TW200402298A - Use of biogenic estriol diester prodrugs for the treatment of autoimmune diseases - Google Patents

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200402298 玖、發明說明： 技術領域 本發明係有關雌三醇酯（例如乙雌三醇3,1 7-二丙酸酯或 雌三醇3，1 7-二己酸酯）之用途，其可用於治療諸如多發性 硬化症（MS)之自體免疫疾病。 先前技術 自體免疫疾病係一種肇因於對自體抗原之無法控制的 免疫反應之免疫的病理類型。對自體免疫疾病之敏感性係 受性別所影響。在生育年齡時，女性普遍會受諸如多發性 硬化症（MS)或類風濕性關節炎（RA)等自體免疫疾病所侵 襲。例如，女性與男性發生MS之比例為2: l(Voskuhl等人， 2001 ; Neuroscientist 叉:258-270 ; Whitacre等人，1999 ;科 學283: 1277-1278)。 MS係影響神經元髓鞘之中樞神經系統的自體免疫疾病 且會造成去髓鞘化現象及後續之神經元細胞死亡等。該疾 病係由對諸如髓磷脂基礎蛋白（MBP)、蛋白脂蛋白（PLP)與 髓磷脂寡樹突細胞蛋白之髓鞘的蛋白質具專一性之CD4 + T淋巴球所媒介。有一種假設為，在遣傳決定的傾向下， 諸如病毒感染之環境因子啟動造成淋巴球之Till與Th2族 群不平衡疾病的發生，促成能穿透血腦障礙並對CNS產生 前發炎作用之活化Thl細胞之累積。軸突之去髓鞘化現象 有部分係起因對軸突具專一性之CD4+淋巴球分泌之諸如 間白素（IL)-12、伽瑪干擾素（IFNY)與阿爾發腫瘤壞死因子 (TNFa)之Thl胞動素。此前發炎性胞動素型態係細胞媒介 83374.doc 200402298 的免疫反應之特徵。對健康的人而言，細胞媒介之Th 1免 疫反應係與體液Th2免疫反應平衡。體液免疫反應係由抗-發炎之Th2胞動素IL-4、IL-5與IL-10所媒介。 目前對MS之治療策略係根據利用干擾素或闔多鈦 (glatiramer acetate)之免疫調節治療。然而，這些治療僅延 遲部分病人之疾病進程。因為皮質類固醇之抗發炎效果， 一般使用其做復發之急性治療。利用皮質類固醇之治療得 減輕MS之急性症狀，但無法影響長期診斷。皮質類固醇除 已知、多種的副作用之外，其亦抑制内生之免疫恩制機 制，故不適用於長期治療。為治療高活性的疾病或對標準 治療無反應，包括受二級持續性MS所苦之病人，一般使用 諸如甲氨嚷玲或環包素之免疫壓制劑。這些物質通常令人 很難忍受。 因而，需要另外的治療MS與其他Thl-媒介之免疫疾病之 策略。 在很多諸如MS之自體免疫疾病，Thl/Th2的平衡受干 擾。雌性激素似乎影響此平衡之調節。在懷孕期，其顯示 轉移至Th2胞動素型態。目前亦已發現在懷孕期，Thl-媒 介之免疫疾病（像是MS)的臨床症狀有改善。事實上在懷孕 後期MS婦女之復發率下降（Confavreux等人.，1998; N Engl J Med 339(5): 285-291)。疾病活性降低至少部分似乎是因 高量之諸如雌二醇與雌三醇等懷孕後期可見之雌性激素 所致。在Thl-媒介之實驗性自體免疫腦脊髓炎（EAE)之動 物模式MS，其顯示添加相當於懷孕期之量的雌三醇能改善 83374.doc 200402298 疾病（Kim等人·，1999; Neurology 52: 1230-1238; Jansson等 人·，1994; J Neuroimmunol 53: 203-207)。甚且，Correale 等人（1998; J Immunol 161: 3365-3374)指出，由MS 病人之 CD4+ T淋巴球分泌之胞動素比_10係由類似懷孕期濃度之 雌二醇、雌一酮與雌三醇所刺激。 WO 0 1/85 1 54揭示以低劑量雌性激素提高血清濃度至基 礎量之上，但低於懷孕期的量來治療自體免疫疾病。 因為雌性激素涉及前發炎與抗發炎病情間之平衡的調 節，有一種具潛力之治療深受Thi-媒介之免疫疾病所苦的 病人之方法為，％與雖性激素，特別是雄三醇，以達到典 型地在懷孕期發現的連續血清濃度者。 然而，雌性激素之治療用途有數種困擾的問題。缺點之 一為，用雌性激素治療時有造成子宮癌（子宮内膜癌）或乳 癌之潛在危險。例如，使用雌二醇可能生成已知有促進腫 瘤活性之16阿爾發-羌基雌一酮代謝物（Bradl〇w等人.， 1985; Proc Natl Sci USA §2: 6295-6299; Kabat等人.，1997; Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 包：505-509) 〇 雌三醇係規避此問題之會起作用的原理。咸信，雌三醇 之治療與人類癌症發生之小風險有關。因為雌三醇_雌性激 素受體（ER)復合物解離比雌二醇_ER復合物之解離快很 多’故雌三醇係做為較弱且僅是短的持續力之雌性激素。 因而’雌二醇造成最少之子宮内膜增生。此外，雌三醇對 雌一醇與受體t結合展現拮抗活性（Clark等人，1984; j

