TW202126328A - 靶向非洲豬瘟病毒之疫苗與免疫球蛋白、製備其等之方法、及使用其等之方法 - Google Patents

Abstract

本發明提供分離及製備活非洲豬瘟（ASF）病毒（ASFV）的方法及由整個ASF病毒粒子、病毒組分、及/或免疫抑制蛋白因子構成之ASFV疫苗。該ASFV疫苗可用於給豬及野豬免疫接種，或可用於給除豬或野豬之外之物種（諸如家禽、牛、山羊、兔、驢或馬）免疫接種，以產生對ASFV具有廣譜特異性之多株免疫球蛋白。接著可萃取且純化該等ASFV特異性免疫球蛋白。該等ASFV特異性免疫球蛋白可為受ASF感染之豬或野豬提供緊急治療，或可為處於ASF之風險下之豬或野豬（例如可能已經暴露於ASFV或受ASFV感染之個體者）提供預防性治療。

Description

靶向非洲豬瘟病毒之疫苗與免疫球蛋白、製備其等之方法、及使用其等之方法

本發明大體上係關於用於主動及/或被動免疫接種以治療及預防非洲豬瘟（African Swine Fever，ASF）病毒（African Swine Fever Virus，ASFV）感染之組成物。本發明亦係關於分離及製備ASF整個病毒粒子與ASF個別病毒組分之組合的方法，該組合用作豬及/或非豬物種宿主中之疫苗，目的係為了產生對ASFV具有特異性之免疫球蛋白。本文所揭示之對ASFV具有特異性之免疫球蛋白為受ASFV感染或易受ASFV感染之豬及野豬提供廣譜免疫。相關申請案之交叉引用

本申請案主張2019年9月26日申請之美國臨時申請案62/906,357之權益，該申請案以全文引用之方式併入本文中。序列表

本申請案含有序列表，該等序列表已以ASCII格式以電子方式提出且以全文引用之方式併入本文中。該ASCII複本創建於2020年9月24日，命名為Seq. Listings for 1401870.00006.txt，且大小為8,548位元組。

ASF為由ASFV所引起之高度接觸傳染性出血性疾病。（USDA監督計劃（USDA Surveillance Program）, 第3頁）。ASF影響豬科中之哺乳動物，包括家養豬、野生豬及歐亞野豬。（USDA監督計劃, 第3頁）。在二十世紀初首次在東非鑑認出該病毒，其在大多數撒哈拉以南非洲國家自土生疣豬擴散至家養豬群體。（Sánchez-Cordón等人,African swine fever: A re-emerging viral disease threatening the global pig industry , 233 Vet. J. 41, 41（2018））。非洲疣豬及叢林豬係ASFV之天然帶病原宿主，幾乎不顯示臨床徵象且保持持久感染。（Dixon等人,African swine fever virus evasion of host defences , 266 Virus Res. 25, 25（2019））。相比之下，家養豬、野生豬或野豬之感染則會導致急性出血熱，死亡率高。（Dixon等人, 第25頁）。

在1950年代後期，ASFV擴散至歐洲，且之後擴散至南美及加勒比海。（Sánchez-Cordón等人, 第41頁）。在無有效疫苗之情況下，用於控制病毒擴散之方法僅限於將受感染及暴露之豬隔離及宰殺。（Netherton等人,Identification and Immunogenicity of African Swine Fever Virus Antigens , 10 Front. Immun. 1, 1（2019））。在1990年代中期，ASF自非洲外地區得到成功根除，但到2007年，病毒再次經歷第二次洲際擴散，且擴散至喬治亞及東歐。（Sánchez-Cordón等人, 第41頁）。最近，在中國、越南、蒙古、柬埔寨、及韓國已報告ASF爆發（FAO網站；ASF情況更新）。ASF擴散至中國尤其受到關注，因為中國係世界最大之豬肉生產國。（Netherton等人, 第1頁）。

ASFV自身係在巨噬細胞、單核球、及樹突狀細胞之細胞質中複製的大型複雜雙股DNA病毒。（Dixon等人, 第25頁）。傳統不活化疫苗已為不成功的且減毒活疫苗未能產生所需功效。（Sánchez-Cordón等人, 第44頁）。與研發成功的ASF疫苗相關之挑戰被認為係由於未能理解病毒如何調節宿主對感染的反應及未鑑別之保護性抗原。（Sánchez-Cordón等人, 第44頁）。

本發明之發明人已開發出一種分離活ASFV及病毒組分以製備包含整個病毒粒子、個別病毒結構蛋白、及涉及加劇感染之病毒組分（包括但不限於免疫抑制因子及/或宿主免疫因子）之ASFV疫苗的方法。在γ輻照後如此ASFV疫苗可用於給豬、野豬或易受ASF感染之其他物種主動免疫接種或接種疫苗。另外或替代地，活ASFV疫苗或經γ輻照之ASFV疫苗可用於給除豬或野豬以外之物種（諸如家禽、牛、兔、山羊、驢或馬）主動免疫接種或接種疫苗，以產生對ASFV具有廣譜特異性之多株免疫球蛋白。在一較佳實施方式中，使用該ASFV疫苗給諸如雞之產蛋家禽接種，並且接著可自蛋黃萃取及純化抗體或抗體部分。所產生之產蛋家禽抗體可用於預防病毒黏著、病毒擴散、治療ASF、預防ASF。來自家禽或鳥類之IgY同型的抗體特別適用於此等應用。

可投予該等ASFV特異性免疫球蛋白以用於緊急治療受ASFV感染之豬或野豬。緊急治療可包含非經腸及/或經口投予該等免疫球蛋白，例如藉由腹膜內或肌內注射及/或以食物組成物形式。另外或替代地，該等免疫球蛋白可藉由相同投予途徑作為預防性治療來投予。在一實施方式中，該等ASFV特異性免疫球蛋白可呈液體或凍乾粉末形式，經復水且接著可經腹膜內或肌內注射，較佳係以每公斤體重約0.5至約1.0 mg之注射劑量一週兩次持續一或多週，例如投予一或多種受ASFV感染或暴露之豬或野豬。或者，ASFV特異性免疫球蛋白可經口投予，以每公斤體重約1.0 mg之口服劑量，諸如添加至餵料中，每天一次持續連續約5天至約7天，例如投予一或多種受ASFV感染或暴露之豬或野豬。

在一實施方式中，本文揭示治療受感染之豬或野豬之ASFV感染之方法，該方法包含向該受感染之豬或野豬投予有效量之包含對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物。

本文亦揭示治療受感染之豬或野豬之ASFV感染之方法，其中該組成物係以提供為每公斤該受感染之豬或野豬的體重約0.5 mg至約1.0 mg的該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白之劑量的量投予。

