TW202210627A - 屬於芽孢桿菌屬之菌株及使用該菌株之微生物農藥 - Google Patents

Abstract

本發明的課題為提供一種作為生物農藥，可安全使用之土壤傳染性植物病害防除劑等。 本發明的解決手段藉由將於以往的發現所未知悉之土壤傳染性植物病害的防除作用之芽孢桿菌、虛構芽胞桿菌屬細菌新穎菌株的活菌體或包含該活菌體之培養物作為有效成分，可提供一種蔬菜類青枯病防除劑等之土壤傳染性植物病害防除劑等。本防除劑其特徵為可將起因於土壤細菌之Ralstonia solanacearum species complex之青枯病(bacterial wilt disease)及/或軟腐病(bacterial soft rot)藉由莖葉散布處理防除的點。

Description

屬於芽孢桿菌屬之菌株及使用該菌株之微生物農藥

本發明係關於藉由進行地上部散布，於因來自根之感染導致之青枯病等，有效之土壤傳染性植物病害防除劑及/或較以往株可更短時間培養之芽孢桿菌(Bacillus)屬等之細菌菌株。

因病原性細菌導致之農作物病害(植物病害)的防除，對全世界之農業關係者而言係非常重要之課題，對此進行了耕種的防除及殺菌消毒劑的使用等之對應。惟，細菌性植物病害當中，即使使用這般的耕種的防除或殺菌消毒劑等，亦存在防除困難者。

例如，蔬菜類青枯病係因棲息在土壤中之細菌即青枯病菌種複合體(Ralstonia solanacearum species complex)所引起之土壤傳染性病害，於蕃茄、茄子、青椒、馬鈴薯等，感染到此青枯病菌時，由於植物全體急速萎凋，最後枯死，故大幅影響對作物的生產性。又，由於本菌係將熱帶、亞熱帶、溫帶地域為中心分布在世界各地，上述之茄科植物為中心感染200種以上的作物，而受到被害，青枯病是在農業場面之深刻且重要的問題之一。

而且，目前為止已考量多數青枯病防除方法，例如，雖已進行化學農藥的使用或太陽光消毒、還原消毒等之土壤消毒、抵抗性砧木的品種育成等，但由於即使已藉由土壤消毒等殺菌土壤表面之菌，青枯病菌亦可長期間生存在土壤深部(50cm~1m位)，故亦有土壤殺菌劑等無法到達這般的深度的情況，完全從土壤中排除本菌為困難。又，針對抵抗性品種，抵抗性並不完全，有因環境條件導致效果不充分的情況。進而，雖亦有青枯病抵抗性誘導劑(專利文獻1)等之提案，但此亦非發揮充分效果者。

因此，於近年來，於病原體存在於土壤的條件下，作為以拮抗作用抑制植物體的發病之防除方法，提案有使用生物農藥之方法。針對青枯病菌，目前為止，雖研究藉由使用假單胞菌(Pseudomonas)屬、芽孢桿菌(Bacillus)屬等之各菌株的微生物農藥之防除(非專利文獻1)，但此等之生物農藥中防除效果並不充分。又，雖嘗試了藉由包含複數種微生物之堆肥投入，防除青枯病，但其有效性並並清楚，對防除失敗之例亦多。又，此等藉由對土壤進行處理雖顯示效果，但此等之方法有必要於土壤、根圏及植物體內定著拮抗菌，但於非常多樣的條件下之土壤，顯示常時安定之效果困難的情況為多，又，於植物體內，未顯示病原性之菌株的定著及增殖本身為困難的情況亦多，變成使用生物農藥之防除方法無法確立的要因之一。

在這般的技術背景，當業界中，強烈期望不僅具有充分之基本活性，於植物體內不會顯示病原性，對於使用可於土壤或植物體等定著且增殖之微生物，如青枯病等之以往防除困難之土壤傳染性植物病害，亦發揮充分之(實用的且安定的)防除效果，作為農藥可安全使用之土壤傳染性病害防除劑等之開發及商品化。 [先前技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1]日本特開2012-211124號公報 [非專利文獻]

[非專利文獻1]化學與生物Vol.51(2013)No.8 p.541~ 547

[發明欲解決之課題]

本發明係以提供一種在實際的作物生產現場，發揮安定的土壤傳染性植物病害防除效果，作為生物農藥可安全使用之植物非病原性的菌株，及使用該菌株之土壤傳染性植物病害防除劑等為目的而完成者。 此外，由於青枯病是因棲息在土壤中之細菌所引起之病害，故通常進行所謂灌溉處理、土壤燻蒸之土壤處理。然而，如上述，對土壤處理有幾個不利的點。 本發明為了克服此點，係以提供一種新穎且有效果的處理方法、構成要件為目的而完成者。 [用以解決課題之手段]

為了達成上述目的，本發明者們從各方面進行研究的結果，從各種處理當中，注重在微生物處理，進而努力研究的結果，首次發現於以往之發現所未被知悉之屬於芽孢桿菌屬之新穎菌株，儘管是土壤病害，並非土壤處理，而是藉由僅進行作物之地上部處理，例如莖葉處理，或土壤處理亦藉由與此併用，即使將土壤傳染性病害之青枯病作為施用部位，即所謂間接性施用，亦可充分有效果地防除。 換言之，為了達成上述目的，本發明者們努力研究的結果，發現藉由將於以往之發現所未被知悉之屬於芽孢桿菌屬之新穎菌株莖葉散布在植物體，對不進行直接接觸之土壤傳染性植物土壤病害的防除等發揮實用的效果，且發現於實際之作物生產現場亦可安全使用。又，本菌株與含有以往之芽孢桿菌屬細菌的植物病害防除劑相比較，發現可於短時間培養，將本菌株作為有效成分之防除劑可於短時間且迅速製造，而終至完成本發明。

亦即，本發明之實施形態係如以下。 (1)一種新穎細菌菌株之枯草桿菌(Bacillus sp.)G4L1菌株(NITE BP-03204)。 (2)一種新穎細菌菌株之提蒙芽孢桿菌(Bacillus timonensis)G5S1菌株(NITE BP-03206)。 (3)一種新穎細菌菌株之Fictibacillus solisalsi G5L2菌株(NITE BP-03205)。 (4)如(1)~(3)中任一項所記載之菌株，其特徵為藉由施用在植物的種子、植物體的根部、植物體的莖葉部、栽培用載體、營養液、土壤之至少一個，可防除植物病害。 (5)如(1)~(3)中任一項所記載之菌株，其特徵為增殖速度快速。 (6)一種植物病害防除劑，其特徵為將如(1)~(3)中任一項所記載之1以上之菌株或該菌株的培養物作為有效成分含有。 (7)如(6)所記載之劑，其特徵為藉由施用在植物的種子、植物體的根部、植物體的莖葉部、栽培用載體、營養液、土壤之至少一個，可防除植物病害。 (8)如(6)或(7)所記載之劑，其特徵為可防除蔬菜類、果樹類、米類、麥類之至少一個的病害。 (9)如(6)~(8)中任一項所記載之劑，其特徵為可防除茄科植物及/或十字花科植物的病害。 (10)如(7)~(9)中任一項所記載之劑，其特徵為藉由施用在植物體的莖葉，可防除土壤傳染性植物病害。 (11)如(10)所記載之劑，其特徵為可防除蔬菜類青枯病及/或蔬菜類軟腐病。 (12)一種植物病害防除方法，其係包含將如(1)~(3)中任一項所記載之1以上的菌株之活菌體或包含該活菌體之培養物，與植物的種子、植物體的根部、地上部、栽培用載體、營養液、土壤接觸或混合之步驟而成。 (13)如(12)所記載之方法，其特徵為防除蔬菜類、果樹類、米類、麥類之至少一個的病害。 (14)如(12)或(13)所記載之方法，其特徵為防除茄科植物及/或十字花科植物的病害。 (15)如(12)~(14)中任一項所記載之方法，其特徵為藉由施用在植物體的莖葉，防除土壤傳染性植物病害。 (16)如(12)~(15)中任一項所記載之方法，其特徵為防除蔬菜類青枯病及/或蔬菜類軟腐病。

又，本發明之其他實施形態係如以下。 (17)一種新穎細菌菌株之枯草桿菌(Bacillus sp.)G4L1菌株(NITE BP-03204)。 (18)一種新穎細菌菌株之提蒙芽孢桿菌(Bacillus timonensis)G5S1菌株(NITE BP-03206)。 (19)一種新穎細菌菌株之Fictibacillus solisalsi G5L2菌株(NITE BP-03205)。 (20)如(17)~(19)中任一項所記載之菌株，其特徵為藉由施用在植物體的莖葉，可防除植物土壤病害，增殖速度快速。 (21)一種植物病害防除劑，其特徵為將如(17)~(20)所記載之1以上的菌株或該菌株的培養物作為有效成分含有。 (22)如(21)所記載之劑，其係土壤傳染性植物病害防除劑。 (23)如(22)所記載之劑，其係蔬菜類青枯病防除劑。 (24)如(21)~(23)中任一項所記載之劑，其係茄科植物之病害防除劑。 (25)一種植物病害防除方法，其係包含將如(17)~(20)所記載之1以上的菌株之活菌體或包含該活菌體之培養物與植物體及/或土壤(尤其是根圏土壤)接觸之步驟而成。 (26)如(25)所記載之方法，其特徵為防除土壤傳染性植物病害。 (27)如(26)所記載之方法，其特徵為防除蔬菜類青枯病。 (28)如(25)~(27)中任一項所記載之方法，其特徵為防除茄科植物的病害。 (29)一種土壤傳染性植物病害之蔬菜類青枯病的防除方法，其特徵為僅將如(23)所記載之蔬菜類青枯病防除劑散布在植物體的地上部，即發揮防除效果。 (30)如(17)~(20)中任一項(一種)所記載之菌株，其係如(17)~(20)中任一項(一種)所記載之菌株，增殖速度快速作為特徵，其特徵為相對於至得到600nm吸光度測定值3.00~3.50為止所需要的培養時間，在以往之芽孢桿菌屬細菌，(約)15小時以上，該菌株為(約)10小時，短時間增殖。 (31)如(30)所記載之菌株，其係相對於在以往之芽孢桿菌屬細菌，其特徵為至得到600nm吸光度測定值3.00~ 3.50為止所需要的培養時間為14~16小時，該菌株為9~12小時，詳細為9~11小時，更詳細為9~10小時。 (32)一種迅速製造如(21)或(22)所記載之防除劑的方法，其特徵為培養如(17)~(20)、(30)、(31)中任一項(一種)所記載之增殖速度快速之菌株，以短時間取得該菌株及/或其培養物，以短時間製造將此或此等作為有效成分之防除劑。 [發明效果]

根據本發明，可提供一種於青枯病等之以往防除為困難之土壤傳染性植物病害防除，於對地上部之散布顯示顯著的效果(實用的且安定的效果)，且可在實際的作物生產現場安全使用，與含有以往之芽孢桿菌屬之土壤傳染性植物病害防除劑相比較，可短時間培養之土壤傳染性植物病害防除劑等。

為了達成上述目的，本發明者們從各方面研究的結果，注重在微生物處理，廣泛探索微生物。其結果，本發明者們首次發現分離成功之細菌菌株係以往未知之新穎菌株，而且對青枯病之原因菌進行拮抗之所謂新穎具有有用的作用。此外，進而針對施用方法進行研究的結果，得到完全超出預期，藉由將土壤細菌之青枯病菌， 並非土壤處理，而是散布在植物體地上部例如莖葉，即所謂可藉由間接性處理防除之完全新穎的發現。

亦即，本發明係首次發現新穎細菌菌株的分離、藉由該菌株之青枯病的防除、而且藉由莖葉散布之防除所謂的新穎條件，進而，有機地結合此等，進一步研究的結果而終至完成者。

首先，於本發明，作為土壤傳染性植物病害防除劑等之有效成分，係使用屬於芽孢桿菌(Bacillus)屬或虛構芽胞桿菌(Fictibacillus)屬之菌株。尚，本發明中，所謂「土壤傳染性植物病害」，係意指藉由病原體感染有用植物的地下部而產生之被害。主要雖為因棲息在土壤中之病原體而導致，但並非被限定於此。 又，本說明書中，於以下雖將青枯病的防除為中心進行說明，但對於軟腐病等之同樣土壤傳染性植物病害，本發明亦發揮有效的效果。

尤其是皆為在岐阜縣岐阜市柳戸1-1(岐阜大學校園內)，由蕃茄葉單離之菌株，以細菌學的性質及藉由16SrRNA基因之基因組序列 之系統解析鑑定時，非常清楚是屬於植物非病原性之芽孢桿菌屬菌･虛構芽胞桿菌屬菌之新菌株的芽孢桿菌屬G4L1菌株、提蒙芽孢桿菌(Bacillus timonensis)G5S1菌株、Fictibacillus solisalsi G5L2菌株，或是此任一個菌株之變異株，更佳為使用保持與該菌株同等之性質者。尚，從使用API20NE之套組(Sysmex BioMérieux股份有限公司製品)進行之試驗，非常清楚G4L1菌株及G5S1菌株、G5L2菌株分別具有如以下所示之細菌學的性質。

＜G4L1菌株＞ G4L1菌株之菌學的性質係如以下。

(A)形態學的性質 形態：桿菌 大小：0.9~1.0μm×2.0~8.0μm 運動性：無 (B)培養的性質 菌落的顏色：薄黃色~薄帶綠之黃色 菌落的形態：不規則狀、隆起：偏平、周緣：波狀 (C)生理學的性質 革蘭氏染色性：陽性 最適生育pH：中性區域(pH6.5-8.0) 最適生育溫度：35℃ 硝酸鹽的還原：+ 吲哚生成(色胺酸)：- 葡萄糖發酵：- 精胺酸二水解酶：+ 尿素酶：- 水解(β-葡萄糖苷酶)：+ 水解(蛋白酶)：+ 同化(葡萄糖)：+ 同化(阿拉伯糖)：+ 同化(甘露糖)：+ 同化(甘露糖醇)：+ 同化(N-乙醯基-葡萄糖胺)：+ 同化(麥芽糖)：+ 同化(葡萄糖酸鉀)：+ 同化(癸酸)：- 同化(己二酸)：+ 同化(蘋果酸鹽)：+ 同化(檸檬酸三鈉)：+ 同化(乙酸苯酯)：+ 本菌株不僅具有優異之青枯病防除作用，而且具有僅藉由植物之地上部處理，即可防除土壤傳染性植物病害之青枯病及軟腐病所謂獨特的作用。

