TW201726132A - 丁基原啡因之乙二醇醚 - Google Patents

Abstract

本發明係關於用於經口投與之新穎丁基原啡因之乙二醇醚及其在慢性疼痛治療中之用途。

Description

丁基原啡因之乙二醇醚

在美國，慢性疼痛係獲得健康照護之主要原因，具有多於1億患者。其在超過60%之此等患者中管理不足，因此生活品質下降、功能性能力減弱且生產力損失。存在若干類別之用於治療慢性疼痛之藥物。長期類鴉片療法(COT)通常保留用於患有利用更保守或介入之方法管理不足之頑固性慢性疼痛之彼等。對於慢性疼痛而言，治療目標係減少疼痛並改良功能，故患者可恢復日常活動。 然而，可用類鴉片療法具有若干問題，包括安全性及耐受性，濫用、誤用及流用(diversion)之潛能以及投與途徑及劑型限制。用於患有慢性疼痛之患者的理想治療應提供持續疼痛緩解而具有最小或無有害副作用。其應容易並方便投與。可以若干劑量強度用於個體調定至最適當劑量之可口服(吞嚥)藥物將滿足該等容易且方便的投藥準則。 口服投藥對治療慢性疼痛而言甚為關鍵，此乃因當患者不直接處於醫務監督下時，其係方便的且有利於劑量調定。由於慢性疼痛之不均一性質，劑量調定至關重要。通常需要不同劑量以治療不同類型之疼痛。通常不僅在治療開始時必需劑量調定以確保患者接受最有效且最安全的劑量，而且由於通常隨時間發生之疼痛強度之變化而在療程期間亦必需。 類鴉片丁基原啡因(式I) (一種部分μ激動劑及完全κ拮抗劑)可係用於治療慢性疼痛之理想止痛劑。其具有以下結構：式1。 丁基原啡因係強效止痛劑且通常止痛效力係嗎啡之約30倍。該藥物濫用潛能低且由於其部分μ激動劑活性，在增加劑量下對呼吸抑制具有上限效應。另外，丁基原啡因具有雙重治療活性，亦即以通常為類鴉片依賴所需劑量十分之一之劑量進行止痛治療。 不幸地，丁基原啡因不可如大部分其他類鴉片般經口投與，此乃因其在胃腸道中被2相代謝酶去活化而形成丁基原啡因之水溶性酯代謝物，即O-葡萄糖醛酸苷及具有酚系羥基之硫酸酯。因此，經口投藥之後，丁基原啡因之絕對生物利用度不一致且小於10%。因此，不存在經FDA核準之丁基原啡因之口服調配物用於治療類鴉片依賴或疼痛中之任一者並不令人驚訝(表1)。表 1 ：由US FDA核準之丁基原啡因劑型 *可用泛型 受體藥理學支持丁基原啡因之獨特治療性質(表2)：表 2 ：丁基原啡因之類鴉片受體藥理學及其治療用途

現已合成丁基原啡因之乙二醇醚(「EGE」)。其結構係：式2。 化合物之名稱係：2-[(2S )-2-[(5R ,6R ,7R ,14S )-9α-環丙基甲基-4,5-環氧-6,14-橋伸乙基(ethano)-3-羥基-6-甲氧基嗎啡喃-7-基]-3,3-二甲基丁-2-醇]-乙醇。其分子量係512。 在經口投與之後，EGE丁基原啡因自胃腸道吸收且不同於丁基原啡因，該化合物不經歷顯著首渡代謝。本發明化合物之類鴉片藥理學與丁基原啡因類似但不同於後者，其吸收進入體循環及快速代謝允許其藉由經口投與遞送。 由於本發明化合物之受體藥理學，其可口服用於丁基原啡因將適合之疼痛療法，但在如此遞送時其生物利用度減小。作為可以不同劑量強度使用之口服劑，可容易地將其調定至最低之有效且安全劑量並在各種情況下用於疼痛治療，該等情況亦即，當非類鴉片止痛藥不再有效或不可使用時或當增加劑量對於疼痛控制成為必需時。亦可將其與納洛酮一起調配為濫用阻遏劑。 值得注意地，本發明化合物較相應二乙二醇醚(出於比較目的亦將其合成)顯著更穩定。 在一個實施例中，本發明提供新穎的丁基原啡因之乙二醇醚，用於在慢性疼痛治療中經口投與。 在另一態樣中，本文提供治療患者慢性疼痛之方法。該方法包括將治療有效量之醫藥組合物投與患者，該醫藥組合物包含醫藥上可接受之載劑或賦形劑及具有上式2之EGE丁基原啡因或其溶劑合物或鹽。 在另一態樣中，本文提供治療患者慢性焦慮症及抑鬱症之方法。該方法包括將治療有效量之醫藥組合物投與患者，該醫藥組合物包含醫藥上可接受之載劑或賦形劑及具有上式2之EGE丁基原啡因或其溶劑合物或鹽。 可將EGE丁基原啡因化合物與醫藥上可接受之賦形劑或載劑組合用於投與。 上文所繪示之EGE丁基原啡因游離鹼可原樣採用或以醫藥上可接受之鹽或溶劑合物之形式採用。 可將醫藥組合物調配為口服錠劑、膠囊或膜或延長釋放口服錠劑、膠囊或膜。 熟習此項技術者自以下詳細說明及圖將明瞭本發明之其他目的、特徵及優點。

