SU955571A1 - Vaccine tf-130 (k) against trichophytosis of cattle and method for treatment and prophylaxis of trichophytosis of cattle - Google Patents

Vaccine tf-130 (k) against trichophytosis of cattle and method for treatment and prophylaxis of trichophytosis of cattle Download PDF

Info

Publication number
SU955571A1
SU955571A1 SU802894952A SU2894952A SU955571A1 SU 955571 A1 SU955571 A1 SU 955571A1 SU 802894952 A SU802894952 A SU 802894952A SU 2894952 A SU2894952 A SU 2894952A SU 955571 A1 SU955571 A1 SU 955571A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
cattle
dose
months
culture
vaccine
Prior art date
Application number
SU802894952A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
А.Х. Саркисов
Л.М. Яблочник
С.В. Петрович
Л.И. Никифоров
И.И. Жарков
К.П. Летягин
Х.А. Джилавян
В.Г. Мельник
Original Assignee
Всесоюзный Ордена Ленина Институт Экспериментальной Ветеринарии
Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Всесоюзный Ордена Ленина Институт Экспериментальной Ветеринарии, Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов filed Critical Всесоюзный Ордена Ленина Институт Экспериментальной Ветеринарии
Priority to SU802894952A priority Critical patent/SU955571A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU955571A1 publication Critical patent/SU955571A1/en

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

1. Вакцина против трихофитии круп|1ого рогатого скота, сЪдержаща  анти ен из живой культуры Trichophyton fariforme, защитную среду, включающую уелатин, сахарозу и воду, отличающа с  тем, что, с целью повышени  имМуногенности, в качестве антигена используют живую культуру Trichophyton fariforme 130 Л при концентрации микроконидий указанной культуры гриба 250-650 млн,на 1 мл защитной среды следующего состава,мае.%: Сахароза15-30 Желатин2,0-8,0 ВодаОстальное 2.Вакцина по п.1, отличающа с  тем, что она содержит- антибиотики на 1 МП вакцины, ед; Пенициллин50-100 Стрептомицин 50-100 3.Способ профилактики и лечени  трихофитии крупного рогатого скота включающий внутримьппечное введение антигенного препарата из живой культуры Trichophyton fariforme в область § крупа двукратно с интервалом 1014 дней, отличающийс  тем, что, с целью повышени  эффективности , в качестве антигенного препарата используют живую культуру Trichophyton farifortne 130 Л, при этом дл  профилактики молодн ку крупного рогатого скота в возрасте до 5 мес цев препарат, ввод т в дозе 1-2 мл, а старше 5 мес цев в дозе 2-4 мл, а дл  лечени  препарат ввод т молодн ку крупного рогатого скота в возрас- те до 5 мес цев в дозе 2-4 мл, а стар- ше 5 мес цев в дозе 4-8 мп.1. Vaccine against cattle trichophytosis | first cattle, containing anti-en from living culture Trichophyton fariforme, protective environment including weelatin, sucrose and water, characterized in that, in order to increase immunogenicity, live culture Trichophyton fariforme 130 is used as an antigen. L when the concentration of microconidia of the specified culture of the fungus is 250-650 million, per 1 ml of protective medium of the following composition, May.%: Sucrose15-30 Gelatin2.0-8.0 Water Remaining 2. Vaccine according to claim 1, characterized in that it contains - antibiotics for 1 MP vaccine, units; Penicillin 50-100 Streptomycin 50-100 3. A method for the prevention and treatment of cattle trichophytosis, including intramuscular administration of an antigen preparation from a live culture of Trichophyton fariforme in the area of croup twice with an interval of 1014 days, characterized in that, in order to increase efficiency, as antigenic Trichophyton farifortne 130 L is used as a live culture, while for the prevention of young cattle under 5 months of age, the drug is administered in a dose of 1-2 ml, and older than 5 months in a dose of 2-4 ml. prepar Young cattle are introduced at an age of up to 5 months at a dose of 2-4 ml, and older than 5 months at a dose of 4-8 mp.

