TH20107U - กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนเอพีพี (app) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบสี - Google Patents

กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนเอพีพี (app) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบสี

Info

Publication number
TH20107U
TH20107U TH1903001740U TH1903001740U TH20107U TH 20107 U TH20107 U TH 20107U TH 1903001740 U TH1903001740 U TH 1903001740U TH 1903001740 U TH1903001740 U TH 1903001740U TH 20107 U TH20107 U TH 20107U
Authority
TH
Thailand
Prior art keywords
primer
alzheimer
dipstick
app gene
risk
Prior art date
Application number
TH1903001740U
Other languages
English (en)
Other versions
TH20107Y (th
TH1903001740C3 (th
Inventor
ขำดี นายจัตุรงค์
แก้วพินิจ นายธงชัย
สันติวัฒนกุล นายสมชาย
Original Assignee
มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ
Filing date
Publication date
Application filed by มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ filed Critical มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ
Publication of TH20107U publication Critical patent/TH20107U/th
Publication of TH20107Y publication Critical patent/TH20107Y/th
Publication of TH1903001740C3 publication Critical patent/TH1903001740C3/th

Links

Abstract

------22/01/2564------(OCR) กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ทองยีนเอพีพี (APP) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบ สี เริ่มจากการออกแบบไพรเมอร์ 5 เส้น ที่จำเพาะต่อลำดับเบสกลายพันธุตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของ ยีนเอพีพี(APP)ที่มีความเสี่ยงอัลไซเมอร์โดยให้ไพรเมอร์ 1 เส้นติดฉลากด้วยไบโอติน (biotin) หรือไดกอกซิเจนิน(Digoxigenin) และให้ไพรเมอร์อีก 1 เส้นติดฉลากด้วยสารเรืองแสง (FITC) ในการติดตามปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นบน แผ่นดิพสติค (dipstick) ในระบบนี้ดีเอ็นเอจะเพิ่มปริมาณภายใต้อุณหภูมิ 61 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 60 นาทีในกล่องให้ความร้อน (heating block) แล้วอ่านผลบนแผ่นดิพสติค (dipstick) เมื่อให้ผลบวก จะปรากฏเส้น ทดสอบสีชมพู บริเวณแถบทดสอบ (T) และแถบควบคุม (C) แสดงว่าในตัวอย่างพบเบสกลายพันธุตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของยีนเอพีพี (APP) ที่มีความเสี่ยงอัลไซเมอร์ แต่ถ้าผลลบ จะปรากฏเส้นทดสอบสีชมพู เฉพาะแถบควบคุม (C) เท่านั้น วิธีการนี้เทียบเท่ากับการตรวจสอบด้วยเทคนิคพีซีอาร์ (PCR) แบบเรียลไทม์ (real time)อีกทั้งยังไม่ต้องใช้เครื่องพีซีอาร์ (PCR) และเครื่องแยกสารพันธุกรรมด้วยกระแสไฟฟ้าในการติดตามผลของปฏิกิริยา ------------ หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนเอพีพี (APP) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบ สี เริ่มจากการออกแบบไพรเมอร์ 5 เส้น ที่จำเพาะต่อลำดับเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของ ยีนเอพีพี (APP) ที่มีความเสี่ยงอัลไซเมอร์ โดยให้ไพรเมอร์ 1 เส้นติดฉลากด้วยไบโอติน (biotin) หรือไดกอกซิเจนิน (Digoxigenin) และให้ไพรเมอร์อีก 1 เส้นติดฉลากด้วยสารเรืองแสง (FITC) ในการติดตามปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นบน แผ่นดิพสติค (dipstick) ในระบบนี้ดีเอ็นเอจะเพิ่มปริมาณภายใต้อุณหภูมิ 61 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 60 นาที ในกล่องให้ความร้อน (heating block) แล้วอ่านผลบนแผ่นดิพสติค (dipstick) เมื่อให้ผลบวก จะปรากฏเส้น ทดสอบสีชมพู บริเวณแถบทดสอบ (T) และแถบควบคุม (C) แสดงว่าในตัวอย่างพบเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของยีนเอพีพี (APP) ที่มีความเสี่ยงอัลไซเมอร์ แต่ถ้าผลลบ จะปรากฏเส้นทดสอบสีชมพู เฉพาะ แถบควบคุม (C) เท่านั้น วิธีการนี้เทียบเท่ากับการตรวจสอบด้วยเทคนิคพีซีอาร์ (PCR) แบบเรียลไทม์ (real time) อีกทั้งยังไม่ต้องใช้เครื่องพีซีอาร์ (PCR) และเครื่องแยกสารพันธุ์กรรมด้วยกระแสไฟฟ้าในการติดตามผลของปฏิกิริยา

