KR20230123522A - 낭성 섬유증 막관통 전도도 조절제로서 사용하기 위한 1,3,4-옥사디아졸 고리를 함유하는 거대환 - Google Patents

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제레미 제이. 클레멘스
윌리엄 슐츠 베차라
브렛 씨. 북서
토마스 클리블랜드
티모시 쿤
미첼 갈란트
페터 디데릭 얀 그로텐후이스
사라 사비나 하디다 루아
줄리 라테로
마크 토마스 밀러
프라수나 파라셀리
이만 케이. 람토훌
툼쿤타 자가데스와르 레디
클라우디오 스투리노
리노 발데즈
징란 저우
민선 백
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버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드
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Abstract

본 개시는 낭성 섬유증 막관통 전도도 조절자(CFTR)의 조절제, 적어도 하나의 이러한 조절제를 함유하는 약학적 조성물, 이러한 조절제 및 약학적 조성물을 사용해 낭성 섬유증을 치료하는 방법, 및 이러한 조절제를 제조하는 방법에 관한 것이다.

Description

낭성 섬유증 막관통 전도도 조절제로서 사용하기 위한 1,3,4-옥사디아졸 고리를 함유하는 거대환
본 출원은 2020년 11월 18일에 출원된 미국 특허 가출원 제63/115,552호의 이익을 주장하며, 그 내용은 그 전체가 참조로서 통합된다.
본 발명은 낭성 섬유증 막관통 전도도 조절자(CFTR)의 조절제, 상기 조절제를 함유하는 약학적 조성물, 이러한 조절제 및 약학적 조성물을 사용해 낭성 섬유증 및 CFTR-매개 장애를 치료하는 방법, 및 이러한 조절제를 제조하는 방법에 관한 것이다.
낭성 섬유증(CF)은 전 세계적으로 약 83,000명의 아동과 성인에게 영향을 미치는 열성 유전 질환이다. CF 치료의 진전에도 불구하고, 치료법은 없다.
CF 환자의 경우, 호흡기 상피에서 내인성으로 발현된 CFTR의 돌연변이는 정단 음이온 분비를 감소시켜 이온 및 체액 수송의 불균형을 유발한다. 이로 인한 음이온 수송의 감소는 폐에서 점액 축적을 증가시키고, CF 환자를 결국 사망에 이르게 하는 미생물 감염을 수반하는 데 기여한다. 호흡기 질환 이외에, CF 환자들은 일반적으로 위장 문제 및 췌장 기능 부전을 앓고 있으며, 치료하지 않고 방치하는 경우 사망에 이르게 된다. 또한, 남성 남성 섬유증 환자의 대부분은 불임이고, 여성 낭성 섬유증 환자들 가운데 생식력이 감소되는 경우도 있다.
CFTR 유전자의 서열 분석은 다양한 질병 유발 돌연변이를 밝혀냈다(Cutting, G. R. 등의 문헌[(1990) Nature 346:366-369]; Dean, M. 등의 문헌[(1990) Cell 61:863:870]; 및 Kerem, B-S. 등의 문헌[(1989) Science 245:1073-1080]; Kerem, B-S 등의 문헌[(1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447-8451]). 현재까지, CF 유전자에서 2000개가 넘는 돌연변이가 식별되었으며; 현재, CFTR2 데이터베이스에는 이들 식별된 돌연변이 중 322개에 대한 정보만이 포함되어 있고, 281개의 돌연변이를 질환 유발자로서 정의하기에 충분한 증거가 있다. 가장 흔한 질환 유발 돌연변이는 CFTR 아미노산 서열의 508 위치에서 페닐알라닌의 결실이며, 이는 일반적으로 F508del 돌연변이로서 지칭된다. 이러한 돌연변이는 낭성 섬유증의 많은 사례에서 발생하며 중증 질환과 관련이 있다.
CFTR은 흡수 및 분비 상피 세포를 포함하는 다양한 세포 유형에서 발현되는 cAMP/ATP-매개 음이온 채널이며, 이는 막을 가로지르는 음이온 플럭스뿐만 아니라 다른 이온 채널 및 단백질의 활성도 조절한다. 상피 세포에서, CFTR의 정상적인 기능은 호흡기 및 소화 조직을 포함하는, 전신에 걸쳐 전해질 수송을 유지하는 데 중요하다. CFTR은 각각 6개의 막관통 나선 및 뉴클레오티드 결합 도메인을 함유하는 막관통 도메인의 탠덤 반복체로 이루어진 단백질을 암호화하는 1480개의 아미노산으로 구성된다. 2개의 막관통 도메인은, 채널 활성 및 세포 수송을 조절하는 다수의 인산화 부위를 갖는 큰 극성 조절(R) 도메인에 의해 연결된다.
염화물 수송은 세포의 기저측 표면에서 발현된 정점 막 및 Na+-K+-ATPase 펌프 및 Cl- 채널 상에 존재하는 ENaC(상피세포 나트륨 채널) 및 CFTR의 활성 조절에 의해 일어난다. 내강 측으로부터 염화물의 이차적 능동 수송은 세포내 염화물의 축적을 초래하는데, 이어서 이는 Cl- 채널을 통해 세포를 수동적으로 떠날 수 있고, 이는 벡터 수송을 초래한다. 기저측 표면 상의 Na+/2Cl-/K+ 공동수송체, Na+-K+-ATPase 펌프, 및 기저측 막 K+ 채널과 내강 측면 상의 CFTR의 배열은 염화물의 분비를 조정한다. 물은 아마도 스스로 능동적으로 운반되지 않기 때문에, 상피를 가로지르는 물의 흐름은 나트륨과 염화물의 벌크 흐름에 의해 생성된 작은 상피관통 삼투압 구배에 의존한다.
최근에 다수의 CFTR 조절제가 식별되었다. 이들 조절제는, 예를 들어 강화제, 교정제, 강화제 인핸서/공동 강화제, 증폭제, 통독제, 및 핵산 요법으로서 특성화될 수 있다. 상피 세포 표면에서 돌연변이체 및 야생형 CFTR의 채널 게이팅 활성을 증가시키는 CFTR 조절제는 강화제로서 알려져 있다. 교정제(corrector)는 잘못된 단백질 가공 및 이로 인한 상피 표면으로의 수송을 개선한다. Ghelani 및 Schneider-Futschik의 문헌[(2020) ACS Pharmacol. Transl. Sci. 3:4-10]. 낭성 섬유증 치료용으로 미국 FDA의 승인을 받은 3개의 CFTR 교정제가 있다. 그러나, 일부 CFTR 교정제를 사용하는 단일 요법은 충분히 효과적인 것으로 확인되지는 않았으며, 결과적으로 CFTR 활성을 강화시키기 위해서는 강화제와의 병용 요법이 필요하다. 현재 낭성 섬유증의 치료제로 승인된 CFTR 강화제는 단 하나이다. 따라서, 낭성 섬유증의 치료가 이들 새로운 소분자 CFTR 조절제에 의해 바뀌긴 하였지만, 질환 진행을 예방하고, 낭성 섬유증 및 다른 CFTR 매개 질환의 중증도를 감소시키고, 이들 질환의 보다 심각한 형태를 치료하기 위해서는 새롭고 더 나은 조절제가 필요하다.
본 발명의 일 양태는 식 I, I’, I", Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 신규한 화합물을 제공한다.
예를 들어, 식 I의 화합물은 다음과 같이 도시된 화합물:
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염일 수 있고, 식 중:
X는-N(R X1 )- 및 로부터 선택되고;
고리 A는 C1-C6 알킬 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
R X1 은 H, C1-C6 알킬(하이드록시, 옥소, -OR X2 , 및 -N(R X2 )2로부터 독립적으로 치환된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및 C3-C8 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R X2 는 H 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Y는 -C(R Y )2-, -O-, -CO-, -NR YN -, 및 로부터 독립적으로 선택되되, 여기서 각각의 R YN 은 H, C1-C4 알킬, 및 CO2 R YN1 로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 R YN1 은 C1-C4 알킬 및 C3-C6 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -OR Y1 ,
-CO2 R Y1 , -COR Y1 , -CON(R Y1 )2, 및 -N(R Y1 )2로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
각각의 R Y1 은 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의 R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
고리 B는 다음으로부터 선택되고:
■ C6-C10 아릴(할로겐, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
■ C3-C8 시클로알킬,
■ 5원 내지 10원 헤테로아릴, 및
■ 3원 내지 6원 헤테로시클릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨);
각각의 Q는 다음으로부터 독립적으로 선택되고:
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알킬:
o 할로겐,
o 옥소,
o C6-C10 아릴(할로겐 및 OCF3으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C3-C8 시클로알킬:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐, -NH2, 및 -NHCOMe로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C1-C6 알콕시,
o C6-C10 아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐 및 하이드록시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알콕시:
■ 할로겐,
■ C3-C8 시클로알킬(CF3으로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(할로겐, CF3, OCF3, 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C6-C10 아릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 5원 내지 10원 헤테로아릴:
o 할로겐,
o C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(1개 내지 3개의 CF3 기로 임의 치환됨), 및
o 3원 내지 10원 헤테로시클릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 3원 내지 10원 헤테로시클릴:
o C1-C6 알킬(옥소 및 및 C3-C8 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o 옥소;
각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(하이드록시, C6-C10　아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C3-C8 시클로알킬, C6-C10　아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -B(OR 2 )2, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , -PO(OR 2 )2, 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R 2 는 수소, C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~6개의 기로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 및 C6-C10　아릴(C1-C6 플루오로알킬 및 C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되고;
Z는 , , , 및 로부터 선택되되; 고리 C는 C6-C10 아릴 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z1 은 수소, -CN, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10 아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, NH2, NH(CO)(C1-C6 알킬), 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하고;
각각의 R Z3 은 하이드록시, C1-C6 알콕시, C1-C6 알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되거나; 2개의 R Z3 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
n은 4, 5, 6, 7, 및 8로부터 선택되고;
m은 0, 1, 2, 및 3으로부터 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서, X는 -N(R X1 )-이다.
식 I의 일부 구현예에서, X는 이다.
식 I의 일부 구현예에서, X는 다음으로부터 선택된다:
-NH-, -N(CH3)-, -N(CH2CH3)-, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 및 .
식 I의 일부 구현예에서,
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -CO2 R Y1 , 및 -CON(R Y1 )2로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나;
2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
식 I의 일부 구현예에서, 각각의 R Y1 는 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의 R Y1 가 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성한다.
식 I의 일부 구현예에서, 각각의 Q는 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서, 각각의 Q는 페닐이다.
식 I의 일부 구현예에서,
각각의 R Y 는 다음으로부터 독립적으로 선택되거나:
수소, 하이드록시, -CH3, -CD3, -CH2CH3, , , , , , , , , , , , , 및 ;
동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 테트라하이드로프로필, 및 테트라하이드로푸릴로부터 선택된 고리를 형성하거나;
2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
식 I의 일부 구현예에서, 고리 B는 C6-C10 아릴(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서, 고리 B는 페닐(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 피리딜로부터 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서, 고리 B는 다음으로부터 선택된다:
,,,,, 및 .
식　I의 일부 구현예에서,　n은 4, 5, 6, 및 7로부터 선택된다.
식　I의 일부 구현예에서, -(Y)n-은 다음으로부터 선택된 기이다:
식 I의 일부 구현예에서, 각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(C6-C10 아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C1-C6 알콕시, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -B(OR 2 )2, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서, 각각의 R 2 는 C6-C10 아릴(C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서, 각각의 R 1 은 -Br,
-CF3, -NH2, -CH3, -CH(CH3)2, -CN, -OH, -OCH3, -NH(CH3), -NH(CH2CH3), -CONH2,
-CO2CH3, -SO2CH3, -SO2Ph, PO(CH3)2, B(OH)2, 페닐, 피리딜, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로푸라닐, 시클로프로필, 시클로헥실, 이미다졸릴, , , , 및 로부터 독립적으로 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서, Z는 로부터 선택되고, 여기서　고리 C는 C6-C10 아릴로부터 선택된다.
식　I의 구현예에서, 기:
는 다음으로부터 선택된다:
식　I의 구현예에서, 기:
는 이다.
식 I의 일부 구현예에서, R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로부터 임의로 선택됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10 아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서, R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택된다.
식 I의 일부 구현예에서,
R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 및 하이드록시로부터 선택되거나;
R Z1 및 R Z2 는 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적을 허용 가능한 염.
식 I의 일부 구현예에서,
R Z1 은 수소, CH3, CF3, CH2OH, 페닐, 시클로프로필, 및 테트라하이드로피라닐로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 및 하이드록시로부터 선택되거나;
R Z1 및 R Z2 는 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적을 허용 가능한 염.
식 I의 일부 구현예에서, R Z2 는 하이드록시이다.
식 I의 일부 구현예에서, Z는 다음으로부터 선택된다:
식 I의 일부 구현예에서, Z는 이다. 식 I의 일부 구현예에서, Z는 이다. 식 I의 일부 구현예에서, Z는 이다. 식 I의 일부 구현예에서, Z는 이고, 여기서 (R)은 칸-인골드-프렐로그 규칙에 따른 중앙 탄소 원자의 입체화학적 명칭을 지칭한다. 식 I의 일부 구현예에서, Z는 이고, 여기서 (S)는 칸-인골드-프렐로그 규칙에 따른 중앙 탄소 원자의 입체화학적 명칭을 지칭한다.
식 I의 일부 구현예에서, m은 1 및 2로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 화합물은 식 I’에 포함되는 화합물:
I',
이의 중수소화된 유도체, 및 이들 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하며, 식 중:
X는-N(R X1 )- 및 로부터 선택되고;
고리 A는 C1-C6 알킬 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
R X1 은 H, C1-C6 알킬(하이드록시, 옥소, -OR X2 , 및 -N(R X2 )2로부터 독립적으로 치환된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및 C3-C8 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R X2 는 H 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Y는 -C(R Y )2-, -O-, -CO-, -NR YN -, 및 로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 R YN 은 H, C1-C4 알킬, 및 CO2Me로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -OR Y1 ,
-CO2 R Y1 , -COR Y1 , -CON(R Y1 )2, 및 -N(R Y1 )2로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
각각의 R Y1 은 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의 R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
고리 B는 다음으로부터 선택되고:
■ C6-C10 아릴(할로겐, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
■ C3-C8 시클로알킬,
■ 5원 내지 10원 헤테로아릴, 및
■ 3원 내지 6원 헤테로시클릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨);
각각의 Q는 다음으로부터 독립적으로 선택되고:
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알킬:
o 할로겐,
o 옥소,
o C6-C10 아릴(할로겐 및 OCF3으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C3-C8 시클로알킬:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐, -NH2, 및 -NHCOMe로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C1-C6 알콕시,
o C6-C10 아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐 및 하이드록시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알콕시:
■ 할로겐,
■ C3-C8 시클로알킬(CF3으로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(할로겐, CF3, OCF3, 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C6-C10 아릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 5원 내지 10원 헤테로아릴:
o 할로겐,
o C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(1개 내지 3개의 CF3 기로 임의 치환됨), 및
o 3원 내지 10원 헤테로시클릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 3원 내지 10원 헤테로시클릴:
o C1-C6 알킬(옥소 및 및 C3-C8 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o 옥소;
각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(C6-C10 아릴 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C1-C6 알콕시, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , -PO(OR 2 )2, 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R 2 는 수소, C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~6개의 기로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 및 C6-C10　아릴(C1-C6 플루오로알킬 및 C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되고;
Z는 로부터 선택되고;
R Z1 은 수소, -CN, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10　아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하고;
각각의 R Z3 은 하이드록시, C1-C6 알콕시, C1-C6 알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되거나; 2개의　R Z3 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
n은 4, 5, 6, 및 7로부터 선택되고;
m은 0, 1, 2, 및 3으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 식 I의 화합물은 식　I"의 화합물:
I",
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 모든 변수는 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 I"의 일부 구현예에서, 에 의해 제시된 화합물의 일부는 이고, 여기서 (R)은 칸-인골드-프렐로그 규칙에 따른 중앙 탄소 원자의 입체화학적 명칭을 지칭한다. 식 I"의 일부 구현예에서, 에 의해 제시된 화합물의 일부는 이고, 여기서 (S)는 칸-인골드-프렐로그 규칙에 따른 중앙 탄소 원자의 입체화학적 명칭을 지칭한다.
본 발명의 화합물은 또한, 식 Ia, IIa, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIg, 및 IIh의 화합물:
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염을 포함이며, 여기서 모든 변수는 식 I'에 대해 정의된 것과 같다.
본 발명의 화합물은 또한, 식　Ia', IIa', IIb', IIc', IId', IIe', IIf', IIg', 및 IIh'의 화합물:
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 모든 변수는 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 Ia', IIa', IIb', IIc', IId', IIe', IIf', IIg', 및 IIh'의 일부 구현예에서, 에 의해 제시된 화합물의 일부는 이고, 여기서 (R)은 칸-인골드-프렐로그 규칙에 따른 중앙 탄소 원자의 입체화학적 명칭을 지칭한다. 식 I"의 일부 구현예에서, 에 의해 제시된 화합물의 일부는 이고, 여기서 (S)는 칸-인골드-프렐로그 규칙에 따른 중앙 탄소 원자의 입체화학적 명칭을 지칭한다.
본 발명의 또 다른 양태는 식 I, I’, I", Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 조성물을 제공하며, 상기 조성물은 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분을 포함한다. 따라서, 본 발명의 또 다른 양태는 CFTR-매개 질환인 낭성 섬유증을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 식 I, I’, I", Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 임의로, 적어도 하나의 추가 성분을 포함하는 약학적 조성물의 일부로서 약학적으로 허용 가능한 담체를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
소정의 구현예에서, 본 발명의 약학적 조성물은 식 I, I’, I", Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함한다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I", Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는 조성물은 임의로 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 이의 중수소화된 유도체, 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태는 CFTR-매개 질환인 낭성 섬유증을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본원에 개시된 신규한 화합물, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 전술한 것 중 어느 하나의 중수소화된 유도체로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하고, 임의로 다음으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 추가 CFTR 조절제를 추가로 투여하는 단계를 포함한다: (R)-1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-N-(1-(2,3-디하이드록시프로필)-6-플루오로-2-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-1H-인돌-5-일)시클로프로판카르복스아미드 (화합물 II), N-[2,4-비스(1,1-디메틸에틸)-5-하이드록시페닐]-1,4-디하이드로-4-옥소퀴놀린-3-카르복스아미드 (화합물 III) 또는 N-(2-(터트-부틸)-5-하이드록시-4-(2-(메틸-d3)프로판-2-일-1,1,1,3,3,3-d6)페닐)-4-옥소-1,4-디하이드로퀴놀린-3-카르복스아미드 (화합물 III-d), 3-(6-(1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)시클로프로판 카르복스아미도)-3-메틸피리딘-2-일)벤조산 (화합물 IV), N-(1,3-디메틸피라졸-4-일)설포닐-6-[3-(3,3,3-트리플루오로-2,2-디메틸-프로폭시)피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드 (화합물 V), N-(벤젠설포닐)-6-[3-[2-[1-(트리플루오로메틸) 시클로프로필]에톡시]피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드 (화합물 VI), (14S)-8-[3-(2-{디스피로[2.0.2.1]헵탄-7-일}에톡시)-1H-피라졸-1-일]-12,12-디메틸-2λ6-티아-3,9,11,18,23-펜타아자테트라시클로 [17.3.1.111,14.05,10]테트라코사-1(22),5,7,9,19(23),20-헥사엔-2,2,4-트리온 (화합물 VII), (11R)-6-(2,6-디메틸페닐)-11-(2-메틸프로필)-12-{스피로[2.3]헥산-5-일}-9-옥사-2λ6-티아-3,5,12,19-테트라아자트리시클로[12.3.1.14,8]노나데카-1(17),4(19),5,7,14(18),15-헥사엔-2,2,13-트리온 (화합물 VIII); N-(벤젠설포닐)-6-(3-플루오로-5-이소부톡시-페닐)-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드 (화합물 IX), 및 N-[(6-아미노-2-피리딜)설포닐]-6-(3-플루오로-5-이소부톡시-페닐)-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드 (화합물 X).
본 발명의 또 다른 양태는 CFTR-매개 질환인 낭성 섬유증을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 식 I, I’, I", Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하고, 임의로 다음으로부터 선택된 하나 이상의 추가 CFTR 조절제를 추가로 투여하는 단계를 포함한다:
(ASP-11)(Journal of Cystic Fibrosis (2018), 17(5), 595-606에 개시됨), 및:
(네솔리카프터(nesolicaftor) 또는 PTI-428)(WO 2016/105485에 개시됨). 일 구현예에서, 추가 CFTR 조절제는 ASP-11이다. 일 구현예에서, 추가 CFTR 조절제는 PTI-428을 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 CFTR-매개 질환인 낭성 섬유증을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하고, 임의로 다음으로부터 선택된 하나 이상의 추가 CFTR 조절제를 추가로 투여하는 단계를 포함한다:
(갈리카프터 또는 ABBV-2222)(미국 특허 출원 공개 제2016-0120841호에 개시됨);
(ABBV-3221)(WO 2018/065921에 개시됨);
(포세나카프터 또는 PTI-801)(WO 2017/062581에 개시됨); ABBV-2851(WO 2017/009804에 개시됨); GLPG2737(미국 특허 출원 공개2017-0101405호에 개시됨); ABBV-3748; ABBV-3903; 및 ABBV-119.
도 1은 비정질 화합물 4(순수한 형태)의 X-선 분말 회절(XRPD) 패턴을 제공한다.
도 2는 비정질 화합물 4(순수한 형태)에 대한 열중량 분석(TGA) 곡선을 제공한다.
도 3은 비정질 화합물 4(순수한 형태)의 DSC 분석을 제공한다.
도 4는 비정질 화합물 19(순수한 형태)의 XRPD 패턴을 제공한다.
도 5는 비정질 화합물 19(순수한 형태)에 대한 TGA 곡선을 제공한다.
도 6은 비정질 화합물 19(순수한 형태)의 DSC 분석을 제공한다.
도 7은 결정질 화합물 41 형태 A의 XRPD 패턴을 제공한다.
도 8은 결정질 화합물 41 형태 A의 TGA 곡선을 제공한다.
도 9는 결정질 화합물 52 형태 A(순수)의 XRPD 패턴을 제공한다.
도 10은 결정질 화합물 52 형태 A(순수)의 TGA 곡선을 제공한다.
도 11은 결정질 화합물 52 형태 A(순수)의 DSC 분석을 제공한다.
도 12는 비정질 화합물 60(순수한 형태)의 XRPD 패턴을 제공한다.
도 13은 비정질 화합물 60(순수한 형태)에 대한 TGA 곡선을 제공한다.
도 14는 비정질 화합물 60(순수한 형태)의 DSC 분석을 제공한다.
도 15는 비정질 화합물 70(순수한 형태)의 XRPD 패턴을 제공한다.
도 16은 결정질 화합물 163 형태 A(순수)의 XRPD 패턴을 제공한다.
도 17은 결정질 화합물 163 형태 A(순수)의 DSC 분석을 제공한다.
도 18은 비정질 화합물 173(순수한 형태)의 XRPD 패턴을 제공한다.
도 19는 비정질 화합물 173(순수한 형태)에 대한 TGA 곡선을 제공한다.
도 20은 비정질 화합물 173(순수한 형태)의 DSC 분석을 제공한다.
정의
본원에서 사용되는 바와 같이, “화합물 II”는 (R)-1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-N-(1-(2,3-디하이드록시프로필)-6-플루오로-2-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-1H-인돌-5-일)시클로프로판카르복스아미드를 지칭하며, 이는 다음 구조로 도시될 수 있다:
화합물 II.
화합물 II는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 II 및 화합물 II를 제조하는 방법과 사용하는 방법은 WO 2010/053471, WO 2011/119984, WO 2011/133751, WO 2011/133951, 및 WO 2015/160787에 개시되어 있으며, 이들 각각은 참조로서 본원에 통합된다.
본 개시 전체에 걸쳐 사용되는 바와 같이, “화합물 III”은 N-(5-하이드록시-2,4-디-터트-부틸-페닐)-4-옥소-1H-퀴놀린-3-카르복스아미드를 지칭하며, 이는 다음의 구조에 의해 도시된다:
화합물 III.
화합물 III도 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 III 및 화합물 III을 제조하는 방법과 사용하는 방법은 WO 2006/002421, WO 2007/079139, WO 2010/108162, 및 WO 2010/019239에 개시되어 있으며, 이들 각각은 참조로서 본원에 통합된다.
일부 구현예에서, 화합물 III의 중수소화된 유도체(화합물 III-d)가 본원에 개시된 조성물 및 방법에 사용된다. 다음 구조로 도시된 것과 같은 화합물 III-d의 화학명은 N-(2-(터트-부틸)-5-하이드록시-4-(2-(메틸-d3)프로판-2-일-1,1,1,3,3,3-d6)페닐)-4-옥소-1,4-디하이드로퀴놀린-3-카르복스아미드이다:
화합물 III-d.
화합물 III-d는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 III-d 및 화합물 III-d의 제조 및 사용 방법은 WO 2012/158885, WO 2014/078842, 및 미국 특허 제8,865,902호에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 참조로서 본원에 통합된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “화합물 IV”는 3-(6-(1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)시클로프로판카르복스아미도)-3-메틸피리딘-2-일)벤조산을 지칭하며, 이는 다음의 화학 구조로 도시된다:
화합물 IV.
화합물 IV는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 IV 및 화합물 IV의 제조 및 사용 방법은 WO 2007/056341, WO 2009/073757, 및 WO 2009/076142에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 참조로서 본원에 통합된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “화합물 V”는 N-(1,3-디메틸피라졸-4-일)설포닐-6-[3-(3,3,3-트리플루오로-2,2-디메틸-프로폭시)피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드를 지칭하며, 이는 다음의 화학 구조로 도시된다:
화합물 V.
화합물 V는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 V 및 화합물 V의 제조 및 사용 방법은 WO 2018/107100 및 WO 2019/113476에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 참조로서 본원에 통합된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “화합물 VI”은 N-(벤젠설포닐)-6-[3-[2-[1-(트리플루오로메틸)시클로프로필]에톡시]피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드를 지칭하며, 이는 다음의 화학 구조로 도시된다:
화합물 VI.
화합물 VI은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 VI 및 화합물 VI의 제조 및 사용 방법은 WO 2018/064632에 개시되어 있으며, 이는 참조로서 본원에 통합된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “화합물 VII”는 (14S)-8-[3-(2-{디스피로[2.0.2.1]헵탄-7-일}에톡시)-1H-피라졸-1-일]-12,12-디메틸-2λ6-티아-3,9,11,18,23-펜타아자테트라시클로 [17.3.1.111,14.05,10]테트라코사-1(22),5,7,9,19(23),20-헥사엔-2,2,4-트리온을 지칭하며, 이는 다음의 화학 구조로 도시된다:
화합물 VII.
화합물 VII은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 VII 및 화합물 VII의 제조 및 사용 방법은 WO 2019/161078, WO 2020/102346, 및 PCT 출원 제PCT/US2020/046116에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 참조로서 본원에 통합된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “화합물 VIII”은 (11R)-6-(2,6-디메틸페닐)-11-(2-메틸프로필)-12-{스피로[2.3]헥산-5-일}-9-옥사-2λ6-티아-3,5,12,19-테트라아자트리시클로[12.3.1.14,8]노나데카-1(17),4(19),5,7,14(18),15-헥사엔-2,2,13-트리온을 지칭하며, 이는 다음의 화학 구조로 도시된다:
화합물 VIII.
화합물 VIII은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 VIII 및 화합물 VIII의 제조 및 사용 방법은 WO 2020/206080에 개시되어 있으며, 이는 참조로서 본원에 통합된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “화합물 IX”는 N-(벤젠설포닐)-6-(3-플루오로-5-이소부톡시-페닐)-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드를 지칭하며, 이는 다음의 화학 구조로 도시된다:
화합물 IX.
화합물 IX는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 IX 및 화합물 IX의 제조 및 사용 방법은 WO 2016/057572에 개시되어 있으며, 이는 참조로서 본원에 통합된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “화합물 X”은 N-[(6-아미노-2-피리딜)설포닐]-6-(3-플루오로-5-이소부톡시-페닐)-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드를 지칭하며, 이는 다음의 화학 구조로 도시된다:
화합물 X.
화합물 X는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 화합물 X 및 화합물 X의 제조 및 사용 방법은 WO 2016/057572에 개시되어 있으며, 이는 참조로서 본원에 통합된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “알킬(alkyl)”은 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20개의 탄소 원자와 같은) 탄소 원자를 함유하는 포화, 분지형 또는 비분지형 지방족 탄화수소를 지칭한다. 알킬기는 치환되거나 치환되지 않을 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “pi 결합”은 인접한 원자의 p 궤도에 의해 형성되는 공유 결합을 지칭한다. Pi 결합은 2개의 원자 사이에 다중 결합, 즉 이중 또는 삼중 결합이 있는 경우에 존재한다. 예를 들어, 탄소-탄소 이중 결합은 1개의 pi 결합으로 이루어지고, 탄소-탄소 삼중 결합은 2개의 pi 결합으로 이루어된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “할로알킬기(haloalkyl group)”는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 알킬기를 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 ““플루오로알킬(fluoroalkyl)”은 하나 이상의 불소 원자로 치환된 알킬기를 지칭한다. 일부 구현예에서, 플루오로알킬기는 1~6개의 불소 원자로 치환된다. 일부 구현예에서, 플루오로알킬기는 과불화(perfluorinated)된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “알콕시(alkyoxy)”는 산소 원자에 공유 결합된 알킬 또는 시클로알킬을 지칭한다. 알콕시는 치환되거나 치환되지 않을 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “할로알콕실기(haloalkoxyl group)”는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 알콕시기를 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 ““플루오로알콕시(fluoroalkoxy)”은 하나 이상의 불소 원자로 치환된 알콕시기를 지칭한다. 일부 구현예에서, 플루오로알콕시기는 1~6개의 불소 원자로 치환된다. 일부 구현예에서, 플루오로알콕시기는 과불화된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “시클로알킬(cycloalkyl)”은 3~12개의 탄소(예를 들어, 3~10개의 탄소)를 갖는 환형, 이환, 삼환 , 또는 다환 비방향족 탄화수소기를 지칭한다. “시클로알킬기”는 단환 고리, 이환 고리, 삼환 고리, 가교된 고리, 융합된 고리, 및 스피로 고리(모노스피로 고리 및 디스피로 고리를 포함함)를 포함한다. 시클로알킬기의 비제한적인 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 아다만틸, 노르보닐, 및 디스피로[2.0.2.1]헵탄이다. 시클로알킬기는 치환되거나 치환되지 않을 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “헤테로아릴 고리”는 O, N 또는 S와 같은 헤테로원자인 적어도 하나의 고리 원자를 포함하는 방향족 고리를 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “헤테로시클릴 고리” 및 “헤테로시클릴”은 O, N, S, 또는 Si와 같은 헤테로원자인 적어도 하나의 고리 원자를 포함하는 고리 내에 3개 내지 12개의 원자(예를 들어 3~10개의 원자)를 함유하는 비방향족 탄화수소를 지칭한다. “헤테로시클릴” 고리는 단환 고리, 이환 고리, 삼환 고리, 다환 고리, 가교된 고리, 융합된 고리, 및 스피로 고리(모노 스피로 및 디스피로 고리를 포함함)를 포함한다.
“치환된(substituted)”은 “치환된” 기의 적어도 하나의 수소가 치환기로 치환된 것을 나타낸다. 달리 명시되지 않는 한, “임의 치환된” 기는 기의 각 치환 가능한 위치에서 적절한 치환기를 가질 수 있으며, 임의의 주어진 구조에서 둘 이상의 위치가 지정된 군으로부터 선택된 둘 이상의 치환기로 치환될 수 있는 경우, 치환기는 모든 위치에서 동일하거나 상이할 수 있다.
질소에 대한 보호기의 예는, 예를 들어, t-부틸 카르바메이트(Boc), 벤질(Bn), 파라-메톡시벤질(PMB), 테트라하이드로피라닐(THP), 9-플루오레닐메틸 카르바메이트(Fmoc), 벤질 카르바메이트(Cbz), 메틸 카르바메이트, 에틸 카르바메이트, 2,2,2-트리클로로에틸 카르바메이트(Troc), 2-트리메틸실릴에틸 카르바메이트(Teoc), 알릴 카르바메이트(Aloc 또는 Alloc), 포름아미드, 아세트아미드, 벤즈아미드, 알릴아미드, 트리플루오로아세트아미드, 트리페닐메틸아민, 벤질리덴아민, 및 p-툴루엔설폰아미드를 포함한다. 질소 보호기의 포괄적인 목록은 Wuts, P. G. M.의 문헌[“Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis: Fifth Edition,” 2014, John Wiley and Sons]에서 확인할 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “중수소화된 유도체(들)(deuterated derivative(s))”는 하나 이상의 수소 원자가 중수소 원자로 치환된 동일한 화학 구조를 의미한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “CFTR”은 낭성 섬유증 막관통 전도 조절자를 의미한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “CFTR 조절제”는 CFTR의 활성을 증가시키는 화합물을 지칭한다. CFTR 조절제에 의한 활성의 증가에는 CFTR을 교정, 강화, 안정화 및/또는 증폭시키는 화합물을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “CFTR 교정제(CFTR corrector)”는 CFTR의 가공 및 수송을 용이하게 하여 세포 표면에서 CFTR의 양을 증가시키는 화합물을 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “CFTR 강화제(CFTR potentiator)”는 세포 표면에 위치한 CFTR 단백질의 채널 활성을 증가시켜 이온 수송을 강화시키는 화합물을 지칭한다. 본원에 개시된 신규한 화합물은 CFTR 강화제이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “CFTR 강화제 인핸서”, “CFTR 강화 인핸서”, 및 “CFTR 공동 강화제”는 상호교환적으로 사용되고 CFTR 강화를 향상시키는 화합물을 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “활성 약학적 성분(API)” 또는 “치료제”는 생물학적 활성 화합물을 지칭한다.
용어 “환자(patient)” 및 “대상체(subject)”는 상호 교환적으로 사용되며 인간을 포함하는 동물을 지칭한다.
용어 “유효 투여량(effective dose)” 및 “유효량(effective amount)”은 본원에서 상호 교환적으로 사용되며, 투여되는 대상에게 원하는 효과(예: CF 또는 CF 증상의 개선, CF 또는 CF 증상의 중증도 경감)를 생성하는 해당 화합물의 양을 지칭한다. 유효 투여량의 정확한 양은 치료의 목적에 따라 달라지게 되며, 당업자가 공지된 기술을 사용해 확인할 수 있을 것이다(예를 들어, Lloyd의 문헌[(1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding] 참조).
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “치료(treatment, treating 등)”는 일반적으로 대상체에서 CF의 하나 이상의 증상을 개선하는 것, 또는 CF 또는 CF의 하나 이상의 증상의 중증도를 경감시키는 것을 의미한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, “치료”는 다음을 포함하지만 이들로 한정되지는 않는다: 대상체의 성장 증가, 체중 증가, 폐에서의 점액 감소, 췌장 및/또는 간 기능 개선, 흉부 감염 감소, 및/또는 기침 또는 호흡곤란의 감소. 이들 증상 중 어느 하나의 중증도를 개선하거나 완화시키는 것은 당업계에 공지된 표준 방법 및 기술에 따라 쉽게 평가될 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 2개 이상의 화합물, 제제, 또는 추가 활성 약학적 성분을 지칭할 때의 용어 “병용(in combination with)”은 환자에게 2개 이상의 화합물, 제제, 또는 활성 약학적 성분을 서로에 대해 먼저, 동시에, 나중에 투여하는 것을 의미한다.
용어 “약(about)” 및 “대략(approximately)”은, 조성물 또는 투여 형태의 성분의 투여량, 양, 또는 중량%와 관련하여 사용될 때, 명시된 투여량, 양, 또는 중량%의 값, 또는 명시된 투여량, 양, 또는 중량%로부터 수득되는 것과 동등한 약리학적 효과를 제공하는 것으로 당업자가 인식하는 투여량, 양, 또는 중량%의 범위를 포함한다. 용어 “약(about)” 및 “대략(approximately)”은 당업자에 의해 결정되는 특정 값에 대한 허용 가능한 오차를 지칭할 수 있으며, 이는 값이 측정되거나 결정되는 방법에 따라 부분적으로 달라진다. 일부 구현예에서, 용어 “약” 및 “대략”은 주어진 값 또는 범위의 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 또는 0.5% 이내를 의미한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 수치 값 바로 앞에 나타나는 기호 “~”는 용어 “약” 및 “대략”과 동일한 의미를 갖는다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “용매”는 생성물이 적어도 부분적으로 용해될 수 있는 (생성물의 용해도 >1 g/L인) 임의의 액체를 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “실온” 또는 “주변 온도”는 15℃ 내지 30℃를 의미한다.
본 발명의 소정의 화합물은 별도의 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 및/또는 이들 입체이성질체 또는 거울상 이성질체의 혼합물로서 존재할 수 있음을 이해할 것이다. 본원에 개시된 화학 구조에서 사용되는 바와 같이, 입체형성 원자에 대한 “웨지”() 또는 “해시”() 결합은 알려진 절대 입체화학(즉, 하나의 입체이성질체)의 키랄 중심을 나타낸다. 본원에 개시된 화학 구조에서 사용되는 바와 같이, 입체형성 원자에 대한 “파형” 결합()은 미지의 절대 입체화학(즉, 하나의 입체이성질체)의 키랄 중심을 나타낸다. 본원에 개시된 화학 구조에서 사용되는 바와 같이, 이중 결합된 탄소에 대한 “파형” 결합()은 E/Z 이성질체의 혼합물을 나타낸다. 본원에 개시된 화학 구조에서 사용되는 바와 같이, 입체형성 원자에 대한 (“직선”) 결합은 혼합물(예: 라세미체 또는 농축물)이 존재하는 곳을 나타낸다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 이중 결합된 탄소에 대한 2개의 (“직선”) 결합은 이중 결합이 그려진 것과 같이 E/Z 입체화학을 가짐을 나타낸다. 본원에 개시된 화학 구조에서 사용되는 바와 같이, (“파형”선은 기 “A”에 대한 “직선” 결합에 수직임)는 기 “A”가 “파형” 선에서 종결되는 결합의 말단에 부착점이 갖는 치환기임을 나타낸다.
본원에 개시된 소정의 화합물은 호변이성질체로서 존재할 수 있으며, 비록 하나의 호변이성질체 구조만이 도시되어 있지만, 모든 호변이성질체 형태가 의도된다. 예를 들어, 화합물 A에 대한 설명은 이의 호변이성질체 화합물 B를 포함하는 것으로 이해되며, 그 반대의 경우도 마찬가지이다:
본원에서 사용되는 바와 같이, “최소 기능(MF) 돌연변이”는 최소 CFTR 기능(기능이 없거나 거의 없는 CFTR 단백질)과 관련된 CFTR 유전자 돌연변이를 지칭하며, 예를 들어, CFTR 채널의 개방 및 폐쇄 능력의 심각한 결함과 관련된 돌연변이(채널 게이팅 결함 또는 “게이팅 돌연변이”로 알려짐); 세포의 CFTR 가공 및 세포 표면으로의 CFTR 전달에 있어서 심각한 결함과 관련된 돌연변이; CFTR 무합성(또는 최소 합성)과 관련된 돌연변이; 및 채널 전도도의 심각한 결함과 관련된 돌연변이를 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “약학적으로 허용 가능한 염”은 본 개시의 화합물의 염 형태로서 비독성인 염의 형태를 지칭한다. 본 개시의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 적절한 무기 및 유기 산, 및 염기로부터 유래된 것들을 포함한다. 화합물의 “유리 염기” 형태는, 예를 들어 이온 결합된 염을 함유하지 않는다.
본 발명의 하나 이상의 화합물 또는 화학식과 관련하여 “및 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 중수소화된 유도체”라는 문구는 “및 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 전술한 것들 중 어느 하나의 중수소화된 유도체”와 상호 교환적으로 사용된다. 이들 문구는 참조된 화합물 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염, 참조된 화합물 중 어느 하나의 중수소화된 유도체, 및 이들 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하도록 의도된다.
당업자는, “화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염”의 양이 개시될 때, 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염 형태의 양이 화합물의 유리 염기의 농도와 등량이라는 것을 인식할 것이다. 본원의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 개시된 양이 이들의 유리 염기 형태에 기초한다는 것을 참고한다.
적절한 약학적으로 허용 가능한 염은, 예를 들어, S. M. Berge 등의 문헌[J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19]에 기술되어 있는 것들이다. 예를 들어, 전술한 문헌의 표 1은 다음의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
아세트산염 요오드화물 벤자틴
벤젠설포네이트 이세티오네이트 클로로프로카인
벤조에이트 젖산염 콜린
중탄산염 락토비온산염 디에탄올아민
중주석산염 말산염 에틸렌디아민
브롬화물 말레인산염 메글루민
에데트산칼슘 만델산염 프로카인
캄실레이트 메실레이트 알루미늄
탄산염 메틸브롬화물 칼슘
염화물 메틸니트레이트 리튬
구연산염 메틸설페이트 마그네슘
중염산염 뮤신산염 칼륨
에데트산염 나프실레이트 나트륨
에디실레이트 질산염 아연
에스톨레이트 파모에이트(엠보네이트)
에실레이트 판토테네이트
푸마르산염 인산염/이인산염
글루셉테이트 폴리갈락투론산염
글루콘산염 살리실산염
글루탐산염 스테아르산염
글리콜릴라사닐레이트 서브아세테이트
헥실레소르시네이트 숙신산염
하이드라바민 황산염
브롬화수소산염 탄닌산염
염산염 타르타르산염
하이드록시나프토에이트 테오시에이트
트리에티오디드
약학적으로 허용 가능한 산 부가염의 비제한적인 예는: 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산, 또는 과염소산과 같은 무기산으로 형성된 염; 아세트산, 옥살산, 말레산, 타르타르산, 구연산, 숙신산 또는 말론산과 같은 유기산으로 형성된 염; 및 당업계에서 사용되는 다른 방법, 예컨대 이온 교환을 사용하여 형성된 염을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 염의 비제한적인 예는 아디핀산염(adipate), 알긴산염(alginate), 아스코르브산염(ascorbate), 아스파르트산염(aspartate), 벤젠설폰산염(benzenesulfonate), 벤조산염(benzoate), 중황산염(bisulfate), 붕산염(borate), 부티르산염(butyrate), 캠퍼산염(camphorate), 캠퍼설폰산염(camphorsulfonate), 구연산염(citrate), 시클로펜탄프로피온산염(cyclopentanepropionate), 이글루콘산(digluconate), 도데실황산염(dodecylsulfate), 에탄설폰산염(ethanesulfonate), 포름산염(formate), 푸마르산염(fumarate), 글루코헵톤산염(glucoheptonate), 글리세로인산염(glycerophosphate), 글루콘산염(gluconate), 헤미황산염(hemisulfate), 헵타노에이트(heptanoate), 헥사노에이트(hexanoate), 하이드로아이오다이드(hydroiodide), 2-하이드록시-에탄설폰산염(2-hydroxy-ethanesulfonate), 락토바이온산염(lactobionate), 젖산염(lactate), 라우린산염(laurate), 라우릴 황산염(lauryl sulfate), 말산염(malate), 말레산염(maleate), 말론산염(malonate), 메탄설폰산염(methanesulfonate), 2-나프탈설폰산염(2-naphthalenesulfonate), 니코틴산염(nicotinate), 질산염(nitrate), 올레산염(oleate), 옥살산염(oxalate), 팔미트산염(palmitate), 파모산염(pamoate), 펙틴산염(pectinate), 과황산염(persulfate), 3-페닐프로피온산염(3-phenylpropionate), 인산염(phosphate), 피크르산염(picrate), 피발산염(pivalate), 프로피온산염(propionate), 스테아르산염(stearate), 숙신산염(succinate), 황산염(sulfate), 타르타르산염(tartrate), 티오시안산염(thiocyanate), p-톨루엔설폰산염(p-toluenesulfonate), 운데카노산염(undecanoate), 발레르산염(valerate)의 염을 포함한다. 적절한 염기로부터 유래된 약학적으로 허용 가능한 염은 알칼리 금속, 알칼리 토금속, 암모늄, 및 N+(C1-4알킬)4 염을 포함한다. 본 개시는 또한 본원에 개시된 화합물의 임의의 염기성 질소 함유 기의 사차화를 고려한다. 알칼리 금속 염 및 알칼리 토금속 염의 적절한 비제한적인 예는 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 및 마그네슘을 포함한다. 약학적으로 허용 가능한 염의 추가적인 비제한적인 예는 암모늄, 사차 암모늄, 및 할로겐화물, 수산화물, 카복실레이트, 황산염, 인산염, 질산염, 저급 알킬 설폰산염, 및 아릴 설폰산염과 같은 반대 이온을 사용하여 형성된 아민 양이온을 포함한다. 약학적으로 허용 가능한 염의 다른 적절한 비제한적인 예는 베실산염 및 글루코사민 염을 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “비정질(amorphous)”은 분자의 위치에서 긴 범위 순서를 갖지 않는 고형분 물질을 지칭한다. 비정질 고형분은 일반적으로 분자가 무작위 방식으로 배열되는 초냉방된 액체이므로, 잘 정의된 배열, 예를 들어 분자 패킹이 없고, 장거리 순서가 없다. 비정질 고형분은 일반적으로 등방성이고(즉, 모든 방향으로 유사한 특성을 나타냄), 명확한 융점을 갖지 않는다. 예를 들어, 비정질 물질은 이의 X-선 분말 회절(XRPD) 패턴에서 두드러지는 특징적 결정질 피크(들)를 갖지 않는 고형 물질이다(즉, XRPD에 의해 결정했을 때 결정질이 아님). 대신에, 이의 XRPD 패턴에서 하나 또는 여러 개의 넓은 피크(예: 할로)가 나타난다. 넓은 피크는 비정질 고형분의 특징이다. 비정질 물질과 결정질 물질의 XRPD의 비교는 US 2004/0006237을 참조한다. 일부 구현예에서, 고형분 물질은 비정질 화합물을 포함할 수 있고, 물질은, 예를 들어, XRPD 스펙트럼에서 예리한 특징적인 결정질 피크(들)의 결여를 특징으로 할 수 있다(즉, 물질은 XRPD로 결정 시, 결정질이 아니라 비정질임). 대신에, 그 물질의 XRPD 패턴에서 하나 또는 여러 개의 넓은 피크(예를 들어, 할로)가 나타날 수 있다. 비정질 물질과 결정질 물질의 XRPD의 비교는 US 2004/0006237을 참조한다. 비정질 화합물을 포함하는 고형 물질은, 예를 들어 순수 결정질 고형분의 융점보다 낮은 유리 전이 온도를 특징으로 할 수 있다. 예를 들어, 고상 NMR과 같은 다른 기술이 또한 결정질 또는 비정질 형태를 특성화하는 데 사용될 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “결정 형태”, “결정질 형태” 및 “형태”는 결정 격자 내에 특정 분자 충진 배열을 갖는 결정 구조(또는 다형체)를 상호 교환적으로 지칭한다. 결정질 형태는, 예를 들어, X-선 분말 회절(XRPD), 단결정 X-선 회절, 및 13C 고상 핵 자기 공명(13C SSNMR)을 포함하는 하나 이상의 특성분석 기술에 의해 동정되고 서로 구별될 수 있다. 따라서, 본원에서 사용되는 용어 “화합물 I의 결정질 형태 [X]”는, 예를 들어 XRPD, 단결정 X-선 회절, 및 13C SSNMR을 포함하는 하나 이상의 특성분석 기술에 의해 식별되고 다른 결정질 형태로부터 구별될 수 있는 고유한 결정질 형태를 지칭한다. 일부 구현예에서, 신규한 결정질 형태는 하나 이상의 특정된 2-θ 값(°2θ)에서 하나 이상의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “유리 형태”는 고상에서의 화합물의 비-이온화 버전을 지칭한다. 유리 형태의 예는 유리 염기 및 유리 산을 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “용매화물(solvate)”은 본 개시의 화합물의 하나 이상의 분자, 및 결정 격자에 혼입된 용매(들)의 하나 이상의 분자를 화학량론적 또는 비화학량론적 양으로 포함하는 결정 형태를 지칭한다. 용매가 물일 때, 용매화물은 “수화물(hydrate)”로서 지칭된다.
일부 구현예에서, 고형분 물질은 결정질 고형분과 비정질 고형분의 혼합물을 포함할 수 있다. 비정질 화합물을 포함하는 고형분 물질은 또한, 예를 들어, 최대 30%의 결정질 고형분을 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물을 포함하도록 제조된 고형분 물질은 또한, 예를 들어, 최대 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 또는 2%의 결정질 고형분을 함유할 수 있다. 고형분 물질이 결정질 고형분 및 비정질 고형분 혼합물을 함유하는 구현예에서, XRPD와 같은 특성분석 데이터는 결정질 고형분 및 비정질 고형분 모두의 지표를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 본 개시의 결정질 형태는 최대 30%의 비정질 화합물을 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 화합물 I의 결정질 제제는 최대 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 또는 2%의 비정질 고형분을 함유할 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “실질적으로 비정질(substantially amorphous)”은 분자의 위치에서 긴 범위 순서를 거의 갖지 않거나 전혀 갖지 않는 고형분 물질을 지칭한다. 예를 들어, 실질적으로 비정질 물질은 15% 미만의 결정화도(예를 들어, 10% 미만의 결정화도, 5% 미만의 결정화도, 또는 2% 미만의 결정화도)를 갖는다. 용어 “실질적으로 비정질”은, 결정도가 없는(0%) 물질을 지칭하는 설명자인 “비정질(amorphous)”을 포함한다는 것에도 주목한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “실질적으로 결정질”은 비정질 분자가 거의 없거나 전혀 없는 고형분 물질을 지칭한다. 예를 들어, 실질적으로 결정질 재료는 15% 미만의 비정질 분자(예를 들어, 10% 미만의 비정질 분자, 5% 미만의 비정질 분자, 또는 2% 미만의 비정질 분자)를 갖는다. 또한, 용어 “실질적으로 결정질”은 100% 결정질 형태인 물질을 지칭하는 설명자 “결정질”을 포함한다는 것에도 주목한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 결정질 형태는, 정량적 XRPD와 같은 당업계의 방법에 의해 결정했을 때, 결정질 형태가 중량 기준으로 샘플 내 모든 고형분 형태(들)의 합의 90% 이상을 차지하는 경우, “실질적으로 순수”하다. 일부 구현예에서, 고형분 형태는, 고형분 형태가 중량 기준으로 샘플 내 모든 고형분 형태(들)의 합의 95% 이상을 차지하는 경우, “실질적으로 순수”하다. 일부 구현예에서, 고형분 형태는, 고형분 형태가 중량 기준으로 샘플 내 모든 고형분 형태(들)의 합의 99% 이상을 차지하는 경우, “실질적으로 순수”하다. 용어 “실질적으로 순수한”은 설명자 “순수한”을 포함한다는 것도 참고한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “XRPD”는 X-선 분말 회절의 분석적 특성분석 방법을 지칭한다. 본원에 개시된 XRPD 패턴은 투과 또는 반사 기하학적 구조에 있어서의 주변 조건에서 회절계를 사용하여 기록되었다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “주변 조건(ambient condition)”은 실온, 개방 대기 조건, 및 조절되지 않은 습도 조건을 의미한다. 용어 “실온” 및 “주변 온도”는 15°C 내지 30°C를 의미한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “X-선 분말 회절도”, “X-선 분말 회절 패턴”, “XRPD 패턴”, “XRPD 스펙트럼”은 세포 좌표 상의 신호 강도에 대한 (가로 좌표 상의) 신호 위치를 도표화하는, 실험적으로 수득한 패턴을 상호 교환적으로 지칭한다. 비정질 물질의 경우, X-선 분말 회절도는 하나 이상의 넓은 신호를 포함할 수 있고; 결정질 물질의 경우, X-선 분말 회절도는 하나 이상의 신호를 포함할 수 있고, 이들 신호 각각은 …도 2θ(° 2θ)에서 측정했을 때의 이들의 각도 값에 의해 식별되며, “…도 2θ에서의 신호”, “…의 [a] 2θ 값(들)에서의 신호” 및/또는 “…로부터 선택된 적어도 …2θ 값(들)에서의 신호”로서 표현될 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같은 “신호(signal)” 또는 “피크(peak)”는 계수(count)로서 측정된 강도가 국지적 최대인, XRPD 패턴의 지점을 지칭한다. 당업자는, XRPD 패턴 내의 하나 이상의 신호(또는 피크)가 중첩될 수 있고, 예를 들어 육안으로는 명백하지 않을 수 있음을 인식할 것이다. 실제로, 당업자는 당업계에서 인식된 일부 방법이 리트벨트 정제(Rietveld refinement)와 같은 패턴으로 신호가 존재하는지 여부를 결정할 수 있고 이에 적합하다는 것을 인식할 것이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, “…도 2θ)”는 X-선 분말 회절 실험(o 2θ)에서 측정하고 관찰했을 때의 X-선 반사 위치를 지칭한다.
측정된 각도 값의 반복성은 ± 0.2° 2θ의 범위 내에 있다. 즉, 각도 값은 인용된 각도 값 + 0.2도 2θ, 각도 값 - 0.2도 2θ, 또는 이들 2개의 단부 지점(각도 값 +0.2도 2θ 및 각도 값 -0.2도 2θ) 사이의 임의의 값일 수 있다.
용어 “신호 강도(signal intensities)” 및 “피크 강도(peak intensities)”는 주어진 X-선 분말 회절도 내의 상대 신호 강도를 상호 교환적으로 지칭한다. 상대 신호 또는 피크 강도에 영향을 미칠 수 있는 인자는 샘플 두께 및 바람직한 배향(예를 들어, 결정질 입자는 무작위로 분포되지 않음)을 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, X-선 분말 회절도는 2개의 회절도에서 신호의 적어도 90%, 예컨대 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%가 중첩될 때 “[특정] 도면에 표시된 것과 실질적으로 유사하다”. “실질적 유사도”를 결정함에 있어서, 당업자는 동일한 결정질 형태라 할지라도 XRPD 회절도에서의 강도 및/또는 신호 위치에 있어서 변동이 있을 수 있음을 이해할 것이다. 따라서, 당업자는 XRPD 회절도(도 2θ)에서의 신호 최대값은 보고된 2θ 값±0.2도 값(당업계에서 인지된 편차)으로서 식별된다는 것을 이해할 것이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 고상 핵 자기 공명(SSNMR) 스펙트럼은 2개의 스펙트럼에서 신호의 적어도 90%, 예컨대 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%가 중첩될 때 “[특정] 도면에 표시된 것과 실질적으로 유사하다”. “실질적 유사도”를 결정함에 있어서, 당업자는 동일한 결정질 형태라 할지라도 SSNMR 스펙트럼에서의 강도 및/또는 신호 위치에 있어서 변동이 있을 수 있음을 이해할 것이다. 따라서, 당업자는 SSNMR 스펙트럼의 화학적 이동(본원에서 언급된 백만불율(ppm) 단위)은 일반적으로 그 값이 보고된 값의 ±0.2 ppm 값(당업계에서 인지된 편차)으로 식별됨을 이해할 것이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “... 2θ 값에서의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도”는 X-선 분말 회절 실험(o 2θ)에서 측정하고 관찰했을 때의 X-선 반사 위치를 포함하는 XRPD 패턴을 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “DSC”는 시차주사 열량측정의 분석 방법을 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “분해 개시”는 전이 전 베이스라인과 변곡 접선의 교차점을 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “유리 전이 온도” 또는 “Tg”는 이 온도를 초과하면 경질의 취성 “유리” 비정질 고형분이 점성 또는 고무질이 되는 온도를 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “용융 온도”, “용융점”, 또는 “Tm”은 금속이 고상에서 액상으로 전이되는 온도를 지칭한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “TGA”는 열중량 분석(Thermo Gravimetric Analysis 또는 thermogravimetric Analysis)의 분석 방법을 지칭한다.
구현예의 상세한 설명
식 I의 화합물, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이들 화합물 및 염의 중수소화된 유도체에 추가하여, 본 발명은 식 I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 식 I의 화합물은 식 Ia, IIa, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIg, 및 IIh 중 어느 하나의 화합물:
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택되며, 여기서 모든 변수는 식 I'에 대해 정의된 것과 같다.
일부 구현예에서, 식 I의 화합물은 식　I''의 화합물:
I'',
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 모든 변수는 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
일부 구현예에서, 식 I의 화합물은 식 Ia', IIa', IIb', IIc', IId', IIe', IIf', IIg', 및 IIh' 중 어느 하나의 화합물:
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택되며, 여기서 모든 변수는 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
또한, 표 10에 도시된 식 중 어느 하나로부터 선택된 식을 갖는 화합물, 이의 중수소화된 유도체, 및 이들 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염이 본원에 개시된다.
고형분 형태
본 개시의 또 다른 양태는 본원에 기술된 치료 방법 및 약학적 조성물에 사용될 수 있는 식 I의 화합물(예를 들어 식 I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, 및 IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염)을 제공한다.
비정질 화합물 4 (순수한 형태)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 4의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 4의 순수한 비정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 비정질 화합물 4(순수한 형태)를 제공한다. 도 1은 실온에서 비정질 화합물 4(순수한 형태)의 X-선 분말 회절도를 제공한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 4(순수한 형태)는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 4(순수한 형태)는 실질적으로 비정질이다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 4(순수한 형태)는 Cu Kα 방사선의 입사 빔을 갖는 X-선 분말 회절 분석에 의해 생성된 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 4(순수한 형태)는 도 1과 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
결정질 화합물 5 형태 A (순수)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 5의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 5의 순수한 결정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 결정질 화합물 5 형태 A(순수)를 제공한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 5 형태 A(순수)는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 5 형태 A(순수)는 실질적으로 결정질이다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 5 형태 A(순수)는 정방정계, I41 공간군, 및 Cu Kα 방사선(λ=1.54178 Å)을 사용하여 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서 측정된 다음 단위 셀 치수를 특징으로 한다:
비정질 화합물 19 (순수한 형태)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 19의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 19의 순수한 비정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 비정질 화합물 19(순수한 형태)를 제공한다. 도 4는 실온에서 비정질 화합물 19(순수한 형태)의 X-선 분말 회절도를 제공한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 19(순수한 형태)는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 19(순수한 형태)는 실질적으로 비정질이다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 19(순수한 형태)는 Cu Kα 방사선의 입사 빔을 갖는 X-선 분말 회절 분석에 의해 생성된 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 19(순수한 형태)는 도 4와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
결정질 화합물 41 형태 A
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 41의 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 41의 결정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 결정질 화합물 41 형태 A를 제공한다. 도 7은 결정질 화합물 41 형태 A의 X-선 분말 회절도를 제공한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 실질적으로 결정질이다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 Cu Kα 방사선의 입사 빔을 갖는 X-선 분말 회절 분석에 의해 생성된 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 및 21.2 ± 0.2도 2θ 중 하나 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 및 21.2 ± 0.2도 2θ 중 2개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 및 21.2 ± 0.2도 2θ에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 21.2 ± 0.2도 2θ, 18.0 ± 0.2도 2θ, 16.6 ± 0.2도 2θ, 및 20.7 ± 0.2도 2θ 중 3개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 21.2 ± 0.2도 2θ, 18.0 ± 0.2도 2θ, 16.6 ± 0.2도 2θ, 및 20.7 ± 0.2도 2θ 중 4개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 21.2 ± 0.2도 2θ, 18.0 ± 0.2도 2θ, 16.6 ± 0.2도 2θ, 및 20.7 ± 0.2도 2θ 중 5개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 21.2 ± 0.2도 2θ, 18.0 ± 0.2도 2θ, 16.6 ± 0.2도 2θ, 및 20.7 ± 0.2도 2θ에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 14.2 ± 0.2도 2θ, 16.6 ± 0.2도 2θ, 18.0 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 20.3 ± 0.2도 2θ, 20.7 ± 0.2도 2θ, 21.2 ± 0.2도 2θ, 22.2 ± 0.2도 2θ, 및 25.1 ± 0.2도 2θ 중 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8개, 또는 그 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 41 형태 A는 도 7과 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
결정질 화합물 52 형태 A (순수)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 52의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 52의 순수한 결정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 결정질 화합물 52 형태 A(순수)를 제공한다. 도 9는 결정질 화합물 52 형태 A(순수)의 X-선 분말 회절도를 제공한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 실질적으로 결정질이다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 Cu Kα 방사선의 입사 빔을 갖는 X-선 분말 회절 분석에 의해 생성된 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 6.8 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 및 18.6 ± 0.2도 2θ에서 하나 이상의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 6.8 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 및 18.6 ± 0.2도 2θ에서 2개 이상의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 6.8 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 및 18.6 ± 0.2도 2θ에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 6.8 ± 0.2도 2θ, 12.7 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 18.6 ± 0.2도 2θ, 20.6 ± 0.2도 2θ, 및 21.4 ± 0.2도 2θ 중 3개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 6.8 ± 0.2도 2θ, 12.7 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 18.6 ± 0.2도 2θ, 20.6 ± 0.2도 2θ, 및 21.4 ± 0.2도 2θ 중 4개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 6.8 ± 0.2도 2θ, 12.7 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 18.6 ± 0.2도 2θ, 20.6 ± 0.2도 2θ, 및 21.4 ± 0.2도 2θ 중 5개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 12.7 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 18.6 ± 0.2도 2θ, 20.6 ± 0.2도 2θ, 및 21.4 ± 0.2도 2θ에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 6.8 ± 0.2도 2θ, 12.7 ± 0.2도 2θ, 15.1 ± 0.2도 2θ, 15.5 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 18.6 ± 0.2도 2θ, 19.2 ± 0.2도 2θ, 19.7 ± 0.2도 2θ, 20.4 ± 0.2도 2θ, 20.6 ± 0.2도 2θ, 21.4 ± 0.2도 2θ, 및 27.2 ± 0.2도 2θ 중 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11개, 또는 그 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)는 도 9와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
비정질 화합물 60 (순수한 형태)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 60의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 60의 순수한 비정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 비정질 화합물 60(순수한 형태)을 제공한다. 도 12는 실온에서 비정질 화합물 60(순수한 형태)의 X-선 분말 회절도를 제공한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 60(순수한 형태)은 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 60(순수한 형태)은 실질적으로 비정질이다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 60(순수한 형태)은 Cu Kα 방사선의 입사 빔을 갖는 X-선 분말 회절 분석에 의해 생성된 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 60(순수한 형태)은 도 12와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
비정질 화합물 70 (순수한 형태)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 70의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 70의 순수한 비정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 비정질 화합물 70(순수한 형태)을 제공한다. 도 15는 실온에서 비정질 화합물 70(순수한 형태)의 X-선 분말 회절도를 제공한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 70(순수한 형태)은 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 70(순수한 형태)은 실질적으로 비정질이다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 70(순수한 형태)은 Cu Kα 방사선의 입사 빔을 갖는 X-선 분말 회절 분석에 의해 생성된 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 70(순수한 형태)은 도 15와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
결정질 화합물 163 형태 A (순수)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 163의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 163의 순수한 결정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 결정질 화합물 163 형태 A(순수)를 제공한다. 도 16은 결정질 화합물 163 형태 A(순수)의 X-선 분말 회절도를 제공한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 실질적으로 결정질이다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 Cu Kα 방사선의 입사 빔을 갖는 X-선 분말 회절 분석에 의해 생성된 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 및 15.0 ± 0.2도 2θ 중 하나 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 및 15.0 ± 0.2도 2θ 중 2개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 및 15.0 ± 0.2도 2θ에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 14.1 ± 0.2도 2θ, 15.0 ± 0.2도 2θ, 19.1 ± 0.2도 2θ, 및 25.8 ± 0.2도 2θ 중 3개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 14.1 ± 0.2도 2θ, 15.0 ± 0.2도 2θ, 19.1 ± 0.2도 2θ, 및 25.8 ± 0.2도 2θ 중 4개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 14.1 ± 0.2도 2θ, 15.0 ± 0.2도 2θ, 19.1 ± 0.2도 2θ, 및 25.8 ± 0.2도 2θ 중 5개 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 14.1 ± 0.2도 2θ, 15.0 ± 0.2도 2θ, 19.1 ± 0.2도 2θ, 및 25.8 ± 0.2도 2θ에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 14.1 ± 0.2도 2θ, 14.6 ± 0.2도 2θ, 15.0 ± 0.2도 2θ, 16.9 ± 0.2도 2θ, 19.1 ± 0.2도 2θ, 20.0 ± 0.2도 2θ, 22.5 ± 0.2도 2θ, 25.6 ± 0.2도 2θ, 및 25.8 ± 0.2도 2θ 중 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 또는 그 이상에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 163 형태 A(순수)는 도 16과 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
비정질 화합물 173 (순수한 형태) 및 결정질 화합물 173 형태 A (순수)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 173의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 173의 순수한 비정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 비정질 화합물 173(순수한 형태)을 제공한다. 도 18은 실온에서 비정질 화합물 173(순수한 형태)의 X-선 분말 회절도를 제공한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 173(순수한 형태)은 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 173(순수한 형태)은 실질적으로 비정질이다. 일부 구현예에서, 비정질 화합물 173(순수한 형태)은 Cu Kα 방사선의 입사 빔을 갖는 X-선 분말 회절 분석에 의해 생성된 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 비정질 화합물 173(순수한 형태)은 도 18과 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 173의 순수한 결정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 결정질 화합물 173 형태 A(순수)를 제공한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 173 형태 A(순수)는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 173 형태 A(순수)는 실질적으로 결정질이다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 173 형태 A(순수)는 삼사정계, P1 공간군, 및 Cu Kα 방사선(λ=1.54178 Å)을 사용하여 Bruker 회절계를 이용해 150 K에서 측정된 다음 단위 셀 치수를 특징으로 한다:
결정질 화합물 175 형태 A (순수)
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 175의 순수한 고형분 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 175의 순수한 결정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 결정질 화합물 175 형태 A(순수)를 제공한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 175 형태 A(순수)는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 175 형태 A(순수)는 실질적으로 결정질이다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 175 형태 A(순수)는 사방정계, P212121 공간군, 및 Cu Kα 방사선(λ=1.54178 Å)을 사용하는 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서 측정된 다음 단위 셀 치수를 특징으로 한다:
결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A
일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 188의 용매화된 결정질 형태를 제공한다. 일부 구현예에서, 용매화된 결정질 형태는 디클로로메탄 용매화물이다. 일부 구현예에서, 본 발명은 결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A를 제공한다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A는 실질적으로 순수하다. 일부 구현예에서, 결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A는 실질적으로 결정질이다.
일부 구현예에서, 결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A는 단사정계, P21 공간군, 및 Cu Kα 방사선(λ=1.54178 Å)을 사용하는 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서 측정된 다음 단위 셀 치수를 특정으로 한다:
치료 방법
예를 들어 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염과 같은, 본원에 개시된 신규한 화합물 및 고형분 형태 중 어느 하나는 CFTR 조절제로서 작용할 수 있고, 신체 내에서 CFTR 활성을 조절할 수 있다. CFTR을 암호화하는 유전자의 돌연변이로 인해 고통을 받는 개체는 CFTR 조절제를 투여 받음으로써 이점을 누릴 수 있다. CFTR 돌연변이는 CFTR의 양(세포 표면에 있는 CFTR 채널의 수)에 영향을 미치거나, CFTR 기능(이온을 개방하고 수송하는 각 채널의 기능적 능력)에 영향을 미칠 수 있다. CFTR 양에 영향을 미치는 돌연변이는, 합성 결함(클래스 I 결함)을 야기하는 돌연변이, 가공 및 수송 결함(클래스 II 결함)을 유발하는 돌연변이, CFTR의 합성 감소(클래스 V 결함)을 유발하는 돌연변이, 및 CFTR의 표면 안정성 감소(클래스 VI 결함)를 유발하는 돌연변이를 포함한다. CFTR 기능에 영향을 미치는 돌연변이는 게이팅 결함(클래스 III 결함)을 유발하는 돌연변이 및 전도도 결함(클래스 IV 결함)을 유발하는 돌연변이를 포함한다. 일부 CFTR 돌연변이는 다수의 클래스의 특성을 나타낸다. CFTR 유전자의 소정의 돌연변이는 낭성 섬유증을 초래한다.
따라서, 일부 구현예에서, 본 발명은 환자에서 낭성 섬유증을 치료하는 방법, 이의 중증도를 경감시키는 방법, 또는 이를 대증적으로 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은, 예를 들어 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 전술한 건 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염과 같은, 본원에 개시된 신규한 화합물 및 고형분 형태 중 어느 하나의 치료적 유효량을 환자에게 단독으로 투여하거나 또 다른 CFTR 조절제와 같은 다른 활성 성분과 함께 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 환자는 F508del/최소 기능(MF) 유전자형, F508del/F508del 유전자형(F508del 돌연변이에 대해 동형접합성), F508del/게이팅 유전자형, 또는 F508del/잔존 기능(RF) 유전자형을 갖는다. 일부 구현예에서, 환자는 이형접합성이고 F508del 돌연변이를 갖는다. 일부 구현예에서, 환자는 N1303K 돌연변이에 대해 동형접합성이다.
일부 구현예에서, 1 mg 내지 1000 mg의 본원에 개시된 화합물, 이의 중수소화된 유도체, 또는 화합물 또는 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염이 매일 투여된다.
일부 구현예에서, 환자는 이형접합성이고 표 2로부터 선택된 하나의 대립유전자 상에 F508del 돌연변이를 갖고 다른 하나의 대립유전자 상에 돌연변이를 갖는다.
일부 구현예에서, 본 개시는 또한 전술한 화합물의 동위원소 표지된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 사용하는 치료 방법에 관한 것으로서, 이러한 화합물 및 염의 화학식 및 변수는 각각 독립적으로 전술한 것 또는 전술한 임의의 다른 구현예와 같으며, 단, 식 중 하나 이상의 원자는 일반적으로 자연적으로 발생하는 (동위원소 표지된) 원자의 원자 질량 또는 질량 수와 다른 원자 질량 또는 질량 수를 갖는 원자/원자들로 치환된 것이다. 상업적으로 이용 가능하고 본 개시에 적합한 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소, 및 염소 각각의 동위원소, 예를 들어, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F, 및 36Cl를 포함한다.
동위원소 표지된 화합물 및 염은 다수의 유익한 방식으로 사용될 수 있다. 이들은 약물 및/또는 다양한 유형의 검정, 예컨대 기질 조직 분포 검정에 적합할 수 있다. 예를 들어, 삼중수소 (3H) 표지된 화합물 및/또는 탄소-14(14C -표지된 화합물은 제조가 비교적 간단하고 검출력이 뛰어나기 때문에 기재 조직 분포 검정과 같은 다양한 유형의 검정에 특히 유용하다. 예를 들어, 중수소(2H) 표지된 화합물은 치료적으로 유용하고, 비-2H 표지된 화합물에 비해 잠재적으로 치료에 유리하다. 일반적으로, 중수소(2H) 표지된 화합물 및 염은 후술하는 동역학 동위원소 효과로 인해 동위원소 표지되지 않은 것들에 비해 더 높은 대사 안정성을 가질 수 있다. 더 높은 대사 안정성은 생체 내 반감기 증가 또는 투여량 저감으로 직접적으로 바뀔 수 있고, 이는 바람직할 수 있다. 동위원소 표지된 화합물 및 염은, 본원의 실시예 부분 및 제조 부분의 합성 반응식 및 관련 설명에 기술된 절차를 수행하여, 비-동위원소 표지된 반응물을 쉽게 이용 가능한 동위원소 표지된 반응물로 치환함으로써 일반적으로 제조될 수 있다.
일부 구현예에서, 동위원소 표지된 화합물 및 염은 중수소(2H) 표지된 화합물이다. 일부 특정 구현예에서, 동위원소 표지된 화합물 및 염은 중수소 (2H) 표지된 것으로서, 하나 이상의 수소 원자가 중수소로 치환된 것이다. 화학 구조에서, 중수소는 “2H” 또는 “D”로서 표시된다.
치료제를 발견하고 개발할 때, 당업자는 바람직한 시험관 내 특성을 유지하면서 약동학적 파라미터를 최적화하려고 시도한다. 약동학적 프로파일이 나쁜 많은 화합물이 산화 대사에 취약하다고 가정하는 것이 합리적일 수 있다.
중수소 (2H) 표지된 화합물 및 염은 일차 동적 동위원소 효과(kinetic isotope effect)를 통해 화합물의 산화 대사를 조절할 수 있다. 일차 동적 동위원소 효과는 동위원소 핵의 교환에 기인하는 화학 반응에 대한 속도의 변화이며, 이는 결국 이러한 동위원소 교환 후 공유 결합 형성에 필요한 기저 상태 에너지(ground state energy)의 변화에 의해 야기된다. 보다 무거운 동위원소 교환은 일반적으로 화학적 결합을 위한 기저 상태 에너지를 낮추고, 이에 따라 속도 제한 결합 파괴(rate-limiting bond breakage)를 감소시킨다. 결합 파괴가 다중 생성물 반응의 좌표를 따라 안장점 영역 내에서 또는 그 부근에서 발생하는 경우, 생성물 분포 비율이 실질적으로 변경될 수 있다. 설명하자면: 중수소가 교환 가능하지 않은 위치에서 탄소 원자에 결합되는 경우, kM/kD의 속도 차이는 2~7이 일반적이다. 추가 논의에 대해서는 S. L. Harbeson 및 R. D. Tung의 문헌[Deuterium In Drug Discovery and Development, Ann. Rep. Med. Chem. 2011, 46, 403-417]을 참조하고, 동 문헌은 참조로서 본원에 통합된다.
본 개시의 동위원소 표지된 화합물 및 염에 혼입된 동위원소(들)(예를 들어, 중수소)의 농도는 동위원소 농축 계수에 의해 정의될 수 있다. 본원에서 사용되는 용어 “동위원소 농축 계수(isotopic enrichment factor)”는 특정 동위원소의 동위원소성 풍부함과 천연 풍부함 간의 비율을 의미한다. 일부 구현예에서, 본 개시의 화합물의 치환기가 중수소로 표시되는 경우, 이러한 화합물은 각각의 지정된 중수소 원자에 대해 적어도 3500(각각의 지정된 중수소에서 52.5% 중수소 혼입), 적어도 4000(60% 중수소 혼입), 적어도 4500개(67.5% 중수소 혼입), 적어도 5000(75% 중수소 혼입), 적어도 5500(82.5% 중수소 혼입), 적어도 6000(90% 중수소 혼입), 적어도 6333.3(95% 중수소 혼입), 적어도 6466.7(97% 중수소 혼입), 적어도 6600(99% 중수소 혼입), 또는 적어도 6633.3(99.5% 중수소 혼입)의 동위원소 농축 계수를 갖는다.
병용 요법
본원에 개시된 일 양태는 예를 들어 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염과 같은, 본원에 개시된 신규한 화합물 및 고형분 형태 중 어느 하나를 적어도 하나의 추가의 활성 약학적 성분과 병용으로 사용하여 낭성 섬유증 및 다른 CFTR 매개 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
따라서, 일부 구현예에서, 본 발명은 환자에서 낭성 섬유증을 치료하는 방법, 이의 중증도를 경감시키는 방법, 또는 이를 대증적으로 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은, 예를 들어 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 이들 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염과 같은, 본원에 개시된 신규한 화합물 및 고형분 형태 중 어느 하나의 유효량을 환자에게 단독으로 투여하거나, 예를 들어 CFTR 조절제와 같은 적어도 하나의 추가의 활성 약학적 성분과 함께 투여하는 단계를 포함한다.
일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 점액 용해제, 기관지확장제, 항생제, 항감염제, 및 항염증제로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 추가 치료제는 항생제이다. 본원에서 유용한 예시적인 항생제는 토브라마이신 흡입식 분말(TIP)을 포함하는 토브라마이신, 아지트로마이신, 아즈트레오남의 에어로졸화된 형태를 포함하는 아즈트레오남, 아미카신의 리포솜 제형을 포함하는 아미카신, 흡입에 의한 투여에 적합한 시프로플록사신 제형을 포함하는 시프로플록사신, 에어로졸화된 레보플락사신 제형을 포함하는 레보플락사신, 및 두 가지 항생제, 예를 들어 포스포마이신과 토브라마이신의 조합을 포함한다.
일부 구현예에서, 추가 제제는 뮤코라이트(mucolyte)이다. 본원에서 유용한 예시적인 뮤코라이트는 Pulmozyme®을 포함한다.
일부 구현예에서, 추가 제제는 기관지확장제이다. 예시적인 기관지확장제는 알부테롤, 메타프로테네롤 설페이트, 피르부테롤 아세테이트, 살메테롤, 또는 테트라부린 설페이트를 포함한다.
일부 구현예에서, 추가 제제는 항염증제, 즉 폐의 염증을 감소시킬 수 있는 제제이다. 본원에서 유용한 예시적인 이러한 제제는 이부프로펜, 도코사헥사논산(DHA), 실데나필, 흡입식 글루타티온, 피오글리타존, 하이드록시클로로퀸, 또는 시마바스타틴을 포함한다.
일부 구현예에서, 추가 제제는 영양제이다. 예시적인 영양제는 Pancreate®, Pancreacarb®, Ultrase®, 또는 Creon®을 포함하는 판크렐리파아제(췌장 효소 대용품), Liprotomase®(구 Trizytek®), Aquadeks®, 또는 글루타티온 흡입을 포함한다. 일 구현예에서, 추가 영양제는 판크렐리파아제이다.
일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 조절제로부터 선택된다. 일부 구현예에서, CFTR 조절제는 CFTR 교정제이다. 일부 구현예에서, CFTR 조절제는 CFTR 강화제 인핸서/공동 강화제(예를 들어 ASP-11)이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 증폭제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 통독제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 핵산 요법이다.
일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 ENaC 억제제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 TMEM16A 조절제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 GPR39 작용제이다.
일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가의 활성 약학적 성분은 다음으로부터 선택된다: (a) 화합물 II 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염; (b) 화합물 IV 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염; (c) 화합물 V 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염; (d) 화합물 VI 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염; (e) 화합물 VII 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염; 및 (f) 화합물 VIII 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염. 따라서, 일부 구현예에서, 본원에 제공된 병용 요법은 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 화합물 및 중수소화된 유도체 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물; 및 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 병용 요법은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; (b) 화합물 II, 화합물 IV, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 중수소화된 유도체로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 (c) 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 병용 요법은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; (b) 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 중수소화된 유도체로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 (c) 화합물 VII 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 병용 요법은 다음을 포함한다: (a) I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물; (b) 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 (c) 다음에 기술된 화합물로부터 선택된 적어도 하나의 화합물: WO 2016/105485, 미국 특허 출원 공개 제2016-0120841호, 미국 특허 출원 공개 제2017-0101405호, WO 2017/009804, WO 2018/065921, WO 2017/062581; Phuan, P.-W. 등의 문헌[J. Cyst. Fibros. 2018, 17 (5), 595-606]; Pedemonte, N. 등의 문헌[Sci. Adv. 2020, 6 (8), eaay9669]; Phuan, P.-W. 등의 문헌[Sci. Rep. 2019, 9 (1), 17640]; Bose, S. 등의 문헌[J. Cyst. Fibros. 2020, 19 Suppl 1, S25-S32]; Crawford, D.K.의 문헌[J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374 (2), 264-272]; Brasell, E.J. 등의 문헌[PLoS One 2019, 14 (12), e0223954]; Smith, N.J, Solovay, C.F.의 문헌[Pharm. Pat. Anal. 2017, 6 (4), 179-188]; Kunzelmann, K. 등의 문헌[Front. Pharmacol. 2019, 10, 3]; 또는 Son, J.-H. 등의 문헌[Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888].
일부 구현예에서, 본원에 제공된 병용 요법은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물; (b) 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 (c) PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, PTI-801, FDL-176, PTI-808, GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451 (아이센티카프터), GLPG3067/ABBV-3067 (노보카프터), ABBV-191, ELX-02, MRT5005, Lunar-CF, RCT223, 아밀로라이드, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, ARO-ENaC1001, ETD002, 및 DS-1039로부터 선택된 적어도 하나의 화합물.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 병용 요법은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물; 및 (b) 다음에 기술된 화합물로부터 선택된 적어도 하나의 화합물: WO 2019/195739, WO 2019/200246, WO 2021/030555, WO 2021/030556, WO 2010/053471, WO 2011/119984, WO 2011/133751, WO 2011/133951, WO 2015/160787, WO 2007/056341, WO 2009/073757, WO 2009/076142, WO 2018/107100, WO 2019/113476, WO 2018/064632, WO 2019/152940, WO 2016/057572, WO 2021/030554, WO 2020/206080, WO 2016/105485, 미국 특허 출원 공개 제2016-0120841호, 미국 특허 출원 공개 제2017-0101405호, WO 2017/009804, WO 2018/065921, WO 2017/062581; Phuan, P.-W. 등의 문헌[J. Cyst. Fibros. 2018, 17 (5), 595-606]; Pedemonte, N. 등의 문헌[Sci. Adv. 2020, 6 (8), eaay9669]; Phuan, P.-W. 등의 문헌[Sci. Rep. 2019, 9 (1), 17640]; Bose, S. 등의 문헌[J. Cyst. Fibros. 2020, 19 Suppl 1, S25-S32]; Crawford, D.K.의 문헌[J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374 (2), 264-272]; Brasell, E.J. 등의 문헌[PLoS One 2019, 14 (12), e0223954]; Smith, N.J, Solovay, C.F.의 문헌[Pharm. Pat. Anal. 2017, 6 (4), 179-188]; Kunzelmann, K. 등의 문헌[Front. Pharmacol. 2019, 10, 3]; 또는 Son, J.-H. 등의 문헌[Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888].
일부 구현예에서, 본원에 제공된 병용 요법은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물; 및 (b) 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, PTI-801, FDL-176, PTI-808, GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451 (아이센티카프터), GLPG3067/ABBV-3067 (노보카프터), ABBV-191, ELX-02, MRT5005, Lunar-CF, RCT223, 아밀로라이드, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, ARO-ENaC1001, ETD002, 및 DS-1039, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 2개의 화합물.
일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 화합물 II 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물과 함께 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 이들 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 화합물 IV 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물과 함께 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 이들 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 화합물 V 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물과 함께 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 이들 화합물 및 중수소화된 유도체 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 화합물 VI 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물과 함께 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 화합물 VII 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물과 함께 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이들 화합물의 중수소화된 유도체, 및 전술한 화합물 및 중수소화된 유도체 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 화합물 VIII 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물과 함께 투여된다.
식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 각각의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이들의 중수소화된 유도체 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 각각은 독립적으로 매일 1회, 매일 2회, 또는 매일 3회 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 매일 2회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 2회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 IV 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 IV 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 2회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 V 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 V 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 2회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 VI 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 VI 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 2회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 VII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 VII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 2회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 VIII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 및 화합물 VIII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 2회 투여된다.
일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선태된 적어도 하나의 화합물; 화합물 II, 화합물 IV, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선태된 적어도 하나의 화합물; 화합물 II, 화합물 IV, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 2회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 화합물 VII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 화합물 VII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물이 매일 2회 투여된다.
식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이들의 중수소화된 유도체 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 단일 약학적 조성물로 투여되거나 별도의 약학적 조성물로 투여될 수 있다. 이러한 약학적 조성물은 매일 1회 또는 매일 다회(예: 매일 2회) 투여될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 주어진 양의 API(예를 들어, 화합물 II, 화합물 VII, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염)가 1일 또는 매일 1회 또는 2회 투여된다는 것은, 상기 주어진 양이 조제할 때마다 투여된다는 것을 의미하며, 이는 매일 1회 1회 또는 2회 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 제1 약학적 조성물로 투여되고; 화합물 VII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 제2 약학적 조성물로 투여된다.
일부 구현예에서, 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 제1 약학적 조성물로 투여되고; 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 제2 약학적 조성물로 투여되고; 화합물 VII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물은 제3 약학적 조성물로 투여된다.
식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염에 대해 당업계에 알려진 임의의 적합한 약학적 조성물이 사용될 수 있다. 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 위한 일부 예시적인 약학적 조성물은 WO 2011/119984, 및 WO 2014/014841에서 확인할 수 있으며, 이들 모두는 참조로서 본원에 통합된다. 화합물 III 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염에 대한 일부 예시적인 약학적 조성물은 WO 2007/134279, WO 2010/019239, WO 2011/019413, WO 2012/027731, 및 WO 2013/130669에서 확인할 수 있고, 화합물 III-d 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염에 대한 일부 예시적인 약학적 조성물은 US 8,865,902, US 9,181,192, US 9,512,079, WO 2017/053455, 및 WO 2018/080591에서 확인할 수 있으며, 이들 모두는 참조로서 본원에 통합된다. 화합물 IV 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 위한 일부 예시적인 약학적 조성물은 WO 2010/037066, WO 2011/127421, 및 WO 2014/071122에서 확인할 수 있으며, 이들 모두는 참조로서 본원에 통합된다. 화합물 V 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 위한 일부 예시적인 약학적 조성물은 WO 2019/152940에서 확인할 수 있으며, 이는 참조로서 본원에 통합된다. 화합물 VI 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 위한 일부 예시적인 약학적 조성물은 WO 2019/079760에서 확인할 수 있으며, 이는 참조로서 본원에 통합된다.
약학적 조성물
본 발명의 또 다른 양태는 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분과 함께 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 조절제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 교정자이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 강화제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 강화를 향상시키는 화합물, 즉 CFTR 강화제 인핸서/ 공동 강화제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 증폭제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 통독제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 CFTR 핵산 요법이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 ENaC 억제제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 TMEM16A 조절제이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 추가 활성 약학적 성분은 GPR39 작용제이다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 각각이 CFTR 교정자인 적어도 2개의 추가 활성 약학적 성분을 포함한다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 하나는 CFTR 교정자이고 하나는 CFTR 강화제 인핸서인 적어도 2개의 추가 활성 약학적 성분을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 다음을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, (b) 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 (c) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
일부 구현예에서, 본 발명은 다음을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, (b) 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 (c) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
일부 구현예에서, 본 발명은 다음을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, (b) 화합물 VII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 (c) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
일부 구현예에서, 본 개시는 다음을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, (b) 화합물 II, 화합물 IV, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, (c) 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 (d) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
일부 구현예에서, 본 개시는 다음을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, (b) 화합물 II 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, (c) 화합물 VII 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 (d) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; (b) 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 중수소화된 유도체로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; (c) 다음에 개시된 화합물로부터 선택된 적어도 하나의 화합물: WO 2016/105485, 미국 특허 출원 공개 제2016-0120841호, 미국 특허 출원 공개 제2017-0101405호, WO 2017/009804, WO 2018/065921, WO 2017/062581; Phuan, P.-W. 등의 문헌[J. Cyst. Fibros. 2018, 17 (5), 595-606]; Pedemonte, N. 등의 문헌[Sci. Adv. 2020, 6 (8), eaay9669]; Phuan, P.-W. 등의 문헌[Sci. Rep. 2019, 9 (1), 17640]; Bose, S. 등의 문헌[J. Cyst. Fibros. 2020, 19 Suppl 1, S25-S32]; Crawford, D.K.의 문헌[J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374 (2), 264-272]; Brasell, E.J. 등의 문헌[PLoS One 2019, 14 (12), e0223954]; Smith, N.J, Solovay, C.F.의 문헌[Pharm. Pat. Anal. 2017, 6 (4), 179-188]; Kunzelmann, K. 등의 문헌[Front. Pharmacol. 2019, 10, 3]; 또는 Son, J.-H. 등의 문헌[Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888]; 및 (d) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; (b) 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 중수소화된 유도체로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; (c) PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, PTI-801, FDL-176, PTI-808, GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451 (아이센티카프터), GLPG3067/ABBV-3067 (나보카프터), ABBV-191, ELX-02, MRT5005, Lunar-CF, RCT223, 아밀로라이드, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, ARO-ENaC1001, ETD002, 및 DS-1039로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; 및 (d) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물; (b) 다음에 기술된 화합물로부터 선택된 적어도 하나의 화합물: WO 2019/195739, WO 2019/200246, WO 2021/030555, WO 2021/030556, WO 2010/053471, WO 2011/119984, WO 2011/133751, WO 2011/133951, WO 2015/160787, WO 2007/056341, WO 2009/073757, WO 2009/076142, WO 2018/107100, WO 2019/113476, WO 2018/064632, WO 2019/152940, WO 2016/057572, WO 2021/030554, WO 2020/206080, WO 2016/105485, 미국 특허 출원 공개 제2016-0120841호, 미국 특허 출원 공개 제2017-0101405호, WO 2017/009804, WO 2018/065921, WO 2017/062581; Phuan, P.-W. 등의 문헌[J. Cyst. Fibros. 2018, 17 (5), 595-606]; Pedemonte, N. 등의 문헌[Sci. Adv. 2020, 6 (8), eaay9669]; Phuan, P.-W. 등의 문헌[Sci. Rep. 2019, 9 (1), 17640]; Bose, S. 등의 문헌[J. Cyst. Fibros. 2020, 19 Suppl 1, S25-S32]; Crawford, D.K.의 문헌[J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374 (2), 264-272]; Brasell, E.J. 등의 문헌[PLoS One 2019, 14 (12), e0223954]; Smith, N.J, Solovay, C.F.의 문헌[Pharm. Pat. Anal. 2017, 6 (4), 179-188]; Kunzelmann, K. 등의 문헌[Front. Pharmacol. 2019, 10, 3]; 또는 Son, J.-H. 등의 문헌[Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888]; 및 (c) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 다음을 포함한다: (a) 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’의 화합물 및 고형분 형태, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물; (b) 화합물 II, 화합물 IV, 화합물 V, 화합물 VI, 화합물 VII, 화합물 VIII, 화합물 IX, 화합물 X, PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, PTI-801, FDL-176, PTI-808, GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451 (아이센티카프터), GLPG3067/ABBV-3067 (나보카프터), ABBV-191, ELX-02, MRT5005, Lunar-CF, RCT223, 아밀로라이드, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, ARO-ENaC1001, ETD002, 및 DS-1039, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 중수소화된 유도체로부터 선택된 적어도 2개의 화합물; 및 (c) 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체.
본원에 개시된 임의의 약학적 조성물은 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체는 약학적으로 허용 가능한 비히클 및 약학적으로 허용 가능한 보조제(adjuvant)로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 제제는 약학적으로 허용 가능한 필러, 붕해제, 계면활성제, 결합제, 윤활제로부터 선택된다.
본원에 기술된 약학적 조성물은 낭성 섬유증 및 다른 CFTR-매개 질환을 치료하는 데 유용하다.
전술한 바와 같이, 본원에 개시된 약학적 조성물은 임의로 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체는 보조제 및 비히클로부터 선택될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체는 원하는 특정 투여 형태에 적합한 경우, 임의의 및 모든 용매, 희석제, 기타 액체 비히클, 분산 보조제, 현탁 보조제, 표면 활성제, 등장화제, 증점제, 유화제, 보존제, 고형분 결합제, 및 윤활제를 포함한다. D.B. Troy(ed.)의 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st edition, 2005, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia] 및 J. Swarbrick 및 J. C. Boylan(ed.)의 문헌[Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, 1988-1999, Marcel Dekker, New York]에는 약학적 조성물을 제형화하는데 사용된 다양한 담체, 및 이의 제조를 위한 공지된 기술이 개시되어 있다. 임의의 종래 담체가, 예컨대 임의의 바람직하지 않은 생물학적 효과를 생성하거나, 달리 약학적 조성물의 임의의 다른 성분(들)과 유해한 방식으로 상호 작용함으로써 본 개시의 화합물과 호환되지 않는 경우를 제외하고, 이러한 종래 담체를 사용하는 것도 본 개시의 범위에 포함되는 것으로 본다. 약학적으로 허용 가능한 적절한 담체의 비제한적인 예는 이온 교환기, 알루미나, 스테아린산 알루미늄, 레시틴, 혈청 단백질(예: 인간 혈청 알부민), 완충 물질(예: 인산염, 글리신, 소르브산, 및 소르브산칼륨), 포화 식물성 지방산, 물, 염, 및 전해질(예를 들어, 황산프로타민, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 및 아연 염)의 부분 글리세리드 혼합물, 콜로이드성 실리카, 삼규산마그네슘, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 울 지방, 당류(예: 락토오스, 포도당, 및 수크로오스), 전분(예: 옥수수 전분 및 감자 전분), 셀룰로오스 및 이의 유도체(예: 나트륨 카복시메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 및 셀룰로오스 아세테이트), 분말 트라가칸스, 맥아, 젤라틴, 탈크, 부형제(예: 코코아 버터 및 좌제 왁스), 오일(예: 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유, 및 대두유), 글리콜(예: 프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜), 에스테르(예: 올레산 에틸 및 라우린산 에틸), 한천, 완충제(예: 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄), 알긴산, 발열원이 없는 물, 등장성 식염수, 링거 용액, 에틸 알코올, 인산염 완충액, 비독성의 호환 윤활제(예: 라우릴 황산 나트륨 및 스테아린산 마그네슘), 착색제, 방출제, 코팅제, 감미제, 향미제, 방향제, 보존제, 및 항산화제를 포함하지만, 이들로 한정되지는 않는다.
비제한적인 예시적인 구현예
1. 식 I의 화합물:
I,
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물로서, 식 중:
X는 -N(R X1 )- 및 로부터 선택되고;
고리 A는 C1-C6 알킬 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
R X1 은 H, C1-C6 알킬(하이드록시, 옥소, -OR X2 , 및 -N(R X2 )2로부터 독립적으로 치환된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및 C3-C8 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R X2 는 H 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Y는 -C(R Y )2-, -O-, -CO-, -NR YN -, 및 로부터 독립적으로 선택되되, 여기서 각각의 R YN 은 H, C1-C4 알킬, 및 CO2 R YN1 로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 R YN1 은 C1-C4 알킬 및 C3-C6 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -OR Y1 ,
-CO2 R Y1 , -COR Y1 , -CON(R Y1 )2, 및 -N(R Y1 )2로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
각각의 R Y1 은 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의 R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
고리 B는 다음으로부터 선택되고:
■ C6-C10 아릴(할로겐, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
■ C3-C8 시클로알킬,
■ 5원 내지 10원 헤테로아릴, 및
■ 3원 내지 6원 헤테로시클릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨);
각각의 Q는 다음으로부터 독립적으로 선택되고:
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알킬:
o 할로겐,
o 옥소,
o C6-C10 아릴(할로겐 및 OCF3으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C3-C8 시클로알킬:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐, -NH2, 및 -NHCOMe로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C1-C6 알콕시,
o C6-C10 아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐 및 하이드록시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알콕시:
■ 할로겐,
■ C3-C8 시클로알킬(CF3으로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(할로겐, CF3, OCF3, 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C6-C10 아릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 5원 내지 10원 헤테로아릴:
o 할로겐,
o C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(1개 내지 3개의 CF3 기로 임의 치환됨), 및
o 3원 내지 10원 헤테로시클릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 3원 내지 10원 헤테로시클릴:
o C1-C6 알킬(옥소 및 및 C3-C8 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o 옥소;
각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(하이드록시, C6-C10　아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C3-C8 시클로알킬, C6-C10　아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -B(OR 2 )2, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , -PO(OR 2 )2, 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R 2 는 수소, C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~6개의 기로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 및 C6-C10　아릴(C1-C6 플루오로알킬 및 C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되고;
Z는 , , , 및 로부터 선택되되; 고리 C는 C6-C10 아릴 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z1 은 수소, -CN, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10 아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, NH2, NH(CO)(C1-C6 알킬), 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하고;
각각의 R Z3 은 하이드록시, C1-C6 알콕시, C1-C6 알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되거나; 2개의 R Z3 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
n은 4, 5, 6, 7, 및 8로부터 선택되고;
m은 0, 1, 2, 및 3으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
2. 구현예 1에 있어서,
X는 -N(R X1 )- 및 로부터 선택되고;
고리 A는　C1-C6　알킬 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된　4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
R X1 은 H, C1-C6 알킬(하이드록시, 옥소, -OR X2 , 및 -N(R X2 )2로부터 독립적으로 치환된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및 C3-C8 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R X2 는 H 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Y는 -C(R Y )2-, -O-, -CO-, -NR YN -, 및 로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 R YN 은 H, C1-C4 알킬, 및 CO2Me로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6　알콕시, 및　Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -OR Y1 ,
-CO2 R Y1 , -COR Y1 , -CON(R Y1 )2, 및 -N(R Y1 )2로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
각각의 R Y1 은 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의　R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
고리 B는 다음으로부터 선택되고:
■ C6-C10 아릴(할로겐, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
■ C3-C8 시클로알킬,
■ 5원 내지 10원 헤테로아릴, 및
■ 3원 내지 6원 헤테로시클릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨);
각각의 Q는 다음으로부터 독립적으로 선택되고:
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알킬:
o 할로겐,
o 옥소,
o C6-C10 아릴(할로겐 및 OCF3으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C3-C8 시클로알킬:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐, -NH2, 및 -NHCOMe로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C1-C6 알콕시,
o C6-C10 아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐 및 하이드록시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알콕시:
■ 할로겐,
■ C3-C8 시클로알킬(CF3으로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(할로겐, CF3, OCF3, 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C6-C10 아릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 5원 내지 10원 헤테로아릴:
o 할로겐,
o C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(1개 내지 3개의 CF3 기로 임의 치환됨), 및
o 3원 내지 10원 헤테로시클릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 3원 내지 10원 헤테로시클릴:
o C1-C6 알킬(옥소 및 및 C3-C8 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o 옥소;
각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(C6-C10 아릴 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C1-C6 알콕시, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴,
-SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , -PO(OR 2 )2, 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R 2 는 수소, C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~6개의 기로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 및 C6-C10　아릴(C1-C6 플루오로알킬 및 C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되고;
Z는 로부터 선택되고;
R Z1 은 수소, -CN, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10 아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하고;
각각의 R Z3 은 하이드록시, C1-C6 알콕시, C1-C6 알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되거나; 2개의 R Z3 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
n은 4, 5, 6, 및 7로부터 선택되고;
m은 0, 1, 2, 및 3으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
3. 구현예 1 또는 2에 있어서, X는 -NR X1 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
4. 구현예 1~3 중 어느 하나에 있어서, X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
5. 구현예 1 또는 2에 있어서, X는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
6. 구현예 1, 2, 또는 5에 있어서, 고리 A는 피롤리딘, 피페라진, 모르폴린, 및 이소티아졸리딘으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
7. 구현예 1, 2, 5, 또는 6에 있어서, X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
8. 구현예 1~7 중 어느 하나에 있어서, 각각의　R Y 는 다음으로부터 독립적으로 선택되거나:
동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 테트라하이드로푸라닐, 및 테트라하이드로피라닐로부터 선택된 고리를 형성하거나;
2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
9. 구현예 1~8 중 어느 하나에 있어서, 각각의　Q는 할로겐 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10　아릴로부터 독립적으로 선택되는,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
10. 구현예 1~9 중 어느 하나에 있어서, 각각의　Q는 페닐인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
11. 구현예 1~10 중 어느 하나에 있어서, 각각의 고리 B는 C6-C10 아릴(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
12. 구현예 1~11 중 어느 하나에 있어서, 각각의 고리 B는 다음으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
13. 구현예 1~12 중 어느 하나에 있어서, -(Y)n-은 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
14. 구현예 1~13 중 어느 하나에 있어서, -(Y)n-은 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
15. 구현예 1~14 중　어느 하나에 있어서, Y는 -C(R Y )2-인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
16. 구현예 15에 있어서, 각각의 Y는 -CH2- 및 -C(Me)2-로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
17. 구현예 1~16 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 C1-C6 플루오로알킬 및 -N(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되는,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
18. 구현예 1~16 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 Br, -CH3, -CF3, -CHF2, -OH, -OCH3, -CN, -NH2,
독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
19. 구현예 1~18 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 -CF3　및 -NH2로부터 독립적으로 선택되는,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
20. 구현예 1~19 중 어느 하나에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
21. 구현예 1~20 중 어느 하나에 있어서,
R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
22. 구현예 1~21 중 어느 하나에 있어서, Z는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
23. 구현예 1~22 중 어느 하나에 있어서, 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
24. 구현예 1~23 중 어느 하나에 있어서, R Z1 은 C1-C6 플루오로알킬로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
25. 구현예 1~24 중 어느 하나에 있어서, R Z1 은 -CF3인,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
26. 구현예 1~25 중 어느 하나에 있어서, R Z2 는 하이드록시인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
27. 구현예 1~21 중 어느 하나에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
28. 구현예 1~21 중 어느 하나에 있어서, 는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
1. 구현예 1~28 중 어느 하나에 있어서, n은 4, 5, 및 6으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
2. 구현예 1~29 중 어느 하나에 있어서, n은 5인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
3. 구현예 1~29 중 어느 하나에 있어서, n은 6인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
4. 구현예 1~31 중 어느 하나에 있어서, m은 1 및 2로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
5. 구현예 1~32 중 어느 하나에 있어서, m은 2인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
6. 식 Ia:
Ia,
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물로서, 식 중:
X는 -NR X1 - 및 로부터 선택되고;
고리 A는　C1-C6　알킬 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된　4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
R X1 은 H, C1-C6 알킬(하이드록시, 옥소, -OR X2 , 및 -N(R X2 )2로부터 독립적으로 치환된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및 C3-C8 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R X2 는 H 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Y는 -C(R Y )2-, -O-, -CO-, -NR YN -, 및 로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 R YN 은 H, C1-C4 알킬, 및 CO2Me로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -OR Y1 , -CO2 R Y1 , -COR Y1 , -CON(R Y1 )2, 및 -N(R Y1 )2-로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
각각의 R Y1 은 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의　R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
고리 B는 다음으로부터 선택되고:
■ C6-C10 아릴(할로겐, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
■ C3-C8 시클로알킬,
■ 5원 내지 10원 헤테로아릴, 및
■ 3원 내지 6원 헤테로시클릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨);
각각의 Q는 다음으로부터 독립적으로 선택되고:
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알킬:
o 할로겐,
o 옥소,
o C6-C10 아릴(할로겐 및 OCF3으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C3-C8 시클로알킬:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐, -NH2, 및 -NHCOMe로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C1-C6 알콕시,
o C6-C10 아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐 및 하이드록시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알콕시:
■ 할로겐,
■ C3-C8 시클로알킬(CF3으로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(할로겐, CF3, OCF3, 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C6-C10 아릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 5원 내지 10원 헤테로아릴:
o 할로겐,
o C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(1개 내지 3개의 CF3 기로 임의 치환됨), 및
o 3원 내지 10원 헤테로시클릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 3원 내지 10원 헤테로시클릴:
o C1-C6 알킬(옥소 및 및 C3-C8 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o 옥소;
각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(C6-C10 아릴 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C1-C6 알콕시, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , -PO(OR 2 )2, 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R 2 는 수소, C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~6개의 기로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 및 C6-C10　아릴(C1-C6 플루오로알킬 및 C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되고;
Z는 로부터 선택되고;
R Z1 은 수소, -CN, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10　아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하고;
각각의 R Z3 은 하이드록시, C1-C6 알콕시, C1-C6 알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되거나; 2개의　R Z3 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
n은 4, 5, 6, 및 7로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
35. 구현예 34에 있어서, X는 -NR X1 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
36. 구현예 34 또는 35에 있어서,　X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
37. 구현예 구현예 34에 있어서, X는 1. 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
38. 구현예 34 또는 37에 있어서, 고리 A는 피롤리딘, 피페라진, 모르폴린, 및 이소티아졸리딘으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
39. 구현예 34, 37, 또는 38에 있어서, X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
40. 구현예 34~39 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R Y 는 다음으로부터 독립적으로 선택되거나:
수소, 하이드록시, 메틸,
;
동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 테트라하이드로푸라닐, 및 테트라하이드로피라닐로부터 선택된 고리를 형성하거나;
2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
41. 구현예 34~40 중 어느 하나에 있어서, 각각의 Q는 할로겐 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
42. 구현예 34~41 중 어느 하나에 있어서, 각각의 Q는 페닐인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
43. 구현예 34~42 중 어느 하나에 있어서, 각각의 고리 B는 C6-C10 아릴(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
44. 구현예 34~43 중 어느 하나에 있어서, 각각의 고리 B는 다음으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
45. 구현예 34~44 중 어느 하나에 있어서, -(Y)n-은 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
46. 구현예 34~45 중 어느 하나에 있어서, -(Y)n-은 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
47. 구현예 34~45 중　어느 하나에 있어서, Y는 -C(R Y )2-인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
48. 구현예 47에 있어서, 각각의 Y는 -CH2- 및 -C(Me)2-로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
49. 구현예 34~48 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 C1-C6 플루오로알킬 및 -N(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되는,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
50. 구현예 34~48 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 Br, -CH3, -CF3, -CHF2, -OH, -OCH3, -CN, -NH2,
로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
51. 구현예 34~50 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 -CF3　및 -NH2로부터 독립적으로 선택되는,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
52. 구현예 34~51 중 어느 하나에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
53. 구현예 34~52 중 어느 하나에 있어서,
R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
54. 구현예 34~53 중 어느 하나에 있어서, Z는 1. 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
55. 구현예 34~54 중 어느 하나에 있어서, 1. 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
56. 구현예 34~55 중 어느 하나에 있어서, R Z1 은 C1-C6 플루오로알킬로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
57. 구현예 34~56 중 어느 하나에 있어서, R Z1 은 -CF3인,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
58. 구현예 34~57 중 어느 하나에 있어서, R Z2 는 하이드록시인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
59. 구현예 34~53 중 어느 하나에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
60. 구현예 34~53 중 어느 하나에 있어서, 는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
61. 구현예 34~60 중 어느 하나에 있어서, n은 4, 5, 및 6으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
62. 구현예 34~61 중 어느 하나에 있어서, n은 5인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
63. 구현예 34~62 중 어느 하나에 있어서, n은 6인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
64. 식　IIa, IIb, IIc, 및 IId의 화합물:
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물로서, 식 중:
X는 -NR X1 - 및 로부터 선택되고;
고리 A는　C1-C6　알킬 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된　4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
R X1 은 H, C1-C6 알킬(하이드록시, 옥소, -OR X2 , 및 -N(R X2 )2로부터 독립적으로 치환된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및 C3-C8 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R X2 는 H 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Y는 -C(R Y )2-, -O-, -CO-, -NR YN -, 및 로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 R YN 은 H, C1-C4 알킬, 및 CO2Me로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -OR Y1 , -CO2 R Y1 , -COR Y1 , -CON(R Y1 )2, 및 -N(R Y1 )2-로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
각각의 R Y1 은 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의　R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
고리 B는 다음으로부터 선택되고:
■ C6-C10 아릴(할로겐, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
■ C3-C8 시클로알킬,
■ 5원 내지 10원 헤테로아릴, 및
■ 3원 내지 6원 헤테로시클릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨);
각각의 Q는 다음으로부터 독립적으로 선택되고:
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알킬:
o 할로겐,
o 옥소,
o C6-C10 아릴(할로겐 및 OCF3으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C3-C8 시클로알킬:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐, -NH2, 및 -NHCOMe로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C1-C6 알콕시,
o C6-C10 아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐 및 하이드록시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알콕시:
■ 할로겐,
■ C3-C8 시클로알킬(CF3으로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(할로겐, CF3, OCF3, 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C6-C10 아릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 5원 내지 10원 헤테로아릴:
o 할로겐,
o C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(1개 내지 3개의 CF3 기로 임의 치환됨), 및
o 3원 내지 10원 헤테로시클릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 3원 내지 10원 헤테로시클릴:
o C1-C6 알킬(옥소 및 및 C3-C8 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o 옥소;
각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(C6-C10 아릴 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C1-C6 알콕시, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴,
-SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , -PO(OR 2 )2, 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R 2 는 수소, C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~6개의 기로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 및 C6-C10　아릴(C1-C6 플루오로알킬 및 C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되고;
Z는 로부터 선택되고;
R Z1 은 수소, -CN, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10　아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하고;
각각의 R Z3 은 하이드록시, C1-C6 알콕시, C1-C6 알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되거나; 2개의　R Z3 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
m은 0, 1, 2, 및 3으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
65. 구현예 64에 있어서, m은　1 및 2로부터 선택되는, 화합물.
66. 구현예 64 또는 65에 있어서, m　2인, 화합물.
67. 식 IIe, IIf, IIg, 및 IIh의 화합물:
및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물로서, 식 중:
X는 -NR X1 - 및 로부터 선택되고;
고리 A는　C1-C6　알킬 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된　4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
R X1 은 H, C1-C6 알킬(하이드록시, 옥소, -OR X2 , 및 -N(R X2 )2로부터 독립적으로 치환된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및 C3-C8 시클로알킬로부터 선택되고;
각각의 R X2 는 H 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Y는 -C(R Y )2-, -O-, -CO-, -NR YN -, 및 로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 R YN 은 H, C1-C4 알킬, 및 CO2Me로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -OR Y1 , -CO2 R Y1 , -COR Y1 , -CON(R Y1 )2, 및 -N(R Y1 )2-로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
각각의 R Y1 은 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의　R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
고리 B는 다음으로부터 선택되고:
■ C6-C10 아릴(할로겐, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
■ C3-C8 시클로알킬,
■ 5원 내지 10원 헤테로아릴, 및
■ 3원 내지 6원 헤테로시클릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨);
각각의 Q는 다음으로부터 독립적으로 선택되고:
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알킬:
o 할로겐,
o 옥소,
o C6-C10 아릴(할로겐 및 OCF3으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C3-C8 시클로알킬:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐, -NH2, 및 -NHCOMe로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C1-C6 알콕시,
o C6-C10 아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C3-C8 시클로알킬,
■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴:
o 할로겐,
o CN,
o C1-C6 알킬(할로겐 및 하이드록시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알콕시:
■ 할로겐,
■ C3-C8 시클로알킬(CF3으로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(할로겐, CF3, OCF3, 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o C6-C10 아릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 5원 내지 10원 헤테로아릴:
o 할로겐,
o C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
o C3-C8 시클로알킬(1개 내지 3개의 CF3 기로 임의 치환됨), 및
o 3원 내지 10원 헤테로시클릴,
■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 3원 내지 10원 헤테로시클릴:
o C1-C6 알킬(옥소 및 및 C3-C8 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
o 옥소;
각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(C6-C10 아릴 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C1-C6 알콕시, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , -PO(OR 2 )2, 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R 2 는 수소, C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~6개의 기로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 및 C6-C10　아릴(C1-C6 플루오로알킬 및 C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되고;
Z는 로부터 선택되고;
R Z1 은 수소, -CN, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10　아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하고;
각각의 R Z3 은 하이드록시, C1-C6 알콕시, C1-C6 알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되거나; 2개의　R Z3 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
68. 구현예 64~67 중 어느 하나에 있어서, X는　-NR X1 인,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
69. 구현예 64~68 중 어느 하나에 있어서, X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
70. 구현예 64~67 중 어느 하나에 있어서, X는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
71. 구현예 64~67 또는 70 중 어느 하나에 있어서, 고리 A는 피롤리딘, 피페라진, 모르폴린, 및 이소티아졸리딘으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
72. 구현예 64~67, 70, 또는 71 중 어느 하나에 있어서, X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
73. 구현예 64~72 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R Y 는 다음으로부터 독립적으로 선택되거나:
수소, 하이드록시, 메틸,
동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 테트라하이드로푸라닐, 및 테트라하이드로피라닐로부터 선택된 고리를 형성하거나;
2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
74. 구현예 64~73 중 어느 하나에 있어서, 각각의 Q는 할로겐 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
75. 구현예 64~74 중 어느 하나에 있어서, 각각의 Q는 페닐인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
76. 구현예 64~75 중 어느 하나에 있어서, 각각의 고리 B는 C6-C10 아릴(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
77. 구현예 64~76 중 어느 하나에 있어서, 각각의 고리 B는 다음으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
78. 구현예 64~77 중 어느 하나에 있어서, (-Y-Y-Y-Y-Y-Y-Y-)는 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
79. 구현예 78에 있어서, (-Y-Y-Y-Y-Y-Y-Y-)는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
80. 구현예 64~77 중 어느 하나에 있어서, (-Y-Y-Y-Y-Y-Y-)는 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
81. 구현예 80에 있어서, (-Y-Y-Y-Y-Y-Y-)는 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
82. 구현예 64~77 중 어느 하나에 있어서, (-Y-Y-Y-Y-Y-)는 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
83. 구현예 82에 있어서, (-Y-Y-Y-Y-Y-)는 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
84. 구현예 64~77 중 어느 하나에 있어서, (-Y-Y-Y-Y-)는 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
85. 구현예 84에 있어서, (-Y-Y-Y-Y-)는 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
86. 구현예 64~77 중 어느 하나에 있어서, Y는 -C(R Y )2-인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
87. 구현예 86에 있어서, 각각의 Y는 -CH2- 및 -C(Me)2-로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
88. 구현예 64~87 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 C1-C6 플루오로알킬 및 -N(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
89. 구현예 64~87 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 Br, -CH3, -CF3, -CHF2, -OH, -OCH3, -CN, -NH2,,
로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
90. 구현예 64~89 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 -CF3 및 -NH2로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
91. 구현예 64~90 중 어느 하나에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
92. 구현예 64~91 중 어느 하나에 있어서,
R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
93. 구현예 64~92 중 어느 하나에 있어서, Z는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
94. 구현예 64~93 중 어느 하나에 있어서, 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
95. 구현예 64~94 중 어느 하나에 있어서, R Z1 은 C1-C6 플루오로알킬로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
96. 구현예 64~95 중 어느 하나에 있어서, R Z1 은 -CF3인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
97. 구현예 64~96 중 어느 하나에 있어서, R Z2 는 하이드록시인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염.
98. 구현예 64~92 중 어느 하나에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
99. 구현예 64~92 중 어느 하나에 있어서, 는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 염:
100. 구현예 1에 있어서, X는 -N(R X1 )-인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
101. 구현예 1에 있어서, X는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
102. 구현예 1에 있어서, X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
-NH-, -N(CH3)-, -N(CH2CH3)-,
103. 구현예 1, 및 100~102 중 어느 하나에 있어서,
각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -CO2 R Y1 , 및 -CON(R Y1 )2로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나;
2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
104. 구현예 1 및 100~103 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R Y1 는 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의 R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
105. 구현예 1 및 100~104 중 어느 하나에 있어서, 각각의 Q는 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
106. 구현예 1 및 100~105 중 어느 하나에 있어서, Q는 페닐인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
107. 구현예 1, 및 100~106 중 어느 하나에 있어서,
각각의 R Y 는 다음으로부터 독립적으로 선택되거나:
수소, 하이드록시, -CH3, -CD3, -CH2CH3,
동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 테트라하이드로프로필, 및 테트라하이드로푸릴로부터 선택된 고리를 형성하거나;
2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
108. 구현예1, 및 100~107 중 어느 하나에 있어서, 고리 B는 C6-C10 아릴(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
109. 구현예 1, 및 100~108 중 어느 하나에 있어서, 고리 B는 페닐(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 피리딜로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
110. 구현예 1 및 100~109 중 어느 하나에 있어서, 고리 B는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
111. 구현예 1 및 100~110 중 어느 하나에 있어서, n은 4, 5, 6, 및 7로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
구현예 1 및 100~111 중 어느 하나에 있어서, -(Y)n-은 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
113. 구현예 1 및 100~112 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(C6-C10 아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C1-C6 알콕시, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -B(OR 2 )2, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
114. 구현예 1 및 100~113 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 2 는 C6-C10 아릴(C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
115. 구현예 1 및 100~114 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 -Br, -CF3, -NH2, -CH3, -CH(CH3)2, -CN, -OH, -OCH3, -NH(CH3), -NH(CH2CH3), -CONH2, - CO2CH3, -SO2CH3, -SO2Ph, PO(CH3)2, B(OH)2, 페닐, 피리딜, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로푸라닐, 시클로프로필, 시클로헥실, 이미다졸릴, 로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
116. 구현예 1 및 100~115 중 어느 하나에 있어서, Z는 , , 및 로부터 선택되고; 고리 C는 C6-C10 아릴로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
117. 구현예 1 및 100~116 중 어느 하나에 있어서, 기:
는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수수화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
118. 구현예 1 및 100 내지 117 중 어느 하나에 있어서, 기:
는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염.
118A. 구현예 1 및 100~117 중 어느 하나에 있어서, R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10 아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
118B. 구현예 1 및 100~117 항 어느 하나에 있어서, R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
119. 구현예 1, 및 100~118 중 어느 하나에 있어서,
R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 및 하이드록시로부터 선택되거나;
R Z1 및 R Z2 는 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적을 허용 가능한 염.
120. 구현예 1, 및 100~119 중 어느 하나에 있어서,
R Z1 은 수소, CH3, CF3, CH2OH, 페닐, 시클로프로필, 및 테트라하이드로피라닐로부터 선택되고;
R Z2 는 수소, 할로겐, 및 하이드록시로부터 선택되거나;
R Z1 및 R Z2 는 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적을 허용 가능한 염.
121. 구현예 1 및 100~120 중 어느 하나에 있어서, R Z2 는 하이드록시인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
122. 구현예 1 및 100~121 중 어느 하나에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
123. 구현예 1 및 100~122 중 어느 하나에 있어서, m은 1 및 2로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
124. 구현예 1 및 100~123 중 어느 하나에 있어서,
X는 -N(R X1 )- 및 로부터 선택되고;
고리 A는 4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
R X1 은 H 및 C1-C6 알킬로부터 선택되고;
각각의 Y는 -C(R Y )2- 및 로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R Y 는 수소, C1-C6 알킬, 및 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되거나;
동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
고리 B는 C6-C10 아릴(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)이고,
각각의 R 1 은 C1-C6 플루오로알킬 및 -NH2로부터 독립적으로 선택되고;
Z는 이고;
R Z1 은 C1-C6 플루오로알킬이고;
R Z2 는 하이드록시이고;
n은 4, 5, 및 6으로부터 선택되고;
m은 2인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
125. 구현예 1 및 100~124 중 어느 하나에 있어서, 고리 A는 피롤리딘인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
126. 구현예 1 및 100~125 중 어느 하나에 있어서, X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
-NH-, -N(CH3)-,
127. 구현예 1 및 100~126 중 어느 하나에 있어서,
각각의 R Y 는 다음으로부터 독립적으로 선택되거나:
수소, -CH3, -CD3, ;
동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 및 테트라하이드로피릴로부터 선택된 고리를 형성하거나;
2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
128. 구현예 1 및 100~127 중 어느 하나에 있어서, 고리 B는 페닐(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
129. 구현예 1 및 100~128 중 어느 하나에 있어서, 고리 B는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
130. 구현예 1 및 100~129 중 어느 하나에 있어서, -(Y)n-은 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
131. 구현예 1 및 100~130 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R 1 은 CF3 및 -NH2로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
132. 구현예 1 및 100~131 중 어느 하나에 있어서, R Z1 은 CF3인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
133. 구현예 1 및 100~132 중 어느 하나에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
134. 표 10의 화합물, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 전술한 것 중 어느 하나의 중수소화된 유도체로부터 선택된 화합물.
135. 구현예 134에 있어서, 화합물은 다음으로부터 선택되는 화합물:
136. 약학적 조성물로서, 구현예 1~135 중 어느 하나의 화합물, 염, 또는 중수소화된 유도체; 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
137. 구현예 136에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)를 추가로 포함하는, 약학적 조성물.
138. 구현예 137에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 조절 활성을 갖는 화합물 또는 이의 염 또는 중수소화된 유도체를 포함하는, 약학적 조성물.
139. 구현예 137 또는 138에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 교정제를 포함하는, 약학적 조성물.
140. 구현예 137~139 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (R)-1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-N-(1-(2,3-디하이드록시프로필)-6-플루오로-2-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-1H-인돌-5-일)시클로프로판카르복스아미드(화합물 II)를 포함하는, 약학적 조성물:
화합물 II.
141. 구현예 137~140 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 3-(6-(1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)시클로프로판카르복스아미도)-3-메틸피리딘-2-일)벤조산(화합물 IV)을 포함하는, 약학적 조성물:
화합물 IV.
142. 구현예 137~141 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 N-(1,3-디메틸피라졸-4-일)설포닐-6-[3-(3,3,3-트리플루오로-2,2-디메틸-프로폭시)피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드(화합물 V)를 포함하는, 약학적 조성물:
화합물 V.
143. 구현예 137~142 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 N-(벤젠설포닐)-6-[3-[2-[1-(트리플루오로메틸) 시클로프로필]에톡시]피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드(화합물 VI)를 포함하는, 약학적 조성물:
화합물 VI.
144. 구현예 137~143 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (들)(14S)-8-[3-(2-{디스피로[2.0.2.1]헵탄-7-일}에톡시)-1H-피라졸-1-일]-12,12-디메틸-2λ6-티아-3,9,11,18,23-펜타아자테트라시클로 [17.3.1,111,14.05,10]테트라코사-1(22),5,7,9,19(23),20-헥사엔-2,2,4-트리온(화합물 VII)을 포함하는, 약학적 조성물:
화합물 VII.
145. 구현예 137~144 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (들)(11R)-6-(2,6-디메틸페닐)-11-(2-메틸프로필)-12-{스피로[2.3]헥산-5-일}-9-옥사-2λ6-티아-3,5,12,19-테트라아자트리시클로[12.3.1.14,8]노나데카-1(17),4(19),5,7,14(18),15-헥사엔-2,2,13-트리온(화합물 VIII)을 포함하는, 약학적 조성물:
화합물 VIII.
146. 구현예 137~145 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)은 PTI-428, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, 및 PTI-801로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는, 약학적 조성물.
147. 구현예 137~146 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 강화제 인핸서를 포함하는, 약학적 조성물.
148. 구현예 137~147 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ASP-11을 포함하는, 약학적 조성물.
149. 구현예 137~148 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 강화제를 포함하는, 약학적 조성물.
150. 구현예 137~149 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 다음으로부터 선택된 화합물을 포함하는, 약학적 조성물: N-(5-하이드록시-2,4-디-터트-부틸-페닐)-4-옥소-1H-퀴놀린-3-카르복스아미드(화합물 III):
화합물 III,
및 N-(2-(터트-부틸)-5-하이드록시-4-(2-(메틸-d3)프로판-2-일-1,1,1,3,3,3-d6)페닐)-4-옥소-1,4-디하이드로퀴놀린-3-카르복스아미드(화합물 III-d):
화합물 III-d.
151. 구현예 137~150 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 FDL-176, PTI-808, GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451 (아이센티카프터), GLPG3067/ABBV-3067 (나보카프터), 및 ABBV-191로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는, 약학적 조성물.
152. 구현예 137~151 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 증폭제를 포함하는, 약학적 조성물.
153. 구현예 137~152 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 PTI-428을 포함하는, 약학적 조성물.
154. 구현예 137~153 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 통독제를 포함하는, 약학적 조성물.
155. 구현예 137~154 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ELX-02를 포함하는, 약학적 조성물.
156. 구현예 137~155 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 핵산 요법을 포함하는, 약학적 조성물.
157. 구현예 137~156 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 MRT5005, Lunar-CF, 및 RCT223으로부터 하나 이상의 제제를 포함하는, 약학적 조성물.
158. 구현예 137~157 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ENaC 억제제를 포함하는, 약학적 조성물.
159. 구현예 137~158 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 아밀로라이드, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1,265,162, AZ5634, 및 ARO-ENaC1001을 포함하는, 약학적 조성물.
160. 구현예 137~159 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 TMEM16A를 포함하는, 약학적 조성물.
161. 구현예 137~160 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ETD002를 포함하는, 약학적 조성물.
162. 구현예 137~161 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 GPR39 작용제를 포함하는, 약학적 조성물.
163. 구현예 137~162 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 DS-1039를 포함하는, 약학적 조성물.
