TW200927134A - 6-pyrimidinyl-pyrimid-2-one derivative - Google Patents

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200927134 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明有關可作爲藥劑的活性成份之化合物，該藥劑 係用以預防及/或治療因r蛋白質激酶1(ΤΡΚ1亦稱 GSK3 /9糖原合成酶激酶3/3 )之異常活性所致的疾病，諸 如神經退化性疾病（例如阿茲海默症）。 φ 【先前技術】 阿茲海默症係爲進行性老年癡呆症，其中觀察到因爲 神經細胞退化及神經細胞數量減少所致之明顯大腦皮質萎 縮。在病理上，於腦中觀察到許多老年斑及神經原纖維纏 結。患者數目隨著老年人口之增加而增多，此疾病造成嚴 重之社會問題。雖已提出各式各樣之理論，但尙無法說明 病因。期望早期鑑別病因。 已知阿茲海默症之兩種特徵病理變化出現之程度與智 〇 能障礙程度關係密切。因此，硏究人員自1980年代早期 即經由兩病理變化之組份的分子層級硏究來追尋病因。老 年斑係於胞外累積，/3類澱粉蛋白質被解釋爲其主要組份 (說明書下文縮寫爲"AjS": Biochem. Biophys. Res. Commun·， 1 20, 885 ( 1 984); EMBO J.，4，2757 ( 1 985);

Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82，4245 ( 1 9 85))。另一病理 變化，即神經原纖維纏結，稱爲成對螺旋狀纖維（說明書 以下縮寫爲"PHF”）之雙螺旋絲狀物質於細胞內累積，已 揭露τ蛋白質（一種專屬於腦與微管有關之蛋白質）爲其 -5- 200927134 主要組份（Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85, 45 06 ( 1 988); Neuron, 1, 827 (1988)) ° 此外，基於遺傳學硏究，已發現早老蛋白1及2爲家 族性阿茲海默症之致病基因（Nature, 3 75，754 ( 1 995); Science, 26 9, 973 ( 1 995); Nature. 3 76，775 ( 1 995))，且 已揭示早老蛋白1及2之突變的存在促進A 石之分泌（ Neuron, 17，1 0 0 5 (1 9 9 6); Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94, 2025 (1 997))。由此等結果，認爲在阿茲海默 症中，A0因爲特定理由而異常地累積並附聚，配合PHF 之形成，造成神經細胞死亡。亦預期穀胺酸之胞外流出及 因應該流出之穀胺酸受體活化可能爲缺血性腦血管病變所 致之神經細胞死亡早期的重要因素。 已記載刺激AMP A受體（穀胺酸受體中之一）之海人 酸治療增加作爲AA之前驅物的澱粉狀蛋白先驅蛋白質（ 說明書下文縮寫爲"APP")之 mRNA ( Society for Neuroscience Abstracts，17, 1445 (1991))，亦促進 APP 之代謝(The Journal of Neuroscience, 10, 2 4 0 0 (1990)) 。因此，強烈暗示AyS之累積涉及因缺血性腦血管病症所 致之細胞死亡。觀察到AA之異常累積及附聚的其他疾病 包括例如唐氏症（Down syndrome)、因孤立腦部澱粉狀 蛋白血管病變所致之腦出血、路易體疾病（Lewy body disease)及諸如此類者。此外，作爲顯示因PHF累積所 致之神經原纖維纏結的疾病，實例包括進行性核上神經麻 痺、亞急性硬化腦炎帕金森氏症、腦炎後帕金森氏症、拳 -6- 200927134 擊手腦炎、關島複合型巴金森失智症、路易體疾病及諸如 此類者。 r蛋白質通常由一群於SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳之 48至65 kD A重量處形成數個譜帶的相關蛋白質組成，促 進微管之形成。已證實倂入患有阿茲海默症之腦中PHF 內的r蛋白質與一般r蛋白質比較，係異常磷酸化（J. Biochem., 99, 1 807 ( 1 986); Proc. Natl. Acad. Sci. USA, H 8 3, 49 1 3 ( 1 98 6))。已單離催化該異常磷酸化之酶。該蛋 白質係稱爲τ蛋白質激酶1(說明書下文縮寫爲"TPK1 ") ，且已說明其物化性質（J. Biol. Chem.，267，1 0897 (1 992))。而且，自基於TPK1之部分胺基酸序列的大鼠 大腦皮質cDNA庫選殖大鼠TPK1之cDNA，決定其核苷 酸序列並推算胺基酸序列。結果，顯示大鼠TPK1之主要 結構係對應於稱爲大鼠GSK-3/3之酶（糖原合成酶激酶3 β ，FEBS Lett·，325，167 (1993))。 Q 已記載老年斑之主要組份A泠係神經毒性（Science， 25 0, 279 (1 990))。雖已針對爲何造成細胞死亡之原 因提出各種理論，然而，尙未建立任何可靠之理論。 T a k a s h i m a等人觀察以A /3處理胎鼠海馬初代培養系統所 致之細胞死亡，隨之發現TPK1活性因爲AiS處理而增加 ，而由 A/S所致之細胞死亡則由TPK1之反義所抑制（ Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90, 7789 ( 1 993 ); EP6 1 603 2 ) o 就前文而言，抑制TPK1活性之化合物可能於阿茲海 200927134 默症中壓抑之神經毒性及PHF之形成且抑制神經細 胞死亡，藉以中止或延遲疾病之進行。化合物亦可藉由抑 制A ^之神經毒性來作爲用以治療缺血性腦血管病症、唐 氏症、腦部澱粉狀蛋白血管病變、因路易體疾病所致之腦 出血及諸如此類者的藥劑。此外，化合物可作爲用以治療 以下疾病之藥劑：神經退化性疾病諸如進行性核上神經麻 痺、亞急性硬化腦炎帕金森氏症、腦炎後帕金森氏症、拳 φ 擊手腦炎、關島複合型巴金森失智症、路易體疾病、匹克 氏症（Pick’s disease)、皮質基底核退化及額顳癡呆症、 血管性癡呆症、創傷性損傷、腦及脊髓創傷、周邊神經病 變、視網膜病變及青光眼，以及其他疾病，諸如非胰島素 依賴型糖尿病、肥胖症、躁鬱症、精神分裂症、禿髮、乳 癌、非小細胞肺癌、甲狀腺癌、T或B細胞白血病及數種 由病毒誘發之腫瘤。 人類TPK1抑制劑亦可抑制PfGSK3，在惡性瘡原蟲 Q Γ户/ w所中發現此酶之異物種同源基因 ，結果發現其可用於治療瘧疾（Biochimica et Biophysica Acta 1697, 181- 196, 2004 ) ° 近來，人類遺傳學及動物硏究兩者皆指出Wnt/LPR5 路徑作爲骨質計量之主要調節劑的角色。TPK 1之抑制導 致經典Wnt訊息傳導的必然活化。因爲骨質減低之病症 中涉及Wnt訊息傳導缺陷，故TPK1抑制劑亦可用於治療 骨質減少病症、與骨骼有關之病變、骨質疏鬆症。 根據最近之數據，TPK1抑制劑可用於治療或預防天 200927134 皰瘡。 近來硏究顯示TPK1抑制劑治療改善嗜中性球及巨核 細胞復原。因此，TPK1抑制劑可用於治療由癌症化療所 引發之嗜中性球減少症。 已知某些 6-嘧啶基-嘧啶-2-酮衍生物具有作爲TPK1 抑制劑之活性（W003/027080 )，然而，已驚異地發現式 (Ϊ)化合物表現出更佳之體內活性，而不抑制細胞色素 0 P450 2D6 : CYP 2D6。此點對於該化合物之發展性有巨 幅貢獻。 此外，通常作爲藥劑之化合物係針對與其他藥物組合 投藥來進行硏究。此點隨著最近醫藥治療之多元化及人口 老化而增加。爲了避免藥物-藥物相互作用，希望（例如 )其中一種所投予化合物不會抑制細胞色素P450酶，諸 如細胞色素P4 5 0 2D6。此點可能導致與藥物組合有關之 無法預期的副作用。 Ο 由W003/027080之已知化合物，體外活性相當，因 此預期所有此等化合物皆會具有類似之型線。令人驚異的 是發現W003/027080所大體涵蓋但未例示之化合物中之 大幅異於其他所揭示之化合物。 【發明內容】 本發明之目的係提供一種化合物，其可作爲用以預防 及/或治療諸如阿茲海默症之疾病的藥劑之活性成份，改 良體內活性而不抑制細胞色素2D6。詳言之，目的係提供

