TW202042816A - 組合吡衍生物與使細胞內的吡衍生物核糖三磷酸體的量增加的化合物而成的ｒｎａ病毒感染症治療劑 - Google Patents

組合吡衍生物與使細胞內的吡衍生物核糖三磷酸體的量增加的化合物而成的ｒｎａ病毒感染症治療劑 Download PDF

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Abstract

本發明之課題為提供對RNA病毒顯示效果的RNA病毒感染症治療劑，其包含吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物與特定化合物的新穎組合；以及提供可同時增強對複數種RNA病毒之抗病毒活性的RNA病毒感染症治療劑，其包含包含吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物與特定化合物的組合。若依照本發明，可提供一種RNA病毒感染症治療劑，其係將吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽與可使細胞內的吡

Description

組合吡衍生物與使細胞內的吡衍生物核糖三磷酸體的量增加的化合物而成的RNA病毒感染症治療劑
本發明係關於將吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物與使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物組合而成的RNA病毒感染症治療劑。
流感病毒(Influenza virus)或伊波拉病毒(Ebola virus)等RNA病毒為各種感染症之原因，現正尋求對抗其之策略。另一方面，就對於許多RNA病毒具有廣泛抗病毒活性之化合物而言，已知有法比拉韋(fabipiravir)(以下，亦稱為T-705)等之吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物(非專利文獻1)。
若能增強此等吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物之活性，在作為醫藥上將更為有用。迄今，已有報導藉由將法比拉韋與神經胺酸酶抑制劑組合，對流感病毒顯示相乘之效果(專利文獻1)。又，報導藉由將法比拉韋與吉西他濱(gemcitabine)或奧巴克拉(obatoclax)組合，亦可對伊波拉病毒顯示相乘之效果(專利文獻2)。
然而，RNA病毒經由進化而獲得耐藥性。例如，已知有神經胺酸酶抑制劑耐性的流感病毒(非專利文獻2)。為了對抗其所獲得之此種耐性，必須經常尋求對RNA病毒顯示效果的新穎化合物組合。
又如前述，對許多RNA病毒顯示廣泛效果為法比拉韋的特徴。然而，仍不知可同時增強對複數種RNA病毒之抗病毒活性的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物與特定化合物之組合。
[先前技術文獻] [專利文獻]
[專利文獻1]國際公開第08/099874號小冊子 [專利文獻2]國際公開第2007/202789號小冊子 [非專利文獻]
[非專利文獻1] Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci. 93, 449-463. [非專利文獻2] CDC Health Advisory：CDC issues interim recommendations for the use of influenza antivirals in the setting of oseltamivir Resistance among circulating influenza A (H1N1) viruses, 2008-09 Season.
[發明欲解決之課題]
本發明之課題，為提供一種RNA病毒感染症治療劑，其包含對RNA病毒顯示效果的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物與特定之化合物的新組合。又本發明之其他課題，為提供一種RNA病毒感染症治療劑，其包含可同時增強對複數種RNA病毒之抗病毒活性的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物與特定化合物的組合。 [用以解決課題之手段]
在此種狀況下，本發明人進行專心檢討的結果，發現若將通式[1]所表示之吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽
Figure 02_image003
(式中，R1 及R2 相同或相異地，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)，與可使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物，尤其是選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤(thiopurin)系代謝拮抗劑、噻唑呋林(tiazofurin)、烷基化劑及黃嘌呤(xanthine)衍生物之群組中的一種以上化合物組合使用，可使對複數種RNA病毒之抗病毒活性同時增強，於是完成本發明。
亦即，本發明提供以下項目。 [1]一種RNA病毒感染症治療劑，其係將通式[1]所表示的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽
Figure 02_image005
(式中，R1 及R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)，與可使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物組合而成。 [2]如[1]記載之治療劑，其中R1 為氫原子，R2 為氟原子或氫原子，及R3 為氫原子。 [3]如[2]記載之治療劑，其中R1 為氫原子，R2 為氟原子，及R3 為氫原子。 [4]如[1]至[3]中任一項記載之治療劑，其中使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物為選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物之群組中的一種以上之化合物。 [5]如[4]記載之治療劑，其中 葉酸拮抗劑為甲胺蝶呤(methotrexate)或普拉曲沙(pralatrexate)； 硫嘌呤系代謝拮抗劑為通式[2]所表示的巰基嘌呤衍生物：
Figure 02_image007
(式中，R4 表示氫原子或可經保護之胺基；R5 表示氫原子或通式[3]
Figure 02_image009
(式中，R6 表示氫原子、C1-6 烷基或羧基；R7 表示氫原子、C1-6 烷基、苄基或對硝基苄基))； 烷基化劑為替莫唑胺(temozolomide)； 黃嘌呤衍生物為茶鹼(theophylline)。 [6]如[5]記載之治療劑，其中硫嘌呤系代謝拮抗劑為6-巰基嘌呤、氮雜硫嘌呤或6-硫鳥嘌呤。 [7]如[1]至[6]中任一項記載之治療劑，其係將一種以上之其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒作用的藥劑進一步組合而成。 [8]如[7]記載之治療劑，其中其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒作用的藥劑為利巴韋林(ribavirin)。 [9]一種RNA病毒感染症治療劑，其係將通式[1]所表示的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽
Figure 02_image011
(式中，R1 及R2 相同或相異地表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)，與選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物之群組中的一種以上化合物組合而成。 [10]一種RNA病毒感染症治療劑，其含有通式[1]所表示的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽
Figure 02_image013
(式中，R1 、R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)，該RNA病毒感染症治療劑係與可使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物併用。 [11]如[10]記載之治療劑，其中R1 為氫原子，R2 為氟原子或氫原子，及R3 為氫原子。 [12]如[11]記載之治療劑，其中R1 為氫原子，R2 為氟原子，及R3 為氫原子。 [13]如[10]至[12]中任一項記載之治療劑，其中可使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物為選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物之群組中的一種以上之化合物。 [14]如[13]記載之治療劑，其中 葉酸拮抗劑為甲胺蝶呤或普拉曲沙； 硫嘌呤系代謝拮抗劑為通式[2]所表示的巰基嘌呤衍生物
Figure 02_image015
(式中，R4 表示氫原子或可經保護之胺基；R5 表示氫原子或通式[3]
Figure 02_image017
(式中，R6 表示氫原子、C1-6 烷基或羧基；R7 表示氫原子、C1-6 烷基、苄基或對硝基苄基)； 烷基化劑為替莫唑胺； 黃嘌呤衍生物為茶鹼。 [15]如[14]記載之治療劑，其中硫嘌呤系代謝拮抗劑為6-巰基嘌呤、氮雜硫嘌呤或6-硫鳥嘌呤。 [16]一種RNA病毒感染症治療劑，其含有通式[1]所表示的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽
Figure 02_image019
(式中，R1 、R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)；該RNA病毒感染症治療劑係與選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物之群組中的一種以上之化合物併用。 [17]如[10]至[15]中任一項記載之治療劑，其進一步與一種以上其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用的藥劑併用。 [18]如[17]記載之治療劑，其中其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用之藥劑為利巴韋林。
本發明進一步提供以下項目。 [A]一種RNA病毒感染症之治療法，其包含將通式[1]所表示的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽
Figure 02_image021
(式中，R1 及R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)，及使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物投予至對象。 [B]一種通式[1]所表示的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽
Figure 02_image023
(式中，R1 及R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)，與使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物之用途，其係用於製造RNA病毒感染症治療藥。 [C]一種通式[1]所表示的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽
Figure 02_image025
(式中，R1 及R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)，與使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加之化合物的組合，其係用於RNA病毒感染症之治療。 [發明之效果]
組合吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽與使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物之RNA病毒感染症治療劑，對RNA病毒感染症的治療或預防等之處置有用。
[用以實施發明的形態]
以下，詳細說明本發明。 鹵素原子意指氟原子、氯原子、溴原子及碘原子。C1-6 烷基意指甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、戊基、異戊基、2-甲基丁基、2-戊基、3-戊基及己基等直鏈狀或分枝鏈狀的C1-6 烷基。
就胺基保護基而言，包含所有通常能作為胺基保護基使用之基，例如，可列舉W.古林(W. Greene)氏等「有機合成中的保護基」(Protective Groups in Organic Synthesis)第5版，第895～1193頁，2014年，約翰威立公司(John Wiley & Sons,INC.)所記載的基。
具體而言，例如，可列舉醯基、烷氧基羰基、芳基烷氧基羰基、芳基氧基羰基、芳基烷基、烷氧基烷基、芳基烷氧基烷基、芳硫基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、二烷基胺基亞烷基、芳基亞烷基、含氮雜環式亞烷基、亞環烷基、二芳基磷醯基、二芳基烷基磷醯基、含氧雜環式烷基及經取代矽烷基等。
就通式[1]的化合物之鹽而言，可列舉通常所知的羥基之鹽。例如，可列舉與鈉及鉀等鹼金屬的鹽；與鈣及鎂等鹼土金屬的鹽；銨鹽；以及與三甲基胺、三乙基胺、三丁基胺、N-甲基哌啶、N-甲基
Figure 108147521-A0304-12-02
啉、二乙基胺、二環己基胺、普魯卡因、二苄基胺、N-苄基-β-苯乙基胺、1-艾非那胺(1-ephenamine)及N,N'-二苄基伸乙基二胺等含氮有機鹼之鹽等。就較佳之鹽而言，可列舉藥理學上可容許之鹽，以與鈉之鹽為更佳。
在通式[1]之化合物中，較佳R1 為氫原子；R2 為氟原子；R3 為氫原子。再者，較佳之化合物為T-705。
或者，在通式[1]之化合物中，較佳R1 為氫原子；R2 為氫原子；R3 為氫原子。較佳之此化合物為T-1105。
通式[1]之化合物可藉由本身周知之方法組合而製造，例如，可依照國際公開第00/10569號小冊子記載之製造法製造。
通式[1]所表示之吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽，例如T-705，已知在細胞內受到核糖基磷酸化，其結果生成的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體顯示抗病毒作用(Antimicrob Agents Chemother. 2005；49(3)：981-6.)。其中，吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體意指通式[4]所表示之化合物