進而，針對G4L1菌株，進行用以種鑑定之基因組解析。基因組解析的方法係如以下。

400鹼基長之條碼化由G4L1株提取之DNA。使用IonPGM(商標)Hi-Q(商標)ViewOT2 kit-400(Thermo Fisher SCIENTIFIC公司)進行資料庫化，使用次世代定序儀用前處理裝置之Ion OneTouch(商標)2 System(Thermo Fisher SCIENTIFIC公司)進型模板調製。將所得之模板使用Ion PGM Sequencing Hi-Q View kit(Thermo Fisher SCIENTIFIC公司)與Ion 318 Chip version 2(Thermo Fisher SCIENTIFIC公司)，在次世代定序儀Ion PGM(商標)解讀鹼基配列。確認所得之鹼基配列的質量後，去除銜接子。使用解析軟體之CLC Genomics Workbench version 12 (QIAGEN公司)，進行全新基因組定序(de novo assembly)，並進行基因組配列解讀。針對所得之配列，使用TrueBac ID system version 1.92(Chunlab公司)，根據近緣種與全基因組比較，進行藉由ANI值之種鑑定。

又，於Genome-to-Genome Distance Calculator ver 2.1 webserver(Leibniz Institute DSMZ)使用BLAST+ method(Camacho et al. 2009)，實施近緣之參照菌株及基準菌株與digital DNA-DNA hybridization，算出GGDC (formula 2)值。

將基因組解析結果示於表1。ANI值任一近緣參照菌株、基準株皆為95%以下，且與近緣參照菌株、基準菌株之GGDC(formula 2值)亦為27.3~56.3%。根據參考文獻1(Proc.Natl.Acad.Sci.USA November 10, 2009 106(45) 19126-19131)，ANI值為95%以下者視為新種，根據參考文獻2(Stand Genomic Sci February 28, 2010, 2(1) 117-134)、參考文獻3(Int J Syst Evol Microbiol January 1, 2007, 57(1) 81-91)，認為由於GGDC(formula 2值)為70%以下者視為新種，故G4L1株為新種。

＜G5S1菌株＞ G5S1菌株之菌學的性質係如以下。

(A)形態學的性質 形態：桿菌 大小：0.8~1.3μm×2.5~5.5μm 運動性：有 (B)培養的性質 菌落的顏色：薄帶紅之黃色~薄黃色(半透明) 菌落的形態：圓形、隆起：凸圓狀、周緣：全緣 (C)生理學的性質 革蘭氏染色性：陽性 最適生育pH：中性區域(pH6.5-7.5) 最適生育溫度：40℃ 硝酸鹽的還原：+ 吲哚生成(色胺酸)：- 葡萄糖發酵：- 精胺酸二水解酶：- 尿素酶：- 水解(β-葡萄糖苷酶)：+ 水解(蛋白酶)：- 同化(葡萄糖)：+ 同化(阿拉伯糖)：- 同化(甘露糖)：- 同化(甘露糖醇)：- 同化(N-乙醯基-葡萄糖胺)：+ 同化(麥芽糖)：+ 同化(葡萄糖酸鉀)：- 同化(癸酸)：- 同化(己二酸)：- 同化(蘋果酸鹽)：- 同化(檸檬酸三鈉)：- 同化(乙酸苯酯)：- 本菌株不僅具有優異之青枯病防除作用，而且具有僅藉由植物之地上部處理，即可防除土壤傳染性植物病害之青枯病及軟腐病所謂獨特的作用。

＜G5L2菌株＞ G5L2菌株之菌學的性質係如以下。

(A)形態學的性質 形態：桿菌 大小：0.8~1.3μm×3.4~9.0μm 運動性：有 (B)培養的性質 菌落的顏色：薄帶綠之黃色 菌落的形態：圓形、隆起：中心凸狀、周緣：全緣 (C)生理學的性質 革蘭氏染色性：陽性 最適生育pH：中性區域(pH6.5前後) 最適生育溫度：40℃ 硝酸鹽的還原：- 吲哚生成(色胺酸)：- 葡萄糖發酵：- 精胺酸二水解酶：- 尿素酶：- 水解(β-葡萄糖苷酶)：+ 水解(蛋白酶)：+ 同化(葡萄糖)：+ 同化(阿拉伯糖)：+ 同化(甘露糖)：+ 同化(甘露糖醇)：+ 同化(N-乙醯基-葡萄糖胺)：+ 同化(麥芽糖)：+ 同化(葡萄糖酸鉀)：+ 同化(癸酸)：- 同化(己二酸)：+ 同化(蘋果酸鹽)：+ 同化(檸檬酸三鈉)：- 同化(乙酸苯酯)：+ 本菌株不僅具有優異之青枯病防除作用，而且具有僅藉由植物之地上部處理，即可防除土壤傳染性植物病害之青枯病及軟腐病所謂獨特的作用。

G4L1菌株、G5S1菌株、G5L2菌株係於獨立行政法人製品評估技術基盤機構･特許微生物寄託中心(〒292-0818日本國千葉縣木更津市Kazusa鎌足2-5-8)，分別皆於2020年(令和2年)4月20日被國際寄託，其寄託編號分別為NITE BP-03204及NITE BP-03206、NITE BP-03205。

可使用在屬於芽孢桿菌屬或虛構芽胞桿菌屬之菌株的培養之培養基，若該菌株為可增殖者，則可為任意者。例如，除了肉汁(Bouillon)培養基等一般的培養基之外，亦可列舉包含葡萄糖、蛋白腖(Peptone)、酵母萃取物之培養基等。又，於液體培養基以外，可使用加洋菜之斜面培養基及平板培養基等之固體培養基。

作為培養基之碳源，可利用可同化屬於芽孢桿菌屬或虛構芽胞桿菌屬之菌株所有者。具體而言，可列舉可利用葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、澱粉水解物、糖蜜等、屬於芽孢桿菌屬之菌株的各種合成或天然碳源。又，作為培養基之氮源，同樣一開始可利用蛋白腖、肉萃取物、酵母萃取物、大豆粕等之有機氮含有物，再可利用可利用該菌株之各種合成或天然物。進而，依照微生物培養之常法，如有必要亦可添加食鹽、磷酸鹽等之無機鹽類、鈣、鎂、鐵等之金屬的鹽類、維他命、胺基酸、核酸關連物質等之微量營養源。進而，如有必要亦可添加消泡劑等之各種添加劑。

而且，屬於芽孢桿菌屬或虛構芽胞桿菌屬之菌株的培養可於振盪培養法、通氣培養法等之有氧的條件下進行。培養條件雖並非被限定於此，但定為溫度為20~45℃，較佳為30~40℃，pH為5~8，較佳為6~7，培養期間為0.5~2天，較佳為1~1.5天即可。

本菌株增殖速度快速亦作為重要的特徵之一具有者。上述培養期間係作為以確實得到充分之菌體濃度般一般的規則而規定者，雖定為0.5天(亦即12小時)以上，(雖亦因培養規模等而異)其以下，例如，由於即使於(約)7~10小時之非常短的培養期間，亦可得到可耐得住實用之菌體濃度，故並非排除此短培養期間者。 如此，所謂有效成分微生物的培養所需要之時間短，就目前而言，有關本發明之微生物防除劑的製造僅是迅速進行。據此，本發明亦有助於該微生物防除劑之迅速製造方法者。又，在培養中之污染的風險亦可大幅減輕。

如以上的方式進行所培養之屬於芽孢桿菌屬及/或虛構芽胞桿菌屬之菌株，不會分離菌體，而是以包含活菌體之培養物的狀態，可作為土壤傳染性植物病害防除劑等之有效成分使用。又，從上述培養物，亦可將通常之方法，例如藉由膜分離或離心分離等之處理，將分離活菌體，且如有必要進行洗淨之培養分離菌體自體或其處理物(培養分離菌體與其他成分之混合物等)作為有效成分使用。進而，亦可以將上述培養物或經分離之活菌體藉由凍結乾燥、噴霧乾燥等之方法乾燥之乾燥物，或藉由此等之液體或固體之稀釋物等之狀態使用。又，依照農藥製劑之慣用的方法等，亦可與各種之添加物一起於各種之劑型以經製劑化的狀態使用。作為該劑型，例如可列舉粒劑、乳劑、水合劑、流動劑等。

有關本發明之土壤傳染性植物病害防除劑等所包含之活菌體的濃度，只要能發揮所期望的效果，雖並未特別限制，但如果菌濃度太少時，則得不到充分之結果，反之，如果菌濃度過多，由於有菌被浪費的情況，故例如作為液劑，進行調製來使用時，亦可於1×10⁵ ~ 1×10¹¹ cfu/ml的範圍適當調整，期望1×10⁶ ~1×10¹⁰ cfu/ml的範圍為合適。於此，在本發明，所謂「cfu」係指菌落形成單位(Colony Forming Unit)。尚，即使在使用培養物的情況，依據上述活菌體濃度適當設計即可。菌濃度雖可用「cfu」表示，但亦可以600nm吸光度(OD₆₀₀ )測定值表示。例如，OD₆₀₀ 之測定值1.0以NB培養基、30℃、200rpm、24小時振動培養的條件，枯草桿菌G4L1菌株大概相當於2.3×10⁷ cfu/ml，提蒙芽孢桿菌G5S1菌株大概相當於1.4×10⁷ cfu/ml，Fictibacillus solisalsi G5L2菌株大概相當於1.6×10⁸ cfu/ml。惟，因菌株的狀態、培養條件並非一定成為此值。

本發明係將防除植物病害，例如屬於植物病原性之青枯病菌種複合體(Ralstonia solanacearum species complex)之細菌作為病原體之茄科植物(茄子、蕃茄、青椒、辣椒、馬鈴薯(Potato)等之茄科蔬菜類)、葫蘆科植物(黃瓜、苦瓜等之葫蘆科蔬菜類)等之青枯病變可能。尚，在本發明所謂「防除」，係意指藉由防止感染到有用植物作為對象之土壤傳染性植物病原菌等，來回避該植物病害等。

有關本發明之植物病害防除劑等可直接施用，或是可以水等稀釋來施用。作為藥劑之施用方法並未特別限定，例如，可列舉於直接作物或種子以散布或浸漬等使其附著之方法、散布在土壤之方法、添加在作物或土壤之水或添加在肥料之方法、對農機具處理之方法等。其中，更適合為直接散布在作物之方法。如此，藉由於根、莖、葉、種子等之植物體上，或是於其栽培土壤中存在有關本發明之土壤傳染性植物病害防除劑等，來抑止各種之土壤傳染性植物病害。

本發明並非將土壤細菌以土壤散布，而是於藉由莖葉散布，亦即藉由作物之地上部處理可防除的點非常獨特。土壤處理係將灌溉作業所謂繁重的作業作為必要，需要多量的藥劑，因此，雖有引起污染水或周圍的環境之公害的風險，但於莖葉散布，這般的風險被大幅減輕，故本發明係非常優異。 由於青枯病係因土壤細菌而引起者，若通常，一般則認為是藉由土壤處理防除。本案發明違反這般的技術常識，於僅藉由負担少之植物地上部處理，發揮充分之青枯病防除效果這點係具有非常高之技術的價值者，亦可充分預期經濟的成功。

本發明之藥劑施用量由於因適用作物、對象病害、施用方法、發生傾向、被害的程度、環境條件、使用之劑型等而異，故雖適當調整較佳，但不能一概而定，例如可例示作物每1株之液劑處理30ml~1L，較佳為處理50ml~1L之方法等。又，施用時期此亦因對象病害或劑型等而異，但較佳為於定植前後2週之間進行適當處理。進而，由於本發明係無須擔心耐性菌出現的微生物農藥，故於數日間之連續使用或於連作之連用亦可能。

進而，有關本發明之土壤傳染性植物病害防除劑等，如有必要可與其他肥料、農藥、例如殺菌劑、抗病毒劑、殺蟲劑、殺蟎劑、殺線蟲劑、共力劑、引誘劑、除草劑、植物生長調整劑等併用。此情況下，可以不會對有效成分之菌株給予較大之影響的條件進行混合劑化來施用，又，可分別時間施用，或是可兩者同時施用。