Description

ЙЗбёретение относитс  к области ветеринарной микологии, в частности, к вакцинам против трихофитии (стригУЩё1 о лиша ) крупного рогатого ckota,The elimination relates to the field of veterinary mycology, in particular, to the vaccine against trichophytosis (shearbite) of bovine ckota,

Известны препарат ТФ-130 ВИЭВ и вакцина ЛТФ-130 против трихофитии крупного рогатого скота, включающие айтиген из живой иммуногенной культуры Trichophyton fariforme штамм 130, разбавитель - физиологический раствор или дистиллированную воду, антибиотики - пенициллин и стрептомицин. ЛТФ-130 включает дополнительно напол нитель: сахарозу, желатин и воду tl,2The preparation TF-130 VIEV and the LTP-130 vaccine against cattle trichophytia are known, including Aytigen from live immunogenic culture Trichophyton fariforme strain 130, diluent - saline or distilled water, antibiotics - penicillin and streptomycin. LTP-130 includes an additional filler: sucrose, gelatin and water tl, 2

Препарат ТФ-130 и вакцину ЛТФ-130 ввод т внутримьшечно в дозе 5-20 мл, двукратно с интервалом 10-14 дней.The drug TF-130 and the LTP-130 vaccine are administered intramuscularly in a dose of 5-20 ml, twice with an interval of 10-14 days.

Недостатками препарата ТФ-130 lj . вл ютс  короткий срок его годности (4 мес ца) и жесткий температурньй режим хранени .The disadvantages of the drug TF-130 lj. are short shelf life (4 months) and hard temperature storage.

Недостатками вакцины. ЛТФ-130 2  вл ютс  введение большого объема иммунизирующей дозы (5-20 мл с содер , жанием в 1 мл готовой к применению вакцины 4-10 млн, жизнеспособных микроконидий), необходимость выпуска в св зи с этим большой массы рартворйтел  (на 1000 доз от 5 до 20 л) и относительно короткий cpojc годности вакцины 12 мес цев.The disadvantages of the vaccine. LTP-130 2 is the administration of a large volume of immunization dose (5-20 ml with 4-10 million vaccine ready for use, viable microconidia) in 1 ml, the need to release in connection with this a large mass of sterilizer (per 1000 doses from 5 to 20 l) and a relatively short shelf life of 12 months.

Вакцина ЛТФ-130 р2 прин та нами за прототип.The BLTP-130 p2 vaccine is taken as a prototype.

Цель изобретени  - повьщ1ение инмуногенности вакцины увеличение выхда жизнеспособных микроконидий и снижение объема вводимой дозы.The purpose of the invention is to increase the immunogenicity of the vaccine by increasing the output of viable microconidia and reducing the volume of the injected dose.

Дл  Достижени  указанной цели, она содержит антиген Trichophyton fariforme . 130 Л при концентрации микроконий указанной культуры гриба 250650 млн, на 1 мл защитной среды следующего состава, мас.%:To achieve this goal, it contains the Trichophyton fariforme antigen. 130 L when the concentration of microconium specified culture of the fungus 250650 million, 1 ml of protective medium of the following composition, wt.%:

Сахароза15-30 Sucrose15-30

Желатин2,0-8,0Gelatin2.0-8.0

ВодаОстальноеWaterEverything

Дл  достижени  цели вакцина также содержит антибиотики в расчете на 1 мл вакцины, ед:To achieve the goal, the vaccine also contains antibiotics per 1 ml of vaccine, units:

Пенициллин 50-100 Стрептомицин 50-100 , Дл  повьтени  зффективности способа профилактики и лечени  трихофитии включающего внутримьппечное введение антигенного препарата из живой купьч туры Trichophyton fariforme в област крупа двукратно с интервалом 10-14Penicillin 50-100 Streptomycin 50-100, To improve the effectiveness of a method for the prevention and treatment of trichophytosis involving intramuscular administration of an antigenic preparation from a live Trichophyton fariforme package in the croup region twice with an interval of 10-14