164. 낭성 섬유증을 치료하는 방법으로서, 구현예 1~135 중 어느 하나의 화합물, 염, 또는 중수소화된 유도체, 또는 구현예 136~163 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
165. 구현예 164에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)를 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
166. 구현예 165에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 조절 활성을 갖는 화합물 또는 이의 염 또는 중수소화된 유도체를 포함하는, 방법.
167. 구현예 165 또는 166에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 교정제를 포함하는, 방법.
168. 구현예 165~167 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (R)-1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-N-(1-(2,3-디하이드록시프로필)-6-플루오로-2-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-1H-인돌-5-일)시클로프로판카르복스아미드(화합물 II)를 포함하는, 방법:
화합물 II.
169. 구현예 165~168 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 3-(6-(1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)시클로프로판카르복스아미도)-3-메틸피리딘-2-일)벤조산(화합물 IV)을 포함하는, 방법:
화합물 IV.
170. 구현예 165~169 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 N-(1,3-디메틸피라졸-4-일)설포닐-6-[3-(3,3,3-트리플루오로-2,2-디메틸-프로폭시)피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드(화합물 V)를 포함하는, 방법:
화합물 V.
171. 구현예 165~170 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 N-(벤젠설포닐)-6-[3-[2-[1-(트리플루오로메틸) 시클로프로필]에톡시]피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드(화합물 VI)를 포함하는, 방법:
화합물 VI.
172. 구현예 165~171 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (들)(14S)-8-[3-(2-{디스피로[2.0.2.1]헵탄-7-일}에톡시)-1H-피라졸-1-일]-12,12-디메틸-2λ6-티아-3,9,11,18,23-펜타아자테트라시클로 [17.3.1,111,14.05,10]테트라코사-1(22),5,7,9,19(23),20-헥사엔-2,2,4-트리온(화합물 VII)을 포함하는, 방법:
화합물 VII.
173. 구현예 165~172 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (들)(11R)-6-(2,6-디메틸페닐)-11-(2-메틸프로필)-12-{스피로[2.3]헥산-5-일}-9-옥사-2λ6-티아-3,5,12,19-테트라아자트리시클로[12.3.1.14,8]노나데카-1(17),4(19),5,7,14(18),15-헥사엔-2,2,13-트리온(화합물 VIII)을 포함하는, 방법:
화합물 VIII.
174. 구현예 165~173 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 PTI-428, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, ABBV-2851, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, 및 PTI-801로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는, 방법.
175. 구현예 165~174 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 강화제 인핸서를 포함하는, 방법.
176. 구현예 165~175 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ASP-11을 포함하는, 방법.
177. 구현예 165~176 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 강화제를 포함하는, 방법.
178. 구현예 165~177 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 다음으로부터 선택된 화합물을 포함하는, 방법: N-(5-하이드록시-2,4-디-터트-부틸-페닐)-4-옥소-1H-퀴놀린-3-카르복스아미드(화합물 III):
화합물 III,
및 N-(2-(터트-부틸)-5-하이드록시-4-(2-(메틸-d3)프로판-2-일-1,1,1,3,3,3-d6)페닐)-4-옥소-1,4-디하이드로퀴놀린-3-카르복스아미드(화합물 III-d):
화합물 III-d.
179. 구현예 165~178 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 FDL-176, PTI-808, GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451 (아이센티카프터), GLPG3067/ABBV-3067 (나보카프터), 및 ABBV-191로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는, 방법.
180. 구현예 165~179 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 증폭제를 포함하는, 방법.
181. 구현예 165~180 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 PTI-428을 포함하는, 방법.
182. 구현예 165~181 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 통독제를 포함하는, 방법.
183. 구현예 165~182 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ELX-02를 포함하는, 방법.
184. 구현예 165~183 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 핵산 요법을 포함하는, 방법.
185. 구현예 165~184 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 MRT5005, Lunar-CF, 및 RCT223으로부터 선택된 적어도 하나의 제제를 포함하는, 방법.
186. 구현예 165~185 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ENaC 억제제를 포함하는, 방법.
187. 구현예 165~186 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 아밀로라이드, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1,265,162, AZ5634, 및 ARO-ENaC1001을 포함하는, 방법.
188. 구현예 165~187 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 TMEM16A 조절제를 포함하는, 방법.
189. 구현예 165~188 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ETD002를 포함하는, 방법.
190. 구현예 165~180 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 GPR39 작용제를 포함하는, 방법.
191. 구현예 165~190 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 DS-1039를 포함하는, 방법.
192. 낭성 섬유증을 치료하는 데 사용하기 위한, 구현예 1~135 중 어느 하나의 화합물, 염, 또는 중수소화된 유도체; 또는 구현예 136~163 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물.
193. 낭성 섬유증을 치료하기 위한 의약을 제조하는 데 있어서, 구현예 1~135 중 어느 하나의 화합물, 염, 또는 중수소화된 유도체; 또는 구현예 136~163 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물의 용도.
194. 실질적으로 비정질 화합물 4(순수한 형태)(즉, 화합물 4의 15% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 4의 10% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 4의 5% 미만이 결정질 형태임).
195. 구현예 194에 있어서, 화합물 4는 100% 비정질인, 실질적으로 비정질 화합물 4(순수한 형태).
196. 구현예 194 또는 195에 있어서, 도 1과 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 비정질 화합물 4(순수한 형태).
197. 실질적으로 결정질 화합물 5 형태 A(순수)(즉, 화합물 5의 15% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 5의 10% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 5의 5% 미만이 비정질 형태임).
198. 구현예 197에 있어서, 화합물 5 형태 A(순수)는 100% 결정질인, 실질적으로 순수한 화합물 5 형태 A(순수).
199. 구현예 197 또는 198에 있어서, 정방정계, I41 공간군, 및 Cu Kα 방사선(λ=1.54178 Å)을 사용하여 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서 측정된 다음 단위 셀 치수를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 5 형태 A(순수):
200. 실질적으로 비정질 화합물 19(순수한 형태)(즉, 화합물 19의 15% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 19의 10% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 19의 5% 미만이 결정질 형태임).
201. 구현예 200에 있어서, 화합물 19는 100% 비정질인, 실질적으로 비정질 화합물 19(순수한 형태).
202. 구현예 200 또는 201에 있어서, 도 4와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 비정질 화합물 19(순수한 형태).
203. 실질적으로 결정질 화합물 41 형태 A(즉, 화합물 41의 15% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 41의 10% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 41의 5% 미만이 비정질 형태임).
204. 구현예 203에 있어서, 화합물 41 형태 A는 100% 결정질인, 실질적으로 순수한 화합물 41 형태 A.
205. 구현예 203 또는 204에 있어서, 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 및 21.2 ± 0.2도 2θ로부터 선택된 1, 2, 또는 3개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 41 형태 A.
206. 구현예 203~205 중 어느 하나에 있어서, 14.2 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 21.2 ± 0.2도 2θ, 18.0 ± 0.2도 2θ, 16.6 ± 0.2도 2θ, 및 20.7 ± 0.2도 2θ로부터 선택된 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 41 형태 A.
207. 구현예 203~206 중 어느 하나에 있어서, 14.2 ± 0.2도 2θ, 16.6 ± 0.2도 2θ, 18.0 ± 0.2도 2θ, 19.5 ± 0.2도 2θ, 20.3 ± 0.2도 2θ, 20.7 ± 0.2도 2θ, 21.2 ± 0.2도 2θ, 22.2 ± 0.2도 2θ, 및 25.1 ± 0.2도 2θ 중 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 또는 9개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 41 형태 A.
208. 구현예 203~207 중 어느 하나에 있어서, 도 7과 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 41 형태 A.
209. 실질적으로 결정질 화합물 52 형태 A(순수)(즉, 화합물 52의 15% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 52의 10% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 52의 5% 미만이 비정질 형태임).
210. 구현예 209에 있어서, 화합물 52 형태 A(순수)는 100% 결정질인, 실질적으로 순수한 화합물 52 형태 A(순수).
211. 구현예 209 또는 210에 있어서, 6.8 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 및 18.6 ± 0.2도 2θ로부터 선택된 1, 2, 또는 3개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 52 형태 A(순수).
212. 구현예 209~211 중 어느 하나에 있어서, 6.8 ± 0.2도 2θ, 12.7 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 18.6 ± 0.2도 2θ, 20.6 ± 0.2도 2θ, 및 21.4 ± 0.2도 2θ로부터 선택된 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 52 형태 A(순수).
213. 구현예 209~212 중 어느 하나에 있어서, 6.8 ± 0.2도 2θ, 12.7 ± 0.2도 2θ, 15.1 ± 0.2도 2θ, 15.5 ± 0.2도 2θ, 17.3 ± 0.2도 2θ, 18.6 ± 0.2도 2θ, 19.2 ± 0.2도 2θ, 19.7 ± 0.2도 2θ, 20.4 ± 0.2도 2θ, 20.6 ± 0.2도 2θ, 21.4 ± 0.2도 2θ, 및 27.2 ± 0.2도 2θ로부터 선택된 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 결정질 화합물 52 형태 A(순수)
214. 구현예 209~213 중 어느 하나에 있어서, 도 9와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 52 형태 A(순수).
215. 실질적으로 비정질 화합물 60(순수한 형태)(즉, 화합물 60의 15% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 60의 10% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 60의 5% 미만이 결정질 형태임).
216. 구현예 215에 있어서, 화합물 60은 100% 비정질인, 실질적으로 비정질 화합물 60(순수한 형태).
217. 구현예 215 또는 216에 있어서, 도 12와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 비정질 화합물 60(순수한 형태).
218. 실질적으로 비정질 화합물 70(순수한 형태)(즉, 화합물 70의 15% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 70의 10% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 70의 5% 미만이 결정질 형태임).
219. 구현예 218에 있어서, 화합물 70은 100% 비정질인, 실질적으로 비정질 화합물 70(순수한 형태).
220. 구현예 218 또는 219에 있어서, 도 15와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 비정질 화합물 70(순수한 형태).
221. 실질적으로 결정질 화합물 163 형태 A(순수)(즉, 화합물 163의 15% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 163의 10% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 163의 5% 미만이 비정질 형태임).
222. 구현예 221에 있어서, 화합물 163 형태 A(순수)는 100% 결정질인, 실질적으로 순수한 화합물 163 형태 A(순수).
223. 구현예 221 또는 222에 있어서, 7.4 ± 0.2도 2θ에서 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 163 형태 A(순수).
224. 구현예 221 또는 223에 있어서, 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 및 15.0 ± 0.2도 2θ로부터 선택된 1, 2, 또는 3개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 163 형태 A(순수).
225. 구현예 221~224 중 어느 하나에 있어서, 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 14.1 ± 0.2도 2θ, 15.0 ± 0.2도 2θ, 19.1 ± 0.2도 2θ, 및 25.8 ± 0.2도 2θ로부터 선택된 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 163 형태 A(순수).
226. 구현예 221~225 중 어느 하나에 있어서, 7.4 ± 0.2도 2θ, 8.4 ± 0.2도 2θ, 14.1 ± 0.2도 2θ, 14.6 ± 0.2도 2θ, 15.0 ± 0.2도 2θ, 16.9 ± 0.2도 2θ, 19.1 ± 0.2도 2θ, 20.0 ± 0.2도 2θ, 22.5 ± 0.2도 2θ, 25.6 ± 0.2도 2θ, 및 25.8 ± 0.2도 2θ로부터 선택된 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 또는 11개의 신호를 갖는 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는 결정질 화합물 163 형태 A(순수).
227. 구현예 221~226 중 어느 하나에 있어서, 도 16과 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 163 형태 A(순수).
228. 실질적으로 비정질 화합물 173(순수한 형태)(즉, 화합물 173의 15% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 173의 10% 미만이 결정질 형태이고, 화합물 173의 5% 미만이 결정질 형태임).
229. 구현예 228에 있어서, 화합물 173은 100% 비정질인, 실질적으로 비정질 화합물 173(순수한 형태).
230. 구현예 228 또는 229에 있어서, 도 18와 실질적으로 유사한 X-선 분말 회절도를 특징으로 하는, 실질적으로 비정질 화합물 173(순수한 형태).
231. 실질적으로 결정질인 화합물 173(순수한 형태)(즉, 화합물 173의 15% 미만은 비정질 형태, 화합물 173의 10% 미만은 비정질 형태, 화합물 173의 5% 미만은 비정질 형태임).
232. 구현예 231에 있어서, 화합물 173 형태 A(순수)는 100% 결정질인, 실질적으로 순수한 화합물 173 형태 A(순수).
233. 구현예 231 또는 232에 있어서, 삼사정계, P1 공간군, 및 Cu Kα 방사선(λ=1.54178 Å)을 사용하여 Bruker 회절계를 이용해 150 K에서 측정된 다음 단위 셀 치수를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 173 형태 A(순수):
234. 실질적으로 결정질 화합물 175 형태 A(순수)(즉, 화합물 175의 15% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 175의 10% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 175의 5% 미만이 비정질 형태임).
235. 구현예 234에 있어서, 화합물 175 형태 A(순수)는 100% 결정질인, 실질적으로 순수한 화합물 175 형태 A(순수).
236. 구현예 234 또는 235에 있어서, 사방정계, P212121 공간군, 및 Cu Kα 방사선(λ=1.54178 Å)을 사용하여 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서 측정된 다음 단위 셀 치수를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 175 형태 A(순수):
237. 실질적으로 결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A(즉, 화합물 188 디클로로메탄 용매화물의 15% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 188 디클로로메탄 용매화물의 10% 미만이 비정질 형태이고, 화합물 188 디클로로메탄 용매화물의 5% 미만이 비정질 형태임).
238. 구현예 237에 있어서, 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A는 100% 결정질인, 실질적으로 순수한 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A.
239. 구현예 237 또는 238에 있어서, 단사정계, P21 공간군, 및 Cu Kα 방사선(λ=1.54178 Å)을 사용하여 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서 측정된 다음 단위 셀 치수를 특징으로 하는, 실질적으로 결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A:
실시예
일반 실험 절차
약어
AcOH: 아세트산
Boc 무수물 ((Boc)2O): 디-터트-부틸 디카르보네이트
Boc: 부톡시 카르보닐
BOP: 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트
t-BuOH: 터트-부탄올
CDCl3: 클로로포름-d
CDI: 1,1’-카르보닐디이미다졸
CD3OD: 메틸-d 4 알코올-d
CH2Cl2: 디클로로메탄
CH3CN: 아세토니트릴
CO2: 이산화탄소
Cs2CO3: 탄산 세슘
CuI: 요오드화(I)구리
DCE: 1,2-디클로로에탄
DCM: 디클로로메탄
DIEA: (DIPEA; N,N-디이소프로필에틸아민)
DMAP: 4-디메틸아미노피리딘
DMF: N,N-디메틸포름아미드
DMP: 데스-마틴 페리오디난
DMSO: 디메틸 설폭시드
DMSO-d6: 디메틸 설폭시드-d6
EDCI: 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드
ESI-MS: 전기분무 이온화 질량 분광분석
Et2O: 디에틸 에테르
Et3N 또는 TEA: 트리에틸아민
EtOAc: 아세트산 에틸
EtOH: 에탄올
Et2O: 디에틸 에테르
ESI-MS: 전기분무 이온화 질량 분광분석
Grubbs 촉매 2세대: [1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)이미다졸리딘-2-일리덴]-디클로로-[(2-이소프로폭시페닐)메틸렌]루테늄
H2: 수소
HATU: N-[(디메틸아미노)-1H-1,2,3-트리아졸로-[4,5-b]피리딘-1-일메틸렌]-N-메틸메탄아미늄 헥사플루오로포스페이트 N-옥사이드
HCl: 염산
HOBT: 하이드록시벤조트리아졸
HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피
H2: 수소
H2O2: 과산화수소
KHSO4: 중황산칼륨
KOH: 수산화칼륨
K2CO3: 탄산칼륨
KMnO4: 과망간산칼륨
KHCO3: 중탄산칼륨
LC: 액체 크로마토그래피
LiAlH4: 수소화리튬 알루미늄
LiOH: 수산화 리튬
MeMgCl: 염화 메틸 마그네슘
MeTHF 또는 2-MeTHF 또는 2-Me-THF: 2-메틸테트라하이드로푸란
MeOH: 메탄올
MTBE: 메틸 터트-부틸 에테르
MgSO4: 황산마그네슘
MS: 질량 분광분석
n-Bu4NF·H2O: 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드 일수화물
Na: 나트륨
NaH: 수소화나트륨
NaHCO3: 중탄산나트륨
NaOAc: 아세트산나트륨
NaOH: 수산화나트륨
Na2SO4: 황산나트륨
NBS: N-브로모숙신이미드
NH3: 암모니아
NH4Cl: 염화암모늄
NH4HCO3: 중탄산암모늄
NMP: N-메틸-2-피롤리돈
NMR: 핵 자기 공명
N2: 질소
Pd/C: 탄소 상의 팔라듐
Pd2(dba)3: 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)
Pd(dppf)Cl2: 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 염화 팔라듐(II)
Pd(OAc)2: 아세트산 팔라듐(II)
PhI(OAc)2: (디아세톡시요오드)벤젠
POCl3: 염화 포스포릴
PtO2: 산화 백금
RT 또는 rt: 실온
SFC: 초임계 유체 크로마토그래피
실리카 Cat Pd: 실리카 상의 팔라듐
SiO2: 실리카 겔
TBAF: 테트라-n-부틸암모늄 불화물
TBAI: 테트라부틸암모늄 요오드화물
TBDPS-Cl 또는 TBDPSCl: 터트-부틸디페닐클로로실란
TEA: 트리에틸아민
TEMPO: 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐옥시
TFA: 트리플루오로아세트산
THF: 테트라하이드로푸란
Ti(OEt)4: 티타늄 (IV)에톡시드
TMEDA: 테트라메틸에틸렌디아민
TMSCF3: 트리플루오로메틸트리메틸실란
p-TsCl 또는 염화 토실: p-톨루엔설포닐 클로라이드 또는 4-톨루엔설포닐 클로라이드
T3P: 1-프로판포스폰 무수물
UPLC: 초고성능 액체 크로마토그래피
Xantphos: 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐
Zhan 촉매-1B: 디클로로[1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)-2-이미다졸리디닐리덴][[5-[(디메틸아미노)설포닐]-2-(1-메틸에톡시-O)페닐]메틸렌-C]루테늄(II)
일반 UPLC-MS/HPLC-MS/GC 분석 방법:
LC 방법 A: Waters 사에서 제조한 Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(50 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002350)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 3.0분에 걸쳐 1%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.2 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 B: Kinetex C18 컬럼(4.6 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS (온도: 45℃; 유속: 2.0 mL/분; 실행 시간: 3분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서, 1.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 C: Kinetex Polar C18 컬럼(3.0 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.2 mL/분; 실행 시간: 6분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 4.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 D: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(50 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002350)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 5.0분에 걸쳐 1%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.2 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 E: Kinetex Polar C18 컬럼(3.0 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.2 mL/분; 실행 시간: 3분. 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서, 1.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 F: Kinetex C18 컬럼(4.6 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 2.0 mL/분; 실행 시간: 6분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 4.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 G: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18 컬럼(50 x 4.6 mm)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 6분에 걸쳐 5%~100% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물 (+ 0.1% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.1% 트리플루오로아세트산)).
LC 방법 H: Waters 사에서 제조한, Waters Cortex C18 컬럼(3.0 X 50 mm, 2.7 μm 입자 크기))(pn: 186007370)을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 55℃; 유속: 1.2 mL/분; 이동상 A: 물(+ 0.1% 트리플루오로아세트산); 이동상 B: 아세토니트릴(+ 0.1% 트리플루오로아세트산); 구배: 4분에 걸쳐 5%~100% B, 100% B에서 0.5분 동안 평형, 1.5분 동안 5% B에서 평형).
LC 방법 I: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(30 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002349)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 1.2분에 걸쳐 1%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.5 mL/분, 주입 부피 = 1.5 μL, 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 J: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(50 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002350)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 3.0분에 걸쳐 30%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.2 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 K: Kinetex EVO C18 컬럼(4.6 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 2.0 mL/분; 실행 시간: 4분. 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LCMS 방법 L: X-Terra MS C18 컬럼(4.6 X 150 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 40℃; 유속: 1.5 mL/분; 실행 시간: 10분; 이동상: 95% 물(+ 10 mM 중탄산암모늄) 및 5% 아세토니트릴에서 시작하여 6.5분 동안 95% 아세토니트릴로 변화하는 선형 구배에 이어서, 3.5분 동안 95% 아세토니트릴 유지).
LC 방법 M: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(50 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002350)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 3.0분에 걸쳐 50%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.2 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 N: Waters 사에서 제조한 Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(50 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002350)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 3.0분에 걸쳐 1%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(0.05% 포름산암모늄); 이동상 B = 아세토니트릴; 유속 = 1.2 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 O: Kinetex Polar C18 컬럼(3.0 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.2 mL/분; 실행 시간: 4분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 3.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 P: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(100 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002350)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 13.5분에 걸쳐 1%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 0.8 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 Q: Phenomenex에 의해 판매된 Onyx Monolithic C18 컬럼(50 × 4.6 mm)(pn: CH0-7644)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 2.9분에 걸쳐 1%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 12 mL/분; 주입 부피 = 50 μL; 및 컬럼 온도 = 25℃).
LC 방법 R: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(30 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002349)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 1.0분에 걸쳐 30%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.2 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 S: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(30 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002349)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 1.0분에 걸쳐 1%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.5 mL/분, 주입 부피 = 1.5 μL, 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 T: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(30 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002349)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 1.0분에 걸쳐 50%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.2 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 U: Waters 사에서 제조한, Acquity UPLC-MS BEH C18 컬럼(30 × 2.1 mm, 1.7 μm 입자 크기)(pn: 186002349)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 1.0분에 걸쳐 75%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물(+ 0.05% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.035% 트리플루오로아세트산); 유속 = 1.2 mL/분; 주입 부피 = 1.5 μL; 및 컬럼 온도 = 60℃).
LC 방법 V: Kinetex EVO C18 컬럼(2.1 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.0 mL/분; 실행 시간: 1.5분; 이동상: 98% 이동상 A(95:5의 10 mM 포름산암모늄/물:아세토니트릴, pH 9) 및 2% 이동상 B(아세토니트릴)에서 시작하여 1.15분 동안 98% 아세토니트릴로 변화하는 선형 구배에 이어서 0.2분 동안 98% 아세토니트릴 유지, 이어서 0.05분 동안 98% 물 및 10 mM 포름산암모늄으로 복귀하고, 0.1분 동안 유지).
LC 방법 W: Kinetex Polar C18 컬럼(3.0 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.2 mL/분; 실행 시간: 4분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 3.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 1.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 X: Kinetex Polar C18 컬럼(3.0 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.2 mL/분; 실행 시간: 5분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 4.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 1.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 Y: Luna C18 컬럼(3.0 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.5 mL/분; 실행 시간: 3.5분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 1.3분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 2.2분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 Z: Luna C18 컬럼(3.0 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.5 mL/분; 실행 시간: 2.5분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 1.3분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 1.2분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 AA: SunFire C18 컬럼(4.6 X 75 mm, 3.5 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 1.5 mL/분; 실행 시간: 6분; 이동상: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 4.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
LC 방법 BB: XBridge C18 컬럼 (4.6 X 75 mm, 5 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(유속: 1.5 mL/분; 실행 시간: 6분; 이동상: 95% 물(+ 10 mM 중탄산암모늄) 및 5% 아세토니트릴에서 시작하여 3분 동안 5% 물(+ 10 mM 중탄산암모늄) 및 95% 아세토니트릴로 변화한 다음, 3분 동안 95% 아세토니트릴 및 5% 물(+ 10 mM 중탄산암모늄) 유지).
LC 방법 CC: Phenomenex ZB-1MS 컬럼(0.25 X 30 mm, 0.25 μm 입자 크기))을사용하는 분석 GC(시작 온도: 50℃, 온도 변화: 300℃까지 20℃/분의 속도로 변화; 및 300℃에서 5분 동안 유지).
LC 방법 DD: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18 컬럼(50 x 4.6 mm)을 사용하는 분석 역상 UPLC-MS(구배: 12분에 걸쳐 5%~100% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = 물 (+ 0.1% 트리플루오로아세트산); 이동상 B = 아세토니트릴(+ 0.1% 트리플루오로아세트산)).
LC 방법 EE: Kinetex EVO C18 컬럼(4.6 X 50 mm, 2.6 μm 입자 크기))을 사용하는 분석 역상 HPLC-MS(온도: 45℃; 유속: 2.0 mL/분; 실행 시간: 3분; 이동상 조건: 95% 물(+ 0.1% 포름산) 및 5% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)에서 시작하여 2.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산)로 변화하는 선형 구배에 이어서, 1.0분 동안 95% 아세토니트릴(+ 0.1% 포름산) 유지).
일반 X-선 분말 회절(XRPD) 방법
X-선 분말 회절(XRPD) 패턴은 PANalytical Empyrean X-선 회절계(Almelo, The Netherlands)를 사용하여 연속 모드에서 실온에서 기록하였다. 45 kV 및 40 mA로 작동되는 Cu 튜브를 사용하여 X-선을 생성하였다. Pixel 1d 검출기를 산란 방지 슬릿 P8과 함께 사용하였다. 발산 광학장치(Divergence optics)는 10mm 마스크, 1/8 발산 슬릿, 및 1/2 산란 방지 슬릿이 구비된 Bragg Brentano High Definition(BBHD)이였다. 연속 스캔 모드는 4도 내지 40도의 2-θ 범위에 걸쳐 통합된, 0.0131도의 단계 크기 및 13.77초의 계수 시간/단계를 사용하였다. 분말 샘플을 제로 백그라운드 홀더 내의 오목한 영역 상에 배치하고, 유리 슬라이드로 평평하게 하였다.
일반 열중량 분석(TGA) 방법
TGA를 사용하여 특성화된 로트에서 잔류 용매의 존재를 조사하고, 샘플의 분해가 발생하는 온도를 식별하였다. 다음의 실시예에서 달리 제공되지 않는 한, TGA 데이터는 Mettler Toledo TGA/DSC 3+ STARe 시스템에서 수집되었다. 화합물 4에 대한 TGA 데이터는 TRIOS 시스템이 구비된 TA 기기 Discovery 시리즈 상에서 수집되었다.
일반 시차 주사 열량계(DSC) 방법
다음의 실시예에서 달리 제공되지 않는 한, 물질의 융점 또는 유리 전이점은 Mettler Toledo TGA/DSC 3+ STARe 시스템을 사용하여 측정되었다. 화합물 4에 대한 DSC 데이터는 TRIOS 시스템이 구비된 TA 기기 Discovery 시리즈 상에서 수집되었다.
일반 합성 반응식:
본 개시의 또 다른 양태는 식 I, I’, I’’, Ia, Ia’, IIa, IIa’, IIb, IIb’, IIc, IIc’, IId, IId’, IIe, IIe’, IIf, IIf’, IIg, IIg’, IIh, IIh’, 화합물 1 내지 213, 화합물 214 내지 222, 이의 중수소화된 유도체, 및 이들 화합물 및 중수소화된 유도체의 약학적으로 허용 가능한 염을 제조하는 방법, 및 전술한 것 중 어느 하나를 제조하기 위한 중간체를 제조하는 방법을 제공한다. 다음의 반응식의 일부 구현예 및 실시예에서, 각각의 질소 및 산소 원자는, 특정된 가변 치환기에 더하여 또는 이를 대신하여, 본원에 개시된 보호기의 범위로부터 선택된 하나 이상의 보호기를 임의로 가질 수 있다. 다음의 반응식 및 실시예의 일부 구현예에서, 각각의 화합물은 중수소화된 유도체로 대체될 수 있다.
반응식 1:
반응식 1은 식 1-1의 화합물로부터 식 1-7의 중간체 화합물을 제조하는 프로세스를 지칭한다. Alk는 C1-C6 선형 또는 분지형 알킬 기로부터 선택된다. X 1 은 Cl, I, 또는 Br과 같은 할로겐으로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. a는 2, 3, 4, 및 5로부터 선택된 정수이다. Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
그리냐르(Grignard) 유형 첨가 반응에 적절한 임의의 조건을 사용해 식 1-1의 화합물을 식 1-2의 화합물과 반응시켜 식 1-3의 화합물을 형성할 수 있다. 예를 들어, 식 1-2의 화합물로 식 1-1의 화합물의 그리냐르 첨가 반응을 -78℃의 Et2O에서 수행한 다음, 1 N 수성 HCl을 첨가하여 식 1-3의 화합물을 수득할 수 있다. 식 1-3의 화합물을 식 1-4의 화합물로 변환하는 것은 산소 보호기를 설치하기 위한 임의의 적절한 절차에 의해 달성될 수 있다. 식 1-4의 에스테르를 식 1-5의 카르복시산으로 변환하는 것은 임의의 적절한 가수분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 1-5의 카르복시산을 식 1-6의 화합물로 변환하는 것은 식 1-5의 화합물을 DMF 중 HATU 및 Et3N과 반응시키고, 이어서 터트-부틸 N-아미노카르바메이트를 첨가함으로써 달성될 수 있다. 임의의 적절한 가수분해 조건을 사용하여 식 1-6의 카르바메이트를 식 1-7의 하이드라지드로 변환할 수 있다. 예를 들어, 식 1-7의 화합물은 주변 온도에서 식 1-6의 화합물을 CH2Cl2 중 HCl과 반응시켜 수득할 수 있다.
반응식 2:
반응식 2는 식 2-1의 화합물로부터 식 2-3의 중간체 화합물을 제조하는 프로세스를 지칭한다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. a는 2, 3, 4, 및 5로부터 선택된 정수이다. R 1 , m, 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
아미드 결합을 형성하기에 적절한 임의의 조건을 사용해 식 2-1의 화합물 및 식 1-7의 화합물로부터 식 2-3의 화합물을 생산할 수 있다. 예를 들어, 식 2-1의 화합물을 아세토니트릴 및 DMF 중 CDI와 반응시킨 다음 식 1-7의 화합물을 첨가하여 식 S2-2의 화합물을 수득할 수 있다. 식 2-2의 화합물은 옥사디아졸 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 2-3의 화합물로 변환할 수 있다. 예를 들어, 식 2-2의 화합물을 아세토니트릴 중 DIPEA와 반응시킨 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드를 첨가하여 식 2-3의 옥사디아졸을 수득할 수 있다.
반응식 3:
반응식 3은 식 3-1의 화합물로부터 식 3-8의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. Alk는 C1-C6 선형 또는 분지형 알킬 기로부터 선택된다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. a는 1, 2, 3, 및 4로부터 선택된 정수이고. b는 0, 1, 2, 3, 및 4로부터 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. 고리 A, R 1 , m, 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 3-1의 화합물을 식 3-2의 화합물과 반응시켜 식 3-3의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 3-3의 에스테르를 식 3-4의 카르복시산으로 변환하는 것은 임의의 적절한 가수분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 3-5의 화합물은 아미드 결합 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 3-4의 화합물 및 식 1-7의 화합물로부터 제조될 수 있다. 식 3-5의 화합물은 옥사디아졸 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 3-6의 화합물로 변환할 수 있다. 예를 들어, 식 3-5의 화합물을 아세토니트릴 중 DIPEA와 반응시킨 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드를 첨가하여 식 3-6의 옥사디아졸을 수득할 수 있다. 식 3-6의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 3-6의 화합물을 DCE 중 Grubbs 2세대 촉매의 존재 하에 반응시켜 식 3-7의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 3-7의 불포화 화합물을 식 3-8의 거대고리로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 알코올 탈보호에 적절한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 4:
반응식 4는 식 2-3의 화합물로부터 식 4-3의 화합물을 제조하는 프로세스를 지칭한다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. 고리 A, R 1 , m, 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 2-3의 화합물을 식 3-2의 화합물과 반응시켜 식 4-1의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 4-2의 화합물을 제조하기 위한 식 4-1의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 4-1의 화합물을 DCE 중 Zhan 촉매-1B의 존재 하에 반응시켜 식 4-2의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 4-2의 불포화 화합물을 식 4-3의 거대고리로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 알코올 탈보호에 적절한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 5:
반응식 5는 식 2-3의 화합물로부터 식 5-5의 화합물을 제조하는 프로세스를 지칭한다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. PG 2 는 Boc 및 Fmoc와 같은 적절한 질소 보호기로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. 고리 A, R 1 , m, 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 2-3의 화합물을 식 5-1의 화합물과 반응시켜 식 5-2의 화합물을 수득하는 것은 임의의 교차 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 2-3의 말단 올레핀-함유 화합물을 DCE 중 Grubbs 2세대 촉매의 존재 하에 식 5-1의 말단 올레핀-함유 화합물과 반응시켜 식 5-2의 교차 복분해 생성물을 수득할 수 있다. 식 5-2의 불포화 화합물을 식 5-3의 화합물로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 아민 탈보호에 적절한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다. 식 5-4의 화합물을 제조하기 위한 식 5-3의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 5-4의 화합물을 식 5-5의 알코올로 변환하는 것은 알코올 탈보호에 적합한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 6:
반응식 6은 식 3-1의 화합물로부터 식 6-7의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. Alk는 C1-C6 선형 또는 분지형 알킬 기로부터 선택된다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, Y 및 R X1 은 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 3-1의 화합물을 식 6-1의 화합물과 반응시켜 식 6-2의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 6-2의 에스테르를 식 6-3의 카르복시산으로 변환하는 것은 임의의 적절한 가수분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 6-4의 화합물은 아미드 결합 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 6-3의 화합물 및 식 1-7의 화합물로부터 제조될 수 있다. 식 6-4의 화합물은 옥사디아졸 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 6-5의 화합물로 변환할 수 있다. 예를 들어, 식 6-4의 화합물을 아세토니트릴 중 DIEA와 반응시킨 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드를 첨가하여 식 6-5의 옥사디아졸을 수득할 수 있다. 식 6-6의 화합물을 제조하기 위한 식 6-5의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 6-5의 화합물을 DCE 중 Zhan 촉매-1B의 존재 하에 반응시켜 식 6-6의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 6-6의 불포화 화합물을 식 6-7의 거대고리로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 알코올 탈보호에 적절한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 7:
반응식 7은 식 3-1의 화합물로부터 식 7-7의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. Alk는 C1-C6 선형 또는 분지형 알킬 기로부터 선택된다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG는 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 0, 1, 2, 및 3으로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 4보다 크지 않다. R 1 , m, Y, R X1 , 및 R Y 는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 3-1의 화합물을 식 7-1의 화합물과 반응시켜 식 7-2의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 7-2의 에스테르를 식 7-3의 카르복시산으로 변환하는 것은 임의의 적절한 가수분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 7-4의 화합물은 아미드 결합 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 7-3의 화합물 및 식 1-7의 화합물로부터 제조될 수 있다. 식 7-4의 화합물은 옥사디아졸 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 7-5의 화합물로 변환할 수 있다. 예를 들어, 식 7-4의 화합물을 아세토니트릴 중 DIEA와 반응시킨 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드를 첨가하여 식 7-5의 옥사디아졸을 수득할 수 있다. 식 7-6의 화합물을 제조하기 위한 식 7-5의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 7-5의 화합물을 DCE 중 Zhan 촉매-1B의 존재 하에 반응시켜 식 7-6의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 7-6의 불포화 화합물을 식 7-7의 거대고리로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 알코올 탈보호에 적절한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 8:
반응식 8은 식 2-3의 화합물로부터 식 8-3의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, Y, 및 R X1 은 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 2-3의 화합물을 식 6-1의 화합물과 반응시켜 식 8-1의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 2-3의 화합물을 아세토니트릴 중 DIEA와 반응시키고 가열하여 식 8-1의 화합물을 수득할 수 있다. 식 8-2의 화합물을 제조하기 위한 식 8-1의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 8-1의 화합물을 DCE 중 Zhan 촉매-1B의 존재 하에 반응시켜 식 8-2의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 8-2의 불포화 화합물을 식 8-3의 거대고리로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 알코올 탈보호에 적절한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 9:
반응식 9는 식 9-1의 화합물로부터 식 9-5의 화합물을 제조하는 프로세스를 지칭한다. L X 는 Cl, I, 또는 Br과 같은 할로겐으로부터 선택된다. c는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이다. 고리 A, 고리 B, R 1 , m, 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 9-1의 화합물을 식 9-2의 화합물과 반응시켜 식 9-3의 화합물을 형성하는 것은 임의의 적절한 옥사디아졸 형성 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 9-2의 화합물을 DCM 중 (N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란과 반응시키고, 이어서 식 9-1의 화합물을 적가하여 식 9-3의 화합물을 수득할 수 있다. 식 9-4의 화합물을 제조하기 위한 식 9-3의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 팔라듐-촉매화 올레핀 커플링 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 아세토니트릴 중 식 9-3의 화합물을 트리스-o-톨릴포스판 및 Pd(OAc)2와 반응시키고, 이어서 트리에틸아민을 첨가하여, 식 9-4의 거대고리를 E/Z 이성질체로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 9-4의 불포화 화합물을 식 9-5의 거대고리로 변환하는 것은 올레핀 환원에 적절한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 10:
반응식 10은 식 10-1의 화합물로부터 식 10-8의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. Alk는 C1-C6 선형 또는 분지형 알킬 기로부터 선택된다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. 고리 A, R 1 , 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 10-1의 화합물을 식 3-2의 화합물과 반응시켜 식 10-2의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 10-1의 화합물을 아세토니트릴 중 식 3-2의 화합물 및 DIEA와 반응시켜 식 10-2의 화합물을 수득할 수 있다. 식 10-2의 에스테르를 식 10-3의 카르복시산으로 변환하는 것은 임의의 적절한 가수분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 10-4의 화합물은 아미드 결합 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 10-3의 화합물 및 식 1-7의 화합물로부터 제조될 수 있다. 식 10-4의 화합물은 옥사디아졸 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 10-5의 화합물로 변환할 수 있다. 예를 들어, 식 10-4의 화합물을 아세토니트릴 중 DIEA와 반응시킨 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드를 첨가하여 식 10-5의 옥사디아졸을 수득할 수 있다. 식 10-6의 화합물을 제조하기 위한 식 10-5의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 10-5의 화합물을 DCE 중 Zhan 촉매-1B의 존재 하에 반응시켜 식 10-6의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 10-7의 화합물을 식 10-8의 화합물로 변한하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 10-7의 불포화 화합물을 식 10-8의 거대고리로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 알코올 탈보호에 적절한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 11:
반응식 11은 식 2-3의 화합물로부터 식 11-4의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, Y, R X1 , 및 R YN 은 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 2-3의 화합물을 식 11-1의 화합물과 반응시켜 식 11-2의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어 식 2-3의 화합물 및 식 11-1의 화합물을 가열 하 DMSO 중에서 반응시켜 식 11-2의 화합물을 수득할 수 있다. 식 11-2의 말단 올레핀-함유 화합물을 식 11-3의 카르복실산으로 변환하는 것은 임의의 산화성 절단 조건을 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 11-2의 화합물을 사산화오스뮴 및 과요오드산나트륨의 존재 하에 디옥산과 물의 혼합물에서 반응시켜 식 11-3의 화합물을 수득할 수 있다. 식 11-4의 화합물을 제조하기 위한 식 11-3의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 아미드 결합 형성 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 11-3의 화합물을 IDEA와 DMF 중에서 반응시키고, HATU를 첨가하여, 식 11-4의 화합물을 수득할 수 있다.
반응식 12:
반응식 12는 식 2-3의 화합물로부터 식 12-4의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. a는 3, 4, 5, 및 6으로부터 선택된 정수이다. 고리 A, R 1 , m, 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 2-3의 말단 올레핀-함유 화합물을 식 12-1의 카르복실산으로 변환하는 것은 임의의 적절한 산화 조건을 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 2-3의 화합물을 수소화붕산화/산화에 의해 알코올로 전환한 후, 알코올을 카르복실산으로 산화시킴으로써, 화학식 12-1의 화합물을 수득할 수 있다. 식 12-1의 화합물을 식 12-2의 화합물과 반응시켜 식 12-3의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어 식 12-1의 화합물을 마이크로웨이브에서 식 12-2의 화합물 및 디이소프로필에틸아민과 반응시켜 식 12-3의 화합물을 수득할 수 있다. 식 12-4의 화합물을 제조하기 위한 식 12-3의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 아미드 결합 형성 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 12-3의 화합물을 DMF 중 DIEA와 반응시키고, HATU를 첨가하여, 식 12-4의 화합물을 수득할 수 있다.
반응식 13:
반응식 13은 식 3-1의 화합물로부터 식 13-7의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. 각각의 Alk는 C1-C6 선형 또는 분지형 알킬 기로부터 독립적으로 선택된다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG는 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, X, Y, R X1 , 및 R Y 는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 3-1의 화합물을 식 13-1의 화합물과 반응시켜 식 13-2의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 3-1의 화합물과 식 13-1의 화합물을 아세토니트릴 중에서 교반한 후 디이소프로필에틸아민을 적가하고 가열하여 식 13-2의 화합물을 수득할 수 있다. 식 13-2의 디에스테르를 식 13-3 또는 식 13-4의 카르복실산으로의 변한하는 것은 임의의 적합한 가수분해 조건에 이어지는 적합한 아미드 결합 형성 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 13-2의 화합물을 메탄올 중 하이드라진 일수화물과 반응시켜 식 13-3 또는 식 13-4의 화합물을 수득할 수 있다. 식 13-3의 화합물 또는 식 13-4의 화합물을 식 13-5의 화합물로 변환하는 것은 임의의 적절한 아미드 결합 형성 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 13-5의 화합물을 식 13-6의 화합물로 변환하는 것은 옥사디아졸 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 13-5의 화합물을 아세토니트릴 중 N,N-디이소프로필에틸아민과 반응시킨 후, 4-메틸벤젠설포닐 클로라이드를 첨가하여 식 13-6의 옥사디아졸을 수득할 수 있다. 식 13-6의 화합물을 식 13-7의 알코올로 변환하는 것은 알코올 탈보호에 적합한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 14:
반응식 14는 식 14-1의 화합물로부터 식 14-7의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. PG 2 는 Boc 및 Fmoc와 같은 적절한 질소 보호기로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, X, Y, 및 R X1 은 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 14-1의 화합물을 식 14-2의 화합물과 반응시켜 식 14-3의 화합물을 형성하는 것은 임의의 적절한 아민 결합 형성 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 14-3의 화합물을 식 14-4의 화합물로 변환하는 것은 알코올을 이탈기로 변환시키는 임의의 적절한 절차에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 14-3의 화합물을 무수 THF 중 트리페닐포스핀에 이어서 2,2,2-트리클로로아세토니트릴과 반응시켜 식 14-4의 화합물을 수득할 수 있다. 식 14-4의 화합물을 식 14-5의 화합물로 변환하는 것은 임의의 적절한 아민 탈보호 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 14-6의 화합물을 제조하기 위한 식 14-5의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 14-5의 화합물을 DCM 중 TFA와 반응시켜 식 14-6의 화합물을 수득할 수 있다. 식 14-6의 화합물을 식 14-7의 알코올로 변환하는 것은 알코올 탈보호에 적합한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 15:
반응식 15는 식 7-6의 화합물로부터 식 15-4의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 0, 1, 2, 및 3으로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 4보다 크지 않다. R 1 , m, Y, R X1 , 및 R Y 는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 7-6의 화합물을 식 15-1의 알코올로 변환하는 것은 임의의 적합한 올레핀 산화 절차를 사용하여 달성될 수 있다. 식 15-1의 화합물을 식 15-2의 화합물로 변환하는 것은 임의의 적절한 알코올 탈보호 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 15-2의 화합물의 알코올을 식 15-3의 카르보닐 함유 화합물로 변환하는 것은 임의의 적절한 산화 절차를 사용하여 달성될 수 있다. 식 15-4의 화합물을 생성하기 위해 식 15-3의 카르보닐 함유 화합물을로 변환하는 것은 임의의 적절한 환원 조건을 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 16:
반응식 16은 식 3-1의 화합물로부터 식 16-10 및 식 16-11의 화합물을 제조하는 프로세스를 지칭한다. Alk는 C1-C6 선형 또는 분지형 알킬 기로부터 선택된다. LG는 할로겐 및 OTf 및 OTs와 같은 산소계 이탈기로부터 선택된다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, X, Y, 및 R Z1 은 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 3-1의 화합물을 식 16-1의 화합물과 반응시켜 식 16-2의 화합물을 수득하는 것은 임의의 적절한 방향족 치환 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 16-2의 에스테르를 식 16-3의 카르복시산으로 변환하는 것은 임의의 적절한 가수분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 16-5의 화합물은 아미드 결합 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 16-3의 화합물 및 식 16-4의 화합물로부터 제조될 수 있다. 식 16-5의 화합물은 옥사디아졸 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 16-6의 화합물로 변환할 수 있다. 예를 들어, 식 16-5의 화합물을 아세토니트릴 중 DIEA와 반응시킨 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드를 첨가하여 식 16-6의 옥사디아졸을 수득할 수 있다. 식 16-7의 화합물을 제조하기 위한 식 16-6의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 16-6의 화합물을 DCE 중 Zhan 촉매-1B의 존재 하에 반응시켜 식 16-7의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 16-7의 화합물을 식 16-8의 화합물로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 알코올 탈보호에 적합한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다. 식 16-8의 화합물을 식 16-9의 카르보닐 함유 화합물로 변환하는 것은 임의의 적절한 산화 조건을 사용하여 달성될 수 있다. 식 16-9의 카르보닐 함유 화합물을 식 16-10의 옥심으로 변환하는 것은 임의의 적절한 옥심 형성 절차를 사용하여 달성될 수 있다. 식 16-9의 카르보닐 함유 화합물을 식 16-11의 알코올로 변환하는 것은 카르보닐에 대한 친핵성 첨가에 대한 임의의 적절한 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 17:
반응식 17은 식 17-1의 화합물로부터 식 17-7의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, X, Y, 및 R Z1 은 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 17-1의 화합물의 카르복실산을 식 17-2의 화합물과 반응시켜 식 17-3의 화합물을 수득하는 것은 옥사디아졸 형성에 대한 임의의 적절한 조건을 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 17-1의 화합물을 DCM 중 식 17-2의 화합물 및 N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란과 반응시켜 식 17-3의 화합물을 수득할 수 있다. 식 17-3의 화합물의 알코올을 식 17-4의 카르보닐 함유 화합물로 변환하는 것은 임의의 적절한 산화 조건을 사용하여 달성될 수 있다. 식 17-4의 카르보닐 함유 화합물을 식 17-5의 알코올로 변환하는 것은 카르보닐에 대한 친핵성 첨가에 대한 임의의 적절한 절차를 사용하여 달성될 수 있다. 식 17-6의 화합물을 제조하기 위한 식 17-5의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 17-5의 화합물을 DCE 중 [1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)이미다졸리딘-2-일리덴]-디클로로-[(2-이소프로폭시-5-니트로-페닐)메틸렌]루테늄의 존재 하에 반응시켜 식 17-6의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 17-6의 화합물을 식 17-7의 화합물로 변환하는 것은 올레핀 환원에 적합한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 18:
반응식 18은 식 17-1의 화합물로부터 식 18-5의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. PG 1 은 벤질 및 실릴 모이어티와 같은 적절한 산소 보호기(예, BDPS, TBS, 및 TMS)로부터 선택된다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, X, 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 17-1의 화합물을 식 18-1의 화합물과 반응시켜 식 18-2의 화합물을 형성하는 것은 임의의 적절한 아민 결합 형성 조건에 의해 달성될 수 있다. 식 18-2의 화합물은 옥사디아졸 형성에 적절한 임의의 조건을 사용하여 식 18-3의 화합물로 변환할 수 있다. 예를 들어, 식 18-2의 화합물을 디이소프로필에틸아민 및 p-톨루엔설포닐 클로라이드와 반응시켜 식 18-3의 옥사디아졸을 수득할 수 있다. 식 18-4의 화합물을 제조하기 위한 식 18-3의 화합물의 거대고리화는 임의의 적절한 폐환 복분해 조건에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 18-3의 화합물을 DCE 중 Zhan 촉매-1B의 존재 하에 반응시켜 식 18-4의 거대고리를 E/Z 이성질체의 혼합물로서 수득할 수 있다( 결합으로 표시됨). 식 18-4의 화합물을 식 18-5의 화합물로 변환하는 것은 올레핀 환원 및 알코올 탈보호에 적합한 임의의 절차를 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 19:
반응식 19는 식 13-7의 화합물로부터 식 19-2의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, X, 및 Y는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 13-7의 화합물의 알코올을 식 19-1의 올레핀으로 변환하는 것은 임의의 적절한 탈수 절차를 사용하여 달성될 수 있다. 식 19-1의 화합물을 식 19-2의 화합물로 변환하는 것은 임의의 적절한 올레핀 환원 조건을 사용하여 달성될 수 있다.
반응식 20:
반응식 20은 식 20-1의 화합물로부터 식 20-2의 화합물을 제조하기 위한 프로세스를 지칭한다. 각각의 a 및 b는 1, 2, 3, 및 4로부터 독립적으로 선택된 정수이되, 단, a + b는 5보다 크지 않다. R 1 , m, X, Y, R Z1 , 및 R 2 는 상기 식 I에 대해 정의된 것과 같다.
식 20-1의 아민을 식 20-2의 아민으로 변환하는 것은 임의의 적절한 아민화 절차를 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, 식 20-1의 아민을 비스(트리메틸실릴)아미노]나트륨의 존재 하에 알킬 할라이드와 반응시켜 식 20-2의 화합물을 수득할 수 있다.
중간체의 제조
중간체 1: 메틸 3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트의 제조
단계 1: 메틸 3-(벤즈하이드릴리덴아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
디옥산(800 mL) 중 메틸 3-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(47.3 g, 197.43 mmol), 디페닐메탄이민(47 g, 259.33 mmol), Xantphos(9.07 g, 15.675 mmol), 및 탄산 세슘(131 g, 402.06 mmol)의 혼합물을 질소로 버블링함으로써 30분 동안 탈기시켰다. Pd(OAc)2(3.52 g, 15.679 mmol)를 첨가하고, 시스템을 질소로 3회 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 셀라이트 패드로 여과하였다. 케이크를 EtOAc로 세척하고, 용매를 감압 하에 증발시켜 메틸 3-(벤즈하이드릴리덴아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(90 g, 84%). ESI-MS m/z 계산된 값 384.10855, 확인된 값 385.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.24분 (LC 방법 B).
단계 2: 메틸 3-아미노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
메탄올(200 mL) 중 메틸 3-(벤즈하이드릴리덴아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(65 g, 124.30 mmol)의 현탁액에 HCl(메탄올 중 3 M)을 첨가하였다(146 mL의 3 M, 438.00 mmol). 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 용매를 제거하였다. 잔류물을 아세트산에틸(2 L) 및 디클로로메탄(500 mL)에 용해시켰다. 유기상을 5% 수성 중탄산 나트륨 용액(3 X 500 mL) 및 염수(2 X 500 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 헵탄(2 X 50 mL)으로 분쇄하고 모액은 버렸다. 수득된 고형분을 디클로로메탄과 헵탄의 혼합물(1:1, 40 mL)로 분쇄하고 여과하여 메틸 3-아미노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(25.25 g, 91%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.24 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.98 (br. s, 2H), 4.00 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -63.23 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 220.046, 확인된 값 221.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.62분 (LC 방법 E).
단계 3: 메틸 3-아미노-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
0℃의 아세토니트릴(300 mL) 중 메틸 3-아미노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(18.75 g, 80.91 mmol)의 용액에 N-브로모숙신이미드(18.7 g, 105.3 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하였다. 아세트산에틸(1000 mL)을 첨가하였다. 유기층을 10% 티오황산나트륨 용액(3 X 200 mL)으로 세척하고, 아세트산에틸(2 X 200mL)로 역추출하였다. 합쳐진 유기 추출물을 포화 중탄산 나트륨 용액(3 X 200 mL), 염수(200 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 메틸 3-아미노-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 수득하였다(25.46 g, 98%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 3.93-4.03 (m, 3H), 6.01 (br. s., 2H), 7.37 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -64.2 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 297.9565, 확인된 값 299.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.55분 (LC 방법 F).
단계 4: 메틸 3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
메틸 3-아미노-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(5 g, 15.549 mmol), (Boc)2O(11 g, 11.579 mL, 50.402 mmol), DMAP(310 mg, 2.5375 mmol), 및 CH2Cl2(150 mL)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(0%~15% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 연황색 고형분으로서 수득하였다(6.73 g, 87%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.42 (s, 18H), 3.96 (s, 3H), 7.85 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -63.9 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 498.06134, 머무름 시간: 2.34분 (LC 방법 B).
중간체 2: 6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산의 제조
단계 1: 터트 -부틸 2-알릴피롤리딘-1-카르복실레이트
s-부틸리튬(시클로헥산 중 1.4 M의 20.4 mL, 28.56 mmol)을 디에틸 에테르(80 mL) 중 터트-부틸 피롤리딘-1-카르복실레이트(3.5 g, 20.44 mmol) 및 테트라메틸에틸에네디아민(2.8675 g, 3.7 mL, 24.676 mmol)의 용액에 -78℃에서 적가하고 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 염화아연(THF 중 0.5 M의 57 mL, 28.5 mmol)을 -78℃에서 서서히 첨가하고, 혼합물을 90분 동안 교반하였다. 리튬 염화물(THF 중 0.5 M의 82 mL, 41 mmol) 중 시안화구리(I)(2.2 g, 24.564 mmol)의 용액을 -78℃에서 서서히 첨가하고 혼합물을 90분 동안 교반한 다음, 3-브로모프로프-1-엔(7.4094 g, 5.3 mL, 61.247 mmol)을 -78℃에서 서서히 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 수성 수산화암모늄(60mL)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 상을 분리하고, 수성상을 디에틸 에테르(2 x 60 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(60 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산에틸/헵탄)로 정제하여, 터트-부틸 2-알릴피롤리딘-1-카르복실레이트의 투명한 오일을 수득하였다(2.9 g, 67%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.46 (s, 9H), 1.66-1.95 (m, 4H), 1.99-2.23 (m, 1H), 2.33-2.62 (m, 1H), 3.22-3.46 (m, 2H), 3.67-3.94 (m, 1H), 4.97-5.11 (m, 2H), 5.62-5.84 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 211.1572, 확인된 값 234.2 (M+Na)+; 머무름 시간: 2.17분 (LC 방법 B).
단계 2: 2-알릴피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)
트리플루오로아세트산(13.468 g, 9.1 mL, 118.12 mmol)을 디클로로메탄(12 mL) 중 터트-부틸 2-알릴피롤리딘-1-카르복실레이트(1.6 g, 7.5721 mmol)에 0℃에서 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 농축시켰다. 툴루엔(10 mL)을 혼합물에 첨가하고 농축시켜(4회 반복), 2-알릴피롤리딘(트리플루오로아세테이트 염)을 호박색 오일로서 수득하였다(1.9 g, 99%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.57-1.85 (m, 1H), 1.89-2.31 (m, 3H), 2.35-2.71 (m, 2H), 3.32 (br. s., 2H), 3.61 (br. s., 1H), 4.95-5.35 (m, 2H), 5.51-5.91 (m, 1H), 8.27 (br. s., 1H), 9.31 (br. s., 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -75.9 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 111.1048, 확인된 값 112.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.36분 (LC 방법 B).
단계 3: 메틸 6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
밀봉된 시험관에서, 2-알릴피롤리딘(트리플루오로아세테이트 염)(338 mg, 1.5008 mmol)을 아세토니트릴(10 mL) 중 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(500 mg, 1.0015 mmol) 및 DIPEA(964.60 mg, 1.3 mL, 7.4635 mmol)에 첨가하였다. 시험관을 밀봉하고, 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 포화 중탄산나트륨 용액(25 mL)을 첨가하고 아세트산 에틸(3 x 25 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(25 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(480 mg, 91%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.42 (s, 18H), 1.65-1.90 (m, 2H), 1.94-2.18 (m, 2H), 2.24-2.40 (m, 1H), 2.51-2.65 (m, 1H), 3.41-3.52 (m, 1H), 3.55-3.69 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 4.46-4.60 (m, 1H), 4.95-5.11 (m, 2H), 5.65-5.87 (m, 1H), 7.63 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -56.0 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 529.24, 확인된 값 530.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.63분 (LC 방법 E).
단계 4: 6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-3-( 터트- 부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF(156 mL) 중 메틸 6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(13.1 g, 24.74 mmol)의 용액에 메탄올(125 mL) 및 물(100 mL)을 첨가하였다. 수산화 리튬 무수물(2.116 g, 86.6 mmol)을 혼합물에 세번에 나누어 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 3.5시간 동안 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거한 다음, 70 mL의 10% 수성 HCl을 첨가하고, 생성된 혼합물을 EtOAc(3 X 100 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% EtOAc/헵탄)로 정제하여 6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산를 황색 고형분으로서 수득하였다(7.85 g, 76%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.52 (s, 9H), 1.74-1.81 (m, 2H), 1.98-2.01 (m, 1H), 2.15-2.26 (m, 2H), 2.44-2.50 (m, 1H), 3.38-3.43 (m, 1H), 3.63-3.69 (m, 1H), 4.25-4.32 (m, 1H), 5.04-5.08 (m, 2H), 5.70-5.80 (m, 1H), 9.13 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 11.11 (br. s, 1H). ESI-MS m/z 계산된 값 415.1719, 확인된 값 416.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.01분 (LC 방법 A).
중간체 3: (2 S )-2-알릴피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 (2 S )-2-(요오드메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트
0℃의 2-메틸테트라하이드로푸란(300 mL) 중 이미다졸(16.9 g, 248.2 mmol) 및 트리페닐포스판(35.8 g, 136.5 mmol) 용액에 요오드(34.8 g, 137.1 mmol)를 30분에 결쳐 나누어 첨가하였다. 반응 온도는 < 6 ºC로 유지되었고 혼합물은 짙은 오렌지색 태피가 되었으며, 이를 교반하여 연황색의 과립을 수득하였다. 혼합물을 주변 온도로 가온하고, 2-메틸테트라하이드로푸란(150 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(25 g, 124.2 mmol)의 용액을 나누어 첨가하였다. 혼합물을 주변 온도에서 16시간 동안 교반하여 연황색 슬러리를 수득하였다. 염을 제거하기 위해 셀라이트를 이용해 슬러리를 여과하고 여액을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 150 mL의 EtOAc에 용해시켰다. 혼합물에 150 mL의 헥산을 첨가하여 오일을 수득하였다. 이 오일은 EtOAc(~ 300 mL)의 첨가에 대해 용해되지 않는다. 오일은 흡인하여 제거하고, 이를 분석하여 트리페닐포스핀 옥사이드임을 밝혔다. 오일을 제거한 후 남은 용매상을 진공에서 농축하였다. 스탠딩 상태에서 형성된 침전물을 100 mL의 MTBE 중에서 교반하였다. 여과에 의해 침전물을 제거하고 MTBE로 세척하였다. 여액을 진공 중에서 농축시키고 실리카 겔 크로마토그래피(0%~40% EtOAc/헥산)로 정제하여, 터트-부틸 (2S)-2-(요오드메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트를 연황색 오일로서 수득하였다(36.5 g, 94%). 1H NMR (499 MHz, 클로로포름-d) δ 3.89 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.42 (d, J = 34.7 Hz, 4H), 2.06 (s, 1H), 2.00 - 1.86 (m, 2H), 1.82 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 311.0382, 확인된 값 312.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 A).
단계 2: 터트 -부틸 (2 S )-2-알릴피롤리딘-1-카르복실레이트
요오드화구리(103 g, 540.8 mmol)를 질소 하 THF(525 mL) 중에 현탁시키고 교반하면서 -40℃로 냉각시켰다. 내부 온도를 -40°C와 -45°C 사이로 유지하면서 브로모(비닐)마그네슘(1 L의 1 M, 1.000mol)을 첨가 깔때기를 통해 40분에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 걸쭉한 현탁액을 1시간 동안 교반하여 -10°C로 가온하였다. 흑색 현탄액을 -40℃로 냉각시키고, 내부 온도를 -40°C와 -45°C 사이로 유지하면서 THF(260 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-(요오드메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(105 g, 337.4 mmol)를 30분에 걸쳐 적가하였다. 걸쭉한 현탁액을 18°C로 서서히 가온하면서 추가 3시간 동안 교반하였다. 흑색 현탁액을 감압하에 농축시키고 포화 수성 염화암모늄 용액(300 mL) 및 MTBE(300 mL)로 처리하였다. 고형분을 여과하여 제거하고 상을 분리하였다. 유기상 포화 수성 염화암모늄 용액으로 2회 더 세척하고(2 X 100 mL), 수상을 MTBE(100 mL)로 1회 역추출하였다. 합쳐진 유기층을 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(헥산에서 5% 아세톤/헥산 (생성물은 200-210 nm에서 흡수됨))로 정제하여 터트-부틸 (2S)-2-알릴피롤리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다(32 g, 45%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.74 (ddt, J = 17.3, 10.3, 7.2 Hz, 1H), 5.13 - 4.97 (m, 2H), 3.70 (s, 1H), 3.23 (dq, J = 19.2, 11.3, 9.4 Hz, 2H), 2.46 - 1.52 (m, 6H), 1.40 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 211.15723, 확인된 값 212.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 A).
단계 3: (2 S )-2-알릴피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)
DCM (120 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-알릴피롤리딘-1-카르복실레이트(17 g, 80.45 mmol)의 용액에 TFA(30 mL, 389.4 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 주변 온도에서 24시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 중에서 제거하고 생성물을 툴루엔(200 mL) 아제오트로프로 3회 처리하였다. 생성물을 진공 하에서 16시간 건조시켜 (2S)-2-알릴피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)을 다크 오일로서 수득하였다(17 g, 94%). ESI-MS m/z 계산된 값 111.1048, 확인된 값 112.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.4분 (LC 방법 A).
중간체 4: 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산의 제조
단계 1: 메틸 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴(400 mL) 중 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(31.6 g, 63.29 mmol) 및 (2S)-2-알릴피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)(17 g, 75.49 mmol)의 용액에 DIEA(45 mL, 258.4 mmol)를 첨가하고 혼합물을 80ºC에서 2시간 동안 가열하였다. 추가의 DIEA(10 mL, 57.41 mmol)를 첨가하고 80ºC에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 EtOAc(700 mL)로 희석하고, 250 mL의 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% EtOAc/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 수득하였다(15 g, 45%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.63 (s, 1H), 5.78 (ddt, J = 17.3, 10.2, 7.2 Hz, 1H), 5.15 - 4.91 (m, 2H), 4.54 (qd, J = 7.5, 3.1 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.61 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 3.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.69 - 2.53 (m, 1H), 2.32 (dt, J = 13.7, 7.5 Hz, 1H), 2.07 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 2.02 - 1.94 (m, 1H), 1.86 - 1.69 (m, 2H), 1.43 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 529.24, 확인된 값 530.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.06분 (LC 방법 A).
단계 2: 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
메틸 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(20.5 g, 38.71 mmol)를 THF(150 mL) 및 MeOH(150 mL) 중에 용해시킨 다음(황색 용액), 물(150 mL)로 처리하고(황색 유화액), LiOH(3.5 g, 146.1 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 60℃로 가열하고 3.5시간 동안 교반하였다. 황색 혼합물을 감압 하에 농축시켜 대부분의 THF 및 MeOH를 제거하여, 황색 유화액을 수득하고, 이를 얼음조에서 냉각시켜 황색 잔득한 현탄액을 수득하였다(pH = 14). 내부 온도를 10ºC 내외로 유지시키면서, 현탄액에 HCl(1 M의 160 mL, 160 mmol)을 서서히 첨가하여 산성화시키고(발포화), 이어서 냉수조에서 1시간 동안 교반하였다. 여과에 의해 고형분을 수집하고, 차가운 물로 세척하고, 밤새 건조시켰다. 고형분을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산의 선형 구배)로 정제하여 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(13.4 g, 83%)을 밝은 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 11.11 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 5.83 - 5.67 (m, 1H), 5.12 - 5.02 (m, 2H), 4.29 (qd, J = 7.8, 3.1 Hz, 1H), 3.66 (q, J = 9.0 Hz, 1H), 3.41 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 2.47 (ddd, J = 13.8, 7.6, 3.2 Hz, 1H), 2.29 - 2.17 (m, 1H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 2.06 - 1.93 (m, 1H), 1.87 - 1.69 (m, 2H), 1.53 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 415.1719, 확인된 값 416.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.38분 (LC 방법 M).
중간체 5: 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(염산염 염)의 제조
단계 1: 에틸 2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오에이트
-78℃의 Et2O(270 mL) 중 에틸 3,3,3-트리플루오로-2-옥소-프로파노에이트(25.15 g, 147.87 mmol)의 용액에 THF 중 브로모(부트-3-에닐)마그네슘(190 mL의 0.817 M, 155.23 mmol)을 1.5시간의 기간에 걸쳐 적가하였다(내부 온도 -72℃ 내지 -76℃). 혼합물을 -78℃에서 20분 동안 교반하였다. 드라이아이스-아세톤 조를 제거하였다. 혼합물을 1시간 동안 5℃로 서서히 가온시키고, 1 N 수성 HCl(170 mL) 및 분쇄된 얼음(150 g)의 혼합물에 첨가하였다(pH = 4). 2개의 층을 분리시켰다. 유기층을 농축시키고, 잔류물을 수성상과 합치고, EtOAc(2 X 150 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 5% 수성 NaHCO3(50 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 농축시키고, THF(2 X 40 mL)와 함께 증발시켜 에틸 2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오에이트(37.44 g, 96%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.77 (ddt, J = 17.0, 10.4, 6.4 Hz, 1H), 5.15 - 4.93 (m, 2H), 4.49 - 4.28 (m, 2H), 3.88 (s, 1H), 2.35 - 2.19 (m, 1H), 2.17 - 1.89 (m, 3H), 1.34 (t, J = 7.0 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -78.74 (s, 3F) ppm.
단계 2: 에틸 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오에이트
0℃의 DMF(120 mL) 중 에틸 2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오에이트(24.29 g, 87.6% 순도, 94.070 mmol)의 용액에 NaH(광유 중 60%, 5.64 g, 141.01 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 브롬화벤질(24.13 g, 141.08 mmol) 및 TBAI(8.68 g, 23.500 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. NH4Cl(3 g, 0.6당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 30 mL의 EtOAc를 첨가한 다음, 얼음물을 첨가하였다(400 g). 혼합물을 CH2Cl2로 추출하고, 합쳐진 유기층을 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(0~20% CH2Cl2/헵탄)로 정제하여 에틸 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오에이트(26.05 g, 88%)를 분홍색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.34 (t, J =7.2 Hz, 3H), 2.00-2.19 (m, 3H), 2.22-2.38 (m, 1H), 4.33 (q, J =7.2 Hz, 2H), 4.64 (d, J =10.6 Hz, 1H), 4.84 (d, J =10.9 Hz, 1H), 4.91-5.11 (m, 2H), 5.62-5.90 (m, 1H), 7.36 (s, 5H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -70.5 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 316.12863, 확인된 값 317.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.47분 (LC 방법 B).
단계 3: 2-벤질옥시-2(트리플루오로메틸)헥스-5-엔산
물(60 mL) 중 수산화나트륨(7.86 g, 196.51 mmol)의 용액을 메탄올(210 mL) 중 에틸 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오에이트(24.86 g, 78.593 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 50℃에서 밤새 가열하였다. 반응물을 농축시켜 메탄올을 제거하고, 물(150 mL)로 희석하고, 헵탄(1 X 100 mL)으로 카르복실레이트 나트륨 염을 세척하였다. 수용액을 HCl의 3 N 수용액으로 pH = 2로 산성화시켰다. 카르복시산을 디클로로메탄(3 X 100mL)으로 추출하고 황산나트륨으로 건조시켰다. 용액을 여과하고 농축시켜 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔산(22.57 g, 97%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.31 (br. s., 1H), 7.55 - 7.20 (m, 5H), 5.93 - 5.70 (m, 1H), 5.17 - 4.91 (m, 2H), 4.85 - 4.68 (m, 1H), 4.67 - 4.55 (m, 1H), 2.32 - 1.94 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -70.29 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 288.09732, 확인된 값 287.1 (M-1); 머무름 시간: 3.1분 (LC 방법 C).
단계 4: 터트 -부틸 N- [[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바메이트
DMF(130 mL) 중 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔산(21.92 g, 92.4% 순도, 70.263 mmol)의 용액에 HATU(37.2 g, 97.836 mmol) 및 Et3N(15 g, 148.24 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 터트-부틸 N-아미노카르바메이트(12.2 g, 92.312 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하고 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음물(500 g)로 희석하고, CH2Cl2로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(0%~30% EtOAc/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바메이트(26.08 g, 92%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.46 (s, 9H), 2.10-2.31 (m, 3H), 2.34-2.51 (m, 1H), 4.60-4.72 (m, 1H), 4.73-4.86 (m, 1H), 4.95-5.19 (m, 2H), 5.83 (ddt, J =16.7, 10.4, 6.1 Hz, 1H), 6.28 (br. s., 1H), 7.30-7.51 (m, 5H), 8.34 (d, J =2.6 Hz, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -73.6 (s, 3F) ppm.
단계 5: 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)
CH2Cl2(200 mL) 중 터트-부틸 N-[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바메이트(43.12 g, 107.2 mmol)의 용액에 HCl(100 mL의 4 M, 400.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 주변 온도에서 7시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 헵탄으로부터 2회 스트리핑하고, 생성된 고형분을 고진공을 사용해 진공에서 20시간 동안 건조시켜 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)을 수득하였다(35 g, 96%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 9.92 (s, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 2H), 7.30 - 7.24 (m, 2H), 7.24 - 7.16 (m, 1H), 5.72 - 5.57 (m, 1H), 5.02 - 4.87 (m, 2H), 4.71 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.70 (s, 2H), 2.34 - 1.85 (m, 4H). ESI-MS m/z 계산된 값 302.1242, 확인된 값 303.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.5분 (LC 방법 A).
중간체 6: 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드의 제조
단계 1: 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드
2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)를 아세트산 에틸(500 mL) 중에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO3(500 mL)으로 조심스럽게 처리한 다음 0.5시간 동안 교반하였다. 상을 분리하고 유기상을 1:1 포화 수성 NaHCO3/물(500 mL)로 1회, 1:4 포화 수성 NaHCO3/물(500 mL)로 1회, 물(500 mL)로 1회, 그리고 염수(300 mL)로 1회 세척하였다. 수성상을 아세트산 에틸(200 mL)로 1회 역추출하고, 합쳐진 유기상을 건조시키고, 여과하고, 증발시킨 다음, 툴루엔과 공-증발시키고, 진공 하에서 추가로 건조시켜 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드를 황색 오일로서 수득하였다(50 g, 99%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.33 (s, 1H), 7.53 - 7.27 (m, 5H), 5.81 (ddt, J = 16.6, 10.2, 6.3 Hz, 1H), 5.10 - 4.93 (m, 2H), 4.71 (s, 2H), 4.57 - 4.28 (m, 2H), 2.27 - 1.84 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 302.1242, 확인된 값 303.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.5분 (LC 방법 A).
중간체 7: 터트 -부틸 N- [2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N- [2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
주변 온도의 EtOAc(2.2 L) 중 6-브로모-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(239.2 g, 621.1 mmol) 및 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(염산염 염)(230.1 g, 761.2 mmol)의 혼합물에 피리딘(200 mL, 2.473 mol)을 첨가하자 침전물이 형성되었다. 혼합물에 1-프로판포스폰산 무수물(500 g의 50% w/w, 785.7 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주변 온도에서 12시간 동안 교반하였다. 물(2 L) 중 NaOH(149 g의 50% w/w, 1.863 mol)를 서서히 첨가하여 반응물을 퀀칭시키고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 유기상을 분리하고, 수성상을 EtOAc(1 L)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 용매의 절반을 제거한 후, 유기상을 수성 HCl(1000 mL의 1 M, 1.000 mol)로 2회 세척하였다. 유기상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 따뜻한 헵탄(2.5 L) 및 MTBE(0.25 L)에서 슬러리화하고, 혼합물을 주변 온도에서 12시간 동안 교반하여 연황색 슬러리를 수득하였다. 슬러리를 여과하고, 생성된 필터 케이크를 1 L의 10% MEBE/헵탄으로 2회 세척하였다. 황백색 고형분을 2시간 동안 공기 건조시킨 다음, 40℃의 진공에서 20시간 동안 건조시켜 터트-부틸 N-[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 수득하였다(379.9 g, 91%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.09 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 10.35 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.36 (dt, J = 24.4, 7.2 Hz, 3H), 5.87 (ddt, J = 16.0, 10.4, 5.2 Hz, 1H), 5.09 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 5.02 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.84 (q, J = 11.4 Hz, 2H), 2.35 - 2.12 (m, 4H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 668.1069, 확인된 값 670.9 (M+3, Br 동위원소)+; 머무름 시간: 3.5분 (LC 방법 D).
단계 2: 터트 -부틸 N- [2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3- 피리딜 ]카르바메이트
터트-부틸 N-[2-[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(102 g, 150.8 mmol)를 무수 아세토니트릴(1000 mL)에 용해시키고 DIPEA(92 mL, 528.2 mmol)를 첨가하였다. 생성된 주황색 용액을 70℃(내부 온도)로 가열하여 맑은 황색 용액을 만들었다. 그런 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(37.4 g, 196.2 mmol)를 12.47 g씩 3등분하여 10분 간격으로 첨가한 다음, 반응물을 30분 동안 추가로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 아세토니트릴을 감압 하에 농축시켰다. 혼합물에 1000 mL의 MTBE를 첨가한 다음, 800 mL의 물을 첨가하고, 혼합물을 교반하고, 층을 분리시켰다. 유기층을 700 mL의 물 중 구연산 용액(36.3 g, 188.9 mmol)으로 세척한 다음, 400 mL의 포화 NaHCO3에 이어서 300 mL의 염수로 세척하였다. 그런 다음, 유기층을 무수 MgSO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 15%~50%의 8% EtOAc 용액/헥산 내지 순수 헥산)를 사용해 정제하여 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 수득하였다(91.7 g, 93%), 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 10.18 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.55 - 7.47 (m, 2H), 7.45 - 7.37 (m, 2H), 7.36 - 7.28 (m, 1H), 5.83 - 5.68 (m, 1H), 5.10 - 4.93 (m, 2H), 4.82 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.59 - 2.13 (m, 4H), 1.56 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 650.0963, 확인된 값 651.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.81분 (LC 방법 D).
중간체 8: 터트 -부틸 N- [2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]- N-터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N- [2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]- N-터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트
MTBE(300 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(30 g, 41.910 mmol)의 용액에 DIEA(6.6780 g, 9 mL, 51.670 mmol), DMAP(0.28 g, 2.2919 mmol), 및 Boc 무수물(20.1 g, 21.158 mL, 92.097 mmol)을 첨가하였다. 생성된 황색의 탁한 용액을 35℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 증발시켰다. 그런 다음, 황색 유성 잔류물을 300 mL DCM에 용해시키고, 물(300 mL)로 세척하고, 이어서 염수(300 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(0%~20% EtOAc/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(28.68 g, 87%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.89 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.35 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 5.96 - 5.76 (m, 1H), 5.11 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.01 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.65 - 2.51 (m, 2H), 2.36 - 2.17 (m, 2H), 1.27 (d, J = 23.5 Hz, 18H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 750.1488, 확인된 값 751.6 (M+1)+; 머무름 시간: 3.9분 (LC 방법 G).
중간체 9: 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(염산염)의 제조
단계 1: 에틸 2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트
-78℃의 디에틸 에테르(300 mL) 중 에틸 3,3,3-트리플루오로-2-옥소-프로파노에이트(30 g, 176.38 mmol)의 용액에 알릴(브로모)마그네슘(185 mL의 1 M, 185.00 mmol)을 3시간에 걸쳐 적가하였다(내부 온도 -74℃ 내지 -76℃). 혼합물을 -78℃에서 45분 동안 교반하였다. 드라이아이스-아세톤 조를 제거하였다. 혼합물을 1시간에 걸쳐 약 10℃로 가온시키고, 1N 수성 HCl(210 mL) 및 분쇄된 얼음(400 g)(pH 4)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 5% 수성 NaHCO3로 세척하고, 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 농축시키고, 헥산과 함께 증발시켜 에틸 2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트(42.2 g, 90%)를 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.33 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 2.60 - 2.79 (m, 2H), 3.84 (br. s., 1H), 4.24 - 4.48 (m, 2H), 5.09 - 5.33 (m, 2H), 5.59 - 5.82 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -78.5 (s, 3F) ppm.
단계 2: 에틸 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트
DMF(100 mL) 중 에틸 2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트(18.56 g, 83.105 mmol)의 용액에 NaH(5.3 g, 60% w/w, 132.51 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 15분 동안 교반하고, 브롬화벤질(21.14 g, 15 mL, 121.12 mol) 및 테트라부틸 암모늄 요오드화물(8.5 g, 23.012 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 물(300 mL)로 퀀칭시키고, 아세트산에틸(3 x 300 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(500 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(20%~60% DCM/헥산)로 정제하여 에틸 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트(22.01 g, 70%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 7.55 - 7.25 (m, 5H), 6.00 - 5.80 (m, 1H), 5.30 - 5.10 (m, 2H), 4.86 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.81 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 302.113, 확인된 값 303.5 (M+1)+; 머무름 시간: 4.14분 (LC 방법 G).
단계 3: 2-벤질옥시-2(트리플루오로메틸)펜트-4-엔산
메탄올(150 mL) 중 에틸 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트(28.99 g, 95.902 mmol)의 용액에 물(50 mL) 중 NaOH(7.6714 g, 191.80 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 물(200 mL)로 희석하고 디에틸 에테르(200 mL)로 세척하였다. 수성층을 농축된 HCl로 pH 1로 산성화하고, 디에틸 에테르(3 X 200 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔산(28.04 g, 99%)을 연황색 액체로서 수득하였다. 1H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 7.55 - 7.28 (m, 5H), 5.97 - 5.69 (m, 1H), 5.33 - 5.17 (m, 2H), 4.95 - 4.66 (m, 2H), 2.91 (d, J = 7.1 Hz, 2H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다.
단계 4: 터트 -부틸 N- [[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바메이트
DMF(2 L) 중 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔산(300 g, 1.094 mol)의 용액에 HATU(530 g, 1.394 mol) 및 DIEA(400 mL, 2.296 mol)를 첨가하고, 혼합물을 주변 온도에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물에 터트-부틸 N-아미노카르바메이트(152 g, 1.150 mol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 36시간 동안 교반하였다. 반응물을 차가운 물(4 L)로 퀀칭시키고, 혼합물을 EtOAc(2 X 2 L)로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(0~40% EtOAc/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바메이트(386.49 g, 91%)를 오일로서 수득하였는데, 이는 서서히 결정화되어 황백색 고형분이 되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.00 (d, J = 37.9 Hz, 1H), 8.93 (s, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.29 (m, 3H), 6.01 - 5.64 (m, 1H), 5.32 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.17 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 2.96 (qd, J = 15.4, 6.8 Hz, 2H), 1.39 (d, J = 17.3 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 388.16098, 확인된 값 389.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.51분 (LC 방법 D).
단계 5: 2-벤질옥시-2(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(염산염)
DCM(400 mL) 중 터트-부틸 N-[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바메이트(98.5 g, 240.94 mmol)의 용액에 디옥산 중 HCl(200 mL의 4 M, 800.00 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 농축시키고, DCM 및 헥산과 공동 증발시켜 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(염산염 염)(81.15 g, 97%)를 황백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.07 (s, 1H), 7.70 - 7.16 (m, 5H), 5.87 - 5.61 (m, 1H), 5.45 - 5.09 (m, 2H), 4.79 (s, 2H), 3.6 - 3.4 (m, 2H), 3.23 - 3.07 (m, 1H), 3.04 - 2.87 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 288.10855, 확인된 값 289.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.0분 (LC 방법 H).
중간체 10: 메틸 3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트의 제조
단계 1: 메틸 3-아미노-5-브로모-피리딘-2-카르복실레이트
메탄올(250 mL) 중 3-아미노-5-브로모-피리딘-2-카르복시산(10g, 43.77 mmol)의 용액에 황산(10 mL, 187.6 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 75℃에서 3일 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매의 약 2/3을 감압 하에 제거하였다. 생성된 혼합물을 염수 (200 mL) 및 얼음(200 mL)의 혼합물에 부었다. 수성층을 EtOAc(3 X 200 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고 물(70 mL), 5% NaHCO3(70 mL) 및 염수(70 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축하여, 메틸 3-아미노-5-브로모-피리딘-2-카르복실레이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(4.56 g, 45%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 3.96 (s, 3H), 5.82 (br. s, 2H), 7.24 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 8.06 (d, J = 1.8 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 229.96909, 확인된 값 231.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.51분 (LC 방법 EE).
단계 2: 메틸 3-아미노-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트
질소 하에서, 메틸 3-아미노-5-브로모-피리딘-2-카르복실레이트(9.79 g, 42.372 mmol), 메틸설피닐옥시나트륨(8.8 g, 86.2 mmol), 요오드화(I)구리(8.8 g, 46.206 mmol), L-프롤린(34 mg, 0.2953 mmol) , 및 DMF(195 mL)의 혼합물을 130℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc(1.2 L)를 교반하면서 첨가하였다. 혼합물을 규조토를 통해 여과하고 EtOAc로 세척하였다. 여액을 28% 수성 NH3(1 X 100 mL 이어서 1 X 50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 약 160 mL로 농축시켜, 침전물로 생성하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고 건조시켜 메틸 3-아미노-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트(6.35 g, 65%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 11H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.23 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.09 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.29 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 230.03613, 확인된 값 231.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.22분 (LC 방법 E)..
단계 3: 메틸 3-아미노-6-브로모-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴(515 mL) 중 메틸 3-아미노-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트(8 g, 34.746 mmol)의 용액에 NBS(12.7 g, 71.355 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 35℃에서 64시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시켜 대부분의 아세토니트릴을 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(200 mL)로 희석하고, 10% 수성 티오황산나트륨의 용액(100 mL)으로 처리하였다. 실온에서 10분 동안 교반한 후, 포화 수성 중탄산나트륨 용액(100 mL)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물과 아세트산 에틸로 세척한 다음, 검조시켜 메틸 3-아미노-6-브로모-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트(6.2 g, 55%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.99 (s, 1H), 7.25 (br. s., 2H), 3.83 (s, 3H), 3.42 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 307.94666, 확인된 값 308.8 (M+1)+; 머무름 시간: 1.57분 (LC 방법 E).
단계 4: 메틸 3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트
메틸 3-아미노-6-브로모-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트(6.2 g, 19.153 mmol), 터트-부톡시카르보닐 터트-부틸 카르보네이트(12.825 g, 13.5 mL, 58.764 mmol), DMAP(373 mg, 3.0532 mmol), 및 DCM(185 mL)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트(8.72 g, 89%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.33 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 1.43 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 508.0515, 확인된 값 352.8 (M-155)+; 머무름 시간: 2.08분 (LC 방법 E).
중간체 11: 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트의 제조
단계 1: 메틸 1-옥시도-5-(트리플루오로메틸)피리딘-1-늄-2-카르복실레이트
0℃에서 1,2-디클로로에탄(300 mL) 중 메틸 5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(40 g, 191.09 mmol)의 교반 용액에 요소 과산화수소(62.7 g, 646.53 mmol)를 나누어 첨가하였다. 그런 다음, 냉각조(CO2/아세톤조)를 이용해 -10℃의 온도에서 트리플루오로아세트산 무수물(107.70 g, 72 mL, 507.65 mmol)을 30분에 걸쳐 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 0℃의 온도에서 30분 동안 추가로 교반한 다음, 주변 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 냉각된 얼음물(600 mL)에 부었다. 혼합물을 디클로로메탄(300 mL)로 희석한 다음, 층을 분리하였다. 수성상을 다이클로로메탄(2 x 200 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 물(2 X 300 mL) 및 염수(1 X 200 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 메틸 1-옥시도-5-(트리플루오로메틸)피리딘-1-늄-2-카르복실레이트(47.6 g, 90%)를 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.89 (s, 1H), 8.02 - 7.90 (m, 1H), 7.86 - 7.72 (m, 1H), 3.89 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -62.00 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 221.02998, 확인된 값 222.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.24분 (LC 방법 E).
단계 2: 메틸 6-하이드록시-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
0℃의 DMF(305 mL) 중 메틸 1-옥시도-5-(트리플루오로메틸)피리딘-1-늄-2-카르복실레이트(51.058 g, 230.66 mmol)의 혼합물에 트리플루오로아세트산 무수물(291.62 g, 193 mL, 1.3885 mol)을 적가하였다. 그런 다음, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 과량의 트리플루오로아세트산을 제거하였다. 잔여 DMF 용액을 0℃로 냉각된 교반 물 부피(1000 mL)에 적가하였다. 여과에 의해 침전된 고형분을 수집한 다음, 물(300 mL)로 세척하였다. 고형분을 진공 하에 건조시켜 메틸 6-하이드록시-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(45.24 g, 86%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.90 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -66.39 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 221.03, 확인된 값 222.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.43분 (LC 방법 E).
단계 3: 메틸 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
황산(200 mL의 18.4 M, 3.6800 mol) 중 메틸 6-하이드록시-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(33.04 g, 149.41 mmol)의 얼음 냉각 용액에 질산(13 mL의 15.8 M, 205.40 mmol)을 적가하였다. 5분 후, 얼음조를 제거하고, 반응 혼합물을 38℃에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료되지 않았고, 질산(3 mL의 15.8 M, 47.400 mmol)을 실온에서 적가하고, 반응물을 38℃에서 4.5시간 동안 가열하였다. 반응물을 얼음처럼 차가운 물(900 mL) 위에 서서히 붓고, 혼합물을 0℃에서 15분 동안 냉각시켰다. 그런 다음, 생성된 고형분을 여과에 의해 단리하고, 물(600 mL)로 세척하였다. 고형분을 진공 하에 밤새 건조시켜 메틸 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(39.49 g, 99%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 3.95 (s, 3H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -64.56 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 266.0151, 확인된 값 267.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.64분 (LC 방법 E).
단계 4: 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
메틸 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(10 g, 37.575 mmol) 및 페닐 디클로로포스페이트(48.008 g, 34 mL, 227.55 mmol)의 혼합물을 170℃에서 90분 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 아세트산에틸(400 mL)로 희석하고, 염수(2 x 200 mL)로 세척하였다. 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(0%~15% 아세트산에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(5.45 g, 50%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.75 (s, 1H), 4.07 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -64.12 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 283.9812, 확인된 값 285.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.95분 (LC 방법 E).
중간체 12: 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산의 제조
단계 1: 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF(180 mL) 및 물(180 mL) 중 메틸 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(32 g, 120.24 mmol)의 혼합물을 수산화리튬 일수화물(15.14 g, 360.79 mmol)로 처리하고 27℃에서 밤새 교반하였다. 미정제 반응 혼합물을 실온에서 냉각시키고, 0.5 M의 염산 수용액(380 mL)으로 pH를 2로 조정한 다음, 2-메틸 THF와 함께 1 L 분별 깔때기로 옮겨 추출하였다. 층을 분리한 다음, 유기층을 물(150 mL), 염수(150 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(29.61 g, 96%)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.45 (s, 1H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -64.53 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 251.9994, 확인된 값 253.0 (M+1)+; 머무름 시간: 0.79분 (LC 방법 E).
중간체 13: [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트의 제조
단계 1: N'- [2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
아세토니트릴(300 mL) 및 DMF(60 mL) 중 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(29.92 g, 102.66 mmol)의 용액에 CDI(17.48 g, 107.80 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반한 다음, 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(염산염 염)(33.04 g, 97.534 mmol)를 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 26℃에서 19시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 추출 깔때기로 옮겨 물(300 mL) 및 2-Me THF(400 mL)로 헹구었다. 혼합물을 2-Me THF(3 x 400 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 0.5 N의 HCl 수용액(3 X 300 mL), 염수(3 X 250 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발에 의해 농축시켰다. 그런 다음, 이를 디클로로메탄(2 X 300 mL)에서 2회 가용화시키고, 감압 하에 증발에 의해 휘발성 물질을 제거하여 N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(58.5 g, 94%)를 갈색 거품 잔여물로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 536.11304, 확인된 값 537.2 (M+1)+. 머무름 시간: 2.03분 (LC 방법 E).
단계 2: [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트
디클로로메탄(190 mL) 중 N’-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(9.76 g, 16.922 mmol)의 0℃ 용액에 DIPEA(8.0136 g, 10.8 mL, 62.004 mmol)를 첨가하고, 이어서 트리플루오로메틸설포닐 트리플루오로메탄설포네이트(12.410 g, 7.4 mL, 43.985 mmol)를 첨가하였다. 20분 후, 냉각조를 제거하고, 반응물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음처럼 차가운 1.0 N HCl 수용액, 및 EtOAc(300 mL)가 담긴 분별 깔때기에 옮겼다. 유기층을 분리하고, 수성층을 아세트산에틸(2 X 150 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 얼음처럼 차가운 1.0 N HCl 수용액(60 mL) 및 염수(3 X 40 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(0%~10% EtOAc/헵탄)로 정제하여 [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(5.334 g, 40%)를 주황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.74 (s, 1H), 7.50 - 7.27 (m, 5H), 5.87 - 5.68 (m, 1H), 5.12 - 4.96 (m, 2H), 4.88 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.60 - 2.16 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -62.68 (s, 3F), -71.80 (s, 3F), -73.04 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 650.0518, 확인된 값 651.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.94분 (LC 방법 C).
중간체 14: 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산의 제조
단계 1: 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
0℃에서 THF(48.51 mL) 및 물(24.26 mL) 중 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.14 g, 4.006 mmol)의 용액에 수산화리튬 일수화물(201.7 mg, 4.807 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온시킨 다음 2시간 동안 교반하였다. 1 N HCl을 첨가하여 용액을 pH 약 2~3으로 산성화시킨 다음, EtOAc로 추출하였다. 유기상을 물과 염수로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 투명한 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(1.05 g, 97%)을 시럽으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 269.9655, 확인된 값 271.0 (M+1)+; 머무름 시간: 0.37분 (LC 방법 S).
중간체 15: 터트 -부틸 N- [2-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]- N-터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N- [2-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]- N-터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트
MTBE(1.333 L) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(222 g, 340.8 mmol)의 용액에 DIPEA(65.3 mL, 374.9 mmol)에 이어서 DMAP(2.09 g, 17.11 mmol)를 첨가하였다. MTBE(250 mL) 중 디-터트-부틸 디카르보네이트(111.6 g, 511.3 mmol)의 용액을 약 8분에 걸쳐 첨가하고(발열 없음), 반응물을 30분 동안 추가로 교반하였다. 1 L의 물을 첨가하고 층을 분리하였다. 유기층을 KHSO4(886 mL의 0.5 M, 443.0 mmol), 300 mL 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 대부분의(> 95%) MTBE를 45℃에서 회전 증발에 의해 증발시켜, 걸쭉한 오일을 남겼다. 1.125 L의 헵탄을 첨가하고, 45℃ 회전증발조에서 용해될 때까지 회전시킨 다음, 회전 증발에 의해 325 mL의 용매를 증발시켰다. 회전증발조의 온도를 실온으로 낮추자, 생성물이 증발 중에 결정화되기 시작하였다. 그런 다음, 플라스크를 -20℃ 냉동고에 밤새 넣어 두었다. 생성된 고형분을 여과하고 차가운 헵탄으로 세척하고, 실온에서 3일 동안 건조시켜 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(240.8 g, 94%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.95 (s, 1H), 7.52 - 7.45 (m, 2H), 7.44 - 7.36 (m, 2H), 7.36 - 7.29 (m, 1H), 5.83 - 5.67 (m, 1H), 5.08 - 5.00 (m, 1H), 5.00 - 4.94 (m, 1H), 4.79 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.57 - 2.26 (m, 3H), 2.26 - 2.12 (m, 1H), 1.41 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 750.14874, 확인된 값 751.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.76분 (LC 방법 D).
중간체 16: (2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 및 (2 S )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드의 제조
단계 1: 2-벤질옥시-2(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드
터트-부틸 N-[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바메이트(386.49 g, 995.1 mmol)를 DCM(1.25 L) 및 톨루엔(250 mL)에 용해시키고, HCl(750 mL의 4 M, 3.000 mol)로 실온에서 처리하고, 황색 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축시키고, EtOAc(2 L)로 희석하였다. 혼합물을 NaOH(600 mL의 2 M, 1.200 mol)로 처리하고, 주변 온도에서 10분 동안 교반하였다. 유기상을 분리하고, 1 L의 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(286 g, 100%)를 수득하고, 이를 후속 단계(미량의 톨루엔이 존재)에 바로 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.34 (s, 1H), 7.40 - 7.22 (m, 5H), 5.69 (ddt, J = 17.1, 10.3, 6.9 Hz, 1H), 5.33 - 5.23 (m, 1H), 5.15 (dd, J = 10.3, 1.8 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 3.05 - 2.87 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 288.10855, 확인된 값 289.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.32분 (LC 방법 B).
단계 2: (2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 및 (2 S )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드
라세미 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(5.0 g, 17.35 mmol)을 40℃에서 키랄 SFC(ChiralPak IG 컬럼(250 X 21.2 mm; 5 νm); 이동상: 7% MeOH(+ 20 mM NH3), 93% CO2, 유속: 70 mL/분; 샘플 농도: 메탄올 중 111 mg/mL(개질제 없음); 주입 부피 = 160 νL, 배출 압력 136 bar; 검출 파장: 210 nM로 분리하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다.
첫 번째로 용리한 거울상이성질체는 (2S)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(1.79 g, 72%)로 단리되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.31 (s, 1H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.26 (m, 3H), 5.77 - 5.62 (m, 1H), 5.28 (dq, J = 17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.15 (dq, J = 10.2, 1.3 Hz, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.44 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 2.99 (dd, J = 7.4, 1.3 Hz, 1H), 2.91 (dd, J = 15.4, 6.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 288.10855, 확인된 값 289.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.28분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리한 거울상이성질체는 백색 고형분으로서 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(1.7 g, 68%)로 단리되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.31 (s, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 2H), 7.39 - 7.25 (m, 3H), 5.77 - 5.62 (m, 1H), 5.28 (dq, J = 17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.15 (dq, J = 10.2, 1.5 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 3.00 (dd, J = 15.3, 7.5 Hz, 1H), 2.91 (dd, J = 15.3, 6.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 288.10855, 확인된 값 289.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.28분 (LC 방법 J).
중간체 17: [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]트리플루오로메탄설포네이트의 제조
단계 1: N'- [2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
아세토니트릴(90 mL) 및 DMF(18 mL) 중 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(8.5 g, 29.165 mmol)의 용액에 CDI(5 g, 30.836 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반한 다음, 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(염산염 염)(9 g, 27.716 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 추출 깔때기로 옮겨 물(300 mL) 및 2-Me THF(400 mL)로 헹구었다. 혼합물을 2-메틸 테트라하이드로푸란(3 X 400 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 0.5 N의 HCl 수용액(3 X 300 mL), 염수(3 X 250 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 그런 다음, 이를 디클로로메탄(2 X 300 mL)에서 2회 가용화시키고, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하여 N’-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(14.7 g, 75%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 522.0974, 확인된 값 523.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.08분 (LC 방법 E).
단계 2: [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트
0℃의 디클로로메탄(175 mL) 중 N’-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(14.7 g, 20.712 mmol) 및 DIPEA(9.79 g, 13.2 mL, 75.783 mmol)에 트리플루오로메틸설포닐 트리플루오로메탄설포네이트(14.758 g, 8.8 mL, 52.308 mmol)를 첨가하였다. 20분 후 냉각조를 제거하고, 반응물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음처럼 차가운 1.0 N HCl 수용액(180 mL), 및 EtOAc(500 mL)가 담긴 분별 깔때기에 옮겼다. 유기층을 분리하고, 수성층을 아세트산에틸(2 X 120 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 얼음처럼 차가운 1.0 N HCl 수용액(120 mL) 및 염수(3 X 120 mL)로 다시 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발에 의해 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(0%~20% 아세트산에틸/헵탄)로 정제하여 [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(5.425 g, 40%)를 주황색 점성 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.65 (s, 1H), 7.36 - 7.21 (m, 5H), 5.93 - 5.74 (m, 1H), 5.28 - 5.10 (m, 2H), 4.78 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.21 - 3.05 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -62.69 (s, 3F), -71.82 (s, 3F), -73.32 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 636.03613, 확인된 값 637.1 (M+1)+; 머무름 시간: 4.0분 (LC 방법 C).
중간체 18: (2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N- [[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바메이트
DMF(2 L) 중 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔산(365 g, 1.266 mol)의 용액에 HATU(612 g, 1.610 mol) 및 DIEA(450 mL, 2.584 mol)를 첨가하고, 혼합물을 주변 온도에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물에 터트-부틸 N-아미노카르바메이트(200 g, 1.513 mol)를 첨가하고(첨가 후 약간의 발열), 혼합물을 주변 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 얼음물(5 L)에 부었다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하였다. 고형분을 EtOAc(2 L)에 용해시키고 염수로 세척하였다. 유기상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 오일을 EtOAc(500 mL)로 희석한 다음 헵탄(3 L)으로 희석하고, 몇 시간 동안 주변 온도에서 교반하여 걸쭉한 슬러리를 수득하였다. 슬러리를 추가의 헵탄으로 희석하고 여과하여 거품같은 백색 고형분(343 g)을 수집하였다. 여액을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(0~40% EtOAc/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바메이트(464 g, 91%, 결정화 산물과 합쳐짐)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 402.17664, 확인된 값 303.0 (M+1-Boc)+; 머무름 시간: 2.68분 (LC 방법 D).
단계 2: (2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드
DCM(1.25 L) 중 터트-부틸 N-[[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바메이트(464 g, 1.153 mol)의 용액에 HCl(925 mL의 4 M, 3.700 mol)을 첨가하고, 혼합물을 주변 온도에서 20시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축시켜 대부분의 DCM을 제거하였다. 혼합물을 이소프로필 아세테이트(1 L)로 희석하고, 1 L의 얼음물 중 NaOH(140 g의 50% w/w, 1.750 mol)로 pH = 6이 되도록 염기화하였다. 유기상을 분리하고, 1L의 염수로 세척하고, 합쳐진 수성상을 이소프로필 아세테이트(1 L)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 어두운 황색 오일을 수득하였다. (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (358 g, 정량) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 7.44 - 7.29 (m, 5H), 5.81 (ddt, J = 16.8, 10.1, 6.4 Hz, 1H), 5.13 - 4.93 (m, 2H), 4.75 (dd, J = 10.5, 1.5 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.78 (s, 2H), 2.43 (ddd, J = 14.3, 11.0, 5.9 Hz, 1H), 2.26 - 1.95 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 302.1242, 확인된 값 303.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.0분 (LC 방법 D).
중간체 19: 2-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸의 제조
단계 1: N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(28.8 g, 114.24 mmol) 및 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(30 g, 104.07 mmol)를 아세트산 에틸(300 mL) 및 트리에틸아민(42.108 g, 58 mL, 416.13 mmol)의 혼합물 중에 용해시켰다. 프로필포스폰 무수물(106 g, 50% w/w, 166.57 mmol)을 실온(20℃ 내지 25℃)에서 첨가하고 반응물을 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 1 M 수성 염화암모늄(400 mL)으로 퀀칭시키고, 상을 분리하고 유기상을 1 M 수성 염화암모늄(400 mL)으로 세척한 다음, 1 M 중탄산칼륨(2 X 300 mL)으로 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과한 다음, 헵탄(250 mL)을 첨가하고 혼합물을 건조될 때까지 증발시켜 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드를 황색 고형분으로서 수득하였다(63 g, 61%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.42 - 7.33 (m, 3H), 5.96 - 5.83 (m, 1H), 5.35 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.90 - 4.81 (m, 2H), 3.12 - 2.94 (m, 2H) ppm. 3개의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. ESI-MS m/z 계산된 값 522.0974, 확인된 값 523.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.102분 (LC 방법 C).
단계 2: 2-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸
N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(45 g, 80.979 mmol)를 포스포릴 트리클로라이드(90 mL) 및 아세토니트릴(90 mL)의 혼합물 중에 용해시키고, 디메틸포름아미드(45 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. pH를 모니터링하고 6 M 수산화나트륨(300 mL)으로 조정하면서, 반응물을 1 M 수성 중탄산칼륨 용액(1.3 L)으로 퀀칭하였다. 이어서, 생성물을 아세트산에틸(3 x 500 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 황산나트륨(150 g) 상에서 건조시킨 다음, 여과하고 농축시켰다. 이어서, 생성물을 125 g의 실리카 겔을 사용하여 건조 포장하고 헵탄(2 L) 및 이어서 헵탄 중 10% MTBE(8 L)로 용리하는 600 g 실리카 패드 상에서 정제하여, 일부 순수한 생성물 및 일부 오염된 생성물을 수득하였다. 이 오염된 생성물을 50 g의 실리카를 사용하여 건조된 상태로 충진하고, 400g 실리카 패드(구배: 헵탄(1 L)에 이어서 10% MTBE/헵탄(6 L))을 이용해 정제하여, 순수한 생성물 및 일부 오염된 생성물을 수득하였다. 이 오염된 생성물을 역상 크로마토그래피(컬럼: 100 g C18 컬럼; 용리 구배: 0.1% 수성 포름산 내지 메탄올(생성물은 약 80% 메탄올에서 용리됨))로 추가로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 진공 하에 메탄올을 증발시킨 다음, 수성 용액을 아세트산 에틸(2 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과한 다음 증발 건조시켜 더 원하는 순수한 생성물을 수득하였다. 각각의 정제로부터 원하는 생성물의 모든 로트를 합하여, 2-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸을 연황색 오일로서 수득하였다(13.5 g, 30%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.26 (s, 1H), 7.46 - 7.31 (m, 5H), 5.92 (dd, J = 16.9, 9.5 Hz, 1H), 5.39 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 5.26 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.31 (d, J = 6.8 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 522.053, 확인된 값 523.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.784분 (LC 방법 C).
중간체 20: 메틸 6-클로로-5-(디플루오로메틸)-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트의 제조
단계 1: 메틸 5-(디플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
오토클레이브에에 2-브로모-5-(디플루오로메틸)피리딘(25 g, 120.19 mmol), 메탄올(250 mL), 트리에틸아민(29.04 g, 40 mL, 286.98 mmol) 및 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(2.6 g, 3.5533 mmol)을 첨가하였다. 오토클레이브를 질소로 퍼징한 다음, 일산화탄소로 퍼징하였다. 혼합물을 130℃에서 가열하고, 일산화탄소 압력을 120 psi로 조정하였다. 혼합물을 130℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 25℃로 냉각시켰다. 혼합물을 질소로 퍼징하고 진공 하에 농축시켰다. 생성된 고형분을 아세트산에틸(500 mL)로 희석한 다음, 물(200 mL) 및 중탄산나트륨(20 g)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 강하게 교반하고 층을 분리하였다. 유기층을 물(200 mL) 및 염수(200 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 20%에서 50%의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-(디플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 회백색 고형분으로서 수득하였다(11.41 g, 51%). ESI-MS m/z 계산된 값 187.0445, 확인된 값 188.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.48분 (LC 방법 E).
단계 2: 메틸 5-(디플루오로메틸)-1-옥시도-피리딘-1-늄-2-카르복실레이트
과산화 요소 수소(13.7 g, 145.64 mmol)를 DCE(70 mL) 중 메틸 5-(디플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(8.1 g, 43.282 mmol)의 용액에 첨가하였다. 냉각조(CO2/아세톤조) 중 -10℃의 온도에서 트리플루오로아세트산 무수물(24.025 g, 15.9 mL, 114.39 mmol)을 20분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 추가로 교반한 다음, 주변 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 얼음물(150 mL)에 붓고, 1 N 수산화나트륨 수용액 ~150 mL으로 pH = 2 내지 3으로 조정하였다. 혼합물을 디클로로메탄(200 mL)로 희석한 다음, 층을 분리하였다. 수성상을 다이클로로메탄(2 x 150 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(150 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 메틸 5-(디플루오로메틸)-1-옥시도-피리딘-1-늄-2-카르복실레이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(8.39 g, 87%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.41 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.43 - 7.36 (m, 1H), 6.84 - 6.47 (m, 1H), 4.03 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -115.27 (d, J = 55.9 Hz, 2F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 203.0394, 확인된 값 204.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.73분 (LC 방법 E).
단계 3: 메틸 5-(디플루오로메틸)-6-하이드록시-피리딘-2-카르복실레이트
무수 트리플루오로아세트산(84.616 g, 56 mL, 402.87 mmol)을 DMF (130 mL) 중 메틸 5-(디플루오로메틸)-1-옥시도-피리딘-1-윰-2-카르복실레이트(11.63 g, 47.060 mmol)의 혼합물에 0℃에서 30분 동안 적가하였다. 혼합물을 48℃에서 4시간 동안 교반한 다음, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 무수 트리플루오로아세트산을 제거하였다. 잔여 DMF 용액에 30분에 걸쳐 0℃의 물(1 L)에 부었다. 침전된 고형분을 여과로 수집하고 물(200 mL)로 세척하였다. 고형분을 진공 하에서 건조시켜, 메틸 5-(디플루오로메틸)-6-하이드록시-피리딘-2-카르복실레이트를 회백색 고형분으로서 수득하였다(5.74 g, 60%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.29 (br. s., 1H), 7.88 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.07 - 6.76 (m, 1H), 3.87 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -118.60 (br. s., 2F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 203.0394, 확인된 값 204.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.34분 (LC 방법 E).
단계 4: 메틸 5-(디플루오로메틸)-6-하이드록시-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트
황산(48 mL의 18.4 M, 883.2 mmol) 중 메틸 5-(디플루오로메틸)-6-하이드록시-피리딘-2-카르복실레이트(7.43 g, 36.575 mmol)의 얼음 냉각시킨 용액에 질산(2.5 mL의 15.8 M, 39.5 mmol)을 적가하였다. 5분 후, 얼음조를 제거하고, 반응 혼합물을 45℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 얼음물(300mL) 중 침전시켰다. 용액을 0℃에서 15분 동안 냉각시킨 다음, 고형분을 여과에 의해 단리하고 물(200 mL)로 세척하였다. 고형분을 진공 하에서 밤새 건조시켜, 메틸 5-(디플루오로메틸)-6-하이드록시-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트를 회백색 고형분으로서 수득하였다(5.47 g, 56%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.41 (s, 1H), 7.19 - 6.75 (m, 1H), 3.94 (s, 3H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -118.87 (d, J = 54.5 Hz, 2F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 248.0245, 확인된 값 249.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.6분 (LC 방법 E).
단계 5: 메틸 6-클로로-5-(디플루오로메틸)-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트
메틸 5-(디플루오로메틸)-6-하이드록시-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트(2 g, 8.06 mmol)를 포스포릴 트리클로라이드(6.58 g, 4 mL, 42.914 mmol) 및 아세토니트릴(4 mL)의 혼합물에 0℃에서 용해시켰다(발열). DMF(1.888 g, 2 mL, 25.83 mmol)을 0℃에서 첨가하였다(발열). 생성된 황색 밀키 혼합물을 70℃에서(오일조에서 사전 가열됨) 4시간 동안 교반하였다. 추가의 포스포릴 트리클로라이드(3.29 g, 2 mL, 21.457 mmol)를 첨가하였다. 오렌지색 용액을 70℃에서 밤새 교반하였다. 0℃로 냉각시키고 메탄올(30 mL)을 첨가하였다. 50% 포화 중탄산나트륨 용액(50 mL)을 0℃에서 적가하였다. 물(50 mL), 메탄올(50 mL) 및 아세트산 에틸(150 mL) 중 탄산칼륨(10 g)의 용액을 첨가하였다. 수성층을 분리하고 아세트산 에틸(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여액을 진공 하에서 농축시켜 오렌지색 오일을 수득하고, 이를 5%에서 30%까지의 MTBE/헵탄의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 메틸 6-클로로-5-(디플루오로메틸)-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트를 황색 오일로서 수득하였다(1.92 g, 79%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.70 (s, 1H), 7.16 - 6.76 (m, 1H), 4.06 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -117.39 (d, J = 53.1 Hz, 2F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 265.9906, 확인된 값 267.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.84분 (LC 방법 E).
중간체 21: 2-메틸헥스-5-엔-2-아민(염산염)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 2,2-디메틸아지리딘-1-카르복실레이트
디에틸 에테르(750 mL) 중 터트-부틸 N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)카르바메이트(30 g, 155.35 mmol)의 용액에 p-TsCl(35.6 g, 186.73 mmol) 및 분말화된 KOH(103 g, 1.5605 mol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 온도를 환류 온도로 올려 16시간 동안 교반하였다. KOH(17 g, 303 mmol)를 한 번 더 첨가하고, 반응물을 추가로 2시간 동안 환류하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 에테르(500 mL)로 희석하였다. 형성된 고형분을 유리 프릿화 깔대기를 통한 여과에 의해 제거하고 추가의 에테르(100 mL)로 세척하였다. 합쳐진 에테르 여액을 물(100 mL) 및 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜, 터트-부틸 2,2-디메틸아지리딘-1-카르복실레이트를 투명한 오일로서 수득하였다(24.602 g, 88%). 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 2.04 (s, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.28 (s, 6H) ppm.
단계 2: 터트 -부틸 N -(1,1-디메틸펜트-4-에닐)카르바메이트
반응 플라스크를 THF(205 mL, 2 M, 410 mmol) 및 무수 THF(200 mL) 중 알릴(클로로)마그네슘로 채웠다. 용액을 -30℃로 냉각시키고, 브롬화 구리(I)(황화 디메틸 복합체)(28 g, 136.2 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 동일한 온도에서 30분 동안 교반한 다음, -78℃로 냉각시켰다. 무수 THF(200 mL) 중 터트-부틸 2,2-디메틸아지리딘아지리딘-1-카르복실레이트(24.602 g, 136.49 mmol)를 반응 혼합물에 적가하였다. 반응물을 동일한 온도에서 30분 동안 교반한 다음, -20℃의 냉동고로 옮기고, 3시간 동안 보관하였다. 반응물을 0℃에서 포화 수성 염화암모늄 용액(200 mL)으로 퀀칭하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, 디에틸 에테르(200 mL)로 희석하였다. 용액을 셀라이트 패드를 통해 여과하고 에테르(100 mL)로 세척하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성층을 디에틸 에테르(2 x 200 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 10%까지의 디에틸 에테르/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 터트-부틸 N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)카르바메이트를 연황색 액체로서 수득하였다(18.6 g, 61%). 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 5.82 (ddt, J = 16.8, 10.2, 6.6, 6.6 Hz, 1H), 5.09 - 4.87 (m, 2H), 4.38 (s, 1H), 2.11 - 1.98 (m, 2H), 1.79 - 1.64 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.26 (s, 6H) ppm.
단계 3: 2-메틸헥스-5-엔-2-아민(염산염)
디에틸 에테르(350 mL, 2 M, 700 mmol) 중 터트-부틸 N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)카르바메이트(26.6 g, 124.7 mmol) 및 HCl의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 헥산으로 분쇄하여, 2-메틸헥스-5-엔-2-아민 (염산염)을 백색 고형분으로서 수득하였다(15.198 g, 77%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.08 (s, 3H), 5.92 - 5.64 (m, 1H), 5.15 - 4.87 (m, 2H), 2.21 - 1.96 (m, 2H), 1.72 - 1.49 (m, 2H), 1.23 (s, 6H) ppm.
화합물 1~213 및 화합물 214~222의 제조
실시예 1: 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(4개 입체이성질체의 혼합물)(화합물 1)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
아세토니트릴 (5 mL) 중 6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(200 mg, 0.4815 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)(180 mg, 0.5314 mmol), 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 (염산염)(140 mg, 0.7303 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸(일수화물)(100 mg, 0.653 mmol) 및 트리에틸아민(101.64 mg, 0.14 mL, 1.0044 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 수성 1 N HCl (30 mL), 포화 수성 중탄산나트륨 (30 mL), 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 10%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(300 mg, 89%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 1.51 (s, 9H), 1.65-1.81 (m, 2H), 1.88-2.00 (m, 1H), 2.07-2.34 (m, 5H), 2.37-2.59 (m, 2H), 3.27-3.43 (m, 1H), 3.56-3.71 (m, 1H), 4.25-4.40 (m, 1H), 4.66-4.77 (m, 1H), 4.78-4.91 (m, 1H), 4.93-5.19 (m, 4H), 5.69-5.91 (m, 2H), 7.32-7.51 (m, 5H), 9.01 (br. s., 1H), 9.16 (dd, J=18.8, 5.9 Hz, 1H), 9.85-10.01 (m, 1H), 10.05 (br. s., 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -75.2 내지 -72.1 (m, 3F), -57.8 (d, J=9.2 Hz, 1F) ppm. 머무름 시간: 2.82분 (LC 방법 B).
단계 2: 터트 -부틸 N -[6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
아세토니트릴(50 mL) 중 터트-부틸 N-[6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(2.45 g, 3.5016 mmol) 및 DIPEA(1.1872 g, 1.6 mL, 9.1858 mmol)용액을 50℃에서 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(815 mg, 4.2749 mmol)를 50℃에서 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(200 mL)으로 염기화시키고, 아세트산 에틸(3 X 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(100 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 70%에서 100%까지의 아세토니트릴/0.1%의 포름산을 함유하는 물 구배를 사용하는 역상 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 검 물질로서 수득하였다(2.2 g, 92%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 1.51 (s, 9H), 1.64-1.78 (m, 2H), 1.86-2.08 (m, 2H), 2.16-2.57 (m, 6H), 3.32-3.44 (m, 1H), 3.53-3.69 (m, 1H), 4.35-4.49 (m, 1H), 4.58-4.69 (m, 1H), 4.71-4.87 (m, 1H), 4.88-5.10 (m, 4H), 5.60-5.84 (m, 2H), 7.24-7.43 (m, 5H), 8.99 (s, 1H), 9.55 (br. s., 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -73.0 (s, 3F), -57.3 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 681.27496, 확인된 값 682.5 (M+1)+; 머무름 시간: 3.19분 (LC 방법 K).
단계 3: 터트 -부틸 N -6-(벤질옥시)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
1,2-디클로로에탄 (15 mL) 중 터트-부틸 N-[6-(2-알릴피롤리딘-1-일)-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(155 mg, 0.2274 mmol)의 탈기된 용액에 Grubbs 2세대 촉매(40 mg, 0.047 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 0.75시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃러 냉각시키고 디(에틸렌 글리콜) 비닐 에테르(125.84 mg, 0.13 mL, 0.9522 mmol)를 첨가하여 촉매를 퀀칭한 다음, 실온에서 10분 동안 교반하고 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 10%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-6-(벤질옥시)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)를 황녹색 고형분으로서 수득하였다(125 mg, 84%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 1.46 (s, 9H), 1.60-1.79 (m, 2H), 1.86-2.00 (m, 1H), 2.00-2.25 (m, 3H), 2.26-2.53 (m, 2H), 2.58-2.82 (m, 1H), 3.39-3.67 (m, 3H), 3.83-4.05 (m, 1H), 4.51-4.65 (m, 1H), 4.89-5.00 (m, 1H), 5.36-5.55 (m, 2H), 7.11-7.28 (m, 5H), 8.81-8.98 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -75.0 and -74.1 (2s, 3F), -55.5 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 653.24365, 확인된 값 654.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.94분 (LC 방법 K).
단계 4: 터트 -부틸 N -[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
메탄올(4 mL) 중 터트-부틸 N-6-(벤질옥시)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(30 mg, 0.0459 mmol)의 질소 배기된 용액에 SiliaCat Pd0(73 mg, 0.24 mmol/g, 0.0175 mmol)를 첨가하고, 반응물을 수소 풍선 하 실온에서 64시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 메탄올로 세척하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트를 황색 검으로서 수득하였다(15 mg, 58%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 1.20-1.27 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.48-1.59 (m, 5H), 1.85-1.98 (m, 1H), 1.99-2.65 (m, 4H), 3.30-3.62 (m, 3H), 3.87-4.18 (m, 2H), 8.75-8.97 (m, 2H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -80.8 and -77.4 (s, 3F), -55.4 내지 -54.9 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 565.2124, 확인된 값 566.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.73분 (LC 방법 K).
단계 5: 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(4개 입체이성질체의 혼합물)(화합물 1)
TFA(1.4800 g, 1 mL, 12.98 mmol)를 DCM(4 mL) 중 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(30 mg, 0.053 mmol)에 실온에서 첨가하고 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액(20 mL)에 붓고 DCM(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(4개의 입체이성질체의 혼합물)을 황색 고형분으로서 수득하였다(10 mg, 39%). 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 0.80-1.01 (m, 2H), 1.13-1.36 (m, 3H), 1.42-1.68 (m, 4H), 1.71-1.87 (m, 1H), 1.91-2.08 (m, 1H), 2.12-2.29 (m, 1H), 2.36-2.75 (m, 2H), 3.31-3.47 (m, 1H), 3.52-3.75 (m, 1H), 3.86-4.23 (m, 1H), 7.62 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -82.0 and -78.8 (s, 3F), -58.1 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.15994, 확인된 값 466.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.84분 (LC 방법 F).
실시예 2: 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)(화합물 2) 및 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)(화합물 3)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (부분 입체이성질체 쌍 1) 및 터트 -부틸 N -[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (부분 입체이성질체 쌍 2)
메탄올(60 mL) 중 터트-부틸 N-6-(벤질옥시)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(675 mg, 1.0327 mmol)의 질소 배기된 용액에 SiliaCat Pd0(1.6 g, 0.24 mmol/g, 0.384 mmol)를 첨가하고, 반응물을 수소 풍선 하 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 메탄올로 세척하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 1)를 황색 고형분 및 용리될 제1 부분 입체이성질체 쌍으로서 수득하였다(190 mg, 33%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 0.79-0.91 (m, 1H), 0.94-1.10 (m, 1H), 1.25 (br. s., 1H), 1.41-1.68 (m, 13H), 1.70-1.84 (m, 1H), 1.85-2.07 (m, 2H), 2.08-2.27 (m, 2H), 2.28-2.44 (m, 1H), 2.54-2.74 (m, 1H), 3.40-3.71 (m, 3H), 3.94-4.14 (m, 1H), 8.80-9.10 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -77.4 (s, 3F), -55.1 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 565.2124, 확인된 값 566.3 (M+1)+; 머무름 시간: 8.407분 (LC 방법 L).
연속된 용리를 통해, 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 2)를 황색 고형분 및 용리될 제2 부분 입체이성질체 쌍으로서 수득하였다(165 mg, 28%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 0.81-0.98 (m, 2H), 1.41-1.60 (m, 13H), 1.61-1.89 (m, 3H), 1.93-2.25 (m, 3H), 2.35-2.62 (m, 2H), 3.46-3.69 (m, 3H), 3.95-4.13 (m, 1H), 8.91 (br. s., 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -80.8 (s, 3F), -55.1 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 565.2124, 확인된 값 566.4 (M+1)+; 머무름 시간: 8.426분 (LC 방법 L).
단계 2: 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)(화합물 2)
TFA(2.9600 g, 2 mL, 25.96 mmol)를 DCM(2 mL) 중 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 1)(190 mg, 0.336 mmol)에 실온에서 첨가하고 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 중탄산나트륨 수용액(20 mL) 내에 붓고 DCM(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체 쌍 1)을 황색 고형분으로서 수득하였다(117 mg, 71%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.71-0.91 (m, 1H), 1.32-1.62 (m, 6H), 1.65-1.80 (m, 1H), 1.81-2.00 (m, 2H), 2.02-2.16 (m, 1H), 2.18-2.36 (m, 1H), 2.38-2.62 (m, 2H), 3.18-3.31 (m, 1H), 3.39-3.56 (m, 1H), 3.78-3.94 (m, 1H), 6.10 (s, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.69 (s, 1H) ppm.19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -79.3 (s, 3F), -55.8 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.15994, 확인된 값 466.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.82분 (LC 방법 F).
단계 3: 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)(화합물 3)
TFA(2.9600 g, 2 mL, 25.96 mmol)를 DCM(4 mL) 중 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 2)(165 mg, 0.2918 mmol)에 실온에서 첨가하고 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액(20 mL) 내에 붓고 DCM(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체 쌍 2)을 황색 고형분으로서 수득하였다(90 mg, 65%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.72-0.94 (m, 1H), 1.21-1.54 (m, 5H), 1.55-1.79 (m, 3H), 1.81-1.93 (m, 1H), 1.94-2.18 (m, 2H), 2.19-2.41 (m, 2H), 3.17-3.30 (m, 1H), 3.41-3.60 (m, 1H), 3.88-4.09 (m, 1H), 6.10 (br. s., 2H), 7.53 (s, 1H), 7.69 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -76.5 (s, 3F), -55.9 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.15994, 확인된 값 466.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.78분 (LC 방법 F).
실시예 3: (6 R ,12 R )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 4) 및 (6 S, 12 R )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 5)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
NMP (70 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(7.8 g, 18.78 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(염산염)(6.4 g, 18.89 mmol) 및 DIEA(8.5 g, 65.77 mmol)를 첨가하고, 이어서 HATU(10.7 g, 28.14 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반한 다음, 혼합물을 물(100 mL)로 희석하고, EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 5%까지의 EtOAc/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 수득하였다(10.2 g, 78%). 1H (400 MHz, 클로로포름-d) δ1.52 (s, 9H), 1.67-1.79 (m, 2H), 1.95-1.97 (m, 1H), 2.14-2.29 (m, 5H), 2.43-2.53 (m, 2H), 3.34-3.38 (m, 1H), 3.61-3.67 (m, 1H), 4.31-4.36 (m, 1H), 4.71-4.75 (m, 1H), 4.84-4.87 (m, 1H), 4.99-5.14 (m, 4H), 5.75-5.88 (m, 2H), 7.38-7.43 (m, 5H), 9.01 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 9.12-9.20 (m, 1H), 9.92-9.99 (m, 1H), 10.06 (d, J = 2.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 699.2855, 확인된 값 700.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.39분 (LC 방법 A).
단계 2: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(19.3 g, 27.58 mmol)를 아세토니트릴(385 mL) 중에 용해시킨 다음, DIEA(14.5 mL, 83.25 mmol)를 첨가하고 50℃까지 가열하였다. 이 황색 용액에, p-톨루엔설포닐 클로라이드(7.9 g, 41.44 mmol)를 서서히 첨가하고, 오렌지색 용액을 70°C에서 6시간 동안 가열하였다. p-톨루엔설포닐 클로라이드(0.8 g, 4.196 mmol)를 추가로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 짙은 오렌지색 용액을 포화 중탄산나트륨 용액(400 mL)으로 세척하고, 중탄산나트륨 상을 아세트산 에틸(2 X 150 mL)로 2회 역추출하였다. 합쳐진 유기상을 포화 중탄산나트륨 용액(200 mL) 및 염수 (200 mL)로 1회 더 세척하였다. 합쳐진 유기상을 건조시키고, 여과하고 증발시켜 짙은 오렌지색 오일을 수득하였다. 잔류물을 0%에서 5%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 수득하였다(16.5 g, 88%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 9.58 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.48 - 7.20 (m, 5H), 5.75 (dddd, J = 17.6, 15.4, 7.0, 4.6 Hz, 2H), 5.10 - 4.93 (m, 4H), 4.82 (dd, J = 31.7, 10.9 Hz, 1H), 4.67 (dd, J = 10.9, 6.4 Hz, 1H), 4.45 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.64 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 3.40 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 2.61 - 2.17 (m, 6H), 2.14 - 1.87 (m, 2H), 1.84 - 1.64 (m, 2H), 1.57 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 681.27496, 확인된 값 682.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.52분 (LC 방법 M).
