'-(2-苯甲氧基-3,3-二氟-戊-4-烯醯基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.33 g，68%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.05 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.74 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.45 - 7.31 (m, 5H), 6.12 - 5.96 (m, 1H), 5.85 - 5.71 (m, 2H), 5.57 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.46 (br. s, 1H), 5.08 - 4.91 (m, 2H), 4.88 - 4.77 (m, 2H), 4.26 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 2.11 - 1.96 (m, 4H), 1.52 (d, J = 1.5 Hz, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.50 (s, 3F), -104.56至-105.38 (m, 1F), -106.39至-107.22 (m, 1F)。ESI-MS m/z計算值585.2011，實驗值586.2 (M+1) +；滯留時間：2.23分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： 6-[5-(1- 苯甲氧基 -2,2- 二氟 - 丁 -3- 烯基 )-1,3,4- 噁二唑 -2- 基 ]- N-(1,1- 二甲基戊 -4- 烯基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 胺
Figure 02_image3523
向在0℃下之 N'-(2-苯甲氧基-3,3-二氟-戊-4-烯醯基)-6-(1,1-二甲基戊-4-烯基胺基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-碳醯肼(1.33 g，2.2715 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液中添加DIEA (1.76 g，2.3720 mL，13.618 mmol)，隨後逐滴添加三氟甲磺酸酐(961 mg，3.4061 mmol)。在0℃下攪拌混合物30 min。添加嗎啉(1.2 g)。在0℃下攪拌混合物5 min。添加NaHCO 3飽和水溶液(25 mL)。分離兩層，且水層用二氯甲烷(2 × 30 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟層析(用0%至30% EtOAc/庚烷之梯度溶離)來純化，得到呈淡黃色油狀之6-[5-(1-苯甲氧基-2,2-二氟-丁-3-烯基)-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(938 mg，73%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.52 (s, 1H), 7.41 - 7.29 (m, 5H), 6.08 (dq, J = 17.5, 11.5 Hz, 1H), 5.81 - 5.69 (m, 2H), 5.62 - 5.52 (m, 2H), 5.11 - 4.90 (m, 3H), 4.80 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.10 - 1.92 (m, 4H), 1.49 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.56 (s, 3F), -103.99至-104.84 (m, 1F), -107.22至-108.19 (m, 1F)。ESI-MS m/z計算值567.1905，實驗值568.2 (M+1) +；滯留時間：2.39分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： 6- 苯甲氧基 -7,7- 二氟 -12,12- 二甲基 -17- 硝基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,8,14,16- 六烯 ( E/Z 混合物 )
Figure 02_image3525
向乾燥的1 L燒瓶中饋入6-[5-(1-苯甲氧基-2,2-二氟-丁-3-烯基)-1,3,4-噁二唑-2-基]- N-(1,1-二甲基戊-4-烯基)-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(420 mg，0.7401 mmol)及1,2-二氯乙烷(400 mL)。向溶液鼓泡通入氮氣1 h且加熱至75℃。快速添加第2代Grubbs催化劑(130 mg，0.1531 mmol)於1,2-二氯乙烷(5 mL)中之溶液。在75℃下攪拌混合物40 min。添加更多含第2代Grubbs催化劑(60 mg，0.0707 mmol)之1,2-二氯乙烷(5 mL)。在75℃下攪拌混合物1 h且冷卻至室溫。添加DMSO (385 mg)。在室溫下攪拌混合物10 min且在矽膠(20 g)上濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟層析(用0%至30% EtOAc/庚烷之梯度溶離)來純化，得到呈粗淡黃色油狀之粗物質6-苯甲氧基-7,7-二氟-12,12-二甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯(180 mg)。此材料藉由逆相層析(管柱：100 g Aq C 18。梯度：5%至95% MeCN/水+ 0.1%甲酸調節劑)進一步純化。減壓濃縮含有產物之級分以移除大部分乙腈。殘餘物用NaHCO 3飽和水溶液(10 mL)處理且用EtOAc (3 × 20 mL)萃取。將有機層合併且經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈淡黃色油狀之6-苯甲氧基-7,7-二氟-12,12-二甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (160.2 mg，40%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.46 (s, 1H), 7.40 - 7.30 (m, 5H), 6.36 - 6.25 (m, 1H), 6.06 - 5.93 (m, 1H), 5.57 (br. s, 1H), 5.21 (dd, J = 8.1, 2.0 Hz, 1H), 4.77 - 4.66 (m, 2H), 2.84 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 2.40 - 2.28 (m, 1H), 2.17 - 2.07 (m, 1H), 1.86 (dd, J = 14.2, 6.8 Hz, 1H), 1.46 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.14 (s, 3F), -92.09至-92.96 (m, 1F), -110.61 (dd, J = 254.8, 20.4 Hz, 1F)。ESI-MS m/z計算值539.1592，實驗值540.2 (M+1) +；滯留時間：2.3分鐘(LC方法E)。 步驟 8 ： 17- 胺基 -7,7- 二氟 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇、 17- 胺基 -7- 氟 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 非鏡像異構物之混合物 ) ( 化合物 216) 及 17- 胺基 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 化合物 217)
Figure 02_image3527
向100 mL燒瓶中之6-苯甲氧基-7,7-二氟-12,12-二甲基-17-硝基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯( E/Z混合物) (175 mg，0.3244 mmol)於MeOH (15 mL)中之溶液中添加10% Pd/C (50%潤濕，82 mg，5% w/w，0.0385 mmol)。燒瓶中之空氣經由真空經氮氣置換三次。氮氣經由真空經氫氣置換六次。在氫氣(氣球)下在室溫下攪拌反應混合物16 h。經由矽藻土過濾混合物，且濾餅用EtOAc洗滌。濃縮濾液，且殘餘物藉由矽膠急驟層析(用10%至50% EtOAc/庚烷溶離)來純化，得到三種產物。
分離出呈黃色固體狀之主要產物17-胺基-7,7-二氟-12,12-二甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(102 mg，73%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.28 (s, 1H), 5.38 - 5.27 (m, 1H), 4.94 (br. s, 2H), 4.46 (br. s, 1H), 3.29 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 2.54 - 2.10 (m, 4H), 1.97 - 1.73 (m, 2H), 1.64 - 1.49 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 1.36 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -63.87 (s, 3F), -101.77至-103.92 (m, 2F). ESI-MS m/z計算值421.1537，實驗值422.3 (M+1) +；滯留時間：3.15分鐘(LC方法C)。
單脫氟副產物(20 mg)藉由矽膠層析(梯度為20%至50% EtOAc/庚烷)進一步純化。減壓濃縮所需級分，且凍乾殘餘物，得到呈黃色固體狀之17-胺基-7-氟-12,12-二甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非鏡像異構物之混合物) (16 mg，12%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.56 (s, 1H), 6.58 (d, J = 6.1 Hz, 0.5H), 6.52 (d, J = 6.6 Hz, 0.5H), 6.00 - 5.85 (m, 2H), 5.29 - 4.77 (m, 2H), 4.62 (s, 0.5H), 4.56 (s, 0.5H), 3.05 - 2.80 (m, 1H), 2.17 - 1.97 (m, 1H), 1.95 - 1.62 (m, 3H), 1.60 - 1.41 (m, 3H), 1.39 - 1.27 (m, 6H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) δ -62.22 (s, 3F), -184.41至-186.39 (m, 1F)。ESI-MS m/z計算值403.1631，實驗值404.2 (M+1) +；滯留時間：3.09分鐘(LC方法C)。
雙脫氟副產物(10 mg)藉由矽膠層析(梯度為20%至70% MTBE/庚烷)純化且冷凍經燥，得到呈黃色固體狀之17-胺基-12,12-二甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(8 mg，6%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.55 (s, 1H), 6.06 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 5.89 (s, 2H), 4.98 - 4.89 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 2.63 - 2.51 (m, 1H), 2.10 - 1.95 (m, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 1H), 1.59 - 1.37 (m, 6H), 1.34 (s, 3H), 1.30 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) δ -62.18 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值385.1726，實驗值386.2 (M+1) +；滯留時間：3.62分鐘(LC方法BB)。 步驟 9 ： 17- 胺基 -7,7- 二氟 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 218) 及 17- 胺基 -7,7- 二氟 -12,12- 二甲基 -15-( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 219)
Figure 02_image3529
使外消旋17-胺基-7,7-二氟-12,12-二甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(102 mg，0.2382 mmol)經受SFC分離，其使用以下條件：管柱Phenomenex Lux 5 μm，纖維素4 (250 × 21.2 mm)；6.7 mg/注射；溶離劑：10% EtOH (0.1% 二乙胺)/90% CO 2；流速：75 mL/min；濃度：22.2 mg/mL於甲醇中(無調節劑)；注射體積：300 μL；出口壓力：100巴；波長：250 nm；溫度：40℃。
