TW202110436A - Gpcr 異聚體抑制劑及其用途 - Google Patents

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李智煐
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Abstract

本發明係關於與癌症有關之CXC受體4 (CXCR4)-G蛋白偶聯受體(GPCR)異聚體(CXCR4-GPCR異聚體)之抑制劑，其中CXCR4與其他G蛋白偶聯受體(GPCRx)形成功能性異聚體。更特定言之，本發明係關於與CXCR4形成異聚體之ADRB2，其在用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激之後導致CXCR4之下游傳訊增強。本發明亦提供了包含CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之醫藥組合物及套組，以及其治療及使用方法，以及其在癌症之診斷及/或治療中之方法。

Description

GPCR異聚體抑制劑及其用途
本發明係關於癌症治療之領域。具體而言，本文提供了包含CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合之醫藥組合物，以及使用該等醫藥組合物之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組及所使用之醫藥組合物。
G蛋白偶聯受體(GPCR)為與G蛋白偶聯之七跨膜域細胞表面受體。GPCR藉由感知包括光、氣味分子、激素、神經傳遞物質、趨化因子、小脂質分子及核苷酸之刺激來介導各種感覺及生理反應。人類基因體中大約有800個GPCR基因，且預測其中多於一半編碼諸如嗅覺、視覺及味覺受體之感覺受體(Bjarnadottir, T.K.等人, (2006) Comprehensive repertoire and phylogenetic analysis of the G protein-coupled receptors in human and mouse, Genomics 88, 263-273)。剩餘350個GPCR在胚胎發育，行為，情緒，認知，血壓、心率及消化過程之調控、免疫系統及炎症之調控，體內穩態之維持以及癌症之生長及轉移中起著重要生理作用(Filmore, D., (2004) It's a GPCR world. Modern Drug Discovery American Chemical Society 2004 (November), 24–28；Overington, J.P.等人, (2006) How many drug targets are there? Nat Rev Drug Discov 5, 993-996)。GPCR與許多疾病有關，且為所有處方藥中約40%之目標(Filmore, D. (2004))。
CXC受體4 (「CXCR4」)為趨化因子受體家族GPCR之成員。CXCR4在大多數造血細胞型、骨髓幹細胞、內皮先驅細胞、血管內皮細胞、神經元及神經元幹細胞、小神經膠質細胞及星狀細胞中表現(Klein, R.S.等人, (2004) Immune and nervous system CXCL12 and CXCR4: parallel roles in patterning and plasticity, Trends Immunol 25, 306-314；Griffith, J.W.等人, (2014) Chemokines and chemokine receptors: positioning cells for host defense and immunity, Annu Rev Immunol 32, 659-702)。CXCR4對其配體CXC模體趨化因子配體12 (CXCL12)(亦稱為基質細胞衍生因子1 (SDF-1))有反應，並且在造血、心血管及神經系統之胚胎發育中起重要作用(Griffith, J.W.等人, (2014))。CXCR4經發現為人類免疫缺陷病毒(HIV)之共同受體，並且在造血幹細胞(HSC)向骨髓之歸巢、炎症、組織之免疫監視以及成人中之組織再生中起重要作用(Chatterjee, S.等人, (2014) The intricate role of CXCR4 in cancer, Adv Cancer Res 124, 31-82)。CXCR4涉及多種免疫及自體免疫疾病，例如HIV感染、局部缺血、傷口癒合、類風濕性關節炎、全身性紅斑狼瘡(SLE)、間質性肺炎、血管疾病、多發性硬化症、肺纖維化及過敏性氣道疾病(Chu, T.等人, (2017) CXCL12/CXCR4/CXCR7 Chemokine Axis in the Central Nervous System: Therapeutic Targets for Remyelination in Demyelinating Diseases, Neuroscientist 23, 627-648；Debnath, B.等人, (2013) Small molecule inhibitors of CXCR4, Theranostics 3, 47-75；及Domanska, U.M.等人, (2013) A review on CXCR4/CXCL12 axis in oncology: no place to hide, Eur J Cancer 49, 219-230)。CXCR4亦與多種不同癌症有關，並且被認為在惡性腫瘤中具有多種潛在作用。CXCR4在多於23種人類癌症中過表現，包括乳癌、肺癌、腦癌、腎癌(或腎細胞癌)、胰臟癌、卵巢癌、前列腺癌、黑素瘤、白血病、多發性骨髓瘤、胃腸道癌及軟癌組織肉瘤，並且被認為係不良預後標誌物(Domanska, U.M.等人, (2013)；Chatterjee, S.等人, (2014)；及Furusato, B.等人, (2010) CXCR4 and cancer, Pathol Int 60, 497-505)。
已研究了有限數目的GPCR家族例如趨化因子、腎上腺素及類鴉片受體家族中CXCR4及GPCR之異聚體之形成。考慮到CXCR4在多種病理狀況下之主要作用及表現增加，很有可能存在為特定疾病賦予獨特特徵的不同CXCR4-GPCRx異聚體。
腎上腺素受體β2 (有時稱為β-2腎上腺素受體或β2腎上腺素受體(「ADRB2」))為與腎上腺素(epinephrine)相互作用的跨細胞膜β-腎上腺素受體，腎上腺素為其經由下游L型鈣通道相互作用之傳訊介導生理反應諸如平滑肌鬆弛及支氣管擴張的激素及神經傳遞物質(配體同物異名，腎上腺素(adrenaline))(Gregorio, G.G.等人, (2017) Single-molecule analysis of ligand efficacy in beta2AR-G-protein activation, Nature 547, 68-73)。CXCR4及ADRB2之異聚體(CXCR4-ADRB2異聚體)之形成，以及CXCR4及ADRB2 (β2-AR)在心肌細胞上之共表現，以及使用免疫共沉澱及生物發光共振能量轉移的CXCR4與ADRB2之物理關聯(LaRocca, T.J.等人, (2010) beta2-Adrenergic receptor signaling in the cardiac myocyte is modulated by interactions with CXCR4, J Cardiovasc Pharmacol 56, 548-559；Nakai, A.等人, (2014) Control of lymphocyte egress from lymph nodes through beta2-adrenergic receptors, J Exp Med 211, 2583-2598)。
考慮到CXCR4在多種病理狀況下之主要作用及表現增加，很有可能存在可為特定疾病賦予獨特特徵的CXCR4-ADRB2異聚體。因此，此項技術中需要鑑別及開發CXCR4-ADRB2異聚體之抑制劑，以用作例如相對於CXCR4抑制劑單一療法，具有較高功效及較低副作用的靶向CXCR4-ADRB2異聚體之癌症治療劑。
本文提供了CXCR4-ADRB2異聚體之抑制劑或CXCR4-ADRB2異聚體之抑制劑之組合，以及包含其之醫藥組合物或醫藥套組，以及它們的治療及使用方法，其中增強之下游傳訊由功能性CXCR4-ADRB2異聚體形成產生(例如，相對於CXCR4下游增強之傳訊，或相對於ADRB2下游增強之傳訊)；其中個體諸如個體之細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體中之存在與疾病例如癌症有關。
在一個態樣中，本文提供了用於抑制患有癌症之個體之細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法，該方法包括向個體投與：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福(burixafor)；及(b) ADRB2抑制劑；其中：(i)增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生；且(ii)所投與之抑制劑之組合抑制癌症個體中之來自該CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊。
在另一態樣中，本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，該方法包括向個體投與：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(b) ADRB2抑制劑；其中：(i)增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生；且(ii)所投與之抑制劑之組合抑制癌症個體中之來自該CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊。
在另一態樣中，本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，該方法包括：(a)確定個體之細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生；及(b)若個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與：(i) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(ii) ADRB2抑制劑。
在另一態樣，本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包括：(1)藉由以下方式確定個體是否具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞：獲得或已獲得來自個體之生物樣品；及對生物樣品進行或已進行檢定以確定是否：(i)個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體；或(ii) CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合：改變一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質或功能；改變一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症進展；及(2)若個體俱有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及(3)若個體不具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向癌症個體投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑。
在另一態樣中，本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包括：(1)藉由以下方式確定個體是否具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞：獲得或已獲得來自個體之生物樣品；及對生物樣品進行或已進行檢定以確定是否：(i)個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體；或(ii) CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合：改變一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質或功能；改變一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症進展；及(2)若個體具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及(3)若個體不具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向癌症個體投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑；其中：(a)相對於投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑，在向癌症個體投與布利沙福及ADRB2抑制劑之組合後，具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之進展多降低5-100%之範圍；(b)相對於呈單一抑制劑投與時布利沙福之功效，當與ADRB2抑制劑組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體投與時，布利沙福之功效增加5-2000%之範圍；及/或(c)相對於呈單一抑制劑投與時ADRB2抑制劑之功效，當與布利沙福組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體投與時，ADRB2抑制劑之功效增加5-2000%之範圍。
在另一態樣中，本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包括：(1)藉由以下方式確定個體之細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體：獲得或已獲得來自個體之生物樣品，及對生物樣品進行或已進行檢定以確定該CXCR4-ADRB2異聚體是否存在於個體之細胞中；其中對生物樣品進行之檢定為或包含以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定(proximity-based assay)、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、微陣列或螢光動物檢定；及(2)若個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(3)若個體之細胞不含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑。
在另一態樣中，本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包括：(1)藉由以下方式確定個體之細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體：獲得或已獲得來自個體之生物樣品，及對生物樣品進行或已進行檢定以確定該CXCR4-ADRB2異聚體是否存在於個體之細胞中；其中對生物樣品進行之檢定為或包含以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、微陣列或螢光動物檢定；及(2)若個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(3)若個體之細胞不含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑；其中：(a)相對於投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑，在向癌症個體投與布利沙福及ADRB2抑制劑之組合後，具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之進展多降低5-100%之範圍；(b)相對於呈單一抑制劑投與時布利沙福之功效，當與ADRB2抑制劑組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體投與時，布利沙福之功效增加5-2000%之範圍；及/或(c)相對於呈單一抑制劑投與時ADRB2抑制劑之功效，當與布利沙福組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體投與時，ADRB2抑制劑之功效增加5-2000%之範圍。
在另一態樣中，本文提供了在治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症中所使用之醫藥套組，該醫藥套組包括：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(b) ADRB2抑制劑；其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生。
在另一態樣中，本文提供在治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之醫藥組合物，該醫藥組成物包括：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；(b) ADRB2抑制劑；及(c)醫藥學上可接受之載劑；其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生。
在另一態樣，本文提供了醫藥組合物，其包括：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；(b) ADRB2抑制劑；及(c)醫藥學上可接受之載劑。
相關申請案之交互參照
本申請案要求於2020年5月11日提交之美國臨時專利申請案第63/022,845號及在2019年5月17日提交之美國臨時專利申請案第62/849,755號之權益，各申請案之揭露均以引用之方式整體併入本文。序列表
本申請案以引用之方式併入以ASCII文本格式與本申請案一起提交之序列表，該序列表之標題為「14462-012-185_SEQ_LISTING.txt」，創建於2020年5月11日，且大小為1,516個位元組。縮寫
除非另有說明，否則以下內容包括本文所揭示之術語之縮寫：急性骨髓樣白血病(AML)、腺病毒高通量系統(AdHTS)、腎上腺素受體β2 (ADRB2)、雙分子螢光互補(BiFC)、生物發光共振能量轉移(BRET)、牛血清白蛋白(BSA)、癌症幹細胞(CSC)、慢性淋巴球性白血病(CLL)、慢性骨髓樣白血病(CML)、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、Venus之C末端片段(VC)、C-X-C模體趨化因子配體12 (CXCL12)、CXC受體4 (CXCR4)、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、福爾馬林固定石蠟包埋 (FFPE)、螢光共振能量轉移(FRET)、G蛋白偶聯受體(GPCR)、多形性膠質母細胞瘤(GBM)、升糖素受體(GCGR)、GPCR異聚體鑑別技術(GPCR-HIT)、顆粒球集落刺激因子(G-CSF)、造血幹細胞(HSC)、肝細胞癌(HCC)、人類免疫缺陷病毒(HIV)、國際基礎及臨床藥理學聯合會之受體命名法及藥物分類委員會(NC-IUPHAR)、多發性骨髓瘤(MM)、感染複數(MOI)、骨髓增生異常症候群(MDS)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、非小細胞肺癌(NSCLC)、Venus之N末端片段(VN)、患者源性細胞(PDC)、患者源性異種移植物(PDX)、正電子發射斷層掃描(PET)、電腦斷層掃描(CT)、接近連接檢定(PLA)、逆轉錄定量聚合酶鏈反應(有時稱為RT-qPCR、或qRT-PCR、或qPCR、或即時PCR)、單光子發射電腦斷層掃描(SPECT)、小淋巴球性淋巴瘤(SLL)、小細胞肺癌(SCLC)、基質細胞衍生因子1 (SDF-1)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、循環閾值(Ct)、時間解析FRET (TR-FRET)、腫瘤微環境(TME)、血管平滑肌細胞(VSMC)、WHIM症候群(疣、低伽瑪球蛋白血症、感染及嗜中性白血球骨髓保留症)、綠色螢光蛋白(GFP)及黃色螢光蛋白(YFP)。
如本文所用，冠詞「一個」、「一種」及「該」係指該冠詞之語法對象中之一者或多於一者。舉例而言，樣品係指一個樣品或二或更多個樣品。
如本文所用，術語「個體」係指哺乳動物。個體可為人類或非人類哺乳動物，例如狗、貓、牛、馬、小鼠、大鼠、兔或其基因轉殖物種。個體可為患者或癌症患者。
如本文所用，術語「樣品」係指含有一或多種感興趣之組分之材料或材料之混合物。來自個體之樣品係指自個體獲得之樣品，包括活體內 或原位 獲得、達到或收集之生物組織或流體來源之樣品。可以自個體之含有癌前或癌細胞或組織之區域獲得樣品。此等樣品可為但不限於自哺乳動物分離之器官、組織、級分及細胞。在某些實施例中，樣品可為生物樣品，例如生物流體樣品或生物組織樣品。樣品亦可為組織生檢。在某些實施例中，生物樣品包括但不限於淋巴結、血液樣品、血漿樣品、全血、部分純化之血液、血清、骨髓、細胞溶解產物、細胞培養物、細胞株、組織、口腔組織、胃腸組織、器官、胞器、生物流體、尿液樣品、皮膚樣品、唾液樣品、腦液樣品或眼液樣品。
如本文所用，術語「治療(treat、treating及treatment)」在關於癌症患者使用時，係指降低癌症之嚴重程度或延緩或減慢癌症之進展之作用，包括(a)抑制癌症生長或阻止癌症之發展，及(b)導致癌症消退或者延遲或最小化與癌症之存在有關之一或多種症狀。
如本文所用，術語「投與(administer、administering或administration)」係指藉由本文所述或此項技術中另外已知之方法將化合物、化合物之組合或包含它們之醫藥組合物遞送至個體體內或導致其遞送至個體體內之行為。投與化合物、化合物之組合或包含它們之醫藥組合物包括規定將化合物、化合物之組合或包含它們之醫藥組合物遞送至患者體內。示範性投與形式包括：口服劑型，例如錠劑，膠囊，糖漿，懸浮劑；可注射劑型，例如靜脈內(IV)、肌肉內(IM)或腹膜內(IP)；皮下(SC)、顱內(IC)；透皮劑型，包括霜劑、膠凍劑、散劑或貼劑；頰劑型；吸入散劑、噴霧劑、懸浮劑及直腸栓劑。
如本文所用，片語「治療劑」係指可用於治療、改善、預防或管理癌症及/或與其相關之症狀之任何劑。在某些實施例中，治療劑係指本發明之CXCR4-ADRB2異聚體之抑制劑。治療劑可為眾所周知可用於或者已經或目前用於治療、改善、預防或管理癌症及/或與其相關之症狀之劑。
如本文所用，如本文所用之片語「有效量」係指足以實現有益或所要結果之量。有效量可以一或多次投與、應用或劑量之形式投與。此類遞送取決於許多變數，包括使用個別劑量單位之時間段、劑之生物利用度、投與途徑等。
如本文所用，當與疾病或病症結合使用時，化合物(例如，本文所提供之治療劑例如抑制劑、拮抗劑或任何其他治療劑)或化合物之組合之術語「治療有效量」係指足以在疾病或病症之治療或管理中提供治療益處或足以延遲或最小化與該疾病或病症有關之一或多種症狀之量。化合物之治療有效量意謂當單獨使用或與其他療法組合使用時在疾病或病症之治療或管理中提供治療益處之化合物之量。該術語涵蓋改善總體治療，減輕或避免症狀或者增強另一治療劑之治療功效之量。該術語亦指足以引起由研究人員、獸醫、醫師或臨床醫師尋求的生物分子(例如 ，蛋白、酶、RNA或DNA)、細胞、組織、系統、動物或人類之生物學或醫學反應之化合物之量。
如本文所用，術語「異聚體」係指由CXCR4單元(或當在含CXCR4之異聚體之情境下鑑別時，有時稱為CXCR4單元體)及ADRB2單元(或當在含ADRB2之異聚體之情境下鑑別時，有時稱為ADRB2單元體)組成之巨分子複合物，其生物化學性質分別與CXCR4單體或ADRB2單體之生物化學性質明顯不同，或分別與CXCR4單體及ADRB2單體之生物化學性質明顯不同。可藉由以下來評估異聚化：原位雜交、免疫組織化學、RNAseq、逆轉錄定量PCR (有時稱為RT-qPCR、或qRT-PCR、或qPCR、或即時PCR)、所鑑別之異聚體之各單體或單元體之表現水準(例如，與CXCR4-ADRB2異聚體有關之CXCR4及ADRB2之表現水準)、微陣列、接近連接檢定(PLA)、時間解析FRET (TR-FRET)、全身單光子發射電腦斷層掃描(SPECT)或正電子發射斷層掃描/電腦斷層掃描(PET/CT)。
如本文所用，片語「細胞內Ca2+檢定」、「鈣動員檢定」或它們的變形係指量測與GPCR活化或抑制(例如，CXCR4活化或抑制及/或ADRB2活化或抑制)有關之鈣通量的基於細胞之檢定。該方法利用鈣敏感螢光染料，該染料經吸收至大多數細胞之細胞質中。染料結合自細胞內儲存池(intracellular store)釋放之鈣，且其螢光增加。螢光強度之變化與回應於感興趣之受體之配體活化而釋放至細胞質中的細胞內鈣之量直接相關。在某些實施例中，GPCR為CXCR4。在某些實施例中，GPCR為ADRB2。在某些實施例中，基於細胞之檢定量測與CXCR4-ADRB2異聚體活化或抑制有關之鈣通量。
如本文所用，片語「基於接近性之檢定」係指能夠在活體外 (在細胞溶解產物中)及在活細胞中監測兩個蛋白分子之接近性及/或結合(例如CXCR4蛋白(單體或單元)與ADRB2蛋白(單體或單元)之接近性及/或結合)之生物物理及生物化學技術，包括生物發光共振能量轉移(BRET)、螢光共振能量轉移(FRET)、雙分子螢光互補(BiFC)、接近連接檢定(PLA)、半胱胺酸交聯及免疫共沉澱(Ferre, S.等人, (2009) Building a new conceptual framework for receptor heteromers, Nat Chem Biol 5, 131-134；Gomes, I.等人, (2016) G Protein-Coupled Receptor Heteromers, Annu Rev Pharmacol Toxicol 56, 403-425)。
用於偵測CXCR4-ADRB2異聚體形成之替代方法包括但不限於：免疫染色(Bushlin, I.等人, (2012) Dimerization with cannabinoid receptors allosterically modulates delta opioid receptor activity during neuropathic pain, PLoS One 7, e49789；Decaillot, F.M.等人, (2008) Cell surface targeting of mu-delta opioid receptor heterodimers by RTP4, Proc Natl Acad Sci U S A 105, 16045-16050)；免疫電子顯微術(Fernandez-Duenas, V.等人, (2015) Untangling dopamine-adenosine receptor-receptor assembly in experimental parkinsonism in rats, Dis Model Mech 8, 57-63)；BRET (Pfleger, K.D.等人, (2006) Illuminating insights into protein-protein interactions using bioluminescence resonance energy transfer (BRET), Nat Methods 3, 165-174)；時間解析FRET檢定(Fernandez-Duenas, V.等人, 2015)；原位雜交(He, S.Q.等人, (2011) Facilitation of mu-opioid receptor activity by preventing delta-opioid receptor-mediated codegradation, Neuron 69, 120-131)；FRET (Lohse, M.J.等人, (2012) Fluorescence / bioluminescence resonance energy transfer techniques to study G-protein-coupled receptor activation and signaling, Pharmacol Rev 64, 299-336)；使用GPCR異聚體鑑別技術(GPCR-HIT, Dimerix Bioscience) (Mustafa, S.等人, (2011) G protein-coupled receptor heteromer identification technology: identification and profiling of GPCR heteromers, J Lab Autom 16, 285-291)、使用BRET、FRET、BiFC、雙分子發光互補、酶片段檢定及Tango Tango GPCR檢定系統(Thermo Fisher Scientific) (Mustafa, S.等人, (2010) Uncovering GPCR heteromer-biased ligands, Drug Discov Today Technol 7, e1-e94)之β-抑制蛋白(β-arrestin )募集檢定；PRESTO-Tango系統(Kroeze, W.K.等人, (2015) PRESTO-Tango as an open-source resource for interrogation of the druggable human GPCRome, Nat Struct Mol Biol 22, 362-369)；調控分泌/聚集技術(ARIAD Pharmaceuticals) (Hansen, J.L.等人, (2009) Lack of evidence for AT1R/B2R heterodimerization in COS-7, HEK293, and NIH3T3 cells: how common is the AT1R/B2R heterodimer? J Biol Chem 284, 1831-1839)；受體選擇及擴增技術(ACADIA Pharmaceuticals)(Hansen, J.L.等人, 2009)；DimerScreen (Cara Therapeutics)(Mustafa，S.，2010)；二聚體/相互作用蛋白易位檢定(Patobios)(Mustafa，S.，2010)；免疫共沉澱法(Abd Alla, J.等人, (2009) Calreticulin enhances B2 bradykinin receptor maturation and heterodimerization, Biochem Biophys Res Commun 387, 186-190)；使用表面酶聯免疫吸附檢定(ELISA)(Decaillot, F.M.等人, 2008)或流式細胞分析技術(Law, P.Y.等人, (2005) Heterodimerization of mu- and delta-opioid receptors occurs at the cell surface only and requires receptor-G protein interactions, J Biol Chem 280, 11152-11164)之GPCR內化檢定；全細胞磷酸化檢定(Pfeiffer, M.等人, (2002) Heterodimerization of somatostatin and opioid receptors cross-modulates phosphorylation, internalization, and desensitization, J Biol Chem 277, 19762-19772)；及接近連接檢定(PLA)(Frederick, A.L.等人, (2015) Evidence against dopamine D1/D2 receptor heteromers, Mol Psychiatry 20, 1373-1385)。
用於偵測表現CXCR4及ADRB2兩者之細胞中之藥理學性質、傳訊性質及/或轉運性質之變化的替代方法包括但不限於：放射性配體結合檢定(Bushlin, I.等人, 2012；Pfeiffer, M.等人, 2002)；細胞表面生物素化及免疫墨點法(He, S.Q.等人, 2011)；免疫染色(Bushlin, I.等人, 2012; Decaillot, F.M.等人, 2008)；免疫電子顯微術(Fernandez-Duenas, V.等人, 2015); [35S]GTP-γS結合檢定(Bushlin, I.等人, 2012)；使用諸如Fura 2-乙醯甲氧基酯(Molecular Probes)、Fluo-4 NW鈣染料(Thermo Fisher Scientific)或FLIPR5染料(Molecular Devices)之鈣成像或檢定；使用放射性免疫檢定套組之cAMP檢定(Amersham Biosciences)；AlphaScreen (PerkinElmer Life Sciences)；Parameter Cyclic AMP 檢定(R&D Systems)；femto cAMP套組(Cisbio)；cAMP直接免疫檢定套組(Calbiochem) 或GloSensor cAMP檢定(Promega); GTP酶檢定(Pello, O.M.等人, (2008) Ligand stabilization of CXCR4/delta-opioid receptor heterodimers reveals a mechanism for immune response regulation, Eur J Immunol 38, 537-549)；PKA活化(Stefan, E.等人, (2007) Quantification of dynamic protein complexes using Renilla luciferase fragment complementation applied to protein kinase A activities in vivo, Proc Natl Acad Sci U S A 104, 16916-16921)；ERK1/2及/或Akt/PKB磷酸化檢定(Callen, L.等人, (2012) Cannabinoid receptors CB1 and CB2 form functional heteromers in brain, J Biol Chem 287, 20851-20865)；報導基因檢定諸如cAMP反應元件(CRE)；血清反應元件(SRE)；血清反應因子反應元件(SRF-RE)；及分泌型鹼性磷酸酶檢定(Decaillot, F.M.等人, 2011)；使用TR-FRET或[3H]肌醇來量測1-磷酸肌醇產生(Mustafa, S.等人, (2012) Identification and profiling of novel alpha1A-adrenoceptor-CXC chemokine receptor 2 heteromer, J Biol Chem 287, 12952-12965); 用於量測下游靶基因表現之RT-qPCR (Mustafa, S.等人, 2012)；及腺苷酸環化酶活性(George, S.R.等人, (2000) Oligomerization of mu- and delta-opioid receptors. Generation of novel functional properties. J Biol Chem 275, 26128-26135)；下一代定序(NGS)；以及可以偵測由於受體異二聚化所產生之受體功能變化的任何其他檢定。
如本文所用，術語「ADRB2」係指腎上腺素受體β2 (亦稱為β-2腎上腺素受體或β2腎上腺素受體)，其為與腎上腺素(epinephrine)相互作用的跨細胞膜β-腎上腺素受體 ，腎上腺素為其經由下游L型鈣通道相互作用之傳訊介導生理反應諸如平滑肌鬆弛及支氣管擴張的激素及神經傳遞物質 (配體同物異名，腎上腺素(adrenaline))(Gregorio, G.G.等人, 2017)。ADRB2亦藉由如表1所示之獨特示範性資料庫標識符(ID)及替代名稱來鑑別。ADRB2在肌肉系統(如平滑肌鬆弛、運動神經末梢、肝醣分解)及循環系統(如心肌收縮、心輸出量增加)中起作用。在正常眼睛中，沙丁胺醇(salbutamol)對β-2之刺激經由網路增加眼內壓。在消化系統中，ADRB2誘導肝臟之肝醣分解及葡萄糖新生以及胰腺之胰島素分泌(Fitzpatrick, D.等人, (2004) 「Table 20:2」 (Mass: Sunderland))。ADRB2之活化可刺激促進腫瘤生長及轉移之傳訊途徑(Antoni, M.H.等人, (2006) Nat Rev Cancer 6: 240-248；Thaker, P.H.等人, (2006) Nat Med 12: 939-944)，包括Ras介導之Raf原癌基因絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶(Raf)/雙特異性促分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/細胞外訊息調控激酶(ERK)、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/RAC絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶(Akt)及cAMP/蛋白激酶A/促分裂原活化之蛋白激酶途徑，其促進細胞增殖及入侵並抑制癌細胞之凋亡，從而可增強腫瘤生長並促進轉移(Quốc Lu'o'ng, K.V.等人, (2012) Cancer Manag Res 4: 431-445)。
如本文所用，術語「CXCR4」係指C-X-C模體趨化因子受體4，其亦藉由如表1所示之獨特示範性資料庫標識符(ID)及替代名稱來鑑別(Chatterjee, S.等人, 2014；Debnath, B.等人, 2013；Domanska, U.M.等人, 2013；Guo, F.等人, (2016) CXCL12/CXCR4: a symbiotic bridge linking cancer cells and their stromal neighbors in oncogenic communication networks, Oncogene 35, 816-826；Peled, A.等人, (2012) Development of novel CXCR4-based therapeutics, Expert Opin Investig Drugs 21, 341-353；Roccaro, A.M.等人, (2014) SDF-1 inhibition targets the bone marrow niche for cancer therapy, Cell Rep 9, 118-128；Walenkamp, A.M.E.等人, (2017) CXCR4 Ligands: The Next Big Hit? J Nucl Med 58，77S-82S)。CXCL12與CXCR4之結合引發配體結合下游之不同傳訊途徑，從而可能導致多種反應，例如趨化性、細胞存活及/或增殖、細胞內鈣增加及基因轉錄。已顯示，趨化性係經由MAPK，透過PKC或透過Gαi 來介導，該等途徑可透過Erk/1/2來傳訊(Mellado, M.等人, (2001) Annu Rev Immunol;19:397–421; Bendall, L.J.等人, (2005) Cancer Res;65:3290–8)。趨化因子CXCL12及趨化因子受體CXCR4對在腫瘤形成之許多階段起重要作用。CXCR4在多種人類癌症中過表現，且此過表現與多種癌症個體(包括乳癌、肺癌、腎癌、結腸癌、卵巢癌及腦癌以及淋巴瘤及白血病)中之複發風險增加及總體生存不佳相關(Balkwill, F., (2004) Nat Rev Cancer; 4:540–50. 1–5； Orimo, A.等人, (2005) Cell; 121:335–48；Domanska, U.M.等人, 2013)。CXCR4在癌症及其他疾病中之關鍵作用觸發了供臨床使用之選擇性CXCR4抑制劑之開發。表 1
基因名稱 完整名稱 其他名稱 示範性ID
CXCR4 C-X-C模體趨化因子受體4 白血球衍生之七跨膜域受體；脂多醣相關蛋白3；基質細胞衍生之因子1受體；趨化因子(C-X-C模體)受體4；LPS相關蛋白3七跨膜螺旋受體；C-X-C趨化因子受體第4型；神經肽Y受體Y3；神經肽Y3受體；趨化因子受體；七跨膜區段受體，脾臟；趨化因子(C-X-C模體)，受體4 (融合素(Fusin))；SDF-1受體；CD184抗原；融合素；LAP-3；LESTR；NPYRL；FB22；HM89；LCR1；D2S201E；HSY3RR；NPYY3R； CXC-R4；CXCR-4；CD184；NPY3R；WHIMS；LAP3；NPYR；WHIM GCID：GC02M136114 HGNC：2561 Entrez基因：7852 Ensembl：ENSG00000121966 OMIM：162643 UniProtKB：P61073
ADRB2 腎上腺素受體β2 腎上腺素β-2受體，表面；β-2腎上腺素受體；β-2腎上腺素受體；ADRB2R；B2AR；腎上腺素受體β2，表面；腎上腺素受體β2表面；β-2腎上腺素受體；兒茶酚胺受體； BETA2AR；ADRBR；BAR GCID：GC05P148825 HGNC：286 Entrez基因：154 Ensembl：ENSG00000169252 OMIM：109690 UniProtKB：P07550
* GCID：Genecards鑑別 HGNC：HUGO基因命名委員會
如本文所用，術語「CXCL12」(或基質衍生之因子1 (「SDF-1」))係指淋巴球之強趨化劑。在胚胎發生期間，CXCL12引導造血細胞從胎兒肝臟向骨之遷移，且在成年期，CXCL12藉由透過CXCR4依賴性機制募集內皮先驅細胞而在血管生成中發揮重要作用。CXCL12亦在脾紅髓及淋巴結髓索內經表現(Pitt等人, (2015) Cancer Cell, 27:755-768；及Zhao等人, (2011) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 108:337-342)。人類CXCL12之示範性胺基酸序列及對應編碼核酸序列可分別見於GENBANK登錄號：NP_954637.1及NM_199168.3。
沙美特羅為 長效β2 腎上腺素受體促效劑 (LABA)且具有自胺11個原子之鏈長度的芳烷基。據信此種蓬鬆性使該化合物更具親脂性並且對β2腎上腺素受體具有選擇性。沙美特羅由Glaxo (現為GlaxoSmithKline，GSK)於1980年代首次銷售及製造，於1990年作為Serevent®發售。該產品由GSK在英國以Allen＆Hanburys品牌銷售。沙美特羅用於維持及預防哮喘症狀以及維持 慢性阻塞性肺病 (COPD)症狀(2010年全球慢性阻塞性疾病倡議(2010 Global initiative for chronic obstructive disease))。支氣管痙攣之症狀包括 呼吸短促、喘鳴、咳嗽及胸悶。沙美特羅亦用於預防運動期間之呼吸困難(運動誘導之支氣管收縮)。
如本文所用，術語「ADRB2抑制劑」係指抑制或壓製ADRB2單體或者CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元或單元體之功能之分子。本文所提供之可用於治療方法、抑制方法、醫藥組合物及/或醫藥套組以及其方法及用途之ADRB2抑制劑之非限制性實例包括但不限於：ADRB2拮抗劑、ADRB2反向促效劑、ADRB2陽性別構調節劑、ADRB2陰性別構調節劑、ADRB2特異性抗體或其抗原結合部分(包括單域抗體樣支架)、具有藉由間隔臂連接至對CXCR4有選擇性之藥效基團之對ADRB2有選擇性之藥效基團的二價配體、針對ADRB2及CXCR4之雙特異性抗體、與CXCR4配體連接之放射性標記之ADRB2配體以及抑制CXCR4-ADRB2異聚體選擇性傳訊之小分子配體。在某些實施例中，ADRB2抑制劑抑制或壓製ADRB2單體之功能。在某些實施例中，ADRB2抑制劑抑制或壓製CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元或單元體之功能。在某些實施例中，ADRB2抑制劑抑制或壓製CXCR4-ADRB2異聚體之功能。在某些實施例中，ADRB2抑制劑抑制或壓製在用ADRB2單體之ADRB2促效劑來刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，ADRB2抑制劑抑制或壓製在用CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元之ADRB2促效劑來刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，ADRB2抑制劑抑制或壓製在用CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元之ADRB2促效劑及CXCR4促效劑來共刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，ADRB2抑制劑抑制或壓製在用CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2促效劑及CXCR4促效劑來共刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，增強之反應為增強之Ca2+反應。在某些實施例中，增強之反應為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之癌症進展。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞增殖。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞遷移。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之轉移。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之腫瘤生長。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之血管生成。在某些實施例中，該一或多個細胞為一或多個癌細胞。在某些實施例中，該一或多個細胞源自個體。在某些實施例中，該一或多個細胞來自從個體獲得之生物樣品。表2列出了ADRB2抑制劑之某些實例。
如本文所用，術語「CXCR4抑制劑」係指抑制或壓製CXCR4單體或者CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元或單元體之功能之分子。本文所提供之可用於治療方法、抑制方法、醫藥組合物及/或醫藥套組以及其方法及用途之CXCR4抑制劑之非限制性實例包括但不限於：CXCR4拮抗劑、CXCR4反向促效劑、CXCR4陽性別構調節劑、CXCR4陰性別構調節劑、CXCR4特異性抗體或其抗原結合部分(包括單域抗體樣支架)、具有藉由間隔臂連接至對ADRB2有選擇性之藥效基團之對CXCR4有選擇性之藥效基團的二價配體、針對ADRB2及CXCR4之雙特異性抗體、與CXCR4配體連接之放射性標記之ADRB2配體以及抑制CXCR4-ADRB2異聚體選擇性傳訊之小分子配體。在某些實施例中，CXCR4抑制劑抑制或壓製CXCR4單體之功能。在某些實施例中，CXCR4抑制劑抑制或壓製CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元或單元體之功能。在某些實施例中，CXCR4抑制劑抑制或壓製CXCR4-ADRB2異聚體之功能。在某些實施例中，CXCR4抑制劑抑制或壓製用CXCR4單體之CXCR4促效劑刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，CXCR4抑制劑抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元之CXCR4促效劑刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，CXCR4抑制劑抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元之CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，CXCR4抑制劑抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，增強之反應為增強之Ca2+反應。在某些實施例中，增強之反應為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之癌症進展。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞增殖。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞遷移。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之轉移。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之腫瘤生長。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之血管生成。在某些實施例中，該一或多個細胞為一或多個癌細胞。在某些實施例中，該一或多個細胞源自個體。在某些實施例中，該一或多個細胞來自從個體獲得之生物樣品。表2列出了CXCR4抑制劑之某些實例。