此申請案主張於2015年10月26日提出申請之美國臨時申請案第62/246,211號之35 U.S.C. § 119(e)之優先權之權益，其揭示內容以引用方式併入本文中。 定義 在描述本發明之化合物、組合物、方法及製程時，除非另外指示，否則以下術語具有以下含義。 如本文中所使用，術語「一(a、an)」或「該(the)」不僅包括具有一個成員之態樣，亦包括具有多於一個成員之態樣。舉例而言，除非上下文另有明確指示，否則單數形式「一(a、an)」及「該(the)」包括複數個指示物。因此，例如，提及「細胞(a cell)」包括複數個此等細胞且提及「該試劑(the agent)」包括提及一或多種為熟習此項技術者已知之試劑等。 一般而言，術語「約」及「大約」應意指鑒於量測之性質或精度之所量測數量之可接受之誤差程度。通常，例示性誤差程度在給定值或值之範圍之20百分比(%)內、較佳10%內及更佳5%內。或者，且尤其在生物系統中，術語「約」及「大約」可意指在給定值之一數量級內、較佳在5倍內及更佳在2倍內之值。除非另外說明，否則本文給定之數值量係近似值，意指在未明確說明時可推知術語「約」或「大約」。 術語「急性疼痛」係指持續短於3至6個月之疼痛。 術語「投與(administering、administration)」及其衍生詞係指可用於實現將試劑或組合物遞送至生物作用之期望位點之方法。 術語「慢性疼痛」係指持續延長之時間段(例如大於3至6個月)之疼痛，但疼痛之特徵性體徵可較此時期更早或更晚發生。慢性疼痛可係溫和的、痛苦的、間歇的或持續的。 如本文所使用，術語「組合物」意欲涵蓋包含指定量之指定成份之產品以及自指定量之指定成份之組合直接或間接產生之任一產品。 術語「醫藥上可接受之」載劑、稀釋劑或賦形劑係可與調配物之其他成分相容且對其接受者無害之載劑、稀釋劑或賦形劑。 術語「個體(subject)」、「個體(individual)」或「患者」係指動物，例如哺乳動物，包括但不限於靈長類(例如人類)、牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠及諸如此類。 術語「治療有效量」係指對經治療之適應症產生顯著及有益效應之治療劑之量。 術語「治療(treating、treatment)」及其衍生詞係指對患者(例如，哺乳動物(尤其地人類或動物))之疾病或醫學病況(例如疼痛)之治療(treating或treatment)，其包括：改善疾病或醫學病況，亦即，消除患者之疾病或醫學病況或導致其消退；抑制疾病或醫學病況，亦即，使患者之疾病或醫學病況之發展減慢或停止；或減輕患者之疾病或醫學病況之症狀。 本文中所揭示之醫藥組合物可包含醫藥上可接受之載劑。在某些態樣中，醫藥上可接受之載劑部分取決於所投與之具體組合物，以及用於投與該組合物之具體方法。因此，存在眾多種本發明醫藥組合物之適宜調配物(例如，參見Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co., Easton, PA (1990))。 應瞭解，在本文所論述之任何或所有組合物及治療方法中，代替EGE丁基原啡因或除其以外，可使用醫藥上可接受之鹽。因此，在具體實施例中，在本發明之方法中使用EGE丁基原啡因之醫藥上可接受之鹽(亦即，任何醫藥上可接受之鹽)。