Claims (13)
1.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตรI สาย A (สูตรเคมี) สาย B โดยที่ X คือกรดอิมิโนของ อินซูลิน ของคน หรือคืออนุมูลของกรดอะมิโนที่เหมือนกันหรือต่างกันที่แทนที่ หน้าที่ทั้งหมดก็คือทำให้โมเลกุลทำให้โมเลกุลมีประจุเหมือนกันหรือเป็นลบมากกว่าอินซูลินของคนที่ pH เป็นกลาง และกำหนดให้อย่าง น้อยมี X 1 ตัว แตกต่างจากกรดอะมิโนของคนที่อยู่ในตำแหน่งเดียวกันในโมเลกุลอินซูลิน ซึ่งก็คือ เมื่อ X ในตำแหน่ง A(8) คือ His หรือ Phe, X ใน ตำแหน่ง A (21) คือ Asp, X ใน ตำแหน่ง B(5) คือ Ala, X ในตำแหน่ง B(9) คือ Leu, X ในตำแหน่ง B(10) , คือ Asn หรือ Leu, X ในตำแหน่ง B(12) คือAsn หรือ X ในตำแหน่ง B(26) คือ Ala ดังนั้นอย่างน้อยจะ ต้องมี X 1 ตัวที่แตกต่างจากกรดอะมิโนของอินซูลินของคนที่อยู่ในตำแหน่งเดียวกันโดยมีเงื่อนไขว่าอาจมีการเอาส่วนกรดอะมิโนมากถึง 4 ตัว ออกจาปลายด้าน Nและ/หรือ เอาส่วนกรดอะมิโนมากถึง 5 ตัว ออกจากปลายด้าน C ของ สาย-B โดยที่ทำการเพราะเลี้ยงยีสต์สายพันธุ์ที่มีพาหะแสดงลักษณะที่ถอดแบบได้ซึ่งประกอบด้วยลำดับดีเอนเอที่ประมวลรหัสสารตั้งต้นของสารคล้ายคลึงอินซูลินในอาหารเพาะเลี้ยงที่เหมาะสม และนำสารตั้งต้นออกจากเซลล์เพาะเลี้ยงแล้วเปลี่ยนมันให้เป็นสารคล้ายคลึงอินซูลินชนิดใหม่ โดยการเปลี่ยนแปลงโดยเอนไซม์ และสารเคมีแบบอินวิโทร1. The process of preparing insulin-like substances in humans involves formula I, chain A (chemical formula), chain B, where X is the insulin-like amino acid, or the same or different amino acid radical that replaces it. The entire function is to make the molecule more negatively charged than human insulin at neutral pH and to ensure that at least one X molecule is different from the human amino acids at the same position in the insulin molecule, i.e., when X at position A(8) is His or Phe, X at position A(21) is Asp, X at position B(5) is Ala, X at position B(9) is Leu, X at position B(10) is Asn or Leu, X at position B(12) is Asn, or X at position B(26) is Ala. Thus, at least one X molecule must be different from the human insulin amino acids at the same position, provided that up to four amino acid segments are removed from the N-terminus and/or up to five amino acid segments are removed from the C-terminus of the B-strand. This is accomplished by culturing a yeast strain containing a transcribed carrier DNA sequence encoding the insulin-like precursor in a suitable culture medium, and then extracting the precursor from the culture and converting it into a new insulin-like precursor by enzymatic modification. And invitro-based chemicals.
