TW200524846A - Novel compounds - Google Patents

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200524846 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係有關新穎化合物、其製備方法、包括其之組 成物以及其於治療或預防疾病上之利用，該疾病或不適係 可經由抑制細胞黏著而控制。更特定言之，本發明係有關 新穎苯丙胺酸衍生物，其會抑制α4整合素（integrin)所媒 介之細胞黏著，故認為可用於治療或預防炎症疾病。 【先前技術】 白血球與内皮細胞或細胞外間質蛋白之間的多重黏 _ 著交互作用為免疫及發炎調節作用之關鍵因子。白血球自 發炎處之血管移動離開的最早事件包括：白血球滾動，隨 後整合素活動性改變，此導致隨後穩固之附著（參照 Butcher, Cell 67:1033-1036 (1991); Harlan, Blood 3:513-525 (1985); Hemler, Annu. Rev. Immunol. 8:365-400 (1990); Osborn, Cell 62:3-6 (1990); Shimizu et al.?

Immunol. Rev. 114:109-143 (1990); Springer, Nature 346:425-434 (1990))。回應趨化因子，白血球會移動穿過 兩鄰近内皮細胞並進入部分由細胞外間質蛋白纖維結合素 (fibronectin, FN) ($- ^ Wayner et al.? J. Cell Biol. 105:1873-1884 (1987))及膠原蛋白（CN)(參見 Bornstein et al·，Ann· Rev. Biochem. 49:957-1003 (1980);以及 Miller， Chemistry of the collagens and their distribution,於 “Extracellular Matrix Biochemistry” 5 K.A. Piez and A. H. Reddi，editors，Elsevier，Amsterdam，41-78 (1983))戶斤組成 5 316565 200524846 之組織。麥與此等黏著反應之重要辨識分子係屬於整合素 基因超級家族的成員（參見hv· /則浙?0/· 8:365-400 (1990)； Hynes, Ce// 48:549-554 (1987); Shimizu et al·，/m則⑽/· hv· 114:1〇9_143 (199〇);以及 Sprmger， 346:425-434 (1990)) ° 整合素為由非共價結合之次單元所組成的雜二聚體 (heterodimer)，該次單元係指α與占次單元。迄今，已鑑 定出8種整合素/5次單元，其可與16種不同α次單元結合 以形成至少23種不同整合素。 α 4 /5 !整合素，亦被稱為VLA-4 (極遲抗原-4)，係構 成性地表現於白血球（包括淋巴球、單核球、嗜酸性白血球 及嗜鹼性白血球）表面（參見Hemler et al·，CTzem. 262:11478-11485 (1987); W&B〇Chneretal.，J.£Xp.U· 173:1553-15 56 (1991))。經報告指出VLA-4係存在於敗血 症病患之嗜中性白血球上（參見Ibbotson et al.，Nature Med 7:465-470 (2001))。VLA-4會結合至已活化内皮細胞上之 血管細胞黏者分子-1 (VCAM -1)’致使白血球外渗（elices et al·，Ce// 60:577-5 84 (1990))。一旦當該細胞到達血管外 之空間時’則VLA-4可結合至連結片段-1 (connecting segment-1，CS-1)，該連接片段-1為fn A鏈之可變剪接區 (alternatively spliced region)(Wayne et al.? J. Cell Biol. 109:1321-1330 (1989))。此外，已知VLA-4會結合至造骨 蛋白，該造骨蛋白為動脈硬化斑塊中經上調（upregulated) 之蛋白（參見 Bayless et al·，J. ☆// Sczhce 111:1165-1174 6 316565 200524846 (1998))。 α 4冷7整合素，亦知為LPAM-1 (淋巴球-集合淋巴結 (Peyer、patch )黏著分子-1)，會與三種已知配位子 (VCAM-1、CS-1、MAdCAM-Ι)相互作用。黏膜位址素細胞 黏著分子（Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule -1， MAdCAM-1)為對a 4 /3 7顯現獨特專一性之一種配位子（參 ^ Andrew et al.? J. Immunol. 153:3847-3861 (1994);

Briskin et al.，TVWt/re 363:461-464 (1993);以及 Shyjan et al·， J· /mmw^zo/· 156:2851-2857 (1996))。MAdCAM-1 高度表現 於集合淋巴結高内皮小靜脈上、腸系膜淋巴結内、以及腸 黏膜固有層與乳腺小靜脈上（Berg et al·，/mm關〇/·及ev· 105:5-18 (1989))。顯示整合素 α 4/5 7 與 MAdCAM-1 於調節 淋巴球歸巢遷移（trafficking)至正常腸部係相當重要 (Holzmann et al·，Ce// 56:37-46 (1989)) 〇 此外，已有文獻述及整合素《4冷1及石7之口服 生物可利用之非胜肽小分子拮抗劑可用於治療或預防如氣 喘、發炎性腸道疾病、類風濕性關節炎、多發性硬化症及 其他疾病之症狀（參見專利說明書WO 99/363 93及W〇 02/18320，其說明書之内容以參考文獻方式納入本文）。 目前所發現之新種類化合物係落於專利說明書WO 99/36393之一般範圍内，但並未明確揭露於其中。 【發明内容】 於第一實施態樣中，本發明係提供式（I)化合物或其醫 藥上可接受之衍生物： 316565 200524846

式中 R1為〉臭；以及 R2為鹵素、Ci_6垸基或c“院氧基。 較佳者，^為_素或c]_6烧氧基。 更佳者，R2為氟、甲氧基或乙氧基。 、於其他實施態樣中，本發明係提供E1至E7 (如下述） 或其醫藥上可接受之衍生物，亦即 (S)-2-{[l-(2-濞_5·乙氧基苯基）甲醯基]胺基卜3-(4，-氰 基2，6 -一甲氧基聯笨_4_基）丙酸； (S)-2-{[l-(2-溴-5-氟笨基）甲醯基]胺基卜3-(4，_氰基 2，6 -二曱氧基聯笨_4_基）丙酸； (S)-2-{[l-(2-溴-5-曱氧基苯基）曱醯基]胺基卜3_(4，_氰 基-2，6’-二曱氧基聯苯基）丙酸； (8)-2-{[1-(2-溴-5-曱基苯基）曱醯基]胺基卜3-(4，-氰基 -2，6、二甲氧基聯苯_4_基）丙酸； (S)-2_{[(2-漠-5_氯苯基）曱醯基]胺基卜3_[4，-氰基 ，6、二甲氧基聯苯基]丙酸； (S)-2-{[(2,5-二溴苯基）甲醯基]胺基卜3_[4，-氰基 8 316565 200524846 -2’，6’-一甲氧基聯笨—4-基]丙酸； (S)-2-{[(5-(異丙氧基）_2_溴苯基）甲醯基]胺基卜3_[4，_ 氰基-2’，6’-二甲氧基聯苯_4_基]丙酸 或其醫藥上可接受之衍生物。 本5兒明書之全部内容除非另行說明，否則： 該術語「鹵素」係用於敘述選自氟、氯、溴或碘者; 該術語「Cl_6烷基」係用於敘述由包含1至ό個碳原 子之直鏈或分支狀烷基所組成之基團或基團之一部份；此 等基團之實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、 異丁基、第三丁基、戊基或己基； 。亥術π Ci-6烷氧基」係用於敘述以氧原子鍵結至上 述，6烷基之基團或基團之一部份；此等基團之實例包括 :乳基：乙氧基、丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第三丁 乳基、戊氧基或己氧基。 〃本發明化合物之特徵為：於聯苯基核心之4,位置引 氰基並使該聯笨基核心、與所請2,5_二取代苯甲酿基组合 =化合物或其㈣上可接受之衍生物對於經^ …“之細胞黏著具有強烈抑制活性。此外，亦發現 些霄施例於經口投藥及/或適去 極佳生物可利用率。 ^方式全身性投樂後顯現 卜述）展現上述特性之有利組合。 且有=Γ(Ι)化合物或其醫藥上可接受之㈣^ 所有此寺異構型，包括其混合物，皆包含構 316565 9 200524846 非鏡像異構物 法、色層分析法知技術例如··分段結占 型亦可經由下'卞士^ ,凡成。忒化合物之單一立體異構 物製備、或使.由相對應之光學性純之中間產 應消旋物之離析二ριχ =體(=1哪啦由相對 之分段姓曰法制 或、，，工由非鏡像異構物鹽類 之方二曰其中該非鏡像異構物鹽類係由相對庫 =與適當光學活性酸或驗反應形成。或者鏡= 社種二經由與適當對掌性化合物反應形成新共價鍵 =鏡像混合物(在此情況下係分別形成軸類及:〆 二可心^技術如管柱層析法、hplc或分段結晶 本文所使用術語「醫藥上可接受之衍生物」意指林 明化合物之任何醫藥上可接受鹽或前藥例如酯，於投荜至 接受者時，能夠提供（直接或間接地）本發明化合物或^活 性代謝物或殘基。此等衍生物不需經過度實驗而可為該項 技藝中具有通常知識者所辨識。然而，可參照「Burg^，s、 Medicinal Chemistry and Drug Discovery，5th Edition Vol Principles and Practice」之教示，該文教示此類衍生物之 範圍以參考文獻方式納入本文。較佳之醫藥上可接受衍生 物為鹽類及酯類。 ’刀g °接㈣早-種非鏡像異構物可藉由適當化學作用 如新共價鍵之水解分裂而轉換為單—種鏡像異構物。 於有機化學技藝中具有通常知識者應了解，許多有機 化合物可與溶劑形成複合物，其可於溶劑中反應或自溶劑 316565 10 200524846 沉澱或結晶。此等複合物已知為「溶劑合物」。例如，具有 水之複合物已知為「水合物」。本發明化合物之溶劑合物係 包含於本發明之範®壽内。 本文所使用術語「前藥」意指可於體内轉換（例如，藉 由於血液中水解）成為其具有療效之活性形式的化合物。醫 藥上可接受之前藥係詳述於：T· Higuchi and V· Stella, Prodrugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series，Edward B. Roche，ed·，Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987，and in D. Fleisher， S. Ramon and H. Barbra “ Improved oral drug delivery: solubility limitations overcome by the use of prodrugs” ， Advanced Drug Delivery Reviews (1996) 19(2) 115-130，其 中各文獻以參考文獻之方式納入本文。 前藥可為任何經共價鍵結之載劑，當此類前藥經投藥 至病患時，可於活體内釋放式（I)化合物或其醫藥上可接受 之衍生物。前藥一般係經由對官能基進行某種程度之修飾 而製備，因此可藉由例行性操作或於活體内將該修飾裂解 以產生原化合物。於羧酸（-COOH)之實例中，可使用酯類 如曱酯、乙酯、雙酯類等等。酯類可本身具有活性，及/ 或於人體内在活體條件下為可水解性。適當之醫藥上可接 受且於活體内可水解之酯基包括於人體内可輕易分解而留 下原酸（parent acid)或其鹽者。 本發明化合物可呈醫藥上可接受之鹽形式及/或可以 11 316565 200524846 醫藥上可接受之鹽形式投藥。適當鹽類之評介可參見