在另一實例實施方式中，包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物係投予持續包含每週或連續7天至少一次之時間段。

在一個方面，包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物係藉由肌內或腹膜內注射非經腸投予。

在另一方面，包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物為經口投予的食品。

在另一實施方式中係一種在處於ASF病毒感染之風險下之豬或野豬中預防ASF病毒感染、降低ASF病毒感染之發病率、及/或降低ASF病毒感染之嚴重程度之方法，該方法包含向該豬或野豬投予有效量之包含對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物。

在一個方面，該組成物以提供為每公斤該處於其風險下之豬或野豬的體重約0.5 mg至約1.0 mg的該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白之劑量的量投予。

在另一方面，包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物係投予持續包含每週或連續7天至少一次之時間段。

亦應理解，本發明考慮包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物可非經腸投予。

在另一方面，包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物為經口投予的食品。

本文所揭示之另一實施方式係產生ASFV特異性免疫球蛋白之方法，其中將由整個ASF病毒粒子、病毒組分、及/或免疫抑制蛋白因子構成之ASFV疫苗投予非豬物種宿主，以用於產生ASFV特異性免疫球蛋白。

在一個實例實施方式中，該宿主為產蛋家禽。

在本文所揭示之另一實例實施方式中係單位劑型，其包含治療或預防有效量之包含對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物。

在另一實施方式中，該組成物係經調配用於經口投予之食品。

本文亦揭示在處於ASF病毒感染之風險下之豬或野豬中預防ASF病毒感染、降低ASF病毒感染之發病率、及/或降低ASF病毒感染之嚴重程度之方法，該方法包含向該豬或野豬投予有效量之包含ASF病毒組分之ASFV疫苗組成物。

在一個方面，該等ASF病毒組分為非活性的。

在另一方面，該ASFV疫苗組成物係藉由肌內或腹膜內注射非經腸投予。

亦揭示者為一實例實施方式，其中該ASFV疫苗組成物係以提供為每隻豬或野豬約0.05 mg至約1.0 mg的該等ASF病毒組分之劑量的量投予。

在另一實施方式中，係單位劑型，其包含有效量之包含ASF病毒組分之ASFV疫苗組成物。

在一個方面，該等ASF病毒組分係衍生自受ASF感染之脾單核細胞（spleen mononuclear cell，SMNC）、受ASF感染之周邊血液及單核細胞（peripheral blood and mononuclear cell，PBMC）、及/或受ASF感染之初生肺泡巨噬細胞（primary alveolar macrophage，PAM）。

在另一方面，該等ASF病毒組分為不活化的。

在另一方面，該ASFV疫苗用於治療及/或預防處於ASF感染之風險下之豬或野豬的ASF感染。

在一實施方式中，對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白，其用於治療及/或預防處於ASF感染之風險下之豬或野豬的ASF感染。

在本文中應理解且經考慮，該ASFV疫苗可適用於預防性治療豬或野豬的ASF感染。在另一實施方式中，該ASFV疫苗及該等ASFV特異性免疫球蛋白可在治療攝生法中組合使用及/或一起投予豬或野豬。

定義

下文提供一些定義。然而，定義可位於下文「實施方式」章節中，且以上標題「定義」並不意謂「實施方式」章節中之該等揭示內容並非定義。

如本文中所使用，「約（about）」、「大約（approximately）」及「實質上（substantially）」被理解為係指數值範圍內之數字，例如參考數字之-10%至+10%、較佳參考數字之-5%至+5%、更佳參考數字之-1%至+1%、最佳參考數字之-0.1%至+0.1%的範圍。

本文中之所有數值範圍應理解為包括該範圍內之所有整數、全部或分數。此外，此等數值範圍應解釋為對涉及該範圍內之任何數字或數字子集的請求項提供支持。舉例而言，1至10之揭示內容應解釋為支持1至8、3至7、1至9、3.6至4.6、3.5至9.9等之範圍。

除非上下文另外明確規定，否則如本發明及所附申請專利範圍中所用，單數形式「一（a/an）」及「該（the）」包括複數個指示物。因此，舉例而言，提及「一組分」或「該組分」包括兩個或更多個組分。

措辭「包含（comprise/comprises/comprising）」應解釋為包括性而非排他性的。同樣，除非自上下文明確禁止這樣構建，否則術語「包括（include/including）」、「含有（containing）」及「具有（having）」應全部被解釋為包括性的。另外，就此而言，此等術語指定所陳述特徵之存在，但不排除額外或其他特徵之存在。

然而，本文所揭示之組成物及方法可能缺乏本文未特定揭示之任何要素。因此，使用術語「包含」之實施方式的揭示內容為（i）具有經鑑別之組分或步驟以及額外組分或步驟之實施方式的揭示內容，（ii）「基本上由經鑑別之組分或步驟組成」之實施方式的揭示內容，及（iii）「由經鑑別之組分或步驟組成」之實施方式的揭示內容。本文所揭示之任何實施方式均可與本文所揭示之任何其他實施方式組合。

「X及/或Y（X and/or Y）」之上下文中使用的術語「及/或（and/or）」應解釋為「X」、或「Y」或「X及Y（X and Y）」。類似地，「X或Y中之至少一者（at least one of X or Y）」應解釋為「X」、或「Y」或「X及Y」。

當術語「實例（example）」及「諸如（such as）」在本文中使用時，尤其緊接著術語列表時，其僅為例示性及說明性的，且不應被視為排他性或全面的。

「個體（subject/individual）」為哺乳動物，較佳為豬或野豬。如本文所用，「有效量（effective amount）」為在個體中預防感染、治療疾病或醫學病況，或更一般而言，減少症狀、控制疾病進展或減弱病毒感染持續一定時間段的量。

術語「豬（pig）」係指家養豬、野豬或野生豬。

術語「豬（swine）」係指家養豬、野豬或野生豬。

術語「家禽（fowl）」係指野生或家養產蛋家禽，諸如雞、鴨、天鵝、鵝、火雞、孔雀、珠雞、鴕鳥、家鴿、鵪鶉、雉或野鴿。

術語「非易感物種（non-susceptible species）」或「非易感宿主（non-susceptible host）」係指不易受ASFV感染或一般而言，不易受ASF感染之物種。

術語「免疫球蛋白（immunoglobulin）」或「抗體（antibody）」係指由白血球及淋巴球產生之糖蛋白分子且藉由特異性識別且結合於特定抗原及幫助其中和而參與機體免疫系統及免疫反應。

