TW202233607A - Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ抑制劑化合物之新結晶形式 - Google Patents

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Abstract

本發明關於KRAS G12C抑制劑化合物之結晶形式及其製備方法。此外，本發明關於藥物組成物，該藥物組成物包含所述結晶形式以及至少一種藥學上可接受的賦形劑。本發明之藥物組成物可以用作藥物，特別是用於治療癌症和KRAS G12C突變型癌症之藥物。

Description

KRAS　G12C抑制劑化合物之新結晶形式
本發明提供了治療有用的化合物（即1-{6-[(4 M)-4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}丙-2-烯-1-酮（化合物A））之結晶形式。本發明還提供了包含該等結晶形式之藥物組成物，以及製備該等結晶形式之方法和在癌症和KRAG G12C突變型癌症特別是如非小細胞肺癌、結腸直腸癌、胰臟癌和實性瘤等癌症的治療中使用該等結晶形式之方法。
KRAS致癌蛋白係具有作為細胞內傳訊途徑（如MAPK、PI3K和Ral途徑）的調節劑之至關重要角色的GTP酶，該等傳訊途徑涉及增殖、細胞存活和腫瘤形成。KRAS的致癌基因活化主要藉由密碼子12的誤義突變發生。在大約30%的所有人類癌症中均發現了KRAS功能獲得型突變。KRAS G12C突變係特異的亞突變，盛行於大約13%的肺腺癌、4%（3%-5%）的結腸腺癌和更小部分的其他癌症類型。
在正常細胞中，KRAS在無活性GDP束縛態與活性GTP束縛態之間交替。密碼子12處KRAS的突變（如G12C）會損害GTP酶活化蛋白（GAP）刺激的GTP水解。在這種情況下，因此，KRAS G12C從GTP到GDP形式的轉化會非常緩慢。結果KRAS G12C轉變成活性GTP束縛態，因此驅動致癌基因傳訊。
因此，能夠抑制這種致癌基因傳訊的化合物將是有用的。還重要的是能夠提供呈固體形式（例如多形形式）的形式之這種化合物，該形式適合用於原料藥和藥物產品開發。
然而，尚不可能預測特定化合物或化合物的鹽是否將首先形成多形體或者任何此類多形體是否將適用於在適合投與於有需要的患者之藥物組成物中的商業用途、或者哪些多形體將顯示出希望的特性。
這是因為特定化合物的不同固態形式通常具有不同的特性。因此，活性藥物成分（API）之固態形式在確定治療性藥物的易製備性、吸濕性、穩定性、溶解度、儲存穩定性、易配製性、在胃腸液中的溶解速率和體內生體可用率方面起著重要作用。
當使用API的特定固體形式時，還可以在製造期間和/或在配製期間改進活性藥物成分的加工或處理。希望的加工特性意味著某些固體形式可以更容易地處理，更適合儲存，和/或允許更好的純化。
化合物A係實例1的化合物並且具有以下描繪的化學結構，
Figure 02_image003
（化合物A）
化合物A係KRAS G12C的強有力且選擇性的共價抑制劑，化合物A與KRAS G12C結合並且將其誘捕至無活性的鳥苷二磷酸（GDP）束縛態。在細胞測定中，化合物A選擇性地抑制KRAS G12C的下游效應蛋白募集並且特異性地抑制KR ASG12C突變細胞系中KRAS驅動的致癌基因傳訊和增殖。在KRAS G12C突變異種移植和患者源性小鼠異種移植腫瘤模型中，化合物A治療還導致劑量依賴性的抗腫瘤活性，KRAS G12C靶佔用，以及促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）途徑靶基因、雙特異性磷酸酶6（DUPS6）之表現減少。
因此，化合物A有潛力減少患有KRAS G12C突變型實性瘤的患者之腫瘤生長。
獲得化合物A之結晶形式並非易事。對化合物A之常規結晶實驗（如從熱飽和溶液蒸發或藉由沈澱）僅獲得無定形材料、油類或凝膠樣材料。
諸位發明人現在已經能夠生產化合物A之結晶固體形式，該等結晶固體形式具有的特性可使它們適合用於原料藥和藥物產品開發中。該等固體形式提供適合用於工業規模製造的處理特性。本發明還提供了生產該等多形體之方法，該等方法適合大規模生產。
本文提供的該等形式具有良好的物理和化學穩定性和/或具有良好的加工品質。此外，本文提供的該等形式中之一些形式可用作中間體，便於使化合物A之其他有用的結晶形式能夠得以製備。
本發明提供了如本文定義的化合物A之結晶形式，該結晶形式選自化合物A之水合物HA結晶形式、水合物HB結晶形式、水合物HC結晶形式、變型C結晶形式、乳酸溶劑化物形式（例如L-乳酸溶劑化物結晶形式的形式G或L-乳酸溶劑化物結晶的形式F）以及醇溶劑化物（例如異丙醇溶劑化物、乙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物或正丙醇溶劑化物）結晶形式。
本發明提供了如本文定義的化合物A之結晶形式，該結晶形式選自化合物A之水合物HA結晶形式、水合物HB結晶形式、水合物HC結晶形式、變型C結晶形式、L-乳酸溶劑化物結晶形式的形式G、L-乳酸溶劑化物結晶的形式F以及醇溶劑化物（例如異丙醇溶劑化物、乙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物或正丙醇溶劑化物）結晶形式。
本發明還提供了如本文定義的化合物A之結晶形式，其X射線粉末繞射光譜與圖1、圖2、圖3、圖4、圖5、圖6、圖7、圖8、圖9、圖10、圖11或圖12所示之X射線粉末繞射光譜基本相同。
本發明還提供了如本文定義的化合物A之結晶形式，當使用CuKα輻射測量時，該結晶形式的X射線粉末繞射光譜與圖1、圖2、圖3、圖4、圖5、圖6、圖7、圖8、圖9、圖10、圖11或圖12所示之X射線粉末繞射光譜基本相同。
本發明提供了本文描述和表徵的化合物A之結晶形式。
化合物A之化學名稱係1-{6-[(4 M)-4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}丙-2-烯-1-酮。化合物A係具有以下化學結構的化合物。化合物A還以名稱「a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮」為人所知。
Figure 02_image005
化合物A還已知為「JDQ443」或「NVP-JDQ443」並且描述於2021年6月24日公開的PCT申請WO 2021/124222之實例1中。
對於製造藥物化合物及其配製物，重要的是活性化合物呈可方便處理和加工的形式以便獲得商業上可行的、可靠的且可再現的製造方法。
已經發現化合物A之某些結晶形式（特別是本發明之水合物HA和變型C）具有良好的理化特性，該等理化特性對於旨在用於在口服固體劑型中使用的原料藥係特別有用的。
本文且特別是在請求項中描述了本發明之各種實施方式或方面。應認識到，每個實施方式中指定的特徵可以與其他指定特徵組合以提供本發明之另外實施方式。特別地，應認識到在特定實施方式或方面中提及的特徵係本發明之較佳方面。以下實施方式係本發明之代表。
本發明之結晶形式中之任一種可以藉由X射線粉末繞射圖表徵，該X射線粉末繞射圖具有與以下實例中該結晶形式相關的表中之一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、或更多個或所有峰。例如，每個形式可以藉由X射線粉末繞射圖表徵，該X射線粉末繞射圖具有至少一個、兩個、三個或四個峰（例如四個），特別是選自最具特徵峰的峰。
本發明之結晶形式可以藉由製藥工業領域中熟知的用於表徵固體的分析方法來表徵。此類方法包括但不限於熔點測定、PXRD、DSC和TGA。
給定的結晶形式可以藉由前述分析方法之一或者藉由將它們中的兩種或更多種組合來表徵。特別地，化合物A之水合物HA和/或變型C可以藉由本文所述特徵中的任一個或藉由將該等特徵中的兩個或更多個組合來表徵。 化合物A之水合物HA
化合物A之水合物HA係具有有利特性的固體形式並且適合用於加工成可以向有需要的受試者投與的藥物產品。
化合物A之水合物HA在本文中還被稱為「化合物A之結晶形式水合物HA」。
在濕度和溫度變化時，水合物HA在很大程度上保持不變。例如，當在環境相對濕度下從25°C加熱至65°C時，水合物HA的XRPD圖保持不變。在80°C下，它轉化成無水形式，即變型A。當將相對濕度增加到10%相對濕度（RH）或以上時，變型A轉化回水合物HA。
相比之下，當加熱至較低的溫度，即從25°C加熱至40°C時水合物HB的XRPD圖變成水合物HC，並且在進一步加熱至70°C及以上時轉化成無水形式（即變型B）。
在濕度和溫度存在下，提高水合物HA的穩定性使水合物HA對於開發具有結晶原料藥的固體劑型比其他形式（例如，水合物HB）更有吸引力。
化合物A之水合物HA可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個或四個峰，該組由以下組成：8.2°、11.6°、12.9°和18.8°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。化合物A之水合物HA可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之峰，該組由以下組成：8.2°、11.6°、12.9°和18.8°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
水合物HA結晶形式還可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、或八個、或所有峰，該組由以下組成：8.2°、11.6°、12.1°、12.9°、14.6°、16.2°、18.8°、20.4°和24.1°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。水合物HA結晶形式還可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少四或五個峰，該組由以下組成：8.2°、11.6°、12.1°、12.9°、14.6°、16.2°、18.8°、20.4°和24.1°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
在一個實施方式中，水合物HA以基本上純的形式存在。
當在10 K/min下加熱時，水合物HA的差示掃描量熱法（DSC）示出峰溫度為約28°C和78°C的兩個吸熱事件。該等熱事件最可能與脫水和熔化相關。進一步加熱後，樣本在約138°C示出玻璃相變。
水合物HA係吸濕性的並且在80% RH、25°C下吸收高達7.0%。
在25°C下，在大多數溶劑中，水合物HA在平衡後係穩定的，未觀察到形式變化。用水作溶劑用於造粒而進行的造粒模擬實驗示出，不同於水合物HB，水合物HA無形式變化。
本發明還提供了用於製造水合物HA之方法，該方法可以在工業規模上進行。水合物HA可以藉由以下來製造：首先形成化合物A之醇溶劑化物（例如，異丙醇溶劑化物、乙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物或正丙醇溶劑化物），並讓該醇溶劑化物在暴露於空氣時自發地轉化成水合物HA。替代性地，水合物HA可以藉由以下來製造：首先從化合物A之另一種醇溶劑化物（例如，異丙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物或正丙醇溶劑化物）形成乙醇溶劑化物，並讓該乙醇溶劑化物在暴露於空氣時自發地轉化成水合物HA。
因此本發明提供了化合物A之醇溶劑化物（例如，異丙醇溶劑化物、乙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物或正丙醇溶劑化物）在製造水合物HA中之用途。
本發明提供了用於製備化合物A之結晶形式水合物HA之方法，該方法包括以下步驟： (i)      將化合物A懸浮於醇溶劑中以形成相應的醇溶劑化物； (ii)     從母液中分離出獲得的晶體的至少一部分； (iii)    視需要地將分離的晶體洗滌；以及 (iv)    在潮濕氣氛中在減壓下將分離的晶體乾燥以形成水合物HA結晶形式。
還提供了用於製備化合物A之結晶形式水合物HA之方法，該方法包括以下步驟： (i)      將化合物A懸浮於醇中以形成相應的結晶形式的化合物A之醇溶劑化物； (ii)     從母液中分離出獲得的晶體的至少一部分； (iii)    視需要地將分離的晶體洗滌；以及 (iv)    在潮濕氣氛中將分離的晶體乾燥（視需要地在減壓下乾燥）以形成水合物HA結晶形式。