Steroid Biochem 1005-1013)，因而雌三醇對反抗雌二 83374.doc 200402298 醇之致癌性似乎具保護角色。雌三醇之拮抗效果僅在雌三 醇對雌二醇與雌一酮比例為10 :丨時才會發現，在此比例 以下雌二醇僅受部份或最低之拮抗，且可做為強力雌激素 (Melamed等人·，1997; Mol Endocrinol 辽·· 1 868-1 878)。此 比例會在懷孕後期達成。 先前技蟄遭遇的問題之一為任何施用型式皆無法在讓 病人在舒服的情形下，讓雌三醇達到連續的懷孕期血中含 量。當口服時，雌三醇之生物利用率很低。為達例如，施 用於陰道後之相當的血清含量必須口服多丨0倍之雌三醇 (Head等人·，1998; Altern Med Rev ίου”。因此，口 服時雌三醇須為高劑量；但是，便可能有副作用。口服雌 三醇造成肝臟高的動情期生成性。對肝的效果包括例如， 凝血系統與高壓素原的因子合成增加。 另一種在先前技藝已知之口服雌三醇的問題為雌三醇 在病人間的血中含量差別很大，通常不可能對劑量做一般 性推薦。 有問題的也包括雌三醇之半衰期非常短約15_5 3小時 (Heithecker等人，，1991;HormResil:234_238)。因此為 達成類似在懷孕時所見之雌三醇之固定持續的血中含 量，必須在對病人不便之短期間内施與口服高劑量之雌: 醇，而且須考慮數種副作用。 增加雌三醇之口服劑量並非增〜戶斤需之全身性動情期 生成之方式。雌三醇之骨質保護效果對雌三醇之全身性動 情期生成係很好的標誌。EP 〇㈣248說明若係採用至少 83374.doc 200402298 24小時之連續性釋放雌三醇並達恆定的血中含量之穿皮 施用時，雌三醇即展現抗骨質疏鬆效果。這些效果之決定 因子為恆定的雌三醇之血中含量。儘管Lindsay等人（1979;

