TW202208396A - Ｔ細胞調控性多聚體多肽和使用彼之方法 - Google Patents

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Abstract

本發明提供包含免疫調控性多肽且包含呈現表位之Wilms氏瘤肽之T細胞調控性多聚體多肽。T細胞調控性多聚體多肽係用於調控T細胞之活性及用於調控個體之免疫反應。

Description

Ｔ細胞調控性多聚體多肽和使用彼之方法
本揭露提供包含免疫調控性多肽且包含呈現表位之Wilms氏瘤肽之T細胞調控性多聚體多肽(TMMP)。
適應性免疫反應涉及存在於T細胞之表面上的T細胞受體(TCR)與藉由主要組織相容性複合體(MHC；在人類亦稱為人白血球抗原(HLA)複合體)非共價呈現在抗原呈現細胞(APC)之表面上的小肽抗原之接合。此接合代表免疫系統的靶向機制且係T細胞調控(活化或抑制)及效應功能之必需分子交互作用。在表位特異性細胞靶向之後，經靶向之T細胞經由在APC上發現之共刺激蛋白與T細胞之對應共刺激蛋白之接合而活化。兩種信號—表位/TCR結合及APC共刺激蛋白與T細胞共刺激蛋白之接合—係驅動T細胞特異性及活化或抑制所需。TCR對給定表位具特異性；然而，共刺激蛋白不具表位特異性，且相反地通常在所有T細胞或大T細胞子集上表現。
[所欲解決之問題] 本發明人嘗試製備可用於調控T細胞之活性及調控個體之免疫反應的T細胞調控性多聚體多肽。 [技術解決方案] 根據本揭露之一態樣，揭示T細胞調控性多聚體多肽。 根據本揭露之另一態樣，揭示包含核酸分子之核酸。 根據本揭露之又另一態樣，揭示包含核酸之表現載體。 根據本揭露之又另一態樣，揭示選擇性調控對Wilms氏瘤-1(WT-1)表位具特異性之T細胞的活性之方法。 根據本揭露之又另一態樣，揭示調控個體之免疫反應的方法。 根據本揭露之又另一態樣，揭示選擇性遞送免疫調控性多肽至目標T細胞之方法。 根據本揭露之又另一態樣，揭示在獲自個體之混合的T細胞族群中偵測與WT-1表位結合之目標T細胞的存在之方法。 [優異功效] T細胞調控性多聚體多肽係用於調控T細胞之活性及用於調控個體之免疫反應。
定義 在本文中可互換使用之用語「多核苷酸(polynucleotide)」及「核酸分子(nucleic acid)」係指任何長度之聚合形式的核苷酸，不論核糖核苷酸或去氧核醣核苷酸。因此，此用語包括但不限於單股、雙股或多股DNA或RNA、基因體DNA、cDNA、DNA-RNA雜交、或包含嘌呤及嘧啶鹼基或其他天然、經化學或生化修改、非天然或衍生性核苷酸鹼基之聚合物。 用語「肽(peptide)」、「多肽(polypeptide)」及「蛋白質(protein)」在本文中可互換使用且係指任何長度之聚合形式的胺基酸，其可包括編碼及非編碼胺基酸、經化學或生化修飾或衍生之胺基酸及具有經修飾之肽骨架之多肽。 多核苷酸或多肽具有與另一多核苷酸或多肽某一百分比之「序列同一性」意指當比對時，該百分比之鹼基或胺基酸係相同，且當比較二個序列時，該百分比之鹼基或胺基酸係在相同的相對位置。序列同一性可以一些不同方式測定。為了測定序列同一性，序列可使用可得自包括ncbi.nlm.nili.gov/BLAST、ebi.ac.uk/Tools/msa/tcoffee/、ebi.ac.uk/Tools/msa/muscle/、mafft.cbrc.jp/alignment/software/網站之各種方便方法及電腦程式比對(例如BLAST、T-COFFEE、MUSCLE、MAFFT等)。見例如Altschul et al.(1990), J. Mol. Bioi. 215：403-10。 用語「保守性胺基酸取代(conservative amino acid substitution)」係指具有類似側鏈之胺基酸殘基之蛋白質的可交換性。例如，具有脂族側鏈之胺基酸群組係由甘胺酸、丙胺酸、纈胺酸、白胺酸及異白胺酸組成；具有脂族羥基側鏈之胺基酸群組係由絲胺酸及蘇胺酸組成；具有含醯胺側鏈之胺基酸群組係由天冬醯胺酸及麩醯胺酸組成；具有芳族側鏈之胺基酸群組係由苯丙胺酸、酪胺酸及色胺酸組成；具有鹼性側鏈之胺基酸群組係由離胺酸、精胺酸及組胺酸組成；具有酸性側鏈之胺基酸群組係由麩胺酸及天冬胺酸組成；及具有含硫側鏈之胺基酸群組係由半胱胺酸及甲硫胺酸組成。例示性保守性胺基酸取代群組係：纈胺酸-白胺酸-異白胺酸、苯丙胺酸-酪胺酸、離胺酸-精胺酸、丙胺酸-纈胺酸-甘胺酸及天冬醯胺酸-麩醯胺酸。 如本文中所使用之用語「免疫突觸(immunological synapse/immune synapse)」通常係指介於適應性免疫反應之二個交互作用免疫細胞之間的天然界面，包括例如介於抗原呈現細胞(APC)或目標細胞與效應細胞例如淋巴細胞、效應T細胞、自然殺手細胞及類似物之間的界面。介於APC與T細胞之間的免疫突觸通常係藉由T細胞抗原受體與主要組織相容性複合體分子之交互作用起始，例如Bromley et al., Annu Rev Immunol. 2001；19：375-96所述；其揭露全文以引用方式併入本文中。 「T細胞」包括表現CD3之所有類型的免疫細胞，包括輔助T細胞(CD4+ 細胞)、細胞毒性T細胞(CD8+ 細胞)、T調節細胞(Treg)及NK-T細胞。 如本文中所使用之用語「免疫調控性多肽(immunomodulatory polypeptide)」(亦稱為「共刺激多肽(co-stimulatory polypeptide)」)包括在抗原呈現細胞(APC)(例如樹突細胞、B細胞及類似物)上之多肽，其與T細胞上之同源共免疫調控性多肽特異性結合，藉此提供除了由例如TCR/CD3複合體與裝載肽之主要組織相容性複合體(MHC)多肽之結合所提供之原始信號以外的信號，且媒介T細胞反應，包括但不限於增生、活化、分化及類似者。免疫調控性多肽可包括但不限於CD7、B7-1(CD80)、B7-2(CD86)、PD-L1、PD-L2、4-1BBL、OX40L、Fas配體(FasL)、誘導性共刺激配體(ICOS-L)、細胞間黏附分子(ICAM)、CD30L、CD40、CD70、CD83、HLA-G、MICA、MICB、HVEM、淋巴毒素β受體、3/TR6、ILT3、ILT4、HVEM、與Toll配體受體結合之促效劑或抗體及與B7-H3特異性結合之配體。 如上所述，「免疫調控性多肽」(在本文中亦稱為「MOD」)與T細胞上之同源共免疫調控性多肽特異性結合。 本揭露之TMMP的「免疫調控性結構域(immunomodulatory domain)」(「MOD」)與同源共免疫調控性多肽結合，該同源共免疫調控性多肽可存在於目標T細胞上。 如本文中所使用之「異源性(Heterologous)」是指分別未在天然核酸或蛋白質中發現之核苷酸或多肽。 如本文中所使用之「重組(Recombinant)」是指特定核酸(DNA或RNA)係各種選殖、限制、聚合酶連鎖反應(PCR)及/或接合步驟組合之產物，該些步驟導致具有異於天然系統中發現之內源性核酸之結構編碼或非編碼序列之建構體。編碼多肽之DNA序列可自cDNA片段或一系列合成的寡核苷酸組裝以提供合成的核酸，該合成的核酸能夠在細胞或不含細胞之轉錄及轉譯系統所包含之重組轉錄單元中表現。 用語「重組表現載體(recombinant expression vector)」或「DNA建構體(DNA construct)」在本文中可互換使用以指包含載體及至少一個插入物之DNA分子。產生重組表現載體通常係為了表現及/或增殖插入物之目的或為了建構其他重組核苷酸序列。插入物可與啟動子序列或不與啟動子序列可操作地連接，且可與DNA調節序列或不與DNA調節序列可操作地連接。 如本文中所使用，用語「親和力(affinity)」係指二種劑(例如抗體及抗原)之可逆性結合的平衡常數且係表現為解離常數(KD )。比起抗體對非相關胺基酸序列之親和力，親和力可高出至少1倍、高出至少2倍、高出至少3倍、高出至少4倍、高出至少5倍、高出至少6倍、高出至少7倍、高出至少8倍、高出至少9倍、高出至少10倍、高出至少20倍、高出至少30倍、高出至少40倍、高出至少50倍、高出至少60倍、高出至少70倍、高出至少80倍、高出至少90倍、高出至少100倍或高出至少1,000倍或超過高出至少1,000倍。抗體對目標蛋白質之親和力可為例如約100奈莫耳(nM)至約0.1 nM、約100 nM至約1皮莫耳(pM)或約100 nM至約1飛莫耳(fM)或超過約100 nM至約1飛莫耳。如本文中所使用，用語「親合力(avidity)」係指二種或超過二種劑之複合體在稀釋後抗解離之抗性。關於抗體及/或抗原結合片段之用語「免疫反應性(immunoreactive)」及「優先結合(preferentially binds)」在本文中可互換使用。 在本文中使用之用語「結合」(例如指涉TMMP與T細胞上之多肽(例如T細胞受體)的結合)係指介於二個分子之間的非共價交互作用。非共價結合係指二個分子之間因為例如靜電、疏水性、離子性及/或氫鍵交互作用包括諸如鹽橋及水橋之交互作用的直接締合。非共價結合交互作用通常具有解離常數(KD )小於10-6 M、小於10-7 M、小於  10-8 M、小於10-9 M、小於10-10 M、小於10-11 M、小於 10-12 M、小於10-13 M、小於10-14 M或小於10-15 M之特徵。「親和力」係指非共價結合之強度，結合親和力增加與較低KD 相關。「特異性結合(specific binding)」通常係指以至少約10-7 M或高於10-7 M之親和力結合，例如5 x 10-7 M、10-8 M、5 x 10-8 M、10-9 M及高於10-9 M。「非特異性結合(non-specific binding)」通常係指以小於約10-7 M之親和力(例如以10-6 M、10-5 M、10-4 M之親和力結合)結合(例如配體與除彼之指定結合部位或受體以外之部份結合)。然而，在一些上下文例如TCR與肽/MHC複合體之間的結合中，「特異性結合」可在1 μM至100 μM或100 μM至1 mM之範圍內。如本文中所使用之「共價結合」或「共價鍵」係指在二個不同分子之間形成一或多個共價化學結合。 本文所使用之用語「治療(treatment/treating)」及類似用語通常係指獲得所欲藥理學及/或生理學效應。該效應可為預防性，也就是完全或部分預防疾病或其症狀，及/或該效應可為治療性，也就是部分或完全治癒疾病及/或疾病帶來的不良影響。本文所使用之「治療」涵蓋對哺乳動物之疾病或症狀之任何治療，且包括：(a)預防疾病或症狀在個體發生，該個體可為易發生該疾病或症狀但尚未被診斷為已有該疾病者；(b)抑制疾病或症狀，即停止疾病的發展或進展；及/或(c)緩解疾病，即造成疾病消退及/或緩解一或多種疾病症狀。治療劑可在疾病或損傷開始之前、之期間或之後投予。持續性疾病之治療受到特別關注，其中該治療穩定或減少患者之非所欲臨床症狀。最好在受影響組織完全喪失功能之前實施該治療。主題療法最好在疾病的症狀性階段期間投予，且在一些情況下在疾病的症狀性階段之後投予。 用語「個體(individual/subject)」、「宿主(host)」及「患者(patient)」在本文中可互換使用且係指需要診斷、治療或療法之任何哺乳動物個體。哺乳動物包括例如人類、非人靈長動物、齧齒動物(例如大鼠、小鼠)、兔類動物(例如兔)、有蹄類(例如牛、綿羊、豬、馬、山羊及類似動物)等。 在進一步描述本發明之前，應理解本發明不限於所述之具體實施態樣，因為此類實施態樣當然可能變化。亦應理解的是，本文所使用之用語只是為了描述具體實施態樣之目的，並不意圖限制，因為本發明之範圍將僅由隨附之權利要求限制。 當提供數值範圍時，應理解除非上下文另外清楚地指明，否則本發明涵蓋該範圍之上限及下限之間的各插入值(至下限單位之十分之一)及在該陳述範圍中之任何其他陳述或插入值。受限於陳述範圍中任何具體排除之上下限，這些較小範圍之上限及下限可獨立地包括於較小範圍中且亦涵蓋於本發明內。當陳述範圍包括上下限之一或二者時，本發明亦包括排除該些所包括之上下限之任一或二者的範圍。 除非另行定義，此處所使用之所有技術及科學用語和本發明所屬技術領域中具有通常知識者所通常瞭解之意義相同。雖然任何與此處所描述之方法及材料類似或相等者亦可被用於實施或測試本發明，較佳方法及材料係於此描述。在本文中提及之所有公開案均以引用方式併入本文中以揭示並描述與所引用公開案相關之方法及/或材料。 應注意的是，除非上下文另外清楚地指明，否則本說明書及隨附之權利要求中所用的單數形式「一(a/an)」及「該(the)」包括複數指代物。因此，例如指涉「T細胞調控性多聚體多肽」包括複數個該等多肽，且指涉「免疫調控性多肽」包括指涉所屬技術領域中具有通常知識者已知之一或多種免疫調控性多肽及彼之等效物等。應進一步注意的是，申請專利範圍的撰寫可排除任何可選的元件。因此，此陳述係意圖作為使用該等排除性用語如「僅(solely)」、「只有(only)」及類似用語連接列舉請求項元件或使用「負面」限制時之前置基礎。 當能了解的是本發明之某些特徵為了清楚說明之目的而在分開之實施態樣之上下文中描述者，亦有可能在單一實施態樣中組合提供。相反地，本發明之各種特徵為了簡便起見而在單一實施態樣之上下文中描述者，亦有可能分開或在任何適當之亞組合中提供。關於本發明之實施態樣的所有組合係具體涵蓋於本發明且在本文中揭示，正如同各個及每個組合係個別且明確地揭示。此外，各種實施態樣及其元件之所有次組合亦具體涵蓋於本發明且在本文中揭示，正如同各個及每個該等次組合係個別且明確地在本文中揭示。 提供在本文中所討論之公開案僅限於彼等在本申請案申請日期之前的揭示內容。本文中之內容不應被視為承認本發明不具有憑藉先前發明而早於該等公開案之權利。另外，所提供之公開日期可能與實際公開日期不同，其可能需要獨立確認。詳細說明 本揭露提供包含免疫調控性多肽且包含呈現表位之Wilms氏瘤-1(WT-1)肽之T細胞調控性多聚體多肽。TMMP係用於調控T細胞之活性及用於調控個體之免疫反應。T 細胞調控性多聚體多肽 本揭露提供T細胞調控性多聚體多肽(TMMP)，其包含：a)第一多肽；及b)第二多肽，其中該TMMP包含表位；第一主要組織相容性複合體(MHC)多肽；第二MHC多肽；一或多種免疫調控性多肽；及可選地免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架。本揭露提供TMMP，其中TMMP係異二聚體，其包含：a)第一多肽，其包含第一MHC多肽；及b)第二多肽，其包含第二MHC多肽，其中第一多肽或第二多肽包含表位(例如呈現表位之肽)；其中第一多肽及/或第二多肽包含可相同或不同之一或多種免疫調控性多肽；及可選地Ig Fc多肽或非Ig支架。本揭露之TMMP在本文中亦稱為「本揭露之多聚體多肽」或「synTac」。存在於本揭露之TMMP中之肽表位係WT-1肽。 本揭露提供TMMP，其包含異二聚體多肽，該異二聚體多肽包含：a)第一多肽，其包含：i)肽表位；及ii)第一MHC多肽；b)第二多肽，其包含第二MHC多肽；及c)至少一種免疫調控性多肽，其中第一及/或第二多肽包含至少一種(即一或多種)免疫調控性多肽。可選地，第一或第二多肽包含Ig Fc多肽或非Ig支架。該一或多種免疫調控性多肽中至少一種係變體免疫調控性多肽，其相較於對應野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之親和力展現對該同源共免疫調控性多肽減少的親和力。存在於本揭露之TMMP中之表位以至少100 μM(例如至少10 μM、至少1 μM、至少100 nM、至少10 nM或至少1 nM)之親和力與T細胞上之T細胞受體(TCR)結合。本揭露之TMMP與第一T細胞結合之親和力係至少25%高於TMMP與第二T細胞結合之親和力，其中第一T細胞在其表面上表現同源共免疫調控性多肽及TCR，該TCR與表位結合之親和力係至少100 μM，且其中第二T細胞在其表面上表現同源共免疫調控性多肽，但不在其表面上表現以至少100 μM(例如至少10 μM、至少1 μM、至少100 nM、至少10 nM或至少1 nM)之親和力與表位結合之TCR。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之肽表位係WT-1肽。 本揭露提供TMMP，其中TMMP係： A)異二聚體，其包含：a)第一多肽，其包含第一MHC多肽；及b)第二多肽，其包含第二MHC多肽，其中第一多肽或第二多肽包含表位(例如呈現表位給T細胞之肽)；其中第一多肽及/或第二多肽包含一或多種可相同或不同之免疫調控性多肽，且其中一或多種免疫調控性多肽中至少一種可為野生型免疫調控性多肽或野生型免疫調控性多肽之變體，其中變體免疫調控性多肽相較於對應野生型免疫調控性多肽之胺基酸序列包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代；且其中第一多肽或第二多肽可選地包含Ig Fc多肽或非Ig支架；或 B)異二聚體，其包含：a)第一多肽，其包含第一MHC多肽；及b)第二多肽，其包含第二MHC多肽，其中第一多肽或第二多肽包含表位；其中第一多肽及/或第二多肽包含可相同或不同之一或多種免疫調控性多肽， 其中一或多種免疫調控性多肽中至少一種係野生型免疫調控性多肽之變體，其中變體免疫調控性多肽相較於對應野生型免疫調控性多肽之胺基酸序列包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代， 其中一或多個免疫調控性結構域中至少一個係變體免疫調控性多肽，其相較於對應野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之親和力展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力，且其中表位以至少10-7 M之親和力與T細胞上之TCR結合，以使：i)TMMP多肽與第一T細胞結合之親和力係至少25%高於TMMP與第二T細胞結合之親和力，其中第一T細胞在其表面上表現同源共免疫調控性多肽及TCR，該TCR與表位結合之親和力係至少10-7 M，且其中第二T細胞在其表面上表現同源共免疫調控性多肽，但不在其表面上表現以至少10-7 M之親和力與表位結合之TCR；及/或ii)當藉由生物膜干涉術測量時，對照TMMP (其中對照包含野生型免疫調控性多肽)對同源共免疫調控性多肽之結合親和力與包含野生型免疫調控性多肽之變體的TMMP對同源共免疫調控性多肽之結合親和力的比例係在1.5：1至106 ：1之範圍內；且其中變體免疫調控性多肽相較於對應野生型免疫調控性多肽之胺基酸序列包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代；且 其中第一多肽或第二多肽可選地包含Ig Fc多肽或非Ig支架；或 C)異二聚體，其包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)表位；ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第二MHC多肽；及ii)可選地免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架，其中TMMP包含可相同或不同之一或多個免疫調控性結構域，其中一或多個免疫調控性結構域中至少一個係：A)在第一多肽之C端；B)在第二多肽之N端；C)在第二多肽之C端；或D)在第一多肽之C端及在第二多肽之N端，且其中一或多個免疫調控性結構域中至少一個可為野生型免疫調控性多肽或野生型免疫調控性多肽之變體，其中變體免疫調控性多肽相較於對應野生型免疫調控性多肽之胺基酸序列包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代；且 可選地其中一或多個免疫調控性結構域中至少一個係變體免疫調控性多肽，其相較於對應野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之親和力展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力，且其中表位以至少10-7 M之親和力與T細胞上之TCR結合，以使：i)TMMP與第一T細胞結合之親和力係至少25%高於TMMP與第二T細胞結合之親和力，其中第一T細胞在其表面上表現同源共免疫調控性多肽及TCR，該TCR與表位結合之親和力係至少10-7 M，且其中第二T細胞在其表面上表現同源共免疫調控性多肽，但不在其表面上表現以至少10-7 M之親和力與表位結合之TCR；及/或ii)當藉由生物膜干涉術測量時，對照TMMP(其中對照包含野生型免疫調控性多肽)對同源共免疫調控性多肽之結合親和力與包含野生型免疫調控性多肽之變體的TMMP對同源共免疫調控性多肽之結合親和力的比例係在1.5：1至106 ：1之範圍內；且其中變體免疫調控性多肽相較於對應野生型免疫調控性多肽之胺基酸序列包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代。存在於本揭露之TMMP中之肽表位係WT-1肽。 本揭露提供TMMP，其包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)表位；ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第二MHC多肽；及ii)可選地Ig Fc多肽或非Ig支架。本揭露之TMMP包含一或多種免疫調控性多肽，其中一或多種免疫調控性多肽中至少一種係：A)在第一多肽之C端；B)在第二多肽之N端；C)在第二多肽之C端；或D)在第一多肽之C端及在第二多肽之N端。該一或多種免疫調控性多肽中至少一種係變體免疫調控性多肽，其相較於對應野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之親和力展現對該同源共免疫調控性多肽減少的親和力。存在於本揭露之TMMP中之表位以至少100 μM(例如至少10 μM、至少1 μM、至少100 nM、至少10 nM或至少1 nM)之親和力與T細胞上之T細胞受體(TCR)結合。本揭露之TMMP與第一T細胞結合之親和力係至少25%高於TMMP與第二T細胞結合之親和力，其中第一T細胞在其表面上表現同源共免疫調控性多肽及TCR，該TCR與表位結合之親和力係至少100 μM，且其中第二T細胞在其表面上表現同源共免疫調控性多肽，但不在其表面上表現以至少100 μM(例如至少10 μM、至少1 μM、至少100 nM、至少10 nM或至少1 nM)之親和力與表位結合之TCR。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之表位以約10-4 M至約5 x 10-4 M、約5 x 10-4 M至約10-5 M、約10-5 M至5 x 10-5 M、約5 x 10-5 M 至10-6 M、約10-6 M至約5 x 10-6 M、約5 x 10-6 M至約10-7 M、約10-7 M至約5 x 10-7 M、約5 x 10-7 M至約10-8 M或約10-8 M至約10-9 M的親和力與T細胞上之TCR結合。換句話說，在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之表位以約1 nM至約5 nM、約5 nM至約10 nM、約10 nM至約50 nM、約50 nM至約100 nM、約0.1 μM至約0.5 μM、約0.5 μM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM、約75 μM至約100 μM的親和力與T細胞上之TCR結合。 比起對應野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之親和力，存在於本揭露之TMMP中之免疫調控性多肽以低於至少10%、低於至少15%、低於至少20%、低於至少25%、低於至少30%、低於至少35%、低於至少40%、低於至少45%、低於至少50%、低於至少55%、低於至少60%、低於至少65%、低於至少70%、低於至少75%、低於至少80%、低於至少85%、低於至少90%、低於至少95%或低於超過95%的親和力與其同源共免疫調控性多肽結合。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽具有1 nM至100 nM或100 nM至100 μM之結合親和力。例如，在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽具有約100 nM至150 nM、約150 nM至約200 nM、約200 nM至約250 nM、約250 nM至約300 nM、約300 nM至約350 nM、約350 nM至約400 nM、約400 nM至約500 nM、約500 nM至約600 nM、約600 nM至約700 nM、約700 nM至約800 nM、約800 nM至約900 nM、約900 nM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約15 μM、約15 μM至約20 μM、約20 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM或約75 μM至約100 μM之結合親和力。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽具有約1 nM至約5 nM、約5 nM至約10 nM、約10 nM至約50 nM、約50 nM至約100 nM之結合親和力。 免疫調控性多肽對其同源共免疫調控性多肽減少的親和力及表位對TCR之親和力之組合提供本揭露之TMMP增強的選擇性。例如，相較於與第二T細胞之結合，本揭露之TMMP選擇性地與第一T細胞結合，該第一T細胞展示：i)對存在於TMMP中之表位具特異性之TCR；及ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽，該第二T細胞展示：i)對除存在於TMMP中之表位以外之表位具特異性之TCR；及ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽。例如，本揭露之TMMP與第一T細胞結合之親和力係至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少2倍、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或超過100倍高於其與第二T細胞結合之親和力。 在一些情況下，本揭露之TMMP當向有彼之需要之個體投予時，誘導表位特異性T細胞反應及表位非特異性T細胞反應兩者。換句話說，在一些情況下，本揭露之TMMP當向有彼之需要之個體投予時，藉由調控第一T細胞之活性來誘導表位特異性T細胞反應，該第一T細胞展示：i)對存在於TMMP中之表位具特異性之TCR；ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽；且藉由調控第二T細胞之活性來誘導表位非特異性T細胞反應，該第二T細胞展示：i)對除存在於TMMP中之表位以外之表位具特異性之TCR；及ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽。表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1或至少100：1。表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係約2：1至約5：1、約5：1至約10：1、約10：1至約15：1、約15：1至約20：1、約20：1至約25：1、約25：1至約50：1或約50：1至約100：1或超過100：1。「調控T細胞之活性」可包括下列一或多者：i)活化細胞毒性(例如CD8+ )T細胞；ii)誘導細胞毒性(例如CD8+ )T細胞之細胞毒性活性；iii)誘導細胞毒性(例如CD8+ )T細胞生產及釋放細胞毒素(例如穿孔素；顆粒溶解酶；顆粒溶解素)；iv)抑制自動反應性T細胞之活性；及類似物。 免疫調控性多肽對其同源共免疫調控性多肽減少的親和力及表位對TCR之親和力之組合提供本揭露之TMMP增強的選擇性。因此例如，相較於與第二T細胞結合之親合力，本揭露之TMMP以較高親合力與第一T細胞結合，該第一T細胞展示：i)對存在於TMMP中之表位具特異性之TCR；及ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽，該第二T細胞展示：i)對除存在於TMMP中之表位以外之表位具特異性之TCR；及ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽。 免疫調控性多肽與其同源共免疫調控性多肽之間的結合親和力可藉由使用經純化的免疫調控性多肽及經純化的同源共免疫調控性多肽之生物膜干涉術(BLI)測定。TMMP與其同源共免疫調控性多肽之間的結合親和力可藉由使用經純化的TMMP及同源共免疫調控性多肽之BLI測定。BLI方法所屬技術領域中具有通常知識者所廣為週知。見例如Lad et al.(2015)J. Biomol. Screen . 20(4)：498-507；及Shah and Duncan(2014)J. Vis. Exp. 18：e51383。 BLI測定可使用Octet RED 96(Pal ForteBio)儀器或類似儀器進行如下。TMMP(例如本揭露之TMMP；對照TMMP(其中對照TMMP包含野生型免疫調控性多肽))係固定在不溶的支撐物(「生物感測器」)之上。固定的TMMP係「目標」。固定可藉由將捕捉抗體固定在不溶的支撐物之上致效，其中捕捉抗體固定TMMP。例如，固定可藉由將抗Fc(例如抗人IgG Fc)抗體固定在不溶的支撐物之上致效，其中固定的抗Fc抗體結合且固定TMMP(其中TMMP包含IgFc多肽)。共免疫調控性多肽係以數種不同濃度施加至固定的TMMP，且記錄儀器的反應。測定係在包含25mM HEPES pH 6.8、5%聚(乙二醇)6000、50 mM KCl、0.1%牛血清白蛋白及0.02% Tween 20非離子清潔劑之液體培養基中進行。共免疫調控性多肽與固定TMMP之結合係在30℃下進行。作為結合親和力之陽性對照，可使用抗MHC第I型單株抗體。例如，可使用抗HLA第I型單株抗體W6/32(美國菌種保存中心(American Type Culture Collection)編號HB-95；Parham et al.(1979)J. Immunol . 123：342)，其具有7 nM之KD 。可使用抗MHC第I型單株抗體之連續稀釋產生標準曲線。共免疫調控性多肽或抗MHC第I型mAb係「分析物」。BLI分析自二個表面反射之白光的干涉圖型：i)固定的多肽(「目標」)；及ii)內部參考層。與生物感測器尖端結合之分子(「分析物」；例如共免疫調控性多肽；抗HLA抗體)數量的變化造成干涉圖型中的偏移；此干涉圖型中的偏移可即時測量。描述目標/分析物交互作用之親和力的二個動力學用語係締合常數(k a )及解離常數(k d )。這二個用語的比例(k d /a )產生親和力常數KD 。 BLI測定係在多孔板中進行。為了運行測定，板配置係經定義，測定步驟係經定義，且生物感測器係經分配於Octet資料擷取軟體。生物感測器組成係經水合。經水合之生物感測器組成及測定板係在Octet儀器上平衡10分鐘。一旦獲得資料，經獲得之資料係裝載至Octet資料分析軟體中。資料係在處理窗中藉由指明參考扣減方法、y軸比對、步驟間校正及Savitzky-Golay過濾處理。資料係在分析窗中藉由指明分析步驟(締合及解離)、選擇曲線擬合模型(1：1)、擬合方法(全域)及關注窗(以秒計)分析。評估擬合品質。各資料軌跡(分析物濃度)之KD 值若在3倍範圍內可經平均。KD 誤差值應在親和力常數值的一個量級內；R2 值應超過0.95。見例如Abdiche et al.(2008)J. Anal. Biochem. 377：209。 除非在本文中另行說明，否則本揭露之TMMP對同源共免疫調控性多肽的親和力或對照TMMP(其中對照TMMP包含野生型免疫調控性多肽)對同源共免疫調控性多肽的親和力係如上述使用BLI測定。 在一些情況下，當藉由BLI測量時(如上述)，i)對照TMMP(其中對照包含野生型免疫調控性多肽)對同源共免疫調控性多肽的結合親和力與ii)本揭露之TMMP(其包含野生型免疫調控性多肽之變體)對同源共免疫調控性多肽的結合親和力的比例係至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。在一些情況下，當藉由BLI測量時，i)對照TMMP(其中對照包含野生型免疫調控性多肽)對同源共免疫調控性多肽的結合親和力與ii)本揭露之TMMP(其包含野生型免疫調控性多肽之變體)對同源共免疫調控性多肽的結合親和力的比例係在1.5：1至106 ：1之範圍內，例如1.5：1至10：1、10：1至50：1、50：1至102 ：1、102 ：1至103 ：1、103 ：1至104 ：1、104 ：1至105 ：1或105 ：1至106 ：1。 作為一實例，其中對照TMMP包含野生型IL-2多肽，且其中本揭露之TMMP包含變體IL-2多肽(其相對於野生型IL-2多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調控性多肽，當藉由BLI測量時，i)對照TMMP對IL-2受體(即同源共免疫調控性多肽)的結合親和力與ii)本揭露之TMMP對IL-2受體的結合親和力的比例係至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。在一些情況下，其中對照TMMP包含野生型IL-2多肽，且其中本揭露之TMMP包含變體IL-2多肽(其相對於野生型IL-2多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調控性多肽，當藉由BLI測量時，i)對照TMMP對IL-2受體(即同源共免疫調控性多肽)的結合親和力與ii)本揭露之TMMP對IL-2受體的結合親和力的比例係在1.5：1至106 ：1之範圍內，例如1.5：1至10：1、10：1至50：1、50：1至102 ：1、102 ：1至103 ：1、103 ：1至104 ：1、104 ：1至105 ：1或105 ：1至106 ：1。 作為另一實例，其中對照TMMP包含野生型PD-L1多肽，且其中本揭露之TMMP包含變體PD-L1多肽(其相對於野生型PD-L1多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調控性多肽，當藉由BLI測量時，i)對照TMMP對PD-1多肽(即同源共免疫調控性多肽)的結合親和力與ii)本揭露之TMMP對PD-1多肽的結合親和力的比例係至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。 作為另一實例，其中對照TMMP包含野生型CD80多肽，且其中本揭露之TMMP包含變體CD80多肽(其相對於野生型CD80多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調控性多肽，當藉由BLI測量時，i)對照TMMP對CTLA4多肽(即同源共免疫調控性多肽)的結合親和力與ii)本揭露之TMMP對CTLA4多肽的結合親和力的比例係至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。 作為另一實例，其中對照TMMP包含野生型CD80多肽，且其中本揭露之TMMP包含變體CD80多肽(其相對於野生型CD80多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調控性多肽，當藉由BLI測量時，i)對照TMMP對CD28多肽(即同源共免疫調控性多肽)的結合親和力與ii)本揭露之TMMP對CD28多肽的結合親和力的比例係至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。 作為另一實例，其中對照TMMP包含野生型4-1BBL多肽，且其中本揭露之TMMP包含變體4-1BBL多肽(其相對於野生型4-1BBL多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調控性多肽，當藉由BLI測量時，i)對照TMMP對4-1BB多肽(即同源共免疫調控性多肽)的結合親和力與ii)本揭露之TMMP對4-1BB多肽的結合親和力的比例係至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。 作為另一實例，其中對照TMMP包含野生型CD86多肽，且其中本揭露之TMMP包含變體CD86多肽(其相對於野生型CD86多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調控性多肽，當藉由BLI測量時，i)對照TMMP對CD28多肽(即同源共免疫調控性多肽)的結合親和力與ii)本揭露之TMMP對CD28多肽的結合親和力的比例係至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。 本揭露之TMMP對目標T細胞的結合親和力可以下列方式測量：A)使本揭露之TMMP與目標T細胞接觸，該目標T細胞在其表面上表現：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)與表位結合之T細胞受體，其中TMMP包含表位標籤，以使TMMP與目標T細胞結合；B)使結合目標T細胞之TMMP與螢光標示之結合劑(例如螢光標示之抗體)接觸，該螢光標示之結合劑與表位標籤結合，產生TMMP/目標T細胞/結合劑複合體；C)使用流式細胞術測量TMMP/目標T細胞/結合劑複合體之平均螢光強度(MFI)。表位標籤可為例如FLAG標籤、血球凝集素標籤、c-myc標籤、聚(組胺酸)標籤等。在一系列濃度之TMMP庫成員測量之MFI提供親和力之量度。在一系列濃度之TMMP庫成員測量之MFI提供TMMP之半數最大有效濃度(EC50 )。在一些情況下，本揭露之TMMP對目標T細胞的EC50 係在nM的範圍內；且TMMP對對照T細胞(其中對照T細胞在其表面上表現：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)不與存在於TMMP中之表位結合之T細胞受體)的EC50 係在μM的範圍內。在一些情況下，本揭露之TMMP對對照T細胞的EC50 與TMMP對目標T細胞的EC50 的比例係至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。本揭露之TMMP對對照T細胞的EC50 與TMMP對目標T細胞的EC50 的比例係TMMP之選擇性的表現。 在一些情況下，當如前段所述測量時，相較於TMMP庫成員與對照T細胞之結合，本揭露之TMMP展現與目標T細胞的選擇性結合，該對照T細胞包含：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)與除存在於TMMP庫成員中之表位以外之表位結合之T細胞受體。二聚化 TMMP 本揭露之TMMP可經二聚化；即本揭露提供多聚體多肽，其包含本揭露之TMMP之二聚體。因此，本揭露提供TMMP，其包含：A)第一異二聚體，其包含：a)第一多肽，其包含：i)肽表位；及ii)第一主要組織相容性複合體(MHC)多肽；及b)第二多肽，其包含：i)第二MHC多肽，其中第一異二聚體包含一或多種免疫調控性多肽；及B)第二異二聚體，其包含：a)第一多肽，其包含：i)肽表位；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其包含：i)第二MHC多肽，其中第二異二聚體包含一或多種免疫調控性多肽，且其中第一異二聚體及第二異二聚體係互相共價連接。在一些情況下，二個TMMP的胺基酸序列係彼此相同。在一些情況下，第一異二聚體及第二異二聚體係經由第一異二聚體之第二多肽的C端區及第二異二聚體之第二多肽的C端區互相共價連接。在一些情況下，第一異二聚體及第二異二聚體係經由第一異二聚體之第二多肽的C端胺基酸及第二異二聚體之第二多肽的C端區互相共價連接；例如在一些情況下，第一異二聚體之第二多肽的C端胺基酸及第二異二聚體之第二多肽的C端區係直接或經由連接子互相連接。連接子可為肽連接子。肽連接子可具有1個胺基酸至200個胺基酸的長度(例如1胺基酸(aa)至5 aa、5 aa至10 aa、10 aa至25 aa、25 aa至50 aa、50 aa至100 aa、100 aa至150 aa或150 aa至200 aa)。在一些情況下，第一異二聚體之肽表位及第二異二聚體之肽表位包含相同胺基酸序列。在一些情況下，第一及第二異二聚體之第一MHC多肽係MHC第I型â2-微球蛋白，且其中第一及第二異二聚體之第二MHC多肽係MHC第I型重鏈。在一些情況下，第一異二聚體之免疫調控性多肽及第二異二聚體之免疫調控性多肽包含相同胺基酸序列。在一些情況下，第一異二聚體之免疫調控性多肽及第二異二聚體之免疫調控性多肽係變體免疫調控性多肽，該變體免疫調控性多肽相較於對應親代野生型免疫調控性多肽包含1至10個胺基酸取代，且其中該1至10個胺基酸取代導致變體免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽的減少親和力結合。在一些情況下，第一異二聚體之免疫調控性多肽及第二異二聚體之免疫調控性多肽各自獨立地選自由IL-2、4-1BBL、PD-L1、CD80、CD86、ICOS-L、OX-40L、FasL、JAG1(CD339)、TGFβ、CD70及ICAM所組成之群組。合適MHC多肽、免疫調控性多肽及肽表位之實例係描述於下。MHC 多肽 如上所述，本揭露之TMMP包括MHC多肽。以本揭露之目的而言，用語「主要組織相容性複合體(MHC)多肽」意在包括各種物種的MHC多肽，包括人MHC(亦稱為人白血球抗原(HLA))多肽、囓齒動物(例如小鼠、大鼠等)MHC多肽及其他哺乳動物物種(例如兔類動物、非人靈長動物、犬、貓、有蹄類(例如馬、牛、綿羊、山羊等)之MHC多肽及類似物。用語「MHC多肽」意在包括第I型MHC多肽(例如β-2微球蛋白及MHC第I型重鏈)。 在一些情況下，第一MHC多肽係MHC第I型β2M(β2M)多肽且第二MHC多肽係MHC第I型重鏈(H鏈)(「MHC-H」)。在其他情況下，第一MHC多肽係MHC第I型重鏈多肽；且第二MHC多肽係β2M多肽。在一些情況下，β2M及MHC-H鏈兩者皆係人來源；即MHC-H鏈係HLA重鏈或其變體。除非以其他方式明確陳述，否則本揭露之TMMP不包括MHC第I型重鏈之膜錨定結構域(跨膜區)或一部分的MHC第I型重鏈，該部分的MHC第I型重鏈足以將所得TMMP錨定至其中表現該所得TMMP之細胞(例如真核細胞諸如哺乳動物細胞)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之MHC第I型重鏈不包括與天然MHC第I型重鏈相關聯之信號肽、跨膜結構域或細胞內結構域(細胞質尾)。因此，例如在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之MHC第I型重鏈僅包括MHC第I型重鏈之α1、α2及α3結構域。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之MHC第I型重鏈具有約270個胺基酸(aa)至約290 aa的長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之MHC第I型重鏈具有270 aa、271 aa、272 aa、273 aa、274 aa、275 aa、276 aa、277 aa、278 aa、279 aa、280 aa、281 aa、282 aa、283 aa、284 aa、285 aa、286 aa、287 aa、288 aa、289 aa或290 aa的長度。 在一些情況下，TMMP之MHC多肽係人MHC多肽，其中人MHC多肽亦稱為「人白血球抗原」(「HLA」)多肽。在一些情況下，TMMP之MHC多肽係第I型HLA多肽，例如β2-微球蛋白多肽或第I型HLA重鏈多肽。 MHC第I型重鏈 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之MHC第I型重鏈多肽包含與圖 6 描繪之人HLA重鏈多肽之胺基酸序列的所有或部分(例如50、75、100、150、200或250個毗連胺基酸)具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。在一些情況下，MHC第I型重鏈具有270 aa、271 aa、272 aa、273 aa、274 aa、275 aa、276 aa、277 aa、278 aa、279 aa、280 aa、281 aa、282 aa、283 aa、284 aa、285 aa、286 aa、287 aa、288 aa、289 aa或290 aa的長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之MHC第I型重鏈多肽包含圖 6 描繪之胺基酸序列的1至30、1至5、5至10、10至15、15至20、20至25或25至30個胺基酸插入、刪除及/或取代(除了指示為重鏈共通序列中可變之該些位置以外)。在一些情況下，MHC第I型重鏈不包括跨膜或細胞質結構域。作為一實例，本揭露之TMMP之MHC第I型重鏈多肽可包含與圖 6 描繪之人HLA-A重鏈多肽之胺基酸25-300或胺基酸25-299(缺乏所有或實質上所有的前導、跨膜及細胞質序列)或胺基酸25-365(缺乏前導)具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。 HLA-A 在一些情況下，本揭露之TMMP包含HLA-A重鏈多肽。可被併入本揭露之TMMP中之HLA-A重鏈肽序列或其部分包括不含所有或實質上所有的前導、跨膜及細胞質序列之HLA A*2402等位基因重鏈。該些等位基因中任一者可包含位置84、139及/或236中一或多者之突變(如圖 6 所示)，該突變選自：位置84之酪胺酸至丙胺酸(Y84A)；位置84之酪胺酸至半胱胺酸(Y84C)；位置139之丙胺酸至半胱胺酸(A139C)；及位置236之丙胺酸至半胱胺酸取代(A236C)。