TW201328704A - 用於治療胰管系統狹窄或／及阻塞之ｇｌｐ－１促進劑 - Google Patents

Abstract

本發明是有關於一種用於治療疾病或症狀的醫藥組成物，其中該疾病或症狀與位在胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關，該組成物包含至少一種GLP-1促進劑以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。

Description

用於治療胰管系統狹窄或/及阻塞之GLP-1促進劑

本發明是有關於一種用於治療疾病或症狀的醫藥組成物，其中該疾病或症狀與位在胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關，該組成物包含至少一種GLP-1促進劑以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。

胰臟是一個外分泌與內分泌腺體。內分泌胰臟(蘭氏小島)製造被分泌至血流中的胰島素。外分泌胰臟製造含有消化酵素(例如蛋白酶、脂酶及核酸酶)與碳酸氫鹽的胰液。該等酵素以酶原的方式提供。胰管系統將胰液導入十二指腸中。

胰體(pancreas body)(胰腺體(corpus pancreatis))在解剖學上有別於頭部(胰腺頭(caput pancreatis)及尾部(胰腺尾(cauda pancreatis))。

胰管系統包括大胰管(亦稱為胰大管(ductus pancreaticus major)、主胰管或維生氏管(duct of Wirsung))。大胰管通到肝胰管。肝胰管是由總膽管與大胰管的匯合所形成，產生位於十二指腸壁的乏特氏乳頭(papilla of Vater)(亦稱為乏特氏乳頭或十二指腸大乳頭)。乏特氏乳頭包括歐迪氏括約肌。歐迪氏括約肌是由圍繞可變長度之肝胰管的平滑肌纖維所組成。

在胰管系統中有一些非病理變形。例如，肝胰管可 能被擴大而形成肝胰管壺腹(亦稱為乏特氏壺腹)。在另一種變形中，肝胰管可能是短的或不存在。這表示總膽管(亦稱為膽總管(ductus choledochus))與大胰管可獨立地通到十二指腸中。

在又一種變形中，可能存在副胰管(胰副管、桑氏胰副管)，其靠十二指腸小乳頭(亦稱為十二指腸小乳頭(papilla duodeni minor))通到十二指腸中。副胰管繞過肝胰管與乏特氏乳頭。

一種常見的先天性異常為胰腺分裂症(pancreas divisium)(完全胰腺分裂症或不完全胰腺分裂症)，胰腺分裂症是因為胚胎發育期間腹側與背側胰管之間異常融合。在完全胰腺分裂症中，存在完全分離的胰管系統，導致乏特氏乳頭與十二指腸小乳頭。不完全胰腺分裂症是一種在胰管的腹側與背側之間有不當連接的胰腺異常。胰膽連接異常是一種被定義為胰管與膽管在十二指腸壁外連接的先天性異常(Kamisawa et al.,J.Anat.2008,212(2)：125-34)。

胰管系統與膽管系統在組織學上是相關的。胰管系統與膽管系統(包括肝管、膽囊、膽囊管、膽總管)具有類似的組織學結構；壁包含平滑肌，且其內面覆有柱狀上皮。

膽管中(尤其是膽囊)與胰管系統中的平滑肌收縮可由膽囊收縮素(CCK)所引起。CCK是在小腸黏膜中製造。CCK經由循環到達膽囊。CCK釋放可能是由脂肪 餐食所引起。透過膽囊收縮，膽汁被釋放至促進脂肪乳化的十二指腸中。CCK的另一個功能為誘導消化酵素釋放至胃中與胰腺中。

胰管系統的狹窄或/及阻塞可能導致胰液流減弱，致使與疼痛相關的症狀。例如由於周圍組織向內生長所致(因為癌症或/及發炎性過程)之胰管系統中的狹窄隆起或/及阻塞可導致管內容積因為胰液累積而增加，合併有管壁舒張。胰液含有溶解的胰酵素(例如澱粉酶與脂酶)，當其累積在胰管系統中時將變得具有自體攻擊性，在胰管系統中造成持續的發炎性過程。此外，可能合併有管壁舒張的容積增加會造成嚴重的急性或慢性疼痛。治療此種疼痛包括使用類鴉片止痛劑治療或藉由外科手術移除狹窄或/及阻塞。此手術可為”根治性”手術，亦即完全移除罹病組織。

阻塞可能是因為結石所引起，例如碳酸氫鈣結石。這些結石也可稱為胰石(pancreatic stone)。這些結石包括胰石(pancreolith)。”胰石”的同義字為”胰結石(pancreatic calculus)”。胰腺中出現結石稱為胰腺結石”pancreolithiasis”。胰腺中的結石可能是例如在胰腺炎期間形成。結石可能是因為酵素濃度與發炎性細胞的失衡而造成沉積所引起。甚至可引起發炎反應，且發炎與結石形成持續著。參見，例如Marvin Sleisenger(ed.)Gastrointestinal disease：pathophysiology,diagnosis,management,Saunders,Philadelphia,1973,1983,1993。

胰管系統的狹窄也可能是癌症所引起，例如外分泌胰腺癌或/及內分泌胰腺癌。隨著生長，外分泌胰腺癌或/及內分泌胰腺癌可導致胰管系統狹窄。胰腺癌的實例包括，但不限於胰臟囊腺瘤、胰臟囊腺腫瘤、胰臟腺棘皮癌及分泌型腫瘤，諸如多發性內分泌贅瘤形成、胰島瘤、升糖素瘤與體抑素瘤。參見，例如Marvin Sleisenger(ed.)Gastrointestinal disease：pathophysiology,diagnosis,management,Saunders,Philadelphia,1973,1983,1993。

類升糖素肽-1(GLP-1)是一種內分泌激素，其在經口攝入葡萄糖或脂肪後增高胰島素反應。GLP-1通常會調節升糖素濃度、減緩胃排空、刺激(原-)胰島素的生物合成、增加對胰島素的敏感性以及刺激肝糖的胰島素依賴性生物合成(Holst(1999),Curr.Med.Chem6：1005,Nauck et al.(1997)Exp Clin Endocrinol Diabetes 105：187,Lopez-Delgado et al.(1998)Endocrinology 139：2811)。

人類GLP-1具有37個胺基酸殘基(Heinrich et al.,Endocrinol.115：2176.(1984),Uttenthal et al.,J Clin Endocrinol Metabol(1985)61：472)。GLP-1的活性片段包括GLP-1(7-36)醯胺與GLP-1(7-37)。

艾塞那肽(exendin)是一群能夠降低血糖濃度的肽。艾塞那肽與GLP-1(7-36)在序列上具有某些類似性(53%，Goke et al.J.Biol Chem 268,19650-55)。艾塞那 肽-3與艾塞那肽-4在天竺鼠胰腺的腺泡細胞中透過與艾塞那肽受體交互作用而刺激細胞性cAMP生成增加(Raufman,1996,Reg.Peptides 61：1-18)。相對於艾塞那肽-4，艾塞那肽-3在胰腺的腺泡細胞中引起澱粉酶釋放增加。

艾塞那肽-3、艾塞那肽-4與艾塞那肽促進劑已被提議用於治療糖尿病與預防高血糖症；它們降低胃運動以及胃排空(US 5,424,286與WO98/05351)。

艾塞那肽類似物可依據天然艾塞那肽-4序列的胺基酸置換及/或C-端截斷來鑑別。此類的艾塞那肽類似物描述於WO 99/07404、WO 99/25727、WO 99/25728中。艾塞那肽-4類似物包括利西拉來(lixisenatide)(亦稱為AVE0010、desPro³⁶-艾塞那肽-4-Lys₆-NH₂或H-desPro³⁶-艾塞那肽-4-Lys₆-NH₂)。

WO 2007/028394揭示使用GLP-1分子治療膽囊運動障礙及/或膽疼痛/不適。依據WO 2007/028394，膽囊運動障礙可能是膽管區域的運動增加，或膽管區域的運動減低。GLP-1分子被認為是蠕動促進劑。依據WO 2007/028394，GLP-1分子可與一或多種能夠引起膽汁流及/或治療膽管運動疾患的其他刺激因子(等)一起投藥。或者，GLP-1分子可以與一或多種能夠減少膽汁流的抑制性因子一起投藥。在WO 2007/028394中未呈現GLP-1分子能夠影響膽囊生理學的實驗驗證。

未知GLP-1對於胰管系統具有任何影響。

膽囊運動可表示為膽囊排出率(gallbladder ejection fraction)且可藉由膽道閃爍造影來評估。膽道閃爍造影是一種核子成像步驟以評估膽囊功能。例如，標記^99m鎝的亞胺二乙酸衍生物被i.v.注射，然後容許循環至肝臟，於該處被分泌至膽系統並由膽囊儲存。膽道閃爍造影被用於診斷膽囊運動障礙，其涉及膽囊功能不全。帶有膽囊排出率(GBEF)的個案有低於40%被認為是表示膽囊切除術(Behar J.et al.,Gastroenterology 2006 130：1498-1509)。

膽囊的鬆弛與收縮是由平滑肌細胞所媒介且經由^99m鎝膽道閃爍造影法呈現動態測量的型態關聯。

發明摘述

本發明實施例係一種隨機化、雙盲、安慰劑對照、雙順序、雙處理交叉研究，評估單次皮下注射20 μg利西拉來在健康男性與女性受試者中對於膽囊運動的效用。膽囊運動已藉由膽道閃爍造影來分析。膽囊收縮素(CCK-8)已在投與單劑量安慰劑或20 μg利西拉來後60分鐘被投與，接著馬上是單劑量^99mTc甲溴菲寧(mebrofenin)(一種經^99mTc標記的亞胺二乙酸衍生物)。程序可歸納如下。透過將對輻射敏感的照相機放在受試者腹部上，可獲得肝臟、膽管與膽囊的”圖像”，其對應於放射性膽汁移動之處。在注射利西拉來或安慰劑與 ^99mTc注射後，以1幀/分持續60分鐘獲得肝臟幀圖。在60分鐘時的膽囊視觀之後，經由連續輸注泵投與0.02 μg/kg CCK-8持續60分鐘。在CCK-8輸注之後持續影像擷取至少又60分鐘。

在安慰劑組中，CCK-8引起由膽囊所記錄之計數下降，表示膽汁由膽囊經由膽管釋放至十二指腸中。令人驚訝的是，在健康受試者中透過皮下投與單劑量20 μg利西拉來，CCK-8的這個效用被大大地減少(參見第2圖中的例示性充填曲線與排空曲線)。在膽囊中的^99mTc維持高量，表示僅有少部分膽汁被釋放。這個效用已如下被定量。在安慰劑組中，CCK-8引起膽囊排出率(GBEF，或排出率EF，亦即從膽囊被排出之膽汁體積分率)增加至多達約85%，如同由CCK的生理作用所預期般。在利西拉來組中，於CCK-8投與之後排出率維持在低於40%(參見第3圖中的例示性GBEF曲線，平均值提供於第7圖與表9中)。接受利西拉來，13/24(54%)受試者在60分鐘時具有GBEF低於40%，相較於接受安慰劑為1/24(4%)。在健康受試者中皮下投與單劑量20 μg利西拉來會明顯地降低對CCK-8反應所引起之膽囊排空(表示為膽囊排出率(GBEF))，相較於安慰劑在60分鐘時達45.8%。