Figure 02_image027
(式中，R1 及R2 相同或相異地表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)。
使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物，意指與通式[1]所表示之吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽組合而使用時，經由將細胞內之酵素或代謝途徑活化或抑制等，結果使細胞內的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物。與未組合之情況比較，以使吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之濃度增加1.5倍以上為較佳，以增加2倍以上為更佳。就此種化合物而言，例如，可列舉葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物。再者，葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑及噻唑呋林為代謝拮抗劑。
葉酸拮抗劑意指甲胺蝶呤及普拉曲沙等抑制DNA合成中必要之葉酸代謝酵素並抑制細胞增殖的化合物。以甲胺蝶呤及普拉曲沙為較佳。
葉酸拮抗劑可藉由組合本身周知之方法而製造，可使用市售者。
硫嘌呤系代謝拮抗劑意指6-巰基嘌呤、氮雜硫嘌呤及6-硫鳥嘌呤等具有硫嘌呤骨架的代謝拮抗劑。硫嘌呤系代謝拮抗劑以通式[2]所示的硫嘌呤系代謝拮抗劑為較佳。在通式[2]之化合物中，較佳R4 為氫原子或胺基，R5 為氫原子或通式[3]所表示之基。在通式[3]所表示之基中，較佳R6 為氫原子，R7 為甲基。
就特佳之硫嘌呤系代謝拮抗劑而言，可列舉6-巰基嘌呤、氮雜硫嘌呤及6-硫鳥嘌呤，以6-巰基嘌呤為最佳。
硫嘌呤系代謝拮抗劑可藉由組合本身周知之方法而製造，或者亦可使用市售者。
烷基化劑意指與DNA相互作用，抑制細胞增殖的化合物，例如，替莫唑胺、氮芥類(hitrogen mustands)、鹽酸氮芥-N-氧化物、氮芥苯丁酸(chlorambucil)、環磷醯胺、依弗醯胺(ifosfamide)、噻替哌(thiotepa)、卡巴醌(carboquone)、甲磺英丙舒凡(improsulfan tosylate)、白消安(busulfan)、鹽酸尼莫斯汀(nimustine hydrochloride)、二溴甘露醇(mitobronitol)，美法崙(melphalan)、達卡巴仁(dacarbazine)、雷尼莫司汀(ranimustine)、磷酸雌莫司汀(estramustine)鈉、三伸乙基三聚氰胺、卡莫斯汀(carmustine)、洛莫斯汀(lomustine)、鏈佐黴素(streptozocin)、哌泊溴烷(pipobroman)、依托糖苷(etogluside)、卡鉑(carboplatin)、順鉑(cisplatin)、米波鉑(miboplatin)、奈達鉑(nedaplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、六甲蜜胺(altretamine)、氨莫司汀(ambamustine)、鹽酸二溴螺氯銨(dibrospidium)、福莫斯汀(fotemustine)、潑尼莫斯汀(prednimustine)、嘌嘧替派(pumitepa)、苯達莫斯汀(ribomustine)、蘇消安(treosulfan)、曲磷胺(trofosfamide)、淨司他丁替馬拉美(zinostatin stimalamer)、阿德列辛(adozelesin)、半脫胺亞硝脲(cystemustin)及比折來新(bizelesin)。以替莫唑胺為較佳。
烷基化劑可藉由組合本身周知之方法而製造，或者亦可使用市售者。
黃嘌呤衍生物意指具有黃嘌呤骨架之化合物，例如，可列舉黃嘌呤、茶鹼、咖啡因、副黃嘌呤(paraxanthine)、可可豆鹼(theobromine)、多索茶鹼(doxofylline)、恩普洛芬(enprofilin)、胺基茶鹼、膽鹼茶鹼酯、二羥丙茶鹼(diprophylline)及羥丙茶鹼(proxyphylline)。以茶鹼為較佳。
黃嘌呤衍生物可藉由組合本身周知之方法而製造，或者亦可使用市售者。
在本發明中，組合使用吡
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衍生物與使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物。組合意指包含將吡
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衍生物，及使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物，同時地，個別地或以特定順序投予之形式(併用)及形成混合物(摻合劑)之形式。
亦即，不僅意指吡
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衍生物或其鹽及使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物之投予時期為相同，吡
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衍生物或其鹽及使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物於1次投予時程中投予之形式亦包含在「併用」中。吡
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衍生物或其鹽及使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物之投予途徑，可相同，亦可相異。
吡
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衍生物或其鹽與使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物之量比，只要為能使吡
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衍生物或其鹽之抗病毒活性增強的量比即可。較佳而言，吡
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衍生物或其鹽：使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物(莫耳比)為1：500～500：1，更佳為1：200～200：1，進一步更佳為1：50～50：1，再進一步更佳為1：10～10：1。
在使用本發明之吡
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衍生物或其鹽及使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物之情況，可將通常製劑化所使用的賦形劑、載劑及稀釋劑等之製劑輔助劑適宜混合，此等可依照常法，形成錠劑、膠囊劑、散劑、糖漿劑、顆粒劑、丸劑、懸浮劑、乳劑、液劑、粉體製劑、栓劑、點眼劑、點鼻劑、點耳劑、貼附劑、軟膏劑或注射劑等形式。
在作為合劑使用之情況，只要將吡
