TW201043611A

TW201043611A - New compounds

Info

Publication number: TW201043611A
Application number: TW099107870A
Authority: TW
Inventors: Ioannis Sapountzis; Daniel Kuhn; Heinz Stadtmueller
Original assignee: Boehringer Ingelheim Int
Priority date: 2009-03-18
Filing date: 2010-03-17
Publication date: 2010-12-16
Also published as: US20110071158A1; CA2755759A1; EP2408752B1; CN102421762A; AR076134A1; WO2010106097A1; KR20110128927A; BRPI1013618A2; JP5628281B2; JP2012520850A; EA201101330A1; ZA201105986B; UY32494A; EP2408752A1; MX2011009780A; CL2011002300A1; US20140051674A1; IL214746A0; AU2010224881A1

Description

201043611 六、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於一種新穎通式（1)之2,4_二胺基嘧啶，

R, ⑴ 其中基團B、R*至广^阳及“有申請專利範圍及說明書中給出之含義，其異構體、製備此等嘧啶之方法及其作為藥物之用途。【先前技術】獲得侵襲及轉移特性之腫瘤細胞需要特異性生存信號。此等信號使其克服了尤其由喪失細胞黏著而引起之特殊細胞祠亡機制（失巢凋亡）。在此過程中，局部黏著斑激酶 (FAK/PTK2)為基本信號分子之一 ’其一方面經由所謂「局部黏著斑」來控制細胞-基質之相互作用，且另一方面賦予抗失巢凋亡性。藉由抑制PTK2干擾此等機制可導致腫瘤細胞之細胞凋亡性細胞死亡且限制腫瘤之侵襲性及轉移性生長。此外，局部黏著斑激酶對腫瘤相關之内皮細胞的生長、遷移及存活具有重要意義。因此，藉由抑制PTK2 亦可實現抗血管生成活性。一般已知嘧啶為激酶抑制劑。因此，舉例而言，在國際專利申請案 WO 2005/118544、WO 2007/003596及WO 2007/132010 14664】 .doc 201043611 中描述在4位上經非芳族基團取代之嘧啶為具有抗癌活性之活ί生組伤，而此等專利說明書中之大多數化合物具有酿胺取代基[-C(0)NH-]。本發明之目的為指出新穎二胺基㈣作為活性物質，其可用於㈣及/或治療特徵為過度或異常細胞增殖之疾病。本發明之另一目的為指出在活體外及/或活體内對酶 PTK2具有抑制作用且具有能夠用作藥物之適合藥理學及/ 或藥物動力學特性的二胺基D密咬。此等特性尤其包括相對〇於已知之細胞週期激酶的PTK2選擇性抑制作用，較佳相對於Aurora B之ΡΤΚ2選擇性抑制作用。【發明内容】已意外發現’通式化合物可用作特異性ρτκ2抑制劑，其+基團B、RW、RX、具有下文給出之含義。因此，本發明化合物可用於例如治療與ρτκ2活性有關且特徵為過度或異常細胞增殖之疾病。本發明係關於通式（1)化合物

其中Β為視情況經一或多個R4取代之選自〇3-10環烷基及3-8員雜環烷基之基團； R1、R2及R4各自獨立地表示選自Ra、Rb及經一或多個相同或不同之Re&/或Rb取代之以的基團；

Rx表示氫或選自Ra、Rb及經一或多個相同或不同之RC&/ 146641.doc 201043611 或Rb取代之…的基團； R3 為選自以下之基團：-NRcRe、-N(ORc)Re、-N(Rg)NReRc、 -N(Rg)C(0)Re、_N[C(0)Re]2、-N(0Rg)C(0)Re、-N(Rg)C(NRg)Rc、 -N(Rg)N(Rg)C(0)Rc ' -N[C(0)Rc]NRcRc ' -N(Rg)C(S)Rc ' -N(Rg)S(0)Rc ' -N(Rg)S(0)0Re、-N(Rg)S(0)2Rc、-N[S(0)2Rc]2、-N(Rg)S(0)20Rc、 -N(Rg)S(0)2NRcRc、-N(Rg)[S(0)2]2Rc、-N(Rg)C(0)ORc、 -N(Rg)C(0)SRe、-N(Rg)C(0)NRcRc、-N(Rg)C(0)NRgNRcRc、 -N(Rg)N(Rg)C(O)NR0Rc ' -N(Rg)C(S)NRcRc ' -[N(Rg)C(0)]2Rc ' -N(Rg)[C(0)]2Rc、-N{[C(0)]2Rc}2、-N(Rg)[C(0)]20Rc、 -N(Rg)[C(0)]2NRcRc、-N{[C(0)]20Rc}2、-N{[C(0)]2NRcRc}2、 -[N(Rg)C(0)]20Re、-N(Rg)C(NRg)ORc、-N(Rg)C(NOH)Rc、 -N(Rg)C(NRg)SRc及-N(Rg)C(NRg)NRcRc，或視情況經Re及/4Rd取代之TV-鍵聯之3-8員雜環烷基； R5為選自 li 素、-CN、-N〇2、-ORc、-C(0)Rc、-NRCRC、 C!.4烷基、CN4_烷基、C3.H)環烷基、C4_16環烷基烷基及3-8 員雜環烷基之基團； m等於1、2或3 ; η 等於0、1、2、3或4; 各R彼此獨立地選自Ci_6烧基、C3-1G環院基、C4-I6環炫· 基烧基、C6.1()芳基、c7_16芳基院基、2-6員雜烧基、3-8員雜環烷基、4-14員雜環烷基烷基、5-12員雜芳基及6-1 8員雜芳基烧基；各Rb為適合基團且在各狀況下彼此獨立地選自以下： =0、-ORc、Cj.3 鹵烧氧基、-OCF3、=S、-SRC、=NRC、=NORc、 146641.doc -6 - 201043611 =NNReRc、=NN(Rg)C(0)NReRe、-NReRe、-ONRcRe ' -N(ORe)Rc、 -N(Rg)NRcRc、鹵素、-CF3、-CN、-NC、-OCN、-SCN、-NO、-N02、 =N2、-N3、-S(0)Rc、-S(0)0Rc、-S(0)2Rc、-S(0)2ORc、-S(0)NRcRc、 -S(0)2NRcRc、-0S(0)Rc、-0S(0)2Rc、-0S(0)20Rc、-0S(0)NRcRc、 -0S(0)2NRcRc、-C(0)Rc、-C(0)0Rc、-C(0)SRc、-C(0)NRcRc、 -C(0)N(Rg)NRcRc、-C(0)N(Rg)ORc、-C(NRg)NRcRc、-C(NOH)Rc、 -C(NOH)NRcRc、-0C(0)Rc、-0C(0)0Rc、-0C(0)SRc、-0C(0)NRcRc、 -OC(NRg)NRcRc、-SC(0)Rc、-SC(0)0Rc、-SC(0)NRcRc、〇 -SC(NRg)NRcRc、-N(Rg)C(0)Rc、-N[C(0)Rc]2、-N(0Rg)C(0)Rc、 -N(Rg)C(NRg)Rc、-N(Rg)N(Rg)C(0)Re、-N[C(0)Rc]NRcRc、 -N(Rg)C(S)Rc、-N(Rg)S(0)Re、-N(Rg)S(0)0Re、-N(Rg)S(0)2Rc、 -N[S(0)2Rc]2、-N(Rg)S(0)20Rc、-N(Rg)S(0)2歷Rc、-N(Rg)[S(0)2]2Rc、 -N(Rg)C(0)ORc、-N(Rg)C(0)SRc、-N(Rg)C(0)NRcRc、 -N(Rg)C(0)NRgNRcRc、-N(Rg)N(Rg)C(0)NRcRc、-N(Rg)C(S)NRcRc、 -[N(Rg)C(0)]2Rc、-N(Rg)[C(0)]2Rc、-N{[C(0)]2Rc}2、 -N(Rg)[C(0)]20Rc、-N(Rg)[C(0)]2NRcRc、-N{[C(0)]20Rc}2、〇 -N{[C(0)]2NRcRc}2、-[N(Rg)C(0)]20Rc、-N(Rg)C(NRg)ORc、 -N(Rg)C(NOH)Rc、; 各Re彼此獨立地表示氫或視情況經一或多個相同或不同之Rd及/或1^取代的選自以下之基團：Cw烷基、C3.1()環烷基、C4_n環烷基烷基、C6.1()芳基、C7_16芳基烷基、2-6員雜烷基、3-8員雜環烷基、4-14員雜環烷基烷基、5-12員雜芳基及6-18員雜芳基烷基； &Rd表示適合基團且在各狀況下彼此獨立地選自以下： 146641.doc 201043611 =0、-ORe、Ci-3 鹵烷氧基、-OCF3、=S、-SRe、=NRe、=NORe、 =NNReRe、=NN(Rg)C(0)NReRe、-NReRe、-ONReRe、-N(Rg)NReRe、鹵素、-CF3、-CN、-NC、-OCN、-SCN、-NO、-N〇2、=N2、-N3、 -S(0)Re、-S(0)0Re、-S(0)2Re、-S(0)20Re、-S(0)NReRe、 -S(0)2NReRe、-0S(0)Re、-OS(0)2Re、-0S(0)20Re、-0S(0)NReRe、 -OS(0)2NReRe、-C(0)Re、-C(0)0Re、-C(0)SRe、-C(0)NReRe、 -C(0)N(Rg)NReRe、-C(0)N(Rg)0Re、-C(NRg)NReRe、-C(NOH)Re、 -C(NOH)NReRe、-0C(0)Re、-OC(0)ORe、-0C(0)SRe、-0C(0)NReRe、 -OC(NRg)NReRe、-SC(0)Re、-SC(0)0Re、-SC(0)NReRe、〇 -SC(NRg)NReRe、-N(Rg)C(0)Re、-N[C(0)Re]2、-N(0Rg)C(0)Re、 -N(Rg)C(NRg)Re、-N(Rg)N(Rg)C(0)Re、-N[C(0)Re]NReRe、 -N(Rg)C(S)Re、-N(Rg)S(0)Re、-N(Rg)S(0)ORe、-N(Rg)S(0)2Re、 -N[S(0)2Re]2、-N(Rg)S(0)20Re、-N(Rg)S(0)2NReRe、-N(Rg)[S(0)2]2Re、 -N(Rg)C(0)〇Re、-N(Rg)C(0)SRe、-N(Rg)C(0)NReRe、 -N(Rg)C(0)NRgNReRe、-N(Rg)N(Rg)C(0)NReRe、-N(Rg)C(S)NReRe、 -[N(Rg)C(0)]2Re、-N(Rg)[C(0)]2Re、-N{[C(0)]2Re}2、 -N(Rg)[C(0)]20Re、-N(Rg)[C(0)]2NReRe、_N{[C(0)]20Re}2、 Q -N{[C(0)]2NReRe}2、-[N(Rg)C(0)]20Re、-N(Rg)C(NRg)ORe、 N(Rg)C(NOH)Re、; 各以彼此獨立地表示氫或視情況經一或多個相同或不同之Rf及/或Rg取代的選自以下之基團：Cu烷基、C3_8環烷基、C4-h環烷基烷基、C6_1()芳基、C7.16芳基烷基、2-6員雜烷基、3-8員雜環烷基、4-14員雜環烷基烷基、5-12員雜芳基及6-18員雜芳基烷基； 146641.doc 201043611 各Rf表示適合基團且在各狀況下彼此獨立地選自以下：鹵素、-ORg&-CF3，且各118彼此獨立地表示氫、Cl 6烷基、C3-8環烷基、C4.ii . 環烷基烷基、C6_io芳基、C7.16芳基烷基、2-6員雜烷基、3- 8員雜環院基、4-14員雜環烷基、5-12員雜芳基或6-18員雜 ' 芳基烷基；其限制條件為苯環A不同時具有兩個氣取代基；視情況為其互變異構體、外消旋體、對映異構體、非對〇映異構體及混合物形式，及視情況選用之其藥理學上可接受之酸加成鹽。在一較佳實施例（A1)中’本發明係關於如下通式Q)化合物，其中Rx為氫。在另一較佳實施例（B1)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中B為C3.8環烷基。

G 在另一較佳實施例（B2)中’本發明係關於如下通式（1)化合物， . 其中B為環己基。在另一較佳實施例（B3)中’本發明係關於如下通式化合物，其中B為環戊基。在另一較佳實施例（B4)中’本發明係關於較佳實施例 (B2)及/或（B3)之化合物， 146641.doc 201043611 其中基團R3及基團

相對於環系B呈反式構型。在另—較佳實施例（C1)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中R5為選自鹵素、-cf3&c1_4鹵烷基之基團。在另-較佳實施例（C2)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中！^係選自溴、氯及-CF3。在另—較佳實施例（C3)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中 R>_CF3。在另—較佳實施例（C4)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中R5為氯。在另一較佳實施例（C5)中，本發明係關於如下通式合物，其中RS為溴。在另一較佳實施例（D1)中，本發明係關於如下通式ο”匕 146641.doc -10- 201043611 其中 R3係選自-NRCRC、-N(〇Rc)Rc、_N(Rg)C(0)Rc、 -N(0Rg)C(0)Rc、-N(Rg)S(〇)2Rc、-N(Rg)C(0)0Rc及 -N(Rg)C(0)NRcRc， . 或視情況經『及/或Rd取代之鍵聯之4-6員雜環烷基，且

Rc、1^及1^如上文所定義。在另一較佳實施例（D2)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中 R3係選自-NRCRC、-N(Rg)C(0)Rc及-N(Rg)S(0)2Rc，且〇及Rg如上文所定義。在另一較佳實施例（D3)中’本發明係關於如下通式（1)化合物，其中 R3係選自-N(Rg)C(0)Rcl及-N(Rg)S(0)2Rcl ;

Rel對應於基團Rc，且 Rc&Rg如上文所定義。在另一較佳實施例（D4)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，〇其中 R3係選自·NHCUCORC1、烷基）C(0)Rcl、 -NHS(0)2Rel 及 _n(C!.4 烷基）S(0)2Rcl ; . Rel對應於基團Rc，且以如上文所定義。 * 在另一較佳實施例（D5)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中 R3係選自 _NHC(〇)Rcl、-N(Me)C(0)Rcl、-N(Et)C(0)Rcl、 -N(iPr)C(0)Rcl、_N(„Pr)c(〇)Rcl、-NHS(0)2Rcl、-N(Me)S(0)2Rcl、 146641.doc -11· 201043611 -N(Et)S(0)2Rcl、-N(/Pr)S(0)2Rcl及.N0Pr)S(O)2Rcl ;

Rel對應於基團Rc，且 Re如上文所定義。在另一較佳實施例（D6)中，本發明係關於較佳實施例 (D3)及/或（D4)及/或（D5)之化合物，其中Rcl係選自Cm烷基、C3-5環烷基、Cw烷氧基甲基、 (Ci_4烧基）NH-CH〗-及（C!_4烧基）2N-CH2_。在另一較佳實施例（D7)中，本發明係關於較佳實施例 (D3)及/或（D4)及/或（D5)之化合物，其中Rel係選自甲基及乙基。在另一較佳實施例（D8)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中 R3係選自-NHS(0)2Me及-N(Me)S(0)2Me。在另一較佳實施例（E1)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中η值為〇。在另一較佳實施例（F1)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中m值為1或2 ; 各R2在各狀況下彼此獨立地選自鹵素、Ci 6烷基及Ci 6 烧氧基，且 R1如上文所定義。在另一較佳實施例（F2)中，本發明係關於如下通式（1)化合物， 146641.doc 201043611 其中苯環A具有局部結構

(0 或（i〇 ^“及只^各自獨立地表示Cw烷氧基 R2b係選自鹵素及c]_6烷基；且 R1如上文所定義。本發明係關於較佳實施例基；且本發明係關於如下通式（1)化〇在另一較佳實施例（F3)中， (F2)之化合物，其中R2a及R2c表示甲氧基； R2b#選自氟、氯、甲基及乙基；且 R1如上文所定義。在另一較佳實施例（F4)中，合物，其中苯環A具有局部結構 R2d

(iv) (丨丨·)或 R及R2e各自獨立地表示<^.6烷氧基； R2f係選自鹵素及Ci 6烷基；且 Rl如上文所定義。在另較佳實施例（F5)中，本發明係關於較佳實施例 146641.doc 13 201043611 (F4)之化合物，其中R2d及R2e表示甲氧基； R係選自氟及甲基；且 R1如上文所定義。在另較佳實施例（G1)中，本發明係關於如下通式⑴化合物，其中R係選自R、Rb2及經_或多個相同或不同之Rb2及/ 或1^2取代的Ra2 ; 各只32在各狀況下彼此獨立地選自ci 6烷基及3_7員雜環烷基；各Rb2表示適合取代基且在各狀況下彼此獨立地選自以下：-ORc2、-NRc2Rc2、-C(〇)Rc2、-C(0)〇Rc2、-C(0)NRc2Rc2、 -C(0)N(Rg2)〇Re2、_N(Rg2)c(〇)RC2、N(Rg2)c(〇)〇Rc2 及 -N(Rg2)C(0)NRc2Rc2，

Re2各自獨立地表示氫或視情況經一或多個相同或不同 2Rd2及/4Re2取代的選自以下之基團：Cw烷基、C3-6環烷基及3-7員雜環烷基；各Rd2表示適合取代基且在各狀況下彼此獨立地選自以下：-ORe2、-NRe2Re2及-C(0)NRe2Re2 ;

Re2各自獨立地表示氫或視情況經一或多個相同或不同 iRf2及/4Rg2取代的選自以下之基團：C!·6烷基及C3_6環烷基；

Rf2各自獨立地表示-ORg2，

Rg2各自獨立地表示氫或C〗-6烷基。 146641.doc -14- 201043611

(G1)之化合物，

' -C(0)NRc2Rc2 > -C(〇)N(Rg2)ORc2 下：-〇RC2、-NRC2RC2、c(〇)〇rC2、_ 及-N(Rg2)C(〇)Rc2 ;且

Rc2&Rg2如上文所定義。在另較佳實施例（G3)中，本發明係關於如下通式（j)化合物， Ο 其中 Rl表示-c(〇)nrc2rc2 ,且 RC2如上文所定義。在另一較佳實施例（G4)中，本發明係關於較佳實施例 (G1)及/或（G2)及/或（G3)之化合物，其中雜環烷基Ra2及/或Re2為選自哌啶基、哌嗪基、吡咯啶基、四氫哌喃基及嗎啉基之雜環烷基。在另一較佳實施例（G5)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，〇其中R1係選自以下··

