TH10090A3 - "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ด้วยวิธีแอนติบอดีอะเรย์โดยใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ที่ห่อหุ้มด้วยลิโปโซม เป็นตัวรายงานผลซึ่งสัญญาณของผลสามารถอ่านได้ด้วยตาเปล่า" - Google Patents
"กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ด้วยวิธีแอนติบอดีอะเรย์โดยใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ที่ห่อหุ้มด้วยลิโปโซม เป็นตัวรายงานผลซึ่งสัญญาณของผลสามารถอ่านได้ด้วยตาเปล่า"Info
- Publication number
- TH10090A3 TH10090A3 TH1103000847U TH1103000847U TH10090A3 TH 10090 A3 TH10090 A3 TH 10090A3 TH 1103000847 U TH1103000847 U TH 1103000847U TH 1103000847 U TH1103000847 U TH 1103000847U TH 10090 A3 TH10090 A3 TH 10090A3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- listeria
- monocytogenase
- antibody
- slides
- liposome
- Prior art date
Links
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 title claims abstract 23
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 title claims abstract 23
- 241000186781 Listeria Species 0.000 title claims abstract 20
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims abstract 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract 5
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims abstract 5
- 108090000437 Peroxidases Proteins 0.000 claims abstract 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims abstract 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims 3
- LVSPDZAGCBEQAV-UHFFFAOYSA-N 4-chloronaphthalen-1-ol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=CC=C(Cl)C2=C1 LVSPDZAGCBEQAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 claims 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 claims 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 claims 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims 2
- 229940088598 Enzyme Drugs 0.000 claims 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 1
- IHTAVMHKEISGKU-UHFFFAOYSA-N N[SiH3].N[SiH3] Chemical compound N[SiH3].N[SiH3] IHTAVMHKEISGKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims 1
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 claims 1
- 229940072417 Peroxidase Drugs 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 1
- 230000000903 blocking Effects 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 claims 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 claims 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 claims 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims 1
- 239000004544 spot-on Substances 0.000 claims 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 abstract 2
- 230000000051 modifying Effects 0.000 abstract 2
Abstract
DC60 (13/06/56) การประดิษฐ์นี้ได้พัฒนากรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ด้วยวิธีแอนติบอดีอะเรย์ที่ สามารถอ่านสัญญาณผลได้ด้วยตาเปล่า ซึ่งเป็นทางเลือกหนึ่งในการตรวจเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส แบบ หลายตัวอย่างได้ในครั้งเดียว โดยได้ทำการปรับขยายสัญญาณตัวรายงานผลด้วยการติดฉลากแอนติบอดีด้วย ลิโปโซมที่ห่อหุ้มเอนไซม์ฮอร์สแรดีสเปอร์ออกซิเดส เพื่อใช้ในขั้นตอนการตรวจสัญญาณจุดของแอนติบอดี อะเรย์ ซึ่งการประดิษฐ์นี้สามารถขยายสัญญาณได้มากขึ้นจนกระทั่งสามารถมองเห็นสัญญาณผลได้ด้วยตาเปล่า ซึ่งจากเดิมการทำแอนติบอดีอะเรย์ต้องอ่านด้วยเครื่องเท่านั้น จึงช่วยให้การใช้เทคนิคแอนติบอดีอะเรย์ในการ ตรวจหาเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส สะดวกและรวดเร็วขึ้น รวมทั้งราคาถูกลง และยังสามารถทำการตรวจ นอกสถานที่ได้ การประดิษฐ์นี้ได้พัฒนากรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ด้วยวิธีแอนติบอดีอะเรย์ที่ สามารถอ่านสัญญาณผลได้ด้วยตาเปล่า ซึ่งเป็นทางเลือกหนึ่งในการตรวจเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส แบบ หลายตัวอย่างได้ในครั้งเดียว โดยได้ทำการปรับขยายสัญญาณตัวรายงานผลด้วยการติดฉลากแอนติบอดีด้วย ลิโปโซมที่ห่อหุ้มเอนไซม์ฮอร์สแรดีสเปอร์ออกซิเดส เพื่อใช้ในขั้นตอนการตรวจสัญญาณจุดของแอนติบอดี อะเรย์ ซึ่งการประดิษฐ์นี้สามารถขยายสัญญาณได้มากขึ้นจนกระทั่งสามารถมองเห็นสัญญาณผลได้ด้วยตาเปล่า ซึ่งจากเดิมการทำแอนติบอดีอะเรย์ต้องอ่านด้วยเครื่องเท่านั้น จึงช่วยให้การใช้เทคนิคแอนติบอดีอะเรย์ในการ ตรวจหาเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส สะดวกและรวดเร็วขึ้น รวมทั้งราคาถูกลง และยังสามารถทำการตรวจ นอกสถานที่ได้
