TW201235470A - Media, kits, systems and methods for the micropropagation of bamboo - Google Patents

Description

201235470 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本文揭示用於竹子微繁殖之培養基、套組、系統及方 法。 【先前技術】 竹亞科（Bambusoideae)(屬於禾本科（p〇aceae))包含木本 及草本竹子。當前，已識別出約12〇個屬的溫帶及熱帶木 本竹子。竹子係具有許多不同應用的多功能植物。估計全 世界約有22億人一定程度地使用竹子，且在1985年，屬於 竹子的全球收益估計為約45億美元，竹子的市場仍在擴 大》竹筍係亞洲烹飪主食，且竹子可在眾多產品中發現， 包括牙籤、掃帚、葡萄栽培及樹木栽培用 料、鎮木地板、層壓材料、像具、手工藝品及其= 品。另外，竹子正在成為重要的纺織材料來源，其可作為 紙生產中之組份及作為建築用木材來源。 人們認為竹子係環境友好性「綠色」產品。賦予竹子矣 色美譽之特性之-係其極快速之生長速率。竹子係世界」 生長最快的木本植物，其可達成遠超過每天3英尺之生| 速率。其達成此生長速率之原因部分在於其具有能為㈣ 生長提供大量能量之根莖系統。 儘管竹子之生長速率較怏 平㈣但其所具有的其他特性使其 ^為難以進行管理之作物。最大之_可能源於以下事 ^許多具有重要商業價值之竹子僅以長達嶋⑽年之 間隔開花。以下事實使此長開花週期之困難複雜化：許多 154254.doc 201235470 二：表現為集中(或群體)開花，其中種群中所有植物同時 二'舉例而言，桂竹吻"晰知“⑽―〇以13〇 門隔開化，且無論地理位置或氣候條件是否不同，此種 中之所有相同原種之植物均同時開花。開花後竹子死 亡。 竹子之漫長開花間隔及集中開花習性使得極難獲得繁殖 子以下事貫使此問題複雜化：即使可獲取竹子種 子’其仍只能存活不超過3至6個月。 由於藉由種子繁殖竹子具有該等困難，因此通常藉由無 性技術（例如叢生分株及把插）來繁殖竹子。然而，該等無 性繁殖技術不足以滿足增長的世界性需求，此乃因其大規 模生產之能力與其實際效率二者均過低。另外，許多無性 篡殖方法具有不能消除存在於親本植物中之病原體的弊 端。 業内非常需要達成大規模產生竹子之方法。微繁殖（亦 稱為組織培養，該等術語在本文中可互換使用）係達成此 目標之優良方法。 微繁殖與自把插生長植物並無不同。然而，與自抵插生 長之植物不同，微繁殖植物係在無菌培養基中活體外生 長。通常，培養基包含瓊脂’其中添加有各種化合物，例 如營養素、無機鹽、生長調節劑、糖、維生素及其他化合 物0 組織培養植物之益處係植物可生長於無菌環境中，以便 其保持無病狀態。其他益處包括在較小空間中生長極大量 154254.doc 201235470 植物之能力、減少微繁殖植物對水及營養素之需要及可進 而用於生成更多組織培養材料之組織快速增殖。此外，微 繁殖極為靈活且可快速升級（在丨年内，可自任一基因型產 生近1百萬株植物）。此等短時間範圍及大數量是任何習用 方法均不能相提並論的。組織培養亦提供易於輸送及遞送 之高品質植物之產生。 人們已發表一些論述組織培養竹子之論文。然而，實際 上（即’對於竹子大規模繁殖而言），該等論文中所述之方 法不能轉化成商業上可行之繁殖系統。 在組織培養竹子中所遇到之困難係高發生率之内源性污 染或表面污染及褐變、與休眠或部位效應及玻璃質化有關 之因素。本發明提供克服該等困難之培養基、系統及方 法，從而允許以商業規模無性生產竹子。 【發明内容】 本發明藉由提供用於組織培養竹子之有效培養基、系統 及方法來克服在商業規模無性生產竹子中所遇到之困難。 本文所揭示之一個實施例係用於微繁殖竹子之培養基， 其中該培養基包含間拓普林（meta_t〇p〇lin)或嗟苯隆 (thidiazuron)。在另一實施例中，培養基包含間拓普林及 噻苯隆。在另一實施例中’培養基係b-9-i培養基、b-9-ii 培養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、 CW2-i培養基、CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、cW2-iv培 養基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、b-10-iv培養基、b-10-v培養基、b-11-i培養 154254.doc 201235470 基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、b-ll-v培養基、b-l2c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-1-ii 培養基、b-1-iii培養基、培養基、^^^培養基、b_4_ i培養基、b-4-ii培養基、b_4_iH培養基、b_4_iv培養基、b_ 4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、 b-6-ιν培養基、b-6-v培養基、CWM培養基、CWl_ii培養 基、CWl-iii培養基、cwi_iv培養基、cwi-ν培養基、 CW3-1培養基、CW3-H培養基、cW3-iii培養基、CW3-iv培 養基、CW3-V培養基、CW4-i培養基、CW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、c\V4-iv培養基、（:霤扣乂培養基、（：贾5“培 養基、CW5-"培養基、cW5-iii培養基、cW5-iv培養基、 CW5-V培養基、cW6-i培養基、CW6_H培養基、CW6 Hi培 養基、CW6-iv培養基及/或CW6-V培養基。 本文所揭示實施例亦包括用於竹子微繁殖之系統。在一 個實施例中’ I系統包含套組’其包含含有間拓普林或噻 苯隆之培養基。在另一實施例中，可在同一培養基中或在 分開培養基中發現間拓普林及噻笨隆。在另一實施例中， 培養基係b-9-i培養基、b-9-ii培養基、b_9_Hi培養基、b 9· iv培養基、b-9-v培養基、CW2-i培養基、CW2_H^養基、 CW2-ni培養基、CW2-i_養基、CW2_V培養基二培 養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、b_1〇 iv培養基、b-10-V培養基、b-11-i培養基、b-11-ii培養基、b_U iii培養 基、b-11-iv培養基、b-π-ν培養基、b_12ci培養基、b I54254.doc -6- 201235470 12c-ii培養基、b-12c-iii培養基、b-12c-iv培養基、b-12c-v 培養基、b-1-i培養基、b—i-ii培養基、b_1Hi培養基、b-1_ iv培養基、b-Kv培養基、b_4_i培養基、b_4-ii培養基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、b-6-iv培養基、b-6-v培養基、 CWl-i培養基、cwi-ii培養基、CWl-iii培養基、CWl-iv培 養基、CWl-v培養基、cW3-i培養基、cW3-ii培養基、 CW3-iii培養基、cW3-iv培養基、CW3-V培養基、CW4-i培 養基、CW4-ii培養基、cW4-iii培養基、cW4-iv培養基、 CW4_V培養基' CW5-i培養基、CW5-ii培養基、cW5-iii培 養基' CW5-iv培養基、CW5-V培養基、cW6-i培養基、 CW6-ii培養基、cW6-iii培養基、CW6-iv培養基及/或CW6-v培養基。 本文所揭示實施例亦包括微繁殖竹子之方法。在一個實 施例中’該方法包含在包含間拓普林及/或噻苯隆之培養 基中培養竹子外植體、培養物及/或幼芽。在另一實施例 中’可在同一培養基中或在分開培養基中發現間拓普林及 噻苯隆。在另一實施例中’培養基係b-9-i培養基、b-9-ii 培養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、 CW2-i培養基、cW2-ii培養基、CW2-iii培養基、cW2-iv培 養基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、b-10-iv培養基、b-10-v培養基、b-11-i培養 基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-ll-iv培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養 154254.doc 201235470 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-l-ii 培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、 b-6-iv培養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、CWl-ii培養 基、CWl-iii培養基、CWl-iv培養基、CWl-v培養基、 CW3-i培養基、CW3-ii培養基、CW3-iii培養基、CW3-iv培 養基、CW3-V培養基、CW4-i培養基、CW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、CW4-iv培養基、CW4-V培養基、CW5-i培 養基、CW5-ii培養基、CW5-iii培養基、CW5-iv培養基、 CW5-V培養基、CW6-i培養基、CW6-ii培養基、CW6-iii培 養基、CW6-iv培養基及/或CW6-V培養基。 實施例包括（但不限於）： 1. 一種培養基，其包含以下組份、基本上由以下組份組 成或由以下組份組成： 組份 mg/L(除非另有說明） 組份 mg/L(除非另有說明） NH4N03 1650±2 kh2po4 170±2 KN〇3 1900±2 FeS〇4 55.7±0.2 Ca(N03)2 550±2 Na2EDTA 74.6±0.2 MgS〇4 370±2 Na2H2P04 170±2 MnS〇4 16.9±0.2 肌醇 100±2 ZnS〇4 8.6±0.2 硫胺素 0.4±0.2 C11SO4 0.025±.002 NAA 0.05±.02 CaCl2 440士 2 BAP 1±0.2 K1 0.83±.02 間拓普林 5±2 C0CI2 0.025±.002 糖g/L 30 ±2 H3BO3 6.2±.02 瓊脂g/L 5.5 ±0.2 Na2Mo〇4 0.25±.02 154254.doc 201235470 或 組份 mg/L(除非另有說明） 組份 mg/L(除非另有說明） NH4N〇3 1650±2 kh2po4 170±2 kno3 1900±2 FeS04 55.7±0.2 Ca(N〇3)2 550±2 Na2EDTA 74.6±0.2 MgS〇4 370±2 Na2H2P04 170±2 MnS〇4 16.9 士 2 肌醇 100±2 ZnS〇4 8.6±0.2 硫胺素 0.4±0.2 CuS〇4 0.025±.002 NAA 0.05 土.02 CaCl2 440±2 BAP 1 士 0.2 K1 0.83±.02 噻苯隆 0.75±.02 CoCl2 0.025±.002 間拓普林 5士2 H3BO3 6.2±0.2 糖g/L 30±2 Na2Mo〇4 0.25±.02 瓊脂g/L 5.5±0.2 2_ —種微繁殖竹子之方法，其包含使竹子外植體暴露於 實施例1之培養基中。 3.如實施例2之方法，其進一步包含使竹子幼芽暴露於以 下培養基中：b-9-i培養基、b-9-ii培養基、b-9-iii培養基、 b-9-iv培養基、b-9-v培養基、CW2-i培養基、CW2-ii培養 基、CW2-iii培養基、CW2-iv培養基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、b-10-iv培養 基、b-10-v培養基、b-11-i培養基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養 基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養基、b-12c-iv培養基、 b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-1-ii培養基、b-1-iii培養 基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養 基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培 154254.doc 201235470 養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、b-6-iv培養基、b-6-v 培養基' CWl-i培養基、CWl-ii培養基、CWl-iii培養基、 CWl-iv培養基、CWl-v培養基、CW3-i培養基、CW3-ii培 養基、CW3-iii培養基、CW3-iv培養基、CW3-V培養基、 CW4-i培養基、CW4-ii培養基、CW4-iii培養基、CW4-iv培 養基、CW4-V培養基、CW5-i培養基、CW5-ii培養基、 CW5-iii培養基、CW5-iv培養基、CW5-V培養基、CW6-i培 養基、CW6-ii培養基、CW6-iii培養基、CW6-iv培養基及/ 或CW6-V培養基。 4. 如實施例3之方法，其進一步包含使竹子幼芽暴露於支 持過渡至試管外條件之培養基中。 5. 如實施例3之方法，其中該方法自一個外植體產生 100,000個竹子幼芽。 6. 如實施例2、3、4或5中任一者之方法，其中該方法進 一步包含獲得外植體。 7. 如實施例6之方法，其中該外植體係竹莖基部之第三結 即 ° 8. —種套組，其包含由以下組成之培養基： 組份 mg/L(除非另有說明） 組份 mg/L(除非另有說明） NH4N〇3 1650±2 kh2po4 170±2 kno3 1900士2 FeS〇4 55.7±0.2 Ca(N〇3)2 550±2 Na2EDTA 74.6±0.2 MgS04 370±2 Na2H2P04 170±2 MnS〇4 16.9±0.2 肌醇 100±2 ZnS〇4 8.6 土 0.2 硫胺素 0.4±0.2 CuS〇4 0.025±.002 NAA 0.05±.02 154254.doc -10- 201235470 組份 rng/L(除非另有說明） 組份 mg/L(除非另有說明） CaCl2 440±2 BAP 1±0.2 K1 0.83±.02 間拓普林 5±2 CoCl2 0.025±.002 糖g/L 30 土 2 H3BO3 6.2±.02 瓊脂g/L 5.5 ±2 Na2Mo〇4 0.25±.02 或 組份 mg/L(除非另有說明） 組份 mg/L(除非另有說明） NH4NO3 1650±2 kh2po4 170士2 KNO3 1900±2 FeS〇4 55.7±0.2 Ca(N〇3)2 550±2 Na2EDTA 74.6±0.2 MgS〇4 370±2 Na2H2P〇4 170±2 MnS〇4 16.9±2 肌醇 100±2 ZnS〇4 8.6±0.2 硫胺素 0.4±0.2 CuS〇4 0.025±.002 NAA 0.05±.02 CaCl2 440±2 BAP 1±0.2 K1 0.83±.02 噻苯隆 0.75±.02 C0CI2 0.025±.002 間拓普林 5±2 H3BO3 6.2±0.2 糖g/L 30±2 Na2Mo〇4 0.25±.02 瓊脂g/L 5.5士0.2 9.如實施例8之套組，其進一步包含b-9-i培養基、b-9-ii 培養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、 CW2-i培養基、CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、CW2-iv培 養基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、b-10-iv培養基、b-10-v培養基、b-11-i培養 基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-1-ii 培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4- 154254.doc • 11 - 201235470 i培養基、b-4-ii培養基、b_4-iii培養基、b-4-iv培養基' b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、 b-6-iv培養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、CWl-ii培養 基、CWl-iii培養基、CWl-iv培養基、CWl-v培養基、 CW3-i培養基、CW3-ii培養基、CW3-iii培養基、CW3-iv培 養基、CW3-V培養基、CW4-i培養基、CW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、CW4-iv培養基、CW4-V培養基、CW5_i培 養基、CW5-ii培養基、CW5-iii培養基、CW5-iv培養基、 CW5-v培養基、CW6-i培養基、CW6-ii培養基、CW6-iii培 養基、CW6-iv培養基及/或CW6-V培養基。 1 0.如實施例8或9之套組，其進一步包含支持過渡至試管 外條件之培養基。 11.如實施例8、9或10之套組，其進一步包含外植體。 —種微繁殖竹子之方法，其包含使竹子外植體暴露於 包含間拓普林及/或噻苯隆之培養基中。 U·如實施例12之方法，其中該培養基包含^9_丨培養基、 b-9-ii培養基、b_9_iH培養基、b_9_iv培養基、b 9 v培養 基、CW2-1培養基、cW2-ii培養基、培養基、 CW2-W培養基、〇%2^培養基、b l〇 i培養基、卜1〇毛培 養基、b-io-iii培養基、^丨^“培養基、b i〇 v培養基、卜 u-i培養基、b-η-ϋ培養基、b_u_iH培養基、b u iv培養 基、b-ii-v培養基、b_12c-i培養基、匕丨仏七培養基、卜 培養基、b_12c_iv培養基、b l2c v培養基、b小1培 養基、b-1-ii培養基、tM-iu培養基、b]_iv培養基、b-i-v 154254.doc 201235470 培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b_4_ iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、 iii培養基、b-6-iv培養基、b-6-v培養基、cwi-i培養基、 CWl-ii培養基、CWl-iii培養基' CWl-iv培養基、CWl v 培養基、CW3-i培養基、CW3-ii培養基、CW3-iii培養基、 CW3-W培養基、CW3-V培養基、CW4-i培養基、C\V4-ii培 養基、CW4-iii培養基、CW4-W培養基、CW4-V培養基、 CW5-i培養基、CW5-ii培養基、CW5-iii培養基、cW5-iv培 養基、CW5-V培養基、CW6-i培養基、cW6-ii培養基、 CW6-iii培養基、CW6-iv培養基及/或CW6-V培養基。 14. 如實施例12之方法，其中該外植體係竹莖基部之第三 結節。 15. —種培養基，其包含b-9-i培養基、b_9七培養基、b_9_ iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、（：冒2_丨培養基、 CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、CW2-iv培養基、CW2 v 培養基、b-10-i培養基、b-HMi培養基、卜丨^出培養基、 b-10-iv培養基、b-10-v培養基、b_n i培養基、b ii ii培養 基、b-11-iii培養基、匕-11_“培養基、b n_v培養基、b_ 12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b l2c_m培養基、b i2c iv 培養基、b-12c-v培養基、b-l_i培養基、卜丨七培養基、b_ 1-iii培養基、b-1-iv培養基、培養基、b_4_i培養基、 b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b_4_iv培養基、b 4_v培養 基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b_6 iH培養基、卜^培 養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、cwi ii培養基、 154254.doc 201235470 CWl-iii培養基、cwi_iv培養基、cwi v培養基、cw3 i培 養基、CW3-u培養基、cw3-iii培養基、cW3-iv培養基、 CW3-V培養基、CW4_i培養基、cW4_n培養基、CW4_iH培 養基、CW4-iV培養基、CW4_V培養基、^冒5“培養基、 CW5-ii培養基、CW5_iH培養基、CW5_iv培養基、CW5 v 培養基、CW6-i培養基、cW6-ii培養基、cW6-iii培養基、 CW6-iv培養基及/或CW6-V培養基。 16. —種培養基，其基本上由以下組成：b_9_i培養基、b_ 9- ii培養基、b-9-iii培養基、b_9_iv培養基、^^…々培養基、 CW2-i培養基、CW2-ii培養基、CW2_iu培養基 、CW2-iv培 養基、CW2-V培養基、b-l(M培養基、b-10-ii培養基' b-

10- iii培養基、b-10-iv培養基、b-l〇-v培養基、b-11-i培養 基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b_u•丨v培養基、b_u_ v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-l2c-iii培養 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-1-H 培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、 b-6-iv培養基、b-6-v培養基、cwi-i培養基' CWl-ii培養 基、CWl-iii培養基、CWl-iv培養基、CWl-v培養基、 CW3-i培養基、CW3-ii培養基、cW3-iii培養基、CW3-iv培 養基、CW3-V培養基、CW4-i培養基、CW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、CW4-iv培養基、（:W4_v培養基、CW5-i培 養基、CW5-ii培養基、cW5-iii培養基、CW5-iv培養基、 I54254.doc • 14· 201235470 CW5-V培養基、CW6-i培養基、CW6-ii培養基、CW6-iii培 養基、CW6-iv培養基及/或CW6-V培養基。 17. —種培養基，其由以下組成：b-9-i培養基、b-9-ii培 養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、CW2-i 培養基、CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、CW2-iv培養 基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、b-10-iv培養基、b-10-v培養基、b-11-i培養 基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-1-ii 培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、 b-6-iv培養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、CWl-ii培養 基' CW卜iii培養基、cWl-iv培養基、CWl-v培養基、 CW3-i培養基、CW3-ii培養基、CW3-iii培養基、CW3-iv培 養基、CW3-V培養基、cW4-i培養基、CW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、CW4-iv培養基、CW4-V培養基、CW5-i培 養基、CW5-ii培養基、cW5-iii培養基、CW5-iv培養基、 CW5-V培養基、CW6-i培養基、c\V6-ii培養基、CW6-iii培 養基、CW6-iv培養基及/或cw6-v培養基。 18. —種套組’其包含如實施例15、16或17之培養基。 19. 一種微繁殖竹子之方法，其利用如實施例1、i 5 ' 16 或17之培養基。 154254.doc •15· 201235470 20. —種微繁殖竹子之方法，其利用如實施例8、9、10、 11或18之套組。 額外實施例包括： 21. —種培養基，其包含以下組份、基本上由以下組份組 成或由以下組份組成： 組份 mg/L(除非另有說明） 組份 mg/L(除非另有說明） NH4N03 1650±2 KH2P〇4 170±2 KN〇3 1900±2 FeS〇4 55.7±0.2 Ca(N03)2 550±2 Na^EDTA 74·6±0·2 MgS〇4 370±2 NaiH2P〇4 170±2 MnS〇4 16.9±0.2 肌醇 100±2 ZnS〇4 8.6db〇.2 硫胺素__ 0.4±0.2 CuS04 0.025±.002 NAA 0.05±.02 CaCl2 440±2 JBAP--- 1 土 0.2 K1 0.83±.02 細座兰丝重- —丨.一---- Γ 5±2 C0C12 0.025±.002 ___ 30 ±2 H3B03 6.2±.02 - 5.5 ±0.2 Na2Mo〇4 0.25±.02 ----~1 或 組份 mg/L(除非另有說明） _______ 組_____ mg/L(除非另有說明） NH4NO3 1650±2 --- 170±2 kno3 1900±2 FcS〇4________ 55.7±0·2 Ca(N03)2 550±2 n^edta-- 74.6dt〇.2 MgS〇4 370±2 NaaHzP^i--- 170±2 MnS〇4 16.9±2 ___ 100±2 ZnS〇4 8.6±0.2 -- 0.4±0.2 C11SO4 0.025± 002 naa___—- 0.05±.02 CaCl2 440±2 BAP_—----- 1±0.2 K1 0.83±.〇2 細胞分— 0.75±.02 C0CI2 〇.〇25db.〇02 5±2 154254.doc -16 - 201235470 組份 mg/L(除非另有説明） 組份 mg/L(除非另有說明） H.BO, 6.2±0.2 糖g/L 30±2 Na2Mo〇4 0.25±.02 瓊脂g/L 5.5±0.2 其中細胞分裂素A係如本文所述之間拓普林或間拓普林類 似物且細胞分裂素B係如本文所述之噻苯隆或噻苯隆類似 物0 22. —種微繁殖竹子之方法，其包含使竹子外植體暴露於 實施例21之培養基中。 23. 如實施例22之方法’其進一步包含使竹子幼芽暴露於 以下培養基中：b-9-i培養基、b_9_n培養基、培養 基、b-9-ιν培養基、b-9-v培養基、養基、cwhii 培養基、CW2-iii培養基、CW2_iw^養基、CW2_v培養 基、b-10-i培養基、b-UMi培養基、b_1〇_Hi培養基、b_1〇_ iv培養基、b-10-v培養基、b_1M培養基、^丨以丨培養基、 b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、^丨丨^培養基、b_12c i培 養基、b-Uc-ii培養基、b_12c_Hi培養基、b 12civ培養 基、b-12c-v培養基、b-l_i培養基、b_Mi培養基、…卜出 培養基、b-1-iv培養基、培養基、卜扣丨培養基、b-4_u 培養基、b-4_iii培養基、b_4_iv培養基、^彳^培養基、b_6· i培養基、b-6-ii培養基、b_6_Hi培養基、b_6_w培養基、b_ 6-v培養基、CWl-i培養基、cwwi培養基、cwl_Hi培養 基、CWl-iv培養基、CWl-v培養基、（2貿3_丨培養基、CW3-U培養基、cw3-iii培養基、CW3_iv培養基、（^3々培養 基、CW4-1培養基、cW4-ii培養基、cW4-iii培養基、 CW4-1V培養基、CW4_V培養基、（：评5丨培養基、匚冒5_^培 154254.doc -17· 201235470 養基、CW5-iii培養基、CW5-iv培養基、CW5-V培養基、 CW6-i培養基、CW6-ii培養基、CW6-iii培養基、CW6-iv培 養基及/或CW6-V培養基。 24. 如實施例23之方法，其進一步包含使竹子幼芽暴露於 支持過渡至試管外條件之培養基中。 25. 如實施例23之方法，其中該方法自一個外植體產生 100,000個竹子幼芽。 26. 如實施例22、23、24或25中任一者之方法，其該方法 進一步包含獲得外植體。 27. 如實施例26之方法，其中該外植體係竹莖基部之第三 結節。 28. —種包含培養基之套組，該培養基包含以下組份、基 本上由以下組份組成或由以下組份組成： 組份 mg/L(除非另有說明） 組份 mg/L(除非另有說明） NH4N〇3 1650±2 kh2po4 170±2 kno3 1900土2 FeS〇4 55.7±0.2 Ca(N03)2 550±2 Na2EDTA 74.6±0.2 MgS04 370±2 Na2H2P04 170±2 MnS〇4 16.9±0.2 肌醇 100±2 ZnS〇4 8.6 土 0,2 硫胺素 0.4±0.2 CuS〇4 0.025±.002 NAA 0.05 土 .02 CaCl2 440±2 BAP 1±0.2 K1 0.83±.02 細胞分裂素A 5±2 CoCl2 0.025±.002 糖g/L 30 ±2 H3BO3 6.2±.02 瓊脂g/L 5.5 ±2 Na2Mo〇4 0.25±.02 或 154254.doc -18· 201235470 組份 mg/L(除非另有說明） 組份 mg/L(除非另有說明） NH4N03 1650±2 KH2P04 170±2 KN03 1900±2 FeS04 55.7±0.2 Ca(N03)2 550±2 Na2EDTA 74.6±0.2 MgS04 370±2 Na2H2P04 170 士 2 MnS04 16.9±2 肌醇 100±2 ZnS04 8.6 士 0.2 硫胺素 0.4±0.2 CuS04 0.025±.002 NAA 0.05±.02 CaC12 440±2 BAP 1±0.2 K1 0.83±.02 細胞分裂素B 0.75±.02 CoC12 0.025±.002 細胞分裂素A 5±2 H3B03 6.2±0_2 糖g/L 30±2 Na2Mo04 0.25±.02 瓊脂g/L 5.5±0.2 其中細胞分裂素A係如本文所述之間拓普林或間拓普林類 似物且細胞分裂素B係如本文所述之噻苯隆或噻苯隆類似 物。 29.如實施例28之套組，其進一步包含b-9-i培養基、b-9-ii培養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、 CW2-i培養基、CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、CW2-iv培 養基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、b-10-iv培養基、b-10-v培養基、b-11-i培養 基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-1-ii 培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、 b-6-iv培養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、CWl-ii培養 154254.doc -19- 201235470 基、CW1-1U培養基、cwi-iv培養基、CWl-ν培養基、 CW3-1培養基、Cw3-ii培養基、CW3-iii培養基、CW3-iv培 養基、CW3-V培養基、（^以培養基、^贾扣^培養基、 CW4-iii培養基、CW4_iv培養基、CW4_v培養基、^冒彡^培 養基、CW5-ii培養基、CW5_iH培養基、^5七培養基、 CW5-V培養基' cW6-i培養基、CW6-ii培養基、CW6-iii培 養基、CW6-iv培養基及/或CW0-V培養基。 30.如實施例28或29之套組，其進一步包含支持過渡至試 管外條件之培養基。 3 1.如實施例28、29或30之套組，其進一步包含外植體。 32. —種微繁殖竹子之方法，其包含使竹子外植體暴露於 包含如本文所述之間拓普林或間拓普林類似物及/或如本 文所述之噻苯隆或噻苯隆類似物之培養基中。 3 3.如實施例32之方法，其中該培養基包含b-9-i培養基、 b-9-ii培養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養 基、CW2-i培養基、CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、 CW2-iv培養基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培 養基、b-10-iii培養基、b-10-iv培養基、b-10-v培養基、b-1M培養基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養 基、b-11-v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培 養基、b-1-ii培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、b-1-v 培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b-4· iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6- -20- 154254.doc