дней,в качестве антигенного препарат используют живую культуру Trichophyton fariforme 130 этом дл  профилактики молодн ку крупного рогатого скота в возрасте до 5 мес цев препарат ввод т в дозе 1- мл; а старше 5 мес цев - в дозе 2-4 мл, а дл  лечени  препарат ввод т молодн ку крупного рогатого скота в возрасте до 5 мес цев в дозе 2-4 мл, а старше 5 мес цев в дозе 4-8 мл.days, a living culture of Trichophyton fariforme 130 is used as an antigenic drug for the prevention of young cattle under 5 months of age; the drug is administered at a dose of 1 ml; and older than 5 months at a dose of 2-4 ml, and for treatment the drug is administered to young cattle under the age of 5 months at a dose of 2-4 ml, and older than 5 months at a dose of 4-8 ml.

Пример. Т.fariforme ТФ-130 получена в процессе длительного ступенчатого отбора по признаку спорообразовани  и облапает слепуюпими свойствами.Example. T. fariforme TF-130 was obtained in the process of long-term stepwise selection on the basis of sporulation and possesses blind properties.

Культурально-морфологические свойства.Cultural and morphological properties.

Мицелий, бесцветный, септированный , ровньй, иногда ракеткообразный от 2 до 5 MkM в диаметре. Микроконидий овальной, округлой или грушевидной формы, в диаметре 1-2 мкм, в длину 2-4 мкм. Артроспоры образуютс  редко, располагаютс  цепочками, имею круглую или почти четырехугольную форму. Хламидоспоры образзтотс  редко обычно в старых переросших культура Образующиес  чрезвычайно редко микро конидии веретенообразной формы имеют 3-5 перегородок, диаметр 5-8 мкм, длину 30-50 мкм.Mycelium, colorless, septic, even, sometimes raciform from 2 to 5 MkM in diameter. Microconidium is oval, round or pear-shaped, 1-2 µm in diameter, 2-4 µm in length. Artrospores are rarely formed, have chains, and have a round or almost quadrangular shape. Chlamydospores specimens rarely usually in old culture overgrown. The resulting extremely rare micro conidia of a spindle-shaped form have 3-5 partitions, a diameter of 5-8 microns, a length of 30-50 microns.

Культура Т.fariforme .ТФ-130 Л вьфащиваетс  на сусло-агаре. Дл  приготовлени  сусло-агара используют пивное неохмеленное сусло с кислотностью 1,6-2,4 (оптимум 1,9), содержанием сахара 6-10% (оптимум 7%) по Баплингу, рН после стерилизации 6,2-7,0 (оптимум 6,8).The T.fariforme .TF-130L culture is infused on wort agar. For the preparation of wort agar, a beer non-boiled wort is used with an acidity of 1.6-2.4 (optimum 1.9), sugar content 6-10% (optimum 7%) according to Bapling, pH after sterilization 6.2-7.0 ( optimum 6.8).

Культуру выращивают при 25-30 С (оптимум 26 С) в течение 10-15 (оптимум 12) дней, после чего используют дл  приготовлени  вакцины.The culture is grown at 25-30 ° C (optimum 26 ° C) for 10-15 (optimum 12) days, after which it is used to prepare a vaccine.

Сусло-агар. Колони  бела , пушиста , кремовата , с кратерообразным углублением в центре, хорошо выражена множественна  .концентрическа  зональность , плотно врастает в агар, пигмента не образует.Wort agar. The colonies are white, fluffy, creamy, with a crater-shaped depression in the center, well-pronounced, multiple. Concentrated zonality, densely growing into agar, does not form a pigment.

Морковно-картофельньй агар. Колони  плоска , бела , в центре с желтоватым оттенком, воздушный мицелий развит средне, обратна  сторона в центре желта .Carrot-potato agar. Colony is flat, white, in the center with a yellowish tinge, aerial mycelium is developed moderately, the reverse side in the center is yellow.

