TW202027733A - 含有葉黃素之點眼液組合物 - Google Patents

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林怡嬋
陳億州
莊宇倫
蔡政翰
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Abstract

一種含有葉黃素之點眼液組合物，其主要係由一天然具有抗發炎物質、一可增加液體黏稠度的物質以及一人工淚液所組合而成，利用該可增加液體黏稠度的物質提高該點眼液組合物滯留眼表的時間，以增加該抗發炎物質停留在眼表的作用時間，促進本發明於乾眼症治療以及抑制眼表發炎之效果。

Description

含有葉黃素之點眼液組合物
本發明係有關一種含有天然抗發炎能力之葉黃素之點眼液組合物，其組合物可用於抑制眼表發炎或乾眼症。
人類眼睛為一球體結構，由外到內之組織結構分別為結膜(conjunctiva)、角膜(cornea)、前房(anterior chamber)、虹膜(iris)、水晶體(lens)、玻璃體(vitreous body)、視網膜(retina)等，並以水晶體(lens)為一中心分界點，將眼球分成眼前部(anterior part)與眼後部(posterior part)。而眼前部之結膜、角膜以及淚膜(tear film)為眼睛最前端第一線與外界接觸之組織，顯示出其在眼表之保護功能及重要性，而且眼前段多種發炎反應皆發生於此。
淚液層由裡到外又可以分成3層主要結構，分別為黏膜層(mucin layer)、水層(water layer)及油脂層(lipid layer)，淚液層功能的正常運作，可以保持眼睛表面的濕潤、提供養分給角膜、移除眼睛表面之異物，達到保護眼表之功用，若其中有一層功能不正常或是功能喪失，像是油脂層功能障礙及黏液層功能不正常導致淚液過度蒸散或水層造成之淚液量的降低，以上因素會導致眼睛表面之慢性發炎，進而造成眼睛乾澀的情況產生，最終產生乾眼症(dry eye syndrome，DES)。
乾眼症是一種與眼睛角膜，結膜，淚腺功能異常之疾病，由於現今長時間使用3C產品、隱形眼鏡配戴時間過長以及長時間待在冷氣房等乾燥環境下，都易發生眼表乾燥狀況，進而誘使眼睛表面慢性發炎，最終導致所謂的乾眼症。
由於乾眼症通常會造成眼睛乾澀(ocular dryness)、充血(hyperemia)、眼部刺激感(ocular irritation)的發生，且伴隨著眼表發炎(inflammation)反應，也會造成生活上諸多不適，倘若乾眼症不正確給予治療，發展至後期，最嚴重甚至可能導致眼睛角膜潰瘍、混濁，造成視力缺損且無法回復。現今治療乾眼症的方式，是以人工淚液(artificial tear，AT)為主，再搭配有抗發炎能力(anti-inflammation)之藥物來治療，而給予抗發炎藥物之治療方式，對於乾眼症的治療來說，是一種針對其病因根本之治療方式。由於眼睛特殊結構，使用人工淚液滴至眼睛後，會由鼻淚管通道快速流失，致使人工淚液在眼睛表面滯留時間短暫。而且由於現代人生活繁忙，給予兩種藥劑，經常會發生點完一種藥而忘記點另外一種藥的情形，造成延緩治療效果及延長時程。再者，抗發炎藥物多為膏狀，點入眼睛後會造成患者視線模糊不清，導致行動不便之困擾。
現今常用於乾眼症治療的眼表抗發炎藥物主要可以分成兩大類：類固醇類(steroids)以及非類固醇類抗發炎藥物(Non-Steroidal Anti-Inflammation Drug, NSAID)。含有類固醇的抗發炎藥物長時間使用後，有可能使眼睛的排水管道阻塞，進一步造成眼壓升高、視神經萎縮，最後恐有罹患青光眼失明之虞。而非類固醇類抗發炎藥物-NSAIDs (Non-Steroidal Anti-Inflammation Drug)，像是溴芬酸(bromfenac)以及環孢菌素(Cyclosporin A)等，也有一些缺點，溴芬酸可能會造成眼睛畏光、疼痛感，甚至角膜厚度變薄等副作用；環孢菌素則有可能會產生眼睛的灼熱感、充血以及搔癢感等症狀。因此開發一種副作用低的抗發炎藥物，解決上述之問題，即為此行業相關業者亟欲研究之課題所在。
