TH11158C3 - ผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนเพื่อผลิตโปรตีนเป้าหมายที่เหนี่ยวนำด้วยเมธานอล และกรรมวิธีการใช้ผลิตภัณฑ์ดังกล่าว - Google Patents
ผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนเพื่อผลิตโปรตีนเป้าหมายที่เหนี่ยวนำด้วยเมธานอล และกรรมวิธีการใช้ผลิตภัณฑ์ดังกล่าวInfo
- Publication number
- TH11158C3 TH11158C3 TH1203000594U TH1203000594U TH11158C3 TH 11158 C3 TH11158 C3 TH 11158C3 TH 1203000594 U TH1203000594 U TH 1203000594U TH 1203000594 U TH1203000594 U TH 1203000594U TH 11158 C3 TH11158 C3 TH 11158C3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- gene expression
- protein
- product
- enzyme
- target
- Prior art date
Links
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract 17
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title claims abstract 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract 6
- 241001221837 Ogataea thermomethanolica Species 0.000 claims abstract 6
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims abstract 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 claims 2
- 108010025188 Alcohol oxidase Proteins 0.000 claims 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 claims 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 claims 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 claims 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 claims 1
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 claims 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims 1
- 238000010362 genome editing Methods 0.000 claims 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract 4
- 230000014616 translation Effects 0.000 abstract 4
- WBVHXPUFAVGIAT-UHFFFAOYSA-N [C].OCC(O)CO Chemical compound [C].OCC(O)CO WBVHXPUFAVGIAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 abstract 2
- 230000006837 decompression Effects 0.000 abstract 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 abstract 2
- 238000012356 Product development Methods 0.000 abstract 1
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract 1
Abstract
DC60 (20/06/55) การประดิษฐ์นี้เป็นการพัฒนาผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนและกรรมวิธีการใช้ผลิตภัณฑ์สำหรับการ แสดงออกยีนเพื่อผลิตโปรตีนเป้าหมายที่เหนี่ยวนำด้วยเมธานอล ที่ซึ่งผลิตภัณฑ์ดังกล่าวประกอบด้วยเซลล์ยีสต์ Pichia thermomethanolica สายพันธุ์ทนร้อน และพลาสมิดพาหะที่ประกอบด้วยส่วนสำคัญในการแสดงออกยีนคือโปรโมเตอร์ชนิด เหนี่ยวนำด้วยเมธานอลที่แยกได้จาก Pichia thermomethanolica โดยผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนตามการประดิษฐ์ นี้ สามารถควบคุมการแสดงออกของยีนเป้าหมายให้ผลิตโปรตีนได้ในช่วงอุณหภูมิกว้างตั้งแต่ 30 ถึง 45 องศาเซลเซียส ซึ่ง ลักษณะดังกล่าวมีความเหมาะสมกับการนำไปประยุกต์ใช้กับการผลิตโปรตีนเป้าหมายในระดับขยายขนาดซึ่งมีปัญหาความ ร้อนสะสมสูง จึงช่วยลดต้นทุนในการผลิตที่ไม่ต้องใช้ระบบหล่อเย็น นอกจากนี้ ยังมีข้อดีเพิ่มเติมอื่นๆ อาทิ โปรตีนลูกผสมที่ ผลิตได้สามารถผลิตออกนอกเซลล์เป็นโปรตีนหลักโดยที่ไม่มีโปรตีนของเซลล์เจ้าบ้านปะปน ทำให้ง่ายต่อการนำไปทำให้ บริสุทธิ์ในขั้นต่อไป และในกรณีที่โปรตีนเป้าหมายคือเอนไซม์ยังพบว่าผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนนี้ทำให้ได้เอนไซม์ ที่มีกิจกรรมสูง รวมทั้งยังช่วยให้สามารถผลิตโปรตีนได้ตั้งแต่ระยะดีรีเพรสชั่นที่ใช้แหล่งคาร์บอนที่เป็นกลีเซอรอลได้อีกด้วย การประดิษฐ์นี้เป็นการพัฒนาผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนและกรรมวิธีการใช้ผลิตภัณฑ์สำหรับการ แสดงออกยีนเพื่อผลิตโปรตีนเป้าหมายที่เหนี่ยวนำด้วยเมธานอล ที่ซึ่งผลิตภัณฑ์ดังกล่าวประกอบด้วยเซลล์ยีสต์ Pichia thermomethanolica สายพันธุ์ทนร้อน และพลาสมิดพาหะที่ประกอบด้วยส่วนสำคัญในการแสดงออกยีนคือโปรโมเตอร์ชนิด เหนี่ยวนำด้วยเมธานอลที่แยกได้จาก Pichia thermomethanolica โดยผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนตามการประดิษฐ์ นี้ สามารถควบคุมการแสดงออกของยีนเป้าหมายให้ผลิตโปรตีนได้ในช่วงอุณหภูมิกว้างตั้งแต่ 30 ถึง 45 องศาเซลเซียส ซึ่ง ลักษณะดังกล่าวมีความเหมาะสมกับการนำไปประยุกต์ใช้กับการผลิตโปรตีนเป้าหมายในระดับขยายขนาดซึ่งมีปัญหาความ ร้อนสะสมสูง จึงช่วยลดต้นทุนในการผลิตที่ไม่ต้องใช้ระบบหล่อเย็น นอกจากนี้ ยังมีข้อดีเพิ่มเติมอื่นๆ อาทิ โปรตีนลูกผสมที่ ผลิตได้สามารถผลิตออกนอกเซลล์เป็นโปรตีนหลักโดยที่ไม่มีโปรตีนของเซลล์เจ้าบ้านปะปน ทำให้ง่ายต่อการนำไปทำให้ บริสุทธิ์ในขั้นต่อไป และในกรณีที่โปรตีนเป้าหมายคือเอนไซม์ยังพบว่าผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนนี้ทำให้ได้เอนไซม์ ที่มีกิจกรรมสูง รวมทั้งยังช่วยให้สามารถผลิตโปรตีนได้ตั้งแต่ระยะดีรีเพรสชั่นที่ใช้แหล่งคาร์บอนที่เป็นกลีเซอรอลได้อีกด้วย
Claims (1)
1. ผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนเพื่อผลิตโปรตีนเป้าหมายที่เหนี่ยวนำด้วยเมธานอล ที่ซึ่งผลิตภัณฑ์ดังกล่าว ประกอบด้วย (1)เซลล์เจ้าบ้านยีสต์ Pichia thermomethanolica สายพันธุ์ทนร้อน ซึ่งใช้เมธานอลเป็นแหล่งคาร์บอน (2)พลาสมิดพาหะสำหรับการแสดงออกยีนเป้าหมายที่มีส่วนประกอบของลำดับเบสที่สำคัญต่อการแสดงออกของ ยีนในทิศทางจากปลาย 5\'ไปยังปลาย 3\'ดังนี้(ก)ลำดับเบสที่เป็นโปรโมเตอร์ที่ควบคุมการสร้างเอนไซม์ แอลกอฮอล์ออกซิเดสซึ่งคัดแยกได้จากยีสต์ Pichia thermomethanolica สายพันธุ์ทนร้อน และมีลำดับเบส ตามรูปที่ 1(ข)ลำดับเบสของแอลฟา-แฟกเตอร์ซีครีชั่นซิกนอลซึ่งเป็นส่วนนำโปรตีนออกนอกเซลล์ที่คัดแยก ได้จาก Saccharomyces cerevisiae(ค)ลำดับเบสที่เป็นตำแหน่งโคลนยีนแบบมัลติเปิล(multiple cloning sites,MCS)ซึ่งมีตำแหน่งของเอนไซม์ตัดจำเพาะ ได้แก่ Clal,Pstl,EcoRl,Pmll,Sfil,BsmBl,Asp7181, Kpnl,Xhol,Sacll,Notl และ Xbal เพื่อเป็นตำแหน่งตัดต่อยีนเป้าหมายที่ประมวลรหัสเป็นโปรตีนที่ต้องการ เข้ายังพลาสมิดพาหะ(ง)ลำดับเบสที่เป็นทรานสคริปชั่นเทอมิเนเตอร์ของเอนไซม์แอลกอฮอล์ออกซิเดสที่คัด แยกได้จาก Pichia pastoris (จ)ยีนต้านยาปฏิชีวนะซีโอซินสำหรับใช้คัดแยกเซลล์ที่มีพลาสมิดลูกผสม
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH11158A3 TH11158A3 (th) | 2016-02-11 |
| TH11158C3 true TH11158C3 (th) | 2016-02-11 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Naduthodi et al. | Comprehensive genome engineering toolbox for microalgae Nannochloropsis oceanica based on CRISPR-Cas systems | |
