TW200920725A - Carbamate stereoisomer - Google Patents

Description

200920725 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於新穎的胺甲酸酯立體異構物、製備該胺 曱酸s旨立體異構物的方法、含有該胺甲酸醋立體異構：的 醫藥組成物以及該胺甲酸酯立體異構物於治療上的用途， 尤其是治療與可逆性呼吸道阻塞疾病有關的支氣管收縮， 包括但不限於氣喘、囊狀纖維化和慢性阻塞性肺病，包括 慢性支氣管炎以及氣腫。 【先前技術】 發明背景 罹患與可逆性呼吸道阻塞疾病有關的支氣管收縮的患 者通常是使用支氣管擴張劑治療，用以放鬆支氣管平滑肌。 現今使用的支氣管擴張劑—般分為兩種，選擇性腎 上腺素受體促效劑例如阿布叔醇（albuter〇1)(沙丁胺醇 (saibUtamol))、沙美特羅（salmeter〇1)和福莫特羅 (f〇rm〇terol)，以及簟毒鹼受體拮抗劑例如異丙托品 (ipratropium)和太托品（tiatropium)。 β2_選擇性腎上腺素受體促效劑會造成不良影響，而這些 不良影響有部份是由於腎上腺素受體的活化。因此促效 劑對於β2_腎上腺素受體的選擇性非f重要，因為它限制了 可給的劑量，因而影響到支氣管擴張的程度以及劑量頻率。 長效作用對患者來說是重要的，不僅可將服藥所花的 時間減到最少，也可以避免在不方便的時間，例如在工作 200920725 時、在學校或夜間必須服藥。有些更近期的β2_選擇性腎上 腺素受體促效劑’尤其是沙美特羅和福莫特羅具有長效的 作用，典型的是約個小時。福莫特羅尤其具有優點，因 為它也具有快速的藥效。然而，福莫特羅相當有效，這使 得它非常難配製，尤其是使用定量吸入器以產生—致的率 物遞送方式經由氣霧劑给藥者（即劑量成分一致性）此 夕卜，它在水溶液中不穩定，也就是說使用喷霧器給藥的溶 液在製造後的保存期限的大部分時間必須保持冷藏。 福莫特羅是α-胺基甲基苯甲醇衍生物的一種 請案在關年代早期就提出申請了，例如us3,9_。 二 = 發明是建立在其他人的早期努力下，例如描述 ，，319 (相同於Μ 765,986，弓|用在 3,994,974 )。也許因為調配該化合物困難，所 時間才商品化。該化合物含有兩化了很長 四種立體里槿报+ / + 于性中^，所以能夠以 體屬式存在和分離出四種立體異構形式 取早是以有活性的（R，R)-和不活性的（s，s)_異構物的外 4旋混合物商品化的，是乾粉調配物’近有 性的叫異構物於嘴霧器溶液中商品化的二 6,3〇3’145也已知福莫特羅的（s，r)異構物 < 而，就像⑽)·異構物—樣，這個化合物在 然 中是不穩定的，所以噴霧器溶液需要冷藏儲存皿。下在水各液 【發明内容】 7 200920725 令人驚#地’今發現將（S，R)-福莫特羅中的曱氧基置換 成羥基，以及將曱醯基氫原子置換成曱基，已得到具有特 別引人注目之性質組合的異構物。 所以，根據一個方面’本發明提供式⑴化合物

