TW200808822A

TW200808822A - Erythropoietin receptor agonists

Info

Publication number: TW200808822A
Application number: TW096113045A
Authority: TW
Inventors: Luis Borges; Randal R Ketchem; Ai Ching Lim; Christopher Mehlin; hong-xing Zhou
Original assignee: Amgen Inc
Priority date: 2006-04-14
Filing date: 2007-04-13
Publication date: 2008-02-16
Also published as: AR060440A1; US20080124340A1; PE20080187A1; JP2009533057A; AU2007238704A1; WO2007120766A2; WO2007120766A3; MX2008013201A; EP2007812A2; CA2649384A1

Description

200808822 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明大體係關於紅血球生成素受體拮抗劑，包含紅血球生成素受體拮抗劑之套組，及使用紅血球生成素受體拮抗劑之方法。【先前技術】紅jk球生成素（Ep〇)係一種與紅血球系祖細胞生長及成熟為紅血球相關之醣蛋白激素。EP〇由胎兒肝臟及成人腎 # 臟產生且刺激由紅血球前期細胞產生紅血球。EPO產生減少通常因腎衰竭而發生在成人身上，其可引起貧血症。已藉由基因工程設計技術，涉及由以編碼紅血球生成素之基因轉染之宿主細胞表現及分泌該蛋白來產生EPO。投與重組EP0可有效治療貧血症。舉例而言，Eschbach等人（N. Engl J Med 316，73 (1987))描述了 EPO用於醫治由慢性腎衰竭引起之貧血症之用途。

Miyake 等人（J· Biol· Chem· 252, 5558 (1977))已描述人類 _ 尿EPO之純化。紅血球生成素編碼基因之锻別、選殖及表現描述於頒予Lin之美國專利第4,703,008號。頒予Lai等人之美國專利第4,667,016號包括用於自細胞培養基純化重組 EPO之方法之描述。據認為紅血球生成素受體（Ep〇_R)係以多聚複合物之形式存在。沈積研究表明其分子量為33〇 +/- 48 kDa (Mayeux 等人 Eur. J· Biochem· 194，271 (1990))。交聯研究指示受體複合物包括多種不同多肽， 66-72 kDa種類與 85及100 kDa種類（Mayeux 等人 j· Bi〇1· 120060.doc 200808822

Chem· 266，23380 (1991); McCaffery 等人 J· Biol· Chem· 264，10507 (1991))。亦由EPO受體之免疫沉澱反應偵測到不同之95 kDa蛋白（Miura & Ihle Blood 81，1739 (1993))。另一交聯研究揭示110、130及145 kDa之三種含EPO複合物。110及145 kDa複合物含有EPO受體，因為其可經對抗該受體產生之抗體免疫沉澱（Miura & Ihle，同上文）。羧基端截斷EPO受體之表現導致對110 kDa複合物之偵測，但未偵測出145 kDa複合物。此表明較高分子量之複合物含有 Φ 存在於110 kDa複合物中之多肽及額外之35 kDa蛋白。經選殖及表現小鼠及人類EPO受體獲得對EPO受體複合物之結構及功能的進一步瞭解（D’Andrea等人Cell 57，277 (1989); Jones 等人 Blood 76，31 (1990); Winkelmann 等人 Blood 76，24 (1990); PCT申請案第 WO 90/08822號；頒予 D’Andrea等人之美國專利第5,278,065號）。全長人類EPO受體為具有大約.224個胺基酸之胞外域及25胺基酸信號肽之 483胺基酸跨膜蛋白。人類受體顯示出與小鼠受體約82% • 之胺基酸序列同源性。表現於哺乳動物細胞中之經選殖全長EPO受體（66-72 KDa)已顯示與EPO以類似於紅血球系祖細胞上天然受體之親和力結合。因此，據認為此形式含有主要EPO結合判定子。作為交聯複合物之部分經觀察到之 85及100 KDa蛋白不同於EPO受體，但大體接近EPO，因為 EPO可與其交聯。85與100 KDa蛋白彼此相關且85 KDa蛋白可為100 KDa種類之蛋白水解分裂產物（Sawyer J. Biol. Chem. 264, 13343 (1989)) 〇 120060.doc 200808822 已製得僅含有胞外域之可溶（截斷）形式之EPO受體且發現其與EPO以約1 nM或比全長受體低約3至10倍之親和力結合（Harris 等人 J. Biol. Chem. 267，15205 (1992); Yang & Jones Blood 82, 1713 (1993)) 〇 EPO受體之活化產生數種生物作用。三種活性包括刺激未成熟紅血球母細胞增殖，刺激未成熟紅血球母細胞分化及抑制紅血球系祖細胞之細胞凋亡（Liboi等人Proc. Natl·

Acad· Sci· USA 90，11351 (1993); Koury Science 248，378 # (1990))。導致刺激增殖及刺激分化之信號轉導路徑表現出可分離（Noguchi等人Mol· Cell. Biol· 8, 2604 (1988); Patel 等人 J. Biol· Chem_ 267, 21300 (1992); Liboi 等人 ibid)。【發明内容】

在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段。在某些實施例中，單鏈可變片段包含：a)包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4 之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸 10之胺基酸序 58之胺基酸序 62之胺基酸序 66之胺基酸序 70之胺基酸序 74之胺基酸序 78之胺基酸序序列；e)包含 SEQ ID NO: 9 及 SEQ ID NO: 列；f)包含 SEQ ID NO: 56及 SEQ ID NO: 列；g)包含 SEQ ID NO: 60及 SEQ ID NO: 列；h)包含 SEQ ID NO: 64及 SEQ ID NO: 列；i)包含 SEQ ID NO: 68及 SEQ ID NO: 列；j)包含 SEQ ID NO: 72及 SEQ ID NO: 列；k)包含 SEQ ID NO: 76及 SEQ ID NO: 120060.doc 200808822 列；1)包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；〇)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列；P)包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序 Φ 列；或t)包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段。在某些實施例中，單鏈可變片段包含：a)包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 3及 SEQ ID NO· 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: ® 10之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO·· 56及SEQ ID NO: 58 之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序 120060.doc 200808822 列；η)包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO·· 90之胺基酸序列；〇)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列；p)包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NCh 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種治療患者貧血症之方法。在某些實施例中，該治療患者貧金症之方法包含向該患者投與單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a)包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO·· 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5 及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7及 SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序歹ij ; f)包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74 之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序歹; m)包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸 120060.doc -10- 200808822 序列；〇)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列；P)包含SEQ ID NO·· 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NOM04及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO·· 110之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種促進患者組織保護之方法。在某些實施例中，促進患者組織保護之方法包含向該患者投與單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a)包含 SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7 及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；幻包含SEQ ID NO: 9及 f) 包含 SEQ ID NO: 56及 g) 包含 SEQ ID NO: 60及 h) 包含 SEQ ID NO: 64 及 i) 包含 SEQ ID NO: 68及 j) 包含 SEQ ID NO: 72 及 k) 包含 SEQ ID NO: 76 及 l) 包含 SEQ ID NO: 80 及 m) 包含 SEQ ID NO: 84及 n) 包含 SEQ ID NO: 88及〇)包含 SEQ ID NO: 92及 SEQ ID NO: 10之胺基酸序列 SEQ ID NO: 58之胺基酸序列 SEQ ID NO: 62之胺基酸序列 SEQ ID NO: 66之胺基酸序列 SEQ ID NO: 70之胺基酸序列 SEQ ID NO: 74之胺基酸序列 SEQ ID NO: 78之胺基酸序列 SEQ ID NO: 82之胺基酸序列 SEQ ID NO: 86之胺基酸序列 SEQ ID NCh 90之胺基酸序列 120060.doc • 11· 200808822 SEQ ID NO: 94之胺基酸序列；p)包含SEQ ID NO: 96及 SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及 SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及 / SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及 SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 112 及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法。在某些實施例中，該活化哺乳動 φ 物中紅血球生成素受體内源活性之方法包含向該哺乳動物投與一定量單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含 SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；e)包含SEQ ID NO: 9 及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 56及 SEQ ID NO: 58之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 60及鲁 SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 64及 SEQ ID NO: 66之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 68及 SEQ ID NO: 70之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 72及 SEQ ID NO: 74之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 76及 SEQ ID NO: 78之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 80及 SEQ ID NO: 82之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 84及 SEQ ID NO: 86之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 88及 SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；o)包含SEQ ID NO: 92及 120060.doc -12- 200808822 SEQ ID NO: 94之胺基酸序列；p)包含SEQ ID NO: 96及 SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及 SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及 SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及 SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 112 及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種抗體。在某些實施例中，該抗體包含：a)包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NCh 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d)包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列；f)包含 SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列；g)包含 SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含 SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列；i)包含 SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列；j)包含 SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: 76及SEQ ID NCh 78之胺基酸序列；1)包含 SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列；m)包含 SEQ ID NO·· 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序歹，J ; n)包含 SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；〇)包含 SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序歹; ρ)包含 SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含 SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含 120060.doc -13- 200808822 SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含 SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或t)包含 SEQ ID NO: 112及 SEQ ID NO: 114之胺基酸序歹，J。在某些實施例中，提供一種治療患者貧血症之方法。在某些實施例中，該治療患者貧血症之方法包含向該患者投與抗體，其中該抗體包含：a)包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4 之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之腺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；〇)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列；p)包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序歹丨J ; q)包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NCh 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序 120060.doc -14- 200808822 列；或t)包含SEQ ID NOr 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種促進患者組織保護之方法。在某些實施例中，促進患者組織保護之方法包含向該患者投與抗體，其中該抗體包含：a)包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6 之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NCh 74之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；〇)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序歹; p)包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及SEQ m NO: 110之胺基酸序歹J ;或t)包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸 120060.doc •15- 200808822 序列。在某些實施例中，提供一種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法。在某些實施例中，該活化哺乳動物中紅jk球生成素受體内源活性之方法包含向該哺乳動物投與一定量抗體，其中該抗體包含：a)包含SEQ ID NO: 1 及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 3及 SEQ ID NO: 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58 之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；〇)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列；p)包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO·· 114之胺基酸 120060.doc -16 - 200808822 序列。在某些實施例中，提供一種單鏈町變片段。在某些實施

例中，單鏈可變片段包含：a)包含ID NC): 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ lP N〇: 14、SEQ ID NO: 15及SEQ ID NO: 16之胺基酸斤列’ b)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID N0: 13、SEQ ID N〇:

17、SEQ ID NO: 18及SEQ ID NO: 19之胺基酉夂序列’ c)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、ID N0: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ IP NO: 22 之胺基酸序列；d)包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID N〇: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；e)包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、 SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；f)包含 SEQ ID NO·· 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含Seq ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；h)包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139 之胺基酸序列；i)包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID 120060.doc -17- 200808822

NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151 之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO·· 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列；1)包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168 及 SEQ ID NO: 169 之胺基酸序列；n)包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID

NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID

NO: 175 之胺基酸序列；o)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及SEQ ID NO: 181之胺基酸序列；p)包含SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列；q)包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID

NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID

NO: 193 之胺基酸序列；r)包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204 及 SEQ ID NO: 205 之胺基酸序列；或t)包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID 120060.doc -18- 200808822 NO: 211之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段。在某些實施例中，單鏈可變片段包含：a)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、 SEQ ID NO: 15及SEQ ID NO: 16之胺基酸序列；b)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: φ 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；d)包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、 SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；e)包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 123 > SEQ ID NO: 124 > SEQ ID NO: 125 > SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g) 籲包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；h)包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及SEQ ID NO: 139之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: -19- 120060.doc 200808822

148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及SEQ ID NO: 157之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m)包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；n)包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；o)包含SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列；p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO·· 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列；q)包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及SEQ ID NO: 193之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID •20- 120060.doc 200808822 NO·· 210及SEQ ID NO: 211之胺基酸序歹。

在某些實施例中，提供一種治療患者貧血症之方法。在某些實施例中，該治療患者貧血症之方法包含向該患者投與單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； b)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、 SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NCh 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 29、 SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131 ^ SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 13 4之胺基酸序列；h)包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及SEQ ID NO: 139之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序 120060.doc -21 - 200808822

列；j)包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 15(^SEQ ID NO: 151 之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: I52、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: !55、SEQ ID NO: 156及SEQ ID NO: 157之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: l60、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162 及 SEQ ID NO: 163 之胺基酸序

列；m)包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: l65、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: !68ASEQ m NO: 169 之胺基酸序列；n)包含 SEQ ID NO: I70、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；〇)包含SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: I78、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180 及 SEQ ID NO: 181 之胺基酸序列；p)包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: l83、SEQ ID

NO: 184 > SEQ ID NO: 185 > SEQ ID NO: 186ASEQ ID

NO: 187之胺基酸序列；q)包含 SEQ ID NO: l88、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191 ' SEQ ID NO: 192及SEQ ID NO: 193之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: I96 ' SEQ ID

NO: 197、SEQ ID NCh 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID

NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID

NO: 205之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 206、SEQ • 22- 120060.doc 200808822 ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種促進患者組織保護之方法。在某些實施例中，促進患者組織保護之方法包含向該患者投與單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a)包含 SEQ ID NO: 11 ^ SEQ ID NO: 12 > SEQ ID NO: 13 - SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15 及 SEQ ID NO: 16 之胺基酸序歹ij ; b)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: φ 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、 SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；d)包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO· 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、 SEQ ID NO: 33及SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；f)包含 • SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、 SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、 SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；h)包含 SEQ ID NO: 135、 SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、 SEQ ID NO: 138及SEQ ID NO: 139之胺基酸序列；i)包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、 120060.doc -23- 200808822 SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含 SEQ ID N0: 146、SEQ ID N0: 147、 SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: 152、 SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、 SEQ ID NO: 156及SEQ ID NO: 157之胺基酸序列；1)包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、 SEQ ip NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；m)包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、 SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO·· 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；n)包含 SEQ ID NO: 17G、 SEQ ID NO: Π1、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、 SEQ ID NO: 174及SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；o)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、 SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181 之胺基酸序列；p)包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、 SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列；q)包含 SEQ ID NO: 188、 SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、 SEQ ID NO: 192及SEQ ID NO: 193之胺基酸序列；r)包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、 SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、 SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203 ' SEQ ID NO: 204及 • 24- 120060.doc 200808822 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法。在某些實施例中，該活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法包含向該哺乳動物投與一定量單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、 SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列；b)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 23、 SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序歹; f)包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NCh 133及SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 120060.doc -25- 200808822 137、SEQ ID NO: 13 8及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列；i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及SEQ ID NO: 151之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列；1) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；m)包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；〇) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO·· 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列；p)包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及SEQ ID NO: 187之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列；r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: -26- 120060.doc 200808822 199之胺基酸序列；s)包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210 及 SEQ ID NO: 211 之胺基酸序列0

在某些實施例中，提供一種抗體。在某些實施例中，該抗體包含：a)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及SEQ ID NO: 19之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、 SEQ ID NO: 21及SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；d)包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；或 e)包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO·· 34之胺基酸序列；f)包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 120060.doc •27· 200808822 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139 之胺基酸序列；i)包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 15 0及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列；k) 包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO:

154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列；1)包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175 之胺基酸序列；〇)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及SEQ ID NO: 181之胺基酸序列；p)包含SEQIDNO·· 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列；q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193 之胺基酸序列；r)包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 120060.doc -28 - 200808822 198及SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t)包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種治療患者貧血症之方法。在某些實施例中，該治療患者貧血症之方法包含向該患者投 ❿ 與抗體，其中該抗體包含：a)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及SEQ ID NO: 16之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22 之胺基酸序列；d)包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: Φ 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、 SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO·· 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；f)包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133 及 SEQ ID NO: 134 之胺基酸序 120060.doc -29- 200808822

列；h)包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID

NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID

NO: 139 之胺基酸序歹《] ; i)包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID

NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID

NO: 144及SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO·· 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151 之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID

NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID

NO: 157 之胺基酸序列；1)包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及SEQ ID NO: 163之胺基酸序歹丨J ; m)包含SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO· 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO·· 169之胺基酸序列；n)包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID

NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID

NO: 175之胺基酸序列；o)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID

NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID

NO: 180及SEQ ID NO: 181之胺基酸序歹，J ; p)包含SEQ ID

NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID

NO: 185、SEQ ID NO: 186 及 SEQ ID NO: 1S7 之胺基酸序列；q)包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID

NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID

NO: 193 之胺基酸序列；r)包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID 120060.doc -30- 200808822

NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204 及 SEQ ID NO: 205 之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。

在某些實施例中，提供一種促進患者組織保護之方法。在某些實施例中，該促進患者組織保護之方法包含向該患者投與抗體，其中該抗體包含：a)包含SEQ ID NO: 11、 SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及SEQ ID NO: 16之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22 之胺基酸序列；d)包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；或 e)包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、 SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；f)包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID 120060.doc -31- 200808822

NO: 132、SEQ ID NO·· 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；h)包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID

NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID

NO: 139之胺基酸序列；i)包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151 之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID

NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID

NO: 157之胺基酸序列；1)包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；n)包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID

NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID

NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID 120060.doc -32- 200808822 NO: 193 之胺基酸序列；r)包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204 及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或t)包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。

在某些實施例中，提供一種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法。在某些實施例中，該活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法包含向該哺乳動物投與一定量抗體，其中該抗體包含：a)包含8£卩10>!0·· 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO·· 13、SEQ ID NO: 14、 SEQ ID NO: 15及SEQ ID NO: 16之胺基酸序列；b)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18 及 SEQ ID NO: 19 之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NOM1、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；d)包含 SEQ ip NO: 23、SEQ ID NO: 24、 SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID 120060.doc -33- 200808822

NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID

NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID

NO: 134之胺基酸序列；h)包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及SEQ ID NO: 139之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID

NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID

NO: 151之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及SEQ ID NO: 157之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；m)包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID

NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID

NO: 169 之胺基酸序列；n)包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；o)包含SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180 及 SEQ ID NO: 181 之胺基酸序列；p)包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID

NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID 120060.doc -34- 200808822 NO: 187之胺基酸序列；q)包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及SEQ ID NO: 193之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種抗體。在某些實施例中，該抗體包含：a)包含SEQ ID NO: 45之胺基酸序列；b)包含 SEQ ID NO: 46之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 47之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列；或e)包含 SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種治療患者貧血症之方法。在某些實施例中，該治療患者貧血症之方法包含向該患者投與抗體，其中該抗體包含：a)包含SEQ ID N0: 45之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 46之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 47之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種促進患者組織保護之方法。在某些實施例中’該促進患者組織保護之方法包含向該患者投與抗體，其中該抗體包含：a)包含SEQ ID N〇: 45之 •35- 120060.doc 200808822 胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 46之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NO: 47之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法。在某些實施例中，該活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法包含向該哺乳動物投與一定量抗體，其中該抗體包含：a)包含SEQ ID NO: 45之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 46之胺基酸序列；c) φ 包含SEQ ID NO: 47之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 48 之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種製造單鏈可變片段之方法。在某些實施例中，製造單鏈可變片段之方法包含在宿主細胞中表現該單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含 SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID • NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 60 及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 64及 SEQ ID NO: 66之胺基酸序歹丨J ; i)包含SEQ ID NO: 68及 SEQ ID NO: 70之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 72及 SEQ ID NO: 74之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 76及 SEQ ID NO: 78之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 80及 120060.doc -36- 200808822 SEQ ID NO: 82之胺基酸序列；m)包含SEQ ID NO: 84及 SEQ ID NO: 86之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 88及 SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；o)包含SEQ ID NO: 92及 SEQ ID· NO: 94之胺基酸序列；p)包含SEQ ID NO: 96及 SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及 SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及 SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及 SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 112 及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種製造融合至Fc之單鏈可變片段之方法。在某些實施例中，製造融合至Fc之單鏈可變片段之方法包含在宿主細胞中表現該融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a)包含SEQ ID NO: 1及 SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列；c)包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8 之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列；f)包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列；i)包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列；j)包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO·· 76及SEQ ID NO·· 78之胺基酸序列；1)包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序 120060.doc -37- 200808822 列；m)包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；o)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列；P)包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列；r)包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸 _ 序列。在某些實施例中，提供一種製造單鏈可變片段之方法。在某些實施例中，製造單鏈可變片段之方法包含在宿主細胞中表現該單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含·· a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、 SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15 及 SEQ ID NO: 16 之胺基酸序列；b)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: • 19 之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 23、 SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f)包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 120060.doc -38 - 200808822

125、SEQ ID NO: 126 > SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；h)包含SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列；i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及SEQ ID NO: 151之胺基酸序列；k)包含SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 1 5 7之胺基酸序列；1) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160 ^ SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；m)包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；n)包含SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；o) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列；p)包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 120060.doc -39- 200808822 186及SEQ ID NO: 187之胺基酸序列；q)包含SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列；r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO:

204及SEQ ID卩Ch 205之胺基酸序列；或t)包含SEQ ID )

NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211 之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種製造融合至Fc之單鍵可變片段之方法。在某些實施例中，製造融合至F c之單鏈可變片段之方法包含在宿主細胞中表現該融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含：a)包含SEQ ID NO: 11、

SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ

ID NO: 15及SEQ ID NO: 16之胺基酸序列；b)包含SEq ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO·· 18及 SEQ ID NO·· 19之胺基酸序列；包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID N〇: 13、SEq ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22 之胺基酸序列；d)包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24 ' SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID N〇: 28t 胺基酸序列；或 e)包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 3〇、 120060.doc •40· 200808822

SEQ ID NCh 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；f)包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及SEQ ID NO: 128之胺基酸序列；g)包含SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；h)包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139 之胺基酸序列；i)包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；j)包含SEQ ID

NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151 之胺基酸序列；k)包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157 之胺基酸序列；1)包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；m)包含SEQ ID

NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；n)包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175 之胺基酸序列；o)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID 120060.doc -41- 200808822

NO: 180及SEQ ID NO: 181之胺基酸序列；p)包含SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186 及 SEQ ID NO: 187 之胺基酸序列；q)包含 SEQ ID NO·· 188、SEQ ID NO·· 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193 之胺基酸序列；r)包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及SEQ ID NO: 199之胺基酸序列；s)包含SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO·· 203、SEQ ID NO: 204 及 SEQ ID NO: 205 之胺基酸序列；或t)包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種製造融合至Fc之單鏈可變片段之方法。在某些實施例中，製造融合至Fc之單鏈可變片段之方法包含在宿主細胞中表現該融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含·· a)包含SEQ ID NO: 45之胺基酸序列；b)包含SEQ ID NO: 46之胺基酸序列；c)包含 SEQ ID NO: 47之胺基酸序列；d)包含SEQ ID NO: 48之鞍基酸序列；或e)包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段。在某些實;^ 例中，該單鏈可變片段特異性結合：a)至少人類Epo受趙胞外域之胺基酸F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域< 胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之賤 120060.doc -42- 200808822 基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70 ;或h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段。在某些實施例中，該單鏈可變片段特異性結合：a)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 E62、F93及M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 V48、E62、L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70 ;或 h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。某些實施例提供一種治療患者貧血症之方法。在某些實施例中，該治療患者貧血症之方法包含向該患者投與单鍵可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合：a)至少人類 Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 E62、F93及M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 V48、E62、L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域 120060.doc -43- 200808822 之胺基酸V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70 ;或 h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。某些實施例提供一種促進患者組織保護之方法。在某些實施例中，促進患者組織保護之方法包含向該患者投與單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合·· a)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 E62、F93及M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 V48、E62、L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70 ;或 h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法。在某些實施例中，該活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法包含向該哺乳動物投與一定量單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合：a)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo 受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至 120060.doc -44- 200808822 少人類Epo受體胞外域之联基酸A44、V48、P63、L66、 R68及H70 ;或h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及 R99。在某些實施例中，提供一種抗體。在某些實施例中，該抗體特異性結合：a)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及M150 ; e)至少人類 Φ Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、L66、R68及H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68 及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及H70 ;或h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種治療患者貧血症之方法。在某些實施例中，該治療患者貧血症之方法包含向該患者投與抗體，其中該抗體特異性結合：a)至少人類Epo受體胞 • 外域之胺基酸F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70 ;或h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 120060.doc -45- 200808822 在某些實施例中，提供一種促進患者組織保護之方法。在某些實施例中，該促進患者組織保護之方法包含向該患者投與抗體，其中該抗體特異性結合：a)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93 及M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70 ;或h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法。在某些實施例中，該活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法包含向該哺乳動物投與一定量抗體，其中該抗體特異性結合：a)至少人類 Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 E62、F93及M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 V48、E62、L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70 ;或 h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種製造單鏈可變片段之方法。 120060.doc •46- 200808822 在某些實施例中，該製造單鏈可變片段之方法包含在宿主細胞中表現該單鏈可變片段。在某些實施例中，該單鏈可變片段特異性結合：a)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸 F93及H114 ; b)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93 及H114 ; c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68 及H70 ; g)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及H70 ;或h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種製造融合至Fc之單鏈可變片段之方法。在某些實施例中，該製造融合至Fc之單鏈可變片段之方法包含在宿主細胞中表現該融合至Fc之單鏈可變片段。在某些實施例中，該單鏈可變片段特異性結合：a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及HI 14 ; b)至少人類 Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114 ; c)至少人類Epo 受體胞外域之胺基酸F93 ; d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及M150 ; e)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、L66、R68及H70 ; f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68及H70 ; g)至少人類Epo 受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70 ; 或h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種與人類Epo受體結合之抗 120060.doc -47 - 200808822 體。在某些實施例中，該抗體包含一或多個選自以下之序列：A)第一胺基酸序列，其包含：〇具有式：Xi YWM心之CDR1 ’其中又1為任何胺基酸且&為任何胺基酸；ϋ)具有式：NIKPDGSEKYV X12 SVKG之 CDR2，其中 χ12為任何胺基酸；及iii)具有式：VSRGGS X7 SD之CDR3，其中χ 為任何胺基酸；及Β)第二胺基酸序列，其包含：丨）具有式：TGTSSD X7 G X9 Y Xll YVS之 CDR1，其中 &為任何胺基酸且X9為任何胺基酸且Xuj任何胺基酸；及ii)具有式：Xi V X3 X4 RPS之CDR2，其中任何胺基酸且心為任何胺基酸且Χ4為任何胺基酸。在某些實施例中，提供一種與人類Ερ〇受體結合之單鏈可變片段。在某些實施例中，該單鏈可變片段包含一或多個選自以下之序列：A)第一胺基酸序列，其包含：丨）具有式· X! YWM X5之CDR1，其中任何胺基酸且&為任何胺基酸；ii)具有式：NIKPDGSEKYV X12 SVKG之 CDR2，其中Xlz為任何胺基酸；及Hi)具有式：vsrggs Χ? SD之CDR3，其中為任何胺基酸；及b)第二胺基酸序列，其包含：i)具有式：TGTSSD χ7 G χ9 γ Xu YVSi CDR1，其中χ?為任何胺基酸且&為任何胺基酸且χ"為任何胺基酸，及ii)具有式：Xi V X3 X4 RPS之CDR2，其中Χ! 為任何胺基酸且X3為任何胺基酸且χ4為任何胺基酸。在某些實施例中，提供一種抗體，其與野生型人類Ερ〇受體結合，但無法與一突變Ερ〇受體結合，其中該突變Ερ〇受體胞外域34位置處之胺基酸為精胺酸。 120060.doc -48- 200808822 在某些實施例中，提供一種抗體，其與野生型人類Epo 受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo 受體胞外域60位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種抗體，其與野生型人類Epo 受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo 受體胞外域88位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種抗體，其與野生型人類Epo 受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo 受體胞外域150位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種抗體，其與野生型人類Epo 受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo 受體胞外域87位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種抗體，其與野生型人類Epo 受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo 受體胞外域63位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種抗體，其與野生型人類Epo 受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo 受體胞外域64位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種抗體，其與野生型人類Epo 受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo 受體胞外域99位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域34位置處之胺基酸為精胺酸。 120060.doc -49- 200808822 在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域60位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域88位置處之胺基酸為精胺酸。

在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與一突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域150位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與一突變Ep〇受體結合，其中該突變Epo受體胞外域87位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與一突變Ep〇受體結合，其中該犬變Epo受體胞外域63位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與一突變Ep〇受體結合，其中該犬變Epo受體胞外域64位置處之胺基酸為精胺酸。在某些實施例中，提供一種單鏈可變片段，其與野生型 =類Epo党體結合，但無法與一突變Ep〇受體結合，其中該大交Epo文體胞外域99位置處之胺基酸為精胺酸。【實施方式】申明案中引用之所有文獻或文獻之部分，限於）專利、專利申 >主莹々九舍（仁不專利申_案、文早、書籍及論文均明確以全 120060.doc -50- 200808822 文引用的方式併入本文中以用於任何目的。在一或多份以弓I用方式併入之文獻對術語之定義與本申請案中對該㈣之定義相矛盾之情況下，以本申請案為準。除非提供明確定義，否則與本文中所述之分析化學、合成有機化學及醫學及醫藥化學相聯繫使用之術語及其實^ 室程序及技術為此項技術中熟知及常用之彼等。可使用椤準技術進行化學合成、化學分析、醫藥學製備、調配、= 遞及患者治療。鲁在本申請案中，除非另外特別指出，否則使用單數包括複數。在本申請案中，除非另外特別指出，否則使用”或" 意謂”及/或”。在多項附屬項申請專利範圍之情況下，使用 ”或”係指僅以選擇方式依附於—項以上前述獨立項或附屬項申請專利範圍。此外，使用術語"包含，，以及其他形式，諸如”包括有”及"包括於”不具限制性。而且，除非另外特別指出，否則諸如”元件”或”組件，，之術語涵蓋包含一單位之7L件及組件及包含_個以上亞單位之元件及組件。如根據本發明所用，除非另外特別指出，否則以下術語應理解為具有以下含義·· ° 如本文所用之術語”經分離之聚核苷酸"意謂染色體組、 cDNA或合成來源或其某些組合來源之聚核苷酸，根據來源”經分離之聚核芽酸”⑴不與所有或一部分自然存在”經为離之核*sr’之聚核芽酸相結合；⑺連接至不與其自然連接之聚核㈣；或（3)不作為更大序列之部分自然存在。、術叩聚核苷酸”與"募核苷酸”可互換使用，且在本文中 120060.doc •51- 200808822 意謂長度為至少2個鹼基之核苷酸之聚合形式。在某些實施例中，驗基可包含核糖核酸、去氧核糖核酸及任一類型核苷酸之經修飾形式中之任一種。該術語包括單鏈及雙鏈形式之DNA。在某些實施例中，提供與編碼本文所述之某些多肽之特定聚核苷酸互補之聚核苷酸。術語"自然存在之核苷酸”包括去氧核糖核酸及核糖核酸。去氧核糠核酸包括（但不限於）腺苷、鳥嘌呤、胞嘧啶及胸苷。核糠核酸包括（但不限於）腺苷、胞嘧啶、胸苷及 # 尿嘧啶。術語”經修飾之核苷酸"包括（但不限於）具有經修飾或經取代之糖基及其類似物之核苷酸。'術語”聚核苷酸鍵"包括（但不限於）諸如硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、硒代磷酸酯、二硒代磷酸酯、苯胺硫代磷酸酯、苯胺磷酸酯、磷醯胺酯及其類似物之聚核苷酸鍵。例如參見LaPlanche 等人 dcz·心及以.14:9081 (1986); Stec 等人 J. C/zew· Soc. 106:6077 (1984); Stein 等人 TVmc/· jcz·办及以· 16:3209 (1988); Zon 等人』Drt/g Design 6:539 鲁 (1991); Zon 等人 Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach，第 87-108 頁（F. Eckstein，Ed·，〇xford University Press，Oxford England (1991)); Stec等人，美國專利第 5，151，510號；Uhlmann 及 Peyman C/zemica/ 90:543 (1990)。在某些實例中，聚核苷酸可包括用於摘測之標記。術語"經分離之多肽"係指滿足以下條件之任何多肽：不含至少一些通常與其一起發現之蛋白質；（2)基本上不含 120060.doc -52- 200808822 來自相同來源（例如來自相同物種）之其他蛋白質；（3)由不同物種之細胞表現；或（4)自然中不存在。

術語”多肽”、”肽"及”蛋白質"在本文中可互換使用且係指兩個或兩個以上經由肽鍵或經修改之肽鍵（亦即肽電子等排體）彼此連接之胺基酸之聚合物。該等術語適用於含有自然存在之胺基酸之胺基酸聚合物以及其中一或多個胺基酸殘基為非自然存在之胺基酸或自然存在之胺基酸之化學類似物的胺基酸聚合物。胺基酸聚合物可含有一或多個經一或多種自然處理（諸如轉譯後處理）修飾之胺基酸殘基及/或一或多個經一或多種此項技術中已知之化學修飾技術修飾之胺基酸殘基。參考多肽之”片段”係指參考多肽之任何部分之胺基酸相連段。片段可為小於參考多肽長度之任何長度。參考多肽之”變異體”係指相對於參考多肽具有一或多處胺基酸取代、缺失或插人之多肽。在某些實施例中，參考多肽之變異體具有改變之轉譯後修飾位點（亦即糖基化位點）。在某些實施例中，參考多肽及參考多肽之變異體均為特異、、Ό 口齊j。在某些實施例中，參考多肽及參考多狀之變異體均為抗體。交-體包括（但不限於）糖基化變異體。糖基化變異體包括盥务土 a /、彡考夕肽相比較糖基化位點之數目及/或類型已改變之轡I^ ^ t _ ^ 文異體。在某些實施例中，參考多肽之糖基化變異體包含多於或小於參考多肽之N連接糖基化位點數、實轭例中，^連接糖基化位點由序列Asn-X-Ser 120060.doc -53- 200808822 或Asn-X-Thr表徵’其中X表示之胺基酸殘基可為除脯胺酸外之任何胺基酸殘基。在某些實施例中，參考多肽之糖基化變異體包含N連接醣鏈之重排，其中去除一或多個n連接糖基化位點（通常為自然存在之位點）且產生一或多個新的N連接位點。參考多肽之變異體包括（但不限於）半胱胺酸變異體。在某些實施例中，半胱胺酸變異體包括由一或多個非半胱胺酸殘基置換參考多肽之一或多個半胱胺酸殘基；及/或由 • 一或多個半胱胺酸殘基置換參考多肽之一或多個非半胱胺酸殘基之變異體。在某些實施例中，當特定多肽必須（例如）在不可溶包涵體分離後再折疊成生物活性構型時，半胱胺酸變異體可適用。在某些實施例中，參考多肽之半胱胺酸變異體具有少於參考多肽之半胱胺酸殘基。在某些實轭例中，參考多肽之半胱胺酸變異體具有偶數個半胱胺酸以將由未配對半胱胺酸引起之相互作用降至最低。在某些實施例中，半胱胺酸變異體具有多於天然蛋白之半胱胺酸拳殘基。參考夕肽之衍生物"係指滿足以下條件之多肽··（1)具有參考多肽之—或多個胺基酸殘基之—或多種修飾；及/或 (2)經一或多個非肽基鍵置換一或多個肽基鍵；及/或端及/或C端經修飾》某些例示性修飾包括（但不限於）乙醯化、酿化、ADP-核糖基化、醯胺化、生物素標記、共價連接黃素、共價連接血紅素、共價連接核㈣或核苷酸衍生物、共價連接脂質或脂W衍生物、共價連接罐脂醢肌 120060.doc •54- 200808822 醇乂％ %化、一硫鍵形成、去曱基化、共價交鍵形成、胱胺酸形成、焦麩胺酸形成、甲醯化、γ_羧化、糖基化、GPI錨形成、羥基化、碘化、甲基化、肉豆蔻醯化、氧化、蛋白水解處理、麟酸化、異戊二烯化、外消旋化、砸颯基化、硫酸化、轉運RNA介導之胺基酸添加至蛋白質 (諸如精胺酸化）及泛素化。在某些實施例中，參考多肽及參考多肽之衍生物均為特異性結合劑。在某些實施例中，參考多肽及參考多肽之衍生物均為抗體。

多肽包括（但不限於）經自然處理（諸如轉譯後處理）或經此項技術中熟知之化學修飾技術修飾之胺基酸序列。在某些實施例中，修飾可發生於多肽中之任何位置，包括肽骨架、胺基酸側鏈及胺基或羧基端。在某些該等實施例中，既疋多肽中之數個位點處可存在相同或不同程度之修飾。在某些實施例中，既定多肽含有多種類型之修飾，諸如天然序列中一或多個胺基酸之缺失、添加及/或取代。在某些實施例中，多肽可為支鏈及，或環狀。環狀、支鏈及支鏈環狀多肽可由轉譯後自然處理（包括但不限於泛素化）產生或可藉由合成方法製得。在某些實施例列包含至少_個互補賤區（cdr)。一肽序用於一物體之術語”自然存在”意謂物體可在自 Γ雜舉例而言’存在於生物體（包括病毒）中可自自I來刀離且未經人們在實驗室巾U其他方式有意或聚核苷酸為自然存在的。 > 夕如本文所用之術語"可操作地連接”係指處於允許其以預 120060.doc -55· 200808822 關係中的組份。舉例而言，在_酸 ^ 控制相與編碼序心便於㈣控制序列發揮作用相交少怂姓丁 ϋ 、牡，、&制序 “時㈣料下達成編碼序列之表現的方式彼此、二 &制序列可為"可操作地連接"至編碼序列。及：："控制序列"係指可實現與其結合之編碼序列之表現物L之聚㈣酸序列。該等控制序列之性質可因宿主生不网。對於原核生物之某些例示性控制序列包括二―不限於）啟動子、核糖體結合位點及轉錄終止序列。直 2物之某些例示性控制序列包括（但不限於）啟動子、增 =及轉錄終止序列。在某些實施例中，”控制序列"可包括别導序列及/或融合搭配物序列。 w L具_中’备第一與第二聚核芽酸編碼序列轉錄早一連續mRNA中而可轉譯為單一相連多肽時，第一聚核芽酸序列可操作地連接至第二聚核普酸序列。在多肽之情況下’若各經連接之多狀能夠以預定方式發。作用，則兩個或兩個以上多肽係，，可操作地連接，f。當可插作地連接至另一多肽時能狗以預定方式發揮作用之多肽未可操作地連接至另一多肽時能夠或不能夠以預定方式發揮作用。舉例而言，在某些實施例中，第一多肽在未連 =不能以預定方式發揮作用’但可經由與第二多狀連接穩定而使其能夠以預定方式發揮作用。或者，在某些實施例中’第-多肽在未連接時能狗以預定方式發揮作用，且在可刼作地連接至第二多肽時可保持該能力。如本文所用，當兩個或兩個以上多肽連接形成單一相連 120060.doc -56- 200808822 分子時，該兩個或兩個以上多 _ 中，藉由將兩個㈣以上多肽以:融：’？__ 轉譯或藉由將兩個或兩個以目連多狀序列形式式合成來使其融合。在某此實施❹早—相連多肽序列形合多肽可在活體内自兩個；：：個或兩個以上融苷酸編碼序列轉譯。在某此實施例广作地連接之聚核 a"…、二““列中’兩個或兩個以上融口夕肽可在活體外自兩傭或兩 s ^ 工J森作地連接之聚核

轉譯。在某些實施例中1兩個多肽經多肽 β夕肽連接子連接，則該兩個或兩個以上多狀經融合。如，文所用’若各經連接之多肽能夠以歡方式發揮作，則兩個或兩個以上多肽係可”操作地融合、在某些實施例中，只要第一多肽中之至少一個不同多肽 :位與第二多肽連接即可將含有兩個或兩個以上不同多肽早位之第-多肽視為與第二多肽連接。作為一非限制性實例:在某些實施例中’在所有以下情形中將抗體視為與第一多肽連接：（a)第二多肽與抗體重鏈多肽之一連接；（b) 第一多肽與抗體輕鏈多肽之一連接；（C)第二多肽之第一分子與抗體之重鏈多肽之一連接且第二多肽之第二分子與抗體之輕鏈多狀之一連接；及（d)第二多肽之第一及第二分子與抗體之第一及第二重鏈多肽連接且第二多肽之第三及第四分子與抗體之第一及第二輕鏈多肽連接。在某些實施例中，表述”第一多肽與第二多肽連接，，涵蓋如下情形：（a)僅一第一多肽分子與僅一第二多肽分子連接；（b)僅一第一多肽分子與一個以上第二多肽分子連接； 120060.doc -57- 200808822 (:)-個以上第一多肽分子與二多 w-個以上第一多肽分子夕狀刀子連接，及 ^ jtb ψ 上弟一多肽分子連接。當連接分子包含-個以上第-多肽分子可盥第”：：々子時，所有或不及所有之第-多肽分子接：二二肽共價或非共價連接。在某些實施例中，當連接二包:一個以上第—多肽分子時，一或多個第刀子可與其他第-多肽分子共價或非共價連接。

=本文所用，”彈性連接子"係指無法根據其化學結構預 2在三維空間中之固定形式之任何連接子。熟習此項技術者可預測特定連接子在目標情況下是否為彈性連接子。在某些實施财’包含3㈣3個以上胺基酸之肽連接子為彈性連接子。如本文所用，20種習知胺基酸及其縮寫遵循習知用法。參見 Immimology-A Synthesis(第 2版，E s ⑽心及^ 化 Gren編，Sinauer Associate Sunderland，Μ_· (1991))。在某些實施例中，多肽中可併入一或多種非習知胺基酸。術語’’非習知胺基酸"係指非20種習知胺基酸之一之任何胺基酸。術語"非自然存在之胺基酸”係指無法在自然中找到之胺基酸。非自然存在之胺基酸為非習知胺基酸之子集。非習知胺基酸包括（但不限於）20種習知胺基酸之立體異構體（例如，D-胺基酸）；非自然胺基酸，諸如'心雙取代胺基酸、N-烷基胺基酸、乳酸、高絲胺酸、高半胱胺酸、4_ 羥基脯胺基、γ-羧基麩胺酸、ε-Ν，Ν，Ν-三甲基離胺酸、ε· Ν-乙酿基離胺酸、〇-ί粦絲胺酸、Ν-乙酿基絲胺酸、甲酿 120060.doc -58- 200808822 基甲硫胺酸、3-曱基組胺酸、5-羥基離胺酸、σ-Ν-曱基精胺酸及此項技術中已知之其他類似胺基酸及亞胺基酸（例如‘羥基脯胺酸）。在本文所用之多肽符號中，根據標準用法及慣例左侧方向為胺基端方向且右側方向為羧基端方向0 在某些實施例中，保守性胺基酸取代包括經一或多個非習知胺基酸殘基取代。在某些實施例中，非習知胺基酸殘基係藉由化學肽合成而非藉由在生物系統中合成併入。

術語酸性殘基係指在兩個相同或不同之其他胺基酸殘基之間併入多肽中時包含至少一個酸性基團之〇_或乙_形式之胺基酸殘基。在某些實施例中，酸性殘基包含含有至少一個酸性基團之側鏈。例示性酸性殘基包括（但不限於）天冬胺酸（D)及麩胺酸（Ε)。在某些實施例中，酸性殘基可為非習知胺基酸。術語"芳族歹曼基"係指包含至少一個芳基之DjL·形式之胺基酸殘基。在某些實施例中，芳族殘基包含含有至少一芳基之側鏈。例*性芳族殘基包括（但不限於）苯丙胺酸 (F)、酪胺酸（γ)及色胺酸、 &妝^(界）。在某些實施例中，芳族殘基可為非習知胺基酸。術語"鹼性殘基”係指在緊鄰一公$ #、，緊㈤或夕個相同或不同之胺基酉夂殘基併入多肽中時可舍会、 . 至夕一個鹼性基團之D·或L-形式之胺基酸殘基。在某此眚 I、乂二貝也例中，鹼性殘基包含含有至 > 一個鹼性基團之側鏈。例 △ > ☆ 〖生驗性殘基包括（但不限於) 組胺MH)、離胺酸（κ)及精 )槓胺敲（R)。在某些實施例中，鹼 120060.doc -59- 200808822 性殘基可為非習知胺基酸。術語”中性親水性殘基”係指在緊鄰一或多個相同或不同之胺基酸殘基併入多肽中時包含至少一個親水性及/或極性基團，但不包含酸性或鹼性基團之〜或^形式之胺基酸殘基。例示性中性親水性殘基包括（但不限於）丙胺酸、半胱胺酸（C)、絲胺酸（S)、蘇胺酸（T)、天冬醯胺酸（N)& 麩醯胺酸（Q)。在某些實施例中，中性親水性殘基可為非習知胺基酸。術語’’親脂性殘基"及”Laan係指具有至少一個無電荷脂族及/或芳族基團之D-或L-形式之胺基酸殘基。在某些實施例中，親脂性殘基包含含有至少一個無電荷脂族及/或芳族基團之側鏈。例示性親脂性側鏈包括（但不限於）丙胺酸 (A)、苯丙胺酸（F)、異白胺酸⑴、白胺酸（L)、正白胺酸 (NIe)、甲硫胺酸（M)、顯胺酸（v)、色胺酸（^及酪胺酸 (Y)。在某些實施例中，親脂性殘基可為非習知胺基酸。術語"兩性殘基”係指可為親水性或親脂性殘基之D-或l_ 形式之胺基酸殘基。例示性兩性殘基包括（但不限於）丙胺酸（A)。在某些實施例中，兩性殘基可為非習知胺基酸。術語”非官能性殘基"係指在緊鄰一或多個相同或不同之胺基酸殘基併入多肽中時不具有酸性、鹼性及芳族基團之 D-或L-形式之胺基酸殘基。例㈣非官能性胺基酸殘基包括（但不限於）甲硫胺酸（M)、甘胺酸⑹、丙胺酸（a)、綠胺酸（V)、異白胺酸⑴、白胺酸（L)及正白胺酸（Nie)。在某些實施例中，非官能性殘基可為非習知胺基酸。 120060.doc -60 - 200808822 在某些實施例中，將甘胺酸（G)及脯胺酸（p)視為可影響肽鏈定向之胺基酸殘基。在某二實施例中’保守性取代可包括以相同殘基類型中之員置換一殘基類型中之一員。作為非限制性實例中，在某些實施例中，保守性取代可包括以不同酸性殘基（諸如E)置換酸性殘基（諸如D)。在某些實施例中，非保守性取代可包括以不同殘基類型中之一員置換一殘基類型中之一員。作為非限制性實例中，在某些實施例中，非保守性取代可包括以鹼性殘基（諸如κ)置換酸性殘基（諸如D卜在某些實施例中，以另一胺基酸殘基取代半胱胺酸殘基以防止在多肽中之該位置形成二硫鍵。根據某些實施例，在進行保守性或非保守性取代時，可考慮胺基酸之水合指數。各胺基酸已基於其疏水性及電荷特徵賦予水合指數值。2〇種自然存在之胺基酸之水合指數為：異白胺酸（+4.5)、纈胺酸（+4.2)、白胺酸（+3·8)、苯丙胺酸（+2·8)、半胱胺酸/胱胺酸（+25)、甲硫胺酸（+19)、丙胺酸（+1.8)、甘胺酸（-0.4)、蘇胺酸（_〇·7)、絲胺酸（_〇8)、色胺酸（-0.9)、酪胺酸（|3)、脯胺酸㈠…、組胺酸（_3.2)、麵胺酸（-3.5)、麩隨胺酸（-3·5)、天冬胺酸（_3 5)、天冬醯胺酸（-3.5)、離胺酸(>3·9)及精胺酸（_4.5)。此項技術中已瞭解胺基酸水合指數在對蛋白質賦予交互生物功能中之重要性。Kyte等人，j M〇/K, 157:1〇5_ 131 (1982)。已知在某些情形下可用某些胺基酸取代具有類似水合指數之其他胺基酸且仍保持類似生物活性。在某 120060.doc -61 - 200808822 些實施例中，在基於水合指數進行改變時，包括取代水人指數在±2範圍内之胺基酸。在某些實施例中，包括取代水合指數在± 1範圍内之胺基酸；且在某些實施例中，包括取代水合指數在±0.5範圍内之胺基酸。此項技術中亦已瞭解尤其在由此產生之生物功能性蛋白或狀思欲用於免疫學實施例之情況下（如本案中）可有效其於親水性進行相似胺基酸取代。在某些實施例中，蛋白質之最大局部平均親水性（如由其相鄰胺基酸之親水性決定） Φ 與其免疫原性及抗原性有關，亦即與多肽之生物特性有關。此專胺基舞殘基已被賦予如下親水性值··精胺酸 (+3.0)、離胺酸（+3.0)、天冬胺酸（+3·0±1)、麩胺酸（+3.〇土 1)、絲胺酸（+0.3)、天冬醢胺酸（+〇·2)、麵醯胺酸（+0.2)、甘胺酸（〇)、蘇胺酸（-0.4)、脯胺酸（-〇·5±1)、丙胺酸（_〇·5)、組胺酸（-0.5)、半胱胺酸（-1.0)、甲硫胺酸（_13)、纈胺酸 (-1.5)、白胺酸（-1.8)、異白胺酸（-υ)、酪胺酸卜23)、苯籲丙胺酸（-2.5)及色胺酸（-3.4)。在某些實施例中，在基於類似親水性值進行改變時，包括取代親水性值在±2範圍内之 fe基酸；在某些實施例中，包括取代親水性值在士 1範圍内之胺基酸；且在某些實施例中，包括取代親水性值在±0·5 範圍内之胺基酸。在某些情形下，亦可基於親水性自一級胺基酸序列鑑別抗原決定基。此等區域亦稱為"抗原決定基核心區"。例示性胺基酸取代陳述於表1中。 120060.doc •62- 200808822 表1 :胺基酸取代原殘基例示性取代更特定之例示性取代 Ala Val，Leu, lie Val Arg Lys，Gln，Asn Lys Asn Gin Gin Asp Glu Glu Cys Ser，Ala Ser Gin Asn Asn Glu Asp Asp Gly Pro, Ala Ala His Asn，Gln，Lys，Arg Arg lie Leu，Val，Met，Ala，Phe，正白胺酸 Leu Leu 正白胺酸，lie，Val，Met，Ala，Phe lie Lys Arg，1，4-二胺基-丁酸，Gln，Asn Arg Met Leu，Phe，lie Leu Phe Leu，Val，lie，Ala，Tyr Leu Pro Ala Gly Ser Thr，Ala，Cys Thr Thr Ser Ser Tip Tyr, Phe Tyr Tyr Trp，Phe，Thr，Ser Phe Val lie，Met，Leu，Phe，Ala，正白胺酸 Leu