200927134 一種新穎之化合物，其可藉由抑制ΤΡΚ 1活性以壓 之神經毒性及ΡΤΗ之形成且藉由抑制神經細胞之 而於改善體內活性且不抑制C ΥΡ 2 D 6之下用以作 的預防及/或治療神經退化性疾病諸如阿茲海默症 的活性成份。 令人驚異地發現下式（I)所示之新穎化合物 需活性且可作爲用以預防及/或治療前述疾病的藥 性成份。基於此等發現而完成本發明。 本發明因此提供一種式（I )所示之化合物： (I) {3-甲基-2-( (2S) -2-(4-(5-甲基-1,2,4-噁二 基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧啶-4(3Η) -其醫藥上可接受之鹽。 本發明有關作爲藥劑之3-甲基-2- (( 2S ) -2-5-甲基-1，2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶 )嘧啶-4 (3Η)-酮或醫藥上可接受之鹽。 本發明有關作爲2：蛋白質激酶1抑制劑之3 -甲 ((2S) -2· (4- (5 -甲基-1,2,4-噁二唑-3-基）苯 3 啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧啶-4(3Η)-酮或醫藥上可g 鹽。 本發明有關作爲用以預防及/或治療因r蛋白® -10- Αβ 亡， 根本 藥劑 有所 之活 唑-3- 酮}或 C 4-( -4-基 基-2 )嗎 受之 激酶 200927134 1活性過高所致之疾病的藥劑之3 -甲基-2-( (2S) -2-( 4- ( 5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧啶-4 (3H)-酮或醫藥上可接受之鹽。 本發明有關用以預防及/或治療神經退化性疾病之 3-甲基-2-( (2S) -2-(4-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基） 苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4 -基）嘧啶-4 (3H)-酮或醫藥上 可接受之鹽。 φ 本發明有關用以預防及/或治療下列疾病之3 -甲基- 2- ( ( 2S) -2- ( 4- ( 5 -甲基·1，2,4 -噁二唑-3-基）苯基） 嗎啉）-6 -(嘧啶-4 -基）嘧啶_ 4 ( 3 Η )-酮或醫藥上可接受 之鹽：阿茲海默症、缺血性腦血管病變、唐氏症、因腦部 澱粉狀蛋白血管病變所致之腦出血、進行性核上神經麻痺 、亞急性硬化腦炎帕金森氏症、腦炎後帕金森氏症、拳擊 手腦炎、關島複合型巴金森失智症、路易體疾病、匹克氏 症、皮質基底核退化、額顳癡呆症、血管性癡呆症、創傷 〇 性損傷、腦及脊髓創傷、周邊神經病變、視網膜病變及青 光眼。 本發明有關用以預防及/或治療選自下列疾病之3-甲基-2- ( ( 2S) -2- ( 4- ( 5 -甲基-1,2,4-噁二唑-3-基）苯 基）嗎啉）-6-(嘧啶-4 -基）嘧啶-4 (3Η)-酮或醫藥上可 接受之鹽：非胰島素依賴型糖尿病、肥胖症、躁鬱症、精 神分裂症、禿髮、乳癌、非小細胞肺癌、甲狀腺癌、Τ或 Β細胞白血病、骨質疏鬆症、瘧疾、由癌症化療所引發之 嗜中性球減少症及病毒誘發之腫瘤。 -11 - 200927134 先前硏究顯示GSK3活性降低長期增益現象（Long Term Potentiation)，一種記憶鞏固之電氣生理關連，暗 示此酶之抑制劑可具有增強認知活性。發現化合物之增強 認知效果可應用於治療下列疾病特有之記憶缺失：阿茲海 默氏症、帕金森症、與年齡有關之記憶力減退、輕度認知 減退、腦創傷、精神分裂症及其他觀察到該種缺失之病症 〇 參 本發明有關式（I) 3·甲基-2-( (2S) -2-(4-(5-甲 基-1，2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧 啶-4 ( 3H )-酮或醫藥上可接受之鹽，其係用以形成具有 下列疾病特有之認知及記憶缺失特徵的疾病：阿茲海默氏 症、帕金森氏症、與年齡有關之記憶力減退、輕度認知減 退、腦創傷、精神分裂症及其他觀察到該種缺失之病症。 進行本發明之最佳模式 φ 除非另有陳述，否則下列定義係用以說明且定義用以 描述本發明之各種術語的意義及範圍。 前述式（I)所示化合物之醫藥上可接受之鹽可包括 與無機酸（諸如鹽酸、氫溴酸及諸如此類者）之鹽及與有 機酸（諸如乙酸、丙酸、酒石酸、反丁烯二酸、順丁烯二 酸、蘋果酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸及諸如此類 者）之鹽。 除前述式（I)所示化合物之外，其醫藥上可接受之 鹽、其溶劑合物及水合物亦涵蓋於本發明範圍內。 -12- 200927134 本發明化合物於體內對TPK1具有抑制活性。因此， 其可抑制神經退化性疾病諸如阿茲海默症患者之TPK1活 性，以壓抑A yS之神經毒性及PHF之形成，並抑制神經 細胞死亡。是故，本發明化合物可作爲根本地預防及/或 治療阿茲海默症之藥劑的活性成份。此外，本發明化合物 亦可作爲用以預防及/或治療以下疾病之藥劑的活性成份 :缺血性腦血管病變、唐氏症、因孤立腦部澱粉狀蛋白血 φ 管病變所致之腦出血、進行性核上神經麻痒、亞急性硬化 性泛腦炎、腦炎後帕金森氏症、拳擊手腦炎、關島複合型 巴金森失智症、路易體疾病、匹克氏症、皮質基底核退化 額顳癡呆症、血管性癡呆症、創傷性損傷、腦及脊髓創傷 、周邊神經病變、視網膜病變及青光眼、非胰島素依賴型 糖尿病、肥胖症、躁鬱症、精神分裂症、禿髮、乳癌、非 小細胞肺癌、甲狀腺癌、T或B細胞白血病及數種由病毒 誘發之腫瘤、骨質疏鬆症、瘧疾、由癌症化療所引發之嗜 〇 中性球減少症及具有下列疾病特有之認知及記憶缺失特徵 的疾病：阿茲海默氏症、帕金森氏症、與年齡有關之記億 力減退、輕度認知減退、腦創傷、精神分裂症及其他觀察 到該種缺失之病症。 本發明化合物亦對CYP2D6具有低抑制活性，對於待 組合使用之藥劑的代謝影響較低。因此，即使該藥劑與其 他藥劑組合使用，亦幾乎不會產生藥劑-藥劑相互作用。 此外’本發明化合物未表現明顯毒性因此適用於藥劑 -13- 200927134 作爲本發明藥劑之活性成份，可使用前述式（I)所 示之物質及其醫藥上可接受之鹽及其溶劑合物及其水合物 。該物質本身可投藥作爲本發明藥劑，然而，期望以包含 前述物質作爲活性成份及一或多種醫藥添加劑之醫藥組成 物形式投予該藥劑。作爲本發明藥劑之活性成份，可組合 使用二或更多種前述物質。 醫藥組成物之類型不特別限制，組成物可以經口或非 Φ 經腸胃投藥之任何調合物形式提供。例如，醫藥組成物可 調配成例如用以經口投藥之醫藥組成物形式，諸如顆粒、 粉末、硬質膠囊、軟質膠囊、糖漿、乳液、懸浮液、溶液 及諸如此類者，或用於非經腸胃投藥之醫藥組成物形式， 諸如靜脈內、肌內或皮下投藥之注射、滴入輸液、經皮製 劑、經口腔製劑、鼻滴劑、吸入劑、栓劑及諸如此類者。 本發明藥劑之投藥劑量及頻率不特別限制，可視情況 適當地選擇’諸如預防及/或治療目的、疾病類型、患者 〇 體重或年齡、疾病嚴重性及諸如此類者。通常，經口投藥 至成人之日劑量可爲0.01至1,000毫克（活性成份重量 )’且該劑量可每曰投藥一次或以分次部分投藥多次，或 數曰投藥一次。當該藥劑以注射形式使用時，投藥可較佳 地於對成人0.001至3000毫克（活性成份重量）之日劑 量下連續或斷續地進行。 【實施方式】 實施例 -14- 200927134 參照實施例更詳細說明本發明。然而，本發明範圍不 受限於下列實施例。 本發明化合物之製備 實施例 1:3-甲基-2-((23)-2-(4-(5-甲基-1，2,4-噁二 唑-3 _基）苯基）嗎啉）-6 -(嘧啶-4 -基）嘧啶_ 4 ( 3 Η )-酮 藉由2-氯-1-甲基-1Η-[4,4’]聯嚼U定基-6-嗣（中間物1 )及對應之胺（中間物1 9 )於鹼存在下縮合而製備本發 明化合物。 本發明化合物之一般合成流程圖如下° 流程圖1 :中間物1之合成流程圖

❹ -15- 200927134 流程圖2 :本發明化合物之合成流程圖

XVn-p, OH Η

Br 中間物 § 中間物 11

步驟1 -1 :血嘧啶酸乙酯（中間物3 ) 將血嘧啶酸單水合物（中間物2，53.19克，0.306毫 G 莫耳）添加至1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一烷-7-烯（46.51 克，0.306毫莫耳）於二甲基甲醯胺（85毫升）中之溶液 中。溶液攪拌5分鐘後，將乙基碘（57.14克，0.366毫 莫耳）添加至溶液，混合物於60°C加熱5小時。將水（ 1 000毫升）添加至混合物，過濾收集形成之沉澱物，以 水洗滌，乾燥產生血嘧啶酸乙酯（中間物3，49.25克，88 % )。 'H NMR ( DMSO-d6 ) 6 : 1.2 9 ( 3 Η，dt，J = 1 . 5，6 · 9

Hz) ，4.3 1 (2H，dq，J=1.2，7.2 Hz) ’ 6.04 ( 1H > d， -16- 200927134 J=1.2 Hz ) ，11.11 (lH，s) ，11.37 (lH，s)

MS ： [M + H]+= 185 熔點：2 0 5 · 5 °C 步驟1-2: 2,6-二氯嘧啶-4-甲酸乙酯（中間物4) 將N，N-二乙基苯胺（60毫升，0.377毫莫耳）添加至 血嘧啶酸乙酯（中間物3，97.70克，0_531毫莫耳）及磷 醯氯（120毫升’ 1,31莫耳）之混合物中且混合物回流7〇 分鐘。將溶液倒入冰水中，過濾收集形成之固體且以水洗 滌。此固體溶於乙酸乙酯中’溶液經矽膠過濾。濾液以硫 酸鈉乾燥’於減壓下濃縮。所得之殘留物藉短矽膠管柱層 析純化（溶離劑；己烷/乙酸乙酯 =2/1)產生2,6 -二氯 嘧啶-4-甲酸乙酯（中間物4，99.94克，85% )。 1 H NMR ( CDC 1 3 ) δ : 1.4 5 ( 3 Η，t，J = 7.3 Η ζ )， 4.5 1 ( 3Η > q ' J = 7. 1 Hz ) ，7.97( 1H，s)

MS ： [M + H] + = 221 熔點：3 1.6 °C 步驟1-3:嘧啶-4-甲酸乙酯（中間物5) 將三乙基胺（ 48.03克，0.475毫莫耳）添加至2,6 -二 氯嘧陡-4-甲酸乙醋（中間物4，38.60克，0.175毫莫耳 )於四氫呋喃（7〇〇毫升）中之溶液中。溶液添加鈀-碳 (5%)，於氫氛圍下攪拌6小時。濾除反應系統中之固 體’濾液於減壓下濃縮。所得之殘留物藉矽膠管柱層析純 -17- 200927134 化，產生嘧啶·4 -甲酸乙酯（中間物5，23.06克， 〇 NMR ( CDC13 ) δ : 1.46 ( 3Η > t » J = 7. 1 4.52 ( 2H - q，J = 7.1 Hz) ，8.03 ( 1H，dd，J=1 Hz) ，9.00 ( 1H，d，J = 5.0 Hz) ’ 9.42 ( 1H 5 d Hz )

MS ： [M + H]+ = 153 φ 熔點：3 6.8 °C 步驟1-4: 3-合氧基-3-(嘧啶-4-基）丙酸乙酯（中 ) 乙醇（16.18克，0.351莫耳）於二乙醚（15 中之溶液添加至氫化鈉（13.71克，0.343莫耳， 中60%，石蠟以己烷洗除）於二乙醚（1〇〇毫升） 液中。混合物攪拌30分鐘後，於減壓下蒸發溶劑 Φ 苯（100毫升）添加至殘留物。溶液添加嘧啶-4-甲 (中間物5’ 30.86克，0.203莫耳）及乙酸乙酯 克，0.346莫耳）於甲苯（10〇毫升）中之溶液， 物於8 0 °C加熱3小時。混合物添加鹽酸且隨之碳 以調至pH 4。溶液分溶於水及乙酸乙酯之間。有 鹽水洗滌且以硫酸鈉乾燥。於減壓下蒸發溶劑，） 合氧基- 3-(嘧啶-4 -基）丙酸乙酯（中間物6，36.] 92% )。 'H NMR ( CDC13 ) 5 : 1.35 ( 3H，t，J = 6.9 87% ) Hz )， .7 - 5.0 ，J=1.4 間物6 毫升） 於石蠟 中之溶 ，將甲 酸乙酯 (30.48 且混合 酸氫鈉 機層以 奎生3-10克， Hz )， -18- 200927134 4.3 1 ( 2H，q，J = 7.2 Hz) ，6.47 ( 1H > s ) ，7.84 ( 1H， dd，J=1.5，5.4Hz) ，8.89(lH，d，J = 5.1Hz) > 9.24 ( 1 H，d，J=1.2 Hz ) ，1 2.22 ( 1 H，s ) MS ： [M + H]+ = 195