接著，雖將可混用或併用之公知之殺菌劑(殺菌活性成分)或病害防除劑化合物例示於以下，但並非被限定於此等之例者。

殺菌活性成分或病害防除劑化合物： 放射形農桿菌(Agrobacterim radiobacter)、戊環唑(azaconazole)、阿拉酸式苯･S･甲基(acibenzolar-S-methyl)、嘧菌酯(azoxystrobin)、敵菌靈(anilazine)、安美速(amisulbrom)、胺基吡芬(aminopyrifen)、愛特丁(ametoctradin)、殺螟丹(aldimorph)、亞汰尼(isotianil)、吡唑萘菌胺(isopyrazam)、異丙噻菌胺(isofetamid)、異氟西波(isoflucypram)、亞賜圃(isoprothiolane)、種菌唑(ipconazole)、艾氟芬喹啉(ipflufenoquin)、抑氟康唑(ipfentrifluconazole)、依普同(iprodione)、抑發利(iprovalicarb)、丙基喜樂松(iprobenfos)、依滅列(imazalil)、克熱淨烷苯磺酸鹽(iminoctadine-albesilate)、克熱淨三乙酸鹽(iminoctadine-triacetate)、易胺座(imibenconazole)、應吡福安(inpyrfluxam)、應普馬汀A(imprimatin A)、應普馬汀B(imprimatin B)、護粒松(edifenphos)、乙環唑(etaconazole)、噻唑菌胺(ethaboxam)、依瑞莫菌胺(ethirimol)、乙氧基喹啉(ethoxyquin)、依得利(etridiazole)、烯髒菌酯(enestroburin)、烯肟菌酯(enoxastrobin)、依普座(epoxiconazole)、有機油(organic oils)、毆殺斯(oxadixyl)、噁嗪拉唑(oxazinylazole)、奧賽普林(oxathiapiprolin)、嘉保信(oxycarboxin)、氧喹啉銅(oxine-copper)、氧四環素(oxytetracycline)、噁咪唑反丁烯二酸鹽(oxpoconazole-fumarate)、歐索林酸(oxolinic acid)、辛酸銅(copper dioctanoate)、辛噻酮(octhilinone)、甲呋醯胺(ofurace)、肟醚菌胺(orysastrobin)、鄰苯基酚(o-phenylphenol)、嘉賜黴素(kasugamycin)、四氯丹(captafol)、加普胺(carpropamid)、貝芬替(carbendazim)、萎鏽靈(carboxin)、香旱芹酮(carvone)、假絲酵母(Candida oleophila)、佐氏假絲酵母(Candida saitoana)、快諾芬(quinoxyfen)、昆諾浮美林(quinofumelin)、蟎離丹(chinomethionat)、克菌丹(captan)、氟喹唑(quinconazole)、五氯硝基苯(quintozene)、克熱淨(guazatine)、鋅錳(cufraneb)、甲香菌酯(coumethoxystrobin)、丁香菌酯(coumoxystrobin)、鏈孢黏帚黴菌(Gliocradium catenulatum)、白色隱球酵母孢菌(Cryptococcus albidus)、克收欣(kresoxim-methyl)、克拉康(clozylacon)、粉紅螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)、乙菌利(chlozolinate)、氯吲哚醯肼(chloroinconazide)、四氯異苯(chlorothalonil)、地茂散(chloroneb)、毛殼菌(Chaetomium cupreum)、微坦盾殼黴(Coniothyrium minitans)、賽座滅(cyazofamid)、乙黴威(diethofencarb)、雙氯氰菌胺(diclocymet)、益發靈(dichlofluanid)、二氯苯賽斯(dichlobentiazox)、達滅淨(diclomezine)、大克爛(dicloran)、二氯酚(dichlorophen)、腈硫醌(dithianon)、達克利(diniconazole)、達克利･M(diniconazole-M)、鋅乃浦(zineb)、敵蟎普(dinocap)、大芬滅替(dipymetitrone)、二苯基胺(diphenylamine)、待克利(difenoconazole)、環氟菌胺(cyflufenamid)、二氟林(diflumetorim)、環克座(cyproconazole)、賽普洛(cyprodinil)、矽氟唑(simeconazole)、二甲嘧酚(dimethirimol)、二甲基二硫化物(dimethyl disulfide)、達滅芬(dimethomorph)、克絕(cymoxanil)、醚菌胺(dimoxystrobin)、絮絨擬酵母(Pseudozyma flocculosa)、致金黃色假單胞菌(Pseudomonas aureofaciens)、綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、丁香假單胞菌(Pseudomonas syringae)、螢光假單胞菌(Pseudomonas flurorescens)、羅氏假單胞菌(Pseudomonas rhodesiae)、福美鋅(ziram)、矽噻菌胺(silthiofam)、夏南瓜黃斑鑲嵌病毒弱毒株(Zucchini yellow mosaic virus)、鏈黴素(streptomycin)、灰綠鏈黴菌(Streptomyces griseoviridis)、鏈黴菌(Streptomyces lygicus)、螺噁茂胺(spiroxamine)、環丙吡菌胺(sedaxane)、辛菌胺(seboctylamine)、座賽胺(zoxamide)、苯并烯氟菌唑(solatenol)、邁隆(dazomet)、大孢籃狀菌(Talaromyces flavus)、噻醯菌胺(tiadinil)、腐絕(thiabendazole)、得恩地(thiram)、多保淨(thiophanate)、甲基多保淨(thiophanate-methyl)、賽氟滅(thifluzamide)、得恩地(thiram)、四氯硝基苯(tecnazene)、克枯爛(tecloftalam)、四克利(tetraconazole)、咪菌威(debacarb)、得克利(tebuconazole)、異丁乙氧喹啉(tebufloquin)、特比萘芬(terbinafine)、多果定(dodine)、嗎菌靈(dodemorph)、三泰隆(triadimenol)、三泰芬(triadimefon)、三挫磷(triazoxide)、水楊菌胺(trichlamide)、三環吡菌威(triclopyricarb)、棘孢木黴菌 (Trichoderma asperellum)、深綠木黴(Trichoderma atroviride)、蓋氏木黴(Trichoderma gamsii)、子座木黴(Trichoderma stromaticum)、哈氏拉法木黴(Trichoderma harzianum)、綠木黴(Trichoderma viride)、青綠木黴(Trichoderma virens)、多孢木黴(Trichoderma polysporum)、木素木黴(Trichoderma lignorum)、三賽唑(tricyclazole)、滅菌唑(triticonazole)、三得芬(tridemorph)、賽福座(triflumizole)、三氟敏(trifloxystrobin)、賽福寧(triforine)、托福寧(tolylfluanid)、脫克松(tolclofos-methyl)、甲磺菌胺(tolnifanide)、托普洛卡(tolprocarb)、代森鈉(nabam)、鏈黴菌素(natamycin)、萘替芬(naftifine)、氯啶(nitrapyrin)、酞菌酯(nitrothal-isopropyl)、尼瑞莫(nuarimol)、壬基酚磺酸銅(copper nonyl phenol sulphonate)、多黏類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)、洋蔥假單胞菌(Barkholderia cepacia)、液化澱粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)、簡單芽孢桿菌(Bacillus simplex)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、短小芽胞桿菌(Bacillus pumilus)、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)、免疫球蛋白(harpin protein)、爭論貪嗜菌(Variovorax paradoxus)、維利黴素(validamycin)、氯氟氰菊酯(valifenalate)、成團泛菌(Pantoea agglomerans)、四唑吡氨酯(picarbutrazox)、聯苯吡菌胺(bixafen)、啶氧菌酯(picoxystrobin)、寡雄腐霉(Pythium oligandrum)、氟唑菌醯羥胺(pydiflumetofen)、聯苯三唑醇(bitertanol)、樂殺蟎(binapacryl)、檜木醇(hinokitiol)、非病原性細菌性軟腐病菌(Erwinia carotovora)、非病原性葡萄根瘤菌(Rhizobium vitis)、聯苯(biphenyl)、粉病靈(piperalin)、殺紋寧(hymexazol)、唑菌酯(pyraoxystrobin)、百克敏(pyraclostrobin)、必記福敏(pyraziflumid)、白粉松(pyrazophos)、吡普洛潑尼(pyrapropoyne)、唑胺菌酯(pyrametostrobin)、甲氧苯啶菌(pyriofenone)、啶菌唑(pyrisoxazole)、必噠克緹(pyridachlometyl)、啶斑肟(pyrifenox)、稗草丹(pyributicarb)、吡菌苯威(pyribencarb)、嘧黴胺(pyrimethanil)、百快隆(pyroquilon)、免克(vinclozolin)、福美鐵(ferbam)、噁唑菌酮(famoxadone)、葉枯淨(phenazine oxide)、咪唑菌酮(fenamidone)、烯肟菌胺(fenaminstrobin)、芬瑞莫(fenarimol)、芬諾尼(fenoxanil)、富米綜(ferimzone)、拌種咯(fenpiclonil)、苯吡克咪徳(fenpicoxamid)、胺苯吡菌酮(fenpyrazamine)、芬克座(fenbuconazole)、甲呋醯苯胺(fenfuram)、苯銹啶(fenpropidin)、芬普福(fenpropimorph)、環醯菌胺(fenhexamid)、福爾培(folpet)、熱必斯(phthalide)、尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)、布瑞莫(bupirimate)、麥穗寧(fuberidazole)、保米黴素-S(blasticidin-S)、福拉比(furametpyr)、呋霜靈(furalaxyl)、呋喃羧酸(furancarboxylic acid)、扶吉胺(fluazinam)、氟因菌唑(fluindapyr)、氟啼菌酯(fluoxastrobin)、氟㗁派啉(fluoxapiprolin)、fluoxytioconazole、氟比來(fluopicolide)、氟醚菌醯胺(fluopimomide)、氟吡菌醯胺(fluopyram)、氟醯亞胺(fluoroimide)、氟克殺(fluxapyroxad)、氟喹唑(fluquinconazole)、呋菌唑(furconazole)、呋醚唑(furconazole -cis)、護汰寧(fludioxonil)、護矽得(flusilazole)、氟硫滅(flusulfamide)、噻菌淨(flutianil)、福多寧(flutolanil)、護汰芬(flutriafol)、flufenoxadiazam、氟菌蟎酯(flufenoxystrobin)、氟苯醚醯胺(flubeneteram)、flumetylsulforim、氟醯菌胺(flumetover)、氟嗎啉(flumorph)、大伏革菌(Phlebiopsis gigantea)、普快淨(proquinazid)、撲克拉(prochloraz)、撲滅寧(procymidone)、硫菌威(prothiocarb)、丙硫菌唑(prothioconazole)、溴硝醇(bronopol)、普拔克(propamocarb-hydrochloride)、普克利(propiconazole)、甲基鋅乃浦(propineb)、撲殺熱(probenazole)、溴克座(bromuconazole)、福美昆(flometoquin)、吡啶醯菌胺(florylpicoxamid)、菲克利(hexaconazole)、本達樂(benalaxyl)、本達樂･M(benalaxyl-M)、麥銹靈(benodanil)、免賴得(benomyl)、披扶座(pefurazoate)、平克座(penconazole)、賓克隆(pencycuron)、苯并烯氟菌唑(benzovindiflupyr)、佈生(benthiazole)、苯噻菌胺(benthiavalicarb-isopropyl)、吡噻菌胺(penthiopyrad)、平氟芬(penflufen)、白克列(boscalid)、福賽得(fosetyl)(包含鋁、鈣、鈉等之鹽)、保粒黴素(polyoxin)、代森福美鋅(polycarbamate)、波爾多液(Bordeaux mixture)、代森錳銅(mancopper)、鋅錳乃浦(mancozeb)、曼普胺(mandipropamid)、杏仁菌酯(mandestrobin)、錳乃浦(maneb)、邁克尼(myclobutanil)、解殼聚糖松江菌(Mitsuaria chitosanitabida)、礦物油(mineral oils)、米多黴素(mildiomycin)、滅速克(methasulfocarb)、威百畝(metam)、滅達樂(metalaxyl)、滅達樂･M(metalaxyl-M)、metarylpicoxamid、免得爛(metiram)、美特洛(metyltetraprole)、滅特座(metconazole)、苯氧菌胺(metominostrobin)、滅芬農(metrafenone)、滅派林(mepanipyrim)、甲分三康唑(mefentrifluconazole)、消蟎多(meptyldinocap)、滅普寧(mepronil)、碘卡佈(iodocarb)、昆布糖(laminarin)、亞磷酸及鹽(phosphorous acid and salts)、鹼性氯化銅(copper oxychloride)、銀(silver)、乙酸銅(copper(II) acetate)、氧化亞銅(cuprous oxide)、氫氧化銅(copper hydroxide)、碳酸氫鉀(potassium bicarbonate)、碳酸氫鈉(sodium bicarbonate)、硫(sulfur)、硫酸氧喹啉(oxyquinoline sulfate)、硫酸銅(copper sulfate)、(3,4-二氯異噻唑-5-基)甲基 4-(tert-丁基)苯甲酸酯(化學名、CAS註冊編號：1231214-23-5)、UK-2A(編碼編號)、十二烷基苯磺酸雙乙烯二胺銅錯鹽[II](DBEDC)、乙酸三苯基錫(TPTA)、三苯基氯化錫(TPTC)、氫氧化三苯基錫(TPTH)。

接著，雖將可混用或併用之公知之殺蟲劑(殺蟲活性成分)、殺蟎劑(殺蟎活性成分)、殺線蟲劑(殺線蟲活性成分)、共力劑化合物(共力活性成分)例示於以下，但並非被限定於此等之例者。

