TH139988A - กระบวนการตรวจวัดปริมาณเชื้อแบคทีเรียด้วยการตรวจการเปลี่ยนแปลงสี (colorimetric detection) - Google Patents

Abstract

DC60 (20/06/56) การประดิษฐ์นี้ได้พัฒนากระบวนการตรวจหาเชื้อเเบคทีเรียโดยเทคนิคการจับกันเเบบเเข่งขัน (competitive assay) ของเเบคทีเรียเเละเอนไซม์ที่มีประจุเป็นลบ กับ อนุภาคที่มีประจุบนผิวเป็นบวก โดยที่ ประจุบนผิวอนุภาคมีค่าความเป็นบวกสูงทำให้มีเเนวโน้มที่จะเลือกจับกับผนังเซลล์ของเเบคทีเรียที่มีประจุเป็น ลบมากกว่าการจับกับเอนไซม์ซึ่งมีค่าประจุเป็นลบน้อยกว่าเเบคทีเรีย ดังนั้น เมื่อในตัวอย่างมีปริมาณเชื้อ เเบคทีเรียที่เเตกต่างกัน จึงส่งผลให้ปริมาณของอนุภาคที่ใช้ในการจับกับเชื้อเเบคทีเรียมีปริมาณต่างกันเเละ อนุภาคที่เหลืออยู่มีปริมาณที่แตกต่างกันตามลำดับ การตรวจวัดสัญญาณจึงอาศัยการตรวจวัดปริมาณ เอนไซม์อิสระที่ไม่ได้จับกับอนุภาคที่มีประจุบนผิวเป็นบวก โดยการใช้โมเลกุลสารซับสเตรทที่สามารถ เกิดปฏิกิริยาได้โดยมีเอนไซม์ดังกล่าวเป็นตัวเร่งการเกิดปฏิกิริยา เเละตรวจวัดการเปลี่ยนเเปลงของปฏิกิริยา โดยการติดตามสีที่เปลี่ยนเเปลงไปด้วยตาเปล่าหรือการวัดค่าการดูดกลืนแสงด้วยเครื่องวัดค่าการดูดกลืนแสง การประดิษฐ์นี้มีข้อดีในแง่ (1) มีขีดจำกัดในการตรวจวัดที่ความเข้มข้นต่ำ (low detection limit) โดยสามารถ เเยกความเเตกต่างระหว่างตัวอย่างที่มีเเละไม่มีการปนเปื้อนของเชื้อเเบคทีเรียเดี่ยวหรือเเบคทีเรียผสม ได้ใน ระดับต่ำที่สุดที่ 1 ซีเอฟยูต่อมิลลิลิตร (2) สามารถใช้ในการตรวจวัดปริมาณเชื้อเเบคทีเรียทั้งหมด (total bacteria) ที่ปนเปื้อนในตัวอย่างได้อย่างถูกต้อง (3) การตรวจวิเคราะห์สามารถทำได้โดยง่าย ไม่ต้องการ เครื่องมือที่มีราคาสูงในการวิเคราะห์ โดยเป็นการอ่านค่าการเปลี่ยนเเปลงสีด้วยตาเปล่า หรือ การวัดค่าการ ดูดกลืนเเสงด้วยอุปกรณ์ที่มีในห้องปฏิบัติการทั่วไป เเละ (4) ระยะเวลาที่ใช้ในการวิเคราะห์น้อยกว่าวิธี มาตรฐานด้วยการเพาะเลี้ยงเชื้อที่ใช้อยู่ในปัจจุบัน นอกจากนี้ ยังมีผลการทดสอบในตัวอย่างน้ำดื่มที่เเสดงให้ เห็นถึงความเป็นไปได้ในการนำกระบวนการตามการประดิษฐ์นี้ไปปรับใช้จริงในทางอุตสาหกรรมได้ การประดิษฐ์นี้ได้พัฒนากระบวนการตรวจเชื้อเเบคทีเรียโดยเทคนิคการจับเเบบเเข่งขัน (Commpertiive asssey)ของเเบคทีเรียเเละเอนไซม์ที่มีปีระจุเป็นลบ กับ อนุภาคที่มีประจุบนผิวเป็นบวก โดยที่ ประจุผิวอนุภาคมีค่าความเป็นบวกสูงทำให้เเนวโน้มที่จะเลือกจับกับผนังเซลล์ของเเบคทีเรียที่มีประจุเป็น ลบมากกว่าการจับ รับเอนไซม์ซึ่งมีค่าประจุเป็นลบน้อยกว่าเเบบคทีเรีย ดังนั้น เมื่อในตัวอย่างมีปริมาณเชื้อ เเบคทีเรียที่เเตกต่างกัน จึงส่งผลให้ปริมาณของอนุภาคที่ใช้ในการจับกับเชื้อ เเบคทีเรียมีปริมาณต่างกันเเละ เอนไซม์อิสระที่ไม่ได้จับกับอนุภาคที่มีประจุบนผิวเป็นมาก โดยการใช้โมเลกุลสารซับสเตรตที่สามารถ เกิดปฏิกิริยาได้โดยมีเอนไซม์ดังกล่าวเป็นตัวเร่งการเกิดปฏิกิริยา เเละตรวจวัดการเปลี่ยนเเปลงของปฏิกิริยา โดยการติดตามสิ่งที่เปลี่ยนเเปลงไปด้วยตาเปล่าหรือการวัดค่าความเข้มข้นต่ำ(Low detection linel)โดยสามารถ เเยกความเเตกต่างระหว่างตัวอย่างที่มีเเละไม่มีการปนเปื้อนของเเบคทีเรียเดี่ยวหรือเเบคทีเรียผสม ได้ใน ระดับต่ำที่สุด 1 ซีเอฟยูต่อมิลลิลิตร(2)สามารถใชข้ในการตรวจวัดปริมาณเชื้อเเบคทีเรียทั้งหมด(total bacteria) ที่ปนเปื้อนมในตัวอย่างได้อย่างถูกต้อง(3)การตรวจวิเคราะห์สามารถทำได้โดยง่าย ไม่ต้องการ เครื่องมือที่มีราคาสูงในการวิเคราะห์ โดยเป็นการอ่านค่าการเปลี่ยนเเปลงสีด้วยตาเปล่า หรือ การวัดค่าการ ดูดกลืนเเสงด้วยอุปกรณ์ที่มีในห้องปฏิบัติการทั่วไป เเละ(4)ระยะเวลาที่ใช้ในการวิเคราะห์น้อยกว่าวิธี มาตรฐานด้วยการเพาะเลี้ยงเชื้อที่ใช้อยู่ในปัจจุบัน นอกจากนี้ ยังมีผลการทดสอบในตัวอย่างน้ำดื่มที่เเสดงให้ เห็นถึงความเป็นไปได้ในการนำกระบวนการตามการประดิษฐ์นี้ไปปรับใช้จริงในทางอุตสาหกรรมได้

Claims (1)

1. : DC60 (20/06/56) การประดิษฐ์นี้ได้พัฒนากระบวนการตรวจหาเชื้อเเบคทีเรียโดยเทคนิคการจับกันเเบบเเข่งขัน (competitive assay) ของเเบคทีเรียเเละเอนไซม์ที่มีประจุเป็นลบ กับ อนุภาคที่มีประจุบนผิวเป็นบวก โดยที่ ประจุบนผิวอนุภาคมีค่าความเป็นบวกสูงทำให้มีเเนวโน้มที่จะเลือกจับกับผนังเซลล์ของเเบคทีเรียที่มีประจุเป็น ลบมากกว่าการจับกับเอนไซม์ซึ่งมีค่าประจุเป็นลบน้อยกว่าเเบคทีเรีย ดังนั้น เมื่อในตัวอย่างมีปริมาณเชื้อ เเบคทีเรียที่เเตกต่างกัน จึงส่งผลให้ปริมาณของอนุภาคที่ใช้ในการจับกับเชื้อเเบคทีเรียมีปริมาณต่างกันเเละ อนุภาคที่เหลืออยู่มีปริมาณที่แตกต่างกันตามลำดับ การตรวจวัดสัญญาณจึงอาศัยการตรวจวัดปริมาณ เอนไซม์อิสระที่ไม่ได้จับกับอนุภาคที่มีประจุบนผิวเป็นบวก โดยการใช้โมเลกุลสารซับสเตรทที่สามารถ เกิดปฏิกิริยาได้โดยมีเอนไซม์ดังกล่าวเป็นตัวเร่งการเกิดปฏิกิริยา เเละตรวจวัดการเปลี่ยนเเปลงของปฏิกิริยา โดยการติดตามสีที่เปลี่ยนเเปลงไปด้วยตาเปล่าหรือการวัดค่าการดูดกลืนแสงด้วยเครื่องวัดค่าการดูดกลืนแสง การประดิษฐ์นี้มีข้อดีในแง่ (1) มีขีดจำกัดในการตรวจวัดที่ความเข้มข้นต่ำ (low detection limit) โดยสามารถ เเยกความเเตกต่างระหว่างตัวอย่างที่มีเเละไม่มีการปนเปื้อนของเชื้อเเบคทีเรียเดี่ยวหรือเเบคทีเรียผสม ได้ใน ระดับต่ำที่สุดที่ 1 ซีเอฟยูต่อมิลลิลิตร (2) สามารถใช้ในการตรวจวัดปริมาณเชื้อเเบคทีเรียทั้งหมด (total bacteria) ที่ปนเปื้อนในตัวอย่างได้อย่างถูกต้อง (3) การตรวจวิเคราะห์สามารถทำได้โดยง่าย ไม่ต้องการ เครื่องมือที่มีราคาสูงในการวิเคราะห์ โดยเป็นการอ่านค่าการเปลี่ยนเเปลงสีด้วยตาเปล่า หรือ การวัดค่าการ ดูดกลืนเเสงด้วยอุปกรณ์ที่มีในห้องปฏิบัติการทั่วไป เเละ (4) ระยะเวลาที่ใช้ในการวิเคราะห์น้อยกว่าวิธี มาตรฐานด้วยการเพาะเลี้ยงเชื้อที่ใช้อยู่ในปัจจุบัน นอกจากนี้ ยังมีผลการทดสอบในตัวอย่างน้ำดื่มที่เเสดงให้ เห็นถึงความเป็นไปได้ในการนำกระบวนการตามการประดิษฐ์นี้ไปปรับใช้จริงในทางอุตสาหกรรมได้ การประดิษฐ์นี้ได้พัฒนากระบวนการตรวจเชื้อเเบคทีเรียโดยเทคนิคการจับเเบบเเข่งขัน (Commpertiive asssey)ของเเบคทีเรียเเละเอนไซม์ที่มีปีระจุเป็นลบ กับ อนุภาคที่มีประจุบนผิวเป็นบวก โดยที่ ประจุผิวอนุภาคมีค่าความเป็นบวกสูงทำให้เเนวโน้มที่จะเลือกจับกับผนังเซลล์ของเเบคทีเรียที่มีประจุเป็น ลบมากกว่าการจับ รับเอนไซม์ซึ่งมีค่าประจุเป็นลบน้อยกว่าเเบบคทีเรีย ดังนั้น เมื่อในตัวอย่างมีปริมาณเชื้อ เเบคทีเรียที่เเตกต่างกัน จึงส่งผลให้ปริมาณของอนุภาคที่ใช้ในการจับกับเชื้อ เเบคทีเรียมีปริมาณต่างกันเเละ เอนไซม์อิสระที่ไม่ได้จับกับอนุภาคที่มีประจุบนผิวเป็นมาก โดยการใช้โมเลกุลสารซับสเตรตที่สามารถ เกิดปฏิกิริยาได้โดยมีเอนไซม์ดังกล่าวเป็นตัวเร่งการเกิดปฏิกิริยา เเละตรวจวัดการเปลี่ยนเเปลงของปฏิกิริยา โดยการติดตามสิ่งที่เปลี่ยนเเปลงไปด้วยตาเปล่าหรือการวัดค่าความเข้มข้นต่ำ(Low detection linel)โดยสามารถ เเยกความเเตกต่างระหว่างตัวอย่างที่มีเเละไม่มีการปนเปื้อนของเเบคทีเรียเดี่ยวหรือเเบคทีเรียผสม ได้ใน ระดับต่ำที่สุด 1 ซีเอฟยูต่อมิลลิลิตร(2)สามารถใชข้ในการตรวจวัดปริมาณเชื้อเเบคทีเรียทั้งหมด(total bacteria) ที่ปนเปื้อนมในตัวอย่างได้อย่างถูกต้อง(3)การตรวจวิเคราะห์สามารถทำได้โดยง่าย ไม่ต้องการ เครื่องมือที่มีราคาสูงในการวิเคราะห์ โดยเป็นการอ่านค่าการเปลี่ยนเเปลงสีด้วยตาเปล่า หรือ การวัดค่าการ ดูดกลืนเเสงด้วยอุปกรณ์ที่มีในห้องปฏิบัติการทั่วไป เเละ(4)ระยะเวลาที่ใช้ในการวิเคราะห์น้อยกว่าวิธี มาตรฐานด้วยการเพาะเลี้ยงเชื้อที่ใช้อยู่ในปัจจุบัน นอกจากนี้ ยังมีผลการทดสอบในตัวอย่างน้ำดื่มที่เเสดงให้ เห็นถึงความเป็นไปได้ในการนำกระบวนการตามการประดิษฐ์นี้ไปปรับใช้จริงในทางอุตสาหกรรมได้ข้อถือสิทธิ์ (ข้อที่หนึ่ง) ซึ่งจะปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา : 1.กระบวนการตรวจวัดปริมาณเชื้อแเบคทีเรียด้วยการจากการเปลี่ยนแปลงสี ที่มีลักษณะเฉพาะคือ กระบวนการดังกล่าวอาศัยการจับการแบบแข่งขัน (Commpertiive binding)ระหว่างเอนไซม์และเชื้อ แบคทีเรียที่มีประจุเป็นลบ กับ อนุภาคที่มีประจุลบเป็นบวก โดยที่ประจุผิวอนุภาคมีค่า ความเป็นบวกสูง ทำให้มีแนวโน้มที่จะเลือกจับผนังเซลล์ของแบคทีเรียที่มีประจุลบมากกว่าการจับกับแอนไซม์ซึ่งมีค่า ประจุเป็นลบน้อยกว่าแบคทีเรีย ดังนั้น เมื่อใดตัวอย่างมีปริมแท็ก :