熔點：5 2.3 °C 步驟1-5 : 2-锍基-1-甲基-1H-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（中間 〇 物” 3-合氧基-3-(嘧啶-4-基）丙酸乙酯（中間物 6， 36.10 克，0.186 莫耳）、N -甲基硫脲（25.40 克，0.282 莫耳）及1,8-二氮雜雙環[5·4·0]十一烷-7-烯（29.11克， 0 · 1 9 1莫耳）於乙醇（1 5 0毫升）中之溶液回流2 1小時。 於減壓下蒸發一半量之乙醇，添加鹽酸。過濾收集形成之 沉澱物，以水洗滌並乾燥。沉澱物於熱乙酸乙酯（1〇〇〇 毫升）中攪拌，過濾收集沉澱物，乾燥產生2-锍基-1-甲 Q 基-1Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（中間物7，33.91克，83% ) 〇 *H NMR ( CDC13 ) δ ： 3.59 ( 3Η，s) ，6.91 ( 1H > s )，8.27 ( 1H，d，J = 2.4 Hz) ，9.08 ( 1H，d，J = 2.1 Hz )，9.41(lH，s) > 11.99 (1H> s) MS ： [M + H]+= 221 熔點：228.0°C (分解） 步驟1-6 : 2-氯-卜甲基-1Η-[4, 4’]聯嘧啶基-6-酮（中間物 -19- 200927134 1 ) 2 -巯基-1 -甲基-1 Η - [ 4,4，]聯嘧啶基-6 -酮（中間物7， 8_8克’ 40毫莫耳）於二甲基甲醯胺（3〇毫升）及二 氯乙烷（3 0毫升）之混合溶劑中之懸浮液添加至磷醯氯 (11.2毫升’ 120毫莫耳），且混合物於65 攪拌50分 鐘。將溶液倒入以冰冷卻之二氯甲烷（300毫升）中，將 水添加至該溶液’且混合物劇烈攪拌5分鐘。添加碳酸鈉 水溶液（25.4克，240毫莫耳，於水（1〇〇毫升）中）， pH以飽和碳酸氫鈉水溶液調至8。添加次氯酸鈉水溶液 (於水中5%，120毫升）。以塞里矽藻土過濾後，有機 層以二氯甲烷萃取兩次，以飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，且 以硫酸鈉乾燥。於減壓下蒸發溶劑，所得之殘留物藉矽膠 管柱層析純化（溶離劑；乙酸乙酯/己烷=1/1 )，以二乙 醚洗滌，產生2-氯-1-甲基-1Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（中間 物1)之淡黃色固體（2.2克，62%，純度98.7%)。 *H NMR ( CDC13 ) δ : 3.74 ( 3Η，s) ，7.58 ( 1H ’ s )，8 . 1 9 ( 1 Η，d，J = 5 · 7 Hz) ，8 · 9 2 ( 1 H，d，J = 5 · 2 Hz )> 9.3 1 ( 1H > d - J=1. 1Hz ) MS ： [M + H]+ = 223 熔點：1 6 8 · 5 °C (分解） 步驟1 - 7 : 2 -溴-(1 S ) -1 - ( 4 -溴苯基）乙醇（中間物9 ) (S) -CBS (25毫升，（S) -2-甲基- CBS-嚼唑硼烷 ，Aldrich製造，1.0 Μ甲苯溶液）冷卻至 Ot：，添加硼 -20- 200927134 烷-四氫呋喃錯合物（185毫升，185毫莫耳，i.o μ四氫 呋喃溶液）。燒瓶藉冰-氯化鈉浴冷卻後，在溫度保持-5 t至〇 °C之下以一小時逐滴添加4 -溴苯甲醯甲基溴（中間 物8，50.28克，181毫莫耳）於二氯甲烷（300毫升）中 之溶液。混合物於〇°C攪拌50分鐘後，分小批量添加甲 醇（12毫升）。之後，逐滴添加〇.5 Μ鹽酸（300毫升） 且混合物於室溫攪拌40分鐘。濾除沉澱物，濾液分溶於 φ 二氯甲烷與水之間。分離有機層，水層以二氯甲烷萃取。 結合有機層，以〇·5 Μ鹽酸及鹽水洗滌兩次，並以無水硫 酸鈉乾燥。於減壓下蒸發溶劑，產生2-溴-l-(lS)-(4-溴苯基）乙醇（中間物9)之淡棕色油。此重要之粗產物 不加純化地使用於後續步驟。 步驟1-8:(28)-2-(4-溴苯基）環氧乙烷（中間物10) 前述步驟所得之（2S) -2-溴-1-(4-溴苯基）乙醇（ ❹ 中間物9)溶於乙醚（300毫升），溶液與氫氧化鈉水溶 液（14.47克，362毫莫耳於300毫升水中）一起於雙層 系統中在室溫下攪拌1.5小時。混合物分溶於二乙醚及水 之間’有機層以飽和鹽水洗滌並以無水硫酸鈉乾燥。於減 壓下蒸發溶劑，產生（2S) -2- (4 -溴苯基）環氧乙烷（ 中間物1 〇 )之淡棕色油。此粗產物不加純化地使用於後 續步驟。 1 H-NMR ( 3 00 MHz ’ CDC 13 ) <5 : 2 · 74-2 · 77 ( 1 Η，m )> 3.13-3.17 ( 1H > m ) ，3.8 2 - 3.8 4 ( 1 Η，m ) ，7.16 ( -21 - 200927134 2H，d，J = 8.4 Hz ) ，7.48 ( 2H，d，J = 8.4 Hz ) 步驟 1-9: (IS) -1-(4-溴苯基）-2-( (1R)-1-苯基乙 基胺基）乙醇（中間物1 1) 前述步驟所得之（2S ) -2- ( 4-溴苯基）環氧乙烷（ 中間物1〇)及（R) -1-苯基乙基胺（65.22克，5 3 8毫莫 耳）之混合物於在8 0 °C加熱之油浴中攪拌3小時。於減 壓下餾除過量胺（於7 mmHg約70°C )。冷卻後，形成之 固體殘留物以異丙醚洗滌並乾燥，產生（IS) -1-(4-溴 苯基）-2- ( ( 1R) -1-苯基乙基胺基）乙醇（中間物1 1， 46.76克，3步驟之產率81%)之白色結晶。 *H-NMR ( 3 00MHz > CDC13 ) δ : 1.39 ( 3Η，d， J = 6.3 Hz) ，2.48 ( 1H，dd，J = 9.0Hz，12.0 Hz) ，2.77 (1H，dd，J = 3.6 Hz，12.3 Hz) ，3.82 ( 1H，dd，J = 6.6 Hz，13.2 Hz) ，7.16 ( 2H，d，J = 8.4 Hz ) ，7.20-7.27 (

3H，m) ，7.3 1-7.34 ( 2H，m ) ，7 · 4 1 ( 2 H，d，J = 8.4 H z )

MS : [M + H]+ = 320 熔點：1 0 6.3 °C 比旋光性；[a]D = +80.74 (c=1.0，二氯甲院） 步驟 1-10: (6S) -6-(4 -溴苯基）-4-( (1R) -1-苯基乙 基）嗎啉-3 -酮（中間物1 2 ) 氯乙醯氯（19.5毫升，245毫莫耳）於二氯甲烷（ -22- 200927134 100毫升）中之溶液逐滴添加至（is) -1-( 4-溴苯基）-2- ( ( 1R) -1-苯基乙基胺基）乙醇（中間物1 1，71.0克 ，222毫莫耳）及三乙基胺（34毫升，245毫莫耳）於二 氯甲烷（600毫升）中以冰冷卻之溶液中。混合物攪拌2 小時後，添加1 Μ鹽酸，且混合物分溶於水及氯仿之間。 有機層以飽和碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌，並以無水硫酸 鈉乾燥。於減壓下蒸發溶劑，殘留物溶於2-丙醇（600毫 升）中。溶液添加氫氧化鉀（85%，18.3克，278毫莫耳 )。混合物於室溫攪拌1 5小時。於減壓下蒸發溶劑，殘 留物添加乙酸乙酯。混合物分溶於水及乙酸乙酯之間，有 機層以鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌，並以無水 硫酸鎂乾燥。於減壓下蒸發溶劑，產生（6S ) -6- ( 4-溴 苯基）-4- ( ( 1R ) -1-苯基乙基）嗎啉-3-酮（中間物 12 ，92克）之棕色油。此粗產物不加純化地使用於後續反 應。 •H-NMR ( 3 00 MHz > CDC13) δ ： 1.53 ( 3Η，d， J = 7_0 Hz) ，2.96 ( 1H，dd，J = 3.0 Hz，12.2 Hz) ，3.29 (1H > dd，J=10.8 Hz，12.0 Hz) ，4.38 ( 1H，d，J=I6.8 Hz) ，4.49 ( 1H，d，J=16.9 Hz ) ，4.53 ( 1H，dd，J = 3.0 Hz，10.6 Hz) ，6.53 ( 1H，q，J = 7.2 Hz ) ，7.14 ( 2H > d ，J = 8.3 Hz) ，7.28 -7.3 9 ( 5H，m ) ，7.45 ( 2H，d， J= 8.4 Hz ) MS ： [M + H]+ = 360 比旋光性；[a]D = +71.68 ( c = 0.5，氯仿） -23- 200927134 步驟 1-11: (2S) -2- (4-溴苯基）-4-(( 基）嗎啉（中間物13 ) 於步驟1-10所得（6S) -6- (4-溴苯3 )-1 -苯基乙基）嗎啉-3 -酮（中間物1 2，9 2 喃（4 0 0毫升）以冰冷卻之溶液中以3 0分 烷-四氫呋喃錯合物（I·0 M四氫呋喃溶液 φ 6 0 0毫莫耳）。温至室溫且攪拌2小時後’ 冷卻且逐滴添加甲醇（7 〇毫升）。於減壓 殘留物添加甲醇（750毫升）及1 Μ氫氧 280毫升）。混合物於80°C攪拌一小時，期 添加1 Μ氫氧化鈉水溶液（70毫升）3 卻至室溫後，於減壓下蒸發甲醇，形成之溶 萃取。有機層以水及鹽水洗滌，並以無水硫 減壓下蒸發溶劑，產生（2S ) -2- ( 4-漠苯3 ❹ ）-1-苯基乙基）嗎啉（中間物13，68克， 之產率88% )之白色結晶。 IR ( ATR) : 1 48 7，1449，1117，1098 699，550cm·1 Ή-NMR ( CDCla) ^ : 1.35 ( 3H ^ d) m ) ’ 2.60 ( 1Η ’ m ) ’ 3 ·〇5 ( 1H，m ) ，3 ，3.75 ( 1H，m ) ’ 3.89 ( 1H，m )，4 55 7.25 ( 7H - m ) ，7.46 ( 2H，d ) MS ： [M + H] + = 346 丨R )-苯基乙 £)-4-( ( 1R 克）於四氫咲 鐘逐滴添加硼 ，600毫升， 混合物再以冰 下蒸發溶劑。 化鈉水溶液（ 間每15分鐘 次。混合物冷 液以乙酸乙酯 酸鈉乾燥。於 £ ) -4-( ( 1R 自中間物1 1 ，809 ， 758 ， ，2.10 ( 2H， .35 ( 1Η > q ) (IΗ，m )， -24- 200927134

熔點：88』°C 比旋光性；[a]D = +32.06 ( C=1 .0，二氯甲烷） 步驟 1-12:4-( (2S) -4-( (1R) -i_ 苯基乙基）嗎啉-2- 基）苯甲醛（中間物Η ) (28)-2-(4-溴苯基）-4-((11〇-1-苯基乙基）嗎 啉（中間物13，63.3克，183毫莫耳）於四氫呋喃（450 U 毫升）中之溶液於-78 °C添加正丁基鋰（1.57 Μ己烷溶液 ，175毫升，275毫莫耳）且混合物攪拌20分鐘。添加 Ν，Ν二甲基甲醯胺（28.3毫升，365毫莫耳）且混合物於_ 7 8 °C攪拌2小時，隨後溫至-10 °C。以氯化銨水溶液中止 反應，形成之溶液分溶於水及乙酸乙酯之間。有機層以水 及鹽水洗滌，並以硫酸鈉乾燥。於減壓下蒸發溶劑，產生 粗製4-( (2S) -4-( (1R) -1-苯基乙基）嗎啉-2-基）苯 甲醛（中間物1 4，5 5.1克）。此化合物不進一步純化地 φ 使用。 步驟 1-13:4-( (2S) -4-( (1R) -1-苯基乙基）嗎啉-2- 基）苄腈（中間物1 5 ) 粗製4-( (2S) -4-( (1R) -1-苯基乙基）嗎啉-2-基 )苯甲醛（中間物14，55.1克）於乙醇（280毫升）中之 溶液在室溫添加乙酸鈉（30.0克，3 65毫莫耳）及羥基胺 鹽酸鹽（25.4克，3 6 5毫莫耳）。回流2小時後，混合物 分溶於水及二氯甲烷之間，有機層以水及鹽水洗滌並以硫 -25-