本發明提供了用於製造水合物HA之方法，該方法包括以下步驟：(i) 將化合物A溶解在醇溶劑混合物（例如四氫呋喃和乙醇的混合物）中；(ii) 在溶劑混合物中藉由除去溶劑混合物中的一些形成化合物A之濃溶液；(iii) 向所得溶液添加醇溶劑化物晶體或水合物HA晶體作為晶種；(iv) 加熱所得混合物（例如至40°C至70°C之間的溫度）；(v) 將剩餘的溶劑除去以形成化合物A之醇溶劑化物濕餅（例如當使用四氫呋喃和乙醇的混合物時，化合物A之乙醇的醇溶劑化物）以及 (v) 在受控的真空下（例如30至60 mbar）在水蒸汽氣氛下，在從室溫至60°C（例如50°C）的溫度範圍下，將濕餅乾燥。
提供了用於製造水合物HA之方法，該方法包括以下步驟：(i) 將化合物A溶解在乙醇溶劑混合物中，該乙醇溶劑混合物包含乙醇和沸點低於乙醇的溶劑（例如，二氯甲烷或四氫呋喃）；(ii) 將沸點較低的溶劑（例如二氯甲烷或四氫呋喃）除去以形成化合物A於乙醇中的濃溶液；(iii) 向混合物添加更多的乙醇；(iv) 向所得溶液中添加乙醇溶劑化物晶體作為晶種；(iv) 加熱所得混合物（例如至40°C至70°C之間的溫度）；(v) 將乙醇除去以形成化合物A之乙醇溶劑化物濕餅以及 (v) 在受控的真空下（例如30至60 mbar）在水蒸汽氣氛下，在從室溫至60°C（例如50°C）的溫度範圍下，將濕餅乾燥。 化合物A之醇溶劑化物
化合物A之水合物HA經由固體-固體轉換（其經由化合物A之醇溶劑化物）獲得。例如，藉由暴露於空氣，從化合物A之異丙醇溶劑化物、乙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物或正丙醇溶劑化物可以獲得化合物A之水合物HA。因此，化合物A之醇溶劑化物作為用於製造水合物HA的起始材料可為特別有用的。
在一個實施方式中，醇溶劑化物以基本上純的形式存在。
化合物A之異丙醇（IPA）溶劑化物可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少兩或三個峰，該組由以下組成：7.5°、12.5°和17.6°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。化合物A之異丙醇溶劑化物可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個、或所有峰，該組由以下組成：7.5°、12.5°、15.5°、16.4°、17.6°、21.4°和24.4°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
化合物A之乙醇（EtOH）溶劑化物可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少兩個、或三個或四個峰，該組由以下組成：7.9°、12.7°、18.2°和23.1°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。化合物A之乙醇溶劑化物可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、或八個、或更多個或所有峰，該組由以下組成：7.9°、12.7°、13.1°、15.5°、15.9°、16.9°、18.2°、18.6°、和23.1°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
化合物A之丙二醇溶劑化物可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少兩個、或三個或四個峰，該組由以下組成：7.3°、13.2°、18.0°和22.5°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。化合物A之丙二醇溶劑化物還可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、或八個、或更多個或所有峰，該組由以下組成：7.3°、13.2°、15.6°、16.2°、18.0°、22.5°、22.8°、23.2°和25.1°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。化合物A之丙二醇溶劑化物還可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自實例2e中的相應表的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、或八個、或更多個或所有峰，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
化合物A之1-丁醇溶劑化物可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：7.7°、14.5°、17.9°和19.3°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。化合物A之1-丁醇溶劑化物還可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、或八個、九個、或更多個或所有峰，該組由以下組成：7.7°、12.8°、14.5°、15.7°、17.9°、19.3°、21.3°、22.2°、24.0°和28.8°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
化合物A之正丙醇溶劑化物可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：7.6°、15.3°、17.7°和18.5°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。化合物A之正丙醇溶劑化物還可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、或八個、或更多個或所有峰，該組由以下組成：7.6°、12.3°、13.1°、15.3°、16.0°、16.7°、17.7°、18.5°和28.1°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。 化合物A之水合物HB
化合物A之水合物HB可以藉由從甲醇/水（60 : 40）的混合物結晶直接獲得，無需首先形成醇溶劑化物。
水合物HB係四水合物（理論上的含水量為12.1%）並且又稱為「四水合物HB」。
水合物HB很容易轉化為另一種水合物，即水合物HC（其又稱為一水合物HC）。在30%相對濕度（RH）以下，水合物HB轉化成一水合物HC並且在0% RH下完全脫水成無水形式，當將相對濕度提高至20% RH或以上時，該無水形式形成水合物HC。當將相對濕度增加至超過60%-70% RH時，一水合物HC轉化成四水合物HB。
化合物A之水合物HB可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少兩個、三個或所有峰，該組由以下組成：7.9°、15.8°、18.2°和26.4°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。化合物A之水合物HB還可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、或所有峰，該組由以下組成：6.5°、7.9°、12.0°、13.1°、15.8°、17.2°、17.7°、18.2°、19.8°、21.6°、23.1°和26.4°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。 化合物A之變型C
化合物A之變型C係穩定的無水結晶形式，當在帶有針孔的樣本盤中以10 K/min的速度在DSC中加熱時，該結晶形式的熔點為約196°C。熔化與分解相關。變型C係非吸濕的並且在95% RH下示出0.5%的最大吸水率。變型C可以藉由從乙酸乙酯/庚烷結晶獲得，但需要高純的起始材料用於結晶。變型C示出針狀的顆粒形態。在25°C、50°C或70°C下，除在乙醇和甲醇（其中變型C轉化成水合物HA）以及異丙醇中（其中變型C轉化成HA和異丙醇溶劑化物的混合物）以外，在大多數溶劑中，變型C在平衡後係穩定的。
用水性介質作溶劑用於造粒而進行的造粒模擬實驗示出，變型C無形式變化。化合物A之水合物HB並不是這種情況。
在一個實施方式中，變型C以基本上純的形式存在。
化合物A之變型C可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個或所有峰，該組由以下組成：6.1°、12.2°、16.3°和19.4°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
化合物A之變型C可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之峰，該組由以下組成：6.1°、12.2°、16.3°和19.4°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
化合物A之變型C還可以藉由x射線粉末繞射圖（XRPD）表徵，該x射線粉末繞射圖包含具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個或更多個或所有峰，該組由以下組成：6.1°、7.3°、8.8°、12.2°、14.7°、15.4°、16.3°、18.2°、19.4°、20.8°、21.8°、25.4°和29.4°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。 化合物A之L-乳酸溶劑化物形式
如本文所述之化合物A之L-乳酸溶劑化物形式F和G還是物理上穩定的化合物A之結晶形式並且因此可以摻入包含化合物A之藥物組成物中。 定義
在本發明之上下文中，除非另有明確說明，否則以下定義具有所指示的含義。
如本文所用，化合物A之術語「結晶形式」係指化合物A之結晶溶劑化物，或結晶水合物。術語「結晶形式」應相應地進行解釋。
如本文所用，術語「多形體」係指具有相同的化學組成但是形成晶體的分子、原子和/或離子之空間排列不同的結晶形式。
如本文所用，術語「無水形式」或「無水物」係指其中沒有水配合在晶體結構中或被其容納的結晶固體。無水形式可以仍含有殘餘的水，該殘餘的水不是晶體結構的一部分，但可以吸附在晶體的表面上或吸收到晶體的無序區域中。典型地，無水形式含有基於結晶形式的重量不大於2.0 w%、較佳的是不大於1.0 w%的水。
如本文所用，術語「水合物」係指其中水配合在晶體結構中或被其容納（例如，作為晶體結構的一部分）或被截留在晶體中（水夾雜物））的結晶固體。因此，水能夠以化學計量的量或非化學計量的量存在。例如，水合物可被稱為半水合物或稱為一水合物，取決於水/化合物的化學計量學。含水量可以例如藉由卡爾費休庫侖分析法（Karl-Fischer-Coulometry）來測量。
如本文所用，術語「無定形的」係指非結晶的化合物之固體形式。無定形化合物不具有長程有序，並且不顯示具有反射的確定性X射線繞射圖。
如本文所用，術語「室溫」係指在從20°C至30°C範圍內的溫度。
除非另有指定，否則在本領域中常用的標準條件下進行測量。
關於X射線繞射峰位置的術語「基本上相同」意指考慮典型的峰位置和強度可變性。例如，熟悉該項技術者應當理解，峰位置（2θ（2θ值））將顯示一些設備之間的可變性，典型地多達0.2°或0.1°。
應當理解本文引用的2θ（two-theta）值可為所引用數值的正或負0.2° 2θ。此外，熟悉該項技術者應當理解，相對峰強度將顯示裝置之間的可變性以及由於結晶度、較佳的取向、製備的樣本表面、和熟悉該項技術者已知的其他因素而引起的可變性，並且相對峰強度應該僅作為定性量度。
除非另有說明，否則本文引用的2θ（2θ值）係在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得的。
提及水合物HA的「X射線粉末繞射圖與圖1中示出的X射線粉末繞射圖基本上相同」之表述可以與提及結晶水合物HA的「X射線粉末繞射圖，其特徵在於圖1中示出的代表性X射線粉末繞射圖」之表述互換使用。提及如本文所述之化合物A之其他形式之類似表述應相應地進行解釋。
熟悉該項技術者還應理解，可以獲得具有取決於所採用的測量條件的測量誤差之X射線繞射圖。特別地，通常已知X射線繞射圖中的強度可以取決於所採用的測量條件而波動。應進一步理解，相對強度也可以取決於實驗條件而變化，並且因此，不應考慮確切的強度量級。另外，常規X射線繞射圖的繞射角之測量誤差典型地為約5%或更小，並且應當考慮與前述繞射角有關的此類測量誤差程度。因此，應理解本發明之晶體形式不限於提供與本文揭露之附圖中描繪的X射線繞射圖完全相同的X射線繞射圖之晶體形式。提供與附圖中揭露的X射線繞射圖基本上相同的X射線繞射圖之任何晶體形式都落入本發明之範圍內。確定X射線繞射圖的實質特徵之能力在熟悉該項技術者的能力範圍內。