人類視網膜含有各式各樣的類胡蘿蔔素，而葉黃素(Lutein)為構成視網膜主要物質之一，本身為一種抗發炎、抗氧化物質，可直接吸收有害的藍光與近紫外光線，具有保護視覺神經細胞的效果。其具有的抗氧化力可以減少視覺受器與視網膜色素上皮層（ retinal pigment epithelium ， RPE ）內的自由基生成，保護黃斑部，令眼睛具有最清晰視力的功能。
然，不論類胡蘿蔔素或葉黃素人體都無法自行合成，只能夠藉由攝取食物或是保健食品來補充，在綠色蔬菜或是雞蛋蛋黃中都含有大量的葉黃素。但是藉由攝取食物來補充的葉黃素需要透過腸道吸收、血液循環系統等方式，最後才進入血液末端器官「眼睛」，因此實質生物可利用度低。
聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol, PVA)為一種具極性之合成高分子，其特性包括低的蛋白質吸附性、良好的生物相容性、高親水性及化學耐受性等。依照分子量的不同，擁有不一樣的特性，像是增加其分子量可增加黏度、黏合力、加強張力、防水性以及成膠性；降低分子量則會增加PVA之水溶性等。因為其多變之物理特性，被廣泛運用在各個領域。
緣此之故，申請人有鑑於習知技術之缺失，乃發明一種具有天然抗發炎成份且增加眼表滯留時間之「點眼液組合物」，可有效減少重複給藥次數且有效治療之組合，用以改善上述習用之缺失。
本發明之目的，在於提供一種含有葉黃素之點眼液組合物，將葉黃素直接應用於眼表，提高葉黃素於眼表濃度，進一步有效抑制眼表發炎或治療乾眼症; 克服習知以食物形式攝取，葉黃素實際作用在眼球或/及眼表應用性低的現況，
為達上述目的，本發明之技術手段在於：利用下述成份組合成一點眼液組合物；其成份包含一具有抗發炎之天然物質，例如：葉黃素(Lutein)、一可以增加液體黏稠度的物質，例如：聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol, PVA)以及一人工淚液。藉由將該點眼液組合物點在眼表，使具有抗發炎之葉黃素直接作用於眼表。
本發明之另一目的，在於提供一種可延長滯留眼表時間之點眼液組合物，藉以增加抗發炎物質或治療藥物在眼表停留的時間，而有效治療或抑制乾眼症。
為達上述目的，本發明之技術手段在於：添加一種可增加液體黏稠度之物質，例如：聚乙烯醇(PVA)於點眼液組合物中，使得該點眼液組合物在眼表停留時間拉長，利用提高藥劑停留於眼表時間，令葉黃素滲透到後眼部，因此除了治療乾眼症治療以及抑制眼表發炎之效果外，進一步還可保護視網膜，助於預防視網膜病變。
為便於 貴審查委員對本案含有葉黃素之點眼液組合物有更進一步的認識與瞭解，茲舉實施例配合圖式，詳細說明如下。
實施例1
本實施例係提供一種組合物，該組合物係由一天然具有抗發炎物質及一可增加液體黏稠度的物質所組合而成，以針對該組合物是否會對人類角膜上皮細胞(Human Cornea Epithelium Cell, HCE-2 )活性產生不良影響、造成傷害以及是否可以降低細胞(HCE-2)之發炎反應實驗。
在本實施例中該天然抗發炎物質為一葉黃素(Lutein，簡寫L)，該可增加液體黏稠度的物質為一聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol, 簡寫PVA)。
