TR201811041T4 - Yeni̇ bi̇leşi̇kler. - Google Patents

Abstract

Buluş, HNE inhibitörleri olan ve HNE aktivitesinin bir rol oynadığı hastalıkların veya durumların tedavisinde yararlı olan yeni bileşikleri sağlayan, insan nötrofil elastaz inhibitör özelliklerine sahip pirimidinon türevleri olan heterosiklik bileşikler ve bunların tedavide kullanımı ile ilgilidir.

Description

TEKNIK ALAN Bu bulus, insan nötrofil elastaz inhibitör özelliklerine sahip pirimidinon türevleri olan heterosiklik bilesikler ve bunlarin tedavide kullanimi ile ilgilidir.

TEKNIGIN BILINEN DURUMU Insan nötrofil elastazi (HNE), nötrofillerin azurofilik granüllerinde bulunan 32 kDa serin proteinazdir. Fibronektinjaminin, proteoglikanlar, Tip I” ve Tip IV kollajenler ile elastin de dahil olmak üzere çok çesitli ekstraselüler matris proteinlerinin degradasyonunda rol oynar (Bieth, G. in Regulation of Matrix accumulation, yapisal proteinlerinin bozunmasiyla hasarli dokularin onarimi ve atilmasi yoluyla homeostazda önemli bir rol oynadigi uzun süredir gözlenmistir. Bakteriyel gövdenin bozulmasiyla bakteriyel istilaya karsi savunmada ile de ilgilidir. Matriks dokulari üzerindeki etkilerine ek olarak HNE, IL-8 gen ekspresyonunun yukari regülasyonunda rol oynar ve ayni zamanda akcigerin epitel hücrelerinden lL-8 salgilanmasini da indükler. Tütün dumanina maruz kalmanin neden oldugu Kronik Obstrüktif Akciger Hastaliginin hayvan modellerinde, hem küçük moleküllü inhibitörler hem de HNE protein inhibitörleri, inflamatuvar yaniti ve amfizemin gelisimini inhibe eder (Wright, JL v.d. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2002, 166, nedenle HNE, hem matriks tahribatinda hem de nötrofil akisinin karakteristik bir özellik oldugu kronik solunum yolu hastaliklarindaki inflamatuvar yanitlari güçlendirmede rol oynayabilir. Gerçekten de, HNE'nin, kronik Obstrüktif akciger hastaligi (KOAH), kistik fibroz (CF), akut solunum sikintisi sendromu (ARDS), pulmoner amfizem, pnömoni ve akciger fibrozisi dahil olmak üzere birçok akciger hastaliginda rol oynadigina inanilmaktadir. Ayni zamanda, örnegin, kalp yetmezliginde ve akut miyokard enfarktüsünü takiben iskemik doku yaralanmasinin olusumunda doku yeniden modellemesinin yapildigi çesitli kardiyovasküler hastaliklarda da rol oynar.

KOAH, her biri hava akisinin sinirlanmasina katkida bulunan üç farkli patolojik durumu kapsayan bir semsiye terimdir: kronik bronsit, amfizem ve küçük-solunum yolu hastaligi. Genel olarak üçü de KOAH'Ii hastalarda degisen ölçeklerde mevcuttur ve her üçü de KOAH'Ii hastalarin bronkoalveolar sizinti (BAL) sivilarinda gözlenen nötrofil sayisinin artmasiyla nötrofil aracili inflamasyona bagli olabilir KOAH'taki baslica patojenik determinantin, d1-antitripsin (d1-AT), sekretuar Iökosit proteaz inhibitörü (SLPl) ve pre-elafi gibi HNE ve proteaz-anti-proteaz dengesinin ("elastaz: anti-elastaz hipotezi" olarak da bilinir) çesitli inflamatuar KOAH hastaliklarina yol açtigi bilinmektedir. Proteaz inhibitörü oi1-antitripsin genetik eksikligine sahip olan bireyler, zamanla siddeti arttiran amfizem gelistirirler HNE fazlaligi yikicidir ve pulmoner morfolojinin elastikiyet kaybina ve akcigerdeki hava yollarinin alveolar eklerinin (amfizem) yok olmasina ve ayni zamanda mikrovasküler geçirgenligi ile mukus hipersekresyonu (kronik bronsit) arttirmasina yolaçan Bazi insan nötrofil inhibitörleri, teknikte bugüne kadar tarif edilmistir. Özellikle nötrofil elastaz inhibitör özelliklerine sahip bazi pirimidin türevlerini ve tedavide kullanimlarini tarif eder.

Birçok HNE inhibitörünün yukarida bildirildigi gibi tarif edilmis olmasina ragmen, hala daha fazla HNE inhibitörlerine Ihtiyaç duyulmaktadir. Özellikle, HNE enzim inhibisyonu için yüksek bir kuvvetle donatilmis daha fazla HNE inhibitörlerine hala ihtiyaç vardir. Özellikle avantajli olan, ayni zamanda, HNE enzim inhibisyonu için yüksek bir kuvvet ile donatilmis olan ve bir inhalasyon Islemi olarak uygun bir gelisme yetenegi profili gösterecek olan ek HNE inhibitörlerinin tanimlanmasi olacaktir.

Bu bulus, bulusun bilesiklerini saglayarak yukarida bahsedilen ihtiyaci hedef almaktadir.

A1 basvurularinda tarif edilmistir.

BULUSUN TANIMI Bu bulus, HNE inhibitörleri olan ve HNE aktivitesinin bir rol oynadigi hastaliklarin veya durumlarin tedavisinde yararli olan yeni bilesikler saglar.

Bulusun Özeti olarak burada tarif edilmeyen HNE inhibitörleri olan bilesikler ile ilgilidir.

BULUSUN DETAYLI AÇIKLANMASI Bu bulusa göre, asagidakilerden olusan gruptan seçilen bir bilesik sunulmaktadir: piridinyum bromür; piridinyum bromür; piridinyum bromür; piridinyum bromür; piridinyum bromür; piridinyum bromür; piridinyum bromür; piridinyum bromür; Özellikle mevcut bulus, asagidaki Tablo'da Iistelenenlerden olusan gruptan seçilen bir bilesik veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunu saglar: Bilesik Adi Ara i_(âI{5lê`iy"ano-â'-[(RS-'e-meto'ksika'r'bonii-7-metii-3-okso-8-(3- 4 1` (Eks- siynahÄ-g- `[(`R`)"- G-me`toksika`rbonil- 7- metil- 3- okso- 8- -(3- 10 Bilesik Adi Ara Bulusun bilesikleri, tuzlar, özellikle farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlar, N- oksitler, hidratlar, solvatlar ve bunlarin polimorflari seklinde hazirlanabilir. Buradaki bir bilesige veya "bulusa ait bilesiklere" ve benzerlerine yapilan atiflar, tuz, N-oksit, hidrat, solvat veya polimorfik formda olsun veya olmasin böyle bilesikleri içerir.

Bulusa ait bilesikler, HNE'nin dahil oldugu hastaliklarin tedavisinde veya önlenmesinde, örnegin kronik obstrüktif akciger hastaligi (KOAH), bronsektazi, kronik bronsit, akciger fibrozu, pnömoni, akut solunum sikintisi sendromu (ARDS) pulmoner amfizem, sigara kaynakli amfizem ve kistik fibroz tedavisinde kullanilabilir.

Bu nedenle, bulusun diger yönleri (i) bulusun bir bilesigini ve farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici veya eksipiyani içeren bir farmasötik bilesik; ve (ii) HNE'nin dahil oldugu bir hastalik veya durumun tedavisi veya önlenmesi için bir ilacin üretilmesi için bulusun bir bilesiginin kullanilmasidir. deginmektedir, burada ana bilesik, eger varsa, farmasötik olarak kabul edilebilir olarak tasarlanmis serbest asit veya bazik grubun herhangi birinin, geleneksel olarak herhangi bir baz veya asitle karsilik gelen ekleme tuzuna dönüstürülmesiyle modifiye edilir.

Asidik olan bulusa ait bilesikler, farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlar dahil alkali metal hidroksitler gibi bazlar ile tuzlar olusturabilir; örn. sodyum ve potasyum hidroksitler; alkali toprak metal hidroksitler örn. kalsiyum, baryum ve magnezyum hidroksitler; organik bazlar ile ör. N-metil-D-glukamin, kolin tris (hidroksimetil) amino-metan, L-arginin, L-lisin, N-etil piperidin, dibenzilamin ve benzerleri. Bazik olan bu bilesikler, inorganik asitler içeren farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlar da dahil olmak üzere tuzlar olusturabilirler; örn. hidroklorik veya hidrobromik asitler, sülfürik asit, nitrik asit veya fosforik asit ve benzerleri gibi hidrohalik asitler ve organik asitler ile örn. asetik, tartarik, süksinik, fumarik, maleik, malik, salisilik, sitrik, metansülfonik, p-toluensülfonik, benzoik, benzensülfonik, glutamik, laktik ve mandelik asitler ve benzerleri ile. Kuaterner nitrojene sahip olan bilesikler, klorür, bromür, asetat, format, p-tolüensülfonat, süksinat, hemi-süksinat, naftalen-bis sülfonat, metansülfonat, ksinafoat ve benzerleri gibi farmasötik olarak kabul edilebilir bir karsi iyon ile kuaterner tuzlar da olusturabilirler.

