TW202224673A - 苯芴醇及其衍生物在治療冠狀病毒感染方面的應用 - Google Patents

苯芴醇及其衍生物在治療冠狀病毒感染方面的應用 Download PDF

Info

Publication number
TW202224673A
TW202224673A TW110126933A TW110126933A TW202224673A TW 202224673 A TW202224673 A TW 202224673A TW 110126933 A TW110126933 A TW 110126933A TW 110126933 A TW110126933 A TW 110126933A TW 202224673 A TW202224673 A TW 202224673A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
formula
pharmaceutical composition
butyl
preparation
infection
Prior art date
Application number
TW110126933A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI800875B (zh
Inventor
曹瑞源
王曼麗
李薇
趙磊
楊晶晶
李月香
樊士勇
周辛波
肖典
胡志紅
李松
鐘武
Original Assignee
中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院 filed Critical 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
Publication of TW202224673A publication Critical patent/TW202224673A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI800875B publication Critical patent/TWI800875B/zh

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本發明涉及苯芴醇及其衍生物在治療冠狀病毒感染方面的應用，具體提供了式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物在製備藥物中的用途，該藥物用於治療冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染。

Description

苯芴醇及其衍生物在治療冠狀病毒感染方面的應用
本發明涉及生物醫藥領域，具體涉及苯芴醇及其衍生物在治療冠狀病毒感染方面的應用。
苯芴醇（Lumefantrine/benflumetol）是已上市藥物複方蒿甲醚-苯芴醇片（商品名：Coartem/Riamet）的主要有效成分，具有良好的抗瘧活性。複方苯芴醇目前已被批准用於治療體重5kg以上（含5kg）、惡性瘧原蟲引起的急性無併發症感染患者。同時，複方苯芴醇對氯喹耐藥地區感染惡性瘧疾的患者同樣具有理想治療效果。複方蒿甲醚-苯芴醇藥片（Artemether-Lumefantrine）包含20mg蒿甲醚及120mg苯芴醇，二者作為主要有效成分配伍使用，有助於互補發揮二者的抗瘧作用，對惡性瘧原蟲及其病症有顯著治療效果。除用於瘧疾治療外，苯芴醇還具有較強的抗腫瘤活性，其能在體內外模型中有效抑制原型和耐藥型膠質母細胞瘤的生長。此外，臨床試驗結果顯示，複方苯芴醇可能對人巨細胞病毒有一定抑制效果。目前，複方蒿甲醚-苯芴醇片已在中國、美國、瑞士等全球多個國家核准上市。
2019新型冠狀病毒（2019-nCoV）是以前從未在人類中發現的冠狀病毒新毒株。2020年2月11日，國際病毒分類委員會（ICTV）宣佈，2019新型冠狀病毒（2019-nCoV）的正式分類名為嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）。同日，世界衛生組織（WHO）宣佈，由這一病毒導致的疾病的正式名稱為COVID-19。SARS-CoV-2感染的症狀主要以肺炎為主，依據病情的輕重程度可分為單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等。單純性感染的患者可能有非特異性症狀，例如發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適，老年人和免疫抑制者可能會出現非典型症狀。輕症肺炎的患者主要以咳嗽、呼吸困難+呼吸急促為主。重症肺炎可見於青少年、成人或兒童，主要症狀為呼吸頻率增加，嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣等。急性呼吸窘迫症候群的肺部影像為雙側磨玻璃影，但不能完全由積液、大葉滲出或者肺不張或者肺部塊影解釋，以肺水腫為主要症狀。敗血症患者往往有致命的器官功能障礙，敗血性休克是最為危重的患者，死亡可能性較高。目前，針對新型冠狀病毒感染，臨床上以支援治療為主，無特異抗病毒藥物可用。
本發明目的是發現對冠狀病毒特別是SARS-CoV-2有抗病毒活性的藥物，可用於其感染引起相關疾病如單純性感染如發熱、咳嗽和咽喉痛等、肺炎、急性或嚴重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫綜合征、 敗血症和敗血性休克等的救治。本發明藉由創造性的研究發現，式A所示化合物（苯芴醇及其衍生物）具有抑制SARS-CoV-2複製方面的功能，在治療SARS-CoV-2引起的疾病方面具有很好的潛在治療效果。
為此，在本發明的第一方面，本發明提供了式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物在製備藥物中的用途，該藥物用於治療冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染；
Figure 02_image001
式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基。
發明人發現，式A所示化合物可在細胞上抑制病毒複製，減少細胞培養物中病毒核酸載量。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病為COVID-19。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病或感染為呼吸系統疾病，例如單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸道感染、嚴重急性呼吸道感染（SARI）、低氧性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等。
在一些實施方案中，該單純性感染包括但不限於發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適。在一些實施方案中，該輕症肺炎包括但不限於咳嗽，呼吸困難及/或呼吸急促。在一些實施方案中，該重症肺炎包括但不限於呼吸頻率增加，嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣。在一些實施方案中，該急性呼吸窘迫症候群包括但不限於肺水腫。在一些實施方案中，該敗血症包括但不限於器官功能障礙。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，式A所示化合物的結構如式I所示，