首先培養人類角膜上皮細胞(HCE-2)，種細胞前在 10 公分培養盤上加入 1 mL 之 FNC coating Mix 水溶液，三十秒後去除剩餘的FNC水溶液，再以 37 °C 水域槽解凍細胞並進行培養，繼代時以 1:3~ 1:4 的比例繼代，每三天換一次 KSFM 培養液。
細胞毒性實驗
本實驗首先以200 μL/well的FNC coating MIX水溶液塗層96孔盤，30秒後將之移除，每孔種5×
Figure 02_image001
顆HCE-2細胞，並加入KSFM培養液進行培養，待隔日貼覆後，將KSFM培養液移除並用緩衝液PBS潤洗，接著將最終濃度為10 μM、5 μM、2.5 μM、0.125 μM的葉黃素(L)與1%、0.5%、0.1%、0.05%、0.01% (wt./v) 之聚乙烯醇(PVA)各自混和後，加至96孔盤與細胞進行培養，待隔天配置體積比1:10混和的WST-8試劑與KSFM培養液，移除舊培養液，每孔加入110 μL混有試劑之培養液，放入培養箱反應3.5小時，並以ELISA reader調整吸光直至450 nm進行檢測，最後以ANOVA (Analysis of Variance)分析結果。其中控制組control只有添加KSFM培養液。
結果請參閱第1圖所示，葉黃素(L)與聚乙烯醇(PVA)混合後不論濃度高低，與控制組control相比並沒有顯著差異。
細胞活性實驗
本實驗係使用習知Live/Dead染色技術進行細胞活性實驗。以0.5 mL 的FNC coating MIX水溶液塗層於24 孔盤中，30秒後移除，並於每孔盤中種入3×104 顆HCE-2細胞，待隔日貼覆後，將最終濃度為20 μM、10 μM、5 μM之葉黃素(L)，混和1% (wt./v) 聚乙烯醇(PVA)加入至24孔盤中進行培養，待隔天與第三天，去除培養液並加入0.5 mL以2:1:2000的鈣綠黃素(Calcein-AM)、碘化丙啶(propidium iodide，PI)以及無血清培養液混和之混和液，放置37度培養箱反應10分鐘後，以倒立式螢光顯微鏡觀察並拍照。死亡對照組別則在去除培養液之前，加入最終濃度為0.5% (wt./v)的Triton X-100，使細胞死亡，最後使用ANOVA進行數據分析。其中控制組control只添加培養液。
結果請參閱第2圖所示，此圖係將細胞存活率之螢光染色結果量化，葉黃素(L)與聚乙烯醇(PVA)混和後，5 μM與10 μM濃度之葉黃素(L)之綠色螢光與控制組control是無明顯差異的，且無死亡細胞之紅色螢光產生，表明在第一天，葉黃素(L)與聚乙烯醇(PVA)混和後對於細胞是無影響的(請參考附件)。
發炎因子基因表現實驗
將人類角膜上皮細胞(HCE-2)以濃度3 x 105 (cell/ml)培養於6孔盤中，並於培養箱中培養過夜，使細胞貼附，隨後以濃度500 ng/mL之脂多糖(Lipopolysaccharides，LPS)與細胞進行共培養6小時，誘導細胞發炎，待培養6小時後，將含有脂多糖(LPS)之培養基移除，並將帶有藥物之培養基加入6孔盤中，治療2小時，接續以聚合酶連鎖反應(Real-Time polymerase chain reaction, Real-Time PCR) 檢測細胞發炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的基因表現量。帶有藥物的培養基分別包括一控制組、一對照組以及複數實驗組，說明如下：
控制組Control：正常HCE-2細胞，培養基中沒有添加任何藥劑令細胞產生變化。
對照組LPS：利用脂多糖LPS誘導細胞發炎，培養基中沒有添加任何藥劑。
實驗組PVA1：培養基中添加1% (wt./v) 聚乙烯醇(PVA)。
實驗組L2.5；培養基中添加2.5 μM葉黃素(L)。
實驗組L5：培養基中添加5 μM葉黃素(L)。