146641.doc •15- 201043611

在另一較佳實施例（G6)中，本發明係關於如下通式（1)化合物，其中R1係選自以下：

尤其較佳之通式（1)化合物為以下：

146641.doc - 16 - 201043611 1-93 1-125 ❹ 1-127 1-131 1-134 1-137 、g>»掌性 Yf-〇

146641.doc 17 201043611 對掌性 ί'ο 1-140

rXC 1-142 ,σΝ 1-144 1-147

1-152

1-155

1-158 1-164

1-165

y 146641.doc -18- 201043611 對掌姓 1-166 〇^α:.aw 1-195 及

上文根據本發明化合物（1)之不同分子部分提及之所有車交佳實施例可以任何所要方式彼此組合，得到較佳本發明化合物（1)或較佳本發明化合物（1)之通用分量。本發明亦日月確包括此組合確^之各個別實施例或分量且為本發明^ U 目標。本發明亦係關於本發明化合物與無機酸或有機酸形成之藥理學上可接受之鹽。在另一態、樣中，本發明係關於通式⑴化合物或其藥理學上可接受之鹽，其用作藥物。在另一態樣中，本發明係關於通式（1)化合物或其藥理學上可接受之鹽，其用於治療及/或預防癌症、感染、發 Q 炎及自體免疫疾病。在另一態樣中，本發明係關於通式（1)化合物或其藥理學上可接受之鹽，其用於治療及/或預防癌症。在另一態樣中，本發明係關於通式（1)化合物或其藥理 =上可接又之鹽，其用於治療及/或預防前列腺癌、卵巢癌、胰臟癌及非小細胞支氣管癌。在另一態樣中，本發明係關於含有一或多種通式（1)化 s物或其藥理學上可接受之鹽作為活性物質，視情況與習 146641.doc -19- 201043611 知賦形劑及/或載劑組合的醫藥製劑。本發明另外係關於一種包含通式（1)化合物及至少一種不同於式（1)之其他抑制細胞或細胞毒性活性物質的醫藥製劑’其中化合物（1)亦視情況以互變異構體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體及其混合物形式存在，或以所有上述形式之藥理學上可接受之鹽的形式存在。【實施方式】定義如本文所用，除非另外說明，否則以下定義適用。烷基由子基團飽和烴鏈及不飽和烴鏈組成，而後者可進一步再分成具有雙鍵之烴鏈（烯基）及具有參鍵之烴鏈（炔基）。烯基含有至少一個雙鍵，炔基含有至少一個參鍵。若烴鏈具有至少一個雙鍵以及至少一個參鍵，則按照定義其屬於炔基子基團。上述所有子基團可進一步分成直鏈 (未分支）及分支鏈。若烷基經取代，則在各狀況下取代可彼此獨立地為在所有具有氫之碳原子處的單取代或多取代。下文列出個別子基團之代表性實例。直鍵（未分支）或分支鏈餘和烴鍵：甲基；乙基；正丙基’·異丙基(1_甲基乙基）；正丁基； 1-甲基丙基’異丁基（2_曱基丙基）；第二丁基甲基丙基第三丁基（1山二甲基乙基）；正戊基；1•甲基丁基； 1-乙基丙基；異戊基（3_甲基丁基）；新戍基（2,2二甲基基正己基；2,3_二甲基丁基；2,2_二，基丁基；3,3_二丙 146641.doc •20· 201043611 甲基丁基，2-甲基-戊基，3 -甲基戊基；正庚基；2_甲基己基’ 3-甲基己基；2,2-二甲基戊基；2,3-二甲基戊基；2,4_ 二甲基戊基；3,3-二甲基戊基；2,2,3-三甲基丁基；3-乙基戊基；正辛基；正壬基；正癸基等。直鏈（未分支）或分支鏈稀基：乙烯基；丙-1-烯基；烯丙基（丙_2-烯基異丙烯基；丁-1-烯基；丁-2-烯基；丁 _3_烯基；2_曱基_丙_2_烯基；2_ 曱基-丙_1-烯基；1·甲基-丙-2-烯基；i-甲基_丙_丨_烯基；〇 1_次甲基丙基；戊-1-烯基；戊-2-烯基；戊_3_烯基；戊_4_ 烯基；3-甲基-丁 _3_烯基；3_甲基_丁_2_烯基；弘甲基_丁_ 1烯基，己-1-稀基；己-2-烯基；己_3_烯基；己_4_稀基；己-5-烯基；2,3_二曱基_丁_3_浠基；2，夂二曱基丁 _2-烯基，2-次曱基_3_甲基丁基；2,3_二曱基―丁-丨―烯基丨己_ 1，3 一烯基，己_ι，4_二烯基；戊-〖，‘二烯基；戊-丨，^二烯基’丁-1,3-二晞基；2,3-二曱基丁- i，3-二稀基等。直鏈（未分支）或分支鏈炔基：〇乙炔基；丙_1_炔基；丙_2_炔基；丁_丨炔基；丁 _2炔基；丁-3-炔基；1_曱基-丙炔基等。在無任何另外定義之情況下術語丙基、丁基、戊基、己基庚基、辛基、壬基、癸基等意謂具有相應碳原子數之飽和烴基，包括所有異構體形式。在無任何另外定義之情況下術語丙烯基、丁烯基、戊烯基己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基等意謂具有相應被原子數及一個雙鍵之不飽和烴基適當時包括所 146641.doc -21 - 201043611 有異構體形式，亦即（Ζ)/(五)異構體。在無任何另外定義之情況下術語丁二烯基、戊二烯基、己二烯基、庚二烯基、辛二烯基、壬二烯基、癸二烯基等意謂具有相應碳原子數及兩個雙鍵之不飽和烴基，適當時包括所有異構體形式，亦即（ζ)/(£)異構體。在無任何另外定義之情況下術語丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基等意謂具有相應碳原子數及一個參鍵之不飽和烴基，包括所有異構體形式。術語雜烷基意謂由上文定義之最廣泛含義之烷基衍生的基團，只要烴鏈中一或多個基團-CH3彼此獨立地經基團 -OH、-SH或-ΝΗ：2置換，一或多個基團_Ch2_彼此獨立地經基團-〇-、-S-或-NH-置換，一或多個基團 HIC—— 經基團I置換，一或多個基團=CH-經基團=N-置換， -或多個基團=ch2經基團=NH置換，或—或多個基團=ch 經基團ΞΝ置換，同時雜烧基中總共只可存在最多三個雜原子’在兩個氧原子之間及兩個硫原子之間或一個氧原子與一個硫原子之間必須存在至少一個碳原子，且該基團整體上必須為化學穩定的。由自烷基之間接定義/派生直接顯而易見，雜烷基由具有雜原子之子基團飽和烴鏈、雜烯基及雜炔基組成， 146641.doc -22- 201043611 進步再分成直鏈（未分支）及分支鏈。若雜烷基經取代，則在各狀況下取代可彼此獨立地為在所有具有氫之氧、硫、氮及/或碳原子處的單取代或多取代。雜烷基本身可作為取代基經碳原子及雜原子與分子鍵聯。下文列出典型實例：一曱基胺基曱基；二甲基胺基乙基（1-二曱基胺基乙基；2-二曱基-胺基乙基）；二甲基胺基丙基（1_二曱基胺基丙基' 2-二曱基胺基丙基、3_二甲基胺基丙基”二乙基胺〇基甲基，二乙基胺基乙基（1-二乙基胺基乙基、2-二乙基胺基乙基），二乙基胺基丙基（丨·二乙基胺基丙基、2_二乙基胺基-丙基、3-二乙基胺基丙基）；二異丙基胺基乙基（1_二異丙基胺基乙基、2-二異丙基胺基乙基）；雙_2_甲氧基乙基胺基；[2-(二甲基胺基_乙基乙基_胺基甲基；3_[2_ (二甲基胺基-乙基）-乙基-胺基]_丙基；羥甲基；2_羥乙基；3-羥丙基；甲氧基；乙氧基；丙氧基；甲氧基甲基； 2-曱氧基乙基等。

Q _素表不氟、氣、》臭及/或破原子。鹵烷基由上文定義之最廣泛含義之烷基衍生，此時烴鏈之一或多個氫原子彼此獨立地經相同或不同之鹵素原子置換。由自烷基之間接定義/衍生直接顯而易見，齒烷基由子基團飽和鹵烴鏈、鹵烯基及齒炔基組成，且可進一步再分成直鏈（未分支）及分支鏈。若鹵烷基經取代，則在各狀況下取代可彼此獨立地為在所有具有氫之碳原子處的單取代或多取代。 146641.doc -23- 201043611 ^ ^ t #J ^ ^ -CF3 ； -CHF2 ； -CH2F ； -CF2CF3 ； -CHFCF3 ； -CH2CF3 ； -CF2CH3 ； -CHFCH3 ； -CF2CF2CF3 ； -CF2CH2CH3 ； -CF = CF2 ; -CC1 = CH2 ； -CBr=CH2 ； -CI = CH2 ； -C.C-CF3 ； -CHFCH2CH3 ;及 _chfch2cf3。環烧基由子基團單環烴環、雙環煙環及螺煙環組成，而各子基團可進—步再分成飽和及不飽和（環稀基）。術語不環系卜存在至少-個雙鍵，但不形成厚子之方4 中，兩個環以具有至少兩個共用碳二二聯。在螺煙環中’兩個環共用-個碳原子基經取代’則在各狀況下取代可彼此獨立地為在所有具有氫之碳 L “ 的单取代或多取代。環烷基為取代基經環系之任何適下文列出個別子基團之典型實例。“子鍵聯單環飽和烴環：環丙基；環丁基；環戊基；單環不银和煙環：環己基環庚基等。王衣丁 -1-烯基；環丁 -2-烯環戊-3-烯基；環己-丨_烯 %庚-1-烯基；環庚-2-烯環丁-1，3-二烯基；環戊_ 環戊~2,4-二烯基；環己_ ¥已~2,4-二烯基；環己_ 環丙-1-烯基；環丙_2•烯基基；環戊-1-烯基；環戊烯基基；環己-2-烯基；環己_3_烯基基；環庚-3-烯基；環庚_4_烯基 1，4-二烯基；環戊_i，3二烯基 1，3-二稀基；環己-丨，5_二烯基 1，4-二烯基；環己_2,5_二烯基等飽和及不飽和雙環煙環： 146641.doc -24- 201043611 雙環[2.2.0]己基；雙環[3.2.0]庚基；雙環[3 21]辛基；雙環[2.2.2]辛基；雙環[4.3.0]壬基（八氫茚基）；雙環[44〇] 癸基（十氫萘）；雙環[2,2,1]庚基（降福基）；雙環[2 2…庚― 2,5-二烯基（降福-2,5-二烯基）；雙環[2,2，1]庚_2_烯（降:烯基）；雙環[4.1.〇]庚基（降蒈基）；雙環-[3. ι·ι]庚基（蔽基） ’ 等。飽和及不飽和螺烴環：螺[2.5]辛基、螺[3.3]庚基、螺[4.5]癸-2-婦基等。〇環烷基烷基表示在各狀況下皆為最廣泛含義之上文定義之基團烷基與環烷基的組合。烷基作為取代基與分子直接鍵聯且又經環烷基取代。烷基及環烷基可在兩基團中經適於達成此目的之任何碳原子鍵聯。兩個基團之組合中亦包括烷基及環烷基之各別子基團。芳基表示具有至少一個芳環之單環、雙環或三環碳環。若芳基經取代，則在各狀況下取代可彼此獨立地為在所有具有氫之碳原子處的單取代或多取代。芳基本身可作為取代基經環系之任何適合位置與分子鍵聯。典型實例包括苯基、萘基、茚滿基（2,3_二氫茚基）、 i，2,3,4-四氫萘基及苐基。 . 芳基烷基表示在各狀況下皆為最廣泛含義之如上文所定義之基團烷基與芳基的組合。烷基作為取代基與分子直接鍵聯且又經芳基取代。烧基及芳基可在兩基團中經適於達成此目的之任何碳原子鍵聯。兩個基團之組合中亦包括烷基及芳基之各別子基團。 146641.doc •25· 201043611 典型實例包括苯曱基；h笈基；苯基稀丙基等。土 ’2-本乙基，苯乙烯雜芳基表示具有至少一個芳環之較於相應芳基或環烷基，含有 ……、相次多個相同或不同之彼此獨立地選自氮 '硫及氧之雜屌原子代替—或多個碳原子，同時所得基團必須為化學穩定的。右雜方基經取代，則在各狀況下取代可彼此獨立地為在〇牡所有具有氫之碳及/或氮原子處的單取代或多取代。雜芸A + ’方基本身作為取代基可經環系之任何適合位置（碳與氮）與分子鍵聯。下文列出典型實例。單環雜芳基：吱喃基；嘆吩基；料基；嚼嗤基；隹唾基；異。惡嗤基；異噻唑基；吡唑基；咪唑基；三唑基；四唑基；噁二唑基；噻二唑基；吡啶基；嘧啶基；噠嗪基；吡嗪基；三嗪基，吡啶基-W-氧化物；吡咯基_氧化物；嘧啶基氧化物’嗓17秦基-iV~乳化物’ η比唤基氧化物；。米。坐基氧化物；異噁吐基-7V-氧化物；噁唑基-趴氧化物；噻唑基氧化物；噁二唑基-iV-氧化物；噻二唑基氧化物；三唾基-iV-氧化物；四唑基氧化物等。多環雜芳基：吲哚基；異吲哚基；苯并呋喃基；苯并噻吩基；苯并嚼唑基；苯并噻唑基；苯并異噁唑基；苯并異噻哇基；苯并咪唑基；吲唑基；異喹啉基；喹啉基；喹喏啉基；啐啉；酜σ秦基；啥°坐淋基；笨并三°桊基；4丨D朵嗪基；°惡。坐并η比α定 146641.doc -26- 201043611 基；咪唑并吼啶基；喑啶基；吲哚啉基；異咣烷基；吮烷基，四氫異喹啉基；異吲哚啉基；異苯并四氫呋喃基；異苯并四氫噻吩基；異苯并噻吩基；苯并噁唑基；吡啶并吡啶基，笨并四氫呋喃基；苯并四氫噻吩基；嘌呤基；笨并間二氧雜環戊烯基；啡噁嗪基；啡噻嗪基；喋啶基；苯并噻唑基，咪唑并吼啶基；咪唑并噻唑基；二氫苯并異噁嗪基·’苯并異噁嗪基；苯并噁嗪基；二氫苯并異噻嗪基；笨并哌喃基；笨并硫哌喃基；薰草基；異薰草基；色酮基；〇色滿酮基；四氫喹啉基；二氫喹啉基；二氫喹啉酮基；二氫異喹啉酮基；二氫薰草基；二氫異薰草基；異吲哚啉_ 基’笨并二噁烧基；笨并噁唑啉酮基；喹啉基氧化物，吲哚基-ΛΓ-氧化物；吲哚啉基_#_氧化物；異喹啉基氧化物；喹唑啉基氧化物；喹喏啉基_^氧化物；酞嗪基-沁氧化物；吲哚嗪基-沁氧化物；吲唑基_沁氧化物；苯并噻唑基氧化物；苯并咪唑基_#_氧化物；苯并硫哌喃 ◎ 基氧化物及苯并硫哌喃基-及二氧化物等。雜芳基烷基表示在各狀況下皆為最廣泛含義之上文定義之烷基與雜芳基的組合。烷基作為取代基與分子直接鍵聯且又經雜芳基取代。可在烷基侧經適於達成此目的之任何炭原子及在雜芳基側經適於達成此目的之任何碳或氮原子實現烷基與雜芳基之鍵聯。兩個基團之組合中亦包括烷基及雜芳基之各別子基團。術語雜環烷基意謂自如上文定義之環烷基衍生之基團，若:^裒中或多個基團-CH2-彼此獨立地經基團_〇_、_s_ 146641.doc •27- 201043611 或-NH-置換，或一或多個基團=CH_經基團=沐置換時，雖然總共可存在不超過5個雜原子，但在兩個氧原子之間及兩個硫原子之間或一個氧原子與一個硫原子之間必須存在至少一個碳原子，且該基團整體上必須為化學上穩定。雜原子可同時呈所有可能氧化態存在（硫—亞砜_s〇_、颯_ S〇2_ ;氮—N-氧化物）。由環烷基之間接定義/衍生顯而易見，雜環烷基係由子基團單環雜環、雙環雜環及螺雜環組成，而各子基團亦可進一步再分成飽和及不飽和（雜環烯基）。術語不飽和意謂在所關注環系中，存在至少一個雙鍵，但不形成芳族系統。在雙環雜環中，兩個環以具有至 >、兩個共用原子之方式鍵聯。在螺雜環中，兩個環共用一個碳原子（螺原子）。若雜環烷基經取代，則可在彼此獨立之所有帶氫之碳及/或氮原子處分別經單取代或多取代。本身作為取代基之雜環烷基可經環系之任何適合位置與分子鍵聯。下文列出個別子基團之典型實例。單環雜環（飽和及不飽和）：四氫呋喃基；吡咯啶基；吡咯啉基；咪唑啶基；噻唑啶基；咪唑啉基；吡唑啶基；咄唑啉基；哌啶基；哌嗪基；環氧乙烷基；氮丙啶基；氮雜環丁烷基；M_二氧雜環己烷基，氮雜環庚烷基；二氮雜環庚烷基；嗎啉基；硫嗎啉基，咼嗎啉基；高哌啶基；高哌嗪基；高硫嗎啉基；硫嗎啉基-义氧化物；硫嗎啉基弋^二氧化物；丨，3_二氧戊環基；四氫哌喃基；四氫硫哌喃基；π,4]_氧氮雜環庚烷 146641.doc •28· 201043611 基；四氫嘆吩基；咼硫嗎啦基二氧化物；c惡η坐咬_ 基；二氫°比坐基，一虱D比洛基，二氫。比嗓基；二氫d比咬基；二氫嘴定基；二氫呋喃基；二氫派喃基；四氫噻吩基氧化物；四氫噻吩基-*5,二氧化物；高硫嗎啉基氧化物；2,3-二氫氮唉；2尺-吡咯基；4丑_哌喃基；l，4-二氫0比咬基等。雙環雜環（飽和及不飽和）： 8-氮雜雙環[3.2.1 ]辛基；8-氮雜雙環[5.1〇]辛基；2_氧〇雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚基；8-氧雜-3-氮雜-雙環[3.2.1]辛基；3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛基；2,5-二氮雜_雙環-[2.2.1] 庚基；1-氮雜-雙環[2·2.2]辛基；3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛基；3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬基；2,6-二氮雜-雙環[3.2.2] 壬基；六氫-呋喃并[3,2-b]呋喃基等。螺雜環（飽和及不飽和）： 1，4-一氧雜-螺[4.5]癸基；1-氧雜_3,8-二氮雜_螺[4.5]癸基；及2,6-二氮雜-螺[3.3]庚基；2,7-二氮雜-螺[4.4]壬基； ❹ 2,6-一氮雜-螺[3.4]辛基，3,9-二氮雜-螺[5.5]·]--基；28_ 二氮雜-螺[4·5]癸基等。雜環烷基烷基表示在各狀況下皆為最廣泛含義之上文定義之烷基與雜環烷基之組合。烷基作為取代基與分子直接鍵聯且又經雜環烷基取代。可在烷基侧經適於達成此目的之任何碳原子及在雜環烷基側經適於達成此目的之任何碳或氮原子實現烷基與雜環烷基之鍵聯。兩個基團之組合中亦包括烷基及雜環烷基之各別子基團。 146641.doc -29- 201043611 術語「適合取代基」意謂一方面基於價數為適當的且另一方面使系統具有化學穩定性之取代基。「前藥」意謂呈前驅代謝物形式之活性物質。可部分區別多部分載劑-前藥系統與生物轉化系統。後者含有呈需要化學或生物代謝之形式的活性物質。熟習此項技術者將熟悉此類前藥系統（Sloan, Kenneth B.; Wasdo，Scott C. The role of prodrugs in penetration enhancement. Percutaneous Penetration Enhancers (第 2 版）（2006).51-64 ; Lloyd, Andrew W. Prodrugs.

