TW201517912A - 含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物以及其製造方法 - Google Patents
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Abstract
本發明為一種含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其係包含對含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液照射電子束,而得到交聯物之步驟。
Description
本發明關於一種含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物以及其製造方法、水可膨脹性膠體以及其製造方法、以及包含該交聯物之醫療材料、化妝料、以及美容用材料。
玻尿酸廣泛地分布在雞冠、臍帶、皮膚、軟骨、玻璃體、關節液等生物組織中,並且廣泛地被利用於作為例如化妝料、醫藥品、食品之成分。
專利文獻1(特開平5-58881號公報)中有記載玻尿酸膠體以及其製造方法。然而,玻尿酸在生體內會被玻尿酸酶所分解,故在生體內容易被分解。
專利文獻1:日本特開平5-58881號公報
本發明提供一種耐酵素分解性優異之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物以及其製造方法、水可膨脹性膠體以及其製造方法、以及包含該交聯物之醫療材料、化妝料、以及美容用材料。
本案發明者發現,對含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液照射電子束所得之該修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,具有優異之耐酵素分解性。
且,本案發明者發現,藉由將前述交聯物以特定之溫度來處理,能夠提高熱安定性以及耐酵素分解性。
1.本發明一型態相關之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法包含對含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液照射電子束,而得到交聯物之步驟。
2.如上述1之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,前述電子束的照射強度能夠為5kGy以上且800kGy以下。
3.如上述1或2之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,能夠對前述含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽的濃度為5質量%以上且60質量%
以下之溶液照射前述電子束。
4.如上述3之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,前述溶液的pH值能夠為8以下。
5.如上述1至4中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,照射前述電子束之前的前述修飾玻尿酸及/或其鹽之平均分子量能夠為10萬以上,且,相對於構成玻尿酸的2糖單位,羧甲基化率能夠為50%以上。
6.如上述1至5中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,相對於照射前述電子束之前的前述修飾玻尿酸及/或其鹽,前述交聯物之收率能夠為30質量%以上。
7.如上述1至6中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,前述交聯物能夠具有水可膨脹性。
8.如上述1至7中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,能夠進一步包含以水將包含交聯物之組成物洗淨,並去除交聯物以外之雜質之步驟,該交聯物係於照射前述電子束之步驟所得。
9.本發明一型態相關之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,能夠以上述1至8中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法所得。
10.本發明一型態相關之具有水可膨脹性之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,其對水之可膨脹度為10倍以上且1,000倍以下(質量比)。
11.如上述10之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,其係具有可逆的水可膨脹性。
12.如上述9至11中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物中,將混合物在50℃下保存24小時後的殘存率能夠為1%以上,該混合物為使如上述9至11中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物分散於生理食鹽水中,使其濃度成為1質量%(固體成分)來調製。
13.如上述9至12中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物中,將混合物在玻尿酸酶(5單位/每交聯物1mg)存在下,並於40℃中保存24小時後的殘存率能夠為1%以上,該混合物為使如上述9至12中任一之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物分散於50mM磷酸緩衝液中,使其濃度成為0.1質量%(固體成分)來調製。
14.如上述1至7中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,能夠到第2組成物,該第2組成物中包含對包含以照射前述電子束之步驟所得之交聯物的第1組成物,進一步施予其他交聯處理步驟所得之交聯物。
15.如上述14之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或
其鹽之交聯物之製造方法中,能夠包含將包含前述第1組成物之溶液保持在-200℃以上且10℃以下之步驟。
16.如上述15之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,前述溶液中之前述第1組成物的濃度能夠為1質量%以上且30質量%以下。
17.如上述16之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,前述溶液之pH值能夠為3以下。
18.如上述15至17中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,能夠進一步包含以水將包含以前述保持步驟所得之交聯物的第2組成物洗淨,並去除該交聯物以外的雜質之步驟。
19.如上述1至7中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,能夠藉由將包含第1組成物與含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之混合物的溶液保持在-200℃以上10℃以下,得到包含第3交聯物之第3組成物,該第1組成物包含於照射前述電子束之步驟所得的交聯物。
20.如上述19之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,得到前述第3組成物之步驟中,前述溶液中之前述第1組成物/前述含有羧甲基之修飾玻尿酸(質量比)能夠為1/10以上且10/1以下。
21.如上述19或20之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,前述溶液中之前述
第1組成物的濃度能夠為1質量%以上且30質量%以下。
22.如上述19至21中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,前述溶液中之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽的濃度能夠為1質量%以上且30質量%以下。
23.如上述19至22中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,前述溶液之pH值能夠為3以下。
24.如上述19至23中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中,能夠進一步包含以水將包含第3交聯物之第3組成物洗淨,並去除該第3交聯物以外的雜質之步驟,該第3交聯物為藉由前述保持之步驟所得。
25.本發明一型態相關之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物係藉由如上述14至18、19至24中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法所得。
26.本發明一型態相關之水可膨脹性膠體包含如上述請求項9至13、以及25中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物與水,且前述交聯物之含量以固體成分換算為0.1質量%以上且10質量%以下。
