Claims (12)
1.รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอที่สามารถจำลองตัวได้เองโดยอัตโนมัติในเซลล์ของแบคทีเรียโคลินีฟอร์มที่มีการเรียงตัวของดีเอ็นเอที่ถอดรหัสสำหรับแอสพาโตไคเนส ซึ่งการยับยั้งย้อนกลับด้วยแอล-ไลซีน และแอล-ทรีโอนีน ถูกทำให้ลดลง,การเรียงตัวของดีเอ็นเอที่ถอดรหัสสำหรับไดไฮโดรไดพิโคลิเนต รีดักเตส,การเรียงตัวของดีเอ็นเอที่ถอดรหัสสำหรับไดไฮโดรไดพิโคลิเนต ซินเทส,การเรียงตัวของดีเอ็นเอที่ถอดรหัสสำหรับไดอะมิโนพิมิเลต ดีคาร์บอกซิเลส และการเรียงตัวของดีเอ็นเอ และการเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่ถอดรหัสสำหรับแอสพาเตท อะมิโนทรานสเฟอเรส1. Recombinant DNA capable of automatic replication in colineform bacterial cells containing DNA sequences transcribed for aspartokines (which are reversibly inhibited by L-lysine and L-threonine), dihydrodipicolinate reductase, dihydrodipicolinate synthase, diaminopimylate decarboxylase, and aspartate aminotransferase.
2.รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่แอสพาโตไคเนสที่กล่าวถึงซึ่งมีการยับยั้งย้อนกลับด้วยแอล-ไลซีน และแอล-ทรีโอนีน ถูกทำให้ลดลงเป็นแอสพาโตไคเนสที่มีต้นกำเนิดมาจากแบคทีเรียโคลินีฟอร์ม และโดยที่ แอสพาโตไคเนสที่กล่าวถึงเป็นแอสพาโตไคเนสกลายพันธุ์ ซึ่งส่วนที่เป็นกรดอะมิโนที่ตรงกับส่วนที่เป็นอาลานีนตำแหน่งที่ 279 นับจากปลายด้านที่มีไนโตรเจนในการเรียงตัวของกรดอะมิโนที่แสดงไว้ในตารางการเรียงตัวของสารหมายเลข 5 ถูกเปลี่ยนไปเป็นส่วนที่เป็นกรดอะมิโนชนิดอื่นนอกเหนือจากอานีน และนอกเหนือจากกรดอะมิโนที่เป็นกรดในหน่วยย่อยแอลฟ่าของมัน, และส่วนที่เป็นกรดอะมิโนที่ตรงกับส่วนที่เป็นอาลานีนตำแหน่งที่ 30 นับจากปลายด้านที่มีไนโตรเจนของมันในการเรียงตัวของกรดอะมิโนที่แสดงไว้ในตารางการเรียงตัวของสารหมายเลข 7 ถูกเปลี่ยนไปเป็นส่วนที่เป็นกรดอะมิโนอื่นนอกเหนือจากอาลานีน และนอกเหนือจากกรดอะมิโนที่เป็นกรดในหน่วยย่อยเบต้าของมัน2. Recombinant DNA pursuant to claim 1, where the aforementioned aspartokinesase, which is reversibly inhibited by L-lysine and L-threonine, is reduced to a colineform-derived aspartokinesase, and where the aforementioned aspartokinesase is a mutant aspartokinesase in which the amino acid region corresponding to the alanine region at position 279 from the nitrogenous end of the amino acid sequence shown in Sequence Table No. 5 is altered to an amino acid other than alanine and other than an acidic amino acid in its alpha subunit, and the amino acid region corresponding to the alanine region at position 30 from the nitrogenous end of its amino acid sequence shown in Sequence Table No. 7 is altered to an amino acid other than alanine and other than an acidic amino acid in its beta subunit.
3.รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่การเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่กล่าวถึงซึ่งถอดรหัสสำหรับไดไฮโดรไดพิโคลิเนท รีดักเตส ได้ทำการถอดรหัสสำหรับการเรียงตัวของกรดอะมิโนที่แสดงไว้ในตารางการเรียงตัวของสารหมายเลข 113. Recombinant DNA pursuant to claim 1, whereby the aforementioned DNA sequence transcribed for dihydrodipicolinate reductase has been transcribed for the amino acid sequence shown in sequencing table number 11.
4.รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่การเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่กล่าวถึงซึ่งถอดรหัสสำหรับไดไฮโดรไดพิโคลิเนท ซินเทส ได้ทำการถอดรหัสสำหรับการเรียงตัวของกรดอะมิโนที่แสดงไว้ในตารางการเรียงตัวของสารหมายเลข 154. Recombinant DNA pursuant to claim 1, whereby the aforementioned DNA sequence transcribed for dihydrodipicolinate synthase transcribes the amino acid sequence shown in Synthesis Table No. 15.
