TW202142246A - 抑制多種具抗藥性菌株之綠膿桿菌及含有該綠膿桿菌之組合物 - Google Patents

抑制多種具抗藥性菌株之綠膿桿菌及含有該綠膿桿菌之組合物 Download PDF

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陳建華
黃建文
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本發明係揭露一種抑制多種具抗藥性菌株之綠膿桿菌及含有該綠膿桿菌之組合物,其中,該綠膿桿菌係具有抑制多種具抗藥性微生物生長之能力,故能用於治療臨床上細菌感染及其相關併發症,並且有效避免微生物產生抗藥性之風險。

Description

抑制多種具抗藥性菌株之綠膿桿菌及含有該綠膿桿菌之組合物
本發明係有關於一種微生物組合物及其用途,特別係指一種抑制多種具抗藥性菌株之綠膿桿菌及含有該綠膿桿菌之組合物。
按,鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii )廣泛地存在於大自然中,並且喜歡溫暖潮濕之環境,當病患進行治療而接受侵入性管路,如尿管、胸管、中央靜脈導管等時,充滿水及溫暖之管內空間形成鮑氏不動桿菌最佳生長環境,使得臨床上開始發生患者感染鮑氏不動桿菌之案例。隨著抗生素被大量濫用,誘使鮑氏不動桿菌產生多重抗藥性,而具多重抗藥性之鮑氏不動桿菌目前臨床上並無有效抗生素能夠將之殺死,造成臨床治療上所面臨之照護難題。
抗甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus ;MRASA)係為一種特殊之金黃色葡萄球菌;受到抗甲氧西林金黃色葡萄球菌多會導致皮膚感染、軟組織感染、肺炎、敗血症、心內膜炎等病症,並會透過接觸到患者而被傳染。基於抗甲氧西林金黃色葡萄球菌幾乎對於所有青黴素類抗生素具有抗藥性,並且為環境中普遍存在之細菌,因此,常會於群體中爆發流行性之感染,並且根據統計,住院患者若感染抗甲氧西林金黃色葡萄球菌,不僅會增加治療時間,並且死亡率也會大幅提昇。
本發明之主要目的係在於提供一種綠膿桿菌,其係能夠有效地抑制多種具抗藥性微生物之生長,而能用於治療臨床上細菌感染及其相關併發症,並且有效避免微生物產生抗藥性之風險。
本發明之另一目的係在於提供一種含有該綠膿桿菌之組合物,其係透過將本發明所揭綠膿桿菌或其培養液製備為一組合物,而透過投予有效量之組合物至個體或環境中,能夠抑制或避免多種具抗藥性微生物生長,達到降低感染及其併發症發生之功效。
緣是,為達成上述目的,本發明係揭露一種綠膿桿菌或其代謝物用於製備抑制抗藥性微生物生長之組合物之用途。
其中,該綠膿桿菌代謝物係為該綠膿桿菌之培養液。
於本發明之一實施例中,該綠膿桿菌或其代謝物係具有同時抑制兩種以上抗藥性微生物之能力,其中,該抗藥性微生物係為鮑氏不動桿菌及抗甲氧西林金黃色葡萄球菌。
為能增加本發明所揭組合物之應用性,該組合物係能夠依據使用需求而被製備為不同劑型或不同投予方式,舉例來說,該綠膿桿菌或其代謝物與一藥學上可接受之載劑組合而成一藥品,而藉由投予有效量至一個體,可達到預防或治療抗藥性微生物所引起之感染或相關病症之功效;或該綠膿桿菌或其代謝物得被製備為一外用抗菌劑,可用於環境中,以有效避免抗藥性微生物於如醫療管路等環境中生長,進而預防細菌感染之發生。
本發明係揭露一種綠膿桿菌或其代謝物之用途,具體來說,本發明所揭綠膿桿菌或其代謝物係具有同時抑制多種抗藥性微生物之能力,特別是用於抑制鮑氏不動桿菌及抗甲氧西林金黃色葡萄球菌。
以下,為能說明本發明之技術特徵及其所能達成之功效,將舉若干實例作進一步說明如後。
以下實例所使用之綠膿桿菌菌株PA3596、PA3613、PA3625、PA3681、PA3712、PA3715、PA3744、PA3772,係為本案發明人於臨床上所收集而得者。
實例一:綠膿桿菌對於鮑氏不動桿菌之抑菌試驗
進行由臨床收取8株綠膿桿菌(P. aeruginosa )菌株(PA3596、PA3613、PA3625、PA3681、PA3712、PA3715、PA3744、PA3772)以及寄存編號為ATCC10145之綠膿桿菌,分別進行培養,再分別收集各綠膿桿菌之菌落、培養液及培養過濾液,其中,培養過濾液係將培養液以0.22μm濾膜進行過濾後所得之液體。
將各綠膿桿菌之菌落、培養液及培養過濾液分別點於鋪有不同鮑氏不動桿菌菌株之培養盤上,經過16小時培養後,觀察其抑菌圈,結果如圖1所示,並分別測量抑菌圈之直徑,結果如下表1所示,其中,「-」表示未檢測到任何抑菌圈。
由圖1及表1之結果可知,本發明所揭各綠膿桿菌菌株之菌落或培養液對於不同鮑氏不動桿菌菌株皆有極佳之抑菌能力。
表1:各綠膿桿菌菌株對於不同鮑氏不動桿菌菌株之抑菌結果
  抑菌圈大小(公分)(3重複)
  鮑氏不動桿菌菌株
  AB3652 AB3659 AB3748 AB3768
綠膿桿菌菌株 菌落 培養過濾液 菌落 培養過濾液 菌落 培養過濾液 菌落 培養過濾液
PA3596 -/-/-  -/-/- 0.4/0.4/0.4 0.8/0.6/0.8 0.4/0.4/- -/-/- -/-/- -/-/-
PA3613  -/-/-  -/-/- -/-/- 0.4/0.5/0.7 -/-/- -/-/- -/-/- -/-/-
PA3625  -/-/-  -/0.4/0.4 -/-/- -/-/- -/-/- -/-/- -/-/- -/-/0.4
PA3681 0.6/-/0.6  0.4/0.3/- -/-/- 0.2/0.2/0.3 -/0.4/- -/-/- -/-/- 0.4/0.3/0.4
PA3712  -/-/-  0.3/-/- -/-/- -/0.2/- -/-/- -/-/- -/-/- 0.3/-/-
PA3715 -/-/-  -/-/0.4 -/-/- 0.3/0.3/0.4 -/-/- -/-/- -/-/- -/-/0.4
PA3744 -/0.4/-  -/-/- -/-/- -/-/- 0.3/-/0.2 -/-/- 0.6/0.6/- -/-/-
PA3772 0.4/0.6/0.6 0.4/0.3/0.4 -/-/- 0.5/0.6/0.6 0.4/0.4/0.4 -/-/- 0.5/0.6/0.8 0.4/0.3/0.4
ATCC10145 -/-/- 0.4/0.3/- -/-/- 0/0.8/0.8 -/-/- -/-/- -/-/- 04./0.3/0.3
實例二:綠膿桿菌對於抗甲氧西林金黃色葡萄球菌之抑菌試驗
如同實例一所述者,取各綠膿桿菌菌株之菌落及培養過濾液後,分別點於鋪有不同抗甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株之培養盤上,經過16小時培養後,觀察其抑菌圈,結果如圖2所示,並分別測量抑菌圈之直徑,結果如下表2所示,其中,「-」表示未檢測到任何抑菌圈。
由圖2及表2之結果顯示,本發明所揭綠膿桿菌菌株之菌落或培養液對於所有抗甲氧西林金黃色葡萄球菌皆有極佳之抑制能力。
表2:各綠膿桿菌菌株對於不同抗甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株之抑菌結果
  抑菌圈大小(公分)(3重複)
  抗甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株
  MASA3813 MASA3981 MRSA1 MRSA2
綠膿桿菌菌株 菌落 培養過濾液 菌落 培養過濾液 菌落 培養過濾液 菌落 培養過濾液
PA3596 0.8/0.9/0.8 0.4/0.3/0.4 0.8/0.6/0.7 0.4/0.4/0.6 1.1/1/1 0.4/0.5/0.4 0.8/0.6/0.6 0.3/0.3/0.3
PA3613 0.5/0.5/0.4 -/-/- 0.5/0.5/0.6 0.6/0.5/0.5 0.7/0.6/0.7 0.3/0.4/0.5 0.5/0.3/0.4 0.4/0.3/0.3
PA3625 0.8/0.7/0.8 -/-/- 0.6/0.5/0.6 0.3/0.4/0.3 0.7/0.6/0.7 0.3/0.4/0.4 0.7/0.5/0.7 0.4/0.3/0.3
