TW200922629A - Utilization of novel compounds with amyloid affinity and method of producing the same - Google Patents

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200922629 翁：i 九、發明說畹： f發明所屬之技術領域】 【◦0 0 1】 本發明係有關於新型;殿粉樣蛋白親和性化合物的使用及製造 特別疋以王身性;殿粉樣變性病（棚yl〇id〇SiS)為首的澱 务樣蛋白（amylGid)蓄積的疾病的診斷方面，對於病灶部位殿粉 樣蛋白的制’極為相，係有齡生體組織巾的澱粉樣蛋白檢 測試藥。 【先前技術】 ， 【0002】 …被稱献粉樣蛋㈣纖維狀蛋白f，因為沉積於體内各個不 同器g或組織而導致發病的疾病，總稱為殿粉樣變性病 U_idC)SiS)。_樣·病共通之處，是_為澱粉樣蛋白 種含豐富乙型：（編)結構的纖維狀蛋白質沉積於全 身各齡或局部，使顧料_產生觀異常的情形。所 粉樣蛋白，伽粉樣蛋白0或變異甲狀腺運送蛋白 ^ (加⑽伽⑽⑷、沒2微小球蛋白（Beta2mi 各種澱粉樣蛋㈣前驅物蛋白在生咖凝⑽ 體的總稱。殿粉樣蛋白，無論是由哪-微粉樣蛋疑集 所形成’都具有豐富乙型—片(一二蛋: 乙型—片有結合蝴叫。。啊侧物（_:=) 200922629 等的化合物，就都具有澱粉裱蛋白親和性的特徵。 [0003] 澱粉樣變性病（amyloidosis)，因為殿粉樣蛋白的沉積型態， 可以分_全身性麟樣變性病（systemic卿iQidQsis)和^ 部性澱粉樣變性病（l〇cal amyloidosis)。 全身性殿粉樣·病，係全身的各個部份因為麟樣蛋白沉 積而引起的疾病。全身倾粉樣變性病，例如：在肝臟做出的殺 粉樣蛋白，沉積全身的料而發生障礙的家族⑽粉樣變性病； 心臟及手關料大關節處’澱粉樣蛋白沉積的老年性伙腺運送 蛋白殿粉樣難病；細透析病患的骨、關料處翻的透析殿 私樣支n慢性關節風濕症（rheumatism)等的慢性發炎性疾 病續發急性期蛋白—血清澱概蛋自A (serum ―咖A D 所致的殿粉樣蛋白沉積而發病的反應性A請粉樣變性病（續發性 殿粉樣變性病）；由免疫球蛋白起源的澱粉樣蛋白沉積全身臟器而 發病的免疫細胞性澱粉樣變性病等。 局部性殿粉樣變性病，係—部份顧中，麟樣蛋白沉積而 引起的疾病。局部性婦樣變性病，例如：殿粉樣蛋白沉積在腦 部的阿⑵海默氏症（Alzheimerdisease)、腦血管澱粉樣變性病、 庫貝氏病（Creutzfeldt-Jakobdisease)等的腦澱粉樣變性病以 外第一型糖尿病伴隨胰臟或胰島廇（insuHn〇ma)處;殿粉樣蛋 200922629 “ 、处’馬麵樣蛋白沉積的内分泌殿粉樣變性病’皮膚户 殿粉樣蛋自_的皮歧粉樣變 性病，皮膚或肺部發生妹節狀的 澱粉㈣沉積的局部性澱粉樣變性病等。、、”狀的 【0004] 殿粉樣變性_診斷，如果是全雜練樣難病的情形 寺首先從可以做活組織切片（biopsy)的部位如皮膚、腎臟、 等採取組織’用剛果紅染色或硫黃素T染色來進行，岡·】果紅 疋-種對殿粉樣蛋白的乙型片親和性很高的螢光性化合物，藉由 這種定向排顺（QnentatiQn)在偏細微鏡下呈現雙折射 (Birefringence)，所以可以將組織内沉積的澱粉樣蛋白選擇性 地染色。同樣地，硫黃素了也是具雜粉樣蛋白親和性的榮光性 化合物，和縣紅—樣地被使贿。藉由這樣敝義色，得到 陽性結果後’再配合使用抗_免錢色等，可以進行確定診斷。 但是，用剛果紅或硫黃素τ染色，即使在偏光顯微鏡下觀察，也 有很難判定陽性的時候。 » [0005] 另-方面，近年來’正子射出斷層攝影（p〇sitr〇nEmissi〇n Tonography ; PET)、單光子射出電腦斷層攝影⑶邮ph〇t〇n Emission Computed Tomography ； SPECT)^^^#^fKMagnetic 200922629

Resonance Imaging)等的影像診斷設備顯著地普及的同時，全身 性殿粉樣雜翩f彡翁_方法也—紐研究著。 但是’剛果紅或硫黃素T，標示作為影像診斷探索劑（pr〇be) 來使用時’鑛粉樣蛋自的結合特異性（speeifiGity)很差，無 法得到良好的檢測敏感度，是其缺點。 再者’由於縣紅具有致紐，不能顧在人體的診斷用途 上。 因此對全身性殺粉樣變性病有親和性及檢測度高、也可以應 用在生體内（invivG)檢測的螢紋藥，即剛果紅魅物_雙(3_ 羥基羰基-4-羥基）苯乙烯基苯 (bis-(3-hydroxycarbonyl-4-hydroxy) styrylbenzene ； BSB) 或其衍生物’就被討論過《非專利文獻十四、專利文獻七》。哪， 因為對於來自麟祕變性病和全身性珊樣變性病峽粉樣蛋 白有很高的親和性、其結構上又不具聯苯胺（⑹灿庇）的結構， 減少致癌性關題，有人報細放射性標示可以作為影像診斷探 索劑（probe)使用。 · 【0006】 另-方面，腦殿粉樣變性病的代表例是阿兹海默氏症 (Alzheimer disease，以下稱為AD) ’因為不可能從生體切片取 樣，將具有很高的澱粉樣蛋白親和性化合物作為標記物（胍加) 200922629 使用，從生體内（in vivo)檢測AD的嘗試已經在進行中。 像這樣的腦内澱粉樣蛋白影像診斷用探索劑，其大多數是對 澱粉樣蛋白親和性很高、且腦部滲移性很高、疏水性 (hydrophobic)低分子化合物，用各種放射性核種如碳u ("〇、 氟18 (18F)、和碘123 (1231 )等標示後的化合物。具體實例，有： 以6-碘-2-[4’ -(N，N-二甲基氨基）苯基]苯並噻唑（6_i〇d〇 -2-[4 -(N，N-dimethylamino) phenyl] benzothiazole;以下稱 為「TZDM」）、或6-羥基-2-[4’ -(N-曱基氨基）苯基]苯並噻唑 (6-hydroxy-2-[4, - ( N-methylamino) phenyl]benzothiazole;以下稱為「6-0H-BTA-1」）等為首之種種 的硫黃素（Thioflavine)衍生物《專利文獻一、非專利文獻三》； 以（E)-4-甲基氣基-4 -經基芪（（E)-4-methylamino-4， -hydroxystilbene;以下稱為「SB-13」）、或(E)-4-二甲基氨基-4， 蛾K ((E)-4-dimethylamino-4’ -iodine-stilbene;以下稱為 「m-1 -SB」）等為首之種種芪化合物《專利文獻二、非專利文獻四、 * 非專利文獻五》；以6-埃-2-[4，-(N，N-二甲基氨基）苯基]苯並嚼 0坐（6-iodo-2-[4 - (N，N-dimethyl amino) phenyl] benoxazole ;以下稱為「IB0X」）、6_[2—(氟）乙氧基]_2_[2_(2」二 甲基氨基噻唑-5-基）乙烯基]苯並噁唑 (6-[2-(flouro)ethoxy]-2-[2- (2-dimethylamino thiazol -5-yl) ethenyl]benzoxazole)為首之苯並噁唑衍生物《非專利 200922629 文獻六、非專利文獻七》；以2-(l-{6-[(2-氟乙基）（甲基)氨基]-·2-奈基}亞乙基）丙二猜（2-(1-{6- [(2-fluoro ethyl) (methyl)amino]-2-naphthyl}ethylidene) malononitrile ;以下 稱為「FDDNP」）為首的DDNP衍生物《專利文獻四、非專利文獻八》； 及，以6-蛾-2-[4’ -(N，N-二甲基氨基）苯基]〇米。坐並[i，2_a]n比唆 (6-iodine-2-[4, -(N,N- dimethylamino) phenyl] imidazo[l，2-a]pyridine ;以下稱為「IMPY」）為首的咪唑並吡啶 (imidazopyridine)衍生物《專利文獻三、非專利文獻九》等用 UC或放射性鹵素標示的化合物，都一直有人提出報告。還有，關 於這些影像診斷用探索劑（pr〇be)的一部份，實施頭部影像（head imaging)研究，在阿茲海默氏症病人方面，所謂健康正常例子， 也有報告明確顯示放射能異常地集積於腦部《非專利文獻十、非 專利文獻十一、非專利文獻十二、非專利文獻十三》。 還有，國際公報第2007/002540號說明小冊中，揭露以殿粉 樣蛋白親和性為基礎’用乙三醇（ethyleneglyeQl)或聚乙二醇 (P〇lyethylenegl_)騎質，結合放射性同位素標示部位的 一系列化合物《專利文獻五》。 再者’國際公報第2〇07/063946號說明小冊中，揭露· 腦内代謝為目的，結合5個原子的㈣族轉基所做成的一系列 化合物《專利文獻六》。 ’、 200922629 [0 0 0 7] 【專利文獻-】特表2GG4-5G6723號公報。 【專利文獻二】縣2005-5嶋5號公報。 【專利文獻三】特表2005-512945號公報。 【專利文獻四】特表2002-523383號公報。 【專利文獻五】國際公報第2007/002540號說明小冊。 【專利文獻六】國際公報第2007/063946號說明小冊。 【專利文獻七】國際公報第2005/016888號說明小冊。 【非專利文獻一】J. A. Hardy & G. A. Higgins,

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Medicine and Biology, 2003，30，頁 565 - 571 )。 【0009】 另一方面’ IMPY為首的具有咪唑並吡啶（imidaz〇pyridine) 骨架結構的化合物，投與後具有向腦内滲移、集積在澱粉樣蛋白 處的性質之同時，和前述化今物不同，具有較快的正常組織廓清 200922629 力，性質較優，此點在[125ι]標示化合物所做實驗之結果中已經明 確顯示了。但是，IMPY在基因逆向變異測試（Reverse Mutati〇n

Test)係呈現陽性的化合物，此化合物作為影像診斷探索劑使用 的時候，就必須充分地注意其投與量和投與形態（國際公開第〇3 /106439號說明小冊）。’ 關於FDDNP，也有報告指出在基因逆向變異測試（^胃％ mutation test)中呈現陽性（國際公開第〇3/1〇6439號說明小 冊）。 【0010】 作為以殿粉樣蛋白為標㈣影像診斷齡劑，具核粉樣蛋 白親和性、從正清力非常快速的IMPY之伽能繼續維 持’而致突變性的毒性能被抑制，這樣的化合物是合於理想、可 以使用’但目前時點，賊雜性能的化合物尚未有人提出。 又ίΜΡΥ方面，在澱粉樣蛋白未沉積的白質可以看到非特異 ^集積’此點經過吾人研究的結果，已經確認（參照後述比較例 2)為了作為AD診斷劑來使用，必須要使用在殿粉樣蛋白沉積 X外月b抑制非特異性集積的化合物，像這樣的化合物目前尚 未有人提出。 15 【0011】 200922629 以澱粉樣蛋白為標靶之探索劑，雖然已揭示有各種化合物， 但是確認具有臨床應用性能的化合物則尚未存在，本發明有鑒於 以上事項，藉由提供具有澱粉樣蛋白親和性的新規化合物，希望 在生體外（in vitro)和生體内（in vivo)都能高敏感度地檢測 出殿粉樣蛋白，作為發明之目的。 【解決問題的方法】 【0012】 本發明團隊發現4有雜並K (imidazopyridine：) ~苯 基（phenyl)物結構或脑似骨架結構的化合物，將氧鍵合在 其苯基的碳喊的特定新轉合物，具備了職粉樣蛋白的二和 性’並且’致突變性等的毒性很低；以及，藉由將該化合物群類 作為探索細，論在生體外（invitr。）和生㈣—ο) 都能祕献地_職蛋自，找出魏合物_完成本發明。 【0013】 個面向，係提供一種檢測沈積生 其係含有下列化學式（1): 也就是說，依據本發明的一 體組織澱粉樣蛋白的檢測試藥， 16 【0014】 200922629 【化5】

,r2 [0015] (1 > 斤表丁的化σ物或其鹽類所做成的檢測沉積生體組織的 樣蛋白的檢測試藥。特別是，經由前述化學式⑴所表示的化合 物或其麵’提供_後樣蛋自有高度特紐献粉樣蛋白檢測 試藥。此處，所謂高度特異性_粉樣蛋白檢職藥，係指且有 向殿粉樣蛋白_雜、响其他雜職乎沒雜積性，由於 具有快速的料力，在投與後經過時間後的影像，殿粉樣蛋 白描現的特異性很高，就作為所稱的檢測試藥。 [0016] 所謂生體組織’係已知的澱粉樣變性病（_Qid〇s 種沉積了膽樣蛋㈣纟職。像這樣·體組_代表性例子^ 腦、心臟、麵、_、晴，物紐 = 是腦。《域㈣情料，代紐_贿雖錄是阿兹織 默症（論臟s dlsease ; AD)，氏體失智症㈤ with Lewy bodies ; DLB)。 17 200922629 【0017】 化學式（1)中’ Αι、A2·、A3、和A4係各自獨立的碳或氮’ 但至少有一者必須是碳。Αι、&、Aa、和A4之中，有三個以上是 碳則較為理想；全部都是碳，則更為理想。再者，化學式（丨）中， R係結合在Al、A2、A3、或A4的任一者的碳。又，R1的結合位置， 是As的碳、亦即6位置的碳是較為理想的。 【0018】 化學式（1)中，R1係放射性齒素取代基，！^可以使用各種放 射性鹵素’較理想的是選自氟· Μ (%)、溴Μ (、）、溴76 (、）、 峨 123 (1231 )、碘 124 (1241 )、碘 125 (1251 )及碘 131 (”）卿 成群類選出的放紐时，較合於理想的是制氟18 (18F)、或 碘 123 (1231)。 【0019】 系選自氫、氫氧基、甲氧基（methoxy)、羧基（carb〇咖 )、氨基（amino)、N-甲基氨基（N-methylarain〇)、N，N—二

土戈L 土（Ν’ N-dimethylamino)及，基（Cyano)所成群類之化學基，·只2 係氫、氫氧基、羧基、或氨基是較理想的；铲係氫、或氫氧基是 更理想的；R2係氫氧基則是特別理想。 18 200922629 m係0〜2的整數。 [0 0 2 0] · 特別合於理想的態樣方面，本發明相關之化學式⑴的化合 物，係選自以下所成群類的化合物之中：2-(4’ ~乙氧基苯基· )-6-[1231]碘咪唑並[u—a]吡啶（2_(4, _ eth〇xy phenyl)-6-[123I]i〇d〇 imidazo [i，2a]pyridine)、2-(4，-乙氧基 苯基)-6-[1251]碘咪唑並[u—a]吡啶（2—(4，_ eth〇xy phenyl)-6-[125I]i〇d〇 imidazo [l，2a]pyridine)、2-(4，-乙氧基 苯基)-6-[1311]碘咪唑並[i，2-a]吡啶（2-(4，- ethoxy phenyl)-6-[1311]i〇do imidazo [1, 2a]pyridine) > 2-[4J -{T -羥基乙氧基）苯基]-6-[1231]碘。米唑並[1，2-a]«比啶（ 2-[4 -(2 -hydroxy ethoxy) phenyl]-6-[123I]i〇do imidazo [l，2a]pyridine)、2-[4’ -(2” -羥基乙氧基）苯基]-6-[125I]碘咪 0坐並[1，2-a]nAe定（2-[4，-(2” -hydroxy ethoxy) phenyl]-6-[125I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-[4，-(2” -羥基乙氧基）苯基]-6-[131I]碘咪唑並[1，2-a]吡啶（ 2-[4’ -(2” -hydroxy ethoxy) phenyl]-6-[131I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-[4’ _(3” -經基丙氧基）苯基]-6-[123I]峨口米 唑並[l，2-a]吡啶（2-[4’ -(3” -hydroxy propoxy) phenyl]-6-[123I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-[4’ -(3” - 19 200922629 羥基丙氧基）苯基]-6-[125I]碘咪唑並[1，2-a]吡啶（ 2-[4J -(3Μ -hydroxy propoxy) phenyl]-6-[125I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-[4’ -(3” -羥基丙氧基）苯基]-6-[131I]碘咪 0坐並[1，2-a]e比受（2-[4’ -(3” -hydroxy propoxy) phenyl]-6-[131I]iodo imidazo [1，2a]pyridine)、2-(3’ -乙氧基 苯基)-6-[123I]硪坐並[1，2-3]>^σ定（2-(3’ - ethoxy phenyl)-6-[123I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-(3，-乙氧基 苯基)-6-[125I]碘咪唑並[l，2-a]吡啶（2-(3，- ethoxy phenyl)-6-[125I]iodo imidazo [1，2a]pyridine)、2-(3’ -乙氧基 苯基)-6-[131I]蛾味e坐並[1，2-&]°比咬（2-(3，- ethoxy 事 phenyl)-6-[131I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-[3，-(2” - 羥基乙氧基）苯基]-6-[123I]碘咪唑並[l，2-a]吡啶（2-[3，-(2” -hydroxy ethoxy) phenyl]-6-[123I]iodo imidazo [1, 2a]pyridine )、2-[3’ -(2” -羥基乙氧基）苯基]-6-[125I]碘咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-[3，-(2” -hydroxy ethoxy) phenyl ]-6-[125I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-[3’ -(2” -羥基乙氧基）苯基]-6-[131I]破咪 〇坐並[l，2-a]e比咬（2-[3’ -(2” -hydroxy ethoxy) phenyl]-6-[131I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-[3，-(3” - * 羥基丙氧基）苯基]-6-[123I]碘咪唑並[1，2-a]吡啶（ 2-[3’ -(3，，-hydroxy propoxy) phenyl]-6-[123I]iodo imidazo [l，2a]pyridine)、2-[3’ -(3” -羥基丙氧基）苯基]-6-[125I]峨咪 20 200922629 嗤並[l，2-a]e比咬（2-[3，-(3，，-hydroxy propoxy) phenyl]-6-[125l]i〇d〇 imidazo [l，2a]pyridine) 、以及 2 [3 (3 -經基丙氧基）苯基]-6-[131I]碘咖坐並[1，2-a]°比咬（ 2~[3, -(3^ -hydroxy propoxy) phenyl]-6-[131I]iodo imidazo U，2a]pyridine)。本發明相關之理想的澱粉樣蛋白檢測試藥，係 含有以上這些化合物或其鹽類所做成的澱粉樣蛋白檢測試藥。 【0 0 2 1】 别述化學式（1)之化合物，係新規化合物。依據本發明的另 個面向，係提供放射性鹵素標示有機化合物之製造方法，哕方 法係包括以下作業為其特徵， " 調製作業：調製含有下列化料⑵所表示之化合物或其鹽 類、以及放射性_素離子的反應溶液的調製作業， 规 【0 0 2 2】 【化6】

