TW201018496A - Hypoallergenic dermatological composition - Google Patents

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Anne Mandeau
Bernard Fabre
Valerie Teysseyre
Jean-Francois Boe
Trigueros Veronique Crebassa
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Fabre Pierre Dermo Cosmetique
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Description

201018496 六、發明說明： c發明所屬·^技術領域3 本發明係關於對縠類的過敏症。 I：先前技術3 在本發明的意義内，穀類包括禾本科(Poaceae)及假榖 類（pseudocereals) ° 名稱<穀類 >係關於禾本亞目（Gramineae)，其成熟的< 榖粒 >(穎果）特別因為其高澱粉含量而使用作為食物（巴黎 (Paris)R.R.，莫伊誰（Moyse)H.醫療材料概略（Precis de matiere medicale.)II生藥學特刊（Pharmacognosie speciale)。 種子植物門（Spermaphytes)(繼續）：被子植物 (Angiosperms)。單子葉植物綱(Monocotyledones)-雙子葉植 物綱（Dicotyledones)。無花瓣植物亞綱及全花瓣植物亞綱 (Apetales et Diapetales·)第 2版。巴黎：馬松(Masson)，1981， 第16頁）。名稱<穀類>亦特別關於這些植物之種子。 在植物學中，穀類屬於禾本科（或禾本亞目）。 該禾本亞目通常為草狀單子葉植物(Monocots)，其具有 中空莖、在節（空心莖）間攜帶二縱列葉與一經常分開及含葉 舌的葉鞠。花排列在小穗上及最經常歸納為複穗狀花序或 稱為<圓錐花序>叢。花簡化成雄蕊及子房：二片葉爸片或 穎片保護小穗；及二片外桴(lemmas)與花一起，其之一在 前方、斜靠、纏繞、經常有芒。三個突出的雄蕊擺動 (oscillating)且經由其背面連接。子房具有丨心皮與二羽狀型 式，緊緊包住胚珠及成長成一種指為穎果的特別果實；大 201018496 量的胚乳具澱粉性。 此科包括大約700個屬及12000種物種。 大部分的禾本科植物使用於食物的目的（小麥、大麥、 黑麥、燕麥、高梁、小米、玉米、米…）。 最傳統食用的穀類物種列在下列表1中。 201018496
表1 :食用，屬於禾本科的主要榖類物種 拉丁名 ~~~~- 俗名 阿比西尼亞燕麥(Avena aby ssinica Hochst·) 短燕麥(Avena brevis Roth) 裸燕麥(Avena nuda L··) 裸燕麥 鍵粗種燕麥(Avena saliva L.) 芒果雀麥(Bromus mango E. Desv.) 馬援種薏苡(Coix 丨acryma-jobi var. ma-yuen (Rom. Caill.) 印度實竹(Dendrocalamus strictus (Roxb.) Nees) 直長馬唐(EHgitariaexilis (Kippist) 黑馬唐(Digitaria iburna Stapf) 紫穗稗(Echinochloa esculenta (A.Braun) H. Scholz) 日本小米 龍爪稷原亞種(Eleusine coracana subsp. coracana) 紅色小米 苔麵XEragrostis tef (Zuccagni) Trotter) 畫眉草(lovegrass) A^Hordeum vulgare subsp. vulgare) 常見的大麥 光稃稻(Oryza glaberrima Steud.) 