SU941898A1 - Способ количественного определени @ -аланина - Google Patents

Description

(5) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ fi -АЛАНИНА

1

Изобретение относитс  к количест-венному определению / -аланина, примен емого в производстве аминокислот, кроме того, р)-апанин используют в медицине, биологии и биохимии, а точность определени  / -аланина способствует чистоте конечного продукта.

Известны полиграфические и спектро ({ютометрические методы определени  Р -аланина . ,о

Однако указанные методы мало селективны и требуют сложного оборудовани  .

Известен также титриметрический способ определени  р-аланина гйдро- 5 окисью натри  31.

Способ ограничен анализом чистого {Ь-аланина, однако в смес х с сол ми аммони , сильными основани ми и вторичными и третичными аминокислотами 20 определение невозможно, так как названные примеси искажают результаты анализа.

Наиболее близким по технической

сущности к предлагаемомуЯвл етс  способ количественного определени  р-аланина путем потенциометрического титровани  аминогруппы в среде смеси ацетонитрила с уксусной кислотой в объемных соотношени х 5:Т раствором хлорной кислоты в метилэтилкетоне . Проведение определений согласно известному способу заключаетс  в следующем: навеску -аланина 0,03-0,04 г раствор ют в уксусной кислоте, добавл ют ацетонитрил до объемного соотношени  1:5, погружают пару электродов (стеко нный и каломельный ) , потенциометрически титруют 0,1 и. раствором хлорной кислоты в метилэтилкетоне до по влени  отчетливого скачка потенциала на кривой титровани . Относительна  ошибка определени  (-аланина составл ет ,1. Определению не подлежат смеси р-аланина с вторичными и третичными аминокислотами, аммиаком, щелочами и кислотами. Недостатками известного способа  вл ютс  низка  селективность из-за невозможности применени  способа дл  определени  -аланина в присутст вии вторичных и третичных аминокислот , аммиака, щелочей и сильных кислот , так как названные соединени  вступают в реакцию с титрантом или р-аланином. Цель изобретени  - повышение селективности определени . Поставленна  цель достигаетс  тем то в способе количественного определени  Р -аланина навеску fi-аланина в воде обрабатывают 0, М раствором бензальдегида в диметилсульфоксиде при рН 10,5-11 с последующим титрованием непрореагировавшего бенз альдегида раствором гидрохлорида гидроксиламина в диметилсульфоксиде в среде растворител , содержащего диметилсульфоксид и водный раствор гидроокиси натри  при,их объемном соотношении 1-1,5:1 соответ ственно. Повышение селективности определени  за счет расширени  определени  .V-аланина °в различных смес х достига етс  вследствие специфической реакции аминогруппы Э-аланина с бензальдегидом и селективной реакции остатка бензальдегида с титрантом. Бензальдегид вступает в реакцию с аминогруппой (-аланина, а с вторичными и третичными аминокислотами, аммиаком, щелочами и кислотами не воздействуют. Использование именно раствора бензальдегида в диметилсульфоксиде и проведение реакции бензальдегида с р-аланином при рН 10,,0 обеспечивает количественное прохождение реакции в течении 20-25 мин. Повышение рН среды во вре взаимодействи  1Ь-аланина с бензальдегидом приводит к полимеризации бензальдегида и искажает результаты определени , а понижение рН замедл ет реакцию. Использование бензальдегида преимущественно перед другими альдегидами и обеспечивает специфическую реакцию с р-аланином. Исполь зование другого ароматического альде гида , например салицилового альдегида , замедл ет реакцию, а использование алифатического альдегида, например формальдегида, понижает селектив ность определени  вследствии вступле 9 84 ни  вторичных аминокислот и аммиака в реакцию с альдегидом. Использование в качестве титранта раствора гидрохлорида гидроксиламина в диметилсульфоксиде и в качестве растворител  смеси З/ -ного водного раствора гидроксида натри  с диметилсульфоксидом в объемных соотношени х 1:1-1,5 создает услови  дл  селективного и количественного титровани  бензальдегида, сопровождающегос  выраженным скачком потенциала в точке эквивалентности. Присутствие вторичных и третичных аминокислот, аммиака, солей аммони , кислот и щелочей не вли ет на определение р)-аланина. Таким образом, предлагаемый способ заключаетс  в следующем: навеску анализируемого образца, содержащего 0,, г f -аланина , раствор ют в 5 мл дистиллированной воды, добавл ют 5 мл буферного раствора с рН 10,5-11,0; 10;0 мл 0,15-0,2 М . раствора бензальдегида в диметилсупьфоксиде и перемешивают не менее 30 мин. Затем добавл ют 20-30 мл смеси воды с диметилсульфоксидом в соотношении 1:1,5-2 по объему, после этого и непосредственно перед титрованием добавл ют мл водного раствора гидроокиси натри . В раствор погружают пару электродов (платиновый и каломельный) и потенциометрически титруют 0,1-0,15 М раствором гидрохлорида гидроксиламина в диметилсульфоксиде до по влени  скачка потенциала на кривой титт ровани . Параллельно исполн ют холостой опыт, т.е. титруют 10,0 мл 0,150 ,2 М раствора бензальдегида в диметилсульфоксиле . По разнице количества израсходованного титранта на титрование холостого опыта и анализа наход т количество бензальдегида, израсходованного в реакции с -аланином , и, соответственно, количество ргаланина. Пример i. Количественное определение -аланина. Навеску р-аланина 0,ОЗбЗ г, взвешенного с точностью ± 0,0002 г, помещают в колбу дл  титровани  со шлифом, емкостью 100 мл в 5 мл дистиллированной воды, добавл ют 5 мл буферного раствора с рН 11,0 приготовленного из тетрабората натри  и гидроокиси натри , и 10,0 мл 0,15 М раствора бензальдегида в диметилсульфоксиде. Колбу закрывают пробкой и оставл ют перемешивать на магнитной мешалке на 30 мин. Параллельно готов т холостой опыт: в колбу дл  титровани  помещают 5 мл дистиллированной воды, 5 мл буферного раствора и 10,0 мл 0,15 М раствора бензальдегида и оставл ют перемешивать на 30 мин. Затем к растворам добавл ют 30 мл смеси воды с диметилсульфоксидом в объемном соотношении 1:2 и непосредственно перед титрованием добавл ют k мл 30% водного раствора гидроокиси натри . В раствор погружают пару электродов (платиновый и каломельный) и потенциометрически титруют 0,1038 М раствором гидрохлорида гидроксиламина в диметилсульфоксиде до по влени  скачка потенциала на кривой титровани . Расход титранта на титрование холостой опыта составл ет И,41 мл, а расход титранта н титрование анализа составл ет 10,50 мл. Содержание -аланина рассчитывают У (.оз80.08302 X - - -- X 100 99,6% Стандартное отклонение равно±О,9 Пример 2. Количественное оп 1ределение |Ь-аланина в конденсате про изводства i -аланина. Конденсат производства р-аланина теоретически содержит «5-50% р-аланина, 45-50% вторичных и третичных аминокислот и 5 10% воды. Навеску конденсата 0,1035 г взвешивают , помещают в колбу дл  титрова ни , раствор ют в 5 мл дистиллирован ной воды, добавл ют 5 мл буферного раствора с рН 10,7 приготовленного и