S 201235470 ill培養基、b-6-iv培養基、b-6-v培養基、cwi-i培養基、 CWl-ii培養基、Cwi-iii培養基、cwi-iv培養基、CW1_V 培養基、CW3-1培養基、CW3-ii培養基、cW3-iii培養基、 CW3-1V培養基、CW3-V培養基、（：冒4“培養基、CW44培 養基、CW4-ui培養基、cW4-iv培養基、CW4-V培養基、 CW5-i培養基、CW5-ii培養基、cW5-iii培養基、CW5-iv培 養基、CW5-V培養基、CW6-i培養基、cW6-ii培養基、 CW6-iii培養基、CW6-iv培養基及/或CW6_w^養基。 34. 如實施例32之方法，其中該外植體係竹莖基部之第三 結節。 35. —種培養基，其包含b-9-i培養基、b-9-ii培養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、CW2-i培養基、 CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、CW2-W培養基、CW2-V 培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、 b-10-iv培養基、b_10-v培養基、b-11-i培養基、b-11-ii培養 基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養基、b，12c-ii培養基、b-12c-iii培養基、b-12c-iv 培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-1-ii培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4-i培養基、 b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養 基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、b-6-iv培 養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、CWl-ii培養基、 CWl-iii培養基、CWl-iv培養基、CWl-v培養基、CW3-i培 養基、CW3-ii培養基、CW3-iii培養基、CW3-iv培養基、 154254.doc -21- 201235470 CW3-V培養基、CW4_i培養基、cl4』培養基、cw4⑴培 養基、CW4-iv培養基、CW4-v培養基、cW5-i培養基、 CW5-U培養基、（^冒弘⑴培養基、CW5 iv培養基、 培養基、CW6-i培養基、CW6-U培養基、cW6-iii培養基、 CW6-iv培養基及/或c\V6-v培養基。 36. —種培養基，其基本上由以下組成：b 9 i培養基、b_ 9 ii培養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、 CW2-1培養基、CW2_U培養基、cW2_iH培養基、CW2_iv培 養基、CW2-V培養基、b_1(M培養基、b_1(Mi培養基、卜 10-111培養基、b_1〇-iv培養基、b-10-v培養基、b-11-i培養 基、b-11-ii培養基、培養基、b ll iv培養基、b ii_ v培養基、b_12c-i培養基、b-12c_H培養基、b_12c-Hi培養 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基' b-1-i培養基、b-1-ii 培養基、b-1-iii培養基、b_i_iv培養基、b_l v培養基、b 4_ i培養基、b-4-ii培養基、b_4_Hi培養基、b_4_iv培養基、b_ 4-v培養基、b-6-i培養基、b_6_H培養基、b_6_m培養基、 b-6-ιν培養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、CWl-ii培養 基、CWl-iii培養基、cwi-iv培養基、CWl-v培養基、 CW3-i培養基、CW3-ii培養基、cW3-iii培養基、CW3-iv培 養基、CW3-V培養基、cW4-i培養基、CW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、cW4-iv培養基、CW4-V培養基、CW5-i培 養基、CW5-ii培養基、cW5-iii培養基、CW5-iv培養基、 CW5-V培養基、CW6-i培養基、CW6-ii培養基、CW6-iii培 養基、CW6-iv培養基及/或cv/6-v培養基。 154254.doc

S -22- 201235470 37. —種培養基，其由以下組成：b-9-i培養基、b-9-ii培 養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、CW2-i 培養基、CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、CW2-iv培養 基' CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-l〇-iii培養基、b-l〇-iv培養基、b-10-v培養基、b-11-i培養 基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b-1-ii 培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4-1培養基、b-4-ii培養基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、 b-6-iv培養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、CWI-Π培養 基、CWl-iii培養基、cWl-iv培養基、CW1·^^養基、 CW3-i培養基、CW3-ii培養基、CW3-iii培養基、CW3_iv培 養基、CW3-v培養基、cW4-i培養基、cW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、CW4_iv培養基、CW4_V培養基、cwq 養基、CW5-ii培養基、CW5_m培養基、培養基 CW5 νίσ養基、CW6_i培養基、CW6ii培養基、山 養基、CW6-_養基及/或CW6 v培養基。 38. —種套組，其包合知每 3如貫施例35、36或37之培養基。 39. —種微繁殖竹子之太 乃在，其利用如實施例21、35、3 或37之培養基。 40. —種微繁殖竹子之方去 30、31或38之套組。 其利用如實施例28、29、 154254.doc •23· 201235470 41· 一種用於微繁殖竹子之培養基，其中該培養基支持ι〇 至120天增殖週期達至少1個月、至少3個月、至少6個月、 至少9個月、至少12個月、至少15個月、至少18個月、至 少21個月、至少24個月或至少36個月。 42.如實施例41之培養基，其中該培養基包含以下培養 基、基本上由以下培養基組成或由以下培養基組成：b 9 i 培養基、b-9-ii培養基、b_9_iii培養基、b_9_iv培養基、匕 9-v培養基、CW2_i培養基、CW2_n培養基、CW2⑴培養 基、CW2-iv培養基、CW2_V培養基、b_1(M培養基、b i〇_ 11培養基、b-10-iii培養基、b-io-iv培養基、b_1〇_v培養 基、b-11-i培養基、b-H-n培養基、b_1Mii培養基、b ii_ iv培養基、b-11-v培養基、b_i2c_i培養基、b_12c_H培養 基、b-12c-iii培養基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b_ 1-i培養基、b-1-ii培養基、b-l_iii培養基、b-l-iv培養基、 b-1-v培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基、b-4-iii培養 基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養 基、b-6-iii培養基、b-6-iv培養基、b-6-v培養基、c；wi-i培 養基、CWl-ii培養基、cWl-iii培養基、CW1-W培養基、 CWl_v培養基、CW3-i培養基、CW3-ii培養基、cW3-iii培 養基、CW3-iv培養基、CW3-V培養基、cW4-i培養基、 CW4-ii培養基、cW4-iii培養基、CW4-iv培養基' CW4-V 培養基、CW5-i培養基、CW5-ii培養基、cW5-iii培養基、 CW5-1V培養基、CW5-V培養基、CW6-i培養基、CW6-ii培 養基、CW6-iii培養基、（:W6-iv培養基及/或CW6-V培養 154254.doc • 24- 201235470 基。 額外實施例包括： 43. —種用於微繁殖竹子之培養基，其中該培養基包含間 拓普林或其類似物且支持10至120天增殖週期達至少6個 月。 44. 如實施例43之培養基，其中該培養基支持10至12〇天 增殖週期達至少1年。 45. 如實施例43或44之培養基，其中該間拓普林或其類似 物係以0.0125 mg/mL至10 mg/mL之量存在。 46. 如實施例43、44或45之培養基，其中該培養基進一步 包含11塞苯隆或其類似物。 47. 如實施例43、44、45或46之培養基，其中該培養基進 一步包含NAA、BAP、2ip及 / 或 IBA。 48. —種微繁殖竹子之方法，其包含在如實施例43、44、 45、46或47之培養基中培養竹子之外植體及/或幼芽。 49. 如實施例48之微繁殖竹子之方法，其中該竹子係蓉城 竹（Phyllostachys bissetti)、缺苞箭竹（Fargesia denudate)、 菲白竹（Pleioblastus fortunei)、維氏熊竹（Sasa Veitchii)、 黃金竹（Pleioblastus viridistriatus)、粗節筱竹 (Thamnocalamus crassinodus)、力口 波秋竹（Chusquea Culeou 「Cafta Prieta」）、綠竹（Bambusa Old Hamii)、橋竹 (Phyllostachys Moso)、烏芽竹（Phyllostachys Atrovaginata)、馬來甜龍竹（Dendrocalamus Asper)或狹葉 瓜多竹（Guadua Angustifolia)。 154254.doc -25- 201235470 50. —種用於將幼芽過渡至試管外條件之培養基，其中培 養基包含以下培養基、基本上由以下培養基組成或由以下 培養基組成：Br-2-i培養基、ΒΓ·2·π培養基、Br_2m培養 基、Br-2-w培養基、汾_2〜培養基、Ech i培養基、Ech ii 培養基、Ech-iii培養基、Ech_iv、^“培養基、Amei_w 養基、Amel-ii培養基、Amei_iH培養基、AmeM_養基或 Amel-v培養基。 51. —種用於微繁殖竹子之培養基，其中該培養基包含噻 苯隆或其類似物且支持10至12〇天增殖週期達至少6個月。 52_如實施例51之培養基’其中該培養基支持1〇至12〇天 增殖週期達至少1年。 53·如實施例51或52之培養基，其中該噻苯隆或其類似物 係以0.0001 mg/mL至5 mg/mL之量存在。 54.如實施例51、52或53之培養基，其中該培養基進一步 包含間拓普林或其類似物、NAA、BAP、2ip及/或IBA。 55·如實施例54之培養基，其中該間拓普林或其類似物係 以 0.0125 mg/mL至 10 mg/mL之量存在》 56.如實施例 43、44、45、46、47、5 1、52、53、54或 55 之培養基，其中該培養基包含以下培養基、基本上由以下 培養基組成或由以下培養基組成·· b-9-i培養基、b-9-ii培 養基、b-9-iii培養基、b-9-iv培養基、b-9-v培養基、CW2-i 培養基、CW2-ii培養基、CW2-iii培養基、CW2-W培養 基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-ii培養基、b-l〇-iii培養基、b-10-iv培養基、b_10-v培養基、b-11-i培養 154254.doc -26· 201235470 基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、卜丨丨七培養基、b_n_ v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養基、b-12c-iii培養 基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b_M培養基、b-1-ii 培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、卜丨〜培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基' b_4_iH培養基、b_4 iv培養基、b_ 4-v培養基、b-6-ι培養基、b-6-ii培養基、b-6-ii'i培養基、 b-6-iv培養基、b-6-v培養基、CW1_i培養基、cw卜ii培養 基、cwi-iii培養基、（:臀丨^培養基、CW1_V培養基、 CW3-i培養基、CW3-ii培養基、cW3-iii培養基、CW3-iv培 養基、CW3-V培養基、cW4-i培養基、CW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、CW4-iv培養基、CW4-V培養基、CW5-i培 養基、CW5-ii培養基、（：冒5_以培養基、cw5-iv培養基、 CW5-V培養基、CW6-i培養基、cW6-ii培養基、c\V6-iii培 養基、CW6-iv培養基及/或CW6-V培養基。 57. —種微繁殖竹子之方法，其包含在如實施例51、52、 53、54或55之培養基中培養竹子之外植體及/或幼芽。 58. 如實施例57之微繁殖竹子之方法，其中該竹子係蓉城 竹（Phyllostachys bissetti)、缺爸箭竹、菲白竹、維 竹、黃金竹、粗節筱竹、加波秋竹、綠竹、楠竹、烏芽 竹、馬來甜龍竹或狹葉瓜多竹。 59. —種套組，其包含如實施例43、44、45、46、47、 50、51、52、53、54、55或56中任一者之培養基。 實施例亦包括所有上文所提供之實施例，其中經微繁殖 之竹子係大青籬竹（Arundinaria gigantea)、巴苦竹 154254.doc -27- 201235470 (Bambusa balcoa)、龍頭竹（Bambusa vulgaris)、黃金間碧 竹（Bambusa vulgaris 'Vitatta')、綠竹、馬曱竹（Bambusa tulda)、勃氏甜龍竹（Dendrocalamus brandesii)、馬來甜龍 竹、版納甜龍竹（Dendrocalamus hamiltonii)、龍竹 (Dendrocalamus giganteus) 、黃竹 (Dendrocalamus membranaceus)、印度實竹（Dendrocalamus strictus)、菲律 賓巨竹（Gigantochloa aspera)、斯科爾泰基尼巨竹 (Gigantochloa scortechini)、阿庫拉塔瓜多竹（Guadua aculeata)、尼加拉瓜阿庫拉塔瓜多竹（Guadua aculeata 「Nicaragua」）、實心瓜多竹（Guadua amplexifolia)、狹葉 瓜多竹、雙色狹葉瓜多竹（Guadua angustifolia bi-color)、 錐花瓜多竹（Guadua paniculata)、梨果竹（Melocanna bambusoides)、樂多竹（Neohouzeaua dullooa)(長穗竹屬 (Teinostachyum))、特拉凡村奥克蘭竹（Ochlandra travancorica)、莫索毛竹（Phyllostachys edulis「Moso」）、紫 竹（Phyllostachys nigra)、毛金竹（Phyllostachys nigra 「Henon」）或盧瑪波思勞竹（Schizostachyum lumampao)。 【實施方式】 竹子係具有許多不同應用的多功能植物。其係亞洲烹飪 主食，且可在眾多產品中發現，包括牙籤、掃帚、葡萄栽 培及樹木栽培用竿、景觀美化材料、鑲木地板、層壓材 料、傢具、手工藝品及其他家用物品。另外，竹子正在成 為重要的紡織材料來源，其可作為紙生產中之組份及作為 建築用木材來源。 154254.doc

S 201235470 人們認為竹子係環境友好性「綠色」產品。賦予竹子綠 色美譽之特性之一係其極快速之生長速率。然而，儘管竹 子之生長速率較快，但其所具有的其他特性使其成為難以 進行管理之作物，包括其長開花週期及表現集十（或群體） 開花之傾向性。 本文所揭示實施例以商業規模提供竹子之微繁殖或組織 培養（該等術語在本文中可互換使用）。 微繁殖植物係在無菌培養基辛活體外生長。無菌培養基 可係液體、半固體或固體，且培養基之物理狀態可藉由納 入一或多種膠凝劑而改變。可使用適用於植物組織培養基 的業内已知之任一膠凝劑。瓊脂最常用於此目的。此等瓊 脂之實例包括A、E或Μ型瓊脂及BactoTM瓊脂。其他例示 性膠凝劑包括角又菜膠、結蘭膠（ge„an gum)(以 PhytaGel™、Gelrite®及GeizanTM自市面購得）、海藻酸及其 鹽及瓊脂糖。亦可使用該等試劑之摻合物，例如瓊脂、角 叉菜膠、結蘭膠、瓊脂糖及海藻酸或其鹽中之二者或多 者。通常’培養基包含瓊脂，其中添加有各種化合物，例 如營養素、無機鹽、生長調節劑、糖、維生素及其他化合 物。其他培養基添加劑可包括（但不限於）胺基酸、大量元 素、鐵、微量元素、肌醇及不明確之培養基組份（例如酪 蛋白水解物或酵母提取物）。舉例而言，培養基可包括以 下中之任一組合：NH4N03、KN03 ' Ca(N03)2、K2S04、

MgS04、MnS04、ZnS04、CuS04、CaCl2、ΚΙ、CoCl2、 H3B03、Na2Mo04、KH2P〇4、FeS04、Na2EDTA、 154254.doc •29· 201235470

NasHJO4、肌醇、硫胺素、吡多辛（pyrid〇xine)、菸酸、 甘胺酸、核黃素、抗壞血酸、石夕標準溶液、β_萘氧乙酸 (ΝΑΑ)、吲哚丁酸（ΙΒΑ)、3-吲哚乙酸（ΙΑΑ)、苄基胺基嘌 呤（ΒΑΡ)、6-γ-γ-(二甲基烯丙基胺基）·嘌呤（2_ip)、糖、瓊 脂、角叉菜膠及木炭。植物生長調節劑之實例包括生長素 及具有生長素樣活性之化合物、細胞分裂素及具有細胞分 裂素樣活性之化合物。例示性生長素包括2,4·二氣苯氧基 乙酸、IBA、毒莠定（picl〇ram)及其組合。除間拓普林及噻 苯隆以外，例示性細胞分裂素亦包括硫酸腺嘌呤、节基腺 嘌呤、二甲基烯丙基嘌呤、激動素、玉米素及其組合。在 培養基中亦可包括赤黴酸。在培養基中可包括糖且其可用 作奴源。此等糖為彼等熟習此項技術者已知。例示性糖包 括蔗糖、葡萄糖、麥芽糖、半乳糖及山梨醇或其組合。 本文揭示允許以商業規模成功地組織培養竹子之專門典 養基、系統及方法。本文所述某些培養基包括細胞分裂素 間拓普林及/或噻苯隆。儘管某些實施例利用如下文特定 化合物所定義之間拓普林及/或噻苯隆，但其他相關化合 物亦可係成功的。 本發明可用之化合物包括具有以下通式之間拓普林類似 物 HN——R1-

154254.doc 30- 201235470 其中w係芳基或雜芳基； R1係經取代或未經取代之烷基，其中烷基中之任—c均可 經〇、N或s取代； 每一 R2均獨立為H、OH、C丨-C6烷基、C丨-C6伸烷基、Ci_c 烷基基、_素、氰基、C^-C：6烷氧基、芳基或雜芳基，其 各自視情況經cvc6烷基、SH、NHR3、C〇2R3或齒素取 代； R3係H、〇H、C,-C6烧基、Cl-CM烧基、Cl_C6燒基基、函 素、羧基、酯基、醛基或氰基； r係0至8。 在一個實施例中，W係

其中虛線代表鍵之存在或不存在； X1至X7各自獨立選自C、N、〇、s， 之X係C。 Ο、S， 前提為將環與N連接 在另一實施例中，該等化合物具有以下結構 HN--R1--γ

XV -χ6 其中虛線代表鍵之存在或不存在。 在另一實施例中， 該等化合物具有以下結構 154254.doc •31· 201235470 HN-(CH2)q X1r τΧ6

P (R2)r 其中虛線代表鍵之存在或不存在； X8至X12各自獨立選自C、N、0、s ; 每一 R4均獨立為H、OH、Cl-C6烷基、C丨_c6伸烷基、c丨·C6 炫基基、鹵素、氰基、Cl_C6烷氧基、芳基或雜芳基，其 各自視情況經C〗-C6烷基、SH、NHR3、C02R3或鹵素取 代； R3係Η、〇H、C〗-C6烷基、CVC6伸烷基、C「C6烷基基、南 素、羧基、酯基、醛基或氰基； P係0至5 ;且 q係0至6。 在其他實施例中，化合物具有以下結構 HN- x1〆

(R2)r 在又—實施例中，化合物具有以下結構

-32- 154254.doc

S 201235470 此外，化合物可具有選自以下之結構

在一個實施例中，R4係OH。 在另一實施例中，化合物具有選自以下之結構

在另一實施例中，該等化合物具有以下結構

154254.doc -33- 201235470 其中虛線代表鍵之存在或不.存在。 在另一實施例中，該等化合物具有以下結構

其中虛線代表鍵之存在或不存在； X8至Xu各自獨立選自C、N、〇、s; 每一 R4均獨立為Η、〇H、C丨-C6烷基、CVC6伸烷基、CrC6 基或雜芳基，其 C〇2R3或鹵素取 烷基基、鹵素、氰基、C丨_c6烷氧基、芳 各自視情況經基、sh、NHR3、 代； 鹵 R係Η、〇H、CVQ烧基、烧基、Ci_C6烧基基 素、羧基、酯基'醛基或氰基； P係0至5 ;且 q係0至6 » 在其他實施例中，化合物具有以下結構

在又一實施例中，化合物具有以下結構 154254.doc _34· 201235470

或 N. 在一個實施例中， 基苄基胺基）-嘌呤， 分子量為241.25，且 化合物係間拓普林，其亦稱為6-(3-羥 且縮寫為mT，分子式為C丨2H10N5〇H， 且具有以下結構式：

其中該間拓普林得自柳樹或白楊樹。 本發明可用之化合物包括具有以·f通式之絲隆類似物

其中v係芳基或雜芳基； 母一 R及R均各自獨立為H、OH、Ci-C6烧基、Ci-Ce伸烧 基、CrC6烷基基、鹵素、氰基、c^-C：6烷氧基、芳基或雜 芳基，其各自視情況經C 1 - C 6烧基或鹵素取代； η係0至4 ; 〇係0至5 ; X13至X16各自獨立選自C、N、0、S; Z1及Z2各自獨立為NH、Ο ' SH或CH，或Z1與Z2可經組合 以形成經取代或未經取代之芳基或雜芳基；且 154254.doc -35- 201235470 Y1係〇或s

在個實施例中，化合物係°塞苯隆，其亦稱為1-苯基-3_ 基）腺’且％笨基胺基曱酿基胺基-i，2,3-。塞 -唾之λ子式為c9H8N4C)s，分子量為22G 25且具有以下結 構式