非洲米 水稻(Oryza sativa L.) 米 赫替考稷(Panicum hirticaule J. Presl) 稷原亞種(Panicum miliaceum subsp，miliaceum) 常見的小米 細柄黍(Panicum sumatrense Roth) 密花雀稗(Paspalum scrobiculatum L.) 御穀(Pennisetum glaucum (L.) R. Br.) 珍珠小米 加拿麗®1 草(Phalaris canariensis L·) 金絲雀草 黑麥(Secale cereale subsp. cereale) 黑麥植物 非洲直葉黑麥(Secale strictum subsp. afiicanum (Stapf) K. Hammer) 義大利狗尾草原亞種(Setaria italica subsp. italica) 義大利小米、果(ίοχΐ millet)、中國小米、匈 牙利小米_ 棕葉狗尾草(Setaria palmifolia (J. Koenig) Stapf) 短生狗尾草(Setaria pumila sutep. pumila) 小狗尾草 高梁原亞種(Soi^hum bicolor subsp. bicolor) 大粟 高^______ 小黑麥類(xTriticosecale spp.) 小黑堯一_ 小麥原亞種(Triticum aestivum subsp. aestivum) 常見的土查二 斯佩爾特小麥(Triticum aestivum subsp. Spelta (L.) Thell.) 印度圓粒小麥(Triticum aestivum subsp. sphaerococcum (Percival) Mackey) 單粒小麥原亞種(Triticum monococcum subsp. monococcum) 小斯佩_特小參，單粒 小麥_一一 提摩菲維小麥原亞種(Triticumtimopheevii subsp· timopheevii) 圓錐小麥波斯小麥亞種(Triticum turgidum subsp. carthlicum (Nevski) A· Love & D. Love) 波斯小麥 ___:- 圓錐小麥硬粒小麥亞種(Triticum turgidum subsp. dunrni (Desf.) Husn.) 硬粒小史一- 圓錐小麥波蘭小麥亞種(Triticum turgidum subsp. polonicum (L.) Thell_) 祐科夫斯基小麥(Triticum zhukovskyi A. M. Menabde & Eritzjan) 下弯尾稃草(Urochloa deflexa (Schumach.) H. Scholz) ----- 多枝尾稃草(Urochloa ramosa (L.) T· Q. Nguyen) ----- 沼生孤(Zizania palustris L·.) ~ 玉米原亞種(Zea mays subsp. mays L.) 玉米__— 201018496 某些來自其它科植物的穀粒類似於榖類及其指為假穀 類。此等物種之實施例（其與穀類相關但不是禾本科部分， 其亦被食用及其可被包含在食物過敏症中）包括列在下列 表2中的那些： 表2 :與穀類相關、不屬於禾本科、被食用的主要物種 拉丁名 俗名 科 尾穗莧(Amaranthus caudatus L·.) 