TR202022438A2 - İdrarda Trehalaz Ölçümüne Yönelik Bir Solüsyon ve Bu Solüsyonun Kullanıldığı Ölçüm Yöntemi - Google Patents
İdrarda Trehalaz Ölçümüne Yönelik Bir Solüsyon ve Bu Solüsyonun Kullanıldığı Ölçüm YöntemiInfo
- Publication number
- TR202022438A2 TR202022438A2 TR2020/22438A TR202022438A TR202022438A2 TR 202022438 A2 TR202022438 A2 TR 202022438A2 TR 2020/22438 A TR2020/22438 A TR 2020/22438A TR 202022438 A TR202022438 A TR 202022438A TR 202022438 A2 TR202022438 A2 TR 202022438A2
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- urine
- solution
- glucose
- trehalase
- measurement
- Prior art date
Links
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 title abstract description 67
- 108010087472 Trehalase Proteins 0.000 title abstract description 45
- 238000005259 measurement Methods 0.000 title abstract description 35
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 title abstract description 6
- 102100029677 Trehalase Human genes 0.000 title description 32
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 abstract description 46
- 239000008103 glucose Substances 0.000 abstract description 46
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 31
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 abstract description 31
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 abstract description 31
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 30
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 abstract description 8
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 abstract description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 40
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 13
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 4
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 4
- 210000000512 proximal kidney tubule Anatomy 0.000 description 3
- XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylphosphoric acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 2
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 2
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 2
- XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N Adenosine diphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- NFBQIWJDUKFHJP-SQOUGZDYSA-N (2r,3s,4r,5r)-3,4,5,6-tetrahydroxy-2-phosphonooxyhexanoic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(O)=O)OP(O)(O)=O NFBQIWJDUKFHJP-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 208000022461 Glomerular disease Diseases 0.000 description 1
- BUEFQXUHTUZXHR-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Pro zwitterion Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O BUEFQXUHTUZXHR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010018473 Glycosuria Diseases 0.000 description 1
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 description 1
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-KCDKBNATSA-N aldehydo-D-galactose 6-phosphate Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O VFRROHXSMXFLSN-KCDKBNATSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 231100000317 environmental toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 231100000852 glomerular disease Toxicity 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 210000000110 microvilli Anatomy 0.000 description 1
- 229940101270 nicotinamide adenine dinucleotide (nad) Drugs 0.000 description 1
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 1
- 238000013214 routine measurement Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229960000707 tobramycin Drugs 0.000 description 1
- NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N tobramycin Chemical compound N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N 0.000 description 1
- 238000002562 urinalysis Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01028—Alpha,alpha-trehalase (3.2.1.28)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- G01N2333/926—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) acting on alpha -1, 4-glucosidic bonds, e.g. hyaluronidase, invertase, amylase
Abstract
Buluş, böbrek hasarının bir göstergesi olarak idrar trehalaz enzimi aktivitesi ölçmek için in vitro diyagnostik (biyokimyasal tıbbi tanı) alanında idrarda glukoz ölçüm kitleri ile beraber kullanıma yönelik trehaloz solüsyonu ve bu solüsyonun kullanıldığı ölçüm yöntemi ile ilgilidir.