如本文所用，術語「拮抗劑」係指藉由結合並阻斷受體來阻斷或阻抑生物反應的一類受體配體或藥物，亦稱為阻斷劑。拮抗劑對它們的同族受體具有親和力，且它們的結合破壞了相互作用並抑制了在同族受體處促效劑或反向促效劑之功能。例如，ADRB2拮抗劑可為藉由結合及/或阻斷ADRB2受體來阻斷或阻抑生物反應之ADRB2配體或ADRB2藥物。在某些實施例中，ADRB2拮抗劑可破壞ADRB2促效劑或ADRB2反向促效劑與ADRB2 (例如，ADRB2單體或者CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元體或單元)之相互作用及/或抑制ADRB2促效劑或ADRB2反向促效劑與ADRB2 (例如，ADRB2單體或者CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元體或單元)之功能。在某些實施例中，ADRB2拮抗劑阻斷、抑制或壓製ADRB2單體之功能。在某些實施例中，ADRB2拮抗劑阻斷、抑制或壓製CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元或單元體之功能。在某些實施例中，ADRB2拮抗劑阻斷、抑制或壓製CXCR4-ADRB2異聚體之功能。在某些實施例中，ADRB2拮抗劑阻斷、抑制或壓製用ADRB2單體之ADRB2促效劑刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，ADRB2拮抗劑阻斷、抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元之ADRB2促效劑刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，ADRB2拮抗劑阻斷、抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2單元之ADRB2促效劑及CXCR4促效劑共刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，ADRB2拮抗劑阻斷、抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2促效劑及CXCR4促效劑共刺激之後的增強之反應。例如，CXCR4拮抗劑可為藉由結合及/或阻斷CXCR4受體來阻斷或阻抑生物反應之CXCR4配體或CXCR4藥物。在某些實施例中，CXCR4拮抗劑可破壞CXCR4促效劑或CXCR4反向促效劑與CXCR4 (例如，CXCR4單體或者CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元體或單元)之相互作用及/或抑制CXCR4促效劑或CXCR4反向促效劑與CXCR4 (例如，CXCR4單體或者CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元體或單元)之功能。在某些實施例中，CXCR4拮抗劑阻斷、抑制或壓製CXCR4單體之功能。在某些實施例中，CXCR4拮抗劑阻斷、抑制或壓製CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元或單元體之功能。在某些實施例中，CXCR4拮抗劑阻斷、抑制或壓製CXCR4-ADRB2異聚體之功能。在某些實施例中，CXCR4拮抗劑阻斷、抑制或壓製用CXCR4單體之CXCR4促效劑刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，CXCR4拮抗劑阻斷、抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元之CXCR4促效劑刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，CXCR4拮抗劑阻斷、抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4單元之ADRB2促效劑及CXCR4促效劑共刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，CXCR4拮抗劑阻斷、抑制或壓製用CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2促效劑及CXCR4促效劑共刺激之後的增強之反應。在某些實施例中，增強之反應為增強之Ca2+反應。在某些實施例中，增強之反應為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之癌症進展。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞增殖。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞遷移。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之轉移。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之腫瘤生長。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之血管生成。在某些實施例中，該一或多個細胞為一或多個癌細胞。在某些實施例中，該一或多個細胞源自個體。在某些實施例中，該一或多個細胞來自從個體獲得之生物樣品。表2列出了CXCR4拮抗劑及ADRB2拮抗劑之某些實例。表 2
基因名稱 示範性拮抗劑/ 反向促效劑 示範性抗體/ 奈米抗體/ i- 抗體/ 其他
CXCR4 ALX40-4C、AMD070 (AMD11070，X4P-001)、AMD3100 (普樂沙福(plerixafor))、AMD3465、ATI 2341、BKT140 (BL-8040；TF14016；4F-苯甲醯基-TN14003)、CTCE-9908、CX549、D-[Lys3] GHRP-6、FC122、FC131、GMI-1359、GSK812397、GST-NT21MP、異硫脲-1a、異硫脲-1t (IT1t)、KRH-1636、KRH-3955、LY2510924、MSX-122、N-[11 C] 甲基-AMD3465、POL6326、SDF-1 1-9 [P2G]二聚體、SDF1 P2G、T134、T140、T22、TC 14012、TG-0054 (布利沙福)、USL311、病毒巨噬細胞炎性蛋白II (vMIP-II)、WZ811、[64 Cu]-AMD3100、[64 Cu]-AMD3465、[68 Ga] 潘替沙福(pentixafor)、[90 Y] pentixather、[99m Tc]O2 -AMD3100、[177 Lu] pentixather及508MCl (化合物26)。 AD-114、AD-114-6H、AD-114-Im7-FH、AD-114-PA600-6H、ALX-0651、LY2624587、PF-06747143、烏克普魯單抗(ulocuplumab)(MDX1338/BMS-936564)、12G5、238D2及238D4
ADRB2 阿普洛爾(alprenolol)、阿替洛爾(atenolol)、倍他洛爾(betaxolol)、布拉洛爾(bupranolol)、布托沙明(butoxamine)、卡那洛爾(carazolol)、卡維地洛、CGP 12177、環丙洛爾(cicloprolol)、ICI 118551、ICYP、拉貝洛爾(labetalol)、左旋倍他洛爾(levobetaxolol)、左旋布諾洛爾(levobunolol)、LK 204-545、美托洛爾(metoprolol)、納多洛爾(nadolol)、NIHP、NIP、普羅帕酮(propafenone)、普萘洛爾(propranolol)、索他洛爾(sotalol)、SR59230A及噻嗎洛爾(timolol)。   
如本文所用，片語「蛋白-蛋白相互作用抑制劑」、「PPI抑制劑」或它們的變形係指可乾擾蛋白-蛋白相互作用之任何分子。與涉及明確的結合袋區(binding pocket)之酶-受質相互作用不同，蛋白-蛋白相互作用為蛋白之間在相對較大區域上的瞬時相互作用或締合且通常由靜電相互作用、疏水相互作用、氫鍵及/或凡得瓦力驅動。PPI抑制劑可包括但不限於與破壞GPCR異聚體界面之肽序列融合之膜滲透性肽或脂質，例如CXCR4及/或ADRB2單元之跨膜螺旋、細胞內環或C末端尾。CXCR4-ADRB2異聚體之PPI抑制劑例如可為與靶向一或多個CXCR4-ADRB2異聚體界面之肽結合之膜滲透性肽或細胞穿透肽(CPP)，或可為靶向一或多個CXCR4-ADRB2異聚體界面之細胞穿透脂化肽。
例如，膜滲透性肽或細胞穿透肽包括：HIV-1 TAT肽，例如TAT48-60 及TAT49-57 ；滲透蛋白(Penetratin)，例如pAntp(43-58)；聚精胺酸(Rn，例如R5至R12)；Diatos肽載體1047 (DPV1047，Vectocell®)；MPG (與SV40大T抗原之核定位訊號(NLS)融合之HIV gp41)；Pep-1 (與SV40大T抗原之NLS融合之富含色胺酸之簇)；pVEC肽(血管內皮鈣黏著蛋白)；基於p14替代閱讀框(ARF)蛋白之ARF(1-22)；未加工之牛朊病毒蛋白BPrPr之N末端(1-28)；模型兩親性肽(MAP)；Transportan；天青蛋白衍生之p28肽；兩親性β折疊肽，例如VT5；富含脯胺酸之CPP，例如Bac 7 (Bac1-24)；疏水性CPP，例如衍生自α1-抗胰蛋白酶之C105Y；衍生自合成C105Y之PFVYLI；Pep-7肽(CHL8肽噬菌體殖株)；以及經修飾之疏水性CPP，例如裝訂肽(stapled peptide)及異戊烯基化肽(Guidotti, G.等人, (2017) Cell-Penetrating Peptides: From Basic Research to Clinics, Trends Pharmacol Sci 38, 406-424；Kristensen, M.等人, (2016) Applications and Challenges for Use of Cell-Penetrating Peptides as Delivery Vectors for Peptide and Protein Cargos, Int J Mol Sci 17)。膜滲透性肽或細胞穿透肽可進一步包括例如TAT衍生細胞穿透肽、基於訊息序列之(例如，NLS)細胞穿透肽、疏水性膜易位序列(MTS)肽及富含精胺酸之分子運輸蛋白。細胞穿透脂質化肽包括例如pepducin，例如ICL1/2/3、C-尾短棕櫚醯化肽(Covic, L.等人, (2002) Activation and inhibition of G protein-coupled receptors by cell-penetrating membrane-tethered peptides, Proc Natl Acad Sci USA, 99, 643-648；及O’Callaghan, K.等人, (2012) Turning receptors on and off with intracellular pepducins: new insights into G-protein-coupled receptor drug development. J Biol Chem 287, 12787-12796)。
靶向CXCR4-ADRB2異聚體界面之一或多種肽可為例如CXCR4之跨膜域、ADRB2之跨膜域、CXCR4之細胞內環、ADRB2之細胞內環、CXCR4之C末端域或ADRB2之C末端域、CXCR4之細胞外環、ADRB2之細胞外環、CXCR4之N末端區或ADRB2之N末端區。
如本文所用，當與基因結合使用時，術語「表現(express、expression或expressing)」及其類似者係指基因所攜帶之資訊因表現型而變成顯性之過程，包括將基因轉錄成信使RNA (mRNA)，隨後將mRNA分子轉譯成多肽鏈並將其組裝成最終蛋白。在某些實施例中，可以根據特定基因之表現，例如根據來自特定基因之最終蛋白之表現來表徵疾病，例如癌症。例如，癌症可表徵為表現CXCR4之癌症、表現ADRB2之癌症或表現CXCR4並且表現ADRB2之癌症。
如本文所用，當與基因結合使用時，片語「表現水準」係指基因之表現產物之量或累積，例如基因之RNA產物之量(基因之RNA水準)或基因之蛋白產物之量(基因之蛋白水準)。除非另外指定，否則若基因具有多於一個對偶基因，則基因之表現水準係指此基因之所有現有對偶基因之表現產物之累積總量。例如，癌症可與基因之特定產物(例如，基因之特定RNA產物或基因之特定蛋白產物)之表現水準(量)有關。例如，癌症可與基因之特定產物(例如，基因之特定RNA產物或基因之特定蛋白產物)之表現水準(量)有關。例如，癌症可具有CXCR4基因之特定表現水準。例如，癌症可具有ADRB2基因之特定表現水準。例如，癌症可具有CXCR4基因之特定表現水準及ADRB2基因之特定表現水準。例如，癌症可具有CXCR4蛋白之特定表現水準。例如，癌症可具有ADRB2蛋白之特定表現水準。例如，癌症可具有CXCR4蛋白之特定表現水準及ADRB2蛋白之特定表現水準。
如本文所用，當與可定量值結合使用時，術語「參考」係指可用於確定如在樣品中所量測之值之顯著性的預定值。
如本文所用，片語「參考表現水準」係指可用於確定細胞中或樣品中基因之表現水準之顯著性的基因之預定表現水準。基因之參考表現水準可為一般熟習此項技術者所確定的參考細胞中基因之表現水準。例如，CXCR4基因之參考表現水準可為其在細胞(例如T細胞或癌細胞)中之平均表現水準。因此，若高於細胞(例如T細胞或癌細胞)中基因之平均表現水準，則可確定細胞(或細胞樣品)中CXCR4基因之表現水準指示該細胞(或細胞樣品)為表現CXCR4之細胞(或表現CXCR4之細胞樣品)。例如，ADRB2基因之參考表現水準可為其在細胞(例如T細胞或癌細胞)中之平均表現水準。因此，若高於細胞(例如T細胞或癌細胞)中基因之平均表現水準，則可確定ADRB2基因在細胞(或細胞樣品)中之表現水準指示該細胞為表現ADRB2之細胞(或表現ADRB2之細胞樣品)。基因之參考表現水準亦可為一般熟習此項技術者透過對各種樣品細胞群中基因之表現水準進行之統計分析所確定之截止值。例如，癌症之樣品中CXCR4基因之表現水準可高於CXCR4基因之參考水準。例如，癌症之樣品中CXCR4蛋白之表現水準可高於CXCR4蛋白之參考水準。例如，癌症之樣品中ADRB2基因之表現水準可高於ADRB2基因之參考水準。例如，癌症之樣品中ADRB2蛋白之表現水準可高於ADRB2蛋白之參考水準。例如，癌症之樣品中CXCR4基因之表現水準及ADRB2基因之表現水準可分別高於CXCR4基因之參考水準及ADRB2基因之參考水準。例如，癌症之樣品中CXCR4蛋白之表現水準及ADRB2蛋白之表現水準可分別高於CXCR4蛋白之參考水準及ADRB2蛋白之參考水準。在某些實施例中，例如，藉由分析具有至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%已知表現一基因之細胞之樣品細胞群中該基因之表現水準，一般熟習此項技術者可確定呈基因之參考表現水準之截止值，該截止值可用於指示在組成未知的細胞群中表現該基因之細胞之百分比。
如本文所用，關於個體(例如，癌症個體，例如癌症患者)，術語「選擇(selecting)」及「選定之(selected)」用於意謂特定個體基於(由於)具有預定標準或一組預定標準而明確選自較大個體群，例如，個體之CXCLR4表現水準大於參考水準、個體之ADRB2表現水準大於參考水準之或者個體之CXCR4表現水準及ADRB2表現水準高於相應參考水準。類似地，「選擇性治療個體」係指向以下個體(例如，癌症個體，例如癌症患者)提供治療，該個體基於(由於)具有預定標準或一組預定標準而明確選自較大個體群，例如，個體之CXCR4表現水準大於參考水準、個體之ADRB2表現水準大於參考水準或者個體之CXCR4表現水準及ADRB2表現水準大於相應參考水準。類似地，「選擇性投與」係指向以下個體(例如，癌症個體，例如癌症患者)投與藥物，該個體基於(由於)具有預定標準或一組預定標準而明確選自較大個體群，例如，個體之CXCR4表現水準大於參考水準、個體之ADRB2表現水準大於參考水準或者個體之CXCR4表現水準及ADRB2表現水準大於相應參考水準。選擇、選擇性治療及選擇性投與意謂個體係基於個體之生物學而遞送針對疾病或病症(例如癌症)之個性化療法，而不是僅基於患有疾病或病症(例如癌症)而遞送標準治療方案。
傳統上認為GPCR起在配體結合之後與異三聚體G蛋白相互作用之單體的作用，且藥物係基於單體GPCR或同聚GPCR而開發(Milligan, G. (2008) A day in the life of a G protein-coupled receptor: the contribution to function of G protein-coupled receptor dimerization, Br J Pharmacol 153 Suppl 1, S216-229)。這種觀點已發生了巨大變化，因為發現GPCR可形成異聚體，且異聚化對於一些GPCR而言為必不可少的。已知GPCR異聚化改變GPCR成熟及細胞表面遞送、配體結合親和力、傳訊強度及途徑以及受體去敏化及再循環(Terrillon, S.等人, (2004) Roles of G-protein-coupled receptor dimerization, EMBO Rep 5, 30-34；Ferre, S.等人, (2009)；Rozenfeld, R.等人, (2010) Receptor heteromerization and drug discovery, Trends Pharmacol Sci 31, 124-130；Gomes, I.等人, (2016)；Farran, B. (2017) An update on the physiological and therapeutic relevance of GPCR oligomers, Pharmacol Res 117, 303-327)。不同GPCR異聚體顯示出不同功能及藥理性質，且GPCR異聚化可根據細胞型、組織及疾病或病理狀況而有所不同(Terrillon, S.等人, 2004；Ferre, S.等人, 2009；Rozenfeld, R.等人, 2010；Gomes, I.等人, 2016；Farran, B., 2017)。現在，GPCR異聚化被認為是普遍現象，且解釋GPCR異聚化為理解受體功能、生理學、在疾病及病理狀況中之作用方面開闢了新途徑。因此，鑑別GPCR異聚體及其功能性質為開發新藥品或尋找舊藥物之副作用較少、功效較高且組織選擇性增加的新用途提供了新機會(Ferre, S.等人, 2009；Rozenfeld, R.等人, 2010；Farran, B., 2017)。
真正GPCR異聚體之鑑別需要透徹且嚴格的評估。為了將GPCR異聚體與GPCR之簡單締合區分開，此項技術中之研究人員以及國際基礎及臨床藥理學聯合會之受體命名法及藥物分類委員會(International Union of Basic and Clinical Pharmacology Committee on Receptor Nomenclature and Drug Classification；NC-IUPHAR)宣佈GPCR異聚體為「由至少兩個具有明顯不同於其個別組分之生物化學性質之(功能性)受體單元[單元體]組成」，且此等異聚體存在於天然組織中(Ferre, S.等人, 2009；Gomes, I.等人, 2016；Pin, J.P.等人, (2007) International Union of Basic and Clinical Pharmacology. LXVII. Recommendations for the recognition and nomenclature of G protein-coupled receptor heteromultimers, Pharmacol Rev 59, 5-13)。他們提出了三個標準來證明GPCR異聚體：(1)異聚體應表現出適當共定位及相互作用，以使用免疫共沉澱、原位雜交或基於接近性之技術(包括接近連接檢定)在表現兩種受體之細胞/組織中實現別構，而在缺乏受體之一之細胞/組織中不實現別構；(2)異聚體應僅在表現兩種受體之細胞/組織中表現出獨特性質，例如傳訊、配體結合及/或轉運之變化，而在缺乏受體之一之細胞/組織中不表現；及(3)異聚體選擇性試劑應改變異聚體特異性性質。異聚體選擇性試劑包括異聚體選擇性抗體、膜滲透性肽及二價/雙功能配體(Gomes, I.等人, 2016；Pin, J.P.等人, 2007)。儘管已使用在異種細胞中表現之重組受體在活體外 鑑別出許多GPCR異聚體，但由於技術問題，僅少數顯示出新穎性質，且極少顯示出天然組織中GPCR異聚化之證據(Gomes, I.等人, 2016)。NC-IUPHAR宣佈對於批准新GPCR異聚體，應提供滿足上述三個標準中之至少兩個標準之證據(Pin, J.P.等人, 2007)。
如本文所揭示，在確定CXCR4-ADRB2異聚體之存在(presence/existence )中，為了確立是否滿足3個標準中之標準1 (關於異聚體組分是否直接或經由充當別構之通道之中間蛋白來共定位及物理相互作用)，可使用以下方法中之一或多者，包括但不限於：共內化檢定；共定位檢定(確定細胞區室內受體單元體之共定位)，例如原位 雜交、免疫組織化學或免疫電子顯微鏡術；基於接近性之檢定，例如基於接近性之生物物理技術，包括共振能量轉移(RET)、生物發光RET (BRET)、螢光RET (FRET)、時間解析螢光RET (TR-FRET)、抗體輔助FRET、配體輔助FRET、雙分子螢光互補(BiFC)、CXCR4及ADRB2之表現水準以及接近連接檢定(PLA)；免疫共沉澱檢定；或螢光動物。例如，利用BiFC、共內化檢定、CXCR4及ADRB2之表現水準或PLA來評估CXCR4-ADRB2異聚體是否滿足3個標準中之標準1。
如本文所揭示，為了確立是否滿足3個標準中之標準2 (關於CXCR4-ADRB2異聚體是否表現出不同於個別單元體之性質)，例如增強之下游傳訊，例如增加之鈣動員(例如藉由鈣動員檢定來確定)，對上文所討論之滿足3個標準中之標準1之CXCR4-ADRB2異聚體採用了雙層方法：(1)確定在個別單元體情境中是否存在增強之下游傳訊，例如增加之鈣動員(協同作用)，在(a)用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後，相對於(b)用單獨CXCL12或單獨ADRB2促效劑刺激，比較共表現HA-VC及單元體之一(CXCR4或ADRB2)之細胞中之鈣動員；及(2)確定在CXCR4-ADRB2異聚體情境中是否存在增強之下游傳訊，例如增加之鈣動員(協同作用)，在(a)用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後，相對於(b)用單獨CXCL12或單獨ADRB2促效劑之刺激之總和，比較在共同表現CXCR4及ADRB2之細胞中之鈣動員。如本文所揭示，為了滿足3個標準中之標準2且認為CXCR4-ADRB2異聚體產生增強之下游傳訊，例如增加之鈣動員，必須(1)在任一單元體情境(即CXCR4及HA-VC情境或ADRB2及HA-VC情境)中不存在增強之下游傳訊，例如增加之鈣動員，且(2)在CXCR4-ADRB2異聚體情境中存在增強之下游傳訊，例如增加之鈣動員。在單元體情境及CXCR4-ADRB2異聚體情境中，用於刺激細胞之CXCL12 (作為單一劑或與ADRB2促效劑組合)之濃度及用於刺激細胞之ADRB2促效劑(ADRB2之內源性促效劑或已知選擇性促效劑)(作為單一劑或與CXCL12組合)之濃度獨立地處於100倍EC50濃度或更低的濃度。例如，用於刺激細胞之CXCL12 (作為單一劑或與ADRB2促效劑組合)之濃度處於15 nM之濃度(大約為針對CXCR4之EC50濃度)。
如本文所揭示，在確定CXCR4-ADRB2異聚體之存在時，為了確立是否滿足3個標準中之標準3 (關於異聚體選擇性試劑是否應改變異聚體特異性性質)，滿足3個標準中之標準1及3個標準中之標準2之個體源性細胞在拮抗劑(CXCR4拮抗劑、ADRB2拮抗劑或CXCR4-ADRB2異聚體拮抗劑)之存在下受到影響，例如影響含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞增殖。
在一些實施例中，如本文所揭示之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥組合物或醫藥套組包括或依賴於確定細胞中CXCR4及ADRB2之締合滿足以下標準或特徵中之至少兩者以便被認為是CXCR4-ADRB2異聚體，其包含：1)細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白來共定位及物理相互作用，如經由以下中之一或多者所確定：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微術、CXCR4及ADRB2之表現水準、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定或螢光動物檢定；2)增加之鈣動員量，以使得：a)細胞中在個別單元體情境中用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後CXCR4或ADRB2產生等於或少於用CXCL12或ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量；及b)相對於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之該鈣動員量之總和，在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後，該CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員，如經由鈣動員檢定所確定；或3) CXCR4-ADRB2異聚體選擇性試劑：i)改變個體源性細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質；ii)改變個體源性細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；iii)改變含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或iv)降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症進展(諸如，一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展之降低、含有該CXCR4-ADRB2異聚體之一或多個個體源性細胞之細胞增殖之減少、一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞遷移之減少、一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之轉移之減少及/或一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之血管生成之減少)。在一些實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體選擇性試劑改變個體源性細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質，如藉由以下方法中之至少一種所確定：PLA；放射性配體結合檢定；[35S] GTP -γS結合檢定；Calcuim檢定；cAMP檢定；GTP酶檢定；PKA活化；ERK1/2及/或Akt/PKB磷酸化檢定；Src及STAT3磷酸化檢定；CRE報導基因檢定；NFAT-RE報導基因檢定；SRE報導基因檢定；SRF-RE報導基因檢定；分泌型鹼性磷酸酶檢定；1-磷酸肌醇產生檢定；腺苷酸環化酶活性檢定；藉由RT-PCR、RT-qPCR、RNAseq、下一代定序(NGS)或微陣列來分析靶基因表現。在一些實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體選擇性試劑改變個體源性細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能，如藉由以下方法中之至少一種所確定：PLA；放射性配體結合檢定；[35S] GTP -γS結合檢定；Calcuim檢定；cAMP檢定；GTP酶檢定；PKA活化；ERK1/2及/或Akt/PKB磷酸化檢定；Src及STAT3磷酸化檢定；CRE報導基因檢定；NFAT-RE報導基因檢定；SRE報導基因檢定；SRF-RE報導基因檢定；NF-kB-RE報導基因檢定；分泌型鹼性磷酸酶檢定；1-磷酸肌醇產生檢定；腺苷酸環化酶活性檢定；藉由RT-PCR、RT-qPCR、RNAseq或微陣列來分析靶基因表現。在一些實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體選擇性試劑改變含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質，如藉由以下方法中之至少一種所確定：對癌細胞之增殖、遷移、入侵及耐藥性(存活)之檢定；對免疫細胞功能之調節之檢定；對血管生成之檢定；對血管發生之檢定；對轉移之檢定；對耐藥性之檢定；對組織微陣列(TMA)之檢定；及對癌細胞-腫瘤微環境(TME)相互作用之檢定。例如，在一些實施例中，如本文所揭示之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥組合物或醫藥套組包括或依賴於確定細胞中CXCR4及ADRB2之締合滿足以下標準或特徵中之至少兩者以便被認為是CXCR4-ADRB2異聚體，其包含：1)細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白來共定位及物理相互作用，如經由以下中之一或多者所確定：共內化檢定、雙分子螢光互補(BiFC)、CXCR4及ADRB2之表現水準或接近連接檢定(PLA)；2)增加之鈣動員量，以使得：a)細胞中在個別單元體情境中用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後CXCR4或ADRB2產生等於或少於用CXCL12或ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量；及b)相對於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之該鈣動員量之總和，在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後，該CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員，如經由鈣動員檢定所確定；或3) CXCR4-ADRB2異聚體選擇性試劑：i)改變個體源性細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質；ii)改變個體源性細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；iii)改變含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或iv)降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症進展(諸如，一或多個個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展之降低、一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞增殖之減少、含有該CXCR4-ADRB2異聚體之一或多個個體源性細胞之細胞遷移之減少、一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之轉移之減少及/或一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之血管生成之減少)。在一些實施例中，如本文所揭示之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥組合物或醫藥套組包括或依賴於確立細胞中CXCR4及ADRB2之締合滿足標準1及2以便被認為是CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，如本文所揭示之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥組合物或醫藥套組包括或依賴於確立細胞中CXCR4及ADRB2之締合滿足標準1及3以便被認為是CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，如本文所揭示之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥組合物或醫藥套組包括或依賴於確立細胞中CXCR4及ADRB2之締合滿足標準2及3以便被認為是CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，如本文所揭示之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥組合物或醫藥套組包括或依賴於確立細胞中CXCR4及ADRB2之締合滿足標準1、2及3以便被認為是CXCR4-ADRB2異聚體。
如本文所揭示，滿足三個標準中之至少兩個的CXCR4-ADRB2異聚體可具有、引起或產生增強之下游傳訊。增強之下游傳訊可能係由於CXCR4-ADRB2異聚體，例如CXCR4-ADRB2異聚體之促效作用、CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效作用、CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2促效作用及/或CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效作用及ADRB2促效作用。在一些實施例中，增強之下游傳訊可在CXCR4、ADRB2或CXCR4-ADRB2異聚體之下游。在一些實施例中，相對於在相應個別單元體情境中來自CXCR4單元體或ADRB2單元體之下游傳訊，增強之下游傳訊可來自CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，相對於在個別單元體情境中來自CXCR4單元體之下游傳訊，增強之下游傳訊可來自CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，相對於在個別單元體情境中來自ADRB2單元體之下游傳訊，增強之下游傳訊可來自CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，相對於在相應個別單元體情境中來自CXCR4單元體或ADRB2單元體之下游傳訊，增強之下游傳訊可來自CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，來自該CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊可在癌症個體中經抑制，例如在個體之癌細胞中經抑制。在一些實施例中，來自該CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊可為增加之鈣動員量(或協同鈣動員量)，其可以藉由細胞內Ca2+檢定(例如鈣動員檢定)來確定。
如本文所揭示，滿足三個標準中之至少兩個的CXCR4-ADRB2異聚體可具有、引起或產生增強之下游傳訊，其中增強之下游傳訊為增加之鈣動員量。來自CXCR4-ADRB2異聚體之增加之鈣動員量可為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行之單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少10%的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在一些實施例中，來自CXCR4-ADRB2異聚體之增加之鈣動員量可為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行之單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少10%的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後的協同鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。例如，來自CXCR4-ADRB2異聚體之增加之鈣動員量(或協同鈣動員量)可為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行之單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少75%、至少90%、至少100%、至少150%或至少200%的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在一些實施例中，來自CXCR4-ADRB2異聚體之增加之鈣動員量(或協同鈣動員量)可為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行之單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大10-100%之間的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後的鈣動員量， 如經由鈣動員檢定所確定，例如可為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行之單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大25-100%之間、50-100%之間、75-100%之間或100-200%之間的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
在一些實施例中，根據如本文所揭示之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥組合物或醫藥套組，CXCR4-ADRB2異聚體滿足三個標準中之至少兩個，從而具有、引起或產生增強之下游傳訊，其中增強之下游傳訊為增加之鈣動員量，以使得：a)細胞中在個別單元體情境中在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後CXCR4或ADRB2產生等於或少於用CXCL12或ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量；及b) 相對於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之該鈣動員量之總和，在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後，該CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員；如經由鈣動員檢定所確定。例如，在一些實施例中，來自CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊為增加之鈣動員量，以使得：i)細胞中在個別單元體情境中，來自單元體CXCR4或ADRB2之鈣動員為非協同的，如經由鈣動員檢定所確定；且ii)細胞中來自CXCR4-ADRB2異聚體之鈣動員為協同的，如經由鈣動員檢定所確定。在一些實施例中，個別單元體情境可為：a)在不存在個別單元體ADRB2之情況下，細胞中之個別單元體CXCR4；或b)在不存在個別單元體CXCR4之情況下，細胞中之個別單元體ADRB2；在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生等於或小於用CXCL12或ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在一些實施例中，個別單元體情境可獨立地為：a)在不存在個別單元體ADRB2之情況下，細胞中之個別單元體CXCR4；及b)在不存在個別單元體CXCR4之情況下，細胞中之個別單元體ADRB2；在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生等於或小於用CXCL12或ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。例如，在一些實施例中，用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後由CXCR4-ADRB2異聚體產生之鈣動員量可大於用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和，如經由鈣動員檢定所確定。
本文提供了用於抑制患有癌症之個體之細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法，該方法包含向個體投與：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(b) ADRB2抑制劑；其中：(i)增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生；且(ii)所投與之抑制劑之組合抑制癌症個體中之來自該CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，該方法包含向個體投與：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(b) ADRB2抑制劑；其中：(i)增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生；且(ii)所投與之抑制劑之組合抑制癌症個體中之來自該CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，該方法包含：(a)確定個體之細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生；及(b)若個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與：(i) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(ii) ADRB2抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含：(1)藉由以下方式確定個體是否具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞：獲得或已獲得來自個體之生物樣品；及對生物樣品進行或已進行檢定以確定是否：(i)個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體；或(ii) CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合：改變一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質或功能；改變一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症進展；及(2)若個體具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(3)若個體不具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向癌症個體投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含：(1)藉由以下方式確定個體是否具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞：獲得或已獲得來自個體之生物樣品；及對生物樣品進行或已進行檢定以確定是否：(i)個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體；或(ii) CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合：改變一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質或功能；改變一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症進展；及(2)若個體具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及(3)若個體不具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向癌症個體投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑；其中：(a)相對於投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑，在向癌症個體投與布利沙福及ADRB2抑制劑之組合之後，具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之進展多降低5-100%之範圍；(b)相對於呈單一抑制劑投與時布利沙福之功效，當與ADRB2抑制劑組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體投與時，布利沙福之功效增加5-2000%之範圍；及/或(c)相對於呈單一抑制劑投與時ADRB2抑制劑之功效，當與布利沙福組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體投與時，ADRB2抑制劑之功效增加5-2000%之範圍。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含：(1)藉由以下方式確定個體之細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體：獲得或已獲得來自個體之生物樣品，及對生物樣品進行或已進行檢定以確定該CXCR4-ADRB2異聚體是否存在於個體之細胞中；其中對生物樣品進行之檢定為或包含以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定(proximity-based assay)、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、微陣列或螢光動物檢定；及(2)若個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(3)若個體之細胞不含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含：(1)藉由以下方式確定個體之細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體：獲得或已獲得來自個體之生物樣品，及對生物樣品進行或已進行檢定以確定該CXCR4-ADRB2異聚體是否存在於個體之細胞中；其中對生物樣品進行之檢定為或包含以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、微陣列或螢光動物檢定；及(2)若個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(3)若個體之細胞不含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向癌症個體投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑；其中：(a)相對於投與布利沙福或ADRB2抑制劑之單一抑制劑，在向癌症個體投與布利沙福及ADRB2抑制劑之組合之後，具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之進展多降低5-100%之範圍；(b)相對於呈單一抑制劑投與時布利沙福之功效，當與ADRB2抑制劑組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體投與時，布利沙福之功效增加5-2000%之範圍；及/或(c)相對於呈單一抑制劑投與時ADRB2抑制劑之功效，當與布利沙福組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體投與時，ADRB2抑制劑之功效增加5-2000%之範圍。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了在治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症中所使用之醫藥套組，該醫藥套組包含：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(b) ADRB2抑制劑；其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供在治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之醫藥組合物，該醫藥組成物包含：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；(b) ADRB2抑制劑；及(c)醫藥學上可接受之載劑；其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了包含以下之醫藥組合物：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；(b) ADRB2抑制劑；及(c)醫藥學上可接受之載劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了用於抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法，該方法包含向細胞投與：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(b) ADRB2抑制劑；其中：(i)增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生；且(ii)與布利沙福及ADRB2抑制劑之接觸抑制細胞中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊。在某些實施例中，該方法進一步包括確定細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體。在特定實施例中，細胞為個體之細胞。在特定實施例中，個體之細胞為癌細胞。在特定實施例中，細胞為癌細胞。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了在抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊中所使用之醫藥套組，該醫藥套組包含：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；及(b) ADRB2抑制劑；其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生。在特定實施例中，細胞為個體之細胞。在特定實施例中，個體之細胞為癌細胞。在特定實施例中，細胞為癌細胞。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