OH

HO

OH HN. Ο 或其醫藥上可接受的鹽。 式::化合物也以其化學名稱被稱為甲基[2_經基 7 . , w Ί I本基）-ΐ-曱基乙基]胺基] 乙基]-本基]胺曱酸酯，在化學摘要 基-5-[叫i，基_2_[[(1R) 美丨疋胺甲酸[2’ 基]乙基]-苯基]_甲§旨。 基本基）_1_甲基乙基]胺 式⑴異構物已被發現具有特 對於β2·腎上腺素受體具有良^ 的性質。尤其，它 於β2-比對βι-腎上腺素受體有 常向的親和性、對 室溫下在水溶液中有良好的穩定、择性、長效、以及在 【實施方式] 發明詳流_ 200920725 應瞭解本發明提供的化合 鏡像異構上純的形式或與其= =物。此異構物可以 存在和分=種其他異構物的推和物 枣兔月耠供呈除了外消旋混合物之外的 任何異構物混合物之異構物， 丹切再描述在3,657,319中。 在一些具體實例中，該異構物實皙 此^ 苒物只慮上是不含（R，R)-鏡像異構 物’其可展現不同的功效’導致摻和物的功效有顯著差異。 它可以具有（R，S)-異構物的1:1非鏡像異構物混合物存在， 但最佳為鏡像異構上純的（即實質上不含所有其他的里構 物）。例如，該異構物可包含所有存在的胺曱酸[2_羥基-經基-2·[[(2-(4-經基苯基）小甲基乙基]胺基]乙基]苯基]•甲 酯的至少50重量％，較佳至少75%，例如至少9〇%、至少 95%或至少99%。 在本文術語「醫藥上可接受的鹽」是指從醫藥上 可接受的、相對無毒的酸’包括無機酸和有機酸製備的鹽。 適合的酸包括醋酸、苯橫酸、苯甲酸、樟腦績酸、礙酸、 檸檬酸、二氫填酸、乙烯績酸、反丁稀二酸、半乳糖酸酸、 葡萄糖酸、葡萄糖酸·酸、麵胺酸、氫溴酸、氫氯酸、氫硤 酸、異丁酸、羥乙磺酸、乳酸、順丁烯二酸、蘋果酸、丙 二酸、杏仁酸、曱確酸、單氫碳酸、單氫麟酸、單氫硫酸、 黏酸、硝酸、帕莫酸（Pamoic acid)、泛酸、磷酸、苯二甲酸、 丙酸、辛二酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、曱苯磺酸，包括 對甲苯續酸、間甲苯磺酸和鄰曱苯磺酸，以及類似物（參 見例如 Berge et al.，J. Pharm. Sci_，66:1-19 (1977); Stahl and Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts, Wiley 200920725 VCH，（2002))。也包括的是龙 /、他具有醆性之相盈主 合物的鹽類，包括胺基酸 于…f的化 他化合物，例如阿斯匹靈、：二胺酸和類似物，以及其 可藉由把這些化合物的中性形式與:夠=相和類似物。 來得到酸加成鹽，可不加其 戛、想要的酸接觸 中。為固體時，鹽類可以曰开:"或在適合的惰性溶劑 ……η 或非晶形的變形存在。酸加 成鹽的例子疋D-酒石酸鹽。 本發明的化合物也可以製造成氣化形式，即其中，例 如甲氧幾基上的-或多個氫原子被置換成氣。 甲美合物中的甲氧幾基上的甲基亦被考慮置換成氟 土卩°亥基團中一、二或三個曱基氳原子置換成氟原 子）。此類化合物可藉由相似於本文所描述之製備胺甲酸 S旨異構物的方法來製備。 :甲酸S曰異構物及其醫藥上可接受的鹽類可藉由下述 製備八中5玄方法包含使式（II)化合物與下通式（Η〗）化 合物反應，

ΗΝ. ,OCH3 (Π) 其中Pl代表氫原子或羥基保護基， 10 200920725 p3nh

(ΠΙ) 其中p2代表氫原子或羥基保護基且P3代表苯甲胺保護 以得到通式（zv)化合物

ΌΡ2 (IV) 基 要 或其鹽，然後移除任何保護基p1 形成醫藥上可接受的酸加成鹽。 P2和P3，並且若 需 保護基可以是任何適合的保護基，例如如Green et al l “Protective Groups in Organic Chemistry，”（Wiley 2nd ed 1991)中所描述的。羥基保護基的例子包括芳烷基，例如笨 曱基’以及三烷矽烷基，例如第三丁基二甲石夕燒義 C TBDMS )。苯曱胺保護基的例子是視需要在苯環上被— 或多個如1、2或3個選用的取代基，例如選自鹵素、 烷基及（1-4C)烷氧基者取代的苯曱基；例如未經取代的笨甲 基。 式（II)及（ΙΠ)化合物之間的反應是藉由將兩種化合物熔 化在一起而方便地進行的，例如藉由在5〇至13〇〇c的範圍 11 200920725 内加熱，例如約7 5。C。 由P1、P2以及P3所代表的任何保護基可用習知的方法 移除。例如，苯甲基可藉由在碳上鈀存在下催化氫化來移 除，以及三烷矽烷基可用氟化四丁基銨處理。 式（II)化合物可藉由將式（V)化合物與鹼，例如鹼金屬碳 酸鹽如碳酸舒反應製備，

ο (V) 其中Ζ代表離去原子或基團，例如溴原子。 式（V)化合物可藉由使用例如硼將式（VI)化合物

(VI) 在手性輔助如（1S，2R)-1-胺基-2-茚醇存在下立體選擇 還原，然後將硝基還原成胺基及將得到的胺基乙醯化，例 如使用二曱基碳酸鹽而製得。 12 200920725 通式（III)化合物可藉由將通式（VII)化合物 p3nh、