殺蟲活性成分、殺蟎活性成分、殺線蟲活性成分、共力活性成分： 氟丙菊酯(acrinathrin)、印楝素(azadirachtin)、亞滅松(azamethiphos)、阿環那比(acynonapyr)、谷速松･乙基(azinphos-ethyl)、谷速松･甲基(azinphos-methyl)、滅蟎醌(acequinocyl)、亞滅培(acetamiprid)、乙醯蟲腈(acetoprole)、毆殺松(acephate)、亞環鍚(azocyclotin)、阿巴汀(abamectin)、雙丙環蟲酯(afidopyropen)、阿福索拉納(afoxolaner)、呋蟲胺(amidoflumet)、三亞蟎(amitraz)、棉鈴威(alanycarb)、得滅克(aldicarb)、碸滅威(aldoxycarb)、亞列寧(allethrin)[包含d-cis-trans-體、d-trans-體]、依殺松(isazophos)、氯唑磷(isamidofos)、水胺硫磷(isocarbophos)、加福松(isoxathion)、抑克斯能(isocycloseram)、甲基亞芬松(isofenphos-methyl)、滅必蝨(isoprocarb)、ε-甲氧苄氟菊酯(epsilon-metofluthrin)、ε-沒氟菊酯(epsilon-momfluorothrin)、愛獲滅(ivermectin)、依米賽松(imicyafos)、益達胺(imidacloprid)、依普寧(imiprothrin)、因得克(indoxacarb)、益化利(esfenvalerate)、愛芬克(ethiofencarb)、愛殺松(ethion)、益斯普(ethiprole)、二溴化乙烯(ethylene dibromide)、依殺蟎(etoxazole)、依芬寧(etofenprox)、滅線磷(ethoprophos)、益多松(etrimfos)、依馬菌素(emamectin)、因滅汀(emamectin benzoate)、安殺番(endosulfan)、益避寧(empenthrin)、噁唑硫非(oxazosulfyl)、歐殺滅(oxamyl)、滅多松(oxydemeton-methyl)、異亞碸磷(oxydeprofos)、毆滅松(omethoate)、核多角體病病毒(Nuclear polyhedrosis virus)、硫線磷(cadusafos)、κ-七氟菊酯(kappa-tefluthrin)、κ-畢芬寧(kappa-bifenthrin)、水黃皮素(karanjin)、培丹(cartap)、顆粒病病毒(Granulosis virus)、加保利(carbaryl)、丁基加保扶(carbosulfan)、加保扶(carbofuran)、γ-BHC(gamma-BHC)、滅殺威(xylylcarb)、拜裕松(quinalphos)、烯蟲炔酯(kinoprene)、蟎離丹(chinomethionat)、急性麻痺病病毒(Entero virus)、牛壁逃(coumaphos)、冰晶石(cryolite)、可尼丁(clothianidin)、克芬蟎(clofentezine)、可芬諾(chromafenozide)、氯蟲醯胺(chlorantraniliprole)、氯氧磷(chlorethoxyfos)、可氯丹(chlordane)、硝基三氯甲烷(chloropicrin)、陶斯松(chlorpyrifos)、陶斯松･甲基(chlorpyrifos-methyl)、克凡派(chlorfenapyr)、克芬松(chlorfenvinphos)、克福隆(chlorfluazuron)、氯甲硫磷(chlormephos)、氯普亞列寧(chloroprallethrin)、昆蟲痘病毒(Entomopoxi virus)、虹色病毒(Irido virus)、氰蟲醯胺(cyazypyr)、氰乃松(cyanophos)、汰芬隆(diafenthiuron)、二胺磷(diamidafos)、賽安勃(cyantraniliprole)、賽派芬(cyetpyrafen)、除蟎靈(dienochlor)、唑蟎氰(cyenopyrafen)、蔬果磷(dioxabenzofos)、二苯丙醚(diofenolan)、西格瑪病毒(Sigma virus)、環溴蟲醯胺(cyclaniliprole)、環氧蟲啶(cycloxaprid)、雙特氯松(dicrotophos)、除線磷(dichlofenthion)、環丁三氟喃(cyclobutrifluram)、乙氰菊酯(cycloprothrin)、二氯松(dichlorvos)、二氯滅嗪(dicloromezotiaz)、大克蟎(dicofol)、第昔尼(dicyclanil)、二硫松(disulfoton)、達特南(dinotefuran)、敵蟎通(dinobuton)、氯氟氰蟲醯胺(cyhalodiamide)、賽洛寧(cyhalothrin)[包含gamma-體,lambda-體]、賽芬寧(cyphenothrin)[包含(1R)-trans-體]、賽扶寧(cyfluthrin)[包含beta-體]、二福隆(diflubenzuron)、賽芬蟎(cyflumetofen)、氟蟎嗪(diflovidazin)、環丙氟蟲胺(cyproflanilide)、鍚蟎丹(cyhexatin)、亞滅寧(cypermethrin)[包含alpha-體,beta-體,theta-體,zeta-體]、大普達井(dimpropyridaz)、二甲基-2,2,2-三氯-1-羥基乙基膦酸酯(DEP)、甲基毒蟲畏(dimethylvinphos)、大滅松(dimethoate)、四氟甲醚菊酯(dimefluthrin)、茉莉酮(jasmone)、順式-茉莉酮(cis-jasmone)、茉莉酸(jasmonic acid)、茉莉酸甲酯(methyl jasmonate)、矽護芬(silafluofen)、賽滅淨(cyromazine)、蟲生線蟲(Steinernema carpocapsae)、昆蟲寄生性線蟲(Steinernema kushidai)、格拉斯氏線蟲(Steinernema glaseri)、spidoxamat、賜諾特(spinetoram)、賜諾殺(spinosad)、賜派芬(spirodiclofen)、賜派滅((spirotetramat)、賜派酮(spiropidion)、螺甲蟎酯(spiromesifen)、蘇康脲鈉(sulcofuron-sodium)、氟蟲胺(sulfluramid)、速殺氟(sulfoxaflor)、治螟磷(sulfotep)、二嗪農(diazinon)、賽果培(thiacloprid)、賽速安(thiamethoxam)、替阿札芬(tioxazafen)、硫敵克(thiodicarb)、硫賜安(thiocyclam)、殺蟲雙(thiosultap)、治線磷(thionazin)、硫伐隆(thiofanox)、硫滅松(thiometon)、替克樂比薩佛(tyclopyrazoflor)、四氯蟲醯胺(tetrachlorantraniliprole)、樂本松(tetrachlorvinphos)、得脫蟎(tetradifon)、氟氰蟲醯胺(tetraniliprole)、四氟醚菊酯(tetramethylfluthrin)、治滅寧(tetramethrin)、丁基嘧啶磷(tebupirimfos)、得芬諾(tebufenozide)、得芬瑞(tebufenpyrad)、汰福寧(tefluthrin)、得福隆(teflubenzuron)、內吸磷･S･甲基(demeton-S-methyl)、亞培松(temephos)、第滅寧(deltamethrin)、托福松(terbufos)、泰滅寧(tralomethrin)、拜富寧(transfluthrin)、唑蚜威(triazamate)、三落松(triazophos)、三氯松(trichlorfon)、棘孢木黴菌(Trichoderma asperellum)、哈氏木黴菌(Trichoderma harzianum)、三福隆(triflumuron)、三氟苯嘧啶(triflumezopyrim)、混殺威(trimethacarb)、脫芬瑞(tolfenpyrad)、二溴磷(naled)、尼古丁(nicotine)、菸鹼氟脯(nicofluprole)、烯啶蟲胺(nitenpyram)、奈馬克丁(nemadectin)、濃核病病毒(Denso virus)、諾伐隆(novaluron)、諾福隆(noviflumuron)、淡紫色擬青黴(Paecilomyces lilacinus)、洋蔥假單胞菌(Barkholderia cepacia)、伯克氏菌(Barkholderia rinojensis)、臘蚧輪刺孢菌(Verticillium lecanii)、烯蟲乙酯(hydroprene)、西澤巴斯德氏菌(Pasteuria nishizawae)、穿透巴斯德芽孢菌(Pasteuria penetrans)、蘇雲金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)、蘇雲金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)所生產之昆蟲毒素、蘇雲金芽孢桿菌 亞種 鮎澤(Bacillus thuringiensis subsp. Aizawai)、蘇雲金芽孢桿菌亞種 以色列(Bacillus thuringiensis subsp. Israelensis)、蘇雲金芽孢桿菌 亞種 庫斯克(Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki)、蘇雲金芽孢桿菌･亞種 擬步行蟲(Bacillus thuringiensis subsp. Tenebrionis)、日本甲蟲芽孢桿菌(Bacillus popilliae)、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)、繁米松(vamidothion)、巴拉松(parathion)、巴拉松･甲基(parathion-methyl)、合芬寧(halfenprox)、氯蟲醯肼(halofenozide)、百亞列寧(bioallethrin)、百亞列寧S‐環戊烯基(bioallethrin S-cyclopentenyl)、百列滅寧(bioresmethrin)、雙-(2-氯-1-甲基乙基)醚(DCIP)、雙三氟蟲脲(bistrifluron)、海滅隆(hydramethylnon)、必芬蟎(bifenazate)、畢芬寧(bifenthrin)、氟蟲雙醯胺(pyflubumide)、胡椒基丁醚(piperonyl butoxide)、派滅淨(pymetrozine)、白克松(pyraclofos)、吡嗪氟蟲腈(pyrafluprole)、必芬松(pyridaphenthion)、畢達本(pyridaben)、三氟甲吡醚(pyridalyl)、百利福腙(pyrifluquinazon)、皮瑞普(pyriprole)、百利普芬(pyriproxyfen)、比加普(pirimicarb)、畢汰芬(pyrimidifen)、嘧蟎胺(pyriminostrobin)、亞特松(pirimiphos-methyl)、除蟲菊素(pyrethrine)、伐滅磷(famphur)、芬普尼(fipronil)、芬殺蟎(fenazaquin)、芬滅松(fenamiphos)、撲滅松(fenitrothion)、芬諾克(fenoxycarb)、苯硫威(fenothiocarb)、酚丁滅寧(phenothrin)[包含(1R)-trans-體]、仲丁威(fenobucarb)、芬殺松(fenthion)、賽達松(phenthoate)、芬化利(fenvalerate)、芬普蟎(fenpyroximate)、氧化芬佈賜(fenbutatin oxide)、芬普寧(fenpropathrin)、大福松(fonofos)、氟化硫醯(sulfuryl fluoride)、佈嘉信(butocarboxim)、丁酮威(butoxycarboxim)、布芬淨(buprofezin)、扶線威(furathiocarb)、普亞列寧(prallethrin)、嘧蟎酯(fluacrypyrim)、氯氟氰蟲醯胺(fluazaindolizine)、氟佐隆(fluazuron)、氟噻蟲碸(fluensulfone)、氟吡菌醯胺(fluopyram)、氟乙酸鈉鹽(sodium fluoroacetate)、氟米塔麥(fluxametamide)、氟環隆(flucycloxuron)、護賽寧(flucythrinate)、氟硫滅(flusulfamide)、賽扶寧(fluthrin)、福化利(fluvalinate)[包含tau-體]、氟吡呋喃酮(flupyradifurone)、吡氟硫磷(flupyrazofos)、氟必靈(flupyrimin)、丁烯氟蟲腈(flufiprole)、福芬靈(flufenerim)、氟菌蟎酯(flufenoxystrobin)、氟芬隆(flufenoxuron)、氟殺逢(fluhexafon)、氟大滅(flubendiamide)、氟苯氟醚(flupentiofenox)、福滅寧(flumethrin)、氟拉蘭(fluralaner)、氣鈴芬(flurimfen)、普硫松(prothiofos)、氟蟲清(protrifenbute)、氟尼胺(flonicamid)、加護松(propaphos)、毆蟎多(propargite)、茉莉酸丙酯(prohydrojasmon)、佈飛松(profenofos)、布洛苯胺(broflanilide)、丙氟菊酯(profluthrin)、撲達松(propetamphos)、安丹(propoxur)、福美昆(flometoquin)、新殺蟎(bromopropylate)、合賽多(hexythiazox)、六伏隆(hexaflumuron)、細腳擬青黴(Paecilomyces tenuipes)、玫煙色擬青黴菌(Paecilomyces fumosoroceus)、淡紫色擬青黴菌(Paecilomyces lilacinus)、啶菌噁唑(heptafluthrin)、飛達松(heptenophos)、百滅寧(permethrin)、異噻蟲唑(benclothiaz)、苯吡莫賽(benzpyrimoxan)、免速達(bensultap)、西脫蟎(benzoximate)、免敵克(bendiocarb)、免扶克(benfuracarb)、厚孢普可尼亞菌(Pochonia chlamydosporia)、纖細白僵菌(Beauveria tenella)、巴氏蠶白僵菌(Beauveria bassiana)、布氏白殭菌(Beauveria brongniartii)、巴賽松(phoxim)、裕必松(phosalone)、福賽絕(fosthiazate)、吉福松(fosthietan)、福賜米松(phosphamidon)、益滅松(phosmet)、瀏陽霉素複合體(polynactins)、覆滅蟎(formetanate)、福瑞松(phorate)、機油(machine oil)、馬拉松(malathion)、密滅汀(milbemectin)、滅加松(mecarbam)、甲硫酚磷(mesulfenfos)、納乃得(methomyl)、聚乙醛(metaldehyde)、美氟綜(metaflumizone)、達馬松(methamidophos)、威百畝(metham)、滅賜克(methiocarb)、滅大松(methidathion)、異硫氰酸甲酯(methyl isothiocyanate)、甲基溴(methyl bromide)、氧氯甲氧氯(methoxychlor)、滅芬諾(methoxyfenozide)、甲醚菊酯(methothrin)、美特寧(metofluthrin)、美賜平(methoprene)、治滅蝨(metolcarb)、速滅磷(mevinphos)、氯氟醚菊酯(meperfluthrin)、植物單孢菌(Monacrosporium phymatophagum)、植物單孢菌(Monacrosporium phymatophagum)、亞速靈(monocrotophos)、沒氟菊酯(momfluorothrin)、哈氏木黴菌(Trichoderma harzianum)、性誘劑A(litlure-A)、性誘劑B(litlure-B)、磷化鋁(aluminium phosphide)、磷化鋅(zinc phosphide)、膦(phosphine)、祿芬隆(lufenuron)、列卡路(rescalure)、列滅寧(resmethrin)、雷皮菌素(lepimectin)、魚藤精(rotenone)、質型多角體病病毒包埋體(Cytoplasmic polyhedrosis virus)、芬佈賜(fenbutatin oxide)、石灰氮(calcium cyanide)、有機錫化合物(organotins)、硫酸尼古丁(nicotine-sulfate)、(Z)-11-十四碳烯基=乙酸酯、(Z)-11-十六碳烯醛、(Z)-11-十六碳烯=乙酸酯、(Z)-9,12-十四烷二烯=乙酸酯、(Z)-9-十四碳烯-1-醇、(Z,E)-9,11-十四烷二烯=乙酸酯、(Z,E)-9,12-十四烷二烯=乙酸酯、1,1,1-三氯-2,2-雙(4-氯苯基)乙烷(DDT)、1,3‐二氯丙烯(1,3-dichloropropene)、2,4-二氯-5-{2-[4-(三氟甲基)苯基]乙氧基}苯基 2,2,2-三氟乙基 亞碸(化學名、CAS註冊編號：1472052-11-1)、2,4-二甲基-5-[6-(三氟甲硫基)己基氧基]苯基-2,2,2-三氟乙基 亞碸(化學名、CAS註冊編號：1472050-34-2)、2-{2-氟-4‐甲基-5-[(2,2,2-三氟乙基)亞磺醯基(Sulfinyl)]苯氧基}-5-(三氟甲基)吡啶(化學名、CAS註冊編號：1448758-62-0)、3-氯-2-{2-氟-4‐甲基-5-[(2,2,2-三氟乙基)亞磺醯基(Sulfinyl)]苯氧基}-5-(三氟甲基)吡啶(化學名、CAS註冊編號：1448761-28-1)、4,6-二硝基-o-甲酚(DNOC)、4-氟-2-甲基-5-(5,5-二甲基己基氧基]苯基 2,2,2-三氟乙基 亞碸(化學名、CAS註冊編號：1472047-71-4)、Bt蛋白質(Cry1Ab,Cry1Ac,Cry1Fa,Cry2Ab,mCry3A, Cry3Ab,Cry3Bb,Cry34/35Ab1)、甲基丁香油酚、4-(p-乙醯氧基苯基)-2-丁酮、(Z)-10-十四碳烯基=乙酸酯、(E,Z)-4,10-十四烷二烯=乙酸酯、(Z)-8-十二碳烯基=乙酸酯、(Z)-11-十四碳烯基=乙酸酯、(Z)-13-二十碳烯(Eicosene)-10-酮、14-甲基-1-十八烯、AKD-1193(編碼編號)、BCS-AA10147(編碼編號)、CL900167(編碼編號)、O,O-二乙基-O-[4-(二甲基胺磺醯基(Sulfamoyl))苯基]-硫代磷酸酯(Phosphorothioate)(DSP)、O-乙基-O-4-(硝基苯基)苯基硫代磷酸酯(Phosphonothioate)(EPN)、RU15525(編碼編號)、XMC(XMC)、Z-13-二十碳烯(Eicosene)-10-酮、ZXI8901 (編碼編號)、F4260(編碼編號)。