此外，亦可採用與HLA-A*2402重鏈等位基因之序列之所有或部分(例如50、75、100、150、200或250個毗連胺基酸)具有至少75%(例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%)或100%胺基酸序列同一性之HLA-A序列(例如其可包含1至25、1至5、5至10、10至15、15至20、20至25或25至30個胺基酸插入、刪除及/或取代)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含HLA-A重鏈多肽，其包含下列HLA-A共通胺基酸序列： GSHSMRYF X1 TSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQ X2 MEPRAPWIEQEGPEYWD X3X4 T X5X6X7 KA X8 SQ X9X10 R X11X12 L X13X14X15X16X17 Y YNQSE X18 GSHT X19 Q X20 M X21 GCDVG X22 D X23 RFLRGY X24 Q X25 AYDGKDYIAL X26 EDLRSWTAADM A AQ X27 TX287X29 KWE X30X31X32 EAEQ X33 R X34 YL X35 G X36 CV X37X38 LRRYLENGKETLQRTD X39 PKTHMTHH X40X41 SDHEATLRCWALX42 FYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP A GDGTFQKWA X43 VVVPSG X44 EQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE X45 (SEQ ID NO：19)，其中X1係F、Y、S或T；X2係K或R；X3係Q、G、E或R；X4係N或E；X5係R或G；X6係N或K；X7係M或V；X8係H或Q；X9係T或I；X10係D或H；X11係A、V或E；X12係N或D；X13係G或R；X14係T或I；X15係L或A；X16係R或L；X17係G或R；X18係A或D；X19係I、L或V；X20係I、R或M；X21係F或Y；X22係S或P；X23係W或G；X24係R、H或Q；X25係D或Y；X26係N或K；X27係T或I；X28係K或Q；X29係R或H；X30係A或T；X31係A或V；X32係H或R；X33係R、L、Q或W；X34係V或A；X35係D或E；X36係R或T；X37係D或E；X38係W或G；X39係P或A；X40係P或A；X41係V或I；X42係S或G；X43係A或S；X44係Q或E；且X45係P或L。 HLA-A24 (HLA-A*2402) 作為一非限制性實例，本揭露之TMMP之MHC第I型重鏈多肽可包含與下列人HLA-A24(亦稱為HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEP RFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALRYYNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRPAGDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWEPSSQPTVPIVGIIAGLVLLGAVITGAVVAAVMWRRNSSDRKGGSYSQAASSDSAQGSDVSLTACKV(SEQ ID NO：20)。此類MHC第I型重鏈在亞洲人族群(包括亞洲人後裔個體族群)可具有優勢。在一些情況下，胺基酸84係Ala。在一些情況下，胺基酸84係Cys。在一些情況下，胺基酸236係Cys。在一些情況下，胺基酸84係Ala且胺基酸236係Cys。在一些情況下，胺基酸84係Cys且胺基酸236係Cys。 在一些情況下，本揭露之TMMP之MHC第I型重鏈多肽可包含與下列人HLA-A24(亦稱為HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR Y YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP A GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：21)，其中胺基酸84係Tyr且胺基酸236係Ala(胺基酸84及236係粗體及底線)；且其中 MHC第I型重鏈具有約275個胺基酸的長度。 在一些情況下，本揭露之TMMP之MHC第I型重鏈多肽可包含與下列人HLA-A24(亦稱為HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR A YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP A GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：22)，其中胺基酸84係Ala且胺基酸236係Ala(胺基酸84及236係粗體及底線)；且其中 MHC第I型重鏈具有約275個胺基酸的長度。 在一些情況下，本揭露之TMMP之MHC第I型重鏈多肽可包含與下列人HLA-A24(亦稱為HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR Y YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP C GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：23)，其中胺基酸84係Tyr且胺基酸236係Cys(胺基酸84及236係粗體及底線)；且其中 MHC第I型重鏈具有約275個胺基酸的長度。 在一些情況下，本揭露之TMMP之MHC第I型重鏈多肽可包含與下列人HLA-A24(亦稱為HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR A YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP C GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：24)，其中胺基酸84係Ala且胺基酸236係Cys(胺基酸84及236係粗體及底線)；且其中 MHC第I型重鏈具有約275個胺基酸的長度。 在一些情況下，本揭露之TMMP之MHC第I型重鏈多肽可包含與下列人HLA-A24(亦稱為HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR C YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP A GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：25)，其中胺基酸84係Cys且胺基酸236係Ala(胺基酸84及236係粗體及底線)；且其中 MHC第I型重鏈具有約275個胺基酸的長度。 在一些情況下，本揭露之TMMP之MHC第I型重鏈多肽可包含與下列人HLA-A24(亦稱為HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR C YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP C GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：26)，其中胺基酸84係Cys且胺基酸236係Cys(胺基酸84及236係粗體及底線)；且其中 MHC第I型重鏈具有約275個胺基酸的長度。 β-2微球蛋白 本揭露之TMMP之β2-微球蛋白(β2M)多肽可為人β2M多肽、非人靈長動物β2M多肽、鼠β2M多肽及類似物。在一些情況下，β2M多肽包含與圖6描繪之β2M胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。在一些情況下，β2M多肽包含與圖6描繪之β2M胺基酸序列的胺基酸21至119具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。 在一些情況下，合適β2M多肽包含下列胺基酸序列： IQRTPKIQVY SCHPAENGKS NFLNCYVSGF HPSDIEVDLLKNGERIEKVE HSDLSFSKDW SFYLLYYTEF TPTEKDEYAC RVNHVTLSQP KIVKWDRDM(SEQ ID NO：32)；且HLA第I型重鏈多肽包含下列胺基酸序列： GSHSMRYFFTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDGETRKVKAHSQTHRVDL(aa1){C}(aa2)AGSHTVQRMYGCDVGSDWRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSW(aa3){C}(aa4))HKWEAAHVAEQLRAYLEGTCVEWLRRYLENGKETLQRTDAPKTHMTHHAVSDHEATLRCWALSFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTEL(aa5)(C)(aa6)QKWAAVVVPSGQEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWEP(SEQ ID NO：27)，其中指示為{C}之半胱胺酸殘基形成介於α1與α2-1螺旋之間的雙硫鍵且(C)殘基與位置12之β2M多肽半胱胺酸形成雙硫鍵。在以上序列中，「aa1」係「胺基酸簇1」；「aa2」係「胺基酸簇2」；「aa3」係「胺基酸簇3」；「aa4」係「胺基酸簇4」；「aa5」係「胺基酸簇5」；且「aa6」係「胺基酸簇6」；見例如圖10。aa1、aa2、aa3、aa4、aa5及aa6每次出現係經獨立地選擇為1至5個胺基酸殘基，其中胺基酸殘基係i)獨立地選自任何天然存在(例如經編碼之)胺基酸或ii)除了脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在胺基酸。 在一些情況下，MHC多肽相對於參考MHC多肽包含單一胺基酸取代(其中參考MHC多肽可為野生型MHC多肽)，其中單一胺基酸取代以半胱胺酸(Cys)殘基取代胺基酸。此類半胱胺酸殘基(當存在於本揭露之TMMP之第一多肽的MHC多肽中時)可與存在於本揭露之TMMP之第二多肽鏈中之半胱胺酸殘基形成雙硫鍵。 在一些情況下，本揭露之TMMP之第一多肽的第一MHC多肽及/或本揭露之TMMP之第二多肽的第二MHC多肽包括以半胱胺酸取代胺基酸之胺基酸取代，其中第一MHC多肽中之經取代之半胱胺酸與第二MHC多肽中之半胱胺酸形成雙硫鍵，其中第一MHC多肽中之半胱胺酸與第二MHC多肽中之經取代之半胱胺酸形成雙硫鍵或其中第一MHC多肽中之經取代之半胱胺酸與第二MHC多肽中之經取代之半胱胺酸形成雙硫鍵。 例如在一些情況下，下列HLA β2-微球蛋白及HLA第I型重鏈中之殘基對中一者係經半胱胺酸取代(其中殘基編號係成熟多肽之編號)：1)β2M殘基12、HLA第I型重鏈殘基236；2)β2M殘基12、HLA第I型重鏈殘基237；3)β2M殘基8、HLA第I型重鏈殘基234；4)β2M殘基10、HLA第I型重鏈殘基235；5)β2M殘基24、HLA第I型重鏈殘基236；6)β2M殘基28、HLA第I型重鏈殘基232；7)β2M殘基98、HLA第I型重鏈殘基192；8)β2M殘基99、HLA第I型重鏈殘基234；9)β2M殘基3、HLA第I型重鏈殘基120；10)β2M殘基31、HLA第I型重鏈殘基96；11)β2M殘基53、HLA第I型重鏈殘基35；12)β2M殘基60、HLA第I型重鏈殘基96；13)β2M殘基60、HLA第I型重鏈殘基122；14)β2M殘基63、HLA第I型重鏈殘基27；15)β2M殘基Arg3、HLA第I型重鏈殘基Gly120；16)β2M殘基His31、HLA第I型重鏈殘基Gln96；17)β2M殘基Asp53、HLA第I型重鏈殘基Arg35；18)β2M殘基Trp60、HLA第I型重鏈殘基Gln96；19)β2M殘基Trp60、HLA第I型重鏈殘基Asp122；20)β2M殘基Tyr63、HLA第I型重鏈殘基Tyr27；21)β2M殘基Lys6、HLA第I型重鏈殘基Glu232；22)β2M殘基Gln8、HLA第I型重鏈殘基Arg234；23)β2M殘基Tyr10、HLA第I型重鏈殘基Pro235；24)β2M殘基Ser11、HLA第I型重鏈殘基Gln242；25)β2M殘基Asn24、HLA第I型重鏈殘基Ala236；26)β2M殘基Ser28、HLA第I型重鏈殘基Glu232；27)β2M殘基Asp98、HLA第I型重鏈殘基His192；及28)β2M殘基Met99、HLA第I型重鏈殘基Arg234。MHC/HLA第I型重鏈之胺基酸編號係參照不含信號肽之成熟MHC/HLA第I型重鏈。例如在一些情況下，成熟HLA-A胺基酸序列之殘基236係經Cys取代。在一些情況下，成熟HLA-B胺基酸序列之殘基236係經Cys取代。在一些情況下，成熟HLA-C胺基酸序列之殘基236係經Cys取代。在一些情況下，圖6描繪之胺基酸序列的殘基32(對應成熟β2M之Arg-12)係經Cys取代。 在一些情況下，β2M多肽包含胺基酸序列：IQRTPKIQVY S R HPAENGKS NFLNCYVSGF HPSDIEVDLLKNGERIEKVE HSDLSFSKDW SFYLLYYTEF TPTEKDEYAC RVNHVTLSQP KIVKWDRDM(SEQ ID NO：31)。在一些情況下，β2M多肽包含胺基酸序列：IQRTPKIQVY S C HPAENGKS NFLNCYVSGF HPSDIEVDLLKNGERIEKVE HSDLSFSKDW SFYLLYYTEF TPTEKDEYAC RVNHVTLSQP KIVKWDRDM(SEQ ID NO：32)。 在一些情況下，HLA第I型重鏈多肽包含HLA-A*2402胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR Y YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP A GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：21)。 在一些情況下，HLA第I型重鏈多肽包含HLA-A*2402胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR A YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP A GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：22)。 在一些情況下，HLA第I型重鏈多肽包含胺基酸序列： GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR C YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP A GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：25)。 在一些情況下，HLA第I型重鏈多肽包含胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR Y YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP C GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：23)。 在一些情況下，HLA第I型重鏈多肽包含胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR A YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP C GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：24)。 在一些情況下，HLA第I型重鏈多肽包含胺基酸序列：GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR C YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP C GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：26)。 在一些情況下，β2M多肽包含下列胺基酸序列： IQRTPKIQVY S C HPAENGKS NFLNCYVSGF HPSDIEVDLLKNGERIEKVE HSDLSFSKDW SFYLLYYTEF TPTEKDEYAC RVNHVTLSQP KIVKWDRDM(SEQ ID NO：32)；且本揭露之TMMP之HLA第I型重鏈多肽包含下列胺基酸序列： GSHSMRYFSTSVSRPGRGEPRFIAVGYVDDTQFVRFDSDAASQRMEPRAPWIEQEGPEYWDEETGKVKAHSQTDRENLRIALR Y YNQSEAGSHTLQMMFGCDVGSDGRFLRGYHQYAYDGKDYIALKEDLRSWTAADMAAQITKRKWEAAHVAEQQRAYLEGTCVDGLRRYLENGKETLQRTDPPKTHMTHHPISDHEATLRCWALGFYPAEITLTWQRDGEDQTQDTELVETRP C GDGTFQKWAAVVVPSGEEQRYTCHVQHEGLPKPLTLRWE(SEQ ID NO：23)，其中在HLA第I型重鏈多肽之胺基酸236處之Cys殘基及在β2M多肽之殘基12處之Cys在TMMP中互相形成雙硫鍵。 在一些情況下，β2M多肽包含胺基酸序列：IQRTPKIQVYS C HPAENGKSNFLNCYVSGFHPSDIEVDLLKNGERIEKVEHSDLSFSKDWSFYLLYYTEFTPTEKDEYACRVNHVTLSQPKIVKWDRDM(SEQ ID NO：32)。 在一些情況下，本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽係經由：i)存在於連接子中之Cys殘基，該連接子連接第一多肽鏈中之肽表位及β2M多肽；及ii)存在於第二多肽鏈之MHC第I型重鏈中之Cys殘基以雙硫鍵互相連接。在一些情況下，存在於MHC第I型重鏈中之Cys殘基係導入作為Y84C取代之Cys。在一些情況下，連接第一多肽鏈中之肽表位及β2M多肽之連接子係GCGGS(G4S)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1至9之整數(即其中n係1、2、3、4、5、6、7、8或9)。例如，在一些情況下，連接子包含胺基酸序列GCGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：34)。作為另一實例，連接子包含胺基酸序列GCGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO：35)。本揭露之TMMP之經雙硫鍵連接之第一及第二多肽之實例係示意性描繪於圖2A至圖2F。經多個雙硫鍵連接之 TMMP 在一些情況下，本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽係藉由至少二個雙硫鍵(即二個鏈間雙硫鍵)互相連接。此類經多個雙硫鍵連接之TMMP的實例係示意性描繪於圖7A及圖7B和圖8A至圖8C。此外，當本揭露之TMMP包含IgFc多肽時，異二聚體TMMP可經二聚化，以使雙硫鍵連接二個異二聚體TMMP中之IgFc多肽。此類安排係示意性描繪於圖7C及圖7D，其中雙硫鍵係由虛線表示。除非另行說明，本章節之經多個雙硫鍵連接之TMMPP中所描述之至少二個雙硫鍵不是指連接二聚化TMMP中之IgFc多肽的雙硫鍵。 如上所述，在一些情況下，本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽係藉由至少二個雙硫鍵(即二個鏈間雙硫鍵)互相連接。例如，在一些情況下，本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽係藉由2個鏈間雙硫鍵互相連接。作為另一實例，在一些情況下，本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽係藉由3個鏈間雙硫鍵互相連接。作為另一實例，在一些情況下，本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽係藉由4個鏈間雙硫鍵互相連接。 在一些情況下，當本揭露之TMMP之第一多肽中之肽表位係藉由包含Cys之連接子連接至β2M多肽時，至少二個雙硫鍵中至少一者連接連接子中之Cys至第二多肽之MHC第I型重鏈中之Cys。在一些情況下，當本揭露之TMMP之第一多肽中之肽表位係藉由連接子連接至MHC第I型重鏈多肽時，至少二個雙硫鍵中至少一者連接連接子中之Cys至存在於第二多肽中之β2M多肽中之Cys。 在一些情況下，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)相較於包括至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP展現增加的穩定性。在一些情況下，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)相較於包括至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP展現增加的活體外穩定性。例如，在一些情況下，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)相較於包括至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP展現高出至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少50%、至少2倍、至少5倍或至少10倍之活體外穩定性。 本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)相較於包括至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP是否展現增加的活體外穩定性可藉由隨時間及/或在指明條件下及/或在TMMP純化期間測量存在於樣本中之經雙硫鍵連接之異二聚體TMMP的量來測定。 例如在一些情況下，當TMMP儲存在37℃下達一段時間(例如達一段約1週至約2週、約2週至約4週或約4週至約2個月的時間)，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)相較於包括至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP展現高出至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少50%、至少2倍、至少5倍或至少10倍之活體外穩定性。例如在一些情況下，在37℃下活體外儲存本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)達28天之後剩餘的經雙硫鍵連接之異二聚體TMMP的量相較於在37℃下活體外儲存對照TMMP(包括存在於經多個雙硫鍵連接之TMMP中之至少二個雙硫鍵之僅一個的TMMP)達28天之後剩餘的經雙硫鍵連接之異二聚體TMMP的量係高出至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少50%、至少2倍、至少5倍或至少10倍。 在一些情況下，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP相較於包括至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP展現增加的活體內穩定性。例如，在一些情況下，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP相較於包括至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP展現高出至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少50%、至少2倍、至少5倍或至少10倍之活體內穩定性。 在一些情況下，相較於當TMMP係包括至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP時所生產之經雙硫鍵連接之異二聚體TMMP的量，在本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)中存在的二個雙硫鍵提供增加經雙硫鍵連接之異二聚體TMMP的生產。例如，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)可在活體外細胞培養的哺乳動物細胞中生產，其中哺乳動物細胞係培養於液體細胞培養基中。TMMP可分泌至細胞培養基中。細胞可經裂解以產生細胞裂解物且TMMP可存在於細胞裂解物中。TMMP可自細胞培養基及/或細胞裂解物純化。例如，當TMMP包含IgG1 Fc多肽時，細胞培養基及/或細胞裂解物可與經固定之蛋白質A接觸(例如可將細胞培養基及/或細胞裂解物施用至蛋白質A管柱，其中蛋白質A係固定在珠上)。存在於細胞培養基及/或細胞裂解物中之TMMP變成與經固定之蛋白質A結合。在洗滌管柱以移除未結合之材料之後，經結合之TMMP係經洗提以產生蛋白質A洗出液。存在於蛋白質A洗出液中之經雙硫鍵連接之異二聚體TMMP的量相較於當TMMP係包括存在於經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)中之至少二個雙硫鍵之僅一個的對照TMMP時存在於蛋白質A洗出液中之經雙硫鍵連接之異二聚體TMMP的量係高出至少0.5%、至少1%、至少2%、至少3%、至少4%、至少5%、至少6%、至少7%、至少8%、至少9%或至少10%。在一些情況下，在洗出液中係為非聚集的經雙硫鍵連接之異二聚體TMMP之總TMMP蛋白質的百分比係至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%。蛋白質A洗出液可進行粒徑排阻層析法(SEC)及/或一或多個其他額外純化步驟。 在一些情況下，本揭露之T細胞調控性多聚體多肽包含至少一種異二聚體，其包含：a)第一多肽，其包含：i)WT1肽表位，其中WT1肽具有至少4個胺基酸的長度(例如4個胺基酸至25個胺基酸；例如WT1肽具有4、5、6、7、8、9、10至15、15至20或20至25個胺基酸的長度)；及ii)第一MHC多肽；b)第二多肽，其包含第二MHC多肽及c)至少一種免疫調控性多肽，其中第一及/或第二多肽包含免疫調控性多肽，且其中異二聚體包含介於第一多肽與第二多肽之間的2個雙硫鍵(即異二聚體包含：i)連接第一多肽及第二多肽之第一雙硫鍵；及ii)連接第一多肽及第二多肽之第二雙硫鍵)。換句話說，第一多肽包含第一Cys殘基，該第一Cys殘基與第二多肽之第一Cys殘基形成雙硫鍵(第一雙硫鍵)；且第一多肽包含第二Cys殘基，該第二Cys殘基與第二多肽之第二Cys殘基形成雙硫鍵(第二雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)肽表位；ii)肽連接子；及iii)β2M多肽；及b)第二多肽，其包含MHC第I型重鏈多肽，其中第一及第二多肽之一或二者包含至少一種免疫調控性多肽，其中TMMP包含：a)第一雙硫鍵，該第一雙硫鍵介於下列之間：i)存在於連接子中之Cys，該連接子介於肽表位與β2M多肽之間；及ii)導入至MHC第I型重鏈多肽中之第一Cys；及b)至少第二雙硫鍵，該至少第二雙硫鍵介於第一多肽與第二多肽之間，其中至少第二雙硫鍵介於下列之間：i)第一多肽中之Cys，其係位於存在於連接子中之Cys C端；及ii)第二多肽中之Cys，其係位於導入至MHC第I型重鏈多肽中之第一Cys C端。 在一些情況下，在本揭露之TMMP之第一或第二多肽中形成第一及第二雙硫鍵之Cys殘基彼此相隔約10個胺基酸至約200個胺基酸。例如在一些情況下，在TMMP之第一或第二多肽中形成第一及第二雙硫鍵之Cys殘基係約10個胺基酸(aa)至約15 aa、約15 aa至約20 aa、約20 aa至約25 aa、約25 aa至約30 aa、約30 aa至約40 aa、約40 aa至約50 aa、約50 aa至約60 aa、約60 aa至約70 aa、約70 aa至約80 aa、約80 aa至約90 aa、約90 aa至約100 aa、約100 aa至約110 aa、約110 aa至約120 aa、約120 aa至約130 aa、約130 aa至約140 aa、約140 aa至約150 aa、約150 aa至約160 aa、約160 aa至約170 aa、約170 aa至約180 aa、約180 aa至約190 aa或約190 aa至約200 aa。 作為實例，在一些情況下，在本揭露之TMMP之第一多肽中形成第一及第二雙硫鍵之Cys殘基彼此相隔約10個胺基酸至約80個胺基酸殘基。例如在一些情況下，第一多肽中形成第二雙硫鍵之Cys殘基係位於第一多肽中形成第一雙硫鍵之Cys殘基C端約10個胺基酸至約80個胺基酸(例如約10個胺基酸(aa)至約15 aa、約15 aa至約20 aa、約20 aa至約25 aa、約25 aa至約30 aa、約30 aa至約40 aa、約40 aa至約50 aa、約50 aa至約60 aa、約60 aa至約70 aa或約70 aa至約80 aa)。在一些情況下，第一多肽中形成第二雙硫鍵之Cys殘基係位於第一多肽中形成第一雙硫鍵之Cys殘基C端10 aa、11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa、20 aa、21 aa、22 aa、23 aa、24 aa或25 aa。在一些情況下，第一多肽中形成第二雙硫鍵之Cys殘基係位於第一多肽中形成第一雙硫鍵之Cys殘基C端15 aa。在一些情況下，第一多肽中形成第二雙硫鍵之Cys殘基係位於第一多肽中形成第一雙硫鍵之Cys殘基C端20 aa。在一些情況下，第一多肽中形成第二雙硫鍵之Cys殘基係位於第一多肽中形成第一雙硫鍵之Cys殘基C端25 aa。 在一些情況下，在本揭露之TMMP之第二多肽中形成第一及第二雙硫鍵之Cys殘基彼此相隔約140個胺基酸至約160個胺基酸。例如在一些情況下，第二多肽中形成第二雙硫鍵之Cys殘基係位於第二多肽中形成第一雙硫鍵之Cys殘基C端約140個胺基酸至約160個胺基酸。在一些情況下，第二多肽中形成第二雙硫鍵之Cys殘基係位於第二多肽中形成第一雙硫鍵之Cys殘基C端140個胺基酸(aa)、141 aa、142 aa、143 aa、144 aa、145 aa、146 aa、147 aa、148 aa、149 aa、150 aa、151 aa、152 aa、153 aa、154 aa、155 aa、156 aa、157 aa、158 aa、159 aa或160 aa。 本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)可包含：a)第一多肽，其包含：i)WT1肽(例如4個胺基酸至約25個胺基酸之WT1肽)；及ii)第一MHC多肽，其中第一多肽包含介於WT1肽與第一MHC多肽之間的肽連接子，其中肽連接子包含Cys殘基，且其中第一MHC多肽係β2M多肽，該β2M多肽包含導入Cys殘基之胺基酸取代；及b)第二多肽，其包含第二MHC多肽，其中第二MHC多肽係第I型重鏈，該第I型重鏈包含基於HLA-A*2402之胺基酸編號(描繪於圖6)或在另一第I型重鏈等位基因之對應位置之Y84C取代及A236C取代，其中TMMP包含介於肽連接子之Cys殘基與第I型重鏈之胺基酸位置84或另一第I型重鏈等位基因之對應位置之Cys殘基之間的雙硫鍵，且其中TMMP包含介於β2M多肽之經導入之Cys殘基與第I型重鏈之胺基酸位置236或另一第I型重鏈等位基因之對應位置之Cys之間的雙硫鍵；及c)至少一種免疫調控性多肽，其中第一及/或第二多肽包含至少一種免疫調控性多肽。實例係示意性描繪於圖7A及圖7B。 在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(SEQ ID NO：36)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1至10之整數。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：37)，其中n係1。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：35)，其中n係2。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：34)，其中n係3。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS (GGGGS)n(SEQ ID NO：38)，其中n係4。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：39)，其中n係5。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：40)，其中n係6。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：41)，其中n係7。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：42)，其中n係8。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：43)，其中n係9。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：44)，其中n係10。 在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(SEQ ID NO：45)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：46)，其中n係1至10之整數。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：47)，其中n係1。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：48)，其中n係2。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：49)，其中n係3。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS (GGGGS)n(SEQ ID NO：50)，其中n係4。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：51)，其中n係5。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：52)，其中n係6。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：53)，其中n係7。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：54)，其中n係8。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：55)，其中n係9。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：56)，其中n係10。 下列係MHC第I型重鏈之非限制性實例，其包含基於HLA-A*2402之胺基酸編號的Y84C取代及A236C取代(描繪於圖6)。HLA-A 在一些情況下，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)包含：a)第一多肽，其包含：i)WT1肽(例如4個胺基酸至約25個胺基酸之WT1肽)；及ii)第一MHC多肽，其中第一多肽包含介於WT1肽與第一MHC多肽之間的肽連接子，其中肽連接子包含Cys殘基，且其中第一MHC多肽係β2M多肽，該β2M多肽包含導入Cys殘基之胺基酸取代；及b)第二多肽，其包含HLA-A MHC第I型重鏈，該HLA-A MHC第I型重鏈包含與下列胺基酸序列具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：gshsmryfstsvsrpgrgeprfiavgyvddtqfvrfdsdaasqrmeprapwieqegpeywdeetgkvkahsqtdrenlrialr C ynqseagshtlqmmfgcdvgsdgrflrgyhqyaydgkdyialkedlrswtaadmaaqitkrkweaahvaeqqraylegtcvdglrrylengketlqrtdppkthmthhpisdheatlrcwalgfypaeitltwqrdgedqtqdtelvetrp C gdgtfqkwaavvvpsgeeqrytchvqheglpkpltlrwe(SEQ ID NO：26)，其中胺基酸84係Cys且胺基酸236係Cys；及c)至少一種免疫調控性多肽，其中第一及/或第二多肽包含至少一種免疫調控性多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(SEQ ID NO：36)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1至10之整數。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。例如，β2M多肽可包含與下列胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列：IQRTPKIQVYSC HPAENGKSNFLNCYVSGFHPSDIEVDLLKNGERIEKVEHSDLSFSKDWSFYLLYYTEFTPTEKDEYACRVNHVTLSQPKIVKWDRDM(SEQ ID NO：32)，其中胺基酸12係Cys。至少一種免疫調控性多肽可為對目標T細胞展現活化/刺激效應或對目標T細胞展現壓制/抑制效應之多肽。例如至少一種免疫調控性多肽可為細胞介素(例如IL2多肽、IL7多肽、IL12多肽、IL15多肽、IL17多肽、IL21多肽、IL27多肽、IL-23多肽、TGFβ多肽及類似物；且包括所有家族成員例如IL17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E、IL-17F、IL-17E)、4-1BBL多肽、ICOS-L多肽、OX-40L多肽、CD80多肽、CD86多肽(CD80及CD86亦分別稱為B7-1及B7-2)、CD40多肽、CD70多肽、JAG1(CD339)多肽、ICAM(CD540多肽、PD-L1多肽、FasL多肽、PD-L2多肽、PD-1H(VISTA)多肽、ICOS-L(CD275)多肽、GITRL多肽、HVEM多肽、CXCL10多肽、CXCL9多肽、CXCL11多肽、CXCL13多肽及CX3CL1多肽、半乳糖凝集素-9多肽、CD83多肽、CD30L多肽、HLA-G多肽、MICA多肽、MICB多肽、HVEM(CD270)多肽、淋巴毒素β受體多肽、3/TR6多肽、ILT3多肽、ILT4多肽、CXCL10多肽、CXCL9多肽、CXCL11多肽、CXCL13多肽及CX3CL1多肽。這些免疫調控性多肽可為野生型多肽或野生型多肽之變體。其中，下列免疫調控性多肽可產生活化/刺激效應：CD80、CD86、4-1BBL、OX40L、CD70、ICOS-L、CD40、ICAM(CD54)、IL2、IL7、IL12、IL15、IL17、IL21、IL27、IL23、GITRL、TGFβ、淋巴毒素β受體、3/TR6、ILT3、ILT4、CXCL10、CXCL9、CXCL11、CXCL13及CX3CL1。其中，下列免疫調控性多肽可產生壓制/抑制效應：PD-1H、PD-L1、PD-L2、TGFβ、FasL、HVEM、半乳糖凝集素-9、ILT3、ILT4。TGFβ多肽取決於情境可產生活化/刺激效應或壓制/抑制效應。在一些情況下，至少一種免疫調控性多肽係如本文他處所述之減少親和力變體。在一些情況下，第一或第二多肽包含Ig Fc多肽。 在一些情況下，本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)包含HLA-A第I型重鏈多肽。在一些情況下，存在於本揭露之經多個雙硫鍵連接之TMMP(例如經雙重雙硫鍵連接之TMMP)中之HLA-A重鏈多肽包含與圖6描繪之HLA-A*2402胺基酸序列具有至少95%、至少98%或至少99%胺基酸序列同一性之胺基酸序列，其中HLA-A重鏈多肽包含Y84C及A236C取代。支架多肽 TMMP可包含Fc多肽或可包含另一合適支架多肽。 合適支架多肽包括基於抗體之支架多肽及基於非抗體之支架。基於非抗體之支架包括例如白蛋白、XTEN(延長重組)多肽、轉鐵蛋白、Fc受體多肽、類彈性蛋白多肽(見例如Hassouneh et al.(2012)Methods Enzymol. 502：215；例如包含(Val-Pro-Gly-X-Gly；SEQ ID NO：250)五肽重複單元之多肽，其中X係除脯胺酸以外之任何胺基酸)、白蛋白結合多肽、絲樣多肽(見例如Valluzzi et al.(2002)Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 357：165)、絲-彈性蛋白樣多肽(SELP；見例如Megeed et al.(2002)Adv Drug Deliv Rev . 54：1075)及類似物。合適XTEN多肽包括例如該些揭示於WO 2009/023270、WO 2010/091122、WO 2007/103515、US 2010/0189682及US 2009/0092582者；亦見Schellenberger et al.(2009)Nat Biotechnol . 27：1186)。合適白蛋白多肽包括例如人血清白蛋白。 合適支架多肽在一些情況下將為半衰期延長多肽。因此在一些情況下，合適支架多肽相較於缺乏支架多肽之對照TMMP增加TMMP的活體內半衰期(例如血清半衰期)。例如在一些情況下，相較於缺乏支架多肽之對照TMMP，支架多肽增加TMMP之活體內半衰期(例如血清半衰期)至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約50%、至少約2倍、至少約2.5倍、至少約5倍、至少約10倍、至少約25倍、至少約50倍、至少約100倍或超過100倍。作為實例在一些情況下，相較於缺乏Fc多肽之對照TMMP，Fc多肽增加TMMP之活體內半衰期(例如血清半衰期)至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約50%、至少約2倍、至少約2.5倍、至少約5倍、至少約10倍、至少約25倍、至少約50倍、至少約100倍或超過100倍。Fc 多肽 在一些情況下，本揭露之TMMP之第一及/或第二多肽鏈包含Fc多肽。本揭露之TMMP之Fc多肽可為人IgG1 Fc、人IgG2 Fc、人IgG3 Fc、人IgG4 Fc等。在一些情況下，Fc多肽包含與圖4A至圖4G描繪之Fc區的胺基酸序列具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc區包含與圖4A描繪之人IgG1 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc區包含與圖4A描繪之人IgG1 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列；且包含N77之取代；例如，Fc多肽包含N77A取代。在一些情況下，Fc多肽包含與圖4A描繪之人IgG2 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列；例如Fc多肽包含與圖4A描繪之人IgG2 Fc多肽之胺基酸99-325具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含與圖4A描繪之人IgG3 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列；例如Fc多肽包含與圖4A描繪之人IgG3 Fc多肽之胺基酸19-246具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含與圖4B描繪之人IgM Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列；例如Fc多肽包含與圖4B描繪之人IgM Fc多肽之胺基酸1-276具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含與圖4C描繪之人IgA Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列；例如Fc多肽包含與圖4C描繪之人IgA Fc多肽之胺基酸1-234具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。 