och3 (VII) 與三溴化硼反應以得到通式（VIII)化合物而製得

(VIII) 。 然後例如藉由與三烷矽烷基函化物如氯化第三丁基二 甲矽烷反應來保護羥基。 應了解存在於本方法之最終產物中的所有胺甲酸[2_羥 5-Π-經基-2-[[(2·(4-經基笨基）小甲基乙基）胺基）乙基） 苯基）甲酉曰的式⑴化合物重量百分比會取決於所用的起始 k. 物質的鏡像異構物純度以及所使用的任何鏡像異構物純化 步驟，例如手性液態層析法。 進_=Γ。)中間產物被認為是新賴的且提供為本發明的 所以，根據另一方面，本發明提供了—種醫藥 其包含式(I)化合物或其醫藥上可接受的 ， 述，以及醫藥上可接受的載劑。 4如本文中所 根據本發明的醫藥組成物可 地給藥給患者，例如藉由口服、漆:可方便的途徑適宜 道、口頰或直腸）、非紋、列如鼻、舌下、陰 非…的或經皮膚给藥。它可以： 13 200920725 例如溶液、懸浮液、粉末、壓鍵、氣霧劑調配物、錠劑、 栓劑、乳劑、硬或軟明膠膠囊或糖漿形式。式⑴化合物可 以溶於載劑中、用載劑稀釋或用載劑支持。因此，該載劑 可以是式（I)化合物的支持物’例如膠囊、小袋、紙張或其 他醫藥容器。 在一具體實例中’該醫藥組成物是適用於喷霧器給藥 的水洛液。為了穩定性，該水溶液調配物可為等張的和經 緩衝在最理想的pH值下。噴霧用水溶液調配物也可以是自 由鹼或不溶性鹽或環糊精加成物的奈米顆粒懸浮液或微米 懸浮液。 在另一具體實例中，該醫藥組成物是適用於定量吸入 益給藥的氣霧劑調配物，該氣霧劑調配物含有晶形形式的 乙醯胺異構物和推進劑或在具有適當的推進劑的溶液中、 推進劑的組合以及推進劑與可接受的共溶劑或其他溶解劑 的組合。 該推進劑可以是用於氣霧劑調配物中的任何適合的推 進劑，例如氫氟烷烴（HFA)如丨丄以·四氟乙貌（hfai34)或 1，1，1，2,3,3,3·七氟丙烷（HFA227)或推進劑的組合。較佳的是 HFA134。推進劑可佔氣霧劑調配物的至少9〇重量。氣霧 劑調配物也可包括尤其是惰性氣體以幫助形成氣霧劑。 氣霧劑調配物可進一步包含界面活性劑。該界面活性 劑係用來使胺甲酸酿異構物安定和分散在懸浮液中，以及 也用來作為定量吸入器的閥濁滑劑。它可以是用於氣霧劑 調配物中任何適合的界面活性劑。用在氣霧劑調配物中之 200920725 界面活性劑的例子描述在美國專利第5,225，i83號，其在此 ^作為參考。較佳的界面活性劑是油酸。當界面活性劑 存在時’界面活性劑通常存在的量是從！⑽至wo的界 面活性劑：胺甲酸酿異構物，較佳約1:2〇。 ' 轧霧劑調配物可進一步包含共溶劑。氣霧劑調配物中 ”冷相功能是加速界面活性劑溶解，界面活性劑在推進 射冷解度差。它可以是氣霧劑調配物中所用的任何適合 =^ 可使用共溶劑例如甘油或乙醇。較佳的共溶劑是 ^醇’尤其是無水乙醇。乙醇成分可方便的佔氣霧劑調配 至夕30重量％ ’例如2至6%。 曰疋里吸入器典型的包含含有氣霧劑調配物的罐體、計 =閥閥桿以及可接受閥桿的致動器。使用時，患者壓迫 罐體進致動器並且吸氣，使調配物劑量得以給予並且進入 患者肺部。 所以，根據進一步方面，本發明提供了 一種定量吸入 :其包含含有描述於本文中之氣霧劑調配物的罐體、計 里閥以及致動器。 罐體的内部表面較佳的是例如用保護性聚合物塗覆 的’或用其他方式處理來使調配物和罐體之間的化學或物 理柯六 . 乂互作用降到最低。吸入器較佳的具有孔徑直徑在從 〇·2至0.60 mm的範圍。 在又另一具體實例中，醫藥組成物是適合吸入或吹氣 的乾粉形式。該組成物可包含只有胺甲酸酯異構物結晶（例 如具有質量中數氣動直徑從1至10微米，較佳的是從2至 15 200920725 1微米），或與適合的—種或多種醫藥上可接受的載 合、共沉澱、共社曰十喊、涵私… /、、·。M或喷灑乾燥的胺甲酸酯異 的醫藥上可接受的哉為丨 山 载齊丨匕括但不限於一或更多天然或合成 的碳水化合物例如單類、鑠 _ 干顆雙螺、二醋、寡醣、多醣、多元 醇、胺基酸和蛋白暂&、、六為丨人 贫白質的心劑合物，及/或是其醫藥上可接受 的酉旨、縮路、或踏脑广木/ 飞·-類（虽此類衍生物存在的話）形式。載 =佳的是乳糖，更佳的p水合乳糖。乾粉組成物可以 疋早位劑罝形式呈現，在例如膠囊或藥包如明膠、或氣泡 已扃中在吸入器或吹藥器辅助下，粉末可以從該處給藥。 :粉組成4勿可以多劑量形式呈⑨，用吸入器或吹藥器計 !，或在裝置中預先計量成為分開的劑量以用於一系列的 給藥。 方便的，乾粉調配物是用多劑量乾粉吸入器給藥的。 所以本發明也提供了多劑量乾粉吸入器，其含有乾粉 儲存槽’纟中含有描述於本文前述之胺甲酸酯異構物乾^ 氣霧劑調配物、以及計量槽。 根據本發明的式⑴化合物可以與一或多種例如選自類 固醇’例如倍氯米松（becl〇methas〇ne)、特安皮質醇 (triamcinolone )、氟尼縮鬆（funisolide )、莫米松 (mometasone)、布地奈德（budesonide )或氟替卡松 (fluticasone )、簟毒鹼受體拮抗劑例如異丙托品、太托品、 或格隆溴胺（glycopyrrolate )的其他活性成分共同給藥。 所以，在一具體實例中，根據本發明的醫藥組成物可以新 穎的機制進一步包含類固醇及/或簟毒鹼受體拮抗劑及/或 200920725 控制劑或支氣管擴張劑。 在另-個具體實例中，根據本發明的醫藥組成物可進 -步包含抗發炎劑’例如腫瘤壞死因子阿伐（TNFa)的抑制 劑、二肽基肽酶iV、以及促發炎介白素如旧和iLn的抗 體。 & 在另〃體實例巾，根據本發明#醫藥組成物可進_ 步包含化痰劑例如色甘酸、乙醯半胱胺酸、精胺酸、或2_ 姨基乙續酸鹽。 根據另-方面’本發明提供了治療支氣管收縮疾病的 方法’該方法包含給藥給需要治療的患者 化合物或其醫藥上可接受㈣。 气⑴ 支氧官收縮疾症"ό]* α , 陆4 i 、届了以疋例如慢性阻塞性肺病（例如氣 腫或支氣管炎）、囊 八 叢狀纖維化、或氣喘。 患〇Τ* JJV/ 9 * a, „ , 疋類或非人類的哺乳動物，例如狗、貓、 馬、牛、羊或豬。較佳的，患者是人類。 化合物給藥的 類、體重和年齡 於許多因素，例如患者的種 溢认人斗s 乂及要/σ療的症狀的嚴重性。例如’給 7Κ、、，口人頭的劑吾I ， 物（α ό i 匕括從75至5,000微克的胺甲酸酯異構 扨、以自由給舛瞀 行 彳鼻）。該劑量可以例如每天給藥一或兩次。 根據另—大 可接受的蹄，1本發明提供了式(1)化合物或其醫藥上 J风，其係用於治療。 根捸又另—太 可接受的鹽的 本發明提供式⑴化合物或其醫藥上 藥品。 、用途’其係用於製造治療慢性阻塞性肺病之 17 200920725 根據再進一步方面，本發明提供了含有式⑴化合物或 其醫藥上可接受的鹽及醫藥上可接受的載劑的醫藥組成 物，其係用於治療慢性阻塞性肺病，或作為支氣管擴張劑。 雖然則述的發明為了說明的原因已相當詳細的描述， 對熟習此技藝的人而言，在不脫離本文所描述之本發明的 範疇下進行改變和修飾將是顯而易見的。 實施例 下面實施例說明本發明。