如本文所述，不知道利西拉來對於GBEF的效用之原因。在不希望受理論囿限的情況下，因為利西拉來而降低CCK所引起之膽囊排空可由利西拉來引起膽囊的 平滑肌鬆弛來解釋。因此，利西拉來在膽囊中提供解攣效用。因為胰管系統與膽管就管中的平滑肌細胞而言共有明顯的類似性，吾人可推論利西拉來在胰管系統中可如同在膽管系統中表現類似的平滑肌鬆弛效用。依據本文揭示利西拉來對於GBEF的效用，預期胰管系統中的平滑肌細胞會因為投與利西拉來或GLP-1促進劑而變得鬆弛。因此，包括利西拉來在內的GLP-1促進劑可在胰管系統中提供解攣或抗攣效用。

膽管中或胰管系統中的狹窄或/及阻塞可能導致痙攣，通常會疼痛。GLP-1促進劑的解攣效用提議GLP-1促進劑在治療與狹窄或阻塞過程相關之疾病的治療用途。因為胰管系統與膽管系統在解剖學上與組織學上相近，故GLP-1促進劑(諸如利西拉來)不僅對膽管，還有胰管系統或/及周圍胰腺組織的狹窄或阻塞過程可表現治療效用。平滑肌鬆弛會增加管腔，因而若出現狹窄或阻塞時能增進膽汁或/及胰液流動。因為解攣活性，GLP-1促進劑變得適於治療在膽管系統或/及胰管系統中與狹窄或/及阻塞有關的疼痛。

因此，本發明的第一個方面係一種用於治療疾病或症狀的醫藥組成物，其中該疾病或症狀與位在胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關，該組成物包含至少一種GLP-1促進劑以及視情況選用的醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。狹窄或/及阻塞也可以是位在周邊胰腺組織中。

在本發明中，”胰管系統”包括，但不限於大胰管、 肝胰管、乏特氏乳頭、歐迪氏括約肌、副胰管及十二指腸小乳頭。

狹窄或/及阻塞可位在大胰管中、在肝胰管中、在乏特氏乳頭中、在歐迪氏括約肌中、在副胰管中或/及在十二指腸小乳頭中。

具體而言，狹窄或/及阻塞可位在大胰管中、在副胰管中或/及在十二指腸小乳頭中。

阻塞可能是由胰管系統中的結石或/及結石病所致，具體而言為胰腺結石。結石可為胰結石。結石可包括碳酸鹽。

與位在胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關的疾病可為結石病、胰腺結石、與胰管系統中形成結石有關的胰腺炎，其中胰腺炎可為慢性胰腺炎。

與位在胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關的疾病或症狀可為癌症。具體而言，癌症在胰管系統中導致狹窄。癌症可為在大胰管中、在肝胰管中、在乏特氏乳頭中、在歐迪氏括約肌中、在副胰管中或/及在十二指腸小乳頭中的任一種癌症。具體而言，癌症包括腫瘤。癌症亦可位在周邊胰腺組織中。

具體言之，癌症可在大胰管中、在副胰管中或/及在十二指腸小乳頭中。

癌症可為外分泌胰腺癌，或內分泌胰腺癌。癌症可包括轉移，例如從在另一器官中的轉移性癌症衍生而來的轉移。具體言之，癌症可選自胰臟囊腺瘤、胰臟囊腺 腫瘤、胰臟腺棘皮癌及分泌型腫瘤，諸如多發性內分泌贅瘤形成、胰島瘤、升糖素瘤與體抑素瘤。

狹窄或/及阻塞可能導致疼痛。

治療可為緩和治療(palliative treatment)。緩和治療在罹患癌症的患者中是必要的，尤其是不能操作的癌症、末期癌症、對抗癌治療無反應的癌症(例如因為輻射或/及化學療法)、存在從於另一器官中之轉移性癌症衍生而來的轉移，其中轉移導致胰管系統中的狹窄或/及阻塞，且其中癌症具體而言會疼痛，具體而言是因為形成狹窄或/及阻塞。更具體而言，癌症形成狹窄。

治療，尤其是緩和治療，可持續至少一個月、至少兩個月、至少三個月、至少四個月或至少六個月。

本發明的另一個方面是一種用於緩和治療的醫藥組成物，該組成物包含至少一種GLP-1促進劑，以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。緩和治療為本文所述的緩和治療。具體而言，緩和治療包括治療由胰管系統中的狹窄或/及阻塞所引起的疼痛。具體而言，緩和治療包括治療由胰管系統中的狹窄或/及阻塞所引起的疼痛。更具體而言，緩和治療包括治療胰管系統之狹窄或/及阻塞所引起的癌症。組成物為本文所述的組成物。

本發明的又一方面為一種用於治療疼痛的醫藥組成物，該組成物包含至少一種GLP-1促進劑，以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。疼痛 為本文所述的疼痛。具體而言，疼痛可與胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關。治療疼痛可為緩和治療，具體而言如本文所述之緩和治療。組成物為本文所述的組成物。

本發明的另一方面為一種治療與胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關之疾病或症狀的方法，該方法包含將包括至少一種GLP-1促進劑，以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑的醫藥組成物投與給有需要的個體。在本發明方法中，該疾病或症狀可為如本文所述任一種與在胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關之疾病。組成物為本文所述的組成物。

如本文所述的醫藥組成物或/及方法所治療的患者或/及個體可為哺乳動物，包括人類及非人類哺乳動物。較佳的患者或/及個體為人類。

具體而言，患者未罹患糖尿病，諸如第1型或第2型糖尿病。

具體而言，患者不肥胖。更具體而言，患者的身體質量指數低於30 kg/m²或低於27 kg/m²。

具體而言，患者未罹患CNS疾患，諸如阿茲海默症或帕金森氏症。

本發明的再一方面為GLP-1促進劑於製造用以治療與胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關之疾病或症狀的藥物的用途，該藥物包含至少一種GLP-1促進劑，以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。 在本發明的用途中，該疾病或症狀可為如本文所述任一種與在胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關之疾病。藥物為本文所述的藥物。

在本發明中，GLP-1促進劑的”抗攣活性”或”解攣活性”表示平滑肌的緊張程度，具體而言在膽管系統或/及胰管系統中，因為投與GLP-1促進劑而被降低。具體而言，利西拉來提供抗攣或解攣活性。

在本發明中，該至少一種GLP-1促進劑可為一種、兩種、三種、四種、五種或更多種GLP-1促進劑。具體而言，該至少一種GLP-1促進劑可為一種GLP-1促進劑。”GLP-1促進劑”亦稱為”GLP-1受體促進劑”。

在本發明中，術語”GLP-1促進劑”包括GLP-1、其類似物與衍生物、艾塞那肽-3、其類似物與衍生物，以及艾塞那肽-4，其類似物與衍生物。亦包括表現GLP-1生物活性的物質。

本發明醫藥組成物可包含彼此獨立地選自由以下組成之群的一或多者：類升糖素肽-1(GLP-1)、GLP-1的類似物與衍生物、艾塞那肽-3、艾塞那肽-3的類似物與衍生物、艾塞那肽-4，艾塞那肽-4的類似物與衍生物。

GLP-1、艾塞那肽-3或/及艾塞那肽-4，如本文所用，包括GLP-1、艾塞那肽-3或/及艾塞那肽-4之醫藥上可接受之鹽。

GLP-1促進劑為利西拉來或/及其醫藥上可接受之鹽較佳。

GLP-1促進劑為利拉魯肽或/及其醫藥上可接受之鹽亦較佳。

例如，GLP-1類似物及衍生物描述於WO 98/08871中；艾塞那肽-3、艾塞那肽-3的類似物與衍生物，以及艾塞那肽-4和艾塞那肽-4的類似物與衍生物可見於WO 01/04156、WO 98/30231、US 5,424,286、EP申請案99 610 043.4、WO 2004/005342以及WO 04/035623中。這些文獻併入本文中做為參考文獻。描述於這些文獻中的艾塞那肽-3和艾塞那肽-4，以及其中所述其類似物與衍生物可用於組成本發明作為GLP-1促進劑。亦可使用這些文獻中所述的艾塞那肽-3和艾塞那肽-4，及其中所述它們的類似物和衍生物的任何所需組合作為GLP-1促進劑。

該至少一種GLP-1促進劑較佳係獨立選自由艾塞那肽-4、艾塞那肽-4之類似物與衍生物，及其藥理上可接受之鹽組成之群。

一個更佳的GLP-1促進劑為選自由以下組成之群的艾塞那肽-4類似物：H-desPro³⁶-艾塞那肽-4-Lys₆-NH₂(desPro³⁶-艾塞那肽-4-Lys₆-NH₂、AVE0010、利西拉來)、H-des(Pro^36,37)-艾塞那肽-4-Lys₄-NH₂、H-des(Pro^36,37)-艾塞那肽-4-Lys₆-NH₂、及其藥理上可接受之鹽。

一個更佳的GLP-1促進劑為選自由以下組成之群 的艾塞那肽-4類似物：desPro³⁶[Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)、desPro³⁶[IsoAsp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)、desPro³⁶[Met(O)¹⁴,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)、desPro³⁶[Met(O)¹⁴,IsoAsp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)、desPro³⁶[Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-2(1-39)、desPro³⁶[Trp(O₂)²⁵,IsoAsp²⁸]艾塞那肽-2(1-39)、desPro³⁶[Met(O)¹⁴Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)，desPro³⁶[Met(O)¹⁴Trp(O₂)²⁵,IsoAsp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)，及其藥理上可接受之鹽。

一個更佳的GLP-1促進劑為選自上段中所述之群的艾塞那肽-4類似物，其中肽-(Lys)₆-NH₂附接在艾塞那肽-4類似物的C端。

一個更佳的GLP-1促進劑為選自由以下組成之群的艾塞那肽-4類似物：H-(Lys)₆-desPro³⁶[Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂、desAsp²⁸Pro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、H-(Lys)₆desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、H-Asn-(Glu)₅desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、 desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-(Lys)₆-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-Asn-(Glu)₅-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-(Lys)₆-desPro³⁶[Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂、H-desAsp²⁸ Pro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Trp(O₂)²⁵]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、H-(Lys)₆-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、H-Asn-(Glu)₅-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39-NH₂、desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH2、H-(Lys)₆-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-Asn-(Glu)₅-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-(Lys)₆-desPro³⁶[Met(O)¹⁴,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂、des Met(O)¹⁴Asp²⁸Pro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、 H-(Lys)₆-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、H-Asn-(Glu)₅-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-(Lys)₆-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂、H-Asn-(Glu)₅desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-(Lys)₆-desPro³⁶[Met(O)¹⁴,Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂、desAsp²⁸Pro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Trp(O₂)²⁵]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、H-(Lys)₆-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、H-Asn-(Glu)₅desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-NH₂、desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-(Lys)₆-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂、H-Asn-(Glu)₅-desPro³⁶,Pro³⁷,Pro³⁸[Met(O)¹⁴,Trp(O₂)²⁵,Asp²⁸]艾塞那肽-4(1-39)-(Lys)₆-NH₂， 及此等化合物之藥理上可接受之鹽。

一個更佳的GLP-1促進劑為選自由Arg³⁴,Lys²⁶(N^ε(γ-麩胺醯基(N^α-十六醯基)))GLP-1(7-37)[利拉魯肽]及其藥理上可耐受之鹽組成之群。

一個更佳的GLP-1促進劑為利西拉來。利西拉來具有H-desPro³⁶-艾塞那肽-4-Lys₆-NH₂(desPro³⁶艾塞那肽-4-Lys₆-NH₂、AVE0010)的序列。此物係以SEQ ID NO：93公開於WO 01/04156中。利西拉來為艾塞那肽-4衍生物： SEQ ID NO：1：利西拉來(44 AS)

H-G-E-G-T-F-T-S-D-L-S-K-Q-M-E-E-E-A-V-R-L-F-I-E-W-L-K-N-G-G-P-S-S-G-A-P-P-S-K-K-K-K-K-K-NH₂

SEQ ID NO：2：艾塞那肽-4(39 AS)