Bulusa ait bilesiklerin en az bir stereojenik merkeze sahip olmasi durumunda, bunlar enantiyomerler olarak mevcut olabilirler. Bulusa uygun bilesikler iki veya daha fazla stereojenik merkeze sahip oldugunda, ek olarak diastereoizomerler olarak mevcut olabilirler. Tüm bu Izomerlerin ve bunlarin herhangi bir orandaki karisimlarinin, bu bulusun kapsami dahilinde oldugu anlasilmalidir.

Genel formül (I)'in bilesiklerinin, karbon atomu (1) ile temsil edilen ve dolayisiyla optik stereoizomerler olarak var olan en az bir stereojenik merkez içerdigi açik olacaktir.

Bir uygulamada. bu bulus, karbon (1)'in mutlak konfigürasyonunun asagida gösterilen sekilde oldugu, yukarida tanimlandigi gibi formül (l)'in bilesikleri olan formül (l)'e iliskindir.

Baska bir uygulamada, bu bulus, karbon (1)'in mutlak konfigürasyonunun asagida gösterilen sekilde oldugu, yukarida tanimlandigi gibi formül (l)'in bilesikleri olan formül (l)'e iliskindir.

Karbon (1)'in mutlak konfigürasyonu, gruplarin önceliklerine bagli olarak Cahn- Bulusun Uygulamalari Bulusa ait bilesikler, formül (l)'e ait bilesikler ve daha spesifik olarak, formül (l)'in bilesikleri veya bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlaridir. burada R grubu, asagidakilerden olusan gruptan seçilir 2-(3-hidroksi-piridinil)etil; - 2-(2-metil-piridinil)etil; 2-(4-hidroksimetil-piridinil)etil; 2-(5-hidroksi-2-metiI-piridinil)etil; - 2-(3,5-dimetiI-piridinil)etil; 2-(2-etiI-piridinil)etil; 2-(2-(2-hidroksi-etil)piridinil)etil 2-(4-etiI-piridinil)etil.

Yararlilik Bu bilesiklerin terapötik yararliligi, insan nötrofil elastasinin etkisi ile en azindan kismen aracilik ettigi bilinen herhangi bir hastaliga uygun olmasidir. Örnegin mevcut bilesikler, kronik obstrüktif akciger hastaligi (COPD), kistik fibroz (CF), bronsektazi, akut solunum sikintisi sendromu (ARDS), pulmoner amfizem, pnömoni ve akciger fibrozunun tedavisinde yararli olabilir.

Bulusa ait bilesikler, örnegin astim (hafif, orta veya siddetli), steroid dirençli astim, bronsit, kronik obstrüktif akciger hastaligi (COPD), kistik fibroz (CF), pulmoner ödem, pulmoner emboli, pnömoni, pulmoner sarkoidoz, pulmoner amfizem, silikoz, pulmoner fibrozis, pulmoner hipertansiyon, solunum yetmezligi, akut respiratuvar distres sendromu (ARDS), amfizem, kronik bronsit, tüberküloz, aspergilloz ve diger fungal enfeksiyonlar, hipersensitivite pnömonisi, akciger vaskülatüründe vaskülitik ve trombotik bozukluklar, solunum yollarinin iltihapli ve sekretuar kosullari ile iliskili kronik öksürügün tedavisi ile ilgili antitusif aktivite, solunum sinsityal virüsüne bagli enfeksiyon, grip, koronavirüs (ciddi akut solunum yolu sendromu, SARS dahil) ve adenovirüs, bronsektazi ve akciger kanseri gibi iltihapli solunum rahatsizliklarinin tedavisi için yararlidir.

Bu bulus, ayni zamanda, etken madde olarak, bulusun bir bilesigini içeren farmasötik formülasyonlarla da ilgilidir. Diger bilesikler, akcigerin inflamatuvar hastaliklarinin önlenmesi ve tedavisi için bu bulusun bilesikleriyle birlestirilebilir.

Dolayisiyla bu bulus, ayni zamanda, bulusun bir bilesiginin ve bir veya daha fazla baska terapötik ajanin terapötik olarak etkili bir miktarini içeren, akcigerdeki inflamatuvar hastaliklarin önlenmesi ve tedavisi için farmasötik bilesimlerle de Kombinasyonlar Bulusun bilesikleri ile kombinasyon terapisi için uygun terapötik maddeler sunlari içerir: (1) bir kortikosteroid, örnegin budesonid, beklometazon, beklometazon (örn., Mono veya dipropionat ester olarak), flunisolid, flutikazon (örn., Propionat veya furoat ester olarak), Ciclesonide, mometazon (örn., Furoat ester olarak), mometasonedesonid, rofleponide, hidrokortizon, prednizon, prednizolon, metil prednizolon, naflocort, deflaza-kortu, halopredon asetat, fluokinolon asetonid, fluosinonid, klokortolon, tipredan, prednikarbate, alklometason dipropionat, halometazon, rimeksolon. deprodon propiyonat, triamsinolon, betametazon, fludrokortizon, desoksikortikosteron, rofleponid, etiprednol dikloasetat ve benzerleri. bilinen) gibi solunum hastaliklari için klinik veya klinik öncesi gelistirilen steroidleri glukokortikoid reseptör agonistleri (SEGRA'Iar); (2) albuterol, bambuterol, terbutalin, fenoterol, formoterol, formoterol fumarat, salmeterol, salmeterol ksinafoat, arformoterol, arfo-moterol tartrat, indakaterol (QAB-149), karmoterol, Bl (abediterol), BI1744CL (olodaterol) ve brodxaterol gibi bir p2-adrenoreseptör agonisti; (3) montelukast, zafirlukast veya pranlukast gibi bir Iökotrien modülatörü; (4) örnegin ipratropiyum bromür, tiotropiyum, tiotropiyum bromür (Spiriva®), seçici muskarinik-3 (M3) reseptör antagonistleri anti-kolinerjik ajanlari; (5) roflumilast, silomilast veya teofilin gibi fosfodiesteraz-IV (PDE-IV) inhibitörlerini; (6) kodein veya dekstramorfan gibi bir antitüsif ajani ve (7) ibuprofen veya ketoprofen gibi bir steroidal olmayan anti-enflamatuar ajan (NSAID); (8) N asetil sistein veya fudostein gibi bir mukolitik; (9) ambroksol, hipertonik solüsyonlar (örn., Salin veya mannitol) veya sürfaktan gibi bir balgam söktürücü/mukokinetik modülatör; (10) rekombinant insan deoksiribonükleaz I (dornaz-alfa ve rhDNase) veya helisidin gibi bir peptid mukolitik; (11) azitromisin, tobramisin ve aztreonam gibi antibiyotikler ve Kinazlarin (JAK) inhibitörleri gibi p38 Mitojen Aktive Edilmis Protein (MAP) kinaz inhibitörleri; (13) R inhibitörleri; (14) fosfatidilinositol-kinaz (PI3K), (15) ribavirin, zanamivir veya inhibitörleri; (16) pioglitazone ve rosiglitazon gibi PPAR-y agonistleri gibi azaltilmis yan etki profilleri ile gelistirilmekte olan yeni nesil molekülleri de içerebilir.

Bulusun bir yönüne göre, bulus, bulusa ait bilesiklerin, anti-inflamatuvar ilaçlar ve bronkodilatatör ilaç kombinasyonlari (örnegin üçlü kombinasyon ürünü) ile kombinasyon halinde, salmeterol ksinafoat/flutikazon propionat (Advair/Seretide®), vilanterol/flutikazon furoat (BREO ELLIPTATM), formoterol fumarat/budesonid (Symbicort®), formoterol fumarat / mometazon furoat, formoterol fumarat/beklometazon dipropionat (Foster), formoterol fumarat/flutikazon propiyonat (FIutiForm®), Inda-caterol/mometasone furoate, lndacaterol/QAE-397, formoterol fumarat/siklesonid, arformoterol tartrat/siklesonid de dahil fakat bunlarla sinirli olmamak üzere, inhalasyon yoluyla verilmesini saglamaktadir.

Baska bir yönüyle bulus, salmeterol ksinafoat/tiotropiyum bromür, formoterol fumarat/tI-otropiyum bromür, formoterol fumarat/glikopirolat (PT003)i BI 1744 CL/tiotropiyum bromür, indacateroI/NVA237, indacterol/QAT-370, bulusa ait bilesiklerin, diger bronkodilatatör ilaç kombinasyonlari, özellikle de [32 agonisti/M3 antagonisti kombinasyonlari (yani üçlü kombinasyon ürünü) ile kombinasyon halinde inhalasyon yoluyla verilmesini saglar.

Birinci ve ikinci etken maddenin agirlik orani degisebilir ve her bir bilesenin etkili dozuna bagli olacaktir. Genel olarak, her birinin etkili bir dozu kullanilacaktir.