術語「抗原（antigen）」或「免疫原（immunogen）」或「半抗原（hapten）」係對機體而言係外來的或被認為係外來的且單獨或在與較大分子形成複合物之後引起免疫反應之物質或結構或小分子。術語「抗原」、「免疫原」或「半抗原」可在本發明中互換使用。

術語「被動免疫（passive immunity）」或「被動免疫接種（passive immunization）」係指作為將抗體自另一個人、動物、物種或其他外部來源引入個體中之結果的免疫。

術語「主動免疫（active immunity）」或「主動免疫接種（active immunization）」係指作為將抗原天然及/或人工引入個體中之結果的免疫。

術語「佐劑（adjuvant）」或「免疫佐劑（immunologic adjuvant）」係指可添加至疫苗中以刺激個體免疫系統反應之物質。

術語「免疫抑制蛋白因子（immunosuppressive protein factor）」及/或「宿主過度反應性免疫因子（host over-reactive immune factor）」係指可包括但不限於細胞激素（例如，TNF家族之細胞激素）、促炎性細胞激素（例如，IL-17F及/或干擾素）及/或下調之抗炎性細胞激素（例如，IL10）的因子。術語「免疫抑制蛋白因子」及/或「宿主過度反應性免疫因子」可在本文中互換使用，且一般係指逃避先天性及/或適應性免疫反應之因子。

術語「治療（treatment/treat）」包括預防性或預防性治療（預防及/或減緩所靶向之病理性病況、感染、病症或疾病發展）及治癒性、治療性或疾病改善性治療兩者，包括以下治療性措施：治癒、減緩、減少所診斷之病理性病況、感染、病症或疾病之症狀、及/或中止該所診斷之病理性病況、感染、病症或疾病之進展；及治療處於接觸疾病或感染或疑似已接觸疾病或感染之個體，以及患病或已被診斷患有病理性病況、感染、病症或疾病之個體。術語「治療」未必指示治療個體直至完全恢復。術語「治療」亦指維持及/或促成未患有病理性病況、感染、病症或疾病，但可能容易罹患病理性病況、感染、病症或疾病之個體的健康。術語「治療」亦意欲包括增強或以其他方式增強一或多種初步預防性或治療性措施。作為非限制性實例，可由醫生、保健專家、獸醫、獸醫專家、動物馴養員或其他人類進行治療。

如本文所使用，術語「單位劑型（unit dosage form）」係指適用作個體之單一劑量的物理離散單元，各單元含有足以產生所需功效之量的預定量之本文所揭示之組成物，以及醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑或媒劑。單位劑型之規格視所用之特定化合物、待達成之功效及與宿主中各化合物相關之藥效學而定。

術語「無菌（sterile）」理解為意謂不含任何細菌或其他活微生物。

如本文所使用之術語「醫藥學上可接受（pharmaceutically acceptable）」係指當向個體投予時不會引起實質不良過敏或免疫反應之物質。

除非另外表述，否則本文中所表述之所有百分比均按組成物之總重量計。當本文中提及pH時，值對應於用標準設備在約25℃下量測之pH。「環境溫度（ambient temperature）」或「室溫（room temperature）」在約15℃至約25℃之間，且環境壓力為約100 kPa。

如本文所使用，術語「mM」係指水溶液之體積莫耳濃度單位，其呈mmol/L。舉例而言，1.0 mM等於1.0 mmol/L。

如提及特定組分所使用之術語「實質上沒有（substantially no）」、「基本上不含（essentially free）」或「實質上不含（substantially free）」意謂所存在之組分中之任一者佔不超過約3.0重量%，諸如不超過約2.0重量%、不超過約1.0重量%、較佳不超過約0.5重量%或更佳不超過約0.1重量%。

術語「食物（food）」、「食品（food product）」及「食物組成物（food composition）」意指意欲由動物（包括人類）攝取且向該動物提供至少一種營養物的產品或組成物。食品之較佳實施方式包括蛋白質、碳水化合物、脂質、維生素或礦物質中之至少一者。

在本發明內，術語「免疫接種（immunize）」或「接種疫苗（vaccinate）」可互換使用。 實施方式ASFV 疫苗

本發明大體上係關於一種ASFV疫苗，其包含全活ASFV粒子及天然表現之ASF病毒組分的組合，視情況在無菌緩衝液中稀釋，例如在無菌生理鹽水緩衝液中稀釋至約10%。ASFV疫苗可用於給非易感物種宿主主動免疫接種或接種疫苗，以產生ASFV特異性免疫球蛋白。非易感物種宿主可為非豬哺乳動物宿主，例如家禽、馬、牛、驢、山羊或兔。

本發明之另一方面大體上係關於一種產生ASFV疫苗之方法。在一較佳實施方式中，ASFV抗原係由受ASF感染之豬或野豬獲得。在一個實施方式中，血液可自受ASF感染之豬或野豬抽取且藉由抗凝劑收集至血液收集管中。血液收集管可例如在約4℃下以約1,500 x g離心約15分鐘，以獲得膚色血球層。替代地，可藉由在聚蔗糖（Ficoll）上進行標準梯度離心或熟習此項技術者已知之其他方法將含血漿之周邊血液及單核細胞（PBMC）與血液分離。另外，任何紅血球（red blood cell，RBC）可使用包含約0.83% NH₄ Cl之溶液或藉由熟習此項技術者已知之任何其他方法溶解。

所收集及/或分離之PBMC可藉由一或多次凍融循環來破壞及/或溶解，例如置放於乾冰乙醇浴（約-72℃）中持續第一預定時間段，且隨後置放於室溫下持續第二預定時間段。此過程可重複一或多次。經破壞之PBMC可在第二離心步驟中離心，例如在約4℃下以約800 x g離心約15分鐘。上清液較佳含有整個病毒粒子、病毒組分、免疫抑制蛋白因子及宿主過度反應性免疫因子，且可收集且在預定pH下用緩衝液（諸如無菌生理鹽水緩衝液）稀釋一或多次，例如10次。所得ASFV疫苗可在低於室溫之溫度下以一或多個部分儲存，例如在約-20℃或低於約-20℃下以多個約1 ml等分試樣儲存。在一個實例實施方式中，可在冷凍及儲存之前評估上清液中之蛋白質含量及/或病毒效價。

在另一實施方式中，ASFV疫苗可由諸如脾之受ASFV感染的淋巴器官獲得。可自受ASFV感染之豬或野豬採集脾且將其解剖成複數個組織切片。較佳地，採集之後立即解剖。組織切片可添加至緩衝液中且在冰上均質化。可離心均質化組織混合物以產生單細胞懸浮液，例如在預定時間及預定溫度下以約800 x g離心，例如在約4℃下離心約15分鐘。單細胞懸浮液可含有RBC及脾單核細胞（SMNC）。RBC可使用包含約0.83% NH₄ Cl之溶液或藉由熟習此項技術者已知之任何其他方法溶解。SMNC可藉由熟習此項技術者已知之任何方法收集及溶解。細胞碎片可藉由離心移除且可收集上清液。