단계 3: 터트 -부틸 N -[(12 S )-6-벤질옥시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
DCE(2000 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트( 10.47 g, 14.131 mmol)우ㅏ 탈기된 용액을 질소 분위기 하 50℃로 15분 동안 가열하였다. 이어서, Zhan 촉매-1B(2 g, 2.722 mmol)를 첨가하고 혼합물을 70℃로 가열하고 이 온도에서 밤새 유지하였다. 추가의 Zhan 촉매-1B(0.5 g, 0.6805 mmol)를 첨가하고 가열을 4시간 동안 지속하였다. 반응 혼합물을 냉각하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 10%까지의 EtOAc/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[(12S)-6-벤질옥시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)를 진한 황록색의 발포체로서 수득하였다(5.87 g, 61%). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.01 (s, 1H), 8.98 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.38 - 7.21 (m, 5H), 5.64 - 5.47 (m, 2H), 5.02 (q, J = 11.3 Hz, 1H), 4.68 (q, J = 11.0 Hz, 1H), 4.15 - 3.92 (m, 1H), 3.75 - 3.42 (m, 3H), 2.92 - 2.81 (m, 1H), 2.79 - 2.64 (m, 1H), 2.58 - 2.48 (m, 1H), 2.48 - 2.35 (m, 1H), 2.31 - 2.16 (m, 2H), 2.10 - 1.99 (m, 1H), 1.82 - 1.71 (m, 2H), 1.55 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 653.2437, 확인된 값 654.1 (M+1)+; 머무름 시간: 4.29분 (LC 방법 G).
단계 4: (6R,12R)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 4) 및 (6 S 12 R )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 5)
Pd/C(10 w/w의 250 mg, 0.2349 mmol)에 탈기된 MeOH(10 mL) 중 터트-부틸 N-[(12S)-6-벤질옥시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(1.4 g, 2.142 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 H2 풍선(10 mg, 4.961 mmol) 하에서 3일 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, MeOH로 세척하였다. 여액을 증발시키고 미정제 생성물을 0%에서 25%까지의 EtOAc/헥산 구배로 용리하는 40 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 크로마토크래피 처리하여. N-Boc-보호된 생성물 중간체를 부분 입체이성질체의 혼합물로서 수득하였다. 이어서, 이 물질을 DCM(10 mL)에 용해시키고, TFA(1 mL, 12.98 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 주변 온도에서 20시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 중에서 제거하고, 미정제 오일을 30%에서 100%까지의 아세토니트릴/물 구배로 용리하는 C18 컬럼을 사용하는 역상 컬럼 크로마토그래피로 크로마토그래피 처리하여 650 mg의 부분 입체이성질체의 혼합물을 수득하였다. 이 혼합물을 6분에 걸친 CO2 중 10% 메탄올 이동상(유속 = 70 mL/분)을 사용하는 ChiralPak AS-H 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기))을 사용하는 키랄 SFC로 처리하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
첫 번째로 용리한 부분 입체이성질체는 (6R,12R)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올로서 단리되었다(261.4 mg, 52%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.46 (s, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.01 (q, J = 9.8, 9.1 Hz, 2H), 3.65 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.51 - 3.38 (m, 1H), 2.57 - 2.40 (m, 2H), 2.18 (dtd, J = 12.5, 6.3, 3.5 Hz, 1H), 2.12 - 1.95 (m, 2H), 1.84 (p, J = 10.0, 9.5 Hz, 1H), 1.77 - 1.37 (m, 8H), 0.94 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.15994, 확인된 값 466.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.17분 (LC 방법 D).
두 번째로 용리한 부분 입체이성질체는 (6S,12R)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올로서 단리되었다(256.4 mg, 51%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.59 (s, 1H), 4.04 (s, 1H), 3.62 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 3.43 (s, 1H), 2.61 (s, 1H), 2.36 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 2.28 - 2.09 (m, 2H), 2.07 - 1.71 (m, 3H), 1.61 (d, J = 22.0 Hz, 6H), 1.01 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.15994, 확인된 값 466.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.12분 (LC 방법 D).
단계 5: 비정질 화합물 4(순수한 형태)의 고형분 형태의 특성 분석
A. X-선 분말 회절
단계 4에 의해 생산된 비정질 화합물 4(순수한 형태)에 대한 XRPD 회절도를 일반적인 X-선 분말 회절(XRPD) 방법을 사용해 수득하였는데, 이는 도 1에 제공되어 있다.
B. 열중량 분석 (TGA)
비정질 화합물 4(순수한 형태)에 대한 TGA 데이터는 TRIOS 시스템이 구비된 TA 기기 Discovery 시리즈 상에서 수집되었다. 비정질 화합물 4(순수한 형태)에 대한 TGA 곡선은 도 2에 제공되어 있다. TGA 곡선은 350.00℃까지 10.00℃/분의 속도로 온도가 증가할 때 약 40℃ 내지 155℃에서 1.69%의 중량이 손실되었음을 보여준다.
C. 시차주사 열량측정 분석
비정질 화합물 4(순수한 형태)에 대한 DSC 데이터는 TRIOS 시스템이 구비된 TA 기기 Discovery 시리즈 상에서 수집되었다. DSC 분석은 다음과 같이 조절된 방법을 사용해 수행하였다:
-20.00℃에서의 평형,
60초마다 +/- 1.00℃로 조절됨,
5.00분동안 등온 유지, 이어서
2.00℃/분의 속도로 250.00℃까지 승온.
비정질 화합물 4(순수한 형태)의 DSC 온도변화도는 도 3에 제공되어 있다. 온도 기록은 77.6℃에서의 Tg 중간점을 나타낸다.
단계 6: 결정질 화합물 5 형태 A(순수)의 고형분 형태 특성 분석
A. 단결정 X-선 회절
결정질 화합물 5 형태 A (순수)의 단결정을 에탄올 및 펜탄으로부터 성장시켰다. Cu Kα 방사선(λ = 1.54178 Å) 및 CCD 검출기가 구비된 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서의 X-선 회절 데이터를 획득하였다. SHELX 프로그램(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)을 사용하여 구조를 해석하고 정제하였으며, 결과는 아래 표 3에 요약되어 있다.
실시예 4: (6 S 12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 6)의 제조
단계 1: (6 S 12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 6)
20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체 쌍 1)(96.7 mg, 0.2078 mmol)을 6분에 걸친 CO2 중 8% 메탄올 이동상(유속 = 10 mL/분)을 사용하는 ChiralPak AS-H 컬럼(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기))을 사용하는 키랄 SFC로 처리하여, (6S12S)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올을 용리될 제2 거울상이성질체로서 수득하였다(30.8 mg, 64%). ESI-MS m/z 계산된 값 465.15994, 확인된 값 466.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.13분 (LC 방법 N).
실시예 5: (6 R 12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 7)의 제조
단계 1: (6 R 12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 7)
20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체 쌍 2)(80 mg, 0.1719 mmol)을, ChiralPak AS-H(250 X 10 mm) 5 μm 컬럼; 40ºC, 및 70 μL 부피 주입으로 유속 10.0 mL/분을 사용하는 용리제로서 CO2 중 8% MeOH(개질제 아님)를 사용하는 키랄 SFC로 정제하여, (6R12S)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올을 제1 용리 거울상이성질체로서 수득하였다,(19.9 mg, 50%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.73 (s, 1H), 7.58 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.12 (s, 2H), 4.02 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.52 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.30 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 2.35 (ddd, J = 25.1, 14.1, 6.2 Hz, 2H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 2.10 - 2.00 (m, 1H), 1.94 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 1.79 - 1.68 (m, 2H), 1.64 (s, 1H), 1.58 - 1.46 (m, 2H), 1.46 - 1.33 (m, 2H), 0.88 (q, J = 5.7, 4.9 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.15994, 확인된 값 466.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.1분 (LC 방법 A).
실시예 6: 16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)(화합물 8) 및 16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)(화합물 9)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 3-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트
n-부틸리튬(핵산 중 2.5 M의 26.6 mL, 66.5 mmol)을 테트라하이드로푸란(100 mL) 중 메틸트리페닐포스포니움 브로마이드(23.8 g, 66.625 mmol)에 0℃에서 서서히 첨가하였다. 생성된 오렌지색 용액을 0℃에서 5분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 유지하면서, 테트라하이드로푸란(75 mL) 중 터트-부틸 3-포르밀피롤리딘-1-카르복실레이트(12.5 g, 62.736 mmol)의 용액을 첨가 깔대기를 사용하여 서서히 첨가하였다. 0℃에서 15분 동안 교반한 후, 반응물을 2.5시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 다시, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 포화 수성 염화암모늄(200 mL)으로 퀀칭시키고, 디에틸 에테르(3 X 150 mL)를 사용하여 추출하였다. 유기층을 합치고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 15%까지의 EtOAc/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 3-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트를 투명한 용액으로 수득하였다(10.18 g, 82%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 1.45 (s, 9H), 1.60-1.77 (m, 1H), 1.99 (dtd, J=12.5, 6.4, 3.4 Hz, 1H), 2.69-2.85 (m, 1H), 2.96-3.12 (m, 1H), 3.19-3.36 (m, 1H), 3.38-3.63 (m, 2H), 4.97-5.15 (m, 2H), 5.76 (dt, J=17.1, 8.6 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 197.14159, 확인된 값 142.2 (M- t Bu+1)+; 머무름 시간: 2.08분 (LC 방법 B).
단계 2: 3-비닐피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)
트리플루오로아세트산(47.360 g, 32 mL, 415.35 mmol)을 디클로로메탄(32 mL) 중 터트-부틸 3-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트(8 g, 40.553 mmol)에 0℃에서 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 농축시켰다. 툴루엔(40 mL)을 첨가하고 농축시켜, 3-비닐피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)을 갈색 오일로서 수득하였다(13.3 g, 93%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.87 (br. s., 2H), 5.81 - 5.64 (m, 1H), 5.28 - 5.09 (m, 2H), 3.56 - 3.40 (m, 2H), 3.39 - 3.25 (m, 1H), 3.10 - 2.91 (m, 2H), 2.32 - 2.16 (m, 1H), 1.96 - 1.79 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -75.96 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 97.08915, 확인된 값 98.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.33분 (LC 방법 O).
단계 3: 9 H -플루오렌-9-일메틸 3-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트
9H-플루오렌-9-일메틸 카르보노클로리데이트(550 mg, 2.126 mmol)를 디클로로메탄(20 mL) 중 3-비닐피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)(500 mg, 1.4206 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(556.50 mg, 0.75 mL, 4.3058 mmol)에 실온에서 첨가하였다. 용액을 2일 동안 교반한 다음, 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(2 X 20 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 20%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 9H-플루오렌-9-일메틸 3-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트를 투명한 오일로서 수득하였다(458 mg, 100%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.54-1.75 (m, 1H), 1.84-2.04 (m, 1H), 2.66-2.85 (m, 1H), 2.90-3.05 (m, 1H), 3.13-3.27 (m, 1H), 3.28-3.49 (m, 2H), 4.15-4.37 (m, 3H), 4.93-5.18 (m, 2H), 5.69-5.87 (m, 1H), 7.21-7.47 (m, 4H), 7.62 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.88 (d, J=7.6 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 319.15723, 확인된 값 320.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.36분 (LC 방법 B).
단계 4: 9 H -플루오렌-9-일메틸 3-[5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥스-1-에닐]피롤리딘-1-카르복실레이트 ( E / Z 혼합물)
1,2-디클로로에탄 (8 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(1.63 g, 2.5023 mmol) 및 9H-플루오렌-9-일메틸 3-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트(3.6 g, 11.271 mmol)의 탈기된 용액에 Grubbs 2세대 촉매(129 mg, 0.1516 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 9H-플루오렌-9-일메틸 3-[5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥스-1-에닐]피롤리딘-1-카르복실레이트 (E/Z 혼합물)를 회백색 고형분으로서 수득하였다(1.3 g, 47%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 1.56 (s, 9H), 1.60-1.76 (m, 1H), 1.90-2.03 (m, 1H), 2.10-2.23 (m, 1H), 2.28-2.55 (m, 3H), 2.65-2.85 (m, 1H), 3.01-3.14 (m, 1H), 3.29-3.43 (m, 1H), 3.47-3.64 (m, 2H), 4.18-4.29 (m, 1H), 4.31-4.41 (m, 2H), 4.63-4.74 (m, 1H), 4.76-4.88 (m, 1H), 5.37-5.56 (m, 2H), 7.28-7.45 (m, 7H), 7.47-7.55 (m, 2H), 7.57-7.65 (m, 2H), 7.73-7.81 (m, 2H), 9.35 (s, 1H), 10.16-10.22 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.5 (br. s., 3F), -63.8 (br. s., 3F) ppm. 머무름 시간: 2.96분 (LC 방법 K).
단계 5: 9 H -플루오렌-9-일메틸 3-[5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥실]피롤리딘-1-카르복실레이트
아세트산 에틸(16 mL) 중 9H-플루오렌-9-일메틸 3-[5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥스-1-에닐]피롤리딘-1-카르복실레이트 (E/Z 혼합물)(205 mg, 0.2175 mmol)의 질소 탈기된 용액에 탄소 상 팔라듐(46 mg, 0.0216 mmol)을 첨가하고 반응물을 수소 풍선 하 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 아세트산 에틸로 세척하고, 여액을 증발시켜, 9H-플루오렌-9-일메틸 3-[5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥실]피롤리딘-1-카르복실레이트를 호박색 검으로서 수득하였다(190 mg, 92%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 1.34-1.46 (m, 4H), 1.56 (s, 9H), 1.91-2.18 (m, 3H), 2.25-2.50 (m, 3H), 2.85-2.99 (m, 1H), 3.25-3.40 (m, 1H), 3.44-3.66 (m, 3H), 4.18-4.29 (m, 1H), 4.30-4.41 (m, 2H), 4.63-4.74 (m, 1H), 4.75-4.85 (m, 1H), 7.26-7.44 (m, 7H), 7.46-7.54 (m, 2H), 7.56-7.65 (m, 2H), 7.72-7.80 (m, 2H), 9.34 (s, 1H), 10.19 (br. s., 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.5 (br. s., 3F), -63.8 (br. s., 3F) ppm. 머무름 시간: 2.97분 (LC 방법 K).
단계 6: 터트 -부틸 N -[2-[5-[1-벤질옥시-5-피롤리딘-3-일-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
피페리딘(172.20 mg, 0.2 mL, 2.0224 mmol)을 THF(5 mL) 중 9H-플루오렌-9-일메틸 3-[5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥실]피롤리딘-1-카르복실레이트(75 mg, 0.0794 mmol)에 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 5%에서 70%, 및 100%까지의 메탄올/0.1% 포름산을 함유하는 물 구배를 사용하는 역상 (C18 컬럼) 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-5-피롤리딘-3-일-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 투명한 오일로서 수득하였다(27 mg, 43%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 1.31-1.47 (m, 4H), 1.49-1.71 (m, 10H), 1.96-2.25 (m, 4H), 2.26-2.44 (m, 2H), 2.62-2.74 (m, 1H), 3.07-3.19 (m, 1H), 3.22-3.42 (m, 2H), 4.64-4.73 (m, 1H), 4.74-4.83 (m, 1H), 7.29-7.44 (m, 3H), 7.44-7.53 (m, 2H), 8.42 (br. s, 1H), 9.35 (s, 1H), 10.18 (s, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.5 (br. s., 3F), -63.8 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 721.16986, 확인된 값 722.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.01분 (LC 방법 K).
단계 7: 터트 -부틸 N -[10-(벤질옥시)-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(18),11,13,15(19),16-펜타엔-16-일]카르바메이트
DIPEA(51.940 mg, 0.07 mL, 0.4019 mmol)를 아세토니트릴(7 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-5-피롤리딘-3-일-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(32 mg, 0.0443 mmol)에 첨가하고 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액(50 mL)에 붓고 아세트산 에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 10%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[10-(벤질옥시)-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(18),11,13,15(19),16-펜타엔-16-일]카르바메이트를 황녹색 검으로서 수득하였다(23 mg, 79%). 1H NMR (300MHz, 클로로포름-d): δ 9.03-9.32 (m, 1H), 8.90-9.01 (m, 1H), 7.19-7.30 (m, 5H), 4.61-4.83 (m, 2H), 4.44-4.59 (m, 1H), 4.10-4.19 (m, 1H), 3.28-3.51 (m, 2H), 3.09-3.26 (m, 1H), 2.52-2.68 (m, 1H), 2.20-2.38 (m, 1H), 1.93-2.17 (m, 3H), 1.73-1.92 (m, 1H), 1.39-1.60 (m, 9H), 1.22-1.37 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -60.41 (s, 1.5F), -60.90 (s, 1.5F), -74.03 (s, 1.5F), -74.94 (br. s., 1.5F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 641.24365, 확인된 값 642.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.14분 (LC 방법 O).
단계 8: 10-(벤질옥시)-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(18),11,13,15(19),16-펜타엔-16-아민
TFA(1.4800 g, 1 mL, 12.98 mmol)를 DCM(2 mL) 중 터트-부틸 N-[10-(벤질옥시)-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(18),11,13,15(19),16-펜타엔-16-일]카르바메이트(60 mg, 0.0935 mmol)에 실온에서 첨가하고 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액(20 mL)에 붓고 DCM(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜, 10-(벤질옥시)-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(18),11,13,15(19),16-펜타엔-16-아민을 황녹색 검으로서 수득하였다(36 mg, 71%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.34 (s, 1H), 7.29 - 7.13 (m, 5H), 5.51 - 5.06 (m, 2H), 4.85 - 4.72 (m, 1H), 4.71 - 4.60 (m, 1H), 4.59 - 4.43 (m, 1H), 3.53 - 3.27 (m, 1H), 3.25 - 2.84 (m, 2H), 2.70 - 2.50 (m, 1H), 2.43 - 2.21 (m, 1H), 2.14 - 1.91 (m, 3H), 1.66 - 1.28 (m, 6H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d): δ -62.15 내지 -60.08 (m, 3F), -75.57 내지 -73.50 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 541.1912, 확인된 값 542.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.65분 (LC 방법 O).
단계 9: 16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올
메탄올(6 mL) 중 10-(벤질옥시)-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(18),11,13,15(19),16-펜타엔-16-아민(42 mg, 0.0776 mmol)의 질소 탈기된 용액에 SiliaCat Pd0(120 mg, 0.24 mmol/g, 0.0288 mmol)를 첨가하고 반응물을 수소 풍선 하 실온에서 2일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 메탄올로 세척하고, 여액을 증발시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 4 입체이성질체s, 16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올을 황색 고형분 및 4개의 입체이성질체의 라세미 혼합물로서 수득하였다(17 mg, 48%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 - 7.64 (m, 1H), 7.60 - 7.54 (m, 1H), 6.52 (br. s, 1H), 6.36 (br. s, 1H), 4.49 - 4.32 (m, 1H), 4.19 - 4.04 (m, 1H), 3.04 - 2.83 (m, 2H), 2.21 - 1.82 (m, 5H), 1.65 - 1.25 (m, 6H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -59.86 (br. s., 1.5F), -60.32 (br. s., 1.5F), -77.43 (br. s., 1.5F), -78.51 (br. s., 1.5F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 451.1443, 확인된 값 452.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.52분 (LC 방법 C).
단계 10: 16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)(화합물 8) 및 16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)(화합물 9)
16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올(14 mg, 0.03102 mmol), 4개의 입체이성질체의 라세미 혼합물을 C18 컬럼 및 30%에서 65까지의 아세토니트릴/5 mM 염산을 함유하는 물 구배를 사용하는 역상 분취 크로마토그래피로 30분 동안 정제하여, 부분 입체이성질체의 2개의 분리된 쌍을 수득하였다:
첫 번째로 용리한 부분 입체이성질체 쌍은 16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)로서 단리되었다(5.6 mg, 78%). ESI-MS m/z 계산된 값 451.1443, 확인된 값 452.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.58분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리한 부분 입체이성질체 쌍은 16-아미노-10,18-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-2,12,13,19-테트라아자테트라시클로[13.3.1.12,5.111,14]헤니코사-1(19),11,13,15,17-펜타엔-10-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)로서 단리되었다(1.7 mg, 24%). ESI-MS m/z 계산된 값 451.1443, 확인된 값 452.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.62분 (LC 방법 A).
실시예 7: (6 E 12 R )-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,6,17,19-헥사엔-20-아민 (화합물 10)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트
수소 용기 내의 MeOH(150 mL) 중 터트-부틸 N-[(12S)-6-벤질옥시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(6.87 g, 10.090 mmol)의 용액에 10% Pd/C(2.7 g, 2.5371 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 3회 퍼징한 다음, 수소로 2회 역충전한 후 60 psi에서 67시간 동안 수소화시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트 베드로 여과하고, 필터 베드를 MeOH(3 X 100 mL)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 로터리 증발기로 농축시켜, 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(5.71 g, 95%). ESI-MS m/z 계산된 값 565.2124, 확인된 값 566.5 (M+1)+; 머무름 시간: 3.92분. 이 물질을 추가 정제없이 후속 단계에서 사용하였다 (LC 방법 G).
단계 2: 터트 -부틸 N -[(6 E 12 R )-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,6,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트
터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트(14 mg, 0.02476 mmol)를 피리딘(1.5 mL) 중 용해시키고, POCl3(105 μL, 1.126 mmol)를 용액에 서서히 첨가하였다. 혼합물을 시일하고 50℃에서 20시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 메탄올로 희석하고 여과하였다. 생성된 물질을 15분 동안 실행하여 50%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl)로 용리하는 C18 컬럼을 사용하는 역상 분취 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[(6E12R)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,6,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(6.4 mg, 47%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.13 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 7.41 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 4.26 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 3.59 (q, J = 8.6, 8.2 Hz, 1H), 3.50 - 3.40 (m, 1H), 3.04 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.44 (t, J = 12.7 Hz, 1H), 2.26 - 2.17 (m, 1H), 2.13 - 2.08 (m, 1H), 1.99 (s, 1H), 1.78 (t, J = 11.1 Hz, 2H), 1.70 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.63 - 1.56 (m, 1H), 1.51 (s, 9H), 1.48 (s, 1H), 1.25 (s, 1H), 1.18 - 1.08 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 547.2018, 확인된 값 548.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.84분 (LC 방법 M).
단계 3: (6 E 12 R )-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,6,17,19-헥사엔-20-아민 (화합물 10)
DCM(0.50 mL) 중 터트-부틸 N-[(6E12R)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,6,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트(17 mg, 0.03105 mmol)의 용액에 TFA(0.4 mL, 5.192 mmol)를 서서히 첨가하였다.. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔류물을 DCM(15 mL)를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정체하여, (6E12R)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,6,17,19-헥사엔-20-아민을 수득하였다(11 mg, 78%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.43 (s, 1H), 7.16 - 6.96 (m, 1H), 4.59 (bs, 2H), 4.24 (q, J = 7.8 Hz, 1H), 3.40 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 3.00 (qd, J = 11.5, 4.2 Hz, 1H), 2.67 - 2.39 (m, 1H), 2.23 (dtd, J = 12.5, 6.4, 3.1 Hz, 1H), 2.07 (dd, J = 12.4, 6.1 Hz, 1H), 1.96 (dq, J = 13.3, 4.8, 4.4 Hz, 2H), 1.81 - 1.66 (m, 3H), 1.64 - 1.48 (m, 2H), 1.26 (s, 1H), 1.15 (td, J = 12.1, 6.0 Hz, 1H). ESI-MS m/z 계산된 값 447.14938, 확인된 값 448.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.43분 (LC 방법 M).
실시예 8: (12 R )-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민 (거울상이성질체 1)(화합물 11) 및 (12 R )-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민 (거울상이성질체 2)(화합물 12)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
MeOH(2 mL) 중 터트-부틸 N-[(6E12R)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,6,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트(17 mg, 0.03105 mmol)의 용액에 PtO2(1.7 mg, 0.007486 mmol)를 첨가하였다. 플라스크를 고무 격막으로 밀봉하였다. 모든 공기를 비우고 질소 가스로 3회 충전하였다. 마지막으로 모든 질소 가스를 제거하고, 플라스크를 수소 풍선에 연결하였다. 반응물을 90분 동안 교반하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 농축시켜, 터트-부틸 N-[(12R)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트를 수득하였다(14 mg, 82%). ESI-MS m/z 계산된 값 549.21747, 확인된 값 550.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.88분 (LC 방법 M).
단계 2: (12 R )-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민 (거울상이성질체 1)(화합물 11) 및 (12 R )-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민 (거울상이성질체 2)(화합물 12)
DCM(2 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(18 mg, 0.03276 mmol)의 용액에 TFA(1 mL, 12.98 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 45분 동안 교반하고, 농축시켰다. 잔류물을 1 mL 메탄올 중에 용해시키고, CO2 중 14% MeOH로 용리하는 분취 ChiralCel ODAD 컬럼 (10 Х 250 mm, 5 μm 입자)을 통한 70 μL 주입을 사용하는 분취 키랄 SFC로 통과시켜, 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
첫 번째로 용리한 거울상이성질체는 (12R)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민 (거울상이성질체 1)로서 단리되었다(4.2 mg, 56%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.43 (s, 1H), 3.99 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.82 (ddd, J = 11.9, 8.1, 3.0 Hz, 1H), 3.61 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.55 (bs, 2H), 3.43 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 2.55 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 2.39 (q, J = 12.6 Hz, 1H), 2.17 (dtd, J = 12.3, 6.3, 3.5 Hz, 1H), 1.98 (ddt, J = 9.8, 6.8, 3.5 Hz, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 1H), 1.57 (m, J = 28.4, 17.2, 6.4 Hz, 7H), 0.89 (q, J = 9.9, 9.2 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 449.16504, 확인된 값 450.1 (M+1)+; 머무름 시간: 10.21분 (LC 방법 P).
두 번째로 용리한 거울상이성질체는 (12R)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민 (거울상이성질체 2)로서 단리되었다(5.0 mg, 65%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.42 (s, 1H), 4.16 (q, J = 8.7, 8.2 Hz, 1H), 4.00 (td, J = 8.4, 4.4 Hz, 1H), 3.63 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 3.40 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 2.78 (bs, 2H), 2.45 - 2.37 (m, 1H), 2.23-2.1 (m, 3H), 2.03 - 1.92 (m, 1H), 1.86 - 1.72 (m, 3H), 1.71 - 1.57 (m, 2H), 1.52-1.45 (m, 3H), 1.04 - 0.98 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 449.16504, 확인된 값 450.1 (M+1)+; 머무름 시간: 10.03분 (LC 방법 P).
실시예 9: (6 R, 12 R )-20-(메틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 13)의 제조
단계 1: (6 R, 12 R )-20-(메틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 13)
DMF(0.6 mL) 중 (6R,12R)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (30 mg, 0.06446 mmol)의 용액에 [비스(트리메틸실릴)아미노]나트륨(142 μL of 1 M, 0.142 mmol) 및 이에 이어서 THF 중 요오드메탄(1 M의 71 μL, 0.071 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 에테르로 희석하고 수성 1 M NH4Cl로 세척하였다. 유기층을 건조시키고(MgSO4), 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 10%에서 35%까지의 EtOAc/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여, (6R,12R)-20-(메틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올을 오렌지색 고형분으로서 수득하였다(13.3 mg, 43%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.31 (q, J = 5.4 Hz, 1H), 3.91 (q, J = 8.3 Hz, 1H), 3.54 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 3.32 - 3.24 (m, 1H), 2.97 (d, J = 4.9 Hz, 3H), 2.29 (t, J = 13.0 Hz, 1H), 2.14 (s, 1H), 2.02 - 1.89 (m, 3H), 1.85 - 1.68 (m, 1H), 1.51 (d, J = 24.3 Hz, 7H), 0.84 (d, J = 12.2 Hz, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -55.43, -79.24 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.94분 (LC 방법 Q).
실시예 10: (6 R, 12 R )-20-(에틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 14)의 제조
단계 1: (6 R, 12 R )-20-(에틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 14)
DMF(0.6 mL) 중 (6R,12R)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (30 mg, 0.06446 mmol)의 용액에 [비스(트리메틸실릴)아미노]나트륨(142 μL of 1 M, 0.142 mmol) 및 이에 이어서 THF 중 브로모에탄(1 M의 71 μL, 0.071 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 에테르로 희석하고 수성 1 M NH4Cl로 세척한 다음, 유기층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 10%에서 35%까지의 EtOAc/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여, (6R12R)-20-(에틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올을 오렌지색 고형분으로서 수득하였다(18.4 mg, 58%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.23 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 3.98 - 3.85 (m, 1H), 3.54 (q, J = 8.6 Hz, 1H), 3.37 (m, 3H), 2.29 (t, J = 13.7 Hz, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.03 - 1.88 (m, 2H), 1.83 - 1.70 (m, 1H), 1.65 - 1.36 (m, 8H), 1.22 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 0.84 (s, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -55.40, -79.25 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 493.19125, 확인된 값 494.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.03분 (LC 방법 Q).
실시예 11: (6 S, 12 R )-20-(메틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 15)의 제조
단계 1: (6 S, 12 R )-20-(메틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 15)
DMF(0.6 mL) 중 (6S12R)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (30 mg, 0.06446 mmol)의 용액에 [비스(트리메틸실릴)아미노]나트륨(142 μL of 1 M, 0.142 mmol) 및 이에 이어서 THF 중 요오드메탄(1 M의 71 μL, 0.071 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 에테르로 희석하고 수성 1 M NH4Cl로 세척한 다음, 유기층을 건조시키고(MgSO4), 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 10%에서 35%까지의 EtOAc/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여, (6S12R)-20-(메틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올을 황색 고형분으로서 수득하였다(15.5 mg, 50%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.33 (q, J = 5.0 Hz, 1H), 4.03 (q, J = 7.3, 6.8 Hz, 1H), 3.55 (q, J = 8.6 Hz, 1H), 3.31 - 3.22 (m, 1H), 2.97 (d, J = 4.9 Hz, 3H), 2.44 - 2.25 (m, 1H), 2.17 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 2.05 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 1.93 (s, 1H), 1.82 - 1.62 (m, 4H), 1.49 (ddd, J = 34.0, 18.0, 7.7 Hz, 5H), 0.97 - 0.83 (m, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -55.57, -76.40 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 Q).
실시예 12: (6 S, 12 R )-20-(에틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 16)의 제조
단계 1: (6 S, 12 R )-20-(에틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 16)
DMF(0.6 mL) 중 (6S12R)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(30 mg, 0.06446 mmol)의 용액에 [비스(트리메틸실릴)아미노]나트륨(142 μL of 1 M, 0.142 mmol) 및 이에 이어서 THF 중 브로모에탄(1 M의 71 μL, 0.071 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 에테르 및 수성 1 M NH4Cl로 희석하였다. 층을 분리하고, 유기층을 건조시키고(MgSO4), 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 10%에서 35%까지의 EtOAc/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여, (6S12R)-20-(에틸아미노)-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올을 황색 고형분으로서 수득하였다(16.6 mg, 52%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 7.55 (s, 2H), 6.24 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.03 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 3.55 (q, J = 9.0, 8.5 Hz, 1H), 3.21-3.40 (m, 3H), 2.44 - 2.26 (m, 1H), 2.18 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 2.03 (td, J = 13.8, 12.6, 7.4 Hz, 1H), 1.94 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 1.72 (dq, J = 21.7, 13.1, 11.4 Hz, 3H), 1.47 (ddt, J = 41.4, 15.4, 9.5 Hz, 6H), 1.24 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.91 (td, J = 11.8, 6.0 Hz, 1H). 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6) d -55.55, -76.42. ESI-MS m/z 계산된 값 493.19125, 확인된 값 494.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.02분 (LC 방법 Q).
실시예 13: 19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체 쌍 1)(화합물 17) 및 19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체 쌍 2)(화합물 18)의 제조
단계 1: 메틸 3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)피리딘-2-카르복실레이트
250-mL 밀봉된 용기 내에서, 2-비닐피롤리딘(879 mg, 9.047 mmol), DIEA(4.75 mL, 27.27 mmol) 및 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(2.5 g, 5.007 mmol)를 아세토니트릴(28 mL) 중에 합치고, 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g; 구배: 100% 헥산 내지 50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)피리딘-2-카르복실레이트를 황갈색 고형분으로서 수득하였다(1.93 g, 75%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.04 (s, 1H), 5.74 (ddd, J = 16.7, 10.3, 6.1 Hz, 1H), 5.16 - 5.06 (m, 1H), 5.03 - 4.90 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.65 (p, J = 8.6 Hz, 1H), 3.43 (t, J = 8.3 Hz, 1H), 2.14 (dq, J = 11.9, 6.5 Hz, 1H), 2.02 - 1.92 (m, 1H), 1.90 - 1.78 (m, 1H), 1.71 (ddt, J = 11.9, 9.2, 7.0 Hz, 1H), 1.35 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.2243, 확인된 값 516.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.79분 (LC 방법 J).
단계 2: 3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)피리딘-2-카르복시산
THF(20 mL), 메탄올(19 mL) 및 물(15 mL) 중 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)피리딘-2-카르복실레이트(1.93 g, 3.744 mmol)의 용액에 무수 수산화 리튬(350 mg, 14.32 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반하였다. THF 및 메탄올을 증발시켜 제거한 다음, 30 mL의 10% 수성 HCl을 첨가하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 100% 헥산 내지 80% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)피리딘-2-카르복시산을 황색 고형분으로서 수득하였다(1.35 g, 90%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.46 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 5.71 (ddd, J = 16.9, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.18 (ddd, J = 17.1, 2.1, 1.1 Hz, 1H), 5.00 - 4.88 (m, 2H), 3.61 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 3.29 (s, 1H), 2.12 (dtd, J = 11.2, 6.5, 3.7 Hz, 1H), 1.93 (dtd, J = 13.3, 6.7, 3.2 Hz, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.73 - 1.62 (m, 1H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 401.15625, 확인된 값 402.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.72분 (LC 방법 A).
단계 3: 터트 -부틸 N -[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)-3-피리딜]카르바메이트
NMP(16.5 mL) 중 3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)피리딘-2-카르복시산(1.3 g, 3.239 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)(1.10 g, 3.247 mmol) 및 DIEA(2.25 mL, 12.92 mmol) 를 첨가하고, 이어서 HATU (1.7 g, 4.471 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸로 희석하고 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 100% 헥산 내지 70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(1.75 g, 79%). ESI-MS m/z 계산된 값 685.2699, 확인된 값 686.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.3분 (LC 방법 J).
단계 4: 터트 -부틸 N -[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)-3-피리딜]카르바메이트
아세토니트릴(40 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)-3-피리딜]카르바메이트(1.75 g, 2.552 mmol) 및 DIEA(1.55 mL, 8.899 mmol)의 용액을 50℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(760 mg, 3.986 mmol)를 3회에 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(50 mL)으로 퀀칭시키고, 아세트산 에틸로 추출하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 100% 헥산 내지 50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 잔류물로서 수득하였다(1.69 g, 99%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.45 - 7.31 (m, 5H), 5.86 (m, J = 19.1, 16.7, 10.1, 6.4 Hz, 1H), 5.64 (m, J = 17.1, 10.2, 6.9, 5.0 Hz, 1H), 5.22 - 5.12 (m, 1H), 5.12 - 4.94 (m, 2H), 4.90 (dddd, J = 19.0, 10.2, 1.9, 0.8 Hz, 1H), 4.83 - 4.70 (m, 2H), 4.65 (dd, J = 11.0, 6.9 Hz, 1H), 3.65 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 3.39 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 2.57 (m, J = 15.7, 10.8, 5.7 Hz, 1H), 2.48 - 2.37 (m, 1H), 2.35 - 2.20 (m, 2H), 2.10 (dt, J = 11.6, 5.8 Hz, 1H), 2.03 - 1.93 (m, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.75 - 1.65 (m, 1H), 1.46 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 667.25934, 확인된 값 668.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.23분 (LC 방법 M).
단계 5: 터트 -부틸 N -[6-(벤질옥시)-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,9,16,18-헥사엔-19-일]카르바메이트 ( E / Z 혼합물)
150 mL 둥근 바닥 플라스크 중에서, DCE(400 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-6-(2-비닐피롤리딘-1-일)-3-피리딜]카르바메이트(1.67 g, 2.501 mmol)의 탈기된 용액을 질소 분위기 하 50℃로 가열하였다. 이어서, Zhan 촉매-1B(300 mg, 0.4089 mmol)를 10분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열한 다음, 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. Zhan 촉매-1B(300 mg, 0.4089 mmol)를 추가로 첨가하고, 85°C에서 추가로 18시간 동안 가열하여 반응을 완료하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 C18 컬럼 및 50%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(개질제로서 5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 분취 크로마토그래피로 15분 동안 정제하여, 터트-부틸 N-[6-(벤질옥시)-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,9,16,18-헥사엔-19-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물) 을 황색 잔류물로서 수득하였다(45 mg, 3%). ESI-MS m/z 계산된 값 639.228, 확인된 값 640.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 M).
단계 6: 터트 -부틸 N -[6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 1) 및 터트 -부틸 N -[6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 2)
AcOH (2.5 mL) 중 터트-부틸 N-[6-(벤질옥시)-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,9,16,18-헥사엔-19-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(45 mg, 0.07036 mmol)의 용액에 Pd/C(10% w/w의 9.1 mg, 0.008551 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 Parr 진탕기에 넣고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 60 psi로 가압하였다. 혼합물을 17시간 동안 진탕시켰다. 해당 시간이 경과한 후, 반응기를 감압하고, 반응물을 여과하고 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 C18 컬럼 및 30%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(개질제로서 5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 분취 크로마토그래피로 15분 동안 정제하여, 2개의 부분 입체이성질체 쌍을 황색 잔류물로서 수득하였다:
첫 번째로 용리한 부분 입체이성질체 쌍을 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (부분 입체이성질체 쌍 1)로서 단리하였다(15 mg, 77%). ESI-MS m/z 계산된 값 551.1967, 확인된 값 552.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.88분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리한 부분 입체이성질체 쌍을 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (부분 입체이성질체 쌍 2)로서 단리하였다(16 mg, 82%). ESI-MS m/z 계산된 값 551.1967, 확인된 값 552.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.95분 (LC 방법 J).
단계 7: 19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)(화합물 17)
터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (부분 입체이성질체 쌍 1)(15 mg, 0.0272 mmol)를 DCM(250 μL) 중에 용해시키고, 혼합물에 TFA(50 μL, 0.649 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 증발 건조시킨 다음, 에테르로 희석하고 재농축시켰다. 이어서, 잔류물을 C18 컬럼 및 10%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 분취 크로마토그래피로 30분에 걸쳐 정제하여, 19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)을 황색 고형분으로서 수득하였다(1.4 mg, 11%). ESI-MS m/z 계산된 값 451.1443, 확인된 값 452.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 A).
단계 8: 19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)(화합물 18)
터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (부분 입체이성질체 쌍 2)(16 mg, 0.02901 mmol)을 DCM(250 μL) 중에 용해시키고 혼합물에 TFA(50 μL, 0.649 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 잔류물을 C18 컬럼 및 30%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 분취 크로마토그래피로 15분에 걸쳐 정제하여, 19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)을 황색 고형분으로서 수득하였다(2.7 mg, 21%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.57 (s, 1H), 4.10 (s, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.47 (s, 1H), 2.42 - 2.31 (m, 1H), 2.23 (s, 1H), 2.20 - 2.08 (m, 3H), 2.01 (q, J = 5.9 Hz, 1H), 1.90 - 1.82 (m, 1H), 1.76 - 1.63 (m, 3H), 1.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 1.30 - 1.15 (m, 1H) ppm. 2개의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 451.1443, 확인된 값 452.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.01분 (LC 방법 A).
실시예 14: 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(화합물 19) 및 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(화합물 20)의 제조
단계 1: 메틸 3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
5 mL의 밀봉된 마이크로웨이브 바이얼에서, N-메틸부트-3-엔-1-아민 (염산염)(375 mg, 3.084 mmol), DIEA (2.001 mL, 11.49 mmol) 및 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.0 g, 2.003 mmol)를 아세토니트릴(15 mL) 중에 합치고, 혼합물을 70ºC로 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 황색 오일로서 수득하였다(565 mg, 56%). ESI-MS m/z 계산된 값 503.22433, 확인된 값 504.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.73분 (LC 방법 J).
단계 2: 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF (3.6 mL) 중 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(360 mg, 0.715 mmol)의 용액에 메탄올(3.6 mL) 및 물(1.8 mL)을 첨가하였다. 무수 수산화 리튬(327.8 mg, 13.69 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60ºC에서 1시간 동안 가열하였다. THF 및 메탄올을 감압 하에 제거하였다. 용액이 산성이 될 때까지 수성 1 M HCl 용액을 첨가한 다음, 아세트산 에틸(3 X 75 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(75 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜, 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산을 황색 고형분으로서 수득하였다(270 mg, 97%). ESI-MS m/z 계산된 값 389.15625, 확인된 값 390.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.7분 (LC 방법 R).
단계 3: 터트 -부틸 N -[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
NMP (5.5 mL) 중 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(415 mg, 1.066 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(325 mg, 1.075 mmol) 및 DIEA(750 μL, 4.306 mmol)를 첨가한 다음, HATU(560 mg, 1.473 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸로 희석하고 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 발포체로서 수득하였다(580 mg, 81%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.54 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 10.32 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 7.53 - 7.47 (m, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 5.92 - 5.81 (m, 1H), 5.81 - 5.70 (m, 1H), 5.12 - 5.00 (m, 3H), 4.95 (dd, J = 10.2, 2.0 Hz, 1H), 4.86 (t, J = 9.4 Hz, 2H), 3.36 (dd, J = 8.6, 6.1 Hz, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.33 - 2.28 (m, 2H), 2.26 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 2.19 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 673.2699, 확인된 값 674.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.23분 (LC 방법 J).
단계 4: 터트 -부틸 N -[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
아세토니트릴(14 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(575 mg, 0.8536 mmol) 및 DIEA(550 μL, 3.158 mmol)의 용액을 50ºC까지 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(255 mg, 1.338 mmol)를 3회에 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(50 mL)으로 퀀칭시키고, 아세트산 에틸로 추출하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 잔류물로서 수득하였다(540 mg, 97%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.59 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.38 - 7.30 (m, 3H), 5.89 - 5.68 (m, 2H), 5.13 - 4.92 (m, 4H), 4.73 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.47 - 3.36 (m, 2H), 2.95 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 2.44 (td, J = 14.6, 13.1, 6.8 Hz, 1H), 2.38 - 2.23 (m, 5H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 655.25934, 확인된 값 655.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.15분 (LC 방법 M).
단계 5: 터트 -부틸 N -[6-벤질옥시-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
DCE(130 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(540 mg, 0.8236 mmol)의 탈기된 용액에 Zhan 촉매-1B(91 mg, 0.124 mmol)를 질소 분위기 하 50ºC에서 10분에 걸쳐 2회에 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)을 황색 잔류물로서 수득하였다(395 mg, 76%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.09 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 4H), 5.67 - 5.56 (m, 1H), 5.43 (q, J = 8.3 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.45 - 3.33 (m, 2H), 3.10 - 3.02 (m, 3H), 2.62 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 2.45 (s, 2H), 2.24 (dt, J = 15.6, 6.5 Hz, 2H), 1.47 (d, J = 4.9 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 627.228, 확인된 값 628.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.94분 (LC 방법 M).
단계 6: 터트 -부틸 N -[6-하이드록시-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트
AcOH (22 mL) 중 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(390 mg, 0.6214 mmol)의 용액에 Pd/C(10% w/w의 67 mg, 0.06296 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 60 psi로 가압하였다. 혼합물을 Parr 진탕기에서 4시간 동안 진탕시켰다. 반응기를 감압하고, 추가의 0.2 당량 Pd/C(10% w/w의 134 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 Parr 진탕기에 다시 넣고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 55 psi로 가압하였다. 혼합물을 3시간 동안 진탕시켰다. 해당 시간이 경과한 후, 반응기를 감압하고, 추가의 0.7 당량 Pd/C(10% w/w의 465 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 Parr 진탕기에 다시 넣고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 45 psi로 가압하였다. 혼합물을 6시간 이상 진탕시켰다. 해당 시간이 경과한 후, 반응기를 감압하고 여과한 다음, 진공 하에서 농축시켰다. EtOAc(25 mL)를 AcOH(5 mL)와 함께 첨가한 다음, 질소 하에서 퍼징하고, 1.0 당량의 새로운 Pd/C(10% w/w의 665 mg, 0.6214 mmol) 를 첨가하였다. 혼합물을 Parr 진탕기에 넣고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 35 psi로 가압하였다. 혼합물을 3시간 이상 진탕시켰다. 해당 시간이 경과한 후, 반응기를 감압하고, 반응물을 여과하고 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 0%에서 30% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배)로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(209 mg, 62%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.10 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 3.44 (td, J = 14.1, 13.3, 4.3 Hz, 1H), 3.34 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 3.31 - 3.25 (m, 1H), 3.03 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 2.15 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 1.89 (dd, J = 12.1, 5.3 Hz, 1H), 1.72 - 1.65 (m, 1H), 1.65 - 1.55 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.46 - 1.35 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 539.1967, 확인된 값 540.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 J).
단계 7: 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
DCM(3.0 mL) 중 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트(185 mg, 0.3429 mmol)의 용액에 TFA(1.25 mL, 16.22 mmol)를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 잔류물을 C18 컬럼 및 1%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(+5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 HPLC로 15.0분에 걸쳐 정제하여, 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올을 황색 고형분으로서 수득하였다(130 mg, 86%). ESI-MS m/z 계산된 값 439.1443, 확인된 값 440.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.95분 (LC 방법 A).
단계 8: 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(화합물 19) 및 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(화합물 20)
라세미 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(130 mg, 0.2959 mmol)을. 유속 70.0 mL/분(주입 부피 500 μL)으로 12% 메탄올/88% CO2로 용리하는 Phenomenex LUX-4 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)를 사용하는 키랄 SFC로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
첫 번째로 용리되는 거울상이성질체, 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(45.0 mg, 69%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.59 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 4.97 (d, J = 36.3 Hz, 2H), 3.30 - 3.13 (m, 2H), 2.87 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.14 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.93 (dt, J = 12.6, 6.3 Hz, 1H), 1.72 - 1.65 (m, 1H), 1.55 (ddt, J = 37.4, 14.8, 7.4 Hz, 4H), 1.40 (td, J = 14.2, 12.9, 6.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1443, 확인된 값 440.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.03분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체, 17-아미노-13-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(44.9 mg, 68%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.60 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 51.0 Hz, 2H), 3.22 (dtd, J = 34.7, 13.0, 4.4 Hz, 2H), 2.87 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 2.14 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.94 (td, J = 12.1, 5.6 Hz, 1H), 1.73 - 1.65 (m, 1H), 1.55 (ddt, J = 37.4, 14.2, 7.3 Hz, 4H), 1.38 (dt, J = 14.6, 7.7 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1443, 확인된 값 440.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.03분 (LC 방법 A).
단계 9: 비정질 화합물 19(순수한 형태)의 고형분 형태의 특성 분석
A. X-선 분말 회절
일반적인 X-선 분말 회절(XRPD) 방법을 사용해 비정질 화합물 19(순수한 형태)에 대한 XRPD 회절도를 수득하였는데, 이는 도 4에 제공되어 있다.
B. 열중량 분석 (TGA)
비정질 화합물 19(순수한 형태)에 대한 TGA 곡선은 도 5에 제공되어 있다. TGA 곡선은 350.00℃까지 10.00℃/분의 속도로 온도가 증가할 때 약 40℃ 내지 198.6℃에서 5.71%의 중량이 손실되었음을 보여준다.
C. 시차주사 열량측정 분석
비정질 화합물 19 순수한 형태)에 대한 DSC 데이터는 다음의 방법을 사용하여 수집하였다:
25℃에서 200.00℃, 10℃/분,
200℃에서 -20℃, -50℃/분, 이어서
-20℃에서 150℃, 10℃/분.
비정질 화합물 19(순수한 형태)의 DSC 온도변화도는 도 6에 제공되어 있다. 온도 기록은 69.6℃에서의 Tg 중간점을 나타낸다.
실시예 15: (12 R )-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(화합물 21) 및 (12 R )-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(화합물 22)의 제조
단계 1: 에틸 2-옥소헥스-5-엔오에이트
질소 하 기계적으로 교반하는 2 L 플라스크 내 THF(290 mL) 중 옥살산 디에틸(58.5 g, 400.3 mmol)를 건조 얼음조에서 냉각시키고, 내부 온도를 -70℃로 유지하면서 브로모(부트-3-에닐)마그네슘(800 mL of 0.5 M, 400 mmol)을 1.5시간에 걸쳐 적가하였다. 생성된 백탁 크림 용액을 2시간동안 교반한 다음, 구연산(1 M의 400 mL, 400 mmol)을 첨가하여 퀀칭시키고 얼음조로부터 제거하고 0.5시간 동안 교반하였다. 상을 분리하고 유기상을 포화 NaHCO3(3 X 250 mL) 및 염수(2 X 250 mL)로 세척하였다. 수성상을 MeTHF(300 mL)로 한 번 역추출하고, 합쳐진 유기상을 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 0%~100% DCM/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피으로 정제하여, 에틸 2-옥소헥스-5-엔오에이트를 황색 액체로서 수득하였다(49 g, 78%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 5.82 (ddt, J = 16.8, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.07 (dq, J = 17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.02 (dq, J = 10.2, 1.4 Hz, 1H), 4.32 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.95 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.45 - 2.34 (m, 2H), 1.37 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm.
단계 2: 에틸 2-하이드록시헥스-5-엔오에이트
디클로로메탄(317.6 mL) 중 에틸 2-옥소헥스-5-엔오에이트(12.4 g, 79.4 mmol)의 용액에 나트륨 트리아세톡시보로히드라이드(33.66 g, 158.8 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물에 포화 수성 NaHCO3을 첨가하여 조심스럽게 퀀징시켰다. 생성된 층을 분리하고, 수성층을 DCM(2 x 150 mL)으로 추가로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켜, 에틸 2-하이드록시헥스-5-엔오에이트를 담황색 오일로서 수득하였다(12.2 g, 97%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.99 - 5.63 (m, 1H), 5.36 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.21 - 4.76 (m, 2H), 4.09 (qd, J = 7.1, 1.3 Hz, 2H), 3.99 (dt, J = 7.9, 4.9 Hz, 1H), 2.08 (tdd, J = 8.1, 6.6, 1.5 Hz, 2H), 1.82 - 1.49 (m, 2H), 1.19 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm.
단계 3: 에틸 2-벤질옥시헥스-5-엔오에이트
DMF(65.89 mL) 중 에틸 2-하이드록시헥스-5-엔오에이트(12.3 g, 77.75 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(60% w/w의 3.9 g, 97.51 mmol)을 0ºC에서 나누어 첨가하였다. 혼합물(크림 현탄액)을 0ºC에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물에 브로모메틸벤젠(11.61 mL, 97.61 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온까지 가온하고 18시간 동안 교반하였다. 반응물에 200 mL의 포화 수성 NH4Cl을 서서히 첨가하여 퀀칭시키소, 생성된 혼합물을 주변 온도에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 MTBE(415.2 mL)로 희석하고, 유기상을 분리하였다. 유기상을 물물(166.2 mL), 염수(50 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜, 에틸 2-벤질옥시헥스-5-엔오에이트를 오렌지색 오일로서 수득하였다(19 g, 98%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.39 - 7.27 (m, 5H), 6.01 - 5.50 (m, 1H), 5.05 - 4.91 (m, 2H), 4.65 - 4.34 (m, 2H), 4.14 (qd, J = 7.1, 3.6 Hz, 2H), 3.97 (dd, J = 7.2, 5.4 Hz, 1H), 2.10 (dtd, J = 8.0, 6.7, 1.4 Hz, 2H), 1.74 (dtd, J = 12.6, 7.1, 6.3, 3.1 Hz, 2H), 1.21 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. 머무름 시간: 0.75분 (LC 방법 S).
단계 4: 2-벤질옥시헥스-5-엔산
MeOH(112.6 mL) 및 THF (38.6 mL) 중 에틸 2-벤질옥시헥스-5-엔오에이트(19.3 g, 77.72 mmol)의 용액에 NaOH(2 M의 72.2 mL, 144.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 주변 온도에서 6시간 동안 교반하였다. 유기 용매를 진공 중에서 제거하고, 잔류물을 1 M NaOH(25 mL)로 희석하고 MTBE(2 X 300 mL)로 추출하였다. 유기상을 100 mL의 1 N NaOH로 역추출하고, 합쳐진 수성상을 10% 수성 HCl로 pH = 1까지 산성화시켰다. 수성상을 아세트산 에틸(2 X 150 mL)로 추출하고 유기상을 합치고, 염수(150 mL)로 세척하였다. 유기상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 진공 중에서 농축시켜, 2-벤질옥시헥스-5-엔산을 오렌지색 오일로서 수득하였다(13.5 g, 79%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.61 (s, 1H), 7.67 - 6.71 (m, 5H), 5.79 (ddt, J = 16.9, 10.2, 6.6 Hz, 1H), 5.07 - 4.81 (m, 2H), 4.49 (dd, J = 103.0, 11.7 Hz, 2H), 3.88 (dd, J = 7.8, 4.7 Hz, 1H), 2.18 - 2.04 (m, 2H), 1.75 (tqd, J = 14.9, 7.3, 2.9 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 220.10994, 확인된 값 221.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.57분 (LC 방법 S).
단계 5: 터트 -부틸 N -(2-벤질옥시헥스-5-엔오일아미노)카르바메이트
DMF(112.2 mL) 중 2-벤질옥시헥스-5-엔산(13.5 g, 61.29 mmol)의 용액에 HATU(30.71 g, 80.77 mmol) 및 DIEA(22.83 mL, 131.1 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 주변 온도에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물에 터트-부틸 N-아미노카르바메이트(8.424 g, 63.74 mmol)를 첨가하고(첨가 시 약간의 발열), 혼합물을 주변 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 희석하고 아세트산에틸(3 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(25 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고 진공 중에서 농축시켜, 오렌지색 오일을 수득하였다. 이어서, 미정제 물질을 0%에서 50%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 gram 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-(2-벤질옥시헥스-5-엔오일아미노)카르바메이트를 무색 오일로서 수득하였다(20 g, 76%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.71 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.52 - 7.11 (m, 5H), 5.91 - 5.69 (m, 1H), 5.06 - 4.88 (m, 2H), 4.48 (dd, J = 110.1, 11.7 Hz, 2H), 3.82 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 2.69 (s, 9H), 2.22 - 2.01 (m, 2H), 1.81 - 1.62 (m, 2H) ppm.
단계 6: 2- 벤질옥시헥스- 5-엔하이드라지드 (염산염)
디클로로메탄(2.962 mL) 중 터트-부틸 N-(2-벤질옥시헥스-5-엔오일아미노)카르바메이트(515 mg, 1.54 mmol)의 용액에 HCl(디옥산 중 4 M의 1.782 mL, 7.128 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 농축시키고, 디클로로메탄 및 헵탄과 공동 증발시켜, 2-벤질옥시헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)을 백색 고형분으로서 수득하였다(417 mg, 99%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.04 (s, 1H), 10.20 (s, 2H), 7.43 - 7.26 (m, 5H), 5.79 (ddt, J = 16.9, 10.3, 6.6 Hz, 1H), 5.12 - 4.76 (m, 2H), 4.49 (dd, J = 67.3, 11.7 Hz, 2H), 4.01 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 2.15 - 2.00 (m, 2H), 1.75 (td, J = 7.9, 6.0 Hz, 2H) ppm.
단계 7: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[(2-벤질옥시헥스-5-엔오일아미노)카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
NMP(44.87 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(3.5 g, 8.425 mmol)의 용액에 2-벤질옥시헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)(2.313 g, 8.543 mmol), DIEA(4.457 mL, 25.59 mmol) 및 HATU (4.475 g, 11.77 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(3 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 미정제 물질을 0%에서 70%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 gram 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[(2-벤질옥시헥스-5-엔오일아미노)카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(2.65 g, 50%). ESI-MS m/z 계산된 값 631.29816, 확인된 값 632.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.76분 (LC 방법 T).
단계 8: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(1-벤질옥시펜트-4-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-( 트리플루오로메틸 )-3-피리딜]카르바메이트
아세토니트릴(57.84 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[(2-벤질옥시헥스-5-엔오일아미노)카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(2.53 g, 4.005 mmol) 및 DIEA(2.425 mL, 13.92 mmol)의 용액을 50℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(840 mg, 4.406 mmol)를 2회에 나누어 첨가하였다. 혼합물을 70℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액(25 mL)으로 퀀칭시키고, 아세트산 에틸(3 X 25 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(1-벤질옥시펜트-4-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(1.75 g, 71%)를 반 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 613.2876, 확인된 값 614.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.9분 (LC 방법 T).
단계 9: 터트 -부틸 N -[(12 S )-6-( 벤질옥시 )-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
DCE(481.2 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(1-벤질옥시펜트-4-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(2.0 g, 3.259 mmol)의 탈기된 용액에 Zhan 촉매-1B(358.7 mg, 0.4889 mmol)를 질소 분위기 하 50℃에서 10분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 20시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g; 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[(12S)-6-(벤질옥시)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(110 mg, 6%)를 황색 잔류물로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 585.2563, 확인된 값 586.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.85분 (LC 방법 T).
단계 10: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (거울상이성질체 1) 및 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (거울상이성질체 2)
AcOH(5.4 mL) 중 터트-부틸 N-[(12S)-6-(벤질옥시)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(200 mg, 0.3415 mmol)의 용액에 Pd/C(10% w/w의 145.4 mg, 0.1366 mmol)를 첨가하였다. 수소 분위기 하에, Parr 진탕기를 사용해 45 psi에서 혼합물을 밤새 진탕하였다. 반응 혼합물을 실리카 플러그를 통해 여과하고, 아세트산 에틸로 웰을 세척한 다음, 여액을 농축시켜 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트를 황색 잔류물로서 수득하였다. 이 물질을 0%에서 10%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(24 g 컬럼)로 20분에 걸쳐 정제하여, 2개의 부분 입체이성질체로 분리하고, 이를 각각 단일 거울상이성질체로 단리하였다:
첫 번째로 용리되는 거울상이성질체, 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (거울상이성질체 1)(50 mg, 59%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.90 (s, 2H), 5.26 (dd, J = 8.8, 4.2 Hz, 1H), 4.22 (ddt, J = 9.8, 7.5, 3.9 Hz, 1H), 4.04 - 3.66 (m, 1H), 3.69 - 3.42 (m, 2H), 2.44 - 2.30 (m, 1H), 2.29 - 2.12 (m, 2H), 2.00 (tdd, J = 6.8, 4.5, 2.7 Hz, 2H), 1.92 - 1.73 (m, 2H), 1.71 - 1.57 (m, 3H), 1.54 (s, 9H), 1.46 (qt, J = 8.7, 3.8 Hz, 3H), 1.11 - 0.94 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 497.22498, 확인된 값 498.42 (M+1)+; 머무름 시간: 0.59분 (LC 방법 T).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체, 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (거울상이성질체 2)(30 mg, 35%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.95 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 5.05 (dd, J = 10.2, 3.4 Hz, 1H), 4.10 - 4.02 (m, 1H), 3.69 - 3.43 (m, 2H), 3.37 - 2.79 (m, 1H), 2.56 (dddd, J = 10.4, 8.4, 5.9, 2.3 Hz, 1H), 2.35 - 2.12 (m, 2H), 1.99 (ddt, J = 14.2, 6.5, 3.9 Hz, 2H), 1.86 - 1.45 (m, 17H), 1.05 - 0.90 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 497.22498, 확인된 값 498.42 (M+1)+; 머무름 시간: 0.6분 (LC 방법 T).
단계 11: (12 R )-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 21)
DCM(129.8 μL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (거울상이성질체 1)(7 mg, 0.01407 mmol)의 용액에 TFA(58.6 μL, 0.7606 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시킨 다음, DCM 중에서 취하고, 포화 수성 NaHCO3 용액으로 세척하였다. 유기층을 농축시켜, (12R)-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)를 황색 고형분으로서 수득하였다(4.1 mg, 73%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.16 (dd, J = 8.7, 4.2 Hz, 1H), 4.20 - 4.03 (m, 1H), 3.61 - 3.50 (m, 1H), 3.38 - 3.28 (m, 1H), 2.27 (ddt, J = 9.8, 5.1, 2.6 Hz, 1H), 2.22 - 2.09 (m, 2H), 1.90 (dqd, J = 16.7, 7.1, 6.7, 3.5 Hz, 2H), 1.83 - 1.66 (m, 2H), 1.64 - 1.46 (m, 4H), 1.45 - 1.29 (m, 4H), 0.93 (ddt, J = 17.2, 11.2, 5.5 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 397.17255, 확인된 값 398.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.31분 (LC 방법 T).
단계 12: (12 R )-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 22)
DCM(129.8 μL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (거울상이성질체 2)(7 mg, 0.01407 mmol)의 용액에 TFA(58.6 μL, 0.7606 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시킨 다음, 디클로로메탄 중에서 취하고, 포화 수성 NaHCO3 용액으로 세척하였다. 유기층을 농축시켜, (12R)-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)를 황색 고형분으로서 수득하였다(3.0 mg, 54%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.19 (s, 1H), 4.97 (dd, J = 10.2, 3.4 Hz, 1H), 3.96 (dd, J = 7.8, 2.2 Hz, 1H), 3.66 - 3.46 (m, 1H), 3.42 - 3.26 (m, 1H), 2.58 - 2.39 (m, 1H), 2.26 - 2.03 (m, 2H), 1.91 (ddt, J = 14.1, 6.5, 3.3 Hz, 2H), 1.79 - 1.31 (m, 8H), 0.90 - 0.67 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 397.17255, 확인된 값 398.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.31분 (LC 방법 T).
실시예 16: 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 23), 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 24), 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 25), 및 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 26)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(2-부트-3-에닐피롤리딘-1-일)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DMSO(2 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(250.3 mg, 0.3331 mmol)의 용액에 2-부트-3-에닐피롤리딘(74 mg, 0.591 mmol) 및 Cs2CO3(342 mg, 1.05 mmol)를 마이크로웨이브 바이얼 중에서 첨가하였다. 반응물을 마이크로웨이브 조사 하 120℃에서 30분 동안 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 아세트산 에틸로 희석하고, 포화 염화암모늄 용액으로 세척한 다음 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 0%에서 30%까지의 EtOAc/헥산의 얕은 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(2-부트-3-에닐피롤리딘-1-일)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 무색 시럽으로서 수득하였다(174 mg, 66%). ESI-MS m/z 계산된 값 695.29065, 확인된 값 696.37 (M+1)+; 머무름 시간: 1.51분 (LC 방법 U). 소량의 생성물은 제2 N-Boc 보호기를 여전히 함유하고 있었지만, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: 터트 -부틸 N -[6-(벤질옥시)-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,9,18,20-헥사엔-21-일]카르바메이트 ( E / Z 혼합물)
DCE(50 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(2-부트-3-에닐피롤리딘-1-일)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(170 mg, 0.2444 mmol)(비스-N-Boc 보호기를 포함하는 일부 시작 물질로 오염됨, 이전 단계 참조)의 탈기된 용액에 Zhan 촉매-1B(47 mg, 0.05848 mmol)를 첨가하고, 반응물을 70℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 혼합물을 1:4 EtOAc/헥산과 혼합하고 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 농축시키고, 생성된 갈색 잔류물을 0%에서 30%까지의 EtOAc/헥산의 얕은 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-(벤질옥시)-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,9,18,20-헥사엔-21-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다(87 mg, 53%). ESI-MS m/z 계산된 값 667.25934, 확인된 값 668.38 (M+1)+; 머무름 시간: 2.37분 (LC 방법 M).
단계 3: 터트 -부틸 N -[6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-21-일]카르바메이트
AcOH(5 mL) 중 터트-부틸 N-[6-(벤질옥시)-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,9,18,20-헥사엔-21-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(68 mg, 0.1019 mmol)의 용액에 Pd/C(10% w/w의 62 mg, 0.05826 mmol, 50% 물)를 첨가하였다. 플라스크를 수소 Parr 진탕기 상에 두고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 50 psi로 가압하고, 2일 동안 진탕하였다. 플라스크를 감압시키고, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 0%에서 100%까지의 EtOAc/헥산의 얕은 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-21-일]카르바메이트를 수득하였다(38 mg, 64%). ESI-MS m/z 계산된 값 579.228, 확인된 값 580.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.86분 (LC 방법 R).
단계 4: 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올
TFA(250 μL, 3.245 mmol) 및 디클로로메탄(750 μL)의 사전 제조 용액 중 터트-부틸 N-[6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-21-일]카르바메이트(38 mg, 0.06557 mmol)를 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 증발로 제거한 다음, 1 mL의 DMSO 중에서 희석하고, 40%에서 80%까지의 아세토니트릴/물(+5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 HPLC로 30분에 걸쳐 정제하여, 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올을 황색 고형분으로서 수득하였다(28 mg, 83%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.48 - 7.35 (m, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.16 (dt, J = 43.9, 7.8 Hz, 1H), 3.54 (q, J = 8.9 Hz, 2H), 3.14 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 2.38 - 2.25 (m, 1H), 2.16 (dd, J = 14.6, 8.1 Hz, 1H), 1.97 (dd, J = 8.8, 4.3 Hz, 1H), 1.94 - 1.79 (m, 2H) , 1.73 (q, J = 9.8, 8.8 Hz, 1H), 1.61 (s, 1H), 1.52 - 1.26 (m, 5H), 1.23 - 1.11 (m, 2H), 1.07 - 0.92 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.69분 (LC 방법 R).
단계 5: 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 23), 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 24), 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 25), 및 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 26)
21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올(48.01 mg, 0.09306 mmol)의 혼합물을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기), 및 10%에서 90% 까지의 이동상 B(이동상 A = CO2, 이동상 B = 메탄올(개질제 없음), 10 mL/분의 유속, 주입 부피 70 νL)를 사용하는 일반상 SFC로 정제하였다. 이들 조건을 통해 아래에 기술된 것과 같은 4개의 거울상이성질체 생성물을 생산하였다:
처음 용리한 거울상이성질체, 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)을 황색 고형분으로서 수득하였다(4.8 mg, 43%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.41 (s, 2H), 4.20 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.54 (q, J = 8.3 Hz, 1H), 3.12 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 2.11 (dt, J = 13.7, 8.1 Hz, 1H), 1.95 - 1.70 (m, 3H), 1.61 (d, J = 10.6 Hz, 2H), 1.51 - 1.29 (m, 4H), 1.27 - 1.12 (m, 3H), 0.95 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.87분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리한 거울상이성질체, 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)을 황색 고형분으로서 수득하였다(4.3 mg, 39%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.41 (s, 2H), 4.21 (q, J = 8.3 Hz, 1H), 3.54 (q, J = 8.4 Hz, 1H), 3.12 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 2.29 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 2.22 - 2.15 (m, 1H), 2.11 (dt, J = 14.8, 8.0 Hz, 1H), 1.94 - 1.80 (m, 2H), 1.79 - 1.70 (m, 1H), 1.61 (d, J = 9.3 Hz, 2H), 1.52 - 1.28 (m, 4H), 1.19 (q, J = 7.9, 6.7 Hz, 3H), 0.95 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.87분 (LC 방법 J).
세 번째로 용리한 거울상이성질체, 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올(거울상이성질체 3)을 황색 고형분으로서 수득하였다(9.4 mg, 84%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.39 (s, 2H), 4.09 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 3.54 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 3.21 - 3.08 (m, 1H), 2.31 (dt, J = 15.0, 7.1 Hz, 1H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 1.97 (t, J = 10.8 Hz, 2H), 1.88 (dt, J = 8.3, 4.8 Hz, 2H), 1.72 (h, J = 10.5, 9.6 Hz, 1H), 1.58 - 1.50 (m, 1H), 1.47 (dt, J = 10.7, 5.3 Hz, 2H), 1.42 (s, 3H), 1.15 (d, J = 15.9 Hz, 2H), 0.99 (dq, J = 12.0, 6.3 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.87분 (LC 방법 J).
네 번째로 용리한 거울상이성질체, 21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-23-옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.013,17]트리코사-1(22),2,4,18,20-펜타엔-6-올(거울상이성질체 4)을 황색 고형분으로서 수득하였다(9.4 mg, 84%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.40 (s, 2H), 4.10 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.54 (q, J = 8.4 Hz, 1H), 3.15 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 2.31 (dt, J = 14.9, 7.2 Hz, 1H), 2.16 (dd, J = 11.7, 6.7 Hz, 1H), 1.97 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 1.88 (dt, J = 8.4, 4.3 Hz, 2H), 1.80 - 1.65 (m, 1H), 1.54 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 1.46 (dt, J = 11.9, 6.2 Hz, 2H), 1.34 (ddt, J = 33.8, 12.9, 6.5 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 16.0 Hz, 2H), 1.02 - 0.94 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.85분 (LC 방법 J).
실시예 17: 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 27), 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 28), 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 29), 및 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 30)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 2-(하이드록시메틸)-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트
테트라하이드로푸란(40 mL) 중 (4,4-디메틸피롤리딘-2-일)메탄올(3 g, 23.22 mmol)의 용액에 트리에틸아민(7.1148 g, 9.8 mL, 70.311 mmol)을 첨가한 다음, 디-터트-부틸 디카르보네이트(6 g, 27.492 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 진공 중에서 농축시켰다. 잔류물을 아세트산 에틸(150 mL) 중에 용해시킨 다음, 혼합물을 1 N HCl(150 mL), 염수(150 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 2-(하이드록시메틸)-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트를 투명한 오일로서 수득하였다(4.95 g, 92%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 4.08 - 3.94 (m, 1H), 3.71 - 3.51 (m, 2H), 3.32 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.97 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 1.92 - 1.69 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.38 - 1.22 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 1.01 (s, 3H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다.
단계 2: 터트 -부틸 2-(요오드메틸)-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트
2-메틸 테트라하이드로푸란(75 mL) 중 이미다졸(2.9 g, 42.599 mmol) 및 트리페닐포스핀(6.2 g, 23.638 mmol)의 용액에 요오드(6.5 g, 25.61 mmol)를 0ºC에서 30분에 걸쳐 나누어 첨가하였다. 반응 온도를 < 6ºC로 유지하면, 혼합물은 짙은 오렌지색 태피가 되었고 교반시 옅은 황색 및 과립형이 되었다. 혼합물을 실온까지 가온하고, 2-메틸 테트라하이드로푸란(25 mL) 중 터트-부틸 2-(하이드록시메틸)-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트(4.9 g, 21.368 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하여 연황색 슬러리를 수득하였다. 셀라이트로 슬러리를 여과하고, 디에틸 에테르(75 mL)로 세척하고, 여액을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 20%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 2-(요오드메틸)-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트를 연황색 오일로서 수득하였다(6.7 g, 92%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 3.85 - 3.68 (m, 1H), 3.68 - 3.27 (m, 3H), 3.05 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.05 - 1.83 (m, 1H), 1.59 - 1.44 (m, 10H), 1.11 (s, 3H), 1.00 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 339.0695, 확인된 값 284.1 (M-55)+; 머무름 시간: 2.29분 (LC 방법 E).
단계 3: 터트 -부틸 2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트
탈기된 2-메틸 테트라하이드로푸란(56 mL) 중 요오드화 구리(4.8 g, 25.203 mmol)의 현탄액을 -50℃로 냉각시키고, 반응 온도를 < -40ºC로 유지하면서, 테트라하이드로푸란 중 비닐 마그네슘 브로마이드(1 M의 50 mL, 50 mmol)를 적가하였다. 첨가(20분)에 이어서, 짙은 현탄액을 30분 동안 교반하여 온도를 -10ºC로 승온시키면, 이 시점에서 이는 묽은 흑색 현탄액이 된다. 흑색 현탄액을 -60ºC로 냉각시키고, 반응 온도를 < -50ºC로 유지하면서, 2-메틸 테트라하이드로푸란(14 mL) 중 터트-부틸 2-(요오드메틸)-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트(5.6 g, 16.509 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하여 반응 온도를 -15℃로 상승시켰다. 반응물을 포화 염화암모늄(25 mL)으로 퀀칭시키고, 유기상을 분리하고 포화 염화암모늄(75 mL)으로 세척하였다. 수성상을 디에틸 에테르(75 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 생성된 옅은 오렌지색 오일을 0%에서 20%까지의 디클로로메탄/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(80 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트를 연황색 오일로서 수득하였다(1.6 g, 40%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 5.84 - 5.59 (m, 1H), 5.14 - 4.98 (m, 2H), 4.01 - 3.73 (m, 1H), 3.51 - 3.19 (m, 1H), 2.90 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.79 - 2.45 (m, 1H), 2.36 - 2.15 (m, 1H), 1.76 (ddd, J = 12.6, 7.3, 1.8 Hz, 1H), 1.51 - 1.44 (m, 10H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H) ppm.
단계 4: 2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)
트리플루오로아세트산(13.320 g, 9 mL, 116.82 mmol)을 냉각조 내의 디클로로메탄(15 mL) 중 터트-부틸 2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-카르복실레이트 (2.35 g, 9.8181 mmol)의 용액에 -20℃에서 15분에 걸쳐 첨가하였다. 약간의 발열이 발생하였으며, 최고 온도는 -10℃에 도달하였다. 냉각조를 제거하고, 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 용매를 진공 하에서 제거하였다. 잔류물을 진공 하에서 밤새 건조시겨, 2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)을 어두운 오일로서 수득하였다(3.4 g, 94). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 9.13 (br. s., 1H), 8.16 (br. s., 1H), 5.81 - 5.62 (m, 1H), 5.32 - 5.08 (m, 2H), 3.93 - 3.77 (m, 1H), 3.08 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.64 - 2.38 (m, 2H), 2.09 - 1.86 (m, 1H), 1.74 - 1.53 (m, 1H), 1.22 (s, 3H), 1.19 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -75.94 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 139.1361, 확인된 값 140.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.69분 (LC 방법 C).
단계 5: 터트 -부틸 N -[6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DMSO(5 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(1 0 g, 1.331 mmol)의 용액에 탄산 세슘(2.2 g, 6.752 mmol) 및 2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)(685 mg, 2.705 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 마이크로웨이브 반응기에서 100℃로 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 분쇄된 얼음 상에 붓고, 얼음이 녹은 후 물을 따라내고, 생성된 반죽같은 물질을 아세트산 에틸에 용해시키고, 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 수득하였다(654 mg, 69%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.46 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.40 (dt, J = 7.6, 1.8 Hz, 2H), 7.38 - 7.30 (m, 3H), 5.84 (dddt, J = 19.6, 16.7, 10.1, 6.4 Hz, 1H), 5.75 - 5.61 (m, 1H), 5.15 - 4.89 (m, 4H), 4.78 - 4.61 (m, 2H), 4.54 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.35 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.03 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 2.49 - 2.39 (m, 3H), 2.38 - 2.18 (m, 3H), 1.79 (dd, J = 12.2, 6.6 Hz, 1H), 1.55 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.12 (s, 3H), 0.85 (d, J = 2.2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 709.3063, 확인된 값 710.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.36분 (LC 방법 M). 소량의 생성물은 제2 N-Boc 보호기를 여전히 함유하고 있었지만, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 6: 터트 -부틸 N -[6-(벤질옥시)-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트 ( E / Z 혼합물)
DCE(200 mL) 중 터트-부틸 N-[6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(650 mg, 0.9159 mmol)(비스-N-Boc 보호기를 포함하는 일부 시작 물질로 오염됨, 이전 단계 참조)의 탈기된 용액에 Zhan 촉매-1B(192 mg, 0.2389 mmol)를 첨가하고, 반응물을 70℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축시켰다. 혼합물을 1:4 EtOAc/헥산과 혼합하고 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 농축시키고, 생성된 갈색 잔류물을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헥산의 얕은 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-(벤질옥시)-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다(420 mg, 67%). ESI-MS m/z 계산된 값 681.27496, 확인된 값 682.5 (M+1)+; 머무름 시간: 2.18분 (LC 방법 M). 소량의 생성물은 제2 N-Boc 보호기를 여전히 함유하고 있었지만, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 7: 터트 -부틸 N -[6-하이드록시-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
AcOH(5 mL) 중 터트-부틸 N-[6-(벤질옥시)-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(420 mg, 0.6161 mmol)(비스-N-Boc 보호기를 포함하는 일부 시작 물질로 오염됨, 이전 단계 참조)의 용액에 Pd/C(10% w/w의 174 mg, 0.1635 mmol, 50% 물 함유)를 첨가하였다. 플라스크를 수소 Parr 진탕기 상에 두고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 40 psi로 가압하고, 밤새 진탕하였다. 플라스크를 감압하고 추가의 Pd/C(182 mg, 0.171 mmol, 10% w/w, 50% 물 함유) 및 몇 방울의 1 M HCl을 첨가하였다. 혼합물을 수소 Parr 진탕기에 넣고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 60 psi로 가압하고, 밤새 진탕하였다. 플라스크를 감압시키고, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헥산의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-하이드록시-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(170 mg, 46%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 593.24365, 확인된 값 594.36 (M+1)+; 머무름 시간: 1.92분 (LC 방법 M).
이 정제 단계에서, 비스-N-Boc 생성물인 터트-부틸 N-[(터트-부톡시)카르보닐]-N-[6-하이드록시-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(84 mg, 20%)도 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 693.2961, 확인된 값 694.34 (M+1)+; 머무름 시간: 1.74분 (LC 방법 M).
단계 8: 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1) 및 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)
터트-부틸 N-[6-하이드록시-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(170 mg, 0.2864 mmol)를 사전에 제조된 TFA(200 μL, 2.596 mmol) 및 디클로로메탄(800 μL) 용액 중에 용해시키고 실온에서 약 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 별도로, 사전에 제조된 TFA(200 μL, 2.596 mmol) 및 디클로로메탄(800 μL) 중 터트-부틸 N-[(터트-부톡시)카르보닐]-N-[6-하이드록시-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(84 mg, 0.1211 mmol)를 실온에서 약 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 용매를 감압 하에 제거하였다. 2개의 반응물로부터 수득된 미정제 생성물을 합치고, 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 85%에서 90%까지의 아세토니트릴/물(+5 mM HCl) 이중 구배 실행을 사용하는 역상 HPLC로 30분에 걸쳐 정제하여 2개의 별도의 부분 입체이성질체 쌍을 수득하였다:
첫 번째로 용리한 부분 입체이성질체 쌍, 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)을 황색 고형분으로서 단리하였다(40 mg, 67%). ESI-MS m/z 계산된 값 493.19125, 확인된 값 494.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.26분 (LC 방법 M).
두 번째로 용리한 부분 입체이성질체 쌍, 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)을 황색 고형분으로서 단리하였다(46 mg, 77%). ESI-MS m/z 계산된 값 493.19125, 확인된 값 494.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.3분 (LC 방법 M).
단계 9: 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 27), 및 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 28)
20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)(47 mg, 0.09525 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기), 및 주입 부피 70 μL로 10 mL/분의 유속을 사용하는 10%에서 90%까지의 MeOH/CO2 구배를 사용하는 일반상 키랄 SFC로 정제하여, 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
첫 번째로 용리한 거울상이성질체 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)을 밝은 황색 고형분으로서 수득하였다(19.4 mg, 83%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.12 (s, 2H), 4.33 - 4.22 (m, 1H), 3.32 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.31 (dt, J = 14.6, 7.3 Hz, 2H), 2.04 (ddd, J = 14.5, 8.8, 5.8 Hz, 1H), 1.93 (dd, J = 11.9, 6.2 Hz, 1H), 1.71 (dt, J = 46.2, 8.5 Hz, 2H), 1.41 (tt, J = 18.8, 7.7 Hz, 5H), 1.12 (s, 3H), 0.96 - 0.89 (m, 1H), 0.88 (s, 3H ppm). ESI-MS m/z 계산된 값 493.19125, 확인된 값 494.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.26분 (LC 방법 M).
두 번째로 용리한 거울상이성질체 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)을 밝은 황색 고형분으로서 수득하였다(17.9 mg, 76%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.12 (s, 2H), 4.27 (q, J = 10.2 Hz, 1H), 3.32 (d, J = 9.6 Hz, 1H)), 3.00 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.32 (dq, J = 14.9, 6.6 Hz, 2H), 2.04 (ddd, J = 14.5, 9.0, 6.0 Hz, 1H), 1.93 (dd, J = 11.9, 6.2 Hz, 1H), 1.75 (q, J = 8.8, 8.4 Hz, 1H), 1.67 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 1.52 - 1.31 (m, 5H), 1.12 (s, 3H), 0.93 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 0.88 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 493.19125, 확인된 값 494.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.25분 (LC 방법 M).
단계 10: 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 29) 및 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 30)
20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)(46 mg, 0.09322 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기), 및 주입 부피 70 μL로 10 mL/분의 유속을 사용하는 10%에서 90%까지의 MeOH/CO2 구배를 사용하는 일반상 키랄 SFC로 정제하여, 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
첫 번째로 용리한 거울상이성질체 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)을 밝은 황색 고형분으로서 수득하였다(14.6 mg, 63%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.71 (s, 1H), 6.11 (s, 2H), 4.12 (q, J = 9.3 Hz, 1H), 3.31 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 3.00 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.45 (dt, J = 12.8, 6.7 Hz, 1H), 2.25 (dq, J = 9.4, 5.8, 4.7 Hz, 1H), 1.97 (dt, J = 13.7, 8.7 Hz, 1H), 1.88 (dd, J = 11.9, 6.2 Hz, 1H), 1.56 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.50 - 1.34 (m, 5H), 1.11 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.84 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 493.19125, 확인된 값 494.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.3분 (LC 방법 M).
두 번째로 용리한 거울상이성질체 20-아미노-14,14-디메틸-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)을 밝은 황색 고형분으로서 수득하였다(13.7 mg, 60%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 1H), 6.11 (s, 2H), 4.12 (q, J = 9.3 Hz, 1H), 3.31 (s, 2H), 3.00 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.45 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 2.23 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 1.97 (dt, J = 13.4, 8.5 Hz, 1H), 1.89 (dd, J = 11.9, 6.2 Hz, 1H), 1.55 (s, 2H), 1.42 (q, J = 12.3, 10.9 Hz, 5H), 1.11 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.82 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 493.19125, 확인된 값 494.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.3분 (LC 방법 M).
실시예 18: (12R)-6-(하이드록시이미노)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민(화합물 31)의 제조
단계 1: 터트-부틸 N-[(12R)-6-옥소-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
DCM(1.628 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(100 mg, 0.201 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(102.3 mg, 0.2412 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 30분 동한 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고 농축시켰다. 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 10분에 걸쳐 정제하여, 터트-부틸 N-[(12R)-6-옥소-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(70 mg, 70%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.98 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 4.00 - 3.88 (m, 1H), 3.64 - 3.51 (m, 1H), 3.51 - 3.41 (m, 1H), 3.22 - 3.10 (m, 1H), 2.75 - 2.62 (m, 1H), 2.57 (td, J = 11.8, 7.1 Hz, 1H), 2.20 - 1.88 (m, 4H), 1.83 - 1.56 (m, 6H), 1.48 (s, 10H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 495.20935, 확인된 값 496.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.67분 (LC 방법 T).
단계 2: (12R)-6-(하이드록시이미노)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민 (화합물 31)
디클로로메탄(400 μL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-옥소-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(18 mg, 0.03544 mmol)의 용액에 TFA(27.30 μL, 0.3543 mmol) 를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, EtOH(200 μL) 중에 용해시킨 다음, 하이드록실아민 (염산염)(3.773 mg, 0.05429 mmol)을 첨가하고, 이어서 NaOAc(4.858 mg, 0.05922 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 75℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 여과하고, 30%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(+5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 HPLC로 정제하였다. 두 번째로 용리된 분획 및 메이저 부분 입체이성질체를 합치고, 증발시켰다. 생성된 고형분을 아세트산 에틸 중에 용해시키고, 포화 NaHCO3으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켜, (12R)-6-(하이드록시이미노)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-아민을 오렌지색 고형분으로서 수득하였다(10 mg, 69%). 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.51 (s, 1H), 3.91 - 3.76 (m, 1H), 3.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.28 (dd, J = 17.8, 8.8 Hz, 1H), 3.20 - 3.08 (m, 1H), 2.52 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.37 (ddd, J = 13.8, 9.7, 4.3 Hz, 1H), 2.20 - 2.01 (m, 1H), 1.88 (dd, J = 6.9, 3.3 Hz, 1H), 1.85 - 1.61 (m, 3H), 1.60 - 1.29 (m, 5H), 0.95 - 0.84 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 410.16782, 확인된 값 411.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.99분 (LC 방법 A). 생성물은 옥심의 입체 화학이 알려지지 않은 단일 거울상이성질체이다.
실시예 19: (11R)-19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 32) 및 (11R)-19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 33)의 제조
단계 1: 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
NMP(32 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(2.3 g, 5.537 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 (염산염)(1.89 g, 5.820 mmol), DIEA(3.2 mL, 18.37 mmol) 및 HATU(2.59 g, 6.812 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸로 희석하고 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 50% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 gram 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 발포체로서 수득하였다(3.16 g, 83%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.38 (s, 1H), 10.28 (d, J = 18.9 Hz, 2H), 8.88 (s, 1H), 7.46 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.38 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 5.98 - 5.84 (m, 1H), 5.83 - 5.69 (m, 1H), 5.38 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.23 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 5.04 - 4.91 (m, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.70 (ddt, J = 18.2, 6.9, 3.3 Hz, 1H), 3.55 (q, J = 8.6 Hz, 1H), 3.36 - 3.32 (m, 1H), 3.09 (dd, J = 15.7, 7.5 Hz, 1H), 2.99 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 2.36 - 2.27 (m, 1H), 2.18 (dd, J = 17.9, 4.5 Hz, 1H), 2.07 - 1.98 (m, 1H), 1.93 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 1.75 (dt, J = 17.8, 8.3 Hz, 1H), 1.66 (dt, J = 10.3, 7.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 685.2699, 확인된 값 686.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.91분 (LC 방법 M).
단계 2: 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
아세토니트릴(100 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(3.16 g, 4.609 mmol) 및 DIEA(3 mL, 17.22 mmol)의 용액을 50℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(1.4 g, 7.343 mmol)를 한번에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 중탄산나트륨의 포화 수용액(50 mL)으로 퀀칭시키고, 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 아세트산 에틸(3 X 100 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 40% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 gram 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 발포체로서 수득하였다(2.59 g, 84%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.45 (s, 1H), 8.65 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 7.35 (ddd, J = 21.4, 7.6, 5.2 Hz, 5H), 5.91 (ddd, J = 17.5, 12.8, 7.6 Hz, 1H), 5.79 - 5.62 (m, 1H), 5.41 - 5.29 (m, 1H), 5.23 (t, J = 11.8 Hz, 1H), 5.06 - 4.97 (m, 1H), 4.94 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.76 (dd, J = 14.1, 10.9 Hz, 1H), 4.62 (dd, J = 10.9, 6.5 Hz, 1H), 4.42 - 4.31 (m, 1H), 3.60 - 3.50 (m, 1H), 3.45 - 3.35 (m, 1H), 3.27 (t, J = 8.2 Hz, 2H), 2.23 (t, J = 11.8 Hz, 1H), 2.03 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 1.95 (s, 1H), 1.71 (ddd, J = 18.8, 15.4, 8.1 Hz, 2H), 1.51 - 1.44 (m, 9H), 1.23 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 667.25934, 확인된 값 668.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.3분 (LC 방법 M).
단계 3: 터트-부틸 N-[(11S)-6-(벤질옥시)-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,8,16,18-헥사엔-19-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)
DCE(600 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(2.59 g, 3.879 mmol)의 탈기된 용액에 Zhan 촉매-1B(465 mg, 0.6337 mmol)를 질소 분위기 하 50℃에서 10분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 14시간 동안 가열하였다. 다시, Zhan 촉매-1B(465 mg, 0.6337 mmol)를 첨가하고 혼합물을 80℃에서 22시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 10%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[(11S)-6-(벤질옥시)-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,8,16,18-헥사엔-19-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)를 밝은 황색 고형분으로서 수득하였다(160 mg, 6.5%). ESI-MS m/z 계산된 값 639.228, 확인된 값 640.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.01분 (LC 방법 M).
단계 4: 터트-부틸 N-[(11R)-6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (거울상이성질체 1) 및 터트-부틸 N-[(11R)-6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (거울상이성질체 2)
AcOH(6 mL) 및 아세트산 에틸(6 mL) 중 터트-부틸 N-[(11S)-6-(벤질옥시)-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,8,16,18-헥사엔-19-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(240 mg, 0.3752 mmol)의 용액에 Pd/C(10% w/w의 400 mg, 0.3759 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 Parr 진탕기 내에 두고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 가압하였다. 혼합물을 80 psi에서 3시간 동안 진탕한 다음, 100 psi에서 4시간 동안 추가로 진탕하였다. 반응기를 감압하고, 반응물을 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 100% 헥산에서 60% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배)로 정제하여 2개의 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리된 거울상이성질체, 터트-부틸 N-[(11R)-6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (거울상이성질체 1)를 황색 잔류물로서 단리함(58.7 mg, 57%). ESI-MS m/z 계산된 값 551.1967, 확인된 값 552.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.42분 (LC 방법 M).
두 번째 용리된 거울상이성질체, 터트-부틸 N-[(11R)-6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (거울상이성질체 2)를 황색 잔류물로서 단리함(58.5 mg, 57%). ESI-MS m/z 계산된 값 551.1967, 확인된 값 552.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.32분 (LC 방법 M).
단계 5: (11R)-19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 32)
DCM(1000 μL) 중 터트-부틸 N-[(11R)-6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (거울상이성질체 1)(55 mg, 0.09973 mmol)의 용액에 TFA(750 μL, 9.735 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 1%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(+5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 HPLC로 15.0분에 걸쳐 정제하여, (11R)-19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)을 황색 고형분으로서 수득하였다(23.0 mg, 51%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.68 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 5.75 (s, 2H), 3.83 (q, J = 7.8 Hz, 1H), 3.51 (q, J = 8.2 Hz, 2H), 2.35 - 2.21 (m, 2H), 2.12 (dq, J = 11.6, 6.0 Hz, 1H), 2.00 (q, J = 7.9 Hz, 1H), 1.96 - 1.88 (m, 2H), 1.84 - 1.72 (m, 1H), 1.69 - 1.50 (m, 3H), 1.48 - 1.36 (m, 1H), 1.16 (ddd, J = 13.0, 10.0, 6.1 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 451.1443, 확인된 값 452.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.05분 (LC 방법 A).
단계 6: (11R)-19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 33)
DCM(1000 μL) 중 터트-부틸 N-[(11R)-6-하이드록시-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-19-일]카르바메이트 (거울상이성질체 2)(55 mg, 0.09973 mmol)의 용액에 TFA(750 μL, 9.735 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 1%에서 99%까지의 아세토니트릴/물(+5 mM HCl) 구배를 사용하는 역상 HPLC로 15.0분에 걸쳐 정제하여, (11R)-19-아미노-6,17-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-3,4,15,20-테트라아자테트라시클로[14.3.1.12,5.011,15]헤니코사-1(20),2,4,16,18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)을 황색 고형분으로서 수득하였다(23.8 mg, 52%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.67 (s, 1H), 7.62 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.59 (s, 2H), 3.97 (q, J = 8.1 Hz, 1H), 3.54 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 2.41 - 2.32 (m, 1H), 2.15 (dt, J = 11.8, 5.9 Hz, 1H), 2.04 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 1.97 - 1.90 (m, 1H), 1.90 - 1.74 (m, 2H), 1.74 - 1.48 (m, 4H), 1.39 (dd, J = 18.2, 11.8 Hz, 1H), 1.11 (td, J = 11.3, 7.0 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 451.1443, 확인된 값 452.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.98분 (LC 방법 A).
실시예 20: 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 34) 및 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 35)의 제조
단계 1: 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(2-메톡시에틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트
250-mL 밀봉된 용기 내에서, N-(2-메톡시에틸)부트-3-엔-1-아민 (180 mg, 1.393 mmol), DIEA (1000 μL, 5.741 mmol) 및 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(600 mg, 0.7984 mmol)를 아세토니트릴(15 mL) 중에 합치고 혼합물을 80℃에서 36시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 60% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(80 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(2-메톡시에틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트를 황색 발포체로서 수득하였다(269 mg, 42%). ESI-MS m/z 계산된 값 799.33795, 확인된 값 800.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 M).
단계 2: 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(2-메톡시에틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
THF(2.5 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(2-메톡시에틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(241 mg, 0.3013 mmol)의 용액에 MeOH(2.5 mL) 및 물(2 mL)을 첨가한 다음 수산화 리튬(26 mg, 1.086 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 7시간 동안 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거한 다음, 10% HCl(10 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(5 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 100% 헥산에서 50% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(40 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(2-메톡시에틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(138 mg, 65%). ESI-MS m/z 계산된 값 699.2855, 확인된 값 700.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.2분 (LC 방법 M).
단계 3: 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)
500 mL 둥근 바닥 플라스크 중에서, DCE(80 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(2-메톡시에틸)아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(180 mg, 0.2573 mmol)의 탈기된 용액을 질소 분위기 하 50℃로 가열하였다. 이어서, Zhan 촉매-1B(35 mg, 0.04770 mmol)를 10분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 30%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(40 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)를 황색 잔류물로서 수득하였다(103 mg, 60%). ESI-MS m/z 계산된 값 671.2542, 확인된 값 672.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.0분 (LC 방법 M).
단계 4: 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트
AcOH(2.5 mL) 및 아세트산 에틸(2.5 mL) 중 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(103 mg, 0.1534 mmol)의 용액에 Pd/C(10% w/w의 165 mg, 0.1550 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 Parr 진탕기 상에 두고, 진공 하에 탈기시키고, 질소 가스를 3회 채웠다. 그런 다음, 모든 질소 가스를 제거하고, 반응기를 수소 가스로 가압하였다. 혼합물을 80 psi에서 3시간 동안 진탕하고, 100 psi에서 4시간 동안 추가로 진탕하였다. 반응기를 감압하고, 반응물을 여과하고 농축시키고, 고진공 하에 30분동안 두어, 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트를 황색 잔류물로서 수득하였다(64 mg, 72%). ESI-MS m/z 계산된 값 583.22296, 확인된 값 584.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.39분 (LC 방법 J).
단계 5: 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
DCM(1.0 mL) 중 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트(64 mg, 0.1097 mmol)의 용액에 TFA(750 μL, 9.735 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 잔류물을 100% 헥산에서 60%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여, 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올을 황색 고형분으로서 수득하였다(50 mg, 94%). ESI-MS m/z 계산된 값 483.1705, 확인된 값 484.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.35분 (LC 방법 A).
단계 6: 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 34) 및 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 35)
라세미 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(49 mg, 0.1014 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)를 사용해 키랄 SFC(용리: 14% MeOH(+ 20 mM NH3)/86% CO2)로 정제하여 다음 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
첫 번째 용리된 거울상이성질체를 역상 분취 HPLC(용리 구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여, 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)을 황색 고형분으로서 수득하였다(13.4 mg, 54%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.71 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 3.51 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.30 (s, 1H), 3.29 - 3.23 (m, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.14 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.89 (dq, J = 17.4, 5.5, 4.9 Hz, 1H), 1.66 - 1.50 (m, 4H), 1.42 (ddd, J = 28.9, 14.6, 7.3 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 483.1705, 확인된 값 484.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 A).
두 번째 용리된 거울상이성질체를 역상 분취 HPLC(용리 구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여, 17-아미노-13-(2-메톡시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)을 황색 고형분으로서 수득하였다(13.8 mg, 56%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.71 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.31 (s, 2H), 3.52 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.35 - 3.29 (m, 1H), 3.29 - 3.23 (m, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.14 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.93 - 1.84 (m, 1H), 1.67 - 1.50 (m, 4H), 1.50 - 1.35 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 483.1705, 확인된 값 484.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 A).
실시예 21: (12R)-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-온(화합물 36)의 제조
단계 1: (12R)-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-온 (화합물 36)
터트-부틸 N-[(12R)-6-옥소-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(8 mg, 0.01615 mmol)의 용액을 디클로로메탄(137 μL) 중에 용해시키고, TFA(62.09 μL, 0.8059 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 다이클로로메탄에 용해시키고, 포화 NaHCO3 용액으로 세척하였다. 유기층을 농축시켜 (12R)-20-아미노-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-온(3 mg, 47%)을 주황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.49 (s, 1H), 4.00 (q, J = 8.3 Hz, 1H), 3.66 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 3.48 (s, 1H), 3.28 (td, J = 11.6, 2.5 Hz, 1H), 2.72 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.64 (dt, J = 11.9, 5.9 Hz, 1H), 2.30 - 2.00 (m, 4H), 1.96 - 1.67 (m, 6H), 1.01 (d, J = 11.7 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 395.15692, 확인된 값 396.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.67분 (LC 방법 A). 2개의 교환 가능한 NH2 양성자가 1H NMR에서 관찰되지 않음.
실시예 22: 5-아미노-11-하이드록시-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-15-온 (거울상이성질체 1)(화합물 37) 및 5-아미노-11-하이드록시-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-15-온 (거울상이성질체 2)(화합물 38)의 제조
단계 1: 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-5-하이드록시-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
THF(2.533 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(330 mg, 0.5066 mmol)의 용액에 보란-황화 디메틸 복합체(2 M의 380 μL, 0.76 mmol)를 0℃에서 적가하고, 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 반응물을 실온까지 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃로 냉각시킨 후, NaOH(2 M의 1.35 mL, 2.7 mmol)로 퀀칭시키고, 이어서 과산화수소(300 μL, 9.79 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 아세트산 에틸(2 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 염수(25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 여액을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g; 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-5-하이드록시-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(200 mg, 59%)를 무색 반-고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 668.1069, 확인된 값 670.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.6분 (LC 방법 T).
단계 2: 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-5-옥소-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
디클로로메탄(2.0 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-5-하이드록시-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(135 mg, 0.2017 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(102.6 mg, 0.2419 mmol)을 첨가하였다. 반응은 15분 후에 완료되었다. 반응물을 포화 수성 NaHCO3으로 퀀칭시켰다. 디클로로메탄(2 X 25 mL)으로 추출한 다음, 유기층을 합치고, 염수로 세척한 다음, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 여액을 0%에서 30%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)를 통해 10분에 걸쳐 여과하여, 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-5-옥소-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 백색 고형분으로서 수득하였다(100 mg, 74%). ESI-MS m/z 계산된 값 666.09125, 확인된 값 667.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.66분 (LC 방법 T).
단계 3: 5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥산산
터트-부탄올(5.44 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-5-옥소-1-(트리플루오로메틸)펜틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(450 mg, 0.6743 mmol) 및 2-메틸-2-부텐(1.389 mL, 13.11 mmol)의 용액에 물(5.44 mL) 중 염화나트륨(126.3 mg, 1.396 mmol) 및 제일 인산나트륨, 일수화물(651.7 mg, 4.723 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 부분적으로 농축시켰다. 물(20 mL)을 첨가하고, 수성층을 1 N HCl로 pH 약 1 내지 2로 산성화시키고, 디클로로메탄(2 X 50 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜, 5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥산산을 미정체 백색 고형분으로서 수득하였다(455 mg, 99%). ESI-MS m/z 계산된 값 682.0862, 확인된 값 683.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.57분. 이 물질을 추가 정제 없아 다음 단계에 직접 투입하였다(LC 방법 T).
단계 4: 5-벤질옥시-5-[5-[3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-피페라진-1-일-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥산산
마이크로웨이브 밀봉된 바이얼에서, 5-벤질옥시-5-[5-[6-브로모-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥산산(160 mg, 0.2341 mmol), 디이소프로필에틸아민(244.7 μL, 1.405 mmol) 및 피페라진(100.8 mg, 1.17 mmol)을 아세토니트릴(1 mL)에 첨가하고, 혼합물을 90℃에서 9시간 동안 가열하였다. 반응물을 물로 희석하고, 아세트산 에틸(3 X 15 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜, 5-벤질옥시-5-[5-[3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-피페라진-1-일-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥산산을 황색 고형분으로서 수득하였다(150 mg, 93%). ESI-MS m/z 계산된 값 688.2444, 확인된 값 689.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.69분. 이 물질을 추가 정제 없아 다음 단계에 직접 투입하였다(LC 방법 S).
단계 5: 터트-부틸 N-[11-(벤질옥시)-15-옥소-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-5-일]카르바메이트
DMF(12.5 mL) 중 5-벤질옥시-5-[5-[3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-피페라진-1-일-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6,6,6-트리플루오로-헥산산(125 mg, 0.1815 mmol)의 용액에 DIEA(158.1 μL, 0.9077 mmol)를 첨가한 다음, HATU(151.8 mg, 0.3992 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산 에틸(3 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 미정제 물질을 100%헥산에서 70% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 터트-부틸 N-[11-(벤질옥시)-15-옥소-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-5-일]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(115 mg, 80%). ESI-MS m/z 계산된 값 670.2338, 확인된 값 671.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.9분 (LC 방법 S).
단계 6: 터트-부틸 N-[11-하이드록시-15-옥소-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-5-일]카르바메이트
아세트산(2.639 mL) 중 터트-부틸 N-[11-(벤질옥시)-15-옥소-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-5-일]카르바메이트(115 mg, 0.1458 mmol)의 질소 플러싱된 용액에 Pd/C(10% w/w의 53.11 mg, 0.04991 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 배기시킨 다음, 수소-충전 풍선을 사용해 수소 분위기 하에 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 실리카 플러그를 통해 용액을 여과하고, 아세트산 에틸로 세척한 다음, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 30%에서 99%까지의 아세토니트릴/물 구배의 C18 컬럼을 사용하는 분취 역상 HPLC로 정제하였다. 원하는 분획을 합쳐서, 터트-부틸 N-[11-하이드록시-15-옥소-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-5-일]카르바메이트를 회백색 고형분으로서 수득하였다(25 mg, 30%). ESI-MS m/z 계산된 값 580.1869, 확인된 값 581.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.76분 (LC 방법 S).
단계 7: 5-아미노-11-하이드록시-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-15-온 (거울상이성질체 1)(화합물 37) 및 5-아미노-11-하이드록시-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-15-온 (거울상이성질체 2)(화합물 38)
터트-부틸 N-[11-하이드록시-15-옥소-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-5-일]카르바메이트(20 mg, 0.03445 mmol)를 디클로로메탄(342.4 μL) 중에 용해시키고, 혼합물에 TFA(132.4 μL, 1.719 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 진공 중에서 농축시킨 다음, 디클로로메탄 중에서 취하고, 포화 수성 NaHCO3으로 세척하였다. 유기층을 진공 중에서 농축하여 옅은 황색 고형분을 수득하고, 이를 CO2 중 18% 메탄올(20 mM NH3) 이동상을 사용하는 ChiralPak OD 컬럼(250 X 10 mm, 5 *?*m 입자 크기)(유속 = 10 mL/분, 컬럼 온도 = 35℃)을 사용하는 키랄 SFC로 5분에 걸쳐 처리하였다. 이들 조건을 통해 아래에 기술된 것과 같은 2개의 거울상이성질체 생성물을 생산하였다:
피크 1을 농축시켜 5-아미노-11-하이드록시-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-15-온 (거울상이성질체 1)(2.9 mg, 35%)을 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.15 (dq, J = 14.8, 7.2 Hz, 1H), 3.73 (dd, J = 10.7, 5.4 Hz, 1H), 3.48 (ddd, J = 16.9, 10.5, 6.5 Hz, 2H), 3.32 (tq, J = 13.1, 6.7, 5.8 Hz, 4H), 3.03 (dq, J = 12.8, 5.7 Hz, 1H), 2.65 - 2.46 (m, 3H), 2.28 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 1.94 - 1.81 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 480.13446, 확인된 값 481.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.34분 (LC 방법 A).
피크 2를 농축시켜 5-아미노-11-하이드록시-3,11-비스(트리플루오로메틸)-21-옥사-1,8,9,16,22-펜타아자테트라시클로[14.2.2.12,6.17,10]도코사-2,4,6(22),7,9-펜타엔-15-온 (거울상이성질체 2)(2.9 mg, 35%)을 담황색 고형분으로서 수득하였다; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.61 (d, J = 39.0 Hz, 2H), 4.14 (dt, J = 13.6, 7.1 Hz, 1H), 3.74 (q, J = 5.2 Hz, 1H), 3.52 - 3.25 (m, 6H), 3.02 (dt, J = 12.8, 6.0 Hz, 1H), 2.64 - 2.47 (m, 3H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.00 - 1.86 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 480.13446, 확인된 값 481.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.34분 (LC 방법 A).
실시예 23: 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 39) 및 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 40)의 제조
단계 1: 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트
N-메틸부트-3-엔-1-아민 (염산염)(370 mg, 3.043 mmol), DIEA(1.5 mL, 8.612 mmol) 및 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트(860 mg, 1.688 mmol)를 아세토니트릴(12 mL) 중에 합치고, 혼합물을 70℃에서 20시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 60% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(80 g 컬럼)로 정제하여, 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트를 옅은 황색 잔류물로서 수득하였다(820 mg, 95%). ESI-MS m/z 계산된 값 513.2145, 확인된 값 514.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.89분 (LC 방법 A).
단계 2: 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복시산
THF(8.5 mL) 중 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복실레이트(810 mg, 1.577 mmol)의 용액에 메탄올(7.5 mL) 및 물(6.5 mL)을 첨가한 다음, 무수 수산화 리튬(150 mg, 6.138 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 가열하면서 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거한 다음, 10 mL의 10% 수성 HCl을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(5 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 100% 헥산에서 80% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(40 gram 컬럼)로 정제하여, 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복시산을 황색 고형분으로서 수득하였다(485 mg, 77%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.82 (s, 1H), 10.08 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 5.78 (ddt, J = 17.0, 10.2, 6.8 Hz, 1H), 5.05 (dq, J = 17.2, 1.7 Hz, 1H), 4.97 (ddt, J = 10.2, 2.4, 1.2 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 3.21 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.30 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 399.1464, 확인된 값 400.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.72분 (LC 방법 A).
단계 3: 터트-부틸 N-[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-3-피리딜]카르바메이트
NMP(7 mL) 중 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-메틸설포닐-피리딘-2-카르복시산(480 mg, 1.202 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(380.9 mg, 1.260 mmol) 및 DIEA (850 μL, 4.880 mmol)를 첨가한 다음, HATU(565 mg, 1.486 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸로 희석하고 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 60% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(80 gram 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-3-피리딜]카르바메이트를 황색 오일로서 수득하였다(720 mg, 88%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, 1H), 10.66 (s, 1H), 10.33 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 2H), 7.41 - 7.37 (m, 2H), 7.35 - 7.31 (m, 1H), 5.82 - 5.74 (m, 1H), 5.15 - 5.04 (m, 2H), 5.04 - 4.98 (m, 2H), 4.97 (dd, J = 10.1, 2.1 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.27 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.84 (s, 3H), 2.34 - 2.27 (m, 4H), 2.19 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 683.2601, 확인된 값 684.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.91분 (LC 방법 J).
단계 4: 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-3-피리딜]카르바메이트
아세토니트릴(20 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-3-피리딜]카르바메이트(720 mg, 1.053 mmol) 및 DIEA(750 μL, 4.306 mmol)의 용액을 50℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(320 mg, 1.678 mmol)를 한번에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 중탄산나트륨의 포화 수용액(50 mL)으로 퀀칭시키고, 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 아세트산에틸(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 100% 헥산에서 50% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-3-피리딜]카르바메이트(640 mg, 91%)를 황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.80 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.44 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 7.39 - 7.30 (m, 3H), 5.91 - 5.72 (m, 2H), 5.10 (dd, J = 17.1, 1.8 Hz, 1H), 5.07 - 4.98 (m, 2H), 4.96 (dd, J = 10.2, 2.0 Hz, 1H), 4.74 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.29 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.48 - 2.36 (m, 2H), 2.33 (t, J = 8.6 Hz, 4H), 1.50 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 665.2495, 확인된 값 666.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.22분 (LC 방법 J).
단계 5: 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)
500 mL 둥근 바닥 플라스크 중에서, DCE(225 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-5-메틸설포닐-3-피리딜]카르바메이트(600 mg, 0.9013 mmol)의 탈기된 용액을 질소 분위기 하 50℃로 가열하였다. 이어서, Zhan 촉매-1B(212 mg, 0.2889 mmol)를 10분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 4시간 동안 가열하였다. 추가의 Zhan 촉매-1B(106 mg, 0.144 mmol)를 첨가하고 혼합물을 70℃에서 10시간 동안 추가로 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 50%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(80 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물) 를 황색 고형분으로서 수득하였다(235 mg, 41%). ESI-MS m/z 계산된 값 637.2182, 확인된 값 638.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.0분 (LC 방법 J).
단계 6: 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트
AcOH(5.0 mL) 및 아세트산 에틸(5 mL) 중 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(235 mg, 0.3685 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 이어서, Pd/C(10% w/w의 355 mg, 0.3336 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, 수소 가스로 채워진 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm에서 5시간 동안 교반단 다음, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 100% 헥산에서 55% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트(145 mg, 72%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.19 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.31 - 3.24 (m, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.15 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 1.92 (dd, J = 11.8, 6.5 Hz, 1H), 1.70 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 1.59 (s, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.40 (s, 1H), 1.29 - 1.23 (m, 2H), 0.85 (dt, J = 10.9, 6.6 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 549.1869, 확인된 값 550.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.98분 (LC 방법 A).
단계 7: 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
DCM(2.5 mL) 중 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트(140 mg, 0.2547 mmol)의 용액에 TFA(2.0 mL, 25.96 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발 건조시킨 다음, 에테르로 희석하고, 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 80%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여, 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올을 황색 고형분으로서 수득하였다(85 mg, 74%). ESI-MS m/z 계산된 값 449.13446, 확인된 값 450.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.62분 (LC 방법 A).
단계 8: 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 39) 및 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 40)
라세미 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(90 mg, 0.2002 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기), 및 6분에 걸친 25% MeOH(+20 mM NH3)/75% CO2 용리를 사용하는 키랄 SFC로 정제하여, 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
첫 번째 용리된 거울상이성질체를 역상 분취 HPLC(용리 구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여, 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)를 황색 고형분으로서 수득하였다(38.8 mg, 85%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.97 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.56 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.17 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.12 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 1.94 (tt, J = 16.5, 8.5 Hz, 1H), 1.70 - 1.62 (m, 1H), 1.62 - 1.55 (m, 2H), 1.55 - 1.44 (m, 2H), 1.40 (dd, J = 15.3, 7.0 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 449.13446, 확인된 값 450.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.61분 (LC 방법 A).
두 번째 용리된 거울상이성질체를 역상 분취 HPLC(용리 구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여, 17-아미노-13-메틸-15-메틸설포닐-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)를 황색 고형분으로서 수득하였다(38.6 mg, 85%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.97 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.56 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.17 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.12 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 1.95 (td, J = 13.1, 7.4 Hz, 1H), 1.72 - 1.64 (m, 1H), 1.64 - 1.56 (m, 2H), 1.56 - 1.44 (m, 2H), 1.44 - 1.34 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 449.13446, 확인된 값 450.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.61분 (LC 방법 A).
실시예 24: 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18) ,2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 41) 및 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 42)의 제조
단계 1: N-(2-벤질옥시에틸)부트-3-엔-1-아민
아세토니트릴(180 mL) 중 4-요오드부트-1-엔(12.5 g, 68.68 mmol), 2-벤질옥시에탄아민(12.5 g, 82.67 mmol) 및 DIEA(42 mL, 241.1 mmol)의 혼합물을 500 mL 밀봉된 용기 내 50℃에서 90시간 동안 가열하였다. 이어서, 혼합물을 수조 중에서 가열하지 않고 회전 증발로 잔류물로 농축시키고, 잔류물을 100% 헥산에서 100% 아세트산 에틸까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 gram 컬럼)로 정제하여, N-(2-벤질옥시에틸)부트-3-엔-1-아민을 옅은 호박색 오일로서 수득하였다(6.69 g, 47%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.39 - 7.24 (m, 5H), 5.79 (ddt, J = 17.1, 10.2, 6.7 Hz, 1H), 5.04 (dq, J = 17.2, 1.7 Hz, 1H), 4.99 (ddt, J = 10.2, 2.4, 1.2 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.49 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.74 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.71 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 2.60 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.17 (qt, J = 7.0, 1.4 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 205.14667, 확인된 값 206.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.74분 (LC 방법 A).
단계 2: 메틸 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴(41.0 mL) 중 N-(2-벤질옥시에틸)부트-3-엔-1-아민 (3.1 g, 15.10 mmol) and 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(2.11 g, 7.415 mmol)의 용액에 DIEA(6.5 mL, 37.32 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 두개의 컬럼에서 100% 헥산에서 30% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 gram 컬럼)로 2회 정제하여, 메틸 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 황색 잔류물로서 수득하였다(3.23 g, 96%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.60 (s, 1H), 7.32 - 7.19 (m, 3H), 7.19 - 7.11 (m, 2H), 5.72 (ddt, J = 17.1, 10.2, 6.8 Hz, 1H), 5.08 - 4.96 (m, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.84 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.72 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.66 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.37 (q, J = 7.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 453.15115, 확인된 값 454.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.15분 (LC 방법 A).
단계 3: 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF(38 mL) 중 메틸 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(3.23 g, 7.124 mmol)의 용액에 MeOH(38 mL) 및 물(30 mL)을 첨가한 다음, 수산화 리튬(737.8 mg, 30.81 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하면서 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거하고, 10 mL의 10% 수성 HCl을 첨가하여 pH 약 4로 산성화시키고, 혼합물을 EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(5 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 80% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 gram 컬럼)로 정제하여, 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산을 황색 고형분으로서 수득하였다(2.71 g, 87%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.27 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.28 (dd, J = 8.0, 6.1 Hz, 2H), 7.25 - 7.19 (m, 1H), 7.19 - 7.13 (m, 2H), 5.72 (ddt, J = 17.1, 10.2, 6.7 Hz, 1H), 5.15 - 4.96 (m, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.83 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.71 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.66 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.37 (q, J = 7.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1355, 확인된 값 440.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.88분 (LC 방법 A).
단계 4: 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
NMP (28 mL) 중 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (1.6 g, 3.641 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (1.98 g, 6.550 mmol) 및 DIEA (3 mL, 17.22 mmol)를 첨가한 다음, HATU (2.9 g, 7.627 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸로 희석하고 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 60% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 gram 컬럼)로 정제하여, 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드를 황색 고형분으로서 수득하였다(1.0 g, 38%). ESI-MS m/z 계산된 값 723.24915, 확인된 값 724.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 J).
단계 5: N-(2-벤질옥시에틸)-6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (25 mL) 중 6-[2-벤질옥시에틸(부트-3-에닐)아미노]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (833 mg, 1.151 mmol) 및 DIEA (1000 μL, 5.741 mmol)의 용액을 50℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드 (350 mg, 1.836 mmol)를 한번에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 중탄산나트륨의 포화 수용액(50 mL)으로 퀀칭시키고, 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 아세트산에틸(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 50% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(80 gram 컬럼)로 정제하여, N-(2-벤질옥시에틸)-6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민을 황색 오일로서 수득하였다(650 mg, 80%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.73 (s, 1H), 7.40 - 7.27 (m, 5H), 7.27 - 7.16 (m, 3H), 7.17 - 7.09 (m, 2H), 5.84 (ddt, J = 16.8, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.71 (ddt, J = 17.1, 10.2, 6.8 Hz, 1H), 5.10 (dq, J = 17.2, 1.6 Hz, 1H), 5.05 - 4.94 (m, 3H), 4.76 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.85 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.76 - 3.61 (m, 4H), 2.60 - 2.51 (m, 2H), 2.38 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.31 - 2.18 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 705.2386, 확인된 값 706.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.79분 (LC 방법 M).
단계 6: 6-벤질옥시-13-(2-벤질옥시에틸)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)
500 mL 둥근 바닥 3-구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기시킨, DCE (290 mL) 중 Zhan 촉매-1B(165 mg, 0.2249 mmol)의 용액을 50℃로 가열하고, DCE (40 mL) 중 N-(2-벤질옥시에틸)-6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (640 mg, 0.9070 mmol)을 주사기로 적가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 100% 헥산에서 50% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배)로 정제하여 6-벤질옥시-13-(2-벤질옥시에틸)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(360 mg, 59%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 677.2073, 확인된 값 678.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.53분 (LC 방법 M).
단계 7: 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
AcOH (5.5 mL) 및 아세트산 에틸 (5.5 mL) 중 6-벤질옥시-13-(2-벤질옥시에틸)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(355 mg, 0.5239 mmol)을 질소로 퍼징하고, Pd/C (10% w/w의 85 mg, 0.07987 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm에서 1시간 동안 교반하였다. 더 많은 Pd/C(475 mg의 10% w/w, 0.4453 mmol)를 첨가하고, 3시간 동안 추가로 교반하였다. 반응물을 셀라이트 플러그로 여과하고, 아세토니트릴과 아세트산 에틸로 세척한 다음, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 100% 헥산 내지 100% 아세트산 에틸)로 정제하여 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(166 mg, 68%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.56 (d, J = 48.2 Hz, 1H), 4.11 (d, J = 13.4 Hz, 2H), 3.58 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.54 - 3.31 (m, 1H), 3.26 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.17 (dq, J = 14.3, 6.8 Hz, 2H), 2.14 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.94 - 1.85 (m, 1H), 1.70 - 1.50 (m, 4H), 1.50 - 1.34 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.15485, 확인된 값 470.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.58분 (LC 방법 A).
단계 8: 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 41) 및 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 42)
라세미 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (165 mg, 0.3515 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기), 및 18% MeOH(+20 mM NH3)/82% CO2 용리를 사용하는 키랄 SFC로 정제하여, 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
첫 번째 용리된 거울상이성질체를 역상 분취 HPLC(용리 구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여, 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)을 황색 고형분으로서 수득하였다(53.7 mg, 64%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.29 (s, 2H), 3.58 (t, J = 6.7 Hz, 3H), 3.31 - 3.13 (m, 4H), 2.14 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.90 (h, J = 6.9, 4.2 Hz, 1H), 1.72 - 1.51 (m, 4H), 1.51 - 1.34 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.15485, 확인된 값 470.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.58분 (LC 방법 A).
두 번째 용리된 거울상이성질체를 역상 분취 HPLC(용리 구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여, 17-아미노-13-(2-하이드록시에틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)을 황색 고형분으로서 수득하였다(51.4 mg, 62%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 3.58 (t, J = 6.7 Hz, 3H), 3.29 - 3.14 (m, 4H), 2.13 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 1.95 - 1.84 (m, 1H), 1.69 - 1.49 (m, 4H), 1.48 - 1.27 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.15485, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.58분 (LC 방법 A).
단계 9: 결정질 화합물 41 형태 A의 고형분 형태 특성 분석
A. X-선 분말 회절
[00525] 단계 8에 의해 생산된 결정질 화합물 41 형태 A에 대한 XRPD 회절도를 일반적인 X-선 분말 회절(XRPD) 방법을 사용해 수득하였다. 결정질 화합물 41 형태 A에 대한 XRPD 회절도가 도 7에 제공되어 있고, XRPD 데이터는 아래 표 4에 요약되어 있다.
B. 열중량 분석 (TGA)
결정질 화합물 41 형태 A에 대한 TGA 곡선은 도 8에 제공되어 있다. TGA 곡선은 350.00℃까지 10.00℃/분의 속도로 온도가 증가할 때 약 30℃ 내지 181.8℃에서 3.89%의 중량이 손실되었음을 보여준다.
실시예 25: 17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온(거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 43) 및 17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온(거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 44)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[메틸-[2-(메틸아미노)에틸]아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DMSO (2 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트 (250 mg, 0.3327 mmol)의 용액에 N, N´-디메틸에탄-1,2-디아민 (360 μL, 3.381 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 15.0분에 걸쳐 10%에서 99%까지의 이동상 B(이동상 A = H2O (5 mM HCl), 이동상 B = CH3CN)의 이중 구배를 사용하는 역상 C18 컬럼 상에서 정제하여, 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[메틸-[2-(메틸아미노)에틸]아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트를 수득하였다(174 mg, 79%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.67 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.44 - 7.32 (m, 5H), 5.87 (ddt, J = 16.9, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.11 (dq, J = 17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.01 (dd, J = 10.3, 1.7 Hz, 1H), 4.77 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.59 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.52 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.14 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.50 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 2.31 (dq, J = 11.0, 5.8 Hz, 2H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 658.2702, 확인된 값 659.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.54분 (LC 방법 R).
단계 2: 4-벤질옥시-4-[5-[3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-6-[메틸-[2-(메틸아미노)에틸]아미노]-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜탄산
디옥산 (3 mL) 및 물 (1 mL)의 3:1 혼합물 중 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[메틸-[2-(메틸아미노)에틸]아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트 (100 mg, 0.1518 mmol)의 용액에 오스뮴 테트록사이드 (2-메틸-2-프로판올 중 2.5%의 50 μL, 0.03737 mmol) 및 나트륨 페리오데이트(106 mg, 0.4956 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 밤새 교반하였다. 물(25 mL)을 첨가하고, 아세트산 에틸로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4를 이용해 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(100% 헥산 내지 100% EtOAc의 얕은 구배)로 정제하여, 4-벤질옥시-4-[5-[3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-[메틸-[2-(메틸아미노)에틸]아미노]-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜탄산을 수득하였다(62 mg, 60%). ESI-MS m/z 계산된 값 676.2444, 확인된 값 677.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.44분 (LC 방법 R).
단계 3: 터트 -부틸 N -[6-벤질옥시-10,13-디메틸-9-옥소-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트
DMF (10 mL) 중 4-벤질옥시-4-[5-[3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-[메틸-[2-(메틸아미노)에틸]아미노]-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜탄산 (62 mg, 0.09163 mmol)의 용액에 DIEA (60 μL, 0.3445 mmol)를 첨가한 다음, HATU (65 mg, 0.1709 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 교한한 지 3시간 후, 모든 시작 물질이 사라졌다. 혼합물을 물로 희석하고, 아세트산에틸(3 X)로 추출하였다. 유기상을 합치고 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 15.0분에 걸쳐 30%에서 99%까지의 이동상 B(이동상 A = H2O (5 mM HCl), 이동상 B = CH3CN)를 사용하는 역상 HPLC-MS 방법으로 정제하여, 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-10,13-디메틸-9-옥소-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트를 갈색 오일로서 수득하였다(42 mg, 70%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.89 (s, 1H), 8.51 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.27 (m, 5H), 4.73 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.57 - 4.53 (m, 1H), 4.14 (s, 1H), 4.02 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.81 (s, 1H), 3.69 (s, 1H), 3.14 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 3.03 (d, J = 40.3 Hz, 3H), 2.92 - 2.78 (m, 2H), 2.69 - 2.58 (m, 3H), 1.51 - 1.39 (m, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 658.2338, 확인된 값 659.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.74분 (LC 방법 R).
단계 4: 17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온
EtOH (5 mL) 중 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-10,13-디메틸-9-옥소-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트 (40 mg, 0.06074 mmol)의 용액에 Pd/C (10% w/w의 35 mg, 0.03289 mmol)를 첨가하고 3 방향 스톱콕 및 수소 풍선을 장착하였다. 반응 혼합물에 진공을 인가하고, 질소 가스를 3회 역충진한 다음, 진공을 인가하였다. 플라스크에 풍선으로부터 수소 가스를 채우고, 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 혼합물에 진공을 인가하고, 질소 가스를 3회 역충진한 다음, 아세트산에틸로 희석하고 셀라이트로 여과하였다. 여액을 농축시키고 진공 하에서 건조시켜, 30 mg의 터트-부틸 N-[6-하이드록시-10,13-디메틸-9-옥소-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트를 갈색 오일로서 수득하였다. 이 물질을 TFA(100 μL, 1.298 mmol) 및 디클로로메탄(400 μL)의 사전 제조된 용액의 1:4 혼합물에 용해시키고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고 진공 하에서 건조시켜, 17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온을 갈색 오일로서 수득하였다(25 mg, 88%). ESI-MS m/z 계산된 값 468.13446, 확인된 값 469.0 (M+1)+; 머무름 시간: 0.58분 (LC 방법 S).