減壓濃縮含有第一溶離化合物之級分。將殘餘物溶解於乙腈(2.2 mL)中，且添加水(1.8 mL)。所得透明黃色溶液經冷凍乾燥，得到材料，該材料藉由矽膠層析(梯度為30%至50% EtOAc/庚烷)再次純化，隨後冷凍乾燥，得到呈黃色固體狀之17-胺基-7,7-二氟-12,12-二甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (40 mg，40%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.59 (s, 1H), 7.19 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.97 (s, 2H), 5.32 - 5.22 (m, 1H), 4.61 (s, 1H), 2.58 - 2.51 (m, 1H), 2.47 - 2.31 (m, 1H), 2.27 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 1.98 (m, 1H), 1.89 - 1.74 (m, 1H), 1.64 - 1.42 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.35 - 1.29 (m, 1H), 1.27 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) δ -62.30 (s, 3F), -99.00至-100.99 (m, 2F)。ESI-MS m/z計算值421.1537，實驗值422.2 (M+1) +；滯留時間：4.45分鐘(LC方法AA)。
減壓濃縮含有第二溶離化合物之級分。將殘餘物溶解於乙腈(2.5 mL)中，且添加水(2.2 mL)。所得透明黃色溶液經冷凍乾燥，得到材料，該材料藉由矽膠層析(梯度為30%至50% EtOAc/庚烷)再次純化，隨後冷凍乾燥，得到呈黃色固體狀之17-胺基-7,7-二氟-12,12-二甲基-15-(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (41 mg，41%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.59 (s, 1H), 7.19 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.97 (s, 2H), 5.32 - 5.23 (m, 1H), 4.61 (s, 1H), 2.58 - 2.51 (m, 1H), 2.46 - 2.31 (m, 1H), 2.28 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 1.99 (m, 1H), 1.89 - 1.75 (m, 1H), 1.63 - 1.42 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.35 - 1.29 (m, 1H), 1.27 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) δ -62.29 (s, 3F), -99.01至-100.95 (m, 2F)。ESI-MS m/z計算值421.1537，實驗值422.2 (M+1) +；滯留時間：4.45分鐘(LC方法AA)。 實例 120 ：製備 [(6 R)-6- 羥基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -17- 基 ] 硼酸 ( 化合物 220)
Figure 02_image3531
步驟 1 ： [(6 R)-6- 羥基 -12,12- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(17),2,4,14(18),15- 五烯 -17- 基 ] 硼酸 ( 化合物 220)
Figure 02_image3533
向(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(225 mg，0.4963 mmol)及雙(頻哪醇基)二硼(375 mg，1.4767 mmol)於乙腈(6 mL)中之溶液中添加亞硝酸三級丁酯(346.80 mg，0.4 mL，3.3631 mmol)，且在80℃下攪拌混合物15分鐘。減壓移除揮發物，且將粗材料與利用以下之此相同反應之另外批次合併：(6 R)-17-胺基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(117 mg，0.2581 mmol)、雙(頻哪醇基)二硼(160 mg，0.6301 mmol)、亞硝酸三級丁酯(108.38 mg，0.125 mL，1.051 mmol)及乙腈(3 mL)。經合併之粗產物藉由逆相層析(C 18管柱，梯度為5%至100%甲醇/水+ 0.1%甲酸調節劑)來純化，在此期間頻哪醇硼酸酯水解成硼酸，得到呈黃色固體狀之[(6 R)-6-羥基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]硼酸(37 mg，42%純度)。將此材料(0.0322 mmol)與由類似合成製備之其他兩個批次之相同材料(12 mg，78%純度，0.0194 mmol)及17 mg，60%純度，0.0212 mmol)合併，且經合併之材料藉由逆相層析(C 18管柱，梯度為5%至100%乙腈/鹼性水(碳酸氫銨/氫氧化銨緩衝液，pH = 10))進一步純化，在凍乾之後得到呈淺黃色固體狀之[(6 R)-6-羥基-12,12-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]硼酸(8.8 mg，2%總產率)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.73 (s, 2H), 8.14 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 5.52 (s, 1H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 2.34 - 2.21 (m, 1H), 2.09 - 1.96 (m, 1H), 1.74 - 1.65 (m, 1H), 1.63 - 1.53 (m, 1H), 1.43 (br. s., 7H), 1.36 (s, 3H), 1.29 - 1.18 (m, 1H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) δ -62.02 (s, 3F), -78.34 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值482.156，實驗值481.2 (M-1) -；滯留時間：3.81分鐘(LC方法BB)。 實例 121 ：製備 17- 胺基 -10,10- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 221) 及 17- 胺基 -10,10- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 222)
Figure 02_image3535
Figure 02_image3537
步驟 1 ： 5,5- 二甲基氧雜環庚 -2- 酮
Figure 02_image3539
向4,4-二甲基環己酮(6.1 g，48.338 mmol)於二氯甲烷(120 mL)中之溶液中添加 間氯過氧化苯甲酸(17.5 g，75% w/w，76.058 mmol)。在室溫下於暗處攪拌混合物2天且過濾。濾餅用二氯甲烷-戊烷(1:1，20 mL)洗滌。在0℃下，將濾液添加至碳酸鈉(6 g，56 mmol)、水(50 mL)及10%硫代硫酸鈉水溶液(50 mL)之混合物中。在0℃下攪拌所得混合物10 min，且轉移至分液漏斗。有機層用飽和NaHCO 3(50 mL)及鹽水(20 mL)洗滌，且經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈白色固體狀之5,5-二甲基氧雜環庚-2-酮(6.87 g，100%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.22 – 4.18 (m, 2H), 2.62 - 2.58 (m, 2H), 1.67 - 1.63 (m, 2H), 1.58 - 1.54 (m, 2H), 1.02 (s, 6H). ESI-MS m/z計算值142.0994，實驗值143.2 (M+1) +；滯留時間：1.54分鐘。(LC方法E)。 步驟 2 ： 6- 羥基 -4,4- 二甲基 - 己酸甲酯
Figure 02_image3541
向5,5-二甲基氧雜環庚-2-酮(6.87 g，48.314 mmol)於MeOH (100 mL)中之溶液中添加硫酸(0.8 g，0.4348 mL，95% w/w，7.7488 mmol)。在回流下攪拌混合物1 h。濃縮混合物，且殘餘物用二乙醚(100 mL)溶解。所得溶液用飽和NaHCO 3(50 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，且經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷(100 mL)中，且再次經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到8.02 g無色油狀物，該無色油狀物由所需產物6-羥基-4,4-二甲基-己酸甲酯及雜質6-羥基-4,4-二甲基-己酸(6-甲氧基-3,3-二甲基-6-側氧基-己酯)之5:1混合物組成。所需產物6-羥基-4,4-二甲基-己酸甲酯表徵：ESI-MS m/z計算值316.225，實驗值317.3 (M+1) +；滯留時間：1.98分鐘(LC方法E)。不純的產物混合物直接用於隨後步驟中。 步驟 3 ： 4,4- 二甲基 -6-( p- 甲苯基磺醯基氧基 ) 己酸甲酯
Figure 02_image3543
向在0℃下之7.2 g 6-羥基-4,4-二甲基-己酸甲酯及雜質6-羥基-4,4-二甲基-己酸(6-甲氧基-3,3-二甲基-6-側氧基-己酯)之5:1混合物於二氯甲烷(100 mL)中之溶液中添加Et 3N (10 g，83.98 mmol)，隨後添加甲苯磺醯氯(10 g，52.453 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。添加冰水(100 mL)。混合物用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取。經合併之有機層用飽和NaHCO 3(20 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由用0%至30%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到11.8 g無色油狀物，該無色油狀物由所需產物4,4-二甲基-6-( 對甲苯基磺醯基氧基)己酸甲酯及雜質6-[4,4-二甲基-6-( 對甲苯基磺醯基氧基)己醯基]氧基-4,4-二甲基-己酸酯之5:1混合物組成。所需產物4,4-二甲基-6-( 對甲苯基磺醯基氧基)己酸甲酯表徵：ESI-MS m/z計算值470.2338，實驗值471.3 (M+1) +；滯留時間：2.27分鐘(LC方法E)。不純的產物混合物直接用於隨後步驟中。 步驟 4 ： 6-( 二苯甲基胺基 )-4,4- 二甲基 - 己酸甲酯
Figure 02_image3545
向11.8 g 4,4-二甲基-6-( 對甲苯基磺醯基氧基)己酸甲酯及雜質6-[4,4-二甲基-6-( 對甲苯基磺醯基氧基)己醯基]氧基-4,4-二甲基-己酸酯之5:1混合物於 正丁醇(150 mL)中之溶液中添加二苯甲基胺(21 g，106.45 mmol)，隨後添加DIEA (4 g，5.3908 mL，30.949 mmol)。在100℃下攪拌混合物45 h，冷卻且濃縮。將殘餘物(47 g)溶解於乙酸乙酯(300 mL)中，且用飽和NaHCO 3(200 mL)洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由用0%至20%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之6-(二苯甲基胺基)-4,4-二甲基-己酸甲酯(7.59 g，50% (3步驟))。ESI-MS m/z計算值353.2355，實驗值354.3 (M+1) +；滯留時間：1.8分鐘(LC方法E)。 步驟 5 ： 6-( 二苯甲基胺基 )-4,4- 二甲基 - 己 -1- 醇
Figure 02_image3547