PA3681 0.9/0.9/0.8 -/-/-  0.8/1/0.9 0.4/0.6/0.5 0.6/0.7/0.6 0.8/0.9/0.8 0.6/0.7/0.6 0.4/0.4/0.4
PA3712 -/-/- -/-/-  -/-/- -/-/- -/-/- -/-/- 0.4/0.4/0.4 -/-/-
PA3715 -/-/- -/-/-  -/-/- -/-/- 0.3/0.4/0.3 -/-/- -/-/- -/-/-
PA3744 0.8/0.7/0.7 -/-/- 0.4/0.5/0.4 0.7/0.7/- 0.7/0.7/0.7 -/0.4/0.4 0.5/0.6/0.6 -/-/0.4
PA3772 0.9/0.8/0.8 0.7/0.7/0.6 1/0.6/0.5 0.4/0.6/0.7 1.2/0.9/1 0.4/0.3/0.4 0.5/0.6/0.7 0.4/0.4/0.4
ATCC10145 -/-/- -/-/- -/-/- -/-/- 0.2/0.3/- -/-/- 0.4/0.3/0.6 -/-/-
實例三:綠膿桿菌培養液分析試驗
將實例一中所述各綠膿桿菌菌株之胞外培養液經萃取及冷凍乾燥後,以質譜分析其中phenazine-1-carboxamide之含量,結果如圖3所示。
由圖3之結果可知,本發明所揭綠膿桿菌菌株PA3596、PA3681與PA3772有高含量的phenazine-1-carboxamide。根據先前研究(Xu, L. Q.  et. al, Isolation and determination of four potential antimicrobial components from Pseudomonas aeruginosa extracts. International journal of medical sciences, 14(13), 1368, 2017; Cardozo, V. F., et. al, Antibacterial activity of extracellular compounds produced by a Pseudomonas strain against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains. Annals of clinical microbiology and antimicrobials, 12(1), 12, 2013)可知,而phenazine-1-carboxamide係為具有抗菌能力之活性成分,故由此結果可知推知,本發明所揭綠膿桿菌係透過如phenazine-1-carboxamide之活性成分,達到抑制多種抗藥性微生物之功效。
圖1A係為觀察綠膿桿菌菌株PA3772菌落及習知綠膿桿菌(寄存編號為ATCC10145)抑制鮑氏不動桿菌之結果。 圖1B係為觀察綠膿桿菌菌株PA3772培養過濾液及習知綠膿桿菌(寄存編號為ATCC10145)抑制鮑氏不動桿菌之結果。 圖2A係為觀察綠膿桿菌菌株PA3772菌落及習知綠膿桿菌(寄存編號為ATCC10145)抑制抗甲氧西林金黃色葡萄球菌之結果。 圖2B係為觀察綠膿桿菌菌株PA3772培養過濾液及習知綠膿桿菌(寄存編號為ATCC10145)抑制抗甲氧西林金黃色葡萄球菌之結果。 圖3係為各綠膿桿菌菌株培養液以質譜分析其內phenazine-1-carboxamide含量之結果。

Claims (6)

  1. 一種綠膿桿菌或其代謝物用於製備抑制抗藥性微生物生長之組合物之用途。
  2. 如請求項1所述用途,其中,該抗藥性微生物係為鮑氏不動桿菌。
  3. 如請求項1所述用途,其中,該抗藥性微生物係為抗甲氧西林金黃色葡萄球菌。
  4. 如請求項1所述用途,其中,該綠膿桿菌代謝物係為該綠膿桿菌之培養液。
  5. 如請求項1所述用途,其中,該組合物係為一藥品。
  6. 如請求項1所述用途,其中,該組合物係為一外用抗菌劑。
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