實驗組L10：培養基中添加10 μM葉黃素(L)。
實驗組L2.5P1：培養基中添加2.5 μM葉黃素(L)以及1% (wt./v) 聚乙烯醇(PVA)。
實驗組L5P1：培養基中添加5 μM葉黃素(L) 以及1% (wt./v) 聚乙烯醇(PVA)。
實驗組L10P1：培養基中添加10 μM葉黃素(L) 以及1% (wt./v) 聚乙烯醇(PVA)。
結果請參閱第3A至3C圖所示，使用LPS濃度500 ng/mL與人類角膜上皮細胞(HCE-2)共培養6小時後，可以看到相對於控制組Control，對照組LPS發炎因子表現量明顯上升，顯示出LPS成功誘導人類角膜上皮細胞呈現發炎狀態。接著以不同藥物進行治療2小時結果發現，加入聚乙烯醇(PVA)1% (wt./v) 進行治療(實驗組PVA1)，發炎因子IL-1β表現量有下降的現象，但在其他發炎因子IL-6以及TNF-α卻無抑制效果；隨著葉黃素(L)的添加，可以看到，不管在IL-1β、IL-6還是TNF-α，葉黃素(L)皆具有抑制LPS誘導人類角膜上皮細胞(HCE-2)發炎之發炎因子表現量，顯示出葉黃素(L)具有抗發炎能力。同時，也可以看到添加葉黃素(L)混和聚乙烯醇(PVA)1% (wt./v)進行治療之組別，相對於LPS誘導發炎組，皆有明顯抑制發炎因子表現之能力，*: p ＜ 0.05，**: p ＜ 0.01，***: p ＜ 0.001。
從本實施例實驗結果可知，濃度2.5 μM至10 μM的葉黃素與1% (wt./v) 聚乙烯醇(PVA)混合並不會傷害人類角膜上皮細胞(HCE-2)，並且有最佳抑制發炎的功能。
前述實施例中之WST-8、ELISA、Live/Dead染色技術以及Real-Time PCR為實驗套組且為習知技術，故，不再本說明書中加已贅述。
實施例2
基於實施例1的實驗結果，本實驗係測試將體積百分濃度為1% (wt./v) 聚乙烯醇(PVA)、2.5 μM至10 μM的葉黃素(L)加入一人工淚液(artificial tear, 簡稱AT)中，是否影響人工淚液之生理特性，例如：酸鹼度、滲透壓、黏性及折射率。
其中該人工淚液(AT)為習知人工淚液，其生理特性與淚液相似，包含：氯化鈉(NaCl) 450 mg、氯化鉀(KCl) 150 mg、氯化鈣(CaCl2 ) 15 mg、磷酸氫二鈉(Na2 HPO4 ) 450 mg。
在本實驗中分別使用酸鹼度測定儀，係採用廠牌為EUTECH INSTRUMENTS型號為pH510；微滲透壓儀，係採用廠牌為Advanced Instruments型號為3320；程式流變儀裝置(檢測黏性)，係採用廠牌為Brookfield型號為DVⅢ之微電腦程式流變儀裝置；屈折度儀，係採用廠牌為ATAGO型號為DR-A1標準型。
結果請參見下表1所示，該聚乙烯醇(PVA)及葉黃素(L)添加至人工淚液(AT)後，其生理特性都相近於習知人工淚液的範圍。而正常人之淚液的酸鹼值為pH6.5-7.6，滲透壓為260-340 mOsm/kg，本發明之點眼液組合物的生理特性也近似正常人之淚液。
表1.點眼液組合物之生理特性比較
  酸鹼值 滲透壓(mOsm/kg) 黏性(pa.s) 折射率(m.sl/(m.sl)l)
人工淚液 8.3 253 0.9 約1.33 ~ 134
點眼液組合物 7.7 ~ 8.3 260 ~ 280 1.15 1.334
前述實施例中之酸鹼度測定儀、微滲透壓儀及程式流變儀裝置為實驗儀器且為習知技術，故，不再本說明書中加已贅述。
實施例3
本實驗係提供一種組合物，該組合物係由該具有抗發炎物質葉黃素(L)、該可增加液體黏稠度物質之聚乙烯醇(PVA)及實施例2之該人工淚液組合而成，此即為本發明之點眼液組合物，接著以該點眼液組合物進行治療乾眼症的功效測試實驗。
