TW200524645A - Decontamination of prion-contaminated surfaces with phenols - Google Patents

Description

200524645 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於生物去污染之領域。 【先前技術】 本發明在關於自醫療儀器、牙科用儀器、及製藥儀器移 除及/或破壞有害的生物物質（例如，普恩（蛋白質狀^染 劑））方面得到特別的應用，且本發明經其詳細參考資料說 明。然而，應瞭解可使用本發明之方法及系統進行多種受 普恩感染物質污染之設備、儀器、及其它表面（例如，製 藥設備、食品加工設備、實驗室動物研究設備，其包括地 板、工作台表面、儀器、籠子、發酵槽、液體管線、及諸 如此類）之生物去污染步驟。 該名詞，，普恩（Prion)”係用以描述可引起人類及/或動物之 相當類似腦疾（其必然致命）之蛋白質狀感染劑。這些疾病 通稱為可傳染性海綿狀腦病（TSEs)。TSEs包括人類之克魯 滋費德-賈可症（Creutzfeldt-Jakob disease)(CJD)及變體 CJD(vCJD)、牛隻之牛海綿狀腦病（BSE)，亦稱為，，狂牛症,，、 羊播疼症’及糜鹿之丨更性消耗病。全部這些疾病皆侵襲動 物之神經器官或容易感染該特定病症之動物。其特徵為起 先長期潛伏，繼而出現短期之神經病徵（其包括痴呆及失 去協調性），最後導致死亡。 已認為造成這些疾病之感染劑為一種不具有結合性核酸 之簡早蛋白負。已5忍為此種普恩疾病之致病機制包括一種 起先係正常之伯主編碼之蛋白質。该蛋白質可進行構型變 95048.doc 200524645 化，轉化成異常型式（普恩），其可自繁殖。目前此種變化 之正確原因尚未知。該異常型式之蛋白質並不能在體内有 效分解，且其在特定組織（特別為神經組織）内之蓄積最後 會導致組織彳貝害’例如，細胞死亡。一旦重要的神經組織 損害已發生，即可發現臨床徵象。 因此可以將普恩疾病分類成蛋白質聚集疾病，其亦包括 幾種其它致命疾病，例如，阿滋海默氏症（Alzheimer's disease)及澱粉樣變性病。就CJD而言，最普遍發生在人類 (m σ l’OOO’OOO . i之比例發生）之普恩疾病約85%病 例被認為係偶發，約1G%被認為來自遺傳，及約5%因醫生 疏失所造成。 雖然並不㈣具高觸染性，普恩疾病可藉由特定高危險 組織(其包括腦、脊椎、大腦脊流體，及眼睛)傳染。已報 導於幾種程序期間（其包括硬腦膜移植、角臈移植、心包 的同種移植、及藉由人類之促性腺激素與人類的成長激素 污染）發生之因醫生鈐生撕、生+ ^成 请生馼失所造成之傳染。亦有報導經由醫 (其包括神經外科用儀器、深度電極、及用於很接 =:經系之外科程序之其它裝置)得到之傳染。正在 + ^ , 汉木低危險性”之程序（例如，扁桃腺 切除術及牙科程序）可能引 # ^ ^ 7人無法接受的感染危險， “ ’右“關連性疾病之發生率增加，更令人擔心。 在對受普恩感染之患者進行外科處理後 物可殘留在外科儀器（特 9 哭U。^、、《、砷卜科用儀11及眼科用儀 …曰伙期間，报難測定外科用適合物是否為普 95048.doc 200524645 恩載體。 本項技藝已確知不同程序之微生物去污染作用。例如， π衛生”係隱含藉由清洗清除污物或細菌。”消毒”需要清先 以消滅有害微生物。”滅菌”隱含全部活微生物之消滅。 現在已知在習知意義上不會存活或再生之特定生物物質 (例如，普恩）仍然可複製及/或轉化成有害實體。文中我們 使用該名詞”失活作用”表示消滅此種有害生物物質（例如， 普恩），及/或破壞其複製或進行構型變化之能力，使其不 會轉變成有害物種。 ' 普恩耐力之㈣惡名日召彰，且其可抗去污染及滅菌之例行 方法。不像微生物，普恩不具有可破壞或分裂2Dna或 RNA。普恩由於具疏水性，所以容易—起聚集在不可溶凝 塊内。