| Cui et al. | Homology‐independent genome integration enables rapid library construction for enzyme expression and pathway optimization in Yarrowia lipolytica | |
| Geier et al. | Compact multi-enzyme pathways in P. pastoris | |
| Li et al. | Enabling xylose utilization in Yarrowia lipolytica for lipid production | |
| Hwang et al. | Lipase‐catalyzed process for biodiesel production: Protein engineering and lipase production | |
| Teo et al. | Bacterial F ad R and synthetic promoters function as modular fatty acid sensor‐regulators in S accharomyces cerevisiae | |
| Mellitzer et al. | Synergistic modular promoter and gene optimization to push cellulase secretion by Pichia pastoris beyond existing benchmarks | |
| ES2740449T3 (es) | Célula de levadura | |
| Cao et al. | A genetic toolbox for metabolic engineering of Issatchenkia orientalis | |
| Madhavan et al. | Synthetic biology and metabolic engineering approaches and its impact on non-conventional yeast and biofuel production | |
| Liu et al. | Construction of a stable and temperature-responsive yeast cell factory for crocetin biosynthesis using CRISPR-Cas9 | |
| Bernat-Camps et al. | Enabling growth-decoupled Komagataella phaffii recombinant protein production based on the methanol-free PDH promoter | |
| US10612032B2 (en) | Inducible production-phase promoters for coordinated heterologous expression in yeast | |
| Lai et al. | Fine-tuned gene expression elements from hybrid promoter libraries in Pichia pastoris | |
| CN107326041A (zh) | 一种利用终止子调控酿酒酵母基因表达强度的方法 | |
| Wang et al. | The marine diatom Phaeodactylum tricornutum as a versatile bioproduction chassis: Current progress, challenges and perspectives | |
| Arjmand | Promoters in Pichia pastoris: a toolbox for fine-tuned gene expression | |
| BR112016006560A2 (pt) | molécula de ácido nucleico sintética, gene quimérico, vetor, método de transformação de células bacterianas, linhagem bacteriana recombinante, método de produção de promotores de gene e promotor de gene | |
| TH11158A3 (th) | ผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนเพื่อผลิตโปรตีนเป้าหมายที่เหนี่ยวนำด้วยเมธานอล และกรรมวิธีการใช้ผลิตภัณฑ์ดังกล่าว | |
| TH11158C3 (th) | ผลิตภัณฑ์สำหรับการแสดงออกยีนเพื่อผลิตโปรตีนเป้าหมายที่เหนี่ยวนำด้วยเมธานอล และกรรมวิธีการใช้ผลิตภัณฑ์ดังกล่าว | |
| Yuan et al. | Engineering an industrial Saccharomyces cerevisiae strain with the inulinase gene for more efficient ethanol production from Jerusalem artichoke tubers | |
| Ullah et al. | Recent developments in heterologous production of cellulases and xylanases using the Pichia pastoris expression system | |
| Felber et al. | Strains and molecular tools for recombinant protein production in Pichia pastoris | |
| Lv et al. | A simple procedure for protein ubiquitination detection in Saccharomyces cerevisiae: Gap1p as an example | |
| WO2014102103A3 (en) | Heterologous intron within a signal peptide |