(5) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ ЭРИТРОЦИТОВ(5) METHOD OF CONSERVATION OF ERYTHROCYTES
Изобретение относитс к медицине а именно к низкотемпературному консервированию эритроцитов человека дл длительного хранени , и может найти применение на станци х переливани крови. Известен способ консервировани эритроцитов путем смешивани их с раствором, содержащим сахарозу, маннит, хлористый натрий, бидистиллированную воду и в качестве криопр тектора этиленгликоль, с последующим замораживанием .в два этапа до и оттаивании 1 . Однако известный способ не обеспечивает высокой сохранности эритро цитов в процессе размораживани . Целью изобретени вл етс предупреждение разрушени эритроцитов в процессе размораживани . Цель достигаетс тем, что способ консервации эритроцитов осуществ л ют путем смешивани их с растворо содержащим сахарозу, маннит, хлррис тый натрий, бидистиллированную воду, криопротектор с последующим замораживанием и оттаиванием, в качестве криопротектора используют оС -пропиленгликоль , а замораживание ведут со скоростью 12-1 град/мин до температуры (-150)-(-170)С. Способ осуществл ют следующим образом. Пример. Из крови, стабилизированной цитратным стабилизатором № и хранившейс 1 сут. при , отдел ют насадок и к оставшейс зритромассе приливают до соотношени 1:1 криоконсервант следующего состава: Л -Пропиленгликоль ( 1,2-пропандиол) 350 мл 30 6 Сахароза Вода дистиллирован620 мл на Температуру криоконсерванта И эритромассы к моменту их смеши-вани довод т до 20-25°С.The invention relates to medicine, in particular to the low-temperature preservation of human erythrocytes for long-term storage, and can be used at blood transfusion stations. A known method of preserving red blood cells by mixing them with a solution containing sucrose, mannitol, sodium chloride, bidistilled water and ethylene glycol as a cryoprotector, followed by freezing in two stages before and thawing 1. However, the known method does not provide high preservation of erythrocytes during the thawing process. The aim of the invention is to prevent the destruction of red blood cells during defrosting. The goal is achieved by the method of preserving erythrocytes by mixing them with a solution containing sucrose, mannitol, sodium chloride, bidistilled water, cryoprotectant followed by freezing and thawing; 1 deg / min to a temperature of (-150) - (- 170) С. The method is carried out as follows. Example. From blood stabilized with citrate stabilizer No. and stored for 1 day. when the nozzles are separated, the cryoconservative of the following composition is added to the remaining mass of a 1: 1 ratio: L-Propylene glycol (1,2-propandiol) 350 ml 30 6 Sucrose Water distilled 620 ml per temperature of the cryoconservative And erythromass to to 20-25 ° C.
Полуменную эритровзвесь центрифугируют в течение 20 мин при 2000 об/мин После отделени надосадка эритромассу (135 мл) перенос т с соблюдением правил асептики в алюминиевый контеймер емкостью 150 мл. Контейнер помещают в металлический чехол, погружают азот и охлаждают со скоростью 12 град/мин до температуры . Затем контейнер перенос т в хранилище с жидким азотом ().The semi-erythromycin suspension is centrifuged for 20 minutes at 2000 rpm. After separation of the supernatant, the erythromass (135 ml) is transferred, in compliance with the rules of asepsis, into an aluminum container with a capacity of 150 ml. The container is placed in a metal case, immersed in nitrogen and cooled at a rate of 12 deg / min to temperature. The container is then transferred to a liquid nitrogen storage ().
Размораживают эритромассу ё воде температурой . После этого ее отмывают одноэтапно: к размороженной эритромассе до соотношени 1:1 непреpbiBHO в течение 5 мин добавл ют первый отмывающий раствор, состо щий из сахарозы (100 г) хлористого натри () и воды бидистиллированной (875 мл), затем не центрифугиру непрерывно в течение 5 мин добавл ют второй отмывающий раствор, состо щий из сахарозы (30 г), хлористого натри .(9 г) и воды бидистиллированной (9б1 мл),, до соотношени размороженна эритромасса: отмывающий раствор 1:3. Затем полученную эритровзвесь центрифугируют, удал ют на 1осадочную жидкость и к эритроцитам добавл ют до соотношени 1:1 взвешивающий раствор ЦНИИТК86.Defrost erythromassu water temperature. After that, it is washed in one stage: the first wash solution consisting of sucrose (100 g) of sodium chloride () and double-distilled water (875 ml) is added to the thawed erythromass to a 1: 1 ratio of noncontiguous for 5 minutes, then continuously A second washing solution consisting of sucrose (30 g), sodium chloride (9 g) and twice-distilled water (9 ml) is added to the thawed erythromass: washing solution 1: 3 ratio for 5 minutes. Then, the resulting erythrosis suspension is centrifuged, removed by 1 sedimentation liquid, and a weighing solution TSNIITK86 is added to the erythrocytes to a 1: 1 ratio.
СодержаниейС-пропиленгликол после отмывки устанавливают методом дерного магнитного резонанса и химическим методом . Оно составл ет менее 1,5%.The content of C-propylene glycol after washing is established by nuclear magnetic resonance and chemical methods. It is less than 1.5%.
Предлагаемый способ- позвол ет избежать разрушени эритроцитов в процессе размораживани . Кроме того,он прост в исполнении и позвол ет получить экономию средств приблизительно до 100 р. на 1 л криоконсервированной эритромассы.The proposed method avoids the destruction of the red blood cells during the thawing process. In addition, it is simple to perform and allows for savings of up to about 100 p. on 1 l of cryopreserved erythromass.