2.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตร I โดยใช้สารตั้งต้นซึ่งสังเคราะห์ทางชีวภาพ มีสูตร II สาย A (สูตรเคมี) สาย B โดยที่ Qn คือสายเพบไทด์ และ n คือกรดอะมิโนที่เกิดตามธรรมชาติ R คือ Lys หรือ Arg, n คือ จำนวนเต็มจาก 0 ถึง 33m คือ Q หรือ 1 และ X คือ ที่ได้นิยามไว้ข้างต้นและกำหนดให้สายเพบไทด์ -Qn-R- ไม่มีกรดอะมิโน ที่อยู่ติดกัน 2 ตัวมีคุณสมบัตเป็นเบส นำสารตั้งต้น สูตร II นี้มาทำปฏิกิริยากับ L-รีโอนีน เอสเทอร์ เมื่อมี ทริพซิน หรืออนุพันธ์ของทริพซิน แล้วเปลี่ยน ธรีโอนีนเอสเทอร์ของสารคล้ายคลึงอินซูลินของคนไปเป็น สารคล้ายคลึอินซิลินของคนตามวิธีที่ทราบกันดีแล้ว2. The preparation method for human insulin-like compounds (formula I) using a biosynthetic precursor (formula II), chain A (chemical formula), chain B, where Qn is the peptide chain and n is a naturally occurring amino acid, R is Lys or Arg, n is an integer from 0 to 33, m is Q or 1, and X is as defined above, and it is assumed that the peptide chain -Qn-R- does not have two adjacent amino acids that are basic. This formula II precursor is reacted with L-rheonine ester in the presence of trypsin or its derivatives, and the threonine ester of the human insulin-like compound is then converted into a human insulin-like compound using a well-known method.
3.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตร I โดยที่สารตั้งต้นที่สังเคราะห์ทางชีวภาพ มีสูตร III สาย A (สูตรเคมี) สาย B โดยที่ V และ T ต่างก็คือ Lys หรือ Asg และ X คือที่ให้นิยามไว้ข้างต้นนำสารตั้งต้นสูตร III มาทำปฏิกิริยากับเทรพิซินและคาร์บอกซีเพบทิเดส B ในสารละลายน้ำ แล้วแยกเก็บสารคล้ายคลึงอินซูลินของคนจากสารละลายของปฏิกิริยา3. The method for preparing human insulin-like substances with formula I involves using a biosynthetic precursor with formula III, chain A (chemical formula), and chain B, where V and T are either Lys or Asg, and X is defined above. The formula III precursor is reacted with trepicin and carboxypetidase B in aqueous solution, and the human insulin-like substance is then collected from the reaction solution.
4.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตร I โดยที่สารคล้ายคลึงอินซูลินประกอบด้วยกรดอะมิดนแทนที่ทีทเหมาะสมซึ่งสังเคราะห์ขึ้นทางเคมีตามวิธีที่เป็นที่รู้จักกัน หรือ สาย A- และ B- ที่มีกรดอะมิโนแทนที่ที่เหมาะสมนั้นสร้างขึ้นทางเคมีตามวิธีที่เป็นที่รู้จักกัน และ A-และ B- ที่แปรเปลี่ยนนั้นจะเชื่อมต่อกันด้วยสะพานไดซัลไฟด์ระหว่าง A(7)Cys และระหว่าง A(20)Cys และ B(19)Cys และสะพานในสาย A ระหว่าง A(6)Cys และ A(11)Cys4. Preparation of insulin-like substances for people with formula I, where the insulin-like substance consists of appropriate amino acid substitutes which are chemically synthesized by known methods, or the A- and B- chains with appropriate amino acid substitutes are chemically constructed by known methods, and the A- and B- variants are connected by disulfide bridges between A(7)Cys and between A(20)Cys and B(19)Cys and bridges in the A chain between A(6)Cys and A(11)Cys.
5.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลิน ของคนที่มีสูตร I โดยที่กรดอะมิโนที่แทนที่คุณสมบัติเป็นไฮโดรฟิลิกมากกว่ากรดอะมิโนในโมเลกุลของอินซูลินของคนที่อยู่ในตำแหน่งเดียวกัน5. A method for preparing insulin-like compounds for individuals with formula I, where the substituted amino acids exhibit greater hydrophilic properties than the amino acids in the human insulin molecule at the same position.