Smith and Williams' Introduction to the Principles of Drug Design and Action (第 4 版）（2006),211-232;Neervannan，Seshadri· Strategies to impact solubility and dissolution rate during drug lead optimization: salt selection and prodrug design approaches. American Pharmaceutical Review (2004)，7(5)，108.110-113)。適合前藥含有例如經酶可裂解之鍵聯基團（例如胺基曱酸酯基、磷酸酯基、N-醣苷基或二硫基）與溶解改良物質（例如四乙二醇、醣、胺基酸）鍵聯之通式物質。載劑-前藥系統含有與屏蔽基團結合之原樣活性物質，該屏蔽基團可藉由最簡單可能之可控機制裂解。本發明化合物中本發明屏蔽基團之功能為中和電荷以改善細胞吸收。若本發明化合物與屏蔽基團一起使用，則亦可能另外影響其他藥理學參數，諸如口服生物可用性、組織分布、藥物動力學及對非特異性磷酸酶之穩定性。活性物質之延遲釋放亦可能涉及持續釋放效應。此外，可發生改善之代謝，因此產生較高活性物質效率或有機體特異性。在前藥調配物之狀況下，選擇屏蔽 146641.doc -30· 201043611 基團或使屏蔽基團與活性物質結合之鍵聯基團，使得前藥足夠親水以溶解於血清中，具有足夠化學及酶穩定性以到達活性部位，且亦足夠親水以確保其適於擴散控制之膜輸送。此外，應使活性物質在合理時段内經化學或酶誘發而釋放，且不言而喻，所釋放之輔助組份應無毒。然而，在本發明之範疇内，無屏蔽基團或鍵聯基團之化合物可看作是首先必須在細胞中藉由酶及生物化學過程自所攝取化合物製備的前藥。 Ο 縮寫清單

abs. 絕對，無水 Ac 乙醯基 Bn 苯甲基 Boc 第三丁氧羰基 Bu 丁基 c 濃度 cHex 環己烷 d 天 TLC 薄層層析法 DCM 二氣曱烷 DEA 二乙胺 DIPEA iV-乙基二異丙胺(許尼希鹼(Htinig base)) DMF AUV-二曱基甲醯胺 DMSO 二曱亞硬 EE 乙酸乙酯 eq 當量 ESI 電灑離子化法 Et 乙基 EtOH 乙醇 h 小時 HATU 四氟磷酸0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-况況W-四曱基-錁 hex 己基 HPLC 高效液相層析 i 異 IR 紅外光譜法 146641.doc -31 - 201043611 cat. 催化劑 cone. 濃 b.p. 沸點 LC 液相層析 sin. 溶液 Me 甲基 MeOH 甲醇 min 分鐘 MPLC 中壓液相層析 MS 質譜法 NMP iV-曱基吡咯啶酮 NP 正相 n.a. 不可用 Ph 苯基 Pr 丙基 Py rac 外消旋 Rf(Rf) 滯留因子 RP 逆相 RT 環境溫度 TBTU 四氟硼酸〇-(苯并三唑-1-基)-AA,iV；W-四甲基-錁 Temp. 溫度 tert. 第三 TFA 三氟乙酸 THF 四氫°夫喃 tRet. 滯留時間(HPLC) uv 紫外線本發明之特徵及優勢將自以下詳述實例顯而易見，該等實例以實例說明本發明之基本原理，但不限制其範疇：製備本發明化合物通用除非另外說明，否則所有反應均在市售設備中使用化學實驗室中習用之方法進行。對空氣及/或濕度敏感之起始物質儲存在保護氣體下，且在保護氣體（氮氣或氬氣）下使用其進行相應反應及操作。 146641.doc -32- 201043611 在密封容器（較佳為2、5或20 mL)中，在Biotage製造之 Initiator或CEM製造之Explorer中，較佳在攪拌下進行微波反應。層析對於製備型中壓層析（MPLC ’正相），使用Millipore製造之梦耀(名稱：Granula Silica Si-60A 35-70 μιη)或Macherey Nagel 製造之 C-18 RP-% 膠（RP 相）（名稱：p〇lyg〇prep 100-50 C18) 〇 O 在Merck製造之玻璃上預製矽膠60 TLC板（含有螢光指示劑F-254)上進行薄層層析。使用 Waters(名稱：XTerra Prep. MS C18，5 μΜ, 30x100 mm，或 XTerra Prep· MS C18，5 μηι，50x100 mm OBD，或 Symmetrie C18, 5 μηι, 19x100 mm，或 Sunfire C18 OBD， 19x100 mm, 5 μπι，或 Sunfire Prep C 10 μηι OBD 50x150 mm，或 X-Bridge Prep C18 5 μηι OBD 19x50 mm)、 Agilent(名稱：Zorbax SB-C8 5 μηι PrepHT 21.2x50 mm)及〇

Phenomenex(名稱：Gemini C18 5 μιη AXIA 21.2x50 mm或 Gemini C18 10 μιη 50x150 mm)製造之管柱進行製備型高壓層析（HPLC)，使用 Agilent(名稱：Zorbax SB-C8，5 μιη， 21.2><50 mm 或 Zorbax SB-C8 3.5 μιη 2.1x50 mm)及 Phenomenex(名稱：Gemini C18 3 μηι 2x30 mm)製造之管柱進行分析型HPLC(反應控制）。 HPLC質譜法/IJV光譜法使用Agilent製造之HPLC-MS設備（具有質量偵測器之高 146641.doc -33- 201043611 效液相層析）獲得表徵實例之滯留時間/MS-ESI+。指定與進樣峰一起溶離之化合物的滯留時間tRet=0.00。方法A : 管柱： Waters，Xterra MS C18，2.5 μπι，2.1x30 mm,部件號 186000592 溶離劑： A :具有0.1% HCOOH之H20 ; B :乙腈(HPLC級）偵測： MS:正離子及負離子模式質量範圍： 120-900 m/z 碎裂電壓： 120 增益EMV : 1 ;臨限值：150 ;步長：0·25 ; UV : 254 nm ; 帶寬：1 進樣：進樣體積5 μί 分離：流速 1.10 mL/min 管柱溫度： 40°C 梯度： 0·00分鐘： 5%溶劑B 0.00-2.50 分鐘： 5% + 95°/〇溶劑 B 2.50-2.80 分鐘： 95% 溶劑 B 2.81-3.10 分鐘： 95°/。~>5% 溶劑 B 方法B : 管柱： Waters, Xterra MS C18, 2.5 μηι, 2.1 X 50 mm,部件號 186000594 溶離劑： A :具有 0.1% HCOOH 之 H20 ; B :具有〇_1% HCOOH之乙腈偵測： MS :正離子及負離子模式 146641.doc •34- 201043611 質量範圍： 100-1200 m/z 碎裂電壓： 70 增益EMV : 臨限值：1 mAU ;步長：2 nm ; UV : 254 nm以及230 nm 進樣：標準1 μΐ^ 流速： 0.6 mL/min 管柱溫度： 35〇C 梯度： ❹ 0·00分鐘： 5%溶劑B 0.00-2.50 分鐘： 5%+95% 溶劑 B 2.50- 4.00 分鐘： 95% 溶劑 B 4.00-4.50 分鐘： 95%~>5% 溶劑 B 4.50- 6.00 分鐘： 95% 溶劑 A 方法C : 管柱： Waters, X-Bridge Cl8, 3.5 μπι, 2.1 χ 50 mm » 溶離劑： A :具有 10 mM ΝΗ3之Η20 ; Β :具有 10 ηΜ ΝΗ3 ❹ 偵測：之乙腈 MS :正離子及負離子模式質量範圍： 100-800 m/z . 碎裂電壓： 70 增益EMV : 臨限值：1 mAU ;步長：2 nm ; UV : 220-320 nm 進樣：標準1 μί 流速： 0.8 mL/min 管柱溫度： 25 °C 梯度： 0.00分鐘： 2%溶劑Β 146641.doc -35- 201043611

0.00-4.00 分鐘： 2%+98%溶劑 B

4.00-6.00 分鐘： 98% 溶劑 B 方法D : 管柱： Waters, X-Bridge C18, 3·5 μιη, 2.1x50 mm，溶離劑： A :具有 0.1% HCOOH 之 H20 ; B ··具有 0.1〇/〇 HCOOH之乙腈偵測： MS :正離子及負離子模式質量範圍：100-800 m/z 碎裂電壓：70

增益EMV :臨限值：1 mAU ;步長：2 nm ; UV : 220-320 nm 進樣：標準1 mL 流速： 0.8 mL/min 管柱溫度：梯度： 35〇C 0.00分鐘： 0.00-4.00 分鐘： 4.00-6.00 分鐘：

2%溶劑B 2%~>98。/。溶劑 B 98%溶劑B 方法E : 管柱： Phenomenex Gemini C18, 3.0 μηι，2.0x50 mm，溶離劑： A :具有10 mM NH3之H20 ; B :具有10 nM NH3 之乙腈偵測： MS :正離子及負離子模式質量範圍：100-800 m/z 碎裂電壓：70 增益EMV :臨限值：1 mAU ;步長：2 nm ; UV : 220-320 nm 146641.doc -36 - 201043611

進樣：標準IpL 流速： 1.0 mL/min

管柱溫度：35°C

梯度： 0.00分鐘： 2%溶劑B

0.00-3.50 分鐘： 2%+98% 溶劑 B

3.50-6.00 分鐘： 98°/〇溶劑 B 方法F : 管柱： Phenomenex Gemini C18, 3.0 μιη, 2.0x50 mm，

溶離劑： A :具有0.1% HCOOH之H20 ; B :具有0.1% HCOOH之乙腈偵測： MS :正離子及負離子模式質量範圍：100-800 m/z 碎裂電壓：70 〇增益EMV : 進樣：流速：管柱溫度：梯度：臨限值：1 mAU ;步長：2 nm ; UV : 220-320 nm 標準1 μί 1.0 mL/min 35〇C 0.00分鐘： 0.00-3.50 分鐘： 3.50-6.00 分鐘：

2%溶劑B 2%今98%溶劑B 95°/◦溶劑B 由下文所述之合成方法製備本發明化合物，其中通式之取代基具有上文指定之含義。此等方法欲說明本發明，而非將本發明限於此等方法之内容，或將所主張之化合物的範疇限於此等實例。在未描述起始化合物之製備的情況 146641.doc -37- 201043611 下，其可購得或可類似於本文所述之已知化合物或方法製備。根據公開之合成方法製備文獻中描述之物質。

反應流程A

藉由使用一或多種胺RyNH2及RZNH2進行親核芳族取代，由5位上經R5取代之2,4-二氯嘧啶A-1製備I型實例化合物。取代順序在很大程度上視所用之胺、反應條件（酸性或驗性反應條件及路易斯酸（Lewis acid)之加成）及取代武 R5而定。Ry及Rz為各狀況下適於獲得本發明之實例化合物之基團。根據自文獻已知之方法’在諸如THF、DCM、NMP、 EtOH、MeOH、DMSO或DMF之常用溶劑中，使用諸如 DIPEA或K2C03之鹼或諸如HC1之酸，進行a_i、A-2及A-3 上之親核芳族取代。所用之胺RyNH2& RzNH2可購得或根據自文獻已知之方法合成。接著可以自文獻已知或與文獻

得之I型二胺基嘧啶。因此，舉例而言，直接可獲得之I型二胺基嘧啶之基團y及Rz(由羧酸…磺酸…鹵素_或胺基 146641.doc •38- 201043611 取代之芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基組成）可藉由取代（雜芳基本身處）、烷基化、醯化、醯胺化或加成反應來改質。製備起始化合物除非另外說明，否則所有起始物質皆購自商品供應商且直接用於合成中。藉由公開之合成方法製備文獻中所述之物質。 a) 2,4-二氣-5-三氟甲基-嘧啶（A-la)

A-1a 將二氣曱基尿癌咬（48.0 g，267 mmol)懸浮於21 〇 mL 氧氣化磷（POCI3)中，同時除去濕氣。緩慢逐滴添加二乙基苯胺（47.7 g，320 mmol)至此懸浮液中，使得溫度保持在25°C與30°C之間。添加結束後，又在水浴中攪拌混合物〇 5-10分鐘，且在8〇-9〇°C下加熱混合物5_6小時，且除去濕氣。藉由在約1200 g與冰水混合之硫酸中攪拌來消除過量 poch，且立即以各狀況下500 mL乙醚或第三丁基甲基醚萃取水相3次。以300 mL與冰水混合之硫酸（約〇 ι m)洗務合併之醚性萃取物2次，且以冷生理食鹽水溶液洗務，且 ^即經硫酸納乾燥ϋ乾燥劑，且真空除切劑。經短管柱（20 cm)(頭溫：65-7(TC )直孪 ΠηΑ m / 具工（ίο毫巴（mbar))蒸餾殘餘物，獲彳于無色液體，將其裝入瓶中且儲存在氬氣下。 146641.doc *39· 201043611 TLC ： Rf=0.83(cHex:EE=3:l) 類似於此程序，自相應中間物/離析物或相淹士々曰應市售離析物獲得其他**密咬A-1。 b) 4-(4·氣_5-三氟甲基-喊咬-2·基胺基）_3_甲氧基-笼田政贫甲酯（A-3a)

將4-胺基-3-甲氧基苯甲酸苯甲酯（1_92 g ’ 6 8 mm〇i)及 K2C03(2.38 g，17 mmol)懸浮於4 mL二噁烷中，且接著與 2’4-二氣-5-三氟曱基嘧啶（1.48 mL，6 8 mm〇1)混合。接著在油浴（約130。〇中在攪拌下使懸浮液回流1〇〇分鐘。一旦反應結束，便濾出反應混合物，藉由旋轉蒸發來濃縮濾液，且藉由正相管柱層析來純化。合併A_3a之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet=1.94 min ; MS (M-H)+=436)且藉由旋轉蒸發來濃縮。 c) 4-(4-氣-5-三氟甲基-嘧啶_2_基胺基）3甲氧基_苯甲酸（A_ 4a)

146641.doc •40- 201043611 在鼠化兩壓爸中將化合物A-3a( 1.3 g，3 mmol)懸浮於50 mL THF中，且與Pd(OH)2/碳（180 mg，裝填20%，約 50% 水）混合。接著，施加4.5巴Η2，且攪拌反應混合物24小時。反應結束後，濾出反應混合物，蒸發濾液且粗產物Α_ 4a(HPLC-MS : tRet. = 1.24 min ; MS (Μ-Η)+;346)未經任何另外純化即用於隨後反應中。 d) 4-(4-氣-5-三氟甲基-嘧啶_2_基胺基）-3-甲氧基甲基-哌啶-4-基）-苯甲醯胺（A-5a)

將化合物A-4a(2.0 g，5.6 mmol)懸浮於70 mL甲苯中，與亞硫醯氯（840 μΐ^，11.5 mmol)合併且在攪拌下加熱至 12 0 C，歷k 2小時。反應混合物冷卻至室溫，且使用旋轉 Q 式蒸發器除去溶劑。將殘餘物懸浮於50 mL THF中，冷卻至〇 C且逐滴與4-胺基-1-甲基哌啶（657 mg，5.75 mmol)及 DIPEA(1.97 mL，11.5 mmol)溶解於 20 mL THF 中之溶液混合。反應混合物緩慢達至室溫，且在室溫下再攪拌12小時。使反應混合物冷卻至〇t:，濾出產物A_5a(HPLC_Ms: W-2.06 min ; Ms (M+H)+=444)且未經任何另外純化即使用。 e) 4_[4-((ir，2r)_2_胺基環己基胺基卜s三氟甲基嘧啶_ 2基胺基卜3-甲氧基甲基-旅咬_4_基）-苯甲斑胺（A_6a) 14664i.doc • 41 - 201043611

將化合物 A-5a(1.5 g，3·38 mmol)及（1R,2R)-環己烷-1,2-二胺（463 mg 5 4.06 mmol)懸浮於 15 mL EtOH 中，與 DIPEA(4.9 mL，26.5 mmol)合併且在70°C下攪拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，且使用旋轉式蒸發器除去溶劑。將殘餘物溶解於DMF中且藉由製備型HPLC純化。冷凍乾燥 A-6a 之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet. = 0.56 min ； MS (M+H)+=522)。 f) 3-甲氧基-N-(l-甲基-哌啶-4-基）-4-[4-((lR，2R)-2-丙醯胺基-環己基胺基）-5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基】-苯甲醯胺1-1

將丙酸（12 mg，0.15 mmol)及 HATU(58 mg，0.15 mmol) 懸浮於 DMF(500 pL)中，與DIPEA(80 pL，0.48 mmol)合併，且在室溫下攪拌反應混合物15分鐘。接著添加八-6a(50 mg，0· 1 mmol)，且擾拌反應混合物隔夜。過滤反應混合物，且藉由製備型HPLC純化。冷凍乾燥1-1之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet =1.82 min ; MS (M+H)+=578)。 146641.doc -42- 201043611 g) 4-【4-(2-胺基-環己基胺基）·5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基]-3-甲氧基-苯甲酸苯甲酯（A-7a)

將化合物A-3a( 1.0 g，2.28 mmol)及反-環己燒-1，2-二胺〇 (313 mg ’ 2.74 mmol)懸浮於 10 mL EtOH中，與DIPEA(3.3 mL，17.3 mmol)合併且在70°C下攪拌隔夜。反應結束後，蒸發反應混合物，且粗產物A-7a(HPLC-MS : tRet=l.ll min ; MS (M-H)+=516)未經任何另外純化即用於隨後反應中。 h) 4-[4-(2-乙醯胺基-環己基胺基）-5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基】-3 -甲氧基-苯甲酸苯甲酿（A-8a)

將化合物 A-7a(500 mg’ 0.97 mmol)懸浮於 DCM中，a 卻至〇C且接著與三乙胺（161 pL，1.16 mmol)及乙酸肝 (100 mg，0_97 mmol)混合。在〇°C下攪拌反應混合物H、時’與水混合且以DCM萃取。有機相經MgSCU乾燥，過濾’蒸發濾液且粗產物A-8a(HPLC-MS: tRet=1.78 min. 146641.doc -43- 201043611 MS (M-H)+=55 8)未經任何另外純化即用於隨後反應中。 i) 4-[4-(2-乙醯胺基-環己基胺基）_5_三氟甲基_嘧啶_2_基胺基】-3-甲氧基-苯甲睃（A-9a)