於可成功消毒微生物之許多條件下，普恩會形成更 堅固的凝塊’其可保護本身及在下面的普恩免於滅菌法之 消滅。 / 干J有開-日心八…用炙報告書要求 先後將上述儀ϋ浸泡在濃氫氧化鈉或次氯酸鹽内，費時兩 小時’然後在壓熱器内-小時。這些攻擊性的處理方法II 、面療统置(特別為軟質内視鏡及其它具塑肖、黃銅， 或銘零件之裝置）不相容。許多裝置因曝露於高溫下而受 ^宝化:處理法（例如’強驗）通常對醫療裝置材質或表面 片口：—般而言，據稱戊二越、甲越、環氧乙烧、液體過 ::、大部份酚系物、醇類，及-些方法(例如，乾熱 /、彿騰法、冷束法、υν、電離法、及微波輕射法）皆無 95048.doc 200524645 效。因此，對於可抗普恩又能夠與各表面相容之產物及方 法有明確的需要。

Ernst 及 Race(j. ViroI· Methods 41:193-202(1993))描述一 項研究’其t根據作者描述，已發現切·第三基齡、 鄰-节基-對·氯酚、及2-苯基酚之以酚為主之消毒劑可對抗 羊搔疼症。該研究調查濃度（〇·9_9〇%)及曝露時間（〇5_16小 時）對於注射田鼠腦均漿之羊搔疼症敏感性田鼠模式所移 除之感染程度之影響。已發現相當高濃度LpHTM.長時期 可減少普恩之存在。在其它研究中，通常已發現粉類並不 能對抗普恩。 本發明提供一種處理受普恩感染物質污染之表面之新穎 且改良之方法，其可克服上述問題等等。 、 【發明内容】 根據本毛明方面，係提供一種處理受普恩污染之主體 之方法。该方法包括以含酚之組合物接觸該主體 體上之普恩失去活性。 亥主 根據本發明另一方面，係提供—種測定主要含齡之去、_ =組合物對受普恩污染之物質之效力之方法。該方法包: ^ 〆可诏〉谷液及一蛋白質物質，測定麫出 該物質吸收之該酚數量， 、二 里並根據酚之初吸收量測定該纟人 物之效力。 '' σ 本發明之一項優點在於其對儀器具和善性。 本發明另-項優點在於其能快速並有效地使普恩失、、舌 本發明另—項優點在於其可以與多種物質及裝置相容 95048.doc 200524645 一旦閱讀並瞭解以下較佳具體實施例之詳述，般技術 者可清楚瞭解本發明又另一項優點。 以下縮寫使用在全文内： bsa =牛血清白蛋白 OBPCP=鄰-节基_對_氣酉分 〇PP=鄰-苯基酚 PCMX =對·氯，間_二曱苯酚 PTAP=對-第三-戊基酚 3,4DiOH苯曱酸=3,4二經基苯甲酸 3,5DiMeO酚=3,5二甲氧基酚 2,6DiMeO酉分=2,6二甲氧基紛 2,3DiMe-紛=2,3二甲氧基盼 本發明係關於一種可減少或去除有害普恩之消毒劑組合 物’其能有效處理多種主體（其包括表面及液態主體），該 /肖毋劑組合物包含g分或g分類之組合物。能有效經該組合物 移除或貫質上減少普恩污染之表面包括用於醫療，牙科 用，及製藥程序之儀器表面、用於食品及飲料加工業之儀 器表面，及工作台表面、牆壁、地板、天花板、發酵槽、 液體供應線路，及在醫院、工業設施、研究實驗室、及諸 如此類中可能受污染之表面。特定實例包括棄置前之醫療 廢棄物（例如，血液、組織及其它身體廢棄物）之處理、收 容已知或被懷疑受普恩感染之動物所使用之房間、籠子， 及諸如此類之處理、受BSE感染區（其包括屠牢場、食口口加 工設施，及諸如此類)之去污染、醫療裝置再處理二； 95048.doc -10- 200524645 或滅菌系統之去污染、醫藥調配物、藥物，及具有抗真 菌、抗病毒、抗結核病、及抗細菌效力，及普恩效力之清 潔劑。 該組合物包含一或多種酚。適合之酚類包括經烷基、氯 基’及硝基-取代之酚類及雙酚類，及其羧酸。