該等鹽可(例如)在最後分離及純化化合物期間原位製備或藉由單獨使經純化之化合物以其游離鹼形式與適宜有機或無機酸反應並分離由此形成之鹽來製備。在一些實施例中，EGE之醫藥上可接受之鹽係使用以下酸製備：乙酸、海藻酸、鄰胺苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙烯基磺酸、甲酸、富馬酸、糠酸、半乳糖醛酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、麩胺酸、乙醇酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙基磺酸、乳酸、馬來酸、苦杏仁酸、甲烷磺酸、黏液酸、硝酸、撲酸、泛酸、苯基乙酸、磷酸、丙酸、柳酸、硬脂酸、琥珀酸、對胺苯磺酸、硫酸、酒石酸或對-甲苯磺酸。可用於本文所述方法中之醫藥上可接受之鹽之進一步說明參見(例如) S.M. Berge等人，「Pharmaceutical Salts,」 1977, J. Pharm. Sci. 66:1-19，其全文以引用方式併入本文中。 本發明化合物可以非溶劑化形式以及與醫藥上可接受之溶劑(例如水、乙醇及諸如此類)之溶劑化形式存在。一般而言，出於本發明之目的，將溶劑化形式視為等同於非溶劑化形式。在具體實施例中，EGE之溶劑合物形式係水合物。 一般而言，鹽調配物可改良所得治療劑之儲放壽命。適當的鹽合成可提供結晶、不易氧化並容易操縱之產物。可製備將提供穩定及結晶化合物之多種鹽。幾個實例係鹽酸鹽、硫酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、甲烷磺酸鹽、丙二酸鹽、富馬酸鹽及抗壞血酸鹽。 在某些具體實施例中，將此一醫藥組合物調配為口服錠劑或膠囊、延長釋放口服錠劑或膠囊(硬明膠膠囊、軟明膠膠囊)、舌下錠劑或膜或延長釋放舌下錠劑或膜。說明性醫藥上可接受之載劑及調配物在下文中更詳細闡述。 投藥及投與途徑 本發明之醫藥組合物係以與劑量調配物相容之方式並以將對改善疼痛(例如急性或慢性疼痛)或類鴉片依賴治療有效之量投與，在後一情形中，通常將其與反向μ類鴉片受體激動劑(例如，納洛酮)結合投與。欲投與之量端視多種因素而定，包括(例如)個體之年齡、體重、身體活動及飲食以及經治療病況之階段或嚴重程度。在某些實施例中，劑量之大小亦可由伴隨在具體個體中投與治療劑之任何不良副作用之存在、性質及程度而確定。 一般而言，EGE丁基原啡因之口服形式之投藥將藉由關於丁基原啡因自身之當前實踐及藉由關於口服活性類鴉片(例如，嗎啡)之當前實踐告知，將EGE丁基原啡因之不同生物利用度及效能作為因素考慮。在相對於嗎啡之動物研究(下文實例7)中，EGE丁基原啡因鹽酸鹽展現較嗎啡小約40%之生物利用度及小約2.5%之活性。 對於不耐受類鴉片之成人個體(例如，非類鴉片依賴之個體)之疼痛，較佳劑量可在約0.3 mg/天至約16 mg/天、更佳約1 mg/天至約8 mg/天之範圍內，最佳以每6小時等分劑量給藥。用於疼痛之兒童劑量將較佳接近該等範圍之下限。 對於不耐受類鴉片之成人個體(例如，非類鴉片依賴之個體)之慢性焦慮症及抑鬱症，較佳劑量可在約0.3 mg/天至約48 mg/天、更佳約1 mg/天至約16 mg/天之範圍內，最佳以每6小時等分劑量給藥。用於疼痛之兒童劑量將較佳接近該等範圍之下限。 為阻遏濫用，可將EGE丁基原啡因與治療有效量之反向μ激動劑(例如，納洛酮或納曲酮(naltrexone))以約1:1、2:1、3:1或4:1之反向μ激動劑對EGE丁基原啡因之比率組合給藥。 醫藥組合物 本發明之組合物可以習用形式之製劑經口投與個體，例如膠囊、微膠囊、錠劑、顆粒、粉末、糖錠劑、丸劑、栓劑、口服懸浮液、糖漿、口服凝膠劑、噴霧劑、溶液及乳液。