6.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่ X ไม่มากกว่า 7 ตัว แตกต่างจากกรดอะมิโนที่อยู่ในตำแหน่งเดียวกันของอินซูลินของคน6. A method for preparing an insulin-like substance as described in claim 1, where X is no more than 7 different from the amino acids at the same position as human insulin.
7.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยเลือกกรดอะมิโนที่แทนที่มาจากกลุ่มที่ประกอบด้วย Asp, Glu, Ser, Thr, His และ Ile7. A method for preparing an insulin-like substance as described in Patent 1 by selecting substitute amino acids from the group consisting of Asp, Glu, Ser, Thr, His, and Ile.
8.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่กรดอะมิโนที่แทนที่คือ Asp และ/หรือGlu8. A procedure for preparing an insulin-like substance as described in Patent 1, where the substituted amino acids are Asp and/or Glu.
9.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่อย่างน้อย มี X หนึ่งตัวในตำแหน่งB(9), B(10), B(12), B(26), B(27) หรือ B(28) แต่งต่างจากกรดอะมิโนที่ตำแหน่งเดียวกันในโมเลกุลของอินซูลินของคน9. A method for preparing human insulin similarity compounds as described in claim 1, where at least one X is present at position B(9), B(10), B(12), B(26), B(27) or B(28) different from the amino acid at the same position in the human insulin molecule.
10.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่อย่างน้อย มี X หนึ่งตัวในตำแหน่งB(9), B(12), B(27), หรือ B(28) แตกต่างจากกรดกรดอะมิโนที่ตำแหน่งเดียวกันในโมเลกุลของอินซูลินของคน10. A method for preparing a human insulin similarity as described in claim 1, where at least one X is present at position B(9), B(12), B(27), or B(28) and differs from the amino acid at the same position in the human insulin molecule.
11.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 โดยที่อย่างน้อย มี X หนึ่งตัวในตำแหน่งB(27), คือ Glu, X ในตำแหน่ง B(12) คือ Ile หรือ Tye, X ในตำแหน่ง A21 คือ Asp และในตำแหน่ง B27 คือ Glu X ในตำแหน่งB9 คือ Asp X ในตำแหน่ง A21 และตำแหน่ง B9 คือ Asp และในตำแหน่ง B27 คือ Glu x ในตำแหน่ง A8 คือ His ในตำแหน่ง B9คือ Asp และในตำแหน่ง B27 คือ Glu X ในตำแหน่ง B10 คือ Aspหรือ X ในตำแหน่ง B9 คือ Asp และในตำแหน่ง B27 คือ Gluหรือ X ในตำแหน่ง B28 คือ Asp11. A procedure for preparing an insulin-like substance as described in claim 1, where at least one X at position B(27), i.e., Glu, X at position B(12) i.e., Ile or Tye, X at position A21 i.e., Asp and at position B27 i.e., Glu, X at position B9 i.e., Asp, X at position A21 and B9 i.e., Asp and at position B27 i.e., Glu, X at position A8 i.e., His at position B9 i.e., Asp and at position B27 i.e., Glu, X at position B10 i.e., Asp, or X at position B9 i.e., Asp and at position B27 i.e., Glu, or X at position B28 i.e., Asp.
12.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 1 แต่มีลักษณะที่ขาดกรดอะมิโนที่ปลาย N ของสายB ได้ถึง 4 ตัว และ/หรือ ขาดกรดอะมิโนได้ถึง 5 ตัว ที่ปลายC ของสาย B12. A method for preparing an insulin-like substance as described in claim 1, but characterized by the absence of up to 4 amino acids at the N-terminus of the B chain and/or up to 5 amino acids at the C-terminus of the B chain.
13.กรรมวิธีการเตรียมสารคล้ายคลึง อินซูลินของคนดังกล่าวในข้อถือสิทธิ 12 โดยมีลักษณะที่ขาดกรดอะมิโน B(1) และ/หรือ B(30)13. A method for preparing insulin-like substances of the human mentioned in claim 12, characterized by the absence of amino acids B(1) and/or B(30).