단계 5: 17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 43) 및 17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 44)
17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온 (20 mg, 0.0427 mmol)(MeOH 중 ~23 mg/mL)의 라세미 혼합물을 5분에 걸친 CO2 중 12% 메탄올(유속 = 10 mL/분, 컬럼 온도 = 35℃)을 사용하는 ChiralCel OJ-3 컬럼 (250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기))를 사용하는 키랄 SFC로 정제하였다. 이들 조건을 통해 아래에 기술된 것과 같은 2개의 거울상이성질체 생성물을 생산하였다:
피크 1을 농축시켜 17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온(거울상이성질체 1)(염산염)(1.8 mg, 17%)을 점성이 있는 갈색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.74 - 7.66 (m, 1H), 6.43 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.01 (ddd, J = 13.5, 10.0, 4.3 Hz, 2H), 3.73 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.78 (d, J = 4.1 Hz, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.59 (d, J = 6.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 468.13446, 확인된 값 469.09 (M+1)+; 머무름 시간: 1.5분 (LC 방법 A).
피크 2를 농축시켜 17-아미노-6-하이드록시-10,13-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,10,13,18-펜타아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-온(거울상이성질체 2)(염산염)(2.3 mg, 21%)을 점성이 있는 갈색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.69 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.43 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.02 (dq, J = 10.1, 6.1, 5.4 Hz, 2H), 3.71 (d, J = 10.2 Hz, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.80 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.63 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 2.58 (d, J = 9.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 468.13446, 확인된 값 469.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.5분 (LC 방법 A).
실시예 26: (12 R )-20-아미노-6-메틸-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 45)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-6-메틸-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
THF (605.4 μL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-옥소-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (30 mg, 0.06055 mmol)의 용액을 -78ºC로 냉각시킨 다음, MeMgCl (3 M의 60.53 μL, 0.1816 mmol)을 질소 분위기 하에서 적가하고, 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 반응물을 1 M HCl로 퀀칭한 다음, 아세트산 에틸 (2 X 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 40%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여, 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6-메틸-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(20 mg, 65%). ESI-MS m/z 계산된 값 511.24063, 확인된 값 512.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.82분 (LC 방법 R).
단계 2: (12 R )-20-아미노-6-메틸-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 45)
DCM (342.4 μL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6-메틸-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트 (20 mg, 0.0391 mmol)의 용액에 TFA (150.3 μL, 1.951 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시킨 다음, DCM 중에 용해시키고, 포화 NaHCO3 용액으로 세척하고, 유기층을 농축시켜 황색 고형분을 수득하였다. 이 고형분을 5분에 걸친 CO2 이동상 중 40% 메탄올 (+ 20 mM NH3)(유속 = 10 mL/분, 컬럼 온도 = 35℃)을 사용하는 ChiralPak IG 컬럼 (250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기))을 사용하는 정상 상 SFC 방법으로 정제하여, 두 번째로 용리된 거울이성질체인, (12R)-20-아미노-6-메틸-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)을 황색 고형분으로서 수득하였다(1.6 mg, 10%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.47 (s, 1H), 4.06 (q, J = 8.6 Hz, 1H), 3.68 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.44 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 2.64 - 2.50 (m, 1H), 2.23 (ddd, J = 14.5, 10.6, 3.5 Hz, 2H), 2.02 (s, 2H), 1.90 (ddd, J = 14.4, 10.3, 6.8 Hz, 2H), 1.81 (s, 3H), 1.73 - 1.62 (m, 3H), 1.62 - 1.43 (m, 4H) ppm. 2개의 교환 가능한 NH2 양성자 및 1개의 교환 가능한 OH 양성자가 양성자 NMR에서 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 411.1882, 확인된 값 412.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.95분 (LC 방법 A).
실시예 27: 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트 (거울상이성질체 1)(화합물 46) 및 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트(거울상이성질체 2)(화합물 47)의 제조
단계 1: 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-부트-3-에닐-아미노]아세테이트 및 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(터트-부톡시카르보닐아미노)-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-부트-3-에닐-아미노]아세테이트
250-mL 밀봉된 용기 내에서, 에틸 2-(부트-3-에닐아미노)아세테이트 (1 g, 6.361 mmol), DIEA (1.5 mL, 8.612 mmol) 및 터트-부틸 N-[2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트 (860 mg, 1.144 mmol)를 아세토니트릴(25 mL) 중에 합치고 혼합물을 90℃에서 48시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 40% 아세트산 에틸/헥산까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 gram 컬럼)로 정제하여, 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-부트-3-에닐-아미노]아세테이트를 황색 발포체로서 수득하였다(245 mg, 26%). ESI-MS m/z 계산된 값 827.3329, 확인된 값 828.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.88분 (LC 방법 M).
또한, 실리카 겔 컬럼으로부터 모노-boc 생성물, 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(터트-부톡시카르보닐아미노)-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-부트-3-에닐-아미노]아세테이트 (116 mg, 14%)를 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 727.28046, 확인된 값 728.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.09분 (LC 방법 M).
단계 2: 에틸 2-[6-벤질옥시-17-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-13-일]아세테이트 ( E/Z 혼합물)
500 mL 둥근 바닥 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속으로 탈기시킨, DCE (250 mL) 중 Zhan 촉매-1B(110 mg, 0.1499 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 이어서, DCE (30 mL) 중 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-부트-3-에닐-아미노]아세테이트(355 mg, 0.4288 mmol) 및 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(터트-부톡시카르보닐아미노)-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-부트-3-에닐-아미노]아세테이트(156 mg, 0.2144 mmol)를 주사기를 통해 적가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 2시간 동안 가열하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 미정제 물질은 100% 헥산에서 50%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(80 g 컬럼)로 정제하여, 에틸 2-[6-벤질옥시-17-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-13-일]아세테이트 (E/Z 혼합물)를 수득하였다(314 mg, 92%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.39 - 7.25 (m, 5H), 5.61 (q, J = 8.1 Hz, 1H), 5.41 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.13 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.60 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.49 (t, J = 12.7 Hz, 1H), 2.71 - 2.52 (m, 3H), 2.43 - 2.34 (m, 1H), 2.33 - 2.23 (m, 1H), 1.33 (s, 9H), 1.28 (s, 9H), 1.26 - 1.21 (m, 1H), 1.18 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 799.3016, 확인된 값 800.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.69분 (LC 방법 M).
단계 3: 에틸 2-[17-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트
AcOH (5 mL) 및 아세트산 에틸 (5 mL) 중 에틸 2-[6-벤질옥시-17-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-13-일]아세테이트 (E/Z 혼합물)(310 mg, 0.3876 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(64 mg의 10% w/w, 0.06014 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소에서 1시간 동안 교반하였다. 더 많은 Pd/C(350 mg의 10% w/w, 0.3289 mmol)를 첨가하고 3시간 동안 추가로 교반하였다. 반응물을 셀라이트 플로그로 여과하고, 아세토니트릴과 아세트산 에틸로 세척한 다음, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 100% 헥산 내지 100% 아세트산 에틸)로 정제하여 에틸 2-[17-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트(228 mg, 83%)를 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 4.35 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 4.11 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.65 - 3.49 (m, 2H), 2.23 - 2.08 (m, 2H), 1.85 (td, J = 10.2, 9.2, 4.2 Hz, 1H), 1.73 - 1.55 (m, 3H), 1.55 - 1.38 (m, 4H), 1.35 (s, 9H), 1.27 (s, 9H), 1.16 (d, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 711.27026, 확인된 값 712.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.16분 (LC 방법 M).
단계 4: 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트
DCM (1.5 mL) 중 에틸 2-[17-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트 (56 mg, 0.07869 mmol)의 용액에 TFA (250 μL, 3.245 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발 건조시킨 다음, 에테르로 희석하고, 농축시켰다. 잔류물을 100% 헥산에서 80%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(4 g 컬럼)로 정제하여, 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(26.8 mg, 67%) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 511.16544, 확인된 값 512.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 A).
단계 5: 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트 (거울상이성질체 1)(화합물 46) 및 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트 (거울상이성질체 2)(화합물 47)
라세미 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트(26.8 mg, 0.05240 mmol)를 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 x 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 14% MeOH(+ 20 mM NH3)/86% CO2)로 정제하여 2개의 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리된 거울상이성질체를 역상 분취 HPLC(용리 구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트 (거울상이성질체 1)(11.4 mg, 84%)를 황색 고형분으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.69 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.13 - 4.03 (m, 4H), 3.42 - 3.32 (m, 2H), 2.14 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.91 (dt, J = 12.8, 6.1 Hz, 1H), 1.59 (ddd, J = 25.0, 17.2, 9.1 Hz, 4H), 1.47 (q, J = 7.6, 6.1 Hz, 1H), 1.36 (q, J = 8.2, 7.0 Hz, 2H), 1.14 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 511.16544, 확인된 값 512.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 A).
두 번째 용리된 거울상이성질체를 역상 분취 HPLC(용리 구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 에틸 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트(거울상이성질체 2)(11.1 mg, 82%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.13 - 4.03 (m, 4H), 3.44 - 3.32 (m, 2H), 2.14 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.98 - 1.86 (m, 1H), 1.59 (tt, J = 16.8, 8.1 Hz, 4H), 1.50 - 1.43 (m, 1H), 1.43 - 1.32 (m, 2H), 1.14 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 511.16544, 확인된 값 512.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 A).
실시예 28: 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]- N -메틸-아세트아미드 (거울상이성질체 1)(화합물 48) 및 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]- N -메틸-아세트아미드 (거울상이성질체 2)(화합물 49)의 제조
단계 1: 2-[17-( 터트- 부톡시카르보닐아미노)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-13-일]아세트산
THF (900 μL) 중 에틸 2-[17-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]아세테이트 (72 mg, 0.1012 mmol)의 용액에 메탄올 (900 μL) 및 물 (630 μL)을 첨가한 다음, 수산화 리튬 (11.3 mg, 0.4719 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열하면서 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거하고, 10 mL의 수성 HCl(10%)을 첨가하여 pH 약 4로 산성화시키고, 생성물을 아세트산 에틸(2 X 5 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(1 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 100% 헥산에서 80%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(4 g 컬럼)로 정제하여 잔류물을 수득하고, 이를 진공 중에 2시간 동안 두어서, 2-[17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-13-일]아세트산을 황색 고형분으로서 수득하였다(51 mg, 86%). ESI-MS m/z 계산된 값 583.1865, 확인된 값 584.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.41분 (LC 방법 J).
단계 2: 터트- 부틸 N- [6-하이드록시-13-[2-(메틸아미노)-2-옥소-에틸]-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트
NMP (1 mL) 중 2-[17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-13-일]아세트산 (51 mg, 0.08741 mmol)의 용액에 메틸아민 (염산염)(15 mg, 0.2222 mmol) 및 DIEA (125 μL, 0.7176 mmol)를 실온에서 첨가한 다음, HATU (42 mg, 0.1105 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 유기 물질을 아세트산에틸(3 X 5 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 미정제 물질을 100% 헥산에서 80%까지의 아세트산 에틸/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여 잔류물을 수득하고(화합물은 60% 아세트산 에틸에서 용리됨), 이를 진공 중에 2시간 동안 두어서, 터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-[2-(메틸아미노)-2-옥소-에틸]-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트를 옅은 황색 고형분으로서 수득하였다(43.7 mg, 84%). ESI-MS m/z 계산된 값 596.2182, 확인된 값 597.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.31분 (LC 방법 M).
단계 3: 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]- N- 메틸-아세트아미드
터트-부틸 N-[6-하이드록시-13-[2-(메틸아미노)-2-옥소-에틸]-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]카르바메이트 (43 mg, 0.07208 mmol)를 디클로로메탄 (2 mL) 중에 용해시키고, 혼합물에 TFA (150 μL, 1.947 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 교반하였다. 1시간 후, 반응을 완료하였다. 혼합물을 증발 건조시킨 다음, 에테르로 희석하고, 재농축시켰다. 이어서, 미정제 물질을 100% 헥산에서 100% 아세트산 에틸까지의 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(12 g 컬럼)로 정제하여 잔류물을 수득하고(화합물은 85% 아세트산 에틸에서 용리됨), 이를 진공 중에 2시간 동안 두어서, 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]-N-메틸-아세트아미드를 황색 고형분으로서 수득하였다(30.6 mg, 86%). ESI-MS m/z 계산된 값 496.16577, 확인된 값 497.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.46분 (LC 방법 A).
단계 4: 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]- N- 메틸-아세트아미드 (거울상이성질체 1)(화합물 48) 및 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]- N- 메틸-아세트아미드 (거울상이성질체 2)(화합물 49)
라세미 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]-N-메틸-아세트아미드 (30.6 mg, 0.06164 mmol)를 ChiralPak IG 컬럼 (250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기))을 사용하여 정상상 SFC 방법(구배: 5분에 걸쳐 22% 메탄올(20 mM NH3)/CO2 이동상; 유속 = 5 mL/분, 컬럼 온도 = 35℃)으로 정제하였다. 이들 조건을 통해 아래에 기술된 것과 같은 2개의 거울상이성질체 생성물을 생산하였다:
첫 번째로 용리되는 거울상이성질체 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]-N-메틸-아세트아미드 (거울상이성질체 1)를 황색 고형분으로서 수득하였다(10.3 mg, 67%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.73 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 3.78 - 3.67 (m, 2H), 3.23 (ddd, J = 15.2, 11.4, 3.9 Hz, 2H), 2.62 (d, J = 4.5 Hz, 3H), 2.18 - 2.10 (m, 2H), 1.91 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.58 (dq, J = 19.3, 10.5, 9.3 Hz, 4H), 1.48 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 1.37 (s, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 496.16577, 확인된 값 497.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.45분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 2-[17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-13-일]-N-메틸-아세트아미드 (거울상이성질체 2)를 황색 고형분으로서 수득하였다(11.2 mg, 72%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.73 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 3.78 - 3.67 (m, 2H), 3.23 (ddt, J = 19.5, 12.8, 5.8 Hz, 2H), 2.62 (d, J = 4.5 Hz, 3H), 2.14 (q, J = 5.8, 4.9 Hz, 2H), 1.90 (s, 1H), 1.58 (dq, J = 28.5, 11.4, 10.0 Hz, 4H), 1.48 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 1.37 (s, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 496.16577, 확인된 값 497.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.45분 (LC 방법 A).
실시예 29: (12 R )-20-아미노-18-메틸-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 50) 및 (12 R )-20-아미노-18-메틸-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 51)의 제조
단계 1: 메틸 5-브로모-1-옥시도-피리딘-1-윰-2-카르복실레이트
무수 트리플루오로아세트산 (41.869 g, 28.1 mL, 199.35 mmol)을, 온도를 10℃ 미만으로 유지하면서 0℃의 아세토니트릴 (140 mL) 중 메틸 5-브로모피리딘-2-카르복실레이트 (21.5 g, 99.522 mmol) 및 과산화 요소 수소 (20 g, 212.61 mmol)에 적가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 혼합물을 0.5 N 수성 염산 용액(200 mL)에 붓고, DCM(2 X 100 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜, 메틸 5-브로모-1-옥시도-피리딘-1-윰-2-카르복실레이트를 황색 고형분으로서 수득하였다(26.2 g, 98%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.65 (s, 1H), 7.85 - 7.69 (m, 2H), 4.00 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 230.9531, 확인된 값 232.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.05분 (LC 방법 E).
단계 2: 메틸 5-브로모-6-하이드록시-피리딘-2-카르복실레이트
무수 트리플루오로아세트산 (298.00 g, 200 mL, 1.4188 mol)을 DMF (240 mL) 중 메틸 5-브로모-1-옥시도-피리딘-1-윰-2-카르복실레이트 (40 g, 151.70 mmol)의 혼합물에 0℃에서 1시간에 걸쳐 적가하고(온도는 10℃ 미만으로 유지됨), 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 감압 하에 농축시켜 과량의 트리플루오로아세트산을 제거하였다. 잔류 DMF 용액을 교반 중인 물(1.5 L)에 서서히 붓고, 이를 30분에 걸쳐 0℃로 냉각시켰다. 고형분 침전물을 여과에 의해 수집한 다음, 물(400 mL)로 세척하였다. 고형분을 동결건조에 의해 건조시켜 메틸 5-브로모-6-하이드록시-피리딘-2-카르복실레이트(27.2 g, 77%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 10.27 (br. s., 1H), 7.89 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 230.9531, 확인된 값 232.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.31분 (LC 방법 E).
단계 3: 메틸 5-브로모-6-하이드록시-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트
얼음조에서 냉각된 황산 (65 mL) 중 메틸 5-브로모-6-하이드록시-피리딘-2-카르복실레이트 (10.9 g, 46.976 mmol)의 용액에 질산 (4.2280 g, 4 mL, 46.968 mmol)을 적가하였다. 5분 후, 얼음조를 제거하고, 반응 혼합물을 30℃에서 밤새 교반하였다. 질산(528.5 mg, 0.5 mL, 5.871 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 30℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 얼음처럼 차가운 물(500 mL)을 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 추가의 물로 헹구고, 건조시켜 메틸 5-브로모-6-하이드록시-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트(8.15 g, 58%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 10.29 - 9.81 (m, 1H), 8.46 (s, 1H), 4.07 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 275.93817, 확인된 값 277.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.55분 (LC 방법 E).
단계 4: 메틸 5-브로모-6-클로로-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트
메틸 5-브로모-6-하이드록시-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트 (7.5 g, 26.802 mmol) 및 페닐 디클로로포스페이트 (32.476 g, 23 mL, 153.93 mmol)의 혼합물을 170℃에서 90분 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 아세트산에틸(350 mL)로 희석하고, 염수(350 mL)로 세척하였다. 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 330 g; 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 5-브로모-6-클로로-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트(7 g, 87%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 293.9043, 확인된 값 294.9 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 E).
단계 5: 메틸 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴 (250 mL) 중 메틸 5-브로모-6-클로로-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트 (25 g, 84.61 mmol) and (2S)-2-알릴피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)(31 g, 107.37 mmol)의 용액에 DIEA (75.684 g, 102 mL, 585.59 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 3시간 동안 환류하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸 (500 mL)로 희석하고, 염수 (2 X 200 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공 중에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 0%에서 35%까지의 EtOAc/헥산 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 메틸 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트를 갈색 오일로서 수득하였다(22.01 g, 69%). ESI-MS m/z 계산된 값 369.0324, 확인된 값 370.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.9분 (LC 방법 G).
단계 6: 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르복시산
테트라하이드로푸란 (7 mL) 중 메틸 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트 (1.4 g, 3.5511 mmol)의 용액에 물 (7 mL) 중 LiOH (400 mg, 9.5321 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 다음. H2O (50 mL)로 희석하고 1 N HCl로 산성화하였다(pH 3). 혼합물을 EtOAc (3 X 50 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜, 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르복시산을 황색 고형분으로서 수득하였다(1.34 g, 100%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.47 (s, 1H), 6.69 - 6.39 (m, 1H), 5.88 - 5.66 (m, 1H), 5.20 - 5.02 (m, 2H), 4.78 - 4.62 (m, 1H) , 4.09 - 3.98 (m, 1H), 3.93 - 3.81 (m, 1H), 2.65 - 2.52 (m, 1H), 2.33 - 2.18 (m, 1H), 2.14 - 2.05 (m, 2H), 1.95 - 1.82 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 355.01675, 확인된 값 356.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 E).
단계 7: 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]- N '-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드
CH2Cl2 (90 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르복시산 (5.41 g, 14.232 mmol)의 용액에 옥살릴 클로라이드 (2.5463 g, 1.75 mL, 20.061 mmol)를 실온에서 첨가한 다음, DMF (1.3 g, 1.3771 mL, 17.785 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, CH2Cl2 (60 mL) 중 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)(5.82 g, 17.181 mmol) 및 DIPEA (2.8938 g, 3.9 mL, 22.390 mmol)의 용액을 15분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 추가의 DIPEA (222.60 mg, 0.3 mL, 1.7223 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 0℃로 냉각시키고, 5% 수성 NaHCO3(200 mL)을 첨가하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성층을 CH2Cl2(2 x 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 30%까지의 EtOAc/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(120 g 컬럼)로 정제하여, 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드를 황색 발포체로서 수득하였다(8.56 g, 94%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 9.28 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 9.03 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.59 - 7.28 (m, 5H), 5.92 - 5.63 (m, 2H), 5.19 - 4.94 (m, 4H), 4.89 - 4.77 (m, 1H), 4.75 - 4.68 (m, 1H), 4.66 - 4.51 (m, 1H), 4.09 - 3.93 (m, 1H), 3.85 - 3.71 (m, 1H), 2.62 - 2.35 (m, 2H), 2.32 - 1.95 (m, 6H), 1.91 - 1.73 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -73.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 639.13043, 확인된 값 640.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.34분 (LC 방법 E).
단계 8: 2-[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-2-피리딜]-5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸
50℃의 아세토니트릴(340 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-5-브로모-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드 (13.3 g, 20.767 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (8.0136 g, 10.8 mL, 62.004 mmol)의 용액에 p-톨루엔설포닐 클로라이드 (4.15 g, 21.768 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 주변 온도로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 아세트산 에틸(125 mL)에 용해시키고, 수성 5% NaHCO3(25 mL), 물(2 X 25 mL), 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 증발시켜 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 220 g 컬럼; 구배: 0%~15% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여, 2-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-2-피리딜]-5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸을 적색 오일로서 수득하였다(11.54 g, 89%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.56 (s, 1H), 7.49 - 7.27 (m, 5H), 5.91 - 5.58 (m, 2H), 5.23 - 4.89 (m, 4H), 4.79 (dd, J = 10.6, 4.1 Hz, 1H), 4.72 - 4.54 (m, 2H), 4.13 - 3.95 (m, 1H), 3.94 - 3.76 (m, 1H), 2.69 - 1.62 (m, 10H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -73.13 (br. s., 3F), -73.26 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 621.1199, 확인된 값 622.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.69분 (LC 방법 E).
단계 9: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
오븐 건조된 1.0 L 둥근 바닥 플라스크에서, 디클로로에탄 (475 mL) 중 2-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-5-브로모-3-니트로-2-피리딜]-5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸 (1.9 g, 2.7259 mmol)의 탈기된 용액을 질수 분위기 하 50℃로 가열하였다. 이어서, Zhan 촉매-1B(300 mg, 0.4089 mmol)를 15분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 20%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(80 g 컬럼)로 정제하여, (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)을 황색 발포체로서 수득하였다(1.2 g, 73%). ESI-MS m/z 계산된 값 593.08856, 확인된 값 594.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.48분 (LC 방법 E).
단계 10: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-메틸-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
디옥산 (2 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)(100 mg, 0.1682 mmol)의 용액에 메틸보론산 (30 mg, 0.5012 mmol), 아세트산 팔라듐(II)(5 mg, 0.0223 mmol), Xantphos (30 mg, 0.0518 mmol) 및 탄산칼륨 (70 mg, 0.5065 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 질소로 5분 동안 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반한 다음,셀라이트 패드를 통해 여과하고, EtOAc(3 X 10 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농측시키고, 0%에서 25%까지의 아세트산 에틸/헵탄 구배를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피(24 g 컬럼)로 정제하여, (12S)-6-(벤질옥시)-18-메틸-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)을 황색 발포체로서 수득하였다(62 mg, 70%). 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.09 (s, 1H), 7.42 - 7.28 (m, 5H), 5.64 - 5.43 (m, 2H), 5.24 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.02 - 4.91 (m, 1H), 4.10 - 3.96 (m, 1H), 3.95 - 3.85 (m, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 3.44 - 3.25 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.45 - 2.25 (m, 2H), 2.23 - 2.06 (m, 4H), 1.92 - 1.73 (m, 2H), 1.54 - 1.44 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -73.06 (s, 3F), -73.53 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 529.19366, 확인된 값 530.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.53분 (LC 방법 E).
단계 11: (12 R )-20-아미노-18-메틸-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 50) 및 (12 R )-20-아미노-18-메틸-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 51)
메탄올 (7 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-메틸-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(62 mg, 0.1171 mmol)의 용액에 5% 탄소 상 팔라듐(37 mg, 0.0174 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물에 수소를 5분 동안 버블링하고, 수소 풍선 하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 더 많은 5% 탄소 상 팔라듐(15 mg, 0.007 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 수소 분위기 하에 2시간 넘게 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g; 구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 황색 고형분로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (12R)-20-아미노-18-메틸-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(8 mg, 15%)을 수득하였다. 이 물질을 Chiral Technologies에서 판매하는 OD-H 컬럼(250 X 21.2 mm, 5μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 14.5분에 걸쳐 15%~35% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 추가로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 (12R)-20-아미노-18-메틸-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(3.7 mg, 56%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 411.1882, 확인된 값 412.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.99분 (LC 방법 D).
두 번째로 용리한 거울상이성질체 (12R)-20-아미노-18-메틸-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(8.9 mg, 75%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 411.1882, 확인된 값 412.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.90분 (LC 방법 D).
실시예 30: 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 52) 및 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 53)의 제조
단계 1: N -이소프로필부트-3-엔-1-아민
프로판-2-아민(44.032 g, 64 mL, 744.91 mmol)과 4-브로모부트-1-엔(10 g, 74.073 mmol)의 혼합물을 암소에서, 42℃의 오일조에서 15.5시간 동안 가열하였다. 과량의 이소프로필아민의 대부분을 증류하고, 생성된 고형분 잔류물을 물(20 mL)에 용해시켰다. 수산화 나트륨(3.05 g, 76.256 mmol)을 나누어 첨가한 다음, 에테르(2 X 75 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜(조 온도 ≤ 25℃, 압력 ≤ 250 torr) N-이소프로필부트-3-엔-1-아민(7.99 g, 83%)을 담황색 액체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 5.78 (ddt, J = 17.1, 10.2, 6.9 Hz, 1H), 5.16 - 4.99 (m, 2H), 4.85 (br. s., 1H), 2.86 - 2.72 (m, 1H), 2.66 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.25 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 1.05 (d, J = 6.2 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 113.12045, 확인된 값 114.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.34분 (LC 방법 E).
단계 2: 메틸 6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴 (20 mL) 중 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (2 g, 7.0280 mmol) 및 N-이소프로필부트-3-엔-1-아민 (1.9 g, 10.406 mmol)의 용액에 디이소프로필에틸아민 (2.7454 g, 3.7 mL, 21.242 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(75 mL)로 희석하고, 염수(2 X 50 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 0%~20% 디클로로메탄/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.85 g, 71%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.61 (s, 1H), 5.75 (dtd, J = 14.6, 9.9, 7.0 Hz, 1H), 5.15 - 4.94 (m, 2H), 4.29 (m, J = 6.5 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.56 (dd, J = 8.2, 6.8 Hz, 2H), 2.31 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.27 (d, J = 6.5 Hz, 6H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -58.38 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 361.12494, 확인된 값 362.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.58분 (LC 방법 C).
단계 3: 6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF (20 mL) 중 메틸 6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.75 g, 4.843 mmol)의 용액에 MeOH (20 mL) 및 물(16.5 mL)을 첨가하고, 이어서 수산화 리튬 (500 mg, 20.88 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거하고, 10 mL HCl (10%)을 첨가하여 pH를 약 4로 조정하고, 생성물을 EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(5 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 100% 헥산 ~ 80% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (1.13 g, 67%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.25 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 5.76 (ddt, J = 18.9, 9.5, 6.9 Hz, 1H), 5.07 - 4.93 (m, 2H), 4.15 (h, J = 6.6 Hz, 1H), 3.55 (dd, J = 8.3, 6.3 Hz, 2H), 2.26 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.23 (d, J = 6.5 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 347.10928, 확인된 값 348.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.75분 (LC 방법 A).
단계 4: N '-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
0℃의 NMP (20 mL) 중 6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (1.13 g, 3.254 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (1.1 g, 3.639 mmol) 및 DIEA (2.75 mL, 15.79 mmol)를 첨가하고, 이어서 HATU (1.35 g, 3.55 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸로 희석하고 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 100% 헥산 ~ 60% 아세트산 에틸/)로 정제하여 N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (1.65 g, 80%)를 황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 631.22296, 확인된 값 632.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 J).
단계 5: 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -부트-3-에닐- N -이소프로필-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (24 mL) 중 N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[부트-3-에닐(이소프로필)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (800 mg, 1.267 mmol) 및 DIEA (675 μL, 3.875 mmol)의 용액을 50℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(340 mg, 1.783 mmol)를 한번에 첨가하고, 70℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 중탄산나트륨의 포화 수용액(50 mL)으로 퀀칭시키고, 15분 동안 교반하였다. 유기 물질을 아세트산에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산 ∼ 40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-N-이소프로필-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (686 mg, 88%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.79 (s, 1H), 7.40 - 7.30 (m, 5H), 5.85 (ddt, J = 16.8, 10.3, 6.4 Hz, 1H), 5.76 - 5.66 (m, 1H), 5.10 (dq, J = 17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.03 - 4.92 (m, 3H), 4.76 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.18 (h, J = 6.5 Hz, 1H), 3.56 (dd, J = 8.4, 6.2 Hz, 2H), 2.60 - 2.51 (m, 2H), 2.27 (q, J = 7.1 Hz, 3H), 2.24 - 2.16 (m, 1H), 1.25 (d, J = 6.5 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 613.2124, 확인된 값 614.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.71분 (LC 방법 M).
단계 6: 벤질옥시-13-이소프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
1 L 둥근 바닥 3구 프라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기시킨 DCE (400 mL) 중 Zhan 촉매-1B(205 mg, 0.2794 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃에서 가열하였다. 그런 다음, DCE (40 mL) 중 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-N-이소프로필-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (682 mg, 1.112 mmol)의 용액을 주사기를 통해 적가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 100% 헥산 내지 50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-벤질옥시-13-이소프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(550 mg, 84%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.77 (d, J = 14.6 Hz, 1H), 7.46 - 7.26 (m, 5H), 5.65 - 5.57 (m, 1H), 5.57 - 5.31 (m, 1H), 4.88 - 4.79 (m, 2H), 4.13 (tt, J = 13.0, 6.5 Hz, 1H), 3.55 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.43 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 2.39 (t, J = 9.5 Hz, 2H), 2.33 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 2.22 (q, J = 9.4, 6.5 Hz, 2H), 2.09 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 1.28 (q, J = 7.0 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 585.1811, 확인된 값 586.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.46분 (LC 방법 M).
단계 7: 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
AcOH (8.5 mL) 및 아세트산 에틸 (8.5 mL) 중 6-벤질옥시-13-이소프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(550 mg, 0.9394 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하고, Pd/C(155 mg의 10% w/w, 0.1456 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소 가스에서 1시간 동안 교반하였다. 더 많은 Pd/C(850 mg의 10% w/w, 0.7987 mmol)를 첨가하고 3시간 동안 추가로 교반하였다. 반응물을 셀라이트 플로그로 여과하고, 아세토니트릴과 아세트산 에틸로 세척하고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 100% 헥산 내지 100% 아세트산 에틸)로 정제하여 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (349 mg, 79%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.34 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.64 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 3.17 (t, J = 11.3 Hz, 1H), 3.04 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 2.12 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.71 - 1.63 (m, 1H), 1.59 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.54 - 1.37 (m, 6H), 1.09 (dd, J = 9.0, 6.6 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.1756, 확인된 값 468.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.16분 (LC 방법 A).
단계 8: 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 52) 및 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 53)
라세미 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (349 mg, 0.7467 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 x 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 8% MeOH(+ 20 mM NH3)/92% CO2)로 정제하여 2개의 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(129.0 mg, 73%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.35 (s, 2H), 3.65 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 3.17 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 1H), 2.12 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.66 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 1H), 1.52 - 1.28 (m, 6H), 1.09 (dd, J = 8.8, 6.6 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.1756, 확인된 값 468.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 2.16분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-13-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(132.6 mg, 75%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.34 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.64 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 3.20 - 3.12 (m, 1H), 3.04 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.12 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.67 - 1.61 (m, 1H), 1.61 - 1.55 (m, 1H), 1.45 (qd, J = 17.8, 15.8, 8.8 Hz, 6H), 1.09 (dd, J = 9.0, 6.6 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.1756, 확인된 값 468.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.16분 (LC 방법 A).
단계 9: 결정질 화합물 52 형태 A(순수)의 고형분 형태 특성 분석
A. X-선 분말 회절
단계 8에 의해 생성된 결정질 화합물 52 형태 A(순수)의 XRPD 회절도는 일반적인 X-선 분말 회절(XRPD) 방법을 사용해 수득하였다. 결정질 화합물 52 형태 A (순수)에 대한 XRPD 회절도는 도 9에 제공되어 있고, XRPD 데이터는 아래 표 5에 요약되어 있다.
B. 열중량 분석 (TGA)
결정질 화합물 52 형태 A(순수)에 대한 TGA 곡선은 도 10에 제공되어 있다. TGA 곡선은 350.00℃까지 10.00℃/분의 속도로 온도가 증가할 때 213.9℃까지 중량 손실이 없었음을 보여준다.
C. 시차주사 열량측정 분석
DSC 데이터는 220.00℃까지 10.00℃/분으로 온도를 증가시켜 수집하였다. 결정질 화합물 52 형태 A(순수)에 대한 DSC 온도 변화도는 도 11에 제공되어 있다. 온도 변화도는 Tm이 191.94℃에서 발생하고, Tm 피크는 194.42℃, 78.59 J/g에 있음을 보여준다.
실시예 31: (12 R )-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 54) 및 (12 R )-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 55)의 제조
단계 1: [(3 R )-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린-3-일]메탄올
CH2Cl2 (400 mL) 중 [(3R)-모르폴린-3-일]메탄올 (염산염)(4.4 g, 28.645 mmol)의 현탁액에 Et3N(5.8080 g, 8 mL, 57.397 mmol) 및 4-메톡시벤즈알데히드(4.1 g, 30.114 mmol)를 첨가하였다. 혼합물이 맑은 용액이 될 때까지 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 아세트산 (2.1 g, 1.9886 mL, 34.970 mmol) 및 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드(18.2 g, 85.873 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 물(200 mL) 중 KHCO3(57 g)의 용액을 첨가하였다. 2개의 층이 분리되었고, 수성층을 CH2Cl2(2 X 200 mL)로 분리하였다. 합쳐진 유기층을 5% 수성 NaHCO3(50 mL)으로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g; 구배: 0%∼5% MeOH/디클로로메탄)로 정제하여 [(3R)-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린-3-일]메탄올 (6.45 g, 95%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.25 - 7.16 (m, 2H), 6.93 - 6.80 (m, 2H), 4.06 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.97 (dd, J = 11.4, 4.4 Hz, 1H), 3.88 - 3.77 (m, 4H), 3.77 - 3.70 (m, 1H), 3.65 (dd, J = 11.4, 9.4 Hz, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 2H), 3.20 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 2.72 (dt, J = 11.9, 2.9 Hz, 1H), 2.63 - 2.46 (m, 2H), 2.31 (ddd, J = 12.0, 10.0, 3.2 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 237.13649, 확인된 값 238.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.69분 (LC 방법 E).
단계 2: (3 S )-3-(요오드메틸)-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린
CH2Cl2 (250 mL) 중 [(3R)-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린-3-일]메탄올 (6.45 g, 27.181 mmol)의 용액에 트리페닐포스핀 (8.12 g, 30.959 mmol) 및 이미다졸(2.78 g, 40.836 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 5분 동안 교반하였다. 요오드(8.06 g, 31.756 mmol)를 적가하고, 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 약 100 mL로 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피(컬럼: 120 g; 구배: 0%∼10% MeOH/아세트산 에틸)로 정제하여 (3S)-3-(요오드메틸)-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린 (8.76 g, 93%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.30 - 7.24 (m, 2H), 6.90 - 6.81 (m, 2H), 3.85 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.77 - 3.72 (m, 2H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.51 - 3.41 (m, 1H), 3.38 - 3.29 (m, 1H), 3.24 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.70 - 2.58 (m, 1H), 2.42 - 2.21 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 347.0382, 확인된 값 348.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.43분 (LC 방법 E).
단계 3: (3 R )-3-알릴-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린
요오드화(I)구리(404 mg, 2.1213 mmol)를 질소 하에 THF(3 mL)에 현탁하고, 교반하면서 -40℃로 냉각시켰다. THF 중 브로모(비닐)마그네슘(4 mL의 1 M, 4 mmol)을 10분에 걸쳐 서서히 첨가하고, 걸쭉한 현탁액을 30분 동안 추가로 교반한 다음, -10℃로 가온시켰다. 검은색 현탁액을 -40℃로 냉각시키고, THF (1.5 mL) 중 (3S)-3-(요오드메틸)-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린(460 mg, 1.3249 mmol)의 용액을 20분에 걸쳐 적가하였다. 걸쭉한 현탁액을 1시간 동안 15℃로 서서히 가온시키면서 추가로 교반하였다. EtOAc(10 mL) 및 포화 NH4Cl(20 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 실온에서 교반하였다. 그런 다음, 28% 수성 NH3(15 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 0%∼40% EtOAc/헵탄)로 정제하여 (3R)-3-알릴-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린(265 mg, 81%)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.23 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.83 (ddt, J = 17.1, 10.1, 7.0 Hz, 1H), 5.18 - 5.01 (m, 2H), 4.00 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.76 - 3.64 (m, 2H), 3.62 - 3.52 (m, 1H), 3.46 (dd, J = 11.2, 7.9 Hz, 1H), 3.14 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.60 (dt, J = 12.0, 3.4 Hz, 1H), 2.46 (td, J = 7.6, 3.7 Hz, 1H), 2.41 - 2.27 (m, 2H), 2.18 (ddd, J = 12.0, 8.9, 3.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 247.15723, 확인된 값 248.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.34분 (LC 방법 E).
단계 4: (3 R )-3-알릴모르폴린
1,2-디클로로에탄 (60 mL) 중 (3R)-3-알릴-4-[(4-메톡시페닐)메틸]모르폴린 (3.25 g, 13.14 mmol)의 용액에 1-클로로에틸 클로로포르메이트(7.5525 g, 5.7 mL, 52.826 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 78℃에서 18시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔류물을 MeOH(60 mL)에 용해시키고, 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축시키고, EtOAc(2 X 20 mL)에서 공동 증발시켰다. 잔류물을 30 mL의 EtOAc와 헵탄의 1:1 혼합물에 현탁하고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, EtOAc와 헵탄의 1:1 혼합물로 세척하여 (3R)-3-알릴모르폴린 (염산염)(1.515 g, 70%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.41 (br. s., 2H), 5.87 - 5.69 (m, 1H), 5.23 - 5.09 (m, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.68 (td, J = 11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.46 (dd, J = 12.2, 10.1 Hz, 1H), 3.34 - 3.12 (m, 2H), 3.11 - 2.95 (m, 1H), 2.46 - 2.23 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 127.09972, 확인된 값 128.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.32분 (LC 방법 E).
단계 5: 메틸 6-[(3 R )-3-알릴모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴 (22 mL) 중 (3R)-3-알릴모르폴린(염산염)(1.51 g, 9.2273 mmol)의 현탁액에 DIPEA (3.7100 g, 5 mL, 28.706 mmol) 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (3.2 g, 11.245 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반하고, 주변 온도로 냉각시키고 농축시켰다. 잔류물을 CH2Cl2(100 mL)에 용해시키고 물(50 mL) 중 KHCO3(3.6 g)의 용액으로 세척하였다. 수성층을 CH2Cl2(50 mL)로 역추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g; 구배: 0%∼30% EtOAc/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(3R)-3-알릴모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (3.64 g, 100%)를 적색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.61 (s, 1H), 5.64 (ddt, J = 17.1, 10.0, 7.3 Hz, 1H), 5.18 - 4.97 (m, 2H), 4.70 - 4.53 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.99 - 3.86 (m, 2H), 3.75 - 3.52 (m, 4H), 2.62 (t, J = 7.3 Hz, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -57.41 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 375.10422, 확인된 값 376.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.12분 (LC 방법 E).
단계 6: 6-[(3 R )-3-알릴모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
0℃의 THF (40 mL) 중 메틸 6-[(3R)-3-알릴모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (3.6 g, 9.5923 mmol)의 용액에 물(10 mL) 중 수산화 나트륨(762 mg, 19.051 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 수성 HCl(1 N, 18.35 mL)을 적가하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 EtOAc(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 6-[(3R)-3-알릴모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(3.59 g, 99%)을 적색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.63 (s, 1H), 6.30 (br. s., 1H), 5.66 (ddt, J = 17.1, 10.0, 7.1 Hz, 1H), 5.22 - 4.99 (m, 2H), 4.67 (td, J = 7.3, 1.8 Hz, 1H), 4.05 - 3.88 (m, 2H), 3.80 - 3.54 (m, 4H), 2.64 (t, J = 7.3 Hz, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -57.40 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 361.08856, 확인된 값 362.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 E).
단계 7: 6-[(3 R )-3-알릴모르폴린-4-일]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
0℃의 CH2Cl2 (55 mL) 중 6-[(3R)-3-알릴모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (3.38 g, 9.3558 mmol)의 현탁액에 염화 옥살릴(1.6 g, 1.0997 mL, 12.606 mmol)과 DMF(690 mg, 0.7309 mL, 9.4399 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, CH2Cl2 (40 mL) 중 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (염산염)(3.7 g, 10.922 mmol) 및 DIPEA (1.71 g, 2.3046 mL, 13.231 mmol)의 용액을 20분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 0℃로 냉각시키고, 5% 수성 NaHCO3(100 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 CH2Cl2(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g; 구배: 0%∼30% EtOAc/헵탄)로 정제하여 6-[(3R)-3-알릴모르폴린-4-일]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (4.9 g, 81%)를 황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 9.37 - 8.82 (m, 2H), 8.54 - 8.40 (m, 1H), 7.55 - 7.28 (m, 5H), 5.93 - 5.74 (m, 1H), 5.72 - 5.54 (m, 1H), 5.20 - 4.96 (m, 4H), 4.90 - 4.66 (m, 2H), 4.58 - 4.38 (m, 1H), 4.03 - 3.83 (m, 2H), 3.79 - 3.53 (m, 4H), 2.61 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.49 - 2.12 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 645.2022, 확인된 값 646.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.25분 (LC 방법 E).
단계 8: (3 R )-3-알릴-4-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]모르폴린
50℃의 아세토니트릴 (8 mL) 중 6-[(3R)-3-알릴모르폴린-4-일]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (340 mg, 0.5267 mmol) 및 DIPEA (186 mg, 0.2507 mL, 1.4391 mmol)의 용액에 p-톨루엔설포닐 클로라이드(126 mg, 0.6609 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하고, 0℃로 냉각시키고, EtOAc (50 mL) 및 5% 수성 NaHCO3(15 mL)으로 희석하였다. 2개의 층을 분리하고, 유기층을 염수(5 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 0%∼25% EtOAc/헵탄)로 정제하여 (3R)-3-알릴-4-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]모르폴린 (272 mg, 82%)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.70 (s, 1H), 7.45 - 7.29 (m, 5H), 5.90 - 5.73 (m, 1H), 5.72 - 5.55 (m, 1H), 5.17 - 4.97 (m, 4H), 4.81 (dd, J = 10.6, 6.2 Hz, 1H), 4.72 - 4.60 (m, 2H), 4.02 - 3.86 (m, 2H), 3.79 - 3.53 (m, 4H), 2.63 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.46 (d, J = 10.0 Hz, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 627.19165, 확인된 값 628.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.45분 (LC 방법 E).
단계 9: (12 R )-6-(벤질옥시)-21-니트로-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,9,18(22),19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
질소 하에, 건조시킨 250-mL 플라스크에 DCE(25 mL)를 첨가하고, 용매를 통해 5분간 질소를 버블링하였다. 질소 흐름 하에 Zhan 촉매-1B(47 mg, 0.0641 mmol)를 첨가하였다. DCE (2 mL) 중 (3R)-3-알릴-4-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]모르폴린 (270 mg, 0.4303 mmol)의 용액을 70℃에서 1시간에 걸쳐 처가하였다. 혼합물을 질소로 버블링하고, 70℃에서 2.5시간 동안 가열한 다음, 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 0%∼20% EtOAc/헵탄)로 정제하여 (12R)-6-(벤질옥시)-21-니트로-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,9,18(22),19-헥사엔(E/Z 혼합물)(171 mg, 56%)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.68 (s, 1H), 7.41 - 7.26 (m, 5H), 5.69 - 5.43 (m, 2H), 5.13 - 4.88 (m, 2H), 4.12 - 3.86 (m, 3H), 3.82 - 3.56 (m, 4H), 2.83 - 2.52 (m, 2H), 2.52 - 2.31 (m, 2H), 2.28 - 2.15 (m, 1H), 2.14 - 1.98 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -58.28 (s, 3F), -73.62 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 599.16034, 확인된 값 600.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.37분 (LC 방법 E).
단계 10: (12 R )-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올
EtOAc (10 mL) 및 MeOH (10 mL)(12R)-6-(벤질옥시)-21-니트로-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,9,18(22),19-헥사엔 (E/Z 혼합물)(550 mg, 0.6606 mmol)의 용액에 10% 탄소 상 팔라듐(250 mg, 0.1175 mmol, 50% 습식)을 첨가하였다. 혼합물을 실온의 수소 풍선 하에 30℃에서 3일 동안 교반한 다음, 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 0%∼15% EtOAc/디클로로메탄)로 정제하고, 이어서 디클로로메탄과 헥산으로부터 재결정화하여 (12R)-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올 (255 mg, 80%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.41 (s, 1H), 5.37 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 3.90 - 3.68 (m, 5H), 3.47 - 3.09 (m, 3H), 2.62 - 1.94 (m, 3H), 1.90 - 1.60 (m, 2H), 1.58 - 1.40 (m, 5H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.15485, 확인된 값 482.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.29분 (LC 방법 C).
단계 11: (12 R )-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 54) 및 (12 R )-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 55)
라세미 (12R)-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올(100 mg, 0.2075 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 x 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 6분에 걸쳐 20% MeOH/CO2)로 정제하여 2개의 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 (12R)-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(54 mg, 53%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.41 (s, 1H), 5.31 (s, 2H), 3.90 - 3.70 (m, 5H), 3.47 - 3.37 (m, 1H), 3.30 (ddd, J = 12.8, 9.4, 3.1 Hz, 1H), 3.19 - 3.09 (m, 1H), 2.51 - 2.36 (m, 1H), 2.27 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.17 - 2.02 (m, 1H), 1.82 - 1.62 (m, 3H), 1.58 - 1.42 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -60.26 (s, 3F), -80.82 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.15485, 확인된 값 482.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 3.3분 (LC 방법 C).
두 번째로용리되는 거울상이성질체 (12R)-21-아미노-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(43 mg, 41%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.42 (s, 1H), 5.36 (s, 2H), 3.91 - 3.63 (m, 5H), 3.34 (ddd, J = 13.1, 10.4, 2.9 Hz, 1H), 3.26 - 3.11 (m, 2H), 2.65 - 2.47 (m, 1H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.24 - 2.09 (m, 1H), 2.06 - 1.79 (m, 2H), 1.77 - 1.65 (m, 1H), 1.62 - 1.52 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -60.58 (s, 3F), -77.24 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.1549, 확인된 값 482.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.3분 (LC 방법 C).
실시예 32: 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 56) 및 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 57)의 제조
단계 1: N- 벤질 -6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -부트-3-에닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
100 mL 플라스크에서, [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(200 mg, 0.3075 mmol)를 아세토니트릴(6 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시키고, 이어서 DIEA(300 μL, 1.722 mmol) 및 N-벤질부트-3-엔-1-아민(110 mg, 0.6822 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 90분 동안 교반하고, 실온으로 가온시켰다. 반응물을 농축시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 100% 헥산 내지 60% 아세트산 에틸/헥산(생성물은 22% 아세트산 에틸에서 용리됨))로 정제하여 N-벤질-6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(199 mg, 98%)을 황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.83 (s, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 9H), 7.26 (dt, J = 8.3, 3.5 Hz, 1H), 5.84 (ddt, J = 16.9, 10.3, 6.5 Hz, 1H), 5.67 (ddt, J = 17.1, 10.3, 6.8 Hz, 1H), 5.14 - 4.94 (m, 4H), 4.88 (s, 2H), 4.75 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.61 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.54 (s, 1H), 2.45 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 2.37 (q, J = 7.4 Hz, 2H), 2.31 - 2.13 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 661.2124, 확인된 값 662.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.75분 (LC 방법 M).
단계 2: 13-벤질-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
500 mL 둥근 바닥 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속으로 탈기시킨, DCE (150 mL) 중 Zhan 촉매-1B(55 mg, 0.07496 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, DCE (20 mL) 중 N-벤질-6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(199 mg, 0.3008 mmol)의 용액을 주사기를 통해 적가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 3시간 동안 가열하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산 내지 50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 황색 잔류물을 수득하고, 이를 14시간 동안 진공 하에 두어 13-벤질-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(130 mg, 68%)을 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.79 (s, 1H), 7.43 - 7.30 (m, 8H), 7.29 - 7.25 (m, 2H), 5.55 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 5.31 (q, J = 8.6 Hz, 1H), 4.86 (s, 2H), 4.82 (d, J = 1.8 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.49 - 2.25 (m, 4H), 2.24 (d, J = 4.9 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 633.1811, 확인된 값 634.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.49분 (LC 방법 M).
단계 3: 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
250 mL 플라스크에서, AcOH (2 mL) 및 아세트산 에틸 (2 mL) 중 13-벤질-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(130 mg, 0.2052 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(35 mg의 10% w/w, 0.03289 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소에서 4시간 동안 교반하였다. 추가의 Pd/C(약 185.6 mg의 10% w/w, 0.1744 mmol)를 첨가하고, 1시간 동안 추가로 교반하였다. 혼합물을 여과하고 농축시키고, 스테인리스강 압력 반응기에서 신선한 Pd/C(35 mg의 10% w/w, 0.03289 mmol) 및 AcOH(2.008 mL) 및 아세트산 에틸(2.008 mL)과 반응시켰다. 용기를 질소로 퍼징한 다음, 수소로 플러싱하고, 140 psi 수소에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 과량의 아세토니트릴과 아세트산 에틸이 포함된 셀라이트 플러그를 세척한 다음, 유기 여액을 농축시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산 내지 100% 아세트산 에틸 )로 정제하여 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(76 mg, 87%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 425.12863, 확인된 값 426.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 A).
단계 4: 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 56) 및 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 57)
라세미 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(75 mg, 0.1763 mmol)을 40℃의 Phenomenex LUX-4 컬럼(250 x 10 mm, 5μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 10% MeOH(+ 20 mM NH3)/90% CO2; 유속: 70 mL/분; 주입 부피: 500 μL)로 정제하여 2개의 거울상이성질체를 분리하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(23.8 mg, 63%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 (d, J = 15.4 Hz, 2H), 6.29 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 5.95 (s, 2H), 3.23 (td, J = 8.1, 5.3 Hz, 2H), 2.13 (dq, J = 10.9, 6.6, 6.2 Hz, 2H), 1.84 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.67 - 1.60 (m, 2H), 1.59 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 1.52 (s, 1H), 1.39 (d, J = 8.2 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 425.12863, 확인된 값 426.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.77분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(24.0 mg, 63%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 (d, J = 15.4 Hz, 2H), 6.29 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 5.95 (s, 2H), 3.23 (td, J = 8.2, 5.4 Hz, 2H), 2.14 (dq, J = 11.6, 6.8, 6.3 Hz, 2H), 1.86 (p, J = 6.9 Hz, 1H), 1.68 - 1.60 (m, 2H), 1.60 - 1.54 (m, 2H), 1.51 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.38 (d, J = 8.9 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 425.12863, 확인된 값 426.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.77분 (LC 방법 A).
실시예 33: 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-온 (화합물 58)의 제조
단계 1: 메틸 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴 (58.8 mL) 중 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (3.92 g, 13.77 mmol)의 용액에 N-메틸부트-3-엔-1-아민 (염산염)(1.662 g, 13.67 mmol), DIEA (6.224 mL, 35.73 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 100% 헥산 내지 50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 메틸 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(3.89 g, 84%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 333.09363, 확인된 값 334.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.73분 (LC 방법 S).
단계 2: 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
에탄올 (84 mL) 중 메틸 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(4.2 g, 12.60 mmol)의 용액에 하이드라진 (5.932 mL, 189.0 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(150 mL)로 희석하고 DCM(3 X 100 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시킨 다음, 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 0%∼10% MeOH/디클로로메탄)로 정제하여 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(4.05 g, 96%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 333.1049, 확인된 값 334.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.52분 (LC 방법 S).
단계 3: 에틸 2-[ 터트 -부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔오에이트
질소 하에 DMF (96.08 mL) 중 에틸 2-하이드록시헥스-5-엔오에이트 (8 g, 48.04 mmol)의 용액에 이미다졸(6.543 g, 96.11 mmol) 및 DMAP(1.467 g, 12.01 mmol)를 첨가하고, 이어서 TBDPSCl(15.0 mL, 57.68 mmol)을 서서히 첨가하였다. 용액을 주변 온도에서 밤새 교반하였다. 반응물을 디클로로메탄(150 mL)으로 희석하고, 포화 염화 암모늄 용액(2 X 100 mL), 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 220 g; 구배: 0%∼20% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 에틸 2-[터트-부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔오에이트 (15.6 g, 82%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.68 - 7.54 (m, 4H), 7.52 - 7.28 (m, 6H), 5.72 (ddt, J = 16.9, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.05 - 4.79 (m, 2H), 4.21 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 3.88 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.22 - 1.89 (m, 2H), 1.85 - 1.65 (m, 2H), 1.02 (d, J = 11.7 Hz, 12H) ppm. 머무름 시간: 0.88분 (LC 방법 R).
단계 4: 2-[ 터트 -부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔산
MeOH (99.16 mL) 및 THF (34 mL) 중 에틸 2-[터트-부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔오에이트(17 g, 42.86 mmol)의 용액에 NaOH(39.82 mL, 2 N, 79.64 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 주변 온도에서 밤새 교반하였다. 유기 용매를 제거하고, 잔류물을 1 N NaOH(20 mL)로 희석학, MTBE(500 mL)로 2회 추출하였다. 유기상을 1 N NaOH(1 X 50 mL)로 역추출하고, 합쳐진 수성상을 10% 수성 HCl로 pH = 1로 산성화하였다. 수성상을 아세트산 에틸(2 X 100 mL)로 추출하고, 유기상을 염수(1 X 100 mL)로 세척하여였다. 합쳐진 아세트산 에틸 상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 2-[터트-부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔산(10.2 g, 65%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.22 (s, 1H), 7.66 - 7.56 (m, 4H), 7.52 - 7.35 (m, 6H), 5.75 - 5.62 (m, 1H), 4.94 - 4.83 (m, 2H), 4.16 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 2.17 - 2.04 (m, 2H), 1.71 (qd, J = 8.8, 7.4, 3.0 Hz, 2H), 1.03 (s, 9H) ppm. 머무름 시간: 0.86분 (LC 방법 S).
단계 5: 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]- N '-[2-[ 터트 -부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
DMF (37.01 mL) 중 2-[터트-부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔산 (3.344 g, 9.074 mmol) 및 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(2.88 g, 8.642 mmol)의 용액에 DIEA(4.573 mL, 26.25 mmol)를 첨가하고, 이어서 HATU(3.943 g, 10.37 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(3 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 구배: 100% 헥산 내지 70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-N'-[2-[터트-부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(4.5 g, 76%)를 황색의 끈적이는 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 683.2751, 확인된 값 684.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.83분 (LC 방법 R).
단계 6: N -부트-3-에닐-6-[5-[1-[ 터트 -부틸(디페닐)실릴]옥시펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -메틸-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (134.2 mL) 중 6-[부트-3-에닐(메틸)아미노]-N'-[2-[터트-부틸(디페닐)실릴]옥시헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (5.87 g, 8.584 mmol) 및 DIEA(5.194 mL, 29.82 mmol)의 용액을 50℃에서 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(2.557 g, 13.41 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(250 mL)으로 퀀칭시키고, 아세트산 에틸(3 X 125 mL)로 추출하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 100% 헥산 내지 30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 N-부트-3-에닐-6-[5-[1-[터트-부틸(디페닐)실릴]옥시펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-메틸-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(5.61 g, 98%)을 백색 발포성 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 665.2645, 확인된 값 666.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.83분 (LC 방법 T).
단계 7: 터트 -부틸-[[13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-6-일]옥시]-디페닐-실란 ( E/Z 혼합물)
1 L 둥근 바닥 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기시킨, DCE (600 mL) 중 N-부트-3-에닐-6-[5-[1-[터트-부틸(디페닐)실릴]옥시펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-메틸-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.2 g, 1.802 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, DCE (50 mL) 중 [1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)이미다졸리딘-2-일리덴]-디클로로-[(2-이소프로폭시페닐)메틸렌]루테늄(282.3 mg, 0.4505 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g; 구배: 100% 헥산∼40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸-[[13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-6-일]옥시]-디페닐-실란(E/Z 혼합물)(780 mg, 68%)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 637.2332, 확인된 값 638.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.77분 (LC 방법 T).
단계 8: 13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-올 ( E/Z 혼합물)
THF (8.1 mL) 중 터트-부틸-[[13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-6-일]옥시]-디페닐-실란 (E/Z 혼합물)(490 mg, 0.7684 mmol)의 교반 용액에 0℃의 TBAF(1.537 mL, 1 M, 1.537 mmol)를 첨가하였다. 얼음조를 제거하고, 반응물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0% 헥산∼30% EtOAc/헥산)로 정제하여 13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-올(E/Z 혼합물)(180 mg, 59%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 399.11545, 확인된 값 400.8 (M+1)+; 머무름 시간: 1.65분 (LC 방법 A).
단계 9: 13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-온 ( E/Z 혼합물)
DCM (5 mL) 중 13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-올 (E/Z 혼합물)(260 mg, 0.6511 mmol)의 용액에 DMP(359.0 mg, 0.8464 mmol)를 첨가하고, 반응물을 30분 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NaHCO3으로 퀀칭시키고, DCM(2 X 25 mL)으로 추출하였다. 유기층을 합치고, 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-온(E/Z 혼합물)(260 mg, 100%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 397.0998, 확인된 값 398.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.69분 (LC 방법 S).
단계 10: 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-온 (화합물 58)
질소로 플러싱한, 아세트산 에틸 (1.148 mL) 중 13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-온(E/Z 혼합물)(50 mg, 0.107 mmol)의 용액에 Pd/C(38.98 mg, 10% w/w, 0.03663 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 배기시킨 다음, 수소 풍선을 사용해 수소 분위기 하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0% 헥산∼30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-온(30.0 mg, 76%)을 연 주황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.37 (s, 1H), 3.27 (dd, J = 9.1, 6.3 Hz, 2H), 2.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.90 - 2.79 (m, 2H), 1.95 - 1.83 (m, 4H), 1.59 (p, J = 7.1, 6.5 Hz, 2H), 1.48 (tdd, J = 9.3, 5.8, 3.3 Hz, 2H) ppm. 2개의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 369.14127, 확인된 값 370.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.88분 (LC 방법 A).
실시예 34: (6 S, 15 R )-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(화합물 59) 및 (6 R, 15 R )-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(화합물 60)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DCM (5 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)에탄온 (583 mg, 1.833 mmol)의 교반 용액에 DCM (5 mL) 중 (N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란 (552 mg, 1.826 mmol)의 용액을 첨가하고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, DCM (5 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(500 mg, 1.204 mmol)을 서서히 적가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산∼50% EtOAc/헥산의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(582 mg, 64%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 757.0996, 확인된 값 758.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.66분 (LC 방법 T).
단계 2: 터트 -부틸 N -[(15 S )-8-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
아세토니트릴 (200 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(2.0 g, 2.640 mmol)의 교반 용액을 N2로 5분 동안 버블링하였다. 그런 다음, 트리스-o-톨릴포스판 (167 mg, 0.5487 mmol) 및 Pd(OAc)2(64 mg, 0.2851 mmol)를 첨가하고, 이어서 트리에틸아민(2.0 mL, 14.35 mmol)을 첨가하고, 용액을 80℃에서 6시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 약 5 mL 부피로 농축시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산 내지 50% EtOAc/헥산의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[(15S)-8-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(1.04 g, 63%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 629.1873, 확인된 값 630.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.73분 (LC 방법 M).
단계 3: (6 S, 15 R )-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(화합물 59) 및 (6 R, 15 R )-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(화합물 60)
3방향 어댑터를 사용해 H2 풍선이 장착된 둥근 바닥 플라스크에서, 에탄올 (5 mL) 중 터트-부틸 N-[(15S)-8-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(354 mg, 0.5623 mmol)의 용액에 Pd/C(64 mg, 10% w/w, 0.06014 mmol)를 첨가하였다. 진공을 인가하고, 질소 가스로 3회 역충진한 다음 진공을 인가하였다. 플라스크에 수소 가스를 채운 다음, 15시간 동안 교반하였다. 진공을 인가하고, 질소 가스를 3회 역충진한 다음, 아세트산에틸로 희석하고 셀라이트로 여과하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 4 mL의 1:3 TFA/디클로로메탄에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 실온에서 약 1시간 동안 교반하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 30%~99% 아세토니트릴/물(+5 mM HCl))로 정제하여 황색 고형분으로서 및 처음 용리되는 거울상이성질체로서, (6S,15R)-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(염산염)(9.1 mg, 39%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.90 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.35 (m, 1H), 7.22 (ddd, J = 8.4, 4.6, 2.3 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 12.5, 8.4 Hz, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.87 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 3.66 - 3.57 (m, 1H), 3.31 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.98 (dd, J = 14.6, 6.6 Hz, 1H), 2.58 - 2.49 (m, 1H), 2.45 (t, J = 13.5 Hz, 1H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 1.95 (td, J = 12.2, 11.1, 5.9 Hz, 2H), 1.69 - 1.59 (m, 3H), 1.04 (dd, J = 12.0, 6.5 Hz, 1H) ppm. 3개의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 531.1505, 확인된 값 532.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.67분 (LC 방법 J).
두 번째 용리되는 거울상이성질체인 (6R,15R)-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(염산염)(7.7 mg, 33%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (s, 1H), 8.15 (dd, J = 7.7, 2.3 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.33 (ddd, J = 8.4, 4.5, 2.3 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 12.4, 8.4 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 3.98 (dt, J = 9.9, 5.3 Hz, 1H), 3.70 (br. s, 1H), 3.24 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.04 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 2.55 (m, 2H), 2.24 (dt, J = 11.8, 5.9 Hz, 1H), 2.18 - 2.04 (m, 1H), 2.00 - 1.83 (m, 3H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.59 (qd, J = 11.3, 6.1 Hz, 1H), 0.90 - 0.74 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 531.1505, 확인된 값 532.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.73분 (LC 방법 J).
단계 4: 비정질 화합물 60(순수한 형태)의 고형분 형태의 특성 분석
A. X-선 분말 회절
단계 3에 의해 생산된 비정질 화합물 60(순수한 형태)에 대한 XRPD 회절도를 일반적인 X-선 분말 회절(XRPD) 방법을 사용해 수득하였는데, 이는 도 12에 제공되어 있다.
B. 열중량 분석 (TGA)
비정질 화합물 60(순수한 형태)에 대한 TGA 곡선은 도 13에 제공되어 있다. TGA 곡선은 350.00℃까지 10.00℃/분의 속도로 온도가 증가할 때 약 40℃ 내지 229.15℃에서 1.60%의 중량이 손실되었음을 보여준다.
C. 시차주사 열량측정 분석
화합물 60의 순수한 비정질 무함유 형태를 DSC를 사용해 가열 및 냉각 방법에 의해 생성하였다. 물질을 DSC 팬 상에서 240℃로 가열한 다음 실온까지 냉각시켰다. 그런 다음, 물질을 240℃로 다시 가열하여 비정질 물질의 유리 전이 온도를 확인하였다.
DSC 분석은 다음 방법을 사용해 수행하였다:
25.0 내지 240.0℃, 10.00℃/분, N2 50.0 ml/분,
240.0 내지 -20.0℃, -50.00℃/분, N2 50.0 ml/분, 그런 다음
-20.0 내지 240.0℃, 10.00℃/분, N2 50.0 ml/분.
비정질 화합물 60(순수한 형태)의 DSC 온도변화도는 도 14에 제공되어 있다. Tg는 관찰되지 않았다.
실시예 35: 17-아미노-6,13-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 61) 및 17-아미노-6,13-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 62)의 제조
단계 1: 17-아미노-6,13-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 61) 및 17-아미노-6,13-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 62)
질소 하에, THF (504.5 μL) 중 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-온(25 mg, 0.06769 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시킨 다음, MeMgCl (67.70 μL of 3 M, 0.2031 mmol)을 적가하고, 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 1 M HCl로 퀀칭시킨 다음, EtOAc(2 X 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 라세미 혼합물을 황색 고형분으로서 수득하고, 이를 Chiral Technologies에서 판매하는 AS-H 컬럼 (250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)(품번 = 20945)을 사용해 정상상 SFC(컬럼: 45%~80% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2; 유속 = 40 mL/분; 컬럼 온도 = 40℃)로 추가로 정제하여 다음 2개의 거울상이성질체를 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-6,13-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(5 mg, 38%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.35 (s, 1H), 3.36 - 3.19 (m, 2H), 2.92 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.06 (dt, J = 14.6, 7.9 Hz, 2H), 1.84 (dtd, J = 28.4, 12.8, 11.3, 6.1 Hz, 4H), 1.70 (s, 3H), 1.55 - 1.47 (m, 2H), 1.44 - 1.34 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 385.17255, 확인된 값 386.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-6,13-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(5 mg, 36%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.53 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.41 (d, J = 37.2 Hz, 2H), 3.04 (s, 3H), 2.76 - 2.30 (m, 3H), 2.26 - 2.07 (m, 2H), 1.98 (dd, J = 14.5, 7.6 Hz, 3H), 1.79 (s, 3H), 1.66 - 1.41 (m, 5H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 385.17255, 확인된 값 386.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.77분 (LC 방법 A).
실시예 36: (12 R )-20-아미노-18-(프로판-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 63) 및 (12 R )-20-아미노-18-(프로판-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 64)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(프로프-1-엔-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
툴루엔 (14 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(330 mg, 0.5063 mmol)의 용액을 질소 버블링에 의해 20분 동안 탈기하였다. 디클로로메탄(23 mg, 0.0282 mmol)과 칼륨 이소프로페닐트리플루오로보레이트 (106 mg, 0.7163 mmol) 및 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 염화 팔라듐(II)의 복합체를 첨가하고, 이어서 질소 탈기한 탄산 세슘 수용액(0.6 mL, 2 M, 1.2000 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(2 X 25 mL)로 헹구었다. 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(프로프-1-엔-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(210 mg, 71%)을 적색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 555.20935, 확인된 값 556.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.56분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(프로판-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 63) 및 (12 R )-20-아미노-18-(프로판-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 64)
메탄올 (21 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(프로프-1-엔-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(210 mg, 0.3591 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(160 mg, 0.0752 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 황색 고형분으로서 및 처음 용리되는 거울상이성질체로서, (12R)-20-아미노-18-(프로판-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(54 mg, 32%)을 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d)) δ 7.01 (s, 1H), 5.02 (br. s., 2H), 4.03 - 3.80 (m, 1H), 3.79 - 3.58 (m, 2H), 3.35 - 3.20 (m, 1H), 3.15 (td, J = 9.0, 3.1 Hz, 1H), 2.56 - 2.34 (m, 2H), 2.30 - 2.14 (m, 1H), 2.12 - 1.92 (m, 2H), 1.90 - 1.76 (m, 1H), 1.73 - 1.42 (m, 8H), 1.33 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.15 (d, J = 6.2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.2195, 확인된 값 440.3 (M+1)+; 머무름 시간: 3.3분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 (12R)-20-아미노-18-(프로판-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(29 mg, 18%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.01 (s, 1H), 5.47 - 4.58 (m, 2H), 4.04 - 3.83 (m, 1H), 3.81 - 3.67 (m, 1H), 3.65 - 3.51 (m, 1H), 3.33 - 3.17 (m, 1H), 3.16 - 2.99 (m, 1H), 2.67 - 2.48 (m, 1H), 2.45 - 2.29 (m, 1H), 2.28 - 2.10 (m, 2H), 2.06 - 1.87 (m, 2H), 1.86 - 1.72 (m, 1H), 1.70 - 1.45 (m, 7H), 1.34 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.2195, 확인된 값 440.3 (M+1)+; 머무름 시간: 3.22분 (LC 방법 C).
실시예 37: 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 65), 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 66), 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 67), 및 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 68)의 제조
단계 1: 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -(1-메틸부트-3-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
40 mL의 밀봉된 바이알에서, [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(425 mg, 0.6534 mmol)를 실온의 아세토니트릴(11 mL)에 용해시키고, 이어서 DIEA(750 μL, 4.306 mmol) 및 펜트-4-엔-2-아민(염산염)(220 mg, 1.809 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 90분 동안 교반하였다. 반응물을 농축시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산 내지 60% 아세트산 에틸)로 정제하여 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1-메틸부트-3-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(266 mg, 70%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.38 - 7.31 (m, 5H), 5.85 (ddt, J = 16.8, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.78 - 5.63 (m, 1H), 5.13 - 4.94 (m, 4H), 4.76 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.48 (dq, J = 8.2, 5.9 Hz, 1H), 2.59 - 2.51 (m, 2H), 2.47 - 2.40 (m, 1H), 2.33 - 2.19 (m, 3H), 1.22 (d, J = 6.6 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 585.1811, 확인된 값 586.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.01분 (LC 방법 J).
단계 2: 6-벤질옥시-12-메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
500 mL 둥근 바닥 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기시킨, DCE (200 mL) 중 Zhan 촉매-1B(82 mg, 0.1118 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃에서 가열하였다. 그런 다음, DCE (40 mL) 중 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1-메틸부트-3-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(260 mg, 0.4441 mmol)의 용액을 주사기를 통해 적가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산∼50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-벤질옥시-12-메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(150 mg, 61%)을 담황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 557.1498, 확인된 값 558.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 J).
단계 3: 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
250 mL 둥근바닥 플라스크에서, AcOH (2.5 mL) 및 아세트산 에틸 (2.5 mL) 중 6-벤질옥시-12-메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(145 mg, 0.2601 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(275 mg의 10% w/w, 0.2584 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고 과량의 아세토니트릴과 아세트산 에틸이 포함된 셀라이트 플러그를 세척한 다음, 여액을 농축시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산 내지 70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여, 황색 고형분인, 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올의 4개의 입체이성질체의 혼합물을 수득하였다(95 mg, 83%). ESI-MS m/z 계산된 값 439.1443, 확인된 값 440.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.34분 (LC 방법 A).
단계 4: 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 65), 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 66), 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 67) 및 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 68)
라세미 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(93 mg, 0.2117 mmol)을, 40℃의 Phenomenex X-4 컬럼(250 x 21.2 mm, 5μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 10% MeOH(+ 20 mM NH3)/90% CO2; 유속: 70 mL/분; 주입 부피: 500 μL)로 정제하여 4개의 거울상이성질체를 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(18.8 mg, 80%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.59 (d, J = 15.2 Hz, 2H), 6.01 (s, 2H), 5.10 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 3.69 - 3.59 (m, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 2.01 (ddd, J = 13.9, 10.7, 7.0 Hz, 1H), 1.61 (d, J = 9.8 Hz, 2H), 1.50 (d, J = 9.2 Hz, 3H), 1.44 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 1.24 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.84 (td, J = 14.7, 11.1, 6.0 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1443, 확인된 값 440.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.98분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체를 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(16.0 mg, 68%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.00 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.13 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 3.78 - 3.65 (m, 1H), 2.43 - 2.26 (m, 2H), 2.07 - 1.99 (m, 1H), 1.69 (s, 2H), 1.43 (s, 4H), 1.24 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.90 (ddt, J = 18.2, 12.2, 5.9 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1443, 확인된 값 440.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.95분 (LC 방법 A).
세 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 3)(18.3 mg, 78%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.59 (d, J = 15.1 Hz, 2H), 6.00 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.10 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 3.67 - 3.59 (m, 1H), 2.47 (s, 1H), 2.28 - 2.19 (m, 1H), 2.00 (ddd, J = 13.8, 8.8, 5.7 Hz, 1H), 1.66 - 1.57 (m, 2H), 1.53 - 1.50 (m, 1H), 1.44 (d, J = 11.0 Hz, 3H), 1.24 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.89 - 0.81 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1443, 확인된 값 440.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.98분 (LC 방법 A).
네 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 4)(16.4 mg, 70%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.00 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 5.13 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 3.76 - 3.67 (m, 1H), 2.42 - 2.26 (m, 2H), 2.08 (s, 2H), 1.71 - 1.67 (m, 1H), 1.49 - 1.38 (m, 4H), 1.24 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.96 - 0.86 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1443, 확인된 값 440.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.95분 (LC 방법 A).
실시예 38: (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(거울상이성질체 1)(화합물 69) 및 (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 70)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(3-브로모페닐)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DMF (79.83 mL) 중 (N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란 (4.843 g, 16.02 mmol) 및 1-(3-브로모페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄온(4.053 g, 16.02 mmol)의 교반 용액에 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(3.2453 g, 6.406 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 캡핑하고, 실온에서 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3 (1X), 포화 NH4Cl (1X), 및 염수(1X)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 주황색 오일을 수득하고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산∼100% 아세트산 에틸)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(3-브로모페닐)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(4.4 g, 99%)를 황색/주황색 시럽으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 691.12286, 확인된 값 692.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.82분 (LC 방법 T).
단계 2: 터트 -부틸 N -[(15 S )-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
환류 응축기가 장착된 둥근 바닥 플라스크에서, 탈기된 NMP(264 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(3-브로모페닐)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(4.4 g, 6.354 mmol)의 교반 용액에 디아세톡시팔라듐(427.9 mg, 1.906 mmol)에 이어서 트리스-o-톨릴포스판(1.16 g, 3.811 mmol) 및 TEA(708.4 μL, 5.083 mmol)를 첨가하고, 용액을 N2로 5분 동안 버블링한 다음, 오일조에서 140℃에서 100분 동안 가열하였다. 디아세톡시팔라듐(142.7 mg, 0.6356 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리스-o-톨릴포스판(386.8 mg, 1.271 mmol)을 첨가하고, 140℃에서 15분 동안 연속 교반한 다음, TEA(221.3 μL, 1.588 mmol)를 첨가하고 140℃에서 15분 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각시키고 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3 (1X), 포화 NH4Cl (1X), 물 (1X), 및 염수(1X)로 세척한 다음, MgSO4로 건조시키고, 셀라이트로 여과하고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산∼100% 아세트산 에틸의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[(15S)-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(1.62 g, 35%)를 황색/주황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 611.1967, 확인된 값 612.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.64분 (LC 방법 T).
단계 3: 터트 -부틸 N -[(15 R )-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-23-일]카르바메이트
에탄올 (1.689 mL) 중 터트-부틸 N-[(15S)-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트 (E/Z 혼합물)(30.7 mg, 0.04418 mmol)의 용액에 Pd/C(25.03 mg의 10% w/w, 0.02352 mmol)를 첨가하고, 용액을 통해 5분 동안 수소를 버블링한 다음, 플라스크를 수소 풍선으로 캡핑하고 16시간 동안 교반하였다. 용액을 통해 질소를 5분 동안 버블링한 다음, 셀라이트로 여과하고 메탄올로 세척하여 황색 용액을 수득하고, 이를 농축시켜 생성물, 터트-부틸 N-[(15R)-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-23-일]카르바메이트 (29.9 mg, 100%)를 황색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 613.2124, 확인된 값 614.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.75분 (LC 방법 T).
단계 4: (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(거울상이성질체 1)(화합물 69)
DCM (541.8 μL) 중 터트-부틸 N-[(15R)-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-23-일]카르바메이트 (29.9 mg, 0.04415 mmol)의 용액에 TFA(204.2 μL, 2.65 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 주변 온도에서 4시간 동안 교반한 다음, 휘발성 물질을 회전 증발에 의해 제거하고, DMSO에 용해시키고, 여과하고, 역상 HPLC(구배: 15.0분에 걸쳐 40%∼80% 아세토니트릴/물(+5 mM HCl))로 정제하여 황색 고형분으로서 및 처음 용리되는 단일 거울상이성질체로서, (15R)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(거울상이성질체 1)(6.5 mg, 51%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.60 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.33 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.27 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 3.94 - 3.84 (m, 1H), 3.50 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.18 (s, 1H), 2.98 (dd, J = 14.2, 5.9 Hz, 1H), 2.51 (s, 1H), 2.28 (td, J = 11.8, 9.6, 5.6 Hz, 1H), 2.18 - 2.11 (m, 1H), 1.87 (dq, J = 12.4, 6.2 Hz, 2H), 1.84 - 1.74 (m, 1H), 1.69 - 1.59 (m, 1H), 1.53 (dd, J = 11.5, 6.4 Hz, 1H), 0.83 (dd, J = 11.2, 5.9 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 513.16, 확인된 값 514.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.06분 (LC 방법 M).
단계 5: (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 70)
디클로로메탄 (5 mL) 중 터트-부틸 N-[(15R)-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-23-일]카르바메이트 (1.1 g, 1.149 mmol)의 용액에 TFA(15 mL, 194.7 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 주변 온도에서 15분 동아 교반한 다음, 휘발성 물질을 가열 없이 회전 증발에 의해 제거하고, 포화 수성 NaHCO3을 첨가하여 잔여 산을 퀀칭시켰다. 이 혼합물을 EtOAc(2X)로 추출하고, 유기층을 합치고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 여액을 농축시켜 황색 발포체를 수득하고, 이를 역상 크로마토그래피(컬럼: 275 g C18 컬럼; 용리 구배: 50%∼100% 아세토니트릴/물)로 정제하여 약간의 불순물을 여전히 함유하는 생성물을, 용리되는 두 번째 단일 거울상이성질체로서 수득하였다. 불순한 분획을 합치고, 역상 크로마토그래피(컬럼: 100 g C18 컬럼; 용리 구배: 50%~100% 아세토니트릴/물)로 다시 정제하여 순수한 생성물을 수득하고, 이를 제1 컬럼의 순수한 생성물과 합치고, 농축시켜 (15R)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(거울상이성질체 2)(234 mg, 79%)을 황색 고형분으로서 수득하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.70 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.63 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 4.16 (dt, J = 10.6, 5.3 Hz, 1H), 3.60 - 3.48 (m, 1H), 3.23 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 2.90 (dd, J = 15.9, 8.0 Hz, 1H), 2.75 - 2.65 (m, 1H), 2.40 (dt, J = 10.9, 5.6 Hz, 1H), 2.22 (dt, J = 11.9, 6.0 Hz, 1H), 1.92 (dd, J = 12.8, 6.8 Hz, 2H), 1.83 - 1.67 (m, 2H), 1.58 (dt, J = 11.6, 5.8 Hz, 1H), 0.85 (dt, J = 16.2, 6.1 Hz, 1H), 하나의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 513.16, 확인된 값 514.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.34분 (LC 방법 A).
단계 6: 비정질 화합물 70(순수한 형태)의 고형분 형태의 특성 분석
A. X-선 분말 회절
단계 5에 의해 생산된 비정질 화합물 70(순수한 형태)에 대한 XRPD 회절도를 일반적인 X-선 분말 회절(XRPD) 방법을 사용해 수득하였는데, 이는 도 15에 제공되어 있다.
실시예 39: (12 R )-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 71) 및 (12 R )-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 72)의 제조
단계 1: (12 R )-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 71) 및 (12 R )-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 72)
메탄올 (15 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)(300 mg, 0.4396 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 트리에틸아민(217.8 mg, 0.3 mL, 2.1524 mmol)을 첨가하고, 이어서 탄소 상 팔라듐(325 mg, 0.1527 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링하고, 수소 하에 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(40 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 주황색 고형분으로서 및 처음 용리되는 부분 입체이성질체로서, (12R)-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(90 mg, 49%)을 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.06 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.30 - 4.06 (m, 2H), 3.97 - 3.81 (m, 1H), 3.54 - 3.37 (m, 1H), 3.30 - 3.11 (m, 1H), 2.73 - 2.54 (m, 1H), 2.50 - 2.35 (m, 1H), 2.31 - 1.84 (m, 5H), 1.82 - 1.48 (m, 7H), 1.02 - 0.79 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 397.1726, 확인된 값 398.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.22분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체 (12R)-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(60 mg, 33.9%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.08 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.85 (br. s., 2H), 4.00 - 3.87 (m, 1H), 3.54 - 3.36 (m, 1H), 3.26 - 3.07 (m, 1H), 2.75 - 2.55 (m, 1H), 2.36 - 2.12 (m, 3H), 2.11 - 1.92 (m, 3H), 1.84 - 1.75 (m, 1H), 1.73 - 1.34 (m, 6H), 1.10 - 0.95 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 397.1726, 확인된 값 398.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.22분 (LC 방법 C).
실시예 40: 17-아미노-13-시클로부틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 73) 및 17-아미노-13-시클로부틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 74)의 제조
단계 1: 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -부트-3-에닐- N -시클로부틸-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
THF (6 mL) 중 [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(300 mg, 0.4612 mmol)의 혼합물에 N-부트-3-에닐시클로부탄아민 (296 μL, 1.844 mmol) 및 디이소프로필 에틸아민(241 μL, 1.384 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 50℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 세척한 다음 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO4), 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 15분에 걸쳐 0%∼10% EtOAc/헥산)로 정제하여 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-N-시클로부틸-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(127 mg, 44%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.66 (s, 1H), 7.45 - 7.29 (m, 5H), 5.80 (ddt, J = 16.6, 10.2, 6.3 Hz, 1H), 5.64 (ddt, J = 17.1, 10.3, 6.9 Hz, 1H), 5.14 - 4.95 (m, 5H), 4.81 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.33 (p, J = 8.2 Hz, 1H), 3.74 - 3.64 (m, 2H), 2.59 - 2.44 (m, 2H), 2.42 - 2.20 (m, 5H), 2.20 - 2.07 (m, 2H), 1.80 - 1.62 (m, 2H) ppm; 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -58.50, -73.15 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 625.2124, 확인된 값 626.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.61분 (LC 방법 T).
단계 2: 6-벤질옥시-13-시클로부틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
120℃의 툴루엔 (9 mL) 중 벤질리덴-[1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)이미다졸리딘-2-일리덴]-디클로로-루테늄;트리시클로헥실포스판 (25 mg, 0.02945 mmol)의 용액을 질소로 버블링하면서 툴루엔 (9 mL) 중 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-부트-3-에닐-N-시클로부틸-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(121 mg, 0.1934 mmol)의 용액을 적가하고, 혼합물을 질소로 버블링하면서 120℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 15분에 걸쳐 0%∼20% EtOAc/헥산)로 정제하여 6-벤질옥시-13-시클로부틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔(E/Z 혼합물)(45 mg, 35%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 597.1811, 확인된 값 598.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.54분 (LC 방법 T).
단계 3: 17-아미노-13-시클로부틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 73) 및 17-아미노-13-시클로부틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 74)
아세트산 (700 μL) 중 6-벤질옥시-13-시클로부틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔 (E/Z 혼합물)(45 mg, 0.06778 mmol) 및 Pd/C (22 mg of 10% w/w, 0.02067 mmol)의 혼합물을 수소 하에(스테인리스강 압력 용기에서 200 psi) 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 여과하고 여액을 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 15분에 걸쳐 0%∼35% EtOAc/헥산)로 정제하여 라세미 6-벤질옥시-13-시클로부틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-아민을 수득하였다. 라세미 물질을 아세토니트릴에 20 mg/mL로 용해시키고, 거울상이성질체를 AS-3 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기))을 사용해 키랄 SFC(구배: 10분에 걸쳐 5%∼15% 메탄올(5 mM NH3)/CO2 이동상)로 정제하였다. 이 조건으로 아래에 기술된 것과 같은 2개의 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
피크 1을 농축시켜 17-아미노-13-시클로부틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(6.7 mg, 21%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.38 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.07 (tt, J = 9.5, 7.3 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.49 - 3.26 (m, 2H), 2.43 - 2.23 (m, 3H), 2.21 - 2.04 (m, 4H), 1.76 (td, J = 12.4, 5.3 Hz, 1H), 1.62 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 1.53 (s, 6H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -58.82, -79.80 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 Q).
피크 2를 농축시켜 17-아미노-13-시클로부틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(6.5 mg, 20%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.39 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.07 (tt, J = 9.6, 7.3 Hz, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.46 - 3.28 (m, 2H), 2.43 - 2.23 (m, 3H), 2.21 - 2.03 (m, 4H), 1.76 (td, J = 12.4, 5.2 Hz, 1H), 1.68 - 1.41 (m, 8H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -58.82, -79.80 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.83분 (LC 방법 Q).
실시예 41: 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-온 ( E/Z 혼합물)(화합물 75)의 제조
단계 1: 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-온 ( E/Z 혼합물)(화합물 75)
아세트산 에틸 (6.292 mL) 중 13-메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-온(E/Z 혼합물)(250 mg, 0.6292 mmol) 및 염화 주석(II) 이수화물(568 mg, 2.517 mmol)의 혼합물을 55℃에서 30분 동안 교반한 다음, EtOAc로 희석하고, 혼합물에 점성이 생길 때까지 2 N NaOH를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0%∼30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-온(E/Z 혼합물)(185 mg, 80%)을 주황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.37 (s, 1H), 5.67 - 5.51 (m, 1H), 5.46 - 5.31 (m, 1H), 3.37 - 3.26 (m, 2H), 2.97 (d, J = 1.9 Hz, 3H), 2.92 - 2.83 (m, 2H), 2.66 (dq, J = 16.5, 8.4, 7.9 Hz, 4H) ppm. 2개의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 367.1256, 확인된 값 368.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.76분 (LC 방법 S).
실시예 42: 17-아미노-13-메틸-6-페닐-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 76) 및 17-아미노-13-메틸-6-페닐-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 77)의 제조
단계 1: 17-아미노-13-메틸-6-페닐-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1) (화합물 76) 및 17-아미노-13-메틸-6-페닐-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 77)
질소 하에, THF (383.4 μL) 중 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-온(19 mg, 0.05144 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시킨 다음, 브로모(페닐)마그네슘(113.2 μL, 1 M, 0.1132 mmol)을 적가하고, 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 및 1 N HCl로 퀀칭시키고, 아세트산 에틸(2 X 15 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0%∼30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 라세미 혼합물을 황색 고형분으로서 수득하였다. 그런다음, 이 라세미 물질을 Chiral Technologies에서 판매하는 OD-H 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 14.5분에 걸쳐 50%~80% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-13-메틸-6-페닐-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(4 mg, 16%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.50 (s, 1H), 7.31 - 7.15 (m, 5H), 2.95 - 2.82 (m, 3H), 2.26 - 2.07 (m, 2H), 1.96 - 1.77 (m, 2H), 1.71 - 1.08 (m, 8H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 447.1882, 확인된 값 448.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.15분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-13-메틸-6-페닐-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(4 mg, 16%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.50 (s, 1H), 7.29 - 7.18 (m, 5H), 2.91 - 2.81 (m, 3H), 2.26 - 2.08 (m, 2H), 1.92 - 1.81 (m, 2H), 1.71 - 1.20 (m, 8H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 447.1882, 확인된 값 448.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.15분 (LC 방법 A).
실시예 43: 17-아미노-6-시클로프로필-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 78) 및 17-아미노-6-시클로프로필-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 79)의 제조
단계 1: 17-아미노-6-시클로프로필-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 78) 및 17-아미노-6-시클로프로필-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 79)
질소 하에,THF (605.4 μL) 중 17-아미노-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-온(30 mg, 0.08123 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시킨 다음, 브로모(시클로프로필)마그네슘(178.7 μL, 1 M, 0.1787 mmol)을 적가하고, 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물과 1 N HCl로 퀀칭시키고, 아세트산 에틸(2 X 15 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0%∼30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 라세미 혼합물을 수득하고, 이를 Chiral Technologies에서 판매하는 OD-H 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 14.5분에 걸쳐 5%∼15% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-6-시클로프로필-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(3 mg, 9%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (s, 1H), 2.85 (s, 3H), 1.97 (td, J = 9.4, 5.3 Hz, 2H), 1.83 (dd, J = 11.5, 5.9 Hz, 2H), 1.71 - 1.32 (m, 7H), 1.29 - 1.18 (m, 2H), 0.63 (dtd, J = 9.4, 5.4, 3.7 Hz, 1H), 0.52 - 0.36 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 411.1882, 확인된 값 412.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.02분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-6-시클로프로필-13-메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(3 mg, 9%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 2.86 (s, 3H), 1.98 (td, J = 9.3, 5.3 Hz, 2H), 1.89 - 1.74 (m, 2H), 1.69 - 1.45 (m, 4H), 1.44 - 1.33 (m, 2H), 1.32 - 1.05 (m, 3H), 0.68 - 0.59 (m, 1H), 0.55 - 0.35 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 411.1882, 확인된 값 412.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.02분 (LC 방법 A).
실시예 44: (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴 (거울상이성질체 1)(화합물 80) 및 (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴 (거울상이성질체 2)(화합물 81)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르보니트릴 ( E/Z 혼합물)
마이크로웨이브 바이알에서, DMF (6 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(400 mg, 0.6662 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, 시안화 구리(I)(298 mg, 3.3273 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 질소 하에 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음 EtOAc(75 mL)로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여액을 NH4OH 수용액(10% v/v, 3 X 20 mL)으로 세척하였다. 유기층을 염수(2 x 30 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르보니트릴(E/Z 혼합물)(310 mg, 86%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.71 - 8.54 (m, 1H), 7.48 - 7.20 (m, 5H), 5.69 - 5.36 (m, 2H), 5.22 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.04 - 4.89 (m, 1H), 4.31 - 3.90 (m, 3H), 3.34 - 3.10 (m, 1H), 2.55 - 1.87 (m, 8H), 1.72 - 1.60 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 540.1733, 확인된 값 541.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.4분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21- 테트라아자테트라시클로 [15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴
(12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르보니트릴(E/Z 혼합물)(230 mg, 0.4043 mmol)을 메탄올(6 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 10% 탄소 상 팔라듐(260 mg, 0.1222 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하였다. 생성된 여액을 감압 하에 농축시켜 적색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서 (12R)-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴(130 mg, 76%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 422.16782, 확인된 값 423.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.14분 (LC 방법 E).
단계 3: (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴 (거울상이성질체 1)(화합물 80) 및 (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴 (거울상이성질체 2)(화합물 81)
부분 입체이성질체 혼합물인 (12R)-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴(162 mg, 0.3835 mmol)을 Lux 셀룰로오스-5 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 40% MeOH/60% CO2)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체를 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체 (12R)-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴(거울상이성질체 1)(47 mg, 28%)을 주황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.34 (br. s., 1H), 4.25 - 3.85 (m, 3H), 3.83 - 3.71 (m, 1H), 2.58 - 2.38 (m, 2H), 2.19 - 1.90 (m, 5H), 1.79 - 1.65 (m, 2H), 1.64 - 1.37 (m, 6H), 0.97 - 0.82 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -80.74 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 422.1678, 확인된 값 423.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.29분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 (12R)-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르보니트릴(거울상이성질체 2)(35 mg, 21%)을 주황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.35 (s, 1H), 4.98 (br. s., 2H), 4.07 - 3.88 (m, 2H), 3.85 - 3.64 (m, 2H), 2.68 - 2.49 (m, 1H), 2.41 - 2.15 (m, 2H), 2.14 - 1.88 (m, 4H), 1.81 - 1.69 (m, 1H), 1.67 - 1.50 (m, 5H), 1.09 - 0.93 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 422.1678, 확인된 값 423.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.28분 (LC 방법 C).
실시예 45: (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(거울상이성질체 1)(화합물 82) 및 (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(거울상이성질체 2)(화합물 83)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(6-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DCM (2 mL) 중 1-(6-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-에탄온(146.8 mg, 0.5779 mmol) 및 (N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란(174.7 mg, 0.5779 mmol)의 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 다음, DCM (2 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(300 mg, 0.7222 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 물과 염수로 연속 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~100% EtOAc의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(6-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(107 mg, 21%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.43 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 8.99 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 8.67 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.05 - 7.94 (m, 2H), 7.85 - 7.75 (m, 1H), 5.55 - 5.39 (m, 1H), 4.96 - 4.78 (m, 2H), 4.20 (ddd, J = 15.2, 10.7, 6.3 Hz, 1H), 3.53 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.35 (s, 1H), 2.33 (s, 1H), 2.09 (dd, J = 13.8, 6.9 Hz, 1H), 2.01 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.72 (s, 1H), 1.64 - 1.58 (m, 1H), 1.48 (d, J = 2.5 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 692.11816, 확인된 값 693.15 (M+1)+; 머무름 시간: 0.67분 (LC 방법 T).
단계 2: 터트 -부틸 N -[(15 S )-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
아세토니트릴 (8 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(6-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(60 mg, 0.08653 mmol)의 교반 용액에 아세트산 팔라듐(II)(6 mg, 0.02672 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리스-o-톨릴포스판(16 mg, 0.05257 mmol) 및 트리에틸아민(100 μL, 0.7175 mmol)을 첨가하고, 용액을 N2로 1분 동안 버블링하였다. 마이크로웨이브를 조사하면서 혼합물을 150℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, EtOAc로 희석하고, 포화 NH4Cl (1X) 및 염수(1X)로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 황색 오일을 수득하고, 이를 DMSO에 용해시키고, 역상 HPLC(구배: 15.0분에 걸쳐 40%∼80% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))를 사용해 정제하여, 터트-부틸 N-[(15S)-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(27 mg, 51%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 612.19196, 확인된 값 613.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.59분 (LC 방법 T).
단계 3: (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(거울상이성질체 1)(화합물 82) 및 (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (염산염)(거울상이성질체 2)(화합물 83)
3방향 어댑터를 사용해 수소 풍선을 장착한 둥근 바닥 플라스크에서, 에탄올 (5 mL) 중 터트-부틸 N-[(15S)-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(27 mg, 0.04408 mmol)의 용액에 탄소 상 팔라듐(12 mg, 10% w/w , 0.01128 mmol)을 첨가하였다. 혼합물에 진공을 인가하고, 질소 가스로 3회 역충진한 다음 진공을 인가하였다. 플라스크에 수소 가스를 채운 다음, 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 혼합물에 진공을 인가하고, 질소 가스를 3회 역충진한 다음, 아세트산에틸로 희석하고 셀라이트로 여과하였다. 여액을 농축시키고, 400 μL의 1:3 TFA/디클로로메탄 혼합물에 용해시켰다. 반응물을 약 1시간 동안 교반하고 용매를 증발시켰다. 생성된 잔류물을 2 mL의 MeOH에 용해시키고, 역상 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 30%~99% 아세토니트릴/물(+5 mM HCl))로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체 (15R)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(염산염)(거울상이성질체 1)(5.1 mg, 40%)을 황색 비정질 고형분으로서 수득하였다,. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.79 (s, 2H), 7.75 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.59 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.93 (tdd, J = 9.8, 5.9, 3.0 Hz, 1H), 3.49 (q, J = 8.8 Hz, 1H), 3.23 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.10 - 3.00 (m, 1H), 2.74 - 2.67 (m, 1H), 2.43 (dd, J = 14.2, 10.6 Hz, 1H), 2.23 (dqd, J = 19.9, 7.3, 2.7 Hz, 2H), 1.90 (dt, J = 12.6, 6.6 Hz, 1H), 1.69 (dtd, J = 28.3, 11.9, 7.9 Hz, 2H), 1.58 - 1.50 (m, 1H), 0.82 (qd, J = 11.5, 4.6 Hz, 1H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자 피크가 관찰되지 않았는데, NMR에서 DMSO 피크와 중첩된 것으로 여겨짐. ESI-MS m/z 계산된 값 514.1552, 확인된 값 515.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.76분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체 (15R)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24,25-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(염산염)(거울상이성질체 2)(6.7 mg, 55%)을 황색 비정질 고형분으로서 수득하였다,. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (s, 2H), 7.83 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.75 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.48 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.20 - 3.13 (m, 1H), 3.13 - 3.06 (m, 1H), 2.69 - 2.57 (m, 3H), 2.17 - 2.03 (m, 2H), 1.87 (q, J = 9.1, 6.1 Hz, 2H), 1.55 (dtd, J = 28.5, 12.1, 11.4, 3.9 Hz, 2H), 0.94 (tt, J = 10.8, 5.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 514.1552, 확인된 값 515.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 J).
실시예 46: (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 1)(염산염)(화합물 84), (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 2)(염산염)(화합물 85), (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 3)(염산염)(화합물 86), 및 (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 4)(염산염)(화합물 87)의 제조
단계 1: 1-(4-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-에탄-1,1-디올
0℃의 DCM (100 mL) 중 1-(4-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-에탄올(7.095 g, 27.71 mmol)의 교반 용액에 데스-마틴 페리오디난(14.2 g, 33.48 mmol)을 나누어서 첨가하고, 반응물을 18시간에 걸쳐 주변 온도로 가온시켰다. 1:1 포화 수성 NaHCO3/티오황산 나트륨(20 mL)을 첨가하여 반응 혼합물을 퀀칭시키고, 10분 동안 교반하여 층을 분리하였다. 수성층을 DCM(3 X)으로 추출하고, 합쳐진 유기 추출물을 1:1 포화 수성 NaHCO3/티오황산 나트륨(3 X 50 mL) 및 염수 (1회)로 추출하고, 혼합물을 상 분리 카트리지를 통과시켜 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM에 용해시키려고 했지만, 백색 불용성 고형분이 떨어져 나와, 이를 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켜 담황색 오일을 수득하였다. 오일을 물질을 실리카 크로마토그래피(용리 구배: 0%~30% EtOAc/헵탄)로 정제하였다. 관련 분획을 합치고 증발 건조시켜 1-(4-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-에탄-1,1-디올(7.5 g, 100%)을 수득하였다; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 5.3, 1.9 Hz, 1H), 7.72 (s, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 270.9456, 확인된 값 271.8 (M+1)+; 머무름 시간: 0.6분 (LC 방법 V).
단계 2: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(4-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
질소 분위기 하에 75℃에서, DMF (5.256 mL) 중 1-(4-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-에탄-1,1-디올 (344.1 mg, 1.265 mmol) and 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(300 mg, 0.6326 mmol)의 출발 용액에 (N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란(382.4 mg, 1.265 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 캡핑하고, 15분 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 수성 NaHCO3으로 1회 세척하고, 포화 수성 NH4Cl로 1회 세척하고, 염수로 1회 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 주황색 오일을 수득하고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~100% EtOAc의 얕은 구배)로 정제하여 대부분이 MW=439 부산물로 오염된 생성물을 수득하였다. 이 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% DCM~20% MeOH/DCM)로 추가로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(4-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(259.8 mg, 59%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 9.56 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.51 (dd, J = 5.3, 3.2 Hz, 1H), 8.15 - 8.08 (m, 1H), 7.70 (td, J = 5.4, 1.7 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.89 - 5.70 (m, 1H), 5.12 - 4.96 (m, 2H), 4.50 - 4.40 (m, 1H), 3.64 (dd, J = 9.6, 6.7 Hz, 1H), 3.40 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 2.68 - 2.51 (m, 1H), 2.29 - 2.14 (m, 1H), 2.14 - 2.03 (m, 1H), 1.97 (ddt, J = 11.3, 5.5, 2.7 Hz, 1H), 1.81 - 1.66 (m, 2H), 1.54 (d, J = 1.4 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 692.11816, 확인된 값 693.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.79분 (LC 방법 T).
단계 3: (15 S )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올
아세토니트릴 (17.32 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(4-브로모-2-피리딜)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(288.7 mg, 0.4163 mmol)의 교반 용액에 디아세톡시팔라듐(28.04 mg, 0.1249 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리스-o-톨릴포스판(76.03 mg, 0.2498 mmol) 및 트리에틸아민(46.42 μL, 0.333 mmol)을 첨가하고, 용액을 질소로 1분 동안 버블링한 다음 마이크로웨이브 조사에 의해 150℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, EtOAc로 희석하고, 포화 수성 NH4Cl로 1회 및 염수로 1회 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 이 오일을 DCM/MeOH에 용해시키고, 셀라이트와 함께 5분 동안 교반한 다음, MeOH로 용리하면서 셀라이트 패드로 여과하였다. 여액을 농축시켜 황색 발포체를 수득하고, 이를 DCM(3 mL)에 용해시키고, 실온에서 교반하였다. TFA(1.282 mL, 16.64 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 회전 증발에 의해 잔류물을 수득한 다음, DMSO에 용해시키고, Phenomenex에서 판매하는 Luna C18 컬럼(75 × 30 mm, 5 μm 입자 크기)(pn: 00C-4252-U0-AX)을 사용해 역상 HPLC(구배: 15.0분에 걸쳐 50%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = H2O(5 mM HCl); 이동상 B = 아세토니트릴; 유속 = 50 mL/분; 주입 부피 = 950 μL; 컬럼 온도 = 25℃)로 정제하여 (15S)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올(E/Z 부분 입체이성질체의 혼합물)(94.1 mg, 44%)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 512.1395, 확인된 값 513.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.46분 (LC 방법 T).
단계 4: (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 1)(염산염)(화합물 84), (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 2)(염산염)(화합물 85), (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 3)(염산염)(화합물 86), 및 (15 R )-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 4)(염산염)(화합물 87)
에탄올 (5.875 mL) 중 (15S)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올(E/Z 부분 입체이성질체의 혼합물)(94 mg, 0.1834 mmol)의 용액에 탄소 상 팔라듐(58.55 mg의 10% w/w, 0.05502 mmol)을 첨가하고, 용액을 통해 질소를 5분 동안 버블링한 다음, 플라스크를 수소 풍선으로 캡핑하고 4시간 동안 교반하였다. 용액을 통해 질소를 5분 동안 버블링한 다음, 메탄올로 용리하면서 셀라이트로 여과하여, 황색 용액을 수득하고, 이를 농축시켜 황색 고형분을 수득하고, 이를 DMSO에 용해시키고, 여과하고, Phenomenex에서 판매하는 Luna C18 컬럼(75 X 30 mm, 5 μm 입자 크기)(pn: 00C-4252-U0-AX)을 사용해 역상 HPLC(구배: 15.0분에 걸쳐 50%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = H2O (5 mM HCl); 이동상 B = 아세토니트릴; 유속 = 50 mL/분, 주입 부피 = 950 μL; 컬럼 온도 = 25℃)로 정제하여 4개의 이성질체 생성물을 모두 황색 발포체로서 수득하였다:
피크 1: (15R)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 1)(염산염)(5.4 mg, 4%). ESI-MS m/z 계산된 값 514.1552, 확인된 값 515.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.78분 (LC 방법 M).
피크 2: (15R)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 2)(염산염)(31.9 mg, 24%). ESI-MS m/z 계산된 값 514.1552, 확인된 값 515.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.85분 (LC 방법 M).
피크 3: (15R)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 3)(염산염)(5.8 mg, 5%). ESI-MS m/z 계산된 값 514.1552, 확인된 값 515.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.98분 (LC 방법 M).
피크 4: (15R)-23-아미노-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,8,19,24-펜타아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (이성질체 4)(염산염)(22.1 mg, 16%). ESI-MS m/z 계산된 값 514.1552, 확인된 값 515.4 (M+1)+; 머무름 시간: 1.06분 (LC 방법 M).
각 생성물은 단일 부분 입체이성질체/회전장애 이성질체 조합인 것으로 가정한다.
실시예 47: (12 R )-20-아미노-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 88) 및 (12 R )-20-아미노-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 89)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[하이드록시(테트라하이드로피란-4-일)메틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DCM (1.872 mL) 중 테트라하이드로피란-4-카르브알데히드(197.8 mg, 1.733 mmol)의 용액에 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(180 mg, 0.4333 mmol)을 첨가하고, 이어서 N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란(131 mg, 0.4333 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 크로마토그래피(컬럼: 12 g 아민 컬럼; 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[하이드록시(테트라하이드로피란-4-일)메틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(150 mg, 63%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 553.2512, 확인된 값 554.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.72분 (LC 방법 R).
단계 2: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(테트라하이드로피란-4-카르보닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DCM (2.076 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[하이드록시(테트라하이드로피란-4-일)메틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(150 mg, 0.2710 mmol)의 용액에 DMP(127.8 mg, 0.3013 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하고, 포화 수성 NaHCO3으로 퀀칭시켰다. DCM(2 X 25 mL)으로 추출하고, 유기층을 합치고, 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(테트라하이드로피란-4-카르보닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(110 mg, 74%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 551.23553, 확인된 값 552.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.88분 (LC 방법 R).
단계 3: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(1-하이드록시-1-테트라하이드로피란-4-일-펜트-4-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
얼음조로 냉각시킨, THF (1.3 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(테트라하이드로피란-4-카르보닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(56 mg, 0.1015 mmol)의 용액에 브로모(부트-3-에닐)마그네슘(670 μL, 0.5 M, 0.3350 mmol)을 적가하였다. 용액을 20분 동안 교반한 다음, 얼음 조에 둔 상태로 수성 구연산(101.4 μL, 1 M, 0.1014 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 아세트산 에틸(2 X 15 mL)로 추출하고, 유기층을 합치고, 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(1-하이드록시-1-테트라하이드로피란-4-일-펜트-4-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(20 mg, 32%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 607.29816, 확인된 값 608.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.88분 (LC 방법 R).
단계 4: 터트 -부틸 N -[(12 S )-6-하이드록시-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
100 mL 둥근 바닥 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기시킨, DCE (17.5 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(1-하이드록시-1-테트라하이드로피란-4-일-펜트-4-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(35 mg, 0.05760 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃에서 가열하였다. 그런 다음, DCE (50 mL) 중 [1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)이미다졸리딘-2-일리덴]-디클로로-[(2-이소프로폭시페닐)메틸렌]루테늄(8.9 g, 0.0142 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g; 구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[(12S)-6-하이드록시-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(25 mg, 75%)를 황색 반 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 579.26685, 확인된 값 580.48 (M+1)+; 머무름 시간: 0.74분 (LC 방법 R).
단계 5: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트
AcOH (594 μL) 중 터트-부틸 N-[(12S)-6-하이드록시-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(22 mg, 0.03796 mmol)의 용액에 Pd/C(16 mg, 10% w/w, 0.01503 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 플러싱하고, 배기시키고, 수수 풍선 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 플러그로 여과하고, 아세트산 에틸로 세척한 다음, 여액을 농축시켜 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트(18 mg, 82%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 581.28253, 확인된 값 582.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.85분 (LC 방법 R).
단계 6: (12 R )-20-아미노-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 88) 및 (12 R )-20-아미노-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 89)
DCM (308.2 μL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트(15.00 mg, 0.02579 mmol)의 용액에 TFA(119.1 μL, 1.546 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, Chiral Technologies에서 판매하는 OD-H 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 5%~15% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 2개의 단일 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체 (12R)-20-아미노-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(4 mg, 32%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 4.14 - 4.00 (m, 1H), 3.89 (dd, J = 10.6, 5.1 Hz, 2H), 3.52 (q, J = 8.6 Hz, 1H), 3.37 - 3.22 (m, 3H), 2.48 (dtt, J = 9.1, 6.0, 2.9 Hz, 1H), 2.12 (ddt, J = 12.1, 6.3, 3.2 Hz, 1H), 2.05 - 1.25 (m, 16H), 0.90 (ddd, J = 12.2, 10.5, 5.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.23007, 확인된 값 482.4 (M+1)+; 머무름 시간: 3.02분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체 (12R)-20-아미노-6-(옥산-4-일)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(4 mg, 32%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 4.16 - 4.02 (m, 1H), 3.89 (dd, J = 10.6, 5.1 Hz, 2H), 3.52 (q, J = 8.6 Hz, 1H), 3.39 - 3.21 (m, 5H), 2.48 (dtt, J = 9.1, 6.0, 2.9 Hz, 1H), 2.12 (ddt, J = 12.1, 6.3, 3.2 Hz, 1H), 2.06 - 1.29 (m, 14H), 0.90 (ddd, J = 12.2, 10.5, 5.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.23007, 확인된 값 482.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.03분 (LC 방법 A).
실시예 48: (12 R )-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 90) 및 (12 R )-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 91)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-시클로프로필-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
툴루엔 (2.0 mL) 및 물 (0.2 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(100 mg, 0.1465 mmol)의 용액을 질소로 10분 동안 버블링하여 탈기시켰다. 이 혼합물에 인산 칼륨(96 mg, 0.4523 mmol), 트리시클로헥실포스핀 테트라플루오로보레이트(11.4 mg, 0.0310 mmol), 아세트산 팔라듐(II)(3.3 mg, 0.0147 mmol), 및 시클로프로필보론산(33 mg, 0.3842 mmol)을 첨가한 다음, 바이알을 캡핑하고, 오일조에서 100℃에서 21시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(15 mL)로 세척하였다. 여액을 포화 수성 중탄산나트륨(30 mL)과 함께 60 mL 분별 깔때기에 옮기고, 아세트산 에틸(2 X 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(약 15 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-18-시클로프로필-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(69 mg, 85%)을 호박색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 555.20935, 확인된 값 556.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.47분 (LC 방법 W).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올
메탄올 (6 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-시클로프로필-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(104 mg, 0.1872 mmol)의 용액을 질소 가스 하에서 4회 퍼징하였다. 10% 탄소 상 팔라듐(132 mg, 0.062 mmol)을 첨가한 다음, 수소 가스 하에서 3회 퍼징하였다. 그런 다음, 반응물을 실온에서 6.5시간 동안 격렬하게 교반하였다. 더 많은 10% 탄소 상 팔라듐(131 mg, 0.0615 mmol)을 첨가하고, 6.5시간 동안 추가로 교반하였다. 질소 가스 하에서 퍼징한 후, 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 메탄올(40 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 (12R)-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (75 mg, 82%)을 형광성 황색 발포성 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 437.20386, 확인된 값 438.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.17분 (LC 방법 E).
단계 3: (12 R )-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 90) 및 (12 R )-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 91)
라세미 (12R)-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(97 mg, 0.2217 mmol)을 Chiral Technologies에서 판매하는 OD-H 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)를 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 10%~25% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체 (12R)-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(28.9 mg, 59%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.51 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.82 (s, 2H), 3.87 (q, J = 8.0 Hz, 1H), 3.76 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.27 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 2.12 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 2.03 - 1.83 (m, 3H), 1.80 - 1.67 (m, 1H), 1.49 (t, J = 12.4 Hz, 6H), 1.07 (q, J = 9.7, 7.6 Hz, 1H), 0.99 - 0.88 (m, 1H), 0.87 - 0.69 (m, 2H), 0.62 (dd, J = 9.6, 5.5 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 437.20386, 확인된 값 438.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.1분 (LC 방법 D).
두 번째로 부분 입체이성질체 (12R)-20-아미노-18-시클로프로필-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(29.0 mg, 60%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.48 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.82 (s, 2H), 4.11 - 3.72 (m, 2H), 3.36 (dd, J = 9.0, 3.7 Hz, 1H), 2.43 - 2.23 (m, 2H), 2.15 (dddd, J = 11.7, 9.0, 5.9, 2.6 Hz, 1H), 2.10 - 1.94 (m, 2H), 1.90 (ddt, J = 10.9, 7.2, 3.6 Hz, 1H), 1.83 - 1.58 (m, 3H), 1.58 - 1.28 (m, 5H), 1.09 (tdd, J = 9.2, 5.9, 3.8 Hz, 1H), 1.01 - 0.81 (m, 2H), 0.81 - 0.68 (m, 1H), 0.62 (dtd, J = 9.3, 5.8, 3.9 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 437.20386, 확인된 값 438.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.1분 (LC 방법 D).
실시예 49: (15 R )-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 92) 및 (15 R )-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 93)의 제조
단계 1: 1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄올
140 mL의 THF 중 5-브로모-2-메톡시벤즈알데히드(12.0 g, 55.8 mmol) 및 Me3SiCF3(9.9 mL, 67 mmol)의 얼음처럼 차가운 용액에 22.9 mL의 n Bu4NF×H2O(THF 중 1.0 M, 22.9 mmol)를 첨가하였다. 금색 용액을 주변 온도로 가온시키고 10시간 동안 교반하였다. 4.4 M HCl 수용액(25.8 mL, 111.6 mmol)을 서서히 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 30 mL의 EtOAc로 희석하고, 고형분 Na2CO3을 조심스럽게 첨가하였다. 비등이 멈춘 후, 용액을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 주황색 유성 잔류물을 수득하였다. 이 물질을 실리카 겔을 이용해 크로마토그래피(용리 구배: 10:1~4:1 헥산/EtOAc)로 정제하여 1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄올(4.8 g, 30%)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.38 (dd, J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.22 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다.
단계 2: 1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄온
DCM (168.4 mL) 중 1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄올(4.8 g, 16.84 mmol)의 용액에 TEMPO(약 131.6 mg, 0.842 mmol)를 첨가하고, 이어서 PhI(OAc)2(약 10.85 g, 33.68 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 125 mL의 1 M 티오황산 나트륨 용액으로 퀀칭시켰다. 혼합물을 분리하고, 수성층을 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 합치고, 농축 건조시켰다. 미정제 물질을 실리카 크로마토그래피(용리 구배: 0%~30% EtOAc/헵탄)로 정제하였다. 순수한 분획을 합치고 농축시켜 1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄온(3.8 g, 80%)을 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 3: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
질소 분위기 하에, 75℃의 DMF (4.38 mL) 중 1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄온 (298.3 mg, 1.054 mmol) 및 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(250 mg, 0.5272 mmol)의 교반 용액에 (N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란(378.6 mg, 1.252 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 캡핑하고, 15분 동안 교반한 다음 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 수성 NaHCO3으로 1회 세척한 다음, 포화 수성 NH4Cl로 1회 세척하고, 염수로 1회 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 주황색 오일을 수득하였다. 미정제 주황색 오일을, Phenomenex에서 판매하는 Luna C18 컬럼(75 × 30 mm, 5 μm 입자 크기)(품번: 00C-4252-U0-AX)을 사용해 역상 HPLC(구배: 15.0분에 걸쳐 50%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = H2O (5 mM HCl); 이동상 B = 아세토니트릴; 유속 = 50 mL/분; 주입 부피 = 950 μL; 및 컬럼 온도 = 25℃)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(230.7 mg, 61%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 721.1334, 확인된 값 724.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.76분 (LC 방법 T).
단계 4: (15 S )-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올 (부분 입체이성질체의 E/Z 혼합물)
아세토니트릴 (13.78 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(5-브로모-2-메톡시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(229.6 mg, 0.3178 mmol)의 교반 용액에 디아세톡시팔라듐(21.4 mg, 0.09532 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리스-o-톨릴포스판(58.04 mg, 0.1907 mmol) 및 트리에틸아민(35.43 μL, 0.2542 mmol)을 첨가하고, 용액을 N2로 1분 동안 버블링한 다음, 마이크로웨이브 조사에 의해 150℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 셀라이트로 5분 동안 교반하고, EtOAc로 용리하면서 셀라이트로 여과하였다. 여액을 포화 수성 NH4Cl로 1회 세척하고, 염수로 1회 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 황색 고형분을 수득하고, 이를 DCM(2.386 mL)에 용해시키고, 실온에서 교반하였다. TFA(979.1 μL, 12.71 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM으로 희석하고, 1 N NaHCO3으로 세척한 다음(주의: 가스 분출), 수성상을 DCM으로 2회 역추출하였다. 유기층을 합치고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜, 주황색 시럽을 수득하였다. 주황색 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산 내지 100% EtOAc의 얕은 구배)로 정제하여 (15S)-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올(부분 입체이성질체의 E/Z 혼합물)(55.5 mg, 32%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 541.15485, 확인된 값 542.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.55분 (LC 방법 T).
단계 5: (15 R )-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 92) 및 (15 R )-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 93)
에탄올 (3.469 mL) 중 of (15S)-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올(E/Z 부분 입체이성질체의 혼합물)(55.5 mg, 0.1025 mmol)의 용액에 탄소 상 팔라듐(32.72 mg의 10% w/w, 0.03075 mmol)을 첨가하고, 용액을 통해 수소를 5분 동안 버블링한 다음, 플라스크를 수소 풍선으로 캡핑하고, 1시간 동안 교반하였다. 탄소 상 팔라듐(32.72 mg의 10% w/w, 0.03075 mmol)을 첨가하고, 수소 하에서 1시간 동안 계속 교반하였다. 탄소 상 팔라듐(32.72 mg의 10% w/w, 0.03075 mmol)을 첨가한 다음, 100 psi의 수소압 하에 50분 동안 교반하였다. 압력을 풀고, 질소로 역추출한 다음, 셀라이트를 첨가하고, 5분 동안 교반한 다음, 메탄올로 용리하면서 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여액을 농축시키고, DMSO에 용해시킨 다음, 여과하였다. 물질을 Phenomenex에서 판매하는 Luna C18 컬럼(75 × 30 mm, 5 μm 입자 크기)(pn: 00C-4252-U0-AX)을 사용해 역상 HPLC(구배: 15.0분에 걸쳐 50%~99% 이동상 B의 이중 구배; 이동상 A = H2O(5 mM HCl); 이동상 B = 아세토니트릴; 유속 = 50 mL/분; 주입 부피 = 950 μL; 컬럼 온도 = 25℃)로 정제하여 2개의 생성물 피크를 수득하였다:
피크 1 여전히 MW = 541 불순물로 오염되어 있었으므로, 이를 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~100% EtOAc의 얕은 구배)로 정제하여 (15R)-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(거울상이성질체 1)(6.2 mg, 17%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.35 (s, 1H), 8.04 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.13 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 3.89 - 3.78 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.47 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.17 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 2.97 (d, J = 14.6 Hz, 1H), 2.44 - 2.36 (m, 1H), 2.16 (dt, J = 11.7, 5.6 Hz, 1H), 1.97 - 1.90 (m, 1H), 1.89 - 1.82 (m, 2H), 1.79 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 1.60 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 1.52 (dt, J = 11.3, 5.5 Hz, 1H), 0.70 (dd, J = 10.8, 5.2 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 543.17053, 확인된 값 544.4 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.09분 (LC 방법 M).
피크 2를 황색 고형분, (15R)-23-아미노-8-메톡시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(거울상이성질체 2)(4.7 mg, 12%)로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.66 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.20 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 3.82 (dt, J = 9.5, 5.0 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.47 (q, J = 9.3, 8.7 Hz, 1H), 3.18 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.97 - 2.89 (m, 1H), 2.45 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 2.15 (dt, J = 12.0, 5.9 Hz, 1H), 1.96 (dt, J = 7.9, 4.0 Hz, 1H), 1.85 (q, J = 5.9 Hz, 2H), 1.66 (t, J = 12.5 Hz, 2H), 1.52 (dt, J = 11.2, 5.7 Hz, 1H), 0.73 (dq, J = 11.1, 6.0 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 543.17053, 확인된 값 544.4 (M+1)+; 머무름 시간: 1.28분 (LC 방법 M).
실시예 50: 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 1)(화합물 94), 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 2)(화합물 95), 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 3)(화합물 96), 및 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 4)(화합물 97)의 제조
단계 1: 6-(1-에톡시카르보닐펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
20 mL의 밀봉된 바이알에서, 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(725 mg, 2.68 mmol)을 실온의 아세토니트릴(7.25 mL)과 DMSO(7.25 mL)에 용해시키고, 이어서 DIEA(2.75 mL, 15.79 mmol) 및 에틸 2-아미노헥스-5-엔오에이트(850 mg, 5.407 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시킨 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~100% 아세트산 에틸에 이어서 100% DCM~20% 메탄올/DCM)로 정제하여 6-(1-에톡시카르보닐펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(757 mg, 72%)을 어두운 주황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.20 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.07 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.80 (ddt, J = 16.6, 10.4, 6.1 Hz, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 2H), 4.64 (ddd, J = 9.1, 7.0, 4.2 Hz, 1H), 4.09 (qd, J = 7.1, 2.3 Hz, 2H), 2.19 - 2.08 (m, 2H), 2.08 - 1.91 (m, 2H), 1.15 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 391.09912, 확인된 값 392.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.53분 (LC 방법 A).
단계 2: 에틸 2-[[6-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]헥스-5-엔오에이트
0℃로 냉각시킨 NMP (3.5 mL) 중 6-(1-에톡시카르보닐펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(52 mg, 0.1329 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(염산염)(53 mg, 0.1632 mmol)을 첨가하고, 이어서 HATU(65 mg, 0.1709 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, DIEA(150 μL, 0.8612 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키면서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산 에틸로 희석하고 염수로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% DCM~20% 메탄올/DCM)로 정제하여 에틸 2-[[6-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]헥스-5-엔오에이트(42.6 mg, 48%)를 황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 661.19714, 확인된 값 662.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.57분 (LC 방법 J).
단계 3: 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]헥스-5-엔오에이트
아세토니트릴 (18 mL) 중 에틸 2-[[6-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]헥스-5-엔오에이트(573 mg, 0.8661 mmol) 및 DIEA(500 μL, 2.871 mmol)의 용액을 50℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(250 mg, 1.311 mmol)를 한번에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 90분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 중탄산나트륨의 포화 수용액(50 mL)으로 퀀칭시키고, 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 유기 물질을 아세트산에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 유기물을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]헥스-5-엔오에이트(400 mg, 72%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (s, 1H), 8.31 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 3.5 Hz, 5H), 5.94 - 5.72 (m, 2H), 5.38 (dt, J = 17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.25 (dt, J = 10.4, 1.5 Hz, 1H), 4.99 - 4.89 (m, 2H), 4.80 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.63 (td, J = 9.4, 8.9, 2.7 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 10.5, 1.6 Hz, 1H), 4.02 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.31 (s, 1H), 2.49 - 2.45 (m, 1H), 2.10 (td, J = 9.4, 7.7, 4.9 Hz, 3H), 2.03 - 1.94 (m, 1H), 1.04 (td, J = 7.1, 2.2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 643.1865, 확인된 값 644.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.92분 (LC 방법 J).
단계 4: 에틸 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트 ( E/Z 혼합물)
250 mL 둥근 바닥 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기한 Zhan 1B(110 mg, 0.1499 mmol)의 용액을 DCE(200 mL)에 용해시키고, 혼합물을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, DCE (10 mL) 중 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]헥스-5-엔오에이트(400 mg, 0.6216 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 2시간 동안 가열하였다. 잔류물을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산∼50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 에틸 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트(E/Z 혼합물)(315 mg, 82%)를 황백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 615.1553, 확인된 값 616.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 J).
단계 5: 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트
50 mL 둥근 바닥 플라스크에서, AcOH (780 μL) 및 아세트산 에틸 (800 μL) 중 에틸 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트(E/Z 혼합물)(45 mg, 0.07311 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(78 mg의 10% w/w, 0.07329 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산 내지 70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트(32 mg, 88%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.68 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 5.60 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.45 - 4.29 (m, 1H), 4.22 (dddd, J = 17.9, 10.8, 7.1, 3.7 Hz, 2H), 2.29 (ddt, J = 24.4, 14.2, 8.1 Hz, 2H), 2.14 - 2.02 (m, 1H), 1.81 (dt, J = 13.9, 7.7 Hz, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.43 (dt, J = 20.9, 7.9 Hz, 3H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 497.14978, 확인된 값 498.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.32분 (LC 방법 J).