在一些情況下，Fc多肽包含與圖4C描繪之人IgG4 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含與圖4C描繪之人IgG4 Fc多肽之胺基酸100至327具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。 在一些情況下，IgG4 Fc多肽包含下列胺基酸序列：PPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO：57)。 在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4A描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc)。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4A描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc)，例外為以除天冬醯胺酸以外之胺基酸取代N297(圖4A描繪之胺基酸序列之N77)。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4C描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc，其包含N297A取代，該N297A取代係圖4A描繪之胺基酸序列之N77)。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4A描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc)，例外為以除白胺酸以外之胺基酸取代L234(圖4A描繪之胺基酸序列之L14)。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4A描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc)，例外為以除白胺酸以外之胺基酸取代L235(圖4A描繪之胺基酸序列之L15)。在一些情況下，IgG1 Fc多肽包含圖4A描繪之C端Lys。在其他情況下，IgG1 Fc多肽不包括圖4A描繪之C端Lys。 在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4E描繪之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含圖4E描繪之胺基酸序列，但不含C端Lys。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4F描繪之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含圖4F描繪之胺基酸序列，但不含C端Lys。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4G描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc，其包含L234A取代及L235A取代，對應於圖4G描繪之胺基酸序列之位置14及15)。在一些情況下，Fc多肽包含圖4G描繪之胺基酸序列，但不含C端Lys。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4A描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc)，例外為以除脯胺酸以外之胺基酸取代P331(圖4A描繪之胺基酸序列之P111)；在一些情況下，取代係P331S取代。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4A描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc)，例外為以除白胺酸以外之胺基酸取代L234及L235(圖4A描繪之胺基酸序列之L14及L15)。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4A描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc)，例外為以除白胺酸以外之胺基酸取代L234及L235(圖4A描繪之胺基酸序列之L14及L15)及以除脯胺酸以外之胺基酸取代P331(圖4A描繪之胺基酸序列之P111)。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽包含圖4E描繪之胺基酸序列(人IgG1 Fc，其包含L234F、L235E及P331S取代(對應於圖4E描繪之胺基酸序列之胺基酸位置14、15及111))。在一些情況下，存在於TMMP中之Fc多肽係IgG1 Fc多肽，其包含如圖4G描繪之L234A及L235A取代(以Ala取代圖4A描繪之胺基酸序列之L14及L15)。在一些情況下，Fc多肽包含圖4G描繪之胺基酸序列，但不含C端Lys。例如在一些情況下，Fc多肽包含圖4H描繪之胺基酸序列。連接子 本揭露之TMMP可包括一或多個連接子，其中該一或多個連接子係介於下列一或多者之間：i)MHC第I型多肽與Ig Fc多肽，其中該連接子在本文中稱為「L1」；ii)免疫調控性多肽與MHC第I型多肽，其中該連接子在本文中稱為「L2」；iii)第一免疫調控性多肽及第二免疫調控性多肽，其中該連接子在本文中稱為「L3」；iv)肽抗原(「表位」)與MHC第I型多肽；v)MHC第I型多肽與二聚化多肽(例如二聚對之第一或第二成員)；及vi)二聚化多肽(例如二聚對之第一或第二成員)與IgFc多肽。 合適連接子(亦稱為「間隔子」)可輕易選擇且可具有一些任何合適長度，諸如1個胺基酸至25個胺基酸、3個胺基酸至20個胺基酸、2個胺基酸至15個胺基酸、3個胺基酸至12個胺基酸，包括4個胺基酸至10個胺基酸、5個胺基酸至9個胺基酸、6個胺基酸至8個胺基酸或7個胺基酸至8個胺基酸。合適連接子可為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個胺基酸長度。在一些情況下，連接子具有25個胺基酸至50個胺基酸的長度，例如25至30、30至35、35至40、40至45或45至50個胺基酸長度。 例示性連接子包括甘胺酸聚合物(G)n 、甘胺酸-絲胺酸聚合物(包括例如(GS)n 、(GSGGS)n (SEQ ID NO：58)及(GGGS)n( SEQ ID NO：59)，其中n係至少一之整數)、甘胺酸-丙胺酸聚合物、丙胺酸-絲胺酸聚合物及其他所屬技術領域中已知之可撓性連接子。可使用甘胺酸及甘胺酸-絲胺酸聚合物；Gly及Ser兩者皆相對非結構化且因此可作用為介於組分之間的中性繫鏈劑。可使用甘胺酸聚合物；甘胺酸比起甚至丙胺酸觸及顯著較多phi-psi空間且比起具有較長側鏈之殘基遠不受限制(見Scheraga,Rev. Computational Chem. 11173-142(1992))。例示性連接子可包含胺基酸序列包括但不限於GGSG(SEQ ID NO：60)、GGSGG(SEQ ID NO：61)、GSGSG(SEQ ID NO：62)、GSGGG(SEQ ID NO：63)、GGGSG(SEQ ID NO：64)、GSSSG(SEQ ID NO：65)及類似物。例示性連接子可包括例如Gly(Ser4 )n(SEQ ID NO：66)，其中n係1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GSSSS)n(SEQ ID NO：67)，其中n係4。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GSSSS)n(SEQ ID NO：68)，其中n係5。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：69)，其中n係1。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：70)，其中n係2。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n (SEQ ID NO：71)，其中n係3。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：72)，其中n係4。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：73)，其中n係5。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：74)，其中n係6。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：75)，其中n係7。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：76)，其中n係8。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：77)，其中n係9。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n (SEQ ID NO：78)，其中n係10。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：79)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP之第一多肽中之連接子多肽包括半胱胺酸殘基，該半胱胺酸殘基可與存在於本揭露之TMMP之第二多肽中之半胱胺酸殘基形成雙硫鍵。在一些情況下，例如合適連接子包含胺基酸序列G C GGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：35)。作為另一實例，合適連接子可包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1、2、3、4、5、6、7、8或9。例如，在一些情況下，連接子包含胺基酸序列GCGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：34)。作為另一實例，連接子包含胺基酸序列GCGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO：35)。表位 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之表位(呈現一或多個表位之肽)係WT-1肽，例如與MHC一起呈現表位給TCR之WT-1肽。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係6個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係7個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係8個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係9個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係10個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係11個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係6個胺基酸至25個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係6個胺基酸至20個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係7個胺基酸至25個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係7個胺基酸至20個胺基酸長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係至少4個胺基酸長度、至少6個胺基酸長度或至少7個胺基酸長度。 存在於本揭露之TMMP中之表位可具有約4個胺基酸至約25個胺基酸的長度，例如表位可具有4個胺基酸(aa)至10 aa、10 aa至15 aa、15 aa至20 aa或20 aa至25 aa的長度。例如存在於本揭露之TMMP中之表位可具有4個胺基酸(aa)、5 aa、6 aa、7、aa、8 aa、9 aa、10 aa、11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa、20 aa、21 aa、22 aa、23 aa、24 aa或25 aa的長度。在一些情況下，存在於TMMP中之表位具有5個胺基酸至10個胺基酸的長度，例如5 aa、6 aa、7 aa、8 aa、9 aa或10 aa。 存在於本揭露之TMMP中之WT-1表位係經T細胞特異性結合之肽，即該表位係經WT-1表位特異性T細胞特異性結合。表位特異性T細胞與具有參考胺基酸序列之表位結合，但實質上不與異於參考胺基酸序列之表位結合。例如，表位特異性T細胞與具有參考胺基酸序列之表位結合，且以小於10-6 M、小於10-5 M或小於10-4 M之親和力與異於參考胺基酸序列之表位結合(若結合的話)。表位特異性T細胞可以至少10-7 M、至少10-8 M、至少10-9 M或至少10-10 M之親和力與特異性表位結合。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1肽：a)呈現HLA-A*2402限制表位；b)具有長度為9至25個胺基酸之肽表位；且c)包含選自由302-310(RVPGVAPTL)(SEQ ID NO：80)、302-310；V303Y(RYPGVAPTL)(SEQ ID NO：81)、126-134；M127Y(RYFPNAPYL)(SEQ ID NO：82)及417-425；W418Y(RYPSCQKKF)(SEQ ID NO：83)所組成之群組的胺基酸序列。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1肽具有胺基酸序列RYPGVAPTL(SEQ ID NO：81)；且具有9個胺基酸的長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1肽具有胺基酸序列RYFPNAPYL(SEQ ID NO：82)；且具有9個胺基酸的長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1肽具有胺基酸序列RYFPNAPYL(SEQ ID NO：82)；且具有9個胺基酸的長度。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之WT-1肽具有胺基酸序列RYPSCQKKF(SEQ ID NO：83)；且具有9個胺基酸的長度。HLA/ 肽結合測定 可使用一些廣為周知方法之任一者測定給定肽(例如WT-1肽)是否與第I型HLA(包含HLA重鏈及β2M多肽)結合且當與HLA複合體結合時是否可有效呈現表位給TCR。測定包括結合測定及T細胞活化測定。 基於細胞之結合測定 作為一個實例，可使用基於細胞之肽誘導穩定測定來測定肽-HLA第I型結合。在此測定中，允許受到關注肽與TAP缺乏細胞(即具有缺陷轉運蛋白相關聯抗原處理(TAP)機轉且因此很少表面第I型分子之細胞)結合。此類細胞包括例如人T2細胞系(T2(174 x CEM.T2；美國菌種保存中心(ATCC)No. CRL-1992)。Henderson et al.(1992)Science 255：1264。在無有效的經TAP媒介之運輸胞質液肽至內質網中的情況下，經組裝之第I型複合體係結構不穩定且僅暫時保留在細胞表面。然而，當T2細胞與能夠結合第I型之外源性肽培育時，表面肽-HLA第I型複合體係穩定且可藉由流式細胞術例如泛抗第I型單株抗體偵測。藉由添加肽使在細胞表面上之肽-HLA複合體穩定及造成生命期增加驗證彼等之同一性。可使用流式細胞術進行分析，例如當泛HLA第I型抗體包含螢光標記時。肽與各種等位形式之HLA H鏈的結合可藉由基因修飾T2細胞以表現受到關注之等位HLA H鏈測試。 下列係使用T2測定以評估肽與HLA A*0201結合之非限制性實例。將T2細胞以細胞培養基洗滌並濃縮至106 個細胞/ml。將受到關注肽製備於細胞培養基且經連續稀釋提供200 μM、100 μM、20 μM及2 μM之濃度。將細胞與各肽稀釋以1：1混合以給出200 μL之最終體積且最終肽濃度為100 μM、50 μM、10 μM及1 μM。包括HLA A*0201結合肽GILGFVFTL(SEQ ID NO：84)及非HLA A*0201限制肽HPVGEADYF(SEQ ID NO：85)(HLA-B*3501)分別作為陽性及陰性對照。將細胞/肽混合物保持在37℃、5% CO2 下達十分鐘；接著在室溫下培育隔夜。細胞接著在37℃下培育2小時且以螢光標示抗人HLA抗體染色。將細胞以磷酸鹽緩衝鹽水洗滌二次並使用流式細胞術分析。使用抗HLA抗體染色之平均螢光強度(MFI)測量結合強度。 生化結合測定 可在不含細胞之活體外測定系統中測試HLA多肽(HLA重鏈多肽與β2M多肽複合)與受到關注肽之結合。例如，允許經標示之參考肽(例如螢光標示)與HLA多肽(HLA重鏈多肽與β2M多肽複合)結合以形成HLA-參考肽複合體。測試受到關注測試肽自HLA-參考肽複合體置換經標示之參考肽的能力。計算相對結合親和力為需要置換經結合之參考肽之測試肽的量。見例如van der Burg et al.(1995)Human Immunol. 44：189。 作為另一實例，受到關注肽可與HLA分子(HLA重鏈與β2M多肽複合)培育，且可以免疫測定格式測量HLA/肽複合體的穩定性。受到關注肽穩定HLA分子的能力係與呈現已知T細胞表位之對照肽比較。穩定性之偵測係基於HLA/肽複合體之天然構形的存在或不存在，使用抗HLA抗體偵測。見例如Westrop et al.(2009)J. Immunol. Methods 341：76；Steinitz et al.(2012)Blood 119：4073；及美國專利第9,205,144號。 T細胞活化測定 可藉由評估T細胞對肽-HLA複合體之反應，測定給定肽是否與第I型HLA(包含HLA重鏈及β2M多肽)結合且當與HLA複合體結合時是否可有效呈現表位給TCR。可測量之T細胞反應包括例如干擾素-γ(IFNγ)生產、細胞毒性活性及類似物。 ELISPOT測定 合適測定包括例如酶聯免疫斑點(ELISPOT)測定。在此測定中，CD8+ T細胞的IFNγ生產係在呈現與HLA第I型複合之受到關注肽之抗原呈現細胞(APC)之後測量。將抗IFNγ之抗體固定在多孔板之孔上。將APC添加至孔且與受到關注肽培育一段時間，以使肽與APC之表面上的HLA第I型結合。將對肽具特異性之CD8+ T細胞添加至孔，且將板培育約24小時。接著洗滌孔，且使用經可偵測標示之抗IFNγ抗體偵測與經固定之抗IFNγ抗體結合之任何IFNγ。可使用比色測定。例如，經可偵測標示之抗IFNγ抗體可為經生物素標示之抗IFNγ抗體，其可使用例如與鹼性磷酸酶共軛之鏈黴抗生物素蛋白偵測。添加BCIP/NBT(5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸鹽/硝基藍四唑鎓)溶液以使測定顯色。IFNγ分泌T細胞的存在係藉由色斑識別。陰性對照包括不與肽接觸之APC。表現各種HLA H鏈等位基因之APC可用於測定受到關注肽是否與包含特定HLA H鏈之HLA第I型分子有效結合。 細胞毒性試驗 亦可使用細胞毒性試驗測定給定肽是否與特定HLA第I型H鏈結合且當與包含H鏈之HLA第I型複合體結合時是否可有效呈現表位給TCR。細胞毒性試驗涉及培育目標細胞與細胞毒性CD8+ T細胞。目標細胞在其表面上展示包含受到關注肽之肽/HLA第I型複合體及包含待測試HLA H鏈之HLA第I型分子。目標細胞可例如以51 Cr放射活性標示。目標細胞是否有效呈現表位給細胞毒性CD8+ T細胞上之TCR藉此誘導CD8+ T細胞對目標細胞之細胞毒性活性係藉由測量51 Cr自經裂解之目標細胞之釋放測定。特異性細胞毒性可計算為在肽存在下之細胞毒性活性的量減去在肽不存在下之細胞毒性活性的量。 使用肽-HLA四聚體偵測抗原特異性T細胞 作為另一實例，產生具有螢光或重金屬標籤之肽-HLA複合體之多聚物(例如四聚體)。接著可使用多聚物經由流式細胞術(FACS)或質譜細胞計數(CyTOF)識別及定量特異性T細胞。偵測表位特異性T細胞提供結合肽之HLA分子能夠與抗原特異性T細胞之子集上的特異性TCR結合之直接證據。見例如Klenerman et al.(2002)Nature Reviews Immunol. 2：263。免疫調控性多肽 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之免疫調控性多肽係野生型免疫調控性多肽。在其他情況下，存在於本揭露之TMMP中之免疫調控性多肽係變體免疫調控性多肽，該變體免疫調控性多肽相較於對應野生型免疫調控性多肽對共免疫調控性多肽之親和力具有對共免疫調控性多肽減少的親和力。展現對共免疫調控性結構域減少的親和力之合適免疫調控性結構域可與野生型免疫調控性結構域具有1個胺基酸(aa)至20 aa的差異。例如在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽的胺基酸序列與對應野生型免疫調控性多肽有1 aa、2 aa、3 aa、4 aa、5 aa、6 aa、7 aa、8 aa、9 aa或10 aa的差異。作為另一實例，在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽的胺基酸序列與對應野生型免疫調控性多肽有11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa或20 aa的差異。作為一實例，在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括單一胺基酸取代。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括2個胺基酸取代(例如不超過2個胺基酸取代)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括3個胺基酸取代(例如不超過3個胺基酸取代)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括4個胺基酸取代(例如不超過4個胺基酸取代)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括5個胺基酸取代(例如不超過5個胺基酸取代)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括6個胺基酸取代(例如不超過6個胺基酸取代)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括7個胺基酸取代(例如不超過7個胺基酸取代)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括8個胺基酸取代(例如不超過8個胺基酸取代)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括9個胺基酸取代(例如不超過9個胺基酸取代)。在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括10個胺基酸取代(例如不超過10個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括11個胺基酸取代(例如不超過11個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括12個胺基酸取代(例如不超過12個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括13個胺基酸取代(例如不超過13個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括14個胺基酸取代(例如不超過14個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括15個胺基酸取代(例如不超過15個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括16個胺基酸取代(例如不超過16個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括17個胺基酸取代(例如不超過17個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括18個胺基酸取代(例如不超過18個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括19個胺基酸取代(例如不超過19個胺基酸取代)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應參考(例如野生型)免疫調控性多肽包括20個胺基酸取代(例如不超過20個胺基酸取代)。 如上所討論，適合包括於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽相較於對應野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之親和力展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力。 例示性免疫調控性多肽及同源共免疫調控性多肽對包括但不限於： a)4-1BBL(免疫調控性多肽)及4-1BB(同源共免疫調控性多肽)； b)PD-L1(免疫調控性多肽)及PD1(同源共免疫調控性多肽)； c)IL-2(免疫調控性多肽)及IL-2受體(同源共免疫調控性多肽)； d)CD80(免疫調控性多肽)及CD86(同源共免疫調控性多肽)； e)CD86(免疫調控性多肽)及CD28(同源共免疫調控性多肽)； f)OX40L(CD252)(免疫調控性多肽)及OX40(CD134) (同源共免疫調控性多肽)； g)Fas配體(免疫調控性多肽)及Fas(同源共免疫調控性多肽)； h)ICOS-L(免疫調控性多肽)及ICOS(同源共免疫調控性多肽)； i)ICAM(免疫調控性多肽)及LFA-1(同源共免疫調控性多肽)； j)CD30L(免疫調控性多肽)及CD30(同源共免疫調控性多肽)； k)CD40(免疫調控性多肽)及CD40L(同源共免疫調控性多肽)； l)CD83(免疫調控性多肽)及CD83L(同源共免疫調控性多肽)； m)HVEM(CD270)(免疫調控性多肽)及CD160(同源共免疫調控性多肽)； n)JAG1(CD339)(免疫調控性多肽)及Notch(同源共免疫調控性多肽)； o)JAG1(免疫調控性多肽)及CD46(同源共免疫調控性多肽)； p)CD80(免疫調控性多肽)及CTLA4(同源共免疫調控性多肽)； q)CD86(免疫調控性多肽)及CTLA4(同源共免疫調控性多肽)；及 r)CD70(免疫調控性多肽)及CD27(同源共免疫調控性多肽)。 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽具有100 nM至100 μM之結合親和力。例如，在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽具有約100 nM至150 nM、約150 nM至約200 nM、約200 nM至約250 nM、約250 nM至約300 nM、約300 nM至約350 nM、約350 nM至約400 nM、約400 nM至約500 nM、約500 nM至約600 nM、約600 nM至約700 nM、約700 nM至約800 nM、約800 nM至約900 nM、約900 nM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約15 μM、約15 μM至約20 μM、約20 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM或約75 μM至約100 μM之結合親和力。 存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力。類似地，本揭露之包含變體免疫調控性多肽之TMMP展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力。因此例如本揭露之包含變體免疫調控性多肽之TMMP對同源共免疫調控性多肽具有100 nM至100 μM之結合親和力。例如，在一些情況下，本揭露之包含變體免疫調控性多肽之TMMP對同源共免疫調控性多肽具有約100 nM至150 nM、約150 nM至約200 nM、約200 nM至約250 nM、約250 nM至約300 nM、約300 nM至約350 nM、約350 nM至約400 nM、約400 nM至約500 nM、約500 nM至約600 nM、約600 nM至約700 nM、約700 nM至約800 nM、約800 nM至約900 nM、約900 nM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約15 μM、約15 μM至約20 μM、約20 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM或約75 μM至約100 μM之結合親和力。 如圖9所示意性描繪，免疫調控性多肽(即一或多種免疫調控性多肽)可存在於本揭露之TMMP中之多個位置之任一者。圖9描繪二個拷貝之變體IL-2多肽之位置；然而，免疫調控性多肽可為如本文所述之多種免疫調控性多肽之任一者。如圖9所描繪，免疫調控性多肽可位於：1)MHC第I型重鏈N端；2)MHC第I型重鏈C端及Ig Fc多肽N端；換句話說，介於MHC第I型重鏈與Ig Fc多肽之間；3)Ig Fc多肽C端；4)肽表位N端；或5)β2M多肽C端。 PD-L1變體 作為一非限制性實例，在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽係變體PD-L1多肽。野生型PD-L1與PD1結合。 野生型人PD-L1多肽可包含下列胺基酸序列：MRIFAVFIFM TYWHLLNAFT VTVPKDLYVV EYGSNMTIEC KFPVEKQLDL AALIVYWEME DKNIIQFVHG EEDLKVQHSS YRQRARLLKD QLSLGNAALQ ITDVKLQDAG VYRCMISYGG ADYKRITVKV NAPYNKINQR ILVVDPVTSE HELTCQAEGY PKAEVIWTSS DHQVLSGKTT TTNSKREEKL FNVTSTLRIN TTTNEIFYCT FRRLDPEENH TAELVIPGNI LNVSIKICLT LSPST(SEQ ID NO：1)。 野生型人PD-L1胞外域可包含下列胺基酸序列：FT VTVPKDLYVV EYGSNMTIEC KFPVEKQLDL AALIVYWEME DKNIIQFVHG EEDLKVQHSS YRQRARLLKD QLSLGNAALQ ITDVKLQDAG VYRCMISYGG ADYKRITVKV NAPYNKINQR ILVVDPVTSE HELTCQAEGY PKAEVIWTSS DHQVLSGKTT TTNSKREEKL FNVTSTLRIN TTTNEIFYCT FRRLDPEENH TAELVIPGNI LNVSIKI(SEQ ID NO：2)。 野生型PD-1多肽可包含下列胺基酸序列：PGWFLDSPDR PWNPPTFSPA LLVVTEGDNA TFTCSFSNTS ESFVLNWYRM SPSNQTDKLA AFPEDRSQPG QDCRFRVTQL PNGRDFHMSV VRARRNDSGT YLCGAISLAP KAQIKESLRA ELRVTERRAE VPTAHPSPSP RPAGQFQTLV VGVVGGLLGS LVLLVWVLAV ICSRAARGTI GARRTGQPLK EDPSAVPVFS VDYGELDFQW REKTPEPPVP CVPEQTEYAT IVFPSGMGTS SPARRGSADG PRSAQPLRPE DGHCSWPL(SEQ ID NO：3)。在一些情況下，當本揭露之TMMP包含變體PD-L1多肽時，「同源共免疫調控性多肽」係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列的PD-1多肽。 在一些情況下，相較於包含如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的PD-L1多肽之結合親和力，變體PD-L1多肽展現對PD-1(例如包含如SEQ ID NO：3所示之胺基酸序列的PD-1多肽)減少的結合親和力。例如在一些情況下，比起包含如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的PD-L1多肽之結合親和力，本揭露之變體PD-L1多肽以至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、低於至少50%、低於至少55%、低於至少60%、低於至少65%、低於至少70%、低於至少75%、低於至少80%、低於至少85%、低於至少90%、低於至少95%或低於超過95%的結合親和力與PD-1(例如包含如SEQ ID NO：3所示之胺基酸序列的PD-1多肽)結合。 在一些情況下，變體PD-L1多肽對PD-1具有1nM至1mM之結合親和力。在一些情況下，本揭露之變體PD-L1多肽對PD-1具有100 nM至100 μM之結合親和力。作為另一實例，在一些情況下，變體PD-L1多肽對PD1(例如包含如SEQ ID NO：3所示之胺基酸序列的PD1多肽)具有約100 nM至150 nM、約150 nM至約200 nM、約200 nM至約250 nM、約250 nM至約300 nM、約300 nM至約350 nM、約350 nM至約400 nM、約400 nM至約500 nM、約500 nM至約600 nM、約600 nM至約700 nM、約700 nM至約800 nM、約800 nM至約900 nM、約900 nM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約15 μM、約15 μM至約20 μM、約20 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM或約75 μM至約100 μM之結合親和力。 在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有單一胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有2至10個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有2個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有3個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有4個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有5個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有6個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有7個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有8個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有9個胺基酸取代。在一些情況下，變體PD-L1多肽相較於如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示之PD-L1胺基酸序列具有10個胺基酸取代。 合適PD-L1變體包括包含與下列胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列的多肽： FT VTVPK X LYVV EYGSNMTIEC KFPVEKQLDL AALIVYWEME DKNIIQFVHG EEDLKVQHSS YRQRARLLKD QLSLGNAALQ ITDVKLQDAG VYRCMISYGG ADYKRITVKV NAPYNKINQR ILVVDPVTSE HELTCQAEGY PKAEVIWTSS DHQVLSGKTT TTNSKREEKL FNVTSTLRIN TTTNEIFYCT FRRLDPEENH TAELVIPGNI LNVSIKI(SEQ ID NO：86)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala。在一些情況下，X係Arg。 合適PD-L1變體包括包含與下列胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列的多肽： FT VTVPKDLYVV EYGSNMTIEC KFPVEKQLDL AAL X VYWEME DKNIIQFVHG EEDLKVQHSS YRQRARLLKD QLSLGNAALQ ITDVKLQDAG VYRCMISYGG ADYKRITVKV NAPYNKINQR ILVVDPVTSE HELTCQAEGY PKAEVIWTSS DHQVLSGKTT TTNSKREEKL FNVTSTLRIN TTTNEIFYCT FRRLDPEENH TAELVIPGNI LNVSIKI(SEQ ID NO：87)，其中X係除Ile以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Asp。 合適PD-L1變體包括包含與下列胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列的多肽： FT VTVPKDLYVV EYGSNMTIEC KFPVEKQLDL AALIVYWEME DKNIIQFVHG E X DLKVQHSS YRQRARLLKD QLSLGNAALQ ITDVKLQDAG VYRCMISYGG ADYKRITVKV NAPYNKINQR ILVVDPVTSE HELTCQAEGY PKAEVIWTSS DHQVLSGKTT TTNSKREEKL FNVTSTLRIN TTTNEIFYCT FRRLDPEENH TAELVIPGNI LNVSIKI(SEQ ID NO：88)，其中X係除Glu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Arg。 CD80變體 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽係變體CD80多肽。野生型CD80與CD28結合。野生型CD80亦與CD86結合。 人CD80之胞外域之野生型胺基酸序列可如下述： VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：4)。 野生型CD28胺基酸序列可如下述：MLRLLLALNL FPSIQVTGNK ILVKQSPMLV AYDNAVNLSC KYSYNLFSRE FRASLHKGLD SAVEVCVVYG NYSQQLQVYS KTGFNCDGKL GNESVTFYLQ NLYVNQTDIY FCKIEVMYPP PYLDNEKSNG TIIHVKGKHL CPSPLFPGPS KPFWVLVVVG GVLACYSLLV TVAFIIFWVR SKRSRLLHSD YMNMTPRRPG PTRKHYQPYA PPRDFAAYRS(SEQ ID NO：5)。在一些情況下，當本揭露之TMMP包含變體CD80多肽時，「同源共免疫調控性多肽」係包含SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CD28多肽。 野生型CD28胺基酸序列可如下述：MLRLLLALNL FPSIQVTGNK ILVKQSPMLV AYDNAVNLSW KHLCPSPLFP GPSKPFWVLV VVGGVLACYS LLVTVAFIIF WVRSKRSRLL HSDYMNMTPR RPGPTRKHYQ PYAPPRDFAA YRS(SEQ ID NO：6)。 野生型CD28胺基酸序列可如下述：MLRLLLALNL FPSIQVTGKH LCPSPLFPGP SKPFWVLVVV GGVLACYSLL VTVAFIIFWV RSKRSRLLHS DYMNMTPRRP GPTRKHYQPY APPRDFAAYR S(SEQ ID NO：7)。 在一些情況下，相較於包含如SEQ ID NO：4所示之胺基酸序列的CD80多肽對CD28的結合親和力，變體CD80多肽展現對CD28減少的結合親和力。例如在一些情況下，比起包含如SEQ ID NO：4所示之胺基酸序列的CD80多肽對CD28(例如包含如SEQ ID NO：5、6或7中之一者所示之胺基酸序列的CD28多肽)之結合親和力，變體CD80多肽以至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、低於至少50%、低於至少55%、低於至少60%、低於至少65%、低於至少70%、低於至少75%、低於至少80%、低於至少85%、低於至少90%、低於至少95%或低於超過95%的結合親和力與CD28結合。 在一些情況下，變體CD80多肽對CD28具有100 nM至100 μM之結合親和力。作為另一實例，在一些情況下，本揭露之變體CD80多肽對CD28(例如包含如SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6或SEQ ID NO：7所示之胺基酸序列的CD28多肽)具有約100 nM至150 nM、約150 nM至約200 nM、約200 nM至約250 nM、約250 nM至約300 nM、約300 nM至約350 nM、約350 nM至約400 nM、約400 nM至約500 nM、約500 nM至約600 nM、約600 nM至約700 nM、約700 nM至約800 nM、約800 nM至約900 nM、約900 nM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約15 μM、約15 μM至約20 μM、約20 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM或約75 μM至約100 μM之結合親和力。 在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有單一胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有2至10個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有2個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有3個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有4個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有5個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有6個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有7個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有8個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有9個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD80多肽相較於如SEQ ID NO：4所示之CD80胺基酸序列具有10個胺基酸取代。 