TW201043231A - Blood parasiticide - Google Patents

Description

201043231 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本申請案係關於一種用於治療家畜中之蜱傳播性寄生蟲 病之新穎調配物。 【先前技術】 巴貝斯蟲病（Babesiosis)係一種由巴貝斯蟲（Babesia)屬之 原生蟲（諸如牛巴貝斯蟲（及办仍办）及雙芽巴貝斯蟲（及 厶/客引起的紅細胞内寄生蟲感染，其一般係經由蜱叮 〇 咬傳播（與萊姆病（Lyme disease)傳播機制類似）。參見（例 如）BOCK，R.、JACKSON, L.、DE VOS，A.及 JORGENSEN， W. (2004).「Babesiosis of cattle.」尸arimWogy·. 129，增 刊，S247-S269。邊蟲病（Anaplasmosis)(亦係由病媒傳播的 傳染性血液病）係由立克次體（Rickettsial)寄生蟲（邊緣邊蟲 margina/e)及中央邊蟲（viwap/asma ce«ira/e))引 起。參見（例如）KOCAN, Κ·Μ.、DE LA FUENTE, J.、 BLOUIN，E.F.及GARCIA-GARCIA, J_C. (2004).「Anaplasma ❹ marginale (Rickettsiales: Anaplasmataceae): recent advances in defining host-pathogen adaptations of a tick-borne rickettsia·」，S285-S300。極不希望此等 及其他類似寄生蟲存在於家畜群體中。其等皆係可在任何 時間突增至流行病比例的地方性問題。 咪多卡二丙酸鹽係一種曱醯苯胺衍生物，數年來其已用 於治療原生動物疾病（包括牛、馬、羊及犬中之巴貝斯蟲 病及邊蟲病）。參見（例如）MCHARDY，N.及SIMPSON， 148083.doc 201043231 R.Μ. (1973)·「Imidocarb dipropionate therapy in Kenyan anapUsmosis and babesiosis·」

Prot/Mcn‘o«; 6，第2，63-70頁。亦可參見（例如）VIAL，H.J. 及GORENFLOT，A. (2006).「Chemotherapy against babesiosis.」 FeierzwaryPiirahio/ogy·· 13 8, 147-160。味多卡二丙酸鹽之 化學名稱為N，N’-雙（3-(4,5-二氫-1H·咪唑-2-基）苯基）脲且 其結構係如式I所示。其可呈二丙酸鹽及鹽酸鹽形式使用 且可藉由肌内或皮下注射投與，以減少刺激性。咪多卡亦 可預防及治療多種動物中之附紅細胞體病 (eperythrozoonosis)、弓形體病（toxoplasmosis)、賈第鞭毛 蟲病（giardiasis)、錐蟲病（trypanosomiasis)及環形泰勒焦蟲 病（77^7eri_a 。其在注射後被快速吸收並分佈至 全身°該藥物係在肝臟中代謝並以原始形式經腎再吸收， 因此其劑量較小且其作用係持久。 式1