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衍生物或其鹽及使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物，於上述製劑化過程中混合，均勻化後，成為適當之製劑。
本發明之RNA病毒感染症治療劑的投予途徑，無特別限定，可藉由靜脈內、經口、肌肉內、皮下、吸入、噴霧或其他投予途徑投予。又，吡
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衍生物或其鹽，可與使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物同時投予，或以特定之順序投予。
投予方法、投予量及投予次數，可依據患者之年齡、體重及症狀而適宜選擇。通常，對於成人，藉由經口或非經口(例如，注射、點滴及對直腸部位之投予等)投予，就為有效成分的吡
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衍生物或其鹽之量而言，為0.1～1000mg/kg，較佳為0.1～100mg/kg，能以1日1次或分為數次投予。
本發明之RNA病毒感染症治療劑，在RNA病毒感染症之治療或預防等之處置上有用。
RNA病毒感染症意指以流感病毒、副流感病毒(Parainfluenza virus)、布尼亞病毒(Bunyavirus)(克里米亞剛果熱病毒(Crimean-Congo fever virus)、東非瑞夫特河谷熱病毒(Rift Valley fever virus)、拉克羅斯腦炎病毒(Lacrosse encephalitis virus)、多伯伐病毒(Dobrava virus)、馬波拉耳病毒(Maporal virus)、展望山病毒(Prospect Hill virus)、安第斯病毒(Andes virus)、糠蚊熱病毒(Sandfly fever virus)、哈特蘭病毒(Heartland virus)、蓬塔特羅病毒(Punta toro virus)、重症熱性血小板減少症候群病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus)等)、沙粒狀病毒(Arenavirus) 胡寧病毒(Junin virus)、皮欣德病毒(Pichinde virus)、塔卡里伯病毒(Tacaribe virus)、瓜那瑞托病毒(Guanarito virus)、馬秋波病毒(Machupo virus)、淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒(Lymphocytic choriomeningitis virus)、拉薩熱病毒(Lassa fever virus)等)、絲狀病毒(Filovirus) 伊波拉病毒(Ebola virus)、馬爾堡病毒(Marburg virus)等)、狂犬病病毒(Rabies virus)、人類間質肺炎病毒(human metapneumovirus)、RS病毒、立百病毒(Nipah virus)、亨德拉病毒(Hendra virus)、麻疹病毒(measles virus)、A型肝炎病毒、C型肝炎病毒、E型肝炎病毒、屈公病病毒(Chikungunya virus)、西部馬腦炎病毒(Western equine encephalitis virus)、委內瑞拉腦炎病毒(Venezuelan encephalitis virus)、東部馬腦炎病毒(Eastern equine encephalitis virus)、諾羅病毒(norovirus)、脊髓灰白質炎病毒(poliovirus)、埃可病毒(echovirus)、柯沙奇病毒(Coxsackievirus)、腸病毒(enterovirus)、鼻病毒(rhinovirus)、輪狀病毒(rotavirus)、新城病病毒(Newcastle disease virus)、腮腺炎病毒(mumps virus)、水皰性口腔炎病毒(vesicular stomatitis virus)、日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus)、壁蝨媒介性黃病毒(tick-borne Flavivirus)、黄熱病病毒(yellow fever virus)、登革熱病毒(Dengue virus)、西尼羅病毒(West Nile virus)或茲卡熱病毒(Zika virus)等RNA病毒為原因的感染症。本發明較佳可使用作為流感病毒、狂犬病病毒、拉薩熱病毒、布尼亞病毒(克里米亞剛果熱病毒、東非瑞夫特河谷熱病毒、重症熱性血小板減少症候群病毒等)及絲狀病毒(伊波拉病毒、馬爾堡病毒等)之感染症治療劑，特佳可使用作為流感感染症治療劑。
本發明之RNA病毒感染症治療劑，為了作用之增強等目的，可進一步與其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用的藥劑組合使用。其他RNA病毒感染症治療劑意指針對RNA病毒感染症的治療劑，例如，可列舉流感治療劑、C型肝炎治療劑、絲狀病毒感染症治療劑等。就流感治療劑而言，可列舉金剛烷胺(amantadine)、金剛乙胺(rimantadine)、奧司他韋(oseltamivir)、扎那米韋(zanamivir)、帕拉米韋(peramivir)、拉尼米韋(laninaminir)、纈沙韋(valoxavir)等。就C型肝炎治療劑而言，可列舉利巴韋林、聚乙二醇化干擾素、特拉匹韋(telaprevir)、維取力(boceprevir)等。就絲狀病毒感染症治療劑而言，可列舉利巴韋林、帕洛珠單抗(palivizumab)、莫他珠單抗(motavizumab)、RSV-IGIV、MEDI-557、A-60444、MDT-637、BMS-433771、胺碘酮(amiodarone)、決奈達隆(dronedarone)、維拉帕米(verapamil)、伊波拉回復期血漿(Ebola Convalescent Plasma)、TKM-100201、BCX4430、FGI-106、TKM-伊波拉、ZMapp、rNAPc2、OS-2966、MVA-BN filo、布林西朵福韋(brincidofovir)、Ad26-ZEBOV等。顯示抗RNA病毒作用之藥劑，例如，可列舉麥考酚酸(mucophenolic acid)、達托黴素(daptomycin)、耐克羅(niclosamide)、阿奇黴素(azithromycin)，新生黴素(novobiocin)、氯喹(chloroquine)、美金剛(memantine)、丙氯哌嗪(prochloperazine)、氯環定(chlorcyclidine)、馬尼地平(manidipine)、GS-5734、伊馬替尼(Imatinib)、氯丙嗪(chlorpromazine)、硝唑尼特(nitazoxanide)等(Journal of Young Pharmacists. 2019；11(2)：117-121.)。以與利巴韋林組合為較佳。
在將本發明之RNA病毒感染症治療劑與其他RNA病毒感染症治療劑或抗RNA病毒抑制作用組合使用的情況，吡
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衍生物或其鹽與使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物之量比，只要為可使吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽之抗病毒活性增強的量比即可。較佳的吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽：使細胞內的吡