酚類之實 例包括（但不限於）酚；2,3-二甲基酚；3,5-二曱氧基酚 GJDiMeO酉分）；2,6-二甲氧基酚（2,6DiMe〇酚）；鄰_苯基酚 (〇PP);對·第三·戊基酚（PTAP);鄰-f基-對-氣酚 (OBPCP);對-氯，間-甲酚（pcMC);鄰-甲酚；對_甲酚； 2,2-亞甲基雙（對-氣酚）；3,4_二羥基苯甲酸（3,4Di〇H苯甲 酉文），對-經基苯甲酸；咖啡酸；原始茶酸；對-硝基酚；3_ 酚酚，2,3·一甲氧基酚（2,3DiMe-酚）；瑞香草酚；4-氯，3-甲氧基齡；五氣齡；六氯酚；對氯-間-二甲苯酚（PCMX); 三氣生；2,2-甲氧基-雙（4_氯_酚）；及對_苯基酚。 頃發現具有相當高疏水性之酚類在該組合物内更具有效 性。Pc之定義為所計算之辛醇·水配分係數。較高&對數值 表不祕S更具疏水性。可用以測定值之軟體可蹲自， 例如，AdVanced Chemistry Devel〇pment _醫^ 如藉 由ACD軟體方法所測定，該組合物中較佳至少一種酚之h 對數值為至少2_5，更佳為至少約3，且高至約6 ()。頃發現 h對數值愈高（更具疏水性），戶斤吸收的紛愈多。目此，當 該酚具疏水性時，可以使用較低酚濃度以得到所要普恩破 壞作用。Pc對數值為3.35之_種更特佳酉分為％淑。 該組合物較佳具酸性，亦即，中性pH(pH 7)，或較低， 95048.doc 200524645 更佳為pH約6，或更高，最佳為？11約2.5。例如，該組合物 可包括有機酸或無機酸（例如，鹽酸、羥基乙酸、磷酸， 或諸如此類），其係添加以調整？11。亦認為該組合物可以 具鹼性，例如，添加鹼（例如，氫氧化鈉、氫氧化鉀，或 者士此類）以凋整pH。較佳為該驗度可以游離僅5〇〇/〇該 。亥、、且口物包含水或其它適合溶劑。較佳以濃縮液型式提 供：：合物，其可以在水中經稀釋以形成可用以去污染之 適合濃度之去污劑溶液。該濃縮液較佳稀釋至重量該溶液 勺重里/〇。為了更激烈的去污染，可以使用更高濃度 (例如，該溶液之約5重量％)之濃縮液。除非另有指定，可 以提供全部濃度之濃縮液。 古該濃縮液之總莫耳酚濃度較佳為約〇1 Μ_ι〇 M，或更 更佳、力0·2 Μ，或更南，最佳係約〇·5 M或更高。已 =用約G.2 Μ_〇·5 M或更高之總g分濃度調配能消滅至少卿 害蛋白質（例如，普恩）之有效組合物。 八根據特定應用，該組合物亦可包含其它成分。適合之成 ▲用以移除水硬度鹽之多價螯合劑、共溶劑、表面活 背J抑蝕劑、緩衝劑，及諸如此類。 人/夕杨螯合劑較佳為有機酸、無機酸，或其混合物。適 ::機酸包括單·及二_脂肪族羧酸、含羥基之有機酸、 二 < 物“貝螯合劑之實例包括經基乙酸、柳酸、琥 夂、礼酸、酒石酸、山梨酸、胺基磺酸、乙酸、苯甲 • 己酉夂、氰尿酸、二氫乙酸、二甲基胺基磺酸、 95048.doc -12- 200524645 丙酸、聚丙_酸、2 -乙基-己酸、甲酸、反丁稀二酸、ι_麵 胺酸、異丙基胺基磺酸、環烷酸、草酸、戊酸、苯痛酸、 二甲苯磺酸、檸檬酸、甲苯酸、十二烷基苯磺酸、構酸、 硼酸、磷酸、及其組合物，其中較佳為羥基乙酸。就鹼性 組合物而言，可省略該酸多價螯合劑。 該酸較佳以該濃縮液組合物之約2-25%(更佳約5-20%， 更特佳約15-20%)濃度存在。 適合之共溶劑包括僅含碳、氫及氧原子之多元醇。多元 醇之貫例為C2至C(5多元醇，例如，1，2_丙二醇、1 2_ 丁 一 醇、己二醇、丙三醇、山梨糖醇、甘露醇、及葡萄糖。高 碳二醇、聚乙二醇、多氧化物及乙二醇醚亦被視障共溶 劑。這些共溶劑之實例包括烷基醚醇，例如，甲氧基乙 醇、曱氧基乙醇醋酸酯、丁氧基乙醇（丁基溶纖劑）、丙二 醇、聚乙二醇、聚丙二醇、二乙二醇單乙基醚、二乙二醇 單丙基醚、一乙一醇單丁基醚、三丙二醇甲基醚、丙二醇 甲基醚、二丙二醇甲基醚、丙二醇甲基醚醋酸酯、二丙二 醇甲基邊醋酸酯、乙二醇正-丁基醚、匕^二甲氧基乙烧、 2-乙氧基乙醇、醋酸2-乙氧基乙酯、苯氧基乙醇、及乙二 醇正-丙基醚。可以使用共溶劑之組合物。該多元醇較佳 以至少10%(更佳為至少20%且可高至4〇%)濃度存在。 適合之表面活化劑包括陰離子、陽離子、非離子、兩性 離子表面活化劑。更特佳為陰離子表面活化劑，例如，烷 芳基陰離子表面活化劑。表面活化劑之實例包括十二烷基 苯磺酸及1 -辛烷磺酸鈉、及其組合物。 95048.doc -13- 200524645 亦有用之陰離子表面活化劑為硫酸鹽、磺酸鹽（特別為

