SU934380A1 - Способ определени активности холинэстеразы в биологических жидкост х - Google Patents
Способ определени активности холинэстеразы в биологических жидкост х Download PDFInfo
- Publication number
- SU934380A1 SU934380A1 SU802995519A SU2995519A SU934380A1 SU 934380 A1 SU934380 A1 SU 934380A1 SU 802995519 A SU802995519 A SU 802995519A SU 2995519 A SU2995519 A SU 2995519A SU 934380 A1 SU934380 A1 SU 934380A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- solution
- electrode
- activity
- cholinesterase
- potential
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Изобретение относитс к биохи- ( мии и касаетс определени актив- ,ности ферментов.
Известен способ определени активности холинэстеразы в биологических жидкост х путем измерени скорости изменени потенциала окислительновосстановительного электрода, помещенного в испытуемую биологическую жидкость с добавлением субстратар.
Однако известный способ обладает недостаточно высокой чувствительностью (0,5-0,005 е/мл).
Цель изобретени - увеличение чyвct8итeльнocти способа,
Указанна цель достигаетс тем, что способ определени активности . холинэстеразы в биологических жидкост х осуществл ют путем измерени скорости изменени потенциала окислительно-восстановительного электрода , помещенного в испытуемую биологическую жидкость с добавлением субстрата, электрод предварительно
уравновешивают в М растворе ферротферрицианида кали или в М водного раствора йода.
На фиг,1 приведены кривые зависимости потенциала от времени гидролиза ацетилтиохолин бромида при различных активност х холинэстеразы сыворотки крови лошади (электрод ЭО-1 предварительно уравновешен в
10 О, 1 М раствора ферро-феррицианида кали ; активность фермейта на кривых 1-6 соответственно равна 10; 10,1; 0,01; 0,001 и 0,00012 е/мл, на кривой 7 представлен спонтанный
IS гидролиз); на фиг, 2 - кривые зависимости потенциала от времени гидролиза ацетилтиохолин бромида при различных активност х холинэстеразы сыворотки крови лошади (электрод
Claims (2)
- 20 ЭО-1 предварительно уравновешен в 5-Ю М растворе 1-2.; активность фермента на кривых 1-6 соответственно равна 10; 1; 0,1; 0,01; 0,001 и 0,0001 е/мл, на кривой 7 представлен спонтанный гидролиз). Пример 1. В термостатируему кювету объемом 2 мл наливают 1,О мл раствора фермента бутирилхолинэстера зы сыворотки крови лошади на 0,1 М фосфатном буфере рН 7, 8,0 с активностью от 20 до 210 е/мл. Элек трод 30-1 предварительно уравновещи1вают в 0,1 М растворе ферро-феррицианидов , затем промывают З- раза водой и пс ещают в исследуемую реак|Ционную смесь. Электродом сравнени служит хлорсеребр ньЙ:1 электрод в насыщенном растворе хлористого кали ( ЭвЛ-1М-3). Электроды подключают к рН-121 или . Потенциал системы всегда составл ет 236 мВ. Затем добавл ют 1 мл 2,-10 М ацетилтиахолин бромида и измер ют скорость падени потенциала в диапазоне 200-100 мВ (фиг.1). После окончани измерений электрод промывают несколько раз водой, помещают на несколько минут в раствор ферриферроцианидов , после чего он снова готов к работе. П р и М е р
- 2. В термостатированную кювету объемом 2 мл наливают 1,0 мл раствора фермента бутирилхолинэстеразы сыворотки крови лошади на 0,1 М фосфатном буфере рН 7, 8,0 с активностью от 20 до 2-10 е/м и 0,01 мл свежеприготовленного водного раствора I2(5-10 М). В раствор помещают индикаторный электрод 30-1 и хлорсеребр ный электрод сравнени . cтaнaвJlивaют потенциал 412 мВ. Затем в реакционную смесь внос т 1 мл ацетилтиохолинбромида и измер ют скорость падени потенциала от kOQ до 300 мВ (фиг.2). После опыта электрод промывают также, как указано в примере 1. Предлагаемый способ позвол ет увеличить чувствительность до 1,210 е/мл и диапазон измерени активности холинэстеразы (10 10 4е/мл ). Формула изобретени Способ определени активности холинэстеразы в биологических жид1 ост х путем измерени скорости изменени потенциала окислительновосстановительного электрода, помещенного в испытуемую биологическую жидкость с добавлением субстрата, о т ли ч а ю щи и с , тем, что, с целью увеличени чувствительности способа, электрод предварительно уравновешивают в - растворе ферро-феррицианида кали или в 10 - 10 М водного раствора йода. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1. Kraner D.N., Gannon P.L. and Guilbault G.G. Electrochemical detemination o cholinrsterase and thiocholine esters. Analytical chemistry, 1962, З, N7, P. 8i 2Bks .