合適CD80變體包括包含與下列胺基酸序列中任一者具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列的多肽： VIHVTK EVKEVATLSC GH X VSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：89)，其中X係除Asn以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDIT X NLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：90)，其中X係除Asn以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS X VILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：91)，其中X係除Ile以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVL X YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：92)，其中X係除Lys以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS X DPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：93)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS Q X PETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：94)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEE X A QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：95)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRI X WQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：96)，其中X係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYW X KEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：97)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK K X VLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：98)，其中X係除Met以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KM X LTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：99)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MN X WPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：100)，其中X係除Ile以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPE X KNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：101)，其中X係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIF X ITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：102)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA D X PTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：103)，其中X係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPTPSISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTV X QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：104)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala；及 VIHVTK EVKEVATLSC GHNVSVEELA QTRIYWQKEK KMVLTMMSGD MNIWPEYKNR TIFDITNNLS IVILALRPSD EGTYECVVLK YEKDAFKREH LAEVTLSVKA DFPT X SISDF EIPTSNIRRI ICSTSGGFPE PHLSWLENGE ELNAINTTVS QDPETELYAV SSKLDFNMTT NHSFMCLIKY GHLRVNQTFN WNTTKQEHFP DN(SEQ ID NO：105)，其中X係除Pro以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala。 CD86變體 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽係變體CD86多肽。野生型CD86與CD28結合。在一些情況下，當本揭露之TMMP包含變體CD86多肽時，「同源共免疫調控性多肽」係包含SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CD28多肽。 野生型人CD86之全胞外域之胺基酸序列可如下述：APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYM N RTSF D SDS W TLRLHNLQIKDKGLYQCIIH H KKPTGMIRIHQMNSELSVL ANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：8)。 野生型人CD86之IgV結構域之胺基酸序列可如下述：APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYM N RTSF D SDS W TLRLHNLQIKDKGLYQCIIH H KKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：9)。 在一些情況下，相較於包含如SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：9所示之胺基酸序列的CD86多肽對CD28的結合親和力，變體CD86多肽展現對CD28減少的結合親和力。例如在一些情況下，比起包含如SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：9所示之胺基酸序列的CD86多肽對CD28(例如包含如SEQ ID NO：5、6或7中之一者所示之胺基酸序列的CD28多肽)之結合親和力，變體CD86多肽以至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、低於至少50%、低於至少55%、低於至少60%、低於至少65%、低於至少70%、低於至少75%、低於至少80%、低於至少85%、低於至少90%、低於至少95%或低於超過95%的結合親和力與CD28結合。 在一些情況下，變體CD86多肽對CD28具有100 nM至100 μM之結合親和力。作為另一實例，在一些情況下，本揭露之變體CD86多肽對CD28(例如包含如SEQ ID NO：5、6或7中之一者所示之胺基酸序列的CD28多肽)具有約100 nM至150 nM、約150 nM至約200 nM、約200 nM至約250 nM、約250 nM至約300 nM、約300 nM至約350 nM、約350 nM至約400 nM、約400 nM至約500 nM、約500 nM至約600 nM、約600 nM至約700 nM、約700 nM至約800 nM、約800 nM至約900 nM、約900 nM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約15 μM、約15 μM至約20 μM、約20 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM或約75 μM至約100 μM之結合親和力。 在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有單一胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有2至10個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有2個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有3個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有4個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有5個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有6個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有7個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有8個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有9個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：8所示之CD86胺基酸序列具有10個胺基酸取代。 在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有單一胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有2至10個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有2個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有3個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有4個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有5個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有6個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有7個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有8個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有9個胺基酸取代。在一些情況下，變體CD86多肽相較於如SEQ ID NO：9所示之CD86胺基酸序列具有10個胺基酸取代。 合適CD86變體包括包含與下列胺基酸序列中任一者具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列的多肽： APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYM X RTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：106)，其中X係除Asn以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSF X SDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：107)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDS X TLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：108)，其中X係除Trp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIH X KKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：109)，其中X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYM X RTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：110)，其中X係除Asn以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSF X SDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：111)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDS X TLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：112)，其中X係除Trp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIH X KKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：113)，其中X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENL X LNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：114)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENL X LNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：115)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFW X DQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：116)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFW X DQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：117)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVV X WQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：118)，其中X係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVV X WQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：119)，其中X係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWT X RLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：120)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSFDSDSWT X RLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：121)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSK X MNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：122)，其中X係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSK X MNRTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIHHKKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：123)，其中X係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYM X RTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIH X KKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：124)，其中第一X係除Asn以外之任何胺基酸且第二X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，第一及第二X皆為Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYM X RTSFDSDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIH X KKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：125)，其中第一X係除Asn以外之任何胺基酸且第二X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，第一及第二X皆為Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSF X1 SDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIH X2 KKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：126)，其中X1 係除Asp以外之任何胺基酸且X2 係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala且X2 係Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYMNRTSF X1 SDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIH X2 KKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：127)，其中第一X係除Asn以外之任何胺基酸且第二X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，第一及第二X皆為Ala； APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYM X1 RTSF X2 SDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIH X3 KKPTGMIRIHQMNSELSVLANFSQPEIVPISNITENVYINLTCSSIHGYPEPKKMSVLLRTKNSTIEYDGIMQKSQDNVTELYDVSISLSVSFPDVTSNMTIFCILETDKTRLLSSPFSIELEDPQPPPDHIP(SEQ ID NO：128)，其中X1 係除Asn以外之任何胺基酸，X2 係除Asp以外之任何胺基酸且X3 係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala，X2 係Ala且X3 係Ala；及 APLKIQAYFNETADLPCQFANSQNQSLSELVVFWQDQENLVLNEVYLGKEKFDSVHSKYM X1 RTSF X2 SDSWTLRLHNLQIKDKGLYQCIIH X3 KKPTGMIRIHQMNSELSVL(SEQ ID NO：129)，其中X1 係除Asn以外之任何胺基酸，X2 係除Asp以外之任何胺基酸且X3 係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala，X2 係Ala且X3 係Ala。 4-1BBL變體 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽係變體4-1BBL多肽。野生型4-1BBL與4-1BB(CD137)結合。 野生型4-1BBL胺基酸序列可如下述：MEYASDASLD PEAPWPPAPR ARACRVLPWA LVAGLLLLLL LAAACAVFL A CPWAVSGARA SPGSAASPRL REGPELSPDD PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：10)。 在一些情況下，變體4-1BBL多肽係人4-1BBL之腫瘤壞死因子(TNF)同源性結構域(THD)的變體。 人4-1BBL之THD的野生型胺基酸序列可為例如下述SEQ ID NO：11至13中之一者： PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：11) D Paglldlrqg Mfaqlvaqnv Llidgplswy Sdpglagvsl Tgglsykedt Kelvvakagv Yyvffqlelr Rvvagegsgs Vslalhlqpl Rsaagaaala Ltvdlppass Earnsafgfq Grllhlsagq Rlgvhlhtea Rarhawqltq Gatvlglfrv Tpeipaglps Prse(SEQ ID NO：12) D PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPA(SEQ ID NO：13)。 野生型4-1BB胺基酸序列可如下述：MGNSCYNIVA TLLLVLNFER TRSLQDPCSN CPAGTFCDNN RNQICSPCPP NSFSSAGGQR TCDICRQCKG VFRTRKECSS TSNAECDCTP GFHCLGAGCS MCEQDCKQGQ ELTKKGCKDC CFGTFNDQKR GICRPWTNCS LDGKSVLVNG TKERDVVCGP SPADLSPGAS SVTPPAPARE PGHSPQIISF FLALTSTALL FLLFFLTLRF SVVKRGRKKL LYIFKQPFMR PVQTTQEEDG CSCRFPEEEE GGCEL(SEQ ID NO：14)。在一些情況下，當本揭露之TMMP包含變體4-1BBL多肽時，「同源共免疫調控性多肽」係包含SEQ ID NO：14之胺基酸序列的4-1BB多肽。 在一些情況下，相較於包含如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之胺基酸序列的4-1BBL多肽的結合親和力，變體4-1BBL多肽展現對4-1BB減少的結合親和力。例如在一些情況下，當在相同條件下測定時，比起包含如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之胺基酸序列的4-1BBL多肽對4-1BB多肽(例如包含如SEQ ID NO：14所示之胺基酸序列的4-1BB多肽)之結合親和力，本揭露之變體4-1BBL多肽以低於至少10%、低於至少15%、低於至少20%、至少25%、低於至少30%、低於至少35%、低於至少40%、低於至少45%、低於至少50%、低於至少55%、低於至少60%、低於至少65%、低於至少70%、低於至少75%、低於至少80%、低於至少85%、低於至少90%、低於至少95%或低於超過95%的結合親和力與4-1BB結合。 在一些情況下，變體4-1BBL多肽對4-1BB具有100 nM至100 μM之結合親和力。作為另一實例，在一些情況下，變體4-1BBL多肽對4-1BB(例如包含如SEQ ID NO：14所示之胺基酸序列的4-1BB多肽)具有約100 nM至150 nM、約150 nM至約200 nM、約200 nM至約250 nM、約250 nM至約300 nM、約300 nM至約350 nM、約350 nM至約400 nM、約400 nM至約500 nM、約500 nM至約600 nM、約600 nM至約700 nM、約700 nM至約800 nM、約800 nM至約900 nM、約900 nM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約15 μM、約15 μM至約20 μM、約20 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM或約75 μM至約100 μM之結合親和力。 在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有單一胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有2至10個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有2個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有3個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有4個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有5個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有6個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有7個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有8個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有9個胺基酸取代。在一些情況下，變體4-1BBL多肽相較於如SEQ ID NO：10至13中之一者所示之4-1BBL胺基酸序列具有10個胺基酸取代。 合適4-1BBL變體包括包含與下列胺基酸序列中任一者具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列的多肽： PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSY X EDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：130)，其中X係除Lys以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAW X LTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：131)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG X FAQLVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：132)，其中X係除Met以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG M X AQLVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：133)，其中X係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFA X LVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：134)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQ X VAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：135)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQL X AQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：136)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVA X NV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：137)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQ X V LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：138)，其中X係除Asn以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQN X LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：139)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV X LIDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：140)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV L X IDGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：141)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LL X DGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：142)，其中X係除Ile以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLI X GPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：143)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLID X PLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：144)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGG X LSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：145)，其中X係除Pro以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGP X SWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：146)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPL X WY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：147)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLS X Y SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：148)，其中X係除Trp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSW X SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：149)，其中X係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY X DPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：150)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY S X PGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：151)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SD X GLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：152)，其中X係除Pro以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDP X LAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：153)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPG X AGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：154)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLA X VSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：155)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAG X SL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：156)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGV X L TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：157)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVS X TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：158)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL X GGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：159)，其中X係除Thr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL T X GLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：160)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TG X LSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：161)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGG X SYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：162)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGL X YKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：163)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLS X KEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：164)，其中X係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYK X DT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：165)，其中X係除Glu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKE X T KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：166)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKED X KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：167)，其中X係除Thr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT X ELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：168)，其中X係除Lys以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT K X LVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：169)，其中X係除Glu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYV X FQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：170)，其中X係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVF X QLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：171)，其中X係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFF X LELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：172)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQ X ELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：173)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQL X LR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：174)，其中X係除Glu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLE X R RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：175)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLEL X RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：176)，其中X係除Arg以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR X VVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：177)，其中X係除Arg以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR R X VAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：178)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RV X AGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：179)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVA X EGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：180)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAG X GSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：181)，其中X係除Glu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGE X SGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：182)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEG X GS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：183)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTV X LPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：184)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVD X PPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：185)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDL X PASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：186)，其中X係除Pro以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPA X S EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：187)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPAS X EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：188)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS X ARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：189)，其中X係除Glu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EA X NSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：190)，其中X係除Arg以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EAR X SAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：191)，其中X係除Asn以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARN X AFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：192)，其中X係除Ser以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSA X GFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：193)，其中X係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAG X RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：194)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ X LGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：195)，其中X係除Arg以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ R X GVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：196)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RL X VHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：197)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLG X HLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：198)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGV X LHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：199)，其中X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVH X HTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：200)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHL X TEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：201)，其中X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLH X EA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：202)，其中X係除Thr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHT X A RARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：203)，其中X係除Glu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA X ARHAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：204)，其中X係除Arg以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RA X HAWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：205)，其中X係除Arg以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RAR X AWQLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：206)，其中X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHA X QLTQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：207)，其中X係除Trp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQ X TQ GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：208)，其中X係除Leu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQL X Q GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：209)，其中X係除Thr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLT X GATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：210)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ X ATVLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：211)，其中X係除Gly以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GA X VLGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：212)，其中X係除Thr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala；及 PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIGGPLSWY SDPGLAGVSL TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GAT X LGLFRV TPEIPAGLPS PRSE(SEQ ID NO：213)，其中X係除Val以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala。 