【0023】 〔化學式中，Al、A2、A3和A4係個別獨立的碳或氮； 21 200922629 R3係選自非放射性鹵素取代基、硝基（nitro)、烷基鏈碳數 4的三烷基銨基（trialkyl ammonium)、烷基鏈碳數丨〜4的三 烷基甲錫烷基（trialkyl stannyl)取代基、及三笨基甲錫烷 基（triphenyl stannyl)取代基所成群類之化學基； R4係選自氫、氫氧基、曱氧基（methoxy)、羧基（carb〇xyl)、 氨基（amino)、N-曱基氨基（N-methylamino)、N，N~二甲基氨 基（N，N-dimethylamino)及氰基（cyano)所成群類之化學基 9 m係0〜2的整數； » 但，&、心、A3和A4之中’至少有一者係碳；R3係結合在Αι、 A2、A3或A4的碳。〕以及、 合成作業：藉由將反應條件給予前述反應溶液，合成如下列化學 式（1)所表示的化合物或其鹽類的合成作業， 【0 0 2 4】 【化7】

【0 0 2 5】 〔化學式中，A!、A2、A3和A4係個別獨立的碳或氮； 22 200922629 R1係放射性#素取代基；· R2係選自氫、氫氧基、甲氧基（methoxy)、緣基（切外〇 1) 氨基（amino)、N-甲基氨基（N-methylamin〇)、n n、-甲其氨 基αΝ-dimethylamino)及氰基（cyano)所成群類之化學基 m係0〜2的整數； 但，A,、A2、A+A4之中，至少有-者係碳；"系結合在&、 心、A3或A4的碳。〕 係提供包括以上二者作業為特徵之放射性函素標示有機化合物之 製造方法。 【0026】 化學式（2)中，Al、a2、A”和八4係各自獨立的碳或氮， =至少有—者必須是碳。Ai、A2 I、和I之中有三個以上是 =則較為理想；全部都是碳，則更為理想。再者，化學式⑵中， =係結合在Al、A2、a3、或a4的任—者的碟。又，R3的結合位置， 是A3的碳、亦即6位置的碳是較為理想的。 【0027】 周製a有則述化予式⑵所表之前驅物化合物或其鹽類與放 射性齒素離子的反應溶液之調製健，例如，將該前驅物化合物 23 200922629 或其鹽類溶解於惰性械賴巾，再將依照-般已知方法做成的 放射性i素離子溶液加人，就可以完成了。 hi±有機騎卜可以使用不會與該前驅物化合物或其鹽類及 放射! 生鹵素離子發生反躺各種麵，例如，若使用的放射性齒 素疋放射㈣的情形，可以適當使用的是甲醇；若使用的放射性 鹵素是放射性氟的情形，可以適當使用岐乙腈（aeetonitriie)。 合成前述化學式⑴所表的化合物或其鹽類的合成作業中， 給予反應溶液的反應條件，，只魏使化學式⑵的化合物的R3 被添加到反應溶液的放射性錄軒取代，這樣的反應能夠進行 的條件即可’並沒有制的限制，按照放射性自素離子的種類， 使用一般已知的反應條件就可以了。 【0 0 2 8】 本發明之放射性i素標示有機化合物的製造方法中，作為放 射㈣素離子，例如，氟18 (#)、漠75 (75Br)、漠76 (76Br)、 硬 123 (1231 )、蛾 124 (1241):峨 125 (1251 )或蛾 131 (1311)都^ 以使用。 ’ R所表示的放射性_素取代基係峨123 (I2”）、块124 (1241 )、 硬125 Ο)或峨131 Ο)的化學式⑴的化合物，在其製造 的情形時’作為放射性i素離子，可以_使舰123離子（1231 ion)、破 124 離子（124I i〇n)、峨 125 離子（125丨 或蛾 131 24 200922629 離子（131I ion)。作為化學式（2)的化合物，R3係碘、溴、烷基 鏈石炭數1〜4的三烧基曱錫烧基（trialkyl stannyl)取代基或三 苯基曱錫烷基（triphenyl stannyl)取代基的化合物可以理想地 使用，R3係蛾、三曱基曱錫烧基（trimethyl stannyl)取代基、 二丁基曱錫院基或三苯基甲錫烧基（triphenyl stannyl)取代基 的化合物則更為理想。 R1所表示的放射性鹵素取代基係氟18 (18F)的化學式（1)的 化合物，在其製造的情形時，作為放射性齒素離子，可以使用氟 18離子（123l i〇n)。作為化學式⑵的化合物，R3係硝基取代基、 或烧基鍵奴數1〜4的的二烧基銨（trialkyl amm〇nium)取代基 的化合物可以理想地使用。 R1所表示的放射性鹵素取代基係溴75 (75Br)或溴76 (76Br) 的化學式（1)的化合物，在其製造時，作為放射性較離子，可 以使用演75離子（75Br i〇n)或溴76離子d i〇n)。作為化學 式（2)的化合物，R3係溴的化合物就可以理想地使用。 ψ 【0029】 又’依據本發_再另-個面向，係提供下列化學式⑵ 【化8】 25 【0030】 200922629

[0031] 所表的放射性i素標是有機化合_製㈣前驅物化合物或复睡 類。 一 οο [ 2 化子’⑵中’Αι、心、a3、和a4係各自獨立的碳或氮， =至少有-者必須是碳^、a2、A3、和&之中有三個以上是 兔則較為理想；全部都是碳，則更為理想。再者，化學式⑵中， R3係結合在a,、a2、m的任—者的碳。又，r3的結合位置， 是&的碳、亦即6位置的碳是較為理想

οο rL

化干式（2)中，R3係選自非放射性鹵素取代基、硝基（nitr〇 院基鏈蚊數1〜4的二统基銨基（trialkyl amm〇nium)、烧基 鏈碳數1〜4的三烷基甲錫烷基（trialkyl stannyl)取代基、及 二苯基曱錫烷基（triphenyl stannyl)取代基所成群類之化學基 ，作為非放射性！S素取代基，用放射性氟元素的親核取代反應之 目標鹵素或與放射性碘元素間的同位素交換反應之目標鹵素，都 26 200922629 可以使用’較合於理想的是使用氣、碘、或溴。三烷基甲錫烷基 取代基可以使用各種取代基，較合於理想的是使用三甲基曱錫烷 基取代基及三丁基甲錫烷基取代基。 【0034] R係選自氫、虱氧基、甲氧基（methoxy)、叛基（carboxyl )、氨基（amino)、N-曱基氨基（N-methylamino)、N，N-二甲基氨 基（N，N-dimethylamino)及氰基（cyano)所成群類之化學基；R4 係氩、氫氧基、羧基或氨基，是較理想的；R4係氫、或氫氧基， 是更理想的；R4係氫氧基則特別理想。 m係〇〜2的整數。 【發明之成果】 【0 0 3 5】 . 經由本發明，具有澱粉樣蛋白親和性，可以應用於生體外和 生體内，用來檢測與廣範圍澱粉樣變性病相關聯的澱粉樣蛋白孓 檢測試藥、及其製造方法並製造用巾驗，都可以得到。 【實施方式】 【實施本發明之最佳狀態】 27 200922629 [0 0 3 6] ※放射性由素標示有機化合物調製用之前驅物化合物的合成方法 以下’舉6-三丁基曱錫烷基-2-[4’ -(2” -羥基乙氧基）苯基] 口米0坐並[1，2-a]^a定（6-tributylstannyl-2-[4’ -(2” -hydroxyethoxy)phenyl]imidazo[l，2-a]pyridine)為例， * 說明相關本發明一個面向之放射性i素標示有機化合物調製用之 前驅化合物的合成方法。 【0037】 針對6-三丁基甲錫炫基-2-[4’ -(2” -經基乙氧基）苯基] 味嗤並[l，2-a]e比咬的合成，首先，使4’ -經基乙酿苯 (4’ -hydroxyacetophenone)與溴化銅（CuBr2)發生反應，合成 2-溴-4’ -經基乙醮苯（2-bromo-4’ -hydroxyacetophenone)〔圖 一、作業一〕。此時的反應’可以依照已知的方法，例如文獻《King L. Carroll & 0strumG. Kenneth, Journal of Organic Chemistry, 1964，29(12)，頁.3459-3461》所記載的方法來進行。 [0038] 其次，將前述已合成之2-溴-4 羥基乙醯苯，與2—氨基-5- 碘吡啶（2-amino-5-iodopyridine)發生反應，合成2-(4，-輕基 28 200922629 ...-ι ' ·/·/ - r,'：: 苯基)—6—蛾咪唑並[1，2-a]吡啶（2-(4, -hydr〇xyphenyl)-6-i〇d〇 imidazo[l，2-a]pyri(iine)〔圖一、作業二〕。此作業可以依據以 下之要領來進行。 [0 0 3 9] 首先’將2~漠-4,-羥基乙醯苯和2-氨基-5-硪吡啶溶解在乙 腈（acetonitrile)等的惰性溶劑中，在回流溫度狀態下，使其 反應2〜6小時，生成2-(4，_羥基苯基)-6-碘咪唑並[1，2-a]吡啶 的溴化虱酸鹽，形成白色沉澱。此際所用的溶劑，乙腈之外，曱 醇或丙酮荨’在相同反應時通常使用的溶劑，都可以使用。又， 反應溫度如果是可以進行回流的溫度的話，就可以了，例如，乙 腈作為溶劑時，可以是。並且，所用溶劑的量，如果對於反 應屬充分的量則很好，但是過量的話，由於無法得到反應物的沉 澱，必須要謹慎。例如，使甩相當於10毫莫耳（麵〇1)的2_溴_4 -經基乙酿苯來進行反應時，大約使用〜8〇毫升的溶劑就可 以了。 【0 0 4 0] 其次，將反應液過濾，分離沉澱物後，將此白色沉澱物懸浮 於甲醇/水的混合液（1 :丨）中，該懸濁液中再加入相對於沉澱 物超過甚多量的碳酸氫鈉水溶液，則2_(4，_羥基苯基)_6-碘咪唑 29 200922629 並[1，2-a]吡啶游離出來，生成沉澱。藉由過濾取得此新生成的沉 殿物’就可以得到本作業目標產物2-(4，-經基苯基)_6_峨咪唑並 [l，2-a]吡啶〔圖一、作業二〕。甲醇/水混合液的量，為了能使 反應進行，若是充分的量，並無特別限定的必要，但是過多的話， 因為會妨礙生成物的析出，有必要注意，舉例來說，使用相當於 10毫莫耳的2-溴-4，_羥基乙醯苯的情形時，使用大約4〇〜1〇() ' 毫升成度的甲醇/水混合液，就可以了。又，碳酸氫鈉的量，相 對於反應基本物的前述沉澱物，若超過甚多的話，並無特別限制， 例如，若係於前述條件下使其反應的情形時，反應液中添加大約 50笔升程度的飽和碳酸氫鈉水溶液，就可以了。 【0 04 1】 此處再另作一途，使2-溴乙醇（2-bromoethanol)與特-丁基 一苯基氣硅烷（t-butyl dipfienyl chlorosilane ; TBDPSC)發生 反應，合成1-溴-2-(特-丁基二苯基硅氧烷基）乙烷 n-bromo-2-(t-butyl diphenyl sil〇xy) ethane)〔圖-、作業 三〕。此際的反應，可以依照已知的方法，例如文獻《〇rganic

Syntheses，Coll. Vol· 10，頁 no (2〇〇4); V〇l. 79，頁 59 (2002)》記載的方法進行。 【0 0 4 2】 30 200922629 接著，將合成出來的2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[1，2-a] 咕啶充分乾燥後，溶解於N，N-二甲基甲醯胺 (Ν,Ν-dimethylformamide)中，於其中加入碳酸鉀和1-溴-2-(特 -丁基二苯基甲硅烷氧基）乙烷，此混合物在約9〇°c攪拌2小時 後’加入飽和氯化鈉溶液，用.醋酸乙酯抽提’將醋酸乙酯層濃縮、 用色層分析法（chromatogram)進行精製，藉此得到2-[4，-(2” - 特丁基一本基甲娃燒氧基乙乳基）苯基]-6-蛾p米〇坐並[1，2_a]D比 咬（2- [4’ -(2” - t-butyldiphenyl siloxyl ethoxy)phenyl]_6-iodo imidazo [1，2-a] pyridine)〔圖一、作 業四〕。碳酸钟的量，只要能中和在反應中從1_演_2_(特_丁基二 本基甲娃烧氧基）乙烧產生的漠化氬即可，一般是相對於副原料的 1-溴-2-(特-丁基二苯基甲娃烧氧基）乙院的莫耳數比，使用2〜3 倍程度的量就可以了。再者’丨-溴-2-(特-丁基二苯基甲娃烧氧基） 乙烧的量，相對於反應基本物若是過剩的話即可，一般是相對於 基本物的2-(4’ -輕基苯基)-6-破°米°坐並[1，2-a]»»比咬的莫耳數 比，使用1.5倍程度的量就可以了。 【0043】 再其次’所得到的2-[4’ -(2” -特-丁基二笨基甲石圭院氧基乙 氧基)苯基]-6-碘咪唑並[1，2-aH咬，藉由將其上的特—丁基二苯 基曱硅烷基（t-butyldipher^lsi ly 1)以四丁銨化氟（tetrabutyi 31 200922629 ammonium fluoride)隹脫保護反應，可以得到2-[4，-(2，，-羥基 乙氧基）苯基]-6-硪咪嗤並[1，2-3]°比咬（2-[4’-(2，，-hydroxylethoxy) phenyl] -6-iodo imidazo[l，2-a]pyridine)〔圖 一、作業五〕。此時的反應，可以依照已知的方法、例如文獻 《Organic Synthese|，Coll: Vol. 9,頁 417 (1998) ; Vol. 74,頁 248 (1"7)》所記的方法來進行。 [0044] 所得到2-[4’ -(2” -羥基乙氧基）苯基]_6_碘咪唑並 吡啶溶解於二噁烷（di〇xane)，加入三乙胺（triethylamine)後， 再加入雙[二丁基錫](bis[tributyl tin])及催化劑量的四個（三 (tetrakis (triphenyl phosphine)palladium(O)) 〇 將此反應液加熱至約got：使莫反應24彳、時以後，去溶劑，進行 色層分析法精製，可以得到目標產物6_三丁基曱錫絲 -2-[4’ -(2，，-經基乙氧基)笨基h米唾並[仏❿比啶 (6 tributylstannyl-2-[4 ~(2,f -hydroxyethoxy)phenyl]-im idazo [1，2-a] Pyridine)〔圖二、作業一〕。此際，雙[三丁基錫] 的里，相對於反絲本物是過量的話即可。具說，相對於反 應基本物的H4’ -(2”，基乙祕)苯基]+㈣倾L2_a] 吼咬的莫耳數比，若是I5倍程度就可以了。 32 200922629 【0 04 5】 還有，將咪唑並吡啶環上之6位置的取代基做為三丁基曱錫 烷基取代基以外之三垸基甲錫烷基取代基，要得到這樣的化合物 的話，在圖二的作業一，替代雙[三丁基錫]，依照目的而使用不 同的雙[三烷基錫]就可以了。舉例來說，6位置取代基係三甲基 甲錫烷基取代基，合4此化合物時，在圖二的作業一，使用雙[三 曱基錫]’進行前述相同反應的話就可以了。 【0 0 4 6】 "米0坐並°比1定環上相關功能基的鍵合位置是6位置碳以外之碳 的化合物’在圖一、作業二所使用之2-氨基-5-碘吡啶的替代物， 藉由吼咬環上破鍵合位置使丐各種不同化合物而可以得到。舉例 來說，功能基的鍵合位置，若是咪唑並吡啶環的8位置時，在圖 一的作業二’ 2-氨基-5-碘吡啶的替代物，可以使用2-氨基-3~峨 【0 047】 ※放射性由素標示有機化合物的合成方法 其次’以放射性碘標示化合物為例，說明本發明相關之另一 面向的放射性函素標示有機化合物之製造方法。 9 33 200922629 【0 0 48] 放射性峨標示化合物之合成，係將依前述要領合成的標示前 驅物化合物溶解於惰性有機溶劑中，此處，加入依一般已知的方 法所得到的[I]峨化鈉溶液耸，再加入酸及氧化劑，藉由使其發 生反應，就可以得到。溶解標示前驅物化合物之惰性有機溶劑， 可以使用不會與標示前驅物化合物及[123丨]碘化鱗之間發生反應 的溶劑，較理想的是使用甲醇。 【0049】 酸，可以使用各種物質，較理想的是使用鹽酸。 氧化劑，只要能使反應液中的碘發生氧化的物質就可以了， 並沒有特別的限制，較理想的是使用過氧化氫或過醋酸 (peracetic acid)。氧化劑的量，只要能使反應液中的碘發生氧 化的充分的量，就可以了。 【◦050】 硬以外之放射性鹵素標示物，使⑽合目的之放射性鹵素將 因應合成目的之標示前驅物加以標示，就可以得到。舉例來說， 合成6- [18F]氟-2-[4’ -(2” -經基乙氧基)苯基]味唾並[u一a] (6-[I8F]fluoro-2-[4> *-(2^ hydroxyethoxy) phenyl] imidazo [l，2-a] pyridine)的情形時，將作為標示前驅物之 34 200922629 2-[4’ -(2” -誠乙氧基)苯基]如肖基咪唾並⑽—心嘴，在 相間移動催化劑和碳酸鉀的存在下，與[18ρ]氣化物離子發 應，就可以了。 [0051] ※本發明相關檢測試藥的使用方法及調製方法 殿粉樣蛋白由於前驅蛋自__具有射相賤構造 具有乙型片M sheet)構造卻是其共同點。以婦樣蛋白為對 象之染色知，以硫黃素了_果紅為首，—直將此乙型片 ^標乾，無論婦樣蛋白的種類為何者，已知都有相同的染色 9 糊败峨（⑽觸，物嶋蛋白妓 以下’稱為「A/3」)做為前驅物的澱粉樣 :::知能與廣範圍嶋蛋白結合的硫黃素二 蛋白，則具有阻礙結合的作用。 因此’她相關之化學式⑴的化合物，就研究 素T相同地對澱粉樣蛋白 ^ 纽f的乙則具她和性。此即， 本發明相關之化學式⑴的 具有相同的親和性。 4對於多猶粉樣蛋白，顯示 果’崎素― u王H贿樣變性献局雜雜樣變性 35 200922629 病的0斷。在這方面，全身性殿粉樣變性病，列舉實例有免疫球 蛋錄殿粉樣變性病i反應性AA麟樣變性病、家雛殿粉樣變 性病、透析澱粉樣變性病、丟年性澱粉樣變性病等。局部性澱粉 樣變性病，列舉實彳讀麟粉樣變性病、内分泌祕樣變性病、 皮膚殿粉樣變性病、侷限性結節性澱粉樣變性病等。 【0052】 本發明之澱粉樣蛋白檢測試藥，不僅可以應用在以活組織切 片（bi〇psy)為對象的生體外（in vitro)使用之試藥，並且， ;使用致犬變性荨毒性被抑制的化合物，所以也可以應用作為 生體内（in vivo)使用之試藥。 【0053】 本發明相關之殿粉樣蛋白檢測試藥，與其他一般所知的放射 性診斷劑—樣，將前述化學式（1)所表的放射性鹵素標示化合物 依"、、所5周整為適當酸驗值（pH)，用水或生理食鹽水、或者調配 林格氏液等液體’可以加關製。在這種情形下，本化合物之濃 度必須是調配後保有本化合物安定性的濃度以下。本化合物之 才又與篁，只要是能充分使投與藥劑之分布情形影像化的濃度即 可，並沒有特別的限制。舉例來說，若是碘-123 (1231 )標示化合 物及氟-18 (18F)標示化合物的情形時，體重6()公斤的成人一人 36 200922629 相當50〜_百萬肢⑽）程度，可以靜脈給藥或局部給藥來 使用。投與後之藥齡布’可以用—般已知的方法加以影像化， 例如蛾-123 (1231 )標示化合物的情形時，用單光子射出電腦斷層 (Single Photon Emission Computed Tomography ； SPECT)； 氟標示化合物的情形時，用正子射出斷層攝影（p〇sit腿