在氳化高壓釜中將化合物A-8a(510 mg，0.92 mmol)懸浮於10 mL THF中’且與鈀/碳（50 mg，裝填10%)混合。接著施加5巴H2，且攪拌反應混合物24小時反應結束後，濾出反應混合物，蒸發濾液且粗產物A-9a(HPLC-MS : tRet. = 1.27 min; MS (M-H)+=468)未經任何進一步純化即用於隨後反應中。 j) 4-丨4-(2-乙醢胺基·環己基胺基）-5-三氟甲基-嘧啶-2·基胺基】-N-異丙基-3-曱氧基-苯甲醯胺（1-2)

將喊咬 A-9a(50 mg，0.11 mmol)及 TBTU(38 mg , 0.12 mmol)懸浮於 DMF(400 μΙ〇中，與 DIPEA(110 ，0.64 mmol)合併且在室溫下攪拌反應混合物15分鐘。接著添加異丙胺（27 mg，0.46 mmol) ’且擾拌反應混合物隔夜。過 146641.doc • 44 - 201043611 濾反應混合物，且藉由製備型HPLC純化。冷凍乾燥1-2之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet=l_85 min ; MS (M+H)+=509)。 k) 4-{4-【苯甲基-((lR，2R)-2-苯甲基胺基-環己基）-胺基】-5-三氟甲基-喊咬-2-基胺基}-3 -甲氧基-N-(l -甲基-旅咬-4-基）-笨甲醢胺（A-10a)

〇 X

將化合物 A-5a(500 mg，1.13 mmol)及（111，211)-#，妒-二苯甲基-環己烧-1，2-二胺（364 mg ’ 1·24 mmol)(S.E. Denmark, J. E. Marlin J. Org. Chem. 1991, 56, 5063-5079. H. Tye, C. Eldred，M· Wills TWrMe办Ze". 2002, 43，155-158)懸浮於 5 mL EtOH 中，與DIPEA(570 μΐ^，3.36 mmol)混合且在 7〇°C下攪拌。反應結束後，反應混合物冷卻至室溫，且使 ❹ 用旋轉式蒸發器除去溶劑。粗產物A-10a(HPLC-MS : tRet=0.91 min;MS (M-H)+=702)未經任何另外純化即用於隨後反應中。 1) 4-(4-{苯甲基-[(lR，2R)-2-(苯甲基-甲基-胺基）-環己基]-胺基}-5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基）-3-甲氧基-N-(l-甲基·哌啶-4-基）-苯甲醯胺（A-lla) 146641.doc -45- 201043611 .a

Na(OAc)3BH THF, AcOH

(^Ν A-11a 化合物 A-10a(750 mg，1·07 mmol)及曱酸^(164 μι，2.36 mmol，37 % w/w)懸浮於 25 mL THF 中，與乙酸（370 pL， 6.42 mmol)合併且在室溫下攪拌10分鐘。接著使反應混合物冷卻至0°C，且與三乙醯氧基硼氫化鈉（2.05 g，9.66 mmol)合併。反應結束後，將反應混合物與水混合，以1 Μ NaOH調至微鹼性pH值且以EtOAc萃取。有機相經硫酸鎂乾燥且真空蒸發。粗產物A-lla(HPLC-MS : tRet. = 1.09 min ; MS (M-H)+=716)未經任何另外純化即用於隨後反應中〇 m) 3-曱氧基-4-[4-((lR，2R)-2-甲基胺基-環己基胺基）-5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基】-N-(l-甲基-哌啶-4-基）-苯甲醯胺 (A-12a)

在氫化高壓蚤中將化合物A-lla(850 mg，1.09 mmol)懸浮於20 mL THF中，且與Pd(OH)2/碳（180 mg，裝填 10%，約50%水）合併。接著施加7巴H2，且在70°C下攪拌反應混 14664 丨.doc -46- 201043611 合物7 2小時。反應結束後，濾出反應混合物，蒸發遽液且粗產物 A-12a(HPLC-MS : tRet=0.66 min; MS (M-H)+=536) 未經任何另外純化即用於隨後反應中。 η) 3-甲氧基-4-(4-{(lR，2R)-2-[(2-甲氧基-乙醯基）-甲基-胺基】-環己基胺基}-5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基）-Ν-(1·甲基-哌啶-4-基）-苯甲醯胺（1-3)

將甲氧基乙酸（15 mg，0.17 mmol)及 HATU(64 mg，0.17 mmol)懸浮於 DMF(600 pL)中，與 DIPEA(58 pL，0.34 mmol)合併，且在室溫下攪拌反應混合物15分鐘。接著添加溶解於DMF(200 μΙ〇中之 A-12a(60 mg，0.11 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。過濾反應混合物，且藉由 ❹ 製備型HPLC純化。冷凍乾燥1_3之含產物溶離份（1^[(：-MS : tRet.= 1.78 min ; MS (Μ+Η)+=608)。 ο) (lR，2R)-N-(2,5-二氣·痛咬 _4-基）-環己烧-ΐ，2-二胺（Α- 2b)

將 2,4,5-三氣嘴°定（1.0 g，5.45 mmol)懸浮於 65 mL ho- 146641.doc ·47· 201043611

PrOH 中且與 K2CO3(10.55 g，76.33 mmol)合併。接著添加 (1R,2R)-環己烷-1，2-二胺（685 mg，5.99 mmol)，且在 55°C 下攪拌反應混合物3小時。蒸發反應混合物，與水混合且以DCM萃取。有機相經硫酸鎂乾燥且真空蒸發。濾出粗產物且藉由製備型HPLC純化，且冷凍乾燥A-2b之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet=0.61 min ; MS (M+H)+=261/263)。 p) N-[(lR，2R)-2-(2,5-二氣-嘧啶-4-基胺基）-環己基]-乙醯胺（A_3b)

將化合物 A-2b(500 mg，1.92 mmol)懸浮於 5 mL DCM 中，且使反應混合物冷卻至〇°C。接著添加DIPEA(408 μι，2 _3 mmol)及乙酸酐（195 mg，1.95 mmol)，且在 0°C 下攪拌混合物1小時。以DCM稀釋反應混合物，與水混合且以DCM萃取。有機相經硫酸鎂乾燥且真空蒸發。粗產物A-13a(HPLC-MS : tRet =1.19 min ； MS (M+H)+=303/305)未經任何另外純化即用於隨後反應中。 q) N-{(lR，2R)-2-[5-氣-2-(2-甲氧基-苯基胺基）-嘧啶-4-基胺基]-環己基}-乙醯胺（1-4)

146641.doc -48- 201043611 σ密咬A-13a(70 mg，0.23 mmol)及 2-甲氧基苯胺（57 mg， 0.46 mmol)懸浮於MeOH(1.8 mL)中，與HC1之二噁烷溶液 (75 pL，0.3 mmol，4 M)混合，且在微波反應器中將反應混合物加熱至130°C，歷時30分鐘。反應結束後，真空除去所有揮發性組份，將反應混合物與DMF合併且藉由製備 ' 型HPLC純化。冷凍乾燥1-4之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet. = 1.92 min ; MS (M+H)+=390/392)。類似於上文針對合成實例1-1至1-4所述之反應方法a)至〇 q)，可自相應前驅體獲得其他實例1-5至1-123(表1)或其他相當實例，該等前驅體可購得或可藉由自文獻已知之方法製備。表1 :實例1-1至1-123 編號結構 tRe,(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-1 νυν 〇 /ΝΗ 1.82 578 1-2 Υ Η ψΌ '-γΝΗ 1.85 509 146641.doc • 49· 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-3 F-|-F iVV) ::χνΌ ο Ln、 1.78 608 1-4 Ν-γα ΗΝ 乂'Ν 人 Η Ν— 1.92 390/392 1-5 Υη ηΛ ΝγΝ ΝΗ Ί ΝΗ ,α 1.87 564 1-6 fVF 州人 ΝγΝ Ky ：：%〇 ^ΝΗ 1.59 481 1-7 Λτν^ ΝγΝ Ο〇ν 广Η 1.95 495 1-8 pVF η «Λ rYVS ΝγΝ ：：%〇 ΓΎΝΗ 1.84 578 146641.doc -50- 201043611

編號結構 tRe,(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-9 ，VF Η ψΌ 〇〇τΝΗ 1.68 551 1-10 FFYF ΗΝ 又 ΝγΝ yNH 1.80 564 I-11 pVF η ηΛ φτ"0 、:χν ΧΓ 1.63 564 1-12 。声； ΜΗ JJ 1.96 592 1-13 pVF η ηΛ φτΌ :私。人 1.71 495 1-14 ΝΗ 〇^^°\ ΝΗ 1.95 606 146641.doc •51 · 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-15 F 對掌性 ΗΝ 、! 。Q \ 1.81 593 1-16 ΝγΝ / NH NH 1.99 606 1-17 紗< 。声； .αΝΗ 1.86 607 1-18 η〇-Ό ή, y-Nw 。Q \ 2.02 621 1-19 和心丫 ◦ NH 一σΝΗ 1.88 592 1-20 ΝΗ ΝΗ 1.86 590 146641.doc -52- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-21 和心 NrN Ο /NH NH 一σ 1.81 594 1-22 F F^i 0 。Q \ 2.00 618 1-23 5¾% NH NH 1.93 604 1-24 °-^N^ Υ Η η/ ) rirVS ΝγΝ 〇 k/N\ 2.05 635 1-25 YnC Ρ^Η HN ^rVS NwN K^J ΗΝΥ^ΓF H 、。^y〇、 1-26 , 對掌性 V。 Y Η H〆 /〇 φί"0 為κχχ 1.99 623 146641.doc •53- 201043611 編號結構 tRe,(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-27 °·^Ν γΡΗ 7 φτΧ) Η Ύ^Ύ η 1-28 。声； ΝΗ ,α 1.97 592 1-29 丫 ◦ ΝΗ /Λ ρ 1.83 522 1-30 ΝγΝ / ΝΗ 0^ 〇、 2.00 550 1-31 νυν Ο °ν ΝΗ 身' ρ 1.91 552 1-32 Xu心 ν t) N /NH o^。 p 1.97 565 14664I.doc • 54· 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min】 MS (M+H)+ 1-33 NH 2.06 564 1-34 ΝγΝ ^ yNH 2.23 550 1-35 YFH HJN 人 ΝγΝ NH 。^'。\ NH 1.80 564 1-36 p封掌性 V'h Λτν>'Λ ΝγΝ *s^J yNH NH σ 1.78 551 1-37 Yfh hjn 又 rV'A ΝγΝ NH NH 、σ 1.86 564 1-38 p對掌性於5人 ΝγΝ »s^J ,ΝΗ NH 1.87 578 146641.doc -55- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-39 ΝγΝ NH 1.72 481 1-40 F^〇 ΝγΝ NH NH (σ 1.87 578 1-41 VFh «A rVvS ΝγΝ NH NH -σ 1.86 564 1-42 ΝγΝ NH NH σ 1.79 551 1-43 $對掌社 ΝγΝ NH 〇=^°\ NH p 1.81 564 1-44 Ν^γβΓ HN 义 ΐΛΚ K-f O^NH ό 1.71 561/563 146641.doc -56- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-45 Ν^γΒτ «掌性 ΗΝΛΝ^ί3 m ,0 1.80 574/576 1-46 hnAnAh H / 0r°^〇 O^NH 1 1.63 491 1-47 N^Br 娜 ηΛνΜ O^NH 人 1.73 548/550 1-48 ν^Βγ ηνΛν^Κ 令。、υ Ο^ΝΗ 1.72 505/507 1-49 ν^Βγ ηνΛν^Κ 。工Γ 1.69 505/507 1-50 r^Br 綱 ΗΝ^Ν^Ν Ν-^ 0τ°^ Ο^ΝΗ 1.76 574/576 146641.doc 57- 201043611 編號結構 tRe,(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-51 ΗΝΛΝ^ί3 O^NH ό k 1.84 588/590 1-52 N^Yer 細 ηνΛν^Η H° O^NH s 。、 1.69 535/537 1-53 Ν^γΒΓ I HN^N^N N— 1.95 432 1-54 Ν^ΥΒΓ ,ηνΛν^Η /0 1.88 464 1-55 N^Br 對掌，丨生 (^NH ' ό A 1.88 600/602 1-56 ^r°、G 。工Γ 1.60 447/449 1-57 N-YCI hnAn^R Wj 。工1r 1.68 461 146641.doc -58- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-58 N、CI 令。、u 0入NH k 1.70 461 1-59 Ν^γα 綱 ηνΛν^Κ Wj 令。、。 O^NH s 人 1.71 504/506 1-60 Ν·^γ° ηνΑνΛη η_ρ ά- ϋΛ Ο^ΝΗ 0 1.69 517/519 1-61 N、CI hnAn^r η° 令。、Ο Ο^ΝΗ ό k 1.81 544 1-62 Ν^α 娜 ηΛη^ ν-/ 令。、0 。人ΝΗ 0、 1.78 530/532 1-63 ΗΝ^Ν^Ν Ν-/3 令。、G Ο人ΝΗ ό 1.86 556 146641.doc -59- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-64 hA又 H 令。、0 O^NH ό 1 1.73 530/532 1-65 N^C， ηνΑνΛη η / Ο^ΝΗ S 1.66 491/493 1-66 Nr t) wN" ΝΗ XT 1.99 662 1-67 N^CI ηνΛν^Κ ϊ3-^° <τ、π /〇 1.86 420/422 1-68 为νΚ-Nr G w〇 ΝΗ 5~。' χ/Η 1.90 649 1-69 Vph ηνΛ ψΌ ΝΗ ΝΗ 0 1.81 582 146641.doc -60- 201043611

編號結構 tRe,(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-70 N^N / J> 、 NH Ά。' 2.10 496 1-71 O對掌性 fY H、人 ArVS ΝγΝ CCv rrNH 1.84 592 1-72 Υ Η ΝγΝ ：^\〇 /N、 1.75 509 1-73 〇對掌性 γ H、人 φτΌ 、:XV ^ΝΗ 1.73 552 1-74 pVF η "Λ φτΌ σΗ 1.82 578 1-75 ΝγΝ ΗΝ\ 1.93 507 146641.doc -61 - 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-76 Ο対掌性 Η A rvVS HN\ 1.75 467 1-77 ΓΥΥί ΝγΝ O〇s HN\ 1.82 481 1-78 γΡΗ H々、 irVvS ΝγΝ HN\ 1.81 497 1-79 O 對掌性 Yh HfV 、:A HN\ 1.89 495 1-80 F+F H、々 rVrV ΝγΝ ::x^O O 1.95 606 1-81 十H、人/ γυΥ^ι ΝγΝ 0 k^Nx 1.87 592 146641.doc •62- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-82 士 Η Ά ΝγΝ 0 1.77 578 1-83 ::% 0 k/N、 1.92 604 1-84 ΝγΝ 0 k^N、 2.00 618 1-85 Vph ηνΛ rvVS ΝγΝ NH 1.80 499 1-86 P對掌性 Υ，Η ψΌ )Η cT 1.80 569 1-87 Vfh ηνΛ φίΧ) νη α^^°\ )ΝΗ (σ 1.96 596 146641.doc -63- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-88 ΝγΝ NH NH 〜Ο 1.98 582 1-89 fVF η Λτν^ ΝγΝ OH 1.15 468 1-90 3對ϊ性 irV 丫^ ΝγΝ vCC ryH 1 1.85 614 1-91 I S對掌 irV^n NyN ^ V〇c;H rrm 1.91 628 1-92 對掌性 YF Η Υ^ν N^N v〇c ΓΎΝΗ 1 1-93 分對掌性 FY; H、斗。 ityV^ Νγ-Ν 〇^α： ryH 1.85 628 146641.doc •64- 201043611

編號結構 tRe,(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-94 卩*ί掌性 Vfh rSrVS ΝγΝ vCC。 rrNH 1 /以 1.87 648 1-95 0對拿性 fy;h VS rVvS ΝψΝ VCC rrNH 1 /Nj 2.08 594 1-96 ΝγΝ v〇C 广H 1 1-97 vff Q"° ^rV) ΝγΝ v〇C rvNH 1 1.81 590 1-98 1^1對掌性 Vfh^0 ΝγΝ vCC rrNH 1 〆》0 1-99 γΛΛ flV^ ΝγΝ v〇c ΓΎΝΗ 1 1.85 592 146641.doc -65- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ I-100 义 ν^νη Λ ryH 1 1-101 χγΝΗ 1.84 536 1-102 v〇c xr 1 1-103 FYFF工人 r^rV) v〇c XT 1 1.91 618 1-104 ΝφτΌ y〇C 厂NH ' 1-105 Vph Η.Λ 〇ra： .aNH 1 1.79 550

ϋ 146641.doc ·66· 201043611

編號結構 tRe,(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-106 V〇c: NH 1 1-107 j}對掌性 Y 、人 ΝγΝ ::iV 9， 1.83 578 1-108 ：:^〇 ycr 1.91 606 1-109 &對掌性 Y H、人 φτΌ ：：ϊ^〇 rCT 1.93 606 1-110 CJ對掌性人 ςτΌ ^ΝΗ C> 1 1.74 539 1-111 ξ} *ί掌性 Υ Η、人 σΗ 1.83 578 146641.doc -67- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-112 g對掌·ίί pVF η 丫八 1.81 566 1-113 1對掌性 Ηί° ,ΝΗ ΝΗ .σ 1.91 552 1-114 ρ ff 1對掌性〇γα： XT 1.96 594 1-115 0對掌性 F-4—F ΝγΝ ΝΗ 0 N—7 1.85 523 1-116 F i對*性十H , (iYV^ ΝγΝ ΝΗ 厂分、 1.82 536 1-117 1對掌性十Η心 rVV^ N丫N ΝΗ c> 2.08 507 146641.doc 68- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-118 X對掌性十Η巧八 ,φτΌ 1.94 481 1-119 1對掌性 Νγ^Ν ΝΗ 一σΝΗ 1.91 552 1-120 丫 Ο NH jCT 1.92 596 1-121 VNH ΝΗ .σ 2.02 610 1-122 /¾¾對掌性 ’勒 N^N ^NH NH 0 2.52 640 1-123 /as, 對掌性 Q i 5¾ ,NH os=^'°， pNH 2.35 640 合成7Υ-((ΐπ，2Ι?)-2-胺基-環戊基）-7V-甲基-甲烷磺醯胺（B-4a) 146641.doc -69- 201043611 步驟1 :甲烷磺酸甲烷磺醯胺基-環戊酯（B-la)

•J ^ H^〇 Η0'·Ό 〇v-6 ο 將（l»S，2i?)-2-胺基-環戊醇（10 g，72.67 mmol)置於 300 mL DCM中，冷卻至0°C，且相繼與三乙胺（60.7 mL，436 mmol)及曱烷磺醯氣（17 mL，218 mmol)合併。在〇°c下授拌混合物1小時。混合物與水及NaHC〇3飽和溶液合併且萃取。分離出有機相，以水/IN HC1洗條1次，經]vigS04乾燥’濾出且藉由旋轉蒸發來濃縮。產物B-la(HPLC-MS : tRet. = 0.77 min ; MS (M-H)-=256)未經任何另外純化即使用0 步驟2 : iV-((l足2幻-2-疊氮基-環戊基）-甲烷磺醯胺（B_2a)