本文提供了在抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊中所使用之醫藥組合物，該醫藥組合物包含：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；(b) ADRB2抑制劑；及(c)醫藥學上可接受之載劑；其中增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生。在特定實施例中，細胞為個體之細胞。在特定實施例中，個體之細胞係癌細胞。在特定實施例中，細胞為癌細胞。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物進一步包括偵測癌症個體中之CXCR4-ADRB2異聚體之存在。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括鑑別癌症個體中之CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括獲得來自個體之生物樣品。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括對從該個體獲得之生物樣品進行檢定。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括：(i)獲得或已獲得來自癌症個體之生物樣品；(ii)進行或已進行確定從癌症個體獲得之生物樣品中之CXCR4-ADRB2異聚體之存在、一致性或存在與一致性的診斷檢定；及(iii)選擇與布利沙福組合投與的以抑制由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊的ADRB2抑制劑。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括確定是否個體之細胞含有CXCR4-ADRB2異聚體，其包含對從個體獲得之生物樣品進行檢定。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括確定是否個體之細胞含有CXCR4-ADRB2異聚體，其包含獲得來自個體之生物樣品，及對從該個體獲得之生物樣品進行檢定。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途包括其中從該個體獲得之生物樣品含有CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，個體之生物樣品為生物流體樣品。在一些實施例中，生物流體樣品為血液樣品、血漿樣品、唾液樣品、腦液樣品、眼液樣品或尿液樣品。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括其中對生物流體樣品進行液體生檢。在一些實施例中，個體之生物樣品為生物組織樣品。在一些實施例中，生物組織樣品為器官組織樣品、骨組織樣品或腫瘤組織樣品。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括其中對生物組織樣品進行組織樣品檢定。在一些實施例中，本文所提供之方法及用途包括其中個體之細胞含有CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，細胞為癌細胞。在一些實施例中，個體之細胞為癌細胞。在一些實施例中，個體為患者。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物進一步包括其中CXCR4-ADRB2異聚體具有以下特徵中之二或更多者：(1) CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白而在細胞中共定位並物理相互作用；(2)增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚物產生；及/或(3)布利沙福及ADRB2抑制劑之組合：(i)改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質；(ii)改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；(iii)改變一或多個含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；及/或(iv)降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症進展。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或藉由充當別構之通道之中間蛋白而共定位並物理相互作用。在特定實施例中，本文所提供之方法及用途進一步包括進行鑑別或確定細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4及ADRB2組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白而共定位並物理相互作用的檢定。在特定實施例中，確定細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體組分之共定位及物理相互作用之檢定包括以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-PCR、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準、微陣列或螢光動物檢定。在特定實施例中，檢定為共內化檢定。在特定實施例中，檢定為共定位檢定。在特定實施例中，檢定為原位雜交檢定。在特定實施例中，檢定為免疫共沉澱檢定。在特定實施例中，檢定為基於接近性之檢定。在特定實施例中，基於接近性之檢定為或包含共振能量轉移(RET)、生物發光RET (BRET)、螢光RET (FRET)、時間解析螢光RET (TR-FRET)、基於抗體之FRET、基於配體之FRET、雙分子螢光互補(BiFC)或接近連接檢定(PLA)。在特定實施例中，TR-FRET為基於配體之TR-FRET。在特定實施例中，TR-FRET為基於抗體之TR-FRET。在特定實施例中，檢定為雙分子螢光互補(BiFC)。在特定實施例中，檢定為接近連接檢定(PLA)。在特定實施例中，檢定為酶聯免疫吸附檢定(ELISA)。在特定實施例中，檢定為流式細胞分析技術檢定。在特定實施例中，檢定確定CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準及/或CXCR4及ADRB2之表現水準。在特定實施例中，檢定經由RNAseq確定CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準及/或CXCR4及ADRB2之表現水準。在特定實施例中，檢定經由RT-PCR確定CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準及/或CXCR4及ADRB2之表現水準。在特定實施例中，檢定經由RT-qPCR確定CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準及/或CXCR4及ADRB2之表現水準。在特定實施例中，檢定為微陣列檢定。在特定實施例中，檢定為螢光動物檢定。在特定實施例中，檢定確定從該個體獲得之生物樣品中CXCR4-ADRB2異聚體之存在。在特定實施例中，檢定確定個體中CXCR4-ADRB2異聚體之存在。在特定實施例中，檢定確定個體之細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生。在特定實施例中，增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生。在特定實施例中，增強之下游傳訊由該個體細胞中之CXCR4-ADRB2異聚體之存在產生。在特定實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體產生個體細胞中之增強之下游傳訊。在特定實施例中，增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體之促效作用產生。在特定實施例中，增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效作用產生。在特定實施例中，增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2促效作用產生。在特定實施例中，增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效作用及ADRB2促效作用產生。在特定實施例中，增強之下游傳訊在CXCR4、ADRB2或CXCR4-ADRB2異聚體之下游。在特定實施例中，增強之下游傳訊在CXCR4之下游。在特定實施例中，增強之下游傳訊在ADRB2之下游。在特定實施例中，增強之下游傳訊在CXCR4-ADRB2異聚體之下游。在特定實施例中，來自CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊係相對於在相應個別單元體情境中來自CXCR4單元體或ADRB2單元體之下游傳訊。在特定實施例中，來自CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊係相對於在個別單元體情境中來自CXCR4單元體之下游傳訊。在特定實施例中，來自CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊係相對於在個別單元體情境中來自ADRB2單元體之下游傳訊。在特定實施例中，來自CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊係相對於在相應個別單元體情境中來自CXCR4單元體及ADRB2單元體之下游傳訊。在特定實施例中，增強之下游傳訊為增加之鈣動員量。在特定實施例中，增強之反應為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之癌症進展。在特定實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞增殖。在特定實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞遷移。在特定實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之轉移。在特定實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之腫瘤生長。在特定實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之血管生成。在特定實施例中，該一或多個細胞為一或多個癌細胞。在特定實施例中，該一或多個細胞為一或多個個體源性細胞。在特定實施例中，該一或多個細胞來自從個體獲得之生物樣品。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體產生；其中增加之鈣動員量藉由細胞內Ca2+檢定來確定。在特定實施例中，細胞內Ca2+檢定為鈣動員檢定。在特定實施例中，鈣動員測定確定CXCR4-ADRB2異聚體產生增強之下游傳訊。在特定實施例中，鈣動員檢定確定增強之下游傳訊由CXCR4-ADRB2異聚體之存在產生。在特定實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員量，以使得：a)細胞中在個別單元體情境中在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後CXCR4或ADRB2產生等於或少於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量；及b)相對於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之該鈣動員量之總和，在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後，該CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員；如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，細胞中在個別單元體情境中，來自單元體CXCR4或ADRB2之鈣動員為非協同的，如經由鈣動員檢定所確定；且細胞中來自CXCR4-ADRB2異聚體之鈣動員為協同的，如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，其中在個別單元體情境中：a)在不存在個別單元體ADRB2之情況下，細胞中之個別單元體CXCR4；或b)在不存在個別單元體CXCR4之情況下，細胞中之個別單元體ADRB2；在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生等於或小於用CXCL12或ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，其中在個別單元體情境中，獨立地：a)在不存在個別單元體ADRB2之情況下，細胞中之個別單元體CXCR4；及b)在不存在個別單元體CXCR4之情況下，細胞中之個別單元體ADRB2；在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生等於或小於用CXCL12或ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，用CXCR4-ADRB2異聚體之CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生之鈣動員量大於用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和，如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，由CXCR4-ADRB2異聚體之共刺激所產生之鈣動員量為相對於由該CXCR4-ADRB2異聚體之單一促效劑刺激所產生之鈣動員之總和的增加之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，由CXCR4-ADRB2異聚體所產生之增加之鈣動員量為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行之單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比較大的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增加之鈣動員量為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少75%或至少90%的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增加之鈣動員量為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少100%的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。在特定實施例中，增加之鈣動員量為協同鈣動員量。例如，來自含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之協同鈣動員量為與用CXCL12或ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少75%或至少90%的用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：由該CXCR4-ADRB2異聚體之刺激諸如該CXCR4-ADRB2異聚體之共刺激所產生之增強之反應(或增強之下游傳訊)。在某些實施例中，增強之反應(或增強之下游傳訊)為增加之鈣動員量。在某些實施例中，鈣動員藉由細胞內Ca2+檢定來確定。在特定實施例中，細胞內Ca2+檢定為鈣動員檢定。在某些實施例中，增強之反應為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之癌症進展。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞增殖。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之細胞遷移。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之轉移。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之腫瘤生長。在某些實施例中，增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之增強之血管生成。在某些實施例中，該一或多個細胞為一或多個癌細胞。在某些實施例中，該一或多個細胞源自個體。在某些實施例中，該一或多個細胞來自從個體獲得之生物樣品。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有選自由以下各者組成之群的特徵中之一或多者：(1)布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質；(2)布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；(3)布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；及(4)布利沙福及ADRB2抑制劑之組合降低一或多個含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展。在特定實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體之特徵如下：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質。在特定實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體之特徵如下：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能。在特定實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體之特徵如下：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質。在特定實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體之特徵如下：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合降低一或多個含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展之降低。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞增殖之降低。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞遷移之降低。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之轉移之降低。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之血管生成之降低。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：相對於由用CXCR4促效劑或ADRB2促效劑對該CXCR4-ADRB2異聚體進行單刺激所產生之下游ERK傳訊量，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑對CXCR4-ADRB2異聚體進行共刺激產生較大的下游ERK傳訊量。在一些實施例中，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激所產生之下游ERK傳訊量大於用CXCR4促效劑單刺激所產生之量。在一些實施例中，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激所產生之下游ERK傳訊量與用CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大至少5%。在一些實施例中，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激所產生之下游ERK傳訊量與用CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大至少10%、至少25%、至少50%、至少75%或至少90%。在一些實施例中，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激所產生之下游ERK傳訊量與用CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大在5-15%、10-25%、20-50%、40-75%或60-100%之間的範圍。在一些實施例中，與用ADRB2促效劑單刺激所產生之量相比，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激所產生之下游ERK傳訊量較大。在一些實施例中，與用ADRB2促效劑單刺激所產生之量相比，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激所產生之下游ERK傳訊量大至少5%。在一些實施例中，與用ADRB2促效劑單刺激所產生之量相比，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激所產生之下游ERK傳訊量大至少10%、至少25%、至少50%、至少75%或至少90%。在一些實施例中，與用ADRB2促效劑單刺激所產生之量相比，用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑共刺激所產生之下游ERK傳訊量大在5-15%、10-25%、20-50%、40-75%或60-100%之間的範圍。在特定實施例中，CXCR4促效劑為CXCL12，且ADRB2促效劑為沙美特羅。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑之組合：(i)改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質；(ii)改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；(iii)改變一或多個含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；及/或(iv)降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體之癌症進展。在特定實施例中，所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質。在特定實施例中，所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個個體源性細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能。在特定實施例中，所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變一或多個含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質。在特定實施例中，所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑之組合降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症進展。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展之降低。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞增殖之降低。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞遷移之降低。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之轉移之降低。在特定實施例中，降低之癌症進展包含一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之血管生成之降低。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中投與之布利沙福及ADRB2抑制劑之組合抑制來自該CXCR4-ADRB2異聚體(例如來自癌症個體中之該CXCR4-ADRB2異聚體，例如來自細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體，或來自癌症個體之細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體)之增強之下游傳訊。在特定實施例中，CXCR4-ADRB2異聚體組分包含CXCR4及ADRB2之個別單元體。在一些實施例中，在個別單元體情境中含有CXCR4或ADRB2之細胞分別包含：(i)在存在或不存在個別單元體ADRB2之情況下，個別單元體CXCR4；(ii)在存在或不存在個別單元體CXCR4之情況下，個別單元體ADRB2。在一些實施例中，在個別單元體情境中含有CXCR4之細胞在存在或不存在個別單元體ADRB2之情況下包含個別單元體CXCR4。在特定實施例中，在個別單元體情境中含有CXCR4之細胞在不存在個別單元體ADRB2之情況下包含該個別單元體CXCR4。在特定實施例中，在個別單元體情境中含有CXCR4之細胞在存在個別單元體ADRB2之情況下包含該個別單元體CXCR4。在一些實施例中，在個別單元體情境中含有ADRB2之細胞在存在或不存在個別單元體CXCR4之情況下包含個別單元體ADRB2。在特定實施例中，在個別單元體情境中含有ADRB2之細胞在不存在個別單元體CXCR4之情況下包含該個別單元體ADRB2。在特定實施例中，在個別單元體情境中含有ADRB2之細胞在存在個別單元體CXCR4之情況下包含該個別單元體ADRB2。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福，且ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，相對於向該個體投與呈單一抑制劑之CXCR4抑制劑或ADRB2抑制劑，在投與抑制劑之組合之後，癌症之進展協同降低。在一些實施例中，與藉由向該個體投與呈單一抑制劑之CXCR4抑制劑或ADRB2抑制劑所達成之減少之進展水準之總和相比，在投與抑制劑之組合之後，癌症進展減少較大。在一些實施例中，根據本文所提供之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥套組或醫藥組合物，相對於向該個體投與呈單一抑制劑之CXCR4抑制劑或ADRB2抑制劑，在投與抑制劑之組合之後，具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之癌細胞之個體中之癌症進展多降低5-100%之範圍，例如相對向該個體投與呈單一抑制劑之CXCR4抑制劑或ADRB2抑制劑，在投與抑制劑之組合之後，多降低5-100%、10-100%、20-100%、30-100%、40-100%、50-100%、60-100%、75-100%、5-75%、5-50%或5-25%之範圍。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。在特定實施例中，癌症進展藉由腫瘤大小之百分比變化來確定。在特定實施例中，癌症進展藉由在1個月、2個月、3個月、6個月、1年或2年之時期內腫瘤大小之百分比變化來確定。
在一些實施例中，根據本文所提供之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥套組或醫藥組合物，相對於呈單一抑制劑投與時CXCR4抑制劑之功效，當與ADRB2抑制劑組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之癌細胞之個體投與時，CXCR4抑制劑之功效增加5-5000%之範圍，例如相對於呈單一抑制劑投與時CXCR4抑制劑之功效，當與ADRB2抑制劑組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之癌細胞之個體投與時，增加5-4500%、5-4000%、5-3500%、5-3000%、5-2500%、5-2000%、5-1750%、5-1500%、5-1250%、5-1000%、5-900%、5-800%、5-700%、5-500%、5-400%、5-250%、5-200%、5-100%、5-75%、5-50%、5-40%、5-30%、5-25%、1000-3000%、2000-4000%、3000-5000%、3500-4500%、4000-5000%、100-2000%、200-2000%、300-2000%、500-2000%、750-2000%、1000-2000%、1250-2000%、1500-2000%、5-1500%、25-1500%、50-1500%、75-1500%、100-1500%、200-1500%、300-1500%、500-1500%、750-1500%、1000-1500%或1250-1500%之範圍。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。在特定實施例中，CXCR4抑制劑針對個體細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之功效之增加(例如在抑制來自CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊方面)藉由CXCR4抑制劑與ADRB2抑制劑組合投與時之IC50值相對於CXCR4抑制劑呈單一抑制劑投與時之IC50值的變化來確定。在特定實施例中，根據本文所揭示之檢定確定CXCR4抑制劑之IC50值可利用在1-10 μM之範圍內例如處於1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 µM之濃度的ADRB2抑制劑濃度。在特定實施例中，根據本文所揭示之檢定確定CXCR4抑制劑之IC50值可利用在針對ADRB2之IC90濃度下的ADRB2抑制劑，例如ADRB2抑制劑濃度範圍在1-1,000 nM之間例如1-500 nM之間、100-750 nM之間或600-1,000 nM之間，例如濃度為10、25、50、100、250、500、600、700、800、900或1,000 nM。
在一些實施例中，根據本文所提供之用於治療之方法、用於抑制之方法、醫藥套組或醫藥組合物，相對於呈單一抑制劑投與時ADRB2抑制劑之功效，當與CXCR4抑制劑組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之癌細胞之個體投與時，ADRB2抑制劑之功效增加5-5000%之範圍，例如相對於呈單一抑制劑投與時ADRB2抑制劑之功效，當與CXCR4抑制劑組合向具有該含有CXCR4-ADRB2異聚體之癌細胞之個體投與時，增加5-4500%、5-4000%、5-3500%、5-3000%、5-2500%、5-2000%、5-1750%、5-1500%、5-1250%、5-1000%、5-900%、5-800%、5-700%、5-500%、5-400%、5-250%、5-200%、5-100%、5-75%、5-50%、5-40%、5-30%、5-25%、1000-3000%、2000-4000%、3000-5000%、3500-4500%、4000-5000%、100-2000%、200-2000%、300-2000%、500-2000%、750-2000%、1000-2000%、1250-2000%、1500-2000%、5-1500%、25-1500%、50-1500%、75-1500%、100-1500%、200-1500%、300-1500%、500-1500%、750-1500%、1000-1500%或1250-1500%之範圍。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。在特定實施例中，ADRB2抑制劑針對個體細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之功效之增加(例如在抑制來自CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊方面)藉由ADRB2抑制劑與CXCR4抑制劑組合投與時之IC50值相對於ADRB2抑制劑呈單一抑制劑投與時之IC50值的變化來確定。在特定實施例中，根據本文所揭示之檢定確定ADRB2抑制劑之IC50值可利用在1-10 μM之範圍內例如處於1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 µM之濃度的CXCR4抑制劑濃度。在特定實施例中，根據本文所揭示之檢定確定ADRB2抑制劑之IC50值可利用在針對CXCR4之IC90濃度下的CXCR4抑制劑，例如CXCR4抑制劑濃度範圍在1-1,000 nM之間例如1-500 nM之間、100-750 nM之間或600-1,000 nM之間，例如濃度為10、25、50、100、250、500、600、700、800、900或1,000 nM。
在一些實施例中，本文所提供之用於治療之方法、用於抑制之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中相對於單一抑制劑投與，該方法或用途對癌症個體中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊的抑制為5-2000倍之間的範圍，例如相對於單一抑制劑投與，對癌症個體中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊的抑制為5-1750倍、5-1500倍、5-1250倍、5-1000倍、5-900倍、5-800倍、5-700倍、5-500倍、5-400倍、5-250倍、5-200倍、5-100倍、5-75倍、5-50倍、5-40倍、5-30倍、5-25倍、100-2000倍、200-2000倍、300-2000倍、500-2000倍、750-2000倍、1000-2000倍、1250-2000倍、1500-2000倍、5-1500倍、25-1500倍、50-1500倍、75-1500倍、100-1500倍、200-1500倍、300-1500倍、500-1500倍、750-1500倍、1000-1500倍或1250-1500倍之間的範圍。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於治療之方法、用於抑制之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中相對於在相應個別單元體情境中抑制由CXCR4單元體或ADRB2單元體產生之下游傳訊，該方法或用途對癌症個體中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊的抑制為5-2000倍之間的範圍，例如相對於在相應個別單元體情境中抑制CXCR4單元體或ADRB2單元體產生之下游傳訊，對癌症個體中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊的抑制為5-1750倍、5-1500倍、5-1250倍、5-1000倍、5-900倍、5-800倍、5-700倍、5-500倍、5-400倍、5-250倍、5-200倍、5-100倍、5-75倍、5-50倍、5-40倍、5-30倍、5-25倍、100-2000倍、200-2000倍、300-2000倍、500-2000倍、750-2000倍、1000-2000倍、1250-2000倍、1500-2000倍、5-1500倍、25-1500倍、50-1500倍、75-1500倍、100-1500倍、200-1500倍、300-1500倍、500-1500倍、750-1500倍、1000-1500倍或1250-1500倍之間的範圍。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在根據本文所揭示之方法來抑制來自CXCR4-ADRB2異聚體之增強之下游傳訊方面及/或在根據本文所揭示之檢定來確定IC50值方面，關於是否有效或治療上有效來對抑制劑或抑制劑之組合進行初步測試及評估可使用濃度在1-10 μM之間之抑制劑(或組合之各抑制劑之濃度在1-10 μM之間之範圍內)，例如濃度為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 µM。若抑制劑對訊息之抑制對於可確定之量測值而言不足夠明顯，則可以使用更大濃度之抑制劑以更好地評估可確定之量測值，例如IC50值。若抑制劑對訊息之抑制非常強，則可使用更低濃度之抑制劑以更好地評估可確定之量測值，例如IC50值。
在一些實施例中，本文所提供之方法用於治療、改善或預防有需要之個體中之疾病。在一些實施例中，本文所提供之方法可包括向個體投與治療有效量之本文所提供之醫藥組合物。例如，本文所提供之醫藥組合物可包含CXCR4抑制劑、ADRB2抑制劑或CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合；及醫藥學上可接受之載劑。可使用本發明之方法治療或預防之疾病包括但不限於癌症、腫瘤、轉移及/或血管生成。例如，在一些實施例中，本文所提供之方法可用於治療癌症或相關症狀，其中癌症、腫瘤及/或微環境之細胞表現CXCR4-ADRB2異聚體。在一些實施例中，癌症為血液學癌症或實體腫瘤。在一些實施例中，癌症為複發性或難治性癌症。在一些實施例中，癌症為血液學癌症。在一些實施例中，血液學癌症選自由以下組成之群：淋巴瘤、白血病、骨髓瘤及多發性骨髓瘤。在一些實施例中，血液學癌症選自由以下組成之群：多發性骨髓瘤、急性骨髓樣白血病、急性單核球性白血病、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、B細胞急性淋巴母細胞性白血病、霍奇金淋巴瘤、急性前骨髓細胞性白血病、慢性嗜酸性球性白血病及伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)。在一些實施例中，可使用本發明之方法治療、改善或預防之癌症或腫瘤之非限制性實例包括胃腸道腫瘤，例如乳癌、肺癌、肺小細胞癌、肝細胞癌、腦癌、腎癌、胰臟癌或胰臟腺癌、卵巢癌、前列腺癌、黑素瘤、淋巴瘤、白血病、多發性骨髓瘤、腎細胞癌、軟組織肉瘤、胃腸道癌、胃癌、結腸癌、結腸直腸癌、結腸直腸腺癌、膀胱腺癌、食道癌以及胃、食道、咽喉及泌尿生殖道腺癌。在一些實施例中，淋巴瘤為B細胞淋巴瘤、T細胞淋巴瘤或NK細胞淋巴瘤。在一些實施例中，淋巴瘤為複發性或難治性淋巴瘤。在一些實施例中，淋巴瘤選自由以下組成之群：霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、皮膚B細胞淋巴瘤、活化之B細胞淋巴瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、伯基特淋巴瘤、套細胞淋巴瘤(MCL)、濾泡性淋巴瘤(FL)、濾泡性中心淋巴瘤、轉化性淋巴瘤、中間分化之淋巴球性淋巴瘤、中間淋巴球性淋巴瘤(ILL)、瀰漫性低分化淋巴球性淋巴瘤(PDL)、中心細胞性淋巴瘤、瀰漫性小核裂細胞淋巴瘤(DSCCL)、外周T細胞淋巴瘤(PTCL)、皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL)、套膜區淋巴瘤及低度濾泡性淋巴瘤。在一些實施例中，白血病為：(a)選自由以下組成之群之急性白血病：急性淋巴球性白血病(ALL)、T細胞急性淋巴球性白血病(T-ALL)、B細胞急性淋巴母細胞白血病、急性單核球性白血病、急性前骨髓細胞性白血病、急性骨髓細胞性白血病(AML)、急性骨髓樣白血病、急性骨髓性白血病以及骨髓母細胞性、前骨髓細胞性、骨髓單核球性、單核球性及紅血球性白血病；(b)選自由以下組成之群之慢性白血病：慢性骨髓細胞性(顆粒球性)白血病、慢性骨髓性白血病(慢性骨髓樣白血病；CML)及慢性淋巴球性白血病(CLL)；或(c)慢性骨髓單核球性白血病(CMML)、慢性嗜酸性球性白血病、少年骨髓單核球性白血病(JMML)、真性紅血球增多症、自然殺傷細胞白血病(NK白血病)或毛細胞白血病。在一些實施例中，癌症為實體腫瘤。在一些實施例中，實體腫瘤為良性腫瘤或癌症。在一些實施例中，實體腫瘤為癌或肉瘤。在一些實施例中，實體腫瘤選自由以下組成之群：胰臟腺癌、胰臟導管腺癌、腎細胞癌、乳腺癌、乳癌、乳導管腺癌、卵巢漿液性腺癌、卵巢透明細胞腺癌、卵巢黏液性囊腺癌、子宮癌肉瘤、子宮內膜腺癌、子宮內膜基質性肉瘤、子宮內膜癌、胃管狀腺癌、胃腺鱗癌、多發性內分泌贅瘤、黑素瘤、甲狀腺癌、前列腺癌、肝細胞癌、肝內膽管癌、肺腺癌、小細胞肺癌、腺鱗肺癌、惡性上皮樣間皮瘤、膠質母細胞瘤、髓母細胞瘤、星形細胞瘤、肺泡橫紋肌肉瘤及骨肉瘤。在一些實施例中，實體腫瘤選自由以下組成之群：纖維肉瘤、黏液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、惡性上皮樣間皮瘤、尤因氏腫瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、胃癌、結腸直腸癌、食管癌、結腸癌、淋巴惡性腫瘤、胰臟癌、胰臟腺癌、胰臟導管腺癌、乳癌、乳腺癌、乳導管腺癌、肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、腺鱗肺癌、肺泡橫紋肌肉瘤、卵巢癌、卵巢透明細胞腺癌、卵巢黏液性囊腺癌、卵巢漿液性腺癌、前列腺癌、肝細胞癌、軟組織肉瘤、鱗狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、髓質性甲狀腺癌、乳頭狀甲狀腺癌、甲狀腺癌、嗜鉻細胞瘤皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、髓質癌、支氣管癌、胃腸道癌、胃管狀腺癌、胃腺鱗癌、腎癌、肝內膽管癌、腎細胞癌、肝瘤、膽管癌、絨毛膜癌、威爾姆氏瘤(Wilms’ tumor)、子宮癌肉瘤、子宮內膜腺癌、子宮內膜基質性肉瘤、子宮內膜癌、子宮頸癌、睪丸腫瘤、精原細胞瘤、膀胱癌、黑素瘤、多發性骨髓瘤、多發性內分泌贅瘤、CNS腫瘤、神經膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、CNS淋巴瘤、胚細胞瘤、神經管胚細胞瘤、神經鞘瘤顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細胞瘤、聽神經瘤、寡樹突神經膠質瘤、腦脊髓膜瘤、神經母細胞瘤、視網膜母細胞瘤及腦轉移瘤。在一些實施例中，實體腫瘤選自由以下組成之群：乳癌、肺癌及肝細胞癌。在一些實施例中，實體腫瘤為乳癌。在一些實施例中，實體腫瘤為肺癌。在一些實施例中，實體腫瘤為肝細胞癌。在一些實施例中，用於治療癌症之方法為用於抑制由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法。在一些實施例中，用於抑制由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法為用於治療癌症之方法。在一些實施例中，癌症為表現CXCR4之癌症。在一些實施例中，癌症為表現ADRB2之癌症。在一些實施例中，癌症為表現CXCR4之癌症及表現ADRB2之癌症。在一些實施例中，個體中之CXCR4表現水準大於參考水準。在一些實施例中，個體中之ADRB2表現水準大於參考水準。在一些實施例中，個體中之CXCR4表現水準及ADRB2表現水準大於相應參考水準。在一些實施例中，細胞中之CXCR4表現水準大於參考水準。在一些實施例中，細胞中之ADRB2表現水準大於參考水準。在一些實施例中，細胞中之CXCR4表現水準及ADRB2表現水準大於相應參考水準。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物進一步包括確定細胞、個體或從個體獲得之樣品中之CXCR4基因之表現水準，其中若表現水準大於CXCR4基因之參考水準，則確定細胞、個體或從個體獲得之樣品具有表現CXCR4之癌症。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定細胞中CXCR4基因之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定個體中CXCR4基因之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定從個體獲得之樣品中CXCR4基因之表現水準。在一些實施例中，癌症為表現CXCR4之癌症。在特定實施例中，細胞中之CXCR4基因表現水準大於參考水準。在特定實施例中，個體中之CXCR4基因表現水準大於參考水準。在特定實施例中，從個體獲得之樣品中之CXCR4基因表現水準大於參考水準。在CXCR4基因表現水準大於參考水準之特定實施例中，本文所提供之方法或用途包括投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物進一步包括確定細胞、個體或從個體獲得之樣品中之ADRB2基因之表現水準，其中若表現水準大於ADRB2基因之參考水準，則確定細胞、個體或從個體獲得之樣品具有表現ADRB2之癌症。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定細胞中ADRB2基因之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定個體中ADRB2基因之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定從個體獲得之樣品中ADRB2基因之表現水準。在特定實施例中，癌症為表現ADRB2之癌症。在特定實施例中，細胞中之ADRB2基因表現水準大於參考水準。在特定實施例中，個體中之ADRB2基因表現水準大於參考水準。在特定實施例中，從個體獲得之樣品中之ADRB2基因表現水準大於參考水準。在ADRB2基因表現水準大於參考水準之特定實施例中，本文所提供之方法或用途包括投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物進一步包括確定細胞、個體或從個體獲得之樣品中之CXCR4基因及ADRB2基因之表現水準，其中若CXCR4基因及ADRB2基因之表現水準大於CXCR4基因及ADRB2基因之相應參考水準，則確定細胞、個體或從個體獲得之樣品具有表現CXCR4且表現ADRB2之癌症。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定細胞中CXCR4基因及ADRB2基因之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定個體中CXCR4基因及ADRB2基因之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定從個體獲得之樣品中CXCR4基因及ADRB2基因之表現水準。在特定實施例中，癌症為表現CXCR4且表現ADRB2之癌症。在特定實施例中，細胞中之CXCR4基因及ADRB2基因表現水準大於相應參考水準。在特定實施例中，個體中之CXCR4基因及ADRB2基因表現水準大於相應參考水準。在特定實施例中，從個體獲得之樣品中之CXCR4基因及ADRB2基因表現水準大於相應參考水準。在CXCR4基因及ADRB2基因表現水準大於相應參考水準之特定實施例中，本文所提供之方法或用途包括投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物進一步包括確定細胞、個體或從個體獲得之樣品中之CXCR4蛋白之表現水準，其中若表現水準大於CXCR4蛋白之參考水準，則確定細胞、個體或從個體獲得之樣品具有表現CXCR4之癌症。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定細胞中CXCR4蛋白之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定個體中CXCR4蛋白之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定從個體獲得之樣品中CXCR4蛋白之表現水準。在特定實施例中，癌症為表現CXCR4之癌症。在特定實施例中，細胞中之CXCR4蛋白表現水準大於參考水準。在特定實施例中，個體中之CXCR4蛋白表現水準大於參考水準。在特定實施例中，從個體獲得之樣品中之CXCR4蛋白表現水準大於參考水準。在CXCR4蛋白表現水準大於參考水準之特定實施例中，本文所提供之方法或用途包括投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物進一步包括確定細胞、個體或從個體獲得之樣品中之ADRB2蛋白之表現水準，其中若表現水準大於ADRB2蛋白之參考水準，則確定細胞、個體或從個體獲得之樣品具有表現ADRB2之癌症。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定細胞中ADRB2蛋白之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定個體中ADRB2蛋白之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定從個體獲得之樣品中ADRB2蛋白之表現水準。在特定實施例中，癌症為表現ADRB2之癌症。在特定實施例中，細胞中之ADRB2蛋白表現水準大於參考水準。在特定實施例中，個體中之ADRB2蛋白表現水準大於參考水準。在特定實施例中，從個體獲得之樣品中之ADRB2蛋白表現水準大於參考水準。在ADRB2蛋白表現水準大於參考水準之特定實施例中，本文所提供之方法或用途包括投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物進一步包括確定細胞、個體或從個體獲得之樣品中之CXCR4蛋白及ADRB2蛋白之表現水準，其中若CXCR4蛋白及ADRB2蛋白之表現水準大於CXCR4蛋白及ADRB2蛋白之相應參考水準，則確定細胞、個體或從個體獲得之樣品具有表現CXCR4且表現ADRB2之癌症。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定細胞中CXCR4蛋白及ADRB2蛋白之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定個體中CXCR4蛋白及ADRB2蛋白之表現水準。在特定實施例中，本文所提供之方法或用途確定從個體獲得之樣品中CXCR4蛋白及ADRB2蛋白之表現水準。在特定實施例中，癌症為表現CXCR4且表現ADRB2之癌症。在特定實施例中，細胞中之CXCR4蛋白及ADRB2蛋白表現水準大於相應參考水準。在特定實施例中，個體中之CXCR4蛋白及ADRB2蛋白表現水準大於相應參考水準。在特定實施例中，從個體獲得之樣品中之CXCR4蛋白及ADRB2蛋白表現水準大於相應參考水準。在CXCR4蛋白及ADRB2蛋白表現水準大於相應參考水準之特定實施例中，本文所提供之方法或用途包括投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑。在特定實施例中，CXCR4抑制劑為布利沙福。在特定實施例中，ADRB2抑制劑為卡維地洛。
在一些實施例中，本文所提供之醫藥組合物(有時在本文中稱為「醫藥調配物」)包括CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合以及醫藥學上可接受之載劑。在一些實施例中，本文所提供之醫藥組合物包括CXCR4抑制劑及醫藥學上可接受之載劑。在一些實施例中，本文所提供之醫藥組合物包括ADRB2抑制劑及醫藥學上可接受之載劑。可用於本發明之醫藥組合物中之醫藥學上可接受之載劑包括此項技術中已知之任何標準醫藥載劑，例如生理上可接受之載劑、賦形劑或穩定劑，例如磷酸鹽緩衝鹽水溶液、水及乳液例如油及水乳液，以及各種潤濕劑。此等醫藥組合物可以以液體單位劑型或足以將CXCR4抑制劑、ADRB2抑制劑或CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合遞送至需要治療之個體之靶區域的任何其他劑量形式之形式製備。例如，可以以適合於所選擇之投與方式之任何方式來製備醫藥組合物，投與方式例如血管內、肌肉內、皮下、皮內、鞘內等。其他視情況選用之組分例如醫藥級穩定劑、緩衝液、防腐劑、賦形劑等可以由熟習此項技術者容易地選擇。考慮到pH、等滲性、穩定性及其類似者，醫藥組合物之製備在此項技術之技能水準內。