Агар Григораки. Колони  бела , плоска , по периферии паутиниста , обратна  сторона с желтоватым оттенком , вокруг колонии имеетс  широка  зона осветлени . Агар дл  Пенициллиум. Колони  бе ла , плоска , слабо складчата  в це ре, воздушный мицелий развит слабо растущий край паутинистый. Спорообразование. На 10-15-й де вьфащивани  культуры T.fariforme ТФ-130 Л на сусло агаре концентраци  микроконидий в гомогенате 350650 млнУмп, выход вакцины с 1 матра ца 7-14 л. Антигенные свойства. При иммунизации животных вызьшает образование специ чных агглютининов. Титр сьгоо роток иммунизированных тел т по РА 1:80-1:1280. Вирулентность. При нанесении на скарифицированную кожу животного вызъшает слабое заражение на месте внесени  культуры, без образовани  на волосе характерного дл  вирулент ного штамма чехлика; СамовЫздоровление через 20-30 дней. Вторичные очаги не образуютс . Не опасен дл  заражени  человека при работе со штаммом, опасен дл  животных, наход щихс  в контакте с привитым, Реактогенность. Введение живой культуры животным не приводит к кли ническому про влению болезни, иэменейи м в общем состо нии:повышение температуры на месте введени , припухлость, общее повьшхение температурь тела. Иммуногенна  активность. Культур T.fariforme 130 Л при применении на крупном рогатом скоте в цел х иммунизации создает напр женный иммунитет . Иммунитет у животных спуст  20-30 дней после введени  вакцины. Продолжительность иммунитета не ме-. нее 10 лет.. Перед употреблением вакцину ресуспензируют в стерильном физиологическом растворе из расчета 1 доза вакцит ны на 1 мл растворител , ввод т внутримьш1ечно в область крупа в дозе 1-2 МП дл  профилактической цели и в дозе 2-4 МП дл  лечебной.цели, двукратно с интервалом 10-14 дней. Вакцина из данного Штамма с положительными результатами апробирована на 30000000 поголовь .крупного рогатого скота в союзных республиках страны.1 . Вакцина обеспечива.ет профилактику и лечение трихофитии крупного рогатого скота. Благодар  использованию данной культуры в вакцине в 3 раза уменьшд.етс  расход сырь  дл  выращивани  культуры, в 3-5 раз сокращаетс  технологический цикл, выход вакцины увеличиваетс  в 3-5 раз, жизнеспособность мнкроконидий увеличиваетс  в 3-5 раз. В 5 раз сокращаетс  выпуск растворител  и объем стеклотары. Применение вакцины уменьшает затраты времени на обработку одного животного, в 5 раз сокращает потребность в растворителе (на 1 дозу 1-4. мп), что снижает затраты на его изготовление и транспортировку. Применение данной вакцины в ветеринарной практике позволит ликвидировать- в стране заболевание крупного рогатого скота трихофитией.Agar Grigoraki. The colonies are white, flat, on the periphery of the cobweb leaf, the back side is yellowish, there is a wide zone of clarification around the colony. Agar for Penicillium. Colony is white, flat, weakly folded in the center, aerial mycelium developed weakly growing cobwebby margin. Sporulation At the 10–15 th stage of the T.fariforme TF-130 L culture, on the wort agar, the concentration of microconidia in the homogenate was 350,650 million Ump, the output of the vaccine from 1 mat was 7–14 l. Antigenic properties. When animals are immunized, the formation of specific agglutinins occurs. The titer of the immunized bodies is RA 1: 80-1: 1280. Virulence. When applied to the scarified skin of an animal, a mild infection occurs at the place where the culture is applied, without forming a cap characteristic of the virulent strain of the hair; Self Recovery after 20-30 days. Secondary foci are not formed. Not dangerous for human infection when working with a strain; dangerous for animals in contact with the vaccinated, Reactogenicity. The introduction of a live culture to animals does not lead to the clinical manifestation of the disease, and isemenei in general condition: an increase in temperature at the site of administration, swelling, and overall body temperature. Immunogenic activity. T.fariforme 130 L cultures when applied to cattle for immunization creates a tense immunity. Immunity in animals 20-30 days after vaccine administration. The duration of immunity is not me-. It is 10 years old .. Before use, the vaccine is resuspended in sterile saline at the rate of 1 dose of vaccine per 1 ml of solvent, administered intramuscularly in the croup area at a dose of 1-2 MP for a prophylactic purpose and at a dose of 2-4 MP for a treatment. , twice with an interval of 10-14 days. The vaccine from this Strain with positive results was tested on 30,000,000 large cattle in the Union republics of the country.1. The vaccine provides for the prevention and treatment of cattle trichophytia. Due to the use of this culture in the vaccine, a 3-fold decrease in the raw material consumption for growing the crop, a 3-5-fold reduction in the production cycle, an increase in the vaccine output by 3-5 times, the viability of microcranidia increases by 3-5 times. The solvent release and the volume of glass containers are reduced 5 times. The use of the vaccine reduces the time spent on processing one animal, 5 times reduces the need for a solvent (1 dose of 1-4. MP), which reduces the cost of its manufacture and transportation. The use of this vaccine in veterinary practice will allow the elimination of cattle disease trichophytosis in the country.