Berge et al·，J· Pharm· Sci·，1977, 66, 1-19。 '典型地，醫藥上可接受之鹽可使用期望之酸或鹼容易 地製備。該鹽可自溶液沉澱再經由過濾收集或者可經由蒸 發將溶劑移除。 於式⑴化合物之實例中，適當之醫藥上可接受鹽類係 由醫藥上可接受之鹼形成，該醫藥上可接受之鹽類包括銨 鹽類、鹼金屬鹽類如鈉及鉀之鹽類、鹼土金屬鹽類如鈣及 鎂之鹽類以及與有機鹼形成之鹽類，包括一級、二級及三 級月女類如異丙胺、二乙胺、乙醇胺、三曱胺、二環己胺、 N-甲基葡萄糖胺（giucamine)以及參（羥曱基）曱胺。 於其他實施態樣中，本發明亦提供式⑴化合物之製備 方法，該方法包括水解式（II)之羧酸酯衍生物：

R1 、 (II) 及R-係如式（I)中所定義，以及R為可形成羧

(式中R 之基團），之後，視需要可形成其醫藥上可接受之衍生 適當的R基團之實例為Cw烷基如曱基或第三丁基， 316565 12 200524846 較2甲基。水解作用可於酸性或驗性介質中發生。於驗 貝中X解之。兒明貫例為：於適當溶劑中以鹼金屬氫氧 化物處理式（II)化合物，例如於四氮咬喃水溶液中以氯氧化 j處理之。於酸性介質中水解之說明實例為：於適當共溶 J (co_solvent)中、升高之溫度下以無機酸處理式⑴)化合 物例如於一嗜$兀中、6〇c>c下以5N鹽酸處理一夜。此等 方法為該項技藝中具有通常知識者所熟知。 •式（π)化合物可藉由將式（ΙΠ)化合物或其酸加成鹽 (acid addition salt):

(式中R係如式（II)中所定義） 與式（IV)化合物：

(式中R及R-係如式⑴中所定義，以及X為經基或 離去基）反應而製備。

式（III)化合物之酸加成鹽的適當實例為鹽酸鹽。當X 316565 13 200524846 為離去基時，離去基X之適當實例為ii素，較佳為氯。式 (III)與（IV)化合物間之反應，典型係於適當驗例如：有機 驗（如三乙胺）、驗金屬碳酸鹽（如碳酸鋅）或驗金屬碳酸氫鹽 (如碳酸氫鈉）存在下，於惰性有機溶劑如四氫呋喃或二氣 曱烷或混合之有機/水相系統中，以室溫或升高之溫度進 行。當X為羥基時，式（III)與（IV)化合物間之反應係使用 標準耦合方法，例如：使用0-(7-氮雜苯并三唑-1-基）-N，N，N’，N’-四曱基脲鐺六氟磷酸鹽、三乙胺，於無水二曱 基曱醯胺中，於室溫攪拌一夜進行。 實施本發明之最佳模式 式（III)化合物可藉由將式（V)化合物：

(V) 式中Z為離去基，以及Ra為保護基 與式（VI)化合物：

(ho)2b，丫 〇Me (VI) 耦合，接著再將Ra保護基移除而製備。 離去基Z之適當實例為鹵素、烷磺醯氧基（例如：曱 14 316565 200524846 基績酿基）、鹵垸續酿氧基（例如··三氟甲續醒氧基）或芳基 石黃驢氧基（例如：對-甲苯績醒氧基）。保護基之適當實例 包括彼等列於下文者，尤其係第三丁氧基縣(Μ)。 式（111)化σ物亦可藉由將式（V)化合物與式（VH)化合 物 〇Me (VII) (式中Rb為經甲基） 備 耦。接著再移除保濩基Ra並使Rb轉換為氰基而隻 式（）化。物與式（VII)化合物間之反應可經 物與_歸物間之反應__。_ 中且古猎由上述方法移除。Rb基團可使用此項技盡 中具有通常知财所熟知或本域収方 : 奶)化,物與式(VI)化合物或式(VII)化合物間之為反:基可 ^例^項技蟄中具有通常知識者所熟知之鈴木輕合 柳ng)條件下進行。經例示說明，該反應可在@ 田 一乙胺）存在時’於升高之溫度下，使 化劑（例如：肆（三笨基膦）絶（0))於適當溶劑（例如甲 -涛各_)中進行。所得產物之保護基可㈣該項技甲藏土 知識者所熟知之方法移除。當保護基為第三; r該去保護作用可藉由在適當溶劑（例如：醇如 316565 15 200524846 乙醇或異丙醇）中以酸處理（例如··鹽酸）而實施。 式（vi)之中間產物化合物可使用上述方法由商業上可 購得之4-溴二甲氧基苯曱酸製得。確信式（11)、（^) 及（VI)之中間產物化合物具有新穎性且可更進一歩形成本 發明之其他實施態樣。 本發明提供式（II)化合物。本發明尤其提供式（11)中R2 為Cl-6院氧基或氟之化合物。 本發明亦提供式（III)化合物或其酸加成鹽。 本發明復提供式（VI)化合物。 中間產物化合物（IV)及（V)亦可自商業上購得或使用 本文所述之方法經由該項技藝中具有通常知識者所知之方 法或其相似方法製備。 。亥項技藝中具有通常知識者應了解，於式⑴化合物或 其醫藥上可接受之衍生物的製備中，其可能必須或期望去 保護該分子中一個或一個以上之敏感基團以避免非期望之 副反應發生。根據本發明所使用之適當保護基係該項技藝 t具有通常知識者所熟知且可用於習知方法者。參見例 如：T.W. Greene 及 P.G.M· Wuts (John Wiley & Sons 1991) 所著之 Protective groups in organic synthesis” 或 P.J.

Kocienski (Georg Thieme Veriag 1994)所著之 “Protecting

Groups 。適當胺基保護基之實例包括：醯基型之保護基 (例如·曱醯基、三氟乙醯基、乙醯基）、芳香族胺基甲酸 醋型之保護基（例如：笨曱氧基羰基（Cbz)以及經取代之 Cbz)、脂族胺基甲酸酯型之保護基（例如··…芴基曱氧基羰 16 316565 200524846 基（Fmoc)、第三丁氧基羰基（Boc)、異丙氧基羰基、環己基 氧基羰基）以及烷基型之保護基（例如··苯曱基、三苯曱基、 氯三苯曱基）。適當氧保護基之實例可包括例如：烷基矽烷 基如三曱基矽烷基或第三丁基二曱基矽烷基；烷基醚類如 四氫吡喃基或第三丁基；或酯類如乙酯。 . 本發明化合物可根據下列分析法進行活體外生物活 性檢驗。