在一些實施例中，可用於本文提所供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物的本文所提供之醫藥組合物包括：(a) CXCR4抑制劑，其中CXCR4抑制劑為布利沙福；(b) ADRB2抑制劑；及(c)醫藥學上可接受之載劑。在一些實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為ADRB2之拮抗劑、ADRB2之反向促效劑、ADRB2之部分拮抗劑、ADRB2之別構調節劑、ADRB2之抗體、ADRB2之抗體片段、ADRB2之配體或抗體-藥物結合物。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為ADRB2之拮抗劑。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為ADRB2之反向促效劑。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為ADRB2之部分拮抗劑。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為ADRB2之別構調節劑。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為ADRB2之抗體。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為ADRB2之抗體片段。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為ADRB2之配體。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為抗體-藥物結合物。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑選自由以下組成之群：阿普洛爾、阿替洛爾、倍他洛爾、布拉洛爾、布托沙明、卡那洛爾、卡維地洛、CGP 12177、環丙洛爾、ICI 118551、ICYP、拉貝洛爾、左旋倍他洛爾、左旋布諾洛爾、LK 204-545、美托洛爾、納多洛爾、NIHP、NIP、普羅帕酮、普萘洛爾、索他洛爾、SR59230A及噻嗎洛爾。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中ADRB2抑制劑為卡維地洛。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中向個體投與治療有效量之布利沙福。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中向個體投與次治療有效量之布利沙福。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中向個體投與治療有效量之ADRB2抑制劑。在特定實施例中，本文所提供之醫藥組合物或利用它的本文所提供之使用方法包括其中向個體投與次治療有效量之ADRB2抑制劑。
在一些實施例中，本文所提供之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物包括其中呈包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與布利沙福。在一些實施例中，本文所提供之方法或用途包括其中呈包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與ADRB2抑制劑。在一些實施例中，本文所提供之方法或用途包括其中依次、並行或同時投與布利沙福及ADRB2抑制劑之組合。在一些實施例中，本文所提供之方法或用途包括其中呈進一步包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與布利沙福及ADRB2抑制劑之組合。在一些實施例中，本文所提供之方法或用途包括其中呈醫藥組合物之組合投與布利沙福及ADRB2抑制劑。在一些實施例中，本文所提供之方法或用途包括其中醫藥組合物之組合包含：(a)包含布利沙福及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物；及(b)包含ADRB2抑制劑及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物。在一些實施例中，本文所提供之方法或用途包括其中依次、並行、或同時投與醫藥組合物之組合。
可藉由將具有所要純度之抑制劑與視情況選用之生理學上可接受之載劑、賦形劑或穩定劑混合(Remington's Pharmaceutical Sciences(1990)，Mack Publishing Co.，Easton，PA)來以凍乾調配物或水溶液之形式製備含有CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之醫藥調配物、含有CXCR4抑制劑之醫藥調配物及含有ADRB2抑制劑之醫藥調配物以供儲存。可接受之載劑、賦形劑或穩定劑在所採用之劑量及濃度下對接受者無毒，且包括：緩衝液諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑，例如十八烷基二甲基芐基氯化銨；氯化六甲銨；氯化苄烷銨、氯化苯索寧；苯酚、丁醇或苯甲醇；對羥基苯甲酸烷基酯，例如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間甲酚；少於約10個殘基之低分子量多肽；蛋白，例如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，例如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，例如甘胺酸、麩醯胺、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、二醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，如EDTA；糖，例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成鹽相對離子，例如鈉；金屬錯合物，例如鋅蛋白錯合物；及/或非離子界面活性劑，例如TWEEN™、PLURONICS™或聚乙二醇(PEG)。
應當理解，在本文提供之本發明之定義內，亦提供了實質上不影響本發明之各種實施例之活性之修改。因此，以下實例意欲說明而非限製本文所揭示之發明。實例 實例 1. 藉由 BiFC 檢定評估 CXCR4-GPCRx 異聚體形成
為了鑑別新穎CXCR4-GPCRx異聚體，製備了重組腺病毒，其編碼143個與黃色螢光蛋白Venus之N末端片段(VN)融合之GPCR及147個與Venus之C末端片段(VC)融合之GPCR (參見例如Song, Y.B.等人, (2014) Monitoring G protein-coupled receptor activation using an adenovirus-based beta-arrestin bimolecular fluorescence complementation assay, Anal Biochem 449, 32-41；韓國專利第KR 101029972 B1號，在2011年4月12日授予；Y.B., (2012) 「Global analysis of GPCR dimerization using AdBiFC assay」，在部分滿足首爾國立大學生物科學學院哲學博士學位之要求下提交之論文，126頁)。使用雙分子螢光互補(BiFC)檢定鑑別了CXCR4-GPCR異聚體(圖1)，其中僅當Venus之兩個互補VN及VC片段透過其所融合之兩個不同蛋白之間的相互作用而足夠接近時，這兩個片段才重構螢光信號(Hu, C.D.等人, (2002) Visualization of interactions among bZIP and Rel family proteins in living cells using bimolecular fluorescence complementation, Mol Cell 9, 789-798)。
將U-2 OS細胞鋪板在96孔板上，各自用30 MOI編碼CXCR4-VN及GPCRx-VC或CXCR4-VC及GPCRx-VN之腺病毒共轉導，並使其表現GPCR達2天。在用Hoechst 33342對細胞進行染色之後，使用IN Cell Analyzer 1000從每孔三個視野獲得BiFC及核影像。用IN Cell Developer ToolBox (GE Healthcare，Waukesha，WI)中之多目標分析軟體，分析了各個孔中約200個細胞之影像。基於Hoechst信號標記細胞邊界，並量測每個細胞之螢光強度。將螢光強度高於背景水準之細胞視為BiFC陽性細胞。將顯示極高強度之死亡細胞從細胞計數中排除。確定陽性細胞，並將陽性細胞計數比(「BiFC評分」)計算為(陽性細胞/總細胞)×100。
當CXCR4-VN與HA-VC (圖2A)或GCGR-VC (編碼升糖素受體之GPCR)(圖2C)共表現時，未觀察到黃色螢光蛋白(YFP)信號(BiFC信號)。相比之下，當CXCR4-VN與CXCR4-VC共表現時(圖2B)，在質膜及細胞質中觀察到BiFC信號。當CXCR4-VN與ADRB2-VC共轉導時，在質膜及細胞質中觀察到強BiFC信號(圖2D)。將顯示BiFC螢光信號高於背景水準之細胞計數為BiFC陽性細胞，並計算BiFC評分。
蛋白-蛋白相互作用可藉由融合標籤(例如BiFC中之螢光蛋白片段或BRET中之海腎螢光素酶)透過干擾伴侶蛋白之表現、折疊或定位而受到影響。伴侶蛋白亦會損害融合標籤之表現或折疊，並影響基於接近性之檢定結果。因此，特定組合之兩種蛋白之間不存在信號並不一定意味該等蛋白沒有相互作用，而是僅意味所連接之供體及受體分子處於不允許發生相互作用之特定構形(Eidne, K.A.等人, (2002) Applications of novel resonance energy transfer techniques to study dynamic hormone receptor interactions in living cells, Trends Endocrinol Metab 13, 415-421；Kerppola, T.K., (2006) Design and implementation of bimolecular fluorescence complementation (BiFC) assays for the visualization of protein interactions in living cells, Nat Protoc 1, 1278-1286)。
因此，將在CXCR4-VN及GPCRx-VC或CXCR4-VC及GPCRx-VN組合中產生BiFC信號之CXCR4及GPCRx視為相互作用蛋白。眾所周知之同聚物CXCR4-VN及CXCR4-VC對之BiFC評分為9.9。因此，選擇得到等於或高於10之BiFC評分的CXCR4-GPCRx對作為CXCR-GPCRx異聚體之候選物。CXCR4-ADRB2之CXCR4-GPCRx得到24之BiFC評分，且因此被視為CXCR-GPCRx異聚體候選物。2018年12月18日提交之國際申請案PCT/KR2018/016166報導了關於BiFC分析之其他GPCR之評估。實例 2. 藉由共內化檢定來評估 CXCR4-GPCRx 異聚體形成
已知一些GPCR異聚體由於異聚作用而表現出改變之轉運性質，例如伴侶GPCR (GABA(B)受體)之成熟(White, 1998)、促效劑介導之伴侶GPCR從細胞表面之內化(DOR-GRPR，A2A-D2R)(Hillion，J.等人, (2002) Coaggregation, cointernalization, and codesensitization of adenosine A2A receptors and dopamine D2 receptors, J Biol Chem 277, 18091-18097；Liu, X.Y.等人, (2011) Unidirectional cross-activation of GRPR by MOR1D uncouples itch and analgesia induced by opioids, Cell 147, 447-458；Torvinen, M.等人, (2005) Trafficking of adenosine A2A and dopamine D2 receptors, J Mol Neurosci 25, 191-200)以及伴侶GPCR從胞內區室向細胞表面之定位變化(DOR-CB1)(Rozenfeld, R.等人, (2012) Receptor heteromerization expands the repertoire of cannabinoid signaling in rodent neurons, PLoS One 7, e29239)。
共表現之GPCR對回應於僅對於該配對中之一者具有選擇性之促效劑而共內化已用於確認GPCR異聚化(Milligan，G., 2008)。為了檢查GPCRx在共表現時是否調節CXCR4之轉運並形成CXCR4-GPCRx異聚體，且亦為了確認使用BiFC檢定所鑑別之CXCR4與GPCRx之間之物理相互作用，將細胞用編碼CXCR4-GFP及GPCRx之腺病毒共轉導並在用GPCRx促效劑刺激之前及之後30 min獲得GFP影像。將細胞表面上GFP表現之喪失或細胞內GFP顆粒之出現視為CXCR4-GFP與GPCRx之共內化(圖3A-3B)。
在圖4A-4B中，分別用10 nM CXCL12 (圖4A)及100 nM福莫特羅(圖4B)，用對CXCR4 (圖4A)及ADRB2 (圖4B)具有特異性之GPCRx促效劑刺激細胞。在促效劑刺激之前及之後30 min獲得影像，並使用IN Cell Analyzer 2000進行分析。最初，將此等GPCRx促效劑之濃度選擇設置為相應特定GPCRx之EC50濃度(或替代地，Ki或Kd濃度)，且若所得信號太強，則濃度降低至低於EC50，且若所得信號太弱，則濃度增加至不多於EC50濃度之10,000倍。
用CXCL12刺激表現CXCR4-GFP之細胞導致GFP從質膜重新定位至不同的細胞內顆粒，顯示表面CXCR4-GFP內化至細胞質中(圖4A)。關於藉由BiFC檢定所鑑別之CXCR4-ADRB2異聚體，如藉由共表現CXCR4-GFP及ADRB2之細胞中細胞內GFP顆粒增加及質膜中GFP信號降低所展現，ADRB2誘導CXCR4之內化(圖4B)，證實了異聚體共內化。2018年12月18日提交之國際申請案PCT/KR2018/016166報導了關於CXCR4之誘導內化之其他GPCR之評估。實例 3. 藉由 Ca2+ 動員檢定評估 CXCR4-GPCRx 異聚體形成之後增強之 CXCR4 下游傳訊及增強之傳訊之抑制
為了進一步檢查CXCR4-GPCRx異聚體是否表現出與個別單元體(在缺乏受體之一的細胞中)不同之性質，評估了表現任一GPCR或兩種GPCR之細胞中存在一種或兩種促效劑之情況下的鈣傳訊。在此實例中，如在實例2中所說明，將此等GPCRx促效劑之濃度選擇設置為相應特定GPCRx之EC50濃度(或替代地，Ki或Kd濃度)，且若所得Ca2+ 信號太強，則濃度降低至低於EC50，且若所得Ca2+ 信號太弱，則濃度增加至不多於EC50濃度之100倍。
當用編碼CXCR4之腺病毒轉導MDA-MB-231人類乳癌細胞時，用CXCL12刺激引起細胞內鈣動員(圖5A)。用沙美特羅(ADRB2選擇性促效劑)刺激細胞不誘導鈣反應，表明CXCL12引起之鈣反應係由CXCR4介導的。與單獨CXCL12所誘導之鈣反應相比，用CXCL12及沙美特羅共刺激細胞誘導相似的鈣反應。在過表現單獨ADRB2之細胞中，單獨CXCL12不誘導鈣反應，而單獨沙美特羅誘導鈣反應，顯示沙美特羅透過ADRB2誘導鈣反應(圖5B)。用兩種促效劑進行之共刺激誘導與藉由單獨沙美特羅所刺激之鈣反應相似的鈣反應。
在過表現CXCR4及ADRB2之細胞中，用各促效劑進行刺激誘導與表現單獨CXCR4或ADRB2之細胞中所示之鈣反應相似的鈣反應(圖5C相對於5A及5B)。相比之下，與藉由個別促效劑所引起之鈣反應相比，用兩種促效劑一起進行共刺激顯著增加了鈣反應(圖5C及5D)。僅在表現CXCR4及ADRB2之細胞中觀察到增強之鈣傳訊，而在表現單獨CXCR4或ADRB2之細胞中未觀察到。此等結果表明，CXCR4-ADRB2異聚體表現出與其相應個別GPCR單元體不同之性質。
進一步檢查了在用CXCL12及GPCRx配體共刺激之後共表現CXCR4及GPCRx之細胞中之增強之鈣反應是否由GPCRx拮抗劑抑制。特定言之，如圖6所示，在共表現CXCR4及ADRB2之細胞中，投與ADRB2拮抗劑卡維地洛(10 μM)顯著抑制增強之鈣傳訊，且共投與CXCR4拮抗劑(AMD3100；10 uM)及ADRB2拮抗劑卡維地洛(10 μM)導致對鈣傳訊之較大抑制。此等結果表明，CXCR4拮抗劑、ADRB2拮抗劑或CXCR4拮抗劑與ADRB2拮抗劑之組合可用作針對CXCR4-ADRB2異聚體之治療劑。2018年12月18日提交之國際申請案PCT/KR2018/016166報導了關於在存在一種或兩種相應促效劑之情況下以及在存在一種或兩種相應拮抗劑之情況下的鈣傳訊之其他GPCR之評估。
共同投與結果亦表明，小劑量靶向異聚體之各相應單元體之拮抗劑可提供有效抑制CXCR4-GPCRx異聚體反應同時避免與高劑量個別相應拮抗劑有關的副作用的新穎治療工具。實例 4. GPCRx 拮抗劑對內化之抑制
為了進一步研究是否藉由伴侶GPCRx拮抗劑阻止了CXCR4異二聚體之共內化，進行了內化抑制檢定。如圖4B所示(其中GPCRx為ADRB2)，當將CXCR4及GPCRx同時轉導至細胞時，伴侶GPCRx特異性促效劑共內化表現CXCR4-GFP之U-2 OS細胞(對照：CXCR4-GFP (圖4A))。若CXCR4與GPCRx形成異二聚體且由伴侶GPCRx共內化，則它可由GPCRx特異性拮抗劑阻斷。
用編碼GPCRx (ADRB2)之腺病毒轉導穩定表現CXCR4-GFP之U-2 OS細胞。2天之後，在用CXCR4特異性促效劑CXCL12 (20 nM)及/或GPCRx特異性拮抗劑(10 µM)刺激細胞之前及之後20分鐘獲得影像。使用IN Cell Analyzer 2500，觀察到呈GFP顆粒之CXCR4-GFP之內化。將細胞表面上GFP表現之喪失或細胞內GFP顆粒之出現視為CXCR4-GFP共內化。此處，所評估之GPCRx為ADRB2。用CXCR4促效劑CXCL12進行刺激誘導CXCR4-GFP與ADRB2之內化(圖8，左圖)。投與ADRB2拮抗劑卡維地洛對異聚體之內化沒有影響(圖8，中間圖)。ADRB2拮抗劑抑制了CXCL12刺激之CXCR4-GFP與ADRB2之內化(圖8，右圖)。2018年12月18日提交之國際申請案PCT/KR2018/016166報導關於藉由GPCRx抑制內化的其他GPCR的評估。
此等資料表明，藉由抑制CXCR4異聚體之內化，可阻斷過表現CXCR4-ADRB2異聚體之細胞(例如癌症)中異常的下游訊息，以達到治療目的。實例 5. 藉由細胞增殖檢定評估 CXCR4-GPCRx 異聚體傳訊之抑制劑對腫瘤生長之表型作用
為了開發基於CXCR4-GPCRx異聚體之治療劑，評估了共同投與CXCR4拮抗劑及GPCRx拮抗劑對細胞增殖之影響，特別是關於ADRB2。
製備了來自患者之經切除及分離之膠質母細胞瘤組織之單細胞懸浮液(由韓國首爾之Samsung Seoul醫院提供)。將此等細胞在正常神經元幹細胞之增殖及非分化之最佳條件下培養。培養基由補充有鹼性FGF及EGF之無血清Neurobasal培養基組成。
使用ATPlite (PerkinElmer，目錄號6016739試劑)評估了GPCRx拮抗劑對患者源性細胞(PDC)之存活的影響。ATPlite為基於螢火蟲螢光素酶之三磷酸腺苷監測系統。這種發光檢定可替代比色檢定、螢光檢定及放射性同位素檢定，以用於定量評估培養之哺乳動物細胞之增殖及細胞毒性。將細胞以500個細胞/孔接種到384孔板中之40 µL培養基中。隔夜生長之後，將細胞在存在若干劑量GPCRx拮抗劑或單獨DMSO之情況下培養7天。孵育7天之後，將15 µL ATPlite添加至各孔中，且在迴轉式振盪機中以700 rpm將平板振盪5分鐘。在PerkinElmer TopCount偵測儀上在30分鐘內偵測到發光信號。使用以下方程式計算細胞生存力：細胞生存力(%)=(拮抗劑處理之OD/僅DMSO處理之OD)×100%。
當向表現CXCR4及ADRB2之PDC投與ADRB2特異性拮抗劑卡維地洛時，細胞之生長經顯著抑制(IC50 =11.69 μM，圖9)。2018年12月18日提交之國際申請案PCT/KR2018/016166報導了關於細胞增殖之其他GPCR之評估。
此等結果表明，在CXCR4-ADRB2異聚體表現細胞中，ADRB2拮抗劑可阻斷CXCR4異聚體誘導之異常的細胞增殖，表明在攜帶CXCR4-ADRB2異聚體之患者中使用ADRB2拮抗劑抑制癌細胞生長可克服單獨投與CXCR4抑制劑作為癌症治療劑之單一療法之局限性。實例 6. 使用接近連接檢定 (PLA) 評估患者源性細胞 (PDC) 中之 CXCR4-GPCRx 異聚體形成
為了研究天然組織中GPCR複合物之存在，使用了多種方法，例如原子力顯微鏡檢查(Fotiadis, D.等人, (2006) Structure of the rhodopsin dimer: a working model for G-protein-coupled receptors, Curr Opin Struct Biol 16, 252-259)、免疫共沉澱(Gomes, I.等人, (2004) A role for heterodimerization of mu and delta opiate receptors in enhancing morphine analgesia, Proc Natl Acad Sci USA, 101(14):5135-5139)及結合或功能檢定(Wreggett, K.A.等人, (1995) Cooperativity manifest in the binding properties of purified cardiac muscarinic receptors, J Biol Chem 270, 22488-22499)。監測相互作用之最方便的方法係基於用標記蛋白進行之共振能量轉移。可以藉由諸如抗體或螢光配體之選擇性探針進行標記(Roess, D.A.等人, (2000) Luteinizing hormone receptors are self-associated in the plasma membrane, Endocrinology 141, 4518-4523；Patel, R.C.等人, (2002) Ligand binding to somatostatin receptors induces receptor-specific oligomer formation in live cells, Proc Natl Acad Sci U S A 99, 3294-3299)。
Bazin等人採用了基於時間解析螢光共振能量轉移(TR-FRET)之方法，該方法提供高得多的信號雜訊比(Bazin, H.等人, (2002) Time resolved amplification of cryptate emission: a versatile technology to trace biomolecular interactions, J Biotechnol 82, 233-250)。FRET係基於密切接近時兩個螢光團(供體及受體)之間的能量轉移。生物分子之間的分子相互作用可藉由將各伴侶與螢光標記偶聯併藉由偵測能量轉移之水準來評估。在系統激發與螢光量測之間引入大約50至150微秒之時間延遲實現了清除所有非特異性之短時發射信號。
接近連接檢定(PLA)為 將傳統免疫檢定之能力擴展成包括以高特異性及敏感性直接偵測蛋白、蛋白相互作用 及修飾的技術(Gullberg, M.等人, (2004) Cytokine detection by antibody-based proximity ligation, Proc Natl Acad Sci U S A 101, 8420-8424)。在不同物種中產生之兩種一級抗體識別感興趣之蛋白上之靶抗原。針對不同一級抗體恆定區之二級抗體(稱為PLA探針)與一級抗體結合。各PLA探針均均有與其連接的獨特短DNA股。若PLA探針密切接近(即，若兩種感興趣之原始蛋白密切接近，或為蛋白複合物之一部分，如圖所示)，則當添加適當的受質及酶時，DNA股可參與滾環DNA合成。DNA合成反應導致DNA環之數百倍擴增。接下來，添加螢光標記之互補寡核苷酸探針，且它們與擴增之DNA結合。當用螢光顯微鏡觀察時，很容易看到呈明顯亮點之所得高濃度螢光(Gustafsdottir, S.M.等人, (2005) Proximity ligation assays for sensitive and specific protein analyses, Anal Biochem 345, 2-9)。
用表現ADRB2之腺病毒Ad-ADRB2以0、2.5、10、40 MOI之劑量感染過表現CXCR4之細胞株U2OS-CXCR4，達2天。如先前所述進行PLA (Brueggemann, L.I.等人, (2014) Differential protein kinase C-dependent modulation of Kv7.4 and Kv7.5 subunits of vascular Kv7 channels, J Biol Chem 289, 2099-2111；Tripathi, A.等人, (2014) CXC chemokine receptor 4 signaling upon co-activation with stromal cell-derived factor-1alpha and ubiquitin, Cytokine 65, 121-125)。為了進行PLA，將感染之細胞用4%多聚甲醛(PFA)固定在16孔組織培養玻片上。用Duolink提供之封閉溶液封閉玻片，並與小鼠抗CXCR4 (1:200，Santacruz，Sc-53534)、兔抗ADRB2 (1:200，Thermoscientific，PA5-33333)、兔抗CHRM1 (1:200，Ls bio，Ls-C313301)在37℃之加濕室中一起孵育1 h。然後洗滌玻片，並與結合有正及負Duolink II PLA探針之二級抗兔及抗小鼠抗體孵育(在37℃下1 h)。再次洗滌玻片，然後與連接-連接酶溶液孵育(在37℃下30 min)，接著與擴增-聚合酶溶液孵育(在37℃下2 h)。然後用最小體積具有4',6-二甲脒基-2苯基吲哚(DAPI)之Duolink II封固培養基(mounting medium)將玻片封固15-30 min，且在IN Cell分析儀2500下鑑別呈螢光斑點之PLA信號[Duolink原位偵測試劑綠色(λ激發/發射495/527 nm)或紅色(λ激發/發射575/623 nm)]。
如圖10A-10B所示，PLA信號隨著ADRB2之表現水準以劑量依賴性方式增加。在圖10A中，在一系列MOI (感染複數)上來自表現CXCR4-ADRB2異聚體之U2OS細胞之PLA信號之影像。在圖10B中，對紅色信號斑點進行計數並藉由針對陰性對照之正規化進行計算。PLA信號以劑量依賴之方式與ADRB2之表現水準成比例地增加。用ADRB2特異性引子進行藉由qRT-PCR之分析，以研究內源性ADRB2表現。如圖10C所示，U2OS細胞之內源性ADRB2表現水準非常高，表明甚至在沒有病毒感染之切片中亦偵測到了PLA信號(對於ADRB2，MOI為0)。
傳統上，膠質母細胞瘤(GBM)為最常見且致命的原發性腦腫瘤。臨床前癌症生物學在很大程度上依賴於活體外 人類癌細胞株之使用以及經建立之此等細胞株之異種移植過程。然而，建立習知細胞株之過程導致重要生物學性質之不可逆喪失，且因此，異種移植腫瘤模型不維持原始腫瘤中存在之基因體及表型特徵。
直接從膠質母細胞瘤衍生之患者源性細胞(PDC)與正常神經幹細胞具有廣泛的相似性，並再現了人類膠質母細胞瘤之基因型、基因表現模式及活體內 生物學。
為了用PDC樣品進行PLA，將患者源性細胞在16孔組織培養玻片上進行鋪板並用4% PFA固定。用Duolink提供之封閉溶液封閉玻片，並與小鼠抗CXCR4 (1:200，Santa Cruz，Sc-53534)、兔抗ADRB2 (1:200，Thermo Scientific，PA5-33333)、兔抗CHRM1 (1:200，Lsbio，Ls-C313301)在37℃之加濕室中一起孵育1 h。然後洗滌玻片，並與結合有正及負Duolink II PLA探針之二級抗兔及抗小鼠抗體孵育(在37℃下1 h)。再次洗滌玻片，然後與連接-連接酶溶液孵育(在37℃下30 min)，接著與擴增-聚合酶溶液孵育(在37℃下2 h)。然後用最小體積具有4',6'-二甲脒基-2苯基吲哚(DAPI)之Duolink II封固培養基(mounting medium)將玻片封固15-30 min，且在IN Cell分析儀2500下鑑別呈螢光斑點之PLA信號[Duolink原位偵測試劑綠色(λ激發/發射495/527 nm)或紅色(λ激發/發射575/623 nm)]。
如在圖11A-11B中所示，PLA比率係指CXCR4-ADRB2異聚體，且異聚體形成之頻率根據患者而變化。PLA比率計算為：PDC樣品中之螢光斑點數/陰性對照中之螢光斑點數。陰性對照(NC)表示背景螢光信號，其藉由當在PLA加工中在沒有一級抗體(小鼠抗CXCR4、兔抗ADRB2)處理之情況下僅對與正及負Duolink II PLA探針結合之二級抗體進行處理時的斑點數表示。此等資料表明癌症患者樣品中CXCR4-ADRB2異二聚體之定量分析。2018年12月18日提交之國際申請案PCT/KR2018/016166報導了關於PDC中之異聚體形成之其他GPCR之評估。實例 7. 使用 PDX 模型評估活體內 CXCR4-GPCRx 異聚體形成
為了用源自患者之異種移植(PDX)樣品進行PLA，使用了源自膠質母細胞瘤患者之FFPE樣品(由韓國首爾之Samsung Seoul醫院提供)。在將FFPE樣品去蠟化之後，在100℃下進行熱誘導抗原修復達15分鐘。用Duolink提供之封閉溶液封閉玻片，並與兔抗CXCR4 (1:200，Thermoscientific，PA3305)、小鼠抗ADRB2 (1:200，Santacruz，Sc-271322)在37℃之加濕室中一起孵育1 h。其他過程與上述過程相同(用PDC進行之PLA)。
在圖12A中，用DAPI染色來觀察細胞核，且用PLA將CXCR4-ADRB4異聚體藉由染色為小墨點。如圖12B中所示，PLA比率根據患者而不同，且基於該結果，表明有可能藉由伴隨診斷來進行個性化醫療。實例 8. 藉由 Ca2+ 動員檢定評估在 CXCR4-GPCRx 異聚體形成之後增強之 CXCR4 下游傳訊
用編碼CXCR4及ADRB2之腺病毒轉導MDA-MB-231細胞(圖13)。將細胞培養3天，用Cal-520 AM染色，並用單獨CXCL12 (30 nM)、遞增劑量之單獨沙美特羅或沙美特羅與30 nM CXCL12之組合進行處理。使用FlexStation 3量測鈣動員。在過表現CXCR4及ADRB2之MDA-MB-231細胞中，用單獨沙美特羅進行刺激不以劑量依賴方式引起鈣動員(圖13)。但是，當在勛在CXCL12之情況下用沙美特羅共刺激細胞時，在廣泛之沙美特羅濃度範圍(例如10 nM至300 nM之間之濃度)中，鈣傳訊大大增強。實例 9. 藉由 Ca2+ 動員檢定評估 CXCR4-GPCRx 異聚體形成之後增強之 CXCR4 下游傳訊及增強之傳訊之抑制
在過表現CXCR4及ADRB2之MDA-MB-231細胞中，相對於藉由用相應個別促效劑進行單一刺激所引起之鈣反應，用CXCR12 (CXCR4促效劑)及沙美特羅(ADRB2選擇性促效劑)進行共刺激顯著增加鈣反應(圖14)。此等結果證明CXCR4-ADRB2異聚體表現出不同於個別GPCR CXCR4及ADRB2之性質。
亦檢查在用CXCL12及ADRB2配體進行共刺激之後共表現CXCR4及ADRB2之細胞中之增強之鈣反應是否藉由呈CXCR4拮抗劑之抗CXCR4抗體抑制。在共表現CXCR4及ADRB2之細胞中，2 μg抗CXCR4抗體12G5之投與抑制了增強之鈣傳訊，如圖14所示。且兩種拮抗劑(ADRB2拮抗劑卡維地洛及CXCR4拮抗劑12G5一起)之共同投與導致對鈣傳訊之更顯著抑制。此等結果證明，抗CXCR4抗體及ADRB2拮抗劑可用作針對CXCR4-ADRB2異聚體介導之疾病之有效治療(或聯合療法)。
具體而言，利用鈣動員檢定，將MDA-MB-231人類乳癌細胞以每孔20,000個細胞接種於黑色透明底96孔板(Corning Costar, #3340)中之補充有10% FBS之100 μL RPMI 1640中。第二天，將細胞用10 MOI CXCR4及30 MOI GPCRx共轉導。2天後，用指定量之ADRB2拮抗劑卡維地洛(Tocris)、抗CXCR4抗體12G5 (Thermo Scientific，35-8800)處理細胞，並與Cal 6 (Molecular Devices之FLIPR®鈣6檢定套組，目錄號R8191)一起孵育2小時。隨後用指定量CXCL12、ADRB2促效劑或CXCL12及ADRB2促效劑刺激細胞。使用FlexStation 3多模式微量板讀數器量測鈣動員。將結果正規化為基線活性。藉由計算各圖之曲線下面積(AUC)來定量鈣動員。將資料正規化為表現單獨CXCR4之細胞中CXCL12刺激之鈣反應。資料表示三個獨立實驗(平均值±SEM)。*P ＜ 0.05；學生t檢驗。實例 10. CXCR4-ADRB2 異聚體對腫瘤生長之影響
為了研究CXCR4-ADRB2異聚體對腫瘤生長之影響，在A549肺癌細胞中製備穩定過表現單獨CXCR4 (「A549-CXCR4細胞」)或CXCR4及ADRB2兩者以使得細胞含有CXCR4-ADRB2異聚體(「A549-CXCR4-ADRB2細胞」)之細胞株，並在裸鼠中皮下注射相同量細胞(1×107 個細胞/頭)以比較腫瘤生長速率。如圖15A-15B中所示，A549之移植之後28天的腫瘤大小為351.4±214.7 mm3 ，A549-CXCR4細胞為726.9±259.6 mm3 ，且A549-CXCR4-ADRB2細胞為1012.2±556.1 mm3 。移植有A549-CXCR4細胞(過表現CXCR4)之小鼠之腫瘤生長速率快於攜帶單獨親代A549細胞之小鼠之腫瘤生長速度，且在移植有A549-CXCR4-ADRB2細胞(過表現CXCR4及ADRB2兩者)之小鼠中觀察到最快腫瘤生長。此等結果表明，CXCR4-ADRB2異聚體之形成協同增加Ca2+ 反應，且因此促進腫瘤生長。
圖15A顯示了移植有親代細胞A549、A549-CXCR4細胞(穩定過表現CXCR4)或A549-CXCR4-ADRB2細胞(穩定過表現CXCR4及ADRB2)之三隻小鼠在移植之後28天之影像。此等影像顯示，攜帶A549-CXCR4-ADRB2細胞(穩定過表現CXCR4及ADRB2)之小鼠之腫瘤大小為其中最大的(加速最大)。這三隻不同小鼠隨時間推移之腫瘤生長速率在圖15B中用圖形表示。藉由量測腫瘤之長度(L)及寬度(W)並根據下式計算腫瘤體積，每第三或第四天監測腫瘤生長：體積 = 0.5 LW2 。如與攜帶親代細胞A549之小鼠相比，攜帶A549-CXCR4細胞之小鼠顯示相對快速的腫瘤生長，且在移植有A549-CXCR4-ADRB2細胞(穩定過表現CXCR4及ADRB2兩者)之小鼠中，腫瘤生長最快。實例 11. CXCR4-ADRB2 異聚體形成之後增強之 CXCR4 下游傳訊之 Ca2+ 動員抑制 - 單一抑制劑處理與組合抑制劑處理之比較
比較了布利沙福(CXCR4抑制劑，亦稱為TG-0054)之抑制程度(呈Ca2+ 反應之IC50值來量測)，呈以下進行評估：在表現單獨CXCR4之MDA-MB-231細胞(單體或個別單元體情境；「MDA-MB-231-CXCR4細胞」)中之單一處理；在過表現CXCR4及ADRB2之含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231細胞株(「MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞」)中之單一治療；以及在MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞中與ADRB2抑制劑(卡維地洛；10 µM)共同處理。
將MDA-MB-231細胞用編碼僅CXCR4或CXCR4及ADRB2之腺病毒轉導。將細胞培養2天，並用單獨布利沙福(CXCR4抑制劑)處理或用布利沙福及ADRB2抑制劑(卡維地洛；10 uM)共同處理。然後將細胞用Cal-6染色2小時，並用CXCR4促效劑(CXCL12；20 nM)及ADRB2促效劑(Salmeterol；1 µM)刺激。使用FlexStation3量測鈣動員，其結果顯示在表3中，顯示了以下之Ca2+ 反應之IC50：(1)僅用布利沙福處理之MDA-MB-231-CXCR4細胞(第二欄)；(2)用布利沙福及ADRB2抑制劑卡維地洛同時處理之MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞(第3欄)；及(3)僅用布利沙福處理之MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞(第4欄)。表 3 ：
CXCR4 抑制劑 IC50 [nM]
CXCR4 CXCR4+ADRB2 (+卡維地洛10 uM) CXCR4+ADRB2 (- 卡維地洛10 uM)
TG-0054 65.78±1.34 0.02±0.013 90.54±31.27
如表3所示，相對於用單獨CXCR4抑制劑TG-0054之單一處理(第4欄)，當與ADRB2抑制劑卡維地洛組合處理時(第3欄)，含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞中Ca2+ 反應之IC50值降低了4500倍或更多。此結果表明，在含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞中，與用單獨布利沙福之單一處理相比，用布利沙福及ADRB2抑制劑之共同處理更有效地抑制增加之Ca2+ 反應。
為了確定CXCR4-ADRB2異聚體形成誘導構形變化及/或改變對CXCR4抑制劑之結合親和力之可能性，比較了在表現單獨CXCR4之MDA-MB-231-CXCR4細胞與含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞中用布利沙福(TG-0054)單一處理之間的Ca2+ 反應之IC50值。結果表明，相對於MDA-MB-231-CXCR4細胞(第2欄)，在MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞(第4欄)中用CXCR4抑制劑之單一處理僅使IC50值改變約1.4倍。此結果表明與用CXCR4抑制劑之單一處理相比，用CXCR4抑制劑例如布利沙福(TG-0054)及ADRB2抑制劑之共同處理可增加對含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體及/或個體細胞/組織之治療功效，達到某些CXCR4抑制劑之顯著程度。
如表3所示，用布利沙福及卡維地洛之共同處理導致含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞中之Ca2+ 反應之IC50值降低。由於過度劑量ADRB2拮抗劑可影響對應體CXCR4之活性，因此藉由將在650 nM之IC90值濃度下之卡維地洛與一系列CXCR4拮抗劑組合來量測CXCR4拮抗劑之IC50值變化。表4中提供了資料。表 4 ：
CXCR4 抑制劑 IC50 [nM]
CXCR4 CXCR4+ADRB2 (+ 卡維地洛600 nM) CXCR4+ADRB2 (- 卡維地洛600 nM)
AMD3100 54.41±4.80 2.12±0.86 22.45±8.77
烏克普魯單抗 0.41±0.01 0.03±0.02 0.88±0.34
BKT140 578.9±204.1 1.94±0.77 88.66±59.03
TG-0054 65.78±1.34 1.49±0.07 90.54±31.27
如表4所示，關於在CXCR4-ADRB2異聚體情境中之Ca2+ 反應，相對於用單獨CXCR4抑制劑之單一投與(第4欄)，當與ADRB2抑制劑組合投與時(第3欄)，CXCR4抑制劑之IC50值降低。例如，在分別將卡維地洛(600 nM，在單體情境中針對ADRB2之IC90濃度值)與AMD3100、烏克普魯單抗、BKT140及TG-0054共同投與之後，在CXCR4-ADRB2異聚體情境中之Ca2+ 反應之IC 50值降低了約10.5倍(從22.45 nM至2.12 nM)、約29.3倍(從0.88 nM至0.03 nM)、約45.7倍(從88.66 nM至1.94 nM)、約60.7倍(從約90.54 nM至1.49 nM)。此結果表明，與用CXCR4抑制劑之單一投與相比，用低劑量CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之共同投與可增加對含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體之治療功效。實例 12. 用 CXCL12 及 / 或沙美特羅進行之刺激誘導含有 CXCR4-ADRB2 異聚體之細胞株中 ERK 傳訊之活化
ERK1/2調控不同細胞型中之趨化性或存活(Riol-Blanco, L.等人, (2005) The chemokine receptor CCR7 activates in dendritic cells two signaling modules that independently regulate chemotaxis and migratory speed, J. Immunol. 174(7), 4070–4080；Klemke, R.L.等人, (1997) Regulation of cell motility by mitogen-activated protein kinase, J. Cell Biol. 137(2), 481–492；Copp, J.等人, (2009) ORC-specific phosphorylation of mammalian target of rapamycin (mTOR): phospho-Ser2481 is a marker for intact mTOR signaling complex 2, Cancer Res. 69(5), 1821–1827)。在用CXCL12 (CXCR4促效劑)及/或沙美特羅(ADRB2促效劑)刺激細胞中之CXCR4或CXCR4-ADRB2異聚體之後，評估ERK1/2活性。特定言之，對表現Rluc-luc2P之MDA-MB-231細胞(「MDA-MB-231親代細胞」)、表現CXCR4之MDA-MB-231細胞(「MDA-MB-231-CXCR4細胞」)及含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231細胞(「MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞」)進行CXCL12刺激在10分鐘後誘導ERK1/2活化，並在60分鐘後達到最高活性水準。MDA-MB-231親代細胞、MDA-MB-231-CXCR4細胞及MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞之沙美特羅刺激亦在20分鐘後誘導ERK活化，並在60分鐘後降至基礎水準(資料未顯示)。
為了確定CXCR4及ADRB2傳訊之協同作用，在CXCL12及沙美特羅刺激後量測ERK1/2活化水準。將表現Rluc-luc2P或CXCR4或含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231細胞及A549細胞以每孔5×105 個細胞之密度接種在6孔板中。血清飢餓16小時後，在MDA-MB-231親代細胞、MDA-MB-231-CXCR4細胞及MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞中用10 nM CXCL12及/或10 nM沙美特羅將相應細胞處理20分鐘，且在表現Rluc-luc2P之A549細胞(「A549親代細胞」)、表現單獨CXCR4之A549細胞(單體或單個單元體情境；「A549-CXCR4細胞」)及穩定過表現CXCR4及ADRB2之含有CXCR4-ADRB2異聚體之A549細胞株(「A549-CXCR4-ADRB2細胞」)中處理10分鐘。此後，收穫各組細胞並進行西方墨點分析。
在用單獨CXCL12或沙美特羅之刺激中，MDA-MB-231-CXCR4細胞中之ERK1/2活化水準高於MDA-MB-231親代細胞。與MDA-MB-231-CXCR4細胞相比，MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞中之ERK1/2磷酸化顯著增加。當同時用CXCL12及沙美特羅刺激MDA-MB-231親代細胞時，誘導了水準與單一促效劑刺激之水準相似的ERK1/2磷酸化。在MDA-MB-231-CXCR4細胞中，ERK1/2磷酸化增加了各單獨促效劑之總和，而在MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞中，ERK1/2活化協同地增加(圖16A-16B)。
亦研究了A549親代細胞、A549-CXCR4細胞及A549-CXCR4-ADRB2細胞中之ERK1/2活化。在用單獨CXCL12或沙美特羅刺激之後，偵測了A549-CXCR4細胞或A549-CXCR4-ADRB2細胞中之ERK1/2磷酸化。在A549親代細胞中，ERK1/2磷酸化未藉由用單獨CXCL12或沙美特羅刺激而誘導，但在用CXCL12及沙美特羅共刺激之後顯著增加。在A549-CXCR4細胞中，ERK1/2磷酸化由各單獨促效劑誘導，且當用CXCL12及沙美特羅共刺激時，增加了各刺激之總和。在A549-CXCR4-ADRB2細胞中，與用單獨CXCL12相比，當用單獨沙美特羅刺激時誘導了多得多的ERK1/2磷酸化，且當用CXCL12及沙美特羅共刺激時顯著活化(圖17A-17B)。
此等結果表明，癌細胞中CXCR4及ADRB2之表現，且特別是當癌細胞含有CXCR4-ADRB2異聚體時，可導致顯著誘導下游ERK活化且可對癌細胞增殖及趨化性具有重大影響。實例 13. CXCR4 拮抗劑對含有 CXCR4-ADRB2 異聚體之 A549 細胞株中之 CXCR4/CXCL12 介導之增殖增加之影響
為了研究癌細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之存在對癌細胞生長之影響，將含有穩定過表現CXCR4及ADRB2之CXCR4-ADRB2異聚體之A549細胞(「A549-CXCR4-ADRB2細胞」)之生長與作為對照之表現Rluc-luc2P之A549細胞(A549雙陰性細胞；「A549親代細胞」)進行比較，並取決於CXCL12促效劑之存在。
將A549親代細胞或A549-CXCR4-ADRB2細胞以1×104 個細胞/孔之密度鋪板在96孔板中，並在培養基中孵育24 h以實現黏附。洗滌後，添加無血清培養基±CXCL12，在無血清條件中具有或不具有指定CXCR4抑制劑(圖18A：AMD3100 (10 μM)；圖18B：LY2510924 (10 μM)；圖18C：AMD070 (1 μM)；圖18D：TG-0054 (10 μM)；及圖18E：BKT-140 (10 μM)，並將細胞孵育72 h (接種後96 h)。孵育結束時，根據製造商之說明，藉由使用Prestoblue細胞生存力試劑(Thermo Fisher Scientific)評估細胞增殖。
圖18A-18E顯示在存在CXCL12促效劑之情況下觀察到細胞增殖速率增加約20%，且此增加由所測試之各CXCR4拮抗劑阻斷。在正常細胞生長條件(10%血清)下，在A549親代細胞與A549-CXCR4-ADRB2細胞之間未觀察到細胞增殖速率之差異。但是，在無血清條件中，在存在CXCL12之情況下，A549-CXCR4-ADRB2細胞(非A549親代細胞)表現出以劑量依賴方式之細胞增殖增加(資料未顯示)。在存在100 nM CXCL12之情況下達72 h達成約20%之最大增加。CXCL12介導之細胞增殖增加隨著血清濃度增加而減少(資料未顯示)。為了確認細胞增殖速率之增加係藉由CXCR4/CXCL12特異性傳訊而介導，評估了若干CXCR4特異性拮抗劑AMD3100、LY210924、AMD070、TG-0054及BKT-140。所測試之各CXCR4拮抗劑均阻斷了CXCL12對細胞增殖之作用。CXCR4/CXCL12傳訊軸在無血清條件中使細胞增殖率增加約20%，此情況與先前報導一致，即CXCR4/CXCL12僅在次優條件中誘導增殖增加(Balkwill, Fran (2004) Nature Reviews Cancer, Cancer and the Chemokine Network, 4:540-550)。
靶向CXCR4之抑制劑可抑制例如僅與在存在CXCL12之情況下增加的一樣多，且使用較高濃度CXCR4抑制劑可引起細胞毒性(資料未顯示)。此等結果可解釋與在臨床中針對癌症治療使用CXCR4抑制劑作為唯一活性劑有關之腫瘤生長抑制之功效低及不良作用的觀察結果。在含有CXCR4-ADRB2異聚體之個體中，雖然用單獨CXCR4抑制劑處理可能未有效抑制腫瘤生長，但CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之共同投與可有效抑制腫瘤生長。實例 14. CXCR4-ADRB2 異聚體量與腫瘤生長之間的相關性
為了研究CXCR4-ADRB2異聚體量與腫瘤生長之間的相關性，製備了穩定過表現CXCR4同聚物之A549細胞株(「A549-CXCR4細胞」)及穩定過表現CXCR4及ADRB2之含有CXCR4-ADRB2異聚體之A549細胞株(「A549-CXCR4-ADRB2細胞」)。經由PLA比較了經工程改造之細胞株中之CXCR4-ADRB2異聚體量。圖19A-19B顯示，如藉由PLA所確定，在A549親代細胞、A549-CXCR4細胞及A549-CXCR4-ADRB2細胞中分別偵測到約30、約80及大於150個CXCR4-ADRB2異聚體。
為了確定是否含有CXCR4-ADRB2異聚體(如在細胞水準上藉由PLA所證實)以劑量依賴性方式增加腫瘤生長，製備了A549親代細胞及A549-CXCR4-ADRB2細胞，並將相同量細胞(1×107 個細胞/頭)皮下注射於裸鼠體內以比較腫瘤生長速率。藉由量測腫瘤之長度(L)及寬度(W)並根據下式計算腫瘤體積，每第三或第四天監測腫瘤生長：體積 = 0.5 LW2 。如圖19C所示，在A549異種移植小鼠(具有A549親代細胞)中移植後44天之腫瘤大小為562.8±245.9 mm3 ，且在A549-CXCR4-CXCR4-ADRB2異種移植小鼠(具有A549-CXCR4-ADRB2細胞)中為967.2±493.0 mm3 。移植有A549-CXCR4-ADRB2細胞之小鼠之腫瘤生長速率比移植有A549親代細胞之小鼠之腫瘤生長速率快。此等結果表明，CXCR4-ADRB2異聚體之形成協同增加Ca2+ 反應，且因此促進腫瘤生長。
在A549肺癌細胞株及MDA-MB-231乳癌細胞株中證實了CXCR4-ADRB2異聚體之(存在及)量與腫瘤增殖之間的相關性。以與A549細胞株情境相同之方式，製備了過表現CXCR4同聚物之MDA-MB-231-CXCR4細胞株(「MDA-MB-231-CXCR4細胞」)及藉由過表現CXCR4及ADRB2而含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231細胞株(「MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞」)，然後透過PLA比較CXCR4-ADRB2異聚體表現量。如在圖20A-20B中所示，在MDA-MB-231親代細胞、MDA-MB-231-CXCR4細胞及MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞中分別偵測到約65、約80及大於180個CXCR4-ADRB2異聚體。為了確定是否CXCR4-ADRB2異聚體之(存在及)量(如在細胞水準上藉由PLA所證實)以劑量依賴性方式增加腫瘤生長，製備了MDA-MB-231親代細胞、MDA-MB-231-CXCR4細胞及MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞，並將相同量細胞(5×106 個細胞/頭)原位注射於裸鼠中之乳腺脂肪墊以比較腫瘤生長速率。如圖20C所示，在MDA-MB-231異種移植小鼠(具有MDA-MB-231親代細胞)中移植後67天之腫瘤大小為265.8±161.8 mm3 ，在MDA-MB-231-CXCR4異種移植小鼠(具有MDA-MB-231-CXCR4細胞)中為459.2±399.6 mm3 且在MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2異種移植小鼠(具有MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞)中為1107. 0±184.8 mm3 。以MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2異種移植小鼠、MDA-MB-231-CXCR4異種移植小鼠及MDA-MB-231異種移植小鼠之順序觀察到腫瘤大小，此情況表明腫瘤大小取決於CXCR4-ADRB2異構體存在之量而增加。此等結果表明，隨著CXCR4-ADRB2異聚體量增加，腫瘤變得更加惡性。因此，可透過投與靶向CXCR4-ADRB2異聚體之抑制劑或抑制劑之組合，例如CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，來有效治療具有CXCR4-ADRB2異聚體之癌症。實例 15. 在含有 CXCR4-ADRB2 異聚體之 A549 異種移植小鼠中單獨 CXCR4 抑制劑對腫瘤生長之影響