應瞭解咪多卡二丙酸鹽係藉由干擾多元胺合成且作用在 知入寄生蟲體内而發揮效用。與已知調配物相關之常見副 作用係 >主射時之明顯疼痛及與膽鹼酯酶抑制劑活性、唾液 分泌過多、流淚、排便頻率增加、呼吸急促及腹痛（有時 會導致腹絞痛）相一致之急性中毒症狀。 維生素Β 12(氰鈷胺）係與蛋白質' 碳水化合物及脂肪代 148083.doc 201043231 謝有關，並與葉酸共同作用維持紅血球生成。維生素B12 包含必需的礦物質鈷。其係用於家畜之一般代謝、神經及 生殖功能所必需的已知飲食補充劑。其亦有利於血細胞形 成及改善皮毛健康狀況。維生素B12注射液對於罹患維生 素不足之患者而言係有效且測試過的療法。維生素B12之 效用並不限於治療缺乏症。其注射亦可用於治療目的。維 生素B12注射液可作為使身體充滿活力之刺激劑，其透過 乳銘胺傳播其「抗壓力」元素。 與維生素B12相關之已知問題係其在調配物中之安定 ί·生已知維生素Β12通常對熱安定，但對光、氧、酸及驗 敏感。當維生素Β12處於包含促氧化劑之環境中時，其亦 不安定。某些成份（尤其係彼等存在於多重維生素中者）會 與維生素Β12發生交互反應並使其損壞。其他使製造包含 維生素Β 12之調配物之問題複雜化的是必需且希望僅使用 少量維生素Β12以獲得最佳效果。 【發明内容】 文中揭示一種新穎調配物，其包括咪多卡（imid〇carb)二 丙酸鹽、維生素3丨2及醫藥上可接受的載劑，為感染某些 寄生蟲傳染病之動物改善其治療及預防。就效力、安全 性、安疋性及減少與基於。米多+之先前技術療法相關的副 作用而言，文中所揭示及主張之新穎調配物提供諸多優於 先m技術之優點。儘管已知難以獲得包含氰姑胺維生素 B 12之液體調配物，但文中所揭示之新穎組合係令人驚訝 地安定。 148083.doc 201043231 文中所揭示之組合殊客ι β 卞多卡及維生素312之新穎調配物 僅提供獨特的組合，而且亦增加便利性。組合_多卡 生素Β12之單注射療法比其中分別注射該等成份之療法所 需要之工夫、材料及動物處理較少。 文中所揭示之新賴調配物既可用於治療已罹患寄 染病之動物，亦可用於箱奸 '預防。右動物進入被認為存在碑群 體(其可能攜帶引起巴貝斯蟲病(babesiosis)、邊蟲病 (a_a_sis)或其他㈣多卡療法有反應之寄生 之寄生蟲）之環境中時，文中所姐- ^ 馬 又τ所揭不之調配物可用於有效 預防以後被此等寄生蟲感染。 【實施方式】 文中揭示一種包含殊多卡（㈤‘叫二丙酸鹽維生素 1及《夕種邊藥上可接受的載劑之新顆調配物，其在 療及預防家畜之寄生蟲傳染病中顯現改良的效果。 本發明調配物可雜& h a3 t 則精由任何習知方法投與，其包括非經腸 (例如皮下或肌内）注射或靜脈内輸注途徑。該療法可由單 人』里或夕-人劑量組成。雖然可分別投與哺多卡及維生素 B12’但由於明顯的原目，其較佳係呈單一醫藥調配物與 -或多種可接受的載劑一起提供。就可與該調配物相容的 意義…該(等)載劑必須4「可接受」，且對接受者無 。X等載劑通常為無菌的水或鹽水。本發明調配物可包 含水性載劑’諸如無菌無熱原水、生理食鹽水或其他等渗 命液因為其在*液中具有延長的保存期限。本發明醫藥 組合物可事先(例如在配劑前數週或數月或更長時間)以水 148083.doc 201043231 性形式調配完成。 適用於非經腸投藥之調配物包括水性及非水性無菌注射 溶液，其包含使該調配物適用於所預期之接受者之抗氧化 劑、緩衝液'抑菌劑及溶質；及水性及非水性無菌懸浮 液，其可包含懸浮劑及增稠劑。該等調配物可提供於單位 劑量或多劑量容器（如密封安瓿、小瓶或注射器）中，且可 呈冷凍乾燥（凍乾）狀態儲存，其僅需要在使用前立即添加 無菌液體載劑，例如注射用水。可自無菌粉末製備臨時注 〇 射溶液及懸浮液。 本發明調配物或組合物可與提及該調配物之延長保存期 限之說明書或包裝插頁一起封裝或包含在具有該等之套組 中。舉例而言，該等說明書或包裝插頁可述及建議的儲存 條件，如時間、溫度及光，並將本發明調配物之延長或持 久的保存期限考慮在内。該等說明書或包裝插頁亦可述及 本發明調配物之特定優勢’如可能需要在控制的臨床或辦 Q 公至條件外面的場所中使用之調配物的易儲存性。如上所 述，本發明調配物可呈水性形式且可在不如理想條件的情 況下儲存而不明顯損失治療活性。 本發明亦提供一種藉由對個體投與有效量之含於醫藥上 可接受的載劑中之本發明調配物來治療及/或預防疾病或 病症（諸如文中所揭示之任何一或多種疾病或病症）之方 法。 殺寄生蟲_配物將以與良好獸醫操作法一致的方式調 配及投與，同時考慮個別動物之狀況、遞送部位、投藥方 148083.doc 201043231 法、投藥流程及從業者已知之其他因素。因此針對文中目 的之「有效量」係由該等因素決定。 作為一般建議，非經腸投與文中調配物中的咪多卡之醫 藥上有效量係在約mg/kg動物體重至1〇 mg/kg動物體重 之範圍内，但如上所述，此將取決於治療裁量權。更佳 地，此劑量為3 mg/kg至ό mg/kg。觀察變化所需之治療時 間及在治療後等待反應出現之間隔係根據所需效果而變 化。 非經腸投與之文中調配物中的氰钻胺維生素B 12之醫藥 上有效量係在約3 pg/kg患者體重至1 〇〇 pg/kg患者體重的 範圍内’但如上所述’此將取決於治療處理權。更佳地， 此劑量為5 Pg/kg至20 pg/kg。