Description
TARIFNAME Idrarda Trehalaz Ölçümüne Yönelik Bir Solüsyon ve Bu Solüsyonun Kullanildigi Ölçüm Yöntemi Teknik Alan Bulus, böbrek hasarinin bir göstergesi olarak idrar trehalaz enzimi aktivitesi ölçmek için in vitro diyagnostik (biyokimyasal tibbi tani) alaninda idrarda glukoz ölçüm kitleri ile beraber kullanima yönelik trehaloz solüsyonu ve bu solüsyonun kullanildigi ölçüm yöntemi ile ilgilidir. Teknigin Bilinen Durumu Trehalaz renal proksimal tübüllerde ve ince bagirsaklarda bulunan, 75kDa molekül agirligina sahip glikoprotein yapida bir enzimdir. Idrar trehalaz ölçümü renal proksimal tübüllerde olusan hasarin tarama, tani ve takibinde kullanilabilir (112). Diyabetin erken dönmelerinden itibaren, proteinüri ve glukozüri negatifken bile kontrol grubuna göre trehalaz aktivitesinin yüksek oldugu; diyabetin ileri dönemlerinde ise proksimal tübüllerdeki firça kenarlarin kaybolmasina bagli aktivitenin azaldigi bildirilmistir (3). Bazi çevresel toksinlere bagli böbrek hasarini erken gösterebilir. Kursun eriten isçilerde trehalaz aktivitesin kontrollere göre arttigi, kandaki kursun düzeyi ile idrar trehalaz aktivitesi arasinda pozitif bir dogrusal iliski bulundugu; çevresel kadmiyum maruziyeti durumunda da benzer sekilde aktivite yüksekligi gösterilmistir (4'6). Ampisilin ve tobramisin antibiyotiklerinin kullaniminin infantlarda idrar trehalaz aktivitesini artirdigi bildirilmistir (7). Kronik glomerüler hastalik ve özellikle nefrotik sendromda da idrarda trehalaz aktivite artisi gözlenmistir (8). Mevcutta idrarda trehalaz ölçümü için kullanilan farkli yöntemler mevcuttur. Bu yöntemler trehalaz enziminin aktivitesini (kolorimetrik) ve kitlesini ölçenler (immünokimyasal) olarak iki ana gruba ayrilmaktadir. Ancak rutin tani laboratuvarlarinda yaygin olarak kullanilan kit haline getirilmis bir örnek mevcut degildir. Bu sebeple özelikle böbrek hasarinin tanisinin erken, hizli, yaygin ve ekonomik olarak konulmasini saglayacak yöntemlere ihtiyaç duyulmaktadir. Sonuç olarak yukarida anlatilan olumsuzluklardan dolayi ve mevcut çözümlerin konu hakkindaki yetersizligi nedeniyle ilgili teknik alanda bir gelistirme yapilmasi gerekli bulunmustur. Bulusun Kisa Açiklamasi Mevcut bulus, yukarida bahsedilen gereksinimleri karsilayan, tüm dezavantajlari ortadan kaldiran ve ilave bazi avantajlar getiren idrar trehalaz ölçümü ile ilgilidir. Bulusun öncelikli amaci, idrarda glukoz ölçümü için kullanilan kitlerin, idrar trehalaz aktivitesi ölçümü için de kullanilmasini saglayarak trehalaz ölçümü konusundaki ihtiyacin çok hizli ve yaygin bir sekilde giderilmesini saglamaktir. Çünkü idrarda trehalaz ölçümünün aksine idrar glukoz ölçümü dünyadaki neredeyse bütün tibbi tani laboratuvarlarinda yapilan rutin bir ölçümdür. Bulus bu çok yaygin kullanilan idrar glukoz ölçümlerinin idrar trehalaz aktivitesi ölçümü için de kullanilmasini saglayacaktir. Bu amaçla kullanilan baska bir ürün mevcut degildir. Yukarida anlatilan amaçlarin yerine getirilmesi için bulus biyokimyasal tibbi tani alaninda idrarda trehalaz enzimi aktivitesini ölçmek için idrarda glukoz ölçüm kitleri ile beraber kullanima yönelik trehaloz solüsyonudur. Bulusun tercih edilen uygulamasinda bahsedilen