TW202019886A

TW202019886A - 雜芳基類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用

Info

Publication number: TW202019886A
Application number: TW108124702A
Authority: TW
Inventors: 陸標; 張俊珍; 沈曉冬; 賀峰; 陶維康
Original assignee: 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司; 大陸商上海恆瑞醫藥有限公司
Priority date: 2018-07-12
Filing date: 2019-07-12
Publication date: 2020-06-01
Also published as: CN111094254A; WO2020011220A1; CN111094254B

Abstract

本發明涉及雜芳基類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用。具體而言，本發明涉及一種通式(I)所示的雜芳基類衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物以及其作為治療劑，特別是作為A_2a受體和/或A_2b受體拮抗劑的用途和在製備用於治療藉由對A_2a受體和/或A_2b受體的抑制而改善的病況或病症的藥物中的用途，其中通式(I)的各取代基與說明書中的定義相同。

Description

雜芳基類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用

本發明屬於醫藥領域，涉及一種通式(I)所示的雜芳基類衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物以及其作為治療劑，特別是作為A_2a受體和/或A_2b受體拮抗劑的用途和在製備用於治療藉由對A_2a受體和/或A_2b受體的抑制而改善的病況或病症的藥物中的用途。

腺苷是天然存在的嘌呤核苷，是許多生理功能的內源性調節劑。在心血管系統、中樞神經、呼吸系統、腎臟、脂肪和血小板的功能調節中發揮重要作用。

在腫瘤研究中發現，腺苷是腫瘤與免疫相互作用中的重要分子，靶向腺苷通路可藉由多重機制有效地抑制腫瘤進展和轉移。低氧的腫瘤微環境為腫瘤細胞提供了一個強大的選擇壓力，從而增加它們的侵襲性。氧供的缺乏導致營養的缺乏，迫使腫瘤細胞和免疫細胞競爭必需的營養物質。在此過程中，腫瘤細胞可能會抑制淋巴細胞的增殖和效應功能，從而逃避免疫監視，繼續生存，並可播散至其他器官。

腺苷的作用由G蛋白偶聯受體家族介導，目前已知至少有四種亞型的腺苷受體，分類為A₁、A_2a、A_2b和A₃。其中A₁和A₃受體抑制酶腺苷酸環化酶的活性，而A_2a和A_2b受體刺激該酶的活性，由此調節細胞中環AMP水平，藉由這些受體，腺苷調節廣泛的生理功能。

A_2a受體(A_2aR)在機體分佈較為廣泛，在中樞神經系統主要表達於紋狀體，在外周、心、肝、肺、腎等組織也均有表達。A_2b受體(A_2bR)也廣泛表達於各種組織中，但是表達量均較低，與腺苷的親和力也遠低於A_2a受體，因此最開始人們對A_2b受體的研究較少。

近來研究表明，在缺血低氧、炎症、創傷、移植等諸多病理過程中，腺苷A_2a受體的激活可以發揮重要的免疫調節作用，這可能與A_2a受體在T細胞、B細胞、單核巨噬細胞、中性粒細胞等多種免疫細胞上表達水平較高有關。此外，A_2a受體的活化可以促使機體產生免疫耐受，密切參與了腫瘤細胞“免疫逃逸”或“免疫抑制”的形成，為腫瘤的發生發展創造了有利條件。Lokshin及其同事(Cancer Res.2006Aug1；66(15)：7758-65)證實自然殺手細胞上的A_2aR活化可以藉由升高cAMP和激活PKA，從而抑制自然殺手細胞對腫瘤細胞的殺傷。還有研究表明，激活A_2a受體可以促進黑色素瘤A375細胞、成纖維瘤NIH3T3細胞及嗜鉻細胞瘤PC12細胞等腫瘤細胞的增殖，其作用可能與T細胞上A_2a受體的活化可以抑制T細胞活化、增殖、與腫瘤細胞的黏附及對腫瘤細胞產生細胞毒性作用相關；而A_2a受體基因剔除的小鼠則可以加強CD8⁺T細胞抗腫瘤的免疫作用，顯著抑制腫瘤的增殖。因此，A_2a受體拮抗劑可用於腫瘤的治療。此外，Deepak Mittal等人研究發現，A_2b受體在多種腫瘤中過度表達，且與三陰性乳腺癌、多發性骨髓瘤和急性髓性白血病的不良預後相關；A_2b受體的過表達促進了腫瘤細胞的增殖和遷移；A_2b受體抑制劑與化療藥物或免疫檢查點抑制劑聯用可以顯著降低小鼠三陰性乳腺癌模型中的腫瘤轉移；剔除小鼠體內或人結腸癌細胞系中的A_2b受體顯著降低結腸癌的轉移和細胞的成瘤性。這些結果均表明，抑制A_2b 受體可抑制腫瘤的轉移，因此A_2b受體也有望成為治療腫瘤的一個理想靶點(Cancer Res.2016 Aug 1；76(15)：4372-82)。

A_2a受體和A_2b受體都有抑制免疫的作用，因此需要深入研究這兩者之間的相互調節機制，比如當抑制A_2a受體時，是否會增加腺苷對A_2b受體的敏感性。研究A_2a受體和A_2b受體雙抑制劑也成為一個值得探索的方向。

儘管對多種腺苷受體亞型均具有顯著生物學活性的化合物可具有治療作用，但它們可導致不想要的副作用。例如腺苷A₁受體在組織缺血/缺氧時，在中樞、循環、消化系統和骨骼肌中，細胞在處於缺氧和低氧的應激環境時，胞外聚集的腺苷藉由激活胞膜上的A₁受體啟動相應的保護機制，從而增加細胞對缺氧低氧的耐受。位於免疫細胞上的A₁受體在低氧環境中能促進細胞免疫應答。另外，A₁受體還能降低游離脂肪酸和甘油三酯，參與調節血糖。因此，A₁受體的持續阻斷可能會引起機體組織中各種不良反應的發生(Chinese Pharmacological Bulletin,2008,24(5),573-576)。如有文獻報道，在動物模型上，阻斷A₁受體將會產生焦慮、覺醒等不良反應(Basic & Clinical Pharmacology & Toxicology, 2011,109(3),203-7)。腺苷A₃受體(如Gessi S等人，Pharmacol.Ther.117(1),2008,123-140所述)在心肌缺血期間釋放的腺苷在心臟中發揮強力的保護作用，A₃受體的持續阻斷可能增加由任何預先存在的或正在發展的缺血性心臟病引起的併發症的可能性，該缺血性心臟病諸如心絞痛或心衰。

目前，雖然已有許多化合物被開發為A_2a受體的拮抗劑用於治療很多疾病，如WO2007116106、WO2009080197、WO2011159302、WO2011095625、WO2014101373、WO2015031221中所述。但仍有低溶解性、光敏性、低活性、低選擇性和生物利用率較低等問題存在。

因此本發明提供一種新型結構的強抑制活性的腺苷A_2a受體拮抗劑，同時具有此類結構的化合物對腺苷A_2b受體也具有較好的抑制作用，對腺苷 A₁受體和腺苷A₃受體的抑制作用弱，是一種新型結構的選擇性的腺苷A_2a受體和/或A_2b受體拮抗劑。

本發明的目的在於提供一種通式(I)所示的化合物：

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環A選自環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；W選自CH和N；G¹、G²和G³相同或不同，且各自獨立地選自N和CR⁴；R^a選自烷基、鹵烷基、氘代烷基、羥烷基、環烷基、環烷基烷基、雜環基、-C(O)R⁵、-C(S)R⁵、芳基和雜芳基；R¹選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氘代烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代； R²相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氘代烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R³選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氘代烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R⁴選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氘代烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R⁵選自氫原子、烷基、鹵烷基、氘代烷基、羥烷基、胺基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；並且n為0、1、2或3。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物為通式(II)所示的化合物：

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中環A、W、G¹、R^a、R¹、R²、R³和n如通式(I)中所定義。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物為通式(II-1)所示的化合物：

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中環A、W、R^a、R¹、R²、R³和n如通式(I)中所定義。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物為通式(III)或通式(IV)所示的化合物：

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中環A、R^a、R¹、R²、R³和n如通式(I)中所定義。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其中該環A選自芳基和雜芳基，較佳選自苯基、吡啶基、噻吩基和呋喃基；更佳選自苯基和呋喃基。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其中該R^a選自環烷基、環烷基烷基、-C(S)R⁵和-C(O)R⁵；R⁵選自烷基和環烷基；R^a較佳選自環烷基和-C(O)R⁵，更佳R^a選自C_3-8環烷基和-C(O)-C_3-8環烷基；在本發明一個較佳的實施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其中該R¹選自氫原子、烷基或鹵素；較佳選自氫原子和鹵素。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其中該R²選自氫原子、鹵素和烷基；較佳選自氫原子、F和C_1-6烷基。

在本發明一個較佳的實施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其中該R³為烷基；較佳為C_1-6烷基；更佳為甲基。

本發明的典型化合物包括但不限於：

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽。

本發明的另一方面涉及一種通式(IE)所示的化合物：

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為製備通式(I)的中間體，其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G¹~G³、R¹~R³、R⁵和n如通式(I)中所定義。

本發明通式(IE)的典型化合物包括但不限於：

本發明的另一方面涉及一種製備通式(I)所示的化合物的方法，該方法包括：

通式(IA)化合物和通式(IB)化合物發生偶聯反應，得到通式(I)化合物，其中：X為鹵素； M為

或

； R^a選自烷基、鹵烷基、氘代烷基、羥烷基、環烷基、環烷基烷基、雜環基、芳基和雜芳基；環A、W、G¹~G³、R¹~R³和n如通式(I)中所定義。

通式(IC)化合物和通式(ID)化合物發生反應，得到通式(I)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G¹~G³、R¹~R³、R⁵和n如通式(I)中所定義。