使用目前正在開發或在市場上出售之CXCR4抑制劑評估了移植有藉由穩定過表現CXCR4及ADRB2而含有CXCR4-ADRB2之A549細胞(「A549-CXCR4-ADRB2細胞」)之小鼠中之抗腫瘤作用。將A549-CXCR4-ADRB2細胞(1×107 個細胞/頭)皮下注射於裸鼠中。當腫瘤大小達到約50-100 mm3 之平均大小時，用CXCR4抑制劑處理小鼠(n=10 /測試組)：AMD3100 (圖21A)、LY2510924 (圖21B)、AMD070 (圖21C)或TG-0054 (圖21D)。每天一次投與CXCR4抑制劑，持續4週。
如圖21A-21D所示，所測試之大多數CXCR4抑制劑顯示出腫瘤生長之有限抑制。另外，未觀察到劑量依賴性腫瘤減少，且抑制作用不顯著。此外，儘管投與之劑量大於通常劑量，但是腫瘤生長抑制作用為有限的。用10 mpk之高劑量LY2510924之處理導致僅在2個劑量中所測試之10隻小鼠中有3隻死亡。
如實例11及表3-4中所述，在含有CXCR4-ADRB2異聚體(具有增加之Ca 2+訊息)之細胞中，用CXCR4拮抗劑及ADRB2抑制劑之共處理比用單獨CXCR4拮抗劑之單一處理有效。如細胞生長檢定(實例13及圖18A-18E)所述，CXCR4抑制劑減少了由CXCL12刺激所產生之增加之細胞增殖。增加CXCR4抑制劑之量導致細胞毒性。此等結果表明，在抑制CXCR4-ADRB2異聚體之功能方面及在抑制腫瘤生長方面，CXCR4抑制劑與ADRB2抑制劑之共同投與可比投與單獨CXCR4抑制劑有效。實例 16. 單獨或以組合方式之 CXCR4 抑制劑及 ADRB2 抑制劑使用對含有 CXCR4-ADRB2 異聚體之 MDA-MB-231 細胞原位異種移植小鼠 ( 或 A549 細胞異種移植小鼠 ) 中之腫瘤生長之影響
含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231細胞原位異種移植小鼠： 在移植有藉由穩定過表現CXCR4及ADRB2而含有CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231細胞(「MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞」)之小鼠中，投與單獨CXCR4抑制劑不為有效的抗腫瘤治療。如圖22A-22C所示，藉由比較CXCR4抑制劑(AMD3100 (圖22A)、LY2510924 (圖22B)、AMD070 (圖22C))及ADRB2抑制劑(卡維地洛)之單獨或組合投與來評估由於存在CXCR4-ADRB2異聚體所導致之增加之腫瘤生長之抑制(抗腫瘤作用)。將Balb/c-nu/nu雌性小鼠原位移植MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞(1×106 個細胞/頭)。一天一次投與AMD3100 (2.5 mg/kg，7.5mg/kg)、LY2510924 (1 mg/kg，3 mg/kg)、AMD070 (3 mg/kg，10 mg/kg)及/或卡維地洛(30 mg/kg)，持續4週(總計28次)。皮下投與AMD3100、LY2510924及AMD070，且經口投與卡維地洛。在藥物投與之第一天藉由將腫瘤大小轉換為100來計算腫瘤大小(腫瘤生長%)。如圖22C所示，投與單獨CXCR4抑制劑AMD070或單獨ADRB2抑制劑卡維地洛顯示出腫瘤生長之有限抑制。然而，與相應單一投與相比，AMD070與卡維地洛之共同投與有效抑制了腫瘤之生長，且當投與組合(包括卡維地洛)時，隨著CXCR4抑制劑AMD070之量增加，腫瘤之生長亦以劑量依賴性方式減少。此等結果表明，可透過共同投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑來提供由於CXCR4-ADRB2異聚體形成而抑制增加之腫瘤大小(抗腫瘤作用)。
含有CXCR4-ADRB2異聚體之A549細胞異種移植小鼠： 為了研究CXCR4-ADRB2異聚體抑制劑對腫瘤生長之抗腫瘤作用，將藉由穩定過表現CXCR4及ADRB2而含有CXCR4-ADRB2異聚體之A549細胞(「A549-CXCR4-ADRB2細胞」)(1×107 個細胞/頭)皮下注射於裸鼠中。當腫瘤大小達到平均50-100 mm3 時，單獨或組合投與CXCR4抑制劑(AMD3100)、ADRB2抑制劑(卡維地洛)。
圖22D為比較腫瘤生長速率之圖，針對CXCR4抑制劑AMD3100 (2.5 mg/kg，7.5mg/kg)及/或ADRB2抑制劑卡維地洛(30 mg/kg)之活體內 抗腫瘤作用，經由單一投與或共同投與來一天投與一次達4週(總計28次)；皮下投與AMD3100，且經口投與卡維地洛。藉由量測腫瘤之長度(L )及寬度(W )並根據下式計算腫瘤體積，每第三或第四天監測腫瘤生長：體積 = 0.5LW2 。實例 17A-17B. 藉由基於配體之 TR-FRET 之 CXCR4-ADRB2 異聚體偵測
使用時間解析螢光能量轉移(TR-FRET)評估CXCR4-ADRB2異聚體之偵測。TR-FRET將時間解析螢光法(TRF)之低背景態樣與FRET之均質檢定結合在一起。所得檢定提供涉及兩個螢光團(供體及受體)之FRET之靈活性、可靠性及靈敏性之增加。若供體及受體在給定彼此接近性內，則能量源對供體之激發產生至受體之能量轉移。受體繼而以其特徵波長發射光。將A549細胞以每孔20,000個細胞之密度接種於96孔板中。藉由腺病毒感染然後在37℃、5% CO2 下孵育48小時，使CXCR4及ADRB2瞬時過表現在A549細胞中。以0、0.1、0.5、1.25、2.5、5、10及20之MOI處理表現CXCR4之腺病毒，並以3倍高MOI處理表現ADRB2之腺病毒。編碼HA-VC之腺病毒用於調整轉導之腺病毒之總量。為了表徵CXCR4-ADRB2異聚體，用螢光標記之普萘洛爾及鋱標記之TZ14011進行了用標記配體之TR-FRET檢定。圖23A顯示，取決於CXCR4及ADRB2表現之量(其影響形成之CXCR4-ADRB2異聚體之量)，FRET信號增加，且當將未標記之普萘洛爾處理為ADRB2拮抗劑普萘洛爾-g2之競爭物時，FRET信號消失，表明它為CXCR4-ADRB2特異性信號。此等結果表明，可藉由基於配體之TR-FRET方法定量偵測CXCR4-ADRB2異聚體。
除了使用螢光與GPCR特異性配體結合之配體-螢光複合物之外，可將螢光與GPCR特異性抗體或二級抗體結合之抗體-螢光複合物用於TR-FRET。
將U2OS細胞以每孔20,000個細胞之密度接種到96孔板中。在37℃潮濕孵育器中孵育隔夜之後，使用腺病毒系統(0.9-30 MOI攜帶CXCR4之腺病毒及0.5-15 MOI攜帶ADRB2之腺病毒)瞬時過表現CXCR4及ADRB2。為了分析針對CXCR4及ADRB2之基於抗體之TR-FRET之動態範圍及偵測極限，採用攜帶CXCR4及ADRB2之腺病毒(分別為Ad-CXCR4及Ad-ADRB2)之廣泛感染複數(MOI)。各腺病毒感染48 h之後，洗滌細胞並在室溫下用4%多聚甲醛固定10分鐘。洗滌細胞兩次之後，為了使細胞透化，將含有0.1% Triton X-100之DPBS在室溫下處理10分鐘。然後將細胞在室溫下封閉30分鐘，然後在室溫下與兔抗CXCR4抗體及小鼠抗ADRB2抗體一起孵育3小時。用DPBS洗滌細胞4次後，在室溫下處理用鋱穴狀化合物標記之山羊抗兔IgG及用Alexa Fluor 647標記之山羊抗小鼠IgG持續1小時。然後將細胞用DPBS洗滌4次，隨後使用Varioskan LUX多模式微量板讀數器進行分析。
基於抗體之TR-FRET之進行顯示以2 Ad-CXCR4:1 Ad-ADRB2之比之最高信號(圖23B)。因此，分別從30 MOI及15 MOI對Ad-CXCR4及Ad-ADRB2進行連續半數稀釋。將攜帶HA-VC之腺病毒用作陰性對照。在0.9 MOI Ad-CXCR4及0.5 MOI Ad-ADRB2中成功偵測到FRET效率，且亦觀察到劑量依賴性。此等結果表明，基於抗體之TR-FRET可為GPCR異聚體診斷之有前途之工具。實例 18A-18C. 在血癌及實體腫瘤細胞株中藉由 PLA 之 CXCR4-ADRB2 異聚體偵測及藉由 RT-qPCR 之 CXCR4 或 ADRB2RNA 表現水準之定量
檢查了血癌及實體腫瘤細胞株中所偵測之由個別GPCR (CXCR4及ADRB2)產生之RNA量與CXCR4-ADRB2異聚體之量之間的關係。CXCR4在多種人類癌症中過表現，例如，血液學癌症例如骨髓瘤及白血病，以及實體腫瘤例如肺癌及乳癌。且此過表現與復發風險增加及整體生存不良有關。
在藉由qPCR測試之所有三種實體腫瘤細胞株中觀察到CXCR4及ADRB2 RNA之表現：A549 (肺癌)、U2OS (骨肉瘤)及MDA-MB-231 (乳癌)(圖24A)。為了評估A549、U2OS及MDA-MB-231細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之內源表現水準，使用針對CXCR4及ADRB2兩種不同的一級抗體來利用PLA。所得滾環擴增(RCA)產物顯示為紅色螢光信號，在整個細胞表面上廣泛染色，覆蓋細胞核(用DAPI染色)及細胞質(圖24B)。各細胞之平均PLA信號顯示為RCA產物除以細胞數。平均而言，各MDA-MB-231細胞具有約60種RCA產物之值，其後係具有約35種RCA產物之A549細胞及具有約20種RCA產物之U2OS細胞(圖24C)。與A549及U2OS細胞相比，MDA-MB-231細胞株中CXCR4及ADRB2之RNA表現水準最高(CXCR4/ADRB2之ΔCt：7.4/8.8、10.6/12.4、12.8/10.5)，且與A549或U2OS細胞相比，MDA-MB-231中之PLA值最高。可以看出，RNA表現與PLA值之間存在顯著相關性。此等結果表明，可以藉由分析PLA及RNA表現水準來篩查具有CXCR4-ADRB2異聚體之患者。
在藉由qPCR測試之所有三種血癌細胞株中觀察到CXCR4及ADRB2 RNA之表現：HL60 (白血病)、U937 (白血病)及RPMI 8226 (骨髓瘤)(圖25A)。為了評估HL-60、U937及RPMI 8226細胞中CXCR4-ADRB2異聚體之內源表現水準，使用針對CXCR4及ADRB2兩種不同的一級抗體來利用PLA。所得滾環擴增(RCA)產物顯示為在整個細胞表面上廣泛染色之紅色螢光信號(圖25B)。各細胞之平均PLA信號顯示為RCA產物除以細胞數。平均而言，各HL-60細胞具有30種RCA產物之值，其次為U937細胞及RPMI 8226細胞，其約為HL-60值之一半(圖25C)。藉由定量PCR比較CXCR4及ADRB2之RNA表現水準，三種細胞中之ADRB2表現相似(ΔCt：9)，但HL60細胞中CXCR4之表現水準為其他細胞株U937及RPMI 8226之兩倍(ΔCt值：4.7、5.9、5.8)。此等差異顯示了PLA值之相似模式，表明RNA表現水準與PLA值之間存在顯著相關性。此等結果表明能夠成功偵測到懸浮細胞之PLA信號，表明HL-60細胞之CXCR4-ADRB2異聚體量為U937及RPMI 8226細胞兩倍。
對於篩選表現CXCR4異聚體之個體並根據伴侶GPCR類型提供所選藥物而言，CXCR4異聚體之診斷至關重要。已經在我們研究所確立作為診斷CXCR4異聚體之方法之PLA係一種使用抗體、在福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣品中診斷從實體癌個體中提取之組織之方法。此等結果提供了偵測液體生檢中之CXCR4異聚體之可能性，例如血液癌個體樣品、尿液及沉積物。實例 19. 藉由 Ca2+ 動員檢定評估內源性表現 CXCR4 及 ADRB2 單元體之天然細胞中增強之 CXCR4 下游傳訊
CXCR4-GPCRx異聚體例如CXCR4-ADRB2異聚體之性質經由鈣動員檢定在各自內源性表現CXCR4及ADRB2之U937細胞(圖 26A )及HL-60細胞(圖 26B )中，藉由量測用相應促效劑中之一或兩者刺激或共刺激之後產生之鈣傳訊來評估。使用FlexStation3量測鈣動員。
在U937細胞(圖 26A )及HL-60細胞(圖 26B )中，用單獨CXCR4促效劑CXCL12 (200 nM)刺激引起細胞間鈣動員，而用單獨ADRB2促效劑福莫特羅(10 uM)刺激未誘導鈣反應。但是，相對於藉由單促效劑刺激所引起之反應，用兩種促效劑(分別為200 nM及10 uM CXCL12及福莫特羅)共刺激在U937細胞(圖 26A )及HL-60細胞(圖 26B )中產生顯著增加之鈣反應(相對於用CXCL12之單刺激，U937細胞之鈣反應增加約4倍，且相對於用CXCL12之單刺激，HL-60細胞之鈣反應增加約8倍)。實例 20. U937 及 HL-60 細胞株中在 CXCR4-ADRB2 異聚體形成之後增強之 CXCR4 下游傳訊之 Ca2+ 動員抑制 - 單一抑制劑處理與組合抑制劑處理之比較
在存在或不存在卡維地洛(代表性ADRB2抑制劑)之情況下，量測了CXCR4抑制劑在U937細胞及HL-60細胞中抑制CXCR4-ADRB2異聚體之鈣反應增強之效率(實例 19 )。如實例19中所討論，藉由促效劑CXCL12 (200 nM)及福莫特羅(10 μM)誘導CXCR4-ADRB2異聚體之鈣反應增加，且在用促效劑處理細胞之前2小時，添加CXCR4抑制劑(在存在或不存在ADRB2抑制劑卡維地洛之情況下)。使用FlexStation3量測鈣動員，並使用GraphPad Prism軟體計算所得Ca2+反應IC50。資料示於表5。表 5 ：
CXCR4 抑制劑 CXCR4抑制劑IC50 [nM]
U937 HL60
+卡維地洛10 uM - 卡維地洛10 uM +卡維地洛10 uM - 卡維地洛10 uM
AMD3100 0.52 ± 0.06 3.34 ± 2.45 0.34 ± 0.31 1.50± 1.13
烏克普魯單抗 0.26 ± 0.21 1.25 ± 0.44 0.006± 0.003 0.02 ± 0.003
AMD070 4.08 ± 2.75 4.83 ± 0.24 0.28 ± 0.16 3.56 ± 3.17
TG-0054 0.35 ± 0.23 24 ± 12.6 0.32 ± 0.11 4 ± 1.98
如表5所示，在U937細胞中，在存在10 μM卡維地洛之情況下，CXCR4抑制劑AMD3100、烏克普魯單抗及TG-0054更有效地抑制了CXCR4-ADRB2傳訊，如相應CXCR4抑制劑之IC50 值減小所示。具體而言，在存在卡維地洛之情況下，TG-0054之IC50值顯著減小。卡維地洛分別與AMD3100、烏克普魯單抗或TG-0054共同處理之後，Ca2+反應之IC50值減小約6.4倍(從3.34 nM至0.52 nM)、約4.8倍(從1.25 nM至0.26 nM)及約69倍(從24 nM至0.35 nM)。
如表5所示，在HL-60細胞中，在存在10 μM卡維地洛之情況下，各CXCR4抑制劑都更有效地抑制了CXCR4-ADRB2傳訊。卡維地洛分別與AMD3100、烏克普魯單抗、AMD070或TG-0054共同處理之後，Ca2+反應之IC50值減小約4.4倍(從1.50 nM至0.34 nM)、約3.3倍(從0.02 nM至0.006 nM)、約12.7倍(從3.56 nM至0.28 nM)及約12.5倍(從4 nM至0.32 nM)。
此等結果表明在含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞中，與用單獨CXCR4抑制劑之單一處理相比，用CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之共同處理更有效地抑制增加之Ca2+反應。實例 21. MDA-MB-231 細胞株中在 CXCR4-ADRB2 異聚體形成之後增強之 CXCR4 下游傳訊之 Ca2+ 動員抑制 - 單一抑制劑處理與組合抑制劑處理之比較
在用僅編碼ADRB2之腺病毒轉導之MDA-MB-231細胞中，量測了ADRB2抑制劑在抑制ADRB2之鈣反應中之效率，並在用沙美特羅(1 µM)刺激細胞後量測了傳訊。資料示於表6中。另外，在存在或不存在代表性CXCR4抑制劑AMD3100之情況下，在用編碼CXCR4及ADRB2之腺病毒共轉導之MDA-MB-231細胞中，量測了ADRB2抑制劑在抑制CXCR4-ADRB2異聚體之增加之鈣反應(增強之傳訊)中之效率。在用CXCL12 (20 nM)及沙美特羅(1 µM)共刺激MDA-MB-231細胞之後量測Ca2+通量，並在用促效劑處理細胞前2小時添加ADRB2抑制劑(存在或不存在CXCR4抑制劑AMD3100)。使用FlexStation3量測鈣動員，並使用GraphPad Prism軟體計算所得鈣反應之IC50值。資料顯示於表6。表 6 ：
ADRB2抑制劑 僅ADRB2 CXCR4 + ADRB2
+ AMD3100(650 nM) - AMD3100 (650 nM)
布拉洛爾 0.82±0.72 0.10±0.05 3.12±2.27
拉貝洛爾 24.81±24.87 0.54±0.6 57.98±49.24
如表6所示，在MDA-MB-231細胞中，布拉洛爾之單一處理以0.82 nM作為IC50值抑制ADRB2傳訊，而拉貝洛爾之單一治療以24.81 nM作為IC50值抑制ADRB2傳訊。相對於在不存在AMD3100之情況下ADRB2抑制劑之IC50值，在存在650 nM (IC90)之AMD3100之情況下，如以減少之IC50值所展示，ADRB2抑制劑布拉洛爾或拉貝洛爾更有效地抑制CXCR4-ADRB2傳訊，效力較大。相對於單一處理，布拉洛爾與AMD3100組合時之IC50值減小約33倍(從3.12 nM至0.10 nM)，而相對於單一處理，拉貝洛爾與AMD3100組合時之IC50減小約107倍(從57.98 nM至0.54 nM)。此等結果表明在含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞中，與用單獨ADRB2抑制劑之單一處理相比，用CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之共同處理更有效地抑制增加之Ca2+反應。實例 22. MDA-MB-231 細胞株中在 CXCR4-ADRB2 異聚體形成之後增強之 CXCR4 下游傳訊之 Ca2+ 動員抑制 -TG-0054 單一處理與組合抑制劑處理之比較
在用僅編碼CXCR4之腺病毒轉導之MDA-MB-231細胞中，量測了TG-0054 (CXCR4抑制劑)在抑制CXCR4之鈣反應中之效率，並在用 CXCL12 (20 nM)刺激細胞後量測了傳訊。在MDA-MB-231細胞(表現CXCR4)中，量測出TG-0054之IC50值(nM)為65.78±1.34。接著，在用編碼CXCR4及ADRB2之腺病毒共轉導之MDA-MB-231細胞中，在存在或不存在ADRB2抑制劑(10 uM)之情況下，量測TG-0054在抑制CXCR4-ADRB2異聚體之增強之傳訊中之效率。資料示於表7。在用CXCL12 (20 nM)及沙美特羅(1 µM)共刺激MDA-MB-231細胞之後量測Ca2+通量，並在用促效劑處理細胞前2小時添加CXCR4抑制劑TG-0054 (存在或不存在ADRB2抑制劑)。使用FlexStation3量測鈣動員，並使用GraphPad Prism軟體計算所得鈣反應之IC50值。資料顯示於表7。表 7 ：
TG-0054 + ADRB2抑制劑 TG-0054 IC50 [nM]
-(僅TG-0054) 92.89±31.27
卡維地洛 0.02±0.013
拉貝洛爾 0.026±0.014
阿普洛爾 9.19±5.94
卡那洛爾 6.98±0.05
普羅帕酮 6.53±1.67
噻嗎洛爾 11.02±8.06
如上所述，在MDA-MB-231細胞中，TG-0054之單一處理在僅轉導CXCR4之MDA-MB-231中以65.78 nM作為IC50值抑制CXCR4傳訊。如表7所示，相對於在不存在ADRB2抑制劑之情況下之單一處理，在存在ADRB2抑制劑之情況下，如以減少之IC50值所展示，TG-0054更有效地抑制CXCR4-ADRB2傳訊，效力較大。TG-0054與卡維地洛聯組合時IC50值減小約4645倍(從92.89 nM至0.02 nM)，與拉貝洛爾組合時減小約3573倍(從92.89 nM至0.026 nM)，且當與ADRB2抑制劑阿普洛爾、卡那洛爾、普羅帕酮或噻嗎洛爾中之任一者組合處理時減小約10倍或更多。此等結果表明在含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞中，與用單獨TG-0054之單一處理相比，用TG-0054及ADRB2抑制劑一起之共同處理更有效地抑制增加之Ca2+反應。 示範性實施例
實施例A1. 一種用於抑制患有癌症之個體之細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法，該方法包含向該患者投與： a)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)   ADRB2抑制劑； 其中： i)    該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；且 ii)   該所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑抑制該癌症個體中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
實施例A2. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，該方法包含向該個體投與： a)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)   ADRB2抑制劑； 其中： i)    增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；且 ii)   該所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑抑制該癌症個體中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
實施例A3. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，該方法包含： a)    確定該個體之細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；及 b)   若該個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與： i)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 ii)   ADRB2抑制劑。
實施例A4. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含： 1)   藉由以下方式確定該個體是否具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞：獲得或已獲得來自該個體之生物樣品；及對該生物樣品進行或已進行檢定以確定是否： i)    該個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體；或 ii)   CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合：改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質或功能；改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展；及 2)   若該個體具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向該癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 3)   若該個體不具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向該癌症個體投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之單一抑制劑。
實施例A5. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含： 1)   藉由以下方式確定該個體是否具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞：獲得或已獲得來自該個體之生物樣品；及對該生物樣品進行或已進行檢定以確定是否： i)    該個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體；或 ii)   CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合：改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質或功能；改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展；及 2)   若該個體具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向該癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 3)   若該個體不具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向該癌症個體投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之單一抑制劑； 其中： a)    相對於投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之該單一抑制劑，在向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合之後，具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體中之該癌症之進展多降低5-100%之範圍； b)   相對於呈單一抑制劑投與時該布利沙福之功效，當與該ADRB2抑制劑組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該布利沙福之功效增加5-2000%之範圍；及/或 c)    相對於呈單一抑制劑投與時該ADRB2抑制劑之功效，當與該布利沙福組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該ADRB2抑制劑之功效增加5-2000%之範圍。
實施例A6. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含： 1)   藉由以下方式確定該個體之細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體：獲得或已獲得來自該個體之生物樣品，及對該生物樣品進行或已進行檢定以確定該CXCR4-ADRB2異聚體是否存在於該個體之細胞中；其中對該生物樣品進行之該檢定為或包含以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準、微陣列或螢光動物檢定；及 2)   若該個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 3)   若該個體之細胞不含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之單一抑制劑。
實施例A7. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含： 1)   藉由以下方式確定該個體之細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體：獲得或已獲得來自該個體之生物樣品，及對該生物樣品進行或已進行檢定以確定該CXCR4-ADRB2異聚體是否存在於該個體之細胞中；其中對該生物樣品進行之該檢定為或包含以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準、微陣列或螢光動物檢定；及 2)   若該個體之細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 3)   若該個體之細胞不含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之單一抑制劑； 其中： a)    相對於投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之該單一抑制劑，在向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合之後，具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體中之該癌症之進展多降低5-100%之範圍； b)   相對於呈單一抑制劑投與時該布利沙福之功效，當與該ADRB2抑制劑組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該布利沙福之功效增加5-2000%之範圍；及/或 c)    相對於呈單一抑制劑投與時該ADRB2抑制劑之功效，當與該布利沙福組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該ADRB2抑制劑之功效增加5-2000%之範圍。
實施例A8. 一種在治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症中所使用之醫藥套組，該醫藥套組包含： a)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)   ADRB2抑制劑； 其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
實施例A9. 一種在治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症中所使用之醫藥組合物，該醫藥組合物包含： a)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福； b)   ADRB2抑制劑；及 c)    醫藥學上可接受之載劑； 其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
實施例A10.       一種用於抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法，該方法包含向該細胞投與： a)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)   ADRB2抑制劑； 其中： i)    該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；且 ii)   與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之接觸抑制該細胞中之由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增強之下游傳訊。
實施例A11.       如實施例A10之用於抑制之方法，其中該方法進一步包含確定該細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體。
實施例A12.       一種在抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊中所使用之醫藥套組，該醫藥套組包含： a)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)   ADRB2抑制劑； 其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
實施例A13.       一種在抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊中所使用之醫藥組合物，該醫藥組合物包含： a)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福； b)   ADRB2抑制劑；及 c)    醫藥學上可接受之載劑； 其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
實施例A14.       如實施例A10-A13中任一項之用於抑制之方法，其中該細胞為個體細胞。
實施例A15.       如實施例A14之用於抑制之方法，其中該個體細胞為癌細胞。
實施例A16.       如實施例A1-A13中任一項之用於抑制之方法，其中該細胞為癌細胞。
實施例A17.       如實施例A1-A9中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含偵測該癌症個體中之該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
實施例A18.       如實施例A1-A9或A17中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含鑑別該癌症個體中之該CXCR4-ADRB2異聚體。
實施例A19.       如實施例A1-A9或A17-A18中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含獲得來自該個體之生物樣品。
實施例A20.       如實施例A1-A9或A17-A19中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含對從該個體獲得之該生物樣品進行檢定。
實施例A21.       如實施例A1-A9或A17-A20中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含： i)    獲得或已獲得來自該癌症個體之生物樣品； ii)   進行或已進行確定從該癌症個體獲得之該生物樣品中之CXCR4-ADRB2異聚體之存在、一致性或存在及一致性的診斷檢定；及 iii)  選擇與布利沙福組合投與以抑制由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增強之下游傳訊的該ADRB2抑制劑。
實施例A22.       如實施例A1-A9或A17-A21中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含確定該個體細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體，包含對從該個體獲得之生物樣品進行檢定。
實施例A23.       如實施例A1-A9或A17-A22中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中方法進一步包含確定該個體細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體，包含獲得來自該個體之生物樣品，及對從該個體獲得之該生物樣品進行檢定。
實施例A24.       如實施例A1-A9或A17-A23中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中從該個體獲得之該生物樣品含有該CXCR4-ADRB2異聚體。
實施例A25.       如實施例A1-A9或A14-A24中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體。
實施例A26.       如實施例A1-A25中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體具有以下特徵中之二或更多者： 1)   該CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或藉由充當別構之通道之中間蛋白在該細胞中共定位並物理相互作用； 2)   增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；及/或 3)   布利沙福及ADRB2抑制劑之組合： i)    改變該細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質； ii)   改變該細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；及/或 iii)  改變含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之異聚體特異性性質。
實施例A27.       如實施例A1-A9或A14-A25中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體具有以下特徵中之二或更多者： 1)   該CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白在該細胞中共定位並物理相互作用； 2)   增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；及/或 3)   布利沙福及ADRB2抑制劑之組合： i)    改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質； ii)   改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能； iii)  改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；及/或 iv)  降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展。
實施例A28.       如實施例A1-A27中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：該細胞中之該等CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位並物理相互作用。
實施例A29.       如實施例A1-A28中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該等CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位並物理相互作用係藉由以下中之一或多者來確定：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準、微陣列或螢光動物檢定。
實施例A30.       如實施例A1-A29中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該基於接近性之檢定為或包含共振能量轉移(RET)、生物發光RET (BRET)、螢光RET (FRET)、時間解析螢光RET (TR-FRET)、基於抗體之FRET、基於配體之FRET、雙分子螢光互補(BiFC)或接近連接檢定(PLA)。
實施例A31.       如實施例A30之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該TR-FRET為基於配體之TR-FRET。
實施例A32.       如實施例A30之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該TR-FRET為基於抗體之TR-FRET。
實施例A33.       如實施例A1-A30中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位及物理相互作用係藉由以下中之一或多者來確定：共內化檢定、雙分子螢光互補(BiFC)、RT-PCR、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準或接近連接檢定(PLA)。
實施例A34.       如實施例A33之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位及物理相互作用係藉由共內化檢定來確定。
實施例A35.       如實施例A33之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位及物理相互作用係藉由雙分子螢光互補(BiFC)來確定。
實施例A36.       如實施例A33之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位及物理相互作用係藉由接近連接檢定(PLA)來確定。
實施例A37.       如實施例A1-A9或A17-A36中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定從該個體獲得之該生物樣品中該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
實施例A38.       如實施例A1-A37中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定該CXCR4-ADRB2異聚體中該等CXCR4及ADRB2組分之共定位及相互作用。
實施例A39.       如實施例A1-A9或A14-A38中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定該個體細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
實施例A40.       如實施例A1-A9或A17-A39中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定從該個體獲得之該生物樣品中該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
實施例A41.       如實施例A1-A9或A17-A40中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定該個體中該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
實施例A42.       如實施例A1-A41中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
實施例A43.       如實施例A1-A9或A14-A42中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該個體細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
實施例A44.       如實施例A1-A9或A14-A43中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該個體細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體之存在產生。
實施例A45.       如實施例A1-A44中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體產生該增強之下游傳訊。
實施例A46.       如實施例A1-A9或A14-A45中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體在該個體細胞中產生該增強之下游傳訊。
實施例A47.       如實施例A1-A46中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之促效作用產生。
實施例A48.       如實施例A1-A47中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效作用產生。
實施例A49.       如實施例A1-A47中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2促效作用產生。
實施例A50.       如實施例A1-A47中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效作用及ADRB2促效作用產生。
實施例A51.       如實施例A1-A50中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊在該CXCR4、該ADRB2或該CXCR4-ADRB2異聚體之下游。
實施例A52.       如實施例A51之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊在該CXCR4之下游。
實施例A53.       如實施例A51之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊在該ADRB2之下游。
實施例A54.       如實施例A51之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊在該CXCR4-ADRB2異聚體之下游。
實施例A55.       如實施例A1-A50中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊係相對於在相應個別單元體情境中來自CXCR4單元體或ADRB2單元體之下游傳訊。
實施例A56.       如實施例A55之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊係相對於在個別單元體情境中來自CXCR4單元體之下游傳訊。
實施例A57.       如實施例A55之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊係相對於在個別單元體情境中來自ADRB2單元體之下游傳訊。
實施例A58.       如實施例A55之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊係相對於在相應個別單元體情境中來自CXCR4單元體及ADRB2單元體之下游傳訊。
實施例A59.       如實施例A1-A58中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊為增加之鈣動員量。
實施例A60.       如實施例A59之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增加之鈣動員量藉由細胞內Ca2+檢定來確定。
實施例A61.       如實施例A1-A60中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊藉由細胞內Ca2+檢定來確定。
實施例A62.       如實施例A61之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其該中細胞內Ca2+檢定為鈣動員檢定。
實施例A63.       如實施例A62之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該鈣動員檢定確定該CXCR4-ADRB2異聚體產生該增強之下游傳訊。
實施例A64.       如實施例A62或A63之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該鈣動員檢定確定該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之存在產生。
實施例A65.       如實施例A1-A64中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體表現出該增加之鈣動員量，以使得： a)    該細胞中在個別單元體情境中在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後該CXCR4或該ADRB2產生等於或少於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量；及 b)   相對於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之該鈣動員量之總和，在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後，該CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員； 如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A66.       如實施例A1-A65中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中： i)    該細胞中在該個別單元體情境中，來自該單元體CXCR4或ADRB2之該鈣動員為非協同的，如經由鈣動員檢定所確定；且 ii)   該細胞中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該鈣動員為協同的，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A67.       如實施例A1-A66中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在該個別單元體情境中： a)    在不存在該個別單元體ADRB2之情況下，該細胞中之該個別單元體CXCR4；或 b)   在不存在該個別單元體CXCR4之情況下，該細胞中之該個別單元體ADRB2； 在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生等於或小於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A68.       如實施例A1-A67中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在該個別單元體情境中，獨立地： a)    在不存在該個別單元體ADRB2之情況下，該細胞中之該個別單元體CXCR4；及 b)   在不存在該個別單元體CXCR4之情況下，該細胞中之該個別單元體ADRB2； 在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生等於或小於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A69.       如實施例A1-A68中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後產生大於用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A70.       如實施例A1-A69中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於由該CXCR4-ADRB2異聚體之單一促效劑刺激所產生之鈣動員之總和，由該CXCR4-ADRB2異聚體之該共刺激所產生之該鈣動員量為增加之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A71.       如實施例A1-A70中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增加之鈣動員量為用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後大於用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A72.       如實施例A71之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增加之鈣動員量為用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後與用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少75%或至少90%的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A73.       如實施例A71或A72之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增加之鈣動員量為用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後與用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少100%的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A74.       如實施例A71-A73中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增加之鈣動員量為協同鈣動員量。