上清液較佳含有整個病毒粒子、病毒組分、免疫抑制蛋白因子，且SMNC可藉由聚蔗糖梯度離心收集。可收集上清液及SMNC，且使其進行一或多次凍融循環，其中混合物可降至低溫，例如置放於乾冰乙醇浴（約-70℃）中持續第一預定時間段，且隨後置放於室溫下持續第二預定時間段。上清液及經破壞SMNC之混合物可在約4℃下以約800 x g離心約15分鐘。可收集上清液且在預定pH下用緩衝液（諸如無菌生理鹽水緩衝液）稀釋一或多次，例如10次。所得ASFV疫苗可在低於室溫之溫度下儲存以一或多個部分儲存，例如在-20℃或低於-20℃，較佳在約-70℃下以多個約1 ml等分試樣儲存。在另一實例實施方式中，可在冷凍及儲存之前評估上清液中之蛋白質含量及/或病毒效價。

在另一實施方式中，自健康豬收集新鮮初生肺泡巨噬細胞（PAM），且將其塗鋪在細胞培養燒瓶中用含有胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）之完全培養基培養隔夜。在約24小時之後，可洗滌細胞單層，且可將含有感染有ASFV儲備液之血清的培養基添加至培養物中。可培養受ASF感染之PAM直至在培養物中觀察到至少約75%細胞病變效應，例如在ASFV感染後約五至約七天之後。可採集、收集PAM及培養物上清液，且使其進行一或多次凍融循環，其中PAM混合物可降至低溫，例如置放於乾冰乙醇浴（約-70℃）中持續第一預定時間段，且隨後置放於室溫下持續第二預定時間段。上清液及經破壞PAM之混合物可在約4℃下以約800 x g離心約15分鐘。可收集上清液且在預定pH下用緩衝液（諸如無菌生理鹽水緩衝液）稀釋一或多次，例如10次。所得ASFV疫苗可在低於室溫之溫度下以一或多個部分儲存，例如在-20℃或低於-20℃，較佳在約-70℃下以多個約1 ml等分試樣儲存。在另一實例實施方式中，可在冷凍及儲存之前評估上清液中之蛋白質含量及/或病毒效價。

在一較佳實施方式中，ASFV疫苗組成物包含來自SMNC、PBMC及/或PAM中之一者或多於一者的蛋白質混合物、病毒粒子及病毒組分。

在本文中應理解且經考慮，ASFV疫苗組成物含有廣泛範圍之ASFV抗原（亦即綜合ASFV蛋白質）。應理解，可構成ASFV疫苗組成物之蛋白質或抗原可包括完整的全ASFV蛋白質及/或亦可包含所揭示之ASFV蛋白質之部分或區段。

本文亦揭示在使用之前使ASFV疫苗組成物不活化之方法。在一個實例實施方式中，ASFV疫苗組成物可使用γ輻照器在約30 kGy之劑量下輻照。在約30 kGy之劑量下，ASFV DNA受損，而病毒形態及病毒蛋白完整性一般得以保留。

另外或替代地，未經輻照之ASFV疫苗可用於給非豬哺乳動物宿主（諸如家禽、馬、牛、驢、山羊或兔）接種疫苗或免疫接種，諸如以產生ASFV特異性免疫球蛋白。ASFV 特異性免疫球蛋白

本發明之另一方面大體上係關於給非易感病物種宿主免疫接種或疫苗接種以產生ASFV特異性免疫球蛋白之方法。包含整個病毒粒子、病毒組分、免疫抑制蛋白因子及宿主過度反應性免疫因子之ASFV疫苗，例如於無菌生理鹽水緩衝液中之約10% ASFV疫苗的等分試樣（例如約1 mL）可解凍至預定溫度，渦旋且肌內注射至非豬哺乳動物宿主（諸如家禽、馬、牛、驢、山羊或兔）。在初始免疫接種及視情況選用之再免疫接種之後，宿主靜脈血液之樣品可藉由一般熟習此項技術者已知之各種方法收集。

在一較佳實施方式中，抗ASFV免疫球蛋白為IgY抗體，其藉由給諸如雞之產蛋家禽免疫接種或接種疫苗而產生。包含整個病毒粒子、病毒組分、及免疫抑制蛋白因子之ASFV疫苗，例如於無菌生理鹽水緩衝液中之約10% ASFV疫苗的等分試樣（例如約1 mL）可解凍至預定溫度，渦旋且肌內注射至產蛋家禽。較佳地，將ASFV疫苗分成等份（約100 μg蛋白質含量/份），其中一份注射於母雞之左胸且第二份注射於母雞之右胸中，視情況以大約相等體積量，諸如約500 ml注射於右胸且約500 ml注射於左胸。另外或替代地，在將ASFV疫苗注射於母雞之前，ASFV疫苗可用完全弗氏佐劑（complete Freund's adjuvant，CFA）以約1:1比率乳化。在另一實施方式中，後續免疫接種可以包括包含ASFV疫苗及不完全弗氏佐劑（incomplete Freund's adjuvant，IFA）之約1:1溶液的ASFV疫苗組成物。

可在初始免疫接種之後給母雞再免疫接種，例如在初始免疫接種之後約7天及/或在初始免疫接種之後約14天及/或在初始免疫之後約28天給母雞再免疫接種。在初始免疫接種及任何再免疫接種（例如，在初始免疫接種之後約七天）之後，可收集由經免疫接種之母雞產的蛋持續一或多天，以純化抗體IgY。或者，可在免疫接種期間持續地收集蛋。IgY抗體可經由水溶性部分由收集之蛋黃獲得。可將一或多個蛋黃彙集且用冷卻之3 mM HCl稀釋約10次，以得到最終pH為約5之懸浮液（用約10%乙酸調整）。懸浮液可例如在約-20℃下冷凍隔夜。將混合物解凍至預定溫度之後，可在大約4℃下以約13,000 x g離心約15分鐘，且可收集含有IgY免疫球蛋白之上清液。IgY免疫球蛋白可藉由一般熟習此項技術者已知之各種沈澱方法進一步純化，諸如使用硫酸銨或生物相容氯化鈉（參見Hodek, P.等人,Optimized Protocol of Chicken Antibody (IgY) Purification Providing Electrophoretically Homogenous Preparations , 8 Int. J. Electrochem. Sci.113, 113-124（2013））進一步純化。或者，IgY免疫球蛋白可由蛋白部分獲得。