р) -аланин

р) - аланин + аммиак О ,6

р) - аланин + гидроокись натри  0,

(Ь -аланин + серна  кислота 0,05113

0,ОЗбО - 0,9 0,0433 + 1,0

0,0409

1.0 1,0 0,0405 аммиака и хлорида аммони  и 10,0 мл 0,2 М раствора бензальдегида в диметилсульфоксиде . Колбу закрывают пробкой и оставл ют перемешивать на магнитной мешалке на 30 мин. Параллельно провод т холостой опыт. Затем к раствору добавл ют 20 мл смеси воды с диметилсульфоксидом в соотношени х 1:1,5 по объему и непосредственно перед титрованием добавл ют 4 мл Зб% водного раствора гидроокиси натри . В раствор погружают пару электродов и потенциометрически титруют 0,1476 М раствора гидрохлорида гидроксиламина в диметилсульфоксиде Расход титранта на титрование холостого опыта составл ет 13i55 мл, а на титровании анализа - соответственно 9,76 мл. Содержание -аланина рассчитывают X - il3i5i:3j6ioa4z6:0 o8209. 0.1035 X 100 4В,1. Отклонение равно jt 1 0. В таблице представлены результаты определени  | -аланина гидролизатов и конденсатор производства р-аланина и некоторых смесей /i-аланина с кислотами и щелочами согласно предлагаемому способу. Дл  установлени  рН 10,5-11,0 испытаны буферные растворы :тетраборат нет- ри5; - гидроокись натри , аммиак - хлорид аммони  и триметиламин - гидрохлорид триметиламина. Титрование провод т потенциометрически с использованием платинового (индикаторного) и насыщенного каломельного электродов раствором гидрохлорида гидроксиламина в диметилсульфоксиде .

Claims (1)

1. Формула изобретения

   Способ количественного определения ^-аланина путем потенциометрического 35 титрования в среде смешанного растворителя, отличающийся тем, что, с целью повышения селективности определения, навеску β-аланина в_: воде обрабатывают 0,15Ό,2 М раствором *0 бензальдегида в диметилсульфоксиде при pH 10,511,0 с последующим титрованием непрореагировавшего бензальдегида раствором гидрохлорида гидроксиламина в диметилсульфоксиде в сре-*5 де растворителя, содержащего диметилсульфоксид и 5“7%-ный водный раствор гидроокиси натрия при их объемном соотношении 1-1,5:1 соответственно.