〇 200927134 酸鈉乾燥。於減壓下蒸發溶劑。殘留物隨後添 140毫升）及乙酸酐（140毫升）。混合物回流 ，於減壓下移除溶劑。殘留物分溶於水及氯仿之 層以碳酸氫鈉水溶液洗滌，以硫酸鈉乾燥，且於 除溶劑。殘留物藉矽膠管柱層析純化（溶離劑 酸乙酯=9/1)，產生 4-( (2S)-4-( (1R) 基）嗎啉-2-基）苄腈（中間物15 ’ 45.7克，自 爲 86% ) !H NMR ( 400 MHz > CDC13) δ 1.37( J = 7.0 Hz) ，2.01 (1Η，t，J=11.0 Hz) ，2_15 ，J = 3.1，11.7 Hz) ’ 2.60-2.65 ( 1H> m) ’3. 1 H，m ) ，3 .3 9 ( 1H ’ q ’ J = 7.0 Hz) > 3.74 ( j = 2.4 > 11.7 Hz ) ，3.9 2 - 3.9 6 ( 1 H ’ m ) ’4.65 ，J= 2.4，10.2) ’ 7 · 2 4-7 · 3 5 ( 5 H ’ m ) ’ 7.4 8 J = 7.8 Hz) ’ 7_63 ( 2H ’ d，J = 7.8 Hz)

MS ： [M + H] + = 293 熔點：83_6°C 比旋光性；[a]D = +46.23 ( c = 0.5 ’ 氯仿） 步驟1-14 : 4- ( ( 2S )-嗎啉-2-基）苄腈鹽酸鹽 16 ) 4- ( ( 2S ) -4- ( ( 1R) -1-苯基乙基）嗎啉 腈（中間物15’ 45.7克，156晕旲耳）於1,2-二 312毫升）中之溶液於室溫添加氯甲酸氯乙醋 加乙酸（ 2小時後 ，間。有機 減壓下移 :己烷/乙 -1-苯基乙 中間物1 3 3H，d， (1H，dt 08-3.12 ( 1H，dt， (1H，dd (2H，d， (中間物 -2-基）苄 氯乙烷（ (66.9 克 -26- 200927134 ，468毫莫耳）。回流6小時後，溶液於減壓下濃縮。殘 留物溶於甲醇（312毫升）中且溶液回流2小時。於減壓 下移除溶劑後，粗產物以丙酮洗滌並於減壓下乾燥，產生 4-( (2S)-嗎啉-2-基）苄腈鹽酸鹽（中間物16，27.6克 ，79% )。 *H NMR ( 400 MHz，DMSO-d6 ) δ : 2.99 ( 1Η ’ t， J=1 1.7 Hz ) > 3.12 ( 1H，dt，J = 3.1，12.5 Hz) ，3.25- 3.28 ( 1H > m ) ，3.4 8 - 3.5 2 ( 1 H，m ) ，3 · 9 2 ( 1 H，d t ’ J = 2.4，11.7 Hz ) ，4.15 ( 1H，d d，J = 3. 1，12.5 Hz) ’ 4.86 ( 1H，dd，J = 2.4，11.7 Hz) ，7.60 ( 2H，d，J = 8.6 Hz) ，7.90 ( 2H > d，J= 8.6 Hz) ，9_37 ( 2H，brs)

MS ： [M + H]+= 189 熔點：1 9 5 · 8 °C 比旋光性；[a]D= +3 0.3 9 ( c = 0.5，甲醇） 步驟1-15: (2S) -2- (4 -氛基本基）嗎琳-4 -甲酸第二丁 酯（中間物17 ) 4- ( ( 2S ) ·嗎啉-2-基）苄腈鹽酸鹽（中間物16 ’ 17.9克，79.8毫莫耳）於四氫呋喃（400毫升）中之溶液 於〇t添加三乙基胺（24.2克，240毫莫耳）及二碳酸二 第三丁酯（19.2克，87.8毫莫耳），且混合物於室溫攪 拌3小時。形成之溶液分溶於水及乙酸乙酯之間，有機層 以鹽水洗滌，以硫酸鈉乾燥，且於減壓下移除。殘留校1胃 矽膠管柱層析純化（溶離劑；己烷/乙酸乙酯 =6/1) ’ -27- 200927134 產生（2S) -2- (4-氰基苯基）嗎啉-4-甲酸第三丁 間物 17，17.6 克，77%) NMR ( 400 MHz，CDC13 ) 5 : 1.49 ( 9H， 2.69-2.80 ( 1 H，m) ，3.00-3.09 ( 1 H，m) ，3.65-1H，m) ，3.90-4.23 ( 3H，m ) ，4.48 ( 1H，d，

Hz) ’ 7.50 ( 2H，d，J = 7.8 Hz) ，7.66 ( 2H，d Hz ) ❹ MS : [M + H]+= 289

熔點：1 0 4.2 °C 比旋光性；[a]D =-3 7.3 5 ( c = 0.5，氯仿） 步驟 1-16: ( 2S) -2- ( 4- ( 5 -甲基-1,2,4-噁二唑- 苯基）嗎啉-甲酸第三丁酯（中間物1 8 ) (2S) -2- (4 -氨基苯基）嗎咐-4 -甲酸第二丁 間物17，17.6克，61.1毫莫耳）及羥基胺鹽酸鹽 φ 克’ 183毫莫耳）於乙醇（120毫升）中之溶液於 加於水（120毫升）之碳酸鈉（32.4克，305毫莫 且混合物於80 °C攪拌3小時。於減壓下移除溶劑 留物分溶於水及乙酸乙酯之間。有機層以鹽水洗滌 酸鈉乾燥。於減壓下蒸發溶劑。殘留物添加二甲薄 毫升）及N，N-二甲基乙醯胺二甲基縮醛（18,1克， 莫耳）。溶液回流2小時後，使用具有分子篩 Dean-Stark水分離器共沸移除水。混合物於減壓下 且殘留物藉矽膠管柱層析純化（溶離劑；己烷/乙 酯（中 s )， 3.72 ( J=1 1.0 ，J = 7.8 3-基） 酯（中 (12.8 室溫添 耳）， 後，殘 且以硫 :(150 122毫 4A之 濃縮， 酸乙酯 -28- 200927134 =3/1 )，產生（2S) -2- (4- (5 -甲基-1,2,4-噁二唑-3-基 )苯基）嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間物18，16.9克，80 % ) lU NMR ( 400 MHz > CDC 13 ) δ : 1.49 ( 9Η，s)， 2.66 ( 3H，s) ，2.77-2.90 ( 1 Η，m ) » 3.02-3.11 ( 1H > m ) ，3.67- 3.74 ( 1 H，m ) ，3 · 89 - 4.25 ( 3 H，m ) ，4.48 (lH，d，J=11.0Hz) ，7.50(2H，d，J = 7.8Hz) > 8.00 (2H，d，J = 7.8 Hz ) MS ： [M + H] + = 246 ( -tert-BuOCO)

熔點：Π 4.4 °C 比旋光性；[a]D =-34.93 (c = 0.5，氯仿） 步驟 1-17: ( 2S) -2- ( 4- ( 5 -甲基-1，2，4-噁二唑-3-基） 苯基）嗎啉鹽酸鹽（中間物1 9 ) (28)-2-(4-(5-甲基-1，2,4-噁二唑-3-基）苯基） 嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間物18，16.9克，49.0毫莫耳 )於乙酸乙酯（60毫升）中之溶液於室溫添加4N鹽酸之 乙酸乙酯溶液（1 5 0毫升），且溶液攪拌3小時。於減壓 下蒸發溶劑，且濾出形成之沉澱物，以乙酸乙酯洗滌，並 於減壓下乾燥，產生（2S) -2-(4-(5-甲基-1，2,4-噁二 唑-3-基）苯基）嗎啉鹽酸鹽（中間物19，13.3克，96% )。 1H NMR ( 400 MHz，DMS0-d6 ) δ : 2_67 ( 3H，s ) ，3.00 ( 1H，t，J-12.5 Hz) ，3.12 ( 1H，dt，J = 3.9 12.5 -29- 200927134

Hz ) ，3.27 (1H，d， J=12.5 Hz ) ，3.48 ( 1H，d ，J=1 2.5 Hz ) ，3.97 ( 1H，dt > J = 2.4 > 12.5 Hz ) > 4.15 (1H， dd， J = 3 . 1， 12.5 Hz) > 4.89 ( 1 H，dd，1 .6， 11.0 Hz )， 7.58 ( 2H，d，J = 8.6 Hz ) ，8.03 ( 2H，d，J =8.6 Hz )， 9.62 ( 2H，brs )

MS ： [M + H]+ = 246 熔點：2 8 6.8 °C

比旋光性；[a]D = +29.98 ( c = 0.5，甲醇） 步驟 1-18 :3 -甲基-2-( (2S) -2- (4-( 5 -甲基-1，2,4 -噁 二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧啶_4 ( 3H )-酮（本發明化合物） 2 -氯 _ 3 -甲基-6 - ( 1¾、陡-4 -基）-3 Η -1¾ U疋-4 -嗣（9.8 0 克 ，44.0 毫莫耳）及（2S) -2- (4-(5 -甲基-1，2,4 -噁二唑-3-基）苯基）嗎啉鹽酸鹽（13.3克，47.2毫莫耳）之溶液 於室溫添加三乙基胺（13.4克，132毫莫耳），溶液於室 溫攪拌4小時。溶液於減壓下濃縮後，形成之粗產物以水 洗滌，於減壓下乾燥，產生3-甲基-2-( (2S) -2-(4-( 5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基 )嘧啶-4 ( 3Η )-酮（本發明化合物，18.0克，89% )。 'Η NMR ( 400 MHz，DMSO-d6 ) δ : 2.68 ( 3Η > s ) ，3.04 ( 1H，dd，J=1 1 .0，13.3 Hz) ，3.2 1 ( 1H，dt， J = 3 . 1 12.5 Hz) ，3.49 ( 3H，s) ，3.73 ( 1H，d，J= 1 3.3

Hz) ，3.80-3.85 ( 1H，m) ，3.94 ( 1H，dt，J = 2.3，11.7 -30- 200927134

Hz) ，4.11 ( 1H，dd，J=1 .6 > 11.7 Hz) ，4.86 ( 1H > dd ，J = 2.4，10.2 Hz ) ，7.02 ( 1H，s) ，7.66 ( 2H，d，

J = 7.8 Hz) ，8.03 ( 2H，d，J = 7.8 Hz) ，8.22 ( 1H，dd， J=1.6，5.5 Hz) ，9.00 ( 1H，d，J = 4.7 Hz ) ，9.30 ( 1H ，d，J=1 .6 Hz ) MS : [M + H]+ =432 熔點：191°C (分解） @ 比旋光性；[a]D =-53.71 ( c = 0.5，氯仿） 對掌性Η P L C條件； 管柱；DAICEL CHIRALCEL OD-H 250x4.60mm

溶離劑；乙醇/正己烷 =80/20 流速；0.5毫升/分鐘 溫度；4 0 °C 偵測；242奈米（UV ) 滯留時間；23.878分鐘（參考另一異構物；30.615 _ 分鐘） 對照化合物之製備 實施例2 :表1之化合物1的製備： 甲基- 2-[2- ( 3-苯基_[1,2,4]噁二唑-5-基）-嗎啉-4-基 ]-1Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮 -31 - 200927134 中間物 20 中間物 21 中間物 一