Emission Tomography ; PET)，可以將其影像化。 【0054] 藉由投與本發明之澱粉樣蛋白檢測試藥到生體内，可以將沉 積在腦、心臟、肺、消化道：血管、肝臟、騰臟、腎臟、關節、 骨絡等生體組織的澱粉樣蛋白影像化，對於沉積在活組織切片有 困難的生體組織，如腦、心臟、肺、胰臟、錄和關節的殿粉樣 蛋白影像化很有用處。 【實施例】 【0055】 以下所記載的實施例、比較例及參考例，將更進一步詳細說 明本發明，但是本發明並未侷限於此處之内容。 下述實施例中，提供實驗用的各化合物名稱，如表工的定義。 37 200922629 [0056] ί表1】 表1 化合物名稱 常用名 化合物1 2-[4’」(2” -羥基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑並[1,2-a]吡啶 (2-[4! -{T -hydroxyethoxy)phenyl]-6-[123I]i〇d〇imidazo[l,2-a]pyridine) 化合物2 2-(4’ -乙氧基苯基)-6-[1231]碘咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-(41 -ethoxyphenyl) -6-[123I]iodo imidazo[l ,2-a]pyridine ) 化合物3 2-[4’ -(2” -羥基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-[4’ -{T -hydroxyethoxy)phenyl]-6-iodo imidazo[l,2-a]pyridine) 化合物4 2-[3’ -(2” -羥基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑並[1,2-a]吡啶 (2-[3' -(T -hydroxyethoxy)phenyl] -6-[123I]i〇do imidazo[l,2-a]pyridine) 化合物5 2-[3’ -(2” -羥基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]嘧啶 (2-[3' -(T -hydroxyethoxy)phenyl]-6-iodoimidazo[l,2-a]pyrimidine) 化合物6 2-[4’ -(3” -羥基丙氧基)苯基]々-Η]碘咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-[4' -(3" -hydroxypropoxy)phenyl] -6-[l23I]iodo imidazo[l,2-a]pyridine) 化合物7 2-[4, _(3” _羥基丙氧基)苯基]-6-碘咪哩並[l，2-a]吡啶 (2-[4, -(3” _hydroxypropoxy)phenyl]-6-iodoimidazo[l，2-a]pyridine) 化合物8 2-(4’ -乙氧基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-(4' -ethoxyphenyl) -6-iodo imidazo[ 1,2-a]pyridine ) 化合物9 6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ _(2” -羥基乙氧基)苯基]咪唑並[1,2-a]吡啶 (6-tributyl stannyl-2-[4' -{T -hydroxyethoxy)phenyl] imidazo[l,2-a] pyridine) [0 0 5 7] (實施例1)2_[4’ -(2” -經基乙氧基)苯基]-6-破味攻並[l,2-a] *比咬（2-[4，-(2” -hydroxyethoxy)phenyl]-6-iodo imidazo[l，2-a]pyridine)《非放射性碘化合物》之合成 [0 0 5 8] 溴化銅（CuBn) 28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸濁。將8.18公克4’ _羥 38 200922629 基乙醯苯（4’ -hydroxyacetpphenone)(相當60. 〇毫莫耳）溶解 於50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿（chi〇rof〇rm)的混合液中， 將該浴液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後，將反 應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋 酸乙酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到 的粗生成物，用快速矽凝膠管柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)《溶離液：氣仿/曱醇=2〇//1》加以精 製，然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2_溴_4, _經基乙 醯苯（2-bromo- 4，-hydroxy^cetophenone) 7. 25 公克（相當 33. 7 宅莫耳）〔圖一、作業一〕。 【0 0 5 9】 將2->臭-4 -羥基乙醯苯441毫克（相當2. 〇毫莫耳）和2- 氨基-5-溴β比咬（2-amino-5-bromopyridine) 449 毫克（相當 2 0 毫莫耳）溶解於15毫升乙腈（acetonitrile)中，在n〇°c油浴 加熱回流5小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過濾分離 沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結晶懸 浮於10毫升水和10毫升曱醇之混合液中，於該懸濁液中加入約 亳升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從所得 到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾燥.， 得到2-(4，-羥基苯基)-6-碘咪唑並[1，2-a]吡啶52Θ毫克（相當 39 200922629 1. 56毫莫耳）〔圖一、作業上〕。 【0060】 另外’將2-溴乙醇2. 5〇公克（相當20.0毫莫耳）和咪唑 (imidazole) 2· 72公克（相當40. 〇毫莫耳）溶解於1〇毫升的二 曱基甲醯胺（dimethylformamide ; DMF)中，冷卻至0°C後，加入 特-丁基二本基娃氧烧（t-butyl diphenyl chlorosiloxane ; TBDPSC1) 5. 50公克（相當2〇. 〇毫莫耳）。將反應混合物在室溫攪 拌18小時以後’加入飽和氯/匕鈉溶液，用醋酸乙酯進行抽提三次， 合併醋酸乙酯層，用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮，所得到的粗生 成物用石夕凝膠管柱色層分析法（silicagel c〇lumn chromatography)《溶離液：己烷/醋酸乙酯=1〇/1》加以精製， 得到1-溴-2-(特-丁基二苯基甲硅氧烷基）乙烷 (l-brom〇-2-(t-butyl diphenyl siloxy) ethane) 7. 04 公克（相 當19.4毫莫耳）〔圖一、作業三〕。 【0 0 6 1】， 將2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶200毫克（相 當0.595毫莫耳）溶解於3.0毫升N，N-二曱基曱醯胺 (N，N-dimethylformamide)，再加入碳酸鉀 247 毫克（相當 1. 79 毫莫耳）以後，加入1-溴-2-(特-丁基二苯基甲硅烷氧基）乙烷259 200922629 * 毫克（相當0. 714毫莫耳）。將反應混合物在9〇乞授拌2小時後， 加入飽和氯化鈉溶液，用醋酸乙酯抽提三次，合併三次之醋酸乙 酯層，用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。得到的粗生成物用矽凝膠 管柱色層分析法（silicagel column chromatography)《溶離液： 己烷/醋酸乙酯= 2/1》加以精製，得到2-[4，-(2，，-特-丁基二 本基曱娃烧氧基乙氧基）苯基]-6-峨σ米唾並[1，比咬（2_ [4J -(2" -t-butyl diphenyl siloxy ethoxy) phenyl]-6-iod〇-3-methyl imidazo[l，2-a] pyridine) 368 毫克 ψ (相當0.595毫莫耳)〔圖一、作業四〕。 [0 0 6 2] 將2-[4’ -(2” -特-丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基）苯基]-6-峨咪唑並[l，2-a]吡啶368毫克（相當0.595毫莫耳），溶解於1.0 毫升的四氫吱喃（tetrahydrofuran ; THF) ’再加入含1. 0莫耳/ 公升的四丁錢化氟（tetrabutyl ammonium fluoride)的四氫〇夫 °南溶液0. 70毫升。於室溫攪拌2小時後，加入氣化銨溶液，繼續 ψ 加入水5.0毫升和乙腈2·0毫升，析出的沉澱物加以過濾分離。 將濾得的沉澱物以水、乙腈的順序加以洗淨，得到2-[4，-(2，，-經基乙氧基）苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶（2-[4 -(2M -hydroxylethoxy) phenyl]-6-iodo imidazo [1,2-a] Pyridine) 226毫克（相當0.595毫莫耳）〔圖一、作業五〕。 41 200922629 [0063] 所得到的2-[4’ -(2” -經基乙氧基)苯基]l米唾並 [l，2-a]吡啶’其核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：四 TS^^[tetramethylsilane])’WTA*。 [0064】 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） H-NMR (溶劑：重二甲基亞砜、共振頻率：5〇〇MHz):占8.恥 (s，1H)、8.27( s，1H)、7.87( d，J = 8.7 Hz，2H)、7. 54-7. 46 (m，2H )、7. 04 (d，J = 8. 7 Hz，2H )、4. 04 ( t’ J = 4. 6 Hz， 2H ) ' 3. 73 ( t, J = 4. 6 Hz, 2H ) 〇 [0065] C-NMR( >谷劑.重二甲基亞石風、共振頻率：i25MHz): (5158 9、 143.0、 142.4、133.5、131.5、127.卜 124.4、116.7、114.8、 108.1、 76. 7、69. 5、59. 4。 【0066】 (實施例2) 6-三丁基甲錫统基-2-[4’ -(2” -羥基乙氡基)苯基] 味峻並[1，2-al^b^a-tributyl stannyl 42 200922629 _2-[4’ -(2” -hydroxy ethoxy) phenyl] -3-methyl imidazo [l，2-a] pyridine)的合成 [0 0 6 7] 於實施例1所得到的2-[4’ -(2” -羥基乙氧基）苯基]-6-碘 咪唑並[l，2-a]吡啶100毫克（相當0.263毫莫耳），溶解於4.0 毫升二噁烧（dioxane)，加入三乙胺（triethylamine) 2. 0毫升 後，再加入雙(三丁基錫）（bis[tributyl tin]) 〇. 20毫升（相當 0.39毫莫耳）和四個（三苯基膦）化鈀（tetrakis (triphenyl phosphine) palladium(O)) 20.1毫克（催化劑數量）。將反應混 合物在90°C攪拌21小時後，減壓將溶劑蒸餾除去，把殘渣用快速 石夕凝膠管柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)《溶離液：己烷/醋酸乙酯= 1/2》加以精製。 得到6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -(2” -羥基乙氧基）苯基]咪唑並 [1，2-a]吼啶（6-tributyl stanny卜2-[4’ -(2” -hydroxy ethoxy) phenyl] imidazo[l，2-a] pyridine) 75· 3 毫克（相當 〇· 139 毫莫 耳）〔圖二、作業一〕。 【0 0 6 8】 所得到的6-三丁基曱錫烷基-2-[4, -(2，，-羥基乙氧基）苯基] 米唾並[l’2-a]«比咬，其核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物 43 200922629 質：四甲基硅烧|^廿&1116御13山116])，如下所示。 [0069] 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製、 !11-臓（溶劑：重氯仿、共振頻率：5〇〇ΜΗζ): ο.%。 7.89(d，J = 8.7Hz，lH)、7.75(s，lH)、7.56(dj- 8. 7 Hz’ 1H )、7.15 (d，J ; 8. 7 Hz，1H )、6. 98 ( d，J = 8 7

Hz, 1H ) > 4.13 ( t, J = 4. 6 Hz, 2H ) > 3. 99 ( t, J = 4. 6 Hz 2H )、2· 63 ( s，3H )、1. 64-1. 51( m，6H )、1. 36 ( sextet，j =7. 3 Hz，6H )、1.19-1. 06 ( m，6H )、0· 92 ( t，J =7. 3 Hz， 9H )。 [0070] 13C-NMR(溶劑：重氣仿、共振頻率：125MHz): (5158. 6、145. 7、 145. 0、131. 2、130. 0、127. ·4、127. 2、121· 9、116. 9、114. 8、 106. 4、69. 3、61. 4、29. 0、27. 3、13. 7、9. 8。 [0 0 7 1] (實施例3)2-[4’ -(2” -羥基乙氧基)苯基]-6-[mI]-块咪唑並 [l，2-a]吡啶 (2-[4’ -(2” -hydroxyethoxy)phenyl]-6-[123I]-iodo 44 200922629 imidazo[l，2a]pyridine)的合成 [0072] 6-三丁基曱錫烷基—2-[4, _(2” -羥基乙氧基）苯基]咪唑並 [1，2-a；K啶溶解於曱醇/二曱基亞砜混合溶液（混合比例=9/ 1)中’所成的溶液（濃度：1毫克/毫升）6〇微升中，加入丨莫 耳/升之鹽酸150微升、1毫莫耳/毫升的碘化鈉15微升、274 MBq 的[1231]蛾化納250微升、l〇%(W/V)過氧化氫15微升。將該混合 液在50°C靜置10分鐘後，用附有以下條件的高效能液相層析法 (High performance liquid chromatography ; HPLC)，將 2-[4’ -(2” -經基乙氧基）苯基]—6_[123!]_埃咪唑並[u—ap比啶 (2-[4’ -(2” -hydroxyethoxy)phenyl]-6-[123IH〇do imidazo[l，2a]pyridine)的析離部份（fracti〇nation)分離取 得。 [0073] 高效能液相層析法（HPLC)的條件： 筒柱：Phenomenex Luna C18 (商品名，Phenomenex 公司製造， 規格：4. 6X150毫米） 移動相：含0.1%三氟醋酸的水/含有〇. 1%三氟醋酸的乙腈< 80/20—0/100 (17 分鐘） 45 200922629 流速：1. 〇毫升/分鐘（mL / min) 檢測器：紫外線可見光分光光度計（absorption spectrophotometer)《檢測波長：282咖》及放射線檢 測器(型式：STEFFI型，raytest公司製造） 【0074】 9 於該析離部分加入水10毫升後，把該液體放入逆相筒柱（商 品名：Sep-Pak Light C8 Cartridges〔登錄商標〕，Waters 公司 製造，充填劑之充填量：145毫克）作為沖提液，把2_[4，_(2” -羥基乙氧基）苯基]-6-[123I]-碘咪唑並[1，2-a]吡啶於該筒柱中吸 著捕集。用1毫升水洗淨該筒柱後，再用丨毫升二乙基醚 (diethylether)沖提之，使2-[4，-(2，，_羥基乙氧基）苯 基]-6-[123I]-碘咪唑並[1，2-a]吡啶溶出。所得到的放射能量在剛 合成後係22 MBq。又’依據以下條件，進行薄層層析法（TL〇 測定時，其放射化學純度係97%。 【0 0 7 5】 薄層層析法（TLC)分析條件： TLC層析板：Silics Gel 60 F254 (商品名，Meruku公司製造） 展開相··氯仿/曱醇/三乙胺=1〇〇/1/2 檢測器：Rita Star (商品名，raytest公司製造） 46 200922629 [0 0 7 6] (實施例4) 2-(4’ -乙氧基苯基)-6-蛾咪峻並[1,2-a]11**定 (2-(4，-ethoxy phenyl) -6-iodo-imidazo[l，2a]pyridine)《非 放射性碘化合物》的合成 [0077] 溴化銅（CuBn) 2. 72公克（相當12. 2毫莫耳）中加入醋酸 乙醋（ethyl acetate) 30毫升，成為懸濁液。懸濁液中加入4， -乙氧基乙醯笨（4，-ethoxy acetophenone) 1. 00 公克（相當 6. 09 毫莫耳）’進行加熱回流。3小時以後，將反應液冷卻至室溫，進 行過濾，將濾液減壓濃縮。將殘渣溶解於醋酸乙酯再濃縮。所得 到的粗生成物’用石夕凝膠管柱色層分析法（siHcagel c〇lumn chranatography)《溶離液：己烷/醋酸乙酯=1〇/1》加以精製， 知·到2->臭-4 -乙氧基乙醯苯（2-bromo_ 4’ _ ethoxy acetophenone) 1. 20公克（相當4. 94毫莫耳）〔圖三、作業一.〕。 [0078] 將2-溴-4’ -乙氧基乙醯苯1.20公克（相當4. 94毫莫耳） 和 2-氣基-5-蜗π比η定（2-amino-5-iodopyridine) 1.09 公克（相 當4. 95毫莫耳）溶解於2〇毫升乙腈（acetonitrile)中，在11〇 47 200922629 C的油浴中加熱回流1· 5小時。反應結束後，將反應液冷卻至室 溫’過渡分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得 到之粗結晶懸浮於10毫升水和5毫升曱醇之混合液中，於該懸濁 液中加入約20毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動1〇 分鐘。從所得到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓 下使之乾燥，得到2-(4，-乙氧基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶 (2 (4 -ethoxy phenyl) -6-iodo-imidazo[l, 2a]pyridine) 1.64公克（相當4. 5〇毫莫耳）〔圖三、作業二〕。 【0 0 7 9】 所4于到的2-(4 -乙氧基苯基)-6-破味峻並[1，2-a]1*比°定，其 核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：四甲基硅烷 [tetramethylsilane] )，如下所示。 * [0080] 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） H-NMR (溶劑.重二甲基亞颯[dimethylsulfoxide]、共振頻 率：500MHz): 59. 06 ( s，1H )、8. 38 ( s，1H )、7. 86 ( d，J =8. 7 Hz, 2H)、7· 77-7. 57 ( m，2H )、7. 06 (d，J = 8. 7 Hz，2H )、 4.10 ( q，J = 6. 9 Hz, 2H )、1. 36 ( t，J = 6. 9 Hz, 3H )。 48 200922629 【0081】 13C-NMR (溶劑：重二曱基亞颯[dimethylsulfoxide]、共振頻 率：125MHz) H59. 3、141.卜 140. 3、135. 9、132. 0、127. 3、 122.卜 115. 3、114. 9、108. 5、78. 6、63. 2、14. 5。 [0082] (實施例5) 6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -乙氧基苯基)咪唑並. [l,2-a]°ifc咬（6-tributyl stannyl-2- (4，-ethoxy phenyl) imidazo[l，2-a] pyridine)的合成 【0083】 於實施例4所得到的2-(4’ -乙氧基苯基)-6-碘咪唑並 [l，2-a]»比啶364毫克（相當，1.00毫莫耳），溶解於4.〇毫升二噁 烷（dioxane)，再加入三乙胺（triethylamine) 2毫升後，再加 入雙(三丁基鍚）（bis[tributyl tin]) 0. 76毫升（相當1. 5亳莫 耳）和四個（二本基膦）化把（tetrakis (triphenyl phosphine) 口3113&11111(0))76.3毫克（催化劑數量）。將反應混合物在90。(： 攪拌23小時後’減壓將溶劑蒸餾除去，把殘渣用快速矽凝膠管柱 色層为析法（f 1 ash si 1 icage 1 co 1 umn chromatography)《溶離 液：己烧/醋酸乙酯= 5/1》加以精製。得到6_三丁基曱錫烷基 -2-(4’ -乙氧基笨基)咪唑並，[U—a]吡啶（6_tributyi 49 200922629 stanny卜2-(4’ -ethoxy phenyl)-imidazo[l，2-a] pyridine) 331 毫克（相當0. 628毫莫耳）〔圖四、作業一〕。 【0084】 * 所得到的6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ _乙氧基苯基)咪唑並 [l，2_a]吡啶，其核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質··四 甲基硅烷[16廿&11161；1^1311&肪])，如下所示。 [0085] 使用的核磁共振裝置：雇—Ecp〜5()()(日本電子公司製造） lH.R (溶劑:重氣仿、共振頻率:500MHz): d 7.二(s 了 7.88 (d, J-8.7 Hz, 2H)：T.74(S, IH) ^ 7. 58 ( d, g '