Figure 02_image004
式I。
在本發明的第二方面，本發明提供了藥物組合物在製備治療冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染的藥物中的用途，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如前所述。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病為COVID-19。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病或感染為呼吸系統疾病，例如單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸道感染、嚴重急性呼吸道感染（SARI）、低氧性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等。
在一些實施方案中，該單純性感染包括但不限於發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適。在一些實施方案中，該輕症肺炎包括但不限於咳嗽，呼吸困難及/或呼吸急促。在一些實施方案中，該重症肺炎包括但不限於呼吸頻率增加，嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣。在一些實施方案中，該急性呼吸窘迫症候群包括但不限於肺水腫。在一些實施方案中，該敗血症包括但不限於器官功能障礙。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種。在一些較佳的實施方案中，該藥物組合物還包含蒿甲醚，例如，可以是複方蒿甲醚-苯芴醇藥片。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在本發明的第三方面，本發明提供了式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，其用於治療冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染；
Figure 02_image001
式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病為COVID-19。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病或感染為呼吸系統疾病，例如單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸道感染、嚴重急性呼吸道感染（SARI）、低氧性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等。
在一些實施方案中，該單純性感染包括但不限於發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適。在一些實施方案中，該輕症肺炎包括但不限於咳嗽，呼吸困難及/或呼吸急促。在一些實施方案中，該重症肺炎包括但不限於呼吸頻率增加，嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣。在一些實施方案中，該急性呼吸窘迫症候群包括但不限於肺水腫。在一些實施方案中，該敗血症包括但不限於器官功能障礙。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，式A所示化合物的結構如式I所示，
Figure 02_image004
式I。
在本發明的第四方面，本發明提供了藥物組合物，其用於治療冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如前所述。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病為COVID-19。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病或感染為呼吸系統疾病，例如單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸道感染、嚴重急性呼吸道感染（SARI）、低氧性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等。
在一些實施方案中，該單純性感染包括但不限於發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適。在一些實施方案中，該輕症肺炎包括但不限於咳嗽，呼吸困難及/或呼吸急促。在一些實施方案中，該重症肺炎包括但不限於呼吸頻率增加，嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣。在一些實施方案中，該急性呼吸窘迫症候群包括但不限於肺水腫。在一些實施方案中，該敗血症包括但不限於器官功能障礙。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種。在一些較佳的實施方案中，該藥物組合物還包含蒿甲醚，例如，可以是複方蒿甲醚-苯芴醇藥片。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在本發明的第五方面，本發明提供了治療疾病的方法，其包括給予有需要的受試者治療有效量的式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，該疾病為冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染，
Figure 02_image001
式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病為COVID-19。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病或感染為呼吸系統疾病，例如單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸道感染、嚴重急性呼吸道感染（SARI）、低氧性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等。
在一些實施方案中，該單純性感染包括但不限於發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適。在一些實施方案中，該輕症肺炎包括但不限於咳嗽、呼吸困難及/或呼吸急促。在一些實施方案中，該重症肺炎包括但不限於呼吸頻率增加，嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣。在一些實施方案中，該急性呼吸窘迫症候群包括但不限於肺水腫。在一些實施方案中，該敗血症包括但不限於器官功能障礙。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，式A所示化合物的結構如式I所示，