本發明的另一方面涉及一種製備通式(IE)所示的化合物的方法，該方法包括：

通式(IC)化合物和通式(ID)化合物發生反應，得到通式(IE)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵，R⁵如通式(I)中所定義；環A、W、G¹~G³、R¹~R³和n如通式(IE)中所定義。

通式(IE)化合物脫去一個R^a，得到通式(I)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；R⁵選自烷基和環烷基；環A、W、G¹~G³、R¹~R³和n如通式(I)中所定義。

本發明的另一方面涉及一種製備通式(II)所示的化合物的方法，該方法包括：

通式(IIA)化合物和通式(IB)化合物發生偶聯反應，得到通式(II)化合物，其中：X為鹵素； M為

或

； R^a選自烷基、鹵烷基、氘代烷基、羥烷基、環烷基、環烷基烷基、雜環基、芳基和雜芳基；環A、W、G¹、R¹~R³和n如通式(II)中所定義。

通式(IIC)化合物和通式(ID)化合物發生反應，得到通式(I)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G¹、R¹~R³、R⁵和n如通式(II)中所定義。

本發明的另一方面涉及一種通式(IIE)所示的代合物：

其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G、R¹~R³、R⁵和n如通式(II)中所定義。

本發明的另一方面涉及一種製備通式(IIE)所示的化合物的方法，該方法包括：

通式(IIC)化合物和通式(ID)化合物發生反應，得到通式(IIE)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G¹、R¹~R³、R⁵和n如通式(IIE)中所定義。

通式(IIE)化合物脫去一個R^a，得到通式(II)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；R⁵選自烷基和環烷基；環A、W、G¹、R¹~R³和n如通式(II)中所定義。

本發明的另一方面涉及一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的本發明通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在製備用於治療藉由對A_2a受體和/或A_2b受體抑制而改善的病況或病症的藥物中的用途。

在本發明文中，藉由對A_2a受體和/或A_2b受體抑制而改善的病況或病症選自癌症、抑鬱、認知功能病症、神經退行性病症(帕金森氏病、亨廷頓氏病、阿爾茨海默氏病或肌萎縮性側索硬化等)、注意力相關病症、錐體外症候群、異常運動障礙、肝硬化、肝纖維化、脂肪肝、皮膚纖維化、睡眠障礙、中風、腦損傷、神經炎症和成癮行為；較佳為癌症，該癌症選自黑色素瘤、腦瘤(具有惡性的星形神經膠質和少突神經膠質細胞瘤成分的神經膠質瘤等)、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結腸直腸癌(結腸癌、直腸癌等)、肺癌(非小細胞肺癌、小細胞肺癌、原發或轉移性鱗狀癌等)、腎癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮膚癌、神經母細胞瘤、肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌(子宮頸癌、子宮內膜癌等)、頭頸腫瘤(上頜骨癌、喉癌、咽癌、舌癌、口內癌等)、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤等)、真性紅細胞增多症、白血病(急性粒細胞白血病、慢性粒細胞白血病、急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病等)、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌和兒科腫瘤(尤因家族性肉瘤、維爾姆斯肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睾丸癌、成神經細胞瘤、視網膜母細胞瘤、肝胚細胞瘤、腎母細胞瘤等)等；更佳為肺癌。

本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在製備治療癌症、抑鬱、認知功能病症、神經退行性病症(帕金森氏病、亨廷頓氏病、阿爾茨海默氏病或肌萎縮性側索硬化等)、注意力相關病症、錐體外症候群、異常運動障礙、肝硬化、肝纖維化、脂肪肝、皮膚纖維化、睡眠障礙、中風、腦損傷、神經炎症和成癮行為，較佳為癌症的藥物中的用途。

本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在製備治療癌症的藥物中的用途，其中該癌症選自黑色素瘤、腦瘤(具有惡性的星形神經膠質和少突神經膠質細胞瘤成分的神經膠質瘤等)、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結腸直腸癌(結腸癌、直腸癌等)、肺癌(非小細胞肺癌、小細胞肺癌、原發或轉移性鱗狀癌等)、腎癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮膚癌、神經母細胞瘤、肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌(子宮頸癌、子宮內膜癌等)、頭頸腫瘤(上頜骨癌、喉癌、咽癌、舌癌、口內癌等)、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤等)、真性紅細胞增多症、白血病(急性粒細胞白血病、慢性粒細胞白血病、急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病等)、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌和兒科腫瘤(尤因家族性肉瘤、維爾姆斯肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睾丸癌、成神經細胞瘤、視網膜母細胞瘤、肝胚細胞瘤、腎母細胞瘤等)等。

本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在製備治療肺癌，較佳為非小細胞肺癌的藥物中的用途。

本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在製備用於抑制A_2a受體和/或A_2b受體的藥物中的用途。

本發明還涉及一種抑制A_2a受體和/或A_2b受體的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物。

本發明還涉及一種治療藉由對A_2a受體和/或A_2b受體抑制而改善的病況或病症的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物。

本發明涉及一種治療癌症、抑鬱、認知功能病症、神經退行性病症(帕金森氏病、亨廷頓氏病、阿爾茨海默氏病或肌萎縮性側索硬化等)、注意力相關病症、錐體外症候群、異常運動障礙、肝硬化、肝纖維化、脂肪肝、皮膚纖維化、睡眠障礙、中風、腦損傷、神經炎症和成癮行為，較佳為癌症的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物。

本發明進一步涉及一種治療癌症的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其中該癌症選自黑色素瘤、腦瘤(具有惡性的星形神經膠質和少突神經膠質細胞瘤成分的神經膠質瘤等)、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結腸直腸癌(結腸癌、直腸癌等)、肺癌(非小細胞肺癌、小細胞肺癌、原發或轉移性鱗狀癌等)、腎癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮膚癌、神經母細胞瘤、肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌(子宮頸癌、子宮內膜癌等)、頭頸腫瘤(上頜骨癌、喉癌、咽癌、舌癌、口內癌等)、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤等)、真性紅細胞增多症、白血病(急性粒細胞白血病、慢性粒細胞白血病、急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病等)、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌和兒科腫瘤(尤因家族性肉瘤、維爾姆斯肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睾丸癌、成神經細胞瘤、視網膜母細胞瘤、肝胚細胞瘤、腎母細胞瘤等)等。

本發明進一步涉及一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物，其用作藥物。

本發明還涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其用作A_2a受體和/或A_2b受體拮抗劑。

本發明還涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其用於治療藉由對A_2a受體和/或A_2b受體抑制而改善的病況或病症。

本發明還涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其用於治療癌症、抑鬱、認知功能病症、神經退行性病症(帕金森氏病、亨廷頓氏病、阿爾茨海默氏病或肌萎縮性側索硬化等)、注意力相關病症、錐體外症候群、異常運動障礙、肝硬化、肝纖維化、脂肪肝、皮膚纖維化、睡眠障礙、中風、腦損傷、神經炎症和成癮行為，較佳為癌症。

本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其用於治療癌症，其中該癌症選自黑色素瘤、腦瘤(具有惡性的星形神經膠質和少突神經膠質細胞瘤成分的神經膠質瘤等)、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結腸直腸癌(結腸癌、直腸癌等)、肺癌(非小細胞肺癌、小細胞肺癌、原發或轉移性鱗狀癌等)、腎癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮膚癌、神經母細胞瘤、肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌(子宮頸癌、子宮內膜癌等)、頭頸腫瘤(上頜骨癌、喉癌、咽癌、舌癌、口內癌等)、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤等)、真性紅細胞增多症、白血病(急性粒細胞白血病、慢性粒細胞白血病、急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病等)、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌和兒科腫瘤(尤因家族性肉瘤、維爾姆斯肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睾丸癌、成神經細胞瘤、視網膜母細胞瘤、肝胚細胞瘤、腎母細胞瘤等)等。

含活性成分的醫藥組成物可以是適用於口服的形式，例如片劑、糖錠劑、錠劑、水或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊，或糖漿劑或酏劑。可按照本領域任何已知製備藥用組合物的方法製備口服組合物，此類組合物可含有一種或多種選自以下的成分：甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供悅目和可口的藥用製劑。片劑含有活性成分和用於混合的適宜製備片劑的無毒的可藥用的賦形劑。

水懸浮液含有活性物質和用於混合的適宜製備水懸浮液的賦形劑。水混懸液也可以含有一種或多種防腐劑例如尼泊金乙酯或尼泊金正丙酯、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑。

油混懸液可藉由使活性成分懸浮於植物油中配製而成。油懸浮液可含有增稠劑。可加入上述的甜味劑和矯味劑，以提供可口的製劑。

藉由加入水可使適用於製備水混懸液的可分散粉末和顆粒提供活性成分和用於混合的分散劑或濕潤劑、懸浮劑或一種或多種防腐劑。適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑可說明上述的例子。也可加入其他賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。藉由加入抗氧化劑例如抗壞血酸保存這些組合物。

本發明的醫藥組成物也可以是水包油乳劑的形式。

醫藥組成物可以是無菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶劑有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。無菌注射製劑可以是其中活性成分溶於油相的無菌注射水包油微乳。例如將活性成分溶於大豆油和卵磷脂的混合物中。然後將油溶液加入水和甘油的混合物中處理形成微乳。可藉由局部大量注射，將注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本發明化合物恆定循環濃度的方式給予溶液和微乳。為保持這種恆定濃度，可使用連續靜脈內遞藥裝置。這種裝置的實例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型靜脈注射泵。

醫藥組成物可以是用於肌內和皮下給藥的無菌注射水或油混懸液的形式。可按已知技術，用上述那些適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配製該混懸液。無菌注射製劑也可以是在腸胃外可接受的無毒稀釋劑或溶劑中製備的無菌注射溶液或混懸液。此外，可方便地用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質。