歷經10 min，向在0℃下之LiAlH 4(1.13 g，29.773 mmol)於THF (100 mL)中之懸浮液中添加6-(二苯甲基胺基)-4,4-二甲基-己酸甲酯(7.59 g，21.471 mmol)於THF (100 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物隔夜且冷卻至0℃。添加THF (150 mL)，隨後緩慢添加水(1.2 g)於THF (10 mL)中之溶液、25% NaOH水溶液(1.2 g)及水(3.6 g)。在室溫下攪拌所得混合物30 min，經由矽藻土過濾，且濾餅用THF洗滌。濾液經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由用0%至40%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之6-(二苯甲基胺基)-4,4-二甲基-己-1-醇(6.69 g，96%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.49 - 7.16 (m, 10H), 3.57 (br. s, 4H), 3.51 - 3.37 (m, 3H), 2.52 - 2.30 (m, 2H), 1.62 - 1.51 (m, 3H), 1.42 - 1.30 (m, 3H), 0.80 (s, 6H). ESI-MS m/z計算值325.2406，實驗值326.3 (M+1) +；滯留時間：1.72分鐘(LC方法E)。 步驟 6 ： N , N- 二苯甲基 -6- 溴 -3,3- 二甲基 - 己 -1- 胺
Figure 02_image3549
向在0℃下之6-(二苯甲基胺基)-4,4-二甲基-己-1-醇(6.69 g，20.554 mmol)於二氯甲烷(200 mL)中之溶液中添加四溴化碳(8.2 g，24.727 mmol)及三苯基膦(6.6 g，25.163 mmol)。使混合物緩慢升溫至室溫，且在室溫下攪拌隔夜。混合物在矽膠上濃縮，且藉由用0%至10%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之 N, N-二苯甲基-6-溴-3,3-二甲基-己-1-胺(6.04 g，76%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.42 - 7.28 (m, 8H), 7.26 - 7.19 (m, 2H), 3.57 (s, 4H), 3.25 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.47 - 2.38 (m, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 2H), 1.49 - 1.42 (m, 2H), 1.23 - 1.15 (m, 2H), 0.80 (s, 6H). ESI-MS m/z計算值387.1562，實驗值388.2 (M+1) +；滯留時間：1.95分鐘(LC方法E)。 步驟 7 ： 8-( 二苯甲基胺基 )-2- 羥基 -6,6- 二甲基 -2-( 三氟甲基 ) 辛酸乙酯
Figure 02_image3551
向在氮氣下之配備有回流冷凝器之乾燥的100 mL三頸燒瓶中饋入鎂(581 mg，23.905 mmol)及碘(185 mg，0.7289 mmol)，且在室溫下純(neat)攪拌混合物10分鐘且接著加熱至40℃。歷經8分鐘逐滴添加 N, N-二苯甲基-6-溴-3,3-二甲基-己-1-胺(4.61 g，11.87 mmol)於二乙醚(7 mL)中之溶液。在40℃下攪拌混合物10分鐘且接著在30℃下攪拌1 h。將所得混合物冷卻至室溫，且用二乙醚(7 mL)稀釋，接著在-78℃下，歷經15分鐘藉由注射器將其逐滴添加至三氟丙酮酸乙酯(2 g，11.759 mmol)於THF (45 mL)中之冷卻溶液中。在-78℃下攪拌混合物10分鐘。使反應混合物歷經1 h緩慢升溫至室溫，且在室溫下攪拌1.5 h。將反應混合物冷卻至0℃，且用飽和氯化銨水溶液(100 mL)淬滅。所得混合物用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取。經合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物(6.5 g)藉由用0%至40%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到呈無色油狀之8-(二苯甲基胺基)-2-羥基-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸乙酯(2.13 g，37%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.38 - 7.27 (m, 8H), 7.25 - 7.18 (m, 2H), 4.34 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.76 (s, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 4H), 2.39 (dd, J = 79.8, 5.1 Hz, 2H), 1.93 - 1.81 (m, 1H), 1.80 - 1.69 (m, 1H), 1.47 - 1.37 (m, 3H), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.13 - 1.03 (m, 2H), 1.01 - 0.90 (m, 1H), 0.75 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -78.65 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值479.2647，實驗值480.3 (M+1) +；滯留時間：2.05分鐘(LC方法E)。 步驟 8 ： 8- 胺基 -2- 羥基 -6,6- 二甲基 -2-( 三氟甲基 ) 辛酸乙酯
Figure 02_image3553
在室溫下在氫氣(氣球)下攪拌8-(二苯甲基胺基)-2-羥基-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸乙酯(2.13 g，4.4414 mmol)及20%氫氧化鈀/碳(360 mg，50%潤濕，10% w/w，0.2563 mmol)於EtOH (60 mL)中之混合物24 h。添加更多20%氫氧化鈀/碳(360 mg，50%潤濕，10% w/w，0.2563 mmol)。在氫氣(氣球)下在室溫下攪拌混合物2天。經由矽藻土過濾混合物且用EtOAc洗滌。濃縮濾液且與庚烷/EtOAc一起共蒸發(以移除微量EtOH)，得到呈無色油狀之8-胺基-2-羥基-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸乙酯(1.32 g，99%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.43 - 4.31 (m, 2H), 2.68 (dd, J = 10.3, 6.1 Hz, 2H), 2.15 (br. s, 3H), 1.99 - 1.90 (m, 1H), 1.87 - 1.76 (m, 1H), 1.55 - 1.42 (m, 1H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.30 - 1.14 (m, 4H), 1.10 - 0.99 (m, 1H), 0.85 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -78.64 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值299.1708，實驗值300.2 (M+1) +；滯留時間：1.69分鐘(LC方法E)。 步驟 9 ： 6-[(7- 乙氧基羰基 -8,8,8- 三氟 -7- 羥基 -3,3- 二甲基 - 辛基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3555
向8-胺基-2-羥基-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸乙酯(1.32 g，4.4098 mmol)於乙腈(25 mL)中之溶液中添加6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.3 g，4.5682 mmol)及DIEA (2.8 g，3.7736 mL，21.665 mmol)。在60至65℃下攪拌混合物2.5 h。將混合物冷卻至室溫且在矽膠上濃縮。殘餘物藉由用0%至20%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到呈淡黃色固體狀之6-[(7-乙氧基羰基-8,8,8-三氟-7-羥基-3,3-二甲基-辛基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.86 g，77%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.47 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 5.59 (br. s, 1H), 4.37 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.85 (s, 1H), 3.63 - 3.54 (m, 2H), 2.01 - 1.91 (m, 1H), 1.90 - 1.80 (m, 1H), 1.54 - 1.44 (m, 2H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.31 - 1.18 (m, 3H), 1.13 - 1.01 (m, 1H), 0.92 (d, J = 2.4 Hz, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.31 (s, 3F), -78.63 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值547.1753，實驗值548.2 (M+1) +；滯留時間：2.24分鐘(LC方法E)。 步驟 10 ： 6-[(7- 苯甲氧基 -7- 乙氧基羰基 -8,8,8- 三氟 -3,3- 二甲基 - 辛基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image3557
向在0℃下之6-[(7-乙氧基羰基-8,8,8-三氟-7-羥基-3,3-二甲基-辛基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.63 g，2.9775 mmol)於DMF (16 mL)中之溶液中逐份添加NaH (253 mg，60% w/w，6.3256 mmol)。在0℃下攪拌混合物20 min。添加苯甲基溴(766 mg，4.4786 mmol)。將混合物緩慢升溫至室溫且在室溫下攪拌3 h。將混合物冷卻至0℃，且添加NH 4Cl (0.6 g)。在0℃下攪拌混合物30 min。添加碎冰(80 g)。攪拌混合物直至大部分冰融化。沈澱藉由過濾收集且溶解於EtOAc (20 mL)中。濾液用三級丁基甲基醚/庚烷(2:1，2 × 80 mL)萃取。將所有有機層(溶解於EtOAc中之沈澱及三級丁基甲基醚/庚烷洗滌液)合併且經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由用0%至20%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到淡黃色油狀之6-[(7-苯甲氧基-7-乙氧基羰基-8,8,8-三氟-3,3-二甲基-辛基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.965 g，95%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.46 (s, 1H), 7.44 - 7.27 (m, 5H), 5.56 (br. s, 1H), 4.81 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.33 (qd, J = 7.1, 0.9 Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.58 - 3.49 (m, 2H), 2.01 - 1.92 (m, 2H), 1.54 - 1.44 (m, 4H), 1.33 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.25 - 1.18 (m, 2H), 0.90 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.31 (s, 3F), -70.52 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值637.2223，實驗值638.3 (M+1) +；滯留時間：2.47分鐘(LC方法E)。 步驟 11 ： 2- 苯甲氧基 -8-[[6-( 肼羰基 )-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-6,6- 二甲基 -2-( 三氟甲基 ) 辛酸乙酯
Figure 02_image3559
