TH117366A - A process for creating a double RNA by a two-step cloning system. - Google Patents

A process for creating a double RNA by a two-step cloning system.

Info

Publication number
TH117366A
TH117366A TH601005376A TH0601005376A TH117366A TH 117366 A TH117366 A TH 117366A TH 601005376 A TH601005376 A TH 601005376A TH 0601005376 A TH0601005376 A TH 0601005376A TH 117366 A TH117366 A TH 117366A
Authority
TH
Thailand
Prior art keywords
dna
strand
rna
template
gene
Prior art date
Application number
TH601005376A
Other languages
Thai (th)
Other versions
TH86091B (en
TH55624B (en
TH86091A (en
Inventor
จรูญนาถ นางสาวเพทาย
ศักดิ์เสมอพรหม นางสาววรรณวิมล
วิทยาชำนาญกุล นายบุญเสริม
Original Assignee
นางสาวอรกนก พรรณรักษา
นางสาวอรุณศรี ศรีธนะอิทธิพล
นายชาญชัย นีรพัฒนกุล
สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
Filing date
Publication date
Publication of TH86091A publication Critical patent/TH86091A/en
Application filed by นางสาวอรกนก พรรณรักษา, นางสาวอรุณศรี ศรีธนะอิทธิพล, นายชาญชัย นีรพัฒนกุล, สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ filed Critical นางสาวอรกนก พรรณรักษา
Publication of TH117366A publication Critical patent/TH117366A/en
Publication of TH55624B publication Critical patent/TH55624B/en
Publication of TH86091B publication Critical patent/TH86091B/en