H-G-E-G-T-F-T-S-D-L-S-K-Q-M-E-E-E-A-V-R-L-F-I-E-W-L-K-N-G-G-P-S-S-G-A-P-P-P-S-NH₂

亦偏好提供利西拉來之藥理上可耐受之鹽。

術語”至少一種GLP-1促進劑”包括本文所述用於本發明組成物中之GLP-1促進劑的組合，實例為兩種或多種選自本文所述GLP-1促進劑之任何所要GLP-1促進劑組合。

該至少一種GLP-1促進劑更佳係獨立選自艾塞那肽-4、H-desPro³⁶-艾塞那肽-4-Lys₆-NH₂以及Arg³⁴,Lys²⁶(N^ε(γ-麩胺醯基(N^α-十六醯基)))GLP-1(7-37)[利拉魯肽]及其藥理上可接受之鹽。

本發明組成物可含有數量為10 μg/ml至20 mg/ml、較佳25 μg/ml至15 mg/ml的GLP-1促進劑。就酸性至中性溶解的GLP-1促進劑而言，數量較佳為20 μg/ml至300 μg/ml，而就中性至鹼性促進劑而言，它們較佳為500 μg/ml至10 mg/ml。就艾塞那肽-4類似物而言，20 μg/ml至150 μg/ml較佳。

在本發明中，該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶-艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽，可呈足以引起治療效用的數量被投與給有需要的個體。

在本發明中，該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶-艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽，可與適當醫藥上可接受載劑、佐劑或/及輔劑一起調配。

該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶-艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽，可非經口投與，例如藉由注射(諸如藉由肌肉內或藉由皮下注射)。已知適當的注射裝置，例如包含具有活性成分之藥匣，以及注射針頭的所謂”筆”。該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶-艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽，可呈例如數量範圍為每劑量10至15 μg或每劑量15至20 μg的適當數量被投與。

在本發明中，該至少一種GLP-1促進劑，具體而言 desPro³⁶艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽，可呈範圍為10至20 μg、範圍為10至15 μg或範圍為15至20 μg的日劑量被投與。該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽可藉由每天注射1次而被投與。

在本發明中，該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽，可提供為液體組成物。習於技藝者知曉適用於非經口投與之利西拉來的液體組成物。本發明之液體組成物可具有酸性或生理學pH。酸性pH較佳範圍為pH 1-6.8、pH 3.5-6.8或pH 3.5-5。生理學pH較佳範圍為pH 2.5-8.5、pH 4.0-8.5或pH 6.0-8.5。pH可透過醫藥上可接受之稀酸(通常為HCl)或醫藥上可接受之稀鹼(通常為NaOH)來調整。

包含該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽的液體組成物可包含適當的防腐劑。適當的防腐劑可選自苯酚、m-甲酚、苯甲醇及p-羥基苯甲酸酯。較佳的防腐劑為m-甲酚。

包含該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽的液體組成物可包含滲性劑(tonicity agent)。適當滲性劑可選自甘油、乳糖、山梨糖醇、甘露糖醇、葡萄糖、 NaCl、含鈣或含鎂化合物(諸如CaCl₂)。甘油、乳糖、山梨糖醇、甘露糖醇與葡萄糖的濃度在100-250 mM範圍內。NaCl濃度至多為150 mM。較佳滲性劑為甘油。

包含該至少一種GLP-1促進劑，具體而言desPro³⁶艾塞那肽-4(1-39)-Lys₆-NH₂或/及其醫藥上可接受之鹽的液體組成物可包含0.5 μg/mL至20 μg/mL的甲硫胺酸，較佳為1 μg/mL至5 μg/mL。較佳地，液體組成物含有L-甲硫胺酸。

本發明將進一步藉由下列實施例以及圖式來說明。

實施例 摘述

本發明實施例係一種隨機化、雙盲、安慰劑對照、雙順序、雙處理交叉研究，評估單次皮下注射20 μg利西拉來在健康男性與女性受試者中對於膽囊運動的效用。膽囊運動已藉由膽道閃爍造影來分析。膽囊收縮素(CCK-8)已在投與單劑量安慰劑或20 μg利西拉來後60分鐘被投與，接著馬上是單劑量^99mTc甲溴菲寧(一種經^99mTc標記的亞胺二乙酸衍生物)。程序可歸納如下。透過將對輻射敏感的照相機放在受試者腹部上，可獲得肝臟、膽管與膽囊的”圖像”，其對應於放射性膽汁移動之處。在注射利西拉來或安慰劑與^99mTc注射後，以1幀/分持續60分鐘獲得肝臟幀圖。在60分鐘時的膽囊視觀 之後，經由連續輸注泵投與0.02 μg/kg CCK-8持續60分鐘。在CCK-8輸注之後持續影像擷取至少又60分鐘。

在安慰劑組中，CCK-8引起由膽囊所記錄之^99mTc計數下降，表示膽汁由膽囊經由膽管釋放至十二指腸中。令人驚訝的是，在健康受試者中透過皮下投與單劑量20 μg利西拉來，CCK-8的這個效用被大大地減少(參見第2圖中的例示性充填曲線與排空曲線)。在膽囊中的^99mTc維持高量，表示僅有少部分膽汁被釋放。這個效用已如下被定量。在安慰劑組中，CCK-8引起膽囊排出率(GBEF，或排出率EF，亦即從膽囊被排出之膽汁體積分率)增加至多達約85%，如同由CCK的生理作用所預期般。在利西拉來組中，於CCK-8投與之後排出率出乎意料維持在低於40%(參見第3圖中的例示性GBEF曲線，平均值提供於第7圖與表9中)。接受利西拉來，13/24(54%)受試者在60分鐘時具有GBEF低於40%，相較於安慰劑組為1/24(4%)。在健康受試者中皮下投與單劑量20 μg利西拉來會明顯地降低對CCK-8反應所引起之膽囊排空(表示為膽囊排出率(GBEF))，相較於安慰劑在60分鐘時達45.8%。

大綱

1 縮寫和術語的列表

2 倫理考量 2.1 獨立倫理委員會或審核委員會

將方案呈交至獨立倫理委員會及/或審核委員會以供審核與書面核准。

2.2 研究的倫理行為

方案遵守第18屆世界健康大會(Helsinki,1964)以及所有適用的修正案的建議。方案亦遵守研究進行所在國家(英國)的法律和規定，以及任何適用的指導方針。

2.3 受試者資訊以及同意書

在進行任何與研究相關的步驟之前取得試驗同意書。受試者試驗同意書是依據當地規定與要求來修改。

3 引言

利西拉來是一種被發展用於治療第2型糖尿病的類升糖素肽1(GLP-1)受體促進劑艾塞那肽類似物。

在使用GLP-1促進劑治療的患者中已有急性胰腺炎個案的報導，且原因仍不明。胰腺炎是否為GLP-1治療的一類潛在效用或過分重視個案仍在討論中。一個假設為GLP1促進劑可能因為胃膨脹而改變歐迪氏括約肌運動，使患者有膽囊(GB)泥或膽石形成且因而產生胰腺炎的傾向。

膽囊收縮素激發的膽道閃爍造影在超過30年前首次被描述且在關於膽汁力學以及膽囊運動中慣常用於計算膽囊排出率(GBEF)。膽道閃爍造影是在投與經鎝99m(^99mTc)標記的亞胺二乙酸類似物後進行。這些化合物對肝臟攝取具有高親和力且立即被分泌至膽管中並在膽囊中濃縮。因此，脂肪進食或外源性膽囊收縮素被用作為誘發膽囊排空的刺激劑。低GBEF已被認為是膽囊運動功能不良的證明，在不存在結石病的情況下，可鑑別帶有原發性膽囊功能不全以及歐迪氏括約肌阻塞的患者。因為GBEF是隨著膽囊收縮素8(CCK8，CCK的末端胺基酸片段)輸注的劑量與持續時間而定的變量，許多不同的數值已被用於定義異常膽囊功能；就準確定量GBEF來說，越來越多的證據暗示較長的輸注(30至60分鐘)優於較短的輸注(1至3分鐘)。

本研究旨在評估單次皮下注射利西拉來對於刺激膽囊排空的效用(如對歐迪氏括約肌之可能影響的間接測量)，表示為由CCK8引起的GBEF。

4 研究目的 主要目的

‧為評估在60分鐘時20 μg利西拉來對於因為連續輸注0.02 μg/kg.h膽囊收縮素(CCK8)引起之表示為膽囊(GB)排出率(GBEF)之膽囊排空的效用。

次要目的

‧評估在30分鐘時的GBEF。

‧為評估單次皮下注射20 μg利西拉來的藥動學型態。

5 研究計畫 5.1 整體研究設計與計畫的說明

此為單中心、雙盲、隨機化、安慰劑對照、單劑量、雙期、雙順序、雙處理交叉研究，在健康男性與女性受試者中比較利西拉來注射與食鹽水注射(安慰劑)。

准許受試者在第1天早晨進入設施內。在第1天，於隔夜禁食但可自由飲水後，他們準備好要進行膽道閃爍造影。依據隨機分組，受試者接受20 μg利西拉來或安慰劑的皮下給藥，接著立即靜脈內快速輸注放射性標記。在注射^99mTc後，取得影像持續60分鐘。在60分鐘時視觀膽囊，在60分鐘內輸注CCK8；取得GB影像持續至少又60分鐘，接著開始CCK8輸注。

關於測定利西拉來濃度的血液樣本在利西拉來注射後取得至多到12小時。

受試者以雙盲的方式被隨機分到順序1或順2(第1圖)： 順序1

‧第1期：安慰劑

‧第2期：20 μg利西拉來

順序2

‧第1期：20 μg利西拉來

‧第2期：安慰劑

每位受試者參與研究的總持續時間計畫為7至42天且由下列所構成：

‧篩選：2至28天

‧處理期1：2天(第1天，第1天)包括1個處理天

‧廓清：給藥之間最少48小時，最多7天(第1期第1天與第2期第1天之間)

‧處理期2：2天(第1天至第1天)包括1個處理天

‧研究結束：最後一次給藥後2至7天

未計畫劣性分析。沒有修改程序。

訪視時間表描述於表1中。

5.2 研究設計以及選擇對照組的討論

此隨機化、安慰劑對照、雙順序、雙處理交叉研究被設計成評估單劑量利西拉來對於膽囊排空的效用。選擇交叉設計以避免受試者間變異性的影響。

研究包括男性與女性受試者，俾以與第2型糖尿病目標族群相比較。儘管已發現大多數出現有歐迪氏括約肌功能障礙而致使急性胰腺炎復發事件的患者為女性(1)，但在健康受試者中GBEF就男性與女性而言並無差異。僅納入停經後女性以避免使有懷孕可能性的女性暴露不必要的輻射。雖然在肥胖的第2型糖尿病患者中已報導GB排空有明顯減損(2)，但在健康受試者中沒有觀察到身體質量指數與GBEF有統計學上顯著相關性。因此，將身體質量指數至多達35 kg/m²的男性與女性受試者納入研究中。

為使膽汁藉由膽囊最大鬆弛以及歐迪氏括約肌最大收縮而盡可能進入膽囊(3)，在禁食情況下進行膽道閃爍造影。在投藥之後直接注射放射性標記，因為利西拉來t_max為約1.5至2小時。

當吸收完全時(在注射後約1.5小時的平均峰血漿濃度為約100 pg/mL)，利西拉來從血液循環快速消失而使得短廓清期可為2天，且在最後一次給藥之後的1週內研究結束訪視。