Hz, lH)、7.14(d’ J = 8.7HZ，lH)、6.96(d，J = 8 7Hz 4.07 (q, 1 = 6.9 Hz, 2H)> 1.63-1.49 (m, 6^^.43^ ! =6. 9 HZ，3H)、h 39_1. 31 ( m，6H)、1.18-1. 〇4 ( m ’·、 0.90( t，J = 7.3 Hz，9H )。 ’ 、 [0086] 13 t.R(溶劑：重氯仿、共振頻率：125MHz):叫9 145.2^131.2^130.1.127.4.126.7.12L9M1U 48； 106·4、63·6、29」、27.4、15()、138、99。 ·8 50 200922629 [0 0 8 7] (實施例6) 2-(4’ -乙氧基苯基)-6-[1231]碟咪唑並[1,2-a] 咬（2-(4，-ethoxy phenyl) -6-[123I]iodo-imidazo[l，2a]pyridine)的合成 【0 0 8 8】 6-三丁基曱錫烷基-2-(4’ -乙氧基苯基)咪唑並[i，2-a]吡 啶的甲醇/二甲基亞砜=9/1混合液之溶液（濃度：1毫克/毫 升）60微升中’加入2莫耳/升之鹽酸90微升、1毫莫耳/毫升 的碘化鈉15微升、436MBq的[1231]碘化鈉1〇〇微升、i〇%(w/V)過 氧化氫15微升。將該混合液在50°C靜置1〇分鐘後，用附有以下 條件的高效能液相層析法（High performance liquid chromatography ; HPLC)，將 2-(4’ -乙氧基笨基)-6-[123I]-碘咪 唑並[l，2-a]吡啶（2-(4，-ethoxy phenyl)-6-[123I]-iodo imidazo [1，2a] pyridine)的析離部份（fractionation)分離 取得。 【0 0 8 9】 高效能液相層析法（HPLC)的條件： 筒柱：Phenomenex Luna C18 (商品名，Phenomenex 公司製造， 51 200922629 規袼：4.6X150毫米） 移動相：含有0.1%三氟醋酸的水/含有0.1%三氟醋酸的乙腈 = 80/2040/100. (17 分鐘） "IL速.1. 0 毫升 / 分鐘（mL / min) 檢测器：紫外線可見光分光光度計（absorption spectrophotometer)《檢測波長：282nm》及放射線檢 測器（型式：STEFFI型，raytest公司製造） 【0090】 於該析離部分加入水10毫升後，把該液體放入逆相筒柱（商 品名：Sep-Pak Light C8 Cartridges〔登錄商標〕，Waters 公司 製造’充填劑之充填量：145毫克）作為沖提液，把2-(4，-乙氧 基笨基)~6-[1231]_碘咪唑並[l，2-ah比啶吸著捕集於該筒柱中。用 1毫升水洗淨該筒柱後’再用1毫升二乙基醚（diethyl ether)沖 k之’使2-(4’ -乙氧基苯基)-6-[1231]-蛾咪吐並[l，2-a]n比咬溶 出。所得到的放射能量在剛合成後係88MBq。又，依據以下條件， 進行薄層層析法（TLC)測定時，其放射化學純度係98%。 【0091】 薄層層析法（TLC)分析條件： TLC層析板.Silics Gel 60 F254 (商品名，Meruku公司製造） 52 200922629 展開相：氯仿/曱醇/三乙胺= 100/1/2 檢測器：Rita Star (商品名，raytest公司製造） * 【0092】 (參考例1) [123Ι]-ΙΜΡγ的合成 【0093】 為了作為logPocw測定及腦集積性相關研究的比較例，依照 以下方法’合成[123I]_IMPY。 [0 0 9 4] * 依照文獻《Zhi-PingZhuang 等人，J. Med. Chem, 2003, 46, 頁237-243》記載的方法，合成6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -(N，.N- 二甲基氨基）苯基]咪唑並[l，2-a]吡啶 (6-tributylstannyl-2-[4, -(N, N-dimethylamino)phenyl]imi dazo[l，2-a]pyridine)，將其溶解於甲醇中（濃度為1毫克/毫 升）。於該溶液53微升中’加入1莫耳/升的鹽酸75微升、224 〜253MBq的[1231]碘化鈉60〜70微升、1毫莫耳/升的碘化鈉溶液 10微升、10%(W/V)過氧化氫*15微升。將該混合液放在50°C靜置 10分鐘後，依照與實施例3相同條件的高效能液相層析法，將 [123I]-IMPY的析離部份（什actionation)分離取出。 53 200922629 【0095] * 於該析離部份加入水10笔升’放入逆相管柱（商品名：

Sep-Pak〔商標登錄〕Light C8 Cartridges，Waters 公司製造， 充填劑之充填量：145毫克）作為沖提液’將[⑵uhmpy吸附捕集 於該管柱。用1毫升水洗淨該管柱後，以二乙基醚作為沖提液， 將[123i]-impy溶出。所得到之放射能量在剛合成時係41〜57MBq; 又，進行與實施例3相同條件的薄層色層分析法，其放射化學的 純度係93%。 [0 0 9 6] (實施例7、比較例1〜3)澱粉樣蛋白親和性之測定 本發明化合物之澱粉樣蛋白親和性，藉由以下之生體外（Ή vitro)結合試驗加以判定。 [0 0 9 7] ⑴將砂―42 (和光純藥工業製造）溶解於填酸緩衝液（酸 驗值7· 4)，在抓紐小時’得到1毫克/毫升之已凝集A Μ以下於本實施例’稱為ή澱粉樣蛋白」）懸濁液（以下於本實 施例’稱為「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 200922629 [0098] (2)關於前述澱粉樣蛋白懸濁液，依照文獻《％iki，Η.等 人、Laboratory Investigation.包、頁 374-383(1996)》記載的 方法’藉由使.用硫黃素T (thiof lavin T，Fluka公司製造）之螢 ..! 光光度測定法，進行定性實驗，用來確認在（1)所得到之凝集化

AyS係澱粉樣|白（測定條件：激發波長446奈米（nm)、螢光波長 490奈米）。 【0099] (3)依照文獻《Wang，Y.等人、j. Labeled Compounds Radiopharmaceut. U, S239 (2001)》記載的方法，將 2-(4，-氨基苯基）苯並嘆嗤（2-(4’ -aminophenol) benzothiazole)作 為標示前驅物，調製[1251]2-(3，-碘-4, _氨基苯基）苯並噻唑 ([1251]2-(3，-iodo-4，-aminophenol)benzothiazole;以下稱 為「[1251] 3’ -Ι-ΒΤΑ-0」），溶解於乙醇中。剛果紅（c〇ng〇red)、 硫黃素 T (thioflavinT)、及 6-甲基一2-[4, -(N，N-二曱基氨基) (6-raethyl-2- [4J -(N,N_ dimethyl amin〇)Phenyl] benzothiazole ;以下稱為「6_鼢—BTA—2」），可以 將市售試藥商品就其原樣秤量使用。 55 【0100] 200922629 (4)依照文獻《Zhuang，Ζ·Ρ.等人、J.Med· Chem.錯， 237(2003)》記載的方法，合成iMPY。 【0101] (5)各待評價化合物或其乙醇溶液、前述（3)所調製之卜^] 3 -I-ΒΤΑ-0之乙醇溶液、以及前述（1)所調製之澱粉樣蛋白懸 濁液’>谷解於含1%牛血清白蛋白之磷酸缓衝液（酸鹼值7. 4)，各 待判定化合物、[既丨]3，—UTA O、及澱粉樣蛋白的最後濃度， 各別調製成如附表2所記載之濃度的試樣。 » 0 10 2 【表2】 匕合物的最後濃度 實驗 評價化i 物 比較例 1 剛果紅~ 比較例 2 硫黃素 比較例 _3__ ΙΜΡΥ 實施例 η 卜化合物广 1 各 ~~~ 0'0-001 - 0.01 - 0.1 > 1； 10 ： 100 . 1〇〇〇 毫微莫耳/公升 (nm〇l/L) [1251]3，-Ι-ΒΤΑ-0 濃 度 400微微莫耳/公升 (pmol/L) 澱粉樣蛋 白 1微莫耳/公 升(V mol/L) Γ0103] (6)將則迷（5)所調製之各試樣溶液充填到96孔微量板上 的各小井（容量約n Q古， υ· 3¾:升）中。已充填試樣溶液的微量板在22 56 200922629 °C用固定速度（400轉/分鐘·）震盪3小時以後，藉由將各試樣溶 液用玻璃纖維過滤益（glass fiber fiIter，商品名：Mulutiscreen ™—FC’Milipoa公司製造）過濾，把與澱粉樣蛋白結合的[125ι] 3’ -Ι-ΒΤΑ-0及未與澱粉樣蛋白結合的[125ι]3，-ΐ-βΤΑ-〇分離開來。 【0104】 (7)各試樣溶液過濾所用的玻璃纖維過濾器，用含有〇1% 牛血清白蛋白的磷酸缓衝液（酸鹼值7.4)洗淨（0. 5毫升Χ5次）， 玻璃纖維過;慮器之放射能量，.用自動小井·伽碼系統（1 . r system，型式：ARC-301B，Aloka公司製造）測定（以下，各評 價化合物濃度是〇的試樣之放射能量當作A;各評價化合物濃度 是〇. 001毫微莫耳/公升以上之試樣的放射能量當作B)。 【0105】 ⑻另外’調製成15微莫耳（_〇1)/公升的6_Me_BTA_2 洛液、400微微莫耳(pm〇l) /公升的[1251]3，-Ι-ΒΤΑ-0溶液、1微 莫耳（#mo1)/公升的澱粉樣蛋白溶液，進行與前述（6)及（7) 相同的作業’測定輯能量。所求得的放射能#作為背景放射能 量，用在計算阻礙率（以下，當作「阢」）。 57 【0106】 200922629 (9)應用前述（7)及（8)所測定到之放射能量，藉由下列 數學公式（1) 求出阻礙率。 [0107] 【數1】 匐丨 I Α~β〇

xlOO (%) [0108] 所得到的阻礙率轉換為正規分布的概率單位（pr〇bit)後之 值，將該值相對於評價化合物濃度之對數做點記（plot)作成圖 形（graph)、以最小平方法做成近似直線。應用此直線，求出各 評價化合物的50%阻礙濃度（以下稱為rICm值」）。將此值作為指 楳來使用’評定各評價化合物的澱粉樣蛋白親和性。 [0109] · 各評價化合物之1C5。%值顯示於附表3。化合物3，顯示不到 100的IG⑽值，和〆般已知具有澱粉樣蛋白親和性的剛果紅和硫黃 素T比較，顯示有意義的咼度殿粉樣蛋白親和性。從這個結果， 化合物3 ’與IMPY相同’呈現良好的殿粉樣蛋白親和性。 58 200922629 【0110】 【表3】 表3 本發明化合物的IC5w值 宙於 貫驗 評定化合物 比較例1 剛果紅 比較例2 硫黃素T 比較例3 IMPY 實施例7 ~ 化合物3 JC5〇%fji(ninol/L) >1000 Tiooo oil (實施例8〜9、錄例4)使用辛醇（〇ctan〇1)抽出法的分配係 數之測定 【0112】 使用一般所知的辛醇（octanol)抽出法測定得到之分配係數 (以下稱為「l〇gP〇ctaTOl」），作為化合物之腦血液障壁（brain bl〇〇d barrier，以下稱為「BBB」）透過性的指標。 [0113] 實施例3所調製之化合物1的二乙基醚溶液（實施例8)、實 施例6所調製之化合物2的二乙基醚溶液（實施例9)、以及參考 例1所调製之[123I]-IMPY的二乙基醚溶液（比較例4)，分別在含 10毫克/毫升抗壞血酸之生理食鹽水中稀釋，調製成放射能濃度 為20〜30 MBq/毫升。調製完成之試樣溶液各1〇微升，分別加入 59 200922629 到2毫升辛醇（〇ctan〇l)中，然後加入10毫莫耳/公升磷酸緩 衝液（酸鹼值7. 4) 2毫升，攪拌30秒鐘。將混合液用低速離心 機（2000轉/分X60分鐘）離心分離後，辛醇層與水層分別取工 毫升’在自動小井·伽碼系統（Cowell · rSyStem ;型式： ARC-301B，Aloka公司製造）測計個別的放射能讀數。利用所得到 之放射能讀數，從數學公式（2)，算出l〇gpTCtanc)1值。 【0114】 ' 【數2】 ^08^eCUBI〇/ = k>gi〇 辛醇層放射能讀數 放射能讀數 【0115】 將結果顯示於表4。相關之任一化合物的，顯示 係1〜3之間的值。關於可能通過BBB的化合物方面，已知係 logP〇ctaiwl值為 1 〜3 之間的值,《D〇uglasD· Dischin〇 等人， J. Nucl. Med.，（1983)，24，頁 1030-1038》。從以上結果，顯示此 二化合物，與IMPY相同，具有ββΒ通過性。 [0 116] 【表4】 表4 本發明化合物之1 〇gp octanol 值^ 200922629 實驗 化合物 lOgPoctano丨値 比較例4 [123Π-ΙΜΡΥ 1.9 實施例8 化合物1 1.8 實施例9 化合物2 2.1 [0117] (實施例10〜11、比較例5)腦部滲移性及廓清力的測定 【0118】 » 用化合物1 (實施例10)及化合物2 (實施例11 )，測定雄性 威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）相關之腦部放射能集積的隨 時間之變化。 【0119】 實施例3所調製之化合物1的二乙基醚溶液（實施例1〇)、實 轭例6所調製之化合物2的二乙基醚溶液（實施例11)、以及參考 例1所調製之[123I]-IMPY的二乙基醚溶液（比較例5)分別在含有 1〇毫克/耄升抗壞血酸（ascorbic acid)的生理食鹽水中稀釋， 調正成放射能濃度為8〜12 MBq/毫升。所調製完成之試樣溶液 毫升’分別從被硫苯妥（也丨〇口印切1，一種短效麻藥） 麻醉的前述大鼠（7週大) 的尾靜脈注射到體内。投與後2分鐘、 刀麵30分鐘、6〇分鐘，從腹部大動脈抽血後，摘取腦部，測 &的質量。並且用單頻分析儀（single channel analyzer ;檢 測器型號· eD ΟΛ ^ 〜· SP-20，應用光研工業公司製造）測計腦的放射能（以 61 200922629 下，在本實施例，以A表示）。然後，用同樣的方法測定殘留全 之放射能量（以下，在本實施例，以B表示）。應用這些測定結果， 從下列數學公式（3) ’算出在各解剖時咖上，_單位重 相當的放射能分布率（％ID/g)。 還有，在各時間點’同時使用3隻動物進行實驗。 [0120] 【數3】