在80℃下攪拌壓力管中之6-[(7-苯甲氧基-7-乙氧基羰基-8,8,8-三氟-3,3-二甲基-辛基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.96 g，2.8282 mmol)及一水合肼(1.23 g，24.57 mmol)於MeOH (30 mL)中之混合物隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於EtOAc中且用水(20 mL)洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由用20%至60%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠層析純化，得到呈淡黃色固體狀之2-苯甲氧基-8-[[6-(肼羰基)-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸乙酯(1.67 g，93%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.33 (s, 1H), 7.43 - 7.29 (m, 5H), 5.48 (br. s, 1H), 4.82 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.38 - 4.29 (m, 2H), 4.11 (br. s, 2H), 3.55 - 3.45 (m, 2H), 2.03 - 1.93 (m, 2H), 1.60 - 1.42 (m, 4H), 1.33 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.28 - 1.20 (m, 3H), 0.92 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.28 (s, 3F), -70.40 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值637.2335，實驗值638.3 (M+1) +；滯留時間：2.27分鐘(LC方法E)。 步驟 12 ： 2- 苯甲氧基 -8-[[6-[( 三級丁 氧基羰基胺基 ) 胺甲醯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-6,6- 二甲基 -2-( 三氟甲基 ) 辛酸乙酯
Figure 02_image3561
向2-苯甲氧基-8-[[6-(肼羰基)-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸乙酯(1.67 g，2.6193 mmol)、4-(二甲基胺基)吡啶(55 mg，0.4502 mmol)及二異丙基乙胺(1.1 g，1.4825 mL，8.5111 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液中添加二碳酸二三級丁酯(1.5 g，1.5789 mL，6.8729 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，接著在矽膠上濃縮。殘餘物藉由用0%至30%乙酸乙酯/庚烷之梯度溶離之矽膠純化，得到淡黃色油狀之2-苯甲氧基-8-[[6-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸乙酯(1.21 g，63%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.50 (s, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 5H), 5.50 (br. s, 1H), 4.80 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.38 - 4.28 (m, 2H), 3.58 - 3.47 (m, 2H), 2.00 - 1.88 (m, 2H), 1.58 (s, 9H), 1.55 - 1.47 (m, 6H), 1.39 - 1.30 (m, 5H), 0.89 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -63.97 (s, 3F), -70.41 - -70.51 (m, 3F). ESI-MS m/z計算值737.2859，實驗值682.3 (M-55) +；滯留時間：2.68分鐘(LC方法E)。 步驟 13 ： 2- 苯甲氧基 -8-[[6-[( 三級丁氧基羰基胺基 ) 胺甲醯基 ]-5- 硝基 -3-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-6,6- 二甲基 -2-( 三氟甲基 ) 辛酸
Figure 02_image3563
向2-苯甲氧基-8-[[6-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸乙酯(1 g，1.3556 mmol)於MeOH (20 mL)中之溶液中添加NaOH (230 mg，5.7504 mmol)於水(5 mL)中之溶液。在45℃下攪拌混合物5 h，且在43℃下攪拌16 h。將混合物冷卻至室溫且減壓濃縮以移除大部分MeOH。殘餘物用水(10 mL)稀釋且冷卻至0℃。逐滴添加HCl水溶液(1 N，5.3 mL)。所得混合物用EtOAc (3 × 20 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到混雜有一些雙Boc副產物之呈淡黃色泡沫狀之2-苯甲氧基-8-[[6-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸(914 mg，95%)。ESI-MS m/z計算值709.25464，實驗值654.2 (M-55) +；滯留時間：4.9分鐘(LC方法AA)。 步驟 14 ： 6-[(7- 苯甲氧基 -7- 羧基 -8,8,8- 三氟 -3,3- 二甲基 - 辛基 ) 胺基 ]-3- 硝基 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲酸
Figure 02_image3565
向2-苯甲氧基-8-[[6-[(三級丁氧基羰基胺基)胺甲醯基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-6,6-二甲基-2-(三氟甲基)辛酸(914 mg，1.2880 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之溶液中逐滴添加含HCl之1,4-二噁烷(10 mL，4 M，40 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。在30℃下減壓濃縮反應混合物且與EtOAc (3 × 20 mL)一起共蒸發。殘餘物藉由逆相層析(梯度為5%至80%乙腈/水)來純化。減壓濃縮所需級分，且殘餘物經冷凍乾燥，得到呈淡黃色固體狀之6-[(7-苯甲氧基-7-羧基-8,8,8-三氟-3,3-二甲基-辛基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(450 mg，57%)。 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) δ -63.16至-63.54 (m, 3F), -70.23至-70.52 (m, 3F)。ESI-MS m/z計算值595.1753，實驗值596.3 (M+1) +；滯留時間：3.2分鐘(LC方法C)。 步驟 15 ： 9- 苯甲氧基 -5,5- 二甲基 -15- 硝基 -9,17- 雙 ( 三氟甲基 )-2,11,12,18- 四氮雜雙環 [12.3.1] 十八碳 -1(17),14(18),15- 三烯 -10,13- 二酮
Figure 02_image3567
向6-[(7-苯甲氧基-7-羧基-8,8,8-三氟-3,3-二甲基-辛基)胺基]-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(42 mg，0.0635 mmol)於DMF (30 mL)中之溶液中添加DIEA (60 mg，0.4642 mmol)、含1-羥基-7-氮雜苯并三唑之二甲基乙醯胺(0.16 mL，1 M，0.16 mmol)及六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻(80 mg，0.1809 mmol)。在30℃下攪拌混合物，且歷經16 h時段逐滴添加用DMF (5 mL)稀釋之肼於THF之溶液(0.08 mL，1 M，0.08 mmol)。添加之後，在30℃下攪拌反應混合物3 h，且減壓濃縮。藉由使用梯度為0%至40%乙酸乙酯/庚烷之矽膠層析純化，得到呈淡黃色油狀之9-苯甲氧基-5,5-二甲基-15-硝基-9,17-雙(三氟甲基)-2,11,12,18-四氮雜雙環[12.3.1]十八碳-1(17),14(18),15-三烯-10,13-二酮(37 mg，84%，純度= 85%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.39 (br. s, 1H), 8.06 (br. s, 1H), 7.49 - 7.28 (m, 4H), 7.03 - 6.89 (m, 2H), 5.44 (br. s, 1H), 4.69 - 4.51 (m, 1H), 4.46 - 4.18 (m, 2H), 3.28 - 3.13 (m, 1H), 2.38 - 2.24 (m, 1H), 2.17 - 2.06 (m, 1H), 1.92 - 1.74 (m, 1H), 1.45 - 1.29 (m, 5H), 0.99 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -63.92 (s, 3F), -74.18 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值591.1916，實驗值592.2 (M+1) +；滯留時間：4.62分鐘(LC方法AA)。 步驟 16 ： 6- 苯甲氧基 -10,10- 二甲基 -17- 硝基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯
Figure 02_image3569
向在0℃下之9-苯甲氧基-5,5-二甲基-15-硝基-9,17-雙(三氟甲基)-2,11,12,18-四氮雜雙環[12.3.1]十八碳-1(17),14(18),15-三烯-10,13-二酮(55 mg，0.0895 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加DIEA (70 mg，0.5416 mmol)，隨後逐滴添加三氟甲磺酸酐(51 mg，0.1808 mmol)。在0℃下攪拌混合物50 min。添加嗎啉(150 mg)以淬滅反應物。在0℃下攪拌5 min之後，混合物用NaHCO 3飽和水溶液(6 mL)處理，且用二氯甲烷(3 × 10 mL)萃取。經合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(梯度為0%至30%乙酸乙酯/庚烷)純化，得到呈淡黃色油狀之6-苯甲氧基-10,10-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯(46 mg，87%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.54 (s, 1H), 7.37 - 7.27 (m, 5H), 5.99 - 5.88 (m, 1H), 5.00 - 4.90 (m, 2H), 3.68 - 3.54 (m, 1H), 3.51 - 3.39 (m, 1H), 2.41 - 2.30 (m, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 1.70 - 1.59 (m, 1H), 1.51 - 1.31 (m, 5H, 與庚烷重疊), 0.89 (s, 3H, 與庚烷重疊), 0.87 (s, 3H, 與庚烷重疊)。 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.16 (s, 3F), -73.53 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值573.1811，實驗值574.2 (M+1) +；滯留時間：5.19分鐘(LC方法AA)。 步驟 17 ： 17- 胺基 -10,10- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇
Figure 02_image3571
向6-苯甲氧基-10,10-二甲基-17-硝基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯(46 mg，0.0779 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加10%鈀/碳(46 mg，50%潤濕，5% w/w，0.0216 mmol)。燒瓶中之空氣經由真空經氮氣置換3次。燒瓶中之氮氣經由真空經氫氣置換6次。藉由注射器添加含氨水之MeOH (0.38 mL，2 M，0.76 mmol)。在氫氣(氣球)氛圍下在室溫下攪拌反應混合物隔夜。經由矽藻土過濾混合物，用EtOAc洗滌，且真空濃縮濾液。將殘餘物溶解於MeOH (5 mL)中。添加10% Pd/C (60 mg，50%潤濕，5% w/w，0.0282 mmol)。燒瓶中之空氣經由真空經氮氣置換3次。燒瓶中之氮氣經由真空經氫氣置換6次。藉由注射器添加含氨水之MeOH (0.38 mL，2 M，0.76 mmol)。在氫氣(氣球)氛圍下在室溫下攪拌反應混合物隔夜。經由矽藻土過濾混合物，用EtOAc洗滌，且真空濃縮濾液。藉由矽膠層析(梯度為10%至40% EtOAc/庚烷)純化，得到呈黃色固體狀之17-胺基-10,10-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(25 mg，71%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.32 (s, 1H), 4.82 (br. s, 1H), 3.77 (br. s, 1H), 3.56 (td, J = 12.8, 4.2 Hz, 1H), 3.33 (td, J = 12.9, 4.5 Hz, 1H), 2.33 - 2.16 (m, 2H), 1.88 - 1.61 (m, 3H), 1.59 - 1.41 (m, 3H), 1.33 - 1.14 (m, 2H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl 3) δ -64.09 (s, 3F), -79.37 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值453.1599，實驗值454.2 (M+1) +；滯留時間：4.67分鐘(LC方法AA)。 步驟 18 ： 17- 胺基 -10,10- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 1) ( 化合物 221) 及 17- 胺基 -10,10- 二甲基 -6,15- 雙 ( 三氟甲基 )-19- 氧雜 -3,4,13,18- 四氮雜三環 [12.3.1.12,5] 十九碳 -1(18),2,4,14,16- 五烯 -6- 醇 ( 鏡像異構物 2) ( 化合物 222)