B.1a

NaN3, DMF βΟΌ

將化合物 B-la(17.8 g，69.17 mmol)置於 450 mL DMF 中’與NaN3(l 3_5 g，207.5 mmol)合併，加熱至6〇。匚且授拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，且添加7倍之水。搜掉混合物30分鐘，且接著以乙酸乙酯萃取產物。有機相經 MgS〇4乾燥，濾出且藉由旋轉蒸發來濃縮。將藉由旋轉蒸發而濃縮之殘餘物與水及乙醚混合，分離出有機相，經 MgS〇4乾燥，濾出且藉由旋轉蒸發來濃縮。產物& 146641.doc •70- 201043611 2a(HPLC-MS : tRet =0.97 min ; MS (Μ-Η)·=203)未經任何另外純化即用於隨後反應中。步驟3 : #-((lR，2R)-2-疊氮基-環戊基）-#-甲基-甲烷磺醯胺 (B-3a)

I K2C〇3, Mel DME, 85 ΐ B-2a B-3a

將化合物 B-2a(9.8 g，47.98 mmol)置於 600 mL DME 中，且接著與碳酸鉀（13.3 g，95.96 mmol)及碘代甲烷（12 mL， 191.92 mmol)混合。將混合物加熱至85°C且攪拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，與水及乙醚混合，且分離出有機相。再以乙酸乙酯萃取水相，且合併有機相。此等有機相經MgS04乾燥，濾出且藉由旋轉蒸發來濃縮。粗產物B-3a 未經任何另外純化即用於隨後反應中。步驟4 : iV-((lR，2R)-2-胺基-環戊基）-，甲基-曱烷磺醯胺（B-4a)

❹ 在氮化高壓釜中將化合物Β·3<9.8 g，44.90 mmol)懸浮於100 mL EtOH中，且與鈀/碳（1 g，裝填5%)合併。接著施加6巴H2，且在室溫下攪拌反應混合物3小時。反應結束後，濾出反應混合物，蒸發濾液且粗產物&43(1^1^-MS : tRet. = 0.45 min ; MS (M+H)+=193)未經任何另外純化即用於隨後反應中。 146641.doc -71 - 201043611 合成7V-((lR，2R)-2-胺基-環己基）_#-甲基·甲烷磺醯胺（B_8a) 步琢1 : 2-((lR，2R)-2-胺基-環己基）異吲嗓_ι，3_二酮（B_5a)

將（1R，2R)-環己烧-1，2-二胺（12.70 g，111.21 mm〇i)置於 90 mL EtOH中，冷卻至0°C且與鄰苯二甲醯亞胺試劑（1，3_ 二側氧基-1,3-二氫-異吲哚-2-甲酸乙酯；24.38 g，111.21 mmol)混合。在短暫反應時間後，自溶液沈渴免出產物。在〇 C下擾拌混合物1小時。接著使其再冷卻至〇它，再擾拌 30分鐘，且濾出產物。乾燥粗產物B_5a(HpLC MS : tRet.= l _40 min ; MS (M+H)+=245) ’且未經任何另外純化即用於隨後反應中。步琢 2 . ^/"-[(1尺，2尺)-2-(1，3-二側氧基-1，3-二氫__異11引11朵_2_ 基）-環己基]-曱烷磺醯胺（B-6a)

將化合物 B-5a(15 g，61·4 mmol)置於 105 mL Dcm 中，與三乙胺（25.7 mL，184.2 mmol)合併’且接著逐滴添加溶解於45 mL DCM中之甲烷磺醯氣（4.8 mL，61_4 mm〇l)。在至溫下授掉混合物1小時。將混合物與水混合，分離各相，且以DCM再萃取水相2次。合併之有機相經MgS〇4乾 146641.doc •72- 201043611 燥且蒸發。所獲得之固體B-6a未經任何另外純化即用於隨後反應中（HPLC-MS : tRet =1,22 min ; MS (M+H)+=323)。步驟 3 ·· iV-[(lR,2R)-2-(l，3-二側氧基-1，3-二氫-異吲哚-2-基）-環己基]甲基-甲烷磺醯胺（B-7a)

將化合物 B-6a(20.1 g，62.38 mmol)置於 200 mL DME Ο 中，且接著與碳酸鉀（17.2 g，124.7 mmol)及碘代曱烷 (11 ·65 mL，187_ 1 mmol)合併。加熱混合物至85°C且攪拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，與水及乙酸乙酯混合，且分離出有機相。合併之有機相經MgS04乾燥且蒸發。粗產物 B-7a(HPLC-MS : tRet=1.34 min ; MS (M+H)+=337)未經任何另外純化即用於隨後反應中。步称4 : #-((iR，2R)_2_胺基_環己基）_沁曱基-曱烷磺醯胺（B_ 8a)

將化合物 B-7a(19.6 g，58.38 mmol)置於 505 mL EtOH 中’與35%肼水溶液〇5·9 mL，175.1 mmol)合併且在授摔下回流3小時。反應混合物冷卻至室溫，濾出所得固體，以少量EtOH洗滌且藉由旋轉蒸發來濃縮。殘餘物與dcm 146641.doc -73- 201043611 一起攪拌，濾出，以DCM洗滌且合併之有機相經]^#〇4乾燥，濾出且藉由旋轉蒸發來濃縮。油性殘餘物與乙醚合併，此時產物開始結晶析出。回流且攪拌3 〇分鐘。接著使其冷卻至0C ’再攪拌30分鐘，且濾出固體。固體B_ 8a(HPLC-MS : tRet. = 1.81 min ; MS (M+H)+=207)未經任何另外純化即用於隨後反應中。 r) 4-{4-[(lR，2R)-2-(甲烷磺醯基-甲基_胺基）環戊基胺基卜 5-三氟曱基-嘧啶-2-基胺基卜3_甲氧基_#_(1_甲基哌啶_4_ 基）-苯甲醯胺（1-124)

將化合物 A-5a(50 mg，〇·ΐΐ3 mmol)及化合物 B-4a(43.3 mg，0.225 mmol)懸浮於 500 pL EtOH 中，與 DIPEA(75 μί，0.451 mmol)合併且在75°C下攪拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，且使用旋轉式蒸發器除去溶劑。將殘餘物溶解於DMF中且藉由製備型HPLC純化。冷束乾燥1_124之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet =1.77 min ; MS (M+H)+=600)。 s) 4-{4-[(lR，2R)-2-(甲烷磺醢基-甲基-胺基）_環己基胺基卜 5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基}·3·甲氧基甲基-哌啶_4_ 基）_苯甲醢胺（1-90) 146641.doc -74- 201043611

將化合物 A-5a(129 mg，0.291 mmol)及化合物 B-8a(60 mg，0.291 mmol)與 DIPEA(193 μί，1.16 mmol) —起置於 1.2 mL EtOH中且在70°C下攪拌2小時。反應混合物冷卻至室溫，且使用旋轉式蒸發器除去溶劑。殘餘物溶解於DMF 〇中且藉由製備型HPLC純化。冷凍乾燥1-90之含產物溶離份 (HPLC-MS : tRet. = 1.85 min ; MS (M+H)+=614)。 t) 4-【4-((lR，2R)_2-甲烷磺醯胺基-環己基胺基）-5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基]-3-甲氧基-N-(l-甲基-哌啶-4·基）-苯甲醯胺（1-125)

將化合物A-6a溶解於DCM中，且以10% K2C03溶液萃取，乾燥且蒸發。將入-63(5〇1118，0.096 111111〇1)懸浮於11111^ DCM中，且與40 pL三乙胺（0.288 mmol)合併。接著缓慢逐滴添加8 pL(0.1 05 mmol)曱烧續贐氯，且在室溫下攪拌混合物隔夜。蒸發反應混合物，將殘餘物溶解於DMF中，且直接藉由製備型HPLC進行層析來純化。冷凍乾燥1-125之 146641.doc -75- 201043611 含產物溶離份（HPLC-MS : tRet =1.78 min ; MS (M+H)+=600)。 u) 4-[4-((lR，2R)-2-胺基-環戊基胺基）-5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基】-3-甲氧基-N-(l-甲基-哌啶-4-基）-苯甲醯胺（A-6b)

A-5a A^b 將化合物 A-5a(300 mg，0.676 mmol)及（1R,2R)-反-1,2-環戊二胺二鹽酸鹽（11 7 mg，0.676 mmol)懸浮於4 mL EtOH 中，與DIPEA(447 pL，2.71 mmol)混合且在80°C下攪拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，且使用旋轉式蒸發器除去溶劑。將殘餘物溶解於DMF中且藉由製備型HPLC純化。冷凍乾燥A-6b之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet =0.60 min ; MS (M+H)+=508)。 v) 4-[4-((lR，2R)-2-甲烷磺醯胺基-環戊基胺基）-5-三氟甲基-嘧啶-2-基胺基]-3-甲氧基-N-(l-甲基-哌啶-4-基)-苯曱醯胺(1-126)

將化合物A-6b溶解於DCM中，且以10% K2C03溶液萃取，乾燥且蒸發。將A-6b(65 mg，0.128 mmol)懸浮於700 pL DCM中，且與72 μΐ^三乙胺（0.512 mmol)合併。接著在 146641.doc -76- 201043611 0 C下緩慢逐滴添加1〇 134 mm〇l)甲烷磺醯氣，且在至溫下搜掉混合物1小時。蒸發反應混合物，將殘餘物溶解於DMF中，且直接藉由使用製備型hplc進行層析來純化。冷;東乾燥1_126之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet=1.83 min ; MS (M+H)+=586)。 w) 2,5-二氣-4_甲基硫基嘧啶（A_14a)

將 2·4,5-三氣哺咬（10.9 g，59.4 mmol)置於 110 mL THF 中’冷卻至0°C且接著與甲烷硫醇鈉（5 g，71.3 mmol)混合。溫度緩慢增至室溫且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。反應結束後’反應混合物藉由旋轉蒸發來濃縮，與100 mL 水混合且以DCM萃取2次。分離出有機相，經MgS04乾燥’慮出且藉由旋轉蒸發來濃縮。產物A-14a未經任何另外純化即使用。〇 x) 4-(S-氣-4-甲基硫基-嘧啶-2_基胺基）-2-氟-5-甲氧基-苯甲酸苯甲酯（A-15a)

將化合物A-14a(2 g，10.3 mmol)及4-胺基-2-氟-5-甲氧基-苯甲酸苯甲酯（3.4 g，12.3 mmol)置於3 mL NMP中，且與HC1 之二。惡烧溶液（2.8 mL，11_3 mmol，4 Mol/L)合併。 146641.doc -77- 201043611 在100 C下攪拌混合物隔夜。反應混合物冷卻至室溫，且與乙猜合併。再授掉15分鐘，將反應混合物倒入水中且再攪拌30分鐘。過濾沈澱物A_15a(HPLC-MS : tRet =2.05 min ; MS (M+H)+=43 4)，乾燥且未經任何另外純化即使用。 y) 4-(5-氣-4-甲烷磺醯基·嘧啶-2-基胺基）-2-氟-5-甲氧基-苯甲酸苯曱酯（A-16a)

將化合物 A-15a(ll.l g ’ 23.0 mmol)懸浮於3 50 mL DCM 中’與3-氣-過苯甲酸〇CPBA)(13 g ’ 52·9 mmol)缓慢合併且攪拌反應混合物隔夜。以水及1 M NaOH萃取反應混合物2次’且以DCM再次萃取合併之水相。有機相經MgS〇4 乾燥且蒸發。粗產物 A-16a(HPLC-MS : tRet. = l .69 min ; MS (M+H)+=466)未經任何另外純化即用於隨後反應中。 z) 4-(5-氣-4-羥基-嘧啶-2-基胺基）-2-氟-5-甲氧基_苯甲睃 (A-17a)

A.16a 146641.doc -78- 201043611 將化合物 A-16a(5 g，10_7 mmol)置於 1〇 mL ΤΗρ^，且接著與8N NaOH溶液（8 mL ’ 64_4 mmol)合併。首先在室溫下攪拌混合物1小時，且接著在651下攪拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，與水混合，分離出有機相’且以8>} hci 酸化水相。產物經細玻璃纖維過濾器過濾。乾燥產物A_ 17a(HPLC-MS : tRet=l min ; MS (M-H)_=312)，且未經任何另外純化即用於隨後反應中。 aa) 4-(4,5-二氣-嘧啶-2-基胺基）-2-氟-5-甲氧基_苯曱睃（A_ 〇 18a)

A-17a A-18a 將化合物A-17a(3.3 g，10.5 mmol)懸浮於48 mL磷醯氯中，且在攪拌下回流2小時。藉由旋轉蒸發，除去磷醯氣，且殘餘物與水一起攪拌。在室溫下攪拌混合物3〇分鐘，且濾出固體。以水洗滌其，將殘餘物懸浮於THF中，與水及NaAO3飽和溶液混合且攪拌隔夜。藉由旋轉蒸發，除去THF，且水溶液以8Ν Ηα調至pH 2。攪拌3〇分鐘濾出且以水洗滌。乾燥產物A_18a(HPLC_MS : & min ; MS(M-H)-=330)，且未經任何另外純化即用於隨後反應中。 ab) 4-(4,5-二氣-嘧啶_2_基胺基）_2•氟·5_甲氧基·Ν_(ι•甲基_ 哌啶-4-基）-苯甲醯胺（A-Ma) 146641.doc -79- 201043611

1) SOCIj, ψ % 2) DIPEA, THF A>18a

irV N^>N

將化合物A-18a(3.4 g’ 10.1 mm〇1)懸浮於1〇〇 mL甲苯中，與亞硫醯氣（2·2 mL，30.4 mmol)混合且在攪拌下加熱至120°C，歷時2小時。反應混合物冷卻至室溫，且使用旋轉式蒸發器除去溶劑。將殘餘物懸浮於13〇 mL thf中，冷卻至〇°C且向其中逐滴添加4-胺基-1-甲基哌啶2 g，1〇」 mmol)及 DIPEA(5.2 mL，30.4 mmol)溶解於 50 mL· THF 中之 /谷液。反應混合物緩慢達至室溫，且在室溫下搜拌12小時。產物 A-19a(HPLC-MS : tRet =0.87 min ; MS (M+H)+=428) 沈澱，渡出，乾燥且未經任何另外純化即用於隨後反應中。 ac) 4-{5-氣-4-[(lR，2R)-2-(甲烷磺醯基-甲基_胺基）_環戊基胺基】-嘧啶-2-基胺基}-2-氟-5-曱氧基甲基-哌啶_4-基）-苯甲醢胺（1-127)

將化合物 A-19a(3.7 g’ 8.6 mmol)及化合物 B-4a(2.2 g， 11.2 mmol)懸浮於4〇 mL EtOH中，與DIPEA(5.9 mL，34.5 mmol)合併且在751下搜拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫’且使用旋轉式蒸發器除去溶劑。將殘餘物溶解於Dmf 146641.doc -80- 201043611 中且藉由製備型HPLC純化。冷凍乾燥1-127之含產物溶離份（HPLC-MS : tRet =1.99 min ; MS (M+H)+=584)。類似於本文針對合成實例1-124至1-127以及1-90所述之反應方法a)至ac)，可自相應前驅體獲得其他實例1-128至I-195(表2)及其他相當實例，該等前驅體可購得或可藉由自文獻已知之方法製備。表2 :實例1-124至1-195 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-124 P對掌性 v〇c z〇rNH 1 1.77 600 1-125 ΝγΝ k/1 v〇C NH 1 0 1.78 600 1-126 N^N \! v〇C NH 1 0 1.83 586 1-127 〇、/對掌性 XT 1.99 584/586 146641.doc -81 - 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min】 MS (M+H)+ 1-128 «掌枝 ΝγΝ 0r^S NH 1 ό 1.89 648/650 1-129 {?對掌性〇rai NH 1 1.86 614 1-130 g對掌性 Vf h t〇 rV^ N^N 〇^a: /r 1 1.89 662 1-131 JP對掌性 clv^vNH /n j 1.90 634/636 1-132 分對掌性柯。 Ns^N vCC 。，1 八 1.58 604 1-133 -性 +h、v rVV^ ΎΝ Ό 丫〜NH 1.83 589 146641.doc -82- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-134 鉍r 浐； 1.93 578/580 1-135 對掌性， NyN 1.83 565/567 1-136 ^對ϊ性时。 ΝψΝ W 〇yO：0 χτ 1 1.71 619 1-137 〇對掌性 Vfh HfS"° CIWNH oyUAo- HN\ 1.77 551/553 1-138 NYN U 。其： ;; 1.75 541 1-139 $^r 2.08 592 1-140 娜 Yh yfc rXC 2.35 614 146641.doc •83 · 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-141 ΝγΝ Ο 〇^α： ΝΗ 1 0 1.87 618 1-142 綱 r Η ΓΥΝχΝ Ν^Ν W χτ 1 1.84 628 1-143 〇對掌性 rxc 1.92 572 1-144 士 Η、^Γ 、々Ό ΗΝ^Ο S 人 1.81 588 1-145 ρ W掌性 FYf„ » rxc 2.23 614 1-146 彳對掌性秘。 l〇； o、H 2.04 600 1-147 〇對掌性 Vff h ''f t° 〇Ό 户;H 2.04 531 146641.doc • 84- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-148 兄對掌性 N 丫N A 0 ϊ 1.94 586 1-149 I 〇對掌性姥 ΝγΝ v〇c 1.97 628 1-150 對掌性〇«/ Ns^N 〇χχ? 、人0 1.84 643 1-151 〇對掌性柯。 ΝψΝ 〇ra: .σΝΗ 1.82 612 1-152 O對掌性 Fvf^ η HtT% 〇^α:: γΝΗ 1.71 531 1-153 F f?對掌性 W'° N^N W Vynh η〇νΛΑ? 2.03 572 146641.doc -85- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (Μ+Η)+ 1-154 對掌性 Υη ηνΛ 令Ό ΝΗ ΝΗ Ρ 1.79 580/582 1-155 F S對掌性 ,α： 1.82 614 1-156 士 η 9< rVVl ΝγΝ kx1 /V〇c I 1.92 602 1-157 ?\對拿性 fYfFh Vfo rVvS jpYNH h/ 1 1.63 534 1-158 〇射掌性 fyfFh、今。 irVNvS NYN rxx: 2.43 628 1-159 )?對掌性 αχχ；Η 1.80 549 1-160 士 H ΘΓ χΎΗΗ 1.21 600 146641.doc -86- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-161 〇對掌性 ¢^0 〇ya：： ηνΧ)ί 1.94 610 1-162 ? H \ f對掌性 vCC xr 1 1.81 580/582 1-163 ί Η 、I對掌性 v〇c σΗ 1 1.87 580 1-164 娜 _Ν^\〇 N*yN ^y^〇C 1.74 594/596 1-165 O對掌性 FtF H Vt〇 φΌ 1.75 531 1-166 對掌性 ? Ν^Ν ^ 〇ρα: 〇ΝΗ 1 1 1.73 644/646/648 1-167 f Η、L對掌性 Ck^^NH 、。〜cr 1 1.84 658 146641.doc •87- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-168 H 、？___**性 rVUT 丫 cl>v^WNH 〇^CC〇 r^NH ' 1.82 614 1-169 對掌性 α、、/ 〒丨、N"、〇 rV^rS ΝγΝ v〇C。 ryNH 1 1.98 612 1-170 〇、/對掌性〒丨、N·% 〇^αΐ 、γ〜ΝΗ 1 1.82 558 1-171 丫 G CI、v^5^NH 。及 .ΝΗ ϊ 1.84 588 1-172 賴* Ιη、Λ rrvS Nvs^N CC? ^NH 1 T 1.83 632/634 1-173 J-一綱 rVH1 ^•γΝΗ 0、 1.79 614 1-174 、/對掌性 I a，,S.、。 ψΌ 〇^αι xr 1 1.89 598 146641.doc -88- 201043611