適宜調配物可藉由常用方法使用習用有機或無機添加劑來製備，該等添加劑係(例如)賦形劑(例如，蔗糖、澱粉、甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、纖維素、滑石、磷酸鈣或碳酸鈣)、黏合劑(例如，纖維素、甲基纖維素、羥甲基纖維素、聚丙基吡咯啶酮、聚乙烯基吡咯啶酮、明膠、阿拉伯膠、聚乙二醇、蔗糖或澱粉)、崩解劑(例如，澱粉、羧甲基纖維素、羥丙基澱粉、低取代羥丙基纖維素、碳酸氫鈉、磷酸鈣或檸檬酸鈣)、潤滑劑(例如，硬脂酸鎂、輕質無水矽酸、滑石或月桂基硫酸鈉)、矯味劑(例如，檸檬酸、薄荷醇、甘胺酸或桔子粉)、防腐劑(例如，苯甲酸鈉、亞硫酸氫鈉、對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯)、穩定劑(例如，檸檬酸、檸檬酸鈉或乙酸)、懸浮劑(例如，甲基纖維素、聚乙烯基吡咯啶酮或硬脂酸鋁)、分散劑(例如，羥丙基甲基纖維素)、稀釋劑(例如，水)及基質蠟(例如，可可脂、白石蠟脂或聚乙二醇)。 液體劑型可藉由將EGE化合物及視情況一或多種醫藥上可接受之佐劑溶解或分散於載劑(例如鹽水(例如，0.9% w/v氯化鈉)、水性右旋糖、甘油、乙醇及諸如此類)來製備，以形成(例如)經口投與用溶液或懸浮液。在一些實施例中，液體劑型係無菌的。 治療有效劑量亦可以凍乾形式提供。此等劑型可包括緩衝液(例如，碳酸氫鹽)用於在投與之前重構，或者緩衝液可包括在凍乾劑型中用於利用(例如)水重構。 製備此等劑型之方法為熟習此項技術者已知(例如，參見Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co., Easton, PA (1990))。劑型通常包括習用醫藥載劑或賦形劑且可另外包括其他醫藥物、載劑、佐劑、稀釋劑、組織透過增強劑、增溶劑及諸如此類。適當賦形劑可藉由業內熟知之方法調整為特定劑型(例如，參見Remington’s Pharmaceutical Sciences，上文文獻)。 另外，本發明化合物可在含有習用無毒醫藥上可接受之適於每種投與途徑之載劑、佐劑及媒劑之適宜劑量單位調配物中單獨或一起調配。 實例1 合成 EGE丁基原啡因之鹽酸鹽以3個步驟合成：步驟1 -中間體2之合成：向裝備有磁攪拌器、加料漏斗及氮氣入口之250 mL三頸圓底燒瓶裝填丁基原啡因HCl (5.0 g, 10.68 mmol, 1當量)、無水DMSO (30 mL)及粉末碳酸鉀(2.94 g, 21.37 mmol, 2當量)。將所得混合物加熱至55℃並經由加料漏斗經1小時之時段逐滴添加經無水DMSO (20 mL)稀釋之2-(2-溴乙氧基)四氫-2H-哌喃(中間體6)。將此混合物在55℃下加熱過夜。TLC指示反應完成。將反應液冷卻至室溫，用二氯甲烷(10體積)稀釋並用水(15體積)洗滌。分離有機層，用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥並濃縮。對粗產物進行管柱層析(0-5% MeOH/DCM)，以產生呈泡沫狀固體形式之產物2 (5.4 g, 85%)。¹ H NMR一致。 步驟2 -中間體3之合成：向裝備有磁攪拌器、加料漏斗及氮氣入口之250 mL三頸圓底燒瓶裝填中間體2 (10 g, 16.78 mmol, 1.0當量)。添加100 mL甲醇/乙酸/水(7:3:1)並在55℃下將混合物加熱過夜。藉由TLC分析(5% MeOH/DCM)，反應完成並將其冷卻至室溫。用100 mL水稀釋反應混合物，並逐滴添加碳酸氫鈉水溶液以中和剩餘乙酸。用二氯甲烷萃取所得混合物並分離有機層，用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥並濃縮以產生黏性油。對粗產物進行管柱層析(0-5% MeOH/DCM)，以產生呈泡沫狀固體形式之產物3 (8.2 g, 95%)。