步驟2-1: 4-苄基- 2-(3-苯基-1，2,4-噁二唑-5-基）嗎琳（ 中間物2 1 ) 4-苄基-2-嗎啉甲酸鹽酸鹽（中間物20，I.5克’ 5.82 毫莫耳）於Ν,Ν-二甲基甲醯胺（10毫升）中之攪梓溶液 中添加四氟硼酸2- (1Η-苯并三唑-1-基）-1,13，3·四甲基 脲鎗（2.2克，6.98毫莫耳）、1-羥基苯并三哩水合物（ 236毫克，1.74毫莫耳）及Ν,Ν-二異丙基乙基胺（5.1毫 φ 升，29.1毫莫耳），且反應混合物於室溫攪拌30分鐘。 添加Ν’-羥基苯甲脒（7 92毫克，5.82毫莫耳）之後’反 應混合物於室溫攪拌一小時，隨後加熱至11 〇°C。反應完 全時（藉薄層層析檢測），藉添加水分解過量試劑，水層 以乙酸乙酯萃取。萃取液以水及鹽水洗滌，以硫酸鎂乾燥 ，且於真空中濃縮。形成之殘留物藉由於矽膠上管柱層析 純化，（溶離劑；25 %於己烷中之乙酸乙酯），產生4-苄基-2- ( 3-苯基-1,2,4-噁二唑-5-基）嗎啉（中間物Η， 1.44克，77%)之無色油。 lH NMR ( 400 MHz > CDC13 ) δ ·· 2 · 4 1 - 2 4 7 ( 1 Η，m -32- 200927134 )，2.60 ( 1H，dd，J = 9.8，1 1 .1 Hz ) ，2.73 ( 1H， J= 1 .2，11.7 Hz) ，3.13 ( 1H，d，J-l 1 .7 Hz) ，3 2H > s ) ，3.85-3.91 ( 1H > m) ，4.11 ( 1H，dt，J = 11.5 Hz) ，4.99 ( 1H，dd - J = 2.8，9.4 Hz) ，7.26 (5H，m) ，7.45-7.52 ( 3H，m) ，8.09-8. 12 ( 2H > MS ： [M + H]+ = 322 _ 步驟2-2 : 2- ( 3-苯基-[1，2,4]噁二唑-5-基）-嗎啉鹽 (中間物22 ) 4-苄基-2- (3-苯基-1,2,4-噁二唑-5-基）嗎啉（ 物21，2.0克，6.22毫莫耳）於1,2-二氯乙烷（10毫 中之攪拌溶液中添加氯甲酸氯乙酯（2.0毫升，18.7 耳），且反應混合物於70°C攪拌4小時。反應混合 真空中濃縮。移除溶劑後，殘留物溶於甲醇（1 〇毫 ，且反應溶液於回流下攪拌一小時。反應完全時（藉 Q 層析檢測），反應混合物於真空中濃縮。形成之2-( 基-[1，2,4]噁二唑-5-基）-嗎啉鹽酸鹽（中間物22 ) 純化地使用於後續反應。 'H NMR ( 400 MHz » DMSO-d6) δ 3.15-3.22 ，m ) ，3.29-3.3 2 ( 1 Η > m ) ，3.47 ( 1H，dd，J=1 ( 12.6 Hz) ，3.72 ( 1H，dd，J = 2.6，12.8 Hz) ，4.00 (lH，m) ，4.12-4.17 (lH，m) ，5.40(lH，dd，. -10.0 Hz ) ，7.58-7.66 ( 3H，m) ，8.03-8.05 ( 2H， ，9.65 ( 2H，br ) dd， .61 ( 3.0 > -7.3 8 m) 酸鹽 中間 升） 毫莫 物於 升） 薄層 3-苯 不加 (1H ).2 > -4.06 J-2.8 m ) -33- 200927134

MS ： [M + H]+ = 232 熔點：1 9 4.1 °C 步驟 2-3 : 1-甲基-2- ( 2- ( 3-苯基-[1，2,4]噁二唑-5-基）_ 嗎啉-4-基）-lH-[4,4，]聯嘧啶基-6-酮：（表1之化合物1 ) 前述步驟所得之2-(3-苯基-[1，2,4]噁二唑-5-yl)-嗎 啉鹽酸鹽（中間物22 )於四氫呋喃（1 〇毫升）中之溶液 中添加2-氯-3-甲基- 6-(嘧啶-4-基）嘧啶-4-酮（中間物1 ，1.3克，6.22毫莫耳）及三乙基胺（4.3毫升，31.1毫 莫耳），且反應混合物於室溫攪拌2小時。溶液分溶於水 及氯仿之間，有機層以水及鹽水洗滌，以硫酸鎂乾燥，且 於真空中濃縮。形成之殘留物藉由於矽膠上管柱層析純化 (溶離劑；5%於氯仿中之甲醇），產生1-甲基-2-(2-( 3-苯基-[1，2,4]噁二唑-5-基）-嗎啉-4-基）-1Η-[4,4’]聯嘧 啶基-6-酮（表1之化合物1，1.53克，59%，2步驟）之 固體。 *H NMR ( 400 MHz’ DMSO-d6) <5 ： 3.47 ( 3H，s ) ，3.60-3.70 ( 3H，m) ，3.89-4.11 ( 3H，m) ，5.28-5.39 (1H » m ) ，7.02 ( 1H，s) ，7.5 6-7.62 ( 3H，m ) ’ 8.00-8.02 ( 2H，m) ，8.24 ( 1H，d，J = 4.6 Hz) ，9.00 ( 1H，d，j = 4.6 Hz ) ，9.29 ( 1H，s )。 MS ： 4 1 8 ( M + + 1 )。

熔點：1 6 6.7 °C -34- 200927134 實施例3:表丨中化合物2之製備： 甲基_2-[2_ ( 5-苯基-[】，2,4]噁二唑-3-基）-嗎啉-4-基]-1H-[4,4’]聯嘧啶基-6_酮 中間物 23 CI ^CN 中間物 24 — h2NCm^ 中間物些 中間物 26

表]中化合物2 H〇^hn^〇 步驟3-1 : 4-苄基嗎啉-2_甲腈（中間物25 ) N -节基乙醇胺（中間物23，44·8毫升，314毫莫耳） 及2 -氯丙烯腈（中間物24, 25毫升，314毫莫耳）之混合 物於室溫攪拌24小時。混合物冷卻至〇。(：後，將四氫呋喃 ® ( 3 00毫升）及後續第三丁醇鉀添加至該混合物，且混合 物於〇°c攪拌一小時。混合物以乙醚稀釋，隨之以水及鹽 水洗滌並以硫酸鎂乾燥。溶解度於減壓下移除，且殘留物 藉矽膠管柱層析純化（溶離劑；5%於己烷中之乙酸乙酯 )，產生4 -苄基嗎啉-2-甲腈（中間物25)之無色油。 NMR ( 400 MHz ’ CDC13 ) δ : 2.41 ( 1Η，ddd， J = 3.1，8.8，11.8 Hz) ，2.56 ( 1H，dd，J = 3.2，11.9 Hz )-2.64 ( 1H - d > J=1 1 .8 Hz ) ’ 2 · 76 ( 1H，dd，J = 3 · 8， 11.8 Hz ) ，3_57(2H，q’J=12.9Hz) > 3.77 ( 1 H - dt > -35- 200927134 J = 3_6，11.7 Hz) ，4.03 ( 1H，ddd，J = 2.7，8.9 > 11· )，4.60 ( 1 H，t，J = 3.6 Hz ) ，7.2 6 - 7 · 3 6 ( 5 H，m ) MS ： [M + H] + = 203 步驟3 - 2 : 4 -苄基-N ’ -羥基嗎啉-2 -甲脒（中間物2 6 ) 4-苄基嗎啉-2-甲腈（中間物25，5.0克，24·7毫 )於乙醇與水之混合物（2/1，75毫升）中之攪拌溶 添加羥基胺鹽酸鹽（5.2克，74·2毫莫耳）及碳酸氫 13.1克，123.5毫莫耳）’且反應混合物於回流下攪ί 小時。反應以氯仿稀釋’且反應混合物以水及鹽水洗 有機層以硫酸鎂乾燥，且於真空中濃縮。形成之4-= Ν’-羥基嗎啉-2-甲脒（中間物26 )不加純化地使用於 反應。 步驟3-3: 4 -苄基-2- (5-苯基-1,2,4-噁二唑-3-基）嗎 ❹ 中間物27 ) 苯甲酸（2.30克，19.1毫莫耳）於Ν，Ν-二甲基 胺（20毫升）中之攪拌溶液中添加四氟硼酸2-(1Η-三唑-1-基）-1,1，3,3 -四甲基脲鑰（6.15克，19.1毫莫 、1-羥基苯并三唑水合物（518毫克，3.83毫莫耳 Ν，Ν-二異丙基乙基胺（11·〇毫升’63.8毫莫耳）， 應混合物於室溫攪拌30分鐘。添加4-苄基-Ν’-羥基R 2-甲脒（中間物26，3.0克，12.8毫莫耳）後，反應 物於室溫攪拌一小時’隨後加熱至1 1 0 °C。反應完全 7 Hz 莫耳 液中 鈉（ # 1 2 濰。 ?基-後續 啉（ 甲醯 苯并 耳） )及 且反 春琳_ 混合 時（ -36- 200927134 藉薄層層析檢測），藉添加水分解過量試劑，水層以乙酸 乙酯萃取。萃取液以水及鹽水洗滌，以硫酸鎂乾燥，且於 真空中濃縮。形成之殘留物藉由於矽膠上管柱層析純化（ 溶離劑：30%於己烷中之乙酸乙酯），產生4-苄基-2-( 5-苯基-1，2,4-噁二唑-3-基）嗎啉（中間物27，3.08克，75 % )之無色油。 NMR ( 400 MHz，CDC13 ) δ : 2.42 ( 1Η，dt，

J = 3.3 > 11.4 Hz) ，2.54 ( 1H，dd，J= 10.7 Hz ) ，2 · 7 6 ( 1H，dd，J=1·7，1 1 ·5 Hz ) ，3 .1 3 ( 1 H，dd，J = 2.0，9 · 6 Hz) ，3.61 ( 2H > s ) ，3.89 ( 1H > dt，J = 2.5 > 11.2 Hz) ，4.07-4.1 1 ( 1H，m ) > 4.90 ( 1H > dd > J = 2.5 > 10.2 Hz )，7.26-7.3 6 ( 5H，m ) > 7.50-7.53 ( 2H > m ) - 7.57-7.61 ( 1H，m) ，8.15-8.16 (2H，m) MS ： [M + H]+ = 322 0 步驟3-4 :2- (5-苯基-[1,2,4]噁二唑-3-基）-嗎啉鹽酸鹽 (中間物2 8 ) 4-苄基-2· ( 5-苯基-1，2,4-噁二唑-3-基）嗎啉（中間 物27，900毫克，2.80毫莫耳）於1,2-二氯乙烷（2.0毫 升）中之攪拌溶液中添加氯甲酸氯乙酯（0.46毫升，4.20 毫莫耳），且反應混合物於70°C攪拌4小時。反應混合物 於真空中濃縮。移除溶劑後，殘留物溶於甲醇（2.0毫升 )，溶液於回流下攪拌一小時。反應完全時（藉薄層層析 檢測），反應混合物於真空中濃縮。形成之2- ( 5-苯基- -37- 200927134 [1，2，4 ]嚼二唑-3 ·基）-嗎啉鹽酸鹽（中間物2 8 )不加純化 地使用於後續反應。 1H NMR ( 400 MHz，DMSO-心）δ ' 3.17-3.24 ( 1Η ，m ) ’ 3.30-3.44 ( 2H，m ) , 3.60-3.64 ( lH » m ) ’ 3.99 ( 1H ’ dt，J = 2.3 ’ 12.0 Hz ) ，4 · 1 1-4 · 1 5 ( 1H，m ) > 5.16 ( 1H > dd. J = 2.6 - 10.7Hz ) ，7.66 ( 2H ’ t， J = 7.7Hz) ’ 7.73 -7.77 ( ih，m) ，8.12-8.15 ( 2H ’ m) ，9.42 ( 2H，br)

MS ： [M + H]+ = 232 熔點：1 1 1.0°C 步驟3-5: 1-甲基- 2- [2-(5 -苯基-[1，2,4]噁二唑-3-基）-嗎 啉-4-基]-1 Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（表1中化合物2 ) 形成之2-(5-苯基-[1,2,4]噁二唑-3-基）-嗎啉鹽酸鹽 (中間物28 )於四氫呋喃（6.0毫升）中之溶液中添加2-氯-3-甲基-6-(嘧啶-4-基）嘧啶-4-酮（中間物1，260毫 克，2.34毫莫耳）及三乙基胺（1.81毫升，13.0毫莫耳 )，且反應混合物於室溫攪拌2小時。溶液分溶於水及氯 仿之間，有機層以水及鹽水洗滌’以硫酸鎂乾燥’且於真 空中濃縮。形成之殘留物藉由於矽膠上管柱層析純化（溶 離劑；5%於氯仿中之甲醇）’產生1-甲基-2-[2- ( 5-苯 基^1,2,4]噁二唑-3-基）-嗎啉-4-基]-1Η-[4，4’]聯嘧啶基-6-酮（表1中化合物2 ’ 749毫克’ 64% ’ 2步驟）之固 體。 -38- 200927134 ]H NMR ( 400 MHz，DMSO-心）5 ： 3.47 ( 3H，s ) > 3.51-3.68 ( 3H > m ) ，3.96-4.10 ( 3H，m) ，5.15-5.17 (1H > m ) ，7.02 ( 1H，s) ，7 · 6 7 - 7.7 4 ( 3 H，m )， 8.13-8.24 ( 3H，m) ，9.00 ( 1H，d，J = 4.8 Hz) ，9.30 ( 1H，s )。 MS ：418( M + + 1 )。