27.如上述26之水可膨脹性膠體,其係在50℃下保存24小時後的殘存率能夠為1%以上。
28.如上述26或27之水可膨脹性膠體,其係
在玻尿酸酶(5單位/每膠體1mL)的存在下,於40℃保存24小時後的殘存率能夠為1%以上。
29.本發明一型態相關之醫療材料包含如上述9至13以及25中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物。
30.如上述29之醫療材料,其能夠作為選自癒後黏著防止劑、皮下注射劑、膝關節注射劑以及藥物長效劑中之至少1種來使用。
31.本發明一型態相關之化妝料包含如上述9至13以及25中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物。
32.本發明一型態相關之美容用材料包含如上述9至13以及25中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物。
如上述1至8中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,藉由包含對含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液照射電子束,而得到交聯物之步驟,能夠得到具有水可膨脹性以及耐酵素分解性之交聯物。該交聯物能夠作為例如醫療材料、美容用材料以及化妝料之成分來使用。
且,上述10至13中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,藉由具有水可膨脹性,
且對水之可膨脹度為10倍以上且1,000倍以下(質量比),能夠形成安定之水可膨脹性膠體。
進而,如上述26至28中任一項之水可膨脹性膠體,藉由包含如上述9至13以及25中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物與水,且前述交聯物之含量以固體成分換算為0.1質量%以上且10質量%以下,會具有耐酵素分解性。
如上述14至18中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,藉由包含將包含前述第1組成物之溶液保在-200℃以上10℃以下之步驟,且該第1組成物為藉由如上述1至7中任一項之製造方法所得,能夠得到具有水可膨脹性以及耐酵素分解性,且熱安定性優異之第2交聯物。該第2交聯物能夠作為例如醫療材料、美容用材料以及化妝料之成分來使用。
如上述19至24中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,能夠藉由將包含第1組成物與含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之混合物的溶液保持在-200℃以上10℃以下,得到包含第3交聯物之第3組成物,該第1組成物包含在如上述1至7中任一項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法中之照射前述電子束之步驟所得的交聯物。該第3交聯物能夠作為例如醫療材料、美容用材料以及化妝料之成分來使用。
以下,詳細說明本發明。且,在本發明中,在沒有特別的阻礙之下,「份」意指「質量份」,「%」意指「質量%」。
本發明一實施形態相關之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物(以下,單純稱作「交聯物」或「第1交聯物」)之製造方法包含:對含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽(以下,稱作「原料修飾玻尿酸及/或其鹽」或單純稱作「修飾玻尿酸及/或其鹽」)之溶液照射電子束,得到交聯物(第1交聯物)之步驟。藉由得到前述交聯物之步驟,能夠得到包含該交聯物之第1組成物。
本發明中,「羧甲基」意指「-CH2-CO2H」或「-CH2-CO2 -」所表示之基。且,第1交聯物之製造方法所使用之原料修飾玻尿酸及/或其鹽能夠為以後述方法所製造者。
第1交聯物之製造方法中,藉由電子束照射,在修飾玻尿酸及/或其鹽之結構內會產生交聯。在第1交聯物之製造方法中,電子束照射所造成之交聯得機制尚未明朗,但推測與原料修飾玻尿酸及/或其鹽中所包含之羧甲基之
交聯有關。
推測是例如在原料修飾玻尿酸及/或其鹽所包含之羧甲基彼此的碳原子之間,會產生交聯,其結果,會構成3次元網狀結構。第1交聯物中,藉由在3次元網狀結構中吸收水分,能夠形成後述之水膨脹性膠體。
第1交聯物之製造方法中,以更確實地得到第1交聯物之觀點來看,電子束之照射強度為5kGy以上800kGy以下較佳,為10kGy以上更佳,為5kGy以上又更佳,另一方面,為500kGy以下更佳,為400kGy以下又更佳,為100kGy以下再更佳。
第1交聯物之製造方法中,以更確實地得到第1交聯物之觀點來看,對原料修飾玻尿酸及/或其鹽的濃度為5質量%以上且60質量%以下之溶液照射前述電子束較佳,該濃度為10質量%以上更佳,為15質量%以上再更佳,另一方面,該濃度為50質量%以下更佳,為40質量%以下再更佳。
第1交聯物之製造方法中,以能夠更促進交聯之觀點來看,照射電子束之原料修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液的
pH值為8以下較佳,另一方面,該pH值為3以下更佳,為2以下再更佳。
且,使用於將前述溶液之pH值調整成酸性(pH值未滿7)之酸,只要是能夠將該溶液之pH值調整成酸性之酸即可,能夠使用任意之酸。以能夠降低酸的使用量之觀點來看,該酸能夠使用例如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等之無機酸、乙酸、檸檬酸等之有機酸。
第1交聯物之製造方法中,使原料修飾玻尿酸及/或其鹽溶解之溶劑能夠為水以及與水混合之水溶性有機溶劑之混合物。
作為水溶性有機溶劑,能夠舉例如甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇等之醇系溶劑、丙酮、甲乙酮等之酮系溶劑、四氫呋喃,乙腈等,並能夠單獨使用此等或組合來使用。
為了抑制原料修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液之分子量的降低,且衛生地保持原料修飾玻尿酸及/或其鹽,使原料修飾玻尿酸及/或其鹽溶解於溶劑來調製溶液時,藉由於例如0℃以上且20℃以下之溫度保持5小時以上且48小時以下,使該原料修飾玻尿酸及/或其鹽膨脹並使之溶解較佳。
第1交聯物之製造方法中,在電子束照射時,以能夠順利地進行交聯之觀點來看,供應於電子束照射之溶液的溫度通常在-20℃以上且30℃以下較佳。
第1交聯物之製造方法中,以能夠去除由電子束照射所產生的副生成物、或在電子束照射之際使用酸時,能夠去除該酸之觀點來看,能夠進一步包含以水將包含以電子束照射所得之交聯物(第1交聯物)的組成物(第1組成物)洗淨,並去除交聯物以外的雜質之步驟。藉由此洗淨步驟,能夠單離第1交聯物。
本實施形態相關之原料修飾玻尿酸及/或其鹽,其分子量通常為4,000以上且400萬以下。本發明中,原料修飾玻尿酸及/或其鹽之分子量能夠以以下之方法來測定。
使用膠體濾過管柱,藉由將分子量為已知的複數個(純化)玻尿酸(基準物質)進行液相色層分析,由此等之保持時間作出檢量線。同樣地,藉由將測定對象之原料修飾玻尿酸進行液相色層分析,並使用前述檢量線求出分子量,能夠求出原料修飾玻尿酸的分子量。
作為能夠使用於前述液相色層分析之液相色層分析裝置,有舉例如Waters Alliance 2690 HPLC Separations Module(Waters公司製)、Waters Alliance 2695 HPLC Separations Module(Waters公司製)、1200 Series(Agilent公司製)。且,作為能夠使用於液相色層分析之管柱,有舉例如shodex公司製配位基交換層析用管柱(配位基交換模式+大小排除模式),型名「SUGAR KS-801」,「SUGAR KS-802」,「SUGAR KS-803」,「SUGAR KS-804」,「SUGAR KS-805」,「SUGAR KS-806」,「SUGARKS-807」,或TOSOH製大小排除色層分析管柱,型名「TSKgel GMPW」。
第1交聯物之製造方法中,以能夠確實地得到第1交聯物之觀點來看,照射前述電子束之前的前述原料修飾玻尿酸及/或其鹽之平均分子量為10萬以上較佳,為30萬以上更佳,為70萬以上再更佳(通常能夠為300萬以下且200萬以下)。
本發明中,相對於構成具有羧基之修飾玻尿酸及/或其鹽的玻尿酸之2糖單位的羧甲基化率(以下,單純稱作「羧甲基化率」)是以在1H-NMR光譜中,相對於表示鍵結於玻尿酸骨架中之C-2位的N-乙醯基之甲基(-CH3)之質子的波峰(在2ppm附近表現)之積算值,表示羧甲基(-CH2-CO2H或-CH2-CO2 -)之甲烯基(-CH2-)之質子的波峰(在3.8ppm以上且4.2ppm以下之範圍內表現)之積算值的比例(%)來表示。
本發明中,「構成玻尿酸的2糖單位」意指構成玻尿酸,且相鄰鍵結的2糖(葡萄糖醛酸以及N-乙醯葡萄胺糖)所構成的1單位,「相對於構成玻尿酸的2糖單位之羧甲基化率」意指,相對於該1單位,該1單位中所包含之羧甲基的數量,更具體來說,係將該1單位作為100%時,相對於該1單位,該1單位中所包含之羧甲基的數量比例(%)。