類似地，除非另外另外指出，否則如本文所用之單鏈聚核苷酸序列之左側末端為5’末端；雙鏈聚核苷酸序列之左側方向稱為5’方向。新生RNA轉錄物之5’至添加方向在本文中稱為轉錄方向；DNA鏈上具有與RNA相同之序列且處於RNA轉錄物5’末端之5’方向之序列區在本文中稱為”上游序列”；DNA鏈上具有與RNA相同之序列且處於RNA轉錄物31末端之3’方向之序列區在本文中稱為11下游序列”。在某些實施例中，保守性胺基酸取代涵蓋通常藉由化學肽合成或藉由在生物系統中合成而併入之非自然存在之胺 120060.doc -63- 200808822 基酸殘基。彼等非自然存在之胺基酸殘基包括（但不限於）肽模擬物及其他胺基酸部分之翻轉或反向形式。热習此項技術者能夠使用熟知技術判定本文所述參考多肽之適當取代變異體。在某些實施例中，熟習此項技術者可藉由疋靶據信對活性無重要性之區域來鑑別可經改變而不破壞/舌性之適當分子區域。在某些實施例中，可鏗別類似多肽之間的保守殘基及分子部分。在某些實施例中，甚至對生物活性可具有重要性之區域（包括但不限於抗體之 CDR)或對結構可具有重要性之區域可經歷保守性胺基酸取代而不破壞生物活性或對多肽結構無不利影響。另外’在某些實施例中，熟習此項技術者可回顧鑑別類似多肽中對活性及/或結構具有重要性之殘基的結構_功能研九。在某些實施例中，鑒於該比較可預測一多肽中與類似多狀中對活性或結構具有重要性之胺基酸殘基相對應的胺基酸殘基之重要性。在某些實施例中，熟習此項技術者可選擇對該等預測重要性胺基酸殘基進行化學類似胺基酸取代。在某些實施例中，熟習此項技術者亦可與類似多肽中之結構相比較來分析三維結構及胺基酸序列。鑒於該資訊， A習此項技術者可相對於抗體之三維結構預測其胺基酸殘基比對。在某些實施例中，熟習此項技術者可選擇不對預測處於蛋白質表面上之胺基酸殘基進行根本性改變，因為該等殘基可涉及與其他分子之重要相互作用。此外，在某些實施例中’熟習此項技術者可產生在各所需胺基酸殘基 120060.doc -64- 200808822 處含有單一胺基酸取代之測試變異體。某些實施例中，接著可使用熟習此項技術者已知之活性檢定來篩選變異體。舉例而言，在某些實施例中，可針對變異體結合抗體之能力來對其進行篩選。在某些實施例中，可使用該等變異體收集關於適當變異體之資訊。舉例而言，在某些實施例中，若發現特定胺基酸殘基之變化產生經破壞、不合需要地降低或不適當之活性，則可避免具有該變化之變異體。換言之，基於自該等常規實驗收集之資訊，熟習此項技術 # 可容易地判定應避免單獨或與其他突變組合經進一步取代之胺基酸。已有多種科學出版物致力於預測二級結構。參見Moult J·，Cwrr· Ορ· Μ 5紿，ec/z·，7(4):422-427 (1996); Chou等人， 13(2):222-245 (1974); Chou等人， 113(2):211-222 (1974); Chou等人，dreoy Mo/· 47:45-148 (1978); Chou等人，义狀· 47:251-276及 Chou 等人，扪吵人 26:367-384 (1979)。此 ® 外，目前可使用電腦程式辅助預測二級結構。一種預測二級結構之方法係基於同源模建。舉例而言，序列一致性大於30%或類似大於40%之兩種多肽或蛋白質通常具有類似結構拓撲。蛋白結構資料庫（PDB)之新近增長已提供增加的二級結構可預測性，包括多肽或蛋白結構内之潛在折疊數。參見Holm等人，A^c/· dezW·及以.，27(1):244-247 (1999)。已表明既定多肽或蛋白質中存在有限的折疊數，且在已解決結構之臨界值後結構預測將變得明顯更為精確。例如參 120060.doc -65- 200808822 見Brenner等人，Cwrr. Op· iSVrwci. 7(3):369-376 (1997) 〇預測二級結構之其他例示性方法包括（但不限於）"串線 (threading)!, (Jones, D.5 Curr. Opin. Struct. BioLy 7(3):377-87 (1997); Sippl等人，4(1): 15-19 (1996))、’’剖面分析 ”（Bowie 等人，253:164-170 (1991); Gribskov 等人，Mei/z. 183:146-159 (1990); Gribskov等人，Proc· iVai·5^··, 84(13):4355-4358 (1987))及”進化連接”(參見Holm，同上文（199 9)及 Brenner，同上文（1997))。

在某些實施例中，可容易地藉由已知方法計算相關多肽之一致性及相似性。該等方法包括（但不限於）描述於 Computational Molecular Biology，Lesk，Α·Μ·編，Oxford

University Press，New York (1988); Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith，D.W·編，Academic Press, New York (1993); Computer Analysis of Sequence Data，第 1部分， Griffin，Α·Μ·及 Griffin，H.G·編，Humana Press, New Jersey (1994); Sequence Analysis in Molecular Biology，von Heinje， G·， Academic Press (1987); Sequence Analysis Primer， Gribskov，M·及Devereux，J編，M. Stockton Press，New York (1991)及 Carillo 等人，574Μ/· 48:1073 (1988) 中之方法。在某些實施例中，實質上相同之多肽具有與參考胺基酸序列約90%、或約95%、或約96%、或約97%、或約98%、或約99%相同之胺基酸序列。在某些實施例中，對測定一致性之方法進行設計以獲得兩個測試序列之間的最大匹配。在某些實施例中，某些測 120060.doc -66- 200808822 定一致性之方法描述於公共可用電腦程式中。特定測定兩序列間一致性之電腦程式方法包括（但不限於）GCG程式产包，包括 GAP (Devereux 等人，iVwc/· 12:387

(1984)); Genetics Computer Group，University of Wisconsin， Madison，WI，BLASTP、BLASTN及 FASTA (Altschul等人，J· Mo/. 5/o/., 215:403-410 (1990)) °BLASTX程式公共可用，其可自國家生物技術資訊中心（NCBI)及其他來源獲得 {BLAST Manual Altschul# ANCB/NLM/NIH Bethesda, MD # 20894; Altschul等人，同上文（1990))。在某些實施例中，亦可使用此項技術中已知之史密斯·華特曼演算法（Smith Waterman algorithm)測定一致性。某些用於比對兩個胺基酸序列之比對方案可產生兩序列之僅較短區域之匹配，且儘管兩個全長序列間不具有顯著相關性，但此小比對區域可具有極高序列一致性。因此，在某些實施例中，選定比對方法（GAP程式）將產生跨越目標多肽至少50個相連胺基酸之比對。

• 舉例而言’使用電腦演算法GAP (Genetics Computer Group，University of Wisconsin，Madison，Wl)比對待測定序列一致性百分比之兩多肽以便最佳匹配其各別胺基酸 (如經演算法測定之”匹配跨度"）。在某些實施例中，間隙開放罰分（其根據平均對角線之3倍計算，"平均對角線”為所用比較矩陣對角線之平均值；”對角線"為由特定比較矩陣賦予各正確胺基酸匹配之分數或數值）及間隙擴展罰分 (其通常為間隙開放罰分之1/10)以及比較矩陣（諸如PAM 120060.doc -67- 200808822 250或BLOSUM 62)與演算法一起使用。在某些實施例中，演算法亦使用標準比較矩陣。舉例而言，關於PAM 250比較矩陣可參見Dayhoff等人，乂以似ο/' ⑼ 5(3)(1978);對於BLOSUM 62比較矩陣可參見 Henikoff等人，/V〇c· iVa"· 5W USA，89:10915-10919 (1992)。在某些實施例中，用於多肽序列比較之參數包括以下：演算法：Needleman 等人，丄 Mol· Biol, 48:443-453 # (1970)；比較矩陣·· Henikoff等人，同上文（1992)中之BLOSUM 62 ；間隙罰分：12 間隙長度罰分：4 相似性臨限值：0 在某些實施例中，可以上述參數使用GAP程式。在某些實施例中，前述參數為使用GAP演算法進行多肽比較之系 • 統内定參數（以及末端間隙無罰分）。根據某些實施例，胺基酸取代為滿足以下條件之胺基酸取代··（1)降低蛋白水解敏感性；（2)降低氧化敏感性；(3) 改變用於形成蛋白複合物之結合親和力；（4)改變結合親和力；及/或（5)向該等多肽賦予或修飾其他物理化學或功能特性。根據某些實施例，可在自然存在之序列（在某些實施例中為形成分子間接觸之結構域之外的多肽部分）中進行單一或多處胺基酸取代（在某些實施例中為保守性胺基 120060.doc -68 - 200808822 酸取代）。在某些實施例中，保守性胺基酸取代通常不會實質改變親本序列之結構特徵（例如置換胺基酸不應趨向於破壞親本序列中存在之螺旋或破壞表徵親本序列之其他類型之二級結構）。此項技術中公認之多肽二級及三級結構之實例描述於（例如）Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton 編，W. H. Freeman and Company，New York (1984)); Introduction to Protein Structure (C· Branden及 J· 鲁 Tooze編，Garland Publishing，New York，Ν·Υ· (1991))及 Thornton等人Nature 354:105 (1991)中。如本文所用之術語"多肽片段"係指具有胺基端及/或羧基端缺失之多肽。在某些實施例中，片段長度為至少2個至 1，000個胺基酸。應瞭解在某些實施例中，片段長度為至少 5、6、8、10、14、20、50、70、100、150、200、 250、3 00、3 50、400、，450、5 00或 1，000個胺基酸，在醫藥產業中一般將肽類似物用作具有與模板肽類似之 _ 特性的非肽藥物。此等類型之非肽化合物稱作”肽模擬劑” 或”肽模擬物’’。Fauchere，J· jdv· Dag 及15:29 (1986); Veber及 Freidinger TINS 第 392 頁（1985)及 Evans et al· J· M以.CTzem. 30:1229 (1987)。該等化合物通常藉助電腦化分子模建研發。與治療有用肽在結構上類似之肽模擬劑可用於產生類似治療或預防作用。一般而言，肽模擬物與諸如人類抗體之範例多肽（亦即具有生物化學特性或醫藥活性之多肽）在結構上類似，但具有一或多個視情況經選自 I20060.doc -69- 200808822 以下之鍵結藉由此項技術中已知之一、一CH—— 德出-、韻_叫及韻抓。在某些實施例中心一

致序列之-或多個胺基酸經相同類型之D D-離胺酸替代L_離胺酸)系統取代可用於產生更… 肽。另外’包含-致序料„上㈣之_致序列變異之限制性肽可藉由此頊姑分由項技術中已知之方法（RiZ〇及Gierasch . 61:387 (1992))產生，例如（但不限藉由添加㈣形成分子内二硫鍵橋而使肽環化之内耽胺酸殘基。術語"特異性結合”係指抗體與目標以大於其與非目標結合之親和力結合之能力。在某些實施例中，特異性社指與目標以大於與非目標至少1〇、5〇、1〇〇、25〇、5〇口〇或刪倍之親和力之結合。在某些實施例中，親和力係藉由親和力腳Α檢定測定。在某些實施例中，親和力係藉由 BIAcore檢定測定。在某些實施例中，親和力係藉由動力學方法測定。在某些實施例中’親和力係藉由平衡/溶液法測定。 Π抗體”或"抗體肽”均係指完整抗體或其片段。在某些實施例中，片段包括完整抗體之相連部分。在某些實施例中，片¥又包括完整抗體之非相連部分。在某些實施例中，抗體包含scFv。在某些實施例中，抗體包含含有至少一個 CDR之多肽。在某些實施例中，抗體片段可為與完整抗體跳爭特異性結合之結合片段。術語”抗體”亦涵蓋多株抗體 120060.doc -70- 200808822 及單株抗體。在某些實施例中，結合片段係藉由重組dna 技術產生。在某些實施例中，結合片段係藉由完整抗體之酶促或化學裂解而產生。在某些實施例中，結合片段係藉由重組DNA技術產生。結合片段包括（但不限於）Fab、 Fab’、F(ab’)2、Fv、scFv、scFv-Fc(最大抗體）及單鏈抗體。非抗原結合片段包括（但不限於）Fc片段。術語”抗體” 亦涵蓋特異性結合另一抗體之可變區之抗獨特型抗體。在某些實施例中，抗獨特型抗體可用於偵測樣品中特定抗體 # 之存在或阻斷抗體活性。某些用於測定抗體特異性之檢定為熟習此項技術者所熟知且包括（但不限於）ELISA、ELISPOT、西方墨點法、 BIAcore檢定及溶液親和力結合檢定。如本文所用之術語”經分離之抗體"意謂滿足以下條件之抗體··（1)不含至少一些通常與其一起發現之蛋白質；〇基本上不含來自相同來源（例如來自相同物種）之其他蛋白質；（3)由不同物種之細胞表現；或（4)自然中不存在。 •術語π多株抗體"係指結合相同抗原之不同抗原決定基之抗體的異質混合物。術語”單株抗體”係指由相同核酸分子編碼之抗體的集合。在某些實施例中，單株抗體係由單一融合瘤或其他細胞株或由轉殖基因哺乳動物產生。單株抗體通常識別相同抗原決定基。術語"單株”不受限於任何製造抗體之特定方法。術語’’CDR移植抗體”係指將一抗體之cdr插入另—抗體 120060.doc •71· 200808822 構架之抗體。在某些實施例中，衍生€1)11之抗體與衍生構架之抗體為不同物種之抗體。在某些實施例中，衍生cdr 之抗體與衍生構架之抗體為不同同型之抗體。術居多特異性抗體”係指兩個或兩個以上可變區結合不同抗原決疋基之抗體。抗原決定基可處於相同或不同目標上。在某些實施例中，多特異性抗體為識別相同或不同抗原上之兩個不同抗原決定基之"雙特異性抗體，，。術語’’催化抗體”係指附著一或多個催化部分之抗體。在鲁某些實施例中，催化抗體為包含細胞毒性部分之細胞毒性抗體。術語”人化抗體"係指所有或部分抗體構架區得自人類，但所有或部分一或多個CDR區得自另一物種（例如小鼠）之抗體。在某些實施例中，人化過程可遵循此項技術中已知之方法（例如參見Jones等人，7\^仏％ 327, 522-525 (1986). Riechmann等人，332, 323-327 (1988); Verhoeyen 等人，心2外，1534-1536 (1988))藉由用齧齒動物之 ® 互補判定區（CDR)取代人類抗體之相應區域來進行。術語"人類抗體"與”完全人類抗體”可互換使用且係指 CDR及構架均實質上包含人類序列之抗體。在某些實施例中，元全人類抗體係在非人類哺乳物（包括但不限於小鼠、大鼠及兔類動物）體内產生。在某些實施例中，完全人類抗體係在融合瘤細胞中產生。在某些實施例中，完全人類抗體係重組產生。 π嵌合抗體”係指第一物種之抗體可變區融合至另一分 I20060.doc -72· 200808822 子，例如另一第二物種之抗體恆定區之抗體。例如參見美國專利第4,816,567號及Morrison等人，尸以 81:68 51-685 5 (198’5)。在某些實施例中，第一物種可不同於弟一物種。在某些實施例中，第一物種可與第二物種相同。在某些實施例中，嵌合抗體可經由突變誘發或 CDR移植製造。CDR移植通常涉及將一抗體之具有所需特異性之CDR移植至另一抗體之構架區（FR)上。

在某些實施例中，不同於"多特異性"或”多功能，，抗體之雙k抗體通常應理解為其各結合位點相同。當過量抗體將與配位體結合之受體量降低至少約2〇%、 40/。6G/〇、8G/。、85%或更多（如在活體外競爭結合檢定中量測）時抗體實質上抑制配位體與受體之黏著。術π抗原决疋基係指能夠由特異性結合劑結合之分子部分。例示性抗原決定基可包含能夠與目標特異性結合之任何多肽判定子。例元极铲 ' 抗原決疋基判定子包括（但不限於）分子之化學活性表面圃其 / . 爹面團基，例如（但不限於)胺基酸、糖側鏈、磷醯基及磺醯基。在鞏丞長系些實施例中，抗原決定基判疋子可具有特定三維結構特科偁将铽及/或特定電荷特徵。在某些實施例中，抗原決定其么 > 触Λ丄人、疋基為抗體結合之抗原區域。抗原決疋基可為連績或非連續的太逆貝的在某些實施例中，抗原決定基可為模擬劑，因為1自冬盥 ^ ^ ，、用以產生抗體之抗原決定基類似之二維結構，但不包合或禮勺人 ^ ^ 3或僅包含一些存在於該用以產生抗體之抗原決定基中的胺基酸殘基。标抑制及/或中和抗原決定基f，係指當在活體内、活體 120060.doc -73- 200808822 外及/或原位與特異性結合劑結合時導致降低生物活性之抗原決定基。在某些實施例中，中和抗原決定基處於目標之生物活性區上或與其結合。術語"活化抗原決定基”係指當在活體内、活體外及/或原位與特異性結合劑結合時導致活化或維持生物活性之抗原決定基。在某些實施例中，活化抗原決定基處於目標之生物活性區上或與其結合。

術語"劑"在本文中用以表示化合物、化合物之混合物、生物巨分子或自生物材料製得之提取物。如本文所用之術語”醫藥劑或藥物"係指在適當投與患者時能夠誘導所需治療作用之化合物或組合物。。如本文所用之術語"調節劑"為改變分子活性或功能之合物。舉例而言，調節劑可引起分子某-活性或功能之值與無調節劑存在下所觀察到之活性或功能之量值相比力或降低。在某些實施例中，調節劑為降低分子至少一活性或功能之量值的抑制劑或拮抗劑。在某些實施例中調：劑為增加分子至少一種活性或功能之量值的激動劑二：=彳！性活性及功能包括(但不限於)結合^ 於）番白· 破轉導。$些例示性抑制劑包括（但不Ρ 子_貝、肽、抗體、肽抗體、碳水化合物及有機小《」示肽抗體描述於（例如）W〇 01/83525中。如本文所用，"實質上純的”意謂主體物質貝（亦即以莫耳計在組合物中其明顯多別物質）。名f i ^ ^ 在某些實施例中，實質上經純化為所存在之主於任何其他個之部分為主體 120060.doc -74- 200808822 物質占所有存在之巨分子物皙刀于物貝之至少約50%(以莫耳計）的組合物。在某些實施例中，實質貝貝上、、、屯的組合物將包含多於約 80%、85%、90%、qw 々cm。/ & a 、 95%或99%組合物所存在之所有巨分子物質的主體物質。為苴此與# + 、在某二貝她例中，主體物質經純化至基本均質（在組合物益法蕪由習知沾 …、古猎由白知偵測方法偵測到污染物質）’其中組合物基本上由單一巨分子物質組成。術語"患者"包括人類及動物受檢者。

、”聚集"係指個別蛋白分子經由非共價或共價相互作用形成多聚體。聚集可為可逆的或不可逆的。在某些情形下，當發生三級結構喪失或部分展開時，通常隱藏在折疊蛋白結構内之疏水性胺基酸殘基暴露於溶液。在某些情形下，此促進個別蛋白分子間之疏水性.親水性相互作用，從而導致聚集。舉例而言’ Srisialam等人τ Am (9)·· 1884·8 (2GG2)已判定某些蛋白質構型改變伴隨發生聚集且可鑑別特^蛋白之某些區域尤其為造成聚集體形成之原因。在某些情形下，蛋白聚集可由加熱（Sun等人1 Α㈣ Food Chem 50(6): 1636_42 (2〇〇2))、有機溶劑等人，同上文）及諸如SDS及溶血磷脂之試劑（Hagihara等人，

Biochem 41(3): 1020_6 (2〇〇2))誘發。聚集可為活體外蛋白純化及調配中之重要問題。在某些情形下，在聚集體形成後，恢復生物活性之前可需要用強變性溶液增溶隨後複性及正確再折疊。抗體結構單位通常包含四聚體。各該四聚體通常由兩個相同之夕肽鏈對構成，各對具有一全長"輕"鏈（在某些實施 120060.doc -75- 200808822 例中為約25 kDa)及—全長， 7〇 kDa)。術語”重鏈，，、鍵（在某些實施例中為約50-異性之可變區序列的：具：足以賊予針對特定抗原之特域VH及三個恒定區結構域Μ、;王長^包括可變區結構多肽之脸其@ 0 p Ch2&Ch3。Vh結構域處於夕肽之胺基JW且CH3結構域虛钮"重鰱"％雲入#次處於羧基端。如本文所用之術 D。重鏈/函盍全長抗體重鏈及其片段。術自吾輕鍵"包括具有屈可變序列的μn 特定抗原之特異性之 …β 、、 °夕。全長輕鏈包括可變區結構域VL及恆定區結構域CL。如同重鍤，έ μ 重鍵 t鏈之可變區結構域處於多肽之胺基端。如本文所用夕彡卜< „ A一斤用之術浯輕鏈"涵蓋全長輕鏈及其片段。各鏈之胺基端部分通常包括約100至11〇或更多胺基酸之可變區（重鏈中之Vh及輕鏈中之Vl)，其通常負責抗原識別。各鏈之缓基端部分通常定義怪定區（重鏈中之結構域及輪鏈中之CL) ’其可負責效應功能。抗體效應功能包括活化補體及刺激助噬素吞噬作用。人類輕鏈通常分類為 κ及λ輕鏈。重鏈通常分類為μ、δ、γ、且分別將抗體同型定義為IgM、IgD、IgG、IgA及IgE。IgG具有包括（但不限於）IgGi、IgG2、IgG3及IgG4之數種子類。IgM具有包括（但不限於）IgMj IgM2之子類。IgA類似地細分為包括 (但不限於）IgAi&IgA2之子類。在全長輕鏈及重鏈内，可變與恆定區通常由具有約12或12個以上胺基酸之"j”區連接，其中重鏈亦包括具有約10個以上胺基酸之”D"區。例如參見 Fundamental Immunology 第 7 章（Paul，W·編，第 2版 120060.doc -76- 200808822

Raven Press，Ν·Υ· (1989))。各輕/重鏈對之可變區通常形成抗原結合位點。可變區通常展示出由三個高變區（亦稱為互補判定區或 CDR)連接之相對保守之構架區（FR)的相同通用結構。各對重鏈及輕鏈之CDR通常經構架區調整而能夠結合特異性抗原。自N端至C端，輕鏈及重鏈可變區通常均包含結構域 FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3及FR4。各結構域之胺基酸分配通常係根據Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health， Bethesda，Md· (1987及 1991))或 Chothia及 Lesk J· Mol· Biol· 196:901-917 (1987); Chothia 等人 Nature 342:878-883 (1989)之定義。如上文所論述，存在數種類型之抗體片段。Fab片段由一輕鏈及一重鏈之ChI及可變區構成。Fab分子之重鏈不能與另一重鏈分子形成二硫鍵。FabM段含有一輕鏈及一含有CH1與CH2結構域之間更多恆定區之重鏈使得可在兩重鏈之間形成鏈間二硫鍵而形成F(ab’）2分子。Fab片段與 F(ab，)2分子類似，例外為分子重鏈中之恆定域延伸至Ch2 結構域之末端。Fv片段包含重鏈及輕鏈之可變區，但缺少恆定區。單鏈可變片段（scFv)包含重鏈及輕鏈之可變區，其中重鏈與輕鏈可變區融合形成單一分子，此分子形成抗原結合區。在某些實施例中，scFv包含單一多肽鏈。單鏈抗體包含scFv。在某些實施例中，單鏈抗體包含其他融合至scFv之多肽，諸如且不限於一或多個板定區。例示性單 120060.doc -77- 200808822 鏈抗體論述於（例如）WO 88/01649及美國專利第 4,946,778、5,260,203 及 5,869,620號中。Fc 片段含有重鏈之CH2及CH3結構域且含有所有或部分CH1與CH2結構域之間的恆定區。在某些實施例中，所有或部分CHi與cH2結構域之間的恒定區包含一或多個允許F c片段之間形成一或多個鏈間二硫鍵之半胱胺酸。

在某些實施例中，單鏈抗體為最大抗體。術語”最大抗體π包括融合（可經由連接子或直接附著）至卜或Fc片段之 scFv。在某些實施例中，單鏈抗體為結合huEp〇R之最大抗體（’’huEpoR最大抗體”）。在某些實施例中，單鏈抗體為結合且活化huEpoR之最大抗體。例示性1§樣結構域_Fc融合揭示於美國專利第6，117,655號中。在某些實施例中，抗體可使用替代性支架產生。術語，，替代性支架”係指一種不同於兩輕鏈及兩重鏈之傳統抗體構木之構木，其中該構架可具有—或多處經改變之胺基酸及/ 或一或多處序列插入（諸如CDR序列），其賦予所得蛋白特異，結合至少一種目標之能力。在某些實施例中，替代性支架具有一或多個用於產生抗體之CDR。在某些實施例中，替代性支架係基於人類蛋白。在某些實施例中，替代性支㈣基於哺乳動物蛋白。在某些實施例中，替代性支 ^係基於真核動物蛋白。在某些實施例中，替代性支架係基於原核動物蛋白。 120060.doc -78- 200808822 域抗體。適用於產生抗體之替代性支架之某些實例包括 (但不限於）來自駱駝之單結構域抗體、蛋白酶抑制劑、人類血清轉鐵蛋白、CTLA-4、纖維結合蛋白（包括但不限於纖維結合蛋白III型結構域）、C型凝集素樣結構域、脂質運載蛋白家族蛋白、錨蛋白重複蛋白、蛋白A之Z結構域、γ-晶狀體球蛋白、澱粉酶抑制劑、新製癌菌素、CBM4-2、 Τ-細胞受體、Im9、經設計AR蛋白、經設計TPR蛋白、辞指結構域、pVIII、禽胰多肽、GCN4、WW結構域、Src同 # 源3 (SH3)結構域、Src同源2 (SH2)結構域、PDZ結構域、 TEM-1 β-内醯胺酶、GFP、硫氧還蛋白、葡萄糖球菌核酸酶、PHD-指狀結構域、CI-2、ΒΡΤΙ、ΑΡΡΙ、HPSTI、大腸桿菌絲胺酸蛋白酶抑制劑、LACI-D1、LDTI、MTI-II、蠍毒素、昆蟲抵禦素 A肽、EETI-II、Min-23、CBD、PBP、細胞色素13562、轉鐵蛋白、LDL受體結構域A及泛素。替代性支架之某些實例論述於Hey等人，"Artifical，non-antibody binding proteins for pharmaceutical and industrial 擊 applications” Trends in Biotechnology，2UW22

Binz 等人，’’Engineering novel binding proteins from nonimmunoglobulin domains11 Nature Biotechnology, 23:1257-68 (2005)中〇在某些實施例中，可改組功能結構域CH1、CH2、CH3及間插序列以產生不同抗體恆定區。舉例而言，在某些實施例中，該等雜交恆定區可針對血清半衰期、抗體四聚體之組裝及折疊及/或效應功能改良經最優化。在某些實施例 120060.doc 79- 200808822 中’經修飾抗m ·卜— .^ ^ 疋區可猎由將單點突變引入恆定區之胺基酸序列中日、、日,丨^ 成1成所得抗體之改良品質，例如上文所列出之彼等巾之-或多㈣產生。陡二一貝施例中，藉由在不損失對特定目標分子之特異 - 兄下進行同型轉換來將一種同型之抗體轉化為不同 5 i㈤型轉換之方法尤其包括（但不限於）直接重組技術 ⑽M U國專利第4,8 16,397號）及細胞間融合技術（例如多見美國專利第5,916,771號）。在某些實施例中，可使用上文所述之技術或其他此項技術中已知之技術在不損失對特定目標分子之特異性之情況下將抗體自一種子類轉化為另一子類，包括（但不限於）自IgG2子類轉化為IgGi、坨… 或IgG4子類。在某些實施例中，提供包含至少一部分人類序列及另一物種序列之嵌合抗體。在某些實施例中，該嵌合抗體可在宿主體内產生與無宿主抗體序列之抗體相比降低之免疫反應。舉例而言，在某些情形下，可使用所關注之動物作為特定人類疾病之模型。為研究抗體對動物宿主中該疾病之作用，可使用來自不同物種之抗體。但在某些情形下，該專來自另一物種之抗體可在宿主動物體内誘發對抗體自身之免疫反應，從而阻礙對此等抗體之評估。在某些實施例中，以來自宿主動物之抗體胺基酸序列置換抗體之部分胺基酸序列可降低宿主動物抗-抗體反應之量值。在某些實施例中，嵌合抗體包含重鏈及輕鏈，其中輕鏈及重鏈之可變區來自第一物種且輕鏈及重鏈之恆定區來自 I20060.doc -80 - 200808822 弟-物種。在某些實施例中，抗體重鏈恆定區為非人類物種之抗體重鏈恆定區。在某些實施例中，抗體輕鏈怪定區為非人類物種之抗體輕鏈怪^區。在某些實施例中，抗體重鏈怪定區為人類抗體重鏈恒定區，且抗體重鏈可變區為非人類物種之抗體重鏈可變區。在某些實施例中，抗體輕鏈恆定區為人類抗體輕鏈恆定區，且抗體輕鏈可變區為非人類物種之抗體輕鏈可變區。例示性抗體恆定區包括㈠旦不限於）人類抗體恆定區、獼猴抗體恆定區、小鼠抗體恆疋區及兔抗體恆定區。例示性抗體可變區包括（但不限於）人類抗體可變區、小鼠抗體可變區、豬抗體可變區、豚鼠抗體可變區、獼猴抗體可變區及兔抗體可變區。在某些實施例中，可以得自其他抗體序列之構架區置換重鏈及輕鏈中可變區之構架區。某些例示性嵌合抗體可藉由一般技術者熟知之方法產生。在某些實施例中，可將編碼重鏈可變區之第一物種之聚核苷酸與編碼重鏈恆定區之第二物種之聚核苦酸融合。在某些實施例中，可將編碼輕鏈可變區之第一物種之聚核眘酸與編碼輕鏈恆定區之第二物種之核苷酸序列融合。在某些實施例中，可將此等融合核苷酸序列在單一表現載體 (例如質體）或多種表現載體中引入細胞。在某些實施例中’包含至少一種表現載體之細胞可用以製造多肽。在某些實施例中，可將此等融合核苷酸序列在單獨表現載體或單一表現載體中引入細胞。在某些實施例中，宿主細胞表現重鏈及輕鏈，其組合產生抗體。在某些實施例中，包含 120060,d〇c 81 200808822 至少-種表現載體之細胞可用以製造抗體。用於產生及表現抗體之例示性方法論述於下文。在某些實施例中，對抗體重鏈及輕鏈之保守性修飾（及對編碼核㈣之相應修飾）將產生具有與原抗體類似之功

能及化學特徵之抗體。相對而t I 仰对向σ，在某些實施例中，抗體功能及/或化學特徵之實曾料你綠 w 卞了 1人 < 貝貝性修飾可猎由選擇在維持以下各物之作用方面顯著不同之會束壶芬▲ 个Ν <重鏈及輕鏈胺基酸序列之取代來實現：（a)取代區域中分子骨牟 ^ u ^ 刀丁月木之結構，例如薄片或螺旋構型；（b)目標位點分子夕雪共斗、，于之電何或疏水性；或（c)側鏈體積0 某些所需胺基酸取代（保守性或非保守性）可由熟習此項技術者在需要該等取代時判定。在某些實施例中，胺基酸取代可詩㈣㈣之重要絲，諸如可增加或降低抗體親和力或抗體效應功能之殘基。可以夕種方式產生對抗原具有特異性之各種抗體。在某些實施例中，可將含有所關注抗原決定基之抗原引入動物宿主（例如小鼠）體内，由此產生對該抗原蚊基具有特異性之抗體。在某些情形下，可從取自自然暴露於所關注抗

原决定基之伯主之生物樣品中獲得對該抗原決定基具有特異性之抗體。在某些情形下，將人類免疫球蛋白（Ig)基因座引入已滅活内源性Ig基因之小鼠體内可提供獲得人類單株抗體（MAb)之機會。在某些實施例中，可藉由在活體外用輕鏈及重鏈庫（例如嗤菌體呈現庫）進行篩選來獲得對所關 >主抗原決定基具有特異性之抗體。 120060.doc -82- 200808822 雙特異性或雙功能抗體包含兩個不同之重/輕鏈對及兩個不同之結合位點。雙特異性抗體可藉由包括（但不限於）融合瘤融合或Fab’片段連接之多種方法產生。例如來見

Songsivilai及 Lachmann C7M·五χ/7· /mm⑽〇/· 79: 315_321 (1990); Kostelny等人 J. /所772·。/· 148:1547-1553 (1992) 〇在某些實施例中，可在融合瘤細胞株之外的細胞株中表現抗體。在某些實施例中，可使用編碼特定抗體（包括嵌合抗體）之序列轉化適當之哺乳動物宿主細胞。根據某些 _ 實施例，轉化可藉由任何用於將聚核苷酸引入宿主細胞之已知方法，例如包括將聚核苷酸包裝於病毒（或病毒載體）中及用該病毒轉導宿主細胞或藉由使用如美國專利第 4,399,216、4,912,040、4,740,461 及 4,959,455 號巾例示之此項技術中已知之程序轉染載體。在某些實施例中，表現載體包含編碼抗體之聚核苷酸序列。在某些實施例中，提供一種製造多肽之方法，其包含在一定條件下在包含表現載體之細胞中產生多肽，該等條件適於载體表氣其中所含之聚核苷酸以產生多肽。在某些貝鈿例中，提供一種製造抗體之方法，其包含在 …疋條件下在包含至少一種表現載體之細胞中產生抗體，該等條件適於載體表現其中所含之聚核苷酸以產生抗體。某二員方也例中’自宿主細胞表現scFv-Fc蛋白。在某一只也例中，至少一些在宿主細胞中表現之scFv-Fc蛋白形，多聚體’包括（但不限於）二聚體。在某些實施例中，、''田胞中表現之scFV_Fc蛋白包括單體及多聚體。 120060.doc -83· 200808822 在某些實施例中，將載體轉染至細胞中。在某些實施例中，所用轉染程序可取決於待轉化之宿主。某些將異源聚核苷酸引入哺乳動物細胞中之方法在此項技術中係已知的且包括（但不限於）葡聚糖介導之轉染、磷酸鈣沉澱、聚凝胺介導之轉染、原生質體融合、電穿孔、脂質體中之聚核苷酸封裝及將DNA直接顯微注射至細胞核中。某些可用作表現宿主之哺乳動物細胞株在此項技術中係已知的且包括（但不限於）多種可自美國典型培養物保藏中心（American Type Culture Collection)(ATCC)獲得之永生化細胞株，包括（但不限於）中國倉鼠卵巢（CHO)細胞、E5細胞、海拉（HeLa)細胞、幼倉鼠腎（BHK)細胞、猴腎細胞 (COS)、人類肝細胞癌細胞（例如Hep G2)、NS0細胞、SP20 細胞、Per C6細胞、293細胞及多種其他細胞株。在某些實施例中，可經由判定何種細胞株具有高表現含量及產生具有組成性抗原結合特性之抗體來選擇細胞株。在某些實施例中，可經轉染至宿主細胞中之載體包含可操作地連接至編碼抗體之核苷酸之控制序列。在某些實施例中，控制序列促進連接聚核苷酸之表現，從而導致產生由連接聚核苷酸編碼之多肽。在某些實施例中，載體亦包含允許在宿主細胞中實現染色體獨立性複製之聚核苷酸序列。例示性載體包括（但不限於）質體（例如BlueScript、puc 等）黏質體及YACS。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQ 120060.doc -84 - 200808822 APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGTLVTVSS. (SEQ ID NO: 1)及 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQH PGKAPKLMIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQPE DEADYYCSSYAGRNWVFGGGTQLTVL (SEQ ID NO: 2)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 3)及 QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYIYVSWYQQHP GKAPKLMIYDVSRRPSGISDRFSGSKSGNTASLTISGLQAED EADYYCNSYTTLSTWLFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 4) 〇在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGKGTLVTVSS (SEQ ID NO: 5)及 QSALTQPASVSGSPGQSIIISCTGTRSDIGGYNYVSWYQHH PGRAPKLIIFDVNNRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAE DEADYYCNSFTDSRTWLFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 6)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQA 120060.doc -85 - 200808822 PGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLY LQMNSLRAEDTAVYYCVKDRVAVAGKGSYYFDSWGRGTT VTVSS (SEQ ID NO: 7)及 QSVLTQPPSVSEAPGQRVTIACSGSSSNIGNNAVSWYQQLPG KAPTLLIYYDNLLPSGVSDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDE ADYYCAAWDDSLNDWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 8)。 I 在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：

QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIR • QSPSRGLEWLGRTYYRSKWYNDYAVSVKSRMTIKADTSK NQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARDEGPLDYWGQGTLVTVSA (SEQ ID NO: 9)及 QAVLTQPSSVSGAPGQRVTISCTGSSSNLGTGYDVHWYQQLP GTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSDTSGLLAITGLQAEDE ATYYCQSYDFSLSAMVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO]0)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： QVQLQQSGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMHWVRQ • APGKGLEWVAVISNHGKSTYYADSVKGRFTISRDNSKHML YLQMNSLRADDTALYYCARDIALAGDYWGQGTLVTYSA (SEQ ID NO: 56)及 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQS1SSYLNWYQQLPG KVPKLLIYGASKLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDF ATYYCLQDYNYPLTFGPGTRLEIK (SEQ ID NO: 58)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體·· QVQLQESGPGLVRPSGTLSLTCAVSGGSIGSSNWWSWVRQ 120060.doc -86 - 200808822 APGKGLEWIGEISQSGSTNYNPSLKGRVTISLDRSRNQLSLK LSSVTAADTAVYYCARQLRSIDAFDIWGPGTTVTVSA (SEQ ID NO: 60)及 SYVLTQPPSVSVSPGLTATITCSGDKLGDKYASWYQQKPG QSPVLVIYQDRKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAVDE ADYYCQAWDSDTSYVFGTGTQLTVL (SEQ ID NO: 62)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：

QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGYINNYYWSWIRQP PGKGLEWIGYIHYSGSTYYNPSLKSRVTISEDTSKNQFSLK LSSATAADTAVYYCARVGYYYDSSGYNLAWYFDLWGRGT LVTVSA (SEQ ID NO: 64)及 SSELTQDPAVSVALGQTVRITCQGDNLRSYSATWYQQKPGQ APVLVLFGENNRPSGIPDRFSGSKSGDTAVLTITGTQTQDEA DYYCTSRVNSGNHLGVFGPGTQLTVL (SEQ ID NO: 66)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVESGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVR QAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSIS TAYMELSRLRSDDTAVYYCARGGHMTTVTRDAFDIWGQG TMVTVSA (SEQ ID NO: 68)及 SSELTQDPAVSVALGQTIRITCQGDSLRYYYATWYQQKPGQ APILVIYGQNNRPSGVPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEAD YYCGTWDSSVSASWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 70)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：

QYQLQQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFSGYYMHWVR 120060.doc • 87 - 200808822 QAPGQGLEWMGWINPNSGSTNYAQKFLGRVTMTRDTSIST AYMELSSLRSDDTAVYYCARGHSGDYFDYWGQGTLVTVSA (SEQ ID NO: 72)及 EIVLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSSWLAWYQQRPG QAPKLLIYAARLRGGGPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFA TYFCQQSYSTPISFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 74) 〇

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： QVQLQESGSGLARPSQTLSLTCAVSGGSISSSAFSWNWIRQ PPGKGLEWIGYIYHTGITDYNPSLKSRVTISVDRSKNQFSL NVNSVTAADTAVYYCARGHGSDPAWFDPWGKGTLVTVSS (SEQ ID NO: 76)及 QSVLTQPPSVSVSPGQTASITCSGDKLGDKYASWYQQRPG QSPVLVIYRDTKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAVDE ADYYCQAWDSTTSLVFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 78)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGRGTMVTVSS (SEQ ID NO: 80)及 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGFNYVSWYQK YPGKAPKLVIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQA EDEADYYCSSWAPGKNLFGGGTKLTVL (SEQ ID NO·· 82) 〇

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQA 120060.doc -88- 200808822 PGKGLEWVSGISGSGSSEGGTYYADSVKGRFTLSRDNSKN TLYLQMNSLRAEDTALYYCVKDRPSRYSFGYYFDYWGRG TLVTVSS (SEQ ID NO: 84)及 LPVLTQPPSVSVSPGQTASIACSGNKLGDKYVSWYQQKPG QSPLLVIYQDTKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDE ADYYCQAWDSSTDVVFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 86)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGTMVTVSS (SEQ ID NO: 88)及 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHP DKAPRLMIYDVNKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAED EAHYYCNSYAGSNNWVFGGGTQLTVL (SEQ ID NO: 90)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體·· QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 92)及 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQ HPGRAPKLIIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQA DDEADYYCNSYAGSIYVFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 94) 〇

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： QVQLVQSGAEIKKPGASVKVSCKTFGSPFSTNDIHWVRQA 120060.doc -89 - 200808822 PGQGLEWMGIIDTSGAMTRYAQKFQGRVTVTRETSTSTVY MELSSLKSEDTAVYYCAREGCTNGVCYDNGFDIWGQGTL VTVSS (SEQ ID NO: 96)及 DIQMTQSPSTLSASIGDRVTITCRASEGIYHWLAWYQQKPG KAPKLLIYKASSLASGAPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPDDF ATYYCQQYSNYPLTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 98)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ • APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGRGTMVTVSS (SEQ ID NO: 100)及 QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGSYNLVSWYQQHP GKVPKLIIYEVSNRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDE ADYYCSSLTSSGTWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 102)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ

APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 104)及 QSALTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGAYNYVSWYQQHP GKAPKLMIYEVARRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAED EADYYCSSYAGSNNFAVFGRGTKLTVL (SEQ ID NO: 106) 〇

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFRFSSYWMTWVRQ 120060.doc -90- 200808822 APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTMSRDNAKNS VYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 108)及 QSALTQPASVSGSPGQSITIPCTGTSSDIGTYDYVSWYQQHP GKVPKVIIYEVTNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQADD EADYYCNSFTKNNTWVFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 110)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： QVQLVESGGGLVQPGRSLILSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWSQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 112)及 QSALTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSGDVGAYNYVSWYQ QYPGKAPKLMIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSG LQAEDEADYYCNSYRGSNGPWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 114)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 1)及 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQ HPGKAPKLMIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQP EDEADYYCSSYAGRNWYFGGGTQLTVL (SEQ ID NO: 2) 〇 120060.doc -91 - 200808822 在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至F c之單鏈可變片段： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 3)及

QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYIYVSWYQQH

PGKAPKLMIYDVSRRPSGISDRFSGSKSGNTASLTISGLQAED • EADYYCNSYTTLSTWLFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 4)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGKGTLVTVSS (SEQ ID NO: 5)及

QSALTQPASVSGSPGQSIIISCTGTRSDIGGYNYVSWYQHH • PGRAPKLIIFDVNNRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAED EADYYCNSFTDSRTWLFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 6)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQA PGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLY LQMNSLRAEDTAVYYCVKDRVAVAGKGSYYFDSWGRGTT VTVSS (SEQ ID NO: 7)及 120060.doc -92- 200808822 QSVLTQPPSVSEAPGQRVTIACSGSSSNIGNNAVSWYQQLPG KAPTLLIYYDNLLPSGVSDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDE ADYYCAAWDDSLNDWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 8)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIR QSPSRGLEWLGRTYYRSKWYNDYAVSVKSRMTIKADTSK NQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARDEGPLDYWGQGTLVTVSA (SEQ ID NO: 9)及 QAVLTQPSSVSGAPGQRVTISCTGSSSNLGTGYDVHWYQQLP GTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSDTSGLLAITGLQAEDE ATYYCQSYDFSLSAMVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 10)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： QVQLQQSGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMHWVRQ APGKGLEWVAVISNHGKSTYYADSVKGRFTISRDNSKHML YLQMNSLRADDTALYYCARDIALAGDYWGQGTLVTVSA (SEQ ID NO: 56)及 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQLPG KVPKLLIYGASKLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDF ATYYCLQDYNYPLTFGPGTRLEIK (SEQ ID NO: 58)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：

QVQLQESGPGLVRPSGTLSLTCAVSGGSIGSSNWWSWVRQ 120060.doc -93- 200808822 APGKGLEWIGEISQSGSTNYNPSLKGRVTISLDRSRNQLS LKLSSVTAADTAVYYCARQLRSIDAFDIWGPGTTVTVSA (SEQ ID NO: 60)及 SYVLTQPPSVSVSPGLTATITCSGDKLGDKYASWYQQKPG QSPVLVIYQDRKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAVDE ADYYCQAWDSDTSYVFGTGTQLTVL (SEQ ID NO: 62)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：

QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGYINNYYWSWIRQP PGKGLEWIGYIHYSGSTYYNPSLKSRVTISEDTSKNQFSLK LSSATAADTAVYYCARVGYYYDSSGYNLAWYFDLWGRGT LVTVSA (SEQ ID NO: 64)及 SSELTQDPAVSVALGQTVRITCQGDNLRSYSATWYQQKPGQ APVLVLFGENNRPSGIPDRFSGSKSGDTAVLTITGTQTQDEA DYYCTSRVNSGNHLGVFGPGTQLTVL (SEQ ID NO: 66)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： EVQLVESGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVR QAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSIS TAYMELSRLRSDDTAVYYCARGGHMTTVTRDAFDIWGQG TMVTVSA (SEQ ID NO: 68)及 SSELTQDPAVSVALGQTIRITCQGDSLRYYYATWYQQKPGQA PILVIYGQNNRPSGVPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADY YCGTWDSSVSASWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 70)。 120060.doc -94- 200808822 在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： QVQLQQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFSGYYMHWVR QAPGQGLEWMGWINPNSGSTNYAQKFLGRVTMTRDTSIST AYMELSSLRSDDTAVYYCARGHSGDYFDYWGQGTLVTVSA (SEQ ID NO: 72)及 EIVLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSSWLAWYQQRPG QAPKLLIYAARLRGGGPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFA TYFCQQSYSTPISFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 74)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： QVQLQESGSGLARPSQTLSLTCAVSGGSISSSAFSWNWIRQ PPGKGLEWIGYIYHTGITDYNPSLKSRVTISVDRSKNQFSL NVNSVTAADTAVYYCARGHGSDPAWFDPWGKGTLVTVSS (SEQ ID NO: 76)及

QSVLTQPPSVSVSPGQTASITCSGDKLGDKYASWYQQRPG QSPVLVIYRDTKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAVDE ADYYCQAWDSTTSLVFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 78)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGRGTMVTVSS (SEQ ID NO: 80)及 120060.doc -95- 200808822 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGFNYVSWYQK YPGKAPKLVIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQA EDEADYYCSSWAPGKNLFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 82) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQA PGKGLEWVSGISGSGSSEGGTYYADSVKGRFTLSRDNSKN TLYLQMNSLRAEDTALYYCVKDRPSRYSFGYYFDYWGRG • TLVTVSS (SEQ ID NO: 84)及 LPVLTQPPSVSVSPGQTASIACSGNKLGDKYVSWYQQKPG QSPLLVIYQDTKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDE ADYYCQAWDSSTDVVFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 86)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGTMVTVSS (SEQ ID NO: 88)及 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHP DKAPRLMIYDVNKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAED EAHYYCNSYAGSNNWVFGGGTQLTVL (SEQ ID NO: 90) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：

QVQLYESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ 120060.doc -96- 200808822 APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 92)及 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQ HPGRAPKLIIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQA DDEADYYCNSYAGSIYVFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 94)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：

QVQLVQSGAEIKKPGASVKVSCKTFGSPFSTNDIHWVRQA PGQGLEWMGIIDTSGAMTRYAQKFQGRVTVTRETSTSTVY MELSSLKSEDTAVYYCAREGCTNGVCYDNGFDIWGQGTL VTVSS (SEQ ID NO: 96)及 DIQMTQSPSTLSASIGDRVTITCRASEGIYHWLAWYQQKPG KAPKLLIYKASSLASGAPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPDDF ATYYCQQYSNYPLTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 98)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGRGTMVTVSS (SEQ ID NO: 100)及 QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGSYNLVSWYQQHP GKVPKLIIYEVSNRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDE ADYYCSSLTSSGTWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 102)。 120060.doc -97- 200808822 在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 104)及

QSALTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGAYNYVSWYQQHP GKAPKLMIYEVARRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAED EADYYCSSYAGSNNFAVFGRGTKLTVL (SEQ ID NO: 106) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFRFSSYWMTWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVDSVKGRFTMSRDNAKNS VYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 108)及 QSALTQPASVSGSPGQSITIPCTGTSSDIGTYDYVSWYQQHP GKVPKVIIYEVTNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQADD EADYYCNSFTKNNTWVFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 110)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段： QVQLVESGGGLVQPGRSLILSCAVSGFTFSKYWMTWVRQ APGKGLEWVANIKPDGSEKYYVESVKGRFTISRDNAKNSV YLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWSQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 112)及 120060.doc -98- 200808822

QSALTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSGDVGAYNYVSWYQ

QYPGKAPKLMIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSG LQAEDEADYYCNSYRGSNGPWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 114)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYWMS (SEQ ID NO: 11) > NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 12)及 VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 13)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 14)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 15)及 SSYAGRNWV (SEQ ID NO: 16)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYWMS (SEQ ID NO: 11)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 12)、VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 13)、TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 14)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 15)及 SSYAGRNWV (SEQ ID NO: 16) 〇