Figure 02_image004
式I。
在本發明的第六方面，本發明提供了治療疾病的方法，其包括給予有需要的受試者治療有效量的藥物組合物，該疾病為冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如前所述。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病為COVID-19。
在一些實施方案中，該SARS-CoV-2引起的疾病或感染為呼吸系統疾病，例如單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸道感染、嚴重急性呼吸道感染（SARI）、低氧性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等。
在一些實施方案中，該單純性感染包括但不限於發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適。在一些實施方案中，該輕症肺炎包括但不限於咳嗽、呼吸困難及/或呼吸急促。在一些實施方案中，該重症肺炎包括但不限於呼吸頻率增加，嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣。在一些實施方案中，該急性呼吸窘迫症候群包括但不限於肺水腫。在一些實施方案中，該敗血症包括但不限於器官功能障礙。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種。在一些較佳的實施方案中，該藥物組合物還包含蒿甲醚，例如，可以是複方蒿甲醚-苯芴醇藥片。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在本發明的第七方面，本發明提供了式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物在製備作為冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）抑制劑的藥物中的用途，
Figure 02_image001
式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，式A所示化合物的結構如式I所示，
Figure 02_image004
式I。
在本發明的第八方面，本發明提供了藥物組合物在製備作為冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）抑制劑的藥物中的用途，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如前所述。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種。在一些較佳的實施方案中，該藥物組合物還包含蒿甲醚，例如，可以是複方蒿甲醚-苯芴醇藥片。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在本發明的第九方面，本發明提供了式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，其為冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）抑制劑，
Figure 02_image001
式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，式A所示化合物的結構如式I所示，
Figure 02_image004
式I。
在本發明的第十方面，本發明提供了藥物組合物，其為冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）抑制劑，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如前所述。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種。在一些較佳的實施方案中，該藥物組合物還包含蒿甲醚，例如，可以是複方蒿甲醚-苯芴醇藥片。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在本發明的第十一方面，本發明提供了式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物在製備用於抑制冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖的藥物中的用途；
Figure 02_image001
式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，式A所示化合物的結構如式I所示，
Figure 02_image004
式I。
在本發明的第十二方面，本發明提供了藥物組合物在製備用於抑制冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖的藥物中的用途，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如前所述。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種。在一些較佳的實施方案中，該藥物組合物還包含蒿甲醚，例如，可以是複方蒿甲醚-苯芴醇藥片。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在本發明的第十三方面，本發明提供了式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，其用於抑制冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖；
Figure 02_image001
式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，式A所示化合物的結構如式I所示，
Figure 02_image004
式I。
在本發明的第十四方面，本發明提供了藥物組合物，其用於抑制冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如前所述。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種。在一些較佳的實施方案中，該藥物組合物還包含蒿甲醚，例如，可以是複方蒿甲醚-苯芴醇藥片。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在本發明的第十五方面，本發明提供了抑制冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖的方法，其包括給予細胞（例如哺乳動物細胞）有效量的式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物；
Figure 02_image001
式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
在一些實施方案中，式A所示化合物的結構如式I所示，
Figure 02_image004
式I。