Claims (1)

------22/01/2564------(OCR) 1. กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนเอพีพี (APP) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบสี ที่ซึ่งประกอบด้วยการทำปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) ร่วมกับการประยุกต์ใช้แผ่นดิพสติค (dipstick) การทำปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) 25 ไมโครลิตร ประกอบด้วยไพรเมอร์ 3 และไพรเมอร์ 4 อย่างละ 50 พิโคโมล, ไพรเมอร์1 ไพรเมอร์ 2 และไพรเมอร์ 5 อย่างละ 5 พิโคโมล, ดีเอ็นทีพี (dNTP) 0.8 มิลลิโมลาร์ผสมด้วยสารเบตาอีน(betaine) 0.6 โมลาร์, สารแมกนีเซียมซัลเฟส (MgSOa) 4 มิลลิโมลาร์, เอนไซม์ บีเอสที ดีเอ็นเอ โพลีเมอเรส (BstDNA polymerase) 8 U และสารละลายบัฟเฟอร์ ด้วยการทำปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) ที่อุณหภูมิ 61 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 60 นาที จากนั้นดูดสารละลายดังกล่าวจำนวน 5 ไมโครลิตรใส่ในหลอดใหม่ที่มีสารละลายบัฟเฟอร์ 100 ไมโครลิตรทีอุณหภูมิห้อง จากนั้นจุ่มแผ่นดิพสติค (dipstick) ลงในสารละลาย 5 นาที แล้วอ่านผลบนแผ่นดิพสติค (dipstick) เมื่อให้ผลบวก จะปรากฏเส้นทดสอบสีชมพู บริเวณแถบทดสอบ (T) และแถบควบคุม(C) แสดงว่า ในตัวอย่างพบเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของยีนเฮพีพี (APP) ที่มีความเสี่ยงอัลไซเมอร์ แต่ถ้าผลลบ จะปรากฏเส้นทดสอบสีชมพู เฉพาะแถบควบคุม (C) เท่านั้น วิธีการนี้ไม่ต้องใช้เครื่องพีซีอาร์(PCR thermal cycler) และเครื่องแยกสารพันธุกรรมด้วยกระแสไฟฟ้า วิธีนี้เป็นการตรวจสอบหาควาผิดปกติของยีนเอพีพี (APP) ด้วยแผ่นติพสติค (dipstick) ในบุคคลที่มีสงสัยความเสี่ยงอัลไซเมอร์ เพื่อการตรวจวินิจฉัยและป้องกันของโรค กรรมวิธีนี้ออกแบบไพรเมอร์สำหรับเทคนิคแลมป์ (LAMP) ที่ใช้ในการตรวจหาเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของยีนเอพีพี (APP) ที่มีความเสี่ยงอัลไซเมอร์ ในปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP)ประกอบด้วยไพรเมอร์ 5 เส้น ที่จำเพาะต่อลำดับเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของยีนเอพีพี(APP) โดยให้ไพรเมอร์ 4 ติดฉลากด้วยไบโอติน (biotin) หรือไดกอกซิเจนิน (Digoxigenin) และให้ไพรเมอร์ 5 ติดฉลากด้วยสารเรืองแสง (FITC) ในการติดตามปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นบนแผ่นดิพสติค (dipstick) ดังนี้ ไพรเมอร์ที่จำเพาะต่อเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ดังนี้ ไพรเมอร์ 1 ลำดับเบส (5'-3') ACggAggAgATCTCTgAAg ไพรเมอร์ 2 ลำดับเบส (5'-3') gAATggATgTgTACTgTTTCT ไพรเมอร์ 3 ลำดับเบส (5'-3') AgATgTgggTTCAAACAAAggTTTTTAgCATCACCAAggTgATgCT ไพรเมอร์ 4 ลำดับเบส (5'-3') ไบโอติน (biotin) /ไดกอกซิเจนิน (Digoxigenin; Dig) -TgCAAAgAACACCAATTTTTgATgATTTTT gAAgAT ggAT gCAgAATT cc ไพรเมอร์ 5 ลำดับเบส (5'-3') FITC- T g AACTTCATAT CCT g AgT CAT gTc ------------ หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนเอพีพี (APP) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วย แถบสี ที่ซึ่งประกอบด้วยการทำปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) ร่วมกับการประยุกต์ใช้แผ่นดิพสติค (dipstick) การทำ ปฏิกิริยาแลมน์ (LAMP) 25 ไมโครลิตร ประกอบด้วยไพรเมอร์ 3 และไพรเมอร์ 4 อย่างละ 50 พิโคโมล, ไพรเมอร์ 1 ไพรเมอร์ 2 และไพรเมอร์ 5 อย่างละ 5 พิโคโมล, ดีเอ็นทีพี (dNTP) 0.8 มิลลิโมลาร์ผสมด้วยสารเบตาอีน (betaine) 0.6 โมลาร์, สารแมกนีเซียมซัลเฟส (MgSO4) 4 มิลลิโมลาร์, เอนไซม์ บีเอสที ดีเอ็นเอ โพลิเมอเรส (Bst DNA polymerase) 8 U และสารละลายบัฟเฟอร์ ด้วยการทำปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) ที่อุณหภูมิ 61 องศา เซลเซียส เป็นเวลา 60 นาที จากนั้นดูดสารละลายดังกล่าวจำนวน 5 ไมโครลิตรใส่ในหลอดใหม่ที่มีสารละลาย บัฟเฟอร์ 100 ไมโครลิตรที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นจุ่มแผ่นดิพสติค (dipstick) ลงในสารละลาย 5 นาที แล้วอ่านผล บนแผ่นดิพสติค (dipstick) เมื่อให้ผลบวก จะปรากฏเส้นทดสอบสีชมพู บริเวณแถบทดสอบ (T) และแถบควบคุม (C) แสดงว่า ในตัวอย่างพบเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของยีนเอพีพี (APP) ที่มีความเสี่ยงอัล ไซเมอร์ แต่ถ้าผลลบ จะปรากฏเส้นทดสอบสีชมพู เฉพาะแถบควบคุม (C) เท่านั้น วิธีการนี้ไม่ต้องใช้เครื่องพีซีอาร์ (PCR thermal cycler) และเครื่องแยกสารพันธุกรรมด้วยกระแสไฟฟ้า วิธีนี้เป็นการตรวจสอบหาควาผิดปกติของ ยีนเอพีพี (APP) ด้วยแผ่นดิพสติค (dipstick) ในบุคคลที่มีสงสัยความเสี่ยงอัลไซเมอร์ เพื่อการตรวจวินิจฉัยและ ป้องกันของโรค กรรมวิธีนี้ออกแบบไพรเมอร์สำหรับเทคนิคแลมป์ (LAMP) ที่ใช้ในการตรวจหาเบสกลายพันธุ์ ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของยีนเอพีพี (APP) ที่มีความเสี่ยงอัลไซเมอร์ ในปฏิกิริยาแลมป์ (LAMP) ประกอบด้วยไพรเมอร์ 5 เส้น ที่จำเพาะต่อลำดับเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ของยีนเอพีพี (APP) โดยให้โพรเมอร์ 4 ติดฉลากด้วยไบโอติน (biotin) หรือไดกอกซิเจนิน (Digoxigenin) และให้ไพรเมอร์ 5 ติด ฉลากด้วยสารเรืองแสง (FITC) ในการติดตามปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นบนแผ่นดิพสติค (dipstick) ดังนี้
1. ไพรเมอร์ที่จำเพาะต่อเบสกลายพันธุ์ตำแหน่งอาร์เอส (rs) 63750264 ดังนี้ ไพรเมอร์ 1 ลำดับเบส (5'-3') ACggAggAgATCTCTgAAg ไพรเมอร์ 2 ลำดับเบส (5'-3') gAATgg ATgTgTACTgTTTCT ไพรเมอร์ 3 ลำดับเบส (5'-3') AgATgTgggTTCAAACAAAggTTTTTAgCATCACCAAggTgATgCT ไพรเมอร์ 4 ลำดับเบส (5'-3') biotin/Dig- TgCAAAgAACACCAATTTTTgATgATTTTTgAAgATggATgCAgAATTCC ไพรเมอร์ 5 ลำดับเบส (5'-3') FITC- TgAACTTCATATCCTgAgTCATgTC Dig = Digoxigenin
TH1903001740U 2019-07-05 กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนเอพีพี (app) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบสี TH1903001740C3 (th)