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGTSSDVGGYIYVS (SEQ ID NO: 17)、DVSRRPS (SEQ ID NO: 18)及NSYTTLSTWL (SEQ ID NO: 19)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYWMS (SEQ ID NO: 11)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 12)、 VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 13) > TGTSSDVGGYIYVS (SEQ ID NO: 17)、DVSRRPS (SEQ ID NO: 18)及NSYTTLSTWL (SEQ ID NO: 19) 〇在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： 120060.doc -99- 200808822 TGTRSDIGGYNYVS (SEQ ID NO: 20)、FDVNNRPS (SEQ ID NO: 21)及NSFTDSRTWL (SEQ ID NO: 22)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYWMS (SEQ ID NO: 11)^ NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 12)、VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 13)、TGTRSDIGGYNYVS (SEQ ID NO: 20)、FDVNNRPS (SEQ ID NO: 21)及 NSFTDSRTWL (SEQ ID NO: 22)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYAMS (SEQ ID NO: 23) - AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO: 24)及 DRVAVAGKGSYYFDS (SEQ ID NO: 25)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： SGSSSNIGNNAVS (SEQ ID NO: 26)、YDNLLPSG (SEQ ID NO: 27)及 AAWDDSLNDWV (SEQ ID NO: 28)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYAMS (SEQ ID NO: 23)、AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO: 24)、 DRVAVAGKGSYYFDS (SEQ ID NO: 25)、SGSSSNIGNNAVS (SEQ ID NO: 26)、YDNLLPSG (SEQ ID NO: 27)及 AAWDDSLNDWV (SEQ ID NO: 28) 〇在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： SNSAAWN (SEQ ID NO: 29)、RTYYRSKWYNDYAVSKS (SEQ ID NO: 30)及 DEGPLDY (SEQ ID NO: 31) 〇在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGSSSNLGTGYDVH (SEQ ID NO: 32)、GNSNRPS (SEQ ID NO: 33)及 QSYDFSLSAMV (SEQ ID NCh 34)。 120060.doc -100 - 200808822 在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： SNSAAWN (SEQ ID NO: 29)、RTYYRSKWYNDYAVSKS (SEQ ID NO: 30)、DEGPLDY (SEQ ID NO: 31)、 TGSSSNLGTGYDVH (SEQ ID NO: 32)、GNSNRPS (SEQ ID NO: 33)及 QSYDFSLSAMV (SEQ ID NO: 34)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：DYAMH (SEQ ID NO: 123)、VISNHGKSTYYADSVKG (SEQ ID NO: 124)及 DIALAGDY (SEQ ID NO: 125)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 126)、GASKLQS (SEQ ID NO: 127)及 LQDYNYPLT (SEQ ID NO·· 128)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：DYAMH (SEQ ID NO: 123) - VISNHGKSTYYADSVKG (SEQ ID NO: 124)、DIALAGDY (SEQ ID NO: 125)、RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 126)、GASKLQS (SEQ ID NO: 127)及LQDYNYPLT (SEQ ID NO: 128)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SSNWWS (SEQ ID NO: 129)、EISQSGSTNYNPSLKG (SEQ ID NO: 130)及 QLRSIDAFDI (SEQ ID NO: 131)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：DKYAS (SEQ ID NO: 132)、YQDRKRPSGI (SEQ ID NO: 133)及 WDSDTSYV (SEQ ID NO: 134)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SSNWWS (SEQ ID NO: 129)、EISQSGSTNYNPSLKG (SEQ ID NO: 120060.doc -101 - 200808822 130)、QLRSIDAFDI (SEQ ID NO: 131)、DKYAS (SEQ ID NO: 132)、YQDRKRPSGI (SEQ ID NO: 133)及WDSDTSYV (SEQ ID NO: 134)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：NYYWS (SEQ ID NO: 135)- YIHYSGSTYYNPSLKSR (SEQ ID NO: 136)及 VGYYYDSSGYNLAWYFDL (SEQ ID NO: 212)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： QGDNLRSYSAT (SEQ ID NO: 137)、GENNRPS (SEQ ID NO: 138)及 TSRVNSGNHLGV (SEQ ID NO: 139)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：NYYWS (SEQ ID NO: 135)、YIHYSGSTYYNPSLKSR (SEQ ID NO: 136)、VGYYYDSSGYNLAWYFDL (SEQ ID NO: 212)、 QGDNLRSYSAT (SEQ ID NO: 137)、GENNRPS (SEQ ID NO·· 138)及TSRVNSGNHLGV (SEQ ID NO: 139) 〇在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：GYYMH (SEQ ID NO: 140) > WINPNSGGTNYAQKFQGR (SEQ ID NO: 141)及 GGHMTTVTRDAFDI (SEQ ID NO: 142)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： QGDSLRYYYAT (SEQ ID NO: 143)、GQNNRPS (SEQ ID NO: 144)及 GTWDSSVSASWV (SEQ ID NO: 145)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：GYYMH (SEQ ID NO: 140) > WINPNSGGTNYAQKFQGR (SEQ ID NO: 141)、GGHMTTVTRDAFDI (SEQ ID NO: 142) > QGDSLRYYYAT (SEQ ID NO·· 143)、GQNNRPS (SEQ ID 120060.doc 102- 200808822 NO: 144)及 GTWDSSVSASWV (SEQ ID NO: 145)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：GYYMH (SEQ ID NO: 146)、WINPNSGSTNYAQKFLG (SEQ ID NO: 147)及 GHSGDYFDY (SEQ ID NO: 148)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： RASQSVSSWLA (SEQ ID NO: 149)、AARLRG (SEQ ID NO: 150)及 QQSYSTPIS (SEQ ID NO: 151)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：GYYMH • (SEQ ID NO: 146) > WINPNSGSTNYAQKFLG (SEQ ID NO: 147)、GHSGDYFDY (SEQ ID NO: 148)、RASQSVSSWLA (SEQ ID NO: 149)、AARLRG (SEQ ID NO: 150)及 QQSYSTPIS (SEQ ID NO: 151)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： SSAFSWN (SEQ ID NO: 152)、YIYHTGITDYNPSLKS (SEQ ID NO: 153)及GHGSDPAWFDP (SEQ ID NO: 154)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： • SGDKLGDKYAS (SEQ ID NO: 155)、RDTKRPS (SEQ ID NO: 156)及 QAWDSTTSLV (SEQ ID NO: 157)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： SSAFSWN (SEQ ID NO: 152)、YIYHTGITDYNPSLKS (SEQ ID NO: 153)、GHGSDPAWFDP (SEQ ID NO: 154)、 SGDKLGDKYAS (SEQ ID NO: 155)、RDTKRPS (SEQ ID NO: 156)及 QAWDSTTSLV (SEQ ID NO: 157)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYWMS 120060.doc -103- 200808822 (SEQ ID NO: 158)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 159)及 VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 160) 〇在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體·· TGTSSDVGGFNYVS (SEQ ID NO: 161)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 162)及 SSWAPGKNL (SEQ ID NO: 163)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYWMS (SEQ ID NO: 158)- NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 159)、VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 160)、TGTSSDVGGFNYVS (SEQ ID NO: 161)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 162)及SSWAPGKNL (SEQ ID NO: 163)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYAMS (SEQ ID NO: 164) > GISGSGSSEGGTYYADSVKG (SEQ ID NO: 165)及 DRPSRYSFGYYFDY (SEQ ID NO: 166)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： SGNKLGDKYVS (SEQ ID NO: 167)、QDTKRPS (SEQ ID NO: 168)及 QAWDSSTDVV (SEQ ID NO: 169) 〇

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYAMS (SEQ ID NO: 164)、GISGSGSSEGGTYYADSVKG (SEQ ID NO: 165)、DRPSRYSFGYYFDY (SEQ ID NO: 166)、 SGNKLGDKYVS (SEQ ID NO: 167)、QDTKRPS (SEQ ID NO: 168)及 QAWDSSTDVV (SEQ ID NO: 169)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體·· KYWMT (SEQ ID NO: 170)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 171)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 172)。 120060.doc -104- 200808822 在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 173) - DVNKRPS (SEQ ID NO: 174)及NSYAGSNNWV (SEQ ID NO: 175)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT (SEQ ID NO: 170)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 171)、 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 172)、TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 173)、DVNKRPS (SEQ ID NO: 174)及 NSYAGSNNWV (SEQ ID NO: 175)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT (SEQ ID NO: 176) > NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 177)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 178)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 179) > EVSKRPS (SEQ ID NO: 180)及NSYAGSIYV (SEQ ID NO: 181)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT (SEQ ID NO: 176)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 177)、 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 178)、TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 179)、EVSKRPS (SEQ ID NO·. 180)及NSYAGSIYV (SEQ ID NO: 181)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：TNDIH (SEQ ID NO: 182) > IIDTSGAMTRYAQKFQG (SEQ ID NO: 183)及 EGCTNGVCYDNGFDI (SEQ ID NO: 184)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： RASEGIYHWLA (SEQ ID NO: 185)、KASSLAS (SEQ ID 120060.doc -105- 200808822 NO: 186)及 QQYSNYPLT (SEQ ID NO: 187)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：TNDIH (SEQ ID NO: 182)、IIDTSGAMTRYAQKFQG (SEQ ID NO: 183)、EGCTNGVCYDNGFDI (SEQ ID NO: 184)、 RASEGIYHWLA (SEQ ID NO: 185)、KASSLAS (SEQ ID NO: 186)及 QQYSNYPLT (SEQ ID NO: 187)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT (SEQ ID NO: 188)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: • 189)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 190)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGTSSDVGSYNLVS (SEQ ID NO: 191)、EVSNRPS (SEQ ID NO: 192)及 SSLTSSGTWV (SEQ ID NO: 193)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT (SEQ ID NO: 188)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 189)、 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 190)、TGTSSDVGSYNLVS (SEQ ID NO: 191)、EVSNRPS (SEQ ID NO: 192)及SSLTSSGTWV (SEQ ID ® NO: 193) 〇在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT (SEQ ID NO: 194)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 195)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 196)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGTSSDVGAYNYVS (SEQ ID NO: 197)- EVARRPS (SEQ ID NO: 198)及 SSYAGSNNFAV (SEQ ID NO: 199)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT 120060.doc -106- 200808822 (SEQ ID NO: 194)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 195)、 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 196)、TGTSSDVGAYNYVS (SEQ ID NO: 197)、EVARRPS (SEQ ID NO: 198)及SSYAGSNNFAV (SEQ ID NO: 199)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYWMT (SEQ ID NO: 200)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 201)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 202)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGTSSDIGTYDYVS (SEQ ID NO: 203)、EVTNRPS (SEQ ID NO: 204)及NSFTKNNTWV (SEQ ID NO: 205)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：SYWMT (SEQ ID NO: 200)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 201)、 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 202)、TGTSSDIGTYDYVS (SEQ ID NO: 203)、EVTNRPS (SEQ ID NO: 204)及NSFTKNNTWV (SEQ ID NO: 205)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT (SEQ ID NO: 206)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 207)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 208) ° 在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體： TGTSGDVGAYNYVS (SEQ ID NO: 209)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 210)及NSYRGSNGPWV (SEQ ID NO: 211)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：KYWMT (SEQ ID NO: 206)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 207)、 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 208)、TGTSGDVGAYNYVS (SEQ ID 120060.doc -107- 200808822

NO:209)、EVSKRPS(SEQIDNO:210)&NSYRGSNGPWV(SEQID NO: 211)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYWMS (SEQ ID NO: 11)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 12)及VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 13)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 14)、 EVSKRPS (SEQ ID NO: 15)及 SSYAGRNWV (SEQ ID NO: φ 16)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYWMS (SEQ ID NO: 11)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 12)、VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 13)、 TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 14)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 15)及 SSYAGRNWV (SEQ ID NO·· 16)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏠可變片段：TGTSSDVGGYIYVS (SEQ ID NO: 17)、 • DVSRRPS (SEQ ID NO: 18)及NSYTTLSTWL (SEQ ID NO: 19)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYWMS (SEQ ID NO: 11)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 12)、VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 13)、 TGTSSDVGGYIYVS (SEQ ID NO: 17) - DVSRRPS (SEQ ID NO: 18)及NSYTTLSTWL (SEQ ID NO: 19)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之 120060.doc •108- 200808822 單鏈可變片段：TGTRSDIGGYNYVS (SEQ ID NO: 20)、 FDVNNRPS (SEQ ID NO: 21)及 NSFTDSRTWL (SEQ ID NO: 22)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYWMS (SEQ ID NO]l)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 12)、VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 13)、 TGTRSDIGGYNYVS (SEQ ID NO: 20)、FDVNNRPS (SEQ ID NO: 21)及NSFTDSRTWL (SEQ ID NO: 22)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYAMS (SEQ ID NO: 23)、AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO: 24)及DRVAVAGKGSYYFDS (SEQ ID NO: 25) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SGSSSNIGNNAVS (SEQ ID NO: 26)、 YDNLLPSG (SEQ ID NO: 27)及 AAWDDSLNDWV (SEQ ID NO: 28) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYAMS (SEQ ID NO: 23)、AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO: 24) > DRVAVAGKGSYYFDS (SEQ ID NO: 25)、SGSSSNIGNNAVS (SEQ ID NO: 26)、YDNLLPSG (SEQ ID NO: 27)及 AAWDDSLNDWV (SEQ ID NO: 28)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc 之單鏈可變片段：SNSAAWN (SEQ ID NO: 29)、 RTYYRSKWYNDYAVSKS (SEQ ID NO: 30)及 DEGPLDY (SEQ ID NO: 31)。 120060.doc -109- 200808822 在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至F c之單鏈可變片段：TGSSSNLGTGYDVH (SEQ ID NO: 32)、 GNSNRPS (SEQ ID NO: 33)及 QSYDFSLSAMV (SEQ ID NO: 34) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc 之單鏈可變片段：SNSAAWN (SEQ ID NO: 29)、 RTYYRSKWYNDYAVSKS (SEQ ID NO: 30)、DEGPLDY (SEQ ID NO: 31)、TGSSSNLGTGYDVH (SEQ ID NO: 32)、GNSNRPS (SEQ ID NO: 33)及 QSYDFSLSAMV (SEQ ID NO: 34)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc 之單鏈可變片段：DYAMH (SEQ ID NO: 123)、 VISNHGKSTYYADSVKG (SEQ ID NO: 124)及DIALAGDY (SEQ ID NO: 125)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 126)、 GASKLQS (SEQ ID NO: 127)及 LQDYNYPLT (SEQ ID NO: 128)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc 之單鏈可變片段：DYAMH (SEQ ID NO: 123)、 VISNHGKSTYYADSVKG (SEQ ID NO: 124)、DIALAGDY (SEQ ID NO: 125)、RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 126)、 GASKLQS (SEQ ID NO: 127)及 LQDYNYPLT (SEQ ID NO: 128)。 120060.doc -110- 200808822 在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc 之單鏈可變片段：SSNWWS (SEQ ID NO: 129)、 EISQSGSTNYNPSLKG (SEQ ID NO· 130)及 QLRSIDAFDI (SEQ ID NO: 131)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc 之單鏈可變片段：DKYAS (SEQ ID NO: 132)、 YQDRKRPSGI (SEQ ID NO: 133)及 WDSDTSYV (SEQ ID NO: 134)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc 之單鏈可變片段：SSNWWS (SEQ ID NO: 129)、 EISQSGSTNYNPSLKG (SEQ ID NO: 130) ^ QLRSIDAFDI (SEQ ID NO: 131)、DKYAS (SEQ ID NO: 132)、YQDRKRPSGI (SEQ ID NO: 133)及 WDSDTSYV (SEQ ID NO: 134)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：NYYWS (SEQ ID NO: 135)、YIHYSGSTYYNPSLKSR (SEQ ID NO: 136)及VGYYYDSSGYNLAWYFDL (SEQ ID NO: 212) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序肩之融合至Fc之單鏈可變片段：QGDNLRSYSAT (SEQ ID NO: 137)、 GENNRPS (SEQ ID NO: 138)及 TSRVNSGNHLGV (SEQ ID NO: 139)。

在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：NYYWS (SEQ ID NO: 135)、YIHYSGSTYYNPSLKSR (SEQ ID NO: 136)、VGYYYDSSGYNLAWYFDL (SEQ ID NO: 212)、QGDNLRSYSAT (SEQ ID NO: 137)、GENNRPS 120060.doc -111- 200808822 (SEQ ID NO: 138)及TSRVNSGNHLGV (SEQ ID NO: 139)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：GYYMH (SEQ ID NO: 140)、WINPNSGGTNYAQKFQGR (SEQ ID NO: 141)及 GGHMTTVTRDAFDI (SEQ ID NO: 142)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：QGDSLRYYYAT (SEQ ID NO: 143)、 GQNNRPS (SEQ ID NO: 144)及 GTWDSSVSASWV (SEQ ID _ NO: 145)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fe之單鏈可變片段：GYYMH (SEQ ID NO: 140)、WINPNSGGTNYAQKFQGR (SEQ ID NO: 141)、GGHMTTVTRDAFDI (SEQ ID NO: 142)、 QGDSLRYYYAT (SEQ ID NO: 143) ^ GQNNRPS (SEQ ID NO: 144) 及GTWDSSVSASWV (SEQ ID NO: 145)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：GYYMH (SEQ ID NO: 146)、WINPNSGSTNYAQKFLG • (SEQ ID NO]47)及GHSGDYFDY (SEQ ID NO: 148)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：RASQSVSSWLA (SEQ ID NO: 149)、 AARLRG (SEQ ID NO: 150)及 QQSYSTPIS (SEQ ID NO: 151) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：GYYMH (SEQ ID NO: 146)、WINPNSGSTNYAQKFLG (SEQ ID NO: 147)、GHSGDYFDY (SEQ ID NO: 148)、 120060.doc -112- 200808822 RASQSVSSWLA (SEQ ID NO: 149) > AARLRG (SEQ ID NO: 150)及QQSYSTPIS (SEQ ID NO: 151)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鍵可變片段·· SSAFSWN (SEQ ID NO: 152)、YIYHTGITDYNPSLKS (SEQ ID NO: 153)及GHGSDPAWFDP (SEQ ID NO: 154)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至F c之單鏈可變片段：SGDKLGDKYAS (SEQ ID NO: 155)、 RDTKRPS (SEQ ID NO: 156)及 QAWDSTTSLV (SEQ ID NO: 157)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SSAFSWN (SEQ ID NO: 152)、YIYHTGITDYNPSLKS (SEQ ID NO: 153) > GHGSDPAWFDP (SEQ ID NO: 154)、 SGDKLGDKYAS (SEQ ID NO: 155) > RDTKRPS (SEQ ID NO: 156)及QAWDSTTSLV (SEQ ID NO:157)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYWMS (SEQ ID NO: 158)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 159)及VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 160)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：TGTSSDVGGFNYVS (SEQ ID NO: 161)、 EVSKRPS (SEQ ID NO: 162)A SSWAPGKNL (SEQ ID NO: 163) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYWMS (SEQ ID NO: 158)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 159)、VSRGGSYSD (SEQ ID NO: 160)、 120060.doc •113- 200808822 TGTSSDVGGFNYVS (SEQ ID NO: 161)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 162)及 SSWAPGKNL (SEQ ID NO: 163)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYAMS (SEQ ID NO: 164)、GISGSGSSEGGTYYADSVKG (SEQ ID NO: 165)及 DRPSRYSFGYYFDY (SEQ ID NO: 166)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SGNKLGDKYVS (SEQ ID NO: 167)、 • QDTKRPS (SEQ ID NO: 168)A QAWDSSTDW (SEQ ID NO: 169)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYAMS (SEQ ID NO: 164)、GISGSGSSEGGTYYADSVKG (SEQ ID NO: 165)、DRPSRYSFGYYFDY (SEQ ID NO: 166)、SGNKLGDKYVS (SEQ ID NO: 167)、QDTKRPS (SEQ ID NO: 168)及 QAWDSSTDW (SEQ ID NO: 169)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鍵可 _ 變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 170)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 171)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 172)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO·· 173)、 DVNKRPS (SEQ ID NO: 174)及 NSYAGSNNWV (SEQ ID NO: 175) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可

變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 170)、NIKPDGSEKYYVESVKG 120060.doc -114- 200808822 (SEQ ID NO: 171)、VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 172)、 TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 173)、DVNKRPS (SEQ ID NO: 174)及NSYAGSNNWV (SEQ ID NO: 175)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 176)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 177)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 178)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 179)、 • EVSKRPS (SEQ ID NO: 180)及NSYAGSIYV (SEQ ID NO: 181)〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 176)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 177)、VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 178)、 TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 179)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 180)及NSYAGSIYV (SEQ ID NO: 181)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可鲁變片段：TNDIH (SEQ ID NO: 182)、IIDTSGAMTRYAQKFQG (SEQ ID NO: 183)及 EGCTNGVCYDNGFDI (SEQ ID NO·· 184)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：RASEGIYHWLA (SEQ ID NO: 185)、 KASSLAS (SEQ ID NO: 186)及 QQYSNYPLT (SEQ ID NO: 187) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可 120060.doc -115- 200808822 變片段：TNDIH (SEQ ID NO: 182)、IIDTSGAMTRYAQKFQG (SEQ ID NO: 183)、EGCTNGVCYDNGFDI (SEQ ID NO: 184)、RASEGIYHWLA (SEQ ID NO]85)、KASSLAS (SEQ ID NO: 186)及QQYSNYPLT (SEQ ID NO: 187) 〇

在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 188)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 189)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 190) 〇在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：TGTSSDVGSYNLVS (SEQ ID NO: 191)、 EVSNRPS (SEQ ID NO: 192)及 SSLTSSGTWV (SEQ ID NO: 193)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 188)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 189)、VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 190)、 TGTSSDVGSYNLVS (SEQ ID NO: 191)、EVSNRPS (SEQ ID NO: 192)及 SSLTSSGTWV (SEQ ID NO: 193)。

在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 194)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 195)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 196)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：TGTSSDVGAYNYVS (SEQ ID NO: 197)、 EVARRPS (SEQ ID NO: 198)及 SSYAGSNNFAV (SEQ ID NO: 199)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可 120060.doc -116- 200808822 變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 194)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 195)、VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 196)、 TGTSSDVGAYNYVS (SEQ ID NO: 197)、EVARRPS (SEQ ID NO: 198)及 SSYAGSNNFAV (SEQ ID NO: 199)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYWMT (SEQ ID NO: 200)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 201)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 202)。

在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之 • 單鏈可變片段：TGTSSDIGTYDYVS (SEQ ID NO: 203)、 EVTNRPS (SEQ ID NO: 204)及 NSFTKNNTWV (SEQ ID NO: 205)。

在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：SYWMT (SEQ ID NO: 200)、NIKPDGSEKYYVDSVKG (SEQ ID NO: 201)、VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 202)、 TGTSSDIGTYDYVS (SEQ ID NO: 203)、EVTNRPS (SEQ ID NO: 204)及NSFTKNNTWV (SEQ ID NO: 205)。

在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 206)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 207)及 VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 208) 〇

在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可變片段：TGTSGDVGAYNYVS (SEQ ID NO: 209)、 EVSKRPS (SEQ ID NO: 210)及NSYRGSNGPWV (SEQ ID NO: 211)。在某些實施例中，提供一種包含以下序列之融合至Fc之單鏈可 120060.doc -117- 200808822 變片段：KYWMT (SEQ ID NO: 206)、NIKPDGSEKYYVESVKG (SEQ ID NO: 207)、VSRGGSFSD (SEQ ID NO: 208)、 TGTSGDVGAYNYVS (SEQ ID NO: 209)、EVSKRPS (SEQ ID NO: 210)及NSYRGSNGPWV (SEQ ID NO: 211)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：

EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKPDGS

EKYWDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGT

LVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAQSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNY

VSWYQQHPGKAPKLMIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQPEDEADYYCS

SYAGRNWVFGGGTQLTVLGAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDT

LMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLT

VLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSL

TCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNV FSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 45)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKPDGS

EKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLFiAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGT

LVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYIYV

SVVYQQHPGKAPKLMiYDVSRRPSGISDRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCNSY

TTLSTWLFGGGTKVTVLGAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM

ISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWWDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLH

QDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCL

VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLWDKSRWQQGNVFSC SVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 46)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：

EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKPDGS

EKYWDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGKGTL

VTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAQSALTQPASVSGSPGQSillSCTGTRSDIGGYNYVS

WYQHHPGRAPKLIIFDVNNRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCNSFT

DSRTWLFGGGTKLTVLGAAAEPKSCDKJHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMI

SRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWWDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLIVLH

QDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCL 120060.doc -118 - 200808822 VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSC SVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 47)。在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGG

STYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKDRVAVAGKGSYYFDS

WGRGTWWSSGGGGSGGGGSGGGGSAQSVLTQPPSVSEAPGQRVTIACSGSSSNI

GNNAVSWYQQLPGKAPTLLIYYDNLLPSGVSDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADY

YCAAWDDSLNDWVFGGGTKVTVLGAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPP

KPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV

VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTK

NQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRW QQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 48)。

在某些實施例中，提供包含以下序列之抗體：

QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRS

KWYNDYAVSVKSRMTIKADTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARDEGPLDYWGQGTL

VTVSAGGGGSGGGGSGGGGSGAPQAVLTQPSSVSGAPGQRVTISCTGSSSNLGTGY

DVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSDTSGLLAITGLQAEDEATYYCQ

SYDFSLSAMVFGGGTKVWLAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDT

LMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWWDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLT

VLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSL

TCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNV FSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 49)。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸F93。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段， -119- 120060.doc 200808822 其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 〇在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 〇在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及 H70。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及H114。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸F93。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及M150。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、L66、R68及H70。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 120060.doc -120- 200808822

Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68及H70。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及 H70。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸F93、E60及 ® H114。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸V48。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸L66。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸W64。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段， ® 其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸H70。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸V48及W64。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸V48及L66。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸V48及R68。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段， 120060.doc -121 - 200808822 其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸V48及H70。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸W64及R68。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸W64及H70。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R68。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段， • 其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及H70。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸R68及H70。在某些實施例中，提供一種融合至Fc之單鏈可變片段，其特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸八44、乂48、 E62 > P63、W64、L66、R68、H70、S91、F93、R99、 H114及M150中之一或多者。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 w Epo受體胞外域之胺基酸F93、E60及Ή114。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸V48。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸L66。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸W64。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 120060.doc -122- 200808822

Epo受體胞外域之胺基酸H70。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸V48及W64。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸V48及L66。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸V48及R68。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 # Epo受體胞外域之胺基酸V48及H70。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸W64及R68。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸W64及H70。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸L66及R68。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 ® Epo受體胞外域之胺基酸L66及H70。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸R68及H70。在某些實施例中，提供一種抗體，其特異性結合人類 Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、E62、P63、W64、乙66、1168、1170、891、？93、1199、11114及]^150中之一或多者。在某些實施例中，可藉由量測所關注疾病症狀之降低量 120060.doc -123- 200808822 來#估抗體作用。在某些實施例中，戶斤關注之疾病可由病原體引起。在某些實施例中，可藉由包括引人物質（例如癌物貝）及基因處理之其他方法在動物宿主體内引發疾病。在某些實施例中，可藉由摘測動物宿主體内一或多種不良事件來評估作用。術語”不良事件”包括（但*限於）接受抗體之動物宿主中之不良反應，此不良反應在未接受抗體之動物宿主體内不存在。在某些實施例中，+良事件包括（但不限於）動物宿主之發熱、針對抗體之免疫反應、炎症及/或死亡。在某些實施例中，組合物進—步包含最大抗體及至少一 :糖。如本文所用’術語"糖"係指單醣，諸如葡萄糖及甘露糖；或多_ ’包括二膽，諸如隸及乳糖；以及糖衍生物’包括糖醇及糖酸。糖醇包括（但不限於）甘露糖醇、木糖醇、赤藻糖醇、蘇糖醇、山梨糖醇及甘油。糖酸之非限制性實例為L-葡糖酸鹽。某些例示性糖包括（但不限於）海藻糖、岩藻糖及甘胺酸。在某些實施例中，組合物進—步包含至少一種增積劑/ 容積渗透濃度調節劑。該等試射為結晶（例如甘胺酸、甘露糖醇）或非晶形（例如L-組胺酸、嚴糖、諸如葡聚糖、聚乙烯料咬酮1甲基纖維素聚合物及乳糖之聚合物）。在某些實施例中’增積劑/容積渗透濃度調節劑以2% 與5%之間的濃度提供。在某些實施例中，增積劑，容積滲透濃度調節齊!以2.5%與4.5%之間的濃度提供。在某些實施例中，結合特定蛋白且阻斷與其他結合化合 120060.doc -124- 200808822 物之相互作用的抗體可具有治療作用。在本申請案中，在論述抗體治療疾病或病況之用途時，該用途包括包含抗體之組合物，及/或包含抗體及—或多種其他活性成份之組口療法之用& °虽使用抗體"治療"疾病或病況時，該治療可包括或不包括對該疾病或病況之預防。在某些實施例中，單獨投與抗體。在某些實施例中，在技與至少一種其他治療劑之前投與抗體。在某些實施例中，將抗體與至少一種其他治療劑同時投與。在某些實施例中在技與至少—種其他治療劑之後投與抗體。〃 -K⑪例中，可使用抗體治療非人類動物，諸如寵物（狗、I苗、烏、靈長類動物等）及農畜（馬、牛、綿羊、島專）在某些h形下，可根據動物體重判定適當劑 2。舉例而言，在某些實施例中，可使用0·2] mg/kg之劑量。在某些實施例中，可根據動物表面積來判定劑量，例不Μ里在(K1至2〇 mg/in2或5至12叫〜2之範圍内。在某 -貝施例中，對於諸如狗或猫之小動物而t，適當劑量為 o.Wkg。在某些實施例中，藉由注射或其他適當途徑每週投與抗體-或多次直至動物病況得到改良，或可無限期地投藥。應瞭解個別患者對前述藥劑或組合療法之反應可不同，且對於各患者藥物之適當有效組合可由其醫師來判定。 ^ mm例中’抗體可為包含所有或部分抗體及前藥之、、。。刀子之部分。在某些實施例中，術語"前藥"係指醫藥活性物質之前驅體或衍生物形式。在某些實施例中，與 120060.doc -125- 200808822 母體藥物相比前藥的細胞毒性較小且能夠經酶活化或轉化為更具活性之細胞毒性母體形式。例示性前藥包括（但不限於）含填酸鹽前藥、含硫代磷酸鹽前藥、含硫酸鹽前藥、含肽前藥、經D-胺基酸修飾之前藥、糖基化前藥、含 β-内醯胺前藥、含視情況經取代之苯氧基乙醯胺之前藥及含視情況經取代之苯基乙醯胺之前藥、5_氟胞嘧啶及其他 5-默尿苷前藥，其可經轉化為更具活性之細胞毒性游離藥物。可經衍生為前藥形式之細胞毒性藥物之實例包括（但不限於）上文描述之彼等細胞毒性劑。例如參見美國專利第 6,702,705號。在某些實施例中，抗體結合物藉由以分子之抗體部分使分子之細胞毒性部分或前藥部分定靶於患者體内之特定細胞群來發揮作用。在某些實施例中，提供治療患者之方法，其包含投與治療有效量之抗體。在某些實施例中，提供治療患者之方法，其包含投與治療有效量之抗體結合物。在某些實施例

中，將抗體與治療有效量之至少一種如上文論述之其他治療劑一起使用。如上文所論述，在某些實施例中，可將抗體與一或多種投與相同患者之其他藥物同時投與’各藥物均根據適用於該藥劑之方案投與。該治療涵蓋預治療、同時治療、連病治：及交替方案。該等藥物之其他實例包括(但不限於病毒劑、抗生素、止痛劑、皮質類固醇、炎性細胞激素抄抗劑、DMARD、非類固醇消炎藥、化學治療劑、血管： 120060.doc •126- 200808822 成抑制劑及血管生成刺激劑。與在某二只施例中，組合物包含治療有效量之抗體及醫藥予上可接文之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑及/ 或佐劑。在某些實施例中’提供醫藥組合物’其包含治療有效量之抗體及治療有效量之至少—種其他治療劑以及醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑及/或佐劑。

在某二m轭例中，可接受之調配材料較佳在所用劑量及濃度下對接受者無毒性。在某二實施例中，醫藥組合物可含有用於改變、維持或保持組合物之(例如）pH值、容積滲透濃度、黏度、透明度'顏色、等渗性、氣味、無菌狀態、穩定性、溶解或釋放速率、吸附或渗透之調配材料。在某些實施例中，適當之調配材料包括(但不限於)胺基酸(諸如甘胺酸、麩醯：酸 '天上醯胺酸、精胺酸或離胺酸)，殺菌劑，抗氧化劑 (諸如抗壞、亞硫酸納或亞硫酸氫鋼），緩衝劑（諸如删酸鹽、碳酸氫鹽、Tris_HC卜擰檬酸鹽、填酸鹽或其他有機酸）’增積劑(諸如甘露糖醇或甘胺酸），螯合劑(諸如乙二胺四乙酸（EDTA))，錯合劑（諸如咖啡驗、聚乙烯吨㈠ _ ' β_環糊L基丙基-β_環糊精）’填充劑，單黯、二聽及其他碳水化合物（諸如葡萄糖、甘露糖或糊精），蛋: 質（諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白），著色劑、調味劑及稀釋劑，乳化劑，親水性聚合物（諸如聚乙稀吧㈠ 120060.doc -127· 200808822 酮）’低分子1多肽，成鹽平衡離子（諸如鈉），防腐劑（諸如《I化苯曱烴銨、苯甲酸、水楊酸、硫柳汞、苯乙醇、對羥基苯甲酸"旨、對羥基苯曱酸丙酯、氯己定、山梨酸或過氧化氫），>谷劑（諸如甘油、丙二醇或聚乙二醇），糖醇 (諸如甘路糖醇或山梨糖醇），懸浮劑，界面活性劑或濕潤劑（諸如普朗尼克類（pluronies)、PEG、山梨糖醇酯、聚山梨醇醋（諸如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯8〇)、粹通 (triton)、緩血酸胺、_磷酯、膽固醇、泰洛沙泊 (tyloxapal))，穩定增強劑（諸如蔗糖或山梨糖醇），張力增加劑（諸如鹼金屬i化物（較佳為氯化鈉或氯化鉀）、甘露糖醇、山梨糖醇），傳遞媒劑，稀釋劑，賦形劑及/或醫藥佐片J Remington s Pharmaceutical Sciences，第版，H Gennaro編，Mack Publishing Company (1990)。在某些實施例中’將抗體及/或其他治療分子連接至此項技術中已知之半衰期延長媒劑。該等媒劑包括（但不限於）Fc結構域、聚乙二醇及葡聚糖。該等媒劑描述於（例如）美國專利第6,660,843號及公開之pct申請案第|〇 99/25044號中。在某些實施例中，最佳醫藥組合物可由熟習此項技術者取决於（例如）目標投藥途徑、傳遞形式及所需劑量來判疋令\ 如參 t Remivigton s Phcirmaceuticcil Sciences，同上文。在某些實施例中，該等組合物可影響抗體之物理狀恶、穩定性、活體内釋放速率及活體内清除速率。在某些實施例中，醫藥組合物中之主要媒劑或載劑在性 120060.doc -128- 200808822 、:^水性或非水性的。舉例而言，在某些實施例中， ^之媒劑或_可為注㈣水、生理鹽水溶液或人工腦脊髓液’其中可補充非經腸投藥組合物_常用之其他材料在某些實施例中，中性緩衝鹽水或與血清白蛋白混合之I水為另外之例示性媒劑。在某些實施例中，醫藥組合 ^备、、、勺pH值7·0_8·5之丁irs緩衝液或約阳值4 〇_5·5之乙酸凰緩衝液，其可進一步包括山梨糖醇或其適當之替代物。在某些實施例中，S藥組合物Α包含約ρΗ值4·0_5·5乙酸鹽缓衝液、多it醇及可選t界面活性劑之水性或液體調：物，其中該組合物不包含鹽（例如氯化鈉）且其中該組合物相對於患者等滲。例*性多元醇包括（但*限於）蔬糖、葡萄糖、山梨糖醇及甘露糖醇。例示性界面活性劑包括（但不限於）聚山梨醇酯。在某些實施例中，醫藥組合物為包含pH值5·〇之乙酸鹽緩衝液、山梨糖醇及多元醇之水性或液體調配物，其中該組合物不包含鹽（例如氯化鈉）且其中 4組合物相對於患者等滲。某些例示性組合物可在（例如）美國專利第6，171，586號中找到。其他醫藥載劑包括（但不限於）油，包括石油、動物油、植物油、花生油、大豆油、礦物油、芝麻油及其類似物。在某些實施例中，亦可使用葡萄糖或甘油水溶液作為液體载劑，尤其用於可注射 /谷液。在某些實施例中，包含抗體、具有或不具有至少一種其他治療劑之組合物可藉由將具有所需純度之選定組合物與可選調配劑（心所始·⑽，同上文）以/東乾餅或水溶液形式混合來製備以供儲存。另 120060.doc -129- 200808822 外，在某些實施例中，可使用適當賦形溶液（例如薦糖）作為稀釋劑將包含抗體、具有或不具有至少一種其他治療劑之組合物調配為凍乾物。在某些實施例t，將抗體以包含經純化重組蛋白以及生予上可接又之載劑、賦形劑或稀釋劑之生理學上可接受之，合物之形式投與。在某些實施例中，該等载劑在所用 :’!里及浪度下對接受者無毒性。在某些實施例中，製備該 :、且口物可涉及將抗體與緩衝劑、抗氧化劑(諸如抗壞血低分子$多肽（諸如少於10個胺基酸之多肽）、蛋白貝、胺基酸、碳水化合物（諸如葡萄糖、嚴糖或糊精）、螯諸如EDTA)、毅胱甘肽及/或其他穩定劑及賦形劑組口在某些實施例中，在標準給藥試驗中測定適當之劑量且其可根據所選擇之投藥途徑而改變。在某些實施例中，根據適當之產業標準亦可添加防腐劑，限於戍甲醇。在某些實施例中，投藥之量及頻率可诸如所治療疾病之性質及嚴重性、所需反應、患者年齡及病況等因素來判定。在某些實施例中，可選擇用於非經腸傳遞之醫藥板合物某些該等醫藥學上可接受之組合物之製備為熟習此項技術者所知。在某些實施，中’調配物組份以投藥部位存在。在某些實施例中，使用緩㈣μ 辰度足用较衝劑將組合物維持在生理 ΡΗ值或略微較低之ρΗ值下，通常在約5至約8之阳内。 120060.doc 130· 200808822 物可為二二列中’當預期使用非經腸投藥時，治療組合不呈右I 3酉樂學上可接受之载劑，之所需抗體、具有或式':他：療劑之無熱原質非經腸可接受水溶液之形

:、將抗體在具有或不具有至少-種其他治療劑之月況下為配為經適當防腐處理之無菌等滲溶液。在某些實施例中’製備可涉及將所需分子料如可注射微球體y生 :可知蝕性顆粒、聚合化合物(諸如聚乳酸或聚乙醇酸)、微珠或月曰質體之試劑調配，該等試劑可提供產物之控制或、、二睪放接著可經由储槽式注射傳遞產物。在某些實施例中，，亦可使用玻糖駿g变，且其可具有促進循環中之持續日寸間之作用。在某些實施例中，亦可使用可植入藥物傳遞裝置引入所需分子。在某些實施例中，可調配用於吸入之醫藥組合物。在某些實施例中，當治療與肺部病症相關之疾病時吸入投藥係有益的。在某些實施例中，可將抗體在具有或不具有至少一種其他治療劑之情況下調配為乾粉以便吸入。在某些實施例中’可用推進劑調配包含抗體、具有或不具有至少一種其他治療劑之吸入溶液以便用於氣溶膠傳遞。在某些實施例中’可將溶液霧化。肺部投藥另外描述於PCT公開案第WO 94/20069號中，其描述經化學修飾蛋白之肺部傳遞。在某些實施例中，預期可經口投與調配物。在某些實施例中’可將以此方式投與之抗體在具有或不具有至少一種 120060.doc -131 · 200808822 。療剤之情況下使用或不用混配固體劑型（諸如錠，膠囊)中通常使用之彼等载劑調配。在某些實施例中： I:膠囊進行設計以在胃腸道中生物可用性最大化且體循 ;降低最小化之點處釋放調配物之活性部分。在某此實〇中可包括至少一種其他試劑以促進抗體及/或任何其他治療劍之吸收。在某些實施例中，亦可使用稀釋劑、調味劑、低熔點蠟、植物油、潤滑劑、懸浮劑劑及/或黏合劑。朋解 :某些實施例中，醫藥組合物可包括有效量之抗體在具 ^具有至少—種其他治_之情況下與適用於製造錠無毒賦形劑之混合物。在某些實施例中，可藉由將錠心谷解於無菌水或另一適當媒劑中來製備單位劑量形式之溶液。適當之賦形劑包括（但不限於）惰性稀釋劑，諸如石炭 _、碳酸納或碳酸氫納、乳糖或磷及黏合劑，諸如褒又粉、明膠及阿拉伯膠·乃脂酸及滑石。 …及/閏滑劑，諸如硬脂酸鎮、硬其他醫藥組合物為熟習此項技術者清楚瞭解，包括包含具有至少一種其他治療劑之於持續或控制、择…己之0周配物°在某些實施例中，持續或控制傳、生物可侵餘性微粒、多孔U珠及注射儲槽。製備某些調配物技術為熟習此項技術者所知1如參W — 93/15722號，其描述多孔繫人开1茶弟釋放。在某些實施持、、Λ釋放製劑可包括成形物品 120060.doc -132- 200808822 (諸如薄膜或微膠囊）形式之半透性聚合物基質。持續釋放基質包括（但不限於）聚酯、水凝膠、聚交酯（美國專利第 3,773,919號及£? 058,481)、1^麩胺酸與1^麩胺酸-丫-乙酯之共聚物（Sidman等人，5/opo/ymers, 22:547-556 (1983))、聚（2·羥基乙基甲基丙醯酸酯）(Langer等人，J.

Maier.及以·， 15:167-277 (1981)及 Langer，C/zem. Tee/z·， 12··98_1〇5 (1982))、乙烯乙酸乙酯（1^11861'等人，同上文）及聚-D(-)-3-羥基丁酸（ΕΡ 133,988)。在某些實施例中，持續釋放組合物亦可包括脂質體，在某些實施例中其可藉由此項技術中已知之數種方法中之任一種來製備。例如參見

Eppstein等人，iVoc· TVa"· dead. [/以，82:3688-3692 (1985); EP 036,676、EP 088,046及 EP 143,949。在某些實施例中，用於活體内投藥之醫藥組合物係無菌的。在某些實施例中，藉由經無菌過濾膜過濾使用於活體内投藥之醫藥組合物無菌。在某些實施例中，在束乾組合物之情況下，可在凍乾及復水之前或之後使用無菌過濾^ 進行殺菌。在某些實施例中，用於非經腸投藥之組合物可以凍乾形式或溶液儲存。在某些實施例中，通常將非經腸組合物置於具有無菌接取口之容器内’例如靜脈溶液袋或具有可由皮下注射針刺破之阻塞物之小瓶。在某些實施例中，在調配醫藥組合物之後，可將其以、容液、懸浮液、凝膠、乳液、D體或脫水或;東絲切式^ 存於無菌小瓶中。在某些實施例中，”調配物可形式或以投藥前經復水之形式（例如凍乾形式）儲存。 120060.doc -133- 200808822 在某些實施例中，提供用於產生單組。在苴必成奴桌早位之套，、二實施例中，套組可各自含有裝一宏1¾¾壯丄巧祀你蛋白之第益及裝有水性調配物之第二容器。在包括合古w a —只知例中， …有早室及/或多室預充式注射器(例來乾粉注射器（ly〇syringe))之套組。，射盗及

在某些實施例中，用於治療用途之包含抗體、具有或不 1有至少-種其他料狀醫藥組合物之有效量將取決於 (二列峋治療内容及目標。熟f此項技術者應瞭解根據某些只鈿例用於治療之適當劑量因此部分視以下因素而不同· :傳遞之分子、具有或不具有至少一種其他治療劑之：體料治療之適應症、投藥途徑及患者之大小（體重、體表或器官大小）及/或狀況（年齡及總體健康）。在某些實施例中臨床醫生可滴疋劑量及改變投藥途徑來獲得最佳治療效果。在某些實施例中，典型劑量範圍視上述因素而定可為約〇·1 pg/kg至多達約100 mg/kg或更多。在某些實施例中，劑ΐ範圍可為0·1 Hg/kg至多達約100 mg/kg，或i gg/kg至乡達約100 mg/kg，或5叩/kg至多達約1〇〇，或〇·1 mg/kg至多達約 1〇〇 mg/kg。在某些實施例中，給藥頻率應考慮抗體及/或所用調配物中任何其他治療劑之藥物動力學參數。在某些實施例中’臨床醫生持續投與組合物直至達到達成所需效果之劑 ϊ。因此’在某些實施例中，組合物可以單次給藥或以一段時間内兩次或兩次以上給藥（其可含有或不含有相同所需分子量）或經由植入裝置或導管之連續輸注來投藥。進 120060.doc -134- 200808822 一步改進適當劑量之某些方法為熟習項些實施例中’可經由使用H σ某劑量。 J里-反應貝料來確定適當在某些實施例中，醫藥組合物之投藥途徑係根據已知方例如經口，經靜脈内、腹膜内、腦内(實質内)、腦室肌肉内、眼内、動脈内、門靜脈内或病灶内途徑注错由持續釋放系統或藉由植人裝置。在某些實施例 /可糟由快速注射或藉由輸注或藉由植與組合物。、如上文所論述，在各種實施例中，可使用任何有效投藥途徑投與抗體。在某些實施例中，若進行注射，則可（例經由關節内、靜脈内、肌肉内、病灶内、腹膜内、顧骨内、鼻内、吸入或皮下途徑藉由快速注射或藉由連續輸 :，扠與抗體。例不性投藥方法包括(但不限於)自植入物持續釋放、氣溶膠吸人、滴眼液、π服製劑及局部製劑籲（諸如洗劑、凝膠、喷霧劑、軟膏）及其他持續技術。在某些實施例巾，t將抗體與一或多種其他生物活性化合物組合投藥時，此等藥物可藉由相同或不同途徑投與，且可一起、單獨或相繼投與。在某些實施例中，可經由植入膜片、海綿或另一種已吸收或封裝所需分子之適當材料局部投與組合物。在某些實麵例中，在使用植入裝置之情況下，可將裝置植入任何適當之組織Aim，且所需分子可經由擴散、㈣快速釋放或連續投藥來傳遞。 120060,doc -135- 200808822 在某些實施例中，可需要以離體方式使用包含抗體、具有或不具有至少一種其他治療劑之醫藥組合物。在該等實粑例中’使已自患者體内移除之細胞、組織及/或器官暴路於包含抗體、具有或不具有至少一種其他治療劑之醫藥組合物，此後接著將細胞、組織及/或器官植入回患者體内0 在某些實施例中，第一抗體結合一分子上之第一抗原決疋基而第二抗體結合同一分子上之第二抗原決定基。在某坠κ靶例中’第一抗原決定基與第二抗原決定基重疊使得弟一抗體或第二抗體與分子結合均抑制其他抗體與該分子某些實_中’帛_抗原決定基不肖第二抗原、疋土重且使得第一抗體或第二抗體與分子之結合不能抑制其他抗體之結合。在某些實施例中，香I#卜夕h 又篮上之抗原決定基與受體之配位體結合位點重叠。在草此眘Α i 长系么實施例中，抗體與受體之結合抑制配位體與受體之結合。在茸此在系上實施例中，抗體與受體之結合阻斷配位體與受體之έ士人 , 又體之結合。在某些實施例中，抗體結合部分上抑制配位體與受體之結合。在某些實施例中，辱練八工又體77子上之抗原決定基不與受體之配位體結合位點重疊。在京在某二4 4實施例中，抗體與抗原決定基之結合至少邱八、、工，魏少4刀活化受體。在某些其他實施例中，抗體與抗原決定基之結合不活化受體。在某些實施例中，受妒公子上之抗原決定基與受體之配位體結合位點重疊。右宜在某些該4實施例中，抗體與抗原決 120060.doc -136 - 200808822 定基之結合至少部分活化受體。在某些其他實施例中，抗體與抗原決定基之結合不活化受體.。在某些實施例中，抗體與又體上抗原決定基之結合抑制受體配位體對受體之活化。在某些實施例中，抗體與受體上抗原決定基之結合阻斷受體配位體對受體之活化。在某些實施例中，受體之二聚化作用增強其活化。在某些實施例中，受體必須經二聚化後才可活化。在某些實施例中’雙價抗體促進受體之二聚化作用。在某些實施例中，單價抗體與另一單價抗體交聯而產生雙價分子。在某些實施例中，EpoR激動劑為活化huEp〇R之抗體。在某些實施例中，活化huEpoR之抗體（huEp〇R抗體）為最大抗體。在某些實施例中，以低於紅血球生成刺激蛋白 (ESP)之頻率投與huEpoR抗體。ESP之實例包括紅血球生長素α、紅血球生長素β及新型紅血球生成刺激蛋白以。在某些實施例中，huEpoR抗體約每月投與一次或約每兩個月投與一次，或約每三個月投與一次，或約每四個月投與一 -人’或約母五個月投與一次，或約每六個月投與一次。在某些實施例中，對抗huEpoR之抗體不能與天然紅血球生成素（Epo)交又反應且因此不能誘發單純紅血球再生障礙性貧血（PRCA)。因此，投與huEp〇R抗體與投與其他紅血球生成刺激蛋白相比具有降低的誘發PrCA之危險。在某些實施例中，使用允許在一段延長之時段内控制釋放之技藥方法使用具有降低的誘發PRCA之危險的huEp〇R抗體治療疾病或病況。舉例而言（且不限於），可在不增加 120060.doc • 137 - 200808822 PRCA危險之情況下經口或以非侵入式傳遞裝置投與 huEpoR抗體。在某些實施例中，使用至少一種抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO·· 2之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 1〇之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58 之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 72及 SEQ ID NO: 74之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺 120060.doc -138 - 200808822 基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有 SEQ ID NO: 8 8及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些 • 實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用包含含有 SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列之抗體治療疾病或病況。 ^ 在某些實施例中，使用特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、 F93及H114之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸F93抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及Ml 50之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用特異性結合人類Epo受體胞外 120060.doc -139 - 200808822 域之胺基酸V48、E62、L66、R68及H70之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、L66、R68及H70之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、P63、L66、R68及H70之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，使用特異性結合人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99之抗體治療疾病或病況。在某些實施例中，治療與紅血球及/或血色素含量降低相關之疾病或病況。在某些實施例中，疾病或病況為負血症。在某些實施例中，用huEpoR抗體治療貧血症之特徵為與用其他ESP所觀察之反應相比更長持續時間之紅血球生成反應。在某些實施例中，使用huEpoR抗體治療慢性疾病或病況之貧血症。慢性意謂持續或持久。在某些實施例中，慢性疾病或病況可隨時間惡化。在某些實施例中，慢性疾病或病況不會隨時間惡化。例示性慢性疾病包括（但不限於）慢性腎病、充血性心臟衰竭及骨髓發育不良症候群。在某些實施例中，huEpoR抗體具有適用於治療慢性疾病或病況之藥物動力學概況。在某些該等實施例中， huEpoR抗體具有包含與用其他ESP所觀察到之紅血球生成反應相比延長更長持續時間之紅企球生成反應之藥物動力學概況。在某些實施例中，使用huEpoR抗體治療癌症之貧血 120060.doc -140- 200808822 症、化學療法誘導之貧血症、老年貧血症或其他貧血症，包括（但不限於）由感染、炎症、缺鐵、失血、溶血、繼發性曱狀旁腺功能亢進、不充分透析、蛋白質能量營養不良、維生素缺乏或金屬毒性（例如鋁）引起之貧血症。在某些實施例中，使用huEpoR抗體治療患者之prc A，患者係由於疾病引起或回應於投與紅血球生成藥物而出現此病況。在某些實施例中，使用huEpoR抗體促進對紅血球生成素反應性細胞、組織及器官之組織保護。舉例而言（但不限於），在某些實施例中，使用huEpoR抗體在心肌梗塞或中風期間或之後促進組織保護。在某些實施例中，使用 huEpoR抗體促進對可經投與紅血球生成素得到保護之組織的組織保護。可經投與紅血球生成素得到保護之細胞、組織及器官之某些實例描述於PCT公開案WO 02/053580及 WO 00/61164 中。在某些實施例中，使用huEpoR抗體增加有需要患者之血球比容。在某些實施例中，一次投與huEpoR抗體可使血球比容增加持續約30天、或約60天、或約90天、或約120 天、或約150天、或約180天。實例實例1-自天然人類scFv噬菌體呈現庫識別抗huEpoR抗體選擇策略1 在第一輪選擇中，在室溫下將來自天然噬菌體庫之大約 1012個人類8〇[¥噬菌體用1!111?38/0.1%丁〜“1120(1^8/丁) 120060.doc -141- 200808822 中2%無脂乳粉中之200 nM經生物素標記之huEpoR培育1小時，隨後使用PBS/T洗滌5次。使用經抗生蛋白鏈菌素塗饰之磁珠捕捉與huEpoR結合之scFv喔菌體。藉由在37°C下用 1 ml胰蛋白酶處理溶液（50 mM Tris HC1/1 mM CaCl2中之 50 pg/ml豬胰島素，pH值8·0)培育i〇分鐘使結合嗤菌體自磁珠釋放。為將經釋放之噬菌體再引入大腸桿菌（E. coli)細胞，使用10 ml對數生長期TG1細胞在37°C下與自磁珠釋放之全部 • 噬菌體群在無震盪下培育30分鐘且在緩慢震盪下再培育3〇分鐘。將略呈球粒之TG1細胞再懸浮於大約1.5 ml 2xYT培養基中，使用補充100 pg/ml羧苄青黴素及4%葡萄糖之 2xYT培養基將其展布於2塊Nunc培養盤（25 cm><25 cm)上且於30°C下擴增隔夜。接著將經擴增細胞自培養盤刮除且匯合。使用大約10-100 μΐ所彙集之細胞（涵蓋大於10倍之經釋放噬菌體顆粒）接種25 ml 2χΥΤ培養基/100 pg/ml羧苄青黴素及2%葡萄糖且使其在37°C下在震盪下生長至OD6G0為 • 〇·5。接著將此對數生長期培養物在37°C下用大約10"個 Ml 3K07輔助噬菌體重複感染30分鐘且在輕輕震盪下再重複感染30分鐘。細胞形成球粒且將其再懸浮於25 ml補充有100 μΐ/ml羧苄青黴素及25 pg/ml卡那黴素之2xYT培養基中。將細胞在25°C下以250 rpm震蘆隔夜。藉由以1〇,〇〇〇 rpm離心1 0分鐘來收集培養物之上清液。藉由添加1/5體積之20% PEG8000/2.5 M NaCl在冰上培育30分鐘以上使上清液中之噬菌體沉澱。接著藉由以10,000 rpm離心10分鐘使 120060.doc -142- 200808822 噬菌體形成球粒且將其再懸浮於TE緩衝液（10 mM 1>丨8及1 mM EDTA，pH值 7.5)中。在弟一輪選擇中，將經再懸浮之scFv嗟菌體在室溫下用 50 nM t生物素標έ己之huEpoR培育1小時，隨後使用 PBS/〇.i% Tween 2〇洗滌1〇次。使用經抗生蛋白鏈菌素塗佈之磁珠捕捉與huEpoR結合之scFv噬菌體。藉由在37〇c下用1 ml胰蛋白酶處理溶液培育丨〇分鐘使結合喔菌體自磁球釋放。將半量經釋放之噬菌體用於下文描述之選擇策略2。將一小部分來自第二輪選擇之經釋放噬菌體藉由用生長對數期中期之大腸桿菌細胞培養經適當稀釋之噬菌體而再引入TG1細胞。接著將TG1細胞塗佈於2χΥΤ 100 pg/ml羧 "V月黴素皮氏培養皿培養盤上以產生單一集落。將384個隨機選擇之單一集落個別揀出皮氏培養m培養盤且置於含有100 μΐ補充有100 pg/ml羧苄青黴素及2%葡萄糖之2χΥΤ 培養基之96孔培養盤的單獨孔中以產生96孔實驗培養盤。在37 C下在震盪下培育96孔實驗培養盤直至TG1細胞達到大約0.5之OD6〇()(對數生長期中期）。作為單獨步驟’將一組新的含有上述相同培養基的96孔培養盤用一小部分96孔實驗培養盤中生長之培養物接種以產生雙重複培養盤。使此等雙重複培養盤在37。〇下生長隔仪。接者將20 μΐ 50%甘油溶液添加至培養盤之各孔中且將培養盤在乾冰上冷凍且作為母培養盤儲存K_7〇〇c下。接著將96孔實驗培養盤中之對數生長期中期之培養物在 37°C下用大約109個M13K07辅助噬菌體重複感染3〇分鐘且 120060.doc -143- 200808822 在輕輕震盪下再重複感染3 0分鐘。接著將96孔培養盤以 3000 rpm離心5分鐘且藉由翻轉培養盤移除孔中之上清液。接著將200 μΐ補充有1〇〇 pg/ml羧苄青黴素及25 gg/ml 卡那黴素之2xYT培養基添加至各孔中且將培養盤在30°C下在250 rpm震盪下培育隔夜。將隔夜噬菌體培養物以3,〇〇〇 rpm離心5分鐘且使用所得上清液樣品進行ELISA實驗。藉由將huEpoR以1 pg/ml添加至培養盤之孔中且將培養盤在4°C下培育隔夜來製備一組新的Nunc-Immuno Polysorp 96 孔 ELISA培養盤（Nalge Nunc International)。將含有 384 種不同單株噬菌體之一之培養物上清液於PBS/T中2%無脂乳粉溶液中之1/20稀釋液添加至含有塗佈於表面上之 huEpoR之96孔培養盤的各單獨孔中。將培養盤培育1小時，隨後在PBS/T中洗滌3次。使用抗-M13 mAb/HRP結合物（Amersham Biosciences)進行結合嗟菌體之债測，隨後在PBS中洗滌3次。使用ABTS作為底物且偵測405 nm處之吸收。根據對384種隨機挑揀之噬菌體純系之ELISA篩選鑑別出總計96種結合huEpoR之嗟菌體。選擇策略2 將半量第253段中所述之選擇策略1中第2輪選擇之經溶離噬菌體再引入TG1細胞中且使用與選擇策略1之第252段中所述相同之程序進行噬菌體製備。使用大約1012個經擴增scFv嗟菌體藉由將scFv嗤菌體在4°C下用表現huEpoR之 UT-7細胞（1 ml PBS/2% BSAk中2χ106個細胞）培育2小時隨後用PBS/T洗滌10次來進行細胞淘洗。 120060.doc -144 - 200808822 藉由用1 ml甘胺酸/HC1缓衝液（100 mM甘胺基/HCl，pH 值2·5)培育10分鐘隨後以3,000 rpm離心5分鐘來將UT-7細胞噬菌體自細胞表面溶離。將含有經溶離噬菌體之酸性上清液用50 μΐ 1 M Tris鹼溶液中和。將來自UT_7細胞淘洗之經溶離噬菌體之一小部分等分試樣經由噬菌體感染引入TG1細胞中。接著將經噬菌體感染之TG1細胞置於2xYT 100 gg/ml羧苄青黴素皮氏培養皿培養盤上以產生單一集落。將192個隨機選擇之單一集落揀出皮氏培養狐培養盤且個別置於兩塊含有1 ml補充有100 pg/ml羧苄青黴素及2%葡萄糖之2xYT培養基之96深孔培養盤的單獨孔中。在37°C下在震盪下培育兩塊96深孔培養盤直至培養物達到大約0.5之OD600。作為單獨步驟，將一組新的含有上述相同培養基的96孔培養盤用一小部分96深孔培養盤中生長之培養物接種以產生雙重複培養盤。使此等雙重複培養盤在37°C下生長隔夜。接著將20 μΐ 50%甘油溶液添加至培養盤之各孔中且將培養盤在乾冰上冷凍且作為母培養盤儲存於-70°C下。在接種母培養盤後，將兩塊培養物之〇D6C()為大約0.5之 96深孔培養盤用於下文描述之FACS實驗。藉由FACS篩選UT-7細胞結合噬菌體將1 ml補充有100 pg/ml羧苄青黴素及2%葡萄糖之2xYT 培養基置於96深孔培養盤之各孔中。藉由用於來自母培養盤上相應孔之細胞接種96深孔培養盤各孔中之培養基來製備由選擇策略1中之ELISA所鑑別之96種陽性純系的新噬 120060.doc -145- 200808822 菌體樣品。在37°C下在震盪下培育96深孔培養盤直至培養物達到大約0.5之OD600。如選擇策略2中所論述，在37°C下在震盪下於兩塊96深孔培養盤中培育含有來自選擇策略2之192種不同噬菌體之培養物直至培養物達到大約0.5之OD600。接著將三塊含有對數生長期培養物之96深孔培養盤（第 263及264段所述）在37°C下用大約1〇9個M13K07輔助噬菌體重複感染30分鐘且在輕輕震盪下再重複感染30分鐘。接 # 著將培養盤以3000 rpm離心5分鐘且藉由翻轉培養盤移除上清液。接著將1 ml補充有1〇〇 pg/ml羧苄青黴素及25 pg/ml卡那黴素之2xYT培養基添加至各孔中且將培養盤在 3 0°C下藉由以250 rpm震盪培育隔夜。藉由以3000 rpm離心隔夜培養物5分鐘來製備含有噬菌體之上清液。藉由添加 1/5體積之20% PEG8000/2.5 M NaCl溶液自上清液純化噬菌體。藉由離心使沉澱之噬菌體形成球粒且將96深孔培養盤各孔中之所得噬菌體球粒再懸浮於100 μΐ TE缓衝液（1〇 • mM tris HC卜 1 mM EDTA，pH值 7.5)中用於 FACS實驗。在一组新的三塊96孔培養盤之各孔中，將UT_7細胞在 4 C下用1〇 μΐ單一嗟菌體之等分試樣及90 μΐ 2% BSA PBS/T培育1小時。使用冷PBS快速洗滌兩次後，接著將細胞在4°(：下用1〇〇41之2%68人？68/丁中之10§/1111抗-]^13小鼠單株抗體（Amersham Biosciences)培育1小時。使用冷 PBS快速洗滌兩次後，將100 μ1〗gg/ml藻紅蛋白結合之山羊 F(ab’)2 抗小鼠 IgG Fc (Jackson Immuno Research 120060.doc -146- 200808822