THF是指四氫呋喃，Et〇Ac是指醋酸乙酯，而扮2〇是 指二乙醚。 實施例1 胺甲酸[2-經基-5-[(lS)-l-羥基_2_[[(ir)_2_(4_羥基苯 基）-1-甲基乙基]胺基]乙基]-苯基]_甲醋 乙-1 -醇 步驟A) (lS)-l-(3_硝基_4-苯甲氧基笨基）_2_溴 OH 、

把冷的（5。〇 (1S，2RM_胺基_2-節醇（4〇〇毫克，268 毫莫耳）在而（16〇冑升）中的溶液逐滴添加至冷的（〇。〇 硼-二乙基苯胺錯合物（7.0公克，43毫莫耳）在THF (2〇 毫升）的溶液中。添加完畢之後，把所得到的溶液在 下攪拌30分鐘，然後在30分鐘的期間内將2_溴_4，-苯甲氧 基-3，-硝基苯乙_ (20.0公克’⑴毫莫耳）分三次添加乳 18 200920725 ，所得到的溶液在<5τ攪拌一小時，藉由逐滴添加丙酮（17 宅升）來中止反應，然後回溫至室溫隔夜。在真空中把反 應此合物濃縮成殘餘物，該殘餘物溶於曱苯（1 〇〇毫升）中 並且依序用1〇%H2S04 ( 2 X 45毫升）、Η2〇(2χ45毫升） 以及飽和濃鹽水（i χ 4〇毫升）清洗。將有機層以Μ#… 脫水、澄清然後真空濃縮至體積〜4〇毫升。緩慢添加庚烷（45 毫升）以得到濃漿。固體以過濾器收集，並用庚烷（2 X 5 毫升）清洗。將此物質溶於溫曱笨（〜5〇毫升）中，使溶液 ^ m然後用庚烷（5 0毫升）稀釋。將所得到的混合物攪 拌30分鐘，將固體收集後，以庚烷（2χ 5毫升）清洗，然 後真空乾燥至恆重，得到18.9公克（94 〇%)標題化合物。 步驟B) (lS)-l-(3-胺基-4-苯曱氧基笨基）_2_溴乙_卜醇