Cw-Cu磺酸鹽）、磺酸、乙氧化物、肌胺酸化物、及碏美 琥珀酸鹽，例如，月桂基醚硫酸鈉、月桂基硫酸三乙醇 月女、月桂基硫酸鎂、磺基琥珀酸酯、月桂基硫酸銨、碏酸 烷酯、月桂基硫酸鈉、α烯烴磺酸鈉、硫酸烷酯、硫酸化 醇乙氧化物、硫酸化烷基酚乙氧化物、二甲苯磺酸鈉、笨 磺酸烷酯、十二烷基苯磺酸三乙醇胺、十二烷基苯磺酸 鈉、十二烷基苯磺酸鈣、二甲苯磺酸、十二烷基苯磺酸、

肌胺酸Ν_烷醯酯、以桂醯基肌胺酸鈉、磺基琥珀酸二烷 酯、Ν-烷醯基肌胺酸、月桂醯基肌胺酸，及其組合物。 該組合物亦可包含一或多種可溶性無機鹽，例如，氯化 鈉。已發明氯化鈉可增加特定酚類之效力，特別為此等未 經函化之㈣’例如’⑽，然而對於i化賴（例如， PCMX)之影響並未顯著。 一種濃縮液組合物之實例如下： 成份 組合物之重量％

水 一般而言，足量約35.0% 多價螫合價，例如， 0-25%，較佳為約18.〇% 2- 10% ’較佳為約7.〇〇/0 3- 10% ’較佳為約6.〇〇/0 羥基乙酸 表面活化劑，例如， 十二烷基苯磺酸 c14-c16磺酸鈉 共溶劑，例如， 10-40% ’較佳為約24 〇% 95048.doc -14- 200524645 酉分類，例如， 2-15%，較佳為約9.0% OBPCOP Λ 9 ςο/ Α 0·2-5/〇，較佳為約1〇% 在一項具體實施例中，至少邱八

主 ^ # 刀该 OBPCOP 或 OBPCOI 比這些盼中之任—種還更有效之龄(例如，PCMX)取代。 已證:當該濃縮液在水中稀釋至❻量。/。濃度時，此種 組合物能有效處理受普因絍 又3心木之表面。雖然並未完全瞭解 使普恩失去活性之機制，彳Θ ^ 成制C疋預期该酚可以與普恩蛋白質

形成複合物，使其變得盔宝。 、 寸…σ隹此種情況下，普恩不能複 製以產生其它蛋白質。經由本發 貝、、工田不嗌明者研究，認為該酚通常 不會分解普恩。已認為並因恭白片 G W馮a心蛋白貝之立體結構之變化會導 致其與該酚相互作用，使普恩失去活性。 此:卜與白知普恩處理法（例如，高溫或高濃度次氯酸 納或氫氧仙）比較，該組合物可以與多種表面相容。 。、、各種方法（其包括藉由噴塗法、塗佈法、浸潰 或諸:¾此類）塗敷該組合物。在一項具體實施例中，

該組合物係以凝膠型式塗敷。在本具體實施例中，添加增 稠；=1丨（例如，天然或改質纖維素）至調配物中以增加其黏 度。 可X使用其匕合成聚合物（其包括聚醋酸酯）、天然寶 石、無機聚合物（例如，合成黏土）、表面活化劑（例如，嵌 段共聚物及陽離子表面活化劑）作為增稠劑。 雖然更鬲溫度較佳，但是可以於室溫下塗敷該組合物。 頃叙現藉由將該組合物加熱至至少30°c，更佳約40°c，或 95048.doc -15- 200524645 更高溫度，可大量縮短使普恩失去活性所需之時間。 可以使肖人類或^ t動物之普恩研究該，组合物之各種調 配物之效力。或者，可以使用一種普恩模式（例如，蛋白 蛋，例如，牛血清白蛋白（BSA))以評估調配物。較佳普恩 模式為迴腸的流體依賴性有機體（IFD〇)。已#〇urd〇n等 人在（Burdon，29:145 157(1989》中確認 IFD，’且其被描述為在許多方面與，例如，抗消毒作用 及滅菌法之普恩類似。由於可人卫培養lFD〇，s並在實驗室 ㈣測’ ~以其提供用以研究去污方法對於普恩失活之影 響之良好模式系統。在—項具體實施例中，係在改良性徽 漿菌屬基礎培養基肉汁（〇XGid)中人工培養iFD〇s，並藉由 連續稀釋液定量，然後在類似之洋菜上進行平板接種。曰較 佳於室溫下以該濃縮液組合物在水中之約ι%稀釋液模擬 該組合物之用it ’藉由懸浮液試驗研究該去污染調配物之 效力。