Bulusa ait bir bilesigin profilaktik veya terapötik dozunun büyüklügü, elbette, tedavi edilecek olan durumun ciddiyetinin niteligine ve özel bilesik ve uygulama yoluna göre degisecektir ve genellikle farmasötik alanda gerektigi gibi klinik deneme ile belirlenecektir. Ayrica, tekil hastanin yasina, kilosuna ve yanitina göre de degisecektir. Genel olarak, günlük doz araligi, tek veya bölünmüs dozlar halinde bir memelinin vücut agirligi basina yaklasik 0.001 mg ila yaklasik 100 mg, tercihen kg basina 0.01 mg ila yaklasik 50 mg ve en çok tercihen de kg basina 0.1 ila 10 mg olacaktir. Öte yandan, bazi durumlarda bu sinirlarin disinda dozajlarin kullanilmasi gerekebilir.

Bilesimler Bu bulusun bir baska yönü, bulusun bir bilesigini ve farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyiciyi içeren farmasötik bilesimleri saglar. "Bilesim" teriminin, farmasötik bilesimde oldugu gibi, etken madde(ler) içeren bir ürünü ve tasiyiciyi olusturan inert bilesenin (farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanlar) yani sira, dogrudan veya dolayli olarak, herhangi iki veya daha fazla bilesenin kombinasyonundan, komplekslestirilmesinden veya toplanmasindan veya bir veya daha fazla bilesenin ayristirilmasindan veya bir veya daha fazla bilesenin diger reaksiyon türlerinden veya etkilesimlerinden kaynaklanan herhangi bir ürünü kapsamasi amaçlanmistir.

Buna göre, bulusun farmasötik bilesimleri, bulusun bir bilesigi, ilave etken madde(ler) ve farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanlarin karistirilmasiyla yapilan herhangi bir bilesimi kapsar.

Bulusun farmasötik bilesimleri, bir etken madde veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olarak bulusun bir bilesigini içerir ve ayrica farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve istege bagli olarak baska terapötik bilesenler içerebilir. organik bazlar veya asitler dahil olmak üzere farmasötik olarak kabul edilebilir toksik olmayan bazlardan veya asitlerden hazirlanan tuzlari ifade eder.

Mevcut bulusun bir bilesiginin etkili bir dozajiyla bir memelinin, özellikle bir insanin saglanmasi için uygun herhangi bir uygulama yolu kullanilabilir. Terapötik kullanimda, aktif bilesik uyumlu, uygun veya etkili bir yolla uygulanabilir. Uygun uygulama yollari bilinmekle birlikte oral, intravenöz, rektal, parenteral, topikal, oküler, nazal, bukkal ve pulmoner (inhalasyon ile) yollari içerir.

Inhalasyon yoluyla uygulama için uygun bilesimler bilinmektedir ve bu bilesimlerde kullanim için bilinen tasiyicilar ve/veya seyrelticiler içerebilir. Kompozisyon, agirlikça %0.01-99 aktif bilesik içerebilir. Tercihen, bir birim doz, 1 ug ile 10 mg arasinda bir miktarda aktif bilesigi içerir.

En uygun dozaj seviyesi bilinen herhangi bir uygun yöntemle belirlenebilir. Bununla birlikte, belirli bir hasta için spesifik miktarin, kullanilan spesifik bilesigin aktivitesi, yas, vücut agirligi, diyet, genel saglik ve cinsiyet, uygulama süresi, uygulama yolu, atilim orani, baska ilaçlarin kullanimi ve tedavi edilecek hastaligin siddeti gibi çesitli faktörlere bagli olacagi anlasilacaktir.

Inhalasyon yoluyla uygulama için, aktif bilesik tercihen mikro partiküller biçimindedir. Püskürterek kurutma, dondurarak kurutma ve mikronizasyon gibi çesitli tekniklerle hazirlanabilirler. Örnek olarak, bulusun bir bilesimi, bir nebülizörden veya bir sivi itici içinde bir aerosol olarak, örnegin bir basinçli ölçülü doz inhaleri (PMDl) içinde kullanilmak Üzere bir süspansiyon olarak hazirlanabilir. Bir PMDI'da kullanim için uygun olan iticiler, uzman kisilerce bilinir ve CFC-12, HFA- ve HFA- içerir.

Bulusun tercih edilen bir uygulamasinda, bulusun bir bilesimi, kuru toz inbalerin (DPI) kullanilmasi için kuru toz biçimindedir. Birçok DPI türü bilinmektedir.

Uygulama yoluyla uygulama için mikropartiküller, dagitima ve salinima yardimci olan eksipiyanlar ile formüle edilebilir. Örnegin, bir kuru toz formülasyonunda, mikropartiküller, DPl'dan akcigere akisa yardimci olan büyük tasiyici partiküller ile formüle edilebilir. Uygun tasiyici partiküller bilinmektedir ve laktoz partikülleri içerir; 90 um'den daha büyük bir kütlesel medyan aerodinamik çapa sahip olabilirler.

Aerosol bazli bir formülasyon durumunda, tercih edilen bir bilesim asagidaki gibidir: Bulusun Bilesigi 24 mg/kutu Lesitin, NF Liq. Koni. 1,2 mg/kutu Trikloroflorometan, NF 4,025 g/kutu Diklorodifluorometan, NF 12,15 9 / kutu.

Bulusun bilesikleri, mevcut bilesiklerin yararli oldugu hastaliklarin veya durumlarin tedavisinde/önlenmesinde/bastirilmasinda veya iyilestirilmesinde kullanilan diger ilaçlarla kombinasyon halinde kullanilabilir. Bu gibi baska ilaçlar, bir yolla ve bu nedenle yaygin olarak kullanilan bir miktarda veya bulusun bir bilesigi ile es zamanli veya sirali olarak verilebilir. Bulusa ait bir bilesik, bir veya daha fazla baska ilaçla es zamanli olarak kullanildiginda, bulusun bilesigine ek olarak bu tür diger ilaçlari içeren farmasötik bir bilesim tercih edilir. Buna göre, bulusun farmasötik bilesimleri, bulusun bir bilesigine ek olarak bir veya daha fazla baska aktif bilesen içerenleri Bulusun ajanlari, solunan formda uygulanabilir. Aerosol üretimi, örnegin, itici güdümlü püskürtmeli atomizörler veya ultrasonik atomizörler, tercihen, örnegin, inhalasyon kapsülleri veya diger "kuru toz" uygulama sistemlerinden gelen, mikronize edilmis aktif bilesiklerin, itici gazla çalisan ölçülü aerosoller veya propellant içermeyen uygulanmasi kullanilarak gerçeklestirilebilir.

Aktif bilesikler, kullanilan inhaler sistemine bagli olarak tarif edildigi gibi dozlanabilir.

Aktif bilesiklere ek olarak, uygulama sekilleri ayrica örnegin itici maddeler (örnegin ölçülü aerosoller durumunda Frigen), yüzey aktif maddeler, emülsifiye ediciler, stabilizatörler, koruyucular, tatlandiricilar, dolgu maddeleri (örn. Laktoz) gibi eksipiyanlar içerebilir. Toz inhalerleri durumunda veya uygunsa baska aktif bilesikleri içerebilir.

Inhalasyon amaçlari dogrultusunda, hasta için uygun olan bir inhalasyon teknigi kullanilarak optimum partikül boyutundaki aerosollerin üretilebildigi ve verilebildigi çok sayida sistem mevcuttur. Adaptörlerin (aralayicilar, genisleticiler) ve armut biçimli kaplarin (örnegin, Nebulator®, Volumatic®) kullanimina ve ayrica, toz püskürtücüler durumunda, ölçülü aerosoller için bir püskürtücü spreyi (Autohaler®) yayan otomatik aygitlarin kullanimina ek olarak bir dizi teknik çözüm mevcuttur (örnegin, Diskhaler®, R0tadisk®, Turbohaler® veya örnegin EP-A-O505321'de tarif edilen inhaler).

Sentez Yöntemleri Bulusun bir yönünde, asagida Sema A'da rapor edilen genel sentetik yollara göre, formül (I) bilesiklerinin hazirlanmasi için bir islem saglanmaktadir. o EIOAO/LOEt o IMS o 0 N 0/ Et N THF H N 0/ or HN>\\N/\l/\O/ 3 ' ` 1/\ H7N`N/JxN VOYNWÄN N N/\ H 0 H nBuOH, rellux Formül (IV) bilesikleri, O °C'den refluksa bir sicaklikta THF gibi bir solvent içinde trietilamin gibi bir bazin varliginda etil kloroformat (veya etil pirokarbonat) ile reaksiyona sokularak formül (lII) bilesiklerinden hazirlanabilir. Formül (lV) bilesikleri, uygun bir solvent içinde isitilarak formül (l) bilesiklerine dönüstürülebilir.

Uygun kosullar arasinda, IMS gibi bir solventin kullanilmasi ve 150 °C'ye kadar bir sicaklikta mikrodalga isimasi kullanilarak isitma veya geri akista n-bütanol gibi bir solvent içinde geleneksel isitma yer alir.