단계 6: 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 1)(화합물 94), 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 2)(화합물 95), 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 3)(화합물 96), 및 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 4)(화합물 97)
라세미 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트(32 mg, 0.06434 mmol)를 Chiral Technologies에서 판매하는 IC 컬럼(250 × 10 mm, 5 μm 입자 크기)(pn: 83445)을 사용해 정상상 SFC(구배: 12% MeOH[+ 20 mM NH3]/88% CO2의 등용매 용리; 유속: 10 mL/분; 주입 부피 = 70 μL의 22 mg/mL(MeOH); 개질제: 미포함; 컬럼 온도 = 40℃)로 정제하여 3개의 별개의 분획을 수득하였다(거울상이성질체 1, 함께 용리되는 거울상이성질체 2 및 3, 및 거울상이성질체 4). 그런 다음, 거울상이성질체 2와 3을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 × 10 mm, 5 μm 입자 크기)(pn: 00G-4491-P0-AX)을 사용해 정상상 SFC(구배: 10% MeOH[+ 20 mM NH3]/90% CO2의 등용매 용리; 유속: 10 mL/분; 주입 부피 = 70 μL의 12 mg/mL(MeOH)의 농도; 개질제: 미포함; 컬럼 온도 = 40℃)로 분리하였다. 이러한 2회의 SFC 정제를 통해 다음 4개의 개별 거울상이성질체를 단리하였다:
거울상이성질체 1: 황색 고형분, 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 1)(3.1 mg, 38%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.77 - 5.63 (m, 1H), 4.43 (dd, J = 9.4, 3.9 Hz, 1H), 4.30 (qd, J = 7.1, 5.2 Hz, 2H), 3.74 (d, J = 51.8 Hz, 2H), 3.50 (s, 1H), 2.50 - 2.40 (m, 2H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 1.85 (ddt, J = 10.4, 6.9, 3.6 Hz, 1H), 1.77 - 1.65 (m, 3H), 1.53 - 1.40 (m, 3H), 1.36 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 497.14978, 확인된 값 498.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.92분 (LC 방법 A).
거울상이성질체 2: 황색 고형분, 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 2)(1.2 mg, 15%). ESI-MS m/z 계산된 값 497.14978, 확인된 값 498.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 A).
거울상이성질체 3: 황색 고형분, 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 3)(1.5 mg, 19%). ESI-MS m/z 계산된 값 497.14978, 확인된 값 498.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.92분 (LC 방법 A).
거울상이성질체 4: 황색 고형분, 에틸 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복실레이트 (거울상이성질체 4)(3.1 mg, 38%). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.42 - 7.32 (m, 1H), 5.65 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.39 (dt, J = 9.7, 3.5 Hz, 1H), 4.34 - 4.22 (m, 2H), 3.77 (s, 1H), 2.51 (ddt, J = 10.5, 7.4, 3.1 Hz, 1H), 2.36 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 2.30 - 2.20 (m, 1H), 2.03 - 1.89 (m, 1H), 1.75 (ddt, J = 17.9, 12.0, 6.0 Hz, 3H), 1.58 - 1.45 (m, 3H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 497.14978, 확인된 값 498.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 A).
실시예 51: (12 R )-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 98) 및 (12 R )-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 99)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-(디메틸포스포릴)-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
탈기시킨 N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-아민(E/Z 혼합물)(120 mg, 0.2126 mmol), 산화 디메틸포스핀(50 mg, 0.6406 mmol), Xantphos (13 mg, 0.0225 mmol), 및 제삼 인산 칼륨(160 mg, 0.7538 mmol)의 현탁액에 아세트산 팔라듐(II)(5 mg, 0.0223 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 120℃로 밤새 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 아세트산 에틸(10 mL)로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축시키고, 디메틸 설폭시드(3 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 역상 HPLC(구배: 5%~90% 아세토니트릴/물(+0.1% 포름산))로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-18-(디메틸포스포릴)-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(20 mg, 17%)을 황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 561.2117, 확인된 값 562.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.32분 (LC 방법 W).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올
메탄올 (1 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-(디메틸포스포릴)-20-아미노-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)(20 mg, 0.0338 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 5% 탄소 상 팔라듐(22 mg, 0.0103 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 혼합물을 역상 HPLC(구배: 5%~95% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(9 mg, 50%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 473.1804, 확인된 값 474.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.08분 (LC 방법 C).
단계 3: (12 R )-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 98) 및 (12 R )-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 99)
(12R)-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(8.2 mg, 0.01732 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)를 사용해 SFC(용리 구배: 30%~50% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 다음 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 (12R)-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(2.7 mg, 33%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 473.18036, 확인된 값 474.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.33분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 (12R)-20-아미노-18-(디메틸포스포릴)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(0.9 mg, 11%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 473.18036, 확인된 값 474.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.31분 (LC 방법 A),
실시예 52: (12 R )-20-아미노-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 100) 및 (12 R )-20-아미노-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 101)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(2-벤질옥시-1-하이드록시-에틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DCM (2.735 mL) 중 2-벤질옥시아세트알데히드(355.7 μL, 2.532 mmol)의 용액에 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(263 mg, 0.6331 mmol)을 첨가하고, 이어서 N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란(191.4 mg, 0.6331 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 0%~30% EtOAc/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(2-벤질옥시-1-하이드록시-에틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(300 mg, 80%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 589.2512, 확인된 값 590.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.87분 (LC 방법 R).
단계 2: 터트 -부틸 N -(2-{5-[2-(벤질옥시)아세틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일}-6-[(2 S )-2-(프로프-2-엔-1-일)피롤리딘-1-일]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)카르바메이트
DCM (3.176 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-(2-벤질옥시-1-하이드록시-에틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(270 mg, 0.3892 mmol)의 용액에 DMP(215.9 mg, 0.509 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 반응물을 포화 수성 NaHCO3으로 퀀칭시키고, DCM(2 X 25 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-(2-{5-[2-(벤질옥시)아세틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일}-6-[(2S)-2-(프로프-2-엔-1-일)피롤리딘-1-일]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)카르바메이트(180 mg, 79%)를 주황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 587.23553, 확인된 값 588.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.92분 (LC 방법 R).
단계 3: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(벤질옥시메틸)-1-하이드록시-펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
THF (4.0 mL) 중 터트-부틸 N-(2-{5-[2-(벤질옥시)아세틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일}-6-[(2S)-2-(프로프-2-엔-1-일)피롤리딘-1-일]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)카르바메이트(180 mg, 0.3063 mmol)의 용액을 얼음조에서 냉각시키고, 브로모(부트-3-에닐)마그네슘(2.02 mL의 0.5 M, 1.010 mmol)을 적가하고, 용액을 20분 동안 교반하였다. 반응물을 얼음조에 둔 상태로 구연산(306 μL, 1 M, 0.306 mmol)을 첨가하여 퀀칭시키고, 아세트산 에틸(2 X 15 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g; 구배: 0%~30% EtOAc/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(벤질옥시메틸)-1-하이드록시-펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(60 mg, 30%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 643.29816, 확인된 값 644.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.83분 (LC 방법 T).
단계 4: 터트 -부틸 N -[(12 S )-6-[(벤질옥시)메틸]-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
100 mL 둥근 바닥 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기한, DCE (30.0 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[1-(벤질옥시메틸)-1-하이드록시-펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(60 mg, 0.09321 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, DCE (5 mL) 중 [1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)이미다졸리딘-2-일리덴]-디클로로-[(2-이소프로폭시페닐)메틸렌]루테늄(14.40 mg, 0.02298 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 그런 다음, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 gram 컬럼; 구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[(12S)-6-[(벤질옥시)메틸]-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(22 mg, 38%)를 황색 반 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 615.26685, 확인된 값 616.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.74분 (LC 방법 T).
단계 5: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트 (거울상이성질체 1) 및 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트 (거울상이성질체 2)
AcOH (432.0 μL) 중 터트-부틸 N-[(12S)-6-[(벤질옥시)메틸]-6-하이드록시-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔-20-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(25 mg, 0.04061 mmol)의 용액에 Pd/C(11.07 mg, 10% w/w, 0.0104 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 수소 풍선 하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 아세트산 에틸로 세척한 다음, 여액을 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 20분에 걸쳐 0%~20% EtOAc/헥산)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트(거울상이성질체 1)(9 mg, 42%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 527.23553, 확인된 값 528.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.67분 (LC 방법 R).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트(거울상이성질체 2)(9 mg, 42%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 527.23553, 확인된 값 528.4 (M+1)+; 머무름 시간: 0.66분 (LC 방법 R).
단계 6: (12 R )-20-아미노-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 100)
DCM (82.2 μL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트(거울상이성질체 1)(9 mg, 0.01706 mmol)의 용액에 TFA(35.01 μL, 0.4544 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 아세트산 에틸로 희석하고, 포화 수성 NaHCO3으로 세척하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (12R)-20-아미노-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(5 mg, 65%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.67 (s, 1H), 4.20 - 4.12 (m, 1H), 3.91 (dd, J = 94.4, 11.6 Hz, 2H), 3.70 - 3.60 (m, 1H), 3.42 (s, 1H), 2.58 (s, 1H), 2.30 - 2.19 (m, 2H), 2.03 - 1.94 (m, 2H), 1.88 - 1.80 (m, 1H), 1.71 - 1.60 (m, 3H), 1.59 - 1.48 (m, 3H), 1.03 - 0.87 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 427.18314, 확인된 값 428.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.76분 (LC 방법 A).
단계 7: (12 R )-20-아미노-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 101)
DCM (174.7 μL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-20-일]카르바메이트(거울상이성질체 2)(8.5 mg, 0.01611 mmol)의 용액에 TFA(74.39 μL, 0.9656 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 아세트산 에틸로 희석하고, 포화 수성 NaHCO3으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (12R)-20-아미노-6-(하이드록시메틸)-18-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(5 mg, 69%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.70 (s, 1H), 4.11 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 3.89 (dd, J = 79.9, 10.7 Hz, 2H), 3.65 (s, 1H), 3.43 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 2.66 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 2.43 (dd, J = 12.5, 10.1 Hz, 1H), 2.31 - 2.16 (m, 1H), 2.02 (ddt, J = 10.0, 6.7, 3.3 Hz, 1H), 1.92 - 1.71 (m, 3H), 1.70 - 1.58 (m, 5H), 0.95 (td, J = 11.3, 9.4, 5.1 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 427.18314, 확인된 값 428.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.74분 (LC 방법 A).
실시예 53: 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 102), 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 103), 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 104), 및 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 105)의 제조
단계 1: 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔-1-올
20 mL 바이알에서, [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(350 mg, 0.5381 mmol)를 실온의 아세토니트릴(6 mL)에 용해시키고, 이어서 2-아미노펜트-4-엔-1-올(염산염)(225 mg, 1.635 mmol)을 첨가하고, 이어서 DIEA(500 μL, 2.871 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 아세트산 에틸로 희석하고, 물과 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔-1-올(180 mg, 56%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 5.85 (ddt, J = 16.8, 10.2, 6.5 Hz, 1H), 5.78 - 5.63 (m, 1H), 5.10 (dq, J = 17.2, 1.7 Hz, 1H), 5.05 - 4.97 (m, 2H), 4.92 (ddd, J = 10.4, 8.1, 3.5 Hz, 2H), 4.76 (dd, J = 11.0, 1.5 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.55 (dtd, J = 16.3, 11.0, 5.6 Hz, 2H), 2.58 - 2.51 (m, 2H), 2.38 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.30 - 2.17 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 601.17596, 확인된 값 602.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.69분. O-연결된 위치이성질체 부산물은 나중에 용리되었다(LC 방법 J).
단계 2: [6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-일]메탄올
150 mL 플라스크에서, 0.25 당량의 Zhan 촉매-1B, 디클로로[1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)-2-이미다졸리딘일리덴][[5-[(디메틸아미노)설포닐]-2-(1-메틸에톡시-O)페닐]메틸렌-C]루테늄(II)(53 mg, 0.07223 mmol)을 DCE(100 mL)에 용해시켰다. 그런 다음, DCE (5 mL) 중 of 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔-1-올(190 mg, 0.3159 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 70℃로 가열하였다. 잔류물을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~75% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 [6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-일]메탄올(58 mg, 32%)을 황갈색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 573.1447, 확인된 값 574.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.4분 (LC 방법 J).
단계 3: 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
50 mL 둥근 바닥 플라스크에서, 아세트산 에틸 (4 mL) 중 [6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-일]메탄올(58 mg, 0.1011 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(110 mg의 10% w/w, 0.1034 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소에서 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 2개의 피크를 수득하였는데, 이를 완전히 분리할 수는 없었다. 따라서, 4개의 입체이성질체가 합쳐진 혼합물을 함께 농축시켜 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(34.5 mg, 75%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.46분 (LC 방법 A).
단계 4: 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 102), 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 103), 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 104), 및 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 105)
라세미 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(31 mg, 0.06808 mmol)을 대상으로 별도의 SFC 정제를 2회 수행하여 4개의 단일 거울상이성질체를 모두 용해시켰다. 일차 분취 분리에는 Phenomenex에서 판매하는 Phenomenex LUX-4(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기)(pn: 00G-4491-P0-AX)를 사용해 정상상 SFC 방법(구배: 12% MeOH[+ 20 mM NH3]/88% CO2의 등용매 용리; 유속 = 10 mL/분; 주입 부피 = 70 μL의 22 mg/mL 농도의 MeOH(개질제 없음); 및 컬럼 온도 = 35℃)으로 거울상이성질체 1(불순물과 함께 공동 용리함), 거울상이성질체 2, 거울상이성질체 3, 및 거울상이성질체 4를 용해시켰다. 이차 분취 분리에는 ChiralCel에서 판매하는 ChiralCel OJ 컬럼(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기)(pn: 17335)을 사용해 정상상 SFC 분리(구배: 10% MeOH[+20 mM NH3]/90% CO2의 등용매 용리; 유속 = 10 mL/분; 주입 부피 = 70 μL의 12 mg/mL 농도의 MeOH(개질제 없음); 및 컬럼 온도 = 35℃)로 거울상이성질체 1을 용해시켰다. 상기 정제 조건을 통해 4개의 단일 거울상이성질체 모두를 아래와 같이 단리하였다:
거울상이성질체 1, 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(0.9 mg, 12%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.41분 (LC 방법 A).
거울상이성질체 2, 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(1.7 mg, 22%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.53 (s, 1H), 5.26 (s, 1H), 3.85 (dd, J = 11.0, 3.3 Hz, 1H), 3.73 (td, J = 7.1, 3.5 Hz, 1H), 3.61 (ddd, J = 11.1, 7.4, 2.1 Hz, 1H), 2.50 - 2.43 (m, 1H), 2.38 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.14 (ddd, J = 14.7, 9.9, 6.3 Hz, 1H), 1.87 - 1.71 (m, 2H), 1.64 (q, J = 8.1, 7.3 Hz, 1H), 1.59 - 1.45 (m, 3H), 1.29 (s, 1H), 1.19 - 1.11 (m, 1H), 0.91 (dd, J = 16.8, 10.6 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.51분 (LC 방법 A).
거울상이성질체 3, 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 3)(2.2 mg, 28%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.53 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 5.27 (s, 1H), 3.86 (dd, J = 10.9, 3.1 Hz, 1H), 3.70 - 3.63 (m, 1H), 3.60 (ddd, J = 10.9, 7.7, 2.0 Hz, 1H), 2.52 (td, J = 10.8, 9.7, 4.4 Hz, 1H), 2.45 - 2.35 (m, 1H), 2.13 - 2.03 (m, 1H), 1.69 (dt, J = 9.8, 4.8 Hz, 2H), 1.60 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.56 - 1.49 (m, 1H), 1.29 (s, 1H), 1.06 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 0.97 - 0.80 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.42분 (LC 방법 A).
거울상이성질체 4, 17-아미노-12-(하이드록시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 4)(1.9 mg, 24%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.33 (s, 1H), 5.09 (s, 2H), 3.96 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.71 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.52 (dt, J = 14.4, 7.7 Hz, 1H), 2.33 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 1.99 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 1.62 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 1.56 - 1.50 (m, 2H), 1.26 (s, 2H), 1.21 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 1.15 (dd, J = 14.0, 7.3 Hz, 1H), 0.92 - 0.82 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.52분 (LC 방법 A).
실시예 54: 18-아미노-6-하이드록시-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(19),2,4,15,17-펜타엔-13-온 (거울상이성질체 1)(화합물 106) 및 18-아미노-6-하이드록시-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(19),2,4,15,17-펜타엔-13-온 (거울상이성질체 2)(화합물 107)의 제조
단계 1: 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
디옥산 중 [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(6 mg, 0.009225 mmol)의 혼합물에 암모니아(184 μL의 0.5 M, 0.092 mmol)를 첨가하고 이어서 THF(0.4 mL)를 첨가하고, 혼합물을 50℃에서 90분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 세척한 다음 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO4), 여과하고 증발시켜 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(4.3 mg, 90%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.63 (s, 1H), 8.33 (s, 2H), 7.42 - 7.29 (m, 5H), 5.92 (s, 1H), 5.79 (ddd, J = 20.3, 10.1, 3.7 Hz, 1H), 5.15 - 4.94 (m, 1H), 4.80 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.73 - 4.56 (m, 1H), 2.65 - 2.04 (m, 4H) ppm; 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -64.72, -73.14 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 517.11847, 확인된 값 518.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.75분 (LC 방법 S).
단계 2: N -[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]펜트-4-엔아미드
디클로로메탄(1.2 mL)에 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(59 mg, 0.114 mmol), DIPEA(60 μL, 0.3445 mmol), 및 DMAP(114 μL의 0.25 M, 0.0285 mmol)를 첨가하였다. 이 혼합물을 얼음조로 냉각하면서, 펜트-4-엔오일 클로라이드(131 μL의 1 M, 0.131 mmol)를 DCM 용액으로서 첨가하였다. 그런 다음, 용액을 실온에서 30분 동안 교반하고, 혼합물을 수성 1 M NaHCO3, 수성 0.5 M HCl, 물, 및 염수로 세척한 다음, 건조시키고(MgSO4), 여과하고, 증발시켰다. 미정제 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 15분에 걸쳐 0%~25% EtOAc/헥산)로 정제하여 N-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]펜트-4-엔아미드(69.5 mg, 정량화)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.68 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 6.00 - 5.73 (m, 2H), 5.17 - 4.97 (m, 4H), 4.84 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.99 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.61 - 2.12 (m, 6H) ppm; 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -62.60, -73.06 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 599.16034, 확인된 값 600.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 Q).
단계 3: 6-벤질옥시-18-니트로-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(18),2,4,9,15(19),16-헥사엔-13-온 ( E/Z 혼합물)
밀봉된 20 mL 바이알에서, 툴루엔 (8 mL) 중 N-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]펜트-4-엔아미드 (55 mg, 0.09175 mmol) 및 1,3-비스(o-톨릴)-4,5-디하이드로이미다졸;디클로로-[(2-이소프로폭시페닐)메틸렌]루테늄(8 mg, 0.01402 mmol)의 용액을 N2로 1분 동안 버블링한 다음, 120℃에서 45분 동안 가열한 다음, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 15분에 걸쳐 0%~25% EtOAc/헥산)로 정제하여 6-벤질옥시-18-니트로-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(18),2,4,9,15(19),16-헥사엔-13-온(E/Z 혼합물)(32.6 mg, 62%)을 수득하였따. ESI-MS m/z 계산된 값 571.129, 확인된 값 572.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.74분 (LC 방법 S).
단계 4: 18-아미노-6-하이드록시-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(19),2,4,15,17-펜타엔-13-온 (거울상이성질체 1)(화합물 106) 및 18-아미노-6-하이드록시-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(19),2,4,15,17-펜타엔-13-온 (거울상이성질체 2)(화합물 107)
AcOH (700 μL) 중 6-벤질옥시-18-니트로-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(18),2,4,9,15(19),16-헥사엔-13-온 (E/Z 혼합물)(32.6 mg, 0.05705 mmol) 및 탄소 상 팔라듐(18 mg of 10% w/w, 0.01691 mmol)의 혼합물을 스테인리스 강 가압 용기에 넣고, 200 psi의 수소 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 15분에 걸쳐 0%~35% EtOAc/헥산)로 정제하여 라세미 18-아미노-6-하이드록시-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(19),2,4,15,17-펜타엔-13-온을 수득하였다. 이 물질을 1:1 아세토니트릴/메탄올에 용해시키고, 21.2 Х 250 mm LUX-4 컬럼(5μm 입자 크기)을 통해 분취 SFC(용리 구배: 메탄올(5 mM NH3)/CO2(10분에 걸쳐 20%~45%))로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 18-아미노-6-하이드록시-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(19),2,4,15,17-펜타엔-13-온(거울상이성질체 1)(6.9 mg, 27%)을 백색 결정질 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.51 (s, 2H), 5.92 (s, 2H), 3.90 (s, 1H), 2.69 - 2.48 (m, 2H), 2.30 (td, J = 13.1, 11.7, 4.1 Hz, 1H), 2.19 (dq, J = 15.1, 6.1, 4.9 Hz, 2H), 2.02 - 1.77 (m, 2H), 1.56 - 1.32 (m, 4H), 0.99 - 0.78 (m, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -62.85, -79.25 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 453.12357, 확인된 값 454.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.07분 (LC 방법 Q).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 18-아미노-6-하이드록시-6,16-비스(트리플루오로메틸)-20-옥사-3,4,14,19-테트라아자트리시클로[13.3.1.12,5]이코사-1(19),2,4,15,17-펜타엔-13-온(거울상이성질체 2)(7.2 mg, 28%)을 백색 결정질 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.54 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 5.94 (s, 2H), 4.10 (s, 1H), 2.57 (dtd, J = 24.0, 12.0, 5.5 Hz, 2H), 2.30 (td, J = 13.1, 11.9, 3.3 Hz, 1H), 2.23 - 2.12 (m, 2H), 1.92 (d, J = 32.4 Hz, 1H), 1.72 - 1.30 (m, 6H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -62.85, -79.25 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 453.12357, 확인된 값 454.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.07분 (LC 방법 Q).
실시예 55: 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-온 (거울상이성질체 1)(화합물 108) 및 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-온 (거울상이성질체 2)(화합물 109)의 제조
단계 1: N -[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]부트-3-엔아미드
디클로로메탄(2 mL)에 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(100 mg, 0.1933 mmol), DIPEA(102 μL, 0.5856 mmol), 및 DMAP(193 μL의 0.25 M, 0.04825 mmol)를 첨가하였다. 이 혼합물을 얼음조로 냉각하면서, 부트-3-엔오일 클로라이드(232 μL의 1 M, 0.232 mmol)를 DCM 용액으로서 첨가하였다. 0℃에서 15분 동안 교반한 후, 더 많은 부트-3-엔오일 클로라이드(116 μL의 1 M, 0.116 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 15분 동안 교반한 후, 더 많은 부트-3-엔오일 클로라이드(145 μL의 1 M, 0.145 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 15분 동안 추가로 교반한 후, 혼합물을 DCM으로 희석하고, 수성 1 M NaHCO3, 수성 0.5 M HCl, 물, 및 염수로 세척한 다음, 건조시키고(MgSO4), 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 15분에 걸쳐 0%~25% EtOAc/헥산)로 정제하여 N-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]부트-3-엔아미드(24 mg, 21%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 585.1447, 확인된 값 586.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.53분 (LC 방법 J).
단계 2: 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-온 (이성질체 1) 및 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-온 (이성질체 2)
밀봉된 20 mL 바이알에서, 툴루엔 (3.5 mL) 중 N-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]부트-3-엔아미드(23.4 mg, 0.03997 mmol) 및 1,3-비스(o-톨릴)-4,5-디하이드로이미다졸;디클로로-[(2-이소프로폭시페닐)메틸렌]루테늄(4.5 mg, 0.007888 mmol)의 용액을 N2로 1분 동안 버블링한 다음, 120℃에서 45분 동안 가열하였다. 더 많은 촉매, 1,3-비스(o-톨릴)-4,5-디하이드로이미다졸;디클로로-[(2-이소프로폭시페닐)메틸렌]루테늄(4.5 mg, 0.007888 mmol)을 첨가하고, 120℃에서 30분 동안 가열한 다음, 용매를 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 20분에 걸쳐 0%~20% EtOAc/헥산)로 정제하여 2개의 이성질체 생성물을 수득하였다.
처음 용리되는 이성질체를 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-온(이성질체 1)(6.6 mg, 15%)로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 557.1134, 확인된 값 558.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.35분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리되는 이성질체를 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-온(이성질체 2)(2.4 mg, 8%)로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 557.1134, 확인된 값 558.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.29분 (LC 방법 J).
단계 3: 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-온 (거울상이성질체 1)(화합물 108) 및 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-온 (거울상이성질체 2)(화합물 109)
반응 1: 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-온(이성질체 1)(6.6 mg, 0.006157 mmol) 및 탄소 상 팔라듐(3.2 mg의 10% w/w, 0.003007 mmol)을 AcOH(200 μL)에 첨가하고, 혼합물을 스테인리스 강 압력 용기에 넣고, 200 psi H2 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 여과하고 여액을 증발시켰다.
반응 2: 6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-온(이성질체 2)(2.4 mg, 0.003014 mmol) 및 탄소 상 팔라듐(3.2 mg의 10% w/w, 0.003007 mmol)을 AcOH(200 μL)에 첨가하고, 혼합물을 스테인리스 강 압력 용기에 넣고, 200 psi H2 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 여과하고 여액을 증발시켰다.
반응 1 및 반응 2의 미정제 생성물을 합치고, 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 20분에 걸쳐 0%~35% EtOAc/헥산)로 정제하여 2.4 mg의 라세미 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-온을 수득하였다. 이 물질을 1:1 아세토니트릴/메탄올에 용해시키고, 21.2 Х 250 mm LUX-4 컬럼(5μm 입자 크기)을 통해 분취 SFC(용리 구배: 메탄올(5 mM NH3)/CO2(10분에 걸쳐 20%~45%))로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-온(거울상이성질체 1)(1.1 mg, 41%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.61 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 5.63 (s, 2H), 3.91 - 3.32 (m, 1H), 2.89 (td, J = 11.9, 3.9 Hz, 1H), 2.41 (dtd, J = 14.5, 11.2, 9.8, 4.8 Hz, 2H), 2.23 (ddt, J = 16.3, 12.9, 7.7 Hz, 2H), 2.04 (q, J = 4.2 Hz, 1H), 1.87 - 1.71 (m, 1H), 1.65 (d, J = 24.3 Hz, 1H), 1.48 (s, 1H), 0.87 (dd, J = 11.5, 4.4 Hz, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -62.71, -79.79 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1079, 확인된 값 440.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.02분 (LC 방법 Q).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-온(거울상이성질체 2)(1.2 mg, 44%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.61 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 5.63 (s, 2H), 3.65 (s, 1H), 2.99 - 2.81 (m, 1H), 2.41 (ddt, J = 19.2, 9.8, 4.8 Hz, 2H), 2.23 (ddt, J = 16.5, 12.9, 7.7 Hz, 2H), 2.12 - 1.96 (m, 1H), 1.84 - 1.71 (m, 1H), 1.66 - 1.60 (m, 1H), 1.50 - 1.35 (m, 1H), 0.95 - 0.74 (m, 1H) ppm. 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ -62.71, -79.79 ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 439.1079, 확인된 값 440.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.01분 (LC 방법 Q).
실시예 56: 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (거울상이성질체 1)(화합물 110), 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (거울상이성질체 2)(화합물 111), 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (거울상이성질체 3)(화합물 112), 및 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (거울상이성질체 4)(화합물 113)의 제조
단계 1: 3-알릴-1,2-티아졸리딘 1,1-디옥사이드
4,5-디하이드로이소티아졸 1,1-디옥사이드(150 mg, 1.1331 mmol)를 테트라하이드로푸란(7.5 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 알릴(클로로)마그네슘(테트라하이드로푸란 중 3 mL의 2 M, 6 mmol)을 질소 분위기 하에 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응의 이민 중간체(TLC/스타틴 KMnO4)가 소모된 후, 반응물을 0℃로 냉각시킨 다음, 포화 NH4Cl(20 mL)로 퀀칭시켰다. 생성된 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 아세트산 에틸(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/디클로로메탄)로 정제하여 3-알릴-1,2-티아졸리딘 1,1-디옥사이드(90 mg, 49%)를 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.88 - 5.67 (m, 1H), 5.27 - 5.14 (m, 2H), 4.22 (br s., 1H), 3.78 - 3.60 (m, 1H), 3.29 - 3.06 (m, 2H), 2.62 - 2.45 (m, 1H), 2.38 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.14 (dq, J = 13.5, 8.6 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 161.051, 확인된 값 162.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.89분 (LC 방법 E).
단계 2: 3-알릴-2-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,2-티아졸리딘 1,1-디옥사이드
수소화 나트륨(광유 중 60%, 142 mg, 3.5503 mmol)을 0℃의 DMF (21 mL) 중 3-알릴-1,2-티아졸리딘 1,1-디옥사이드(620 mg, 3.8456 mmol)에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 현탁액을 0℃로 냉각시키고 DMF (13 mL) 중 [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(2.1 g, 3.2286 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 물(40 mL)과 아세트산 에틸(30 mL)을 첨가하고, 상을 분리하였다. 수성상을 아세트산 에틸(2 X 30 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 물(50 mL)과 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카-겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g; 용리 구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 3-알릴-2-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,2-티아졸리딘 1,1-디옥사이드(1.4 g, 65%)를 황색 검으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.76 (s, 1H), 7.43 - 7.29 (m, 5H), 5.89 - 5.55 (m, 2H), 5.15 - 4.95 (m, 4H), 4.89 - 4.80 (m, 1H), 4.69 - 4.61 (m, 1H), 3.49 - 3.38 (m, 1H), 3.17 - 3.01 (m, 1H), 2.73 - 2.59 (m, 1H), 2.58 - 2.16 (m, 8H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -59.63 (s, 3F), -73.09 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 661.143, 확인된 값 662.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.32분 (LC 방법 E).
단계 3: 6-벤질옥시-20-니트로-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15λ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔 15,15-디옥사이드 ( E/Z 혼합물)
디클로로에탄(168 mL) 중 Zhan 촉매-1B(133 mg, 0.1813 mmol)를 질소로 버블링하여 탈기시키고, 60℃로 가열하였다. 그런 다음, 디클로로에탄 (168 mL) 중 3-알릴-2-[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,2-티아졸리딘 1,1-디옥사이드(1.05 g, 1.5871 mmol)를 1시간에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 75℃로 가열하고, 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 6-벤질옥시-20-니트로-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15λ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔 15,15-디옥사이드(E/Z 혼합물)(195 mg, 19%)를 녹색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 633.1117, 확인된 값 634.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.3분 (LC 방법 E).
단계 4: 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (부분 입체이성질체 쌍 1) 및 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (부분 입체이성질체 쌍 2)
6-벤질옥시-20-니트로-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15λ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,9,17(21),18-헥사엔 15,15-디옥사이드(E/Z 혼합물)(30 mg, 0.0426 mmol)를 메탄올(3 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(10%, 습식)(20 mg, 0.0094 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 용리 구배: 0%~80% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 2개의 상이한 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였따:
처음 용리되는 생성물 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (부분 입체이성질체 쌍 1)(4 mg, 18%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.72 (s, 1H), 4.69 - 4.52 (m, 1H), 3.46 - 3.35 (m, 1H), 3.28 - 3.18 (m, 2H), 2.72 - 2.55 (m, 1H), 2.36 - 2.17 (m, 2H), 2.14 - 2.02 (m, 1H), 1.97 - 1.68 (m, 3H), 1.66 - 1.44 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -60.96 (s, 3F), -81.11 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.1062, 확인된 값 516.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.9분 (LC 방법 E).
두 번째로 용리되는 생성물 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온(부분 입체이성질체 쌍 2)(4 mg, 18%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.45 (s, 1H), 5.68 (br s, 2H), 4.70 - 4.56 (m, 1H), 4.49 - 4.37 (m, 1H), 3.66 - 3.57 (m, 1H), 3.38 - 3.04 (m, 3H), 2.62 - 1.99 (m, 6H), 1.94 - 1.59 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -59.90 (s, 3F), -78.75 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.1062, 확인된 값 516.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.9분 (LC 방법 E).
단계 5: 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (거울상이성질체 1)(화합물 110), 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (거울상이성질체 2)(화합물 111), 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (거울상이성질체 3)(화합물 112), 및 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (거울상이성질체 4)(화합물 113)
20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (부분 입체이성질체 쌍 1) 및 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온 (부분 입체이성질체 쌍 2)(121 mg, 0.235 mmol)의 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 용리 구배: 0%~20%~60%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하고, 이어서 혼합된 분획을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 용리 구배: 0%~20%~60%의 아세트산 에틸/헵탄)로 다시 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 쌍 생성물을 수득하였다.
거울상이성질체를 분리하기 위해 처음 부분 입체이성질체 쌍을 키랄 SFC(셀룰로오스 5 컬럼; 20% 메탄올/CO2; 유속 = 75 mL/분; 40℃)로 정제하여 2개의 생성물을 단일 거울상이성질체로서 수득하였다.
처음 용리되는 거울상이성질체 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온(거울상이성질체 1)(14 mg, 11%)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.79 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.96 (br. s, 2H), 4.52 - 4.38 (m, 1H), 3.54 - 3.41 (m, 1H), 3.27 - 3.18 (m, 1H), 2.21 - 2.05 (m, 2H), 2.02 - 1.88 (m, 1H), 1.79 - 1.67 (m, 2H), 1.63 - 1.37 (m, 4H), 1.27 - 1.02 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -58.50 (s, 3F), -78.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.1062, 확인된 값 516.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.93분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온(거울상이성질체 2)(12 mg, 10%)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.79 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.96 (br. s., 2H), 4.52 - 4.38 (m, 1H), 3.53 - 3.41 (m, 1H), 3.27 - 3.18 (m, 1H), 2.20 - 2.08 (m, 2H), 2.03 - 1.90 (m, 1H), 1.78 - 1.67 (m, 2H), 1.63 - 1.37 (m, 4H), 1.25 - 1.03 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -58.50 (s, 3F), -78.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.1062, 확인된 값 516.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.93분 (LC 방법 C).
두 번째 부분 입체이성질체 쌍을 키랄 SFC(컬럼: 아밀로오스 1 컬럼; 10% 메탄올/CO2; 유속 = 75 mL/분; 40℃)로 정제하여 거울상이성질체를 분리하여 2개의 생성물을 단일 거울상이성질체로서 수득하였다.
첫 번째 거울상이성질체 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온(거울상이성질체 3)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. (12 mg, 9%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.78 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.87 (br. s., 2H), 4.72 - 4.58 (m, 1H), 3.58 - 3.46 (m, 1H), 3.26 - 3.20 (m, 1H), 2.69 - 2.56 (m, 1H), 2.18 - 2.01 (m, 3H), 1.70 - 1.57 (m, 2H), 1.53 - 1.40 (m, 3H), 1.36 - 1.19 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -58.16 (s, 3F), -77.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.1062, 확인된 값 516.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.93분 (LC 방법 C).
두 번째 거울상이성질체 20-아미노-6-하이드록시-6,18-비스(트리플루오로메틸)-22-옥사-15μ6-티아-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-15,15-디온(거울상이성질체 4)(10 mg, 8%)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.78 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.87 (br. s., 2H), 4.72 - 4.58 (m, 1H), 3.59 - 3.46 (m, 1H), 3.26 - 3.19 (m, 1H), 2.68 - 2.57 (m, 1H), 2.16 - 2.00 (m, 3H), 1.72 - 1.57 (m, 2H), 1.54 - 1.40 (m, 3H), 1.36 - 1.19 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -58.16 (s, 3F), -77.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.1062, 확인된 값 516.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.93분 (LC 방법 C).
실시예 57: (12 R )-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 114) 및 (12 R )-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 115)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-아민 ( E/Z 혼합물)
에탄올 (68 mL) 및 물 (17 mL) 중 (12S)- 6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)(1.7 g, 2.4282 mmol)의 용액에 철(1.6 g, 28.651 mmol) 및 염화 암모늄(170 mg, 3.1781 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 가열한 다음 실온으로 냉각시켰다. 반응물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 포화 수성 NH4Cl 용액(50 mL)과 물(50 mL)로 희석하였다. EtOAc(3 X 50 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-아민(E/Z 혼합물)(1.1 g, 80%)을 황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 563.1144, 확인된 값 564.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.55분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-아민 ( E/Z 혼합물)
디메틸포름아미드 (2 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-아민 (E/Z 혼합물)(150 mg, 0.2658 mmol)의 용액에 요오드화 구리(I)(25 mg, 0.1313 mmol) 및 메탄올 중 메톡시드 나트륨(0.5 mL, 25% w/v, 2.3138 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 105℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(25 mL)로 희석하고, 셀라이트로 여과하였다. 여액을 아세트산 에틸(2 X 25 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-아민(E/Z 혼합물)(55 mg, 38%)을 적색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.51 - 7.26 (m, 5H), 6.49 (s, 1H), 5.66 - 5.46 (m, 2H), 5.21 - 4.91 (m, 3H), 4.75 - 4.60 (m, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.82 - 3.73 (m, 1H), 3.72 - 3.54 (m, 1H), 3.47 - 3.32 (m, 1H), 3.10 - 2.88 (m, 1H), 2.59 - 2.39 (m, 1H), 2.35 - 2.10 (m, 3H), 2.06 - 1.90 (m, 1H), 1.87 - 1.67 (m, 2H), 1.57 - 1.41 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -75.31 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.2144, 확인된 값 516.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.57분 (LC 방법 E).
단계 3: (12 R )-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올
메탄올 (5 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-아민(E/Z 혼합물)(50 mg, 0.097 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 10% 탄소 상 팔라듐(90 mg, 0.0423 mmol) 을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하였다. 생성된 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 디메틸 설폭시드(2 mL)에 용해시킨 다음, 역상 HPLC(구배: 5%~95% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 어두운 녹색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (12R)-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(30 mg, 60%)을 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 6.46 (br. s., 1H), 5.26 - 4.82 (m, 2H), 3.97 - 3.75 (m, 4H), 3.45 - 3.30 (m, 1H), 2.75 - 2.31 (m, 2H), 2.30 - 1.89 (m, 4H), 1.84 - 1.45 (m, 8H), 1.37 - 1.27 (m, 1H), 0.97 - 0.81 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -77.28 (br. s., 3F, 마이너 부분 입체이성질체), -80.82 (br. s., 3F, 메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 427.1831, 확인된 값 428.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.12분 (LC 방법 X).
단계 4: (12 R )-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 114) 및 (12 R )-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 115)
(12R)-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(29 mg, 0.06785 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 SFC(구배: 14.5분에 걸쳐 15%~40% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2의 이중 구배)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 (12R)-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(9.2 mg, 62%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 427.18314, 확인된 값 428.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 D).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 (12R)-20-아미노-18-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(5.4 mg, 37%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 427.18314, 확인된 값 428.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.86분 (LC 방법 D).
실시예 58: (12 R )-21-아미노-6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-16-온 (거울상이성질체 1)(화합물 116) 및 (12 R )-21-아미노-6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-16-온 (거울상이성질체 2)(화합물 117)의 제조
단계 1: (5 R )-5-알릴모르폴린-3-온
파트 A: 0℃의 THF (150 mL) 중 (2R)-2-아미노펜트-4-엔산(3.97 g, 34.483 mmol)의 용액에, 내부 온도를 0 내지 5℃로 유지하면서 THF 중 LiAlH4(46 mL, 1 M, 46 mmol)를 60분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 THF(200 mL)로 희석하고, 0℃로 냉각시킨 다음, 1.82 mL의 물, 1.82 mL의 25% 수성 NaOH, 및 5.46 mL의 물로 퀀칭시켰다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 여과하고, THF로 세척하고, 여액을 보관하였다. 생성된 고형분을 THF(200 mL)에 현탁하고, 가열하여 1시간 동안 환류시키고, 실온으로 냉각시킨 다음, 여과하였다. 합쳐진 모든 여액을 농축시켜 (2R)-2-아미노펜트-4-엔-1-올(4.25 g, 100%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 5.93 - 5.63 (m, 1H), 5.22 - 5.00 (m, 2H), 3.60 (dd, J = 10.6, 3.8 Hz, 1H), 3.32 (dd, J = 10.6, 7.6 Hz, 1H), 2.99 - 2.85 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 2.11 - 1.94 (m, 1H), 1.92 - 1.73 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 101.08406, 확인된 값 102.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.27분 (LC 방법 E).
파트 B: -78℃의 CH2Cl2 (50 mL) 중 (2R)-2-아미노펜트-4-엔-1-올 (3.48 g, 34.405 mmol) 및 Et3N(19.602 g, 27 mL, 193.71 mmol)의 용액에 2-클로로아세틸 클로라이드(10 g, 88.54 mmol)를 적가하고, 혼합물을 1시간에 걸쳐 실온으로 가온시켰다. 혼합물을 CH2Cl2(100 mL) 및 물(100 mL)로 희석하였다. 2개의 층이 분리되었고, 수성층을 CH2Cl2(2 X 50 mL)로 분리하였다. 합쳐진 유기층을 5% 수성 NaHCO3(50 mL)으로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 [(2R)-2-[(2-클로로아세틸)아미노]펜트-4-에닐] 2-클로로아세테이트(2.23 g, 26%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 6.62 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.88 - 5.65 (m, 1H), 5.27 - 5.08 (m, 2H), 4.39 - 4.18 (m, 3H), 4.09 (s, 2H), 4.05 (s, 2H), 2.45 - 2.28 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 253.02725, 확인된 값 254.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.62분 (LC 방법 E).
파트 C: 아세톤 (50 mL) 중 [(2R)-2-[(2-클로로아세틸)아미노]펜트-4-에닐] 2-클로로아세테이트(2.23 g, 8.7757 mmol)의 용액에 물(30 mL) 중 Na2CO3(1.39 g, 13.115 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 농축시켜 아세톤을 제거하였다. 잔류물을 EtOAc(4 X 40 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 아세트산 에틸)로 정제하여 2-클로로-N-[(1R)-1-(하이드록시메틸)부트-3-에닐]아세트아미드(1.55 g, 99%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 6.78 (br. s., 1H), 5.79 (ddt, J = 17.1, 10.1, 7.3 Hz, 1H), 5.29 - 5.05 (m, 2H), 4.08 - 3.97 (m, 3H), 3.77 - 3.65 (m, 2H), 2.46 - 2.28 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 177.05565, 확인된 값 178.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.95분 (LC 방법 E).
파트 D: 0℃의 THF (60 mL) 중 2-클로로-N-[(1R)-1-(하이드록시메틸)부트-3-에닐]아세트아미드(1.46 g, 8.2194 mmol)의 용액에 광유 중 60% NaH(380 mg, 9.5009 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 포화 수성 NH4Cl(10 mL)로 퀀칭시켰다. 혼합물을 농축시켜 THF를 제거하고, CH2Cl2(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(용리제: 100% EtOAc)로 정제하여 (5R)-5-알릴모르폴린-3-온 (806 mg, 69%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 6.22 (br. s., 1H), 5.72 (dddd, J = 16.8, 10.4, 8.1, 6.3 Hz, 1H), 5.30 - 5.13 (m, 2H), 4.27 - 4.05 (m, 2H), 3.92 (dd, J = 11.4, 3.8 Hz, 1H), 3.67 - 3.54 (m, 1H), 3.52 - 3.41 (m, 1H), 2.41 - 2.27 (m, 1H), 2.23 - 2.09 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 141.07898, 확인된 값 142.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.83분 (LC 방법 E).
단계 2: 메틸 6-[(3 R )-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
질소 하에, 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.34 g, 4.7087 mmol), (5R)-5-알릴모르폴린-3-온 (666 mg, 4.7178 mmol), Cs2CO3 (1.84 g, 5.6473 mmol), Xantphos (546 mg, 0.9436 mmol), 및 Pd2dba3(432 mg, 0.4718 mmol)의 혼합물에 1,4-디옥산(20 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 질소 하에 80℃에서 5.5시간 동안 교반하였다. 1,4-디옥산 (10 mL) 중 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.2 g, 4.2168 mmol)의 용액을 15시간에 걸쳐 적가하였다. 적가 후, 혼합물을 80℃에서 4시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시켰다. 물(30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(760 mg, 41%)를 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.75 (s, 1H), 5.71 - 5.41 (m, 1H), 5.20 - 4.94 (m, 2H), 4.84 - 4.56 (m, 1H), 4.52 - 4.37 (m, 1H), 4.34 - 4.18 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 4.03 - 3.93 (m, 2H), 2.80 - 2.08 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -61.08 내지 -62.72 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 389.08347, 확인된 값 390.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.97분 (LC 방법 E).
단계 3: 메틸 6-[(3 R )-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-아미노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
EtOH (5 mL) 및 H2O (1 mL) 중 메틸 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (114 mg, 0.2928 mmol), NH4Cl (20 mg, 0.3739 mmol), 및 철(166 mg, 2.9725 mmol)의 혼합물을 질소 하에 80℃에서 2시간 동안 가열한 다음, 실온으로 냉각시켰다. EtOAc(30 mL) 및 28% 수성 NH3을 교반하면서 첨가하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 50%~80% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-아미노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(80 mg, 76%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.38 - 7.27 (m, 1H), 6.38 - 5.98 (m, 2H), 5.77 - 5.47 (m, 1H), 5.24 - 4.99 (m, 2H), 4.42 - 4.27 (m, 2H), 4.26 - 3.43 (m, 6H), 2.99 - 2.10 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -61.14 내지 -63.58 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 359.10928, 확인된 값 360.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 E).
단계 4: 메틸 6-[(3 R )-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
CH2Cl2 (1.5 mL) 중 메틸 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-아미노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(40 mg, 0.1113 mmol)의 용액에 디-터트-부틸 디카르보네이트(62 mg, 0.2841 mmol) 및 DMAP(3.5 mg, 0.0286 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 감압 하에 용매를 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(62 mg, 100%)를 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.03 - 7.82 (m, 1H), 5.79 - 5.41 (m, 1H), 5.24 - 4.91 (m, 2H), 4.68 - 4.16 (m, 2H), 4.07 - 3.50 (m, 6H), 2.97 - 2.12 (m, 2H), 1.42 (s, 18H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -61.07 내지 -62.72 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 559.2142, 확인된 값 582.2 (M+Na)+; 머무름 시간: 2.22분 (LC 방법 E).
단계 5: 6-[(3 R )-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
파트 A: 질소 하에 EtOAc (100 mL) 중 메틸 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(900 mg, 1.6085 mmol) 및 실리카 겔(15 g, 249.65 mmol)의 혼합물을 80℃에서 4시간 동안 가열하고 70℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축시키고 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(653 mg, 88%)를 백색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 10.36 - 10.12 (m, 1H), 9.41 - 9.25 (m, 1H), 5.81 - 5.45 (m, 1H), 5.26 - 4.96 (m, 2H), 4.49 - 4.23 (m, 2H), 4.08 - 3.49 (m, 6H), 2.91 - 2.11 (m, 2H), 1.54 (s, 9H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -61.17 내지 -62.94 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 459.1617, 확인된 값 460.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.23분 (LC 방법 E).
파트 B: 0℃의 THF (2 mL) 중 메틸 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(50 mg, 0.1088 mmol)의 용액에 H2O (0.5 mL) 중 NaOH(9.9 mg, 0.2475 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 0℃로 냉각시켰다. 1 N 수성 HCl(238 mg)로 산성화시키고, 농축시켜 THF를 제거하였다. 잔류물을 EtOAc(3 X 20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(48 mg, 99%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 10.46 - 10.15 (m, 1H), 9.55 - 9.37 (m, 1H), 5.75 - 5.41 (m, 1H), 5.24 - 4.98 (m, 2H), 4.48 - 4.20 (m, 2H), 4.07 - 3.88 (m, 2H), 3.80 - 3.56 (m, 1H), 2.83 - 2.09 (m, 2H), 1.55 (s, 9H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않았다. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -61.03 내지 -62.82 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 445.14606, 확인된 값 468.1 (M+Na)+; 머무름 시간: 2.13분 (LC 방법 E).
단계 6: 터트 -부틸 N -[6-[(3 R )-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
0℃의 CH2Cl2 (25 mL) 중 6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(632 mg, 1.419 mmol)의 용액에 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (536 mg, 1.7731 mmol), EDCI(염산염)(390 mg, 2.0344 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸(수화물)(55 mg, 0.3592 mmol), 및 DIPEA(150 mg, 1.1606 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 5% 수성 NaHCO3(10 mL)로 처리하고, CH2Cl2(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(966 mg, 93%)를 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 10.83 - 10.58 (m, 1H), 9.83 (br. s., 1H), 9.43 - 9.31 (m, 1H), 9.10 (br. s., 1H), 7.53 - 7.28 (m, 5H), 5.96 - 5.43 (m, 2H), 5.22 - 4.97 (m, 4H), 4.92 - 4.67 (m, 2H), 4.44 - 4.19 (m, 2H), 4.06 - 3.55 (m, 3H), 2.77 - 2.10 (m, 6H), 1.53 (s, 9H) ppm. 머무름 시간: 2.47분 (LC 방법 E).
단계 7: 터트 -부틸 N -[6-[(3 R )-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
0℃의 CH 2 Cl 2 (30 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-2-[[[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]아미노]카르바모일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(906 mg, 1.2417 mmol)의 용액에 DIPEA(1.2614 g, 1.7 mL, 9.7599 mmol)를 첨가하고, 이어서 트리플루오로메탄설폰산 무수물(550 mg, 1.9494 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반한 다음, 모르폴린(120 mg)을 첨가하여 과량의 트리플루오로메탄설폰산 무수물을 퀀칭시키고, 생성된 혼합물을 2분 동안 교반하였다. 반응물을 5% 수성 NaHCO3(10 mL)로 처리하고, CH2Cl2(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(694 mg, 79%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 10.31 - 10.13 (m, 1H), 9.49 - 9.33 (m, 1H), 7.46 - 7.26 (m, 5H), 5.88 - 5.32 (m, 2H), 5.21 - 4.93 (m, 4H), 4.91 - 4.63 (m, 2H), 4.43 - 4.25 (m, 2H), 4.09 - 3.52 (m, 3H), 2.93 - 2.08 (m, 6H), 1.57 (s, 9H) ppm. 머무름 시간: 2.62분 (LC 방법 E).
단계 8: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,9,18(22),19-헥사엔-21-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
건조시킨 1 L 플라스크에 Zhan 촉매-1B(100 mg, 0.1363 mmol)를 채웠다. 진공을 이용해 공기를 질소로 3회 교체하였다. 캐뉼러를 이용해 DCE(260 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 10분 동안 버블링하고 75℃로 가열하였다. DCE (30 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(3R)-3-알릴-5-옥소-모르폴린-4-일]-2-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(692 mg, 0.9724 mmol)의 용액을 2.5시간에 걸쳐 적가하였다. 첨가하는 도중, 40분마다 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링하였다. 첨가가 끝난 후, 혼합물을 질소로 15분 동안 버블링하였다. 그런 다음, 혼합물을 75℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[(12R)-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,9,18(22),19-헥사엔-21-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(483 mg, 73%)를 무색 오일로서 수득하였다. 이 물질을 후속 단계에 직접 투입하였다.
단계 9: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트 (거울상이성질체 1) 및 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트 (거울상이성질체 2)
0℃의 EtOAc (15 mL) 및 MeOH (15 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,9,18(22),19-헥사엔-21-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(483 mg, 0.7066 mmol)의 용액에 10% 탄소 상 팔라듐(120 mg, 50% wet, 0.0564 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 수소 풍선 하에서 10℃ 내지 15℃에서 4시간 동안 교반하고, 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체 터트-부틸 N-[(12R)-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트(거울상이성질체 1)(259 mg, 48%)를 무색 오일로서 단리하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 9.61 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 7.34 - 7.22 (m, 5H), 4.90 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.40 - 4.25 (m, 2H), 4.06 - 3.92 (m, 2H), 3.70 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 2.66 - 2.37 (m, 2H), 2.12 - 1.95 (m, 2H), 1.91 - 1.70 (m, 3H), 1.56 (s, 9H), 1.42 - 1.30 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -62.31 (s, 3F), -74.51 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 685.2335, 확인된 값 630.2 (M-55)+; 머무름 시간: 2.58분 (LC 방법 E).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체 터트-부틸 N-[(12R)-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트(거울상이성질체 2)(201 mg, 41%)를 백색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 9.47 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 7.39 - 7.26 (m, 5H), 4.94 - 4.82 (m, 1H), 4.82 - 4.69 (m, 1H), 4.36 - 4.26 (m, 2H), 4.08 - 3.94 (m, 2H), 3.66 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 2.60 - 2.20 (m, 3H), 2.15 - 1.64 (m, 4H), 1.56 (s, 9H), 1.39 - 1.27 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -62.39 (s, 3F), -74.40 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 685.2335, 확인된 값 630.2 (M-55)+; 머무름 시간: 2.55분 (LC 방법 E).
단계 10: (12 R )-21-아미노-6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-16-온 (거울상이성질체 1)(화합물 116)
파트 A: EtOAc (4 mL) and MeOH (4 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트(거울상이성질체 1)(259 mg, 0.34 mmol)의 용액에 10% 탄소 상 팔라듐(123 mg, 50% 습식, 0.0578 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 수소 풍선 하에서 30℃ 내지 50℃에서 5시간 동안 교반하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 다시, 10% 탄소 상 팔라듐(150 mg, 50% 습식, 0.0705 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 30℃ 내지 50℃에서 6시간 동안 교반하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~35% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트(거울상이성질체 1)(178 mg, 88%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 9.34 - 9.16 (m, 2H), 4.42 - 4.21 (m, 2H), 4.08 - 3.89 (m, 2H), 3.86 - 3.64 (m, 2H), 2.74 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.33 - 2.12 (m, 2H), 2.01 - 1.68 (m, 4H), 1.56 (s, 9H), 1.53 - 1.29 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -62.24 (s, 3F), -80.04 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 595.1865, 확인된 값 596.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.29분 (LC 방법 E).
파트 B: 0℃의 CH2Cl2 (4 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트(거울상이성질체 1)(178 mg, 0.2989 mmol)의 용액에 TFA(1.4800 g, 1 mL, 12.98 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 농축시킨 다음, MeOH와 EtOAc의 1:2 혼합물(3 X 2 mL)과 함께 공동 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~60% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12R)-21-아미노-6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-16-온(거울상이성질체 1)(132 mg, 89%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.31 (s, 1H), 5.86 (s, 2H), 5.43 (s, 1H), 4.46 - 4.22 (m, 2H), 4.07 - 3.87 (m, 2H), 3.80 - 3.63 (m, 1H), 2.52 - 2.21 (m, 2H), 2.03 - 1.51 (m, 7H), 1.41 - 1.32 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -62.66 (s, 3F), -79.06 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 495.13412, 확인된 값 496.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 E).
단계 11: (12 R )-21-아미노-6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-16-온 (거울상이성질체 2)(화합물 117)
파트 A: EtOAc (4 mL) 및 MeOH (4 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-(벤질옥시)-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트(거울상이성질체 2)(209 mg, 0.3048 mmol)의 용액에 10% 탄소 상 팔라듐(150 mg, 50% 습식, 0.0705 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 수소 풍선 하에 30℃ 내지 50℃에서 5시간 동안 교반하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트(거울상이성질체 2)(148 mg, 82%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 9.36 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 4.33 (s, 2H), 4.05 - 3.92 (m, 3H), 3.68 - 3.54 (m, 1H), 2.52 - 2.12 (m, 3H), 2.01 - 1.73 (m, 3H), 1.68 - 1.61 (m, 1H), 1.57 (s, 9H), 1.51 - 1.37 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -62.46 (s, 3F), -78.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 595.1866, 확인된 값 540.3 (M-55)+; 머무름 시간: 2.21분 (LC 방법 E).
파트 B: 0℃의 CH2Cl2 (3 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-16-옥소-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-21-일]카르바메이트(거울상이성질체 2)(148 mg, 0.2485 mmol)의 용액에 TFA(1.4800 g, 1 mL, 12.98 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 농축시킨 다음 MeOH와 EtOAc의 1:3 혼합물(3 X 4 mL)과 함께 공동 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~60% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하고, 생성물을 CH3CN (1 mL) 및 H2O(2 mL)로부터 동결건조시켜 (12R)-21-아미노-6-하이드록시-6,19-비스(트리플루오로메틸)-14,23-디옥사-3,4,17,22-테트라아자테트라시클로[16.3.1.12,5.012,17]트리코사-1(21),2,4,18(22),19-펜타엔-16-온(거울상이성질체 2)(101 mg, 81%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.78 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 6.94 (br. s., 2H), 4.18 (s, 2H), 4.02 - 3.82 (m, 2H), 3.72 - 3.53 (m, 1H), 2.32 - 1.93 (m, 3H), 1.88 - 1.52 (m, 4H), 1.43 - 1.20 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -61.51 (s, 3F), -78.17 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 495.1341, 확인된 값 496.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.72분 (LC 방법 E).
실시예 59: (12 R )-20-아미노-18-페닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 118)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-페닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
압력 튜브에 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(150 mg, 0.2524 mmol), 페닐보론산 피나콜 에스테르(67 mg, 0.3283 mmol), 탄산 세슘(198 mg, 0.6077 mmol), 및 툴루엔(6 mL)을 채웠다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링하고, Pd(dppf)Cl2(13 mg, 0.0159 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 3분 동안 버블링하고, 튜브를 밀봉하였다. 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 물(10 mL)로 처리하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 0%~15% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-페닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(149 mg, 100%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.26 (s, 1H), 7.53 - 7.27 (m, 10H), 5.65 - 5.39 (m, 2H), 5.35 - 4.91 (m, 2H), 4.08 - 3.93 (m, 1H), 3.65 - 3.48 (m, 1H), 2.98 - 2.71 (m, 2H), 2.59 - 2.06 (m, 6H), 1.89 - 1.77 (m, 1H), 1.76 - 1.61 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.83 내지 -73.65 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 591.2093, 확인된 값 592.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.7분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-페닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 118)
EtOAc (4 mL) 및 MeOH (4 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-페닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)(149 mg, 0.2519 mmol)의 용액에 10% 탄소 상 팔라듐(107 mg, 50% 습식, 0.0503 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 수소 풍선 하에 30℃ 내지 50℃에서 4시간 동안 교반하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 황색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (12R)-20-아미노-18-페닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(91 mg, 75%)을 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.55 - 7.49 (m, 1H), 7.48 - 7.31 (m, 5H), 7.18 - 7.14 (m, 1H), 5.93 (s, 2H), 3.98 - 3.65 (m, 1H), 2.78 - 2.54 (m, 2H), 2.34 - 2.20 (m, 1H), 2.13 - 1.93 (m, 2H), 1.84 - 1.27 (m, 10H), 1.02 - 0.70 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -76.08 내지 -79.41 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 473.2039, 확인된 값 474.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.96분 (LC 방법 E).
실시예 60: 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 119), 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 120), 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 121), 및 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 122)의 제조
단계 1: 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로- N -(1-페닐부트-3-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (8 mL) 중 [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(600 mg, 0.9225 mmol)의 용액에 1-페닐부트-3-엔-1-아민(410 mg, 2.785 mmol) 및 DIEA(850 μL, 4.88 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 120분 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~100% 아세트산 에틸)로 정제하여 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-N-(1-페닐부트-3-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(459 mg, 77%)을 황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 8.30 (dd, J = 7.8, 3.2 Hz, 1H), 7.42 - 7.31 (m, 7H), 7.26 - 7.21 (m, 2H), 7.21 - 7.15 (m, 1H), 5.91 - 5.80 (m, 1H), 5.79 - 5.67 (m, 1H), 5.45 - 5.33 (m, 1H), 5.17 - 5.06 (m, 2H), 5.02 (ddd, J = 10.3, 5.5, 2.0 Hz, 2H), 4.77 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.60 (dd, J = 10.8, 8.0 Hz, 1H), 2.94 (ddd, J = 14.3, 9.2, 7.1 Hz, 1H), 2.58 (ddd, J = 25.3, 11.9, 4.7 Hz, 3H), 2.35 - 2.17 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 647.1967, 확인된 값 648.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.08분 (LC 방법 J).
단계 2: 6-벤질옥시-17-니트로-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
500 mL 3구 플라스크에서, 벤질리덴-[1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)이미다졸리딘-2-일리덴]-디클로로-루테늄;트리시클로헥실포스판(125 mg, 0.1472 mmol)을 툴루엔(135 mL)에 용해시켰다. 그런 다음, 툴루엔 (5 mL) 중 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-N-(1-페닐부트-3-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(380 mg, 0.5868 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 110℃에서 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~75% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-벤질옥시-17-니트로-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔(E/Z 혼합물)(147 mg, 40%)을 황갈색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 619.1654, 확인된 값 620.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.39분 (LC 방법 J).
단계 3: 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
100 mL 둥근 바닥 플라스크에서, 아세트산 에틸 (8 mL) 및 AcOH (2 mL) 중 6-벤질옥시-17-니트로-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔(E/Z 혼합물)(147 mg, 0.2373 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(250 mg, 10% w/w, 0.2349 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소 가스에서 7시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 여액을 역상 분취 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl)의 이동상 구배)로 정제하여 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(50 mg, 42%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.67 (s, 1H), 7.59 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.34 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.81 (dd, J = 24.4, 3.9 Hz, 1H), 4.70 (dd, J = 29.0, 10.3 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 54.8 Hz, 1H), 2.27 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 2.07 (s, 1H), 1.82 - 1.57 (m, 2H), 1.50 (s, 1H), 1.40 (s, 2H), 1.26 (d, J = 24.2 Hz, 1H), 1.15 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 501.15994, 확인된 값 502.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.12분 (LC 방법 J).
단계 4: 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 119), 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 120), 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 3)(화합물 121), 및 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 4)(화합물 122)
17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(50 mg, 0.09972 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 Lux-4 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 SFC(용리 구배: 5%~80% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 4개의 이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(6.6 mg, 52%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.78 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.67 (dt, J = 10.6, 2.9 Hz, 1H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.27 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 2.08 - 1.99 (m, 1H), 1.73 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 1.56 (ddd, J = 26.6, 13.0, 6.8 Hz, 2H), 1.39 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 1.35 - 1.29 (m, 1H), 1.13 (d, J = 11.6 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 501.15994, 확인된 값 502.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.12분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(4.8 mg, 38%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.36 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.41 (dd, J = 8.4, 6.4 Hz, 2H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.84 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 4.74 (dt, J = 10.9, 3.2 Hz, 1H), 2.78 - 2.69 (m, 1H), 2.34 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 2.09 (ddd, J = 14.6, 8.9, 6.0 Hz, 1H), 1.81 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 1.70 (dd, J = 14.4, 7.7 Hz, 1H), 1.52 - 1.37 (m, 3H), 1.27 (dd, J = 16.0, 8.6 Hz, 1H), 1.13 (dd, J = 13.8, 6.8 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 501.15994, 확인된 값 502.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.12분 (LC 방법 A).
세 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 3)(6.4 mg, 50%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.34 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.78 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.66 (dd, J = 8.6, 5.4 Hz, 1H), 2.86 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 2.27 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 2.08 - 1.99 (m, 1H), 1.74 (s, 1H), 1.59 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 1.53 (d, J = 20.4 Hz, 1H), 1.38 (d, J = 18.7 Hz, 2H), 1.31 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 1.12 (d, J = 15.1 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 501.15994, 확인된 값 502.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.12분 (LC 방법 A).
네 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-12-페닐-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 4)(7.0 mg, 55%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.42 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.34 (dd, J = 8.4, 6.0 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 4.83 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 4.74 (dt, J = 10.8, 3.2 Hz, 1H), 2.75 (q, J = 9.4, 8.9 Hz, 1H), 2.38 - 2.27 (m, 1H), 2.09 (ddd, J = 14.9, 8.9, 5.9 Hz, 1H), 1.82 (dt, J = 12.0, 4.6 Hz, 1H), 1.69 (dt, J = 14.7, 7.5 Hz, 1H), 1.49 (dq, J = 11.5, 6.2 Hz, 1H), 1.45 - 1.34 (m, 2H), 1.27 (dd, J = 16.0, 8.2 Hz, 1H), 1.13 (dt, J = 14.1, 8.1 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 501.15994, 확인된 값 502.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.12분 (LC 방법 A).
실시예 61: (12R)-20-아미노-18-(옥산-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 123)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
툴루엔 (8 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(200 mg, 0.3365 mmol)의 용액을 질소로 15분 동안 버블링하여 탈기하였다. 디클로로메탄(30 mg, 0.0367 mmol)과 2-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(107 mg, 0.5093 mmol) 및 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 염화 팔라듐(II)의 복합체를 첨가하고, 탈기시킨 탄산 세슘 수용액(0.45 mL, 2 M, 0.9 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 아세트산 에틸(30 mL)로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(2 X 20 mL)로 헹구었다. 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 0%~95% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-18-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(152 mg, 76%)을 적색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.13 (s, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 5.90 - 5.77 (m, 1H), 5.67 - 5.38 (m, 2H), 5.32 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.03 - 4.91 (m, 1H), 4.46 - 4.23 (m, 2H), 4.06 - 3.85 (m, 3H), 3.66 - 3.34 (m, 3H), 2.57 - 2.00 (m, 8H), 1.90 - 1.66 (m, 2H), 1.56 - 1.46 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.96 (s, 3F), -73.62 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 597.2199, 확인된 값 598.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.56분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(옥산-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 123)
(12S)-6-(벤질옥시)-18-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(150 mg, 0.251 mmol)을 메탄올(15 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(160 mg, 5% w/w, 0.0752 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링하고, 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~90% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-(옥산-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(78 mg, 64%)을 연황색 고형분으로서 수득하였다 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.00 (s, 1H), 5.42 - 4.68 (m, 2H), 4.22 - 4.10 (m, 1H), 4.05 (dd, J = 11.4, 3.5 Hz, 1H), 3.99 - 3.81 (m, 1H), 3.79 - 3.66 (m, 1H), 3.61 - 3.46 (m, 2H), 3.19 - 2.99 (m, 2H), 2.62 - 2.30 (m, 2H), 2.27 - 2.18 (m, 1H), 2.12 - 1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.72 (m, 4H), 1.66 - 1.45 (m, 9H), 1.02 - 0.75 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -77.42 (br. s., 3F, 마이너 부분 입체이성질체), -80.82 (br. s., 3F, 메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.2301, 확인된 값 482.3 (M+1)+; 머무름 시간: 3.14분 (LC 방법 C).
실시예 62: (12 R )-20-아미노-18-(피리딘-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 124)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
툴루엔 (8 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(200 mg, 0.3365 mmol)의 용액을 15분 동안 질소로 버블링하여 탈기하고, 디클로로메탄(30 mg, 0.0367 mmol)과 3-피리딜보론산(60 mg, 0.4881 mmol) 및 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 염화 팔라듐(II)의 복합체를 첨가하고, 이어서 탈기한 탄산 세슘 수용액(450 μL, 2 M, 0.9 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 아세트산 에틸(25 mL)로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(2 X 15 mL)로 헹구었다. 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 생성된 혼합물을 역상 HPLC(구배: 0%~95% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(190 mg, 95%)을 적색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.78 - 8.59 (m, 2H), 8.29 (s, 1H), 7.78 - 7.68 (m, 1H), 7.54 - 7.27 (m, 6H), 5.67 - 5.40 (m, 2H), 5.32 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.04 - 4.89 (m, 1H), 4.12 - 3.96 (m, 1H), 3.63 - 3.47 (m, 1H), 3.01 - 2.83 (m, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 1H), 2.54 - 2.11 (m, 5H), 1.95 - 1.82 (m, 1H), 1.78 - 1.61 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.95 (br. s., 3F), -73.60 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 592.2046, 확인된 값 593.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.32분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(피리딘-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 124)
(12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(190 mg, 0.3206 mmol)을 메탄올(19 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 5분 동안 질소로 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(275 mg, 5% w/w, 0.1292 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링하고, 혼합물을 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~90% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-(피리딘-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(45 mg, 29%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.94 - 8.43 (m, 2H), 7.89 - 7.64 (m, 1H), 7.50 - 7.30 (m, 1H), 7.18 - 6.90 (m, 1H), 5.26 - 4.67 (m, 2H), 4.05 - 3.77 (m, 1H), 2.98 - 2.69 (m, 2H), 2.64 - 2.49 (m, 1H), 2.39 - 2.00 (m, 3H), 1.81 - 1.37 (m, 10H), 1.11 - 0.79 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -77.34 (br. s., 3F, 메이저 부분 입체이성질체), -80.73 (br. s., 3F, 마이너 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 474.1991, 확인된 값 475.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.08분 (LC 방법 C).
실시예 63: (12 R )-20-아미노-18-(피리딘-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 125)
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
툴루엔 (8 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(200 mg, 0.3365 mmol)의 용액을 15분 동안 질소로 버블링하여 탈기하였다. 디클로로메탄(30 mg, 0.0367 mmol)과 4-피리딜보론산(60 mg, 0.4881 mmol) 및 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 염화 팔라듐(II)의 복합체를 첨가하고, 이어서 탈기한 탄산 세슘 수용액(450 μL, 2 M, 0.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(2 X 25 mL)로 헹구었다. 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 생성된 혼합물을 역상 HPLC(구배: 0%~90% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(180 mg, 90%)을 황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.75 (br. s., 2H), 8.33 (s, 1H), 7.50 - 7.28 (m, 7H), 5.68 - 5.44 (m, 2H), 5.34 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.05 - 4.90 (m, 1H), 4.12 - 3.96 (m, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 1H), 3.05 - 2.88 (m, 1H), 2.79 - 2.63 (m, 1H), 2.54 - 2.13 (m, 5H), 1.97 - 1.83 (m, 1H), 1.81 - 1.55 (m, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.92 (br. s., 3F), -73.61 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 592.2046, 확인된 값 593.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.32분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(피리딘-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 125)
(12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(180 mg, 0.3038 mmol)을 메탄올(18 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(194 mg, 5% w/w, 0.0911 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 혼합물을 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 0%~95% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-(피리딘-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(60 mg, 41%)을 주황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.66 (br. s., 2H), 7.48 - 7.32 (m, 2H), 7.14 - 6.98 (m, 1H), 5.52 - 4.47 (m, 2H), 4.05 - 3.78 (m, 1H), 2.97 - 2.78 (m, 1H), 2.76 - 2.58 (m, 1H), 2.57 - 2.33 (m, 2H), 2.32 - 1.88 (m, 3H), 1.80 - 1.44 (m, 9H), 1.02 - 0.85 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -77.32 (br. s., 3F, 마이너 부분 입체이성질체), -80.70 (br. s., 3F, 메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 474.1991, 확인된 값 475.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.76분 (LC 방법 C).
실시예 64: (12 R )-20-아미노-18-(옥솔란-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 126)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-(2,5-디하이드로프란-3-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
압력 튜브에 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)(100 mg, 0.1682 mmol), 2-(2,5-디하이드로프란-3-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (50 mg, 0.255 mmol), 탄산 세슘 (132 mg, 0.4051 mmol), Pd(dppf)Cl2 (12 mg, 0.0147 mmol), 툴루엔 (3 mL), 및 H2O(0.2 mL)를 채웠다. 혼합물을 질소로 3분 동안 버블링하고 밀봉하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 22시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 염수(5 mL)로 처리하였다. 혼합물을 EtOAc(320 mL)로 추출하고, 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-18-(2,5-디하이드로프란-3-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(98 mg, 100%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.16 (s, 1H), 7.40 - 7.27 (m, 5H), 5.97 - 5.88 (m, 1H), 5.63 - 5.41 (m, 2H), 5.36 - 4.69 (m, 6H), 4.07 - 3.92 (m, 1H), 3.62 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.18 (m, 1H), 2.46 - 2.06 (m, 6H), 1.88 - 1.68 (m, 2H), 1.56 - 1.46 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.79 내지 -73.78 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 583.2043, 확인된 값 584.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.5분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(옥솔란-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 126)
(12S)-6-(벤질옥시)-18-(2,5-디하이드로프란-3-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 (E/Z 혼합물)(98 mg, 0.1679 mmol), 10% 탄소 상 팔라듐 (100 mg, 50% wet 0.047 mmol), EtOAc (4 mL), 및 MeOH(4 mL)의 혼합물을 수소 풍선 하에 30℃ 내지 50℃에서 5시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 20%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-(옥솔란-3-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(29 mg, 35%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 - 7.46 (m, 1H), 7.33 - 7.21 (m, 1H), 6.10 - 5.85 (m, 2H), 4.13 - 3.87 (m, 2H), 3.85 - 3.67 (m, 3H), 3.61 - 3.48 (m, 2H), 3.14 - 2.96 (m, 1H), 2.47 - 1.60 (m, 9H), 1.58 - 1.32 (m, 6H), 0.93 - 0.73 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -76.50 (s, 3F, 마이터 부분 입체이성질체), -79.35 (s, 3F, 메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.2144, 확인된 값 468.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.23분 (LC 방법 C).
실시예 65: (12 R )-20-아미노-18-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 127)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
툴루엔 (8 mL) 및 탄산 세슘 (0.45 mL, 물 중 2 M, 0.9 mmol) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(200 mg, 0.3365 mmol)의 용액을 20분 동안 질소로 버블링하여 탈기하고, 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라졸(105 mg, 0.5046 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(28 mg, 0.0343 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(2 X 25 mL)로 헹구었다. 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~100% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-18-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(110 mg, 55%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.19 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.52 - 7.47 (m, 1H), 7.42 - 7.27 (m, 5H), 5.60 - 5.41 (m, 2H), 5.33 - 4.90 (m, 2H), 4.05 - 3.93 (m, 4H), 3.55 - 3.40 (m, 1H), 3.24 - 3.07 (m, 1H), 3.05 - 2.90 (m, 1H), 2.50 - 2.02 (m, 5H), 1.99 - 1.82 (m, 1H), 1.79 - 1.59 (m, 2H), 1.49 - 1.26 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.98 (s, 3F)(마이너 부분 입체이성질체), -73.62 (s, 3F)(메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 595.2155, 확인된 값 596.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.44분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 127)
(12S)-6-(벤질옥시)-18-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(100 mg, 0.1679 mmol)을 메탄올(5 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 10% 탄소 상 팔라듐(20 mg, 0.0094 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링하고, 수소 하에 실온에서 3일 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~100% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(34 mg, 42%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.70 - 7.61 (m, 1H), 7.59 - 7.49 (m, 1H), 7.09 - 6.97 (m, 1H), 5.04 (br. s, 2H), 4.16 - 3.82 (m, 4H), 3.21 (br. s, 1H), 2.81 - 2.01 (m, 5H), 1.88 - 1.77 (m, 1H), 1.75 - 1.44 (m, 9H), 1.09 - 0.87 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -77.40 (s, 3F)(마이너 부분 입체이성질체), -80.72 (s, 3F)(메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 477.21, 확인된 값 478.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.26분 (LC 방법 C).
실시예 66: (12 R )-20-아미노-18-(1H-피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 128)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(1 H -피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
밀봉된 튜브에서, 디옥산 (8 mL), 물 (1.5 mL), 및 탄산 세슘 (0.5 mL, 2 M, 1 mmol) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(200 mg, 0.3365 mmol)의 용액을 20분 동안 질소로 버블링하여 탈기하고, 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(98 mg, 0.5051 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(28 mg, 0.0343 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(2 X 25 mL)로 헹구었다. 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 생성된 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~100% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(1H-피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(18 mg, 9%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.27 - 8.18 (m, 1H), 7.76 - 7.67 (m, 2H), 7.42 - 7.28 (m, 5H), 5.63 - 5.43 (m, 2H), 5.33 - 4.90 (m, 2H), 4.08 - 3.93 (m, 1H), 3.57 - 3.40 (m, 1H), 3.17 - 3.03 (m, 1H), 3.02 - 2.89 (m, 1H), 2.50 - 1.44 (m, 10H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.98 (s, 3F)(마이너 부분 입체이성질체), -73.60 (s, 3F)(메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 581.1998, 확인된 값 582.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.35분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(1 H -피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 128)
(12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(1H-피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(20 mg, 0.0344 mmol)을 메탄올(3 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 10% 탄소 상 팔라듐(4 mg, 0.0019 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~100% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-(1H-피라졸-4-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(3 mg, 14%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 463.1944, 확인된 값 464.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.11분 (LC 방법 C).
실시예 67: (12 R )-20-아미노-18-시클로헥실-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 129)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-18-(시클로헥스-1-엔-1-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
밀봉된 튜브에서, 툴루엔 (8 mL) 및 탄산 세슘 (0.5 mL, 2 M, 1 mmol) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(200 mg, 0.3365 mmol)의 용액을 20분 동안 질소로 버블링하여 탈기하고, 시클로헥센-1-일보론산(64 mg, 0.5081 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(28 mg, 0.0343 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(2 X 25 mL)로 헹구었다. 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 생성된 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~100% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-18-(시클로헥스-1-엔-1-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(136 mg, 68%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.05 (s, 1H), 7.50 - 7.26 (m, 5H), 5.78 (br. s., 1H), 5.60 - 5.42 (m, 2H), 5.34 - 4.86 (m, 2H), 4.05 - 3.89 (m, 1H), 3.57 - 3.37 (m, 2H), 2.48 - 1.95 (m, 9H), 1.87 - 1.45 (m, 9H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.98 (s, 3F)(마이너 부분 입체이성질체), -73.61 (s, 3F)(메이저 부분 입체이성질체) ppm. 머무름 시간: 2.89분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-시클로헥실-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 129)
(12S)-6-(벤질옥시)-18-(시클로헥스-1-엔-1-일)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(136 mg, 0.2283 mmol)을 메탄올(5 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음 10% 탄소 상 팔라듐(25 mg, 0.0117 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 1 기압의 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~100% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-시클로헥실-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(49 mg, 44%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.52 (br. s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.93 (br. s., 2H), 3.94 - 3.64 (m, 2H), 3.14 - 3.01 (m, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 1H), 2.48 - 2.23 (m, 2H), 2.22 - 2.07 (m, 1H), 2.04 - 1.83 (m, 4H), 1.81 - 1.70 (m, 4H), 1.65 - 1.09 (m, 12H), 0.94 - 0.74 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -76.47 (s, 3F)(마이너 부분 입체이성질체), -79.36 (s, 3F)(메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.2508, 확인된 값 480.3 (M+1)+; 머무름 시간: 3.82분 (LC 방법 C).
실시예 68: (15 R )-23-아미노-10-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7,9,11(25),20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 130) 및 (15 R )-23-아미노-10-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7,9,11(25),20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 131)의 제조
단계 1: 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)에탄올
바이알에 THF (6 mL) 중 4-플루오로-3-요오드-벤즈알데히드 (1.5 g, 5.9998 mmol) 및 TMSCF3(1.1544 g, 1.2 mL, 8.1184 mmol)을 채운 다음, 0℃로 냉각시켰다. 10분 후, 온도를 5℃ 미만으로 유지하면서 TBAF(0.06 mL, THF 중 1 M, 0.06 mmol)를 적가하였다. 반응물을 10분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온시키고, 밤새 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 0℃로 냉각시키고, 물(0.75 mL, 41.631 mmol)을 첨가하고, 이어서 TBAF(0.66 mL, THF 중 1 M, 0.66 mmol)를 같은 온도에서 적가하였다. 반응물을 0℃에서 10분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온시키고 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 물(100 mL)과 DCM(100 mL) 내에 부은 다음, 유기층을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)에탄올(2 g, 99%)을 갈색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.88 (dd, J = 6.0, 2.2 Hz, 1H), 7.48 - 7.36 (m, 1H), 7.14 - 6.99 (m, 1H), 5.01 - 4.87 (m, 1H), 3.15 (s, 1H) ppm.
단계 2: 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)에탄온
DCM (40 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)에탄올(2 g, 5.9371 mmol)의 용액에 실온의 데스-마틴 페리오디난(4 g, 9.4308 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 동일한 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 200 mL의 10% 티오황산나트륨 용액으로 퀀칭시켰다. 유기층을 분리하고, 포화 NaHCO3 용액(200 mL)으로 세척한 다음, 염수(200 mL)로 세척하였다. 유기물을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 0%~10% 디에틸 에테르/헥산)로 정제하여 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)에탄온(1.485 g, 75%)을 호박색 액체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (dd, J = 6.0, 2.3 Hz, 1H), 8.14 - 8.06 (m, 1H), 7.55 (dd, J = 8.7,7.8 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 317.9165, 확인된 값 318.9 (M+1)+; 머무름 시간: 2.14분 (LC 방법 H).
단계 3: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
DMF (5 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)에탄온 (587 mg, 1.846 mmol) and 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(500 mg, 1.204 mmol)의 교반 용액에 (N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란(568 mg, 1.879 mmol)을 모두 한꺼번에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 물로 세척한 다음 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~50% EtOAc/헥산의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(580 mg, 64%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.46 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 8.87 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.67 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 5.9, 2.3 Hz, 1H), 7.60 (dddd, J = 29.6, 7.4, 4.7, 2.4 Hz, 1H), 7.36 (dt, J = 19.0, 8.3 Hz, 1H), 5.55 (dddt, J = 50.3, 17.5, 10.7, 7.2 Hz, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 1H), 4.89 - 4.80 (m, 1H), 4.26 (dtd, J = 15.0, 8.4, 4.1 Hz, 1H), 3.58 - 3.49 (m, 1H), 3.36 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 2.37 (tdd, J = 12.2, 7.9, 2.5 Hz, 1H), 2.12 (dt, J = 13.3, 7.9 Hz, 1H), 2.03 - 1.91 (m, 2H), 1.75 - 1.59 (m, 2H), 1.48 (d, J = 3.2 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 757.0996, 확인된 값 758.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.34분 (LC 방법 J).
단계 4: 터트 -부틸 N -[(15 S )-10-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
아세토니트릴 (70 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(575 mg, 0.7591 mmol)의 용액에 아세트산 팔라듐(II)(19 mg, 0.08463 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리스(o-톨릴)포스판(52 mg, 0.1708 mmol) 및 트리에틸아민(550 μL, 3.946 mmol)을 첨가하고, 용액을 N2로 2분 동안 버블링한 다음, 80℃에서 22시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 약 5 mL 부피로 농축시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[(15S)-10-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(162 mg, 34%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 629.1873, 확인된 값 630.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.7분 (LC 방법 M).
단계 5: 터트 -부틸 N -[(15 R )-10-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-23-일]카르바메이트
3방향 어댑터를 사용해 H2 풍선이 장착된 둥근 바닥 플라스크에서, 아세트산 에틸 (5 mL) 중 터트-부틸 N-[(15S)-10-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(160 mg, 0.2542 mmol)의 용액에 Pd/C(32 mg, 10% w/w, 0.03007 mmol)를 첨가하였다. 진공을 인가하고, 질소 가스로 3회 역충진한 다음 진공을 인가하였다. 플라스크에 수소 가스를 채운 다음, 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 진공을 인가하고, 질소 가스를 3회 역충진한 다음, 아세트산에틸로 희석하고 셀라이트로 여과하였다. 여액을 농축시키고, 건조시켜 터트-부틸 N-[(15R)-10-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-23-일]카르바메이트(160 mg, 100%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 631.20294, 확인된 값 632.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.83분 (LC 방법 M).
단계 6: (15 R )-23-아미노-10-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7,9,11(25),20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 130) 및 (15 R )-23-아미노-10-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7,9,11(25),20,22-옥타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 131)
미리 제조한 TFA(500 μL, 6.49 mmol)와 디클로로메탄(2 mL)의 용액 중 터트-부틸 N-[(15R)-10-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-23-일]카르바메이트(150 mg, 0.2375 mmol)의 용액을 실온에서 약 1시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 역상 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 50%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체인 (15R)-23-아미노-10-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7,9,11(25),20,22-옥타엔-6-올(거울상이성질체 1)(염산염)(50.1 mg, 74%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (s, 1H), 8.05 (dd, J = 7.3, 2.5 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.42 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.20 - 7.12 (m, 1H), 6.24 (s, 2H), 3.90 (dq, J = 10.5, 5.1 Hz, 1H), 3.52 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 3.19 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 15.6, 6.2 Hz, 1H), 2.62 (dd, J = 15.1, 12.1 Hz, 1H), 2.40 - 2.32 (m, 1H), 2.15 (dt, J = 12.1, 6.0 Hz, 1H), 1.90 (dt, J = 12.2, 6.8 Hz, 2H), 1.77 - 1.62 (m, 2H), 1.55 (qd, J = 11.2, 6.2 Hz, 1H), 0.91 (qd, J = 10.8, 6.1 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 531.1505, 확인된 값 532.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.75분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체인 (15R)-23-아미노-10-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7,9,11(25),20,22-옥타엔-6-올(거울상이성질체 2)(염산염)(24.2 mg, 36%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.84 (s, 1H), 8.01 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.74 - 7.66 (m, 2H), 7.29 - 7.23 (m, 1H), 6.25 (s, 2H), 4.16 (dt, J = 10.7, 5.4 Hz, 1H), 3.55 (q, J = 9.0 Hz, 1H), 3.23 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 2.77 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 2.23 (dt, J = 11.7, 5.7 Hz, 1H), 1.92 (q, J = 5.9 Hz, 1H), 1.84 (s, 2H), 1.75 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 1.60 (td, J = 11.5, 6.3 Hz, 1H), 1.25 - 1.11 (m, 1H), 0.90 (d, J = 12.3 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 531.1505, 확인된 값 532.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.87분 (LC 방법 J).
실시예 69: (12 R )-20-아미노-18-(피리딘-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 132)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
마이크로웨이브 바이알에 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(160 mg, 0.2692 mmol), 트리부틸(2-피리딜)스탄난(160 mg, 0.4346 mmol), Pd(PPh3)4(40 mg, 0.0346 mmol), 및 툴루엔(2 mL)을 채웠다. 튜브를 질소로 플러싱하고 밀봉하였다. 혼합물을 126℃에서 21시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 0%~60% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(80 mg, 50%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.71 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.81 (td, J = 7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.47 - 7.27 (m, 7H), 5.63 - 5.41 (m, 2H), 5.35 - 4.87 (m, 2H), 4.09 - 3.96 (m, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 1H), 3.03 - 2.87 (m, 1H), 2.72 (ddd, J = 10.7, 7.3, 2.8 Hz, 1H), 2.52 - 2.08 (dd, J = 5.4, 3.4 Hz, 5H), 1.92 - 1.61 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.22 내지 -73.82 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 592.2046, 확인된 값 593.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.46분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-(피리딘-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 132)
(12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-18-(피리딘-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(86 mg, 0.1451 mmol), 10% 탄소 상 팔라듐(60 mg, 0.0282 mmol), EtOAc(3 mL), 및 MeOH(1 mL)의 혼합물을 실온의 수소 풍선 하에 3일 동안 둔 다음, 50℃에서 5시간 동안 두었다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 역상 HPLC(구배: 50%~90% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-(피리딘-2-일)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(22 mg, 31%)을 황색 내지 주황색의 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.85 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.57 - 7.45 (m, 2H), 7.44 - 7.30 (m, 2H), 5.95 (br. s., 2H), 3.97 - 3.74 (m, 1H), 2.82 - 2.68 (m, 1H), 2.43 - 1.92 (m, 5H), 1.85 - 1.29 (m, 9H), 1.05 - 0.81 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -76.34 (s, 3F, 메이저 부분 입체이성질체), -79.21 (s, 3F, 마이너 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 474.1991, 확인된 값 475.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.18분 (LC 방법 C).
실시예 70: (12 R )-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (화합물 133)의 제조
단계 1: (12 S )-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-6-올 ( E/Z 혼합물)
디클로로메탄 (40 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(1 g, 1.6824 mmol)의 용액에 염화 티타늄(IV)(3.1832 g, 1.84 mL, 16.782 mmol)을 질소 하에 0℃에서 적가하였다. 냉각조를 제거한 다음, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(150 mL)으로 희석하고, 0℃로 냉각시킨 다음, 포화 중탄산나트륨 용액(100 mL)을 서서히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 15분 동안 격렬하게 교반한 다음, 상을 분리하였다. 수성상을 디클로로메탄(3 x 100 mL)으로 추출하였다. 모든 유기층을 합치고, 염수(100 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10%의 디클로로메탄/아세트산 에틸)로 정제하여 (12S)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-6-올(E/Z 혼합물)(674 mg, 79%)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.54 - 8.40 (m, 1H), 7.34 - 7.20 (m, 1H), 5.63 - 5.27 (m, 2H), 4.06 - 3.75 (m, 3H), 3.38 - 3.01 (m, 1H), 2.33 - 1.54 (m, 9H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -80.14 (br. s., 3F), -80.37 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 503.0416, 확인된 값 503.9 (M+1)+; 머무름 시간: 2.3분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 S )-20-아미노-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-6-올 ( E/Z 혼합물)
에탄올 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중 (12S)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-6-올(E/Z 혼합물)(193 mg, 0.3827 mmol)의 용액에 철(86 mg, 1.54 mmol) 및 염화 암모늄(62 mg, 1.1591 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 100℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 짙은 색상의 용액을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트로 여과하고, 디클로로메탄(100 mL)으로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켰다. 물(20 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 디클로로메탄(2 X 50 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 물질을 진공 하에 건조시켜 (12S)-20-아미노-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-6-올(E/Z 혼합물)(180 mg, 99%)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.39 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.65 - 5.43 (m, 2H), 4.92 (br. s., 2H), 4.09 - 3.94 (m, 1H), 3.90 - 3.74 (m, 1H), 3.65 - 3.42 (m, 2H), 3.39 - 3.25 (m, 1H), 2.98 - 2.75 (m, 1H), 2.56 - 1.93 (m, 6H), 1.80 - 1.67 (m, 1H), 1.55 - 1.39 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -77.58 (s, 3F), -80.75 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 473.0674, 확인된 값 473.9 (M+1)+; 머무름 시간: 2.31분 (LC 방법 E).
단계 3: 터트 -부틸 N -[(12 S )-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]- N -[( 터트 -부톡시)카르보닐]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
(12S)-20-아미노-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-6-올(E/Z 혼합물)(2 g, 3.4115 mmol), 디-터트-부틸 디카르보네이트(3.69 g, 16.907 mmol), 디이소프로필에틸아민(2.1295 g, 2.87 mL, 16.477 mmol), DMAP(76 mg, 0.6221 mmol), 및 디클로로메탄(90 mL)의 혼합물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[(12S)-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트(E/Z 혼합물)(2.21 g, 96%)를 미색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 673.1723, 확인된 값 618.2 (M-55)+; 머무름 시간: 2.59분 (LC 방법 Y).
단계 4: 터트 -부틸 N -[(12 R )-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]- N -[( 터트 -부톡시)카르보닐]카르바메이트
아세트산 에틸 (15 mL) 중 터트-부틸 N-[(12S)-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트(E/Z 혼합물)(294 mg, 0.4359 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 두었다. 알루미나 상 로듐(89 mg, 5% w/w, 0.0432 mmol)을 첨가한 다음, 반응물을 수소 (풍선) 분위기 하에 1.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 질소 분위기 하에 둔 다음, 셀라이트를 통해 여과하고, 농축시켜 터트-부틸 N-[(12R)-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트(280 mg, 95%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.68 - 7.63 (m, 1H), 4.07 - 3.90 (m, 2H), 3.86 - 3.75 (m, 1H), 2.83 - 2.57 (m, 1H), 2.45 - 2.27 (m, 1H), 2.22 - 2.08 (m, 2H), 2.01 - 1.94 (m, 1H), 1.52 - 1.32 (m, 28H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -74.85 (br. s., 3F), -77.76 (s, 3F) ppm. 머무름 시간: 2.99분 (LC 방법 E).
단계 5: 터트 -부틸 N -[(12 R )-18-(벤젠설포닐)-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]- N -[( 터트 -부톡시)카르보닐]카르바메이트
압력 튜브에 터트-부틸 N-[(12R)-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트 (69 mg, 0.102 mmol), 나트륨 벤젠설피네이트(47 mg, 0.2863 mmol), CuI (24 mg, 0.126 mmol), L-프롤린(0.7 mg, 0.0061 mmol), 및 DMSO(0.8 mL)를 채웠다. 튜브를 2분 동안 질소로 플러싱하고 밀봉하였다. 혼합물을 112℃에서 2.5시간 동안 교“L 나고, 실온으로 냉각시키고, 28% 수성 NH3(6 mL)에 첨가하였다. 혼합물을 MTBE(3 X 20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 28% 수성 NH3(4 mL)으로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 터트-부틸 N-[(12R)-18-(벤젠설포닐)-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트(80 mg, 정량화)를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 6: (12 R )-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (화합물 133)
CH2Cl2 (2 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-18-(벤젠설포닐)-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트(75 mg, 0.1019 mmol)의 용액에 TFA(2.9600 g, 2 mL, 25.96 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 농축시킨 다음, MeOH(3 X 3 mL)와 공동 증발시켰다. 잔류물을 CH2Cl2(20 mL) 및 5% 수성 NaHCO3(15 mL)으로 분리하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성층을 CH2Cl2(2 X 20 mL)로 분리하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하고, 생성물을 CH3CN (1 mL) 및 H2O(2 mL)로부터 동결건조시켜 황색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (12R)-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(30 mg, 55%)을 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.08 - 7.99 (m, 1H), 7.86 - 7.77 (m, 2H), 7.76 - 7.68 (m, 1H), 7.67 - 7.52 (m, 3H), 6.41 - 6.23 (m, 2H), 3.93 - 3.69 (m, 2H), 3.09 - 2.92 (m, 1H), 2.23 - 1.74 (m, 5H), 1.66 - 1.18 (m, 8H), 0.50 - 0.33 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 537.1658, 확인된 값 537.9 (M+1)+; 머무름 시간: 3.54분 (LC 방법 C).
실시예 71: (16 R )-24-아미노-22-(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,20,25-테트라아자펜타시클로[19.3.1.12,5.06,11.016,20]헥사코사-1(25),2,4,6(11),7,9,21,23-옥타엔-7-올 (화합물 134)의 제조
단계 1: 메틸 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴 (10 mL) 중 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1 g, 3.514 mmol) 및 (2S)-2-알릴피롤리딘(트리플루오로아세테이트 염)(1 g, 4.4403 mmol)의 용액에 디이소프로필에틸아민(2.3002 g, 3.1 mL, 17.797 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배: 0%~20%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.3 g, 100%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.62 (s, 1H), 5.79 - 5.58 (m, 1H), 5.14 - 4.97 (m, 2H), 4.72 - 4.59 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.73 - 3.57 (m, 2H), 2.63 - 2.47 (m, 1H), 2.43 - 2.26 (m, 1H), 2.17 - 1.99 (m, 2H), 1.94 - 1.75 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -54.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 359.1093, 확인된 값 360.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.29분 (LC 방법 E).
단계 2: 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF (220 mL) 중 메틸 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(22 g, 61.23 mmol)의 용액에 메탄올(220 mL) 및 물(110 mL)을 첨가하였다. 무수 수산화 리튬(21.99 g, 918.2 mmol)을 첨가하고, 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거하였다. 혼합물이 산성이 될 때까지 수성 3M HCl 용액을 첨가한 다음, 수성층을 아세트산 에틸(3 X 200 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(200 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(19.7 g, 93%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 345.09363, 확인된 값 346.06 (M+1)+; 머무름 시간: 0.67분 (LC 방법 R).
단계 3: 메틸 2-벤질옥시-6-하이드록시-벤조에이트
아세토니트릴 (30 mL) 중 메틸 2,6-디하이드록시벤조에이트(1.68 g, 9.9913 mmol), 탄산칼륨(2.76 g, 19.97 mmol), 및 브로모메틸벤젠(1.8694 g, 1.3 mL, 10.93 mmol)의 혼합물을 60℃의 오일조에서 23시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 아세트산 에틸로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 물(75 mL) 및 소량의 1 N 수성 HCl(약 1~2의 pH에 도달하기 위함)과 함께 250 mL 분별 깔때기에 옮기고, 아세트산 에틸(2 X 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 2-벤질옥시-6-하이드록시-벤조에이트(478 mg, 18%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 11.52 (s, 1H), 7.54 - 7.46 (m, 2H), 7.45 - 7.29 (m, 4H), 6.63 (dd, J = 8.4, 1.0 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.96 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 258.0892, 확인된 값 257.2 (M-1)-; 머무름 시간: 2.06분 (LC 방법 E).
단계 4: 메틸 2-벤질옥시-6-(트리플루오로메틸설포닐옥시)벤조에이트
0℃의 DCM (50 mL) 중 메틸 2-벤질옥시-6-하이드록시-벤조에이트(5.45 g, 19.941 mmol) 및 피리딘(3.2274 g, 3.3 mL, 40.802 mmol)에 트리플루오로메틸설포닐 트리플루오로메탄설포네이트(7.3788 g, 4.4 mL, 26.153 mmol)를 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 포화 중탄산나트륨 용액(100 mL)에 붓고, DCM(3 X 50 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 0%~20%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 2-벤질옥시-6-(트리플루오로메틸설포닐옥시)벤조에이트(7.45 g, 93%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.47 - 7.29 (m, 6H), 7.05 - 6.89 (m, 2H), 5.17 (s, 2H), 3.94 (s, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -73.76 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 390.0385, 확인된 값 413.0 (M+Na)+; 머무름 시간: 2.24분 (LC 방법 E).
단계 5: 메틸 2-알릴-6-벤질옥시-벤조에이트
실온의 탈기시킨 건조 THF(35 mL) 중 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)(1.1 g, 0.9519 mmol) 및 염화 리튬(2.35 g, 55.432 mmol)의 용액에 탈기시킨 건조 THF(25 mL) 및 알릴(트리부틸)스탄난(6.75 g, 20.385 mmol) 중 메틸 2-벤질옥시-6-(트리플루오로메틸설포닐옥시)벤조에이트(7.45 g, 18.514 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 밤새 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, MTBE(300 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 물(300 mL), 10% 수성 수산화 암모늄 용액(100 mL), 및 염수(200 mL)로 세척하였다. 용매를 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 0%~5%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 2-알릴-6-벤질옥시-벤조에이트(5.4 g, 100%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.44 - 7.18 (m, 6H), 6.90 - 6.78 (m, 2H), 6.01 - 5.81 (m, 1H), 5.16 - 4.99 (m, 4H), 3.88 (s, 3H), 3.38 (d, J = 6.8 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 282.1256, 확인된 값 305.1 (M+Na)+; 머무름 시간: 2.2분 (LC 방법 E).
단계 6: 2-알릴-6-벤질옥시-벤조산
실온의 THF (25 mL) 및 에탄올 (25 mL) 중 메틸 2-알릴-6-벤질옥시-벤조에이트(3 g, 10.626 mmol)에 수산화 칼륨 용액(10.6 mL의 5 M, 53 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 4일 동안 교반한 다음, 60℃에서 4일 동안 교반하였다. 혼합물을 물(250 mL)에 붓고, MTBE(2 X 100 mL)로 세척하였다. 수성상을 3 N HCl 용액을 사용해 pH = 2로 산성화시키고, MTBE(3 X 100 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 2-알릴-6-벤질옥시-벤조산(2.44 g, 83%)을 주황색 검으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 268.1099, 확인된 값 269.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.98분 (LC 방법 E).
단계 7: 터트 -부틸 N -[(2-알릴-6-벤질옥시-벤조일)아미노]카르바메이트
DMF (25 mL) 중 2-알릴-6-벤질옥시-벤조산(2.4 g, 8.945 mmol)의 용액에 트리에틸아민(1.8876 g, 2.6 mL, 18.654 mmol) 및 HATU(4.75 g, 12.492 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 터트-부틸 N-아미노카르바메이트(1.5 g, 11.35 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 물(200 mL)로 희석하고, 아세트산 에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액(100 mL), 물(100 mL), 및 염수(100 mL)로 세척하였다. 유기층을 감압 하에 증발시켜 농축시킨 다음, 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 0%~40%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[(2-알릴-6-벤질옥시-벤조일)아미노]카르바메이트(2.89 g, 73%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.54 - 7.46 (m, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 6H), 6.93 - 6.77 (m, 2H), 6.72 - 6.58 (m, 1H), 6.33 - 5.91 (m, 1H), 5.18 - 5.01 (m, 4H), 3.56 - 3.48 (m, 1H), 1.90 - 1.87 (m, 1H), 1.50 (d, J = 2.3 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 382.1893, 확인된 값 405.1 (M+Na)+; 머무름 시간: 2.09분 (LC 방법 E).
단계 8: 2-알릴-6-벤질옥시-벤조하이드라지드 (염산염)
CH 2 Cl 2 (15 mL) 중 터트-부틸 N-[(2-알릴-6-벤질옥시-벤조일)아미노]카르바메이트(2.89 g, 6.559 mmol)의 용액에 Et2O 중 HCl(15 mL의 2 M, 30 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 다시, Et2O 중 HCl(5 mL의 2 M, 10 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 헵탄(120 mL)으로 희석하고, 농축시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르에서 분쇄하고, 여과하고, 건조시켜 2-알릴-6-벤질옥시-벤조하이드라지드(염산염)(2.05 g, 98%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.40 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 10.67 (br. s, 2H), 7.47 - 7.27 (m, 6H), 7.06 - 6.96 (m, 1H), 6.91 - 6.80 (m, 1H), 6.42 - 6.32 (m, 1H), 6.00 - 5.73 (m, 1H), 5.22 - 4.96 (m, 4H), 3.29 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 1.83 (d, J = 4.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 282.1368, 확인된 값 283.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 E).
단계 9: N '-(2-알릴-6-벤질옥시-벤조일)-6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
0℃의 디클로로메탄 (20 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(730 mg, 2.1143 mmol)의 현탁액에 염화 옥살릴(390 mg, 0.26 mL, 3.0727 mmol) 및 DMF(188.80 mg, 0.2 mL, 2.583 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 디클로로메탄 (13 mL) 중 2-알릴-6-벤질옥시-벤조하이드라지드(염산염)(810 mg, 2.5408 mmol) 및 DIPEA(497.14 mg, 0.67 mL, 3.8466 mmol)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 포화 수성 중탄산나트륨(200 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 DCM(3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 0%~40%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 N'-(2-알릴-6-벤질옥시-벤조일)-6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(1.16 g, 89%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 9.56 - 9.38 (m, 1H), 8.96 - 8.77 (m, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.48 - 7.28 (m, 5H), 7.20 - 6.50 (m, 3H), 6.37 - 5.90 (m, 1H), 5.87 - 5.65 (m, 1H), 5.24 - 4.97 (m, 5H), 4.79 - 4.57 (m, 1H), 3.79 - 3.58 (m, 2H), 3.50 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 2.70 - 2.51 (m, 1H), 2.45 - 2.26 (m, 1H), 2.20 - 1.99 (m, 2H), 1.97 - 1.73 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -54.77 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 609.2199, 확인된 값 610.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.33분 (LC 방법 E).
단계 10: 2-(2-알릴-6-벤질옥시-페닐)-5-[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸
50℃의 아세토니트릴 (20 mL) 중 N'-(2-알릴-6-벤질옥시-벤조일)-6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(1.16 g, 1.9029 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(742 mg, 1.0 mL, 5.7411 mmol)의 용액에 p-톨루엔설포닐 클로라이드(381 mg, 1.9985 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 3.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 냉각시키고, 농축시키고, 잔류물을 아세트산 에틸(125 mL)에 용해시켰다. 유기층을 5% 수성 중탄산나트륨(25 mL), 물(2 X 25 mL), 및 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 증발시켜 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 0%~20%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 2-(2-알릴-6-벤질옥시-페닐)-5-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸(680 mg, 57%)을 황색 검으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.69 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.38 (dd, J = 7.9, 3.2 Hz, 1H), 7.33 - 7.18 (m, 5H), 7.01 - 6.82 (m, 2H), 6.49 - 6.18 (m, 1H), 5.72 - 5.52 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 5.08 - 4.91 (m, 3H), 4.71 - 4.58 (m, 1H), 3.76 - 3.58 (m, 2H), 3.55 - 3.45 (m, 1H), 2.54 - 2.42 (m, 1H), 2.40 - 2.29 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 2H), 1.93 - 1.73 (m, 4H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -54.68 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 591.2093, 확인된 값 592.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.61분 (LC 방법 E).
단계 11: (16 S )-7-(벤질옥시)-24-니트로-22-(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,20,25-테트라아자펜타시클로[19.3.1.12,5.06,11.016,20]헥사코사-1(25),2,4,6(11),7,9,13,21,23-노나엔 ( E / Z 혼합물)
디클로로에탄 (70 mL) 중 2-(2-알릴-6-벤질옥시-페닐)-5-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸(300 mg, 0.5071 mmol)의 탈기시킨 용액을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, Zhan 촉매-1B(45 mg, 0.0613 mmol)를 15분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 5시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (16S)-7-(벤질옥시)-24-니트로-22-(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,20,25-테트라아자펜타시클로[19.3.1.12,5.06,11.016,20]헥사코사-1(25),2,4,6(11),7,9,13,21,23-노나엔(E/Z 혼합물)(77 mg, 26%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.74 - 8.63 (m, 1H), 7.49 - 7.28 (m, 6H), 7.15 - 6.89 (m, 2H), 5.90 - 5.33 (m, 2H), 5.30 - 5.07 (m, 2H), 4.46 - 4.12 (m, 1H), 3.79 - 3.33 (m, 3H), 3.26 - 2.88 (m, 1H), 2.30 - 1.62 (m, 6H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -53.50 내지 -53.77 (m, 3F) ppm. 머무름 시간: 2.53분 (LC 방법 E).
단계 12: (16 R )-24-아미노-22-(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,20,25-테트라아자펜타시클로[19.3.1.12,5.06,11.016,20]헥사코사-1(25),2,4,6(11),7,9,21,23-옥타엔-7-올 (화합물 134)
(16S)-7-(벤질옥시)-24-니트로-22-(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,20,25-테트라아자펜타시클로[19.3.1.12,5.06,11.016,20]헥사코사-1(25),2,4,6(11),7,9,13,21,23-노나엔(E/Z 혼합물)(70 mg, 0.1242 mmol)을 메탄올(5 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(10% 습식, 30 mg, 0.0141 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (16R)-24-아미노-22-(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,20,25-테트라아자펜타시클로[19.3.1.12,5.06,11.016,20]헥사코사-1(25),2,4,6(11),7,9,21,23-옥타엔-7-올(43 mg, 74%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.46 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.45 - 7.31 (m, 1H), 7.01 - 6.86 (m, 2H), 6.16 (s, 2H), 4.24 - 4.05 (m, 1H), 3.61 - 3.50 (m, 1H), 3.21 - 3.06 (m, 2H), 2.42 - 2.30 (m, 2H), 2.28 - 2.11 (m, 2H), 1.98 - 1.81 (m, 1H), 1.74 - 1.45 (m, 5H), 1.12 - 0.99 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -55.68 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 445.1726, 확인된 값 446.0 (M+1)+; 머무름 시간: 4.35분 (LC 방법 C).
실시예 72: 23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)(염산염)(화합물 135) 및 23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)(염산염)(화합물 136)의 제조
단계 1: 6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-3-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
5-mL 밀봉된 마이크로웨이브 바이알에서, 메틸 3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.2 g, 2.403 mmol) 및 2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘(트리플루오로아세테이트 염)(876 mg, 3.459 mmol) 및 DIEA(2 mL, 11.48 mmol)를 아세토니트릴(10 mL)에서 합치고, 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고, 용매를 제거하였다. 생성된 갈색 잔류물을 아세트산 에틸에 용해시키고, 포화 염화 암모늄 용액으로 세척하고, 이어서 염수로 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 메틸 6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(830 mg, 62%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 557.27124, 확인된 값 558.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.8분 (LC 방법 R).
전술한 물질인 메틸 6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트를 THF(4 mL)와 MeOH(4 mL)의 1:1 혼합물에 용해시키고, LiOH(8 mL, 1 M, 8 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. THF 및 MeOH를 감압 하에 제거하였다. 잔류물에 물(5 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 용액을 HCl(8 mL, 1 M, 8 mmol)로 산성화시키고, 아세트산 에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(25 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 내지 6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(530 mg, 41%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 543.2556, 확인된 값 444.2 (M-100 (Boc))+; 머무름 시간: 0.8분 (LC 방법 R).
단계 2: 터트 -부틸 N -[6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]- N - 터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트
DMF (5 mL) 중 6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-3-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(500 mg, 0.9198 mmol) 및 2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)에탄온(457 mg, 1.437 mmol)의 교반 용액에 (N-이소시아노이미노)트리페닐포스포란(432 mg, 1.429 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 물과 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~100% 아세트산 에틸의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N- 터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트(512 mg, 63%)를 밝은 황색의 점성 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 9.52 (d, J = 21.6 Hz, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.21 (td, J = 7.4, 2.3 Hz, 1H), 7.78 (tdd, J = 8.6, 4.6, 2.3 Hz, 1H), 6.85 (td, J = 11.6, 8.7 Hz, 1H), 5.63 - 5.41 (m, 1H), 4.97 - 4.80 (m, 2H), 4.52 - 4.37 (m, 2H), 3.37 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.02 (s, 1H), 2.54 - 2.35 (m, 1H), 2.12 (dq, J = 21.7, 7.6 Hz, 1H), 1.75 (dd, J = 12.4, 6.9 Hz, 1H), 1.59 (s, 9H), 1.53 (s, 9H), 1.11 (d, J = 3.9 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 5.8 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 885.18335, 확인된 값 786.1 (M-100 (Boc))+; 머무름 시간: 2.03 및 2.06, 부분 입체이성질체 혼합물 (LC 방법 M).
단계 3: 터트 -부틸 N -[8-플루오로-6-하이드록시-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
아세토니트릴 (80 mL) 중 터트-부틸 N-[6-(2-알릴-4,4-디메틸-피롤리딘-1-일)-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(500 mg, 0.5646 mmol)의 교반 용액에 아세트산 팔라듐(II)(18 mg, 0.08017 mmol) 및 트리스(o-톨릴)포스핀(47 mg, 0.1544 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리에틸아민(500 μL, 3.587 mmol)을 첨가하고, 용액을 N2로 1분 동안 버블링한 다음, 80℃에서 22시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 약 5 mL 부피로 농축시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 농축시켰다. 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~100% 아세트산 에틸의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[8-플루오로-6-하이드록시-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(216 mg, 58%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 657.2186, 확인된 값 658.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 M).
단계 4: 23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올
3방향 어댑터를 사용해 H2 풍선이 장착된 플라스크에서, 에탄올 (10 mL) 중 터트-부틸 N-[8-플루오로-6-하이드록시-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(500 mg, 0.7604 mmol)의 용액에 Pd/C(157 mg, 10% w/w, 0.1475 mmol)를 첨가하였다. 용기에 진공을 인가하고, 질소 가스로 3회 역충진한 다음 진공을 인가하였다. 플라스크에 수소 가스를 채운 다음, 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 진공을 인가하고, 질소 가스를 3회 역충진한 다음, 아세트산에틸로 희석하고 셀라이트로 여과하였다. 여액을 농축시키고, 생성된 잔류물을 미리 제조한 TFA(2 mL, 25.96 mmol) 및 디클로로메탄(6 mL)의 용액에 용해시키고, 반응 혼합물을 실온에서 약 1시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 역상 HPLC(구배: 15.0분에 걸쳐 50%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 황색 고형분으로서 및 4개 입체이성질체의 혼합물로서, 23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(127 mg, 30%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 559.1818, 확인된 값 560.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.91분 (LC 방법 J).
단계 5: 23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 1)(염산염)(화합물 135) 및 23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올 (부분 입체이성질체 쌍 2)(염산염)(화합물 136)
23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(80 mg, 0.143 mmol)을 역상 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 40%~85% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 쌍을 분리하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체 쌍인 23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(부분 입체이성질체 쌍 1)(염산염)(1.8 mg, 4%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 559.1818, 확인된 값 560.5 (M+1)+; 머무름 시간: 1.79분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체 쌍인 23-아미노-8-플루오로-17,17-디메틸-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,20,22-옥타엔-6-올(부분 입체이성질체 쌍 2)(염산염)(3.2 mg, 8%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (s, 1H), 7.73 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 12.6, 8.4 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 4.22 - 4.11 (m, 1H), 3.28 (s, 1H), 2.88 (t, J = 12.1 Hz, 2H), 2.58 (s, 1H), 2.11 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 1.88 (dd, J = 12.0, 6.2 Hz, 1H), 1.72 (d, J = 32.5 Hz, 2H), 1.46 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 1.10 (s, 3H), 0.96 - 0.86 (m, 1H), 0.83 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 559.1818, 확인된 값 560.11 (M+1)+; 머무름 시간: 1.85분 (LC 방법 J).
실시예 73: (12 R )-20-아미노-18-벤질-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 137)의 제조
단계 1: (12 S )-18-벤질-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
테트라하이드로푸란 (3 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(55 mg, 0.0925 mmol)의 용액을 질소로 15분 동안 버블링하여 탈기하였다. 디클로로메탄(12 mg, 0.0147 mmol)과 2-벤질-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(60 mg, 0.2751 mmol) 및 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 염화 팔라듐(II)의 복합체를 첨가하고, 이어서 탈기한 탄산 세슘 수용액(120 μL, 2 M, 0.24 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 아세트산 에틸(15 mL)로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(2 X 15 mL)로 세척하였다. 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 생성된 혼합물을 역상 HPLC(구배: 0%~95% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 (12S)-18-벤질-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(50 mg, 89%)을 갈색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.03 (s, 1H), 7.48 - 7.28 (m, 8H), 7.08 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 5.66 - 5.35 (m, 2H), 5.33 - 5.14 (m, 1H), 5.03 - 4.89 (m, 1H), 4.29 - 4.16 (m, 2H), 4.13 - 4.02 (m, 1H), 3.83 - 3.59 (m, 2H), 3.48 - 3.23 (m, 1H), 2.54 - 2.21 (m, 2H), 2.19 - 1.90 (m, 4H), 1.84 - 1.60 (m, 2H), 1.55 - 1.43 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -73.02 (s, 3F), -73.54 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 605.225, 확인된 값 606.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.65분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-벤질-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 137)
메탄올 (5 mL) 중 (12S)-18-벤질-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(50 mg, 0.0826 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(88 mg, 5% w/w, 0.0413 mmol)을 첨가하였다. 그런 다음, 반응물을 통해 풍선으로 수소를 5분 동안 버블링하고, 반응 혼합물을 실온에서 수소 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~95% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 황색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (12R)-20-아미노-18-벤질-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(21 mg, 52%)을 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.35 - 7.19 (m, 3H), 7.09 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 6.61 (br. s., 1H), 5.52 - 4.38 (m, 2H), 4.18 - 3.78 (m, 3H), 3.75 - 3.57 (m, 1H), 3.27 - 3.01 (m, 1H), 2.62 - 2.22 (m, 2H), 2.20 - 2.09 (m, 1H), 2.04 - 1.80 (m, 2H), 1.78 - 1.29 (m, 9H), 1.04 - 0.63 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 487.2195, 확인된 값 488.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.79분 (LC 방법 C).
실시예 74: (6 R, 15 S )-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올 ( E/Z 혼합물)(염산염)(화합물 138) 및 (6 S 15 S )-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올 ( E/Z 혼합물)(염산염)(화합물 139)
단계 1: 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[(1 R )-2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트 및 터트 -부틸 N -[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[(1 S )-2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(200 mg, 0.264 mmol)를 메탄올(6 mL)에 용해시키고, 역상 HPLC(컬럼: C18 컬럼; 구배: 20분에 걸쳐 70%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체인 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[(1R)-2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(78 mg, 78%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.18 (dd, J = 7.1, 2.3 Hz, 1H), 7.96 (ddd, J = 8.6, 4.6, 2.3 Hz, 1H), 7.15 (dd, J = 11.4, 8.6 Hz, 1H), 5.40 (ddt, J = 14.3, 10.9, 7.2 Hz, 1H), 5.01 - 4.86 (m, 2H), 4.34 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.04 (dt, J = 11.0, 8.4 Hz, 1H), 3.77 (m, J = 6.1, 4.2 Hz, 1H), 3.53 (q, J = 8.0, 7.2 Hz, 1H), 3.44 (qd, J = 7.0, 5.0 Hz, 1H), 2.03 - 1.88 (m, 2H), 1.73 - 1.58 (m, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 757.0996, 확인된 값 758.4 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 M).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체인 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[(1S)-2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(67 mg, 60%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.45 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.18 (dd, J = 7.1, 2.3 Hz, 1H), 7.91 (ddd, J = 8.7, 4.6, 2.3 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 11.4, 8.6 Hz, 1H), 5.37 (ddt, J = 17.2, 10.2, 7.1 Hz, 1H), 4.90 - 4.77 (m, 2H), 4.34 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.26 - 4.11 (m, 1H), 3.53 (q, J = 9.0 Hz, 1H), 3.44 (qd, J = 7.0, 5.0 Hz, 2H), 2.36 - 2.27 (m, 1H), 1.98 - 1.89 (m, 1H), 1.76 - 1.52 (m, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 757.0996, 확인된 값 758.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.98분 (LC 방법 M).
단계 2: (6 R, 15 S )-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올 ( E/Z 혼합물)(염산염)(화합물 138)
파트 A: 아세토니트릴 (25 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[(1R)-2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(180 mg, 0.2376 mmol)의 교반 용액에 아세트산 팔라듐(II)(5.947 mg, 0.02649 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리스(o-톨릴)포스핀(18 mg, 0.05914 mmol) 및 트리에틸아민(300 μL, 1.251 mmol)을 첨가하고, 용액을 N2로 2분 동안 버블링한 다음, 80℃에서 22시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 약 5 mL 부피로 농축시키고, 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[(6R,15S)-8-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(87 mg, 58%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 629.1873, 확인된 값 630.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.68분 (LC 방법 M).
파트 B: 터트-부틸 N-[(6R,15S)-8-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(25 mg, 0.03971 mmol)를 미리 제조한 TFA(100 μL, 1.298 mmol)와 디클로로메탄(400 μL)의 용액에 용해시키고, 반응 혼합물을 실온에서 약 1시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 0%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 (6R,15S)-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올(E/Z 혼합물)(염산염)(8.2 mg, 36%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.63 (s, 1H), 8.15 - 8.04 (m, 1H), 7.76 (d, J = 27.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.23 (ddd, J = 25.4, 12.6, 8.4 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 12.1 Hz, 0.5 H), 6.39 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 5.83 (td, J = 12.1, 5.2 Hz, 0.5 H), 5.71 - 5.54 (m, 1H), 4.66 (d, J = 10.0 Hz, 0.5 H), 3.99 (t, J = 5.4 Hz, 0.5 H), 3.63 (tt, J = 17.3, 7.8 Hz, 2H), 3.23 (dd, J = 16.5, 8.5 Hz, 2H), 2.26 - 2.12 (m, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.71 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.58 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 529.1349, 확인된 값 530.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 J).
단계 3: (6 S, 15 S )-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올 ( E/Z 혼합물)(염산염)(화합물 139)
파트 A: 아세토니트릴 (25 mL) 중 터트-부틸 N-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-2-[5-[(1S)-2,2,2-트리플루오로-1-(2-플루오로-5-요오드-페닐)-1-하이드록시-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(180 mg, 0.2376 mmol)의 용액에 아세트산 팔라듐(II)(8 mg, 0.03563 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리스(o-톨릴)포스핀(17 mg, 0.05585 mmol) 및 트리에틸아민(200 μL, 0.435 mmol)을 첨가하고, 용액을 N2로 2분 동안 버블링한 다음, 80℃에서 22시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 약 5 mL 부피로 농축시키고, 생성된 갈색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[(6S,15S)-8-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(84 mg, 56%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 629.1873, 확인된 값 630.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.68분 (LC 방법 M).
파트 B: 터트-부틸 N-[(6S,15S)-8-플루오로-6-하이드록시-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-23-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(25 mg, 0.03971 mmol)를 미리 제조한 TFA(100 μL, 1.298 mmol)와 디클로로메탄(400 μL)의 용액에 용해시키고, 반응 혼합물을 실온에서 약 1시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 0%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 (6S,15S)-23-아미노-8-플루오로-6,21-비스(트리플루오로메틸)-26-옥사-3,4,19,24-테트라아자펜타시클로[18.3.1.12,5.17,11.015,19]헥사코사-1(24),2,4,7(25),8,10,12,20,22-노나엔-6-올(E/Z 혼합물)(염산염)(6.2 mg, 28%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (s, 1H), 7.91 (dd, J = 7.8, 2.2 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.30 (ddd, J = 8.3, 4.4, 2.3 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 12.5, 8.3 Hz, 1H), 6.29 (s, 2H), 5.85 - 5.77 (m, 1H), 5.71 (dd, J = 16.1, 4.2 Hz, 1H), 4.54 - 4.34 (m, 1H), 3.57 (s, 1H), 3.41 - 3.34 (m, 1H), 3.30 - 3.22 (m, 2H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 1.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 1.84 - 1.63 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 529.1349, 확인된 값 530.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 J).
실시예 75: (12 R )-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 140) 및 (12 R )-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 141)의 제조
단계 1: (12 R )-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 140) 및 (12 R )-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 141)
(12R)-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(17 mg, 0.03162 mmol)을 MeOH(2 mL)에 용해시키고, 역상 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 30%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체인 (12R)-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(염산염)(7.2 mg, 79%)을 주황색 비정질 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.04 (s, 1H), 7.81 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.72 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.60 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.89 - 3.76 (m, 2H), 2.98 (dt, J = 9.1, 4.5 Hz, 1H), 2.20 (q, J = 7.0, 6.5 Hz, 1H), 2.03 (q, J = 8.5, 8.0 Hz, 2H), 1.91 - 1.76 (m, 2H), 1.60 (dddd, J = 36.7, 29.0, 14.5, 7.0 Hz, 3H), 1.42 - 1.33 (m, 2H), 1.26 (h, J = 9.5, 8.2 Hz, 3H), 0.42 (dp, J = 10.7, 5.2 Hz, 1H) ppm. 3개의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 537.1658, 확인된 값 538.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.37분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체인 (12R)-20-아미노-18-(벤젠설포닐)-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(염산염)(7.4 mg, 82%)을 주황색 비정질 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.02 (s, 1H), 7.81 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.72 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.61 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.76 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.02 (td, J = 9.1, 3.7 Hz, 1H), 2.18 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 2.09 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 1.99 (d, J = 10.2 Hz, 2H), 1.83 - 1.73 (m, 1H), 1.59 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 1.41 (ddd, J = 29.4, 23.4, 7.4 Hz, 6H), 1.26 (dd, J = 12.1, 4.0 Hz, 1H), 0.42 (d, J = 11.4 Hz, 1H) ppm. 3개의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 537.1658, 확인된 값 538.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.48분 (LC 방법 J).
실시예 76: (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복스아미드 (화합물 142)의 제조
단계 1: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르보니트릴 ( E/Z 혼합물)
마이크로웨이브 바이알에서, DMF (5 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-18-브로모-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(330 mg, 0.5496 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기하고, 시아노 구리(349 mg, 3.8967 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 질소 하에 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(25 mL)로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여액을 아세트산 에틸(3 X 20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수(2 X 30 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g; 구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르보니트릴(E/Z 혼합물)(182 mg, 61%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.62 (s, 1H), 7.46 - 7.27 (m, 5H), 5.71 - 5.34 (m, 2H), 5.30 - 5.16 (m, 1H), 5.08 - 4.87 (m, 1H), 4.30 - 3.89 (m, 3H), 3.39 - 3.10 (m, 1H), 2.57 - 1.84 (m, 8H), 1.79 - 1.46 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -73.07 (s, 3F), -73.59 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 540.1733, 확인된 값 541.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.44분 (LC 방법 E).