經適當接觸時間後，採集各整份作為試樣並經由連 續稀釋液定量’然、後在改良性黴㈣屬洋菜培養基内進行 平板接種。較佳於約3rc下培育各平板，費時幾小時，較 佳約48小時。檢查各平板，並計算看得見的菌落數。然後 測定對數減少值（對數減少值為測定所移除有機體數（其係 以有機體初數之L〇gl。減掉經處理後，有機體數之、。表 示)之方法，例如，6對數減少值表示經處理，從一百萬個 初有機體中，最多一個有機體殘存）。 使用SDS-臟方法以牛血清白蛋白（Bsa)進行分離試驗 顯示該BSA並未經由消毒劑LpHT、解至任何重大程度。 95048.doc -16- 200524645 因此’已認為LpHTM^ JL t七麻人 Ρ 及，、匕主要含酚之組合物對普恩之第 二或第三結構具有微妙的影響，使其不再有害。 頃發現㈣在組合物中之帶離度料因之複合程度有影 響。通常’該酚在組合物内之帶離度愈低，複合程度愈 高，亦即，該盼調配物對普恩失活作用更有效。可藉由選 擇用於該調配物中之盼及其它成分之種類與濃度（例如， 所使用溶劑及共溶劑）以影響帶離度。 不想限制本發明範圍，以下實例表示各消毒劑組合物對 於模擬普恩模式之影響。 【實施方式】 實例 實例1 ·酚濃度對於組合物效力之影響研究 為了測試各種調配物之濃度對於各種組合物之殺普恩活 性，使用IFDO對數減少作為響應進行實驗。組合物 之成分列示於表1内。組合物！為商業調配物，LpHTM。 在改良性黴漿菌屬肉汁内人工培養IFD〇s，並經由連續 稀釋液定篁，然後在類似洋菜培養基上進行平板接種。於 室溫下以該組合物在水中之1%稀釋液藉由懸浮液試驗研 究組合物I-VII之效力。經適當之接觸時間（例如，1〇分鐘） 後’採集各整份作為試樣，並藉由連續稀釋液定量，然後 在改良性儒i：漿鹵屬洋菜培養基内進行平板接種。於3 1下 培育48小時後，經由計算看得見之菌落數以評估各平板， 並測定對數減少值。與現有酚系產物比較之各組合物之結 果如表1所示。 95048.doc 200524645 表1 成份 濃縮液中組份之重量％ I II III IV V VI VII VIII 水 35.00 41.90 41.00 47.00 34.90 40.00 35.90 37.95 羥基乙酸 18.00 18.00 18.00 18.00 18.00 18.00 18.00 18.00 十二烷基苯磺酸 7.00 7.00 7.00 7.00 14.00 14.00 7.00 10.50 Ci4_C16績酸鈉 6.00 12.00 12.00 6.00 12.00 6.00 6.00 9.00 己二醇 24.00 12.00 12.00 12.00 12.00 12.00 24.00 18.00 鄰-节基-對-氯酚 9.00 9.00 9.00 9.00 9.00 9.00 9.00 6.00 鄰-苯基酉分 1.00 0.10 1.00 1.00 0.10 1.00 0.10 0.55 對數減少值 5.1 4.8 4.9 5.2 5.7 4.8 6.7 5.2 初計數：每毫升l〇gl()6.7。 以“^^^進行比較性研究，於處理後所得到之對數減少 值為4.0。根據所得到之對數減少值，實例VII最佳，因為 得到6.7對數減少值（亦即，未發現看得見之菌落）。 實例2 :約等莫耳濃度酚之影举 藉由實例1之方法研究約等莫耳濃度（當帶離度許可時’ 可使用之辰度）之各種酚。表2顯示調配物ιχ_χχ之各成份 (重量％)及所得到之結果。 