接著，雖將可混用或併用之公知之除草劑化合物、除草活性成分或植物生長調節劑化合物例示於以下，但並非被限定於此等之例者。

除草劑化合物或除草活性成分： 碘苯腈(ioxynil)(包含與鋰鹽、鈉鹽、辛酮酸等之鹽)、苯草醚(aclonifen)、丙烯醛(acrolein)、草芬定(azafenidin)、亞喜芬(acifluorfen)(包含與鈉等之鹽)、四唑嘧磺隆(azimsulfuron)、磺草靈(asulam)、乙草胺(acetochlor)、草脫淨(atrazine)、anisiflupurin、莎稗磷(anilofos)、胺唑草酮(amicarbazone)、醯嘧磺隆(amidosulfuron)、殺草強(amitrole)、氯丙嘧啶酸(aminocyclopyrachlor)、氯胺吡啶酸(aminopyralid)、甲基胺草磷(amiprofos-methyl)、草殺淨(ametryn)、蘿摩花葉病毒(Araujia Mosaic Virus)、拉草(alachlor)、損毀鏈格孢(Alternaria destruens)、亞汰草(alloxydim)(包含與鈉等之鹽)、環丙嘧啶醇(ancymidol)、愛速隆(isouron)、依索氯托(isoxachlortole)、抑殺特(isoxaflutole)、異惡草胺(isoxaben)、異癸基醇乙氧基化物(Isodecylalkoholethoxylate)、異丙隆(isoproturon)、鹵苯胺唑(ipfencarbazone)、滅草喹(imazaquin)、甲咪唑烟酸(imazapic)(包含與胺等之鹽)、依滅草(imazapyr)(包含異丙基胺等之鹽)、咪草酸(imazamethabenz)、甲基咪草酸(imazamethabenz-methyl)、咪草啶酸(imazamox)、乙煙酸(imazethapyr)、依速隆(imazosulfuron)、吲嗪氟胺(indaziflam)、茚草酮(indanofan)、乙基甘草津(eglinazine-ethyl)、戊草丹(esprocarb)、甲基胺苯磺隆(ethametsulfuron-methyl)、抑伏靈(ethalfluralin)、磺噻隆(ethidimuron)、乙氧嘧磺隆(ethoxysulfuron)、氯氟草醚(ethoxyfen)、乙基氯氟草醚(ethoxyfen-ethyl)、乙氧草黃(ethofumesate)、乙氧苯草胺(etobenzanid)、epyrifenacil、草藻滅二鈉鹽(endothal-disodium)、樂滅草(oxadiazon)、快噁草酮(oxadiargyl)、歐克芬(oxaziclomefone)、環氧嘧磺隆(oxasulfuron)、復祿芬(oxyfluorfen)、歐拉靈(oryzalin)、老布達胡椒病毒(Obuda Pepper Virus)、嘧苯胺磺隆(orthosulfamuron)、坪草丹(orbencarb)、油酸(oleic acid)、苯酮唑(cafenstrole)、辛酸(caprylic acid)、癸酸(capric acid)、乙基克繁草(carfentrazone-ethyl)、特胺靈(karbutilate)、雙醯草胺(carbetamide)、快伏草(quizalofop)、乙基快伏草(quizalofop-ethyl)、乙基快伏草-P(quizalofop-P-ethyl)、喹禾糠酯(quizalofop-P-tefuryl)、野油菜黃單孢菌(Xanthomonas campestris)、莫克草(quinoclamine)、快克草(quinclorac)、氯甲喹啉酸(quinmerac)、檸檬酸(citric acid)、草隆(cumyluron)、氯醯草膦(clacyfos)、草甘膦(glyphosate)(包含鈉、鉀、胺、丙基胺、異丙基胺、銨、異丙基銨、胍、單乙醇胺、膽鹼、BAPMA(N,N-雙-(胺基丙基)甲基胺)、二甲基胺或三甲基硫鹽(trimesium)等之鹽)、草銨膦(glufosinate)(包含胺或鈉等之鹽)、草銨膦･P(glufosinate-P)、草銨膦･P･鈉鹽(glufosinate-P-sodium)、剋草同(clethodim)、炔草酸(clodinafop)、炔丙基炔草酯(clodinafop-propargyl)、畢克草(clopyralid)(包含單乙醇胺鹽)、可滅蹤(clomazone)、甲氧基護谷(chlomethoxyfen)、克普草(clomeprop)、甲基氯酯磺草(cloransulam-methyl)、克攔本(chloramben)、氯草敏(chloridazon)、豆磺隆(chlorimuron)、氯嘧磺隆(chlorimuron-ethyl)、氯磺隆(chlorsulfuron)、大克草(chlorthal-dimethyl)、草克樂(chlorthiamid)、氯醯亞胺(chlorphthalim)、甲基整形醇(chlorflurenol-methyl)、克普芬(chlorpropham)、滅落寧(chlorbromuron)、枯草龍(chloroxuron)、氯麥隆(chlorotoluron)、酮螺達(ketospiradox)(包含鈉、鈣或氨等之鹽)、葫蘆炭疽刺盤孢菌(Colletotrichum orbiculare)、似膠黏孢炭疽刺盤孢菌(Colletotrichum gloeosporioides)、曲型炭疽病菌(Colletotrichum truncatum)、真菌植物病原體(Chondrostercum purpureum)、嘧啶肟草醚(saflufenacil)、假蒟亭鹼(sarmentine)、氰乃淨(cyanazine)、氰胺(cyanamide)、氟硫草定(diuron)、乙基乙醯甲草胺(diethatyl-ethyl)、dioxopyritrione、麥草畏(dicamba)(包含胺、二乙基胺、異丙基胺、二甘醇胺、二甲基銨、二醇胺、異丙基銨、金胺、鉀、三乙醇胺(trolamine)、BAPMA (N,N-雙-(胺基丙基)甲基胺)、膽鹼、鈉或鋰等之鹽或甲基酯等之酯)、環草敵(cycloate)、環殺草(cycloxydim)、雙氯磺草胺(diclosulam)、環丙嘧磺隆(cyclosulfamuron)、環吡寧(cyclopyranil)、環吡瑞莫(cyclopyrimorate)、敵草腈(dichlobenil)、禾草靈(diclofop)、禾草靈･P･甲基(diclofop-P-methyl)、禾草靈･甲基(diclofop-methyl)、2,4-滴丙酸(dichlorprop)、2,4-滴丙酸-P(dichlorprop-P)(包含二甲基銨、鉀、鈉、膽鹼等之鹽或丁氧乙酯、2-乙基己基酯、異辛酯、甲基酯等之酯)、敵草快(diquat)、二溴敵草快(diquat dibromide)、氟硫草定(dithiopyr)、環草隆(siduron)、敵樂胺(dinitramine)、乙基環醯草酯(cinidon-ethyl)、西速隆(cinosulfuron)、特樂酚(dinoseb)(包含乙酸鹽)、特樂酯(dinoterb)、賽伏草(cyhalofop)、丁基賽伏草(cyhalofop-butyl)、環吡氟草酮(cypyrafluone)、雙苯醯草胺(diphenamid)、野燕枯(difenzoquat)、大伏肯(diflufenican)、大芬比(diflufenzopyr)、草滅淨(simazine)、dimesulfazet、大滅克(dimethachlor)、戊草津(dimethametryn)、汰草滅(dimethenamid)、汰草滅･P(dimethenamid-P)、西草淨(simetryn)、大滅普(dimepiperate)、大滅能(dimefuron)、螢光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、環庚草醚(cinmethylin)、滅草靈(swep)、磺草酮(sulcotrione)、氟磺唑草胺(sulfentrazone)、草硫膦(sulfosate)、磺醯磺隆(sulfosulfuron)、甲基嘧磺隆(sulfometuron-methyl)、西殺草(sethoxydim)、Scelerothinia minor、特草定(terbacil)、香草隆(daimuron)、疥鏈黴菌素･A(thaxtomin A)、煙草微綠嵌紋病毒(Tobacco Mild Green Mosaic Tobamovirus)、煙草胞裂病毒(Tobacco Rattle Virus)、茅草枯(dalapon)、噻草啶(thiazopyr)、氟丙嘧草酯(tiafenacil)、唑酮磺吩酸(thiencarbazone)(包含鈉鹽、甲基酯等)、仲草丹(tiocarbazil)、殺丹(thiobencarb)、噻二唑草胺(thidiazimin)、噻苯隆(thidiazuron)、噻吩磺隆(thifensulfuron)、噻黃隆(thifensulfuron-methyl)、甜菜安(desmedipham)、敵草淨(desmetryne)、特福披洛米(tetflupyrolimet)、欣克草(thenylchlor)、牧草胺(tebutam)、得匍隆(tebuthiuron)、得殺草(tepraloxydim)、特呋喃三酮(tefuryltrione)、草淨津(terbuthylazine)、特丁淨(terbutryn)、特丁通(terbumeton)、田寶三酮(tembotrione)、吡草磺(topramezone)、三甲苯草酮(tralkoxydim)、賽其爛(triaziflam)、醚苯磺隆(triasulfuron)、賽法猛(triafamone)、野麥畏(tri-allate)、草達津(trietazine)、三氯比(triclopyr)、丁氧乙基三氯比(triclopyr-butotyl)、三氯比･三乙基銨(triclopyr-triethylammonium)、三氟甲磺隆(tritosulfuron)、三唑磺草酮(tripyrasulfone)、三氟草嗪(trifludimoxazin)、甲基氟胺磺隆(triflusulfuron-methyl)、三福林(trifluralin)、三氟啶磺隆(trifloxysulfuron)(包含鈉等之鹽)、甲基苯磺隆(tribenuron-methyl)、硝黃草酮(tolpyralate)、納得爛(naptalam)(包含與鈉等之鹽)、萘普草(naproanilide)、敵草胺(napropamide)、敵草胺-M(napropamide-M)、煙嘧磺隆(nicosulfuron)、乳酸(lactic acid)、草不龍(neburon)、氟草敏(norflurazon)、伯克氏菌(Burkholderia rinojensis)、萬隆(vernolate)、巴拉刈(paraquat)、巴拉刈･二氯化物(paraquat dichloride)、氟氯吡啶酯(halauxifen)、氟氯吡啶酯･苄基(halauxifen-benzyl)、氟氯吡啶酯･甲基(halauxifen-methyl)、合氯氟(haloxyfop)、合氯氟･P (haloxyfop-P)、合氯氟･乙氧基乙酯(haloxyfop-etotyl)、合氯氟･P･甲基(haloxyfop-P-methyl)、鹵索芬(halosafen)、合速隆(halosulfuron-methyl)、畢克斯隆索(bixlozone)、畢克爛(picloram)(包含與二氯銨、三乙醇胺(trolamine)等之鹽)、氟吡醯草胺(picolinafen)、雙環哌喃酮(bicyclopyrone)、雙草醚･鈉鹽(bispyribac-sodium)、唑啉草酯(pinoxaden)、雙唑草酮(bipyrazone)、治草醚(bifenox)、哌草磷(piperophos)、雙唑草腈(pyraclonil)、磺醯草吡唑(pyrasulfotole)、匹唑芬(pyrazoxyfen)、乙基百速隆(pyrazosulfuron-ethyl)、苄草唑(pyrazolynate)、畢拉草(bilanafos)、派芬草(pyraflufen)、乙基派芬草(pyraflufen-ethyl)、噠草福(pyridafol)、嘧硫草醚･鈉鹽(pyrithiobac-sodium)、必汰草(pyridate)、環酯草醚(pyriftalid)、稗草丹(pyributicarb)、嘧啶肟草醚(pyribenzoxim)、嘧啶硫蕃(pyrimisulfan)、甲基嘧草醚(pyriminobac-methyl)、派羅克殺草碸(pyroxasulfone)、吡唑磺草胺(pyroxsulam)、棕櫚疫黴(Phytophthora palmivora)、棉胺寧(phenisopham)、非草隆(fenuron)、異噁苯碸(fenoxasulfone)、噁唑菌胺(fenoxaprop)(包含甲基、乙基、異丙基酯)、噁唑菌胺･P(fenoxaprop-P)(包含甲基、乙基、異丙基酯)、芬昆諾三酮(fenquinotrione)、乙基唑禾草酸(fenthiaprop-ethyl)、四唑醯草胺(fentrazamide)、苯唑氟草酮(fenpyrazone)、甜菜寧(phenmedipham)、Phoma chenopodicola、莖點黴菌(Phoma herbarum)、巨口莖點黴菌(Phoma macrostoma)、丁基拉草(butachlor)、布芬草(butafenacil)、抑草磷(butamifos)、丁酯(butylate)、縱溝柄鏽菌(Puccinia canaliculata)、遏藍菜柄鏽菌(Puccinia