Jurkat J6 親近閃爍測定法（Scintillation Proximity Assay ； SPA ) _

Jurkat J6親近閃爍測定法係用於研究該表現於Jurkat J6細胞膜上之VLA-4與試驗化合物之交互作用。於含有 50 mM HEPES、100 mM NaCl 及 ImM MnCl2(以 4 M Na〇H 將pH調整至7.5)之分析緩衝液中，使J6細胞（1百萬個細 胞/孔）包覆塗覆有麥胚凝集素（wheat germ agglutinin )之 SPA微球（Amersham，1 mg/well)。將氖化之3H標準化合物 A (1至3 nM最終分析濃度）與試驗化合物溶於適當溶劑並· 以分析緩衝液稀釋（最高分析濃度為2.5 μ m ;十點劑量反 應曲線）。重複分析化合物2次並進行四參數曲線迴歸分 析。根據 Cheng & Prusoff (Biochem Pharmacol·，22(23): 3099-3 108 (1973))之方法計算各化合物之平衡解離常數。 數據以平均pKi表示。 標準化合物A為（2S)-3-[4-({[4-(胺基羰基）-1-六氫吡 啶基]羰基}氧基）苯基>2-[((23)-4-曱基-2-{[2-(2-曱基苯氧 基）乙醯基]胺基}戊醯基）胺基]丙酸鉀鹽，其係詳述於專利 17 316565 200524846 氣化之 说明書 WO 00/37444 (Glaxo Group Ltd· et al )中 3H衍生物可使用習知方法製備。 所有根據本發明製備之實例皆可根據此方法進行檢 驗並發現具有pKig 8.6。 从 式（I)化合物或其醫藥上可接受之衍生物會抑制整 合素所媒介之細胞黏著。一般認為α4整合素所媒介之= 胞黏著係與下述範圍内之病症相關，例如：類風濕性關ς 炎（RA);氣喘；過敏症狀如鼻炎；成人呼吸困窘症侯群； 愛滋病失智症；阿茲海默氏症；心血管疾病；血栓或有害鲁 之血小板凝集；再閉塞後之血栓溶解；再灌注傷害；皮声 發炎疾病如乾癖、濕疹、接觸性皮膚炎及異位性皮膚炎: 糖尿病（例如··胰島素依賴型糖尿病、自體免疫性糖尿病）； 多發性硬化症；全身性紅斑性狼瘡（SLE);發炎性腸道疾病 如潰瘍性結腸炎、克隆氏症（局部性腸炎）及迴腸囊袋炎 (pouchitis)(例如：於直腸大腸切除術或迴腸肛門吻合術後 所產生），與白血球浸潤至腸胃道有關之疾病如乳糜瀉、非· 熱帶口炎性腹瀉（nontropical sprue)、與血清陰性關節病變 有關之腸病變、淋巴球性或膠原性結腸炎及嗜伊紅血球性 月腸炎，與白血球浸潤至其他上皮内襯組織（epithelial lined tissues)如皮膚、泌尿道、呼吸道及關節滑膜有關之 疾病；胰臟炎；乳房炎（乳腺）；肝炎；膽囊炎；膽管炎或 膽管周圍炎（肝臟中之膽管及周圍組織）；支氣管炎；鼻竇 炎、肺臟發炎疾病所導致之間質纖維化如過敏性肺炎；膠 原疾病（於SLE及RA);類肉瘤病；骨質疏鬆症；骨關節 18 316565 200524846 炎；動脈粥樣硬化；腫瘤性疾病包括惡性腫瘤之轉移或癌 之增生’創傷（促進創傷癒合特定眼疾如視網膜剝離、 過敏性結膜炎及自體免疫性葡萄膜炎；修格連氏症候群 (Sjogren’s syndrome);器官移植後之排斥作用（慢性或急 性）；宿主對移植物或移植物對宿主疾病；内膜增生；動脈 硬化（包括移植後之移植物動脈硬化）；手術後如經皮冠狀 動脈氣球擴張術（percutaneous transluminal angioplasty，PTC A)及經皮冠狀動脈再開通（percutane〇us tranSlUminal artery recanalizati〇n)後之再栓塞或再狹窄；腎 φ 炎；腫瘤血管新生；惡性腫瘤；多發性骨髓瘤及骨髓瘤所 誘導之骨溶蝕作用（boneresorpti〇n);敗血症；以及中枢神 經系統損傷如中風、創傷性腦損傷及脊髓損傷與梅尼爾氏 症（Meniere’s disease)。 本發明化合物較佳可用於治療或預防氣喘、過敏症狀 如鼻火、發炎性腸道疾病如潰瘍性結腸炎及克隆氏症、類 風濕性關節炎、異位性皮膚炎、多發性硬化症及器官移植 後之排斥作用。尤其，本發明化合物可用於治療或預防發 炎性％道疾病或多發性硬化症。 本發明更進一步提供以媒介細胞黏著之α 4整合素的 抑制劑處理可發揮效益之疾病 < 治療或預防方法，該方法 包括.將安全及有$欠量之式⑴化合物或其醫藥上可接受之 衍生物投藥至需要此治療之病患。本發明尤其提供治療或 預防上述病症之方法。 本毛月亦提供用於治療（.尤其係用於治療或預防上述 316565 19 200524846 病症）之式（i)化合物或其醫藥上可接受之衍生物。 於另一實施態樣中，本發明提供式⑴化合物或其醫華 上可接受之衍生物於藥劑製造上之用途，該藥劑係用於治 療或預防以媒介細胞黏著整合素的抑制劑處理能發 揮效益之病症，尤其係上述之病症。 雖=發明化合物可經單獨投藥，但其較佳係根據標 法配製為醫藥組成物。因此本發明亦提供包括 =有效虿之式⑴化合物或其醫藥上可接受之衍生物與 …可接受之載劑或稀釋劑混合之醫藥組成物。 、◊本發明進一步提供包括式⑴化合物或其醫藥上可接 又之何生物以及另—種治療活性劑之醫藥組成物。 本發明更進一步提供製備醫藥組成物之方法， 匕括將至少—種本發明化合物或其醫藥上 :/ 與醫藥上可接受之載劑或稀釋劑混合。 又何物 該醫藥組成物可於人類或獸醫藥物中供 使用’且係典型地包含任何一種或一種以上之醫= 灣劑、載劑或賦形劑。作為治療用途之可接：可接 稀釋劑為製藥技藝中所熟知，且係詳述於例如汉又載劑或 Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing C〇 (A lngt〇n '

Gennar°edlt· 1985)。醫藥上可接受之載劑、賦开卜,. f之選擇可根據所欲之投藥途徑或標準製藥=或稀釋 遗。該載劑或稀釋劑必須為醫藥上可接、二進订師 接叉者而言應為無毒性。該醫藥上可接受之=p對於其 可為例如：黏結_如糖聚、阿拉 ^或賦形劑 月.、山梨醇、 3】6565 20 200524846 西只蓍膠、聚乙婦基Dft㈣_)、 玉米殺粉、她η梨醇、甘胺酸隸、薦糖、 酸鎂、滑石、聚乙二醇、石夕石 月劑（例如硬脂 濕潤劑（例如硫酸月桂醋納）等等:以（例如馬鈴薯激粉）、 本發明組成物之投藥（投遞） 種或-種以上之方式··經σ投羊(例如限於下列-« t (例如作為錠劑、膠嚢或可 攝取之溶液）、局部投藥、經黏膜 /囊戍了 ^ 95 Λ ^ ^ . 仅去（例如作為鼻用喷劑 或及入之_)、經鼻投藥、_投藥(例如經由可注 射型式）、經腸胃投藥、脊髓内投 允机嚅^ , 腹艇腔内投藥、肌肉 才又k、砰脈内投藥、子宮内投藥、眼内投藥、皮内投μ、 腦内投藥、氣管内投藥、陰道内投藥、腦室内投藥、：腦 内，藥、皮下投藥、經眼投藥（包括玻璃體内（imravitreai) 投樂或脈絡膜内（illtraCameral)投藥）、經皮投藥、直腸投 藥、口腔投藥、經硬脊髓膜外腔投藥、舌下投藥。又 例如，该化合物可以下列形式經口投藥：錠劑、膠囊、 粒劑、酏劑、溶液或懸浮液（其可包含調味劑或著色劑^ 以提供直接_、延遲-、修飾-、持續…脈衝-或控制型-釋放 之施用。該錠劑可包含賦形劑如微晶纖維素、乳糖、擰檬 酸納、碳酸鈣、磷酸氫鈣及甘胺酸；崩解劑如澱粉（較佳為 玉米、馬鈴薯或樹薯澱粉）、羥乙酸澱粉鈉、交聯竣甲基纖 維素鈉（croscarmellose sodium)及某些複合石夕酸鹽類；以及 制粒黏結劑如聚乙烯基D比洛烧酮、羥丙基曱基纖維素 (HPMC)、羥丙基纖維素（HPC)、蔗糖、明膠及阿拉伯膠。 此外，復可包含潤滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸、山窬酸甘油 21 316565 200524846 酯及滑石。相似類型之固體組成物亦可作為明膠膠囊之殖 (miIk sugar)或高分子量聚乙二醇。對於水性縣浮 句相味劑、著色劍或 木枓料化獻/或懸浮劑以及稀釋劑如水、乙醇 醇及甘油、以及其之組合合用。 一 本發明化合物可經使用習知研磨方法如濕磨法㈣ mdlmg)研磨以得到適用於錠劑或其他劑型之粒子 發明化合物經精細分割（奈米粒子）之製劑可藉由該項技藝 中已知之方法製備，例如參見國際專利申請書第㈣ 02/00196 號案（SmithKline Beecham)。 右本土明化合物為非經腸投藥，則此等投藥法之實例 係包括下歹:卜種或-種以上之方式··經靜脈内、動脈内、 、 _⑹至内、尿這内、胸骨内、顧内、肌肉 内或皮下技與该樂劑；及/或藉由使用輸液技術投荜。對非 經腸投藥法而言，該化合物最佳係以無g水溶液形式使 用、，其可包含其他物質例如：足夠之鹽類或葡萄糖，以使 血液等張。若需要，應將該水溶液適當地緩衝化 (pH自3至9較佳）。該於無菌狀態下之適當非經腸調配物 衣η丨可以。玄項技蟄中具有通常知識者所熟知之標準製藥技 術輕易完成。 士所不本發明化合物可經鼻或藉由吸入方式投藥， 且线㈣當推進劑例如：二氣二敗甲炫、三氣說甲烧、 氣四氟乙：)：凡、氫敗烧如Up—四氣乙烧⑽A IB ΑΤ”,，） 22 316565 200524846 或 1，1，1，2,3,3,3-七氟丙烷（HFA 227EA)(例如來自 Ine〇s