95048.doc -18- 200524645 表2 成份 分子量 莫耳酌 /100 克 IX X XI XII XIII XIV 2,3_二甲基酚 122.17 0.090 11.00 鄰-节基-對-氯西分 218.69 0.086 18.86 鄰-苯基酚 142.58 0.084 14.29 對-氯•間·曱酉分 156.61 0.087 12.45 對-氣-間-二甲苯酚 150.2 0.099 15.50 2,4,5-三氣酉分 197.46 0.090 17.80 己二醇 4.00 3.95 6.29 4.21 4.00 4.23 異丙基醇 8.00 7.90 7.62 8.14 8.40 8.08 月桂基硫酸鈉 22.46 18.86 20.60 19.92 19.80 19.60 α稀烴績酸酉旨 6.70 6.32 6.10 6.03 7.00 6.45 羥基乙酸 19.00 18.68 17.14 18.30 21.00 18.00 三乙胺 2.50 1.43 0.95 1.34 1.40 1.02 軟水 26.34 24.00 27.01 29.61 22.90 24.82 對數減少值 4.1 4.7 4.8 4.3 4.4 4.9 95048.doc -19- 200524645 表2，續 成份 分子量 莫耳龄 /100 克 XV XVI XVII XVIII XIX XX 2,2-亞甲基 雙(4-氯酚) 122 0.051 6.17 六氣酚 406.9 0.026 10.56 對-甲酚 108.1 0.086 9.33 盼 94.1 0.090 8.46 瑞香草酚 150.2 0.090 13.52 三氣生 289.4 0.056 16.18 乙二醇 3.81 15.96 4.17 4.10 4.01 10.95 異丙基醇 14.42 20.57 7.96 8.26 8.00 20.79 月桂基硫 酸鈉 19.41 17.76 19.02 19.91 19.11 16.93 α烯烴績 酸酯 7.26 12.70 6.26 6.28 6.29 3.98 經基乙酸 22.14 18.38 18.00 17.92 18.00 11.81 三乙胺 1.48 1.45 1.00 1.00 1.00 0.68 軟水 25.31 2.62 34.26 34.07 30.07 18.68 對數減少 值 3.8 3.6 3.7 3.6 3.2 2.7 根據所得到對數值，使用2,4,5-三氯酚之調配物XIV之最 大對數減少值（4.9)比使用LpH之調配物之對數減少值（4.0) 更好。 實例3 :具配分係數（pe)之結果之相互關係 95048.doc -20- 200524645 pc之定義為所計算之率醇-水配分係數。使用兩種方法計 算該Pc對數值。第一種方法使用Alchemy 2000 Molecular Modeling Software(Tripos)及由 STERIS Corporation研發之 資料組。第二種方法使用 Advanced Chemistry Development(ACD) Software Solaris v4.67(© 1994-2002 ACD)。各酚之所計算Pe對數值如表3所示：將這些值與實 例2所得到對數減少值之菌落比較。 表3 酚 Pc對數值 (Alchemy2000) Pc對數值 (ACD) 菌落之Log10 減少值 紛 1.39 1.48 3.6 對-曱盼 2.08 1.94 3.7 2,3-二甲基酚 2.50 2.40 4.1 對-氣-間-曱酉分 2.58 2.89 4.3 對-氣-間-二曱苯酚 3.05 3.35 4.4 2,4,5-三氣酚 3.23 3.71 4.9 瑞香草酚 3.27 3.28 3.2 鄰_苯基酚 3.40 2.94 4.8 2,2-亞甲基雙(4-氣 酚） 4.27 4.62 3.8 鄰-苄基-對-氯酚 4.32 4.41 4.7 三氯生 4.51 5.82 2.7 六氯齡 5.75 7.20 3.6 95048.doc -21 - 200524645 Θ表示IFDO對數減少值對ρ。對數之刪）值及& 對數（ACD)值。該匕對數⑷如叫2_)值與對數（a⑶) 值間之相互關係如圖2所示。 除了一氯生及瑞香草酚以外，各酚類之活性似乎與該酚 有關之Pc對數有相互關係。 