Links

Abstract

------06/11/2563------(OCR) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวกับกรรมวิธีการผลิตอาร์เอนเอสายคู่แบบยาว โดยมีดีเอนเอพาหะที่มีชิ้นส่วนของดีเอนเอต้นแบบที่จะสร้างเป็นสายอาร์เอนเอในลักษณะแฮร์พิน และถ่ายดีเอนเอพาหะที่มียีนเป้าหมายเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้านเพื่อใช้เป็นแหล่งสร้างลายอาร์เอนเอในปริมาณมาก วิธีนี้ลดขั้นตอนการตัดต่อดีเอนเอต้นแบบของยีนเป้าหมายเข้าสู่ดีเอนเอพาหะ โดยใช้เส้นดีเอนเอต้นแบบมีขนาดยาวกว่าเส้นวกกลับประมาณ 100 เบส ทำให้ส่วนที่เกินของเส้นแม่แบบกลายเป็นส่วนโค้งของแฮร์พินอาร์เอนเอ โดยไม่ต้องโคลนยีนที่ไม่เกี่ยวข้องเพิ่มเข้าไปอีกตังเช่นวิธีเดิม เนื่องจากกระบวนการตัดต่อยีนสามารถทำได้ใน 2ขั้นตอน ดังนั้น จำนวนดีเอนเอไพรเมอร์ที่ใช้ในวิธีนี้จึงลดลงครึ่งหนึ่งเมื่อเปรียบเทียบกับการสร้างแบบเดิมและอาร์เอนเอลายคู่ที่สร้างให้มีความจำเพาะกับลำดับเบสในยีนอาร์เอนเอดีเพนเดนท์อาร์เอนเอโพลิเมอเรสของไวรัสหัวเหลือง สามารถนำมาใช้ป้องกันโรคไวรัสหัวเหลืองในกุ้งได้อย่างมีประสิทธิภาพ ------------ DC60 (26/05/54) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวกับกรรมวิธีการผลิตอาร์เอนเอสายคู่แบบยาว โดยมีดีเอนเอพาหะที่มี ชิ้นส่วนของดีเอนเอต้นแบบที่จะสร้างเป็นสายอาร์เอนเอในลักษณะแฮร์ฟิน และถ่ายดีเอนเอพาหะที่มี ยีนเป้าหมายเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้านเพื่อใช้เป็นแหล่งสร้างสายอาร์เอนเอในปริมาณมาก วิธีนี้ลดขั้นตอน การตัดต่อดีเอนเอต้นแบบของยีนเป้าหมายเข้าสู่ดีเอนเอพาหะ โดยใช้เส้นดีเอนเอต้นแบบมีขนาดยาว กว่าเส้นวกกลับประมาณ 100 เบส ทำให้ส่วนที่เกินของเส้นแม่แบบกลายเป็นส่วนโค้งของแฮร์พินอาร์ เอนเอ โดยไม่ต้องโคลนยีนที่ไม่เกี่ยวข้องเพิ่มเข้าไปอีกดังเช่นวิธีเดิม เนื่องจากกระบวนการตัดต่อยีน สามารถทำได้ใน 2 ขั้นตอน ดังนั้นจำนวนดีเอนเอไพรเมอร์ที่ใช้ในวิธีนี้จึงลดลงครึ่งหนึ่งเมื่อ เปรียบเทียบกับการสร้างแบบเดิม และอาร์เอนเอสายคู่ที่สร้างให้มีความจำเพาะกับลำดับเบสในยีน อาร์เอนเอดีเพนเดนท์อาร์เอนเอโพลิเมอเรสของไวรัสหัวเหลือง สามารถนำมาใช้ป้องกันโรคไวรัสหัว เหลืองในกุ้งได้อย่างมีประสิทธิภาพ------06/11/2020------(OCR) This invention is about a process for producing long double-stranded RNA. It uses a carrier DNA that contains a fragment of template DNA to form a hairpin RNA strand and transfers the target gene into host cells to be used as a source for producing large-scale RNA patterns. This method simplifies the steps of inserting the template DNA of the target gene into the carrier DNA by using a template DNA strand that is approximately 100 bases longer than the reverse strand, resulting in the excess of the template strand becoming a hairpin RNA curve. This does not require additional cloning of unrelated genes as with the previous method. Since the gene editing process can be done in two steps, the number of DNA primers required in this method is halved compared to the previous method and the double-stranded RNA that is specific to the base sequence in the yellow head virus dependent RNA polymerase gene can be used to effectively prevent yellow head virus disease in shrimp. ------------ DC60 (26/05/54) This invention is about a process for producing long double-stranded RNA. The carrier DNA contains a fragment of template DNA to be converted into a hairpin RNA strand, and the vector DNA containing the target gene is transfected into host cells to serve as a source for high-throughput RNA production. This method simplifies the insertion of the template DNA of the target gene into the carrier DNA by using a template DNA strand approximately 100 bases longer than the reverse strand, resulting in the excess portion of the template strand becoming a hairpin RNA curve without the need to clone additional unrelated genes as with the conventional method. Since the gene editing process can be performed in two steps, the number of DNA primers required in this method is halved compared to the conventional method. Furthermore, double-stranded RNA, specifically designed to target the base sequence of the yellow head virus (YHV) dependent RNA polymerase gene, can be effectively used to prevent yellow head virus disease in shrimp.

Claims (1)