Fluor) 一氧化碳或其他適當氣體，由加塵之容哭、戈 喷霧器或霧化器，以乾粉吸入劑型或氣霧噴霧劑形式適當 地投與。就加壓之氣霧劑而言，該劑量單位可藉由下述方 式決定：提供閥以投遞計量供給之量。該加壓之容器、泵、 喷霧器或霧化器可含有活性化合物之溶液或懸浮液，例 如.使用乙醇與該推進劑之混合物作為溶劑，其可同時包 =潤滑劑例如山梨糖醇酐三油酸酯。使用於吸入器或：： 器之膠囊及膠粒（例如：由明膠製造）可調配成含有化合物 與適當粉末基質（如乳糖或澱粉）之粉末混合物。 或者，本發明化合物可以栓劑或子宮托形式投藥， 其可以凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、乳膏、軟膏或敷粉形 式局。Me用。本發明化合物亦可藉由例如使用皮膚貼布而 經皮或穿透皮膚投藥。其亦可經由肺部或直腸途徑投雄。 其亦可經由眼部投藥。為使用於眼部，該化合物可於等"張、 PH經调整之無菌鹽水中調配為微粒化懸浮液，或較佳於等 張：PH經調整之無菌鹽水中調配為溶液，且視需要可與保 存劑如氣化苯二曱經錢（benzylalk〇niumchi〇dde)組合。 或者，其可經调配為軟膏如凡士林。 、為局部施用於皮膚，本發明製劑可經調配為含有將該 活卜生化合物>予或溶解於例如具有下列一者或一者以上之 混合物中的適當軟膏：礦物油、液態石瑕、白凡士林、丙 7酵、氧伸乙基系聚合物-氡伸丙基系聚合物、乳化蠟及 水。或者’可將其調配為適當洗劑或乳膏，經懸浮或溶解 23 316565 200524846 於例如下列一者或一者以上之混合物中 酐單硬脂酸酯、聚乙二醇、、夜能 ", 木-子 ^ 液心石4鼠、聚山梨醇酐脂肪酸 W〇、㈣㈣、综櫚醇、2 —辛基十二院醇、苯甲醇及水。 本發明之組成物可藉由直接注射而投筚。 於較佳具體實施例中’本發明之製劑係經全身性投遞 (如經口服、經口腔、經舌下)，更佳者為經口服。 口此較乜者仏5亥製劑為適用於口服投遞之型式。 旦=型地，將由醫師決定該最適於個別接受者之實際劑 里。用於任何特定個妙夕枯—令丨曰 ▲ 彳寸疋劑I》辰度及劑量頻率可依據 ° m ’該因子包括：所使用之特定化合物的 / 化合物之代謝穩定性及作料間、年齡、體重、 ::健康狀況、性別、飲食、投藥模式及時間、排泄速率、 組合、特定病症之嚴重程度以及個別接受之治療。 對於經由口或非經腸投藥至人類而言，該製劑之每日 劑置可以單一劑或分成數劑投與。 根據本發明，該化合物投藥至人類（體重大約7〇kg)之 建議劑量為：每單位劑量0._至2§，較佳為〇1叫至 k之活性成分，其係以游離酸之重量表示。該 日，投與例如…次。該劑量係取決於投藥途徑。當二 ^可月b而要依病患之年齡、體重及病症嚴重程度對劑量進 订例订性變化。該劑量亦取決於投藥途徑。該精確劑量及 投藥途徑最終將由巡診醫師及獸醫決定。 本發明化合物亦可與其他治劑組合使用。因此，於其 他只知悲I中本發明係提供包括本發明化合物或其醫藥上 3]6565 24 200524846 可接文之衍生物與其他治療劑之組合。 當式(I)化合物或其醫藥上可接受 2療劑（對於相同疾病狀態具有活性）組合使用時^ ::劑量：能與單獨使用該化合物時不同。適當之； 化：：技蟄中具有通常知識者輕易領會。經了解，本發明 化合物於治療或子音P六卜 年Mi广此置可依疾病之性質以及病患之 ^與症狀而改變’且最㈣由診察f師及獸醫決定。可

性：(二合物或其醫藥上可接受之衍生物組合的其他活 性衣劑貫例包括，但不限於：（a)其他VLA 織胺拮抗劑；⑷則D，s;⑷抗糖尿病劑，例如格: 讀（_a驗s)藥物；⑷抗膽驗劑；（f)c〇x_2抑制劑， 例如2-(4-乙氧基-苯基)_3_(4_甲續酸基-苯基吼唾并 。荅哄（如專利申請案W0 99/1293〇中所揭露）；（g)pDE_iv 抑制劑；(h)類固醇，例如皮質類固醇；(猶效 趨化細胞激素f體拮抗劑，例如CCR_2、ccr_3、 及CCR 8 ’ (k)適當之多發性硬化症治療或預防如干擾素； ⑴LFA]拮抗劑；㈣TNF抑制劑；⑻柳氮磺胺呲啶…’ (smpha—ne )及5_胺基水楊酸鹽；以及（。）免疫抑制劑。 上文所提及之組合可為醫藥調配物之形式，因此包含 j述所定義之組合以及醫藥上可接受之載劑或賦形劑的醫 藥調配物係本發明之另一態樣。此等組合之個別成分可經 由任何方便的途徑，以分開或組合之醫藥調配物相繼地Z 同時地投藥。若為相繼投藥時，可先投與本發明化合物或 該第二種治療劑。若為同時投藥時’該組合物可以相同或 316565 25 200524846 相異之醫藥組成物投藥。 、將兩種化合物組合於相同調配物中，則應了解該 2種化合物必須穩定且彼此相容並與其他調配物之成分相 谷。經個別調配時，等化合物可便利地以該項技藝中已知 之方法以任何適宜之調配物提供。 本況明書中所引用之所有刊物（包括但不限於專利及 專利申明案）以麥考文獻方式納入本文，如同各個別刊物 在本文中被個別指定全文做為參考文獻一樣。 【實施方式】 下列製備例及實施例係說明本發明化合物之製備。 一般方法 ,於實驗章節所示之術語MDAP表示質譜指引之自動 衣備法（Mass Directed Auto Preparation)，係藉由製備型 hplc將化合物純化之自動化系統，並藉由將質譜儀與製 備型HPLC系統組合，以偵測及收集具有所期望質量之部 刀接著，再使用Waters FractionLynx MADP系統以及適 當之逆相層析管柱，該逆相層析管柱係使用水/乙腈梯度溶 析，且兩種溶劑皆含〇. 1%曱酸。 製備例1 (S)-2-第二丁氧基羰基胺基_3_(4_羥基苯基）丙酸曱酯（ρι) 將二碳酸二-第三丁酯（200 g，〇 92 m〇1)分批加至^酪 胺酸曱酯鹽酸鹽（200 g，〇·86 m〇1，Aldnch)與碳酸氫鈉（1〇〇 §，1.19 111〇1)之二氯曱烷（11〇及水（1][〇混合物中。於室溫下 攪拌該混合物2小時。分離有機層並使用二氯曱烷（5〇〇 mi) 316565 26 200524846 再萃取水層。將合併之有機層以硫酸鎂脫水、過濾並減壓 濃縮以產生如無色玻璃之粗標題化合物，其係未經純化而 用於後續步驟；LC/MS (ES-ve) : [M-Η]· at m/z 294 (C15H2iN05 之理論值：[M-H]-atm/z 294)。 製備例2 (S)-2-第二丁氧基幾基胺基_3-(4-三氟甲續醢基氧基苯基） 丙酸甲酯（P2) 於氬氣下’將D比咬（58 mL，0.72 mol)添加至粗（S)-2-第 二丁氧基羰基胺基-3-(4-羥基苯基）丙酸曱酯（pi，70.5 g， 0.24 mol)之二氯曱烷（1L)溶液中。使該溶液於冰中冷卻， 接著再滴加三氟曱磺酸酐（52 mL，0.31 mol)並同時攪拌 之。於添加完成後，將該混合物於冰中攪拌2小時、以2M 鹽酸（500 mL)洗滌、經硫酸鎂脫水、過濾並減壓濃縮。粗 產物經石夕膠管柱層析法（Bi〇tage 75L，800g石夕石）純化，以 乙酸乙酯：己烧（15:85)沖提，產生無色油狀之標題化合物， 其緩慢固化’得到白色固體；LC/MS (ES+ve): [M-BOC+H] + at m/z 328 (C16H20N〇7 之理論值：[m+H]+ at m/z 428)。 製備例3 4笔曱基2,6-—曱氧基笨基硼酸（P3) (ps :卿酸：boronic acid) 於氬氣下’將（3，5-二甲氧基苯基）曱醇（53 g，0.31 mol， Aldnch)之無水四氫呋喃（1L)溶液冷卻至-50°C至-70°C，並 使用正丁基鐘（45〇 mL，1·6Μ於己烧，0.72 mol)處理30分 鐘。於添加後’以45分鐘時間使該反應混合物升溫至〇°C， 27 316565 200524846 接著於室溫下靜置2小時。而後將該反應液再冷卻至, c並以删酸二甲s旨（135 mL，115 mQl)分次處理之。於添加 後，使該混合物升溫至室溫並另外攪拌18小時。該反應係 方、〇 C下經由分批添加擰檬酸水溶液（75 g檸檬酸於 mL水中）而終止。添加氣化鈉使水層飽和並以乙酸乙酯（2 X 1L)萃取該產物。使合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾並 減壓濃縮。將乙酸乙酉旨添加至殘餘物，過遽收集所得益色 沉澱並於4(TC下真空乾燥以產生無色固體之標題化合 物，其係未經純化而用於後續反應。 製備例4 (S)-2-第二丁氧基羰基胺基_3_(4，_羥甲基_2，,6，_二甲氧基 聯苯-4-基）丙酸甲酯（p4) 將二乙胺（28 mL，0.20 mol)添加至（s)_2_第三丁氧基 羰基胺基-3-(4-三氟甲磺醯氧基苯基）丙酸甲酯（p2, 42 73匕 0.10 _1)及4-經曱基_2,6_二甲氧基苯基硼酸（p3, 29 7匕 〇.14mol)之無水二甲基甲醯胺（25〇mL)溶液中。於使用氬 除氣後，添加肆（三苯基膦）鈀（〇)(58^5111111〇1)，並於氬 氣下將該混合物加熱至9(TC1小時。[觀察到NB a輕微放 熱]。在使其冷卻至室溫後，以乙酸乙醋（1 L)及水（7〇〇 mL) 稀釋該混合物’並分離之。將有機層以水（2 χ 3〇〇叫洗 滌、經硫酸鎂脫水、過濾並減壓濃縮。粗產物經矽膠管柱 層析法（Biotage 75L，800g矽石）純化，以乙酸乙酯：己烷 (50.50)冲提，產生無色固體之標題化合物； (ES+ve) : [M_B0C+H]+ at m/z 346 (C24H3iN〇7 理論值 316565 28 200524846 [M+H]+ at m/z 446)。 製備例5 (S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-(4，-曱醯基-2，，6，-二甲氧基 聯苯-4-基）丙酸甲酯（P5)