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衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物(莫耳比)為1：500～500：1，更佳為1：250～250：1，進一步更佳為1：150～150：1。
本發明之RNA病毒感染症治療劑與其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用之藥劑的量比，只要使本發明之RNA病毒感染症治療劑之抗病毒活性增強的量比即可。較佳的本發明之RNA病毒感染症治療劑：其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用之藥劑(莫耳比)為1：100～100：1，更佳為1：50～50：1，進一步更佳為1：10～10：1，再進一步更佳為1：5～5：1。 [實施例]
繼而，列舉實施例，說明本發明，然而本發明不受此等之限定。
試驗例1 藉由病毒之RNA依存性RNA聚合酶(RdRp)複合體之複製子(replicon)活性，調查將吡
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衍生物與代謝拮抗劑組合時對RNA病毒的效果。為了進行複製子活性評價，參考周知之方法(Neumann, G.等，J. Virol. 74：547-551 (2000))，構築使用細胞之報告子的檢定系統。在該檢定系統中，藉由為報告子蛋白質的螢光素酶(Luc)之活性，評價複製子活性。
就吡
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衍生物而言，選擇6-氟-3-羥基-2-吡
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羧醯胺(T-705)。就代謝拮抗劑而言，選擇葉酸拮抗劑之甲胺蝶呤及普拉曲沙；就硫嘌呤系代謝拮抗劑而言，選擇6-巰基嘌呤、氮雜硫嘌呤及硫鳥苷。就RNA病毒而言，選擇流感病毒。
(1)報告子檢定系統之構築 (1-1)野生型病毒蛋白質基因之選殖 依照上述周知文獻記載之方法，將編碼病毒蛋白質PA、PB1、PB2、NP之基因，藉由RT-PCR法自Influenza A/PR/8/34(H1N1)株擴增，並選殖入pcDNA3.1載體中。將所得到之pcDNA3.1/PR8_PA質體DNA、pcDNA3.1/PR8_PB1質體DNA、pcDNA3.1/PR8_PB2質體DNA及pcDNA3.1/PR8_NP質體DNA分別命名為野生型PA DNA、野生型PB1 DNA、野生型PB2 DNA及野生型NP DNA。
(1-2)報告子質體之製作 繼而，製作包含報告子基因之質體DNA。具體而言，從5´末端至3´末端，製作由編碼來自人類之聚合酶I啟動子的區域(Jones, M. H.等，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85： 669-673 (1988))、Influenza A/PR/8/34 (H1N1)株之NTR所挾持之Luc基因、編碼來自小鼠之聚合酶I終止子的區域(Grummt, I.等，Cell 45：837-846(1986))連接而成的DNA，選殖入pcDNA3.1載體，得到報告子質體pcDNA3.1/ polI_NTR_RhLuc。
(1-3)293T細胞之調製 (1-3-1)293T細胞之培養 細胞係使用表現SV40 large T抗原的人類胎兒腎細胞293T細胞(以下，稱為293T細胞)。在添加10%胎牛血清之DMEM培養基中，於5%二氧化碳條件，37℃下進行繼代培養的293T細胞，藉由伸乙基二胺四乙酸胰蛋白酶法剝離，播種以成為2.4×107 個細胞/225cm2 燒瓶。然後，於5%二氧化碳條件下，在37℃培養一夜，得到單層之293T細胞。
(1-3-2)對293T細胞之轉導 對於3mL之Opti-MEM(Thermo Fisher Scientific公司製)，將野生型PA DNA調整成0.96μg，野生型PB1 DNA調整成9.6μg，野生型PB2 DNA調整成9.6μg，野生型NP DNA調整成9.6μg及2種報告子質體pcDNA3.1/polI_NTR_RhLuc調整成9.6μg，(用於確認DNA導入是否成功)pGL4.54(Promega公司製、＃E5061)調整成9.6μg，添加Lipofectamine LTX Reagent with PLUS Reagent (Thermo Fisher Scientific公司製)所附加的49μL之PLUS試劑。又，於2.9mL之Opti-MEM中添加0.23mL之Lipofectamine LTX試劑，並放置5分鐘。然後，將二液以體積比成為1:1之方式混合，於室溫放置15分鐘。將上述混合液以成為6mL/225cm2 燒瓶之量，添加於293T細胞之培養燒瓶中，放置約6小時，將流感病毒之RdRp、NP及報告子質體導入細胞中。
(2)T-705與代謝拮抗劑之組合所導致之複製子抑制活性的測定 (2-1)對細胞之藥劑添加及培養
將轉導入之293T細胞藉由伸乙基二胺四乙酸胰蛋白酶法剝離，將以下(A)至(D)中任一種試驗液播種於以10μL/孔添加之384孔培養盤(Corning公司製，＃3707)中，以成為1.5×104 cells/10μL/孔。又，就未添加細胞之空白組而言，設置將以下(A)或(D)之液添加於孔中的空白組孔。然後，在5%二氧化碳條件下，於37℃培養約20小時。
(A)含有10μM T-705及0.1%DMSO之培養基 (B)含有代謝拮抗劑單劑(最終濃度：10μM～0.08μM，從10μM以公比5分5階段稀釋)及0.1%DMSO之培養基 (C)含有T-705(最終濃度：10μM)、代謝拮抗劑(最終濃度：10μM～0.08μM，從10μM以公比5分5階段稀釋)及0.1%DMSO之培養基 (D)含有0.1%DMSO之培養基 (A)至(D)中任一者均以添加10%胎牛血清之DMEM培養基稀釋及混合。
(2-2)Luc活性之測定及複製子抑制活性之評價 在Luc活性之測定中，使用Dual-Glo螢光素酶檢定系統(Promega公司製)。在約20小時之培養後，將該System所附加之Dual-Glo試劑以20μL/孔添加，於室溫攪拌10分鐘以上，將細胞溶解。然後，藉由微量盤分析儀(Microplate Reader)(Perkin Elmer公司製，2104 EnVision)測定發光強度。繼而，將該系統所附加之Stop&Glo Reagent以20μL/孔添加，在室溫攪拌10分鐘以上後，藉由微量盤分析儀(同上)測定發光強度。以例數為1來實施。從以下所示之式，算出複製子反應率及複製子抑制率。
[未添加T-705時之複製子反應率(%)]=[(代謝拮抗劑添加孔之平均發光強度)-(含有0.1%DMSO之培養基添加孔的平均發光強度)]/[(藥劑無添加孔之平均發光強度)-(含有0.1%DMSO之培養基添加孔的平均發光強度)]×100
[添加T-705時之複製子反應率(%)]=[(代謝拮抗劑與T-705添加孔之平均發光強度)-(含有10μM T-705及0.1%DMSO之培養基添加孔的平均發光強度)]/[T-705添加孔之平均發光強度)-(含有10μM T-705及0.1%DMSO之培養基添加孔的平均發光強度)]×100
複製子抑制率(%)=100-[複製子反應率(%)]
其結果，如表1所示，可知縱使T-705單劑係為不抑制之濃度，但藉由添加葉酸拮抗劑或硫嘌呤製劑，可使T-705之複製子抑制率提高。再者，硫鳥苷為6-硫鳥嘌呤與核糖環結合而成之化合物。在細胞內，由於6-硫鳥嘌呤被認為會被代謝成硫鳥苷(或硫鳥苷之代謝產物)，所以研判6-硫鳥嘌呤亦與硫鳥苷同樣，可使T-705之複製子抑制率提高。 [表1] 藉由T-705與代謝拮抗劑之組合所導致的T-705複製子抑制率(%)