Formül (Ill) bilesikleri, asagidaki Sema B'ye göre hazirlanabilir: CF; Tiiis-Poiiiosrai Ure hidroien peroksit O Formül (V) bilesikleri, formül (Vlll) bilesiklerini verecek sekilde) oda sicakligindan refluks sicakligina kadar THF gibi bir solvent içinde TMS-polifosfat gibi bir asit varliginda 3-bromo-4-f0rmiI-benzonitril gibi bir benzaldehit ve etil asetoasetat gibi bir asetoasetat ile reaksiyona sokulabilir. Formül (lll) bilesikleri, formül (VIII) bilesiklerinden, üre hidrojen peroksit gibi bir oksitleyici ajan ile reaksiyona sokularak ve ardindan lMS'de hidrazin hidrat ile in-situ tedaviden sonra hazirlanabilir.

Ayrica, karbonun (1) mutlak konfigürasyonunun yukarida gösterilen formül (I) bilesikleri oldugu formül (l) bilesikleri. Sema C'ye göre hazirlanabilir.

NH, W` ' H _ i-i-Çricncrime. 0 Ü :' N ii HI'I iki-.i 3 N L Polifosforik CF :ç .ooi FJH gt.” ii POCI DMF N' YhntemA :N ini N .,I 0/ _ i-iriMr:/ A ;Çüâsâêli A 3-5': Formül (II) bilesikleri, formül (V) bilesiklerinin, Sema B'deki formül (VIII) bilesiklerine dönüstürülmesi için tarif edilen benzer bir yöntem kullanilarak 3-bromo-4-formil- benzoik asit ile reaksiyona sokularak formül (V) bilesiklerinden elde edilebilir.

Stereojenik merkezde (1) mutlak konfigürasyonun Sema C'de bildirildigi gibi oldugu, formül (ll) bilesikleri olan formül (ll)" bilesikler, dioksan gibi uygun bir solvent içinde (+)-Cinkhonine gibi uygun bir kiral amin ile bir kiral diastereomerik tuzun olusturulmasi, ardindan tuzun formül (II)'in enantiyomerik olarak saf bilesiklerini elde etmek üzere hidroklorik asit gibi bir asitle islenmesiyle formül (II) bilesiklerinden elde edilebilir. Stereojenik merkezde (1) mutlak konfigürasyonun Sema C'de bildirildigi gibi oldugu formül (VIII) ait bilesikleri olan formül (VIII) bilesikleri, formül (II) bilesiklerinden, ara primer amidi vermek üzere 0 °C ile oda sicakligi arasindaki bir sicaklikta THF gibi bir solvent Içinde karbonil diimidazol gibi bir birlestirme maddesi oldugunda sulu amonyakla reaksiyona sokularak hazirlanabilir. Amidini formül (VIII)" bilesiklerine dönüstürülmesi, bir dehidrasyon maddesi kullanilarak gerçeklestirilebilir. Uygun kosullar arasinda, DMF gibi bir solvent ve 0 'C ile oda sicakligi arasindaki bir sicaklikta fosfor oksiklorür gibi bir dehidrasyon maddesi kullanimi yer alir.

Yukarida tanimlandigi gibi formül (I) bilesikleri olan ve karbonun (1) mutlak konfigürasyonunun Sema C'de (Yöntem A) gösterilen bilesik oldugu formül (I)" bilesikleri, formül (VIII) bilesiklerinin, Sema A'da formül (I) bilesiklerine dönüstürülmesine iliskin olarak tarif edilen benzer yöntemler kullanilarak formül (VIII)" bilesiklerinden elde edilebilir. Alternatif olarak, yukarida tanimlandigi gibi formül (I) bilesikleri olan ve karbonun (1) mutlak konfigürasyonunun Sema C'de gösterilen bilesik oldugu formül (I)" bilesikleri, yöntem B kullanilarak formül (VIII)" bilesiklerinden de elde edilebilir; burada, burada formül (VIII)" bilesikleri, diger gruplarin, formül (I) bilesikleri için tanimlandigi gibi oldugu formül (I)" bilesikleri elde etmek üzere -5-5 °C sicaklikta diklorometan gibi solvent çözücü içinde 2,6-Iutadin gibi bir bazin varliginda fosgen veya trifosgen ve susuz hidrazin gibi bir klorokarbonil Içeren/salan bilesik ile reaksiyona sokulabilir.

Teknikte uzman kisi, uygun kiral aminin ve mutlak konfigürasyonunun seçilmesiyle, formül (ll)', (VIll)' ve (la)' türevlerinin (formül (ll), (VIII) ve (I) bilesikleridir, burada sirasiyla stereojenik merkezdeki (1) mutlak konfigürasyon, Sema C'de bildirilenin tam tersidir] elde edilebilecegini anlar.

Teknikte uzman kisi, uygun oldugu hallerde, sentetik yollarin bulusa ait baska bilesiklerin saglanmasina uyarlanmasi için deneylerde spesifik olarak açiklanan kosullara uygun varyasyonlar getirebilir. Bu tür varyasyonlar arasinda, sinirlandirici olmamak kosuluyla, farkli bilesikler üretmek için, solventlerdeki ve reaksiyonlarin sicakligindaki degisiklikler, reaktiflerin benzer kimyasal rol ile degistirilmesi, islevsel koruma/koruma önlemlerinin alinmasi veya çikarilmasi için uygun baslangiç malzemelerinin kullanimi, reaksiyon kosullarina ve reaktiflere duyarli gruplarin yani sira kimyasal iskelenin daha fazla islevsellesmesine yönelik özel sentetik adimlarin eklenmesi veya çikarilmasi yer alabilir. Örneklerde kullanilabilen, tarif edilen ve bildirilen prosesler, bulusun bilesiklerinin hazirlanmasi için mevcut olan sentetik yöntemlerin kapsamini sinirlayici olarak görülmemelidir.

Baslangiç maddeleri veya ara ürünler olarak kullanilan bilesikler piyasada mevcuttur, bunlarin hazirlanmasi literatürde spesifik olarak tarif edilebilir veya bunlar literatürde mevcut olan ve teknikte uzman kisilerce iyi bilinen yöntemlere göre hazirlanabilir.

Tarif edilen proses, bulusun istenen bilesiklerinden herhangi birini elde etmek için vasifli kisilerce bilinen uygun herhangi bir varyant ile düzgünce modüle edilmeye uygun oldugundan özellikle avantajlidir. Bu varyantlar, bu bulusun kapsami dahilindedir.

Yukarida belirtilenlerden anlasilacagi gibi, teknikte bilgili olan kisiler için tarif edilen gruplardan herhangi birinin, bu sekilde veya uygun sekilde korunmus bir formda mevcut olabilecegi açiktir. Özellikle, Ara Maddeler ve Örneklerde mevcut olan ve istenmeyen yan reaksiyon ve yan ürünler olusturabilen fonksiyonel gruplarin, alkilasyon, asilasyon, birlestirme veya sülfonlasyon gerçeklesmeden önce uygun sekilde korunmasi gerekir. Benzer sekilde, bu koruyucu gruplarin müteakip olarak korumasinin kaldirilmasi, söz konusu reaksiyonlarin tamamlanmasinin ardindan gerçeklestirilebilir.

Bu bulusta, aksi belirtilmedikçe, "koruyucu grup" terimi, bagli oldugu grubun islevini korumak için uyarlanmis bir koruyucu grubu ifade etmektedir. Tipik olarak koruyucu gruplar, amino, hidroksil veya karboksil islevlerini korumak için kullanilir. Uygun koruyucu gruplar, örnegin, teknikte uzman kisilerce iyi bilinen benzil, benziloksikarbonil, t-butoksikarbonil, alkil veya benzil esterleri ya da benzerlerini içerebilir [bkz, genel bir referans için, T.W. Green; Protective Groups in Organic Benzer sekilde, örnegin karbonil, hidroksil veya amino gruplari da dahil olmak üzere söz konusu gruplarin herhangi birinin seçici korumasi ve korumasinin kaldirilmasi, organik sentetik kimyada yaygin olarak kullanilan çok iyi bilinen yöntemlere göre gerçeklestirilebilir.

Formül (l) bilesiklerinin istege bagli tuz olusumu, serbest asidik ya da amino gruplarinin herhangi birinin uygun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlara dönüstürülmesiyle gerçeklestirilebilir. Bu durumda da bulusun bilesiklerinin istege bagli salifikasyonu için kullanilan çalisma kosullari, uzman kisinin siradan bilgisi dahilindedir.

Mevcut oldugunda formül (l) bilesiklerinin diastereoizomerleri, örnegin preparatif HPLC veya kromatografik saflastirmalar gibi teknikte iyi bilinen yöntemlere göre elde edilebilir. Formül (I) bilesiklerinin rasemik bir karisimi, preparatif HPLC ve kiral bir duragan faza sahip bir kolon kullanilarak ayrilabilir veya teknikte iyi bilinen yöntemler kullanilarak çesitli enantiyomerler elde etmek üzere çözülebilir. Ayrica, kiral ara maddeler çözülebilir ve bulusun kiral bilesiklerini hazirlamak için kullanilabilir.