1. : DC60 (26/05/54) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวกับกรรมวิธีการผลิตอาร์เอนเอสายคู่แบบยาว โดยมีดีเอนเอพาหะที่มี ชิ้นส่วนของดีเอนเอต้นแบบที่จะสร้างเป็นสายอาร์เอนเอในลักษณะแฮร์ฟิน และถ่ายดีเอนเอพาหะที่มี ยีนเป้าหมายเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้านเพื่อใช้เป็นแหล่งสร้างสายอาร์เอนเอในปริมาณมาก วิธีนี้ลดขั้นตอน การตัดต่อดีเอนเอต้นแบบของยีนเป้าหมายเข้าสู่ดีเอนเอพาหะ โดยใช้เส้นดีเอนเอต้นแบบมีขนาดยาว กว่าเส้นวกกลับประมาณ 100 เบส ทำให้ส่วนที่เกินของเส้นแม่แบบกลายเป็นส่วนโค้งของแฮร์พินอาร์ เอนเอ โดยไม่ต้องโคลนยีนที่ไม่เกี่ยวข้องเพิ่มเข้าไปอีกดังเช่นวิธีเดิม เนื่องจากกระบวนการตัดต่อยีน สามารถทำได้ใน 2 ขั้นตอน ดังนั้นจำนวนดีเอนเอไพรเมอร์ที่ใช้ในวิธีนี้จึงลดลงครึ่งหนึ่งเมื่อ เปรียบเทียบกับการสร้างแบบเดิม และอาร์เอนเอสายคู่ที่สร้างให้มีความจำเพาะกับลำดับเบสในยีน อาร์เอนเอดีเพนเดนท์อาร์เอนเอโพลิเมอเรสของไวรัสหัวเหลือง สามารถนำมาใช้ป้องกันโรคไวรัสหัว เหลืองในกุ้งได้อย่างมีประสิทธิภาพ ข้อถือสิทธิ์ (ข้อที่หนึ่ง) ซึ่งจะปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา : แท็ก :1. : DC60 (26/05/54) This invention relates to a method for producing long double-stranded RNA by using a carrier DNA containing a fragment of template DNA to form a hairpin RNA strand and transferring the vector DNA containing the target gene into host cells for use as a source for producing large quantities of RNA strands. This method simplifies the steps of inserting the template DNA of the target gene into the carrier DNA by using a template DNA strand approximately 100 bases longer than the reverse strand, resulting in the excess of the template strand becoming a curved hairpin RNA without the need to clone additional unrelated genes as with the conventional method. Since the gene editing process can be done in two steps, the number of DNA primers required in this method is halved compared to the conventional method. And the double-stranded RNA that is specific to the base sequence in the yellow head virus dependent RNA polymerase gene can be used to effectively prevent yellow head virus disease in shrimp. Claim (first item) which will appear on the advertisement page: Tag:
TH601005376A 2009-04-24 Two-step cloning method for the production of double-stranded RNA TH86091B (en)

Publications (4)

Publication Number Publication Date
TH86091A TH86091A (en) 2007-08-20
TH117366A true TH117366A (en) 2012-11-15
TH55624B TH55624B (en) 2017-06-28
TH86091B TH86091B (en) 2021-12-23

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP4310196A3 (en) Methods and compositions for manipulating nucleic acids
WO2013032850A3 (en) Compositions and methods for high fidelity assembly of nucleic acids
JP6110297B2 (en) Combination sequence barcodes for high-throughput screening
JP2017537626A5 (en)
NZ712727A (en) Compositions and methods of nucleic acid-targeting nucleic acids
RU2017130143A (en) CRISPR HYBRID DNA / RNA POLINUKDEOTOIDES AND METHODS
MX2019010131A (en) Novel promoter and purine nucleotide production method using same.
MX342195B (en) 5-methoxy. 3'-oh unblocked, fast photocleavable terminating nucleotides and methods for nucleic acid sequencing.
WO2015083001A3 (en) Nucleic acid probe and method of detecting genomic fragments
EA201690274A1 (en) METHOD OF SITE-SPECIFIC ENZYMATIC SWIPING OF NUCLEIC ACIDS IN VITRO INTRODUCTION NOT MEETING IN THE NATURE OF NUCLEOTIDES
JP2012228256A5 (en)
JP2015142558A5 (en)
JP2010525813A5 (en)
WO2012142611A3 (en) Sequencing small amounts of complex nucleic acids
WO2015095226A3 (en) Preserving genomic connectivity information in fragmented genomic dna samples
WO2009073629A3 (en) Efficient shotgun sequencing methods
JP2014514921A5 (en)
MX2020001998A (en) Target sequence specific alteration technology using nucleotide target recognition.
SG11201809242VA (en) Method for increasing mutation introduction efficiency in genome sequence modification technique, and molecular complex to be used therefor
CN104962627A (en) SPN locus in linkage with round or flat character of peach fruit shape, molecular marker based on locus and application thereof
CN103609527A (en) Green-shin recessive white-feather chicken strain breeding method
TH117366A (en) A process for creating a double RNA by a two-step cloning system.
CN101177697B (en) A method for preparing nucleic acid molecular weight markers
JP2012085645A5 (en)
CN109097456A (en) Single molecule high fidelity amplification method