第1交聯物之製造方法中,以能夠更促進交聯之觀點來看,照射前述電子束之前的前述原料修飾玻尿酸及/或其鹽之羧甲基化率為50%以上較佳,為70%以上更佳,為80%以上再更佳,另一方面,通常為400%以下,且能夠為200%以下。
第1交聯物之製造方法中,以更促進交聯之觀點來看,相對於照射前述電子束之前的前述修飾玻尿酸及/或其鹽,前述第1交聯物之收率為30質量%以上較佳,為40質量%以上更佳,為50質量%以上再更佳,為70質量%以上特別佳(通常100質量%以下)。且,前述收率能夠以本案實施例所示之方法算出。
第1交聯物之製造方法中所使用之原料的修飾玻尿酸及/或其鹽(以下,亦稱作「原料修飾玻尿酸及/或其鹽」)能夠藉由例如在溫度為30℃以下之含水溶劑中,使原料玻尿酸及/或其鹽與含鹵乙酸及/或其鹽反應之步驟所得。
在使上述反應之步驟中,反應液(含水溶劑)中,原料玻尿酸及/或其鹽之至少一部分(較佳為玻尿酸及/或其鹽之全部或大部分)與含鹵乙酸及/或其鹽能夠在溶解之狀態下,使該玻尿酸及/或其鹽與該含鹵乙酸及/或其鹽反應。此時,以玻尿酸及/或其鹽與含鹵乙酸及/或其鹽會溶解之觀點來看,前述反應液在目測下亦可為透明。
本發明中,「玻尿酸」意指具有一個以上之葡萄糖醛酸與N-乙醯葡萄胺糖之二糖所構成的重複構造單位之多糖類。且,作為「玻尿酸之鹽」,雖無特別限定,但以在食品或藥學上可容許之鹽較佳,並有舉例如,鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋅鹽、鎂鹽、銨鹽等。
玻尿酸基本上為包含至少1個β-D-葡萄糖醛酸的1位與β-D-N-乙醯-葡萄糖胺的3位有鍵結之2糖單位之2糖以上者,且基本上由β-D-葡萄糖醛酸與β-D-N-乙醯-葡萄糖胺所構成,並鍵結複數個2糖單位者。該糖亦可為不飽和糖,作為不飽和糖,有舉出非還原末端糖,
通常為葡萄糖醛酸的4,5位碳之間為不飽和者等。
使用於製造原料修飾玻尿酸及/或其鹽之玻尿酸及/或其鹽(原料玻尿酸及/或其鹽),亦可使用從動物等天然物(例如雞冠、臍帶、皮膚、關節液等生物組織等)中所萃取者,或可使用培養微生物、動物細胞或植物細胞所得者(例如使用鏈球菌屬之細菌等之發酵法)、化學性或酵素性合成者等。
作為原料玻尿酸及/或其鹽,雖亦可使用該粗萃取物以及純化物之任一者,但以純化物,具體來說以羧甲基化可以順利進行之觀點來看,使用純度為90%(質量比)以上之原料玻尿酸及/或其鹽較佳。
原料玻尿酸及/或其鹽的平均分子量,通常以順利進行羧甲基化之觀點來看,為4,000以上且400萬以下較佳,為300萬以下再更佳。且,原料玻尿酸及/或其鹽的平均分子量,能夠以下述之方法來測定。
亦即,精密地測量約0.05g之(純化)玻尿酸類(本品),並溶解於0.2mol/L濃度之氯化鈉溶液中,正確地測量正確成為100mL之溶液以及此溶液8mL、12mL以及16mL,分別添加於0.2mol/L濃度的氯化鈉溶液中,並將正確成為20mL之溶液作為試料溶液。對於每個試料溶液
以及0.2mol/L濃度之氯化鈉溶液,以日本藥局方(第十六改正)一般試驗法之黏度測定法(第1法毛細管黏度測定法)於30.0±0.1℃下測定比黏度(式(A)),算出各濃度中的還原黏度(式(B))。將還原黏度設為縱軸,並將本品所換算之相對於乾燥物的濃度(g/100mL)設為橫軸,畫出圖型,由連接各個點的直線與縱軸之交點,求出極限黏度。將於此所求出之極限黏度導入Laurent之式(式(C))中,算出平均分子量(Torvard C Laurent,Marion Ryan,and Adolph Pietruszkiewicz,”Fractionation of hyaluronic Acid”,Biochemina et Biophysica Acta.,42,476-485(1960),四方田千佳子,「玻尿酸鈉製劑之SEC-MALLS所得之分子量評估」,國立衛研報,第121號,030-033(2003))。
(式A)比黏度={(試料溶液所需要的流下秒數)/(0.2mol/L氯化鈉溶液之所需要的流下秒數)}-1
(式B)還原黏度(dL/g)=比黏度/(相對於本品所換算出的乾燥物之濃度g/100mL))
(式C)極限黏度(dL/g)=3.6×10-4M0.78
M:平均分子量
在原料玻尿酸及/或其鹽中,玻尿酸及/或其鹽的含量為原料玻尿酸及/或其鹽的純度之指標,且玻尿酸及/或其鹽的含量越多,可以說原料玻尿酸及/或其鹽的純度越
高。
本發明中,原料玻尿酸及/或其鹽中之玻尿酸的含量是由以咔唑硫酸法(例如日本藥局方)所測定之葡萄糖醛酸定量值所算出的值。
咔唑硫酸法為:在硼酸鈉.硫酸溶液中添加玻尿酸水溶液並混合,再將玻尿酸加熱分解後進行冷卻,添加咔唑.乙醇溶液並混合,測定加熱後放冷的試料液之吸光度(530nm)之方法。使用經相同處理之D-葡萄糖醛酸內酯,作成檢量線,算出D-葡萄糖醛酸內酯換算值後,乘以1.102,求出葡萄糖醛酸定量值。對所得之葡萄糖醛酸定量值乘上(玻尿酸類的分子量/葡萄糖醛酸的分子量),算出玻尿酸類的含量。
本發明中,「修飾玻尿酸及/或其鹽」意指,至少一部分有導入有機基之玻尿酸及/或其鹽,並具有與玻尿酸及/或其鹽相異之構造。且,本發明中「有機基」意指具有碳原子之基。
因此,本發明中,「含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽」意指至少一部分有導入羧甲基之玻尿酸及/或其鹽。
更具體來說,原料修飾玻尿酸及/或其鹽中,例如,構成玻尿酸(參照下述式(1))之氫氧基(下述式(1)中,構成玻尿酸之N-乙醯葡萄胺糖的C-4位、
C-6位以及構成玻尿酸之葡萄糖醛酸的C-2位、C-3位)中至少一部分之氫氧基的氫原子能夠被-CH2-CO2H及/或-CH2-CO2 -所表示之基取代。亦即,原料修飾玻尿酸及/或其鹽中,在此等之位置上的氫氧基中的1個或2個以上之位置上的氫氧基之氫原子亦可被-CH2-CO2H及/或-CH2-CO2 -所表示之基所取代。
(式中,n表示1以上且7,500以下之數)。
原料修飾玻尿酸及/或其鹽能夠例如為下述式(2)所表示之化合物。
(式中,R1~R5獨立地表示氫氧基、-CH2-CO2H、或-CH2-CO2 -所表示之基(惟,R1~R5之任一者皆表示氫氧基
之情況除外)n表示1以上且7,500以下之數)。
第1交聯物之製造方法中,以能夠提高氫氧基之親核性之觀點來看,前述原料玻尿酸及/或其鹽與含鹵乙酸及/或其鹽之反應在鹼基性條件下進行較佳,反應液(含水溶劑)之pH值為8以上(9以上14以下,較佳為10以上14以下,更佳為11以上14以下)更佳。
且,此時,為了將反應液調整成鹼基性,能夠在反應液中使用鹼基性電解質。作為鹼基性電解質,有舉例如氫氧化鈉、氫氧化鉀等之鹼金屬的氫氧化物、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氫氧化鋇等鹼土類金屬之氫氧化物。以能夠有效率地得到原料修飾玻尿酸及/或其鹽之觀點來看,反應液中之鹼基性電解質的濃度例如為0.2莫耳/L以上且10莫耳/L以下,較佳為0.5莫耳/L以上且8莫耳/L以下。
且,此時,前述含水溶劑中之前述玻尿酸的濃度為0.05g/mL以上0.5g/mL以下較佳。
原料修飾玻尿酸及/或其鹽之製造方法中,含鹵乙酸及/或其鹽是為了將羧甲基導入原料玻尿酸及/或其鹽時所使用。
含鹵乙酸能夠例如為單鹵乙酸及/或其鹽,更
具體來說,為氯乙酸及/或其鹽,或溴乙酸或其鹽較佳。含鹵乙酸之鹽為例如氯乙酸的鹼金屬鹽及/或溴乙酸的鹼金屬鹽較佳,為氯乙酸鈉及/或溴乙酸鈉更佳。
作為含鹵乙酸及/或其鹽,使用溴乙酸及/或其鹽時,以能夠抑制低分子化的進行之觀點來看,於反應液之溫度為10℃以下(例如超過0℃且10℃以下)進行反應較佳。
例如,為了製造高分子量(例如80萬以上)且高羧甲基化率(例如50%以上,較佳為50%以上且200%以下))之原料修飾玻尿酸及/或其鹽,作為含鹵乙酸及/或其鹽,使用溴乙酸及/或其鹽,並在反應液之溫度為10℃以下(例如,超過0℃且10℃以下)進行反應較佳。
含鹵乙酸及/或其鹽的使用量通常為原料玻尿酸及/或其鹽的使用量之10%以上且500%以下(質量比),為50%以上且200%以下(質量比)較佳。
原料修飾玻尿酸及/或其鹽之製造方法中,以原料玻尿酸及/或其鹽的溶解性較高之觀點來看,前述含水溶劑
為水或水溶性有機溶劑與水之混合液較佳。
含水溶劑為水溶性有機溶劑與水之混合液時,亦即,含水溶劑包含水以及水溶性有機溶劑兩者時,以能夠提高玻尿酸的溶解性之觀點來看,該混合液中之水溶性有機溶劑的比例為60v/v%以下(超過0v/v%且60v/v%以下)較佳,為40v/v%以下(超過0v/v%且40v/v%以下)更佳。
作為水溶性有機溶劑,能夠舉例如甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇等之醇系溶劑、丙酮、甲乙酮等之酮系溶劑、四氫呋喃、乙腈等,並能夠單獨使用此等或組合來使用。其中,以異丙醇、乙醇等碳原子數1、2或3的低級醇較佳。
在前述反應中,以能夠順利進行羧化,且能夠抑制分子量之低下的觀點來看,反應液的溫度通常為30℃以下(較佳為超過0℃且30℃以下)較佳,為10℃以下(較佳為超過0℃且30℃以下)更佳。尤其是,藉由將反應液的溫度設為10℃以下,能夠容易地得到高分子量(80萬以上)之原料修飾玻尿酸及/或其鹽。
例如,使用氯乙酸及/或其鹽作為含鹵乙酸及/或其鹽時,以能夠順利地進行羧甲基化,且抑制所得之原料修飾玻尿酸及/或其鹽的褐變色之觀點來看,前述反應中之反應液的溫度通常能夠為(較佳為超過0℃且30℃以
下),為1℃以上且30℃以下較佳。