Yukaridakilerden anlasilacagi gibi, yukarida bahsedilen prosesin, bulusun uygun bilesimlerinin hazirlanmasi için bunlarin herhangi bir varyantinin kapsami, duruma göre örnegin uygun yogusturma maddeleri, solventler ve koruyucu gruplar seçerek özel ihtiyaçlara göre reaksiyon kosullarinin uyarlanabilmesi için uygun sekilde uyaHanabMr Formül (la) bilesikleri, yani R'nin yukarida tanimlandigi gibi oldugu bir formül (l) bilesikleri, Sema D'ye göre hazirlanabilir. Formül (I)' bilesikleri olan ve R'nin, bromin veya bunlarla sinirli olmamak üzere gruptan alinan diger uygun aktive edici grup oldugu Formül (lX) bilesikleri, Cl, l, OTf, SemalarA ve B'ye göre hazirlanabilir.

Formül (I) kiral bilesiklerinin de benzer sekilde Sema C'ye göre hazirlanabilecegi takdir edilmelidir.

Bir formül (XI) bilesigi, birformül (IX) bilesiginden hazirlanabilir. Formül (XI) bilesigi, tetraetilen glikol veya dimetoksietan gibi bir solvent içinde, pentametilpiperidin gibi bir bazin varliginda, oda sicakligindan 160 °C'ye kadar bir sicaklikta Herrmann- Beller katalizörü/tribütilfosfin tetrafloroborat gibi uygun bir katalizör/ligand sisteminin varliginda uygun sekilde ikame edilmis bir vinil bilesigi (X) ile reaksiyona sokularak Heck birlestirme kimyasi kullanilarak hazirlanabilir. Formül (Xll) bilesigi, ara aldehit ve bir formül (Xll) bilesigi elde etmek için 0 °C ile oda sicakligi arasindaki bir sicaklikta MeOH gibi bir solvent içinde sodyum borohidrid gibi bir indirgeyici madde verecek sekilde -10 °C'de DCM gibi bir solvent içinde trifloroasetik asit gibi bir asit kullanilarak hidroliz ve indirgeme basamaklarini takiben formül (Xl) bilesiklerinden hazirlanabilir. Formül (XIII) bilesigi, 0 °C ile 50 °C arasindaki bir sicaklikta DCM gibi bir solvent içinde bir karbon tetrabromür/trifenil fosfin karisimi kullanilarak birformül (Xll) bilesiginden hazirlanabilir. Tipik olarak, formül (I) bilesikleri, oda sicakligindan 80 °C'ye kadar bir sicaklikta asetonitril gibi bir solvent içinde bir ikame edilmis piridin, R bilesiklerinden elde edilebilir.

A **ait E' '9 im (BUCIWÇ A im ,\ A 3" He"r~isrr-3=i=i ' - _ »ww-f › ”rs/`WX - ;km 3/ *th /\ ;za-'355: A “Nur-x A` " N'Bf'i 'Humax /\ j; /`\ii'\ N lalvOH " N / 15:15:,1-4 s -csl asi CB*I DFli: P. = ikarreli :-iiidi'iyu-n A 8- 3 A N ntv-3`i ili-'C ` " Genel Deneysel Detaylar Reaksiyonlar, belirtilmemisse Inert bir atmosfer altinda gerçeklestirilmemistir ve tüm solventler ve ticari reaktifler, alindigi gibi kullanilmistir.

Kromatografi ile saflastirma, CombiFlash® Companion saflastirma sistemini veya Biotage SP1 saflastirma sistemini kullanarak saflastirmayi ifade eder. Ürünlerin bir kartusu', ortalama boyutu 50 pm ve nominal 60A gözenekliligi olan düzensiz parçaciklara sahip baglanmamis aktiflestirilmis silika içeren önceden paketlenmis bir polipropilen kolonu ifade eder. Gerekli ürünü içeren fraksiyonlar (TLC ve/veya LCMS analizi ile tanimlanmistir) toplanmis, organik fraksiyon buharlastirma yoluyla uzaklastirilmis ve kalan sulu fraksiyon Iiyofilize edilerek son ürün elde edilmistir.

Ince tabaka kromatografisi (TLC) kullanildiginda, bir floresan indikatör (254 nm), (örnegin Fluka 60778) ile alüminyum folyo plakalari üzerinde tipik olarak 3 x 6 cm silika jel kullanilarak plakalar kullanilarak silika jel TLC'ye atifta bulunur. Mikrodalga deneyleri, tek modlu bir rezonatör ve dinamik alan ayarlamasi kullanan bir Biotage bara kadar basinçlara ulasilabilir.

NMR spektrumlari 400 MHz'de çalisan bir 5 mm ters algilama üçlü rezonans probu veya 400 MHz'de çalisan 5 mm'lik bir ters algilama üçlü rezonans TXl probu ile bir Bruker Avance DRX 400 spektrometresi ile bir Varian Unity Inova 400 spektrometresinde veya 300 MHz'de çalisan standart 5mm çift frekansli prob ile bir BrukerAvance DPX 300 spektrometre üzerinde elde edildi. Vardiyalar ppm olarak Bilesik isimleri, MDL lSIS TM/Draw 2.5 SP2 yaziliminda Autonom 2000 özelligi kullanilarak olusturulmustur.

Analitik LC-MS Kosullari LC-MS Yöntem 1 Azsu + %0.1 formik asit ile elüe edilerek bir ClB-ters faz kolonuna (30 x 4.6 mm Phenomenex Luna 3 pm partikül büyüklügü) sahip Waters ZQ dört kutuplu kütle spektrometresi; B: MeCN + %0,1 formik asit. Gradyan: Gradyan-Zaman akis (mL/dk)iL/dk) %A %8 0.30 2.0 95 5 4.30 2.0 5 95 .30 2.0 5 95 .80 2.0 95 5 6.00 2.0 95 5 Algilama - MS, ELS, UV (in-line HP1100 PDAdedektörü ile ESI kaynagina 200 pI/dk bölünmüstü r) MS iyonizasyon yöntemi - Elektrosprey (pozitif ve negatif iyon) LC-MS Yöntem 2 Azsu + %0.1 formik asit ile elüe edilerek bir C18-ters faz kolonuna (30 X 4.6 mm Phenomenex Luna 3 pm partikül büyüklügü) sahip Waters Micromass ZMD dört kutuplu kütle spektrometresi; B: MeCN + %0,1 formik asit. Gradyan: Gradyan- Zaman akis (mL/dk) iL/dk) %A %8 0.50 2.0 95 5 4.50 2.0 5 95 .50 2.0 5 95 6.00 2.0 95 5 Algilama - MS, ELS, UV (in-line UV dedektörü ile MS'ye 100 pl bölünmüstür) MS iyonizasyon yöntemi - Elektrosprey (pozitif ve negatif iyon) LC-MS Yöntem 3 Azsu + %0.1 formik asit ile elüe edilerek 40 °C'de tutulan C18-ters faz kolonuna ( sahip Waters Micromass ZQ2000 dört kutuplu kütle spektrometresi; B: MeCN + %0,1 formik asit. Alternatif olarak, belirtildiginde bir C18-ters faz (100 x 2.1 mm Acquity UPLC BEH Shield 1.7 um partikül büyüklügü) kolonu kullanildi.

Gradyan: Gradyan- Zaman akis(mL/dk) %A %8 0.40 0.4 95 5 6.00 0.4 5 95 6.80 0.4 5 95 7.00 0.4 95 8.00 0.4 95 Algilama- MS, UV PDA MS iyonizasyon yöntemi - Elektrosprey (pozitif/negatif iyon) LC-MS Yöntem 4 Azsu + %01 formik asit ile elüe edilerek bir C18-ters faz kolonuna (30 x 4.6 mm Phenomenex Luna 3 um partikül büyüklügü) sahip Waters Platform LC dört kutuplu kütle spektrometresi; B: MeCN + %0,1 formik asit. Gradyan: Gradyan-Zaman akis(mL/dk) %A %8 0.50 2.0 95 5 4.50 2.0 5 95 .50 2.0 5 95 6.00 2.0 95 5 Algilama - MS, ELS, UV (Bölünme - in-Iine HP1100 DAD dedektörü ile ESI kaynagina MS iyonizasyon yöntemi - Elektrosprey (pozitif ve negatif iyon).

LC-MS Yöntem 5 Azsu + %01 formik asit ile elüe edilerek bir C18-ters faz kolonuna (30 x 4.6 mm Luna 3 um partikül büyüklügü) sahip Waters VG II dört kutuplu kütle spektrometresi; B: MeCN + %0,1 formik asit.