thlaspeos)、丁烯草胺(butenachlor)、仲丁靈(butralin)、丁苯草酮(butroxydim)、啶嘧磺隆(flazasulfuron)、麥草伏(flamprop)(包含Z甲基、乙基、異丙基酯)、麥草伏･M(flamprop-M)(包含甲基、乙基、異丙基酯)、氟嘧磺隆(primisulfuron)、甲基氟嘧磺隆(primisulfuron-methyl)、伏寄普丁酯(fluazifop-butyl)、伏寄普･P(fluazifop-P)、伏寄普･P･丁酯(fluazifop-P-butyl)、異丙吡草酯(fluazolate)、伏草隆(fluometuron)、乙基乙羧氟草醚(fluoroglycofen-ethyl)、氟酮磺隆･鈉鹽(flucarbazone-sodium)、氟消草(fluchloralin)、氟吡磺隆(flucetosulfuron)、氟噻甲草酯(fluthiacet-methyl)、氟啶嘧磺隆･甲基(flupyrsulfuron-methyl)(包含鈉、鈣或氨等之鹽)、噻草胺(flufenacet)、氟噠嗪草酯(flufenpyr-ethyl)、四氟丙酸(flupropanate)(包含鈉鹽)、氟胺草唑(flupoxame)、丙炔氟草胺(flumioxazin)、氟胺草酯(flumiclorac-pentyl)、唑嘧磺草胺(flumetsulam)、氟啶草酮(fluridone)、呋草酮(flurtamone)、氯氟吡氧乙酸(fluroxypyr)(包含丁氧基丙酯(butometyl)、異辛酯(meptyl)等之酯體或鈉、鈣、氨等之鹽)、氟咯草酮(flurochloridone)、普拉草(pretilachlor)、丙苯磺隆(procarbazone)(包含與鈉等之鹽)、氨氟樂靈(prodiamine)、三氟丙磺隆(prosulfuron)、苄草丹(prosulfocarb)、普拔草(propaquizafop)、撲草胺(propachlor)、普拔根(propazine)、除草靈(propanil)、戊炔草胺(propyzamide)、普樂寶(propisochlor)、咪唑嘧磺隆(propyrisulfuron)、苯胺靈(propham)、氟唑草胺(profluazol)、調環酸･鈣鹽(prohexadione-calcium)、丙苯磺隆(propoxycarbazone)、丙苯磺隆･鈉鹽(propoxycarbazone-sodium)、氯苯噻草酮(profoxydim)、克草(bromacil)、溴莠敏(brompyrazon)、佈滅淨(prometryn)、撲滅通(prometon)、溴苯腈(bromoxynil)(包含丁酸、辛酸或庚酸等之酯體)、溴酚肟(bromofenoxim)、溴丁醯草胺(bromobutide)、雙氟磺草胺(florasulam)、氯氟吡啶酯(florpyrauxifen)、氯氟吡啶酯･苄基(florpyrauxifen-benzyl)、菲殺淨(hexazinone)、烯草胺(pethoxamid)、草除靈(benazolin)、草除靈･乙基(benazolin-ethyl)、平速爛(penoxsulam)、香瓜茄嵌紋病毒(Pepino Mosaic Virus)、胺苯吡菌酮(heptamaloxyloglucan)、氟丁醯草胺(beflubutamid)、氟丁醯草胺-M(beflubutamid-M)、克草猛(pebulate)、壬酸(pelargonic acid)、醯苯草酮(bencarbazone)、喹草酮(benquitrione)、雙苯嘧草酮(benzfendizone)、地散磷(bensulide)、免速隆(bensulfuron)、甲基免速隆(bensulfuron-methyl)、苯并雙環酮(benzobicyclon)、吡草酮(benzofenap)、本達隆(bentazone)、甲氯醯草胺(pentanochlor)、施得圃(pendimethalin)、本特松(pentoxazone)、氟草胺(benfluralin)、呋草黃(benfuresate)、殺木膦(fosamine)、氟磺胺(fomesafen)、甲醯嘧磺隆(foramsulfuron)、福芬素(forchlorfenuron)、甲氯丙酸(mecoprop)(包含鈉、鉀、異丙基胺、三乙醇胺、二甲基胺、二醇胺、三乙醇胺(trolamine)、膽鹼等之鹽或乙二基(ethadyl)酯、2-乙基己基酯、異辛酯、甲基酯等之酯)、甲氯丙酸･P･鉀鹽(mecoprop-P-potassium)、磺胺磺隆(mesosulfuron)(包含甲基等之酯體)、硝草酮(mesotrione)、滅草胺(metazachlor)、雙醚氯吡嘧磺隆(metazosulfuron)、甲基苯噻隆(methabenzthiazuron)、苯嗪草酮(metamitron)、甲氯丙酸(metamifop)、威百畝(metam)(包含鈉等之鹽)、甲烷亞砷酸二鈉(DSMA)、美西除靈(methiozolin)、甲基香草隆(methyldymuron)、甲氧隆(metoxuron)、磺草唑胺(metosulam)、甲基磺隆(metsulfuron-methyl)、撲多草(metobromuron)、吡喃隆(metobenzuron)、莫多草淨(metolachlor)、滅必淨(metribuzin)、甲哌啶氯化物(mepiquat chloride)、滅芬草(mefenacet)、單嘧磺隆(monosulfuron)(包含甲基、乙基、異丙基酯)、綠谷龍(monolinuron)、稻得壯(molinate)、碘甲磺隆(iodosulfuron)、碘甲磺隆甲基鈉鹽(iodosulfulon-methyl-sodium)、碘芬磺隆(iofensulfuron)、碘芬磺隆･鈉鹽(iofensulfuron-sodium)、乳氟禾草靈(lactofen)、朗剋三酮(lancotrione)、理有龍(linuron)、rimisoxafen、碸嘧磺隆(rimsulfuron)、環草定(lenacil)、2,2,2-三氯乙酸(TCA)(包含鈉、鈣或氨等之鹽)、2,3,6-三氯苯甲酸(2,3,6-TBA)、2,4,5-三氯苯氧基乙酸(2,4,5-T)、2,4-二氯苯氧基乙酸(2,4-D)(包含胺、二乙基胺、三乙醇胺、異丙基胺、二甲基銨、二醇胺、十二烷基銨、庚基銨、十四烷基銨、三乙基銨、參(2-羥基丙基)銨、三乙醇胺(trolamine)、膽鹼、鈉或鋰等之鹽或丁氧乙酯、2-丁氧基丙基酯、2-乙基己基酯、甲基酯、乙基酯、丁基酯、異丁基酯、辛基酯、戊基酯、丙基酯、異辛酯、異丙基酯、異辛酯(meptyl)酯、糠基酯、等之酯)、2,4-二氯苯氧基丁酸(2,4-DB)(包含胺、二乙基胺、三乙醇胺、異丙基胺、二甲基銨、膽鹼、鈉或鋰等之鹽或異辛酯等之酯)、2-胺基-3-氯-1,4-萘醌(ACN)、2-甲基-4-氯苯氧基乙酸(MCPA)(包含鈉、二甲基銨、膽鹼等之鹽，或2-乙基己基酯、異辛酯、乙基酯等之酯等)、2-甲基-4-氯苯氧基丁酸(MCPB)(包含鈉鹽、乙基酯等)、4-(2,4-二氯苯氧基)丁酸(2,4-DB)、4,6-二硝基-O-甲酚(DNOC)(包含胺或鈉等之鹽)、(5S)-3-(3,5-二氟苯基)-N-[rel-(3R,5R)-5-(三氟甲基磺醯基胺基甲醯基)四氫呋喃-3-基]-5-乙烯基-4H-異噁唑-5-甲醯胺((5S)-3-(3,5-difluorophenyl)-N-[rel-(3R,5R)-5-(trifluoromethylsulfonylcarbamoyl)tetrahydrofuran-3-yl]-5-vinyl-4H-isoxazole-5-carboxamid)(化學名、CAS註冊編號：2266183-40-6)(國際公開第2018/228986號公報、國際公開第2020/114934號公報)、N4-(2,6-二氟苯基)-6-(1-氟-1-甲基-乙基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺(N4-(2,6-difluorophenyl)- 6-(1-fluoro-1-methyl-ethyl)-1,3,5-triazine-2,4-diamine)(化學名、CAS註冊編號：1606999-43-2)(國際公開第2014/064094號公報、國際公開第2015/162164號公報)、(5S)-3-(3,5-二氟苯基)-N-[(3R)-5-(甲基磺醯基胺基甲醯基)-2,3-二氫呋喃-3-基]-5-乙烯基-4H-異噁唑-5-甲醯胺((5S)-3-(3,5-difluorophenyl)-N-[(3R)-5-(methylsulfonylcarbamoyl)-2,3-dihydrofuran-3-yl]-5-vinyl-4H-isoxazole-5-carboxamid) (化學名、CAS註冊編號：2266190-06-9)(國際公開第2018/228986號公報、國際公開第2020/114934號公報)、(5R)-3-(3,5-二氟苯基)-5-甲基-N-[rel-(3R,5R)-5-(甲基磺醯基胺基甲醯基)四氫呋喃-3-基]-4H-異噁唑-5-甲醯胺((5R)-3-(3,5-difluorophenyl)-5-methyl-N-[rel-(3R,5R)-5-(methylsulfonylcarbamoyl) tetrahydrofuran-3-yl]-4H-isoxazole-5-carboxamid)(化學名、CAS註冊編號：2266164-36-5)(國際公開第2018/228986號公報、國際公開第2020/114934號公報)、(5R)-3-(3,5-二氟苯基)-N-[(3R)-5-(甲氧基胺基甲醯基)-2,3-二氫呋喃-3-基]-5-甲基-4H-異噁唑-5-甲醯胺((5R)-3-(3,5-difluorophenyl)-N-[(3R)-5-(methoxycarbamoyl)-2,3-dihydrofuran-3-yl]-5-methyl-4H-isoxazole-5-carboxamid)(化學名、CAS註冊編號：2266170-31-2)(國際公開第2018/228986號公報、國際公開第2020/114934號公報)、2-[2-(3,4-二甲氧基 苯基)-6-甲基-3-側氧基-噠嗪-4-羰基]環己烷-1,3-二酮(2-[2-(3,4-dimethoxyphenyl)-6-methyl-3-oxo-pyridazine-4-carbonyl] cyclohexane-1,3-dione)(化學名、CAS註冊編號：2138855-12-4)(國際公開第2017/178582號公報、國際公開第2018/015476號公報)、4-羥基-1-甲基-3-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]咪唑啉啶-2-酮(4-hydroxy-1-methyl-3-[4-(trifluoromethyl)-2-pyridyl]imidazolidin-2-one)(化學名、CAS註冊編號：1708087-22-2)(國際公開第2015/059262號公報、國際公開第2018/015476號公報)、6-(1-氟環戊基)-N4-(2,3,5,6-四氟苯基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺(6-(1-fluorocyclopentyl)-N4-(2,3,5,6-tetrafluorophenyl)-1,3,5-triazine- 2,4-diamine)(化學名、CAS註冊編號：1820807-75-7)(國際公開第2015/162164號公報)、6-(1-氟-1-甲基-乙基)-N4-(2,3,5,6-四氟苯基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺(6-(1-fluoro-1-methyl-ethyl)-N4-(2,3,5,6-tetrafluorophenyl)-1,3,5-triazine-2,4- diamine)(化學名、CAS註冊編號：1606999-21-6)(國際公開第2014/064094號公報、國際公開第2015/162164號公報)、(5S)-3-(3-氟-5-甲基-苯基)-N-[rel-(3R,5R)-5-(甲氧基 胺基甲醯基)四氫呋喃-3-基]-5-乙烯基-4H-異噁唑-5-甲醯胺((5S)-3-(3-fluoro-5-methyl-phenyl)-N-[rel-(3R,5R)-5-(methoxycarbamoyl) tetrahydrofuran-3-yl]-5-vinyl-4H-isoxazole-5-carboxamid) (化學名、CAS註冊編號：2266292-43-5)(國際公開第2018/228986號公報、國際公開第2020/114934號公報)、6-(1-甲基環丁基)-N4-(2,3,5,6-四氟苯基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺(6-(1-methylcyclobutyl)-N4-(2,3,5,6-tetrafluorophenyl)-1,3,5-triazine-4,4-diamine)(化學名、CAS註冊編號：1607001-97-7)(國際公開第2014/064094號公報、國際公開第2015/162164號公報)、AE-F‐150944(編碼編號)、F9960(編碼編號)、IR-6396(編碼編號)、MCPA･硫代乙基(MCPA-thioethyl)、NC-656(編碼編號)、SYP-298(編碼編號)、SYP-300(編碼編號)、S-乙基二丙基硫胺甲酸酯(EPTC)、S-莫多草淨(S-metolachlor)、S-9750(編碼編號)、MSMA(MSMA)、HW-02(編碼編號)、S-523(編碼編號)、SL-1201(編碼編號)。