Figure 02_image3573
外消旋17-胺基-10,10-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(41 mg，0.0905 mmol)藉由SFC來純化，其使用以下條件：Phenomenex Lux 5 µm，纖維素4管柱(250 × 21.2 mm)；9.6 mg/注射；溶離劑：10% MeOH，90% CO 2；流速：75 mL/min；濃度：13.7 mg/mL於甲醇中(無調節劑)；注射體積：700 µL；出口壓力：100巴；波長：220 nm；溫度：40℃。
減壓濃縮來自對掌性SFC分離之含有第一溶離化合物之級分。殘餘物再次藉由矽膠層析(梯度為0%至40% EtOAc/庚烷)純化且經冷凍乾燥，得到呈黃色固體狀之17-胺基-10,10-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物1) (13 mg，32%，99.9% ee)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.57 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.18 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 5.89 - 5.79 (m, 2H), 3.48 - 3.35 (m, 1H), 3.28 - 3.15 (m, 1H), 2.24 - 2.12 (m, 1H), 2.11 - 2.00 (m, 1H), 1.77 - 1.57 (m, 3H), 1.55 - 1.44 (m, 1H), 1.43 - 1.26 (m, 2H), 0.87 (s, 3H), 0.83 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) δ -62.94 (s, 3F), -78.03 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值453.15994，實驗值454.2 (M+1) +；滯留時間：4.68分鐘(LC方法AA)。
減壓濃縮來自對掌性SFC分離之含有第二溶離化合物之級分。殘餘物再次藉由矽膠層析(梯度為0%至40% EtOAc/庚烷)純化且經冷凍乾燥，得到呈黃色固體狀之17-胺基-10,10-二甲基-6,15-雙(三氟甲基)-19-氧雜-3,4,13,18-四氮雜三環[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(鏡像異構物2) (18 mg，44%，99.9% ee)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.57 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.18 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 5.91 - 5.76 (m, 2H), 3.47 - 3.35 (m, 1H), 3.28 - 3.16 (m, 1H), 2.24 - 2.12 (m, 1H), 2.11 - 2.00 (m, 1H), 1.77 - 1.57 (m, 3H), 1.54 - 1.44 (m, 1H), 1.43 - 1.26 (m, 2H), 0.87 (s, 3H), 0.83 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) δ -62.94 (s, 3F), -78.03 (s, 3F). ESI-MS m/z計算值453.15994，實驗值454.2 (M+1) +；滯留時間：4.68分鐘(LC方法AA)。 實例 122 ：生物活性分析 CFTR 介導之短路電流之尤斯 (Ussing) 腔室分析
使用來源於F508del及最小函數CFTR突變(F508del/MF-HBE)異型接合之CF個體之人類支氣管上皮(HBE)細胞進行尤斯腔室實驗，且如先前所描述培養(Neuberger T, Burton B, Clark H, Van Goor F Methods Mol Biol 2011:741:39-54)。四天後，移除頂部培養基且在使用前細胞在空氣液體界面生長＞14天。此產生有纖毛(表徵人類支氣管呼吸道上皮之特徵)之單層完全分化柱狀細胞。
為分離CFTR介導之短路(I SC)電流，將Costar® Snapwell™細胞培養物插入件上生長之F508del/MF-HBE安裝於尤斯腔室中且在37℃下量測低電壓-夾鉗記錄條件(V 保持=0 mV)之經上皮I SC。基側溶液含有(以mM計) 145 NaCl、0.83 K 2HPO 4、3.3 KH 2PO 4、1.2 MgCl 2、1.2 CaCl 2、10葡萄糖、10 HEPES (pH用NaOH調節至7.4)，且頂端溶液含有(以mM計) 145 NaGluconate、1.2 MgCl 2、1.2 CaCl 2、10葡萄糖、10 HEPES (pH用NaOH調節至7.4)及30 µM胺氯吡脒以阻擋上皮鈉離子通道。將毛喉素(20 µM)添加至頂端表面以活化CFTR，繼而頂端添加由BPO、GlyH-101及CFTR抑制劑172 (各自在20 µM最終分析濃度下)組成之CFTR抑制劑混合液以特定地分離CFTR電流。在抑制後自峰毛喉素反應至穩態電流，測定針對各條件之CFTR介導之I SC(µA/cm 2) 。 增效劑化合物之鑑別
於如上文所描述之尤斯腔室研究中測定CFTR介導之I SC上CFTR增效劑化合物之活性。將F508del/MF-HBE細胞培養物與在一系列濃度下之增效劑化合物以及10 µM (14 S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ 6-硫雜-3,9,11,18,23-五氮雜四環[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮一起在37℃下及在20%人類血清存在下培育18-24小時。在18-24小時培育期間所使用之增效劑化合物及(14 S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ 6-硫雜-3,9,11,18,23-五氮雜四環[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮之濃度在整個CFTR介導之I SC之尤斯腔室量測中保持恆定，以確保化合物在整個全部實驗中存在。將假定的F508del增效劑之功效及效能與已知頂點增效劑艾伐卡托(ivacaftor) ( N-[2,4-雙(1,1-二甲基乙基)-5-羥基苯基]-1,4-二氫-4-側氧基喹啉-3-甲醯胺)之功效及效能進行比較。
下表表示使用此實例中描述之分析產生之代表性本發明化合物之CFTR調節活性(EC 50：+++為＜ 500 nM；++為500 nM - 1 µM；+為＞ 1 µM；及ND為「此分析未測定」)。 表 10 ：生物活性
化合物編號 結構 EC50
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Figure 02_image3943
 +
196
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197
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 +++
198
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199
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 +++
200
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204
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205
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 +++
206
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207
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 +++
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209
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211
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221
Figure 02_image3994
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222
Figure 02_image3996
 ND
其他實施例
前述論述僅揭示且描述本發明之例示性實施例。熟習此項技術者將根據此類論述及圖式及申請專利範圍容易認識到，可在不背離如以下申請專利範圍中所定義的本發明之精神及範疇的情況下在其中進行各種改變、修改及變化。
圖 1提供非晶形化合物4 (純形式)之X射線粉末繞射(XRPD)圖。
圖 2提供非晶形化合物4 (純形式)之熱重分析(TGA)曲線。
圖 3提供非晶形化合物4 (純形式)之DSC分析。
圖 4提供非晶形化合物19 (純形式)之XRPD圖。
圖 5提供非晶形化合物19 (純形式)之TGA曲線。
圖 6提供非晶形化合物19 (純形式)之DSC分析。
圖 7提供結晶化合物41形式A之XRPD圖。
圖 8提供結晶化合物41形式A之TGA曲線。
圖 9提供結晶化合物52形式A (純)之XRPD圖。
圖 10提供結晶化合物52形式A (純)之TGA曲線。
圖 11提供結晶化合物52形式A (純)之DSC分析。
圖 12提供非晶形化合物60 (純形式)之XRPD圖。
圖 13提供非晶形化合物60 (純形式)之TGA曲線。
圖 14提供非晶形化合物60 (純形式)之DSC分析。
圖 15提供非晶形化合物70 (純形式)之XRPD圖。
圖 16提供結晶化合物163形式A (純)之XRPD圖。
圖 17提供結晶化合物163形式A (純)之DSC分析。
圖 18提供非晶形化合物173 (純形式)之XRPD圖。
圖 19提供非晶形化合物173 (純形式)之TGA曲線。
圖 20提供非晶形化合物173 (純形式)之DSC分析。
Figure 110143003-A0101-11-0002-1

Claims (87)

  1. 一種選自式 I化合物之化合物：
    Figure 03_image001
    I， 及其氘化衍生物及醫藥學上可接受之鹽，其中： X係選自-N( R X1 )-及
    Figure 03_image3999
    ； 環 A為4至6員雜環基，其視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基及側氧基之基團取代； R X1 係選自H、C 1-C 6烷基((視情況經1-3個獨立地選自羥基、側氧基、-O R X2 及-N( R X2 ) 2之基團取代)及C 3-C 8環烷基； 各 R X2 係獨立地選自H及C 1-C 6烷基； 各 Y係獨立地選自-C( R Y ) 2-、-O-、-CO-、-N R YN -及
    Figure 03_image4001