Gradyan: Gradyan- Zaman akis(mL/dk) %A %8 0.30 2.0 95 5 4.30 2.0 5 95 .30 2.0 5 95 .80 2.0 95 6.00 2.0 95 Algilama - MS, ELS, UV (Bölünme - in-line HP1050 DAD dedektörü ile ESI kaynagina M8 iyonizasyon yöntemi - Elektrosprey (pozitif ve negatif iyon) MDAP Sistemi: Aletler: Agilent 1260 sonsuzluk aritma sistemi. Agilent 6100 serisi tek Dört Kutuplu Kolon: XSELECT CSH Prep C18 5 pm OBD, 30X150 mm, RT Mobil Faz A: %0,1 sulu formik asit Mobil Faz B: asetonitril içinde %0,1 formik asit Akis: 60 ml/dk Gradyan Programi: %10-%95, 22 dk, belirli bir odakli gradyan etrafinda merkezlenmis DMSO'da (+ istege bagli formik asit ve su) 20-60 mg/ml'lik bir solüsyonun Örnek Enjeksiyonu Deneysel bölümde kullanilan kisaltmalar DCM Diklorometan DMF N,N-dimetilf0rmamid DMSO Dimetilsülfoksit EtzQ Dietil eter EtOAc Etil asetat HPLC Yüksek performansli sivi kromatografisi LC-MS Sivi Kromatografi-Kütle Spektrometresi MeCN Asetonitril MDAP Kütle Yönlendirmeli Otomatik Saflastirma NBS N-Bromosüksinimid Rt Alikonma süresi RT Oda sicakligi THF Tetrahidrofuran Takip eden prosedürlerde, bazi baslangiç materyalleri bir "Ara Madde" veya için verilir. Baslangiç maddesi, esas olarak, atifta bulunulan partiden hazirlanmamis olabilir.

Teknikte uzman kisilerce takdir edilecegi gibi, "benzer" veya "analog" bir prosedürün kullanimina atifta bulunuldugunda, böyle bir prosedür, örnegin reaksiyon sicakligi, reaktif/solvent miktari, reaksiyon süresi, çalisma kosullari veya kromatografik aritma kosullari gibi küçük varyasyonlari içerebilir. piridinyum bromür Ara Madde 1 3-Br0m0-4-dibromometilbenzoik asit içinde mekanik bir karistirici ile çözüldü. Daha sonra DCM (1 L) Içindeki bir AlBN (50 9, 0.3 mol, 0.07 esd.) bulamaci ilave edildi ve karisim, bir N2 atmosferi altinda bir refluks kondansatörü altinda güçlü isik (500 W) altinda isimaya tabi tutuldu. Reaksiyonun iç sicakligi 17 °C'den 41 °C'ye yükseldi ve ilk beyaz süspansiyon, hafif geri akisa ulastigi için açik turuncu bir süspansiyon haline geldi. Toplam 72 saat sonra reaksiyon tamamlandi ve bulutlu turuncu solüsyona su (5 L) ilave edildi; bu, oda sicakliginda 1 saat karistirildi.

Turuncu bifazik karisim daha sonra bir gece beklemeye birakildi ve daha sonra bir turuncu damitik ve bir tan rengi asili kati verecek sekilde vakumla konsantre edildi.

Kati, daha sonra filtrasyon yoluyla toplandi, su (2 L) ile yikandi ve 2 saat boyunca emilim ile kurutularak, basliktaki bilesigi, açik renkli nemli bir kati (1860 9) halinde 1H NMR (.

Ara Madde 2 3-Br0m0-4-f0rmilbenzoik asit 3.25 esd.) sonrasinda 20 dakikalik bir süre boyunca küçük porsiyonlar halinde ilave edildi. Köpürme, ilk eklemeden sonra meydana geldi, bu nedenle köpügü çökertmek ve daha fazla köpürmeyi bastirmak için EtOAc (0.2 L) eklendi. Ekleme tamamlandiktan sonra, kahverengi süspansiyon 40 dakika boyunca 90 °C'ye isitildi, daha sonra 90 dakika 90 °C'de karistirildi, daha sonra 90 dakika boyunca 40 °C'ye kadar sogutuldu. EtOAc (1.5 L) eklendi, ardindan damlatma hunisi (0.7 L) yoluyla sulu konsantre HCI ilave edildi, bu da 002 gazinin kuvvetli evrimi ve EtOAc'nin çogunun buharlasmasi ile sonuçlandi. Köpürme ürününün yogunlastiricidan ve reaktörün duvarlarindan yikanmasi için ilave EtOAc (1 L) eklendi, sonra ek EtOAc (0.3 L) eklendi ve kalin bulamaç oda sicakliginda bir gece boyunca karistirildi. Bulamaç daha sonra 40 °C'ye isitildi ve 45 dakika boyunca kuvvetli bir sekilde karistirilarak damlatma hunisi vasitasiyla ilave sulu konsantre HCl ilave edildi, bu da CO2 gazi olusumu, EtOAc'nin çogunun buharlasmasi ve bir kati olusumu ile sonuçlandi. Karistirma islemi durduruldu ve kati madde sulu karisimin tepesine (pH 1) akitildi. Sulu tabakanin çogunlugu ayrildi (yaklasik 5 L) ve daha sonra 2-MeTHF (5 L) eklendi. Berrak sulu tabaka daha sonra çikarildi ve organik tabaka ek 2-MeTHF ile 10 L'ye seyreltildi ve koyu turuncu bir solüsyon verecek sekilde 50 °C'ye isitildi. Organik tabaka daha sonra 1 M HC1 (0.5 L) ile yikandi, buharlastirildi ve tan rengi bir kati (960.3 g) halinde baslik bilesigi verecek sekilde toluen ile azeotroplandi.

LCMS (Yöntem 4): Rt 2.73 dk, m/z +H]+ 1H NMR (, Ara Madde 3 tetrahidropirimIdin-5-karboksilik asit metil ester altinda bir 10 L ceketli reaktöre yüklendi ve THF (4.6 L) içinde süspanse edildi ve karistirirken, -10 °C'ye kadar sogutuldu (iç sicaklik -3 °C). Polifosforik asit (1650 9, 3.6 wt esd.), 50 °C'de bir su banyosunda önceden isitildi, daha sonra bir kisim eklendi, hemen bir ekzoterm ile sonuçlandi ve iç sicaklik 19 °C'ye yükseldi. Elde edilen portakal rengi karisim daha sonra 10 °C'Iik artislarla 75 °C'ye hafif bir geri akisa kadar ilitildi ve reaksiyon bu sicaklikta 20 saat karistirildi. Reaksiyon daha sonra 20 °C'ye kadar sogutuldu ve THF'nin hacmi, koyu turuncu yapiskan bir yag verecek sekilde vakumla çikarildi; bu daha sonra su (5 L) ve Et20 (5 L) ile seyreltildi. 8qu tabaka ayrildi ve tekrar Et20 (2x2 L) ile ekstrakte edildi ve birlestirilen organikler daha sonra su (1 L), brin (1 L) ile yikandi ve kurutuldu (Na2804) ve ince parçaciklari uzaklastirmak için Celite'ten filtrelendi. Filtrelenen solüsyon, daha sonra vakumda konsantre edilerek viskoz bir turuncu zamk elde edildi ve Et20 (yaklasik 1.5 L) içinde yeniden süspansiyon haline getirildi ve gece boyunca beklemeye birakildi. Elde edilen süspansiyon filtrelendi ve toplanan kati Et20 (0.5 L) ile çalkalandi ve basliktaki bilesigi (754 g) elde etmek üzere 4 gün boyunca 50 °C'de (8 mbar) vakumlu bir firinda kurutuldu.

LCMS (Yöntem 1): Rt 3.52 dk, m/z +H]+ 1H NMR(, 3), 2.07 (3H, 3).

Ara Madde 4 tetrahidropirimidin-5-karboksilik asit metil ester ve 80 °C'ye kadar isitildi. Elde edilen süspansiyon, inorganik kalintilari uzaklastirmak için filtrelendi ve berrak solüsyon tekrar 80 °C'ye isitildi ve (+)- Cinchonine (88 9, 0.29 mol, 1.0 esdeger) ilave edildi ve sonuçta berrak bir solüsyon elde edildi. Elde edilen karisim yavasça sogumaya birakildi ve kristallesti. 3 saat sonra, sonuçtaki kati filtrelendi ve soguk dioksan ile yikandi. Kati, sicak dioksan (85 °C) içinde yeniden süspansiyon haline getirildi ve gece boyunca sogumaya ve kristallesmeye birakildi. Elde edilen kristaller filtrelendi, soguk dioksan ile yikandi ve tekrar sicak dioksandan tekrar kristallestirildi. Son yeniden kristallestirme katilari süzülerek çikarildi ve hava ile kurutularak ara ürün (+)-Cinchonine tuzu, beyaz bir kati olarak 83.2 9 (%68) verdi. Çözünmüs (+)-Cinsonin tuzunun optik safligi, 1 M HC1 ve EtOAc arasinda bölüstürme ile belirlendi; organik tabaka ayrildi, vakumda konsantre edildi ve sonra boyunda %20 lPA/n-heptan (+ % ile yikanarak kiral analitik HPLC'ye (ChiraIPak lA, 5 uM 4.6 x 250 mm) tabi tutuldu. Rasemik ürün ayrica kiral HPLC ile kontrol edildi; Rasemik bir örnek için 14.8 ve 42.5 daklik tutulma süreleri gözlendi ve istenen enantiyomer 42.5 dakta elüe edildi ve %99.5ee'den daha büyük oldugu Ara madde (+)-Cinonin tuzu ( arasinda bölüstürülerek salindi. Sulu tabaka tekrar EtOAc (2 x 0.5 L) ile özümlendi ve birlestirilen organik katmanlar 1 M HC1 (0.5 L), daha sonra da brin (0.25 L) ile yikandi, kurutuldu (Na2804) ve vakum altinda deristirilerek beyaz bir kati (45.45 9) halinde basliktaki bilesigi verdi.