實施例A75.       如實施例A74之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該等細胞的該協同鈣動員量為用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後與用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少75%或至少90%之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A76.       如實施例A1-A75中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增加之鈣動員量之特徵如下： a)    在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後，細胞中在個別單元體情境中該CXCR4或該ADRB2產生等於或少於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量；及 b)   相對於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之該鈣動員量之總和，在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後，該CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員； 如經由鈣動員檢定所確定。
實施例A77.       如實施例A1-A76中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：相對於由用CXCR4促效劑或ADRB2促效劑對CXCR4-ADRB2異聚體進行單刺激所產生之下游ERK傳訊量，用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑對該CXCR4-ADRB2異聚體共刺激產生較大的下游ERK傳訊量。
實施例A78.       如實施例A77之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量大於用該CXCR4促效劑單刺激所產生之量。
實施例A79.       如實施例A78之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量與用該CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大至少5%。
實施例A80.       如實施例A78之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量與用該CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大至少10%、至少25%、至少50%、至少75%或至少90%。
實施例A81.       如實施例A78-A80中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激產生之該下游ERK傳訊量與用該CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大5-15%、10-25%、20-50%、40-75%或60-100%之間的範圍。
實施例A82.       如實施例A77之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量大於用該ADRB2促效劑單刺激所產生之量。
實施例A83.       如實施例A82之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量與用該ADRB2促效劑單刺激所產生之量大至少5%。
實施例A84.       如實施例A82之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量與用該ADRB2促效劑單刺激所產生之量大至少10%、至少25%、至少50%、至少75%或至少90%。
實施例A85.       如實施例A82-A84中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激產生之該下游ERK傳訊量與用該ADRB2促效劑單刺激所產生之量大5-15%、10-25%、20-50%、40-75%或60-100%之間的範圍。
實施例A86.       如實施例A1-A9或A14-A85中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質。
實施例A87.       如實施例A1-A9或A14-A86中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能。
實施例A88.       如實施例A1-A9或A14-A87中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質。
實施例A89.       如實施例A1-A9或A14-A88中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合降低該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展。
實施例A90.       如實施例A1-A89中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合抑制來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
實施例A91.       如實施例A1-A90中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合抑制該細胞中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
實施例A92.       如實施例A1-A9或A17-A91中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合抑制該癌症個體中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
實施例A93.       如實施例A1-A9或A17-A92中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合抑制該癌症個體之該細胞中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
實施例A94.       如實施例A1-A93中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體組分包含CXCR4及ADRB2之個別單元體。
實施例A95.       如實施例A1-A94中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該CXCR4之該細胞在存在或不存在該個別單元體ADRB2之情況下包含該個別單元體CXCR4。
實施例A96.       如實施例A95之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該CXCR4之該細胞在不存在該個別單元體ADRB2之情況下包含該個別單元體CXCR4。
實施例A97.       如實施例A95之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該CXCR4之該細胞在存在該個別單元體ADRB2之情況下包含該個別單元體CXCR4。
實施例A98.       如實施例A1-A94中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該ADRB2之該細胞在存在或不存在該個別單元體CXCR4之情況下包含該個別單元體ADRB2。
實施例A99.       如實施例A98之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該ADRB2之該細胞在不存在該個別單元體CXCR4之情況下包含該個別單元體ADRB2。
實施例A100.     如實施例A98之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該ADRB2之該細胞在存在該個別單元體CXCR4之情況下包含該個別單元體ADRB2。
實施例A101.     如實施例A1-A100中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之布利沙福及ADRB2抑制劑之該組合： i)    改變該細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質； ii)   改變該細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；及/或 iii)  改變含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之異聚體特異性性質。
實施例A102.     如實施例A1-A9或A14-A101中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合： i)    改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質； ii)   改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能； iii)  改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或 iv)  降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展。
實施例A103.     如實施例A102之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質。
實施例A104.     如實施例A102或103之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能。
實施例A105.     如實施例A102-A104中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質。
實施例A106.     如實施例A102-A105中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展。
實施例A107.     如實施例A102-A106中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合降低該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展。
實施例A108.     如實施例A102-A107中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包含該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展之降低。
實施例A109.     如實施例A102-A108中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包含該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞增殖之降低。
實施例A110.     如實施例A102-A109中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包含該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞遷移之降低。
實施例A111.     如實施例A102-A110中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包含該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之轉移之降低。
實施例A112.     如實施例A102-A111中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包括該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之血管生成之降低。
實施例A113.     如實施例A1-A112中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該布利沙福係呈包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與。
實施例A114.     如實施例A1-A113中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑係呈包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與。
實施例A115.     如實施例A1-A114中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中依次、並行或同時投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合。
實施例A116.     如實施例A1-A115中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合係呈進一步包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與。
實施例A117.     如實施例A1-A116中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該布利沙福及該ADRB2抑制劑係呈醫藥組合物之組合投與。
實施例A118.     如實施例A117之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中醫藥組合物之該組合包含： a)    包含該布利沙福及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物；及 b)   包含該ADRB2抑制劑及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物。
實施例A119.     如實施例A117或A118之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中依次、並行或同時投與該等醫藥組合物之該組合。
實施例A120.     如實施例A1-A119中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該癌症為血液學癌症或實體腫瘤。
實施例A121.     如實施例A120之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該癌症為血液學癌症。
實施例A122.     如實施例A121之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該血液學癌症選自由以下組成之群：淋巴瘤、白血病、骨髓瘤及多發性骨髓瘤。
實施例A123.     如實施例A122之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該淋巴瘤為B細胞淋巴瘤、T細胞淋巴瘤或NK細胞淋巴瘤。
實施例A124.     如實施例A122或A123之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該淋巴瘤為複發性或難治性淋巴瘤。
實施例A125.     如實施例A122-A124中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該淋巴瘤選自由以下組成之群：霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮膚B細胞淋巴瘤、活化之B細胞淋巴瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、伯基特淋巴瘤、套細胞淋巴瘤(MCL)、濾泡性淋巴瘤(FL)、濾泡性中心淋巴瘤、轉化性淋巴瘤、中間分化之淋巴球性淋巴瘤、中間淋巴球性淋巴瘤(ILL)、瀰漫性低分化淋巴球性淋巴瘤(PDL)、中心細胞性淋巴瘤、瀰漫性小核裂細胞淋巴瘤(DSCCL)、外周T細胞淋巴瘤(PTCL)、皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL)、套膜區淋巴瘤及低度濾泡性淋巴瘤。
實施例A126.     如實施例A122之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該白血病為： a)    選自由以下組成之群之急性白血病：急性淋巴球性白血病(ALL)、T細胞急性淋巴球性白血病(T-ALL)、B細胞急性淋巴母細胞白血病、急性單核球性白血病、急性前骨髓細胞性白血病、急性骨髓細胞性白血病(AML)、急性骨髓樣白血病、急性骨髓性白血病及骨髓母細胞、前骨髓細胞性、骨髓單核球性、單核球性及紅血球性白血病； (b)  選自由以下組成之群之慢性白血病：慢性骨髓細胞性(顆粒球性)白血病、慢性骨髓性白血病(慢性骨髓樣白血病；CML)及慢性淋巴球性白血病(CLL)；或 (c)  慢性骨髓單核球性白血病(CMML)、慢性嗜酸性球性白血病、少年骨髓單核球性白血病(JMML)、真性紅血球增多症、自然殺傷細胞白血病(NK白血病)或毛細胞白血病。
實施例A127.     如實施例A120之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該癌症為實體腫瘤。
實施例A128.     如實施例A127之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為良性腫瘤或癌症。
實施例A129.     如實施例A127之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為癌或肉瘤。
實施例A130.     如實施例A127之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤選自由以下組成之群：纖維肉瘤、黏液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、惡性上皮樣間皮瘤、尤因氏腫瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、胃癌、結腸直腸癌、食管癌、結腸癌、淋巴惡性腫瘤、胰臟癌、胰臟腺癌、胰臟導管腺癌、乳癌、乳腺癌、乳腺導管腺癌、肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、腺鱗肺癌、肺泡橫紋肌肉瘤、卵巢癌、卵巢透明細胞腺癌、卵巢黏液性囊腺癌、卵巢漿液性腺癌、前列腺癌、肝細胞癌、軟組織肉瘤、鱗狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、髓質性甲狀腺癌、乳頭狀甲狀腺癌、甲狀腺癌、嗜鉻細胞瘤皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、髓質癌、支氣管癌、胃腸道癌、胃管狀腺癌、胃腺鱗癌、腎癌、肝內膽管癌、腎細胞癌、肝瘤、膽管癌、絨毛膜癌、威爾姆氏瘤、子宮癌肉瘤、子宮內膜腺癌、子宮內膜基質性肉瘤、子宮內膜癌、子宮頸癌、睪丸腫瘤、精原細胞瘤、膀胱癌、黑素瘤、多發性骨髓瘤、多發性內分泌贅瘤、CNS腫瘤、神經膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、CNS淋巴瘤、胚細胞瘤、神經管胚細胞瘤、神經鞘瘤顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細胞瘤、聽神經瘤、寡樹突神經膠質瘤、腦脊髓膜瘤、神經母細胞瘤、視網膜母細胞瘤及腦轉移瘤。
實施例A131.     如實施例A130之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤選自由以下組成之群：乳癌、肺癌及肝細胞癌。
實施例A132.     如實施例A131之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為乳癌。
實施例A133.     如實施例A131之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為肺癌。
實施例A134.     如實施例A131之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為肝細胞癌。
實施例A135.     如實施例A1-A9或A17-A134中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體之生物樣品為生物流體樣品。
實施例A136.     如實施例A135之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中對該生物流體樣品進行液體生檢。
實施例A137.     如實施例A135或A136之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該生物流體樣品為血液樣品、血漿樣品、唾液樣品、腦液樣品、眼液樣品或尿液樣品。
實施例A138.     如實施例A1-A9或A17-A137中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體之生物樣品為生物組織樣品。
實施例A139.     如實施例A138之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中對該生物組織樣品進行組織樣品檢定。
實施例A140.     如實施例A138或A139之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該生物組織樣品為器官組織樣品、骨組織樣品或腫瘤組織樣品。
實施例A141.     如實施例A1-A140中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該用於治療癌症之方法為用於抑制由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法。
實施例A142.     如實施例A1-A140中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該用於抑制由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法為用於治療癌症之方法。
實施例A143.     如實施例A1-A9或A17-A142中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之該單一抑制劑，在向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合之後，具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體中該癌症之進展多降低5-100%之範圍。
實施例A144.     如實施例A1-A9或A17-A143中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於呈單一抑制劑投與時該布利沙福之功效，當與該ADRB2抑制劑組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該布利沙福之功效增加5-5000%之範圍。
實施例A145.     如實施例A1-A9或A17-A144中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於呈單一抑制劑投與時該ADRB2抑制劑之功效，當與該布利沙福組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，ADRB2抑制劑之功效增加5-5000%之範圍。
實施例A146.     如實施例A1-A9或A17-A145中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於單一抑制劑投與，向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合對該癌症個體中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增強之下游傳訊的抑制為5-2000倍之間的範圍。
實施例A147.     如實施例A1-A9或A17-A146中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於在相應個別單元體情境中由CXCR4單元體或ADRB2單元體所產生之下游傳訊之抑制，向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合對該癌症個體中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增強之下游傳訊的抑制為5-2000倍之間的範圍。
實施例A148.     如實施例A17-A147中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞為癌細胞。
實施例A149.     如實施例A17-A147中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞為個體細胞。
實施例A150.     如實施例A149之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體細胞為癌細胞。
實施例A151.     如實施例A1-A150中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體為癌症個體。
實施例A152.     如實施例A1-A151中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體為患者。
實施例A153.     一種醫藥組合物，其包含： a)    CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福； b)   ADRB2抑制劑；及 c)    醫藥學上可接受之載劑。
實施例A154.     如實施例A1-A153中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之拮抗劑、ADRB2之反向促效劑、ADRB2之部分拮抗劑、ADRB2之別構調節劑、ADRB2之抗體、ADRB2之抗體片段、ADRB2之配體或抗體-藥物結合物。
實施例A155.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2拮抗劑。
實施例A156.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2反向促效劑。
實施例A157.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2部分拮抗劑。
實施例A158.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之別構調節劑。
實施例A159.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之抗體。
實施例A160.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之抗體片段。
實施例A161.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之配體。
實施例A162.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為抗體-藥物結合物。
實施例A163.     如實施例A154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑選自由以下組成之群： 阿普洛爾、阿替洛爾、倍他洛爾、布拉洛爾、布托沙明、卡那洛爾、卡維地洛、CGP 12177、環丙洛爾、ICI 118551、ICYP、拉貝洛爾、左旋倍他洛爾、左旋布諾洛爾、LK 204-545、美托洛爾、納多洛爾、NIHP、NIP、普羅帕酮、普萘洛爾、索他洛爾、SR59230A及噻嗎洛爾。
實施例A164.     如實施例A163之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為卡維地洛。
實施例A165.     如實施例A1-A9或A17-A164中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中向該個體投與治療有效量之該布利沙福。
實施例A166.     如實施例A1-A9或A17-A164中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中向該個體投與次治療有效量之該布利沙福。
實施例A167.     如實施例A1-A9或A17-A166中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中向該個體投與治療有效量之該ADRB2抑制劑。
實施例A168.     如實施例A1-A9或A17-A166中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中向該個體投與次治療有效量之該ADRB2抑制劑。
實施例A169.     如實施例A1-A9或A14-A168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中該CXCR4基因之表現水準，其中若該表現水準大於該CXCR4基因之參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現CXCR4之癌症。
實施例A170.     如實施例A169之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現CXCR4之癌症。
實施例A171.     如實施例A169或A170之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
實施例A172.     如實施例A169或A170之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
實施例A173.     如實施例A169或A170之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
實施例A174.     如實施例A169-A173中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，在確定該CXCR4基因表現水準大於參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
實施例A175.     如實施例A1-A9或A14-A168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中之該ADRB2基因之該表現水準，其中若該表現水準大於該ADRB2基因之參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現ADRB2之癌症。
實施例A176.     如實施例A175之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現ADRB2之癌症。
實施例A177.     如實施例A175或A176之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
實施例A178.     如實施例A175或A176之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
實施例A179.     如實施例A175或A176之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
實施例A180.     如實施例A175-179中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，在確定該ADRB2基因表現水準大於參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
實施例A181.     如實施例A1-A9或A14-A168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4基因及該ADRB2基因之該表現水準，其中若該CXCR4基因及該ADRB2基因之該等表現水準大於該CXCR4基因及該ADRB2基因之相應參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現CXCR4且表現ADRB2之癌症。
實施例A182.     如實施例A181之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現CXCR4之癌症及表現ADRB2之癌症。
實施例A183.     如實施例A181或A182之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
實施例A184.     如實施例A181或A182之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
實施例A185.     如實施例A181或A182之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
實施例A186.     如實施例A181-A185中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中在確定該CXCR4基因表現水準及該ADRB2基因表現水準大於相應參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
實施例A187.     如實施例A1-A9或A14-A168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中該CXCR4蛋白之該表現水準，其中若該表現水準大於該CXCR4蛋白之參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現CXCR4之癌症。
實施例A188.     如實施例A187之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現CXCR4之癌症。
實施例A189.     如實施例A187或A188之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
實施例A190.     如實施例A187或A188之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
實施例A191.     如實施例A187或A188之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
實施例A192.     如實施例A187-A191中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，在確定該CXCR4蛋白表現水準大於參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
實施例A193.     如實施例A1-A9或A14-A168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中之該ADRB2蛋白之該表現水準，其中若該表現水準大於該ADRB2蛋白之參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現ADRB2之癌症。
實施例A194.     如實施例A193之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現ADRB2之癌症。
實施例A195.     如實施例A193或A194之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
實施例A196.     如實施例A193或A194之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
實施例A197.     如實施例A193或A194之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
實施例A198.     如實施例A193-A197中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，在確定該ADRB2蛋白表現水準大於參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
實施例A199.     如實施例A1-A9或A14-A168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4蛋白及該ADRB2蛋白之該表現水準，其中若該CXCR4蛋白及該ADRB2蛋白之該等表現水準大於該CXCR4蛋白及該ADRB2蛋白之相應參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現CXCR4且表現ADRB2之癌症。
實施例A200.     如實施例A199之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現CXCR4之癌症及表現ADRB2之癌症。
實施例A201.     如實施例A199或A200之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
實施例A202.     如實施例A199或A200之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
實施例A203.     如實施例A199或A200之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
實施例A204.     如實施例A199-A203中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中在確定該CXCR4蛋白表現水準及該ADRB2蛋白表現水準大於相應參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
實施例A205.     如實施例A1-A204中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為卡維地洛。
實施例A206.     如實施例A1-A205中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊為用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑對該CXCR4-ADRB2異聚體進行共刺激之增強之反應。
實施例A207.     如實施例A1-A206中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之癌症進展。
實施例A208.     如實施例A207之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之細胞增殖。
實施例A209.     如實施例A207或A208之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之細胞遷移。
實施例A210.     如實施例A207-A209中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之轉移。
實施例A211.     如實施例A207-A210中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之腫瘤生長。
實施例A212.     如實施例A207-A211中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之血管生成。
實施例A213.     如實施例A207-A212中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該一或多個細胞為一或多個癌細胞。
實施例A214.     如實施例A207-A213中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該一或多個細胞來源於個體。
實施例A215.     如實施例A207-A214中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該一或多個細胞來自從個體獲得之生物樣品。材料及方法 試劑
CXCL12購自R&D systems (Minneapolis，Minnesota，USA)。烏克普魯單抗及BKT140分別購自Creative Biolabs (Shirley，NY，USA)及Chem Scene (Monmouth Junction，NJ，USA)。AMD3100獲自Cayman Chemical Company (Ann Arbor，MI，USA)。AMD070及LY2510924購自Medchem express (Princeton，NJ，USA)。TG-0054 (Brixafor)購自MedKoo Biosciences, Inc (Triangle Park，North Carolina，USA)。卡維地洛購自4 Chem Laboratory (Korea)。所用之藥物之資訊如下：重組人類SDF-1α (CXCL12)(PEPROTECH，Cat.300-28A，Rocky Hill，NJ，USA)、沙美特羅(Tocris，Cat.4712，Minneapolis，MN，USA)、卡維地洛(Tocris，Cat.2685，Minneapolis，MN，USA)、AMD3100 (Tocris，Cat.3299，Minneapolis，MN，USA)、TG-0054 (MedKoo Biosciencex，Inc.，Cat.206522，Morrisville，NC，USA)、布拉洛爾(Abcam，ab141132，Cambridge，CB2 0AX，UK)、拉貝洛爾(Prestwick Chemical Library®，Prestw-277)、阿普洛爾(Prestwick Chemical Library®，Prestw-250，Boulevard Gonthier d'Andernach Parc d'innovation 67400 ILLKIRCH - France) 、卡那洛爾(PubChem，Cat. 71739，Bethesda，MD，USA)、普羅帕酮(Prestwick Chemical Library®，Prestw-499)及噻嗎洛爾(Prestwick Chemical Library®，Prestw-948)。細胞培養
所有細胞株均購自美國典型培養物保藏中心(Manassas, VA, USA)。A549、MDA-MB-231、U2OS、HL-60、U937及RPMI 8226細胞在補充有10%胎牛血清(Gibco)及1%青黴素-鏈黴素(Gibco)之RPMI培養基1640 (Thermo Fisher Scientific，Waltham，MA，USA)中生長。所有細胞株在存在5% CO2 之情況下於37℃下生長。穩定細胞株之構築
為了建立穩定的表現Rluc及luc2P之細胞株作為具有潮黴素及殺稻瘟素抗性之對照細胞株，藉由將ViraPower慢病毒包裝混合物(Invitrogen，K497500)及pLenti6-Rluc表現構築體共轉染到293FT生產細胞株中來產生慢病毒原種(含有包裝之pLenti6-Rluc表現構築體，該構築體在pLenti-CMV Hygro DEST (Addgene，#17454)中插入了Rluc基因)。將此慢病毒原種轉導至A549細胞株，然後用潮黴素(100 µg/mL)進行選擇。為了建立穩定的表現Rluc-luc2P之細胞株，藉由將ViraPower包裝混合物及pLenti6/V5-luc2P表現構築體共轉染到293FT生產細胞株中來產生慢病毒原種(含有包裝之pLenti6/V5-luc2P表現構築體，該構築體在pLenti6/V5-DEST GatewayTM 載體(Invitrogen, V49610)中插入了Luc2P基因)。將此慢病毒原種轉導至A549-Rluc細胞株，然後用殺稻瘟素(5 µg/mL)進行選擇。然後選擇對抗生素具有抗性之殖株並進行RT-qPCR及免疫螢光，以證實插入之基因Rluc及luc2P之表現。
為了建立穩定的表現CXCR4之細胞株，藉由將ViraPower慢病毒包裝混合物(Invitrogen，K497500)及pLenti6-CXCR4表現構築體共轉染到293FT生產細胞株中來產生慢病毒原種(含有包裝之pLenti6-CXCR4表現構築體，該構築體在pLenti-CMV Hygro DEST (Addgene，#17454)中插入了CXCR4基因)。將此慢病毒原種轉導至A549細胞株，然後用潮黴素(100 µg/mL)進行選擇。為了建立穩定的表現CXCR4-ADRB2異聚體之細胞株，藉由將ViraPower包裝混合物及pLenti6/V5-ADRB2表現構築體共轉染到293FT生產細胞株中來生產慢病毒原種(含有包裝之pLenti6/V5-ADRB2表現構築體，該構築體在pLenti6/V5-DEST GatewayTM載體(Invitrogen, V49610)中插入了ADRB2基因)。將此慢病毒原種轉導至A549-CXCR4細胞株，然後用潮黴素(100 µg/mL)及殺稻瘟素(5 µg/mL)進行選擇。然後選擇對抗生素具有抗性之殖株並進行RT-qPCR及免疫螢光，以證實插入之基因CXCR4及ADRB2之表現。pLenti CMV Hygro DEST(w117-1)為Eric Campeau及Paul Kaufman之禮物(Addgene質體#17454)(Campeau，E.等人, (2009) A versatile viral system for expression and depletion of proteins in mammalian cells, PLoS One 4, e6529)。使用LR重組將CXCR4 cDNA插入慢病毒載體。使用ViraPower慢病毒表現系統(Invirtogen)產生編碼CXCR4之慢病毒。
為了在MDA-MB-231乳癌細胞中建立穩定的表現CXCR4之細胞株，藉由將ViraPower慢病毒包裝混合物(Invitrogen，K497500)及pLenti6-CXCR4表現構築體共轉染到293FT生產細胞株中來產生慢病毒原種(含有包裝之pLenti6-CXCR4表現構築體，該構築體在pLenti-CMV Hygro DEST (Addgene，#17454)中插入了CXCR4基因)。將此慢病毒原種轉導至MDA-MB-231細胞株，然後用潮黴素(100 µg/mL)進行選擇。為了建立穩定的表現CXCR4及ADRB2之細胞株以使得細胞含有CXCR4-ADRB2異聚體，藉由將ViraPower包裝混合物及pLenti6/V5-ADRB2表現構築體共轉染到293FT生產細胞株中來生產慢病毒原種(含有包裝之pLenti6/V5-ADRB2表現構築體，該構築體在pLenti6/V5-DEST GatewayTM 載體(Invitrogen, V49610)中插入了ADRB2基因)。將此慢病毒原種轉導至MDA-MB-231-CXCR4細胞株，然後用潮黴素(100 µg/mL)及殺稻瘟素(5 µg/mL)進行選擇。然後選擇對抗生素具有抗性之殖株並進行RT-qPCR及免疫螢光，以證實插入之基因CXCR4及ADRB2之表現。鈣動員檢定
將MDA-MB-231人類乳癌細胞以每孔20,000個細胞接種於黑色透明底96孔板(Corning Costar, #3340)中之補充有10% FBS之100 μL RPMI 1640中。第二天，將細胞用10 MOI CXCR4及30 MOI GPCRx共轉導。使用編碼HA-VC之腺病毒來調整轉導之腺病毒之總量。2天後，將細胞用指定量拮抗劑處理，並與Cal 6 (Molecular Devices之FLIPR®鈣6檢定套組，目錄號R8191)一起孵育2 h。隨後用指定量CXCL12、ADRB2促效劑或CXCL12及ADRB2促效劑刺激細胞。使用FlexStation 3多模式微量板讀數器(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)量測鈣之動員。將結果正規化為基線活性。在37℃下使用490 nm之激發波長及525 nm之發射波長量測鈣動員，並藉由計算各圖之曲線下面積(AUC)進行定量。將資料正規化為表現單獨CXCR4之細胞中CXCL12刺激之鈣反應。資料代表三個獨立實驗(平均值±SEM)。