Maturitas Jj 279-285)已施與相當高劑量（12毫克/天）口服 雌三醇，卻未顯示其骨質保護效果。 EP 0163 596揭示雌-；ι，3,5(10)-三缔酯衍生物、製備此類 化合物之方法與包含其之醫藥組合物。 鑒於先前技藝遭遇之問題，目前需要經由達到固定持續 之·雌二醇血中含量而無所述缺點之新穎的治療自體免疫 疾病的方法。 發明内宏 本發明目的係在防止或降低先前技藝之缺點，亦即提供 新頭的m療自體免疫疾病，尤其是ms之策略。本發明在一 方面，該自體免疫疾病係Thl-所媒介者。 本發明目的利用雌三醇之前藥，尤其是雌三醇二酯可達 成，較佳者為雌三醇3,17-二丙酸酯或3,17-二己酸酯。又以 雌三醇酯3，17β-二-正-己醯氧基雖三婦醇 最佳。該化合物以非經腸施用之前藥較佳，藉此得防止肝 臟-雌三醇交互作用。諸如3，17β-二_正_己酸氧基U，3,5(i〇)_ 雌三缔-16α-醇之雌三醇前藥可使雌三醇達成固定與持續 S血中含量。根據本發明施用諸如3，17卜二-正-己醯氧基 _1，3,5(1〇)-雌二歸]6α_醇之雌三醇二酯的前藥，造成免疫 反應轉移至抗發炎Th2.型，因此提供改善類似則之自體免 疫疾病之具前景的方法與用途。 83374.doc 200402298 、本發明係有關以雌三醇二g旨前藥製備治療諸如哺乳類 工MS的自體免疫疾病之藥物的用途。此類雄三醇二醋以雌 三醇3，17-二丙酸酯或雌三醇3，17_二_正_己酸酯較佳。θ最佳 之雌三醇二酷為3，17β_二-正-己驢氧基三缔 -16α-醇。特別是施用低劑量之本發明的雌三醇二酯，諸如 3,17β 一正_己醞氧基雌三烯_ΐ6α_醇造成在諸 如弟一或第三期之懷孕後期所見之高與持續的血液含 里，較佳者係在第三期後期，而對肝功能無任何影響。 在另一方面，本發明提供須治療諸如MS<自動免疫疾病 (哺礼類的治療方法，該方法包括施與需，治療的哺乳類醫 藥有效量之雌三醇二酯。對本發明之方法與用途而言， 3，17β-一-正-己醯氧基- ΐ，3,5(ι〇)_雌三晞_16α_醇係最佳之 雌三醇二酯的前藥。 實施方式 本發明係有關以諸如3，17β-二_正_己醯氧基]，3,5(1〇)_ 雌二烯-16α-醇之雌三醇二酯前藥治療諸如MS之自體免疫 疾病之方法與用途。 雌三醇二酯係以下列通式表示：

83374.doc -11 - 200402298 其中R係直鏈或支鏈烷基或苯基。 一=發月所用〈雌二醇二g旨以雌三醇二丙酸醋或雄 一醇3’17:_己酸酯較佳。本發明所用之化合物以3，—·二· 己酉-氧基]，3,5(1〇>雕三缔」6α-醇最佳。儘管3，口卜二- s己氧基]，3,5(1〇>雌三缔]6心醇係為本發明目的之 最^雌一醇一酉曰，但此並不排除使用其他適當之雌三醇二 酯之可能。 在本發明内容所謂“前藥，，之意義係指在生物體内會被 代謝成活性型式之無生物活性之物質。 c用於本發明《雌三醇二酿前藥及其製法請參照奸〇 96之說明。特別是在實例6之EP 〇 163 596有製備 3，17β-二_正_己醯氧基]，3,5(ι〇)_雌三烯_ΐ6α_醇之方法說 明。 本發明提供新的自體免疫疾病諸如MS之治療策略。其提 供達成與維持血中高的雌三酯含量如懷孕之第二與第三 期之可能。該血中含量高到足以造成加_媒介之免疫疾病 的免疫轉移。 户本發明比先前技藝優秀之部分在於，與傳統使用之雌三 醇（Ej)比較’由二醋前藥釋出之雌三醇具有高的生物利用 率、。本發明（雌三醇二酯前藥特別適用於大的劑量間隔。 因為雌三醇由二酯前藥之釋出緩慢，在施用相對低劑量後 :此達到咼、固定與持續之雌三醇血中含量。Heithecka 等人1991(H〇rm Res 2^:234438)所做之預備研究顯示雌三 醇二酯衍生物可比雌三醇增加血液雌三醇含量更長的期 83374.doc •12- 200402298 間。 為本發明目的施用雌三醇二酯做為前藥之良好結果 為，可發現在第一次通過時，與肝臟功能之交互作用低很 多。其優點為該釋出之雌三醇令人很能忍受。 在一較佳方面，本發明係有關使用雌三醇二醋（例如雌三 醇3，17·•丙酸酯或雌三醇3,17-己酸酯）以製造治療自體免疫 疾病之藥物。該疾病以Thl-媒介之自體免疫疾病較佳，最 佳者為MS。最佳之雌三醇二酯前藥為3，17β•二：正_己醯氧 _ 基-1，3,5(10)-雌三烯-16α-醇。該藥物以治療人較佳。 在第一個較佳方面，本發明係有關治療自體免疫疾病之 方法。該疾病以Thl-媒介之自體免疫疾病較佳，最佳者為 MS。該方法包括施與須此治療之哺乳類雌三醇二酯，以施 於人較佳。該雌三醇二酯較佳者為雌三醇3，17_二丙酯或雌 三醇3，17-二己酯，又以二酯3，17卜二_正-己醯氧基 -1，3,5(10)·雌三婦_16α_醇最佳。 自免疫疾病有部分係由可辨識特定組織（組織專一性）之 籲 袷主成分（自體抗原）或不同之外來組織並攻擊該組織之丁 細胞所造成。本發明内容所包括，但不為此限之自體免疫 疾病為，例如多發性硬化症（MS)、實驗性自體免疫腦脊髓 火（EAE)、類風濕性關節炎、青少年寡關節炎、膠原蛋白 誘發之關節炎、第一型糖尿病、發炎性腸疾、橋本氏甲狀 腺炎、克隆氏症、移植對宿主疾病、紅斑性狼瘡疾病、阿 狄森氏症及其類似者。 本發月之如藥需要施用至足以將血中雕三醇含量提昇 83374.doc -13· 200402298 至相當於懷孕期的量。例如，頃發現雌三醇之分泌級數為 40毫克/24小時’且懷孕後期在血中之濃度為K1〇〇毫微克/ 毫升（參照·· Katagiri等人，1976，Am J Obstet Gynecol 272-280; Klopper等人，1977，Obstet Gynecol，459-461; Fischer-Rasmussen等人，1981，Acta 0bstet Gynecol Scand 417-420)。 根據本發明通式之雌三醇的二酯前藥（見第丨丨頁）使我們 能以代謝安定型吸收與/或結合雌三醇。據此，可達到高的 王身性雌二醇I而不會產生肝臟之動情期生成副作用。甚 且’因為生成雌三醇㈣存庫，可得固定與持續之雖三醇 的血中含量°生物體内之雌三醇的半衰期亦延長。據此， 可能允許較長之施用間隔。因生物利用率改善，以相當低 劑量亦可達成效果。 不贫明的雌三醇