Laboratories)添加至培養盤上之各孔中。接著將典養般在 4°C下培育1小時。將細胞使用冷PBS再洗滌兩次且再懸浮於1 ml固定缓衝液（2%聚曱醛PBS，pH值7.4)中。使用 Multiwell Caliber流式細胞儀進行FACS。鑑別出選擇策略1中14種噬菌體及選擇策略2中38種嗟菌體為表現EpoR之UT-7細胞之結合劑。彼等scFv噬菌體樣品之DNA定序分析產生總計29種獨特scFv序列。實例2_噬菌體scFv轉化為scFv_Fc、IgG2及IgGl蛋白，表現 _ 及純化使用流線型亞選殖程序將所有29種噬菌體scFv純系轉化為scFv-Fc融合蛋白（圖2)。藉由PCR使用一對載體特異性引子（pUCRev/FdTet)自編碼純系之嗟菌粒擴增編碼scfv之 DNA。將scFv之Ncol及Notl限制片段接合至pcn(與Nc〇I產生黏性末端）及Notl消化之哺乳動物表現載體pDC409a-GlFc 導致 scFv 與人類 IgGi Fc 融合。pDC409a-huGlFc 在 Notl後含有人類IgG! Fc。Ncol與pcii限制片段具有相同黏 ® 性末端。scFv-Fc蛋白之分泌由VH5a信號序列介導。得自個別噬菌體純系之最大抗體命名為”Mxb X"，其中X表示純系號。對於將scFv純系轉化為IgG2表現構築體而言，使用各可變域之特異性引子自編碼純系之噬菌粒PCR擴增編碼VH或 VL之DNA片段。將VH (Nhe/Ascl)片段接合至類似限制消化之IgG2重鏈表現載體PVE414NhuIgG2產生抗體重鏈表現構築體。將νλ Nhel/Narl片段接合至類似限制消化之輕鏈 120060.doc -147- 200808822 表現載體pVE414NhiaLC產生抗體λ輕鏈表現構築體。將 Vk Nhel/Bsi W1片段接合至類似限制消化之輕鏈表現載體 pVE414NhuicLC產生抗體κ輕鏈表現構築體。輕鏈恆定區類型之選擇與可變輕鏈同型相匹配。對於1§01表現構築體之產生而言，將用於IgG2表現構築體之相同VH Nhe/Ascl片段接合至類似限制消化之 pVE414NhuIgGl載體。使用第263段所述之輕鏈表現構築體表現IgGi輕鏈以及IgG2輕鏈。在哺乳動物COS-1 PKB E5細胞中藉由共轉染抗體重鏈及輕鏈表現構築體瞬時表現scFv-Fc蛋白。亦在哺乳動物 COS-1 PKB E5細胞中藉由共轉染抗體重鏈及輕鏈表現構築體瞬時表現IgG!蛋白。亦在哺乳動物COS-1 PKB E5細胞中藉由其轉染抗體重鏈及輕鏈表現構築體瞬時表現IgG2蛋白。使用蛋白A親和力層析自改良性培養基中將經表現之抗體純化至大於95%之純度。藉由N端胺基酸定序確認蛋白質的識別且由280 nm處之吸收測定濃度。實例3-FACS對抗體與細胞表面huEpoR結合之分析使用FACS分析scFv-Fc蛋白與細胞表面表現之huEpoR之結合。將UT-7細胞在4°C下用單獨5 nM scFv-Fc蛋白或5 nM scFv-Fc蛋白及0·5 pg/ml rHuEpo培育1小時。使用冷 PBS快速洗滌兩次後，接著將UT-7細胞在4°C下用1 pg/ml 藻紅蛋白結合之山羊F(abf)2抗人類igG Fc (Jackson Immuno Research Laboratories)培育1小時。將細胞使用冷 PBS洗滌兩次且再懸浮於1 ml固定緩衝液（2%聚甲醛PBS， 120060.doc -148- 200808822 pH值7.4)中。使用FACSCaliber流式細胞儀（Becton-

Dickinson)進行FACS。自scFv-Fc表現載體表現之蛋白質之FACS跡線顯示於圖3 中。純系2、純系5、純系7、純系10及純系30均結合表現 huEpoR之UT-7細胞（圖3A)但不結合陰性對照細胞（圖3B)。過量之rHuEpo阻斷純系2、純系5、純系7及純系10之UT-7 細胞表面結合（圖3 A)。rHuEpo不阻斷純系30之結合（圖 3A)。 # 實例4·純系2、5、7、10及30之序列使用標準技術定序純系2、純系5、純系7、純系10及純系30。純系2、純系5、純系7、純系10及純系30之可變重鏈及可變輕鏈之核酸及胺基酸序列顯示於下文中。在各胺基酸序列中按順序用下劃線標出重鏈及輕鏈CDR1、CDR2 及 CDR3。 >純系#2VH核酸序列

GAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTG • AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTAHGGATGAGCTGGGT CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATGG AAGTGAGAAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA ACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGC CGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTACTCGGACTGGGGCCAA GGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 35) 120060.doc -149- 200808822 >純系#2VH胺基酸序列 EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSVWRQAPGKGLEWVANIKPDGS EKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGT LVTVSS (SEQ ID NO: 1) >純系#2VL核酸序列

CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCCGCGTCCGGGTCTCCTGGACAGTCAGTCA

CCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGTTGGTGGTTATAACTATGTCTCCTGG

TACCAACAGCACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGATTTATGAGGTCAGTAAGC

GGCCCTCAGGGGTCCCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTC

CCTGACCGTCTCTGGGCTCCAGCCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGCAGCTCA

TATGCAGGCAGGAACTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCCAGCTCACCGTTTTA (SEQ ID NO: 36) >純系#2VL胺基酸序列 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSKRP SGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQPEDEADYYCSSYAGRNWVFGGGTQLTVL (SEQ ID NO: 2) >純系#5VH核酸序列

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCT

GAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGG

TCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATG

GAAGTGAGAAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGA

CAACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACG

GCCGTGTATTACTGTGCAAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTACTCGGACTGGGGC CAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 37) >純系#5VH胺基酸序列 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSVWRQAPGKGLEWVANIKPDGS EKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGT LVTVSS (SEQ ID NO: 3) 120060.doc -150- 200808822 >純系#5VL核酸序列

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCA

CCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGTTGGTGGCTATATTTATGTCTCCTGG

TACCAACAACACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGATTTATGATGTCAGTCGTCG

GCCCTCAGGGATTTCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCC

CTGACCATCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGACGAGGCTGATTATTACTGCAACTCATA

TACAACCCTCAGCACCTGGCTCTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA (SEQ ID NO: 38) >純系#5VL胺基酸序列

QSALTQPASVSGSPGQS1TISCTGTSSDVGGYIYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSRRPS G1SDRFSGSKSGNTASLT1SGLQAEDEADYYCNSYTTLSTWLFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 4) >純系#7VH核酸序列

GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTG

AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATGG

AAGTGAGAAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGC

CGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTACTCGGACTGGGGCAAA GGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 39) >純系#7VH胺基酸序列 EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSVWRQAPGKGLEVWANIKPDGS EKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGKGTL VTVSS (SEQ ID NO: 5) 120060.doc 151 - 200808822 >純系#7VL核酸序列

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCA

TCATCTCCTGCACTGGAACCCGCAGTGACATTGGTGGTTACAACTATGTCTCCTGG

TACCAACACCACCCAGGCAGAGCCCCCAAACTCATCATTTTTGATGTCAATAATCG

GCCCTCAGGAGTCTCTCACCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCC

CTGACCATCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGACGAGGCTGATTATTACTGCAATTCATT

TACAGACAGCCGGACTTGGCTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA (SEQ ID NO: 40) 、 >純系#7VL胺基酸序列

QSALTQPASVSGSPGQSI11SCTGTRSDIGGYNYVSWYQHHPGRAPKL11FDVNNRPSG VSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCNSFTDSRTWLFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 6) >純系#10VH核酸序列

GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTG AGACTC 丁 CC 丁 GTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGT CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTAGTGG TGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGAC aAttccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacgg CCGTGTATTACTGTGTAAAAGATAGGGTTGCTGTAGCTGGTAAGGGTTCGTATTAC TTTGACTCTTGGGGGAGGGGGACCACGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 41) • >純系#10VH胺基酸序列 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSVWRQAPGKGLEVWSAISGSGG STYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKDRVAVAGKGSYYFDS WGRGTTVTVSS (SEQ ID NO: 7) 120060.doc 152- 200808822 >純系#10VL核酸序列

CAGTCTGTGCTGACGCAGCCGCCCTCGGTGTCTGAAGCCCCCGGGCAGAGGGTC

ACCATCGCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAATAATGCTGTAAGTTGGTA

CCAGCAACTCCCAGGAAAGGCTCCCACACTCCTCATCTATTATGATAATCTGCTGC

CCTCAGGGGTCTCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCT

GGCCATCAGTGGGCTCCAGTCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCTGCATGG

GATGACAGCCTGAATGATTGGGTGTTCGGCGGTGGGACCAAGGTCACCGTCCTA (SEQ ID NO: 42) >純系#10VL胺基酸序列

QSVLTQPPSVSEAPGQRVTIACSGSSSNIGNNAVSWYQQLPGKAPTLLIYYDNLLPSG VSDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNDWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO： 8) >純系#3 0VH核酸序列

CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGTCCAGGACTGGTGAAGCCCTCGCAGACCCTC

TCACTCACCTGTGCCATCTCCGGGGACAGTGTCTCTAGCAACAGTGCTGCTTGGA

ACTGGATCAGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGAAGGACATACTA

CAGGTCCAAGTGGTATAATGAHATGCAGTATCTGTGAAAAGTCGAATGACCATAA

AAGCAGACACATCCAAGAACCAGTTCTCCCTGCAACTGAACTCTGTGACTCCCGAA

GACACGGCTGTGTATTACTGTGCAAGAGATGAGGGACCGCTTGACTACTGGGGCC AGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGGCC (SEQ ID NO: 43) >純系#30VH胺基酸序列 QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRS KWYNDYAVSVKSRMT1KADTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARDEGPLDYWGQGTL VTVSA (SEQ ID NO: 9) 120060.doc 153- 200808822 >純系#3 0VL核酸序列

CAGGCTGTGCTCACTCAGCCGTCCTCAGTGTCTGGGGCCCCAGGGCAGAGGGTC

ACCATCTCCTGCACTGGGAGCAGCTCCAACCTCGGGACAGGTTATGATGTACACT

GGTACCAGCAGCTTCCAGGAACAGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGCAAT

CGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCGGGCTCCAAGTCTGACACCTCAGGTT

TGCTGGCCATCACTGGGCTCCAGGCTGAGGATGAGGCTACTTATTACTGCCAGTC

CTATGACTTCAGCCTGAGTGCTAIGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTC CTA (SEQ ID NO: 44) >純系#3 0VL胺基酸序列

QAVLTQPSSVSGAPGQRVTISCTGSSSNLGTGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRP sgvpdrfsgsksdtsgllaitglqaedeatyycqsydfslsamvfgggtkvtvl (SEQ ID NO： 10) 使用純系2、5、7、10及30製造scFv-Fc蛋白。編碼該等 scFv-Fc蛋白之核酸序列及胺基酸序列顯示如下： >Mxb #2 scFv-Fc核酸序列

GAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTG

AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCinrTAGTAGCTAHGGATGAGCTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATGG

AAGTGAGAAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGC

CGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTACTCGGACIGGGGCCAA

GGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGGAGGCGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCT

GGCGGTGGCGGAAGTGCACAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCCGCGTCCGGG

TCTCCTGGACAGTCAGTCACCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGnGGTG

GTTATAACTATGTCTCCTGGTACCAACAGCACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATG

ATTTATGAGGTCAGTAAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGATCGCTTCTCTGGCTCCA

AGTCTGGCAACACGGCCTCCCTGACCGTCTCTGGGCTCCAGCCTGAGGATGAGG

CTGAHAHACTGCAGCTCATATGCAGGCAGGAACTGGGTGTTCGGCGGAGGGAC

CCAGCTCACCGTTTTAGGTGCGGCCGCAGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCAC

ACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCT 120060.doc -154- 200808822

TCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATG

CGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTG

GACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAAC

AGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATG

GCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAA

MCCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCC

CCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA

GGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAG

AACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTA

TAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGC

TCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGT CTCCGGGTAAA (SEQ ID NO: 50)

>Mxb #2 scFv-Fc胺基酸序列

EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKPDGS

EKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGT

LVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAQSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNY

VSWYQQHPGKAPKLMIYEVSKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQPEDEADYYCS

SYAGRNVWFGGGTQLTVLGAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDT

LMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLT

VLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSL

TCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNV FSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO： 45) >Mxb #5 scFv-Fc核酸序列

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCT

GAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGG

TCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATG

GAAGTGAGAAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGA

CAACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACG

GCCGTGTATTACTGTGCAAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTACTCGGACTGGGGC

CAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGGAGGCGGCGGTTCAGGCGGAGGTGG

CTCTGGCGGTGGCGGAAGTGCACAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCT

GGGTCTCCTGGACAGTCGATCACCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGTTG

GTGGCTATATTTATGTCTCCTGGTACCAACAACACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTC

ATGATTTATGATGTCAGTCGTCGGCCCTCAGGGATTTCTGATCGCTTCTCTGGCTC

CAAGTCTGGCAACACGGCCTCCCTGACCATCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGACGA 120060.doc -155- 200808822

GGCTGATTATTACTGCAACTCATATACAACCCTCAGCACCTGGCTCWCGGCGGAG

GGACCAAGGTCACCGTCCTAGGTGCGGCCGCAGAGCCCAAATCTTGTGACAAAAC

TCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTC

CTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCA

CATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTA

CGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTA

CAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTG

AATGGCAAGGAGTACAAGTGCMGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCG

AGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCAGAGGTGTACACCCT

GCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGT

CAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCC

GGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTC

CTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCT

CATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTC CCTGTCTCCGGGTAAA (SEQ ID NO: 51) >Mxb #5 scFv-Fc胺基酸序列

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKPDGS

EKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGQGT

LVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAQSALTQPASVSGSPGQSmSCTGTSSDVGGYIW

SWYQQHPGKAPKLMIYDVSRRPSGISDRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCNSY

TTLSTWLFGGGTKVTVLGAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM

ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWWDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLH

QDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCL

VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSC SVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO： 46) >Mxb #7 scFv-Fc核酸序列

GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTG

AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATGG

AAGTGAGAAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGC

CGTGTATTACTGTGCGAGAGTTrCGAGGGGTGGGAGCTACTCGGACTGGGGCAAA

GGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGGAGGCGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCT

GGCGGTGGCGGAAGTGCACAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGG

TCTCCTGGACAGTCGATCATCATCTCCTGCACTGGAACCCGCAGTGACATTGGTG

GTTACAACTATGTCTCCTGGTACCAACACCACCCAGGCAGAGCCCCCAAACTCATC

ATTTTTGATGTCAATAATCGGCCCTCAGGAGTCTCTCACCGCTTCTCTGGCTCCAA 120060.doc -156- 200808822

GTCTGGCAACACGGCCTCCCTGACCATCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGACGAGGC

TGATTATTACTGCAATTCATTTACAGACAGCCGGACTTGGCTGTTCGGCGGAGGGA

CCAAGCTGACCGTCCTAGGTGCGGCCGCAGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCA

CACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTC

TTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACAT

GCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGT

GGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAA

CAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAAT

GGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGA

AAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCC

CCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA

GGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAG

AACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTA

TAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGC

TCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGT CTCCGGGTAAA (SEQ ID NO: 52) >Mxb #7 scFv-Fc胺基酸序歹ij

EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSVWRQAPGKGLEVWANIKPDGS

EKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGKGTL

VTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAQSALTQPASVSGSPGQSIIISCTGTRSDIGGYNYVS

WYQHHPGRAPKLIIFDVNNRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCNSFT DSRTWLFGGGTKLTVLGAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM!

SRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWWDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLH

QDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCL

VKGFYPSDiAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSC SVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO: 47) >Mxb #10 scFv-Fc核酸序列

GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTG

AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTAGTGG

TGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGAC

AATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGG

CCGTGTAHACTGTGTAAAAGATAGGGHGCTGTAGCTGGTAAGGGWCGTAHAC

TTTGACTCTTGGGGGAGGGGGACCACGGTCACCGTCTCGAGTGGAGGCGGCGGT 120060.doc -157 - 200808822

TCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGAAGTGCACAGTCTGTGCTGACGCAG

CCGCCCTCGGTGTCTGAAGCCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCGCCTGTTCTGGA

AGCAGCTCCAACATCGGAAATAATGCTGTAAGTTGGTACCAGCAACTCCCAGGAAA

GGCTCCCACACTCCTCATCTATTATGATAATCTGCTGCCCTCAGGGGTCTCTGACC

GATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCA

GTCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCTGCATGGGATGACAGCCTGAATGATT

GGGTGTTCGGCGGTGGGACCAAGGTCACCGTCCTAGGTGCGGCCGCAGAGCCCA

AATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGG

GGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCC

GGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGG

TCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCC

GCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCT

GCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCC

CTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAAC

CACAGGTGTACACCGTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCA

GCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGA

GAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTC

CGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAG

CAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACA CGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA(SEQ ID NO: 53) >Mxb # 10 scFv-Fc胺基酸序列：

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSVWRQAPGKGLEWVSAISGSGG

STYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKDRVAVAGKGSYYFDS

WGRGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAQSVLTQPPSVSEAPGQRVTIACSGSSSNI

GNNAVSWYQQLPGKAPTLLIYYDNLLPSGVSDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADY

YCAAWDDSLNDWVFGGGTKVTVLGAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPP

KPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWWDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV

VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTK

NQVSLTCLVKGFYPSDiAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRW QQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ !D NO: 48) >Mxb #30 scFv-Fc核酸序列：

CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGTCCAGGACTGGTGAAGCCCTCGCAGACCCTC TCACTCACCTGTGCCATCTCCGGGGACAGTGTCTCTAGCAACAGTGCTGCTTGGA ACTGGATCAGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGAAGGACATACTA CAGGTCCAAGTGGTATAATGAUATGCAGTATC 丁GTGAAAAGTCGAATGACCATAA I20060.doc -158- 200808822

AAGCAGACACATCCAAGAACCAGTTCTCCCTGCAACTGAACTCTGTGACTCCCGAA

GACACGGCTGTGTATTACTGTGCAAGAGATGAGGGACCGCTTGACTACTGGGGCC

AGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGGCCGGTGGCGGTGGCAGCGGCGGTGGTGGG

TCCGGTGGCGGCGGATCTGGCGCGCCACAGGCTGTGCTCACTCAGCCGTCCTCA

GTGTCTGGGGCCCCAGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCACTGGGAGCAGCTCC

AACCTCGGGACAGGTTATGATGTACACTGGTACCAGCAGCTTCCAGGAACAGCCC

CCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATT

CTCGGGCTCCAAGTCTGACACCTCAGGTTTGCTGGCCATCACTGGGCTCCAGGCT

GAGGATGAGGCTACUAUAC 丁 GCCAGTCCTATGACTTCAGCCTGAGTGCTATGGT

ATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTAGCGGCCGCAGAGCCCAAATCTTG

TGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCG

TCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCC

TGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTC

AACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAG

GAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGG

ACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGC

CCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTG

TACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCT

GCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATG

GGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCT

CCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAA

CGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAG AGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA (SEQ ID NO： 54) >Mxb #3 0 scFv-Fc胺基酸序列：

QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRS

KWYNDYAVSVKSRMTIKADTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARDEGPLDYWGQGTL

VTVSAGGGGSGGGGSGGGGSGAPQAVLTQPSSVSGAPGQRVTISCTGSSSNLGTGY

DVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSDTSGLLAITGLQAEDEATYYCQ

SYDFSLSAMVFGGGTKVTVLAAAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDT

LMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWWDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLT

VLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSL

TCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNV FSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 49)。實例5_對huEpoR之競爭性結合使用盤基ELISA測試純系2、純系5、純系7、純系10及 120060.doc •159- 200808822 純系30 scFv-Fc蛋白與純系5及純系3〇嗟菌體競爭結合huEpoR之能力。使經生物素標記之匕邱成固定於抗生蛋白鍵菌素培養盤上。WscFv_Fc蛋白及scFv噬菌體添加至培養盤中。接著使用抗-M13小鼠單株抗體隨後使用藻紅蛋白結合之山羊F(ab，）2抗小鼠igG Fc (Jacks〇n Immun〇

Research Laboratories)偵測scFv嗟菌體之結合。使用一系列 8 種濃度之各 scFv-Fc 蛋白（〇、0 032、〇 16、〇 8、4、 20、100及500 ηΜ)測試純系2、純系5、純系7、純系1〇及純系30 scFv-Fc蛋白對噬菌體結合之抑制。純系2、純系 5、純系7及純系10 SCFV-FC蛋白表現出對純系5 scFv噬菌體與huEpoR結合之劑量依賴性抑制（圖4A)。然而，濃度高達500 nM之純系30 scFv-Fc蛋白亦未抑制純系5 scFv嗟菌體與huEpoR之結合（圖4A)。純系30 scFv_Fc蛋白以劑量依賴性方式抑制砘系30 scFv噬菌體與huEpoR之結合，但濃度高達500 nM之純系2、純系5、純系7或純系1〇 SCFV-Fc蛋白均無抑制作用（圖4B)。彼等結果表明純系2、純系5、純系7及純系10 scFv-Fc蛋白之抗原決定基與純系5 白之抗原決疋基重璺’但純系3〇 scFv-Fc蛋白所結合之抗原決定基不與純系2、純系5、純系7及純系1 〇 scFv-Fc蛋白之抗原決定基重疊。實例6_抗體與小鼠EpoR-Fc蛋白（muEpoR_Fc)之結合使用ELISA檢定測定純系2、純系5、純系7、純系1〇及純系30 scFv-Fc蛋白以及純系2、純系5、純系7、純系1〇及純系30 IgG2蛋白與小鼠Ep〇R (muEpoR)之交又反應性。將 120060.doc -160- 200808822 個別 scFv-Fc蛋白或 IgG2蛋白（100 μΐ 50 mM NaHC03 中之 1 pg/ml抗體儲備溶液，pH值8.5)添加至Nunc-Immuno Polysorp ELISA培養盤（Nalge Nunc International)上之各孔中使得各孔僅包含單一純系。將培養盤在4°C下培育隔夜。在室溫下用4%牛奶/PBS/0.1% Tween 20將孔阻斷1小時後，將培養盤用PBS/0.1% Tween 20洗滌3次。將100 μΐ 5 pg/ml經生物素結合之muEpoR-Fc蛋白添加至各孔中且在 25°C下培育1小時。使用抗生蛋白鏈菌素-HRP結合物（在 4%牛奶PBS/0.1% Tween 20中1:1000倍稀釋）偵測結合之 muEpoR-Fc 〇使用次偶氮基雙（3_乙基苯噻唑琳-0-磺酸）(ABTS)作為底物且在平板讀取器上量測405 nm處之吸收。所有抗體（純系2、純系5、純系7、純系10及純系30 scFv-Fc蛋白及純系2、純系5、純系7、純系10及純系30 IgG2 蛋白）均顯示出與muEpoR-Fc之顯著交叉反應水平（圖5)。實例7_使用BIAcore量測對huEpoR之結合動力學在 BIAcore 3000儀器（BIAcore International AB)上測定純系2、純系5、純系7、純系10及純系30 scFv-Fc蛋白之親和力。使山羊抗人類Fc抗體（Jackson Immuno Research Laboratories)固定於經由N羥基丁二醯胺化學活化之CM4晶片（BIAcore International AB)上。使 scFv-Fc蛋白溶液流過晶片且溶液中之scFv-Fc蛋白經由Fc與固定之山羊抗人類 Fc抗體結合而被捕捉於晶片上。各動力學操作在25°C下使用50 μΐ/min之流動速率。各操作使用濃度高達1〇〇〇 nM之 huEpoR蛋白作為分析物。使用BIAcore提供之BIAevaluation 120060.doc -161- 200808822 軟體版本3藉由具有質量傳遞之1:1 Langmuir+局部^議合使用1分鐘結合期及5分鐘解離期來進行資料分析。使低 pH值之甘胺酸緩衝液（5G mM甘胺酸⑽，pH值丨5)流過晶片以移除經捕捉之ScFv-Fc蛋白從而恢復山羊抗人類卜抗體CM4晶片表面。使用此相同晶片表面單獨捕捉5種__ Fc蛋白中之各者。 BIAcore動力學結合感測圖顯示於圖6中且結合參數總結於下表2中。5種不同SCFV-Fc蛋白之親和力自i. i nM至 • 14,900 nM變化。所有5種―❿蛋白之結合及解離速率 (分別為kon及kQff)均在抗體之典型範圍内。具有最高親和力之scFv-Fc蛋白為純系1〇 scFv_Fc蛋白，其具有最慢 (2.2XHT4 s·1)。具有最低親和力之scFv_Fc蛋白為純系 scFv-Fc蛋白，其具有最慢k〇n (1·8χ1〇4 μ·、’及最快k〇H (2,74〇xl(T4 s]) 〇表2 ·對huEpoR之scFv-Fc BIAcore結合動力學之總表

ScFv-Fc 純系 Kio3,1/Ms) 1/s) KD(10夂]VI) #2 4.1 1,360 334 #5 2.8 612 217 #7 2.0 541 271 #10 2^0 22 「1.1 #30 • 18 2J40 14,900 實例8-活體外針對人類紅血球生成素受體之活化篩選seFv_ Fc蛋白在實例1中鑑別之29種scFv序列中篩選作為活化huEp〇R 之scFv-Fc蛋白或IgG蛋白。在經含有螢光素酶報導基因前 120060.doc -162- 200808822 之9個STAT5結合位點之構築體轉染之UT-7細胞（人類巨核母細胞）(UT-7-LUC細胞）中藉由基於螢光素酶之報導檢定 (螢光素酶檢定）進行scFv-Fc蛋白及IgG蛋白之活體外篩選。若無另外提示，則在37°C下於5% C02/95%大氣下之濕潤培育箱中維持所有細胞且進行所有細胞檢定。在使用前將所有胎牛血清（FBS)在55°C下加熱滅活45分鐘。所有用於細胞處理之杜貝卡氏磷酸鹽緩衝生理食鹽水 (PBS)(Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline)均無氯化I弓及氯化鎂。將UT-7-LUC 細胞（Amgen, Inc·; Thousand Oaks， CA)維持於包含含有 10% FBS (HyClone; Logan，UT)、500 gg/mL潮黴素（Roche; Penzberg，Germany)、100 U/mL 青黴素、100 pg/mL 鍵徽素、292 pg/mL L-魏醯胺酸（IX PSG; Invitrogen)及1 U/mL重組人類紅血球生成素（Epoetin Alpha, rHuEpo; Amgen，Inc·)之 IMDM (Invitrogen; Carlsbad，CA)之生長培養基中。將細胞在PBS (Invitrogen) 中洗滌兩次且以每毫升400,000個細胞再懸浮於檢定培養基（含有 1% FBS、IX PSG及 12.5 mM HEPES之 RPMI培養基 (Invitrogen))中。在隔夜培育後，測定細胞數目及生存力，且將細胞以每毫升200,000個細胞再懸浮於檢定培養基中。在96孔不透明培養盤（Corning; Corning，NY)中連續稀釋各scFv-Fc蛋白。各稀釋重複進行三次且使用以下scFv_Fc 蛋白濃度：Mxb 5、Mxb 10及Mxb 30 : 1000、333、111、 37.04、12.35、4.115、1.372、0.457、0.152、0.051、 120060.doc -163- 200808822 0.017及 0.006 nM ° Mxb 2及 Mxb 7 : 2500、1250、625、 312.5、156.25、78.125、39.0625、19.53125、9.765625、 4.882813、2.441406、1.220703、0.610352、0.3051758、 0.1525879、0.76294、0.038147、0.019073、0.009537、 0.004768 、 0.002384 、 0.001192 、 0.000596 、 0.000298

nM。作為對照標準，在用於測試各scFv-Fc蛋白之相同培養盤中連續稀釋rHuEpo。各Epo稀釋重複進行三次且使用以下Epo濃度：Mxb 2、Mxb 5、Mxb 10及Mxb 30之培養盤：100、10、1、0.1、0.01 及 0·001 nM。Mxb 7之測試培養盤：1488、744、372、186、93、46.5 > 23.2 ^ 11.6 > 5.8、2·9、1.5、0·71、0·36、0.18、0.09、0.045、0.023、 0.011 〜0.006 > 0.003 > 0.0015 > 0.0007、0.0004 ^ 0.0002 nM。將大約10，0 0 0個細胞添加至各孔中。接著培養細胞6 小時，且根據Steady-Glo螢光素酶檢定（？1：〇11^8& Corporation)之薇商說明進行檢定。實例1中鑑別之29種最大抗體中有22種顯示結合huEpoR 且誘導不同程度之UT-7-Luc細胞反應。Mxb 2、Mxb 5、

Mxb 7、Mxb 10及Mxb 30結果圖示於圖7中。實例9-活體外針對huEpoR活化篩選抗體使用如上文實例8中相對於scFv-Fc蛋白所報導之基於螢光素酶之報導檢定個別使用實例2中描述之29種scFv-Fc蛋白及亦於實例2中描述之29種IgG2蛋白來活化huEpoR。將所得劑量·滴定轉化為抗體（scFv-Fc蛋白或IgG2蛋白）之最大螢光素酶信號與重組人類紅血球生成素（rHuEpo)標準之 120060.doc -164- 200808822 最大螢光素酶信號之比率。純系2、純系5、純系7、純系 10及純系30 scFv-Fc蛋白以及純系2、純系5、純系7、純系 10及純系30 IgG2蛋白之結果圖示於圖8中。與相應純系2、純系5、純系7、純系10及純系30 IgG2蛋白相比，純系2、純系5、純系7、純系10及純系30 scFv-Fc蛋白為更強效之 huEpoR激動劑。實例10-活體外信號轉導實驗將UT-7細胞維持於由含有10% FBS (HyClone)、100 # U/mL青黴素、100 pg/mL鏈黴素、292 gg/mL L-麩醯胺酸 (IX PSG; Invitrogen)及 1 U/mL rHuEpo (Epoetin Alpha， rHuEpo; Amgen Inc.)之IMDM (Invitrogen)組成之生長培養基中。將細胞在PBS (Invitrogen)中洗務兩次且再懸浮於由 IMDM及0.5% FBS組成之饑餓培養基。在隔夜培育後，測

.定細胞數目及生存力，且將細胞以每毫升3,000,000個細胞再懸浮於含有 50 ng/mL rHuEpo、1 gg/mL Mxb 2、1 pg/mL Mxb 5、1.54 pg/mL純系 2 IgG2蛋白（IgG2 2)、1.54 pg/mL • 純系5 IgG2蛋白（IgG2 5)或PBS之IMDM中。以37°C加熱塊刺激細胞歷時〇、2、15或60分鐘。rHuEpo對此等細胞之活化接合huEpoR且誘導信號分子Stat5及Akt之磷酸化。接著將細胞懸浮液在4°C下以7000 rpm離心1分鐘且移除上清液。將細胞球粒用冰冷PBS洗滌且在4°C下以7000 rpm離心 1分鐘。移除上清液且使用補充有完全（無EDTA)蛋白酶抑制劑混合疑劑（Roche Diagnostics)之M-PER哺乳動物蛋白提取試劑（Pierce Biotechnology，Inc·; Rockford，IL)產生細胞溶 120060.doc -165- 200808822 解物。接著將所有樣品旋轉ίο秒鐘，接著將溶解物在室溫下在不定時旋轉培育下5分鐘。接著將溶解物以2000 ηρηι 離心5分鐘，且將上清液轉移成等分試樣且在乾冰/乙醇浴中瞬間乾燥且儲存於-80°C下備用。西方墨點法··將所有蛋白樣品與IX NuPAGE樣品還原劑 (111¥11：1*〇8611)及1乂^[11?人0£1^08樣品緩衝液（111¥11：1*〇8611)組合，在100°C下培育5分鐘，且在預鑄4-20% Tris-甘胺酸凝膠（Invitrogen)上執行。所有凝膠均裝載有SeeBlue Plus2蛋 _ 白梯（Invitrogen)。接著將蛋白質轉移至具有0.45 μιη孔徑之硝化纖維膜濾紙夾層（Invitrogen)。在蛋白質轉移後，在室溫下將膜在含Tween 20之Tris緩衝生理食鹽水（pH值 8.0)(TBS-T; SIGMA)中之5%墨點分析級阻斷劑無脂乳粉 (牛奶；Bio-Rad Laboratories; Hercules，CA)中阻斷至少 1 小時。將膜首先用TBS-T中2.5%牛血清白蛋白（BSA; SIGMA)中 1 pg/mL 之抗磷酸化 Stat5 A/B 抗體（Upstate; Charlottesville，VA)點潰。在室溫下在震盪臺上用抗麟酸 w 化Stat5 A/B抗體將培育進行1小時，隨後在TBS_T中進行3 次沖洗及3次洗滌歷時15分鐘。接著用在TBS-T中之1.25% BSA中稀釋至1:2000之山羊抗小鼠辣根過氧化物酶（HRP) 結合之抗體（Pierce Biotechnology，Inc·)點潰。所有培育均係在室溫下在震盪臺上使用山羊抗小鼠-HRP結合之抗體進行1小時，隨後在TBS-T中進行3次沖洗及3次洗滌歷時15分鐘。使用增強化學發光（ECL)西方墨點偵測系統（Amersham Bioscience)偵測硝化纖維膜上之蛋白質。接著將膜曝光於 120060.doc -166- 200808822

Kodak BIOMAX 化學發光檢測膠片（Kodak; Rochester， NY)。在偵測後，在Restore西方墨點洗脫緩衝液（PIERCE) 中將膜洗脫20分鐘。對於以下抗體使用上述相同方法重複墨點分析：完全 Stat5 : 1:1000倍稀釋之初級抗體-抗 Stat5 (Cell Signaling Technology; Danvers，ΜΑ)，1:2000倍稀釋之二級抗體-山羊抗大鼠-HRP (Pierce Biotechnology，Inc·)。填酸化 Akt: 1:1000倍稀釋之初級抗體-抗磷酸化Akt (Thr308)(Cell # Signaling Technology)，1:2000倍稀釋之二級抗體-山羊抗大鼠-HRP。完全Akt: 1:1000倍稀釋之初級抗體-抗Akt (Cell Signaling Technology)，1:2000倍稀釋之二級抗體-山羊抗大鼠-HRP。此實驗結果表明Mxb 2、Mxb 5、IgG2 2及IgG2 5活化 huEpoR且誘導 Stat5及 Akt之磷酸化。Mxb 2、Mxb 5、IgG2 2及IgG2 5磷酸化之動力學相對於rHuEpo略為延緩。Mxb 2 及IgG2 2之結果顯示於圖9中。圖9顯示在rHuEpo刺激UT-7 _ 細胞後，在2分鐘内偵測到Stat5之劇烈磷酸化且在1 5分鐘時達到最大，而在Mxb 2及IgG2 2之情況下’刺激後2分鐘時Stat5磷酸化水平較低。Akt磷酸化之情況同時如此。與經Mxb 2刺激之細胞相比，經IgG2 2刺激之細胞中Stat5及 Akt填酸化水平較低。此信號轉導實驗表明Mxb 2及IgG2 2 為比rHuEpo弱之huEpoR激動劑。實例11-BFU-E檢定在CD34+人類周邊血液祖細胞（CD34+PBPC)上使用爆式 120060.doc -167- 200808822 紅jk球系形成單位（BFU-E)檢定來評估包括Mxb 2、Mxb 5、Mxb 7及Mxb 3 0之一部分Mxb之活性。BFU-E檢定描述於 Elliott 等人，Activation of the Erythropoietin (EPO) receptor by bivalent anti-EPO receptor antibodies, J. Biol. Chem. 271(40)，24691-24697 中。在本案中，BFU-E檢定測試scFv-Fc蛋白刺激由自健康志願者血液分離之人類初級細胞產生紅血球系集落之能力。某些促進紅血球系集落形成之試劑亦促進紅血球系祖細胞增殖，防止細胞凋亡且誘導細胞分化。對於此檢定而言，由自經rhG-CSF血液活動之正常供體獲得之清除術產物純化CD34+PBPC。在35 mm皮氏培養皿中，在含有100 ng/mL rhSCF、rhlL-3及rhlL-6之各者及對數遞增劑量 0.1 至 1，〇〇〇 ng/mL之rHuEpo或 1 至 10,000 ng/mL 之Mxb 2、Mxb 5、Mxb 7或Mxb 30之甲基纖維素基培養基 (METHOCULT™ H4230, StemCell Technologies, Vancouver, BC，Canada)中每毫升培養1000個CD34+PBPC，所有樣品均重複三次。在37°C下濕潤腔室中在5% C02/95%大氣中培育培養物，且14天後計數BFU-E衍生集落之數目。觀察各培養物且使用解剖顯微鏡在20倍下進行計數。BFU-E衍生集落定義為含有多於50個細胞之單焦或多焦血色素化細胞叢集。

Mxb 2、Mxb 5、Mxb 7及Mxb 30誘導含血色素之紅血球系集落形成，但在誘導BFU-E衍生集落方法中所有最大抗體之功效顯著弱於rHuEpo。如圖10中可見，由任一種最大 120060.doc -168 - 200808822 抗體所誘導之集落之最大數目均顯著少KrHuEP0所誘導之數目，且誘導此最大數目時之濃度顯著高於在rHuEP0情況下之濃度。此等資料表明^^-以蛋白為與rHuEP0相比具有較低功效之huEpoR激動劑。實例12-活體内實驗在數種實驗中測試小鼠體内單次注射Mxb 2、Mxb 5、 Mxb 7或Mxb 10之作用。實例12Α·小鼠體内之Mxb 5劑量滴定實驗 # 給2個月大之雌性BDF-1小鼠皮下注射最終體積為200 μΐ 之載劑（含 01% BSA 之 PBS)、3 pg/kg PEG-NESP (PEG-NESP及製備PEG-NESP之方法大體描述於PCT公開案第WO 01/76640 中）或 0.5、2.5、5或 7.5 mg/kg Mxb 5。在長達 60 天中之多個時間點自後眼眶竇收集血液且使用ADVIA血液分析儀評估CBC參數。資料呈現於圖12及13中，其中各時間點n=5。

Mxb 5存在明顯劑量效應，其中在0.5 mg/kg下活性極其鲁有限，但在注射2.5與7.5 mg/kg之間Mxb 5劑量之小鼠體内觀察到顯著紅血球生成活性。Mxb 5之活性概況不同於 PEG-NESP ;在注射PEG_NESP或Mxb後第4天均達成網狀紅血球峰值，但在接受2.5與7·5 mg/kg之間Mxb 5劑量之小鼠體内網狀紅血球反應之持續時間顧著增加。第8天經 PEG-NESP處理小鼠之網狀紅血球數返回基線，但經過14 至1 8天Mxb 5處理小鼠之網狀紅血球才返回基線。在注射5 與7·5 mg/kg之間Mxb 5劑量的小鼠體内，血色素含量保持 120060.doc -169- 200808822 在基線以上持續46至52天。相比而言，經PEG-NESP處理小鼠之血色素含量在第16天即返回基線，因此在經Mxb 5 或PEG-NESP處理小鼠之血色素反應之持續時間及量值方面存在極顯著差異。此實驗表明單次注射Mxb 5使血色素含量增加保持在基線以上持續一段時間，此時間長於小鼠體内紅血球之總壽命（40天）。由於投與紅血·球生成劑後血色素之下降速率與紅血球之壽命（人類為12〇天)有關，因此向人類單次投與Mxb 5可能足以醫治貧血症持續2_4個月之鲁時間。實例12B-小鼠體内之Mxb 7劑量滴定實驗給2個月大之雌性BDF_1小鼠皮下注射最終體積為200 μΐ 之載劑（含 0.1% BSA之 PBS)、3 pg/kg PEG-NESP (Amgen， 111。.）或0.5、2.5、5或7.5 11^/1^%乂匕7(八11^611，111〇.)。在長達24天中之多個時間點自後眼眶竇收集血液且使用ADVIA 血液分析儀評估CBC參數。資料呈現於圖14及15中，其中各時間點n=5。 ® 單次注射Mxb 7引起網狀紅血球數及血色素含量增加，此增加呈劑量依賴性方式且持續一段較長時間。在單次皮下（SC)注射7·5 mg/kg之Mxb 7後，網狀紅血球數保持在基線以上持續12天，而在注射PEG-NESP之小鼠體内，網狀紅血球數保持在基線以上持續8天。在此實驗中，量測金色素含量24天，在此期間與經PEG-NESP處理之小鼠相比較，在接受7 · 5 mg/kg Mxb 7之小鼠體内，血色素增加保持在較高含量且持續較長時間。在單次PEG-NESP注射後， 120060.doc -170- 200808822 第5天血色素達到峰值，且第14天血色素返回基線。相比而言，在單次注射Mxb 7 (7.5 mg/kg)後，第12天血色素達到峰值，且第24天血色素返回基線。此實驗表明Mxb 7具有與PEG-NESP極為不同之特性。如由網狀紅血球數及血色素含量增加所示，在單次投藥後，經Mxb 7處理小鼠之紅血球生成反應持續時間長於經PEG-NESP處理之小鼠。實例12C-小鼠體内之Mxb 10劑量滴定實驗給2個月大之雌性BDF-1小鼠皮下注射最終體積為200 μΐ • 之載劑(含 0.1% BSA 之 PBS)、3 pg/kg PEG-NESP (Amgen， Inc.)或 0.05、0.15、0.5、1.5、3 或 5 mg/kg Mxb 10 (Amgen，Inc.)。在長達52天中之多個時間點自後眼眶竇收集血液且使用ADVIA血液分析儀評估CBC參數。資料呈現於圖16及17中，其中各時間點n=5。