IL-2變體 在一些情況下，存在於本揭露之TMMP中之變體免疫調控性多肽係變體IL-2多肽。野生型IL-2與IL-2受體(IL-2R)(即包含IL-2Rα、IL-2Rβ及IL-2Rγ之異三聚體多肽)結合。 野生型IL-2胺基酸序列可如下述：APTSSSTKKT QLQL EH LLL D LQMILNGINN YKNPKLTRML T F KF Y MPKKA TELKHLQCLEEELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNRWITFC Q SIIS TLT(SEQ ID NO：15)。 野生型IL2與在細胞之表面上的IL2受體(IL2R)結合。IL2受體在一些情況下係異三聚體多肽，其包含α鏈(IL-2Rα；亦稱為CD25)、β鏈(IL-2Rβ；亦稱為CD122)及γ鏈(IL-2Rγ；亦稱為CD132)。人IL-2Rα、IL2Rβ及IL-2Rγ之胺基酸序列可如下述。 人IL-2Rα：ELCDDDPPE IPHATFKAMA YKEGTMLNCE CKRGFRRIKS GSLYMLCTGN SSHSSWDNQC QCTSSATRNT TKQVTPQPEE QKERKTTEMQ SPMQPVDQAS LPGHCREPPP WENEATERIY HFVVGQMVYY QCVQGYRALH RGPAESVCKM THGKTRWTQP QLICTGEMET SQFPGEEKPQ ASPEGRPESE TSCLVTTTDF QIQTEMAATM ETSIFTTEYQ VAVAGCVFLL ISVLLLSGLT WQRRQRKSRR TI(SEQ ID NO：16)。 人IL-2Rβ：VNG TSQFTCFYNS RANISCVWSQ DGALQDTSCQ VHAWPDRRRW NQTCELLPVS QASWACNLIL GAPDSQKLTT VDIVTLRVLC REGVRWRVMA IQDFKPFENL RLMAPISLQV VHVETHRCNI SWEISQASHY FERHLEFEAR TLSPGHTWEE APLLTLKQKQ EWICLETLTP DTQYEFQVRV KPLQGEFTTW SPWSQPLAFR TKPAALGKDT IPWLGHLLVG LSGAFGFIIL VYLLINCRNT GPWLKKVLKC NTPDPSKFFS QLSSEHGGDV QKWLSSPFPS SSFSPGGLAP EISPLEVLER DKVTQLLLQQ DKVPEPASLS SNHSLTSCFT NQGYFFFHLP DALEIEACQV YFTYDPYSEE DPDEGVAGAP TGSSPQPLQP LSGEDDAYCT FPSRDDLLLF SPSLLGGPSP PSTAPGGSGA GEERMPPSLQ ERVPRDWDPQ PLGPPTPGVP DLVDFQPPPE LVLREAGEEV PDAGPREGVS FPWSRPPGQG EFRALNARLP LNTDAYLSLQ ELQGQDPTHL V(SEQ ID NO：17)。 人IL-2Rγ：LNTTILTP NGNEDTTADF FLTTMPTDSL SVSTLPLPEV QCFVFNVEYM NCTWNSSSEP QPTNLTLHYW YKNSDNDKVQ KCSHYLFSEE ITSGCQLQKK EIHLYQTFVV QLQDPREPRR QATQMLKLQN LVIPWAPENL TLHKLSESQL ELNWNNRFLN HCLEHLVQYR TDWDHSWTEQ SVDYRHKFSL PSVDGQKRYT FRVRSRFNPL CGSAQHWSEW SHPIHWGSNT SKENPFLFAL EAVVISVGSM GLIISLLCVY FWLERTMPRI PTLKNLEDLV TEYHGNFSAW SGVSKGLAES LQPDYSERLC LVSEIPPKGG ALGEGPGASP CNQHSPYWAP PCYTLKPET(SEQ ID NO：18)。 在一些情況下，當本揭露之TMMP包含變體IL-2多肽時，「同源共免疫調控性多肽」係含IL-2R之多肽，其包含SEQ ID NO：16、17及18之胺基酸序列。 在一些情況下，相較於包含如SEQ ID NO：15所示之胺基酸序列的IL-2多肽的結合親和力，變體IL-2多肽展現對IL-2R減少的結合親和力。例如在一些情況下，當在相同條件下測定時，比起包含如SEQ ID NO：15所示之胺基酸序列的IL-2多肽對IL-2R(例如包含如SEQ ID NO：16至18所示之胺基酸序列的含IL-2R多肽)之結合親和力，變體IL-2多肽以低於至少10%、低於至少15%、低於至少20%、至少25%、低於至少30%、低於至少35%、低於至少40%、低於至少45%、低於至少50%、低於至少55%、低於至少60%、低於至少65%、低於至少70%、低於至少75%、低於至少80%、低於至少85%、低於至少90%、低於至少95%或低於超過95%的結合親和力與IL-2R結合。 在一些情況下，變體IL-2多肽對IL-2R具有100 nM至100 μM之結合親和力。作為另一實例，在一些情況下，變體IL-2多肽對IL-2R(例如包含如SEQ ID NO：16至18所示之胺基酸序列的含IL-2R多肽)具有約100 nM至150 nM、約150 nM至約200 nM、約200 nM至約250 nM、約250 nM至約300 nM、約300 nM至約350 nM、約350 nM至約400 nM、約400 nM至約500 nM、約500 nM至約600 nM、約600 nM至約700 nM、約700 nM至約800 nM、約800 nM至約900 nM、約900 nM至約1 μM、約1 μM至約5 μM、約5 μM至約10 μM、約10 μM至約15 μM、約15 μM至約20 μM、約20 μM至約25 μM、約25 μM至約50 μM、約50 μM至約75 μM或約75 μM至約100 μM之結合親和力。 在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有單一胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有2至10個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有2個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有3個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有4個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有5個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有6個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有7個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有8個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有9個胺基酸取代。在一些情況下，變體IL-2多肽相較於如SEQ ID NO：15所示之IL-2胺基酸序列具有10個胺基酸取代。 合適IL-2變體包括包含與下列胺基酸序列中任一者具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列同一性之胺基酸序列的多肽： APTSSSTKKT QLQLEHLLLD LQMILNGINN YKNPKLTRML T X KFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：214)，其中X係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala。在一些情況下，X係Met。在一些情況下，X係Pro。在一些情況下，X係Ser。在一些情況下，X係Thr。在一些情況下，X係Trp。在一些情況下，X係Tyr。在一些情況下，X係Val。在一些情況下，X係His； APTSSSTKKT QLQLEHLLL X LQMILNGINN YKNPKLTRML TFKFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：215)，其中X係除Asp以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APTSSSTKKT QLQL X HLLLD LQMILNGINN YKNPKLTRML TFKFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：216)，其中X係除Glu以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala。 APTSSSTKKT QLQLE X LLLD LQMILNGINN YKNPKLTRML TFKFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：217)，其中X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala。在一些情況下，X係Thr。在一些情況下，X係Asn。在一些情況下，X係Cys。在一些情況下，X係Gln。在一些情況下，X係Met。在一些情況下，X係Val。在一些情況下，X係Trp； APTSSSTKKT QLQLE X LLLD LQMILNGINN YKNPKLTRML TFKFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：218)，其中X係除His以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala。在一些情況下，X係Arg。在一些情況下，X係Asn。在一些情況下，X係Asp。在一些情況下，X係Cys。在一些情況下，X係Glu。在一些情況下，X係Gln。在一些情況下，X係Gly。在一些情況下，X係Ile。在一些情況下，X係Lys。在一些情況下，X係Leu。在一些情況下，X係Met。在一些情況下，X係Phe。在一些情況下，X係Pro。在一些情況下，X係Ser。在一些情況下，X係Thr。在一些情況下，X係Tyr。在一些情況下，X係Trp。在一些情況下，X係Val； APTSSSTKKT QLQLEHLLLD LQMILNGINN YKNPKLTRML TFKF X MPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：219)，其中X係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APTSSSTKKT QLQLEHLLLD LQMILNGINN YKNPKLTRML TFKFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFC X SIIS TLT(SEQ ID NO：220)，其中X係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X係Ala； APTSSSTKKT QLQLE X1 LLLD LQMILNGINN YKNPKLTRML T X2 KFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：221)，其中X1 係除His以外之任何胺基酸，且其中X2 係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；且X2 係Ala。在一些情況下，X1 係Thr；且X2 係Ala； APTSSSTKKT QLQLEHLLL X1 LQMILNGINN YKNPKLTRML T X2 KFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：222)，其中X1 係除Asp以外之任何胺基酸，且其中X2 係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；且X2 係Ala； APTSSSTKKT QLQL X1 HLLL X2 LQMILNGINN YKNPKLTRML T X3 KFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：223)，其中X1 係除Glu以外之任何胺基酸；其中X2 係除Asp以外之任何胺基酸；且其中X3 係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X3 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；X2 係Ala；且X3 係Ala； APTSSSTKKT QLQLE X1 LLL X2 LQMILNGINN YKNPKLTRML T X3 KFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：224)，其中X1 係除His以外之任何胺基酸；其中X2 係除Asp以外之任何胺基酸；且其中X3 係除Phe以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X3 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；X2 係Ala；且X3 係Ala； APTSSSTKKT QLQLEHLLL X1 LQMILNGINN YKNPKLTRML T X2 KFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFC X3 SIIS TLT(SEQ ID NO：225)，其中X1 係除Asp以外之任何胺基酸；其中X2 係除Phe以外之任何胺基酸；且其中X3 係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X3 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；X2 係Ala；且X3 係Ala； APTSSSTKKT QLQLEHLLL X1 LQMILNGINN YKNPKLTRML T X2 KF X3 MPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：226)，其中X1 係除Asp以外之任何胺基酸；其中X2 係除Phe以外之任何胺基酸；且其中X3 係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X3 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；X2 係Ala；且X3 係Ala； APTSSSTKKT QLQLE X1 LLL X2 LQMILNGINN YKNPKLTRML T X3 KF X4 MPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFCQSIIS TLT(SEQ ID NO：227)，其中X1 係除His以外之任何胺基酸；其中X2 係除Asp以外之任何胺基酸；其中X3 係除Phe以外之任何胺基酸；且其中X4 係除Tyr以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X3 係Ala。在一些情況下，X4 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；X2 係Ala；X3 係Ala；且X4 係Ala； APTSSSTKKT QLQLEHLLL X1 LQMILNGINN YKNPKLTRML T X2 KF X3 MPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFC X4 SIIS TLT(SEQ ID NO：228)，其中X1 係除Asp以外之任何胺基酸；其中X2 係除Phe以外之任何胺基酸；其中X3 係除Tyr以外之任何胺基酸；且其中X4 係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X3 係Ala。在一些情況下，X4 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；X2 係Ala；X3 係Ala；且X4 係Ala； APTSSSTKKT QLQLE X1 LLL X2 LQMILNGINN YKNPKLTRML T X3 KF X4 MPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFC X5 SIIS TLT(SEQ ID NO：229)，其中X1 係除His以外之任何胺基酸；其中X2 係除Asp以外之任何胺基酸；其中X3 係除Phe以外之任何胺基酸；其中X4 係除Tyr以外之任何胺基酸；且其中X5 係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X3 係Ala。在一些情況下，X4 係Ala。在一些情況下，X5 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；X2 係Ala；X3 係Ala；X4 係Ala；X5 係Ala；及 APTSSSTKKT QLQLE X1 LLLD LQMILNGINN YKNPKLTRML T X2 KFYMPKKA TELKHLQCLE EELKPLEEVL NLAQSKNFHL RPRDLISNIN VIVLELKGSE TTFMCEYADE TATIVEFLNR WITFC X3 SIIS TLT(SEQ ID NO：230)，其中X1 係除His以外之任何胺基酸；其中X2 係除Phe以外之任何胺基酸；且其中X3 係除Gln以外之任何胺基酸。在一些情況下，X1 係Ala。在一些情況下，X2 係Ala。在一些情況下，X3 係Ala。在一些情況下，X1 係Ala；X2 係Ala；且X3 係Ala。額外多肽 本揭露之TMMP之多肽鏈除該些上述者以外可包括一或多個多肽。合適額外多肽包括表位標籤及親和力結構域。一或多個額外多肽可包括在TMMP之多肽鏈N端、TMMP之多肽鏈C端或TMMP之多肽鏈內部。 表位標籤 合適表位標籤包括但不限於血球凝集素(HA；例如YPYDVPDYA(SEQ ID NO：231))；FLAG(例如DYKDDDDK (SEQ ID NO：232))；c-myc(例如EQKLISEEDL；SEQ ID NO：233)及類似物。 親和力結構域 親和力結構域包括用於識別或純化之肽序列，該肽序列可與結合伴(例如諸如經固定在固體撐體上者)交互作用。編碼多個連續單一胺基酸(諸如組胺酸)之DNA序列當與經表現之蛋白質融合時，可藉由高親和力結合至樹脂管柱(諸如鎳瓊脂糖)而用於單步驟純化該重組蛋白。例示性親和力結構域包括His5(HHHHH)(SEQ ID NO：234)、HisX6(HHHHHH)(SEQ ID NO：235)、C-myc(EQKLISEEDL) (SEQ ID NO：233)、Flag(DYKDDDDK)(SEQ ID NO：232)、StrepTag(WSHPQFEK)(SEQ ID NO：236)、血球凝集素例如HA標籤(YPYDVPDYA)(SEQ ID NO：231)、麩胱甘肽-S-轉移酶(GST)、硫氧還蛋白、纖維素結合域、RYIRS(SEQ ID NO：237)、Phe-His-His-Thr(SEQ ID NO：238)、幾丁質結合域、S肽、T7肽、SH2結構域、C端RNA標籤、WEAAAREACCRECCARA(SEQ ID NO：239)、金屬結合域例如鋅結合域或鈣結合域諸如該些來自鈣結合蛋白質者例如鈣調蛋白、肌鈣蛋白C、鈣調磷酸酶B、肌球蛋白輕鏈、恢復蛋白(recoverin)、S-調節蛋白、視錐蛋白(visinin)、VILIP、神經鈣蛋白(neurocalcin)、海馬鈣蛋白(hippocalcin)、神經元鈣傳感蛋白(frequenin)、鈣收縮蛋白(caltractin)、鈣蛋白酶大次單位(calpain large-subunit)、S100蛋白、小白蛋白(parvalbumin)、鈣結合蛋白D9K、鈣結合蛋白D28K及鈣視網膜蛋白(calretinin)、內含肽(inteins)、生物素、鏈黴抗生物素蛋白、MyoD、Id、白胺酸拉鍊序列及麥芽糖結合蛋白。藥物共軛體 本揭露之TMMP之多肽鏈可包含與多肽鏈連接(例如共價連接)之小分子藥物。例如，當本揭露之TMMP包含Fc多肽時，該Fc多肽可包含經共價連接之小分子藥物。在一些情況下，小分子藥物係癌症化學治療劑，例如細胞毒性劑。本揭露之TMMP之多肽鏈可包含與多肽鏈連接(例如共價連接)之細胞毒性劑。例如，當本揭露之TMMP包含Fc多肽時，該Fc多肽可包含經共價連接之細胞毒性劑。細胞毒性劑包括前藥。 藥物(例如癌症化學治療劑)可與本揭露之TMMP之多肽鏈直接或間接連接。例如，當本揭露之TMMP包含Fc多肽時，藥物(例如癌症化學治療劑)可與Fc多肽直接或間接連接。直接連接可涉及與胺基酸側鏈直接連接。間接連接可經由連接子連接。藥物(例如癌症化學治療劑)可經由硫醚鍵、醯胺鍵、胺甲酸酯鍵結、雙硫鍵或醚鍵結與本揭露之TMMP之多肽鏈(例如Fc多肽)連接。 連接子包括可切割連接子及不可切割連接子。在一些情況下，連接子係蛋白酶可切割連接子。合適連接子包括例如肽(例如2至10個胺基酸長度；例如2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸長度)、烷基鏈、聚(乙二醇)、二硫化物基團、硫醚基團、酸不穩定基團、光不穩定基團、肽酶不穩定基團及酯酶不穩定基團。合適連接子之非限制性實例係：i)N-琥珀醯亞胺基-[(N-順丁烯二醯亞胺基丙醯胺基)-四乙二醇]酯(NHS-PEG4-順丁烯二醯亞胺)；ii)N-琥珀醯亞胺基4-(2-吡啶基二硫)丁酸酯(SPDB)；N-琥珀醯亞胺基4-(2-吡啶基二硫)2-磺酸基丁酸酯(磺酸基-SPDB)；N-琥珀醯亞胺基4-(2-吡啶基二硫)戊酸酯(SPP)；N-琥珀醯亞胺基-4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)-環己烷-1-羧基-(6-醯胺基己酸酯)(LC-SMCC)；κ-順丁烯二醯亞胺基十一酸N-琥珀醯亞胺基酯(KMUA)；γ-順丁烯二醯亞胺丁酸N-琥珀醯亞胺基酯(GMBS)；ε-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(EMCS)；m-順丁烯二醯亞胺苯甲醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(MBS)；N-(α-順丁烯二醯亞胺基乙醯氧基)-琥珀醯亞胺酯(AMAS)；琥珀醯亞胺基-6-(β-順丁烯二醯亞胺基丙醯胺)己酸酯(SMPH)；N-琥珀醯亞胺基4-(p-順丁烯二醯亞胺基苯基)丁酸酯(SMPB)；N-(p-順丁烯二醯亞胺基苯基)異氰酸酯(PMPI)；N-琥珀醯亞胺基4(2-吡啶基硫)戊酸酯(SPP)；N-琥珀醯亞胺基(4-碘-乙醯基)胺基苯甲酸酯(SIAB)；6-順丁烯二醯亞胺基己醯基(MC)；順丁烯二醯亞胺基丙醯基(MP)；p-胺基苄氧羰基(PAB)；N-琥珀醯亞胺基4-(順丁烯二醯亞胺基甲基)環己烷羧酸酯(SMCC)；N-琥珀醯亞胺基-4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)-環己烷-1-羧基-(6-醯胺基己酸酯)、SMCC之「長鏈」類似物(LC-SMCC)；3-順丁烯二醯亞胺基丙酸N-琥珀醯亞胺基酯(BMPS)；N-琥珀醯亞胺基碘乙酸酯(SIA)；N-琥珀醯亞胺基溴乙酸酯(SBA)；及N-琥珀醯亞胺基3-(溴乙醯胺基)丙酸酯(SBAP)。 多肽(例如Fc多肽)可經如文獻所述之交聯試劑諸如琥珀醯亞胺基4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)-環己烷-1-羧酸酯(SMCC)、磺酸基-SMCC、順丁烯二醯亞胺基苄醯氧基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(MBS)、磺酸基-MBS或琥珀醯亞胺基-碘乙酸酯修飾以導入1至10個反應基。經修飾之Fc多肽接著與含氫硫基之細胞毒性劑反應以產生共軛體。 例如，當本揭露之TMMP包含Fc多肽時，包含Fc多肽之多肽鏈可為式(A)-(L)-(C)，其中(A)係包含Fc多肽之多肽鏈；其中(L)(若存在的話)係連接子；且其中(C)係細胞毒性劑。(L)(若存在的話)連接(A)與(C)。在一些情況下，包含Fc多肽之多肽鏈可包含超過一個細胞毒性劑(例如2、3、4或5個或超過5個細胞毒性劑)。 合適藥物包括例如雷帕黴素(rapamycin)。合適藥物包括例如類視色素諸如全反式視黃酸(ATRA)；維生素D3；維生素D3類似物；及類似物。如上所述在一些情況下，藥物係細胞毒性劑。細胞毒性劑為該領域所知。合適細胞毒性劑可為導致細胞死亡或誘導細胞死亡或以一些方式降低細胞存活性之任何化合物，且包括例如類美坦素(maytansinoid)及類美坦素類似物、苯并二氮呯、類紫杉醇(taxoid)、CC-1065及CC-1065類似物、雙聯黴素(duocarmycin)及雙聯黴素類似物、烯二炔諸如卡利奇黴素(calicheamicin)、海兔毒素(dolastatin)及海兔毒素類似物包括耳抑素(auristatin)、托美黴素(tomaymycin)衍生物、來普黴素(leptomycin)衍生物、甲胺蝶呤(methotrexate)、順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、道諾黴素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)、長春新鹼(vincristine)、長春鹼(vinblastine)、黴法蘭(melphalan)、絲裂黴素C(mitomycin C)、氯芥苯丁酸及N-嗎啉基多柔比星。 例如在一些情況下，細胞毒性劑係抑制真核細胞中微管形成之化合物。此類劑包括例如類美坦素、苯并二氮呯、類紫杉醇、CC-1065、雙聯黴素、雙聯黴素類似物、卡利奇黴素、海兔毒素、海兔毒素類似物、耳抑素、托美黴素及來普黴素或前述任一者之前藥。類美坦素化合物包括例如N(2')-去乙醯基-N(2')-(3-巰基-1-側氧基丙基)-美坦素(DM1)；N(2')-去乙醯基-N(2')-(4-巰基-1-側氧基戊基)-美坦素(DM3)；及N(2')-去乙醯基-N2-(4-巰基-4-甲基-1-側氧基戊基)-美坦素(DM4)。苯并二氮呯包括例如吲哚啉苯并二氮呯及噁唑啶基苯并二氮呯。 細胞毒性劑包括紫杉醇；細胞遲緩素B；短桿菌肽D；溴化乙啶；吐根鹼；絲裂黴素；依托泊苷；替尼泊苷(tenoposide)；長春新鹼；長春鹼；秋水仙鹼(colchicine)；多柔比星；道諾黴素；二羥蒽二酮；美坦素或其類似物或衍生物；耳抑素或其功能性肽類似物或衍生物；海兔毒素10或15或其類似物；伊立替康或其類似物；米托蒽醌；光輝黴素；放線菌素D；1-去氫睪固酮；葡萄糖皮質素；普魯卡因；四卡因；利多卡因；普壓律(propranolol)；嘌呤黴素；卡利奇黴素或其類似物或衍生物；抗代謝物；6巰嘌呤；6硫鳥嘌呤；阿糖胞苷；氟達拉濱(fludarabine)；5氟尿嘧啶；癸巴肼(decarbazine)；羥基尿素；天冬醯胺酶；吉西他濱；克拉屈濱；烷化劑；鉑衍生物；雙聯黴素A；雙聯黴素SA；拉夏黴素(rachelmycin) (CC-1065)或其類似物或衍生物；抗生素；吡咯并[2,1-c][1,4]-苯并二氮呯(PDB)；白喉毒素；蓖麻毒素；霍亂毒素；類志賀毒素；LT毒素；C3毒素；志賀毒素；百日咳毒素；破傷風毒素；黃豆Bowman-Birk蛋白酶抑制劑；假單胞菌外毒素；阿羅林(alorin)；皂草素；蒴蓮根毒素(modeccin)；白素毒素(gelanin)；相思豆毒素A鏈；蒴蓮根毒素A鏈；α-八疊球菌；油桐(Aleurites fordii )蛋白；香石竹蛋白；美洲商陸(Phytolacca americana )蛋白；苦瓜抑制劑；麻風樹毒蛋白(curcin)；巴豆毒素(crotin)；皂甙抑制劑；白樹毒素(gelonin)；線菌毒素(mitogellin)；局限曲黴素(restrictocin)；酚黴素(phenomycin)；依諾黴素(enomycin)毒素；核糖核酸酶(RNA酶)；DNA酶I；葡萄球菌腸毒素A；商陸抗病毒蛋白；白喉菌素毒素；及假單胞菌內毒素。例示性 TMMP 本揭露之TMMP包含至少一種異二聚體，該至少一種異二聚體包含：a)第一多肽，其包含：i)WT-1肽表位；及ii)第一MHC多肽；b)第二多肽，其包含第二MHC多肽，及c)至少一種免疫調控性多肽，其中該第一及/或第二多肽包含免疫調控性多肽。因此在一些情況下，本揭露之TMMP包含至少一種異二聚體，該至少一種異二聚體包含：a)第一多肽，其包含：i)WT-1肽表位；ii)第一MHC多肽；及iii)至少一種免疫調控性多肽；及b)第二多肽，其包含第二MHC多肽。在其他情況下，本揭露之TMMP包含至少一種異二聚體，該至少一種異二聚體包含：a)第一多肽，其包含：i)WT-1肽表位；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其包含：i)第二MHC多肽；及ii)至少一種免疫調控性多肽。在一些情況下，本揭露之TMMP包含至少一種異二聚體，該至少一種異二聚體包含：a)第一多肽，其包含：i)WT-1肽表位；ii)第一MHC多肽；及iii)至少一種免疫調控性多肽；及b)第二多肽，其包含：i)第二MHC多肽；及ii)至少一種免疫調控性多肽。在一些情況下，至少一種免疫調控性多肽係野生型免疫調控性多肽。在其他情況下，至少一種免疫調控性多肽係變體免疫調控性多肽，其相較於對應野生型免疫調控性多肽對共免疫調控性多肽之親和力展現對該共免疫調控性多肽減少的親和力。在一些情況下，本揭露之TMMP包含二個免疫調控性多肽，其中該二個免疫調控性多肽具有相同胺基酸序列。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)WT-1肽表位；ii)第一MHC多肽；及iii)至少一種免疫調控性多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第二MHC多肽；及ii)Ig Fc多肽。在一些情況下，第一MHC多肽係β2M多肽；且第二MHC多肽係HLA重鏈多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及在位置236之Ala之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，β2M多肽包含在位置12之Arg(R12)。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。在一些情況下，第一多肽自N端至C端之順序包含：i)WT-1肽表位；ii)第一MHC多肽；及iii)二個免疫調控性多肽，其中該二個免疫調控性多肽具有相同胺基酸序列。在一些情況下，Ig Fc多肽係人IgG1 Fc多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽係包含L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一及第二多肽以雙硫鍵互相連接。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16A及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16T及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，肽連接子係介於下列一或多者之間：i)第二MHC多肽與Ig Fc多肽；ii)表位與第一MHC多肽；iii)第一MHC多肽與免疫調控性多肽；及iv)(當TMMP在第一多肽鏈上包含二個免疫調控性多肽時)二個免疫調控性多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：79)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：240)，其中n係1至10之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1至9之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，WT-1肽表位係CMTWNQMN(SEQ ID NO：241)。在一些情況下，WT-1肽表位係CYTWNQMNL(SEQ ID NO：242)。在一些情況下，WT-1肽表位係RVPGVAPTL(SEQ ID NO：80)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPGVAPTL(SEQ ID NO：81)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYFPNAPYL(SEQ ID NO：82)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPSCQKKF(SEQ ID NO：83)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)WT-1肽表位；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)至少一種免疫調控性多肽；ii)第二MHC多肽；及iii)Ig Fc多肽。在一些情況下，第一MHC多肽係β2M多肽；且第二MHC多肽係HLA重鏈多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及在位置236之Ala之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，β2M多肽包含在位置12之Arg(R12)。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。在一些情況下，第二多肽自N端至C端之順序包含：i)二個免疫調控性多肽，其中該二個免疫調控性多肽具有相同胺基酸序列；ii)第二MHC多肽；及iii)Ig Fc多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽係人IgG1 Fc多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽係包含L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一及第二多肽以雙硫鍵互相連接。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16A及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16T及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，肽連接子係介於下列一或多者之間：i)第二MHC多肽與Ig Fc多肽；ii)表位與第一MHC多肽；iii)第一MHC多肽與免疫調控性多肽；及iv)(當TMMP在第二多肽鏈上包含二個免疫調控性多肽時)二個免疫調控性多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：79)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：240)，其中n係1至10之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1至9之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，WT-1肽表位係CMTWNQMN(SEQ ID NO：241)。在一些情況下，WT-1肽表位係CYTWNQMNL(SEQ ID NO：242)。在一些情況下，WT-1肽表位係RVPGVAPTL(SEQ ID NO：80)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPGVAPTL(SEQ ID NO：81)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYFPNAPYL (SEQ ID NO：82)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPSCQKKF(SEQ ID NO：83)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)WT-1肽表位；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第二MHC多肽；ii)Ig Fc多肽；及iii)至少一種免疫調控性多肽。在一些情況下，第一MHC多肽係β2M多肽；且第二MHC多肽係HLA重鏈多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及在位置236之Ala之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，β2M多肽包含在位置12之Arg(R12)。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。在一些情況下，第二多肽自N端至C端之順序包含：i)第二MHC多肽；ii)Ig Fc多肽；及iii)二個免疫調控性多肽，其中該二個免疫調控性多肽具有相同胺基酸序列。在一些情況下，Ig Fc多肽係人IgG1 Fc多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽係包含L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一及第二多肽以雙硫鍵互相連接。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16A及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16T及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，肽連接子係介於下列一或多者之間：i)第二MHC多肽與Ig Fc多肽；ii)表位與第一MHC多肽；iii)Ig Fc多肽與免疫調控性多肽；及iv)(當TMMP在第二多肽鏈上包含二個免疫調控性多肽時)二個免疫調控性多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：79)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：240)，其中n係1至10之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1至9之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，WT-1肽表位係CMTWNQMN(SEQ ID NO：241)。在一些情況下，WT-1肽表位係CYTWNQMNL(SEQ ID NO：242)。在一些情況下，WT-1肽表位係RVPGVAPTL(SEQ ID NO：80)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPGVAPTL(SEQ ID NO：81)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYFPNAPYL (SEQ ID NO：82)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPSCQKKF(SEQ ID NO：83)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)至少一種免疫調控性多肽；ii)WT-1肽表位；及iii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第二MHC多肽；及ii)Ig Fc多肽。在一些情況下，第一MHC多肽係β2M多肽；且第二MHC多肽係HLA重鏈多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及在位置236之Ala之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，β2M多肽包含在位置12之Arg(R12)。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。在一些情況下，第一多肽自N端至C端之順序包含：i)二個免疫調控性多肽，其中該二個免疫調控性多肽具有相同胺基酸序列；ii)WT-1肽表位；及iii)第一MHC多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽係人IgG1 Fc多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽係包含L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一及第二多肽以雙硫鍵互相連接。