化合物A之結晶形式或溶劑化物在本文中可以被稱為係藉由「如附圖中所示」的圖形數據表征的。此類數據包括例如粉末X射線繞射、DSC和TGA分析。熟悉該項技術者理解，諸如儀器類型的變化，響應以及樣本定向性、樣本濃度和樣本純度的變化之因素可能導致當以圖形形式呈現時此類數據的小幅變化，例如與精確的峰位置和強度有關的變化。然而，本文附圖中的圖形數據與針對另一種或未知的固體形式而生成的圖形數據之比較以及兩組圖形數據涉及相同的晶體形式之確認完全在熟悉該項技術者的知識範圍內。
如本文所用，術語「母液」係指固體從所述溶液中結晶後剩餘的溶液。
如本文所用，當關於本文揭露的形式（例如水合物HA或變型C）使用時，「基本上純的」或「實質上純的形式」意指化合物基於該化合物的重量具有大於90重量%（w%），包括大於90 w%、91 w%、92 w%、93 w%、94 w%、95 w%、96 w%、97 w%、98 w%和99 w%，並且還包括等於約100 w%的化合物A之純度。其餘的材料包含該化合物的一或多種其他形式、和/或反應雜質和/或由其製備產生的加工雜質。例如，化合物A之結晶形式可以被認為係基本上純的，因為其具有如藉由本領域此時已知和普遍接受的手段所測量的大於90 w%的純度，其中剩餘的小於10 w%的材料包含化合物A之一或多種其他形式和/或反應雜質和/或加工雜質。因此，在實施方式中，提供了化合物A之結晶形式（例如水合物HA或變型C），該結晶形式具有大於90 w%（包括大於90 w%、91 w%、92 w%、93 w%、94 w%、95 w%、96 w%、97 w%、98 w%和99 w%）的純度。
如本文所用，術語「藥學上可接受的賦形劑」係指在給定劑量下不顯示出顯著的藥理活性並且除活性藥物成分之外被添加到藥物組成物中的物質。賦形劑可以起到尤其是媒介物、稀釋劑、釋放劑、崩散劑、溶解修飾劑、吸收增強劑、穩定劑或製造助劑的作用。賦形劑可以包括填充劑（稀釋劑）、黏合劑、崩散劑、潤滑劑和助滑劑。
如本文所用，術語「填充劑」或「稀釋劑」係指用於在遞送之前稀釋活性藥物成分的物質。稀釋劑和填充劑還可以用作穩定劑。
如本文所用，術語「黏合劑」係指將活性藥物成分和藥學上可接受的賦形劑結合在一起以維持凝聚和離散部分的物質。
如本文所用，術語「崩散劑（disintegrant或disintegrating agent）」係指在添加到固體藥物組成物中後促進其在投與後分解或崩散並且允許活性藥物成分盡可能有效地釋放以允許其迅速溶解的物質。
如本文所用，術語「潤滑劑」係指被添加到粉末混合物中以防止壓實的粉末塊在壓片或封裝過程期間黏附到設備上的物質。它們有助於片劑從模具中噴出並且可以改進粉末流動性。
如本文所用，術語「助滑劑」係指用於片劑和膠囊配製物以改進在片劑壓縮期間的流動特性並且產生抗結塊作用的物質。
如本文所用，關於化合物A之術語「有效量」或「治療有效量」，產生所希望的治療性和/或預防性效果。
如本文所用，術語「非吸濕性」係指當用GMS（或DVS）測量時在從0至95% RH範圍內的相對濕度下並且在(25.0 ± 0.1)°C的溫度下在吸附循環中顯示出基於化合物的重量至多2 w%的吸水率之化合物。非吸濕性較佳的是最高0.5%。
如本文可互換使用的術語「固體形式」或「固態形式」係指化合物的任何結晶和/或無定形相。 藥物組成物和用途
在另一個方面，本發明提供了如上述方面及其相應的實施方式中任一項所定義的化合物A之結晶形式用於製備藥物組成物的用途。
在又另一個方面，本發明提供了藥物組成物，該藥物組成物包含如上述方面及其相應的實施方式中任一項所定義的化合物A之結晶形式，以及視需要地至少一種藥學上可接受的賦形劑。
包含在本發明之藥物組成物中的至少一種藥學上可接受的賦形劑較佳的是選自由以下組成之群組：填充劑、稀釋劑、黏合劑、崩散劑、潤滑劑、助滑劑及其組合。
在較佳的實施方式中，藥物組成物呈口服固體劑型（如片劑），該藥物組成物包含如上述方面及其相應的實施方式中任一項所定義的化合物A之結晶形式。
在另一個方面，本發明提供了化合物A之結晶形式或包含該結晶形式（其如本文所述之所描述方面及其相應的實施方式中任一項中所定義）的藥物組成物，該藥物組成物用作藥物。
在又另一個方面，本發明提供了化合物A之結晶形式或包含該結晶形式（其如本文所述之方面及其相應的實施方式中任一項中所定義）的藥物組成物，該藥物組成物用於在增生性疾病、特別是癌症或腫瘤的治療中使用。
待治療的癌症較佳的是KRAS G12C突變型癌症。
待藉由投與本發明之固體形式治療的癌症或腫瘤包括選自由以下組成之群組的癌症或腫瘤：肺癌（包括肺腺癌、非小細胞肺癌和鱗狀細胞肺癌）、結腸直腸癌（包括結腸直腸腺癌）、胰臟癌（包括胰臟腺癌）、子宮癌（包括子宮內膜癌）、直腸癌（包括直腸腺癌）、闌尾癌、小腸癌、食道癌、肝膽癌（包括肝癌和膽管癌）、膀胱癌、卵巢癌和實性瘤，特別地當該癌症或腫瘤帶有KRAS G12C突變時。原發部位不明但示出KRAS G12C突變的癌症還可以得益於用本發明之固體形式的治療。
特別較佳的癌症包括非小細胞肺癌、結腸直腸癌、胰臟癌和實性瘤。
在另一個方面，本發明關於治療和/或預防增生性疾病，特別是癌症（例如，非小細胞肺癌、結腸直腸癌、胰臟癌和實性瘤）之方法，所述方法包括向需要這類治療的患者投與治療有效量的如本文所述方面及其相應的實施方式中定義的結晶形式。
在另一個方面，本發明提供了本發明之結晶化合物用於製備用於治療癌症或腫瘤的藥物之用途，視需要地其中該癌症或腫瘤係KRAS G12C突變型。 實例 實例1：製備1-{6-[(4 M)-4-(5-氯-6-甲基-1 H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1 H-吲唑-5-基)-1 H-吡唑-1-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}丙-2-烯-1-酮（化合物A）
1-{6-[(4 M)-4-(5-氯-6-甲基-1 H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1 H-吲唑-5-基)-1 H-吡唑-1-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}丙-2-烯-1-酮（化合物A）的合成如以下所述。化合物A還以名稱「a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮」為人所知。 一般方法和條件：
溫度以攝氏度給出。如果沒有另外提及，則所有蒸發都在減壓下進行，典型地在約15 mm Hg與100 mm Hg（= 20-133毫巴）之間進行。
使用的縮寫係本領域常規的那些縮寫。
使用電灑方法、化學方法和電子衝擊電離方法在LC-MS、SFC-MS或GC-MS系統上使用一系列以下配置的儀器獲取質譜：使用ESI方法在LCMS系統上使用一系列以下配置的儀器獲取具有沃特世（Waters）SQ檢測器的沃特世Acquity UPLC或質譜：具有PDA檢測器的沃特世Acquity LCMS。[M+H] +係指化學物種的質子化分子離子。
NMR光譜使用Bruker Ultrashield™400（400 MHz）、Bruker Ultrashield™600（600 MHz）和Ascend™400（400 MHz）光譜儀運行，均以或不以四甲基矽烷作為內標。將化學位移（δ值）以四甲基矽烷的低場ppm報告，光譜分裂模式被指定為單信號（s）、雙信號（d）、三重信號（t）、四重信號（q）、多重信號、未解析的或更多重疊信號（m）、寬信號（br）。溶劑在括弧中給出。僅報告觀察到且與溶劑峰不重疊的質子信號。
Celite：Celite R（Celite公司）= 基於矽藻土的助濾劑
相分離器：Biotage - 溶質相分離器 - （部件號：120-1908-F，70 mL，以及部件號：120-1909-J，150 mL）
SiliaMetS®Thiol：SiliCYCLE硫醇金屬淨化劑-（R51030B，粒徑：40-63 µm）。
本文所述之X射線粉末繞射（XRPD）圖根據兩種方法。 XRPD方法1
使用以下方法以分析在實例2a至2e - 圖1至5（化合物A之水合物HA、IPA溶劑化物、乙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物）、實例3 - 圖8（化合物A之變型C）和實例5- 圖10（化合物A之水合物HC）中獲得的樣本。
使用在反射幾何中的Bruker Advance D8可以獲得本文所述之X射線粉末繞射（XRPD）圖。使用零背景Si平板樣本架分析粉末樣本。輻射為Cu Kα（λ = 1.5418 Å）。在2°與40°2θ之間測量圖譜。
樣本量：5-10 mg
樣本架：零背景Si平板樣本架 XRPD參數：
儀器 Bruker D8 Advance
檢測器 LYNXEYE（1D模式），開角：2.948°，掃描模式：連續掃描
輻射 CuKα（0.15418 nm）
單色儀 鎳濾光片
X射線發生器功率 40 kV、40 mA
測角儀半徑 280 mm
步長 0.0164°（2θ值）
時間/步 0.3秒/步
掃描範圍 2°至40°（2θ值）
掃描時間 約768秒
狹縫 初級：固定的照明的樣本大小10 mm；二級：開角2.2°，軸向索拉（soller）：2.5°
XRPD方法2
使用以下方法以分析在製備正丙醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物、L-乳酸溶劑化物（形式G）、L-乳酸溶劑化物（形式F）、以及實例4（化合物A之水合物HB）中獲得的樣本。
如下使用在反射幾何中的Bruker Advance D2可以獲得本文所述之X射線粉末繞射（XRPD）圖。使用零背景Si平板樣本架分析粉末樣本。輻射為Cu Kα（λ = 1.5418 Å）。在4°與40°2θ之間測量圖譜。
樣本量：5-10 mg
樣本架：零背景Si平板樣本架 XRPD參數：
儀器 Bruker D2
檢測器 LYNXEYE，掃描模式：連續掃描
輻射 CuKα（0.15418 nm）
單色儀 鎳濾光片
X射線發生器功率 30 kV，10 mA
測角儀半徑 141 mm
步長 0.024°（2θ值）
時間/步 0.15秒/步
掃描範圍 4°至40°（2θ值）
掃描時間 約258秒
狹縫 \
可以藉由HPLC測量降解產物，例如使用以下參數。
HPLC
儀器 沃特世Acquity UPLC
柱 ACQUITY BEH C18
粒徑（µm） 1.7
尺寸（mm） 2.1 x 100
溫度（°C） 40
流速（ml/min） 0.50
進樣體積（µl） 0.5
樣本溶劑 乙腈/水（50 : 50）
樣本濃度（µg/ml） 400
檢測波長（nm） 210
流動相A 在95%水/5%乙腈中的0.05% TFA
流動相B 在95%乙腈/5%水中的0.05% TFA
執行時間（min） 14
梯度 分鐘 % B
   初始 5
   2.0 5
   9.0 60
   10.0 95
   11.0 95
   11.1 5
   13.0 5
儀器法
微波：除非另有說明，否則所有微波反應均在Biotage引發器中進行，從具有Robot Eight/Robot Sixty處理能力的2.45 GHz磁控管GHz在以0-400 W進行輻照。
UPLC-MS和MS分析方法：使用帶沃特世SQ檢測器的沃特世Acquity UPLC。
UPLC-MS-1: Acquity HSS T3；粒徑：1.8 µm；柱尺寸：2.1 x 50 mm；洗脫液A：H 2O + 0.05% HCOOH + 3.75 mM乙酸銨；洗脫液B：CH 3CN + 0.04% HCOOH；梯度：在1.40 min內5%至98% B，然後98% B持續0.40 min；流速：1 mL/min；柱溫：60°C。
UPLC-MS-3: Acquity BEH C18；粒徑：1.7 µm；柱尺寸：2.1 x 50 mm；洗脫液A：H 2O + 4.76%異丙醇+ 0.05% HCOOH + 3.75 mM乙酸銨；洗脫液B：異丙醇+ 0.05% HCOOH；梯度：在1.7 min內1%至98% B，然後98% B持續0.1 min；流速：0.6 mL/min；柱溫：80°C。
UPLC-MS-4: Acquity BEH C18；粒徑：1.7 µm；柱尺寸：2.1 x 100 mm；洗脫液A：H 2O + 4.76%異丙醇+ 0.05% HCOOH + 3.75 mM乙酸銨；洗脫液B：溶析液異丙醇+ 0.05% HCOOH；梯度：在8.4 min內1%至60% B，然後在1 min內60%至98% B；流速：0.4 mL/min；柱溫：80°C。