可按用於直腸給藥的栓劑形式給予本發明化合物。可藉由將藥物與在普通溫度下為固體但在直腸中為液體，因而在直腸中會溶化而釋放藥物的適宜的無刺激性賦形劑混合來製備這些醫藥組成物。此類物質包括可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。

如本領域技術人員所熟知的，藥物的給藥劑量依賴於多種因素，包括但並非限定於以下因素：所用具體化合物的活性、患者的年齡、患者的體重、患者的健康狀況、患者的行為、患者的飲食、給藥時間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合等；另外，最佳的治療方式如治療的模式、通式化合物(I)的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據傳統的治療方案來驗證。

[發明的詳細說明]

除非有相反陳述，在說明書和權利要求書中使用的術語具有下述含義。

術語“烷基”指飽和脂肪族烴基團，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳含有1至12個碳原子的烷基，更佳為含有1至6個碳原子的烷基。非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各種支鏈異構體等。更佳的是含有1至6個碳原子的低級烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自H原子、D原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的環烷基)，其中烷基的定義如上所述。烷氧基的非限制性實例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基。烷氧基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自H原子、D原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“環烷基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，環烷基環包含3至20個碳原子，較佳包含3至12個碳原子，較佳包含3至10個碳原子，更佳包含3至6個碳原子。單環環烷基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等；多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。環烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包含3至20個環原子，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_m(其中m是整數0至2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。較佳包含3至12個環原子，其中1~4個是雜原子；更佳包含3至10個環原子，其中1-4是雜原子；更佳包含5至6個環原子；其中1-3個是雜原子。單環雜環基的非限制性實例包括吡咯烷基、四氫吡喃基、1,2.3.6-四氫吡啶基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌嗪基等。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。

該雜環基環可以稠合於芳基、雜芳基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜環基，其非限制性實例包括：

雜環基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“芳基”指6至14員全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)基團，其為具有共軛的π電子體系的多環(即其帶有相鄰對碳原子的環)基團，較佳為6至10員，例如苯基和萘基。該芳基環可以稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，其非限制性實例包括：

芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“雜芳基”指包含1至4個雜原子、5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基較佳為5至10員，更佳為5員或6員，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、三嗪基、喹啉、喹唑啉等。該雜芳基環可以稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，其非限制性實例包括：

雜芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“鹵烷基”指烷基被一個或多個鹵素取代，其中烷基如上所定義。

術語“環烷基烷基”指烷基被一個或多個環烷基取代，較佳被一個環烷基取代，其中烷基如上所定義。

術語“氘代烷基”指烷基被一個或多個氘原子取代，其中烷基如上所定義。

術語“羥基”指-OH基團。

術語“羥烷基”指被羥基取代的烷基，其中烷基如上所定義。

術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。

術語“羥基”指-OH基團。

術語“胺基”指-NH₂。

術語“氰基”指-CN。

術語“硝基”指-NO₂。

術語“羰基”指C=O。

術語“羧基”指-C(O)OH。

術語“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(環烷基)，其中烷基、環烷基如上所定義。

本發明還包括各種氘化形式的式(I)化合物。與碳原子連接的各個可用的氫原子可獨立地被氘原子替換。本領域技術人員能夠參考相關文獻合成氘化形式的式(I)化合物。在製備氘代形式的式(I)化合物時可使用市售的氘代起始物質，或它們可使用常規技術採用氘代試劑合成，氘代試劑包括但不限於氘代硼烷、三氘代硼烷四氫呋喃溶液、氘代氫化鋰鋁、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。

“視需要”或“視需要地”意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，“視需要被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。

“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更較佳為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。

“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。

“可藥用鹽”是指本發明化合物的鹽，這類鹽用於哺乳動物體內時具有安全性和有效性，且具有應有的生物活性。

[本發明化合物的合成方法]

為了完成本發明的目的，本發明採用如下技術方案：

方案一

本發明通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：

通式(IA)化合物和通式(IB)化合物在催化劑存在下在鹼性條件下，發生偶聯反應得到通式(I)化合物；其中：X為鹵素； M為

或

提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、乙酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；較佳碳酸鉀；該催化劑包括但不限於鈀/碳、四-三苯基膦鈀、二氯化鈀、醋酸鈀、雙(二亞芐基丙酮)鈀、氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]鈀、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀、1,1’-雙(二苄基磷)二氯二戊鐵鈀或三(二亞苄基丙酮)二鈀，較佳為[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀；上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、乙二醇二甲醚、水或N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。

方案二

通式(IC)化合物和通式(ID)化合物在鹼性條件下，反應得到通式(I)化合物；其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G¹~G³、R¹~R³、R⁵和n如通式(I)中所定義。

提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、乙酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；較佳N,N-二異丙基乙胺；上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、乙二醇二甲醚、水或N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。

方案三

通式(IC)化合物和通式(ID)化合物在鹼性條件下(較佳三乙胺或N,N-二異丙基乙胺)，反應得到通式(IE)化合物；通式(IE)化合物在鹼性條件下(較佳碳酸氫鈉)脫去一個R^a，得到通式(I)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；R⁵選自烷基和環烷基；環A、W、G¹~G³、R¹~R³和n如通式(I)中所定義。

提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、乙酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、乙二醇二甲醚、水或N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。

方案四

本發明通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：

通式(IIA)化合物和通式(IB)化合物在鹼性條件下在催化劑存在下發生偶聯反應，得到通式(II)化合物，其中：X為鹵素； M為

或

； R^a選自烷基、鹵烷基、氘代烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、環烷基烷基、芳基和雜芳基；環A、W、G¹、R¹~R³和n如通式(II)中所定義。

方案五

通式(IIC)化合物和通式(ID)化合物在鹼性條件下發生反應，得到通式(II)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G¹、R¹~R³、R⁵和n如通式(II)中所定義。

方案六

通式(IIC)化合物和通式(ID)化合物在鹼性條件下(較佳三乙胺或N,N-二異丙基乙胺)發生反應，得到通式(IIE)化合物，通式(IIE)化合物在鹼性條件下(較佳碳酸氫鈉)脫去一個R^a，得到通式(II)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；R⁵選自烷基和環烷基；環A、W、G¹、R¹~R³和n如通式(II)中所定義。

提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、乙酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；較佳碳酸氫鈉；上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、乙二醇二甲醚、水或N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。

方案七

通式(IIA)化合物和通式(IB’)化合物在鹼性條件(較佳碳酸鉀)下在催化劑(較佳[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀)存在下發生偶聯反應，得到通式(IIC’)化合物，其中：X為鹵素； M為

或

；通式(IIC’)化合物和通式(ID’)化合物在鹼性條件下(較佳N,N-二甲基甲醯胺)發生反應，得到通式(II)化合物，其中：R^a選自-C(O)R⁵和-C(S)R⁵；R⁵選自烷基和環烷基；環A、W、G¹、R¹~R³和n如通式(II)中所定義。

鹼性條件和催化劑的選擇可參考其他技術方案。

以下結合實施例用於進一步描述本發明，但這些實施例並非限制著本發明的範圍。

[實施例]

化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或/和質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d ₆)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)。

MS的測定用FINNIGAN LCQAd(ESI)質譜儀(生產商：Thermo，型號：Finnigan LCQ advantageMAX)。

高效液相色譜法(HPLC)分析使用Agilent HPLC 1200DAD、Agilent HPLC 1200VWD和Waters HPLC e2695-2489高壓液相色譜儀。

手性HPLC分析測定使用Agilent 1260 DAD高效液相色譜儀。

高效液相製備使用Waters 2767、Waters 2767-SQ Detecor2、Shimadzu LC-20AP和Gilson-281製備型色譜儀。

手性製備使用Shimadzu LC-20AP製備型色譜儀。

CombiFlash快速製備儀使用Combiflash Rf200(TELEDYNE ISCO)。

薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm~0.2mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm。

矽膠管柱色譜法一般使用煙臺黃海矽膠200~300目矽膠為載體。

激酶平均抑制率及IC₅₀值的測定用NovoStar酶標儀(德國BMG公司)。

本發明的已知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自ABCR GmbH & Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶遠科技(上海)有限公司化學科技(Accela ChemBio Inc)、達瑞化學品等公司。

實施例中無特殊說明，反應能夠均在氬氣氛或氮氣氛下進行。

氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。

氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。

加壓氫化反應使用Parr 3916EKX型氫化儀和清藍QL-500型氫氣發生器或HC2-SS型氫化儀。

氫化反應通常抽真空，充入氫氣，重複操作3次。

微波反應使用CEM Discover-S 908860型微波反應器。

實施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。

實施例中無特殊說明，反應的溫度為室溫，為20℃~30℃。

實施例中的反應進程的監測採用薄層色譜法(TLC)，反應所使用的展開劑，純化化合物採用的管柱層析的沖提劑的體系和薄層色譜法的展開劑體系包括：A：二氯甲烷/甲醇體系，B：正己烷/乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等鹼性或酸性試劑進行調節。

實施例1

N-(4-(呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺1

第一步

6-溴-4-甲基喹唑啉1b

將1-(2-胺基-5-溴苯基)乙-1-酮1a(1g，4.67mmol，採用公知的方法“Journal of Medicinal Chemistry,2015,58(14),5522-5537”製備而得)，原甲酸三乙酯(1.04g，7.01mmol)和乙酸銨(540.15mg，7.01mmol)加入反應瓶中，110℃下，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，反應液用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，得標題產物1b(500mg)，產率：47.98%。

MS m/z(ESI)：223.1[M+1]。

第二步

4-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)喹唑啉1c

在氬氣氛下，依次加入化合物1b(360mg，1.61mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷)(409.82mg，1.61mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(236.17mg，322.77μmol)和乙酸鉀(475.16mg，4.84mmol)溶解於20mL二甲醚溶液中，加熱至80℃，攪拌4小時。停止反應，冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，得到標題產物1c(330mg)，產率：75.7%。