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16A及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16T及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，肽連接子係介於下列一或多者之間：i)第二MHC多肽與Ig Fc多肽；ii)表位與第一MHC多肽；iii)免疫調控性多肽與表位；及iv)(當TMMP在第一多肽鏈上包含二個免疫調控性多肽時)二個免疫調控性多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列AAAGG (SEQ ID NO：79)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：240)，其中n係1至10之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1至9之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，WT-1肽表位係CMTWNQMN(SEQ ID NO：241)。在一些情況下，WT-1肽表位係CYTWNQMNL(SEQ ID NO：242)。在一些情況下，WT-1肽表位係RVPGVAPTL(SEQ ID NO：80)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPGVAPTL(SEQ ID NO：81)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYFPNAPYL (SEQ ID NO：82)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPSCQKKF (SEQ ID NO：83)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)WT-1肽表位；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第二MHC多肽；ii)至少一種免疫調控性多肽；及iii)Ig Fc多肽。在一些情況下，第一MHC多肽係β2M多肽；且第二MHC多肽係HLA重鏈多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及在位置236之Ala之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84A取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽係具有Y84C取代及A236C取代之HLA-A24多肽。在一些情況下，β2M多肽包含在位置12之Arg(R12)。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。在一些情況下，第二多肽自N端至C端之順序包含：i)第二MHC多肽；ii)二個免疫調控性多肽，其中該二個免疫調控性多肽具有相同胺基酸序列；及iii)Ig Fc多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽係人IgG1 Fc多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽係包含L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一及第二多肽以雙硫鍵互相連接。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16A及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，免疫調控性多肽係包含H16T及F42A取代之變體IL-2多肽。在一些情況下，肽連接子係介於下列一或多者之間：i)第二MHC多肽與免疫調控性多肽；ii)免疫調控性多肽與Ig Fc多肽；iii)表位與第一MHC多肽；iii)第一MHC多肽與免疫調控性多肽；及iv)(當TMMP在第二多肽鏈上包含二個免疫調控性多肽時)二個免疫調控性多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：79)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：240)，其中n係1至10之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1至9之整數(例如其中n係2、3或4)。在一些情況下，WT-1肽表位係CMTWNQMN(SEQ ID NO：241)。在一些情況下，WT-1肽表位係CYTWNQMNL(SEQ ID NO：242)。在一些情況下，WT-1肽表位係RVPGVAPTL(SEQ ID NO：80)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPGVAPTL(SEQ ID NO：81)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYFPNAPYL(SEQ ID NO：82)。在一些情況下，WT-1肽表位係RYPSCQKKF (SEQ ID NO：83)。 如上所述且如圖9所示意性描繪，免疫調控性多肽(即一或多種免疫調控性多肽)可存在於本揭露之TMMP中之多個位置之任一者。圖9描繪二個拷貝之變體IL-2多肽之位置；然而，免疫調控性多肽可為如本文所述之多種免疫調控性多肽之任一者。如圖9所描繪，免疫調控性多肽可位於：1)MHC第I型重鏈N端(位置1)；2)MHC第I型重鏈C端及Ig Fc多肽N端；換句話說，介於MHC第I型重鏈與Ig Fc多肽之間(位置2)；3)Ig Fc多肽C端(位置3)；4)肽表位N端(位置4)；或5)β2M多肽C端(位置5)。「位置1」係指在第I型MHC重鏈之相同多肽鏈上且在第I型MHC重鏈N端的免疫調控性多肽之位置；例如其中TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)肽表位(例如WT-1肽)；及ii)β2M多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)一或多種免疫調控性多肽；及ii)第I型MHC重鏈多肽。「位置2」係指在第I型MHC重鏈之相同多肽鏈上且在第I型MHC重鏈C端但非多肽鏈之C端的免疫調控性多肽之位置；例如其中TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)肽表位(例如WT-1肽)；及ii)β2M多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第I型MHC重鏈多肽；ii)一或多種免疫調控性多肽；及iii)Ig Fc多肽。「位置3」係指在第I型MHC重鏈之相同多肽鏈上且在多肽鏈C端的免疫調控性多肽之位置；例如其中TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)肽表位(例如WT-1肽)；及ii)β2M多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第I型MHC重鏈多肽；ii)Ig Fc多肽；及iii)一或多種免疫調控性多肽。「位置4」係指在β2M多肽之相同多肽鏈上且在肽表位及β2M多肽N端的免疫調控性多肽之位置；例如其中TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)一或多種免疫調控性多肽；ii)肽表位(例如WT-1肽)；及iii)β2M多肽；及b)第二多肽，其包含第I型MHC重鏈多肽(例如第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第I型MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽。「位置5」係指在β2M多肽之相同多肽鏈上且在β2M多肽C端(例如在多肽鏈之C端)的免疫調控性多肽之位置；例如其中TMMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)肽表位(例如WT-1肽)；ii)β2M多肽；及iii)一或多種免疫調控性多肽；及b)第二多肽，其包含第I型MHC重鏈多肽(例如第二多肽，其自N端至C端之順序包含：i)第I型MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽。 另外，如上所討論及如圖8A至圖8C所示意性描繪，本揭露之TMMP之第一多肽鏈及第二多肽鏈可藉由一或多個雙硫鍵連接。例如，本揭露之TMMMP可包含：a)第一多肽鏈，其包含具有R12C取代之β2M多肽；及b)第二多肽鏈，其包含具有A236C取代之第I型MHC重鏈多肽；以使雙硫鍵在第一多肽鏈之β2M多肽的位置12之Cys與第二多肽鏈之第I型MHC重鏈多肽的位置236之Cys之間形成。作為另一實例，本揭露之TMMMP可包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)肽表位；ii)肽連接子，其包含GCGGS(GGGGS)n (SEQ ID NO：33)序列，其中n係1、2或3；及iii)β2M多肽；及b)第二多肽，其包含具有Y84C取代之第I型MHC重鏈多肽，以使雙硫鍵在第一多肽鏈之肽連接子的Cys與第二多肽鏈之第I型MHC重鏈多肽的位置84之Cys之間形成。在其他實例中，本揭露之TMMP可包含：a)第一多肽，其自N端至C端之順序包含：i)肽表位；ii)肽連接子，其包含GCGGS(GGGGS)n (SEQ ID NO：33)序列，其中n係1、2或3；及iii)具有R12C取代之β2M多肽；及b)第二多肽，其包含具有Y84C取代及A236C取代之第I型MHC重鏈多肽；以使：i)第一雙硫鍵在第一多肽鏈之肽連接子的Cys與第二多肽鏈之第I型MHC重鏈多肽的位置84之Cys之間形成；及ii)第二雙硫鍵在第一多肽鏈之β2M多肽的位置12之Cys與第二多肽鏈之第I型MHC重鏈多肽的位置236之Cys之間形成。為了簡單起見，第一雙硫鍵係稱為「G2C/Y84C」；且第二雙硫鍵係稱為「R12C/A236C」。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵而非R12C/A236C雙硫鍵；b)R12C/A236C雙硫鍵而非G2C/Y84C雙硫鍵；或c)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵。 本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵且非R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置1之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵且非R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置2之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵且非R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置3之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵且非R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置4之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵且非R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置5之免疫調控性多肽。 本揭露之TMMP可包括：a)R12C/A236C雙硫鍵且非G2C/Y84C雙硫鍵；及至少一個在位置1之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)R12C/A236C雙硫鍵且非G2C/Y84C雙硫鍵；及至少一個在位置2之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)R12C/A236C雙硫鍵且非G2C/Y84C雙硫鍵；及至少一個在位置3之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)R12C/A236C雙硫鍵且非G2C/Y84C雙硫鍵；及至少一個在位置4之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)R12C/A236C雙硫鍵且非G2C/Y84C雙硫鍵；及至少一個在位置5之免疫調控性多肽。 本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置1之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置2之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置3之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置4之免疫調控性多肽。本揭露之TMMP可包括：a)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵；及b)至少一個在位置5之免疫調控性多肽。 本揭露之TMMP之第一及第二多肽鏈的胺基酸序列之非限制性實例係提供於圖3A至圖3C、圖10A至圖10G及圖11至圖14。 具有表位RVPGVAPTL(SEQ ID NO：80)(WT1 302-310)之例示性TMMP 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11A描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖3B描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11A描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖3C描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11B描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10A描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11B描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10B描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11C描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10E描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11C描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10F描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11D描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10G描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11E描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10C描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖11F描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10D描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 具有表位RYPGVAPTL(SEQ ID NO：81)(WT-1 302-310；V303Y)之例示性TMMP 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12A描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖3B描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12A描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖3C描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12B描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10A描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12B描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10B描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12C描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10E描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12C描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10F描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12D描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10G描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12E描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10C描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖12F描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10D描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 具有表位RYFPNAPYL(SEQ ID NO：82)(WT-1 126-134；M127Y)之例示性TMMP 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13A描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖3B描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13A描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖3C描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13B描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10A描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13B描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10B描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13C描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10E描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13C描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10F描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13D描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10G描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13E描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10C描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖13F描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10D描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 具有表位RYPSCQKKF(SEQ ID NO：83)(WT-1 417-425；W418Y)之例示性TMMP 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14A描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖3B描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14A描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖3C描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14B描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10A描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14B描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10B描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14C描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10E描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置1之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14C描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10F描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置3之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14D描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10G描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵(但非R12C/A236C雙硫鍵)。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14E描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10C描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)G2C/Y84C雙硫鍵及R12C/A236C雙硫鍵兩者。 在一些情況下，本揭露之TMMP包含：a)第一多肽鏈，其包含圖14F描繪之胺基酸序列；及b)第二多肽鏈，其包含圖10D描繪之胺基酸序列。此類TMMP包含：a)在如圖9描繪之位置5之免疫調控性多肽；及b)R12C/A236C雙硫鍵(但非G2C/Y84C雙硫鍵)。產生 T 細胞調控性多聚體多肽之方法 本揭露提供一種獲得包含一或多個變體免疫調控性多肽之TMMP之方法，該一或多個變體免疫調控性多肽相較於對應親代野生型免疫調控性多肽對共免疫調控性多肽之親和力展現對同源共免疫調控性多肽降低的親和力，該方法包含：A)產生包含複數個成員之TMMP庫，其中各成員包含：a)第一多肽，其包含：i)表位；及ii)第一主要MHC多肽；及b)第二多肽，其包含：i)第二MHC多肽；及ii)可選地Ig Fc多肽或非Ig支架，其中各成員在第一多肽、第二多肽或第一及第二多肽兩者上包含不同變體免疫調控性多肽；B)測定各庫成員對同源共免疫調控性多肽之親和力；及C)選擇展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力之成員。在一些情況下，親和力係藉由生物膜干涉術(BLI)使用經純化的TMMP庫成員及同源共免疫調控性多肽測定。BLI方法所屬技術領域中具有通常知識者所廣為週知。BLI測定見上述。見例如Lad et al.(2015)J. Biomol.Screen.20 (4)：498-507；及Shah and Duncan(2014)J. Vis. Exp. 18：e51383。 本揭露提供一種獲得TMMP之方法，該TMMP展現對T細胞之選擇性結合，該方法包含：A)產生包含複數個成員之TMMP庫，其中各成員包含：a)第一多肽，其包含：i)表位；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其包含：i)第二MHC多肽；及ii)可選地免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架，其中各成員在第一多肽、第二多肽或第一及第二多肽兩者上包含不同變體免疫調控性多肽，其中變體免疫調控性多肽的胺基酸序列與親代野生型免疫調控性多肽有1個胺基酸至10個胺基酸的差異；B)使TMMP庫成員與目標T細胞接觸，該目標T細胞在其表面上表現：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)與表位結合之T細胞受體，其中TMMP庫成員包含表位標籤，以使該TMMP庫成員與目標T細胞結合；C)使結合目標T細胞之TMMP庫成員與螢光標示之結合劑接觸，該螢光標示之結合劑與表位標籤結合，產生TMMP庫成員/目標T細胞/結合劑複合體；D)使用流式細胞術測量TMMP庫成員/目標T細胞/結合劑複合體之平均螢光強度(MFI)，其中在一系列濃度之TMMP庫成員測量之MFI提供親和力之量度及表觀親合力；及E)選擇相較於TMMP庫成員與對照T細胞之結合選擇性地結合目標T細胞之TMMP庫成員，該對照T細胞包含：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)與除存在於TMMP庫成員中之表位以外之表位結合之T細胞受體。在一些情況下，自庫單離經識別為選擇性地與目標T細胞結合之TMMP庫成員。 在一些情況下，親代野生型免疫調控性多肽及同源免疫調控性多肽對係選自： IL-2及IL-2受體； 4-1BBL及4-1BB； PD-L1及PD-1； CD70及CD27； TGFβ及TGFβ受體； CD80及CD28； CD86及CD28； OX40L及OX40； FasL及Fas； ICOS-L及ICOS； ICAM及LFA-1； JAG1及Notch； JAG1及CD46； CD80及CTLA4；及 CD86及CTLA4。 本揭露提供一種獲得包含一或多個變體免疫調控性多肽之TMMP之方法，該一或多個變體免疫調控性多肽相較於對應親代野生型免疫調控性多肽對共免疫調控性多肽之親和力展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力，該方法包含：自包含複數個成員之TMMP庫選擇展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力之成員，其中該複數個成員包含：a)第一多肽，其包含：i)表位；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其包含：i)第二MHC多肽；及ii)可選地Ig Fc多肽或非Ig支架，其中庫之成員包含存在於第一多肽、第二多肽或第一及第二多肽兩者之複數個變體免疫調控性多肽。在一些情況下，選擇步驟包含使用生物膜干涉術測定TMMP庫成員與同源共免疫調控性多肽之間的結合之親和力。在一些情況下，TMMP係如上述。 在一些情況下，方法進一步包含：a)使經選擇之TMMP庫成員與目標T細胞接觸，該目標T細胞在其表面上表現：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)與表位結合之T細胞受體，其中TMMP庫成員包含表位標籤，以使該TMMP庫成員與目標T細胞結合；b)使結合目標T細胞之經選擇之TMMP庫成員與螢光標示之結合劑接觸，該螢光標示之結合劑與表位標籤結合，產生經選擇之TMMP庫成員/目標T細胞/結合劑複合體；及c)使用流式細胞術測量經選擇之TMMP庫成員/目標T細胞/結合劑複合體之平均螢光強度(MFI)，其中在一系列濃度之經選擇之TMMP庫成員測量之MFI提供親和力之量度及表觀親合力。相較於TMMP庫成員與對照T細胞之結合，選擇性結合目標T細胞之經選擇之TMMP庫成員被識別為與目標T細胞選擇性結合，該對照T細胞包含：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)與除存在於TMMP庫成員中之表位以外之表位結合之T細胞受體。在一些情況下，結合劑係對表位標籤具特異性之抗體。在一些情況下，相較於對應親代野生型免疫調控性多肽，變體免疫調控性多肽包含1至20個胺基酸取代(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代)。在一些情況下，TMMP包含二個變體免疫調控性多肽。在一些情況下，二個變體免疫調控性多肽包含相同胺基酸序列。在一些情況下，第一多肽包含二個變體免疫調控性多肽中之一者且其中第二多肽包含二個變體免疫調控性多肽中之第二者。在一些情況下，二個變體免疫調控性多肽係在TMMP之相同多肽鏈上。在一些情況下，二個變體免疫調控性多肽係在TMMP之第一多肽上。在一些情況下，二個變體免疫調控性多肽係在TMMP之第二多肽上。 在一些情況下，方法進一步包含自庫單離經選擇之TMMP庫成員。在一些情況下，方法進一步包含提供核酸，該核酸包含編碼經選擇之TMMP庫成員的核苷酸序列。在一些情況下，核酸係存在於重組表現載體中。在一些情況下，核苷酸序列係可操作地連接至在真核細胞中具功能性之轉錄控制元件。在一些情況下，方法進一步包含導入核酸至真核宿主細胞中，且在液體培養基中培養細胞以在細胞中合成經編碼之經選擇之TMMP庫成員。在一些情況下，方法進一步包含自細胞或自包含細胞之液體培養基單離經合成之經選擇之TMMP庫成員。在一些情況下，經選擇之TMMP庫成員包含Ig Fc多肽。在一些情況下，方法進一步包含將藥物共軛至Ig Fc多肽。在一些情況下，藥物係選自類美坦素、苯并二氮呯、類紫杉醇、CC-1065、雙聯黴素、雙聯黴素類似物、卡利奇黴素、海兔毒素、海兔毒素類似物、耳抑素、托美黴素及來普黴素或前述任一者之前藥之細胞毒性劑。在一些情況下，藥物係類視色素。在一些情況下，親代野生型免疫調控性多肽及同源免疫調控性多肽係選自：IL-2及IL-2受體；4-1BBL及4-1BB；PD-L1及PD-1；CD70及CD27；TGFβ及TGFβ受體；CD80及CD28；CD86及CD28；OX40L及OX40；FasL及Fas；ICOS-L及ICOS；ICAM及LFA-1；JAG1及Notch；JAG1及CD46；CD80及CTLA4；及CD86及CTLA4。 本揭露提供一種獲得包含一或多個變體免疫調控性多肽之TMMP之方法，該一或多個變體免疫調控性多肽相較於對應親代野生型免疫調控性多肽對共免疫調控性多肽之親和力展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力，該方法包含：A)提供包含複數個成員之TMMP庫，其中該複數個成員包含：a)第一多肽，其包含：i)表位；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其包含：i)第二MHC多肽；及ii)可選地Ig Fc多肽或非Ig支架，其中庫之成員包含存在於第一多肽、第二多肽或第一及第二多肽兩者之複數個變體免疫調控性多肽；及B)自庫選擇展現對同源共免疫調控性多肽減少的親和力之成員。在一些情況下，選擇步驟包含使用生物膜干涉術測定TMMP庫成員與同源共免疫調控性多肽之間的結合之親和力。在一些情況下，TMMP係如上述。 在一些情況下，方法進一步包含：a)使經選擇之TMMP庫成員與目標T細胞接觸，該目標T細胞在其表面上表現：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)與表位結合之T細胞受體，其中TMMP庫成員包含表位標籤，以使該TMMP庫成員與目標T細胞結合；b)使結合目標T細胞之經選擇之TMMP庫成員與螢光標示之結合劑接觸，該螢光標示之結合劑與表位標籤結合，產生經選擇之TMMP庫成員/目標T細胞/結合劑複合體；及c)使用流式細胞術測量經選擇之TMMP庫成員/目標T細胞/結合劑複合體之平均螢光強度(MFI)，其中在一系列濃度之經選擇之TMMP庫成員測量之MFI提供親和力之量度及表觀親合力。相較於TMMP庫成員與對照T細胞之結合，選擇性結合目標T細胞之經選擇之TMMP庫成員被識別為與目標T細胞選擇性結合，該對照T細胞包含：i)與親代野生型免疫調控性多肽結合之同源共免疫調控性多肽；及ii)與除存在於TMMP庫成員中之表位以外之表位結合之T細胞受體。在一些情況下，結合劑係對表位標籤具特異性之抗體。在一些情況下，相較於對應親代野生型免疫調控性多肽，變體免疫調控性多肽包含1至20個胺基酸取代(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代)。在一些情況下，TMMP包含二個變體免疫調控性多肽。在一些情況下，二個變體免疫調控性多肽包含相同胺基酸序列。在一些情況下，第一多肽包含二個變體免疫調控性多肽中之一者且其中第二多肽包含二個變體免疫調控性多肽中之第二者。在一些情況下，二個變體免疫調控性多肽係在TMMP之相同多肽鏈上。在一些情況下，二個變體免疫調控性多肽係在TMMP之第一多肽上。在一些情況下，二個變體免疫調控性多肽係在TMMP之第二多肽上。 在一些情況下，方法進一步包含自庫單離經選擇之TMMP庫成員。在一些情況下，方法進一步包含提供核酸，該核酸包含編碼經選擇之TMMP庫成員的核苷酸序列。在一些情況下，核酸係存在於重組表現載體中。在一些情況下，核苷酸序列係可操作地連接至在真核細胞中具功能性之轉錄控制元件。在一些情況下，方法進一步包含導入核酸至真核宿主細胞中，且在液體培養基中培養細胞以在細胞中合成經編碼之經選擇之TMMP庫成員。在一些情況下，方法進一步包含自細胞或自包含細胞之液體培養基單離經合成之經選擇之TMMP庫成員。在一些情況下，經選擇之TMMP庫成員包含Ig Fc多肽。在一些情況下，方法進一步包含將藥物共軛至Ig Fc多肽。在一些情況下，藥物係選自類美坦素、苯并二氮呯、類紫杉醇、CC-1065、雙聯黴素、雙聯黴素類似物、卡利奇黴素、海兔毒素、海兔毒素類似物、耳抑素、托美黴素及來普黴素或前述任一者之前藥之細胞毒性劑。在一些情況下，藥物係類視色素。在一些情況下，親代野生型免疫調控性多肽及同源免疫調控性多肽係選自IL-2及IL-2受體；4-1BBL及4-1BB；PD-L1及PD-1；TGFβ及TGFβ受體；CD80及CD28；CD86及CD28；OX40L及OX40；FasL及Fas；ICOS-L及ICOS；CD70及CD27；ICAM及LFA-1；JAG1及Notch；JAG1及CD46；CD80及CTLA4；及CD86及CTLA4。核酸 本揭露提供一種核酸，其包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列。本揭露提供一種核酸，其包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列。 本揭露提供核酸，其包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列。在一些情況下，本揭露之TMMP之個別多肽鏈係於分開核酸編碼。在一些情況下，本揭露之TMMP之所有多肽鏈係於單一核酸編碼。在一些情況下，第一核酸包含編碼本揭露之TMMP之第一多肽的核苷酸序列；且第二核酸包含編碼本揭露之TMMP之第二多肽的核苷酸序列。在一些情況下，單一核酸包含編碼本揭露之TMMP之第一多肽及本揭露之TMMP之第二多肽的核苷酸序列。編碼多聚體多肽之個別多肽鏈的分開核酸 本揭露提供核酸，其包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列。如上所述，在一些情況下，本揭露之TMMP之個別多肽鏈係於分開核酸編碼。在一些情況下，編碼本揭露之TMMP之分開多肽鏈的核苷酸序列係可操作地連接至轉錄控制元件，例如啟動子諸如在真核細胞中具功能性之啟動子，其中啟動子可為組成性啟動子或誘導性啟動子。 本揭露提供第一核酸及第二核酸，其中第一核酸包含編碼本揭露之TMMP之第一多肽的核苷酸序列，其中第一多肽自N端至C端之順序包含：a)表位(例如T細胞表位)；b)第一MHC多肽；及c)免疫調控性多肽(例如上述之減少親和力變體)；且其中第二核酸包含編碼本揭露之TMMP之第二多肽的核苷酸序列，其中第二多肽自N端至C端之順序包含：a)第二MHC多肽；及b)Ig Fc多肽。合適T細胞表位、MHC多肽、免疫調控性多肽及Ig Fc多肽係於上描述。在一些情況下，編碼第一及第二多肽之核苷酸序列係可操作地連接至轉錄控制元件。在一些情況下，轉錄控制元件係在真核細胞中具功能性之啟動子。在一些情況下，核酸係存在於分開的表現載體中。 本揭露提供第一核酸及第二核酸，其中第一核酸包含編碼本揭露之TMMP之第一多肽的核苷酸序列，其中第一多肽自N端至C端之順序包含：a)表位(例如T細胞表位)；及b)第一MHC多肽；且其中第二核酸包含編碼本揭露之TMMP之第二多肽的核苷酸序列，其中第二多肽自N端至C端之順序包含：a)免疫調控性多肽(例如上述之減少親和力變體)；b)第二MHC多肽；及c)Ig Fc多肽。合適T細胞表位、MHC多肽、免疫調控性多肽及Ig Fc多肽係於上描述。在一些情況下，編碼第一及第二多肽之核苷酸序列係可操作地連接至轉錄控制元件。在一些情況下，轉錄控制元件係在真核細胞中具功能性之啟動子。在一些情況下，核酸係存在於分開的表現載體中。編碼存在於多聚體多肽中之二個或超過二個多肽之核酸 本揭露提供核酸，其包含編碼本揭露之TMMP之至少第一多肽及第二多肽的核苷酸序列。在一些情況下，當本揭露之TMMP包括第一、第二及第三多肽時，核酸包括編碼第一、第二及第三多肽之核苷酸序列。在一些情況下，編碼本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽的核苷酸序列包括穿插在編碼第一多肽之核苷酸序列與編碼第二多肽之核苷酸序列之間的可蛋白分解切割連接子。在一些情況下，編碼本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽的核苷酸序列包括穿插在編碼第一多肽之核苷酸序列與編碼第二多肽之核苷酸序列之間的內部核糖體進入位點(IRES)。在一些情況下，編碼本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽的核苷酸序列包括穿插在編碼第一多肽之核苷酸序列與編碼第二多肽之核苷酸序列之間的核糖體跳躍信號(或順式作用水解酶元件，CHYSEL(SEQ ID NO：243))。核酸實例係描述於下，其中可蛋白分解切割連接子係提供於編碼本揭露之TMMP之第一多肽及第二多肽的核苷酸序列之間；在這些實施態樣之任一者中，IRES或核糖體跳躍信號可用於代替編碼可蛋白水解切割連接子之核苷酸序列。 在一些情況下，第一核酸(例如重組表現載體、mRNA、病毒RNA等)包含編碼本揭露之TMMP之第一多肽鏈的核苷酸序列；且第二核酸(例如重組表現載體、mRNA、病毒RNA等)包含編碼本揭露之TMMP之第二多肽鏈的核苷酸序列。在一些情況下，編碼第一多肽之核苷酸序列及編碼第二多肽之第二核苷酸序列各自可操作地連接至轉錄控制元件，例如啟動子諸如在真核細胞中具功能性之啟動子，其中啟動子可為組成性啟動子或誘導性啟動子。 本揭露提供核酸，其包含編碼重組多肽之核苷酸序列，其中重組多肽自N端至C端之順序包含：a)表位(例如T細胞表位)；b)第一MHC多肽；c)免疫調控性多肽(例如上述之減少親和力變體)；d)可蛋白分解切割連接子；e)第二MHC多肽；及f)免疫球蛋白(Ig)Fc多肽。本揭露提供核酸，其包含編碼重組多肽之核苷酸序列，其中重組多肽自N端至C端之順序包含：a)第一前導肽；b)表位；c)第一MHC多肽；d)免疫調控性多肽(例如上述之減少親和力變體)；e)可蛋白分解切割連接子；f)第二前導肽；g)第二MHC多肽；及h)Ig Fc多肽。本揭露提供核酸，其包含編碼重組多肽之核苷酸序列，其中重組多肽自N端至C端之順序包含：a)表位；b)第一MHC多肽；c)可蛋白分解切割連接子；d)免疫調控性多肽(例如上述之減少親和力變體)；e)第二MHC多肽；及f)Ig Fc多肽。在一些情況下，第一前導肽及第二前導肽係β2-M前導肽。在一些情況下，核苷酸序列係可操作地連接至轉錄控制元件。在一些情況下，轉錄控制元件係在真核細胞中具功能性之啟動子。 合適MHC多肽係於上描述。在一些情況下，第一MHC多肽係β2-微球蛋白多肽；且其中第二MHC多肽係MHC第I型重鏈多肽。在一些情況下，β2-微球蛋白多肽包含與圖5描繪之β2M胺基酸序列具有至少85%胺基酸序列同一性的胺基酸序列。在一些情況下，MHC第I型重鏈多肽係HLA-A*2402重鏈。在一些情況下，MHC第I型重鏈多肽包含與圖6描繪之胺基酸序列具有至少85%胺基酸序列同一性的胺基酸序列。 合適Fc多肽係於上描述。在一些情況下，Ig Fc多肽係IgG1 Fc多肽、IgG2 Fc多肽、IgG3 Fc多肽、IgG4 Fc多肽、IgA Fc多肽或IgM Fc多肽。在一些情況下，Ig Fc多肽包含與圖4A至圖4G描繪之胺基酸序列具有至少85%胺基酸序列同一性的胺基酸序列。 合適免疫調控性多肽係於上描述。 合適可蛋白分解切割連接子係於上描述。在一些情況下，可蛋白分解切割連接子包含選自下列之胺基酸序列：a)LEVLFQGP(SEQ ID NO：244)；b)ENLYTQS(SEQ ID NO：245)；c)DDDDK(SEQ ID NO：246)；d)LVPR(SEQ ID NO：247)；及e)GSGATNFSLLKQAGDVEENPGP(SEQ ID NO：248)。 在一些情況下，介於表位與第一MHC多肽之間的連接子包含第一Cys殘基，且第二MHC多肽包含胺基酸取代以提供第二Cys殘基，以使第一及第二Cys殘基提供介於連接子與第二MHC多肽之間的雙硫鍵。在一些情況下，第一MHC多肽包含胺基酸取代以提供第一Cys殘基，且第二MHC多肽包含胺基酸取代以提供第二Cys殘基，以使第一Cys殘基及第二Cys殘基提供介於第一MHC多肽與第二MHC多肽之間的雙硫鍵。重組表現載體 本揭露提供重組表現載體，其包含本揭露之核酸。在一些情況下，重組表現載體係非病毒載體。在一些情況下，重組表現載體係病毒建構體，例如重組腺相關病毒建構體(見例如美國專利第7,078,387號)、重組腺病毒建構體、重組慢病毒建構體、重組反轉錄病毒建構體、非整合性病毒載體等。 合適表現載體包括但不限於病毒載體(例如基於痘瘡病毒；脊髓灰白質炎病毒；腺病毒(見例如Li et al., Invest Opthalmol Vis Sci 35：2543 2549, 1994；Borras et al., Gene Ther 6：515 524, 1999；Li and Davidson, PNAS 92：7700 7704, 1995；Sakamoto et al., H Gene Ther 5：1088 1097, 1999；WO 94/12649、WO 93/03769；WO 93/ 19191；WO 94/28938；WO 95/11984及WO 95/00655)；腺相關病毒(見例如Ali et al., Hum Gene Ther 9：81 86, 1998；Flannery et al., PNAS 94：6916 6921, 1997；Bennett et al., Invest Opthalmol Vis Sci 38：2857 2863, 1997；Jomary et al., Gene Ther 4：683 690, 1997；Rolling et al., Hum Gene Ther 10：641 648, 1999；Ali et al., Hum Mol Genet 5：591 594, 1996；Srivastava in WO 93/09239, Samulski et al., J. Vir.