UPLC-MS-6: Acquity BEH C18；粒徑：1.7 µm；柱尺寸：2.1 x 50 mm；洗脫液A：H 2O + 0.05% HCOOH + 3.75 mM乙酸銨；洗脫液B：異丙醇+ 0.05% HCOOH；梯度：在1.7 min內5%至98% B，然後98% B持續0.1 min；流速：0.6 mL/min；柱溫：80°C。 製備型方法： 手性SFC方法：
C-SFC-1: 柱：直鏈澱粉-C NEO 5 µm；250 x 30 mm；流動相；流速：80 mL/min；柱溫：40°C；背壓：120巴。
C-SFC-3: 柱：Chiralpak AD-H 5 µm；100 x 4.6 mm；流動相；流速：3 mL/min；柱溫：40°C；背壓：1800 psi。 縮寫：
縮寫 說明
AcCN、ACN 乙腈
Ac 2O 乙酸酐
AcOH 乙酸
AIBN 2,2′-偶氮雙(2-甲基丙腈)
aq. 水性
Ar 氬氣
B 2Pin 2 4,4,4′,4′,5,5,5′,5′-八甲基-2,2′-二(1,3,2-二氧雜環戊硼烷)
BPR 背壓
brine 飽和氯化鈉水溶液
n-BuLi 正丁基鋰
conc. 濃縮的
DAST N,N-二乙基-1,1,1-三氟-λ 4-硫烷胺
DCE 二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
DEA 二乙胺
DHP 3,4-二氫哌喃
DIPEA N, N-二異丙基乙胺， N-乙基- N-異丙基丙烷-2-胺
DMA N, N-二甲基乙醯胺
DMAP N, N-二甲基吡啶-4-胺
DMF N, N-二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
DMSO-d 6 六氘代二甲亞碸
dppf 1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵
ee 鏡像異構物過量
ESI 電灑離子化
ESI-MS 電灑離子化質譜法
EtOAc 乙酸乙酯
GBq 千兆貝可（gigabecquerel）
h 小時
HPLC 高效液相層析法
IPA 2-丙醇
KOAc 乙酸鉀
L/mL/μL 升/毫升/微升
LC-MS或LCMS 液相層析法和質譜法
M 莫耳
MeOH 甲醇
min（mins） 一分鐘或若干分鐘
MTBE 甲基三級丁基醚
MS 質譜法
MW、mw 微波
m/z 質荷比
N 正態性
N 2 氮氣
NaOtBu 三級丁醇鈉
NBS N-溴代琥珀醯亞胺
NCS N-氯代琥珀醯亞胺
NIS N-碘代琥珀醯亞胺
NEt 3、Et 3N、TEA 三乙胺
PDA 光電二極體陣列檢測器
NMR 核磁共振
Pd(PPh 3) 4 四(三苯基膦)鈀(0)
iPrMgCl 異丙基氯化鎂
PTSA 對甲苯磺酸
RM 反應混合物
RP 逆相
Rt 滯留時間
RT 室溫
RuPhos 2-二環己基膦基-2′,6′-二異丙氧基二苯基
RuPhos-Pd-G3 (2-二環己基膦基-2′,6′-二異丙氧基-1,1′-二苯基)[2-(2′-胺基-1,1′-二苯基)]甲磺酸鈀(II)
Sat. 飽和的
SFC 超臨界流體層析法
SQ 單四極桿
TBAF 四丁基氟化銨
tBME、TBME、TBMe 三級丁基甲基醚
TBq 兆貝可（terabecquerel）
t-BuOH 三級丁醇
tBuXPhos-Pd-G3 tBuXPhos-Pd-G3，[(2-二-三級丁基膦基-2′,4′,6′-三異丙基-1,1′-二苯基)-2-(2′-胺基-1,1′-二苯基)]甲磺酸鈀(II)
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
TLC 薄層層析法
T 3P 丙基膦酸酐
TsCl 甲苯磺醯氯，4-甲基苯-1-磺醯氯
UPLC 超高效液相層析法
XPhos 2-二環己基膦基-2′,4′,6′-三異丙基二苯基
XPhos-Pd-G3 (2-二環己基膦基-2′,4′,6′-三異丙基-1,1′-二苯基)[2-(2′-胺基-1,1′-二苯基)]甲磺酸鈀(II)
用於製備本發明化合物的所有起始材料、結構單元、試劑、酸、鹼、脫水劑、溶劑和催化劑係可商購獲得的或可藉由熟悉該項技術者已知的有機合成方法生產。此外，本發明之化合物可以藉由熟悉該項技術者已知的有機合成方法生產，如以下實例所示。
所有終產物、中間體和起始材料的結構藉由標準分析光譜特徵（例如，MS、IR、NMR）來確認。較佳的（最具活性的）阻轉異構物的代表性實例之絕對立體化學已經藉由複合物的X射線晶體結構之分析確定，在該等複合物中，各個化合物與KRASG12C突變體結合。在X射線結構不可得到的所有其他情況下，都以類似方式指定了立體化學，假設對於每一對，在共價競爭測定中表現出最高活性的阻轉異構物具有與X射線晶體學觀察到上述代表性實例的相同組態。絕對立體化學係根據卡恩-英格爾-普雷洛格（Cahn-lngold-Prelog）規則來指定的。 中間體C1的合成：三級丁基6-(3-溴-4-(5-氯-6-甲基-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吲唑-4-基)-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯
Figure 02_image007
步驟C.1：三級丁基6-(甲苯磺醯基氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（中間體C2）
在20°C-25°C下，向三級丁基6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯 [CAS號：1147557-97-8]（2.92 kg，12.94 mmol）在DCM（16.5 L）中之溶液中添加DMAP（316.12 g，2.59 mol）和TsCl（2.96 kg，15.52 mol）。在10°C-20°C下，向反應混合物中逐滴添加Et 3N（2.62 kg，25.88 mol）。將反應混合物在5°C-15°C下攪拌0.5 h，並且然後在18°C-28°C下攪拌1.5 h。反應完成後，將反應混合物在真空下濃縮。向殘餘物添加NaCl（在水中5%，23 L）隨後用EtOAc（23L）萃取。將合併的水層用EtOAc（10 L x 2）萃取。將合併的有機層用NaHCO 3（在水中3%，10 L x 2）洗滌並在真空下濃縮以給出標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.81 - 7.70 (m, 2H), 7.53 - 7.36 (m, 2H), 4.79 - 4.62 (m, 1H), 3.84 - 3.68 (m, 4H), 2.46 - 2.38 (m, 5H), 2.26 - 2.16 (m, 2H), 1.33 (s, 9H)。UPLC-MS-1: Rt = 1.18 min；MS m/z [M+H] +；368.2. 步驟C.2：3,5-二溴-1 H-吡唑
在-78°C下，經20分鐘向3,4,5-三溴-1 H-吡唑 [CAS號：17635-44-8]（55.0 g，182.2 mmol）在無水THF（550 mL）中之溶液中逐滴添加n-BuLi（145.8 mL，364.5 mmol），保持內部溫度在-78°C/-60°C。將RM在該溫度下攪拌45 min。然後將反應混合物用MeOH（109 mL）在-78°C下小心淬滅並在該溫度下攪拌30 min。允許混合物達到0°C並攪拌1 h。然後，將混合物用EtOAc（750 mL）稀釋並添加HCl（0.5 N，300 mL）。在真空下濃縮各層。將粗殘餘物溶解於DCM（100 mL）中，冷卻至-50°C並添加石油醚（400 mL）。過濾沈澱的固體並用正己烷（250 mL x2）洗滌並在真空下乾燥以給出標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.5 (br s, 1H), 6.58 (s, 1H)。 步驟C.3：三級丁基6-(3,5-二溴-1 H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯
在15°C下，向三級丁基6-(甲苯磺醯基氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（中間體C2）（步驟C.1，900 g，2.40 mol）在DMF（10.8 L）中之溶液中添加Cs 2CO 3（1988 g，6.10 mol）和3,5-二溴-1 H-吡唑（步驟C.2，606 g，2.68 mol）。將反應混合物在90°C下攪拌16 h。將反應混合物倒入冰-水/鹽水（80 L）中並用EtOAc（20 L）萃取。將水層用EtOAc（10 L x 2）再萃取。將合併的有機層用鹽水（10 L）洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾，並在真空下濃縮。將殘餘物與二㗁𠮿（1.8 L）一起研磨，並在60°C下溶解。向淺黃色溶液中緩慢添加水（2.2 L），並在添加900 mL水後開始重結晶。將所得懸浮液冷卻至0°C，過濾，並用冷水洗滌。將濾餅與正庚烷一起研磨，過濾，然後在真空下在40°C下乾燥以給出標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 6.66 (s, 1H), 4.86 - 4.82 (m, 1H), 3.96 - 3.85 (m, 4H), 2.69 - 2.62 (m, 4H), 1.37 (s, 9H)；UPLC-MS-3: Rt = 1.19 min；MS m/z [M+H] +；420.0/422.0/424.0。 步驟C.4：三級丁基6-(3-溴-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（中間體C3）
在惰性氣氛下，在-80°C下，向三級丁基6-(3,5-二溴-1 H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（步驟C.3，960 g，2.3 mol）在THF（9.6 L）中之溶液中逐滴添加 n-BuLi（1.2 L，2.5 mol）。將反應混合物在-80°C下攪拌10 min。然後在-80°C下，向反應混合物中逐滴添加碘甲烷（1633 g，11.5 mol）。在-80°C下攪拌5 min後，允許反應混合物溫熱至18°C。將反應混合物倒入飽和NH 4Cl水溶液（4 L）中並用DCM（10 L）萃取。將分離的水層用DCM（5 L）再萃取，並將合併的有機層在真空下濃縮。將粗產物在60°C下溶解於1,4-二㗁𠮿（4.8 L）中，然後逐滴緩慢添加水（8.00 L）。將所得懸浮液冷卻至17°C並攪拌30 min。將固體過濾，用水洗滌，並在真空下乾燥以給出標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 6.14 (s, 1H), 4.74 - 4.66 (m, 1H), 3.95 - 3.84 (m, 4H), 2.61 - 2.58 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.37 (s, 9H)；UPLC-MS-1: Rt = 1.18 min；MS m/z [M+H] +；356.1/358.1。 步驟C.5：三級丁基6-(3-溴-4-碘-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（中間體C4）
在15°C下，向三級丁基6-(3-溴-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（中間體C3）（步驟C.4，350 g，0.980 mol）在乙腈（3.5 L）中之溶液中添加NIS（332 g，1.47 mol）。將反應混合物在40°C下攪拌6 h。反應完成後，將反應混合物用EtOAc（3 L）稀釋並用水（5 L x 2）洗滌。將有機層用Na 2SO 3（在水中10%，2 L）、用鹽水（2 L）洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾，並在真空下濃縮以給出標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 4.81 - 4.77 (m, 1H), 3.94 - 3.83 (m, 4H), 2.61 - 5.59 (m, 4H), 2.26 (s, 3H), 1.37 (s, 9H)；UPLC-MS-1: Rt = 1.31 min；MS m/z [M+H] +；482.0/484.0。 步驟C.6：三級丁基6-(3-溴-4-(5-氯-6-甲基-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吲唑-4-基)-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（中間體C1）