因為利西拉來可能是一種會引起過敏反應的肽，本研究聘請過敏反應評估委員會來評估研究中所發生的過敏反應或過敏樣反應。

5.3 研究族群的選擇

總計招募24名受試者以便有20名可供評估的受試者(各個隨機分組的性別為至少30%)。

依據下列標準將受試者納入研究。

5.3.1 納入標準 人口學

I1. 納入介於35至65歲的男性或女性受試者。

I2. 納入身體質量指數介於18.0至35.0 kg/m²。

健康狀態

I3. 按照充分臨床評估(詳細的醫療病史與完整的身體檢查)而被證實為健康。

I4. 仰位姿勢靜止10分鐘之後的生命徵象正常：-95 mmHg<收縮壓<160 mmHg

-45 mmHg<舒張壓<90 mmHg

-40 bpm<心率<100 bpm

I5. 仰位姿勢靜止10分鐘後的標準12-導程心電圖(ECG)正常；120 ms<PR<220 ms，QRS<120 ms，QTc430 ms(若為男性)，QTc450 ms(若為女性)

I6. 實驗室參數落在正常範圍內，除非研究人員認為異常就健康受試者來說為臨床上不相干的；但是血清肌酸酐、鹼性磷酸酶、肝臟酵素(天冬胺酸轉胺酶、丙胺酸轉胺酶、膽紅素)不超過實驗室正常值的上限(除非受試者書面紀錄為吉伯特氏症候群)

I7. 若女性絕孕持續超過3個月或停經後；停經定義為超過60歲，或介於45至60歲閉經持續至少2年，血漿濾泡刺激素濃度>30 UI/L。依據充分臨床評估(詳細的醫療病史與完整的身體檢查)而被證實為健康。

規定

I8. 在與研究相關的任何程序前必須提供書面試驗同意書。

I9. 受適用的健保系統，及/或遵從相關生醫研究所適用的國家法的建議所保護

110. 未受任行政或法律監督

5.3.2 排除標準 醫療病史與臨床狀態

E1. 臨床上關於心血管、肺、胃腸、肝、腎、代謝、血液學、神經學、骨骼肌肉、關節、精神、全身性、眼、婦科(若為女性)或感染疾病的任何病史或存在；或急性疾病的徵象

E2. 頻繁頭痛及/或偏頭痛、復發性嘔吐及/或噁心(1個月超過2次)

E3. 在納入前3個月內捐血，不論體積多少

E4. 症狀性姿勢性低血壓(凡是血壓降低)或非症狀性姿勢性低血壓，如在3分鐘內當由仰位改變成站立姿勢時收縮壓降低≧20 mmHg所定義

E5. 藥物過敏或臨床上由臨床醫師診斷並治療之明顯過敏性疾病的存在或病史

E6. 藥物或酒精濫用的病史或存在(每週習慣性酒精飲用男性>21單位而女性>14單位[1單位=1/2品脫啤酒，25 mL的40%酒精或125 mL的紅酒杯])

E7. 每天抽超過5根香煙或等量，在研究期間無法戒菸

E8. 過量飲用含有黃嘌呤鹼基的飲料(每天>4杯或4瓶)

干擾物質

E9. 在納入之前的14天內任何藥物(包括聖約翰 草)，或降低該藥物的半衰期或藥效半衰期5倍內，在28天內有接種任何疫苗

一般條件

E10. 在研究人員的判斷下，可能無法在研究期間順從或因為語言問題或心智發展不佳而無法合作的任何受試者

E11. 依據實施規定處於先前研究之排除期的任何受試者

E12. 緊急時無法聯繫的任何受試者

E13. 直接涉入方案進行的研究人員或任何副研究人員、研究助理、藥劑師、研究協調者、或其他工作人員的任何受試者

生物狀態

E14. 對下列任一測試為陽性反應：B型肝炎表面抗原、抗C型肝炎病毒抗體、抗人類免疫缺乏病毒1與2抗體(抗HIV1與抗HIV2 Ab)

E15. 尿液藥物篩檢為陽性結果(安非他命/甲基安非他命、巴比妥鹽、苯二氮平、大麻、古柯鹼、鴉片劑)

E16. 酒精測試陽性

研究特性

E17. 在預料第1個研究日之前的7天內急性腹瀉或便秘。若篩選在第1個研究日之前>7天發生，在第1個研究日確定此標準。腹瀉定義 為液體糞便通過及/或排便頻率超過每天3次。便祕定義為無法比每隔一天還多的頻率開腸

E18. 來自於臨床試驗的輻射暴露，包括來自本研究者，排除背景輻射但包括診斷性X射線與其他醫學暴露，在最近12個月超過5 mSv或在最近5年超過10 mSv。無職業性暴露工人，如電離輻射規定1999所定義，容許參與本研究

E19. 先前使用利西拉來、艾塞那肽(Byetta^TM)或其他非經口GLP-1促進劑

E20. 胰腺炎、慢性胰腺炎、膽囊疾病、膽囊切除術、胃/胃外科手術、發炎性腸病的病史

E21. 依據超音波掃描存在膽石或臨床顯著肝臟異常

5.3.3 受試者離開療法或評估

若受試者在任何時間且不問理由為何而決定要退出處理，他們可以這麼做，或受試者可因為研究人員的決定而退出。

經歷確診為過敏反應而被研究人員認為和投與研究產品極為相關的受試者要退出其他處理。

從篩選至研究結束要考慮到特定中止規定。在經手動讀取QTcF(QTc，斐德利亞校正)延長(自動測量：≧500 ms)的個案下以及懷孕的情況下中止投與研究產 品。另外，在任何診斷為急性胰腺炎的情況下，將中止使用研究與其他可疑藥物治療且在臨床上對受試者進行後續訪視。

5.4 處理 5.4.1 研究產品 5.4.1.1 利西拉來

‧藥學形式：在3-mL玻璃藥匣中的無菌水溶液供用於皮下注射，含有活性成分300 μg(即100 μg/mL)、甘油、三水合乙酸鈉、甲硫胺酸、間-甲酚、HCL/NaOH及水以供注射。

‧投藥途徑及方法：使用筆型注射器(OptiClik®)皮下施用。

‧每次投藥的藥物劑量：依據隨機分組時間表，在第1期或第2期的第1天早晨1次20 μg利西拉來。

‧藉由深層皮下注射在左或右前外側腹壁中來投與研究產品。

‧為正確給藥，OptiClik筆的單位被設定如下：20 μg利西拉來=OptiClik上的20單位(=200 μL)。

‧利西拉來是由贊助商提供。

5.4.1.2 安慰劑

‧藥學形式：在3-mL玻璃藥匣中的無菌水溶液供用於皮下注射，含有氯化鈉、間-甲酚、HCL/NaOH及水以供注射。

‧投藥途徑及方法：使用筆型注射器(OptiClik)皮下 施用。

‧每次投藥的藥物劑量：依據隨機分組時間表，在第1期或第2期的第1天早晨1次200 μL安慰劑。

‧藉由深層皮下注射在左或右前外側腹壁中來投與研究產品。

‧為正確給藥，OptiClik筆的單位被設定如下：200 μL安慰劑=OptiClik上的20單位。

‧安慰劑是由贊助商提供。

OptiClik筆型注射器是由贊助商提供給每位受試者以供注射研究產品。針頭(Ypsomed Optifine^TM 8,8 mm X 31G，訂購編號3100564)是由臨床機構所購買。拋棄式材料由研究人員保管直到研究結束時贊助商進行全部文件證明調和。

5.4.1.3 非研究產品 5.4.1.3.1 放射性藥品(^99mTc甲溴菲寧/Cholediam)

用於製備^99mTc甲溴菲寧注射的Cholediam®套組是由Quotient Clinical所提供且含有40 mg甲溴菲寧與0.6 mg無水氯化亞錫。此研究中的有效劑量每期不超過60 MBq(1.44 mSv)而總計不超過120 MBq。

5.4.1.3.2 膽囊收縮素8(Kinevac/辛卡利特)

膽囊收縮素8(CCK8)是由贊助商以辛卡利特提供以用於注射(Kinevac®)。使用5 mL無菌水來使含有5 μg辛卡利特的小瓶還原。接著，使用食鹽水將2.5 μg辛卡利特在50 mL注射器中稀釋成50 mL並依據下列公式 輸注： 輸注速率(mL/hr)=體重(kg)x 0.02(CCK8劑量)x 20(含有1 μg CCK8的溶液體積)

5.4.2 研究產品的特性 5.4.2.1 研究產品

研究產品是由贊助商提供在3-mL玻璃藥匣中的無菌水溶液供用於皮下注射，含有300 μg/mL利西拉來(即100 μg/mL)、甘油、三水合乙酸鈉、甲硫胺酸、間-甲酚、HCL/NaOH及水以供注射(批號FRA01282/40C008/C1005517)。

安慰劑是提供為無菌水溶液供用於皮下注射，含有氯化鈉、間-甲酚、HCL/NaOH及水以供注射(批號FRA01419/40C006/C1005518)。

5.4.2.2 非研究產品

鎝99m(^99mTc)甲溴菲寧是由Quotient Clinical以Cholediam提供用於注射套組；各小管於無菌、無熱原質、冷凍乾燥溶液中於氮氣下含有40 mg甲溴菲寧與0.6 mg無水氯化亞錫(批號FRA01419/40C006/C1005518)。

膽囊收縮素-8是由贊助商以辛卡利特提供用於注射(Kinevac)，小管中含有5 μg辛卡利特(批號C1008567)。

5.4.3 將受試者分派至處理組的方法

隨機化處理套組編號表主要由賽諾菲阿凡提斯 (sanofiaventis)所產生。

在頭1個研究期的第1天投與研究產品之前，遵守所有納入/排除標準的受試者被分派：

‧依據納入時間順序漸增的受試者編號。

‧根據其受試者編號以預先計畫的順序有處理編號(對應於處理順序的編號)。處理編號仿效隨機化處理套組編號表。受試者依據其隨機化處理套組編號接受研究藥物。

受試者隨機分組成順序1或順序2。隨機分組比率為1：1且按照性別分層以確保各個性別的至少30%在本研究中受到處理。關於更多細節，參見研究方案。

5.4.4 研究中的劑量選定

依據第2期劑量範圍研究，本研究中所用20 μg劑量的利西拉來被認為是提供最佳利益-風險比且在非糖尿病與糖尿病族群中皆耐受良好。

與所用輻射最大可能劑量有關的風險非常地小且被認為是可接受的。每位受試者所接受的有效^99mTc劑量就1次投與來說不超過60 MBq(1.44 mSv)而就2次投與來說不超過120 MBq(2.88 mSv)。這與放射性物質諮詢委員會一致，其建議就膽囊的診斷程序來說^99mTc劑量不超過150 MBq且僅略高於每年在英國所接受之平均天然背景輻射劑量(2.7 mSv)。

辛卡利特是唯一由美國食品藥物管理局(FDA)所核准的CCK8類似物。儘管在已公開的研究中，CCD8劑 量可為0.01至0.5 μg/kg且快速注射的輸注持續時間為1至60分鐘，短輸注造成腹部絞痛與噁心，且使得GB注射率的可再現正常範圍難以達致(4)。在3個不同CCK8輸注方法的研究中，於60名受試者中使用0.02 μg/kg劑量以15分鐘、30分鐘和60分鐘輸注來投與，顯示60分鐘輸注在健康受試者中相較於15分鐘和30分鐘的較短輸注時間具有最低變異性(5)。因此，在本研究中，輸注0.02 μg/kg持續60分鐘。