且,例如使用溴乙酸及/或其鹽作為含鹵乙酸及/或其鹽時,以羧甲基化能夠順利地進行,且能夠抑制所得之原料修飾玻尿酸及/或其鹽之褐變色以及分子量低下的觀點來看,前述反應中之反應液的溫度通常為10℃以下(較佳為超過0℃且10℃以下),為1℃以上且10℃以下較佳。
前述反應中,以順利地進行羧化,且能夠抑制分子量低下的觀點來看,反應時間通常為30分鐘以上且100小時以下較佳,為60分鐘以上且60小時以下更佳。
本發明一實施形態相關之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物(以下亦稱作「第2交聯物」)之製造方法能夠得到包含第2交聯物之第2組成物,該第2交聯物係對包含在上述實施形態相關之第1交聯物之製造方法中,照射前述電子束之步驟所得之第1交聯物之第1組成物,進一步施予其他的交聯處理步驟所得。此時,其他的交聯處理步驟能夠包含例如將上述包含第1組成物之溶液保持在-200℃以上10℃以下之步驟。
藉由本實施形態相關之交聯物之製造方法(以下,單純稱作「製造方法」),以上述其他的交聯處
理步驟,能夠更提高前述交聯物的熱安定性以及硬度。亦即,藉由本實施形態相關之交聯物之製造方法,能夠製造熱安定性以及硬度比第1交聯物更高之第2交聯物。
本實施形態相關之製造方法中,藉由前述保持之步驟,構成該第1交聯物的糖鏈彼此之距離會縮短,其結果,構成該糖鏈之官能基彼此(例如羧基彼此、氫氧基彼此、N-乙醯基彼此、羧基與氫氧基、氫氧基與胺基、胺基與羧基)之間會產生氫鍵。其結果,推測是構成該第1交聯物之糖鏈彼此會介著氫鍵而強力地鍵結,藉此能夠得到熱安定性被提高的第2交聯物。
且,推測是構成該第1交聯物之糖鏈彼此會介著氫鍵而鍵結,並構築3次元網狀結構。本實施形態相關之製造方法所得之第2交聯物藉由在此3次元網狀結構中吸收水分,能夠形成後述之水膨脹性膠體。
尤其是,修飾玻尿酸及/或其鹽中具有羧甲基的部分,相較於玻尿酸及/或其鹽,在玻尿酸骨架的一構成單位中具有較多的羧基。亦即,推測是由於該一構成單位中,能夠涉及氫鍵之羧基較玻尿酸及/或其鹽多,故在前述保持之步驟中,能夠形成較多的氫鍵。
因此,第2交聯物在室溫下具有後述之優異熱安定性。亦即,第2交聯物所具有之氫鍵在室溫下難以被破壞。且,本實施例中,「室溫」意指25℃以上且30
℃以下之溫度。
藉由調整前述保持之步驟中的溫度,能夠調整第2交聯物之交聯程度,藉此,能夠調整使用該第2交聯物之水可膨脹性膠體的硬度。例如,本實施形態相關之製造方法中,以能夠形成更多氫鍵,且得到成為更硬且熱安定性更高之水可膨脹性膠體的原料之第2交聯物之觀點來看,將前述保持之步驟在-1℃以下進行更佳,在-10℃以下進行再更佳,另一方面,在-30℃以上較佳。且,以能夠得到成為具有柔軟性之水可膨脹性膠體的原料之第2交聯物之觀點來看,將前述保持步驟在0℃以上且20℃以下進行更佳,在1℃以上且10℃以下進行再更佳。
本實施形態相關之製造方法中,因應前述保持之步驟中的保持溫度、或用於保持在特定之保持溫度之裝置的種類,能夠將前述保持步驟在1秒鐘以上且400小時以下之時間來進行,為了更加提高熱安定性以及耐酵素分解性,進行30小時以上的時間較佳,另一方面,亦可進行300小時以下的時間,且能夠進行96小時以下的時間。
本實施形態相關之製造方法中,以能夠更確實地形成
氫鍵,並更提高熱安定性之觀點來看,前述溶液中之前述第1組成物的濃度為1質量%以上30質量%以下較佳,另一方面,為25質量%以下更佳。
本實施形態相關之製造方法中,以能夠更確實地形成氫鍵,並更提高熱安定性之觀點來看,前述第1交聯物的溶液之pH值為3以下(0以上且3以下之範圍)更佳,為2以下再更佳,亦可為1以下。
前述保持之步驟中,前述溶液之pH值為3以下時,由於前述第1交聯物中所包含之羧基會變成酸型(-CO2H),故推測該羧基彼此以及該羧基與其他官能基(例如氫氧基、胺基等)之間,氫鍵會更容易被構築,熱安定性會更加優異。
且,使用於將前述溶液之pH值調整成酸性(pH值未滿7)之酸,只要是能夠將該溶液之pH值調整成酸性之酸即可,能夠使用任意之酸。以能夠降低酸的使用量之觀點來看,該酸能夠使用例如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等之無機酸、乙酸、檸檬酸等之有機酸。
本實施形態相關之製造方法中,使前述第1交聯物溶解之溶劑能夠為水、以及與水混合之水溶性有機溶劑之混合物。
作為水溶性有機溶劑,能夠舉例如甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇等之醇系溶劑、丙酮、甲乙酮等之酮系溶劑、四氫呋喃,乙腈等,並能夠單獨使用此等或組合來使用。
本實施形態相關之製造方法中,以能夠去除副生成物之觀點(尤其是前述溶液包含酸時,能夠去除該酸並提高pH值之觀點)來看,能夠進一步包含以水將包含交聯物(第2交聯物)之第2組成物洗淨,並去除該交聯物(第2交聯物)以外之雜質之步驟,且該交聯物(第2交聯物)為以前述保持之步驟所得。
前述洗淨中所使用之洗淨液,能夠使用例如水、以及水與水溶性有機溶劑之混合液。於此,水溶性有機溶劑只要是前述修飾玻尿酸及/或其鹽的溶解性較低者即可。由於在前述洗淨中,藉由將洗淨液的溫度設在30℃以下(通常為0℃以上且25℃以下,較佳為3℃以上,更佳為4℃以上),能夠維持在前述保持步驟中所形成的氫鍵,並能夠維持最後所得之第2交聯物的特性(熱安定性,水可膨脹性)。
在本實施形態相關之製造方法中,以能夠使氫鍵更確實地形成,並更提高熱安定性之觀點來看,將前述保持之
步驟以及前述洗淨步驟之組合重複1次以上較佳,通常能夠重複2次以上且5次以下。
本實施形態相關之製造方法中進一步包含:藉由前述保持之步驟,得到包含前述第2交聯物之第2組成物後,以水將前述第2組成物洗淨,並得到前述第2交聯物之步驟時,相對於前述第2組成物之質量,前述第2交聯物之質量為30%以上較佳,為40%以上更佳,為50%以上再更佳。且,前述收率能夠以本案實施例所示之方法算出。
本發明一實施形態相關之修飾玻尿酸及/或其鹽的交聯物(以下,亦稱作「第3交聯物」)之製造方法中包含:將包含第1交聯物之第1組成物與修飾玻尿酸及/或其鹽之混合物保持在-200℃以上且10℃以下之步驟,該第1交聯物為藉由照射上述實施形態相關之第1交聯物之製造方法中的前述電子束之步驟所得。藉由該保持之步驟,會得到包含第3交聯物之第3組成物。且,上述第3交聯物之製造方法中,亦可使用洗淨第1組成物所得之第1交聯物取代前述第1組成物。
藉由上述保持之步驟,能夠製造得到膨脹度能比第1交聯物更高,且更柔軟之膠體的第3交聯物。
本實施形態相關之製造方法中,推測是藉由前述保持之步驟,構成第1交聯物之糖鏈彼此的距離會縮短,其結果,構成該糖鏈的官能基(例如第2交聯物之說明欄中所例示者)彼此之間會產生氫鍵,並介著該氫鍵構築3次元網狀結構,進一步,在該第1交聯物之存在下,構成修飾玻尿酸及/或其鹽以及該第1交聯物之糖鏈彼此藉由介著氫鍵強力地鍵結,構成該第1交聯物之3次元網狀結構中會更進一步構築新的3次元網狀結構,故能夠得到熱安定性更提高之第3交聯物。
且,第1組成物中,除了包含第1交聯物之外,亦包含照射前述電子束之步驟所產生的副生成物(例如經低分子化的修飾玻尿酸及/或其鹽)或未反應之修飾玻尿酸及/或其鹽等化合物,藉由上述保持之步驟,該化合物也能夠涉及3次元網狀結構之構築。藉此,第3交聯物之熱安定性被更加提高。
第3交聯物藉由在上述2重的3次元網狀結構中吸收水分,能夠形成後述之水膨脹性膠體。
因此,第3交聯物在室溫下具有後述之更優異的酵素安定性以及熱安定性。亦即,第3交聯物所具有之氫鍵在室溫下難以被破壞。
於此,以能夠得到耐酵素分解性以及熱安定性更優異的第3交聯物之觀點來看,前述溶液中之前述第1組成物的濃度為1質量%以上且30質量%以下較佳,為
2質量%以上更佳,另一方面,為15質量%以下較佳,為10質量%以下更佳。且,同樣地,前述溶液中之修飾玻尿酸及/或其鹽的濃度為1質量%以上且30質量%以下較佳,為2質量%以上更佳,另一方面,為15質量%以下較佳,為10質量%以下更佳。
且,得到前述第3組成物之步驟中,以能夠得到再更優異的酵素安定性以及熱安定性之觀點來看,前述溶液中之前述第1組成物/前述修飾玻尿酸(質量比)能夠為1/10以上且10/1以下,為1/5以上較佳,為1/3以上更佳,另一方面,為5/1以下較佳,為3/1以下更佳。
為了抑制該混合物中之第1交聯物以及修飾玻尿酸及/或其鹽的分子量低下,且衛生地保持該混合物,使該混合物溶解於溶劑中來調製溶液時,藉由保持在例如0℃以上且20℃以下之溫度中5小時以上且48小時以下,使該混合物膨脹並溶解較佳。
在保持用於得到第3交聯物之該混合物的步驟中,保持溫度、保持時間、該溶液中之第1交聯物的濃度、該溶液之pH值、溶劑以及洗淨步驟分別與用於得到第2交聯物之前述保持之步驟中的保持溫度、保持時間、溶液中之第1交聯物的濃度、溶液之pH值、溶劑以及洗淨步驟相同。
本發明一實施形態相關之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物(第1交聯物)能夠以上述實施形態相關之第1交聯物之製造方法所得。
第1交聯物能夠具有水可膨脹性。本發明中,「水可膨脹性」意指吸收水分而膨脹之性質,一般來說,意指吸收水分而成為膠體狀之性質。第1交聯物藉由具有電子束照射所成之交聯所形成之3次元網狀結構,並在該3次元網狀結構中吸收水分而膨脹,來構成膠體。
且,本發明中,「膠體」意指具有三次元網狀結構之高分子,「水可膨脹性膠體」意指在三次元網狀結構之內部吸收水分而保持之膨脹體,更具體來說,是具有在桐山漏斗用之濾紙No.707上放置1小時時,水不會從該濾紙流出之性質之高分子。