向三級丁基6-(3-溴-4-碘-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（中間體C4）（步驟C.5，136 g，282 mmol）和5-氯-6-甲基-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吲唑（中間體D1，116 g，310 mmol）在1,4-二㗁𠮿（680 mL）中之攪拌懸浮液中添加水性K 3PO 4（2M，467 mL，934 mmol）隨後添加RuPhos（13.1 g，28.2 mmol）和RuPhos-Pd-G3（14.1 g，16.9 mmol）。在惰性氣氛下，將反應混合物在80°C下攪拌1 h。反應完成後，將反應混合物倒入1M NaHCO 3水溶液（1 L）中並用EtOAc（1L x 3）萃取。將合併的有機層用鹽水（1 L x 3）洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾，並在真空下濃縮。將粗殘餘物藉由正相層析法（洗脫液：石油醚/EtOAc從1/0至0/1）純化以給出黃色油狀物。將該油狀物溶解於石油醚（1 L）和MTBE（500 mL）中，然後在真空中濃縮，以給出標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.81 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 5.94 - 5.81 (m, 1H), 4.90 - 4.78 (m, 1H), 3.99 (br s, 2H), 3.93 - 3.84 (m, 3H), 3.81 - 3.70 (m, 1H), 2.81 - 2.64 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 2.46 - 2.31 (m, 1H), 2.11 - 1.92 (m, 5H), 1.82 - 1.67 (m, 1H), 1.64 - 1.52 (m, 2H), 1.38 (s, 9H)；UPLC-MS-3: Rt = 1.30 min；MS m/z [M+H] +；604.1/606.1。 合成中間體D1：5-氯-6-甲基-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吲唑
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步驟D.1：1-氯-2,5-二甲基-4-硝基苯
向2-氯-1,4-二甲基苯（3.40 kg，24.2 mol）在AcOH（20.0 L）中的冰冷的溶液中添加H 2SO 4（4.74 kg，48.4. mol，2.58 L）隨後逐滴添加（滴液漏斗）HNO 3（3.41 kg，36.3 mol，2.44 L，67.0%純度）在H 2SO 4（19.0 kg，193. mol，10.3 L）中的冷溶液。然後允許反應混合物在0°C - 5°C下攪拌0.5 h。將反應混合物緩慢倒入碎冰（35.0 L）中並沈澱出黃色固體。將懸浮液過濾並將濾餅用水（5.00 L x 5）洗滌以給出黃色固體，將該黃色固體懸浮於MTBE（2.00 L）中持續1 h，過濾，乾燥以給出呈黃色固體的標題化合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.90 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.42 (s, 3H)。 步驟D.2：3-溴-2-氯-1,4-二甲基-5-硝基苯
向1-氯-2,5-二甲基-4-硝基苯（步驟D.1，2.00 kg，10.8 mol）在TFA（10.5 L）中的冷卻溶液中緩慢添加濃H 2SO 4（4.23 kg，43.1 mol，2.30 L）並將反應混合物在20°C下攪拌。少量分批添加NBS（1.92 kg，10.8 mol）並將反應混合物在55°C下加熱2 h。將反應混合物冷卻至25°C，然後倒入碎冰溶液以獲得淺白色沈澱，將該白色沈澱經真空過濾，用冷水洗滌並在真空下乾燥以給出呈黃色固體的標題化合物，將該標題化合物不經進一步純化用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 (s, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.49 (s, 3H)。 步驟D.3：3-溴-4-氯-2,5-二甲基苯胺
向3-溴-2-氯-1,4-二甲基-5-硝基苯（步驟D.2，2.75 kg，10.4 mol）在THF（27.5 L）中冰冷的溶液中添加HCl（4M，15.6 L）然後少量分批添加Zn（2.72 kg，41.6 mol）。允許反應混合物在25°C下攪拌2 h。藉由添加飽和NaHCO 3水溶液將反應混合物鹼化（直至pH = 8）。將混合物用EtOAc（2.50 L）稀釋並劇烈攪拌10 min並且然後藉由矽藻土墊過濾。分離有機層並將水層用EtOAc（3.00 L x 4）再萃取。將合併的有機層用鹽水（10.0 L）洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾並在真空下濃縮以給出呈黃色固體的標題化合物，將該標題化合物不經進一步純化用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 6.59 (s, 1H), 5.23 (s, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.18 (s, 3H)。 步驟D.4：3-溴-4-氯-2,5-二甲基苯重氮四氟硼酸鹽
將BF 3.Et 2O（2.00 kg，14.1 mol，1.74 L）溶解於DCM（20.0 L）中並在氮氣氛下冷卻至-5°C至-10°C。將3-溴-4-氯-2,5-二甲基苯胺（步驟D.3，2.20 kg，9.38 mol）在DCM（5.00 L）中之溶液添加至上述反應混合物並攪拌0.5 h。逐滴添加亞硝酸三級丁酯（1.16 kg，11.3 mol，1.34 L）並將反應混合物在相同溫度下攪拌1.5 h。TLC（石油醚 : EtOAc = 5 : 1）顯示起始材料（R f= 0.45）被完全消耗。將MTBE（3.00 L）添加至反應混合物以給出黃色沈澱，將該黃色沈澱藉由真空過濾並用冷MTBE（1.50 L x 2）洗滌以給出呈黃色固體的標題化合物，將該標題化合物不經進一步純化用於下一步驟。 步驟D.5：4-溴-5-氯-6-甲基-1 H-吲唑
向在氯仿（20.0 L）中的18-冠-6 醚（744 g，2.82 mol）添加KOAc（1.29 kg，13.2 mol）並將反應混合物冷卻至20°C。然後緩慢添加3-溴-4-氯-2,5-二甲基苯重氮四氟硼酸鹽（步驟D.4，3.13 kg，9.39 mol）。然後允許反應混合物在25°C下攪拌5 h。反應完成後，將反應混合物倒入冰冷的水（10.0 L）中，並將水層用DCM（5.00 L x 3）萃取。將合併的有機層用飽和NaHCO 3水溶液（5.00 L）、鹽水（5.00 L）洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾並在真空下濃縮以給出呈黃色固體的標題化合物。 1H NMR (600 MHz, CDCl 3) δ 10.42 (br s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 2.58 (s, 3H)。UPLC-MS-1: Rt = 1.02 min；MS m/z [M+H] +；243/245/247。 步驟D.6：4-溴-5-氯-6-甲基-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吲唑
25°C下，向PTSA（89.8 g，521 mmol）和4-溴-5-氯-6-甲基-1 H-吲唑（步驟D.5，1.28 kg，5.21 mol）在DCM（12.0 L）中之溶液中逐滴添加DHP（658 g，7.82 mol，715 mL）。將混合物在25°C下攪拌1 h。反應完成後，將反應混合物用水（5.00 L）稀釋並分離有機層。將水層用DCM（2.00 L）再萃取。將合併的有機層用飽和NaHCO 3水溶液（1.50 L）、鹽水（1.50 L）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。將粗殘餘物藉由正相層析法（洗脫液：石油醚/EtOAc 從100/1至10/1）純化以給出呈黃色固體的標題化合物。 1H NMR (600 MHz, DMSO- d 6) δ 8.04 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 5.88 - 5.79 (m, 1H), 3.92 - 3.83 (m, 1H), 3.80 - 3.68 (m, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.40 - 2.32 (m, 1H), 2.06 - 1.99 (m, 1H), 1.99 - 1.93 (m, 1H), 1.77 - 1.69 (m, 1H), 1.60 - 1.56 (m, 2H)。UPLC-MS-6: Rt = 1.32 min；MS m/z [M+H] +；329.0/331.0/333.0 步驟D.7：5-氯-6-甲基-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吲唑（中間體D.1）
將4-溴-5-氯-6-甲基-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吲唑（步驟D.6，450 g，1.37 mol）、KOAc（401 g，4.10 mol）和B 2Pin 2（520 g，2.05 mol）在1,4-二㗁𠮿（3.60 L）中之懸浮液用氮氣脫氣0.5 h。添加Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2（55.7 g，68.3 mmol）並將反應混合物在90°C下攪拌6 h。將反應混合物藉由矽藻土過濾並將濾餅用EtOAc（1.50 L x 3）洗滌。將混合物在真空下濃縮以給出黑色油狀物，將該黑色油狀物藉由正相層析法（洗脫液：石油醚/EtOAc 從100/1至10/1）純化以給出呈棕色油狀物之所希望的產物。將殘餘物懸浮於石油醚（250 mL）中1 h以獲得白色沈澱。將懸浮液過濾，在真空下乾燥以給出呈白色固體的標題化合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.17 (d, 1H), 7.52 (s, 1H), 5.69 - 5.66 (m, 1H), 3.99 - 3.96 (m, 1H), 3.75 - 3.70 (m, 1H), 2.51 (d, 4H), 2.21 - 2.10 (m, 1H), 2.09 - 1.99 (m, 1H), 1.84 - 1.61 (m, 3H), 1.44 (s, 12H)；UPLC-MS-6: Rt = 1.29 min；MS m/z [M+H] +；377.1/379。 化合物A之合成
Figure 02_image011
步驟1：三級丁基6-(4-(5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯
在500 mL燒瓶中，在氬氣下，將三級丁基6-(3-溴-4-(5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（中間體C1，10 g，16.5 mmol）、(1-甲基-1H-吲唑-5-基)硼酸（6.12 g，33.1 mmol）、RuPhos（1.16 g，2.48 mmol）和RuPhos-Pd-G3（1.66 g，1.98 mmol）懸浮於甲苯（165 mL）中。添加K 3PO 4（2M，24.8 mL，49.6 mmol）並將反應混合物置於預熱油浴（95°C）中並攪拌45 min。將反應混合物倒入飽和NH 4Cl水溶液並用EtOAc萃取（x3）。將合併的有機層用飽和NaHCO 3水溶液洗滌，乾燥（相分離器）並在減壓下濃縮。將粗殘餘物用THF（50 mL）稀釋，添加SiliaMetS®硫醇（15.9 mmol）並將混合物在40°C下渦旋1 h。過濾混合物，將濾液濃縮並將粗殘餘物藉由正相層析法（洗脫液：在CH 2Cl 2中的MeOH從0%至2%）純化，將純化的級分再次藉由正相層析法（洗脫液：在CH 2Cl 2中的MeOH從0%至2%）純化以給出呈米黃色泡沫的標題化合物。UPLC-MS-3: Rt = 1.23 min；MS m/z [M+H] +；656.3/658.3。 步驟2：5-氯-6-甲基-4-(5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-(2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑
將TFA（19.4 mL，251 mmol）添加至三級丁基6-(4-(5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯（步驟1，7.17 g，10.0 mmol）在CH 2Cl 2（33 mL）中之溶液中。將反應混合物在RT下在氮氣下攪拌1.5 h。將RM在減壓下濃縮以給出呈三氟乙酸鹽的標題化合物，將該標題化合物不經純化用於下一步驟。UPLC-MS-3: Rt = 0.74 min；MS m/z [M+H] +；472.3/474.3。 步驟3：1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮
將丙烯酸（0.69 mL，10.1 mmol）、丙基膦酸酐（在EtOAc中50%，5.94 mL，7.53 mmol）和DIPEA（21.6 mL，126 mmol）在CH 2Cl 2（80 mL）中之混合物在RT下攪拌20 min，並且然後添加（滴液漏斗）至5-氯-6-甲基-4-(5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-(2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑三氟乙酸酯（步驟2，6.30 mmol）在CH 2Cl 2（40 mL）中的冰冷的溶液中。將反應混合物在RT下在氮氣下攪拌15 min。將RM倒入飽和NaHCO 3水溶液中並用CH 2Cl 2（x3）萃取。將合併的有機層乾燥（相分離器）並濃縮。將粗殘餘物用THF（60 mL）稀釋並添加LiOH（2N，15.7 mL，31.5 mmol）。將混合物在RT下攪拌30 min直到由丙烯醯氯與吲唑的游離NH基團反應產生的副產物消失（UPLC），然後倒入飽和NaHCO 3水溶液中並用CH 2Cl 2（3x）萃取。將合併的有機層乾燥（相分離器）並濃縮。將粗殘餘物藉由正相層析法（洗脫液：在CH 2Cl 2中的MeOH從0%至5%）純化以給出標題化合物。將異構物藉由手性SFC（C-SFC-1；流動相：CO 2/[IPA + 0.1% Et 3N]: 69/31）分離以給出實例1：1-{6-[(4 M)-4-(5-氯-6-甲基-1 H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1 H-吲唑-5-基)-1 H-吡唑-1-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}丙-2-烯-1-酮（化合物A）（還已知為a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮）作為第二洗脫峰（白色粉末，呈無定形的形式）： 1H NMR (600 MHz, DMSO- d 6) δ 13.1 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.42 (m, 2H), 7.30 (d, 1H), 6.33 (m, 1H), 6.12 (m, 1H), 5.68 (m, 1H), 4.91 (m, 1H), 4.40 (s, 1H), 4.33 (s, 1H), 4.11 (s, 1H), 4.04 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.96-2.86 (m, 2H), 2.83-2.78 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.04 (s, 3H)；UPLC-MS-4: Rt = 4.22 min；MS m/z [M+H] +526.3/528.3；C-SFC-3（流動相：CO 2/[IPA + 0.1% Et 3N]: 67/33）：Rt = 2.23 min。實例1的化合物又稱為「化合物A」。
獲得作為第一洗脫峰的化合物A之阻轉異構物，a( S)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮：C-SFC-3（流動相：CO 2/[IPA + 0.1% Et 3N]: 67/33）：Rt = 1.55 min。 實例2：合成化合物A之水合物HA。 實例2a：化合物A之結晶異丙醇（IPA）溶劑化物和化合物A之結晶水合物（水合物HA）形式
將25 mg的無定形的化合物A（從以上實例1中獲得）添加至0.1 mL的2-丙醇中。將所得澄清溶液在25°C下攪拌3天，然後沈澱出結晶固體。藉由離心過濾（即，使用離心機的過濾）收集固體。濕餅表徵為化合物A之結晶異丙基（IPA）溶劑化物。將濕餅在環境條件下乾燥過夜，提供了結晶水合物HA。
藉由XRPD分析化合物A之水合物HA（參見圖1）並且在下表中示出了其特徵峰。
特別地，化合物A之水合物HA的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之一個、兩個、三或四個峰，該組由以下組成：8.2°、11.6°、12.9°和18.8°。
指數 2θ d值 相對強度 強度
1 8.2° 10.72Å 100% 強
2 11.6° 7.60Å 11% 弱
3 12.1° 7.30Å 10% 弱
4 12.9° 6.87Å 14% 中
5 14.6° 6.05Å 21% 中
6 16.2° 5.47Å 15% 中
7 18.8° 4.73Å 28% 中
8 20.4° 4.34Å 18% 中
9 24.1° 3.69Å 29% 中
藉由XRPD分析化合物A之結晶IPA溶劑化物形式（參見圖2）並且在下表中示出了其特徵峰。特別地，結晶IPA溶劑化物形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三個峰，該組由以下組成：7.5°、12.5°和17.6°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 7.5° 11.77 100% 強
2 12.5° 7.08Å 20% 中
3 15.5° 5.73Å 14% 低
4 16.4° 5.42 Å 8% 低
5 17.6° 5.04 Å 28% 中
6 21.4° 4.15Å 11% 低
7 24.4° 3.64Å 8% 低
實例2b：化合物A之結晶乙醇（EtOH）溶劑化物和化合物A之結晶水合物（水合物HA）形式
將25 mg的無定形的化合物A（從以上實例1中獲得）添加至0.1 mL的乙醇。將所得澄清溶液在25°C下攪拌3天。將實例1中獲得的化合物A之水合物HA之晶體作為種子添加至所得溶液中。將所得懸浮液再平衡1天，然後沈澱出固體。藉由離心過濾來收集固體。濕餅表徵為結晶乙醇溶劑化物，其在環境條件下乾燥過夜後，產生化合物A之水合物HA。
替代性地，將3.1 g的化合物A添加至20 mL的乙醇中，並將所得澄清溶液在25°C下攪拌20 min。將約50 mg結晶水合物HA（以上獲得）作為種子添加，並將所得混合物在25°C下平衡6小時。將所得懸浮液過濾，並將濕餅表徵為結晶乙醇溶劑化物。然後將固體在環境條件（25°C，60%-70%相對濕度（RH））下乾燥3天，獲得2.8 g化合物A之水合物HA，產率為90%。
在不添加水合物HA種子的條件下也可以獲得結晶乙醇溶劑化物晶體。將化合物A在乙醇中懸浮至少一小時，然後沈澱出固體。藉由離心過濾來收集固體。濕餅表徵為結晶乙醇溶劑化物，其在環境條件下乾燥過夜後，產生水合物HA晶體。
藉由XRPD分析化合物A之結晶乙醇溶劑化物形式（參見圖3）並且在下表中示出了其特徵峰。
特別地，結晶乙醇溶劑化物形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：7.9°、12.7°、18.2°和23.1°。
指數 2θ d值 相對強度 強度
1 7.9° 11.20Å 100% 強
2 12.7° 6.99Å 24% 中
3 13.1° 6.76Å 12% 弱
4 15.5° 5.70Å 18% 弱
5 15.9° 5.58Å 11% 弱
6 16.9° 5.24Å 11% 弱
7 18.2° 4.88Å 32% 中
8 18.6° 4.77Å 17% 弱
9 23.1° 3.85Å 26% 中
實例2c-1：從化合物A之結晶乙醇溶劑化物替代性製備結晶水合物（水合物HA）製劑
化合物A之水合物HA可以藉由以下製備：首先藉由向二氯甲烷和乙醇的溶劑混合物中添加化合物A形成化合物A之乙醇溶劑化物，將二氯甲烷除去（例如，藉由蒸餾），從所得懸浮液中回收乙醇溶劑化物結晶材料（例如藉由過濾），並且然後在高溫下（例如在50°C至60°C範圍內），在水蒸汽氣氛下，將乙醇溶劑化物晶體的濕餅乾燥以形成水合物HA晶體。
可以使用以下程序。
將4.00 kg的化合物A和0.040 kg 1%的檸檬酸溶解在11 kg二氯甲烷和9 kg乙醇的溶劑混合物中。將所得混合物過濾。收集濾液並將39 kg的乙醇添加至濾液。將所得溶液在真空下，在低於55°C的溫度（即保持夾套溫度（JT）在 ≤ 55°C）下蒸餾以除去二氯甲烷。將28 kg的餾出物收集在接收槽中。另外將26 kg的乙醇添加至反應器中殘餘的溶液中。在真空下，在將夾套溫度設定在 ≤ 55°C的情況下將所得溶液再一次濃縮並且將25 kg的餾出物收集在接收槽中。
將26 kg的乙醇添加至反應器中殘餘的溶液中。然後將反應器中殘餘的溶液加熱直到60°C至70°C之間的溫度。在那個溫度15分鐘後，將混合物冷卻至50°C至60°C的更低溫度。將0.010 kg的化合物A之乙醇溶劑化物作為晶種添加。將所得懸浮液攪拌至少30分鐘，冷卻至30°C-40°C的溫度，並且然後攪拌至少60分鐘。將懸浮液在真空下在低於55°C的溫度（JT ≤ 55°C）下濃縮以除去乙醇並且在接收槽中回收20 kg的餾出物。
將在蒸餾反應器中的所得混合物加熱至60°C-70°C的溫度。在那個溫度15分鐘後，將所得混合物冷卻至0°C-10°C，攪拌至少 ≥ 6小時並且然後過濾。用乙醇洗滌濕餅。
然後在受控的真空下在50°C下在水蒸汽氣氛下，在烘箱裡將濕餅（其表徵為乙醇溶劑化物）乾燥。烘箱裡的壓力在30與60毫巴之間變化。進行乾燥直到留在晶體裡的乙醇殘餘物處於可接受水平，例如小於2000 ppm。獲得水合物HA的晶體。 實例2c-2：從化合物A之結晶醇溶劑化物替代性製備結晶水合物（水合物HA）製劑
在35°C-40°C範圍內的溫度下將異丙醇溶劑化物晶體（100 g）溶解在四氫呋喃（THF，366.5 g）和乙醇（122.7 g）的混合物中。將所得混合物過濾並且用THF/乙醇的溶劑混合物沖洗過濾器。將濾液冷卻至環境溫度（例如20°C至30°C之範圍內）。將乙醇（66.7 g）添加至濾液。然後添加水合物HA晶體的晶種作為懸浮液（0.50 g，在2.50 g乙醇中）。將所得混合物在攪拌器中攪拌30分鐘以產生化合物A之乙醇溶劑化物之晶體。
然後將THF溶劑藉由真空蒸餾除去。藉由添加乙醇使蒸餾燒瓶或反應器中的體積保持恒定。
然後將所得混合物在蒸餾反應器中在環境溫度下攪拌一段短的時間（例如30分鐘），加熱至在30°C至40°C之間的溫度範圍持續一小時，並且然後冷卻至0°C-10°C。然後將混合物再攪拌2小時，過濾，並用冷乙醇洗滌。然後，在受控的真空下在50°C下在水蒸汽氣氛下，在烘箱裡將濕餅（其表徵為乙醇溶劑化物）乾燥。烘箱裡的壓力在40與60毫巴之間變化。獲得水合物HA晶體，產率為89%。 實例2d：結晶水合物（水合物HA）製劑的替代性製備
將25 mg的化合物A（從以上實例1中獲得）添加至0.1 mL的甲醇中。將所得澄清溶液在25°C下攪拌3天。將實例1中獲得的水合物HA晶體作為種子添加至所得溶液中。將所得懸浮液再平衡1天，然後沈澱出固體。藉由離心過濾收集固體，並在環境條件下乾燥過夜。藉由XRPD分析濕餅並且發現該濕餅包含甲醇溶劑化物和化合物A之水合物HA之混合物（參見圖4）。在環境條件下乾燥過夜後，濕餅產生化合物A之結晶水合物（水合物HA）。 實例2e：化合物A之結晶丙二醇溶劑化物和結晶水合物（水合物HA）
將25 mg的化合物A（從以上實例1中獲得）添加至0.1 mL的丙二醇中。將所得懸浮液在50°C下攪拌1週。藉由離心過濾來收集固體。過濾後獲得的濕餅表徵為結晶丙二醇溶劑化物。在環境條件下將濾餅乾燥1週後，獲得結晶水合物HA。