Claims (3)

1. Вакцина против трихофитии крупного рогатого скота, содержащая античен из живой культуры Trichophyton fariforme, защитную среду, включающую желатин, сахарозу й воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения иммуногенности, в качестве антигена используют живую культуру Trichophyton fariforme 130 Л при кон центрации микроконидий указанной культуры гриба 250-650 млн.на 1 мл защитной среды следующего состава,мае.%:1. A vaccine against cattle trichophytosis containing antichine from the live culture of Trichophyton fariforme, a protective environment including gelatin, sucrose water, characterized in that, in order to increase immunogenicity, the living culture of Trichophyton fariforme 130 L is used as antigen at a concentration microconidium of the indicated culture of the fungus 250-650 million per 1 ml of protective medium of the following composition, May.% Сахароза 15-30 'Sucrose 15-30 ' Желатин 2,0-8,0Gelatin 2.0-8.0 Вода ОстальноеWater Else 2. Вакцина по п.1, отличаю щаяся тем, что она содержит- антибиотики на 1 мп вакцины, ед:2. The vaccine according to claim 1, characterized in that it contains antibiotics per 1 megapixel vaccine, unit: Пенициллин 50-100Penicillin 50-100 Стрептомицин 50-100Streptomycin 50-100 3. Способ профилактики и лечения трихофитии крупного рогатого скота^ включающий внутримышечное введение антигенного препарата из живой культуры Trichophyton fariforme в область § крупа двукратно с интервалом 1014 дней, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности, в качестве антигенного препа рата используют живую культуру Tricho- S phyton fariforme 130 Л, при этом для “ профилактики молодняку крупного рога- того скота в возрасте до 5 месяцев препарат, вводят в дозе 1-2 мл, а старше 5 месяцев ·< в дозе 2-4 мл, а для лечения препарат вводят молодняку крупного рогатого скота в возрасте до 5 месяцев в дозе 2-4 мл, а старше 5 месяцев в дозе 4-8 мл.3. A method for the prevention and treatment of cattle trichophytosis ^ involving intramuscular administration of an antigenic preparation from a live culture of Trichophyton fariforme in the area of § croup twice with an interval of 1014 days, characterized in that, in order to increase efficiency, Tricho live culture is used as an antigenic preparation - S phyton fariforme 130 L, while for “prophylaxis of young cattle under the age of 5 months, the drug is administered in a dose of 1-2 ml, and older than 5 months · <in a dose of 2-4 ml, and for treatment introduce young large ro atogo livestock before the age of 5 months in a dose of 2.4 ml, and over 5 months in a dose of 4-8 ml.
SU802894952A 1980-03-28 1980-03-28 Vaccine tf-130 (k) against trichophytosis of cattle and method for treatment and prophylaxis of trichophytosis of cattle SU955571A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU802894952A SU955571A1 (en) 1980-03-28 1980-03-28 Vaccine tf-130 (k) against trichophytosis of cattle and method for treatment and prophylaxis of trichophytosis of cattle

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU802894952A SU955571A1 (en) 1980-03-28 1980-03-28 Vaccine tf-130 (k) against trichophytosis of cattle and method for treatment and prophylaxis of trichophytosis of cattle