단계 2: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르복스아미드 ( E/Z 혼합물)
EtOH (4.5 mL) 및 물(0.5 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르보니트릴(E/Z 혼합물)(50 mg, 0.0925 mmol)의 용액에 가파-파킨스(Ghaffar-Parkins) 촉매 (PtHiPMe2OH)(2 mg, 0.0047 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 70℃에서 4시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시켰다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 0%~60% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르복스아미드(E/Z 혼합물)(32 mg, 62%)를 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.44 - 8.27 (m, 1H), 7.52 - 7.20 (m, 5H), 6.89 - 6.60 (m, 1H), 5.76 (br. s., 1H), 5.64 - 5.31 (m, 2H), 5.28 - 5.09 (m, 1H), 5.01 - 4.81 (m, 1H), 3.99 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.83 - 3.57 (m, 1H), 3.52 - 3.14 (m, 2H), 2.64 - 1.68 (m, 8H), 1.16 - 0.98 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -72.96 (br. s., 3F), -73.46 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 558.18384, 확인된 값 559.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.21분 (LC 방법 E).
단계 3: (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복스아미드 (화합물 142)
메탄올 (5 mL) 중 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔-18-카르복스아미드(E/Z 혼합물)(32 mg, 0.0573 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 두고, 탄소 상 팔라듐(30 mg, 5% w/w, 0.0141 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 수소 분위기 하에 두고, 밤새 교반하였다. 반응물을 질소 분위기 하에 두고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 40%~100% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하였다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 19분에 걸쳐 30%~50% 아세토니트릴/물(+ 10 mM NH4HCO3))로 추가로 정제하여 황색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (12R)-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복스아미드(11 mg, 43%)를 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.63 - 7.37 (m, 1H), 6.97 - 6.59 (m, 1H), 6.28 - 5.82 (m, 1H), 5.08 (br. s., 2H), 4.52 - 4.11 (m, 1H), 4.04 - 3.80 (m, 1H), 3.79 - 3.56 (m, 1H), 3.13 - 2.86 (m, 1H), 2.75 - 1.32 (m, 12H), 1.18 - 0.77 (m, 2H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -77.35 (br. s., 3F, 마이너 부분 입체이성질체), -80.65 (s, 3F, 메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 440.17838, 확인된 값 441.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.72분 (LC 방법 C).
실시예 77: (12 R )-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (화합물 143)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-18-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]설파닐}-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
디옥산 (2 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트(100 mg, 0.1478 mmol)의 용액에 탄산 세슘(100 mg, 0.3069 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기하였다. 4-(트리플루오로메톡시) 벤젠티올(70 mg, 0.3605 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 질소로 5분 동안 다시 탈기하였다. Xantphos(18 mg, 0.0311 mmol)에 이어서 Pd2(dba)3(14 mg, 0.0153 mmol)을 반응 혼합물에 첨가한 다음, 질소로 2분 동안 탈기시키고, 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(25 mL)을 첨가하였다. 이 혼합물을 디클로로메탄(2 X 25 mL)으로 추출하고, 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하였다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 5%~100% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 추가로 정제하여 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]설파닐}-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(48 mg, 47%)를 황색 발포체로서 수득하였다. 머무름 시간: 2.97분 (LC 방법 W).
단계 2: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설피닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
디클로로메탄 (1 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]설파닐}-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(20 mg, 0.029 mmol)의 용액에 0℃의 3-클로로퍼벤조산(7 mg, 0.0312 mmol)을 질소 하에 첨가하고, 생성된 혼합물을 0℃에서 질소 하에 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃의 중탄산나트륨 수용액(15 mL)으로 퀀칭시켰다. 혼합물을 디클로로메탄(2 X 15 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설피닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(19 mg, 93%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 머무름 시간: 2.53분 (LC 방법 W).
단계 3: 터트 -부틸 N -[(12 R )-6-하이드록시-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
디클로로메탄 (3 mL) 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설피닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(55 mg, 0.0779 mmol)의 용액에 0℃의 3-클로로퍼벤조산(18 mg, 0.0803 mmol)을 질소 하에 첨가한 다음, 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 중탄산나트륨 수용액(15 mL)으로 퀀칭시켰다. 혼합물을 디클로로메탄(2 X 15 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~5% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하였다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 5%~90% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 추가로 정제하여 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(43 mg, 55%)를 황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 721.2005, 확인된 값 722.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.8분 (LC 방법 Z).
단계 4: (12 R )-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (화합물 143)
미리 제조한 TFA(0.5 mL)와 디클로로메탄(0.5 mL)의 용액 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(10 mg, 0.0139 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물에 수성 중탄산나트륨(15 mL)을 실온에서 서서히 첨가하여 퀀칭시킨 다음, 이를 디클로로메탄(2 X 15 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 0%~5% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 황색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (12R)-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(7 mg, 53%)을 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.11 (br. s., 1H), 8.05 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.46 - 5.84 (m, 2H), 4.86 - 4.03 (m, 2H), 3.74 - 3.64 (m, 1H), 2.76 - 2.50 (m, 1H), 2.35 - 2.14 (m, 4H), 1.90 - 1.42 (m, 9H), 0.95 - 0.83 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -57.76 (br. s., 3F, 부분 입체이성질체 모두의 -OCF3), -77.56 (br. s., 3F, 마이너 부분 입체이성질체), -80.53 (s, 3F, 메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 621.1481, 확인된 값 620.0 (M-1)+; 머무름 시간: 3.08분 (LC 방법 AA).
실시예 78: (12 R )-20-아미노-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 144)의 제조
단계 1: (12 R )-20-아미노-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 144)
트리플루오로아세트산(0.5 mL)과 디클로로메탄(0.5 mL)의 1:1 혼합물 중 터트-부틸 N-[(12R)-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트(25 mg, 0.037 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물에 수성 중탄산나트륨(15 mL)을 서서히 첨가하여 퀀칭시킨 다음, 이를 디클로로메탄(2 X 15 mL)으로 추출하였다. 유기층을 합친 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-브로모-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(12 mg, 68%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.63 - 7.61 (m, 1H), 4.04 - 3.82 (m, 2H), 3.80 - 3.39 (m, 3H), 3.36 - 3.26 (m, 1H), 2.45 - 2.19 (m, 2H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 2.07 - 1.84 (m, 2H), 1.79 - 1.66 (m, 1H), 1.65 - 1.29 (m, 7H), 0.93 - 0.77 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -76.40 (s, 3F, 마이너 부분 입체이성질체), -79.30 (s, 3F, 메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 475.08307, 확인된 값 476.1 (M+1)+; 머무름 시간: 4.93분 (LC 방법 AA).
실시예 79: (12 R )-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설피닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 145)의 제조
단계 1: (12 R )-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설피닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 145)
트리플루오로아세트산(0.5 mL)과 디클로로메탄(0.5 mL)의 1:1 혼합물 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설피닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(17 mg, 0.0241 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물에 중탄산나트륨 수용액(15 mL)을 서서히 첨가하여 퀀칭시킨 다음, 이를 디클로로메탄(2 X 15 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 연주황색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (12R)-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설피닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(11 mg, 75%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 605.15314, 확인된 값 606.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.8분 (LC 방법 AA).
실시예 80: (12 R )-20-아미노-18-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]설파닐}-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 146)의 제조
단계 1: (12 R )-20-아미노-18-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]설파닐}-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 146)
트리플루오로아세트산(0.5 mL)과 디클로로메탄(0.5 mL)의 1:1 혼합물 중 터트-부틸 N-[(12R)-6-하이드록시-18-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]설파닐}-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(26 mg, 0.0377 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물에 수성 중탄산나트륨(15 mL)을 서서히 첨가하여 퀀칭시킨 다음, 이를 디클로로메탄(2 X 15 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]설파닐}-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(15 mg, 67%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.65 - 7.45 (m, 1H), 7.44 - 7.35 (m, 4H), 7.21 - 7.09 (m, 1H), 4.08 - 3.57 (m, 3H), 3.39 - 3.20 (m, 1H), 2.40 - 2.19 (m, 2H), 2.16 - 1.91 (m, 2H), 1.89 - 1.79 (m, 1H), 1.77 - 1.58 (m, 2H), 1.55 - 1.33 (m, 5H), 1.30 - 1.18 (m, 2H), 0.85 - 0.71 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -56.84 내지 -56.86 (m, 3F, 부분 입체이성질체 모두의 -CF3), -76.38 (br s, 3F, 마이너 부분 입체이성질체), -79.27 (br s, 3F, 메이저 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 589.1582, 확인된 값 590.2 (M+1)+; 머무름 시간: 5.43분 (LC 방법 AA).
실시예 81: (12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 147)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 (2 S )-2-[(3- 터트 -부톡시-3-옥소-프로폭시)메틸]피롤리딘-1-카르복실레이트
아세토니트릴 (50 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(4.03 g, 20.024 mmol)의 용액을 터트-부틸 프로프-2-엔오에이트(13.125 g, 15 mL, 102.4 mmol) 및 수용액 수산화 벤질트리메틸암모늄(1.952 g, 40% w/w, 4.6685 mmol)으로 연속 처리하고, 실온에서 교반하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 물(250 mL)과 함께 1.0 L 분별 깔때기에 옮기고, MTBE(3 X 250 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(150 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 (2S)-2-[(3-터트-부톡시-3-옥소-프로폭시)메틸]피롤리딘-1-카르복실레이트(5.88 g, 89%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 3.75 (br. s., 1H), 3.67 - 3.48 (m, 2H), 3.42 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 3.26 (dd, J = 9.1, 7.6 Hz, 1H), 3.22 - 3.12 (m, 2H), 2.40 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 1.91 - 1.66 (m, 4H), 1.39 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 329.2202, 확인된 값 352.2 (M+23)+; 머무름 시간: 2.23분 (LC 방법 E).
단계 2: 터트 -부틸 (2 S )-2-(3-하이드록시프로폭시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트
THF (6 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-[(3-터트-부톡시-3-옥소-프로폭시)메틸]피롤리딘-1-카르복실레이트(362 mg, 1.0989 mmol)의 용액을 얼음조에서 냉각시키고, 수소화 디이소부틸알루미늄(3.4 mL의 1 M, 3.4 mmol)의 디클로로메탄 용액으로 서서히 처리하였다. 20분 후, 플라스크를 얼음조에서 제거하고, 혼합물을 실온에서 약 2시간 동안 교반하였다. 얼음조에서 다시 냉각시키고, 반응물을 로셸 염 수용액(20 mL)으로 서서히 퀀칭시켰다. 약간의 MTBE(25 mL)를 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 격렬히 교반하였다. 125 mL 분별 깔때기에 옮기고, 층을 분리하였다. 그런 다음, 수성층을 MTBE(2 X 25 mL)로 다시 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(25 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~70% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 (2S)-2-(3-하이드록시프로폭시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(191 mg, 67%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 4.01 - 3.89 (m, 1H), 3.76 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.65 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.57 (dd, J = 9.5, 4.0 Hz, 1H), 3.42 - 3.28 (m, 3H), 2.27 (br. s., 1H), 1.98 - 1.75 (m, 6H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 259.1784, 확인된 값 282.2 (M+23)+; 머무름 시간: 1.71분 (LC 방법 E).
단계 3: 터트 -부틸 (2 S )-2-(3-브로모프로폭시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트
디클로로메탄 (4 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-(3-하이드록시프로폭시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (191 mg, 0.7365 mmol) 및 트리페닐포스핀(215 mg, 0.8197 mmol)의 용액을 얼음조에서 냉각시키고, 사브롬화탄소(272 mg, 0.8202 mmol)로 처리하였다. 반응물을 얼음조 내에 유지한 상태로 방치하여 4시간에 걸쳐 점진적으로 실온으로 가온시킨 다음, 실온에서 밤새(16시간) 교반하였다. 그런 다음, 미정제 반응 혼합물을 실리카 겔로 처리하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~15% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 (2S)-2-(3-브로모프로폭시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(172 mg, 70%)를 맑은 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 4.02 - 3.81 (m, 1H), 3.68 - 3.44 (m, 5H), 3.42 - 3.19 (m, 3H), 2.09 (quin, J = 6.2 Hz, 2H), 1.97 - 1.77 (m, 4H), 1.47 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 321.094, 확인된 값 344.1 (M+23)+; 머무름 시간: 2.2분 (LC 방법 E).
단계 4: 브로모-[3-[[(2 S )-1- 터트 -부톡시카르보닐피롤리딘-2-일]메톡시]프로필]마그네슘
2구 10-mL 플라스크를 질소 하에 화염 건조시키고, 마그네슘(132 mg, 5.431 mmol)을 채웠다. 플라스크 내의 마그네슘을 질소 하에 히트건으로 가열하여 활성화시켰다. 냉각시킨 후, 요오드(1 mg, 0.0039 mmol)를 첨가하고, 이어서 테트라하이드로푸란 (3 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-(3-브로모프로폭시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(500 mg, 1.5516 mmol)의 용액을, 반응 혼합물이 연속 비등하도록 적가하였다. 첨가 후, 어두운 색의 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 교반을 중단하고, 임의의 미세 입자를 가라 앉혔다. 생성된 브로모-[3-[[(2S)-1-터트-부톡시카르보닐피롤리딘-2-일]메톡시]프로필]마그네슘을 THF 중의 용액으로서 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 5: 터트 -부틸 (2 S )-2-[(4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-4-하이드록시-펜톡시)메틸] 피롤리딘 -1-카르복실레이트
-78℃의 디에틸 에테르 (6 mL) 중 에틸 3,3,3-트리플루오로-2-옥소-프로파노에이트(384.90 mg, 0.4 mL, 1.6972 mmol)의 용액에 브로모-[3-[[(2S)-1-터트-부톡시카르보닐피롤리딘-2-일]메톡시]프로필]마그네슘(3 mL의 0.517 M, 1.551 mmol)의 THF 용액을 5분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 교반하였다. 1시간 후 드라이아이스-아세톤조를 제거하였다. 반응 혼합물을 30분에 걸쳐 -30℃로 서서히 가온시켰다. 반응 혼합물애, 포화 수성 NH4Cl 용액(2 mL)과 분쇄한 얼음(10 g)을 첨가하였다. 2개의 층을 분리시켰다. 유기층을 농축시키고, 잔류물을 수성상과 합치고, MTBE(3 x 60 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(2 X 20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 농축시켜 730 mg의 연황색 미정제 오일을 수정하였다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 (2S)-2-[(4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-4-하이드록시-펜톡시)메틸]피롤리딘-1-카르복실레이트(380 mg, 46%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.41 - 4.29 (m, 2H), 4.17 - 4.00 (m, 1H), 3.99 - 3.80 (m, 1H), 3.64 - 3.19 (m, 6H), 2.20 - 2.06 (m, 1H), 2.00 - 1.65 (m, 6H), 1.47 (s, 9H), 1.35 (t, J = 7.0 Hz, 3H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -78.57 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 413.2025, 확인된 값 436.2 (M+23)+; 머무름 시간: 2.17분 (LC 방법 E).
단계 6: 터트 -부틸 (2 S )-2-[(4- 벤질옥시 -4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-펜톡시)메틸]피롤리딘-1-카르복실레이트
0℃의 DMF (4 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-[(4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-4-하이드록시-펜톡시)메틸]피롤리딘-1-카르복실레이트(380 mg, 0.7905 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(45 mg, 광유 중 60% 분산액, 1.1251 mmol)을 나누어 첨가하고, 첨가 도중에는 온도를 10℃ 미만으로 유지하였다. 얼음수조에서 30분 동안 교반한 후, 브로모메틸 벤젠(201.32 mg, 0.14 mL, 1.1771 mmol)을 적가한 다음, 반응물을 점짐적으로 실온으로 가온시키고, 20시간 동안 교반하였다. 0℃의 염화 암모늄(72 mg, 1.346 mmol)을 고형분으로서 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 헵탄/MTBE의 1:3 용액 15 mL 뿐만 아니라 물(5 mL)도 첨가하였다. 혼합물을 추출 깔때기에 옮기고, 헵탄/MTBE(1:3, 40 mL) 및 물(20 mL)로 헹구었다. 유기층을 분리하고, 수성상을 헵탄/MTBE 용액(1:3, 2 X 60 mL)으로 다시 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(1 X 20 mL)과 염수(2 X 20 mL)로 세척한 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 (2S)-2-[(4-벤질옥시-4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-펜톡시)메틸]피롤리딘-1-카르복실레이트(365 mg, 87%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 7.46 - 7.28 (m, 5H), 4.82 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.34 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.99 - 3.76 (m, 1H), 3.58 - 3.47 (m, 1H), 3.43 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.38 - 3.16 (m, 3H), 2.18 - 1.97 (m, 2H), 1.96 - 1.73 (m, 5H), 1.69 - 1.59 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.34 (t, J = 7.0 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -70.43 내지 -70.82 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 503.2495, 확인된 값 526.3 (M+23)+; 머무름 시간: 2.55분 (LC 방법 E).
단계 7: 2-벤질옥시-5-[[(2 S )-1- 터트 -부톡시카르보닐피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산
메탄올 (6.5 mL) 중 터트-부틸 (2S)-2-[(4-벤질옥시-4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-펜톡시)메틸]피롤리딘-1-카르복실레이트(0.75 g, 1.4254 mmol)의 용액에 물(2 mL) 중 수산화 나트륨(110 mg, 2.7502 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 대부분의 메탄올을 제거하였다. 물(30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 Et2O(2 X 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 물(2 X 30 mL)로 세척하고, 합쳐진 수성상을 1 N 수성 HCl(2.9 mL)로 처리한 다음, DCM(3 X 100 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 2-벤질옥시-5-[[(2S)-1-터트-부톡시카르보닐피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(657 mg, 95%)을 걸쭉한 무색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 475.2182, 확인된 값 498.2 (M+23)+; 머무름 시간: 2.25분 (LC 방법 E).
단계 8: 2-벤질옥시-5-[[(2 S )-피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산 (염산염)
0℃에서, 1,4-디옥산 (20 mL) 중 2-벤질옥시-5-[[(2S)-1-터트-부톡시카르보닐피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(1.787 g, 3.7544 mmol)의 교반 용액에 1,4-디옥산 중 염산(12 mL, 4 M, 48 mmol) 용액을 적가하였다. 첨가 5분 후에 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 23시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 증발에 의해 제거하였다. 고형분을 디클로로메탄(30 mL)에 용해시킨 다음, 감압 하에 농축시키고, 진공 하에 건조시켜 2-벤질옥시-5-[[(2S)-피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(염산염)(1.58 g, 98%)을 연황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.26 (br s, 1 H), 9.28 (br s, 1H), 8.66 (br s, 1H), 7.48 - 7.26 (m, 5H), 4.77 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.69 - 3.59 (m, 1H), 3.58 - 3.53 (m, 1H), 3.52 - 3.40 (m, 3H), 3.18 - 3.03 (m, 2H), 2.15 - 1.77 (m, 5H), 1.76 - 1.49 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 375.16574, 확인된 값 376.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.4분 (LC 방법 Z).
단계 9: 2-벤질옥시-5-[[(2 S )-1-[6-메톡시카르보닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산
아세토니트릴 (2 mL) 중 2-벤질옥시-5-[[(2S)-피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산 (염산염)(50 mg, 0.1117 mmol) 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(45 mg, 0.1542 mmol)의 용액에 디이소프로필에틸아민(74.2 mg, 0.1 mL, 0.5741 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거한 다음, 아세트산 에틸(70 mL)로 희석하고, 30 mL의 물과 함께 추출 깔때기에 옮겼다. 혼합물을 아세트산에틸(3 X 70 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 0.5 N 수성 염산(2 X 10 mL) 및 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 2-벤질옥시-5-[[(2S)-1-[6-메톡시카르보닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(53 mg, 75%)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.66 - 8.52 (m, 1H), 7.43 - 7.19 (m, 5H), 4.82 - 4.69 (m, 2H), 4.63 - 4.53 (m, 1H), 4.06 - 3.89 (m, 3H), 3.73 - 3.29 (m, 6H), 2.14 - 1.92 (m, 5H), 1.91 - 1.76 (m, 1H), 1.72 - 1.53 (m, 2H). 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR ppm에서 관찰되지 않았다. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -54.31 내지 -54.66 (m, 3F), -71.70 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 623.1702, 확인된 값 646.0 (M+23)+; 머무름 시간: 2.34분 (LC 방법 E).
단계 10: 메틸 6-[(2 S )-2-[[4-벤질옥시-4-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
DMF (1.5 mL) 중 2-벤질옥시-5-[[(2S)-1-[6-메톡시카르보닐-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]피롤리딘-2-일]메톡시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(53 mg, 0.0839 mmol)의 용액에 트리에틸아민(18.15 mg, 0.025 mL, 0.1794 mmol) 및 HATU(44 mg, 0.1157 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하고, 터트-부틸 N-아미노카르바메이트(14 mg, 0.1059 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 냉수로 희석하고, 아세트산 에틸(3 X 40 mL)로 추출한 다음, 수성 포화 NaHCO3 용액(2 X 10 mL), 물(1 X 10 mL), 및 염수(3 X 10 mL)로 세척하였다. 유기층을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(2S)-2-[[4-벤질옥시-4-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(52 mg, 83%)를 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.66 - 8.53 (m, 1H), 8.33 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.47 - 7.28 (m, 5H), 6.32 (br. s, 1H), 4.90 - 4.78 (m, 1H), 4.78 - 4.56 (m, 2H), 4.05 - 3.92 (m, 3H), 3.72 - 3.33 (m, 6H), 2.32 - 2.17 (m, 2H), 2.13 - 1.99 (m, 3H), 1.93 - 1.79 (m, 1H), 1.73 - 1.63 (m, 2H), 1.49 - 1.42 (m, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 737.2496, 확인된 값 736.2 (M-1)-; 머무름 시간: 2.41분 (LC 방법 E).
단계 11: 6-[(2 S )-2-[[4-벤질옥시-4-[( 터트 -부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
메틸 6-[(2S)-2-[[4-벤질옥시-4-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(433 mg, 0.547 mmol) 및 수산화 리튬(일수화물)(73 mg, 1.7396 mmol)의 혼합물에 THF(13 mL) 및 물(13 mL)을 실온에서 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 증발시켜 농축시킨 다음, 물(25 mL) 과 DCM(40 mL)으로 헹구면서 분별 깔때기에 옮겼다. 1 M 염산 수용액으로 pH를 2로 조정하였다. 혼합물을 DCM(3 X 60 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(10 mL), 염수(10 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 내지 농축시켜 6-[(2S)-2-[[4-벤질옥시-4-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(410 mg, 98%)을 황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.77 - 8.52 (m, 2H), 7.44 - 7.27 (m, 5H), 6.65 (br. s, 1H), 4.88 - 4.56 (m, 3H), 3.79 - 3.36 (m, 6H), 2.18 - 1.84 (m, 6H), 1.80 - 1.61 (m, 2H), 1.54 - 1.43 (m, 9H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. 머무름 시간: 2.31분 (LC 방법 E).
단계 12: (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 6-[(2 S )-2-[[4-벤질옥시-4-[( 터트 -부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
CH2Cl2 (3.6 mL) 중 6-[(2S)-2-[[4-벤질옥시-4-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(410 mg, 0.5383 mmol) 의 용액에 N-하이드록시숙신아미드(69 mg, 0.5995 mmol) 및 DCC(114 mg, 0.5525 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 형성된 침전물을 여과하고, 디에틸 에테르로 헹구고, 고형분을 버린 다음, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/디클로로메탄)로 정제하여 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 6-[(2S)-2-[[4-벤질옥시-4-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(400 mg, 85%)를 연황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.69 - 8.58 (m, 1H), 8.36 - 8.27 (m, 1H), 7.46 - 7.29 (m, 5H), 6.28 (br. s, 1H), 4.93 - 4.78 (m, 1H), 4.78 - 4.60 (m, 2H), 3.76 - 3.38 (m, 6H), 2.89 (s, 4H), 2.32 - 2.18 (m, 2H), 2.17 - 2.06 (m, 3H), 1.97 - 1.84 (m, 1H), 1.75 - 1.61 (m, 2H), 1.45 (s, 9H) ppm. 머무름 시간: 2.30분 (LC 방법 E).
단계 13: (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 6-[(2 S )-2-[[4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-(하이드라진카르보닐)펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (염산염)
1,4-디옥산 (34 mL) 중 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 6-[(2S)-2-[[4-벤질옥시-4-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(849 mg, 0.9631 mmol)의 용액에 염산(11 mL, 디옥산 중 4 M, 44 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 32℃의 오일조에서 20시간에 걸쳐 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 1,2-디클로로에탄(2 X 15 mL)으로부터 증발시키고, 진공 하에 건조시켜 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 6-[(2S)-2-[[4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-(하이드라진카르보닐)펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(염산염)(828 mg, 100%)를 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.66 - 8.53 (m, 1H), 7.45 - 7.26 (m, 5H), 4.95 - 4.52 (m, 3H), 3.85 - 3.33 (m, 7H), 2.94 - 2.52 (m, 4H), 2.31 - 1.76 (m, 6H), 1.69 - 1.47 (m, 2H) ppm. 3개의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. ESI-MS m/z 계산된 값 720.1979, 확인된 값 721.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.9분 (LC 방법 Z).
단계 14: (6 S )-12-벤질옥시-18-니트로-12,20-비스(트리플루오로메틸)-8-옥사-2,14,15,21-테트라아자트리시클로[15.3.1.02,6]헤니코사-1(21),17,19-트리엔-13,16-디온
1,2-디클로로에탄 (140 mL) 중 ((2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 6-[(2S)-2-[[4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-(하이드라진카르보닐)펜톡시]메틸]피롤리딘-1-일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(염산염)(828 mg, 0.9625 mmol)의 현탁액에 트리에틸아민(943.8 mg, 1.3 mL, 9.327 mmol)을 1분에 걸쳐 적가하였다. 그런 다음, 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각시키고, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40%아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (6S)-12-벤질옥시-18-니트로-12,20-비스(트리플루오로메틸)-8-옥사-2,14,15,21-테트라아자트리시클로[15.3.1.02,6]헤니코사-1(21),17,19-트리엔-13,16-디온(364 mg, 61%)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.78 - 8.48 (m, 1H), 8.30 - 8.13 (m, 1H), 7.48 - 7.28 (m, 3H), 7.23 - 7.01 (m, 2H), 4.81 - 4.53 (m, 2H), 4.39 - 4.23 (m, 1H), 4.02 - 3.08 (m, 6H), 2.25 - 1.78 (m, 5H), 1.53 - 1.29 (m, 1H), 1.00 - 0.87 (m, 1H), 0.77 - 0.51 (m, 1H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않음. 19F NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ -54.07 (마이너 부분 입체이성질체의 s, 3F, Ar-CF3), -59.20 (메이저 부분 입체이성질체의 s, 3F, Ar-CF3), -73.96 (마이너 부분 입체이성질체의 s, 3F, Alk-CF3), -74.09 (메이저 부분 입체이성질체의 s, 3F, Alk-CF3) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 605.1709, 확인된 값 606.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.93분 (LC 방법 Z).
단계 15: (12 S )-6-(벤질옥시)-20-니트로-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔
0℃의 아세토니트릴(2 mL) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(14.692 mg, 0.02 mL, 0.1125 mmol) 중 (6S)-12-벤질옥시-18-니트로-12,20-비스(트리플루오로메틸)-8-옥사-2,14,15,21-테트라아자트리시클로[15.3.1.02,6]헤니코사-1(21),17,19-트리엔-13,16-디온(17 mg, 0.0275 mmol)의 용액에 4-메틸벤젠설포닐 클로라이드(7 mg, 0.036 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 70℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 아세트산 에틸(80 mL)에 용해시키고, 유기층을 5% 중탄산나트륨 수용액(2 X 15 mL), 물(2 X 15 mL), 염수(15 mL)로 세척한 다음, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔(9 mg, 55%)을 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 클로로포름-d) δ 8.72 - 8.66 (m, 1H), 7.41 - 7.23 (m, 5H), 5.34 - 4.62 (m, 2H), 4.55 - 4.44 (m, 1H), 4.10 - 4.02 (m, 1H), 3.81 - 3.55 (m, 3H), 3.50 - 3.38 (m, 1H)3.07 - 2.97 (m, 1H), 2.94 - 2.62 (m, 1H), 2.35 - 2.22 (m, 1H), 2.21 - 2.00 (m, 4H), 1.69 - 1.59 (m, 1H), 1.55 - 1.46 (m, 1H) ppm. 19F NMR (282 MHz, 클로로포름-d) δ -53.19 (s, 3F, 마이너 부분 입체이성질체의 Ar-CF3), -53.26 (s, 3F, Ar-CF3 of 메이저 부분 입체이성질체), -72.58 (s, 3F, 마이너 부분 입체이성질체의 Alk-CF3), -72.79 (s, 3F, 메이저 부분 입체이성질체의 Alk-CF3) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 587.16034, 확인된 값 588.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.12분 (LC 방법 Z).
단계 16: (12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (화합물 147)
(12S)-6-(벤질옥시)-20-니트로-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔(9 mg, 0.0151 mmol)을 무수 메탄올(2 mL)에 용해시켰다. 혼합물 내로 질소를 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(17 mg, 5% w/w, 0.008 mmol)을 첨가하였다. 그런 다음, 풍선으로 수소를 5분 동안 버블링하고, 반응 혼합물을 실온에서 수소 하에 밤새 교반하였다. 수소 풍선을 질소로 교체하고, 혼합물을 바늘 배출구를 통해 질소로 퍼징하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(5 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/디클로로메탄)로 정제하여 연황색 발포체를 수득하고, 이를 아세토니트릴/물로부터 동결건조시켜 (12S)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(4.8 mg, 63%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.64 - 7.41 (m, 1H), 4.47 - 4.08 (m, 2H), 3.87 - 3.36 (m, 4H), 3.06 - 2.68 (m, 2H), 2.29 - 1.99 (m, 3H), 1.98 - 1.83 (m, 2H), 1.66 - 1.54 (m, 1H), 1.38 - 1.28 (m, 1H), 0.96 - 0.80 (m, 1H) ppm. 2개의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않거나 용매 피크에 의해 가려짐. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -54.52 내지 -56.24 (부분 입체이성질체 모두의 m, 3F, -CF3), -76.97 (s, 3F, 메이저 부분 입체이성질체), -81.17 (s, 3F, 마이너 부분 입체이성질체) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.13922, 확인된 값 468.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.37분 (LC 방법 AA).
실시예 82: 17-아미노-6-하이드록시- N , N -디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 1)(화합물 148), 17-아미노-6-하이드록시- N , N -디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 2)(화합물 149), 17-아미노-6-하이드록시- N , N -디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 3)(화합물 150), 및 17-아미노-6-하이드록시- N , N -디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 4)(화합물 151)의 제조
단계 1: 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트
20 mL 마이크로웨이브 바이알에서, [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(1.35 g, 2.076 mmol)를 실온의 아세토니트릴(10 mL)에 용해시키고, 이어서 에틸 2-아미노펜트-4-엔오에이트(900 mg, 6.286 mmol)를 첨가한 다음, DIEA(1.75 mL, 10.05 mmol)를 첨가하고, 그런 다음 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 gram 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트(900 mg, 67%)를 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (s, 1H), 8.14 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 7.40 - 7.24 (m, 5H), 5.81 (dddt, J = 40.2, 17.2, 10.2, 6.7 Hz, 2H), 5.16 - 4.98 (m, 4H), 4.76 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.69 (dddd, J = 9.1, 7.2, 5.3, 1.9 Hz, 1H), 4.59 (dd, J = 10.7, 2.0 Hz, 1H), 4.03 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.82 - 2.63 (m, 2H), 2.55 (dd, J = 12.4, 7.4 Hz, 1H), 2.47 (s, 1H), 2.34 - 2.15 (m, 2H), 1.04 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 643.1865, 확인된 값 644.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.05분 (LC 방법 J).
단계 2: 에틸-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트 ( E/Z 혼합물)
1L 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기시킨, 1,2-디클로로에탄 (400 mL) 중 Zhan 촉매-1B(250 mg, 0.3407 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, 1,2-디클로로에탄 (10 mL) 중 에틸 2-[[6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트(900 mg, 1.399 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 2시간 동안 가열하였다. 잔류물을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 에틸-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트(E/Z 혼합물)(310 mg, 36%)를 황백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 615.1553, 확인된 값 616.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 J).
단계 3: 에틸-17-아미노-6-벤질옥시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트 ( E/Z 혼합물)
아세트산 에틸 (7 mL) 중 에틸-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트(E/Z 혼합물)(160 mg, 0.26 mmol), 및 염화 주석(II) 이수화물(235 mg, 1.041 mmol)의 혼합물을 55℃에서 90분 동안 교반하였다. 30분 후, 추가의 염화 주석(II) 이수화물(235 mg, 1.041 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 혼합물이 점성을 가질 때까지 2 N NaOH을 혼합물에 첨가한 다음, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 염수로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 그런 다음, 혼합물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 에틸-17-아미노-6-벤질옥시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트(E/Z 혼합물)(125 mg, 82%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 585.1811, 확인된 값 586.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 J).
단계 4: 에틸-6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트 ( E/Z 혼합물)
디옥산 (6 mL) 중 에틸-17-아미노-6-벤질옥시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트(E/Z 혼합물)(125 mg, 0.2135 mmol)의 용액에 디-터트-부틸 디카르보네이트(175 mg, 0.8018 mmol), 트리에틸아민(220 μL, 1.578 mmol), 및 DMAP(3.5 mg, 0.02865 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물로 희석하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 물(5 mL), 포화 수성 중탄산나트륨(5 mL), 및 염수(5 mL)로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~40% EtOAc/헥산의 얕은 구배)로 정제하여 에틸-6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트(E/Z 혼합물)(110 mg, 75%)를 밝은 황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 685.2335, 확인된 값 686.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.29분. 생성물은 소량의 비스-Boc 보호된 부산물로 오염되었다(ESI-MS m/z 계산된 값 785.28595, 확인된 값 786.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.37분 (LC 방법 J).
단계 5: 6-벤질옥시-17-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-카르복시산 ( E/Z 혼합물)
THF (2 mL) 중 에틸-6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트(E/Z 혼합물)(135 mg, 0.1969 mmol)(이전 단계에서 넘어 온 소량의 유사한 비스-Boc 보호된 화합물로 오염됨)의 용액에 MeOH (2 mL) 및 H2O(3 mL)를 첨가하고, 이어서 수산화 리튬(30 mg, 1.253 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거하고, 수성 10% HCl(10 mL)을 첨가하여 pH를 약 4로 조정하고, 생성물을 EtOAc(2 X 150 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~80% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-카르복시산(E/Z 혼합물)(61 mg, 47%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 657.2022, 확인된 값 658.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.03분 (LC 방법 J).
단계 6: 터트 -부틸 N -[6-벤질옥시-12-(디메틸카르바모일)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
실온의 NMP (2.0 mL) 중 6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-카르복시산(E/Z 혼합물)(61 mg, 0.09277 mmol)의 용액에 N-메틸메탄아민(염산염)(38 mg, 0.466 mmol) 및 DIEA(250 μL, 1.435 mmol)를 첨가하고, 이어서 HATU(55 mg, 0.1446 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 유기 물질을 아세트산에틸(3 X 5 mL)로 추출하였다. 유기물을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 4 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-12-(디메틸카르바모일)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(49 mg, 77%)를 담황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 684.2495, 확인된 값 685.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.15분 (LC 방법 J).
단계 7: 터트 -부틸 N -[12-(디메틸카르바모일)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트 (부분 입체이성질체 쌍 1) 및 터트 -부틸 N -[12-(디메틸카르바모일)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트 (부분 입체이성질체 쌍 2)
100 mL 둥근 바닥 플라스크에서, AcOH (1 mL) 및 아세트산 에틸 (1 mL) 중 터트-부틸 N-[6-벤질옥시-12-(디메틸카르바모일)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(39 mg, 0.05697 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(65 mg, 10% w/w, 0.06108 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 과량의 아세트산에틸로 세척하고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 30%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 쌍을 분리하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체 쌍인 터트-부틸 N-[12-(디메틸카르바모일)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 1)(8.7 mg, 51%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 596.2182, 확인된 값 597.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.53분 (LC 방법 J).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체 쌍인 터트-부틸 N-[12-(디메틸카르바모일)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 2)(6.7 mg, 39%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 596.2182, 확인된 값 597.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.61분 (LC 방법 J).
단계 8: 17-아미노-6-하이드록시- N , N -디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 1)(화합물 148) 및 17-아미노-6-하이드록시- N , N -디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 2)(화합물 149)
DCM (750 μL) 중 터트-부틸 N-[12-(디메틸카르바모일)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 1)(8.7 mg, 0.01458 mmol)의 용액에 TFA(100 μL, 1.298 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 생성물의 부분 입체이성질체 쌍을 수득하였다. 이 혼합물을 키랄 SFC(컬럼: ChiralPak IG 컬럼(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기); 용리 구배: 14% MeOH(+ 20 mM NH3)/86% CO2; 유속: 10 mL/분)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-6-하이드록시-N,N-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드(거울상이성질체 1)(2.1 mg, 55%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.33 (s, 1H), 5.80 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.96 (q, J = 5.7 Hz, 1H), 3.58 (s, 1H), 3.13 (s, 3H), 3.04 (s, 3H), 2.38 - 2.29 (m, 1H), 2.28 - 2.16 (m, 2H), 2.04 (s, 1H), 1.77 (dt, J = 13.5, 6.6 Hz, 1H), 1.60 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 1.54 - 1.48 (m, 2H), 1.44 - 1.37 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 496.16577, 확인된 값 497.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.56분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-6-하이드록시-N,N-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 2)(1.1 mg, 30%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 496.16577, 확인된 값 497.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.56분 (LC 방법 A).
단계 9: 17-아미노-6-하이드록시- N , N -디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 3)(화합물 150) 및 17-아미노-6-하이드록시- N , N -디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드 (거울상이성질체 4)(화합물 151)
DCM (750 μL) 중 터트-부틸 N-[12-(디메틸카르바모일)-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트(부분 입체이성질체 쌍 2)(9.1 mg, 0.01526 mmol)의 용액에 TFA(100 μL, 1.298 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 생성물의 부분 입체이성질체 쌍을 수득하였다. 이 혼합물을 키랄 SFC(컬럼: ChiralPak IG 컬럼(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기); 용리 구배: 14% MeOH(+ 20 mM NH3)/86% CO2; 유속: 10 mL/분)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-6-하이드록시-N,N-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드(거울상이성질체 3)(1.7 mg, 44%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.34 (s, 1H), 5.71 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.97 (q, J = 6.2 Hz, 1H), 3.59 (s, 1H), 3.08 (s, 3H), 3.03 (s, 3H), 2.41 (dt, J = 15.4, 8.0 Hz, 1H), 2.27 (dt, J = 11.9, 6.1 Hz, 1H), 2.20 (s, 1H), 2.04 (s, 1H), 1.82 (s, 1H), 1.65 (dd, J = 12.5, 6.2 Hz, 2H), 1.51 (s, 2H), 1.26 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 496.16577, 확인된 값 497.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.59분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체 17-아미노-6-하이드록시-N,N-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복스아미드(거울상이성질체 4)(1.5 mg, 39%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 496.16577, 확인된 값 497.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.59분 (LC 방법 A).
실시예 83: (12 R )-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 152) 및 (12 R )-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 153)의 제조
단계 1: (12 R )-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 152) 및 (12 R )-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 153)
(12R)-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(15 mg, 0.02413 mmol)을 역상 HPLC(구배: 30분에 걸쳐 30%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl) )로 정제하여 2개의 단일 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체인 (12R)-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(염산염)(5.8 mg, 69%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.15 - 8.11 (m, 1H), 8.05 (dt, J = 8.7, 2.6 Hz, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.33 (m, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.02 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.80 (s, 1H), 2.55 (s, 1H), 2.47 - 2.22 (m, 4H), 2.10 (s, 1H), 1.67 (s, 5H), 1.50 (d, J = 13.3 Hz, 3H) ppm. 하나의 개의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않거나 용매 피크에 의해 가려짐. ESI-MS m/z 계산된 값 621.1481, 확인된 값 622.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.26분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체인 (12R)-20-아미노-18-[4-(트리플루오로메톡시)벤젠설포닐]-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(20),2,4,17(21),18-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(염산염)(2.4 mg, 28%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.20 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 8.04 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 7.32 (dd, J = 13.5, 8.2 Hz, 3H), 5.26 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.38 (d, J = 9.8 Hz, 2H), 2.60 (d, J = 36.9 Hz, 1H), 2.35 (d, J = 37.6 Hz, 2H), 2.22 - 2.04 (m, 1H), 1.76 - 1.43 (m, 8H) ppm. 2개의 교환 가능한 양성자가 관찰되지 않거나 용매 피크에 의해 가려짐. ESI-MS m/z 계산된 값 621.1481, 확인된 값 622.4 (M+1)+; 머무름 시간: 1.4분 (LC 방법 A).
실시예 84: [(6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온 (화합물 154)
단계 1: 에틸 2-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)펜트-4-엔오에이트
디옥산(7.5 mL)에 용해시킨 에틸 2-아미노펜트-4-엔오에이트(1.3 g, 9.079 mmol)의 용액에 디-터트-부틸 디카르보네이트(2.5 g, 11.45 mmol) 및 트리에틸아민(4.5 mL, 32.29 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 디옥산을 절반 부피로 증발시키고, 물을 첨가하였다. 혼합물을 아세트산에틸로 추출하고, 합쳐진 유기상을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 440 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~100% EtOAc의 얕은 구배)로 정제하여 에틸 2-(터트-부톡시카르보닐아미노)펜트-4-엔오에이트(1.68 g, 76%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.21 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.76 (ddt, J = 17.1, 10.1, 6.9 Hz, 1H), 5.12 - 5.01 (m, 2H), 4.12 - 4.02 (m, 2H), 3.97 (td, J = 8.2, 5.6 Hz, 1H), 2.35 (tt, J = 14.4, 7.2 Hz, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.17 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 243.14706, 확인된 값 244.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.56분 (LC 방법 A).
단계 2: 2-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)펜트-4-엔산
THF (25 mL) 중 에틸 2-(터트-부톡시카르보닐아미노)펜트-4-엔오에이트(1.68 g, 6.905 mmol)의 용액에 MeOH(25 mL) 및 H2O(35 mL)를 첨가하고, 이어서 수산화 리튬(990 mg, 41.34 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거하고, 수성 10% HCl(10 mL)을 첨가하여 pH를 약 4로 조정하고, 생성물을 EtOAc(2 X 150 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 그런 다음, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~100% 아세트산 에틸의 얕은 구배)로 정제하여 2-(터트-부톡시카르보닐아미노)펜트-4-엔산(1.48 g, 100%)을 점성 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.38 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.89 - 5.58 (m, 1H), 5.09 (dd, J = 17.2, 2.0 Hz, 1H), 5.03 (dd, J = 10.2, 2.1 Hz, 1H), 3.93 (td, J = 8.6, 5.1 Hz, 1H), 2.47 - 2.25 (m, 2H), 1.38 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 215.11575, 확인된 값 216.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.11분 (LC 방법 A).
단계 3: 터트 -부틸 N -[1-(피롤리딘-1-카르보닐)부트-3-에닐]카르바메이트
실온의 THF (48 mL) 및 NMP (48 mL) 중 2-(터트-부톡시카르보닐아미노)펜트-4-엔산(1.35 g, 6.272 mmol)의 용액에 피롤리딘(1.85 mL, 22.16 mmol) 및 DIEA(6.5 mL, 37.32 mmol)를 첨가하고, 이어서 HATU(3.69 g, 9.705 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 물, 구연산 용액으로 희석하고 아세트산에틸(2 X 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 gram 컬럼; 구배: 100% 헥산~100% 아세트산 에틸의 얕은 구배)로 정제하여 터트-부틸 N-[1-(피롤리딘-1-카르보닐)부트-3-에닐]카르바메이트(1.45 g, 86%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.90 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.74 (ddt, J = 17.1, 10.1, 7.0 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 17.2, 2.0 Hz, 1H), 5.01 (dd, J = 10.1, 2.2 Hz, 1H), 4.20 (td, J = 8.3, 5.6 Hz, 1H), 3.52 (dt, J = 10.1, 6.8 Hz, 1H), 3.41 (dt, J = 10.0, 6.8 Hz, 1H), 3.25 (td, J = 13.5, 12.0, 7.2 Hz, 2H), 2.32 (dt, J = 13.1, 6.2 Hz, 1H), 2.22 (dd, J = 14.3, 7.6 Hz, 1H), 1.87 (p, J = 6.7 Hz, 2H), 1.81 - 1.71 (m, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 268.17868, 확인된 값 269.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.3분 (LC 방법 A).
단계 4: 2-아미노-1-피롤리딘-1-일-펜트-4-엔-1-온 (염산염)
DCM (20 mL) 중 터트-부틸 N-[1-(피롤리딘-1-카르보닐)부트-3-에닐]카르바메이트(1.45 g, 5.403 mmol)의 용액에 HCl(디옥산 중 4 N, 7 mL, 28 mmol)을 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발 건조시킨 다음, 에테르로 희석하고, 농축시켰다. 잔류물을 밤새 진공에 두어 2-아미노-1-피롤리딘-1-일-펜트-4-엔-1-온(염산염)(750 mg, 68%)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 168.12627, 확인된 값 169.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.52분 (LC 방법 A).
단계 5: 터트 -부틸 N -[2-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[1-(피롤리딘-1-카르보닐)부트-3-에닐아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
20-mL 마이크로웨이브 바이알에서, 2-아미노-1-피롤리딘-1-일-펜트-4-엔-1-온(염산염)(550 mg, 2.687 mmol), DIEA(900 μL, 5.167 mmol), 및 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(700 mg, 0.9315 mmol)를 아세토니트릴(12 mL) 및 DMSO(3.5 mL)에서 합치고, 혼합물을 90℃에서 14시간 동안 가열하였다. 그런 다음, 105℃에서 24시간 동안 추가로 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[1-(피롤리딘-1-카르보닐)부트-3-에닐아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(159 mg, 23%)를 황색 고형분으로서 생산하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 738.29645, 확인된 값 739.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.91분 (LC 방법 M).
단계 6: 터트 -부틸 N -[(6 R )-6-벤질옥시-12-(피롤리딘-1-카르보닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
500 mL 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기한, 1,2-디클로로에탄 (100 mL) 중 Zhan 촉매-1B(40 mg, 0.05451 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, 1,2-디클로로에탄 (50 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[1-(피롤리딘-1-카르보닐)부트-3-에닐아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(155 mg, 0.2098 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축시킨 다음, 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~60% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[(6R)-6-벤질옥시-12-(피롤리딘-1-카르보닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(98 mg, 66%)를 연황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 710.26514, 확인된 값 711.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.62분 (LC 방법 M).
단계 7: [(6 R )-17-아미노-6-벤질옥시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온 ( E/Z 혼합물)
1,2-디클로로에탄 (100 mL) 중 터트-부틸 N-[(6R)-6-벤질옥시-12-(피롤리딘-1-카르보닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]카르바메이트(E/Z 혼합물)(98 mg, 0.138 mmol)의 용액에 TFA(750 μL, 9.735 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시킨 다음, 헥산과 DCM으로 희석하고, 다시 농축시킨 다음, 진공 하에 밤새 건조시켜 [(6R)-17-아미노-6-벤질옥시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온(E/Z 혼합물)(105 mg, 82%)을 연녹색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 610.2127, 확인된 값 611.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.67분 (LC 방법 J).
단계 8: [(6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온 (화합물 154)
50 mL 둥근 바닥 플라스크에서, AcOH (2.5 mL) 및 아세트산 에틸 (5 mL) 중 [(6R)-17-아미노-6-벤질옥시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온(E/Z 혼합물)(98 mg, 0.1605 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(185 mg, 10% w/w, 0.1738 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 과량의 아세트산에틸로 세척하고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~100% 아세트산 에틸)로 정제하여 [(6R)-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온(48.3 mg, 58%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 522.1814, 확인된 값 523.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.68분 (LC 방법 A).
실시예 85: (6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복시산 (거울상이성질체 1)(화합물 155) 및 (6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복시산 (거울상이성질체 2)(화합물 156)의 제조
단계 1: 에틸 2-[[6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-[비스( 터트 -부톡시카르보닐)아미노]-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트 및 에틸 2-[[6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트
디옥산 (32 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(2.1 g, 2.794 mmol), 에틸 2-아미노펜트-4-엔오에이트(1.2 g, 8.381 mmol), (1E,4E)-1,5-디페닐펜타-1,4-디엔-3-온;팔라듐(128 mg, 0.1398 mmol), Xantphos(165 mg, 0.2852 mmol), 및 탄산 세슘(3.7 g, 11.36 mmol)의 혼합물을 1분 동안 질소로 버블링하여 탈기한 다음, 밀봉하고, 95℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 아세트산 에틸로 희석한 다음, 물과 염수로 세척한 다음, 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 에틸 2-[[6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(터트-부톡시카르보닐아미노)-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트(66 mg, 3%)를 연황색 고형분으로서 생산하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 713.26483, 확인된 값 714.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.13분 (LC 방법 M).
실리카 겔 컬럼 정제를 통해 에틸 2-[[6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트(167 mg, 7%)도 단리하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 813.31726, 확인된 값 814.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.91분 (LC 방법 J).
단계 2: (6 R )-6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-카르복시산 ( E/Z 혼합물)
500 mL 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기한, 0.25 당량의 Zhan 촉매-1B(52 mg, 0.07087 mmol)를 DCE(150 mL)에 용해시키고, 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, DCE (150 mL)에서 에틸 2-[[6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-(터트-부톡시카르보닐아미노)-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트(66 mg, 0.09248 mmol)와 합쳐진 에틸 2-[[6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]펜트-4-엔오에이트(167 mg, 0.2052 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 75℃로 가열하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 149 mg of a 혼합물 of 에틸 (6R)-6-벤질옥시-17-[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트 및 (6R)-6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12-카르복실레이트를 황백색 고형분으로서 수득하였다. THF (2.5 mL) 중 이 혼합물의 용액에 MeOH (2.5 mL) 및 H2O(2.5 mL)를 첨가하고, 이어서 수산화 리튬(45 mg, 1.879 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. THF와 메탄올을 감압 하에 제거한 다음, 5 mL의 10% 수성 HCl을 첨가하여 pH를 약 4로 조정하고, 생성물을 EtOAc(2 X 25 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(25 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~80% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-카르복시산(E/Z 혼합물)(63.3 mg, 21%, 80% 순도)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 657.2022, 확인된 값 658.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.03분 (LC 방법 J).
단계 3: (6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복시산 (거울상이성질체 1)(화합물 155) 및 (6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복시산 (거울상이성질체 2)(화합물 156)
AcOH (540 μL) 중 (6R)-6-벤질옥시-17-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12-카르복시산(E/Z 혼합물)(20 mg, 0.03042 mmol)의 용액에 Pd/C(12.95 mg, 10% w/w, 0.01217 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 채워진 풍선 하에 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 플러그를 통해 여과하고, 아세트산 에틸로 꼼꼼히 세척한 다음, 여액을 농축시켰다. 잔류물에 TFA(500 μL)를 첨가하고, 이 혼합물을 실온에서 3분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 역상 HPLC(구배: 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 2개의 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복시산(거울상이성질체 1)(5 mg, 43%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.57 (s, 1H), 4.34 (dd, J = 9.4, 3.1 Hz, 1H), 2.58 - 2.44 (m, 1H), 2.44 - 2.34 (m, 1H), 2.14 (dt, J = 13.7, 8.0 Hz, 1H), 1.95 - 1.86 (m, 1H), 1.79 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 1.69 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 1.55 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 1.49 - 1.39 (m, 1H), 1.36 - 1.29 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.11847, 확인된 값 470.05 (M+1)+; 머무름 시간: 1.29분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-카르복시산(거울상이성질체 2)(4 mg, 28%)을 황색 고형분으로서 수집하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.57 (s, 1H), 4.43 (dd, J = 9.2, 3.6 Hz, 1H), 2.51 - 2.32 (m, 2H), 2.19 (ddd, J = 14.8, 9.3, 6.4 Hz, 1H), 1.97 - 1.67 (m, 4H), 1.61 - 1.55 (m, 1H), 1.48 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 1.33 (d, J = 6.2 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.11847, 확인된 값 470.02 (M+1)+; 머무름 시간: 1.39분 (LC 방법 A).
실시예 86: [(6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온 (거울상이성질체 1)(화합물 157) 및 [(6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온 (거울상이성질체 2)(화합물 158)의 제조
단계 1: [(6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온 (거울상이성질체 1)(화합물 157) 및 [(6 R )-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온 (거울상이성질체 2)(화합물 158)
[(6R)-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온(42 mg, 0.08039 mmol)을 ChiralPak IC 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용하여 키랄 SFC(용리 구배: 14% MeOH (+ 20 mM NH3)/86% CO2; 유속: 70 mL/분)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체를 황색 고형분으로서 단리하고, 이를 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 추가로 정제하여 [(6R)-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온(거울상이성질체 1)(7.7 mg, 36%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 522.1814, 확인된 값 523.0 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.68분 (LC 방법 A).
두 번째 용리되는 거울상이성질체를 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 추가로 정제하여 [(6R)-17-아미노-6-하이드록시-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12-일]-피롤리딘-1-일-메탄온(거울상이성질체 2)(5.3 mg, 25%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.33 (s, 1H), 5.65 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.77 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.61 - 3.45 (m, 4H), 2.41 (dt, J = 15.4, 8.1 Hz, 1H), 2.30 (dd, J = 13.2, 6.8 Hz, 1H), 2.21 (s, 1H), 1.95 (ddd, J = 27.7, 12.5, 6.3 Hz, 4H), 1.88 - 1.83 (m, 1H), 1.67 (dd, J = 12.7, 5.9 Hz, 3H), 1.55 (q, J = 9.1, 6.7 Hz, 3H) ppm. 교환 가능한 아릴 NH2 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. ESI-MS m/z 계산된 값 522.1814, 확인된 값 523.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.69분 (LC 방법 A).
실시예 87: (12 R )-20-아미노-19-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 159) 및 (12 R )-20-아미노-19-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 160)의 제조
단계 1: 2,6-디클로로-4-메톡시-3-니트로-피리딘
황산(127 mL) 중 2,6-디클로로-4-메톡시-피리딘(21.17 g, 118.92 mmol)의 용액에 0℃의 질산(17.898 g, 18.8 mL, 193.15 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 얼음물(350 mL)에 부엇다. 현탁액을 여과하고, 물(80 mL)로 세척하여 2,6-디클로로-4-메톡시-3-니트로-피리딘(24.5 g, 91%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ 7.74 (s, 1H), 4.06 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 221.9599, 확인된 값 223.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.91분 (LC 방법 G).
단계 2: 에틸 2-(6-클로로-4-메톡시-3-니트로-2-피리딜)-2-시아노-아세테이트
DMF (9 mL) 중 2,6-디클로로-4-메톡시-3-니트로-피리딘 (208 mg, 0.914 mmol) 및 CsCO3(446.6 mg, 1.3707 mmol)의 용액에 에틸 2-시아노아세테이트(119.78 mg, 113 μL, 1.0589 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물(20 mL)과 수성 HCl(2 M, 7 mL)을 반응 혼합물에 첨가한 다음, EtOAc(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(2 X 15 mL)에 이어서 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(최소한의 DCM과 함께 25 g SiO2 상에 건식 로딩함)(용리 구배: 0%~100% EtOAc/헥산)로 정제하여 에틸 2-(6-클로로-4-메톡시-3-니트로-2-피리딜)-2-시아노-아세테이트(153.8 mg, 56%)를 짙은 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 7.10 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.37 - 4.26 (m, 2H), 4.05 (s, 3H), 1.33 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 299.0309, 확인된 값 300.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.85분 (LC 방법 G).
단계 3: 6-클로로-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르복시산
물(0.3 mL)과 DMSO (0.1 mL) 중 에틸 2-(6-클로로-4-메톡시-3-니트로-2-피리딜)-2-시아노-아세테이트(50.7 mg, 0.1658 mmol)의 혼합물에 NaOAc(33.8 mg, 0.412 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 교반하고, H2O2(3.4015 g, 0.1 mL의 30% w/w, 30 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 수성 HCl(0.5 M, 5 mL)을 첨가한 다음, EtOAc(3 X 5 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(2 X 5 mL), 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(최소한의 DCM과 함께 12 g SiO2 상에 건식 로딩함)(용리 구배: 0%~15% MeOH/DCM)로 정제하여 6-클로로-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르복시산(22.8 mg, 59%)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.44 (s, 1H), 3.97 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 231.9887, 확인된 값 233.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.75분 (LC 방법 G).
단계 4: 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르복시산
DMF (45 mL) 중 6-클로로-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르복시산 (0.4 g, 1.7199 mmol) 및 (2S)-2-알릴피롤리딘 (트리플루오로아세테이트 염)(0.8 g, 3.5523 mmol)의 용액에 탄산칼륨(1.23 g, 8.8998 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 110℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 100 mL의 물로 희석하였다. 혼합물을 DCM(3 x 100 mL)으로 세척하였다. 그런 다음, 밝은 황색 수성 용액을 1 N 수성 HCl 용액(20 mL)으로 pH = 3으로 산성화시켰다. 용액을 DCM(3 X 100 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기 용액을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여액을 증발시켰다. 잔류물을 진공에서 건조시켜 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르복시산(0.84 g, 64%)을 갈색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 307.11682, 확인된 값 308.5 (M+1)+; 머무름 시간: 2.44분 (LC 방법 G). 이 물질을 추가 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.
단계 5: 6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]- N '-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드
EtOAc (130 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르복시산(3.55 g, 7.649 mmol)의 용액 내로 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(염산염)(3.93 g, 11.601 mmol) 및 피리딘(3.7164 g, 3.8 mL, 46.984 mmol)을 첨가하자, 용액은 탁하게 변하였다. 그런 다음, EtOAc 중 무수 프로필포스폰산 용액(9.6218 g, 9.0007 mL의 50% w/w, 15.12 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 1 M 수성 NaHCO3 용액(250 mL)과 함께 15분 동안 교반하여 퀀칭시켰다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc(2 X 200 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(300 mL)로 세척하고, (Na2SO4)로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 유성 잔류물을 실리카 상에 건식 로딩하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 220 g 컬럼; 구배: 0%~40% EtOAc/헥산)로 정제하여 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드(2.3 g, 50%)를 발포성 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 10.07 - 9.99 (m, 1H), 9.40 - 9.31 (m, 1H), 7.43 - 7.32 (m, 5H), 5.92 (s, 1H), 5.87 - 5.75 (m, 2H), 5.16 - 4.99 (m, 4H), 4.81 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 10.6 Hz, 1H)4.19 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.56 (s, 1H), 3.40 (s, 1H), 2.58 - 2.37 (m, 2H), 2.29 - 1.90 (m, 8H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 591.2305, 확인된 값 592.5 (M+1)+; 머무름 시간: 3.4분 (LC 방법 G).
단계 6: 2-[6-[(2 S )-2-알릴피롤리딘-1-일]-4-메톡시-3-니트로-2-피리딜]-5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸
50℃의 아세토니트릴(20 mL) 중 6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-N'-[2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-4-메톡시-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드(0.4 g, 0.4402 mmol) 및 DIEA(296.80 mg, 0.4 mL, 2.2964 mmol)의 용액에 염화 토실(0.14 g, 0.7343 mmol)을 첨가하였다. 온도를 70℃로 가온시키고, 혼합물을 이 온도에서 밤새 교반하였다. 더 많은 염화 토실(0.14 g, 0.7343 mmol)과 DIEA(296.80 mg, 0.4 mL, 2.2964 mmol)를 첨가하고, 6시간 동안 계속 가열하였다. 추가의 염화 토실0.42 g, 2.203 mmol)과 DIEA(890.40 mg, 1.2 mL, 6.8893 mmol)를 첨가하고, 밤새 계속 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 아세트산 에틸(100 mL)에 용해시켰다. 유기층을 수성 5% NaHCO3(100 mL), 물(2 X 100 mL), 및 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 플래쉬 크로마토그래피(미정제물을 25 g 컬럼 상에 건실 로딩함; 용리 구배: 0%~40% EtOAc/헥산)로 정제하여 2-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-4-메톡시-3-니트로-2-피리딜]-5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸(0.23 g, 89%)을 황녹색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 573.2199, 확인된 값 574.5 (M+1)+; 머무름 시간: 3.87분 (LC 방법 G).
단계 7: (12 S )-6-벤질옥시-19-메톡시-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
질소 분위기 하에, 50℃의 DCE (250 mL) 중 2-[6-[(2S)-2-알릴피롤리딘-1-일]-4-메톡시-3-니트로-2-피리딜]-5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸(1 g, 1.7116 mmol)의 탈기된 용액에 Zhan 촉매-1B(200 mg, 0.2722 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃로 가열하고, 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(25 g의 실리카 겔 상에 건식 로딩함; 용리 구배: 0%~40% EtOAc/헥산)로 정제하여 (12S)-6-벤질옥시-19-메톡시-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(320 mg, 29%)을 녹색 고형분으로서 수득하였다 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.40 - 7.21 (m, 5H), 6.33 (s, 1H), 5.70 - 5.36 (m, 2H), 4.70 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.95 - 3.85 (m, 1H), 3.53 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 3.38 (t, J = 10.3 Hz, 2H), 2.45 - 2.34 (m, 2H), 2.17 - 1.90 (m, 6H), 1.62 - 1.49 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 545.1886, 확인된 값 546.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.46분 (LC 방법 H).
단계 8: (12 R )-20-아미노-19-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(염산염)(화합물 159) 및 (12 R )-20-아미노-19-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(염산염)(화합물 160)
MeOH (15 mL) 중 (12S)-6-벤질옥시-19-메톡시-20-니트로-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,9,17,19-헥사엔(E/Z 혼합물)(226 mg, 0.3503 mmol)의 용액에 탄소 상 팔라듐(226 mg, 0.2124 mmol)을 첨가하였다. 플라스크를 질소로 채우고, 배기하고, 수소로 다시 채웠다. 이를 3회 반복하였다. 혼합물을 60 psi에서 2일 동안 수소화하였다. 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(2 X 100 mL)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 증발시킨 다음, HPLC(구배: 30분에 걸쳐 15%~75% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl); 유속: 30 mL/분)로 저제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체를 (12R)-20-아미노-19-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(염산염)(10.6 mg, 6%)로서 단리하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.52 (br, 2H), 6.28 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.85 (s, 1H), 3.51 - 3.37 (m, 2H), 3.29 - 3.13 (m, 1H), 2.20 - 1.84 (m, 6H), 1.80 - 1.65 (m, 2H), 1.65 - 1.52 (m, 2H), 1.50 - 1.34 (m, 3H), 0.98 - 0.81 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 427.1831, 확인된 값 428.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.0분 (LC 방법 H).
두 번째 용리되는 부분 입체이성질체를 (12R)-20-아미노-19-메톡시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(염산염)(21.3 mg, 12%)로서 단리하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.52 (br, 2H), 6.21 (s, 1H), 4.05 - 3.78 (m, 4H, OH and CH3), 3.47 (m, 2H), 3.20 (m, 1H), 2.27 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.14 - 2.04 (m, 1H), 2.04 - 1.64 (m, 7H), 1.54 - 1.28 (m, 4H), 1.03 - 0.80 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 427.1831, 확인된 값 428.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.0분 (LC 방법 H).
실시예 88: (12 R )-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 161) 및 (12 R )-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 162)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -[( 터트 -부톡시)카르보닐]- N -[(12 R )-6-하이드록시-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트
마이크로웨이브 바이알에 터트-부틸 N-[(12R)-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트100 mg, 0.1478 mmol), 나트륨 메탄설피네이트(46 mg, 0.4506 mmol), 요오드화 구리(I)(33 mg, 0.1733 mmol), L-프롤린(1.3 mg, 0.0113 mmol), 및 DMSO(1.2 mL)를 채웠다. 튜브를 2분 동안 질소로 플러싱하고 밀봉하였다. 혼합물을 112℃에서 3시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시킨 다음, 28% 수성 NH3(2 mL) 및 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 MTBE(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 0%~30%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 터트-부틸 N-[(터트-부톡시)카르보닐]-N-[(12R)-6-하이드록시-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(48 mg, 48%)를 황색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 675.255, 확인된 값 676.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.99분 (LC 방법 Y). 생성물은 소량의 모노-Boc 보호된 유사한 생성물로 오염되었다.
단계 2: (12 R )-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올
디클로로메탄 (3 mL) 중 터트-부틸 N-[(터트-부톡시)카르보닐]-N-[(12R)-6-하이드록시-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]카르바메이트(74 mg, 0.1095 mmol)의 용액에 TFA(4.44 g, 3 mL, 38.94 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 물질을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 20%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (12R)-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(40 mg, 77%)을 황색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 475.15012, 확인된 값 476.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.89분 (LC 방법 Z).
단계 3: (12 R )-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 161) 및 (12 R )-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 162)
(12R)-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(66.2 mg, 0.1392 mmol)의 부분 입체이성질체 혼합물을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-4 컬럼(250 x 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 SFC(용리 구배: 30%~45% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 (12R)-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(25.3 mg, 76%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.99 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.31 (s, 2H), 3.88 (p, J = 7.7 Hz, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.30 - 3.24 (m, 1H), 2.35 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.30 - 2.20 (m, 1H), 2.14 (dt, J = 12.9, 7.4 Hz, 1H), 2.06 - 1.94 (m, 1H), 1.94 - 1.84 (m, 1H), 1.79 - 1.67 (m, 1H), 1.63 - 1.37 (m, 7H), 0.95 - 0.78 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 475.15012, 확인된 값 476.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.43분 (LC 방법 D).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 (12R)-20-아미노-18-메탄설포닐-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(17.3 mg, 52%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.99 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.33 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 4.02 (q, J = 8.1 Hz, 1H), 3.88 (q, J = 7.9 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.22 (dd, J = 18.3, 3.9 Hz, 1H), 2.30 - 2.13 (m, 3H), 2.11 - 1.99 (m, 1H), 1.97 - 1.84 (m, 1H), 1.75 (dq, J = 19.5, 11.3, 9.2 Hz, 2H), 1.53 (ddd, J = 29.0, 16.3, 7.5 Hz, 4H), 1.43 - 1.30 (m, 2H), 0.95 (dt, J = 10.7, 5.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 475.15012, 확인된 값 476.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.31분 (LC 방법 D).
실시예 89: (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 163) 및 (6 R )-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,17-디올 (화합물 164)의 제조
단계 1: 메틸 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
2-메틸헥스-5-엔-2-아민(염산염)(69.4 g, 463.7 mmol)을 아세토니트릴(960 mL)에 현탁하고, DIEA(220 mL, 1.263 mol)로 처리하였다. 형성된 갈색 용액에 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(120 g, 421.7 mmol)를 한번에 첨가하였다. 주황색 용액을 2.5시간에 걸쳐 65℃로 서서히 가열하였다(주의: 반응물은 가열 시 발열을 나타냄). 짙은 주황색 용액을 40℃에서 증발시키고, 잔류물에 MTBE(1 L) 및 물(1 L)을 첨가하고, 층을 분리하였다. 짙은 주황색 유기상을 포화 수성 NH4Cl/물 혼합물의 1:1 용액(2 X 600 mL)으로 세척하고, 염수(400 mL)로 1회 세척하고, 유기상을 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 메틸 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(152.7 g, 100%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 361.12494, 확인된 값 362.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.02분 (LC 방법 D).
단계 2: 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
메틸 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(152.4 g, 421.7 mmol)를 메탄올(750 mL)에 용해시키고, 교반하면서 NaOH(750 mL의 2 M, 1.500 mol)로 처리하였다(모두 한번에 첨가하자, 30℃에서 40℃로 약간의 발열이 발생함). 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 짙은 적색 용액을 감압 하에 42℃에서 농축하고, 생성된 붉은 주황생 용액을 툴루엔(1 L)으로 처리하였다. 유화액을 얼음조에서 교반하고, 내부 온도를 15℃ 미만으로 유지하면서, HCl(260 mL의 6 M, 1.560 mol)을 첨가하여 pH = 1로 조정하였다. 상을 분리하고, 유기상을 물로 2회 세척하고(2 X 500 mL) 염수로 1회(400 mL) 세척하였다. 유기상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 증발시키고, 진공에서 건조시켜 137 g의 짙은 주황색 고형분 덩어리를 수득하였다. 이 물질을 아세토니트릴(약 1 L, 잔류 툴루엔을 제거하기 위함)로부터 증발시키고, 아세토니트릴(600 mL)에 용해시키고, 약 60℃로 가온시켰다. 짙은 적색의 뜨거운 용액에 N-시클로헥실시클로헥산아민(79 mL, 396.5 mmol)을 교반하면서 첨가하고(60℃에서 70℃로의 발열이 나타남), 뜨거운 용액을 시딩하였다. 내부 온도가 약 60℃일 때, 물질은 고형분 덩어리가 되었는데, 이를 부순 후 자기 교반할 수 있었다. 걸쭉한 현탁액을 냉각용 온수조에서 밤새 교반한 다음, 얼음조에서 3시간 동안 교반하였다. 고형분을 여과에 의해 수집하고, 여액이 무색이 될 때까지 차가운 아세토니트릴로 세척하고, 주말에 걸쳐 건조시켜 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(디시클로헥실아민 염)(172 g, 77%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 이 염을 MTBE(1 L)에 현탁하고, 구연산(1.2 L의 1 M, 1.200 mol)으로 처리하였다. 혼합물을 교반하고, 상을 분리하였다. 유기상을 1 M 구연산으로 2회 세척하고(2 X 400 mL) 0.5M KHSO4로 4회 세척하였다(4 X 400 mL). 그런 다음, 유기상을 염수(200 mL)로 1회 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(113.4 g, 77%)을 황색 내지 주황색 오일로서 수득하였는데, 이는 방치 상태에서 결정화되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.21 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 6.20 - 6.00 (m, 1H), 5.82 - 5.57 (m, 1H), 5.13 - 4.74 (m, 2H), 1.97 (d, J = 2.9 Hz, 4H), 1.45 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 347.10928, 확인된 값 348.0 (M+1)+ ; 머무름 시간: 2.49분 (LC 방법 D).
단계 3: N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(100 g, 285.1 mmol) 및 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(86.3 g, 299.4 mmol)를 DMF(600 mL)에 용해시키고, 얼음조에서 냉각시켰다. 내부 온도가 3.1℃일 때, HATU(114 g, 299.8 mmol)를 한 번에 첨가하였다(발열은 관찰되지 않음). 그런 다음, 내부 온도를 3~10℃로 유지하면서 DIEA(100 mL, 574.1 mmol)를 0.5시간에 걸쳐 서서히 첨가하였다(발열성). 첨가 후, 얼음조를 제거하고, 반응물을 실온으로 가온시키면서 0.5시간 동안 추가로 교반하였다. 주황색 용액을 얼음물(3 L)과 MTBE(1 L)의 교반 용액에 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하고, 상을 분리하였다. 유기상을 물로 2회 세척하고(2 X 1 L), 0.2 M KHSO4로 세척하고(3 X 1 L), 염수(250 mL)로 1회 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(181 g, 정량적 수율)를 주황색 덩어리로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 617.2073, 확인된 값 618.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.25분 (LC 방법 D). 이 물질은 다음 단계에서 바로 사용하였다.
단계 4: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(176.1 g, 285.2 mmol)를 아세토니트릴(1.4 L)에 용해시키고, 55℃로 가열하였다. 황색 내지 주황색 용액을 DIEA(124 mL, 711.9 mmol)로 처리하고, 이어서 염화 토실(54.4 g, 285.3 mmol)을 15분에 걸쳐 나누어 첨가하고(발열 반응; 가열 맨틀을 제거하고, 서서히 첨가함으로써 내부 온도를 55℃ 내지 60℃로 유지함), 반응물을 55~60℃에서 45분 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에 40℃에서 농축시키고, 잔류물을 1:1의 MTBE/헵탄(1.4 L) 및 물(1.4 L)로 추출하였다. 유기상을 물(1.5 L) 1회 더 세척하고, 0.2M KHSO4로 세척하고(2 X 1 L), 염수(0.5 L)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 172 g의 주황색 오일을 수득하고, 이를 100 mL의 툴루엔 및 300 mL의 헵탄에 용해시켰다. 용액을 3 kg 실리카 컬럼에 로딩하였다(컬럼 부피 = 4800 mL; 유속 = 900 mL/분). 100% 헥산으로 1분 동안 용리한 다음, 내부 구배를 106분에 걸쳐 0%~10% 아세트산 에틸/헥산으로 프로그래밍하였다(2 컬럼 부피). 생성물은 약 4% 아세트산 에틸에서 용리되기 시작하였으므로, 생성물의 용리가 완료될 때까지 4.3% 아세트산 에틸을 등용매 구배로서 유지하여, 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(139.1 g, 80%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.51 (s, 1H), 7.40 - 7.27 (m, 5H), 6.03 - 5.87 (m, 1H), 5.80 - 5.66 (m, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.31 - 5.16 (m, 2H), 5.03 - 4.95 (m, 1H), 4.95 - 4.89 (m, 1H), 4.81 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.28 - 3.13 (m, 2H), 2.08 - 1.99 (m, 2H), 1.99 - 1.89 (m, 2H), 1.47 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 599.1967, 확인된 값 600.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.71분 (LC 방법 D).
단계 5: (6 R )-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
12 L, 3구 둥근 바닥 플라스크에서, 이 반응을 46.3 g의 병렬 배치로 3회 수행하였다. 아래의 실험은 이들 배치 중 하나에 대해 기술한 것이다.
가열 블랭킷 내에 배치된 12 L 용기에 산포 튜브, 및 가스 버블러와 오버헤드 교반기가 구비된 환류 응축기를 부착하였다. 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(46.3 g, 76.22 mmol)을 DCE(8.23 L)에 용해시켰다. 질소 가스의 무거운 스트림을 시스템에 살포하였다. 가열 블랭킷을 50℃로 설정하였다. 용기가 53℃에 도달하면, 디클로로[1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)-2-이미다졸리딘일리덴][[5-[(디메틸아미노)설포닐]-2-(1-메틸에톡시-O)페닐]메틸렌-C]루테늄(II)(Zhan 촉매-1B, 11.2 g, 15.26 mmol)를 모두 한번에 첨가하였다. 촉매 용기를 DCE로 헹구고, 헹굼액을 반응물에 첨가하였다. 촉매 첨가가 완료된 후, 블랭킷 온도을 73℃로 올렸다. 내부 온도가 72℃에 도달한 후, 2시간 28분 동안 계속 교반한 다음, 가열 블랭킷 온도을 45℃로 내렸다. 2시간 27분 후, 내부 온도가 50℃에 도달하였다. 15분 후, 고형분인 2-설파닐피리딘-3-카르복시산(12 g, 77.33 mmol) 및 트리에틸아민(11 mL, 78.92 mmol)을 첨가하였다. 12시간 동안 교반한 다음, 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 100 g의 SiO2 및 10 g의 활성탄(20~40메쉬, 과립형)을 반응물에 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 다음, 셀라이트로 여과하고, 여액을 증발시켜 미정제 생성물 혼합물을 수득하였다. 3회의 병행 반응 모두의 물질을 합쳐 71.2 g의 미정제 생성물 혼합물을 수득하였다. 이 물질을 2개의 별도 3 kg 실리카 겔 컬럼(구배: 110분에 걸쳐 100% 헥산~10% 아세트산 에틸/헥산의 구배에 이어서 10분에 걸쳐 10% 아세트산 에틸/헥산~100% 아세트산 에틸의 구배)을 이용해 정제하였다. 2개의 정제된 별도 배치를 합친 후, (6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(51.88 g, 40%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.49 - 7.21 (m, 5H), 6.58 (s, 1H), 5.79 (dt, J = 13.7, 6.5 Hz, 1H), 5.58 (ddd, J = 15.0, 8.8, 5.6 Hz, 1H), 4.83 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.13 (dd, J = 14.2, 5.4 Hz, 1H), 2.77 (dd, J = 14.3, 8.8 Hz, 1H), 2.38 - 2.24 (m, 1H), 2.14 - 1.93 (m, 3H), 1.58 - 1.32 (m, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 571.1654, 확인된 값 572.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.46분 및 3.49분 (LC 방법 D). 생성물은 이중 결합 이성질체의 3:1 혼합물로서 형성되었다.
단계 6: (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 163) 및 (6 R )-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,17-디올 (화합물 164)
(6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(50.8 g, 88.89 mmol)을 250 mL의 에탄올에 용해시키고, 28℃ 수조를 이용해 회전 증발시켜 부분적으로 농축시켜 임의의 잔류 용매를 제거한 다음, 5 L 플라스크에서 추가의 에탄올(720 mL)에 용해시켰다. 질소 가스를 역충진하면서 5 사이클의 하우스 진공을 사용해 용액을 탈기하였다. 질소 하에 기질 용액에 디하이드록시팔라듐(15.2 g의 10% w/w, 10.824 mmol)을 첨가하였다. 수소를 역충진하면서 6 사이클의 하우스 진공을 반복하여 질소 분위기를 수소로 교체하였다. 마지막으로, 풍선을 사용해 용기를 1 atm의 수소 하에 유지시켰다. 이 혼합물을 자석 교반기로 밤새 격렬하게 교반한 다음, 수소 풍선을 제거하였다. 중간 크기의 프릿형 깔때기 상에서 70 g의 셀라이트를 통해 혼합물을 여과하였다. 녹색 여액 용액을 28℃ 수조를 이용해 회전 증발시켜 농축시켰다. 42.65 g의 미정제 생성물을 황색 고형분으로서 수득하였는데, 이중 41.5 g을 역상 크로마토그래피(125 mL의 메탄올에 용해시키고, 2.55 mL DMF(2% DMF/메탄올 용액)를 3.8 kg C18 컬럼 상에 로딩함; 컬럼 부피 = 3.3 L; 유속 = 375 mL/분; 프로그래밍된 구배: 176분에 걸쳐 40%~70% 아세토니트릴/물(20 컬럼 부피)에서 시작한 다음, 이어지는 약 20분에 걸쳐 100% 아세토니트릴의 구배)로 정제하였다. 혼합된 순수한 분획을 컬럼으로부터 단리하였다. 순수한 분획을 농축시켜 황색 고형분으로서, (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (28.17 g, 70%)을 수득하였다. 이 물질을, 유사한 방법에 의해 제조한 여러 개의 더 작은 배치(80 mg, 340 mg, 360 mg, 1.46 g, 및 1.63 g)와 아세토니트릴에서 용액으로서 합친 다음, 농축시켜 황색 고형분을 수득하였다. 이 고형분을 디클로로메탄에 용해시키고, 헵탄을 첨가한 다음, 용액을 진공 하에 40℃의 암소에서 밤새 농축시켜, 31.95 g의 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 5.96 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 2.90 - 2.71 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 1H), 1.91 - 1.74 (m, 1H), 1.73 - 1.57 (m, 1H), 1.56 - 1.38 (m, 5H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H). ESI-MS m/z 계산된 값 453.15994, 확인된 값 454.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.03분 (LC 방법 D).
전술한 역상 정제에서 생성된 하나의 혼합된 분획은 불순물을 함유하였는데, 이는 전술한 의도된 생성물보다 한 단위가 더 큰 덩어리를 나타냈다. 이 분획을 농축시키고, 잔류물을 3.6 mL의 메탄올에 용해시킨 다음, 역상 분취 HPLC(컬럼: C18 컬럼; 구배: 1~99% 아세토니트릴/물(+ HCl 개질제))로 정제하여 황색 고형분으로서, (6R)-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,17-디올 (105 mg, 0.003%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.43 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 2.91 - 2.74 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 2.10 - 1.96 (m, 1H), 1.85 - 1.68 (m, 1H), 1.68 - 1.54 (m, 1H), 1.53 - 1.37 (m, 5H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 454.14395, 확인된 값 455.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.87분 (LC 방법 D).
단계 7: 결정질 화합물 163 형태 A(순수)의 고형분 형태 특성 분석
A. X-선 분말 회절
단계 6에 의해 생성되고 EtOH로부터 재결정화에 의해 생성된 결정질 화합물 163 형태 A(순수)의 XRPD 회절도는 일반적인 X-선 분말 회절(XRPD) 방법을 사용해 수득하였다. 결정질 화합물 163 형태 A (순수)에 대한 XRPD 회절도는 도 16에 제공되어 있고, XRPD 데이터는 아래 표 6에 요약되어 있다.
B. 시차주사 열량측정 분석
DSC 데이터는 250.00℃까지 10.00℃/분으로 온도를 증가시켜 수집하였다. 단계 6에 의해 생성된 결정질 화합물 163 형태 A(순수)에 대한 DSC 온도 변화도는 도 17에 제공되어 있다. 온도 변화도는 Tm이 180.8℃에서 발생하고, Tm 피크는 183.18℃, 62.32 J/g에 있음을 보여준다.
실시예 90: (6 S )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 165)의 제조
단계 1: 메틸 3-아미노-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
2 L의 3구 둥근 바닥 플라스크르에 메틸 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(28.4 g, 78.6 mmol)를 채우고, 어두운 적색 오일을 에탄올 (140 mL) 및 THF(140 mL)에 용해시켰다. 반응 용기를 수조 내에 배치하였다. 500 mL 첨가 깔때기를 플라스크에 부착하였다. 디티온산 나트륨(이나트륨 염)(50 g, 287.2 mmol)을 물(330 mL)에 용해시키고, 수용액을 첨가 깔때기에 첨가하였다. 디티온산 나트륨 용액을, 내부 온도가 28℃ 이하로 유지될 수 있는 속도로 서서히 기질 용액에 첨가하였다. 첨가 도중, 침전이 발생하였고, 반응 혼합물의 색상은 짙은 진홍색에서 주황색으로 밝아지기 시작하였다. 약 1시간 후 첨가가 완료되었다. 첨가가 완료될 때까지, 반응 혼합물은 불균질에서 균질로 바뀌었다. 주황색 반응 용액을 2-메틸테트라하이드로푸란(600 mL)으로 희석하고, 20분 동안 교반하였다. 200 mL의 염수를 첨가하고, 계속 교반하였다. 상을 분리하고, 유기물을 1 M 수성 HCl(3 X 200 mL)로 세척하였다. 마지막으로, 염수(1 X 200 mL)로 세척한 다음, 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시키고, 진공 하에 추가로 건조시켜 메틸 3-아미노-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(24.59 g, 92%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 5.92 - 5.68 (m, 1H), 5.51 (s, 2H), 5.07 - 4.80 (m, 2H), 4.29 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 2.07 - 1.94 (m, 4H), 1.42 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 331.15076, 확인된 값 332.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.96분 (LC 방법 D).
단계 2: 3-아미노-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
500 mL, 2구 둥근 바닥 플라스크에 메틸 3-아미노-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(23.6 g, 71.23 mmol) 및 THF(120 mL)를 채우고, 교반하여 용해시켰다. 125 mL 첨가 깔때기를 가열 블랭킷에 부착하였다. 수산화 칼륨(21 g, 374.3 mmol)을 물(120 mL)에 용해시키고, 이 수용액을 첨가 깔때기에 첨가하였다. 수성 KOH 용액을 12분에 걸쳐 기질에 첨가하였다(첨가 도중, 내부 온도는 19℃에서 27℃로 상승함). 내부 온도를 45℃ 내지 50℃로 유지하였다. N2 하에 공냉식 환류 응축기를 이용해 격렬히 교반하였다. 약 5시간 후에 발열이 멈춘 후, 반응물을 주변 온도로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 500 mL 분별 깔때기에 두고, 상을 분리하였다. 유기상을 500 mL 플라스크에 넣고, 농축시켜 대부분의 THF를 제거하였다. 미정제 잔류물을 300 mL의 이소프로필 아세테이트에 재용해시켰다. 유기 용액을 1 M 수성 HCl(1 X 200 mL) 및 염수(1 X 100 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시키고, 진공 하에 추가로 건조시켜 주황색 고형분으로서, 3-아미노-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (21.47 g, 95%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (s, 3H), 7.49 (s, 1H), 5.89 - 5.61 (m, 1H), 5.05 - 4.75 (m, 2H), 4.24 (s, 1H), 1.94 (s, 4H), 1.37 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 317.1351, 확인된 값 318.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.58분 (LC 방법 D).
단계 3: 3-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
3-아미노-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(12.4 g, 39.08 mmol)을 THF(100 mL)에 용해시켰다. 용액을 N2 분위기 하에 교반하였다. 디-터트-부틸 디카르보네이트(10 mL, 43.53 mmol)를 THF(20 mL)에 용해시키고, 이 용액을 주사기를 통해 반응 용액에 첨가하였다. 이어서, 트리에틸아민(8.01 g, 79.16 mmol)을 주사기를 통해 15분에 걸쳐 반응 용액에 첨가하였다. 17시간 후, 반응물을 감압 하에 농축시켜 THF를 제거하였다. 미정제 생성물을 200 mL의 이소프로필 아세테이트에 재용해시켰다. 용액을 500 mL 분별 깔때기에 넣고, 유기 용액을 1 M 수성 HCl(1 X 80 mL, 1 X 20 mL) 및 염수(30 mL)로 세척하였다. 유기물을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시키고, 고진공 하에 추가로 건조시켜 진한 적색 오일로서, 3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(16.3 g, 99%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.59 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 5.87 - 5.63 (m, 1H), 5.00 - 4.85 (m, 2H), 4.82 - 4.76 (m, 1H), 1.97 (s, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.41 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 417.18753, 확인된 값 418.4 (M+1)+; 머무름 시간: 3.42분 (LC 방법 D).
단계 4: 터트 -부틸 N -[2-[[[(2 S )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
N2 분위기 하에, 2-메틸테트라하이드로푸란 (200 mL) 중 3-(터트-부톡시카르보닐아미노)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (16.3 g, 38.66 mmol) 및 (2S)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 (12.4 g, 43.02 mmol)의 용액에 고형분 2-클로로-4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진(8 g, 45.57 mmol)을 첨가하였다. 2-메틸테트라하이드로푸란 (50 mL) 중 4-메틸모르폴린 (5.24 g, 50.77 mmol)의 용액을 1시간에 걸쳐 반응 혼합물에 점진적으로 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 이소프로필 아세테이트(250 mL)로 희석하고, 물(1 X 50 mL), NaHCO3의 포화 수용액(2 X 100 mL), 및 염수(1 X 30 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 220 g 컬럼)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[[[(2S)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(21.92 g, 82%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.53 (s, 1H), 9.95 (s, 1H), 9.63 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.51 - 7.42 (m, 2H), 7.42 - 7.27 (m, 3H), 5.99 - 5.68 (m, 2H), 5.45 - 5.12 (m, 2H), 5.03 - 4.87 (m, 2H), 4.88 - 4.84 (m, 3H), 3.22 - 2.85 (m, 2H), 2.13 - 1.79 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.42 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 687.2855, 확인된 값 688.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.82분 (LC 방법 D).
단계 5: 터트 -부틸 N -[2-[5-[(1 S )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트
아세토니트릴 (120 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[[[(2S)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바모일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트 (14 g, 20.36 mmol)의 용액에 DIEA(7.94 g, 61.43 mmol)를 첨가하고, 용액을 50℃로 가열하였다. 아세토니트릴 (50 mL) 중 p-TsCl(4.33 g, 22.71 mmol)의 용액을 약 1시간에 걸쳐 첨가 깔때기를 통해 서서히 적가하였다. 생성된 진한 갈색 용액을 6.5시간 동안 가열하였다. 다시, 50℃로 가열하면서 p-TsCl(약 1 g, 6시간 간격으로 3회로 나누어 첨가함)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 이소프로필 아세테이트(250 mL)로 희석하고, NaHCO3의 포화 수용액(50 mL)을 교반하면서 서서히 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하고, 층을 분리하였다. 유기층을 NaHCO3의 포화 수용액(1 X 50 mL) 및 염수(1 X 50 mL)로 세척한 다음, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 짙은 진홍색 오일로서, 터트-부틸 N-[2-[5-[(1S)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(16.4 g, 정량화)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.35 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 6.03 - 5.82 (m, 1H), 5.80 - 5.62 (m, 1H), 5.41 - 5.29 (m, 1H), 5.22 (dd, J = 10.3, 1.8 Hz, 1H), 5.05 - 4.88 (m, 2H), 4.89 - 4.83 (m, 1H), 4.84 - 4.73 (m, 2H), 4.63 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.27 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.18 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 669.27496, 확인된 값 670.6 (M+1)+; 머무름 시간: 1.36분 (LC 방법 D).
단계 6: 터트 -부틸 N -[2-[5-[(1 S )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]- N - 터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트
아세토니트릴 (100 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[(1S)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]카르바메이트(13 g, 19.41 mmol)의 용액에 DMAP(473 mg, 3.872 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 교반하여, 이를 균질한 용액으로 만들었다. 아세토니트릴 (20 mL) 중 디-터트-부틸 디카르보네이트(5.51 g, 25.25 mmol)의 용액을 서서히 첨가하고, 반응 혼합물을 40분 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 CH3CN을 제거한 다음, 툴루엔과 공비혼합하여 잔류 t BuOH를 제거하였다. 생성된 물질을 디클로로메탄/툴루엔의 1:1 혼합물(40 mL)에 용해시키고, 프릿형 깔때기를 통해 여과하여, 잔류 고형분을 제거하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 주황색 시럽으로서, 터트-부틸 N-[2-[5-[(1S)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(12 g, 80%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.58 (s, 1H), 7.42 - 7.26 (m, 5H), 6.01 - 5.82 (m, 1H), 5.82 - 5.60 (m, 1H), 5.27 - 5.11 (m, 2H), 5.00 - 4.83 (m, 3H), 4.71 (dd, J = 73.3, 10.6 Hz, 2H), 3.18 (d, J = 7.0, 2.1 Hz, 2H), 2.04 - 1.95 (m, 4H), 1.46 (s, 6H), 1.41 (d, J = 3.6 Hz, 18H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 769.3274, 확인된 값 670.6 (M+1-Boc)+; 머무름 시간: 0.44분 (LC 방법 S).
단계 7: 터트 -부틸 N -[(6 S )-6-벤질옥시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-17-일]- N - 터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
툴루엔 (2.7 L) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[(1S)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(18 g, 23.38 mmol)의 교반 용액에 N2를 격렬하게 살포한 다음, 용액을 70℃로 가열하기 시작했다. 내부 온도가 50℃에 도달할 때, Zhan 촉매-1B(2.6 g, 3.543 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 용기를 주변 온도로 냉각시키고, 2-설파닐피리딘-3-카르복시산(2.23 g, 14.37 mmol)을 첨가하고 이어서 트리에틸아민(2 mL, 14.35 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 주변 온도에서 밤새 교반하고, 실리카 겔(40 g, 230 내지 400메쉬)을 첨가하였다. 혼합물을 주변 온도에서 20분 동안 교반한 다음, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 200 mL EtOAc로 헹구고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 40분에 걸쳐 100% 헥산~25% EtOAc/헥산)로 정제하여 무색 오일로서, 터트-부틸 N-[(6S)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-17-일]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트 (E/Z 혼합물)(11.87 g, 62%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 5H), 6.00 (dt, J = 15.0, 7.4 Hz, 1H), 5.62 - 5.54 (m, 1H), 5.55 - 5.17 (m, 1H), 4.81 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.31 - 3.18 (m, 1H), 2.84 (dd, J = 14.3, 7.6 Hz, 1H), 2.42 - 2.29 (m, 1H), 2.25 (dt, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 2.18 - 2.01 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.28 (s, 9H), 1.22 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 741.2961, 확인된 값 742.6 (M+1)+; 머무름 시간: 3.84분 (LC 방법 D).
단계 8: 터트 -부틸 N - 터트 -부톡시카르보닐- N -[(6 S )-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트
에탄올(160 mL) 중 터트-부틸 N-[(6S)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-17-일]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(E/Z 혼합물)(10.85 g, 14.63 mmol)의 용액을 탈기하여, 5 사이클의 진공 및 N2 역충진으로 공기를 제거하고, 플라스크를 N2 하에 두었다. 탄소 상 팔라듐(4.3 g, 5% w/w, 2.02 mmol) 및 암모니아(2.12 mL의 7 M, 14.84 mmol)를 첨가하고, 탈기를 반복한 다음, N2 분위기 하에 방치하였다. 반응 혼합물을, 수소 가스백 및 환기 바늘을 사용해 1 atm의 수소 압 하에 밤새 교반하였다. 수소 분위기를 N2로 교체하고, 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 필터 케이크를 EtOH(200 mL)로 꼼꼼히 헹구었다. 여액을 감압 하에 농축시켜 무색 오일로서, 터트-부틸 N-터트-부톡시카르보닐-N-[(6S)-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트(9.35 g, 88%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.60 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.29 - 3.03 (m, 1H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 2.11 - 1.97 (m, 1H), 1.95 - 1.60 (m, 2H), 1.58 - 1.39 (m, 25H), 1.39 (s, 2H), 1.34 - 1.17 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 653.26483, 확인된 값 654.4 (M+1)+; 머무름 시간: 3.41분 (LC 방법 D).
단계 9:(6 S )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 165)
이소프로필 알코올(85 mL) 중 터트-부틸 N-터트-부톡시카르보닐-N-[(6S)-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-일]카르바메이트8.49 g, 12.99 mmol)의 용액에 0℃의 메탄 설폰산(8.43 mL, 129.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 서서히 가온시키고, 주변 온도에서 3일에 걸쳐 교반하였다. 반응 혼합물을 아세트산 에틸(250 mL)로 희석하고, NaHCO3의 포화 수용액(3 X 50 mL) 및 염수(60 mL)로 세척한 다음, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 750 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~90% EtOAc/헥산의 얕은 구배)로 정제하여 밝은 황색 고형분으로서, (6S)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(2.48 g, 42%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 5.96 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 2.91 - 2.71 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 2.15 - 1.97 (m, 1H), 1.92 - 1.74 (m, 1H), 1.73 - 1.57 (m, 1H), 1.55 - 1.38 (m, 5H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 453.15994, 확인된 값 454.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.99분 (LC 방법 D).
실시예 91: (6 R )-17-아미노-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (염산염)(화합물 166)의 제조
단계 1: ( E )-2-메틸- N -(2-피리딜메틸렌)프로판-2-설핀아미드
디클로로메탄 (125 mL) 중 피리딘-2-카르브알데히드(10 g, 93.362 mmol)의 용액에 황산 마그네슘(52 g, 432.01 mmol), 피리디늄 p-툴루엔설포네이트(780 mg, 3.1038 mmol), 및 2-메틸프로판-2-설핀아미드(7.5 g, 61.881 mmol)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 디클로로메탄(50 mL)으로 세척하였다. 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 330 g 컬럼; 구배: 0%~35% 아세트산 에틸/디클로로메탄)로 정제하여 갈색 오일로서, (E)-2-메틸-N-(2-피리딜메틸렌)프로판-2-설핀아미드 (9.2 g, 71%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.81 - 8.72 (m, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.01 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.81 (td, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.39 (ddd, J = 7.6, 4.9, 1.2 Hz, 1H), 1.28 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 210.0827, 확인된 값 211.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.51분 (LC 방법 Z).
단계 2: 2-메틸- N -[1-(2-피리딜)부트-3-에닐]프로판-2-설핀아미드
-78℃의 테트라하이드로푸란 (182 mL) 중 (E)-2-메틸-N-(2-피리딜메틸렌)프로판-2-설핀아미드(10 g, 47.552 mmol)의 냉각된 용액에 알릴(브로모)마그네슘(80 mL, 디에틸 에테르 중 1 M, 80 mmol)을 적가하였다. HPLC 분석에 의해 출발 물질의 완전한 소모가 관찰될 때까지 반응물을 -78℃에서 유지시켰다. 반응물을 포화 염화 암모늄(100 mL)으로 서서히 퀀칭시킨 다음, 디클로로메탄(2 X 50 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 용매를 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 220 g 컬럼; 구배: 0%~5% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 연황색 고형분으로서, 2-메틸-N-[1-(2-피리딜)부트-3-에닐]프로판-2-설핀아미드 (7.5 g, 62%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.67 - 8.41 (m, 1H), 7.65 (td, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 1H), 7.18 (ddd, J = 7.6, 4.9, 1.0 Hz, 1H), 5.92 - 5.51 (m, 1H), 5.19 - 4.98 (m, 2H), 4.84 (br d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.65 - 4.35 (m, 1H), 2.86 - 2.49 (m, 2H), 1.33 - 1.06 (m, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 252.1296, 확인된 값 253.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.35분 (LC 방법 Z).
단계 3: 1-(2-피리딜)부트-3-엔-1-아민 (염산염)
메탄올 (60 mL) 중 2-메틸-N-[1-(2-피리딜)부트-3-에닐]프로판-2-설핀아미드 (7 g, 27.736 mmol)의 용액에 염산(70 mL, 디에틸 에테르 중 2 M, 140 mmol)을 실온에서 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 디에틸 에테르(100 mL)를 첨가하고, 45분 동안 교반하였다. 생성된 침전물을 여과하고, 디에틸 에테르(75 mL)로 세척하고, 고형분을 진공 하에 건조시켜 황백색 고형분으로서, 1-(2-피리딜)부트-3-엔-1-아민 (염산염)(4.75 g, 90%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.06 - 8.77 (m, 3H), 8.75 - 8.58 (m, 1H), 8.14 - 7.90 (m, 1H), 7.84 - 7.64 (m, 1H), 7.60 - 7.39 (m, 1H), 5.79 - 5.49 (m, 1H), 5.08 - 4.85 (m, 2H), 4.65 - 4.52 (m, 1H), 2.88 - 2.75 (m, 1H), 2.73 - 2.57 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 148.1, 확인된 값 149.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.02분 (LC 방법 BB).
단계 4: 터트 -부틸 N -[2-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[1-(2-피리딜)부트-3-에닐아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]- N - 터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트
질소로 퍼징한 100-mL 용기에서, 1-(2-피리딜)부트-3-엔-1-아민 (염산염)(760 mg, 4.116 mmol), DIEA (1.5 mL, 8.612 mmol), 3Å 분자체, 및 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-브로모-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(1 g, 1.331 mmol)를 DMSO(20 mL)에서 합쳤다. 용액을 통해 질소를 5분 동안 버블링하여 혼합물을 탈기한 다음, 용기를 캡핑하고, 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 그런 다음, 물질을 물로 희석하고, 아세트산 에틸(50 mL)을 첨가하였다. 그런 다음, 구연산 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 아세트산 에틸(2 X 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~100% 아세트산 에틸의 얕은 구배)로 정제하여 황색 고형분으로서, 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[1-(2-피리딜)부트-3-에닐아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(98 mg, 9%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 818.32263, 확인된 값 819.0 (M+1)+ ; 머무름 시간: 1.94분 (LC 방법 J).
단계 5: 터트 -부틸 N -[(6 R )-6-벤질옥시-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]- N - 터트 -부톡시카르보닐-카르바메이트 ( E/Z 혼합물)
100 mL 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기한, Zhan 촉매-1B(23 mg, 0.03135 mmol)의 용액을 1,2-디클로로에탄(75 mL)에 용해시키고, 혼합물을 질소 분위기 하에 50℃에서 가열하였다. 그런 다음, 1,2-디클로로에탄 (5 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-6-[1-(2-피리딜)부트-3-에닐아미노]-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(98 mg, 0.1197 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[(6R)-6-벤질옥시-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트(E/Z 혼합물)(23 mg, 24%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 790.2914, 확인된 값 791.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.82분 (LC 방법 J).
단계 6: (6 R )-17-아미노-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-올 ( E/Z 혼합물)
터트-부틸 N-[(6R)-6-벤질옥시-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-17-일]-N-터트-부톡시카르보닐-카르바메이트 (E/Z 혼합물)(23 mg, 0.02909 mmol)에 TFA(3.0 mL, 38.94 mmol)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 용매를 증발시킨 다음, 잔류물을 DCM으로 희석하고 재농축시킨 다음, 잔류물을 진공 하에 1시간 동안 건조시켜 미정제 황색 고형분으로서, (6R)-17-아미노-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-올(E/Z 혼합물)(10 mg, 69%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 500.13956, 확인된 값 501.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.14분 (LC 방법 J). 이 물질을 후속 단계에 직접 투입하였다.
단계 7: (6 R )-17-아미노-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (염산염)(화합물 166)
50 mL 둥근 바닥 플라스크에서, 아세트산 에틸 (500 μL) 중 (6R)-17-아미노-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-6-올 (E/Z 혼합물)(10 mg, 0.01998 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(8 mg, 10% w/w, 0.007517 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 탈기한 다음, 수소 가스로 채운 풍선으로 퍼징하였다. 혼합물을 1 atm의 수소에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼; 4 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하고 이어서 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 황색 고형분으로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (6R)-17-아미노-12-(2-피리딜)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (염산염)(3.16 mg, 29%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.86 (s, 2H), 7.68 (s, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.49 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.40 (s, 2H), 6.12 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 2.73 (s, 1H), 1.62 (s, 1H), 1.46 (d, J = 9.9 Hz, 4H), 1.25 (d, J = 16.5 Hz, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 502.15518, 확인된 값 503.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.76분 (LC 방법 A).
실시예 92: (12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 167) 및 (12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 168)의 제조
단계 1: (12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 167) 및 (12 S )-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 168)
(12S)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(250 mg, 0.5349 mmol)을 LUX-4 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 12% MeOH(+ 20 mM NH3)/88% CO2)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다.
처음 용리되는 거울상이성질체인 (12S)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(65.5 mg, 52%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.50 (s, 1H), 4.43 - 4.36 (m, 1H), 4.14 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.00 - 3.24 (m, 5H), 3.02 - 2.73 (m, 2H), 2.37 - 1.75 (m, 4H), 1.61 (s, 2H), 1.26 (s, 2H), 1.01 - 0.71 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.13922, 확인된 값 468.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.84분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 (12S)-20-아미노-6,18-비스(트리플루오로메틸)-10,22-디옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(105.5 mg, 84%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.56 (s, 1H), 4.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.79 (t, J = 11.3 Hz, 1H), 3.70 - 3.38 (m, 3H), 2.99 (s, 1H), 2.77 (t, J = 12.7 Hz, 1H), 2.38 - 1.78 (m, 6H), 1.58 (s, 1H), 1.25 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.13922, 확인된 값 468.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 A).
실시예 93: 메틸 (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트 (거울상이성질체 1)(화합물 169) 및 메틸 (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트 (거울상이성질체 2)(화합물 170)의 제조
단계 1: 메틸 (12 R )-20-{bis[( 터트 -부톡시)카르보닐]아미노}-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트
오토클레이브(autoclave)에 터트-부틸 N-[(12R)-18-브로모-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-20-일]-N-[(터트-부톡시)카르보닐]카르바메이트 (200 mg, 0.2956 mmol), 메탄올 (5 mL), 트리에틸아민 (72.6 mg, 0.1 mL, 0.7175 mmol), 및 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(6 mg, 0.0082 mmol)을 첨가하였다. 오토클레이브를 질소로 퍼징한 다음, 일산화탄소로 퍼징하였다. 혼합물을 130℃에서 가열하고, 일산화탄소 압력을 120 psi로 조정하였다. 혼합물을 130℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 25℃로 냉각시켰다. 혼합물을 질소로 퍼징하고 진공 하에 농축시켰다. 생성된 고형분을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석한 다음, 물(20 mL) 과 탄산 나트륨(1.5 g)을 첨가하고, 혼합물을 20분 동안 격렬하게 교반하였다. 층을 분리하고, 유기층을 물(10 mL)과 염수(10 mL)로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 갈색 미정제 고형분으로서, 메틸 (12R)-20-{bis[(터트-부톡시)카르보닐]아미노}-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트(189 mg)를 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 655.2829, 확인된 값 556.4 (M+H-Boc)+; 머무름 시간: 2.15분 (LC 방법 Z).
단계 2: 메틸 (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트 (거울상이성질체 1)(화합물 169) 및 메틸 (12 R )-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트 (거울상이성질체 2)(화합물 170)
디클로로메탄 (3 mL) 중 메틸 (12R)-20-{bis[(터트-부톡시)카르보닐]아미노}-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트(189 mg, 0.2883 mmol)의 용액에 TFA(4.44 g, 3 mL, 38.94 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 역상 HPLC(구배: 16분에 걸쳐 50%~60% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 분리하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체인 메틸 (12R)-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트(거울상이성질체 1)(11 mg, 8%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.49 (s, 1H), 4.92 (br. s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.61 - 3.45 (m, 2H), 2.93 - 2.77 (m, 2H), 2.38 - 2.17 (m, 3H), 2.16 - 2.01 (m, 1H), 2.01 - 1.90 (m, 1H), 1.76 - 1.47 (m, 8H), 1.15 - 1.02 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -77.36 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.178, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.4분 (LC 방법 AA).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체인 메틸 (12R)-20-아미노-6-하이드록시-6-(트리플루오로메틸)-22-옥사-3,4,16,21-테트라아자테트라시클로[15.3.1.12,5.012,16]도코사-1(21),2,4,17,19-펜타엔-18-카르복실레이트(거울상이성질체 2)(11 mg, 8%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.37 (s, 1H), 4.84 (br s, 2H), 4.11 (br s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.55 - 3.41 (m, 1H), 2.92 (br t, J = 8.1 Hz, 1H), 2.72 (br t, J = 11.2 Hz, 1H), 2.44 (br t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 2.17 - 2.05 (m, 1H), 2.02 - 1.90 (m, 1H), 1.85 - 1.41 (m, 9H), 1.07 - 0.91 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -80.68 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.17804, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.55분 (LC 방법 AA).
실시예 94: 17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 171) 및 17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 172)의 제조
단계 1: 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -(2,2-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
밀봉된 150 mL 바이알에서, [6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 트리플루오로메탄설포네이트(900 mg, 1.414 mmol)를 실온의 아세토니트릴(35 mL)에 용해시키고, 2,2-디메틸펜트-4-엔-1-아민(염산염)(675 mg, 4.51 mmol)을 첨가하고, 이어서 DIEA(1.75 mL, 10.05 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열한 다음 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 짙은 주황색 발포체로서, 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(2,2-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (570 mg, 67%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (s, 1H), 8.02 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 5H), 5.97 - 5.72 (m, 2H), 5.38 (dd, J = 17.0, 1.8 Hz, 1H), 5.25 (dd, J = 10.3, 1.8 Hz, 1H), 4.99 - 4.89 (m, 2H), 4.80 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.47 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.63 - 2.49 (m, 2H), 1.92 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 0.81 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 599.1967, 확인된 값 600.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.72분 (LC 방법 M).
단계 2: 6-벤질옥시-11,11-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
1 L, 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기한, DCE (400 mL) 중 Zhan 촉매-1B(180 mg, 0.2453 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, DCE (75 mL) 중 6-[5-[1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(2,2-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(570 mg, 0.9508 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 그런 다음, 가열조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. DCM (28 mL) 중 에틸 부타-2,3-디엔오에이트(450 μL, 3.877 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 연황색 고형분으로서, 6-벤질옥시-11,11-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(112 mg, 14%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 571.1654, 확인된 값 572.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.46분 (LC 방법 M).
단계 3: 17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
스테인리스 강 압력 용기에서, AcOH (3 mL) 중 6-벤질옥시-11,11-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(112 mg, 0.1372 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(150 mg의 10% w/w, 0.141 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 탈기한 다음, 진공(3 X)을 인가한 다음, 수소 가스로 퍼징하고, 240 psi의 수소 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 1%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 황색 고형분으로서, 17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (21 mg, 34%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 453.15994, 확인된 값 454.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.02분 (LC 방법 A).
단계 4: 17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 171) 및 17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 172)
17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(21 mg, 0.04632 mmol)을 OJ 컬럼(250 X 4.6 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 SFC(용리 구배: 8% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 2개의 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(4.6 mg, 43%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.27 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.72 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.77 (s, 1H), 3.66 (s, 1H), 3.03 (s, 1H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 2.20 (dt, J = 15.0, 5.0 Hz, 1H), 2.03 - 1.96 (m, 1H), 1.77 (s, 1H), 1.50 - 1.38 (m, 1H), 1.26 - 1.17 (m, 2H), 0.91 (s, 6H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. ESI-MS m/z 계산된 값 453.15994, 확인된 값 454.2 (M+1)+ ; 머무름 시간: 2.02분 (LC 방법 A).
나중에 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(4.5 mg, 42%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.29 (s, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.80 - 4.65 (m, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.01 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 2.38 (dt, J = 14.7, 8.3 Hz, 1H), 2.21 (dt, J = 14.9, 5.0 Hz, 1H), 2.04 - 1.97 (m, 1H), 1.77 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 1.50 - 1.39 (m, 1H), 1.26 - 1.17 (m, 2H), 0.91 (s, 6H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. ESI-MS m/z 계산된 값 453.15994, 확인된 값 454.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.02분 (LC 방법 A).
실시예 95: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로부탄]-6-올 (화합물 173)
단계 1: 메틸 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
밀봉된 125 mL 용기에서, 1-알릴시클로부탄아민 (염산염)(673 mg, 3.655 mmol), DIEA (3.0 mL, 17.22 mmol), 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.1 g, 3.479 mmol)를 아세토니트릴(20 mL)에서 합치고, 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 담황색 고형분으로서, 메틸 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.15 g, 92%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.42 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 5.78 (ddt, J = 17.3, 10.2, 7.1 Hz, 1H), 5.08 - 4.94 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.69 (dt, J = 7.2, 1.3 Hz, 2H), 2.30 (qd, J = 9.7, 2.7 Hz, 2H), 2.20 - 2.09 (m, 2H), 1.77 (dtd, J = 9.7, 7.5, 6.9, 4.5 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 359.10928, 확인된 값 360.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.98분 (LC 방법 A).
단계 2: 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF (20 mL), 메탄올 (20 mL), 및 물 (10 mL) 중 메틸 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.15 g, 3.201 mmol)의 용액에 수산화 리튬(1.17 g, 48.86 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. THF 및 메탄올을 감압 하에 제거하였다. 용액이 산성이 될 때까지 수성 3 M HCl 용액을 첨가한 다음, 아세트산 에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 그런 다음, 잔류물을 진공 하에 16시간 동안 두어, 담황색 고형분으로서, 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(1.04 g, 94%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.06 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 5.79 (ddt, J = 17.3, 10.2, 7.1 Hz, 1H), 5.16 - 4.86 (m, 2H), 2.71 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 2.31 (qd, J = 9.7, 2.7 Hz, 2H), 2.21 - 2.10 (m, 2H), 1.84 - 1.71 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 345.09363, 확인된 값 346.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.61분 (LC 방법 A).
단계 3: 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]- N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
DMF (20 mL) 중 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(875 mg, 2.534 mmol)의 용액에 DIEA(2 mL, 11.48 mmol) 및 HATU(955 mg, 2.512 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, DMF (5 mL)에 용해시킨 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(845 mg, 2.795 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산 에틸로 희석하고 염수로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 디클로로메탄~15% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 황색 발포체로서, 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (1.2 g, 75%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.51 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 10.39 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 2H), 7.41 - 7.30 (m, 3H), 5.92 - 5.73 (m, 2H), 5.10 - 5.04 (m, 2H), 5.03 - 4.98 (m, 2H), 4.84 (q, J = 11.4 Hz, 2H), 2.74 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.36 - 2.17 (m, 8H), 1.82 - 1.70 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 629.2073, 확인된 값 630.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.74분 (LC 방법 J).
단계 4: N -(1-알릴시클로부틸)-6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (23 mL) 중 6-[(1-알릴시클로부틸)아미노]-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (1.2 g, 1.906 mmol) 및 DIEA(1.1 mL, 6.315 mmol)의 용액을 60℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(440 mg, 2.308 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 90분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 중탄산나트륨 포화 수용액(100 mL)으로 퀀칭시키고, 아세트산 에틸(3 X 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 N-(1-알릴시클로부틸)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (1.02 g, 87%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 5H), 5.81 (dddt, J = 30.8, 17.3, 10.2, 6.8 Hz, 2H), 5.10 (dq, J = 17.2, 1.6 Hz, 1H), 5.04 - 4.90 (m, 3H), 4.76 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.65 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.62 - 2.51 (m, 2H), 2.28 (pd, J = 11.0, 10.0, 3.9 Hz, 4H), 2.10 (ddt, J = 12.2, 7.6, 3.8 Hz, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 611.1967, 확인된 값 612.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.66분 (LC 방법 M).
단계 5: (6 R )-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12,1'-시클로부탄] ( E/Z 혼합물)
1 L, 3구 플라스크에서, 질소 라인을 통해 연속 탈기한, Zhan 촉매-1B(350 mg, 0.477 mmol)를 DCE(450 mL)에 용해시키고, 혼합물을 질소 분위기 하에 50℃로 가열하였다. 그런 다음, DCE (50 mL) 중 N-(1-알릴시클로부틸)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1 g, 1.635 mmol)의 용액을 주사기를 통해 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 5시간 동안 가열한 다음, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 담황색 잔류물로서, (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12,1'-시클로부탄] (E/Z 혼합물)(650 mg, 68%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.35 (d, J = 4.6 Hz, 4H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 5.89 - 5.79 (m, 1H), 5.79 - 5.68 (m, 1H), 4.86 (s, 2H), 2.73 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.57 - 2.53 (m, 1H), 2.37 - 2.27 (m, 4H), 2.27 - 2.10 (m, 4H), 1.74 (td, J = 9.9, 9.3, 4.3 Hz, 1H), 1.61 (q, J = 9.4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 583.1654, 확인된 값 584.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.35분 (LC 방법 M).
단계 6: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로부탄]-6-올 (화합물 173)
250 mL 둥근 바닥 플라스크에서, AcOH (14 mL) 및 아세트산 에틸 (5 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔-12,1'-시클로부탄] (E/Z 혼합물)(630 mg, 1.08 mmol)의 용액을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd/C(1.15 g의 10% w/w, 1.081 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 탈기한 다음, 진공(3 X)을 인가한 다음, 용액을 통과하는 연속 바늘을 통해 수소 가스로 퍼징하고, 혼합물을 1 atm의 수소 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 황색 고형분을 수득하였다. 이 물질을 역상 HPLC(구배: 15분에 걸쳐 30%~99% 아세토니트릴/물(+ 5 mM HCl))로 정제하여 황색 고형분으로서, (6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로부탄]-6-올 (381.6 mg, 75%)을 수득하였다, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.58 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 5.95 (s, 2H), 5.48 (s, 1 H ), 2.44 - 2.33 (m, 2H ), 2.32 - 2.21 (m, 2H), 2.15 - 2.04 (m, 2H), 2.02 - 1.82 (m, 2H), 1.82 - 1.60 (m, 5H), 1.57 - 1.41 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.15994, 확인된 값 466.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.13분 (LC 방법 A).
단계 7: 비정질 화합물 173 (순수한 형태) 및 결정질 화합물 173 형태 A(순수)의 고형분의 특성 분석
A. X-선 분말 회절
단계 6에 의해 생산된 비정질 화합물 173(순수한 형태)에 대한 XRPD 회절도를 일반적인 X-선 분말 회절(XRPD) 방법을 사용해 수득하였다. 비정질 화합물 173(순수한 형태)에 대한 XRPD 회절도는 도 18에 제공되어 있다.
B. 열중량 분석 (TGA)
단계 6에 의해 생산된 비정질 화합물 173(순수한 형태)에 대한 TGA 곡선은 도 19에 제공되어 있다. TGA 곡선은 350.00℃까지 10.00℃/분의 속도로 온도가 증가할 때 39℃ 내지 224.6℃에서 3.98%의 중량이 손실되었음을 보여준다.
C. 시차주사 열량측정 분석
DSC 분석은 다음과 같이 조절된 방법을 사용해 수행하였다:
-20.00℃에서의 평형,
60초마다 +/- 1.00℃로 조절됨,
5.00분동안 등온 유지, 이어서
2.00℃/분의 속도로 250.00℃까지 승온.
단계 6에 의해 생산된 비정질 화합물 173(순수한 형태)에 대한 DSC 온도변화도는 도 20에 제공되어 있다. 온도변화도는 96.3℃에서 재결정화가 이루어지고 161.53℃, 59.89 J/g에서 용융됨을 보여준다. Tg는 관찰되지 않았다.
D. 단결정 X-선 회절
결정질 화합물 173 형태 A (순수)의 단결정을 디클로로메탄 및 헥산에서 성장시켰다. Cu Kα 방사선(λ = 1.54178 Å) 및 CPAD 검출기가 구비된 Bruker 회절계를 이용해 150 K에서의 X-선 회절 데이터를 획득하였다. SHELX 프로그램(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)을 사용하여 구조를 해석하고 정제하였으며, 결과는 아래 표 7에 요약되어 있다.
실시예 96: (6 R )-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 174) 및 (6 R )-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 175)의 제조
단계 1: N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
실온의 아세토니트릴 (20 mL) 및 DMF (4 mL) 중 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(2 g, 7.8856 mmol)의 무색 용액에 1,1'-카르보닐디이미다졸(1.35 g, 8.3257 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반한 다음, 아세토니트릴 (10 mL) 중 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(2.42 g, 7.7253 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 40℃에서 20시간 동안 완만하게 가열한 다음, 실온으로 다시 냉각시키고, 물과 2-메틸테트라하이드로푸란으로 퀀칭시켰다. 혼합물을 2-메틸테트라하이드로푸란(3 X 200 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 HCl의 0.5 N 수용액(2 X 120 mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발시켜 농축시켜 황색 오일로서, N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (4.8 g, 94%)를 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.
단계 2: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-올
0℃의 아세토니트릴(200 mL) 중 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(6.47 g, 8.4557 mmol) 및N,N-디이소프로필에틸아민(5.8618 g, 7.9 mL, 45.355 mmol)의 용액에 4-메틸벤젠설포닐 염화물(3.71 g, 19.46 mmol)을 나누어 첨가하였다. 첨가 후, 냉각조를 제거하고, 반응물을 26℃에서 44시간에 걸쳐 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 증발에 의해 제거하였다. 잔류물을 아세트산에틸(180 mL)에 용해시키고, 염산의 0.5 N 수용액(3 X 25 mL) 및 염수(2 X 15 mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발시켜 농축시켜 끈적이는 갈색 잔류물로서, 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-올 (6.67 g, 70%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 518.1025, 확인된 값 519.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.1분 (LC 방법 BB).
단계 3: ( E )- N -(1-(벤질옥시)프로판-2-일리덴)-2-메틸프로판-2-설핀아미드
THF (140 mL) 중 1-벤질옥시프로판-2-온 (9.5 g, 52.07 mmol) 및 2-메틸프로판-2-설핀아미드 (6.7 g, 55.28 mmol)의 용액에 Ti(OEt)4(30.464 g, 28 mL, 133.55 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 염수(300 mL)에 부었다. 생성된 현탁액을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc(300 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 EtOAc(2 X 200 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(350 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~45% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 황색 오일로서, (E)-N-(1-(벤질옥시)프로판-2-일리덴)-2-메틸프로판-2-설핀아미드 (6.85 g, 42%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 267.1293, 확인된 값 268.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.56분 (LC 방법 G).
단계 4: N -[1-(벤질옥시메틸)-1-메틸-부트-3-에닐]-2-메틸-프로판-2-설핀아미드
-78℃의 툴루엔 (120 mL) 중 (E)-N-(1-(벤질옥시)프로판-2-일리덴)-2-메틸프로판-2-설핀아미드 (5.3 g, 18.236 mmol)의 용액에 알릴(브로모)마그네슘(26.8 mL의 1 M, 26.8 mmol)을 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NH4Cl(200 mL)로 퀀칭시키고, 실온으로 가온시켰다. 유기층을 분리하고, 수성층을 EtOAc(3 X 200 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 연황색 오일로서, N-[1-(벤질옥시메틸)-1-메틸-부트-3-에닐]-2-메틸-프로판-2-설핀아미드 (5.32 g, 80%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 309.1762, 확인된 값 310.5 (M+1)+; 머무름 시간: 3.31분 (LC 방법 G).
단계 5: 1-벤질옥시-2-메틸-펜트-4-엔-2-아민
1,4-디옥산 (85 mL) 중 N-[1-(벤질옥시메틸)-1-메틸-부트-3-에닐]-2-메틸-프로판-2-설핀아미드 (5.32 g, 14.612 mmol)의 용액에 디에틸 에테르 중 HCl(42 mL의 2 M, 84 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 증발시켰다. 잔류물을 EtOAc(150 mL) 및 포화 NaHCO3(150 mL)으로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 아세트산에틸(2 X 150 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% MeOH/DCM)로 정제하여 연갈색 오일로서, 1-벤질옥시-2-메틸-펜트-4-엔-2-아민 (1.9749 g, 63%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.38 - 7.29 (m, 4H), 7.30 - 7.23 (m, 1H)5.86 - 5.76 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.99 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.13 (s, 2H), 2.08 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 1.61 (s, 2H), 0.94 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 205.1467, 확인된 값 206.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.49분 (LC 방법 H).
단계 6: N -[1-(벤질옥시메틸)-1-메틸-부트-3-에닐]-6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
디클로로메탄 (5 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-올(300 mg, 0.5084 mmol)의 0℃ 용액에 DIPEA(200.34 mg, 0.27 mL, 1.5501 mmol)를 첨가하고 이어서 트리플루오로메틸설포닐 트리플루오로메탄설포네이트(184.47 mg, 0.11 mL, 0.6538 mmol)를 첨가하였다. 20분 후 얼음조를 제거하고, 반응물을 실온에서 40분 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃로 다시 냉각시켰다. 혼합물에 디클로로메탄 (0.5 mL) 및 DIPEA (200.34 mg, 0.27 mL, 1.5501 mmol) 중 1-벤질옥시-2-메틸-펜트-4-엔-2-아민(125 mg, 0.6089 mmol)을 첨가하였다. 20분 후 얼음조를 제거하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 주황색 오일로서, N-[1-(벤질옥시메틸)-1-메틸-부트-3-에닐]-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (78 mg, 20%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.47 (s, 1H), 7.43 - 7.23 (m, 10H), 6.26 (br s, 1H), 5.86 - 5.69 (m, 2H), 5.13 - 4.96 (m, 4H), 4.84 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.57 - 4.45 (m, 2H), 3.66 - 3.53 (m, 2H), 2.74 - 2.17 (m, 6H), 1.48 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -64.68 (s, 3F), -73.15 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 705.2386, 확인된 값 706.3 (M+1)+; 머무름 시간: 4.54분 (LC 방법 BB).
단계 7: (6 R )-6-벤질옥시-12-(벤질옥시메틸)-12-메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 ( E / Z 혼합물)
1,2-디클로로에탄 (120 mL) 중 N-[1-(벤질옥시메틸)-1-메틸-부트-3-에닐]-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(248 mg, 0.3393 mmol)의 용액을 질소 가스로 20분 동안 탈기하였다. 60℃의 용액에 처음 량의 Zhan 촉매-1B(15 mg, 0.0204 mmol)를 첨가하고, 반응물을 이 온도에서 40분 동안 교반하였다. 그런 다음, 동일한 양의 Zhan 촉매-1B(15 mg, 0.0204 mmol)를 첨가하고, 60℃에서 2.5시간 동안 계속 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 약 5~6 방울의 DMSO로 촉매를 퀀칭시키고, 반응물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~90% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 연황색 발포체로서, (6R)-6-벤질옥시-12-(벤질옥시메틸)-12-메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(174 mg, 75%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.54 - 8.48 (m, 1H), 7.40 - 7.21 (m, 10H), 6.49 - 6.14 (m, 1H), 5.65 - 5.53 (m, 1H), 5.42 - 5.29 (m, 1H), 5.26 - 5.12 (m, 1H), 4.97 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.69 - 4.60 (m, 1H), 4.59 - 4.43 (m, 1H), 3.78 - 3.62 (m, 1H), 3.62 - 3.28 (m, 2H), 2.71 - 2.08 (m, 5H), 1.44 - 1.39 (m, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -64.15 내지 -64.22 (m, 3F), -73.15 내지 -73.40 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 677.2073, 확인된 값 678.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.3분 (LC 방법 C).