植物生長調節劑： 1-萘基乙醯胺(1-naphthylacetamide)、1-甲基環丙烯(1-methylcyclopropene)、1,3-二苯基脲(1,3-diphenylurea)、2,3,5-三碘苯甲酸(2,3,5-triiodobenzoic acid)、2-甲基-4-氯苯氧基丁酸(MCPB)[包含鈉鹽、乙基酯等]、2-(萘-1-基)乙醯胺(2-(naphthalene-1-yl)acetamide)、2,6-二異丙基萘(2,6-diisopropylnaphthalene)、3-[(6-氯-4-苯基喹唑啉-2-基)胺基]丙烷-1-醇(3-[(6-chloro-4-phenylquinazoline-2-yl) amino]propane-1-ol)、4-側氧基-4-(2-苯基乙基)胺基丁酸(化學名、CAS註冊編號：1083-55-2)、4-氯苯氧基乙酸(4-CPA)、5-胺基乙醯丙酸鹽酸鹽(5-aminolevulinic acid hydrochloride)、5-(三氟甲基)苯并[b]噻吩-2-羧酸甲酯(Methyl 5-(trifluoromethyl)benzo[b]thiofen-2-carboxylate)、AVG(aminoethoxyvinylglycine)、n-癸基醇(n-decanol)、anisiflupurin、四稀雌酮(aviglycine)、環丙嘧啶醇(ancymidol)、離層酸(abscisic acid)、亞賜圃(isoprothiolane)、依納素(inabenfide)、吲哚乙酸(indole acetic acid)、吲哚丁酸(indole butyric acid)、單克素(uniconazole)、單克素-P(uniconazole-P)、Ecolyst、吲唑酯(ethychlozate)、益收生長素(ethephon)、丙醯藝苔素內酯(epocholeone)、氯化鈣(calcium chloride)、氯化膽鹼(choline chloride)、羥喹啉硫酸鹽(oxine-sulfate)、opabactin、裂殖素(kinetin)、過氧化鈣(calcium peroxide)、香旱芹酮(carvone)、喹喔啉(quinabactin)、甲酸鈣(calcium formate)、坐果酸(cloxyfonac)、坐果酸･鉀鹽(cloxyfonac-potassium)、果美生長素(cloprop)、克美素(chlormequat)、克美素･氯化物(chlormequat-chloride)、克普芬(chlorpropham)、膽鹼(choline)、細胞分裂素(cytokinins)、氧化型穀胱甘肽(oxydized glutathione)、氰胺(cyanamide)、氰酸鈉(sodium cyanate)、環苯胺(cyclanilide)、2,4-滴丙酸(dichlorprop)(包含二甲基銨、鉀、鈉、膽鹼等之鹽，或丁氧乙酯、2-乙基己基酯、異辛酯、甲基酯等之酯)、2,4-滴丙酸-P(dichlorprop-P)(包含鈉、鉀、二甲基銨等之鹽或2-乙基己基酯)、敵草快(diquat)、二溴敵草快(diquat dibromide)、環丙醯草胺(dikegulac)、激勃酸(gibberellinic acid)、勃激素A4(gibberellin A4)、勃激素A7(gibberellin A7)、穫萎得(dimethipin)、殺雄啉(sintofen)、茉莉酮(jasmone)、順式-茉莉酮(cis-jasmone)、茉莉酸(jasmonic acid)、茉莉酸甲酯(methyl jasmonate)、鏈黴素(streptomycin)、石灰硫(calcium polysulfide)、亞拉生長素(daminozide)、碳酸鈣(calcium carbonate)、噻苯隆(thidiazuron)、癸烷-1-醇(decan-1-ol)、三十醇(triacontanol)、抑芽唑(triapenthenol)、抗倒酯(trinexapac-ethyl)、脫葉磷(tribufos)、巴克素(paclobutrazol)、石蠟(paraffin)、雙草醚･鈉鹽(bispyribac-sodium)、殺紋寧(hymexazol)、仲丁靈(butralin)、氟噻甲草酯(fluthiacet-methyl)、乙基派芬草(pyraflufen-ethyl)、氟節胺(flumetralin)、調嘧醇(flurprimidol)、芴丁酸(flurenol)、前尼替丁(pronitridine)、茉莉酸丙酯(prohydrojasmon)、調環酸･鈣鹽(prohexadione-calcium)、胺苯吡菌酮(heptamaloxyloglucan)、6-苄基胺基嘌呤(6-benzylaminopurine)、施得圃(pendimethalin)、福芬素(forchlorfenuron)、刺芒柄花素(formononetin)、馬來酸二醯肼(maleic hydrazide)、甲哌啶氯化物(mepiquat chloride)、美福泰(mefluidide)、脂殼寡糖(lipochitooligosaccharides) (例如lipochitooligosaccharides SP104)、硫化鈣(calcium sulfate)。

接著，雖將可混用或併用之公知之藥害減輕化合物例示於以下，但並非被限定於此等之例者。

藥害減輕化合物： 雙苯噁唑酸(isoxadifen)、雙苯噁唑酸･乙基(isoxadifen-ethyl)、解草腈(oxabetrinil)、辛烷-1,8-二胺(octane-1,8-diamine)、解毒喹(cloquintocet)、解草酯(cloquintcet-mexyl)、二狄烈(dietholate)、解草胺腈(cyometrinil)、烯丙醯草胺(dichlormid)、二環酮(dicyclonone)、賽普磺胺(cyprosulfamide)、香草隆(daimuron)、萘酸酐(1,8-Naphthalic Anhydride)、解草唑(fenchlorazole)、解草唑乙酯(fenchlorazole-O-ethyl)、解草啶(fenclorim)、解草噁唑(furilazole)、氟草肟(fluxofenim)、解草胺(flurazole)、解草嗪(benoxacor)、美卡芬(metcamifen)、米芬能(mephenate)、吡唑二酸(mefenpyr)、吡唑二酸乙基(mefenpyr-ethyl)、吡唑二酸-二乙基(mefenpyr-diethyl)、低級烷基取代苯甲酸、2,2-二氯-N-(1,3-二氧戊烷-2-基甲基)-N-(2-丙烯基)乙醯胺(PPG-1292)、2-二氯甲基-2-甲基-1,3-二噁烷(MG-191)、3-二氯乙醯基-2,2,5-三甲基-1,3-噁唑烷(R-29148)、4-二氯乙醯基-1-氧雜-4-氮雜螺環[4.5]癸烷(AD-67)、4-羧基-3,4-二氫-2H-1-苯并吡喃-4-乙酸(CL-304415、編碼編號)、MON4660(編碼編號)、美卡芬(metcamifen)、N1,N2-二烯丙基-N2-二氯乙醯基甘胺酸醯胺(DKA-24、編碼編號)、1-溴-4-[(氯甲基)磺醯基]苯(CSB)、2-丙烯基 1-氧雜-4-氮雜螺環[4,5]癸烷-4-二硫代甲酸酯(Carbodithioate)(MG-838、編碼編號)、3-(二氯乙醯基)-2,2-二甲基-1,3-噁唑烷(R-28725、編碼編號)、R-29148(編碼編號)、1-(二氯乙醯基)氮雜烷(TI-35、編碼編號)。

接著，雖將可混用或併用之公知之生物農藥例示於以下，但並非被限定於此等之例者。

生物農藥： 簡管薊馬(Haplothrips brevitubus)、細腰兇薊馬(Franklinothrips vespiformis)、豌豆潛蠅姬小蜂(Diglyphus isaea)、麗蚜小蜂(Encarsia formosa)、胡瓜捕植蟎(Amblyseius cucumeris)、粉蚧玉棒跳小蜂(Pseudaphycus malinus)、溫氏捕植璊(Amblyseius womersleyi)、桃赤蚜蚜繭蜂(Aphidius colemani)、漿角蚜小蜂(Eretmocerus eremicus)、食蚜癭蚊(Aphidoletes aphidimyza)、斯氏鈍綏蟎(Amblyseius swirskii)、南方小花蝽(Orius strigicollis)、利小植綏蟎(Phytoseiulus persimilis)、退變鈍綏蟎(Amblyseius degenerans)、利小植綏蟎(Phytoseiulus persimilis)、小黑花椿(Orius sauteri)、反顎繭蜂(Dacnusa sibirica)、加州捕植蟎(Amblyseius californicus)、日本通草蛉(Chrysoperla nipponensis)、Anicetus beneficus。

接著，雖將可混用或併用之公知之農業資材例示於以下，但並非被限定於此等之例者。

農業資材： 乙烯、次氯酸水(限電解於鹽酸或氯化鉀水溶液所得者)、小蘇打、食醋、腐殖質、腐殖酸、黃腐酸、海藻萃取物、多糖類、胺基酸、微生物資材、源自動植物之機能性成分、微生物代謝物、微生物活性化資材、土壤展著劑、土壤浸透性調節資材、土壤保水資材等，或生物刺激劑(biostimulant)。

接著，雖將可混用或併用之公知之農業用肥料成分例示於以下，但並非被限定於此等之例者。

肥料中雖有無機質肥料與有機質肥料等，但例如可列舉氯化銨、硫酸銨、硝酸銨、磷酸二氫銨、硝酸尿素銨、尿素、石灰氮、硝酸鉀、過磷酸石灰、重過磷酸石灰、磷酸二氫鉀、氯化鉀、硫酸鉀、碳酸鉀、矽酸鉀、油粕、魚粉、米糠、蝙蝠糞、發酵雞糞等。

又，本發明之土壤傳染性植物病害防除劑等，亦可使用在以基因組重組、基因組編輯等之嶄新的育種技術、人工交配等，獲得害蟲耐性、病害耐性、除草劑耐性等之特性之植物。

如此進行，藉由將芽孢桿菌屬細菌菌株，例如芽孢桿菌屬G4L1菌株、提蒙芽孢桿菌G5S1菌株，及/或Fictibacillus solisalsi G5L2菌株之活菌體或包含該活菌體之培養物作為有效成分，於蔬菜類青枯病等之土壤傳染性植物病害防除亦顯示顯著的效果，可提供一種於實際之作物生產現場亦可安全使用之藥劑。

以下，雖針對本發明之實施例進行描述，但本發明並非僅被限定於此等之實施例，在本發明之技術性思想內，此等之各式各樣的變形為可能。 [實施例1]

(蕃茄青枯病防除效果確認試驗) 將蕃茄(品種：Ponderosa)以填充園藝培土之盆(9cm×9cm)生育至4複葉期。而且，將枯草桿菌G4L1菌株懸濁液、提蒙芽孢桿菌G5S1菌株懸濁液、Fictibacillus solisalsi G5L2菌株懸濁液50ml藉由手噴進行莖葉處理，於35℃之溫室保管7天。然後，將蕃茄青枯病菌懸濁液50ml藉由底面給水處理接種。作為比較，亦實施僅底面給水處理蕃茄青枯病菌懸濁液者(無處理區)。尚，G4L1菌株懸濁液、G5S1菌株懸濁液、G5L2菌株懸濁液係於NB培養基(肉萃取物0.5%、蛋白腖1.5%、氯化鈉0.5%、磷酸一氫鉀0.5%、pH7.0)，以30℃、200rpm、24小時振盪培養後，進行離心集菌(4500×g、15分鐘)，將此以滅菌水懸濁，使用進行2次離心集菌之操作者，以600nm吸光度(OD₆₀₀ )成為1.0的方式來調製。又，蕃茄青枯病菌懸濁液係將於YP培養基(酵母0.5%、蛋白腖1.0%、pH6.8~7.2)24小時振動培養後經離心集菌者以蒸餾水稀釋，並以600nm吸光度(OD₆₀₀ )成為0.02(9.2×10⁶ cfu/ml)的方式調製來使用。

而且，於蕃茄青枯病菌接種20天後，將蕃茄青枯病之發病程度用以下枝基準進行指數調査，算出發病度及防除價。又，針對各5株，進行照片拍攝。將結果示於圖面代用照片之圖1、圖2。

＜發病指數＞ 0：無發病 1：一部分之小葉萎凋 2：未滿半數之複葉萎凋 3：半數以上之複葉萎凋 4：枯死

＜發病度及防除價＞ 發病度=Σ(發病指數×該株數)/(調査株數×4)×100 防除價=100-(處理區之發病度/無處理區之發病度)×100

將此試驗結果示於下述表2及圖1(圖面代用照片)。無處理區相對於2/3之葉發病蕃茄青枯病，G4L1菌株處理區、G5S1菌株處理區、G5L2菌株處理區已大幅降低發病葉率，平均發病度亦已大幅降低。防除價亦已顯示高之值，顯示該菌株對於蕃茄青枯病發揮高防除效果。圖2係表示無處理區的結果之圖面代用照片。

[實施例2]

(與既存芽孢桿菌劑之蕃茄青枯病防除效果比較試驗) 以將蕃茄(品種：Ponderosa)填充園藝培土之盆(9cm×9cm)生育至4複葉期，將枯草桿菌G4L1菌株懸濁液、提蒙芽孢桿菌G5S1菌株懸濁液、Fictibacillus solisalsi G5L2菌株懸濁液50ml，及作為比較劑之既存芽孢桿菌劑之Impressionclear(註冊商標：S.D.S Biotech公司製)、AgroCare水合劑(註冊商標：日本曹達公司製)、Ecoshot(註冊商標：組合化學工業公司製)、抗生物質劑之瓦達黴素液劑5(註冊商標：住友化學公司製)藉由手噴，進行莖葉處理，以35℃之溫室保管7天。然後，將蕃茄青枯病菌懸濁液50ml藉由底面給水處理接種。作為比較，亦實施僅底面給水處理蕃茄青枯病菌懸濁液者(無處理區)。尚，G4L1菌株懸濁液、G5S1菌株懸濁液、G5L2菌株懸濁液係於NB培養基(肉萃取物0.5%、蛋白腖1.5%、氯化鈉0.5%、磷酸一氫鉀0.5%、pH7.0)，以30℃、200rpm、24小時振盪培養後，進行離心集菌(4500×g、15分鐘)，將此以滅菌水懸濁，使用進行2次離心集菌之操作者，以600nm吸光度(OD₆₀₀ )成為1.0的方式來調製。如下述表3所記載，懸濁液中之活菌數相當於G4L1菌株懸濁液為2.3×10⁷ cfu/ml，G5S1菌株懸濁液為1.6×10⁸ cfu/ml，G5L2菌株懸濁液為1.4×10⁷ cfu/ml。又，蕃茄青枯病菌懸濁液係將以YP培養基(酵母0.5%、蛋白腖1.0%、pH6.8~7.2)24小時振動培養後進行離心集菌者以蒸餾水稀釋，以600nm吸光度(OD₆₀₀ )成為0.02(9.2×10⁶ cfu/ml)的方式調製來使用。尚，比較劑之活菌數以成為Impressionclear(1.6×10⁸ cfu/ml)、AgroCare水合劑(1.6×10⁸ cfu/ml)、Ecoshot(1.6×10⁸ cfu/ml)方式進行調整，瓦達黴素液劑5係將800倍稀釋液供試於試驗。