solüsyonun 0,2- 68,9 g/dL araliginda tercihen 40 g/dL konsantrasyonda trehaloz içermesidir. Bulus ayrica bahsedilen solüsyonu içeren idrarda trehalaz ölçüm kitlerini de kapsar. Yukarida anlatilan amaçlarin yerine getirilmesi için bulus bahsedilen solüsyonun kullanildigi idrarda trehalaz enzimi ölçüm yöntemi olup, asagidaki islem adimlarini içermektedir: a) Trehaloz solüsyonu ile idrar örneginin karistirilmasi, b) Karisimin önceden belirlenen sicaklik ve sürede bekletilmesi, c) Seçilen bir idrarda glukoz ölçüm kiti ile karisimda glukoz ölçümü yapilmasi, d) Önceki adimlarda bahsedilen es kosullarda deiyonize su katilmis idrar karisiminda glukoz ölçümünün yapilmasi, e) Iki ölçüm sonucu arasindaki glukoz farkinin degerlendirilmesi. Bulusun bir uygulamasina göre "a" islem adiminda bahsedilen trehaloz solüsyonu 0,2- 68,9 g/dL araliginda tercihen 40 g/dL konsantrasyonda trehaloz içermektedir. Bulusun bir uygulamasina göre "a" islem adiminda 1 birim hacim trehaloz solüsyonu ile 39 birim hacim idrar karistirilmaktadir. Bulusun bir uygulamasina göre "d" islem adiminda 1 birim hacim deiyonize su ile 39 birim hacim idrar karistirilmaktadir. Bulusun bir uygulamasina göre e islem adiminda trehaloz solüsyonu ve deiyonize su katilarak yapilan iki farkli idrar glukoz ölçümü arasindaki fark trehalaz aktivitesi olarak hesaplanmaktadir. Bulusun bir uygulamasina göre "e" islem adiminda Trehalaz enzimi tarafindan olusturulan glukoz konsantrasyonundan yola çikarak U/L olarak trehalaz aktivitesi sonucu hesaplanmaktadir. Bulusun bir uygulamasina göre e islem adiminda dakikada 1 umol trehalozdan 2 umol glukoz üreten Trehalaz aktivitesi bir Ünite (U) olarak kabul edilmektedir. Bulusun yapisal ve karakteristik özellikleri ve tüm avantajlari asagida verilen detayli açiklama sayesinde daha net olarak anlasilacaktir ve bu nedenle degerlendirmenin de bu sekiller ve detayli açiklama göz önüne alinarak yapilmasi gerekmektedir. Bulusun Detayli Açiklamasi Bu detayli açiklamada bulus konusu ve tercih edilen uygulamalari konunun daha iyi anlasilmasina yönelik olarak ve hiçbir sinirlayici etki olusturmayacak sekilde açiklanmaktadir. Bulus, biyokimyasal tibbi tani alaninda idrarda trehalaz enzimi aktivitesini ölçmek için idrarda glukoz ölçüm kitleri ile beraber kullanima yönelik trehaloz solüsyonudur. Bulus konusu trehaloz solüsyonu dünya çapinda tibbi tani laboratuvarlarinda rutin olarak idrarda glukoz ölçümü için kullanilan kitlerin, idrar trehalaz aktivitesi ölçümü Bulus konusu olan solüsyonun içinde bulunan trehaloz, idrara katilir. Idrarda bulunan trehalaz enzimi tarafindan glukoza dönüstürülür. Rutin olarak idrarda glukoz ölçümü için kullanilan kit ile içine bulus konusu solüsyon veya deiyonize su katilmis idrarda glukoz ölçümleri yapilir. Solüsyon ve deiyonize su katilarak yapilan iki farkli ölçüm arasindaki fark trehalaz aktivitesini gösterir. Bulus kapsaminda kullanilan idrar glukoz ölçüm kitleri idrar tahlili reaktif stripleri de içermektedir. Bulus konusu trehaloz solüsyonu ile muamele edilmis idrarda olusan glukozu ölçme islevini gerçeklestirir. Bulus konusu solüsyonla idrarda glukoz ölçümü için tibbi tani laboratuvarlarinda rutin olarak kullanilan her tür ticari