猫尾紅(red hot cattail) 籽粒莧(grain amaranth) 雁來紅(love-lies-bleeding) 狐尾草 莧科 (Amaranthaceae) 繁穗览(Amaranthus cruentus L.) 紅莧菜(red amaranth) 莧科 千穗谷(Amaranthus hypochondriacus L.) 莧科 小葉灰藿(Chenopodium album L·.) 白藜 (white goosefoot) 藜科 (Chenopodiaceae) 伯蘭德氏藜奴塔利藜亞種 (Chenopodium berlandieri subsp nuttalliae (Saff.) H. D. Wilson & Heiser) 藜科 帕利狄考氏藜（Chenopodium pallidicaule Aellen) 藜科 查藜原亞種(Chenopodium quinoa subsp. quinoa) 藜麥(quinoa)，秘魯米 藜科 豐田種驀麥(Fagopyrum esculentum Moench) 常見的蕎麥，櫸麥 (beech wheat) 蓼科 (Polygonaceae) 鍵輕騫麥(Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn.) 韃靼蕎麥 蓼科 一年生向日葵(Helianthus annuus L.) 向曰葵 菊科(Asteraceae) 印度胡麻(Sesamum indicum L.) 芝麻 胡麻科 (Pedaliaceae) 穀類及假穀類穀粒包含大量蛋白質：結構性蛋白質、 生物功能性蛋白質及備用蛋白質。歐斯朋（Osborne)(1907) 已根據其溶解度來分類： -可溶於水的白蛋白類 -可溶在鹽液溶液中的球蛋白類 -可溶在水性乙醇中的醇溶穀蛋白類(prolamines) 201018496 -不溶在上述溶劑中、部分可溶在尿素或胍溶液中之穀 蛋白類。 實施例： 小麥 燕麥 大麥 玉米 白蛋白類 麥白蛋白類 (leukosines) 球蛋白類 麻仁球蛋白類 (edestines) 燕麥球蛋白類 (avenalins) 醇溶榖蛋 白類 穀膠蛋白類 穀膠蛋白類 大麥蛋白類 玉米醇溶蛋 白類 穀蛋白類 小麥穀蛋白類 麥燕穀蛋白類 大麥芽鹼類 齊阿寧類 (zeanins) 相反地’地上部分(特別是葉子）的蛋白質含量特別由下 列組成： -葉綠體的膜蛋白（經常關於脂質及色素的蛋白質） -葉綠體的可溶蛋白質（間質）：RuBPCase 黎麥、向曰葵、燕麥、大麥及治生搲(z如 的葉子、小麥和芝麻的嫩穗、米、小麥及玉米芽已經使用 在化粧品中。例如，已使用嫩綠色大麥幼芽作為抗老化劑。 ® 在先述技藝中亦已經揭示出： -使用莧屬的葉萃取物作為抗炎性藥物，特別是用來治 療異位性皮膚炎(JP專利2000143524)。 -用於局部用途之包含燕麥稈萃取物與柳葉菜萃取物 結合的組成物，其使用來治療皮膚的炎性反應（EP 1474159)。 -藉由米胚芽油保護來對抗氡化之化粧品組成物（Ep 1704898)。 -包含小麥芽萃取物之化粧品組成物(WO 9526183)。 201018496 -包含向日葵莖的萃取物在皮膚上異有再生效應之化 粧品產物(FR 2487674) 穀類粉末（特別是小麥粉）已知是麵包師傅氣喘及經由 吸入的過敏性鼻炎之原由。已觀察到白蛋白類及球蛋白類 (此等蛋白質可溶於中性溶液中）具有最強的1gE反應。但 是，某些研究亦已闡明可溶於乙醇或酸性媒質的蛋白質（小 麥榖蛋白類及穀膠蛋白類）之反應性。