該葉黃素(L)之使用濃度範圍為2.5 μM至10 μM，進一步可擴大使用濃度範圍為0.5 μM至15 μM，該聚乙烯醇(PVA)之使用濃度為可擴大為0.1%至5% (wt./v)。在本實驗中使用該葉黃素之濃度為5 μM，聚乙烯醇(PVA)濃度為1% (wt./v) 。
乾眼症動物實驗流程
準備雄性C57BL/6J小鼠分為5組，每組4隻，並將0.1% BAC滴至小鼠眼睛表面，每日2次，持續給藥13天以誘導眼表發炎，進而造成小鼠產生乾眼症之症狀，接著依組別施予不同的藥劑進行治療，治療10天後分別進行角膜螢光染色以及淚液分泌量測試實驗。組別與施予之藥劑如下表2所示：
表2
組別 說明
控制組control’ 正常老鼠，沒有刺激誘發乾眼症的小鼠，沒有被施予治療藥劑。
乾眼症組DES 有刺激誘發乾眼症的小鼠，繼續被施予0.1% BAC藥劑。
人工淚液組AT 有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予人工淚液(Artificial tear)進行治療。
實驗組L5’ 有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予含有5 μM 葉黃素(L)的人工淚液進行治療。
實驗組L5P1’ 有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予含有5 μM葉黃素及1% (wt./v) 聚乙烯醇(PVA)的人工淚液，即本發明之點眼液組合物，進行治療。
人工淚液於動物眼表滯留狀態
本實驗僅測試人工淚液組(AT)、實驗組L5’及實驗組L5P1’三組，在三組小鼠眼表滴入體積為2 μL最終濃度為100 μg/mL的TAMRA，以三維活體影像分子分析系統(Non Invasion In Vivo Image System, IVIS)觀察三種不同成分之人工淚液於眼表滯留時間影響，並將其量化。
請參閱第4圖所示，實驗組L5P1’因增稠劑聚乙烯醇(PVA)的添加而提高黏稠度，使得該點眼液組合物滯留在眼表的時間拉長，可有效減少重複給藥次數，並縮短治療眼表發炎以及乾眼症之療程。延長該點眼液組合物滯留眼表時間，可提升該葉黃素(L)滲透到後眼部的機會，進一步預防視網膜病變，增加對視網膜的保護。
角膜螢光染色
藉由0.1% BAC誘導C57B6/J小鼠產生乾眼症症狀後，使用螢光素染色滴於小鼠眼表，當角膜上皮為完整未受傷狀態，不會有螢光沉積，反之，若角膜上皮呈現受傷狀態，螢光素染色會沉積於受傷位置，接著使用裂隙燈切換至藍光激發螢光，其螢光會呈現綠色狀態，以此觀察角膜上皮受損狀態，並依照NEI (National Eye Institute grading system) 進行角膜上皮受損評分，將角膜分成5個區域，並依照綠色螢光沉積嚴重程度，將給予0至3分，請參閱第5圖所示。
結果請參閱第6、7圖所示，相較於控制組Control，乾眼症組DES角膜上皮有明顯綠色螢光沉積，表明角膜上皮有受損狀況，接著針對實驗組AT、實驗組L5、實驗組L5P1等提供不同藥物持續治療10天，其10天治療後結果顯示出乾眼症組DES仍有明顯綠色螢光沉積，且在使用實驗組AT以及實驗組L5’治療後，綠色螢光區域並無明顯改善。但是實驗組L5P1’在治療10天後，角膜上綠色螢光沉積有減少狀況，表明使用混有5μM葉黃素以及1%聚乙烯醇的人工淚液(即本發明之點眼液組合物)可以使角膜上皮受損狀態有較良好之改善情形。將角膜上皮螢光染色量化後(請參閱第7圖所示)，可以發現乾眼症組DES別螢光染色評分是有明顯提升的，使用人工淚液進行治療後(實驗組AT)，對於角膜上皮螢光染色並不會有明顯改善，使用5 μM葉黃素進行治療後(實驗組L5’)，螢光染色是有些微改善的，而使用本發明之點眼液組合物進行治療後(實驗組L5P1’)，可以發現角膜螢光分數相較於乾眼症組DES、實驗組AT以及實驗組L5’，是有明顯改善的趨勢。