MS m/z(ESI)：271.1[M+1]。

第三步

4-(呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-胺1e

在氬氣氛下，依次加入5-溴-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-胺1d(200mg，833.14μmol，採用專利申請公開的方法“EP1439175A1”製備而得)、化合物1c(271mg，1.00mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(61mg，83.37μmol)和碳酸鉀(346mg，2.50mmol)溶解於10mL 1,4-二噁烷和水(V/V=4：1)的混合溶液中，加熱至90℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物1e(97.3mg)，產率：38.5%。

MS m/z(ESI)：304.1[M+1]。

第四步

N-(環丙甲醯基)-N-(4-(呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺1f

將化合物1e(50mg,164.8438μmol)溶於5mL二氯甲烷中，加入三乙胺(50mg,494.1200μmol)，冷卻到0℃，滴加環丙基甲醯氯(52mg,497.4425μmol)的二氯甲烷溶液1mL，加畢攪拌0.5小時。加水，少量飽和碳酸氫鈉，用二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物1f(97.3mg)，產率：73.16%。

MS m/z(ESI)：440.2[M+1]。

第五步

N-(4-(呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺1

將化合物1f(53mg,120.6012μmol)溶於5mL甲醇中，加入碳酸氫鈉(31mg,369.0186μmol)，攪拌反應3小時，過濾，加20mL乙酸乙酯，依次用水(10mL)，氯化鈉溶液(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物1(32mg)，產率：71.44%。

MS m/z(ESI)：372.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 11.04(s,1H),9.16(s,1H),8.70(s,1H),8.36(s,1H),7.99-8.02(m,1H),7.86-7.89(m,1H),7.70(s,1H),6.75(m,1H),6.55(m,1H),2.92(s,3H),2.22(m,1H),0.85-0.87(m,4H)。

實施例2

N-(5-(4-甲基喹唑啉-6-基)-4-苯基嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺2

第一步

5-(4-甲基喹唑啉-6-基)-4-苯基嘧啶-2-胺2b

將5-溴-4-苯基嘧啶-2-胺2a(1g，3.99mmol，採用專利申請“WO2014125426A1”公開的方法製備而得)，化合物1c(1.1g，4.07mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(439mg，599μmol)和碳酸鉀(1.1g，8.04mmol)溶解於70mL 1,4-二噁烷和水(V/V=4：1)的混合溶液中，加熱至90℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物2b(400mg)，產率：30.9%。

第二步

N-(5-(4-甲基喹唑啉-6-基)-4-苯基嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺2

在氬氣氛下，將化合物2b(0.15g,478mmol)，和N,N-二異丙基乙胺(185mg,1.43mmol)溶於二氯甲烷(20mL)中，加入環丙基甲醯氯(75mg,718μmol)，反應15分鐘，停止反應，往反應中加入30mL水，分液，水相用二氯甲烷(3×30mL)萃取，後用飽和氯化鈉溶液(100mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，旋幹，用波層色譜法，分離得純品溶於得到標題產物2(15mg)，產率：8.2%。

MS m/z(ESI)：381.6[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 9.19(s,1H),8.73(s,1H),8.62(s,1H),7.96-7.93(t,2H),7.61-7.59(d,1H),7.43-7.36(m,3H),7.29-7.27(d,2H),2.85(s,3H),2.11(s,1H),1.26-1.23(m,2H),1.01-0.97(m,2H)。

實施例3

N-環丙基-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)-4-苯基嘧啶-2-胺3

第一步

N-環丙基-4-苯基嘧啶-2-胺3b

將2-(甲磺醯基)-4-苯基嘧啶3a(1.1g,4.6954mmol，採用專利申請公開的方法“US2003/060626A1”製備而得)溶於20mL 1,4-二噁烷中，加入環丙胺(804mg, 14.0820mmol,975.7282能)，用封管在80℃攪拌3小時。冷卻，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物3b(890mg)，產率：89.72%。

MS m/z(ESI)：212.1[M+1]。

第二步

5-溴-N-環丙基-4-苯基嘧啶-2-胺3c

將化合物3b(840mg,3.9761mmol)溶於10mL N,N-二甲基甲醯胺中，分批加入NBS(708mg,3.9779mmol)，攪拌反應30分鐘。加水，用乙酸乙酯萃取三次(50mL×3)，合併有機相，依次用水(20mL×3)，氯化鈉溶液(20mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物3c(730mg)，產率：63.27%。

MS m/z(ESI)：290.1[M+1]。

第三步

N-環丙基-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)-4-苯基嘧啶-2-胺3

在氬氣氛下，依次加入化合物3c(100mg,344.6398μmol)，化合物1c(93mg,344.2738μmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(25mg,34.1665μmol)和碳酸鉀(143mg,1.0362mmol)溶解於12mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱至80℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物3(12mg)，產率：9.85%。

MS m/z(ESI)：354.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ 91.04(s,1H),8.52(s,1H),8.10(s,1H),8.82-8.84(m,1H),7.72-7.75(m,1H),7.40-7.42(m,2H),7.32-7.38(m,1H),7.28-7.30(m,2H),2.84(m,1H),2.85(s,3H),0.84-0.86(m,2H),0.63(m,2H)。

實施例4

N-環丙基-4-(呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-胺4

第一步

N-環丙基-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-胺4b

將4-(呋喃-2-基)-2-(甲磺醯基)嘧啶4a(0.3g,1.33mmol，採用專利申請公開的方法“CN105237518A”製備而得)溶於20mL 1,4-二噁烷中，加入環丙胺(229mg,4.01mmol)，用封管在80℃攪拌3小時。冷卻，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物4b(120mg)，產率：44.5%。

MS m/z(ESI)：202.6[M+1]。

第二步

5-溴-N-環丙基-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-胺4c

將化合物4b(120mg,0.596mmol)溶於10mL N,N-二甲基甲醯胺中，分批加入N-溴代丁二醯亞胺(116mg,0.656mmol)，攪拌反應30分鐘。加水，用乙酸乙酯萃取三次(50mL×3)，合併有機相，依次用水(20mL×3)，氯化鈉溶液(20mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物4c(100mg)，產率：59.8%。

MS m/z(ESI)：279.6[M+1]。

第三步

N-環丙基-4-(呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-胺4

在氬氣氛下，依次加入化合物4c(100mg,357μmol)，化合物1c(106mg,392μmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(39mg,53.5μmol)和碳酸鉀(98mg,713.9μmol)溶解於12mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱至80℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物4(6mg)，產率：4.89%。

MS m/z(ESI)：343.6[M+1]。

¹H N1MR(400MHz,CD₃OD)δ 9.22(s,1H),8.36(s,1H),8.05-8.02(t,2H),7.79-7.77(d,1H),7.36(s,1H),6.53(brs,1H),6.36(s,1H),5.72(s,1H),2.95(s,3H),2.91(s,1H),0.93-0.88(m,2H),0.64(m,2H)。

實施例5

N-(4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺5

第一步

4-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺5c

氬氣氛下，依次加入化合物5a(5.0g,38.59mmol，採用專利申請公開的方法“WO2009/158011A1”製備而得)，化合物5b(6.5g,46.45mmol，採用公知的方法“Organic Letters,2011,13(13),3312-3315”製備而得)，[1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(2.83g,3.86mmol)，碳酸鉀(7.99g,57.89mmol)溶解於120mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱至90℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物5c(6.5g)，產率：89.01%。

MS m/z(ESI)：190.1[M+1]。

第二步

5-溴-4-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺5d

將化合物5c(5.85g,30.92mmol)溶於50mL N,N-二甲基甲醯胺中，分批加入N-溴代丁二醯亞胺(6.60g,37.08mmol)，攪拌反應1小時。加水，用乙酸乙酯萃取三次(100mL×3)，合併有機相，水洗三次(50mL×3)，飽和氯化鈉溶液洗滌一次(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物5d(6.5g)，產率：78.41%。

MS m/z(ESI)：228.1.0[M+1]。

第三步

4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-胺5e

在氬氣氛下，依次加入化合物5d(1.5g,5.59mmol)，化合物1c(1.66g,6.16mmol)，[1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(410mg,0.56mmmol)，碳酸鉀(2.32g,16.79mmol)溶解於75mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱至90℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物5e(982mg)，產率：52.99%。

MS m/z(ESI)：332.2[M+1]。

第四步

N-(環丙甲醯基)-N-(4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺5f

將化合物5e(150mg,452.55μmol)溶於10mL二氯甲烷中，加入N,N-二異丙基乙胺(177mg,1.37mmol)，冷卻到0℃，滴加環丙基甲醯氯(119mg,1.14mmol)，加畢，攪拌2小時。加水，少量飽和碳酸氫鈉溶液，用二氯甲烷萃取三次(20mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物5f(80mg)，產率：37.81%。

MS m/z(ESI)：468.2[M+1]。

第五步

N-(4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺5

將化合物5f(80mg,171.12μmol)溶於甲醇(5mL)中，加入碳酸氫鈉(44mg,523.81μmol)，攪拌3小時。加入水，二氯甲烷萃取三次，合併有機相，食氯化鈉溶液洗滌，硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物5(23mg)，產率：33.65%。

MS m/z(ESI)：400.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 11.13(s,1H),9.13(s,1H),8.88(s,1H),8.35(s,1H),7.86(d,1H),7.64(d,1H),7.61(t,2H),7.17(t,2H),2.89(s,3H),2.19(brs,1H),0.86(brs,4H)。