(1989)63：3822-3828；Mendelson et al., Virol.(1988)166：154-165；及Flotte et al., PNAS (1993)90：10613-10617)；SV40；單純疱疹病毒；人免疫不全病毒(見例如Miyoshi et al., PNAS 94：10319 23, 1997；Takahashi et al., J Virol 73：7812 7816, 1999)之病毒載體；反轉錄病毒載體(例如鼠白血病病毒、脾臟壞死病毒及衍生自反轉錄病毒諸如勞斯肉瘤病毒、Harvey氏肉瘤病毒、禽白血病病毒、慢病毒、人免疫不全病毒、骨髓增生性肉瘤病毒及乳腺腫瘤病毒之載體)；及類似物。 許多合適表現載體係所屬技術領域中具有通常知識者已知且許多可自商業途徑獲得。舉例提供下列載體；以真核宿主細胞而言：pXT1、pSG5(Stratagene)、pSVK3、pBPV、pMSG及pSVLSV40(Pharmacia)。然而，可使用任何其他載體只要其與宿主細胞係可相容。 取決於所利用的宿主/載體系統，一些合適轉錄及轉譯控制元件之任一者包括組成性及誘導性啟動子、轉錄增強子元件、轉錄終止子等可用於表現載體(見例如Bitter et al.(1987)Methods in Enzymology , 153：516-544)。 在一些情況下，編碼DNA靶向性RNA及/或經定點修飾之多肽的核苷酸序列係可操作地連接至控制元件，例如轉錄控制元件諸如啟動子。轉錄控制元件在真核細胞例如哺乳動物細胞；或原核細胞(例如細菌或古細菌細胞)中可具功能性。在一些情況下，編碼DNA靶向性RNA及/或經定點修飾之多肽的核苷酸序列係可操作地連接至多個控制元件，以允許在原核及真核細胞中表現編碼DNA靶向性RNA及/或經定點修飾之多肽的核苷酸序列。 合適真核啟動子(在真核細胞中具功能性之啟動子)之非限制性實例包括該些來自巨細胞病毒(CMV)立即早期、單純疱疹病毒(HSV)胸苷激酶、早期及晚期SV40、來自反轉錄病毒之長末端重複(LTR)及小鼠金屬硫蛋白-I者。選擇適當載體及啟動子係所屬技術領域中具有通常知識者所知。表現載體亦可含有用於轉譯起始之核糖體結合位點及轉錄終止子。表現載體亦可包括用於擴增表現之適當序列。經基因修飾的宿主細胞 本揭露提供經基因修飾的宿主細胞，其中宿主細胞係經本揭露之核酸的基因修飾。 合適宿主細胞包括真核細胞，諸如酵母菌細胞、昆蟲細胞及哺乳動物細胞。在一些情況下，宿主細胞係哺乳動物細胞系之細胞。合適哺乳動物細胞系包括人細胞系、非人靈長動物細胞系、囓齒動物(例如小鼠、大鼠)細胞系及類似物。合適哺乳動物細胞系包括但不限於HeLa細胞(例如美國菌種保存中心(ATCC)編號CCL-2)、CHO細胞(例如ATCC編號CRL9618、CCL61、CRL9096)、293細胞(例如ATCC編號CRL-1573)、Vero細胞、NIH 3T3細胞(例如ATCC編號CRL-1658)、Huh-7細胞、BHK細胞(例如ATCC編號CCL10)、PC12細胞(ATCC編號CRL1721)、COS細胞、COS-7細胞(ATCC編號CRL1651)、RAT1細胞、小鼠L細胞(ATCC編號CCLI.3)、人胚胎腎(HEK)細胞(ATCC編號CRL1573)、HLHepG2細胞及類似物。 在一些情況下，宿主細胞係經基因修飾的哺乳動物細胞以使其不合成內源性MHC β2-M。 在一些情況下，宿主細胞係經基因修飾的哺乳動物細胞以使其不合成內源性MHC第I型重鏈。在一些情況下，宿主細胞係經基因修飾的哺乳動物細胞以使其不合成內源性MHC β2-M且使其不合成內源性MHC第I型重鏈。組成物 本揭露提供組成物，其包括包含本揭露之TMMP (synTac)的醫藥組成物。本揭露提供組成物，其包括包含本揭露之TMMP的醫藥組成物。本揭露提供組成物，其包括包含本揭露之核酸或重組表現載體的醫藥組成物。包含多聚體多肽之組成物 本揭露之組成物除了本揭露之TMMP以外可包含下列一或多者：鹽，例如NaCl、MgCl2 、KCl、MgSO4 等；緩衝劑，例如Tris緩衝劑、N-(2-羥乙基)哌𠯤-N'-(2-乙磺酸)(HEPES)、2-(N-N-嗎啉基)乙磺酸(MES)、2-(N-N-嗎啉基)乙磺酸鈉鹽(MES)、3-(N-N-嗎啉基)丙磺酸(MOPS)、N-三[羥甲基]甲基-3-胺基丙磺酸(TAPS)等；助溶劑；清潔劑，例如非離子清潔劑諸如Tween-20等；蛋白酶抑制劑；甘油；及類似物。 組成物可包含醫藥上可接受之賦形劑，其中許多係所屬技術領域中已知且無須在此詳細討論。醫藥上可接受之賦形劑已在多種出版物中充分描述，包括例如"Remington：The Science and Practice of Pharmacy", 19th Ed.(1995), or latest edition, Mack Publishing Co；A. Gennaro(2000)"Remington： The Science and Practice of Pharmacy", 20th edition, Lippincott, Williams, & Wilkins；Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(1999)H.C. Ansel et al., eds 7th ed., Lippincott, Williams, & Wilkins；and Handbook of Pharmaceutical Excipients(2000)A.H. Kibbe et al., eds., 3rd ed. Amer. Pharmaceutical Assoc.。 醫藥組成物可包含本揭露之TMMP及醫藥上可接受之賦形劑。在一些情況下，主題醫藥組成物將適用於向個體投予，例如將為無菌。例如在一些情況下，主題醫藥組成物將適用於向人類個體投予，例如其中組成物係無菌且無可偵測致熱原及/或其他毒素。 蛋白質組成物可包含其他組分，諸如醫藥等級的甘露醇、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素、葡萄糖、蔗糖、鎂、碳酸酯及類似物。組成物可包含醫藥上可接受之調整生理條件所需之助劑物質，諸如pH調整及緩衝劑、毒性調整劑及該類似物，例如醋酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、乳酸鈉、鹽酸鹽、硫酸鹽、溶劑合物(例如經混合之離子鹽、水、有機物)、水合物(例如水)及類似物。 例如，組成物可包括水溶液、粉末形式、顆粒劑、錠劑、丸劑、栓劑、膠囊、懸浮液、噴霧及類似物。組成物可根據以下描述之各種投予途徑調配。 當本揭露之TMMP係作為注射劑(例如皮下、腹膜內、肌肉內及/或靜脈內)直接至組織中時，可提供調配物作為立即可用劑型或作為非水溶液形式(例如可重構儲存穩定粉末)或水溶液形式，諸如由醫藥上可接受之載劑及賦形劑構成之液體。亦可提供含蛋白質之調配物以增強TMMP在投予之後的血清半衰期。例如TMMP可以脂質體調配物提供、製備為膠體或其他用於延長血清半衰期之習知技術。多種方法可用於製備脂質體，如例如Szoka et al. 1980Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 9：467、美國專利第4,235,871號、第4,501,728號及第4,837,028號中所述。製劑亦可以控制釋放或緩釋形式提供。 適用於腸胃外投予之調配物的其他實例包括等張無菌注射溶液、抗氧化劑、抑菌劑及使調配物與預期受者的血液等張之溶質、懸浮劑、助溶劑、增稠劑、穩定劑及保存劑。例如，主題醫藥組成物可存在於容器中，例如無菌容器諸如注射器。調配物可以單位劑量或多劑量密封容器(諸如安瓿及小瓶)呈現，且可儲存在冷凍乾燥(凍乾)條件下，僅需在馬上要使用前添加無菌液體賦形劑(例如注射用水)。臨時注射溶液及懸浮液可自無菌粉末、顆粒及錠劑製備。 本揭露之TMMP於調配物中之的濃度可廣泛變化(例如從小於約體重的0.1%，通常為2%或至少約2%到多達20%至50%或超過50%)，且通常主要將根據所選之特定投予模式及患者需求基於流體體積、黏度及基於患者之因素來選擇。 本揭露提供包含本揭露之組成物例如液體組成物之容器。容器可為例如注射器、安瓿及類似物。在一些情況下，容器係無菌。在一些情況下，容器及組成物皆係無菌。 本揭露提供組成物，其包括包含本揭露之TMMP的醫藥組成物。組成物可包含：a)本揭露之TMMP；及b)如上述之賦形劑。在一些情況下，賦形劑為醫藥上可接受之賦形劑。 在一些情況下，本揭露之TMMP存在於液體組成物中。因此，本揭露提供包含本揭露之TMMP之組成物(例如液體組成物包括醫藥組成物)。在一些情況下，本揭露之組成物包含：a)本揭露之TMMP；及b)鹽水(例如0.9% NaCl)。在一些情況下，組成物係無菌。在一些情況下，組成物適用於向人類個體投予，例如其中組成物係無菌且無可偵測致熱原及/或其他毒素。因此，本揭露提供組成物，其包含：a)本揭露之TMMP；及b)鹽水(例如0.9% NaCl)，其中組成物係無菌且無可偵測致熱原及/或其他毒素。包含核酸或重組表現載體之組成物 本揭露提供組成物(例如醫藥組成物)，其包含本揭露之核酸或重組表現載體。各式各樣的醫藥上可接受之賦形劑係所屬技術領域中已知且無須在此詳細討論。醫藥上可接受之賦形劑已在多種出版物中充分描述，包括例如A. Gennaro(2000)"Remington：The Science and Practice of Pharmacy", 20th edition, Lippincott, Williams, & Wilkins；Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(1999)H. C. Ansel et al., eds 7th ed., Lippincott, Williams, & Wilkins；and Handbook of Pharmaceutical Excipients(2000)A. H. Kibbe et al., eds., 3rd ed. Amer. Pharmaceutical Assoc.。 本揭露之組成物可包括：a)一或多個核酸或一或多個包含編碼TMMP之核苷酸序列的重組表現載體；及b)下列一或多者：緩衝劑、界面活性劑、抗氧化劑、親水性聚合物、糊精、螯合劑、懸浮劑、助溶劑、增稠劑、穩定劑、制菌劑、潤濕劑及保存劑。合適緩衝劑包括但不限於(諸如N,N-雙(2-羥乙基)-2-胺基乙磺酸(BES)、雙(2-羥乙基)胺基-參(羥甲基)甲烷(BIS-Tris)、N-(2-羥乙基)哌𠯤-N'3-丙磺酸(EPPS或HEPPS)、甘胺醯甘胺酸、N-2-羥乙基哌𠯤-N'-2-乙磺酸(HEPES)、3-(N-N-嗎啉基)丙烷磺酸(MOPS)、哌𠯤-N,N'-雙(2-乙烷-磺酸)(PIPES)、碳酸氫鈉、3-(N-參(羥甲基)-甲基-胺基)-2-羥基-丙磺酸)TAPSO、(N-參(羥甲基)甲基-2-胺基乙磺酸(TES)、N-參(羥甲基)甲基-甘胺酸(Tricine)、參(羥甲基)-胺基甲烷(Tris)等)。合適鹽包括例如NaCl、MgCl2 、KCl、MgSO4 等。 本揭露之醫藥調配物可包括約0.001%至約90%(w/w)的量之本揭露之核酸或重組表現載體。在以下調配物的說明中，「主題核酸或重組表現載體」將被理解為包括本揭露之核酸或重組表現載體。例如在一些情況下，主題調配物包含本揭露之核酸或重組表現載體。 主題核酸或重組表現載體可與其他化合物或化合物之混合物摻合、包封、共軛或以其他方式相關聯；此類化合物可包括例如脂質體或受體靶向分子。主題核酸或重組表現載體可經組合於具有一或多個協助攝取、分布及/或吸收之組分的調配物中。 主題核酸或重組表現載體組成物可被調配成許多可能之劑量形式之任一種，諸如但不限於錠劑、膠囊、凝膠膠囊、液體糖漿、軟膠、栓劑及灌腸劑。主題核酸或重組表現載體組成物亦可經調配為於水性、非水性或混合介質中之懸浮液。水性懸浮液可進一步包含增加懸浮液之黏度之物質，包括例如羧甲基纖維素鈉、山梨醇及/或葡聚糖。懸浮液亦可含有穩定劑。 包含主題核酸或重組表現載體之調配物可為脂質體調配物。如本文中所使用，用語「脂質體(liposome)」是指由排列成球形雙層或雙層兩親性脂質所構成的囊泡。脂質體係單層或多層囊泡，其具有自親脂性物質所形成之膜及含有所欲遞送之組成物的水性內部。陽離子脂質體係帶正電脂質體，其可與帶負電DNA分子交互作用以形成穩定複合體。pH敏感性或帶負電之脂質體被認為是捕獲DNA而非與其複合。陽離子及非陽離子脂質體兩者可用於遞送主題核酸或重組表現載體。 脂質體亦包括「空間上經安定化」之脂質體，該用語如本文中所使用係指包含一或多個特殊化脂質之脂質體，該特殊化脂質當併入脂質體中時，導致相對於缺乏該特殊化脂質之脂質體增強的循環生命期。空間上經安定化之脂質體的實例係該些脂質體之形成囊泡脂質部分的一部分包含一或多個糖脂或係經一或多個親水性聚合物諸如聚乙二醇(PEG)部份衍生者。脂質體及彼等之用途係進一步描述於美國專利第6,287,860號，其全文係以引用方式併入本發明中。 本揭露之調配物及組成物亦可包括界面活性劑。界面活性劑於藥物產品、調配物及乳液中之用途係所屬技術領域中廣知的。界面活性劑及彼等之用途係進一步描述於美國專利第6,287,860號。 在一實施態樣中，包括各種穿透增強劑以致效核酸的有效遞送。除了協助非親脂性藥物擴散穿過細胞膜之外，穿透增強劑亦增強親脂性藥物之穿透性。穿透增強劑可經分類為屬於五種廣泛類別之一，即界面活性劑、脂肪酸、膽汁鹽、螯合劑及非螯合非界面活性劑。穿透增強劑及彼等之用途係進一步描述於美國專利第6,287,860號，其全文係以引用方式併入本發明中。 用於口服投予之組成物及調配物包括粉末或顆粒劑、微粒、奈米粒、於水或非水介質中之懸浮液或溶液、膠囊、凝膠膠囊、囊劑(sachets)、錠劑或迷你錠劑。增稠劑、調味劑、稀釋劑、乳化劑、分散輔助劑或黏合劑可為所欲。合適口服調配物包括該些主題反義核酸係搭配一或多種穿透增強劑界面活性劑及螯合劑投予者。合適界面活性劑包括但不限於脂肪酸及/或其酯或鹽、膽酸及/或其鹽。合適膽汁酸/鹽及脂肪酸及彼等之用途係進一步描述於美國專利第6,287,860號。亦合適者係穿透增強劑例如脂肪酸/鹽與膽汁酸/鹽之組合。例示性合適組合係月桂酸、癸酸及UDCA之鈉鹽。進一步穿透增強劑包括但不限於聚氧乙烯-9-月桂基醚及聚氧乙烯-20-鯨蠟醚。合適穿透增強劑亦包括丙二醇、二甲亞碸、三乙醇胺、N,N-二甲基乙醯胺、N,N-二甲基甲醯胺、2-吡咯啶酮及其衍生物、四氫呋喃甲基醇及AZONE™。調控 T 細胞活性之方法 本揭露提供一種選擇性調控表位特異性T細胞的活性之方法，該方法包含使T細胞與本揭露之TMMP接觸，其中使T細胞與本揭露之TMMP接觸選擇性調控表位特異性T細胞的活性。在一些情況下，接觸發生在活體外。在一些情況下，接觸發生在活體內。在一些情況下，接觸發生在離體。 在一些情況下，例如其中目標T細胞係CD8+ T細胞，TMMP包含第I型MHC多肽(例如β2-微球蛋白及第I型MHC重鏈)。 當本揭露之TMMP包括屬於活化性多肽之免疫調控性多肽時，使T細胞與TMMP接觸活化表位特異性T細胞。在一些情況下，表位特異性T細胞係對存在於癌細胞上之表位具特異性之T細胞，且使表位特異性T細胞與TMMP接觸增加T細胞對癌細胞的細胞毒性活性。在一些情況下，表位特異性T細胞係對存在於癌細胞上之表位具特異性之T細胞，且使表位特異性T細胞與TMMP接觸增加表位特異性T細胞的數量。 在一些情況下，表位特異性T細胞係對存在於病毒感染細胞上之表位具特異性之T細胞，且使表位特異性T細胞與TMMP接觸增加T細胞對病毒感染細胞的細胞毒性活性。在一些情況下，表位特異性T細胞係對存在於病毒感染細胞上之表位具特異性之T細胞，且使表位特異性T細胞與TMMP接觸增加表位特異性T細胞的數量。 當本揭露之TMMP包括屬於抑制性多肽之免疫調控性多肽時，使T細胞與TMMP接觸抑制表位特異性T細胞。在一些情況下，表位特異性T細胞係對存在於自我抗原中之表位具特異性之自我反應性T細胞，且接觸減少自我反應性T細胞的數量。 本揭露提供一種調控個體之免疫反應之方法，該方法包含向個體投予有效量的本揭露之TMMP。投予TMMP誘導表位特異性T細胞反應(例如WT-1表位特異性T細胞反應)及非表位特異性T細胞反應，其中表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係至少2：1。在一些情況下，表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係至少5：1。在一些情況下，表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係至少10：1。在一些情況下，表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係至少25：1。在一些情況下，表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係至少50：1。在一些情況下，表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係至少100：1。在一些情況下，個體係人。在一些情況下，調控增加對癌細胞之細胞毒性T細胞反應，例如表現WT-1之癌症細胞。在一些情況下，投予係靜脈內、皮下、肌肉內、全身性、淋巴內、遠離治療部位、局部或在治療部位或靠近治療部位。 本揭露提供一種選擇性地遞送共刺激(即免疫調控性)多肽至目標T細胞之方法，該方法包含使混合的T細胞族群與本揭露之TMMP接觸，其中混合的T細胞族群包含目標T細胞及非目標T細胞，其中目標T細胞係對存在於TMMP內之表位具特異性(例如目標T細胞對存在於TMMP內之WT-1表位具特異性)且其中接觸步驟遞送存在於TMMP內之一或多個共刺激多肽(免疫調控性多肽)至目標T細胞。在一些情況下，T細胞族群係活體外。在一些情況下，T細胞族群係在個體的活體內。在一些情況下，方法包含向個體投予TMMP。在一些情況下，T細胞係細胞毒性T細胞。在一些情況下，混合的T細胞族群係獲自個體之混合的T細胞的活體外族群，且接觸步驟導致目標T細胞活化及/或增生以產生經活化及/或增生之目標T細胞的族群；在一些這些情況下，方法進一步包含向個體投予經活化及/或增生之目標T細胞的族群。 本揭露提供一種在獲自個體之混合的T細胞族群中偵測與受到關注表位(例如WT-1表位)結合之目標T細胞的存在之方法，該方法包含：a)使混合的T細胞族群與本揭露之TMMP在活體外接觸，其中TMMP包含受到關注表位(例如WT-1表位)；及b)偵測T細胞因應該接觸之活化及/或增生，其中經活化及/或增生之T細胞指示目標T細胞的存在。治療方法 本揭露提供一種治療個體之方法，該方法包含向該個體投予有效治療個體之量的本揭露之TMMP或編碼TMMP之一或多個核酸。亦提供用於治療人或動物本體之方法中之本揭露之TMMP。在一些情況下，本揭露之治療方法包含向有彼之需要之個體投予包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列的一或多個重組表現載體。在一些情況下，本揭露之治療方法包含向有彼之需要之個體投予包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列的一或多個mRNA分子。在一些情況下，本揭露之治療方法包含向有彼之需要之個體投予本揭露之TMMP。可治療之病況包括例如癌症及如下述之自體免疫病症。 在一些情況下，本揭露之TMMP當向有彼之需要之個體投予時，誘導表位特異性T細胞反應及表位非特異性T細胞反應兩者。換句話說，在一些情況下，本揭露之TMMP當向有彼之需要之個體投予時，藉由調控第一T細胞之活性來誘導表位特異性T細胞反應，該第一T細胞展示：i)對存在於TMMP中之表位具特異性之TCR；ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽；且藉由調控第二T細胞之活性來誘導表位非特異性T細胞反應，該第二T細胞展示：i)對除存在於TMMP中之表位以外之表位具特異性之TCR；及ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽。表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1或至少100：1。表位特異性T細胞反應與非表位特異性T細胞反應的比例係約2：1至約5：1、約5：1至約10：1、約10：1至約15：1、約15：1至約20：1、約20：1至約25：1、約25：1至約50：1或約50：1至約100：1或超過100：1。「調控T細胞之活性」可包括下列一或多者：i)活化細胞毒性(例如CD8+ )T細胞；ii)誘導細胞毒性(例如CD8+ )T細胞之細胞毒性活性；iii)誘導細胞毒性(例如CD8+ )T細胞生產及釋放細胞毒素(例如穿孔素；顆粒溶解酶；顆粒溶解素)；iv)抑制自動反應性T細胞之活性；及類似物。 免疫調控性多肽對其同源共免疫調控性多肽減少的親和力及表位對TCR之親和力之組合提供本揭露之TMMP增強的選擇性。因此例如，相較於與第二T細胞結合之親合力，本揭露之TMMP以較高親合力與第一T細胞結合，該第一T細胞展示：i)對存在於TMMP中之表位具特異性之TCR；及ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽，該第二T細胞展示：i)對除存在於TMMP中之表位以外之表位具特異性之TCR；及ii)與存在於TMMP中之免疫調控性多肽結合之共免疫調控性多肽。 本揭露提供一種選擇性調控個體的表位特異性T細胞之活性之方法，該方法包含向個體投予有效量的本揭露之TMMP或包含編碼TMMP之核苷酸序列的一或多個核酸(例如表現載體；mRNA；等)，其中TMMP選擇性調控個體的表位特異性T細胞之活性。選擇性調控表位特異性T細胞之活性可治療個體的疾病或病症。因此，本揭露提供一種治療方法，該方法包含向有彼之需要之個體投予有效量的本揭露之TMMP。 在一些情況下，免疫調控性多肽(「MOD」)係活化性多肽且TMMP活化表位特異性T細胞。在一些情況下，表位係癌症相關表位且TMMP增加對癌症相關表位具特異性之T細胞的活性。在一些情況下，MOD係活化性多肽且TMMP活化WT-1表位特異性T細胞。在一些情況下，T細胞係輔助T細胞(CD4+ 細胞)、細胞毒性T細胞(CD8+ 細胞)或NK-T細胞。在一些情況下，表位係WT-1表位且TMMP增加對表現WT-1表位之癌細胞具特異性之T細胞(例如輔助T細胞(CD4+ 細胞)、細胞毒性T細胞(CD8+ 細胞)及/或NK-T細胞)的活性。CD4+ T細胞之活化可包括增加CD4+ T細胞之增生及/或誘導或增強CD4+ T細胞釋放細胞介素。NK-T細胞及/或CD8+細胞之活化可包括：增加NK-T細胞及/或CD8+細胞之增生；及/或誘導NK-T細胞及/或CD8+細胞釋放細胞介素諸如干擾素γ。在一些情況下，本揭露之TMMP減少調節性T(Treg)細胞之增生及/或活性。Treg係FoxP3+ 、CD4+ T細胞。在一些情況下，例如當本揭露之TMMP包含抑制性免疫調控性多肽(例如PD-L1、FasL及類似物)時，TMMP減少Treg之增生及/或活性。 在一些情況下，免疫調控性多肽係活化性多肽且TMMP活化表位特異性T細胞。在一些情況下，表位係癌症相關表位且TMMP增加對癌症相關表位具特異性之T細胞的活性。 當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向具有表現WT-1之癌症之個體投予。表現WT1之癌症包括白血病、結締組織增生性小圓細胞腫瘤、胃癌、結腸癌、肺癌、乳癌、生殖細胞腫瘤、卵巢癌、子宮癌、甲狀腺癌、肝癌、腎癌、Kaposi氏肉瘤、肉瘤、肝細胞癌、Wilms氏腫瘤、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓發育不良症候群(MDS)、非小細胞肺癌(NSCLC)、骨髓瘤、胰臟癌、結直腸癌、間皮瘤、軟組織肉瘤、神經胚細胞瘤及腎胚細胞瘤。 當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的急性骨髓樣白血病(AML)。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的骨髓瘤。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的卵巢癌。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的胰臟癌。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的非小細胞肺癌(NSCLC)。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的結直腸癌(CRC)。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的乳癌。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的Wilms氏瘤。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的間皮瘤。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的軟組織肉瘤。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的神經胚細胞瘤。當本揭露之TMMP包含WT-1肽表位時，TMMP可向有彼之需要之個體投予以治療個體的腎胚細胞瘤。 本揭露提供一種治療個體的癌症之方法，該方法包含向個體投予有效量的本揭露之TMMP或包含編碼TMMP之核苷酸序列的一或多個核酸(例如表現載體；mRNA；等)，其中TMMP包含T細胞表位，該T細胞表位係癌症表位，且其中TMMP包含刺激性免疫調控性多肽。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時減少個體的癌細胞之數量的量。例如在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時，相較於在投予TMMP之前或在投予TMMP不存在下之個體的癌細胞之數量，減少個體的癌細胞之數量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%的量。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時減少個體的癌細胞之數量至不可偵測水準的量。 在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時減少個體的腫瘤質量的量。例如在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體(具有腫瘤之個體)投予時，相較於在投予TMMP之前或在投予TMMP不存在下之個體的腫瘤質量，減少個體的腫瘤質量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%的量。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體(具有腫瘤之個體)投予時減少個體的腫瘤體積的量。例如在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體(具有腫瘤之個體)投予時，相較於在投予TMMP之前或在投予TMMP不存在下之個體的腫瘤體積，減少個體的腫瘤體積至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%的量。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時增加個體的存活時間的量。例如在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時，相較於在投予TMMP不存在下之個體的預期存活時間，增加個體的存活時間至少1個月、至少2個月、至少3個月、3個月至6個月、6個月至1年、1年至2年、2年至5年、5年至10年或超過10年的量。 在一些情況下，表位特異性T細胞係對存在於病毒感染細胞上之表位具特異性之T細胞，且使表位特異性T細胞與TMMP接觸增加T細胞對病毒感染細胞的細胞毒性活性。在一些情況下，表位特異性T細胞係對存在於病毒感染細胞上之表位具特異性之T細胞，且使表位特異性T細胞與TMMP接觸增加表位特異性T細胞的數量。 因此，本揭露提供一種治療個體的病毒感染之方法，該方法包含向個體投予有效量的本揭露之TMMP或包含編碼TMMP之核苷酸序列的一或多個核酸，其中TMMP包含T細胞表位，該T細胞表位係病毒表位，且其中TMMP包含刺激性免疫調控性多肽。在一些情況下，「有效量」的TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時減少個體的病毒感染細胞之數量的量。例如在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時，相較於在投予TMMP之前或在投予TMMP不存在下之個體的病毒感染細胞之數量，減少個體的病毒感染細胞之數量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%的量。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時減少個體的病毒感染細胞之數量至不可偵測水準的量。 因此，本揭露提供一種治療個體的感染之方法，該方法包含向個體投予有效量的本揭露之TMMP或包含編碼TMMP之核苷酸序列的一或多個核酸，其中TMMP包含T細胞表位，該T細胞表位係病原體相關表位，且其中TMMP包含刺激性免疫調控性多肽。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時減少個體的病原體之數量的量。例如在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時，相較於在投予TMMP之前或在投予TMMP不存在下之個體的病原體之數量，減少個體的病原體之數量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%的量。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時減少個體的病原體之數量至不可偵測水準的量。病原體包括病毒、細菌、原蟲及類似物。 在一些情況下，免疫調控性多肽係抑制性多肽且TMMP抑制表位特異性T細胞之活性。在一些情況下，表位係自我表位且TMMP選擇性抑制對自我表位具特異性之T細胞的活性。 本揭露提供一種治療個體的自體免疫病症之方法，該方法包含向個體投予有效量的本揭露之TMMP或包含編碼TMMP之核苷酸序列的一或多個核酸，其中TMMP包含T細胞表位，該T細胞表位係自我表位，且其中TMMP包含抑制性免疫調控性多肽。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時，相較於在投予TMMP之前或在投予TMMP不存在下之個體的自我反應性T細胞之數量，減少自我反應性T細胞之數量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%的量。在一些情況下，「有效量」的TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時減少個體的Th2細胞介素之生產的量。在一些情況下，「有效量」的本揭露之TMMP係當以一或多個劑量向有彼之需要之個體投予時改善個體與自體免疫疾病相關之一或多個症狀的量。 如上所述，在進行主題治療方法之一些情況下，本揭露之TMMP係作為TMMP本身(per se )向有彼之需要之個體投予。在進行主題治療方法之其他情況下，包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列的一或多個核酸係向有彼之需要之個體投予。因此在其他情況下，本揭露之一或多個核酸(例如本揭露之一或多個重組表現載體)係向有彼之需要之個體投予。調配物 合適調配物係於上描述，其中合適調配物包括醫藥上可接受之賦形劑。在一些情況下，合適調配物包含：a)本揭露之TMMP；及b)醫藥上可接受之賦形劑。在一些情況下，合適調配物包含：a)核酸，其包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列；及b)醫藥上可接受之賦形劑；在一些情況下，核酸係mRNA。在一些情況下，合適調配物包含：a)第一核酸，其包含編碼本揭露之TMMP之第一多肽的核苷酸序列；b)第二核酸，其包含編碼本揭露之TMMP之第二多肽的核苷酸序列；及c)醫藥上可接受之賦形劑。在一些情況下，合適調配物包含：a)重組表現載體，其包含編碼本揭露之TMMP之核苷酸序列；及b)醫藥上可接受之賦形劑。在一些情況下，合適調配物包含：a)第一重組表現載體，其包含編碼本揭露之TMMP之第一多肽的核苷酸序列；b)第二重組表現載體，其包含編碼本揭露之TMMP之第二多肽的核苷酸序列；及c)醫藥上可接受之賦形劑。 合適醫藥上可接受之賦形劑係描述於上。劑量 合適劑量可由主治醫師或其他合格醫學人士基於各種臨床因子判定。如醫學領域所廣為周知，任何病患之劑量取決於許多因素，包括該病患之體型大小、身體表面積、年齡、所欲投予之特定多肽或核酸、病患的性別、投予時間及途徑、整體健康及其他併投之藥物。本揭露之TMMP可以介於每劑量1 ng/kg體重與20 mg/kg體重之間的量投予，例如介於0.1 mg/kg體重至10 mg/kg體重之間，例如介於0.5 mg/kg體重至5 mg/kg體重之間；然而，設想低於或高於此例示性範圍之劑量，特別是考慮前述因子。如果方案係連續輸注，其亦可在每分鐘每公斤體重1 μg至10 mg之範圍內。本揭露之TMMP可以約1 mg/kg體重至50 mg/kg體重的量投予，例如約1 mg/kg體重至約5 mg/kg體重、約5 mg/kg體重至約10 mg/kg體重、約10 mg/kg體重至約15 mg/kg體重、約15 mg/kg體重至約20 mg/kg體重、約20 mg/kg體重至約25 mg/kg體重、約25 mg/kg體重至約30 mg/kg體重、約30 mg/kg體重至約35 mg/kg體重、約35 mg/kg體重至約40 mg/kg體重或約40 mg/kg體重至約50 mg/kg體重。 在一些情況下，本揭露之TMMP之合適劑量係0.01 μg至100 g每kg體重、0.1 μg至10 g每kg體重、1 μg至1 g每kg體重、10 μg至100 mg每kg體重、100 μg至10 mg每kg體重或100 μg至1 mg每kg體重。所屬技術領域中具有通常知識者可輕易根據在體液或組織中測量之經投予藥劑的停留時間及濃度以預估投藥之重複頻率。在成功治療之後，所欲的是使病患經歷維持療法以預防疾病狀態復發，其中本揭露之TMMP係以維持劑量投予，維持劑量之範圍為0.01 μg至100 g每kg體重、0.1 μg至10 g每kg體重、1 μg至1 g每kg體重、10 μg至100 mg每kg體重、100 μg至10 mg每kg體重或100 μg至1 mg每kg體重。 所屬技術領域中具有通常知識者將輕易理解劑量水準可隨特定TMMP、症狀的嚴重性及個體對不良反應的感受性而改變。給定化合物之較佳劑量可由所屬技術領域中具有通常知識者藉由多種手段輕易判定。 在一些情況下，投予多劑之本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體。本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體的投予頻率可取決於多種因子之任一者例如症狀的嚴重性等而異。例如在一些情況下，本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體係投予每月一次、每月二次、每月三次、每隔一週一次(qow)、每週一次(qw)、每週二次(biw)、每週三次(tiw)、每週四次、每週五次、每週六次、每隔一天一次(qod)、每日一次(qd)、一天兩次(qid)或一天三次(tid)。 本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體的投予期間，例如投予本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體的時間期間可取決於多種因子之任一者例如患者反應等而異。例如本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體可在範圍約一天至約一週、約二週至約四週、約一個月至約二個月、約二個月至約四個月、約四個月至約六個月、約六個月至約八個月、約八個月至約1年、約1年至約2年或約2年至約4年或超過4年的時間期間內投予。投予途徑 活性劑(本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體)係使用適用於藥物遞送之任何可用方法及途徑(包括活體內及離體方法)以及全身性及局部投予途徑向個體投予。 習知及醫藥上可接受之投予途徑包括腫瘤內、腫瘤周圍、肌肉內、淋巴內、氣管內、顱內、皮下、皮內、局部施用、靜脈內、動脈內、直腸、鼻、口服及其他經腸及腸胃外投予途徑。投予途徑可經組合(若有需要)或取決於TMMP及/或所欲效應而調整。本揭露之TMMP或本揭露之核酸或重組表現載體可以單一劑量或以多劑投予。 在一些情況下，本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體係經靜脈內投予。在一些情況下，本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體係經肌肉內投予。在一些情況下，本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體係經淋巴內投予。在一些情況下，局部投予本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體。在一些情況下，腫瘤內投予本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體。在一些情況下，本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體係經腫瘤周圍投予。在一些情況下，本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體係經顱內投予。在一些情況下，本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體係經皮下投予。 在一些情況下，本揭露之TMMP係經靜脈內投予。在一些情況下，本揭露之TMMP係經肌肉內投予。在一些情況下，本揭露之TMMP係經局部投予。在一些情況下，本揭露之TMMP係經腫瘤內投予。在一些情況下，本揭露之TMMP係經腫瘤周圍投予。在一些情況下，本揭露之TMMP係經顱內投予。在一些情況下，TMMP係經皮下投予。在一些情況下，本揭露之TMMP係經淋巴內投予。 本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體可使用適用於遞送習知藥物之任何可用習知方法及途徑(包括全身性或局部途徑)投予至宿主。一般來說，考慮用於本揭露之方法中的投予途徑包括但不必然限於經腸、腸胃外及吸入途徑。 除吸入投予以外之腸胃外投予途徑包括但不必然限於局部、穿皮、皮下、肌肉內、眼眶內、囊內、脊椎內、胸骨內、腫瘤內、淋巴內、腫瘤周圍及靜脈內途徑，即除經由消化道以外之任何投予途徑。可進行腸胃外投予以致效本揭露之TMMP、本揭露之核酸或本揭露之重組表現載體之全身性或局部遞送。當全身性遞送係所欲時，投予一般而言涉及侵入性或全身性吸收局部或黏膜投予醫藥製劑。組合療法 在一些情況下，本揭露之用於治療個體的癌症之方法包含：a)投予本揭露之TMMP；及b)投予至少一個額外治療劑或治療性治療。合適額外治療劑包括但不限於小分子癌症化學治療劑及免疫檢查點抑制劑。合適額外治療性治療包括例如放射、手術(例如外科切除腫瘤)及類似物。 本揭露之治療方法可包含共投本揭露之TMMP及至少一個額外治療劑。所謂「共投」係指向個體投予本揭露之TMMP及至少一個額外治療劑兩者，雖然不必然在相同時間，以求達成投予TMMP及至少一個額外治療劑兩者的治療效應結果。投予TMMP及至少一個額外治療劑可為實質上同時，例如可在投予至少一個額外治療劑的約1分鐘至約24小時內(例如在約1分鐘內、約5分鐘內、約15分鐘內、約30分鐘內、約1小時內、約4小時內、約8小時內、約12小時內或約24小時內)向個體投予TMMP。在一些情況下，本揭露之TMMP係向正在經歷或已經歷至少一個額外治療劑的治療之個體投予。TMMP之投予可在不同時間及/或以不同頻率發生。 作為一實例，本揭露之治療方法可包含共投本揭露之TMMP及免疫檢查點抑制劑諸如對免疫檢查點具特異性之抗體。所謂「共投」係指向個體投予本揭露之TMMP及免疫檢查點抑制劑(例如對免疫檢查點多肽具特異性之抗體)兩者，雖然不必然在相同時間，以求達成投予TMMP及免疫檢查點抑制劑(例如對免疫檢查點多肽具特異性之抗體)兩者的治療效應結果。投予TMMP及免疫檢查點抑制劑(例如對免疫檢查點多肽具特異性之抗體)可為實質上同時，例如可在投予免疫檢查點抑制劑(例如對免疫檢查點多肽具特異性之抗體)的約1分鐘至約24小時內(例如在約1分鐘內、約5分鐘內、約15分鐘內、約30分鐘內、約1小時內、約4小時內、約8小時內、約12小時內或約24小時內)向個體投予TMMP。在一些情況下，本揭露之TMMP係向正在經歷或已經歷免疫檢查點抑制劑(例如對免疫檢查點多肽具特異性之抗體)的治療之個體投予。TMMP及免疫檢查點抑制劑(例如對免疫檢查點多肽具特異性之抗體)之投予可在不同時間及/或以不同頻率發生。 例示性免疫檢查點抑制劑包括靶向諸如CD27、CD28、CD40、CD122、CD96、CD73、CD47、OX40、GITR、CSF1R、JAK、PI3K δ、PI3K γ、TAM、精胺酸酶、CD137(亦稱為4-1BB)、ICOS、A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、LAG3、TIM3、VISTA、CD96、TIGIT、CD122、PD-1、PD-L1及PD-L2之免疫檢查點多肽之抑制劑。在一些情況下，免疫檢查點多肽係選自CD27、CD28、CD40、ICOS、OX40、GITR、CD122及CD137之刺激性檢查點分子。在一些情況下，免疫檢查點多肽係選自下列的抑制劑檢查點分子：A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、IDO、KIR、LAG3、PD-1、TIM3、CD96、TIGIT及VISTA。 在一些情況下，免疫檢查點抑制劑係對免疫檢查點多肽具特異性之抗體。在一些情況下，抗免疫檢查點抗體係單株抗體。在一些情況下，抗免疫檢查點抗體係人化或去免疫化，以使抗體實質上不誘發人的免疫反應。在一些情況下，抗免疫檢查點抗體係人化單株抗體。在一些情況下，抗免疫檢查點抗體係去免疫化單株抗體。在一些情況下，抗免疫檢查點抗體係全人單株抗體。在一些情況下，抗免疫檢查點抗體抑制免疫檢查點多肽與免疫檢查點多肽配體之結合。在一些情況下，抗免疫檢查點抗體抑制免疫檢查點多肽與免疫檢查點多肽受體之結合。 合適抗免疫檢查點抗體包括但不限於尼沃魯單抗(nivolumab)(Bristol-Myers Squibb)、派姆單抗(pembrolizumab) (Merck)、匹利珠單抗(pidilizumab)(Curetech)、AMP-224 (GlaxoSmithKline/Amplimmune)、MPDL3280A(Roche) 、MDX-1105(Medarex, Inc./Bristol Myer Squibb)、MEDI-4736(Medimmune/AstraZeneca)、艾維路單抗(arelumab) (Merck Serono)、伊匹單抗(ipilimumab)(YERVOY,(Bristol-Myers Squibb)、曲美木單抗(tremelimumab)(Pfizer)、匹利珠單抗(pidilizumab)(CureTech, Ltd.)、IMP321(Immutep S.A.)、MGA271(Macrogenics)、BMS-986016(Bristol-Meyers Squibb)、立魯單抗(lirilumab)(Bristol-Myers Squibb)、烏瑞魯單抗(urelumab)(Bristol-Meyers Squibb)、PF-05082566(Pfizer)、IPH2101(Innate Pharma/Bristol-Myers Squibb)、MEDI-6469(MedImmune/AZ)、CP-870,893 (Genentech)、莫格利珠單抗(Mogamulizumab)(Kyowa Hakko Kirin)、瓦里木單抗(Varlilumab)(CelIDex Therapeutics)、艾維路單抗(EMD Serono)、加利昔單抗(Galiximab)(Biogen Idec)、AMP-514(Amplimmune/AZ)、AUNP 12(Aurigene and Pierre Fabre)、因多莫得(Indoximod)(NewLink Genetics)、NLG-919(NewLink Genetics)、INCB024360(Incyte)；KN035；及彼等之組合。例如在一些情況下，免疫檢查點抑制劑係抗PD-1抗體。合適抗PD-1抗體包括例如尼沃魯單抗、派姆單抗(亦稱為MK-3475)、匹利珠單抗、SHR-1210、PDR001及AMP-224。在一些情況下，抗PD-1單株抗體係尼沃魯單抗、派姆單抗或PDR001。合適抗PD1抗體係描述於美國專利公開號2017/0044259。以匹利珠單抗而言，見例如Rosenblatt et al.(2011)J. Immunother . 34：409-18。