各細胞分裂素若存於培養基巾，财均以m 至1〇0 ^之量及其間之所有量存在。在某也實施例寺 間拓普林及/或其類似物可以以下量存在· 〇謝叫n 〇.〇1 邮/L、（M mg/L、！ mg/L、2 mg/L、3 邮化、 mg/L、U mg/L、3.3 mg/L、3 4 mg/L、3 $ _、： 、3.7 mg/L、3.8 mg/L、3 9 爪机、4 邮几、^ 、4.2 mg/L、4.3 mg/L、4·4 mg/L、（5 叫几、4 J54254.doc s -36- 201235470 mg/L、4.7 mg/L、4.8 mg/L、4.9 mg/L、5 mg/L、5.2 mg/L、5.3 mg/L、5.4 mg/L、5.5 mg/L、5.7 mg/L、5.8 mg/L、5.9 mg/L、6 mg/L、6.2 mg/L、6.3 mg/L、6.4 mg/L、6.5 mg/L、6.7 mg/L、6.8 mg/L、6.9 mg/L、7 mg/L、7.2 mg/L、7.3 mg/L、7.4 mg/L、7.5 mg/L、7.7 mg/L、7.8 mg/L、7.9 mg/L、8 mg/L 10 mg/L、11 mg/L、12 mg/L、13 mg/L、14 mg/L、16 mg/L、17 mg/L、18 mg/L、19 mg/L、21 mg/L、22 mg/L、23 mg/L、24 mg/L、26 mg/L、27 mg/L、28 mg/L、29 mg/L、31 mg/L、3 2 mg/L、3 3 mg/L、34 mg/L、36 mg/L、37 mg/L、38 mg/L、39 mg/L、41 mg/L、42 mg/L、43 mg/L、44 mg/L、46 mg/L、47 mg/L、48 mg/L、49 mg/L、51 mg/L、52 mg/L、53 mg/L、54 mg/L、56 mg/L、57 mg/L、58 mg/L、59 mg/L、61 mg/L、62 mg/L、63 mg/L、64 mg/L、66 mg/L、67 mg/L、68 mg/L、69 mg/L、71 mg/L、72 mg/L、73 mg/L、74 mg/L、76 mg/L、77 mg/L、78 mg/L、79 mg/L、81 mg/L、82 mg/L、83 mg/L、84 mg/L、86 mg/L、87 mg/L、88 mg/L、89 mg/L、91 mg/L、92 mg/L、93 mg/L、94 mg/L ' 5.1 mg/L ' 5.6 mg/L、6.1 mg/L ' 6.6 mg/L ' 7.1 mg/L、7.6 、9 mg/L、 mg/L ' 15 mg/L、20 mg/L、25 mg/L、30 mg/L、35 mg/L ' 40 mg/L、45 mg/L、50 mg/L、5 5 mg/L、60 mg/L、65 mg/L、70 mg/L、75 mg/L、80 mg/L、85 mg/L、90 mg/L、95 154254.doc -37- 201235470

mg/L、96 mg/L、97 mg/L、98 mg/L、99 mg/L 或 100 mg/L。在特定實施例中，噻苯隆及/或其類似物可以以下 量存在：0.001 mg/L ' 0.01 mg/L、0.025 mg/L ' 0.05 mg/L、0.075 mg/L、0_1 mg/L、0.15 mg/L、0.2 mg/L、 0.25 mg/L、0.3 mg/L、0.35 mg/L、0.4 mg/L、0·45 mg/L、 0.5 mg/L、0.55 mg/L、0_6 mg/L、0.65 mg/L、0.7 mg/L、 0.75 mg/L、0.8 mg/L、0.85 mg/L、0.9 mg/L、0.95 mg/L、 1.0 mg/L、1.25 mg/L、1.50 mg/L、1.75 mg/L、2.25 mg/L、2.5 mg/L、2.75 mg/L、3.5 mg/L、4.5 mg/L、5 mg/L、6 mg/L、7 mg/L、8 mg/L、9 mg/L、10 mg/L 12 mg/L、13 mg/L、14 mg/L、15 mg/L

mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L

17 mg/L 22 mg/L 27 mg/L 3 2 mg/L 37 mg/L 42 mg/L 47 mg/L 52 mg/L 5 7 mg/L 62 mg/L 67 mg/L 72 mg/L 77 mg/L

18 mg/L 23 mg/L 28 mg/L 33 mg/L 3 8 mg/L 43 mg/L 48 mg/L 5 3 mg/L 58 mg/L 63 mg/L 68 mg/L 73 mg/L 78 mg/L

19 mg/L 24 mg/L 29 mg/L 34 mg/L 3 9 mg/L 44 mg/L 49 mg/L 54 mg/L 59 mg/L 64 mg/L 69 mg/L 74 mg/L 79 mg/L

20 mg/L 25 mg/L 30 mg/L 35 mg/L 40 mg/L 45 mg/L 50 mg/L 55 mg/L 60 mg/L 65 mg/L 70 mg/L 75 mg/L 80 mg/L 11 16 21 26 31 36 41 46 51 56 61 66 71 76 81 154254.doc -38· s 201235470 mg/L、82 mg/L、in /t /r 8 83 mg/L、84 mg/L、85 mg/L、86 S 87 mg/L、88 mg/L、89 mg/L、90 mg/L、91 g/L 92 mg/L、93 mg/L、94 mg/L、95 mg/L、％ ' 97 mg/L ^ 98 mg/L ^ 99 mg/L^ 100 mg/L 〇 _虽利用間普林及/或其類似物與苯隆及/或其類似物 夺”可以一定比率納入。舉例而言，間拓普林及/ 5、其類似物與噻苯隆及/或其類似物之量可係I 〇〇: 1、 95.1、9G:1、85:1、8G:1、75M、7():1、65:ι、、 55.1 、 50:1 、 45:1 、 40:1 、 35:1 、 30:1 、 29:1 、 28:1 、 27.1 、 26:1 、 25:1 、 24:1 、 23:1 、 22:1 、 21:1 、 20:1 、 19:1 、 18:1 、 17:1 、 16:1 、 15:1 、 14:1 、 13:1 、 12:1 、 11:1、1〇:1、9:1、8:1、7:1、6.9:1、6.8:1、6.7:1、6.6:1、 6.5:1 、 6.4:1 、 6.3:1 、 6.2:1 、 6.1:1 、 6:1 、 5.9:1 、 5.8:1 、 5.7:1 、 5.6:1 、 5.5:1 、 5.4:1 、 5.3:1 、 5.2:1 、 5.1:1 、 5:1 、 4:1、3··1、2:1、1:1、0.75:1、0.5:1、0.25:1、0 w、 〇·〇75:1、〇.〇5:1、〇·〇25:1或0.001:1。當使用間拓普林與嗔 苯隆二者時，其可存在於相同或不同培養基中。 同樣，ΝΑΑ、ΒΑΡ、2ip及/或IBΑ可以以下量存在： 0.001 mg/L ' 0.01 mg/L、0.1 mg/L、1 mg/L、2 mg/L、3 mg/L、3.1 mg/L、3·2 mg/L、3.3 mg/L、3.4 mg/L、3 5 mg/L、3.6 mg/L、3.7 mg/L、3.8 mg/L、3.9 mg/L、4 mg/L ' 4.1 mg/L ' 4.2 mg/L ' 4.3 mg/L ' 4.4 mg/L ' 4 5 mg/L、4.6 mg/L、4.7 mg/L、4.8 mg/L、4.9 mg/L、5 mg/L、5.1 mg/L、5.2 mg/L、5.3 mg/L、5.4 mg/L、5 5 154254.doc -39- 201235470 mg/L、5.6 mg/L、5.7 mg/L、5.8 mg/L、5.9 mg/L、6 mg/L、6.1 mg/L、6.2 mg/L、6.3 mg/L、6.4 mg/L、6.5 mg/L、6.6 mg/L、6.7 mg/L、6.8 mg/L、6.9 mg/L、7 mg/L、7.1 mg/L、7.2 mg/L、7.3 mg/L、7.4 mg/L、7.5 mg/L、7.6 mg/L、7.7 mg/L、7.8 mg/L、7.9 mg/L、8 mg/L、9 mg/L、10 mg/L、11 mg/L、12 mg/L、13 mg/L、 14 mg/L、15 mg/L、16 mg/L、17 mg/L、18 mg/L、19 mg/L、20 mg/L、21 mg/L、22 mg/L、23 mg/L、24 mg/L、25 mg/L、26 mg/L、27 mg/L、28 mg/L、29 mg/L、30 mg/L、31 mg/L、3 2 mg/L、33 mg/L、34 mg/L、35 mg/L、36 mg/L、37 mg/L、38 mg/L、39 mg/L、40 mg/L、41 mg/L、42 mg/L、43 mg/L、44 mg/L、45 mg/L、46 mg/L、47 mg/L、48 mg/L、49 mg/L、50 mg/L、51 mg/L、52 mg/L、53 mg/L、54 mg/L、5 5 mg/L、56 mg/L、57 mg/L、58 mg/L、59 mg/L、60 mg/L、61 mg/L、62 mg/L、63 mg/L、64 mg/L、65 mg/L、66 mg/L、67 mg/L、68 mg/L、69 mg/L、70 mg/L、71 mg/L、72 mg/L、73 mg/L、74 mg/L、75 mg/L、76 mg/L、77 mg/L、78 mg/L、79 mg/L、80 mg/L、81 mg/L、82 mg/L、83 mg/L、84 mg/L、85 mg/L、86 mg/L、87 mg/L、88 mg/L、89 mg/L、90 mg/L、91 mg/L、92 mg/L、93 mg/L、94 mg/L、95 mg/L、96 mg/L、97 mg/L、98 mg/L、99 mg/L 或 100 mg/L、或 0.001 mg/L、0.01 mg/L、0.025 mg/L、 -40- 154254.doc s 201235470 0.05 mg/L、0.075 mg/L、0.1 mg/L、0_15 mg/L、0.2 mg/L、0.25 mg/L、0.3 mg/L、0.35 mg/L、0.4 mg/L、0.45 mg/L、0.5 mg/L、0.55 mg/L、0.6 mg/L、0.65 mg/L、0.7 mg/L、0.75 mg/L、0.8 mg/L、0.85 mg/L、0.9 mg/L、0.95 mg/L、1.0 mg/L、1.25 mg/L、1.50 mg/L、1.75 mg/L、 2.25 mg/L ' 2.5 mg/L ' 2.75 mg/L ' 3.5 mg/L > 4.5 mg/L ' 5 mg/L、6 mg/L、7 mg/L、8 mg/L、9 mg/L、10 mg/L、11 mg/L、12 mg/L、13 mg/L、14 mg/L、15 mg/L、16 mg/L、17 mg/L、18 mg/L、19 mg/L、20 mg/L、21 mg/L、22 mg/L、23 mg/L、24 mg/L、25 mg/L、26 mg/L、27 mg/L、28 mg/L、29 mg/L、30 mg/L、31 mg/L、32 mg/L、3 3 mg/L、34 mg/L、35 mg/L、36 mg/L、37 mg/L、38 mg/L、39 mg/L、40 mg/L、41 mg/L、42 mg/L、43 mg/L、44 mg/L、45 mg/L、46 mg/L、47 mg/L、48 mg/L、49 m.g/L、50 mg/L、51 mg/L、52 mg/L、53 mg/L、54 mg/L、55 mg/L、56 mg/L ' 57 mg/L、58 mg/L、59 mg/L、60 mg/L、61 mg/L、62 mg/L、63 mg/L、64 mg/L、65 mg/L、66 mg/L、67 mg/L、68 mg/L、69 mg/L、70 mg/L、71 mg/L、72 mg/L、73 mg/L、74 mg/L、75 mg/L、76 mg/L、77 mg/L、78 mg/L、79 mg/L、80 mg/L、81 mg/L、82 mg/L、83 mg/L、84 mg/L、85 mg/L、86 mg/L、87 mg/L、88 mg/L、89 mg/L、90 mg/L、91 mg/L、92 mg/L、93 mg/L、94 mg/L、95 mg/L、96 -41 - 154254.doc 201235470 mg/L、97 mg/L、98 mg/L、99 mg/L或 100 mg/L。 上文已提供包括間拓普林及噻苯隆在内的眾多化合物之 結構或式《熟習此項技術者應認識到，所提及化合物應廣 泛理解為包括所繪示結構或化學名稱之化學實體之醫藥上 可接受之鹽、前藥、互變異構體、替代固體形式、非共價 複合物、類似物、衍生物及其組合。 醫藥上可接受之鹽係適用於本文所揭示方法中之母體化 合物之任一鹽。醫藥上可接受之鹽亦係指可因投與酸、另 —鹽或轉化為酸或鹽之前藥而形成的任—鹽。鹽包含化合 物之一或多種離子形式（如：共軛酸或共扼鹼）與一或多種 相應抗衡離子結合。可自一或多種去質子化酸性基團（例 如羧酸）、一或多種質子化鹼性基團（例如胺）、或二者（例 如兩性離子）形成鹽或納入該等基團。 不也·又上述化合物限制，上述化合物之各種互變異構體 均有可能。本文所用「互變異構體」係指f子在鄰接單鍵 與雙鍵之間之遷移。互變異構化係可逆的過程。當化合物 包括（例如但不限於）烯醇基團、酮基團、 、内酿胺基團、酿

在兩個鍵長之間以共振方式分配。

154254.doc -42- 201235470 同種類之非晶固體形式、玻璃及諸如此類。 非共價複合物係可在化合物與一或多種其他化學物質之 間形成的複合物’其不涉及化合物與其他化學物質之間的 共價鍵結相互作用。其在化合物與其他化學物質之間可或 可不具有特定比率。實例可包括溶劑合物、水合物、電荷 轉移複合物及諸如此類。 概。之，在典型微繁殖中，將植物置於刺激生理過程 (如植物及/或植物内之生長及增殖）之各種培養基中。通 吊β亥方法包括3個步驟（在下文所述外植體製備及消毒 後）·（1)在培養基中起始外植體之活體外生長及/或增殖； (2)在第二培養基中進一步進行活體外增殖；及（3)過渡至 试官外條件。然而，並非每一組織培養方法均需要每一步 驟，且在某些方法中，可組合或跳過步驟。舉例而言，儘 管在步驟1與2之間培養基類型冑常會有所變化，但在某些 實施例中，並不包括培養基變化。在其他方法中，植物可 能無需促進過渡至試管外條件之特定步驟，而是在支持增 殖之相同培養基中完成此方法。因此，如本文所述，可將 培養基定義為階段1培養基（該方法之第！培養基卜階段2培 養基（該方法之第2培養基）；階段3培養基（該方法之第3 = 養基）等。在特定方法中，特定培養基可基於步驟數來改 變階段’且其巾該特定培養基保留其順序。 為開始該方法，可獲得或製備階段丨培養基。階段丨培養 基包括通常適宜植物之pH(通常為4 〇·7 〇或4 5_6 5)。隨後 將階段1培養基置於試管或其他適當容器（包括缸、各、 154254.doc •43· 201235470 罐、杯等，其中當不指定時統稱為「管」）中。可將該等 管加蓋或覆蓋’並實施高壓釜處理，以對管及培養基進行 滅菌。在另一實施例中，滅菌係藉由在2〇〇卞下以5至25磅 Μ力（psi)高塵爸處理10至25分鐘來達成。在另一實施例 中’滅菌係藉由在250°F之溫度下’以15磅壓力（psi)高壓 蚤處理15至18分鐘來達成。亦可藉由每一百個管中可接受 之污染管數量來評估無菌性，例如（但不限於）〇個污染管/ 100管 '不超過^固污染管/100管、不超過2個污染管/1〇〇 管、不超過3個污染管/100管、不超過4個污染管/1〇〇管、 不超過5個污染官/100管、不超過6個污染管/1〇〇管、不超 過7個污染管/1〇〇管、不超過8個污染管/1〇〇管、不超過9個 污染管/100管、不超過10個污染管/1〇〇管等。 在含有膠凝劑（例如瓊脂、瓊脂糖、結蘭膠、角叉 或其組合）之培養基中，培養基在冷卻後固化且用以向微 營養素、生長調節劑、水及其他

繁殖植物組織提供擔體、營養 化合物’如下文所述。通常， 基，而盒含有40-50 mL培暴A

154254.doc -44- 201235470 植體取自2歲齡竹子植物。在另一實施例中，外植體取自5 歲齡或更年幼之竹子植物。在另一實施例中，外植體取自 4歲齡或更年幼之竹子植物。在另一實施例中，外植體取 自3歲齡或更年幼之竹子植物。在另一實施例中，外植體 取自2歲齡或更年幼之竹子植物。在另一實施例中，外植 體取自1歲齡或更年幼之竹子植物。在另一實施例中，外 植體取自6個月齡或更年幼之竹子植物。在另一實施例 中，外植體取自3個月齡或更年幼之竹子植物。獲得外植 體之竹子可在任一適宜耕作環境中生長，包括（但不限於） 在生長室中生長、在溫室或在田野中生長。 如熟習此項技術者所應瞭解，可根據本發明使用多種適 當外植體。在本發明之某些實施例中，可使用來自莖之不 成熟結節部分作為外植體材料。在一個實施例十，外植體 可係側枝剛剛在結節部分處破鞘之新生長莖。新生長莖包 括彼等在當季或當年内自植物獲得者，其中該等新生長莖 可自植物上之任一結節獲得。在一個特定實施例中 體材料包括或限於莖基部之第三結節。 可將結節部分切割成具有完整幼芽之3_5毫米、卜10毫 米、2-9毫米、3-8毫米、4-6毫米、3_6赛半七 J 6毫未或2-7毫米部 分，且消毒以去除外植體外部上之病原體。可使用業内已 知之任一、;肖毒方法。例示性消毒方法包括應用消毒劑（例 如選自以下之消毒劑：漂白劑（次氯酸納及/或次氯酸卸及/ 或次氣酸約）、醇（例如，乙醇、異丙醆 ，、、 臭氧、氯氣、礙 >谷液或抗生素或彳/t真菌溶液或其纟且人 、’且》)、或使外植體之暴 I54254.doc •45- 201235470 露表面短時間經受紫外光或-20°C或更低之溫度或高於 4 0 C或5 0 C之溫度處理。在某些實施例中，可將少量（幾 滴）Tween 2〇添加至消毒溶液中。 在初始消毒後’可剝除並棄去外鞘並將剩餘塊放置於約 1%、5%、10°/〇、15%、20%、25%或 3 0%市售漂白劑溶液 或相似消毒溶液中。可將存於消毒溶液中之去皮外植體放 置於振盪台（例如實驗室旋轉器（速度可調之Barnstead/Lab line定軌振盪器）’型號KS 260)上以每分鐘6至9轉或1轉、 2轉、3轉、4轉、5轉、6轉、7轉、8轉、9轉、1〇轉、“或 12轉、13轉、14轉或15轉維持1〇分鐘、20分鐘、30分鐘、 60分鐘、90分鐘、120分鐘、150分鐘、180分鐘或210分 鐘。在另一實施例中，隨後可將去皮外植體放置於約1〇/〇 漂白劑溶液或相似消毒溶液中，且重新置於振盪臺上維持 30分鐘。在另一實施例中’可重複此1%漂白劑或相似消 毒溶液步驟。在另一實施例中，該等所述步驟係漸進的且 包括整個消毒過程。如熟習此項技術者所應瞭解，可根據 本發明使用多種適當消毒程序。 在消毒後’可將外植體置於管内之階段1培養基上且可 將管置於經調節生長室中。本文所用「生長室」可包括眾 多組態及尺寸，包括臺式盒、單獨室、壁櫥、小房間、大 房間等。如熟習此項技術者所瞭解，可適當地控制此生長 室中之諸如光或溫度等變量β組織培養竹子之適當範圍包 括在200-500英尺、150-550英尺或100-600英尺燭光下 65°F-70°F、60°F-75°F 或 55°F-80°F。照明可係全光譜，但 •46· 154254.doc

S 201235470 亦可根據本發明利用替代照明系統。 可在管内同時在生長室中於階段1培養基上建立外植體 自身。在更常見的3階段組織培養中，在建立（即生長且無 可見污染）後，將自外植體生長之細胞培養物轉移至第二 (階段2)培養基中。或者，在建立後，細胞培養物可保留在 階段1培養基中。在組織培養過程中之此階段，可在相對 較短時間内產生大量植物，此乃因每一細胞培養物均可產 生多個幼芽且可將每一幼芽分離並置於個別管中，其中該 幼芽將產生其他幼芽用以分離及增殖。 不將培養基限定於特定階段，常用作階段1及/或階段2 培養基之培養基的非限制性實例包括： 培養基 b-12c(i-v): 組份(除非另有說 明，否則均以mg/L 計） b-12c-i b-12c-ii b-12c-iii b-12c，iv b-12c-v NH4N〇3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 kno3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 Ca(N〇3)2 225-775 410-690 495-605 550 550±2 MgS〇4 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6 土 0.2 CuS04 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 kh2p〇4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 154254.doc -47- 201235470 組份(除非另有說 明，否則均以mg/L 計） b-12c-i b-12c-ii b-12c-iii b-12c-iv b-12c-v FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7 土 0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0·05±·02 BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 噻苯隆 0.36-1.12 0.56-0.94 0.67-.083 0.75 0.75±.02 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5.5±0.2 培養基CW2(i-v): 組份 CW2-i CW2-ii CW2-iii CW2-iv CW2-v nh4no3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 kno3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900士 2 Ca(N03)2 225-775 410-690 495-605 550 550±2 MgS〇4 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS04 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6±0.2 CuS〇4 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 kh2po4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 154254.doc -48- 201235470 組份 CW2-i CW2-ii CW2-iii CW2-iv CW2-v 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0.05±.02 BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5.5±0.2 培養基CW3(i-v): 組份 CW3-i CW3-ii CW3-iii CW3-iv CW3-v NH4NO3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 KN〇3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 Ca(N03)2 225-775 410-690 495-605 550 550±2 MgS〇4 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6±0.2 CuS〇4 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo04 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 KH2PO4 85-255 120-210 150-190 170 170 士 2 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7 士 0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100 土 2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.05-0.15 0.07-0.12 0.09-0.11 0.1 0.1 士 0.02 BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 IBA 0.1-0.3 0.15-0.25 0.17-0.22 0.2 0.2 士 0.1 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5·5±0.2 154254.doc •49- 201235470 培養基b-9(i-v): 組份 b-9-i b-9-ii b-9-iii b-9-iv b-9-v NH4N〇3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 KN〇3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 MgS〇4 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6±0.2 C11SO4 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440士 2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 KH2PO4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0.05±.02 BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 噻苯隆 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5.5±0.2 培養基CW4(i-v): 組份 CW4-i CW4-ii CW4-iii CW4-iv CW4-v NH4NO3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 KN〇3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900士2 MgS〇4 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 154254.doc •50-