Ara madde 5 tetrahidro-pirimidin-5-karboksilik asit metilester Ara madde 4 ( içinde çözüldü ve 1,1'-karb0nildiimidazol (57.5 9, 0.35 mol, 2.0 esd.) kisim olarak eklendi ve oda sicakliginda karistirilmak üzere gaz evrimi sona erdi. Ardindan, sulu amonyak solüsyonu (%33, damla damla eklendi, iç sicaklik 10 °C'yi asmadi (baslangiç ilavesinde gözlenen ekzoterm). Reaksiyon, 2 saat boyunca oda sicakliginda karismaya birakildi, daha sonra brin eklendi ve katmanlar ayrildi. Organik faz sulu 1 M HC1 (2 x) ile yikandi ve asidik tabaka ayrica EtOAC ile ekstrakte edildi. Birlestirilen organik katmanlar, brin ile yikandi, kurutuldu (Na2804), süzüldü ve renksiz bir köpük (87.3 9) halinde baslik bilesigi verecek sekilde vakumla konsantre edildi.

LCMS (Yöntem 2): Rt 3.44 dk, m/z +H]+ 1H NMR (, 8.11 (1H, d, Ara madde 6 tetrahidropirimidin-5-karboksilik asit metil ester Ara madde 5 ( içerisinde çözündürüldü ve bir buz banyosunda 0-5 °C'ye kadar sogutuldu. -Daha sonra, iç sicakligin 10 °C'yi asmamasini saglayarak fosforlu oksiklorür (62.0 9, damla damla ilave edildi. Ekleme tamamlandiktan sonra, sari solüsyon, 0-5 °C'de 15 dakika karistirildi, daha sonra bir kati 2 M Na2C03 ve buz karisimina döküldü. Sari bir çökelti olustu ve bulamaç 1 saat yaslandirildi, daha sonra kati süzüldü, suyla yikandi ve 40-45 °C'de P205 üzerinde bir vakumlu firin içinde kurutuldu. Son ürünün NMR analizi hala baslangiç materyalinin kaldigini gösterdi, böylece reaksiyon tekrar 20 mL fosfor oksiklorür kullanilarak tekrar edildi. Elde edilen kati maddenin NMR'si, ürünün POCI3 ile bir eklenti oldugunu gösterdi. Bu nedenle, kati, mutlak EtOH ( içerisinde çözündürüldü ve süspansiyon, çözünmeye yardimci olmak için isitildi. Daha sonra doymus sulu NaHC03 solüsyonu ( ilave edildi ve karisim 40 °C'ye isitildi ve 2 saat karistirildi. Elde edilen karisim daha sonra suya ( eklendi ve sonuçtaki beyaz kati süzüldü, suyla yikandi ve hava ile kurutularak basliktaki bilesik elde edildi (77.5 9).

LCMS (Yöntem 2): LCMS (Yöntem 2): 1H NMR (, (3H, 3), 2.06 (3H, 3).

Ara madde 7 tetrahidro- [1 ,2,4] triazolo [4,3-a] pirimidin-G-karboksilik asit metil ester Ara madde 6 ( içerisinde çözündürüldü, 2,6- Karistirilirken, 3 dakika boyunca triposgen (5.58 9, 18.8 mmol) ilave edildi. 5 dakika sonra, reaksiyon oda sicakligina isitildi ve 25 dakika karistirildi. Reaksiyon içinde sogutulmus (7 °C) bir hidrazin solüsyonu (THF içinde 1 M, karisimina aktarildi. Karisim, 5 dakika daha 7 °C'de karistirildi. 2.25 saat sonra, reaksiyon karisimi su, %10 sitrik asit solüsyonu (kalinti lutidin gidermek için), su ve %50 doymus brin ile yikandi ve organik faz kurutuldu (Na2804), süzüldü ve vakumda konsantre edildi. Daha fazla saflastirma, silika jel kullanilarak kromatografi ile gerçeklestirildi ve krem rengi bir kati olarak Ara Madde 7'yi vermek üzere sikloheksan içinde %40 ila %.

LCMS (Yöntem 3): Rt 3.61 dk, m/z +H]+ 1H NMR (, 783-779 (1H, Kiral saflik Chiralpak IC kiral HPLC kolonu (5 um partikül boyutu, %5 MeOH/DCM, akis hizi 5 mL/dk) ile analiz edildi ve Rt = 5.83 dakika verdi. (%100 ee). Bir rasemik numune (Ara madde 4), sirasiyla birinci ve ikinci siyirma enantiomerleri için 3.58 ve .85 dakika Rt verdi.

Aramadde8 (R)-5-[2-(2-ters-but0ksi-vinil)-4-siyano-feniI]-7-metil-3-okso-8-(3-triflorometil-fenil)- mmol), tri-tersiyer-butil fosfonyum tetrafloroborat (540 mg, 1.86 mmol) Herrmann- Beller katalizörü (trans-di (u-asetato) bis (O-di-o-tolil-fosfino) benzil) dipaladyum (ll)) ile yüklendi. Tetra-etilen glikol ( eklenmis ve sonuçtaki solüsyon, Argon altinda gazdan arindirildi. Karisim daha sonra 1 saat 150 °C'de isitildi. Karisim sogutuldu, EtOAc ve sulu %10 sitrik asit ile seyreltildi ve organik ekstrakt su ve brin ile yikandi, daha sonra kurutuldu (NaZSO4) ve vakumda konsantre edildi. Nihai tortu, kromatografi ile saflastirilarak, sikloheksan Içinde %25-75 EtOAC ile elüe edilerek, baslik bilesigi bir E/Z izomer karisimi olarak ve sari bir köpük halinde (7.95 9) elde edildi.

LC-MS (Yöntem 5): Rt = 3.87 dk, m/z = 554.2 [M+H]+ Ara madde 9 (R)-5-[4-Siyano-2-(2-hidroksi-etil)-feniI]-7-metil-3-okso-8-(3-trifl0rometiI-fenil)- DCM ( solüsyonu, bir tuz/buz banyosu kullanilarak -10 °C'ye sogutuldu ve TFA ( ile damla damla islendi. Solüsyonu -10 °C'de 2 saat karistirdiktan sonra, sonuçtaki solüsyon buz soguklugunda sulu NaZCOS solüsyonuna döküldü. Organik faz ayrildi ve sulu faz ayrica DCM (70 mL) ile ekstrakte edildi ve birlestirilen DCM ekstrakti, -5 °C`de tuz/buz banyosuna geri döndü. Sodyum boro-hidrit (1.57 9, 41.42 mmol) porsiyon halinde ilave edildi ve 15 dakika karistirildiktan sonra, elde edilen karisima MeOH (32 mL) ilave edildi. Reaksiyon, -5 °C'de 1.5 saat karistirildi, su ilave edildi ve elde edilen karisim, organik fazin ayrilmasindan önce 15 dakika kuvvetli bir sekilde karistirmaya birakildi. Sulu faz ayrica DCM ile ekstre edildi ve birlestirilen organik ekstrakt, brin ile yikandii kurutuldu (Na2804) ve vakumda konsantre edildi.

Sonuçtaki tortu. EtOAc ile elüe edilerek kromatografi ile saflastirildi ve krem rengi bir kati olarak baslik bilesigi verdi (3.7 9).

LC-MS (Yöntem 5): Rt = 3.17 dk, m/z = 500.1 [M+H]* Ara madde 10 (R)-5-[2-(2-bromo-etil)-4-siyano-feniI]-7-metil-3-oks0-8-(3-triflorometil-fenil)- 2,3,5,8-tetrahy-dro-[1,2,4] triazolo[4,3-a] pirimidin-ö-karboksilik asit metil ester Ara ürün 9 ( içerisinde oda sicakliginda 9, 69.1 mmol) daha sonra 10 dakika boyunca kisimlar halinde Ilave edildi.

Reaksiyon karisimi, oda sicakligini korumak için buz içinde kisa bir süre sogutuldu (küçük bir baslangiç ekzotermi olusur). Karistirmaya 3 saat boyunca RT'de devam edildi. Karisim su ile yikandi, organik faz kurutuldu (Na2SO4), süzüldü ve buharlastirildi ve tortu, sikloheksan içinde %40 ila %75 EtOAC gradyani ile elüt edilerek kromatografiye tabi tutuldu ve baslik bilesigi beyaz bir kati olarak elde edildi (23.6 9).