熔點：2 0 7.6 °C 實施例4 :表1中化合物3之製備： 2-[2- ( 4-呋喃-3-基-苯基）-嗎啉-4-基]-I-甲基- 】H-[4,4’] 聯嘧啶基-6 -酮

步驟4-1 : 2- ( 4-溴苯基）環氧乙烷（中間物30) 4-溴苯甲醛（中間物29，25.25克，136毫莫耳）、 碘化三甲基硫鑰（28.71克，141毫莫耳）、水（6.5毫升 -39- 200927134 ，361毫莫耳）及氫氧化鉀（15.56克，277毫莫耳）於乙 腈（M0毫升）中之混合物溫至55°C歷經2.5小時。形 成之溶液分溶於水及二乙醚之間，有機層以水、稀鹽酸及 鹽水洗滌，並以硫酸鈉乾燥。2- ( 4-溴-苯基）·環氧乙烷 (中間物30)之粗產物係藉於減壓下移除有機溶劑而製 得，其不加純化地使用於後續反應。 0 步驟4-2 : 2-苄基胺基-1- ( 4-溴-苯基）-乙醇（中間物31 ) 前述步驟製得之2- (4-溴-苯基）-環氧乙烷（中間物 3〇)的粗產物及苄基胺（47.00克，439毫莫耳）之混合 物加熱至70°C歷經8小時，且於減壓下餾除過量苄基胺 (於lOmmHg約 65°C )。將殘留物冷卻以固化，以二異 丙醚洗滌，產生2-苄基胺基-1-(4-溴-苯基）-乙醇（中間 物31，23.63克，自4-溴苯甲醛爲57%)之白色固體。 φ *H NMR ( 400 MHz，CDC13 ) δ : 2.68 ( 1Η > dd， J = 9.0 » 12.2 Hz ) ，2.92 ( 1H，dd，J = 3.6，12.2 Hz )， 3·79-3.87 ( 2H，m) ，4.67 ( 1H，dd，J = 3.6，8.9 Hz)， 7-22-7.36 ( 7H，m) ，7.44-7.47 ( 2H，m)

MS : [M + H]+ = 306 熔點：1 0 8.8 °C 步驟4-3 : 4-苄基-6- ( 4-溴-苯基）-嗎啉-3-酮（中間物32 -40- 200927134 將於甲苯（30毫升）中之氯乙醯氯（8.49克，75.2 毫莫耳）添加至2-苄基胺基-1-(4-溴-苯基）-乙醇（中間 物31，21.85克’ 71·4毫莫耳）於甲苯（3〇〇毫升）中以 冰冷卻之溶液中後，將三乙基胺（10.25克，101毫莫耳 )於甲苯（2 0毫升）中之溶液添加至混合物並攪拌一小 時。隨後將在甲醇（30毫升）中之甲醇鈉（28%甲醇溶 液’ 45.73克’ 23 7毫莫耳）添加至溶液並攪拌2小時。 藉添加稀鹽酸以將pH調至約7.0來中止反應，且分溶於 水及乙酸乙酯之間。有機層以稀鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉 水溶液及鹽水洗滌並以硫酸鈉乾燥。於減壓下移除溶劑， 且殘留物藉矽膠管柱層析純化（溶離劑；己烷/乙酸乙酯 =1/1 )，產生4-苄基-6- ( 4-溴·苯基）-嗎啉-3-酮（中間 物32，21.26克，86%)之無色油。 1H NMR ( 400 MHz，CDC13 ) δ : 3.26 ( 1Η ’ dd， J = 3.4，12.3 Hz) ，3.35 ( 1H，dd，J=10_4，12.3 Hz) ’ 4.47 ( 1H，d，J= 16.8 Hz ) ，4.51 ( 1H，d，J=16.6 Hz ) ，4.56 ( 1H，d，J = 14.6 Hz ) ，4.72 ( 1H ’ d ’ J= 14.8 Hz )，7.19 ( 2H，d，J = 8.4 Hz) ，7 · 2 7 - 7 · 3 8 ( 5 H ’ m ) ’ 7.47 ( 2H，d，J = 8.5 Hz ) MS : [M + H]+= 346 步驟4-4 : 4-苄基-2- ( 4-溴-苯基）-嗎啉（中間物33 ) 4-苄基-6- ( 4-溴-苯基）-嗎啉-3-酮（中間物32， 18.70克，54毫莫耳）於四氫呋喃（1〇〇毫升）中之溶液 -41 - 200927134 於氮氛圍下在〇 °c逐滴添加硼烷-四氫呋喃錯合物於四氫 肤喃中之溶液（0.9 Μ，170毫升’ 153毫莫耳）。形成之 混合物溫至室溫且攪拌3小時。冷卻至0 後，藉由緩緩 添加甲醇（30毫升）中止反應。澄清混合物於減壓下蒸 發，殘留油以IN氫氧化鈉水溶液（300毫升）稀釋。形 成之水性混合物於1 〇〇 攪拌3小時且冷卻至室溫。產生 之有機物質以乙酸乙酯萃取’結合之萃取液以無水硫酸鈉 乾燥。濃縮後，殘留物藉矽膠管柱層析純化（溶離劑；己 嫁/乙酸乙醋 =3/1)，產生4 -卞基-2- (4-漠-苯基）-嗎 啉（中間物33，17.30克’ 52毫莫耳，96%)之無色油。 !H NMR ( 400 MHz，CDC13) δ ： 2.26 ( 1Η，dt， j = 3.4 > 11.5 Hz) > 2.74 ( 1H，dd，J=1.6，11.5 Hz)， 2.8 5-2.89 ( 1 H，m) ，3_82 ( 1H，dt，J = 2.5，11.4 Hz) ,3.98 -4.02 ( 1 H > m ) ，4 · 5 3 ( 1 H，d，J = 2 · 2，1 0 · 2 H z ) ，7.21 ( 2H，d，J = 8.3 Hz) ，7.45 ( 2H，d，J = 8.2 Hz ) MS ： [M + H] + = 332 步驟4-5 : 2- ( 4-溴-苯基）-嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間 物34 ) 4·苄基-2- ( 4-溴苯基）-嗎啉（中間物33，10.0克 ，30毫莫耳）於二氯乙烷（90毫升）中之溶液於室溫添 加氯甲酸氯乙酯（4.0毫升，36毫莫耳），形成之溶液回 流一小時。冷卻至室溫後，混合物於減壓下濃縮。殘留物 以甲醇（100毫升）稀釋，形成之溶液回流一小時。蒸發 -42- 200927134 甲醇，將乙酸乙酯添加至殘留固體。濕磨後，過濾收集白 色固體並於減壓下乾燥。所得之固體以四氫呋喃（60毫 升）懸浮，且於室溫在形成之混合物中添加二碳酸二第三 丁酯（6.50克，30毫莫耳）及1N氫氧化鈉水溶液（60 毫升，6 0毫莫耳）。經2小時攪拌後，以乙酸乙酯進行 萃取操作，結合之有機相以無水硫酸鈉乾燥，之後濃縮。 形成之固體以己烷洗滌，產生2- ( 4-溴-苯基）-嗎啉-4-甲 〇 酸第三丁酯（中間物34，9.08克，26.5毫莫耳，88%) 之白色固體，其不進一步純化地使用於後續反應 NMR(400 MHz > CDC 13 ) δ ·· 1.48 ( 9Η > s )， 2·77 ( 2Η，br ) ，3.03 ( 1H，br ) ，3.67 ( 1H，dt，J = 2.4 ’ 11-7 Hz) ，3.94 ( 2H > br ) ，4.0 1 ( 1 H > d，J=10.8 Hz )，4.37 ( 1H，d，J=1 0.2 Hz) ，7.2 4 - 7.2 6 ( 2 H，m )， 7·48-7.50 ( 2H，m ) MS: [M + H]+ = 242 (-第三丁 氧羰基） ® 熔點：9 7.5 t 步驟4-6:2-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧雜硼戊環-2-基）-苯基]-嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間物35 ) 2_ ( 4-溴-苯基）-嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間物34， 6克’ 17·5毫莫耳）、雙（頻哪醇根基）二硼（5.1克’ 20毫莫耳）、乙酸鉀（3.5克，36毫莫耳）及[1,1，·雙（ 二苯膦）二茂鐵]二氯鈀〔II) (1.2克，1.5毫莫耳）於 Ν，Ν_二甲基甲醯胺（40毫升）中之混合物於氮氛圍下加 -43- 200927134 熱至80°C。攪拌3小時後，反應混合物冷卻至室溫且倒入 水中。以乙酸乙酯進行萃取操作，有機相以鹽水洗滌。所 收集之有機層以硫酸鈉乾燥並濃縮。形成之物質藉於矽膠 快速管柱層析純化（己烷/乙酸乙酯 =5/1作爲溶離劑） 。得到2-[4- ( 4,4,5,5-四甲基- [1,3,2]二氧雜硼戊環-2-基 )·苯基]-嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間物35，5.6克，14_5 毫莫耳，83%產率）之白色固體。 ❹1H NMR ( 400 MHz，CDC13 ) <5 : 1 .34 ( 12H - s )， 1 ·48 ( 9H - s ) ，2.80 ( 1Η，br ) ，3.05 ( 1H，br )， 3·68 ( 1H，dt，J = 2.3，11.7 Hz )，3.94 ( 2H，br) ，4.03 (1H ’ d > J= 1 0.4 Hz) ，4.43 ( 1H，d，J = 9.8 Hz) ，7.38 (2H，d > 3 = 7.9 Hz )，7.81 ( 2H，d，J = 7.9 Hz ) MS : [m + H]+ = 290 (-第三丁氧羰基）

熔點：1 2 9.4 °C ® 步驟4-7: 2- (4-呋喃-3-基-苯基）-嗎啉-4·甲酸第三丁酯 (中間物3 6 ) 2-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1，3,2]二氧雜硼戊環-2-基）-苯基]-嗎啉-4-甲酸第三丁酯（1.0克，2.6毫莫耳）、3-溴 咲喃（0.27毫升，3_0毫莫耳）、四（三苯膦）鈀（0) (〇·35克，0.3毫莫耳）及2N碳酸鉀水溶液（4.5毫升） 於N，N-二甲基甲醯胺（5毫升）中之混合物於氮氛圍下加 熱至8〇。(：並攪拌3小時。反應混合物倒入水中並以乙酸 乙醋萃取。有機相以鹽水洗滌並以硫酸鈉乾燥。濃縮後， -44 - 200927134 藉矽 膠 丨管柱 層析 ( 溶離劑 :己烷/ 乙酸: 乙 酯 =3/1 ) 將殘 留物 純 化， 產生 2- -(4-呋 喃-3-基 -苯基 ) - 嗎琳-4 -甲 1酸第 三丁 酯 (中 間物 36 > 0.73 克，2.2 毫莫 耳 85%產率） 之 白色 固 體。 *H NMR ( 400 MHz > CDC13 ) δ ： 1 .49 ( 9H，： s ) j 2.85 ( 1Η > br ) ，3 .06 ( 1H，br ) ，3.69 ( 1Η，dt， J = 2.6 > 11 .8 Hz ) ，3. 96 (2H， br ) ，4. 03 ( 1Η， d，J= 1 0 .1 Hz )， 4. 43 ( 1H， d， J = 9.2 Hz ) ，6 .70 ( 1 Η ，d，J = 1 • 3 Hz )， 7. 38 ( 2H， d， J = 8,0 Hz )， 7.47- 7. 49 丨（3H，ir i ) t 7.73 ( 1H， s )