將二氧化猛（230 g，2.64 mol)分批添加至（S)-2-第三丁 氧基羰基胺基-3-(4’-羥甲基_2’，6、二甲氧基聯苯基）丙 酸曱酯（P4, 28.98 g，65.1 mmol)之二氯曱烷（1 L)溶液中。使 所付懸洋液於室溫下撲掉1小時’接著通過石夕藻土過遽， 再以一氯曱烧（1 L)洗蘇該石夕藻土墊。減壓濃縮遽液以產生鲁 無色泡沫之產物，其係未經近一步純化而供使用之；LC/MS (ES+ve) : [M-BOC+H]+ at m/z 344 (C24H29N07 理論值 [M+H]+ at m/z 444)。 製備例6 (S)-2-第三丁氧基羰基胺基_3_[4，_(羥亞胺基甲基>2，，6，_二 甲氧基聯苯-4-基]丙酸曱酯（P6) 將鹽酸經胺（7.4 g，106 mmol)及二異丙基乙胺（1 8 mL, 106 mmol)添加至（S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-(4，-曱醯基 β -2，6 -一曱氧基聯苯_4_基）丙酸曱g旨（ρ5，23.6 g，53 mmol) 之四氫呋喃（300 mL)溶液中。使該反應混合物回流加熱2 小時’接著再冷卻至室溫。減壓濃縮該溶液，而後再溶解 於乙酸乙酯中（500 mL)，以10%檸檬醪水溶液、水、以及 鹽水（各500 mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並減壓濃縮以 產生無色泡沫，其係未經進一步純化而用於下一步驟； LC/MS (ES+ve) : [M-BOC+H]+ at m/z 359 (C24H30N2〇7 理 29 316565 200524846 論值[M+H]+ at m/z 459)。 製備例7 (S)-2-胺基-3_(4’-氰基）-2，，6，-二甲氧基聯苯基基】丙酸甲 酯鹽酸鹽（P7) 於〇°C、氬氣下將氣化亞硫醯（3〇 mL，411 mmol)滴加 至（S)-2-第三丁氧基羰基胺基羥亞胺基曱基>2，，6，_ 二曱氧基聯笨基]丙酸曱酯（P6, 46」g，ιοί mmol)之二氯 曱烧（500 mL)溶液中。使該反應液升溫至室溫並授拌3 天。過遽收集沉澱之固體，以二氣甲烷（2〇〇 mL)洗滌並於 45 C減壓乾燥。單離該標題化合物，其呈白色固體；lc/ms at m/z 341)。 製備例8 2-溴-5-經基苯甲酸甲酯（p8) 於氬氣下攪拌含2-溴-5-甲氧基苯曱酸（3〇.〇 g，13〇 mmol，Aldrich)之無水二氯曱烷（6〇〇 mL)，並於乾冰/丙酮 中冷卻，以1 5分鐘時間添加三溴化硼μ於二氯甲烧，28〇 mL，280 mmol)。接著將該混合物於室溫下攪拌2 5小時， 產生沉殿。而後以3 0分鐘時間謹慎地滴加曱醇（3〇〇 mL) (注意··起始時為強烈放熱並伴隨起泡），最後得到深色均 貝/谷液，並於§亥溶液中添加濃硫酸（1 5 mL)。使溶液回流攪 拌1小時、冷卻之、並減壓濃縮。將殘餘物溶於二氯甲烷 (500 mL)中、以鹽水（5〇〇 mL)洗滌、經硫酸鎂乾燥、過濾 並減壓濃縮以產生固體標題化合物；LC/MS (ES+ve): 30 316565 200524846 [M + H]+atm/z231，233 (C8H7Br〇3 理論值[M + H]+atm/z 231， 233)。 製備例9 2-溴-5-乙氧基苯甲酸曱酯（P9) 於氬氣下攪拌含氫化鈉（60%於礦物油中，4.24 g，106 mmol)之無水二曱基曱醯胺（150 mL)，並於冰中冷卻，以 15分鐘時間添加含2-溴-5-羥基苯甲酸甲酯（P8, 20.41 g5 88 mmol)之二曱基甲醯胺（150 mL)。使該混合物於室溫下攪拌 45分鐘，於冰中再冷卻，並以蛾乙烧（8.5 mL，106 mmol) 處理之。將此混合物於室溫下攪拌3小時、減壓濃縮、以 乙酸乙酯（400 mL)稀釋、再以水（3 X 400 mL)及鹽水（400 mL)洗滌、並經硫酸鎂脫水、過濾以及減壓濃縮，產生標 題化合物，其係受微量之對應乙酯以及殘餘礦物油污染。 此物質係未經進一步純化而用於下一步驟；LC/MS (ES+ve) : [M+H]+ at m/z 259, 261 ((：10比而〇3 理論值 [M+H]+ at m/z 259, 261) 〇 製備例10 2-溴-5-乙氧基苯甲酸（P10) 將2-溴-5-乙氧基苯甲酸曱酯（P9, 20.53 g，79 mmol)置 於四氫呋喃（600 mL)中攪拌，並以含有氫氧化鋰（18.2g， 79 1 mmol)之水（200 mL)處理。使該混合物檟:拌4天、減壓 濃縮、以水（500 mL)稀釋、再以5N鹽酸酸化並萃取至乙 酸乙酯（2 X 300 mL)中。將合併之萃取液以鹽水（250 mL) 洗滌、經硫酸鎂脫水、過濾並減壓濃縮以得到灰白色固體。 31 316565 200524846 與己烧一起濕磨、過濾、以及乾燥，得到白色粉末之標題化 合物；LC/MS (ES+ve) : [M+H]+ at m/z 245, 247 (C9H9Br03 理論值[M+H]+atm/z 245,247)。 製備例Π (8)-2-{[1-(2-溴-5-乙氧基苯基）曱醯基】胺基卜3_(4，_氰基 -2’，6’-二曱氧基聯苯-4-基）丙酸甲酯鹽酸鹽（pi 於JL氣下將（S)-2-胺基-3-(4、氰基）-2’，6’-二曱氧基聯 苯-4-基]丙酸甲酯鹽酸鹽（P7, 37.1 g，98.5 mmol)溶於二氣 甲烷（500 mL)及水（400 mL)中，並冷卻至〇°c。添加碳酸氫_ 鈉（20.1 g，239.3 mmol)至該反應混合物中，接著再滴加2-溴-5-乙氧基苯曱醯氯（27.2 g，103.7 mmol){係使用草醯氣 (4當量）’在二氣曱烧及一滴二曱基曱酸胺中，經由標準方 法自2-溴-5-乙氧基苯甲酸（P10)製備}。使該反應物於〇。〇 下攪拌1小時，接著再以飽和碳酸氫鈉水溶液（2〇〇 mL)稀 釋。於有機層分離後，使用二氯曱烷（2 X 400 mL)再萃取 水層。將合併之有機層以硫酸鎂乾燥、過濾並減壓濃縮。_ 產物經石夕膠管柱層析法（Biotage 75L，800g石夕石）純化，以 乙酸乙_ :一氣曱烧（3:97)沖提，產生無色固體之標題化合 物；MS (ES+ve): [M+H]+ at m/z 567，569 (C28H27BrN206 理 論值[M+H]+ at m/z 567, 569)。 製備例12 (S)-2-{[l-(2-溴-5-甲氧基苯基）甲醢基]胺基卜3-(4，_氰基 _2’，6’_二曱氧基聯苯基-4-基）丙酸乙g旨（P12) 於氬氣、室溫下，將2-溴-5-甲氧基苯曱酸（0.355 g， 32 316565 200524846 1.54 mmol，Aldnch)、0-(7-氮雜苯并三唑_^)·ν，ν，ν，，ν，、 四曱基脲鍚六氟磷酸鹽（Μ68 g，2當量）以及三乙胺（1069 mL，5當里）添加至一曱基曱酿胺（25 mL)，同時攪拌之。於 〇·5小時後，添加該與P7相對應之乙酯（pi3) : (s)_孓胺基 -3-(4’-氰基-2’，6’-二曱氧基聯苯-4-基）丙酸乙酯鹽酸鹽（〇 6 g，1 ¥里），並持續稅拌一仪。接著減壓蒸發溶劑並將殘餘 物分溶於乙酸乙酯與水之間。於蒸發至乾前，以水（χ2) 及飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層。粗產物係藉由矽膠管 柱層析法純化，其中使用〇至10%甲醇二氣曱烷梯度層 析’接著再經製備型HPLC純化，得到標題化合物。 MS (AP+ve): [M+H]+ at m/z 567, 569 (C28H27BrN206 理論值[M+H]+atm/z 567,569)。 製備例13 (S)-2-胺基-3-(4’-氰基-2’，6’-二甲氧基聯苯_4_基）丙酸乙酯 鹽酸鹽（P7-對應乙酯）(pi3) 於〇°C、氬氣下，以15分鐘時間將氣化亞硫醯（7 71 mL， 105.7 mmol)滴加至（S)-2-第三丁氧基羰基胺基_3_[4，_(羥亞 胺基甲基）-2’，6、二甲氧基聯苯_4_基]丙酸乙酯（12.5g，26.5 mmol)[係以相似於p 1至p6之順序製備，不過於製備例j 開始時以L-赂胺酸乙酯鹽酸鹽（得自Bachem)取代L-酪胺 酸曱酯鹽酸鹽]之二氣甲烷（250 mL)溶液中。使該反應於批 次溫度下再攪拌15分鐘，然後升溫至室溫並持續攪拌一 夜。過濾收集沉澱之標題化合物，以二氣曱烷（2χ15 mL) 洗滌並減壓乾燥。LC/MS (ES+ve) : [M+H]+ at m/z 355 33 316565 200524846 (C20H22N2O4 理論值[M+H]+atm/z 355)。 實施例1 (S)-2-{[l-(2-溴-5-乙氧基苯基）曱醢基]胺基卜3-(4，-氣基 -2’，6’-二曱氧基聯笨-4-基）丙酸（E1)