在一些實施方式中，ASFV特異性免疫球蛋白組成物包含蛋黃或其任何含IgY抗體部分。蛋黃為蛋之較佳部分，因為蛋黃典型地含有濃度比蛋白高得多之IgY。然而，蛋白可能含有足以用於一些應用之IgY濃度。

在抗體組成物之一些實施方式中，IgY自蛋之成分濃縮、分離或純化。此可藉由多種方法，例如藉由一般熟習此項技術者已知之方法實現。若需要，IgY抗體之效價可藉由免疫分析（例如ELISA）來測定。

在抗體組成物之一些實施方式中，組成物係藉由包含以下之方法製得：獲得先前主動接種針對ASFV之疫苗之家禽產的蛋，且將抗體部分與蛋黃分離。家禽較佳為家養家禽。家養家禽可為雞、鴨、天鵝、鵝、火雞、孔雀、珠雞、鴕鳥、家鴿、鵪鶉、雉、野鴿或其他家養家禽。家養家禽較佳為雞。家養家禽更佳為主要出於蛋或肉生產而飼養之家養雞。

在抗體組成物之一些實施方式中，抗體組成物係藉由包含以下之方法製得：給母雞主動接種針對ASFV之疫苗，在免疫接種時間段之後自母雞收集蛋，且將抗體部分與蛋黃分離。視情況地，自母雞收集蛋可在免疫接種時間段之後連續進行。

伴隨特定目標產生IgY的其他方法已為熟習此項技術者所知，但尚不知曉此等方法先前已成功地用於產生ASFV抗體。此章節中所揭示之抗體適用於本發明中所述之方法及組成物中之任一者。

已發現來自禽蛋之IgY抗體一般具成本效益且係病毒黏著抑制劑（亦即免疫球蛋白）之充裕來源。該等抗體結合至帶有抗原之病毒（諸如ASFV）之表面，由此防止出現病毒與潛在宿主細胞之間的初始接觸階段。如在本發明中其他處所闡述，預防病毒與宿主細胞之間的初始黏著階段具有許多應用，包括治療病毒性疾病及預防病毒性疾病。

在抑制劑之一些實施方式中，抑制劑包含禽蛋成分，其中禽蛋包含抑制黏著有效量之對ASFV具有特異性的IgY。禽蛋成分可為本發明中描述為合適抗體組成物之任何成分。

提供用於預防對細胞病毒黏著的方法。病毒感染細胞之第一步驟為病毒與細胞之間的接觸及黏著。儘管此步驟對於建立感染至關重要，但在此早期預防感染之方法很少。更典型地，使用諸如主動疫苗接種之技術來對抗病毒感染，該等技術使得機體產生中和病毒之抗體。若主動疫苗接種不可行，則最通常僅在症狀上治療病毒性疾病。本文所描述之方法提供有效手段以預防感染過程中之此早期步驟，而無需在個體暴露於病原體之前充分投予，如主動疫苗接種所需。

抗體可用於藉由結合於病毒且干擾病毒結合其靶向膜受體之能力來防止病毒與細胞之間黏著。在本申請案中，禽類抗體（諸如IgY）具有優於哺乳動物抗體之獨特優點，尤其當個體為哺乳動物時。如上所述，IgY抗體之優點包括IgY抗體相比於哺乳動物抗體更具特異性、更穩定且引起較少非吾人所樂見之免疫反應形式。IgY抗體亦可以簡易及較廉價方式由蛋獲得。

在該方法之一個實施方式中，該方法包含向個體投予抑制黏著有效量之病毒黏著抑制劑。病毒黏著抑制劑可為本文所揭示之ASFV特異性免疫球蛋白組成物之任何實施方式。在該方法之一些實施方式中，病毒黏著抑制劑包含禽蛋成分，該成分包含抑制黏著有效量之對ASFV具有特異性的IgY。成分可為本文所揭示之作為合適抗體組成物之任何成分。

在該方法之一些實施方式中，ASFV特異性免疫球蛋白組成物為醫藥品，其包含禽蛋之內含物、包含有效量之對ASFV具有特異性之IgY的禽蛋之內含物。醫藥品可包含如本文中所論述之額外組分。醫藥品可藉由熟習此項技術者已知或如本文所述之任何方法投予。治療方法

本發明之又另一方面大體上係關於一種可投予受ASFV感染或暴露之豬或野豬的ASFV疫苗及ASFV特異性免疫球蛋白之醫藥學上可接受之組成物。另外或替代地，如先前所描述，ASFV疫苗可投予非豬哺乳動物宿主。

在一個實施方式中，ASFV疫苗及/或ASFV特異性免疫球蛋白呈組成物形式，諸如但不限於醫藥組成物。所揭示之組成物可包含與醫藥學上可接受之載劑組合的上文所揭示之該等組成物中之一或多者。此類載劑及調配方法之實例可見於Remington: The Science and Practice of Pharmacy （第20版, Lippincott, Williams & Wilkins, Daniel Limmer編）。為形成適合於投予之醫藥學上可接受之組成物，該等ASFV特異性免疫球蛋白組成物將含有治療有效量之抗體。抗體之治療有效量可為抑制黏著有效量及/或可有效地在個體（亦即，豬或野豬）中產生被動免疫之量。另外或替代地，為形成適合於投予之醫藥學上可接受之組成物，該等ASFV疫苗組成物將含有治療有效量之ASFV抗原（例如ASFV病毒粒子及/或病毒組分）。經輻照之ASFV抗原之治療有效量可為可有效地在個體（亦即，豬或野豬）中產生保護性免疫的量。

本發明之醫藥組成物可用於本發明之治療及預防方法中。以足以遞送治療有效量之ASFV特異性免疫球蛋白或ASFV疫苗之量將該等組成物投予豬或野豬，以便在本文所揭示之治療及預防方法中有效。治療有效量可根據多種因素而變化，諸如但不限於個體之病況、體重、性別及年齡。其他因素包括投予模式及部位。可以此項技術中已知之任何方法向個體提供醫藥組成物。例示性投予途徑包括但不限於腹膜內、肌內、皮下、靜脈內、局部、皮上、經口、骨內、鼻內。經口投予ASFV特異性免疫球蛋白可藉由添加至個體之餵料（固體或液體）來達成。