舉例而言’用作本文實例中的載劑之PEG 400對皮膚無 害且易溶於水。此使其成為可注射調配物中引人注意的成 伤。热悉此項技術者應瞭解亦可用具有類似性質之其他該 專賦形劑來代替，以形成符合本發明申請專利範圍的適宜 組合物。舉例而言，其他懸浮劑可為其他親水性聚合物， 特疋δ之為其他聚環氧乙烧聚合物。如文中所使用，peg 之聚環氧乙烷聚合物係指一種通式為H(〇CH2CH2)n〇H之聚 合物。一般而言’各PEG係由「n」個單元之平均數或以 道耳頓計之平均分子量來命名。聚乙二醇聚合物之不同分 子量在相關技藝中係已知，其包括PEG 200 (n=4)、PEG 3〇〇 (n~6)、PEG 400 (n=8)、PEG 600 (n=12)、PEG 900、 PEG looo (n=2〇) ^ PEG 1450 (n=32) > PEG 3350 (n=75) ' 148083.doc 201043231 PEG 4500 (n=1〇〇)、及PEG 8000 (11=150)。該等聚乙二醇 聚合物較佳為聚合物PEG 200至PEG 600，其分子量係在約 190至約630道耳頓的範圍内。較佳的聚乙二醇包括（但不 限於）PEG 200、peg 300、PEG 400、及 PEG 600。可用於 所揭不之組合物中之其他載劑/界面活性劑為丙二醇脂肪 酸醋’諸如（除其他以外）丙二醇單辛酸酯、丙二醇二辛酸 酉曰、丙二醇二癸酸酯、丙二醇二辛酸二癸酸酯、丙二醇二 月桂酸醋、丙二醇羥基硬脂酸酯、丙二醇異硬脂酸酯、丙 二醇月桂酸酯、丙二醇蓖麻油酸酯、丙二醇硬脂酸酯、丙 二醇二辛酸酯、及丙二醇蓖麻油酸酯。較佳的丙二醇脂肪 酸醋包括（但不限於）C8/C10甘油三酸酯及丙二醇二辛酸二 癸酸？旨及其可相容之混合物。 可用於所揭示調配物中之另一賦形劑為丙酸。丙酸以 0.1至1重量％之間的濃度抑制黴菌及某些細菌的生長。丙 酸亦係可形成活性成份之鹽形式之有機酸。該醫藥上可接 嗳的鹽可藉由在適宜溶劑中包含無機酸或有機酸而獲得。 無機酸之實例包括鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸、高碘酸及類 似物。此外’有機酸之實例包括甲酸、乙酸、丁酸、草 酸、丙二酸、戊酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、酒石酸、 檸檬酸、蘋果酸、苯甲酸、對甲苯磺酸、甲磺酸及類似 物。 此外，作為另一實例，實例2之調配物包含利多卡因 (Ud〇caine)成份，其在接種部位作為麻醉劑，以使接受注 射之動物的不適感降至最低。其他麻醉劑在相關技藝中係 148083.doc 201043231 已知且應適合作為所揭示調配物中之利多卡因之替代物曳 除利多卡因以外之其他物質。 本發明調配物係尤其適用，因為其等係安全、有效且注 射部位極少顯示反應或無反應（其對動物而言很疼痛且可 月匕會杈壞欲用作食品之家畜動物之肉質）。此外其等顯 示必要的安定性，以使其有足夠長時間供調配、封裝、運 輸及儲存，而不減少存在於調配物中之活性物質之含量。 因此，本發明提供一種具有商業上可利用的保存期限之產 ，其無需預混合兩種活性物質或分別投與該等活性物 質。 已呈現本發明之以上描述，用於闡釋及描述目的。其並 不意欲詳盡闡釋或將本發明限制於所揭示之明確形式。可 根據以上教不進行明顯的修飾及變化。選擇及描述實施例 以提供本發明主旨及其實際應用之最佳閣述，以使相關技 斉中之般技藝者可依各種實施例並藉由適於所涵蓋之特 &用途的各種修飾來利用本發明。當根據公平合法及公 正地賦予該等修飾及變化之範圍來理解其等時所有該等 修飾及變化係涵蓋於隨附申請專利範圍所決定之本發明範 疇内。 實例1 χ下係與文中所揭示之本發明相一致的調配物之實例。 值得注意的是，可大批量製造實例1之調配物。 148083.doc 201043231