MS : [M + H]+ = 230 (-第三丁 氧羰基） 熔點：1 1 4 · 0 °C 步驟4-8: 2-[2-(4-呋喃-3-基-苯基）-嗎啉-4-基]-1-甲基-1Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（表1中化合物3) 2- (4-咲喃-3-基-本基）-嗎琳-4-甲酸第三丁醋（中間 物36，0.73克，2.2毫莫耳）於室溫溶於4N鹽酸乙酸乙 酯溶液中，且混合物攪拌2小時。將反應混合物濃縮後， 收集形成之固體物質。所得之固體以四氫呋喃（10毫升 )懸浮。於室溫在混合物中添加2-氯-3-甲基-6-(嘧啶-4-基）-3H-嘧啶_4_酮（中間物1，0.33克，I·5毫莫耳）及 三乙基胺（0.62毫升，4.5毫莫耳）。攪拌6小時後，形 成之混合物倒入水中且以氯仿萃取。有機溶液以硫酸鈉乾 燥並濃縮。藉於矽膠快速管柱層析將殘留物純化（氯仿/ -45- 200927134 甲醇 =95/5作爲溶離劑），產生2-[2-(4-呋喃-3-基-苯 基）-嗎啉-4-基]-1-甲基-1Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（表1中 化合物3，0.55克，1.3毫莫耳，87%)之白色固體。 !H NMR ( 400 MHz > DMSO-d6) ¢5 : 3_04 ( 1H，dd， J=1 0.8，12.8 Hz) ，3.20 ( 1H，dt，J = 2.8 > 12.4 Hz)， 3.49 (3H，s) ，3.71(lH，d，J=13_4Hz) ，3_76(1H，

d，J=1 2.9 Hz) ，3.92 ( 1H > dt，J=1.8，11.7 Hz) ，4.10 (1H，dd - J= 1 .8，11.6 Hz) ，4.76 ( 1H，dd，J-1.9， 10.6 Hz) > 6.98 ( 1 H > s ) ，7.02(lH，s) ，7.47( 1H， d > 8.2 Hz ) ，7_64(IH，d，J=8.3Hz) ，7_75(lH，d， J= 1 .6 Hz) ，8.21-8.22 ( 2H > m ) ，8.99 (1H，d，J = 5. 1

Hz ) ，9.30 ( 1H，s ) MS : [M + H] + = 4 1 6 熔點：219.4°C (分解） φ 實施例5:表1中化合物4之製備：1-甲基-2-{2-[4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基）-苯基]-嗎啉-4-基}-111-[4,4’]聯嘧啶 基-6-酮 -46- 200927134

⑩ 步驟 5-1 : 2-[4- ( 1-甲基-1H-咪唑-2-基）-苯基]-嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間物37) 2-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1，3,2]二氧雜硼戊環-2-基）· 苯基]-嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間物35，1.0克，2.6毫 莫耳）、2-溴-1-甲基咪唑（0.29毫升，3.0毫莫耳）、四 (三苯膦）鈀（0) (0.35克，0.3毫莫耳）及2N碳酸鉀 水溶液（4.5毫升）於N，N-二甲基甲醯胺（5毫升）中之 ^ 混合物於氮氛圍下加熱至80°C並攪拌3小時。反應混合 物倒入水中並以乙酸乙酯萃取。有機相以鹽水洗滌並以硫 酸鈉乾燥。濃縮後，殘留物藉矽膠管柱層析純化（溶離劑 :乙酸乙酯），產生2-[4-(1-甲基-111-咪唑-2-基）-苯基 ]-嗎啉_4_甲酸第三丁酯（中間物37，0.40克，1.2毫莫耳 ，45% )之無色油。 JH NMR ( 400 MHz，CDC13 ) δ : 1.49 ( 9Η，s)， 2.85 ( 1Η，br) > 3.07 ( 1H，br) ，3.6 6 - 3 · 7 6 ( 1H，m )，3.75 ( 3H，s) ，3.95 ( 2H，br ) ，4.05 ( 1H，d， -47- 200927134 J = 9.8 Hz) ，4.47 ( 1H，d，J = 9.1 Hz) ，6.97 ( 1H，s) ，7.12 ( 1H，d，J=1 .0 Hz ) ，7.4 7 ( 2 H，d，J = 8.1 H z ) ，7_64 ( 2H，d，8.3 Hz ) MS ： [M + H]+ = 344 步驟5-2: 1-甲基- 2-{2-[4-(I-甲基-1H-咪唑-2-基）-苯基 ]-嗎啉-4-基}-1Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（表1中化合物4) @ 2-[4- ( 1-甲基-1H-咪唑-2-基）-苯基]-嗎啉-4-甲酸第 三丁酯（中間物37, 0.40克，1.2毫莫耳）於室溫下溶於 4N鹽酸之乙酸乙酯溶液（5毫升），且混合物攪拌2小 時。將反應混合物濃縮後，收集形成之固體物質。所得之 固體以四氫呋喃（10毫升）懸浮。在室溫下於混合物中 添加2-氯-3 -甲基- 6-(嘧啶-4-基）-3H-嘧啶-4-酮（中間 物1，0.18克，0.8毫莫耳）及三乙基胺（0.42毫升，3 毫莫耳）。攪拌6小時後，形成之混合物倒入水中且以氯 φ 仿萃取。有機溶液以硫酸鈉乾燥並濃縮。殘留物藉矽膠管 柱層析純化（溶離劑；氯仿/甲醇 =95/5 )，產生1-甲 基-2-{2-[4-(卜甲基-1H-咪唑-2-基）-苯基]-嗎啉-4-基}-1Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（表1中化合物4, 0.12克，0.3 毫莫耳，35%)之白色固體。 'H NMR ( 400 MHz, DMSO-d6) δ : 3.07 ( 1Η，dd， J=10.8，12.8 Hz) ，3.1 8-3.26 ( 1H > m ) > 3.50 ( 3H > s )，3.73 ( 1H，d，J=13. I Hz) ，3.76 ( 3H，s) ，3.82 (1H，d，J=13.0 Hz) ，3.94 ( 1H，dt，J = 2.1，11.7 Hz -48- 200927134 )，4.10 (1H，d，J=13. 1 Hz) ，4.82 (1H，dd > J=1.9， 10.3 Hz ) > 6.98 ( 1 H > s ) ，7.02(lH，s) - 7.26 ( 1H > s ) ，7.57 ( 2H，d，J = 8.3 Hz) ，7.71 ( 2H，d，J = 8.4 Hz )，8.23 ( 1H，dd，J=1.2，5.4 Hz) ，9.00 ( 1H，d， J = 5.0 Hz) ，9.3 0 ( 1H，d，J= 1 . 1 Hz) MS : [M + H] + = 430 熔點：1 79.8°C (分解） 實施例6 :表1中化合物5之製備： 甲基- 2-[2- ( 4-吡唑-1-基-苯基）-嗎啉-4-基]-1Η-[4,4，]聯 嘧啶基-6 -酮

BrTl ^-VnBoc Φ間物 34 中間物 38 ❹ 步驟6-1: 2-(4-吡唑-1-基-苯基）-嗎啉-4-甲酸第三丁酯 (中間物3 8 ) 2- ( 4-溴-苯基）-嗎啉-4-甲酸第三丁酯（中間物34， 3.0克，8.8毫莫耳）、碘化銅（I) (0.05克，0.3毫莫 耳）、碘化鈉（1.8克，12毫莫耳）及反-N，N’-二甲基環 己烷-1,2-二胺（0.1毫升，0.6毫莫耳）於甲苯（10毫升 )於氮氛圍下回流3小時。混合物冷卻至室溫後，將吡唑 (0.68克，10毫莫耳）及磷酸鉀（6.4克，30毫莫耳） 添加至混合物。形成之混合物回流3小時且隨後冷卻至室 -49-

200927134 溫。濾除固體物質後，將濾液倒入水中並以z 。有機層以硫酸鈉乾燥並濃縮。藉於矽膠快適 殘留物純化，產生2- ( 4-吡唑-1-基-苯基）_ 第三丁酯（中間物38，1.7克，5.3毫莫耳， 色固體。

!H NMR ( 400 MHz ^ CDC13) δ ： 1.49 2.84 ( 1Η，br ) ，3.06 ( 1H，br ) ，3.70 ( IK ，11.7 Hz) ，4.04 ( 1H，d，J=10.1 Hz), ‘ ，J = 8.8 Hz) ，6.47 ( 1H ’ t，J = 2.0 Hz) ， ，J = 8.6 Hz ) ，7.70 ( 2H，d，J = 8.5 Hz)，， ，J= 1 .3 Hz) ，7.93 ( 1H，d，J = 2.4 Hz )

MS : [M + H]+ = 230 (-第三丁 氧羰基） 熔點：8 7.3 °C 步驟6-2 ·· ：l -甲基-2-[2- ( 4-吡唑-1 -基-苯基） 1Η-[4,4’]聯嘧啶基-6-酮（表1中化合物5 ) 2- ( 4-吡唑-1-基-苯基）-嗎啉-4-甲酸第三 物38，1.74克，5.3毫莫耳）於室溫溶於4N 乙酯溶液（1 〇毫升），且混合物攪拌2小時 合物濃縮後，收集形成之固體物質。一部分 5〇〇毫克）以四氫呋喃（20毫升）懸浮。於室 中添加 2-氯-3-甲基-6-(嘧啶-4-基）-3 H-嘧 間物1，0.3 3克，1 .5毫莫耳）及三乙基胺（ 4 · 5毫莫耳）。攪拌6小時後，形成之混合物 ，酸乙酯萃取 丨管柱層析將 嗎啉-4 -甲酸 60% )之白 (9H，s )， [，dt ， J=2.4 4 · 4 6 ( 1 Η，d 7.47 ( 2H，d 7.72 ( 1H，d -嗎琳-4 -基]- 丁酯（中間 鹽酸之乙酸 。將反應混 所得固體（ 溫在混合物 陡-4-酮（中 0.62毫升， 倒入水中且 -50-

200927134 以氯仿萃取。有機溶液以硫酸鈉乾燥並i 膠管柱層析純化（溶離劑；氯仿/甲醇 = 甲基-2-[2-(4-吡唑-1-基-苯基）-嗎啉-4 嘧啶基-6-酮（表1中化合物5，0.44克 % )之白色固體。

'H NMR ( 400 MHz > DMS〇-d6) δ J=10.7，12.8 Hz) ，3.2 1 ( 1H，dt，J = 2 3.49 ( 3H > s ) ，3.72 ( 1H - d * J = 13.0 H d，J=13.0 Hz) ，3.94 ( 1H，dt，J=1.8， (1H，dd，J=l_9，1 1.7 Hz ) ，4.80 ( 1 10.4 Hz) ，6.56 ( 1H，t，J = 2.0 Hz) ’ 7.59 ( 2H > d，J = 8.6 Hz ) ，7.76 ( 1H，丨 7.87 ( 2H，d，8.6 Hz) ，8.22 ( 1H，dd )，8.52 ( 1H > d，J = 2.5 Hz ) > 9.00 ( 1 )，9.30 ( 1H，d，J=1.2 Hz ) MS : [M + H] + = 4 1 6