編號結構 tRet(HPLC) [min】 MS (M+H)+ 1-175 丫 a、广性 V〇c;H .σΝΗ 1.86 588 1-176 F p對掌性时。〇 ΝγΝ ^ 炉;Η 1 1.78 614 1-177 CJ對掌性 Υ Η Ύ，。令Ό 〇σΝΗ 人 1.69 531 1-178 §對掌性 1.43 576 1-179 對掌性 ρ ? Η V% ΛτΝχ5> ΤΙ i 1.67 566/568 1-180 Ο 封y性 i Nr U 1.69 564 1-181 % 1.77 561 146641.doc 89- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-182 g 掌性 r h>> ψΌ 2.17 624/626 1-183 兄對掌性 f B、今。 r〇AH 2.14 580/582 1-184 對掌性、Η rxx： 2.36 594/596 1-185 對掌性 ? η "r φίΌ 2.37 614/616/618 1-186 Q對掌性 FYFFh >T〇 irVV^ N^N 入 1.78 515 1-187 §對掌性 γΡΗ、?今。 rVvS Νγ-Ν :)σΝΗ 人 1.73 535 1-188 1 S對掌性 Yf H Vt。 ^rVS Ν丫 Ν jr 人 1.72 529 146641.doc -90- 201043611 編號結構 tRet(HPLC) [min] MS (M+H)+ 1-189 1 8 * 掌 * 1.75 545 1-190 封掌性 j f η呷八 4¾ 1.73 450/452 1-191 對掌性 α时。 rVial ? 2.02 566 1-192 ,〇 »»Λ irVvS10 Η 丫 U Λνχχ?η 1.78 580 1-193 g封掌性 Fs]<Fu hPs^o 1.89 605 1-194 i對掌性 Fv]^F h hn^s^o xJrN "0 1 1.82 535 1-195 g對掌性 FYfh hn^^o YYNH 〇γΛ^〇〇rNH 1 1.72 587

以下實例描述本發明化合物之生物活性，但本發明不限於此等實例。 146641.doc •91 · 201043611 PTK2酶測試分析法1 此測試使用活性PTK2酶（Invitrogen代號為PV3 832)，且使用聚-Glu-Tyr(4:l，Sigma P-0275)作為激酶受質。在 DELFIATM分析法中經由受質磷酸化來偵測激酶活性。以销標記之鱗酸化赂胺酸抗體PT60(Perkin Elmer，編號： AD00400)偵測磷酸化受質。為測定PTK2抑制劑之濃度-活性曲線，將化合物用1 0% DMS0/H20連續稀釋，且置放10 μί各稀釋液於96孔微量滴定盤（具有U形底之透明培養盤，Greiner編號： 650101)(抑制劑測試一式兩份）之各孔中，且與每孔10 μι PTK2激酶（每孔0.01 pg)混合。相應地，預先以激酶稀釋緩衝液（20 mM TRIS/HC1 pH 7.5、0·1 mM EDTA、0.1 mM EGTA、0.286 mM正釩酸鈉、添加有新鮮製備之BSA 之10%甘油（第五部分，1 mg/mL)、及DTT(1 mM))稀釋 PTK2激酶。在室溫下預培育測試化合物及PTK2激酶1小時，且以每分鐘500轉震盪。藉由每孔添加10 mL聚 (Glu，Tyr)受質（溶解於 250 mM TRIS/HC1 pH 7.5，9 mM DTT中之每孔25 聚（Glu,Tyr)、每孔0.05 pg生物素標記聚（Glu,Tyr))，使反應開始，DMSO之最終濃度為2%。接著添加 20 μι ATP混合物（30 mM TRIS/HC1 pH 7·5、0_02 % Brij、0.2 mM 正釩酸鈉、10 mM 乙酸鎂、0·1 mM EGTA、lx磷酸酶抑制劑混合液l(Sigma，編號： P2850) ' 50 μΜ ATP(Sigma，編號：A3377 ; 15 mM儲備 146641.doc -92- 201043611 溶液））。激酶反應1小時（以500 rpm震盪培養盤）後，藉由每孔添加12 pL 100 mM EDTA(pH 8.0)，使反應停止，且在室溫下再震盪5分鐘（500 rpm)。將55 μί反應混合物轉移至抗生蛋白鏈菌素培養盤（Roche製造之Strepta Well High Bind(透明，96孔），編號：11989685001)中，且在室溫下培育1小時（以500 rpm震盪）。接著以每孔200 μΕ D-PBS(Invitrogen，編號14190)洗滌微量滴定盤3次。接著添加100 pL含有DELFIA Eu-Nl抗磷酸化酪胺酸PT60抗〇體（Perkin Elmer，編號：AD0040，用 DELFIA測試緩衝液 (Perkin Elmer，編號：1244-111)稀釋 1:2000)之溶液，且在室溫下培育混合物1小時（以500 rpm震盪）。接著以每孔 200 μίν DELFIA洗猶:緩衝液（Perkin Elmer，編號：1244-11 4)洗滌培養盤3次，添加每孔200 μί濃度增強溶液 (Perkin Elmer ’編號·· 1244-105)，且在室溫下培育混合物1 0分鐘（以300 rpm震盪）。接著在微量滴定盤言買取器（VICTOR3，Perkin Elmer)中量 Ο 測時間延遲之銪螢光。所用陽性對照組為含有溶劑對照 (於測試緩衝液中之2°/。DMSO)且展現未受抑制之激酶活性的孔。含有測試緩衝液而非酶之孔用作背景激酶活性對照組。藉助於S型曲線分析演算法（FIFTY，基於GraphPAD Prism第3.03版）以可變希爾係數（Hill coefficient)進行迭代計算，自濃度活性分析測得IC5G值。分析法2 146641.doc •93- 201043611 此測試使用活性PTK2酶（Invitrogen代號為PV3832)，且使用聚-Glu-Tyr(4:l，Sigma P-0275)作為激酶受質。在 DELFIATM分析法中藉助於受質磷酸化來偵測激酶活性。以銪標記之磷酸化酪胺酸抗體PT66(Perkin Elmer，編號： AD0040)偵測磷酸化受質。為測定PTK2抑制劑之濃度-活性曲線，首先用10% DMS0/H20連續稀釋化合物，且接著用激酶稀釋缓衝液（20 mM TRIS/HC1 pH 7.5、0.1 mM EDTA、0.1 mM EGTA、 0.286 mM正叙酸鈉、添加有新鮮製備之BSA之10%甘油（第五部分，1 mg/mL)、及DTT(1 mM))稀釋，且將每孔10 μί 各稀釋液分配於96孔微量滴定盤（透明U形底之培養盤， Greiner編號650101)(抑制劑測試一式兩份）中，且與每孔10 pL PTK2激酶（每孔0.01 pg)混合。相應地，預先以激酶稀釋缓衝液稀釋PTK2激酶。在室溫下預培育經稀釋之PTK2 抑制劑及PTK2激酶1小時，且以每分鐘500轉震盪。接著添加每孔10 μι聚-Glu-Tyr受質（溶解於250 mM TRIS/HC1 pH 7_5、9 mM DTT 中之每孔25 pg聚-Glu-Tyr、每孔 0.05 pg生物素標記聚-Glu-Tyr)。藉由添加20 μί ATP混合物（30 mM TRIS/HC1 pH 7.5、0.02% Brij、0.2 mM正釩酸鈉、10 mM乙酸錢、0.1 mM EGTA、lx填酸酶抑制劑混合液 l(Sigma，編號：P2850)、50 μΜ ATP(Sigma，編號： A3377 ; 15 mM儲備溶液）），使反應開始，DMSO最終濃度為0.5%。激酶反應1小時（以500 rpm震蘯培養盤）後，藉由添加每孔12 μΐ^ 100 mM EDTA(pH 8)，使反應停止，且在 146641.doc • 94- 201043611 室溫下再震盪5分鐘（500 U/min)。將55 μί反應混合物轉移至抗生蛋白鏈菌素培養盤（Roche製造之Strepta Well High Bind(透明，96孔），編號：11989685001)中，且在室溫下培育1小時（以500 rpm震盪）。接著以每孔200 pL D-PBS(Invitr〇gen，編號14190)洗滌微量滴定盤5次。接著添 • 加100 pL含有DELFIA Eu-Nl抗磷酸化酪胺酸PT66抗體 (Perkin Elmer，編號：AD0040，用 DELFIA 測試緩衝液 (Perkin Elmer，編號：1244-111)稀釋 1:9000)之溶液，且將 Ο 其在室溫下培育1小時（以500 rpm震盪）。接著以每孔200 pL DELFIA 洗蘇缓衝液（Perkin Elmer，編號：1244-114)洗蘇培養盤5次，添加每孔200 μί濃度增強溶液（Perkin Elmer，編號：1244-105)，且整體在室溫下培育10分鐘（以 300 rpm震蘯）。接著在微量滴定盤讀取器（Victor，Perkin Elmer)中量測時間延遲之銪螢光。陽性對照組由含有溶劑（於測試缓衝液中之0.5% DMSO)且展現未受抑制之激酶活性的孔組〇成。含有測試緩衝液而非酶之孔用作背景激酶活性對照組。

. 藉由使用S型曲線分析演算法（FIFTY，基於GraphPAD

Prism第3.03版）以可變希爾係數進行迭代計算，自濃度-活性分析測得IC5G值。下表3給出如自分析法1或分析法2( + )測定所獲得之幾乎所有實例化合物1-1至1-195的IC5〇值。因此充分證明本發明化合物之抑制活性。 146641.doc -95- 201043611 表3 編 PTK2 1h 號 IC50 [nM] 1-1 1 I-2 3 Ι·3 10 Ι-4 9 Ι-5 19 Ι-6 4 i-7 3 I-8 2 I-9 3 1-10 3 1-11 2 1-12 3 1-13 18 1-14 32 1-15 3 1-16 4 1-17 15 1-18 46 1-19 4 卜20 1 1-21 4 I-22 15 I-23 3 I-24 24 卜25 24 I-26 23 I-27 6 卜28 3 I-29 1 I-30 5 1-31 5 I-32 21 I-33 70 卜34 71 I-35 81 I-36 400 I-37 400 卜38 400 I-39 2 I-40 2 1-41 2 編 PTK2 1h 號 ic5〇 [nM] I-42 1 I-43 2 I-44 2 I-45 1 I-46 2 I-47 0.96 卜48 2 I-49 10 卜50 1 卜51 1 卜52 2 I-53 8 I-54 4 I-55 2 卜56 3 I-57 26 I-58 3 1-59 1 1-60 3 卜61 1 I-62 1 I-63 3 I-64 1 I-65 3 I-66 200 I-67 10 I-68 200 I-69 1 I-70 440 卜71 10 I-72 31 I-73 0.95 I-74 1 I-75 3 I-76 1 卜77 2 I-78 4 I-79 3 I-80 9 1-81 3 I-82 0.98 編號 ΡΤΚ2 1h ic5〇 fnM] I-83 4 · 卜84 37 I-85 2 I-86 7 I-87 2 I-88 2 I-89 9 I-90 0.8 卜91 1 I-93 0.86 I-94 0.79 I-95 7 I-97 2 I-99 3 1-101 2 卜103 7 1-105 38 1-107 1 1-108 1 1-109 1 1-110 2 1-111 1 1-112 1 1-113 5 卜114 1 1-115 1 1-116 1 M17 1 1-118 1 卜119 6 1-120 2 1-121 3 1-124 0.81 1-125 0.93 1-126 0.9 1-127 0.53* 卜128 0.79 Μ 29 0.73 1-130 0.24* 1-131 0.29* 卜132 0.93 編號 ΡΤΚ2 1h IC5〇 [nM] 1-133 0.91 1-134 0.5* 1-135 1 卜136 0.28* 1-137 0.44* 1-138 0.41* Μ 39 0.49* 1-140 0.86* 1-141 1 卜142 0.5* 卜143 0.94 1-144 0.76* 1-145 3 1-146 0.58* 1-147 0.9 1-148 0.95 1-149 2 1-150 2 1-151 0.67* 1-152 0.41* Μ 53 0.69* 1-154 1 卜155 0.93* 1-156 2 1-157 0.69 卜158 1* 1-159 0,9* 1-160 0.71* 1-161 1 1-162 1 卜163 2 1-164 1 1-165 4 卜166 0.49* 1-167 3 1-168 3 卜169 4 1-170 2 1-171 2 1-172 2 卜173 2 146641.doc 96- 201043611 編號 ΡΤΚ2 1h ICs〇 [nM] 1-174 4 Μ 75 0.64 1-176 0.44* 1-177 2 Μ 78 0.91* 1-179 0.46* 編號 PTK2 1h IC50 [nMl 1-180 0.43* 1-181 0.43* Ϊ-182 4 1-183 4 1-184 1* 卜185 r 編號 PTK2 1h IC50 [nM] 1-186 4 1-187 6 1-188 16 1-189 9 1-190 13 1-191 10* 編 PTK2 1h 號 IC50 [nM] 1-192 2* 1-193 0.72* 1-194 0.71* _ 卜195 0.32* — 軟瓊脂分析法使用此細胞測試來測定ΡΤΚ2抑制劑對PC-3前列腺癌細胞於軟壤脂中生長（『固著非依賴性生長』）的影響。在2週培育時間後，藉由阿爾瑪藍（Alamar Blue)(刃天青）染色來證明細胞活力。 PC_3細胞（ATCC CRL-143 5)在含有補充有10%胎牛血清 (Invitrogen，編號：16000-044)之 F12 Kaighn 培養基 (Gibco ’編號.21127)的細胞培養瓶（1乃cm2)中生長。在培育箱中於37°C及5% C〇2下培育培養物，且每週進行2 次。測試I在96孔微量滴定盤（Greiner，編號：655 185)中進行’且由以下組成·由90 μΐ^含有1.2%壤脂糖（Invitrogen， 4%瓊脂糖膠1χ液體40 mL，編號：18300-012)之培養基組成的下層，隨後於60 pL培養基及0.3%瓊脂糖中之細胞層’及最終包含30 pL含有稀測試化合物之培養基（未添加璦脂糖）的頂層。為製備下層，將4%填脂糖與1 〇χ D-PBS(GibC〇，編號：14200)及Η20—起煎煮，且因此預稀釋為lx D-PBS中之3%瓊脂糖。後者以培養基（F12 Kaighn/l〇% FCS)及FCS調至含有10% FCS之F12 Kaighn培養基中1.2% 146641.doc -97- 201043611 壤脂糖之最終稀釋液。向微量滴定盤之各孔提供9〇叫下層懸浮液且冷卻至室溫，歷時！小時。對於細胞層，使用胰蛋白酶(GibC0, 〇.〇5%;編號：253〇〇)分離似細胞，計數，且在各狀況下每孔接種400個細胞於60吣添加有 0.3%壤脂糖之Fl2 Kaighn〇()% Fcs)中（沉）。在經2小時冷卻至至後$加測試化合物（3 Q叫連續稀釋液）以供三重量測。測試化合物之濃度通常覆蓋1 μΜ至0.06 nM之測試範圍。化合物（儲備溶液：1〇〇% DMS〇中1〇 mM)首先用 100% DMSO連續稀#，且接著用F12 Kaighn培養基預稀釋，以獲得0.8% DMSO之最終濃度。在37t：及5% c〇2下在蒸汽飽和氛圍中培育細胞14天。接著以染料阿爾瑪藍 (AbD Serotec，編號：BUF〇12B)證明活細胞之代謝活性。為此，添加每孔25 μί阿爾瑪藍懸浮液，且整體在培育箱中於37 C下培育約8小時。陽性對照組由填有25 經熱壓處理還原之阿爾瑪藍與丨75 FI2 Kaighn培養基（1〇% FCS)之混合物的空孔組成。所用之陰性對照組為含有兩値無細胞之瓊脂糖層及培養基頂層之孔。藉助於螢光分光計 (SpectraMAX GeminiXS，Molecular Devices)測定螢光強度。激發波長為53 0 nm，發射波長為590 nm。藉由使用S型曲線分析演算法（FIFTY，基於GraphPAD Prism第3.03版）以可變希爾係數進行迭代計算，自濃度_ 活性分析測得EC5G值。磷酸化PTK2(pY397)分析法使用此細胞測試來測定PTK2抑制劑對酪胺酸397上PTK2 146641.doc •98· 201043611 磷酸化（ρΥ397)狀態的影響。 PC-3細胞（前列腺癌，ATCC CRL-1435)在含有添加有 10% 胎牛血清（Invitrogen，編號：16000-044)之 F12 Kaighn 培養基（Gibco，編號：21127)之細胞培養瓶（175 cm2)中生長。在培育箱中於37°C及5% C02下培育培養物，且每週進行2次。測試時，將每孔2xl04個細胞/180 pL培養基塗於96孔微量滴定盤（Costar，編號：3598)中，且在培育箱中於37°C Ο 及5% C02下培育隔夜。第二天，添加測試化合物（20 pL連續稀釋液）。測試化合物之濃度通常涵蓋1 0 μΜ至5 fM之範圍。測試化合物（儲備溶液：10 mM 100% DMSO溶液）首先用100% DMSO連續稀釋，且接著用培養基稀釋，使最終濃度為0.5% DMS0。接著在培育箱中於37°C及5% C02下培育細胞2小時。接著移除培養物上清液，且在室溫下以 100 μ!^ 4°/。甲醛之D-PBS溶疼固定細胞，歷時20分鐘。在移除曱醛溶液後，以300 μΐ洗滌緩衝液（0.1% Triton X-100 〇之D-PBS溶液）洗滌細胞一次，歷時5分鐘。接著在環境溫度下在每孔100 μΐ淬滅溶液（在洗滌緩衝液中含30%過氧化氫、10%疊氮化鈉）中培育20分鐘。再以300 μΐ洗滌缓衝液洗滌細胞覆層1次，歷時5分鐘，且接著以每孔1 〇〇 μΐ阻斷緩衝液（於 TBST(25 mM Tris/HCl pH 8.0、150 mM NaCl、 0.05% Tween 20)中含 5%脫脂奶粉（Maresi Fixmilch))洗滌 1 小時。以50 μι經阻斷缓衝液稀釋1:1000倍之第一抗體抗磷酸化 ΡΤΚ2 [ρΥ397]兔單株（Invitrogen/Biosource，編號： 146641.doc -99- 201043611 44-625G)替換阻斷緩衝液。為達成對照之目的，改用經阻斷緩衝液稀釋1:400倍之PTK2 [總]抗體（純系4 47小Z單株，Upstate，編號：〇5-537)。在下培育隔夜。接著以 3 0 0 μ L洗務緩衝液洗丨條細胞覆層一次，歷時$分f 且、、、加每孔50 第二抗體。為偵測已結合之磷酸化ρτκ2 [ΡΥ397]抗體，使用與辣根過氧化酶偶聯之山羊抗-兔抗體（Dako ’編號：Ρ0448 ;以阻斷緩衝液稀釋1:75〇倍）。為偵測已結合之PTK2 [總]抗體，使用亦與辣根過氧化酶偶聯之兔-抗-小鼠抗體（Dako，編號：P0161 ;以阻斷緩衝液稀釋1:1000倍）。在溫和震盪下，在室溫下培育1小時。接著再以300 μί洗滌緩衝液洗滌細胞覆層一次，歷時5分名里，且接著以300 μΐ PBS洗蘇。藉由吸滤來移除pBS，藉由添加100 μί染色溶液（ΤΜΒ過氧化酶受質（KPL，編號： 50-76-02)與過氧化酶溶液B(H2〇2)(KpL，編號：5〇_65_〇2) 之1:1混合物）進行過氧化酶染色。染色劑在暗處經丨〇_3〇为鐘顯色。藉由添加每孔丨00 1Μ磷酸溶液停止反應。在450 nm下使用吸光里測裝置（vicTOR3 PerkinElmer)測定吸光度。使用抗磷酸化PTK2 [pY397]免疫染色之抑制性來測定ECw值。抗_ρτΚ2 [總]抗體之染色用於對照之目的’且在抑制劑影響下應保持恆定。藉助於S型曲線分析演算法（FIFTY，基於GraphPAD Prism第3.03版），採用可變希爾係數進行迭代計算，自濃度-活性分析測得ec50 值。在上文所述之磷酸化PTK2(pY397)分析法中，表3中所 14664i.doc -100- 201043611 列之所有實例化合物的EC5G值（PC-3)均小於或等於10 μΜ，一般小於1 μΜ。