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU802995519A SU934380A1 (ru) | 1980-08-04 | 1980-08-04 | Способ определени активности холинэстеразы в биологических жидкост х |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU802995519A SU934380A1 (ru) | 1980-08-04 | 1980-08-04 | Способ определени активности холинэстеразы в биологических жидкост х |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU934380A1 true SU934380A1 (ru) | 1982-06-07 |
Family
ID=20922815
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU802995519A SU934380A1 (ru) | 1980-08-04 | 1980-08-04 | Способ определени активности холинэстеразы в биологических жидкост х |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU934380A1 (ru) |
-
1980
- 1980-08-04 SU SU802995519A patent/SU934380A1/ru active
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Garry et al. | A micro method for serum cholinesterase | |
| Siedel et al. | Reagent for the enzymatic determination of serum total cholesterol with improved lipolytic efficiency. | |
| Guilbault et al. | An enzyme electrode for the amperometric determination of glucose | |
| Andres et al. | Fibre-optic pesticide biosensor based on covalently immobilized acetylcholinesterase and thymol blue | |
| Hemker | Handbook of synthetic substrates | |
| JPH10501425A (ja) | 液体サンプル中のアナライトの計測装置 | |
| Huang et al. | Amperometric determination of total cholesterol in serum, with use of immobilized cholesterol ester hydrolase and cholesterol oxidase | |
| Dupuy et al. | Rapid determination of alpha-amylase activity by use of a new chromogenic substrate. | |
| Tammelin | An electrometric method for the determination of cholinesterase activity | |
| Mascini et al. | Determination of free and total cholesterol in human bile samples using an enzyme electrode | |
| Pemberton et al. | An assay for the enzyme N-acetyl-β-D-glucosaminidase (NAGase) based on electrochemical detection using screen-printed carbon electrodes (SPCEs) | |
| SU934380A1 (ru) | Способ определени активности холинэстеразы в биологических жидкост х | |
| Laczka et al. | Fast electrochemical detection of anti-HIV antibodies: Coupling allosteric enzymes and disk microelectrode arrays | |
| Trautschold et al. | Kallikrein | |
| Lous et al. | A comparison of three methods, utilizing different principles, for the determination of uric acid in biological fluids | |
| Delahunty et al. | Automated creatine kinase-MB estimation by immuno-inhibition: a clinical evaluation. | |
| JP3468312B2 (ja) | アルカリホスファターゼの検出方法 | |
| JPS634661B2 (ru) | ||
| Fernandes et al. | Use of sorghum seed tissue as a biocatalyst in a stirred reactor for oxalic acid determination | |
| Baum et al. | Kinetic analysis of cholinesterases using a choline ester selective electrode | |
| Cheng et al. | Rapid assay of galactose in blood serum and urine by amperometric measurement of enzyme-catalyzed oxygen consumption | |
| Gleeson et al. | A simple enzymatic fluorimetric method for the determination of triglycerides in 10 μl of serum | |
| Krug et al. | Enzyme-based fiber-optic device for the determination of total and free cholesterol | |
| Suye et al. | A fluorometric determination of urea with urease | |
| JPS5871897A (ja) | アミラ−ゼ活性の新規な測定法 |