且,第1交聯物具有水可膨脹性,且對水之可膨脹度為10倍以上1,000倍以下(質量比)。
且,本發明中,「膨脹度」意指在水可膨脹性膠體中,相對於交聯物的質量之水的質量(交聯物與水
之質量比)。
更具體來說,第1交聯物之對水的可膨脹度為10倍以上且1,000倍以下較佳。
以能夠安定並保持水之觀點來看,第1交聯物的膨脹度為15倍以上(質量比)更佳,另一方面,為500倍以下(質量比)更佳,為100倍以下(質量比)更佳。
作為第1交聯物之特徵之一,有舉出具有可逆的水可膨脹性。本發明中,「可逆的水可膨脹性」意指具有添加水後會膨脹並成為膠體,且使膠體乾燥並去除水分後會成為固體之性質,且能夠重覆從膠體成固體之變化以及從固體成膠體之變化之性質。第1交聯物藉由具有可逆的水可膨脹性,能夠多次重覆自膠體成固體之變化以及自固體成膠體之變化,故操作性優異。
由於第1交聯物為固體,能夠作為固體保存。通常,玻尿酸、第1交聯物等多糖類以存在水之狀態(例如水溶液或膠體之狀態)來保存,比以固體之狀態來保存更能夠抑制分解。因此,第1交聯物之保存安定性較優異。
第1交聯物具有耐酵素(玻尿酸酶)分解性。更具體來說,將分散於50mM磷酸緩衝液中使第1交聯物之濃度成為0.1質量%(固體成分)所調製之混合物,於玻尿酸酶(5單位/每交聯物1mg)存在下40℃中保存24小時後的殘存率為1%以上較佳,為10%以上且100%以下之範圍內更佳。且,耐酵素分解性能夠以例如本案實施例所示之方法來測定。
作為第1交聯物之耐酵素分解性優異的原因之一,有舉出第1交聯物具有羧甲基。推測第1交聯物藉由具有羧甲基,玻尿酸酶較難以辨認第1交聯物中所包含之玻尿酸骨架,故會提升耐酵素分解性。
且,第1交聯物具有羧甲基之事實,例如在交聯物之1H-NMR光譜解析中,能夠以出現在3.8ppm以上且4.2ppm以下之波峰的存在來辨別。
第1交聯物具有熱安定性。更具體來說,將混合物在50℃下保存24小時後的殘存率為1%以上較佳,該混合物為使第1交聯物分散於生理食鹽水中使其濃度成為1質量%(固體成分)所調製。且,熱安定性能夠以例如本案實施例所示之方法來測定。由第1交聯物,藉由在50℃下保存24小時後的殘存率為1%以上,具有熱安定性。
第2交聯物是以得到上述第2組成物之方法所得,且第3交聯物是以得到上述第3組成物之方法所得。藉由上述實施形態相關之製造方法,能夠得到水可膨脹性以及熱安定性比第1交聯物更高之第2交聯物以及第3交聯物。
且,第2交聯物以及第3交聯物雖然具有與原料之第1交聯物相同之化學結構式、平均分子量以及修飾率,但因為上述氫鍵之形成,具有與第1交聯物相異之物理性質(後述之水膨脹性以及熱安定性)。
亦即,第2交聯物以及第3交聯物藉由包含羧甲基,相較於玻尿酸及/或其鹽,包含較多涉及氫鍵之羧基,故熱安定性較優異。
第2交聯物以及第3交聯物能夠具有水可膨脹性。本發明中,「水可膨脹性」意指吸收水分而膨脹之性質,一般來說,意指吸收水分而成為膠體狀之性質。第2交聯物以及第3交聯物具有電子束照射所成之交聯所形成之3次元網狀結構,並藉由在該3次元網狀結構中吸收水分而膨脹,來構成膠體。
且,第2交聯物以及第3交聯物具有水可膨脹性,且對水之可膨脹度為10倍以上且1,000倍以下(質量比)。
且,第2交聯物以及第3交聯物,其對水之可膨脹度為20倍以上且300倍以下較佳。
以更安定並能夠保持水之觀點來看,第2交聯物以及第3交聯物之膨脹度為30倍以上(質量比)更佳,另一方面,能夠為100倍以下(質量比)。
作為第2交聯物以及第3交聯物的特徵之一,有舉出具有可逆的水可膨脹性。本發明中,「可逆的水可膨脹性」意指具有添加水後會膨脹並成為膠體,且使膠體乾燥並去除水分後會成為固體之性質,且能夠重覆從膠體成固體之變化以及從固體成膠體之變化之性質。第2交聯物以及第3交聯物藉由具有可逆的水可膨脹性,能夠多次重複從膠體成固體之變化以及從固體成膠體之變化,故操作性優異。
由於第2交聯物以及第3交聯物為固體,故能夠作為固體保存。玻尿酸、第2交聯物以及第3交聯物等之多糖類通常以存在水之狀態(例如水溶液或膠體之狀態)來保存,但以固體之狀態來保存更能夠抑制分解。因此,第2交聯物以及第3交聯物之保存安定性較優異。
第2交聯物以及第3交聯物具有耐酵素(玻尿酸酶)分解性。更具體來說,將混合物在玻尿酸酶(5單位/每交聯物1mg)存在下並於40℃中保存24小時後,其殘存率為1%以上較佳,為3%以上100%以下之範圍內更佳,該混合物為使第2交聯物或第3交聯物分散於50mM磷酸緩衝液中使其濃度成為0.1質量%(固體成分)所調製。且,耐酵素分解性能夠以例如本案實施例所示之方法來測定。尤其是,由於第3交聯物具有2重的3次元網狀結構,故具有更優之耐酵素分解性。
作為第2交聯物以及後述之第3交聯物之耐酵素分解性優異的原因之一,有舉出第2交聯物以及第3交聯物具有羧甲基。推測第2交聯物以及第3交聯物藉由具有羧甲基,玻尿酸酶較難以辨識第2交聯物以及第3交聯物中所包含之玻尿酸骨架,故會提升耐酵素分解性。
且,第2交聯物以及第3交聯物具有羧甲基之事實,能夠例如在交聯物之1H-NMR光譜解析中,以出現在3.8ppm以上且4.2ppm以下之波峰的存在來辨別。
第2交聯物以及第3交聯物具有熱安定性。更具體來說,將混合物在50℃下保存24小時後的殘存率為1%以上較佳,保存96小時後的殘存率為1%以上更佳,該混合物為使第2交聯物或第3交聯物分散於生理食鹽水中使其濃度成為1質量%(固體成分)所調製。且,熱安定性能
夠以例如本案實施例所示之方法來測定。
且,由於第2交聯物以及第3交聯物之熱安定性是因為上述之氫鍵,故該熱安定性會隨時間經過而緩緩降低。更具體來說,第2交聯物具有因為生體內所存在的熱(例如37℃~40℃前後)而使氫鍵漸漸解離之性質,故具有適度的熱安定性。
本發明之一實施形態相關之水可膨脹性膠體包含選自第1交聯物、第2交聯物以及第3交聯物中之至少1種交聯物(以下,單純稱作「至少1種交聯物」)、與水,且前述第1交聯物及/或第2交聯物之含量以固體成分換算為0.1質量%以上且10質量%以下。亦即,前述至少1種交聯物能夠選自第1交聯物、第2交聯物以及第3交聯物中之1種或2種以上。
更具體來說,本實施形態相關之水可膨脹性膠體包含第1交聯物時,前述第1交聯物之含量以固體成分換算為0.5質量%以上且10質量%以下較佳。
以更能夠提高水可膨脹性膠體的安定性之觀點來看,本實施形態相關之水可膨脹性膠體中的前述第1交聯物之含量以固體成分換算為0.8質量%以上較佳,為1質量%以上更佳,另一方面,為8質量%以下較佳,為5質量%以下更佳。
且,本實施形態相關之水可膨脹性膠體包含第2交聯物時,前述第2交聯物之含量以固體成分換算為0.2質量%以上且10質量%以下較佳。
以更能夠提高水可膨脹性膠體的安定性之觀點來看,本實施形態相關之水可膨脹性膠體中的前述第2交聯物之含量以固體成分換算為0.5質量%以上較佳,另一方面,為8質量%以下較佳,為5質量%以下更佳。
且,本實施形態相關之水可膨脹性膠體包含第3交聯物時,前述第3交聯物之含量以固體成分換算為0.2質量%以上且10質量%以下較佳。
以更能夠提高水可膨脹性膠體的安定性之觀點來看,本實施形態相關之水可膨脹性膠體中的前述第3交聯物之含量以固體成分換算為0.5質量%以上較佳,另一方面,為8質量%以下較佳,為5質量%以下更佳。
本實施形態相關之水可膨脹性膠體中所包含之水的比例,能夠由相對於使本實施形態相關之水可膨脹性膠體乾燥並去除水分前後的質量差,本實施形態相關之水可膨脹性膠體之乾燥前的質量來算出。且,本實施形態相關之水可膨脹性膠體的乾燥(水的去除)能夠以例如真空乾燥、減壓乾燥、凍結乾燥來進行。
且,以熱安定性更優異之觀點來看,本實施形態相關之水可膨脹性膠體的pH值為3以上且8以下較佳。
本實施形態相關之水可膨脹性膠體具有熱安定性。更具體來說,本實施形態相關之水可膨脹性膠體在50℃下保存24小時後的殘存率為1%以上較佳,保存96小時後的殘存率為1%以上更佳。
本實施形態相關之水可膨脹性膠體之耐酵素分解性較優異。更具體來說,本實施形態相關之水可膨脹性膠體在玻尿酸酶(5單位/每膠體1mL)的存在下,於40℃保存24小時後的殘存率為1%以上較佳,為10%以上且100%以下之範圍內更佳。
本發明一實施形態相關之醫療材料包含上述至少1種交聯物(例如水可膨脹性膠體)。本實施形態相關之醫療材料藉由包含上述至少1種交聯物,具有耐酵素分解性以及熱安定性,並能夠以固體來保存,故保存安定性優異。
尤其是,本實施形態相關之醫療材料藉由包含上述實施形態相關之水可膨脹性膠體,並因為上述實施形態相關之水可膨脹性膠體之可逆的水可膨脹性,在使用時,能夠於第1交聯物及/或第2交聯物中添加水來調製水可膨脹性膠體,故操作性優異。
本實施形態相關之醫療材料能夠使用在一般
生體內適合性所要求之用途。作為該用途,有舉例如癒後黏著防止劑、皮下注射劑、藥物長效劑、藥理活性物質之載體、創傷被覆材料、人工皮膚、外科手術用縫合線、止血劑、人工器官、醫療用具、醫療器具。
本實施形態相關之醫療材料中所包含的上述實施形態相關之至少1種交聯物(例如水可膨脹性膠體)具有適度的熱安定性,且優異的耐酵素分解性較優異。因此,本實施形態相關之醫療材料作為例如癒後黏著防止劑、皮下注射劑使用時,上述實施形態相關之水可膨脹性膠體在生體內之程度的期間不會經分解而殘存,之後,才會在生體內被分解,故能夠防止組織彼此癒後黏著,且安全性優異。