併用藥劑 T-705濃度 代謝拮抗劑濃度(μM)
(μM) 0 0.08 0.4 2.0 10
甲胺蝶呤 0 -3.3 1.3 18 20 19
10 -7.8 11 36 34 37
普拉曲沙 0 -2.3 24 23 24 23
10 0.58 33 33 33 35
6-巰基嘌呤 0 -2.3 -1.1 1.5 2.7 8.2
10 2.2 1.8 3.7 17 38
氮雜硫嘌呤 0 -0.98 3.1 -6.1 3.4 5.8
10 -1.8 3.3 1.3 5.9 26
硫鳥苷 0 -7.5 -4.8 -5.4 -3.7 12
10 -2.3 -1.2 ※ 14 23
※由於錯誤而無法取得數據。
(3)藉由T-705與代謝拮抗劑之組合所導致的複製子50%抑制濃度之測定 與(2-1)同樣地，使用以下(E)至(H)之試驗液，進行對細胞之藥劑添加及培養。與(2-2)同樣地，評價複製子抑制活性。
(E)含有T-705單劑(最終濃度：1.4μM～1000μM，從1000μM以公比3分8階段稀釋)及0.1%DMSO之培養基 (F)含有代謝拮抗劑單劑(最終濃度：0.03μM～200μM，從200μM以公比3分10階段稀釋，或從20μM以公比2分10階段稀釋)及0.1%DMSO之培養基 (G)含有T-705(最終濃度：1.4μM～1000μM，從1000μM以公比3分8階段稀釋)、代謝拮抗劑(最終濃度：0.03μM～200μM，從200μM以公比3分10階段稀釋，或從20μM以公比2分10階段稀釋)及0.1%DMSO之培養基 (H)含有0.1%DMSO之培養基
50%抑制濃度之計算，係使用XLfit(5.3.1.3版)之劑量反應單點模型(Sigmoidal Dose-Response Model；[擬合(fit)=(A+((B-A)/(1+((C/x)＾ D))))])。將與各代謝拮抗劑併用的T-705之50%抑制濃度示於表2。可知藉由T-705與代謝拮抗劑之組合，顯示比T-705單劑低的50%抑制濃度。 [表2]
6-巰基嘌呤濃度[μM] 0 0.03 0.09 0.27 0.82 2.5 7.4 22 67 200
T-705之50%抑制濃度[μM] 310 303 275 219 163 67 16 2.3 5.1 23
　
甲胺蝶呤濃度[μM] 0 0.08 0.16 0.31 0.63 1.25 2.5 5 10 20
T-705之50%抑制濃度[μM] 314 46 43 41 47 40 38 39 28 30
　
普拉曲沙濃度[μM] 0 0.08 0.16 0.31 0.63 1.25 2.5 5 10 20
T-705之50%抑制濃度[μM] 304 32 31 25 29 18 24 25 22 23
在本試驗系統中，6-巰基嘌呤單劑(>200μM)、甲胺蝶呤單劑(>20μM)、普拉曲沙單劑(>20μM)方面，複製子抑制率未達到50%，未見抑制活性。藉由T-705及代謝拮抗劑之組合，與T-705單劑之情況相比，複製子抑制活性顯著地增強。
試驗例2 關於吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物與代謝拮抗劑之併用效果，以病毒之細胞感染模型，進一步進行試驗。
就吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物而言，選擇T-705。就代謝拮抗劑而言，選擇6-巰基嘌呤。就RNA病毒而言，選擇流感病毒。
(1)MDCK細胞之培養 將在培養液中添加10%胎牛血清之伊格爾(Eagle)MEM培養基中，5%二氧化碳條件下，於37℃進行繼代培養的馬丁達比犬腎(Madin-Darby Caine Kidney)(以下，稱為MDCK)細胞，藉由伸乙基二胺四乙酸胰蛋白酶法剝離，藉由相同培養基以成為100μL中包含2×104 個細胞的方式調製的懸浮液，播種於96孔培養盤。在5%二氧化碳條件下，於37℃進行一夜培養，得到成為單層的MDCK細胞。
(2)流感病毒感染及藥劑添加 就試驗培養基而言，使用在添加60μg/mL之卡那黴素(kanamycin)的伊格爾MEM培養基中，以成為1μg/mL之方式添加L-1-甲苯磺醯胺-2-苯基乙基氯甲基酮(TPCK)處理胰蛋白酶的培養基。去除(1)所得到之MDCK細胞的培養上清液，以伊格爾MEM培養基洗滌後，在各孔中添加以下(A)～(C)。藥劑添加後，於5%二氧化碳條件下，在35℃培養3～4日。
(A)100μL之添加有60μg/mL之卡那黴素的伊格爾MEM培養基 (B)50μL之以伊格爾MEM培養基調整成4.0×103 PFU/mL的流感病毒(PR/8(H1N1))液，其中該伊格爾MEM培養基包含經試驗培養基4倍濃度之TPCK處理的胰蛋白酶 (C) 50μL之伊格爾MEM培養基，其包含設定濃度的4倍濃度之T-705及6-巰基嘌呤之各設定濃度組合， T-705設定濃度(μM)：0、0.01、1、3、10、30 6-巰基嘌呤設定濃度(μM)：0、0.1、0.3、1、3、10
(3)細胞變性效果(CPE)之判定 藉由以下之方法判定伴隨流感病毒之增殖而出現的細胞變性效果(CPE)。
培養結束後，在各孔中添加50μL之100%福馬林液，進行病毒之去活化及細胞固定。於室溫靜置2小時以上後，添加100μL/孔之0.005%亞甲藍(methylene blue)液，並於室溫靜置1小時。除去0.005%亞甲藍液，並用水輕輕洗淨後，使其風乾。然後，藉由微量盤分析儀(Tecan公司製，infinit M200)測定吸光度(660nm)。非感染對照組，係添加50μL之包含經試驗培養基4倍濃度之TPCK處理過之胰蛋白酶的伊格爾MEM培養基，代替流感病毒液，進行與試驗群同樣之操作，測定吸光度。空白組方面，係在未播種MDCK細胞之孔中，施行與無感染對照組同樣之操作，並測定吸光度。
試驗係以例數1實施3次(感染對照組為例數8)。以用平均值減去空白組之值所得的數值作為吸光度。從無感染對照組之吸光度減去感染對照組之吸光度的值，當作病毒增殖之完全抑制值，從以下所示之公式算出各試驗之CPE抑制率。
病毒增殖抑制率=[(單劑及併用作用時之吸光度)-(感染對照組之吸光度)]/[(無感染對照組之吸光度)-(感染對照組之吸光度)]
50%抑制濃度之計算，係使用Microsoft Office Excel 2007之FORECAST函數(一次回歸法)。
將6-巰基嘌呤添加時之T-705的50%CPE抑制濃度變化示於表3。和T-705單劑相較，與6-巰基嘌呤之組合，T-705之50%抑制濃度成為較低值。再者，於本試驗系統中，用6-巰基嘌呤(10μM)單劑，並未顯示CPE抑制效果。 [表3] 藉由添加6-巰基嘌呤所造成之T-705之50%抑制濃度變化
6-巰基嘌呤濃度 [μM] 0 0.1 0.3 1 3 10
T-705 50%抑制濃度 [μM] 1.97 1.83 1.32 0.77 0.70 0.38
藉由細胞感染模型，亦可確認：與T-705單劑之情況相比，使用T-705與代謝拮抗劑之組合，可使抗病毒活性增強。
試驗例3 使用與試驗例2相同之流感病毒細胞感染模型，關於吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物與代謝拮抗劑及其他RNA病毒感染症治療劑之併用效果，進一步進行試驗。
選擇T-705作為吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物。選擇6-巰基嘌呤作為代謝拮抗劑。選擇利巴韋林作為其他RNA病毒感染症治療劑，關於藥劑之設定濃度及CPE之判定，如以下之方法，進行試驗。