5.4.5 針對每名受試者之劑量的篩選及時間安排 5.4.5.1 研究產品 5.4.5.1.1 利西拉來

依據隨機分組時間表，在第1期或第2期的第1天早晨於禁食狀態下投與20 μg劑量的利西拉來1次。20 μg劑量的利西拉來對應於OptiClik筆上的20單位(=200 μL)。

5.4.5.1.2 安慰劑

依據隨機分組時間表，在第1期或第2期的第1天早晨於禁食狀態下投與安慰劑(200 μL)1次。

5.4.5.2 非研究產品 5.4.5.2.1 放射性藥物(^99mTc甲溴菲寧/Cholediam)

就在投與利西拉來或安慰劑之後，在各期第1天早晨於至少10小時的隔夜禁食後靜脈內輸注單劑量的^99mTc甲溴菲寧。

5.4.5.2.2 膽囊收縮素8(Kinevac/辛卡利特)

在各期第1天投與放射性標記且持續60分鐘後60分鐘開始輸注單劑量的CCK8(0.02 μg/kg)。

5.4.6 盲法

除了負責樣本分析與藥動學評估的生物分析師與藥動學人員以外，所有涉入研究的人員是盲化的直到資料庫上鎖。

研究產品與安慰劑係難以分辨且注射體積相同。各處理套組與對應藥匣標記有賽諾菲阿凡提斯電腦程式所產生的編號。研究人員無法取得隨機化(處理)編碼，除非當研究產品的知識對於處理受試者為必要之時。

複審ARAC編號並以盲化的方式來判斷過敏反應或過敏樣反應。

5.4.7 先前或合併療法

於5.3.2段中指明在納入之前不能使用的藥物治療。

在研究期間不容許合併藥物治療。但是，若特定治療基於任何理由是必要的，必須在適當的紀錄書上保留精確紀錄，包括藥物治療名稱(國際非專有藥名)、日劑量與使用的持續期間。

5.4.8 處理順從性

受直接醫學監督而投與研究產品。每次投與的實際劑量與實際時間被記錄在個案報告書中。進行1個月檢查以依據受試者檢核研究產品的接受。

5.5 藥效學、安全性與藥動學評估

安全性、藥動學與藥效學評估的概要呈現於表1中；各期的詳細時間表提供於表2中。

5.5.1 藥效學評估

在藉由投與CCK8刺激之後的膽囊排空表示為GBEF，投與刺激劑之後淨GB計數的百分比變化。在開始CCK8投與之後30分鐘與60分鐘時依據下列公式評估GBEF：

5.5.1.1 藥效學測量與時間選擇

在隔夜禁食後，受試者皮下接受20 μg利西拉來並在之後立刻接受靜脈內輸注經^99mTc標記之甲溴菲寧，同時仰位橫臥在大視野γ照相機下。以每分鐘1幀取得肝期影像持續60分鐘。在60分鐘時視觀GB後，經由恆定輸注泵投與0.02 μg/kg CCK8持續60分鐘。在開始CCK8輸注後以1分鐘幀持續擷取影像持續至少又60分鐘直到CCK8輸注完成。根據顯示膽囊清楚影像的幀將感興趣的區域拖曳至膽囊周圍及背景(鄰近正常肝臟)，得到經背景校正的時間-活性曲線。因為評估期的持續時間短，未針對放射活性衰退進行校正。

5.5.1.2 主要藥效學變量

主要藥效學變量為在第1期第1天以及第2期第2天開始CCK8輸注後60分鐘時的GBEF。

5.5.1.3 次要藥效學變量

次要藥效學變量為在第1期第1天以及第2期第2 天開始CCK8輸注後30分鐘時的GBEF。在研究期間亦每2分鐘收集GBEF。

5.5.2 安全性變量與評估的時間選擇

經由下列監測安全性：

‧按照受試者所報導或由研究人員觀察到的自然不良事件；

‧臨床實驗室檢驗(生化學、血液學、尿檢)；

‧心電圖(ECG)紀錄(心率；PR、QRS、QT間期；QTc)

‧生命徵象測量(心率、收縮壓與舒張壓；體重、身高[用於計算身體質量指數]、體溫)；

‧身體檢查

監測臨床顯著異常(若有的話)直到復元或直到臨床上穩定。

僅在篩選時進行血清學(B型肝炎表面抗原、C型肝炎抗體、抗HIV1與抗HIV2抗體)。在篩選及各期第1天進行尿液藥物篩檢以及酒精呼吸測試。

5.5.2.1 不良事件

從簽署試驗同意書直到研究結束訪視，紀錄下所有不良事件，不問嚴重性或與研究產品的關聯性。關於各個不良事件，研究人員具體指明發生日期、強度、對研究產品所採取的行為、所提供的改善治療以及結果，並提供評估不良事件與研究產品是否相關的合理可能性。

危急不良事件(SAE)係在任何劑量下所發生的任何 不適宜醫學事件：‧造成死亡；或‧危及生命；或‧需要住院或延長繼續住院；或‧造成持續或明顯能力喪失/失能；或‧為先天性異常/出生缺陷；或‧醫學上重要事件。

5.5.2.1.1 在事先具體指明監測下的不良事件

需要事先具體指明監測的不良事件(AEPM)定義為以方案中所述事先具體指明的方式被監測、書面紀錄並且處理的不良事件(危急或不危急)。

若有以下要立即通知贊助商：

‧ALP增加≧2x標準值上限(ULN)

‧QTc≧500 ms

‧懷孕

‧症狀性劑量過高

‧胰腺炎及/或胰臟酵素(澱粉酶、脂酶)增加>2x ULN不須立即通知的AEPM為：

‧非症狀性劑量過高

‧局部耐受性

‧若依據方案附件C中所述的計分系統，計分≧1的皮膚反應。具體指明計分≧3的方案被報導為不良事件，而若刺激計分為3或4諮詢皮膚病醫生。這個資訊於卷宗註釋(2009年11月2日)中被校正以報導計分≧1 的皮膚反應而計分≧4諮詢皮膚病醫生。

‧過敏反應或過敏樣反應。

5.5.2.2 實驗室安全性參數

在篩選、各期第1天以及在研究結束訪視時測量標準臨床實驗室參數(生化學、血液學、尿檢)(表1)。可依據研究人員的醫學判斷在研究期間進行其他試驗。在禁食狀態下取得血液樣本。

‧生化學

-血漿/血清電解質：鈉、鉀、鈣、氯化物

-肝功能：ALT、天冬胺酸轉胺酶、γ-麩胺醯轉化酶、鹼性磷酸酶、總膽紅素與結合型膽紅素

-代謝：總膽固醇、三酸甘油酯、葡萄糖、白蛋白、總蛋白

-潛在肌肉毒性：肌酸酐磷酸激酶

-腎臟功能：脲、肌酸酐

-胰腺功能：澱粉酶、脂酶

‧血液學

-紅血球計數、血容比、血紅素及血小板

-差異(嗜中性球、淋巴球、嗜鹼性球、單核球與嗜酸性球)白血球計數

-國際標準化比值以及活化部分凝血酶時間

‧尿檢：量桿蛋白質、葡萄糖、紅血球、白血球(若為陽性進行定量檢驗)、酮體、pH

預先具體指明監測的實驗室安全性參數

監測、書面紀錄並處理下列實驗室異常。

‧嗜中性球減少症

‧血小板減少症

‧急性腎功能不全

‧疑似橫紋肌溶解症

5.5.2.3 其他安全性參數 生命徵象

於篩選、各期第1天以及研究結束訪視時測量心率、血壓(收縮壓與舒張壓測量)以及體溫。心率與血壓是在仰位靜止姿勢10分鐘之後，還有在站立姿勢3分鐘之後取得。

心電圖

在仰位至少10分鐘後記錄標準12導程ECG(以25 mm/s、10 mm/mV的10秒紀錄)。由自動測量推得之心電圖參數為HR、PR、QRS、QT以及QTc。

身體檢查

身體檢查包括心臟與呼吸聽診；周邊動脈博；瞳孔、膝蓋、阿基里斯以及巴賓斯基反射；周邊淋巴結檢查；以及腹部檢查。

5.5.3 藥動學評估與時間選擇 5.5.3.1 藥動學測量與時間選擇

血液收集的取樣時間可在期流程表(表2)中找到。

用於測量血漿樣本中的利西拉來的生物分析法簡述於表3中。

分析經利西拉來處理之受試者的所有血漿樣本。由生物分析師分析接受安慰劑之受試者僅在給藥後1.5小時取得之樣本(P03)，生物分析師對此並非太早盲化的。

5.5.3.2 藥動學變量

表4列出主要藥動學參數，它們是依據利西拉來的血漿濃度而測定。加入分析膽囊排空期間的部分AUC，俾以能夠探究暴露的個別影響。

5.5.4 測量適合度

本研究中使用適於評估目的之標準測量。主要評估 指標，GBEF，通常用來評估膽囊排空，而膽囊收縮素激發的膽道閃爍造影在膽力學以及膽囊運動的研究中被慣常用來計算GBEF。

5.6 數據品質確保

固定地點監測確保試驗進行的品質。處理臨床試驗數據是依據下列規定以及程序來進行。資料輸入、核對以及確認是使用標準電腦軟體(Oracle® Clinical第4.5.1版)來進行；數據儲存在Oracle數據庫的數位VMS電腦。雙進法用來確保數據(除了註釋以外)從CRF被準確地轉移至數據庫。此外，每次數據庫更改可使用稽核軌跡來追蹤。制定數據核對法來限定所有自動有效性檢核，以及追加人工檢核以確保數據品質。探究所有差異直到獲得解決。

賽諾菲阿凡提斯進行研究者會議還有個別地點開始會議以逐漸產生對臨床研究方案、個案報告書以及研究程序的共同理解。

藥動學數據操作以及數據品質確保

人口學數據、投藥日期及時間、取樣日期及時間，和濃度以電子方式被傳輸至Oracle Clinical and Watson數據庫的藥動學數據庫。品管(QC)檢核傳輸至Watson的濃度數據；未測出差異。所有表中提供的藥動學參數係由電腦產生的。在計算濃度的平均數值時，低於定量下限(LLOQ)的濃度數值被看作0；就計算藥動學參數而言，若在C_max前出現被視為0，除非為”缺漏”。

平均值計算及其相關統計學是由未經四捨五入的數值所產生，且可能略為不同於使用經四捨五入的數值所測定的彼等數值。若要進行最終藥動學分析，將藥動學參數以電子方式傳輸至生物統計學部以便進一步統計。在所有報告表格中，濃度以及藥動學參數數值為經四捨五入的3位有效數。

本研究生物分析以及藥動學段的所有原始數據保存在適當檔案內。

提供在接受安慰劑與利西拉來的正常健康受試者中膽囊充填及排空曲線與GBEF(%)的實例(第2與3圖)。

5.7 在方案以及決定樣本大小中所計畫的統計學方法 5.7.1 統計學以及分析計畫

統計學方法的細節歸納如下。進行臨床數據分析為賽諾菲阿凡提斯生物統計學與程式部的責任，使用SAS®(SAS/Unix V9.2,SAS Institute,NC USA)。藥動學參數的統計學分析是由藥物處理部進行，使用Pharmacokinetic Data Management System(PKDMS)(內部軟體第2.0版與WinNonlin Professional®第5.2.1版)。

5.7.1.1 藥效學變量的分析

所有藥效學分析是使用藥效學族群來進行。

5.7.1.1.1 藥效學變量的描述

藥效學評估指標為透過在60分鐘(主要變量)以及30分鐘(次要變量)時膽道閃爍造影所測得之由連續輸 注0.02 μg/kg CCK8所引起GBEF。GBEF，由Quotient Clinical所提供，等同於投與刺激劑後淨GB計數的百分比變化。