贫如取佳的3，17β-一-止-氧基-Μ，5叫雌三埽_16(^醇有很多優點，例如：

1 ·減少對肝臟之副作用； 2.延長生物體内雌三醇之半衰期，·與 3 ·增強生物利用率。 其結果’根據本發明之前藥 與較低劑量。甚且，病人門、間仔以較她 病人間夂差異亦減小。 二該二醋之貯存庫效果，相對於使用 的鏈長而定。 |、丁存庫<效果視醋化之單罐 如上述定義之適 用於本發明目的 之活性成分例如， 誇如 83374.doc -14- 200402298 3，17β-二-正-己醯氧基-1，3,5(10)-雌三烯-16α-醇之雌三醇 二酯，得根據已知製備化妝品之方法，併入醫藥組合物。 得根據此藝已知之方法，製造本發明所用之藥物與醫藥 組合物。亦可使用一般已知並使用之佐劑，以及更適當之 載體或稀釋劑。適當之載體與佐劑得為藥物、化妝品與相 關領域所推薦者，例如：Ullmann氏技術化學百科 (Encyclopedia of Technical Chemistry) ’ 第 4冊（1953)1 〜39 頁；Journal of Pharmaceutical Science第 52冊（1963)918ff 頁；Η·ν· Czetsch-Lindenwald，“Hilfsstoffe ftir Pharmazie und angrenzende Gebiete” ； Pharm. Ind· 2，1961，72 頁；Dr Η·Ρ· Fiedler, Lexikon der Hilfsstoffe fur Pharmazie,

Kosmetik und angrenzende Gebiete, Cantor KG, Aulendorf in WUrttemberg，1971 〇 施用本發明之雌三醇二酯前藥諸如，3，17β•二_正_己醯氧 基-1，3,5(10>-雌三埽_16α_醇做為藥物，得採口服、直腸、 子宮内 '陰道内、局部、穿皮或非經腸方式。口服施用型 式得為粉末、顆粒、錠劑、藥丸、喉片、糖果、膠囊、流 體萃取物、_與㈣。直腸或陰道内施用得為栓劑或子 |内裝m局部施用型式得為懸浮液、乳液、 乳霜或膠。穿皮施用型式俨μ “ 一 土式仵為貼片。無菌注射液或油 液或懸浮液之施用得為古τ 〜上 人田r生岭 續釋放之需要，根據本菸0曰、一 优们生成刀持 Λ月 < 藥物得經由野存庫注射盘始 入製備物。施用之較佳模式為注射。 #射”植 植入物得包括惰性材 生物可降解聚合物或諸如 83374.doc 200402298 矽酮橡膠之合成矽酮。 製備醫藥組合物之適當稀釋劑之定義請參照EP 〇 i 63 596 〇