將（S)-2-{[l-(2-溴-5-乙氧基苯基）甲醯基]胺基卜3-(4，_ 氰基二甲氧基聯笨-4-基）丙酸曱酯（Pll，51.5g，90.8 mmol)之四氫呋喃（950 mL)溶液冷卻至〇°C並以0.5 Μ氫氧 化鋰水溶液（700 mL)處理之。使該反應混合物於〇°c授拌1 小時’接著再以5 Μ鹽酸酸化。於真空下蒸發四氫咲喃並 將殘餘物以乙酸乙酯稀釋。於分離有機層後，以乙酸乙酯 再萃取水層。將合併之有機層以水（Χ2)洗滌再經硫酸鎂乾 燥，並於真空下蒸發溶劑以產生無色固體之標題化合物； 1H NMR δ (DMSO-d6): 1.29 (3H, t, J7.0Hz), 2.96 (1H, dd, J 13.9, 10.9Hz), 3.22 (1H, dd, J14.1, 4.2Hz), 3.71 (6H, s), 3.99 (2H, q, J7.0Hz)t 4.65 (1H, ddd, J10.9, 8.4, 4.3Hz), 6.69 (1H, d, J3.0Hz), 6.91 (1H, dd, J8.8, 3.1Hz), 7.14 (2H, d, J8.1Hz), 7.24 (2H, s), 7.32 (2H, d, J8.1Hz,)t 7.47 (1H, d, J8.8Hz), 8.77 (1H, br. d, J8.4Hz), 12.83 (1H, br. s); MS (ES+ve) [M+H] at m/z 553, 555 (〇27Η25Β「Ν2〇6 requires [M+H]+ at m/z 553, 555). 實施例1-替代合成方法 該標題化合物亦可使用下列方法製備。 4-溴-3,5-二曱氧基苯曱醯胺 34 316565 200524846 將氯化亞硫酿（60 mL，0.82 mo])添加至經授拌之4-漠 -3,5-二曱氧基苯甲酸（得自 Jmtan Baocheng，100 g，0.38 mol)的甲苯（700 mL)及二曱基甲醯胺（1 mL)懸浮液。於氮 氣下回流攪拌該反應物。2小時後HPLC顯示酸完全耗盡， 得到曱醋（酸氣化物用曱醇使之停止反應）。蒸餾移除揮發 物並將所得固體添加至0.88氨（350 mL)。使該混合物於室 溫下攪拌45分鐘。過濾產物，以水（2 X 200 mL)洗滌並於 真空下乾燥一夜以產生灰白色固體之標題化合物 1H NMR δ (DMSO-d6): 3.89 (6H, s), 7.23 (2H, s), 7.52 (1H, s), 8.2 (1H, s) MS (ES+ve) [M+H]+ at m/z 260, 262 (C9H10B「N〇3 requires [M+H]+ at m/z 260, 262) 4-溴-3,5-二甲氧基苯甲腈 將三氯乙酸酐（129 mL，0.91 mol)添加至4-溴-3,5-二 甲氧基苯曱醯胺（104 g，0.3 8 mol)之吡啶（127 mL，1.57 mol) 及四氳呋喃（950 mL)懸浮液中。使用冰浴將溫度維持在20 至25°C。於氮氣下，使該橙/棕色溶液於20至25°C攪拌1 小時。HPLC顯示4-溴-3,5-二曱氧基苯曱醯胺完全耗盡以 得到產物。將反應混合物濃縮至大約起始體積之50%。添 加水（900 mL)並濾除產物、以水（2 X 250 mL)洗滌並於40 QC下真空乾燥以產生鬆軟灰白色固體之標題化合物。 1H NMR δ (CDCI3)： 3.96 (6H, s), 6.8 (2H, s) 4-氰基-2,6-二甲氧基苯基腼酸（口8:腼酸：1}〇1*01^&(^(!) 於5至10°C、氮氣下，將異丙基鎂氣化物（isopropyl magnesium chloride)(於四氫咲喃之 2M 溶液，206 mL， 0.412 mol)添加至4_溴-3,5-二曱氧基苯甲腈（50 g，0.207 35 316565 200524846 ^ 氫夫南（400 mL)漿狀物。使所得溶液升溫至室 、，、HPLC刀析顯示起始原料已完全消耗。將反應混合物 冷卻至5 $ 1 A 、，、 斤 C，並添加至硼酸三甲酯〇〇3 mL，0.92 mol) 氫夫南（100 mL)溶液，添加期間係將溫度維持在1〇。〇 ，下=反應升溫至室溫。HpLC顯示產物反應完成。將 乂反二作匕a物冷部至5至1〇〇c並添加鹽酸（別〇 mL)， 4加期間h將溫度維持纟i 〇。〇以下。力室溫搜摔該混合物 3〇分鐘，接著蒸餾移除揮發物。過濾產物、以水洗滌之並 於40 C真空乾燥以產生灰白色固體之標題化合物。 1H NMR δ (DMSO-de): 3.78 (6H, s), 7.0 (2H, s), 9.25 (2H, s) (S)-2-胺基-3-(4，-氰基-2，，6，_二甲氧基聯苯_心基）丙酸甲酯 鹽酸鹽 於90t下將二碳酸二-第三丁酯（17 9 g，81 8 mm〇1)i 曱苯（60 mL)溶液滴加至⑻_甲基酪胺酸（得自Flamma， 15·2 g，77.9 mmol)之甲苯（120 mL)溶液。使該反應混合物 於90 C攪拌至少30分鐘。一旦經HPLC分析完成，將該 反應混合物冷卻至〇°C並添加吼唆（19 mL，0.23 mol)(溫度 維持於0°C)。滴加三氟甲烷磺酸酐（16.7 mL)(溫度維持於 〇°C)。將該橙色漿狀物於0°C下攪拌至少2小時。一旦經 HPLC分析完成，添加2M鹽酸（133 mL)(溫度維持於〇 °C )。將各層分離並以10% w/w碳酸鈉水溶液（138 mL)及 36% w/w鹽水（13 8 mL)洗滌上層有機層。有機層經濃縮為 大約60 mL並先後添加固態氣化鈉（30 g)及正庚烧（3〇〇 mL)。將混合物過濾，並使濾液萃取至1 -甲基-2-D比α各坑酉同 36 316565 200524846 (2 X 1 50 niL)。於真空下蒸餾殘餘之揮發性有機溶劑。添 加4-氰基-2,6-二曱氧基苯基硼酸（17·5 g，84·5 mm〇i)並將 違溶液除氣。添加肆（三笨基膦）把（〇)(38,2.7111111〇1)及三 乙胺（19.8 mL) ’並使該反應混合物加熱至7〇它。於7〇。〇 下攪拌該反應物至少2小時。一旦經HPLC分析完成，將 反應混合物置換至另一個容器並以甲苯（3〇〇 mL)稀釋。添 加2M鹽酸（3 00 mL)並過渡該混合物。將有機層分離並以 水（300 mL)洗滌。過濾有機層並以甲苯（9〇 mL)洗滌。使該 甲苯溶液與以Silicycle矽石支承之N_官能化硫脲（11.7 g) 攪拌至少15小時。過濾該矽石並以曱苯（3〇 mL)洗滌。將 該溶液共沸乾燥，接著再於5(TC下緩慢添加至氣化氫之異 丙醇（155 mL, 5M濃度）溶液。使反應混合物於5(rc下攪拌 3〇分鐘直至經HPLC分析完成。將混合物冷卻至2〇〇c並於 真空下濾、除產物’再以曱苯（60 mL)洗蘇之。使該固體於 40 C真空乾燥以產生灰白色固體之標題化合物。 2-溴-5-羥基苯甲酸甲酯 於-15至-10 C下將二 >臭化石朋（18 mL，190.5 mmol)之二 氯甲烧（1 8 mL)溶液添加至經攪拌之2-溴-5-甲氧基苯曱酸 (得自 Wychem，20 g，86.6 mmol)的二氯甲烷（200 mL)懸浮 液。使該黃色懸浮液升溫至〇°C。HPLC分析顯示酸已耗 趾。添加甲醇（100 mL)使反應終止。