在本發明的第十六方面，本發明提供了抑制冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖的方法，其包括給予細胞（例如哺乳動物細胞）有效量的藥物組合物，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如前所述。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種。在一些較佳的實施方案中，該藥物組合物還包含蒿甲醚，例如，可以是複方蒿甲醚-苯芴醇藥片。
在一些實施方案中，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在一些實施方案中，該哺乳動物包括牛科動物、馬科動物、羊科動物、豬科動物、犬科動物、貓科動物、齧齒類動物、靈長類動物，例如是人、貓、狗或豬。
本發明中，所用術語“2019新型冠狀病毒（2019-nCoV）”的正式分類名為嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）。
本發明中，所用術語“2019新型冠狀病毒 (2019-nCoV)引起的疾病”的正式名稱為COVID-19。
在本發明中，“受試者”指脊椎動物。在某些實施方案中，脊椎動物指哺乳動物。該哺乳動物包括牛科動物、馬科動物、羊科動物、豬科動物、犬科動物、貓科動物、齧齒類動物、靈長類動物，例如是人、貓、狗或豬。哺乳動物包括，但不限於牲畜(諸如牛)、寵物(諸如貓、犬、和馬)、靈長類動物、小鼠和大鼠。在某些實施方案中，哺乳動物指人。
本發明中，術語“治療有效量”或“預防有效量”是指在合理的醫學判斷範圍內，足以治療或預防患者疾病但足夠低地避免嚴重副作用（在合理的利益/風險比）的量。化合物的治療有效量將根據所選擇的具體化合物（例如考慮化合物的效力、有效性和半衰期）、所選擇的給藥途徑、所治療的疾病、所治療的疾病的嚴重性、所治療的患者的年齡、大小、體重和身體疾病、所治療的患者的醫療史、治療持續時間、並行療法的性質、所需的治療效果等因素發生變化，但仍可以由本領域技術人員常規確定。
另外需要指出，該式A所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物針對不同患者的特定使用劑量和使用方法決定於諸多因素，包括患者的年齡、體重、性別、自然健康狀況、營養狀況、藥物的活性強度、服用時間、代謝速率、病症的嚴重程度以及診治醫師的主觀判斷。這裡較佳使用劑量介於0.001-1000mg/kg體重/天。
本發明式A所示化合物的藥學上可接受的鹽包括其無機或有機酸鹽，以及無機或有機堿鹽，本發明涉及上述鹽的所有形式。其中包括但不限於：鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋰鹽、葡甲胺鹽、鹽酸鹽、氫澳酸鹽、氫腆酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、草酸鹽、三甲基乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、苦味酸鹽、天冬氨酸鹽、葡糖酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽和雙羥萘酸鹽等。
本發明涉及的藥物組合物可以包括藥學上可接受的載體，載體包括但不限於：離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白如人血白蛋白、緩衝物質如磷酸鹽、甘油、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、鹽或電解質、如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態氧化矽、三矽酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素物質、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蜂蠟、羊毛脂。
本發明所述藥物組合物可以根據不同給藥途徑而製備成各種形式。
根據本發明，該的藥物組合物可以以下面的任意方式施用：口服、噴霧吸入、直腸用藥、鼻腔用藥、頰部用藥、陰道用藥、局部用藥、非腸道用藥如皮下、靜脈、肌內、腹膜內、鞘內、心室內、胸骨內和顱內注射或輸入、或借助一種外植儲器用藥。其中較佳口服、腹膜內或靜脈內用藥方式。
當口服用藥時，該式A所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物可製成任意口服可接受的製劑形式，包括但不限於片劑、膠囊、水溶液或水懸浮液。其中，片劑一般使用的載體包括乳糖和玉米澱粉，另外也可加入潤滑劑如硬質酸鎂。膠囊製劑一般使用的稀釋劑包括乳糖和乾燥玉米澱粉。水懸浮液製劑則通常是將活性成分與適宜的乳化劑和懸浮劑混合使用。如果需要，以上口服製劑形式中還可加入一些甜味劑、芳香劑或著色劑。
當直腸用藥時，該式A所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物一般可製成栓劑的形式，其藉由將藥物與一種適宜的非刺激性成形劑混合而製得。該成形劑在室溫下呈現固體狀態，而在直腸溫度下熔化釋出藥物。該類成形劑包括可哥脂、蜂蠟和聚乙二醇。 當局部用藥時，特別是治療局部外敷容易達到的患面或器官，如眼睛、皮膚或下腸道神經性疾病時，該式A所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物可根據不同的患面或器官製成不同的局部用藥製劑形式，具體說明如下：
當眼部局部施用時，該式A所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物可配製成一種微粉化懸浮液或溶液的製劑形式，所使用載體為等滲的一定pH的無菌鹽水，其中可加入也可不加防腐劑如氯化苄基烷醇鹽。此外對於眼用，也可將化合物製成膏劑形式如凡士林膏。
當皮膚局部施用時，該式A所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物可製成適當的軟膏、洗劑或霜劑製劑形式，其中活性成分懸浮或溶解於一種或多種載體中。這裡軟膏即可使用的載體包括但不限於：礦物油、液體凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯、乳化蠟和水；洗劑或霜劑可使用的載體包括但不限於：礦物油、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、吐溫60、十六烷酯蠟、十六碳烯芳醇、2-辛基十二烷醇、苄醇和水。
當下腸道局部施用時，該式A所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物可製成如上所述的直腸栓劑製劑或適宜的灌腸製劑形式，另外也可使用局部透皮貼劑。
該式A所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物還可以無菌注射製劑形式用藥，包括無菌注射水或油懸浮液，或無菌注射溶液。其中，可使用的載體和溶劑包括水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，滅菌的非揮發油也可用作溶劑或懸浮介質，如單甘油酯或二甘油酯。
上述各種劑型的藥物均可以按照藥學領域的常規方法製備。