由於本實施形態相關之醫療材料包含上述實施形態相關之至少1種交聯物,故能夠因應適用部位而成形,能夠為例如膠體狀、薄片狀、薄膜狀、粒子狀、纖維狀、海綿狀、管狀,且能夠使用在外科手術中。更具體來說,能夠將薄片狀或薄膜狀之本實施形態相關之醫療材料貼附於患部。且,本實施形態相關之醫療材料包含上述實施形態相關之水可膨脹性膠體時,例如在內視鏡手術中,由於能夠使用內視鏡將膠體狀的本實施形態相關之醫療材料容易地注入患部,故能夠適當地作為癒後黏著防止劑來使用。
本實施形態相關之醫療材料能夠作為例如膝關節注射劑來使用。本實施形態相關之醫療材料包含上述實施形態相關之水可膨脹性膠體時,具有適度的彈力性以及適度的熱安定性,且具有優異之耐酵素分解性。因此,將本實施形態相關之醫療材料作為例如膝關節注射劑來使用時,上述實施形態相關之水可膨脹性膠體在生體內之程度的期間不會被分解,並能夠殘存,且安全性優異。
本實施形態相關之醫療材料能夠作為例如藥物長效劑來使用。本實施形態相關之醫療材料包含上述實施形態相關之水可膨脹性膠體時,保水性、適度的熱安定性以及優異之耐酵素分解性較優異。因此,將本實施形態相關之醫療材料作為例如藥物長效劑來使用時,上述實施形態相關之水可膨脹性膠體在生體內之程度的期間不會被分解而會殘存,之後,由於會在生體內被分解,故具有輔助藥物慢放之作用,且安全性優異。
且,本實施形態相關之醫療材料中能夠因應必要,而配合增量劑、結合劑、潤滑劑、保存劑、抗氧化劑、香料、甜味料、酸味料、賦形劑等。且,亦能夠配合維他命C、維他命B2、維他命B12、維他命E等維他命類、核酸、硫酸軟骨素、膠原蛋白等營養成分、鐵、鋅等
礦物成分等之各種營養成分。
利用第1交聯物之良好的水可膨脹性、熱安定性,第1交聯物能夠適合地作為例如癒後黏著防止劑、膝關節注射劑、美容用材料、化妝料來使用。
且,利用第2交聯物之適度的熱安定性,第2交聯物尤其是能夠適合地作為美容用材料、化妝料來使用。
進一步利用第3交聯物之良好的酵素安定性,第3交聯物尤其是能夠適合地作為癒後黏著防止劑、膝關節注射劑、美容用材料來使用。
本發明一實施形態相關之化妝料包含上述實施形態相關之至少1種交聯物(例如水可膨脹性膠體)。
且,上述實施形態相關之至少1種交聯物因為構成該交聯物之羧基,具有較高的保水效果。其中,上述實施形態相關之至少1種交聯物中所包含的羧基會與水構成氫鍵,故推測是因為該羧基而發揮優異之保水力。因此,在例如皮膚等生物組織中具有較高之保水效果。因此,藉由將上述實施形態相關之至少1種交聯物作為例如化妝料之成分來使用,能夠達到較高的保濕效果。
因此,本實施形態相關之化妝料中所包含之
上述實施形態相關之至少1種交聯物由於較高的保水效果、適度的熱安定性以及優異之耐酵素分解性較優異,故作為化妝料使用時,會在生體內漸漸分解,故能長久維持較高的保濕作用。且,本實施形態相關之化妝料包含上述實施形態相關之水可膨脹性膠體時,由於具有作為膠體適度的彈力性,故配合於化妝料中時,能夠使之產生膠體特有的觸感,且同時,藉由在膠體中配合有效成分,能夠使有效成分慢放。
上述實施形態相關之水可膨脹性膠體亦可使其塗布或接觸於生物組織的表面來攝取,尤其是使其塗布或接觸於臉、手腕、手指、腳、關節等之皮膚較佳。
本實施形態相關之化妝料的型態並無特別限定,但有舉例如皮膚用化妝料。藉由將上述實施形態相關之至少1種交聯物使用於皮膚用化妝料,由於具有適度的黏度,且保水效果較高,故能夠賦予皮膚滋潤,並改善皮膚的粗糙感。
作為本實施形態相關之皮膚用化妝料的型態,有舉例如潔顏液、清洗液、化妝水(例如美白化妝水)、乳液(例如雪花膏、冷霜)、乳液、美容液、面膜(例如膠狀剝離型、膏狀擦去型、粉末狀沖洗型)、洗面乳、粉底液、口紅、護唇膏、唇膏、唇線筆、腮紅、刮鬍膏、防曬乳、體香乳、身體乳液(包含護手霜、護腳霜)、身體霜、肥皂、入浴劑。
本實施形態相關之化妝料中亦可進一步配合
以下之成分。作為前述成分,有舉例如陽離子化多糖類(例如陽離子化玻尿酸、陽離子化羥乙基纖維素、陽離子化古亞膠、陽離子化澱粉、陽離子化玉米糊劑、陽離子化葡聚糖、陽離子化丁聚醣、陽離子化蜂蜜等)、負離子界面活性劑(例如烷基苯磺酸鹽、聚氧伸烷基烷基醚硫酸酯鹽、烷基硫酸鹽、烯烴磺酸鹽、脂肪酸鹽、二烷基磺基丁二酸酯等)、非離子界面活性劑(例如聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯硬化蓖麻油衍生物等)、陽離子界面活性劑(例如烷基三甲基銨鹽、二烷基二甲基銨鹽、烷基吡啶陽離子鹽、氯化硬脂醯三甲基銨等)、兩性界面活性劑(例如烷基甜菜鹼、烷基醯胺丙基甜菜鹼、咪唑啉甜菜鹼、蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂等)、油分(例如矽、矽衍生物、流動石蠟、鯊烷、蜜蠟、棕櫚蠟、橄欖油、酪梨油、苦茶油、荷荷芭油、馬油等)、保濕劑(例如玻尿酸鈉、水解玻尿酸、乙醯化玻尿酸、玻尿酸二甲基矽醇、神經醯胺、月桂醯基麩胺酸二植物甾醇辛基十二烷酯、植物肝醣、水解蛋殼膜、海藻糖、甘油、去端肽膠原蛋白、山梨醇、麥芽糖醇、1,3-丁二醇等)、高級脂肪酸(例如月桂酸、廿二酸、棕櫚酸、硬脂酸、異硬脂酸、油酸等)、高級醇(例如鯨蠟醇、硬脂醇、二十二醇、異硬脂醇、鯊肝醇等)、多價醇(例如甘油、二甘油、1,3-丙二醇、甲甘醇、聚乙二醇、戊烯甘油等)、增黏劑(例如纖維素酯、羧乙烯聚合物、黃原膠、棕櫚酸糊精等)、兩性高分子樹脂化合物(例如甜菜鹼化二烷氨基丙烯酸烷基酯共聚物
等)、陽離子性高分子樹脂化合物(例如乙烯吡咯啶酮/二甲基氨基甲基丙烯酸乙酯共聚物陽離子化物、聚二甲基二烯丙基鹵化銨型陽離子性聚合物等)、防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸丙酯、苯氧乙醇等)、抗氧化劑(例如生育酚、BHT等)、金屬封閉劑(例如依地酸鹽、艾提壯酸鹽等)、紫外線吸收劑(例如二苯甲酮衍生物、對氨安息香酸衍生物、甲氧基肉桂酸衍生物等)、紫外線反射劑(例如氧化鈦、氧化鋅等)、蛋白質水解物(例如角蛋白胜肽、膠原胜肽、大豆胜肽、小麥胜肽、牛奶胜肽、蠶絲胜肽、蛋白胜肽等)、胺基酸(例如左旋精胺酸、麩胺酸、甘胺酸、丙胺酸、羥脯胺酸、半胱胺酸、絲胺酸、L-茶胺酸等)、天然物萃取物(苦參萃取物、海草萃取物、尤加利樹萃取物、蜂王漿萃取物、迷迭香萃取物、櫸樹萃取物等)、其他機能性成分(輔酶Q10、熊果素、聚季銨鹽51、彈力蛋白、鉑奈米膠質、棕櫚酸視黃醇、泛醇、尿囊素、二月桂醯基麩胺酸離胺酸鈉、磷酸抗壞血酸鎂、L-抗壞血酸2-配醣體、土耳其鞣酸、麴酸、亞油酸、傳明酸等)、磷脂質聚合物、香料、色素。
本發明一實施形態相關之美容用材料包含上述實施形態相關之至少1種交聯物(例如水可膨脹性膠體)。藉由將本實施形態相關之美容用材料注射於例如臉部、頭部、
頸部、胸部、腹部、臀部、背部、腰部、手部、腿部,能夠使用在達到美容上之效果(將例如豐胸、美顏、美腳等外觀變佳)。
本實施形態相關之美容用材料兼具適度的耐酵素分解性與熱安定性。例如本實施形態相關之美容用材料包含第2交聯物時,由於具有適度的柔軟性,故使用感良好。且,本實施形態相關之美容用材料包含第2交聯物時,具有適度的硬度,且在生體內具有適度的安定性。且,例如本實施形態相關之美容用材料包含第3交聯物時,由於具有良好的耐酵素分解性,故在生體內具有適度的安定性。
以下,以實施例進一步詳細地說明本發明,但本發明不限定於實施例。
秤重並取出1.04g之氫氧化鈉於30mL之樣品瓶後,添加水12mL使其溶解。接著,添加分子量為175萬之玻尿酸2.0g使其溶解後,添加單溴乙酸3.62g使其溶解,並於1℃下靜置16小時。之後,於200mL燒杯中置入乙醇80mL,一邊攪拌該反應液一邊添加。之後,以400網孔之濾布回收沉澱後,添加10%之氯化鈉水溶液40mL並使
其沉澱。近一步,藉由以8%鹽酸水溶液調製pH值後,以乙醇100mL洗淨3次後,減壓濾過,並於55℃下減壓乾燥3小時,得到實施例1之含有羧甲基之修飾玻尿酸。
實施例1之含有羧甲基之修飾玻尿酸之分子量為121萬,羧甲基化率為99%。且,將羧甲基化率以後述之方法來測定以及算出。
實施例1中,除了使用分子量為170萬之原料玻尿酸以外,其他進行與實施例1相同的操作,得到實施例2之含有羧甲基之修飾玻尿酸。
實施例2之含有羧甲基之修飾玻尿酸之分子量為118萬,羧甲基化率為98%。
實施例1中,除了將反應時間設為3小時以外,其他進行與實施例1相同的操作,得到實施例3之含有羧甲基之修飾玻尿酸。
實施例3之含有羧甲基之修飾玻尿酸之分子量為159萬,羧甲基化率為61%。
進行與實施例1相同的操作,得到實施例4之含有羧甲基之修飾玻尿酸。
實施例4之含有羧甲基之修飾玻尿酸之分子量為106萬,羧甲基化率為99%。
且,實施例1所得之含有羧甲基之修飾玻尿酸的羧甲基化率利用以下之方法由1H-NMR光譜的積算值求出。
將試料7mg與內部標準物質4,4-二甲基-4-戒戊烷磺酸鈉(DSS)1mg溶解於重水0.7mL中,移入並放置於NMR試料管中,並蓋上。
裝置:Varian NMR system 400NB型(Varian Technologies Japan Limited)
觀測頻率數:400MHz
溫度:30℃
基準:DSS(0ppm)
積算次數:64次
積分1H-NMR光譜之2.0ppm附近所出現之玻尿酸的N-乙醯基(CH3)之波峰與出現在3.8ppm以上且4.2ppm以下之範圍的羧甲基之甲烯基(-CH2-)的波峰。由積分值並以下述之式,求出構成修飾玻尿酸之玻尿酸的每個2糖重複單位所鍵結之羧甲基數、羧甲基化率(CM化率)。
CM化率=(3.8ppm以上且4.2ppm以下之範圍所出現的波峰積分值/2)/(2.0PPM的波峰積分值/3)
對於實施例1至3中分別所得之含有羧甲基之修飾玻尿酸,使用電子束照射裝置(型名EPS-800,(股)NHV公司),並以表1所示之各條件進行電子束照射。