關於藥劑之設定濃度，如以下之方式設定。 T-705設定濃度(μM)：0、0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30 利巴韋林設定濃度(μM)：0、0.1、0.3、1、3、10、30、100 6-巰基嘌呤設定濃度(μM)：0、10
關於CPE之判定，將藉由亞甲藍液染色的培養盤以目視確認，判定顯示完全CPE抑制效果的最小藥劑濃度。
顯示T-705及利巴韋林單劑時之完全CPE抑制效果的最小藥劑濃度分別為3、30(μM)。又，顯示6-巰基嘌呤(10μM)添加時之T-705之完全CPE抑制效果的最小藥劑濃度為0.3(μM)。再者，顯示6-巰基嘌呤(10μM)及利巴韋林(3μM)添加時之T-705之完全CPE抑制效果的最小藥劑濃度為0.1(μM)。
與T-705單劑及T-705與代謝拮抗劑之組合的情況相比，藉由細胞感染模型可確認T-705與代謝拮抗劑及其他RNA病毒感染症治療劑之組合，可使抗病毒活性進一步增強。
試驗例4 藉由流感以外之病毒的細胞感染模型，使用為布尼亞病毒之蓬塔特羅病毒，進行與試驗例2同樣之試驗。選擇T-705作為吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物。選擇6-巰基嘌呤、氮雜硫嘌呤、替莫唑胺、茶鹼及噻唑呋林作為化合物。
(1)293T細胞之培養 細胞係使用293T細胞。將在添加有10%胎牛血清之DMEM培養基中，於5%二氧化碳條件下，於37℃進行繼代培養的293T細胞，藉由伸乙基二胺四乙酸胰蛋白酶法剝離，將以1mL相同培養基中包含1×105 個細胞之方式調製成的懸浮液播種於24孔培養盤中，在5%二氧化碳條件下，於37℃進行一夜培養。
(2)蓬塔特羅病毒(Punta Toro virus)感染及藥劑添加 去除(1)所得到的293T細胞之培養上清液，用伊格爾MEM培養基洗滌後，在各孔中，將調整成1.0×103 PFU/mL之蓬塔特羅病毒液以各0.1mL之量添加，在5%二氧化碳條件下，於37℃培養1小時。除去病毒液後，添加T-705單劑(最終濃度：20μM)、代謝拮抗劑(最終濃度：10μM)或混入T-705單劑(最終濃度：20μM)及代謝拮抗劑(最終濃度：10μM)且添加有1%胎牛血清之伊格爾MEM培養基，在5%二氧化碳條件下，於37℃培養3日。又，就感染對照組而言，加入添加有1%胎牛血清之伊格爾MEM培養基，以代替包含藥劑的培養基。
(3)蓬塔特羅病毒之定量 (3-1)Vero細胞之培養 將在培養液中添加10%胎牛血清之伊格爾MEM培養基中，於5%二氧化碳條件下，37℃進行繼代培養的猴腎Vero細胞，藉由伸乙基二胺四乙酸胰蛋白酶法剝離，並用添加有2%胎牛血清之伊格爾MEM培養基調製成100μL中包含2×104 個細胞的懸浮液，並將其播種於96孔培養盤中。在5%二氧化碳條件下，於37℃進行一夜培養，得到成為單層的Vero細胞。
(3-2)病毒之定量 在(3-1)所得到之Vero細胞中，各添加50μL(n=4)之原液及稀釋液，其中該稀釋液係將(2)中取得之病毒培養液藉由伊格爾MEM培養基，以公比為10，分5階段稀釋而成。在5%二氧化碳條件下，於37℃進行3～4日培養。
(3-3)病毒量之計算 培養結束後，在各孔中添加50μL之100%福馬林液，進行病毒之去活化及細胞固定。於室溫靜置2小時以上後，以100μL/孔添加0.005%亞甲藍液，並於室溫靜置1小時。除去0.005%亞甲藍液，用水輕輕洗淨後，使其風乾。然後，使用以下之Bohrens-Karber法的公式，算出各樣本之50%感染量的對數值(LogTCID50 )。將相對於感染對照組的病毒量降低效果，以⊿LogTCID50 表示。
LogTCID50 =D+h×d+0.5×d D：全部孔(n=4)為CPE陽性(陽性率=1)之最高稀釋倍率的常用對數 h：各孔之CPE陽性率(>1之情況) d：試料之稀釋倍率的常用對數
將結果示於表4。可確認藉由將T-705與化合物併用，⊿LogTCID50 增加。 [表4]
  T-705 6-巰基嘌呤 氮雜硫嘌呤 替莫唑胺 茶鹼 噻唑呋林
單劑時 1.0* 0.2 1.0 0.0 1.0 1.0
T-705併用時 - 5.5 5.0 2.0 2.25 2.25
*記載顯示相對於感染對照組之病毒量降低效果的⊿LogTCID50 值。
除試驗例2之流感病毒外，在蓬塔特羅病毒中，亦可確認藉由T-705與代謝拮抗劑之併用，可使抗病毒活性增強。又，可知藉由替莫唑胺、茶鹼及噻唑呋林與T-705併用，亦顯示優良的病毒量降低效果。
試驗例5 選擇T-1105作為吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物，選擇6-巰基嘌呤作為化合物，進行與試驗例4同樣之試驗。將結果示於表5。 [表5]
  T-1105 6-巰基嘌呤
單劑時 0.0 0.0
T-1105 併用時 - 2.5
與T-705同樣，亦可確認藉由T-1105與代謝拮抗劑之併用，可使抗病毒效果增強。
試驗例6 如前述，吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽在細胞內接受核糖基磷酸化。已知例如T-705，藉由從核糖基磷酸化產生的T-705-4-呋喃核糖基-5-磷酸鹽(T-705RTP)抑制病毒之RdRp蛋白質，而顯示抗病毒作用。為了確認試驗例1中所見之藉由6-巰基嘌呤使T-705之活性增強的效果，是否為藉由T-705RTP量之變化而產生者，測定在293T細胞中，於6-巰基嘌呤處理下的T-705RTP量。
(1)在293T細胞中於6-巰基嘌呤處理下之T-705RTP量的測定 (1-1)細胞內T-705RTP之萃取 將以5×105 個細胞播種於6孔培養盤之各孔中的293T細胞，在媒液(0.3%DMSO)或各種濃度之6-巰基嘌呤、T-705、或兩藥劑中，於5%二氧化碳條件下，在37℃培養24小時。
培養後，用2ml PBS洗淨後，加入300μl胰蛋白酶，於37℃靜置5分鐘，剝去細胞。繼而在細胞中添加400μl胰蛋白酶抑制劑並懸浮，再回收於1.5ml試管中。將細胞懸浮液以1,000rpm，4℃，離心2分鐘(MX-301，TOMY)，除去500μl上清液。繼而在細胞中添加1ml PBS使其再懸浮，從其中分取60μl於1.5ml試管中，作為細胞數測定用之樣本。從殘餘之細胞懸浮液中分取1ml於1.5ml試管中，作為T-705RTP萃取用。將分取之細胞懸浮液以2,000×g，4℃，離心2分鐘，並除去900μl之上清液。繼而，為了萃取T-705RTP，在懸浮液中添加500μl甲醇，使其充分懸浮。使用離心蒸發器(CVE-3100、EYELA)，於37℃使其蒸發乾涸。將樣本使用於隨後之LC/MS/MS分析。
(1-2)細胞數之測定及LC/MS/MS分析 進行細胞數之測定及LC/MS/MS分析，測定各樣本中之T-705RTP量。試驗方法係依照Matsuda S, Kasahara T. Genes Environ. 40：13.(2018)實施。將T-705RTP量之變化示於圖1。可知藉由6-巰基嘌呤，T-705處理後之細胞內T-705RTP量增加。
T-705之作用機構，亦即，在細胞內轉化為T-705RTP後，顯示抗病毒活性，若為T-705具有效果之病毒，不管病毒種類為何皆適用。由於藉由代謝拮抗劑，細胞內T-705RTP量增加，所以可說T-705與代謝拮抗劑之組合，能同時增強對於以T-705治療時顯示有效之複數種RNA病毒的抗病毒活性。
此機構不僅適用於T-705，亦廣泛地適用於通式[1]所表示之吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽。例如，除T-705以外，在通式[1]之化合物中，R1 為氫原子；R2 為氫原子；R3 為氫原子之化合物(3-羥基-吡