PhCH2〇

nh2 將步驟A)產物（18.7公克，53」毫莫耳）於曱苯（4〇 耄升）和THF ( 40毫升）中之溶液添加到含有pt2〇 ( 37〇 宅克）的帕而搖瓶中。在H2 ( 50 pSi，344.74 kpa)下搖晃 此此合物直到反應完全（18小時）。藉由過濾移除催化劑， 以及將濾液濃縮成油狀物。管柱層析法（丨公斤矽膠，並且 用19:1的CH2Cl2/MeOH裝填並洗提）得到n.9公克（69 6〇/〇) 標題化合物。 步驟C) (lS)-l-(3-甲氧羰基胺基_4_苯曱氧基苯基）_2_ 19 200920725 溴乙-1 -醇

=H

PhCH20"^X\ji;:^ NHCOOCH3 將步驟B產物（u.7公克，36·3毫莫耳）於吡啶（117 宅升）中之溶液在室溫下攪拌15分鐘。一次添加二碳酸二 〔曱酯（4_9公克，37毫莫耳），以及將反應混合物在室溫下 攪拌30分鐘，然後在4〇()(：下攪拌4小時。添加額外的二 碳酸二甲酯（1.3公克，9.7毫莫耳）以及持續在40。(：：下攪 拌2小時。將反應物溶液真空濃縮成油狀物，使其分配在 CH2C12 ( 470 毫升）及 1〇0/〇 aq. HC1 ( 120 毫升）之間。用 〇^2〇：12(1\120毫升）萃取水層。合併的有機層依序用^2〇 (1 X 350毫升）和濃鹽水（1 χ 35〇毫升）清洗，用MgS〇4 脫水，澄清然後真空濃縮成濃聚。用己燒（1 2〇毫升）稀釋 I 混合物以及攪拌30分鐘。固體用過濾器收集，以及用己烷 (2 X 60毫升）清洗，然後真空乾燥至恆重，得到〜丨〇公克 白色固體。藉由在EhO (60毫升）中研磨進一步純化此物 質。固體用過濾器收集，用EhO ( 2 x 10毫升）清洗，然 後真空乾燥至恆重，得到8_5公克部分純化的產物。用矽膠 層析法（800公克管柱，以cH2Cl2/Me〇H ( 19:1 )裝填及洗 提）進一步純化此物質，得到7.2公克（52%)適合用於進 一步轉換的標題化合物。 步驟D) (lS)-l-(3-甲氧羰基胺基笨甲氧基苯基）_環 20 200920725 氧乙烷

PhCH20 NHCOOCH3 步驟C)產物（3.5公克，9 )客钱甘、 •毫莫耳）和碳酸鉀（17 公克，12毫莫耳）於甲醇（ ，7 T砰130耄升）及THF (3〇毫升 的懸洋液在室溫下攪拌25小時 中 f然後真空濃縮成殘餘物。 用CH2C12 ( 35毫升）研磨殘铃板 铒熠殘餘物，所侍到的固體用CH2C12 (2 X 8毫升）清洗之後丟棄。 ^ ^ 交云桊將合併的CHWh萃取物濃縮 成殘餘物，在己烷/峻（丨：Γ )(50毫升）中研磨。將固體 用過慮器收集，用己燒（2 1 2 χ 15毛升）清洗，然後真空乾燥 十重’得到1.4公克（51%)環氧化物。用37公克（97 笔莫。耳）的起始物質進行一次相同的反應，得到17公克 (59/°)進一步產物，總共是3.1公克適合用於進一步轉換 的標題環氧化物。 進，轉換 步驟E) [(1R)_N_笨甲基_2_(肛經基苯基甲基乙基]· 胺

八於[(1R)-N-笨甲基_2_(4_甲氧苯基）]_甲基乙基]胺（53〇 A克，2〇.8毫莫耳）在CH2C12 ( 25毫升）的溶液中在0.5 21 200920725 小時的期間内緩慢添加BBr3於CH2C12( 25.0毫升，i 〇M， 25·〇毫莫耳）溶液。添加之後’該混合物在室溫下攪拌22 小時。添加水（125毫升）’然後添加2.5M aq. Na〇Ii ( 15 毫升）至PH 6。用Et0Ac ( 4 X 200毫升）萃取該混合物， 以及將有機層脫水（NajCU)和濃縮。用CHAU ( 12〇毫 升）研磨殘餘物（3.9公克）’然後濃縮至乾燥，得到標題 化合物（3.8公克，76%)。 步驟F) [(iR)_N-苯甲基_2_(4_第三丁基二甲矽烷氧基苯 基）-1-曱基乙基]胺