A

Bx腦的質量 xioo *·· (3) 【0121】 其結果顯示於表5。如表5所示，化合Μ及 ™附相同，在投與後2分鐘的時點，確認雜高的放射^ 集積，其後到it 60分鐘時，則顯 月匕 果，咖及化合物2，和師 部滲移性及快速從腦部的廓清力——樣，顯示具有报高的腦 [0122] 【表5】 表5 本發明化合物靜 脈注射後H部放射能分布率 (大鼠） 62 200922629 化合物 單位重量 听相當的放条 : f能分布率（％ro/g) 2分鐘後 5分鐘後 3〇分鐘後 60分鐘後 實施例10 化合物1 0.90 0.52 0.06 0.01 實施例11 化合物2 0.89 0.66 0.13 0.04 比較例5 [123I]-IMPY 1.19 0.97 0.23 0.09 【0123】 (實加例6)利用注入殿粉樣蛋白的模型大鼠（m〇del rat)之 [123I]-IMPY 的活鍾外（ex vivo)自動射線攝影（autoradi〇gram) 【0124】 (1)將A /3 b4〇(胜肽研究所製造）溶解於磷酸緩衝液（酸鹼值7.4)， 在37C振盪72小時’得到1毫克/毫升之凝集A/5懸濁液（以下， 於本實施例’稱為「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 【0125】 ⑵在雄性戚斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）的單側扁桃腺， 注射前述澱粉樣蛋㈣職2.5微升（相# 25微克）；作為對照 組，係另-側的扁桃腺，注㈣酸緩衝生理食鹽水（酸驗值7. 4) 2. 5微升。注射；殿粉樣蛋白懸濁液和鱗酸緩衝生理食鹽水（酸驗值 7.4) 1日後，將大鼠做成檢體。 【0126】 ⑶將ΠΗΜΡΥ畴於含有10毫克/毫升抗壯酸的生理食 63 200922629 鹽水中，當作試樣溶液（試樣溶液中的放射能濃度29 MBq/毫 升）。將此溶液従被硫笨妥麻醉的前述大鼠尾靜脈注射到體内（投 與量：0. 5毫升，投與後之放射能：相當14. 5 MBq)。 【0127】 ψ (4)技與60分#里後將腦部摘取出來，用切片機（型式：， 萊卡公司製造）製作成厚度1G微米的腦切片。將該腦切片放在影 像板（imaging plate )上使其曝光2〇小時以後，使用生物影像 分析儀（型式：BAS-25GG，富士照相底片公司製造）進行圖像解 析0 【0128】 (5)使用生物影像分析儀進行前述圖像解析結束以後，藉由硫黃 素T做病理染色、使用螢光顯微鏡（型式：了圓㈣型，紙〇n 公司製造；激發波長：400〜440毫微米、檢測波長：47〇亳微米） 做出影像，確織粉樣蛋白在該切片上沉積的情形〔圖五b〕。· 【0129】 澱粉樣蛋白注入腦内的大氣的腦切片之自鋪線攝影

Uut〇radiogram)及硫黃素τ染色的影像顯示於圖五。如該圖所 不’在注續粉樣蛋_之扁桃腺，雖__確的放射能集積， 64 200922629 但是沒纽錢粉樣蛋白的腦白f，也可以看到有雜異性的集 接。 【0130】 (實施例12)雎部溉粉樣蛋白描現的確認 [0131] 為了砰價本發明之化合物能否描現腦部澱粉樣蛋白，進行以 下實驗。 【0132】 (1) 將A/9w2 (和光純藥工業製造）溶解於罐酸緩衝液（酸鹼值 7. 4)在37 C振盪72小時，得到1毫克/毫升之凝集懸濁液 (以下於本實施例，稱為「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 【0133】 (2) 在雄性威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）的單側扁桃腺， 注射前述澱粉樣蛋白懸濁液2 5微升（相當25微克）；作為對照 者，係另一侧的扁桃腺，注射磷酸缓衝生理食鹽水（酸鹼值7. 4) 2. 5微升。注射澱粉樣蛋白懸濁液和磷酸緩衝生理食鹽水（酸鹼值 7.4) 1日後，將大鼠做成檢體。 65 200922629 【0134】 (3) 將化合物1溶解於含有ι〇毫吞 笔兄/笔升抗壞血酸的生理食鹽 水中’當傾樣驗（試樣溶液中之放射能濃度娜心毫升 將此溶液從前制硫耗鱗的大鼠尾靜驗_大鼠體内（投 與量15 €升，投織之放概：相當u〜13 _)。 [0135] (4) 投與60分鐘後將腦部摘取出來，用切片機（型式：CM3〇5〇s， 萊卡公司裝造）製作成厚度10微米的腦抓。將該腦切片放在景多 像板（imaging plate)上使其曝光2〇小時以後，使用生物影像 分析儀（Bioimaging analyzer，型式：BAS-2500，富士照相底片 公司製造）進行圖像解析。· 【0136】 (5) 使用生物影像分析儀進行前述圖像解析結束以後，以硫黃素 T做病理染色、使用螢光顯微鏡（型式：TE2〇〇〇—u型，Nikon公司 製造；激發波長：400〜440毫微米、檢測波長：470毫微米）做 出影像’確認殿粉樣蛋白在該切片上沉積的情形〔圖六b〕。 66 【0137] · 200922629 殿粉樣蛋白注入腦内的大鼠的腦切片之自動射線攝影 (autoradiogram)及硫黃素T染色的影像顯示於圖六。如該圖所 示’在注入殿粉樣蛋白的-側扁桃腺，看到明確的放射能集積。 另-方面，在靖生理食鹽水之-側扁桃腺，和其他部位比較， 無法確認有意義的放射能缝。又，該自崎線攝影方面，殿粉 樣蛋白注入部位以外的放射能集積，幾乎看不到。還有，從硫黃 素T染色的結果，放·_雜存在有澱粉樣蛋㈣事實，〇 以確認〔圖六〕。 【0138】 如上所示，化合物丨在澱粉樣蛋白注入部位以外部位，幾乎 看不到相關放射能集積，如同在[123ΙΗΜργ所見，也幾乎看不到 ，腦白質的麵異性結合^從這個結果，化合物丨，在自動射線攝 影的影像全部，具有很高的澱粉樣蛋自描現能力。從以上結果來 看化5物1顯示係在描現腦内殿粉樣蛋白方面有报高特異性的 化合物。 【0139】 (實施例13)觸部澱粉樣蛋白描現的確認 67 【0140】 200922629 將化合物2溶解於1G亳克/毫升的抗壞血酸溶液所成之溶液 作為試樣練（試樣溶財的放射能濃度25 _/毫升）來使用 以外，其他進行與實施例12相同的操作。 ψ 【0141】 澱粉樣蛋白注入腦内的大氣的腦切片相關之自動射線攝影 一(a_radiQgram)及硫黃射_色的影像顯示於圖七。如該圖所 不，在注人殿粉樣蛋_的—側扁桃腺，看卿確的放射能 集積。又’從放射能集積部位的硫黃素τ染色的結果，確認在該 部位存在核錄蛋自。另—方面，纽魅騎财之一側扁 桃腺’和其他部位比較，無法確認有意義的放射能集積。 ψ 【0142】 化合物2方面，澱粉樣蛋白注入部位以外的部位，雖然多少 可=看到放射能集積，但該集積情形，和ΓιΗΜργ比較起來， 相當％到抑制。這個結果，顯示在影像全部有較高的澱粉樣蛋白 描現能力。 從以上結果來看，顯示化合物2係在描現腦内殿粉樣蛋白方 面有报高特異性的化合物。 68 【0143】 200922629 (實施例14)2-[3’ -(2” -幾基乙氧基)苯基]-6-球味嗅並[i,2-a] 吡啶（2-[3’ -(2” - hydroxy ethoxy)phenyl]-6、ioci〇 imidazo [l，2a]pyridine)《非放射性破化合物》之合成 【0144】 溴化銅（CuBn) 8. 60公克（相當46. 0毫莫耳）中加入醋酸 乙酯（e^thyl acetate) 50毫升，使其懸濁。懸濁液中再加入3，- 經基乙酿苯（3，-hydroxyacetophenone) 2. 50 公克（相當 22. 〇 毫莫耳），進行加熱回流。2小時以後，將反應液冷卻至室溫，進 行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋酸乙酯，加入活性碳 進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到的粗生成物，用快速 石夕凝膠管柱色層分析法（flash silicagel column chromatography )(溶離液：己院/醋酸乙酯=2/1)加以精辑， 得到2-漠-3’ -羥基乙醯苯（2-1)1'〇111〇- 3’ -hydroxyacetophenone)4. 42 公克（相當 20. 6 毫莫耳）（圖八、 作業一）。 【0145】 將2-溴-3’ -羥基乙醯苯987毫克（相當4. 55毫莫耳）和2-氨基-5-姨°比咬（2-amino_5-iodopyridine) 1. 00 公克（相當 4. 55 毫莫耳）溶解於50毫升乙腈（acetonitrile)中，在U〇°C油洛 69 200922629 加熱回流2小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過遽分離 沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結晶懸 浮於10毫升水和1毫升曱醇之混合液中’於該懸濁液中加入約 10毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從所得 到之混合物過滤分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾燥·， 得到2-(3’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-（3， -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo[l，2-a]pyridine) 927毫克（相當2.76毫莫耳）〔圖八、作業二〕。 【0146】 r 另外一途’將2-溴乙醇（2-bromoethanol) 2. 50公克（相當 20. 0毫莫耳）和味吐（imidazole) 2. 72公克（相當40. 〇毫莫耳） 溶解於二曱基曱醯胺（dimethyl formamide ; DMF)中，冷卻至〇 C後’加入特-丁基二苯基氯石圭烧（t-butyldiphenyl chlorosilane ; TBDPSC1) 5. 50 公克（相當 20. 0 毫莫耳）。將反應 混合物在室溫中授拌18小時以後，加入飽和氣化納水溶液，用醋 酸乙酯進行抽提3次。合併醋酸乙酯抽提液，用無水硫酸鈉乾燥 後、減壓濃縮之，所得到之粗生成物用矽凝膠管柱色層分析法（溶 離液.己烧/醋酸乙醋= 10/^1)進行精製，得到1—漠-2-(特丁基 一本基曱娃烧氧基）乙燒（l-bromo-2-(t-butyldiphenylsiloxyl) ethane) 7·04公克（相當19.4毫莫耳）〔圖八、作業三〕。 200922629 【0147】 - 將2-(3’ -羥基笨基)-6-碘咪唑並[1，2-a]吡啶300毫克（相 當0.893毫莫耳）溶解於5.0毫升二甲基甲醯胺中，加入370毫 克（相當2. 68毫莫耳）碳酸鉀之後，再加入1-溴-2-(特-丁基二 苯基甲石i燒氧基）乙烧（l-bromo-2-(t-butyl diphenyl siloxyl) ethane) 357毫克（相當〇. 982毫莫耳）。將反應混合物在90°C攪 拌2小時以後，加入飽和氯化鈉水溶液，用醋酸乙酯進行抽提3 次。合併醋酸乙酯抽提液，用無水硫酸鈉乾燥後、減壓濃縮之， 所得到之粗生成物用矽凝膠管柱色層分析法（溶離液：己烷/醋 酸乙酯= 3/1)進行精製，得到2-[3’ -(2” -特-丁基二苯基甲硅 烧氧基乙氧基）苯基]-6-蛾啼β全並[1，2-8]°比咬 (2-[3， -(2” -t-butyl diphenyl siloxyl ethoxy) phenyl]-6-iodo-imidazo[l，2-a]pyridine)477 毫克（相當 〇. 771 毫莫耳）〔圖八、作業四〕。 【0148] 將2-[3’ -(2” -特-丁基二苯基曱硅烷氧基乙氧基）苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶477毫克（相當0.771毫莫耳）溶解於0.98 毫升四氫吱喃（tetrahydrofuran)中，加入1. 〇莫耳/升的氟化 四丁基銨（tetrabutylammonium fluoride ; TBAF)之四氫咬喃溶 71 200922629 液ο.93毫升。在室溫下攪拌还分鐘後，加入氯化錢水溶液，繼 續加入水5· 0冑升和乙腈2. 〇毫升，析出的沉澱物分別過滤。過 慮出來的 >儿澱物依照水、乙腈的順序加以洗淨，得到2_ [ 3，-(2” -經基乙氧基）本基]-6-峨味。坐並[i，2-a]ji比π定（2-[3，_ (2 -hydroy ethoxy)phenyl]-6-i〇d〇 imidazo[l, 2-a]pyridine) 120毫克（相當0.316毫莫耳）〔圖八、作業五〕。 【0149】 所得到之2-[3, -(2” _手基乙氧基）苯基]_6_碘咪唑並 [l，2-a]吡啶的核磁共振測定結果（内部標準物質：四曱基硅烷）， 如下所示。 [0150] 使用的核磁共振褒置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） H-NMR(溶劑：重二甲基亞砜、共振頻率：5〇〇MHz):占8. 9i (s， 1H)，8.35(S，1H)，7.52-7.51(m，2H)，7 45 (s，2H)’， 7.35 ( t’ /= 8.2 Hz’ 1H )，，6.93-6.90 ( m，1H )，4 〇6 ( t， /= 4.6 Hz, 2H )>3.75 ( t, /= 4.6 Hz, 2H )〇 【0151】 (實施例15)6-三丁基甲雜基-H3’ —(2” _趣紅氧基)苯基] 72 200922629 味吐並[l，2-a]e比咬（6-tributyl stannyl-2-[3’ -(2” -hydroxy ethoxy)phenyl]imidazo[l，2-a] pyridine)之合成 【0152] 在實施例14所得到之得到2-[3’ -(2” -羥基乙氧基）苯 基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶（2-[3，-(2” -hydroyethoxy)phenyl]-6-iodo imidazo[l, 2-a]pyridine) 70 毫克（相當0.184毫莫耳）溶解於4. 0毫升二噁烷（dioxane)， 加入三乙胺2. 0毫升後，再加X雙(三丁基錫）〇. 20毫升(相當0. 39 毫莫耳）和催化劑數量之四個（三苯基膦）化把（tetrakis (triphenyl phosphine)palladium(O)) 14. 0 毫克。將反應混合物 在90°C攪拌20小時後，減壓下將溶劑蒸餾除去，把殘渣用快速矽 凝膠管柱色層分析法（溶離液：己院/醋酸乙酯=2 / 1)加以精 製’得到6-三丁基甲錫烧基-2-[3’ -(2” -經基乙氧基）苯基]咪唾 並[l，2-a]吡啶（6-tributyl stannyl-2- [3，-(2” -hydroxy ethoxy) phenyl] imidazo[l，2-a] pyridine) 73. 0 毫克（相當 0.134毫莫耳）〔圖九、作業二〕。 【0153】 所得到之6-三丁基甲錫烧基-2-[3’ -(2，，~羥基乙氧基）苯基] 咪唑並[1，2-a]吡啶的核磁共振測定結果（内部標準物質··四曱基 73 200922629 硅烧），如下所示。 【0154】 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） $一NMR (溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz): 5 7· 99 ( d j =0.9Hz，1H)，7.82(S，lH)，7.64-7.50 (m，3H)，7.34、7 31 (m，1H )，7.18-7.17 ( m，1H ) ’ 6. 90-6. 87 ( m，iH )，4. 2〇 (t，/= 4. 3 Hz, 2H )，3. 98 ( t，/= 4. 3 Hz，2H )，l. 694 48 (m’ 6H )，1. 39-1. 32 ( m，6H ) ’ 1.19-1. 05 ( m，6H )，〇. 91 (t，/ = 7. 4 Hz, 9H )。 【0155】 (實施例16)2-[3’ -(2” -羥基乙氧基)苯基]_6-[123I]碘味唾並 [l，2-a]°ifc咬（2-[3’ -(2” -hydroxy