Aurora-B激酶分析法使用由大腸桿菌表現之在N末端位置具備GST標籤的重組非洲爪檐（Xenopws /izeWOAurora B野生型蛋白質（胺基酸 60-361)與自細菌獲得且經純化之非洲爪蟾INCENP(胺基酸 790-847)的複合物進行放射性酶抑制分析法。以同等方式，亦可使用非洲爪擔Aurora B突變體（G96V)與非洲爪禱 O INCENP79G-847 之複合物。表現及純化來自非洲爪檐之Aurora-B00·361的編碼序列經BamHI及 Sail切割位點選殖至修飾型式之pGEX-6T(Amersham Biotech)中。載體含有兩個由核糖體結合位點隔開之選殖卡匣，允許雙順反子表現。在此構型1f7，非洲爪墙Aurora B由第一卡匣表現，且非洲爪蟾INCENP79G_847由第二卡匣表現。所得載體為pAUB-IN847。〇首先，用PUBS520輔助質體及pAUB-IN847使大腸桿菌菌株BL21(DE3)共轉型，此後使用〇D600為0.45_0.7之0.3 mM IPTG誘發蛋白質表現。在23-25°C下，在攪動下，繼續表現約12-16小時。接著藉由離心來移除細菌，且使用超音波將離心塊溶解於溶解緩衝液（50 mM Tris/Cl pH 7.6 ' 300 mM Naa、1 mM DTT、1 mM EDTA、5%甘油、R0Che完全蛋白酶抑制劑錠劑）中’每公升大腸桿菌培養物使用20-30 mL溶解緩衝 146641.doc -101 · 201043611 液。藉由離心（12000 rpm，45-60分鐘，JA20轉子）使溶解之物質脫除碎片。在4°C下，以每公升大腸桿菌培養物300 μΐ^平衡 GST Sepharose Fast Flow(Amersham Biosciences)培育上清液4-5小時。接著以30體積溶解緩衝液洗滌管柱材料，且接著以30體積裂解緩衝液（50 mM Tris/Cl pH 7·6、 150 mM NaCl、1 mM DTT、1 mM EDTA)平衡。為使GST 標籤自Aurora B裂解，每毫克受質使用10單位前切割蛋白酶（Amer sham Biosciences)，且在4 °C下培育混合物16小時。將含有裂解產物之上清液裝載至以離子交換緩衝液 (50 mM Tris/Cl pH 7.6 ' 150 mM NaCl ' 1 mM DTT ' 1 mM EDTA)平衡之 6 mL Resource Q管柱（Amersham Biosciences) 上。當Aurora B/INCENP複合物流過時被捕捉，接著濃縮且裝載至以 SEC 缓衝液（10 mM Tris/Cl pH 7.6、150 mM NaCM、1 mM DTT、1 mM EDTA)平衡之 Superdex 200 尺寸排阻層析（SEC)管柱上。收集含有AuroraB/INCENP複合物之溶離份且使用Vivaspin濃縮器（分子量排除3000-5000 Da)濃縮至12 mg/mL之最終濃度。將用於激酶分析法之等分試樣（例如240 ng/pL)自此儲備溶液轉移至冷凍緩衝液 (50 mM Tris/Cl pH 8.0 > 150 mM NaCl ' 0.1 mM EDTA ' 0.03% Brij-35、10%甘油、1 mM DTT)中，且儲存在-80°C 下。激酶分析法將測試物質置於聚丙烯培養皿（96孔，Greiner #655 201) 中以覆蓋10 μΜ-0.0001 μΜ之濃度範圍。分析法中DMSO之 146641.doc -102- 201043611 最終濃度為5%。將30 kL蛋白質混合物（於冷凍緩衝液中之 50 mM Tris/Cl pH 7.5 ' 25 mM MgCl2 ' 25 mM NaCl ' 167 μΜ ATP、10 ng非洲爪擔Aurora B/INCENP複合物）吸至10 μΐ提供於25% DMSO中之測試物質中，且在室溫下培育15 分鐘。接著添加10 pL肽混合物（100 mM Tris/Cl pH 7.5、50 ' mM MgCl2 ' 50 mM NaCl ' 5 μΜ NaF ' 5 μΜ DTT ' 1 μΟΐ γ-Ρ33- ATP [Amersham]、50 μΜ受質肽[生物素-EPLERRLSLVPDS 或其多聚體，或生物素-EPLERRLSLVPKM或其多聚體，或 Ο 生物素-LRRWSLGLRRWSLGLRRWSLGLRRWSLG])。培育反應物75分鐘（環境溫度），且藉由添加180 pL 6.4%三氯乙酸使反應停止，且在冰上培育20分鐘。首先以100 pL 70% 乙醇平衡多孔濾板（Millipore，ΜΑΙΡ NOB10)，且接著以 180 μΐ^三氣乙酸平衡，且使用適合抽吸設備除去液體。接著施用反應停止之激酶反應物。在各狀況下使用180 μί 1 %三氣乙酸進行5次洗滌步驟後，乾燥培養皿下部（在55°C 下10-20分鐘），且添加25 pL閃爍混> 合液（Microscint，〇

Packard # 601361 1)。使用 Wallac 1450 Microbeta液體閃爍計數器定量併入之γ-磷酸酯。不含測試物質或不含受質肽之樣品用作對照組。使用Graph Pad Prism軟體獲得IC50 值。在下表4中，比較代表性選擇之本發明化合物（1)對PTK2 之抑制常數與對Aurora B之抑制常數，以證明化合物之選擇性。 146641.doc • 103 - 201043611 表4 編號 ΡΤΚ21Η ICs, [ηΜ] Aurora Β IC$〇 ΙηΜΙ 1-90 0.8 280 1-91 1 264 I-93 0.86 4039 1-124 0.81 241 1-125 0.93 257 1-126 0.9 265 Μ 27 0.53* 417 Μ 28 0.79 >5000 Μ 31 0.29* 1013 Μ 33 0.91 2193 1-134 0.5* 778 1-135 1 1027 Μ 37 0.44* 1069 Μ 38 0.41* 422 編號 ΡΤΚ21Η ICso【ηΜ】 Aurora Β ICM【ηΜ】上140 0.86* >5000 1-142 0.5* 311 JJi4 076* >9000 -Η46 0.58* 413 1-147 0.9 332 1-148 0.95 707 -1-152 0,41* 1587 1-153 0.69* >10000 Μ 55 0.93* 245 Μ 58 1* >10000 Μ 64 1 3363 .1-165 4 167 1-166 0.49* 1137 Μ 95 0.32* 641 本發明物質為PTK2激酶抑制劑。鑒於其生物學特性，新穎通式（1)化合物、其異構體及其生理學上可接受之鹽適於治療特徵為過度或異常細胞增殖之疾病。邊等疾病包括例如：病毒感染（例如HIV及卡波西氏肉瘤 (Kaposi’s sarcoma));發炎及自體免疫疾病（例如結腸炎、關節炎、阿茲海默氏病（Alzheimer，s disease)、絲球體腎炎及創傷癒合）；細菌、真菌及/或寄生物感染；白血病、淋巴瘤及硬瘤（例如癌瘤及肉瘤）、皮膚病（例如牛皮癬）；特徵為細胞數目增加之基於增生之疾病（例如纖維母細胞、肝細胞、骨細胞及骨髓細胞 '軟骨或平滑肌細胞或上皮細胞（例如子宮内膜增生））；骨病及心血管疾病（例如再狹窄及肥大）。例如（但不限於）以下癌症可用本發明化合物治療：月&腫瘤，諸如聽神經瘤、星形細胞瘤，諸如纖維型星升^ 細胞瘤、原漿型星形細胞瘤、肥胖型星形細胞瘤、未分化 146641.doc •104- 201043611 型星形細胞瘤、毛細胞型星形細胞瘤、神經膠母細胞瘤、膠質肉瘤、多形態黃星形細胞瘤、室管膜下大細胞巨細胞星形細胞瘤及嬰幼兒促纖維增生性星形細胞瘤；腦淋巴瘤、腦轉移瘤、腦垂腺腫瘤（諸如促乳素瘤、腦垂腺偶見瘤、HGH(人類生長激素）產生腺瘤及促腎上腺皮質激素腺瘤）、顱咽管瘤、神經管胚細胞瘤、腦膜瘤及少突神經膠質瘤；神經瘤，諸如植物性神經系統腫瘤（諸如神經母細胞瘤、神經節細胞瘤、副神經節瘤（嗜鉻細胞瘤）及頸動脈〇球腫瘤）、周邊神經系統腫瘤（諸如殘肢神經瘤、神經纖維瘤、神經瘤（神經勒瘤、雪旺瘤（Schwannoma))及惡性雪旺瘤）’以及中樞神經系統腫瘤（諸如腦及骨髓腫瘤）；腸癌，諸如直腸癌、結腸癌、肛門癌及十二指腸癌；眼瞼腫瘤 (眼險器官之基底細胞瘤或腺癌）；視網膜母細胞瘤；胰臟癌’膀胱癌；肺腫瘤（支氣管癌-小細胞肺癌（SClc)、非小細胞肺癌（NSCLC)(諸如紡錘體-細胞板上皮細胞癌）、腺癌〇 (腺泡狀腺癌、乳頭狀腺癌、細支氣管-肺泡腺癌）及大細胞支氣管癌（巨細胞癌、透明細胞癌乳癌，諸如乳腺管癌、小葉癌、黏液癌或管狀癌、佩吉特氏癌（Paget,s carcinoma);非霍奇金淋巴瘤（n〇n_H〇dgkin，s lymph〇mas) (B淋巴性或T淋巴性NHL)，諸如毛細胞白血病、伯基特淋巴瘤（Burkitt’s lymphoma)或蕈樣真菌病；霍奇金病 (Hodgkin's disease);子宮癌（子宮體癌或子宮内膜癌）； CUP症候群（原發部位未明之癌）；卵巢癌（卵巢癌瘤-黏液性或漿液性囊腫、子宮内膜瘤、透明細胞瘤、布倫納氏瘤 146641.doc -105- 201043611 (Brenner’s tumour));膽囊癌；膽管癌，諸如克拉斯基瘤 (Klatskin tumour);睪丸癌（生殖性或非生殖性肝細胞腫瘤）；喉癌’諸如聲帶之聲門上腫瘤、聲門腫瘤及聲門下腫瘤；骨癌，諸如骨軟骨瘤、軟骨瘤、軟骨母細胞瘤、軟骨黏液樣纖維瘤、軟骨肉瘤、骨瘤、骨樣骨瘤、骨母細胞瘤' 骨肉瘤、非骨化性骨纖維瘤、纖維骨瘤、促結締組織增生性骨纖維瘤、骨纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、破骨細胞瘤或巨細胞腫瘤、尤文氏肉瘤（Ewing，s sarc〇ma)及聚細胞瘤；頭頸部腫瘤（HNO腫瘤）’諸如唇及口腔腫瘤（唇癌、舌癌、口腔癌）、鼻咽癌（鼻瘤、淋巴上皮癌）、咽癌、口咽癌、扁桃體癌（扁桃體惡性瘤）及舌（底部）癌、下嚥癌、喉癌（喉頭癌）、鼻竇及鼻腔腫瘤、唾液腺及耳腫瘤；肝細胞癌（肝細胞癌瘤（HCC));白血病，諸如急性白血病’諸如急性淋巴性/淋巴母細胞白金病（ALL)、急性骨髓性白血病（AML)，慢性淋巴性白血病（CLL)、慢性骨髓性白血病（CML);胃癌（乳頭狀腺癌、管狀腺癌或黏液腺癌、腺鱗癌、鱗狀癌或未分化癌’·惡性黑素瘤，諸如淺表擴散性黑素瘤（SSM)、結節型黑素瘤（nmM)、惡性小痣黑素瘤 (LMM)、肢端雀斑痣樣黑素瘤（ALM)或肢端無色素性黑素瘤（AMM);腎癌，諸如腎細胞癌（腎上腺樣瘤或格臘維次氏瘤（Grawitz，S tUmour));食管癌；陰莖癌；前列腺癌；陰道癌或陰道癌瘤；曱狀腺癌，諸如乳頭狀癌、濾泡性癌、髓性癌或未分化型甲狀腺癌；胸腺癌（胸腺瘤）；尿道癌（尿道癌瘤 '尿道上皮癌）及外陰癌。 146641.doc -106- 201043611 新穎化合物可用於預防、短期或長期治療上述疾病，視情況亦與放射線療法或其他「當前技術水平」化合物組合’諸如抑制細胞或細胞毒性物質、細胞增殖抑制劑、抗血管生成物質、類固醇或抗體。通式（1)化合物可單獨使用或與其他本發明活性物質組合，視情況亦與其他藥理學活性物質組合。

可與本發明化合物組合投與之化學治療劑包括（但不限於）激素、激素類似物及抗激素（例如他莫西芬（tamoxifen)、托瑞米芬（toremifene)、雷洛昔芬（raloxifene)、氟維斯群 (fulvestrant)、乙酸曱地孕酿I (megestrol acetate)、氟他胺 (flutamide)、尼魯米特（nilutamide)、比卡魯胺（bicalutamide)、胺魯米特（aminoglutethimide)、乙酸環妇：酮（cyproterone acetate)、非那雄安(finasteride)、乙酸布舍瑞林（buserelin acetate)、氟氫可的松（fludrocortisone)、氟甲睪酮 (fluoxymesterone)、甲經助孕酮（medroxyprogesterone)、奥曲肽（octreotide))、芳香酶抑制劑（例如安美達錠 (anastrozole)、來曲。圭（letrozole)、利阿嗤（liarozole)、伏氯嗤（vorozole)、依西美坦（exemestane)、阿他美坦 (atamestane))、LHRH促效劑及拮抗劑（例如乙酸戈舍瑞林 (goserelin acetate)、亮丙瑞林（luprolide))、生長因子抑制劑（生長因子為諸如「血小板衍生生長因子」及「肝細胞生長因子」，抑制劑為例如「生長因子」抗體、「生長因子受體」抗體及酪胺酸激酶抑制劑，諸如吉非替尼 (gefitinib)、拉帕替尼（lapatinib)及曲妥珠單抗 146641.doc -107- 201043611 (trastuzumab));信號轉導抑制劑（例如伊馬替尼（Imatinib) 及索拉非尼（sorafenib));抗代謝物（例如抗葉酸劑（諸如曱胺0票吟（methotrexate)、培美曲塞（premetrexed)及雷替曲塞 (raltitrexed))、嘧啶類似物（諸如 5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil)、卡培他濱（capecitabin)及吉西他濱（gemcitabin))、嗓吟及腺苷類似物（諸如疏基嘌呤（mercaptopurine)、硫鳥嘌呤 (thioguanine)、克拉屈濱（cladribine)及喷司他丁（pentostatin)、阿糖胞苷（cytarabine)、氟達拉濱（fludarabine));抗腫瘤抗生素（例如蒽環黴素（anthracyclin)(諸如小紅莓（doxorubicin)、道諾黴素（daunorubicin)、表柔比星（epirubicin)及黃膽素 (idarubicin))、絲裂黴素 C(mitomycin-C)、博萊黴素 (bleomycin)、放線菌素 D(dactinomycin)、光神黴素 (plicamycin)、鏈脲佐菌素（streptozocin));鈾衍生物（例如順翻（cisplatin)、奥沙利始（oxaliplatin)、卡始 (carboplatin));烧基化劑（例如雌莫司汀（estramustin)、氮芥（meclorethamine)、美法余（melphalan)、苯丁酸氮齐 (chlorambucil)、白消安（busulphan)、達卡巴嗓（dacarbazin)、環填醯胺（cyclophosphamide)、異環墻醯胺（ifosfamide)、替莫嗤胺（temozolomide)、亞石肖基脲（諸如卡莫司汀 (carmustin)及洛莫司汀（lomustin))、〇塞替派（thiotepa));抗有絲分裂劑（例如長春花屬生物驗（Vinca alkaloid)，諸如長春驗（vinblastine)、長春地辛（vindesin)、長春瑞濱 (vinorelbin)及長春新驗（vincristine));及紫杉烧（taxane)，諸如太平洋紫杉醇（paclitaxel)、多西紫杉醇（docetaxel); -108· 146641.doc 201043611 拓撲異構酶抑制劑（例如表鬼臼毒素（epipodophyllotoxin)，諸如依託泊苦（etoposide)及麟酸依託泊苦（etopophos)、替尼泊武（teniposide)、安0丫咬（amsacrin)、拓撲替康（topotecan)、依立替康（irinotecan)、米托蒽S昆（mitoxantron))及多種化學治療劑，諸如胺磷汀（amifostin)、阿那格雷（anagrelid)、氯屈膦酸鹽（clodronat)、非格司亭（filgrastin)、α干擾素、甲醯四氫葉酸（leucovorin)、利妥昔單抗（rituximab)、丙卡巴肼（procarbazine)、左旋口米0坐（levamisole)、美司那（mesna)、 Ο 米托坦（mitotane)、帕米膦酸鹽（pamidronate)及卟吩姆 (porfimer) 〇適合製劑包括例如錠劑、膠囊、栓劑、溶液（尤其供注射（皮下、靜脈内、肌肉内）及輸注用之溶液）、酏劑、乳液或可分散散劑。醫藥活性化合物之含量應在整個組合物之 0.1至90重量％、較佳0.5至50重量％之範圍内，亦即足以實現下文指定之劑量範圍之量。需要時，指定之劑量可一天分若干次給與。