知香草盼及三氣生並不包括在該圖及後續圖中，因為其 明顯不適合。這兩種用以計算對數之方法彼此完全良好 地一致。 通常，Pc對數值介於2與6.5之間（由上述方法當中任一種 測知）之酚類具增強之活性。 已發現LpH™產物中之酚類為效力之最重要需求，且其 評比為〇BPCD〉〉OPP〉PTAP。t使用未確定濃度之這些酚 類測試時，最佳組合物被證明是含0PBCP4 〇pp之調配 物；PTAP之有效性很低。 酴類抗普恩之作用似乎不包括普恩之分解。其在藉由 SDS-PAGE使用BSA所進行之蛋白質分解研究中已證明。 一旦曝露至該酚調配物，該蛋白質似乎未受損害。因此可 推斷酚類對於普恩蛋白質之第二或第三結構具有料想不到 的成妙作用’或在某方面可以使其不具感染性。 實例4 ·溫度對於紛調配物活性之影樂 在改良性黴漿菌屬肉汁内人工培養IFD0,S，並經由連續 稀釋液定量，然後在類似洋菜培養基上進行平板接種。於 各皿度（20及408°C )下以該組合物在水中之1%稀釋液藉由 懸浮液測試研究溫度對於酚調配物活性之影響。經過5、 95048.doc -22- 200524645 15及20分鐘接觸時間後，採集各整份作為試樣，並藉由連 續稀釋液定量，然後在改良性黴㈣屬洋菜培養基内進行 平板接種。於378°C下培育48小時後，藉由計算看得見之 菌落數以評估各平板，並測定對數減少值。比較於汕它及 408°C下該酚組合物（LpH)之結果如圖3所示。 如圖3所示，與於20。(：下15分鐘比較，於4〇t下在$分鐘 内，IFDO含量減至在可偵測含量以下（亦即，大於i乙叫）。 實例5紛調配物及BSA蛋白質之相互作用 製備具有不同酚類之酚溶液，其方法如下：使酚與增溶 劑（例如，陰離子表面活化劑）、有機酸、異丙醇、二醇， 及胺之混合物1.38克帶離於99毫升水中以形成含總酚濃度 為4 mM之浴液。添加1克bsA至酚溶液内以得到濃度為約 0.15 mM之BSA(已假定BSA之分子量為約66 〇〇〇道耳呑）。 攪拌該溶液，費時15分鐘，然後以18〇〇 rpm離心處理5分 鐘。藉由高效液相層析法（HPLC)分析各整份。圖4表示根 據經由BSA吸收之初酚存在百分比，進行4回操作之結 果。所吸收百分比顯示與沉澱物之形成量具有良好相互關 係。根據這些結果，該吸收％為測定酚對抗普恩之效力之 良好方法。 實例6 畫出得自貫例5之初濃度吸收百分比對該酚之hPlc滯留 時間之曲線。圖5表示這些值間之相互關係。得到〇 81之 相關係數’其表示HPLC滞留時間為藉由蛋白質吸收酚之 相當良好的預測指標。 95048.doc -23- 200524645 實例7 晝出幾種酚類之？斜— c t數（經由電腦計算）值對所吸收同等 物之曲線。其結果翱_ 禾顯不P對數值愈高（更具疏水性），吸收 更多齡S此’當I分具疏水性時，可使用低西分濃度以達到 所要普恩破壞作用。 實例8 研究具不同含量之鹽水及酚之100毫升水之酚吸收性。 其結果顯示在表4内。該輔藥包括表面活化劑類之混合 物。 表4 操作 回數 溫度 鹽水 酚 辅藥 (重量％) BSA比 酚濃度 (重量％) 紛吸收 初濃度 % 1 35 0 OPP 1 30 0.8 1.47 95.2 2 27.5 2.5 OPP 1.25 26 2.4 18.42 30.4 3 20 5 OPP 1 22 4 16.66 25.5 4 35 5 PCMX 1.5 22 0.8 15.38 29.1 5 20 0 PCMX 1.5 i 30 4 26.74 11.2 6 27.5 2.5 PCMX 1.25 26 2.4 21.43 17.8 7 35 0 PCMX 1 22 4 15.34 30.2 8 27.5 2.5 PCMX 1.25 26 2.4 20.3 21.7 9 27.5 2.5 OPP 1.25 26 2.4 18.16 30.8 10 20 0 OPP 1.5 22 0.8 7.58 66.3 11 20 5 PCMX 1 30 0.8 21.46 30.4 12 35 5 OPP 1.5 30 4 25.48 15.4 -24- 95048.doc 200524645 其結果顯㈣㈣巾鹽水之存在（其存在 重量％時）對於紛吸收有重大影響。 