S 201235470 組份 CW4-i CW4-ii CW4-iii CW4-iv CW4-v ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6±0.2 CuS〇4 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025士.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 ΚΙ 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 KH2PO4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.05-0.15 0.07-0.12 0.09-0.11 0.1 0.1±0.02 BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1 士 0.2 IBA 0.1-0.3 0.15-0.25 0.17-0.22 0.2 0.2±0.1 噻苯隆 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5.5±0.2 培養基CWl(i-v): 組份 CWl-i CWl-ii CWl-iii CWl-iv CWl-v NH4NO3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 KN〇3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 MgS〇4 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6±0.2 CuS〇4 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025士.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 C0CI2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 154254.doc •51- 201235470 組份 CWl-i CWl-ii CWl-iii CWl-iv CWl-v Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 KH2PO4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0.05±.02 BAP 0.5 - 1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5.5±0.2 石夕溶液mL 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 培養基CW5(i-v): 組份 CW5-i CW5-ii CW5-iii CW5-iv CW5-v NH4NO3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650士2 kno3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 MgS04 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6 土 0.2 CuS〇4 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 C0CI2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25 士.02 KH2PO4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100 士 2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0.05 士.02 154254.doc -52- s 201235470 組份 CW5-i CW5-ii CW5-iii CW5-iv CW5-v BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0_2 IBA 0.1-0.3 0.15-0.25 0.17-0.22 0.2 0.2±0.1 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5.5 士 0.2 梦溶液mL 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 培養基CW6(i-v): 組份 CW6-1 CW6-ii CW6-iii CW6-iv CW6-v nh4no3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 kno3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 MgS04 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS04 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6 士 0.2 CuS04 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 kh2p〇4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 k2s〇5 181.85-545.63 272.80-454.69 327.45-400.05 363.75 363.75±.02 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.05-0.15 0.07-0.12 0.09-0.11 0.1 0.1±0.02 BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0_2 IBA 0.1-0.3 0.15-0.25 0.17-0.22 0.2 0.2±0.1 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 噻苯隆 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5.5±0.2 154254.doc •53- 201235470 培養基 b-10(i-v): 組份 b-10-i b-10-ii b-10-iii b-10-iv b-10-v NH4N〇3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 KN〇3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 MgS04 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6±0.2 CuS〇4 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 kh2p〇4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS04 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0.05±.02 BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 培養基 b-1 l(i-v): 組份 b-ll-i b-ll-ii b-ll-iii b-ll-iv b-ll-v NH4NO3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 kno3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 MgS04 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS04 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6士 0.2 CuS04 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 ·54· 154254.doc s 201235470 組份 b-ll-i b-ll-ii b-ll-iii b-ll-iv b-ll-v CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440士 2 ΚΙ 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2土0_2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 kh2p〇4 85-255 120-210 150-190 170 170 士 2 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7 士 0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6 土 0.2 Na2H2P04 85-255 120-210 150-190 170 170±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±0.2 NAA 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0.05 士 .02 BAP 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 噻苯隆 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 間拓普林 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5.5±0.2 培養基b-l(i-v): 組份 b-l-i b-l-ii b-l-iii b-l-iv b-l-v nh4no3 600-1800 900-1500 1080-1320 1200 1200±2 Ca(N〇3)2 838-2515 1257-2096 1510-1844 1677 1677±2 k2s〇4 121-363 181-302 218-266 242 242±2 MgS〇4 270-830 410-690 500-610 555 555±2 MnS〇4 12.60-38.00 19.00-31.70 22.80-27.80 25.35 25.35±.02 ZnS〇4 6.4-19.5 9.6-16.2 11.5-14.0 12.9 12.9 土 0.2 CuS〇4 0.018-0.055 0.027-0.046 0.033-0.041 0.037 0.037±0.002 CaCl2 48-144 72-120 85-105 96 96±2 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 KH2PO4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS04 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 154254.doc -55- 201235470 組份 b-1-i b-1-ii b-1-iii b-1-iv b-1-v Na2H2P04 42-128 63-106 75-95 85 85±2 肌醇 100-300 150-250 180-220 200 200±2 硫胺素 0.4-1.4 0.6-1.1 0.8-1.0 0.9 0.9±0.2 〇比多辛 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0·5±0·2 煙酸 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0·2 , 甘胺酸 1-3 1.5-2.5 1.75-2.25 2 2±1 核黃素 10-30 15-25 18-22 20 20±2 BAP 0.1-0.3 0.15-0.25 0.17-0.22 0.2 0.2 士 0·1 NAA 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 噻苯隆 0.36-1.12 0.56-0.94 0.67-.083 0.75 0.75±.02 2ip 7-23 11-19 13-17 15 15±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 角叉菜膠g/L 3-11 4-10 5-8 7 7士 2 培養基 b-4(i-v) ·· 組份 b-4-i b-4-ii b-4-iii b-4-iv b-4-v ΝΗ4ΝΟ3 600-1800 900-1500 1080-1320 1200 1200±2 Ca(N〇3)2 838-2515 1257-2096 1510-1844 1677 1677±2 K2s〇4 121-363 181-302 218-266 242 242±2 MgS〇4 270-830 410-690 500-610 555 555±2 MnS〇4 12.60-38.00 19.00-31.70 22.80-27.80 25.35 25.35±.02 ZnS04 6.4-19.5 9.6-16.2 11.5-14.0 12.9 12.9±0.2 CuS04 0.018-0.055 0.027-0.046 0.033-0.041 0.037 0.037±.002 CaCl2 48-144 72-120 85-105 96 96±2 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25 土 .02 KH2PO4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS〇4 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P〇4 42-128 63-106 75-95 85 85±2 肌醇 100-300 150-250 180-220 200 200±2 硫胺素 0.4-1.4 0.6-U 0.8-1.0 0.9 0.9±0.2 。比多辛 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 154254.doc •56- 201235470 組份 b-4-i b-4-ii b-4-iii b-4-iv b-4-v 煙酸 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 甘胺酸 1-3 1.5-2.5 1.75-2.25 2 2±1 核黃素 10-30 15-25 18-22 20 20±2 ΒΑΡ 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 ΝΑΑ 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 噻苯隆 0.36-1.12 0.56-0.94 0.67-.083 0.75 0.75±.02 2ip 10-30 15-25 18-22 20 20±2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 角叉菜膠g/L 3-11 4-10 5-8 7 7±2 培養基b-6(i-v): 組份 b-6-i b-6-ii b-6-iii b-6-iv b-6-v nh4no3 600-1800 900-1500 1080-1320 1200 1200±2 Ca(N03)2 838-2515 1257-2096 1510-1844 1677 1677±2 K2S04 121-363 181-302 218-266 242 242±2 MgS〇4 270-830 410-690 500-610 555 555±2 MnS〇4 12.60-38.00 19.00-31.70 22.80-27.80 25.35 25.35±.02 ZnS〇4 6.4-19.5 9.6-16.2 11.5-14.0 12.9 12.9±0.2 CuS〇4 0.018-0.055 0.027-0.046 0.033-0.041 0.037 0.037±.002 CaCl2 48-144 72-120 85-105 96 96±2 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±.02 kh2p〇4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS04 27.0-84.0 40.0-70.0 50.0-60.0 55.7 55.7±0.2 Na2EDTA 37.0-112.0 55.0-94.0 67.0-82.0 74.6 74.6±0.2 Na2H2P04 42-128 63-106 75-95 85 85±2 肌醇 100-300 150-250 180-220 200 200±2 硫胺素 0.4-1.4 0.6-1.1 0.8-1.0 0.9 0.9±0.2 0比多辛 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 煙酸 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 甘胺酸 1-3 1.5-2.5 1.75-2.25 2 2±1 核黃素 10-30 15-25 18-22 20 20±2 NAA 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.2 154254.doc ·57· 201235470 組份 b-6-i ----- b-6-ii b-6-iii 噻苯隆 0.12-0.36 0.18-0.31 22- 9R 0.25 b-6-v 0.25±.02 2ip 2.5-7.5 3.7-6.2 .^〇 4.5-5.5 5 糖g/L 12-37 15-35 20-30 — .19:6.1 1 _25 5士 2 25±2 瓊脂g/L 2.7-8.2 ---- 4.1-6.8 5.5 5‘5±0.2 角叉菜膠g/L 1-3 1.5-2.5 1.75-2 ] 〇 2±1 去除瓊脂或鹿角菜膠將每—捭羞其絲 培養基轉化為液體培養基且該 等培養基之液體形式及其用途明確包括在本發明範圍内。 7 a心因體形式。可藉由 預期幼芽數在組織培養過程之不同階段可不同且亦可端 視竹種而定。然而，一般而令 & 73又叩》，在该過程開始時，增殖次 數紅0-2.0、⑷.0或WO。在確立後，增殖可端視所 選容器而冑。舉例而言，增殖範圍可為（但不限於）卜1〇或 2-6株植物/管、Μ5或4_9株植物/紅、HQ或μ?株植物/ 盒或1-50或20-35株植物/罐。包括數量μ原因在於某些 種或特定細胞培養物在階段丨或階段2培養基中需要更長時 間’然後開始增殖。，然而，藉由對其實施整個過程，大多 數（若非全部）在數個週期内開始增殖。舉例而言，一些細 胞培養物可僅在培養i個月、2個月、3個月、4個月、5個 月、6個月、7個月、8個月、9個月、1〇個月、n個月、12 個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月或18個 月後開始增殖。 本文所揭示方法可自單一外植體產生以下非限制性幼芽 數：100、500、1，000、5,000、1〇 〇〇〇、2〇 〇〇〇、5〇 〇〇〇、 100,000、250,〇〇〇、500,000、75〇 〇〇〇、1〇〇〇 〇〇〇 或更 多0 154254.doc -58 - 201235470 在經由培養及傳代培養增殖後，可選擇特定植物幼芽以 過渡至試管外條件。通常，支持過渡至試管外條件之培養 基代表階段2、階段3、階段4或階段5培養基。此等培養基 之非限制性實例包括： 培養基Ech(i-v): 組份 Ech-i Ech-ii Ech-iii Ech-iv Ech-v NH4N〇3 825-2475 1237-2063 1485-1815 1650 1650±2 kno3 950-2850 1425-2375 1710-2090 1900 1900±2 MgS04 185-555 275-465 330-410 370 370±2 MnS〇4 8.0-26.0 12.0-22.0 15.0-19.0 16.9 16.9±0.2 ZnS〇4 4.0-12.0 6.0-10.0 8.0-9.0 8.6 8.6 土 0.2 CuS04 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 CaCl2 220-660 330-350 400-480 440 440±2 K1 0.40-1.25 0.60-1.05 0.75-0.90 0.83 0.83±.02 CoCl2 0.012-0.378 0.020-0.030 0.022-0.028 0.025 0.025±.002 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2 士 0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25±·02 kh2p〇4 85-255 120-210 150-190 170 170±2 FeS〇4 13.0-42.0 20.8-34.7 25.1-30.5 27.8 27.8±0.2 Na〗EDTA 18.6-56.0 28.0-46.6 33.6-41.0 37.3 37.3±0.2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.35-0.45 0.4 0.4±0.2 〇比多辛 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5 士 0.2 煙酸 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 甘胺酸 1-3 1.5-2.5 1.75-2.25 2 2士 1 NAA 0.05-0.15 0.07-0.12 0.09-0.11 0.1 0·1±0·02 IAA 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0.05±.02 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30士2 瓊脂g/L 2.7-8.2 4.1-6.8 4.9-6.1 5.5 5·5±0·2 154254.doc -59- 201235470 培養基 BR-2(i-v): 組份 BR-2-i BR-2-ii BR-2-iii BR-2-iv BR-2-v NH4N03 700-2100 1050-1750 1260-1540 1400 1400±2 Ca(N03)2 973-2919 1459-2433 1752-2140 1946 1946±2 K2SO4 606.3-1818.8 909.4-1515.6 1091.5-1333.5 1212.5 1212.5±0.2 MgS〇4 370-1110 555-925 665-815 740 740±2 MnS〇4 16.9-50.7 25.4-42.3 30.5-37.1 33.8 33.8±0.2 ZnS〇4 8.6-25.8 12.9-21.5 15.5-18.0 17.2 17.2±0.2 CuS〇4 0.02 - 0.08 0.03-0.07 0.04-0.06 0.05 0.05±.02 CaCl2 72-216 108-180 130-158 144 144±2 H3BO3 3.0-9.0 4.0-8.0 5.0-7.0 6.2 6.2±0.2 Na2Mo〇4 0.12-0.36 0.18-0.31 .22-.28 0.25 0.25 土 .02 kh2p〇4 72-342 202-338 243-297 270 270±2 FeS〇4 16.68-50.04 25.02-41.70 30.06-36.66 33.36 33.36±.02 Na2EDTA 22.38-67.14 33.57-55.95 40.36-49.16 44.76 44.76±.02 肌醇 100-300 150-250 180-220 200 200±2 硫胺素 0.4-1.4 0.6-1.2 0.8-1.0 0.9 0.9±0.2 。比多辛 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 煙酸 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 甘胺酸 1-3 1.5-2.5 1.75-2.25 2 2±1 核黃素 10-30 15-25 18-22 20 20±2 抗壞血酸 50-150 75-125 90-110 100 100±2 NAA 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0_5 士 0.2 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 角叉菜膠g/L 4-12 6-10 7-9 8 8±2 木炭g/L 150-450 220-370 270-330 300 300±2 培養基 Amel(i-v): 組份 Amel-i Amel-ii Amel-iii Amel-iv Amel-v NH4NO3 410-1240 620-1030 740-910 825 825±2 Ca(N〇3)2 475-1425 710-1190 855-1045 950 950±2 MgS〇4 90-280 140-230 160-200 185 185±2 MnS〇4 4.20-12.70 6.30-10.60 7.65-9.25 8.45 8.45 士.02 154254.doc •60· 201235470 組份 Amel-i Amel-ii Amel-iii Amel-iv Amel-v ZnS04 2.0-6.5 3.0-5.5 3.5-5.0 4.3 4.3±0.2 CuS〇4 .0062-.0188 .0094-.0156 .0115-.0135 0.0125 0.0125 ±.0002 CaCl2 110-330 165-285 195-240 220 220±2 ΚΙ .207-.623 .310-.520 .375-.455 0.415 0.415 ±.002 η3βο3 1.5-4.6 2.3-4.0 2.8-3.4 3.1 3.1±0.2 CaCl2 .0062-.0188 .0094-.0156 .0115-.0135 0.0125 0.0125 ±.0002 Na2Mo〇4 .062-.188 .093-.157 .115-.135 0.125 0.125 ±.002 ΚΗ2Ρ〇4 40-130 60-110 75-95 85 85±2 FeS〇4 6.8-20.9 10.4-17.5 12.5-15.5 13.9 13.9±0.2 Na2EDTA 9.32-27.98 13.95-23.35 16.85-20.45 18.65 18.65±.02 Na2H2P04 40-130 60-110 75-95 85 85±2 肌醇 50-150 75-125 90-110 100 100±2 硫胺素 0.2-0.6 0.3-0.5 0.36-0.44 0.4 0.4±.2 。比多辛 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 煙酸 1-3 1.5-2.5 1.75-2.25 2 2±1 核黃素 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 NAA 0.2-0.8 0.3-0.7 0.4-0.6 0.5 0.5±0.2 IBA 0.5-1.5 0.7-1.3 0.9-1.1 1 1±0.5 糖g/L 15-45 22-37 27-33 30 30±2 瓊脂g/L 1.5-4.5 2.0-4.0 2.5-3.5 3 3±2 角叉菜膠g/L 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5±2 木炭g/L 2.5-7.5 3.7-6.2 4.5-5.5 5 5士2 在過渡至試管外條件期間，可將幼芽及培養基置於透氣 或不透氣容器中。 在本文所述方法、系統或套組中，本文所述培養基中之 每一者均可與每一其他培養基組合使用。此外，培養基可 以大於2之組合進行組合（例如，套組可包括本文所提供不 154254.doc •61 · 201235470 同培養基中之2者，或包括本文所提供不同培養基中之3 者’或包括本文所述不同培養基中之3者以上）。儘管本文 未明確闡述每一可能的組合，但熟習此項技術者應瞭解， 本發明支持所有可能的組合。 在過渡至試管外條件後，但在將植物置於土壤令、或暴 露於較少調控之生長條件前，植物可經受一系列經設計以 使其適應未經調控之生長環境之處理。此係由於一些植物 在微培育時’未產生足夠防禦結構（例如用蠟質角質層）來 保護其免受一般環境條件影響。植物在置於未經調控之環 境前可經受之處理可包括（但不限於）濕度適應、溫度變化 適應及風壓適應。可逐漸地及/或以交錯方式引入該等適 應因素。 適合與本發明一起使用之代表性竹子屬包括：酸竹屬 (Acidosasa)、懸竹屬（Ampelocalamus)、青籬竹屬 (Arundinaria)、簕竹屬（Bambusa)、巴山木竹屬（Bashania)、 柏瑞達竹屬（Borinda)、短穗竹屬（Brachystachyum)、空竹 屬（Cephalostachyum)、方竹屬（Chimonobambusa)、香竹屬 (Chimonocalamus)、秋竹屬（Chusquea)、牡竹屬 (Dendrocalamus)、藤竹屬（Dinochloa)、鐮序竹屬 (Drepanostachyum)、俄米竹屬（Eremitis)、箭竹屬 (Fargesia)、貢山竹屬（Gaoligongshania)、巨竹屬 (Gigantochloa)、 瓜多竹屬（Guadua)、 陰陽竹屬 (Hibanobambusa)、喜馬拉雅筱竹屬（Himalayacalamus)、箸 竹屬（Indocalamus)、大節竹屬（Indosasa)、李薩克竹屬 154254.doc -62-

S 201235470 (Lithachne)、梨藤竹屬（Melocalamus)、梨竹屬 (Melocanna)、月月竹屬（Menstruocalamus)、狹葉竹屬 (Nastus)、李海竹屬（Neohouzeaua)、尼羅巴竹属（Neololeba)、 奥克蘭竹屬（Ochlandra)、少穗竹屬（Oligostachyum)、奥美 加竹屬（Olmeca)、奧塔竹屬（Otatea)、漢竹屬（Oxytenanthera)、 剛竹屬（Phyllostachys)、苦竹屬（Pleioblastus)、矢竹屬 (Pseudosasa)、 瑞迪竹屬（Raddia)、扇枝竹屬 (Rhipidocladum)、沙羅卡拉竹屬（Sarocalamus)、赤竹屬 (Sasa)、東琶竹屬（Sasaella)、華菩竹屬（Sasamorpha)、思 勞竹屬（Schizostachyum)、業平竹屬（Semiarundinaria)、倭 竹，屬（Shibataea)、唐竹屬（Sinobambusa)、筱竹屬 (Thamnocalamus)、泰竹屬（Thyrsostachys)及玉山竹屬 (Yushania) 〇 該等屬内之種之非限制性實例包括： 酸竹屬：黃甜竹五ί/Μ/ζ·ί) 银竹 Μ ..技 W {Ampelocalamus Scandens) 青籬竹屬：阿巴拉契亞青籬竹（drwwc/z'warM appalachiana)、小餘竹（Arundinaria funghomii)、大 I 綠 竹、梅肯大青籬竹（Jrw«心'Macon')及軟條青 ^ (Arundinaria Tecta) 练竹屬••安怪簕竹（Bambusa arnhemica)、巴苦竹 [Bambusa balcooa)、印复簕竹（Bambusa bambos)、爲竹 [Bambusa basihirsuta)、吊终、綠竹[Bambusa beecheyana)、 ^ ^ (Bambusa beecheyana var pubescens)、裔竹[Bambusa 154254.doc -63- 201235470 blumeana)、媽竹{Bambusa boniopsis)、織旬竹（Bambusa fewrmam’ciz)、粉單竹c/iw«gz’z·)、粉單竹巴布拉塔 變種var. Barbelatta)、牛角竹 cornigerii)、乳熱 ％ {Bambusa dissimulator)、白苟熱的 {Bambusa 山·jhwM/aior 'Albinodia’）、料慈竹 d/ijieg/α)、長枝竹（^SamZ^Msa do/ic/zoc/fli/a)、條紋長枝竹 (jBam6wia i/o"cAoc/ai/a ’Stripe1)、綠條紋孝順竹（·βαΑη6Μ·5α dolichomerithalla 'Green stripe’）、銀條紋孝順竹（·βα/η6Μία dolichomerithalla 'Silverstripe')、黃毛竹(Bambusa emeiensis 'Chrysotrichus')、：K 琴綠、的{Bambusa emeiensis ’Flavidovirens’）、金絲慈竹’Viridiflavus’）、 大目艮竹eutuldoides)、黃絲、令的{Bambusa ewiw/i/oz’des 'Viridivittata')、泥竹（5<3»ι6Μία 、馬來翁 Ή (Bambusa glaucophylla) ' ^ ^ (Bambusa intermedia) ' *ί* 久黑竹（Bambusa lako)、法戴竹{Bambusa lapidea)、H 馬 竹{Bambusa longispiculata)、斑款熱竹（Bambusa maculata)、 馬尊竹（Bambusa malingensis)、考順竹（Bambusa multiplex)、 花孝順竹wM/i/p/ex ’Alphonse Karr’）、小葉琴絲 竹multiplex 'Fernleaf Stripestem')、鳳尾竹 wM/iip/ex ’Fernleaf’）、金色女神孝順竹 ww/i^p/ex 'Golden Goddess’）、金條紋孝順竹 multiplex ’Goldstripe’）、米登裏綠色孝順竹 ’Midori Green’）、觀音竹（5awZ?M5a mw/iip/ex ’Riviereorum')、銀絲竹（5aw6M5a mw/"’/?/ejc ’Silverstripe’）、 -64- 154254.doc s 201235470 小條紋嚴形孝順竹（万awZjwso multiplex 'Tiny Fern Striped’）、小蕨形孝順竹（5aw0Mja wM/iz_p/ex ’Tiny Fern')、 垂柳竹（方multiplex ’WiUowy’）、俯竹（Bambusa nutans)、.％ 網綠竹（Bambusa odashimae)、在甩竹（odashimae X B. Tuldoides)、綠竹、奥氏箱竹、 米篩竹(Bambusa pachinensis、、稽％ 竹{Bambusa pervariabilis)、韋瑞遂斯携％ 竹（Bambusa pervariabilis ’Viridistriatus’）、硬頭黃竹rz·容it/α)、木竹 rM"/a)、車筒竹（jBiZwhia iinoipz’woiaj、翁竹廣 瀨種（方ip. ’Hirose')、簕竹純系 X種fp. 'Clone X')、簕竹奈奈種'Nana')、灰稈竹 {Bambusa sp. 'Polymorpha’）、帕堤歐竹厶wja sp. 'Richard Waldron')、刺竹（Bawhja 、蘇柏瑞 _ 竹（Bambusa suberecta)、黃反竹（Bambusa textilis)、楼 青反竹（Bamhusa textilis 'Dwarf’）、玉竹又（Bambusa textilis 'Kanapaha')、紫斑竹iejciz·//·? ’Maculata’）、黃竹仔 textilis ’Mutabilis')、斯堪頓青皮竹（5amhja iexii/is ’Scranton')、青皮竹斑葉變種（Bawhwsa iexiz7z’5 var. Albostriata)、光竿青皮竹iejcii/z) var. Glabra)、 崖州竹（5aw0Mja iexiz·//·? var. Gracilis)、馬甲竹、條紋馬曱 竹iw/c/α 'Striata')、青竿竹（5aw6w·^ iw/i/oz’i/e5)、 吊綠軍竹（Bambusa variostriata 、佛肚竹（5aw厶 ventricosa)、金终、議董竹（Bambusa ventricosa ’Kimmei')、 龍頭竹、黃金間碧竹、條紋大佛肚竹vw/garb 154254.doc -65- 201235470 'Wamin Striata')及大佛肚竹（万'Warnin’） 巴山木竹屈：巴山木竹Fargah)及飽竹子 {Bashania Qingchengshanensis) 柏瑞達竹屬：尺Λ 5之55、阿佈施柏瑞達竹（5〇r/«i/a d/6ocerea)、狭耳柏瑞達竹（5orzw如J、窄柏 瑞達竹（B〇rifida Contracta)、費吉多柏瑞違竹（Borinda Frz'gz'c/orww)，凡戈柏瑞達竹心厂㈣尽0〜）、白雲凡戈 柏瑞達竹（5c?rz·«如/w«客'White Cloud')、瀘水柏瑞達竹 (J5orki/a 、馬克陸柏瑞達竹（β〇η·«βα