kitler kullanilabilir. Bulus konusu solüsyonla gerçeklestirilen ddrarda trehalaz enzimi ölçüm yöntemi en temel halinde asagidaki islem adimlarini içermektedir. - Trehaloz solüsyonu ile idrar örneginin karistirilmasi, - Karisimin önceden belirlenen sicaklik ve sürede bekletilmesi, - Seçilen bir idrarda glukoz ölçüm kiti ile karisimda glukoz ölçümü yapilmasi, - Önceki adimlarda bahsedilen es kosullarda deiyonize su katilmis idrar karisiminda glukoz ölçümünün yapilmasi, - Iki ölçüm sonucu arasindaki glukoz farkinin degerlendirilmesi. Bulus konusu olan trehaloz solüsyonu 0,2- 68,9 g/dL araliginda tercihen 40 g/dL konsantrasyonda deiyonize su veya trehalaz aktivitesini etkilemeyecek baska bir çözelti içinde çözülmüs trehaloz içerir. Bu solüsyondan 1 birim hacim 39 birim hacim idrar ile karistirilir. Bulusun farkli uygulamalarinda Trehaloz solüsyonu 40 g/dL den farkli konsantrasyonda trehaloz içeriyorsa solüsyon ve idrar hacimleri karisimdaki final trehaloz konsantrasyonu 0,1-5 g/dL araliginda tercihen 1 g/dL konsantrasyonda olacak sekilde degistirilir. Uygun bir süre boyunca, uygun bir sicaklikta beklenir. Solüsyonun içinde bulunan trehaloz, idrarda bulunan trehalaz enzimi tarafindan glukoza dönüstürülür. Idrarda ne kadar yüksek konsantrasyonda trehalaz enzimi varsa o kadar çok glukoz olusur. Rutin olarak idrarda glukoz ölçümü için kullanilan kit ile içine bulus konusu solüsyon katilmis idrarda glukoz ölçümü yapilir. Ayni ölçüm, solüsyon yerine ayni hacimde deiyonize su katilmis ve ayni kosullarda (süre ve sicaklik) bekletilmis idrar kullanilarak da yapilir. Bu ölçümün sonucu kör olarak kabul edilir. Solüsyon ve deiyonize su katilarak yapilan iki farkli idrar glukoz ölçümü arasindaki fark trehalaz aktivitesini gösterir. Trehalaz enzimi tarafindan olusturulan glukoz konsantrasyonundan yola çikarak U/L olarak trehalaz aktivitesi sonucu hesaplanir. Hesaplamada solüsyonun idrarla inkübe edildigi süre, sulandirma faktörü ve final inkübasyon hacmi de dikkate alinir. Dakikada 1 umol trehalozdan 2 umol glukoz üreten Trehalaz aktivitesi bir Idrar Trehalaz Aktivitesi Ölçümü Örnek 1: Idrar Örneginin Toplanmasi: Hastadan spot orta akim idrari alindi. Idrar örneginin bulanik olmamasina dikkat edildi. Alinan idrar örnegi temiz ve kuru bir tüpe konuldu. Alternatif uygulamalarda hemen çalisilmayacak örnekler agizlari kapatilip +4°C`de 2 saat, -20`Clde 48 saat saklanabilmektedir. Idrar ve %40 trehaloz solüsyonunun karistirilmasi ve inkübasyonu: Örnek tüpüne, hastadan alinan 975 uL idrar ve 25 uL %40 trehaloz solüsyonu katildi. Kör tüpüne, hastadan alinan 975 uL idrar ve 25 uL deiyonize su katildi. Tüpler 30 dakika süreyle 37C'de inkübe edildi. Alternatif uygulamalarda, trehaloz solüsyonu farkli konsantrasyonda ise kullanilan idrar ve solüsyon hacimleri uygun sekilde degistirilebilir. Inkübasyon süresi ve sicakligi laboratuvar kosullarina göre degistirilebilir. Trehalaz Aktivitesi Ölçümü: Ölçüm prensibi idrara katilan trehalozun idrarda bulunan trehalaz enzimi tarafindan glukoza yikimi sonrasi olusan glukozun ölçümüne dayanmaktadir. Idrar glukozu kinetik kolorimetrik yöntemle Abbott Architect C cihazinda ARCHITECT marka (Referans no: 3L82, Almanya) glukoz kiti ile