Mxb 10存在極其明顯的劑量依賴性效應。即使在最低 Mxb 10劑量（0.05 mg/kg)下亦存在明顯網狀紅血球數及血色素含量變化，最低劑量之Mxb 10具有與3 pg/kg PEG-® NESP極其類似之活性。Mxb 10為比Mxb 2、Mxb 7及Mxb 5更強效之藥劑。在經0· 1 5 mg/kg Mxb 2處理之小鼠體内，網狀紅血球數保持在基線以上持續10天且血色素含量保持在基線以上持續19天。在0.5 mg/kg Mxb 10劑量下，網狀紅血球數保持在基線以上持續13天且血色素含量保持在基線以上持續3 1天。在1 · 5 mg/kg Mxb 10劑量下，網狀紅血球數保持在基線以上持續1 8天且血色素含量保持在基線以上持續40天。在3 mg/kg Mxb 10劑量下，網狀紅血球數保 120060.doc -171 - 200808822 持在基線以上持續23天且血色素含量保持在基線以上持續 5 0天。最後，在5 mg/kg Mxb 10之劑量下，網狀紅血球保持在基線以上持續28天且血色素含量在第52天實驗終止時仍保持在基線以上。在另一給予小鼠5 mg/kg Mxb 10之實驗中，血色素含量在單次皮下注射Mxb 10後第56天返回基線。實例12D_小鼠體内之Mxb 2單一劑量實驗給3個月大之雌性BDF-1小鼠皮下注射最終體積為200 μΐ • 之載劑（含 0.1% BSA之 PBS)、3 pg/kg PEG-NESP (Amgen， Inc.)或 13 mg/kg Mxb 2 (Amgen，Inc·)。在長達24天中之多個時間點自後眼眶竇收集血液且使用ADVIA血液分析儀 (Bayer; Germany)評估CBC參數。資料呈現於圖18及19 中，其中各時間點n=5。在此實驗中，將單一劑量Mxb 2之紅血球生成作用與由對照劑PEG-NESP所誘導之作用相比較。在接受Mxb 2之動物體内網狀紅血球數保持在基線以上持續更多天（經PEG-_ NESP處理動物之8天對經Mxb 2處理小鼠之9天），但當考慮血色素反應時紅血球生成反應差異之私度顯者增強。在 PEG-NESP處理後血色素含量在第14天返回基線，而在經 Mxb 2處理之小鼠體内經過24天血色素才降至基線。此等資料進一步表明由Mxb 2所誘導之紅金球生成反應顯著長於由PEG-NESP所誘導之紅血球生成反應。實例13-Mxb 5及IgGi 5之藥物動力學研究在雌性BDF-1小鼠體内表徵Mxb 5及1gGi 5之藥物動力學 120060.doc -172· 200808822 (PK)概況。給動物靜脈内注射3 75 mg/kg $或$ 7 mg/kg IgGl 5(等莫耳量）。在長達1〇〇天中之多個時間點自後眼眶竇或藉由心臟穿刺收集血液，其中各時間an=4。將血液樣品轉移至Costar微量離心管中且允許其凝結。接著將樣品在4°C下以11，5〇〇 rpm離心10分鐘。接著將所得血清樣品轉移至個別管中且在分析前儲存於_7〇。〇下。藉由丑1^8八使用固定之11沾1)0尺蛋白及抗人類1^/1^1)結合物量測樣品中之Mxb 5&IgGl 5濃度。使用一段時間内之血清濃 ® 度值進行藥物動力學分析。用於此分析之各時間點各蛋白（平均複合物）血清濃度之平均及標準偏差描述於圖19中。IgGl 5及撾讣5之一些藥物動力學參數顯示於圖21八、2職22中。抓5顯示出長於Mxb 5之半衰期（分別為320.^^58.3小時）。與此相一致，IgGl 5之清除比Mxb 5慢（分別為〇.〇〇71對〇〇12 mL/h) 且1§仏5之平均滯留時間大於Mxb 5(分別為482·27對 • 217.51小時）。此分析表明此兩種蛋白f之藥物動力學之顯著差異，與Mxb5相比IgGl50較慢之去除而具有較長滯留時間。實例14-其他純系之篩選及鐘別使用實m中所述之選擇策略使天然嗟菌體庫之心嗤菌體經歷兩輪可溶性huEp〇R選擇。在兩輪選擇後自嗟菌體池中有機揀出2，_種scFv噬菌體。將2，_種噬菌體用於筛選’由此鑑別出960種表現出特異性結合_〇κ 之scFv嗤菌體。 120060.doc -173- 200808822 自960種scFv噬菌體純系製得質體DNA微量提取物且將其匯合。將來自960種scFv嗤菌體純系之DNA池用Ncol及 Notl消化。將所得〇·75 kb片段接合至Pcil及Notl消化之哺乳動物表現載體pDC409a-GlFc。pDC409a-GlFc描述於實例中。將接合產物轉化至TG1細胞中。接合後，揀出1，920 個單一集落且在96孔培養盤中使用Qiagen BioRobot 3000 自1，920個集落之各者製得質體DNA微量提取物。此等96 孔培養盤充當儲備培養盤。儲備培養盤中各孔之DNA濃度 • 在50與200 ng/μΐ之間。將來自儲備培養盤之DNA之等分試樣在一組新的96孔培養盤（第一組測試培養盤）中與Lipofectamine 2000 (Invitrogen)組合。經在室溫下培育30分鐘在第一組測試培養盤之孔中形成脂質/DNA複合物。接著將脂質/DNA複合物添加至含有Cos PKB細胞之第二組96孔培養（第二組測試培養盤）中。脂質DNA複合物轉染至Cos PKB細胞中。轉染後5天，自第二組測試培養盤收集含有表現蛋白之籲培養物上清液。使用活體外EpoR活化檢定測試培養物上清液結合EpoR之能力。對各測試蛋白進行兩次活體外EpoR 活化檢定。第一次檢定使用最終稀釋度為1:2之培養物上清液。第二次檢定使用最終稀釋度為1:20之培養物上清液。亦藉由Fc ELISA測試第二組測試培養盤上清液之蛋白質力價。來自Fc ELISA之濃度範圍為5-20 pg/ml之間。此等篩選鑑別出第二組純系：純系201、純系276、純系 120060.doc -174- 200808822 295、純系307、純系318、純系319、純系323、純系330、純系352及純系378。如實例1中大體描述分離純系13、純系15、純系16、純系29及純系34。使用實例2 _所述之選殖策略構築含有第二組純系之 IgG2及Fab表現構築體。藉由N端胺基酸定序確認蛋白質的識別且由分光光度計上2 8 0 nm處之吸收測定濃度。對第二組純系定序。純系13、純系15、純系16、純系 29、純系34、純系201、純系276、純系295、純系307、純系318、純系319、純系323、純系330、純系352及純系378 之可變重鏈及可變輕鏈之DN A及胺基酸序列顯示如下。在各序列中按順序用下劃線標出重鏈及輕鏈CDR1、CDR2及 CDR3 〇 >#13VH核酸序列

CAGGTACAGCTGCAGCAGTCAGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTG

AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTATGCTATGCACTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTAGAGTGGGTGGCAGTTATATCAAATCATGGA

AAGAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ATTCCAAGCACATGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGACGACACGGC

TCTATATTACTGTGCGAGAGATATAGCATTGGCTGGGGACTACTGGGGCCAGGGC ACCCTGGTCACCGTCTCTGCC (SEQ ID NO: 55) >#13VH胺基酸序列 QVQLQQSG6GWQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMHVWRQAPGKGLEWVAV1SNHG KSTYYADSVKGRFTISRDNSKHIVILYLQMNSLRADDTALYYCARDIALAGDYWGQGTL VTVSA (SEQ ID NO: 56) 120060.doc -175- 200808822 >#13VL核酸序列

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGT

CACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATCTTAATTGGTATCAGC

AACTACCAGGGAAAGTCCCTAAACTCCTGATCTATGGTGCATCGAAGTTGCAAAGT

GGGGTCCCCTCCAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCA

TCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCTCCAAGATTACAATT ATCCTCTCACTTTCGGCCCTGGGACACGACTGGAGATCAAA (SEQ ID NO: 57) >#13VL胺基酸序列 D1QMTQSPSSLSASVGDRVT1TCRASQS1SSYLNWYQQLPGKVPKLLIYGASKLQSGVP SRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQDYNYPLTFGPGTRLEIK (SEQ ID NO： 58)

>#15VH核酸序列

CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAGGCCTTCGGGGACCCTG

TCCCTCACCTGCGCTGTCTCTGGTGGCTCCATCGGCAGTAGTAACTGGTGGAGTT

GGGTCCGCCAGGCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCTCTCAGA

GTGGGAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGGGTCGAGTCACCATATCACTAGA

CAGGTCCAGGAACCAGTTGTCCCTGAAGTTGAGTTCTGTGACCGCCGCGGACACG

GCCGTGTATTACTGTGCGAGACAGCTGCGGTCGAnGATGCTnTTGATATCTGGG GCCCAGGGACCACGGTCACCGTCTCGGCC (SEQ ID NO: 59) >#15VH胺基酸序列

QVQLQESGPGLVRPSGTLSLTCAVSGGSIGSSNWWSVWRQAPGKGLEWIGEISQSG STNYNPSLKGRVTISLDRSRNQLSLKLSSVTAADTAVYYCARQLRSIDAFDIWGPGTTV TVSA (SEQ ID NO: 60) >#15VL核酸序列 TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACTGACAGCCA CCATCACCTGCTCTGGAGATAAATTGGGGGACAAATATGCTTCCTGGTATCAGCAG AAGCCAGGCCAGTCCCC 丁 GTGDGCrrCATCTATCAAGATAGGAAGCGACCCTCAG GGATCCCTGAGCGATTCTCTGGGTCCAATTCTGGGAACACAGCCACTCTGACCAT CAGCGGGACCCAGGCTGTGGATGAGGCTGACTATTACTGTCAGGCGTGGGACAG CGACACTTCTTATGTCTTCGGAACTGGGACCCAGCTCACCGTTTTA (SEQ ID NO: 61) 120060.doc -176 - 200808822 >#15VL胺基酸序列 SYVLTQPPSVSVSPGLTAT1TCSGDKLGDKYASWYQQKPGQSPVLV1YQDRKRPSGIP ERFSGSNSGNTATLTISGTQAVDEADYYCQAWDSDTSYVFGTGTQLTVL (SEQ ID NO: 62) >#16VH核酸序列

CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTG

丁 CCCTTCACCTGCACTG 丁 CTCTGGTGGCTACATCAATAATTACTACTGGAGCTGGAT

CCGGCAGCCCCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTGGGTACATCCATTACAGTGG

GAGCACCTACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGAAGACACG

TCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGCGACCGCTGCGGACACGGCCG

TGTATTACTGTGCGAGAGTTGGGTATTACTATGATAGTAGTGGTTATAATCTTGCCT GGTACTTCGATCTCTGGGGCCGTGGAACCCTGGTCACCGTCTCGGCC (SEQ ID NO: 63) >#16VH胺基酸序列 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGY1NNYYWSW1RQPPGKGLEWIGYIHYSGSTY YNPSLKSRVTISEDTSKNQFSLKLSSATAADTAVYYCARVGYYYDSSGYNLAWYFDLW GRGTLVTVSA (SEQ ID NO： 64) >#16VL·核酸序列

TCTTCTGAGCTGACTCAGGACCCTGCTGTGTCTGTGGCCTTGGGACAGACGGTCA

GGATCACATGCCAGGGAGACAACCTCAGAAGTTATTCTGCAACTTGGTACCAACAG

AAGCCAGGACAGGCCCCTGTCCTTGTCCTCTTTGGTGAAAACAACCGGCCCTCAG

GGATCCCAGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCAGGGGACACAGCTGTCTTGACCAT

CACTGGGACTCAGACCCAAGATGAGGCTGACTATTATTGCACTTCCAGGGTCAATA

GCGGGAACCATCTGGGGGTGTTCGGCCCAGGGACCCAGCTCACCGTTTTA (SEQ ID NO: 65) >#16VL胺基酸序列 SSELTQDPAVSVALGQTVRITCQGDNLRSYSATWYQQKPGQAPVLVLFGENNRPSGI PDRFSGSKSGDTAVLTITGTQTQDEADYYCTSRVNSGNHLGVFGPGTQLTVL (SEQ ID NO: 66) >#29VH核酸序列 120060.doc -177- 200808822

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTGTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTG

AAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCGGCTACTATATGCACTGGGT

GCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACCCTAACAG

TGG 丁 GGCACAAACTATGCACAGAAGTTTCAGGGCAGGG 丁 CACCATGACCAGGC3AC

ACGTCCATCAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGGCTGAGATCTGACGACACGG

CCGTGTATTACTGTGCGAGAGGGGGGCACATGACTACGGTGACCCGTGATGCTTT TGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTGCC (SEQ ID NO: 67) >#29VH胺基酸序列 EVQLVESGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHVWRQAPGQGLEWMGW1NPNS GGTNYAQKFQGRVTMTRDTS1STAYMELSRLRSDDTAVYYCARGGHMTTVTRDAFDI WGQGTMVTVSA (SEQ ID NO: 68)

>#29VL核酸序列

TCTTCTGAGCTGACTCAGGACCCTGCTGTGTCTGTGGCCTTGGGACAGACAATCA

GGATCACATGCCAAGGAGACAGCCTCAGATACTATTATGCAACCTGGTATCAGCAG

AAGCCAGGACAGGCCCCTATACTTGTCATCTATGGTCAGAATAATCGGCCCTCAG

GGGTCCCAGACCGATTCTCTGGCTCCAGCTCAGGAAACACAGCTTCCTTGACCAT

CACTGGGGCTCAGGCGGAAGATGAGGCTGACTATTACTGCGGAACATGGGATAGC

AGTGTGAGTGCCTCTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA (SEQ ID NO: 69) >#29VL胺基酸序列 SSELTQDPAVSVALGQTIRITCQGDSLRYYYATWYQQKPGQAP1LVIYGQNNRPSGVP DRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGTWDSSVSASWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 70) >#34VH核酸序列

CAGGTACAGCTGCAGCAGTCAGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTG

AAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCAGCGGCTATTATATGCACTGGGT

GCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACCCTAACAG

TGGCAGCACAAAHATGCACAGAAGTTTCTGGGCAGGGTCACCATGACCAGGGAC

ACGTCCATCAGCACAGCCTACATGGAACTGAGCAGCCTGAGATCTGACGACACGG

CCGTGTAHACTGTGCGAGGGGACACTCCGGTGACTATTTTGACTACTGGGGCCA GGGAACCCTGGTCACCGTCTCGGCC (SEQ ID NO: 71) >#34VH胺基酸序列 120060.doc -178- 200808822 QVQLQQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFSGYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNS GSTNYAQKFLGRVTMTRDTSISTAYMELSSLRSDDTAVYYCARGHSGDYFDYWGQGT LVTVSA (SEQ ID NO: 72) >#34VL核酸序列 GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTTGGAGACAGAGT CACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTGGTTGGCCTGGTATCAA CAGAGACCAGGGCAAGCCCCTAAACTGCTGATCTATGCTGCACGTTTGCGAGGTG GAGGCCCTTCAAGGTTCAGTGGCAGCGGCTCTGGGACAGAATTCACTCTCACCAT CAGCAG 丁C 丁 GCAACC 丁GAAGACTTTGCGACTTACTTC 丁 GTCAACAGAGUACAGTA CCCCGATCAGTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGGAGATCAAA (SEQ ID NO: 73) φ >#34VL胺基酸序列 E1VLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSSWLAWYQQRPGQAPKLL1YAARLRGGGP SRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYFCQQSYSTPISFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 74) >#201VH核酸序列

CAGGTGCAGCIGCAGGAGTCGGGCTCAGGACTGGCGAGGCCTTCACAGACCCTG TCCCTCACCTGCGCTGTCTCTGGTGGCTCCATCAGCAGTAGTGCTTTCTCCTGGAA TTGGATCCGGCAGCCACCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTGGATACATCTATCAT ACTGGGATCACCGATTATAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTGGA CAGGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAACGTGAACTCTGTGACCGCCGCGGACACG GCCGTGTATTATTGTGCCAGAGGACACGGTTCGGACCCCGCCTGGTTCGACCCCT GGGGCAAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 75) >#201VH胺基酸序列 0ν0Ι·0Ε3〇301·ΑΚΡ8€Π181·1ΌΑν3008Ι833ΑΡ3ννΝννΐΡ^ΡΡ0Κ0ί·Εννΐ0ΥΙΥΗΤ0Ι TDYNPSLKSRVTISVDRSKNQFSLNVNSVTAADTAVYYCARGHGSDPAWFDPWGKGT LVTVSS (SEQ ID NO: 76) >#201VL核酸序列 120060.doc 179- 200808822

CAATCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCA

GCATCACCTGCTCTGGAGATAAATTGGGGGATAAATATGCTTCCTGGTATCAGCAG

AGGCCAGGCCAGTCCCCTGTTCTGGTCATCTATCGAGACACCAAGCGGCCCTCAG

GGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACAGCCACTCTGACCAT

CAGCGGGACCCAGGCTGTGGATGAGGCTGACTATTACTGTCAGGCGTGGGACAG CACCACCTCCCTGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA (SEQ ID NO: 77) >#201VL胺基酸序列 QSVLTQPPSVSVSPGQTASITCSGDKLGDKYASWYQQRPGQSPVLVIYRDTKRPSG1P ERFSGSNSGNTATLT1SGTQAVDEADYYCQAWDSTTSLVFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 78)

>#276VH核酸序列

GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTG

AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGT

CCGCCAGGCTCCTGGGAAGGGGCTGGAGIGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATGG

AAGTGAGAAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGC

CGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTACTCGGACTGGGGCCG AGGGACAATGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO： 79) >#276VH胺基酸序列 EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEVWAN1KPDGS EKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSYSDWGRGT MVTVSS (SEQ ID NO: 80) >#276VL核酸序列

CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCCGCGTCCGGGTCTCCTGGACAGTCAGTCA CCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGTTGGCGGTTTTAACTATGTCTCCTGG TACCAAAAGTACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCGTCATTTATGAGGTCAGTAAGCG GCCCTCAGGGGTCCCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCCGGCAACACGGCCTCC CTGACCGTCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGCAGCTCAT GGGCACCTGGTAAAAACTTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA (SEQ ID NO： 81) 120060.doc -180 - 200808822 >#276VL胺基酸序列 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGFNYVSWYQKYPGKAPKLV1YEVSKRP SGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAEDEADYYCSSWAPGKNLFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 82) >#295VH核酸序列

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTG AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGT CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTGGTAGTGG TAGTAGTGAAGGTGGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCCTC TCCAGAGACAATTCCAAGAATACCC 丁 GTATCTGCAAATGAACAGCC 丁 GAGAGCCGA GGACACGGCCTTATATTACTGTGTGAAAGATCGCCCTAGTCGATACAGCTTTGGTT ATTACTTTGACTACTGGGGCCGGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 83) >#295VH胺基酸序列 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSG1SGSGS SEGGTYYADSVKGRFTLSRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTALYYCVKDRPSRYSFGYYF DYWGRGTLVTVSS (SEQ ID NO: 84) >#295VL核酸序列

CTGCCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCA

GCATCGCCTGCTCTGGAAATAAATTGGGGGATAAATATGTTTCCTGGTATCAGCAG

AAGCCAGGCCAGTCCCCTCTGCTGGTCATCTATCAAGATACCAAGCGGCCCTCAG GGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCAGGGAACACAGCCACTCTGACCAT CAGCGGGACCCAGGCTATGGATGAGGCTGACTATTACTGTCAGGCGTGGGACAG CAGCACTGATGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA (SEQ ID NO: 85) >#295VL胺基酸序列 LPVLTQPPSVSVSPGQTASIACSGNKLGDKYVSWYQQKPGQSPLLV1YQDTKRPSGIP ERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDEADYYCQAWDSSTDWFGGGTKLTVL (SEQ ID NO: 86 >#307VH核酸序列 120060.doc -181 200808822 GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCT GAGACTCTCCTGTGCGGTCTCTGGGTTCACCTTTAGTAAGTATTGGATGACCTGGG 丁 CCGCCAGGC 丁 CCAGGGAAGGGACTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATG GAAG 丁 GAGAAATACTATGTGGAG 丁 CTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGA CAACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGTGTGAGAGCCGAAGACACG GCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTTCTCGGACTGGGGC CAGGGGACAATGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO： 87) >#307VH胺基酸序列 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTVWRQAPGKGLEWVANIKPDGS EKYYVESVKGRFT1SRDNAKNSVYLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGT MVTVSS (SEQ ID NO: 88) φ >#307VL核酸序列

CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCCGCGTCCGGGTCTCCTGGACAGTCAGTCA

CCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGCGACGTTGGTGGTTATAACTATGTCTCCTGG

TACCAACAACACCCAGACAAAGCCCCCAGACTCATGATTTATGACGTCAATAAGCG

GCCCTCAGGGGTCCCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCC

CTGACCGTCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGATGAGGCTCATTATTACTGCAACTCATA TGCAGGCAGCAACAATTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCCAGCTCACCGTTTTA (SEQ ID NO: 89) >#307VL胺基酸序列

QSVLTQPPSASGSPGQSVT1SCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPDKAPRLMIYDVNKRP SGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAEDEAHYYCNSYAGSNNWVFGGGTQLTVL (SEQ ID NO: 90) >#318VH核酸序列

CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTG

AGACTCTCCTGTGCGGTCTCTGGGTTCACCTTTAGTAAGTATTGGATGACCTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATGG

AAGTGAGAAATACTATGTGGAGTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGTGTGAGAGCCGAAGACACGGC

CGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTTCTCGGACTGGGGCCAA GGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 91) >#31 8VH胺基酸序列 120060.doc -182- 200808822 QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTVWRQAPGKGLEWVAN1KPDGS EKYYVESVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGT LVTVSS (SEQ ID NO: 92) >#318VL核酸序列

CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCCGCGTCCGGGTCTCCTGGACAGTCAGTCA CCATC 丁 CCTGCAC 丁 GGAACCAGCAGTGACGUGGTGGUATA/mATGTCTCCTOG TACCAACAACACCCAGGCAGAGCCCCCAAACTCATCATTTATGAGGTCAGTAAGCG GCCCTCAGGGGTCCCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCC CTGACCGTCTCTGGGCTCCAGGCTGACGATGAGGCTGATTATTACTGCAACTCATA TGCAGGCAGCATTTATG丁CTTCGGGAGTGGGACCAAGGTCACCGTCCTA (SEQ ID NO: 93) >#318VL胺基酸序列 QSVLTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNWSWYQQHPGRAPKL1IYEVSKRPS GVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQADDEADYYCNSYAGS1YVFGSGTKVTVL (SEQ ID NO： 94) >#319VH核酸序列

CAGGTGCAGCTGGTGCAATCTGGGGCTGAAATTAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGA

AGGTTTCCTGCAAGACATTTGGATCCCCCTTCAGCACGAATGACATACACTGGGTG

CGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAATAATCGACACTAGTGGC

GCCATGACAAGGTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACCGTGACCAGGGAA

ACGTCCACGAGCACAGTCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAAATCTGAAGACACGG

CTGTGTACTACTGTGCGAGAGAGGGTTGTACTAATGGTGTATGCTATGATAATGGT TTTGATATCTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 95) >#319VH胺基酸序列 QVQLVQSGAEIKKPGASVKVSCKTFGSPFSTNDIHVWRQAPGQGLEWMGUDTSGAM TRYAQKFQGRVTVTRETSTSTVYMELSSLKSEDTAVYYCAREGCTNGVCYDNGFDIW GQGTLVTVSS (SEQ ID NO： 96) >#319VL核酸序列 120060.doc •183· 200808822

GATATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTATTGGAGACAGAGT

CACCATCAOCTGCCGGGCCAGTGAGGGTATTTATCATTGGTTGGCCTGGTATCAG

CAGAAGCCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTATAAGGCCTCTAGTTTAGCCAG

TGGGGCCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACC

ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTAnACTGCCAACAATATAGTAAT TATCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGGAGATCAAA (SEQ ID NO: 97) >#319VL胺基酸序列 DIQMTQSPSTLSAS1GDRVTITCRASEG1YHWLAWYQQKPGKAPKLL1YKASSLASGAP SRFSGSGSGTDFTLTISSLQPDDFATYYCQQYSNYPLTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO： 98) >#323VH核酸序列

CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTG

AGACTCTCCTGTGCGGTCTCTGGGTTCACCTTTAGTAAGTATTGGATGACCTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATGG

AAGTGAGAAATACTATGTGGAGTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGTGTGAGAGCCGAAGACACGGC

CGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTTCTCGGACTGGGGCCG GGGGACAATGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO： 99) >#323VH胺基酸序列 QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQAPGKGLEWVANIKPDGS EKYYVESVKGRFT1SRDNAKNSVYLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGRGT MVTVSS (SEQ ID NO: 100) >#323VL核酸序列

CAATCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCA

CCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGATGTTGGGAGTTATAACCTTGTCTCCTGG

TACCAACAACACCCAGGCAAAGTCCCCAAACTCATCATTTATGAGGTCAGTAATCG

GCCCTCAGGGGTTTCTCATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCC

CTGACCATCTCTGGACTCCAGGCTGAGGACGAGGCTGATTAITACTGCAGCTCATT

GACAAGCAGCGGCACTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA (SEQ ID NO: 101) >#323VL胺基酸序列 120060.doc -184· 200808822 QSALTQPASVSGSPGQSIT1SCTGTSSDVGSYNLVSWYQQHPGKVPKLI1YEVSNRPS GVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSLTSSGTWVFGGGTKVTVL (SEQ ID NO: 102) >#330VH核酸序列

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCCGGGGGGTCCCT

GAGACTCTCCTGTGCGGTCTCTGGGTTCACCTTTAGTAAGTATTGGATGACCTGGG

丁 CCGCCAGGC 丁 CCAGGGAAGGGACTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATG

GAAGTGAGAAATACTATGTGGAGTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGA

CAACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGTGTGAGAGCCGAAGACACG

GCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTTCTCGGACTGGGGC CAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 103)

>#330VH胺基酸序列 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSKYWMTWVRQAPGKGLEWVANIKPDGS EKYYVESVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQGT LVTVSS (SEQ ID NO: 104) >#330VL核酸序列

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTCCCTCCGCGTCCGGGTCTCCTGGGCAGTCAGTCA

CCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGTTGGTGCTTATAACTATGTCTCCTGG

TACCAACAGCACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGATTTATGAGGTCGCTAGGC

GGCCCTCAGGGGTCCCTGATCGCTTCTCTGGCTCTAAGTCTGGCAACACGGCCTC

CCTGACCGTCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGATGAGGCTGATTATTATTGCAGCTCA

TATGCAGGCAGCAACAATTTCGCGGTCTTCGGCAGAGGGACCAAGCTGACCGTCC TA (SEQ ID NO: 105) >#330VL胺基酸序列 QSALTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDVGAYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVARRP SGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAEDEADYYCSSYAGSNNFAVFGRGTKLTVL (SEQ ID NO: 106) >#352VH核酸序列

GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCGGGGGGGTCCCT

GAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCAGGTTTAGTAGCTATTGGATGACCTGGG

TCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATG

GAAGTGAGAAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATGTCCAGAGA 120060.doc -185- 200808822 CAACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACG GCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTTCTCGGACTGGGGC CAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO： 107) >#352VH胺基酸序列 EVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFRFSSYWMTWVRQAPGKGLEWVANIKPDG SEKYYVDSVKGRFTMSRDNAKNSVYLQMNSLRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWGQ GTLVTVSS (SEQ ID NO: 108) >#352VL核酸序列

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCA

CCATCCCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACATTGGTACTTATGACTATGTCTCCTGG

TACCAACAACACCCAGGCAAAGTCCCCAAAGTCATTATTTATGAGGTCACCAATCG

GCCCTCAGGGGTTTCTAATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCC

CTGACCATCTCTGGGCTCCAGGCTGACGACGAGGCTGATTATTACTGCAACTCATT

TACAAAGAACAACACTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA (SEQ ID NO: 109) >#3 52VL胺基酸序列 QSALTQPASVSGSPGQSmPCTGTSSDIGTYDYVSWYQQHPGKVP_YEVTNRPSG VSNRFSGSKSGNTASLTISGLQADDEADYYCNSFTKNNTVWFGGGTKLTVL (SEQ ID NO： 110) >#378VH核酸序列

CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTG

ATACTCTCCTGTGCGGTCTCTGGGTTCACCTTTAGTAAGTATTGGATGACCTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGGTGGCCAACATAAAGCCAGATGG

AAGTGAGAAATACTATGTGGAGTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ACGCCAAGAATTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGTGTGAGAGCCGAAGACACGGC

CGTGTATTACTGTGCGAGAGTTTCGAGGGGTGGGAGCTTCTCGGACTGGAGCCAA GGAACCTTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 111) >#378VH胺基酸序列 QVQLVESGGGLVQPGRSLILSCAVSGFTFSKYWMTVWRQAPGKGLEVWANIKPDGS EKYYVESVKGRFTISRDNAKNSVYLQMNSVRAEDTAVYYCARVSRGGSFSDWSQGTL VTVSS (SEQ ID NO: 112) 120060.doc -186- 200808822 >#378VL核酸序列

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTCCCTCCGCGTCCGGGTCTCCTGGGCAGTCAGTCA

CCATCTCCTGCACTGGAACCAGCGGTGACGTTGGTGCTTATAACTATGTCTCCTGG

TACCMCAGTACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGAinTATGAGGTCAGTAAGAG

GCCCTCCGGGGTCCCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCC

CTGACCGTCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGCAACTCATA

TAGGGGCAGCAACGGTCCTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCT A(SEQIDN〇：113) >#378VL胺基酸序列 QSALTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSGDVGAYNYVSWYQQYPGKAPKLMIYEVSKRP SGVPDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAEDEADYYCNSYRGSNGPVWFGGGTKVTVL φ (SECHDNO: 114)。實例15-FACS對抗體與細胞表面huEpoR結合之分析使用FACS分析8〇卩¥-卩〇蛋白與細胞表面表現之]111丑卩〇11之結合。所有使用之scFv-Fc蛋白均具有得自IgGi之Fc。將 UT-7細胞在4°C下用單獨5 nM scFv-Fc蛋白或5 nM scFv-Fc 蛋白及0.5 pg/ml rHuEpo培育1小時。使用冷PBS洗滌快速洗滌兩次後，接著將UT-7細胞在4°C下用1 pg/ml藻紅蛋白結合之山羊F(ab’）2抗人類 IgG Fc (Jackson Immuno Research 鲁 Laboratories)培育1小時。將細胞使用冷PBS洗滌兩次且再懸浮於1 ml固定缓衝液（2%聚甲醛PBS，pH值7.4)中。使用 FACSCaliber流式細胞儀（Becton-Dickinson)進行 FACS。自scFv-Fc表現載體表現之蛋白質之FACS跡線顯示於圖 22中。純系13、純系15、純系16、純系29及純系34均結合表現huEpoR之UT-7細胞（圖22A)但不結合陰性對照細胞（圖 22B)。過量之rHuEpo阻斷純系15、純系16及純系34之UT-7 細胞表面結合（圖22A)。rHuEpo不阻斷純系13或純系29之 120060.doc -187- 200808822 結合（圖22A)。實例16-純系201、純系276、純系295、純系307、純系 318、純系319、純系323、純系330、純系352及純系378對 huEpoR之競爭結合使用盤基ELISA測試純系201、純系276、純系295、純系307、純系318、純系319、純系323、純系330、純系352 及純系378與Epo競爭結合huEpoR.Fc之能力。所有使用之 scFv-Fc蛋白均具有得自IgGAFc。使用結合huEpoR.Fc之 _ 經生物素標記之Epo作為競爭劑。使huEpoR.Fc固定於 Polysorp ELISA培養盤上。藉由使用抗生蛋白鏈菌素_hrp 結合物以0至50 pg/ml之各蛋白進行濃度滴定來測試scFv-Fc形式之純系2〇1、純系276、純系295、純系307、純系 318、純系319、純系323、純系330、純系352及純系378對 Epo結合之抑制。除純系13、純系15、純系16、純系29、純系30及純系34外之所有純系均實質上在高濃度下阻斷籲 EP0結合（圖23)。如實例5中大體描述，測試噬菌體形式之純系2、純系5、純系7、純系1 〇、純系J 3、純系i 5、純系 16、純系29、純系30及純系34與最大抗體形式之純系5及純系30競爭結合EpoR之能力。實例I7-抗艎與小鼠EpoR (muEpoR)及獼猴Ep〇R (cynoEpoR)之結合使用ELISA檢定測試某些scFv_Fc形式之純系的交叉反應性。所有使用之scFv-Fc蛋白均具有得自IgGiiFc。所測試之純系為：純系13、純系1 5、純系16、純系29、純系34、 120060.doc -188- 200808822 純系201、純系276、純系295、純系307、純系318、純系 319、純系323、純系330、純系352及純系378。將100 μΐ 1 gg/ml(於 50 mM NaHC03，pH值 8·5 中）cynoEpoR或 muEpoR 添加至Polysorp ELISA培養盤上之各孔且在下培育隔夜。在室溫下用4%牛奶/PBS/0.1 % Tween 20將孔阻斷1小時後，將培養盤用PBS/0.1% Tween 20洗滌3次。將100 μ1 5 pg/ml scFv-Fc添加至各孔中且在25°C下培育1小時。使用抗人類IgG Fc-HRP結合物（在4%牛奶PBS/0.1〇/o Tween 20中 1:1000倍稀釋）偵測結合之cynoEpoR或muEpoR。使用 ABTS (2,2’_次偶氮基-雙（3-乙基苯噻唑啉-6-續酸））作為底物且在平板讀取器上量測405 nm處之吸收。所有純系均顯示出與cynoEpoR相當高的交叉反應水平（圖23)。純系 276、純系323、純系352及純系378顯示出與muEp0R實質性的交叉反應水平（圖23)。實例18_使用Biacore量測對人類及獼猶EpoR之速率及親和力常數使用裝備CM5感測器晶片之Biacore T100儀器（Biac〇re AB，Uppsala，Sweden)在25 °C下進行表面電漿共振實驗。用 0.1 Μ N-羥基丁二醯亞胺（NHS)與0.4 Μ 1-乙基_3_(3_二甲基胺基丙基）碳化二醯亞胺鹽酸鹽（EDC)之1:1 (ν/ν)混合物活化CM5晶片上之各流槽。使用標準胺偶聯化學使i〇乙酸鈉（pH值5.0)中30 pg/ml之Fey片段特異性親和力純化山羊抗人類IgG抗體固定至CM5晶片上之兩流槽上，目標含量為10,000共振單位（RU)。經注射1 Μ乙醇胺滅活殘餘 120060.doc -189 - 200808822 之反應性表面。接著在所有剩餘步驟中將電泳緩衝液轉換為 HBS-EP+0.1 mg/ml BSA。對於各經測試之scFv-Fc蛋白，在電泳緩衝液中將scFv_ Fc蛋白稀釋至200 ng/ml且將其以1〇 μ1/ιηίη3射經過測試流槽歷時2分鐘以捕捉最大抗體。所有使用之scFv_Fe蛋白均具有得自IgGiiFc。對照流槽表面上未捕蛋白。接著使人類或獼猴EpoR以24·7-6000 nM範圍内之濃度以及缓衝液（空白組）流經兩流槽。使用5〇 μ1/ηιίη之流動速率及i 鲁77鐘之結合期隨後5分鐘（對於cyno EpoR)或10分鐘（對於hu Ep〇R)之解離期。每次循環後，經注射10 mM甘胺酸pH值 1·5 30秒鐘使表面恢復。接著在測試流槽上捕捉新鮮之 scFv-Fc蛋白以備用於下一循環。藉由減去對照表面反應以移除總折射率變化而雙重引用貝料，且接著減去平均緩衝液空白反應以移除來自實驗流糸為假以。處理Ep〇R資料且以Biacore T100評估軟體籲 v 1.1 (Blac〇re AB，Uppsala，使其總體擬合具有質畺傳遞之1 · 1相互作用模型及局部尺脱父。純系川與人類 Ρ 、、、屯系34與cyno EP〇R及純系3 1 8與cyno EpoR之間所、J得之相互作用的解離速率過快而無法精確量測，因此使貧料替代擬合穩態模型。穩態模型僅產生親和力測定而益動力學值。速率及親和力常數總結於表3中。所計算之hu Ep〇R與 SCFv-Fc蛋白之親和力在純系#10之1 · 1爾（先前表2中所示之資料）至純系#2〇1之4030 nM變化。對於Cyn〇邱成而 120060.doc 200808822 言，範圍為純系#10之6.83 nM至純系#201之18,600 nM。純系#10具有最慢之koff，而純系#201具有最慢之kon。大體而言，對於人類及獼猴EpoR所計算之親和力十分相似，其中僅兩種scFv-Fc蛋白（純系#34及#307)顯示出兩物種間大於10倍之差異。表3 :對scFv-Fc蛋白之人類及獼摇EpoR結合動力學之總表

ScFv-Fc蛋白純系所用EpoR kon(105,1/Ms) koff(l(T4,1/s) KD(nM) #5 人類未1 ί複，參見先前資料獼猴 4.37 611 140 #10 人類未1 t複，參見先前資料獼猴 1.56 10.7 6.83 #13 人類 0.55 568 1,040 獼猴 0.65 597 920 #15 人類 0.61 1?190 1，950 獼猴 0.37 1,150 3,130 #16 人類 0.65 1?420 2?190 獼猴 0.65 2?830 4,360 #29 人類 1.29 629 487 獼猴 1.90 504 265 #30 人類擬合穩態模型 35690 獼猴 2.11 4,850 2?31〇 #34 人類 5.36 2,030 378 獼猴擬合穩態模型 5?810 #201 人類 0.046 187 4,030 獼猴 0.027 508 18,600 #295 人類 0.18 29.6 163 獼猴 0.41 221 539 #307 人類 22.8 23460 108 獼猴 2.99 3?610 1,210. #318 人類 6.59 5,580 847 獼猴擬合穩態模型 4890 #319 人類 1.58 335 212 獼猴 2.13 258 121 #330 人類 8.22 373 45.4 獼猴 1.08 965 890 實例19-活體外針對人類紅血球生成素受體之活化篩選 120060.doc -191- 200808822 scFv_Fe 蛋白針對huEpoR之活化篩選scFv-Fc蛋白。在經含有鸯光素酶報導基因前之9個STAT5結合位點之構築體轉染之UT-7 細胞（人類巨核母細胞）(UT-7-LUC細胞）中藉由基於螢光素酶之報導檢定（螢光素酶檢定）進行scFv-Fc蛋白之活體外篩選。所有使用之scFv-Fc蛋白均具有得自IgGi之Fc。若無另外提示，則在37°C下於5% C02/95%大氣下之濕潤培育箱中維持所有細胞且進行所有細胞檢定。在使用前將所有胎牛 • 血清（FBS)在55°C下加熱滅活45分鐘。所有甩於細胞處理之杜貝卡氏磷酸鹽緩衝生理食鹽水（PBS)均無氯化鈣及氯化鎮0 將UT-7-LUC細胞（Amgen，Inc·; Thousand Oaks，CA) 維持於包含含有 10% FBS (HyClone; Logan，UT)、500 pg/mL潮黴素（Roche; Penzberg，Germany)、100 U/mL 青黴素、100 pg/mL 鏈黴素、292 gg/mL L-麩醯胺酸（IX PSG; Invitrogen)及0.5 U/mL重組人類紅金球生成素（紅血球生長素 a，rHuEpo; Amgen，Inc·)之 IMDM (Invitrogen; Carlsbad， ® CA)之生長培養基中。將細胞在檢定培養基（含有1% FBS、IX PSG 及 12.5 mM HEPES 之 RPMI 培養基 (Invitrogen))中洗滌兩次且以每毫升400,000個細胞再懸浮於檢定培養基中。在隔夜培育後，測定細胞數目及生存力，且將細胞以每毫升200,000個細胞再懸浮於檢定培養基中。在96孔不透明培養盤（Corning; Corning，NY)中連續稀釋各scFv-Fc蛋白。各實驗中之濃度範圍、稀釋倍數、稀釋 I20060.doc -192- 200808822 數及重複數不同，且其顯示於表4中。作為對照標準，在每塊96孔培養盤之7個孔中連續稀釋重組人類EPO，重複兩次，最終濃度為0.82 nM至5.25E-05 nM。將大約10,000 個細胞添加至各孔中。接著培養細胞1 8至24小時，且根據 Steady_Glo螢光素酶檢定（Promega Corporation)之廠商說明進行檢定。在96孔培養盤照度計讀取螢光素酶活性。使用 GraphPad Prism®軟體繪製資料以產生結合曲線及EC5G值。資料以平均EC5G±標準偏差之形式呈現於表5中。 • 表4 : IJT-7-螢光素酶檢定中所用之Mxb濃度之總表

最大抗體濃度範圍稀釋倍數重複數檢定數最兩濃度最低濃度 (nM) (nM) Mxb#2 2,500 0.032 5 1 1 Mxb#5 5,000 6.86 3 1 1 91 5,000 0.028 3 3 1 " 2,500 0.16 5 1 1 " 2,500 0.16 5 3 1 ff 2,500 0.16 5 2 1 Η 2,500 0.032 5 1 1 Μ 2,500 1.143 3 1 1 I! 1,000 0.457 3 2 1 Mxb#7 2,500 0.032 5 1 1 Mxb#10 5,000 6.859 3 1 1 II 5,000 0.0282 3 3 1 ff 2,500 0.032 5 1 1 Mxb#13 5,000 6.859 3 1 1 Mxb#15 5,000 6.859 3 1 1 Mxb#29 5?000 6.859 3 1 1 Mxb#30 2,500 1.143 3 1 1 Mxb#34 5,000 6.859 3 1 1 If 25 0.034 3 3 1 Mxb#201 5,000 6.859 3 1 1 Mxb#276 5,000 0.028 3 3 1 II 5,000 6.859 3 2 1 ir 2,500 0.032 5 1 1 tt 2,500 1.143 3 1 1 120060.doc -193- 200808822

最大抗體濃度範圍稀釋倍數重複數檢定數最兩濃度最低濃度 (nM) (nM) Mxb#295 5,000 6.859 3 1 1 Mxb#307 5,000 6.859 3 1 1 Mxb#318 25 0.034 3 3 1 Mxb#319 5,000 6.859 3 1 1 Mxb#323 5,000 6.859 3 2 1 If 2,500 0.032 5 1 1 II 2,500 1.143 3 1 1 Mxb#330 25 0.034 3 3 1 Mxb#352 5,000 0.028 3 3 1 ft 5,000 6.859 3 2 1 tr 2,500 0.032 5 1 1 ir 2?500 1.143 3 1 1 Mxb#378 2,500 0.032 5 1 1 II 2,500 1.143 3 1 1 表5 活體外活性(UT-7螢光素酶檢定）純系平均 EC50(nM) 標準偏差 #2 0.6035 N/A #5 0.7911 0.4156 #7 0.4683 N/A #10 0.2955 0.2416 #13 4.0250 N/A #15 2.8025 N/A #16 N/A N/A #29 1.5215 N/A #30 0.6705 N/A #34 0.1095 0.0916 #201 8.2755 N/A #276 0.3215 0.4016 #295 0.6065 N/A #307 0.3810 N/A #318 0.0154 N/A #319 5.8655 N/A #323 0.6133 0.5003 #330 0.0075 N/A #352 2.1560 1.2868 #378 0.0550 0.0210 120060.doc -194 - 200808822 表 5 顯示對於 Mxb 2、Mxb 5、Mxb 7、Mxb 10、Mxb 13、Mxb 1 5、Mxb 16、Mxb 29、Mxb 30、Mxb 34、Mxb 201、Mxb 276、Mxb 295、Mxb 307、Mxb 318、Mxb 319、Mxb 323、Mxb 330、Mxb 352及 Mxb 378之huEpoR活化及EpoR活性水平之EC50值。結果以使用GraphPad Prism 軟體（無任何背景相減）計算之平均EC5G值土標準偏差來表示。當僅進行一次實驗時，標準偏差表示為N/A。

實例 20-Mxb 276、Mxb 323、Mxb 352及 Mxb 378之活體内實驗測試小鼠體内單次注射scFv-FciSMxb 276、Mxb 323、乂父5 3 52或]^^5 378之作用。測試具有1§01&或1§02化之scFv-Fc蛋白。具有IgGifc之scFv-Fc蛋白縮寫為Mxb X—G1MB或X—G1MB，其中"X"為純系數目。具有IgG2fc之 scFv-Fc蛋白縮寫為Mxb X—G2MB或X一G2MB，其中"X”為純系數目。在此實驗中使用PEG-NESP作為陽性對照。使用載劑（10 mM磷酸鉀，161 mM L-精胺酸，pH值7·5)作為陰性對照。給2個月大之雌性BDF-1小鼠皮下注射最終體積為200 μΐ 之載劑（含〇·1% BSA 之 PBS)、3 pg/kg PEG-NESP (Amgen， Inc.)或100 pg scFv-Fc蛋白。在每隻小鼠100 pg之單一單次快速劑量下測試以下scFv-Fc蛋白：Mxb 276_G1MB、Mxb 323 G1MB 、Mxb 352 G1MB 、Mxb 378 G1MB 、Mxb 276 G2MB、Mxb 323 G2MB、Mxb 352 G2MB 及 Mxb 378_G2MB。在多個時間點自後眼眶竇收集血液且使用 120060.doc -195- 200808822 ADVIA血液分析儀評估CBC(全血言十數）參數。對於第一實驗而言，在第2、3、5、9、11、15、20、22、27、29、36 及38天收集載劑及276_Mxb組之血液。對於經PEG-NESP 處理之小鼠組，在第2、3、5、9、11、15、20及22天收集血液。對於所有其他組，在第2、3、5、9、11及16天收集血液。在第二實驗中，所有組均於第2、3、5、9、11及16 天收集血液。如圖24及25中所示，並非對所有小鼠均監測完整38天。當CBC參數返回基線值時可停止收集。在各時 ® 間點對5隻小鼠收集血液。資料呈現於圖24及25中。如由每隻小鼠1 〇〇 pg之劑量下血色素及網狀紅金球數增加所觀察’ Mxb 276_G1MB具有紅血球生成刺激作用。在此劑量下對此實驗中所測試之任何其他Mxb均未觀察到顯著作用。PEG-NESP充當陽性對照且以預測方式執行。 Mxb 276_G1MB之活性概況不同於PEG-NESP ;在注射 PEG-NESP或Mxb 276—G1MB後第5天均達成網狀紅血球峰值，但在接受一定劑量Mxb 276—G1MB之小鼠體内網狀紅 ® 血球反應之持續時間顯著增加。第9天經PEG-NESP處理小鼠之網狀紅血球數返回基線，但經過19至20天經Mxb 276_G1 MB處理小鼠之網狀紅血球才返回基線。在注射此劑量之Mxb 276_G1MB之小鼠體内，血色素含量保持在基線以上持續22至29天。相比而言，經PEG-NESP處理小鼠之血色素含量在第15天即返回基線，因此經Mxb 276—G1MB處理之小鼠與經PEG-NESP處理之小鼠相比在血色素反應之持續時間及量值方面存在極顯著之差異。此實 120060.doc -196- 200808822 驗表明單次注射Mxb 276_G1MB使血色素含量增加保持在基線以上持續一段相當長的時間，此時間接近於小鼠體内紅血球之總壽命（大約40天）。由於投與紅血球生成劑後血色素之下降速率與紅血球之壽命（人類為大約12〇天）有關，因此向人類單次投與Mxb 276—G1MB可能足以醫治貧血症持續2-3個月之時間。實例21-Mxb人類點突變Fc及Mxb獼猴點突變Fc之產生使Mxb 5、Mxb 10及Mxb 30(具有人類Fc)及Mxb 5(具有 • 獼猴Fc)在蛋白質Fc部分之天冬醯胺酸297處突變。突變天冬醯胺酸位於相當於人類IgG CH2結構域之天冬醯胺酸297 之位置處。在所有突變體（N297S)中使用Stratagene、 QuikChange II定點突變誘發套組以絲胺酸殘基置換297位置處之天冬醯胺酸。對於人類Fc突變誘發而言，在反應中使用引子4606-78 (CGG GAG GAG CAG TAC AGC AGC ACG TAC CGT GTG)及 4606-79 (CAC ACG GTA CGT GCT GCT GTA CTG CTC CTC CCG)。對於密爾猴Fc突變誘發而 ® 言，使用引子 4606-76 (GGG AGA GGC AGT TCA GCA GCA CGT ACC GCG)及 4606-77 (CGC GGT ACG TGC TGC TGA ACT GCC TCT CCC)。根據廠商說明進行突變誘發。模板DNA顯示於圖28中。使天冬醯胺酸297突變係用以抑制Mxb與活體内存在之效應細胞上之Fey受體III ("FcgRIII")結合。目標係將表現 FcgRIII之免疫效應細胞對骨髓中造血祖細胞之任何殺傷降至最低。此受體接合於效應細胞中觸發ADCC(抗體依賴性 -197- 120060.doc 200808822 細胞介導之細胞毒性）。例如參見Radaev等人，J"