其中第6圖之橫座標分別為DES 13d：乾眼症誘發13天；T3為治療第3天；T7為治療第7天；T10為治療第10天。
淚液分泌量測試
乾眼症臨床常見症狀之一為淚液減少，因此淚液分泌量測試也可作為一乾眼症是否誘發之指標，持續點0.1% BAC於小鼠眼表13天後，可以看到相對於控制組Control，乾眼症組DES的淚液有顯著減少，請參閱第8圖所示。
請參閱第9圖所示，經過本發明之點眼液組合物(實驗組L5P1’)治療後，實驗組L5P1’的淚液分泌量有明顯回復。
本發明實驗圖式中*表示 p ＜ 0.05，**表示 p ＜ 0.01，***表示 p ＜ 0.001 （與control比較）。
發炎激素分析
本實施例係測試本發明之點眼液組合物與其他測試組對於乾眼症小鼠發炎因子抑制效果。本實施例係以ELISA法定量細胞發炎因子IL-1β、IL-6及TNF-α濃度，在經過發明之點眼液組合物與其他測試組治療10天後發炎因子濃度變化，其組別與施予之藥劑如下表3所示：
表3
組別 說明
控制組control’ 正常老鼠，沒有刺激誘發乾眼症的小鼠，沒有被施予治療藥劑。
乾眼症組DES 有刺激誘發乾眼症的小鼠，繼續被施予0.1% BAC藥劑。
人工淚液組AT 有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予人工淚液(Artificial tear)進行治療。
實驗組L5’ 有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予含有5μM 葉黃素(L)的人工淚液進行治療。
實驗組L5P1’ 有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予含有5μM葉黃素及1%聚乙烯醇(PVA)的人工淚液，即本發明之點眼液組合物，進行治療。
實驗組C 有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予市售乾眼症治療藥物（含Cyclosporin A）進行治療。
請參閱第10A-10C圖所示，經過刺激誘發乾眼症小鼠(乾眼症組DES)的細胞發炎因子有明顯增加，而以本發明之點眼液組合物(實驗組L5P1’)治療後發炎因子有明顯下降，顯示乾眼症的發炎狀況被抑制了。而實驗組C抑制發炎效果不如本發明。由本實驗可知，本發明之點眼液組合物對於抑制發炎因子，以及抑制乾眼症發炎更優於市售產品。
前述實施例中之淚腺分泌測試實驗、NEI及眼球螢光染色為實驗套組且為習知技術，非侵入式3D活體分子影像系統為習知之儀器，故，不再本說明書中加已贅述。
本案之發明人針對葉黃素、聚乙烯醇使用濃度以及該點眼液組合物之酸鹼值值另進行多種組合之實驗，其葉黃素使用濃度範圍可為0.5 μM至15 μM，其中如實施例所示2.5 μM至10 μM為最佳；聚乙烯醇使用之濃度範圍可為0.1%至1.5% (wt./v)，如實施例所示1% (wt./v) 為最佳；該點眼液組合物之酸鹼值範圍係可為正常眼睛的酸鹼值，即為pH6.5至pH8.5，其中pH7.7至pH8.3為最佳。
上列詳細說明係針對本發明之可行實施例之具體說明，惟該實施例並非用以限制本發明之專利範圍，凡未脫離本發明技藝精神所為之等效實施或變更，均應包含於本案之專利範圍中。