Macciureana)、怒江桕瑞違竹（Borinda Nujicmgensis)、帕 匹銳柏瑞違竹（β〇Ηηίία PaPyHfera)、伯龍柏瑞遠竹 (5orz_«c/<3 尸容α)、柏瑞達竹木裏種（5οη·«ί/α 5/?. 短穩竹屬：短穗竹（万c/ewiz//orMm)及毛環 Μ ^ ^ (Brachystachyum densiflorum var. villosum) 空竹魇·.香魏的（Cephalostachyum pergracile)及金毛隻 Ή- {Cephalostachyum Virgatum) 方竹屬：中間大葉節竹（C/zi/wowofeamZii^a /wcrcrop/z少//α ’Intermedia’、、^ {Chimonobambusa Marmorea) ' 5¾. ^ .^x. 寒竹{Chimonobambusa marmorea 'Variegata')、方竹 {Chimonobambusa Quadrangular is)、尤，蘇 4尹方竹 {Chimonobambusa quadrangular is 'Joseph de Jussieu')、 .11- 4t {Chimonobambusa quadrangularis ’Suow1)、黃才曹 方竹{Chimonobambusa quadrangularis ’Yellow Groove')、 -66- 154254.doc s 201235470 八 Η 竹[Chimonobambusa 及節竹 (Chi mono bam bus a tumidissinoda) 香竹 M ..反夸竹{Chimonocalamus pallens) 秋竹屬··安狄那秋竹（C/zwMwea 、捲耳秋竹 (C/zw^wea 、恰帕斯冠狀捲耳秋竹（C/zMwwea circinata ’Chiapas’ Coronalis)、秋竹（Chusquea culeou)、 阿根廷秋竹cw/eow 'Argentina')、加波秋竹 (C/zwj《wea cw/eow 'Cafia Prieta1)、秋竹希裏爾變型 cw/ei?« 'Hillier's Form·)、庫明秋竹（C/iMigMea Cumingii)、薄葉秋竹（Chusquea Deiicatula)、佛：iL 秋竹 (Chusquea Foliosa)、加列霞秋竹（Chusquea Galeottiana)、 大秋竹（CAwsgrMea 、青秋竹G/awca)、 裏 l 秋竹（Chusquea Liebmannii)、X 息秋竹（Chusquea MacroWac/^a)、米莫秋竹澳洲亞種wz’/wojfl ssp. Australis)、山地秋竹（C/2Mi《wea Μο«ία«α)、穆氏秋竹 (Chusquea Muelleri)、复締秋竹（Chusquea Pittieri)、西姆 秋竹（C/iMWwea Simp/id/'/ora)、秋竹奇孔基亞科種 (Ch叫wea ?/>· 'Chiconquiaco')、秋竹拉斯維加斯種 (Chusquea sp. 'LdiS Vigas')、'\、秋竹（Chusquea Subtilis)、 蘇克塔秋竹（C/zwwwea 5Wcaia)、絨毛秋竹（C/zwigwea

Tomentosa)、‘％ iL 秋竹{Chusquea Uliginosa)、瓦爾秋的 (Chusquea valdiviensis)反維加秋竹（Chusquea Virgata) 牡竹屬：馬來甜龍竹、勿洞黑馬來甜龍竹 (Z)e«办oca/amMiS ’Betung Hitam’）、勃氏甜龍竹、黑勃 154254.doc -67- 201235470 氏甜龍竹（D⑼办’Black’）、勃氏甜龍竹 (雜色«办〇ca/amwi (variegated))、美穗龍竹 {Dendrocalamus Calostachyus)、龍竹、龍竹（奎爾純 % liDendrocalamus giganteus (Quail Clone))、龍竹（雜 ^j){Dendrocalamus giganteus (variegated)) ' J{S. it M 、 建水龍竹（De«droca/amMS 、建水龍竹（雜 色 '^Dendrocalamus jianshuiensis (variegated))、麻竹 (Dendrocalamus latiflorus)、矣濃蘇竹（Dendrocalamus /ai(/7orw·? ’Mei-nung’）、黃竹、吊絲竹 Minor)、花吊絲竹（Ζ>β«(^ο<:α/α/?2Μ·Γ miwor ’Amoenus1)、錫金 龍竹（Z)e«办oca/aww·? 、巨龍竹 iSVm’cws)、牡竹馬魯奇種（Z)e/ii/n9ca/<2/wMi 叹· ’Maroochy')、 牡竹帕克巨型種?/?. ’Parker’s Giant’）、印 度實竹、維迪牡竹⑺e«办Ka/fi/wi)及雲南龍竹 [Dendrocalamus Yunnanicus) 藤竹屬：馬來藤竹（Dhoc/z/oo: 及紫蘀籐竹 {Dinochloa Scandens) 錄序竹屬：錄序竹伸締變種（Drepa/iosiac/^wm /a/caiwm var. sengteeanum)及嗓西鐮序竹{Drepanostachyum Khasianum) 俄米竹屬：俄米竹屬 箭竹屬：貼毛箭竹di/prewa)、阿彼箭竹 (Fargesia 、白龍阿披箭竹 ’White Dragon1)、缺爸箭竹、如發龍頭箭竹 -68- 154254.doc

S 201235470 {Fargesia 办acocep/m/a 'Rufa')、神農箭竹（Fargeha mwrz’e/z’ae)、SABE 939神農箭竹（Far容eha rnwr/e/iae 'SABE 939·)、吸血鬼神農箭竹rnwr/e/ke ’Vampire')、神 農箭竹（下一代幼苗）、華西箭竹（·Ρα7β·5ζ·α 、九寨溝 華西箭竹（Fargeda π"ζ·ί/α 'Jiuzhaigou')、拐棍竹 、坎貝爾拐棍竹（Farge以_α 'Campbell')、臥 龍拐棍竹（Fargeha roijwWa ’Wolong')、箭竹斯卡種 (jpargesz'asp· ’Scabrida')及傘把竹（i^ar#以·α C/ii/b) 貢山竹屬：貢山竹（Gao/z’gowgi/za ⑴·α Me 容 α/οί/ζ>^<3) 色竹 Μ ··黑綠色竹（Gigantochloa Hitam Hijau)、白毛旦 竹{Gigantochloa 、阿帕.斯竹（G/g^wioc/i/oa 、熱帶黑竹（G/gawioc/j/oa airoWo/acea)、黑巨竹 {Gigantochloa d"er)、哈斯卡巨竹（Gz·容 a«ioc/z/oa /Λ3·5ίΛ：αγ/ζ·α«β)、毛筍竹（GigaWoc/z/oa jLevb)、路特斯巨竹 {Gigantochloa Luteostriata)、花巨竹（Gz'gawioc/j/oa Maxima)、H 巨竹（Gigantochloa Pseudoarundinacea)、瑞 德巨竹（G/g^wioc/z/oa 、羅布巨竹 /?ο0Μ·?ία)、巨竹雷卡種（G/gawioc/z/oa j/7 ’Rachel Carson')、 巨竹巴厘白條種（G4a«ioc/z/oa 'Bali White Stripe1)、巨 竹蘇門答臘3751種（G^imioc/ζ/σα 'Sumatra 3751·)、巨 竹維佳3827種（⑺尽⑽ioc/2/οα ip. 'Widjaja 3827·)及瓦伊巨竹 {Gigantochloa Wrayii) 瓜多竹屬：實心瓜多竹、狹葉瓜多竹、雙色狹葉瓜多 竹、少刺狹葉瓜多竹（Gwa<iw<3 awgwsnyb/z'a 丨Less Thorny')、 154254.doc -69- 201235470 查科瓜多竹C/zacoewiz··?)、長葉瓜多竹（Gwai/wa Zo/igi/o/ia)、錐花瓜多竹、瓜多竹黃杆種（Gwfli/wfl ίρ. ’Aureocaulis’）及域毛瓜多竹（Gwadwa Fe/wiz_;ia) 陰揚竹風··德揚竹[Hibanobambusa Tfanquillans)反白故 陰陽竹（·ί^·厶’Shiroshima·) 喜馬拉雅狡竹屬：喜馬拉雅筱竹（奶wa/a>>aca/<3mw5 尸<3/。0狀"/)、大瑪喜馬拉雅後竹（开〜<3/<3>^£?<3/〇；««15/<3/〇0；^"/ ’Damarapa’）、虎克喜馬拉雅筱竹（//Vma/ayaca/aww·? Hookerianus)、爲平喜馬拉雅筱竹（奶wa/ayaca/amwi P/awaiw·?)及坡十喜馬拉雅復竹（^^/wa/ayaca/amw·? Porcaiws) 碁竹屬：都昌碁竹（/«doca/awws Cordaiw·?)、闊葉箬竹 (/«i/ocfl/aww 、河北闊葉箬竹（/Woca/fl/ww latifolius 'H〇Pe^') ' ^ ^ ^ (Indocalamus Longiauritus) ' # 葉竹中田大智種（7«d〇ca/imwi «sp· ’Hamadae’）、箬葉竹實心 種{Indocalamus sp. 'Solidus')、箬竹{Indocalamus 7^M//aiws)及勝利禁竹Kici£?rzfl/i5) 大節竹廣：大節竹（_/>7ί/〇·5<3·5α Οα·^(/7〇Γα)及橄欖竹 {Indosasa Gigantea^ 李薩克竹眉：矮李薩克竹（Z的ac/me //wmi/b) 梨藤竹属：瀾倉梨藤竹（Me/oca/awwi JrreciM·?) # 竹 >S : # ^ {Melocanna Baccifera) 月月竹廣：月月竹(Me«5irM〇ca/i3!7MW5 狹葉竹肩：厄拉狹葉竹（Wasiwj五/αί«5) 车海竹搔·· Mekongensis

154254.doc S 201235470 尼羅巴竹屬：黑色尼羅巴竹dira) 奥克蘭竹屬：斯都奥克蘭竹（Oc/z/flwi/rof iS7rz_i/M/a) 少稳竹屬：屏南少穗竹（0/&〇iiac/2_yww G/aftreice”·?） 奥美加竹屬：直立奥美加竹（O/meca i?.ecia) 奥塔竹屬：米卻肯銳葉奥塔竹（Οίαίβα aewwiwaia 'Michoacan')、銳葉奥塔竹銳葉亞種acw7?n’《aia ssp. Acuminata)、銳葉奥塔竹阿兹特亞種（Oiaiea acww/waifl ssp. Aztecorum)、銳葉奥塔竹矮阿茲特亞種（(9Miea acuminata ssp. aztecorum 'Dwarf')、菲布萊奥塔竹（Oiiziea 及瑪雅銀青奥塔竹（Oiaiea glauca 'Mayan

Silver') 淇竹屬：阿比西尼滇竹及酒 ^ {^Oxy ten anther a braunii) 剛竹屬：尖頭青竹（Phyllostachys; Jcwia)、黃古竹 (Phyllostachys Angusta)、石綠竹（Phyllostachys Arcana)、 黃槽石綠竹arcima ’Luteosulcata’）、烏芽 竹、人面竹dwrea)、班入人面竹 {Phyllostachys aurea ’Albovariegata')、唐氏人面竹 awrea ’Dr Don’）、倒垂黃人面竹 awrea 'Flavescens-inversa')、寡花人面竹 {Phyllostachys aurea 'Holochrysa')、錦經人面竹 awrea 'Koi’）、竹村人面竹 aurea 'Takemurai')、-¾- # "Hr (^Phyllostachys aureosulcata) ' 阿拉塔黃槽竹awreojM/caia 'Alata1)、黃稈金 154254.doc -71- 201235470 竹（户A少'Aureocaulis’）、倒垂哈爾濱 黃槽竹（尸awre〇5w/caia ’Harbin Inversa’）、哈爾 濱黃槽竹（尸iiMreosM/⑶ία 'Harbin’）、京竹 {Phy Host achy s awreoiw/caia ’Pekinensis’）、金鎮玉竹 {Phyllostachys awreosw/cflia 'Spectabilis’）、毛環水竹 {Phyllostachys awreoiw/caifl 、桂竹、班入桂竹 {Phyllostachys ’Albovariegata·)、黃槽桂竹 {Phyllostachys 0aw厶’Castillon Inversa’）、金明竹 {Phyllostachys bambusoides ’Castillon’）、矮金桂竹

ZiawZiwJo/deJ 'Golden Dwarf’）、喬氏斑點桂 竹6α/τίόι/·5〇/·ί/β·5 ’Job’s Spot’）、卡瓦達納桂竹

ZjamZjMSo/i/ei 'Kawadana’）、馬利耶克桂竹 {Phyllostachys bambusoides 'Marliac') 肋葉桂竹 (尸'Rib Leaf')、李查德豪布裏希 桂竹’Richard Haubrich')、細弯 莖桂竹（P/z_y"〇Ji<3c/7>^ iawftwsozWe·? ’Slender Crookstem’）、 亞斑葉桂竹（P/zW/osiacr/z;^ 'Subvariegata’）、斑 竹{Phyllostachys 'Tanakae’）、白·彎莖桂竹 {Phyllostachys bambusoides ’White Crookstem1)、蓉城竹 (Phyllostachys Bissetii)、祿蓉成竹[Phyllostachys bissetii ’Dwarf')、白哺雞竹（P/zy/ZoiMe/zj/i ，毛竹 (Phyllostachys Edulis)、安德 毛竹{Phyllostachys edulis 'Anderson’）、雙色毛竹（P/^/Zosiac/^s· edw/ii 'Bicolor')、金 條紋毛竹edw/b ’Goldstripe')、龜曱竹 -72- 154254.doc s 201235470 ei/w/b 'Heterocycla')、甜筒竹 jE/ega/7·?)、曲稈竹F/exwoja)、欽明曲稈竹 {Phyllostachys flexuosa 'Kimmei')、淡竹（Phyllostachys G/awea)、淺藍淡竹（P/zjW/oWac/z;^ g/awca 'Notso')、箱竹 {Phyllostachys g/awca ’Yunzhu’）、水竹（P/iy/Zojiac/j少s heteroclada)、黎子竹（Phyllostachys heteroclada ’Purpusata’）、 實莖水竹（尸少·？ /zeieroc/izc/a 'Solidstem')、烏竹 (Phyllostachys Hispida)、换鄉竹（Phyllostachys Humilis)、 紅殼雷竹、紅哺雞竹 TWi/esce/ii)、假毛竹ATwizwgHewiz··?)、轎杠竹 {Phyllostachys Lithophila)、大節财竹（Phyllostachys Zo/ws/zawewjb)、臺灣桂竹Mah'woz·)、裝部 美竹(Phyllostachys mannii 'Decora')、曼尼美竹 {Phyllostachys 'Mannii')、毛環竹

Meyeri)、猿竹（Phyllostachys Nidularia)、實既竹 (Phyllostachys nidularia ’Farcta’）、滑戰篌竹（Phyllostachys mWM/aWa 'Smoothsheath')、紫竹、虎竹（P/^/iosiac/z;^ nigra ’Bory’）、大黑千久紫竹（Phyllostachys nigra 'Daikokuchiku')、霍爾紫竹nigra 'Hale') ' 毛金竹、目黑千久紫竹nigra 'Megurochiku')、 目白紫竹（外少"oWac/zv m’gra ’Mejiro’）、目奇薩紫竹 {Phyllostachys nigra 'Muchisasa')、奥赛羅紫竹 {Phyllostachys 則’gra Othello·)、斑紫竹 m.gra ’Punctata')、島田紫竹w/p-a 'Shimadake')、 154254.doc •73· 201235470 土 佐紫竹«/gra 'Tosaensis')、灰竹 (Phyllostachys Nuda)、繁蒲頭反竹（Phyllostachys nuda •Localis1)、安吉金竹（户Parv^/bh'a)、灰水竹 {Phyllostachys Platyglossa)、+ 竹{Phyllostachys Praecox)、 雷竹（/*//>»//〇·?ίαο/ίρ /7r£zecox ’Prevernalis·)、花杆早竹 {Phyllostachys praecox ’ Viridisulcata’）、高節竹 {Phyllostachys Prominens)、早園竹(Phyllostachys /Vopi«分 、北京早園竹«分 wa 'Beijing')、等竹（Phyllostachys Robustiramea)、江邊竹 (Phyllostachys Rubromarginata)、後竹[Phyllostachys Stimulosa)、·％ 竹（Phyllostachys Varioauriculata)、年竹 {Phyllostachys Violascens)、粉綠竹{Phyllostachys Viridiglaucescens)、剛竹（Phyllostachys Viridis)、綠反景 儀的{Phyllostachys viridis ’Houzeau’）、黃皮綠筋竹 {Phyllostachys viridis ’Robert Young1)、烏哺雞竹 Κζ’ναχ)、黃桿烏哺雞竹（P/iy/Zosiflc/i少j Wvax 'Aureocaulis’）、黑斑點烏哺雞竹v/v<3x 'Black Spot')、欽明烏哺雞竹（P/^/Zosiac/^j Wvax 'Huangwenzhu Inversa’）及黃紋竹（Ρ/ι>»//〇5ί<2ί：/ζ_)/·5 vivax 'Huangwenzhu') (Pleioblastus Amarus)、錄地竹（JPleioblastus Argenteostriatus)、 黃苦竹（Pleioblastus Chino)、狹葉黃苦竹（Pleioblastus c/n’wo 'Angustifolia’）、雅致青苦竹c/n'«o 154254.doc -74- s 201235470 'Elegantissimus')、欽明青苦竹c/zi*«o ’Kimmei')、村上青苦竹c/jz'wo 'Murakamiansus')、 帶鞠雜色青苦竹〇Ρ/βζ·οό/αίί«ί cA/m? ’Vaginatus Variegatus·)、無 毛琴竹（Pleioblastus distichus)、小無毛翠％ {Pleioblastus distichus ’Mini’）、菲白竹、高締苦竹（户/己，〇0/似〜5 、大明竹（Ρ/βζ·ο6/αίίΜ·5 Grawz’wei/j)、蒙斯大明 竹{Pleioblastus gramineus 'Monstrispiralis') 、 ¢:竹 {Pleioblastus HindsiV)、療苦的{Pleioblastus Humilis、、艰 葉矮苦竹’Albovariegatus·)、雜色矮 苦竹（P/ez’oi/asiM·? humilis 'Variegatus')、衢縣苦竹 (Pleioblastus Jwjn’awews/j)、科佐苦竹（尸/βζϋ/α·5ίΜ·5 尺odzwmae)、金剛竹X'owgosawewhj)、阿可金 剛竹（尸towgosawensb 'Akibensis')、黃條金剛竹 (P/eio^/asiws Aongosanensb ’Aureostriatus')、琉球苦竹 (Pleioblastus Linearis)、钱络痕珠辛 ％ {Pleioblastus /z’wean’i 'Nana’）、長島苦竹（P/ez’oZj/asiwi· A^gas/n’ma)、油苦 竹(Pleioblastus Oleosus、、琴竹、Pleioblastus Pygmaeus)、 綠條紋翠竹pjwwaew·? 'Greenstripe')、多分枝 翠竹（尸/e/oHaWwi 'Ramosissimus’）、坪井西布苦 竹{Pleioblastus shibuyartus 'Tsuboi')、川竹（P/e/oZj/asiwj hwom·/·)、白紋女竹·5//ηο«/ζ· 'Variegatus’）、黃 金竹、科索黃金竹WnWiirkiw·? 'Chrysophyllus1) 及切斯托黃金竹（P/doHajiWi 矢竹屬：茶稈竹/4waM/z_·^ 、托竹 154254.doc -75- 201235470 (Pseudosasa Cantori)、筆年地、Pseudosasa Guanxianensis、、 夫竹{Pseudosasa japonica、、鸯失竹{Pseudosasa japonica ’Akebono’）、曙筋矢竹（尸'Akebono- 並矢竹（尸·5·βΜί/ο·5α·5ίϊ _/a/?o«z_c<3 'Tsutsumiana’）、斑葉矢竹 {Pseudosasa japonica 'Variegata')、廣竹{Pseudosasa Longiligula)、沃瓦矢竹Owaiarz·/)、矢竹仔 {Pseudosasa Usawai、反聋 ％ [Pseudosasa Vifidula) 瑞迪竹屬：巴西瑞迪竹（及adAa _βΓαίζ7ίβ«·5ί·5)及二列葉竹 {Raddia Distichophylla) 扇枝竹屬：皮締扇枝竹（及WpWoc/adwm PiiiieW)及瑞斯 $i 故竹{Racemiflorum) 沙羅卡拉竹屬：法貝沙羅卡拉竹（《SWoca/a/ww·? 及 植夫沙羅卡拉竹（Saroca/amMi Fawgz'imwi) 赤竹屬：色魯赤竹（《S^a Cer«M<3)、纖細赤竹（心如 Gr<3ci//z‘wa)、哈雅赤竹（iSaM //α>»βίαβ)、卡賈赤竹（《Sasa Kagamiana)、卡賈赤竹義範亞種（5*<3·5α kagamiana ssp. Yoshinoi)、千島菩竹（Soia ATwri/ensz··?)、希默千島箬竹 (Sasa kurilensis 'Shimofuri')、大葉赤竹（Sasa Megalophylla)、納考赤竹（Sasa Nagimontana)、波赤竹 (<Saia 園藝種）、歐仕達赤竹（iSasa Os/nWewHs)、 掌葉赤竹Pa/maiaJ、塞南赤竹（《Sasa 、西 米赤竹（《S^a <S/iiwiii/zwa«a)、赤竹吹伯種（<Saia 5p. Γ5·ΜΖ?〇ί(3«α)及維氏熊竹 -76- 154254.doc s 201235470 東笆竹屬：備中東笆竹、目艾黑 東爸竹以’J ’muraii')、馬薩東琶竹（《S^aeZ/a Masamwweawo)、斑葉馬薩東笆竹（SasaeZ/a wwawwweawa 'Albostriata')、黃條紋馬薩東琶竹（5*asae//a masamw/ieawa ’Aureostriata')、拉莫東爸竹（《S^iaeZ/a 、沙薩東爸 竹（<Sajae//a SajaA^wa)及仕巴東笆竹（S^aeZ/a Shiobarensis) 華蕃竹屬：伯瑞華菩竹（<^α·5αΑηο/77/ζα ^orea/z'i) 思勞竹屬：短枝黃金竹 （iSc/^z〇Jiac//_y“w 、巴厘庫甯短枝黃金竹（iSc/n’zc^iac/^Mm 0r<2c^ycr/<2i/Mw 'Bali Kuning’）、考達思勞竹（•Sc/zz’zojiflc/^Mw Caudatum)、格勞思勞竹（Schizostachyum Glaucifolium')、 嶺南思勞竹（Sc/n'zosiac/iywm «/acw/ans)、利馬思勞竹 (Sc/n’zc^iac/zywm lima)及思勞竹穆雷島種（5Άζ·ζο·?ίαί?/ζ>^/« sp. 'Murray Island') 業平竹屬：業平竹、綠色業 平竹（《Sewiarwwi/z'wario! /c^iwosa 'Viridis1)、富特業平竹 (Semiarundinaria Fortis)、专 I 業年竹[Semiarundinaria 、四季竹（iSemz’arwwi/z’warz'fl 、馬基業平 竹{Semiar undinar ia Makinoi)、奥庫 業平竹 (iSemiarwwiiz’Mflrz’a (9A：wioz·)、業平竹馬陸種（iSewiarw«山’《w’a sp. Maruyamana)、業平竹韓國種（<Sewn‘arM«i^«aWa ?/?· Torea')、夜叉竹（Sem/arMwc/iwaria Γα·5/ιαβ?αΑ：β)、欽明夜叉 竹«山_«arfa ’Kimmei1)及倒垂欽明夜叉竹 154254.doc -77- 201235470 {Semiarundinaria yashadake 'kimmei inversa') 倭竹屬·•織毛竹（Shibataea Chinensis)、银竹（Shibataea

Kumasaca) ' % H {Shibataea kumasaca 'Albostriata') ' 黃條紋倭竹（从Arwmaiaca ’Aureostriata')、狹葉倭竹 [Shibataea Lancifolia)反南年银竹{Shibataea Nanpingensis) 唐竹屬：撤欖竹G/ganiea)、暗衫竹 {Sinobambusa intermedia)、唐竹{Sinobambusa Tootsih)反 斑葉唐竹iooiWA： 'Albostriata’） 後竹屬：美國殺竹園藝種（r/mmwociz/amw·? arbiaiws 'Aristatus hort. US')、粗節復竹、丘美粗節筱竹 {Thamnocalamus crawkoi/wj ’Kew Beauty’）、夢多粗節筱 竹（Thamnocalamus crassinodus 'Mendocino·)、美林粗節薇 竹crau/wodwi ’Merlyn')、聶拉粗節筱竹 (Thamnocalamus nepalensis 'Nyalam·) 、 薇竹 {Thamnocalamus Spathiflorus)及特斯拉筱竹 (^Thamnocalamus Tessellatus) 泰竹屬： 大泰竹(9//verz·)及泰竹 {Thyrsostachys Siamensis) 玉山竹屬··綠山竹（Twdawiof 、喜馬玉山竹 (ywAizm'a 、皮特懷玉山竹训cep ’Pitt