Chem, 2001 年5 月 11 日；276(19):16478-83lKdAditv專 k，J Biol Chem· 2001 年5月 11 日；276(19):16469-77。在突變誘發後，揀出集落且經由序列分析確認正確的 DNA序列。使用Qiagen緊致製備套組根據廠商說明製備純系]^^6#5-huFc_N297S (21457)、Mxb#10_huFc-N297S (21480)、 Mxb#30-huFc-N297S (21481)及 cyno-Fc N297S (21456)之籲 DNA大量提取物。經由聚合酶鏈式反應（PCR)將5f Hind III 位點及3’ Bam HI位點添加至各純系。使用上述最大提取物作為PCR反應之模板DNA。對於 Mxb#5-huFc-N297S 、 Mxb# 10-huFc-N297S 及 Mxb#30-huFc-N297S在 PCR 中使用弓I 子 4611-63 (GAC TGC AAG CTT GAC ACC ATG GGG TCA ACC GCC)及 4611-64 (GCA TAC GGA TCC TCA TTT ACC CGG AGA CAG)(圖 27)。對於Mxb 5(具有獼猴Fc)，在PCR反應中使用引子‘όΙΙ-όΒ 及 4606-84 (CAT GGG GGT GTG AAC TCT GCG GCC GCT AGG ACG G)擴增純系 5 scFve及添加 51 Hind III 位點。在PCR反應中使用引子4606-83 (CCG TCC TAG CGG CCG CAG AGT TCA CAC CCC CAT G)及 4611-65 (GCA TCA GGA TCC TCA TTT ACC CGG AGA CAC)擴增 cyno-Fc N297S及添加3* Bam HI位點。接著使用純系5 scFv擴增產物及cyno-Fc N297S擴增產物作為藉由重疊延伸nSOE-ing" 120060.doc -198- 200808822 PCR反應進行基因剪接之模板（圖27)。在反應中使用引子 4611-63及4611-65 。所有PCR反應均於MJ Research Peltier熱循環器（PTC， Waltham，MA)中使用高保真擴增PCR系統（Roche， Indianapolis，IN，目錄第 11732650001 號）執行。PRC反應及條件顯示於圖27中。在PCR擴增後，使用Qiagen’s Qiaquik凝膠提取套組遵循廠商說明來管柱純化所有擴增產物。接著用Hind III剪切 ® 擴增產物90分鐘。使用Qiagen Qiaquik凝膠提取套組根據廠商說明管柱純化擴增產物。接著用Bam HI剪切擴增產物 90分鐘。使用Qiagen Qiaquik凝膠提取套組根據廠商說明來凝膠純化剪切產物且接著使用New England Biolab’s T4 連接酶將其接合至pTT5 BamHI/Hindlll隔夜。第二天管柱純化接合產物且經由電穿孔將其轉化至 DH10B細胞中。接著揀出用於定序之集落且進行定序。4 種scFv-Fc蛋白之序列呈現於圖29中。 ® 實例22-獼猴體内Mxb 5、Mxb 10及Mxb 30之劑量遞增研究將實例21中所述之4種scFv-Fc蛋白之各者靜脈内投與獼猴，且量測靜脈投藥後之藥效學（血液學作用）及藥物動力學（PK)作用。如實例21中所提示，所測試scFv-Fc蛋白之Fc 區不具有結合FcgRIII之能力。scFv-Fc蛋白中所用之人類點突變Fc為缺少FcgRIII結合所需糖基化位點之人類突變Fc。scFv-Fc蛋白中所用之獼猴點突變卩〇為亦缺少 FcgRIII結合所需糖基化位點之獼猴IgG」點突變Fc。所測試 120060.doc -199- 200808822 之scFv-Fc蛋白為Mxb 5人類點突變Fc(非糖基化fc)、Mxb 5 獼猴點突變Fc(非糖基化Fc)、Mxb 10人類點突變fc(非糖基化Fc)及Mxb 30人類點突變Fc(非糖基化Fc)。在研究中使用總計18隻重量在2與4 kg之間的雌性獼猴。將猴子分為以下6個實驗組： 1.媒劑對照組（1〇111]^1鱗酸鉀，161111]^11^精胺酸，@11值7.5) 2·陽性對照組（peg_NESP) 3.Mxb#5人類點突變Fc 4·Mxb#10人類點突變Fc 5. Mxb#30人類點突變fc 6. Mxb#5獼猴點突變Fc 研究持續31天且藉由IV注射將SCFV-Fc蛋白或對照樣品投與各動物兩次。在研究的第1天及第15天進行白、媒劑對照物及陽性對照物（peg_NESP)之投藥。在第i 天弟一次投藥時各scFv_Fc蛋白以1 〇 mM麟酸卸，161 mM L-精胺酸（pH值7.5)中〇·5 mg/kg之劑量注射且在第15天第二次投藥時以10 mM磷酸鉀，161 mML-精胺酸（PH值7.5) 中5 mg/kg之劑量注射。兩次注射Peg-Nesp之劑量均為〇〇3 mg/kg。兩次注射媒劑對照物（1〇 mM磷酸鉀，“I mM L-精胺酸，pH值7·5)之劑量均為i ml/kg。在靜脈内投藥後，在給藥前兩天，第一天給藥前及投與第一劑量後 120、192、288、360、456、528、624 及 696 小時自各動物收集血液（大約1 mL)用於PK及血液學分析。資料之初步分析顯示出Mxb 5、Mxb 10及Mxb 3 0之間的 120060.doc -200- 200808822 差異。參見圖26A及26B。兩種Mxb 5變異體在以5 mg/kg 給藥時誘導網狀紅血球及血色素含量下降，但Mxb 3 〇及 Mxb 10未誘導網狀紅血球或血色球之任何下降。此外，在投與第一劑量後第5天，與給藥前基線網狀紅血球含量相比，投與Mxb 10之猴子的網狀紅血球含量之增加具有統計學顯著性（ρ=〇·〇29，F-檢驗）。實例23-EP〇R之抗EpoR SCFv-Fc蛋白丙胺酸掃描之抗原決定基定位已測疋與配位體錯合之EpoR之細胞外配位體結合域之晶體結構（Syed等人，395, 511_6 (1998))。使用此資訊產生一組突變體，可用其定位抗體結合所涉及之個別表面殘基。針對EpoR執行丙胺酸掃描策略。用於選擇突變殘基之方法涉及計算機制及相互作用結構分析。將所有殘基標為紅色。接著，計算二聚體中所有殘基之溶劑暴露。將表面積>60 A2或溶劑暴露率250%之殘基標為綠色。接著，將具有正Φ角之甘胺酸標為紫紅色，同時將^…及

Pro9i^為备、紅色’因為其封端N端螺旋。接著選擇填充表面間隙之殘基（標為藍色）。接著藉由觀察結構找出指向表面但排除在溶劑暴露計算之外的殘基來選擇其他殘基。將此等殘基標為青色。為將突變數降至95，將脯胺酸，即特定為殘基23、50及203標為紫紅色。接著根據溶劑暴露及溶劑暴露率分選青色殘基。保留各量測中之前6個而將其餘標為紫紅色。使非丙胺酸殘基突變為丙胺酸且使丙胺酸突變為絲胺酸。 120060.doc -201- 200808822 抗體與抗原之結合覆蓋抗體結合區域中之抗原表面積。抗原殘基之此覆蓋片包括直接涉及抗體結合與處於抗體結合區域中但不直接有助於結合之兩種殘基。抗原殘基之覆蓋片疋義抗原上之結構抗原決定基。藉由丙胺酸掃描未見直接涉及結合抗體之此覆蓋片内之殘基可能經由其他相互作用有助於總抗體結合。丙胺酸掃描係一種測試突變殘基是否為功能抗原決定基口p刀之方法。功能抗原決定基描述抗原中直接涉及抗體結合之彼等殘基。使用單位點丙胺酸突變體判定抗原中具有直接涉及抗體結合之側鏈的彼等殘基；丙胺酸具有小於除甘胺酸外所有其他殘基之側鏈，且因此可引起側鏈結合位點喪失且影響抗體結合。不同類型之抗原決定基定位係結構抗原決定基，或抗原中接觸抗體或由抗體掩蓋之彼等殘基。將精胺酸突變引入抗原係一種測試殘基是否為結構抗原決定基部分之方法。精胺酸側鏈大型且龐大，從而有效阻斷抗體結合，無論野生型殘基是否直接涉及抗體結合。因此，使用單位點精胺酸突變體判定抗原中處於覆蓋片中之彼等殘基。若突變為精胺酸之抗原殘基調整抗體之結合，則表明此殘基為結構抗原決定基部分。若抗原野生型殘基為精胺酸，則使其突變為麵醯胺酸。丙胺酸突變體之構築、表現及表徵根據標準技術產生9 5種個別丙胺酸或絲胺酸突變體。以 9 6孔模式合成含有突變殘基之正義及反義寡核苷酸。使用 120060.doc 200808822

Quickchange II套組（Stratagene)根據廠商說明進行野生型 (WT) huEpoR之突變誘發。所有突變體均於pTT5載體中構築，且在 C端標記 6xHis-Avitag (Avidity，LLC，Denver， Colorado)。以96孔模式進行突變誘發反應及轉化。瞬時轉染2936-E懸浮細胞（NRCC)。藉由西方分析檢測改良性培養基中重組蛋白之表現含量及完整性。平均表現含量估算為約5 pg/mL ; 6種突變體未表現，而另外8種突變體表現不良。所有胺基酸殘基均根據其在人類Epo受體胞外域中之位置來鑑別。以下突變體因未表現或不良表現而不能進行抗原決定基定位：R32A、S54A、K65A、Q71A、W82A、 R108A、W209A 及 W212A。最後，突變殘基 F208A 及 P86A 影響所有scFv-Fc蛋白之結合，且可能係不正確折疊。因此，即使其減弱抗體結合，仍不應視為抗原決定基部分。若可能，則檢測突變體結合Epo之能力以確認其正確折疊。檢定方法 1. ELISA結合檢定使用ELIS A結合檢定量測抗EpoR抗體與含有所關注突變蛋白之改良性上清液之結合。將100 μΐ lxPBSt i叩/mL之純化scFv-Fc蛋白塗佈於N職c Maxisorp培養盤上且在4度下培育隔夜。所有使用之scFv-Fc蛋白均具有得自IgGi2Fc。在室溫下用2% BSA/PBS/0.1% Tween 20將孔阻斷1小時後，將培養盤用PBS/0.1 % Tween 20洗膝3次。基於相對 120060.doc -203 - 200808822 WT蛋白之凝膠密度測定法標準化EpoR突變蛋白之濃度。在0.1% BSA/PBS/0.1% Tween 20中將EpoR突變蛋白連續稀釋3倍，培養基亦含有恆定1:5000倍稀釋度之抗-6xHis mAb-HRP (R&DSystems)。在室溫下捕捉EpoR突變體/抗-6xHis mAb-HRP混合物歷時兩小時。使用ΤΜΒ (3,3·，5,5’_ 四甲基聯苯胺）作為底物且在平板讀取器上量測450 nm下之吸收。使用GraphPad Prism®軟體藉由非線性回歸分析（S 型劑量反應，可變斜率）來分析結合資料以產生EC5G值。 • 表明消除結合或使結合相對於野生型降低50%之突變為抗原決定基部分。代表性資料顯示於圖30中。 2. EpoR LANCE結合檢定亦使用均相LANCE FRET(螢光共振能量轉移）檢定使用 Eu-螯合劑結合之抗IgG mAb及APC結合之抗-pHis mAb檢定EpoR-Ab之結合。基於相對野生型蛋白之凝膠密度測定法標準化EpoR突變體之濃度。將突變EpoR蛋白在純化抗-EpoR scFv-Fc蛋白（1·5 nM)、0.75 nM Eu螯合劑標記之抗-鲁 IgG mAb (Perkin Elmer)與 35 nM APC·抗-His mAb Ab (Perkin Elmer)之混合物中連續稀釋2倍。將樣品在室溫下培育2小時，隨後在螢光平板讀取器中在535 nm下激發且在65 5 nm下彳貞測。表現為抗原決定基部分之EpoR突變體減弱或消除FRET信號。使用GraphPad Prism®軟體繪製結合資料以產生結合曲線及EC5〇值。表明消除結合或使結合相對於野生型降低50%之突變為抗原決定基部分。代表性資料顯示於圖3 1中。 120060.doc -204- 200808822 精胺酸掃描如上文所提示，所有胺基酸殘基均根據其在人類Ep〇受體胞外域中之位置來鑑別、。亦藉由與丙胺酸突變體相同之方法製造以下突變體：E34R、E60R、P63R、W64R、 T87R、A88R、R99E、A103R、V112R、M150R、H153R及 A166R。預期與丙胺酸突變體相比精胺酸突變體引入更大的結構混亂，由此確認吾人對此等殘基之分配（圖32)。定位8種候選促效性scFv-Fc蛋白Mxb #2、#5、#7、 # #10、#13、#15、#29及 #30。根據 LANCE及 ELISA檢定使結合相對於WT減弱>50%或消除結合之丙胺酸突變之總表顯示於表6中。表6亦為根據ELISA檢定使結合相對於WT減弱>50%或消除結合之精胺酸突變之總表。該表並不將表中未列出之其他殘基排除在抗原決定基部分之外；彼等殘基可能未經突變，或檢定可能不具有足夠敏感性以識別其為抗原決定基部分。表6· 8種抗EpoR促效性scFv-Fc蛋白之人類EpoR抗原決 • 定基中之受影響部分之殘基的總表 scFv-Fc 蛋白 EpoR胞外域中改變為丙胺酸之殘基 EpoR胞外域中改變為精胺酸之殘基 Mxb#2 F93，H114 E34, E60 Mxb #5 S91，F93，H114 E60 Mxb #7 F93 E60 Mxb #10 E62，F93，M150 A88，M150 Mxb #13 V48，E62，L66，R68，H70 Mxb #15 V485 W64? L66? R68? H70 T87 Mxb #29 A44, V48, P63, L66, R68, H70 P63, W64, R99 Mxb #30 L66, R99 R99 120060.doc -205 - 200808822 此等抗體之抗原決定基可分為兩種不同之類別。第一種類別為Epo競爭性scFv-Fc蛋白（Mxb 2、Mxb 5、Mxb 7及

Mxb 10)。第二種類別為不與Ep〇競爭之彼等scFv-Fc蛋白 (Mxb 30、Mxb 13、Mxb 15 及 Mxb 29)。彼等資料與非 Ep〇競爭性scFv-Fc蛋白藉由結合二聚體之配位體結合袋遠側之區域來激動EpoR受體之假設相一致。實例24-scFv-Fe蛋白可變重鏈及可變輕鏈CDR區序列比對及系統發生分析

為測定scFv-Fc蛋白CDR間之差異性，使用cdr之電子剪接。首先鑑別CDR區。接著自序列中移除構架區且使用小肽序列作為CDR之間之連接子。使用電子剪接序列之多重比對產生糸統發生樹狀圖。將該方法同時用於可變重鏈及可變輕鏈序列。使用MiniPileup程式（CGC軟體）產生多重比對及系統發生樹狀圖（圖33及34)。在系統發生鄰位連接分析中總結結果（圖34)。純系307、純系2、純系3 1 8、純系 378、純系330、純系276、純系352、純系7、純系5與純系 323之可變重鏈CDr區中具有相對較高程度之一致性。此等純系之間，可變輕鏈胺基酸序列之差異性主要可見於 CDR3區中。純系16、純系201、純系15、純系13、純系 1〇、純系295、純系29、純系34、純系319及純系3〇之可變重鏈及可變輕鏈CDR中均顯示出較高程度之序列差異。【圖式簡單說明】圖1顯示根據實例1中論述之操作自人類scFv嗟菌體呈現庫篩選EpoR促效抗體之步驟的流程圖。 120060.doc •206- 200808822 圖2顯示描述根據實例2論述之操作使噬菌體scFv純系自噬菌體呈現庫流線型轉化為哺乳動物表現構築體 (pDC409a_huGlFc)中之 scFv-Fc开》式之示意圖。Ncol與 Pcil 產生用於接合之黏性末端。scFv Ncol/Notl限制片段逐批轉化為Pcil/Notl限制性PDC409a-huGlFc載體之過程係高效的。圖3顯示根據實例3論述之操作對結合細胞之抗體的 FACS分析。用於染色之抗體及Epo濃度為5 pg/ml。圖A顯 _ 示染色期間在存在（實線）及不存在（虛線）人類Epo之情況下經scFv-Fc形式之純系2、純系5、純系7、純系10或純系3〇結合後UT-7細胞之螢光強度。抗體及Ep〇i所用濃度均為$ pg/ml。陰影曲線係來自僅使用藻紅素結合之山羊抗人類 F(ab’）2而不用任何初級抗體之染色。圖b顯示經scFv-Fcb 式之純系2、純系5 '純系7、純系1〇或純系30結合後COS-1 細胞之螢光強度（實線）。陰影曲線係來自僅使用藻紅素結鲁合之山羊抗人類F(ab，）2而不用任何初級抗體之染色。圖4顯示根據實例5論述之操作藉由ELISA測試之純系號 2、5、7、1〇及30對可溶性huEp〇R之競爭結合。圖A顯示噬菌體純系5與ScFv-Fc形式之純系2、純系5、純系7、純系10或純系30之間的競爭結合。圖B顯示噬菌體純系3〇與 scFv-Fc形式之純系2、純系5、純系7、純系1〇及純系％之間的競爭結合。圖5顯示根據實例6論述之操作藉由eusa測試之純系 2、純系5、純系7、純系1〇或純系3〇抗體與小氣 120060.doc •207· 200808822 (muEpoR)蛋白之結合。陰影線條柱顯示scFv-Fc形式之結合。空心條柱顯示IgG2形式之結合。圖6顯示根據實例7論述之操作huEpoR蛋白與捕捉於CM4 晶片上之純系2、純系5、純系7、純系10及純系30 scFv-Fc 蛋白之BIAcore感測圖（sensogram)。圖7顯示根據實例8論述之操作最大抗體Mxb 2、Mxb 5、Mxb 7、Mxb 10及Mxb 3 0之huEpoR活化之劑量滴定曲線。將UT_7-Luc細胞（含有螢光素酶報導基因之UT_7細胞） Φ 在96孔培養盤中用經連續稀釋之最大抗體處理6小時，其中稀釋重複進行三次且Mxb 5、Mxb 10及Mxb 3 0之最終濃度為 1000、333、111、37.04、12.35、4·115、1.372、 0·457、0.152、0.051、0.017及 0.006 ηΜ且 Mxb 2及 Mxb 7 之最終濃度為 2500、1250、625、312.5、156.25、 78.125、39.0625、19.53125、9.765625、4.882813、 2.441406、1.220703、0.610352、0.305 1758、0.1525879、 0.76294 - 0.038147、0.019073、0.009537 > 0.004768、 • 0.002384、0.001192、0.000596、0.000298 ηΜ ° 使用重組人類Epo作為參考標準且在用於測試各最大抗體之相同培養盤中連續稀釋。各Epo稀釋重複進行三次，Mxb 2、Mxb 5、Mxb 10 及 Mxb 30 之濃度如下：100、10、1、0·1、0.01 及0.001 ηΜ 且 Mxb 7之濃度如下：1488、744、372、186、 93、46·5、23·2、11·6、5·8、2·9、1.5、0.71、0.36、 0.18、0.09、0.045、0.023、0.011、0.006、0.003、 0.0015、0.0007、0.0004、0.0002 ηΜ。在添加螢光素酶底 120060.doc -208- 200808822 物後，在96孔培養盤光度計上讀出螢光素酶活性。藉由減去背景發光（僅含培養基之孔之值）對原始資料進行處理且以三個值之平均值±標準偏差來表示。圖8顯示根據實例9論述之操作對igG2蛋白（Ab)與scFv-Fc 蛋白（Mxb)誘導huEpoR之最大活性值之比較。各測試試劑之最大螢光素酶活性為自各scFv-Fc蛋白IgG2蛋白之劑量滴定曲線所取之最大值除以自各個別培養盤上rHuEp〇之劑量滴定曲線所取之rHuEpo標準之最大螢光素酶活性。此比率 • 闡述於上文且為三個值之平均值士標準偏差。圖9顯示根據實例10論述之操作由信號分子Stat5&Akt之磷酸化作用所指示之rHuEpo、Mxb 2及IgG2 2對UT-7細胞之活化。圖10顯示根據實例11論述之操作scFv_Fc蛋白Mxb 2、 Mxb 5、Mxb 7及Mxb 30活化CD34+人類周邊血液祖細胞 (CD34+PBPC)且刺激產生BFU-E衍生之集落。圖11顯示根據實例12 A論述之操作單次注射Mxb 5產生網狀紅血球數增加，此增加為劑量依賴性方式且所持續之時間顯著長於以PEG-NESP處理之動物。圖12顯示根據實例12A論述之操作單次注射^^^ $產生血色素含量增加，此增加為劑量依賴性方式且所持續之時間顯著長於以PEG-NESP處理之動物。圖13顯示根據實例12B論述之操作單次注射7產生網狀紅血球數增加，此增加為劑量依賴性方式且所持續之時間顯著長於以PEG-NESP處理之動物。、 120060.doc •209- 200808822 圖14顯不根據實例ΠΒ論述之操作單次注射Mxb 7產生血色素含量增加，此增加為劑量依賴性方式且所持續之時間顯著長於以PEG-NESP處理之動物。圖15顯示根據實例12C論述之操作單次注射ι〇產生網狀紅血球數增加，此增加為劑量依賴性方式且所持續之時間顯著長於以PEG-NESP處理之動物。圖16顯示根據實例12C論述之操作單次注射Mxb 1〇產生血色素含量增加，此增加為劑量依賴性方式且所持續之時 _ 間顯著長於以PEG-NESP處理之動物。圖17顯示根據實例12D論述之操作單次注射2產生網狀紅血球數增加，此增加持續之時間類似於對以pEG_ NESP處理之動物所量測之時間。圖18顯示根據實例12D論述之操作單次注射Mxb 2產生血色素含量增加，此增加持續之時間顯著長於以pEG_ NESP處理之動物。鲁圖19顯示根據實例I3論述之操作Mxb 5 (，，#5 Scfv-Fc”）及

IgG〗5 ("#5 IgG〗"）之金清濃度隨時間之變化。圖20顯示根據實例13論述之操作IgGi 5及Mxb 5在小鼠體内之藥物動力學參數。圖 21 顯示 Mxb 2、Mxb 5、Mxb 7、Mxb 10及 Mxb 30之 CDR 〇圖22顯示根據實例15論述之操作對某些結合細胞之 scFv-Fc蛋白的FACS分析。用於染色之抗體及Ep〇濃度為5 pg/ml。陰影曲線係來自僅使用藻紅素結合之山羊抗人類 120060.doc -210- 200808822 F(ab’)2而不用任何初級抗體之染色。圖a :染色期間在存在（實線）及不存在（虛線）人類Epo之情況下經Mxb 13、Mxb 15、Mxb 16、Mxb 29或Mxb 34結合後UT-7細胞之螢光強度。圖 B :經 Mxb 13、Mxb 15、Mxb 16、Mxb 29 或 Mxb 34 結合後COS-1細胞之螢光強度（實線）。圖23顯示根據實例15、16及17論述之操作scFv_Fc蛋白之EpoR結合及競爭結合。EpoR與人類（hu)、小鼠（mil)及獼猴（cyno)之結合藉由]ELISA及FACS測試。Epo與純系2、純系5、純系7、純系1〇、純系13、純系15、純系16、純系 29、純系30或純系34競爭結合EpoR之能力藉由FACS在UT-7細胞中測試。Epo與純系201、純系276、純系295、純系 307、純系318、純系319、純系323、純系330、純系352或純系378競爭結合EpoR之能力藉由競爭ELIS A測試。純系5 與純系2、純系5、純系7、純系10、純系13、純系15、純系16、純系29、純系30或純系34競爭結合EpoR之能力藉由盤基ELISA測試。純系30與純系2、純系5、純系7、純系 10、純系13、純系15、純系16、純系29、純系30或純系34 競爭結合EpoR之能力藉由盤基ELISA測試。圖24顯示根據實例20論述之操作單次注射Mxb 276_G1 MB產生持績一彳又日守間之網狀紅血球數增加。此增加所持續之時間顯著長於以PEG-NESP處理之動物。圖25顯示根據實例20論述之操作單次注射Mxb 276 G1 MB產生持續一段時間之血紅素增加。此血紅素增加所持續之時間顯著長於以PEG-NESP處理之動物。 120060.doc -211- 200808822 圖26A顯示根據實例22論述之操作在投與Mxb 5人類點突變Fc(非糖基化Fc)(圖中之，，huMxb#5，，）、Mxb 5獼猴點突變Fc(非糖基化Fc)(圖中之”Cyn〇Mxb#5，，）、Mxb 10人類點突變Fc(非糖基化Fc)(圖中之” huMxMlO，，）及Mxb 30人類點突變Fc(非糖基化Fc)(圖中之”huMxb#30”）或對照注射（圖中之 "Peg-NESP”及”媒劑”）後獼猴體内之絕對網狀紅血球數。每隻猴藉由IV注射給藥兩次，第1天進行第一次注射投藥且第15天進行第二次投藥。第i天第一次投藥時以0.5 mg/kg給予scFv_Fc蛋白且第15天第二次投藥時以5 mg/kg給予。兩次注射均以〇·〇3 mg/kg給予peg-Nesp。兩次注射均以1 ml/kg給予媒劑對照物（圖中之”媒劑”）（1〇瓜]^磷酸鉀， 161 mM L-精胺酸，pH 7·5)。圖26β顯示根據實例22論述之操作在投與 huMxb#5、cyn〇Mxb#5、huMxb#10 及 huMxb#30或對照注射後各組中以基線網狀紅血球數量之百分比作圖之網狀紅血球數。基線網狀紅血球數量係自對第一次投藥前第1天所收集之血液之分析獲得。每隻猴藉由1V注射給藥兩次，第1天進行第一次測試物品投藥且第 15天進行第二次投藥。第1天第一次投藥時以0.5 mg/kg給予scFv Fc蛋白且弟η天弟一次投藥時以5 mg/kg給予。兩次注射均以0·〇3 mg/kg給予Peg-Nesp。兩次注射均以1 ml/kg給予媒劑對照物。圖27顯不根據實例21論述之操作用以製造構築體於某些 PCR反應條件。圖28A、b、c及D顯示根據實例21論述之操作用作人類 120060.doc -212- 200808822 及獼猴Fc中N 297 S糖基化位點突變誘發之模板的胺基酸序列。發生N 297 S突變之胺基酸以紅色突出顯示。黃色部分為VH5前導序列，綠色為scFv且藍色為Fc區。圖 28A、28B及28C中之白色部分包括來自原scFv庫之G及來自引入限制位點以促進選殖之胺基酸。圖29A、B、C及D顯示根據實例21論述之操作經突變 scFv-Fc蛋白Mxb#5人類點突變Fc、Mxb# 10人類點突變 Fc、Mxb#30人類點突變Fc、Mxb#5獼猴點突變Fc之最終純 • 系及序列。以紅色突出之胺基酸顯示N 297 S突變。黃色部分為VH5前導序列，綠色為scFv且藍色為Fc區。白色部分包括來自原scFv庫之G及來自引入限制位點以促進選殖之胺基酸。圖30顯示根據實例23論述之操作對突變EpoR蛋白與Mxb 10之結合的ELISA結合檢定。E62A、F93A及M150A相對於WT減弱結合且表現出為Mxb 10結合抗原決定基之部分。

^ 圖31顯示根據實例23論述之操作對Mxb 10與突變EpoR 蛋白之結合的LANCE檢定。E62A、F93 A及Ml 50A相對於 WT減弱結合且表現出為Mxb 10結合抗原決定基之部分。圖32顯示根據實例23論述之操作Mxb 10與精胺酸及丙胺酸EpoR突變體之結合的比較。圖32A顯示精胺酸或丙胺酸之W64突變相對於WT不減弱結合。W64A表現出並非Mxb 10抗原決定基之部分。圖32B顯示丙胺酸之Ml50突變減弱 Mxb 10之結合。精胺酸之M150突變顯著減弱結合。 120060.doc -213- 200808822 圖33顯示根據實例24論述之彳呆作A)可變重鏈CDR區盘B) 可變輕鏈CDR區之序列比對。基於MiniPileup程式使用電子剪接之CDR區進行序列比對。比對為經編碼用以揭示極性（藍色）、非極性（紅色）、酸性（綠色）及鹼性（黃色）胺基酸之顏色。符號”"表示分離CDR1、CDR2及CDR3之連接區。圖34顯示根據實例24論述之操作A)可變重鏈CDR區與B) 可變輕鏈CDR區之系統發生分析。樹狀圖係基於CDR區胺 _ 基酸序列之鄰位連接分析。圖35顯示根據實例24論述之操作圖33之序列比對中可變重鏈及可變輕鏈之CDR中的一致序列。符號"X”表示一致序列中可改變之胺基酸。緊鄰”χ”之下標表示胺基酸在序列中之位置，例如"X〗”表示一致序列中之第一胺基酸。圖36A顯示Epo受體之全長胺基酸序列。圖36B顯示Ερο 受體胞外域之胺基酸序列。在實例23及圖30至32描述之抗 ^ 原決定基定位實驗中使用胞外域之胺基酸序列鑑別胺基酸。胞外域缺少全長Epo受體胺基酸序列中存在之最先24 個胺基酸。胞外域亦缺少全長Ep〇受體之胺基酸25 1至 580 〇 120060.doc -214- 200808822 序列表 <ii〇>美商安美基公司 <120〉紅血球生成素受體激動劑 <130> 06843.0115-00304 <140〉 096113045 <141〉2007-04-13 <150〉 60/792,174 <151〉 2006-04-14 <160> 271 <170> Patentln version 3,3 <210〉 1 <211> 118 <212> PRT <213〉人工序列 <220>

<223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 1

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 - 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

Ala Arg Val Sex Arg Gly Gly Ser Tyr Ser Asp Trp Gly Glu Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 2 <211> 109 <212> PRT <213〉人工麵〈220〉 <223>人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 2

Gin Ser Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gin I 5 10 15

Ser Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 120060-序列表.doc 200808822 20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Met lie Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu. Thr Val Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Arg 85 90 95

Asn Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Gin Leu Thr Val Leu 100 105

<210〉 3 <211> 118 <212> PRT <2i3>人工序列 <220〉 <223〉人工靜ij之說明：合成蛋白序列 <400> 3

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asri Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser Asp Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210〉 4 <211> 110 <212> PRT <213>人工序列 <220〉 <223>AX序列之說明：合成蛋白序列 <400> 4 120060-序列表.doc 200808822

Gin Ser Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Yal Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 10 15

Ser lie Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 20 25 30 lie Tyr Yal Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Met lie Tyr Asp Val Ser Arg Arg Pro Ser Gly lie Ser Asp Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr He Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Tyr Thr Thr Leu 85 90 95

Ser Thr Trp Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 110 <210> 5 <211> 118 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223〉人工序列之說明:合成蛋白序列 <400〉 5

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn He Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser Asp Trp Gly Lys Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser 115

<210〉 6 <211> 110 <212> PRT <213〉AX 序列 120060·序列表.doc 200808822 <22〇> <223〉人工靜ij之說明：合成蛋白序列 <400〉 6

Gin Ser Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 10 15

Ser He He lie Ser Cys Thr Gly Thr Arg Ser Asp lie Gly Gly Tyr 20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin His His Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu 35 40 45 lie lie Phe Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser His Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr He Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Phe Thr Asp Ser 85 90 95

Arg Thr Trp Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210〉 7 <211〉 124 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白靜[J <400> 7

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser 丁rp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Lys Asp Arg Val Ala Val Ala Gly Lys Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp 100 105 110

Ser Trp Gly Arg Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 -4- 120060-序列表.doc 200808822 <2io> 8 <211〉 110 <212> PRT <213〉人工顏 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 8

Gin Ser Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Glu Ala Pro Gly Gin 15 10 15

Arg Val Thr lie Ala Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn He Gly Asn Asn 20 25 30

Ala Val Ser Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Lys Ala Pro Thr Leu Leu 35 40 45

He Tyr Tyr Asp Asn Leu Leu Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala lie Ser Gly Leu Gin 65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 85 90 95

Asn Asp Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 110 <210〉 9 <211〉 119 <212〉 PRT <213〉AX 序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 9

Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gin 1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala lie Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30

Ser Ala Ala Trp Asn Trp lie Arg Gin Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala 50 55 60

Val Ser Val Lys Ser Arg Met Thr lie Lys Ala Asp Thr Ser Lys Asn 65 70 75 80

Gin Phe Ser Leu Gin Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val 85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Glu Gly Pro Leu Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110 120060-序列表.doc 200808822

Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 10 <211> 111 <2I2> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400〉 10

Gin Ala Val Leu Thr Gin Pro Ser Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15

Arg Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Leu Gly Thr Gly 20 25 30

Tyr Asp Val His Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Leu lie Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Asp Thr Ser Gly Leu Leu Ala lie Thr Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Ser Tyr Asp Phe Ser 85 90 95

Leu Ser Ala Met Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 110 <210〉 11 <211〉 5 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 11

Ser Tyr Trp Met Ser <210> 12 〈211〉 17 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 12

Asn He Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys 15 10 15

Gly 6- 120060-序列表.doc 200808822 <210〉 13 <211〉 9 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 13

Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser Asp <210> 14 <211> 14 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 14

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser 1 5 10 <210> 15 <211> 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明:合成肽 <400> 15

Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 16 <211〉 9 〈212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 16

Ser Ser Tyr Ala Gly Arg Asn Trp Val <210> 17 <211> 14 <212> PRT <213〉AX 序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 17

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr lie Tyr Val Ser 1 5 10 <210> 18 <211〉 7 <212> PRT 〈213〉人工序列 120060-序列表.doc 200808822 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 18

Asp Val Ser Arg Arg Pro Ser <210〉 19 <211〉 10 <212> PRT <213〉人工序列 <220> _ <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 19

Asn Ser Tyr Thr Thr Leu Ser Thr Trp Leu 1 5 10

<210〉 20 〈211〉 14 ▲ <212> PRT

• <213〉人工靜J <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 20

Thr Gly Thr Arg Ser Asp lie Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser I 5 10 <210> 21 <211〉 8 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明:合成肽 <400> 21

Phe Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser I 5

<210> 22 <211> 10 <212> PHT <213〉人工麵 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 22

Asn Ser Phe Thr Asp Ser Arg Thr Trp Leu 1 5 10 <210> 23 <211> 5 <212> PRT 〈213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 23 120060-序列表.doc 200808822

Ser Tyr Ala Met Ser <210〉 24 <211> 17 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 24

Ala lie Sex Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 15 10 15

Gly

<2I0> 25 <211> 15 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 25

Asp Arg Val Ala Val Ala Gly Lys Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp Ser 15 10 15 <210〉 26 <211〉 13 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 26

Ser Gly Ser Ser Ser Asn lie Gly Asn Asn Ala Val Ser 1 5 10 <210> 27 <211〉 8 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223〉人工序之說明：合成肽 <400〉 27

Tyr Asp Asn Leu Leu Pro Ser Gly <210〉 28 〈211〉 11 <212> PRT <213〉XX 序列 <220> <223〉人工序^之說明：合成肽 <400> 28

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Asp Trp Val -9- 120060-序列表.doc 200808822 1 5 10 <210> 29 <211> 7 <212> PRT <213〉人工· <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 29

Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn

<210〉 30 <211〉 17 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽

<400> 30

Arg 丁hr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala Val Ser Lys 1 5 10 15

Ser <210> 31 <211〉 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 31

Asp Glu Gly Pro Leu Asp Tyr <210> 32 <211> 14 <212> PRT <213〉人工賴 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 32

Thr Gly Ser Ser Ser Asn Leu Gly Thr Gly Tyr Asp Val His 1 5 10 <210> 33 <211> 7 <212> PRT 〈213〉人工序列 <220> 〈223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 33

Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser 10· 120060-序列表.doc 200808822 <210> 34 <211〉 11 <212〉 PR丁〈213>人工序列 <220〉<223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 34 Gin Ser Tyr Asp Phe Ser Leu Ser Ala Met Val <210> 35 <211> 354 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 35

gaggtccagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt agctattgga tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat 180 gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg 300 aggggtggga gctactcgga ctggggccaa ggcaccctgg tcaccgtctc gagt 354 <210〉 36 <211〉 327 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 36

cagtctgtgc tgactcagcc accctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60 tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120 cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaagcggcc ctcaggggtc 180 cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc 240 cagcctgagg atgaggctga ttattactgc agctcatatg caggcaggaa ctgggtgttc 300 ggcggaggga cccagctcac cgtttta 327 <2iO> 37 <211> 354 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉<223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 37 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt agctattgga tgagctgggt ccgccaggct 120 120060-序列表.doc • 11 - 200808822 ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat 180 gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc aagagtttcg 300 aggggtggga gctactcgga ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc gagt 354 <2I0> 38 <211〉 330 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 38

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60 tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggctatattt atgtctcctg gtaccaacaa 120 cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtcgtcggcc ctcagggatt 180 tctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240 caggctgagg acgaggctga ttattactgc aactcatata caaccctcag cacctggctc 300 ttcggcggag ggaccaaggt caccgtccta 330 <2I0> 39 <211> 354 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 39

gaggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt agctattgga tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat 180 gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg 300 aggggtggga gctactcgga ctggggcaaa ggaaccctgg tcaccgtctc gagt 354 <210> 40 <21l> 330 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 40 cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcatcatc 60 tcctgcactg gaacccgcag tgacattggt ggttacaact atgtctcctg gtaccaacac 120 cacccaggca gagcccccaa actcatcatt tttgatgtca ataatcggcc ctcaggagtc 180 tctcaccgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240 caggctgagg acgaggctga ttattactgc aattcattta cagacagccg gacttggctg 300 120060-序列表.doc -12 - 200808822 ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330 <210> 41 <211> 372 〈212〉 DNA <213〉人工序列 <220〉 <223>AX序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 41

gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgt aaaagatagg 300 gttgctgtag ctggtaaggg ttcgtattac tttgactctt gggggagggg gaccacggtc 360 accgtctcga gt 372 <210> 42 〈211〉 330 <212> DNA <213〉人工序列<220> <223〉人工序列之說明:合成聚核苷酸序列 <400> 42 cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcggtg tctgaagccc ccgggcagag ggtcaccatc 60 gcctgttctg gaagcagctc caacatcgga aataatgctg taagttggta ccagcaactc 120 ccaggaaagg ctcccacact cctcatctat tatgataatc tgctgccctc aggggtctct 180 gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240 tctgaggatg aggctgatta ttactgtgct gcatgggatg acagcctgaa tgattgggtg 300 ttcggcggtg ggaccaaggt caccgtccta 330

<211> 357 <212> DNA <213〉人工序列<220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 43 caggtgcagc tgcaggagtc gggtccagga ctggtgaagc cctcgcagac cctctcactc 60 acctgtgcca tctccgggga cagtgtctct agcaacagtg ctgcttggaa ctggatcagg 120 cagtccccat cgagaggcct tgagtggctg ggaaggacat actacaggtc caagtggtat 180 aatgattatg cagtatctgt gaaaagtcga atgaccataa aagcagacac atccaagaac 240 cagttctccc tgcaactgaa ctctgtgact cccgaagaca cggctgtgta ttactgtgca 300 agagatgagg gaccgcttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcggcc 357 120060-序列表.doc -13- 60 200808822 <210> 44 <211> 333 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 44 caggctgtgc tcactcagcc gtcctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc tcctgcactg ggagcagctc caacctcggg acaggttatg atgtacactg gtaccagcag cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca gcaatcggcc ctcaggggtc cctgaccgat tctcgggctc caagtctgac acctcaggtt tgctggccat cactgggctc caggctgagg atgaggctac ttattactgc cagtcctatg acttcagcct gagtgctatg gtattcggcg gagggaccaa ggtcaccgtc eta <210〉 45 <211> 479 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 45

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser Asp Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Ser Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Ala 130 135 140

Ser Gly Ser Pro Gly Gin Ser Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser 145 150 155 160

Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro 165 170 175 -14 - 120 180 240 300 333 120060-序列表.doc 200808822

Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met He Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser 180 185 190

Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser 195 200 205

Leu Thr Val Ser Gly Leu Gin Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 210 215 220

Ser Ser Tyr Ala Gly Arg Asn Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Gin Leu 225 230 235 240

Thr Val Leu Gly Ala Ala Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 245 250 255

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 260 265 270

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 275 280 285

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 290 295 300

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 305 310 315 320

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 325 330 335

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 340 345 350

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro He Glu Lys Thr lie 355 360 365

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 370 375 380

Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 385 390 395 400

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 405 410 415

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 420 425 430

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 435 440 445

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 450 455 460

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 15- 120060-序列表.doc 200808822 465 470 475 <210〉 46 <211> 480 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 46

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser Asp Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125

Gly Gly Giy Gly Ser Ala Gin Ser Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Val 130 135 140

Ser Gly Ser Pro Gly Gin Ser lie Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser 145 150 155 160

Ser Asp Val Gly Gly Tyr lie Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro 165 170 175

Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met lie Tyr Asp Val Ser Arg Arg Pro Ser 180 185 190

Gly lie Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser 195 200 205

Leu Thr lie Ser Gly Leu Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 210 215 220

Asn Ser Tyr Thr Thr Leu Ser Thr Trp Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys 225 230 235 240

Val Thr Val Leu Gly Ala Ala Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 245 250 255 -16- 120060·序列表.doc 200808822

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 260 265 270

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 275 280 285 了hr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 290 295 300

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 305 310 315 320

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 325 330 335

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 340 345 350

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 355 360 365 lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu 370 375 380

Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys 385 390 395 400

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser 405 410 415

Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 420 425 430

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 435 440 445

Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 450 455 460

Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 475 480 <210〉 47 <211〉 480 <212〉 PRT <213〉AX 序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 47

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 -17- 120060-序列表.doc 200808822

Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser Asp Trp Gly Lys Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Ser Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Val 130 135 140

Ser Gly Ser Pro Gly Gin Ser lie lie lie Ser Cys Thr Gly Thr Arg 145 150 155 160

Ser Asp lie Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin His His Pro 165 170 175

Gly Arg Ala Pro Lys Leu He lie Phe Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser 180 185 190

Gly Val Ser His Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser 195 200 205

Leu Thr lie Ser Gly Leu Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 210 215 220

Asn Ser Phe Thr Asp Ser Arg Thr Trp Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys 225 230 235 240

Leu Thr Val Leu Gly Ala Ala Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 245 250 255

His Thr Cys Pro Fro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 260 265 270

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met He Ser Arg 275 280 285

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 290 295 300

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 305 310 315 320

Lys Thr Lys Pro Arg Giu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 325 330 335 -18 - 120060-序列表.doc 200808822

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 340 345 350

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 355 360 365

He Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu 370 375 380

Pro Fro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys 385 390 395 400

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser 405 410 415

Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 420 425 430

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 435 440 445

Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 450 455 460

Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 475 480 <210> 48 <211〉 486 <212> PRT <213>人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 48

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Lys Asp Arg Val Ala Val Ala Gly Lys Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp 100 105 110 •19- 120060·序列表.doc 200808822

Ser Trp Gly Arg Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Ser Val Leu 130 135 HO

Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Glu Ala Pro Gly Gin Arg Val Thr lie 145 150 155 160

Ala Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn lie Gly Asn Asn Ala Val Ser Trp 165 170 175

Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Lys Ala Pro Thr Leu Leu lie Tyr Tyr Asp 180 185 190

Asn Leu Leu Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser 195 200 205

Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala lie Ser Gly Leu Gin Ser Glu Asp Glu 210 215 220

Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Asp Trp Val 225 230 235 240

Fhe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ala Ala Ala Glu Pro 245 250 255

Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 260 265 270

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 275 280 285

Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 290 295 300

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 305 310 315 320

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn 325 330 335

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp 340 345 350

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 355 360 365

Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu 370 375 380

Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 385 390 395 400

Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie 405 410 415 20- 120060-序列表.doc 200808822

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 420 425 430

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 435 440 445

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys 450 455 460

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu 465 470 475 480

Ser Leu Ser Pro Gly Lys 485 <210> 49 <211> 483 <212> PRT 〈213>人工序列 ▲ <220> • <223〉人工频之說明：合成蛋白序列 <400> 49

Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gin 1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala lie Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30

Ser Ala Ala Trp Asn Trp lie Arg Gin Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala 50 55 60

Val Ser Val Lys Ser Arg Met Thr lie Lys Ala Asp Thr Ser Lys Asn 65 70 75 80

Gin Phe Ser Leu Gin Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val 85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Glu Gly Pro Leu Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ala Pro Gin Ala Val Leu Thr Gin Pro 130 135 140

Ser Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gin Arg Val Thr lie Ser Cys Thr 145 150 155 160

Gly Ser Ser Ser Asn Leu Gly Thr Gly Tyr Asp Val His Trp Tyr Gin 165 170 175 -21 120060-序列表.doc 200808822

Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu lie 丁yr Gly Asn Ser Asn 180 185 190

Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Asp Thr 195 200 205

Ser Gly Leu Leu Ala lie Thr Gly Leu Gin Ala Glu Asp Glu Ala Thr 210 215 220

Tyr Tyr Cys Gin Ser Tyr Asp Phe Ser Leu Ser Ala Met Val Phe Gly 225 230 235 240

Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Ala Ala Ala Glu Pro Lys Ser Cys 245 250 255

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 260 265 270

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 275 280 285

He Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 290 295 300

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 305 310 315 320

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr 325 330 335

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly 340 345 350

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie 355 360 365

Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val 370 375 380

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser 385 390 395 400

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp He Ala Val Glu 405 410 415

Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 420 425 430

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 435 440 445

Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 450 455 460

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser 465 470 475 480 -22- 120060·序列表.doc

200808822

Pro Gly Lys <210〉 50 <21!> 1437 <212〉 DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 50 gaggtccagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt agctattgga tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gctactcgga ctggggccaa ggcaccctgg tcaccgtctc gagtggaggc ggcggttcag gcggaggtgg ctctggcggt ggcggaagtg cacagtctgt gctgactcag ccaccctccg cgtccgggtc tcctggacag tcagtcacca tctcctgcac tggaaceagc agtgacgttg gtggttataa ctatgtctcc tggtaccaac agcacccagg caaagccccc aaactcatga tttatgaggt cagtaagcgg ccctcagggg tccctgatcg cttctctggc tccaagtctg gcaacacggc ctccctgacc gtctctgggc tccagcctga ggatgaggct gattattact gcagctcata tgcaggcagg aactgggtgt tcggcggagg gacccagctc accgttttag gtgcggccgc agagcccaaa tcttgtgaca aaactcacac atgcccaccg tgcccagcac ctgaactcct ggggggaccg tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag gacaccctca tgatctcccg gacccctgag gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac gaagaccctg aggtcaagtt caactggtac gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca gtacaacagc acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa tggcaaggag tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc ccagccccca tcgagaaaac catctccaaa gccaaagggc agecccgaga accacaggtg tacaccctgc ccccatcccg ggaggagatg accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctatcccag cgacatcgcc gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg gactccgacg gctccttctt cctctatagc aagctcaccg tggacaagag caggtggcag caggggaacg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacgcag aagagcctct ccctgtctcc gggtaaa <210> 51 <211〉 1440 <212> DNA <213〉XX序列 <220〉 <223〉人工靜[J之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 51 120060-序列表.doc 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1437 -23- 60 60

<220> 200808822 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt agctattgga tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc aagagtttcg aggggtggga gctactcgga ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc gagtggaggc ggcggttcag gcggaggtgg ctctggcggt ggcggaagtg cacagtctgc cctgactcag cctgcctccg tgtctgggtc tcctggacag tcgatcacca tctcctgcac tggaaccagc agtgacgttg gtggctatat ttatgtctcc tggtaccaac aacacccagg caaagccccc aaactcatga tttatgatgt cagtcgtcgg ccctcaggga tttctgatcg cttctctggc tccaagtctg gcaacacggc ctccctgacc atctctgggc tccaggctga ggacgaggct gattattact gcaactcata tacaaccctc agcacctggc tcttcggcgg agggaccaag gtcaccgtcc taggtgcggc cgcagagccc aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ctggactccg acggctcctt cttcctctat agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa <210> 52 <2I1> 1440 <212> DNA <2i3>人工序列 <223〉人工靜J之說明：合成聚核昔酸序列 <400> 52 gaggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt agctattgga tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gctactcgga ctggggcaaa ggaaccctgg tcaccgtctc gagtggaggc ggcggttcag gcggaggtgg ctctggcggt ggcggaagtg cacagtctgc cctgactcag cctgcctccg tgtctgggtc tcctggacag tcgatcatca tctcctgcac tggaacccgc 120060-序列表.doc -24- 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 60 120 180 240 300 360 420 480 540 540

200808822 agtgacattg gtggttacaa ctatgtctcc tggtaccaac accacccagg cagagccccc aaactcatca tttttgatgt caataatcgg ccctcaggag tctctcaccg cttctctggc tccaagtctg gcaacacggc ctccctgacc atctctgggc tccaggctga ggacgaggct gattattact gcaattcatt tacagacagc cggacttggc tgttcggcgg agggaccaag ctgaccgtcc taggtgcggc cgcagagccc aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ctggactccg acggctcctt cttcctctat agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa <210> 53 <21I> 1458 <212〉 DNA <213〉XX 序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 53 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgt aaaagatagg gttgctgtag ctggtaaggg ttcgtattac tttgactctt gggggagggg gaccacggtc accgtctcga gtggaggcgg cggttcaggc ggaggtggct ctggcggtgg cggaagtgca cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcggtg tctgaagccc ccgggcagag ggtcaccatc gcctgttctg gaagcagctc caacatcgga aataatgctg taagttggta ccagcaactc ccaggaaagg ctcccacact cctcatctat tatgataatc tgctgccctc aggggtctct gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag tctgaggatg aggctgatta ttactgtgct gcatgggatg acagcctgaa tgattgggtg ttcggcggtg ggaccaaggt caccgtccta ggtgcggccg cagagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca cctgaac^cc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc 120060-序列表.doc -25- 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1020

200808822 gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggaggagat gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctatag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaa

<210〉 54 <211> 1449 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400〉 54 caggtgcagc tgcaggagtc gggtccagga ctggtgaagc cctcgcagac cctctcactc acctgtgcca tctccgggga cagtgtctct agcaacagtg ctgcttggaa ctggatcagg cagtccccat cgagaggcct tgagtggctg ggaaggacat actacaggtc caagtggtat aatgattatg cagtatctgt gaaaagtcga atgaccataa aagcagacac atccaagaac cagttctccc tgcaactgaa ctctgtgact cccgaagaca cggctgtgta ttactgtgca agagatgagg gaccgcttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcggccggt ggcggtggca gcggcggtgg tgggtccggt ggcggcggat ctggcgcgcc acaggctgtg ctcactcagc cgtcctcagt gtctggggcc ccagggcaga gggtcaccat ctcctgcact gggagcagct ccaacctcgg gacaggttat gatgtacact ggtaccagca gcttccagga acagccccca aactcctcat ctatggtaac agcaatcggc cctcaggggt ccctgaccga ttctcgggct ccaagtctga cacctcaggt ttgctggcca tcactgggct ccaggctgag gatgaggcta cttattactg ccagtcctat gacttcagcc tgagtgctat ggtattcggc ggagggacca aggtcaccgt cctagcggcc gcagagccca aatcttgtga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgc tggactccga cggctccttc ttcctctata gcaagctcac cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca 120060-序列表.doc -26- 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1458 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440200808822 tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacgc agaagagcct ctccctgtct ccgggtaaa 1449 <210> 55 <211〉 351 <212〉 <213> DNA 人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 55 caggtacagc tgcagcagtc agggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactatgcta tgcactgggt ccgccaggct ccaggcaagg ggctagagtg ggtggcagtt atatcaaatc atggaaagag cacatactac gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagca catgctgtat ctgcaaatga acagcctgag agctgacgac acggctctat attactgtgc gagagatata gcattggctg gggactactg gggccagggc accctggtca ccgtctctgc c 60 120 180 240 300 351

〈210〉 56 <211> 117<212> PRT <213>人工序列 <220〉〈223>人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 56 Gin Val Gin Leu Gin Gin Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg . I 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30

Ala Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Val lie Ser Asn His Gly Lys Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys His Met Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp lie Ala Leu Ala Gly Asp Tyr TrpGlyGlnGlyThrLeu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ala 115

<210> 57 <21I> 321 <212> DNA <213〉人工靜J 120060-序列表.doc -27- 60200808822 <22〇><223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 57 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatctta attggtatca gcaactacca gggaaagtcc ctaaactcct gatctatggt gcatcgaagt tgcaaagtgg ggtcccctcc aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct gaagattttg caacttatta ctgtctccaa gattacaatt atcctctcac tttcggccct gggacacgac tggagatcaa a 120 180 240 300 321 <210> 58 <211> 107 <212〉 PRT <213〉人货列 <220><223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 58 Asp He Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Ser lie Ser Ser 丁yr 20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Lys Leu Gin Ser Gly Val Fro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asp Tyr Asn Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Arg Leu Glu He Lys 100 105 <210> 59 <211> 357 <212> DNA <213〉人工序列 <220><223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400〉 59 caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaggc cttcggggac cctgtccctc acctgcgctg tctctggtgg ctccatcggc agtagtaact ggtggagttg ggtccgccag gccccaggga aggggctgga gtggattggg gaaatctctc agagtgggag caccaactac aacccgtccc tcaagggtcg agtcaccata tcactagaca ggtccaggaa ccagttgtcc ctgaagttga gttctgtgac cgccgcggac acggccgtgt attactgtgc gagacagctg 60 120 180 240 120060-序列表.doc -28- 300 200808822 cggtcgattg atgcttttga tatctggggc ccagggacca cggtcaccgt ctcggcc 357 <210> 60 <211> 119 <212> PRT <213〉人工序列 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 60 Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Arg Pro Ser Gly 1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly Gly Ser lie Gly Ser Ser 20 25 30

Asn Trp Trp Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45

lie Gly Glu lie Ser Gin Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr He Ser Leu Asp Arg Ser Arg Asn Gin Leu Ser 65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Gin Leu Arg Ser lie Asp Ala Phe Asp lie Trp Gly Pro Gly 100 105 110

Thr Thr Val Thr Val Ser Ala 115 <2I0> 61 <211> 32Ϊ <212〉 DNA<213>人工序歹[j

<220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 61 tcctatgtgc tgactcagcc accctcagtg tccgtgtccc caggactgac agccaccatc acctgctctg gagataaatt gggggacaaa tatgcttcct ggtatcagca gaagccaggc cagtcccctg tgttggtcat ctatcaagat aggaagcgac cctcagggat ccctgagcga ttctctgggt ccaattctgg gaacacagcc actctgacca tcagcgggac ccaggctgtg gatgaggctg actattactg tcaggcgtgg gacagcgaca cttcttatgt cttcggaact gggacccagc tcaccgtttt a 60 120 180 240 300 <210〉 62 <211〉 107 <212〉 PRT <213〉人工麵 <220> 120060·序列表.doc -29- 321 200808822 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 62 .