更近’免疫墨點鑑定 法研究已顯示出在小麥及大麥麵粉的中性部分中’於患有 麵包師傅過敏症的患者也清中之主要過敏原落在低分子量 範圍（約20 kDa)内。 當攝取時，穀類有時是腹部疾病及疱疹性皮膚炎的原 由。一些研究已顯示出所包含的大部分抗原為乙醇可溶的 蛋白質之穀膠蛋白部分。 雖然穀類在人類食物中重要，它們被懷疑會讓異位性 皮膚炎症狀惡化，特別在小孩中。同樣地，免疫學研究(基 本SPT測試（皮膚點刺試驗(Skin Price Test))及RAST(放射過 敏原吸附試驗（Radioallergosorbent Test)))已導致可鑑別出 包含於小麥、燕麥、黑麥、大麥、米、小米及玉米中之蛋 白質，且已闡明在小麥與大麥或黑麥間之交叉反應（伐永年 (Varjonen)E，伐伊尼歐(Vainio)E，卡里莫（Kalimo)K，蔣塗 南貝克門（Juntunen-Backman)K，沙弗拉因南（Savolainen)J， 穀類在患有異位性皮膚炎的小孩中之皮膚點刺試驗及 RAST反應。藉由免疫墨水鑑定法，在小麥及燕麥中之igE 黏合組分的特徵。Clin Exp Allergy 1995,25: 1100-1107)(帕 8 201018496 洛蘇歐(Palosuo)K，阿連尼俄斯(Alenius)H，伐永年E，寇奇 南（Kalkkinen)N，劉納拉(Reunala)T ,黑麥 口〇及135 黑麥 醇溶蛋白類及大麥γ-3大麥蛋白與ω_5穀膠蛋白（在小麥相依 性、運動引起的無防禦性過敏中之主要過敏原）之交叉反 應。Clin Exp Allergy，2001，31 : 466-473)。當所攝取的榖
類為異位性皮膚炎之原因時，此似乎包括最不可溶的蛋白 質（被膠蛋白類及小麥穀蛋白類）。許多初步研究已顯示出食 物過敏性在患有異位性皮膚炎的小孩中扮演明顯的角色， 及從食物中移除過敏原導致臨床改善。 已經報導出一些以縠類榖粒之萃取物為主（基本上為 小麥蛋白質（不論是水解或未水解）’但是亦有芝麻）的化粧 品在過敏人士中之接觸性過敏症的例子。小麥蛋白質水解 (其可已經為緩和過敏症問題的解決方案）相反地顯示出更 多一點敏感，由水解引發的結構性改變顯露出新的抗原位 置(佩克奎特(Pecquet)C，勞瑞雷(Lauriere)M.在小麥蛋白質 的水解產物中之新過敏原。Rev Fr Allerg Immunol Clin 2003 ， 43 : 21-23)。 【發明内容3 已想要在過敏人士中特別在小孩中避免（藉由口服及 局部途徑二者）穀類榖粒蛋白質。 因此，已對穀類榖粒敏感或過敏的人士用之化粧品有 需要及強烈的需求。 意外且驚人的是，本發明家已顯示出包含穀類或假穀 類較佳在穗頭出現前收成的地上部分之萃取物的化粧品組 201018496 成物不會造成與是榖類榖粒過敏症的原由之那些蛋白質交 又反應。 因此’本發明之目標為提供一種榖類及/或假穀類之地 上部分(排除縠粒）的萃取物’以便使用在對榖類穀粒蛋白質 過敏之人士中。 名稱”縠類及/或假穀類之地上部分，，於本文中意謂著位 於地面上排除穀粒的任何部分。 <穀類及/或假穀類的地上部分 > 包括葉子及/或莖及/或 小穗及/或花(排除榖粒)較佳。 根據本發明之萃取物為穀類及/或假穀類在穗頭出現 前收成的地上部分之萃取物有利。 在本發明的意義内，措辭<穀類及/或假穀類在穗頭出 現之前收成的地上部分>指為榖類或假縠類在發芽後（約在 發芽後2週至2個月）於拔節階段期間上至穗頭出現(但是排 除）收成的地上部分。 在本發明的意義内，名稱<拔節>指為在開花前，與莖 伸長及形成穗頭出現相應之生長階段。 根據本發明之萃取物從小麥、米、大麥或燕麥（燕麥更 佳）的地上部分獲得較佳。 