實施例6

N-(4-(5-甲基呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺6

第一步

4-(5-甲基呋喃-2-基)嘧啶-2-胺6c

在氬氣氛下，依次加入4-氯嘧啶-2-胺6a(5g,38.5959mmol，南京藥石科技股份有限公司)，4,4,5,5-四甲基-2-(5-甲基呋喃-2-基)-1,3,2-二氧硼雜環戊烷6b(8.833g,42.4539mmol，上海畢得醫藥科技有限公司)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(1.412g,1.9297mmol)，碳酸鉀(10.652g,77.1884mmol)溶解於120mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱至90℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物6c(6.2g)，產率：91.69%。

MS m/z(ESI)：176.1[M+1]。

第二步

5-溴-4-(5-甲基呋喃-2-基)嘧啶-2-胺6d

將化合物6c(6.2g,35.3908mmol)溶於50mL N,N-二甲基甲醯胺中，分批加入N-溴代丁二醯亞胺(6.299g,35.3908mmol)，攪拌反應1小時。加水，用乙酸乙酯萃取三次(100mL×3)，合併有機相，水洗三次(50mL×3)，氯化鈉溶液一次(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物6d(4.4g)，產率：48.93%。

MS m/z(ESI)：254.0[M+1]。

第三步

4-(5-甲基呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-胺6e

在氬氣氛下，依次加入化合物6d(200mg,787.1444μmol)，化合物1c(234mg,866.2368μmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(58mg,79.2664μmol)，碳酸鉀(326mg,2.3623mmol)溶解於24mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱至90℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物6e(138mg)，產率：55.24%。

MS m/z(ESI)：318.2[M+1]。

第四步

N-(環丙甲醯基)-N-(4-(5-甲基呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺6f

將化合物6e(50mg,157.5577μmol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(50mg,478.3087μmol)，冷卻到0℃，滴加環丙基甲醯氯(48mg,474.3552μmol)的二氯甲烷溶液1mL，加畢攪拌0.5小時。加水，少量飽和碳酸氫鈉，用二氯甲烷萃取三次(20mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物6f(35mg)，產率：48.98%。

MS m/z(ESI)：454.2[M+1]。

第五步

將化合物6f(35mg,77.1789μmol)溶於5mL甲醇中，加入碳酸氫鈉(20mg,238.0765μmol)，攪拌反應3小時，過濾，加20mL乙酸乙酯，用水洗一次(10mL)，氯化鈉溶液一次(10mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物6(10mg)，產率：33.61%。

MS m/z(ESI)：386.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 9.28(s,1H),8.53(s,1H),8.51(br,1H),8.10-8.14(m,2H),7.87-7.88(m,1H),6.54-6.55(m,1H),6.02-6.03(m,1H),3.02(s,3H),2.48(m,1H),2.07(s,3H),1.26-1.28(m,2H),1.00-1.03(m,2H)。

實施例7

5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-N-環丙基-4-苯基嘧啶-2-胺7

第一步

6-溴-8-氯-4-甲基喹唑啉7b

將1-(2-胺基-5-溴-3-氯苯基)乙烷-1-酮7a(2.3g，9.25mmol，採用專利申請“WO2009144554”公開的方法製備而得)與乙酸銨(4.3g，55.52mmol)溶於原甲酸三乙酯(60mL)中，加熱至130℃，攪拌反應16小時。反應液減壓濃縮，殘餘物用300mL乙酸乙酯溶解後再用50mL飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化所得殘餘物，得到標題化合物7b(600mg)，產率：25.2%MS m/z(ESI)：256.5[M+1]。

第二步

8-氯-4-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)喹唑啉7c

將6-溴-8-氯-4-甲基喹唑啉7b(0.6g，2.33mmol)，4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼雜環戊烷)(1.19g，4.68mmol),[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(255mg,349μmol)，碳酸鉀(457mg,4.66mmol)溶解於60mL乙二醇二甲醚中，加熱至90℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物7c(700mg)，產率：98.63%。

第三步

5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-N-環丙基-4-苯基嘧啶-2-胺7

在氬氣氛下，依次加入7c(105mg,344μmol)，化合物3c(100mg,344μmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(37.8mg,51.7μmol)和碳酸鉀(95.1mg,689.3mmol)溶解於12mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱至80℃，攪拌2小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物7(18mg)，產率：13.46%。

MS m/z(ESI)：387.6[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ 9.26(s,1H),8.50(s,1H),7.75-7.73(d,2H),7.39-7.35(m,3H),7.31-7.29(d,2H),5.61(s,1H),2.94-2.90(m,1H),2.85(s,3H),0.94-0.87(m,2H),0.66-0.63(m,2H)。

實施例8

N-(4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)乙醯胺8

第一步

N-乙醯基-N-(4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)乙醯胺8a

將化合物5e(100mg,301.8μmol)溶於二氯甲烷(5mL)中，分別加入N,N-二異丙基乙胺(118mg,913.01μmol)和乙醯氯(72mg,917.22μmol)，攪拌2小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液，二氯甲烷萃取三次，合併有機相，氯化鈉溶液洗滌，硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物8a(75mg)，產率：59.82%。

MS m/z(ESI)：416.2[M+1]。

第二步

N-(4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2基)乙醯胺8

將化合物8a(75mg,180.54μmol)溶於甲醇(5mL)中，分別加入碳酸氫鈉(62mg,738.09μmol)，攪拌2小時。加入水，二氯甲烷萃取三次，合併有機相，食氯化鈉溶液洗滌，硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物7(50mg)，產率：74.17%。

MS m/z(ESI)：374.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 10.80(s,1H),9.12(s,1H),8.88(s,1H),8.35(s,1H),7.86(d,1H),7.62(d,1H),7.48(t,2H),7.17(t,2H),2.89(s,3H),2.28(s,3H)。

實施例9

N-(5-(呋喃-2-基)-6-(4-甲基喹唑啉-6-基)-1,2,4-三嗪-3-基)環丙基甲醯胺9

第一步

6-溴-5-(呋喃-2-基)-1,2,4-三嗪-3-胺9b

將6-溴-1,2,4-三嗪-3-胺9a(11g,62.8620mmol，採用專利申請公開的方法“US2016/0251361A1”製備而得)溶於160mL三氟乙酸和二氯甲烷(V/V=1：1)的混合溶液中，加入呋喃(4.707g,69.1455mmol,4.9968mL)，攪拌反應17小時，用飽和碳酸鈉溶液調pH大於7，加入100mL氫氧化鉀(10.6g,188.9294mmol)和鐵氰化鉀(62.09g,188.5858mmol)的水溶液，常溫攪拌17小時。用二氯甲烷萃取三次(200mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到標題產物9b(1.26g)，產率：8.31%。

第二步

5-(呋喃-2-基)-6-(4-甲基喹唑啉-6-基)-1,2,4-三嗪-3-胺9c

在氬氣氛下，依次加入化合物9b(1.2g,4.9783mmol)，化合物1c(1.345g,4.9790mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(365mg,498.8315umol)，碳酸鉀(2.061g,14.9348mmol)溶解於120mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱到90℃攪拌3小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物9c(800mg)，產率：52.81%。

MS m/z(ESI)：305.1[M+1]。

第三步

N-(環丙甲醯基)-N-(5-(呋喃-2-基)-6-(4-甲基喹唑啉-6-基)-1,2,4-三嗪-3-基)環丙基甲醯胺9d

將化合物9c(200mg,657.2332umol)溶於30mL二氯甲烷中，加入三乙胺(200mg,1.9765mmol)，冷卻到0℃，滴加環丙基甲醯氯(206mg,1.9706mmol)的二氯甲烷溶液1mL，加畢，攪拌0.5小時。加水，用二氯甲烷萃取(30mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物9d(210mg)，產率：72.54%。

第四步

將化合物9d(210mg,476.7816umol)溶於30mL甲醇中，加入碳酸氫鈉(80mg,952.3061umol)，攪拌反應3小時，過濾，加50mL乙酸乙酯，用水洗滌(10mL)，氯化鈉溶液洗滌(10mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物9(105mg)，產率：59.14%。

MS m/z(ESI)：373.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 11.53(s,1H),9.17(s,1H),8.53(m,1H),8.06-8.11(m,2H),7.85(m,1H),6.81(m,1H),6.61(m,1H),2.88(s,3H),2.17-2.22(m,1H),0.88-0.90(m,4H)。

實施例10

N-(5-(4,8-二甲基喹唑啉-6-基)-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺10

第一步

1-(2-胺基-5-溴-3-甲基苯基)乙基-1-酮10b

在氬氣氛下，將2-胺基-5-溴-3-甲基苯腈10a(2g,9.47mmol，採用公知的方法“WO2008156757”製備而得)溶解於100mL四氫呋喃中，在-10℃下滴加甲基溴化鎂(2M,23.69mL)，攪拌反應17小時。加10%鹽酸溶液，攪拌1小時，反應液用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(80mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，得到標題產物10b(1.85g)。

MS m/z(ESI)：229.1[M+1]。

第二步

6-溴-4,8-二甲基喹唑啉10c

採用實施例7的合成路線，將第一步原料7a替換成化合物10b，製得目標產物10c(1.78g)。

MS m/z(ESI)：237.0[M+1]。

第三步

4,8-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)喹唑啉10d

採用實施例7的合成路線，將第二步原料7b替換成化合物10c，製得目標產物10d(2.0g)。

MS m/z(ESI)：285.0[M+1]。

第四步

5-(4,8-二甲基喹唑啉-6-基)-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-胺10e

採用實施例1的合成路線，將第三步原料1c替換成化合物10d，製得目標產物10e(40mg)。

第五步

N-(環丙醯基)-N-(5-(4,8-二甲基喹唑啉-6-基)-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺10f