步驟E)產物（3.20公克，13.3毫莫耳）、氯化第三丁 基一曱矽烷（3.59公克，23.8毫莫耳）以及咪唑（2.86公 克’ 42.0毫莫耳）於DMF ( 30.0毫升）中的溶液在室溫下 1. 授拌18小時。將混合物濃縮至乾燥，以及將殘餘物分配在

EtOAc ( 200 毫升）和 sat. aq· NaHC03 ( 200 毫升）之間。 水層被分離’並且再次用EtO Ac (100毫升）萃取。將合併 的有機層用濃鹽水（1〇〇毫升）清洗，用Na2S04脫水’過 濾、以及濃縮得到油狀物。將該油狀物用矽膠（100公克，用 1 : 1 EtOAc :己烷洗提）層析得到標題化合物（4.0公克， 85%)，是棕褐色油狀物。 步驟 G)胺甲酸[2-苯甲氧基_5-[(lS)-l-羥基 -2-[[(lR)-2-(4-第三丁基二曱矽烷氧基苯基甲基乙 22 200920725 基]-N-苯甲基胺基]乙基]苯基]_甲酯 OH CH2Ph

PhCH20

OTBDMS HN, .OCH, 將步驟D)(1.26公克，4.21亳莫耳）以及步驟f)(i.5〇 公克’ 4.22毫莫耳）的產物混合物緩慢加熱到乃。。，不加 任何溶劑。所得到的混合物在此溫度下一共加熱三天，這 時間TLC分析（己烧_Ae，3:1)顯示完全失;^起始的^ 氧化物。冷卻至室溫後，藉由以己烷/Et〇Ac (3 :丨）裝填 及洗提之石夕膠管柱（_公克）中層析二次將相當複雜的反 應混合物純化。全部2_9公克的環氧化物都是用相似的方法 反應和純化得到2.6公克（41%)的標題化合物，是黃色油 狀物。此物質適合用於進一步的轉換。 步驟H)胺甲酸[2·苯曱氧基_5_[(is)小羥基 -2-[[(lR)-2-(4-羥基苯基）_^甲基乙基]_Ν_笨甲基胺基]_乙基] 苯基]_曱酯 23 200920725

QH

PhCH20 CH2Ph

OH

HN \s^°ch3 o 在用冰水浴冷卻的步驟G)產物（17公克，2·6亳 於無水™F( 17毫升）之溶液中添加a化四丁基錄溶液（5 3 毫升的L0M溶液在THF中，5 3毫莫耳），在氣氣下檀掉。 將反應混合物在室溫下㈣！小時，以及τιχ分析（⑽心/ 己烷’ 1: 1)顯示完全反應。用EtOAc (2〇〇毫升）稀釋該 反應混合物，以及用水（2 X 120毫升）清洗兩次，然後脫 水（MgS〇4)、過濾、和濃縮得到粗製的產物，是黃色油狀 物。藉由以1 : 1 EtOAc/己烧填充及洗提的矽膠管柱層析法 (2 X 200公克管柱）純化該粗製的物質[該粗製的產物是以 在CH2C12中的溶液放入管柱中]。將含有純化產物的流分合 併並濃縮得到油狀物。把總共2.6公克的起始物質去保護 (deblock )得到共1.2公克（56% )純化後的標題化合物。 步驟 I)胺甲酸[2-羥基-5-[(lS)-l-羥基-2-[[(lR)-2-(4-羥 基苯基）-1-甲基乙基]胺基]乙基]苯基]-甲酯 24 200920725