根據本發明，有利地使用在對穀類榖粒蛋白質過敏之 人士中的燕麥之地上部分的萃取物包含2至15%的類黃酮 類及0.2至2%的燕麥皂苷A及B ’且5至10%的異蔓荊素 -2"-0-吡喃阿拉伯糖苷與異荭草素比喃阿拉伯糖苷 類黃酮較佳；及/或少於1 ppm的蛋白質，少於0.5 ppm較佳 201018496 及少於0.3 ppm的蛋白質甚至更佳。 所使用之燕麥的地上部分之萃取物其特徵為其有興趣 的類黃酮及皂素之含量。後者藉由高壓液相層析法，使用 二種合適於每種型式的化合物之不同方法分析。 這些不同分子的量依萃取條件而變化。主要的類黃酮 為異蔓荊素-2”-0-吡喃阿拉伯糖苷與異荭草素_2"_〇_吡喃 阿拉伯糖*。燕麥皂料及B為主要4素。這些為雙糖鏈類 固醇皂素。
根據本發明之萃取物為小麥、米或燕麥在穗頭出現之 前收成的地上部分之萃取物有利’及燕麥在穗頭出現之前 收成的地上部分較佳。 根據本發明之萃取物為在有機溶劑中獲得的萃取物有 利。 根據本發明之萃取物可藉由將穀類或假穀類的地上部 分(約在發芽後2週至2個月，在伸長階段上至(及排除)穗頭 出現期間），在乾燥及研錢萃取進人有機溶射來製備。 特別是，使用選自於由下列所组成之群的有機溶劑··酮類、 S曰類、Cl5X4醇及其任何可溶混的比例之混合物。使用選 自於由下列馳狀群的有機溶财利：丙酮、甲基乙基 酮、甲基異丁基，、醋酸乙醋、㈣醇及其任何可溶混 的比例之混合物。 在攪拌或靜態下進行萃取。 在迴流或室溫下進行萃取。 在植物/溶劑比率範圍於1:7至η 20内進行萃取有利， 11 201018496 1 : 8至1 : 12較佳。 60至120分鐘最 萃取進行時間30分鐘至48小時較佳 佳0 可重覆萃取2或3次。 物質 j後，藉由離心或魏，從萃取步财賴得的㈣ 中^出萃取物’及該溶液可或多或少濃縮直到獲得一乾 可經由濃縮、沉澱及過濾進行脫脂化，或藉由將一吸
附基質懷如雜碳核_脂）混合缝濃_未濃縮的 萃取物溶液進行漂白處理。 可在乾燥步驟處以相對於經萃取的乾物質在範圍β 75%内之重量比率加人基f。該基f可為糖(諸如麥芽糖糊 精）、乳糖、氧化石夕或任何其它美容可接受的基質。 參 此萃取物產生自進入丙網或含有最高2〇%的水之丙嗣/ 水中的萃取有利。丙酮或含有最高2G%的水之丙酮/水萃取 物包括有興趣的分子（類黃酮類及皂素類），及高度耗盡的蛋 白質。事實上，描述在歐洲藥典中用來測量蛋白質的分析 方法不成功，及在從丙酮沉澱及以考馬斯(c〇〇massie)藍或 硝酸銀染色後，於SDS-PAGE凝膠上電泳漂移，此顯示出缺 乏指示出蛋白質存在的帶。在相同電泳上點上一對照組， 以評估蛋白質的偵測極限(如為約1奈克），因此，此萃取物 具有含量低於1 ppm之蛋白質（以點在凝膠上的萃取物量為 準）。該蛋白質含量少於0.5 ppm較佳，及少於0.3 ρρπ1的蛋 白質甚至更佳。 12 201018496 本發明之另一個目標係關於穀類及/或假縠類的地上 部分(排除榖粒)之萃取物的用途’其使用在對榖類穀粒蛋白 質過敏之人士中。 本發明的另一個目標係關於穀類及/或假穀類的地上 部分(排除穀粒）之萃取物的用途，其使用來製備低致敏性之 皮膚學組成物，即’減少及/或防止對穀類穀粒蛋白質過敏 的人士之過敏反應的風險。 本發明的另一個目標係關於包含穀類及/或假穀類的 地上部分之萃取物的化粧用低致敏性組成物的用途其使 用在對榖類穀粒蛋白質過敏之人士中。 根據本發明，所使用的皮膚學或化粧品組成物可特別 包括添加劑及調配物輔助劑，諸如乳化劑、增稠劑、膠凝 劑、水清除劑、展佈劑、安定劑、染料、香料及防腐劑。 根據本發明，所使用的皮膚學或化粧品組成物進一步 包含一般皮膚學相容的賦形劑。 