White，）、柏歹1J玉山竹丑、短錐玉山竹 (Yushania Brevipaniculata)、沐川玉山竹(Yushania 五、斑殼玉山竹（ΑΜα⑴α 及馬林玉山竹 {Yushania mating) 154254.doc s 201235470 尤其有用之種包括：edwh's、、大青籬竹、軟 條青籬竹、巴苦竹、印度簕竹、綠竹、青皮竹、馬曱竹、 巴山木竹、短穗竹、大秋竹、馬來甜龍竹、勃氏甜龍竹、 龍竹、版納甜龍竹、印度實竹、缺苞箭竹、如發龍頭箭 竹、神農箭竹、華西箭竹、拐棍竹、臥龍拐棍竹、箭竹斯 卡種、實心瓜多竹、錐花瓜多竹、喜馬拉雅筱竹、箬竹、 斯都奥克蘭竹、銳葉奥塔竹阿茲特亞種、烏芽竹、人面 竹、桂竹、蓉城竹、毛竹、龜曱竹、淡竹、紅哺雞竹、假 毛竹、篌竹、紫竹、毛金竹、灰竹、安吉金竹、雷竹、早 園竹、剛竹、烏哺雞竹、無毛翠竹、菲白竹、琉球苦竹、 矢竹、千島箬竹、維氏熊竹、馬薩東笆竹、伯瑞華箬竹、 短枝黃金竹、巴厘庫甯短枝黃金竹、考達思勞竹、格勞思 勞竹、嶺南思勞竹、利馬思勞竹、思勞竹穆雷島種、業平 竹、夜叉竹、矮竹、撖欖竹、粗節筱竹、特斯拉筱竹、綠 山竹及馬林玉山竹。 如熟習此項技術者應瞭解，許多竹種具有不同的通用名 稱。因此，提供以下術語及語言比較》 _ 經典名稱 等效名稱 ，後竹(ACIDOSASA gigantea) 撖欖竹(INDOSASA gigantea) .內 Π竹種(ARTHROSTYLIDIUNψ·)(Μ 藝楂) 捲耳秋竹(CHUSQUEA circinata) 非洲高地竹 a/pimi) 綠山竹(YUSHANIA alpina) 茶得^(ARUNDINARIA amabilis) 茶稃竹(PSEUDOSASA amabilis) %良黃籬的(ARUNDINARIA anceps、 喜馬玉山竹(YUSHANIA anceps) 責毛 f 籬竹(ARUNDINARLi auricoma) 黃金竹(PLEIOBLASTUS viridistriatus) 法1 黃緣^(ARUNDINARIAfalconeri) 鐮序竹伸締變種(DREPANO STACH YUM falcatum 'var. sengteeanum') 154254.doc •79- 201235470 冷箭竹{ARUNDINARIA fangiana) 植夫沙羅卡拉竹(SAROCALAMUS fangianus) 藍M(ARUNDINARJA hookerianus) 虎克喜馬拉雅筱竹 (HIMALAYACALAMUS hookerianus) ib 矣智樣々(ARUNDINARIA macrospermd) 大青籬竹(ARUNDINARIA gigantea) 馬林青籬竹(ARUNDINARIA maling) 馬林玉山竹(YUSHANIA maling) 特斯拉青籬竹(ARUNDINARIA tessellata) 特斯拉筱竹(THAMNOCALAMUS tessellatus) 維剛青籬竹凡vflga/M) 拉莫東笆竹(S AS AELL A ramosa) 印度^ ^(BAMBUSA arundinacea) 印度簕竹(BAMBUS A bambos) 呢热^{BAMBUSA dissemulator') 泥簕竹(BAMBUSA dissimulator) 烏腳綠竹(A4M5C/&4 βίΛί) 烏腳綠竹(BAMBUSA odashimae) 富 it 錄竹(BAMBUSA forbesii) 黑色尼羅巴竹(NEOLOLEBA atra) 風MM(BAMBUSA glaucescens) 孝順竹(BAMBU S A multiplex) 綠色M方考順竹(BAMBUSA multiplex fGreen 米登襄綠色孝順竹(BAMBUSA multiplex Alphonse^ 'Midori Green1) 養竹仔{Bambusa mutabilis') 黃竹仔(Bambusa textilis 'Mutabilis*) 純系 X 黃竿竹(Bambusa tiddoides ’Clone JC) 筋竹純系 X種(Bambusa sp· 'Clone X*) 文琴青竿竹(Bambusa tuldoides ’verUricosa) 佛肚竹(Bambusa ventricosa) 斑葉竹wsa vflrz’ega/fl)(園藝種） 馬來簕竹(Bambusa glaucophylla) 金絲、竹(BAMBUSA vulgaris ’Striata、 黃金間碧竹(BAMBUSA vulgaris Vittata) 法吳巴山尽竹(BASHANIAfaberf) 法貝沙羅卡拉竹(SAROCALAMUS faberi) 柏列柏瑞達竹 柏列玉山竹(Yushania boliana) 髮Λ 方竹{CHIMONOBAMBUSA falcata) 虎克喜馬拉雅筱竹 (HIMALYACALAMUS hookerianus) 短秋竹(CHUSQUEA breviglumis) 大秋竹(CHUSQUEA gigantea) 短秋竹(C/zw 叫 wea ftrevz’g/wmh) 秋竹(Chusquea culeou) 票、秋^(^(CHUSQUEA nigricans) 加波秋竹(CHUSQUEA culeou 'Cafia Prieta') M^_(CHUSQUEA quild) 瓦爾秋竹(CHUSQUEA valdiviensis) ^YiiPENDROCALAMUSaffinis') 慈竹(BAMBUSA emeiensis) 黃竹(DENDROCALAMUS membranaceus) 膜葉簕竹(BAMBUSA membranacea) 镰芹竹(DREPANOSTACHYUMfalcatum) 虎克喜馬拉雅筱竹 (HIMALAYACALAMUS hookerianus) 154254.doc -80- s 201235470 發科镰序竹(PREPANOSTACHYUMfakoneri) 鐮序竹伸締變種PREPANOSTACHYUM falcatum Var. sengteeanum1) 免 1 镰序竹(DREPANOSTACHYUM hookerianum) 大塌)喜馬拉雅復竹 (HIMALAYACALAMUS falconeri 'Damarapa’） 作締鐮序竹(DREPANOSTACHYUM sengteeanum) 喜馬拉雅筱竹(HIMALAYACALAMUS falconeri) 治竹子(FARGESIA angustissima) 狹耳瑞達竹(BORINDA angustissima) 麵廣豫竹(FARGESIA crassinodus) 粗節筱竹(THAMNOCALAMUS crassinodus) 龍頭M^(Fargesia dracocephala) 阿彼箭竹(Fargesia apircirubens) 白籠龍頭廣竹(Fargesia dracocephala fWhite Dragon^ 白龍阿彼箭竹(Fargesia apircirubens ’White Dragon 丨） 揭葉箭竹(FARGESIA ftigida) 費吉多柏瑞達竹(BORINDA frigidorum) 梅 [FARGESIA fungosa、) 凡戈柏瑞達竹(BORIND A ftmgosa 箭竹A-4種(FARGESU sp ”A-4ir) 貼毛箭竹(FARGESIA adpressa) 箭竹如發複(Fargesia sp.Yufa) 如發龍頭箭竹(Fargesia dracocephala ，Rufa·) 冷箭的(GELIDOCALAMUSfangianus) 植夫沙羅卡拉竹(SAROCALAMUS fangianus) ♦灰禀、^iGIGANTOCHLOA atroviolacea Timor Black") 帝汶黑竹(BAMBUSA lako) 路特斯巨竹(GIGANTOCHLOA luteostriata) 路特斯簕竹(BAMBUS A luteostriata) 炎 E 竹(GIGANTOCHLOA verticiUata) 花巨竹(GIGANTOCHLOA pseudoarundinacea) 艾斯喜馬拉雅復竹泊ca/cwm osper) 扁平喜馬拉雅薇竹(Himalayacalamus planatus) 格羅喜馬拉雅筱竹 falconeri 'glomeratum') 鐮序竹伸締變種(DREPANOSTACHYUM falcatum 'var. sengteeanum') 中間喜馬拉雅筱竹乂L4M/S intermedius) 柏列玉山竹(Yushania boliana) 扁平喜馬拉雅筱竹 planatus) 艾斯喜馬拉雅筱竹 (HIMALAYACALAMUS asper)(園藝種） 烏平喜馬拉雅筱竹(ffJMAUYACALAMUS planatus) 西藏新小竹(Neomicrocalamus microphyllus) (hort.)(園藝種） 154254.doc 81 - 201235470 西緣βΗ、竹(NEOMICROCALAMUS 扁平喜馬拉雅叙竹 microphyllus) (HIMALAYACALAMUS planatus) 龜竹[NEOSINOCALAMUS affinis) 黃毛竹(BAMBUSA emeiensis •Chrysotrichus’） 瑪雅銀銳葉奥塔竹(<9如如 瑪雅銀青奧塔竹(Otatea glauca 'Mayan Silver、 Silver*) 阿兹特奥塔竹^^ecorw/w) 銳葉奥塔竹阿茲特亞種(OTATEA acuminata ssp. Aztecorum) h^(PHYLLOSTACHYS ceratd) 水竹(PHYLLOSTACHYS heteroclada) 未 WHYLLOSTACHYS congestd) 烏芽竹(PHYLLOSTACHYS atrovaginata) 美竹(PHYLLOSTACHYS decord) 裝飾美竹(PHYLLOSTACHYS mannii 'Decora') 氣 f 竹(PHYLLOSTACHYS heterocycla) 龜曱竹(PHYLLOSTACHYS edulis 'Heterocycla*) 毛竹(PHYLLOSTACHYS heterocycla pubescens) 毛竹(PHYLLOSTACHYS edulis) 安德氟毛竹(PHYLLOSTACHYS heterocycla 安德森毛竹(PHYLLOSTACHYS edulis pubescens 9Anderson^ ’Anderson·) 木竹、PHYLLOSTACHYS purpurata) 黎子竹(PHYLLOSTACHYS heteroclada 'Purpurata') 實莖水竹 實莖水竹(PHYLLOSTACHYS tSolidstemr) heteroclada 'Solidstem') It 水竹(PHYLLOSTACHYS purpurata ^Straightstem^ 水竹(PHYLLOSTACHYS heteroclada) 阿可苦竹{PLEIOBLASTUS akibensis) 阿可金剛竹(PLEIOBLASTUS kongosanensis .Akibensis') 羅刹千久大明竹(PLEIOBL4STUS gramineus 蒙斯大明竹(PLEIOBLASTUS gramineus ,Raseetsu-chikur) 'Monstrispiralis') 雜色苦竹(PLEIOBLASTi/S variegatus) 菲白竹(PLEIOBLASTUS fortunei) ^^(Qiongzhuea tumidissinoda) 節竹(Chimonobambusa tumidissinoda) 阿露竹(SASA asahinae 西米赤竹(SASA shimidzuana) 楼赤竹(SASA humilis) 矮苦竹(PLEIOBLASTUS humilis) 翠竹(&4&4；7_ygwfleiJ) 翠竹(PLEIOBLASTUS pygmaeus) 特斯权赤竹(SASA tesselhta) 箬竹(INDOCALAMUS tessellatus) 斑葉赤竹vflriegiiia) 菲白竹(PLEIOBLASTUS fortunei) 154254.doc -82· s 201235470 小維氏熊竹) 哈雅赤竹(Sasa hayatae) 银/^{SASAELLA glabra [Albostriata、 斑葉馬薩東笆竹(S AS AELLA masamuneana 'Albostriata') 來肯馬薩東琶竹 rhyncantha) 馬薩東包竹(SASAELLA masamuneana) 來智^色^(SASAEXLA rhyncantha) 馬薩東爸竹(S AS AELLA masamuneana) 維羅業平竹(SEMMRUNDINARIA viUosa) 奥庫業平竹(SEMIARUNDINARIA okuboi) 裔妁慝(SINARUNDINARIA) 箭竹屬(FARGESIA) 四方竹[TETRAGONOCALAMUS angulatus、 方竹(CHIMONOBAMBUSA quadranqularis) 觉竹(THAMNOCALAMUS ^>athaceus) 神農箭竹(FARGESIA murieliae) M茲特玉山竹(YUSHANLi aztecorum) 銳葉奥塔竹阿茲特亞種(OTATEA acuminata ssp. aztecorum) 中文及日文名稱 中文名稱 植物學名稱 j日文名稱 植物學名稱 茶稈竹(Cha Gang zhu) 茶稈竹 j Hachiku amabilis) 國 毛金竹(PhyUostachys nigra rHenonj ) 車筒竹(Che Tong zhu) 車筒竹| 國 Hoteichiku sinospinosa) 關 尺面的(Phyllostachys aurea) 方竹(Fang zhu) 方 ^(Chimonobambusa 國 H Kikkochiku quadranqularis) Η 竹(PhyUostachys edulis 「Heterocycla」） 佛肚竹(Fo du zhu) 佛肚竹1 Kumazasa ventricosa) 維氏熊竹vezYc/j/zX並 非倭竹(Shibataea kumasaca)) 桂竹(Gui zhu) 桂竹(Phyllostachys H Kurochiku bambusoides) 网 繁竹[Phyllostachys nigra) 寒竹(Han zhu) 篆竹{Chimonobambusa _ 國 Madake marmorea) BH 检竹(Phyllostachys bambusoides) 紅邊竹(Hong Bian zhu) 紅邊竹(Phyllostachys 圓 Medake rubromarginata) )'\々HPleioblastus simonii) 猿竹(Houzhu) 模竹(JPhylhstachys H •, Moso nidularia) ^^{Phyllostachys edulis) •83- 154254.doc 201235470 灰香竹(Hui Xiang zhu) 反香竹(Chimonocaiamus pollens) Narihira 業平竹(Sfe/wiarw/wAwana fastuosa) 金竹(Jin zhu) 金 ^{PhyUostachys sulphured) Okame-zasa 倭^(Shibcitaea kumasaca) 麻竹(Mazhu) 蘇竹(Dendrocalamus latiflorus) Yadake 箭竹(Pseudosasa japonica) 毛竹(Mao zhu) 毛 ^ViiPhyllostachys edulis) 筇竹(Qiong zhu) 涛竹(Chimonobambusa tumidissinoda) 人面竹(Ren Mian zhu) 尺面的{Phyllostachys aurea) 水竹(Shui zhu) 水竹 tPhyllostachys heteroclada) 烏芽竹(WuYa zhu) ·% 芽竹{Phyllostachys atrovaginata) 香標竹(Xiang Nuo zhu) 香織竹(Cephabstachyum pergracile) 紫竹(Zi zhu) 紫 ^(Phyl丨ostachys nigra) 英文名稱 英文 植物學 _英文 植物學 箭竹(Arrow) 「幸運竹 矢竹| (Lueky Bamboo)」 幸運竹(Dmcae/m sanderiand)1 吊絲球竹 (Beechey) 吊络、球竹(Bambusa 麥爾竹(Male) beecheyana) 印度實竹 strictus) 藍竹(Blue) 虎克喜馬拉減竹 | 雲紋竹 (Himalayacalamus (Marbled) hookerianus) 寒竹(Chimonobambusa marmorea) 黑竹(Black) 1墨西哥雨竹 紫 ^(Phyllostachys nigra) 1 (Mexican Weeping) 銳葉奧塔竹阿茲特亞種 {Otatea acuminata subsp. aztecorum) 佛肚竹(Buddha's Belly) 佛肚竹1僧侣竹 ventricosa) H (Monastery) 泰竹 siamensis) -84· 154254.doc

S 201235470 甜條竹或甜莖竹 (Candy Stripe or Candy cane) 大瑪喜馬拉雅筱竹 奥得母竹 {Himalayacalamus (Oldham's) 你coneri「Damarapa」） 綠竹(Bambusa oldhamii) 青籬竹 (Canebrake) 大黃緣^(Arundinaria 墨竹(Painted) gigantea) 黃金間碧竹 vidgaris「Vittata」） 中華女神竹 (Chinese Goddess) 觀音竹印/ex U 青竿竹(Punting 「Riviereorum」） Pole) 黃年^{Bambusa tuldoides) 中華刺竹 (Chinese Thorny) 車筒竹河籬竹(River sinospinosa) 网 Cane) 大青緣竹(Anmdimria gigantea) 常見竹 (Common) 龍頭竹(仇_ 方竹(Square) 方竹(Chimonobambusa quadrangularis) 矮蕨葉竹(Dwarf Fern Leaf) 無毛翠竹(P/e/o Wosfttf _ 國石竹(Stone) distichus) 困 专古竹(Phyllostachys angusta & R nuda) 接白條竹(Dwarf Whitestripe) 菲白竹(Pleioblastus 8甜莖竹 fortunei) H (Sweetshoot) 白哺雞竹 dulcis) 跋葉竹(Femleaf) 凤尾竹(及⑽如如mw//妒/ex jjj軟條青難竹 「Femleaf」） 團(Switch Cane) 軟條青錄竹(yirwwiAVwfrzVi tecta) 喷泉竹 ^Fountain) 茶稈竹(Tea 華西箭竹(Fargesia nitida) Stick) 茶稈竹 amabilis) 巨刺竹(Giant Thomv') 印度簕竹ΜΛΪ bambos) 廟竹(Temple) 業平竹(Semianmdinaria fastuosd) 巨木竹(Giant Timber') 綠竹(Bambusa oldhamii) 帝汶黑竹 (Timor Black) ♦良黑、竹(fiambusa lako) 綠山竹(Green Mountain) 綠山竹(KwAamb α/ρίηα) 茶样竹(Tonkin Cane) 茶解々{Pseudosasa amabilis) 金竹(Golden) 尺面竹(Phyllostachys aurea) 龜甲竹 (Tortoise Shell) 象，竹(Phyllostachys edulis「Heterocycla」） •85- 154254.doc 201235470 金金竹(Golden Golden) 募 H 人面竹(Phyllostaschys aurea「Holochrysa」） 「天竹 (Heavenly Bamboo) j 並非竹子(南天竹C/Via/w/z'mi domestica)) 籬笆竹(Hedge) 考順竹(Bambusct multiplex) 喜馬拉雅藍竹 (Himalayan Blue) 虎克喜馬拉雅筱竹 (Himalayacalamus hookerianus) 馬蹄竹 (Horsehoof) 治热 ^{JBambusa lapidea) 鐵脈竹(Iron Range) 累、色羅巴竹(Neololeba atra) 曰本木竹 (Japanese Timber) 给竹(PhyUostachys bambusoides) 熱帶黑竹 (Tropical Black) 轉(帶 MAUpigantochloa otroviolacea) 傘竹(Umbrella) 神農箭竹(Fargepa murieliae) 水竹(Water) 水竹(Phyllostachys heteroclada) 織工竹 (Weaver's) 黃 ^^(Bambusa textilis) 酒竹(Wine) 酒竹认era braunii) 竹(Yellow Groove) 黃槽竹(户少5 aureosulcata) 熟習此項技術者可藉助本文所述及所揭示之培養基、系 統及方法來達成竹子之滾動式組織培養。本文所用「滾動 式組織培養」意指增殖過程可藉由持續分離並增殖幼芽而 實質上無限地持續。在一個實施例中，將一個幼芽置於管 中且幼芽增殖為多個其他幼芽。增殖後’分離每一幼芽或 幼芽子群且隨後將其各自置於管中以進一步增殖。此過程 可持續進行，同時可在不同時間自增殖過程移出一些或所 有幼芽並將其過渡至試管外條件。無限地持續意指可重複 進行5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13 天、14天、15天、16天、17天、18天、19天、20天、21 天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29 154254.doc • 86 - 201235470 X 30天、31 天、32 天、33 天、34天、35 天、36天、37 天38天、39天、40天、41天、42天、43天、44天、45天 專之彡曰殖週期而不起始新外植體達至少1個月、至少3個 月、至少6個月、至少9個月、至少12個月、至少15個月、 至）18個月、至少21個月、至少24個月或至少刊個月。增 殖週期之特定天數範圍包括1〇至12〇天、1〇至1〇〇天、1〇至 80天、1〇至60天、1〇至42天、1〇至4〇天、1〇至2〇天、丨斗至 120天、14至9〇天、14至7〇天、丨4至50、14至42天、14至 30天、14至21天、12至42天、20至60天、10至15天、14至 20天、14至18天等。 *亥等培養基系統及方法可包裝及/或闡述於各種套組 中。套組可包括（但不限於）存於包裝或容器中之以下中之 一或多者：（1) 一或多個培養基；及一或多個來自一或 多個竹種之外植體。在某些非限制性實施例中，培養基可 係b-9-i培養基、b-9-π培養基、b9iii培養基、b_9_iv培養 基、b-9-v培養基、cW2-i培養基、CW2-U培養基、CW2-iii 培養基、CW2-iv培養基、CW2-v培養基、b-10-i培養基、 b-10-ii培養基、b_1(Mii培養基、b l〇 iv培養基、b_1〇 v培 養基、b-11-i培養基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基' b-11-ιν培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養 基、b-12c-iii培養基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-1_1培養基、b-1-ii培養基、b-1-iii培養基、b-1-iv培養基、 b-^v培養基、b-4-i培養基、培養基、培養 基、b-4-iv培養基、b-4-v培養基' ^3_6_丨培養基、b-6-ii培養 l54254.doc •87· 201235470 基、b-6-iii培養基、b-6-iv培養基、b-6-v培養基、CWl-i培 養基、CWl-ii培養基、CWi-iii培養基、cwl_iv培養基、 CWl-v培養基、cW3-i培養基、CW3-ii培養基、CW3-iii培 養基、CW3-iv培養基、CW3-V培養基、cW4-i培養基、 CW4-ii培養基、c\V4-iii培養基、CW4_iv培養基、CW4-V 培養基、CW5-i培養基、CW5-ii培養基、cW5-iii培養基、 CW5-iv培養基、CW5-V培養基、CW6-i培養基、CW6-ii培 養基、CW6-iii培養基、cW6-iv培養基、CW6-V培養基、 Br-2-i培養基、ΒΓ·2-ϋ培養基、Br-2-iii培養基、Br-2-iv培 養基、Ech-i培養基、Ech-ii培養基、Ech-iii培養基、Ech-iv ' Amel-i培養基、Αη^ι_Η培養基、八爪士出培養基、 Amel-iv培養基或Amel-v。在另一個實施例中，套組可包 含一或多個用於組織培養過程之容器，包括（但不限於） 官、缸、盒或罐。在另一實施例中，套組可包含組織培養 竹子之說明書。在另一實施例中，套組包含上述之組合。 各種套組之組份可存於相同或不同容器中。另外，當提供 套組時，可將培養基之不同組份包裝於分開容器中且在使 用則立即混合。此分開包裝各組份可允許長期儲存而不會 知失活性組份之功能。或者，可提供預混合培養基。 可在任一種類之容器中提供套組中所包括之成份，以便 維持不同成伤之#命且使其不被容器材料吸附或改變。舉 例而言’密封玻璃安瓶可含有已包裝於非反應性中性氣體 (例如氮）下之成份。安瓿可由任一適宜材料組成，例如玻 璃、有機聚合物（例如聚碳酸酯、聚苯乙烯等）、陶瓷、金 154254.doc