Claims (6)
1. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ด้วยวิธีแอนติบอดีอะเรย์ที่สามารถอ่านสัญญาณของ ผลได้ด้วยตาเปล่า ที่มีลักษณะเฉพาะคือ มีการใช้แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโต จิเนส ซึ่งติดฉลากด้วยลิโปโซมที่ห่อหุ้มเอนไซม์ฮอร์สแรดีสเปอร์ออกซิเดสเป็นตัวรายงานผลสัญญาณการ จับกันระหว่างเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ในตัวอย่างกับแอนติบอดีปฐมภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ซึ่งติดอยู่บนวัสดุรองรับ
2. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่งกรรมวิธีมีขั้นตอนดังนี้ (1) การตรึงแอนติบอดีปฐมภูมิบนวัสดุรองรับ (spotting) ; นำแอนติบอดีปฐมภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ละลายในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับตรึงแอนติบอดีปฐมภูมิ ได้แก่ ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (phosphate buffered saline, PBS) พีเอช 7.2 จากนั้นจุด (spot) ลงบนแผ่นสไลด์ที่เคลือบด้วยพอลิ-แอล- ไลซีน (poly-L-lysine) หรือสารเคลือบชนิดอื่น ด้วยเครื่องพิมพ์ไมโครอะเรย์อัตโมมัติ นำไปเก็บใน ตู้ควบคุมความชื้นที่ 30-35 เปอร์เซ็นต์ อุณภูมิ 23-25 องศาเซลเซียส เป็นเวลาประมาณ 12-16 ชั่วโมง (2) การป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจง (blocking) ; โดยการเติมสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสม สำหรับการป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจงลงบนพื้นแผ่นสไลด์ ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ 3 เปอร์เซ็นต์ นมผงขาดมันเนย (skim milk) ในบัฟเฟอร์พีบีเอส (สารละลายป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะ เจาะจง, blocking solution) ลงบนพื้นแผ่นสไลด์ วางไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที (3) การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่มีทวีน 20 (Tween20) อยู่ที่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดยเขย่า เบาๆ และถ้าต้องการเก็บแผ่นสไลด์ไว้ทดสอบทำได้โดยนำแผ่นสไลด์ไปทำให้แห้งและเก็บไว้ใน อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส สามารถเก็บได้เป็นระยะเวลาอย่างน้อย 2 เดือน (4) การใส่สารละลายตัวอย่างที่ต้องการตรวจสอบการปนเปื้อนของเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ; โดยใส่ สารละลายตัวอย่างที่ละลายอยู่ใน 1 เปอร์เซ็นต์ นมผงขาดมันเนย ปริมาตร 20 ไมโครลิตร ทั้งไว้ที่ อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที (5) การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ สารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่มีทวีน 20 อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดย เขย่าเบาๆ (6) การตรวจหาการจับกันระหว่างเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ในตัวอย่างกับแอนติบอดีปฐมภูมิ ; โดยใส่ แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ที่ติดฉลากด้วยลิโปโซมที่ห่อหุ้มเอนไซม์ ฮอร์สแรดีสเปอร์ออกซิเดส ซึ่งละลายใน 1 เปอร์เซ็นต์ นมผงขาดมันเนย ปริมาตร 20 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที (7) การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ สารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่มีทวีน 20 อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที และ สารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ไม่มีทวีน 20 จำนวน 1 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดยเขย่าเบาๆ (8) การตรวจผลสัญญาณจับกันระหว่างแอนติบอดีทุติยภูมิกับเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ด้วย สับสเตรทที่จำเพาะต่อเอนไซม์ฮอร์สแรดีสเปอร์ออกซิเดส ; โดยเติมสารละลาย 4-คลอโร-1-แนฟทอล (4-คลอโร-1-แนฟทอลที่มีความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ปริมาณ 0.0015 เปอร์เซนต์ และเมทานอลปริมาณ 17 เปอร์เซนต์) เพื่อเป็นสับสเตรท ด้วยระยะเวลา 15 นาที (9) การอ่านผลสัญญาณ; โดยติดตามการเกิดตะกอนสีดำเทาบนผิวไลด์ ได้ด้วยตาเปล่า
3. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ตามข้อถือสิทธิ 1 หรือ 2 ที่ซึ่งลิโปโซมที่ห่อหุ้มเอนไซม์ ฮอร์สแรดีสเปอร์ออกซิเดส เลือกได้จากลิโปโซมในรูปแบบ LMC1000 หรือ LMC1000FT/Ex หรือ LMC1000 Ex/FT/Ex
4. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่งสารเคลือบชนิดอื่นเลือกได้จาก ไนโตรเซลลูโลส (nitocellulose) หรือ อะมิโนไซเลน (amino silane) หรือ แอลดีไฮด์ (aldehyde)
5. แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ซึ่งติดฉลากด้วยลิโปโซมที่ห้อหุ้มเอนไซม์ ฮอร์สแรดีสเปอร์ออกซิเดส
6. แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ตามข้อถือสิทธิ 5 ที่ซึ่งลิโปโซมที่ห่อหุ้ม เอนไซม์ฮอร์สแรดีสเปอร์ออกซิเดส เลือกได้จากลิโปโซมในรูปแบบ LMC1000 หรือ LMC1000FT/Ex หรือ LMC1000 Ex/FT/Ex
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH10090C3 TH10090C3 (th) | 2015-07-17 |
| TH10090A3 true TH10090A3 (th) | 2015-07-17 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11156602B2 (en) | Combination product for detecting target marker | |
| Vidal et al. | An electrochemical immunosensor for ochratoxin A determination in wines based on a monoclonal antibody and paramagnetic microbeads | |
| US20220299502A1 (en) | Reagent for detecting target substance containing sugar chain, detection method, carrier used in detection of target substance containing sugar chain, and method for manufacturing said carrier | |
| KR20150065856A (ko) | 포스피노트리신-n-아세틸-트랜스퍼라제에 대한 저항성을 부여하는 효소에 대한 모노클로날 항체 및 검출 방법 | |
| TWI224674B (en) | Immunoassay using insoluble magnetic support particles | |
| CN103597089A (zh) | 用于酶介导的信号放大的新方法 | |
| US4684609A (en) | Method and substance for the enhanced labelling of cellular material | |
| Abbott et al. | Immunohistochemical double‐staining for Ah receptor and ARNT in human embryonic palatal shelves | |
| TH10090A3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ด้วยวิธีแอนติบอดีอะเรย์โดยใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ที่ห่อหุ้มด้วยลิโปโซม เป็นตัวรายงานผลซึ่งสัญญาณของผลสามารถอ่านได้ด้วยตาเปล่า" | |
| TH10090C3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ ลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส ด้วยวิธีแอนติบอดีอะเรย์โดยใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ที่ห่อหุ้มด้วยลิโปโซม เป็นตัวรายงานผลซึ่งสัญญาณของผลสามารถอ่านได้ด้วยตาเปล่า" | |
| IL121534A (en) | Immunogenic diacyl hydrazine compounds, antibodies formed against them and immunoassay methods for measuring said immunogens | |
| Bhattacharya et al. | A novel signal amplification technology based on catalyzed reporter deposition and its application in a Dot-ELISA with ultra high sensitivity | |
| Walls et al. | Detection of mast cells and basophils by immunohistochemistry | |
| CN101600805A (zh) | 与细胞膜上的分子相互作用的化合物的检测方法 | |
| Renneker et al. | Field validation of a competitive ELISA for detection of Theileria annulata infection | |
| Bratthauer | Overview of antigen detection through enzymatic activity | |
| Noda et al. | Determination of ABO blood grouping from human oral squamous epithelium by the highly sensitive immunohistochemical staining method EnVision+ | |
| JP2010044058A (ja) | 酵素標識抗体を用いた酵素免疫測定方法 | |
| Rak et al. | Double labeling fluorescent immunocytochemistry | |
| Moriya et al. | Construction of an Immunochromatographic Determination System for N1, N12‐diacetylspermine | |
| Marttila et al. | Practical aspects of immunomicroscopy on plant material | |
| Dewey | Development of immunoassays for the detection and quantification of fungi | |
| JPS62247258A (ja) | 分析素子 |