更具體來說,將實施例1至3中分別所得之含有羧甲基之修飾玻尿酸與表1所示之添加物或水一起,設為表1所示之原料修飾玻尿酸的濃度之溶液,填充於尼龍中,以成型為厚度2mm之膜狀的狀態照射電子束,分別得到包含含有羧甲基之修飾玻尿酸的交聯物(第1交聯物)之組成物(第1組成物)。且,作為對照,對不包含羧甲基之玻尿酸(kewpie股份公司製)進行相同的電子束照射處理(比較例1:分子量180萬)。
且,表1所示之收率為由以下之方法所測定之值。亦即,使由表1所示之各條件所得之前述組成物分別分散於純水中使其濃度成為1質量%來調製膠體,將該
膠體靜置於1℃下24小時後,以1質量%氫氧化鈉水溶液中和至pH值6。接著,於濾紙上將殘留物(膠體)以吸引過濾回收後,以蒸餾水洗淨,分散於秤量過的培養皿並進行減壓乾燥,之後,測量培養皿的質量,由培養皿的質量變化部分算出殘留物(交聯物)的質量。將收率由以下之式(3)算出。
收率(%)=殘留物的質量/組成物的質量(固體成分)×100...(3)
使由表1所示之各條件所得之交聯物分別分散於生理食鹽水中使其濃度成為1質量%(固體成分)來調製混合物,並將該混合物於50℃下靜置7天。將此保存物以420網孔之尼龍過濾器吸引過濾並回收後,以蒸餾水洗淨,接著,分散於秤量過的培養皿上並進行減壓乾燥。之後,測定培養皿的質量,由培養皿的質量變化部分算出殘留物的質量。由前述交聯物的質量以及殘留物的質量,將熱安定性試驗中之殘存率以以下的式(4)算出。且,在表1中,於50℃下經過7天之前,混合物消失時,表示到混合物消失為止的天數。
熱安定性試驗中之殘存率(%)=殘留物的質量/交聯物的質量(固體成分)×100...(4)
使10mg之由表1所示之各條件所得之含有羧甲基之修飾玻尿酸的交聯物分別分散於50mM磷酸緩衝液中,調製9mL之混合物,添加玻尿酸酶(SIGMA公司,來自bovine testes)50單位(1mL),作成濃度為0.1質量%(固體成分),且包含5單位/每交聯物1mg的玻尿酸酶之10mL的混合物後,將該混合物靜置於40℃下24小時。接著,將此保存物以420網孔之尼龍過濾器吸引過濾並回收後,以蒸餾水洗淨,接著,分散於秤量過的培養皿上並進行減壓乾燥。之後,測定培養皿的質量,由培養皿的質量變化部分算出殘留物的質量。將耐酵素分解性試驗中之殘存率以以下之式(5)算出。
耐酵素分解性試驗中之殘存率(%)=殘留物的質量/交聯物的質量(固體成分)×100...(5)
由表1能夠理解,對含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液照射電子束所得之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽的交聯物(第1交聯物)具有水可膨脹性以及對水之可膨脹度為10倍以上且1,000倍以下(質量比)。
且,由表1能夠理解,包含第1交聯物與水,且該第1交聯物的含量以固體成分換算為0.1質量%以上且10質量%以下之水可膨脹性膠體具有耐酵素分解性以及熱安定性。
對實施例4所得之含有羧甲基之修飾玻尿酸,使用電子束照射裝置(型名EPS-800,(股)NHV公司),並以表2所示之各條件進行電子束照射。
接著,將所得之照射電子束後的溶液(包含第1組成物之溶液)直接於1mol/L之鹽酸中稀釋成含有羧甲基之修飾玻尿酸的濃度成為表2所示之濃度,於4℃下保存20小時使其膨脹溶解來調製溶液。將此溶液,使用表1所示之各添加物調整各pH值後,於-18℃下保持16小時,得到包含含有羧甲基之修飾玻尿酸的交聯物(第2交聯物)之第2組成物(保持步驟)。接著,將此溶液於25℃的流水中保持10分鐘(洗淨步驟),得到前述第2交聯物(實驗編號11)。收率以與實施例5相同之方法算出。
且,除了變更成為表2所示之條件之外,其他依照上述之方法得到第2交聯物(實驗編號12以及13)。且,針對所得之第2組成物,依照與實施例5相同之方法算出收率,且針對所得之第2交聯物,依照與上述試驗例1以及試驗例2所記載之方法相同的方法,進行熱安定性試驗以及耐酵素分解性試驗,並將其結果搭配表2來表示。且,表2中,於50℃下經過7天之前,包含第2交聯物之混合物消失時,表示該混合物至消失為止的天數。
對實施例1所得之含有羧甲基之修飾玻尿酸,使用電子束照射裝置(型名EPS-800,(股)NHV公司),依照表3所示之各條件進行電子束照射。
接著,於所得之經電子束照射所得之包含第1組成物的溶液中,以表3所示之比例添加實施例1所得之含有羧甲基的修飾玻尿酸後,將該溶液調整至表3所示之各個pH值,接著於4℃下保存20小時,使其膨脹溶解後,於-18℃下保持表3所示之各個時間,得到包含含有羧甲基之修飾玻尿酸之交聯物(第3交聯物)的第3組成物(保持步驟)。接著,將此溶液於25℃的流水中保持10分鐘(洗淨步驟),得到第3交聯物(實驗編號21至32)。收率為以與實施例5相同的方法算出。且,針對所得之第3交聯物,依照與上述試驗例1以及試驗例2所記載之方法相同的方法,進行熱安定性試驗以及耐酵素分解性試驗,並將其結果搭配表3來表示。
由表2以及表3能夠理解將對修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液照射電子束所得之第1交聯物保持在-200℃以上且10℃以下所得之第2交聯物(實驗編號11至13)、以及將含有包含該第1交聯物之第1組成物與修飾玻尿酸及/或其鹽的溶液保持於-200℃以上且10℃以下所得之第3交聯物(實驗編號21至32)具有水可膨脹性、以及對水之可膨脹度為10倍以上且1,000倍以下(質量比)。
且,由表2以及表3能夠理解包含第2交聯物及/或第3交聯物與水,且該第2交聯物及/或第3交聯物的含量以固體成分換算為0.1質量%以上且10質量%以下之水可膨脹性膠體具有耐酵素分解性以及較高之熱安定性。
另一方面,針對市售之交聯玻尿酸Synvisc(Genzyme公司)以及Restylane(Q-Med公司),進行耐酵素分解性試驗。更具體來說,Synvisc為將膠體1.25g(含有玻尿酸10mg),Restylane為將膠體0.5g(含有玻尿酸10mg)分散於50mM磷酸緩衝液中使其成為9mL來調製,並添加溶解於50mM磷酸緩衝液中之玻尿酸酶50單位(1mL)來調製混合物10mL,將該混合物的耐酵素分解性以與上述試驗例2之方法相同的方法測定時,確認殘存率皆為0%,耐酵素分解性較差。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1所得之第1交聯物的化妝水。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1所得之第1交聯物的乳液。
第1交聯物 0.3%
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號12所得之第1交聯物的乳液(潤滑乳液)。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號12所得之第2交聯物的美容液(美白保濕精華液)。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號13所得之第2交聯物的美容液面膜(膏狀擦去狀玻璃型)。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前
述實驗編號1所得之第1交聯物的洗顏料(洗面乳型式)。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1所得之第1交聯物的防曬液(乳液)。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1所得之第1交聯物的護唇膏。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1得之第1交聯物的洗髮精。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合前述實驗編號1所得之第1交聯物的潤髮乳。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1所得之第1交聯物的軟膠囊。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1所得之第1交聯物的散劑(顆粒劑)。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1所得之第1交聯物的錠劑。
本配合例中,依照以下所記載之配方,調製配合有前述實驗編號1所得之第1交聯物的有導管袋之白桃膠體飲料。
將前述實驗編號2所得之第1交聯物軋延並成型成厚度為1mm的薄膜狀,滅菌處理後,得到薄片狀的癒後黏著防止劑。
將前述實驗編號12所得之第2交聯物軋延並成型成厚度為1mm的薄膜狀,滅菌處理後,得到薄片狀的癒後黏著防止劑。
以包含0.9%NaCl之注射用水使前述實驗編號2所得之第1交聯物(固體成分換算1%)的乾燥物膨脹,無菌填充於1mL之注射器中,進行滅菌處理後,得到皮下注射劑。
以包含0.9%NaCl之注射用水使前述實驗編號13所得之第2交聯物(固體成分換算1%)的乾燥物膨脹,無菌填充於1mL之注射器中,進行滅菌處理後,得到皮下注
射劑。
以包含0.9%NaCl、0.001%前列腺素E1之注射用水使前述實驗編號2所得之第1交聯物(固形物換算2%)的乾燥物膨脹,進行滅菌處理後,無菌填充於3mL之注射器中,得到藥物長效劑。