將該澄清深色溶液回 流授拌（大約45°C )12小時，蒸發至乾，分溶於水（4〇〇 mL) 及乙酸乙酯（500 mL)之間並分離之。以鹽水（25〇 mL)洗蘇 該有機溶液並經蒸發以產生乳酪色固體之標題化合物。 316565 37 200524846 2-溴-5-乙氧基苯曱酸甲酯 將2-溴-5-备基苯曱酸甲酯（18.9 g，81.8 mmol)、碳酸 钟（34·4 g，249.5 mmol)以及碘乙烷（13 mL，163.7 mmol)之 曱基異丁基酮（190 mL)混合物於7〇至75°c、氤氣下攪拌 15 i % hplc分析顯示完全反應成產物。添加水（1 〇〇 mL)。移除水相並以鹽水（1〇〇mL)洗滌該曱基異丁基酮溶 液，接著於真空下濃縮以產生橙色油狀之標題化合物。 2-溴-5-乙氧基苯曱酸 將2-溴-5-乙氧基苯曱酸曱酯（20·7 g，79.9 mmol)及 氫氧化鈉（4〇 mL，〇 4 mol)在四氫呋喃（1〇〇 mL)中之混 a物方；至溫下授拌1 8小時。fiPLC分析顯示起始原料已耗 盡。使該反應物冷卻至〇至並以5M鹽酸酸化至pH1。 移除有機相並以第三丁基曱基醚（4〇 mL)萃取水相。將有機 相a併，以鹽水（5〇 mL)洗滌並於真空下濃縮以產生乳酪色 固體之標題化合物。 (S)_2-{[i_(2-溴-5-乙氧基苯基）甲醯基]胺基卜3-(4，_氰基 2 ’6 -一甲氧基聯苯-4-基）丙酸甲酉旨 將二乙胺（5·5 mL，39·8 mmol)添加至（s)-2-胺基- 3-(4，-氰基2,6- 一甲氧基聯苯-4-基）丙酸甲酯鹽酸鹽（5 g 1 3 · 3 mmol)之四氫呋喃（1〇〇 mL)懸浮液。使該懸浮液於別。◦攪 拌60刀|里。以1〇分鐘時間滴加2->臭_5_乙氧基苯曱醯氣1 (3·4 g，13 mmol)之曱苯（1〇 mL)溶液（溫度維持於〇至5 °C)。將混合物於〇至5。(：下攪拌至少6〇分鐘。一旦經HpLc 分析完成，依序以2M鹽酸（25mL)、10% w/w碳酸鈉水溶 316565 38 200524846 液（25 mL)及36% w/w鹽水（25 mL)洗滌該反應混合物。蒸 德移除溶劑以得到乳酪色固體。將該乳酪色固體溶於四氫 咲喊（75 mL) ’並與以SlHcycle矽品支承之N_官能化硫脲 (〇 · 75 g)授拌一伏。過濾石夕石並使該四氫咲喃溶液濃縮至大 約30 mL。以45分鐘時間添加水（75 mL)。使該漿狀物於 室溫攪拌1小時。過濾產物、以水（30 mL)洗滌之並於40 C真空乾燥以產生灰白色固體之標題化合物。 1係使用含氯化亞硫醯（3·3當量）之甲笨（16 mL)經由標 準方法自溴乙氧基苯曱酸（3.2 g，13 mmol)製備。 (S)-2-{[l-(2-溴-5-乙氧基苯基）甲醢基]胺基}_3_(4,-氰基 -2’，6’-二曱氧基聯苯基）丙酸四氫呋喃溶劑合物 將（S)-2-{[l-(2-溴-5-乙氧基苯基）曱醯基]胺基卜3_(4，_ 氮基-2’，6’-二曱氧基聯苯基）丙酸甲酯（5 g，8·8 mrn〇1)2 四氫呋喃（25 mL)溶液冷卻至〇至5t：。滴加2M氫氧化鈉 (4·5 mL，9 mmol)(溫度維持於5。〇以下）。使該反應混合物 於0至5°C下攪拌至少18小時。一旦經HPLC分析完成， 將該混合物先以水（50 mL)稀釋再以2M鹽酸（大約1〇 mL) 調整至pHl。使所得懸浮液於〇至5艺熟化至少3〇分鐘， 再於真空下將固體遽除並以水（2〇 mL)洗務之。接著於4〇 C下真空乾燥該產物，產生灰白色固體之標題化合物。 (S)-2-{[l-(2-溴-5-乙氧基苯基）甲醯基】胺基卜3_(4，_氰基 _2’，6’-二甲氧基聯苯-4-基）丙酸（E1) 將（S)-2-{[l-(2-溴-5-乙氧基苯）甲醯基]胺基卜3-(4，_氰 39 316565 200524846 基-2，6 -一甲氧基聯笨_4-基）丙酸四氫呋喃溶劑合物（5 之甲醇（50 mL)懸浮液加熱回流並攪拌以形成溶液。使該溶 液冷卻至60°C並過濾之。接著再將該溶液以15小時時間 冷卻至0°C。使所得懸浮液於下熟化2小時。於真空下 過濾移除固體並以冰曱醇（5 mL)洗滌之。於4〇t下真空乾 無該產物’產生白色結晶狀固體之標題化合物。 實施例2 (S)-2-{[l-(2-溴-5-氟苯基）甲醯基]胺基}_3-(4,·氰基_2，，6，_ ^•甲氧基聯苯-4-基）丙酸（E1) 该標題化合物係使用P13及2-溴-5-氟苯曱醯氣（得自 Apollo)以相似於製備例u及實施例1之方法製備。 [M+H]+ at m/z 527?529 實施例3 (S)-2-{[l-(2-溴-5-甲氧基苯基）甲醯基】胺基卜3-(4，_氰基 -2’，6’-二曱氧基聯苯冰基）丙酸（E3) 實施例3a 该標述化合物可使用P7及2-漠-5-曱氧基苯曱氯（得 自Avocado)以相似於製備例11及實施例1之方法製備。 實施例3b 於室溫下將氫氧化鋰水溶液（〇·5Μ，25 mL)攪拌添加 至（S)-2-{[l-(2-溴-5-甲氧基苯基）甲醯基]胺基卜3-(4，-氰基 -2’，6’-二 T 氧基聯苯-4-基）丙酸乙酯（P12, 0.539 g5 0.95 mmol)之四氫呋喃（30 mL)溶液。持續攪拌2小時，接著再 以過量之1 0%檸檬酸水溶液終止該反應。而後使用乙酸乙 40 316565 200524846 西曰卞取。亥此合物並先後以另一份檸檬酸以及水（x 洗滌 4有機層。％發乾燥有機層並將所得粗產物藉由MDAp純 化’產生白色固體之標題化合物。[M+H]+ at m/z 539, 54卜 實施例4 ⑻-2_{[l-(2-漠甲基苯基）甲醢基】胺基卜3七，_氛基 ’6 _一甲氧基聯苯-4-基）丙酸（E4) 该標題化合物係以相似於製備例12之方法使用pi3 及2 /臭5-甲基苯甲酸（得自Apin)再將所得乙酯以實施例 3b之方法水解而製備。[M+H]+ at m/z 523, 525。 實施例5 (S) 2 {[1-(24-5-氣苯基）曱醯基】胺基卜3_(4，_氛基_2，，6，一 二甲氧基聯苯-4-基）丙酸（E5) 该標題化合物係由相對應之乙酯以相似於實施例3b 之方=製備。該乙酯係使用製備例12之方法由pl3及2_ 溴-5-虱苯曱酸（得自[⑽咖叫製備。[m_町肘m/z541， 543, 545 〇 實施例6 (S) 2-{[1-(2,5_二溴苯基）曱醯基】胺基卜3·(4，_氛基_2，,6，_二 甲氧基聯苯-4-基）丙酸（Ε6) 該標題化合物係由相對應之乙酯以相似於實施例3b 之方法製備。該乙酯係藉由製備例12之方法自卩13及2,5_ 二溴苯甲酸（得自 Lancaster)製備。[M_H]_atm/z585,587, 589。 實施例7 316565 41 200524846 (s)-2-{[i-(5-(異丙氧基）_2,苯基）甲醯基】胺基}冬[4，_氰 基-2’，6’-二甲氧基聯苯_4、基】丙酸(E7) 該標題化合㈣由相對應之乙g|以相似於實施例3b 之方法衣備。亥乙g曰係藉由製備例i 2之方法自⑴及5_ 異丙氧基-2-溴苯甲醆(係以相似於製備例8至製備例1〇之 方去衣備除了在相似於製備例9之烷化步驟使用異丙基 漠外）製備。[M-H]-atm/z 565,567。 【圖式簡單說明】 本案無圖式。 42 316565