Ser Tyr Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Leu 15 10 15

Thr Ala Thr lie Thr Cys Ser Gly Asp Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Ala 20 25 30

Ser Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Val Leu Val lie Tyr 35 40 45

Gin Asp Arg Lys Arg Pro Ser Gly lie Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr lie Ser Gly Thr Gin Ala Val 65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ala Trp Asp Ser Asp Thr Ser Tyr 85 90 95

Val Phe Gly Thr Gly Thr Gin Leu Thr Val Leu 100 105

<210> 63 <211〉 378 <212〉 DNA <213〉AX序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 63 60 120 180 240 300 360 378 caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc acctgcactg tctctggtgg ctacatcaat aattactact ggagctggat ccggcagccc ccagggaagg gcctggagtg gattgggtac atccattaca gtgggagcac ctactacaac ccgtccctca agagtcgagt caccatatca gaagacacgt ccaagaacca gttctccctg aagctgagct ctgcgaccgc tgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agttgggtat tactatgata gtagtggtta taatcttgcc tggtacttcg atctctgggg ccgtggaacc ctggtcaccg tctcggcc <210〉 64 <211〉 126 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 64

Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Tyr He Asn Asn Tyr 20 25 30 30- 120060-序列表.doc 200808822

Tyr Trp Ser Trp lie Arg Gin Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45

Gly Tyr lie His Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60

Ser Arg Val Thr lie Ser Glu Asp Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser Leu 65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Ala Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Val Gly Tyr Tyr Tyr Asp Ser Ser Gly Tyr Asn Leu Ala Trp Tyr 100 105 110

Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val 丁hr Val Ser Ala 115 120 125

<210> 65 <211> 327 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 65 60 120 180 240 300 327 tcttctgagc tgactcagga ccctgctgtg tctgtggcct tgggacagac ggtcaggatc acatgccagg gagacaacct cagaagttat tctgcaactt ggtaccaaca gaagccagga caggcccctg tccttgtcct ctttggtgaa aacaaccggc cctcagggat cccagaccga ttctctggct ccaagtcagg ggacacagct gtcttgacca tcactgggac tcagacccaa gatgaggctg actattattg cacttccagg gtcaatagcg ggaaccatct gggggtgttc ggcccaggga cccagctcac cgtttta <210> 66 <211〉 109 <212> PRT 〈213〉AX序列 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 66

Ser Ser Glu Leu Thr Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin 15 10 15

Thr Val Arg lie Thr Cys Gin Gly Asp Asn Leu Arg Ser Tyr Ser Ala 20 25 30

Thr Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val Leu Phe 35 40 45

Gly Glu Asn Asn Arg Pro Ser Gly lie Fro Asp Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Lys Ser Gly Asp Thr Ala Val Leu Thr lie Thr Gly Thr Gin Thr Gin 65 70 75 80 -31 120060-序列表.doc 200808822

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Thr Ser Arg Val Asn Ser Gly Asn His 85 90 95

Leu Gly Val Phe Gly Pro Gly Thr Gin Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 67 <211> 369 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 67

60 120 ISO 240 300 360 369 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc cctggaoaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagggggg cacatgacta cggtgacccg tgatgctttt gatatctggg gccaagggac aatggtcacc gtctctgcc <210> 68 <211〉 123 <212> PRT 〈213>人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 68

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr 20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser He Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Gly Gly His Met Thr Thr Val Thr Arg Asp Ala Phe Asp lie 100 105 no

Trp Gly Gin Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ala 115 120 -32· 120060-序列表.doc 200808822

<21〇> 69 <211〉 327 <212〉 DNA <213>人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 69 tcttctgagc tgactcagga ccctgctgtg tctgtggcct tgggacagac aatcaggatc 60 acatgccaag gagacagcct cagatactat tatgcaacct ggtatcagca gaagccagga 120 caggccccta tacttgtcat ctatggtcag aataatcggc cctcaggggt cccagaccga 180 ttctctggct ccagctcagg aaacacagct tccttgacca tcactggggc tcaggcggaa 240 gatgaggctg actattactg cggaacatgg gatagcagtg tgagtgcctc ttgggtgttc 300 ggcggaggga ccaaggtcac cgtccta 327

<210〉 70 <211> 109 <212> PRT • <213〉人工序列 <220> 〈223>人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 70

Ser Ser Glu Leu Thr Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin 15 10 15

Thr lie Arg He Thr Cys Gin Gly Asp Ser Leu Arg Tyr Tyr Tyr Ala 20 25 30

Thr Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro lie Leu Val lie Tyr 35 40 45

Gly Gin Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin Ala Glu

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Val Ser Ala 85 90 95

Ser Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 <210> 71 <211〉 354 <212〉 DNA <213〉人工刺 <220> 〈223>人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 71 caggtacagc tgcagcagtc aggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 33- 120060-序列表.doc 120 200808822 tcctgcaagg cttctggata caccttcagc ggctattata tgcactgggt gcgacaggcc cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggcag cacaaattat gcacagaagt ttctgggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac atggaactga gcagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gaggggacac tccggtgact attttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ggcc <210> 72 <211> 118 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400〉 72

Gin Val Gin Leu Gin Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Gly Tyr

180 240 300 354

Tyr Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Leu Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser He Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Gly His Ser Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ala

<210> 73 <211〉 318 <212〉 DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 73 gaaattgtgt tgacgcagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgttggaga cagagtcacc atcacttgcc gggccagtca gagtgttagc agctggttgg cctggtatca acagagacca gggcaagccc ctaaactgct gatctatgct gcacgtttgc gaggtggagg cccttcaagg ttcagtggca gcggctctgg gacagaattc actctcacca tcagcagtct gcaacctgaa gactttgcga cttacttctg tcaacagagt tacagtaccc cgatcagttt cggcggaggg accaagctgg agatcaaa 34- 60 120 180 240 300 120060-序列表.doc 318 200808822 <210〉 74 <211〉 106 <212> PRT <213〉人工麵 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400〉 74

Glu He Val Leu Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Trp 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Ala Ala Arg Leu Arg Gly Gly Gly Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro Glu 65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gin Gin Ser Tyr Ser Thr Pro lie Ser 85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys 100 105 <210〉 75 <211〉 363 <212〉 DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序^之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 75 60 120 180 240 300 360 363 caggtgcagc tgcaggagtc gggctcagga ctggcgaggc cttcacagac cctgtccctc acctgcgctg tctctggtgg ctccatcagc agtagtgctt tctcctggaa ttggatccgg cagccaccag ggaagggcct ggagtggatt ggatacatct atcatactgg gatcaccgat tataacccgt ccctcaagag tcgagtcacc atatcagtgg acaggtccaa gaaccagttc tccctgaacg tgaactctgt gaccgccgcg gacacggccg tgtattattg tgccagagga cacggttcgg accccgcctg gttcgacccc tggggcaagg gcaccctggt caccgtctcg agt <210> 76 <211> 121 <212> PRT <213〉XX序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序^ <400> 76

Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Ser Gly Leu Ala Arg Pro Ser Gin 35- 120060·序列表.doc 200808822 15 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly Gly Ser lie Ser Ser Ser 20 25 30

Ala Phe Ser Trp Asn Trp He Arg Gin Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp lie Gly Tyr lie Tyr His Thr Gly lie Thr Asp Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Val Thr lie Ser Val Asp Arg Ser Lys Asn Gin Phe 65 TO 75 80

Ser Leu Asn Val Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Gly His lGly Ser Asp Pro Ala Trp Phe Asp Pro Trp Gly 100 105 110

Lys Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 77 <211> 321 <212> DNA <213>人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 77 60 120 180 240 300 321 caatctgtgc tgactcagcc accctcagtg tccgtgtccc caggacagac agccagcatc acctgctctg gagataaatt gggggataaa tatgcttcct ggtatcagca gaggccaggc cagtcccctg ttctggtcat ctatcgagac accaagcggc cctcagggat ccctgagcga ttctctggct ccaactctgg gaacacagcc actctgacca tcagcgggac ccaggctgtg gatgaggctg actattactg tcaggcgtgg gacagcacca cctccctggt tttcggcgga gggaccaagc tgaccgtcct a <210〉 78 <211> 107 <212〉 PRT <213〉人工朗 <220> _ <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 78

Gin Ser Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gin 1 5 10 15

Thr Ala Ser lie Thr Cys Ser Gly Asp Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Ala 20 25 30

Ser Trp Tyr Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ser Pro Val Leu Yal He Tyr 35 40 45 36- 120060-序列表.doc 200808822

Arg Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly lie Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr lie Ser Gly Thr Gin Ala Val 65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ala Trp Asp Ser Thr Thr Ser Leu 85 90 95

Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210〉 79 <211> 354 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 79

60 120 180 240 300 354 gaggtccagc tggtacagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt agctattgga tgagctgggt ccgccaggct cctgggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gctactcgga ctggggccga gggacaatgg tcaccgtctc gagt <210> 80 <211〉 118 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 80

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Giy Ser Tyr Ser Asp Trp Gly Arg Gly Thr -37- 120060-序列表.doc 200808822 loo 105 no

Met Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 81 <211> 327 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 81

60 120 180 240 300 327 cagtctgtgc tgactcagcc accctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggc ggttttaact atgtctcctg gtaccaaaag tacccaggca aagcccccaa actcgtcatt tatgaggtca gtaagcggcc ctcaggggtc cctgatcgct tctctggctc caagtccggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc caggctgagg atgaggctga ttattactgc agctcatggg cacctggtaa aaacttattc ggcggaggga ccaagctgac cgtccta <210> 82 <211> 109 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400〉 82

Gin Ser Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 10 15

Ser Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Phe 20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Lys Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Val lie Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Trp Ala Pro Gly 85 90 95

Lys Asn Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu 100 105 <210> 83 <211> 378 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 -38- 120060-序列表.doc 60200808822 <400> 83 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt attagtggta gtggtagtag tgaaggtggc acatactacg cagactccgt gaagggccgg ttcaccctct ccagagacaa ttccaagaat accctgtatc tgcaaatgaa cagcctgaga gccgaggaca cggccttata ttactgtgtg aaagatcgcc ctagtcgata cagctttggt tattactttg actactgggg ccggggaacc ctggtcaccg tctcgagt 120 180 240 300 360 378 <210> 84 <211> 126 <212> PRT <213〉AX序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成蛋白序^

<400〉 84 Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Ser Gly Ser Gly Ser Ser Glu Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala 50 55 60

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 65 70 75 80

Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu 85 90 95

Tyr Tyr Cys Val Lys Asp Arg Pro Ser Arg Tyr Ser Phe Gly Tyr Tyr 100 105 110

Phe Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 85 <211> 321 <212> DNA <213〉AX序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 85 ctgcctgtgc tgactcagcc accctcagtg tccgtgtccc caggacagac agccagcatc gcctgctctg gaaataaatt gggggataaa tatgtttcct ggtatcagca gaagcoaggc cagtcccctc tgctggtcat ctatcaagat accaagcggc cctcagggat ccctgagcga 60 120 120060-序列表.doc 39- 180 240200808822 ttctctggct ccaactcagg gaacacagcc actctgacca tcagcgggac ccaggctatg gatgaggctg actattactg tcaggcgtgg gacagcagca ctgatgtggt attcggcgga gggaccaagc tgaccgtcct a 300 321 <210〉 86 <211> 107 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉<223〉人工序列之說明··合成蛋白序^ <400〉 86 Leu Pro Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gin 1 5 10 15

Thr Ala Ser lie Ala Cys Ser Gly Asn Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Val 20 25 30

Ser Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Leu Leu Val lie Tyr 35 40 45

Gin Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly lie Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr He Ser Gly Thr Gin Ala Met 65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ala Trp Asp Ser Ser Thr Asp Val 85 90 95

Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105

<210〉 87 <211> 354 <212> DNA <213〉AX序列 <220><223>人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 87 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcgg tctctgggtt cacctttagt aagtattgga tgacctgggt ccgccaggct ccagggaagg gactggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggagtctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagtgtgag agccgaagac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gcttctcgga ctggggccag gggacaatgg tcaccgtctc gagt 60 120 180 240 300 <210> 88 <211> 118 <212〉 PRT 〈213〉AX序列〈220〉 120060-序列表.doc 40- 354 200808822 <223〉人工序之說明：合成蛋白序列 <400> 88

Glu Val Gin Leu Val GIu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Tyr 20 25 30

Trp Met Thr Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Val Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Met Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 89 <211> 330 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 89 60 120 180 240 300 330 cagtctgtgc tgactcagcc accctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc tcctgcactg gaaccagcag cgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacaa cacccagaca aagcccccag actcatgatt tatgacgtca ataagcggcc ctcaggggtc cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc

caggctgagg atgaggctca ttattactgc aactcatatg caggcagcaa caattgggtg ttcggcggag ggacccagct caccgtttta <210> 90 <211> 110 <212> PRT <213〉人工靜J <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 90

Gin Ser Val Leu 丁hr Gin Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 10 15

Ser Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 20 25 30 -41- 120060-序列表.doc 200808822

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Asp Lys Ala Pro Arg Leu 35 40 45

Met He Tyr Asp Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala His Tyr Tyr Cys Asn Ser Tyr Ala Gly Ser 85 90 95

Asn Asn Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Gin Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 91 <211> 354 <212〉 DMA <213>人工_ <220> • <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸賴 <400> 91 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcgg tctctgggtt cacctttagt aagtattgga tgacctgggt ccgccaggct ccagggaagg gactggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggagtctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagtgtgag agccgaagac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gcttctcgga ctggggccaa ggaaccctgg tcaccgtctc gagt <210> 92 <211〉 118 <212> PRT · <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Tyr 20 25 30

Trp Met Thr Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80 42- 60 120 180 240 300 354 120060-序列表.doc 200808822

Lea Gin Met Asn Ser Val Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp Trp Gly Gin Gly Thr loo 105 no

Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210〉 93 <211〉 327 <212〉 DNA <213>人工賴 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 93

60 120 180 240 300 327 cagtctgtgc tgactcagcc accctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataatt atgtctcctg gtaccaacaa cacccaggca gagcccccaa actcatcatt tatgaggtca gtaagcggcc ctcaggggtc cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc caggctgacg atgaggctga ttattactgc aactcatatg caggcagcat ttatgtcttc gggagtggga ccaaggtcac cgtccta <210> 94 <21i> 109 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 94

Gin Ser Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 10 15

Ser Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu 35 40 45 lie lie Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Tyr Ala Gly Ser 85 90 95 lie Tyr Val Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 <210> 95 <211> 372 -43 - 120060-序列表.doc 60200808822

<212〉 DNA <213〉人工序列 <220><223〉人工賴之說明：合成聚核苷酸靜J <400> 95 caggtgcagc tggtgcaatc tggggctgaa attaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt tcctgcaaga catttggatc ccccttcagc acgaatgaca tacactgggt gcgacaggcc cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcgacacta gtggcgccat gacaaggtac gcacagaagt tccagggcag agtcaccgtg accagggaaa cgtccacgag cacagtctac atggagctga gcagcctgaa atctgaagac acggctgtgt actactgtgc gagagagggt tgtactaatg gtgtatgcta tgataatggt tttgatatct ggggccaagg caccctggtc accgtctcga gt 120 180 240 300 360 372 <210〉 96 <211> 124 <212> PRT φ <213〉人工序歹U <220〉<223〉人工序^之說明：合成蛋白序列 <400〉 96 Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu lie Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Phe Gly Ser Pro Phe Ser Thr Asn 20 25 30

Asp lie His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly lie lie Asp Thr Ser Gly Ala Met Thr Arg Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr Val Thr Arg Glu Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Gly Cys Thr Asn Gly Val Cys Tyr Asp Asn Gly Phe Asp 100 105 110 lie Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210〉 97 <211〉 321 <212> DNA <213〉XX序列 <220> _<223〉人工序列之說明合成聚核苷酸序列 <400> 97 120060-序列表.doc 44- 60200808822 gatatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctattggaga cagagtcacc atcacctgcc gggccagtga gggtatttat cattggttgg cctggtatca gcagaagcca gggaaagccc ctaaactcct gatctataag gcctctagtt tagccagtgg ggccccatca aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct gatgattttg caacttatta ctgccaacaa tatagtaatt atccgctcac tttcggcgga gggaccaagc tggagatcaa a 120 180 240 300 321 <210〉 98 <21I> 107 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉<223〉人工序列之說明··合成蛋白序列 <400> 98 Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser lie Gly 1 5 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Glu Gly lie Tyr His Trp 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Ala Ser Gly Ala Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Ser Asn Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys 100 105

<210> 99 <211> 354 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉<223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400〉 99 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcgg tctctgggtt cacctttagt aagtattgga tgacctgggt ccgccaggct ccagggaagg gactggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggagtctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagtgtgag agccgaagac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gcttctcgga ctggggccgg gggacaatgg tcaccgtctc gagt 60 120 180 240 300 <210> 100 120060-序列表.doc -45- 354 200808822 <211〉 118 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 100

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys 丁yr 20 25 30

Trp Met Thr Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys-Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr

Leu Gin Met Asn Ser Val Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp Trp Gly Arg Gly Thr 100 105 110

Met Val Thr Val Ser Ser 115

<210> 101 <211〉 330 <212> DNA <213〉人工靜J <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 60 120 180 240 300 330 <400> 101 caatctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc tcctgcactg gaaccagcag tgatgttggg agttataacc ttgtctcctg gtaccaacaa cacccaggca aagtccccaa actcatcatt tatgaggtca gtaatcggcc ctcaggggtt tctcatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctggactc caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcattga caagcagcgg cacttgggtg ttcggcggag ggaccaaggt caccgtccta <210> 102 <211> 110 <212> PRT <213〉人工賴 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 102

Gin Ser Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gin -46- 120060-序列表.doc 200808822 1 10 15

Ser lie Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr 20 25 30

Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu 35 40 45 lie He Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser His Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Leu Thr Ser Ser 85 90 95

Gly Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 110

<211> 354 <212> DNA <213>XX 序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 103 gaggtgcagc tggtggagtc cgggggaggc ttggtccagc ccggggggtc cctgagactc tcctgtgcgg tctctgggtt cacctttagt aagtattgga tgacctgggt ccgccaggct ccagggaagg gactggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggagtctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagtgtgag agccgaagac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gcttctcgga ctggggccag ggcaccctgg tcaccgtctc gagt

<210> 104 <211〉 118 <212> PRT <213〉AX序列 <220> <223>AX序列之說明：合成蛋白序^ <400> 104

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Tyr 20 25 30

Trp Met Thr Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val 50 55 60 47- 60 120 180 240 300 354 120060-序列表.doc 200808822

Lys Gly Arg Phe Thr lie Sex Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Val Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210 105 〈211〉 333 <212〉 DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 105

60 120 180 240 300 333 cagtctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc ctgggcagtc agtcaccatc tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt gcttataact atgtctcctg gtaccaacag cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtcg ctaggcggcc ctcaggggtc cctgatcgct tctctggctc taagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc caggetgagg atgaggctga ttattattgc agctcatatg caggcagcaa caatttcgcg gtcttcggca gagggaccaa gctgaccgtc eta <210> 106 <211〉 111 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 106

Gin Ser Ala Leu Thr Gin Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Fro Gly Gin

Ser Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Giy Ala Tyr 20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Met He Tyr Glu Val Ala Arg Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser 85 90 95

Asn Asn Phe Ala Val Phe Gly Arg Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu -48- 120060-序列表.doc 200808822 100 105 110 <210> 107 <211> 354 <212〉 DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 107 gaggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtccagc cgggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt caggtttagt agctattgga tgacctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggactctg tgaagggccg attcaccatg tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gcttctcgga ctggggccaa ggaaccctgg tcaccgtctc gagt

<210〉 108 <211> 118 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序之說明：合成蛋白序列 <400> 108

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Trp Met Thr Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Met Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 109 <21i> 330 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 -49- 60 120 180 240 300 354 120060-序列表.doc 60200808822 <400〉 109 cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc ccctgcactg gaaccagcag tgacattggt acttatgact atgtctcctg gtaccaacaa cacccaggca aagtccccaa agtcattatt tatgaggtca ccaatcggcc ctcaggggtt tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc caggctgacg acgaggctga ttattactgc aactcattta caaagaacaa cacttgggtg ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 120 180 240 300 330 <210> 110 <211> 110 <212> PRT <213〉人工賴 <220><223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 110 Gin Ser Ala Leu Thr Gin Fro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gin 1 5 10 15

Ser lie Thr lie Pro Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp lie Gly Thr Tyr 20 25 30

Asp Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Val Pro Lys Val 35 40 45 lie lie Tyr Glu Val Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu 丁hr lie Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Phe Thr Lys Asn 85 90 95

Asn Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110

<211> 354 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉<223>人工序列之說明：合成聚核苷酸序列 <400> 111 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctgggaggtc cctgatactc tcctgtgcgg tctctgggtt cacctttagt aagtattgga tgacctgggt ccgccaggct ccagggaagg gactggagtg ggtggccaac ataaagccag atggaagtga gaaatactat gtggagtctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttcagtgtat ctgcaaatga acagtgtgag agccgaagac acggccgtgt attactgtgc gagagtttcg aggggtggga gcttctcgga ctggagccaa ggaaccttgg tcaccgtctc gagt 60 120 180 240 300 120060-序列表.doc -50- 354 200808822 <210> 112 <211〉 118 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400〉 112

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu He Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Tyr 20 25 30

Trp Met Thr Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Val Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp Trp Ser Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 113 <211> 333 <212〉 DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序^之說明：合成聚核苷酸醉ij <400> 113 60 120 180 240 300 333 cagtctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc ctgggcagtc agtcaccatc tcctgcactg gaaccagcgg tgacgttggt gcttataact atgtctcctg gtaccaacag tacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaagaggcc ctccggggtc cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc caggctgagg atgaggctga ttattactgc aactcatata ggggcagcaa cggtccttgg gtgttcggcg gagggaccaa ggtcaccgtc eta <210> 114 <211> 111 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成蛋白序列 -51 - 120060-序列表,doc 200808822 <400> 114

Gin Ser Ala Leu Thr Gin Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gin 1 5 10 15

Ser Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Gly Asp Val Gly Ala Tyr 20 25 . 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin Gin Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Met lie Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Tyr Arg Gly Ser 85 90 95

Asn Gly Pro Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 110 <210> 115 <211> 502 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 115

Met Gly Ser Thr Ala lie Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gin Gly 15 10 15

Val Ser Ala His Met Ala Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30

Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45

Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly 50 55 60

Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys 65 70 75 80

Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn 85 90 95

Ala Lys Asn Ser Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser 115 120 125

Asp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly 130 135 140 52- 120060·序列表.doc 200808822

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Ser Ala Leu 145 150 155 160

Thr Gin Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gin Ser He Thr lie 165 170 175

Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr lie Tyr Val Ser 180 185 190

Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met lie Tyr Asp 195 200 205

Val Ser Arg Arg Pro Ser Gly lie Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys 210 215 220

Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Ser Gly Leu Gin Ala Glu Asp 225 230 235 240

Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Tyr Thr Thr Leu Ser Thr Trp Leu 245 250 255

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ala Ala Ala Glu Pro 260 265 270

Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 275 280 285

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 290 295 300

Thr Leu Met He Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 305 310 315 320

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 325 330 335

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn 340 345 350

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp 355 360 365

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 370 375 380

Ala Pro lie Glu Lys Thr He Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu 385 390 395 400

Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 405 410 415

Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie 420 425 430

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 435 440 445 -53 · 120060-序列表.doc 200808822

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 450 455 460

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys 465 470 475 480

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu 485 490 495

Ser Leu Ser Pro Gly Lys 500 <210> 116 <2I1> 508 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明··合成蛋白序列

<400〉 116

Met Gly Ser Thr Ala lie Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gin Gly 15 10 15

Val Ser Ala His Met Ala Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30

Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45

Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly 50 55 60

Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr 65 70 75 80

Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn 85 90 95

Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Lys Asp Arg Val Ala Val Ala Gly Lys 115 120 125

Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp Ser Trp Gly Arg Gly Thr Thr Val Thr Val 130 135 140

Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 145 150 155 160

Ser Ala Gin Ser Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Glu Ala Pro 165 170 175

Gly Gin Arg Val Thr lie Ala Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn lie Gly 180 185 190 -54- 120060-序列表.doc 200808822

Asn Asn Ala Val Ser Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Lys Ala Pro Thr 195 200 205

Leu Leu lie Tyr Tyr Asp Asn Leu Leu Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg 210 215 220

Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala He Ser Gly 225 230 235 240

Leu Gin Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp 245 250 255

Ser Leu Asn Asp Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 260 265 270

Gly Ala Ala Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro 275 280 285

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 290 295 300

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val 305 310 315 320

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 325 330 335

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 340 345 350

Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 355 360 365

Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 370 375 380

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala 385 390 395 400

Lys Gly Gin Fro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 405 410 415

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 420 425 430

Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro 435 440 445

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 450 455 460

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin 465 470 475 480

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 485 490 495 -55- 120060-序列表-doc 200808822

Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 500 505 <210> 117 <211> 506 <212> PRT <213〉人工序列 <220> _ <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400〉 117

Met Gly Ser Thr Ala lie Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gin Gly 15 10 15

Val Ser Ala His Met Ala Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly 20 25 30

Leu Val Lys Pro Ser Gin Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala lie Ser Gly 35 40 45

Asp Ser Yal Ser Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn Trp lie Arg Gin Ser 50 55 60

Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys 65 70 75 80

Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala Val Ser Val Lys Ser Arg Met Thr He Lys 85 90 95

Ala Asp Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser Leu Gin Leu Asn Ser Val Thr 100 105 110

Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Glu Gly Pro Leu 115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly 130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ala Pro Gin 145 150 155 160

Ala Val Leu Thr Gin Pro Ser Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gin Arg 165 170 175

Val Thr He Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Leu Gly Thr Gly Tyr 180 185 190

Asp Val His Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 195 200 205 lie Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Fro Asp Arg Phe Ser 210 215 220

Gly Ser Lys Ser Asp Thr Ser Gly Leu Leu Ala He Thr Gly Leu Gin 225 230 235 240 -56- 120060-序列表.(Joe 200808822

Ala Glu Asp Glu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Ser Tyr Asp Phe Ser Leu 245 250 255

Ser Ala Met Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ala 260 265 270

Ala Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 275 280 285

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 290 295 300

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 305 310 315 320

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 325 330 335

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 340 345 350

Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 355 360 365

His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 370 375 380

Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly 385 390 395 400

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 405 410 415

Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 420 425 430

Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn 435 440 445

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 450 455 460

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn 465 470 475 480

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 485 490 495

Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 500 505 <210> 118 <211> 227 <212> PRT <213〉人工序列 <220> -57- 120060-序列表.doc 200808822 〈223>人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 118

Glu Phe Thr Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 15 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 20 25 30 lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gin 35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 50 55 60

His His Ala Gin Thr Lys Pro Arg Glu Arg Gin Phe Ser Ser Thr Tyr 65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gin Asp Trp Leu Asn Gly 85 90 95

Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro lie 100 105 1IQ

Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val 115 120 125

Tyr He Leu Pro Pro Pro Gin Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser 130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu 145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu lie Val 180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Thr Phe Ser Cys Ser Val Met 195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Val Ser 210 215 220

Pro Gly Lys 225 <210> 119 <211> 502 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 119

Met Gly Ser Thr Ala lie Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gin Gly -58- 120060·序列表,doc 200808822 10 15

Val Ser Ala His Met Ala Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30

Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45

Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly 50 55 60

Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys 65 70 75 80

Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn 85 90 95

Ala Lys Asn Ser Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser 115 120 125

Asp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly 130 135 140

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Ser Ala Leu 145 150 155 160

Thr Gin Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gin Ser lie Thr lie 165 170 175

Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr He Tyr Val Ser 180 185 190

Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met lie Tyr Asp 195 200 205

Val Ser Arg Arg Pro Ser Gly lie Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys 210 215 220

Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr He Ser Gly Leu Gin Ala Glu Asp 225 230 235 240

Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Tyr Thr Thr Leu Ser Thr Trp Leu 245 250 255

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Vai Leu Gly Ala Ala Ala Glu Pro 260 265 270

Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Fro Ala Pro Glu 275 280 285

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 290 295 300 -59- 120060-序列表.doc 200808822

Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 305 310 315 320

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 325 330 335

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Ser 340 345 350

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp 355 360 365

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 370 375 380

Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu 385 390 395 400

Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 405 410 415

Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie 420 425 430

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 435 440 445

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 450 455 460

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys 465 470 475 480

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu 485 490 495

Ser Leu Ser Pro Gly Lys 500

<210> 120 <211〉 508 <212〉 PRT <213> AX 序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 120

Met Gly Ser Thr Ala lie Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gin Gly 1 5 10 15

Val Ser Ala His Met Ala Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30

Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45

Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly -60- 120060-序列表.doc 55 200808822

Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala He Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr 65 70 75 80

Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn 85 90 95

Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Lys Asp Arg Val Ala Val Ala Gly Lys 115 120 125

Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp Ser Trp Gly Arg Gly Thr Thr Val Thr Val 130 135 140

Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 145 150 155 160

Ser Ala Gin Ser Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Glu Ala Pro 165 170 175

Gly Gin Arg Val Thr lie Ala Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn He Gly 180 185 190

Asn Asn Ala Val Ser Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Lys Ala Pro Thr 195 200 205

Leu Leu lie Tyr Tyr Asp Asn Leu Leu Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg 210 215 220

Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala He Ser Gly 225 230 235 240

Leu Gin Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp 245 250 255

Ser Leu Asn Asp Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 260 265 270

Gly Ala Ala Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro 275 280 285

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 290 295 300

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val 305 310 315 320

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 325 330 335

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 340 345 350 -61 - 120060-序列表.doc 200808822

Arg GIu Glu Gin Tyr Ser Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 355 360 365

Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 370 375 380

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr He Ser Lys Ala 385 390 395 400

Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 405 410 415

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 420 425 430

Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro 435 440 445

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 450 455 460

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin 465 470 475 480

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 485 490 495

Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 500 505 <210> 121 <211> 506 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成蛋白序列 <400> 121

Met Gly Ser Thr Ala lie Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gin Gly 15 10 15

Val Ser Ala His Met Ala Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly 20 25 30

Leu Val Lys Pro Ser Gin Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala lie Ser Gly 35 40 45

Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn Trp He Arg Gin Ser 50 55 60

Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys 65 70 75 80

Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala Val Ser Val Lys Ser Arg Met Thr lie Lys 85 90 95

Ala Asp Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser Leu Gin Leu Asn Ser Val Thr -62- 120060-序列表.doc 200808822 100 105 110

Pro Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Glu Gly Pro Leu 115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly 130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ala Pro Gin 145 150 155 160

Ala Val Leu Thr Gin Pro Ser Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gin Arg 165 170 175

Val Thr lie Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Leu Gly Thr Gly Tyr 180 185 190

Asp Val His Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 195 200 205

lie Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 210 215 220

Gly Ser Lys Ser Asp Thr Ser Gly Leu Leu Ala lie Thr Gly Leu Gin 225 230 235 240

Ala Glu Asp Glu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Ser Tyr Asp Phe Ser Leu 245 250 255

Ser Ala Met Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ala 260 265 270

Ala Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 275 280 285

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 290 295 300

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 305 310 315 320

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 325 330 335

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 340 345 350

Glu Gin Tyr Ser Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 355 360 365

His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 370 375 380

Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly 385 390 395 400 -63· 120060-序列表.doc 200808822

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 405 410 415

Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 420 425 430

Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn 435 440 445

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 450 455 460

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn 465 470 475 480

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 485 490 495

Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 500 505

<210> 122 <211> 496 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序之說明··合成蛋白序列 <400> 122

Met Gly Ser Thr Ala lie Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gin Gly 15 10 15

Val Ser Ala His Met Ala Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30

Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45

Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Trp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly

Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys 65 70 75 80

Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn 85 90 95

Ala Lys Asn Ser Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser 115 120 125

Asp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly 130 135 140

Ser Gly Giy Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Ser Ala Leu -64- 120060-序列表.doc 200808822 145 150 155 160

Thr Gin Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gin Ser lie Thr lie 165 170 175

Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr lie Tyr Val Ser 180 185 190

Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met lie Tyr Asp 195 200 205

Val Ser Arg Arg Pro Ser Gly lie Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys 210 215 220

Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr He Ser Gly Leu Gin Ala Glu Asp 225 230 235 240

Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Tyr Thr Thr Leu Ser Thr 丁rp Leu 245 250 255

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Ala Ala Ala Glu Fhe Thr 260 265 270

Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 275 280 285

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 290 295 300

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gin Glu Asp Pro 305 310 315 320

Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His His Ala 325 330 335

Gin Thr Lys Pro Arg Glu Arg Gin Phe Ser Ser Thr Tyr Arg Val Val 340 345 350

Ser Val Leu Thr Val Thr His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 355 360 365

Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 370 375 380

He Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr lie Leu 385 390 395 400

Pro Pro Pro Gin Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys 405 410 415

Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp He Ala Val Glu Trp Glu Ser 420 425 430

Asn Gly Gin Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 435 440 445 -65- 120060-序歹丨J表·doc 200808822

Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu lie Val Asp Lys Ser 450 455 460

Arg Trp Gin Gin Gly Asn Thr Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 465 470 475 480

Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly Lys 485 490 495 <210> 123 <211〉 5 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 123

Asp Tyr Ala Met His 1 5

<210> 124 <211〉 17 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 124

Val lie Ser Asn His Gly Lys Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 15 10 15

Gly <210> 125 <211> 8 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 125

Asp lie Ala Leu Ala Gly Asp Tyr 1 5 <2I0> 126 <2ll> 11 <212〉 PRT 〈213〉人工麵 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 126

Arg Ala -Ser Gin Ser lie Ser Ser Tyr Leu Asn 1 5 10 <210> 127 〈211〉 7 <212〉 PRT 66- 120060·序列表.doc 200808822 <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 127

Gly Ala Ser Lys Leu Gin Ser 1 5 <210> 12B <211〉 9 <2I2> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 128

Leu Gin Asp Tyr Asn Tyr Pro Leu Thr

<210> 129 <211> 6 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 129

Ser Ser Asn Trp Trp Ser <210〉 130 <211〉 16 <212〉 PRT <213〉人工麵 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 130 GIu lie Ser Gin Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Gly

<210> 131 <211〉 10 <212> PRT <213〉Αχ 序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 131

Gin Leu Arg Ser lie Asp Ala Phe Asp lie 1 5 10 <210> 132 <211〉 5 <2I2> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉AX序列之說明：合成肽 -67- 120060-序列表.doc 200808822 <400〉 132

Asp Lys Tyr Ala Ser <210> 133 <211〉 10 <212〉 PRT <213〉AX序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 133

Tyr Gin Asp Arg Lys Arg Pro Ser Gly lie 1 5 10

<210> 134 <211〉 8 <212> PRT 〈213>人工序列 <220>

<223〉人工靜[J之說明：合成肽 <400> 134

Trp Asp Ser Asp Thr Ser Tyr Val 1 5 <210〉 135 <211〉 5 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 135

Asn Tyr Tyr Trp Ser 1 5 <210> 136 <211〉 17 <212> PRT <213〉AX序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 136

Tyr lie His Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 15 10 15

Arg

<210〉 137 <211> Π <212> PRT <213〉人工靜J <220> <223>人工序列之說明：合成肽 68- 120060·序列表.doc 200808822 <400> 137

Gin Gly Asp Asn Leu Arg Ser Tyr Ser Ala Thr 1 5 10 <210> 138 〈211〉 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工靜J之說明：合成肽 <400〉 138

Gly Glu Asn Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 139 <211> 12 <212〉 PR丁 <213〉人工靜J <220〉

<223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 139

Thr Ser Arg Val Asn Ser Gly Asn His Leu Gly Val 15 10 <210〉 140 <211> 5 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 140

Gly Tyr Tyr Met His 1 5 <210> 141 <211〉 18 <212> PRT <213〉人工序列 <223>人工序列之說明:合成肽 <400> 141

Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gin Lys Phe Gin 1 5 10 15

Gly Arg <210> 142 <211> 14 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 142 69- 120060-序列表,doc 200808822

Gly Gly His Met Thr Thr Val Thr Arg Asp Ala Phe Asp He 1 5 10 <210〉 143 <211〉 11 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 143

Gin Gly Asp Ser Leu Arg Tyr Tyr Tyr Ala Thr 1 5 10 <210> 144 <211> 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽

<400〉 144

Gly Gin Asn Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 145 <211> 12 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 145

Gly Thr Trp Asp Ser Ser Val Ser Ala Ser Trp Val 1 5 10 <210〉 146 <211> 5 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序^之說明：合成肽 <400> 146

Gly Tyr Tyr Met His 1 5 <210> 147 <211> 17 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序之說明··合成肽 <400> 147

Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Gin Lys Phe Leu 1 5 10 15

Gly 70- 120060-序列表.doc 200808822 <210〉 148 <211〉 9 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉ΛΧ序列之說明：合成肽 <400> 148

Gly His Ser Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr 1 5

<210> 149 <211〉 11 <212> PRT <213>AX^0 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 149

Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Trp Leu Ala 1 5 10

<210> 150 <211> 6 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 150

Ala Ala Arg Leu Arg Gly

<210> 151 <211> 9 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 151

Gin Gin Ser Tyr Ser Thr Pro He Ser 1 5 <210〉 152 <211〉 7 <212〉 PRT <213〉AX序列 <220〉 _ <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 152

Ser Ser Ala Phe Ser Trp Asn 1 5 <210> 153 <211> 16 •71- 120060-序列表.doc 200808822 <212〉 PRT <213〉χχ序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 153

Tyr lie Tyr His Thr Gly lie Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 15 10 15 <210> 154 <211> II <212> PRT 〈213〉AX序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 154

Gly His Gly Ser Asp Pro Ala Trp Phe Asp Pro 1 5 10

<210> 155 <211> 11 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 155

Ser Gly Asp Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Ala Ser 1 5 10 <210〉 156 <211〉 7 <212〉 PRT <213>Λχ 序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 156

Arg Asp Thr Lys Arg Pro Ser <210> 157 <211〉 10 <212> PRT <213〉XX序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 157

Gin Ala Trp Asp Ser Thr Thr Ser Leu Val 1 5 10 <210> 158 <21I> 5 <212> PRT <213> AX 序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 -72- 120060-序列表.doc 200808822 <400> 158

Ser Tyr Trp Met Ser 1 5 <210〉 159 <211〉 17 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 159

Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys 15 10 15

Gly <210> 160 <211> 9

▲ <212> PRT • <213〉人工序列 <220> 〈223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 160

Val Ser Arg Gly Gly Ser Tyr Ser Asp 1 5 <210〉 161 <211> 14 <212> PRT <213〉AX序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 161

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Phe Asn Tyr Val Ser 1 5 10

<210〉 162 <211〉 7 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 162

Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser <210> 163 <211〉 9 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉AX序列之說明：合成肽 73- 120060·序列表.doc 200808822 <400> 163

Ser Ser Trp Ala Pro Gly Lys Asn Leu <210> 164 <21i> 5 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 164

Ser Tyr Ala Met Ser <210〉 165 <211〉 20 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽

<400> 165

Gly lie Ser Gly Ser Gly Ser Ser Glu Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp 15 10 15

Ser Val Lys Gly 20 <210> 166 <211> 14 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 166

Asp Arg Pro Ser Arg Tyr Ser Phe Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <2I0> 167 <211〉 11 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 167

Ser Gly Asn Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Val Ser 1 5 10 <2I0> 168 <211> 7 <2i2> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 74- 120060-序列表.doc 200808822 <400> 168

Gin Asp Thr Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 169 <211〉 10 <212〉 PRT <213〉人工· <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 169

Gin Ala Trp Asp Ser Ser Thr Asp Val Val 1 5 10 <210> 170 <211> 5 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽

<400> 170

Lys Tyr Trp Met Thr <210> 171 <211〉 17 <212> PRT <213〉人工· <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 171

Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val Lys 1 5 10 15

Gly <210〉 172 <211〉 9 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序^之說明：合成肽 <400> 172

Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp 1 5 <210〉 173 <211〉 14 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 173 75- 120060-序列表.doc 200808822

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser 1 5 10 <210〉 174 <21i> 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 174

Asp Val Asn Lys Arg Pro Ser <210> 175 <211〉 10 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序^{J之說明：合成肽

<400> 175

Asn Ser Tyr Ala Gly Ser Asn Asn Trp Val 1 5 10 <210> 176 <211〉 5 <212> PRT <213〉人工麵 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 176

Lys Tyr Trp. Met Thr 1 5 <210〉 177 <211〉 17 <212> PRT <213〉人工刺 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 177

Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Yal Glu Ser Val Lys 15 10 15

Gly <210> 178 <211> 9 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 178

Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp 76- 120060-序列表.doc 200808822 1 5 <210〉 179 <211〉 14 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 179

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Giy Gly Tyr Asn Tyr Val Ser 1 5 10 <210> 180 <211> 7 <212> PRT <213〉人工麵 <220> <223>人工序列之說明：合成肽

<400> 180

Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser I 5 <210〉 181 <211> 9 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 181

Asn Ser Tyr Ala Gly Ser lie Tyr Val 1 5 <2I0> 182 <211> 5 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 182

Thr Asn Asp lie His <210> 183 <211〉 17 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 183 lie lie Asp Thr Ser Gly Ala Met Thr Arg Tyr Ala Gin Lys Phe Gin 1 5 10 15

Gly 77- 120060-序列表.doc 200808822 <210> 184 <211> 15 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 184

Glu Gly Cys Thr Asn Gly Val Cys Tyr Asp Asn Gly Phe Asp lie 15 10 15 <210> 185 <211〉 11 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <>185

Arg Ala Ser Glu Gly lie Tyr His Trp Leu Ala 1 5 10

<210〉 186 <211〉 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序^之說明：合成肽 <400> 186

Lys Ala Ser Ser Leu Ala Ser <210〉 187 <211> 9 〈212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 187

Gin Gin Tyr Ser Asn Tyr Pro Leu Thr <210〉 188 <211> 5 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 188

Lys Tyr Trp Met Thr 1 5

<210> 189 <21I> 17 <212> PRT 78- 120060-序列表.doc 200808822 <213〉人工序列 <220〉 <223>ΛΧ序列之說明：合成肽 <400> 189

Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val Lys 15 10 15

Gly <210> 190 <211> 9 <212〉 PRT <213>人工序列 <220〉 <223>人工靜ij之說明：合成肽 <400> 190

Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp

〈210〉 191 〈211〉 14 <212〉 PRT 〈213>人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 191

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr Asn Leu Val Ser 1 5 10 <210> 192 <211> 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序^之說明：合成肽

<400> 192

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser 1 5 〈210〉 193 <211> 10 <212> PRT <213〉XX 序列 <220> <223〉人工序^之說明：合成肽 <400> 193

Ser Ser Leu Thr Ser Ser Gly Thr Trp Val 1 5 10 <210> 194 <211> 5 <2I2> PRT <213〉人工序列 79- 120060-序列表.doc 200808822 <220〉〈223>人工序列之說明：合成肽 <400〉 194

Lys Tyr Trp Met Thr 1 5 <210〉 195 〈211〉 17 <212> PRT <2Π>人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 195

Asn He Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val Lys 15 10 15

Gly

<210〉 196 <211〉 9 <212〉 PRT <213〉人工麵 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 196

Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp <210> 197 <211〉 14 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 197

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ala Tyr Asn Tyr Val Ser 1 5 10 <210〉 198 <211> 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 198

Glu Val Ala Arg Arg Pro Ser 1 5 <210〉 199 <211〉 11 <212> PRT <213〉人工序列 80- 120060-序列表.doc 200808822 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 199

Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Asn Asn Phe Ala Val 1 5 10 <210> 200 <211〉 5 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序^之說明：合成肽 <400> 200

Ser Tyr Trp Met Thr

<210> 201 <211> 17 <212〉 PRT <213〉人工靜j <220> <223〉人工序^之說明：合成肽 <400> 201

Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys 15 10 15

Gly <210〉 202 <211〉 9 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <400〉 202

Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp <210> 203 <211〉 14 <212> FRT <2i3>人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 203

Thr Gly Thr Ser Ser Asp lie Gly Thr Tyr Asp Tyr Val Ser I 5 10 <210〉 204 <21I> 7 <2i2> PRT <213〉人工麵 <220> 81- 120060-序列表.doc 200808822 〈223>人工序列之說明：合成肽 <400> 204

Glu Val Thr Asn Arg Pro Ser <210> 205 〈211〉 10 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 205

Asn Ser Phe Thr Lys Asn Asn Thr Trp Val 1 5 10 <210> 206 <211〉 5 <212> PRT <213〉人工序列

<223>人工序列之說明：合成肽 <400> 206

Lys Tyr Trp Met Thr 1 5 <210> 207 <211> 17 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> _ <223〉人工序列之說明：合成肽 <400> 207

Asn He Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Glu Ser Val Lys 1 5 10 15

Gly

<210> 208 <211> 9 <212> PRT <213〉人工靜j <220> <223〉人工序列之說明··合成肽 <400> 208

Val Ser Arg Gly Gly Ser Phe Ser Asp <210> 209 <211> 14 <2I2> PRT <213〉人工麵 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 82- 120060-序列表.doc 200808822 <400> 209

Thr Gly Thr Ser Gly Asp Val Gly Ala Tyr Asn Tyr Val Ser 1 5 10 <210〉 210 <211〉 7 <212〉 PRT <213>人工靜j <220> <223>人工序^之說明：合成肽 <400〉 210

Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser <210〉 211 <211> 11 <212〉 PRT <213〉XX序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽

<400> 211

Asn Ser Tyr Arg Gly Ser Asn Gly Pro Trp Val 1 5 10 <210> 212 <211〉 18 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明:合成肽 <400〉 212

Val Gly Tyr Tyr Tyr Asp Ser Ser Gly Tyr Asn Leu Ala Trp Tyr Phe 15 10 15

Asp Leu <210〉 213 <211> 508 <212> PRT <213>智人 <400> 213

Met Asp His Leu Gly Ala Ser Leu Trp Pro Gin Val Gly Ser Leu Cys 15 10 15

Leu Leu Leu Ala Gly Ala Ala Trp Ala Pro Pro Pro Asn Leu Pro Asp 20 25 30

Pro Lys Phe Glu Ser Lys Ala Ala Leu Leu Ala Ala Arg Gly Pro Glu .35 40 45

Glu Leu Leu Cys Phe Thr Glu Arg Leu Glu Asp Leu Val Cys Phe Trp 50 55 60 83- 120060-序列表.doc 200808822

Glu Glu Ala Ala Ser Ala Gly Val Gly Pro Gly Asn Tyr Ser Phe Ser 65 70 75 80

Tyr Gin Leu Glu Asp Glu Pro Trp Lys Leu Cys Arg Leu His Gin Ala 85 90 95

Pro Thr Ala Arg Gly Ala Val Arg Fhe Trp Cys Ser Leu Pro Thr Ala 100 105 110

Asp Thr Ser Ser Phe Val Pro Leu Glu Leu Arg Val Thr Ala Ala Ser 115 120 125

Gly Ala Pro Arg Tyr His Arg Val lie His lie Asn Glu Val Val Leu 130 135 140

Leu Asp Ala Pro Val Gly Leu Val Ala Arg Leu Ala Asp Glu Ser Gly 145 150 155 160

His Val Val Leu Arg Trp Leu Pro Pro Pro Glu Thr Pro Met Thr Ser 165 170 175

His He Arg Tyr Glu Val Asp Val Ser Ala Gly Asn Gly Ala Gly Ser 180 185 190

Val Gin Arg Val Glu lie Leu Glu Gly Arg Thr Glu Cys Val Leu Ser 195 200 205

Asn Leu Arg Gly Arg Thr Arg Tyr Thr Phe Ala Val Arg Ala Arg Met 210 215 220

Ala Glu Pro Ser Phe Gly Gly Phe Trp Ser Ala Trp Ser Glu Pro Val 225 230 235 240

Ser Leu Leu Thr Pro Ser Asp Leu Asp Pro Leu lie Leu Thr Leu Ser 245 250 255

Leu He Leu Val Val lie Leu Val Leu leu Thr Val Leu Ala Leu Leu 260 265 270

Ser His Arg Arg Ala Leu Lys Gin Lys lie Trp Pro Gly He Pro Ser 275 280 285

Pro Glu Ser Glu Phe Giu Gly Leu Phe Thr Thr His Lys Gly Asn Phe 290 295 300

Gin Leu Trp Leu Tyr Gin Asn Asp Gly Cys Leu Trp Trp Ser Pro Cys 305 310 315 320

Thr Pro Phe Thr Glu Asp Pro Pro Ala Ser Leu Glu Val Leu Ser Glu 325 330 335

Arg Cys Trp Gly Thr Met Gin Ala Val Glu Pro Gly Thr Asp Asp Glu 340 345 350

Gly Pro Leu Leu Glu Pro Val Gly Ser Glu His Ala Gin Asp Thr Tyr 355 360 365 -84- 120060-序列表.doc 200808822

Leu Val Leu Asp Lys Trp Leu Leu Pro Arg Asn Pro Fro Ser Glu Asp 370 375 380

Leu Pro Gly Pro Gly Gly Ser Val Asp lie Val Ala Met Asp Glu Gly 385 390 395 400

Ser Glu Ala Ser Ser Cys Ser Ser Ala Leu Ala Ser Lys Pro Ser Pro 405 410 415

Glu Gly Ala Ser Ala Ala Ser Phe Glu Tyr Thr lie Leu Asp Pro Ser 420 425 430

Ser Gin Leu Leu Arg Pro Trp Thr Leu Cys Pro Glu Leu Pro Pro Thr 435 440 445

Pro Pro His Leu Lys Tyr Leu Tyr Leu Val Val Ser Asp Ser Gly He 450 455 460

Ser Thr Asp Tyr Ser Ser Gly Asp Ser Gin Gly Ala Gin Gly Gly Leu 465 470 475 480

Ser Asp Gly Pro Tyr Ser Asn Pro Tyr Glu Asn Ser Leu lie Pro Ala 485 490 495

Ala Glu Pro Leu Pro Pro Ser Tyr Val Ala Cys Ser 500 505 <210> 214 <211〉 226 <212> PRT <213〉智人 <400> 214

Ala Pro Pro Fro Asn Leu Pro Asp Pro Lys Phe Glu Ser Lys Ala Ala 1 5 10 15

Leu Leu Ala Ala Arg Gly Pro Glu Glu Leu Leu Cys Phe Thr Glu Arg 20 25 30

Leu Glu Asp Leu Val Cys Phe Trp Glu Glu Ala Ala Ser Ala Gly Val 35 40 45

Gly Pro Gly Asn Tyr Ser Phe Ser Tyr Gin Leu Glu Asp Glu Pro Trp 50 55 60

Lys Leu Cys Arg Leu His Gin Ala Pro Thr Ala Arg Gly Ala Val Arg 65 70 75 80

Phe Trp Cys Ser Leu Pro Thr Ala Asp Thr Ser Ser Phe Val Pro Leu 85 90 95

Glu Leu Arg Val Thr Ala Ala Ser Gly Ala Pro Arg Tyr His Arg Val 100 105 110 lie His He Asn Glu Val Vai Leu Leu Asp Ala Pro Val Gly Leu Val 115 120 125 85- 120060·序列表.doc 200808822