以包含0.9%NaCl、0.001%前列腺素E1之注射用水使前述實驗編號11所得之第2交聯物(固形物換算2%)的乾燥物膨脹,進行滅菌處理後,無菌填充於3mL之注射器中,得到藥物長效劑。
以包含0.9%NaCl之注射用水,使前述實驗編號2所得之第1交聯物(固形物換算0.8%)的乾燥物膨脹,進行滅菌處理後,無菌填充於2mL之注射器中,得到膝關節注射劑。
以包含0.9%NaCl之注射用水使前述實驗編號12所得之第2交聯物(固形物換算0.8%)的乾燥物膨脹,進行滅菌處理後,無菌填充於2mL之注射器中,膝關節注射
劑。
將前述實驗編號26所得之第3交聯物軋延並成型成厚度為1mm的薄膜狀,進行滅菌處理後,得到薄片狀之癒後黏著防止劑。
以包含0.9%NaCl之注射用水使前述實驗編號26所得之第3交聯物(固體成分換算1%)的乾燥物膨脹,無菌填充於1mL之注射器中,進行滅菌處理後,得到皮下注射劑。
以包含0.9%NaCl、0.001%前列腺素E1之注射用水使前述實驗編號28所得之第3交聯物(固形物換算2%)的乾燥物膨脹,進行滅菌處理後,無菌填充於3mL之注射器中,得到藥物長效劑。
以包含0.9%NaCl之注射用水使前述實驗編號28所得之第3交聯物(固形物換算0.8%)的乾燥物膨脹,進行滅菌處理後,無菌填充於2mL之注射器中,得到膝關節注射劑。
Claims (32)
- 一種含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其係包含對含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之溶液照射電子束,而得到交聯物之步驟。
- 如請求項1之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,前述電子束的照射強度為5kGy以上且800kGy以下。
- 如請求項1或2之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其係對前述含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽的濃度為5質量%以上且60質量%以下之溶液照射前述電子束。
- 如請求項3之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,前述溶液的pH值為8以下。
- 如請求項1至4中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,照射前述電子束之前的前述修飾玻尿酸及/或其鹽之平均分子量為10萬以上,且,相對於構成玻尿酸的2糖單位,羧甲基化率為50%以上。
- 如請求項1至5中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,相對於照射前述電子束之前的前述修飾玻尿酸及/或其鹽,前述交聯物之收率為30質量%以上。
- 如請求項1至6中任1項之含有羧甲基之修飾玻 尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,前述交聯物具有水可膨脹性。
- 如請求項1至7中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其係進一步包含以水將包含交聯物之組成物洗淨,並去除交聯物以外之雜質之步驟,該交聯物係於照射前述電子束之步驟所得。
- 一種含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,其係藉由如請求項1至8中任1項之製造方法所得。
- 一種含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,其係對水之可膨脹度為10倍以上1,000倍以下(質量比),且具有水可膨脹性。
- 如請求項10之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,其係具有可逆的水可膨脹性。
- 如請求項9至11中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,其係將混合物在50℃下保存24小時後,其殘存率為1%以上,該混合物為使如請求項9至11中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物分散於生理食鹽水中,至其濃度成為1質量%(固體成分)所調製。
- 如請求項9至12中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,其係將混合物在玻尿酸酶(5單位/每交聯物1mg)存在下,並於40℃中保存24小時後的殘存率為1%以上,該混合物為使如請求項9至12中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物分散於 50mM磷酸緩衝液中,使其濃度成為0.1質量%(固體成分)所調製。
- 如請求項1至7中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其係得到第2組成物,該第2組成物中包含對包含以照射前述電子束之步驟所得之第1交聯物之第1組成物,進一步施予其他的交聯處理步驟所得之第2交聯物。
- 如請求項14之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中包含將前述第1組成物之溶液保持在-200℃以上且10℃以下之步驟。
- 如請求項15之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,前述溶液中之前述第1組成物的濃度為1質量%以上且30質量%以下。
- 如請求項16之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,前述溶液之pH值為3以下。
- 如請求項15至17中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其係進一步包含以水將包含第2交聯物之第2組成物洗淨,並去除該交聯物以外的雜質之步驟,該第2交聯物為藉由前述保持之步驟所得。
- 如請求項1至7中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其係藉由將包含第1組成物與含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之混合物的 溶液保持在-200℃以上10℃以下,得到包含第3交聯物之第3組成物,該第1組成物包含於照射前述電子束之步驟所得的交聯物。
- 如請求項19之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,得到前述第3組成物之步驟中,前述溶液中之前述第1組成物/前述含有羧甲基之修飾玻尿酸(質量比)為1/10以上且10/1以下。
- 如請求項19或20之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,前述溶液中之前述第1組成物的濃度為1質量%以上且30質量%以下。
- 如請求項19至21中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,前述溶液中之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽的濃度為1質量%以上且30質量%以下。
- 如請求項19至22中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其中,前述溶液之pH值為3以下。
- 如請求項19至23中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物之製造方法,其係進一步包含以水將包含第3交聯物之第3組成物洗淨,並去除該第3交聯物以外的雜質之步驟,該第3交聯物係藉由前述保持之步驟所得。
- 一種含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物,其係以如請求項14至18、19至24中任1項之製造 方法所得。
- 一種水可膨脹性膠體,其係包含如請求項9至13以及25中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物、與水,且前述交聯物之含量以固體成分換算為0.1質量%以上且10質量%以下。
- 如請求項26之水可膨脹性膠體,其中,在50℃下保存24小時後的殘存率為1%以上。
- 如請求項26或27之水可膨脹性膠體,其中,在玻尿酸酶(5單位/每膠體1mL)的存在下,於40℃保存24小時後的殘存率為1%以上。
- 一種醫療材料,其係包含如請求項9至13以及25中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物。
- 如請求項29之醫療材料,其係作為選自癒後黏著防止劑、皮下注射劑、膝關節注射劑以及藥物長效劑中之至少1種來使用。
- 一種化妝料,其係包含如請求項9至13以及25中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物。
- 一種美容用材料,其係包含如請求項9至13以及25中任1項之含有羧甲基之修飾玻尿酸及/或其鹽之交聯物。
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