本發明施用之雌三醇二酯前藥，諸如3,170_二_正-己醯氧 基4,3,5(10)-雌三晞-16α-醇之劑量，可提高雌三醇之血清 濃度至0.1〜1〇〇笔微克/¾升。雌三醇之血清濃度範圍為 0.1〜100毫微克/¾升係需要的，以〇i〜l〇毫微克/毫升範圍 幸父佳’取佳範圍為1〜1 0耄微克/毫升。根據本發明，欲達成 此目標可利用施與累積劑量1〜1000毫克/月之本發明的雌 三醇二酯前藥，又以10〜500毫克/月較佳。施用間隔之差 異得為1〜60天、又以5〜50天較佳，最佳為2〇〜4〇天。測定 血清雌三醇濃度之方法為此藝所熟知，例如適當之放射免 疫分析之揭示請參照Heithecker等人，1991 (HormResii: 234〜238) ° — 視情形，根據本發明之醫藥用途方法得進一步包括其他 该醫樂活性成分得為激素，例如黃

醫藥活性成分。例如 類似物、黃體激 。本發明化合物 體激素（黃體助孕素）黃體激素之前驅物、 素受體激動劑或中黃體素（mes〇pr〇gestin) _例如男心激素（黃體助孕素）之組合對子宮内膜增升，與 木二其他與雌二醇之長期使用有關的危險可能有另外的 ^果為避免因為睪固酮分泌減少而造成性慾減低， 可能需要與睪固酮或其他雄性激素組合使用。 丄連，、她用3，17ί3_二-正-己®盛氧基]，3,5(10)-雌三埽]6α_ 醇曰：k成子έ内膜增升。利用伴隨中黃體素與中黃體素之 83374.doc -16 - 200402298 治療，此與雌性激素治療聯合之不必要效果已經沒了（=黃 體激素拮抗劑並具明顯之部分激動塑活性）。該黃體素與中 黃體素得以通常施用型式與劑型施用；而且該施用得為 口、非經腸或子宮内方式。 此治療並未影響多發性硬化症之病程。對子宮切除的人 而言，此伴隨的治療可省略。 利用本發明之雌三醇二酯前藥治療自體免疫疾病 Thi-媒介之疾病，諸如Ms，得進一步包括施用傳統免疫治 療藥劑。在本發明内容之“免疫治療藥劑，，用語意謂但不限 於，諸如皮質酮類固醇、環胞素、FK 5〇6、甲氨喋昤、硫 唑嘌呤、能滅瘤（Mit〇xantrone)、環磷醯胺、闔多鈦共聚物 1 ,诸如 IL-4、IL_5、IL-1 〇、例如 betaferor^t IFNP之抗發 炎胞動素；諸如IL-1、IL-2與IL-12胞動素抑制劑；TNFa、 例如美所普蘭（mesopram)tPDEIV受體拮抗劑；整合素a 4结柷劑與諸如CCR1受體拮抗劑之抗發炎胞動素结抗劑、 包括抗體、反義寡核甘酸與可溶受體之免疫調節或免疫 制藥劑。 & 根據本發明之雌三醇—a 一咚—酉曰則樂，諸如，3，17β-二_正p破 氧基-1，3,5(1〇)_雌二烯16" ^ 卜 己酉也 J平一/布-16a-gf及藥活性 起或分開施用，同時盥^佑& 又/口療Μ仵一 藥^ H二或依料用。施用模式對本發明前 罘一種醫樂有效藥劑之間可能不同。 3，17β-二_正_己醯蚤奚 L虱基-^5(10)-雌三缔-16〇1_醇斟去。 急性EAE之效率： 畔對老紙 t驗設計： 83374.doc •17- 200402298 1·^^:將8周大之雌路易（Lewis).以抗原乳液免 疫注射。帛-天時，經皮下對老鼠後腳肉趾免疫注射〇〇5 *升I下列混合物··全天竺鼠之整個脊索、均質並混合工 克/1毫升之鹽液。然後以丨·· i之含i毫克/毫升結合桿^菌 Freund不完全佐劑與此均質液混合。第一天時以〇〇5毫升 單一推注；王射入每個後肢肉趾讓每隻老鼠接受總數〇 1黑 升。 “ ’笔 2 · Ί •以+故午酿：蓖麻子油（3: 2克/克）載 3，17β-二-正-己醯氧基-ΐ，3,5(10)_雌三烯]6α•醇 劑量=1 000微克/每鼠 體製備