    ，其中各 R YN 係獨立地選自H、C 1-C 4烷基及CO 2 R YN1 ，其中各 R YN1 係獨立地選自C 1-C 4烷基及C 3-C 6環烷基； 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-O R Y1 、-CO 2 R Y1 、-CO R Y1 、-CON( R Y1 ) 2及-N( R Y1 ) 2； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環；或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵； 各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基； 環 B係選自： C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、C 1-C 6烷基及C 1-C 6烷氧基之基團取代)， C 3-C 8環烷基， 5至10員雜芳基，及 3至6員雜環基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)； 各 Q係獨立地選自： C 1-C 6烷基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： 鹵素， 側氧基， C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及-OCF 3之基團取代)，及 C 3-C 8環烷基， C 3-C 8環烷基，其視情況經1-3個獨立地選自以下之基團取代： 鹵素， CN， C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、-NH 2及-NHCOMe之基團取代)， C 1-C 6烷氧基， C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)，及 C 3-C 8環烷基， C 6-C 10芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： 鹵素， CN， C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及羥基之基團取代)， C 1-C 6烷氧基，其視情況經1-4個獨立地選自以下之基團取代： 鹵素， C 3-C 8環烷基(視情況經CF 3取代)， C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素、CF 3、OCF 3及C 1-C 6烷基之基團取代)，及 C 6-C 10芳基， 5至10員雜芳基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： 鹵素， C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)， C 3-C 8環烷基(視情況經1-3個CF 3基團取代)，及 3至10員雜環基， 3至10員雜環基，其視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代： C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自側氧基及C 3-C 8環烷基之基團取代)，及 側氧基； 各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自羥基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)、3至6員雜環基、-B(O R 2 ) 2、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 、-PO(O R 2 ) 2及-PO( R 2 ) 2； 各 R 2 係獨立地選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1至6個獨立地選自鹵素之基團取代)、C 1-C 6氟烷基及C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷基及C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)； Z係選自
    Figure 03_image4003
    、
    Figure 03_image4005
    、
    Figure 03_image4007
    及
    Figure 03_image4009
    ；其中 環 C係選自C 6-C 10芳基及5至10員雜芳基； R Z1 係選自氫、-CN、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基； R Z2 係選自氫、鹵素、羥基、NH 2、NH(CO)(C 1-C 6烷基)及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)， 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團； 各 R Z3 係獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷基及C 6-C 10芳基；或兩個 R Z3 一起形成3至6員雜環基； n係選自4、5、6、7及8；及 m係選自0、1、2及3。
  2. 如請求項1之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 X為-N( R X1 )-。
  3. 如請求項1之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 X為
    Figure 03_image4011
    。
  4. 如請求項1之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 X係選自： -NH-、-N(CH 3)-、-N(CH 2CH 3)-、
    Figure 03_image4013
    、
    Figure 03_image4015
    、
    Figure 03_image4017
    、
    Figure 03_image4019
    、
    Figure 03_image4021
    、
    Figure 03_image4023
    、
    Figure 03_image4025
    、
    Figure 03_image4027
    、
    Figure 03_image4029
    、
    Figure 03_image4031
    、
    Figure 03_image4033
    、
    Figure 03_image4035
    、
    Figure 03_image4037
    、
    Figure 03_image4039
    、
    Figure 03_image4041
    、
    Figure 03_image4043
    、
    Figure 03_image4045
    Figure 03_image4047
    、
    Figure 03_image4048
    、
    Figure 03_image4050
    、
    Figure 03_image4052
    、
    Figure 03_image4054
    、
    Figure 03_image4056
    、
    Figure 03_image4058
    及
    Figure 03_image4060
    。
  5. 如請求項1至4中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： 各 R Y 係獨立地選自氫、羥基、鹵素、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個獨立地選自羥基、C 1-C 6烷氧基及 Q之基團取代)、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素之基團取代)、5至10員雜芳基、-CO 2 R Y1 及-CON( R Y1 ) 2； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自C 3-C 8環烷基及3至7員雜環基之環； 或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。
  6. 如請求項1至5中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R Y1 係獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，或鍵結至同一氮之兩個 R Y1 一起形成3至6員雜環基。
  7. 如請求項1至6中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 Q係獨立地選自C 6-C 10芳基。
  8. 如請求項1至7中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 Q為苯基。
  9. 如請求項1至8中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： 各 R Y 係獨立地選自： 氫、羥基、-CH 3、-CD 3、-CH 2CH 3、
    Figure 03_image4062
    、
    Figure 03_image4064
    、
    Figure 03_image4066
    、
    Figure 03_image4068
    、
    Figure 03_image4070
    、
    Figure 03_image4072
    、
    Figure 03_image4074
    、
    Figure 03_image4076
    、
    Figure 03_image4078
    、
    Figure 03_image4080
    、
    Figure 03_image4082
    、
    Figure 03_image4084
    及
    Figure 03_image4086
    ； 或同一原子上之兩個 R Y 一起形成選自環丁基、環戊基、環己基、四氫吡咯基(tetrahydropyryl)及四氫呋喃基之環； 或兩個 R Y ，其中一者在一個原子上而其第二者在相鄰原子上，一起形成π鍵。
  10. 如請求項1至9中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 B係選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及5至10員雜芳基。
  11. 如請求項1至10中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 B選自苯基(視情況經1-3個獨立地選自鹵素及C 1-C 6烷氧基之基團取代)及吡啶基。
  12. 如請求項1至11中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 環 B係選自：
    Figure 03_image4088
    、
    Figure 03_image4090
    、
    Figure 03_image4092
    、
    Figure 03_image4094
    、
    Figure 03_image4096
    及
    Figure 03_image4098
    。
  13. 如請求項1至12中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 n係選自4、5、6及7。
  14. 如請求項1至13中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中-( Y) n-為選自以下之基團：
    Figure 03_image4100
    、
    Figure 03_image4102
    、
    Figure 03_image4104
    、
    Figure 03_image4106
    、
    Figure 03_image4108
    、
    Figure 03_image4110
    、
    Figure 03_image4112
    、
    Figure 03_image4114
    、
    Figure 03_image4116
    、
    Figure 03_image4118
    、
    Figure 03_image4120
    、
    Figure 03_image4122
    、
    Figure 03_image4124
    、
    Figure 03_image4126
    、
    Figure 03_image4128
    、
    Figure 03_image4130
    、
    Figure 03_image4132
    、
    Figure 03_image4134
    、
    Figure 03_image4136
    、
    Figure 03_image4138
    、
    Figure 03_image4140
    、
    Figure 03_image4142
    、
    Figure 03_image4144
    、
    Figure 03_image4146
    、
    Figure 03_image4148
    、
    Figure 03_image4150
    、
    Figure 03_image4152
    、
    Figure 03_image4154
    、
    Figure 03_image4156
    、
    Figure 03_image4158
    、
    Figure 03_image4160
    、
    Figure 03_image4162
    、
    Figure 03_image4164
    、
    Figure 03_image4166
    、
    Figure 03_image4168
    、
    Figure 03_image4170
    、
    Figure 03_image4172
    、
    Figure 03_image4174
    、
    Figure 03_image4176
    、
    Figure 03_image4178
    、
    Figure 03_image4180
    、
    Figure 03_image4182
    、
