TH26892Y

TH26892Y - ชุดไพรเมอร์และตัวตรวจจับสำหรับตรวจเชื้อทรีโพนีมาพาลลิดัมซับสปีชีส์พาลลิดัมโดยใช้ยีนเบสิคเมมเบรนโปรตีน ด้วยปฏิกิริยาลูปเมดดิเอทเตดไอโซเธอร์มอลแอมปลิฟิเคชั่นหรือแลมป์ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี

Info

Publication number: TH26892Y
Authority: TH

Abstract

------05/07/2567------(OCR) ชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับ (DNA probe) สำหรับตรวจเชื้อทรี โพนีมา พาลลิดัม ซับสปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum ) โดยใช้ยีนเบสิค เมมเบรน โปรตีน (basicmembrane protein (BMP) gene) ด้วยปฏิกิริยาลูป-เมดดิเอทเตด ไอโซเธอร์มอล แอมปลิฟิเคชั่น (Loop-mediated isothermal amplification) หรือ แลมป์ (LAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (dipstick) เพื่อแสดงให้เห็นการประดิษฐ์โดยย่อ ดังนี้1. เป็นชุดตรวจซึ่งประกอบด้วยไพรเมอร์ 4 เส้น คือ ไพรเมอร์กู่ใน (inner primers) ไพรเมอร์เอฟไอพีบีเอ็มพี (FIP BMP) และไพรเมอร์บีไอพี บีเอ็มพี (BIP BMP), ไพรเมอร์คู่นอก (outer primers) ไพรเมอร์เอฟ3 บีเอ็มพี (F3 BMP) และไพรเมอร์บี3 บีเอ็มพี (B3 BMP) และตัวตรวจจับ (DNA probe) ที่จำเพาะต่อลำดับเบสของเชื้อทรี โพนีมา พาลลิดัม ซับสปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspeciespallidum) ถึง 6 ตำแหน่ง2. เป็นชุดตรวจอย่างง่าย สะดวก และรวดเร็ว สามารถทำปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) ที่อุณหภูมิ 60-65 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 45-60 นาที ทราบผลในเวลา 1 ชั่วโมง 30 นาที สามารถนำไปใช้ตรวจภาคสนาม(point-of-care) ได้ เนื่องจาก ไม่ต้องใช้เครื่องเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรม (thermocycler)3. มีความจำเพาะ (specificit) สูง ไม่เกิดผลบวกเมื่อทคสอบกับเชื้อแบคที่เรียตัวอื่นที่มีอวัยวะเป้าหมายหรืออยู่ในสารคัดหลั่งเดียวกับเชื้อทรี โพนีมา พาลลิดัม ซับสปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidumsubspecies pallidum)4. มีความแม่นยำสูงสามารถตรวจพบได้ในระดับปริมาณต่ำสุด (limit of detcction) ที่ปริมาณดีเอ็นเอ 16.3พิโคกรัม (picogram, 10ยกกำลัง-12)5. ใช้สำหรับตรวจเชื้อทรี โพนีมา พาลลิดัม ซับสปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspeciespallidum) ในตัวอย่างเลือด (blood) ซีรัม (serum) ของเหลวในไขสันหลัง (cerebrospinal fluid; CSF)และอวัยวะเป้าหมายของเชื้อทรี โพนีมา พาลลิดัม ซับสปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspeciespallidum) ------------

Claims

OCR 09WP 18/11/2568

1. ชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับ (DNA probe) สำหรับตรวจเชื้อทรีโพนีมา พาลลิดัม ซับส ปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum) โดยใช้ยีนเบสิค เมมเบรน โปรตีน (basic membrane protein (BMP) gene) ด้วยปฏิกิริยาลูป-เมดดิเอทเตด ไอโซเธอร์มอล แอมปลิฟิเคชั่น (Loop- mediated isothermal amplification) หรือ แลมป์ (LAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (dipstick) ประกอบด้วยไพรเมอร์ 4 เส้น ที่จำเพาะต่อลำดับเบสของเชื้อทรีโพนีมา พาลลิดัม ซับสปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum) ถึง 6 ตำแหน่ง ดังนี้ ไพรเมอร์เอฟ3 บีเอ็มพี (F3 BMP) ลำดับเบส (5'-3') ACAAAAGAAGGCAGACGAGT ไพรเมอร์บี3 บีเอ็มพี (B3 BMP) ลำดับเบส (5'-3') CTGTGCACCATTTGCCTTAC ไพรเมอร์เอฟไอพี บีเอ็มพี (FIP BMP) ลำดับเบส (5'-3') AGGGCGGAAAAAGGCCTGTTTATITTTGAAGGGACCTGAGGACTCT ไพรเมอร์ บีไอพี บีเอ็มพี (BIP BMP) ลำดับเบส (5'-3') CGAAGGGTTCAGGTCCTGCTGTTTTTGGCTTTGACACCGGAACTT และตัวตรวจจับ (DNA probe) คือ โพรบ บีเอ็มพี เอฟไอทีซี (Probe BMP FITC) ลำดับเบส (5'-3') FITC-CGGTTAAGTTGTTTCTTAT

2. ชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับ (DNA probe) สำหรับตรวจเชื้อทรีโพนีมา พาลลิดัม ซับส ปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum) โดยใช้ยีนเบสิค เมมเบรน โปรตีน (basic membrane protein (BMP) gene) ด้วยปฏิกิริยาลูป-เมดดิเอทเตด ไอโซเธอร์มอล แอมปลิฟิเคชั่น (Loop- mediated isothermal amplification) หรือ แลมป์ (LAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (dipstick) ตาม ข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่งสภาวะที่เหมาะสมในการตรวจผลผลิตจากปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) มีลักษณะเฉพาะ คือ ทำปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) ที่อุณหภูมิ 60-65 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 45-60 นาที แล้วตรวจผลผลิตดีเอ็นเอ เป้าหมายได้บนแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (dipstick)

3. ชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับ (DNA probe) สำหรับตรวจเชื้อทรีโพนีมา พาลลิดัม ซับส ปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum) โดยใช้ยีนเบสิค เมมเบรน โปรตีน (basic membrane protein (BMP) gene) ด้วยปฏิกิริยาลูป-เมดดิเอทเตด ไอโซเธอร์มอล แอมปลิฟิเคชั่น (Loop- mediated isothermal amplification) หรือ แลมป์ (LAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (dipstick)ตาม ข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่งมีส่วนประกอบหลักของสำหรับใช้ในปฏิกิริยา คือ ไพรเมอร์คู่ใน (inner primers) ไพร เมอร์เอฟไอพี บีเอ็มพี (FIP BMP) และไพรเมอร์บีไอพี บีเอ็มพี (BIP BMP) อย่างละ 0.5-3.0 ไมโครโมลาร์ (มิวM), ไพรเมอร์คู่นอก (outer primers) ไพรเมอร์เอฟ3 บีเอ็มพี (F3 BMP) และไพรเมอร์บี3 บีเอ็มพี (B3 BMP) อย่างละ 0.5-3.0 ไมโครโมลาร์ (มิวM), ดีออกซีนิวคลีโอไทด์ ไตรฟอสเฟต (Deoxynucleotide triphosphate, dNTPs) 0.5-3.0 มิลลิโมลาร์ (mM), สารเบตาอีน (Betaine) 0.1-3.0 โมลาร์ (M), สารแมกนีเซียม ซัลเฟต (MgSO4) 2-6 มิลลิโมลาร์ (mM), เอ็นไซม์ บีเอสที2 ดีเอ็นเอ พอลิเมอร์เรส (Bst 2 DNA polymerase) 1 ยูนิต (unit, U), 10 X ของบัฟเฟอร์ไอโซเทอร์มอพอล (Isothermopol buffer) และ น้ำกลั่น (distilled water)

4. ชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับ (DNA probe) สำหรับตรวจเชื้อทรีโพนีมา พาลลิดัม ซับส ปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum) โดยใช้ยีนเบสิค เมมเบรน โปรตีน (basic membrane protein (BMP) gene) ด้วยปฏิกิริยาลูป-เมดดิเอทเตด ไอโซเธอร์มอล แอมปลิฟิเคชั่น (Loop- mediated isothermal amplification) หรือ แลมป์ (LAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (dipstick) ตาม ข้อถือสิทธิ 1 มีลักษณะเฉพาะคือ ไม่ต้องใช้เครื่องเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรม (thermocycler) เช่นที่ใช้ในวิธี พีซีอาร์ (PCR)

5. ชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับ (DNA probe) สำหรับตรวจเชื้อทรีโพนีมา พาลลิดัม ซับส ปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum) โดยใช้ยีนเบสิค เมมเบรน โปรตีน (basic membrane protein (BMP) gene) ด้วยปฏิกิริยาลูป-เมดดิเอทเตด ไอโซเธอร์มอล แอมปลิฟิเคชั่น (Loop- mediated isothermal amplification) หรือ แลมป์ (LAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (dipstick) ใน ข้อถือสิทธิที่ 1 สำหรับตรวจเชื้อทรีโพนีมา พาลลิดัม ซับสปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum) ในตัวอย่างเลือด (blood) ซีรัม (serum) ของเหลวในไขสันหลัง (cerebrospinal fluid; CSF) และ อวัยวะเป้าหมายของเชื้อทรีโพนีมา พาลลิดัม ซับสปีชีส์ พาลลิดัม (Treponema pallidum subspecies pallidum)