Q 可藉由例如將活性物質與已知賦形劑混合來獲得適合錠劑，該等已知賦形劑例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、磷酸 . 鈣或乳糖；崩解劑，諸如玉米澱粉或褐藻酸；黏合劑，諸如澱粉或明膠；潤滑劑，諸如硬脂酸鎂或滑石；及/或用以延遲釋放之試劑，諸如羧甲基纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素或聚乙酸乙烯酯。錠劑亦可包含若干層。相應地，可藉由用通常用於錠劑包衣之物質（例如可力酮（collidone)或蟲膠、阿拉伯膠、滑石、二氧化鈦或糖）包 146641.doc •109- 201043611 覆類似於錠劑製造之核心來製備包衣鍵劑。為實現延遲釋或預防不相谷性，核心亦可由多層組成。類似地，錠劑已衣可由夕層组成以實現延遲釋放，可能使用上文針對鍵劑所提及之賦形谢。本發月活性物質或其組合之糖漿或酏劑可另外含味齊κ諸如糖精、塞克拉美（eyelamate)、甘油或糖）及風味增強劍（例如調味劑，諸如香草精或柑橘提取物）。其亦可含有懸浮液佐劑或增稍劑（諸如竣甲基纖維素納）、濕潤劑（諸如脂肪醇盘環顏 ’、'、基苯甲酸⑷/、產物）或防腐劑（諸如對經以通常方式製備供注射及輪注用之溶液，例如添加等茫腐劑（諸如對經基苯甲酸醋）或穩定劑（諸如乙二r、 =酸之驗金屬鹽），視情況使用乳化劑及/或分散右:用作稀釋劑，則例如有機溶劑可視情況用作 = 或洛解助劑，且轉移至注射小瓶或安瓶或輪注瓶中f w 糖藉:：合活性物質與惰性載劑(諸如乳糖或山半 )且將其封裳於明膠膠囊中來製備含有 /、物質或活性物質組合之膠囊。 3夕種活性適合栓劑可例如藉由與出於此目的而提中性脂肪或聚乙二醇或其衍生物）混合來製借。劑（绪如可使用之賦形劑包括例如水；醫藥學上 < 劑，諸如石壤（例如石油德份）、植物油（例如^之有機溶 /由）、單官能或多官能醇（例如乙醇或甘油广’由或之麻然礦物粉（例如高嶺土、黏土、滑石、’載劑，諸如天合成礦物粉 146641.doc -110- 201043611 T如高度分散之料及料鹽）、糖（例如錄、乳糖及葡、糖）4化劑(例如木質素、亞硫酸廢液、甲基纖維素、 ?泰及聚乙婦。比略咬_)及潤滑劑（例如硬脂酸鎂、滑石、 . 硬脂酸及月桂基硫酸鈉）。 *由通常方法’較佳藉由經π或經皮途徑，最佳藉由經口途控投與製劑。對於經口投與，除上文提及之載劑以外錠劑當然可含有諸如擰檬酸納、碳酸約及鱗酸氣二妈之添加劑’以及諸如殿粉、較佳馬铃箸殿粉、明膠及其類似物之多種添加劑。此外，可在製錠製程相同時間使用諸如硬月日酸鎂、月桂基硫酸納及滑石之潤滑劑。在水性懸浮液之狀况下，除上文提及之賦形劑外，活性物質可與多種風味增強劑或著色劑組合。對於非經腸使用，可使用活性物質與適合液體載劑之溶液。供靜脈内使用之劑量為每小時丨_丨〇〇〇 mg，較佳為每小〇時 5-5〇〇mg° Λ、：而有時可犯需要偏離指定之量，視體重、投藥途瓜 ' 個體對藥物之反應、其調配物之性質及投與藥物之時 * 間或時間間隔而定。因此，在一些狀況下，使用少於上文給出之最小劑量可能足夠，而在其他狀況下，可能必須超過上限。當大量投與時，宜將其分成多個較小劑量遍布一天。以下調配物實例說明本發明，但不限制其範_ : 醫藥調配物實例 146641.doc -111 · 201043611 A) 鍵劑每錠劑式（1)活性物質 100 mg 乳糖 140 mg 玉米澱粉 240 mg 聚乙烯°比11各咬酮 15 mg 硬脂酸鎂 5 mg 將細粉狀活性物質 500 mg 、乳糖及一些玉米澱粉混合在一起。篩分混合物，接著用聚乙烯吡咯啶酮之水溶液濕潤，捏合，濕式造粒且乾燥。篩分顆粒、剩餘玉米澱粉及硬脂酸鎂，且混合在一起。壓縮混合物，產生適合形狀及尺寸之錠劑。 B) 錠劑每錠劑式（1)活性物質 80 mg 乳糖 55 mg 玉米澱粉 190 mg 微晶纖維素 35 mg 聚乙烯°比洛α定酮 15 mg 羧甲基澱粉鈉 23 mg 硬脂酸鎂 2 mg 將細粉狀活性物質 400 mg 、一些玉米澱粉、乳糖、微晶纖維素 146641.doc •112- 201043611 及聚乙烯吡咯啶酮混合在一起，篩分混合物且用剩餘玉米澱粉及水處理，形成顆粒，乾燥且篩分。添加羧甲基澱粉鈉及硬脂酸鎂且混合，且壓縮混合物，形成適合尺寸之錠劑。 C) 安瓿溶液式（1)活性物質 50 mg 氯化納 50 mg 注射用水 5 ml 將活性物質溶解於固有pH值下或視情況pH 5.5至6.5下〇之水中，且添加氯化納以使溶液等張。過遽所得溶液，除去熱原質，且在無菌條件下將濾液轉移至安瓿中，接著殺菌且藉由熔合來密封。安瓶含有5 mg、25 mg及50 mg活性物質。〇 146641.doc -113 -

Claims

201043611 七、申請專利範圍： 1. 一種通式（1)化合物，

B為視情況經一或多個R4取代之選自C3_1Q環烷基及3-8 員雜環烷基之基團； Ο

R1、R2及R4各自獨立地表示選自Ra、Rb及經一或多個相同或不同之Re及/或1^取代之1^的基團； Rx表示氫或選自Ra、Rb及經一或多個相同或不同之Re 及/或Rb取代之1^的基團； R3 為選自以下之基團：-NReRe、-N(ORc)Rc、-N(Rg)NRcRc、 -N(Rg)C(0)Re、-N[C(0)Rc]2、-N(0Rg)C(0)Rc、-N(Rg)C(NRg)Re、 -N(Rg)N(Rg)C(0)Rc、-N[C(0)Rc]NRcRc、-N(Rg)C(S)Rc、 -N(Rg)S(0)Re、-N(Rg)S(0)0Re、-N(Rg)S(0)2Re、-N[S(0)2Rc]2、 -N(Rg)S(0)20Rc、-N(Rg)S(0)2NRcRc、-N(Rg)[S(0)2]2Rc、 -N(Rg)C(0)0Rc、-N(Rg)C(0)SRc、-N(Rg)C(0)NRcRc、 -N(Rg)C(0)NRgNRcRc、-N(Rg)N(Rg)C(0)NRcRc、-N(Rg)C(S)NRcRc、 -[N(Rg)C(0)]2Rc、-N(Rg)[C(0)]2Re、-N{[C(0)]2Rc}2、 -N(Rg)[C(0)]20Re、-N(Rg)[C(0)]2NReRc、-N{[C(0)]20Rc}2、 -N{[C(0)]2NRcRc}2、-[N(Rg)C(0)]20Rc、-N(Rg)C(NRg)ORc、 -N(Rg)C(NOH)Re、-NCRSCXNR^SR'^-NCI^CXNRSNRCRC，或視情況經Re及/4Rd取代之iV-鍵聯之3-8員雜環烷基； 146641.doc 201043611 R5 為選自鹵素、-CN、-N〇2、-ORc、-C(0)Rc、_ NRR、C1.4烧基、C1.4鹵烧基、〇3.10環烧基、C4.16環烧基烷基及3-8員雜環烷基之基團； m等於1、2或3 ; η 等於〇、1、2、3或4; 各1^彼此獨立地選自CN6烷基、C3_1Q環烷基、c4_16環烧基烷基、Cqo芳基、c7_16芳基烷基、2-6員雜烷基、3-8員雜環烷基、4-14員雜環烷基烷基、5-12員雜芳基及6-18員雜芳基烷基；各Rb為適合基團且在各狀況下彼此獨立地選自以下： =0、-OR。、Cb3 鹵烷氧基、_〇CF3、=S、-SR。、=NRC、 =NORc、=NNRCRC、=NN(Rg)C(0)NRcRc、-NRCRC、-ONRcRc、 -N(ORc)Rc、-N(Rg)NRcRc、鹵素、-CF3 ' -CN、-NC、-OCN、-SCN、 -NO、，N02、=N2、-N3、-S(0)Rc、-S(0)ORc、-S(0)2Rc、-S(0)20Rc、 -S(0)NRcRc、-S(0)2NRcRc ' -OS(0)Rc ' -0S(0)2Rc、-0S(0)20Rc、 -0S(0)NRcRc、-0S(0)2NRcRc、-C(0)Rc、-C(0)0Rc、-C(0)SRc、 -C(0)NRcRc、-C(0)N(Rg)NRcRc、-C(0)N(Rg)0Rc、-C(NRg)NRcRc、 -C(NOH)Rc、-C(NOH)NRcRc、-OC(0)Rc、-OC(0)ORc、-0C(0)SRc、 -0C(0)NRcRc、-OC(NRg)NRcRc、-SC(0)Rc、-SC(0)ORc、 -SC(0)NRcRc ' -SC(NRg)NRcRc ' -N(Rg)C(0)Rc ' -N[C(0)Rc]2 ^ -N(0Rg)C(0)Re、-N(Rg)C(NRg)Re、-N(Rg)N(Rg)C(0)Re、 -N[C(0)Re]NReRe、-N(Rg)C(S)Re、-N(Rg)S(0)Re、-N(Rg)S(0)0Rc、 -N(Rg)S(0)2Re、-N[S(0)2Rc]2、-N(Rg)S(0)2ORc、-N(Rg)S(0)2NRcRc、 -N(Rg)[S(0)2]2Rc、-N(Rg)C(0)0Rc、-N(Rg)C(0)SRc、 146641.doc -2- 201043611 -N(Rg)C(0)NRcRc、-N(Rg)C(0)NRgNRcRc、-N(Rg)N(Rg)C(0)NRcRc、 -N(R8)C(S)NRcRc ' -[N(Rg)C(0)]2Rc ' -N(R8)[C(0)]2Rc ' N{[C(0)]2Rc}2、-N(Rg)[C(0)]2〇Rc、-N(Rg)[C(0)]2NRcRc、 -N{[C(0)]20Rc}2、-N{[C(0)]2NRcRc}2、-[N(Rg)C(0)]20Rc、 -N(Rg)C(NRg)ORc、-N(Rg)C(NOH)Rc、-N(Rg)C(NRg)SRc及 -N(Rg)C(NRg)NRcRc ；各Re彼此獨立地表示氫或視情況經一或多個相同或不同之Rd&/4Re取代的選自以下之基團：Cu烷基、C3_10 〇環烷基、c4_n環烷基烷基、c6_10芳基、c7.16芳基烷基、 2-6員雜烷基、3-8員雜環烷基、4-14員雜環烷基烷基、 5-12員雜芳基及6-18員雜芳基烷基；各Rd表示適合基團且在各狀況下彼此獨立地選自以下：=0、-ORe、Q.3 鹵烷氧基、-OCF3、=S、-SRe、=NRe、=NORe、 =NNReRe ' =NN(Rg)C(0)NReRe ' -NReRe、-ONReRe ' -N(Rg)NReRe ' 鹵素、-CF3、-CN、-NC、-OCN、-SCN、-NO、-N〇2、=N2、-N3、 -S(0)Re、-S(0)0Re、-S(0)2Re、-S(0)20Re、-S(0)NReRe、 o -S(0)2NReRe ' -0S(0)Re、-0S(0)2Re、-0S(0)20Re、-0S(0)NReRe、 -0S(0)2NReRe、-C(0)Re、-C(0)0Re、-C(0)SRe、-C(0)NReRe、 . -C(0)N(Rg)NReRe、-C(0)N(Rg)0Re、-C(NRg)NReRe、-C(NOH)Re、 -C(NOH)NReRe、-0C(0)Re、-0C(0)0Re、-0C(0)SRe、 -0C(0)NReRe、-OC(NRg)NReRe、-SC(0)Re、-SC(0)0Re、 -SC(0)NReRe、-SC(NRg)NReRe、-N(Rg)C(0)Re、-N[C(0)Re]2、 -N(ORg)C(0)Re、-N(Rg)C(NRg)Re、-N(Rg)N(Rg)C(0)Re、 -N[C(0)Re]NReRe ' -N(Rg)C(S)Re、-N(Rg)S(0)Re、-N(Rg)S(0)0Re、 146641.doc 201043611 -N(Rg)S(0)2Re、-N[S(0)2Re]2、-N(Rg)S(0)2〇Re、-N(Rg)S(0)2NReRe、 -N(Rg)[S(0)2]2Re、-N(Rg)C(0)0Re、-N(Rg)C(0)SRe、 -N(Rg)C(0)NReRe、-N(Rg)C(0)NRgNReRe、-N(Rg)N(Rg)C(0)NReRe、 -N(Rg)C(S)NReRe、-[N(Rg)C(0)]2Re、-N(Rg)[C(0)]2Re、 -N{[C(0)]2Re}2、-N(Rg)[C(0)]20Re、-N(Rg)[C(0)]2NReRe、 -N{[C(0)]2ORe}2、-N{[C(0)]2NReRe}2、-[N(Rg)C(0)]20Re、 -N(Rg)C(NRg)ORe、-N(Rg)C(NOH)Re、-N(Rg)C(NRg)SRe及 -N(Rg)C(NRg)NReRe ；各R彼此獨立地表不氮或視情況經一或多個相同或不同之Rj^Rg取代的選自以下之基團：CN6烷基、（：3_8環炫基、C4_iii衷烧基烧基、C；6-1。芳基、C7-I6芳基炫*基、2-6 員雜烷基、3-8員雜環烷基、4-14員雜環烷基烷基、5-12 員雜芳基及6-18員雜芳基烷基；各Rf表示適合基團且在各狀況下彼此獨立地選自以下：南素、-ORg及-CF3，且各1^彼此獨立地表示氫、Cl_6烷基、c3_8環烷基、c4 n 環院基烧基、c0_1()芳基、C716芳基烷基、2_6員雜烷基、 3_8員雜環烷基、4-14員雜環烷基、5-12員雜芳基或6-18 貴雜芳基烷基；其限制條件為該苯環A不同時具有兩個氣取代基；視情況為其互變異構體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體及混合物形式，及視情況選用之其藥理學上可接文之酸加成鹽。 2·如請求項1之化合物，其中RX為氫。 146641.doc 201043611 3. 如請求項1或2之化合物，其中B為C3_8環烷基。 4. 如請求項1或2之化合物，其中R5為選自鹵素、·CF3&c1_4 鹵燒基之基團。 5. 如請求項1或2之化合物，其中R3係選自-nrcrc、 -N(ORc)Re、-N(Rg)C(0)Re、-N(0Rg)C(0)Re、-N(Rg)S(0)2Rc、 -N(Rg)C(0)〇Rc及-N(Rg)C(0)NRcRc，或視情況經Re及/或1^取代之唇鍵聯之4_6員雜環烷基，且 O R£、^及…如請求項1中所定義。 6. 如請求項5之化合物，其中R3係選自_NHC(〇)Rci、_n(Ci 4 烧基）C(0)Rcl、-NHS(〇)2rU 及 _N(Cl 4 烷基）s(〇)2rc1 ; Rel對應於該基團Rc，且如請求項1中定義。 7. 如請求項6之化合物，其中Rei係選自Cl4烷基、c3 5環烷基、Cm烷氧基甲基、（Ci 4烷基）NH_CH2_及（Ci 4烷基）2N-CH2- 〇 Ο Λ 8. 如請求項1或2之化合物，其中η值為〇。 9. 如請求項1或2之化合物，其中 m值為1或2 ; 各R2彼此獨立地選自_素、Cl_6烷基及Cl_6烷氧基，且 Rl如請求項1中定義。 10·如請求項1或2之化合物其中 R係選自Ra2、Rb2及經一或多個相同或不同之Rb2及/ 或Re2取代之Ra2 ; 146641.doc 201043611 &Ra2彼此獨立地選自C!-6烷基及3-7員雜環烷基；各R b 2表示適合取代基且彼此獨立地選自以下： -ORc2、-NRc2Rc2、-C(0)Rc2、-C(0)0Rc2、-C(〇)NRc2Rc2、 -C(0)N(Rg2)0Rc2、-N(Rg2)C(0)Re2、-N(Rg2)C(〇)〇Rc2及 -N(Rg2)C(0)NRc2Rc2，各Rc2彼此獨立地表示氫或視情況經一或多個相同或不同之Rd2及/或Re2取代的選自以下之基團：Cl 6烷基、C3-6 環烷基及3-7員雜環烷基；各Rd2表示適合取代基且在各狀況下彼此獨立地選自以下：-ORe2、-NRe2Re2 及 _c(〇)NRe2Re2 ; 各R彼此獨立地表示氫或視情況經一或多個相同或不同之Rf2及/或Rg2取代的選自以下之基團：CM燒基及Cw 琢烧基；各Rf2獨立地表示_〇Rg2，且 11. 各Rg2彼此獨立地表示氣或Ci6烧基。如請求項1之化合物，其係選自

146641.doc 201043611 1-125 1-127 Ο 1-131 1-134 ο 1-137

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12.如請求項1或2之通式（1)化合物’或其藥理學上可接受之鹽，其係用作藥物。 146641.doc 201043611 13.如请求項1或2之通式（1)化合物’或其藥理學上可接受之鹽’其係用於治療及/或預防癌症、感染、發炎及自體免疫疾病。 14· 一種醫藥製劑，其含有一或多種如請求項1至11中任— 項之通式⑴化合物或其藥理學±可接受之鹽作為活性物質，視情況組合習知賦形劑及/或載劑。 15. —種醫藥製劑’其包含如請求項1至u φ 任—項之通式 (1)化合物及至少一種不同於式χ Λ 〇式（1)之另—抑制細胞或細胞毒性活性物質，其中該化合物亦相味 σ初U)亦視情況以互變異構體、外消旋體、對映異構體、非對映里接触 F 了映異構體及其混合物形式存在，或亦以所有該等上述形式 y八之各別藥理學上可接受之鹽形式存在。

146641.doc 201043611 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明·· 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

(R4)n

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