藉由XRPD分析化合物A之結晶丙二醇溶劑化物形式（參見圖5）並且在下表中示出了其特徵峰。特別地，結晶丙二醇溶劑化物形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：7.3°、13.2°、18.0°和22.5°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 7.3° 12.15Å 34% 弱
2 13.2° 6.70Å 87% 強
3 15.6° 5.69Å 37% 弱
4 16.2° 5.48Å 56% 中
5 18.0° 4.92Å 64% 中
6 22.5° 3.96Å 100% 強
7 22.8° 3.90Å 35% 弱
8 23.2° 3.83Å 33% 弱
9 25.1° 3.55Å 37% 弱
實例2f：化合物A之結晶1-丁醇溶劑化物和化合物A之水合物（水合物HA）
將150 mg的化合物A（從以上實例1中獲得）添加至1至2 mL的1-丁醇中。將所得懸浮液在室溫下攪拌1天。藉由離心過濾來收集固體。過濾後獲得的濕餅表徵為結晶1-丁醇溶劑化物。使濕餅固體在50°C和在75 RH%下靜置1天以給出結晶水合物HA。
藉由XRPD分析化合物A之結晶1-丁醇溶劑化物形式（參見圖6）並且在下表中示出了其特徵峰。特別地，結晶1-丁醇溶劑化物形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：7.7°、14.5°、17.9°和19.3°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 7.7° 11.44Å 18% 弱
2 12.8° 6.89Å 14% 弱
3 14.5° 6.10Å 47% 中
4 15.7° 5.63Å 38% 中
5 17.9° 4.95Å 100% 中
6 19.3° 4.61Å 31% 中
7 21.3° 4.16Å 11% 弱
8 22.2° 4.00Å 11% 弱
9 24.0° 3.70Å 12% 弱
10 28.8° 3.10Å 13% 弱
實例2g：化合物A之結晶正丙醇溶劑化物和水合物HA
將90 mg的化合物A（從以上實例1中獲得）添加至1至2 mL的正丙醇中。將所得懸浮液在室溫下攪拌1天。藉由離心過濾來收集固體。藉由XRPD分析過濾後獲得的濕餅（圖7）並表徵為結晶正丙醇溶劑化物。使濕餅固體在50°C/75RH%下靜置1天，然後獲得結晶水合物（水合物HA）。
藉由XRPD分析化合物A之結晶正丙醇溶劑化物形式（參見圖7）並且下表中示出了其最具特徵的峰。特別地，結晶正丙醇溶劑化物形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：7.6°、15.3°、17.7°和18.5°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 7.6° 11.61Å 100% 強
2 12.3° 7.21Å 56% 中
3 13.1° 6.73Å 24% 弱
4 15.3° 5.80Å 39% 中
5 16.0° 5.54Å 25% 弱
6 16.7° 5.31Å 20% 弱
7 17.7° 5.00Å 72% 強
8 18.5° 4.79Å 23% 弱
9 28.1° 3.18Å 15% 弱
實例3：合成化合物A之變型C。
將50 mg水合物HA晶體（如以上實例2中描述的獲得）和11.6 mg苯甲酸（作為添加劑）添加至2 ml的MTBE（甲基三級丁基醚）中。將所得懸浮液在室溫下攪拌幾天。藉由離心過濾來收集固體。藉由XPRD將濕餅表徵為化合物A之結晶無水物（低結晶度的變型C）形式。
替代性地，還可以如下獲得變型C。
將450 mg水合物HA晶體（如以上實例2中描述的獲得）添加至8 ml的乙酸乙酯/庚烷（體積/體積，1 : 1）混合物中。將60 mg乙酸添加至1 ml乙酸乙酯中。將含有化合物A之溶液和乙酸溶液混合在一起。將所得材料在室溫下攪拌34天。藉由離心過濾來收集固體。濕餅表徵為化合物A之結晶無水物（低結晶度的變型C）形式。
將45.8 mg的化合物A之異丙醇溶劑化物晶體添加至0.2 ml的3-戊酮中。將所得材料加熱至50°C，並攪拌以獲得澄清溶液。將0.6 ml的MTBE添加至溶液中。將所得混合物（作為懸浮液或凝膠獲得）在室溫下攪拌至40°C持續7天。藉由離心過濾來收集固體。濕餅表徵為化合物A之結晶無水物（中結晶度的變型C）形式。
可以如下獲得高結晶度的變型C結晶材料。
將30 ml乙酸乙酯（EtOAc）添加至2.06 g的無定形的化合物A並在55°C下攪拌以獲得澄清溶液。將澄清溶液過濾以除去不溶解的材料。使用另一2 ml EtOAc以洗滌器皿並轉移至本體溶液中。將溶液在53°C下攪拌，並將24 mg變型C固體晶體作為種子添加。在53°C下攪拌約19 h後，澄清溶液變渾濁。然後在6 h內添加12 ml庚烷，並將混合物的溫度保持在53°C下持續4 h。將所得懸浮液在3 h內冷卻至20°C並保持在20°C下持續11 h。將所得懸浮液過濾並用10 ml EtOAc/庚烷（v/v，7/3）洗滌。將固體在50°C在真空下乾燥5 h。獲得1.75 g的變型C的固體。
藉由XRPD分析化合物A之變型C（參見圖8）並且在下表中示出了其特徵峰。特別地，結晶水合物（變型C）形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之一個、兩個、三或四個峰，該組由以下組成：6.1°、12.2°、16.3°和19.4°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 6.1° 14.56 Å 31% 弱
2 7.3° 12.08 Å 19% 弱
3 8.8° 10.07 Å 12% 弱
4 12.2° 7.28 Å 26% 弱
5 14.7° 6.04 Å 33% 弱
6 15.4° 5.74 Å 82% 強
7 16.3° 5.44 Å 100% 強
8 18.2° 4.86 Å 22% 弱
9 19.4° 4.56 Å 79% 強
10 20.8° 4.27 Å 50% 中
11 21.8° 4.07 Å 13% 弱
12 25.4° 3.51 Å 13% 弱
13 29.4° 3.04 Å 22% 弱
實例4：化合物A之結晶水合物（水合物HB）形式
將100 mg的化合物A（無定形的）添加至1 mL的甲醇和水（6 : 4 v/v）的溶劑混合物中。將所得溶液在室溫下攪拌以獲得澄清溶液。將水合物HA晶體作為晶種添加。將所得混合物在室溫下攪拌36小時。藉由離心過濾來收集固體。藉由XRPD分析過濾後獲得的濕餅並表徵為化合物A之結晶水合物（水合物HB）。使濕餅固體在30°C和90% RH下靜置23小時以得到乾燥的結晶水合物（水合物HB）。
藉由XRPD分析化合物A之水合物HB（參見圖9）並且在下表中示出了其特徵峰。特別地，結晶水合物（水合物HB）形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：7.9°、15.8°、18.2°和26.4°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 6.5° 13.55Å 4% 弱
2 7.9° 11.20Å 23% 弱
3 12.0° 7.38Å 23% 弱
4 13.1° 6.77Å 13% 弱
5 15.8° 5.60Å 100% 強
6 17.2° 5.15Å 13% 弱
7 17.7° 5.01Å 15% 弱
8 18.2° 4.87Å 50% 中
9 19.8° 4.48Å 82% 強
10 21.6° 4.11Å 33% 弱
11 23.1° 3.85Å 11% 弱
12 26.4° 3.37Å 46% 中
實例5：化合物A之結晶水合物HC形式
將以上實例4中獲得的化合物A之水合物HB之晶體在烘箱中在50°C下乾燥17小時以給出化合物A之結晶水合物HC。藉由XRPD分析化合物A之水合物HC（參見圖10）並且在下表中示出了其特徵峰。特別地，結晶水合物（水合物HC）形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：7.2°、10.0°、19.2°和27.0°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 7.2° 12.26Å 16% 弱
2 10.0° 8.81Å 31% 弱
3 13.4° 6.60Å 10% 弱
4 14.4° 6.15Å 13% 弱
5 17.4° 5.10Å 78% 強
6 17.7° 5.00Å 100% 強
7 19.2° 4.63Å 32% 弱
8 22.2° 3.99Å 21% 弱
9 24.0° 3.70Å 16% 弱
10 27.0° 3.30Å 15% 弱
實例6：化合物A之結晶L-乳酸溶劑化物（形式G）形式
將69.6 mg化合物A之異丙醇溶劑化物晶體添加至0.2 ml的L-乳酸中。將混合物在室溫下攪拌以獲得澄清溶液。將1 ml的MTBE添加至溶液中。使所得溶液在環境條件下靜置（無密封蓋）。觀察並收集一些固體。固體表徵為化合物A之L-乳酸溶劑化物之結晶形式G。
藉由XRPD分析化合物A之L-乳酸溶劑化物之形式G（參見圖11）並且在下表中示出了其特徵峰。特別地，結晶水合物（水合物HC）形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：10.8°、16.2°、8.9°和27.3°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 5.5° 16.18Å 12% 弱
2 9.1° 9.75Å 52% 中
3 10.8° 8.17Å 43% 中
4 14.4° 6.13Å 31% 弱
5 16.2° 5.46Å 47% 中
6 17.7° 5.00Å 47% 中
7 18.9° 4.70Å 100% 強
8 20.1° 4.41Å 97% 強
9 21.8° 4.08Å 36% 弱
10 23.8° 3.74Å 32% 弱
11 24.7° 3.60Å 38% 弱
12 27.3° 3.27Å 74% 強
實例7：化合物A之結晶L-乳酸溶劑化物（形式F）形式
將226 mg的化合物A晶體之異丙醇溶劑化物添加至0.35 ml的L-乳酸和3 ml的MTBE混合物中。將化合物A之L-乳酸溶劑化物的結晶形式G作為晶種添加。將所得混合物在室溫下攪拌3天。藉由離心過濾來收集固體。過濾後獲得的濕餅表徵為化合物A之結晶形式F。將濕餅固體在真空下在45°C下乾燥2.5 h以獲得化合物A之L-乳酸溶劑化物之乾燥結晶形式F。
藉由XRPD分析化合物A之L-乳酸溶劑化物的形式F（參見圖12）並且在下表中示出了其特徵峰。特別地，結晶L-乳酸溶劑化物形式的XRPD圖之最具特徵的峰可以選自以下：具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之兩個、或三或四個峰，該組由以下組成：13.2°、17.4°、21.2°和25.2°。
指數 2θ d 值 相對強度 強度
1 7.3° 12.07Å 68% 強
2 13.2° 6.71Å 79% 強
3 14.6° 6.07Å 28% 弱
4 15.5° 5.70Å 85% 強
5 16.2° 5.48Å 79% 強
6 17.4° 5.11Å 100% 強
7 18.1° 4.89Å 57% 中
8 19.0° 4.66Å 16% 弱
9 20.3° 4.36Å 25% 弱
10 21.2° 4.18Å 53% 中
11 23.9° 3.72Å 77% 強
12 25.2° 3.53Å 43% 中
實例8：水吸附和解吸實驗
使用如下動態蒸汽吸附（DVS）儀器在25°C、40°C或60°C下記錄水吸附和解吸等溫線。所使用的循環如下：40-0-95-0-40（% RH）。
儀器 優勢/固有的
樣本質量 約10 mg
溫度 25°C或40°C或60°C
Dm/dt（質量變化比時間） 0.002%/min
最大/最小階段時間 360 min/60 min
變型C的水吸附和解吸等溫線
在25°C和最高95% RH下，變型C的最大吸水率係約0.5%。變型C係非吸濕性的。圖13示出在25°C、40-0-95-0-40（% RH）、dm/dt 0.002%/min下，變型C的水吸附-解吸等溫線。
Figure 02_image013
水合物HA的水吸附和解吸等溫線
水合物H A的水吸附和解吸等溫線示出在95% RH下可逆的水的吸收和高達8%的釋放。等溫線係可逆的，吸附和解吸之間只有很小的滯後，這表明水合物H A係通道水合物。取決於相對濕度，水合物H A可以容納高達2.5個分子（對應於7.9%的含水量）。