採用實施例1的合成路線，將第四步原料1e替換成化合物10e，製得目標產物10f(181mg)。

第六步

採用實施例1的合成路線，將第一步原料1f替換成化合物10f，製得目標產物10(75mg)。

MS m/z(ESI)：386.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：11.03(s,1H),9.18(s,1H),8.67(s,1H),8.16(s,1H),7.78(s,1H),7.71(s,1H),6.71(d,1H),6.56(s,1H),2.90(s,3H),2.68(s,3H),2.23-2.26(m,1H),0.85-0.87(m,4H)。

實施例11

N-(5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺11

第一步

5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-胺11a

採用實施例1的合成路線，將第三步原料1c替換成化合物7c，製得目標產物11a(45mg)。

第二步

N-(5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-4-(呋喃-2-基)嘧啶2-基)-N-(環丙基甲醯基)環丙基甲醯胺11b

採用實施例1的合成路線，將第四步原料1e替換成化合物11a，製得目標產物11b(130mg)。

第三步

採用實施例1的合成路線，將第五步原料1f替換成化合物11b，製得目標產物11(15mg)。

MS m/z(ESI)：405.9[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：11.04(s,1H),9.26(s,1H),8.70(s,1H),8.34(d,1H),8.16(d,1H),7.71(s,1H),6.85(d,1H),6.58(dd,1H),2.93(s,3H),2.22-2.23(m,1H),0.84-0.86(m,4H)。

實施例12

N-(4-(呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙基硫甲醯肪12

第一步

環丙基硫代甲醯胺12b

將環丙醯胺12a(1g,11.75mmol，韶遠科技(上海)有限公司)，勞森試劑(4.753g,11.75mmol，上海阿達瑪斯有限公司)，碳酸鈉(1.245g,11.74mmol)加入100mL四氫呋喃中，80℃攪拌5小時。冷卻，減壓濃縮，再加入水和乙醚，分液，乙醚層用水洗，飽和氯化鈉溶液洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得標題化合物12b(720mg)，產率：60.6%。

第二步

5-溴-2-氯-4-(呋喃-2-基)嘧啶12e

在氬氣氛下，依次加入5-溴-2,4-二氯嘧啶12c(2g,8.77mmol，韶遠科技(上海)有限公司)，2-呋喃硼酸12d(884mg,7.9mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(642mg,877.4umol)，碳酸鉀(3.634g,26.33mmol)溶解於120mL 1,4-二噁烷和水(V/V=5：1)的混合溶液中，加熱到90℃攪拌17小時。停止反應，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，得到標題產物12e(1.2g)，產率：52.7%。

第三步

6-(2-氯-4-(呋喃-2-基)嘧啶-5-基)-4-甲基喹唑啉12f

採用實施例1的合成路線，將第三步原料化合物1d替換為化合物12e，製得標題產物12f(1.2g)。

第四步

N-(4-(呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-基)環丙硫代甲醯胺12

將化合物12b(156mg,1.54mmol)加入2mL N,N-二甲基甲醯胺中，加入鈉氫(82mg,2.05mmol)，攪拌30分鐘，再加入化合物12f(330mg,1.02mmol)，繼續攪拌2小時。加入，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，水洗(30mL×3)，飽和氯化鈉溶液洗(30mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物12(48mg)，產率：12.1%。

MS m/z(ESI)：387.9[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 12.40(s,1H),9.15(s,1H),8.82(s,1H),8.38-8.39(m,1H),7.99-8.01(m,1H),7.91-7.93(m,1H),7.68-7.69(m,1H),6.90-6.91(m,1H),6.57-6.58(m,1H),2.91(s,3H),2.90-2.91(m,1H),1.18-1.20(m,2H),1.04-1.06(m,2H)。

實施例13

N-(6-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-5-(呋喃-2-基)-1,2,4-三嗪-3-基)環丙基甲醯胺13

採用實施例9的合成路線，將第二步原料化合物1c替換為化合物7c，製得標題產物13(35mg)。

MS m/z(ESI)：406.9[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 11.55(s,1H),9.27(s,1H),8.52(s,1H),8.35-8.36(m,1H),7.85-7.86(m,1H),6.92-6.93(m,1H),6.62-6.63(m,1H),2.90(s,3H),2.14-2.16(m,1H),0.88-0.89(m,4H)。

實施例14

N-(5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-4-(5-甲基呋喃-2-基)嘧啶-2-基)環丙基甲醯胺14

採用實施例6的合成路線，將第三步原料化合物1c替換為化合物7c，製得標題產物14(30mg)。

MS m/z(ESI)：419.5[M+1].

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 10.96(s,1H),9.22(s,1H),8.62(s,1H),8.31(s,1H),8.14(s,1H),6.60(s,1H),6.17(s,1H),2.91(s,3H),2.16-2.20(m,1H),2.04(s,3H),0.82(t,4H)。

實施例15

N-(環丙甲基)-5-(呋喃-2-基)-6-(4-甲基喹唑啉-6-基)-1,2,4-三嗪-3-胺15

第一步

3-(甲基亞磺醯基)-1,2,4-三嗪15b

將3-(甲硫基)-1,2,4-三嗪15a(3.000g,23.591mmol，上海畢得醫藥科技有限公司)和3-氯過氧化苯甲酸(8.835g,51.198mmol，上海沃凱化學試劑有限公司)溶於200mL二氯甲烷中，攪拌反應2小時，用飽和碳酸鈉溶液調節pH大於7，用二氯甲烷和甲醇(V/V=5：1)的混合溶液萃取三次(200mL×5)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到標題產物15b(2.158g，產率：63.89%)。

第二步

N-(環丙甲基)-1,2,4-三嗪-3-胺15c

將化合物15b(2.158g,15.073mmol)和環丙基甲胺(2.144g,30.146mmol，上海阿達瑪斯有限公司)溶於50mL 1,4-二噁烷中，攪拌反應1小時，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物15c(821mg，產率：36.27%)。

MS m/z(ESI)：151.4[M+1]。

第三步

6-溴-N-(環丙甲基)-1,2,4-三嗪-3-胺15d

將化合物15c(821mg,5.467mmol)溶於50mL乙腈和水(V/V=2：3)的混合溶液中，加入N-溴代丁二醯亞胺(1.022g,5.742mmol)，攪拌反應17小時。減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物15d(1.1g，產率：87.84%)。

MS m/z(ESI)：229.1[M+1]。

第四步

6-溴-N-(環丙甲基)-5-(呋喃-2-基)-4,5-二氫-1,2,4-三嗪-3-胺15e

將化台物15d(810mg,3.536mmol)和呋喃(265mg,3.893mmol，韶遠科技(上海)有限公司科技(上海)有限公司)溶於30mL二氯甲烷和三氟乙酸(V/V=1：1)的混合溶液中，攪拌反應4小時，用飽和碳酸鈉溶液調節pH大於7，用二氯甲烷萃取三次(50mL×3)，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物15e(510mg，產率：48.54%)。

MS m/z(ESI)：297.1[M+1]。

第五步

6-溴-N-(環丙甲基)-5-(呋喃-2-基)-1,2,4-三嗪-3-胺15f

將化合物15e(510mg,1.716mmol)和2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(585mg,2.577mmol，上海阿達瑪斯有限公司)溶於20mL二氯甲烷中，攪拌反應17小時，用飽和碳酸鈉溶液調節pH大於7，用二氯甲烷萃取三次(50mL×3)，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物15f(151mg，產率：29.81%)。

MS m/z(ESI)：295.0[M+1]。

第六步

採用實施例3合成路線，將原料化合物3c替換為化合物15f，製得標題化合物15(124.7mg，產率：71.31%)。

MS m/z(ESI)：359.1[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ 9.16(s,1H),8.40(s,1H),8.07-8.02(m,3H),7.80-7.79(m,1H),6.81(brs,1H),6.60-6.59(m,1H),3.36-3.34(m,2H),2.89(s,3H),1.19-1.14(m,1H),0.50-0.46(m,2H),0.33-0.29(m,2H)。

實施例16

N-(6-(4-甲基喹唑啉-6-基)-5-苯基-1,2,4-三嗪-3-基)-環丙基甲醯胺16

採用實施例1的合成路線，將第三步原料化合物1d替換為6-溴-5-苯基-1,2,4-三嗪-2-胺(採用公知的方法“Journal of Medicinal Chemistry,2012,55(5),1898-1903”製備而得)，製得標題化合物16(35mg)，產率：45.8%。

MS m/z(ESI)：383.1[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ 11.61(brs,1H),9.15(s,1H),8.43(s,1H),7.96(t,1H),7.46-7.54(m,3H),7.36-7.40(m,2H),2.77(s,3H),2.19-2.22(m,1H),0.91(d,4H)。

實施例17

N-(6-(4,8-二甲基喹唑啉-6-基)-5-(呋喃-2-基)-1,2,4-三嗪-3-基)環丙基甲醯胺17

採用實施例9的合成路線，將第二步原料化合物1c替換為化合物10d，製得標題產物17(10mg)。

MS m/z(ESI)：387.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 11.52(s,1H),9.20(s,1H),8.33(s,1H),8.00-8.01(m,1H),7.86-7.87(m,1H),6.78-6.79(m,1H),6.60-6.61(m,1H),2.85(s,3H),2.70(s,3H),2.15-2.18(m,1H),0.88-0.90(m,4H).

實施例18

5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-N-甲基-4-苯基嘧啶-2-胺18

採用實施例3合成路線，將原料化合物3b替換為N-甲基-4-苯基嘧啶-2-胺(採用公知的方法“Journal of Organic Chemistry,2016,81(13),5538-5546”製備而得)，將原料化合物1c替換為7c，製得標題化合物18(136.9mg)。

MS m/z(ESI)：362.1[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ 9.17(s,1H),8.59(s,1H),8.06(s,1H),7.73(s,1H),7.51(s,1H),7.38-7.30(m,5H),2.92-2.91(m,3H),2.81(s,3H)。

實施例19

N-環丙基-4-(5-甲基呋喃-2-基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-胺19

採用實施例4的合成路線，將第一步原料化合物4a替換為4-(甲基呋喃-2-基)-2-(甲磺醯基)嘧啶19a，製得標題產物19(30mg)。

MS m/z(ESI)：357.6[M+1].