在一些情況下，免疫檢查點抑制劑係抗CTLA-4抗體。在一些情況下，抗CTLA-4抗體係伊匹單抗或曲美木單抗。以曲美木單抗而言，見例如Ribas et al.(2013)J. Clin. Oncol . 31：616-22。在一些情況下，免疫檢查點抑制劑係抗PD-L1抗體。在一些情況下，抗PD-L1單株抗體係BMS-935559、MEDI4736、MPDL3280A(亦稱為RG7446)、KN035或MSB0010718C。在一些實施態樣中，抗PD-L1單株抗體係MPDL3280A(阿特珠單抗)或MEDI4736(德瓦魯單抗)。以德瓦魯單抗而言，見例如WO 2011/066389。以阿特珠單抗而言，見例如美國專利第8,217,149號。適合治療之個體 適合用本揭露之方法治療之個體包括患有癌症之個體，包括經診斷為患有癌症之個體、經癌症治療但無法對治療有反應之個體及經癌症治療且起初有反應但後續變得對治療呈現難治性之個體。適合用本揭露之方法治療之個體包括具有感染(例如經病原體諸如細菌、病毒、原蟲等感染)之個體，包括經診斷為具有感染之個體及經感染治療但無法對治療有反應之個體。適合用本揭露之方法治療之個體包括具有細菌感染之個體，包括經診斷為具有細菌感染之個體及經細菌感染治療但無法對治療有反應之個體。適合用本揭露之方法治療之個體包括具有病毒感染之個體，包括經診斷為具有病毒感染之個體及經病毒感染治療但無法對治療有反應之個體。適合用本揭露之方法治療之個體包括具有自體免疫疾病之個體，包括經診斷為具有自體免疫疾病之個體及經自體免疫疾病治療但無法對治療有反應之個體。 本揭露之非限制性態樣的實例 上述本主題的態樣(包括實施態樣)單獨或與一或多個其他態樣或實施態樣組合可為有益。在不限制前述說明下，本揭露之某些非限制性態樣係提供於下。所屬技術領域中具有通常知識者在閱讀本揭露時將顯而易見的是，可使用經個別編號之態樣之各者或可將經個別編號之態樣之各者與之前或之後經個別編號之態樣之任一者組合。此意圖對態樣之所有此類組合提供支持且不限於以下明確提供之態樣的組合： 態樣1.一種T細胞調控性多聚體多肽，其包含： 至少一種異二聚體，其包含：a)第一多肽，其包含：i)Wilms氏瘤-1(WT-1)肽表位，其具有9至25個胺基酸的長度且包含選自由302-310(RVPGVAPTL)(SEQ ID NO：80)、302-310；V303Y(RYPGVAPTL)(SEQ ID NO：81)、126-134；M127Y(RYFPNAPYL)(SEQ ID NO：82)及417-425；W418Y(RYPSCQKKF)(SEQ ID NO：83)所組成之群組的胺基酸序列，及ii)第一第I型主要組織相容性複合體(MHC)多肽；b)第二多肽，其包含第二第I型MHC多肽，及c)至少一種活化性免疫調控性多肽，其中該第一及/或該第二多肽包含該至少一種免疫調控性多肽，且可選地其中該第一或該第二多肽包含免疫球蛋白(Ig)Fc多肽。 態樣2.如態樣1之T細胞調控性多聚體多肽，其中該一或多種免疫調控性多肽中至少一種係變體免疫調控性多肽，其相較於對應野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之親和力展現對該同源共免疫調控性多肽減少的親和力。 態樣3.如態樣2之T細胞調控性多聚體多肽，其中當藉由生物膜干涉術測量時，該野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之該結合親和力與該變體免疫調控性多肽對該同源共免疫調控性多肽之該結合親和力的比例係至少1.5：1。 態樣4.如態樣2或3之T細胞調控性多聚體多肽，其中該變體免疫調控性多肽以選自由約10-4 M至約10-7 M、約10-4 M至約10-6 M及約10-4 M至約10-5 M所組成之群組的親和力與該共免疫調控性多肽結合。 態樣5.如態樣1至4中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中 a1)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該第一MHC多肽；且 b1)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該至少一種免疫調控性多肽； ii)該第二MHC多肽；及 iii)Ig Fc多肽；或 a2)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該第一MHC多肽；且 b2)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該第二MHC多肽； ii)該至少一種免疫調控性多肽；及 iii)Ig Fc多肽；或 a3)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該第一MHC多肽；且 b3)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該第二MHC多肽； ii)Ig Fc多肽；及 iii)該至少一種免疫調控性多肽；或 a4)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該至少一種免疫調控性多肽； ii)該WT-1肽表位； ii)該第一MHC多肽；且 b4)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該第二MHC多肽；及 ii)該Ig Fc多肽；或 a5)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位； ii)該第一MHC多肽；及 iii)該至少一種免疫調控性多肽；且 b5)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該第二MHC多肽；及 ii)免疫球蛋白(Ig)Fc多肽。 態樣6.如態樣1至4中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中：a)該第一MHC多肽係β2-微球蛋白多肽；且該第二MHC多肽係MHC第I型重鏈多肽；或b)該第一MHC多肽係MHC第I型重鏈多肽；且該第二MHC多肽係β2-微球蛋白多肽。 態樣7.如態樣6之T細胞調控性多聚體多肽，其中： a)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該β2-微球蛋白多肽；且 b)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該至少一種免疫調控性多肽； ii)該MHC第I型重鏈多肽；及 iii)Ig Fc多肽。 態樣8.如態樣6之T細胞調控性多聚體多肽，其中： a)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該β2-微球蛋白多肽；且 b)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該MHC第I型重鏈多肽；及 ii)Ig Fc多肽；及 iii)至少一種免疫調控性多肽。 態樣9.如態樣1至8中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該至少一種免疫調控性多肽係選自由下列所組成之群組：細胞介素、4-1BBL多肽、ICOS-L多肽、OX-40L多肽、CD80多肽、CD86多肽、CD40多肽、CD70多肽及彼等之組合。 態樣10.如態樣1至9中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該至少一種免疫調控性多肽包含IL-2多肽。 態樣11.如態樣1至10中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多聚體多肽包含至少2個免疫調控性多肽，且其中該等免疫調控性多肽中至少2個係相同，可選地其中該2個或超過2個免疫調控性多肽係串聯。 態樣12.如態樣1至11中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該至少一種免疫調控性多肽中一或多者係變體IL-2多肽，其相較於野生型IL-2多肽對IL-2受體之親和力展現對該IL-2受體減少的親和力。 態樣13.如態樣12之T細胞調控性多聚體多肽，其中該一或多個變體IL-2多肽包含：i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。 態樣14.如態樣1至13中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該第一多肽及該第二多肽係互相共價連接，可選地其中該共價連接係經由雙硫鍵。 態樣15.如態樣1至14中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該第一MHC多肽或介於該表位與該第一MHC多肽之間的連接子包含胺基酸取代以提供第一Cys殘基，其中該第二MHC多肽包含胺基酸取代以提供第二Cys殘基，且其中該雙硫鍵係介於該第一與該第二Cys殘基之間。 態樣16.如態樣1至15中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多肽包含介於以下之間的雙硫鍵：i)存在於介於該WT-1肽表位與該第一MHC第I型多肽之間的連接子之Cys，其中該第一MHC第I型多肽係β2M多肽；與ii)經由Y84C取代導入至該第二MHC第I型多肽中之Cys殘基，其中該第二MHC第I型多肽係MHC第I型重鏈多肽。 態樣17.如態樣1至15中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多肽包含介於以下之間的雙硫鍵：i)經由R12C取代導入至該第一MHC第I型多肽中之Cys殘基，其中該第一MHC第I型多肽係β2M多肽；與ii)經由A236C取代導入至該第二MHC第I型多肽中之Cys殘基，其中該第二MHC第I型多肽係MHC第I型重鏈多肽。 態樣18.如態樣1至15中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多肽包含第一雙硫鍵和第二雙硫鍵，該第一雙硫鍵介於以下之間：i)存在於介於該WT-1肽表位與該第一MHC第I型多肽之間的連接子之Cys，其中該第一MHC第I型多肽係β2M多肽；與ii)經由Y84C取代導入至該第二MHC第I型多肽中之Cys殘基，其中該第二MHC第I型多肽係MHC第I型重鏈多肽，且該第二雙硫鍵介於以下之間：i)經由R12C取代導入至該β2M多肽中之Cys殘基；與ii)經由A236C取代導入至該MHC第I型重鏈多肽中之Cys殘基。 態樣19.如態樣16或18之T細胞調控性多聚體多肽，其中介於該WT-1肽表位與該第一MHC之間的該連接子係GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1、2、3、4、5、6、7、8或9。 態樣20.如態樣1至19中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該WT-1肽表位具有9個胺基酸的長度。 態樣21.如態樣1至20中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該Ig Fc多肽包含圖4D、圖4E、圖4F、圖4G及圖4H描繪之胺基酸序列中一者。 態樣22.如態樣1至21中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該WT-1肽包含該胺基酸序列302-310(RVPGVAPTL)(SEQ ID NO：80)、302-310；V303Y(RYPGVAPTL)(SEQ ID NO：81)、126-134；M127Y(RYFPNAPYL)(SEQ ID NO：82)及417-425；W418Y(RYPSCQKKF)(SEQ ID NO：83)。 態樣23.如態樣1至21中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該第一或該第二MHC多肽包含與圖6描繪之HLA-A*2402胺基酸序列之胺基酸25-299具有至少95%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。 態樣24.如態樣1至23中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該第一MHC多肽係β2M多肽，且其中該第二MHC多肽包含與HLA-A24多肽具有至少95%胺基酸序列同一性之胺基酸序列，其中該表位係選自由下列所組成之群組：302-310(RVPGVAPTL)(SEQ ID NO：80)、302-310；V303Y(RYPGVAPTL)(SEQ ID NO：81)、126-134；M127Y(RYFPNAPYL)(SEQ ID NO：82)及417-425；W418Y(RYPSCQKKF)(SEQ ID NO：83)，且其中該Ig Fc多肽包含圖4G或圖4H描繪之胺基酸序列。 態樣25.如態樣1之T細胞調控性多聚體多肽，其中：a)該第一多肽包含圖13B描繪之胺基酸序列；且b)該第二多肽包含圖10B描繪之胺基酸序列。 態樣26.如態樣1之T細胞調控性多聚體多肽，其中：a)該第一多肽包含圖12B描繪之胺基酸序列；且b)該第二多肽包含圖10B描繪之胺基酸序列。 態樣27.如態樣1至26中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多聚體多肽包含第一及第二異二聚體，且其中該第一及第二異二聚體係藉由介於該第一及第二異二聚體之該Ig Fc多肽之間的一或多個雙硫鍵共價連接。 態樣28.一種核酸，其包含編碼如態樣1至27中任一項所述之第一或第二多肽之核苷酸序列。 態樣29.一種表現載體，其包含如態樣26之核酸。 態樣30.一種選擇性調控對Wilms氏瘤-1(WT-1)表位具特異性之T細胞的活性之方法，該方法包含使該T細胞與如態樣1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽接觸，其中該接觸選擇性調控該WT-1表位特異性T細胞的活性。 態樣31.一種治療患有癌症之患者之方法，該方法包含向該患者投予有效量的包含如態樣1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽之醫藥組成物。 態樣32.如態樣31之方法，其中該癌症係急性骨髓樣白血病、骨髓瘤、卵巢癌、胰臟癌、非小細胞肺癌、結直腸癌、乳癌、Wilms氏瘤、間皮瘤、軟組織肉瘤、神經胚細胞瘤或腎胚細胞瘤。 態樣33.如態樣31或32之方法，其進一步包含向該個體投予一或多種檢查點抑制劑。 態樣34.如態樣33之方法，其中該檢查點抑制劑係與選自由CD27、CD28、CD40、CD122、CD96、CD73、CD47、OX40、GITR、CSF1R、JAK、PI3K δ、PI3K γ、TAM、精胺酸酶、CD137、ICOS、A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、LAG3、TIM3、VISTA、CD96、TIGIT、CD122、PD-1、PD-L1及PD-L2所組成之群組的多肽結合之抗體。 態樣35.如態樣34之方法，其中該檢查點抑制劑係對PD-1、PD-L1或CTLA4具特異性之抗體。 態樣36.如態樣34或態樣35之方法，其中該一或多種檢查點抑制劑係選自由下列所組成之群組：尼沃魯單抗(nivolumab)、派姆單抗(pembrolizumab)、匹利珠單抗(pidilizumab)、AMP-224、MPDL3280A、MDX-1105、MEDI-4736、艾維路單抗(arelumab)、伊匹單抗(ipilimumab)、曲美木單抗(tremelimumab)、匹利珠單抗、IMP321、MGA271、BMS-986016、立魯單抗(lirilumab)、烏瑞魯單抗(urelumab)、PF-05082566、IPH2101、MEDI-6469、CP-870,893、莫格利珠單抗(Mogamulizumab)、瓦里木單抗(Varlilumab)、艾維路單抗(Avelumab)、加利昔單抗(Galiximab)、AMP-514、AUNP 12、因多莫得(Indoximod)、NLG-919、INCB024360、KN035及彼等之組合。 態樣37.一種調控個體之免疫反應之方法，該方法包含向該個體投予有效量的如態樣1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該投予誘導表位特異性T細胞反應及非表位特異性T細胞反應，且其中該表位特異性T細胞反應與該非表位特異性T細胞反應之比例係至少2：1。 態樣38.一種選擇性遞送免疫調控性多肽至目標T細胞之方法，該方法包含使混合的T細胞族群與如態樣1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽接觸，其中該混合的T細胞族群包含該目標T細胞及非目標T細胞，其中該目標T細胞對存在於該T細胞調控性多聚體多肽內之該WT-1表位具特異性，且其中該接觸遞送存在於該T細胞調控性多聚體多肽內之該一或多種免疫調控性多肽至該目標T細胞。 態樣39.一種在獲自個體之混合的T細胞族群中偵測與WT-1表位結合之目標T細胞的存在之方法，該方法包含：a)使混合的T細胞族群與如態樣1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽在活體外接觸，其中T細胞調控性多聚體多肽包含WT-1表位；及b)偵測T細胞因應該接觸之活化及/或增生，其中經活化及/或增生之T細胞指示目標T細胞的存在。 [發明態樣]實例 下列實施態樣係經提出以提供如何實施及使用本發明之完整揭示及說明給該領域之技藝人士，並非意圖限制發明人認為是他們的發明之範圍，也非意圖表示下列實驗係所有及唯一進行之實驗。本案盡力確保使用數字(例如量、溫度等)之正確性，但實驗誤差及偏差應被考慮。除非另外說明，份數係指重量份數，分子重量係指重量平均分子重量，溫度係攝氏溫度，壓力係大氣壓或接近大氣壓。標準縮寫可被使用，例如bp鹼基對、kb千鹼基、pl皮升、s或sec秒、min分鐘、h或hr小時、aa胺基酸、kb千鹼基、bp鹼基對、nt核苷酸、i.m.肌肉內、i.p.腹膜內、s.c.皮下及類似縮寫。實例 1 結果 測試TMMP刺激CD8+ T細胞之抗原特異性增生的能力。TMMP包括：i)WT1 126-134(M127Y)；或ii)WT1 302-310(V303Y)作為表位。所有TMMP包括A24等位基因MHC第I型重鏈。TMMP包括：a)「重鏈」多肽，其包含：i)A24：02等位基因之第I型HLA-A重鏈多肽，其包含Y84C及A236C取代；ii)二拷貝之IL2(H16A；F42A)免疫調控性(「MOD」)多肽；及iii)IgG1 Fc多肽，其包含L234A及L235A取代；及b)「輕鏈」多肽建構體3975(圖13B)或3977(圖12B)，其包含：i)WT1 126-134(M127Y)或WT1 302-310(V303Y)；及ii)β-2微球蛋白多肽，其包含R12C取代。重鏈及輕鏈多肽係藉由2個雙硫鍵聯結。「重鏈」包含圖10B描繪之鏈3425的胺基酸序列。TMMP包含「重」及「輕」鏈異二聚體之同型二聚體，該同型二聚體藉由在各別IgG1 Fc區之間形成的雙硫鍵聯結。 獲自人供體之周邊血液單核細胞(PBMC)係在活體外與各種濃度(0 nM、10 nM、100 nM、300 nM或1000 nM)之TMMP培育10天。在10天培育期之後，測定對表位具特異性之細胞的數量。來自健康人供體之PBMC的資料(白血球濃縮物24(「L24」)；白血球濃縮物29(「L29」)；白血球濃縮物30(「L30」)；及白血球濃縮物31(「L31」))顯示於圖 15 及圖 16 。 圖15及圖16呈現的資料顯示WT1特異性TMMP可在10天刺激培養期間誘導WT1特異性T細胞自總PBMC擴增。材料及方法 來自健康供體之白血球濃縮物係使用血球分離機器獲得。白血球濃縮物用相等體積之室溫磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)稀釋。自經稀釋之白血球濃縮物藉由密度梯度離心單離PBMC如下：將30 mL之經稀釋之白血球濃縮物放在50 mL錐形管中13 mL之Ficoll-Paque上層且在室溫下於懸翼式轉籃轉子中不煞車以400 g離心30分鐘。自血漿-Ficoll界面收集單核細胞層(淋巴細胞、單核球及血小板)，轉移至新的50 mL錐形管，且在室溫下用3倍過量PBS藉由300 g離心洗滌10分鐘。在小心移除上清液之後，將細胞重懸且在室溫下用50 mL之PBS藉由200 g離心洗滌10分鐘以移除血小板。在洗滌及血小板移除後，將所獲得之PBMC自50 mL試管匯合、重懸於PBS中、計數、以300 g離心成團塊10分鐘且重懸為最終濃度每mL細胞冷凍培養基中50x106 個細胞。 人健康供體PBMC係自如上述之二個白血球濃縮物製備。在實驗當天，將細胞在37℃水浴中解凍並在溫熱ImmunoCultTM -XF細胞擴增培養基(Stemcell Technologies)中藉由350 x g離心洗滌6分鐘。移除上清液，將細胞重新懸浮於ImmunoCultTM 培養基中。活細胞計數係使用Vi-細胞XR自動細胞計數器(Beckman-Coulter)評估。將培養基體積調整至細胞濃度為5x106 個細胞/ml，並接種每孔2 mL之細胞(相當於10x106 個細胞)於6孔板。將PBMC於總體積4 ml之培養基中以所示量的TMMP、肽(10ug/mL)及IL-2(50IU/mL)刺激或以單獨培養基刺激。使細胞在37℃、5% CO2 下刺激10天，其中在第5及7天藉由自孔抽吸2 mL之培養上清液並添加回2 mL之新鮮培養基來置換培養基。 在培養後，藉由在350 x g下離心5分鐘收集成團塊之細胞，活細胞計數係藉由Vi-細胞XR自動細胞計數器(Beckman-Coulter)測定，且細胞藉由下列染色處理以用於流式細胞術：存活性染色、適當WT1肽特異性HLA-A*24：02四聚體(MBL International)及抗CD3、CD14、CD19、CD56、CD4(Biolegend)、CD8(BD Biosciences)之抗體。將經染色之細胞洗滌且藉由流式細胞術分析。 資料擷取係使用Attune NxT流式細胞儀(Invitrogen)實施。將擷取之資料輸出為fcs檔案且使用Flowjo軟體(Tree Star, OR)分析。 將抗原特異性CD8 T細胞的絕對數量作圖，所示之圖表描繪抗原特異性細胞之擴增隨TMMP濃度而改變。實例 2 評估WT-1特異性T細胞對呈現天然WT1 126-134肽或天然WT1 302-310肽之目標細胞的溶細胞活性。資料顯示於圖 17A 及圖 17B 。 WT-1特異性T細胞之擴增係藉由使細胞與實例1描述之二個TMMP接觸來進行，該二個TMMP即：1)包含建構體3975(圖13B)及建構體3425(圖10B)之異二聚體的TMMP(以下稱為「WT1 126-134(M127Y)TMMP」)；或2)包含建構體3977(圖12B)及建構體3425(圖10B)之異二聚體的TMMP(以下稱為「WT1 302-310(V303Y)TMMP」)。方法 健康供體PBMC係在重組人IL-2存在下經WT1 126-134(M127Y)肽或WT1 302-310(V303Y)肽起動10天，且在經絲裂黴素C處理之自體PBMC存在下在ImmunocultTM 培養基中經WT1 126-134(M127Y)TMMP或WT1 302-310(V303Y) TMMP擴增8天。WT1特異性CD8+ T細胞係藉由基於磁珠之分離富集，使用對WT1 126-134(M127Y)肽或WT1 302-310(V303Y)肽具特異性之經藻紅素(PE)標示之四聚體。 在以不同的細胞毒性T淋巴細胞(CTL)：目標細胞比例實施之隔夜培養中，評估經WT1 126-134(M127Y)肽擴增之細胞及經WT1 302-310(V303Y)擴增之細胞分別對經天然WT1 126-134 肽脈衝之T2細胞及經天然WT1 302-310 肽脈衝之T2細胞的溶細胞活性相較於經擴增之WT1特異性細胞對經對照肽脈衝之T2細胞的殺滅。特異性殺滅之評估係藉由流式細胞術進行，比較經天然WT1肽脈衝之存活T2細胞對比對照在隔夜培養後的比例(顯示圖17A中3個供體之經WT1 126-134脈衝之T2細胞及圖17B中2個供體之經WT1 302-310脈衝之T2細胞)。結果 如圖 17A 及圖 17B 所示，自預先起動之T細胞貯庫藉由WT1 126-134(M127Y)TMMP及WT1 302-310(V303Y)TMMP擴增之CD8+ T細胞係功能性溶細胞殺手細胞，其能夠辨識及回應於呈現天然WT1肽126-134(RMFPNAPYL；SEQ ID NO：249)及302-310(RVPGVAPTL；SEQ ID NO：80)之目標細胞。 雖然本發明已參照彼之特定實施態樣描述，所屬技術領域中具有通常知識者應理解可進行各種變化且等效物可經取代而不背離本發明之真實精神及範疇。此外，可對本發明之目的、精神及範疇進行許多修改以適應特定狀況、材料、物質組成、過程、過程步驟。所有此類修改意圖屬於隨附本文之權利要求之範疇內。
[圖 1A 至圖 1F ]係本揭露之各種TMMP的示意圖。 [圖 2A 至圖 2F ]係本揭露之各種經雙硫鍵連接之TMMP的示意圖。 [圖 3A 至圖 3C ]提供本揭露之TMMP的例示性多肽鏈之胺基酸序列。 [圖 4A 至圖 4H ]提供免疫球蛋白Fc多肽之胺基酸序列。 [圖 5 ]提供來自智人(Homo sapiens )(NP_004039.1；SEQ ID NO：267)、黑猩猩(Pan troglodytes ) (NP_001009066.1；SEQ ID NO：267)、恆河獼猴(Macaca mulatta )(NP_001040602.1；SEQ ID NO：268)、家牛(Bos taurus )(NP_776318.1；SEQ ID NO：269)及家鼷鼠(Mus musculus )(NP_033865.2；SEQ ID NO：270)之β-2微球蛋白(β2M)前驅物(即包括前導序列)的多個胺基酸序列比對。胺基酸1-20係信號肽。 [圖 6 ]提供全長人A*2402等位基因HLA重鏈之胺基酸序列。 [圖 7A 至圖 7B ]提供本揭露之經雙硫鍵連接之TMMP的示意圖。 [圖 8A 至圖 8C ]提供本揭露之經雙硫鍵連接之TMMP的組態實例之示意圖。 [圖 9 ]提供本揭露之TMMP中免疫調控性多肽之位置實例的示意圖。 [圖 10A 至圖 10G ]提供本揭露之TMMP的例示性多肽鏈之胺基酸序列。 [圖 11A 至圖 11F ]提供本揭露之TMMP的例示性多肽鏈之胺基酸序列，其中多肽鏈包含WT-1肽RVPGVAPTL(WT-1 302-310)(SEQ ID NO：80)。 [圖 12A 至圖 12F ]提供本揭露之TMMP的例示性多肽鏈之胺基酸序列，其中多肽鏈包含WT-1肽RYPGVAPTL(WT-1 302-310；V303Y)(SEQ ID NO：81)。 [圖 13A 至圖 13F ]提供本揭露之TMMP的例示性多肽鏈之胺基酸序列，其中多肽鏈包含WT-1肽RYFPNAPYL(WT-1 126-134)(SEQ ID NO：82)。 [圖 14A 至圖 14F ]提供本揭露之TMMP的例示性多肽鏈之胺基酸序列，其中多肽鏈包含WT-1肽RYPSCQKKF(WT-1 417-425；W418Y)(SEQ ID NO：83)。 [圖 15 ]描繪含有WT1肽表位126-134(M127Y)及HLA-A*24重鏈之TMMP對抗原特異性CD8+ T細胞擴增的效應。 [圖 16 ]描繪含有WT1肽表位WT1 302-310(V303Y)及HLA-A*24重鏈之TMMP對抗原特異性CD8+ T細胞擴增的效應。 [圖 17A ]描繪WT1特異性T細胞(藉由使細胞與含有WT1肽表位126-134(M127Y)之TMMP接觸來擴增)對呈現天然WT1(126-134)肽之目標細胞的溶細胞活性。 [圖 17B ]描繪WT1特異性T細胞(藉由使細胞與含有WT1肽表位WT1 302-310(V303Y)之TMMP接觸來擴增)對呈現天然WT1(302-310)肽之目標細胞的溶細胞活性。
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Claims (39)

  1. 一種T細胞調控性多聚體多肽，其包含： 至少一種異二聚體，其包含： a)第一多肽，其包含： i)Wilms氏瘤-1(WT-1)肽表位，其具有9至25個胺基酸的長度且包含選自由302-310(RVPGVAPTL)(SEQ ID NO：80)、302-310；V303Y(RYPGVAPTL)(SEQ ID NO：81)、126-134；M127Y(RYFPNAPYL)(SEQ ID NO：82)及417-425；W418Y(RYPSCQKKF)(SEQ ID NO：83)所組成之群組的胺基酸序列，及 ii)第一第I型主要組織相容性複合體(MHC)多肽； b)第二多肽，其包含第二第I型MHC多肽，及 c)至少一種活化性免疫調控性多肽， 其中該第一及/或該第二多肽包含該至少一種免疫調控性多肽，且可選地其中該第一或該第二多肽包含免疫球蛋白(Ig)Fc多肽。
  2. 如請求項1之T細胞調控性多聚體多肽，其中該一或多種免疫調控性多肽中至少一種係變體免疫調控性多肽，其相較於對應野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之親和力展現對該同源共免疫調控性多肽減少的親和力。
  3. 如請求項2之T細胞調控性多聚體多肽，其中當藉由生物膜干涉術測量時，該野生型免疫調控性多肽對同源共免疫調控性多肽之該結合親和力與該變體免疫調控性多肽對該同源共免疫調控性多肽之該結合親和力的比例係至少1.5：1。
  4. 如請求項2或3之T細胞調控性多聚體多肽，其中該變體免疫調控性多肽以選自由約10-4 M至約10-7 M、約10-4 M至約10-6 M及約10-4 M至約10-5 M所組成之群組的親和力與該共免疫調控性多肽結合。
  5. 如請求項1至4中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中 a1)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該第一MHC多肽；且 b1)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該至少一種免疫調控性多肽； ii)該第二MHC多肽；及 iii)Ig Fc多肽；或 a2)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該第一MHC多肽；且 b2)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該第二MHC多肽； ii)該至少一種免疫調控性多肽；及 iii)Ig Fc多肽；或 a3)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該第一MHC多肽；且 b3)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該第二MHC多肽； ii)Ig Fc多肽；及 iii)該至少一種免疫調控性多肽；或 a4)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該至少一種免疫調控性多肽； ii)該WT-1肽表位； iii)該第一MHC多肽；且 b4)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該第二MHC多肽；及 ii)該Ig Fc多肽；或 a5)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位； ii)該第一MHC多肽；及 iii)該至少一種免疫調控性多肽；且 b5)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該第二MHC多肽；及 ii)免疫球蛋白(Ig)Fc多肽。
  6. 如請求項1至4中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中： a)該第一MHC多肽係β2-微球蛋白多肽；且該第二MHC多肽係MHC第I型重鏈多肽；或 b)該第一MHC多肽係MHC第I型重鏈多肽；且該第二MHC多肽係β2-微球蛋白多肽。
  7. 如請求項6之T細胞調控性多聚體多肽，其中： a)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該β2-微球蛋白多肽；且 b)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該至少一種免疫調控性多肽； ii)該MHC第I型重鏈多肽；及 iii)Ig Fc多肽。
  8. 如請求項6之T細胞調控性多聚體多肽，其中： a)該第一多肽自N端至C端之順序包含： i)該WT-1肽表位；及 ii)該β2-微球蛋白多肽；且 b)該第二多肽自N端至C端之順序包含： i)該MHC第I型重鏈多肽；及 ii)Ig Fc多肽；及 iii)至少一種免疫調控性多肽。
  9. 如請求項1至8中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該至少一種免疫調控性多肽係選自由下列所組成之群組：細胞介素、4-1BBL多肽、ICOS-L多肽、OX-40L多肽、CD80多肽、CD86多肽、CD40多肽、CD70多肽及彼等之組合。
  10. 如請求項1至9中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該至少一種免疫調控性多肽包含IL-2多肽。
  11. 如請求項1至10中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多聚體多肽包含至少2個免疫調控性多肽，且其中該等免疫調控性多肽中至少2個係相同，可選地其中該2個或超過2個免疫調控性多肽係串聯。
  12. 如請求項1至11中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該至少一種免疫調控性多肽中一或多者係變體IL-2多肽，其相較於野生型IL-2多肽對IL-2受體之親和力展現對該IL-2受體減少的親和力。
  13. 如請求項12之T細胞調控性多聚體多肽，其中該一或多個變體IL-2多肽包含：i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。
  14. 如請求項1至13中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該第一多肽及該第二多肽係互相共價連接，可選地其中該共價連接係經由雙硫鍵。
  15. 如請求項1至14中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該第一MHC多肽或介於該表位與該第一MHC多肽之間的連接子包含胺基酸取代以提供第一Cys殘基，其中該第二MHC多肽包含胺基酸取代以提供第二Cys殘基，且其中該雙硫鍵係介於該第一與該第二Cys殘基之間。
  16. 如請求項1至15中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多肽包含介於以下之間的雙硫鍵：i)存在於介於該WT-1肽表位與該第一MHC第I型多肽之間的連接子之Cys，其中該第一MHC第I型多肽係β2M多肽；與ii)經由Y84C取代導入至該第二MHC第I型多肽中之Cys殘基，其中該第二MHC第I型多肽係MHC第I型重鏈多肽。
  17. 如請求項1至15中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多肽包含介於以下之間的雙硫鍵：i)經由R12C取代導入至該第一MHC第I型多肽中之Cys殘基，其中該第一MHC第I型多肽係β2M多肽；與ii)經由A236C取代導入至該第二MHC第I型多肽中之Cys殘基，其中該第二MHC第I型多肽係MHC第I型重鏈多肽。
  18. 如請求項1至15中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多肽包含第一雙硫鍵和第二雙硫鍵，該第一雙硫鍵介於以下之間：i)存在於介於該WT-1肽表位與該第一MHC第I型多肽之間的連接子之Cys，其中該第一MHC第I型多肽係β2M多肽；與ii)經由Y84C取代導入至該第二MHC第I型多肽中之Cys殘基，其中該第二MHC第I型多肽係MHC第I型重鏈多肽，且該第二雙硫鍵介於以下之間：i)經由R12C取代導入至該β2M多肽中之Cys殘基；與ii)經由A236C取代導入至該MHC第I型重鏈多肽中之Cys殘基。
  19. 如請求項16或18之T細胞調控性多聚體多肽，其中介於該WT-1肽表位與該第一MHC之間的該連接子係GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：33)，其中n係1、2、3、4、5、6、7、8或9。
  20. 如請求項1至19中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該WT-1肽表位具有9個胺基酸的長度。
  21. 如請求項1至20中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該Ig Fc多肽包含圖4D、圖4E、圖4F、圖4G及圖4H描繪之胺基酸序列中一者。
  22. 如請求項1至21中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該WT-1肽包含該胺基酸序列302-310(RVPGVAPTL)(SEQ ID NO：80)、302-310；V303Y (RYPGVAPTL)(SEQ ID NO：81)、126-134；M127Y (RYFPNAPYL)(SEQ ID NO：82)及417-425；W418Y (RYPSCQKKF)(SEQ ID NO：83)。
  23. 如請求項1至21中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該第一或該第二MHC多肽包含與圖6描繪之HLA-A*2402胺基酸序列之胺基酸25-299具有至少95%胺基酸序列同一性之胺基酸序列。
  24. 如請求項1至23中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該第一MHC多肽係β2M多肽，且其中該第二MHC多肽包含與HLA-A24多肽具有至少95%胺基酸序列同一性之胺基酸序列，其中該表位係選自由下列所組成之群組：302-310(RVPGVAPTL)(SEQ ID NO：80)、302-310；V303Y(RYPGVAPTL)(SEQ ID NO：81)、126-134；M127Y(RYFPNAPYL)(SEQ ID NO：82)及417-425；W418Y(RYPSCQKKF)(SEQ ID NO：83)，且其中該Ig Fc多肽包含圖4G或圖4H描繪之胺基酸序列。
  25. 如請求項1之T細胞調控性多聚體多肽，其中： a)該第一多肽包含圖13B描繪之胺基酸序列；且 b)該第二多肽包含圖10B描繪之胺基酸序列。
  26. 如請求項1之T細胞調控性多聚體多肽，其中： a)該第一多肽包含圖12B描繪之胺基酸序列；且 b)該第二多肽包含圖10B描繪之胺基酸序列。
  27. 如請求項1至26中任一項之T細胞調控性多聚體多肽，其中該多聚體多肽包含第一及第二異二聚體，且其中該第一及第二異二聚體係藉由介於該第一及第二異二聚體之該Ig Fc多肽之間的一或多個雙硫鍵共價連接。
  28. 一種核酸，其包含編碼如請求項1至27中任一項所述之第一或第二多肽之核苷酸序列。
  29. 一種表現載體，其包含如請求項28之核酸。
  30. 一種選擇性調控對Wilms氏瘤-1(WT-1)表位具特異性之T細胞的活性之方法，該方法包含使該T細胞與如請求項1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽接觸，其中該接觸選擇性調控該WT-1表位特異性T細胞的活性。
  31. 一種治療患有癌症之患者之方法，該方法包含向該患者投予有效量的包含如請求項1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽之醫藥組成物。
  32. 如請求項31之方法，其中該癌症係急性骨髓樣白血病、骨髓瘤、卵巢癌、胰臟癌、非小細胞肺癌、結直腸癌、乳癌、Wilms氏瘤、間皮瘤、軟組織肉瘤、神經胚細胞瘤或腎胚細胞瘤。
  33. 如請求項31或32之方法，其進一步包含向該個體投予一或多種檢查點抑制劑。
  34. 如請求項33之方法，其中該檢查點抑制劑係與選自由CD27、CD28、CD40、CD122、CD96、CD73、CD47、OX40、GITR、CSF1R、JAK、PI3K δ、PI3K γ、TAM、精胺酸酶、CD137、ICOS、A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、LAG3、TIM3、VISTA、CD96、TIGIT、CD122、PD-1、PD-L1及PD-L2所組成之群組的多肽結合之抗體。
  35. 如請求項34之方法，其中該檢查點抑制劑係對PD-1、PD-L1或CTLA4具特異性之抗體。
  36. 如請求項34或35之方法，其中該一或多種檢查點抑制劑係選自由下列所組成之群組：尼沃魯單抗(nivolumab)、派姆單抗(pembrolizumab)、匹利珠單抗(pidilizumab)、AMP-224、MPDL3280A、MDX-1105、MEDI-4736、艾維路單抗(arelumab)、伊匹單抗(ipilimumab)、曲美木單抗(tremelimumab)、匹利珠單抗、IMP321、MGA271、BMS-986016、立魯單抗(lirilumab)、烏瑞魯單抗(urelumab)、PF-05082566、IPH2101、MEDI-6469、CP-870,893、莫格利珠單抗(Mogamulizumab)、瓦里木單抗(Varlilumab)、艾維路單抗(Avelumab)、加利昔單抗(Galiximab)、AMP-514、AUNP 12、因多莫得(Indoximod)、NLG-919、INCB024360、KN035及彼等之組合。
  37. 一種調控個體之免疫反應之方法，該方法包含向該個體投予有效量的如請求項1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽， 其中該投予誘導表位特異性T細胞反應及非表位特異性T細胞反應，且 其中該表位特異性T細胞反應與該非表位特異性T細胞反應之比例係至少2：1。
  38. 一種選擇性遞送免疫調控性多肽至目標T細胞之方法，該方法包含使混合的T細胞族群與如請求項1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽接觸，其中該混合的T細胞族群包含該目標T細胞及非目標T細胞，其中該目標T細胞對存在於該T細胞調控性多聚體多肽內之該WT-1表位具特異性，且其中該接觸遞送存在於該T細胞調控性多聚體多肽內之該一或多種免疫調控性多肽至該目標T細胞。
  39. 一種在獲自個體之混合的T細胞族群中偵測與WT-1表位結合之目標T細胞的存在之方法，該方法包含： a)使該混合的T細胞族群與如請求項1至27中任一項之T細胞調控性多聚體多肽在活體外接觸，其中該T細胞調控性多聚體多肽包含該WT-1表位；及 b)偵測T細胞因應該接觸之活化及/或增生，其中經活化及/或增生之T細胞指示該目標T細胞的存在。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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BR112016027897A2 (pt) * 2014-06-18 2017-10-24 Albert Einstein College Medicine Inc polipeptídio multimérico, ácido nucleico, vetor de expressão recombinante, célula hospedeira geneticamente modificada, composição, método, e, método de tratamento de uma infecção num indivíduo
KR20170092660A (ko) * 2014-12-11 2017-08-11 인터내셔널 인스티튜트 오브 캔서 이무놀로지 인코퍼레이티드 혈관 신생병의 면역 요법
CA3070484A1 (en) * 2017-09-07 2019-03-14 Cue Biopharma, Inc. Multimeric t-cell modulatory polypeptides and methods of use thereof
EP3737689A4 (en) * 2018-01-09 2021-12-01 Cue Biopharma, Inc. MULTIMERIC T CELL-MODULATING POLYPEPTIDES AND METHOD OF USING THEREOF
CA3115240A1 (en) * 2018-10-05 2020-04-09 International Institute Of Cancer Immunology, Inc. Composition for preventing or treating benign tumor

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