단계 8: (6 R )-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
(6R)-6-벤질옥시-12-(벤질옥시메틸)-12-메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(174 mg, 0.2542 mmol)을 무수 메탄올(8.7 mL)에 용해시켰다. 혼합물 내로 질소 가스를 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(165 mg, 5% w/w, 0.0775 mmol)을 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물 내로 질소 풍선으로 5분 동안 버블링하고, 반응 혼합물을 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 수소 풍선을 질소로 교체하고, 혼합물을 바늘 배출구를 통해 질소로 퍼징하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 아세트산 에틸(15 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 연황색 발포체로서, (6R)-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (68 mg, 56%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.04분 (LC 방법 C).
단계 9: (6 R )-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 174) 및 (6 R )-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 175)
(6R)-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (59.3 mg, 0.1249 mmol)의 부분 입체이성질체 혼합물을 SFC(컬럼: 40℃의 셀룰로오스 1 컬럼(21.2 mm X 250 mm, 5 μm 입자 크기); 용리 구배: 10% 메탄올/CO2; 유속: 75 mL/분)로 정제하여 2개의 개별 거울상이성질체를 분리하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(21 mg, 35%)을 황색 솜털같은 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.62 - 7.56 (m, 2H), 5.98 (s, 2H), 5.12 (s, 1H), 5.10 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 3.51 (dd, J = 10.5, 5.6 Hz, 1H), 3.36 (dd, J = 10.4, 4.8 Hz, 1H), 2.94 - 2.82 (m, 1H), 2.38 - 2.26 (m, 1H), 2.08 - 1.96 (m, 1H), 1.75 - 1.60 (m, 2H), 1.60 - 1.49 (m, 2H), 1.46 - 1.32 (m, 3H), 1.30 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.72 (s, 3F), -76.81 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.98분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-12-(하이드록시메틸)-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(30 mg, 51%)을 황색 솜털같은 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.62 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 5.95 (s, 2H), 5.26 (s, 1H), 5.19 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 3.38 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 2.43 - 2.15 (m, 1H), 1.99 - 1.85 (m, 1H), 1.73 - 1.57 (m, 1H), 1.55 - 1.26 (m, 9H), 1.22 - 1.12 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.78 (s, 3F), -79.04 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.04분 (LC 방법 C).
단계 10: 결정질 화합물 175 형태 A(순수)의 고형분 형태 특성 분석
A. 단결정 X-선 회절
결정질 화합물 175 형태 A (순수)의 단결정을 디클로로메탄 및 헥산에서 성장시켰다. Cu Kα 방사선(λ = 1.54178 Å) 및 CPAD 검출기가 구비된 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서의 X-선 회절 데이터를 획득하였다. SHELX 프로그램(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)을 사용하여 구조를 해석하고 정제하였으며, 결과는 아래 표 8에 요약되어 있다.
실시예 97: (6 R )-17-아미노-12,12-비스(트리듀테리오메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 176)
단계 1: 1,1,1-트리듀테리오-2-(트리듀테리오메틸)펜트-4-엔-2-아민
테트라하이드로푸란 (1 L) 중 무수 염화 세륨(III)(130 g, 527 mmol)의 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 18시간 동안 40℃로 가열하였다. 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, 디에틸 에테르 중 요오드화 리튬 용액(0.5 M, 1050 mL, 525 mmol)과의 복합체로서 트리듀테리오메틸리튬을 1시간에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물은 황색으로 바뀌었고, 45분 동안 -78℃에서 유지시켰다. 테트라하이드로푸란 (125 mL) 중 펜트-4-엔니트릴(21 mL, 210 mmol)의 용액을 20분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물은 갈색으로 바뀌었고, 3시간 동안 추가로 -78℃에서 유지시켰다. 반응물을 1시간에 걸쳐 0℃로 가온시키고, 농축 수산화 암모늄(65 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 밤새 교반하였다. 황산나트륨(500 g)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 15분 동안 교반한 후, 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 디에틸 에테르(1 L)로 헹구었다. 여액을 감압 하에 최소한의 부피로 농축시켰다. 디클로로메탄(200 mL)을 첨가하여, 백색 고형분 침전물로서 중간체를 형성하였다. 고형분을 여과하고, 여액을 디클로로메탄(700 mL)으로 희석하였다. 디클로로메탄 용액을 2 N 수산화 나트륨(500 mL)과 염수(200 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 혼합물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 350 g 컬럼; 용리 구배: 0%~15%의 농축된 수산화 암모늄/메탄올의 1:1 혼합물/디클로로메탄)로 정제하여 어두운 색상의 오일로서, 1,1,1-트리듀테리오-2-(트리듀테리오메틸)펜트-4-엔-2-아민 (5 g, 20% 수율)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 5.83 (tdd, J = 6.5, 10.3, 17.0 Hz, 1H), 5.02 (qd, J = 1.7, 17.1 Hz, 1H), 4.97 - 4.89 (m, 1H), 2.14 - 2.03 (m, 2H), 1.47 - 1.40 (m, 2H), 1.27 (br s, 2H) ppm. 2H NMR (61.4 MHz, 클로로포름) δ 1.07 (s, 6D) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 119.24, 확인된 값 120.2 (M+H)+; 머무름 시간: 1.1분 (LC 방법 CC).
단계 2: 메틸 6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
밀봉된 500 mL 용기에서, 1,1,1-트리듀테리오-2-(트리듀테리오메틸)펜트-4-엔-2-아민 (8.8 g, 66.42 mmol), DIEA (22.75 mL, 130.24 mmol), 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(18.53 g, 65.12 mmol)를 아세토니트릴(148 mL)에서 혼합하고, 혼합물을 70℃에서 110분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~5% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 적갈생 오일로서, 메틸 6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(18.77 g, 78%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 367.16, 확인된 값 368.267 (M+1)+; 머무름 시간: 2.91분 (LC 방법 D).
단계 3: 6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
메탄올 (93.85 mL) 중 메틸 6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(18.77 g, 51.1 mmol)의 용액에 수성 NaOH(120.87 mL, 2 M, 241.74 mmol)을 첨가하였다. 8시간 동안 교반한 후, 메탄올을 감압 하에 제거하였다. 혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, 6 M HCl 용액(50 mL)을 첨가한 다음, MTBE(120 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 물(3 X 50 mL), 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 미색 고형분으로서, 6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(17.57, 97%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 353.15, 확인된 값 354.207 (M+1)+; 머무름 시간: 2.395분 (LC 방법 D).
단계 4: N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
DMF (105.42 mL) 중 6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(17.57 g, 49.73 mmol) 및 (2R)-2-(벤질옥시)-2-(트리플루오로메틸) 펜트-4-엔하이드라지드(15.05 g, 52.21 mmol)의 용액에 내부 온도를 4.9℃로 유지하면서 HATU(19.85 g, 52.21 mmol)를 한번에 첨가하였다. 그런 다음, 내부 온도를 10℃ 미만으로 유지하면서 DIEA(17.32 mL, 99.453 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(527.1 mL)와 MTBE(175.7 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하고, 상을 분리하였다. 유기상을 물(2 X 175 mL), 0.2 M KHSO4(3 X 175 mL), 염수(44 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 증발시키고, 건조시켜 적색 점성 오일로서, N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(32.7 g, 100%)를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 623.24, 확인된 값 624.422 (M+1)+; 머무름 시간: 3.158분 (LC 방법 D).
단계 5: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
CH3CN (248.07 mL) 중 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (31.01 g, 49.73 mmol) 및 DIEA(17.32 mL, 99.45 mmol)의 용액에, 온도를 50℃ 미만으로 유지하면서 p-톨루엔설포닐 클로라이드(10.43 g, 54.7 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 30분 동안 가열한 다음, 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시켰다. 대부분의 용매를 감압 하에 제거하고, 남은 물질을 MTBE(250 mL)와 물(250 mL)로 나누었다. 상을 분리하고, 유기층을 물(250 mL), 0.2 M KHSO4(2 X 150 mL), 염수(75 mL)로 세척한 다음, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 적색 오일로서, 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(24.65 g, 82%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 605.23, 확인된 값 606.357 (M+1)+; 머무름 시간: 3.60분 (LC 방법 D).
단계 6: (6 R )-6-벤질옥시-17-니트로-12,12-비스(트리듀테리오메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
5 L 3구 플라스크에서, DCE (3.18 L) 중 질소로 연속 탈기한 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-[1,1-비스(트리듀테리오메틸)부트-3-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (21.17 g, 34.96 mmol) 및 Zhan 촉매-1B(6.41 g, 8.74 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 75℃에서 3시간 동안 가열하였다. 2-설파닐피리딘-3-카르복시산 (5.56 g, 35.83 mmol) 및 트리에틸아민(5.1 mL, 36.252 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, N2 하에 45℃에서 밤새 연속 교반하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시킨 다음, 45 g SiO2(230~400 메쉬)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% EtOAc/헥산)로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-12,12-비스(트리듀테리오메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(7.64 g, 37.8%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 577.20, 확인된 값 578.335 (M+1)+; 머무름 시간: 3.36-3.38분 (LC 방법 D).
단계 7: (6 R )-17-아미노-12,12-비스(트리듀테리오메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 176)
EtOH (97.05 mL) 및 EtOAc (32.35 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-12,12-비스(트리듀테리오메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(6.47 g, 11.2 mmol)의 용액에 탄소 상 팔라듐(1.908 g, 5 w/w%, 0.896 mmol)을 첨가하였다. 교반 용액을 5회의 진공/질소 가스 역충진에 이어서 5회의 진공/수소 풍선으로 탈기하였다. 수소 분위기 하에 메탄올 중 암모니아 용액(1.6 mL, 7 M, 11.203 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 분위기 하에 주변 온도에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 헵탄으로 처리하고, 농축시켰다. 생성된 고형분에, DCM/헵탄(3 mL/18 mL)을 첨가하였다. 형성된 고형분을 수집하고, 40℃의 진공 오븐에서 N2를 흘리면서 밤새 건조시켜 밝은 황색 고형분으로서, (6R)-17-아미노-12,12-비스(트리듀테리오메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (5.26 g, 85%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.96 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 2.80 (dt, J = 14.5, 7.5 Hz, 1H), 2.29 - 2.15 (m, 1H), 2.06 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 1.88 - 1.75 (m, 1H), 1.65 (dd, J = 12.6, 8.0 Hz, 1H), 1.55 - 1.36 (m, 5H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 459.20, 확인된 값 460.339 (M+1)+; 머무름 시간: 2.918분 (LC 방법 D).
실시예 98: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로펜탄]-6-올 (화합물 177)의 제조
단계 1: 메틸 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
밀봉된 125 mL 용기에서, 1-알릴시클로펜탄아민 (460 mg, 3.674 mmol), DIEA (3 mL, 17.22 mmol), 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.1 g, 3.479 mmol)를 아세토니트릴(20 mL)에서 합치고, 혼합물을 75℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 담황색 고형분으로서, 메틸 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.19 g, 92%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 5.84 - 5.69 (m, 1H), 5.06 - 4.99 (m, 1H), 4.95 (ddt, J = 17.0, 2.5, 1.4 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.68 (dt, J = 7.3, 1.2 Hz, 2H), 2.17 - 2.06 (m, 2H), 1.86 - 1.74 (m, 2H), 1.72 - 1.58 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 373.12494, 확인된 값 374.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.55분 (LC 방법 J).
단계 2: 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF (12 mL) 중 메틸 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.19 g, 3.188 mmol)의 용액에 메탄올(12 mL)과 물(5 mL)을 첨가하였다. 무수 수산화 리튬(1.3 g, 54.28 mmol)을 첨가하고, 실온에서 90분 동안 교반하였다. THF 및 메탄올을 감압 하에 제거한 다음, 3M HCl 용액을 산성화될 때까지 첨가하였다. 수성층을 아세트산 에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시킨 다음, 진공 하에 밤새 건조시켜 담황색 검으로서, 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (1.02 g, 89%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.22 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 5.84 - 5.69 (m, 1H), 5.02 (dd, J = 10.2, 2.4 Hz, 1H), 4.99 - 4.92 (m, 1H), 2.69 (dd, J = 7.0, 1.3 Hz, 2H), 2.19 - 2.07 (m, 2H), 1.85 - 1.74 (m, 2H), 1.73 - 1.58 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 359.10928, 확인된 값 360.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.78분 (LC 방법 A).
단계 3: 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]- N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
DMF (6 mL) 중 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (250 mg, 0.6958 mmol)의 용액에 DIEA(550 μL, 3.158 mmol) 및 HATU(263 mg, 0.6917 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, DMF (1.5 mL)에 용해시킨 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(212.0 mg, 0.7013 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산 에틸로 희석하고 염수로 세척하였다. 유기층을 10% 구연산 용액에 이어서 염수로 추가 세척하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 100% 디클로로메탄~15% 메탄올/디클로로메탄(생성물은 5% 메탄올/디클로로메탄에서 용리됨))로 정제하고, 원하는 물질을 농축시킨 다음, 이를 4시간 동안 진공 하에 두어 담황색 발포체로서, 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (399.7 mg, 89%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 643.22296, 확인된 값 644.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.88분 (LC 방법 J).
단계 4: N -(1-알릴시클로펜틸)-6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (8 mL) 중 6-[(1-알릴시클로펜틸)아미노]-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (330.1 mg, 0.5129 mmol) 및 DIEA (330.19 mg, 445 μL, 2.5548 mmol)의 용액 내로 염화 토실(122.3 mg, 0.6415 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 상에 직접 로딩하고, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 황색 겔로서, N-(1-알릴시클로펜틸)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (318.5 mg, 99%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 625.2124, 확인된 값 626.4 (M+1)+; 머무름 시간: 4.55분 (LC 방법 G).
단계 5: (6 R )-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,1'-시클로펜탄] ( E/Z 혼합물)
질소 분위기 하에 50℃의 DCE (80 mL) 중 N-(1-알릴시클로펜틸)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (315.1 mg, 0.5037 mmol)의 용액에 Zhan 촉매-1B(155.3 mg, 0.2114 mmol)를 첨가한 다음, 질소로 1분 동안 버블링하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 24 g 실리카 겔 컬럼; 용리 구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 담황색 오일로서, (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,1'-시클로펜탄] (E/Z 혼합물)(82.3 mg, 27%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 597.1811, 확인된 값 598.3 (M+1)+; 머무름 시간: 4.4분 (LC 방법 G).
단계 6: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로펜탄]-6-올 (화합물 177)
아세트산 에틸 (8 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,1'-시클로펜탄] (E/Z 혼합물)(82.3 mg, 0.1377 mmol)의 용액 내로 Pd/C(120 mg, 10% w/w, 0.1128 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물울 질소로 탈기하고 수소로 역충진하기를 3회 반복하였다. 반응 혼합물을 실온에서 40시간 동안 교반하였다. 셀라이트 패드를 통해 여과하여 촉매를 제거하고, 아세트산 에틸(30 mL)로 세척한 다음, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 연황색 분말로서, (6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로펜탄]-6-올 (51.5 mg, 75%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.58 (s, 2H), 5.97 (s, 2H), 4.68 (s, 1H), 2.69 - 2.60 (m, 1H), 2.19 (t, J = 12.8, 12.8 Hz, 1H), 2.14 - 2.06 (m, 1H), 2.03 - 1.94 (m, 1H), 1.91 - 1.72 (m, 4H), 1.68 - 1.38 (m, 10H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 479.1756, 확인된 값 480.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.86분 (LC 방법 H).
실시예 99: (6 R )-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 178) 및 (6 R )-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 179)의 제조
단계 1: 메틸 6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
125 mL 밀봉된 용기에서, 2-메틸헵트-6-엔-3-아민 (염산염)(1.0 g, 6.109 mmol), DIEA (3.75 mL, 21.53 mmol), 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.7 g, 5.376 mmol)를 아세토니트릴(40 mL)에서 합치고, 혼합물을 1시간 동안 80℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 메틸 6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (2.0 g, 99%)를 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.44 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.81 - 5.73 (m, 1H), 4.96 - 4.90 (m, 1H), 4.88 (q, J = 1.5, 1.1 Hz, 1H), 4.29 - 4.17 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.06 - 1.97 (m, 1H), 1.97 - 1.85 (m, 2H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.72 - 1.63 (m, 1H), 0.89 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.7 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 375.1406, 확인된 값 376.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.11분 (LC 방법 A).
단계 2: 6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF (17 mL) 중 메틸 6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.75 g, 4.662 mmol)의 용액에 메탄올(17 mL) 및 물(8.5 mL)을 첨가하였다. 무수 수산화 리튬(1.7 g, 70.99 mmol)을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. THF 및 메탄올을 감압 하에 제거하였다. 혼합물이 산성화될 때까지 3 M HCl 용액을 첨가한 다음, 수성층을 아세트산 에틸(3 X 100 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 염수(100 mL)로 세척한 다음, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~50% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (1 g, 59%)을 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.12 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.43 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.78 (ddt, J = 16.9, 10.2, 6.6 Hz, 1H), 4.97 - 4.85 (m, 2H), 4.30 - 4.18 (m, 1H), 2.06 - 1.85 (m, 3H), 1.85 - 1.63 (m, 2H), 0.89 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.7 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 361.12494, 확인된 값 362.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.77분 (LC 방법 A).
단계 3: N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
EtOAc (3 mL) 중 6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (300 mg, 0.828 mmol), (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 (290 mg, 1.006 mmol), 및 피리딘(342.3 mg, 0.35 mL, 4.3274 mmol)의 용액에 아세트산 에틸 중 무수 프로필포스폰산 용액(600 mg, 50% w/w, 0.9429 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 아세트산 에틸(25 mL)로 희석하고, 10% 수성 염화 암모늄, 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 생성된 황색 오일을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; DCM을 사용해 로딩함; 용리제: 20% 아세트산에틸/헥산)로 정제하였다. 원하는 생성물 분획을 합치고, 진공에서 농축시켜 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (510 mg, 93%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 631.2229, 확인된 값 632.5 (M+1)+; 머무름 시간: 7.51분 (LC 방법 DD).
단계 4: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -(1-이소프로필펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (10 mL) 중 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1-이소프로필펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (510 mg, 0.7424 mmol) 및 DIEA (296.8 mg, 0.4 mL, 2.2964 mmol)의 교반 용액에 50℃의 염화 토실(200 mg, 1.0491 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 아세트산 에틸(25 mL)로 희석하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 생성된 갈색 점성 오일을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; DCM을 사용해 로딩함; 용리제: 5% 아세트산에틸/헥산)로 정제하였다. 원하는 생성물 분획을 합치고, 진공에서 농축시켜 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1-이소프로필펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (398 mg, 85%)을 담황색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 613.2124, 확인된 값 614.3 (M+1)+; 머무름 시간: 8.38분 (LC 방법 DD).
단계 5: (6 R )-6-벤질옥시-12-이소프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
DCE (40 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1-이소프로필펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (398 mg, 0.6162 mmol)의 용액을 질소로 15분 동안 버블링한 다음, Zhan 촉매-1B(120 mg, 0.1633 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 가열하고 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; DCM을 사용해 로딩함; 용리제: 5% 아세트산에틸/헥산)로 정제하였다. 원하는 생성물 분획을 합치고, 진공에서 농축시켜 (6R)-6-벤질옥시-12-이소프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(180 mg, 47%)을 끈적이는 담황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 585.1811, 확인된 값 586.7 (M+1)+; 머무름 시간: 8.17분 (LC 방법 DD).
단계 6: (6 R )-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
EtOH (10 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-12-이소프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(180 mg, 0.3013 mmol) 및 Pd/C(210 mg, 10% w/w, 0.1973 mmol)의 혼합물이 담긴 플라스크를 질소로 퍼징하고 배기하였다. 플라스크에 수소 풍선(0.6074 mg, 6.7489 mL, 0.3013 mmol)을 장착하고, 배기시켰다. 또 다른 수소 풍선(0.6074 mg, 6.7489 mL, 0.3013 mmol)을 장착하고, 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하였다. 케이크를 메탄올로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시키고, 생성된 형광 녹색 오일을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; DCM으로 로딩함; 용리 구배: 20% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하였다. 원하는 생성물 분획을 합치고, 진공에서 농축시켜 (6R)-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (80 mg, 56%)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 467.1756, 확인된 값 468.3 (M+1)+; 머무름 시간: 7.66분 (LC 방법 DD).
단계 7: (6 R )-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 178) 및 (6 R )-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 179)
(6R)-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(78 mg, 0.1669 mmol)의 2개의 부분 입체이성질체를 키랄 초임계 유체 크로마토그래피(컬럼: 셀룰로오스 4 컬럼; 구배: 10% 에탄올(0.1% 디에틸아민 함유)/CO2; 유속= 4 mL/분; 100 bar; 40℃)로 정제하였다. 그런 다음, 각각의 부분 입체이성질체을 함유하는 분획을 감압 하에 농축시켜 2개의 단리된 피크를 수득하였다.
피크 1: 피크 1로부터 수득한 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 용리 구배: 20%~30% EtOAc/디클로로메탄)로 추가로 정제하고 동결 건조시켜 (6R)-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(34 mg, 43%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.63 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.05 (s, 2H), 4.51 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 3.59 - 3.50 (m, 1H), 2.27 - 2.14 (m, 2H), 2.11 - 1.94 (m, 2H), 1.68 - 1.55 (m, 3H), 1.53 - 1.37 (m, 3H), 1.25 - 1.14 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.69 (s, 3F), -79.09 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.1756, 확인된 값 468.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.64분 (LC 방법 C).
피크 2: 피크 2로부터 수득한 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 용리 구배: 20%~30% EtOAc/디클로로메탄)로 추가로 정제하고 동결 건조시켜 (6R)-17-아미노-12-이소프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(26 mg, 33%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.63 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.03 (s, 2H), 4.55 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.14 - 1.95 (m, 3H), 1.85 - 1.73 (m, 1H), 1.62 - 1.34 (m, 5H), 1.31 - 1.21 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.69 (s, 3F), -76.49 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.1756, 확인된 값 468.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.61분 (LC 방법 C).
실시예 100: (6 R )-17-아미노-12-벤질-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 180) 및 (6 R )-17-아미노-12-벤질-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 181)
단계 1: 메틸 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
125 mL의 밀봉된 용기에서, 1-페닐펜트-4-엔-2-아민 (690 mg, 4.279 mmol), DIEA (2 mL, 11.48 mmol), 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.1 g, 3.479 mmol)를 아세토니트릴(28 mL)에서 합치고, 혼합물을 80℃에서 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 메틸 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.25 g, 88%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 409.12494, 확인된 값 410.53 (M+1)+; 머무름 시간: 0.78분 (LC 방법 S).
단계 2: 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
메탄올 (12.5 mL), THF (12.5 mL), 및 물(6.2 mL) 주에서 메틸 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.25 g, 3.054 mmol)를 수산화 리튬(718 mg, 29.98 mmol)과 합치고, 실온에서 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 냉각시키고, 수성층이 산성화될 때까지 1M HCl을 첨가하였다. 아세트산 에틸로 희석하고, 층을 분리하였다. 수성층을 추가의 아세트산에틸(2 X 15 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 추가 정제 없이 농축시켜 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (1.2 g, 99%)을 끈적이는 담황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 395.10928, 확인된 값 396.16 (M+1)+; 머무름 시간: 0.69분. 이 물질을 후속 단계에서 바로 사용하였다(LC 방법 S).
단계 3: 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)- N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
DMF (14 mL) 중 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (375 mg, 0.9486 mmol)의 용액에 DIEA(660 μL, 3.789 mmol) 및 HATU(360 mg, 0.9468 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, DMF (3 mL) 중 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (320 mg, 1.059 mmol)를 적가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 염수와 물로 희석하고, 5분 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(3 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (522 mg, 81%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 679.22296, 확인된 값 680.55 (M+1)+; 머무름 시간: 0.67분 (LC 방법 R).
단계 4: N -(1-벤질부트-3-에닐)-6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (10 mL) 중 6-(1-벤질부트-3-에닐아미노)-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (520 mg, 0.7651 mmol) 및 DIEA(460 μL, 2.641 mmol)의 용액을 60℃로 가열한 다음,, p-톨루엔설포닐 클로라이드(166 mg, 0.8707 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 퀀칭시켰다. 아세트산에틸(3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 N-(1-벤질부트-3-에닐)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (425 mg, 84%)을 황색 반 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 661.2124, 확인된 값 662.6 (M+1)+; 머무름 시간: 0.82분 (LC 방법 R).
단계 5: (6 R )-12-벤질-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
DCE (70 mL) 중 N-(1-벤질부트-3-에닐)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(425 mg, 0.6424 mmol)의 연황색 용액을 통해 질소를 밤새 버블링하였다. 그런 다음, Zhan 촉매-1B(95 mg, 0.1295 mmol)를 3회로 나누어 첨가하고(처음에는 실온에서 첨가함), 5분 동안 질소를 버블링하였다. 그런 다음, 연황색 용액을 75℃(예열한 오일조)에서 2시간 동안 가열하고, 다른 2회는 각각 30분 간격을 두고 첨가하였다. 갈색 용액을 실온으로 냉각시킨 다음, DMSO(10방울)을 첨가하여 촉매를 퀀칭시켰다. 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 디클로로메탄과 함께 실리카 상에 건식 충진하였다. 크로마토그래피(컬럼: 24 g 실리카 컬럼; 구배: 1%~40% MTBE/헵탄)로 정제하여 (6R)-12-벤질-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(76 mg, 19%)을 연황색 오일로서 수득하였다. 이 물질을 후속 단계에 직접 투입하였다.
단계 6: (6 R )-17-아미노-12-벤질-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 180) 및 (6 R )-17-아미노-12-벤질-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 181)
실온의 메탄올 (8 mL) 중 (6R)-12-벤질-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,9,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(75 mg, 0.0829 mmol)의 탈기된 용액에 탄소 상 팔라듐(30 mg, 10% w/w, 0.0282 mmol)을 첨가하였다. 흑색 현탁액을 5분 동안 질소로 퍼징한 다음, 현탁액을 통해 수소를 5분 동안 버블링하였다. 그런 다음, 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 흑색 현탁액을 셀라이트로 여과하고, 진공 하에 농축시켜 황색 형광 오일(59 mg)을 수득하였다. 이 오일을 크로마토그래피(컬럼: 12 g 실리카 컬럼; 구배: 1%~40% MTBE/헵탄)로 정제하여 황색 고형분(48 mg)을 수득하였다. 크로마토그래피(컬럼: 15 g C18 컬럼; 구배: 5%~95% 아세토니트릴/0.02% HCl/물)로 추가로 정제하여 황색 고형분(22 mg)을 수득하였다. 이 고형분을 SFC(컬럼: 셀룰로오스 3 컬럼; 구배: 30% 메탄올/CO2; 유속 = 4 mL/분; 100 bar; 40℃)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체를 분리하였다.
처음 용리되는 피크인 (6R)-17-아미노-12-벤질-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(10.35 mg, 23%)를 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.58 (s, 1H), 7.53 (br. s, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 4H), 7.21 - 7.15 (m, 1H), 6.00 (s, 2H), 4.98 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 3.80 - 3.61 (m, 1H), 3.07 (dd, J = 13.9, 2.9 Hz, 1H), 2.75 (dd, J = 13.9, 10.8 Hz, 1H), 2.55 - 2.41 (m, 1H), 2.36 - 2.21 (m, 1H), 2.11 - 1.96 (m, 1H), 1.75 - 1.41 (m, 6H), 1.16 - 1.00 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.70 (s, 3F), -79.11 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.1756, 확인된 값 516.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.57분 (LC 방법 C).
두 번째 용리되는 피크인 (6R)-17-아미노-12-벤질-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(8.02 mg, 19%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.55 (s, 1H), 7.54 (br. s, 1H), 7.28 - 7.26 (m, 4H), 7.21 - 7.13 (m, 1H), 5.99 (s, 2H), 5.06 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 3.88 - 3.66 (m, 1H), 3.06 (dd, J = 13.9, 3.1 Hz, 1H), 2.77 (dd, J = 13.9, 10.8 Hz, 1H), 2.43 - 2.30 (m, 2H), 2.13 - 2.01 (m, 1H), 1.83 - 1.40 (m, 6H), 1.21 - 1.09 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.67 (s, 3F), -76.35 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 515.1756, 확인된 값 516.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.59분 (LC 방법 C).
실시예 101: (6 R )-17-아미노-12-(4-플루오로페닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 182) 및 (6 R )-17-아미노-12-(4-플루오로페닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 183)의 제조
단계 1: 메틸 6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
플라스크에서, 1-(4-플루오로페닐)부트-3-엔-1-아민 (515 mg, 3.117 mmol), DIEA (1.5 mL, 8.612 mmol), 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (800 mg, 2.53 mmol)를 아세토니트릴(20 mL)에서 혼합하고, 혼합물을 80℃에서 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 메틸 6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (980 mg, 94%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 413.09988, 확인된 값 414.09 (M+1)+; 머무름 시간: 0.76분 (LC 방법 S).
단계 2: 6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
메탄올 (10 mL), THF (10 mL), 및 물(5 mL) 중에서 메틸 6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (980 mg, 2.371 mmol)를 수산화 리튬 (555 mg, 23.18 mmol)과 합치고 실온에서 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 냉각시키고, 수성층이 산성화될 때까지 1 M HCl을 첨가하였다. 아세트산 에틸로 희석하고, 생성된 층을 분리하고, 수성층을 아세트산 에틸(15 mL)로 2회 추가로 추출하였다. 합쳐진 유리물을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 추가 정제 없이 농축시켜 6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (940 mg, 99%)을 주황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 399.08423, 확인된 값 400.8 (M+1)+; 머무름 시간: 0.67분 (LC 방법 S).
단계 3: N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
DMF (16 mL) 중 6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (412 mg, 1.032 mmol)의 용액에 DIEA(720 μL, 4.134 mmol) 및 HATU(392 mg, 1.031 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, DMF (4 mL) 중 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (350 mg, 1.158 mmol)를 적가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응물을 염수와 물로 희석하고, 5분 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(3 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (624 mg, 88%)를 황백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 683.1979, 확인된 값 684.59 (M+1)+; 머무름 시간: 0.83분 (LC 방법 S).
단계 4: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (13 mL) 중 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (624 mg, 0.9129 mmol) 및 DIEA (550 μL, 3.158 mmol)의 용액을 60℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(198 mg, 1.039 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 퀀칭시켰다. 아세트산에틸(3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 골드 컬럼; 구배: 100% 헥산~40% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (526 mg, 87%)을 황색 반 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 665.1873, 확인된 값 666.5 (M+1)+; 머무름 시간: 0.82분 (LC 방법 R).
단계 5: (6 R )-6-벤질옥시-12-(4-플루오로페닐)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
1,2-디클로로에탄 (224 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-[1-(4-플루오로페닐)부트-3-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (500 mg, 0.7512 mmol)의 교반 용액을 질소 가스로 20시간 동안 버블링하여 탈기시켰다. 65℃의 용액에 Zhan 촉매-1B(25 mg, 0.0341 mmol)를 첨가한 다음, 반응물을 이 온도에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 같은 양의 Zhan 촉매-1B(25 mg, 0.0341 mmol)를 첨가하고, 65℃에서 30분 동안 계속 교반하였다. 그런 다음, 같은 양의 Zhan 촉매-1B(25 mg, 0.0341 mmol)를 첨가하고, 65℃에서 2시간 동안 계속 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 몇 방울의 DMSO(약 5~6방울)로 촉매를 퀀칭시키고, 반응물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 용리 구배: 0%~90% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-12-(4-플루오로페닐)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔 (E/Z 혼합물)(235 mg, 41%)을 황백색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 637.156, 확인된 값 638.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.59분 (LC 방법 E). 생성물을 출발 물질로부터 분리하기가 용이하지 않아, 약 83% 순도로 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 6: (6 R )-17-아미노-12-(4-플루오로페닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 182) 및 (6 R )-17-아미노-12-(4-플루오로페닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 183)
(6R)-6-벤질옥시-12-(4-플루오로페닐)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔 (E/Z 혼합물)(240 mg, 0.3765 mmol)을 무수 메탄올(12 mL)에 용해시켰다. 혼합물 내로 질소를 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(245 mg, 5% w/w, 0.1151 mmol)을 첨가하였다. 그런 다음, 풍선으로 수소를 5분 동안 버블링하고, 반응 혼합물을 실온에서 수소 하에 밤새 교반하였다. 수소 풍선을 질소 풍선으로 교체한 다음, 시스템을 공기에 개방하고, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 필터 케이크를 아세트산 에틸(3 X 5 mL)로 세척하고, 여액을 감압 하에 증발시켜 농축시켰다. 잔류물을 10 g의 실리카 겔 상에 건식 로딩하고, 크로마토그래피(컬럼: 24 g 실리카 겔 컬럼; 용리 구배: 0~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 황색 발포성 고형분을 수득하였다(135 mg, LCMS에 의한 97.5% 순도, 67.3% 수율). 이 생성물을 키랄 SFC(컬럼: 셀룰로오스A 4 컬럼; 구배: 10% 메탄올/CO2; 유속 = 3 mL/분; 100 bar; 40℃)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체를 분리하였다. 처음 단리한 피크인 (6R)-17-아미노-12-(4-플루오로페닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(54 mg, 27%)을 황색 고형분 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.66 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 2H), 7.27 - 7.14 (m, 2H), 6.14 (s, 2H), 4.84 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 4.76 - 4.61 (m, 1H), 2.92 - 2.80 (m, 1H), 2.32 - 2.21 (m, 1H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.80 - 1.66 (m, 1H), 1.65 - 1.20 (m, 5H), 1.19 - 1.06 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.26 (s, 3F), -79.09 (s, 3F), -114.87 내지 -114.98 (m, 1F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 519.1505, 확인된 값 520.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.73분 (LC 방법 C).
두 번째로 단리한 부분 입체이성질체인 (6R)-17-아미노-12-(4-플루오로페닐)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (44 mg, 22%)을 황색 고형분 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.66 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.56 - 7.47 (m, 2H), 7.29 - 7.15 (m, 2H), 6.13 (s, 2H), 4.91 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.82 - 4.69 (m, 1H), 2.79 - 2.65 (m, 1H), 2.40 - 2.25 (m, 1H), 2.15 - 2.00 (m, 1H), 1.87 - 1.75 (m, 1H), 1.74 - 1.62 (m, 1H), 1.54 - 1.32 (m, 3H), 1.31 - 1.18 (m, 1H), 1.18 - 1.05 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.23 (s, 3F), -76.30 (s, 3F), -114.88 내지 -115.03 (m, 1F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 519.1505, 확인된 값 520.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.76분 (LC 방법 C).
실시예 102: (6 R )-17-아미노-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 184) 및 (6 R )-17-아미노-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 185)의 제조
단계 1: ( Z )-2-메틸- N -(옥사졸-2-일메틸렌)프로판-2-설핀아미드
디클로로메탄 (250 mL) 중 옥사졸-2-카르브알데히드(10 g, 103.02 mmol)의 용액에 황산 마그네슘(74 g, 614.78 mmol), 피리디늄 p-툴루엔설포네이트(1.3 g, 5.1731 mmol), 및 2-메틸프로판-2-설핀아미드(16.5 g, 136.14 mmol)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 규조토를 통해 여과하고 디클로로메탄(150 mL)으로 세척하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 300 g 컬럼; 구배: 아세트산 에틸/디클로로메탄 0%~30%)로 정제하여 오일을 수득하고, 이를 방치하여 (Z)-2-메틸-N-(옥사졸-2-일메틸렌)프로판-2-설핀아미드(13.2 g, 64%)를 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.51 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 1.28 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 200.0619, 확인된 값 201.4 (M+1)+; 머무름 시간: 1.46분 (LC 방법 Z).
단계 2: 2-메틸- N -(1-옥사졸-2-일펜트-4-에닐)프로판-2-설핀아미드
-78℃의 테트라하이드로푸란 (10 mL) 중 (Z)-2-메틸-N-(옥사졸-2-일메틸렌)프로판-2-설핀아미드 (500 mg, 2.4968 mmol)의 냉각된 용액에 트리메틸알루미늄(2.5 mL의 2 M, 5 mmol)/헵탄을 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반한 다음, 디에틸 에테르 중 브로모(부트-3-에닐)마그네슘 (7.5 mL의 0.5 M, 3.75 mmol)을 적가하였다. HPLC 분석에 의해 출발 물질의 완전한 소모가 관찰될 때까지 반응물을 -78℃에서 유지시켰다. 반응물을 포화 염화 암모늄(25 mL)으로 서서히 퀀칭시키고, 아세트산 에틸(2 X 25 mL)로 추출하고, 염수(25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 설핀아미드 2-메틸-N-(1-옥사졸-2-일펜트-4-에닐)프로판-2-설핀아미드 (450 mg, 70%)를 내지 갈색을 띤 미정제 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 256.1245, 확인된 값 257.4 (M+1)+; 머무름 시간: 1.57분 (LC 방법 Z).
단계 3: 1-옥사졸-2-일펜트-4-엔-1-아민 (염산염)
메탄올 (10 mL) 중 2-메틸-N-(1-옥사졸-2-일펜트-4-에닐)프로판-2-설핀아미드 (1.01 g, 3.9397 mmol)의 용액에 실온의 디에틸 에테르 중 염산(10 mL의 2 M, 20 mmol)을 적가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거한 다음, 생성된 회색 고형분을 디에틸 에테르/메탄올 9/1(50 mL)에 현탁한 다음, 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 회색 현탁액을 여과하고, 디에틸 에테르(25 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 1-옥사졸-2-일펜트-4-엔-1-아민 (염산염)(700 mg, 94%)을 연황색 분말로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (br s, 3H), 8.24 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 5.83 - 5.65 (m, 1H), 5.09 - 4.91 (m, 2H), 4.52 (br s, 1H), 2.12 - 1.97 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 152.095, 확인된 값 153.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.11분 (LC 방법 BB).
단계 4: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로- N -(1-옥사졸-2-일펜트-4-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (8.4 mL) 중 2-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸 (420 mg, 0.8034 mmol) 및 1-옥사졸-2-일펜트-4-엔-1-아민 (염산염)(170 mg, 0.9011 mmol)의 용액에 실온의 디이소프로필아민(404.32 mg, 560 μL, 3.9957 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 50 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 헵탄/디클로로메탄, 0%~20%)로 정제하였다. 원하는 분획을 수집하고, 용매를 감압 하에 농축시켜 2개의 부분 입체이성질체의 갈색을 띤 혼합물로서, 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-N-(1-옥사졸-2-일펜트-4-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (370 mg, 72%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.63 (s, 1H), 8.58 (dd, J = 7.5, 6.2 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.49 - 7.22 (m, 5H), 7.13 (s, 1H), 5.96 - 5.69 (m, 2H), 5.63 - 5.49 (m, 1H), 5.36 (dd, J = 17.0, 0.9 Hz, 1H), 5.23 (dd, J = 10.3, 1.5 Hz, 1H), 4.95 - 4.85 (m, 2H), 4.78 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 10.6, 8.4 Hz, 1H), 3.32 - 3.25 (m, 2H), 2.31 - 2.16 (m, 2H), 2.16 - 1.97 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 638.1712, 확인된 값 639.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.43분 (LC 방법 E).
단계 5: (6 R )-6-벤질옥시-17-니트로-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
500 mL 오븐 건조시킨 둥근 바닥 플라스크에서, 디클로로에탄 (200 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-N-(1-옥사졸-2-일펜트-4-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (370 mg, 0.5795 mmol)의 탈기한 용액을 질소 분위기 하에 70℃로 가열하였다. 그런 다음, Zhan 촉매-1B(52 mg, 0.0709 mmol)를 15분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃로 가열하고, 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 2% 아세트산 에틸/디클로로메탄의 등용매 구배)로 정제하였다. 원하는 분획을 수집하고, 용매를 감압 하에 농축시켜 연황색 발포체로서 및 2개의 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔 (E/Z 혼합물)(162 mg, 46%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.70 - 8.56 (m, 2H), 8.22 - 8.16 (m, 1H), 7.39 - 7.22 (m, 6H), 6.03 - 5.78 (m, 1H), 5.75 - 5.47 (m, 2H), 4.87 - 4.45 (m, 2H), 3.31 - 3.11 (m, 1H), 2.94 - 2.75 (m, 1H), 2.41 - 2.04 (m, 3H), 1.98 - 1.74 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.83 (s, 3F), -62.92 (s, 3F), -73.60 (s, 3F), -73.70 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 610.1399, 확인된 값 611.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.52분 (LC 방법 E).
단계 6: (6 R )-17-아미노-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 184) 및 (6 R )-17-아미노-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 185)
(6R)-6-벤질옥시-17-니트로-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔 (E/Z 혼합물)(160 mg, 0.2621 mmol)을 메탄올(10 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 5분 동안 질소로 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(170 mg, 5% w/w, 0.0799 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 혼합물을 역상 C18 크로마토그래피(컬럼: 15.5 g 컬럼; 구배: 5%~95%의 아세토니트릴(0.1% 포름산)/물(0.1% 포름산))로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체의 혼합물을 수득하였다. 이들 부분 입체이성질체를 키랄 SFC(컬럼: 40℃의 셀룰로오스 1 컬럼(21.2 mm x 250 mm, 5 μm 입자 크기); 용리 구배: 10% 메탄올/CO2; 유속: 4 mL/분)로 정제하여 2개의 개별 거울상이성질체를 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(17 mg, 13%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.25 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 5.99 (d, J = 4.9 Hz,1H), 5.08 - 4.97 (m, 1H), 2.38 - 2.26 (m, 1H), 2.16 - 2.04 (m, 1H), 1.87 - 1.68 (m, 2H), 1.68 - 1.34 (m, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.35 (s, 3F), -76.50 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 492.1345, 확인된 값 492.9 (M+1)+; 머무름 시간: 3.1분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-12-옥사졸-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(18 mg, 14%)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.14 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.98 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.99 - 4.88 (m, 1H), 2.72 - 2.59 (m, 1H), 2.34 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.66 - 1.45 (m, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.39 (s, 3F), -79.05 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 492.1345, 확인된 값 492.9 (M+1)+; 머무름 시간: 3.08분 (LC 방법 C).
실시예 103: (6 R )-17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올(화합물 186)의 제조
단계 1: 터트- 부틸 2,2-디메틸아지리딘-1-카르복실레이트
디에틸 에테르 (100 mL) 중 터트-부틸 N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)카르바메이트 (5.010 g, 25.943 mmol)의 용액 내로 p-TsCl(5.959 g, 31.257 mmol)을 첨가하였다. 용액을 얼음조에서 냉각시켰다. 수산화 칼륨(17.302 g, 262.13 mmol)을 여러 개의 배치로 나누어 반응 혼합물에 첨가하였다. 그런 다음, 반응물을 가열하여 환류시키고, 1시간 동안 교반하였다. 다량의 백색 침전물이 형성되었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 디에틸 에테르(100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 얼음물(100 mL)에 부었다. 2개의 층을 분리하고, 유기층을 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜(35℃ 조온도, 110 Torr 진공) 터트-부틸 2,2-디메틸아지리딘-1-카르복실레이트 (4.49 g, 94%)를 맑은 액체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 2.03 (s, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.27 (s, 6H) ppm.
단계 2: 벤질 N -[[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바메이트
디옥산 (50 mL) 및 물(50 mL) 중 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 (4.914 g, 17.047 mmol) 및 NaHCO3 (4.31 g, 51.305 mmol)의 용액에 0℃의 벤질 클로로포르메이트(8.7235 g, 7.3 mL, 51.136 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 얼음조에서 1시간 동안 교반하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성층을 아세트산에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~60% 에테르/헥산)로 정제하여 벤질 N-[[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바메이트 (9.2 g, 100%)를 맑은 겔로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 422.1453, 확인된 값 423.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.43분 (LC 방법 G).
단계 3: 벤질 N -[[(2 R )-2-벤질옥시-5-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜탄오일]아미노]카르바메이트
무수 THF (100 mL) 중 벤질 N-[[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]아미노]카르바메이트 (9.2 g, 16.989 mmol)의 용액 내로 실온의 9-보라바이시클로[3.3.1]노난(THF 중 170 mL의 0.5 M, 85 mmol)을 적가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃로 냉각시켰다. 1 N NaOH(85 mL, 85 mmol) 및 H2O2(6.66 g, 20 mL의 30% w/w, 58.739 mmol)의 수용액을 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(200 mL)로 희석하고, 포화 티오황산 나트륨(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기 용액을 무수 황산 마그네슘으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~60% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 벤질 N-[[(2R)-2-벤질옥시-5-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜탄오일]아미노]카르바메이트 (6.405 g, 86%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 440.1559, 확인된 값 441.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.95분 (LC 방법 G).
단계 4: 터트- 부틸 N -[2-[(4 R )-4-벤질옥시-4-(벤질옥시카르보닐아미노카르바모일)-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트
반응 바이알에 벤질 N-[[(2R)-2-벤질옥시-5-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜탄오일]아미노]카르바메이트 (6.405 g, 14.543 mmol) 및 터트-부틸 2,2-디메틸아지리딘-1-카르복실레이트 (21.2 g, 123.81 mmol)를 채웠다. 반응물을 80℃로 가열하고, 14시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헥산)로 직접 정제하여 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-4-(벤질옥시카르보닐아미노카르바모일)-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (2.868 g, 32%)를 맑은 액체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 611.2818, 확인된 값 612.4 (M+1)+; 머무름 시간: 3.72분 (LC 방법 G).
단계 5: 터트- 부틸 N -[2-[(4 R )-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-(하이드라진카르보닐)펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트
아세트산 에틸 (100 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-4-(벤질옥시카르보닐아미노카르바모일)-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (1.912 g, 3.126 mmol)의 용액 내로 10% Pd/C(630 mg, 10% w/w, 0.592 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 1 atm의 수소 (수소 풍선) 아래에서 3시간 동안 교반하였다. 여과에 의해 촉매를 제거하였다. 여액을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~60% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-(하이드라진카르보닐)펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (1.083 g, 73%)를 맑은 겔로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.95 (s, 1H), 7.51 - 7.31 (m, 5H), 4.81 (s, 1H), 4.75 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.45 - 3.37 (m, 1H), 3.37 - 3.27 (m, 1H), 3.13 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 2.43 - 2.15 (m, 2H), 1.65 - 1.36 (m, 11H), 1.15 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 477.2451, 확인된 값 478.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.07분 (LC 방법 G).
단계 6: 터트- 부틸 N -[2-[(4 R )-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-[[[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보닐]아미노]카르바모일]펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트
무수 DMF (4.5 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-(하이드라진카르보닐)펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (147.5 mg, 0.3089 mmol) 및 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (92 mg, 0.3649 mmol)의 용액에 TEA(312.18 mg, 0.43 mL, 3.0851 mmol)를 첨가하고, 이어서 아세트산 에틸 중 무수 프로필포스폰산 용액(197.76 mg, 0.37 mL의 50% w/w, 0.3108 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(50 mL)로 희석하고, 1 N HCl(10 mL), 염수(3 X 20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세톤/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-[[[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보닐]아미노]카르바모일]펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (201 mg, 91%)를 황색 겔로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 711.2339, 확인된 값 712.6 (M+1)+; 머무름 시간: 3.56분 (LC 방법 G).
단계 7: 터트- 부틸 N -[2-[(4 R )-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-[5-[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트
아세토니트릴 (4 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-[[[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보닐]아미노]카르바모일]펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (201 mg, 0.2825 mmol) 및 DIEA (363.58 mg, 0.49 mL, 2.8132 mmol)의 용액 내로 p-TsCl(59 mg, 0.3095 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(50 mL)로 희석하고 포화 수성 염화암모늄(2 X 10 mL) 및 염수(10 mL)로 세척하였다. 유기 용액을 무수 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~100% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-[5-[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (86.6 mg, 41%)를 갈색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 693.2233, 확인된 값 694.4 (M+1)+; 머무름 시간: 3.84분 (LC 방법 G).
단계 8: 터트- 부틸 N -[2-[(4 R )-4-벤질옥시-4-[5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트
무수 THF (1 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-5,5,5-트리플루오로-4-[5-[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (86.6 mg, 0.1149 mmol)의 용액 내로 트리페닐포스핀(122 mg, 0.4651 mmol)을 첨가하고, 이어서 0℃의 2,2,2-트리클로로아세토니트릴(33.120 mg, 0.023 mL, 0.2294 mmol)을 적가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(15 mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-4-[5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (21.3 mg, 26%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.70 (s, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 2H), 7.39 - 7.33 (m, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 4.82 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.63 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.42 - 3.30 (m, 2H), 3.11 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.55 - 2.38 (m, 2H), 1.87 - 1.77 (m, 1H), 1.77 - 1.65 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.13 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 711.1894, 확인된 값 712.6 (M+1)+; 머무름 시간: 4.12분 (LC 방법 G).
단계 9: (6 R )-6-벤질옥시-11,11-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔
무수 DCM (1 mL) 중 터트-부틸 N-[2-[(4R)-4-벤질옥시-4-[5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜톡시]-2-메틸-프로필]카르바메이트 (21.3 mg, 0.0299 mmol)의 용액 내로 실온의 TFA(740 mg, 0.5 mL, 6.4899 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM(30 mL)으로 희석하고, 포화 수성 중탄산나트륨(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하였다. 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 건조제를 여과하였다. DIEA(14.840 mg, 0.02 mL, 0.1148 mmol)를 DCM 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 모든 휘발성 물질을 진공 하에 제거하여 (6R)-6-벤질옥시-11,11-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔 (18 mg, 99%)을 황색 겔로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 575.1603, 확인된 값 576.4 (M+1)+; 머무름 시간: 3.8분. 미정제 생성물을 정제 없이 다음 단계 반응에 사용하였다(LC 방법 G).
단계 10: (6 R )-17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올 (화합물 186)
에탄올 (5 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-11,11-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔 (18 mg, 0.0297 mmol)의 용액 내로 10% Pd/C(20 mg, 10% w/w, 0.0188 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 1 atm의 수소 가스 하에 3일 동안 교반하였다. 촉매를 셀라이트 패드를 통해 여과하여 제거하고, 여액을 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~100% 아세트산 에틸/헥산)로 직접 정제하여 (6R)-17-아미노-11,11-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-6-올 (7.3 mg, 53%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.29 (s, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.75 (q, J = 7.6, 7.6, 7.5 Hz, 1H), 3.69 - 3.55 (m, 2H), 3.18 (s, 1H), 2.53 - 2.36 (m, 1H), 2.36 - 2.17 (m, 1H), 1.96 - 1.77 (m, 1H), 1.45 - 1.35 (m, 1H), 1.25 (s, 3H), 1.18 (s, 3H) ppm. 2개의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 455.1392, 확인된 값 456.4 (M+1)+; 머무름 시간: 1.79분 (LC 방법 H).
실시예 104: (6 R ,8 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,8-디올 (화합물 187) , (6 R ,8 S )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,8-디올 (화합물 188), (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올 (거울상이성질체 1)(화합물 189), 및 (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올 (거울상이성질체 2)(화합물 190)의 제조
단계 1: (6 R )-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-8-올 및 (6 R )-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-올 (위치이성질체성 부분 입체이성질체의 혼합물)
보란 테트라하이드로푸란 복합체(2.5 mL, THF 중 1 M 용액, 2.5 mmol) 중 (6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(200 mg, 0.35 mmol)의 용액을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 물(1.3 mL)을 0℃에서 적가하였다(발열 반응). 수성 수산화 나트륨(0.4 mL, 2 M, 0.8 mmol) 및 물 중 과산화 수소(524.48 mg, 1.35 mL, 5.3967 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 다음, 아세트산 에틸(3 X 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 황색 고형분으로서 및 위치이성질체성 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-8-올 and (6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-올(위치이성질체성 부분 입체이성질체의 혼합물)(305 mg, 67%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 589.176, 확인된 값 589.9 (M+1)+; 머무름 시간: 2.26분 (LC 방법 C).
단계 2: (6 R ,8 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,8-디올 (화합물 187), (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올 (부분 입체이성질체의 혼합물) 및 (6 R ,8 S )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,8-디올 (화합물 188)
실온의 메탄올 (6 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-8-올 및 (6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-9-올(위치이성질체성 부분 입체이성질체의 혼합물)(200 mg, 0.2701 mmol)의 혼합물의 탈기된 용액에 10% 탄소 상 팔라듐(60 mg, 0.5638 mmol)을 첨가하였다. 흑색 현탁액을 5분 동안 질소로 퍼징한 다음, 현탁액을 통해 수소를 5분 동안 버블링하였다. 그런 다음, 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 흑색 현탁액을 질소로 퍼징한 다음, 셀라이트로 여과하고, 이를 DCM(3 X 10 mL)으로 세척하고, 여액을 진공 하에 농축시켰다. 역상 HPLC(컬럼: 컬럼 1(50 g C18 컬럼); 구배: 1%~85% 아세토니트릴/물(+ 0.02% HCl) )로 정제하여 3개의 생성물을 수득하였다:
컬럼 1로부터 처음 용리되는 위치이성질체/거울상이성질체는 여전히 불순물로 오염되었고, 이를 역상 HPLC(컬럼: 컬럼 2(50 g C18 컬럼); 구배: 1%~85% 아세토니트릴/물(+ 0.02% HCl))로 정제하여 황색 고형분으로서, (6R,8R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,8-디올 (4.4 mg, 34%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 469.15485, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.85분 (LC 방법 C).
컬럼 1로부터 두 번째로 용리되는 생성물 피크를 역상 HPLC(컬럼: 컬럼 3(15 g, C18 컬럼); 구배: 5%~80% 아세토니트릴/물(+ 0.02% HCl))로 정제하여 14.5 mg의 황색 고형분 및 분리할 수 없는 혼합물로서 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올 (부분 입체이성질체의 혼합물)을 수득하였다. 이 물질을 후속 단계에 직접 투입하였다.
컬럼 1로부터 세 번째로 용리되는 위치이성질체/거울상이성질체인 (6R,8S)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,8-디올 (66 mg, 52%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.50 (s, 1H), 4.40 (td, J = 9.2, 4.9 Hz, 1H), 3.54 (td, J = 12.5, 4.5 Hz, 1H), 2.66 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 2.11 (dd, J = 14.8, 10.0 Hz, 1H), 1.77 - 1.46 (m, 4H), 1.43 (s, 3H), 1.41 - 1.35 (m, 1H), 1.31 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -63.87 (s, 3F), -81.07 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.21분 (LC 방법 C).
단계 3: (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올 (거울상이성질체 1)(화합물 189) 및 (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올 (거울상이성질체 2)(화합물 190)
부분 입체이성질체 혼합물인 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올(부분 입체이성질체의 혼합물)(38 mg, 0.0672 mmol)을 SFC(컬럼: Lux 셀룰로오스 1 컬럼(150 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기); 용리 구배: 7% MeOH/CO2)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올 (거울상이성질체 1)(18.9 mg, 60%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 4.96 - 4.77 (m, 1H), 3.40 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 2.56 (dd, J = 13.4, 5.1 Hz, 1H), 2.28 - 2.13 (m, 1H), 2.21 (dd, J = 13.4, 9.8 Hz, 1H), 1.97 - 1.83 (m, 1H), 1.66 - 1.47 (m, 5H), 1.46 - 1.35 (m, 1H), 1.26 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD3OD) δ -65.52 (s, 3F), -79.65 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.11분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,9-디올 (거울상이성질체 2)(10.3 mg, 32%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 4.78 - 4.65 (m, 1H), 3.40 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 3.02 (dd, J = 14.1, 6.2 Hz, 1H), 2.21 - 2.08 (m, 1H), 2.08 - 1.98 (m, 1H), 1.96 - 1.80 (m, 1H), 1.66 - 1.36 (m, 6H), 1.26 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD3OD) δ -65.54 (s, 3F), -82.01 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.14분 (LC 방법 C).
단계 4: 결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A의 고형분 형태 특성 분석
A. 단결정 X-선 회절
결정질 화합물 188 디클로로메탄 용매화물 형태 A의 단결정을 디클로로메탄으로부터 성장시켰다. Cu Kα 방사선(λ = 1.54178 Å) 및 CPAD 검출기가 구비된 Bruker 회절계를 이용해 100 K에서의 X-선 회절 데이터를 획득하였다. SHELX 프로그램(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)을 사용하여 구조를 해석하고 정제하였으며, 결과는 아래 표 9에 요약되어 있다.
실시예 105: (6 R )-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 191) 및 (6 R )-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 192)의 제조
단계 1: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -(1-시클로프로필펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (6 mL) 중 2-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸 (158 mg, 0.3022 mmol)의 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (150 mg, 0.2022 mL, 1.1606 mmol)을 첨가하고, 이어서 아세토니트릴 (1 mL) 중 1-시클로프로필펜트-4-엔-1-아민(50 mg, 0.3993 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 실리카 겔(약 1 g) 상에 건식 로딩하고, 플래쉬 크로마토그래피(컬럼: 24 g 실리카 겔; 용리 구배: 10%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1-시클로프로필펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(183 mg, 99%)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.57 (s, 1H), 7.42 - 7.30 (m, 5H), 6.05 - 5.91 (m, 1H), 5.84 - 5.70 (m, 2H), 5.35 - 5.21 (m, 2H), 5.05 - 4.92 (m, 2H), 4.82 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.65 (dd, J = 10.4, 3.3 Hz, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 3.31 - 3.17 (m, 2H), 2.23 - 2.12 (m, 2H), 1.93 - 1.76 (m, 2H), 1.02 - 0.89 (m, 1H), 0.68 - 0.59 (m, 1H), 0.57 - 0.48 (m, 1H), 0.45 - 0.28 (m, 2H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.59 (s, 3F), -73.44 내지 -73.58 (m, 3F) ppm. NMR은 1:1 부분 입체이성질체의 혼합물을 보여준다. 생성물은 LCMS 상에서 이온화되지 않았다. 머무름 시간: 2.41분 (LC 방법 E).
단계 2: (6 R )-6-벤질옥시-12-시클로프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔
건조된 250 mL 플라스크에 1,2-디클로로에탄 (100 mL)을 채웠다. 용매를 질소로 30분 동안 버블링하였다. 질소를 부드럽게 흘리면서 Zhan 촉매-1B(27 mg, 0.0368 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 10분 동안 버블링하고, 66℃로 가열하였다. 질소를 버블링한, 1,2-디클로로에탄 (20 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1-시클로프로필펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(183 mg, 0.2992 mmol)의 용액을 1시간에 걸쳐 적가하였다. 첨가가 끝난 후, 혼합물을 질소로 6분 동안 버블링하였다. 혼합물을 66℃에서 0.5시간 동안 계속 교반하고, 실온으로 냉각시킨 다음, 5방울의 DMSO를 첨가하여 촉매를 퀀칭시켰다. 혼합물을 실리카 겔(3 g) 상에서 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피(컬럼: 40 g 실리카 겔; 용리 구배: 5%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-12-시클로프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔(132 mg, 76%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.52 - 8.43 (m, 1H), 7.45 - 7.28 (m, 5H), 5.95 - 5.69 (m, 2H), 5.63 - 5.38 (m, 1H), 5.02 - 4.85 (m, 1H), 4.72 - 4.51 (m, 1H), 3.45 - 3.27 (m, 1H), 3.19 - 2.63 (m, 2H), 2.49 - 2.15 (m, 2H), 2.13 - 1.89 (m, 1H), 1.80 - 1.65 (m, 1H), 1.19 - 0.92 (m, 2H), 0.69 - 0.44 (m, 2H), 0.34 - 0.17 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.83 내지 -64.98 (m, 3F), -72.69 내지 -74.13 (m, 3F) ppm.
단계 3: (6 R )-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
(6R)-6-벤질옥시-12-시클로프로필-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔 (132 mg, 0.2262 mmol), 10% 탄소 상 팔라듐(50% wet)(41 mg, 0.0193 mmol), 및 메탄올(6 mL)의 혼합물을 수소 분위기 (풍선) 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 규조토를 통해 여과하고 아세트산 에틸로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 수소 분위기 (풍선) 하에 실온에서 10% 탄소 상 팔라듐(51 mg, 0.024 mmol) 및 메탄올(6 mL)로 잔류물을 밤새 다시 수소화하였다. 혼합물을 규조토를 통해 여과하고, 아세트산 에틸로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 용리 구배: 10%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (6R)-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(100 mg, 95%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33 - 7.29 (m, 1H), 4.81 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 3.93 (br. s, 1H), 2.85 - 2.60 (m, 2H), 2.48 - 1.98 (m, 3H), 1.87 - 1.46 (m, 7H), 1.39 - 1.31 (m, 1H), 1.04 - 0.92 (m, 1H), 0.78 - 0.68 (m, 1H), 0.56 - 0.40 (m, 2H), 0.24 - 0.10 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.12 (s, 3F), -76.49 내지 -81.49 (m, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.1599, 확인된 값 466.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.49분 (LC 방법 C).
단계 4: (6 R )-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 191) 및 (6 R )-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 192)
(6R)-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(130 mg, 0.2793 mmol)의 2개의 부분 입체이성질체를 키랄 SFC 방법(컬럼: 아밀로오스 1 컬럼; 구배: 8% 메탄올/CO2 이동상; 유속 = 4 mL/분; 컬럼 온도 = 40℃)으로 분리하였다. 그런 다음, 각각의 부분 입체이성질체를 함유하는 분획을 감압 하에 농축시키고, 동결 건조시켜(아세토니트릴/물 혼합물) 2개의 부분 입체이성질체를 수득하였다.
처음 용리되는 부분 입체이성질체인 (6R)-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(31 mg, 24%)을 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.62 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.07 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 2.89 - 2.80 (m, 1H), 2.49 - 2.41 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 1H), 2.13 - 2.02 (m, 1H), 1.79 - 1.58 (m, 3H), 1.56 - 1.36 (m, 3H), 1.34 - 1.21 (m, 1H), 1.09 - 0.97 (m, 1H), 0.73 - 0.63 (m, 1H), 0.48 - 0.33 (m, 2H), 0.14 - 0.04 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.73 (s, 3F), -76.29 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.1599, 확인된 값 466.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.49분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리도는 부분 입체이성질체인 (6R)-17-아미노-12-시클로프로필-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(28 mg, 21%)을 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.62 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.03 (s, 2H), 4.99 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 2.81 - 2.71 (m, 1H), 2.63 - 2.53 (m, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 2.07 - 1.94 (m, 1H), 1.71 - 1.39 (m, 6H), 1.23 - 1.13 (m, 1H), 1.08 - 0.96 (m, 1H), 0.71 - 0.60 (m, 1H), 0.48 - 0.36 (m, 2H), 0.15 - 0.05 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.73 (s, 3F), -79.14 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 465.1599, 확인된 값 466.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.5분 (LC 방법 C.
실시예 106: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로헥산]-6-올(화합물 193)의 제조
단계 1: 메틸 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
플라스크에서, 1-알릴시클로헥산아민 (515 mg, 3.699 mmol), DIEA (1.7 mL, 9.76 mmol), 및 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (950 mg, 3.004 mmol)를 아세토니트릴(23 mL)에서 합치고, 혼합물을 80℃로 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고 진공에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸(50 mL)로 희석하고, 염수(2 X 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~30% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 메틸 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(899 mg, 77%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 387.1406, 확인된 값 388.53 (M+1)+; 머무름 시간: 0.83분 (LC 방법 S).
단계 2: 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
MeOH (9 mL), THF (9 mL), 및 물(4.5 mL) 중에서 메틸 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(899 mg, 2.321 mmol)를 LiOH(500 mg, 20.88 mmol)와 함치고, 실온에서 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 냉각시키고, 수성층이 산성화될 때까지 1 M HCl을 첨가하였다. 아세트산 에틸로 희석하고, 층을 분리하고, 수성층을 추가의 아세트산 에틸(2 X 15 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 추가 정제 없이 농축시켜 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (860 mg, 99%)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 373.12494, 확인된 값 374.1 (M+1)+; 머무름 시간: 0.74분 (LC 방법 S).
단계 3: 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]- N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
DMF (14.5 mL) 중 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (390 mg, 1.045 mmol)의 용액에 DIEA(720 μL, 4.134 mmol) 및 HATU(397 mg, 1.044 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, DMF (3 mL) 중 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드(352 mg, 1.164 mmol)를 적가하였다. 반응물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 반응물을 염수와 물로 희석하고, 5분 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산에틸(3 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 100% 헥산~70% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (575 mg, 84%)를 끈적이는 연주황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 657.2386, 확인된 값 658.3 (M+1)+; 머무름 시간: 0.76분 (LC 방법 R).
단계 4: (9 R )-9-벤질옥시-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)스피로[2,11,12,18-테트라아자바이시클로[12.3.1]옥타데카-1(18),5,14,16-테트라엔-3,1'-시클로헥산]-10,13-디온( E/Z 혼합물)
DCE (180 mL) 중 6-[(1-알릴시클로헥실)아미노]-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(575 mg, 0.899 mmol)의 연황색 용액을 통해 질소를 밤새 버블링하였다. 그런 다음, Zhan 촉매-1B(130 mg, 0.1772 mmol)를 3번에 나누어 첨가하고(처음에는 실온에서 첨가함), 질소를 3분 동안 버블링하였다. 그런 다음, 연녹색 용액을 60℃(예열한 오일조)에서 교반하고, 다른 2번의 양은 각각 30분 간격으로 첨가하였다. 마지막 촉매를 첨가한 후, 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 갈색 용액을 실온으로 냉각시킨 다음, DMSO(10방울)을 첨가하여 촉매를 퀀칭시켰다. 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 정상상 크로마토그래피(컬럼: 24 g 실리카 컬럼; 구배: 1%~40% MTBE/헵탄)로 정제하여 (9R)-9-벤질옥시-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)스피로[2,11,12,18-테트라zabi시클로[12.3.1]옥타데카-1(18),5,14,16-테트라ene-3,1'-시클로헥산]-10,13-디온 (E/Z 혼합물)(446 mg, 70%)을 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.57 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.49 - 7.29 (m, 4H), 7.09 - 6.98 (m, 2H), 5.70 - 5.41 (m, 2H), 5.18 (br. s., 1H), 4.63 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.27 (dd, J = 14.2, 10.9 Hz, 1H), 2.88 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 2.32 - 2.15 (m, 1H), 2.09 - 1.97 (m, 1H), 1.91 (dd, J = 14.2, 5.1 Hz, 1H), 1.79 - 1.47 (m, 4H), 1.45 - 1.12 (m, 7H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 629.2073, 확인된 값 629.9 (M+1)+; 머무름 시간: 3.64분 (LC 방법 C).
단계 5: (6 R )-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,1'-시클로헥산] ( E/Z 혼합물)
DCM (3.6 mL) 중 (9R)-9-벤질옥시-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)스피로[2,11,12,18-테트라zabi시클로[12.3.1]옥타데카-1(18),5,14,16-테트라ene-3,1'-시클로헥산]-10,13-디온 (E/Z 혼합물)(260 mg, 0.3717 mmol) 및 1,4-디아자바이시클로[2.2.2]옥탄(60 mg, 0.5349 mmol)의 용액을 실온의 DCM (2.6 mL) 중 25% 2-클로로-1,3-디메틸-4,5-디하이드로이미다졸-1-윰;클로라이드(73 mg, 0.4318 mmol)의 용액으로 처리하였다. 이미다졸륨 중간체의 형성은 10분 후에 완료되었다. DCM을 증발시키고, 잔류물을 툴루엔(8 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 진한 색상의 혼합물을 물(3 mL)로 퀀칭시키고, MTBE(3 X 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,1'-시클로헥산] (E/Z 혼합물)(320 mg, 115%, 물질은 미정제 상태이고 불순물을 함유함)을 갈색 미정제 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 611.1967, 확인된 값 612.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.4분. 이 물질을 후속 단계에 바로 투입하였다(LC 방법 BB).
단계 6: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로헥산]-6-올 (화합물 193)
실온의 메탄올 (2 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,1'-시클로헥산] (E/Z 혼합물)(40 mg, 0.0515 mmol)의 탈기한 갈색 미정제 용액에 탄소 상 팔라듐(10 mg, 0.0094 mmol)을 첨가하였다. 흑색 혼합물을 통해 질소를 버블링한 다음, 혼합물을 통해 수소(1 atm)를 5분 동안 버블링하였다. 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 흑색 현탁액을 질소로 5분 동안 퍼징한 다음, 셀라이트로 여과하였다. 케이크를 DCM(3 x 10 mL)으로 세척하였다. 황색의 형광 여액을 진공 하에 농축시켜 미정제 황색 고형분을 수득하였다. 유사한 방식으로 제조한 미정제 생성물의 두 번째 로트를 이 로트와 합쳐, 미정제 (6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로헥산]-6-올 (242 mg, 0.4071 mmol)을 수득한 다음, 이를 역상 크로마토그래피(컬럼: 50 g C18 컬럼; 구배: 5%~85% 아세토니트릴/0.02% HCl/물)로 정제하여 황색 고형분으로서, (6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,1'-시클로헥산]-6-올 (162 mg, 79%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.54 (s, 1H), 3.10 - 2.89 (m, 1H), 2.46 - 2.28 (m, 2H), 2.18 - 2.05 (m, 1H), 1.94 - 1.84 (m, 1H), 1.83 - 1.44 (m, 13H), 1.44 - 1.33 (m, 1H), 1.30 - 1.17 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD3OD) δ -65.27 (s, 3F), -80.95 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 493.1912, 확인된 값 494.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.77분 (LC 방법 C).
실시예 107: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (거울상이성질체 1, 시스 디올)(화합물 194) 및 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (거울상이성질체 2, 시스 디올)(화합물 195)의 제조
단계 1: 에틸 3- 터트 -부톡시-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트 ( 시스 디올)
화염 건조된 플라스크에 2-알릴옥시-2-메틸프로판(359 mg, 2.7982 mmol), THF(6.5 mL), 및 TMEDA(286.75 g, 0.37 mL, 2.4676 mmol)를 채웠다. 그런 다음, 플라스크를 드라이아이스-아세톤 조에서 냉각시키고, 세크-부틸리튬의 시클로헥산 용액(1.76 mL의 1.4 M, 2.464 mmol)을 적가하여 처리하였다. 45분 후, 트리메틸알루미늄(1.23 mL의 2 M 헵탄 용액, 2.46 mmol)을 첨가하고, 반응물을 45분 동안 추가로 교반하였다. 에틸 3,3,3-트리플루오로-2-옥소-프로파노에이트(333.58 g, 0.26 mL, 1.9612 mmol)를 첨가하고, 반응물을 냉각조에서 4시간 동안 추가로 교반하였다. 반응물을 1 N 수성 HCl(약 40 mL)로 퀀칭시키고, 실온에서 몇 분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 디에틸 에테르(1 X 40 mL, 2 X 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(2 X 20 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 용리 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서 및 메이저 라세미 시스 이성질체로서, 에틸 3-터트-부톡시-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트 (cis diol)(341 mg, 57%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 5.87 (ddd, J = 17.6, 10.0, 8.1 Hz, 1H), 5.31 - 5.20 (m, 2H), 4.55 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.38 - 4.23 (m, 2H), 3.85 (s, 1H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.23 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -73.35 (s, 3F) ppm. 이 생성물은 약 6.5%의 라세미 트랜스 디올 이성질체로 오염되었다.
단계 2: 에틸 2-벤질옥시-3- 터트 -부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트 ( 시스 디올)
DMF (50 mL) 중 에틸 3-터트-부톡시-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트(시스 디올)(3.24 g, 11.398 mmol)의 용액을 얼음조에서 냉각시키고, 수소화 나트륨(563 mg, 광유 중 60% w/w, 14.076 mmol)으로 처리하였다. 40분 후, 브로모메틸 벤젠(2.6459 g, 1.84 mL, 15.47 mmol)을 첨가하고, 반응물을 점진적으로 실온까지 가온시키고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물에 물(450 mL)을 첨가하고, 수성층을 MTBE(4 X 150 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(2 X 150 mL), 염수(150 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 220 g 컬럼; 용리 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서, 에틸 2-벤질옥시-3-터트-부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트 (cis diol)(3.86 g, 83%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.46 - 7.41 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 1H), 5.98 (ddd, J = 17.9, 9.3, 8.6 Hz, 1H), 5.27 - 5.22 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.92 - 4.85 (m, 1H), 4.79 - 4.73 (m, 1H), 4.59 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.28 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.20 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -65.50 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 374.1705, 확인된 값 397.2 (M+Na)+; 머무름 시간: 2.45분 (LC 방법 E).
단계 3: 2-벤질옥시-3- 터트 -부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔산 ( 시스 디올)
물(10 mL) 중 수산화 나트륨(1.13 g, 28.252 mmol)의 용액을 메탄올 (30 mL) 중 에틸 2-벤질옥시-3-터트-부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오에이트 (시스 디올)(3.4 g, 8.6908 mmol)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 4일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 감압 하에 농축시켜 대부분의 메탄올을 제거하였다. 물(100 mL)을 첨가하고, 1 N 수성 HCl로 pH = 2로 산성화시켰다. 수성층을 아세트산에틸(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(100 mL), 염수(100 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 황색 오일로서, 2-벤질옥시-3-터트-부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔산 (cis diol)(3.29 g, 97%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.11 (br. s., 1H), 7.45 - 7.26 (m, 5H), 5.86 (ddd, J = 17.6, 10.0, 8.1 Hz, 1H), 5.34 - 5.20 (m, 2H), 4.88 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.67 - 4.56 (m, 2H), 1.15 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -64.77 (s, 3F) ppm. 머무름 시간: 2.15분 (LC 방법 E).
단계 4: 2-벤질옥시-3- 터트 -부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 ( 시스 디올)
DMF (50 mL) 중 2-벤질옥시-3-터트-부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔산(시스 디올)(3.29 g, 8.4354 mmol) 및 트리에틸아민(2.5410 g, 3.5 mL, 25.111 mmol)의 용액을 HATU(6.46 g, 16.99 mmol)로 처리하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 얼음조에서 냉각시키고, 하이드라진 수화물(6.708 g, 10 mL, 87.099 mmol)을 첨가하였다. 10분 후, 얼음조를 제거하고, 반응물을 실온에서 약 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 물(450 mL)을 첨가하고, 수성층을 아세트산 에틸(4 X 150 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(2 X 250 mL), 염수(200 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 220 g 컬럼; 용리 구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서, 2-벤질옥시-3-터트-부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 (시스 디올)(2.836 g, 91%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (br. s., 1H), 7.45 - 7.25 (m, 5H), 5.81 (ddd, J = 17.4, 10.5, 7.1 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.21 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.11 - 4.99 (m, 2H), 4.90 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 1.18 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -67.28 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 360.1661, 확인된 값 305.1 (M-55)+; 머무름 시간: 2.13분 (LC 방법 E).
단계 5: N '-[2-벤질옥시-3- 터트 -부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 ( 시스 디올)
DMF (15 mL) 중 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (775 mg, 2.2316 mmol) 및 2-벤질옥시-3-터트-부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 (시스 디올)(750 mg, 2.025 mmol)의 용액을 얼음조에서 냉각시키고, HATU(933 mg, 2.4538 mmol) 및 DIPEA(534.24 mg, 0.72 mL, 4.1336 mmol)로 연속 처리하였다. 5분 후, 얼음조를 제거하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물에 물(100 mL)을 첨가하고, 수성층을 아세트산 에틸(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(2 X 50 mL), 염수(50 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 용리 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 걸쭉한 호백색 오일로서, N'-[2-벤질옥시-3-터트-부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (cis diol)(1.136 g, 81%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 9.61 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 8.89 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.49 - 7.31 (m, 5H), 6.02 - 5.88 (m, 1H), 5.85 - 5.70 (m, 1H), 5.50 - 5.29 (m, 3H), 5.27 - 5.12 (m, 2H), 5.09 - 4.91 (m, 3H), 2.13 - 1.93 (m, 4H), 1.56 (s, 3H), 1.52 (s, 3H), 1.27 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -64.51 (s, 3F), -68.75 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 689.2648, 확인된 값 634.2 (M-55)+; 머무름 시간: 2.59분 (LC 방법 E).
단계 6: 6-[5-[1-벤질옥시-2- 터트 -부톡시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 ( 시스 디올)
아세토니트릴 (8 mL) 중 N'-2-벤질옥시-3-터트-부톡시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (시스 디올)(335 mg, 0.4858 mmol) 및 DIPEA (222.60 mg, 0.3 mL, 1.7223 mmol)의 용액을 60℃로 가열한 다음, p-톨루엔설포닐 클로라이드(106 mg, 0.556 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 90분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 용액을 1/4 부피로 농축시키고, 중탄산나트륨의 포화 수용액(5 mL)으로 퀀칭시킨 다음, 아세트산 에틸(3 X 30 mL)로 추출하였다. 유기물을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 용리 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 담황색 오일로서, 6-[5-[1-벤질옥시-2-터트-부톡시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (시스 디올)(312 mg, 96%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.52 (s, 1H), 7.49 - 7.28 (m, 5H), 6.02 (ddd, J = 17.5, 9.7, 8.1 Hz, 1H), 5.83 - 5.67 (m, 1H), 5.57 (br. s., 1H), 5.36 - 5.18 (m, 2H), 5.08 - 4.67 (m, 5H), 2.14 - 1.89 (m, 4H), 1.56 (s, 3H), 1.49 (s, 3H), 1.11 (s, 9H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -64.58 (s, 3F), -66.62 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 671.2542, 확인된 값 616.2 (M-55)+; 머무름 시간: 4.53분 (LC 방법 BB).
단계 7: 4-벤질옥시-4-[5-[6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜트-1-엔-3-올 ( 시스 디올)
디클로로메탄 (14 mL) 및 TFA (10.360 g, 7 mL, 90.859 mmol) 중 6-[5-[1-벤질옥시-2-터트-부톡시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (시스 디올)(1.4 g, 2.0845 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 디클로로메탄(50 mL)으로 희석하고, 포화 수성 중탄산나트륨(25 mL), 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 용리 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 황색 오일로서, 4-벤질옥시-4-[5-[6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜트-1-엔-3-올 (시스 디올)(1.05 g, 82%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, 1H), 7.55 - 7.21 (m, 5H), 6.24 (s, 1H), 6.00 (ddd, J = 17.1, 10.3, 6.6 Hz, 1H), 5.75 - 5.65 (m, 1H), 5.33 - 5.17 (m, 2H), 4.99 - 4.74 (m, 5H), 4.52 - 4.10 (m, 1H), 2.05 - 1.82 (m, 4H), 1.43 (s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.79 (s, 3F), -67.37 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 615.1916, 확인된 값 616.03 (M+1)+; 머무름 시간: 4.07분 (LC 방법 BB).
단계 8: 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-7-올 ( E/Z 올레핀 혼합물, 시스 디올)
오븐 건조시킨 250 mL 둥근 바닥 플라스크에서, 4-벤질옥시-4-[5-[6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5,5,5-트리플루오로-펜트-1-엔-3-올(시스 디올)(150 mg, 0.2437 mmol)의 탈기한 용액을 질소 분위기 하에 70℃로 가열하였다. 그런 다음, Zhan 촉매-1B(30 mg, 0.0409 mmol)를 15분에 걸쳐 2회로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃로 가열하고, 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(컬럼: 50 g C18 컬럼; 용리 구배: 5%~90% 아세토니트릴/물(0.1% 포름산 함유))로 정제하여 황백색 고형분으로서, 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-7-올(E/Z 올레핀 혼합물, 시스 디올)(70 mg, 49%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (s, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.40 - 7.28 (m, 3H), 6.59 (s, 1H), 6.03 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.77 - 5.57 (m, 2H), 4.85 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.71 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.42 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 2.39 - 2.25 (m, 1H), 2.14 - 1.95 (m, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.39 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.43 (s, 3F), -66.71 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 587.1603, 확인된 값 588.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.78분 (LC 방법 BB).
단계 9: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (거울상이성질체 1, 시스 디올)(화합물 194) 및 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (거울상이성질체 2, 시스 디올)(화합물 195)의 제조
메탄올 (2.5 mL) 중 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-7-올 (E/Z 올레핀 혼합물, 시스 디올)(46 mg, 0.0776 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 3회 및 진공에서 1회 연속 퍼징하였다. 10 wt.% 탄소 상 팔라듐(45 mg, 0.0211 mmol)을 첨가한 다음, 수소 분위기 하에 2회 퍼징하고, 진공에서 1회 연속 퍼징하고, 반응물을 수소 분위기 하에 실온에서 17시간 동안 방치하여 교반시켰다. 반응물을 질소 분위기 하에 퍼징하고, 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 24 g 컬럼; 용리 구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 27 mg의 황색 고형분을 수득하였다. Phenomenex Lux i-셀룰로오스(250 X 21.2 mm, 5 νM 컬럼)를 사용하여 SFC(샘플을 메탄올에 18 mg/mL로 용해시킴; 구배: 10% MeOH(0.1% 디에틸아민)/90% CO2; 유속: 75 mL/분)로 정제하여 2개의 거울상이성질체를 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올(거울상이성질체 1, 시스 디올)(10.2 mg, 27%)을 진황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 5.91 (s, 2H), 5.37 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.37 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 1.84 - 1.62 (m, 2H), 1.50 - 1.10 (m, 12H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.31 (s, 3F), -73.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.47분 (LC 방법 BB).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올(거울상이성질체 2, 시스 디올)(10.2 mg, 27%)을 진황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 5.91 (br. s., 2H), 5.37 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.44 - 4.31 (m, 1H), 1.85 - 1.61 (m, 2H), 1.49 - 1.11 (m, 12H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.32 (s, 3F), -73.66 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.47분 (LC 방법 BB).
실시예 108: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18)2,414,16-펜타엔-6-올 (화합물 196)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -(4-하이드록시-1,1-디메틸-부틸)카르바메이트
4-아미노-4-메틸-펜탄-1-올 (8 g, 64.853 mmol)을 THF(160 mL)에 용해시키고, 중탄산나트륨(20 g, 238.08 mmol)을 첨가하고, 이어서 디-터트-부틸 디카르보네이트(21.5 g, 22.632 mL, 98.512 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 물(300 mL)과 EtOAc(400 mL)로 희석하였다. 수성층을 EtOAc(2 X 200 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세톤/헥산)로 정제하여 백색 왁스로서, 터트-부틸 N-(4-하이드록시-1,1-디메틸-부틸)카르바메이트 (13.7 g, 92%)를 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 4.47 (s, 1H), 3.62 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.82 (s, 1H), 1.75 - 1.65 (m, 2H), 1.61 - 1.48 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.24 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 217.1678, 확인된 값 218.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.26분 (LC 방법 G).
단계 2: 벤질 2-(트리플루오로메틸)옥시란-2-카르복실레이트
디옥산 (550 mL) 및 물(110 mL) 중 벤질 2-(트리플루오로메틸)프로프-2-엔오에이트(25.5 g, 110.78 mmol)의 용액에 0℃의 중탄산나트륨(47 g, 559.48 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물에, 옥손(68.5 g, 222.85 mmol)을 80분에 걸쳐 격렬하게 교반하면서 나누어 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 20분 동안 추가로 교반한 다음, 실온으로 가온시키고, 1.5시간 동안 추가로 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 EtOAc(500 mL) 및 물(500 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 300 mL)로 추출하였다. 유기층을 합친 다음, 염수(300 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% EtOAc/헥산)로 정제하여 무색 오일로서, 벤질 2-(트리플루오로메틸)옥시란-2-카르복실레이트 (24 g, 81%)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.43 - 7.32 (m, 5H), 5.49-5.10 (m, 2H), 3.28 - 3.24 (m, 1H), 3.23 - 3.18 (m, 1H) ppm. 머무름 시간: 3.1분 (LC 방법 G).
단계 3: 벤질 2-[[4-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-2-하이드록시-프로파노에이트
무수 아세토니트릴 (21.5 mL) 중 벤질 2-(트리플루오로메틸)옥시란-2-카르복실레이트 (5 g, 19.904 mmol)의 용액에 터트-부틸 N-(4-하이드록시-1,1-디메틸-부틸)카르바메이트(5.05 g, 22.077 mmol) 및 과염소산 마그네슘(2.22 g, 9.946 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 75℃에서 21시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc(50 mL)과 물(25 mL)로 희석하였다. 수성층을 EtOAc(3 X 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세톤/헥산)로 정제하여 무색 오일로서, 벤질 2-[[4-(터트-부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-2-하이드록시-프로파노에이트 (1.5 g, 16%)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.48 - 7.30 (m, 5H), 5.51 - 4.90 (m, 2H), 4.44 (br. s, 1H), 4.05 (br. s, 1H), 3.95 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.72 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.56 - 3.44 (m, 1H), 3.43 - 3.34 (m, 1H), 1.61 - 1.53 (m, 2H), 1.52 - 1.45 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.22 (d, J = 3.3 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 463.21817, 확인된 값 464.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.81분 (LC 방법 G).
단계 4: 벤질 2-벤질옥시-2-[[4-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-프로파노에이트
아르곤 하에, 오븐 건조된 플라스크에 NaH(730 mg, 60% w/w, 18.252 mmol)를 첨가하고, 헥산(3 X 10 mL)으로 세척하고, DMF (8 mL)를 첨가하였다. 현탁액을 0℃로 냉각시키고, DMF (2.5 mL) 중 벤질 2-[[4-(터트-부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-2-하이드록시-프로파노에이트(3.1 g, 6.0196 mmol)를 (2분에 걸쳐) 적가하였다. 반응물을 같은 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 브로모메틸벤젠(2.3824 g, 1.7 mL, 13.651 mmol) 및 TBAI(241 mg, 0.6525 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 7시간 동안 교반한 다음, 실온으로 서서히 가온시키고 13시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃의 포화 염화암모늄(25 mL)으로 퀀칭시키고, 아세트산 에틸(3 X 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(80 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g 컬럼; 구배: 0%~20% 디에틸 에테르/헥산)로 정제하여 무색 오일로서, 벤질 2-벤질옥시-2-[[4-(터트-부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-프로파노에이트 (1.7 g, 49%)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.38 - 7.27 (m, 10H), 5.31 (s, 2H), 4.80 (s, 2H), 4.35 (s, 1H), 4.01 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.50 - 3.26 (m, 2H), 1.61 - 1.55 (m, 2H), 1.52 - 1.44 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.21 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 553.26514, 확인된 값 554.5 (M+1)+; 머무름 시간: 3.64분 (LC 방법 H).
단계 5: 2-벤질옥시-2-[[4-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-프로판산
THF (7.2 mL) 중 벤질 2-벤질옥시-2-[[4-(터트-부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-프로파노에이트(2.4 g, 4.3352 mmol)의 용액에 LiOH(913 mg, 21.757 mmol)를 첨가하고, 이어서 H2O (2.4 mL) 및 MeOH(2.4 mL)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 TBME(50 mL)로 희석하고, 물(25 mL), HCl(26 mL의 1 M, 26 mmol), 물(50 mL), 염수(2 X 50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 담황색 오일로서, 2-벤질옥시-2-[[4-(터트-부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-프로판산 (2.115 g, 100%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.43 - 7.29 (m, 5H), 4.87 (s, 2H), 4.71 (s, 1H), 4.05 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.97 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 11.2, 5.5 Hz, 2H), 1.75 - 1.50 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.24 (s, 6H) ppm. 산성 양성자가 양성자 NMR 필드에서 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 463.21817, 확인된 값 464.5 (M+1)+; 머무름 시간: 6.37분 (LC 방법 DD).
단계 6: 터트 -부틸 N -[4-[2-벤질옥시-3,3,3-트리플루오로-2-(하이드라진카르보닐)프로폭시]-1,1-디메틸-부틸]카르바메이트
DMF (17.8 mL) 중 2-벤질옥시-2-[[4-(터트-부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-3,3,3-트리플루오로-프로판산(2 g, 4.0994 mmol)의 용액에 HATU(2.34 g, 6.1542 mmol) 및 Et3N(1.2342 g, 1.7 mL, 12.197 mmol)을 실온에서 첨가하고, 생성된 황색 용액을 42분 동안 교반하고, 0℃로 냉각시킨 다음, 하이드라진(3.0630 g, 3 mL, 95.584 mmol)을 10분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 45분 동안 교반하여, 실온으로 가온시켰다. 반응물을 NH4Cl 용액(40 mL)으로 퀀칭시키고, EtOAc(3 X 40 mL)로 추출하고, 물(100 mL), 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 45분에 걸쳐 0%~30% EtOAc/헥산)로 정제하여 무색 오일로서, 터트-부틸 N-[4-[2-벤질옥시-3,3,3-트리플루오로-2-(하이드라진카르보닐)프로폭시]-1,1-디메틸-부틸]카르바메이트 (564.2 mg, 27%)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.99 (s, 1H), 7.43 - 7.31 (m, 5H), 4.88 - 4.79 (m, 2H), 4.42 (s, 1H), 4.17 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.08 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 3.56 - 3.49 (m, 2H), 1.70 (s,1H), 1.66 - 1.61 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.24 (d, J = 4.8 Hz, 6H) ppm. 2개의 교환 가능한 양성자가 1H NMR에서 관찰되지 않음. ESI-MS m/z 계산된 값 477.24506, 확인된 값 478.6 (M+1)+; 머무름 시간: 5.5분 (LC 방법 DD).
단계 7: 터트 -부틸 N -[4-[2-벤질옥시-3,3,3-트리플루오로-2-[[[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보닐]아미노]카르바모일]프로폭시]-1,1-디메틸-부틸]카르바메이트
EtOAc (5 mL) 중 터트-부틸 N-[4-[2-벤질옥시-3,3,3-트리플루오로-2-(하이드라진카르보닐)프로폭시]-1,1-디메틸-부틸]카르바메이트(564.2 mg, 1.1815 mmol)의 용액에 피리딘(547.68 mg, 0.56 mL, 6.9239 mmol), 6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (313 mg, 1.2416 mmol), 및 T3P(1.25 g, 1.9643 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 NH4Cl(40 mL)로 퀀칭시키고, EtOAc(3 X 40 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(100 mL), 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 0%~100% EtOAc/헥산)로 정제하여 황색 유리질 물질로서, 터트-부틸 N-[4-[2-벤질옥시-3,3,3-트리플루오로-2-[[[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보닐]아미노]카르바모일]프로폭시]-1,1-디메틸-부틸]카르바메이트 (300 mg, 34%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 711.2339, 확인된 값 712.6 (M+1)+; 머무름 시간: 6.87분 (LC 방법 DD).
단계 8: [6-[5-[1-벤질옥시-1-[[4-( 터트 -부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-2,2,2-트리플루오로-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 4-메틸벤젠설포네이트
CH3CN (2.15 mL) 중 터트-부틸 N-[4-[2-벤질옥시-3,3,3-트리플루오로-2-[[[6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보닐]아미노]카르바모일]프로폭시]-1,1-디메틸-부틸]카르바메이트(142 mg, 0.1995 mmol)의 용액에 DIPEA(133.56 mg, 0.180 mL, 1.0334 mmol)를 첨가한 다음, p-TsCl(115 mg, 0.6032 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 50시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH4Cl 용액(15 mL)으로 퀀칭시키고, EtOAc(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 NaHCO3(20 mL), 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 0%~30% EtOAc/헥산)로 정제하여 담황색 고형분으로서, [6-[5-[1-벤질옥시-1-[[4-(터트-부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-2,2,2-트리플루오로-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 4-메틸벤젠설포네이트(124 mg, 70%)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.60 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.41 - 7.27 (m, 7H), 4.88 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.82 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.35 - 4.28 (m, 2H), 3.57 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.39(s, 3H), 1.66 - 1.60 (m, 2H), 1.59 - 1.52 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.20 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 847.2322, 확인된 값 848.6 (M+1)+; 머무름 시간: 8.48분 (LC 방법 DD).
단계 9: [6-[5-[1-[(4-아미노-4-메틸-펜톡시)메틸]-1-벤질옥시-2,2,2-트리플루오로-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 4-메틸벤젠설포네이트
DCM 중 [6-[5-[1-벤질옥시-1-[[4-(터트-부톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜톡시]메틸]-2,2,2-트리플루오로-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 4-메틸벤젠설포네이트 (25 mg, 0.0295 mmol)의 용액에 TFA(740 mg, 0.5 mL, 6.4899 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(20 mL)으로 희석하고, NaHCO3(20 mL)으로 퀀칭시키고, 염수(20 mL)로 세척하고, K2CO3으로 건조시키고, 여과하여 [6-[5-[1-[(4-아미노-4-메틸-펜톡시)메틸]-1-벤질옥시-2,2,2-트리플루오로-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 4-메틸벤젠설포네이트(22 mg, 99%)를 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 747.1798, 확인된 값 748.5 (M+1)+; 머무름 시간: 6.05분 (LC 방법 DD).
단계 10: 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔
DCM (20 mL) 중 [6-[5-[1-[(4-아미노-4-메틸-펜톡시)메틸]-1-벤질옥시-2,2,2-트리플루오로-에틸]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 4-메틸벤젠설포네이트 (22 mg, 0.0294 mmol)의 용액에 DIPEA(74.200 mg, 0.100 mL, 0.5741 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공에서 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% EtOAc/헥산)로 정제하여 호박색 오일로서, 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔 (8 mg, 45%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.52 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.42 - 7.25 (m, 5H), 5.56 (s, 1H), 4.94 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.82 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.16 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.08 (dd, J = 10.1, 1.2 Hz, 1H), 3.62 -3.54 (m, 1H), 3.45 - 3.36 (m, 1H), 2.64 - 2.54 (m, 1H), 2.37 - 2.27 (m, 1H), 1.64 - 1.49 (m, 2H), 1.40 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 575.16034, 확인된 값 576.4 (M+1)+; 머무름 시간: 7.66분 (LC 방법 DD).
단계 11: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 196)
질소 하에, EtOH (3.1 mL) 중 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔 (10 mg, 0.0174 mmol)의 용액에 Pd/C(7 mg, 10% w/w, 0.0066 mmol)를 첨가한 다음, 수소 가스로 1분 동안 퍼징하고, 1 atm의 수소 가스 하에 실온에서 5.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 질소를 역충진하고, EtOH(20 mL)로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, EtOH(3 X 20 mL)로 헹구고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 역상 C18(컬럼: 15.5 g 컬럼; 구배: 0%~95% 아세토니트릴/물(0.1% 포름산)의 이동상)로 정제하여 황색 고형분으로서, 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (7 mg, 76%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.47 (s, 1H), 4.08 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.75 - 3.64 (m, 1H), 3.61 - 3.49 (m, 1H), 3.07 - 2.90 (m, 1H), 2.46 - 2.31 (m, 1H), 1.83 - 1.60 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 1.34 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD3OD) δ -65.22 (s, 3F), -78.99 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.1392, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.19분 (LC 방법 C).
실시예 109: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 197) 및 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 198)의 제조
단계 1: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 197) 및 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 198)
라세미 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (10 mg, 0.02196 mmol)을 Chiral Technologies에서 판매하는 AS-H 컬럼(250 X 10 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 8% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(3.3 mg, 65%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.27 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.43 (s, 1H), 4.11 (d, J = 9.4 Hz, 2H), 3.85 (dd, J = 9.5, 1.2 Hz, 1H), 3.67 (ddd, J = 9.3, 6.0, 3.2 Hz, 1H), 3.59 (td, J = 9.6, 9.1, 2.8 Hz, 1H), 3.03 (ddd, J = 13.0, 10.6, 4.6 Hz, 1H), 2.27 (ddd, J = 13.3, 10.5, 6.1 Hz, 1H), 1.83 - 1.71 (m, 1H), 1.67 (dtd, J = 11.1, 6.0, 2.7 Hz, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.85분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-8,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(4.1 mg, 81%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.26 (s, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.43 (s, 1H), 4.11 (d, J = 9.5 Hz, 2H), 3.85 (dd, J = 9.5, 1.4 Hz, 1H), 3.67 (ddd, J = 9.3, 6.1, 3.2 Hz, 1H), 3.59 (td, J = 9.4, 9.0, 2.8 Hz, 1H), 3.03 (ddd, J = 13.2, 10.7, 4.6 Hz, 1H), 2.27 (ddd, J = 13.2, 10.5, 6.1 Hz, 1H), 1.74 (ddd, J = 10.4, 6.7, 3.3 Hz, 1H), 1.66 (ddd, J = 11.4, 6.1, 3.0 Hz, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.85분 (LC 방법 A).
실시예 110: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 199) 및 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 200)의 제조
단계 1: 2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로판-1-올
아세톤(250 mL)과 물(50 mL)의 혼합물 중 2-아미노-2-메틸-프로판-1-올(20.548 g, 22 mL, 230.52 mmol)의 용액에 탄산칼륨(64 g, 463.08 mmol)을 첨가하고, 이어서 브로모메틸벤젠(79.200 g, 55 mL, 463.07 mmol)을 첨가하고, 반응물을 환류 온도에서 72시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄(400 mL)과 물(500 mL)로 나누고, 유기층을 수집하고, 물(500 mL), 염수(500 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~5% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로판-1-올(34 g, 55%)을 백색 고형분으로서 수득하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.26 (d, J = 6.8 Hz, 4H), 7.17 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 7.11 - 7.03 (m, 2H), 4.43 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 3.75 (s, 4H), 3.37 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 1.03 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 269.178, 확인된 값 270.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.51분 (LC 방법 E).
단계 2: N , N -디벤질-1-[3-[ 터트- 부틸(디메틸)실릴]옥시프로폭시]-2-메틸-프로판-2-아민
0℃의 디메틸포름아미드 (105 mL) 중 2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로판-1-올(20 g, 74.244 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(60% w/w)(4.1 g, 102.51 mmol)을 나누어 첨가하였다. 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 3-브로모프로폭시-터트-부틸-디메틸-실란(24.046 g, 22 mL, 94.949 mmol)을 상기 용액에 첨가하였다. 디메틸포름아미드(21 mL)를 첨가하여 혼합물을 희석하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 포화 염화 암모늄(200 mL)으로 퀀칭시켰다. 혼합물을 아세트산 에틸(2 X 200 mL)로 추출한 다음, 유기물을 합치고, 물(2 X 200 mL)과 염수(200 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~15% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서, N,N-디벤질-1-[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]옥시프로폭시]-2-메틸-프로판-2-아민 (16.4 g, 50%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.25 (d, J = 7.1 Hz, 4H), 7.16 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 7.11 - 6.98 (m, 2H), 3.76 (s, 4H), 3.68 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.38 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.34 (s, 2H), 1.69 (quin, J = 6.2 Hz, 2H), 1.06 (s, 6H), 0.86 (s, 9H), 0.03 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 441.3063, 확인된 값 442.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.17분 (LC 방법 E).
단계 3: 3-[2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로폭시]프로판-1-올
건조 테트라하이드로푸란(163 mL) 중 N,N-디벤질-1-[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]옥시프로폭시]-2-메틸-프로판-2-아민(16.3 g, 36.901 mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드(THF 중 1.0 M)(60 mL의 1 M, 60 mmol)를 질소 하에 0℃에서 첨가하였다. 0℃에서 1시간 동안 교반한 후, 냉각조를 제거하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 포화 수성 염화 암모늄 용액(100 mL)을 첨가하여 반응을 퀀칭시켰다. 분리 후, 수성상을 디에틸 에테르(2 X 75 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기 용액을 염수(100 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 5%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서, 3-[2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로폭시]프로판-1-올 (8.25 g, 68%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.26 (d, J = 7.1 Hz, 4H), 7.17 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 4.38 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 3.76 (s, 4H), 3.53 - 3.45 (m, 2H), 3.38 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.34 (s, 2H), 1.66 (quin, J = 6.4 Hz, 2H), 1.06 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 327.2198, 확인된 값 328.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.55분 (LC 방법 E).
단계 4: N , N -디벤질-1-(3-브로모프로폭시)-2-메틸-프로판-2-아민
0℃의 무수 디클로로메탄 (250 mL) 중 3-[2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로폭시]프로판-1-올(8.2 g, 25.041 mmol)의 교반 용액에 사브롬화 탄소(10 g, 30.154 mmol) 및 트리페닐포스핀(9 g, 34.314 mmol)을 연속 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 증발시킨 다음, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서, N,N-디벤질-1-(3-브로모프로폭시)-2-메틸-프로판-2-아민 (6.8 g, 70%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.26 (d, J = 7.1 Hz, 4H), 7.17 (t, J = 7.3 Hz, 4H), 7.11 - 7.01 (m, 2H), 3.76 (s, 4H), 3.59 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.43 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.03 (quin, J = 6.2 Hz, 2H), 1.07 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 389.1354, 확인된 값 390.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.79분 (LC 방법 E).
단계 5: 에틸 5-[2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로폭시]-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트
질소 하에, 환류 응축기가 장착된 건조된 5-mL 2구 플라스크에 마그네슘(640 mg, 26.332 mmol) 및 요오드(166 mg, 0.654 mmol)를 채우고, 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 디에틸 에테르 (7.5 mL) 중 N,N-디벤질-1-(3-브로모프로폭시)-2-메틸-프로판-2-아민(5.1 g, 13.065 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 40℃에서 10분 동안 가열한 다음, 30℃에서 1시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 디에틸 에테르(7.5 mL)를 첨가하였다. -78℃의 테트라하이드로푸란 (51 mL) 중 에틸 3,3,3-트리플루오로-2-옥소-프로파노에이트(2.4377 g, 1.9 mL, 14.332 mmol)의 냉각시킨 용액에 혼합물을 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 10분 동안 교반하였다. 드라이아이스-아세톤 냉각조를 제거하였다. 반응 혼합물을 실온으로 서서히 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 포화 염화암모늄 용액(250 mL)으로 퀀칭시켰다. 생성된 혼합물을 디에틸 에테르(2 X 250 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(250 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 미정제 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서, 에틸 5-[2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로폭시]-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트(3.23 g, 51%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.26 (d, J = 7.3 Hz, 4H), 7.16 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 7.11 - 6.99 (m, 2H), 6.81 (s, 1H), 4.23 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.76 (s, 4H), 3.41 - 3.25 (m, 4H), 2.08 (td, J = 12.8, 4.3 Hz, 1H), 1.84 (td, J = 12.8, 4.4 Hz, 1H), 1.75 - 1.60 (m, 1H), 1.44 - 1.30 (m, 1H), 1.21 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.05 (s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -76.77 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.244, 확인된 값 482.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.83분 (LC 방법 E).
단계 6: 에틸 5-(2-아미노-2-메틸-프로폭시)-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트
에탄올 (102 mL) 중 에틸 5-[2-(디벤질아미노)-2-메틸-프로폭시]-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트(3.4 g, 7.0606 mmol)의 용액을 질소로 15분 동안 탈기한 다음, 20% 탄소 상 수산화 팔라듐(500 mg, 20% w/w, 0.7121 mmol)을 첨가하였다. 질소를 혼합물 내로 10분 동안 버블링한 다음, 수소를 혼합물 내로 15분 동안 버블링하였다. 혼합물을 수소 풍선 하에 실온에서 18시간 동안 교반한 다음, 여과하였다. 용매를 감압 하에 제거하여, 걸쭉한 무색 오일로서, 에틸 5-(2-아미노-2-메틸-프로폭시)-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트(2.09 g, 98%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.43 - 4.29 (m, 2H), 3.54 - 3.42 (m, 2H), 3.16 (s, 2H), 2.72 - 2.20 (m, 2H), 2.20 - 2.04 (m, 2H), 1.96 (ddd, J = 13.9, 10.6, 5.3 Hz, 1H), 1.78 (ddt, J = 19.3, 11.1, 5.6 Hz, 1H), 1.55 - 1.40 (m, 1H), 1.35 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.10 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -78.50 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 301.1501, 확인된 값 302.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.44분 (LC 방법 E).
단계 7: 메틸 6-[[2-(4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-4-하이드록시-펜톡시)-1,1-디메틸-에틸]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
실온의 아세토니트릴 (25 mL) 중 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.8 g, 6.3252 mmol) 및 에틸 5-(2-아미노-2-메틸-프로폭시)-2-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트(2.05 g, 6.8038 mmol)의 교반 용액에 디이소프로필에틸아민(4.0810 g, 5.5 mL, 31.576 mmol)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 증발시켜 제거한 다음, 아세트산 에틸(100 mL)로 희석하고, 150 mL의 물이 담긴 추출 깔때기에 옮겼다. 상을 분리한 다음, 수성상을 아세트산 에틸(2 X 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(150 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 갈색을 띤 오일로서, 메틸 6-[[2-(4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-4-하이드록시-펜톡시)-1,1-디메틸-에틸]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (3.15 g, 91%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.22 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.60 - 3.39 (m, 4H), 2.03 - 1.87 (m, 1H), 1.78 - 1.60 (m, 2H), 1.43 (s, 6H), 1.40 - 1.30 (m, 1H), 1.20 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -63.57 (s, 3F), -76.95 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 549.1546, 확인된 값 550.1 (M+1)+; 머무름 시간: 2.29분 (LC 방법 E).
단계 8: 메틸 6-[[2-(4-벤질옥시-4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-펜톡시)-1,1-디메틸-에틸]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
0℃의 DMF (31 mL) 중 메틸 6-[[2-(4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-4-하이드록시-펜톡시)-1,1-디메틸-에틸]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(3.1 g, 5.6423 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(460 mg, 11.501 mmol)을 광유 중 60% 분산액으로서 나누어 첨가하고, 첨가하는 도중 온도가 10℃를 넘어 상승하지 않도록 하였다. 얼음/얼음수조에서 30분 동안 교반한 후, 브로모메틸벤젠(1.5818 g, 1.1 mL, 9.2485 mmol)을 적가한 다음, 반응물을 얼음조에서 2시간에 걸쳐 실온으로 점진적으로 가온시켰다. 0℃에서 염화 암모늄(910 mg, 17.012 mmol)을 고형분으로서 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, MTBE/헵탄(3:1, 100 mL)을 첨가하고, 이어서 물(100 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 추출 깔때기에 옮겨 MTBE/헵탄(3:1, 100 mL) 및 물(100 mL)로 헹구었다. 유기층을 분리하고, 수성상을 MTBE/헵탄(3:1, 2 X 100 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(150 mL)과 염수(2 x 100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20%의 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서, 메틸 6-[[2-(4-벤질옥시-4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-펜톡시)-1,1-디메틸-에틸]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(3.25 g, 90%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (s, 1H), 7.44 - 7.26 (m, 5H), 6.45 (s, 1H), 4.70 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.62 - 4.57 (m, 1H), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.58 - 3.41 (m, 4H), 2.11 - 1.97 (m, 2H), 1.76 - 1.63 (m, 1H), 1.62 - 1.49 (m, 1H), 1.42 (s, 6H), 1.23 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -63.54 (s, 3F), -70.73 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 639.2015, 확인된 값 640.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.58분 (LC 방법 E).
단계 9: 에틸 2-벤질옥시-5-[2-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트
메틸 6-[[2-(4-벤질옥시-4-에톡시카르보닐-5,5,5-트리플루오로-펜톡시)-1,1-디메틸-에틸]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(3.2 g, 5.0036 mmol)를 메탄올(60 mL)에 용해시킨 다음, 하이드라진 일수화물(2.0580 g, 2 mL, 41.110 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃로 밤새 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거한 다음, 혼합물을 아세트산 에틸(50 mL)에 용해시켰다. 생성된 혼합물을 물(100 mL), 염수(100 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 갈색을 띤 걸쭉한 미정제 오일로서, 에틸 2-벤질옥시-5-[2-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트(3.15 g, 98%)를 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 639.2128, 확인된 값 640.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.29분. 이 물질을 후속 단계에서 바로 사용하였다(LC 방법 E).
단계 10: 에틸 2-벤질옥시-5-[2-[[6-[[비스( 터트- 부톡시카르보닐)아미노]카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트
디클로로메탄 (110 mL) 중 에틸 2-벤질옥시-5-[2-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트 (3.1 g, 4.8472 mmol) 및 터트-부톡시카르보닐 터트-부틸 카르보네이트(2.65 g, 12.142 mmol)의 혼합물에 디이소프로필에틸아민(1.5582 g, 2.1 mL, 12.056 mmol)을 첨가하고 이어서 4-(디메틸아미노)피리딘(60 mg, 0.4911 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 디클로로메탄에 용해시키고, 감압 하에 실리카-겔 상에 미리 흡착시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~15% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 갈색을 띤 오일로서, 에틸 2-벤질옥시-5-[2-[[6-[[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트(2.16 g, 53%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (s, 1H), 7.53 - 7.19 (m, 5H), 6.47 (br. s., 1H), 4.75 - 4.67 (m, 1H), 4.64 - 4.54 (m, 1H), 4.28 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.58 - 3.39 (m, 4H), 2.13 - 1.97 (m, 2H), 1.76 - 1.52 (m, 3H), 1.48 (s, 18H), 1.41 (s, 6H), 1.24 - 1.21 (m, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -63.15 (br. s., 3F), -70.64 내지 -70.77 (m, 3F) ppm; ESI-MS m/z 계산된 값 839.3176, 확인된 값 784.3 (M - 55)+; 머무름 시간: 4.62분 (LC 방법 BB).
단계 11: 2-벤질옥시-5-[2-[[6-[( 터트- 부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산
물(10 mL) 중 수산화 나트륨(300 mg, 7.5005 mmol)의 용액을 메탄올 (40 mL) 중 에틸 2-벤질옥시-5-[2-[[6-[[비스(터트-부톡시카르보닐)아미노]카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜타노에이트(2.1 g, 2.4596 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 50℃로 밤새 가열하였다. 반응물을 농축시켜 메탄올을 제거하고, 미정제 물질을 물(75 mL)로 희석한 다음, 헵탄(75 mL) 및 MTBE(75 mL)로 세척하였다. 수성 용액을 3N 염산 용액으로 pH = 2로 산성화시켰다. 수성 혼합물을 디클로로메탄(4 X 50 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축시켜 갈색을 띤 오일로서, 2-벤질옥시-5-[2-[[6-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(1.58 g, 90%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 711.2339, 확인된 값 656.1 (M - 55)+; 머무름 시간: 2.23분 (LC 방법 E).
단계 12: 2-벤질옥시-5-[2-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산 (염산염)
2-벤질옥시-5-[2-[[6-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(350 mg, 0.4918 mmol)을 디옥산(9 mL)에 용해시킨 다음, 염산(3.5 mL, 디옥산 중 4 M, 14 mmol)을 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시켜, 연황색 미정제 발포체로서, 2-벤질옥시-5-[2-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(염산염)(318 mg, 100%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 611.1815, 확인된 값 612.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.88분 (LC 방법 Z). 이 물질은 다음 단계에서 바로 사용하였다.
단계 13: 9-벤질옥시-3,3-디메틸-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)-5-옥사-2,11,12,18-테트라아자바이시클로[12.3.1]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-10,13-디온
실온의 디메틸포름아미드 (DMF)(200 mL) 중 2-벤질옥시-5-[2-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-2-메틸-프로폭시]-2-(트리플루오로메틸)펜탄산(염산염)(360 mg, 0.5556 mmol)의 교반 용액에 BOP(300 mg, 0.6783 mmol) 및 HOBt(115 mg, 0.8511 mmol)를 첨가하고 이어서 디이소프로필에틸아민(371 mg, 0.5 mL, 2.8706 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 50℃에서 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 상에 건식 로딩하고, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~25% 아세트산 에틸/디클로로메탄)로 정제하여 걸쭉한 맑은 오일로서, 9-벤질옥시-3,3-디메틸-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)-5-옥사-2,11,12,18-테트라아자바이시클로[12.3.1]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-10,13-디온(92 mg, 28%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 593.1709, 확인된 값 594.0 (M+1)+; 머무름 시간: 1.94분 (LC 방법 Z).
단계 14: 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔
실온의 아세토니트릴 (25 mL) 중 9-벤질옥시-3,3-디메틸-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)-5-옥사-2,11,12,18-테트라아자바이시클로[12.3.1]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-10,13-디온 (90 mg, 0.1516 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(148.40 mg, 200 μL, 1.1482 mmol)의 용액에 4-메틸벤젠설포닐 클로라이드(40 mg, 0.2098 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 70℃로 가열하고, 이 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 냉각시키고, 감압 하에 증발에 의해 농축시켰다. 잔류물을 아세트산 에틸(25 mL)에 용해시켰다. 이 용액을 5% 중탄산나트륨의 수용액(2 X 25 mL) 및 염수(25 mL)로 세척한 다음, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 증발에 의해 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 상에 건식 로딩하고, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~15% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 걸쭉한 맑은 오일로서, 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔(47 mg, 54%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 7.34 - 7.18 (m, 5H), 5.39 (br. s., 1H), 5.13 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.56 - 3.44 (m, 3H), 2.56 - 2.32 (m, 2H), 1.61 - 1.51 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.46 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.91 (s, 3F), -73.26 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 575.1603, 확인된 값 576.0 (M+1)+; 머무름 시간: 2.14분 (LC 방법 Z).
단계 15: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔(52 mg, 0.0904 mmol)을 메탄올(3 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(35 mg, 5% w/w, 0.0164 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 혼합물을 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 주사기 마이크로 필터를 사용해 여과하고, 메탄올(10 mL)로 세척하고, 생성된 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 메탄올(3 mL)에서 다시 가용화시켰다. 혼합물 내로 질소를 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(35 mg, 5% w/w, 0.0164 mmol)을 첨가하였다. 그런 다음, 풍선을 이용해 수소를 혼합물 내로 5분 동안 버블링한 다음, 반응 혼합물을 수소 하에 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주사기 마이크로 필터를 사용해 여과하고, 메탄올(5 mL)로 세척하고, 생성된 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하고, 이어서 역상 크로마토그래피(용리 구배: 0%~70% 아세토니트릴/0.1% 수성 NH4HCO3)로 정제하여 황색 오일로서, 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(25 mg, 60%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 4.66 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.75 - 3.57 (m, 2H), 3.38 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.70 - 2.55 (m, 1H), 2.20 (td, J = 13.0, 5.6 Hz, 1H), 1.90 - 1.76 (m, 1H), 1.75 - 1.64 (m, 1H), 1.54 (s, 3H), 1.41 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CD3OD) δ -65.19 (s, 3F), -81.21 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.1392, 확인된 값 456.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.52분 (LC 방법 BB).
단계 16: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 199) 및 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 200)
라세미 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(13.0 mg, 0.02855 mmol)을 50℃의 ChiralPak AS 컬럼(250 X 10 mm; 5νm)을 사용해 키랄 정상상 SFC(용리 구배: 8% MeOH(+ 20 mM NH3)/CO2; 유속: 10 mL/분; 샘플 농도: 메탄올 중 20.6 mg/mL; 주입 부피 = 70 νL; 배출 압력: 152 bar; 검출 파장: 229 nm)로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체를 분리하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(4.6 mg, 70%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.27 (s, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.67 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.71 (ddd, J = 12.2, 9.5, 4.4 Hz, 1H), 3.54 (dt, J = 12.3, 3.8 Hz, 1H), 3.20 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 1.73 (ddt, J = 14.9, 10.3, 4.5 Hz, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.40 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.63분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-10,19-디옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(4.2 mg, 64%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.27 (s, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.66 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.71 (ddd, J = 12.3, 9.8, 4.3 Hz, 1H), 3.54 (dt, J = 12.3, 3.8 Hz, 1H), 3.20 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 1.80 - 1.68 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.40 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 455.13922, 확인된 값 456.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.64분 (LC 방법 A).
실시예 111: (6 R )-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 201) 및 (6 R )-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 202)의 제조
단계 1: ( E )-2-메틸- N -(피리미딘-2-일메틸렌)프로판-2-설핀아미드
툴루엔 (50 mL) 중 피리미딘-2-카르브알데히드(10 g, 92.509 mmol), 2-메틸프로판-2-설핀아미드(11.3 g, 93.234 mmol), 및 중황산 칼륨(13 g, 95.470 mmol)의 혼합물을 50℃에서 밤새 가열하였다. 용액을 디캔팅한 후, 고형분 잔류물을 디클로로메탄으로 3회 세척하고, 세척액을 디캔팅한 용액과 합치고, 용매를 진공에서 증발시켰다. 미정제 혼합물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/디클로로메탄)로 정제하여 황백색 고형분으로서, (E)-2-메틸-N-(피리미딘-2-일메틸렌)프로판-2-설핀아미드(7.85 g, 40%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.93 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.72 (s, 1H), 7.38 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 1.30 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 211.0779, 확인된 값 212.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.31분 (LC 방법 Z).
단계 2: 2-메틸- N -(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐)프로판-2-설핀아미드
-78℃의 테트라하이드로푸란 (40 mL) 중 (E)-2-메틸-N-(피리미딘-2-일메틸렌)프로판-2-설핀아미드 (2 g, 9.4659 mmol)의 냉각된 용액에 트리메틸알루미늄(14 mL의 2 M, 28 mmol)/헵탄을 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 10분 동안 교반한 다음, 알릴(브로모)마그네슘(14 mL, 디에틸 에테르 중 1 M, 14 mmol)을 적가하였다. HPLC 분석에 의해 출발 물질의 완전한 소모가 관찰될 때까지 반응물을 -78℃에서 유지시켰다. 반응물을 -78℃의 포화 수성 염화 암모늄(150 mL)으로 서서히 퀀칭시켰다. 냉각조를 제거한 다음, 혼합물을 실온에서 30분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 아세트산 에틸(2 X 100 mL)로 추출하고, 염수(200 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~5% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 연황색 오일로서, 2-메틸-N-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐)프로판-2-설핀아미드(1.67 g, 70%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 7.18 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 5.74 (ddt, J = 17.0, 10.3, 7.0 Hz, 1H), 5.10 - 4.99 (m, 2H), 4.96 (br d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.72 - 4.65 (m, 1H), 2.84 - 2.59 (m, 2H), 1.29 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 253.1249, 확인된 값 254.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.49분 (LC 방법 Z).
단계 3: 1-피리미딘-2-일부트-3-엔-1-아민 (염산염)
메탄올 (19 mL) 중 2-메틸-N-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐)프로판-2-설핀아미드(2 g, 7.8938 mmol)의 용액에 염산(19 mL, 디에틸 에테르 중 2 M, 38 mmol)을 실온에서 적가한 다음, 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 디에틸 에테르(75 mL)를 첨가하고, 생성된 분홍색 현탁액을 이 온도에서 30분 동안 교반하였다. 생성된 침전물을 여과하고, 디에틸 에테르(50 mL)로 세척하여, 분홍빛 분말로서, 1-피리미딘-2-일부트-3-엔-1-아민 (염산염)(1.45 g, 96%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.89 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 8.87 - 8.74 (m, 3H), 7.53 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 5.71 (ddt, J = 17.0, 10.1, 7.1 Hz, 1H), 5.08 - 4.96 (m, 2H), 4.53 - 4.37 (m, 1H), 2.87 - 2.66 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 149.0953, 확인된 값 150.1 (M+1)+; 머무름 시간: 1.74분 (LC 방법 BB).
단계 4: 3-니트로-6-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
반응 바이알에서, 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (270 mg, 0.9488 mmol)를 1-피리미딘-2-일부트-3-엔-1-아민(염산염)(253 mg, 1.139 mmol) 및 DIEA (785 μL, 4.507 mmol)와 아세토니트릴(7.8 mL)에서 혼합하였다. 반응물을 80℃에서 1시간 동안 가열한 다음, 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 아세트산 에틸로 희석하고, 포화 수성 NaHCO3 용액(3 X)으로 세척하고 이어서 염수로 세척하였다. 유기층을 단리하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 증발 건조시켰다. 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 10%~60% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 회색 고형분을 수득하였다. 이 회색 고형분을 THF(4.8 mL), MeOH(4.8 mL), 및 물(2.4 mL)에 용해시키고, LiOH(340.8 mg, 14.23 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 증발 건조시켰다. 고형분 잔류물을 1 N HCl로 산성화시키고, 아세트산 에틸로 추출하였다. 유기층을 단리하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 증발 건조시켰다. 미정제 물질을 아세트산 에틸/헥산으로부터 재결정화함으로써 정제하여 황갈색 고형분으로서, 3-니트로-6-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(203 mg, 47%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 383.08414, 확인된 값 384.2 (M+1)+; 머무름 시간: 0.55분 (LC 방법 S).
단계 5: N' -[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-6-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
DMF (5 mL) 중 3-니트로-6-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (202 mg, 0.4691 mmol) 및 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔하이드라지드 (184 mg, 0.5886 mmol)의 용액을 얼음조에서 냉각시키고, HATU (255 mg, 0.6706 mmol) 및 DIPEA(140.98 mg, 0.19 mL, 1.0908 mmol)로 연속 처리하였다. 5분 후, 얼음조를 제거하고, 반응물을 실온에서 19시간 동안 교반하였다. 반응물을 물(50 mL)과 함께 125 mL 분별 깔때기로 옮기고, 수성 혼합물을 아세트산에틸(3 X 25 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물(2 X 25 mL)로 세척한 다음 염수(25 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 황색 오일로서 및 부분 입체이성질체의 약 1:1 혼합물로서, N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-6-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (215 mg, 63%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.57 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 9.41 - 9.16 (m, 1H), 8.73 (dd, J = 4.9, 2.7 Hz, 2H), 8.21 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.48 - 7.31 (m, 5H), 7.23 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 7.03 - 6.86 (m, 1H), 5.84 (ddt, J = 16.9, 10.4, 6.1 Hz, 1H), 5.70 (ddt, J = 17.3, 9.8, 7.2 Hz, 1H), 5.57 - 5.43 (m, 1H), 5.16 - 5.00 (m, 4H), 4.88 - 4.81 (m, 1H), 4.77 - 4.71 (m, 1H), 2.99 - 2.86 (m, 1H), 2.86 - 2.76 (m, 1H), 2.51 - 2.35 (m, 1H), 2.32 - 2.16 (m, 3H) ppm. 머무름 시간: 2.4분 (LC 방법 E).
단계 6: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로- N -(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (5 mL) 중 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-3-니트로-6-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐아미노)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (215 mg, 0.2969 mmol) 및 DIPEA (133.56 mg, 0.18 mL, 1.0334 mmol)의 용액을 60℃로 설정된 오일조에서 가열하고, 염화 토실(70 mg, 0.3672 mmol)로 처리하였다. 90분 후, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켜 대부분의 아세토니트릴을 제거하였다. 포화 수성 중탄산 나트륨(50 mL)이 포함된 125 mL 분별 깔때기로 옮기고, 수성층을 아세트산에틸(2 X 40 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(40 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 걸쭉한 호박색 오일로서 및 1 부분 입체이성질체의 약 1:1 혼합물로서, 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-N-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (176 mg, 85%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.75 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.60 (s, 1H), 7.66 (br. s., 1H), 7.45 - 7.28 (m, 5H), 7.25 (td, J = 4.9, 1.0 Hz, 1H), 5.88 - 5.76 (m, 1H), 5.72 - 5.65 (m, 1H), 5.58 (ddtd, J = 17.1, 9.9, 7.4, 2.3 Hz, 1H), 5.10 (dt, J = 17.1, 1.5 Hz, 1H), 5.05 - 4.92 (m, 3H), 4.83 (dd, J = 10.6, 6.2 Hz, 1H), 4.67 (dd, J = 10.5, 4.9 Hz, 1H), 3.02 - 2.92 (m, 1H), 2.85 - 2.75 (m, 1H), 2.59 - 2.22 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 649.1872, 확인된 값 650.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.16분 (LC 방법 BB).
단계 7: (6 R )-6-벤질옥시-17-니트로-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
환류 응축기(상단에는 유리 버블러에 관으로 부착된 어댑터가 있음)가 구비된 100-mL 3구 플라스크에 디클로로에탄(40 mL)을 채우고, 50℃로 설정된 오일조에서 45 내지 60분 동안 가열하면서 질소 가스로 퍼징하였다. Zhan 촉매-1B(22 mg, 0.0300 mmol)를 첨가하고, 5분 동안 교반한 다음, 디클로로에탄 (5 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-N-(1-피리미딘-2-일부트-3-에닐)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(84 mg, 0.1199 mmol)의 용액을 약 5분에 걸쳐 첨가하였다. 가열 온도를 83℃(오일조 온도)로 상승시키고, 질소 가스로 버블링을 계속하면서, 반응물을 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 DMSO(3방울)로 퀀칭시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔에 직접 흡착시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔(E/Z 혼합물)(39 mg, 49%)을 호박색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 621.1559, 확인된 값 622.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.0분 (LC 방법 BB).