在本說明書的各部分，本發明揭露化合物的取代基按照基團種類或範圍揭露。特別指出，本發明包括這些基團種類和範圍的各個成員的每一個獨立的次級組合。例如，術語“C1-C6烷基”特別指獨立揭露的甲基、乙基、C3烷基、C4烷基、C5烷基和C6烷基。
另外，需要說明的是，除非以其他方式明確指出，在本文中通篇採用的描述方式“各…獨立地為”應做廣義理解，其是指不同的符號之間所表達的具體選項之間互相不影響，可以相同，也可以不同。
術語“C1-C6烷基”指的是任意的含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈基團，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、叔戊基、正己基等。
下面詳細描述本發明的實施例，下面藉由參考附圖描述的實施例是示例性的，旨在用於解釋本發明，而不能理解為對本發明的限制。
本發明提供具有式I結構的化合物，其立體異構體，其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物：
Figure 02_image004
式I。
在某些實施方案中，本發明式I所示化合物的藥學上可接受的鹽包括其無機或有機酸鹽，以及無機或有機堿鹽，本發明涉及上述鹽的所有形式。其中包括但不限於：鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋰鹽、葡甲胺鹽、鹽酸鹽、氫澳酸鹽、氫腆酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、草酸鹽、三甲基乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、苦味酸鹽、天冬氨酸鹽、葡糖酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽和雙羥萘酸鹽等。
式I所示化合物可在細胞上抑制病毒複製，減少細胞培養物中病毒核酸載量。
本發明涉及式I所示的化合物，其立體異構體或其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物在製備用於治療冠狀病毒特別是SARS-CoV-2引起的疾病或感染（包括但不限於呼吸系統疾病（例如單純性感染如發熱、咳嗽和咽喉痛等、肺炎、急性或嚴重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫綜合征、 敗血症和敗血性休克、重症急性呼吸綜合征等））的藥物中的用途，
Figure 02_image004
式I。
本發明還涉及式I所示的化合物，其立體異構體、其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物在製備作為冠狀病毒抑制劑的藥物中的用途。
本發明還涉及式I所示的化合物，其立體異構體、其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物在製備用於抑制冠狀病毒在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖的藥物中的用途。
本發明還涉及一種藥物組合物，其包含該式I所示化合物、其立體異構體或其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
本發明還涉及該包含該式I所示化合物、其立體異構體或其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物的藥物組合物或該式I所示化合物、其立體異構體或其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物在製備用於治療呼吸系統疾病但不限於呼吸系統疾病（包括單純性感染如發熱、咳嗽和咽喉痛等、肺炎、急性或嚴重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫綜合征、 敗血症和敗血性休克、重症急性呼吸綜合征等）的藥物中的用途。
本發明還涉及一種在有需要的哺乳動物中治療及/或預防疾病的方法或者在有需要的哺乳動物中抑制冠狀病毒複製或繁殖的方法，該方法包括給有需要的哺乳動物施用治療及/或預防有效量的該包含該式I所示化合物、其立體異構體或其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物的藥物組合物或該的式I所示化合物、其立體異構體、其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，其中所述的疾病包括冠狀病毒引起的疾病。
在某些實施方案中，該冠狀病毒特別是SARS-CoV-2引起的疾病包括但不限於呼吸系統疾病（例如單純性感染如發熱、咳嗽和咽喉痛等、肺炎、急性或嚴重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫綜合征、 敗血症和敗血性休克、重症急性呼吸綜合征等）。
本發明還涉及藥物組合物在製備用於治療冠狀病毒特別是SARS-CoV-2引起的疾病或感染（例如呼吸系統疾病（例如單純性感染如發熱、咳嗽和咽喉痛等、肺炎、急性或嚴重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫綜合征、 敗血症和敗血性休克、重症急性呼吸綜合征等））的藥物中的用途，其中該藥物組合物包含該式I所示化合物、其立體異構體或其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物
Figure 02_image004
式I。
較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
本發明還涉及藥物組合物在製備作為冠狀病毒抑制劑的藥物中的用途，其中該藥物組合物包含式I所示化合物、其立體異構體、其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，
Figure 02_image004
式I。
較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
本發明還涉及藥物組合物在製備用於抑制冠狀病毒在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖的藥物中的用途，其中該藥物組合物包含式I所示化合物、其立體異構體、其藥鹽上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，
Figure 02_image004
式I。
較佳地，該的藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
本發明還涉及式I所示的化合物，其立體異構體或其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，其用於治療冠狀病毒特別是SARS-CoV-2引起的疾病或感染（包括但不限於呼吸系統疾病（例如單純性感染如發熱、咳嗽和咽喉痛等、肺炎、急性或嚴重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫綜合征、 敗血症和敗血性休克、重症急性呼吸綜合征等））。
本發明還涉及式I所示的化合物，其立體異構體、其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，其用作冠狀病毒抑制劑。