ethoxy)phenyl]-6-[123I]iodo imidazo[l，2-a] pyridine)之合成 【0 15 6】 I 將6-三丁基甲竭炫基-2-[3’ -(2” -羥基乙氧基）笨基]坐 並[1，24]吡唆（6-tributyl stannyl-2-[3’ -(2” -hydroxy . ethoxy)phenyl]imidazo[l，2-a] pyridine)溶解於甲醇/二曱基 亞砜=9/1的混合液所成之溶液（濃度為1毫莫耳/毫升）60微 74 200922629 升中，加入1莫耳/升的鹽酸150微升、1毫莫耳/毫升的碘化納 15微升、274MBq的[1231]碘化鈉250微升、l〇%(W/V)過氧化氫15 微升。將该混合液在50 C靜置10分鐘後’依照以下條件的高效能 液相層析法（HPLC)’將2-[3’ -(2” -羥基乙氧基)苯基] 峨口米嗤並[l，2-a]°ita定（2-[3 -(2” -hydroxyethoxy) phenyl]-6-[123I ]iodo imidazo[l，2-a] pyridine)的析離部份分 取出來。 【0157】 高效能液相層析法（HPLC)條件： 管柱：Phenomenex Luna C18 (商品名，Phenomenex 公司製造； 尺寸：4. 6X150毫米） 移動相：含有0.1%三氟乙酸的水/含有〇. 1%三氟乙酸的乙腈 = 80/20 — 0/100 (17 分鐘） 流速：1.0毫升/分鐘 檢測器：紫外光可見光吸，光光度計（檢測波長：282奈米）及 放射線檢測器（raytest公司製造、STEFFI型） 【〇158】 於該析離部分加入水10毫升後’把該液體放入逆相管柱（商 品名：Sep-Pak〔商標登錄〕Light C18 Cartridges，Waters 公 75 200922629 司製造，充填劑之充 : 145毫克）中作騎提液，將2_[3, -C2” -經基乙氧基)苯基]|[,]峨咖坐並[丨，2—小喊吸著捕集 於該管柱。用1毫升水洗淨該管柱後，再用1毫升二乙基醚沖提， 使2-[3, -(2” -經基乙氧基)苯基]_6—ri]蛾咪嗤並[ua]吡 咬溶出’所得到的放射能量在剛合成後係112. _q。又，依據以 下條件’進行薄層層析法（TLC)分析時，其放射化學純度係 97· 0%。 [0159] 薄層層析法（TLC)分析條件： TLC層析板：Silica Gel 60 F254 (商品名，Memku公司製造） 展開相：氣仿/甲醇/三乙胺= 100/1/2 檢測器·· Rita Star (商品名，raytest公司製造） 【0160】 (實施例17)2-[4’ -(3，，-羥基丙氧基)苯基]_6_碘咪唑並[12_&] 地咬（2_[4 -(3 -hydroxy pr〇p〇xy) phenyl]-6-iodo inudazo[l，2-a] pyridine)《非放射性碘化合物》之合成 【0161】 漠化銅（CuBn) 28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 76 200922629 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸濁。懸濁液中再加入溶解 有8.18公克（相當60. 〇毫莫耳）之4，-羥基乙醯苯（4， -hydroxyacetophenone)的50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿混合 液，進行加熱回流。5小時以後，將反應液冷卻至室溫，進行過濾， 將慮液減壓濃縮之。殘潰溶解於醋酸乙g旨，加入活性碳進行脫色 後，過滤溶液、將其濃縮。所得到的粗生成物，用快速石夕凝膠管 柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)(溶 離液：氣仿/甲醇= 20/1)加以精製，再從醋酸乙酯—石油醚進 行再結晶，得到2-溴-4’ -羥基乙醯苯（2-bromo- 4’ -hydroxyacetophenone) 7. 25 公克（相當 33· 7 毫莫耳）〔圖十、 作業一〕。 【0162】 將2-溴-4’ -經基乙醯苯987毫克（相當4. 55毫莫耳）和2-氨基-5-碘吡咬（2-amino-5-i.odopyridine) 1. 00 公克（相當 4. 55 毫莫耳）溶解於50毫升乙腈（acetonitrile)中，在li〇°c油浴 加熱回流2小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過濾分離 沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結晶懸 浮於10毫升水和1毫升曱醇之混合液中，於該懸濁液中加入約10 毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從所得到 之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾燥，得 77 200922629 到2-(4，_經基苯基)-6-峨咪唾並[i，2-a]n比咬 (2-(4J -hydroxyphenyl)-6-i〇d〇-imidazo[l, 2-a]pyridine) 927毫克（相當2· 76毫莫耳）〔附圖十、作業二〕。 【0163] 另外一途，將 3-溴-1-丙醇（3_bromo-l-propanol) 7. 0 公克 (相當50.4毫莫耳）和咪唾’（imidaz〇le) 6.86公克（相當101 宅莫耳）溶解於二曱基曱醯胺（dimethyl f〇rmamide ; MF) 5〇 宅升中，冷卻至o°c後，加入特-丁基二甲基氣娃烷（t_butyl · dimethyl chlorosilane) 7·59 公克（相當 50·4 毫莫耳）。將反應 混合物在室溫中攪拌24小時以後，加入飽和氯化鈉水溶液，用二 乙基嶋行抽提3次。合併二乙基曝提液’聽水硫酸鈉乾燥 後、減壓濃縮之，所得到之粗生成物用減壓蒸餾法（1〇〇乞、 毫米汞柱）進行精製，得到1-溴-3-(特-丁基二曱基曱硅烧氧基） 丙烷（l-bromo-3-(t-butyld，imethylsiloxyl) propane) 7. 23 公 克（相當30. 2亳莫耳）〔圖十、作業三〕）。 【0164] 將2_(4 —經基笨基)-6-碘咪唑並[1，2-a]吡啶2. 00公克（相 當5. 95毫莫耳）溶解於30.0毫升二甲基甲酿胺中，加入2. 47公 克（相當17. 9亳莫耳）碳酸鉀之後’再加入1-溴-3-(特-丁基二 78 200922629 甲基曱石i烧氧基）丙烧（l-bromo-3-(t-bntyldiinethylsiloxyl) propane) 1. 51公克（相當5. 95毫莫耳）。將反應混合物在室溫攪 拌8日以後，加入飽和氣化鈉水溶液，用醋酸乙酯進行抽提3次。 合併醋酸乙酯抽提液，用無水硫酸納乾燥後、減壓濃縮之，所得 到之粗生成物用矽凝膠管柱色層分析法（溶離液：己烷/醋酸乙 酯= 1/1)進行精製，得到2τ[4’ -(3” -特-丁基二曱基曱硅烷氧 基丙氧基）笨基]-6-蛾咪〇坐並[1，2-&]吼咬（2-[4’-(3”-1：-131^1 dimethyl siloxyl propoxy) phenyl] -6-iodo-imidazo[l，2-a]pyridine)l· 52 公克（相當 2. 99 毫莫耳） 〔圖十、作業四〕。 [0165] 將2-[4’ -(3” -特-丁基二曱基曱硅烷氧基丙氧基）苯基]-6-硤咪唑並[1，2-a]吡啶1· 52公克（相當2. 99毫莫耳）溶解於5. 00 毫升四氫吱喃（tetrahydrofuran)中，加入1. 〇莫耳/升的氟化 四丁基銨（tetrabutylammonium fluoride ; TBAF)之四氫吱喃溶 液2. 99毫升。在室溫中攪拌30分鐘後，加入氣化銨水溶液，繼 續加入水10毫升和乙腈5.0毫升，將析出的沉澱物過濾分離出 來。過濾出來的沉澱物依照水、乙腈的順序加以洗淨，得到 2-[4’ -(3” -羥基丙氧基）苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶（2-[4’ - (3” -hydroy 79 200922629 propoxy)phenyl]-6-iod〇-imidazo[l，2-a]pyridine) 1. 03 公克 (相當2· 61毫莫耳）〔圖十、作業五〕。 [0166】 所得到之2-[4，-(3” _羥基丙氧基）苯基]—6-蛾p米〇坐並 [l，2-a]吡啶的核磁共振測定結果（内部標準物質：四曱基硅烷）， 如下所示。 【0167】 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） W-NMR (溶劑：重二甲基曱醯胺[dimethylformamide]、共振 頻率：500MHz) ·· (5 8. 96 ( s，1H )，8. 33 ( s，1H )，7. 98 ( d， J= 8.7 Hz, 2H ) > 7.46 ( s, 2H ) » 7.06 ( d, J= 8. 7 Hz, 2H ) > 4. 63 ( t, / = 5. 0 Hz, 1H ) » 4.17 ( t, / = 6. 0 Hz, 2H ) > 3. 72 ( dt，/ = 5, 0，6. 0 Hz, 2H )，1. 98 ( tt，/ = 6. 0，6. 0 Hz，2H )。 [0168] (實施例18) 6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -(3” -羥基丙氧基)苯 基]-味峻並[l，2-a]°rti咬（6-tributyl stannyl-2-[4’ -（3” -hydroxy propoxy)phenyl]-imidazo[l, 2-a] pyridine)之合成 200922629 【0169】 溴化銅（CuBn) 28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸濁。懸濁液中再加入溶解 有8.18公克（相當60.0毫苺耳）之4，-羥基乙醯笨（4， -hydroxyacetophenone)的50毫升醋酸乙酯和5〇亳升氣仿混合 液’進行加熱回流。5小時以後’將反應液冷卻至室溫，進行過濾， 將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋酸乙酯，加入活性碳進行脫色 後，過濾溶液、將其濃縮。所得到的粗生成物，用快速矽凝膠管 柱色層分析法（溶離液：氣仿/甲醇= 20/1)加以精製，然後從 醋酸乙S旨-石油鍵進行再結晶’得到2_演_4 -經基乙酿苯 (2-bromo- 4’ -hydroxyacetophenone) 7. 25 公克（相當 33 7 毫莫耳）〔圖十一、作業一〕。 9 [0170] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯2.15公克（相當1〇.〇毫莫耳）和 2-氨基-5-溴吼咬（2-amino-5-bromopyridine) 1.74 公克（相當 10. 0毫莫耳）溶解於50毫升乙腈（acetonitrile)中，在丨〇5。〇 油浴加熱回流6小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過濟 分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結 晶懸浮於20毫升水和20毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加 200922629 入約25亳升飽合碳酸举鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從 所得到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨沉澱物，減壓下 使之乾燥’知到6-漠-会—(4 -經基苯基)0米。坐並[i，2_a]n比咬 (6 bromo 2 (4 -hydiroxyphenyl) -iraidazo[l, 2-a]pyridine) 2·41公克（相當8.32毫莫耳）〔圖十一、作業二〕。 【0171】 將充分乾燥移除水分的6-溴-2-(4，_羥基苯基)咪唑並 [1’2—a]n比唆L45公克（相當5.0毫莫耳）溶解於50毫升N，N- 一甲基曱醯胺中’再加人碳酸卸2. 07公克（相當15· G毫莫耳）， 溶液中加入3-溴一1一丙醇（3一br〇m〇—i_pr〇pan〇i )68〇微升（相 ° 毫莫耳），至溫下攪拌17小時。反應結束後，將反應液注 入水中，用氣仿進行抽提3次。合併氯仿抽提液，用飽和食鹽水 洗淨後’再用無水硫_乾燥、聽、濃縮之，所制之粗生成 物用曱醇進行再結晶’得到6贵2_[4’ _(3” _經基丙氧基)苯 ]米上並[l，2a]n比咬（6_brom〇_2—[4，-(3，，-hydroxypropoxy) 1)1^1]11111(^0[1’2—&^_此）1.28公克（相當3.67毫莫 耳）〔圖十一、作業三〕。 【0172】 6 /臭2 [4 -(3 -經基’丙氧基）苯基]—咪嗤並[i,2_a]„比咬 82 200922629 100毫克（相當0.288毫莫耳）溶解於4.0毫升二噁烷（dioxane)， 加入三乙胺2. 0毫升後’再加入雙(三丁基錫）0. 22毫升(相當〇. 43 毫莫耳）和催化劑數量之四個（三苯基膦)化把（tetrakis (triphenyl phosphine)pallqdium(O)) 22· 0 毫克。將反應混合物 在90°C攪拌24小時後，減壓下將溶劑蒸餾除去，把殘渣用快速 矽凝膠管柱色層分析法（溶離液：己烷/醋酸乙酯= 3/1)加以 精製’得到6-三丁基甲錫烷基-2-[4, -(3，，-羥基丙氧基）苯基] 咪唑並[l，2-a]吡啶（6-tributyl stannyl-2-[4，-(3，，-hydroxy propoxy)phenyl] imidazo [l，2-a] pyridine) 68. 0 毫克（相當 0.122毫莫耳）〔圖—、作業四〕。 【0173] » 所得到之6-三丁基甲錫烷基—2_[4, —(3” _羥基丙氧基）苯基] 味吐並[l’2-a；hb啶的核磁共振測定結果（内部標準物質：四曱基 石圭炫》)，如下所示。 【0174] 使用的核磁共振裝置：jNM__ECp_5〇〇 (日本電子公司製造） H-NMR (溶劑：重氣仿、共振頻率：500MHz): 3 7. 97 ( s，1Η )， 7. 88 ( d, / = 8> 3 Hz, 2H ) ^ 7. 74 ( s, 1H ) » 7. 58 ( d, J = 8. 3 HZ’ 1H )，7.14 ( d，/ = 8. 7 Hz，1H )，6. 98 ( d，h 8.7 83 200922629

Hz，2H )，4.18 ( t，/ = 6. 0 Hz，2H )，3· 89 ( t，/ = 6. 0 Hz， 2H )，2. 08 ( tt, /= 6. 0, 6· Ο Hz，2H )，1. 59-1.49 ( m，6H )， 1· 39-1. 31 ( m，6H )，1.18-1. 05 ( m，6H )，0. 90 ( t，/ = 7. 3 Hz，9H )。 ’ 【0175】 (實施例19)2-[4’ -(3” -羥基丙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑並 [1, 2-a]**咬(2-[4’ -(3”-hydroxy propoxy)phenyl ] -6-[123I ]iodo imidazo [l，2a]pyridine)之合成 【0176】 將6-三丁基曱錫烷基-2’-[4’ -(3” -羥基丙氧基）苯基]咪唑 並[1, 2-a]吡啶溶解於曱醇/二曱基亞砜=9/1的混合液所成溶 液（濃度為1毫莫耳/毫升）100微升中，加入2莫耳/升的鹽酸 80微升、1毫莫耳/毫升的碘化鈉15微升、414MBq的[1231]碘化 鈉120微升、10%(W/V)過氧化氫20微升。將該混合液在5〇°C靜置 10分鐘後，使用附有以下條件的高效能液相層析法（HPLC)將 2-[3, -(4” -羥基丙氧基）苯基]-6-ΓΙ]碘咪唑並[u—a]吡啶 (2-[3，-(4” -hydroxyethoxy) phenyl]-6-[123I ]i〇d〇 imidazo[l，2-a] pyridine) ’的析離部份分取出來。 84 200922629 【0177] 高效能液相層析法（HPLC)條件： 管柱：Phenomenex Luna C18 (商品名，Phen〇menex 公司製造； 尺寸：4.6X150毫米） 移動相.含有〇. 1%二氟乙酸的水/含有〇. 三氟乙酸的乙腈 = 80/20 — 0/100 (17 分鐘） 流速：1. 0毫升/分鐘 檢測器：紫外光可見光吸光光度計（檢測波長：282奈米）及 放射線檢測器（raytest公司製造、STEFFI型） 【0178】 * 於該析離部分加入水1〇毫升後，把該液體放入逆相管柱（商 品名：Sep-pak〔商標登錄〕Light C18 Cartridges，Waters 公 司製k，充填劑之充填量：丨45毫克）中作為沖提液，將2-[七 • (3羥基丙氧基）苯基]-6-[123I]碘咪唑並[1，2-a]吡啶吸著捕 集於該管柱。用i毫升水洗淨該管柱後，再用i毫升二乙基趟沖 提，使2-[4, -(3” _羥基丙氧基）苯基]碘咪唑並。，、^ 〇比咬洛出’所得到的放射能量在剛合成後係219MBq。又，依據以 下條件’進行薄層層析法（TLC)分析時，其放射化學純度係 97.0%。 * 、 85 200922629 [0179] 薄層層析法（TLC)分析條件： TLC層析板：Silica GeHO F254 (商品名，Meruku公司製造） 展開相··氯仿/甲醇/三乙胺=1〇〇/1/2 檢測器：Rita Star (商品名，raytest公司製造） 【0180】 (實施例2G〜21、比較例7)使用辛醇（C)etanGl)抽出法的分配 係數之測定 刀' 【◦181】. 實施例16所調製之化合物4的二乙基·液（實施例奶 實2施例19所調製之化合物6的二乙細溶液（實施例21)、以及 [IHMPY❸二乙基峻溶液（比較例υ，分別用含1〇毫克/亳 理食鹽水中稀釋，調製成放射能浪度為2G〜3Ql 升的4樣。難完成之試樣溶液各1()微升，分別加人到 (〇ctan〇l) 2笔升中’然後加入1〇毫莫耳/公升槪緩衝液（酸 驗值=4) 2 $升’麟3()秒鐘。將混合液用低速離心機（麵 /刀60 〃鐘）離心分離後，辛醇層與水層分別取1毫升，在 井伽瑪系統（autoweH . Tsystem ;型式：ARC-301B， Aloka公司製造）測計個別的放射能讀數。_所得到之放射能讀 86 200922629 數，應用數學公式（4)，算出lOgPoctanol值。 [0182] 【數4】 = i〇gt〇 … (4 ) 辛醇層放射能讀數 1 水層放射能讀數 > [0183] 其結果顯示於表6。任一化合物的lOgPaetaml值，均顯示係1 〜3之間的值。關於可能通過BBB的化合物方面，已知其logP〇ct_i 值係1〜3之間的值《參照Douglas D. Dischino等人， J.Nucl. Med.，（1983)，24，頁 1030-1038》。從以上結果，顯示此 二化合物，與IMPY相同，具有BBB通過性。 【0184] 【表6】 表6 本發明化合物之logP〇ct_i值 實驗 化合物 l〇gPoctanol f直 比較例7 [123I]-IMPY 2.1 實施例20 化合物4 2.5 實施例21 化合物6 * 2.1 [0185] (實施例22〜23、比較例8)腦部滲移性及廓清力的測定 87 【0186】 * 【0186】 *200922629 用化合物4及化合物6 ’測定雄性威斯達(Wistar)種類的大 鼠（7週大）之腦部放射能集積的隨時間之變化。 【0187】 化合物4 (實施例22)、化合物6 (實施例23)、以及前述參 考例1所調製之[123I]-IMPY (比較例8)，分別溶解在含有1〇毫克 /毫升抗壞血酸（ascorbic acid)的生理食鹽水中（調製的放射 能濃度為20〜30MBq/毫升）·。調製完成之試樣溶液各取〇· 〇5毫 升，分別從被硫苯妥（thiopental，一種短效麻藥）麻醉的威斯 達(Wistar)種類大鼠（7週大）的尾靜脈注射到體内。投與後2 分鐘、5分鐘、30分鐘、60分鐘，從腹部大動脈抽血後，摘取鳩 部’測定腦的質量。並且用單頻分析儀（single比如㈣ analyzer ;檢測器型號：SP—2〇，應用光研工業公司製造）測計於 的放射能（以下，在本實施例，以A表示）。然後，用同樣的方: 測定殘留全身之放射能量（以下，在本實施例，以B表示）。應 這些败結果，從下舰學公式⑸，算出在各解辦間點上⑴， 腦的單位重倾相當的放射能分布率（％ID/g)。 還有’本實驗，於各個時間點，係朗3隻動物來進行。 88 200922629 【0188】 【數5】 ί δ)

%/B/g = ^A 【0189】 其結果顯示於表7。如矣7 r^一 ΐ23 7所示’化合物4及化合物6，和 []/相同在域後2分鐘的軸，顧他高的放射能 _ ’其_達6_時’，呈現有快速;肖失的傾向 。從這個結 果，化合物4及化合物6， 12 和[Ι]-ΙΜΡΥ —樣’顯示具有很高的 腦部滲移性及快速從腦部移出的廓清力。 【0190】 【表7】 1.19 分鐘後 30分鐘後 60分鐘後 _ 0.28 0.04 0.01 0.56 0.07 0.02 0.97 0.23 0.09 化合物 實施例22 化合物4、 實施例23 化合物Ρ 比較例8 [123Ι]-ΙΜΡΥ^ 1分鐘後 ^056~ ^δΓ 【0 19 1】 機部激粉樣蛋白描現的確認 (實施例24〜25) 89 200922629 [0192] · (1)將Αβ,_42 (和光純藥工業製造）溶解於磷酸緩衝液（酸驗值 7.4) ’在37 (：振盡72小時’得到1亳克/毫升之凝集A万懸湯液 (以下於本實施例，稱為「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 【0193】 (2)在雄性威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）的單側扁桃腺， 注射前述澱粉樣蛋白懸濁液2. 5微升（相當25微克）；作為對照 者’係另一側的扁桃腺，注射磷酸緩衝生理食鹽水（酸鹼值7 4) 2. 5微升。注射澱粉樣蛋白懸濁液和磷酸緩衝生理食鹽水（酸鹼值 7.4) 1日後，將大鼠做成檢體。 【0194】 (3)將化合物4溶解於含有1〇毫克/毫升抗壞血酸的生理食鹽 水中，當作試樣溶液（試樣溶液中之放射能濃度3〇MBq/毫升， 實施例24)，以及將化合物6溶解於含有10毫克/毫升抗壞血酸 的生理食鹽水中，當作試樣溶液（試樣溶液中之放射能濃度3〇MBq /毫升，實施例25)。將此溶液從前述用硫苯妥麻醉的大鼠尾靜 脈注射到大鼠體内（投與量：5毫升，投與後之放射能：相當 11 〜15 MBq)。 200922629 [0195] (4)投與60分鐘後將腦部摘取出來，用切片機（型式：CM3〇5〇s， 來卡么司製ie)製作成厚度1〇微米的腦切片。將該腦切片放在影 像板（imaging plate)上使其曝光20小時以後，使用生物影像 分析儀（Bioimaging analyzer，型式：BAS-2500，富士照相底片 公司製造）進行圖像解析。 [0196] * ⑸使用生物f彡像分析儀進行前述圖像崎結束碰，以硫黃素 T做病理染色、使用螢光顯微鏡（型式：TE2〇〇〇—u型，斷〇n公司 製造；激發波長：400 440毫微米、檢测波長：47〇毫微米）做 出影像，確認殿粉樣蛋白在該切片上沉積的情形〔圖十二及圖十 三〕。 【0197】 _樣蛋白注入腦内的大鼠腦切片之自動射線攝影 (autoradiogram)及硫黃素τ染色的景冰舶二,___