5.รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่การเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่กล่าวถึงซึ่งถอดรหัสสำหรับไดอะมิโนพิมิเลต ดีคาร์บอกซิเลส ได้ทำการถอดรหัสสำหรับการเรียงตัวของกรดอะมิโนที่แสดงไว้ในตารางการเรียงตัวของสารหมายเลข 205. Recombinant DNA pursuant to claim 1, whereby the aforementioned DNA sequence transcribed for diaminopimylate decarboxylase transcribes the amino acid sequence shown in sequencing table number 20.
6.รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่การเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่กล่าวถึงซึ่งถอดรหัสสำหรับแอสพาเตท อะมิโนทรานสเฟอเรส ได้ทำการถอดรหัสสำหรับการเรียงตัวของกรดอะมิโนที่แสดงไว้ในตารางการเรียงตัวของสารหมายเลข 24 หรือ 316. Recombinant DNA pursuant to claim 1, whereby the referred DNA sequence transcribed for aspartate aminotransferase is transcribed for the amino acid sequences shown in Sequence Table No. 24 or 31.
7.แบคทีเรียโคลินีฟอร์มที่มีแอสพาโตไคเนสที่การยับยั้งย้อนกลับโดยแอล-ไลซีนและแอล-ทรีโอนีนถูกทำให้ลดลง และประกอบด้วยการเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่ถอดรหัสสำหรับไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเตส, การเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่ถอดรหัสสำหรับไดไฮโดรพิโคลิเนท ซินเทส, การเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่ถอดรหัสสำหรับไดอะมิโนพิมิเลท ดีคาร์บอกซีเลส และการเรียงตัวของดีเอ็นเอ ที่ถอดรหัสสำหรับแอสพาเตท อะมิโนทรานสเฟอเรส,การทำงานระหว่างเซลล์ของไดไฮโดรไดพิโคลิเนท รีดักเตส,ไดไฮโดรพิโคลิเนท ซินเทส, ไดอะมิโนพิมิเลต ดีคาร์บอกซิเลส และแอสพาเตท อะมิโนทรานสเฟอเรสถูกทำให้เด่นขึ้น7. Coliniform bacteria with aspartokines whose inhibition was reversibly triggered by L-lysine and L-threonine were downregulated, comprised of DNA sequences encoding dihydrodipicolinate reductase, dihydropicolinate synthase, diaminopimylate decarboxylase, and aspartate aminotransferase. The cellular interactions of dihydrodipicolinate reductase, dihydropicolinate synthase, diaminopimylate decarboxylase, and aspartate aminotransferase were dominant.
8.แบคทีเรียโคลินีฟอร์มตามข้อถือสิทธิที่ 7 ที่ถูกทำให้เปลี่ยนแปลงไปโดยการนำเข้าไปด้วย รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอที่ได้นิยามไว้ในข้อถือสิทธิที่ 18. Colineform bacteria as defined in Claim 7, which have been altered by the introduction of recombinant DNA as defined in Claim 1.
9.วิธีการผลิตแอล-ไลซีนที่ประกอบด้วยขั้นตอนของการเพาะเชื้อของแบคทีเรียโคลินีฟอร์มที่พูดถึงตามที่นิยามไว้ในข้อถือสิทธิที่ 8 ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่อนุญาตให้แอล-ไลซีน ถูกผลิตขึ้น และถูกทำให้สะสมอยู่ในสารเพาะเลี้ยงของแบคทีเรีย และการเก็บแอล-ไลซีนจากสารเพาะเลี้ยง9. A method for the production of L-lysine comprising the steps of culturing the coliniform bacteria as defined in claim 8 into a culture medium allowing L-lysine to be produced and accumulated in the bacterial culture medium, and the extraction of L-lysine from the culture medium.
10.ดีเอ็นเอซึ่งถูกแยกออกมาที่ถอดรหัสสำหรับโปรตีนที่ประกอบด้วยการเรียงตัวของกรดอะมิโนที่แสดงไว้ในตารางการเรียงตัวของสารหมายเลข 3110. DNA that has been isolated and transcribed for a protein consisting of the amino acid sequence shown in amino acid sequence table number 31.
11.ดีเอ็นเอ ตามข้อถือสิทธิที่ 10 ซึ่งประกอบด้วยการเรียงตัวของนิวคลีโอไทด์ของนิวคลีโอไทด์หมายเลข 879 ถึง 2174 ในการเรียงตัวของนิว คลีโอไทด์ที่แสดงในตารางการเรียงตัวของสารหมายเลข 3011. DNA, according to claim 10, consists of the nucleotide sequences of nucleotides numbered 879 to 2174 in the nucleotide sequence shown in the sequencing table number 30.
12.ตัวพา pVK7 ซึ่งสามารถจำลองตัวเองได้โดยอัตโนมัติในเซลล์ของ Escherichia coli และ Brevibacterium lactofermentum และประกอบด้วยตำแหน่งที่มีการออกแบบทางพันธุกรรมหลายตำแหน่ง และ lacZ'12. The pVK7 carrier, which is autonomously replicable in Escherichia coli and Brevibacterium lactofermentum cells, contains multiple genetically designed loci and lacZ'.