    Figure 03_image4184
    、
    Figure 03_image4186
    、
    Figure 03_image4188
    、
    Figure 03_image4190
    、
    Figure 03_image4192
    、
    Figure 03_image4194
    、
    Figure 03_image4196
    、
    Figure 03_image4198
    、
    Figure 03_image4200
    、
    Figure 03_image4202
    、
    Figure 03_image4204
    、
    Figure 03_image4206
    、
    Figure 03_image4208
    、
    Figure 03_image4210
    、
    Figure 03_image4212
    、
    Figure 03_image4214
    、
    Figure 03_image4216
    、
    Figure 03_image4218
    、
    Figure 03_image4220
    、
    Figure 03_image4222
    、
    Figure 03_image4224
    、
    Figure 03_image4226
    、
    Figure 03_image4228
    、
    Figure 03_image4230
    、
    Figure 03_image4232
    、
    Figure 03_image4234
    、
    Figure 03_image4236
    、
    Figure 03_image4238
    、
    Figure 03_image4240
    及
    Figure 03_image4242
    。
  15. 如請求項1至14中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R 1 係獨立地選自鹵素、C 1-C 6氟烷基、C 1-C 6烷基(視情況經一個選自C 6-C 10芳基之基團取代)、-O R 2 、-N( R 2 ) 2、-CO 2 R 2 、-CO-N( R 2 ) 2、-CN、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5至6員雜芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6烷基之基團取代)、3至6員雜環基、-B(O R 2 ) 2、-SO 2 R 2 、-S R 2 、-SO R 2 及-PO( R 2 ) 2。
  16. 如請求項1至15中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R 2 係獨立地選自C 6-C 10芳基(視情況經1-3個獨立地選自C 1-C 6氟烷氧基之基團取代)。
  17. 如請求項1至16中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中各 R 1 係獨立地選自-Br、-CF 3、-NH 2、-CH 3、-CH(CH 3) 2、-CN、-OH、-OCH 3、-NH(CH 3)、-NH(CH 2CH 3)、-CONH 2、-CO 2CH 3、-SO 2CH 3、-SO 2Ph、PO(CH 3) 2、B(OH) 2、苯基、吡啶基、四氫哌喃基、四氫呋喃基、環丙基、環己基、咪唑基、
    Figure 03_image4244
    、
    Figure 03_image4246
    、
    Figure 03_image4248
    及
    Figure 03_image4250
    。
  18. 如請求項1至17中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 Z係選自
    Figure 03_image4252
    、
    Figure 03_image4254
    及
    Figure 03_image4255
    ；其中 環 C係選自C 6-C 10芳基。
  19. 如請求項1至18中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中該基團：
    Figure 03_image4257
    係選自：
    Figure 03_image4259
    、
    Figure 03_image4261
    、
    Figure 03_image4263
    、
    Figure 03_image4265
    ,
    Figure 03_image4267
    、
    Figure 03_image4269
    、
    Figure 03_image4271
    、
    Figure 03_image4273
    、
    Figure 03_image4275
    、
    Figure 03_image4277
    、
    Figure 03_image4279
    、
    Figure 03_image4281
    及
    Figure 03_image4283
    。
  20. 如請求項1至19中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中該基團：
    Figure 03_image4285
    為
    Figure 03_image4287
    。
  21. 如請求項1至20中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基、C 6-C 10芳基及5至6員雜芳基。
  22. 如請求項1至21中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 R Z2 係選自氫、鹵素、羥基及C 1-C 6烷氧基(視情況經1-3個獨立地選自C 3-C 10環烷基之基團取代)。
  23. 如請求項1至22中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： R Z1 係選自氫、C 1-C 6烷基(視情況經1-3個羥基取代)、C 1-C 6氟烷基、3至6員雜環基、C 3-C 6環烷基及C 6-C 10芳基；及 R Z2 係選自氫、鹵素及羥基； 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團。
  24. 如請求項1至23中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： R Z1 係選自氫、CH 3、CF 3、CH 2OH、苯基、環丙基及四氫哌喃基；及 R Z2 係選自氫、鹵素及羥基； 或 R Z1 及 R Z2 一起形成選自側氧基及=N-OH之基團。
  25. 如請求項1至24中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 R Z2 為羥基。
  26. 如請求項1至25中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 Z係選自：
    Figure 03_image4289
    、
    Figure 03_image4291
    、
    Figure 03_image4293
    、
    Figure 03_image4295
    、
    Figure 03_image4297
    、
    Figure 03_image4299
    、
    Figure 03_image4301
    、
    Figure 03_image4303
    、
    Figure 03_image4305
    、
    Figure 03_image4307
    、
    Figure 03_image4309
    、
    Figure 03_image4311
    、
    Figure 03_image4313
    、
    Figure 03_image4315
    、
    Figure 03_image4317
    、
    Figure 03_image4319
    及
    Figure 03_image4321
    。
  27. 如請求項1至26中任一項之化合物、氘化衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中 m係選自1及2。
  28. 一種選自表10之化合物的化合物、其醫藥學上可接受之鹽及前述中之任一者之氘化衍生物。
  29. 如請求項28之化合物，其中該化合物係選自： 化合物編號 結構 4
    Figure 03_image4323
            19
    Figure 03_image4325
            32
    Figure 03_image4326
            138
    Figure 03_image4328
            163
    Figure 03_image4330
            173
    Figure 03_image4332
            176
    Figure 03_image4334
            177
    Figure 03_image4336
            178
    Figure 03_image4338
            182
    Figure 03_image4340
            192
    Figure 03_image4342
            193
    Figure 03_image4343
            205
    Figure 03_image4345
     。
  30. 一種醫藥組成物，其包含如請求項1至29中任一項之化合物、鹽或氘化衍生物及醫藥學上可接受之載體。
  31. 如請求項30之醫藥組成物，其進一步包含一或多種額外治療劑。
  32. 如請求項31之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含具有CFTR調節活性之化合物或其鹽或氘化衍生物。
  33. 如請求項31或32之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR校正劑。
  34. 如請求項31至33中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含( R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)- N-(1-(2,3-二羥丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1 H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物 II)：
    Figure 03_image4347
    II。
  35. 如請求項31至34中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)環丙烷甲醯胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化合物 IV)：
    Figure 03_image4349
    化合物 IV。
  36. 如請求項31至35中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含 N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺醯基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 V)：
    Figure 03_image4351
    V。
  37. 如請求項31至36中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含 N-(苯磺醯基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基)環丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 VI)：
    Figure 03_image4353
    化合物 VI。
  38. 如請求項31至37中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含(14 S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1 H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ 6-硫雜-3,9,11,18,23-五氮雜四環[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮(化合物 VII)：
    Figure 03_image4355
    化合物 VII。
  39. 如請求項31至38中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含(11 R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧雜-2λ 6-硫雜-3,5,12,19-四氮雜三環[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物 VIII)：