和其他部位比較，無法碹認戈 ，無法確認有意義的放射能集積。又 三。如這些 個檢體上， 球的放射能 。又，從自動射 200922629 線攝影方面，澱粉樣蛋白注入部位以外之部位，幾乎看不到放射 能集積。還有，從硫黃素τ染色的結果，放射能集積部位有澱粉 樣蛋白存在的事實，可以確認〔圖十二及圖十三〕。從以上結果， 顯不化合物4及化合物6，具有在腦内澱粉樣蛋白部位集積、有 描現腦内澱粉樣蛋白的能力。

[0 1 9 8 J (只施例26〜28)基因逆向變異測試（Reverse Mutati〇n Test) [0199] 為了調查化合物3、化合物5及化合物8的基因突變誘發性 (genotoxicity) ’使用老鼠傷寒桿菌（免 的TA98及TA100菌株，進行基因逆向變異測試（以下稱為「扁的 試驗」）。 [0200] . 試驗係在無添加S 9mix及添加s 9mix的_來實施。陰性 對照組，係使用二甲基亞石風（dimethylsulfoxide;以下稱為 「_」）；陽性對照組’在無添加s 9raix的情形時，使用2_(2一 聯糠醯)-3-(5-硝基-2-聯糠醯）丙烯醯胺（2— _3-(5-此。如_)紅ylamide ;以下稱為「AF 2」），在添加 92 200922629 S 9mix的情形時’使用2-氨基蒽（2-amino anthracene ;以下稱 為「2-AA」）。 【0201] 作為添加在試驗用板（plate)的各被驗試樣’係用dmSO溶 解的個別化合物，其濃度：調製成50毫克/毫升的溶液，然後將 個別溶液，以公比數3、用DMS0稀釋，再調製成7種濃度的溶液。 作為陽性對照試樣調製用的被驗液，若是以TA98為試驗菌株、無 添加S 9mix的情形時，則調製用DMS0溶解AF-2的被驗液（化合 物濃度：1微克/毫升）；若是以TA100為試驗菌株、無添加S 9mix 的情形時，則調製用DMS0溶解AF-2的被驗液（化合物濃度：〇. j 微克/笔升）’右疋以TA98為試驗菌株、有添加s 9mix的情形時， 則調製用DMS0溶解2-AA的被驗液（化合物濃度：5微克/毫升）； 若疋以TA100為試驗菌株、有添加s 9mix的情形時，則調製用 DMS0溶解2-AA的被驗液（化合物濃度：1〇微克/毫升）。 [0202] 各被驗液的添加量，做成〇· 1毫升/試驗用板。各被驗液和 試驗菌株（TA98《TA1GG)混合後，在洋菜雜賴驗用板上的 培養基上錢塗層，於37t培養4M♦糾，各被驗液的添加 里，係0_ 1毫升/試驗用板，各被驗液和s 9 mix和試驗菌株混 93 200922629 合後，在洋躲㈣試驗職上細養基上重複㈣，於阶培 養48小時。另一方面，在陰性對照故只有使用麵和被驗液: 進打前述相_。判_找撕算試驗職上鱗後基因 逆向變異群落（副ny)數來進行，基因逆向變異群落數顯示陰 性對照的2倍以上•、並且有依濃度增加的情形，作為陽性。 【0 2 0 3】 · 【表8】 表8 Ames試驗結果 ___ 致突變性 化合物 L ^^j?DS9mix~| ^5ns9mi7

【0204] (實施例29〜實施例30)尽粉樣蛋白結合性之確認 為了調查本發明相關化合物之結合機轉（mechanism)，使用 以香樹脂醇（amyrin)做為前驅物的澱粉樣蛋白，實施與硫黃素τ 的結合阻礙實驗。絲二雜尿病，鎖轉係蓄積在胰臟的殿 粉樣蛋白。 【0205】 ※方法 94 200922629 (1) 將人的香樹脂醇《和光純藥工業製造》溶解於磷酸緩衝液（酸 驗值7. 4) ’在37°C振盪72小時，得到1毫克/毫升之凝集香樹 脂醇懸濁液（以下於本實施例，稱為「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 【0206】 (2) 關於刖述丨殿粉樣蛋白懸濁液，依照文獻《似丨|^，JJ.等人、

Laboratory Investigation.赵、頁 374-383(1996)》記載的方 法’使用硫黃素T (thioflavin T，Fluka公司製造）做螢光光度 測定，進行定性實驗，確認在（丨）得到之凝集化香樹脂醇係澱粉 樣蛋白（測定條件：激發波長446奈米（nm)、螢光波長49〇奈米）。 【0207】 (3) 將澱粉樣蛋白懸濁液溶解於5〇毫莫耳（mM)構酸緩衝液（酸 驗值7. 4)巾’賴粉樣蛋白懸濁液中的香樹輯濃度成為^微 莫耳（//M)。又，將硫黃素T溶解於5()毫莫耳甘氨酸—氫氧化納 (glycine-_)緩衝液（酸驗值8 5)，把硫黃素了濃度做成 15微莫耳（"M)〇 【0208】 ⑷將各評價化合物和殿粉樣蛋白溶解於5〇毫莫耳猶緩衝液 (酸驗值7.4) ’各評價化合物和雜樣蛋白的最後漠度調製成如 200922629 表9記載之濃度，作成試樣溶液。在（3)調製完成的殿粉樣蛋白 液和硫黃素T液各50微升、試樣溶液50微升，充填到有96洞孔 的微量板（microplate)的各個小井（well)(容量約〇. 3毫升） 中〇 [0 2 0 9] ’ 【表9】 表9 試樣溶液中相關各化合物的最後濃度 實驗 評價化合 物 評價化合物濃度 硫黃素T濃度 激粉樣蛋白 實施例 29 化合物1 各濃度：0, 1.5,15, 30 微莫耳/公升（"m〇l/ L) 5微莫耳/公 升 (^mol/L) 2.6微莫耳/公 升 (Vmol/L) 實施例 30 化合物2 【0210] (5) 50毫莫耳磷酸緩衝液（.酸鹼值7. 4) 100微升和50毫莫耳甘 氨酸一氫氧化鈉（glycine — NaOH)緩衝液混合後的樣本作為空白 對照（blank)，實施與（4)相同作業，應用在阻礙率的計算（以 下，作為BG)。 【0 2 11】 (6)將已充填試樣溶液的微量板，在室溫靜置3〇小時後，用微 量板讀數器（microplate reader)《型式：SPECTRA MAX GEMINI XS ; Molecular Devices公司製造》測定各試樣溶液的螢光強度《測定 96 200922629 條件：激發波長446奈米、螢光波長49〇奈米》。以下，各評價化 合物濃度為0的試樣，其螢光強度為A ;評價化合物濃度為1. 5 微莫耳/公升以上的試樣，其螢光強度為B。 [0212] 辛 ⑺應用前述⑻所測得的螢光強度，從下列數學公式⑹： 【0213】 【數6】 阻礙率⑻⑷ 【◦214] 求出阻礙率。 · 【0215] 各評價化合物的阻辦顯雜表丨〇。化合物丨和化合物2 同樣地，任何一種濃度都阻礙硫黃素了的結合。由此結果，顯示 化合物1和化合物2對硫黃素τ的結合有競合性阻礙。硫黃素了 能夠認得澱粉樣蛋白的乙型片構造而與之結合，這是一般公認的 事實；因此，化合物1和化合物2，與硫黃素τ 一樣具有殿粉樣蛋 白結合機轉，也就是說，顯杀其能夠認得澱粉樣蛋白的乙型片構 97 200922629 造而與之結合。 [0216] 【表10】 表10本發明化合物對於硫黃素T的澱粉樣蛋白（香樹脂醇）結合 的阻礙率 阻礙率(％) 會 於 貫驗 評價化合 評價化合物濃 評價化合物濃 評價化合物濃 物 度 度 度 1.5微莫耳/升 15微莫耳/升 30微莫耳/升 實施例29 化合物1 14.5 37.0 43.7 實施例30 化合物2 28.9 26.6 28.2 【0217】 (實施例31)各臟器的放射能分布率之測定 【0218】 為了確認本發明相關之化合物具有能夠分布在目標臟器、以 及具有良好排出體外的廓清力，使用化合物1，測定SD類大鼠 (Sprague Dawley Rat ;大白鼠）《8週大》的各臟器之放射能集 積之經時間變化。 【0219】 在實施例3調製的化合，1的二乙基醚溶液（實施例1〇)，用 含1〇耄克/毫升抗壞血酸的生理食鹽水稀釋，將放射能濃度調整 98 200922629 為8〜12MBq/亳升’作為試樣溶液。調製完成的試樣溶液各取〇 〇5 毫升，前述大鼠，在硫苯妥（thiopental，一種短效麻藥）麻醉 下’將試獅液從尾靜脈注賴翻。投織5分鐘、3()分鐘、 60分鐘、180分鐘，從腹部冬動脈抽血後，摘取表工丄記載的臟 器。摘取的臟器質量和放射能，依照與實施例1{)相同的方法測定。 此外，臟H摘取後的大鼠全身（以下稱為「殘餘全身」）的放射能 也要測^。制這麵定結果，從下舰學公式⑺，算出在各 B寺間點、各臟科位值量相當的放能分布率。 又，本實驗，於各時間點，係使用3隻動物。 [0220] 【數7】 * _ ____目模臌券的放j^Sg(CPM} 臟器的質量(ϊ) > x抛.·*(7) (全屬網取射能總和 [0221] 結果顯示於表U。如表U所示，化合…，在投盘後5 分鐘分布於顧H後，其放之切分係分布在小腸和大腸。 此外，其放射能分布率係從小腸向大腸渗移。由此來看化合物！， 投與後很快地㈣汁嫌，顯示具有良好的_相靡清力。 =有’剛編蓄積縣，觀察看看腦、續、 月财，各組織共同地在投與後5分鐘明碎看到放射能集積，確 99 200922629 認化合物1已分佈。又，投與後5分綱_⑽分鐘做比較 《（投與後5分鐘之％ID/g) 投與後⑽分鐘之灿々）》，分 別顯示：腦145、心臟2〇、肺13、胰臟24、骨骼9等的高數值。 由此來看，在;麟樣蛋白蓄^的組射，顯示有快相放射能分 布以及快速的廓清力。 從以上所述，要做為生體組織中的澱粉樣蛋白檢測試藥，必 須呈現投與後能夠儘早地放射能分布、以及達成快迷地體外廊清 力的性質。 [0 2 2 2] 【表11】 表1 1 組織/ 臟器 投與後5分鐘 投與後30分鐘 捋後60分鐘 投與後180分k 平均値 標準誤 差 平均値 標準誤 差 平均値 標準誤 差 ------ ---] 平均値 標準誤 差 血液 Γ 0.420 0.028 0.129 0.010 0.101 0.008 0.068 0.009 腦 0.755 0.051 0.049 0.002 0.014 0.002 0.005 0.001 心臟 0.582 0.043 0.081 0.009 0.049 0.006 0.029 0.004 肺 0.661 0.047 0.117 0.011 0.076 ).009 0.053 0.010 肝臟 1.865 0.091 0.293 0.042 0.113 0.008 1 0.051 0.005 脾臟 0.508 0.049 0.072 0.003 0.044 0.003 0.035 0.007 胰臟 0.778 0.029 0.097 0.013 0.051 0.008 0.033 0.006 胃 0.492 0.083 1.202 0.135 0.808 0.097 0.982 0.517 小腸 1.299 0.282 6.720 0.836 7.515 0.371 0.882 0.486 大腸 0.139 0.010 0.054 0.002 — 0.069 0.011 6.876 0.727 腎臟 1.212 0.092 0.432 0.068 0.236 0.034 0.070 0.002 腎]:腺 2.471 一 0.346 0.199 *0.007 一 0.068 0.012 0.052 0.005 骨骼 0.282 0.013 0.066 0.005 0.047 0.004 0.032 0.006 骨髓 0.921 0.146 0.087 0.012 0.015 0.027 0.000 0.000 肌肉 0.372 ’ 0.025 0.042 0.003 0.0251 0.004 0.015 0.003 100 200922629 【0 2 2 3] (實施例32〜33)基因逆向變異測試（Reverse Mutati〇n Test) 9 [0224] 為了调查化合物7、及化合物g的基因突變誘發性 (genotoxicity)，使用老鼠傷寒桿菌（如顯加加·▲) 的TA98及TA100菌株，進行基因逆向變異測試（以下稱為「Ames 試驗」）。 [0225] 忒驗係在無添加S 9mix*及添加S 9mix的情形來實施。陰性 對照組’係使用二曱基亞硪（dimethylsulfoxide ;以下稱為 DMS0」）’陽性對照纟且’在無添加s 9mix的情形時，使用2-(2-聯糠醯)-3-(5^硝基-2-聯糠醢）丙稀酼胺（2-(2-furyl) -3-(5-nitro-2-furyl) acrylamide ;以下稱為「AF-2」），在添加 S 9mix的情形時’使用2-氨基蒽（2-amino anthracene ;以下稱 為「2-AA」）。 【0226】 * 作為添加在試驗用板（plate)的各被驗試樣，係用DMS0溶 解的個別化合物，其濃度：調製成50毫克/毫升的溶液，然後將 101 200922629 個別溶液’以公比數3、用DMS0稀釋，再調製成7種濃度的溶液。 作為陽性對照試樣__被驗液’若如刪為試驗菌株、無 添加S 9mix的情形時，則調鉍用DMS0溶解AF_2的被驗液（化合 物濃度：1微克/毫升）；若是以TA100為試驗菌株、無添加 S 9mix 的情形時，則調製用DMS0溶解AF-2的被驗液（化合物濃度^ ! 微克/毫升）；若是以TA98為試驗菌株、有添加s9mix的情形時， 則5周製用DMS0溶解2-AA的被驗液（化合物濃度：5微克/毫升）； 右疋以TA100為試驗菌株、有添加s 9mix的情形時，則調製用 DMS0>谷解2-AA的被驗液（化合物濃度：1〇微克/毫升）。 [0 2 2 7] * 、各被驗液的添加量’做成〇.；[毫升/試驗用板。各被驗液和 試驗菌株（TA98《TA1GG)混合後，在洋菜雜賴驗用板上的 。養基上重複塗層’於37C培養48小時。另外，各被驗液的添加 θ係〇. 1耄升/ 5式驗用板，各被驗液和S Θ mix和試驗菌株混 口後在洋菜雜的試驗用板上的培養基上重複塗層，於抓培 養48小時。另一方面’在陰性對照組，只有使用DMS0和被驗液， 進仃m述相_操作。躺的方法係計算試驗用板上培養後基因 逆向變異群落（⑽卿）數來進行，基因逆向變異群_顯示陰 1*生對照的2倍以上之值、並且有依濃度增加的情形 ’作為陽性。 102 200922629 [0 2 2 8] 【，表1 2】 表1 2 Ames試驗結果 化合物 致突變性 無添加 S9mix 添加S9mix TA98 TA100 TA98 TA100 實施例32 化合物7 陰性 陰性 陰性 陰性 實施例33 化合物9 陰性 陰性 陰性 陰性 [0 2 2 9] (實施例34〜35)微核試驗（Micronucleus test) [0 2 3 0] , 為了探討化合物3、及化合物7的生體内（in vivo)之致 突變性（mutagenicity)，採用Crlj:CDl(ICR)品種的雄性老鼠的 月叙細胞’ 5周查具有微核的多染性紅血球（micr〇nucleus polychromasia erythrolyte ;以下稱為 MNPCE)的誘發性。 【0 2 3 1】 試驗的用置設定為〇毫克/公斤（陰性對照群）、25〇、5〇〇、 1000及2000毫克/公斤（被誇物質群）。單次經口投與後小時 及48小時之後’將老鼠殺死’製作骨趙抹片標本觀察。又。在陽 性對照群’單次腹腔内投與2亳克/公斤的Mitc)mycin(： (MMC)， 投與後24小時’將老鼠殺死，製作骨趙抹片標本觀察。 103 200922629 [0232] 切有P二、θ、具有微核多紐紅血球⑽PCE)的出現頻率，確 ⑽迎1增加的情形’或者、與陰性對照群比較，其增加係 具有統計學上的意義，朗定為陽性；除此以外，判定為陰性。 有關各投與__ __雜紅血球（以下稱為p⑻ —、’工血球（以下稱為RBC)間的比率，陰性對照群和被驗物質群、 以及和陽性触觸、或者在各觸，從顧考騎__n) 順=和檢測’實财«檢測，做為麟學上的分析。並且， 有思義的準係各自的危險_分別為不及5%和不及以。 【0233】 試驗的結果，被驗物質群之有微核MNPCE的出現頻率、以及 相對於RBC的PCE的比率，與陰性對照群比較，無法發現有意義 的統計學上差異。另一方面，陽性對照群之有微核以肥(：£：的出現 頻率，和陰性對照群比較，則有意義地增加。從以上結果，在該 試驗條件下，對於老鼠骨髓細胞，因為化合物3、及化合物7不 被認為有微核誘發作用’所玫本被驗物質的致突變性（生體内） 判定為陰性。 【0 2 3 4】 104 200922629 (實施例36)澱粉樣蛋白結合性之確認 [02351 藉由以下的生體外結合試驗，評價本發明化合物的澱粉樣蛋 白親和性。 [0236] ※方法 (1) 應用實施例29及實施例30所記載的方法，調製丨毫克/毫 升之凝集化香樹脂醇（amyrin)懸濁液（以下於本實施例，稱為 「香樹脂醇澱粉樣蛋白懸濁液」）。 [0237] 從已被報告Λ來蚊獻《Burke，M ]. f人，BiQGhemistry· 11 ’頁2435-2439 (1972)》所記載的方法，加上部份改變，藉由 以下（2)和（3)的作業’調製出具有交叉乙型片（c麵点_sheet) 構造的胰島素（insulin)。.