使用鈣動員檢定，將U937 (人類骨髓樣白血病細胞)及HL-60 (人類白血病細胞)細胞以每孔100,000個細胞接種於黑色透明底96孔板(Corning Costar, #3340)中之補充有10% FBS之100 µL之RPMI 1640中。並將細胞以100 x g離心1分鐘。將細胞用稀釋於檢定緩衝液(不具有酚紅之漢克平衡鹽溶液)中之Cal 6 (Molecular Devices之FLIPR®鈣6檢定套組，Cat. R8191)染色，並孵育2 h。需要時，在促效劑處理前2小時添加拮抗劑。用指定量CXCR4促效劑(CXCL12，200 nM)、ADRB2促效劑(福莫特羅，10 µM)刺激細胞。使用FlexStation 3多模式微量板讀數器(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)量測鈣之動員。在490 nm之激發波長及525nm之發射波長下於37℃量測細胞內Ca2+ 。將結果正規化為基線活性。藉由計算各圖之曲線下面積(AUC)來定量鈣動員。將資料正規化為表現單獨CXCR4之細胞中CXCL12刺激之鈣反應。使用GraphPad Prism軟體計算IC50 值。西方墨點分析
將細胞以每孔5×105 個細胞之密度接種到6孔板中。血清飢餓16小時後，將細胞用10 nM SDF-1 (PEROTECH，#300-28A)及沙美特羅(TOCRIS，#4712)進行處理，對於MDA-MB-231、MDA-MB-231-CXCR4及MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞細胞持續20分鐘，且對於A549、A549-CXCR4、A549-CXCR4-ADRB2細胞持續10分鐘。之後，使用補充有磷酸酶抑制劑混合物(Roche，#4906845001)及蛋白酶抑制劑混合物(Thermo Fisher Scientific，#A32953)之NP-40裂解緩衝液(Thermo Fisher Scientific，#FNN0021)收穫細胞。藉由Bio-Rad蛋白檢定(Bio-Rad，#5000006)確定細胞溶解產物濃縮物之蛋白。使用乾式轉移系統(Thermo Fisher Scientific，#IB21001)將20 µg蛋白樣品進行還原SDS-PAGE並轉移至PVDF (聚偏二氟乙烯)。將膜用具有1% Tween-20之Tris緩衝鹽水中之5%脫脂乳(BD Difco，#232100)封閉1小時，並與磷酸-ERK1/2 Thr202/Tyr204 (Cell Signaling Technology，#4370)及總ERK1/2 (Cell Signaling Technology，#4695)抗體一起孵育。藉由與辣根過氧化物酶偶聯之二級抗體(Cell Signaling Technology)，然後與SuperSignal West Femto最大靈敏度受質(Thermo Fisher Scientific，#34096)一起孵育來偵測抗原-抗體複合物。藉由iBright西方墨點成像系統(Thermo Fisher Scientific，#A32752)捕獲及分析西方墨點影像。定量聚合酶鏈反應 (qPCR)
使用TRIzol (Invitrogen)提取總RNA，並用DNA水解酶I (Sigma)處理後，從1 μg總RNA合成cDNA。使用SensiFAST SYBR套組(Bioline)進行qPCR。引子序列如下： ADRB2-F：5'-CTCTTCCATCGTGTCCTTCTAC-3'(SEQ ID NO:1)； ADRB2-R：5'-AATCTTCTGGAGCTGCCTTT-3'(SEQ ID NO:2)； CXCR4-F：5′-CCACCATCTACTCCATCATCTTC-3′(SEQ ID NO:3)； CXCR4-R：5′-ACTTGTCCGTCATGCTTCTC-3′(SEQ ID NO:4)； β-肌動蛋白-F：5'-GGAAATCGTGCGTGACATTAAG-3'(SEQ ID NO:5)， β-肌動蛋白-R：5'-AGCTCGTAGCTCTTCTCTCCA-3'(SEQ ID NO:6)； 循環閾值(Ct)由QuantStudio 3即時PCR系統(Thermo Fisher Scientific)計算。ΔCt對應於CtSOI (感興趣之序列)與常用看家基因序列Ct RS (參考序列)之間的差；ΔCt= Ct (CXCR4或ADRB2)-Ct (肌動蛋白)。含有 GPCR cDNA 之腺病毒載體之構築
人類GPCR cDNA殖株獲自Missouri S&T cDNA資源中心(Rolla, MO, USA)。藉由PCR擴增GPCR cDNA，並將其選殖到pDONR201載體中。編碼GPCR之腺病毒為透過在含有GPCR之進入殖株與pAdHTS載體之間進行活體外LR重組，然後使用AdHTS系統轉染到293A細胞中來獲得，如先前所述(Choi, E.W.等人, (2012) AdHTS: a high-throughput system for generating recombinant adenoviruses, J Biotechnol 162, 246-252；及Song, Y.B.等人, (2014))。增殖檢定
將A549雙陰性(RLuc-lucP)細胞或過表現CXCR4及ADRB2之A549-CXCR4-ADRB2細胞株以1×104 個細胞/孔之密度塗鋪板在96孔板中且在培養基中孵育24 h以實現黏附。洗滌後，添加具有或不具有指定藥物之無血清RPMI1640±SDF-1α，並將細胞在37℃、5% CO2 下孵育72 h (接種後96 h)。孵育結束時，根據製造商之說明，藉由使用Prestoblue細胞生存力試劑(Thermo Fisher Scientific，Cat. A13262)評估細胞增殖。簡而言之，將細胞在1x Prestoblue細胞生存力試劑中於37℃下孵育1 h。使用Varioskan LUX多模式微量板讀數器(Thermo Fisher Scientific)在560 nm激發及590 nm發射下量測螢光。偵測到之螢光量與孔內之細胞數成比例。結果表示為來自三個重複孔之平均比率(螢光藥物 /螢光僅媒介物 )±SEM。小鼠異種移植模型
五週大的雌性Balb/c-nu/nu小鼠獲自Envigo (France)，並維持在無特定病原體之動物設施中。Qubest Bio (South Korea)動物實驗倫理委員會基於動物保護法批准了所有有關動物使用及安樂死之規程。將1×107 個A549或A549-CXCR4-ADRB2細胞懸浮在100 µL磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)中，然後皮下植入小鼠右側鎖骨與胸壁之間的腋窩區域。藉由用電子卡尺量測腫瘤之長度(L )及寬度(W )並根據下式計算腫瘤體積，每第三或第四天監測腫瘤生長：體積 = 0.5LW2 。抗腫瘤作用研究
對於使用CXCR4抑制劑之抗腫瘤功效測試，將在A549肺癌細胞株中過表現CXCR4及ADRB2之A549-CXCR4-ADRB2細胞株皮下投與(100 µL PBS中之1×107 個細胞/頭)至BALB/c-nu中。當腫瘤大小達到50-100 mm3 時，將每組十隻小鼠投與媒介物(PBS中之1%二甲基纖維素)、AMD3100 (7.5 mpk，在PBS中調配為22.5 mpk)、LY2510924 (3 mpk，在PBS中調配為10 mpk)、AMD070 (10 mpk，在PBS中之1%二甲基纖維素中調配為30 mpk)或TG-0054 (10 mpk，在PBS中調配為30 mpk)或卡維地洛(在PBS中之1%二甲基纖維素中調配為20 mpk)。皮下注射AMD3100、LY2510924及TG-0054，且每天一次經口投與AMD070及卡維地洛，持續4週(總計28次)。藉由量測腫瘤之長度(L )及寬度(W )，每第三或第四天監測腫瘤生長：體積 = 0.5LW2 。原位模型
使用不含FBS之培養基對Balb/c-nu/nu雌性小鼠原位投與MDA-MB-231細胞或MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞(5×106 個細胞/頭(100 μL細胞+ 100 μL基質膠))。在投與之前，藉由以下方式用Matrigel ™ (BD, 354248)處理細胞。1)基質膠以及用於投與之注射器及針亦保持10℃之條件直到投與。2)將基質膠以50:50之比率與細胞懸浮液混合，並使用23 G之針大小防止細胞破壞。
將針尖放在投與前部位(乳頭2及3之間)並向右或向左移動，以形成較大皮下袋。將基質膠混合物(基質膠:細胞懸浮液= 50:50)注射至皮下袋中。確認液體沒有在注射部位溢出後，將動物放在繁殖箱中。當腫瘤大小達到約50-100 mm3 時，每天以指定劑量單獨或以組合方式用CXCR4抑制劑或ADRB2抑制劑處理，達4週。藥物處理當天定義為第1天。AMD3100 (2.5 mg/kg，在PBS中7.5 mg/kg)、LY2510924 (1 mg/kg，在PBS中3 mg/kg)、AMD070 (3 mg/kg，PBS中之1%甲基纖維素中10 mg/kg)及/或卡維地洛(在PBS中之1%甲基纖維素中30 mg/kg)每天一次投與，持續4週(總計28次)。皮下投與AMD3100、LY2510924及AMD070，且經口投與卡維地洛。藉由在藥物投與之第一天將腫瘤大小轉換為100來計算腫瘤大小。結果表示為5個個體之平均值±標準差。抗體 TR-FRET
在TR-FRET檢定之前，將10,000個細胞鋪板在96孔半區板(Corning)之各孔中。在37℃潮濕孵育器中孵育隔夜之後，使用腺病毒系統(0.9-30 MOI攜帶CXCR4之腺病毒及0.5-15 MOI攜帶ADRB2之腺病毒)瞬時過表現CXCR4及ADRB2。各腺病毒感染48 h後，用DPBS洗滌細胞兩次並在室溫下用4%多聚甲醛固定10分鐘。洗滌細胞兩次之後，為了使細胞透化，將含有0.1% Triton X-100之DPBS在室溫下處理10分鐘。然後在室溫下，將細胞用補充有2%牛血清白蛋白(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)之DPBS封閉30分鐘，隨後在室溫下與兔抗CXCR4抗體(#ab124824, abcam)及小鼠抗ADRB2抗體(#sc271322, Santa Cruz Biotechnology)一起孵育3小時。用DPBS洗滌細胞4次後，在室溫下處理用鋱穴狀化合物標記之山羊抗兔IgG (Cisbio, Bedford, MA, USA)及用Alexa Fluor 647標記之山羊抗小鼠IgG (Thermo Fisher)持續1小時。然後將細胞用DPBS洗滌4次，隨後使用Varioskan LUX多模式微量板讀數器(Thermo Fisher Scientific)進行分析。將各孔之FRET比率簡單計算為520 nm之受體FRET信號與620 nm之供體發射之間的比率。
FRET比= 520 nm處之信號/ 620 nm處之信號×10000
所得資料代表FRET效率。ΔF%之計算係基於不同的FRET比率。
ΔF%=(比率樣品 –比率陰性 )/比率陰性 ×100
ΔF%考慮了供體濃度之變化，且與陰性對照相比，對應於FRET增加之百分比。但是，ΔF%參數不允許比較未用相同供體-配體濃度進行之實驗。配體 TR-FRET
將A549細胞以每孔20,000個細胞之密度接種於96孔板Corning, New York, USA #3688)中。藉由腺病毒感染然後在37℃、5% CO2 下孵育48 h，使CXCR4及ADRB2瞬時過表現在A549細胞中。以0、0.1、0.5、1.25、2.5、5、10及20之MOI處理表現CXCR4之腺病毒，並以3倍高MOI處理表現ADRB2之腺病毒。編碼HA-VC之腺病毒用於調整轉導之腺病毒之總量。
為了表徵CXCR4:ADRB2異聚體，用螢光標記之普萘洛爾及鋱標記之TZ14011 (Cisbio，USA)進行用標記之配體之TR-FRET檢定。感染CXCR4及ADRB2 18小時後，在冰冷的Tris-KREBS緩衝液(20 mM Tris-HCl、118 mM NaCl、5.6 mM葡萄糖、1.2 mM KH2 PO4 、1.2 mM MgSO4 、4.7 mM KCl、1.8 mM CaCl2 ，pH 7.4)中單獨製備配體並保存在冰上(藉由在低於15℃下運作，可以避免所有內化現象)。在此步驟中，用Tris-KREBS緩衝液以所要最終濃度之5倍製備所有配體溶液。藉由在黑暗中於4℃孵育18 h，在96孔板上用10 nM TZ14011-tb、20 nM普萘洛爾-g2 (Cisbio，USA#L0011GRE)及10 mM未標記之普萘洛爾(PRESTWICK CHEMICAL，France)標記細胞且用Varioskan LUX Multimode (Thermo Fisher Scientific, USA)讀板器量測TR-FRET信號。將製備物在334 nm下激發，並在VARIOSKAN上在針對供體之620 nm (TZ14011-Tb)及取決於受體之520 nm (普萘洛爾-g2)下量測螢光發射。資料分析與抗體TR-FRET分析相同。接近連接檢定 (PLA)
根據製造商之規程(Olink Proteomics, Uppsala, Sweden)進行PLA展開。由於檢定中使用之細胞為漂浮的，因此所有重懸步驟均藉由以2,000 rpm離心3分鐘之方式進行。在所有反應之間使用離心將各洗滌步驟進行兩次。將培養之細胞在1 mL DPBS (Thermo Fisher Scientific)中洗滌，然後在室溫下將細胞在4%多聚甲醛中固定10分鐘。然後將細胞在含有0.1% Triton X-100之DPBS中透化，並在37℃下於封閉溶液中封閉1小時。然後除去封閉溶液，並藉由一級抗體溶液將細胞重懸浮。將小鼠抗CXCR4抗體(#35-8800，Thermo Fisher Scientific)及兔抗ADRB2抗體(#PA5-33333，Thermo Fisher Scientific)稀釋於抗體稀釋液中(分別為1:200及1:2000)。在37℃下孵育1小時後，在1:50稀釋於抗體稀釋液中之稀釋下應用PLA探針。將探針與細胞在37℃下孵育1小時。在37℃下消化探針1小時，然後在37℃下進行連接步驟30分鐘。然後將細胞之擴增混合物在37℃下處理100分鐘。用20 µL具有DAPI之VECTASHIELD防褪色封固培養基(Vector Laboratories)來封固細胞。用IN Cell Analyzer 2500 (GE Healthcare)採集PLA影像。
在本說明書中提到之所有公開案及專利申請案皆以全文引用之方式併入本文，其程度與具體且單獨地指出各單獨公開案或專利申請案來以引用之方式併入之程度相同。
儘管已經在本文中示出及描述了較佳實施例，但是對於熟習此項技術者明顯的是，此等實施例僅作為實例提供。旨在以下申請專利範圍限定本發明之範疇，且由此涵蓋此等申請專利範圍之範疇內之方法及結構及其等同物。
圖 1 ：顯示雙分子螢光互補(BiFC)檢定之示意圖。GPCR A與黃色螢光蛋白(YFP) Venus之N末端片段(VN)融合，且GPCR B與Venus之C末端片段(VC)融合。當GPCR A及B形成異聚體時，互補VN及VC足夠接近以形成功能性Venus。圖 2A-2D ：顯示使用BiFC檢定之CXCR4與ADRB2相互作用鑑別。顯示負BiFC信號之代表性影像；CXCR4-VN及HA-VC (圖2A)以及CXCR4-VN及GCGR-VC (圖2C)。顯示正BiFC信號之CXCR4及GPCRx之代表性影像：CXCR4-VN及CXCR4-VC (圖2B)以及CXCR4-VN及ADRB2-VC (圖2D)。圖 3A-3B ：顯示GPCR共內化研究之原理。用GPCRx特異性促效劑處理共表現CXCR4-GFP及GPCRx之細胞。(圖3A) CXCR4及GPCRx彼此不物理相互作用。GPCRx促效劑誘導GPCRx內化，但不誘導CXCR4-GFP內化。(圖3B) CXCR4及GPCRx物理相互作用並形成異聚體。GPCRx促效劑誘導GPCRx內化，且CXCR4-GFP與GPCRx共內化。圖 4A-4B ：顯示了在用相應促效劑對GPCRx進行刺激之後CXCR4-EGFP之共內化(對照：CXCR4-GFP (圖4A))。將U-2 OS細胞用編碼CXCR4-EGFP及GPCRx-VC之腺病毒共轉導，然後檢查GPCRx伴侶與CXCR4-EGFP形成異聚體及誘導CXCR4-EGFP共內化：GPCRx表示ADRB2 (圖4B)。圖 5A-5D ：顯示用相應選擇性促效劑共刺激之後共同表現CXCR4及ADRB2之細胞中鈣反應之增強。用編碼CXCR4及HA-VC (圖5A)、ADRB2及HA-VC (圖5B)或CXCR4及ADRB2 (圖5C)之腺病毒轉導MDA-MB-231人類乳癌細胞。使用編碼HA-VC之腺病毒調整轉導之腺病毒之總量。使細胞表現GPCR達2天，與Cal-520 AM孵育2 h，並用15 nM CXCL12、100 nM沙美特羅(ADRB2選擇性促效劑)或CXCL12及沙美特羅一起處理。使用FlexStation 3多模式微量板讀數器量測鈣動員。將結果正規化為基線活性。資料代表三個獨立實驗(平均值 ± SEM)。(圖5D)鈣動員藉由計算A-C中各圖之曲線下面積(AUC)來定量。將資料正規化為表現單獨CXCR4之細胞中CXCL12刺激之鈣反應。總和表示單獨地在共表現CXCR4及ADRB2之細胞中CXCL12及沙美特羅之刺激之後獲得之反應之計算相加效應，以實現增強作用之可視化。***P ＜0.001；學生t檢驗。圖 6 ：顯示當用CXCL12及ADRB2促效劑沙美特羅同時刺激表現CXCR4及ADRB2且含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞時，用兩種拮抗劑進行之共同投與有效抑制了增強之鈣反應。將MDA-MB-231細胞用編碼CXCR4及ADRB2之腺病毒共轉導。將細胞與Cal-520 AM孵育2 h，與ADRB2拮抗劑或媒介物孵育30 min，並用指定量CXCL12、ADRB2促效劑沙美特羅或CXCL12及ADRB2促效劑沙美特羅刺激。鈣動員如圖5D中所述進行定量。資料代表三個獨立實驗(平均值 ± SEM)。*P ＜0.05，**P ＜0.01，***P ＜0.001；學生t檢驗。圖 7 ：顯示內化抑制研究之原理。將共表現CXCR4-GFP及GPCRx之細胞用CXCL12 (SDF-1)及/或GPCRx特異性拮抗劑處理。情況A：CXCR4及GPCRx形成異聚體。CXCR4促效劑CXCL12 (SDF-1)誘導單獨CXCR4-GFP或CXCR4-GFP與GPCRx之內化。情況B：GPCRx拮抗劑不誘導CXCR4-GFP之內化。情況C：GPCRx特異性拮抗劑抑制CXCL12 (SDF-1)刺激之CXCR4-GFP之內化。圖 8 ：顯示針對CXCR4-ADRB2異聚體之藉由ADRB2拮抗劑之內化之抑制。用編碼ADRB2之腺病毒轉導表現CXCR4-GFP之U-2 OS細胞。藉由CXCR4促效劑CXCR12進行之處理誘導CXCR4-ADRB2內化。但是ADRB2拮抗劑卡維地洛(Carvedilol)不誘導內化。用CXCL12及卡維地洛之共同處理部分抑制了CXCL12誘導之CXCR4-ADRB2內化。圖 9 ：顯示ADRB2拮抗劑對來自癌症患者之患者源性細胞(PDC)之存活之影響。ADRB2拮抗劑卡維地洛對PDC之存活之影響。卡維地洛誘導細胞之存活顯著降低(IC50 = 11.69 µM)。圖 10A-10C ：顯示藉由PLA及RT-qPCR在過表現CXCR4及ADRB2之U-2 OS細胞中的CXCR4-ADRB2異二聚體偵測。在不同MOI下，用編碼ADRB2之腺病毒轉導表現CXCR4-GFP之U-2 OS細胞2天。然後對共表現CXCR4-ADRB2之U-2 OS細胞進行PLA。圖10A：藉由PLA之CXCR4-ADRB2異聚體偵測之影像。圖10B：PLA信號之增加以劑量依賴之方式與ADRB2之表現水準成比例。圖10C：來自RT-qPCR之資料顯示了U-2 OS細胞之內源性ADRB2表現水準。圖 11A-11B ：顯示藉由PLA之在PDC中之CXCR4-ADRB2異聚體偵測。將GBM來源之PDC (樣品ID：986T、948T、783T、777T、352T1、352T2、578T、559T、464T、448T、096T)鋪板在腔室玻片上，並用CXCR4及ADRB2特異性抗體藉由PLA偵測CXCR4-ADRB2異聚體。圖11A：CXCR4-ADRB2異聚體偵測之影像。用DAPI染色來觀察細胞核，且CXCR4-ADRB2異聚體顯示為小點。圖11B：PDC中CXCR4-ADRB2異聚體之比率。圖 12A-12B ：顯示PDX中CXCR4-GPCRx異聚體偵測之結果。GBM來源之PDX (樣品ID；777T、783T、948T、559T)用CXCR4及ADRB2特異性抗體藉由PLA偵測CXCR4-ADRB2異聚體。圖12A：CXCR4-ADRB2異聚體偵測之影像。用DAPI染色來觀察細胞核，且CXCR4-ADRB2異聚體顯示為小點。圖12B：PDX中CXCR4-ADRB2異聚體之比率。圖 13 ：顯示在用ADRB2促效劑共刺激之後共表現CXCR4及ADRB2之細胞中鈣反應之增強。將MDA-MB-231細胞用編碼CXCR4及ADRB2之腺病毒轉導。將細胞培養3天，用Cal-520 AM染色，並用單獨CXCL12 (30 nM)、遞增劑量之單獨沙美特羅或遞增劑量之沙美特羅與30 nM CXCL12之組合進行處理。使用FlexStation 3量測鈣動員。總和表示單獨30 nM CXCL12 (空心正方形)及指定劑量之單獨ADRB2配體(實心圓圈)引起之反應之計算相加值。總和圖描繪為帶有倒三角形之虛線。藉由學生t 檢驗確定各點處總和(倒三角形)與共處理(實心正方形)之間的統計學顯著性差異。* P ＜0.05；** P ＜0.01；*** P ＜0.001；資料代表平均值± SD (n = 3)。圖 14 ：顯示當將表現CXCR4-ADRB2異聚體之細胞用CXCL12及ADRB2促效劑同時刺激時，藉由抗CXCR4抗體及ADRB2拮抗劑之共同處理之增強之鈣反應之有效抑制。將MDA-MB-231細胞用編碼CXCR4及ADRB2之腺病毒共轉導。將細胞用指定濃度之ADRB2拮抗劑(卡維地洛)、抗CXCR4抗體(12G5)或媒介物處理，並與Cal 6孵育2小時。隨後用指定量CXCL12、ADRB2促效劑(沙美特羅)或CXCL12及ADRB2促效劑刺激細胞。圖 15A-15B ：圖15A：顯示分別用親代細胞A549、穩定過表現CXCR4之A549-CXCR4及穩定過表現CXCR4-ADRB2異聚體之A549-CXCR4-ADRB2移植之三隻小鼠在移植之後28天之影像；圖15B：顯示比較圖15A之移植細胞之間的腫瘤生長之圖；藉由量測腫瘤之長度(L )及寬度(W )並根據下式計算腫瘤體積，每第三或第四監測腫瘤生長：體積＝ 0.5LW2 。結果表示為3個個體之平均值±標準差。圖 16A-16B ： 顯示了在表現CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231細胞中藉由CXCL12及/或沙美特羅之刺激之ERK活化。圖16A顯示了用CXCL12 (10 nM)及/或沙美特羅(10 nM)處理20分鐘之MDA-MB-231細胞、MDA-MB-231-CXCR4及MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2中之磷酸-ERK1/2 Thr202/Tyr204及總ERK1/2之西方墨點分析。圖16B顯示了相對於總ERK蛋白水準之磷酸-ERK1/2 Thr202/Tyr204蛋白表現之密度分析(iBright分析軟體)。圖 17A-17B ： 顯示了在表現CXCR4-ADRB2異聚體之A549 細胞中藉由CXCL12及/或沙美特羅之刺激之ERK活化。圖17A顯示了用CXCL12 (10 nM)及/或沙美特羅(10 nM)處理10分鐘之A549、A549-CXCR4、及A549-CXCR4-ADRB2細胞中之磷酸-ERK1/2 Thr202/Tyr204及總ERK1/2之西方墨點分析。圖17B顯示了相對於總ERK蛋白水準之磷酸-ERK1/2 Thr202/Tyr204蛋白表現之密度分析(iBright分析軟體)。圖 18A-18E ： 顯示CXCR4拮抗劑對CXCR4-CXCL12介導之增殖增加之作用。將過表現CXCR4及ADRB2之A549雙陰性(RLuc-Luc2P)細胞及A549-CXCR4-ADRB2細胞鋪板到96孔板中，並在無血清條件中用CXCL12及/或指定藥物刺激72 h (圖18A：AMD3100 (10 μM)；圖18B：LY2510924 (10 μM)；圖18C：AMD070 (1 μM)；圖18D：TG-0054 (10 μM)；及圖18E：BKT-140 (10 μM))。量測來自三個重複孔之螢光，並將資料表示為螢光之平均比率(藥物處理/媒介物)±SEM。圖 19A-19C ： 顯示CXCR4-ADRB2異聚體表現與腫瘤生長之間的相關性：圖19A顯示了在A549親代細胞、表現CXCR4同聚體之A549-CXCR4細胞株及表現CXCR4-ADRB2異聚體之A549-CXCR4-ADRB2細胞株中藉由PLA之CXCR4-ADRB2異聚體之偵測；圖19B顯示了在A549、A549-CXCR4及A549-CXCR4-ADRB2中藉由PLA之CXCR4-ADRB2異聚體之定量；且圖19C顯示了帶有A549親代細胞之小鼠與帶有A549-CXCR4-ADRB2細胞之小鼠之間的腫瘤生長之比較。圖 20A-20C ： 顯示CXCR4-ADRB2異聚體表現與腫瘤生長之間的相關性。圖20A顯示了在MDA-MB-231親代細胞、表現CXCR4同聚體之MDA-MB-231-CXCR4細胞株及表現CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞株中藉由PLA之CXCR4-ADRB2異聚體之偵測；圖20B顯示了在MDA-MB-231、MDA-MB-231-CXCR4及MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2中藉由PLA之CXCR4-ADRB2異聚體之定量；且圖20C顯示了帶有MDA-MB-231親代細胞、帶有MDA-MB-231-CXCR4或MDA-MB-231-CXCR4-ADRB2細胞之小鼠中腫瘤生長之比較。圖 21A-21D ： 顯示在表現CXCR4-ADRB2異聚體之A549異種移植小鼠中單獨CXCR4抑制劑對腫瘤生長之影響。以劑量依賴性方式使移植有表現CXCR4-ADRB2異聚體之A549細胞株之小鼠經受各種CXCR4抑制劑、AMD3100 (圖21A)、LY2510924 (圖21B)、AMD070 (圖21C)或TG-0054 (圖21D)以便比較腫瘤大小。圖 22A-22D ： 顯示當將表現CXCR4-ADRB2異聚體之細胞移植至小鼠中並單獨或以組合方式用CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑卡維地洛處理時，腫瘤之相對生長。圖22A-22C：顯示當將表現CXCR4-ADRB2異聚體之MDA-MB-231細胞原位移植至小鼠中並單獨或以組合方式用CXCR4抑制劑(AMD3100 (圖22A)、LY2510924 (圖22B)或AMD070 (圖22C)及ADRB2抑制劑卡維地洛處理時，腫瘤之相對生長。結果表示為5個個體之平均值±標準差。圖22D：顯示當將表現CXCR4-ADRB2異聚體之A549細胞移植至小鼠(A549異種移植物模型)中並單獨或以組合方式用AMD3100 (CXCR4抑制劑)及卡維地洛(ADRB2抑制劑)處理時，腫瘤之相對生長。藉由量測腫瘤之長度(L)及寬度(W)並根據下式計算腫瘤體積，每第三或第四天監測腫瘤生長：體積 = 0.5 LW2 。結果表示為10個個體之平均值±標準差。圖 23A ： 顯示在不存在或存在作為競爭劑之普萘洛爾(1 μM)之情況下，對在指定MOI下用Ad-CXCR4及Ad-ADRB2瞬時感染且用TZ14011-tb及普萘洛爾-g2標記之A549細胞觀察到之基於配體之TR-FRET信號。圖 23B ： 顯示了對在指示MOI下用Ad-CXCR4及Ad-ADRB2瞬時感染之U2OS細胞觀察到之基於抗體之TR-FRET信號。隨後與兔抗CXCR4抗體及小鼠抗ADRB2抗體一起孵育，將用鋱穴狀化合物標記之山羊抗兔IgG及用Alexa Fluor 647標記之山羊抗小鼠IgG用於TR-FRET。圖 24A-24C ： 顯示在實體腫瘤癌細胞株A549 (肺癌)、U2OS (骨肉瘤)及MDA-MB-231 (乳癌)中藉由PLA之CXCR4-ADRB2異聚體偵測以及藉由RT-qPCR之經由RNA表現水準之CXCR4或ADRB2之定量。圖24A顯示了藉由RT-qPCR之CXCR4及ADRB2之RNA表現水準；圖24B顯示了藉由PLA所偵測之CXCR4及ADRB2異聚體之影像；且圖24C顯示了藉由PLA之CXCR4及ADRB2異聚體之定量。圖 25A-25C ： 顯示在血癌細胞株HL60 (白血病)、U937 (白血病)及RPMI8226 (骨髓瘤)中藉由PLA之CXCR4-ADRB2異聚體偵測以及藉由RT-qPCR經由RNA表現水準之CXCR4或ADRB2之定量。圖25A顯示了藉由RT-qPCR之CXCR4及ADRB2之RNA表現水準；圖25B顯示了藉由PLA所偵測之CXCR4及ADRB2異聚體之影像；且圖25C顯示了藉由PLA之CXCR4及ADRB2異聚體之定量。圖 26A-26B ：顯示當用CXCL12及ADRB2促效劑(福莫特羅)共刺激時，表現CXCR4-ADRB2異聚體之細胞中鈣反應之增強。圖26A顯示了在用CXCL12及ADRB2促效劑福莫特羅共刺激之後，表現CXCR4-ADRB2異聚體之U937細胞中鈣反應之增強；圖26B顯示了在用CXCL12及ADRB2促效劑福莫特羅共刺激之後，表現CXCR4-ADRB2異聚體之HL-60細胞中鈣反應之增強。
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002

Claims (215)

  1. 一種用於抑制患有癌症之個體之細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法，該方法包含向該患者投與： a)      CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福(burixafor)；及 b)      ADRB2抑制劑； 其中： i)       該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；且 ii)      該所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑抑制該癌症個體中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
  2. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，該方法包含向該個體投與： a)      CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)      ADRB2抑制劑； 其中： i)     增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；且 ii)    該所投與之布利沙福及ADRB2抑制劑抑制該癌症個體中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
  3. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，該方法包含： a)      確定該個體細胞是否含有CXCR4-ADRB2異聚體，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；及 b)      若該個體細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與： i)       CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 ii)      ADRB2抑制劑。
  4. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含： 1)      藉由以下方式確定該個體是否具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞：獲得或已獲得來自該個體之生物樣品；及對該生物樣品進行或已進行檢定以確定是否： i)       該個體細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體；或 ii)      CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合：改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質或功能；改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展；及 2)      若該個體具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向該癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 3)      若該個體不具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向該癌症個體投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之單一抑制劑。
  5. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含： 1)      藉由以下方式確定該個體是否具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞：獲得或已獲得來自該個體之生物樣品；及對該生物樣品進行或已進行檢定以確定是否： i)       該個體細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體；或 ii)      CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合：改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質或功能；改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展；及 2)      若該個體具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向該癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 3)      若該個體不具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞，則向該癌症個體投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之單一抑制劑； 其中： a)      相對於投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之該單一抑制劑，在向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合之後，具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體中之該癌症之進展多降低5-100%之範圍； b)      相對於呈單一抑制劑投與時該布利沙福之功效，當與該ADRB2抑制劑組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該布利沙福之功效增加5-2000%之範圍；及/或 c)      相對於呈單一抑制劑投與時該ADRB2抑制劑之功效，當與該布利沙福組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該ADRB2抑制劑之功效增加5-2000%之範圍。
  6. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含： 1)      藉由以下方式確定該個體細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體：獲得或已獲得來自該個體之生物樣品，及對該生物樣品進行或已進行檢定以確定該個體細胞中是否存在該CXCR4-ADRB2異聚體；其中對該生物樣品進行之該檢定為或包含以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準、微陣列或螢光動物檢定；及 2)      若該個體細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 3)      若該個體細胞不含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之單一抑制劑。
  7. 一種用於治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症之方法，其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生，該方法包含： 1)      藉由以下方式確定該個體細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體：獲得或已獲得來自該個體之生物樣品，及對該生物樣品進行或已進行檢定以確定該個體細胞中是否存在該CXCR4-ADRB2異聚體；其中對該生物樣品進行之該檢定為或包含以下中之一或多者：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準、微陣列或螢光動物檢定；及 2)      若該個體細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑之組合，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 3)      若該個體細胞不含有該CXCR4-ADRB2異聚體，則向該癌症個體投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之單一抑制劑； 其中： a)      相對於投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之該單一抑制劑，在向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合之後，具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體中之該癌症之進展多降低5-100%之範圍； b)      相對於呈單一抑制劑投與時該布利沙福之功效，當與該ADRB2抑制劑組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該布利沙福之功效增加5-2000%之範圍；及/或 c)      相對於呈單一抑制劑投與時該ADRB2抑制劑之功效，當與該布利沙福組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該ADRB2抑制劑之功效增加5-2000%之範圍。
  8. 一種在治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症中所使用之醫藥套組，該醫藥套組包含： a)      CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)      ADRB2抑制劑； 其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
  9. 一種在治療具有含有CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之個體中之癌症中所使用之醫藥組合物，該醫藥組合物包含： a)      CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福； b)      ADRB2抑制劑；及 c)      醫藥學上可接受之載劑； 其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
  10. 一種用於抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法，該方法包含向該細胞投與： a)      CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)      ADRB2抑制劑； 其中： i)       該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；且 ii)      與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之接觸抑制該細胞中之由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增強之下游傳訊。
  11. 如請求項10之用於抑制之方法，其中該方法進一步包含確定該細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體。
  12. 一種在抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊中所使用之醫藥套組，該醫藥套組包含： a)      CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福；及 b)      ADRB2抑制劑； 其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
  13. 一種在抑制細胞中之由CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊中所使用之醫藥組合物，該醫藥組合物包含： a)      CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福； b)      ADRB2抑制劑；及 c)      醫藥學上可接受之載劑； 其中增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
  14. 如請求項10-13中任一項之用於抑制之方法，其中該細胞為個體細胞。
  15. 如請求項14之用於抑制之方法，其中該個體細胞為癌細胞。
  16. 如請求項1-13中任一項之用於抑制之方法，其中該細胞為癌細胞。
  17. 如請求項1-9中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含偵測該癌症個體中之該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
  18. 如請求項1-9或17中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含鑑別該癌症個體中之該CXCR4-ADRB2異聚體。
  19. 如請求項1-9或17-18中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含獲得來自該個體之生物樣品。
  20. 如請求項1-9或17-19中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含對從該個體獲得之該生物樣品進行檢定。
  21. 如請求項1-9或17-20中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含： i)       獲得或已獲得來自該癌症個體之生物樣品； ii)      進行或已進行確定從該癌症個體獲得之該生物樣品中之CXCR4-ADRB2異聚體之存在、一致性或存在及一致性的診斷檢定；及 iii)     選擇與布利沙福組合投與以抑制由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增強之下游傳訊的該ADRB2抑制劑。
  22. 如請求項1-9或17-21中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含確定該個體細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體，包含對從該個體獲得之生物樣品進行檢定。
  23. 如請求項1-9或17-22中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該方法進一步包含確定該個體細胞是否含有該CXCR4-ADRB2異聚體，包含獲得來自該個體之生物樣品，及對從該個體獲得之該生物樣品進行檢定。
  24. 如請求項1-9或17-23中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中從該個體獲得之該生物樣品含有該CXCR4-ADRB2異聚體。
  25. 如請求項1-9或14-24中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體細胞含有該CXCR4-ADRB2異聚體。
  26. 如請求項1-25中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體具有以下特徵中之二或更多者： 1)      該CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白在該細胞中共定位並物理相互作用； 2)      增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；及/或 3)      布利沙福及ADRB2抑制劑之組合： i)       改變該細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質； ii)      改變該細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；及/或 iii)     改變含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之異聚體特異性性質。
  27. 如請求項1-9或14-25中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體具有以下特徵中之二或更多者： 1)      該CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白在該細胞中共定位並物理相互作用； 2)      增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生；及/或 3)      布利沙福及ADRB2抑制劑之組合： i)       改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質； ii)      改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能； iii)     改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；及/或 iv)     降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展。
  28. 如請求項1-27中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：該細胞中之該等CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位並物理相互作用。
  29. 如請求項1-28中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該等CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位並物理相互作用係藉由以下中之一或多者來確定：共內化檢定、共定位檢定、原位雜交、免疫組織化學、免疫電子顯微鏡術、基於接近性之檢定、免疫共沉澱檢定、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、流式細胞分析技術、RNAseq、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準、微陣列或螢光動物檢定。
  30. 如請求項1-29中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該基於接近性之檢定為或包含共振能量轉移(RET)、生物發光RET (BRET)、螢光RET (FRET)、時間解析螢光RET (TR-FRET)、基於抗體之FRET、基於配體之FRET、雙分子螢光互補(BiFC)或接近連接檢定(PLA)。
  31. 如請求項30之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該TR-FRET為基於配體之TR-FRET。
  32. 如請求項30之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該TR-FRET為基於抗體之TR-FRET。
  33. 如請求項1-30中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該等CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位及物理相互作用係藉由以下中之一或多者來確定：共內化檢定、雙分子螢光互補(BiFC)、RT-PCR、RT-qPCR、CXCR4之表現水準、ADRB2之表現水準、CXCR4及ADRB2之表現水準或接近連接檢定(PLA)。
  34. 如請求項33之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該等CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位及物理相互作用係藉由共內化檢定來確定。
  35. 如請求項33之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該等CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位及物理相互作用係藉由雙分子螢光互補(BiFC)來確定。
  36. 如請求項33之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞中之該等CXCR4-ADRB2異聚體組分直接或經由充當別構之通道之中間蛋白共定位及物理相互作用係藉由接近連接檢定(PLA)來確定。
  37. 如請求項1-9或17-36中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定從該個體獲得之該生物樣品中該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
  38. 如請求項1-37中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定該CXCR4-ADRB2異聚體中該等CXCR4及ADRB2組分之共定位及相互作用。
  39. 如請求項1-9或14-38中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定該個體細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
  40. 如請求項1-9或17-39中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定從該個體獲得之該生物樣品中該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