5.7.1.1.2 主要分析

使用線性混合型效用模型分析在60分鐘時的GBEF。

GBEF_{在60分鐘時}=順序+期+性別+處理+誤差

其中固定項性別、順序(”利西拉來-安慰劑”-對”安慰劑-利西拉來”)、期(1對2)以及處理(利西拉來對安慰劑)，以及處理的非結構型R矩陣(i、j)、順序間受試者的變異數與共變異數使用SAS PROC MIXED。

處理組間的差異以及對應95% CI是在線性混合型效用模型框架內估算。若2個處理組間(安慰劑減利西拉來)的GBEF絕對差的兩側95% CI的上限少於0.20(或20%)，則證實有不劣性。

經圖式探究若在60分鐘時的GBEF常態分佈。若相對於常態分佈有明顯偏差，則計畫使用無母數方法。

5.7.1.1.3 次要分析/次要變量分析 次要評估指標的分析

就在30分鐘時的GBEF，如上述進行相同的線性混合型效用模型以估算處理組間差異以及對應95% CI。同樣地，若需要的話計畫使用無母數方法。

敘述性統計學及圖

按照處理組別歸納在30分鐘及60分鐘時的 GBEF，並按照受試者、順序以及訪視來列表。按照性別提供相同的敘述性統計學。

兩種評估指標的盒鬚圖是按照處理組別來提供；亦提供個別圖。

另外，在開始CCK8輸注之後每2分鐘按照受試者單獨繪製GBEF數據，按照中位數歸納且按照處理組別繪製平均值並列表。

變異數分量

就在30分鐘以及60分鐘的GBEF而言，藉由在下列線性混合型效用模型框架內使所觀察到的以及預期均方相等來估算受試者內、受試者間以及總標準偏差：GBEF_{在30或60分鐘時}=順序+期+性別+處理+受試者(順序)+誤差

其中固定項性別、順序(”利西拉來-安慰劑”-對”安慰劑-利西拉來”)、期(1對2)以及處理(利西拉來對安慰劑)，以及順序間受試者的隨機效應使用SAS PROC MIXED。90% CI是使用簡單χ²法(就受試者內SD)以及GraybillWang程序(總SD)來計算(6)。

列表

GB膽道閃爍造影數據(在30分鐘以及60分鐘時的GBEF數值、膽道閃爍造影日期與次數)的列表是按照受試者以及順序來提供。

5.7.1.2 安全性數據的分析

安全性評估是以檢視個別數值(臨床顯著異常)、敘 述性統計學(歸納表、圖)以及若需要的話依據統計學分析(適當估算、信賴區間)為基礎。安全性分析係依據賽諾菲阿凡提斯文件”歸納及報導臨床藥理試驗數據”來進行。

所有安全性分析係使用安全性族群來進行。

關於所有安全性數據，觀察期分為3個區段：

‧處理前期定義為當受試者提供試驗同意書以及在期1中首次投與研究產品(排除在外)的時間。

‧就各個處理期來說，正在處理期定義為自投與研究產品至多到投與研究產品後2天的時間。

‧處理後期定義為正在處理期之後到下一期(針對第1期)投與研究產品或追蹤期結束(針對第2期)的時間。

所有安全性分析係以正在處理期為基礎。

實驗室參數、生命徵象以及ECG數據之統計學分析中所用的潛在臨床顯著異常(PCSA)列表的定義為第2.0版，日期為2009年9月14日。

5.7.1.2.1 不良事件 5.7.1.2.1.1 定義

不良事件是依據藥事管理的標準醫學辭典(MedDRA第13.0版)來編碼。它們依據時序標準被分類至預先定義的標準類：

‧處理前不良事件：在處理前期發展或惡化的不良事件

‧處理突發不良事件(TEAE)：於正在處理期期間發 生或惡化的不良事件。

‧處理後不良事件：在處理後期發生的不良事件。

TEAE在不良事件發生時被分派為所接受的研究產品(利西拉來或安慰劑)。若TEAE在一次處理時發展而在一個稍後的處理時惡化，其被視為兩種處理均為處理突發。

若不良事件的開始日期(或時間)不完整或遺漏，則不良事件被認為是在各期中的TEAE，除非部分日期(時間)或註釋顯示為處理前或處理後事件。

在研究中報導的所有不良事件按照個別基礎來列表，其中旗幟表示不良事件狀態。此列表係按照受試者、處理、開始日期及時間來分選。但是，不良事件的分析著重在TEAE。

5.7.1.2.1.2 處理突發不良事件

具有任何TEAE、任何危急TEAE、任何嚴重TEAE、任何造成永久處理中止的TEAE，或任何造成死亡的TEAE(僅在有發生時)的受試者之數目與百分比係按照處理組來歸納。

表現TEAE的受試者係按照處理組別、主要系統器官類(SOC、按照MedDRA級別分類)和首選語(PT)來列表分選。

TEAE係按照處理組別歸納，列表顯示：‧具有至少1次在各SOC以及總SOC中之TEAE的受試者數目與百分比； ‧經歷各SOC中之首選語的受試者數目與百分比；‧各SOC以及總SOC中之所有首選語的發生數目；‧各SOC中每一首選語的發生數目。

5.7.1.2.1.3. 死亡、危急與其他顯著不良事件

按照受試者、發生日期與時間分選，將任何死亡、SAE或其他顯著不良事件列表。

5.7.1.2.1.4 造成處理中止的不良事件

按照受試者、發生日期與時間分選，將任何造成永久處理中止的不良事件列表。

5.7.1.2.2 過敏反應 5.7.1.2.2.1 過敏反應的列表

以詳細補充資訊書面記錄任何可能與過敏反應有關的個案為不良反應。

不問正在處理期的定義，按照受試者、發生日期與時間分類，提供單獨數據的列表(有別於所有不良事件列表，參見5.7.1.2.1.1段)，包括具體而言不良事件的描述、不良事件的症狀、可能病因學、採取的措施、生命徵象測量(在發生時、反應期間與在復元時)以及過敏或過敏樣反應的描述。

亦按照過敏反應評估委員會(ARAC)列示所有此等個案的評估，包括具體而言所報導的事件是否構成過敏反應且若是的話，其診斷及嚴重程度。

於臨床研究報告中詳細描述所有個案。

5.7.1.2.2.2 受試者與家族性過敏醫療病史

針對任何發生潛在過敏反應之受試者以書面記錄受試者與家族性過敏醫療病史，依據MedDRA第13.0版編碼並按照受試者來列表。

5.7.1.2.3 疑似胰腺炎

以詳細補充資訊書面記錄任何疑似胰腺炎的個案為不良事件。

不問正在處理期的定義，按照受試者、發生日期與時間分類，提供單獨數據的列表(有別於所有不良事件列表，參見5.7.1.2.1.1段)，包括具體而言不良事件的描述、澱粉酶及脂酶的數值、胃腸科醫師的評估及胰腺炎的可能病因。

於臨床研究報告中詳細描述所有個案。

5.7.1.2.4 臨床實驗室評估 5.7.1.2.4.1 血液學以及生化學數據

在處理期1與2的第1天以及研究結束訪視時評估臨床實驗室安全性(血液學、生化學與尿檢)。依據研究時間表，未計畫在正在處理期期間評估這些安全性參數。

基線數值為在各處理期第1天收集的數值。若任一位受試者重複任何計畫的基線測試，則最後重新檢核的數值被視為基線，前提為該等測試在首次研究產品投與之前且在相同條件下(例如禁食葡萄糖)進行。

澱粉酶以及脂酶的原始數據係按照處理組別與時間點歸納在敘述性統計學中。

提供以下列表：

‧帶有基線後潛在臨床顯著異常(PCSA)的受試者的個別數據列表，按照功能與測量時間分類；

‧血液學與生化學的所有個別數據列表，包括非計畫實驗室試驗的重新檢核數值及數據，按照生物功能與測量時間。在此等列表中，若低於或高於實驗室下限或上限及/或當達到PCSA標準的絕對界線(若有界定的話)，則標示個別數據；

‧經歷過下列至少一種情況之受試者的肝功能數據的列表：-在研究期間首次投藥後ALT>3x ULN以及總膽紅素>2x ULN中至少一者，不論正在處理期的定義為何；-相同首次投藥後樣本結合型膽紅素(conjugated bilirubin)>35%總膽紅素以及總膽紅素>1.5x ULN，不論正在處理期的定義為何。

‧若有的話，提供與ALT增加2x ULN相關的列表，包括尤其是服藥資訊、醫療以及外科手術病史、酒精習慣、誘發因子，相關徵象以及症狀的事件細節；

‧超出正常範圍之定義的列表。

5.7.1.2.4.2 尿檢數據

列出所有定性與定量尿液試驗結果(量桿)，包括重新檢核的數據。

5.7.1.2.5 生命徵象 5.7.1.2.5.1 心率與血壓

於處理期1及2的第1天和研究結束訪視，在仰位靜止姿勢10分鐘之後與在站立姿勢3分鐘之後測量心率與收縮壓和舒張壓(SBP和DBP)。依據研究時間表，未計畫在正在處理期期間評估這些安全性參數。

要用作為基線的該等數值是各處理期之D1評估數值。若任一位受試者重複任何計劃基線試驗，最後重新檢核的數值被視為基線，前提為該等測試在首次研究產品投與之前進行。

關於心率以及血壓，原始數據(仰位與站立姿勢)按照測量類型(姿勢)、參數與時間點歸納在敘述性統計學中。

提供以下列表：‧所有個別數據，包括非計畫及重新檢核數值，按照測量類型(仰位、站立、直立)來列表。在列表中，若達到PCSA標準的絕對界線(若有界定的話)，則標示個別數值；‧具有基線後PCSA之受試者的個別數據的分別列表。

5.7.1.2.5.2 體溫

列示所有個別數據。

5.7.1.2.6 心電圖

在各處理期第1天以及研究結束訪視時進行自動讀取ECG。依據研究時間表，未計畫有正在處理期評估。

分析來自12導程ECG自動讀取的心率與PR、 QRS、QT與經校正QT間期(QTc)作為原始參數值；基線數值為在各期的第1天數值。若任一位受試者重複任何計劃基線試驗，最後重新檢核的數值被視為基線，前提為該等測試在首次藥物投與之前進行。

就所有參數而言，原始數據係按照處理組別及時間點歸納在敘述性統計學中。

提供以下列表：‧所有單獨數據，包括重新檢核的數值，按照測量類型列表。在列表中，若達到PCSA標準的界線(有界定的話)時，標記數值；‧帶有基線後PCSA之受試者的單獨數據之分別列表；‧使用所有給藥後時間點，帶有延長QTc(男性>450 ms，女性>470 ms)或QTc相對於基線變化>60 ms(若有的話)之受試者的心臟標誌的分別列表(若有的話)；‧在首次給藥後於品質評估中帶有至少一種異常(亦即異常ECG)的受試者的列表。

5.7.1.3 藥動學數據的分析

使用藥動學族群進行所有藥動學分析。

在給藥當天由利西拉來的血漿濃度數據使用非隔室法測定至少一種下列藥動學參數：C_max、t_max、AUC_last、AUC及t_1/2z。

按照敘述性統計學(觀察數目(N)、算術平均數及幾何平均數、標準偏差(SD)、平均值的標準誤差(SEM)、 變異係數(CV%)、中位數、最小值與最大值，以及觀察數目)歸納藥動學參數。