本發明之組成物可僅向個體投予一次或向個體投予超過一次。此外，當向個體投予組成物超過一次時，可使用多種攝生法，諸如但不限於每天一次、每週一次、每月一次或每年一次。亦可向個體投予組成物每天超過一次。ASFV特異性免疫球蛋白組成物及/或ASFV疫苗組成物之治療有效量及合適給藥攝生法可藉由常規測試鑑別，以便獲得最佳活性，同時使任何潛在副作用降至最低。ASFV特異性免疫球蛋白組成物及ASFV疫苗組成物可獨立地投予單獨個體。另外或替代地，ASFV特異性免疫球蛋白組成物及ASFV疫苗組成物可以各種治療攝生法向有需要之單個個體共投予。另外，期望共投予或依序投予其他藥劑。

本發明之組成物可全身性投予，諸如藉由腹膜內、靜脈內或肌內投予。

本發明之組成物可進一步包含改良抗體之溶解性、半衰期、吸收等之藥劑。此外，本發明之組成物可進一步包含減弱非所期望之副作用及/或降低抗體毒性之藥劑。此類藥劑之實例描述於多種文本中，諸如但不限於Remington: The Science and Practice of Pharmacy （第20版, Lippincott, Williams & Wilkins, Daniel Limmer編）。

本發明之組成物可以廣泛多種供投予用之劑型投予。舉例而言，組成物可以諸如但不限於可注射溶液、凍乾粉末或顆粒之形式投予。

在本發明中，醫藥組成物可進一步包含醫藥學上可接受之載劑。此類載劑包括但不限於媒劑、佐劑、懸浮劑、惰性填充劑、稀釋劑、賦形劑、潤濕劑、黏合劑、緩衝劑、崩解劑及載劑。典型地，醫藥學上可接受之載劑對於活性抗體為化學上惰性的且在使用條件下不具有有害副作用或毒性。醫藥學上可接受之載劑可包括聚合物及聚合物基質。醫藥學上可接受之載劑的性質可視所採用之特定劑型及組成物之其他特徵而不同。

舉例而言，對於以固體形式（諸如但不限於粉末或顆粒）經口投予ASFV特異性免疫球蛋白，抗體可與經口、無毒醫藥學上可接受之惰性載劑（諸如但不限於惰性填充劑、適合黏合劑、潤滑劑、崩解劑及輔助劑）組合。適合黏合劑包括但不限於澱粉、明膠、天然糖（諸如葡萄糖或β-乳糖）、玉米甜味劑、天然及合成膠（諸如阿拉伯膠、黃蓍膠）或海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟及其類似黏合劑。用於此等劑型之潤滑劑包括但不限於油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉及其類似潤滑劑。崩解劑包括但不限於澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠及其類似崩解劑。

適用於非經腸投予之調配物包括可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及使調配物與個體之血液等張之溶質的水性等張無菌注射溶液，以及可包括懸浮劑、增溶劑、增稠劑、穩定劑及防腐劑之水性懸浮液。組成物可以諸如無菌液體或液體混合物之生理上可接受之稀釋液投予，包括水、生理鹽水、水性右旋糖及相關糖溶液。

可用於非經腸調配物中之油包括石油、動物油、植物油或合成油。油之特定實例包括花生油、大豆油、芝麻油、棉籽油、玉米油、橄欖油、石蠟油及礦物油。用於非經腸調配物之適合脂肪酸包括聚乙烯去水山梨醇脂肪酸酯，諸如去水山梨醇單油酸酯；及環氧乙烷與疏水性基質之高分子量加成物，其藉由使環氧丙烷與丙二醇、油酸、硬脂酸及異硬脂酸縮合而形成。油酸乙酯及十四烷酸異丙酯為適合的脂肪酸酯之實例。用於非經腸調配物之適合皂包括脂肪鹼金屬、銨及三乙醇胺鹽，且適合清潔劑包括（a）陽離子清潔劑，諸如二甲基二烷基銨鹵化物及烷基吡啶鎓鹵化物；（b）陰離子清潔劑，諸如烷基磺酸鹽、芳基磺酸鹽及烯烴磺酸鹽、烷基硫酸鹽、烯烴硫酸鹽、醚硫酸鹽及單甘油酯硫酸鹽及磺基丁二酸鹽；（c）非離子清潔劑，諸如脂肪胺氧化物、脂肪酸烷醇醯胺及聚氧化乙烯聚丙烯共聚物；（d）兩性清潔劑，諸如烷基β-胺基丙酸鹽及2-烷基咪唑啉四級銨鹽；及（e）其混合物。

適合防腐劑及緩衝劑可用於該等調配物中。為使注射部位處之刺激降至最低或消除，該等組成物可含有一或多種親水親脂平衡（hydrophile-lipophile balance；HLB）呈約12至約17之非離子型界面活性劑。

本發明之組成物亦可與作為靶向藥物載劑之可溶性聚合物偶合。該等聚合物可包括但不限於經軟脂醯基殘基取代之聚乙烯吡咯啶酮、哌喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯醯基-醯胺酚、聚羥乙基天冬醯胺酚或聚氧化乙烯聚離胺酸。此外，本發明之抗體可與適用於達成藥物控制釋放之一類可生物降解之聚合物偶合，該等聚合物例如聚乳酸、聚ε-己內酯、多羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫哌喃、聚氰基丙烯酸酯及水凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物。

本發明之醫藥組成物可經調整以預防個體中之不良反應。此類潛在不良反應包括宿主識別、重度過敏、局部發炎及其他形式之過敏性反應。

與同源抗體治療相比，對免疫球蛋白組成物之不良反應在異源抗體治療中更常見，但就此而言已解釋了IgY抗體之優點。在醫藥組成物之一些實施方式中，抗體經修飾以改變分子之Fc區。在其他實施方式中，處理抗體以防止抗體之Fc區與細胞之Fc受體之間的結合。

本發明之醫藥製劑可以任何醫藥學上可接受之形式儲存，包括以水溶液、冷凍水溶液、凍乾粉末或本文所述之任何其他形式儲存。

醫藥學上可接受之ASFV特異性免疫球蛋白組成物及/或ASFV疫苗組成物ASFV疫苗組成物之非限制性實例較佳進一步包含消炎劑。

醫藥學上可接受之ASFV特異性免疫球蛋白組成物之非限制性實例較佳進一步包含抗體之抗原結合片段，諸如Fab或Fab2片段，其可取代抗體。舉例而言，抗原結合片段可為包括原始IgY之抗原結合區之任何片段。在組成物及方法之一些實施方式中，IgY抗體之經修飾形式可取代IgY抗體，只要IgY抗體之抗原結合區保持其識別ASFV之能力即可。

醫藥學上可接受之ASFV疫苗組成物之非限制性實例較佳進一步包含諸如用於長期儲存及/或運輸之凍乾粉末之組成物。凍乾疫苗可在用於免疫接種或疫苗接種之前復原成溶液（諸如生理鹽水），復原至約原始體積。