成份 用量/L 批晉 咪多卡二丙酸鹽 0.1650 kg 8.2500 kg 聚乙二醇400 0.0500 kg 2.5000 kg 丙酸 0.0400 kg 2.0000 kg 氰鈷胺維生素B12 0.5500 g 27.5000 g EDTA 0.1000 g 5.0000 g 氯化鈉P.A. 0.0080 g 0.4000 kg 注射用水（WFI) 1.0000 L 50.0000 L Ο 以如下方式調配該等成份： 1. 分別檢查配方之組分及設備。

混合物A 2. 在25至3 5°C的溫度下集中50%的水容量（WFI)(25 L)。 將該混合物維持在氮氣泡下。 3. 開始攪拌並缓慢添加咪多卡二丙酸鹽。 4. 維持連續攪拌達30分鐘或直至完全溶解。 5. 將丙酸緩慢添加至此混合物中。 ◎ 6. 維持連續攪拌達30分鐘或直至完全溶解。

混合物B 7. 在25至35°C的溫度下，將10%的水容量（WFI)(5 L)添加 至事先經清潔及乾燥的容器中。將該混合物維持在氮氣泡 下。 8. 在連續攪拌下將氯化鈉添加至該容器中。維持攪拌直 至完全溶解。 9. 在連續攪拌下將氰鈷胺（維生素B12)添加至該容器中。 148083.doc 11 201043231 維持攪拌直至完全溶解。 10.在連續攪拌下將EDTA添加至該容器中。維持挽摔直 至完全溶解。 11 ·在連續攪拌下將聚乙二醇400添加至該容器中。維持 搜拌直至完全溶解。 12. 將混合物B之内容物倒入混合物a中。 13. 在25至35°C的溫度下補足最終體積至100% WFI水 (q，s.P.)。維持連續攪拌達6〇分鐘或直至完全均質化。 14. 收集樣品並鑑定pH，其必須在45至5〇之間，且若需 要’則用丙酸或5 N NaOH溶液修正。 使用0.22微米過濾筒進行管線除菌過濾。 實例2 以下係與文中所揭示 t份 之本發明— 甩量 致的調配物實 4ιΙ· η V· 咪多卡二丙酸鹽 165.0 肌夏2Γ 247.5 聚乙二醇400 50.0 75.0 丙酸 40.0 60.0 氰鈷胺維生素B 12 〇.5〇 0.8250 利多卡因鹽酸鹽 12.50 18.75 EDTA 0.1000 0.1500 氯化鈉P.A. 8.00 12.00 注·射用水（qsp) 1.000 L 1.500 以如下方式調配該等成份：

混合物A 148083.doc -12- 201043231 1. 檢查該配方之組分。 2. 在混合物反應器中集中50%的純水容量。開始將N2注 入該液體中。 3 ·緩慢添加聚乙二醇直至完全混合。 4. 緩慢添加丙酸直至完全混合。

混合物B 5. 在另一反應器中集中30%的純水容量。開始將沁注入 該液體中。 Ο 6·添加氯化鈉並攪拌直至完全溶解。 7. 添加維生素B12並繼續攪拌直至完全溶解。 8. 將混合物B添加至混合物八中_用水補足總體積。攪拌 直至完全均質化（最少30分鐘）。 9. 若需要，則將pH修正至4.5至5.0 ;始、终將該溶液保持 在N2氛圍中。 10. 在0.22 μ無菌濾筒中過濾。 11. 倒至20 ml之琥珀色瓶中，並附加上紅色橡膠瓶塞（無 菌的瓶及瓶塞）。 使上述調配物接受加速安定性測試。將2〇 Μ樣品儲存 於42 C及75 /〇濕度下並藉由1£?1^在6個月時間内檢測咪多 卡一丙酸鹽的含量及維生素B12的含量。測試結果為：在 所有測試中，味多卡二丙酸鹽含量及維生素bi2仍然保留 活性（濃度減少小於5%)。 實例3 進行研究目的在於測定本申請案所提供調配物在注射投 148083.doc •13- 201043231 此研究之指定冑量為3.〇mg/kg。 與牛體内後的安全性 測試調配物：