Publications (3)

Publication Number Publication Date
TH20107U true TH20107U (th) 2022-08-10
TH20107Y TH20107Y (th) 2022-08-10
TH1903001740C3 TH1903001740C3 (th) 2022-08-10

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10689716B1 (en) Materials and methods for detecting coronavirus
Pallisgaard et al. Controls to validate plasma samples for cell free DNA quantification
US12378602B2 (en) Methods and kits for determining the efficiency of plasma separation from whole blood
JPWO2017212904A1 (ja) 複数のプライマーセットを組み合わせたｌａｍｐ法を用いたアフリカ豚コレラウイルスの迅速検出法
KR101873303B1 (ko) 타액 내 dna 메틸화를 이용한 연령 예측 방법
WO2009087685A2 (en) Method for detection of hepatitis nucleic acid and uses thereof
Saeed et al. Real-time polymerase chain reaction: applications in diagnostic microbiology
TH20107Y (th) กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนเอพีพี (app) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบสี
ITMI20101132A1 (it) Metodo ad elevata sensibilita' per rilevare un acido nucleico target in un campione
Xu et al. Validation of quantitative fluorescent-PCR for rapid prenatal diagnosis of common aneuploidies in the Chinese population.
TH20199U (th) กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนอะโพอี (apoe) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบสี
TH20199Y (th) กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนอะโพอี (apoe) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบสี
Eickhoff et al. Ultra-rapid detection of Chlamydia trachomatis by real-time PCR in the LightCycler using SYBR green technology or 5'-nuclease probes
EP2834369B1 (en) Compositions and methods for detection of mycobacterium avium paratuberculosis
WO2022203008A1 (ja) 敗血症の原因細菌を同定する方法及びキット
TH17934U (th) กรรมวิธีการตรวจสอบหาเชื้อวัณโรคชนิด มัยโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส (Mycobacterium tuberculosis) ด้วยแถบสีในขั้นตอนเดียว
TH17934Y (th) กรรมวิธีการตรวจสอบหาเชื้อวัณโรคชนิด มัยโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส (Mycobacterium tuberculosis) ด้วยแถบสีในขั้นตอนเดียว
TH1903001740C3 (th) กรรมวิธีการตรวจสอบการกลายพันธุ์ของยีนเอพีพี (app) ความเสี่ยงอัลไซเมอร์แบบขั้นตอนเดียวด้วยแถบสี
TH18959U (th) กรรมวิธีการตรวจสอบเบสกลายพันธุ์ของเชื้อวัณโรคดื้อต่อยาไอโซไนอะซิด (isoniazid) ด้วยแถบสีในขั้นตอนเดียว
TH18959Y (th) กรรมวิธีการตรวจสอบเบสกลายพันธุ์ของเชื้อวัณโรคดื้อต่อยาไอโซไนอะซิด (isoniazid) ด้วยแถบสีในขั้นตอนเดียว
TH17935U (th) กรรมวิธีการตรวจสอบเบสกลายพันธุ์ของเชื้อวัณโรคดื้อต่อยาไรแฟมพิซิน (Rifampicin) ด้วยแถบสีในขั้นตอนเดียว
TH17935Y (th) กรรมวิธีการตรวจสอบเบสกลายพันธุ์ของเชื้อวัณโรคดื้อต่อยาไรแฟมพิซิน (Rifampicin) ด้วยแถบสีในขั้นตอนเดียว
RU2831277C1 (ru) Способ выявления ДНК микроорганизмов класса Mollicutes в крови и других биоматериалах методом ПЦР-РВ
TH19454Y (th) กรรมวิธีการตรวจสอบเบสกลายพันธุ์ของเชื้อวัณโรคดื้อต่อยาฟลูออโรควิโนโลน (fluoroquinolone) ด้วยแถบสีในขั้นตอนเดียว
TH19454U (th) กรรมวิธีการตรวจสอบเบสกลายพันธุ์ของเชื้อวัณโรคดื้อต่อยาฟลูออโรควิโนโลน (fluoroquinolone) ด้วยแถบสีในขั้นตอนเดียว