Claims (1)

1. 200524846 十、申請專利範圍： 1· 一種如式（I)之化合物或其醫藥上可接受之衍生物·

   (I) 式中： R1為溴；以及 R為鹵素、CN6烧基或C1-6烧氧基。 2·如申請專利範圍第1項之化合物，其中R2為鹵素或c 烷氧基。 、/ “ 3·如申請專利範圍第2項之化合物，其中R2為氟、甲 基或乙氧基。 4 4·如申請專利範圍第丨項之化合物，係選自下列所構成 群組： 之 (S)-2-{[l-(2-溴-5-曱基苯基）曱醯基]胺基卜3_(4，·氰基 _2’，6、二曱氧基聯苯_心基）丙酸； (S)-2-{[(2-溴-5-氣苯基）曱醯基]胺基卜3-[4，_氰基、2，，6，〜 二曱氧基聯苯-4-基]丙酸； · (S)-2-{[(2,5-二溴苯基）曱醯基]胺基卜3_[4，_氰基_2，，6，、 一甲氧基聯苯-4-基]丙酸； (S)-2-{[(5-(異丙氧基）-2_溴苯基）曱醯基]胺基卜3、[4，_氰 43 316565 200524846 基2 ,6 甲氧基聯苯_4_基]丙酸 或其醫藥上可接受之衍生物。 ()1[ (2 /臭、5-乙氧基苯基）曱醯基]胺基卜3-(4，-氰基 -2，6 _一甲氧基聯笨_心基）丙酸或其醫藥上可接受之 生物。 '丁 6·⑻漠I氟苯基）曱醯基]胺基卜3-(4，_氰基 -2 ’6 一甲氧基聯苯_心基）丙酸或其醫藥上可接受之 生物。 / 7· (S) U1 (2 /臭-5-甲氧基苯基）甲醯基]胺基卜3_(4，_氰基 2 ^ 一甲氧基聯笨_4-基）丙酸或其醫藥上可接受之衍 8. —種式⑴化合物之製備方法，係包括： 水解式（II)之羧酸酯衍生物：

   (II) (式中Rl及R2係如式⑴中所定義，以及R為可形成羧 酸酯之基團）； 之後視需要可形成其醫藥上可接受之衍生物。 9·如申請專利範圍第m項中任_項之化合物，其係用 44 316565 200524846 於治療。 1 〇 · —種醫藥組成物，係包括醫療有效旦 第丨至7項中任一項之化合物與醫：上：申請專利範圍 稀釋劑之混合物。 —市丨接受之載劑或 11.一種醫藥組成物，係包括如申請專利範圍第1至工 任一項之化合物以及另一種治療活性南丨。 7員中 12·:種申請專利範圍第1至7項中任4之化合物之用 =’其係用於製造樂劑’該藥劑係用於治療或預防以媒 ”細胞黏著之α4整合素的抑制劑處理可發揮效益之病 13 · —種以媒介細胞黏著之α 效ϋ之病症之治療或預防 有效量之如申請專利範圍 投與至需要此治療之病患 4整合素之抑制劑處理可發揮 方法，該方法係包括將安全及 第1至7項中任一項之化合物 14·如申請專利範圍第13項之方法，#中該病症係選自下 列所構成之群組：類風濕性關節炎（RA);氣喘；過敏症 狀如鼻炎；成人呼吸困窘症侯群；愛滋病失智症；阿兹 海默氏症；心血管疾病；血栓或有害之血小板凝集；再 閉塞後之血栓溶解；再灌注傷害；皮膚發炎疾病如乾 癬H接靠皮膚炎及異位性皮膚炎；糖尿病（例 士騰島素依賴型糖尿病、自體免疫性糖尿病）；多發 性=化症，·全身性紅斑性狼瘡（SLE);發炎性腸道疾^ 如頃瘍性結腸炎、克隆氏症（局部性腸炎）及迴腸囊袋炎 (例如.於直知大腸切除術或迴腸肛門吻合術後所產 316565 45 200524846 生）；與白血球浸潤至腸胃道有關之疾病如乳糜渴、非 △'π &im與血清陰性關節病變有關之腸病變、 淋巴球性或膠原性結腸炎及嗜伊紅血球性胃腸炎；與白 血球/又/閏至其他上皮内概組織如皮膚、泌尿道、呼吸道 及關節滑膜有關之疾病；騰臟炎；乳房炎（乳腺）；肝炎； 膽囊火，膽官炎或膽管周圍炎（肝臟之膽管及周圍組 ’支氣官炎’鼻竇炎、肺臟發炎疾病所導致之間質 纖維化如過敏性肺炎；膠原疾病（於SLE及RA);類肉 瘤病；骨質疏鬆症，·骨關節炎；動脈粥樣硬化；腫瘤性 疾病包括惡性腫瘤之轉移或癌性增生；創傷（促進創傷 癒合）；特定眼疾如視網膜剝離、過敏性結膜炎及自體 免疫性葡萄膜炎，·修格連氏症候群；器官移植後之排斥 作用（忮性或急性）；宿主對移植物或移植物對宿主疾 病；内膜增生；動脈硬化（包括移植後之移植物動脈硬 ^);手術後如經皮冠狀動脈氣球擴張術（ρτ(：Α)及經皮 冠狀動脈再開通後之再栓塞或再狹窄；腎炎；腫瘤血管 新生，惡性腫瘤；多發性骨髓瘤及骨髓瘤所誘導之骨溶 蝕作用；敗血症，·以及中枢神經系統損傷如中風、創傷 (生月回損&及脊髓損傷與梅尼爾氏症（Meniere，s disease)。 5 ·如申凊專利範圍第13項之方法，其中該病症係發炎性 腸道疾病或多發性硬化症。 16· —種如式（π)之化合物·· 46 316565 200524846

   (ID 式中R1及R2係如式（I)中所定義，以及R為可形成羧酸 酉旨之基團。 17. 如申請專利範圍第16項之化合物，其中R2為Cw烷氧 基或氣。 18. —種如式（III)之化合物或其酸加成鹽：

   (Hi) 式中R為可形成羧酸酯之基團。 19. 一種如式（VI)之化合物：

   (HO)，丫 〇Me 47 316565 (VI) 200524846 七、指定代表圖：本案無圖式。 (一） 本案指定代表圖為：無。 (二） 本代表圖之元件代表符號簡單說明：

   八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   ⑴ 4 316565