咪多卡二丙酸鹽-I5g 氰鈷胺（維生素B12) _ 〇 Q5 g 媒劑-100 mL 投樂途徑-皮下 劑量· 1 ml/50 kg d v λ gp_V，a〇mg/kg咪多卡二丙酸踐） 為實現無毒及藥物耐受性讲办—n从 f研九之目的’記錄每-個確認

之不利結果0在投盘彦σ你1Z /、後24小時内觀察動物可能出現的 副作用。在整個研究期間每天重複此等評估。此研究之副 作用被認為係投藥部位中的任何異常反應（疼痛、浮腫、 潰瘍)、行為改變、食慾喪失及與產品用途相關之其他變 化。 在牛體内進行該研究，其中建議該藥物詩治療血寄生 蟲。自16個動物中隨機選擇6頭沒有接受過測試調配物中 所包含藥物治療之病史的霍爾斯坦_瘤牛(h〇istein_z—雜 交雄性乳牛。㉟等動物的體重係在⑹至川Kg的範圍 内。在 >、台療前將㈣動物稱重並藉由編號的耳標藏來識 別。 在三個預先確立的時間段（第零天（治療前）、治療後第7 及15天），收集動物血液以用於生物化學及血液學參數之 分析，並搜集肝及腎中毒證據。進行以下檢測： -生物化學檢測：尿素、肌酸酐、總蛋白、鹼性磷酸 酶、AST ' γ_榖胺醯轉移酶（Y_GT)、肌酸激酶、膽固醇、 148083.doc -14- 201043231 錢、#5、鈉、釺、氯化物； -血液學檢測：紅血球計數、白血球計數、細胞體積、 平均紅血球體積（MCV)、平均紅血球血紅素（mch)、平均 紅企球血紅素濃度（MCHC)、白血球分類計數、血小板。 在檢測過程中，該等動物係在半封閉式方案下飼養並可 自由取食及飲水。所提供的食物（牧草之補充物）係由玉米/ 乾草青貯飼料、濃縮物及礦物鹽組成。配製該等動物可利 用的維持飲食。

該等動物之體重及投藥體積係闡述於表1中。所有動物 皆經由詳細的臨床檢測來檢查。 表1 :動物體重及投藥體積 鱗裁__趙會丨kp[丨 1 192.0 2 165.0 3 180.0 4 198.0 5 203.0 6 結果： 218.0

^配物體葙「ml丨 3.8 3.3 3.6 4.0 4.1 4.4 又樂物注射之動物在投藥之後未顯示局部或全身反應 跡象。觀察牛的施用部位反應；在施用的瞬間或在投藥後 评估該等動物時，在任何時間摩擦投藥部 疼 ⑽臨床行 吊進食及飲水。對健養維持飲食之動物而言， 148083.doc 201043231 該等動物之體重進展仍在所預期的標準内。所分析的參數 無明顯的變化，其支持測試動物之行為臨床評估及在效力 及殘留物研究期間更多數量動物之臨床研究觀察結果。 該方案之目的係評估包含咪多卡二丙酸鹽之調配物（建 議經皮下投與至牛體内）的無毒性及等待時期。 結果顯示沒有出現任何中毒局部反應之投藥部位反應。 類似地，在動物中未觀察到臨床行為變化，且無取食及飲 水變化、及活動性及刺激反應。 生物化學及血液學標記研究之結果證實使用該產品之安 全性。 148083.doc -16-

Claims (1)

1. 201043231 七、申請專利範圍： 1. 種用於治療豕畜之寄生蟲傳染病之組合物，其包含〇米 多卡（imidocarb)二丙酸鹽、氰鈷胺維生素8_12及醫藥上 可接受的載劑。 , 2· 一種調配用於治療家畜之寄生蟲傳染病的組合物之方 法，該調配物包含咪多卡二丙酸鹽、氰鈷胺維生素b_12 及醫藥上可接受的載劑。 3. 一種包含咪多卡二丙酸鹽、氰鈷胺維生素B_l2及醫藥上 〇 可接党的载劑之調配物之用途，其係用於製造治療或預 防家畜之寄生蟲傳染病之藥劑。

   148083.doc 201043231 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   148083.doc 2·