Ala Arg Leu Ala Asp Glu Ser Gly His Val Val Leu Arg Trp Leu Pro 130 135 140

Pro Pro Glu Thr Pro Met Thr Ser His lie Arg Tyr Glu Val Asp Val 145 150 155 160

Ser Ala Gly Asn Gly Ala Gly Ser Val Gin Arg Val Glu lie Leu Glu 165 170 175

Gly Arg Thr Glu Cys Val Leu Ser Asn Leu Arg Gly Arg Thr Arg Tyr 180 185 190

Thr Phe Ala Val Arg Ala Arg Met Ala Glu Pro Ser Phe Gly Gly Phe 195 200 205

Trp Ser Ala Trp Ser Glu Pro Val Ser Leu Leu Thr Pro Ser Asp Leu 210 215 220

Asp Pro 225

<210> 215 <211〉 16 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成肽 <220>

<22l> M0D_RES <222〉（12)..(12) <223>可變胺基酸 <400> 215

Asn He Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Xaa Ser Val Lys Gly 15 10 15 <210> 216 <211> 9 <212〉 PRT <213〉人工賴 <220〉 <223>人工序列之說明：合成肽· <220>

<221〉__RES <222〉⑺.·⑺ <223〉可變胺基酸 <400〉 216

Val Ser Arg Gly Gly Ser Xaa Ser Asp <210> 217 <211> 14 <212> PRT <213〉ΛΧ序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 -86 - 120060-序列表.doc 200808822 <220〉 <221〉 M0D_RES 〈222> (7).. (7) <223〉可變胺基酸 <220> <221> M0D_RES <222> (9).. (9) <223〉可變胺基酸 <220> <221〉 M0DJRES <222> (11)..(11) 〈223〉可變胺基酸 <400> 217

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Xaa Gly Xaa Tyr Xaa Tyr Val Ser 1 5 10 <210> 218 <211> 7 <212> PRT <213〉人工序列 <220> φ <223〉人工序列之說明：合成肽 <220〉 <22I> M0D_RES 〈222> (1).· (1) <223〉可變胺基酸 <220> <221〉 MOD—RES <222〉（3).,(4) <223>可變胺基酸 <400> 218

Xaa Val Xaa Xaa Arg Pro Ser 1 5 <210> 219 <211> 33 <212> DNA <213〉人:EjJ列

〈220〉 <223〉AX序列之說明：合成引子 <400> 219 cgggaggagc agtacagcag cacgtaccgt gtg <210> 220 <211〉 33 <212〉 DNA <213〉人工序歹ij <220> <223〉人工序列之說明：合成引子 <400> 220 cacacggtac gtgctgctgt actgctcctc ccg <210> 221 87- 120060-序列表.doc 200808822 <21I> 30 <212> DNA <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成弓丨子 <400> 221 gggagaggca gttcagcagc acgtaccgcg 30 <210〉 222 <211> 30 <212〉 DNA <213〉χχ 序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成弓丨子 <400> 222 cgcggtacgt gctgctgaac tgcctctccc 30

<210> 223 <211〉 33 <212〉 DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成引子 <400> 223 gactgcaagc ttgacaccat ggggtcaacc gcc 33 <210> 224 <211> 30 〈212〉 DNA <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成弓丨子 <400> 224 gcatacggat cctcatttac ccggagacag 30 <210> 225 <211〉 34 <212> DNA <213〉AX 序列 <220〉 <223〉AX序列之說明：合成弓丨子 <400> 225 catgggggtg tgaactctgc ggccgctagg acgg 34 <2I0> 226 <211> 34 <212> DNA <213〉人工序列合成引子 <220> <223〉人工序列之說明 <400> 226 ccgtcctagc ggccgcagag ttcacacccc catg 34 88- 120060-序列表.doc 200808822 <210> 227 <211> 30 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成弓[子 <400> 227 gcatcaggat cctcatttac ccggagacac <210> 228 <211> 16 <212> PRT <213〉人工 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <220> <221> M0D.RES <222> (127..(12)

<223〉 Asp 或 Glu <400> 228

Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Xaa Ser Val Lys Gly 15 10 15 <210> 229 <211〉 9 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工靜fj之說明：合成肽 <220〉 <221〉 MOD-RES <222〉（7)·,⑺ <223〉 Phe 或丁yr <400〉 229

Val Ser Arg Gly Gly Ser Xaa Ser Asp

<210〉 230 <211〉 14 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成肽 <220> <221〉MOD一RES <222〉（7).. (7) <223〉 Val 或 lie <220〉

<221〉 M0D_RES <222〉⑼· .（9) 、 <223〉Gly, Ala, Thr 或 Ser 89- 120060-序列表.doc 200808822 <220>

<221> MOD^RES <222〉（ilL · (11)、 <223〉 Asn， Asp 或 lie <400> 230

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Xaa Gly Xaa Tyr Xaa Tyr Val Ser 1 5 10 <210〉 231 <211〉 7 <212> PRT <213〉人工测 <220> <223〉人工序^之說明：合成肽 <220>

<221〉__RES <222〉（1)..(1) <223〉 Asp 或 Glu 〈220〉

<221〉__RES <222〉（3)·· (3) <223〉Asn，Ser, Ala 或 Thr <220〉 <22I> M0D_RES 〈222〉（4). · (4) 〈223〉 Lys, Asn 或 Arg <400> 231

Xaa Val Xaa Xaa Arg Pro Ser <210> 232 <211〉 63 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 232

Asn Tyr Tyr Trp Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Tyr lie His Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Gly Tyr 35 40 45

Tyr Tyr Asp Ser Ser Gly Tyr Asn Leu Ala Trp Tyr Phe Asp Leu 50 55 60 <210> 233 <211> 57 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉AX序列之說明：合成多肽 90- 120060-序列表.doc 200808822 <400> 233

Ser Ser Ala Phe Ser Trp Asn Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly 1 5 10 15

Ala Ala Ala Tyr lie Tyr His Thr Gly lie Thr Asp Asn Pro Ser Leu 20 25 30

Lys Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly His 35 40 45

Gly Ser Asp Pro Ala Trp Phe Asp Pro 50 55 <210> 234 <211> 55 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽

<400> 234

Ser Ser Asn Trp Trp Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala 1 5 10 15

Ala Ala Glu lie Ser Gin Ser Gly Ser Thr Asn Asn Pro Ser Leu Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Leu Arg 35 40 45

Ser lie Asp Ala Phe Asp He 50 55 <210〉 235 <211〉 54 <212> PRT <213〉Αχ序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 235

Lys Tyr Trp Met Thr Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala i 5 10 15

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Glu Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Phe Ser Asp 50 <210> 236 <211> 54 <2I2> PRT <213〉人工序列 <220> -91 - 120060-序列表.doc 200808822 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 236

Lys Tyr Trp Met Thr Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Glu Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Phe Ser Asp 50 <210> 237 <211> 54 <212> PRT <213〉人工序列 ▲ <22.0> • <223〉ΛΧ序列之說明：合成多肽 <400〉 237

Lys Tyr Trp Met Thr Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Glu Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Phe Ser Asp 50 <210> 238 <21I> 54 <212> PRT <213〉人工序列

<220> <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 238

Lys Tyr Trp Met Thr Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Asn He Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Glu Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Phe Ser Asp 50

<2I0> 239 <211> 54 <212〉 PRT 92- 120060-序列表.doc 200808822 <213〉人工序列 <220> <223>人工序^之說明：合成多肽 <400> 239

Lys Tyr Trp Met Thr Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Glu Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Phe Ser Asp 50

<210> 240 <211> 54 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成多肽 <400> 240

Ser Tyr Trp Met Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Asn He Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Asp Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Tyr Ser Asp 50 <210〉 241 <211〉 54 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序^之說明:合成多肽 <400〉 241

Ser Tyr Trp Met Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Asn He Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Asp Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Tyr Ser Asp 50 93- 120060-序列表.doc 200808822 <210> 242 <211> 54 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 242

Ser Tyr Trp Met Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Asp Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Giy Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Tyr Ser Asp 50

<210> 243 <211> 54 <212> PRT 〈213>人工麵〈220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 243

Ser Tyr Trp Met Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Asp Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Tyr Ser Asp 50 <210〉 244 〈211〉 54 <212> PRT <213〉AX序列 <220> <223>人工序列之說明··合成多肽 <400> 244

Ser Tyr Trp Met Thr Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Asn lie Lys Pro Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Val Asp Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Val Ser Arg 35 40 45

Gly Gly Ser Phe Ser Asp -94 - 120060-序列表.doc 200808822 50 <210〉 245 <211〉 53 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成多肽 <400> 245

Asp Tyr Ala Met His Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Val He Ser Asn His Gly Lys Ser Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asp lie Ala 35 40 45

Leu Ala Gly Asp Tyr

<210> 246 <211〉 60 <212> PRT <213〉人工· <220〉 <223>人工序列之說明：合成多肽 <400> 246

Ser Tyr Ala Met Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asp Arg Val 35 40 45

Ala Val Ala Gly Lys Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp Ser 50 55 60 <210〉 247 <211〉 62 <212〉 PRT <213〉Αχ 序列 <220> <223>人工序列之說明：合成多肽 <400> 247

Ser Tyr Ala Met Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Gly lie Ser Gly Ser Gly Ser Ser Glu Gly Gly Thr Tyr Ala Asp 20 25 30

Ser Val Lys Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala 35 40 45 95- 120060-序列表.doc 200808822

Asp Arg Pro Ser Arg Tyr Ser Phe Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr 50 55 60 <210〉 248 <211〉 59 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 248

Gly Tyr Tyr Met His Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Ala Gin Lys Phe Gin 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly His 35 40 45

Met Thr Thr Val Thr Arg Asp Ala Phe Asp lie 50 55 <210> 249 <211〉 54 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 249

Gly Tyr Tyr Met His Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Ser Thr Asn Ala Gin Lys Phe Leu 20 25 30

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly His Ser 35 40 45

Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr 50 <210> 250 <211〉 60 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 250

Thr Asn Asp lie His Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala lie lie Asp Thr Ser Gly Ala Met Thr Arg Ala Gin Lys Phe Gin 20 25 30 -96- 120060·序列表.doc 200808822

Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Glu Gly Cys 35 40 45

Thr Asn Gly Val Cys Tyr Asp Asn Gly Phe Asp lie 50 55 60 <210> 251 <211> 55 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明:合成多肽 <400> 251

Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly 1 5 10 15

Ala Ala Ala Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Ala Val 20 25 30

Ser Val Lys Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala 35 40 45

Asp Glu Gly Pro Leu Asp Tyr 50 55 <210> 252 <211> 51 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 252

Arg Ala Ser Gin Ser He Ser Ser Tyr Leu Asn Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Ala Ser Lys Leu Gin Ser Gly Gly 20 25 30

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Leu Gin Asp Tyr Asn Tyr 35 40 45

Pro Leu Thr 50 <210〉 253 ‘ <211> 50 <212> PRT <213〉AX 序列 <220〉〈223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 253

Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Trp Leu Ala Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15 -97- 120060-序列表.doc 200808822

Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Ala Ala Arg Leu Arg Gly Gly Gly Gly 20 25 30

Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Gin Ser Tyr Ser Thr Pro 35 40 45 lie Ser 50 <210〉 254 <211> 51 <212〉 PRT <213〉人工频 <220> <223〉人工序列之說明:合成多肽 <400> 254

Arg Ala Ser GIu Gly lie Tyr His Trp Leu Ala Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Lys Ala Ser Ser Leu Ala Ser Gly Gly 20 25 30

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Gin Tyr Ser Asn Tyr 35 40 45

Pro Leu Thr 50 <210> 255 <211〉 54 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 255

Gin Gly Asp Asn Leu Arg Ser Tyr Ser Ala Thr Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Glu Asn Asn Arg Pro Ser Gly Gly 20 25 30

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Thr Ser Arg Val Asn Ser 35 40 45

Gly Asn His Leu Gly Val 50

<210> 256 <211> 54 <212> FRT <213〉人工靜J <220> _ <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 256

Gin Gly Asp Ser Leu Arg Tyr Tyr Tyr Ala Thr Gly Gly Gly Ala Ala -98- 120060-序列表.doc 200808822 15 ίο

Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gin Asn Asn Arg Pro Ser Gly Gly 20 25 30

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Thr Trp Asp Ser Ser 35 40 45

Val Ser Ala Ser Trp Val 50 <210〉 257 <21I> 55 <2I2> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成多肽 <400> 257

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Gly Gly

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asp Val Asn Lys Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asn Ser Tyr 35 40 45

Ala Giy Ser Asn Asn Trp Val 50 55 <210> 258 <211> 54 <212> PRT <213〉人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成多肽 <400> 258

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Gly Gly 15 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Glu Val Ser Lys Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Ser Ser Tyr 35 40 45

Ala Gly Arg Asn Trp Val 50 <210> 259 〈211〉 54 <2I2> PRT <213〉人工序列 <220〉〈223>人工序列之說明：合成多肽 99- 120060-序列表.doc 200808822 <400> 259

Thr Gly 丁hr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Gly Gly 1 5 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Glu Val Ser Lys Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asn Ser Tyr 35 40 45

Ala Gly Ser lie Tyr Val 50

〈210〉 260 <211> 56 <212〉 PRT 〈213>人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明:合成多肽

<400> 260

Thr Gly Thr Ser Gly Asp Val Gly Ala Tyr Asn Tyr Val Ser Gly Gly 15 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Glu Val Ser Lys Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asn Ser Tyr 35 40 45

Arg Gly Ser Asn Gly Pro Trp Val 50 55 <210> 261 <211> 56 <212〉 PRT <213〉XX 序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 261

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ala Tyr Asn Tyr Val Ser Gly Gly 1 5 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Glu Val Ala Arg Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Ser Ser Tyr 35 40 45

Ala Gly Ser Asn Asn Phe Ala Val 50 55 〈210〉 262 <211> 54 <212〉 PRT <213〉人工序列 -100- 120060-序列表.doc 200808822 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 262

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Phe Asn Tyr Val Ser Gly Gly 15 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Glu Val Ser Lys Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Ser Ser Trp 35 40 45

Ala Pro Gly Lys Asn Leu 50 <210> 263 <211〉 55 <212〉 PRT <213〉人工序列

<220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 263

Thr Gly Thr Ser Ser Asp lie Gly Thr Tyr Asp Tyr Val Ser Gly Gly 1 5 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Glu Val Thr Asn Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asn Ser Fhe 35 40 45

Thr Lys Asn Asn Thr Trp Val 50 55 <210> 264 〈211〉 55 <212〉 PRT <213〉XX序列 <223>人工序^之說明：合成多肽 <400> 264

Thr Gly Thr Arg Ser Asp lie Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Gly Gly 15 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asp Val Asn Asn Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asn Ser Phe 35 40 45

Thr Asp Ser Arg Thr Trp Leu 50 55 <210> 265 <211〉 55 -101 - 120060-序列表.doc 200808822 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 265

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr lie Tyr Val Ser Gly Glv 1 5 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asp Val Ser Arg Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Asn Ser Tyr 35 40 45

Thr Thr Leu Ser Thr Trp Leu 50 55

<210> 266 <211> 55 〈212〉 PRT <213〉人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明:合成多肽 <400> 266

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr Asn Leu Val Ser Gly Gly 1 5 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Glu Val Ser Asn Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Ser Ser Leu 35 40 45

Thr Ser Ser Gly Thr Trp Val 50 55 <210> 267 <211> 52 <212〉 PRT <213〉人工序列 <220> <223〉人工序^之說明：合成多肽 <400> 267

Ser Gly Asp Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Ala Ser Gly Gly Gly Ala Ala 1 5 10 15

Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Asp Arg Lys Arg Pro Ser Gly Gly 20 25 30

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Ala Trp Asp Ser Asp 35 40 - 45

Thr Ser Tyr Val 50 -102- 120060-序列表.doc 200808822 <210> 268 <211〉 52 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 <223〉人工序列之說明：合成多肽〈400) 268

Ser Gly Asp Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Ala Ser Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Arg Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly Gly 20 25 30

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Ala Trp Asp Ser Thr 35 40 45

Thr Ser Leu Val 50

<210> 269 <211> 52 <212> PRT <213〉人工序列 <220〉 _ <223〉人工序列之說明··合成多肽 <400> 269

Ser Gly Asn Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Val Ser Gly Gly Gly Ala Ala 15 10 15

Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly Gly 20 25 30

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Ala Trp Asp Ser Ser 35 40 45

Thr Asp Val Val ‘ 50 <210〉 270 <211> 55 <212〉 PRT <213〉人工頻〈220〉 <223>人工序列之說明：合成多肽 <400〉 270

Ser Gly Ser Ser Ser Asn lie Gly Asn Asn Ala Val Ser Gly Gly Gly 15 10 15

Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Tyr Asp Asn Leu Leu Pro Ser 20 25 30

Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Ala Ala Trp Asp 35 40 45 120060-序列表.doc -103 - 200808822

Asp Ser Leu Asn Asp Trp Val 50 55 <210> 271 <2!1> 56 <212> PR1 <213〉人工麵 <220> <223〉人工序列之說明：合成多肽 <400> 271

Thr Gly Ser Ser Ser Asn Leu Gly Thr Gly Tyr Asp Val His Gly Gly 15 10 15

Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Asn Ser Asn Arg Pro 20 25 30

Ser Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gin Ser Tyr 35 40 45

Asp Phe Ser Leu Ser Ala Met Val 50 55 -104- 120060-序列表.doc

Claims

200808822 十、申請專利範圍： 1. 一種單鏈可變片段，其包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序歹; e) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； k) 包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； 120060.doc 200808822 η)包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； o) 包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 100 及 SEQ ID NO·· 102 之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。 2. —種融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； J20060.doc 200808822 g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NCh 74之胺基酸序列； # k)包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； • o)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 104及 SEQ ID NO·· 106之胺基酸序列； 120060.doc 200808822 s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。 3·如請求項2之融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段進一步包含一多肽連接子。 4_如請求項2之融合至Fc之單鏈可變片段，其中該Fc係得自 IgGi、IgG2、IgG3 或 IgG4。鲁5.如請求項1之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) SEQ ID NO: 1 之VH鏈與 SEQ ID NO: 2之 VL鏈之融合； b) SEQ ID NO: 3之VH鏈與 SEQ ID NO: 4之VL鏈之融合； c) SEQ ID NO: 5之VH鏈與 SEQ ID NO: 6之VL鏈之融合； • d) SEQ ID NO: 7之 VH鏈與 SEQ ID NO: 8之 VL鏈之融合； e) SEQ ID NO: 9之VH鏈與 SEQ ID NO: 10之VL鏈之融合； f) SEQ ID NO: 56 之 VH 鏈與 SEQ ID NO: 58 之 VL 鏈之融合； g) SEQ ID NO: 60之 VH鏈與 SEQ ID NO: 62之 VL鏈之融合； 120060.doc 200808822 h) SEQ ID NO: 64之 VH鏈與 SEQ ID NO: 66之 VL鏈之融合； i) SEQ ID NO: 68之 VH鏈與 SEQ ID NO: 70之 VL鏈之融合； j) SEQ ID NO: 72之 VH鏈與 SEQ ID NO: 74之VL鏈之融合； k) SEQ ID NO: 76之VH鏈與 SEQ ID NO: 78之 VL鏈之融合；

l) SEQ ID NO: 80 之 VH 鏈與 SEQ ID NO: 82 之 VL 鏈之融合； m) SEQ ID NO: 84 之 VH 鏈與 SEQ ID NO: 86 之 VL 鏈之融合； n) SEQ ID NO: 88 之 VH 鏈與 SEQ ID NO: 90 之 VL 鏈之融合； o) SEQ ID NO: 92之VH鏈與 SEQ ID NCh 94之 VL鏈之融合； p) SEQ ID NO: 96之 VH鏈與 SEQ ID NO: 98之 VL鏈之融合； q) SEQ ID NO: 100之VH鏈與 SEQ ID NO: 102之VL鏈之融合； r) SEQ ID NO: 104之VH鏈與 SEQ ID NO: 106之VL鏈之融合； s) SEQ ID NO: 108之VH鏈與 SEQ ID NO: 110之 VL鏈之融合；或 120060.doc 200808822 〇 SEQ ID NO: 112之 νΗ鏈與 SEQ ID NO: 114之VL鏈之融合。 6·如請求項5之單鏈可變片段，其中該Vh鏈之羧基端係與該VL鏈之胺基端融合。 7 · 種核酸’其包含編碼如請求項1之單鏈可變片段之序列。 8 ·如明求項7之核酸，其進一步包含一或多個控制元件，其中該一或多個控制元件中之一或多者係可操作地連接鲁至編碼該單鏈可變片段之序列。 9· 一種載體，其包含如請求項7之核酸。 1 〇· —種載體，其包含如請求項8之核酸。 11· 一種宿主細胞，其包含如請求項9之載體。 1 2· —種宿主細胞，其包含如請求項1〇之載體。 13. —種醫藥組合物，其包含如請求項1之單鏈可變片段。 1 4· 一種治療患者貧企症之方法，其包含向該患者投與一單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQIDN0..3及SEQIDNO:4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID ΝΟ·_ 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO·· 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； 120060.doc 200808822 g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； Φ k)包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； • o)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； 120060.doc -7- 200808822 s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。 15. —種促進患者組織保護之方法，其包含向該患者投與一單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； k) 包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； 120060.doc 200808822 l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列；〇)包含SEQ ID NCh 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。 16. —種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法，其包含向該哺乳動物投與一定量之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； 120060.doc 200808822 d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； k) 包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； o) 包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序 120060.doc -10- 200808822 列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 112及 SEQ ID NO·· 114之胺基酸序 • 列。 17. 如請求項16之方法，其中該紅血球生成素受體係人類紅血球生成素受體。 18. —種抗體，其包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； • e)包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； 120060.doc -11 - 200808822 i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO·· 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； k) 包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； # m)包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； o) 包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； • q)包含 SEQ ID NCh 100 及 SEQ ID NO: 102 之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。 120060.doc -12- 200808822 19. 一種核酸，其包含編碼如請求項18之抗體之序列。 20. 如請求項19之核酸，其進一步包含一或多個控制元件，其中該一或多個控制元件中之一或多者係可操作地連接至編碼該抗體之序列。 21· —種載體，其包含如請求項19之核酸。 22· —種載體，其包含如請求項20之核酸。 23. —種宿主細胞，其包含如請求項21之載體。 24. —種宿主細胞，其包含如請求項22之載體。 _ 25. —種醫藥組合物，其包含如請求項18之抗體。 2 6. —種治療患者貧血·症之方法，其包含向該患者投與一抗體，其中該抗體包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NCh 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序 •列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序 120060.doc -13- 200808822 列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； k) 包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO·· 84及SEQ ID NO·· 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； o) 包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NCh 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。 27. —種促進患者組織保護之方法，其包含向該患者投與一 120060.doc •14- 200808822 抗體，其中該抗體包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； k) 包含SEQ ID NO·· 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序 120060.doc •15- 200808822 列；〇)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NCh 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序 • 列； s) 包含 SEQ ID NO: 108 及 SEQ ID NO·· 110 之胺基酸序列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。 28· —種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法，其包含向該哺乳動物投與一定量之抗體，其中該抗體包含： • a)包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； 120060.doc -16- 200808822 g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO·· 74之胺基酸序列； Φ k)包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NCh 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； • o)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； 120060.doc -17- 200808822 s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列0 29·如請求項28之方法，其中該紅血球生成素受體係人類紅血球生成素受體。 30. —種單鏈可變片段，其包含：

a) 包含SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f) 包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID 120060.doc •18- 200808822 NO: 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列；

i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列； j) 包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列； k) 包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NCh 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID 120060.doc -19- 200808822 NO: 175之胺基酸序列；〇)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列； p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID

NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。 3 1 · —種融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； 120060.doc -20- 200808822 b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；

d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO· 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO、33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f) 包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NCh 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列； 120060.doc •21- 200808822 j) 包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO·· 148、SEQ ID NO·· 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列； k) 包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列；

l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；〇)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列； p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； 120060.doc -22- 200808822 r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID N〇. 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID 199之胺基酸序列， s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NCh 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。 32.如請求項31之融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段進一步包含一多肽連接子。 33·如請求項31之融合至Fc之單鏈可變片段，其中該Fc係得自 IgGi、IgG2、IgG3 或 IgG4。 34如請求項1之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12及 SEQ ID NO: 13 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15 及 SEQ ID NO: 16之VL鏈之融合； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12 及 SEQ ID NO: 13 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18 及 SEQ ID NO: 19之VL鏈之融合； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12及 SEQ ID NO: 13 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之VL鏈之融合； 120060.doc -23- 200808822 d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24及 SEQ ID NO: 25 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27 及 SEQ ID NO: 28之VL鏈之融合； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30及 SEQ ID NO: 31 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33 及 SEQ ID NO: 34之VL鏈之融合； f) 包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124及 SEQ ID NO: 125 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及SEQ ID NO: 128之VL鏈之融合； g) 包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130 及 SEQ ID NO: 131 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO·· 132、SEQ ID NO: 133及SEQ ID NO: 134之VL鏈之融合； h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136 及 SEQ ID NO: 212 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO·· 138及SEQ ID NO: 139之VL鏈之融合； i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141 及 SEQ ID NO: 142之 VH鏈與包含 SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO·· 144及SEQ ID NO: 145之VL鏈之融合； j) 包含 SEQ ID N〇: 146、SEQ ID NO: 147 及 SEQ ID NO: 148 之 VH 鏈與包含 SEQ ⑴ NO: 149、SEQ ID NO: 150及SEQ ID NO: :^丨之％鏈之融合； k) 包含 SEQ ϊϋ N〇: l52、SEQ ID NO: 153 及 SEQ ID NO: 154AVH鏈與包&SEQ ID N0: 155、SEQ ID N0: 156及SEQ ID NO: 157之&鏈之融合； 120060.doc -24- 200808822 l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: NO: 160 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 161、 162及SEQ ID NO: 163之VL鏈之融合； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: NO: 166 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 167、 168及SEQ ID NO: 169之VL鏈之融合； n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: NO: 172 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 173、 # 174及SEQ ID NO: 175之VL鏈之融合； o) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: NO: 178 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 179、 180及SEQ ID NO: 181之VL鏈之融合； p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: NO: 184 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 185、 186及SEQ ID NO: 187之VL鏈之融合； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: _ NO: 190之 VH 鏈與包含SEQ ID NO: 191、 192及SEQ ID NO: 193之VL鏈之融合； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: NO: 196 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 197、 198及SEQ ID NO: 199之VL鏈之融合； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: NO: 202之 VH鏈與包含 SEQ ID NO: 203、 204及SEQ ID NO: 205之Vl鏈之融合；或 159及 SEQ ID SEQ ID NO: 165及 SEQ ID SEQ ID NO: 171 及 SEQ ID SEQ ID NO: 177及 SEQ ID SEQ ID NO: 183及 SEQ ID SEQ ID NO: 189及 SEQ ID SEQ ID NO: 195及 SEQ ID SEQ ID NO: 201 及 SEQ ID SEQ ID NO: 120060.doc -25- 200808822 t)包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207及 SEQ ID NO: 208 之 VH 鏈與包含 SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及SEQ ID NO: 211之VL鏈之融合。 35·如請求項34之單鏈可變片段，其中該VH鏈之羧基端係與該VL鏈之胺基端融合。 3 6· —種核酸，其包含編碼如請求項30之單鏈可變片段之序列。 3 7 ·如請求項3 6之核酸，其進一步包含一或多個控制元件， # 其中該一或多個控制元件中之一或多者係可操作地連接至編碼該單鏈可變片段之序列。 38. —種載體，其包含如請求項36之核酸。 39· —種載體，其包含如請求項37之核酸。 40· —種宿主細胞，其包含如請求項38之載體。 41. 一種宿主細胞，其包含如請求項39之載體。 42· —種醫藥組合物，其包含如請求項30之單鏈可變片段。 43. —種治療患者貧血症之方法，其包含向該患者投與一單 ® 鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 120060.doc -26- 200808822 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO·· 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；

f) 包含 SEQ ID NO: 123 NO: 125 > SEQ ID NO: 126 NO: 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NO: 129 NO: 131 > SEQ ID NO: 132 NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135 NO: 212 > SEQ ID NO: 137 NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140 NO: 142、SEQ ID NO: 143 NO: 145之胺基酸序列； j) 包含 SEQ ID NO: 146 NO: 148、SEQ ID NO: 149 NO: 151之胺基酸序列； k) 包含 SEQ ID NO: 152 SEQ ID NO: 124、SEQ ID SEQ ID NO: 127及 SEQ ID SEQ ID NO: 130、SEQ ID SEQ ID NO: 133及 SEQ ID SEQ ID NO: 136、SEQ ID SEQ ID NO: 138及 SEQ ID SEQ ID NO: 141、SEQ ID SEQ ID NO: 144及 SEQ ID SEQ ID NO: 147、SEQ ID SEQ ID NO: 150及 SEQ ID SEQ ID NO: 153、SEQ ID 120060.doc -27· 200808822 NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； # n)包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列； o) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列； p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO· 186及 SEQ ID • NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID 120060.doc -28- 200808822 NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t)包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。 44. 一種促進患者組織保護之方法，其包含向該患者投與一單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f) 包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID 120060.doc -29- 200808822 NO: 128之胺基酸序列； g) 包含SEQIDNO:129、SEQIDNO:130、SEQID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO、138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID

NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列； j) 包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列； k) 包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； η) 包含SEQIDNO:170、SEQIDNO:171、SEQID NO: 172、SEQ ID NO: 173 ν SEQ ID NO: 174及 SEQ ID 120060.doc -30- 200808822 NO: 175之胺基酸序列；〇)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO·· 181之胺基酸序列； p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID

NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。 45. —種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法，其包含向該哺乳動物投與一定量之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之 120060.doc •31· 200808822 胺基酸序列； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列；

d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f) 包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO·· 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID I20060.doc -32- 200808822 NO: 145之胺基酸序列； j) 包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列； k) 包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID

NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列； o) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列； p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID 120060.doc -33- 200808822 Ν〇: 03之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ⑴ NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID N〇· l96、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ iD NQ: l99之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID • NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。 46·如請求項45之方法，其中該紅血球生成素受體係人類紅企球生成素受體。 47. —種抗體，其包含： a)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； _ b)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； e)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO·· 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d)包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 120060.doc -34- 200808822 28之胺基酸序列； e)包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；

f) 包含SEQ NO: 125、SEQ NO: 128之胺基 g) 包含SEQ NO: 131、SEQ NO: 134之胺基 h) 包含SEQ NO: 212、SEQ NO: 139之胺基 i) 包含SEQ NO: 142、SEQ NO: 145之胺基 j) 包含SEQ NO: 148、SEQ NO: 151之胺基 k) 包含SEQ NO: 154、SEQ NO: 157之胺基 l) 包含SEQ NO: 160、SEQ ID NO: 123、 ID NO: 126、酸序列； ID NO: 129、 ID NO: 132、酸序列； ID NO: 135、 ID NO: 137、酸序列； ID NO: 140、 ID NO: 143、酸序列； ID NO: 146、 ID NO: 149、酸序列； ID NO: 152、 ID NO: 155、酸序列； ID NO: 158、 ID NO: 161 > SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: 124、SEQ ID 127及 SEQ ID 130、SEQ ID 133及 SEQ ID 136、SEQ ID 13 8及 SEQ ID 141、SEQ ID 144及 SEQ ID 147、SEQ ID 150及 SEQ ID 153、SEQ ID 156及 SEQ ID 159、SEQ ID 162及 SEQ ID I20060.doc -35- 200808822 NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；

〇)包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列； P)包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID 120060.doc -36- 200808822 NO: 211之胺基酸序列。 48· —種核酸/其包含編碼如請求項47之抗體之序列。 4 9.如請求項4 8之核酸，其進一步包含一或多個控制元件，其中該一或多個控制元件中之一或多者係可操作地連接至編碼該抗體之序列。 5 0. —種載體，其包含如請求項48之核酸。 5 1 · —種載體，其包含如請求項49之核酸。 52. —種宿主細胞，其包含如請求項50之載體。鲁53· —種宿主細胞，其包含如請求項51之載體。 54. —種醫藥組合物，其包含如請求項47之抗體。 5 5. —種治療患者貧血症之方法，其包含向該患者投與一抗體，其中該抗體包含： a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: ® 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列； 120060.doc -37- 200808822 e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f) 包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列； j) 包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列； k) 包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； 120060.doc -38- 200808822 m)包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID N〇: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID N〇: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列；〇)包含 SEQ ID NO·· 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID N〇: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 18 1之胺基酸序列； p)包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID N〇: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列；包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID N〇: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID N〇. l96、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID N〇: 之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。 120060.doc -39- 200808822 56· —種促進患者組織保護之方法，其包含向該患者投與一抗體，其中該抗體包含： a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列；

c) 包含 SEQ ID NO ·· 11、SEQ ID NO·· 12、SEQ ID NO·· 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f) 包含 SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO: 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列；· h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID 120060.doc -40- 200808822 NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列； j) 包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列；

k) 包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列； o) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列； p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID 120060.doc -41- 200808822 NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。 57· —種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法，其包含向該哺乳動物投與一定量之抗體，其中該抗體包含： a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 120060.doc -42- 200808822 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f) 包含 SEQ ID NO: 123 NO: 125、SEQ ID NO: 126 NO: 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NO: 129 NO: 131、SEQ ID NO: 132 NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135 NO: 212、SEQ ID NO: 137 NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140 NO: 142、SEQ ID NO: 143 NO: 145之胺基酸序列； j) 包含 SEQ ID NO: 146 NO: 148、SEQ ID NO: 149 NO: 151之胺基酸序列； k) 包含 SEQ ID NO: 152 SEQ ID NO: 124、SEQ ID SEQ ID NO: 127及 SEQ ID SEQ ID NO: 130、SEQ ID SEQ ID NO: 133及 SEQ ID SEQ ID NO: 136、SEQ ID SEQ ID NO: 138及 SEQ ID SEQ ID NO: 141、SEQ ID SEQ ID NO: 144及 SEQ ID SEQ ID NO: 147、SEQ ID SEQ ID NO: 150及 SEQ ID SEQ ID NO: 153、SEQ ID 120060.doc •43· 200808822 NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列；

n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列； o) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO] 181之胺基酸序列； p) 包含8五(^10凡0:182、8£(5 10>10:183、8£(^10 NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO·· 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID 120060.doc -44 - 200808822 NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 205之胺基酸序列；或 t)包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。 58·如請求項57之方法，其中該紅血球生成素受體係人類紅血球生成素受體。 59· —種抗體，其包含：籲 a)包含SEQ ID NO: 45之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 46之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 47之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列；或 e) 包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。 60· —種核酸，其包含編碼如請求項59之抗體之序列。 61 ·如请求項6 0之核酸，其進一步包含一或多個控制元件，其中該一或多個控制元件中之一或多者係可操作地連接鲁至該編碼該單鏈可變片段之序列。 62· —種載體，其包含如請求項6〇之核酸。 63· —種載體，其包含如請求項61之核酸。 64· —種宿主細胞，其包含如請求項62之载體。 65. —種宿主細胞，其包含如請求項63之載體。 66· —種醫藥組合物，其包含如請求項59之單鏈可變片段。 67_ —種治療患者貧血症之方法，其包含向該患者投與一抗體，其中該抗體包含： 120060.doc -45 - 200808822 a) 包含SEQ ID NO: 45之胺基酸序列； b) 包含SEQIDNO:46之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 47之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列；或 e) 包含SEQ ID NO·· 49之胺基酸序列。 68. —種促進患者組織保護之方法，其包含向該患者投與一抗體，其中該抗體包含： a) 包含SEQ ID NO: 45之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 46之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 47之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列；或 e) 包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。 69. —種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法，其包含向該哺乳動物投與一定量之抗體，其中該抗體包含： a) 包含SEQIDNOM5之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 46之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 47之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列；或 e) 包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。 70. 如請求項69之方法，其中該紅血球生成素受體係人類紅血球生成素受體。 71· —種製造一單鏈可變片段之方法，其包含在宿主細胞中表現該單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： 120060.doc -46- 200808822 a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQIDNO:3及SEQIDNO:4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； k) 包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； 120060.doc -47- 200808822 〇)包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO·· 112 及 SEQ ID ΝΟ·_ 114 之胺基酸序列。 72. —種製造一融合至Fc之單鏈可變片段之方法，其包含在宿主細胞中表現該融至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含SEQ ID NO: 1及SEQ ID NO: 2之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 3及SEQ ID NO: 4之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 5及SEQ ID NO: 6之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8之胺基酸序列； e) 包含SEQ ID NO: 9及SEQ ID NO: 10之胺基酸序列； f) 包含SEQ ID NO: 56及SEQ ID NO: 58之胺基酸序列； g) 包含SEQ ID NO: 60及SEQ ID NO: 62之胺基酸序 120060.doc -48 - 200808822 列； h) 包含SEQ ID NO: 64及SEQ ID NO: 66之胺基酸序列； i) 包含SEQ ID NO: 68及SEQ ID NO: 70之胺基酸序列； j) 包含SEQ ID NO: 72及SEQ ID NO: 74之胺基酸序列； k) 包含SEQ ID NO: 76及SEQ ID NO: 78之胺基酸序列； l) 包含SEQ ID NO: 80及SEQ ID NO: 82之胺基酸序列； m) 包含SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 86之胺基酸序列； n) 包含SEQ ID NO: 88及SEQ ID NO: 90之胺基酸序列； o) 包含SEQ ID NO: 92及SEQ ID NO: 94之胺基酸序列； p) 包含SEQ ID NO: 96及SEQ ID NO: 98之胺基酸序列； q) 包含SEQ ID NO: 100及SEQ ID NO: 102之胺基酸序列； r) 包含SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 106之胺基酸序列； s) 包含SEQ ID NO: 108及SEQ ID NO: 110之胺基酸序 120060.doc -49- 200808822 列；或 t) 包含SEQ ID NO: 112及SEQ ID NO: 114之胺基酸序列。 73. —種製造一單鏈可變片段之方法，其包含在宿主細胞中表現該單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； # b)包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: W 28之胺基酸序列； e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列； f) 包含 SEQ ID NO·· 123、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO·· 125、SEQ ID NO·· 126、SEQ ID NO: 127及 SEQ ID NO·· 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130、SEQ ID 120060.doc -50- 200808822 NO: 131、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 133及 SEQ ID NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列；

j) 包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列； k) &#SEQIDNO:152、SEQIDNO:153、SEQID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列； m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO·· 175之胺基酸序列； o) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID 120060.doc -51- 200808822 NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列； SEQ ID NO: 183、SEQ ID SEQ ID NO: 186及 SEQ ID SEQ ID NO: 189、SEQ ID SEQ ID NO: 192及 SEQ ID SEQ ID NO: 195、SEQ ID SEQ ID NO: 198及 SEQ ID SEQ ID NO: 201、SEQ ID SEQ ID NO: 204及 SEQ ID SEQ ID NO: 207、SEQ ID SEQ ID NO: 210及 SEQ ID p) 包含 SEQ ID NO: 182 NO: 184、SEQ ID NO: 185 NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188 NO: 190、SEQ ID NO: 191 NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194 NO: 196、SEQ ID NO: 197 NO: 199之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200 NO: 202 > SEQ ID NO: 203 NO: 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206 NO: 208、SEQ ID NO: 209 NO: 211之胺基酸序列。 74· —種製造一融合至Fc之單鏈可變片段之方法，其包含在宿主細胞中表現該融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15及 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列； b) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 120060.doc -52- 200808822 13、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及 SEQ ID NO: 19之胺基酸序列； c) 包含 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 21 及 SEQ ID NO: 22之胺基酸序列； d) 包含 SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及 SEQ ID NO: 28之胺基酸序列；

e) 包含 SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及 SEQ ID NO: 34之胺基酸序列；

f) 包含SEQ ID NO: 123 NO: 125、SEQ ID NO: 126 NO: 128之胺基酸序列； g) 包含 SEQ ID NCh 129 NO: 131、SEQ ID NO: 132 NO: 134之胺基酸序列； h) 包含 SEQ ID NO: 135 SEQ ID NO: 124、SEQ ID SEQ ID NO: 127及 SEQ ID SEQ ID NO: 130、SEQ ID SEQ ID NO: 133及 SEQ ID SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 138及 SEQ ID NO: 139之胺基酸序列； i) 包含 SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 144及 SEQ ID NO: 145之胺基酸序列； j) 包含 SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO·· 147、SEQ ID 120060.doc -53 - 200808822 NO: 148、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 150及 SEQ ID NO: 151之胺基酸序列； k) 包含 SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 156及 SEQ ID NO: 157之胺基酸序列； l) 包含 SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 162及 SEQ ID NO: 163之胺基酸序列；

m) 包含 SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 168及 SEQ ID NO: 169之胺基酸序列； n) 包含 SEQ ID NO: 170、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 174及 SEQ ID NO: 175之胺基酸序列； · o) 包含 SEQ ID NO: 176、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 180及 SEQ ID NO: 181之胺基酸序列； p) 包含 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 186及 SEQ ID NO: 187之胺基酸序列； q) 包含 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 192及 SEQ ID NO: 193之胺基酸序列； r) 包含 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 195、SEQ ID 120060.doc -54- 200808822 NO: 196、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 198及 SEQ ID NO: 199之胺基酸序列； s) 包含 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 202、SEQ ID NO: 203、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NCh 205之胺基酸序列；或 t) 包含 SEQ ID NO: 206、SEQ ID NO: 207、SEQ ID NO: 208、SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 210及 SEQ ID NO: 211之胺基酸序列。籲75_ —種製造一融合至Fc之單鏈可變片段之方法，其包含在宿主細胞中表現該融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段包含： a) 包含SEQ ID NO: 45之胺基酸序列； b) 包含SEQ ID NO: 46之胺基酸序列； c) 包含SEQ ID NO: 47之胺基酸序列； d) 包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列；或 e) 包含SEQ, ID NO: 49之胺基酸序列。 • 76· —種單鏈可變片段，其特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； Ο至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93; d) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 120060.doc -55- 200808822 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及 H70 ;或 h) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 77. —種融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合： # a)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ; c) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93; d) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; ® f)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及 H70 ;或 h) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 78. 如請求項77之融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段進一步包含一多肽連接子。 79. 如請求項77之融合至Fc之單鏈可變片段，其中該Fc係得 120060.doc -56 - 200808822 自 IgGi、IgG2、IgG3 或 IgG4 0 80· —種核酸，其包含編碼如請求項76之單鏈可變片段之序列。 8 1.如請求項8 0之核酸，其進一步包含一或多個控制元件，其中該一或多個控制元件中之一或多者係可操作地連接至該編碼該單鏈可變片段之序列。 82· —種載體，其包含如請求項80之核酸。 83· —種載體，其包含如請求項81之核酸。 ⑩84· —種宿主細胞，其包含如請求項82之載體。 85. —種宿主細胞，其包含如請求項83之載體。 86· —種醫藥組合物，其包含如請求項76之單鏈可變片段。 87. —種治療患者貧血症之方法，其包含向該患者投與一單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及Η114; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； ❿ c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 120060.doc -57- 200808822 P63、L66、R68及 H70 ;或 h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 8 8. —種促進患者組織保護之方法，其包含向該患者投與一單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； c) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93; # d)至少人類£?〇受體胞外域之胺基酸£62、？93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及 H70 ;或 ® h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 89. —種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法，其包含向該哺乳動物投與一定量之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； c) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93; 120060.doc -58 - 200808822 d) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸八44、乂48、 P63、L66、R68及H70 ;或 # h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 90·如請求項89之方法，其中該紅血球生成素受體係人類紅血球生成素受體。 91. 一種抗體，其特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； c) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93; ® d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸£62、卩93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及 H70 ;或 120060.doc -59- 200808822 h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 92· —種核酸，其包含編碼如請求項91之抗體之序列。 93·如請求項92之核酸，其進一步包含一或多個控制元件，其中該一或多個控制元件中之一或多者係可操作地連接至編崎該抗體之序列。 94· 一種載體，其包含如請求項92之核酸。 95· —種載體，其包含如請求項93之核酸。 9 6. —種宿主細胞，其包含如請求項9 4之載體。籲97· —種宿主細胞，其包含如請求項95之載體。 9 8 · —種醫藥組合物，其包含如請求項91之抗體。 99· 一種治療患者貧血症之方法，其包含向該患者投與一抗體，其中該抗體特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114; b) 至少人類£?〇受體胞外域之胺基酸891、卩93及 H114 ； c) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93; ® d)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及 H70 ;或 120060.doc •60- 200808822 h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 100. —種促進患者組織保護之方法，其包含向該患者投與一抗體，其中該抗體特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114 ; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； c) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93; d) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 # M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類丑?〇受體胞外域之胺基酸八44、¥48、 P63、L66、R68及 H70 ;或 h) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 • 101· —種活化哺乳動物中紅血球生成素受體内源活性之方法，其包含向該哺乳動物投與一定量之抗體，其中該抗體特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； c) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93; d) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 120060.doc -61- 200808822 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸乂48、冒64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 P63、L66、R68及 H70 ;或 h) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 _ 102·如請求項101之方法，其中該紅血球生成素受體係人類紅血球生成素受體。 103· —種製造一單鏈可變片段之方法，其包含在宿主細胞中表現該單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； ® c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 120060.doc -62 - 200808822 P63、L66、R68及 H70 ;或 h)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 104. —種製造一融合至Fc之單鏈可變片段之方法，其包含在宿主細胞中表現該融合至Fc之單鏈可變片段，其中該單鏈可變片段特異性結合： a) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93及H114; b) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸S91、F93及 H114 ； # c)至少人類Epo受體胞外域之胺基酸F93 ; d) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸E62、F93及 M150 ； e) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、E62、 L66、R68及 H70 ; f) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸V48、W64、 L66、R68及 H70 ; g) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸A44、V48、 • P63、L66、R68及 H70 ;或 h) 至少人類Epo受體胞外域之胺基酸L66及R99。 105· —種抗體，其結合人類Epo受體，該抗體包含一或多個選自以下序列之序列： A)第一胺基酸序列，其包含： i) 具有式：X〗YWM X5之CDR1，其中Χι為任何胺基酸，且X5為任何胺基酸； Π)具有式：NIKPDGSEKYV X12 SVKG 之 CDR2， 120060.doc -63- 200808822 其中Xl2為任何胺基酸；及 iii)具有式：VSRGGS X7 SD之CDR3，其中χ7為任何胺基酸；及 Β)第二胺基酸序列，其包含： ' i)具有式：TGTSSD X7 G X9 Y Xn yvs 之 CDR1，其中χ7為任何胺基酸，χ9為任何胺基酸，且Χιι為任何胺基酸；及 ii)具有式：Xi V X3 X4 RPS之CDR2，其中义丨為任 Φ 何胺基酸，X3為任何胺基酸，且X4為任何胺基酸。 106.如請求項105之抗體，其中·· A) 該第一胺基酸序列包含： i) 具有式：Xi YWM X5之CDR1，其中又丨為κ或 S，且X5為T或S ; ii) 具有式：NIKPDGSEKYV X12 SVKG 之 CDR2，其中X12gD或E ;及 • Hi)具有式：VSRGGS X7 SD 之 CDR3，其中X7 為 F 或Y ;及 B) 該第二胺基酸序列包含： 0 具有式：TGTSSD X7 G X9 Y Xn YVS 之 CDR1，其中χ7為V或I，X9為G、A、T或S，且Xn 為N、D或I ;及 ii)具有式：X! V X3 X4 RPS之CDR2，其中又1為0 或E，X3為N、S、A或T，且X4為K、N或R。 120060.doc -64- 200808822 107.如請求項105之抗體，其中該抗體包含該第一胺基酸序列及該第二胺基酸序列。 108·如請求項107之抗體，其中該第一胺基酸序列係與該第二胺基酸序列共價結合。 109· —種單鏈可變片段，其結合人類Ep〇受體，該單鏈可變片段包含一或多個選自以下序列之序列·· A) 弟一胺基酸序列，其包含·· i)具有式：X! YWM X52CDR1，其中任何胺基酸’且X5為任何胺基酸； ϋ)具有式：NIKPDGSEKYV X12 SVKG 之 CDR2，其中X!2為任何胺基酸；及 ⑴）具有式：VSRGGS X7 SD之CDR3，其中X7為任何胺基酸；及 B) 第二胺基酸序列，其包含： 0具有式：TGTSSD X7 G X9 Y Xu YVS 之 CDR1，其中X7為任何胺基酸，X9為任何胺基酸，且又”為任何胺基酸；及 u)具有式·· Xi V X3 x4 RPS之CDR2，其中X〗為任何胺基酸，X3為任何胺基酸，且χ4為任何胺基酸。 110·如明求項之單鏈可變片段，其中 Α)該第一胺基酸序列包含：〇具有式：Xi YWM X^CDRl，其中 ΧΑΚ或 S，且Χ5為Τ或S ; 120060.doc -65- 200808822 ii) 具有式：NIKPDGSEKYV X12 SVKG 之 CDR2，其中X12>D或E ;及 iii) 具有式：VSRGGS X7 SD之 CDR3，其中 X7 為 F 或Y ;及 Β)該第二胺基酸序列包含： i)具有式：TGTSSD X7 G X9 Y Xu YVS之 CDR1，其中X7為V或I，X9為G、A、T或S，且Xh為N、D / 或I ;及 φ ii)具有式：Xi V X3 X4 RPS之 CDR2，其中 XiSD或 E，X3 為 N、S、A 或 T，且 X4 為 K、N 或 R。 111. 如請求項108之單鏈可變片段，其中該抗體包含該第一胺基酸序列及該第二胺基酸序列。 112. 如請求項111之單鏈可變片段，其中該第一胺基酸序列係與該第二胺基酸序列共價結合。 113. —種抗體，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域34位置處之 ® 胺基酸為精胺酸。 114. 一種抗體，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域60位置處之胺基酸為精胺酸。 115. —種抗體，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域88位置處之胺基酸為精胺酸。 116• —種抗體，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突 120060.doc -66- 200808822 變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域150位置處之胺基酸為精胺酸。 117. —種抗體，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域87位置處之胺基酸為精胺酸。 118. —種抗體，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域63位置處之胺基酸為精胺酸。鲁 119. 一種抗體，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域64位置處之胺基酸為精胺酸。 120. —種抗體，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域99位置處之胺基酸為精胺酸。 121. —種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域34 • 位置處之胺基酸為精胺酸。 122. —種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域60 位置處之胺基酸為精胺酸。 123· —種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域88 位置處之胺基酸為精胺酸。 124· —種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但 120060.doc •67- 200808822 無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域 15 0位置處之胺基酸為精胺酸。 125· —種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域87 位置處之胺基酸為精胺酸。 126· —種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域63 位置處之胺基酸為精胺酸。 # 127. —種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域64 位置處之胺基酸為精胺酸。 128. —種單鏈可變片段，其與野生型人類Epo受體結合，但無法與突變Epo受體結合，其中該突變Epo受體胞外域99 位置處之胺基酸為精胺酸。

120060.doc -68 -