劑量體積=〇·5毫升/注射 途徑=SQ 頻率=2個劑量：第1天與第15天 溶液：於每次劑量前皆新鮮製備，首先將3 Ι7β 己驢氧基-1，3,5(10)-雄三缔-16α-酵溶於字酸 加蓖麻子油前溫和加熱 實驗組（11=10)： •正一 芊酯，並於添 -載體（苄酸芊酯/蓖麻子油） -1000微克/每鼠之3，17β-二 烯-16α-醇 -正'己醯氧基」，3, 臨床評估： ΕΑΕ分數_症狀 0 正常 1 無力的尾 83374.doc -18- 200402298 一或兩支後肢不完全麻痺 3 一支後肢完全麻痺 或兩支後肢能動但無法 幫助身體運動 4 兩支後肢完全麻痒 後肢完全麻痒與一 或兩支前肢衰弱或垂死 或死亡 •給分數邊緣的老鼠一個半分，諸如3.5 二每隔幾天將老鼠秤重並評分，直至第4天；然後秤重並 每天坪分直至第20天。收集血漿與血清樣本供血液化學分 析。 結果 * 圖1之圖表示以載體與3，17β·二-正-己醯氧基 雌三烯-16α-醇治療動物臨床分數之摘要。將分數進行 Anova分析’發現以載體與Ε3-二己酸酯處理的動物間在疾 病之慢性期有顯著差別（ρ^Ο.028)。 圖式簡單說明： 圖1之圖表示以載體與3，17β-二-正-己醯氧基-1，3,5(10)-雌三烯-16α-醇治療動物臨床分數之摘要。 83374.doc -19-

Claims (1)

1. 200402298 拾、申請專利範圍： 1 · 一種下列通式的雌三醇酯的用途

   其中R係直鏈或支鏈烷基或苯基，係用於製備治療哺 乳動物自體免疫疾病之藥物。 2·根據申請專利範圍第1項之用途，其中該雌三醇酿為雌三 醇3,17-丙酸酯·或雌三醇3J7-二己酸酯。 3·根據申請專利範圍第1項之用途，其中該雌三醇醋為 3，17P-二-正-己醯氧基-1，3,5(1 〇)_雌三烯-16心酵。 4·根據申請專利範圍第ι_3項中任一項之用途，其中該哺乳 類為人類。 5·根據申請專利範圍第1-4項中任一項之用途，其中該自體 免疫疾病涉及Thl-媒介之免疫反應。 6·根據申請專利範圍第ι_5項中任一項之用途，其中該疾病 係選自包括多發性硬化症、類風濕性關節炎、青少年寡 關節炎、第一型糖尿病、發炎性腸疾、橋本氏甲狀腺炎、 阿狄森氏症及其類似者、紅斑性狼瘡疾病、急性移植對 倍主疾病、克隆氏症。 7·根據_請專利範圍第1-6項中任一項之用途，其中該疾病 83374.doc 200402298 為多發性硬化症。 8 ·根據申请專利範圍弟1 _ 7項中任一項之用途’其中該雕三 醇酯之施與累積劑量達1〜1〇〇〇毫克/月。 9·根據申請專利範圍第丨_8項中任一項之用途，其中該治療 進一步包括施與第二種治療藥劑。 1 〇·根據申請專利範圍第1 _9項中任_項之用途，其中該藥物 係經皮下或肌内注射。 1 1 · 一種下列通式的雌三醇酯的用途，

   其中R係Ci-io直鏈或支鏈烷基或苯基，係用於製備提供如 婦人懷孕後期所觀察到之血中雌三醇含量之藥物。 12·根據申請專利範圍第丨丨項之用途，其中該藥物為雌三醇 3，17-丙酸酯-或雌三醇3，17_二己酸酯。 1 3 ·根據申請專利範圍第丨丨項之用途，其中該雌三醇酯係 〇，176-二-正_己醯氧基-1，3,5(10)_雌三烯-16心醇。 14·根據申請專利範圍第11-13項中任一項之用途，其中該雌 二醇的血中含量係介於01〜1〇〇毫微克/毫升。 1 5 ·根據申請專利範圍第11 -14項中任一項之用途，其中該藥 物係經皮下或肌内注射。 83374.doc