    Figure 03_image4357
    化合物 VIII。
  40. 如請求項31至39中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自PTI-428、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766及PTI-801之化合物。
  41. 如請求項31至40中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR增效劑增強劑。
  42. 如請求項31至41中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含ASP-11。
  43. 如請求項31至42中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR增效劑。
  44. 如請求項31至43中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含選自以下之化合物： N-(5-羥基-2,4-二-三級丁基-苯基)-4-側氧基-1 H-喹啉-3-甲醯胺(化合物 III)：
    Figure 03_image412
    化合物 III， 及 N-(2-(三級丁基)-5-羥基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-側氧基-1,4-二氫喹啉-3-甲醯胺(化合物 III-d)：
    Figure 03_image4360
    化合物 III-d。
  45. 如請求項31至44中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自以下之化合物：FDL-176、PTI-808、GLPG1837、GLPG2451/ABBV-2451 (艾森卡福特(Icenticaftor))、GLPG3067/ABBV-3067 (納沃卡福特(Navocaftor))及ABBV-191。
  46. 如請求項31至45中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR擴增劑。
  47. 如請求項31至46中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含PTI-428。
  48. 如請求項31至47中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR通讀藥劑。
  49. 如請求項31至48中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含ELX-02。
  50. 如請求項31至49中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含核酸療法。
  51. 如請求項31至50中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自MRT5005、Lunar-CF及RCT223之藥劑。
  52. 如請求項31至51中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含ENaC抑制劑。
  53. 如請求項31至52中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含胺氯吡脒(amiloride)、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037 (VX-371)、P-1055 (VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5 Rx、BI 1265162、AZ5634及ARO-ENaC1001。
  54. 如請求項31至53中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含TMEM16A調節劑。
  55. 如請求項31至54中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含ETD002。
  56. 如請求項31至55中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含GPR39促效劑。
  57. 如請求項31至56中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種額外治療劑包含DS-1039。
  58. 一種治療囊腫纖維化之方法 ，其包含向有需要之患者投與有效量之如請求項1至29中任一項之化合物、鹽或氘化衍生物或如請求項30至57中任一項之醫藥組成物。
  59. 如請求項58之方法，其進一步包含投與一或多種額外治療劑。
  60. 如請求項59之方法，其中該一或多種額外治療劑包含具有CFTR調節活性之化合物或其鹽或氘化衍生物。
  61. 如請求項59或60之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR校正劑。
  62. 如請求項59至61中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含( R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)- N-(1-(2,3-二羥丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1 H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物 II)：
    Figure 03_image4362
    化合物 II。
  63. 如請求項59至62中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)環丙烷甲醯胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化合物 IV)：
    Figure 03_image4364
    化合物 IV。
  64. 如請求項59至63中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含 N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺醯基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 V)：
    Figure 03_image4366
    化合物 V。
  65. 如請求項59至64中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含 N-(苯磺醯基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基)環丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4 S)-2,2,4-三甲基吡咯啶-1-基]吡啶-3-甲醯胺(化合物 VI)：
    Figure 03_image4368
    化合物 VI。
  66. 如請求項59至65中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含(14 S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1 H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ 6-硫雜-3,9,11,18,23-五氮雜四環[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮(化合物 VII)：
    Figure 03_image4370
    化合物 VII。
  67. 如請求項59至66中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含(11 R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧雜-2λ 6-硫雜-3,5,12,19-四氮雜三環[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物 VIII)：
    Figure 03_image4372
    化合物 VIII。
  68. 如請求項59至67中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自PTI-428、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、ABBV-2851、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766及PTI-801之化合物。
  69. 如請求項59至68中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR增效劑增強劑。
  70. 如請求項59至69中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含ASP-11。
  71. 如請求項59至70中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR增效劑。
  72. 如請求項59至71中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含選自以下之化合物： N-(5-羥基-2,4-二-三級丁基-苯基)-4-側氧基-1 H-喹啉-3-甲醯胺(化合物 III)：
    Figure 03_image412
    化合物 III， 及 N-(2-(三級丁基)-5-羥基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-側氧基-1,4-二氫喹啉-3-甲醯胺(化合物 III-d)：
    Figure 03_image4375
    化合物 III-d。
  73. 如請求項59至72中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自以下之化合物：FDL-176、PTI-808、GLPG1837、GLPG2451/ABBV-2451 (艾森卡福特)、GLPG3067/ABBV-3067 (納沃卡福特)及ABBV-191。
  74. 如請求項59至73中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR擴增劑。
  75. 如請求項59至74中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含PTI-428。
  76. 如請求項59至75中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含CFTR通讀藥劑。
  77. 如請求項59至76中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含ELX-02。
  78. 如請求項59至77中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含核酸療法。
  79. 如請求項59至78中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含至少一種選自MRT5005、Lunar-CF及RCT223之藥劑。
  80. 如請求項59至79中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含ENaC抑制劑。
  81. 如請求項59至80中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含胺氯吡脒、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037 (VX-371)、P-1055 (VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5 Rx、BI 1265162、AZ5634及ARO-ENaC1001。
  82. 如請求項59至81中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含TMEM16A調節劑。
  83. 如請求項59至82中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含ETD002。
  84. 如請求項59至83中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含GPR39促效劑。
  85. 如請求項59至84中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑包含DS-1039。
  86. 如請求項1至29中任一項之化合物、鹽或氘化衍生物或如請求項30至57中任一項之醫藥組成物，其用於治療囊腫纖維化。
  87. 一種如請求項1至29中任一項之化合物、鹽或氘化衍生物或如請求項30至57中任一項之醫藥組成物之用途，其用於製造用於治療囊腫纖維化的藥物。
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