-88- 201235470 屬或通常用於保持相似成份之任_其他材料。適宜容器之 其他實例包括可自與安瓶相似之物f製作之簡易瓶及可包 含箱内襯内部(例如鋁或合金)之封套。其他容器包括試 i d瓶&瓶、瓶、注射器或諸如此類。容器可具有無 菌進入口 μ列如具有可刺穿之塞子之瓶。纟他容器可具有 兩個隔室’其藉由在移除後允許成份混合的可易於移除之 膜隔開。可移除膜可係玻璃、塑料、橡膠等。 如上所述，套组可提供有說明性材料。說明書可印刷於 紙或其他基材上，及/或可以電子可讀媒體提供，例如軟 碟、CD-ROM、DVD-ROM、Zip碟、錄影帶、錄音帶等。 詳細說明書可不以物理形式與套組相連；而是可將使用者 引導至由套組廠商或經銷商指定之網路網站，或以電子郵 件來提供說明書。 所揭示實施例之一個優勢係該等方法比彼等先前所用者 更穩健地產生植物，其無需彼等使用先前技術方法所產生 者所需之特殊處理。舉例而言，本文所揭示方法無需使用 種子或花序來開始植物；無需選擇患病開始植物（例如彼 等表現叢枝病或小葉病病狀者）；無需使用體細胞胚胎發 生且不利用假小穗。為在組織培養後進行成功的生長，所 產生植物無需在盆上直接澆水，而是進行空中澆水以保持 穩健’且無需對光強度或濕度條件進行多次調節，隨後轉 移至溫室或其他生長條件。該等相對於先前方法之改良甚 至提供與所產生植物之健康及生長及處理效率有關之其他 優勢。 154254.doc -89 - 201235470 藉由本發明所涵蓋非限制性實施例包括（階段1、階段 2阳奴3等培養基係如本文其他部分中所定義）： 工.以下種：大青籬竹、巴苦竹、龍頭竹、黃金間碧 杂竹馬甲竹、勃氏甜龍竹、馬來甜龍竹、版納甜龍 竹、龍竹、黃竹、印度實竹、菲律賓巨竹、斯科爾泰基尼 巨竹'阿庫拉塔瓜多竹、尼加拉瓜阿庫拉塔瓜多竹、實心 瓜多竹、狹葉瓜多竹、雙色狹葉瓜多竹、錐花瓜多竹、梨 果竹、樂多竹（長穗竹屬）、特拉凡柯奥克蘭竹莫索毛 竹、紫竹、毛金竹、盧瑪波思勞竹； Π·階段1培養基：培養基b-12-C-v培養基或b-10-v培養 基； HI，階段2培養基：〇们1培養基、CW2-v培養基、 CW3-V培養基、CW4_v培養基、cw5v培養基或cw6v培 養基，經10至120天週期；及 IV.階段3培養基：ΒΓ·2·ν培養基、Echv培養基或^卜 V培養基。 更特疋而。，可使用以下實施例（階段1、階段2、階段3 等培養基係本文其他部分中所定義）： 以年齡在3個月與3年之間之竹子植物開始，可使用來自 側枝剛剛破勒之莖之結節作為外植體。可將每—結節部分 切割成具有完整幼芽之3_5毫米部分。可剝除並棄去外鞘 且將剩餘結節部分塊放置於具有最終漠度為〇 6%之氮氯化 鈉之10%漂白劑溶液中。可將存於漂白劑溶液中之外植體 置；實驗至旋轉器（速度可調之Barnstead/Lab line定軌振盪 154254.doc 201235470 器，型號KS 260)振盈臺上以每分鐘6至9轉維持1小時。隨 後可將外植體放置於具有最終濃度為0.06%之氫氯化鈉之 1 °/〇漂白劑溶液中’且重新置於振盡臺上維持3 〇分鐘。隨 後可重複此1%漂白劑溶液步驟。 然後’可將個別外植體放置於管内之階段1培養基（1 5 _ 25 mL)中且可於65°F-70°F之溫度及200-500英尺燭光之全 波譜光量下將管放置於經調控潔淨生長室中。初始階段i 培養基可係pH為5.7之b-12c-iv。然後可每隔10至12〇天（一 般每隔21天）將外植體轉移至新鮮b-12c-iv培養基中，且棄 去污染管。污染管可藉由瓊脂之細菌性變色或藉由可見表 面污染來鑑別。该專外植體可在b-12c-iv培養基上保留3至 4個10至120天週期（一般21天週期）。若發生增殖，則可在 第二個週期後自培養基取出外植體。若未發生增殖或增殖 未發生至顯著程度’則可使外植體留在培養基上進行第4 個週期。 然後，可將活幼芽轉移至階段2培養基，例如ρΗ&5.7之 b-9、CW1、CW2、CW3、CW4、CW5、CW6 或 b-6。培養 物可在此階段2培養基上保留直至藉由分離至新管中及進 一步擴增獲得期望幼芽數為止。通常，時間範圍包括丨〇至 120天週期（一般14至21天週期），其間指定培養物在階段2 培養基中經受另一增殖循環或將其過渡至階段3培養基（例 如pH為5.7之b-10-iv或b-11-iv)中’以進行進一步增殖。每 個增殖週期可獲得每管1至10個幼芽。 在自增殖過程移出幼芽後，可將其轉移至含有階段3或 154254.doc -91· 201235470 階段4培養基之小組織培養盒（稱為「洋紅盒」）中達1〇至 120天（一般14至21天）’在此實例中，該培養基係？11為5 7 之BR-2(達1〇至㈣天（一般〗4至21天））或阳為5 7之^叫達 10至120天（一般14至21天））。 亦可使用以下程序（階段丨、階段2、階段3等培養基係本 文其他部分中所定義）： 以年齡在3個月與3年之間之竹子植物開始，可使用來自 側枝剛剛破鞘之莖之結節作為外植體。可將每一結節部分 切割成具有完整幼芽之3_5毫米部分。一些外植體(包括取 自1歲或更老之莖的外植體）可藉由將其在7〇%異丙醇之缸 中振盪3秒且隨後將其在自來水龍頭下沖洗丨分鐘來進行預 先沖洗。不預先沖洗其他外植體。 可剝除並棄去外鞘且將剩餘結節部分塊放置於1〇%漂白 劑溶液中。可將存於漂白劑溶液中之外植體置於實驗室旋 轉器（速度可調之Bamstead/Lab line定軌振盪器，型號KS 260)振盪臺上以每分鐘6至9轉維持}小時。對於一些外植 體（包括彼等取自1歲或更老之莖者）而言，可藉由將幾滴 Tween 20添加至丨0%漂白劑溶液中並將外植體浸泡45分鐘 而非1小時來改進此步驟。隨後可將外植體放置於1%漂白 劑溶液中，且重新置於振盪臺上達3〇分鐘。隨後可重複此 1 %漂白劑溶液步驟。 然後，可將個別外植體放置於管内之階段丨培養基（15_ 25 mL)中且將管放置於65卞_7〇卞之溫度及2〇〇 5〇〇英尺燭 光之全波譜光量下之經調控潔淨生長室中。階段丨培養基 154254.doc

S -92- 201235470 可係pH為5.7之b-12c-iv。可每隔10至120天（一般每隔21天） 將外植體轉移至新鮮b-12c-iv培養基中，且棄去污染管。 該等外植體可在b-12c-iv培養基上保留2個1〇至12〇天週期 (一般21天週期）。在週期之間，可移除過量鞘。在轉移至 第三週期時，可將外植體過渡至階段2培養基中，在此實 例中，該培養基為補充有7 g/L(而非上文所提供5 5 §/乙）鹿 角菜膠之b-12-c。在第三週期後，可清洗外植體。可使外 植體在補充有7 g/L(而非上文所提供5·5 g/L)鹿角菜膠之b_ 12-c上保持1〇天120天週期（一般21天週期）直至觀察到多個 幼芽為止。可在3至15個月内進行多個幼芽之觀察。 在外植體表現多個幼芽後，可使其維持於其階段2培養 基上或將其轉移至階段3培養基。非限制性階段3培養基包 括pH為5.7之b-9培養基、CW1培養基、CW2培養基、CW3 培養基、CW4培養基、CW5培養基、CW6培養基或b6培 養基。培養物可在階段2或階段3培養基上保留直至藉由分 離至新管中及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。通常，時 間範圍包括10至120天週期（一般21天週期），其間可指定培 養物經受另一增殖循環或將其過渡至階段3或階段4培養 基，例如’存於「洋紅盒」中之pH為5.7之BR-2培養基達 10至120天（一般21天）或pH為5.7之Amel培養基達1〇至12〇 天（一般14至21天）。 在甚至更特定之非限制性實施例中，可根據先前段落 [000137]-[000145]中所述程序在以下培養基中在ρΗ 5 5· 5.7下微繁殖以下種，該等培養基一般作為階段2培養基： 154254.doc •93· 201235470 大青籬竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-v ； 巴苦竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ； 龍頭竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ； 黃金間碧竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ; 綠竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-v ； 馬曱竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ； 勃氏甜龍竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ; 馬來甜龍竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ; 版納甜龍竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ; 龍竹：b-9-v、CWl-v、CW3_v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-v ； 黃竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-v ； 印度實竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V或 CW6-V ； -94- 154254.doc

S 201235470 菲律賓巨竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v 或 CW6-v ; 斯科爾泰基尼巨竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-V、 CW5-V或 CW6-V ; 阿庫拉塔瓜多竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-V、 CW5-V或 CW6-V ; 尼加拉瓜阿庫拉塔瓜多竹：b-9-v、CWl-v、CW3-V、 CW4-v、CW5-V或 CW6-V ; 實心瓜多竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ; 狹葉瓜多竹：b-9-v、CWl-v、CW3-V、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ; 雙色狹葉瓜多竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v ' CW4-V、 CW5-V或 CW6-V; 錐花瓜多竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ; 梨果竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V 或 CW6-V ； 樂多竹（長穗竹屬）：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-V、 CW5-V或 CW6-V ; 特拉凡柯奥克蘭竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-V、 CW5-V或 CW6-V ; 毛竹：b-9-v、CWl-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V或 CW6- 154254.doc •95- 201235470 糸竹.b 9 v、CW1-V、CW3-V、CW4-V、CW5-V或 CW6· CW4-v、CW5-v 或 毛金竹：b-9-v、cwi.v、 CW6-v ； CW4-v、CW5 盧瑪波思勞竹：b-9-v、CWl-v、CW3 v或 CW6-V。 如先前所述，根據本文所揭示方法產生之竹子具有許多 用途。除彼等其他地方所述用途以外或為了補充該等用 途，本文所揭示培養基、系統及方法產生之竹子之用途及 自該等竹子製備之產物的非限制性實例包括： 例示性紙類型：化學漿紙（Freesheet)、原紙、無酸紙、 A4紙、扉頁紙、證券紙' 書籍紙、圖案紙、無碳紙、目錄 紙、銅版紙、封面紙、兩用證券紙、雙層紙、壓光紙、等 效紙.、高級紙、化學漿紙、長紋紙（Grain Long)、短紋紙 (Grain Short)、木談製紙、牛皮紙、輕碎紙、新聞紙、出 版用紙、粗紙、再生紙、標籤紙、非塗佈紙、白紙、吸收 性紙:酸性紙、相冊紙、蛋白膠紙、驗性紙、鈔票紙、薄 ..氏衛生紙、毛巾紙、絨毛紙、卡式原紙如叫、 -人用紙（OTC) '光學字符識別紙（〇CR)、薄綿紙及餐 巾紙。 例示性裝類型：風乾漿、纖维素紙漿、竹漿、硫酸氫鹽 漿亞硫酉夂鹽聚、漂白紙毁 '化學纖維素（溶解）衆、賊毛 裝飼料漿、游離聚、全漂装、硬漿、高α纖維素毁、磨 木漿、熱法磨木聚、麻漿、木節衆、牛皮紙聚、長纖維 154254.doc

S •96· 201235470 衆、成捆漿、卷装、商品毁、非木材漿、板漿_、加壓磨木 漿、破布漿、再生漿、增強漿、二次漿、半鹼法漿、半漂 壤、半化學漿_、短纖維漿、燒驗法敷、物種毁、硫酸鹽 漿、熱化學漿、未漂漿、黏膠絲漿及木漿。 板/箱：掛麵板、箱板、卡板、舊瓦楞箱（old corrugated Container) (OCC)及紙板。 木製品：結構木板（包括結構夾板、定向粒片板、結構 複合板）、膠合層壓木材、結構複合木材（包括單板層壓木 材、平行粒片木材、定向粒片木材）、預製木Ϊ型托樑、地 面接合板、鐵路枕木、地板及複合材料（包括汽車複合材 料、航空複合材料、音樂複合材料）。 紡織品：原料、長絲紗線、針織織物、針織物、窄幅織 物、不織物、紡紗、編織織物、黏膠人造絲、棉絮、軋製 纖維及布料。 紡織產品：服裝、毛巾、被單/被褥、枕頭 '窗簾。 食品來源：竹筒及用於動物及人類食品消費之任一直接 產品或副產品。 消費品.動物飼料、地毯料、燈泡、家用清潔產品、筷 子及牙籤、清潔掃帚、自行車、輪椅、釣竿、啤酒、烈 酒、醫藥、化妝品、肥皂/洗髮水、廚房用具、工藝品、 傢具、營養製品、紙杯、紙盤及尿布。 能源及生物能源：木炭、隔離材料、原料及生物燃料。 提供以下非限制性實例。在所有實例中，關於支持過渡 至心外條件之培養基的時間可在透氣或不透氣容器中。 154254.doc •97· 201235470 除非另外說明為液體，否則所述培養基係以其上文所提供 固體形式使用。 實例 實例1.彦对矽 以年齡在3個月與3年之間之竹子植物開始，使用來自側 枝剛剛破鞘之莖之結節作為外植體。將每一結節部分切割 成具有完整幼芽之3-5毫米部分。剝除並棄去外鞘且將剩 餘結節部分塊放置於具有最終濃度為〇 6%之氫氣化鈉之 10%漂白劑溶液中。將存於漂白劑溶液中之外植體置於實 驗室旋轉器（速度可調之Barnstead/Lab line定軌振盪器，型 號KS 260)振盪臺上以每分鐘6至9轉维持！小時。隨後將外 植體放置於具有最終濃度為0.06%之氫氣化鈉之1%漂白劑 溶液中，且重新置於振盪臺上維持3〇分鐘。隨後重複此 1%漂白劑溶液步驟。 然後，將個別外植體放置於管内之階段i培養基（15_25 mL)中且將管放置於65卞_7〇卞之溫度及2〇〇5〇〇英尺燭光之 全波譜光量下之經調控潔淨生長室中。此實例中之初始階 段1培養基係pH為5.7之b-12c-iv。每隔1〇至12〇天（一般每 隔21天）將外植體轉移至新鮮卜12(>^培養基中，且棄去污 染管。藉由瓊脂之細菌性變色或藉由可見表面污染來鑑別 污染管。該等外植體在b-12c-iv培養基上保留3至4個1〇至 12〇天週期（一般21天週期）。若發生增殖，則在第三個週期 後自培養基取出外植體。若未發生增殖或增殖未發生至顯 者程度’則使外植體留在培養基上進行第4個週期。 -98- 154254.doc

S 201235470 接下來，將活幼芽轉移至階段2培養基（在此實例中，為 pH 5_7之b_9_iv)。培養物在此b_9_iv培養基上保留直至藉由 分離至新管中及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。通常， 時間範圍包括10至120天週期（一般14至21天週期），其間指 定培養物在階段2培養基中經受另一增殖循環或將其過渡 至階段3培養基（在此實例中，為PH 5.7之b-10-iv)，以進行 進一步增殖。每個增殖週期獲得每管丨至1〇個幼芽。 在自增殖過程移出幼芽後，可將其轉移至含有階段3或 階段4培養基之小組織培養盒（稱為「洋紅盒」）中達⑺至 120天（一般14至21天），在此實例中，該培養基係pH為5.7 之BR-2-iv(達 1〇至 12〇天（一般 14至 21 天））。 實例2 ·缺甚箭竹 在缺爸箭竹之實例中，如實例4所述選擇外植體並消 毒。 然後如實例丨中所述將外植體轉移至含有階段丨培養基 (在此實例中，為b-12e-iv(液體；3(MG mL))之缸中，但改 用缸。右發生増殖’則在第三個週期後自培養基取出外植 體。若未發生增殖或增瘦未發生至顯著程度，則使外植體 留在培養基上進行第4個週期。棄去污染管。 然後將培養物轉移至階段2培養基（在此實例中，為__ W(液體）)上’該培養基存於虹中，位於每分鐘6至9轉之旋 轉架上。培養物在pH為5.7之⑽七培養基上保持㈣⑶ 天週期（-般Μ天週期）直至藉由分離至新紅中及進一步擴 增獲付期望幼芽數為止。每個增殖週期獲得每缸^至^個 154254.doc -99· 201235470 幼芽。隨後將幼芽置於階段3培養基（在此實例中，為pH 6 之Ech-iv)中達1〇至120天（一般14至21天）。 實例3. #冷好 在菲白竹之實例中，如實例1中所述選擇外植體並消 毒。隨後亦如實例1中所述將外植體轉移至含有階段i培養 基（在此實例中，為b—iSc-iv)之管中。隨後將幼芽轉移至階 段2培養基（在此實例中，為存於洋紅盒中之b9iv mL))。其在b-9-iv培養基上保持1〇至120天週期（一般14天 週期）直至藉由分離至新盒中及進一步擴增獲得期望幼芽 數為止。每個增殖週期獲得每盒1至20個幼芽。隨後將幼 穿置於1¾ •^又3培養基（在此實例中，為BR-2-iv)上達10至120 天（一般14至21天）。 維氏熊竹 在維氏熊竹之實例中，如實例1中所述選擇外植體並消 毒。 隨後亦如實例1中所述將外植體轉移至含有階段1培養基 (在此實例中，為bdSc-iv)之管中。隨後將幼芽轉移至階段 2培養基（在此實例中’為pH 5.5之b-1-iv)中達10至12〇天週 期（一般21天週期）直至藉由分離至新管中及進一步擴增獲 得期望幼芽數為止。每個增殖週期獲得每管1至10個幼 芽。隨後將幼芽置於階段3培養基（在此實例中，為pH 5.7 之BR-2-iv)中達14至21天》 實例5·黃金竹及靼萝莜竹 在黃金竹及粗節筱竹之實例中，如實例1中所述選擇外 •100· 154254.doc

S 201235470 植體並消毒。然後亦如實例1中所述將外植體轉移至含有 階段1培養基（在此實例中，為b-12c-iv)之管中。隨後將幼 芽轉移至階段2培養基（在此實例中，為pH 5.5之b-4-iv)中 達10至120天週期（一般21天週期）直至藉由分離至新管中及 進一步擴增獲得期望幼芽數為止。每個增殖週期獲得每管 1至10個幼芽。隨後將幼芽置於階段3培養基（在此實例 中，為pH5.7之Br-2-iv)中達1〇至120天（一般14至21天）。 實例6.加波秋竹 在加波秋竹之實例中，如實例1中所述選擇外植體並消 毒。然後亦如實例1中所述將外植體轉移至含有階段1培養 基（在此實例中，為b-12c-iv培養基）之管中。隨後將幼芽轉 移至階段2培養基（在此實例中，為pH 55ib_9_iv)中達1〇 至120天週期（一般21天週期）直至藉由分離至新管中及進一 步擴增獲得期望幼芽數為止。每個增瘦週期獲得每管1至 10個幼芽。隨後將幼芽置於階段3培養基（在此實例中，為 pH 5.7之 Amel-iv)中達 1〇至 120天（一般 14 至21天）。 實例7 ·綠付 在綠竹之實例中，如實例1中所述選擇外植體並消毒。 然後亦如實例1中所述將外植體轉移至含有階段丨培養基 (在此實例中’為b_1〇_iv (4〇_5〇 之盒中只是改變為

