SU928226A1

SU928226A1 - Способ определени наличи афлотоксинов в и G в продуктах растительного сырь

Info

Publication number: SU928226A1
Application number: SU802919959A
Authority: SU
Inventors: Яков Львович Костюковский; Давыд Борисович Меламед
Original assignee: За витель 928226 сю
Priority date: 1980-04-28
Filing date: 1980-04-28
Publication date: 1982-05-15

Description

(5А) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАЛИЧИЯ АФЛОТОКСИНОВ В И G В ПРОДУКТАХ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

I , .

Изобретение относитс к анализу микроколичеств органических соединений и может быть использовано дл определени токсичных и канцерогенных веществ в объектах окружающей среды, в частности в пищевых продуктах и кормах дл сельскохоз йственных животных „

Установлено, что в различных продуктах зерновых, бобовых, масличных и др. могут содержатьс продуцируемые плесневыми грибами афлотоксины, обладающие выраженной канцерогеннрй активностью и высокой токсичностью„ Установлено, что в пищевых продуктах допустима предельна концентраци афлотоксинов в пищевых продуктах.

Наиболее близким к .предлагаемому по решаемой задаче и достигаемому Э(1)фекту вл етс способ определени наличи афлотоксинов В и G в продукт х растительного сырь , BKJWчающий проведение хромоТографии экстракта из продуктов растительного

сырь на хроматогра(})ической пластинке , подтверждение наличи афлотоксинов на этой пластинке путем вы влени флуоресцирующих п тен в исследуемом образце и сравнение их со стандартным образцом. При этом вы влени флуоресцирующих п тен ведут с помощью трифторуксусной кислоты 111 Недостатком в известном способе вл етс то, что при его применении получаютс недостаточно точные результаты , из-за присутстви загр зненных частиц на пластинке, часть которых также как афлотоксины обладают флуоресцирующей способностью. При использовании трифторуксусной кислоты образуютс соединени флуоресцирующие в той же области, что и продукты , образующиес из афлотоксинов В и G, что делает подтверждение в этом случае недостоверным, на хроматограммах получаютс широкие поло сы фона и размытые п тна Gij,, что резко затрудн ет определение, нижн часть хроматографической пластинки сильно загр знена примесными веществами, что мешает обнаружению п тен образующихс Gr, лежащих в этой области. Цель изобретени - повышение точности определени . Поставленна цель достигаетс тем, что согласно способу определени наличи афлотоксинов в продуктах растительного сырь ,включающему прове дение хроматографии экстракта из продуктов растительного сырь на хромато графической пластинке, подтверждени наличи афлотоксинов на этой пластинке путем выделени флуоресцирующих п тен в исследуемом образце и сравнение их со стандартным образцом, после проведени хроматографии экстракта продуктов растительного сырь отсекают загр зненную примес ми часть пластины ниже уровн п тен афлотоксинов G, а вы вление флуоресцирующих п тен в исследуемом образце ведут продуктами бромировани . При этом в качестве продуктов бромировани может быть использован раствор брома в диоксане. Установлено, что при использовании дл бромировани афлотоксинов В, и G раствора брома в диоксане в результате реакции, протекающей как в растворе, так и непосредственно на хроматографической пластинке, образуютс только продукты присоединени брома по двойной св зи терминального фуранового кольца, например;

Строение дибромидов афлотоксинов В и G,,, обладающих интенсивной флуоресцендией , установлено масс-спектрометрически .

Предлагаемый способ осуществл ют следующим образом.

Экстракт из продуктов растительного сырь подвергают очистке хроматографией и концентрируют его 0,050 ,J мл. На хроматографическую пластинку нанос т по 2-20 мкл два п тна очищенного концентрата и два п тна смеси стандартов В и G и хроматографируют , подсушивают и рассматривают в УФ при ЗбО нм. Отмечают флуоресцирующие п тна стандартов и соответствующие п тна концентрата. Обрезают часть пластинки на 10-12 мм. ниже п тен афлотоксинов. Затем по одному отмеченному п тну стандарта и концентрата обрабатывают 10-15 мкл 5-10%-ного раство эа брома в диоксане , выдерживают 1-3 мин при комнатной температуре и снова хроматографируют в той же системе. Совпадение Rf флуоресцирующих п тен как самих афлотоксинов в стандартных и опытных пробах, так и R соответствующих дибромидов подтверждает наличие афлотоксинов в анализируемом продукте.

Пример 1. Экстракт афлотоксинов из продукта подвергают очистке колоночной хроматографией и концентрируют до 0,05-0,1 мл. На пластинку силуфол нанос т по 10 мкл два п тна очищенного концентрата и два п тна

смеси стандартов В и G и хроматографируют в системе хлороформ-бензолацетон 9:1:1, подсушивают и рассматривают в УФ при ЗбО нм. Отмечают флуоресцирующие п тна стандартов и соответствующие п тна концентрата. Обрезают часть пластинки на 10 мм ниже п тен афлотоксинов. Затем по одному отмеченному п тну стандарта и концентрата обрабатывают 10 мкл 5 -ного

раствора брома в диоксане, выдерживают 1 мин при комнатной температуре и снова хроматографируют в той же системе . Совпадение R флуоресцирующих ; п тен как самих афлотоксинов в стандартных и опытных пробах, так Вл соответствующих дибромидов подтверждает наличие афлотоксинов в анализируемом продукте.

Пример 2. Экстракт афлотоксинов из продукта подвергают предварительной очистке, например обработкой водным раствором сульфата аммони и гексаном, водный слой

Claims

Формула изобретения

1. Способ определения наличия афлотоксинов В₄ и G₄b продуктах растительного сырья, включающий проведение хроматографии экстракта из про-

25 дуктов растительного сырья на хроматографической пластинке, подтверждение наличия афлотоксинов на этой пластинке путем выявления флуоресцирующих пятен в исследуемом образце зо и сравнение их со стандартным образцом, отличающийся тем, что, с целью повышения. точности определения, после проведения хроматографии экстракта продуктов раститель₃₅ ного сырья отсекают загрязненную примесями. часть пластины ниже уровня пятен афлотоксинов В и G^, а выявление флуоресцирующих пятен в исследуемом образце ведут продуктами бро₄₀ мирования.
2. Способ поп. ^отличающий с я тем, что в качестве продуктов бромирования используют раствор брома в диоксане.