kit talimatlarina uygun olarak ölçüldü. Trehaloz solüsyonu katilmis idrar ile deiyonize su katilmis idrar örneklerinde ayri ayri glukoz ölçülerek aradaki fark trehalaz aktivitesi olarak kabul edildi. Idrar Glukoz Ölçümü Deneyinin Prensibi: Glukoz, adenozin trifosfat (ATP) ve magnezyum iyonlarinin varliginda hekzokinaz ile fosforile olur; glukoz-6-fosfat(G-6-P) ve adenozin difosfat (ADP) olusur. Glukoz 6 fosfat-dehidrogenaz (G-6-PDH) G-G-P'yi fosfoglukonata oksitlerken, nikotinamid adenin dinükleotid (NAD) indirgenmis nikotinamid adenin dinükleotid (NADH)'e dönüsür. Tüketilen her bir glukoz molekülüne karsilik bir NADH üretilir. Üretilen NADH, isigi 340 nm'de absorbe eder ve spektrofotometrik olarak yükselmis absorbans olarak tespit edilir. Yöntem <800 mg/dL (44 mmol/L)'e kadar lineerdir. Idrar Trehalaz Aktivitesinin Hesaplanmasi: Trehaloz solüsyonu katilmis idrar ile deiyonize su katilmis idrar öneklerinde ayri ayri glukoz ölçümü yapildiktan sonra su sonuçlar elde edildi: Trehaloz solüsyonu katilmis idrarda glukoz konsantrasyonu: 115 mg/dL Deiyonize su katilmis idrarda glukoz konsantrasyonu: 7 mg/dL (Not: glukozun molekül agirligi 1809/mol) Dakikada 1 umol trehalozdan 2 umol glukoz üreten Trehalaz aktivitesi bir Ünite (U) olarak kabul edilir. Deneyde inkübasyon süresi 30 dakika oldugu için 1 dakikada olusan glukoz: Ölçüm öncesi 39 birim idrara 1 birim hacimde trehaloz solüsyonu katildigi için sonuç "40+39 = 1.025" faktörü ile çarpilarak sulandirma düzeltmesi yapilir: Idrar trehalaz aktivitesi: 100 U/L x 1.025 Idrar trehalaz aktivitesi: 102.5 U/L TR TR TR
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TR2020/22438A TR202022438A2 (tr) | 2020-12-30 | 2020-12-30 | İdrarda Trehalaz Ölçümüne Yönelik Bir Solüsyon ve Bu Solüsyonun Kullanıldığı Ölçüm Yöntemi |
| JP2023536098A JP2024501205A (ja) | 2020-12-30 | 2021-11-11 | 尿中のトレハラーゼを測定するための溶液及びその溶液を使用した測定方法 |
| EP21916005.8A EP4267966A1 (en) | 2020-12-30 | 2021-11-11 | A solution for measurement of trehalase in urine and measurement method using this solution |
| PCT/TR2021/051187 WO2022146320A1 (en) | 2020-12-30 | 2021-11-11 | A solution for measurement of trehalase in urine and measurement method using this solution |
| US18/255,810 US20240102076A1 (en) | 2020-12-30 | 2021-11-11 | A Solution for Measurement of Trehalase in Urine and Measurement Method Using this Solution |
| CN202180087629.2A CN116783486A (zh) | 2020-12-30 | 2021-11-11 | 用于测量尿中海藻糖酶的溶液以及使用该溶液的测量方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TR2020/22438A TR202022438A2 (tr) | 2020-12-30 | 2020-12-30 | İdrarda Trehalaz Ölçümüne Yönelik Bir Solüsyon ve Bu Solüsyonun Kullanıldığı Ölçüm Yöntemi |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR202022438A2 true TR202022438A2 (tr) | 2022-07-21 |
Family
ID=82260953
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2020/22438A TR202022438A2 (tr) | 2020-12-30 | 2020-12-30 | İdrarda Trehalaz Ölçümüne Yönelik Bir Solüsyon ve Bu Solüsyonun Kullanıldığı Ölçüm Yöntemi |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20240102076A1 (tr) |
| EP (1) | EP4267966A1 (tr) |
| JP (1) | JP2024501205A (tr) |
| CN (1) | CN116783486A (tr) |
| TR (1) | TR202022438A2 (tr) |