¹ H NMR一致。 步驟3 -丁基原啡因之乙二醇醚衍生物之合成：向裝備有磁攪拌器、加料漏斗及氮氣入口之250 mL三頸圓底燒瓶裝填溶解於乙酸乙酯(41 mL, 5體積)中之化合物3 (8.2 g, 16 mmol)並逐滴添加1,4-二噁烷中之HCl (1.2當量)以起始沈澱。在室溫下將混合物攪拌30 min並經由真空過濾收集固體，用乙酸乙酯洗滌並在減壓下乾燥，以提供呈灰白色固體形式之產物4 (8.4 g, 95%)。 使用2-[2-(2-溴乙氧基)乙氧基)四氫-2H-哌喃代替以上反應物6類似地合成丁基原啡因之二乙二醇醚偶聯物。 實例2 活體外分析：EGE丁基原啡因之代謝穩定性 使用Tecan Liquid Handling System (Tecan)或等效物，在37 ± 1℃下，於0.2 mL具有及不具有輔因子NADPH-生成系統之含有磷酸鉀緩衝液(50 mM, pH 7.4)、MgCl2 (3 mM)及EDTA (1 mM, pH 7.4)之培育混合物(最終體積)中，在96孔板格式中於所指示之最終濃度下，將EGE丁基原啡因鹽酸鹽(例如，1 mM)與人類肝微粒體(例如，1 mg蛋白質/mL)一起培育。NADPH-生成系統由NADP (1 mM, pH 7.4)、葡萄糖-6-磷酸鹽(5 mM, pH 7.4)及葡萄糖-6-磷酸鹽去氫酶(1單位/mL)組成。將EGE丁基原啡因溶解於甲醇水溶液(0.5% v/v或更少之甲醇)中。反應通常藉由添加輔因子開始，並藉由添加等體積之停止試劑(例如，0.2 mL含有內標準品之乙腈)在4個指定時間點(例如，至多120 min)停止。將零時培育用作100%值以測定基質之損失百分比。一式三份實施培育，零時試樣(其一式四份培育)除外。零輔因子(無NADPH)培育係在零時及最長時間點實施。使試樣經受離心(例如，920 × g，在10℃下10 min)並藉由LC-MS/MS分析上清液部分。與微粒體實施額外培育，其中微粒體經作為陽性對照之標記基質(例如，用以監測基質損失之右旋美沙芬(dextromethorphan))代替，以確定測試系統是否代謝勝任。 藉由LC-MS/MS分析以上試樣。在每種培育溶液中對試樣實施分析。藉由比較實驗時程中之峰值比(通常報導為「剩餘母體%」)測定結果。 利用LIMS (包括Galileo (Thermo Fisher Scientific Inc.)及報導工具Crystal Reports, SAP)、電子表格電腦程式Microsoft Excel (Microsoft Corp.)或等效物計算數據。基於分析物/內標準品(IS)峰面積比，使用LIMS、分析儀器控制及數據處理軟體(AB SCIEX)或等效物估計未改變之母體化合物之量(以測定在每次培育中剩餘基質之大約百分比)。 結果：如圖1中所顯示之結果指示，在分析之持續時間內，EGE丁基原啡因在微粒體酶之存在下經歷快速代謝。微粒體酶通常導致諸如丁基原啡因等藥物之代謝。 實例3 受體結合活性 此實例說明EGE丁基原啡因鹽酸鹽至µ-類鴉片受體及κ-類鴉片受體之結合。 A.人類µ類鴉片受體結合分析 使用玻璃組織研磨機、鐵氟龍(Teflon)研杵及Steadfast攪拌器(Fisher Scientific)，將來自表現人類μ類鴉片受體之中國倉鼠卵巢細胞(Perkin Elmer編號RBHOMM400UA)之膜在分析緩衝液(50 mM Tris，pH 7.5，具有5 mM MgCl2)中勻漿化。在分析板(96孔圓底聚丙烯板)中將膜之濃縮物調整至300 μg/mL。將欲測試之化合物溶解於10 mM之DMSO (Pierce)中，然後在分析緩衝液中稀釋至3.6 nM。在稱為預混合板之第二96孔圓底聚丙烯板中，合併60 μL 6 ×化合物與60 μL 3.6 nM之3H-納洛酮(3H-Nalaxone)。