熔點：1 8 3 . 5 °C 生物檢測 實驗7 :於體內對r磷酸化之抑制活性 試驗化合物於毫克/公斤經口（ 梨糖醇酐單月桂酸酯 80 ( TweenS 0 )/水 投藥至5至6週大25至35克重之CD River Japan, inc.) ，1小時後，對小鼠施 !縮。殘留物藉矽 95/5 )，產生 1-l·-基]-1Η-[4,4’]聯 ，1.0毫莫耳，70 3.05 ( 1H，dd， .5，12.5 Hz )， z ) ，3.79 ( 1 Η， 11.6Hz) > 4.10 Η，d d，J = 1 · 8， 7.02 ( 1H - s )， d > J = 1.4 Hz )， ，J=1 .1，5.3 Hz H ' d > J = 5.2 Hz 0.5%聚乙二醇山 懸浮液）劑量下 -1 雄鼠（Charles 以斷頭術，迅速 -51 - 200927134 取出皮質，之後冷凍於液態N2中。皮質直接以2.3%硫酸 十二酯鈉（SDS)均質化緩衝劑（62.5 mM 2 -胺基-2-(羥 基甲基）-1,3-丙二醇鹽酸鹽（Tris-HCI) - 2.3 % SDS， 各ImM之乙二胺四乙酸（EDTA)，乙二醇-雙（2-胺基 乙醚）-N，N，N’，N’-四乙酸（EGTA)及二硫蘇糖醇（DTT )，蛋白酶抑制劑混合物（sigma P2714)--含有0.2 μΜ 4-(2-胺基乙基）苯磺醯氟（八£88?) ，：13 μΜ烏苯美司 • (best at in) ，1.4μME-64，0.lInM亮肽素，30nM抑肽 酶（aprotinin) ，pH 6.8)均質化，且於 4°C 在 15000 x g 離心15分鐘。使用DC蛋白質檢測組套（BIO-RAD )測 定蛋白質濃度。上清液以試樣緩衝劑（62.5 mM Tris-HCl ，25% 甘油，2% SDS，0.01% 溴酚藍，ΡΗ6·8)稀釋， 以將蛋白質濃度調整至約0.5至2毫克/毫克，接著沸煮5 分鐘。試樣（1 〇微克）於1 〇%硫酸十二酯鈉-聚醯胺電泳 (SDS-PAGE )小型凝膠上分離，且轉移至聚偏二氟乙烯 φ ( PVDF )膜上。該等膜在室溫以含有5 %脫脂牛乳之經 磷酸鹽緩衝的鹽水（PBS )培育1小時，接著於4 °C以 PS3 96抗體（BIOSOURCE)探知隔夜。使用抗-兔IgG甜 菜根過氧酶（HRP)軛合抗體（Promega)作爲二次抗體 ° 該等膜以 Enhanced ChemiLuminescence ( ECL)組套( Amerasham Bioscience)顯像且藉 LAS1000 ( Fuji Photo Film )偵測。 -52- 200927134 表1 化合物 體內 . 1〇毫克/公阡 本發明化合物 58.14** 1 92.12 2 79.21 3 71.44 4 71.21 5 53.35** n相對於佐藥之磷酸化％。 **數據表示統計顯著 實驗8 :對CYP2D6之抑制活性

此藥物動力學硏究之目的係於體外使用人類重組CYP 探知試驗化合物對人類CYP同功酶之比代謝活性的抑制 效果。試驗化合物濃度爲0.4、2、10及50微莫耳/公升 (若試驗化合物於D M S Ο中顯示低溶解度，則濃度設爲 0.2、1、5及25微莫耳/公升）或將陽性對照組添加至含 有CYP 2D 6之反應混合物中。專一性受質及陽性對照組個 別係爲螢光素-6’-甲基醚及奎寧定之乙二醇酯。CYP同功

酶之受質於試驗化合物存在或不存在下以人類重組CYP

培育，測定CYP同功酶之代謝活性。反應混合物於37°C 無NADPH生成系統下預先培育。藉由添加NADPH生成 系統開始反應，隨後藉由添加乙腈終止。藉由反應混合物 之螢光信號（CYP2D6 )測量人類CYP同功酶之活性。各 化合物之IC5〇値係藉由將不含化合物之反應混合物的數 據設定爲1 〇 〇 %活性而加以計算° -53- 200927134

表2 化合物 CYP 2D6 抑制(μΜ)1〕 本發明化合物 >50.0 1 >50.0 2 >25.0 3 2.3 4 >50.0 5 1.9 WCm値 實驗9 :增強認知效果 糖原合成酶抑制劑3 -甲基-2-( (2S) -2- (4- (5 -甲 基-1，2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧 陡-4 ( 3H )-酮之增強認知性質係於正常及經莧菪胺處理 之小鼠體內針對情景記憶缺失描述特徵。情景記億係以目 標識別（OR)測試評估。 目標識別任務係於微暗照明（30 Lux) Plexiglas曠場 箱中進行。待識別之目標爲黑色塑膠球及黑色塑膠蓋。小 鼠接受1 〇分鐘探知試驗（第一次試驗），期間將其個別 於目標A (球或蓋）置入曠場中。使用攝影機將小鼠行爲 記錄於錄影帶上，記錄動物發現目標A所花費之時間（ 當動物將口鼻朝向該目標距離#1厘米）。稍後3小時或 24小時進行1〇分鐘保留試驗（第二個試驗）。此試驗期 間，將目標A及另一目標B置入曠場中，記錄動物發現 兩個目標之時間（t A及tB )。認知指數（RI )定義爲（ -54 - 200927134 tB/ ( tA + tB ) ) χ 100。缺乏認知之機率的理論値爲50% 〇 藉由於探知及保留試驗之間的24小時延遲，或藉由 在探知試驗之前投予毒覃鹼型受體拮抗劑萇菪胺，來誘發 記憶缺失。 正常小鼠之探知及保留試驗間的間隔爲24小時，每 次試驗之前1小時經口投予3-甲基-2- ( ( 2S ) -2- ( 4-( 5-甲基-1，2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基 )嘧啶-4 ( 3 Η )-酮二次，或在探知試驗之後立即投藥一 次。經莨菪胺處理之小鼠探知及保留試驗間的間隔爲3小 時，在探知試驗之前30分鐘腹膜內投予莫菪胺（1毫克/ 公斤），且在探知試驗之前1小時經口投予3-甲基-2-( (2S) -2- (4- (5 -甲基-1,2,4 -噁二唑-3 -基）苯基）嗎啉 )-6-(嘧啶-4-基）嘧啶-4 ( 3Η )-酮。 在正常小鼠中，3 -甲基- 2-( (2S) -2-(4-(5 -甲基- l,2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧啶-4 (3Η)-酮（1-3-10-30毫克/公斤經口）自10毫克/公斤 之劑量開始顯著增加記憶能力，當於探知及保留試驗之前 1小時經口投藥時，顯示經治療之小鼠記得24小時前所 發現之目標。於〇、1、3、10、30毫克/公斤之RI値個別 爲 50%、50.3%、52.6%、60.4% 及 62.9%。 爲區分對記憶取得及對記憶鞏固之影響，在探知期後 立即投予3 -甲基-2- (( 2S) -2- ( 4- ( 5 -甲基-1,2,4 -噁二 唑-3 -基）苯基）嗎啉）-6 -(嘧啶-4 -基）嘧啶-4 ( 3 Η ) _ -55- 200927134 酮（3-10-30毫克/公斤經口）一次。3 -甲基.2-((28)- 2- ( 4- ( 5-甲基-1，2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-( 嘧啶_4_基）嘧啶_4(3H)-酮於10及3〇毫克/公斤劑量下 顯著改善目標識別，顯示化合物鞏固情景記憶之最低有效 劑量爲10毫克/公斤。於〇、3、10、30毫克/公斤下之RI 値個別爲 50.7%、54.6%、58.6% 及 60.0%。 爲 了評估 3 -甲基-2- ( ( 2S) -2- ( 4- ( 5 -甲基 卩惡_•哩-3-基）苯基）嗎琳）-6-(暗陡-4·基）il·密卩定-4 (3H )-酮對情景記憶缺失之增強認知活性，小鼠於探知期之 前30分鐘以膽鹼能拮抗劑莫菪胺（1毫克/公斤皮下）處 理3 0分鐘。莫菪胺完全消除情景記憶，經處理之小鼠不 記得3小時前所發現之目標。在萇菪胺處理之前3〇分鐘 (即在探知期之前1小時）單次經口投予3 _甲基(( 2S) -2- (4-(5 -甲基·ι，2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧啶_4(3H)-酮（1〇毫克/公斤）使莨 φ 菪胺所誘發之情景記憶缺失完全復原，較低劑量3毫克/ 公斤則無效。在0、1 0、3 〇毫克/公斤下，正常小鼠RI値 個別係爲63.5%、61.7%及5 9 7%，而經莨菪胺處理之小 鼠則爲 49.9%、52.7% 及 60.4%。 總之，吾人行爲測試結果證實TPK1抑制劑3_甲基-2_ ((2S ) -2- ( 4- ( 5·甲基噁二唑_3_基）苯基）嗎 啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧啶_4 ( 3H)-酮於正常小鼠身上在 1 〇笔克/公斤最低有效劑量下增加情景記憶且鞏固情景記 憶軌跡。此外’ 3-甲基_2· ( ( 2S ) -2_ ( 4_ ( 5_甲基_ -56- 200927134 1，2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎啉）-6-(嘧啶_4_基）喃|]定_ 4 ( 3 Η )-酮防止經莨菪胺處理之小鼠的情景記憶缺失（ MED 10毫克/公斤）。此等行爲數據強力支持3_甲基_2_ ((2S ) -2- ( 4- ( 5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基）苯基）嗎 啉）-6-(嘧啶-4-基）嘧啶-4(3H)-酮之增強認知潛力。 調配物實施例 藉一般方法混合以下成份且使用習用裝置壓製。 本發明化合物 30毫克 (製備實施例所製備） 結晶纖維素 60毫克 玉米澱粉 100毫克 乳糖 2 0 0毫克 φ 硬脂酸鎂 4毫克 軟質膠囊 藉一般方法混合以下成份且塡入軟質膠囊中。 本發明化合物 30毫克 (製備實施例所製備） 橄欖油 3 00毫克 卵磷脂 20毫克 -57- 200927134 工業應用 本發明化合物具TPK 1抑制活性且可作爲用以預防及 /或治療因TPK1異常活躍所致疾病之藥劑的活性成份， 諸如神經退化性疾病（例如阿茲海默症）及前述疾病。

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Claims (1)

1. 200927134 十、申請專利範圍 I〜種式（I)所示之化合物或其醫藥上可接受之鹽

   ⑴ Ο 2 ‘ ~種藥劑，其包含選自如申請專利範圍第1項之 式（I)所示之化合物及其醫藥上可接受之鹽的物質作爲 活性成份。 3· ~種τ蛋白質激酶1抑制劑，其包含選自如申請 專利範圍第1項之式（I)所示之化合物及其醫藥上可接 受之鹽的物質作爲活性成份。 4.如申請專利範圍第2項之藥劑，其係用以預防及 /或治療因r蛋白質激酶1活性過高所致之疾病。 Ο 5 ·如申請專利範圍第2項之藥劑，其係用以預防及 /或治療神經退化性疾病。 6-如申請專利範圍第5項之藥劑，其中該疾病係選 自阿茲海默症、缺血性腦血管病變、唐氏症、因腦部澱粉 狀蛋白血管病變所致之腦出血、進行性核上神經麻痒、亞 急性硬化腦炎帕金森氏症、腦炎後帕金森氏症、拳擊手腦 炎、關島複合型巴金森失智症、路易體疾病、匹克氏症、 皮質基底核退化、額顳癡呆症、血管性癡呆症、創傷性損 傷、腦及脊髓創傷、周邊神經病變、視網膜病變及青光眼 -59- 200927134 7.如申請專利範圍第2項之藥劑，其係用以預防及 /或治療選自下列之疾病：非胰島素依賴型糖尿病、肥胖 症、躁鬱症、精神分裂症、禿髮、乳癌、非小細胞肺癌、 甲狀腺癌、T或B細胞白血病、骨質疏鬆症、瘧疾、由癌 症化療所引發之嗜中性球減少症及病毒誘發之腫瘤。 8如申請專利範圍第2項之藥劑’其係用以治療具 ❺冑認知及記億缺失之特徵的疾病。

   -60- 200927134 七、指定代表圖： (一） 、本案指定代表圖為：無 (二） 、本代表圖之元件代表符號簡單說明：無

   八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學 式：