Figure 108147521-A0304-12-01
羧醯胺)顯示抗病毒活性(Antiviral Res. 2009; 82(3): 95-102.)，暗示其在細胞內轉變為核糖三磷酸體(Mol Pharmacol. 2013; 84(4): 615-29.)。亦即，藉由吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽與使吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物組合，可同時增強對於以吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽治療時顯示有效之複數種RNA病毒的抗病毒活性。 [產業上利用之可能性]
將吡
Figure 108147521-A0304-12-01
衍生物或其鹽，與選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物之群組之一種以上化合物組合而成的RNA病毒感染症治療劑，顯示增強之抗病毒活性，在醫藥產業之領域中有用。
無。
[圖1]為顯示試驗例6之藉由T-705與6-巰基嘌呤(6MP)之併用暴露而造成之293T細胞內T705-RTP量之變化的圖。
Figure 108147521-A0101-11-0001-1
無。

Claims (18)

  1. 一種RNA病毒感染症治療劑，其係將 通式[1]所表示之吡
    Figure 108147521-A0304-12-01
    衍生物或其鹽
    Figure 03_image001
    (式中，R1 及R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)， 與可使細胞內的吡
    Figure 108147521-A0304-12-01
    衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物組合而成。
  2. 如請求項1之治療劑，其中R1 為氫原子；R2 為氟原子或氫原子；及R3 為氫原子。
  3. 如請求項2之治療劑，其中R1 為氫原子；R2 為氟原子；及R3 為氫原子。
  4. 如請求項1至3中任一項之治療劑，其中使細胞內的吡
    Figure 108147521-A0304-12-01
    衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物，為選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤(thiopurin)系代謝拮抗劑、噻唑呋林(tiazofurin)、烷基化劑及黃嘌呤(xanthine)衍生物之群組中的一種以上化合物。
  5. 如請求項4之治療劑，其中 葉酸拮抗劑為甲胺蝶呤(methotrexate)或普拉曲沙(pralatrexate)； 硫嘌呤系代謝拮抗劑為通式[2]所表示之巰基嘌呤衍生物
    Figure 03_image030
    (式中，R4 表示氫原子或可經保護之胺基；R5 表示氫原子或通式[3]
    Figure 03_image032
    (式中，R6 表示氫原子、C1-6 烷基或羧基；R7 表示氫原子、C1-6 烷基、苄基或對硝基苄基))； 烷基化劑為替莫唑胺(temozolomide)； 黃嘌呤衍生物為茶鹼(theophylline)。
  6. 如請求項5之治療劑，其中硫嘌呤系代謝拮抗劑為6-巰基嘌呤、氮雜硫嘌呤或6-硫鳥嘌呤。
  7. 如請求項1至3之中任一項之治療劑，其係進一步組合一種以上其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用之藥劑而成。
  8. 如請求項7之治療劑，其中其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用之藥劑為利巴韋林(ribavirin)。
  9. 一種RNA病毒感染症治療劑，其係將 通式[1]所表示之吡
    Figure 108147521-A0304-12-01
    衍生物或其鹽
    Figure 03_image034
    (式中，R1 及R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)，與選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物之群組中的一種以上化合物組合而成。
  10. 一種RNA病毒感染症治療劑，其含有通式[1]所表示的吡
    Figure 108147521-A0304-12-01
    衍生物或其鹽
    Figure 03_image036
    (式中，R1 、R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)；該RNA病毒感染症治療劑係與使細胞內的吡
    Figure 108147521-A0304-12-01
    衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物併用。
  11. 如請求項10之治療劑，其中R1 為氫原子；R2 為氟原子或氫原子；及R3 為氫原子。
  12. 如請求項11之治療劑，其中R1 為氫原子；R2 為氟原子；及R3 為氫原子。
  13. 如請求項10至12中任一項之治療劑，其中使細胞內的吡
    Figure 108147521-A0304-12-01
    衍生物核糖三磷酸體之量增加的化合物，為選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物之群組中的一種以上化合物。
  14. 如請求項13之治療劑，其中 葉酸拮抗劑為甲胺蝶呤或普拉曲沙； 硫嘌呤系代謝拮抗劑為通式[2]所表示之巰基嘌呤衍生物
    Figure 03_image038
    (式中，R4 表示氫原子或可經保護之胺基；R5 表示氫原子或通式[3]
    Figure 03_image040
    (式中，R6 表示氫原子、C1-6 烷基或羧基；R7 表示氫原子、C1-6 烷基、苄基或對硝基苄基))； 烷基化劑為替莫唑胺； 黃嘌呤衍生物為茶鹼。
  15. 如請求項14之治療劑，其中硫嘌呤系代謝拮抗劑為6-巰基嘌呤、氮雜硫嘌呤或6-硫鳥嘌呤。
  16. 一種RNA病毒感染症治療劑，其含有通式[1]所表示的吡
    Figure 108147521-A0304-12-01
    衍生物或其鹽
    Figure 03_image042
    (式中，R1 、R2 相同或相異，表示氫原子或鹵素原子；R3 表示氫原子或胺基保護基)；該RNA病毒感染症治療劑係與選自包含葉酸拮抗劑、硫嘌呤系代謝拮抗劑、噻唑呋林、烷基化劑及黃嘌呤衍生物之群組中的一種以上化合物併用。
  17. 如請求項10至12中任一項之治療劑，其係進一步併用一種以上其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用之藥劑。
  18. 如請求項17之治療劑，其中其他RNA病毒感染症治療劑或顯示抗RNA病毒抑制作用之藥劑為利巴韋林。
TW108147521A 2018-12-25 2019-12-25 衍生物核糖三磷酸體的量增加的化合物而成的ｒｎａ病毒感染症治療劑 TWI840481B (zh)

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