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 9.21(s,1H),8.31(s,1H),8.02(t,2H),7.80(d,1H),6.33(s,1H),5.94(s,1H),5.54(s,1H),2.95(s,3H),2.87-2.91(m,1H),2.17(s,3H),0.90(t,2H),0.64(t,2H)。

實施例20

N-(環丙甲基)-6-(4-甲基喹唑啉-6-基)-5-苯基-1,2,4-三嗪-3-胺20

採用實施例3合成路線，將原料化合物3a替換為3-(甲基磺醯基)-5-苯基-1,2,4-三嗪(採用公知的方法“Bioorganic and medicinal chemistry letters,2002,12(16),2137-2140”製備而得)，將原料化合物環丙胺替換為環丙基甲胺(上海阿達瑪斯有限公司)，製得標題化合物20(159.3mg)。

MS m/z(ESI)：369.2[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ 9.10(s,1H),8.22(s,1H),7.92-7.87(m,2H),7.46-7.34(m,6H),3.37-3.35(m,2H),2.72(s,3H),1.23-1.19(m,1H),0.50-0.47(m,2H),0.32-0.29(m,2H)。

實施例21

N-甲基-6-(4-甲基喹唑啉-6-基)-5-苯基-1,2,4-三嗪-3-胺21

採用實施例3合成路線，將原料化合物3a替換為3-(甲基磺醯基)-5-苯基-1,2,4-三嗪(採用公知的方法“Bioorganic and medicinal chemistry letters,2002,12(16),2137-2140”製備而得)，將原料化合物環丙胺替換為甲胺四氫呋喃溶液(上海阿達瑪斯有限公司)，製得標題化合物21(74.8mg)。

MS m/z(ESI)：329.2[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ 9.10(s,1H),8.21(s,1H),7.92-7.87(m,3H),7.47-7.43(m,3H),7.38-7.34(m,2H),3.05-2.97(m,3H),2.71(s,3H)。

實施例22

N-(4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)-1,2,4-三嗪-2-基)丙醯胺22

採用實施例8的合成路線，將第一步原料化合物乙醯氯替換為化合物丙醯氯，製得標題化合物22(34mg)。

MS m/z(ESI)：388.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，DMSO-d ₆)：δ 10.77(s,1H),9.13(s,1H),8.88(s,1H),8.35(s,1H),7.86(d,1H),7.61(d,1H),7.48(d,2H),7.17(t,1H),2.89(s,3H),2.58(q,2H),1.09(t,3H)。

實施例23

N-(5-(呋喃-2-基)-6-(4-甲基喹唑啉-6-基)-1,2,4-三嗪-3-基)環丁基甲醯胺

採用實施例9的合成路線，將第三步環丙甲醯氯替換為環丁基甲醯氯，製得標題產物23(75mg)。

MS m/z(ESI)：386.9[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 11.08(s,1H),9.18(s,1H),8.53-8.54(m,1H),8.06-8.13(m,2H),7.86(m,1H),6.82-6.83(m,1H),6.61-6.62(m,1H),3.58-3.62(m,1H),2.88(s,3H),2.16-2.28(m,4H),1.93-1.96(m,1H),1.80-1.84(m,1H)。

實施例24

5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-N-環丙基-4-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺24

第一步

4-(4-氟苯基)-2-(甲硫基)嘧啶24b

採用實施例5的合成路線，將第一步原料5a替換成化合物24a，製得目標產物24b(1.315g)。

第二步

4-(4-氟苯基)-2-(甲基磺醯基)嘧啶24c

將化合物24b(1.315g，5.97mmol)溶解於50mL二氯甲烷中，加入間氯過氧苯甲酸(2.061g，11.94mmol)，攪拌反應3小時。反應液用飽和碳酸氫鈉溶液(100mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，製得目標產物24c(1.115g，收率74.03%)。

第三步

N-環丙基-4-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺24d

採用實施例3的合成路線，將第一步原料3a替換成化合物24c，製得目標產物24d(377mg)。

第四步

5-溴-N-環丙基-4-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺24e

採用實施例3的合成路線，將第二步原料3b替換成化合物24d，製得目標產物24e(472mg)。

第五步

5-(8-氯-4-甲基喹唑啉-6-基)-N-環丙基-4-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺24

採用實施例7的合成路線，將第三步原料3c替換成化合物24e，製得目標產物24(10mg)。

MS m/z(ESI)：406.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：9.16(s,1H),8.57(s,1H),8.09(s,1H),7.79(s,1H),7.74(s,1H),7.39(s,2H),7.13(t,2H),2.82(s,4H),0.69-0.70(m,2H),0.52-0.53(m,2H)。

實施例25

N-環丙基-4-(4-氟苯基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)嘧啶-2-胺25

採用實施例24的合成路線，將第五步原料7c替換成化合物1c，製得目標產物25(45mg)。

MS m/z(ESI)：372.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：9.06(s,1H),8.54(s,1H),8.16(s,1H),7.78(d,1H),7.74(s,1H),7.51(d,1H),7.36(s,2H),7.11(t,2H),2.82-2.83(m,4H),0.67-0.72(m,2H),0.50-0.54(m,2H)。

實施例26

N-(環丙甲基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)-4-苯基嘧啶-2-胺26

第一步

N-(環丙甲基)-4-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺26a

採用實施例24的合成路線，將第三步原料環丙胺替換成原料環丙甲胺，製得目標產物26a(3.554g)。

第二步

5-溴-N-(環丙甲基)-4-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺26b

採用實施例24的合成路線，將第四步原料24d替換成原料26a，製得目標產物26b(4.565g)。

第三步

N-(環丙甲基)-5-(4-甲基喹唑啉-6-基)-4-苯基嘧啶-2-胺26

採用實施例25的合成路線，將第一步原料24e替換成原料26b，製得目標產物26(65mg)。

MS m/z(ESI)：368.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：9.06(s,1H),8.54(s,1H),8.11(s,1H),7.76(d,1H),7.63(s,1H),7.53(d,1H),7.26-7.35(m,5H),3.26(t,2H),2.81(s,3H),1.13-1.14(m,1H),0.42-0.47(m,2H),0.25-0.28(m,2H)。

測試例：

生物學評價

測試例1、本發明化合物對腺苷A_2a受體(adenosine A_2a receptor，A_2aR)cAMP信號通路，腺苷A_2b受體(adenosine A_2b receptor，A_2bR)cAMP信號通路，腺苷A₁受體(adenosine A₁ receptor，A₁R)cAMP信號通路和腺苷A₃受體(adenosine A₃ receptor，A₃R)cAMP信號通路抑制活性的測定。

以下方法用來測定本發明化合物對腺苷A_2a受體(adenosine A_2a receptor，A_2aR)cAMP信號通路，腺苷A_2b受體cAMP信號通路，腺苷A₁受體cAMP信號通路和腺苷A₃受體cAMP信號通路的抑制活性。實驗方法簡述如下：

一、實驗材料及儀器

1.CHO-K1/A_2aR細胞(NM_000675.5)或CHO-K1/A_2bR細胞(NM_000676.2)或CHO-K1/A₁R細胞(NM_000674.2)或CHO-K1/A₃R細胞(NM_000677.3)

2.胎牛血清(Gibco,10099-141)

3.博來黴素(Thermo,R25001)或G418(ENZO,ALX-380-013-G005)或嘌呤黴素(Thermo,A11138-03)

4.DMEM/F12培養基(GE,SH30023.01)

5.細胞分離緩衝液(Thermo Fisher,13151014)

6.HEPES(Gibco,15630-080)

7.牛血清白蛋白(MP Biomedicals,219989725)

8.咯利普蘭(sigma,R6520-10MG)

9.腺苷脫胺酶(sigma,10102105001)

10.毛喉素(sigma，F6886)

11.2Cl-IB-MECA(Tocris,1104/10)

12.N6-環戊基腺苷(Tocris，1702/50)

13.平衡鹽緩衝液(Thermo,14025-092)

14.cAMP動態2試劑盒(cAMPdynamic 2 kit)(Cisbio,62AM4PEB)

15.384孔板(Coming,4514)或(Nunc,267462#)

16.乙基哢唑(Tocris,1691/10)

17.PHER Astar多功能酶標儀(BMG,Labtech)

二、實驗步驟

2.1腺苷A_2a受體

CHO-K1/A_2aR細胞用含有10%胎牛血清和800μg/ml博來黴素的DMEM/F12培養基進行培養。實驗時使用細胞分離緩衝液消化細胞，用含有20mM HEPES和0.1%牛血清白蛋白的平衡鹽緩衝液重新懸浮細胞並計數，將細胞密度調整為10⁶個/ml。在384孔板中每孔加入5μl細胞懸液，2.5μl用含有20mM HEPES，0.1%牛血清白蛋白，54μM咯利普蘭和2.7U/ml腺苷脫胺酶的平衡鹽緩衝液配製的4×濃度的受試化合物，室溫孵育30分鐘。每孔再加入2.5μl用含有20mM HEPES，0.1%牛血清白蛋白，54μM咯利普蘭和2.7U/ml腺苷脫胺酶的平衡鹽緩衝液配製的4×濃度的乙基哢唑，室溫孵育30分鐘。化合物終濃度是：10000，2000，400，80，16，3.2，0.64，0.128，0.0256，0.00512，0.001024nM，乙基哢唑終濃度是20nM。細胞內cAMP濃度使用cAMP動態2試劑盒檢測。用cAMP裂解緩衝液按1：4的比例分別稀釋cAMP-d2和抗cAMP-Eu-穴狀化合物(Anti-cAMP-Eu-Cryptate)。每孔加入5μl稀釋後的cAMP-d2，再加入5μl稀釋後的抗cAMP-Eu-穴狀化合物，室溫避光孵育1小時。採用PHERAstar多功能酶標儀讀取HTRF信號值。用Graphpad Prism軟件計算化合物抑制活性的IC₅₀值，見表1。