本發明還涉及式I所示的化合物，其立體異構體、其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，其用於抑制冠狀病毒在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖。
本發明還涉及藥物組合物，其用於治療冠狀病毒特別是SARS-CoV-2引起的疾病或感染（例如呼吸系統疾病（例如單純性感染如發熱、咳嗽和咽喉痛等、肺炎、急性或嚴重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫綜合征、 敗血症和敗血性休克、重症急性呼吸綜合征等）），其中該藥物組合物包含該式I所示化合物、其立體異構體或其藥物上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物。
Figure 02_image004
式I
較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
本發明還涉及藥物組合物，其用作冠狀病毒抑制劑，其中該藥物組合物包含式I所示化合物、其立體異構體、其藥學上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，
Figure 02_image004
式I。
較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
本發明還涉及藥物組合物，其用於抑制冠狀病毒在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖，其中該藥物組合物包含式I所示化合物、其立體異構體、其藥鹽上可接受的鹽及/或其溶劑化物及/或其水合物，
Figure 02_image004
式I。
較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
在某些實施方案中，本發明所述的冠狀病毒為SARS-CoV-2。
在某些實施方案中，本發明所述冠狀病毒引起的疾病為SARS-CoV-2引起的疾病，即COVID-19。
在某些實施方案中，本發明所述哺乳動物包括牛科動物、馬科動物、羊科動物、豬科動物、犬科動物、貓科動物、齧齒類動物、靈長類動物，例如是人、貓、狗或豬。
下面結合具體實施例對本發明進行進一步的解釋說明。 實施例1：苯芴醇（即式I所示化合物）降低SARS-CoV-2感染的細胞病毒核酸載量實驗 (1) 藥物處理感染病毒的細胞
將Vero E6細胞（購自ATCC，貨號1586）接種至24孔板，培養24h；然後進行病毒感染，具體的，用2%細胞維持液（配方為：將FBS（購自Gibco公司，貨號16000044）按照2%的體積比加入MEM（購自Gibco公司，貨號10370021），即為2%細胞維持液）將SARS-CoV-2（2019-nCoV）病毒（nCoV-2019BetaCoV/Wuhan/WIV04/2019株，由中國科學院武漢病毒研究所提供）稀釋成相應濃度，然後加入24孔板中使每孔含有病毒量為100TCID 50。接下來再用2%細胞維持液將苯芴醇（購自Selleck公司，貨號S3746）分別稀釋成相應濃度，加入到對應的孔中，使藥物最終濃度分別為100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.13μM，然後放37℃、5% CO 2孵箱繼續培養48h，細胞對照組只加不含有任何受試藥物的2%細胞維持液。 (2) RNA提取
RNA提取試劑盒購自Qiagen公司，貨號74106。下述RNA提取步驟中所涉及的耗材（離心柱、無RNA酶的2mL收集管等）及試劑（RLT、RW1、RPE、無RNA酶水等）均為試劑盒的組成部分。下述提取步驟均為試劑盒說明書所推薦的步驟。 1) 取受試培養板的上清液100μL，加入無核酸酶EP管中，然後每孔加入350μL Buffer RLT，用移液槍吹吸混勻使其充分裂解後，離心取上清； 2) 向1)中所得上清液加入等體積的70%乙醇，混勻； 3) 將上述2)中所得混合液轉入無RNA酶的離心柱中，12000rpm離心15s，棄廢液； 4) 加入700μL Buffer RW1，12000rpm離心15s清洗離心柱，棄廢液； 5) 加入500μL Buffer RPE，12000rpm離心15s清洗離心柱，棄廢液； 6) 加入500μL Buffer RPE，12000rpm離心2min清洗離心柱，棄廢液； 7) 換新的無RNA酶的2mL收集管，12000rpm離心1min，乾燥離心柱，然後離心柱整體轉移至步驟8）的1.5mL收集管中； 8) 換上新的1.5mL收集管，放入步驟7）中乾燥後的離心柱，並向離心柱中加入30μL不含RNA酶的水，12000rpm離心2min，洗脫液即含有相應的RNA，加入RNA酶抑制劑（購自NEB公司，貨號M0314L），用Nano Drop（購自Thermo scientific，型號Nano Drop One）檢測各RNA濃度。 (3) RNA反轉錄
實驗採用TaKaRa公司生產的反轉錄試劑盒（PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser，貨號RR047Q）進行RNA反轉錄，步驟如下。 ①     gDNA去除：收集各實驗組RNA樣品，分別取1μg進行反轉錄。首先，向各實驗組RNA中加入2μL 5× gDNA Eraser Buffer，用 RNase Free 水補足反應體系至 10μL，充分混勻， 42℃水浴 2min 去除樣品中可能存在的gDNA； ② 逆轉錄：向①所得樣品中 加入適量的酶和引物 Mix 及反應緩衝液，用 RNase Free 水補足體積至 20μL，37℃水浴反應 15min，之後投入 85℃水中 5 sec，既可轉錄得到 cDNA。 (4) Real-time PCR
採用螢光定量PCR檢測原病毒液每毫升所含拷貝數。
採用TB Green Premix (Takara，Cat#RR820A)混好反應體系，在StepOne Plus Real-time PCR儀 (品牌：ABI)進行擴增反應和讀數。計算原病毒液每毫升所含拷貝數。步驟如下： ①   首先建立標準品：將質粒pMT-RBD（質粒由中國科學院武漢病毒研究所提供）稀釋成5×10 8copies/μL、5×10 7copies/μL、5×10 6copies/μL、5×10 5copies/μL、5×10 4copies/μL、5×10 3copies/μL、5×10 2copies/μL。取2μL標準品或cDNA範本用於qPCR反應。 ② 實驗過程中所用引物序列如下（均為5’-3’方向表示）： RBD-qF: CAATGGTTTAACAGGCACAGG（SEQ ID NO:1） RBD-qR: CTCAAGTGTCTGTGGATCACG（SEQ ID NO:2） ③ 反應程式如下： 預變性：95℃ 5分鐘； 迴圈參數：95℃ 15秒、54℃ 15秒、72℃30秒，共40個迴圈。 抑制率（%）=(藥物處理組RNA拷貝數)/ (細胞感染組RNA拷貝數) ×100% (5) 藥物對細胞毒性測試
