Claims (3)
1.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตรI สาย A (สูตรเคมี) สาย B โดยที่ X คือกรดอิมิโนของ อินซูลิน ของคน หรือคืออนุมูลของกรดอะมิโนที่เหมือนกันหรือต่างกันที่แทนที่ หน้าที่ทั้งหมดก็คือทำให้โมเลกุลทำให้โมเลกุลมีประจุเหมือนกันหรือเป็นลบมากกว่าอินซูลินของคนที่ pH เป็นกลาง และกำหนดให้อย่าง น้อยมี X 1 ตัว แตกต่างจากกรดอะมิโนของคนที่อยู่ในตำแหน่งเดียวกันในโมเลกุลอินซูลิน ซึ่งก็คือ เมื่อ X ในตำแหน่ง A(8) คือ His หรือ Phe, X ใน ตำแหน่ง A (21) คือ Asp, X ใน ตำแหน่ง B(5) คือ Ala, X ในตำแหน่ง B(9) คือ Leu, X ในตำแหน่ง B(10) , คือ Asn หรือ Leu, X ในตำแหน่ง B(12) คือAsn หรือ X ในตำแหน่ง B(26) คือ Ala ดังนั้นอย่างน้อยจะ ต้องมี X 1 ตัวที่แตกต่างจากกรดอะมิโนของอินซูลินของคนที่อยู่ในตำแหน่งเดียวกันโดยมีเงื่อนไขว่าอาจมีการเอาส่วนกรดอะมิโนมากถึง 4 ตัว ออกจาปลายด้าน Nและ/หรือ เอาส่วนกรดอะมิโนมากถึง 5 ตัว ออกจากปลายด้าน C ของ สาย-B โดยที่ทำการเพราะเลี้ยงยีสต์สายพันธุ์ที่มีพาหะแสดงลักษณะที่ถอดแบบได้ซึ่งประกอบด้วยลำดับดีเอนเอที่ประมวลรหัสสารตั้งต้นของสารคล้ายคลึงอินซูลินในอาหารเพาะเลี้ยงที่เหมาะสม และนำสารตั้งต้นออกจากเซลล์เพาะเลี้ยงแล้วเปลี่ยนมันให้เป็นสารคล้ายคลึงอินซูลินชนิดใหม่ โดยการเปลี่ยนแปลงโดยเอนไซม์ และสารเคมีแบบอินวิโทร 2.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตร I โดยใช้สารตั้งต้นซึ่งสังเคราะห์ทางชีวภาพ มีสูตร II สาย A (สูตรเคมี) สาย B โดยที่ Qn คือสายเพบไทด์ และ n คือกรดอะมิโนที่เกิดตามธรรมชาติ R คือ Lys หรือ Arg, n คือ จำนวนเต็มจาก 0 ถึง 33m คือ Q หรือ 1 และ X คือ ที่ได้นิยามไว้ข้างต้นและกำหนดให้สายเพบไทด์ -Qn-R- ไม่มีกรดอะมิโน ที่อยู่ติดกัน 2 ตัวมีคุณสมบัตเป็นเบส นำสารตั้งต้น สูตร II นี้มาทำปฏิกิริยากับ L-รีโอนีน เอสเทอร์ เมื่อมี ทริพซิน หรืออนุพันธ์ของทริพซิน แล้วเปลี่ยน ธรีโอนีนเอสเทอร์ของสารคล้ายคลึงอินซูลินของคนไปเป็น สารคล้ายคลึอินซิลินของคนตามวิธีที่ทราบกันดีแล้ว 3.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตร I โดยที่สารตั้งต้นที่สังเคราะห์ทางชีวภาพ มีสูตร III สาย A (สูตรเคมี) สาย B โดยที่ V และ T ต่างก็คือ Lys หรือ Asg และ X คือที่ให้นิยามไว้ข้างต้นนำสารตั้งต้นสูตร III มาทำปฏิกิริยากับเทรพิซินและคาร์บอกซีเพบทิเดส B ในสารละลายน้ำ แล้วแยกเก็บสารคล้ายคลึงอินซูลินของคนจากสารละลายของปฏิกิริยา 4.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตร I โดยที่สารคล้ายคลึงอินซูลินประกอบด้วยกรดอะมิดนแทนที่ทีทเหมาะสมซึ่งสังเคราะห์ขึ้นทางเคมีตามวิธีที่เป็นที่รู้จักกัน หรือ สาย A- และ B- ที่มีกรดอะมิโนแทนที่ที่เหมาะสมนั้นสร้างขึ้นทางเคมีตามวิธีที่เป็นที่รู้จักกัน และ A-และ B- ที่แปรเปลี่ยนนั้นจะเชื่อมต่อกันด้วยสะพานไดซัลไฟด์ระหว่าง A(7)Cys และระหว่าง A(20)Cys และ B(19)Cys และสะพานในสาย A ระหว่าง A(6)Cys และ A(11)Cys 5.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตร I โดยที่กรดอะมิโนที่แทนที่คุณสมบัติเป็นไฮโดรฟิลิกมากกว่ากรดอะมิโนในโมเลกุลของอินซูลินของคนที่อยู่ในตำแหน่งเดียวกัน 6.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่ X ไม่มากกว่า 7 ตัว แตกต่างจากกรดอะมิโนที่อยู่ในตำแหน่งเดียวกันของอินซูลินของคน 7.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยเลือกกรดอะมิโนที่แทนที่มาจากกลุ่มที่ประกอบด้วย Asp, Glu, Ser, Thr, His และ Ile 8.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่กรดอะมิโนที่แทนที่คือ Asp และ/หรือGlu 9.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่อย่างน้อย มี X หนึ่งตัวในตำแหน่งB(9), B(10), B(12), B(26), B(27) หรือ B(28) แต่งต่างจากกรดอะมิโนที่ตำแหน่งเดียวกันในโมเลกุลของอินซูลินของคน 1 0.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่อย่างน้อย มี X หนึ่งตัวในตำแหน่งB(9), B(12), B(27), หรือ B(28) แตกต่างจากกรดกรดอะมิโนที่ตำแหน่งเดียวกันในโมเลกุลของอินซูลินของคน 11. Method for preparing human insulin analogues with formula I, A line (chemical formula), B chain, where X is the human insulin emino acid or is the radical of the same or heterogeneous amino acid that replaces. Its all job is to make the molecules more the same or negative charge than neutral pH human insulin and assign at least X 1 different from human amino acids in the same location in the insulin molecule, which is Where X in position A (8) is His or Phe, X in position A (21) is Asp, X in position B (5) is Ala, X in position B (9) is Leu, X in position B (10. ), Is Asn or Leu, X in position B (12) is Asn or X in position B (26) is Ala, so at least X 1 must be different than human insulin amino acid in The same location, provided that up to 4 amino acid segments may be removed from the N-end and / or up to 5 amino acid segments from the C-ends of the -B line. A replaceable carrier strain of yeast containing a DNA sequence that encodes the insulin-like precursor code in an appropriate culture medium. And the precursors were removed from the cultured cells and converted into a new insulin-like substance. By transformation by enzymes And intravenous chemicals 2. Human insulin-like preparation process with formula I using biosynthetic precursors with formula II-A (chemical formula) B-string, where Qn is a peptide chain and n is an amino acid. Naturally, R is Lys or Arg, n is an integer from 0 to 33m is Q or 1, and X is defined above, and the peptide -Qn-R- line does not contain amino acids. The two adjacent ones have a base property. This reactant, formula II, reacts with the L-rionine ester when trypsin or trypsin derivatives are present. Converting the threonine ester of human insulin-like substances into People in a known way of clue incilin. 3. Human insulin-like preparation process with formula I, where the biosynthetic substrate has formula III-A (chemical formula), B-string, where V and T are either Lys or Asg and X are defined. Above, the reactants, formula III, were reacted with trypecin and carboxypeptidase B in aqueous solution. And separate human insulin-like substances from the reaction solution 4. Method of human insulin analogues preparation with formula I, where insulin analogues are composed of appropriate amidase acid, which is chemically synthesized according to known method or acid A- and B- strains. Proper amino-displacement is chemically generated according to known methods, and the modified A- and B- are connected by a disulfide bridge between A (7) Cys and between A (20). Cys and B (19) Cys and the A bridge between A (6) Cys and A (11) Cys 5. Insulin-like preparation process of a person with Formula I, where the amino acid substituting properties is hypo More diphilic amino acids in human insulin molecules in the same location 6. Analogous preparation process The person's insulin in claim 1, where no more than seven X's is different from the amino acids in the same position of human insulin. 7.Similar preparation process The insulin of the said person in claim 1 was selected by the amino acid substituted from the group containing Asp, Glu, Ser, Thr, His and Ile. Such person's insulin in claim 1, where the substituted amino acids are Asp and / or Glu 9. A similar preparation process. Such person's inlins in claim 1 where at least one X is in position B (9), B (10), B (12), B (26), B (27) or B (28). ) Different from amino acids at the same location in human insulin molecules 1 0. The person's insulin in claim 1, where at least one X in position B (9), B (12), B (27), or B (28) differs from the amino acid position. Same in human insulin molecule 1
1.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่อย่างน้อย มี X หนึ่งตัวในตำแหน่งB(27), คือ Glu, X ในตำแหน่ง B(12) คือ Ile หรือ Tye, X ในตำแหน่ง A21 คือ Asp และในตำแหน่ง B27 คือ Glu X ในตำแหน่งB9 คือ Asp X ในตำแหน่ง A21 และตำแหน่ง B9 คือ Asp และในตำแหน่ง B27 คือ Glu x ในตำแหน่ง A8 คือ His ในตำแหน่ง B9คือ Asp และในตำแหน่ง B27 คือ Glu X ในตำแหน่ง B10 คือ Aspหรือ X ในตำแหน่ง B9 คือ Asp และในตำแหน่ง B27 คือ Gluหรือ X ในตำแหน่ง B28 คือ Asp 11. Analogous preparation process Such person's insulin in claim 1 where at least one X in position B (27), is Glu, X in position B (12) is Ile or Tye, X in position A21 is Asp and in position B27. In position B9 is Asp X in position A21 and B9 is Asp and in position B27 is Glu x in position A8 is His in position B9 is Asp and in B27 is Glu X in position B10 is asp or x in position B9 is Asp and in position B27 is Glu or X, in position B28 is Asp 1.
2.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 แต่มีลักษณะที่ขาดกรดอะมิโนที่ปลาย N ของสายB ได้ถึง 4 ตัว และ/หรือ ขาดกรดอะมิโนได้ถึง 5 ตัว ที่ปลายC ของสาย B 12. Analogous preparation process Such person's insulin in claim 1, but is characterized by lack of up to four amino acids at the N ends of the B string and / or up to five amino acids at the C end of the B string 1.
3.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 12 โดยมีลักษณะที่ขาดกรดอะมิโน B(1) และ/หรือ B(30)3. Analogous preparation process The person's insulin in claim 12 is characterized by the lack of amino acids B (1) and / or B (30).