단계 8: (6 R )-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
(6R)-6-벤질옥시-17-니트로-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔(E/Z 혼합물)(32 mg, 0.0477 mmol)을 무수 메탄올(3 mL)에 용해시켰다. 혼합물 내로 질소를 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(35 mg, 5% w/w, 0.0164 mmol)을 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물 내로 질소 풍선으로 5분 동안 버블링하고, 반응 혼합물을 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 나일론 0.45 마이크론 필터(주사기 이용)로 여과학, 메탄올(2 X 0.4 mL)로 헹구었다. 여액을 감압 하에 증발시켜 농축시켜 (6R)-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (30 mg, 86%, 69% 순도)을 어두운 황색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 503.1504, 확인된 값 503.9 (M+1)+; 머무름 시간: 3.13분 (LC 방법 C).
단계 9: (6 R )-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 201) 및 (6 R )-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 202)
라세미 (6R)-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(45 mg, 0.0614 mmol, 69% 순도)을 실리카 겔 상에 직접 흡착시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~50% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 28 mg의 풍부한 물질을 89% 순도로 수득하였다. 그런 다음, 이 물질을 실리카 겔 상에 흡착시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 다시 정제하여 19.5 mg의 풍부한 물질을 95.9% 순도로 수득하였다. 이 부분 입체이성질체 혼합물을 40℃의 Lux 셀룰로오스 1 컬럼(150 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기) 을 사용해 SFC(용리 구배: 20% MeOH/CO2; 유속: 75 mL/분; 주입 부피: 1500 μL; 압력: 100 bar,; 파장: 210 nm)로 분리하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(4 mg, 12%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.82 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.44 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 6.22 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.02 - 4.95 (m, 1H), 2.31 - 2.22 (m, 1H), 2.13 - 2.02 (m, 1H), 1.96 - 1.85 (m, 1H), 1.71 - 1.31 (m, 7H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.80 (s, 3F), -76.54 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 503.1504, 확인된 값 504.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.17분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 (6R)-17-아미노-12-피리미딘-2-일-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(3.5 mg, 11%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.82 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 7.63 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.44 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 6.27 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.06 (s, 2H), 4.91 - 4.84 (m, 1H), 2.60 - 2.50 (m, 1H), 2.24 - 2.13 (m, 1H), 2.12 - 1.99 (m, 1H), 1.74 - 1.47 (m, 5H), 1.46 - 1.25 (m, 2H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.81 (s, 3F), -79.02 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 503.1504, 확인된 값 504.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.12분 (LC 방법 C).
실시예 112: (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,11-디올 (거울상이성질체 1)(화합물 203) 및 (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,11-디올 (거울상이성질체 2)(화합물 204)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)카르바메이트
디클로로메탄 (70 mL) 중 2-아미노-2-메틸-프로판-1-올(13.45 g, 16 mL, 135.8 mmol) 및 트리에틸아민(13.794 g, 19 mL, 136.32 mmol)의 용액에 디-터트- 부틸 디카르보네이트(27 g, 123.71 mmol)를 10분에 걸쳐 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 10% 구연산 수용액(200 mL)으로 희석하고, 이어서 아세트산 에틸(2 X 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(150 mL)과 염수(150 mL)로 세척한 다음, 무수 황산 마그네슘으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 터트-부틸 N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)카르바메이트(19.5 g, 83%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 4.71 (br s, 1H), 4.27 - 3.96 (m, 1H), 3.57 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.25 (s, 6H) ppm.
단계 2: 터트 -부틸 N -(1,1-디메틸-2-옥소-에틸)카르바메이트
DMSO (80 mL) 및 Et3N (8.02 g, 11.05 mL, 79.26 mmol) 중 터트-부틸 N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)카르바메이트(5 g, 26.42 mmol)의 용액을 DMSO (66 mL) 중 삼산화황 피리딘 복합체(12.62 g, 6.573 mL, 79.26 mmol)의 용액으로 처리하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 1시간 동안 실온으로 가온시킨 다음, Et2O 내에 부었다. 유기물을 10% 구연산, 포화 NaHCO3, 및 염수로 세척하였다. 그러 다음 유기물을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 터트-부틸 N-(1,1-디메틸-2-옥소-에틸)카르바메이트(6.0269 g)를 고형분으로서 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 투입하였다..
단계 3: 터트 -부틸 N -(2-하이드록시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)카르바메이트
터트-부틸 N-(1,1-디메틸-2-옥소-에틸)카르바메이트(1 g, 5.3409 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시키고, 염화 알릴마그네슘(5.4 mL의 2 M, 10.8 mmol)를 5분에 걸쳐 적가하여 처리한 다음, 이 온도를 5분 동안 추가로 유지하였다. 드라이아이스조를 제거하고, 플라스크를 얼음조(0℃ 내지 5℃)에 넣었다. 용액을 이 온도에서 1시간 동아 교반한 다음, NH4Cl 수용액(100 mL)과 얼음(100 g)의 혼합물 내에 부었다. 혼합물을 EtOAc로 추출하고(5 X 75 mL), 합쳐진 유기층을 염수(25 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 80 g 컬럼; 구배: 10분에 걸쳐 0%~20% EtOAc/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)카르바메이트 (980 mg, 80%)를 무색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 6.00 - 5.89 (m, 1H), 5.15 - 5.08 (m, 2H), 4.67 (s, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.57 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 2.39 - 2.30 (m, 1H), 2.11 - 2.01 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.37 (s, 3H), 1.23 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 229.1678, 확인된 값 230.7 (M+1)+; 머무름 시간: 4.15분 (LC 방법 DD).
단계 4: 터트 -부틸 N -(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)카르바메이트
아르곤 하에서, 플라스크에 광유 중 NaH(2.12 g, 60% w/w, 53.005 mmol)를 채우고, 헥산(55 mL)으로 세척하고, 주사기와 바늘을 통해 상청액 층(53 mL)을 디캔팅하였다. 고형분을 THF(23 mL)로 처리하고, 0℃로 냉각시켰다. 그런 다음, 0℃의 THF (26 mL) 중 터트-부틸 N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)카르바메이트(4.06 g, 17.705 mmol)의 용액을 슬러리에 35분에 걸쳐 적가하여 처리하고, 30분 동안 추가로 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 브롬화 벤질(7.4776 g, 5.2 mL, 43.72 mmol)을 10분에 걸쳐 적가하여 처리하고, 이어서 TBAI(654 mg, 1.7706 mmol)를 한 번에 첨가하고, 0℃에서 3시간 동안 추가로 교반하였다. 얼음조를 제거하고, 반응물을 90분에 걸쳐 실온으로 가온시키고, 1시간 동안 추가로 교반하였다. 혼합물을 Et2O(50 mL)로 희석하고, 생성된 혼합물을 얼음(300 g) 중 NH4Cl 포화 수용액(300 mL)의 교반 혼합물에 조심스럽게(5 mL씩 나누어서) 첨가하였다. 반응물을 EtOAc(400 mL)로 희석하고, 층을 분리하였다. 수성상을 EtOAc로 추출하고(4 X 150 mL), 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 미정제 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 100% 헥산~5% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)카르바메이트(4.47 g, 78%)를 무색 액체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.36 - 7.31 (m, 4H), 7.31 - 7.26 (m, 1H), 5.99 - 5.89 (m, 1H), 5.13 (dq, J = 17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.06 - 5.02 (m, 1H), 4.71 - 4.64 (m, 2H), 4.54 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.95 - 3.76 (m, 1H), 2.44 - 2.35 (m, 1H), 2.30 - 2.23 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.31 (d, J = 9.4 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 319.2147, 확인된 값 320.4 (M+1)+; 머무름 시간: 7.06분 (LC 방법 DD).
단계 5: 3-벤질옥시-2-메틸-헥스-5-엔-2-아민 (트리플루오로아세테이트 염)
DCM (7 mL) 중 터트-부틸 N-(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)카르바메이트 (400 mg, 1.2522 mmol)의 용액을 질소 하에 0℃로 냉각시키고, DCM (4 mL) 중 TFA(888 mg, 0.6 mL, 7.7879 mmol)의 차가운(0℃ 내지 5℃) 용액을 5분에 걸쳐 적가하여 처리하였다. 조를 제거하고, 반응물을 150분 동안 실온으로 가온시켰다. 반응물을 실온에서 농축시키고, 진공 하에 5일 동안 건조시켜, 3-벤질옥시-2-메틸-헥스-5-엔-2-아민(트리플루오로아세테이트 염)(431 mg, 100%)을 무색 취성 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.81 (s, 3H), 7.42 - 7.32 (m, 4H), 7.34 - 7.26 (m, 1H), 5.96 - 5.84 (m, 1H), 5.21 - 5.12 (m, 1H), 5.07 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.50(dd, J = 7.4, 4.0 Hz, 1H), 2.48 - 2.42 (m, 1H), 2.30 - 2.23 (m, 1H), 1.24 (d, J = 19.7 Hz, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 219.1623, 확인된 값 220.6 (M+1)+; 머무름 시간: 3.18분 (LC 방법 DD).
단계 6: 메틸 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아르곤 하에, DCM (43 mL) 중 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (4.65 g, 16.34 mmol) 및 3-벤질옥시-2-메틸-헥스-5-엔-2-아민 (트리플루오로아세테이트 염)(6.11 g, 18.329 mmol)의 용액에 실온의 Et3N(6.534 g, 9 mL, 64.572 mmol)을 첨가하고, 반응물을 160분 동안 교반하였다. 반응물을, 추가의 Et3N(3.993 g, 5.5 mL, 39.46 mmol)을 3분에 걸쳐 적가하여 처리하고, 40℃에서 가열한 다음, 30℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응물을 DCM(150 ml)으로 희석하고, 염수(20 ml)로 세척하였다. 염수층을 DCM(30 mL)으로 추출하였다. 유기층을 합치고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~5% EtOAc/헥산)로 정제하여 메틸 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (6.18 g, 76%)를 걸쭉한 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.40 (s, 1H), 7.34 - 7.25 (m, 5H), 6.27 (s, 1H), 5.98 - 5.85 (m, 1H), 5.19 - 5.11 (m, 1H), 5.08 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.49 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.81 - 3.75 (m, 1H), 2.55 - 2.46 (m, 1H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 1.53 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.1668, 확인된 값 468.2 (M+1)+; 머무름 시간: 7.64분 (LC 방법 DD).
단계 7: 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF (30 mL) 중 메틸 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(6.18 g, 12.428 mmol)의 용액에 수산화 리튬(일수화물)(5.2 g, 123.92 mmol)을 첨가하고, 이어서 물(6 mL)과 MeOH(2.8 mL)를 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 30℃의 오일조에서 5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 MTBE(300 mL)로 희석하고, 물(200 mL) 및 1 M NaOH(100 mL)로 세척하였다. 유기층을 염수(200 mL)로 추가로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (5.5 g, 93%)을 연황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (s, 1H), 7.36 - 7.24 (m, 5H), 6.00 (s, 1H), 5.97 - 5.85 (m, 1H), 5.14 (dd, J = 17.1, 2.0 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.49 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 7.1, 3.9 Hz, 1H), 3.30 (s, 1H), 2.30 (dt, J = 14.7, 7.2 Hz, 1H), 1.49 (s, 6H) ppm. 하나의 교환 가능한 양성자가 NMR에서 관찰되지 않았다. ESI-MS m/z 계산된 값 453.15115, 확인된 값 454.4 (M+1)+; 머무름 시간: 6.61분 (LC 방법 DD).
단계 8: 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]- N' -[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
건조 EtOAc (2.8 mL) 중 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(349 mg, 0.7697 mmol) 및 2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드(222 mg, 0.7701 mmol)의 용액에 무수 프로필포스폰산 용액(686 mg, EtOAc 중 50%, 1.078 mmol)을 첨가한 다음, 피리딘(273.84 mg, 0.280 mL, 3.462 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 EtOAc(20 mL)로 희석하고, NH4Cl(20 mL)로 퀀칭시키고, EtOAc(2 X 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(2 X 40 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~15% EtOAc/헥산)로 정제하여 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(385 mg, 68%)를 백색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 9.23 - 9.16 (m, 1H), 8.58 (dd, J = 28.2, 5.4 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.44 - 7.34 (m, 5H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 3H), 6.09 (s, 1H), 6.00 - 5.77 (m, 2H), 5.40 - 5.25 (m, 2H), 5.14 (dt, J = 17.1, 1.6 Hz, 1H), 5.07 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.75 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.85 (dd, J = 6.6, 4.3 Hz, 1H), 3.21 - 3.11 (m, 1H), 3.02 (ddd, J = 15.3,7.8, 3.5 Hz, 1H), 2.50 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 2.38 (dt, J = 14.6, 7.1 Hz, 1H), 1.54 - 1.50 (m, 6H) ppm. 하나의 양성자가 NMR에서 관찰되지 않거나 용매에 의해 가려짐. ESI-MS m/z 계산된 값 723.24915, 확인된 값 724.6 (M+1)+; 머무름 시간: 7.9분 (LC 방법 DD).
단계 9: N -(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)-6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
CH3CN (5 mL) 중 6-[(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)아미노]-N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(385 mg, 0.5267 mmol)의 용액에 p-TsCl(115 mg, 0.6032 mmol)을 첨가한 다음 DIPEA(204.05 mg, 0.275 mL, 1.5788 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응물을 EtOAc(30 mL)로 희석한 다음, NH4Cl (30 mL) 및 염수(30 mL)로 세척하였다. Na2SO4를 이용해 유기층을 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~100% EtOAc/헥산)로 정제하여 N-(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(293 mg, 78%)을 담녹색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.44 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.41 - 7.25 (m, 8H), 7.27 - 7.19 (m, 2H), 6.33 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.02 - 5.84 (m, 2H), 5.32 - 5.18 (m, 2H), 5.18 - 5.03 (m, 2H), 4.78 (ddd, J = 34.0,11.0, 1.9 Hz, 2H), 4.68 - 4.60 (m, 1H), 4.46 (dd, J = 11.4, 4.1 Hz, 1H), 3.76 (dt, J = 6.5, 4.0 Hz, 1H), 3.30 - 3.15 (m, 2H), 2.54 - 2.44 (m, 1H), 2.37 (dt, J = 14.6, 7.1 Hz, 1H), 1.49 (s, 6H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 705.2386, 확인된 값 706.4 (M+1)+; 머무름 시간: 8.79분 (LC 방법 DD).
단계 10: (6 R )-6,11-디벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
1,2-디클로로에탄 (60 mL) 중 N-(2-벤질옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(100 mg, 0.1417 mmol)의 용액에 아르곤 가스를 살포하여 탈기한 다음, Zhan 촉매-1B(12.491 mg, 0.017 mmol)를 첨가하고, 1시간 동안 추가로 탈기하였다. 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% EtOAc/헥산)로 정제하여 (6R)-6,11-디벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(77 mg, 76%)을 백색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 677.2073, 확인된 값 678.5 (M+1)+; 머무름 시간: 8.16분 (LC 방법 DD).
단계 11: (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,11-디올 (거울상이성질체 1)(화합물 203) 및 (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,11-디올 (거울상이성질체 2)(화합물 204)
EtOH (3.5 mL) 중 (6R)-6,11-디벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(69 mg, 0.0967 mmol)의 용액에 Pd/C(7 mg, 10% w/w, 0.0066 mmol)를 N2 하에 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 반응 용기를 수소 가스로 퍼징하고, 실온의 수소 풍선을 사용해 1 atm의 수소 하에서 36시간 동안 교반하였다. 추가의 Pd/C(7 mg, 10% w/w, 0.0066 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 48시간 동안 추가로 교반하였다. 혼합물을 EtOH(14 mL)로 여과하고, 셀라이트 플러그를 통해 여과하고, 여액에 Pd/C(39 mg, 10% w/w, 0.0366 mmol)를 N2 하에 첨가한 다음, 반응 용기에 넣고, 이를 수소 가스로 퍼징하고, 실온에서 1 atm의 수소 (풍선) 하에서 1.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% EtOAc/n-펜탄)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체인 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,11-디올(거울상이성질체 1)(11.2 mg, 49%)을 황색 유리질 물질로서 단리하였다. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.50 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 5.79 (dd, J = 10.4, 2.0 Hz, 1H), 2.61 - 2.49 (m, 1H), 2.08 - 1.97 (m, 1H), 1.83 - 1.68 (m, 4H), 1.65 - 1.58 (m, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.46 - 1.37 (m, 1H)1.23 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.5 (M+1)+; 머무름 시간: 2.33분 (LC 방법 H).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체인 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,11-디올(거울상이성질체 2)(10 mg, 44%)을 황색 발포체로서 단리하였다. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 5.83 - 5.77 (m, 1H), 2.52 (td, J = 13.8, 2.4 Hz, 1H), 1.98 - 1.85 (m, 2H), 1.81 - 1.72 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.53 - 1.36 (m, 3H), 1.22 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.5 (M+1)+; 머무름 시간: 2.62분 (LC 방법 H).
실시예 113: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,4'-테트라하이드로피란]-6-올 (화합물 205) 및 (6 R )-17-(메틸아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-12,4'-테트라하이드로피란]-6-올 (화합물 206)의 제조
단계 1: 2-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸
N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)헥스-5-엔오일]-6-하이드록시-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(30 g, 42.507 mmol)를 삼염화 포스포릴(60 mL), 및 아세토니트릴(60 mL)의 혼합물에 용해시켰다. 그런 다음, 디메틸포름아미드(30 mL)를 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 가열하였다. 그런 다음, 혼합물을 20℃ 내지 40℃의 1M 수성 중탄산 칼륨 용액(900 mL)에서 퀀칭시키고, 퀀칭 도중의 pH를 모니터링하여 수산화 나트륨(6 M 용액, 총 240 mL)을 사용해 조정하였다. 그런 다음, 수성상을 아세트산 에틸(2 X 450 mL)로 추출하고, 유기상을 합치고, 황산나트륨(100 g)으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 그런 다음, 잔류물을 아세트산 에틸에 용해시키고, 실리카(100 g)를 사용해 건식으로 충진하였다. 건식으로 충진된 실리카 겔을 헵탄으로 습윤된 실리카 겔(500 g, 건조 기준) 상에 첨가한 다음, 헵탄(2 L)에 이어서 10% 메틸 터트-부틸 에테르/헵탄(4 L)으로 용리한 다음, 20% 메틸 터트-부틸 에테르/헵탄(2 L)으로 용리하고, 마지막으로 아세트산 에틸(2L)로 용리하였다. 순수한 생성물을 함유하는 분획을 증발시키고 합쳐서, 2-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸 (12.5 g, 54%)을 연황색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 536.0686, 확인된 값 537.0 (M+1)+; 머무름 시간: 3.898분 (LC 방법 C).
단계 2: N -(4-알릴테트라하이드로피란-4-일)-6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (5 mL) 중 2-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸(222 mg, 0.4136 mmol), 4-알릴테트라하이드로피란-4-아민(92 mg, 0.6515 mmol), 및 DIPEA(148.40 mg, 0.2 mL, 1.1482 mmol)의 용액을 65℃로 설정된 오일조에서 약 4시간 동안 교반하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨(40 mL)과 함께 125 mL 분별 깔때기에 옮기고, 수성층을 아세트산 에틸(3 X 25 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(25 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~25% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 짙은 적색 유성 잔류물을 수득하였다. 이 물질을 역상 C18 크로마토그래피(용리 구배: 5%~80% 아세토니트릴/물(+ 10 mM 중탄산 암모늄/수산화 암모늄 완충액; pH = 10))로 추가로 정제하여 N-(4-알릴테트라하이드로피란-4-일)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(60.4 mg, 23%)을 주황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.44 - 7.29 (m, 5H), 5.87 - 5.74 (m, 1H), 5.67 (ddt, J = 17.1, 9.9, 7.4 Hz, 1H), 5.43 (br. s., 1H), 5.13 - 4.95 (m, 4H), 4.84 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.80 (dt, J = 11.9, 3.6 Hz, 2H), 3.65 - 3.53 (m, 2H), 2.77 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 2.58 - 2.16 (m, 6H), 1.93 - 1.81 (m, 2H) ppm. 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.52 (s, 3F), -73.15 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 641.2073, 확인된 값 642.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.14분 (LC 방법 BB).
단계 3: (6' R )-6'-(벤질옥시)-17'-니트로-6',15'-비스(트리플루오로메틸)-19'-옥사-3',4',13',18'-테트라아자스피로[옥산-4,12'-트리시클로[12.3.1.12,5]노나데칸]-1'(18'),2',4',9',14',16'-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
디클로로에탄 (30 mL) 중 N-(4-알릴테트라하이드로피란-4-일)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(60.4 mg, 0.0940 mmol)의 용액을 질소 가스로 60분 동안 버블링하였다. 그런 다음, 용액을 60℃로 설정된 오일조에 넣고, 처음 분량의 Zhan 촉매-1B(4.6 mg, 0.0063 mmol)를 첨가하였다. 45분 후, 두 번째 로트의 Zhan 촉매-1B(4.5 mg, 0.0061 mmol)를 첨가하고, 추가로 3시간 동안 계속 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응물을 DMSO(2방울)로 퀀칭시킨 후, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 상에 직접 흡착시켰다. 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (6'R)-6'-(벤질옥시)-17'-니트로-6',15'-비스(트리플루오로메틸)-19'-옥사-3',4',13',18'-테트라아자스피로[옥산-4,12'-트리시클로[12.3.1.12,5]노나데칸]-1'(18'),2',4',9',14',16'-헥사엔 (E/Z 혼합물)(46.4 mg, 80%)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.59 (s, 1H), 7.41 - 7.28 (m, 5H), 5.74 - 5.64 (m, 1H), 5.61 - 5.47 (m, 2H), 5.18 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.98 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.91 - 3.81 (m, 2H), 3.57 - 3.43 (m, 2H), 3.10 (dd, J = 13.6, 8.9 Hz, 1H), 2.86 (dd, J = 13.6, 7.7 Hz, 1H), 2.44 - 1.85 (m, 8H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 613.176, 확인된 값 614.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.96분 (LC 방법 BB).
단계 4: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,4'-테트라하이드로피란]-6-올 (화합물 205) 및 (6 R )-17-(메틸아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-12,4'-테트라하이드로피란]-6-올 (화합물 206)
메탄올 (3 mL) 중 (6'R)-6'-(벤질옥시)-17'-니트로-6',15'-비스(트리플루오로메틸)-19'-옥사-3',4',13',18'-테트라아자스피로[옥산-4,12'-트리시클로[12.3.1.12,5]노나데칸]-1'(18'),2',4',9',14',16'-헥사엔(E/Z 혼합물)(46.4 mg, 0.0748 mmol)의 용액을 질소 가스로 3회 퍼징하였다. 탄소 상 팔라듐(48.5 mg, 5% w/w, 0.0228 mmol)을 첨가한 다음, 반응물을 수소 가스로 2회 퍼징하고, 1 atm의 수소 하에 방치하여 약 19시간 동안 교반시켰다. 반응물을 질소 가스로 2회 퍼징하고, 셀라이트 패드로 여과하고, 케이크를 에탄올(약 30 mL)로 세척하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하고, 잔류물을 역상 C18 크로마토그래피(용리 구배: 5%~70% 아세토니트릴/물(+ 10 mM 중탄산 암모늄/수산화 암모늄 완충액; pH = 10))로 정제하여 2개의 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 생성물인 (6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,4'-테트라하이드로피란]-6-올 (16.7 mg, 44%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.62 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 6.01 (s, 2H), 4.79 (s, 1H), 3.70 - 3.56 (m, 2H), 3.55 - 3.38 (m, 2H), 2.75 - 2.62 (m, 1H), 2.23 - 2.03 (m, 3H), 2.00 - 1.86 (m, 2H), 1.86 - 1.61 (m, 3H), 1.60 - 1.37 (m, 5H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.21 (s, 3F), -78.07 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 495.1705, 확인된 값 496.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.52분 (LC 방법 BB).
두 번째로 용리되는 생성물인 (6R)-17-(메틸아미노)-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-12,4'-테트라하이드로피란]-6-올(7.4 mg, 19%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.16 (q, J = 4.6 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 2H), 3.56 - 3.39 (m, 2H), 2.95 (d, J = 5.1 Hz, 3H), 2.74 - 2.63 (m, 1H), 2.24 - 2.04 (m, 3H), 2.01 - 1.87 (m, 2H), 1.86 - 1.61 (m, 3H), 1.59 - 1.37 (m, 5H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -61.86 (s, 3F), -78.05 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 509.1862, 확인된 값 510.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.79분 (LC 방법 BB).
실시예 114: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 207) 및 (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 208)의 제조
단계 1: N -(3-알릴테트라하이드로푸란-3-일)-6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (5 mL) 중 2-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸 (234 mg, 0.4359 mmol), 3-알릴테트라하이드로푸란-3-아민 (염산염)(99 mg, 0.605 mmol), 및 DIPEA(222.6 mg, 0.3 mL, 1.7223 mmol)의 용액을 65℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 실온에서 19시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액(50 mL)과 함께 125 mL 분별 깔때기에 옮기고, 수성층을 아세트산 에틸(3 X 25 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(25 mL)로 세척하고, 황산나트륨을 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 N-(3-알릴테트라하이드로푸란-3-일)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (220 mg, 80%)을 주황색 내지 적색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.55 (s, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 5H), 5.87 - 5.66 (m, 3H), 5.14 (dd, J = 10.0, 1.2 Hz, 1H), 5.12 - 5.08 (m, 1H), 5.07 - 5.04 (m, 1H), 5.02 (dd, J = 10.1, 1.3 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.67 (dd, J = 10.6, 1.6 Hz, 1H), 4.02 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.98 - 3.92 (m, 2H), 3.85 (dd, J = 9.5, 1.5 Hz, 1H), 2.79 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 2.58 - 2.21 (m, 5H), 2.20 - 2.09 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -64.46 (s, 3F), -73.13 (s, 3F, 부분 입체이성질체 A), -73.17 (s, 3F, 부분 입체이성질체 B) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 627.1916, 확인된 값 628.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.09분 (LC 방법 BB).
단계 2: (6 R )-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,3'-테트라하이드로푸란] ( E/Z 혼합물)
디클로로에탄 (110 mL) 중 N-(3-알릴테트라하이드로푸란-3-일)-6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)펜트-4-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (220 mg, 0.3485 mmol)의 용액을 질소 가스로 22시간 동안 버블링하였다. 용액을 60℃에서 가열하고, 처음 양의 Zhan 촉매-1B(17.9 mg, 0.0244 mmol)를 첨가하였다. 45분 후, 두 번째 양의 Zhan 촉매-1B(18.2 mg, 0.0248 mmol)를 첨가하고, 추가로 3시간 동안 계속 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, DMSO(8방울)로 퀀칭시켰다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~35% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,3'-테트라하이드로푸란] (E/Z 혼합물)(173.9 mg, 82%)을 연한 호박색 반 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 599.1603, 확인된 값 600.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.88분 (LC 방법 BB).
단계 3: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올
에탄올 (9 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,9,14(18),15-헥사엔-12,3'-테트라하이드로푸란] (E/Z 혼합물)(131.7 mg, 0.2171 mmol)의 용액을 질소 가스로 3회 퍼징하였다. 탄소 상 팔라듐(131.5 mg, 5% w/w, 0.0618 mmol)을 첨가한 다음, 반응물을 수소 가스로 2회 퍼징하고, 반응물을 1 atm의 수소 하에 약 22시간 동안 교반하였다. 반응물을 질소 가스로 2회 퍼징하고, 셀라이트 패드로 여과하고, 케이크를 에탄올(약 30 mL)로 세척하였다. 여액의 휘발성 물질을 감압 하에 제거하여, 진황색 오일로서 및 부분 입체이성질체의 혼합물로서, (6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올 (103 mg, 96%)을 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 481.1549, 확인된 값 482.2 (M+1)+; 머무름 시간: 30.39분 (LC 방법 BB).
단계 4: (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 207) 및 (6 R )-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 208)
(6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올 (103 mg)을 역상 크로마토그래피(컬럼: AQ C18 컬럼 (50 g); 용리 구배: 5%~70%의 아세토니트릴/염기성수(10 mM 중탄산 암모늄/수산화 암모늄 완충액, pH = 10))로 정제하였다. 생성된 황색 고형분을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-5 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 um 입자 크기)을 사용해 SFC(구배: 7% EtOH(+ 0.1% di에틸아민)/CO2)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체을 단리한 다음, 아세트산 에틸(10 mL)에 용해시키고, 유기층을 1 N 수성 HCl(10 mL), 중탄산나트륨의 포화 수용액(10 mL), 및 염수(10 mL)로 연속 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시킨 다음, 아세토니트릴/물로부터 동결건조시켜 (6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올(거울상이성질체 1)(44.5 mg, 33%)을 진황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.41 (s, 1H), 4.11 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.81 (td, J = 8.4, 3.5 Hz, 1H), 3.71 - 3.58 (m, 2H), 2.74 (t, J = 11.1 Hz, 1H), 2.31 - 2.15 (m, 2H), 2.13 - 1.95 (m, 2H), 1.80 - 1.59 (m, 2H), 1.57 - 1.35 (m, 5H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.26 (s, 3F), -78.52 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.1549, 확인된 값 482.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.0분 (LC 방법 C).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체을 단리한 다음, 아세트산 에틸(10 mL)에 용해시키고, 유기층을 1 N 수성 HCl(10 mL), 중탄산나트륨의 포화 수용액(10 mL), 및 염수(10 mL)로 연속 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시키고, 아세토니트릴/물로부터 동결건조시켜 (6R)-17-아미노-6,15-비스(트리플루오로메틸)스피로[19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-12,3'-테트라하이드로푸란]-6-올(거울상이성질체 2)(45.5 mg, 34%)을 진황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.26 (s, 1H), 3.90 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.81 - 3.65 (m, 3H), 2.46 - 2.35 (m, 1H), 2.23 - 2.06 (m, 5H), 1.68 - 1.36 (m, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.32 (s, 3F), -77.72 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 481.1549, 확인된 값 482.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.06분 (LC 방법 C).
실시예 115: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (거울상이성질체 1, 트랜스 디올)(화합물 209) 및 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (거울상이성질체 2, 트랜스 디올)(화합물 210)의 제조
단계 1: 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-7-온 ( E/Z 혼합물)
0℃의 디클로로메탄 (2 mL) 중 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-7-올 (E/Z 올레핀 혼합물, 시스 디올)(22 mg, 0.0374 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(25 mg, 0.0589 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, 2시간 동안 환류시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-7-온 (E/Z 혼합물)(20 mg, 91%)을 옅은 색상의 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 585.1447, 확인된 값 586.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.94분 (LC 방법 BB).
단계 2: 17-아미노-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-7-온
메탄올 (12 mL) 중 6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-7-온 (E/Z 혼합물)(120 mg, 0.205 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 버블링한 다음, 탄소 상 팔라듐(131 mg, 5% w/w, 0.0615 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 풍선으로 5분 동안 버블링한 다음, 혼합물을 1 atm의 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올(25 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 17-아미노-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-7-온 (66 mg, 69%)을 형광 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.31 (s, 1H), 5.22 (br. s., 1H), 5.08 (br. s., 2H), 4.40 (br. s., 1H), 3.48 (ddd, J = 19.6, 8.4, 5.0 Hz, 1H), 3.06 - 2.92 (m, 1H), 2.71 (dt, J = 19.3, 5.1 Hz, 1H), 2.22 - 2.07 (m, 1H), 1.78 - 1.60 (m, 3H), 1.53 - 1.41 (m, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.30 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -63.91 (s, 3F), -74.29 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 467.1392, 확인된 값 468.1 (M+1)+; 머무름 시간: 4.65분 (LC 방법 AA).
단계 3: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올
0℃의 테트라하이드로푸란 (2 mL) 중 17-아미노-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-7-온 (36 mg, 0.077 mmol)의 용액에 테트라메틸암모늄 보로하이드라이드(28 mg, 0.3147 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 실온으로 가온시키면서 밤새 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 아세톤(5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반한 다음, 중탄산나트륨의 포화 수용액(25 mL)으로 처리하였다. 혼합물을 아세트산에틸(2 x 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올(33 mg, 80%)(87.1% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.52분 (LC 방법 BB).
단계 4: 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (거울상이성질체 1, 트랜스 디올)(화합물 209) 및 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (거울상이성질체 2, 트랜스 디올)(화합물 210)
17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올 (72 mg, 0.1534 mmol)을 Phenomenex에서 판매하는 LUX-5 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 SFC(구배: 10% 에탄올(+ 0.1% 디에틸아민)/CO2))로 정제하여 2개의 단일 거울상이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 거울상이성질체인 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올(거울상이성질체 1, 트랜스 디올)(16 mg, 22%)을 진황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.59 (s, 1H), 7.40 (br. s., 1H), 6.00 (s, 2H), 5.45 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.17 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 3.17 - 3.03 (m, 1H), 2.02 - 1.89 (m, 2H), 1.70 - 1.52 (m, 2H), 1.47 - 1.34 (m, 6H), 1.24 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.36 (s, 3F), -72.91 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.51분 (LC 방법 BB).
두 번째로 용리되는 거울상이성질체인 17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,7-디올(거울상이성질체 2, 트랜스 디올)(15.5 mg, 22%)을 진황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.59 (s, 1H), 7.41 (br. s., 1H), 6.00 (s, 2H), 5.45 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.17 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 3.16 - 3.03 (m, 1H), 2.01 - 1.90 (m, 2H), 1.69 - 1.52 (m, 2H), 1.49 - 1.34 (m, 6H), 1.24 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.36 (s, 3F), -72.91 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.1 (M+1)+; 머무름 시간: 3.51분 (LC 방법 BB).
실시예 116: (6 R )-17-아미노-12-(메톡시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 211) 및 (6 R )-17-아미노-12-(메톡시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 212)의 제조
단계 1: 1-메톡시헥스-5-엔-2-온
2-메톡시아세토니트릴(1.434 g, 1.5 mL, 20.175 mmol)를 실온에서 7분에 걸쳐 브로모(부트-3-에닐)마그네슘(40.35 mL의 0.5 M, 20.175 mmol)에 적가하였다. 어두운 적색 반응 혼합물을 환류에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 냉각시키고, 염화 암모늄의 포화 수용액(20 mL)으로 퀀칭시켰다. 생성물을 디에틸에테르(2 X 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물과 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 여과하였다. 여액을 감압 하에 제거하여 1-메톡시헥스-5-엔-2-온(1.4 g, 44%)을 갈색 잔류물로서 수득하고, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: 1-메톡시헥스-5-엔-2-아민
메탄올 (40 mL) 중 1-메톡시헥스-5-엔-2-온 (1.4 g, 8.8695 mmol)의 용액에 아세트산 암모늄(12.44 g, 161.39 mmol) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(761 mg, 12.11 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 48시간 동안 교반하고, 농축시키고, pH < 2가 될 때까지 HCl을 조심스럽게 첨가하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 물(15 mL)에 용해시키고, 디에틸 에테르(20 mL)로 추출하였다. 수성 용액을 고형분 KOH로 pH > 12로 만든 다음, 디에틸 에테르(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기 추출물을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 1-메톡시헥스-5-엔-2-아민 (60 mg, 4%)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 5.89 - 5.72 (m, 1H), 5.11 - 4.92 (m, 2H), 3.43 - 3.32 (m, 4H), 3.26 - 3.18 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.43 - 2.24 (m, 2H), 2.24 - 2.07 (m, 2H), 1.63 - 1.37 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 129.1154, 확인된 값 130.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.0분 (LC 방법 BB).
단계 3: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -[1-(메톡시메틸)펜트-4-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (2 mL) 중 1-메톡시헥스-5-엔-2-아민(60 mg, 0.3947 mmol) 및 2-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-5-[6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-1,3,4-옥사디아졸(253 mg, 0.5089 mmol)의 용액에 DIPEA(296.8 mg, 0.4 mL, 2.2964 mmol)를 적가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(구배: 5%~80% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-[1-(메톡시메틸)펜트-4-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (80 mg, 32%)을 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.57 (s, 1H), 7.41 - 7.27 (m, 5H), 6.14 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.04 - 5.90 (m, 1H), 5.82 - 5.68 (m, 1H), 5.34 - 5.20 (m, 2H), 5.02 - 4.88 (m, 2H), 4.81 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 10.5, 5.1 Hz, 1H), 4.60 - 4.51 (m, 1H), 3.55 - 3.45 (m, 2H), 3.40 - 3.37 (m, 3H), 3.28 - 3.20 (m, 2H), 2.13 - 2.04 (m, 2H), 1.84 - 1.73 (m, 2H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -64.72 (s, 3F), -73.49 (s, 3F, 부분 입체이성질체 A), -73.60 (s, 3F, 부분 입체이성질체 B) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 615.1916, 확인된 값 616.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.82분 (LC 방법 AA).
단계 4: (6 R )-6-벤질옥시-12-(메톡시메틸)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
1,2-디클로로에탄 (40 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-[1-(메톡시메틸)펜트-4-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(80 mg, 0.1261 mmol)의 용액 내로 질소 가스를 20시간 동안 버블링하였다. 그런 다음, 용액을 60℃로 설정된 오일조에 넣고, 처음 양의 Zhan-1B 촉매(6.5 mg, 0.0089 mmol)를 첨가하였다. 45분 후, 두 번째 양의 Zhan-1B 촉매(6.5 mg, 0.0089 mmol)를 첨가하고, 추가로 5시간 동안 계속 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응물을 DMSO(3방울)로 퀀칭시키고, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~35% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-12-(메톡시메틸)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(37 mg, 48%)을 담황색 발포체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.52 - 8.43 (m, 1H), 7.41 - 7.28 (m, 5H), 6.40 - 6.24 (m, 1H), 5.85 - 5.75 (m, 1H), 5.74 - 5.56 (m, 1H), 4.90 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.72 - 4.52 (m, 1H), 4.27 - 4.18 (m, 1H), 3.66 - 3.56 (m, 2H), 3.49 - 3.43 (m, 3H), 3.17 - 2.64 (m, 2H), 2.32 - 2.17 (m, 1H), 1.85 - 1.76 (m, 1H), 1.70 - 1.61 (m, 1H), 1.48 - 1.37 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 587.1603, 확인된 값 588.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.7분 (LC 방법 C).
단계 5: (6 R )-17-아미노-12-(메톡시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 211) 및 (6 R )-17-아미노-12-(메톡시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 212)
테트라하이드로푸란 (3 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-12-(메톡시메틸)-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(37 mg, 0.0608 mmol)의 용액을 질소 가스로 5분 동안 버블링하였다. 탄소 상 팔라듐(39 mg, 5% w/w, 0.0183 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물 내로 수소 가스를 5분 동안 버블링한 다음, 반응물을 1 atm의 수소 하에 96시간 동안 방치하여 교반시켰다. 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하고, 케이크를 아세트산 에틸(30 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켰다. 황색 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 19% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 2개의 부분 입체이성질체 생성물을 수득하였다:
처음 용리되는 부분 입체이성질체인 (6R)-17-아미노-12-(메톡시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(5.67 mg, 19%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.64 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.09 (s, 2H), 5.11 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.74 - 3.65 (m, 1H), 3.61 - 3.55 (m, 1H), 3.53 - 3.46 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.44 - 2.35 (m, 1H), 2.29 - 2.19 (m, 1H), 2.08 - 1.96 (m, 1H), 1.68 - 1.56 (m, 2H), 1.55 - 1.37 (m, 4H), 1.07 - 0.95 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.76 (s, 3F), -79.12 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.55분 (LC 방법 AA).
두 번째로 용리되는 부분 입체이성질체인 (6R)-17-아미노-12-(메톡시메틸)-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(4.97 mg, 17%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.64 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.08 (s, 2H), 5.13 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.80 - 3.72 (m, 1H), 3.61 - 3.55 (m, 1H), 3.54 - 3.47 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.39 - 2.23 (m, 2H), 2.12 - 2.00 (m, 1H), 1.75 - 1.61 (m, 2H), 1.58 - 1.35 (m, 4H), 1.12 - 1.01 (m, 1H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.75 (s, 3F), -76.32 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.56분 (LC 방법 AA).
실시예 117: (6 R )-17-아미노-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 213)의 제조
단계 1: 메틸 5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴 (28 mL) 중 2-메틸헥스-5-엔-2-아민 (염산염)(1.40 g, 9.3544 mmol), 메틸 6-클로로-5-(디플루오로메틸)-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트 (1.9 g, 6.293 mmol) 및 DIPEA (4.081 g, 5.5 mL, 31.576 mmol)의 용액을 밀봉된 튜브에 넣고 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 진한 용액을 실온으로 냉각시켰다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 MTBE(40 mL) 및 0.5 M 염산 용액(60 mL)에 용해시켰다. 수성 용액을 MTBE(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 50% 수성 포화 염화 암모늄 용액(1 X 40 mL), 물(30 mL), 염수(20 mL)로 세척한 다음, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 메틸 5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트 (2.4 g, 76%)를 주황색 필름으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 343.1344, 확인된 값 344.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.16분 (LC 방법 E).
단계 2: 5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르복시산
물(18 mL) 중 수산화 리튬(일수화물)(2.8 g, 66.725 mmol)의 용액을 실온의 THF (18 mL) 및 메탄올 (9 mL) 중 메틸 5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르복실레이트(2.4 g, 4.7815 mmol)의 주황색 용액에 첨가하였다. 황색 현탁액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 진한 적색 용액을 실온으로 냉각시키고, 유기 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류 메탄올을 아세토니트릴(20 mL)과 공동 증발시킨 다음, MTBE(60 mL) 및 염산 용액(1 M, 80 mL)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 수성 용액을 분리하고, MTBE(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 농축시키고, 잔류물을 역상 크로마토그래피(구배: 5%~90% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 정제하여 5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르복시산 (1.4 g, 60%)을 주황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.23 (s, 1H), 6.75 - 6.39 (m, 1H), 6.18 (br. s., 1H), 5.86 - 5.74 (m, 1H), 5.73 - 5.65 (m, 1H), 5.10 - 4.99 (m, 1H), 4.96 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 2.14 - 1.96 (m, 4H), 1.53 (br. s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -115.13 내지 -115.65 (m, 2F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 329.1187, 확인된 값 328.6 (M-1)-; 머무름 시간: 1.94분 (LC 방법 C).
단계 3: N' -[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드
HATU(2.0 g, 5.2600 mmol)를 실온의 DMF (7 mL) 중 5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르복시산 (1.4 g, 2.8697 mmol), (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 (1.45 g, 5.0301 mmol), 및 DIPEA(2.6712 g, 3.6 mL, 20.668 mmol)의 주황색 용액에 첨가하였다. 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. DMF 용액을 역상 크로마토그래피(구배: 5%~75% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 직접 정제하여 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드 (2.26 g, 정량화)를 연황색 고형분으로서 수득하였다. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -73.76 (s, 3F), -115.07 내지 -116.18 (m, 2F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 599.2167, 확인된 값 600.3 (M+1)+; 머무름 시간: 3.75분 (LC 방법 BB).
단계 4: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-3-(디플루오로메틸)- N -(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-피리딘-2-아민
DCM (100 mL) 중 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔오일]-5-(디플루오로메틸)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-피리딘-2-카르보하이드라지드 (2.26 g, 3.7695 mmol) 및 1,4-디아자바이시클로[2.2.2]옥탄(715 mg, 6.3741 mmol)의 용액을 실온의 DCM (80 mL) 중 2-클로로-1,3-디메틸-4,5-디하이드로이미다졸-1-윰;클로라이드(895 mg, 5.2942 mmol)의 용액으로 처리하였다. 이미다졸륨 중간체의 형성은 15분 후에 완료되었다. DCM을 증발시키고, 잔류물을 툴루엔(250 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 진갈색 혼합물을 물(150 mL)로 퀀칭시키고, 수성 용액을 분리한 다음, MTBE(3 X 80 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 주황색 오일(2.39 g)을 수득하였다. 이 오일을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 1%~35% MTBE/헵탄)로 정제하여 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-3-(디플루오로메틸)-N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-피리딘-2-아민 (1.75 g, 80%)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.30 (s, 1H), 7.44 - 7.23 (m, 5H), 6.81 - 6.44 (m, 1H), 6.05 - 5.89 (m, 1H), 5.83 - 5.63 (m, 2H), 5.30 - 5.18 (m, 2H), 5.04 - 4.88 (m, 2H), 4.82 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.22 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.12 - 1.86 (m, 4H), 1.48 (s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -73.46 (s, 3F), -115.13 내지 -116.66 (m, 2F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 581.2061, 확인된 값 582.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.43분 (LC 방법 E).
단계 5: (6 R )-6-벤질옥시-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-17-니트로-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
DCE (530 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-3-(디플루오로메틸)-N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-피리딘-2-아민(1.75 g, 3.0063 mmol)의 연황색 용액을 통해 밤새 질소를 버블링하였다. Zhan 촉매-1B(60 mg, 0.0818 mmol)를 실온에서 첨가하고, 질소를 5분 동안 버블링하였다. 그런 다음, 연황색 용액을 65℃에서 30분 동안 교반하고, Zhan 촉매-1B(120 mg, 0.1696 mmol)를 65℃에서 2번으로 나누어 30분 간격으로 첨가하고, 혼합물을 3.5시간 동안 교반하였다. 갈색 용액을 실온으로 냉각시킨 다음, DMSO(6 mL)을 첨가하여 촉매를 퀀칭시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 1%~100% MTBE/헵탄)로 정제하여 미정제 생성물을 수득하고, 이를 역상 크로마토그래피(구배: 5%~100% 아세토니트릴/물(+ 0.1% 포름산))로 추가로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-17-니트로-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔(E/Z 혼합물)(341 mg, 20%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.27 (s, 1H), 7.45 - 7.24 (m, 5H), 6.82 - 6.41 (m, 1H), 5.79 - 5.57 (m, 3H), 4.86 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.54 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 14.1, 3.7 Hz, 1H), 2.70 (dd, J = 14.2, 8.5 Hz, 1H), 2.60 - 2.48 (m, 1H), 2.22 - 2.08 (m, 1H), 2.05 - 1.91 (m, 2H), 1.44 (d, J = 9.4 Hz, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ -73.01 (s, 3F), -115.34 (dd, J = 53.1, 12.3 Hz, 2F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 553.1748, 확인된 값 554.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.34분 (LC 방법 E).
단계 6: (6 R )-6-벤질옥시-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-아민
THF (7 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-17-니트로-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(340 mg, 0.6112 mmol)의 탈기된 용액에 탄소 상 팔라듐(66 mg, 5% w/w, 0.062 mmol)을 첨가하였다. 흑색 현탁액을 5분 동안 질소로 퍼징한 다음, 현탁액을 통해 수소를 5분 동안 버블링하였다. 그런 다음, 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 2일 동안 교반하였다. 다시, 탄소 상 팔라듐(85 mg, 5% w/w, 0.7987 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 수소 분위기 하에 2일 동안 추가로 교반하였다. 흑색 현탁액을 질소로 퍼징한 다음, 셀라이트 플러그를 통해 여과하였다. 케이크를 DCM(3 X 5 mL)으로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 (6R)-6-벤질옥시-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-아민 (290 mg, 24%)을 형광 황색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 525.22, 확인된 값 526.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.40분 (LC 방법 E).
단계 7: (6 R )-17-아미노-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 213)
실온의 THF (8 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-17-아민 (290 mg, 0.4304 mmol)의 탈기된 용액에 탄소 상 팔라듐(160 mg, 5% w/w, 0.1503 mmol)을 첨가하였다. 흑색 현탁액을 5분 동안 질소로 퍼징한 다음, 현탁액을 통해 수소를 5분 동안 버블링하였다. 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 흑색 현탁액을 질소로 퍼징한 다음, 셀라이트 플러그를 통해 여과하고, 케이크를 DCM(3 X 5 mL)으로 세척하였다. 여액을 진공 하에 농축시켜 형광 황색 오일을 수득하고, 이를 역상 크로마토그래피(구배: 5%~80% 아세토니트릴/물(+ 0.02% HCl))로 정제하고, 동결건조시킨 후 원하는 생성물을 황색 고형분으로서 수득하였다(45 mg, 94.5% 순도). 고형분을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 1%~10% EtOAc/DCM)로 추가로 정제하여 (6R)-17-아미노-15-(디플루오로메틸)-12,12-디메틸-6-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (29 mg, 15%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.58 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.18 (t, J = 53.7 Hz, 1H), 5.86 (s, 2H), 5.20 (s, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 1H), 2.27 - 2.14 (m, 1H), 2.12 - 1.98 (m, 1H), 1.89 - 1.75 (m, 1H), 1.71 - 1.57 (m, 1H), 1.54 - 1.37 (m, 5H), 1.34 (s, 3H), 1.29 (s, 3H) ppm. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -78.22 (s, 3F), -114.57 내지 -115.76 (m, 1F), -115.76 내지 -116.87 (m, 1F) ppm. ESI-MS m/z 계산된 값 435.1694, 확인된 값 436.3 (M+1)+; 머무름 시간: 3.21분 (LC 방법 C).
실시예 118: (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올 (부분 입체이성질체 1)(화합물 214) 및 (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올 (부분 입체이성질체 2)(화합물 215)의 제조
단계 1: 터트 -부틸 N -(3-하이드록시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐) 카르바메이트
질소 분위기 하에, 터트-부틸 N-(1,1-디메틸-3-옥소-프로필) 카르바메이트(3.29 g, 14.712 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시키고, 브로모(비닐)마그네슘(35 mL의 1 M, 35 mmol)을 30분에 걸쳐 적가하여 처리하였다. 반응 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 유지시킨 다음, 0℃의 얼음조에 옮기고, 이 온도에서 3시간 동안 유지시켰다. 그런 다음, 혼합물을 200 mL의 포화 수성 NH4Cl 용액으로 퀀칭시켰다. 혼합물을 디에틸 에테르(3 X 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4를 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g; 건식 로딩; 용리 구배: 40분에 걸쳐 0%~45% 디에틸 에테르/헥산)로 정제하여 터트-부틸 N-(3-하이드록시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐) 카르바메이트 (1.9 g, 47%)를 맑은 액체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.96 - 5.81 (m, 1H), 5.30 - 5.19 (m, 2H (비닐 양성자 및 OH)), 5.12 - 5.05 (m, 1H), 4.39 - 4.31 (m, 1H), 1.84 - 1.71 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (s, 3H).
단계 2: 4-[ 터트 -부틸(디메틸)실릴] 옥시-2-메틸-헥스-5-엔-2-아민
건조 DCM (60 mL) 중 터트-부틸 N-(3-하이드록시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐) 카르바메이트 (2.23 g, 9.7246 mmol) 및 2,6-루티딘(4.2559 g, 4.6 mL, 39.718 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시켰다. 그런 다음, 터트-부틸디메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트(15.539 g, 13.5 mL, 58.785 mmol)를 15분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 2시간 동안 교반한 다음, 디클로로메탄(100 mL)으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액(150 mL)을 첨가하였다. 이상성 혼합물을 15분 동안 교반하고, 층을 분리하였다. 수성층을 디클로로메탄(3 X 100 mL)으로 추가로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(완충액 A: 0.05% TFA로 완충된 물; 완충액 B: 0.05% TFA로 완충된 아세토니트릴; 용기 구배: 40분에 걸쳐 30% 완충액 B~90% 완충액 B)로 정제하여 4-[터트-부틸(디메틸)실릴] oxy-2-메틸-헥스-5-엔-2-아민 (0.91 g, 38%)을 맑은 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 5.88 (ddd, J = 17.2, 10.2, 7.0 Hz, 1H), 5.23 - 5.14 (m, 1H), 5.08 - 5.00 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 12.2, 6.6 Hz, 1H), 1.61 (dd, J = 14.0, 7.2 Hz, 1H), 1.47 (dd, J = 14.0, 4.9 Hz, 1H), 1.09 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.11 (s, 3H), 0.06 (s, 3H). ESI-MS m/z 계산된 값 243.2018, 확인된 값 244.4 (M+1)+; 머무름 시간: 2.82분 (LC 방법 G).
단계 3: 메틸 6-[[3-[ 터트 -부틸(디메틸)실릴] 옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐] 아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴 (40 mL) 중 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1 g, 3.514 mmol)의 용액에 4-[터트-부틸(디메틸)실릴] 옥시-2-메틸-헥스-5-엔-2-아민 (0.91 g, 3.7378 mmol) 및 DIEA(1.4098 g, 1.9 mL, 10.908 mmol)를 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온에서 24시간 동안 교반한 다음, 40℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 120 g; 건식 로딩; 용리 구배: 45분에 걸쳐 0%~10% 디에틸 에테르/헥산)로 정제하여 메틸 6-[[3-[터트-부틸(디메틸)실릴] oxy-1,1-디메틸-펜트-4-에닐] 아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (0.96 g, 56%)를 백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 491.2063, 확인된 값 492.0 (M+1)+; 머무름 시간: 4.56분 (LC 방법 G).
단계 4: 6-[[3-[ 터트 -부틸(디메틸)실릴] 옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐] 아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
THF (30 mL) 및 MeOH (9 mL) 중 메틸 6-[[3-[터트-부틸(디메틸)실릴] oxy-1,1-디메틸-펜트-4-에닐] 아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (0.96 g, 1.9529 mmol)의 용액에 물(15 mL) 중 LiOH(0.6 g, 25.054 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 5% 수성 구연산 용액으로 pH = 2로 산성화시켰다. 수성층을 디에틸 에테르(3 x 75 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 6-[[3-[터트-부틸(디메틸)실릴] oxy-1,1-디메틸-펜트-4-에닐] 아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (0.95 g, 100%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 477.1907, 확인된 값 477.9 (M+1)+; 머무름 시간: 4.18분 (LC 방법 G).
단계 5: N '-[(2 R )-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸) 펜트-4-엔오일]-6-[[3-[ 터트 -부틸(디메틸)실릴]oxy-1,1-디메틸-펜트-4-에닐]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
EtOAc (30 mL) 중 (2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸)펜트-4-엔하이드라지드 (0.7 g, 2.4283 mmol) 및 6-[[3-[터트-부틸(디메틸)실릴] 옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐] 아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (0.95 g, 1.9495 mmol)의 혼합물에 피리딘(782.4 mg, 0.8 mL, 9.8913 mmol) 및 무수 프로필포스폰산 용액(2.5656 g, EtOAc 중 2.4 mL의 50% w/w, 4.0316 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물에 1 M 수성 NaHCO3 용액(200 mL)을 첨가하고, 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(3 X 100 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수(100 mL)로 세척하고, (Na2SO4)로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 유성 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g; 건식 로딩; 용리 구배: 30분에 걸쳐 0%~45% 디에틸 에테르/헥산)로 정제하여 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸) 펜트-4-엔오일]-6-[[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]oxy-1,1-디메틸-펜트-4-에닐]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (1 g, 69%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 747.2887, 확인된 값 748.4 (M+1)+; 머무름 시간: 4.52분 (LC 방법 G).
단계 6: 6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -[3-[ 터트 -부틸(디메틸)실릴]옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (7 mL) 중 N'-[(2R)-2-벤질옥시-2-(트리플루오로메틸) 펜트-4-엔오일]-6-[[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐]아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (0.32 g, 0.4279 mmol) 및 DIEA (185.5 mg, 0.25 mL, 1.4353 mmol)의 용액에 TsCl(125 mg, 0.6557 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 아세트산 에틸(75 mL)에 용해시켰다. 유기층을 수성 5% NaHCO3(2 X 75 mL), 물(2 X 75 mL), 염수(75 mL)로 세척하고, 건조시키고(황산나트륨), 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g, 건식 로딩; 용리 구배: 30분에 걸쳐 0%~15% 디에틸 에테르/헥산)로 정제하여 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]oxy-1,1-디메틸-펜트-4-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (311 mg, 100%)을 맑은 황색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 729.2781, 확인된 값 730.4 (M+1)+; 머무름 시간: 4.9분 (LC 방법 G).
단계 7: 5-[[6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-5-메틸-헥스-1-엔-3-올
메탄올 (25 mL) 중 6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]옥시-1,1-디메틸-펜트-4-에닐]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (790 mg, 1.0825 mmol)의 용액에 실온의 수성 1 N HCl(1.6 mL of 1 M, 1.6 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액(100 mL)으로 퀀칭시키고 디에텔에테르(3 X 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 5-[[6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-5-메틸-헥스-1-엔-3-올 (0.67 g, 100%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 615.1916, 확인된 값 616.3 (M+1)+; 머무름 시간: 4.06분 (LC 방법 G).
단계 8: [3-[[6-[5-[(1 R )-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸) 부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 아미노]-3-메틸-1-비닐-부틸] 아세테이트
무수 디클로로메탄 (3 mL) 중 5-[[6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸)부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-5-메틸-헥스-1-엔-3-올 (146.5 mg, 0.238 mmol)의 용액에 피리딘(58.68 mg, 60 μL, 0.7418 mmol), 무수 아세트산(43.28 mg, 40 μL, 0.4239 mmol), 및 촉매량의 DMAP(7.9 mg, 0.0647 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 [3-[[6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸) 부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 아미노]-3-메틸-1-비닐-부틸] 아세테이트 (154.5 mg, 99%)를 연황색 겔로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 657.2022, 확인된 값 658.7 (M+1)+; 머무름 시간: 4.11분 (LC 방법 G).
단계 9: [(6 R )-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로 [12.3.1.12,5] 노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔-10-일] 아세테이트 ( E/Z 혼합물)
Zhan 촉매-1B(145 mg, 0.1973 mmol)를 실온의 툴루엔(40 mL)에서 혼합하고, N2로 30분 동안 탈기하였다. 별도로, 툴루엔 (10 mL) 중 [3-[[6-[5-[(1R)-1-벤질옥시-1-(트리플루오로메틸) 부트-3-에닐]-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜] 아미노]-3-메틸-1-비닐-부틸] 아세테이트 (353 mg, 0.5315 mmol)를 N2로 15분 동안 탈기한 다음, 툴루엔 중 촉매를 함유하는 미리 가열한(110℃) 플라스크에 나누어 첨가하고, 효율적으로 교반하였다. 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 가열하였다. 더 많은 Zhan 촉매-1B(64 mg, 0.0871 mmol)를 첨가하고, 같은 온도에서 추가로 3시간 동안 반응을 계속하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, EtOAc (50 ml) 및 염수(40 ml)를 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 무수MgSO4를 이용해 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 40 g 컬럼; 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헥산)로 정제하여 [(6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로 [12.3.1.12,5] 노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔-10-일] 아세테이트 (E/Z 혼합물)(149 mg, 20%)를 갈색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 629.1709, 확인된 값 630.5 (M+1)+; 머무름 시간: 3.96분 (LC 방법 G).
단계 10: (6 R )-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로 [12.3.1.12,5] 노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-10-올 ( E/Z 혼합물)
실온의 MeOH (0.5 mL) 중 [(6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로 [12.3.1.12,5] 노나데카-1(17),2,4,8,14(18),15-헥사엔-10-일] 아세테이트 (E/Z 혼합물)(12 mg, 0.0191 mmol)의 용액에 K2CO3(14 mg, 0.1013 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 염수(15 mL)와 디클로로메탄(20 ml)을 첨가하고, 층을 분리하였다. 유기층을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(컬럼: 12 g 컬럼; 구배: 0%~40% EtOAc/헥산)로 정제하여 (6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로 [12.3.1.12,5] 노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-10-올 (E/Z 혼합물)(11 mg, 93%)을 무색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 587.1603, 확인된 값 588.5 (M+1)+; 머무름 시간: 4.12분 (LC 방법 G).
단계 11: (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올
EtOH (5 mL) 중 (6R)-6-벤질옥시-12,12-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로 [12.3.1.12,5] 노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔-10-올 (E/Z 혼합물)(110 mg, 0.1779 mmol)의 용액에 5% Pd/C(180 mg, 0.0846 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소 가스로 여러 번 퍼징한 다음, Parr 쉐이커 상에서 50 psi 수소 압력으로 6시간 동안 수소화하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 여액을 농축시켜 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올 (77 mg, 88%)을 녹황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 469.1549, 확인된 값 470.5 (M+1)+; 머무름 시간: 3.61분 (LC 방법 G).
단계 12: (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올 (부분 입체이성질체 1)(화합물 214) 및 (6 R )-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올 (부분 입체이성질체 2)(화합물 215)
라세미 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올 (75 mg, 0.1358 mmol)을 Chiral Cel OJ 컬럼(250 X 21.2 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용해 키랄 SFC(용리 구배: 12% MeOH(20 mM NH3)/88% CO2; 유속: 70 mL/분)로 정제하여 황색 고형분으로서 및 처음 용리되는 피크로서, (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올 (부분 입체이성질체 1)(19.9 mg, 62%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.63 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 5.97 (s, 2H), 4.47 (s, 1H), 4.28 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 3.89 - 3.76 (m, 1H), 3.60 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.37 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 1.95 (tt, J = 11.3, 5.6 Hz, 1H), 1.75 - 1.60 (m, 1H), 1.59 - 1.47 (m, 3H), 1.47 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.03 (dd, J = 13.7, 9.8 Hz, 1H). ESI-MS m/z 계산된 값 469.15485, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.52분 (LC 방법 A).
두 번째로 용리되는 피크인 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6,10-디올(부분 입체이성질체 2)(25.5 mg, 79%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.00 (s, 2H), 4.48 (s, 1H), 4.31 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 3.76 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.65 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.44 (t, J = 12.9 Hz, 2H), 1.97 (dd, J = 13.6, 9.5 Hz, 1H), 1.70 - 1.52 (m, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.11 (dd, J = 13.8, 8.9 Hz, 1H). ESI-MS m/z 계산된 값 469.15485, 확인된 값 470.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.49분 (LC 방법 A).
실시예 119:17-아미노-7-플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 216), 17-아미노-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 217), 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 218), 및 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 219)의 제조
단계 1: 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
압력 튜브에서, MeOH (60 mL) 중 메틸 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (2.72 g, 7.5280 mmol)의 용액에 하이드라진 일수화물(3.35 g, 66.919 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 툴루엔(2 X 20 mL)과 공동 증발시키고, 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(용리 구배: 20%~60% EtOAc/헵탄)로 정제하여 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (2.7 g, 99%)를 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.34 (s, 1H), 5.84 - 5.71 (m, 1H), 5.44 (br. s, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 2H), 3.39 (br. s, 3H), 2.09 - 1.93 (m, 4H), 1.49 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.45 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 361.1362, 확인된 값 362.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.96분 (LC 방법 E).
단계 2: 에틸 3,3-디플루오로-2-하이드록시-펜트-4-엔오에이트
10℃의 DMF (60 mL) 및 물(18 mL) 중 3-브로모-3,3-디플루오로-프로프-1-엔 (4.8 g, 30.582 mmol) 및 툴루엔 중 에틸 2-옥소아세테이트(5.9 mL의 50% w/v, 28.896 mmol)의 용액에 인듐(7 g, 60.966 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 얼음물(200 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하고, 터트-부틸 메틸 에테르(100 mL)로 희석하고, 규조토를 통해 여과하고, 케이크를 터트-부틸 메틸 에테르로 세척하였다. 수성상을 t BuOCH3(2 X 100 mL)으로 역추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물(5.8 g)을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(구배: 50%~100% 디클로로메탄/펜탄)로 정제하여 에틸 3,3-디플루오로-2-하이드록시-펜트-4-엔오에이트(4.283 g, 82%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.10 - 5.93 (m, 1H), 5.82 - 5.72 (m, 1H), 5.58 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.43 - 4.27 (m, 3H), 3.22 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -107.00 내지 -107.85 (m, 1F), -108.89 내지 -109.75 (m, 1F). ESI-MS m/z 계산된 값 180.0598, 확인된 값 181.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.47분. (LC 방법 E).
단계 3: 에틸 2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔오에이트
0℃의 디클로로메탄(19 mL) 및 무수 헵탄(38 mL) 중 에틸 3,3-디플루오로-2-하이드록시-펜트-4-엔오에이트(2.45 g, 11.832 mmol)의 용액에 벤질 2,2,2-트리클로로아세트이미데이트(7 g, 27.72 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 5분 동안 교반하고, 트리플루오로아세트산(400 mg, 2.6653 mmol)을 적가하여 백색 침전물을 수득하였다. 혼합물을 실온으로 서서히 가온시키고 실온(5~19℃)에서 밤새 교반한 다음 0℃로 냉각시키고, 디클로로메탄(50 mL)으로 희석하였다. 포화 수성 NaHCO3(20 mL)을 첨가하고, 2개의 층을 분리하고, 수성층을 디클로로메탄(2 X 30 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4를 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~10% EtOAc/헵탄)로 정제하여 에틸 2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔오에이트(1.56 g, 46%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 생성물은 LCMS 상에서 이온화할 수 없었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 - 7.31 (m, 5H), 6.16 - 6.00 (m, 1H), 5.80 - 5.71 (m, 1H), 5.56 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.33 - 4.16 (m, 3H), 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -102.91 내지 -103.81 (m, 1F), -106.39 내지 -107.27 (m, 1F). 머무름 시간: 4.4분 (LC 방법 AA).
단계 4: 2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔산
DCE(60 mL) 중 에틸 2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔오에이트(1.55 g, 5.735 mmol)의 용액에 트리메틸틴 수산화물(1.88 g, 10.397 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 82℃에서 30시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시켰다. 실리카 겔(8 g)을 첨가하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~15% MeOH/디클로로메탄)로 정제하여 2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔산(1.14 g, 78%)을 무색 오일로서 수득하였다. 생성물은 LCMS 상에서 이온화할 수 없었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 - 7.31 (m, 5H), 6.13 - 5.97 (m, 1H), 5.77 (dt, J = 17.4, 2.2 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.83 - 4.70 (m, 2H), 4.25 (t, J = 9.4 Hz, 1H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -103.47 내지 -104.44 (m, 1F), -106.04 내지 -106.95 (m, 1F). 머무름 시간: 1.86분 (LC 방법 E).
단계 5: N '-(2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔오일)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드
건조시킨 250-mL 플라스크에 2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔산(806 mg, 3.3276 mmol) 및 디클로로메탄(20 mL)을 채웠다. 염화 옥살릴(573 mg, 0.3938 mL, 4.5144 mmol)을 첨가하고, 이어서 DMF(292 mg, 0.3093 mL, 3.9949 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 디클로로메탄 (10 mL) 중 6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (1.80 g, 4.9817 mmol) 및 DIEA (1.3 g, 1.752 mL, 10.059 mmol)의 용액을 15분에 걸쳐 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3(15 mL) 및 물(15 mL)을 첨가하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성층을 디클로로메탄(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(용리 구배: 5%~40% EtOAc/헵탄)으로 정제하고 두 번째 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(용리 구배: 5% EtOAc/디클로로메탄)로 정제하여 N'-(2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔오일)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드(1.33 g, 68%)를 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.05 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.74 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.45 - 7.31 (m, 5H), 6.12 - 5.96 (m, 1H), 5.85 - 5.71 (m, 2H), 5.57 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.46 (br. s, 1H), 5.08 - 4.91 (m, 2H), 4.88 - 4.77 (m, 2H), 4.26 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 2.11 - 1.96 (m, 4H), 1.52 (d, J = 1.5 Hz, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.50 (s, 3F), -104.56 내지 -105.38 (m, 1F), -106.39 내지 -107.22 (m, 1F). ESI-MS m/z 계산된 값 585.2011, 확인된 값 586.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.23분 (LC 방법 E).
단계 6: 6-[5-(1-벤질옥시-2,2-디플루오로-부트-3-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]- N -(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
0℃의 디클로로메탄 (50 mL) 중 N'-(2-벤질옥시-3,3-디플루오로-펜트-4-엔오일)-6-(1,1-디메틸펜트-4-에닐아미노)-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보하이드라지드 (1.33 g, 2.2715 mmol)의 용액에 DIEA(1.76 g, 2.3720 mL, 13.618 mmol)를 첨가하고, 이어서 트리플루오로메탄설폰산 무수물(961 mg, 3.4061 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 모르폴린(1.2 g)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 5분 동안 교반하고, 포화 수성 NaHCO3(25 mL)을 첨가하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성층을 디클로로메탄(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(용리 구배: 0%~30% EtOAc/헵탄)로 정제하여 6-[5-(1-벤질옥시-2,2-디플루오로-부트-3-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(938 mg, 73%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 7.41 - 7.29 (m, 5H), 6.08 (dq, J = 17.5, 11.5 Hz, 1H), 5.81 - 5.69 (m, 2H), 5.62 - 5.52 (m, 2H), 5.11 - 4.90 (m, 3H), 4.80 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.10 - 1.92 (m, 4H), 1.49 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.56 (s, 3F), -103.99 내지 -104.84 (m, 1F), -107.22 내지 -108.19 (m, 1F). ESI-MS m/z 계산된 값 567.1905, 확인된 값 568.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.39분 (LC 방법 E).
단계 7: 6-벤질옥시-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 ( E/Z 혼합물)
건조된 1-L 플라스크에 6-[5-(1-벤질옥시-2,2-디플루오로-부트-3-에닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]-N-(1,1-디메틸펜트-4-에닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (420 mg, 0.7401 mmol) 및 1,2-디클로로에탄 (400 mL)을 채웠다. 용액을 1시간 동안 질소로 버블링하고, 75℃로 가열하였다. 1,2-디클로로에탄 (5 mL) 중 Grubbs 촉매 2세대(130 mg, 0.1531 mmol)의 용액을 신속하게 첨가하였다. 혼합물을 75℃에서 40분 동안 교반하였다. 더 많은 1,2-디클로로에탄 (5 mL) 중 Grubbs 촉매 2세대(60 mg, 0.0707 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 75℃에서 1시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시켰다. DMSO(385 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 실리카 겔(20 g)을 이용해 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(용리 구배: 0%~30% EtOAc/헵탄)로 정제하여 미정제 6-벤질옥시-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (180 mg)을 미정제 담황색 오일로서 수득하였다. 이 물질을 역상 크로마토그래피(컬럼: 100 g Aq C18; 구배: 5%~95% MeCN/물(0.1% 포름산 개질제))로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 감압 하에 농축시켜 대부분의 아세토니트릴을 제거하였다. 잔류물을 포화 수성 NaHCO3(10 mL)으로 처리하고, EtOAc(3 X 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 6-벤질옥시-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(160.2 mg, 40%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 7.40 - 7.30 (m, 5H), 6.36 - 6.25 (m, 1H), 6.06 - 5.93 (m, 1H), 5.57 (br. s, 1H), 5.21 (dd, J = 8.1, 2.0 Hz, 1H), 4.77 - 4.66 (m, 2H), 2.84 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 2.40 - 2.28 (m, 1H), 2.17 - 2.07 (m, 1H), 1.86 (dd, J = 14.2, 6.8 Hz, 1H), 1.46 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.14 (s, 3F), -92.09 내지 -92.96 (m, 1F), -110.61 (dd, J = 254.8, 20.4 Hz, 1F). ESI-MS m/z 계산된 값 539.1592, 확인된 값 540.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.3분 (LC 방법 E).
단계 8: 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올, 17-아미노-7-플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (부분 입체이성질체의 혼합물)(화합물 216) 및 17-아미노-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (화합물 217)
100 mL 플라스크에서, MeOH (15 mL) 중 6-벤질옥시-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-17-니트로-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,8,14,16-헥사엔 (E/Z 혼합물)(175 mg, 0.3244 mmol)의 용액에 10% Pd/C(50% 습식, 82 mg, 5% w/w, 0.0385 mmol)를 첨가하였다. 플라스크 내의 공기를 진공을 통해 질소로 3회 교체하였다. 질소를 진공을 통해 수소로 6회 교체하였다. 반응 혼합물을 수소 (풍선) 하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 규조토를 통해 여과하고, 케이크를 EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(용리 구배: 10%~50% EtOAc/헵탄)로 정제하여 3개의 생성물을 수득하였다.
메이저 생성물 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (102 mg, 73%)을 황색 고형분으로서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.28 (s, 1H), 5.38 - 5.27 (m, 1H), 4.94 (br. s, 2H), 4.46 (br. s, 1H), 3.29 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 2.54 - 2.10 (m, 4H), 1.97 - 1.73 (m, 2H), 1.64 - 1.49 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 1.36 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.87 (s, 3F), -101.77 내지 -103.92 (m, 2F). ESI-MS m/z 계산된 값 421.1537, 확인된 값 422.3 (M+1)+; 머무름 시간: 3.15분 (LC 방법 C).
모노-탈플루오르화된 부산물(20 mg)을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 20%~50% EtOAc/헵탄)로 추가로 정제하였다. 원하는 분획을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 동결 건조시켜 17-아미노-7-플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(부분 입체이성질체의 혼합물)(16 mg, 12%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.56 (s, 1H), 6.58 (d, J = 6.1 Hz, 0.5H), 6.52 (d, J = 6.6 Hz, 0.5H), 6.00 - 5.85 (m, 2H), 5.29 - 4.77 (m, 2H), 4.62 (s, 0.5H), 4.56 (s, 0.5H), 3.05 - 2.80 (m, 1H), 2.17 - 1.97 (m, 1H), 1.95 - 1.62 (m, 3H), 1.60 - 1.41 (m, 3H), 1.39 - 1.27 (m, 6H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.22 (s, 3F), -184.41 내지 -186.39 (m, 1F). ESI-MS m/z 계산된 값 403.1631, 확인된 값 404.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.09분 (LC 방법 C).
비스-탈플루오르화된 부산물(10 mg)을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 20%~70% MTBE/헵탄)로 정제하고 동결 건조시켜 17-아미노-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (8 mg, 6%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.55 (s, 1H), 6.06 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 5.89 (s, 2H), 4.98 - 4.89 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 2.63 - 2.51 (m, 1H), 2.10 - 1.95 (m, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 1H), 1.59 - 1.37 (m, 6H), 1.34 (s, 3H), 1.30 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.18 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 385.1726, 확인된 값 386.2 (M+1)+; 머무름 시간: 3.62분 (LC 방법 BB).
단계 9: 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 218) 및 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 219)
라세미 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (102 mg, 0.2382 mmol)을 다음 조건을 사용해 SFC 분리하였다: 컬럼 Phenomenex Lux 5 νm, 셀룰로오스 4 (250 X 21.2 mm); 6.7 mg/주입; 용리제: 10% EtOH (0.1% 디에틸아민)/90% CO2; 유속: 75 mL/분; 농도: 22.2 mg/mL 메탄올(개질제 미포함); 주입 부피: 300 μL; 배출 압력: 100 bar; 파장: 250 nm; 온도: 40℃.
처음 용리되는 화합물을 함유하는 분획을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴(2.2 mL)에 용해시키고, 물(1.8 mL)을 첨가하였다. 생성된 맑은 황색 용액을 동결 건조시켜 물질을 수득하고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 30%~50% EtOAc/헵탄)으로 다시 정제하고, 이어서 동결 건조시켜 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(40 mg, 40%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.59 (s, 1H), 7.19 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.97 (s, 2H), 5.32 - 5.22 (m, 1H), 4.61 (s, 1H), 2.58 - 2.51 (m, 1H), 2.47 - 2.31 (m, 1H), 2.27 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 1.98 (m, 1H), 1.89 - 1.74 (m, 1H), 1.64 - 1.42 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.35 - 1.29 (m, 1H), 1.27 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.30 (s, 3F), -99.00 내지 -100.99 (m, 2F). ESI-MS m/z 계산된 값 421.1537, 확인된 값 422.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.45분 (LC 방법 AA).
두 번째로 용리되는 화합물을 함유하는 분획을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴(2.5 mL)에 용해시키고, 물(2.2 mL)을 첨가하였다. 생성된 맑은 황색 용액을 동결 건조시켜 물질을 수득하고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 30%~50% EtOAc/헵탄)으로 다시 정제하고, 이어서 동결 건조시켜 17-아미노-7,7-디플루오로-12,12-디메틸-15-(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(41 mg, 41%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.59 (s, 1H), 7.19 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.97 (s, 2H), 5.32 - 5.23 (m, 1H), 4.61 (s, 1H), 2.58 - 2.51 (m, 1H), 2.46 - 2.31 (m, 1H), 2.28 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 1.99 (m, 1H), 1.89 - 1.75 (m, 1H), 1.63 - 1.42 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.35 - 1.29 (m, 1H), 1.27 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.29 (s, 3F), -99.01 내지 -100.95 (m, 2F). ESI-MS m/z 계산된 값 421.1537, 확인된 값 422.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.45분 (LC 방법 AA).
실시예 120: [(6 R )-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]보론산 (화합물 220)의 제조
단계 1: [(6 R )-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]보론산 (화합물 220)
아세토니트릴 (6 mL) 중 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (225 mg, 0.4963 mmol) 및 비스(피나콜라토)디브론(375 mg, 1.4767 mmol)의 용액에 터트-부틸 니트라이트(346.80 mg, 0.4 mL, 3.3631 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 15분 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하고, 미정제 물질을 (6R)-17-아미노-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (117 mg, 0.2581 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(160 mg, 0.6301 mmol), 터트-부틸 니트라이트(108.38 mg, 0.125 mL, 1.051 mmol), 및 아세토니트릴(3 mL)을 사용하는 이와 동일한 반응물의 또 다른 배치와 합쳤다. 합쳐진 미정제 생성물을 역상 크로마토그래피(컬럼: C18 컬럼; 구배: 5%~100% 메탄올/물(0.1% 포름산 개질제 포함))로 정제하여(정제하는 동안 피나콜 보론산 에스테르가 보론산으로 가수분해됨), [(6R)-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]보론산 (37 mg, 42% purity)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 이 물질(0.0322 mmol)을 유사한 합성 절차에 의해 제조한 다른 2개 로트의 동일한 물질(12 mg, 78% 순도, 0.0194 mmol; 및 17 mg, 60% 순도, 0.0212 mmol)과 합치고, 합쳐진 물질을 역상 크로마토그래피(컬럼: C18 컬럼; 구배: 5%~100% 아세토니트릴/염기성수(중탄산암모늄/수산화암모늄 완충액 pH = 10))로 추가로 정제하고, 동결건조시킨 후 [(6R)-6-하이드록시-12,12-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(17),2,4,14(18),15-펜타엔-17-일]보론산(8.8 mg, 2% 전체 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.73 (s, 2H), 8.14 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 5.52 (s, 1H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 2.34 - 2.21 (m, 1H), 2.09 - 1.96 (m, 1H), 1.74 - 1.65 (m, 1H), 1.63 - 1.53 (m, 1H), 1.43 (br. s., 7H), 1.36 (s, 3H), 1.29 - 1.18 (m, 1H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.02 (s, 3F), -78.34 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 482.156, 확인된 값 481.2 (M-1)-; 머무름 시간: 3.81분 (LC 방법 BB).
실시예 121: 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1)(화합물 221) 및 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 222)의 제조
단계 1: 5,5-디메틸옥세판-2-온
디클로로메탄 (120 mL) 중 4,4-디메틸시클로헥산온(6.1 g, 48.338 mmol)의 용액에 메타-클로로퍼옥시벤조산(17.5 g, 75% w/w, 76.058 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온의 암소에서 2일 동안 교반하고 여과하였다. 케이크를 디클로로메탄-펜탄(1:1, 20 mL)으로 세척하였다. 여액을 0℃의 탄산 나트륨(6 g, 56 mmol), 물(50 mL), 및 10% 수성 티오황산 나트륨(50 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하고, 분별 깔때기에 옮겼다. 유기층을 포화 NaHCO3 (50 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 5,5-디메틸옥세판-2-온(6.87 g, 100%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.22 - 4.18 (m, 2H), 2.62 - 2.58 (m, 2H), 1.67 - 1.63 (m, 2H), 1.58 - 1.54 (m, 2H), 1.02 (s, 6H). ESI-MS m/z 계산된 값 142.0994, 확인된 값 143.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.54분. (LC 방법 E).
단계 2: 메틸 6-하이드록시-4,4-디메틸-헥사노에이트
MeOH (100 mL) 중 5,5-디메틸옥세판-2-온(6.87 g, 48.314 mmol)의 용액에 황산(0.8 g, 0.4348 mL의 95%w/w, 7.7488 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 디에틸 에테르(100 mL)로 용해시켰다. 생성된 용액을 포화 NaHCO3(50 mL), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄(100 mL)에 용해시키고, Na2SO4로 다시 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 원하는 생성물인 메틸 6-하이드록시-4,4-디메틸-헥사노에이트 및 불순물인 (6-메톡시-3,3-디메틸-6-옥소-헥실) 6-하이드록시-4,4-디메틸-헥사노에이트의 5:1 혼합물로 이루어진 8.02 g의 무색 오일을 수득하였다. 원하는 생성물인 메틸 6-하이드록시-4,4-디메틸-헥사노에이트의 특성 분석: ESI-MS m/z 계산된 값 316.225, 확인된 값 317.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.98분 (LC 방법 E). 불순한 생성물의 혼합물은 후속 단계에 직접 투입하였다.
단계 3: 메틸 4,4-디메틸-6-( p -톨릴설포닐옥시)헥사노에이트
0℃의 디클로로메탄 (100 mL) 중 7.2 g의 메틸 6-하이드록시-4,4-디메틸-헥사노에이트와 불순물 (6-메톡시-3,3-디메틸-6-옥소-헥실) 6-하이드록시-4,4-디메틸-헥사노에이트의 5:1 혼합물의 용액에 Et3N (10 g, 83.98 mmol)에 이어서 염화 토실(10 g, 52.453 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 얼음물(100 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 디클로로메탄(3 X 50 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 포화 NaHCO3(20 mL)으로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 원하는 생성물인 메틸 4,4-디메틸-6-(p-톨릴설포닐옥시)헥사노에이트, 및 불순물인 6-[4,4-디메틸-6-(p-톨릴설포닐oxy)헥사노일]옥시-4,4-디메틸-헥사노에이트의 5:1 혼합물로 이루어진 11.8 g의 무색 오일을 수득하였다. 원하는 생성물인 메틸 4,4-디메틸-6-(p-톨릴설포닐옥시)헥사노에이트의 특성 분석: ESI-MS m/z 계산된 값 470.2338, 확인된 값 471.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.27분 (LC 방법 E). 불순한 생성물의 혼합물은 후속 단계에 직접 투입하였다.
단계 4: 메틸 6-(디벤질아미노)-4,4-디메틸-헥사노에이트
n-부탄올 (150 mL) 중 11.8 g의 메틸 4,4-디메틸-6-(p-톨릴설포닐옥시)헥사노에이트와 불순물 6-[4,4-디메틸-6-(p-톨릴설포닐옥시)헥사노일]옥시-4,4-디메틸-헥사노에이트의 5:1 혼합물의 용액에 디벤질아민(21 g, 106.45 mmol)에 이어서 DIEA(4 g, 5.3908 mL, 30.949 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 45시간 동안 교반하고, 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물(47 g)을 아세트산 에틸(300 mL)에 용해시키고, 포화 NaHCO3(200 mL)으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4를 이용해 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-(디벤질아미노)-4,4-디메틸-헥사노에이트(7.59 g, 50% (3단계))를 무색 오일로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 353.2355, 확인된 값 354.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.8분 (LC 방법 E).
단계 5: 6-(디벤질아미노)-4,4-디메틸-헥산-1-올
0℃의 THF (100 mL) 중 LiAlH4(1.13 g, 29.773 mmol)의 현탁액에 THF (100 mL) 중 메틸 6-(디벤질아미노)-4,4-디메틸-헥사노에이트 (7.59 g, 21.471 mmol)의 용액을 10분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 0℃로 냉각시켰다. THF(150 mL)를 첨가하고, 이어서 THF (10 mL) 중 물(1.2 g)의 용액을 서서히 첨가하고, 25% 수성 NaOH(1.2 g) 및 물(3.6 g)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 규조토를 통해 여과하고, 필터 케이크를 THF로 세척하였다. 여액을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 6-(디벤질아미노)-4,4-디메틸-헥산-1-올(6.69 g, 96%)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.49 - 7.16 (m, 10H), 3.57 (br. s, 4H), 3.51 - 3.37 (m, 3H), 2.52 - 2.30 (m, 2H), 1.62 - 1.51 (m, 3H), 1.42 - 1.30 (m, 3H), 0.80 (s, 6H). ESI-MS m/z 계산된 값 325.2406, 확인된 값 326.3 (M+1)+; 머무름 시간: 1.72분 (LC 방법 E).
단계 6: N , N -디벤질-6-브로모-3,3-디메틸-헥산-1-아민
0℃의 디클로로메탄 (200 mL) 중 6-(디벤질아미노)-4,4-디메틸-헥산-1-올 (6.69 g, 20.554 mmol)의 용액에 사브롬화 탄소(8.2 g, 24.727 mmol) 및 트리페닐포스핀(6.6 g, 25.163 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 서서히 가온시키고, 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실리카 겔을 이용해 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 0%~10% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 N,N-디벤질-6-브로모-3,3-디메틸-헥산-1-아민 (6.04 g, 76%)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 - 7.28 (m, 8H), 7.26 - 7.19 (m, 2H), 3.57 (s, 4H), 3.25 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.47 - 2.38 (m, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 2H), 1.49 - 1.42 (m, 2H), 1.23 - 1.15 (m, 2H), 0.80 (s, 6H). ESI-MS m/z 계산된 값 387.1562, 확인된 값 388.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.95분 (LC 방법 E).
단계 7: 에틸 8-(디벤질아미노)-2-하이드록시-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트
질소 하에, 환류 응축기가 구비된 건조된 100 mL 3구 플라스크에 마그네슘(581 mg, 23.905 mmol) 및 요오드(185 mg, 0.7289 mmol)를 채우고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, 40℃로 가열하였다. 디에틸 에테르 (7 mL) 중 N,N-디벤질-6-브로모-3,3-디메틸-헥산-1-아민(4.61 g, 11.87 mmol)의 용액을 8분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 40℃에서 10분 동안 교반한 다음, 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 디에틸 에테르(7 mL)로 희석한 다음, -78℃의 THF (45 mL) 중 에틸 트리플루오로피루베이트(2 g, 11.759 mmol)의 냉각 용액에 15분에 걸쳐 주사기로 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 1시간에 걸쳐 실온으로 서서히 가온시키고, 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 포화 수성 염화암모늄(100 mL)으로 퀀칭시켰다. 생성된 혼합물을 아세트산에틸(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물(6.5 g)을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 에틸 8-(디벤질아미노)-2-하이드록시-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트 (2.13 g, 37%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38 - 7.27 (m, 8H), 7.25 - 7.18 (m, 2H), 4.34 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.76 (s, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 4H), 2.39 (dd, J = 79.8, 5.1 Hz, 2H), 1.93 - 1.81 (m, 1H), 1.80 - 1.69 (m, 1H), 1.47 - 1.37 (m, 3H), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.13 - 1.03 (m, 2H), 1.01 - 0.90 (m, 1H), 0.75 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -78.65 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 479.2647, 확인된 값 480.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.05분 (LC 방법 E).
단계 8: 에틸 8-아미노-2-하이드록시-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트
EtOH (60 mL) 중 에틸 8-(디벤질아미노)-2-하이드록시-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트 (2.13 g, 4.4414 mmol) 및 20% 탄소 상 수산화 팔라듐(360 mg, 50% 습식, 10% w/w, 0.2563 mmol)의 혼합물을 수소 (풍선) 하에 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 더 많은 20% 탄소 상 수산화 팔라듐(360 mg, 50% 습식, 10% w/w, 0.2563 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 수소(풍선) 하에 실온에서 2일 동안 교반하였다. 혼합물을 규조토를 통해 여과하고 EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 헵탄/EtOAc와 공동 증발시켜(미량의 EtOH를 제거하기 위함) 에틸 8-아미노-2-하이드록시-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트(1.32 g, 99%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.43 - 4.31 (m, 2H), 2.68 (dd, J = 10.3, 6.1 Hz, 2H), 2.15 (br. s, 3H), 1.99 - 1.90 (m, 1H), 1.87 - 1.76 (m, 1H), 1.55 - 1.42 (m, 1H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.30 - 1.14 (m, 4H), 1.10 - 0.99 (m, 1H), 0.85 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -78.64 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 299.1708, 확인된 값 300.2 (M+1)+; 머무름 시간: 1.69분 (LC 방법 E).
단계 9: 메틸 6-[(7-에톡시카르보닐-8,8,8-트리플루오로-7-하이드록시-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴 (25 mL) 중 에틸 8-아미노-2-하이드록시-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트 (1.32 g, 4.4098 mmol)의 용액에 메틸 6-클로로-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.3 g, 4.5682 mmol) 및 DIEA(2.8 g, 3.7736 mL, 21.665 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60 내지 65℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 실리카 겔을 이용해 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(7-에톡시카르보닐-8,8,8-트리플루오로-7-하이드록시-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.86 g, 77%)를 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 5.59 (br. s, 1H), 4.37 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.85 (s, 1H), 3.63 - 3.54 (m, 2H), 2.01 - 1.91 (m, 1H), 1.90 - 1.80 (m, 1H), 1.54 - 1.44 (m, 2H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.31 - 1.18 (m, 3H), 1.13 - 1.01 (m, 1H), 0.92 (d, J = 2.4 Hz, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.31 (s, 3F), -78.63 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 547.1753, 확인된 값 548.2 (M+1)+; 머무름 시간: 2.24분 (LC 방법 E).
단계 10: 메틸 6-[(7-벤질옥시-7-에톡시카르보닐-8,8,8-트리플루오로-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트
0℃ DMF (16 mL) 중 메틸 6-[(7-에톡시카르보닐-8,8,8-트리플루오로-7-하이드록시-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.63 g, 2.9775 mmol)의 용액에 NaH(253 mg, 60% w/w, 6.3256 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하고, 브롬화 벤질(766 mg, 4.4786 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온까지 서서히 가온시키고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, NH4Cl(0.6 g)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 파쇄된 얼음(80 g)을 첨가하였다. 얼음이 대부분 녹을 때까지 혼합물을 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, EtOAc(20 mL)에 용해시켰다. 여액을 터트-부틸메틸 에테르/헵탄(2:1, 2 X 80 mL)으로 추출하였다. 모든 유기층(EtOAc에 용해시킨 침전물 및 터트-부틸메틸 에테르/헵탄 세척액)을 합치고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 0%~20% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 메틸 6-[(7-벤질옥시-7-에톡시카르보닐-8,8,8-트리플루오로-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트(1.965 g, 95%)를 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 7.44 - 7.27 (m, 5H), 5.56 (br. s, 1H), 4.81 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.33 (qd, J = 7.1, 0.9 Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.58 - 3.49 (m, 2H), 2.01 - 1.92 (m, 2H), 1.54 - 1.44 (m, 4H), 1.33 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.25 - 1.18 (m, 2H), 0.90 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.31 (s, 3F), -70.52 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 637.2223, 확인된 값 638.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.47분 (LC 방법 E).
단계 11: 에틸 2-벤질옥시-8-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트
압력 튜브에서, MeOH (30 mL) 중 메틸 6-[(7-벤질옥시-7-에톡시카르보닐-8,8,8-트리플루오로-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복실레이트 (1.96 g, 2.8282 mmol) 및 하이드라진 일수화물(1.23 g, 24.57 mmol)의 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4를 이용해 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(용리 구배: 20%~60% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 에틸 2-벤질옥시-8-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트 (1.67 g, 93%)를 담황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.33 (s, 1H), 7.43 - 7.29 (m, 5H), 5.48 (br. s, 1H), 4.82 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.38 - 4.29 (m, 2H), 4.11 (br. s, 2H), 3.55 - 3.45 (m, 2H), 2.03 - 1.93 (m, 2H), 1.60 - 1.42 (m, 4H), 1.33 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.28 - 1.20 (m, 3H), 0.92 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.28 (s, 3F), -70.40 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 637.2335, 확인된 값 638.3 (M+1)+; 머무름 시간: 2.27분 (LC 방법 E).
단계 12: 에틸 2-벤질옥시-8-[[6-[( 터트 -부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트
디클로로메탄 (50 mL) 중 에틸 2-벤질옥시-8-[[6-(하이드라진카르보닐)-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트 (1.67 g, 2.6193 mmol), 4-(디메틸아미노)피리딘 (55 mg, 0.4502 mmol), 및 디이소프로필에틸아민(1.1 g, 1.4825 mL, 8.5111 mmol)의 용액에 디-터트-부틸 디카르보네이트(1.5 g, 1.5789 mL, 6.8729 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 실리카 겔을 이용해 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔(용리 구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 에틸 2-벤질옥시-8-[[6-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트(1.21 g, 63%)를 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 5H), 5.50 (br. s, 1H), 4.80 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.38 - 4.28 (m, 2H), 3.58 - 3.47 (m, 2H), 2.00 - 1.88 (m, 2H), 1.58 (s, 9H), 1.55 - 1.47 (m, 6H), 1.39 - 1.30 (m, 5H), 0.89 (s, 6H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.97 (s, 3F), -70.41 - -70.51 (m, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 737.2859, 확인된 값 682.3 (M-55)+; 머무름 시간: 2.68분 (LC 방법 E).
단계 13: 2-벤질옥시-8-[[6-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥탄산
MeOH (20 mL) 중 에틸 2-벤질옥시-8-[[6-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥타노에이트 (1 g, 1.3556 mmol)의 용액에 물(5 mL) 중 NaOH(230 mg, 5.7504 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 45℃에서 5시간 동안 교반하고, 43℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켜 대부분의 MeOH를 제거하였다. 잔류물을 물(10 mL)로 희석하고, 0℃로 냉각시켰다. 수성 HCl(1 N, 5.3 mL)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜, 약간의 비스-Boc 부산물로 오염된 2-벤질옥시-8-[[6-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥탄산(914 mg, 95%)을 담황색 발포체로서 수득하였다. ESI-MS m/z 계산된 값 709.25464, 확인된 값 654.2 (M-55)+; 머무름 시간: 4.9분 (LC 방법 AA).
단계 14: 6-[(7-벤질옥시-7-카르복시-8,8,8-트리플루오로-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산
1,4-디옥산 (5 mL) 중 2-벤질옥시-8-[[6-[(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바모일]-5-니트로-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-6,6-디메틸-2-(트리플루오로메틸)옥탄산(914 mg, 1.2880 mmol)의 용액에 1,4-디옥산 중 HCl(10 mL의 4 M, 40 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 30℃에서 감압 하에 농축시키고 EtOAc(3 X 20 mL)와 공동 증발시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(구배: 5%~80% 아세토니트릴/물)로 정제하였다. 원하는 분획을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 동결 건조시켜 6-[(7-벤질옥시-7-카르복시-8,8,8-트리플루오로-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산(450 mg, 57%)을 담황색 고형분으로서 수득하였다. 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -63.16 내지 -63.54 (m, 3F), -70.23 내지 -70.52 (m, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 595.1753, 확인된 값 596.3 (M+1)+; 머무름 시간: 3.2분 (LC 방법 C).
단계 15: 9-벤질옥시-5,5-디메틸-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)-2,11,12,18-테트라아자바이시클로[12.3.1]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-10,13-디온
DMF (30 mL) 중 6-[(7-벤질옥시-7-카르복시-8,8,8-트리플루오로-3,3-디메틸-옥틸)아미노]-3-니트로-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르복시산 (42 mg, 0.0635 mmol)의 용액에 DIEA (60 mg, 0.4642 mmol), 디메틸아세트아미드 중 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸(0.16 mL의 1 M, 0.16 mmol), 및 (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포니움 헥사플루오로포스페이트(80 mg, 0.1809 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 교반하고, DMF (5 mL)와 희석한 THF 중 하이드라진(0.08 mL의 1 M, 0.08 mmol)을 16시간에 걸쳐 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 30℃에서 3시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 9-벤질옥시-5,5-디메틸-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)-2,11,12,18-테트라zabi시클로[12.3.1]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-10,13-디온 (37 mg, 84%, purity = 85%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.39 (br. s, 1H), 8.06 (br. s, 1H), 7.49 - 7.28 (m, 4H), 7.03 - 6.89 (m, 2H), 5.44 (br. s, 1H), 4.69 - 4.51 (m, 1H), 4.46 - 4.18 (m, 2H), 3.28 - 3.13 (m, 1H), 2.38 - 2.24 (m, 1H), 2.17 - 2.06 (m, 1H), 1.92 - 1.74 (m, 1H), 1.45 - 1.29 (m, 5H), 0.99 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.92 (s, 3F), -74.18 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 591.1916, 확인된 값 592.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.62분 (LC 방법 AA).
단계 16: 6-벤질옥시-10,10-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔
0℃의 디클로로메탄 (3 mL) 중 9-벤질옥시-5,5-디메틸-15-니트로-9,17-비스(트리플루오로메틸)-2,11,12,18-테트라아자바이시클로[12.3.1]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-10,13-디온 (55 mg, 0.0895 mmol)의 용액에 DIEA (70 mg, 0.5416 mmol)에 이어서 무수 트리플루오로메탄설핀산(51 mg, 0.1808 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 50분 동안 교반하였다. 모르폴린(150 mg)을 첨가하여 반응을 퀀칭시켰다. 0℃에서 5분 동안 교반한 후, 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(6 mL)으로 처리하고, 디클로로메탄 (3 X 10 mL)으로 처리하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4를 이용해 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~30% 아세트산 에틸/헵탄)로 정제하여 6-벤질옥시-10,10-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔 (46 mg, 87%)을 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.37 - 7.27 (m, 5H), 5.99 - 5.88 (m, 1H), 5.00 - 4.90 (m, 2H), 3.68 - 3.54 (m, 1H), 3.51 - 3.39 (m, 1H), 2.41 - 2.30 (m, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 1.70 - 1.59 (m, 1H), 1.51 - 1.31 (m, 5H, overlapped with 헵탄), 0.89 (s, 3H, overlapped with 헵탄), 0.87 (s, 3H, overlapped with 헵탄). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.16 (s, 3F), -73.53 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 573.1811, 확인된 값 574.2 (M+1)+; 머무름 시간: 5.19분 (LC 방법 AA).
단계 17: 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올
MeOH (5 mL) 중 6-벤질옥시-10,10-디메틸-17-니트로-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔 (46 mg, 0.0779 mmol)의 용액에 10% 탄소 상 팔라듐(46 mg, 50% 습식, 5% w/w, 0.0216 mmol)을 첨가하였다. 플라스크 내의 공기를 진공을 통해 질소로 3회 교체하였다. 플라스크 내의 질소를 진공을 통해 수소로 6회 교체하였다. MeOH 중 암모니아(0.38 mL의 2 M, 0.76 mmol)를 주사기로 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 분위기(풍선) 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트통해 여과하고, EtOAc로 세척하고, 여액을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 MeOH(5 mL)에 용해시켰다. 10% Pd/C(60 mg, 50% 습식, 5% w/w, 0.0282 mmol)를 첨가하였다. 플라스크 내의 공기를 진공을 통해 질소로 3회 교체하였다. 플라스크 내의 질소를 진공을 통해 수소로 6회 교체하였다. MeOH 중 암모니아(0.38 mL의 2 M, 0.76 mmol)를 주사기로 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 분위기(풍선) 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트통해 여과하고, EtOAc로 세척하고, 여액을 진공 하에 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 10%~40% EtOAc/헵탄)로 정제하여 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (25 mg, 71%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.32 (s, 1H), 4.82 (br. s, 1H), 3.77 (br. s, 1H), 3.56 (td, J = 12.8, 4.2 Hz, 1H), 3.33 (td, J = 12.9, 4.5 Hz, 1H), 2.33 - 2.16 (m, 2H), 1.88 - 1.61 (m, 3H), 1.59 - 1.41 (m, 3H), 1.33 - 1.14 (m, 2H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.09 (s, 3F), -79.37 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 453.1599, 확인된 값 454.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.67분 (LC 방법 AA).
단계 18: 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 1) (화합물 221) 및 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (거울상이성질체 2)(화합물 222)
라세미 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올 (41 mg, 0.0905 mmol)을 다음 조건을 사용해 SFC로 정제하였다: Phenomenex Lux 5 μm, 셀룰로오스 4 컬럼 (250 x 21.2 mm); 9.6 mg/주입; 용리제: 10% MeOH, 90% CO2; 유속: 75 mL/분; 농도: 메탄올(개질제 미포함) 중 13.7 mg/mL; 주입 부피: 700 μL; 배출 압력: 100 bar; 파장: 220 nm; 온도: 40℃.
키랄 SFC 분리에서 처음 용리되는 화합물을 함유하는 분획을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% EtOAc/헵탄)로 다시 정제하고 동결 건조시켜 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 1)(13 mg, 32%, 99.9% ee)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.18 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 5.89 - 5.79 (m, 2H), 3.48 - 3.35 (m, 1H), 3.28 - 3.15 (m, 1H), 2.24 - 2.12 (m, 1H), 2.11 - 2.00 (m, 1H), 1.77 - 1.57 (m, 3H), 1.55 - 1.44 (m, 1H), 1.43 - 1.26 (m, 2H), 0.87 (s, 3H), 0.83 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.94 (s, 3F), -78.03 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 453.15994, 확인된 값 454.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.68분 (LC 방법 AA).
키랄 SFC 분리에서 두 번째로 용리되는 화합물을 함유하는 분획을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배: 0%~40% EtOAc/헵탄)로 다시 정제하고 동결 건조시켜 17-아미노-10,10-디메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-19-옥사-3,4,13,18-테트라아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올(거울상이성질체 2)(18 mg, 44%, 99.9% ee)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.18 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 5.91 - 5.76 (m, 2H), 3.47 - 3.35 (m, 1H), 3.28 - 3.16 (m, 1H), 2.24 - 2.12 (m, 1H), 2.11 - 2.00 (m, 1H), 1.77 - 1.57 (m, 3H), 1.54 - 1.44 (m, 1H), 1.43 - 1.26 (m, 2H), 0.87 (s, 3H), 0.83 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.94 (s, 3F), -78.03 (s, 3F). ESI-MS m/z 계산된 값 453.15994, 확인된 값 454.2 (M+1)+; 머무름 시간: 4.68분 (LC 방법 AA).
실시예 122: 생물활성 검정
CFTR-매개 단락 전류의 우싱 챔버 검정
우싱 챔버 실험은, F508del 및 최소 기능 CFTR 돌연변이에 대해 이형접합성인 CF 대상체로부터 유래된 인간 기관지 상피(HBE)(F508del/MF-HBE) 세포로서, (Neuberger T, Burton B, Clark H, Van Goor F의 문헌[Methods Mol Biol 2011:741:39-54]에서) 전술한 것과 같이 배양한 세포를 사용해 수행하였다. 4일 후, 정점 배지를 제거하고, 사용 전에 세포를 공기 액체 계면에서 14일을 초과하는 기간 동안 성장시켰다. 이를 통해, 인간 기관지 기도 상피의 특징인 섬모를 가진 완전히 분화된 원주 세포의 단층을 생성하였다.
CFTR-매개 단락(ISC) 전류를 단리하기 위해, Costar® Snapwell™ 세포 배양 삽입물 상에서 성장시킨 F508del/MF-HBE를 우싱 챔버에 장착하고, 37℃에서 전압-클램프 기록 조건(Vhold= 0 mV) 하에 경상피성 ISC를 측정하였다. 기저측 용액에는 (mM 단위로) 145 NaCl, 0.83 K2HPO4, 3.3 KH2PO4, 1.2 MgCl2, 1.2 CaCl2, 10 포도당, 10 HEPES(pH는 NaOH로 7.4로 조정함)가 포함되었고, 정점 용액에는 (mM 단위로) 145 NaGluconate, 1.2 MgCl2, 1.2 CaCl2, 10 포도당, 10 HEPES(pH는 NaOH로 7.4로 조정함), 및 상피 나트륨 채널을 차단하기 위한 30 μM 아밀로라이드가 포함되었다. CFTR을 활성화하기 위해 정점면에 포르스콜린(20 μM)을 첨가한 다음, BPO, GlyH-101, 및 CFTR 억제제 172로 이루어진(각각 20 μM의 최종 검정 농도임) CFTR 억제제 칵테일을 정점에 첨가하여 CFTR 전류를 특이적으로 단리하였다. 각 조건에 대한 CFTR-매개 ISC(μA/cm2)는 억제 후 정태 전류에 대한 피크 포르스콜린 반응으로부터 결정하였다.
강화제 화합물의 식별
CFTR-매개된 ISC에 대한 CFTR 강화제 화합물의 활성은 전술한 바와 같이 Ussing 챔버 연구에서 결정되었다. F508del/MF-HBE 세포 배양물을 20% 인간 혈청이 존재하는 가운데 37℃에서 18~24시간 동안 10 μM (14S)-8-[3-(2-{디스피로[2.0.2.1]헵탄-7-yl}에톡시)-1H-피라졸-1-일]-12,12-디메틸-2λ6-티아-3,9,11,18,23-펜타아자테트라시클로 [17.3.1.111,14.05,10]테트라코사-1(22),5,7,9,19(23),20-헥사엔-2,2,4-트리온과 함께, 다양한 농도의 강화제 화합물과 함께 인큐베이션하였다. 18~24시간 인큐베이션 동안에 사용된 강화제 화합물 및 (14S)-8-[3-(2-{디스피로[2.0.2.1]헵탄-7-일}에톡시)-1H-피라졸-1-일]-12,12-디메틸-2λ6-티아-3,9,11,18,23-펜타아자테트라시클로 [17.3.1.111,14.05,10]테트라코사-1(22),5,7,9,19(23),20-헥사엔-2,2,4-트리온의 농도는 CFTR 매개 ISC의 우싱 챔버 측정 전체에 걸쳐 일정하게 유지하여, 전체 실험에 걸쳐 화합물이 존재하도록 하였다. 추정 F508del 강화제의 효능 및 효과를 알려진 Vertex 강화제인, 이바카프터(N-[2,4-비스(1,1-디메틸에틸)-5-하이드록시페닐]-1,4-디하이드로-4-옥소퀴놀린-3-카르복스아미드)의 효능 및 효과와 비교하였다.
다음의 표는 본 실시예에 기술된 검정을 사용하여 생성된 본 발명의 대표적인 화합물에 대한 CFTR 조절 활성을 나타낸다(EC50: +++는 < 500 nM이고; ++는 500 nM ~ 1 μM이고; +는 > 1 μM이며; ND는 “본 검정에서 결정되지 않음”).
기타 구현예
전술한 논의는 본 개시의 단지 예시적인 구현예를 개시하고 기술한다. 당업자는 다음의 청구범위에서 정의된 바와 같은 본 개시의 사상 및 범주로부터 벗어나지 않고도 다양한 변화, 변형, 및 변경이 그 안에서 이루어질 수 있다는 것을 이러한 논의로부터 및 첨부된 도면 및 청구범위로부터 쉽게 인식할 것이다.

Claims (87)

  1. 식 I의 화합물:
    I,
    및 이의 중수소화된 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 화합물로서, 식 중:
    X는 -N(R X1 )- 및 로부터 선택되고;
    고리 A는　C1-C6　알킬 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된　4원 내지 6원 헤테로시클릴이고;
    R X1 은 H, C1-C6 알킬(하이드록시, 옥소, -OR X2 , 및 -N(R X2 )2로부터 독립적으로 치환된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및 C3-C8 시클로알킬로부터 선택되고;
    각각의 R X2 는 H 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Y는 -C(R Y )2-, -O-, -CO-, -NR YN -, 및 로부터 독립적으로 선택되되, 여기서 각각의 R YN 은 H, C1-C4 알킬, 및 CO2 R YN1 로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 R YN1 은 C1-C4 알킬 및 C3-C6 시클로알킬로부터 선택되고;
    각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6　알콕시, 및　Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -OR Y1 ,
    -CO2 R Y1 , -COR Y1 , -CON(R Y1 )2, 및 -N(R Y1 )2로부터 독립적으로 선택되거나;
    동일한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나; 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있는 2개의 R Y 가 합쳐져 pi 결합을 형성하고;
    각각의 R Y1 은 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의　R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
    고리 B는 다음으로부터 선택되고:
    ■ C6-C10 아릴(할로겐, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
    ■ C3-C8 시클로알킬,
    ■ 5원 내지 10원 헤테로아릴, 및
    ■ 3원 내지 6원 헤테로시클릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨);
    각각의 Q는 다음으로부터 독립적으로 선택되고:
    ■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알킬:
    o 할로겐,
    o 옥소,
    o C6-C10 아릴(할로겐 및 OCF3으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
    o C3-C8 시클로알킬,
    ■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환된 C3-C8 시클로알킬:
    o 할로겐,
    o CN,
    o C1-C6 알킬(할로겐, -NH2, 및 -NHCOMe로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
    o C1-C6 알콕시,
    o C6-C10 아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 및
    o C3-C8 시클로알킬,
    ■ 다음으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 C6-C10 아릴:
    o 할로겐,
    o CN,
    o C1-C6 알킬(할로겐 및 하이드록시로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
    o 다음으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 기로 임의 치환된 C1-C6 알콕시:
    ■ 할로겐,
    ■ C3-C8 시클로알킬(CF3으로 임의 치환됨),
    o C3-C8 시클로알킬(할로겐, CF3, OCF3, 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
    o C6-C10 아릴,
    ■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 5원 내지 10원 헤테로아릴:
    o 할로겐,
    o C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨),
    o C3-C8 시클로알킬(1개 내지 3개의 CF3 기로 임의 치환됨), 및
    o 3원 내지 10원 헤테로시클릴,
    ■ 다음으로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환된 3원 내지 10원 헤테로시클릴:
    o C1-C6 알킬(옥소 및 및 C3-C8 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 기로 임의 치환됨), 및
    o 옥소;
    각각의 R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(하이드록시, C6-C10　아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C3-C8 시클로알킬, C6-C10　아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -B(OR 2 )2, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , -PO(OR 2 )2, 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 R 2 는 수소, C1-C6 알킬(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~6개의 기로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 및 C6-C10　아릴(C1-C6 플루오로알킬 및 C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되고;
    Z는 , , , 및 로부터 선택되되; 고리 C는 C6-C10 아릴 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 선택되고;
    R Z1 은 수소, -CN, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10 아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되고;
    R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, NH2, NH(CO)(C1-C6 알킬), 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되거나,
    R Z1 과 R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하고;
    각각의 R Z3 은 하이드록시, C1-C6 알콕시, C1-C6 알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되거나; 2개의 R Z3 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하고;
    n은 4, 5, 6, 7, 및 8로부터 선택되고;
    m은 0, 1, 2, 및 3으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  2. 제1항에 있어서, X는 -N(R X1 )-인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  3. 제1항에 있어서, X는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  4. 제1항에 있어서, X는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
    -NH-, -N(CH3)-, -N(CH2CH3)-, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 및 .
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    각각의 R Y 는 수소, 하이드록시, 할로겐, C1-C6 알킬(하이드록시, C1-C6 알콕시, 및 Q로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴(할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 5원 내지 10원 헤테로아릴, -CO2 R Y1 , 및 -CON(R Y1 )2로부터 독립적으로 선택되거나;
    동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 C3-C8 시클로알킬 및 3원 내지 7원 헤테로시클릴로부터 선택된 고리를 형성하거나;
    2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R Y1 는 수소 및 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 동일한 질소에 결합된 2개의 R Y1 이 합쳐져 3원 내지 6원 헤테로시클릴을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의　Q는 C6-C10 아릴로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, Q는 페닐인, 화합물, 중수수화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
    각각의 R Y 는 다음으로부터 독립적으로 선택되거나:
    수소, 하이드록시, -CH3, -CD3, -CH2CH3, , , , , , , , , , , , , 및 ;
    동일한 원자 상의 2개의 R Y 가 합쳐져 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 테트라하이드로프로필, 및 테트라하이드로푸릴로부터 선택된 고리를 형성하거나;
    2개의 R Y (이 중 하나는 한 원자 상에 있고 다른 하나는 인접한 원자 상에 있음)가 합쳐져 pi 결합을 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 B는 C6-C10 아릴(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 5원 내지 10원 헤테로아릴로부터 선택된다.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 B는 페닐(할로겐 및 C1-C6 알콕시로부터 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨) 및 피리딜로부터 선택되는,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 B는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
    ,,,,, 및 .
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, n은 4, 5, 6, 및 7로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, -(Y)n-은 다음으로부터 선택된 기인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:



  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의　R 1 은 할로겐, C1-C6 플루오로알킬, C1-C6 알킬(C6-C10 아릴로부터 선택된 기로 임의 치환됨), -OR 2 , -N(R 2 )2, -CO2 R 2 , -CO-N(R 2 )2, -CN, C1-C6 알콕시, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5원 내지 6원 헤테로아릴(C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨), 3원 내지 6원 헤테로시클릴, -B(OR 2 )2, -SO2 R 2 , -SR 2 , -SOR 2 , 및 -PO(R 2 )2로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R 2 는 C6-C10 아릴(C1-C6 플루오로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의　R 1 은 -Br, -CF3, -NH2, -CH3, -CH(CH3)2, -CN, -OH, -OCH3, -NH(CH3), -NH(CH2CH3), -CONH2, -CO2CH3, -SO2CH3, -SO2Ph, PO(CH3)2, B(OH)2, 페닐, 피리딜, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로푸라닐, 시클로프로필, 시클로헥실, 이미다졸릴, , , , 및 로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 로부터 선택되고, 여기서　고리 C는 C6-C10 아릴로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 기:
    는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수수화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 기:
    는 인, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, C6-C10 아릴, 및 5원 내지 6원 헤테로아릴로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, R Z2 는 수소, 할로겐, 하이드록시, 및 C1-C6 알콕시(C3-C10 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1~3개의 기로 임의 치환됨)로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    R Z1 은 수소, C1-C6 알킬(1-3 하이드록시로 임의 치환됨), C1-C6 플루오로알킬, 3원 내지 6원 헤테로시클릴, C3-C6 시클로알킬, 및 C6-C10 아릴로부터 선택되고;
    R Z2 는 수소, 할로겐, 및 하이드록시로부터 선택되거나;
    R Z1 　및 R Z2 는 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
    R Z1 은 수소, CH3, CF3, CH2OH, 페닐, 시클로프로필, 및 테트라하이드로피라닐로부터 선택되고;
    R Z2 는 수소, 할로겐, 및 하이드록시로부터 선택되거나;
    R Z1 과　R Z2 가 합쳐져 옥소 및 =N-OH로부터 선택된 기를 형성하는,　화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  25. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, R Z2 는 하이드록시인, 화합물, 중수수화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 다음으로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, m은 1 및 2로부터 선택되는, 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  28. 표 10의 화합물, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 전술한 것 중 어느 하나의 중수소화된 유도체로부터 선택된 화합물.
  29. 제28항에 있어서, 다음으로부터 선택되는 화합물, 이의 중수소화된 유도체, 또는 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염:


  30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항의 화합물, 중수소화된 유도체, 또는 약학적으로 허용 가능한 염; 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
  31. 제30항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)를 추가로 포함하는, 약학적 조성물.
  32. 제31항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 조절 활성을 갖는 화합물 또는 이의 염 또는 중수소화된 유도체를 포함하는, 약학적 조성물.
  33. 제31항 또는 제32항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 교정제를 포함하는, 약학적 조성물.
  34. 제31항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (R)-1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-N-(1-(2,3-디하이드록시프로필)-6-플루오로-2-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-1H-인돌-5-일)시클로프로판카르복스아미드(화합물 II)를 포함하는, 약학적 조성물:
    화합물 II.
  35. 제31항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 3-(6-(1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)시클로프로판카르복스아미도)-3-메틸피리딘-2-일)벤조산(화합물 IV)을 포함하는, 약학적 조성물:
    화합물 IV.
  36. 제31항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 N-(1,3-디메틸피라졸-4-일)설포닐-6-[3-(3,3,3-트리플루오로-2,2-디메틸-프로폭시)피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드(화합물 V)를 포함하는, 약학적 조성물:
    화합물 V.
  37. 제31항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 N-(벤젠설포닐)-6-[3-[2-[1-(트리플루오로메틸) 시클로프로필]에톡시]피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드(화합물 VI)를 포함하는, 약학적 조성물:
    화합물 VI.
  38. 제31항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (14S)-8-[3-(2-{디스피로[2.0.2.1]헵탄-7-일}에톡시)-1H-피라졸-1-일]-12,12-디메틸-2λ6-티아-3,9,11,18,23-펜타아자테트라시클로 [17.3.1.111,14.05,10]테트라코사-1(22),5,7,9,19(23),20-헥사엔-2,2,4-트리온(화합물 VII)을 포함하는, 약학적 조성물:

    화합물 VII.
  39. 제31항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (11R)-6-(2,6-디메틸페닐)-11-(2-메틸프로필)-12-{스피로[2.3]헥산-5-일}-9-옥사-2λ6-티아-3,5,12,19-테트라아자트리시클로[12.3.1.14,8]노나데카-1(17),4(19),5,7,14(18),15-헥사엔-2,2,13-트리온(화합물 VIII)을 포함하는, 약학적 조성물:
    화합물 VIII.
  40. 제31항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 PTI-428, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, 및 PTI-801로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는, 약학적 조성물.
  41. 제31항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 강화제 인핸서를 포함하는, 약학적 조성물.
  42. 제31항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ASP-11을 포함하는, 약학적 조성물.
  43. 제31항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 강화제를 포함하는, 약학적 조성물.
  44. 제31항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)은 다음으로부터 선택된 화합물을 포함하는, 약학적 조성물: N-(5-하이드록시-2,4-디-터트-부틸-페닐)-4-옥소-1H-퀴놀린-3-카르복스아미드(화합물 III):
    화합물 III,
    및 N-(2-(터트-부틸)-5-하이드록시-4-(2-(메틸-d3)프로판-2-일-1,1,1,3,3,3-d6)페닐)-4-옥소-1,4-디하이드로퀴놀린-3-카르복스아미드(화합물 III-d):
    화합물 III-d.
  45. 제31항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 FDL-176, PTI-808, GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451 (아이센티카프터), GLPG3067/ABBV-3067 (나보카프터), 및 ABBV-191로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는, 약학적 조성물.
  46. 제31항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 증폭제를 포함하는, 약학적 조성물.
  47. 제31항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 PTI-428을 포함하는, 약학적 조성물.
  48. 제31항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 통독제를 포함하는, 약학적 조성물.
  49. 제31항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ELX-02를 포함하는, 약학적 조성물.
  50. 제31항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 핵산 요법을 포함하는, 약학적 조성물.
  51. 제31항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 MRT5005, Lunar-CF, 및 RCT223으로부터 선택된 적어도 하나의 제제를 포함하는, 약학적 조성물.
  52. 제31항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ENaC 억제제를 포함하는, 약학적 조성물.
  53. 제31항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 아밀로라이드, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, 및 ARO-ENaC1001을 포함하는, 약학적 조성물.
  54. 제31항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 TMEM16A 조절제를 포함하는, 약학적 조성물.
  55. 제31항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ETD002를 포함하는, 약학적 조성물.
  56. 제31항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 GPR39 작용제를 포함하는, 약학적 조성물.
  57. 제31항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 DS-1039를 포함하는, 약학적 조성물.
  58. 낭성 섬유증을 치료하는 방법으로서, 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 염, 또는 중수소화된 유도체; 또는 제30항 내지 제57항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  59. 제58항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)를 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  60. 제59항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 조절 활성을 갖는 화합물 또는 이의 염 또는 중수소화된 유도체를 포함하는, 방법.
  61. 제59항 또는 제60항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 교정제를 포함하는, 방법.
  62. 제59항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (R)-1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-N-(1-(2,3-디하이드록시프로필)-6-플루오로-2-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-1H-인돌-5-일)시클로프로판카르복스아미드(화합물 II)를 포함하는, 방법:
    화합물 II.
  63. 제59항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 3-(6-(1-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)시클로프로판카르복스아미도)-3-메틸피리딘-2-일)벤조산(화합물 IV)을 포함하는, 방법:
    화합물 IV.
  64. 제59항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 N-(1,3-디메틸피라졸-4-일)설포닐-6-[3-(3,3,3-트리플루오로-2,2-디메틸-프로폭시)피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드(화합물 V)를 포함하는, 방법:
    화합물 V.
  65. 제59항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 N-(벤젠설포닐)-6-[3-[2-[1-(트리플루오로메틸) 시클로프로필]에톡시]피라졸-1-일]-2-[(4S)-2,2,4-트리메틸피롤리딘-1-일]피리딘-3-카르복스아미드(화합물 VI)를 포함하는, 방법:

    화합물 VI.
  66. 제59항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (들)(14S)-8-[3-(2-{디스피로[2.0.2.1]헵탄-7-일}에톡시)-1H-피라졸-1-일]-12,12-디메틸-2λ6-티아-3,9,11,18,23-펜타아자테트라시클로 [17.3.1,111,14.05,10]테트라코사-1(22),5,7,9,19(23),20-헥사엔-2,2,4-트리온(화합물 VII)을 포함하는, 약학적 조성물:
    화합물 VII.
  67. 제59항 내지 제66항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 (들)(11R)-6-(2,6-디메틸페닐)-11-(2-메틸프로필)-12-{스피로[2.3]헥산-5-일}-9-옥사-2λ6-티아-3,5,12,19-테트라아자트리시클로[12.3.1.14,8]노나데카-1(17),4(19),5,7,14(18),15-헥사엔-2,2,13-트리온(화합물 VIII)을 포함하는, 방법:
    화합물 VIII.
  68. 제59항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 PTI-428, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, ABBV-2851, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, 및 PTI-801로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는, 방법.
  69. 제59항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 강화제 인핸서를 포함하는, 방법.
  70. 제59항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ASP-11을 포함하는, 방법.
  71. 제59항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 강화제를 포함하는, 방법.
  72. 제59항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 다음으로부터 선택된 화합물을 포함하는, 방법: N-(5-하이드록시-2,4-디-터트-부틸-페닐)-4-옥소-1H-퀴놀린-3-카르복스아미드(화합물 III):
    화합물 III,
    및 N-(2-(터트-부틸)-5-하이드록시-4-(2-(메틸-d3)프로판-2-일-1,1,1,3,3,3-d6)페닐)-4-옥소-1,4-디하이드로퀴놀린-3-카르복스아미드(화합물 III-d):
    화합물 III-d.
  73. 제59항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 FDL-176, PTI-808, GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451 (아이센티카프터), GLPG3067/ABBV-3067 (나보카프터), 및 ABBV-191로부터 선택된 적어도 하나의 화합물을 포함하는, 방법.
  74. 제59항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 증폭제를 포함하는, 방법.
  75. 제59항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 PTI-428을 포함하는, 방법.
  76. 제59항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 CFTR 통독제를 포함하는, 방법.
  77. 제59항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ELX-02를 포함하는, 방법.
  78. 제59항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 핵산 요법을 포함하는, 방법.
  79. 제59항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 MRT5005, Lunar-CF, 및 RCT223으로부터 선택된 적어도 하나의 제제를 포함하는, 방법.
  80. 제59항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ENaC 억제제를 포함하는, 방법.
  81. 제59항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 아밀로라이드, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, 및 ARO-ENaC1001을 포함하는, 방법.
  82. 제59항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 TMEM16A 조절제를 포함하는, 방법.
  83. 제59항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 ETD002를 포함하는, 방법.
  84. 제59항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 GPR39 작용제를 포함하는, 방법.
  85. 제59항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제(들)는 DS-1039를 포함하는, 방법.
  86. 낭성 섬유증의 치료에 사용하기 위한 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항의 화합물, 염, 또는 중수소화된 유도체 또는 제30항 내지 제57항 중 어느 한 항의 약학적 조성물.
  87. 낭성 섬유증의 치료를 위한 의약을 제조하는 데 사용하기 위한, 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항의 화합물, 염, 또는 중수소화된 유도체 또는 제30항 내지 제57항 중 어느 한 항의 약학적 조성물의 용도.
KR1020237020002A 2020-11-18 2021-11-17 낭성 섬유증 막관통 전도도 조절제로서 사용하기 위한 1,3,4-옥사디아졸 고리를 함유하는 거대환 KR20230123522A (ko)

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