而且，於蕃茄青枯病菌接種11天後，將蕃茄青枯病之發病程度以實施例1之發病指數調査，算出發病度及防除價。

上述之市售的防除劑的有效成分分別如以下。 (A)Impressionclear：Bacillus amyloliquefaciens AT-332 (S.D.S Biotech公司製品) (B)AgroCare水合劑：Bacillus subtilis HAI-0404 (日本曹達公司製品) (C)Ecoshot：Bacillus subtilis D747株 (組合化學工業公司製品) (D)瓦達黴素液劑5：維利黴素A (住友化學公司製品)

將此試驗結果示於下述表3。與比較之既存芽孢桿菌劑Impressionclear、AgroCare水合劑、Ecoshot處理相比較，枯草桿菌G4L1菌株懸濁液、提蒙芽孢桿菌G5S1菌株懸濁液、Fictibacillus solisalsi G5L2菌株懸濁液處理，以同活菌數或是其以下對於蕃茄青枯病顯示明顯優異之防除效果。又，對於已知對於蕃茄青枯病以莖葉散布顯示效果之抗生物質劑瓦達黴素液劑5，亦顯示顯著優異的效果。

[實施例3]

(僅藉由地上部之處理的蕃茄青枯病防除效果確認試驗) 又，為了確認該菌株以莖葉散布對青枯病間接性顯示效果，與實施例1相同，於生育至4複葉期為止之蕃茄(桃太郎8)，以鋁箔完全覆蓋地表面，防止對土壤之該菌株的滴下(圖3)。而且，將枯草桿菌G4L1菌株懸濁液50ml藉由手噴進行莖葉處理，完全風乾後去除鋁箔，於35℃之溫室保管7天。然後，將蕃茄青枯病菌懸濁液50ml藉由底面給水處理接種。作為比較，亦實施僅底面給水處理蕃茄青枯病菌懸濁液者(無處理區)。尚，G4L1菌株懸濁液係於NB培養基(肉萃取物0.5%、蛋白腖1.5%、氯化鈉0.5%、磷酸一氫鉀0.5%、pH7.0)，以30℃、200rpm、24小時振盪培養後，進行離心集菌(4500×g、15分鐘)，將此以滅菌水懸濁，使用進行2次離心集菌之操作者，以600nm吸光度(OD₆₀₀ )成為1.0的方式來調製。又，蕃茄青枯病菌懸濁液係將以YP培養基24小時振動培養後進行離心集菌者以蒸餾水稀釋，以600nm吸光度(OD₆₀₀ )成為0.02(9.2×10⁶ cfu/ml)的方式調製來使用。

而且，針對進行此等之處理的蕃茄各10株，於蕃茄青枯病菌接種13天後，將蕃茄青枯病之發病程度以實施例1之發病指數調査，算出發病度及防除價。

將此試驗結果示於下述表4。相對於無處理區進6成之葉發病蕃茄青枯病，G4L1菌株處理區係發病度已顯著降低，該菌株藉由莖葉散布，間接性顯示對於土壤病害之蕃茄青枯病發揮高防除效果。

[實施例4]

(枯草桿菌G4L1菌之芽胞液的作成) 將枯草桿菌G4L1菌植菌在NA培養基，進行30℃、24小時培養。將生長出的菌落於NB培養基200rpm、35℃、培養4天，於4℃靜置2天，促進溶菌。尚，每次添加Silicone KS-66(註冊商標)：信越化學股份有限公司製)作為消泡劑。

(白菜軟腐病(bacterial soft rot)防除效果確認試驗) 接種白菜軟腐病菌(Erwinia carotovora subsp. carotovora)，在28℃、48小時玻璃濕室使其發病。於移植罹病白菜之9天前，散布在田地內並犁入田裡，準備軟腐病污染田地。將白菜(品種：無雙)之苗於填充與作(註冊商標：JCAM AGRI股份有限公司製)培土之36孔格托盤，使其生育41天，並以株間30cm、條間40cm之間隔移植至上述之軟腐病污染田地。將流動層造粒前述之芽胞液的枯草桿菌G4L1菌製劑(5.7×10⁹ cfu/g)以水稀釋成250倍，將添加1/5000量之展著劑之Kumiai Kumiten(註冊商標：組合化學工業股份有限公司製)的稀釋水，移植26天後與33天後之2次，以分別成為200L/10a的液量的方式使用氣體噴霧器，散布在莖葉。作為比較，準備將未放入枯草桿菌G4L1菌製劑之僅展著劑之稀釋水散布在莖葉者(無處理)、與於蔬菜類之軟腐病防除所慣行使用之無機銅劑Z波爾多(Bordeaux)水合劑(註冊商標)的500倍稀釋液，添加同樣之展著液，散布在莖葉者。

於移植41天後分別各採取26株白菜，將白菜軟腐病之發病程度依照以下之基準調査，算出發病度及防除價。

＜發病指數＞ 0：無發病 1：僅外葉的一部分發病 2：外葉、結球葉的一部分發病 3：結球葉的大部分發病，或是有其以上之被害

＜發病度及防除價＞ 發病度=Σ(發病指數×該株數)×100/(調査株數×3) 防除價=100-(處理區之發病度/無處理區之發病度)×100

將結果示於表5。對於無處理區之發病度23.1，散布G4L1菌製劑之白菜係發病度低，較Z波爾多(Bordeaux)水合劑，顯示更高之防除價。如此，枯草桿菌G4L1菌對於白菜軟腐病發揮高防除效果。

上述之市售的防除劑的有效成分係如以下。 (A)Z波爾多(Bordeaux)水合劑：鹼性硫酸銅(日本農藥公司製品) [實施例5]

(增殖能確認試驗) 將G4L1菌株、與皆為比較之市售之芽孢桿菌屬菌病害防除劑的Impressionclear(註冊商標)、BOTOKILLER(註冊商標)水合劑、Ecoshot(註冊商標)，植菌至NA培養基(肉萃取物0.5%、蛋白腖1.5%、氯化鈉0.5%、洋菜1.5%、pH7.0)，並進行30℃、24小時培養。釣菌24小時後所出現之單一菌落，以NB培養基(肉萃取物0.5%、蛋白腖1.5%、氯化鈉0.5%、磷酸一氫鉀0.5%、pH7.0)，30℃、200rpm、24小時振盪培養後，進行離心集菌(4500×g、15分鐘)，將此以滅菌水懸濁，使用進行2次離心集菌之操作者，皆為以600nm吸光度(OD₆₀₀ )成為0.1的方式來調製。添加100μl將填充5ml之 NB培養基調整在L字試驗管的的菌液。以小型振盪培養裝置，一邊以30℃、70rpm進行振盪培養，一邊測量600nm吸光度(OD₆₀₀ )，而得到增殖曲線。

上述之市售之防除劑的有效成分分別如以下。 (A)Impressionclear：Bacillus amyloliquefaciens AT-332 (S.D.S Biotech公司製品) (B)BOTOKILLER水合劑：Bacillus subtilis (出光興產公司製品) (C)Ecoshot：Bacillus subtilis D747 (組合化學工業公司製品)

將培養結果示於表6及圖4(4菌株的培養曲線)。G4L1菌株較市售芽孢桿菌屬菌病害防除劑更明顯，增殖速度快速，最快到達穩定期。又，吸光度與其他芽孢桿菌屬菌株病害防除劑相比較，亦顯示最高之值，該菌株與以往株相比較，顯示增殖速度快速，較以往株，更可短時間培養。

從上述即可清楚明白，有關本發明之菌株係增殖速度快速，從吸光度的數據亦可清楚明白，培養時間耗費5~8小時急速上昇，即使耗費8~10小時亦急速上昇。事實上，於培養時間8小時的數據，本菌株之吸光度已達到以往菌株之最良菌株(於此，為Impressionclear之有效成分菌株)的吸光度的(約)2倍(以上)，即使在培養時間10小時，亦得到非常高之吸光度。又，得到600nm吸光度(OD₆₀₀ )測定值3.00~3.50為止所需要的培養時間，相對於在以往之芽孢桿菌屬之內，最短之菌株(於此，為Impressionclear之有效成分菌株)為15小時，本菌株的情況為僅以10小時的培養，即已達到該吸光度，證實增殖速度非常高。

如此，使用菌株之增殖速度快速，係指有效成分可以短時間取得，並且短縮了有關本發明之防除劑的製造期間。在微生物農藥的製造，微生物的培養、增殖步驟可以說是化學反應之速率決定階段，若此步驟快速結束，僅此即可得到可短時間迅速製造該防除劑的優點。又，同時對防止污染亦為有益。進而，在製劑步驟亦有優點。

總結本發明係如以下。

以提供一種在實際的作物生產現場，發揮安定的土壤傳染性植物病害防除效果等，作為生物農藥可安全使用之植物非病原性的新穎菌株，及使用該新穎菌株之土壤傳染性植物病害防除劑等作為目的。

而且，藉由於以往之發現，將所未知悉細菌性植物病害･土壤傳染性植物病害的防除作用之芽孢桿菌、虛構芽胞桿菌屬細菌新穎菌株的活菌體或包含該活菌體之培養物作為有效成分，可提供一種蔬菜類青枯病防除劑等之土壤傳染性植物病害防除劑等。本防除劑其特徵為可將起因於土壤細菌之Ralstonia solanacearum species complex之青枯病(bacterial wilt disease)及/或軟腐病(bacterial soft rot)藉由莖葉(散布)處理防除的點。 [受託編號]

在本發明完成寄託手續之微生物的受託編號示於下述。 (1)枯草桿菌(Bacillus sp.)G4L1菌株(NITE BP-03204)。 (2)提蒙芽孢桿菌(Bacillus timonensis)G5S1菌株(NITE BP-03206)。 (3)Fictibacillus solisalsi G5L2菌株(NITE BP-03205)。

[圖1]表示實施例1之蕃茄青枯病防除效果確認試驗中之蕃茄青枯病菌接種14天後之G4L1株處理區的拍攝照片。為了比較個體差，以5連盆進行者。 [圖2]表示實施例1之蕃茄青枯病防除效果確認試驗中之蕃茄青枯病菌接種14天後之無處理區的拍攝照片。 [圖3]表示實施例2之接種方法。 [圖4]表示G4L1株及其他芽孢桿菌屬菌菌株之4菌株的增殖曲線。

國外寄存資訊 1.日本; NPMD ; 2020/04/20 ; NITE BP-03204 2.日本; NPMD ; 2020/04/20 ; NITE BP-03205 3.日本; NPMD ; 2020/04/20 ; NITE BP-03206

Claims (16)

1. 一種新穎細菌菌株之枯草桿菌(Bacillus sp.)G4L1菌株(NITE BP-03204)。
2. 一種新穎細菌菌株之提蒙芽孢桿菌(Bacillus timonensis)G5S1菌株(NITE BP-03206)。
3. 一種新穎細菌菌株之Fictibacillus solisalsi G5L2菌株(NITE BP-03205)。
4. 如請求項1~3中任一項之菌株，其係藉由施用在植物的種子、植物體的根部、植物體的莖葉部、栽培用載體、營養液、土壤之至少一個，可防除植物病害。
5. 如請求項1~3中任一項之菌株，其係增殖速度快速。
6. 一種植物病害防除劑，其特徵為將如請求項1~3中任一項之1以上的菌株或該菌株的培養物作為有效成分含有。
7. 如請求項6之植物病害防除劑，其係藉由施用在植物的種子、植物體的根部、植物體的莖葉部、栽培用載體、營養液、土壤之至少一個，可防除植物病害。
8. 如請求項6或7之植物病害防除劑，其係可防除蔬菜類、果樹類、米類、麥類之至少一個病害。
9. 如請求項6~8中任一項之植物病害防除劑，其係可防除茄科植物及/或十字花科植物的病害。
10. 如請求項7~9中任一項之植物病害防除劑，其係藉由施用在植物體的莖葉，可防除土壤傳染性植物病害。
11. 如請求項10之植物病害防除劑，其係可防除蔬菜類青枯病及/或蔬菜類軟腐病。
12. 一種植物病害防除方法，其係包含將如請求項1~3中任一項之1以上之菌株的活菌體或包含該活菌體之培養物與植物的種子、植物體的根部、地上部、栽培用載體、營養液、土壤接觸或混合之步驟而成。
13. 如請求項12之植物病害防除方法，其係防除蔬菜類、果樹類、米類、麥類之至少一個病害。
14. 如請求項12或13之植物病害防除方法，其係防除茄科植物及/或十字花科植物的病害。
15. 如請求項12~14中任一項之植物病害防除方法，其係藉由施用在植物體的莖葉，防除土壤傳染性植物病害。
16. 如請求項12~15中任一項之植物病害防除方法，其係防除蔬菜類青枯病及/或蔬菜類軟腐病。

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