藥物對細胞毒性的檢測利用CCK-8試劑盒（Beoytime）測定。具體步驟如下： ① 96孔板中接種1×10 4個Vero E6 (ATCC)細胞，37℃培養8小時。 ② 將藥物用DMSO稀釋到合適的母液濃度，再用含2%FBS（購自Gibco公司，貨號16000044）的MEM培養基（購自Gibco公司，貨號10370021）稀釋到與藥物處理同樣的濃度，棄96孔板中原培養基，取100μL含藥物的MEM培養基加入到細胞中，每個濃度做三個複孔。注意設置陰性對照（細胞孔中加DMSO和培養基，而不加藥物）和空白對照（不含細胞，加DMSO和培養基）。加藥完畢，細胞37℃培養48小時。 ③ 向待測孔中加入20μL CCK-8溶液（Beoytime），輕輕混勻，不要產生氣泡，37℃繼續培養2小時。在酶標儀（購自Molecular Devices公司，型號SpectraMax M5）上讀取OD 450，計算細胞活性： 細胞活性（%）=(A （藥物處理組）-A （空白對照）)/ (A （陰性對照）-A （空白對照）) ×100% 其中A為酶標儀讀數。 (6) 實驗結果
病毒增殖抑制實驗的結果顯示，受試化合物在100μM、50μM以及25μM的濃度下，均能夠有效抑制感染上清中SARS-CoV-2病毒基因組的複製。（表1和圖1） 表1. 苯芴醇抗病毒實驗結果
濃度 (μM) 100 50 25 12.5 6.25 3.13 Vehicle
病毒基因組拷貝數 (MOI = 0.05) 2927366 ± 40605 20512679 ± 4610588 48801530 ± 4509346 87790130 ± 9400381 87462582 ± 2932239 125717580 ± 9978188 108280612 ± 21937000
細胞毒性結果顯示，在所有受試濃度下，受試化合物（苯芴醇）的處理均未改變細胞活力，即受試化合物在所有濃度下對細胞均無毒性作用（表2和圖1）。 表2. 苯芴醇的細胞毒性實驗
濃度 (μM) 100 50 25 12.5 6.25 3.13 1.56 0.78 Vehicle
細胞活力 (陰性對照%) 122.12 ± 1.43 115.52 ± 5.83 113.54 ± 2.77 108.69 ± 0.56 106.70 ± 10.62 96.69 ± 3.31 94.55 ± 4.86 92.88 ± 6.79 100 ± 3.22
以上所述的具體實施例，對本發明的目的、技術方案和有益效果進行了進一步詳細說明，所應理解的是，以上所述僅為本發明的具體實施例而已，並不用於限定本發明的保護範圍，凡在本發明的精神和原則之內，所做的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護範圍。
無
圖1顯示苯芴醇有效降低SARS-CoV-2感染的vero E6細胞上病毒核酸載量。苯芴醇在細胞感染SARS-CoV-2 48h後能夠抑制細胞上的病毒RNA載量，且抑制活性呈劑量依賴性。左側縱坐標為依據樣品中病毒RNA的拷貝數計算出的百分比抑制率（對應圖中的圓點及其擬合線），右側縱坐標為依據細胞活力計算出的百分比毒性（對應圖中的方塊及其擬合線），橫坐標為藥物（苯芴醇，lumefantrine）濃度。
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 110126933-A0101-11-0002-2

Claims (10)

  1. 一種如式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物在製備一藥物中的用途，該藥物用於治療冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染； 較佳地，該SARS-CoV-2引起的疾病為COVID-19； 較佳地，該SARS-CoV-2引起的疾病或感染為呼吸系統疾病，例如單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸道感染、嚴重急性呼吸道感染（SARI）、低氧性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等； 較佳地，該單純性感染包括但不限於發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適；較佳地，該輕症肺炎包括但不限於咳嗽、呼吸困難及/或呼吸急促；較佳地，該重症肺炎包括但不限於呼吸頻率增加、嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣；較佳地，該急性呼吸窘迫症候群包括但不限於肺水腫；較佳地，該敗血症包括但不限於器官功能障礙；
    Figure 03_image001
    式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基； 較佳地，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基； 更佳地，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
  2. 如請求項1所述之用途，其中，式A所示化合物的結構如式I所示，
    Figure 03_image004
    式I。
  3. 一種藥物組合物在製備治療冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）引起的疾病或感染的藥物中的用途，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如請求項1至請求項2中任一項所限定； 較佳地，該SARS-CoV-2引起的疾病為COVID-19； 較佳地，該SARS-CoV-2引起的疾病或感染為呼吸系統疾病，例如單純性感染、輕症肺炎、重症肺炎、急性呼吸道感染、嚴重急性呼吸道感染（SARI）、低氧性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群、敗血症、敗血症休克等； 較佳地，該單純性感染包括但不限於發熱、咳嗽、咽喉痛、鼻塞、乏力、頭痛、肌肉疼痛或不適；較佳地，該輕症肺炎包括但不限於咳嗽、呼吸困難及/或呼吸急促；較佳地，該重症肺炎包括但不限於呼吸頻率增加、嚴重的呼吸衰竭或呼吸困難，中心型發紺、嗜睡、意識不清或驚厥、抽氣；較佳地，該急性呼吸窘迫症候群包括但不限於肺水腫；較佳地，該敗血症包括但不限於器官功能障礙； 較佳地，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種；較佳地，該藥物組合物還包含蒿甲醚； 較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
  4. 一種如式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物在製備作為冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）抑制劑的藥物中的用途，
    Figure 03_image001
    式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基； 較佳地，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基； 更佳地，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
  5. 如請求項4所述之用途，其中，式A所示化合物的結構如式I所示，
    Figure 03_image004
    式I。