其可製備成油中水(w/0)或水中油(晴)乳液、多重乳 液（諸如例如，水中油中水（W/〇/w)乳液或油中水中油 (0/W/0)⑽）H步為料散液或油分餘、凝谬或 氣溶膠。 該皮膚學相容的職形劑可為在已由熟知技藝之人士所 热知的那些S中之任何賦形劑，以獲得一以乳膏、香露、 凝膠、軟膏、乳液、微乳液、噴霧、洗髮精等等形式局部 施加的組成物。 根據本發明’所使用的皮膚學或化粧品組成物包含01 13 201018496 至ίο重量％(以該組成物的總重量為準）之榖類或假榖類的 地上部分(排除穀粒）之萃取物有利。該組成物包含量在0.1 至5重量％間（以該組成物的總重量為準）之根據本發明之穀 類的地上部分之萃取物較佳。 圖式簡單說明 第1圖來自燕麥的榖粒與嫩穗之總蛋白質的比較圖，其 使用電泳SDS-PAGE(12.5%的聚丙拂醢胺凝膠）’以考馬斯 藍染色。 第2圖西方墨點法(Western bi〇t)，以抗地上部分蛋白質 多株抗體來酵素染色。 第3圖西方墨點法，以抗榖粒蛋白質多株抗體酵素染 色。 【貧施方式】 下列實施例闡明（但不限制）本發明。 例1:藉由丙鲷萃取製備燕麥在穗頭出現之前收成的地 上部分之萃取物 研磨400公斤燕麥在穗頭出現之前收成的乾地上部 刀’然後將其放在含有10倍體積的丙酮/水混合物之反應 器，在室溫下攪拌一小時。 籍由固體/液體分離獲得第一萃取汁液。再次，在室溫 下以1〇倍體積的丙酮/水混合物攪拌萃取該榨渣一小時。藉 由固體/液體分離獲得第二萃取汁液，然後與第一汁液結 口在水上濃縮所產生的溶液至1.33倍體積/公斤，然後過 濾。在加入麥芽糖糊精載體後（適量至25%/天然萃取物）， 201018496 以微波乾燥如此獲得之萃取物。 如此獲得36公斤的淡栋色粉末，其包含6%的類黃鹏類 (異蔓荊素-2π-0-吡喃阿拉伯糖苷與異荭草素-2”-〇-吡喃阿 拉伯糖苷）及0.6%的燕麥皂苷B，且如此獲得之萃取物的蛋 白質含量低於0.3 ppm。 實施例2 :穀類穀粒的萃取物與相同穀類在穗頭出現之前收 成的地上部分之萃取物的生化學及免疫學比較。 使用生化學（萃取及蛋白質測量）及免疫酶 (immunoenzymatic)(藉由抗體產生來特定偵測蛋白質之存 在）技術關明在穀類榖粒之萃取物與地上部分之萃取物間 缺乏交錯。 穀粒蛋白質之萃取物可如下製備： 研磨榖粒並以氫氧化鈉在pH 8下萃取。在過濾、後，藉 由加入最高pH 5.4的鹽酸來沉澱過濾物。在離心後，拿起沉 澱物，將其放入水溶液中及在4。(：下於具有中斷閾6-8 kDa 的透析袋中對著水透析過夜。 地上部分的萃取物可如下製備： 從新鮮材料： •藉由在Tris. HC1緩衝液pH 8.0中增溶萃取，過濾接著 一系列從丙酮中二次沉澱，以移除鹽 或·· Φ藉由在包含尿素及硫腺之還原性拉恩李（Laemmii) 緩衝液pH 7.5中增溶萃取，過濾接著一系列從丙酮 中二次沉澱，以移除鹽 15 201018496 從乾材料： 藉由在包含尿素及硫脲之還原性拉恩李緩衝液pH 7.5 中增溶萃取27小時，過渡接著—系列從丙酮中二次沉澱， 以移除鹽。 生化學及免疫學研究 生化學技術 I. 電泳 原理用來特別檢驗蛋白質的技術為電泳： 於SDS存在下，帶負電荷的蛋白質在聚丙烯醯胺凝膠中僅 ❿ 依其質量朝向陰極漂移，及藉由著色染料(諸如考馬斯藍或 硝酸銀)偵測蛋白質。 斤使用的正對照與如上所述製備之燕麥之穩頭出現前 的地上部分之總蛋白f的萃取物或總縠粒蛋白質的萃㈣ ' 相應。 II. 闞明結果·第1圖 藉由s PAGE電冰(125%的聚丙稀醯胺凝勝），以考 馬斯藍染色來比較燕麥之紐《自質與穗頭出現前的& ® 上部分之圖。 