OH

OH HN、 ^OCH,

O 把步驟H)產物（300毫克，0.555毫莫耳）、i〇% Pd/C ( 400毫克，乾燥物質）及Et0H( 30毫升）的混合物在5〇 psi ( 3 44.74 kpa )(室溫）氫化22小時。把催化劑過濾掉， 以及將濾出液旋轉蒸發得到標題化合物，是油狀物（2〇〇毫 克）。 步驟J)胺曱酸[2-羥基羥基_2_[[(1R)_2_(4_羥 基苯基）-ι-甲基乙基]胺基]乙基]-苯基]•甲酯、（2S，3S)_2,3_ 二羥基丁烷二酸（1 : 〇 (鹽） 把由步驟I)方法製備出來的480毫克產物溶於〇.9毫升 的i-PrOH中。添加151毫克（100毫莫耳）〇_酒石酸於〇.3 宅升的HsO中之溶液。把反應混合物儲存在5〇c下1 6個小 時。沒有發生結晶作用。把混合物進行旋轉蒸發以移除易 揮發物產生褐色膠。利用丙酮然後iPrOH (各i 〇毫升）嘗 試的研磨並不成功。用異丙醚（15毫升）稀釋此物質（膠）。 檀拌3小時之後’形成淡褐色、自由流動的固體。用漏斗 收集該固體，用5毫升異丙醚清洗，然後在室溫下真空乾 燥60小時至恆重，得到48〇毫克標題化合物。MS w/z:[m+h+] 361· NMR圖譜與指定的結構一致。 25 200920725 β 1和卩2放射線配位子結合分析 藉由量測化合物取代[1251]_氰吲哚洛爾（cyan〇pid〇lc)1) 或[3H]-CGP-12177分別與人類重組βι和β2受體（表現於 CHO細胞中）之特定結合的能力來研究受測化合物對於腎 上腺素0!和β2受體的親和性。…以是定義為可抑制5〇%的 放射性配位子之特定結合的濃度。Ki是從和已知的放 射性配位子KD計算而來的（Cheng及Prusoff，s方程式）。 在這個試驗中’發現實施例1的化合物的Ki >1〇 μΜ， βι受體在濃度20 μΜ時以及β?受體在濃度〇·99 μΜ時只有 抑制44%的特定結合。β"β2的結合比是> 1 〇。 經比較’發現阿福莫特羅（arforrn〇ter〇i)和福莫特羅的 (S，R)異構物的值分別是〇155 μΜ (ρι) 、〇 〇〇4 _ (d 和 41 ( β,/β2)以及 2.50 μΜ ( β! ) 、0.075 μΜ ( β2)和 33 (β"β2)。 本質活性分析（β2 ) 受測化合物的本質活性分析是藉由測量其使來自表現 於CHO細胞中的人類重組β2受體之cAMP生成増加的能 力。數據表示成相對於普魯卡地魯（procater〇l)誘發的cAMp 增加量之反應％。 發現實施例1的化合物具有79%的本質活性。 經比較，發現阿福莫特羅和（S，R)福莫特羅分別具有 98%和91%的本質活性。 达1及β2腎上滕素活性（功能性的） 藉由分離自Dunkin Hartley天竺鼠的右心房的正變速 26 200920725 對腎上腺素βι 50%的濃度是 性效應（positive chronotropic effect)證明 受體的功能性促效作用。得到最大效果之 EC50 ° 藉由放鬆分離自Dunkin Hanley天竺鼠的自律收縮氣 管證明對腎上腺素β2受體的功能性促效作用。得到最大效 果之50%的濃度是EC50。 在這些實驗中’無法決定出實施例1化合物在功能 性分析的Ε(：5〇，因為在濃度30 μΜ只有看到增加2〇%心跳 速率。然而，實施例i化合物被發現對於β2受體的EG。為 62 nM。函數比是 >484。 阿福莫特羅的值經比較發現為3nM(M 、〇〇4inM (β2)以及 75。 在緩衝水溶液中的安定性 溶液製備··製備以下溶液用於各種受測化合物。

•洛液Α是製備自〜30毫克的受測化合物在150毫升的 0.005 Μ檸檬酸鹽緩衝液中，pH5〇 (〜〇2毫克/毫升）。 •溶液B製備如下：將大約3〇毫升小份量的溶液八轉 換！另個令器中，並且ffilN Hci (〜Ο!毫升）將溶液的 PH值調整到pH 3.0。 •洛液C製備如下：將大約3〇毫升小份量的溶液入轉 移到另-個容器中’並且用1Νν_ (〜〇2毫升）將漆液 的pH值调整到pH〜8.〇。 由於調整pH值所用的1Nhc^ 1N Na〇H體積 可忽略，所以溶液A、B、C中的受測化合物濃度是相同的。 27 200920725 餚存方索 ’合狹一裏備出來T TO-罝的各溶液轉移到 < J瓶中，其中9個小瓶儲存在_2〇〇c，以及另兩個分 存放在30°C和40。(：。 、I在各個下述的間隔從_2〇°C的儲存下移出兩個小瓶， 分別存放在30°C和4〇。〇。 瓶 小瓶移除的週數 顯示在下矣。 小瓶務降66裀虹 「~~1 --r-ϊ-ί

儲存條件的週數 3〇°C 或 40°C 12 4 在第 12 週，移出Γ~~ 一'—~~~—-L _ 溫至室溫，這是第0天的溶液。 曼個小瓶並且回 樣本分析：在第12週，用 以在pH 5的第〇天的溶液作為二:法分析所有 的溶液’ HPLC分析該受測化合物（方法準’合液。用有UV偵測的 、條件參見表1 ) 28 200920725 表1 HPLC方法條件 參數 方法細節 管柱 Atlantis dC18, 3μιη 15 0 χ 4.6 mm 動相A 水/HCOOH 100/0.1, v/v 動相B ACN/水/HCOOH 30/70/0.1, v/v/v 管柱溫度 35〇C 取樣器溫度 5°C 注射體積 5微升 流速 0.6毫升/分鐘 波長 PDA 200-350 奈米 操作時間 50分鐘 梯度表 時間 (分鐘） % A %B 0 100 0 8 100 0 15 70 30 45 5 95 46 100 0 50 100 0 表2 SEP-2291 15在水溶液中的安定性 (在pH 5_0下初始濃度的％ ( 0.19847毫克/毫升）） 條件 pH 3.0 pH 5.0 〜pH 8 時間 (wk) 30°C 40°C 30°C 40°C 30°C 40°C 0 98.31 98.3 1 100.20 100.20 97.78 97.78 1 99.95 98.87 99.68 100.40 69.33 30.18 2 99.12 100.33 101.08 101.07 50.77 8.85 4 100.91 105.71 101.59 102.09 27.72 0.52 8 101.16 106.72 105.28 104.88 6.96 0 12 101.54 106.51 106.61 106.74 1.24 0 29 200920725 結論：在pH 3或5，發現實施例1化合物當儲存在30°C 時非常穩定至少1 2週。 【圖式簡單說明】 無 【主要元件符號說明】 益 30