盒。幼芽在b-l〇-iv培養基上保持1〇至12〇天週期（一般以天 週期）直至藉&分離至新t中及冑一步擴增獲得期望幼芽 數為止。每個增殖週期獲得每盒1至2〇個幼芽。隨後將幼 芽置於階段2培養基（在此實例中，為pH 5.7之 Amel-iv)卞 154254.doc -101 · 201235470 達10至120天（一般14至21天）。 章钒姓·毛竹、烏芽竹及馬來甜龍竹 在毛竹、烏芽竹及馬來甜龍竹之實例中’如實例1中所 述選擇外植體並消毒。然後亦如實例1中所述將外植體轉 移至含有階段1培養基（在此實例中，為b-12c-iv)之管中。 隨後將幼芽轉移至階段2培養基（在此實例中，為pH 5.5之 b-9-iv)中達1〇至120天週期（一般21天週期）直至藉由分離至 新管中及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。亦可使用pH為 5.5之B-6培養基。每個增殖週期獲得每管1至1〇個幼芽。 隨後將幼芽置於階段3培養基（在此實例中，為PH 5.7之 Amel-iv)中達10至120天（一般14至21天）。 實例9.淚素及多# 在狹葉瓜多竹之實例中，如實例1中所述選擇外植體並 消毒。然後亦如實例1中所述將外植體轉移至含有階段1培 養基（在此實例中，為b-12c-iv)之管中。隨後將幼芽轉移至 階^又2培養基（在此實例中’為pH 5.5之b-10-iv)中達10至 120天週期（一般21天週期），直至藉由分離至新管中及進一 步搞增獲得期望幼芽數為止。每個增殖週期獲得每管i至 10個幼芽。隨後將幼芽置於階段3培養基（在此實例中，為 pH 5.7之 Amel-iv)中達 1〇至 12〇天（一般 14至21天）。 實例10.蓉硪#-#升茬# 以年齡在3個月至3年之間之竹子植物開始，使用來自側 枝剛剛破狀1之結節作為外植體。將每-結節部分切割 成具有完整幼芽之3-5毫米部分。取一些外植體（包括取自丄 154254.doc 201235470 歲或更老之莖的外植體）在70%異丙醇之缸中振盈3秒進行 預先沖洗’隨後在自來水龍頭下沖洗i分鐘。其他外植體 則不進行預先沖洗。 剝除並棄去外鞘，且將剩餘結節部分塊放置於1〇%漂白 劑溶液中。將存於漂白劑溶液中之外植體置於實驗室旋轉 器（速度可調之Bamstead/Lab line定軌振盪器，型號Ks 260)振盪臺上，以每分鐘6至9轉維持i小時。對於一些外 植體（包括彼等取自1歲或更老之莖者）而言，添加幾滴 Tween 20至10%漂白劑溶液中，並將外植體浸泡^分鐘而 非1小時，來改進此步驟。隨後將外植體放置於1%漂白劑 浴液中，且重新置於振盪臺上達3〇分鐘。隨後重複此ι% 漂白劑溶液步驟。 然後，將個別外植體放置於管内之階段i培養基（15_25 mL)t，且將管放置於65°F-70°F之溫度及200-500英尺燭光 之全波s普光照下之經調控潔淨生長室中。在此實例中，階 段1培養基係pH為5.7之b-12c-iv »每隔1〇至12〇天（一般每 隔21天）將外植體轉移至新鮮b-12c-iv培養基中，且棄去污 染管。該等外植體在b-12c-iv培養基上保留2個10至120天 週期（一般21天週期）。在週期之間，移除過量鞘。在轉移 至第二週期時，將外植體過渡至階段2培養基中，在此實 例中，該培養基為補充有7 g/L(而非上文所提供5.5 g/L)鹿 角菜膠之b-12-c。在第三週期後，清洗外植體。使外植體 在補充有7 g/L鹿角菜膠之b-i2-c上保持1〇至12〇天週期（一 叙21天週期）直至觀察到多個幼芽為止。在3至丨5個月内進 154254.doc •103· 201235470 行多個幼芽之觀察。 在外植體表現多個幼芽後，使其維持於其階段2培養基 上或將其轉移至階段3培養基（在此實例中，使用阳為5 7 之b-9-iv)。使用其中一種Β·9培養基時亦可改用阳為” 之CW1培養基。培養物保留在階段2或階段3培養基上，直 至藉由分離至新管中及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。 通常，時間範圍包括10至12〇天週期（一般21天週期），其間 指定培養物經過另一增殖循環或將其過渡至階段3或階段4 培養基（在此實例中’為存於「洋紅盒」中之ρΗ 57之br_ 2-iv)。 fnu·缺苞箭竹·替代程序 在缺苞箭竹之實例中，如實例丨0中所述選擇外植體並消 毒。然後亦如實例10中所述將外植體轉移至含有階段1培 養基（在此實例中，為b_12c_iv(液體；30_40 mL))之缸t， 但改用缸。該等外植體在匕12(;_^培養基上保留2個10至 120天週期（一般21天週期）^在週期之間，移除過量鞘。在 轉移至第三週期時，將外植體過渡至階段2培養基中，在 此實例中，該培養基為補充有7 g/L(而非上文所提供5 5 g/L)鹿角菜膠之b-12-c。在第三週期後，清洗外植體。使 外植體在補充有7 g/L鹿角菜膠之b_12_c上保持1〇至12〇天 週期（一般21天週期）直至觀察到多個幼芽為止。在3至15個 月内進行多個幼芽之觀察。 在外植體表現多個幼芽後，使其維持於其階段2培養基 上或將其轉移至階段3培養基（在此實例中，為pH 5.7之b- 154254,doc s •104· 201235470 U-1V(液體）），該培養基存於缸中，位於每分鐘6至9轉之 旋轉架上。培養物在階段2或階段3培養基上保持1〇至12〇 天週期（一般14天週期）直至藉由分離至新缸中及進一步擴 增獲得期望幼芽數為止。每個增殖週期獲得每缸1至Μ個 幼芽。隨後將幼芽置於階段3或階段4培養基（在此實例 中，為pH6之Ech-iv)中達10至12〇天（一般21天）。 實例12.著冷#-#痄衮序 在菲白竹之貫例中，如實例丨0中所述選擇外植體並消 毒。然後亦如實例10中所述將外植體轉移至含有階段1培 養基（在此實例中，為b_12c_iv)之管中。該等外植體在b_ 12c-iv培養基上保留2個1〇至12〇天週期（一般21天週期）。 在週期之間，移除過量鞘。在轉移至第三週期時，將外植 體過渡至階段2培養基中，在此實例中，該培養基為補充 有7 g/L(而非上文所提供5·5 g/L)鹿角菜膠之b l2_c。在第 三週期後，清洗外植體。使外植體在補充有7 §几鹿角菜膠 之b 12-c上保持1〇至120天週期（一般21天週期）直至觀察到 多個幼芽為止》在3至15個月内進行多個幼芽之觀察。 在外植體表現多個幼芽後，使其維持於其階段2培養基 上或將其轉移至階段3培養基（在此實例中，為存於洋紅盒 t之b-9-iv (40-50 mL))。（亦可使用CW1培養基）。其在b_ 9-lv培養基上保持1〇至120天週期（一般14天週期）直至藉由 分離至新盒中及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。每個增 殖週期獲得每盒1至20個幼芽。隨後將幼芽置於階段3或階 段4培養基（在此實例中，為BR-2-iv)中達10至12〇天（一般 154254.doc -105- 201235470 14至21天）。 實例13 ··韓托满好-替代裡多 在維氏熊竹之實例中，如實例10中所述選擇外植體並消 毒。 然後亦如實例10中所述將外植體轉移至含有階段i培養 基（在此貫例中，為b-12c-iv)之管中。該等外植體在b_12c_ iv培養基上保留2個1〇至12〇天週期（一般21天週期）。在週 期之間，移除過量鞠。在轉移至第三週期時，將外植體過 渡至階段2培養基中，在此實例中，該培養基為補充有7 g/L(而非上文所提供5.5 g/L)鹿角菜膠之b_12_c。在第三週 期後，清洗外植體。使外植體在補充有7 g/L鹿角菜膠之b_ 12-c上保持1〇至12〇天週期（一般21天週期）直至觀察到多個 幼芽為止。在3至15個月内進行多個幼芽之觀察。 在外植體表現多個幼芽後，使其維持於其階段2培養基 上或將其轉移至階段3培養基（在此實例中，為pH 5.52b_ 1-iv)達1〇至120天週期（一般21天週期）直至藉由分離至新 s中及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。每個增殖週期獲 得每管1至10個幼芽。隨後將幼芽置於階段3或階段4培養 基（在此實例中，為pH 5.7之Br-2-iv)中達1〇至120天（一般 14至21天）。 嘴钒K黃金竹及粗節筱竹-替代程序 在金竹及粗節筱竹之實例中，如實例1 0中所述選擇外植 體並消毒。然後亦如實例10中所述將外植體轉移至含有階 段1培養基（在此實例中’為b-12c-iv)之管中。該等外植體 -106· 154254.doc

S 201235470 在12c iv培養基上保留2個10至120天週期（一般21天週 期）。在週期之間，移除過量鞘。在轉移至第三週期時， 將外植體過渡至階段2培養基中，在此實例中，該培養基 為補充有7 g/L(而非上文所提供5·5 g/L)鹿角菜膠之b_12_ ^。在第三週期後，清洗外植體。使外植體在補充有7 g/L 鹿角菜膠之b-12-c上保持10至12〇天週期（一般21天週期）直 至觀察到多個幼芽為止。在3至15個月内進行多個幼芽之 觀察。 在外植體表現多個幼芽後，使其維持於其階段2培養基 上或將其轉移至階段3培養基（在此實例中，為pH 55之b_ 4-iv)達1〇至120天週期（一般21天週期）直至藉由分離至新 S中及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。每個增殖週期獲 得每官1至10個幼芽。隨後將幼芽置於階段3或階段4培養 基（在此貫例中，為pH 5.7之Br-2-iv)中達1〇至120天（一般 14至21天）。 實例15. >波欢疗-杳歼哀多 在加波秋竹之實例中，如實例10中所述選擇外植體並消 毒。然後亦如實例10中所述將外植體轉移至含有階段1培 養基（在此實例中，為b-12c_iv)之管中。該等外植體在b_ 12c-iv培養基上保留2個10至12〇天週期（一般21天週期）。 在週期之間，移除過量鞘。在轉移至第三週期時，將外植 體過渡至階段2培養基中’在此實例中，該培養基為補充 有7 g/L(而非上文所提供5_5 g/L)鹿角菜膠之b_12_c。在第 二週期後，清洗外植體。使外植體在補充有7 g/L鹿角菜膠 I54254.doc •107· 201235470 之b-12-c上保持10至120天週期（一般21天週期）直至觀察到 多個幼芽為止。在3至15個月内進行多個幼芽之觀察。 在外植體表現多個幼芽後，使其維持於其階段2培養基 上或將其轉移至階段3培養基（在此實例中，為pH 5 5之卜 9-iv)達10至120天週期（一般21天）直至藉由分離至新管中 及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。亦可使用pH為5.5之 B-6培養基◊每個增殖週期獲得每管1至1〇個幼芽。隨後將 幼芽置於階段3或階段4培養基（在此實例中，為pH 5.7之 Amel-iv培養基）中達1〇至12〇天（一般14至21天）。 實例16.綠竹-替代程序 在綠竹之實例中’如實例1〇中所述選擇外植體並消毒。 然後亦如實例1中所述將外植體轉移至含有階段1〇培養基 (在貫例中’ b-10-iv (40-50 mL))之盒中，只是改變為盒。 該等外植體在b-10c-iv培養基上保留2個10至120天週期（一 般2 1天週期）。在週期之間’移除過量鞘。在轉移至第三 週期時’將外植體過渡至階段2培養基中，在此實例中， 該培養基為補充有7 g/L(而非上文所提供5.5 g/L)鹿角菜膠 之b-I0-c。在第三週期後，清洗外植體。使外植體在補充 有7 g/L鹿角菜膠之b-i〇-c上保持10至12〇天週期（一般21天 週期）直至觀察到多個幼芽為止。在3至15個月内進行多個 幼芽之觀察。使培養物維持於階段2培養基上直至獲得期 望幼芽數為止。每個增殖週期獲得每盒1至2〇個幼芽。隨 後將幼芽置於階段3培養基（在此實例中，為pH 5 7之Amel_ lv)中達1〇至12〇天（一般14至21天）。 154254.doc

S -108· 201235470 ’城楠竹、烏芽竹及馬來甜龍竹-替代程序 在楠竹 '烏芽竹及馬來甜龍竹之貫例中，如實例1 〇中所 述選擇外植體並消毒。然後亦如實例l0_所述將外植體轉 移至含有階段1培養基（在此實例中，為b-12C-iv)之管中。 該等外植體在b-12c-iv培養基上保留2個1〇至12〇天週期（一 般21天週期在週期之間，移除過量鞘。在轉移至第三 週期時，將外植體過渡至階段2培養基中，在此實例中， 該培養基為補充有7 g/L(而非上文所提供5.5 g/L)鹿角菜膠 之b 12-c »在第二週期後，清洗外植體。使外植體在補充 有7 g/L鹿角菜膠之b-12-c上保持10至120天週期（一般21天 週期）直至觀察到多個幼芽為止。在3至15個月内進行多個 幼芽之觀察。 在外植體表現多個幼芽後，使其維持於其階段2培養基 上或將其轉移至階段3培養基（在此實例中，為pH 5 5之卜 9-iv)達1〇至120天週期（一般21天週期）直至藉由分離至新 管中及進一步擴增獲得期望幼芽數為止。亦可使用pH& 5.5之6-6培養基。每個增殖週期獲得每管1至1〇個幼芽。 隨後將幼芽置於階段3或階段4培養基（在此實例中，為pH 5.7之八11161七）中達1〇至12〇天（一般14至21天）。 實例18.我#及多妙歼衮多 在狹葉瓜多竹之實例中’如實例1〇中所述選擇外植體並 消毒°然後亦如實例10中所述將外植體轉移至含有階段1 培養基（在此實例中，為b_12c_iv)之管中。該等外植體在b_ 12c-iv培養基上保留2個1〇至12〇天週期（一般21天週期）。 154254.doc •109· 201235470 在週期之間，移除過量鞘。在轉移至第三週期時，將外植 體過渡至階段2培養基中，在此實例中，該培養基為補充 有7 g/L(而非上文所提供5·5 g/L)鹿角菜膠之b_12_c。在第 三週期後，清洗外植體。使外植體在補充有7 g/L鹿角菜膠 之b-12-c上保持1〇至12〇天週期（一般21天週期）直至觀察到 夕個幼芽為止。在3至15個月内進行多個幼芽之觀察。 在外植體表現多個幼芽後，使其維持於其階段2培養基 上或將其轉移至階段3培養基（在此實例中，為pH 5.5之b_ l〇-iv)達1〇至120天週期（一般21天週期）直至藉由分離至新 B中及進步擴增獲得期望幼芽數為止。每個增殖週期獲 得每管1至10個幼芽。隨後將幼芽置於階段3或階段4培養 基（在此貫例中，為pH 5.7之Amel-iv)中達10至120天（一般 14 至 21 天;）。 如熟習此項技術者根據本所提供實例所應瞭解，用於個 別種之組織培養方法包括培養基、定時及生長條件之微小 變化。個別種之該等變化需要基於包括地點、期望效果、 起始材料等在内之因素進行優化。 對於上文所列示實例中所提供種之每一者而言，在特定 實施例中’每一者均可在以下培養基中起始及/或增殖：b-9-1培養基、b-9-ii培養基、b_9_iH培養基、b_9_iv培養基、 b-9-v培養基、CW2 i培養基、cw2-ii培養基、cW2-iii培養 基、CW2-iv培養基、CW2-V培養基、b-10-i培養基、b-10-11培養基、培養基、b-10-iv培養基、b-10-v培養 基、b-11-i培養基、b ll ii培養基、卜丨^出培養基、b_u_ 154254.doc

S -110· 201235470 iv培養基、b-ll-v培養基、b-12c-i培養基、b-12c-ii培養 基、b-12c-iii培養基、b-12c-iv培養基、b-12c-v培養基、b-卜1培養基、b-1-ii培養基、b-1-iii培養基、b_i_iv培養基、 b-1-v培養基、b-4-i培養基、b-4-ii培養基、b_4_iU培養 基' b-4-iv培養基、b-4-v培養基、b-6-i培養基、b-6-ii培養 基、b-6-iii培養基、b-6-iv培養基、b-6-v培養基、CWl-i培 養基、CWl-ii培養基、CW卜Hi培養基' cwi-W培養基、 CWl-v培養基、CW3-i培養基、CW3-ii培養基、cW3-iii培 養基、CW3-W培養基、CW3_"^養基、CW4 i培養基、 CW4-ii培養基、cW4-iii培養基、cW4_iv培養基、CW4_V 培養基、CW5_i培養基、cW5-ii培養基、cW5-iii培養基' CW5-iv培養基、CW5_V培養基、⑽卜丨培養基、培 養基、CW6_iii培養基、養基及/或CW6v培養 基。 在說明將外植體、幼芽或小植株置於含有培養基之管、 缸、盒或罐内之情形下，本文之「在…中」及「在…上」 可交換使用。 除非另有說明’否則說明t及巾請專利範圍中所用所有 表示成份數量、性質（例如，分子量）、反應條件等之數字 在所有情況下均應理解為經過術語「約」修飾。因此，除 非說明相反情況’否則’說明書及隨附中請專利範圍中所 列示數字參數均為可隨本發料求達成之㈣㈣而變化 的近似值。最低限度地，且並非試圖限制巾請專利範圍之 等效項之原則的應用，每—數字參數均應至少根據所報告 154254.doc •111· 201235470 有效位的數量且採用普通捨入技術來解釋β 儘官闡述本發明寬範圍之數值範圍及參數係近似值，但 在具體實例中所闡述之數值盡可能準確地報告。然而，每 一數值固有地含有必然由其各自測試量測中存在之準則偏 差所引起的必然誤差。 除非本文另有說明或上下文明顯矛盾，否則在闡述本發 明的上下文（尤其在下文申請專利範圍之上下文）中所用術 语「一（a及an)」、「該」及相似指示物均應理解為涵蓋單數 與複數二者。本文列舉的數值範圍僅意欲作為個別查閱此 範圍内各單獨值的速記方法。除非本文另有說明，否則各 個別值均如同其在本文中個別引用一般併入本說明書中。 除非本文另有說明或上下文另外明顯矛盾，否則，本文所 闡述的所有方法可以任何適宜順序實施。除非另外主張， 否則，本文所提供之任何及所有實例或例示性語言（例 如’「例如」）僅意欲用於更好地闡釋本發明且並不對本發 明範圍加以料卜本說明書中之任何語言均不應理解為指 示任何未主張要素對本發明實踐係必不可少的。 本文㈣示本發明之替代要素或實施例之分組不應理解 為具有限制性。各群組成貝均可個別地或以與該群組之其 他成員或本文所發現之其他要素的任—組合提及並主張:、 預計出於便利性及/或可專利性之原目，可在群組中納入 群組之-或多個成員或自群組刪除群組之—或多個成員。 當進行任—此納人或刪除時，認為說明書含有所修改之群 組，由此實現隨时請專利範圍中所用所有馬庫西群兔 154254.doc

•112. 201235470 (Markush gr〇up)之書面說明。 本文闡述了本發明之苴此杳 之某些霄鈀例，包括本發明者已知用 =施本發明之最佳模式。當然’彼等熟習藉此技術者在 閱項上述說明後將明瞭該等所述實施例之變化。本發明者 期望熟習此項技術者適當採用此等變化，且該等發明者音 欲本發明可以不同於本文具體闡述之方式來實施。因此广 本發明包括適用法律所允許的本文隨附f請專利範圍中所 引述標的物之所有修改形式及等效形式。此外，除非本文 另有說月或上下文另外明顯矛肩’否則在其所有可能的變 化中，上述元素之任何組合均涵蓋於本發明中。 本文所揭示具體實施例可使用「由…組成」或/及「基 本上由…組成」之語言進一步限定在申請專利範圍中。當 在申請專利範圍中使㈣’無論係、中請時抑或根據修正案 添加，過渡術語「由...組成」均不包括申請專利範圍中未 指定之任何要素、步驟或成份。過渡術語「基本上由…組 成」將申請專利範圍之範圍限定於指定材料或步驟及彼等 不顯著影響基本及新穎特性者。本文固有地或明確地闡述 ) 並實現由此主張之本發明實施例。 最後’應瞭解’本文所揭示本發明實施例用於闡釋本發 明之原理。可採用之其他修改屬於本發明範圍内。因此， 舉例而言，但不限於，可根據本文教示内容利用本發明之 替代組態。因此，本發明並不限於所準確顯示及闡述者。 154254.doc •113·

Claims (1)

1. 201235470 七、申請專利範圍： 1. 一種詩微繁殖竹子之培養基，其中該培養基包含間拓 普林（meta-topolin)或其類似物且支持丨〇至丨2〇天增殖週 期達至少6個月。 2. 如喷求項丨之培養基，其中該培養基支持至Η。天增殖 週期達至少1年。 3. 如請求項_之培養基，其中該間拓普林或其類似物係 以 0.0125 mg/mL至 10 mg/mL之量存在。 4. 如請求項1或2之培養基，其中該培養基進一步包舍噻苯 隆（thidiazuron)或其類似物。 5. 如請求項1或2之培養基，其中該培養基進一步包含 NAA ' BAP、2ip及 /或 IBA。 6. 一種微繁殖竹子之方法，其包含在如請求項1、2、3、4 或5之培養基中培養竹子之外植體及/或幼芽。 7. 如請求項6之微繁殖竹子之方法，其中該竹子係蓉城竹 (Phyllostachys bissetti)、缺苞箭竹（Fargesia denudata)、 菲白竹（Pleioblastus fortunei)、維氏熊竹（Sasa Veitchii)、黃金竹（Pleioblastus viridistriatus)、粗節筱竹 (Thamnocalamus crassinodus)、加波秋竹(Chusquea Culeou 「Cafia Prieta」）、綠竹（Bambusa Old Hamii)、 楠竹（Phyllostachys Moso)、烏芽竹（Phyllostachys Atrovaginata)、馬來甜龍竹（Dendrocalamus Asper)或狭 葉瓜多竹（Guadua Angustifolia)。 8. 如請求項7之微繁殖竹子之方法’其中該竹子係大青籬 154254.doc 201235470 竹（Arundinaria gigantea)、巴苦竹（Bambusa balcoa)、龍 頭竹（Bambusa vulgaris)、黃金間碧竹（Bambusa vulgaris 「Vitatta」）、綠竹、馬甲竹（Bambusa tulda)、勃氏甜龍 竹（Dendrocalamus brandesii)、馬來甜龍竹、版納甜龍竹 (Dendrocalamus hamiltoni)、 龍竹(Dendrocalamus giganteus)、黃竹（Dendrocalamus membranaceus)、印度 實竹（Dendrocalamus strictus)、菲律賓巨竹（Gigantoehloa aspera)、斯科爾泰基尼巨竹（Gigantochloa scortechini)、 阿庫拉塔瓜多竹（Guadua aculeata)、尼加拉瓜阿庫拉塔 瓜多竹（Guadua a.culeata 「Nicaragua」 )、實心瓜多竹 (Guadua amplexifolia)、狹葉瓜多竹（Guadua angustifolia)、雙色狹葉瓜多竹（Guadua angustofolia bicolor) 、 錐花 瓜多竹 （Guadua paniculata) 、 梨果竹 (Melocanna bambusoides)、樂多竹（Neohouzeaua dullooa) (長穗竹屬（Teinostachyum))、特拉凡柯奧克蘭竹 (Ochlandra travancorica)、莫索毛竹（phyli〇stachyS edulis Moso」）、紫竹（phyllostachys nigra)、毛金竹（Phyllostachys nigra Henon」）或盧瑪波思勞竹（schiz〇stachyum lumampao) 〇 9. 一種用於將幼芽過渡至試管外條件之培養基，其中培養 基包含以下培養基、基本上由以下培養基組成或由以下 培養基組成：Br-2-i培養基、玢_24培養基、以_2_出培 養基、Br-2-ιν培養基、Ech-i培養基、Ech-ii培養基、 Ech-iii培養基、Ech_iv、培養基、八削^培養 154254.doc S 201235470 基、Amel-iii培養基、Amel-iv培養基或Amel-v。 10. —種用於微繁殖竹子之培養基，其中該培養基包含D塞苯 隆或其類似物且支持10至120天增殖週期達至少6個月。 11. 如請求項10之培養基’其中該培養基支持10至12〇天增 殖週期達至少1年。 12. 如請求項10或11之培養基’其中該噻苯隆或其類似物係 以0.0001 mg/mL至5 mg/mL之量存在。 13. 如請求項1〇或η之培養基，其中該培養基進一步包含間 拓普林或其類似物、NAA、BAP、2ip及/或IBA。 14. 如請求項13之培養基’其中該間拓普林或其類似物係以 〇·〇 125 mg/mL至 1 0 mg/mL之量存在。 15. 如請求項1、2、10或11之培養基，其中該培養基包含以 下培養基、基本上由以下培養基組成或由以下培養基組 成：b-9-i培養基、b-9-ii培養基、b-9-iii培養基、b-9-iv 培養基、b-9-v培養基、CW2-i培養基、CW2-ii培養基、 CW2-iii培養基、cW2-iv培養基、CW2-V培養基、b-10-i 培養基、b-10-ii培養基、b-10-iii培養基、b-10-iv培養 基、b-l〇-v培養基、b-11-i培養基、b-11-ii培養基、b-11-iii培養基、b-11-iv培養基、b-11-v培養基、b-12c-i培養 基、b-12c-ii 培養基、b-12c-iii 培養基、b-12c-iv 培養 基、b-12c-v培養基、b-1-i培養基、b_l-ii培養基、b-1-iii 培養基、b-1-iv培養基、b-1-v培養基、b-4-i培養基、b-4-ϋ培養基、b-4-iii培養基、b-4-iv培養基、b-4-v培養 基、b-6-i培養基、b-6-ii培養基、b-6-iii培養基、b-6-iv 154254.doc 201235470 培養基、b-6-v培養基、CWl-i培養基、CWl-ii培養基、 CWl-iii培養基、cwi-iv培養基、CWl-v培養基、cW3-i 培養基、CW3-ii培養基、CW3-iii培養基、cW3-iv培養 基、CW3-V培養基、CW4-i培養基、CW4-ii培養基、 CW4-iii培養基、（：冒4七培養基、CW4-V培養基、CW5_i 培養基、CW5-ii培養基、cW5-iii培養基、cW5-iv培養 基、CW5-V培養基、CW6_i培養基、CW6 ii培養基、 CW6-iii培養基、cW6-iv培養基及/或CW6-V培養基。 16. —種微繁殖竹子之方法，其包含在如請求項u、η、 13、14或15之培養基中培養竹子之外植體及/或幼芽。 1 7.如請求項1 6之微繁殖竹子之方法，其中該竹子係蓉域 竹、缺爸箭竹、菲白竹、維氏熊竹、黃金竹、粗節薇 竹、加波秋竹、綠竹、楠竹、烏芽竹、馬來甜龍竹或狹 葉瓜多竹。 18·如請求項17之微繁殖竹子之方法，其中該竹子係大青籬 竹、巴苦竹、龍頭竹、黃金間碧竹、綠竹、馬甲竹、勃 氏甜龍竹、馬來甜龍竹、版納甜龍竹、龍竹、黃竹、印 度實竹、菲律賓巨竹、斯科爾泰基尼巨竹、阿庫拉塔來 多竹、尼加拉瓜阿庫拉塔瓜多竹、實心瓜多竹、狹葉瓜 多竹、雙色狹葉瓜多竹、錐花瓜多竹、梨果竹、樂多竹 (長穗竹屬）、特拉凡柯奥克蘭竹、莫索毛竹、紫竹、毛 金竹或盧瑪波思勞竹。 9、1C 19. 一種套組，其包含如請求項i、2、3、4、$ 11、12、13、14或15中任—項之培養基。 154254.doc ^ S 201235470 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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