在25°C和最高95% RH下，水合物HA的最大吸水率係約8%。水合物HA係吸濕性的。圖14示出在25°C、40-0-95-0-40（% RH）、dm/dt 0.002%/min下化合物A之水合物HA之等溫線圖。
Figure 02_image015
水合物HB的水吸附和解吸等溫線
在25°C和最高95% RH下，水合物HB的最大吸水率係約13%。圖15示出在25°C、40-0-95-0-40（% RH）、dm/dt 0.002%/min下化合物A之水合物HB之等溫線圖。
Figure 02_image017
實例9：造粒模擬實驗
將造粒溶劑逐滴添加至正測試的固體形式直到將固體形式充分地浸濕。手動地將濕的物質研磨。藉由例如XRPD分析和/或DSC分析評估固體形式的結晶度或形式變化。造粒溶劑係水、pH 4.7的50 mM乙酸鹽緩衝液、和pH 6.8的50 mM磷酸鹽緩衝液。
[表]：造粒模擬實驗
用於造粒的溶劑 水合物 HA 的 XRPD 水合物 H B 的 XRPD 變型 C 的 XRPD
水 無形式變化 變成水合物H C，結晶度降低 無形式變化
pH 4.7，50 mM乙酸鹽緩衝液 無形式變化 變成水合物H C，結晶度降低 無形式變化
pH 6.8，50 mM磷酸鹽緩衝液 無形式變化 變成水合物H C，結晶度降低 無形式變化
可以看出水合物HA和變型C適合用於進一步加工成藥物劑型。 實例10：差示掃描量熱法
使用以下儀器參數進行差示掃描量熱法（DSC）
儀器 TA Discovery DSC
溫度範圍 0°C - 300°C
加熱速率 10 K/min
氮氣流速 50 mL/min
當以10 K/min加熱時，化合物A之水合物HA之DSC示出峰溫度為約28°C和78°C的兩個吸熱事件，這兩個事件最可能與脫水和熔化相關。進一步加熱後，樣本在約138°C示出玻璃相變。
當以10 K/min加熱時，四水合物H B的DSC示出約44°C的起始溫度的吸熱事件，這最可能與脫水相關。進一步加熱後，樣本在約141°C示出另一個小的吸熱事件，該事件可能與變型B的熔化或在玻璃相變時的弛豫現象（relaxation phenomenon）相關。
變型C係穩定的無水形式。當在帶有針孔的樣本盤中以10 K/min的速度在DSC中加熱時，具有76%結晶度的樣本展現出約215°C的熔點。熔化與分解有關。 實例11：平衡研究
如下進行平衡研究。將約25 mg的給定固體形式用0.1-0.5 mL的溶劑在25°C下平衡至少2週。將懸浮液過濾並在空氣中乾燥10 min。將固體部分藉由XRPD（X射線粉末繞射）研究。還可以視需要地進行另外的研究（例如DSC、TG、IR、SEM）。
在25°C下的化合物A之水合物HA之平衡研究未示出新的結晶形式的形成。在50°C和70°C下的平衡研究示出在環己烷、乙醇、異丙醇或1,2-丙二醇中若干種溶劑化物的形成。 實例12：本體穩定性研究
結晶形式的穩定性研究如下。在暴露於不同溫度和殘餘的濕度後，例如藉由HPLC和/或XRPD分析本體樣本。
測試條件 水合物 HA 的 XRPD 水合物 H B 的 XRPD 變型 C 的 XRPD
1 週 50°C ， 75% RH 無形式變化，結晶度降低 無變色 無形式變化，結晶度降低無變色 無變化 .無變色
           
如藉由HPLC測量的降解產物% 1.45% 3.97% 0.59%
藉由HPLC分析降解產物。它們按面積-%產物計算。
無
[圖1]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的水合物HA之x射線粉末繞射圖。
[圖2]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的異丙醇（IPA）溶劑化物之x射線粉末繞射圖。
[圖3]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的乙醇（EtOH）溶劑化物之x射線粉末繞射圖。
[圖4]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的甲醇溶劑化物（其已經部分轉化為水合物HA）之x射線粉末繞射圖。
[圖5]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的丙二醇溶劑化物之x射線粉末繞射圖。
[圖6]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的1-丁醇溶劑化物之x射線粉末繞射圖。
[圖7]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的正丙醇溶劑化物之x射線粉末繞射圖。
[圖8]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的變型C之x射線粉末繞射圖。
[圖9]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的水合物HB之x射線粉末繞射圖。
[圖10]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的水合物HC之x射線粉末繞射圖。
[圖11]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的L-乳酸溶劑化物之形式G的x射線粉末繞射圖。
[圖12]展示了a( R)-1-(6-(4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基)丙-2-烯-1-酮（化合物A）的L-乳酸溶劑化物之形式F的x射線粉末繞射圖。
[圖13]展示了化合物A之變型C之水吸附-解吸等溫線。
[圖14]展示了化合物A之水合物HA之水吸附-解吸等溫線。
[圖15]展示了化合物A之水合物HB之水吸附-解吸等溫線。
無
Figure 110140430-A0101-11-0002-1

Claims (26)

  1. 一種具有下式的化合物1-{6-[(4 M)-4-(5-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-甲基-3-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}丙-2-烯-1-酮之結晶形式
    Figure 03_image001
    （化合物A）。
  2. 如請求項1所述之結晶形式，其選自水合物HA、醇溶劑化物（例如異丙醇溶劑化物、乙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物、或正丙醇溶劑化物）、變型C、水合物HB、水合物C、以及乳酸溶劑化物形式（例如，L-乳酸溶劑化物的形式G或L-乳酸溶劑化物的形式F）。
  3. 如請求項1、2或3所述之結晶形式，當使用CuKα輻射測量時，該結晶形式具有的X射線粉末繞射圖與圖1、圖2、圖3、圖4、圖5、圖6、圖7、圖8、圖9、圖10、圖11或圖12中示出的X射線粉末繞射圖基本上相同。
  4. 如請求項1或2或3所述之結晶形式，其係基本純的形式。
  5. 如請求項1、2、3或4所述之結晶形式，其係水合物HA。
  6. 如請求項1至5中任一項所述之結晶形式，其具有X射線粉末繞射圖，該X射線粉末繞射圖具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三或四個峰，該組由以下組成：8.2°、11.6°、12.9°和18.8°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
  7. 如請求項6所述之結晶形式，其中該X射線粉末繞射圖進一步含有具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四或五個峰，該組由以下組成：12.1°、14.6°、16.2°、20.4°和24.1°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
  8. 如請求項1、2或3所述之化合物的結晶水合物HA，當使用CuKα輻射測量時，該結晶水合物HA具有的X射線粉末繞射圖與圖1中示出的X射線粉末繞射圖基本上相同。
  9. 一種用於製備化合物A之結晶形式水合物HA之方法，該方法包括以下步驟： (i)     將化合物A懸浮於醇中以形成相應的結晶形式的化合物A之醇溶劑化物； (ii)    從母液中分離出獲得的晶體之至少一部分； (iii)   視需要地將分離的晶體洗滌；以及 (iv)   在潮濕氣氛中將分離的晶體乾燥（視需要地在減壓下乾燥）以形成水合物HA結晶形式。
  10. 如請求項9所述之方法，其中該醇溶劑選自甲醇、乙醇、2-丙醇、丙二醇、正丙醇和1-丁醇及其組合。
  11. 如請求項9或10所述之方法，其中在低於90%的相對濕度下進行乾燥。
  12. 化合物A之醇溶劑化物在用於製備化合物A之水合物HA之方法中之用途。
  13. 如請求項1、2、3或4所述之結晶形式，其係變型C。
  14. 如請求項1至4、或請求項13中任一項所述之結晶形式，其具有X射線粉末繞射圖，該X射線粉末繞射圖具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三或四個峰，該組由以下組成：6.1°、12.2°、16.3°和19.4°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
  15. 如請求項14所述之結晶形式，其中該X射線粉末繞射圖進一步含有具有選自下組的折射角2θ值（CuKα λ = 1.5418 Å）之至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七或八個、或所有峰，該組由以下組成：7.3°、8.8°、14.7°、15.4°、18.2°、20.8°、21.8°、25.4°和29.4°，在約25°C的溫度和1.5418 Å的x射線波長λ下測得。
  16. 如請求項13、14或15所述之化合物的所述結晶變型C，當使用CuKα輻射測量時，該結晶變型C具有的X射線粉末繞射圖與圖8中示出的X射線粉末繞射圖基本上相同。
  17. 如請求項1所述之結晶形式，其係醇溶劑化物，視需要地其中該溶劑化物係異丙醇溶劑化物、乙醇溶劑化物、甲醇溶劑化物、丙二醇溶劑化物、1-丁醇溶劑化物、或正丙醇溶劑化物。
  18. 如請求項1所述之結晶形式，其係化合物A之乳酸溶劑化物形式（例如，L-乳酸溶劑化物），視需要地其中該乳酸溶劑化物係該L-乳酸溶劑化物的形式G或L-乳酸溶劑化物的形式F。
  19. 一種藥物組成物，其包含如請求項1至8中任一項、或請求項13至18中任一項所述之結晶形式，以及至少一種藥學上可接受的載體或稀釋劑。
  20. 如請求項1至8中任一項、或請求項13至18中任一項所述之結晶形式，用作藥物。
  21. 如請求項1至8中任一項、或請求項13至18中任一項所述之結晶形式，用於在治療癌症，特別是KRAS G12C突變型癌症中使用。
  22. 如請求項1至8中任一項、或請求項13至18中任一項所述之結晶形式，其中該癌症係選自由以下組成之群組的癌症或腫瘤：肺癌（包括肺腺癌、非小細胞肺癌和鱗狀細胞肺癌）、結腸直腸癌（包括結腸直腸腺癌）、胰臟癌（包括胰臟腺癌）、子宮癌（包括子宮內膜癌）、直腸癌（包括直腸腺癌）、闌尾癌、小腸癌、食道癌、肝膽癌（包括肝癌和膽管癌）、膀胱癌、卵巢癌和實性瘤，特別地當該癌症或腫瘤帶有KRAS G12C突變時。
  23. 如請求項1至8中任一項、或請求項13至18中任一項所述之化合物用於製造用於治療癌症的藥物中之用途。
  24. 如請求項23所述之用途，其中該癌症係癌症係選自由以下組成之群組的癌症或腫瘤：肺癌（包括肺腺癌、非小細胞肺癌和鱗狀細胞肺癌）、結腸直腸癌（包括結腸直腸腺癌）、胰臟癌（包括胰臟腺癌）、子宮癌（包括子宮內膜癌）、直腸癌（包括直腸腺癌）、闌尾癌、小腸癌、食道癌、肝膽癌（包括肝癌和膽管癌）、膀胱癌、卵巢癌和實性瘤，特別地當該癌症或腫瘤帶有KRAS G12C突變時。
  25. 一種治療癌症之方法，該方法包括向有需要的受試者或患者投與治療有效量的如請求項1至8中任一項、或請求項13至18中任一項所述之結晶形式或如請求項19所述之藥物組成物。
  26. 如請求項25所述之方法，其中該癌症係癌症係選自由以下組成之群組的癌症或腫瘤：肺癌（包括肺腺癌、非小細胞肺癌和鱗狀細胞肺癌）、結腸直腸癌（包括結腸直腸腺癌）、胰臟癌（包括胰臟腺癌）、子宮癌（包括子宮內膜癌）、直腸癌（包括直腸腺癌）、闌尾癌、小腸癌、食道癌、肝膽癌（包括肝癌和膽管癌）、膀胱癌、卵巢癌和實性瘤，特別地當該癌症或腫瘤帶有KRAS G12C突變時。
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