【圖式簡單說明】 本發明可以在各種元件及^件之排列各種步驟及步驟之 排列中具體化。各該圖示僅用以說明較佳具體實施例，並 不應被視為對本發明之限制。 圖1為表不普恩對各種酚類之配分係數之對數減少值之 標繪圖； /圖2為表不藉由不同方法所得到之配分係數間之相互關 係之標繪圖； 圖3為表示溫度對於藉由酚類減少普恩之影響之標繪 圖； 圖4為表示各種酚類與BSA之相互作用之標繪圖； 圖5為表不各種盼類之所吸收初濃度百分比對HPLC滞留 時間之標繪圖。 95048.doc 25-

Claims (1)

1. 200524645 十、申請專利範圍： 1. 一種處理受普恩（Prion)污染之主體之方法，該方法 <特 徵在於： 以含酚之組合物接觸主體，以使主體上之普恩失去、 性0 2 ·根據請求項1之方法，其進一步之特徵在於： 該紛包括由對-氯-間-二甲苯齡、瑞香草齡、=氯 (triclosan)、4_氣，3_甲基盼、五氯酚、六氯酚、2，^甲 基··雙（4-氣酚）、及對-苯基酚所組成之群組當中至少一 種。 ^ 3 ·根據請求項2之方法，其進一步之特徵在於· 該組合物尚含有鄰-苯基齡及鄰_节基-對-氣盼 少一種0 田丫主 4. 5. 根據請求項3之方法，其進-步之特徵在於： 該齡之濃度為至少〇 〇〇5 M。 根據上述請求項1 -4中任一項之方 於： ，，其進一步之特徵在 6. 遠齡之濃度至高約0.2 Μ。 根據上述請求項1 -4中任一項之方、 於： ' 其進一 步之特徵在

   該酚之匕對數值在2與6.5之間。 根據请求項6之方法，其進—舟 該齡之\對數值在2與5之間Κ特徵在於 8. 根據請求項6之方法 其進 步 <特徵在於 95048.doc 200524645 該齡之pe對數值為至少4。 9·根據上述請求項1-4中任一項 於·· 員之方法，其進一步之特徵在 δ亥組合物含有濃度為至少約10%之酚。 10·根據上述請求項丨_4中任一 於·· 、方法，其進一步之特徵在 該組合物含有一可溶性無機鹽。 11 ·根據凊求項1 〇之方法 使 )、 之方法其遠一步之特徵在於·· 該可溶性鹽包括鈉鹽。 12·根據請求項1丨之方法，1 之方法其進一步之特徵在於： 該納鹽細至少2重量％濃度存在。 13. 根據請求項U之方法，其進―步之特徵在於： 該酚包括鄰_苯基酚。 14. 根據請求項13之方法，其進―步之特徵在於 該鹽包括氯化鈉。 151據上述請求項卜4中任—項之方法，其進一步之特徵在 該盼包括對-氯基，間·二甲苯盼（PCMX) 16·根據上述請灰d h ^ 於： 項"4中任-項之方法，其進-步之特徵在 口亥酚與普恩複合，並形成沉澱物。 17·根據上述請求項卜4中任_項之方法， 於： / <特徵在 該主體包赵 i I 括一表面，且該方法包括以含該盼之叙合物 95048.doc -2 - 200524645 接觸該表面，以使該表面上之普恩失去活性。 18.根據上述請求項i_4中任一項之方法，其進一步之特徵 於： 該主體包括由醫療、牙祖田 牙科用，及製藥儀器所組成之 組中之一種。 19 一種測定主要含驗之本、、亡w / A 女3 之去,可劑組合物對於受普恩污染 質之效力之方法’其特徵在於： 合併該主要含酚之去沄為丨+ 可片h谷液及一蛋白質物質，並 測定經由蛋白質物質帶離之該盼之數量；然後 測定以被帶離之酚量為基準 ~丞半汁’該組合物之效力。 20·根據請求項19之方法，其進一牛夕处 ^ 運步之特徵在於·· 該蛋白質物質包括含普恩 貝及牛血清白蛋白當φ 至少一種。 Υ

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