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU955571A1 true SU955571A1 (en) 1984-11-07

Family

ID=20883079

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU802894952A SU955571A1 (en) 1980-03-28 1980-03-28 Vaccine tf-130 (k) against trichophytosis of cattle and method for treatment and prophylaxis of trichophytosis of cattle

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU955571A1 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994015632A1 (en) * 1992-12-30 1994-07-21 Vserossiisky Gosudarstvenny Nauchno-Issledovatelsky Institut Kontrolya, Standartizatsii I Sertifikatsii Veterinarnykh Preparatov (Vghki) Vaccine against trichophytosis in animals
LT3985B (en) 1994-04-20 1996-06-25 Vserossiisky Gnii Kontrolya St Vaccine against animals trichophytosis
MD939G2 (en) * 1994-07-12 1998-02-28 Institutul De Cercetari Stiintifice De Control, Standardizare Si Certificare A Preparatelor Veterinare Din Rusia Vaccine against animal trichophytosis

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Л. Авторское свидетельство СССР f268593, кл. С 12 К 5/00, 1970. 2. Патент GB №1330240, кл. А 5 В, 1973 (прототип). *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994015632A1 (en) * 1992-12-30 1994-07-21 Vserossiisky Gosudarstvenny Nauchno-Issledovatelsky Institut Kontrolya, Standartizatsii I Sertifikatsii Veterinarnykh Preparatov (Vghki) Vaccine against trichophytosis in animals
LT3985B (en) 1994-04-20 1996-06-25 Vserossiisky Gnii Kontrolya St Vaccine against animals trichophytosis
MD939G2 (en) * 1994-07-12 1998-02-28 Institutul De Cercetari Stiintifice De Control, Standardizare Si Certificare A Preparatelor Veterinare Din Rusia Vaccine against animal trichophytosis

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4438097A (en) Coccidiosis vaccines
PT956042E (en) Mycosis vaccines
US6723328B2 (en) Method for producing a ringworm vaccine
SU955571A1 (en) Vaccine tf-130 (k) against trichophytosis of cattle and method for treatment and prophylaxis of trichophytosis of cattle
KR100262980B1 (en) Dermatomycosis vaccine
US4279893A (en) Vaccine against Newcastle fowl disease, method for preparing and use thereof
US4386065A (en) Vaccine against EAE
SU548947A1 (en) Vaccine for specific prophylaxis and therapy of horse trichophytosis
US3479430A (en) Indirect passive immunization against transmissible gastroenteritis virus in nursing piglets at birth by active immunization of sows prior to farrowing with transmissible gastroenteritis vaccine and method of producing the same
Rimler et al. A growth medium for the production of a bacterin for immunization against infectious coryza
US3422188A (en) Tissue culture hog cholera vaccine
US4312947A (en) Process for the preparation of a vaccine against panleucopenia of the cat
KR20010098698A (en) Combined inactivated vaccine for iridovirus infectious diseases, streptococcus infectious diseases and combined diseases thereof in fishes
US3585108A (en) Transmissible gastroenteritis vaccines and methods of producing the same
KR101210082B1 (en) Vaccine composition for swine polyserositis and manufacturing method thereof
RU2192885C2 (en) Method of preparing vaccine for prophylaxis and treatment of dermatophytosis in domestic and laboratory animals
RU2018321C1 (en) Vaccine against trychophytosis of animals
RU2018322C1 (en) Vaccine against swine erysipelas
RU2084240C1 (en) Vaccine &#34;microderm&#34; for dermatophytosis control in animals
RU2013445C1 (en) Strain of trichophyton mentagrophytes used for preparation of animal trichophytosis vaccine
DE2437166C3 (en) Medicines for interferon-sensitive, viral-related infectious diseases
RU1066074C (en) Pseudomonose vaccine for fur-bearing animals, mainly, minks and method of producing the same and method of its prophylaxis
RU2154495C2 (en) Inactivated emulsion-vaccine against salmonellosis in calves
RU2122428C1 (en) Method of prophylaxis of strangles in horses
DE2165401A1 (en) Combination dead vaccine