將50 μL自預混合板一式雙份轉移至含有膜之分析板。在室溫下將分析板培育2 h。利用0.3%聚乙烯亞胺將GF/C 96孔濾板(Perkin Elmer編號6005174)預處理30 min。使用Packard Filtermate Harvester藉助濾板過濾分析板之內容物並在4℃下用0.9%鹽水洗滌3次。乾燥濾板，將底面密封並將30 μL Microscint 20 (Packard編號6013621)添加至每個孔。使用Topcount-NXT微板閃爍計數器(Microplate Scintillation Counter) (Packard)量測在2.9 KeV至35 KeV範圍內之發射能量。將結果與最大結合、不接受抑制之孔比較。在50 μM未標記納洛酮之存在下測定非特異性結合。EGE丁基原啡因鹽酸鹽之生物活性顯示於圖6中。 結果：圖2中之曲線圖顯示EGE丁基原啡因鹽酸鹽對類鴉片µ受體具有顯著親和性。該概況與丁基原啡因之概況類似。 B.人類κ類鴉片受體結合分析 使用玻璃組織研磨機、鐵氟龍研杵及Steadfast攪拌器(Fisher Scientific)，將來自表現人類κ類鴉片受體之經選殖之HEK-293細胞(Amersham Biosciences UK Ltd. 6110558 200U)之膜在分析緩衝液(50 mM Tris，pH 7.5，具有5 mM MgCl2)中勻漿化。在分析板(96孔圓底聚丙烯板)中將膜之濃縮物調整至300 μg/mL。將欲測試之化合物溶解於10 mM之DMSO (Pierce)中，然後在分析緩衝液稀釋至3.6 nM。在稱為預混合板之第二96孔圓底聚丙烯板中合併60 μL 6 ×化合物與60 μL 3.6 nM 3H-二丙諾啡(3H-Diprenorphine，DPN)。將50 μL自預混合板一式雙份轉移至含有膜之分析板中。將分析板在室溫下培育18 h。利用0.3%聚乙烯亞胺將GF/C 96孔濾板(Perkin Elmer編號6005174)預處理30 min。使用Packard Filtermate Harvester藉助濾板過濾分析板之內容物，並在4℃下用0.9%鹽水洗滌3次。乾燥濾板，將底面密封並將30 μL Microscint 20 (Packard編號6013621)添加至每個孔。使用Topcount-NXT微板閃爍計數器(Packard)量測在2.9 KeV至35 KeV範圍內之發射能量。將結果與最大結合、不接受抑制之孔比較。在50 μM未標記之納洛酮存在下測定非特異性結合。EGE丁基原啡因鹽酸鹽之生物活性顯示於圖6中。 結果：圖3闡述EGE丁基原啡因鹽酸鹽及丁基原啡因之類鴉片κ受體激動劑概況。EGE丁基原啡因及丁基原啡因均已損失其對κ受體之親和性。定性地，正如丁基原啡因，EGE至類鴉片κ受體之結合隨濃度增加。估計在約1 µg下，EGE丁基原啡因之類鴉片κ受體親和性之概況與丁基原啡因之概況相似。 實例4 受體刺激活性 此實例說明EGE丁基原啡因鹽酸鹽刺激經µ-類鴉片受體介導之信號傳導之能力。 µ類鴉片受體激動劑及拮抗劑功能分析：表現人類µ受體之中國倉鼠卵巢(CHO-hMOR)細胞膜中之[35S]GTPγS結合分析 簡言之，CHO-hMOR細胞膜係購自Receptor Biology Inc. (Baltimore Md)。將約10 mg/ml之膜蛋白懸浮於10 mM TRIS -HCl (pH 7.2)、2 mM EDTA、10%蔗糖中並將懸浮液保持於冰上。將1 mL膜添加至15 mL含有50 mM HEPES (pH 7.6)、5 mM MgCl2、100 mM NaCl、1 mM DTT及1 mM EDTA之冷的結合分析緩衝液。利用polytron將膜懸浮液勻漿化並以3000 rpm離心10 min。將上清液以18,000 rpm離心20 min。