顯丁在第1圖中的電泳圖顯露出在所測試的二種萃取 物之蛋白質、^成物(特別關於主要蛋白質)上有顯著差異。但 是確定在這二批蛋白質配料間有性質上的差異之唯一方法 為使用具有特定的抗原~抗體識別之免疫學技術。 免疫化學技術 這些技術需要首先針對在地上部分或穀粒中的總蛋白 16 201018496 =提供抗體。為此目的，將在_物種及相同物種的地上部 刀及殼粒中之總蛋白質的萃取物給藥至兔子。然後，從該 動物血清製備多株抗體。 目標為閣明燕麥之穗頭出現前的地上部分蛋白質與榖 粒的那些不同，及在穀粒蛋白質與地上部分蛋白質間無交 叉反應。 -針對燕麥的穗頭出現前之地上部分蛋白質的抗體對 燕麥榖粒蛋白質 -針對燕麥的穀粒蛋白質之抗體對燕麥穗頭出現前的 地上部分蛋白質 使用ELISA及西方墨點技術。
I.直接 ELISA ELIS A(酶標記免疫吸附測定法）為一種用來偵測抗原 存在於溶液中之免疫化學技術。原理在於讓在測試溶液中 的蛋白質黏合至井’接著接觸該抗蛋白質多株抗體。然後， 在洗滌後，耦合至酵素的第二抗兔IgG抗體將使用簡單的比 色反應顯露出抗原存在於井中。 II·西方墨點法 原理：西方墨點技術由下列組成：蛋白質混合物之 SOS-PAGE電泳，接著藉由特定抗原-抗體交互作用染色。 僅有由多株抗體所識別的那些蛋白質將被顯露出。然後， 該一級抗體由搞合至酵素（諸如驗性磷酸酶）的二級抗體(於 此為抗兔IgG抗體)識別。 闞明結果-第2及3圖 17 201018496 在穀粒蛋白質與針對燕麥之穗頭出現前的地上部分蛋 . 白質之抗體間的交錯（第2圖）及在燕麥之穗頭出現前的地上 部分蛋白質與針對榖粒蛋白質之抗體間的交錯（第3圖）。 西方墨點技術證實由ELISA所獲得的第一結果，即， 燕麥之穗頭出現前的地上部分蛋白質與穀粒蛋白質不同， 而且在二種間亦無交錯。 因此，對經由飲食之燕麥榖粒蛋白質免疫的患者將不 會對地上部分(排除穀粒）萃取物反應，即使其包含蛋白質。 【圖式簡單說明】 鲁 第1圖來自燕麥的縠粒與嫩穗之總蛋白質的比較圖，其 使用電泳SDS-PAGE(12.5%的聚丙烯醯胺凝膠），以考馬斯 藍染色。 _ 第2圖西方墨點法(western blot)，以抗地上部分蛋白質 多株抗體來酵素染色。 第3圖西方墨點法，以抗榖粒蛋白質多株抗體酵素染 色。 【主要元件符號說明j Θ (無） 18

Claims (1)

  1. 201018496 七、申請專利範圍： L 一種縠類或假穀類排除榖粒的地上部分之萃取物，其使 用於對榖類榖粒蛋白質過敏的人士中。 2. 如申請專利第丨項之萃取物，其中該地上部分在德 頭出現之前收成。 3. 如申晴範圍第1或2項之萃取物，其中該穀類為小麥、 米、大麥或燕麥。 4·如申請專利第3項之萃取物，其中該穀類為燕麥。 5. 如申請專利範圍第4項之萃取物，其包含⑴外的類黃 酮類及0.2至2%的燕麥皂苷A及b。 6. 如申請補第4或5項之萃取物，其特徵為含有程度 5至10%的異蔓莉素-2，，_〇_t南阿拉伯糖#與異狂草素 -2"-〇-吡喃阿拉伯糖苷類黃酮。 7. 如申請專利範圍第4至6項中任一項之萃取物，其包含少 於1 Ppm的蛋白質。 8·如申請專利範圍第1至3項中任一項之萃取物，其中該假 穀類為蕎麥、藜麥或芝麻^ 9. 一種包含榖類或假榖類排除榖粒的地上部分之萃取物 的低致敏性化粧品組成物之用途’其使用在對縠類穀粒 蛋白質過敏的人士中。 10. —種榖類或假穀類排除穀粒的地上部分之萃取物的用 途，其使用來製備一可減少及/或防止在對榖類穀粒蛋 白質過敏之人士中的過敏反應之風險的低致敏性皮膚 學組成物。 19
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