LC-MS (Yöntem 5): Rt = 3.83 dk, m/z = +H]+ piridinyum bromür (Örnek 1) MeCN (1 mL) içindeki bir Ara Madde 10 (30 mg, 53 ummol) ve 4-metoksi piridin sonra vakumda konsantre edildi. Ham ürün su ve EtOAc arasinda bölüstürüldü ve sulu tabaka ayrildi ve beyaz bir elektrostatik kati (15 mg) halinde baslik bilesigi verecek sekilde dondurularak kurutuldu.

LC-MS (Yöntem 3): Rt = 3.78 dk, m/z = 591.1 [M]+ Asagidaki örnekler Örnek 134 için kullanilana benzer bir yöntem kullanilarak Ara Madde 10'dan ve uygun sekilde ikame edilmis piridin bilesimlerinden hazirlanmistir: isopropiI-piridinyum bromür; Ex Yapi Ad __ (Yontem 3) HO 5: N 1-(2-{5-Siyano-2-[(R)-6- 0 o (3--triflor0metil-feniI)-2,3,5,8- 2 N N 0 . . m/z = 577,1 H N ~ N tetrahidro-[1,2,4] triazolo [4,3- FE hidroksi-piridinyum bromür B; N 1-(2-{5-Siyan0-2-[(R)-6- N, metoksikarboniI-Y-metiI-3-0kso-8- N a]pirimidin-5-yl]-fenil}-etil)-2-metil- [M]+ r , 1 F piridinyum bromür; Br N 1-(2-{5-Siyan0-2-[(R)-6- HO_ N. metoksikarboniI-7-metII-3-okso-8- N N a]pirimidin-5-yl]-feniI}-etil)-4- [M]+ .i= hidroksimetil-piridinyum bromür; Br N 1-(2-{5-Siyano-2-[(R)-6- N' . metoksikarboniI-T-metiI-3-0kso-8- o ' o (3-trifluorometilfenil)-2,3,5,8- Rt = 3,82 dk, N 7 N a]pirimidin-5-yl]-feniI}-etil)-4- [ivi]+ Ex Yapi Ad ..

(Yontem 3) 1-(2-{5-Siyano-2-[(R)-6- ”o \ B i metoksikarboniI-7-metiI-3-okso-8- â N (3-trifluorometilfenil)-2,3,5,8- N/ N/\ a]pirimidin-5-yI]-feniI}-etil)-5- [MT < I / metoksikarboniI-7-metil-3-okso-8- 7 HNMMO _ _ m/z = 589,1 NAN“ tetrahidro-[1,2,4] triazolo [4,3- [MT |/\ a]pirimidin-5-yl]-feniI}-etil)-2,4- WF dimetil-piridinyum bromür; . 1-(2-{5-Siyan0-2-[(R)-6- N metoksikarbonII-7-metil-3-okso-8- 0 (3-trifluorometilfeniI)-2,3,5,8- 8 N 0 _ ' m/z=589,2 HN . tetrahidro-[1,2,4] triazolo [4,3- a]pirimidin-5-yl]-feniI}-etil)-3,5- 8 N 1-(2-{5-Siyan0-2-[(R)-6- / \ l' metoksikarboniI-7-metil-3-okso-8- <_\N Ö (3-trifluorometilfenil)-2,3,5,8- S / o Rt=3,74 dk, 0 : tetrahidro-[1,2,4] triazolo [4,3- 9 ”NkNîîo/ " 'd' 5 lf 'i t'I 2 mlz=- - [MT etilpiridinyum bromür; E Yapi Ad LC-MS (Yöntem 3) /N \ metoksikarboniI-7-metil-3-okso-8- O : o (3-trifluorometilfeniI)-2,3,5,8- S` ' / _ _ m/z = 605,1 HN N | o tetrahidro-[1,2,4] triazolo [4,3- [MT NAN a]pirimidin-5-yI]-feniI}-etiI)-2-(2- i \ hidroksimetil)-piridinyum bromür; - Q metoksikarboniI-7-metil-3-okso-8- 11 kime” _ _ m/z = 589,1 HNNÄ /i\ tetrahidro-[1,2,4] triazolo [4,3- [M] A a]pirimidin-5-yl]-feniI}-etil)-4- / F etilpiridinyum bromür; Biyolojik Tahlil Bu bulusun bilesikleri, bir insan nötrofil elastaz (HNE) enzim aktivitesi tahlilinde potans için test edildi.

HNE Enzim Tahlili Deneyler, toplam 100 uL'lik bir tahlil hacminde 96 gözlü plakalarda gerçeklestirildi.

Elastaz enziminin (insan Iökosit elastazi, Sigma E8140) nihai konsantrasyonu, 0.00072 U/mL oldu. 100 uM'lik son konsantrasyonda peptit substrati (MeOSuc-Ala- Ala-Pro-Val-AMC, Calbiochem # 324740) kullanildi. DMSO'nun konsantrasyonu, tahlil tamponu içinde %1 idi (0.05M Tris.HCI, 0.1M NaCI, 0.1M baslatildi ve 30 dakika boyunca 25 °C'de inkübe edildi. Inkübasyondan sonra, reaksiyon, 50 ug / kuyucuk bir son konsantrasyonda soya fasulyesi tripsin inhibitörünün (Sigma T9003) eklenmesiyle durduruldu. Floresans, 380 nm uyarma ve 460 nm emisyon dalga boylari kullanilarak bir Molecular Devices floresan plaka okuyucusu kullanilarak ölçüldü.

Her bir bilesige bir doz tepkisi gerçeklestirildi ve her deneyde bilesigin etkisi, kontrol enzimi floresansinin bir yüzdesi olarak ifade edildi. Doza yanit egrileri çizildi ve bilesik potansi (IC50) belirlendi. Bilesikler en az iki ayri deneyde test edildi. Bulusun temsilcisi olan test edilmis örnekler için IC50'ler asagidaki tabloda gösterilmistir: Örnek HNE inhibisyonu 1-11 ++++ Yukaridaki tabloda, HNE enzim inhibisyonu (IC50 degerleri) asagidaki sekilde TANIMLAMADA BELIRTILEN REFERANSLAR Basvuran tarafindan belirtilen bu referanslar listesi yalnizca okuyucu için bir kolaylik saglamasi içindir. Avrupa patent dokümaninin bir parçasini teskil etmez.

Referanslarin derlenmesinde büyük bir özen gösterilmis olmakla birlikte hatalar veya eksiklikler olabilir ve EPO bu anlamda hiçbir sorumluluk üstlenmemektedir.

Tarifnamede Atifta Bulunulan Patent Belgeleri Tarifnamede Atifta Bulunulan Patent Disi Dökümanlar THOMPSON A,B. ; DAUGHTON, D. Et al. Am Rev. Respir. Dis., 1989, vol, 1527- T.W. GREEN, Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1981

Claims (5)

ISTEMLER
1. Asagidakilerden olusan gruptan seçilen bir bilesik: piridinyum brom'ür; etiI)-3-hidroksi-piridinyum bromür; etil)-2-metilpiridinyum bromür; etil)-4-hidroksimetiI-piridinyum bromür; etil)-4-izopropiI-piridinyum bromür; etiI)-5-hidroksi-Z-metil-piridinyum bromür; etiI)-2,4-dimetiI-piridinyum bromür; etiI)-3,5-dimetiI-piridinyum bromür; etiI)-2-(2-hidroksi-etil)-piridinyum bromür; etiI)-4-etilpiridinyum brom'ur; veya bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlari.
2. Formül (I)” in bir bilesigi veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu: burada R grubu, asagidakilerden olusan gruptan seçilir 4- metoksi- piridinil)etil;
3. 3- hidroksi- piridinil)etil; 2- metil- -piridinil)etil;
4. 4- hidroksimetil- -piridinil)etil;
5. 5- hidroksi- 2- metil- p-iridinil)etil; --(2 -etil- p-iridinil)etil; -(2-hidr0ksi-etil)piridinil)etil - 2-(4-etiI-piridinil)etil. Istemler 1 veya 2'ye göre bir farmasötik bilesik ve farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici veya eksipiyan içeren farmasötik bir bilesim. Oral uygulama veya pulmoner yolla uygulama için uyarlanmis olan, istem 3'e göre bir farmasötik bilesim. Ilaç olarak kullanim için istem 1 veya 2'de belirtilene göre bir bilesik. HNE'nin dahil oldugu bir hastalik veya durumun tedavisinde kullanim için istem 5'e göre bir bilesik olup, burada hastalik veya durum kronik obstrüktif akciger hastaligi (KOAH), bronsektazi, kronik bronsit, akcigerfibrozu, zatürre, akut solunum sikintisi sendromu (ARDS), pulmoner amfizem, sigara kullanimina bagli amfizem, kistik fibroz, astim, rinit, sedef hastaligi, atopik dermatit, atopik olmayan dermatit, Crohn hastaligi, ülseratif kolit veya irritabl bagirsak hastaligidir.