本發明之一方面為一種治療受ASFV感染或暴露之豬或野豬的較佳方法，該方法包含在ASFV感染或暴露之豬或野豬中產生被動免疫（圖 1 ）。ASFV特異性免疫球蛋白組成物可包含其他組分作為本發明中其他處論述之醫藥組分。ASFV特異性免疫球蛋白組成物可經由腹膜內或肌內注射以每公斤體重約0.5至約1.0 mg之劑量一週兩次投予有需要之受ASFV感染或暴露的豬或野豬持續一或多週。

本發明之一方面為一種藉由投予包含ASFV特異性免疫球蛋白之組成物來治療受ASFV感染或暴露之豬或野豬的方法。ASFV特異性免疫球蛋白可以每公斤體重約1.0 mg之劑量經口投予（添加至餵料中）給有需要之受ASFV感染或暴露的豬或野豬約每天一次持續連續約5天至約7天。

用於ASFV特異性免疫球蛋白之該等經口投予方法另外包括單獨經口投予未蒸煮的蛋黃或蛋之蛋黃部分，或將其與蛋之蛋白組合投予。經口投予生蛋黃或蛋黃部分可例如藉由進食蛋黃部分來進行。蛋黃部分可與其他成分組合投予以使其更可口或更營養。因此，蛋黃部分可作為食品由個體食用；或者，蛋黃部分可作為醫藥組成物之一部分食用。較佳的是未蒸煮或稍微蒸煮的蛋黃部分，因為蒸煮會使抗體不活化。

治療方法之非限制性實例包括增加非經腸或經口投予之ASFV特異性免疫球蛋白的劑量，以及或替代地以增加之給藥頻率投予。本發明之一方面為一種治療受ASFV感染或暴露之豬或野豬之懷孕母豬、母豬胎兒及/或仔豬的較佳方法。藉由本發明中其他處所論述之方法向懷孕母豬投予ASFV特異性免疫球蛋白。在妊娠及/或哺乳期間，仔豬及/或豬胎兒直接或間接接受ASFV疫苗。

在本發明之另一方面，係一種用於易受ASF感染之豬或野豬的較佳預防性治療方法（圖 1 ）。經輻照之ASFV疫苗組成物可較佳地向個體（亦即，豬或野豬）投予，該等個體包括但不限於以下：已暴露於ASFV之個體、易受ASF感染之個體及/或受ASFV感染之個體。ASFV疫苗組成物可包含額外組分，諸如在本發明中其他處論述之醫藥組分。對於大約20 kg體重之較年幼（亦即並非老齡）的豬，可經由腹膜內、皮下或肌內注射以約0.05 mg/劑至約1.0 mg/劑之劑量向個體投予ASFV疫苗組成物。較佳地，ASFV疫苗組成物以大約100 μg之劑量投予。另外或替代地，ASFV疫苗組成物可投予單個個體超過一次。舉例而言，可以在首次或初次免疫接種之後14天一次性加強免疫接種。另外，第三免疫可在首次或初次免疫接種之後21天進行。

本文揭示圖 2A 中圖解說明之一實例實施方式，特定言之，藉由以與CFA呈1:1之比率投予第一劑量之ASFV疫苗組成物來治療個體的方法。隨後，在約兩週之後，可向個體投予與IFA呈1:1之比率的第二劑量之ASFV疫苗組成物。在首次或初次免疫接種之後約四週，可對豬或野豬進行ASFV攻擊，以測定經免疫接種之個體是否可經受住致死性ASF感染。經輻照之ASFV疫苗可在等於約10⁴ 之 HAD₅₀ （50%血球吸附劑量）至約10⁵ HAD₅₀ 之活病毒的範圍下給藥。實施例

以下非限制性實施例支持以下概念：使用醫藥學上可接受之ASF疫苗組成物以產生待用於治療受感染之豬及/或野豬或預防豬及/或野豬感染的抗體。實施例 1

在第1天、第14天、及在第28天用ASFV疫苗給三組雞（n=3/組）免疫接種。第1組接受作為對照組之生理鹽水（無疫苗），第2組接受含有整個病毒粒子及免疫抑制蛋白因子之ASFV疫苗調配物1，且第3組接受包含整個病毒粒子、病毒組分、及免疫抑制蛋白因子之ASFV疫苗調配物2。在第二次及第三次免疫接種之後，獲取血液樣品，使用經重組ASFV主要衣殼蛋白p72塗佈之ELISA盤（SEQ ID NO: 2）評估ASFV特異性抗體效價評估。實施例1之結果證實ASFV疫苗為免疫性及免疫接種。另外，實施例1證實ASFV疫苗誘導之抗體庫在14天之後（圖 4A ）及28天後（圖 4B ）對ASF病毒組分（諸如ASFV主要衣殼蛋白p72（SEQ ID NO: 2））具有全面特異性。實施例 2

ASFV疫苗組成物係由來自受ASFV感染之豬的受ASFV感染之脾及含PBMC的受ASFV感染之膚色血球層的均質物製備。將PBMC混合物冷凍於乾冰乙醇浴中，且解凍至室溫。將凍融程序重複兩次。使用qPCR評估ASFV疫苗組成物的活性ASFV。結果證實，ASFV疫苗組成物不含ASFV DNA。給三組產蛋母雞（n=3/組）投予對照組或2種不同ASFV疫苗調配物中之1種。第1組接受作為對照組之生理鹽水（無疫苗），第2組接受ASFV疫苗調配物1（由SMNC製備），且第3組接受ASFV疫苗調配物2（由SMNC及PBMC製備）。在第1天、第14天、及第3天，藉由投予ASFV疫苗（經由肌內注射）或給定對照組來給母雞主動免疫接種。在第三次免疫接種後每天收集蛋。使用簡易水稀釋法自蛋黃萃取免疫球蛋白。在第14天在第二次免疫接種之後自雞獲取血液樣品，且經qPCR確定不存在病毒脫落。

使用自接受調配物2之母雞收集的蛋來產生ASFV特異性免疫球蛋白。不使用來自接受生理食鹽水或調配物1之母雞的蛋來產生ASFV特異性免疫球蛋白。使用qPCR分析ASFV特異性免疫球蛋白組成物，且經測定不存在活性ASFV（亦即ASFV特異性免疫球蛋白組成物不含有ASFV DNA）（圖 3 ）。亦評估ASFV特異性免疫球蛋白組成物中IgY抗體之特異性。使用ELISA來偵測對重組ASFV衣殼蛋白p72（SEQ ID NO: 2）具有特異性之抗體，且偵測到6 log₂ 含量之ASFV p72特異性IgY（圖 5 ）。