為支持PK/PD分析，計算早期部分AUC(AUC_t1-t2)，其中t1t2為02h、1-2h及1h30。

5.7.1.4 藥動學/藥效學分析

不適用。

5.7.2 其他統計學/分析考量

不適用。

5.7.3 決定樣本大小

使用2x2交叉設計，總計20名完成的受試者(每個順序10名)需要就在60分鐘時的GBEF證實利西拉來不低於安慰劑超過20%絕對差(不劣性界限)，其中檢定力為90%，若受試者內實際SD為0.10%且假定安慰劑與利西拉來的實際差為最多0.09%。為容許退出，24名受試者參與研究。

6 研究受試者 6.1 受試者安排

總計24名受試者納入、隨機分組並暴露於研究處理(表5)，且所有受試者完成2個研究期。

6.2 方案偏離(PROTOCOL DEVIATIONS) 6.2.1 與所選標準相關的偏離並造成從藥效學分析排除

沒有導致從藥效學分析排除的方案偏離。一個與不符合納入標準I05(QRS=122 msec)有關的偏離不被視為在臨床上相關的。

6.2.2 隨機分組以及給藥不規則性(dosing irregularities)

在研究期間沒有隨機分組不規則性。所有24名受試者接受研究產品(利西拉來、安慰劑)且如計畫投與放射性標記和CCK-8。

依據受試者第826001012號的藥動學型態，其似乎未在任何試驗期中暴露於利西拉來。進行一些研究以排除技術問題。這些研究描述於卷宗註釋中。

‧排除另一名接受利西拉來的受試者來取代受試者第826001012號；在這個給藥組別中，沒有其他受試者有不尋常的利西拉來高暴露。

‧場所以書面形式確認投藥係正確地進行。在使用之前檢核所有藥匣並完成藥物說明。

‧重新分析批次IP0000988的藥匣0000644並確認各藥匣的產品特性。

‧因為就這個發現並沒有找到合理解釋，受試者被納入藥效學以及藥動學分析。

6.2.3 其他偏離

沒有觀察到其他重要的偏離。

6.3 打破盲

在研究期間沒有打破盲。

6.4 分析的數據組

安全性、藥效學以及藥動學族群包含24名受試者(表6)。

6.5 人口學與其他基線特性 6.5.1 人口學

關於安全性族群的人口學數據歸納於表7中。有15名男性以及9名女性受試者，年齡介於35至62歲(平均年齡±SD：47.8±7.9歲)，而平均身體質量指數為約26 kg/m²。除了1名受試者為黑人以外，所有受試者均為高加索人。

表7-基線時的人口學以及受試者特性-安全性族群

男性與女性受試者的人口學特性歸納於表8中。

6.5.2 醫療病史

在篩選時取得醫療病史僅供納入之用；未紀錄相關醫療病史。

6.5.3 基線時的疾病特性

不適用。研究招募健康受試者。

6.5.4 其他基線特性

無

6.5.5 先前及/或合併藥物治療

在研究開始前沒有停止先前藥物治療。在研究期間 沒有投與合併藥物治療。

6.6 處理順從性的測量

在兩個試驗期期間，如計畫有24名受試者接受放射性標記、CCK8輸注以及利西拉來或安慰劑處理持續1天。就所有受試者而言，CCK-8輸注的持續時間對應於方案具體指明的60分鐘持續時間。

7 藥效學評估 7.1 藥效學結果 7.1.1 主要藥效學變量(variable)-在60分鐘時的膽囊排空率

就主要評估指標(在60分鐘時的GBEF)而言，安慰劑與利西拉來之間的平均差的參數評估值為45.80%(95% CI：29.92；61.68)。信賴區間的上限超過20%，表示未證實利西拉來對安慰劑有不劣性(表9)。

依據一名受試者(第826001012號)的藥動學型態，其似乎未在任何試驗期中暴露於利西拉來。可能沒有合理解釋，因此這名受試者的數據已被納入藥效學族群。但是，為資訊之用，將這名受試者排除於分析之外對結果的影響最小。

GBEF評估時間對應於CCK8輸注開始後的時間 LSM=最小平方差，CI=信賴區間 受試者數目：N=24名接受安慰劑，N=24名接受利西拉來20 μg ^a平均值由LSM提供 ^b平均差=LSM(安慰劑)-LSM(利西拉來20 μg)

7.1.1.1 次要分析 7.1.2 次要藥效學變量 7.1.2.1 在30分鐘時的膽囊排空率

就次要評估指標(在30分鐘時的GBEF)而言，安慰劑與利西拉來之間的平均差的參數評估值為41.43%(95% CI：28.64；54.23)(表10)。

表17顯示在30分鐘時的GBEF，其中沒有似乎未在任何試驗期中暴露於利西拉來之受試者的數據(參見7.1.1段)。

GBEF評估時間對應於CCK8輸注開始後的時間 LSM=最小平方差，CI=信賴區間 受試者數目：N=24名接受安慰劑，N=24名接受利西拉來20 μg ^a平均值由LSM提供 ^b平均差=LSM(安慰劑)-LSM(利西拉來20 μg)

7.1.2.2 在30分鐘以及60分鐘時的敘述性統計學

關於GBEF的敘述性統計學歸納於表11中。

在安慰劑投與後30分鐘及60分鐘時的平均(SEM)GBEF(%)分別為59.80(5.67)及84.95(4.20)。單次投與利西拉來後30分鐘及60分鐘，平均GBEF分別為17.97(3.35)及39.01(5.85)(表11)。

在安慰劑和利西拉來投與後30分鐘及60分鐘時的GBEF盒鬚圖呈現在第7圖中。

GBEF=膽囊排出率 GBEF評估時間對應於CCK-8輸注後的時間

7.1.2.3 呈2分鐘的敘述性統計學

在CCK-8輸注期間，接受各處理的每兩分鐘平均值以及中位數GBEF的圖提供於第4圖中。利西拉來的GBEF(%)在所有時間點低於安慰劑且比安慰劑更為緩 慢地增加。兩種曲線皆顯示隨著時間有平緩的增加。

7.1.3 藥效學結論

相較於安慰劑，單次投與20 μg利西拉來在60分鐘時明顯降低對CCK8反應所致之GB排空(表示為GBEF(%))達45.8%(絕對差：95% CI：29.92；61.68)。未證實利西拉來對安慰劑有不劣性。

本研究的設計以及樣本大小計算是以公開文獻中所報導的方法學為基礎(5)。使用相同的CCK8輸注劑量與持續時間，此公開研究報導在正常健康受試者中，在30分鐘以及60分鐘時的平均GBEF百分比分別為64%(±23%)以及84%(±16%)。在PDY11431研究中，接受安慰劑的24名受試者中有23名的GBEF數值與預期一致且在正常濃度下(在60分鐘時~40%)。例外為受試者第826001001號，其在投與安慰劑接著開始CCK8輸注後60分鐘時僅表現17% GBEF。這似乎並非表示此受試者中有相關的功能性疾患，因為接受利西拉來的GBEF在60分鐘時為75.1%。

接受利西拉來時，24名受試者中有22名在60分鐘時具有的GBEF比接受安慰劑在60分鐘時的GBEF還低；就另一名受試者而言，接受利西拉來與安慰劑的GBEF是相同的。於24名受試者中有13名在60分鐘時的GBEF低於正常值下限(~40%)。

8 安全性評估 8.1 暴露程度

在各研究期期間，所有24名納入的受試者接受單次劑量的20 μg利西拉來或安慰劑且如計畫完成研究。

8.2 不良事件 8.2.1 不良事件簡要歸納

在研究期間報導沒有嚴重TEAE、處理突發SAE或造成研究處理中止的TEAE。

在利西拉來處理時，24名受試者中有4名(16.7%)經歷至少1次TEAE，相較於使用安慰劑處理的24名受試者中有1名(4.2%)。所有TEAE為輕度或中度。

未報導有需要過敏反應評估委員會檢閱的過敏不良事件且沒有個案懷疑為胰腺炎。

8.2.2 不良事件的顯示

具有TEAE之受試者數目與百分比按照處理組別、主要系統器官類與首選語歸納在表13中。按照首選語及研究人員所用之原有語說明提供所有不良事件。

8.2.3 不良事件的分析

接受利西拉來的受試者的TEAE主要為胃腸疾患SOC。最常報導的TEAE為噁心，其在3名受試者中被報導(表13)。所有TEAE為輕度或中度。

一名受試者(第826001005號)經歷輕度嘔吐事件，發生在利西拉來投與後約5小時以及CCK輸注開始後4小時，且經評估可能與利西拉來和CCK8處理有關。症狀持續約5分鐘且在不需處理的情況下復元。

一名受試者(第826001021號)在利西拉來投與後1天經歷感染部位血腫，其被研究人員認為可能與利西拉來有關。血腫為輕度且在接下來11天內逐漸復元。

一名受試者(第826001013號)在利西拉來投與後6天經歷腹部疼痛且被視為是處理後不良事件。注意到受試者於追蹤身體檢查時在右肋緣處深呼吸與觸診有輕度壓痛。除深度觸診以外，受試者未發現有任何腹部不適。其餘腹部檢查如安全性實驗室評估為正常。症狀2天後在沒有處理的情況下完全復原。這個事件被研究人員視為可能與利西拉來和CCK-8投與有關。

依據皮膚反應量度的評估，沒有不良事件造成整體評分≧3。

在研究時書面記錄總計8名受試者有10件不良事件：1件處理前不良事件、6件處理突發不良事件以及3件處理後不良事件。最常見的不良事件為胃腸疾患(5件不良事件)，接著是一般疾患(2件不良事件)、損傷、中毒與程序疾患(2件不良事件)，以及皮膚和皮下組織疾患(1件不良事件)。

下面按照受試者(處理組別)提供不良事件(首選語)的列表。

‧受試者第826001002號：挫傷(處理前)

‧受試者第826001005號：噁心、嘔吐(利西拉來)

‧受試者第826001007號：噁心(利西拉來)

‧受試者第826001009號：導管部位腫脹(安慰劑)

‧受試者第826001013號：腹部疼痛(利西拉來)

‧受試者第826001015號：角膜擦傷(安慰劑)

‧受試者第826001021號：注射部位血腫(利西拉來)

‧受試者第826001024號：血皰(安慰劑)、噁心(利西拉來)

8.3 死亡、危急不良事件以及其他顯著不良事件 8.3.1 死亡

研究期間未報導有死亡。

8.3.2 危急不良事件

研究期間未報導有危急不良事件。

8.3.3 造成退出的不良事件或其他顯著不良事件

未報導有造成退出研究的不良事件，以及顯著不良事件。

8.4 臨床實驗室評估

提供所有實驗室數值以及所有可能臨床顯著異常(PCSA)實驗室數值的受試者列表。

8.4.1 時間內的實驗室數值

僅分析實驗室數值的個別數據。

8.4.2 實驗室數值的個別受試者變化

在第2期第-1天以及在研究結束訪視時，於鉀、葡萄糖、嗜中性球以及嗜酸性球有少數PCSA。非常少數的受試者具有>2x ULN的脂酶數值，但經重新檢核數值係在正常範圍內。沒有肝功能、腎功能、血小板或凝血的PCSA報導。

8.4.3 實驗室數據的個別臨床相關異常

研究期間未報導有實驗室數據的臨床相關異常。

8.5 生命徵象、身體調查與其他安全性觀察 8.5.1 生命徵象

提供所有生命徵象數據的受試者列表。

8.5.1.1 時間內的生命徵象數值

提供生命徵象數據的敘述性統計學。

8.5.1.2 生命徵象的個別受試者變化

隨機分組至順序安慰劑-利西拉來的一名受試者(第826001004號)在研究結束訪視時經歷SBP的直立性降低(站立-仰位SBP≦20 mm Hg)。研究期間沒有觀察到其他PCSA。