2.2腺苷A_2b受體

CHO-K1/A_2bR用含有10%胎牛血清和1mg/ml G418的DMEM/F12培養基進行培養。實驗時使用細胞分離緩衝液消化細胞，用含有20mM HEPES和0.1%牛血清白蛋白的平衡鹽緩衝液重新懸浮細胞並計數，將細胞密度調整為10⁶個/ml。在384孔板中每孔加入5μl細胞懸液，2.5μl用含有20mM HEPES，0.1%牛血清白蛋白，54μM咯利普蘭和2.7U/ml腺苷脫胺酶的平衡鹽緩衝液配製的4×濃度的受試化合物，室溫孵育30分鐘。每孔再加入2.5μl用含有20mM HEPES，0.1%牛血清白蛋白，54μM咯利普蘭和2.7U/ml腺苷脫胺酶的平衡鹽緩衝液配製的4×濃度的乙基哢唑(Torcis,1691/10)，室溫孵育30分鐘。化合物終濃度是：100000，10000，1000，100，10，1，0.1和0nM，乙基哢唑終濃度是1μM。細胞內cAMP濃度使用cAMP動態2試劑盒檢測。用cAMP裂解緩衝液按1：4的比例分別稀釋cAMP-d2和抗cAMP-Eu-穴狀化合物。每孔加入5μl稀釋後的cAMP-d2，再加入5μl稀釋後的抗cAMP-Eu-穴狀化合物，室溫避光孵育1小時。採用PHERAstar多功能酶標儀讀取HTRF信號值。用Graphpad Prism軟件計算化合物抑制活性的IC₅₀值，見表2。

2.3腺苷A₁受體

CHO-K1/A₁R用含有10%胎牛血清和1mg/mlG418的DMEM/F12培養基進行培養。實驗時使用細胞分離緩衝液消化細胞，然後用含有20mM HEPES和0.1%牛血清白蛋白的平衡鹽緩衝液重新懸浮細胞並計數，將細胞密度調整為5×10⁵個/ml。在384孔板中每孔加入12.5μl細胞懸液，6.25μl用含有20mM HEPES，0.1%牛血清白蛋白，54μM咯利普蘭和2.7U/ml腺苷脫胺酶的平衡鹽緩衝液配製的4×濃度的受試化合物，室溫孵育30分鐘。每孔再加入6.25μl用含有20mM HEPES，0.1%牛血清白蛋白，54μM咯利普蘭和2.7U/ml腺苷脫胺酶的平衡鹽緩衝液配製的4×濃度的毛喉素和N6-環戊基腺苷，室溫孵育30分鐘。化合物終濃度是：100000，10000，1000，100，10，1，0.1和0nM，毛喉素的終濃度是10μM，CPA的終濃度是10nM。細胞內cAMP濃度使用cAMP動態2試劑盒檢測。用cAMP裂解緩衝液按照1：4的比例分別稀釋cAMP-d2和抗cAMP-Eu-穴狀化合物。每孔加入12.5μl稀釋後的cAMP-d2，再加入12.5μl稀釋後的抗cAMP-Eu-穴狀化合物，室溫避光孵育1小時。採用PHERAstar多功能酶標儀讀取HTRF信號值。用Graphpad Prism軟件計算化合物抑制活性的IC₅₀值，見表1或表2。

2.4腺苷A₃受體

CHO-K1/A₃R用含有10%胎牛血清和10μg/ml嘌呤黴素的DMEM/F12培養基進行培養。實驗時使用細胞分離緩衝液消化細胞，用含有20mM HEPES和0.1%牛血清白蛋白的平衡鹽緩衝液重新懸浮細胞並計數，將細胞密度調整為5×10⁵/ml。在384孔板中每孔加入12.5μl細胞懸液，6.25μl用含有20mM HEPES，0.1%牛血清白蛋白，54μM咯利普蘭和2.7U/ml腺苷脫胺酶的平衡鹽緩衝液配製的4×濃度的受試化合物，室溫孵育30分鐘。每孔再加入6.25μl用含有20mM HEPES，0.1%牛血清白蛋白，54μM咯利普蘭和2.7U/ml腺苷脫胺酶的平衡鹽緩衝液配製的4×濃度的毛喉素和2Cl-IB-MECA，室溫孵育30分鐘。化合物終濃度是：100000，10000，1000，100，10，1，0.1和0nM，毛喉素的終濃度是10μM，2Cl-IB-MECA的終濃度是5nM。細胞內cAMP濃度使用cAMP動態2試劑盒檢測。用cAMP裂解緩衝液按照1：4的比例分別稀釋cAMP-d2和抗cAMP-Eu-穴狀化合物。每孔加入12.5μl稀釋後的cAMP-d2，再加入12.5μl稀釋後的抗cAMP-Eu-穴狀化合物，室溫避光孵育1小時。採用PHERAstar多功能酶標儀讀取HTRF信號值。用Graphpad Prism軟件計算化合物抑制活性的IC₅₀值，見表1或表2。

結論：從表1和表2中數據可以看出，本發明化合物對腺苷A_2a受體和腺苷A_2b受體均具有較好的抑制活性，對腺苷A₁受體和腺苷A₃受體抑制活性作用較弱，說明本發明化合物對腺苷A_2a受體和腺苷A_2b受體具有選擇性抑制作用。

Claims

一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，
其中：環A選自環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；W選自CH和N；G¹、G²和G³相同或不同，且各自獨立地選自N和CR⁴；R^a選自烷基、鹵烷基、氘代烷基、羥烷基、環烷基、環烷基烷基、雜環基、-C(O)R⁵、-C(S)R⁵、芳基和雜芳基；R¹選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氘代烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R²相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氘代烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R³選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氘代烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R⁴選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氘代烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R⁵選自氫原子、烷基、鹵烷基、氘代烷基、羥烷基、胺基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；並且n為0、1、2或3。
如申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物：
或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中環A、W、G¹、R^a、R¹、R²、R³和n如申請專利範圍第1項中所定義。
如申請專利範圍第1或2項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(II-1)所示的化合物：
或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中環A、W、R^a、R¹、R²、R³和n如申請專利範圍第1項中所定義。
如申請專利範圍第1至3項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(III)或通式(IV)所示的化合物：
或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中環A、R^a、R¹、R²、R³和n如申請專利範圍第1項中所定義。
如申請專利範圍第1至4項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該環A選自芳基和雜芳基。
如申請專利範圍第5項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該環A選自苯基、吡啶基、噻吩基和呋喃基。
如申請專利範圍第6項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該環A選自苯基和呋喃基。
如申請專利範圍第1至7項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R^a選自環烷基、環烷基烷基、-C(S)R⁵和-C(O)R⁵；R⁵選自烷基和環烷基。
如申請專利範圍第8項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R^a選自環烷基和-C(O)R⁵。
如申請專利範圍第1至9項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R¹選自氫原子、烷基和鹵素。
如申請專利範圍第10項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R¹選自氫原子和鹵素。
如申請專利範圍第1至11項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R²選自氫原子、鹵素和烷基。
如申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R³為烷基。
如申請專利範圍第1至13項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，該化合物選自：
一種通式(IE)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，
其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G¹至G³、R¹至R³、R⁵和n如申請專利範圍第1項中所定義。
如申請專利範圍第15項所述的通式(TE)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，該化合物選自：
一種製備申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括：
通式(IA)化合物和通式(IB)化合物發生偶聯反應，得到通式(I)化合物，其中：X為鹵素； M為
或
； R^a選自烷基、鹵烷基、氘代烷基、羥烷基、環烷基、環烷基烷基、雜環基、芳基和雜芳基；環A、W、G¹至G³、R¹至R³和n如申請專利範圍第1項中所定義。
一種製備申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括：
通式(IC)化合物和通式(ID)化合物發生反應，得到通式(I)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；環A、W、G¹至G³、R¹至R³、R⁵和n如申請專利範圍第1項中所定義。
一種製備申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括：
通式(IE)化合物脫去一個R^a，得到通式(I)化合物，其中：R^a為-C(O)R⁵；R⁵選自烷基和環烷基；環A、W、G¹至G³、R¹至R³和n如申請專利範圍第1項中所定義。
一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的根據申請專利範圍第1至14項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
一種申請專利範圍第1至14項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽或申請專利範圍第20項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備用於治療藉由對A_2a受體和/或A_2b受體抑制而改善的病況或病症的藥物。
一種申請專利範圍第1至14項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽或申請專利範圍第20項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備用於抑制A_2a受體和/或A_2b受體的藥物。
如申請專利範圍第21項所述的用途，其中該病況或病症選自癌症、抑鬱、認知功能病症、神經退行性病症、注意力相關病症、錐體外症候群、異常運動障礙、肝硬化、肝纖維化、脂肪肝、皮膚纖維化、睡眠障礙、中風、腦損傷、神經炎症和成癮行為。
如申請專利範圍第23項所述的用途，其中該病況或病症為癌症。
如申請專利範圍第23項所述的用途，其中該癌症選自黑色素瘤、腦瘤、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結腸直腸癌、肺癌、腎癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮膚癌、神經母細胞瘤、肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌、頭頸腫瘤、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤、真性紅細胞增多症、白血病、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱癌、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌和兒科腫瘤。
如申請專利範圍第25項所述的用途，其中該癌症為肺癌。