控制組control:正常HCE-2細胞，培養基中沒有添加任何藥劑令細胞產生變化 對照組LPS:利用脂多糖LPS誘導細胞發炎，培養基中沒有添加任何藥劑 實驗組PVA1:培養基中添加1% (wt./v)聚乙烯醇(PVA) 實驗組L2.5:培養基中添加2.5 μM葉黃素(L) 實驗組L5:培養基中添加5 μM葉黃素(L) 實驗組L10:培養基中添加10 μM葉黃素(L) 實驗組L2.5P1:培養基中添加2.5 μM葉黃素(L)以及1% (wt./v)聚乙烯醇(PVA) 實驗組L5P1:培養基中添加5μM葉黃素(L) 以及1% (wt./v)聚乙烯醇(PVA) 實驗組L10P1:培養基中添加10μM葉黃素(L) 以及1% (wt./v)聚乙烯醇(PVA) 控制組control’:正常小鼠，沒有刺激誘發乾眼症的小鼠，沒有被施予治療藥劑 乾眼症組DES:有刺激誘發乾眼症的小鼠，繼續被施予0.1% BAC藥劑 人工淚液組AT:有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予人工淚液(Artificial tear)進行治療 實驗組L5’:有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予含有5 μM 葉黃素(L)的人工淚液進行治療 實驗組L5P1’:有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予含有5 μM葉黃素及1% (wt./v)聚乙烯醇(PVA)的人工淚液，即本發明之點眼液組合物，進行治療 實驗組C:有刺激誘發乾眼症的小鼠，被施予市售乾眼症治療藥物（含Cyclosporin A）進行治療
第1圖為本發明之點眼液組合物對細胞毒性實驗。
第2圖為本發明之點眼液組合物對細胞活性實驗。
第3A圖為本發明之點眼液組合物對角膜細胞發炎因子IL-1β表現量實驗。
第3B圖為本發明之點眼液組合物對角膜細胞發炎因子IL-6表現量實驗。
第3C圖為本發明之點眼液組合物對角膜細胞發炎因子TNF-α表現量實驗。
第4圖為本發明之點眼液組合物應用在動物眼表滯留螢光量化圖。
第5圖為角膜螢光染色評分指標。
第6圖為本發明之點眼液組合物應用在動物治療乾眼症眼表螢光染色之結果，本圖需以彩圖表示。
第7圖為本發明之點眼液組合物應用在動物治療乾眼症眼表螢光染色量化圖。
第8圖為對動物誘發乾眼症淚液分泌量測試。
第9圖為本發明之點眼液組合物應用在動物治療乾眼症後淚液分泌測試。
第10A圖為本發明之點眼液組合物在動物實驗角膜之發炎因子IL-1β表現量實驗。
第10B圖為本發明之點眼液組合物在動物實驗角膜之發炎因子IL-6表現量實驗。
第10C圖為本發明之點眼液組合物在動物實驗角膜之發炎因子TNF-α表現量實驗。

Claims (6)

  1. 一種含有葉黃素之點眼液組合物，其主要係由一濃度為0.5μM至15μM具有抗發炎物質之葉黃素(Lutein)、一體積百分濃度為0.1%至1.5% (wt./v)可以增加液體黏稠度物質之聚乙烯醇(PVA)以及一人工淚液所組合而成，且該點眼液組合物之酸鹼值範圍為pH6.5至pH8.5。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之點眼液組合物，其中該人工淚液成份包含有一氯化鈉(NaCl)、一氯化鉀(KCl)、一氯化鈣(CaCl2 )以及一磷酸氫二鈉(Na2 HPO4 )。
  3. 如申請專利範圍第1項所述之點眼液組合物，其中該點眼液組合物可治療乾眼症、抑制與減緩患者眼表發炎症狀以及令眼淚含量恢復正常值。
  4. 如申請專利範圍第1項所述之點眼液組合物，其中該葉黃素最佳濃度為2.5 μM至10 μM。
  5. 如申請專利範圍第1項所述之點眼液組合物，其中該聚乙烯醇最佳濃度為1% (wt./v)。
  6. 如申請專利範圍第1項所述之點眼液組合物，其中該點眼液組合物之最佳酸鹼值範圍為pH7.7至pH8.3。
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