利用polytron將糰粒再懸浮於10 ml分析緩衝液中。 在25℃下，將膜與經小麥胚芽凝集素塗佈之SPA珠粒(Amersham)在分析緩衝液中預培育45 min。然後將與膜(10 μg/ml)偶聯之SPA珠粒(5 mg/ml)與0.5 nM [35S]GTPγS在分析緩衝液中一起培育。基底結合發生於不存在添加測試化合物下；認為此未經調節之結合係100%，其中經激動劑刺激之結合上升至顯著高於此值之位準。使用一系列濃度之受體激動劑SNC80刺激[35S]GTPγS結合。基底及非特異性結合皆在激動劑不存在下測試；非特異性結合測定包括10 μM未標記之GTPγS。 藉由使用D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Orn-Thr-Pen-Thr-NH2 (CTOP)作為標準評估丁基原啡因及EGE丁基原啡因鹽酸鹽抑制經激動劑刺激之GTPγS結合之潛能來測試其作為拮抗劑之功能。在Packard Top Count上量化放射性。計算以下參數： 刺激% = [(測試化合物-非特異性化合物)/(基底化合物-非特異性化合物)]*100%抑制= (藉由1 μM SNC80之刺激% -在測試化合物之存在下藉由1 μM SNC80之刺激%)*100/(藉由1 μM SNC80之刺激% -100)。 使用GraphPad Prism計算EC50。測試化合物之曲線圖顯示於圖4及圖5中。 結果：圖4中顯示之數據指示EGE丁基原啡因鹽酸鹽係強效µ激動劑。結果亦指示，在10-6M (約1 µg)下化合物之類鴉片µ受體活性與丁基原啡因相似。圖5中之數據顯示EGE丁基原啡因不發揮作為µ-拮抗劑之功能。 實例5 活體內藥物動力學研究 在約翰霍普斯金醫學研究院(Johns Hopkins Medical Institute)使用CD-1小鼠(重約35 gm，每個時間點n = 3)進行動物藥物動力學研究。對各自以10 mg/kg之劑量IV及藉由經口管飼法給予之丁基原啡因及EGE丁基原啡因鹽酸鹽進行PK分析。在投藥後0 min、30 min及1小時、2小時、6小時及24小時收集血液。在收穫血漿後並藉由LC/MS/MS照以下分析藥物之血液試樣： 在摻有測試藥物(10-25000 nM)之小鼠血漿中製備標準曲線。在300 µL含有氯沙坦或丁基原啡因-d4作為內標準品之乙腈中萃取血漿試樣(50 µL)。在4℃下將萃取物以16000 × g離心5分鐘。將上清液(250 µL)轉移至新管並在45℃下在N2下乾燥1小時。利用100 µL 30%乙腈將試樣重構、渦旋處理並離心。將上清液(90 µL)轉移至LC小瓶並在LC/MS上注射10µL。 結果：圖6繪示在10 mg之經口及IV投藥後，EGE丁基原啡因之血漿濃度概況。曲線圖指示量測為經口及IV投藥後濃度曲線下之面積比之二聚體之絕對生物利用度係約40%。 實例6 EGE丁基原啡因及二乙二醇醚丁基原啡因偶聯物之穩定性 穩定性研究之目的係測定兩種試劑經一段時間之實時室溫穩定性。兩種偶聯物之鹽酸鹽係在2013年5月合成並儲存於具有polyseal錐形冒之透明玻璃小瓶中。在合成後立刻及然後在2015年9月藉由HPLC比較化合物之純度，測定穩定性。 HPLC分析之方法：將1 mg/ml之兩種偶聯物溶解於乙腈中並將5 μL注射至反相C-18管柱上，且使用設置在235 nm波長下之UV檢測器檢測溶析液。用於HPLC分析之移動系統係含有0.5%乙酸及乙腈之水之梯度混合物。關於兩種偶聯物之峰純度之結果顯示於下表中。數據顯示在28個月後二乙二醇醚偶聯物(批號MT-A-104-1)隨時間經歷顯著降解。與二乙二醇醚偶聯物相比，EGE偶聯物隨時間不改變。2年之久的試樣之HPLC層析圖顯示於圖7及圖8中。表 3 ：經28個月丁基原啡因之EGE及二乙二醇醚偶聯物之純度。 