三組成年豬表示為A、B及C。A組係由6隻成年豬（各自大約20 kg）構成，且在暴露於ASFV之前一天接受100 mg ASFV特異性免疫球蛋白組成物。B組係由3隻成年豬構成，其在暴露於ASFV之後一天接受100 mg ASFV特異性免疫球蛋白組成物。最後，C組係由3隻成年豬構成，其暴露於ASFV且未接受ASFV特異性免疫球蛋白組成物。

臨床觀察結果顯示，暴露於ASFV後4天，C組中之所有3隻豬均顯示初始ASF症狀，包括活動較少（亦即嗜睡）且展現食物消耗量降低。暴露於ASFV之後六天，C組中之所有3隻豬已停止進食。A組豬在暴露於ASFV之後六天繼續顯現正常且健康，而B組動物顯示食慾降低（亦即食物消耗量降低）及深黃色尿液，但未觀察到ASF之其他徵象或症狀。但如此觀察到疾病徵象。結果揭示在暴露於ASFV之前或之後投予ASFV特異性免疫球蛋白組成物均成功地產生被動免疫。

無

[ 圖 1] 展示製造ASFV疫苗之方法的實例實施方式、藉由投予該ASFV疫苗給豬或野豬主動免疫接種之方法的實施方式、給非豬或非易感物種宿主免疫接種或接種疫苗以產生ASFV特異性免疫球蛋白之方法的實施方式、及藉由投予ASFV特異性免疫球蛋白給豬或野豬被動免疫接種之方法的實施方式。[ 圖 2] 展示藉由向豬或野豬（圖 2A ）或向非豬或非易感物種宿主（圖 2B ）投予該ASFV疫苗進行主動免疫接種以產生ASFV特異性免疫球蛋白之實例實施方式。[ 圖 3] 展示ASFV特異性免疫球蛋白組成物之實例實施方式之qPCR結果。分析該ASFV特異性免疫球蛋白組成物及三個對照組是否存在ASFV p72 DNA（NC_001659.2；SEQ ID NO: 1）。qPCR結果證實該ASFV特異性免疫球蛋白組成物不含ASFV p72 DNA（SEQ ID NO: 1）。[ 圖 4] 展示在第1天、第14天、及第28天使用2種不同ASFV疫苗組成物及作為對照組之生理鹽水（無ASFV疫苗）來免疫接種的3組母雞中之ASFV特異性抗體效價。收集由經免疫接種之母雞產的蛋，萃取免疫球蛋白，且使用經重組ASFV主要衣殼蛋白p72塗佈（ASFV p72；NP_042775.1；SEQ ID NO: 2）之酶聯免疫吸附分析（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）盤在第14天（圖 4A ）及第28天（圖 4B ）評估ASFV特異性抗體效價。[ 圖 5] 展示在第1天、第14天、及第28天使用2種不同ASFV疫苗組成物及作為對照組之生理鹽水（無ASFV疫苗）來免疫接種的3組母雞中的ASFV特異性抗體效價。收集由經免疫接種之母雞產的蛋，萃取免疫球蛋白，且使用經重組ASFV主要衣殼蛋白p72塗佈（SEQ ID NO: 2）之ELISA盤在第28天評估ASFV特異性抗體效價。

Claims (23)

1. 一種治療受感染之豬或野豬之非洲豬瘟（African swine fever，ASF）病毒（African swine fever viral，ASFV）感染之方法，該方法包含向該受感染之豬或野豬投予有效量之包含對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物。
2. 如請求項1之方法，其中該組成物係以提供為每公斤該受感染之豬或野豬的體重約0.5 mg至約1.0 mg的該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白之劑量的量投予。
3. 如請求項1之方法，其中包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的該組成物係投予持續包含每週或連續7天至少一次之時間段。
4. 如請求項1之方法，其中包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的該組成物係藉由肌內或腹膜內注射非經腸投予。
5. 如請求項1之方法，其中包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的該組成物為經口投予之食品。
6. 一種在處於ASF病毒感染之風險下之豬或野豬中預防ASF病毒感染、降低ASF病毒感染之發病率、及/或降低ASF病毒感染之嚴重程度之方法，該方法包含向該豬或野豬投予有效量之包含對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物。
7. 如請求項6之方法，其中該組成物係以提供為每公斤該處於其風險下之豬或野豬的體重約0.5 mg至約1.0 mg的該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白之劑量的量投予。
8. 如請求項6之方法，其中包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的該組成物係投予持續包含每週或連續7天至少一次之時間段。
9. 如請求項6之方法，其中包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的該組成物係非經腸投予。
10. 如請求項6之方法，其中包含該等對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的該組成物為經口投予之食品。
11. 一種產生ASFV特異性免疫球蛋白之方法，其中將由整個ASF病毒粒子、病毒組分、及/或免疫抑制蛋白因子構成之ASFV疫苗投予非豬物種宿主以用於產生ASFV特異性免疫球蛋白。
12. 如請求項11之方法，其中該宿主為產蛋家禽。
13. 一種單位劑型，其包含治療或預防有效量之包含對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白的組成物。
14. 如請求項13之單位劑型，其中該組成物為經調配用於經口投予之食品。
15. 一種在處於ASF病毒感染之風險下之豬或野豬中預防ASF病毒感染、降低ASF病毒感染之發病率、及/或降低ASF病毒感染之嚴重程度之方法，該方法包含向該豬或野豬投予有效量之包含ASF病毒組分之ASFV疫苗組成物。
16. 如請求項15之方法，其中該等ASF病毒組分為非活性的。
17. 如請求項15之方法，其中該ASFV疫苗組成物係藉由肌內或腹膜內注射非經腸投予。
18. 如請求項15之方法，其中該ASFV疫苗組成物係以提供為每隻豬或野豬約0.05 mg至約1.0 mg的該等ASF病毒組分之劑量的量投予。
19. 一種單位劑型，其包含有效量之包含ASF病毒組分之ASFV疫苗組成物。
20. 如請求項19之單位劑型，其中該等ASF病毒組分係衍生自受ASF感染之脾單核細胞（spleen mononuclear cell，SMNC）、受ASF感染之周邊血液及單核細胞（peripheral blood and mononuclear cell，PBMC）、及/或受ASF感染之初生肺泡巨噬細胞（primary alveolar macrophage，PAM）。
21. 如請求項19之單位劑型，其中該等ASF病毒組分為不活化的。
22. 一種ASFV疫苗，其用於治療及/或預防處於ASF感染之風險下之豬或野豬的ASF感染。
23. 一種對ASF病毒組分具有特異性之免疫球蛋白，其用於治療及/或預防處於ASF感染之風險下之豬或野豬的ASF感染。

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