  6. 一種藥物組合物在製備作為冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）抑制劑的藥物中的用途，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如請求項4至請求項5中任一項所限定； 較佳地，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一或多種；較佳地，該藥物組合物還包含蒿甲醚； 較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
  7. 一種如式A所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物在製備用於抑制冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖的藥物中的用途；
    Figure 03_image001
    式A 其中： R a、R b各自獨立地選自H、C1-C6烷基； 較佳地，R a、R b各自獨立地選自正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基； 更佳地，R a、R b各自獨立地選自正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基。
  8. 如請求項7所述之用途，其中，式A所示化合物的結構如式I所示，
    Figure 03_image004
    式I。
  9. 一種藥物組合物在製備用於抑制冠狀病毒（較佳SARS-CoV-2）在細胞（例如哺乳動物細胞）中複製或繁殖的藥物中的用途，該藥物組合物包含式A所示的化合物，或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其水合物，式A所示的化合物如請求項7至請求項8中任一項所限定； 較佳地，該藥物組合物還包含蒿乙醚、蒿甲醚、青蒿酮、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、青蒿乙素、青蒿酸、青蒿素的一種或多種；較佳地，該藥物組合物還包含蒿甲醚； 較佳地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體或輔料，具體地，該藥物組合物為固體製劑、注射劑、外用製劑、噴劑、液體製劑、或複方製劑。
  10. 如請求項7或請求項9所述之用途，其中該哺乳動物包括牛科動物、馬科動物、羊科動物、豬科動物、犬科動物、貓科動物、齧齒類動物、靈長類動物，例如是人、貓、狗或豬。
TW110126933A 2020-07-24 2021-07-22 苯芴醇及其衍生物在治療冠狀病毒感染方面的應用 TWI800875B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010722678.6 2020-07-24
CN202010722678.6A CN111686096B (zh) 2020-07-24 2020-07-24 苯芴醇及其衍生物在制备治疗冠状病毒感染方面的药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW202224673A true TW202224673A (zh) 2022-07-01
TWI800875B TWI800875B (zh) 2023-05-01

Family

ID=72486782

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW110126933A TWI800875B (zh) 2020-07-24 2021-07-22 苯芴醇及其衍生物在治療冠狀病毒感染方面的應用

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20230263748A1 (zh)
EP (1) EP4209209A1 (zh)
JP (1) JP2023534723A (zh)
CN (1) CN111686096B (zh)
TW (1) TWI800875B (zh)
WO (1) WO2022017431A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111686096B (zh) * 2020-07-24 2021-05-14 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 苯芴醇及其衍生物在制备治疗冠状病毒感染方面的药物中的应用
CN111803491A (zh) * 2020-07-24 2020-10-23 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 青蒿素类化合物在治疗冠状病毒感染方面的应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1029680C (zh) * 1988-11-10 1995-09-06 军事医学科学院微生物流行病研究所 抗疟新药苯芴醇的合成新工艺
CN111686096B (zh) * 2020-07-24 2021-05-14 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 苯芴醇及其衍生物在制备治疗冠状病毒感染方面的药物中的应用
CN111803491A (zh) * 2020-07-24 2020-10-23 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 青蒿素类化合物在治疗冠状病毒感染方面的应用

Also Published As

Publication number Publication date
JP2023534723A (ja) 2023-08-10
US20230263748A1 (en) 2023-08-24
CN111686096B (zh) 2021-05-14
EP4209209A1 (en) 2023-07-12
CN111686096A (zh) 2020-09-22
TWI800875B (zh) 2023-05-01
WO2022017431A1 (zh) 2022-01-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI805952B (zh) 取代氨基丙酸酯類化合物在治療SARS-CoV-2感染中的應用
WO2022017439A1 (zh) 青蒿素类化合物在治疗冠状病毒感染方面的应用
TWI798593B (zh) 法匹拉韋在治療冠狀病毒感染方面的應用
WO2022017304A1 (zh) 大麻二酚在治疗冠状病毒感染中的应用
WO2021147272A1 (zh) 苯甲酸酯类化合物在治疗SARS-CoV-2感染方面的应用
WO2022017431A1 (zh) 苯芴醇及其衍生物在治疗冠状病毒感染方面的应用
WO2021147273A1 (zh) 硝唑尼特及其活性形式替唑尼特在治疗SARS-CoV-2感染中的应用
WO2021155651A1 (zh) 4-氨基喹啉类化合物在治疗冠状病毒感染方面的应用
WO2021155654A1 (zh) 利托那韦在治疗SARS-CoV-2感染方面的应用