實例7 止痛-福馬林小鼠爪研究 將重23 ± 3 g之雄性ICR小鼠分為每8隻一組。在足底注射投與一個後爪之福馬林(0.02 ml 2%溶液)之前，將所有測試物質及媒劑對照經腹膜內投與非禁食小鼠。福馬林攻擊後，以5 min之間隔記錄舔後爪時間約35分鐘作為與媒劑、乙醯胺酚及嗎啡相比之測試化合物之止痛活性之量度。表 4 ：研究設計 應用單因子ANOVA分析及隨後之杜納氏測試(Dunnett’s test)進行媒劑對照組與測試化合物處理組間之比較。結果顯示於圖9中。本發明化合物展現快速止痛效應。 實例8 口服調配物 以下組合物係本發明代表性口服錠劑之例示。表 5 實例9 具有反向μ激動劑之濫用阻遏劑口服調配物 以下組合物係如上文所提及之美國專利申請案第14/697,155號中所闡述之本發明代表性口服錠劑與反向μ類鴉片受體激動劑(例如，納洛酮、納曲酮)之組合或該等之同源二聚體之例示。在文獻中亦認為反向μ激動劑係μ類鴉片受體拮抗劑。與該等反向激動劑或拮抗劑之固定組合將阻遏本發明化合物之濫用，此乃因該等化合物將防止本發明化合物結合至μ類鴉片受體且使其活化。為最佳濫用阻遏起見，可將μ激動劑(本發明化合物)及反向μ激動劑以約1:1、2:1、3:1或4:1之比率使用。表 6 實例10 防摻立即釋放口服調配物 以下組合物係本發明代表性防擾口服錠劑之例示。本發明化合物與以下聚合物之一或多者之組合將防止干擾：例如，多醣、糖、糖衍生之醇、澱粉、澱粉衍生物、纖維素衍生物、卡拉膠(Carrageenan)、果膠、海藻酸鈉、結蘭膠(gellan gum)、黃原膠、泊洛沙姆(poloxamer)、Carbopol®、PolyOx®、聚維酮、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、輕丙基甲基纖維素(hypermellose)及其組合，此乃因當壓碎時，該等聚合物在水分之存在下將膠凝且從而使藥物調配物不適於噴出或注射。理想地，對於長效、持續釋放藥物，聚合物將佔總調配物之約50%，且對於立即釋放藥物，佔10%。表 7 實例11 防摻持續釋放口服調配物表 8 應瞭解，本文所述實例及實施例僅為說明之目的，且鑒於其之各種修改或變化將由熟習此項技術者所建議且欲包括在本申請案之精神與範圍內及隨附申請專利範圍之範疇內。倘若優先權申請案與本申請案之間存在衝突，則任何矛盾皆欲以支持本申請案之方式解決。本文中所引用之所有公開案及專利皆出於所有目的以引用方式全部併入本文中。

圖1繪示本發明化合物之微粒體代謝。 圖2繪示本發明化合物之類鴉片受體結合概況-人類μ類鴉片受體結合概況。 圖3繪示本發明化合物之類鴉片受體結合概況-人類κ類鴉片受體結合概況。 圖4繪示本發明化合物之類鴉片受體功能性分析-人類μ類鴉片受體激動劑功能分析。 圖5繪示本發明化合物之類鴉片受體功能性分析-人類μ類鴉片受體拮抗劑功能分析。 圖6繪示在IV及經口投藥之後本發明化合物之概況。 圖7圖解說明本發明化合物隨時間之穩定性。 圖8圖解說明丁基原啡因之二乙二醇醚隨時間之相對不穩定性。 圖9圖解說明EGE丁基原啡因鹽酸鹽在經福馬林(formalin)誘導之大鼠爪疼痛模型中之止痛效應。

Claims (8)

1. 一種化合物，其具有以下結構：或其醫藥上可接受之溶劑合物或鹽。
2. 一種組合物，其包含如請求項1之化合物及醫藥上可接受之賦形劑或載劑。
3. 如請求項2之組合物，其包含該化合物之鹽酸鹽。
4. 如請求項2之組合物，其呈口服錠劑、膠囊或膜或延長釋放口服錠劑、膠囊或膜之形式。
5. 一種如請求項1之化合物之用途，其用於製造治療慢性疼痛用之藥物。
6. 一種如請求項2之組合物之用途，其用於製造治療慢性疼痛用之藥物。
7. 一種如請求項4之組合物之用途，其用於製造治療慢性疼痛用之藥物。
8. 一種如請求項1之化合物或如請求項4之組合物之用途，其用於製造治療慢性焦慮症及抑鬱症用之藥物。