  41. 如請求項1-9或17-40中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該檢定確定該個體中該CXCR4-ADRB2異聚體之存在。
  42. 如請求項1-41中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
  43. 如請求項1-9或14-42中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該個體細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體產生。
  44. 如請求項1-9或14-43中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該個體細胞中之該CXCR4-ADRB2異聚體之存在產生。
  45. 如請求項1-44中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體產生該增強之下游傳訊。
  46. 如請求項1-9或14-45中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體在該個體細胞中產生該增強之下游傳訊。
  47. 如請求項1-46中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之促效作用產生。
  48. 如請求項1-47中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效作用產生。
  49. 如請求項1-47中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之ADRB2促效作用產生。
  50. 如請求項1-47中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之CXCR4促效作用及ADRB2促效作用產生。
  51. 如請求項1-50中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊在該CXCR4、該ADRB2或該CXCR4-ADRB2異聚體之下游。
  52. 如請求項51之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊在該CXCR4之下游。
  53. 如請求項51之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊在該ADRB2之下游。
  54. 如請求項51之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊在該CXCR4-ADRB2異聚體之下游。
  55. 如請求項1-50中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊係相對於在相應個別單元體情境中來自CXCR4單元體或ADRB2單元體之下游傳訊。
  56. 如請求項55之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊係相對於在個別單元體情境中來自CXCR4單元體之下游傳訊。
  57. 如請求項55之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊係相對於在個別單元體情境中來自ADRB2單元體之下游傳訊。
  58. 如請求項55之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊係相對於在相應個別單元體情境中來自CXCR4單元體及ADRB2單元體之下游傳訊。
  59. 如請求項1-58中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊為增加之鈣動員量。
  60. 如請求項59之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增加之鈣動員量藉由細胞內Ca2+檢定來確定。
  61. 如請求項1-60中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊藉由細胞內Ca2+檢定來確定。
  62. 如請求項61之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其該中細胞內Ca2+檢定為鈣動員檢定。
  63. 如請求項62之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該鈣動員檢定確定該CXCR4-ADRB2異聚體產生該增強之下游傳訊。
  64. 如請求項62或63之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該鈣動員檢定確定該增強之下游傳訊由該CXCR4-ADRB2異聚體之存在產生。
  65. 如請求項1-64中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體表現出該增加之鈣動員量，以使得： a)      該細胞中在個別單元體情境中在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後該CXCR4或該ADRB2產生等於或少於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量；及 b)      相對於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之該鈣動員量之總和，在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後，該CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員； 如經由鈣動員檢定所確定。
  66. 如請求項1-65中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中： i)       該細胞中在該個別單元體情境中，來自該單元體CXCR4或ADRB2之該鈣動員為非協同的，如經由鈣動員檢定所確定；且 ii)      該細胞中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該鈣動員為協同的，如經由鈣動員檢定所確定。
  67. 如請求項1-66中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在該個別單元體情境中： a)      在不存在該個別單元體ADRB2之情況下，該細胞中之該個別單元體CXCR4；或 b)      在不存在該個別單元體CXCR4之情況下，該細胞中之該個別單元體ADRB2； 在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生等於或小於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
  68. 如請求項1-67中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在該個別單元體情境中，獨立地： a)      在不存在該個別單元體ADRB2之情況下，該細胞中之該個別單元體CXCR4；及 b)      在不存在該個別單元體CXCR4之情況下，該細胞中之該個別單元體ADRB2； 在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後產生等於或小於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
  69. 如請求項1-68中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後產生大於用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
  70. 如請求項1-69中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於由該CXCR4-ADRB2異聚體之單一促效劑刺激所產生之鈣動員之總和，由該CXCR4-ADRB2異聚體之該共刺激所產生之該鈣動員量為增加之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
  71. 如請求項1-70中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增加之鈣動員量為用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後大於用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
  72. 如請求項71之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增加之鈣動員量為用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後與用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少75%或至少90%的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
  73. 如請求項71或72之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增加之鈣動員量為用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後與用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少100%的鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
  74. 如請求項71-73中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增加之鈣動員量為協同鈣動員量。
  75. 如請求項74之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中來自含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該等細胞的該協同鈣動員量為用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後與用該CXCL12或該ADRB2促效劑對該等細胞進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和相比大至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少75%或至少90%之鈣動員量，如經由鈣動員檢定所確定。
  76. 如請求項1-75中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該增加之鈣動員量之特徵如下： a)      在用CXCL12及ADRB2促效劑共刺激之後，細胞中在個別單元體情境中該CXCR4或該ADRB2產生等於或少於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之鈣動員量之總和的鈣動員量；及 b)      相對於用該CXCL12或該ADRB2促效劑進行單一促效劑刺激所產生之該鈣動員量之總和，在用該CXCL12及該ADRB2促效劑共刺激之後，該CXCR4-ADRB2異聚體表現出增加之鈣動員； 如經由鈣動員檢定所確定。
  77. 如請求項1-76中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：相對於由用CXCR4促效劑或ADRB2促效劑對該CXCR4-ADRB2異聚體進行單刺激所產生之下游ERK傳訊量，用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑對該CXCR4-ADRB2異聚體共刺激產生較大的下游ERK傳訊量。
  78. 如請求項77之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中由用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激產生之下游ERK傳訊量大於由用該CXCR4促效劑單刺激產生之量。
  79. 如請求項78之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量與用該CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大至少5%。
  80. 如請求項78之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量與用該CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大至少10%、至少25%、至少50%、至少75%或至少90%。
  81. 如請求項78-80中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激產生之該下游ERK傳訊量與用該CXCR4促效劑單刺激所產生之量相比大在5-15%、10-25%、20-50%、40-75%或60-100%之間的範圍。
  82. 如請求項77之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中由用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激產生之下游ERK傳訊量大於由用該ADRB2促效劑單刺激產生之量。
  83. 如請求項82之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量與用該ADRB2促效劑單刺激所產生之量相比大至少5%。
  84. 如請求項82之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激所產生之該下游ERK傳訊量與用該ADRB2促效劑單刺激所產生之量相比大至少10%、至少25%、至少50%、至少75%或至少90%。
  85. 如請求項82-84中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中用該CXCR4促效劑及該ADRB2促效劑共刺激產生之該下游ERK傳訊量與用該ADRB2促效劑單刺激所產生之量相比大在5-15%、10-25%、20-50%、40-75%或60-100%之間的範圍。
  86. 如請求項1-9或14-85中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質。
  87. 如請求項1-9或14-86中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能。
  88. 如請求項1-9或14-87中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質。
  89. 如請求項1-9或14-88中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合降低該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展。
  90. 如請求項1-89中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合抑制來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
  91. 如請求項1-90中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合抑制該細胞中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
  92. 如請求項1-9或17-91中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合抑制該癌症個體中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
  93. 如請求項1-9或17-92中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合抑制該癌症個體之該細胞中來自該CXCR4-ADRB2異聚體之該增強之下游傳訊。
  94. 如請求項1-93中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體組分包含CXCR4及ADRB2之個別單元體。
  95. 如請求項1-94中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該CXCR4之該細胞在存在或不存在該個別單元體ADRB2之情況下包含該個別單元體CXCR4。
  96. 如請求項95之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該CXCR4之該細胞在不存在該個別單元體ADRB2之情況下包含該個別單元體CXCR4。
  97. 如請求項95之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該CXCR4之該細胞在存在該個別單元體ADRB2之情況下包含該個別單元體CXCR4。
  98. 如請求項1-94中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該ADRB2之該細胞在存在或不存在該個別單元體CXCR4之情況下包含該個別單元體ADRB2。
  99. 如請求項98之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該ADRB2之該細胞在不存在該個別單元體CXCR4之情況下包含該個別單元體ADRB2。
  100. 如請求項98之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中在個別單元體情境中含有該ADRB2之該細胞在存在該個別單元體CXCR4之情況下包含該個別單元體ADRB2。
  101. 如請求項1-100中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之布利沙福及ADRB2抑制劑之該組合： i)       改變該細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質； ii)      改變該細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能；及/或 iii)     改變含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之異聚體特異性性質。
  102. 如請求項1-9或14-101中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合： i)       改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質； ii)      改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能； iii)     改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質；或 iv)     降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展。
  103. 如請求項102之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性性質。
  104. 如請求項102或103之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合改變該一或多個個體源性細胞中該CXCR4-ADRB2異聚體之異聚體特異性功能。
  105. 如請求項102-104中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合改變該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之異聚體特異性性質。
  106. 如請求項102-105中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中投與之該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合降低具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之癌症進展。
  107. 如請求項102-106中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該CXCR4-ADRB2異聚體之特徵在於具有以下特徵：布利沙福及ADRB2抑制劑之組合降低該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展。
  108. 如請求項102-107中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包含該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之癌症進展之降低。
  109. 如請求項102-108中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包含該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞增殖之降低。
  110. 如請求項102-109中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包含該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之細胞遷移之降低。
  111. 如請求項102-110中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包含該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之轉移之降低。
  112. 如請求項102-111中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該降低之癌症進展包括該一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之個體源性細胞之血管生成之降低。
  113. 如請求項1-112中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該布利沙福係呈包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與。
  114. 如請求項1-113中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑係呈包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與。
  115. 如請求項1-114中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中依次、並行或同時投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合。
  116. 如請求項1-115中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合係呈進一步包含醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物投與。
  117. 如請求項1-116中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該布利沙福及該ADRB2抑制劑係呈醫藥組合物之組合投與。
  118. 如請求項117之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中醫藥組合物之該組合包含： a)      包含該布利沙福及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物；及 b)      包含該ADRB2抑制劑及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物。
  119. 如請求項117或118之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中依次、並行或同時投與該等醫藥組合物之該組合。
  120. 如請求項1-119中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該癌症為血液學癌症或實體腫瘤。
  121. 如請求項120之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該癌症為血液學癌症。
  122. 如請求項121之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該血液學癌症選自由以下組成之群：淋巴瘤、白血病、骨髓瘤及多發性骨髓瘤。
  123. 如請求項122之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該淋巴瘤為B細胞淋巴瘤、T細胞淋巴瘤或NK細胞淋巴瘤。
  124. 如請求項122或123之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該淋巴瘤為複發性或難治性淋巴瘤。
  125. 如請求項122-124中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該淋巴瘤選自由以下組成之群：霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、皮膚B細胞淋巴瘤、活化之B細胞淋巴瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)、套細胞淋巴瘤(MCL)、濾泡性淋巴瘤(FL)、濾泡性中心淋巴瘤、轉化性淋巴瘤、中間分化之淋巴球性淋巴瘤、中間淋巴球性淋巴瘤(ILL)、瀰漫性低分化淋巴球性淋巴瘤(PDL)、中心細胞性淋巴瘤、瀰漫性小核裂細胞淋巴瘤(DSCCL)、外周T細胞淋巴瘤(PTCL)、皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL)、套膜區淋巴瘤及低度濾泡性淋巴瘤。
  126. 如請求項122之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該白血病為： a)      選自由以下組成之群之急性白血病：急性淋巴球性白血病(ALL)、T細胞急性淋巴球性白血病(T-ALL)、B細胞急性淋巴母細胞白血病、急性單核球性白血病、急性前骨髓細胞性白血病、急性骨髓細胞性白血病(AML)、急性骨髓樣白血病、急性骨髓性白血病及骨髓母細胞、前骨髓細胞性、骨髓單核球性、單核球性及紅血球性白血病； (b)     選自由以下組成之群之慢性白血病：慢性骨髓細胞性(顆粒球性)白血病、慢性骨髓性白血病(慢性骨髓樣白血病；CML)及慢性淋巴球性白血病(CLL)；或 (c)     慢性骨髓單核球性白血病(CMML)、慢性嗜酸性球性白血病、少年骨髓單核球性白血病(JMML)、真性紅血球增多症、自然殺傷細胞白血病(NK白血病)或毛細胞白血病。
  127. 如請求項120之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該癌症為實體腫瘤。
  128. 如請求項127之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為良性腫瘤或癌症。
  129. 如請求項127之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為癌或肉瘤。
  130. 如請求項127之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤選自由以下組成之群：纖維肉瘤、黏液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、惡性上皮樣間皮瘤、尤因氏腫瘤(Ewing's tumor)、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、胃癌、結腸直腸癌、食管癌、結腸癌、淋巴惡性腫瘤、胰臟癌、胰臟腺癌、胰臟導管腺癌、乳癌、乳腺癌、乳腺導管腺癌、肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、腺鱗肺癌、肺泡橫紋肌肉瘤、卵巢癌、卵巢透明細胞腺癌、卵巢黏液性囊腺癌、卵巢漿液性腺癌、前列腺癌、肝細胞癌、軟組織肉瘤、鱗狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、髓質性甲狀腺癌、乳頭狀甲狀腺癌、甲狀腺癌、嗜鉻細胞瘤皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、髓質癌、支氣管癌、胃腸道癌、胃管狀腺癌、胃腺鱗癌、腎癌、肝內膽管癌、腎細胞癌、肝瘤、膽管癌、絨毛膜癌、威爾姆氏瘤(Wilms’ tumor)、子宮癌肉瘤、子宮內膜腺癌、子宮內膜基質性肉瘤、子宮內膜癌、子宮頸癌、睪丸腫瘤、精原細胞瘤、膀胱癌、黑素瘤、多發性骨髓瘤、多發性內分泌贅瘤、CNS腫瘤、神經膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、CNS淋巴瘤、胚細胞瘤、神經管胚細胞瘤、神經鞘瘤顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細胞瘤、聽神經瘤、寡樹突神經膠質瘤、腦脊髓膜瘤、神經母細胞瘤、視網膜母細胞瘤及腦轉移瘤。
  131. 如請求項130之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤選自由以下組成之群：乳癌、肺癌及肝細胞癌。
  132. 如請求項131之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為乳癌。
  133. 如請求項131之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為肺癌。
  134. 如請求項131之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該實體腫瘤為肝細胞癌。
  135. 如請求項1-9或17-134中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體之生物樣品為生物流體樣品。
  136. 如請求項135之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中對該生物流體樣品進行液體生檢。
  137. 如請求項135或136之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該生物流體樣品為血液樣品、血漿樣品、唾液樣品、腦液樣品、眼液樣品或尿液樣品。
  138. 如請求項1-9或17-137中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體之生物樣品為生物組織樣品。
  139. 如請求項138之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中對該生物組織樣品進行組織樣品檢定。
  140. 如請求項138或139之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該生物組織樣品為器官組織樣品、骨組織樣品或腫瘤組織樣品。
  141. 如請求項1-140中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該用於治療癌症之方法為用於抑制由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法。
  142. 如請求項1-140中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該用於抑制由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之增強之下游傳訊之方法為用於治療癌症之方法。
  143. 如請求項1-9或17-142中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於投與該布利沙福或該ADRB2抑制劑之該單一抑制劑，在向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合之後，具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體中該癌症之進展多降低5-100%之範圍。
  144. 如請求項1-9或17-143中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於呈單一抑制劑投與時該布利沙福之功效，當與該ADRB2抑制劑組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該布利沙福之功效增加5-5000%之範圍。
  145. 如請求項1-9或17-144中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於呈單一抑制劑投與時ADRB2抑制劑之功效，當與該布利沙福組合向具有含有該CXCR4-ADRB2異聚體之該細胞之該個體投與時，該ADRB2抑制劑之功效增加5-5000%之範圍。
  146. 如請求項1-9或17-145中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於單一抑制劑投與，向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合對該癌症個體中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增強之下游傳訊的抑制為5-2000倍之間的範圍。
  147. 如請求項1-9或17-146中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中相對於在相應個別單元體情境中由CXCR4單元體或ADRB2單元體所產生之下游傳訊之抑制，向該癌症個體投與該布利沙福及該ADRB2抑制劑之該組合對該癌症個體中由該CXCR4-ADRB2異聚體產生之該增強之下游傳訊的抑制為5-2000倍之間的範圍。
  148. 如請求項17-147中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞為癌細胞。
  149. 如請求項17-147中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該細胞為個體細胞。
  150. 如請求項149之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體細胞為癌細胞。
  151. 如請求項1-150中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體為癌症個體。
  152. 如請求項1-151中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組或所使用之醫藥組合物，其中該個體為患者。
  153. 一種醫藥組合物，其包含： a)      CXCR4抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福； b)      ADRB2抑制劑；及 c)      醫藥學上可接受之載劑。
  154. 如請求項1-153中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之拮抗劑、ADRB2之反向促效劑、ADRB2之部分拮抗劑、ADRB2之別構調節劑、ADRB2之抗體、ADRB2之抗體片段、ADRB2之配體或抗體-藥物結合物。
  155. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2拮抗劑。
  156. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2反向促效劑。
  157. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2部分拮抗劑。
  158. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之別構調節劑。
  159. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之抗體。
  160. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑係ADRB2之抗體片段。
  161. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為ADRB2之配體。
  162. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為抗體-藥物結合物。
  163. 如請求項154之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑選自由以下組成之群： 阿普洛爾(Alprenolol)、阿替洛爾(atenolol)、倍他洛爾(betaxolol)、布拉洛爾(bupranolol)、布托沙明(butoxamine)、卡那洛爾(carazolol)、卡維地洛(carvedilol)、CGP 12177、環丙洛爾(cicloprolol)、ICI 118551、ICYP、拉貝洛爾(labetalol)、左旋倍他洛爾(levobetaxolol)、左旋布諾洛爾(levobunolol)、LK 204-545、美托洛爾(metoprolol)、納多洛爾(nadolol)、NIHP、NIP、普羅帕酮(propafenone)、普萘洛爾(propranolol)、索他洛爾(sotalol)、SR59230A及噻嗎洛爾(timolol)。
  164. 如請求項163之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為卡維地洛。
  165. 如請求項1-9或17-164中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中向該個體投與治療有效量之該布利沙福。
  166. 如請求項1-9或17-164中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中向該個體投與次治療有效量之該布利沙福。
  167. 如請求項1-9或17-166中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中向該個體投與治療有效量之該ADRB2抑制劑。
  168. 如請求項1-9或17-166中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中向該個體投與次治療有效量之該ADRB2抑制劑。
  169. 如請求項1-9或14-168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中該CXCR4基因之表現水準，其中若該表現水準大於該CXCR4基因之參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現CXCR4之癌症。
  170. 如請求項169之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現CXCR4之癌症。
  171. 如請求項169或170之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
  172. 如請求項169或170之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
  173. 如請求項169或170之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
  174. 如請求項169-173中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，在確定該CXCR4基因表現水準大於該參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
  175. 如請求項1-9或14-168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中之該ADRB2基因之表現水準，其中若該表現水準大於該ADRB2基因之參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現ADRB2之癌症。
  176. 如請求項175之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現ADRB2之癌症。
  177. 如請求項175或176之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
  178. 如請求項175或176之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
  179. 如請求項175或176之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
  180. 如請求項175-179中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，在確定該ADRB2基因表現水準大於該參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
  181. 如請求項1-9或14-168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4基因及該ADRB2基因之表現水準，其中若該CXCR4基因及該ADRB2基因之表現水準大於該CXCR4基因及該ADRB2基因之相應參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現CXCR4且表現ADRB2之癌症。
  182. 如請求項181之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現CXCR4之癌症及表現ADRB2之癌症。
  183. 如請求項181或182之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
  184. 如請求項181或182之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
  185. 如請求項181或182之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
  186. 如請求項181-185中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中在確定該CXCR4基因表現水準及該ADRB2基因表現水準大於該等相應參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
  187. 如請求項1-9或14-168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中該CXCR4蛋白之表現水準，其中若該表現水準大於該CXCR4蛋白之參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現CXCR4之癌症。
  188. 如請求項187之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現CXCR4之癌症。
  189. 如請求項187或188之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
  190. 如請求項187或188之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
  191. 如請求項187或188之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4表現水準大於參考水準。
  192. 如請求項187-191中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，在確定該CXCR4蛋白表現水準大於該參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
  193. 如請求項1-9或14-168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中之該ADRB2蛋白之表現水準，其中若該表現水準大於該ADRB2蛋白之參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現ADRB2之癌症。
  194. 如請求項193之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現ADRB2之癌症。
  195. 如請求項193或194之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
  196. 如請求項193或194之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
  197. 如請求項193或194之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該ADRB2表現水準大於參考水準。
  198. 如請求項193-197中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，在確定該ADRB2蛋白表現水準大於該參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
  199. 如請求項1-9或14-168中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該方法或用途進一步包含確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4蛋白及該ADRB2蛋白之表現水準，其中若該CXCR4蛋白及該ADRB2蛋白之表現水準大於該CXCR4蛋白及該ADRB2蛋白之相應參考水準，則確定該細胞、該個體或從該個體獲得之該樣品具有表現CXCR4且表現ADRB2之癌症。
  200. 如請求項199之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該癌症為表現CXCR4之癌症及表現ADRB2之癌症。
  201. 如請求項199或200之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該細胞中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
  202. 如請求項199或200之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該個體中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
  203. 如請求項199或200之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中從該個體獲得之該樣品中之該CXCR4表現水準及該ADRB2表現水準大於相應參考水準。
  204. 如請求項199-203中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中在確定該CXCR4蛋白表現水準及該ADRB2蛋白表現水準大於該等相應參考水準之後，該方法或用途包含投與CXCR4抑制劑及ADRB2抑制劑，其中該CXCR4抑制劑為布利沙福。
  205. 如請求項1-204中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該ADRB2抑制劑為卡維地洛。
  206. 如請求項1-205中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊為用CXCR4促效劑及ADRB2促效劑對該CXCR4-ADRB2異聚體進行共刺激之增強之反應。
  207. 如請求項1-206中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之下游傳訊為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之癌症進展。
  208. 如請求項207之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之細胞增殖。
  209. 如請求項207或208之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之細胞遷移。
  210. 如請求項207-209中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之轉移。
  211. 如請求項207-210中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之腫瘤生長。
  212. 如請求項207-211中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該增強之癌症進展為具有一或多個含有該CXCR4-ADRB2異聚體之細胞之該個體中之增強之血管生成。
  213. 如請求項207-212中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該一或多個細胞為一或多個癌細胞。
  214. 如請求項207-213中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該一或多個細胞來源於個體。
  215. 如請求項207-214中任一項之用於抑制之方法、用於治療之方法、所使用之醫藥套組、所使用之醫藥組合物或醫藥組合物，其中該一或多個細胞來自從個體獲得之生物樣品。
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