8.5.1.3 生命徵象的個別臨床相關異常

研究期間沒有報導生命徵象的臨床相關異常。

8.5.2 心電圖

提供所有ECG數據的受試者列表。

8.5.2.1 時間內的心電圖數值

提供ECG數據的敘述性統計學。

8.5.2.2 心電圖的個別受試者變化

無受試者有QTc≧500 ms的PCSA(表14)。

受試者第826001006號，44歲男性，在第2期基線時具有正常QTc為418 ms。四(4)天後他接受單次皮下投與20 μg利西拉來，在研究結束訪視時他具有延長QTc為452 ms的非症狀性PCSA(重新檢核數值為455 ms)，對應於相對基線增加34 ms(表14)。

受試者第826001017號，43歲男性，處理順序安慰劑-利西拉來，在第2期基線時具有延長QTc為459 ms 的非症狀性PCSA(重新檢核數值為436 ms)。研究結束訪視時的QTc數值為正常(409 ms)。

8.5.2.3 心電圖的個別臨床相關異常

研究期間沒有報導ECG數值的臨床相關異常。

8.6 安全性結論

總言之，投與20 μg利西拉來在健康受試者中耐受良好。沒有危急不良事件且沒有因為TEAE而退出研究。

相較於使用安慰劑處理的24名受試者中有1名(4.2%)，在利西拉來處理時，24名受試者中有4名(16.7%)經歷至少1次TEAE。所有TEAE為輕度且在沒有改善處理的情況下復元。投與利西拉來之受試者的TEAE主 要為胃腸疾患SOC，諸如噁心(24名受試者中有3名)以及嘔吐(24名受試者中有1名)。

在實驗室參數中沒有臨床顯著變化。在肝功能與腎功能中沒有觀察到PCSA。

在生命徵象與ECG參數中沒有臨床顯著發現。沒有受試者具有QTc≧500 ms。一名在第2期期間接受利西拉來的男性受試者在研究結束訪視時具有延長QTc為452 ms，對應於相對基線增加34 ms(利西拉來投與後4天)。另一名在第1期期間接受安慰劑的受試者在第2期第-1天具有QTc為+459 ms。研究結束訪視時的QTc數值正常(409 ms)。

沒有報導與過敏反應或疑似胰腺炎相關的不良事件。

9 藥動學評估 9.1 血漿濃度

關於利西拉來分析的生物分析報導可在稍後的日期取得。不同於原計畫，所有來自安慰劑組的樣本被錯誤地分析。

提供個別利西拉來血漿濃度及敘述性統計學。計算個別利西拉來血漿濃度對時間曲線，並且計算利西拉來血漿濃度對時間的疊加曲線。

所有的血液樣本是在計畫取樣時間的15%內收集。

除了一名個案以外，在利西拉來投藥之前取得的樣本具有低於LLOQ的利西拉來濃度(12 pg/mL)(受試者 第826001010號給藥前測得數值>LLOQ(19.9 pg/mL))。在2名接受安慰劑的個案受試者顯示脫離的數值>LLOQ(受試者第826001005號在時間1小時30分之時，12.1 pg/mL以及受試者第826001023號在時間10小時之時，18.2 pg/mL)，而其形態的其他可測量的樣本為<LLOQ。

就兩個試驗期中(安慰劑與利西拉來)的受試者第826001012號，所有樣本低於LLOQ，就此無法找到理由。因此，這個受試者無法計算出藥動學參數。

利西拉來處理的平均(SD)血漿利西拉來濃度-時間型態顯示於第5圖(線性標度)與第6圖(半對數標度)中。

9.2 藥動學參數

提供在單次投與20 μg利西拉來後所得到之利西拉來血漿藥動學數據的個別藥動學分析以及對應敘述性統計學。

利西拉來藥動學數據的敘述性統計學歸納提供於表15中。

皮下投與20 μg利西拉來後，平均峰暴露(C_max)為104 pg/mL並出現在2小時後(中位數)。總暴露(AUC)如平均為634 pg*h/mL，且在主要評估指標膽囊排空的間期期間(AUC_12h)平均暴露為87.3 pg*h/mL。

9.3 藥動學/藥效學關係

不適用

9.4 藥動學結論

皮下投與20 μg利西拉來後，平均峰暴露(C_max)為104 pg/mL並出現在2小時後(中位數)。總暴露(AUC)如平均為634 pg*h/mL，且在主要評估指標膽囊排空的間期期間(AUC_12h)平均暴露為87.3 pg*h/mL。

10 討論及總結論

在此安慰劑-對照交叉研究中，皮下投與單次劑量利西拉來20 μg在健康受試者中於30分鐘與60分鐘時明顯地降低對CCK-8反應而被表示為GBEF(%)之GB 排空。利西拉來對安慰劑在CCK-8輸注60分鐘後未證實有不劣性。

使用利西拉來處理在注射後2小時產生最大血漿濃度。總暴露(AUC)如平均為634 pg*h/mL，且在主要評估指標膽囊排空的間期期間(AUC_12h)平均暴露為87.3 pg*h/mL。

利西拉來在24名研究的受試者中整體耐受良好且評估為安全的。最頻繁的不良事件為噁心。不良事件沒有一者為嚴重或危急的。

11 參考文獻

1. Kakhi VR, Zakavi SY, Davoudi Y. Normal values of gallbladder ejection fraction using 99mTc-sestamibi scintigraphy after a fatty meal formula. J Gastrointestin Liver Dis. 2007 Jun;16(2):157-61. Pubmed PMID: 17592562.

2. Kao CH, Tsou CT, Wang SJ, Yeh SH. The evaluation of gallbladder function by quantitative radionuclide cholescintigraphy in patients with noninsulin-dependent diabetes mellitus. Nucl Med Commun. 1993 Oct;14(10):868-72. PubMed PMID: 8233230.

3. Prandini N. Methods of measuring gallbladder motor functions - the need for standardization: scintigraphy. Dig Liver Dis. 2003 Jul;35 Suppl 3:S62-6. PubMed PMID: 12974513.

4. Krishnamurthy GT, Krishnamurthy S, Brown PH. Constancy and variability of gallbladder ejection fraction: impact on diagnosis and therapy. J Nucl Med. 2004 Nov;45(11):1872-7. PubMed PMID: 15534057.

5. Ziessman HA, Tulchinsky M, Lavely WC, Gaughan JP, Allen TW, Maru A, et al. Sincalide-stimulated cholescintigraphy: a multicenter investigation to determine optimal infusion methodology and gallbladder ejection fraction normal values. J Nucl Med. 2010 Feb;51(2):277-81. Epub 2010 Jan 15. PubMed PMID: 20080900.

6. Burdick R, Graybill F. (1992). Confidence intervals on variance components. Marcel Dekker, NY. ISBN 0-8247-8644-0..

12 支持性資訊

第1圖：研究設計的圖式說明。關於身體檢查、生命徵象、實驗室檢測、ECG以及AE評估參照詳細研究流程圖。縮寫：CCK-8=膽囊收縮素-8；IP=研究產品；EOS=研究結束。

第2圖：接受安慰劑及利西拉來的正常健康受試者的膽囊充填與排空曲線實例。橫座標：時間(分鐘)。縱座標：每秒鐘計數(CPS)。

第3圖：接受安慰劑及利西拉來的正常健康受試者的GBEF(%)實例。橫座標：時間(分鐘)。縱座標：GBEF(%)。

第4圖：平均值與中位數個別圖-藥效學族群。

第5圖：平均(+SD)利西拉來血漿濃度(線性標度)。

第6圖：平均利西拉來血漿濃度(半對數標度)。

第7圖：GBEF在30分鐘以及60分鐘時的盒鬚圖(安慰劑在右，利西拉來20 μg在左)。GBEF的評估時間對應於CCK-8輸注開始後的時間。符號：盒=Q1-Q3四分位；+=平均值；盒內線：中位數；鬚長度=最大值≦1.5(Q3-Q1)；星形=主題標示符的偏離值。縮寫：GBEF=膽囊排出率；min=分鐘。

<110> 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司

<120> 用於治療胰管系統狹窄或/及阻塞之GLP-1促進劑

<130> 51174PEP

<140> EP11183867.8

<141> 2011-10-04

<160> 2

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 44

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> AVE0010

<220>

<221> MOD_RES

<222> (44)..(44)

<223> 醯胺化

<400> 1

<210> 2

<211> 39

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 艾塞那肽-4

<220>

<221> MOD_RES

<222> (39)..(39)

<223> 醯胺化

<400> 2

Claims (21)

1. 一種用於治療疾病或症狀之醫藥組成物，其中該疾病或症狀與位在胰管系統中或/及周邊胰腺組織中的狹窄或/及阻塞有關，該組成物包含至少一種GLP-1促進劑以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。
2. 如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中該狹窄或/及阻塞位在大胰管中、在肝胰管中、在乏特氏(Vater)乳頭中、在歐迪氏(Oddi)括約肌中、在副胰管中或/及在十二指腸小乳頭中。
3. 如申請專利範圍第1至2項中任一項之醫藥組成物，其中該阻塞是由胰管系統中的結石或/及結石病所引起。
4. 如申請專利範圍第1至2項中任一項之組成物，其中該疾病或症狀為癌症。
5. 如申請專利範圍第4項之組成物，其中該癌症為在大胰管中、在肝胰管中、在乏特氏乳頭中、在歐迪氏括約肌中、在副胰管中或/及在十二指腸小乳頭中的癌症。
6. 如申請專利範圍第4或5項之組成物，其中該癌症包括腫瘤。
7. 如前述申請專利範圍任一項之組成物，其中該狹窄或/及阻塞造成疼痛。
8. 如前述申請專利範圍任一項之組成物，其中該治療為緩和治療。
9. 如前述申請專利範圍任一項之組成物，其中該治療為持續至少一個月、至少兩個月、至少三個月、至少四個月或至少六個月的治療。
10. 如前述申請專利範圍任一項之組成物，其中該GLP-1促進劑是選自由GLP-1、其類似物與衍生物、艾塞那肽-3(Exendin-3)、其類似物與衍生物、艾塞那肽-4、其類似物與衍生物組成之群。
11. 如申請專利範圍第1至10項中任一項之組成物，其中該GLP-1促進劑為利西拉來(lixisenatide)或/及其醫藥上可接受之鹽。
12. 如申請專利範圍第1至10項中任一項之組成物，其中該GLP-1促進劑為利拉魯肽(liraglutide)或/及其醫藥上可接受之鹽。
13. 一種用於緩和治療的醫藥組成物，該組成物包含至少一種GLP-1促進劑以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。
14. 如申請專利範圍第13項之醫藥組成物，其中該緩和治療包括治療由胰管系統中的狹窄或/及阻塞引起的疼痛。
15. 一種用於治療疼痛的醫藥組成物，該組成物包含至少一種GLP-1促進劑以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。
16. 如申請專利範圍第15項之醫藥組成物，其中該疼痛與胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關。
17. 如申請專利範圍第15或16項之醫藥組成物，其中該疼痛治療為緩和治療。
18. 一種治療與胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關之疾病或症狀的方法，該方法包含將包括至少一種GLP-1促進劑，以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑的醫藥組成物投與給有需要的個體。
19. 如申請專利範圍第18項之方法，其中該疾病或症狀定義於申請專利範圍第2至9項中任一項。
20. 一種GLP-1促進劑於製造用以治療與胰管系統中的狹窄或/及阻塞有關之疾病或症狀的藥物的用途，該藥物包含至少一種GLP-1促進劑，以及視情況選用之醫藥上可接受載劑、稀釋劑或/及輔劑。
21. 如申請專利範圍第20項之用途，其中該疾病或症狀定義於申請專利範圍第2至9項中任一項。