Claims (1)

1. 義 200920725 申請專利範圍： 1. 一種式（I)化合物 OH HO

   OH HN、 /OCH,

   或其醫藥上可接受的鹽。 2_—種甲基[2-羥基-5-[l-羥基-2-[[(2-(4-羥基苯基）-1-曱基乙基]胺基]乙基]-苯基]胺曱酸酯異構物的混合物，其中 該混合物包含至少90重量％的異構物 OH HO

   ch3 OH 3 .根據申請專利範圍第1項或申請專利範圍第2項的化 合物，其是D-酒石酸鹽的形式。 4. 一種製備根據申請專利範圍第1至3項中任一項之化 合物的方法，該方法包含將通式（II)化合物與下通式（III)化 合物反應： 31 200920725

   (Π) 其中P1代表氫原子或羥基保護基，

   (III) 其中P2代表氫原子或羥基保護基且P3代表苯甲胺保護 基 以得到通式（IV)化合物 OH P3

   OP2 HNk /OCHq 〇 (IV) 或其鹽，然後移除任何保護基P1、P2以及P3，以及若 需要，形成醫藥上可接受的酸加成鹽。 32 200920725 5·—種通式（IV)化合物 OH P3

   HN, XH, (IV) p3=其鹽，其中p>p2各代表氫原子❹基保護基，及 p代表氧原子或苯曱胺保護基，前提*pl、p2和P3其 少一者代表保護基。 、 6 · —種醫藥組成物，其包含根摅由& # 又 3很糠申清專利範圍第1至3 項中任一項的化合物及醫藥上可接受的載劑。 7·根據申請專利範圍第6項的醫藥組成物，其進一步 含類固醇。 > 根據申請專利範圍第7項的醫藥組成物，其中該類固 醇是倍氯米松（beclomethasone)、特安皮質醇 (tnamcin〇lone )、氟尼縮鬆（funisolide)、莫米松 (mometasone)、亞丁皮質醇（budes〇nide)或氟替卡松 (fluticasone) ° 9.根據申請專利範圍第6至8項中任一項的醫藥組成 物，其進一步包含蕈毒鹼受體拮抗劑。 1〇·根據申請專利範圍第9項的醫藥組成物，其中該蕈 毋驗又體拮抗劑是異丙托品（Ipratropium)或太托品 33 200920725 (tiatropium)。 11. 根據申睛專利範圍第6至8項中任一項的醫藥組成 物，其進一步包含抗膽鹼劑。 12. 根據申請專利範圍第11項的醫藥組成物，其中該抗 膽驗劑是格隆 >臭銨（glycopyrralate )。 13. 根據申請專利範圍第6至8項中任—項的醫藥組成 物’其進一步包含化瘦劑。 14 ·根據申凊專利範圍第13項的醫藥組成物，其中該化 痰劑是色甘酸、乙醯半胱胺酸、精胺酸、或2_巯基乙烷磺 酸鹽。 I5.根據申請專利範圍第6至8項中任一項的醫藥組成 物’其進一步包含抗發炎劑。 ^ 1 6.根據申請專利範圍第15項的醫藥組成物，其中該抗 :炎劑是腫瘤壞死因子阿伐（TNFa)或二肽基肽酶IV抑制 口子、及/或對促發炎介白素如IL4和IL13的抗體。 其^7·—種用於治療與可逆性呼吸道阻塞疾病有關的支氣 ’广的邊藥組成物，其包含有效量的根據申請專利範圍 弟1項的化合物。 # 種根據申請專利範圍第1項的化合物之用途，其 縮之^ ^ '台療與可逆性呼吸道阻塞疾，病有關&支氣管收 品。 治療。根據申_專利範圍第1或3項的化合物，其係用於 根據申請專利範圍第2項的異構物的混合物，其係 34 200920725 用於治療。 盆在田冑申5奢專利範圍第2項的異構物混合物的用途， …、於製備治療與可逆性呼吸道阻塞疾病有關的支氣管 收縮之藥品。 22.根據申請專利範圍第3項的化合物的用途’其係用 於製備治療與可逆性呼吸道阻塞疾病有關的支氟管收縮之 藥品。 十一、圖式： 35