| WO (1) | WO2022146320A1 (tr) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2013249007B2 (en) * | 2012-04-20 | 2016-04-21 | California Institute Of Technology | Fluidic devices and systems for sample preparation or autonomous analysis |
| EP3728627A4 (en) * | 2017-12-22 | 2021-08-25 | The Governing Council of the University of Toronto | SYNTHETIC BIOLOGICAL CIRCUITS TO DETECT TARGET ANALYTES USING A GLUCOMETER IN AN ACELLULAR SYSTEM |
| CN111007255A (zh) * | 2019-12-10 | 2020-04-14 | 江苏三联生物工程有限公司 | 一种用于肾损伤标志物检测的蛋白芯片及其制备方法 |
-
2020
- 2020-12-30 TR TR2020/22438A patent/TR202022438A2/tr unknown
-
2021
- 2021-11-11 US US18/255,810 patent/US20240102076A1/en active Pending
- 2021-11-11 CN CN202180087629.2A patent/CN116783486A/zh active Pending
- 2021-11-11 WO PCT/TR2021/051187 patent/WO2022146320A1/en active Application Filing
- 2021-11-11 EP EP21916005.8A patent/EP4267966A1/en active Pending
- 2021-11-11 JP JP2023536098A patent/JP2024501205A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP4267966A1 (en) | 2023-11-01 |
| US20240102076A1 (en) | 2024-03-28 |
| JP2024501205A (ja) | 2024-01-11 |
| WO2022146320A1 (en) | 2022-07-07 |
| CN116783486A (zh) | 2023-09-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cooper | Methods for determining the amount of glucose in blood | |
| CN102154442B (zh) | 1,5‑脱水山梨醇的检测方法和相关诊断试剂盒 | |
| JPWO2010010881A1 (ja) | 溶血させた全血を用いる血中成分の測定方法及びそのキット | |
| CN112501245B (zh) | 一种新型N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶检测试剂 | |
| CN109856128A (zh) | 一种抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸及其制备方法 | |
| Klatskin et al. | The significance of the “one-minute”(prompt direct reacting) bilirubin in serum | |
| TR202022438A2 (tr) | İdrarda Trehalaz Ölçümüne Yönelik Bir Solüsyon ve Bu Solüsyonun Kullanıldığı Ölçüm Yöntemi | |
| EP1376133B1 (en) | Method of screening prediabetic state and screening reagent | |
| CN111455020A (zh) | 一种1,5-脱水山梨醇检测试剂盒及检测方法 | |
| Velázquez-Medina et al. | Comparison of outpatient point of care glucose testing vs venous glucose in the clinical laboratory | |
| Saibaba et al. | Interferences in clinical chemistry analysis | |
| CN103397076B (zh) | 氯化盐在制备消除测定结果出现负值或零值的生化试剂中的应用 | |
| JP4106270B2 (ja) | 新規測定方法 | |
| Giampietro et al. | Decrease in plasma glucose concentration during storage at-20 degrees C. | |
| Dohnal et al. | Comparison of three methods for determination of glucose | |
| CN100547390C (zh) | 光学快速检测谷丙转氨酶试剂 | |
| CN110849870A (zh) | 一种N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的检测试剂 | |
| Supernatant et al. | Stability of reagent | |
| CN114507712B (zh) | 一种基于CRISPR/Cas12的肝素检测方法及其检测试剂盒 | |
| OA20804A (en) | A solution for measurement of Trehalase in urine and measurement method using this solution | |
| SU1596248A1 (ru) | Способ диагностики уросепсиса | |
| Satgunasingam et al. | A simple and rapid one-tube method for the determination of urinary delta-aminolaevulinic acid. | |
| KR20170125204A (ko) | 1,5-안하이드로글루시톨 측정수단 및 그 제조방법 | |
| WO2001004345A1 (en) | Method of differentiating between bacterial and viral infections | |
| Khidir et al. | Effect of Increasing Glucose Concentration on Estimation of Electrolytes by ion selective electrode |