[0238] (2) 騰島素5毫克（sigma Aldoreach Japan公司製造）溶解於 用鹽酸调整酸驗值為2的去離子水j毫升中，在赃加熱1〇分 105 200922629 鐘後，於乾冰/乙醇中急速冷卻。 【0239】 (3) 將（2)的樣本液在9〇°C加熱5分鐘後，於乾冰/乙醇中魚 速冷卻。相同的作業程序反覆操作10次以後，樣本液變成凝膠 狀，以目視加以確認。 [0240] * (4) 將（3)的樣本液經過離心分離《丨6〇〇〇公克分鐘》以 後，除去上層澄清液，將沉澱以1毫升去離子水溶解，得到凝集 化胰島素（insulin)懸濁液（以下，於本實驗，稱為「胰島素澱 粉樣蛋白懸濁液」）。 【◦241] 從已被報告出來的文獻《Ohhashi, Y.等人，journai

Biological Chemistry. ，頁 32843-32848 (2005)》所記载的 方法’加上部份改變，藉由汷下（5)和（6)的作業，調製出具 有父叉乙型片（cross y3-sheet)構造的々2微小球蛋白（点2 microglobulin)。 106 【0242】 200922629 (5) /32微小球蛋白（〇riental酵母公司製造）1毫克/毫升的 溶液中，添加含1〇〇毫莫耳氯化鈉的5〇毫莫耳甘氨酸一鹽酸 (glycin—HC1)緩衝液（酸鹼值2.5)後，使用超音波溫水槽 (Branson Ultrasonic 公司製造；型號：B1200)在 37。(：進行 1 分鐘的超音波處理，接下來，不做超音波處理9分鐘，只在37。〇 加熱。 【0243] , (6)將（5)的操作接續著反覆17次以後，將此樣本液進行與前 述（2)相同的處理，此樣本液以離心分離《16000公克X15分鐘》 以後，除去上層澄清液，將沉澱簡於含⑽毫莫耳氣化納的5〇 毫莫耳甘氨酸緩衝液（值2. 5) 〇· 5毫升，得到凝集化 石2微小球蛋自_液（以下，於本實驗，稱為「•殿粉樣蛋 白懸濁液」）。 [◦244] ^ ⑺實施例29和實施例3〇所記載的應用硫黃素τ⑺也公司 製造）作妓光度測定的定性實驗，經由該實驗確認在⑷和⑹ 得到的凝集傾島姊凝集碌微小_白係驗樣蛋白。_ 107 [0245] 200922629 (8) 調製前述實施例3的方法所合成的化合物丨的水溶液（放 射能濃度500 MBq /毫升），用含〇· 1%牛血清白蛋白的磷酸緩衝液 (酸鹼值7.4)將其稀釋，調製成2—[4，_(2，’ _羥基乙氧基）苯 基]-6-蛾味唾並[l，2-a]嘧啶（2-[4，-(2，，-hydroxy ethoxy)phenyl]-6-iodo imidazo [l，2a]pyrimidine)的總量相 當1· 2〜112·.9微微莫耳（pM)的溶液。 [0246] * (9) 96孔微量板的各小井’添加前述⑻調製完成的溶液5〇 微升（最後濃度0.2〜22. 6微微莫耳）、香樹酯醇懸濁液或胰島素 殿粉樣蛋白懸濁液或0 2m澱粉樣蛋白懸濁液以含〇. 1%牛血清的磷 酸緩衝液（酸驗值7. 4)稀釋後的溶液50微升（最後濃度〇.8微 克/毫升）以厚’再加入相同緩衝液15〇微升。 [0247] (10)在22°C將該微量板以固定速度（4〇〇轉/分鐘）震盪3小 牯以後，各小井的混合液，藉由以玻璃纖維過濾器（glass fiber fllter)《MlliP〇a公司製造’型號Multiscreen™-FC》過濾，將 結合了殿粉樣蛋自的化合物1和游離的化合物1分離。 108 【0248] 200922629 (10)過濾了混合液的玻璃纖維過濾器，用含〇·1%牛血清白蛋白 的磷酸緩衝液洗淨（0.2毫升Χ5次）後’用自動小井·伽碼系統 (autowell . r system)《型式：ARC-301B，Aloka 公司製造》測 定玻璃纖維過濾器之放射能量。 【0249】 (12)從（11)的測定結果，.評價化合物1的澱粉樣蛋白結合量 與已添加的澱粉樣蛋白量之間賴係。非特異性結合，係從前述 (9)的未添加澱粉樣蛋白懸濁液的樣本求出來（實施例昶）。 [0250] 試樣溶液中的化合物！的濃度，與前述（11)所測得的玻璃 纖維過㈣上之放射能讀數⑽）之__，顯示於圖十四。 添域祕蛋_驗之群組（盼四，錄賴粉樣蛋白添 =群組、胰島素麟樣蛋轉加群組、師滅雜蛋白添加群 ⑷、與未添加殿粉樣蛋白懸濁液之群組（圖十四，澱粉樣蛋白未 添加群組）做比較’其放射能全部都是高的；又，依照化合物i 的态加濃度為比例，玻填纖維碱器上之放射能也増加。於本實 2關之各條件，任何—者的驗樣蛋白（以及結合了化合物^ 因1Γ樣蛋白）也比麵纖維磁器的孔徑（卿㈣為大。 4 ’殿粉樣蛋白被保留在玻賴維上，玻璃纖維之放射能讀數 109 200922629 就疋反應結合在澱粉樣蛋白的化合物丨量的值。玻璃纖維之放射 能讀數’ P4著化合物1濃度增加而增加，並且，與澱粉樣蛋白未 添加群組比較，因為其放射能較高，顯示化合物1係具有與殿粉 樣蛋白特異性結合性質的化合物。 【0 2 5 1】 (實施例37)澱粉樣蛋白結*合性之確認 【0252】 作為試樣溶液，調製化合物6的水溶液（放射能濃度5〇〇MBq /亳升），用含0.1%牛血清白蛋白的磷酸緩衝液（酸鹼值7 4)將 其稀釋，調製成2-[4, -(2，，_羥基乙氧基)苯基]_6_碘咪唑並 [l，2-a]嘧啶（2-[4，-(2” -hydroxy eth〇xy)phenyi]-6-i〇do imidazo [1，2a]pyrimidine)的總量相當 〇. 5〜59. 7 微微莫耳(pM) 的溶液，進行與實施例36相*同的作業。 【0253】 試樣溶液中的化合物6的濃度，與玻璃纖維過濾器上之放射 能讀數（CPM)之_關係，顯示於圖十五。添域粉樣蛋白懸濁 液之群組（圖十五，香樹酯醇澱粉樣蛋白添加群組、胰島素澱粉 樣蛋白添加群組、和2m澱粉樣蛋白添加群組）、與未添加澱粉樣 110 200922629 蛋白懸濁液之群組（圖十五，澱粉樣蛋白未添加群組）做比較， 其放射能總體上都是局的；又，依照化合物6的添加濃度為比例， 玻璃纖維過濾器上之放射能也增加。於本實驗相關之各條件，任 何一者的澱粉樣蛋白（以及結合了化合物6的澱粉樣蛋白）也比 玻璃纖維過濾器的孔徑（pore size)為大。因此，澱粉樣蛋白被 保留在玻璃纖維上，玻璃纖維之放射能讀數就是反應結合在澱粉 樣蛋白的化合物6量的值。玻璃纖維之放射能讀數，隨著化合物6 濃度增加而增加，並且，與澱粉樣蛋白未添加群組比較，因為其 放射能較高，顯示化合物6係具有與澱粉樣蛋白特異性結合性質 的化合物。 【產業應用的可能性】 【0254】 本發明相關的生體組織中的澱粉樣蛋白檢測試藥，在以全身 性澱粉樣變性病為首的澱粉樣變性病中，可以應用作為澱粉樣蛋 白的蛋白質之生體外（invitro)及生體内（inviv〇)的診斷劑。 【圖式簡單說明】 【0255】 【圖一】2-[4, -(2，，-羥基乙氧基）苯基]—6_碘咪唑並^，、^嘧 ^ (2-[4, -(r -hydroxy ethoxy)phenyl]-6-i〇d〇 imidazo [l，2a]pyrimidine)《非放射性碘化合物》的合 111 200922629 成過程圖式。 【圖二】6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -(2” -羥基乙氧基）苯基]咪唑 並[l，2-a]nfc^ (6-tributyl stannyl-2-[4’ -（2” -hydroxy ethoxy)phenyl] imidazo [1,2-a] pyridine) ψ 的合成過程圖式。 【圖三】2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶（2-(4，· -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo [1,2-a] pyridine) 的合成過程圖式。 【圖四】6二丁基曱锡烧基-2-(4 -經基笨基)<»米〇坐並[l，2-a]a比 (6-tributyl stannyl-2-(4， -hydroxy phenyl) ψ imidazo [l，2-a] pyridine)的合成過程圖式。 【圖五】[123I]-IMPY投與後的腦切片：（a)自動射線攝影、及（.b) 硫黃素T染色試樣的螢光顯微鏡影像（澱粉樣蛋白懸濁 液之投與部位放大圖示）。 【圖六】2-[4’ -(2” -羥基乙氧基)苯基]_6_广口破味唾並^] 嘧啶（2-[4, -(2” -hydroxy 112 200922629 ethoxy)phenyl ]-6-[123I]i〇d〇 imidazo [l，2a]pyrimidine)投與後的腦切片：（a)自動射線攝 影、及（b)硫黃素T染色試樣的螢光顯微鏡影像（澱粉 樣蛋白懸濁液之投與部位放大圖示）。 ψ 【圖七】2-(4’ -乙氧基苯基)-6-[1231]麟。米唑並[i，2-a]吼啶 (2-(4 -ethoxy phenyl) -6-[123I]i〇d〇 imidazo [1, 2-a] pyridine)投與後的腦切片：（a)自動射線攝影、及（b) 硫黃素T染色試樣的螢光顯微鏡影像（澱粉樣蛋白懸濁 液之投與部位放大圖示）。 【圖八】2-[3’ -(2” -羥基乙氧基）苯基]-6-碘咪唑並[1，2-a]嘧 啶（2-[3’ -(2” -hydroxy ethoxy)phenyl]-6-iodo imidazo [l，2a]pyrimidine)《非放射性蛾化合物》的合 成過程圖式。 【圖九】6-三丁基曱錫烷基-2-[3’ -(2，，-羥基乙氧基）苯基]咪唑 並[l，2-a]^°^ (6-tributyl stannyl-2-[3’ -(2” -hydroxy ethoxy)phenyl] imidazo [1,2-a] pyridine) 的合成過程圖式。 113 200922629 【圖十】2-[4’ -(3” -羥基丙氧基）苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]嘧 咬（2-[4， -(3” -hydroxy propoxy)phenyl]-6-iodo imidazo [l，2a]pyrimidine)《非放射性碘化合物》的合 成過程圖式。

V 【圖十一】6-三丁基曱錫烷基-2-[4’ -(3” _羥基丙氧基)苯基]咪 唑並[l，2-a]吡啶（6-tributyl stannyl-2-[4，-(3，， -hydroxy propoxy)phenyl] imidazo [1,2-a] pyridine)的合成過程圖式。 圖十二】化合物4投與後的腦切片：⑹自動射線攝影、及⑻ 琉汽素T耗雜的螢絲微鏡影像（麟樣蛋白懸 濁液之投與部位放大圖示）。 【圖十三】化:物6投與後的腦切片:⑹自動射線攝影、及⑻ =素T染色離的螢光顯微鏡影像（樣蛋白賤 濁液之投與部位放大圖示）。 心； 【圖十四】化合物1 的澱粉樣蛋白結合性能之圖示 圖十五】化合物 的澱粉樣蛋白結合性能之圖 不 114

Claims (1)

1. 200922629 十、申請專利範圍： 1、-種檢^沈積生敵、峡粉樣蛋白的檢測試藥，其係含有如 下列化予式⑴所絲德合物或其麵所贼的檢測沈積 在生體組織的殿粉樣蛋白的檢測試藥： 【化1】

   〔化學式中，Ar,、A2、A1和A4係個別獨立的碳或氮； R係放射性齒素取代基； 係選自氫、虱氧基、甲氧基（methoxy)、羧基（carboxyl )氨基（amino)、N-f 基氨基（N-methylamino)、N, N-二 甲基氰基（Ν,Ν-dimethylamino)及氰基（cyano)所成群 類之化學基； m係0〜2的整數； 但’ Αι、&、A1和A4之中，至少有一者係碳；R1係結合在 Αι、A2、a3 或 A4 的碳。〕 2、 如申請專利範圍第1項所述之檢測試藥，其中Al、a2、A3 和A4之中，至少有三者養碳。 115 1 如申請專利範圍第2項所述之檢測試藥，乂、A2、心和心， 200922629 全部都是碳 試藥 、如申請專利範圍第工項〜第4項之任 “，係由氟 18(>漠75(、)、漠76(;:=^^ 峨 124 (1241)、峨 125 (125 的放射性«取代基。 31 (丨）所軸群類選出 、如申請專利範圍第i項〜第 其中在辦知a ， 仗J 員所迷之檢測試藥， 、織係腦、心臟、肺、胰臟、骨路或關節。 7 其係包含以下 不有機化合物的製造方 、—種放射性㈣標示有機化合物的製造方法， 二者作業為其特徵的放射性齒素標 法； 所表示的化合物或其 調製作業：調製含有如下列化學式（2) 鹽類、及放射性自素離子的反應溶液： 【化2】 116 200922629

   R4 〔化學式中’ A!、A2、A3和A4係個別獨立的碳或氮； R3係選自非放射性鹵素取代基、硝基（nitro)、烷基鏈碳·數 1〜4的三烧基銨基（trialkyl ammonium)、燒基鏈碳數1 〜4的三烧基曱錫烧基（trialkyl stannyl)取代基、及二 笨基曱錫烧基（triphenyl stannyl)取代基所成群類之化 學基； R係選自氫、氫氧基、曱氡基（methoxy)、敌基（carboxyl )、氣基（amino)、N-甲基氨基（N-methylamino)、N，N-二 甲基氨基（N，N-dimethylamino)及氰基（cyano)所成群 類之化學基·， m係0〜2的整數； 但，Ai、A2、As和A4之中，至少有一者係碳；R3係結合在 Αι、A2、A3 或 A4 的礙；〕 ό成作業：藉由將反應條件給予前述反應溶液，合成如下 列化學式（1)所表示的化合物或其鹽類， ’【化4】 117 200922629

   〔化學式中，Al、A3和A4係個別獨立的碳或氮； R1係放射性鹵素取代基； R係選自氫、氫氧基、甲氧基（meth〇xy)、羧基（Carb_l )、氨基（amino)、N-甲基氨基（N-methylamino)、N，N— 甲基氨基⑽-dimethylamino)及氰基（eyan。）所成群 類之化學基； m係0〜2的整數；· 但，A!、A2、A*A4之中，至少有一者係碳；以結合在 Αι、A2、Aa 或 A4 的碳；〕 係提供包括以上二者作業為特徵之放射_素標示有機化 合物之製造方法。 8、 如申請細贿7_述之放概_示有機化合物的 製造方法，其中A!、A2、A_A4之中，至少有三者是碳。 * 9、 如申請專利範圍第8項所述之放射性_ ^ A 丨王不有機化合物的 製造方法’其中H、ΜσΑ4全部都是碳。 118 200922629 1 ο、如申請專娜圍第7項〜第9項之任—項所述之放射性齒 素標示有機化合物的製造方法，其中RyoR4係氫氧基。 1 1、如申請專職圍第7項〜第i Q項之任—項所述之放射性 鹵素標示有機化合物的製造方法，其中R3係選自碘、溴、 烷基鏈碳數1〜4的三烷基曱錫烷基（trialkyi stannyl) 取代基、及三苯基甲錫院基取代基所成群類之化學基； 放射性齒素離子係選自碘123離子（123ι丨011)、碘124離子 (124I ion)、碘 125 離子（125l i〇n)及碘 131 離子（，i〇n) 所形成群類的放射性由素離子；Ri係選自碘123 (⑵丨）、碘 124 (1241 )、碘125 (1251 )及碘131 (，）所形成群類的放 射性齒素。 12、 如申請專利範圍第11項所述之放射性鹵素標示有機化合 物的製造方法，其中R3係選自破、三甲基甲錫烷基（ trimethyl stannyl)取代基、及三苯基甲錫烷基（triphenyl stannyl )取代基所成群類之化學基。 ψ 13、 如申請專利範圍第7項〜第1〇項之任一項所述之放射性 鹵素標示有機化合物的製造方法，其中R3係選自硝基取代 基、或烧基鏈石反數1〜4的三烧基|安基（廿^取1 ammoniiM 119 200922629 )取代基；放射性鹵言離子係氟18離子i〇n)，^係 氟 18 (18F)。 1 4、如申請專利棚第7項〜第i㈣之任—項所述之放射性 鹵素標示有機化合物的製造方法，其中R3係漠；放射性函 素離子係漠75離子（75Br i〇n)、或演76離子（76阶㈤ ;R1 係溴 75 (75Br)、或溴 76 (76Br)。 15、種放射性鹵素標示有機化合物調製用的前驅物化合物或 其鹽類，其壯下舰學式⑵所表示之簡性_素標示 有機化合物合成用的前驅物化合物或其鹽類： 【化4】

   〔化學式中，Αι、&、A3、和A4、係個別獨立的碳或氮； 1*^3 係選自非放射性鹵素取代基、硝基（nitro)取代基、烧 基鏈奴數1〜4的三烧基銨（trialkyl ammonium)取代基、 燒基鏈碳數1〜4的三烧基曱錫烧基（trialkyl stannyl) 取代基、及三苯基曱錫烧基（triphenyl stannyl)取代基 所成群類之化學基； 120 200922629 R4係選自氫、獻氧基、曱氧基（methoxy )、竣基（carboxyl)、 氨基（811^110)、1'1-曱基氨基（卜11161±^1311^110)、1^-二甲 基氨基（N，N-dimethylamino)及氰基（cyano)所成群類 之化學基； m係〇〜2的整數； 但，A!、A2、A3、和A4、之中，至少有一者係碳；R3係結 合在Αι、A2、A3、或A4的碳。〕 16、 如申請專利範圍第15項所述之放射性!s素標示有機化合 物調製用的前驅物化合物或其鹽類，其中Al、A2、A3、和 A4至少有三個是碳。 17、 如申請專利範圍第16項所述之放射性_素標示有機化合 物調製用的前驅物化合物或其鹽類，其中Al、A2、A3、和 八4全部都是碳。 1 8、如中請專利範圍第1 5項〜第i 7項之任__項所述之放射 性齒素標示有機化合物調製用的前驅物化合物或其鹽類， 其中R4係氫氧基。 121