SU734281A1 - Unit for cell culturing in monolayer - Google Patents
Unit for cell culturing in monolayer Download PDFInfo
- Publication number
- SU734281A1 SU734281A1 SU772556464A SU2556464A SU734281A1 SU 734281 A1 SU734281 A1 SU 734281A1 SU 772556464 A SU772556464 A SU 772556464A SU 2556464 A SU2556464 A SU 2556464A SU 734281 A1 SU734281 A1 SU 734281A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- vessels
- vessel
- culture fluid
- cells
- gas
- Prior art date
Links
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
1one
Изобретение относитс к клеточной биологии, в частности к оборудованию дл культивировани клеток животных и человека, и может найти применение в медицине, вирусологии и ветеринарии. The invention relates to cell biology, in particular to equipment for the cultivation of animal and human cells, and can be used in medicine, virology and veterinary medicine.
Наиболее близкой по технической сущности к предлагаемому изобретению вл етс установка дл культивировани клеток в монослое, содержаща культивационный сосуд с насадкой дл прикреплени клеток, трубопроводы дл подвода и отвода культуральной среды 1.The closest to the technical essence of the present invention is an installation for culturing cells in a monolayer, containing a cultivation vessel with a nozzle for cell attachment, pipelines for supplying and discharging the culture medium 1.
Известна система содержит также контур термостатировани и внешний циркул ционный контур, включающий датчик рН с измерителем, пери стальтический насос и трехходовой клапан,....The known system also contains a thermostating circuit and an external circulation circuit including a pH sensor with a meter, a peristatic pump and a three-way valve, ....
Клетки,закрепленные на неподвижной насадке,посто нно олмваготс свежей питательной средой.Перистальтический насос в зависимости от рН питательной среды обеспечивает подачу культуральной жидкости.Cells mounted on a fixed attachment are constantly filled with fresh nutrient medium. A peristaltic pump, depending on the pH of the nutrient medium, provides the culture fluid.
Недостатком известной система - вл етс то, что в процессе, циркулировани питательной среды, клетки.A disadvantage of the known system is that in the process of circulating the nutrient medium, the cell.
не прикрепившиес к насадке, разрушаютс в результате работы перистальтического насоса. Другим недостатком этой установки вл етс мала межфазна поверхность контакта газа с культуральной жидкостью, что затрудн ет интенсивный газовый обмен в системе.not attached to the nozzle, are destroyed by the operation of a peristaltic pump. Another disadvantage of this installation is the small interfacial surface of gas contact with the culture fluid, which makes it difficult to exchange gas intensively in the system.
Цель изобретени - повышение эф10 фективности культивировани путем увеличени межфазной поверхности контакта газа с культуральной жидкостью и снижени травматизации . клеток.The purpose of the invention is to increase the efficiency of cultivation by increasing the interfacial surface of gas contact with the culture fluid and reducing trauma. cells.
1515
Цель достигаетс тем, что предлагаема установка снабжена дополнительным сосудом с насадкой, сообщенным в нижней части с основным культивационным сосудом, систе20 мой подачи и отвода газа в сосуды дл контактировани его с культуральной жидкостью и перемещени ее из одного сосуда в другой, а также устройством дл регулировани пода25 чи и отвода газа в сосуды.The goal is achieved by the fact that the proposed plant is equipped with an additional vessel with a nozzle that communicates in the lower part with the main cultivation vessel, a system for supplying and venting gas to the vessels for contacting it with the culture fluid and transferring it from one vessel to another. supply and discharge of gas into the vessels.
Устройство дл регулировани включает датчики уровн культуральной жидкости в сосудах, блок комму ,тации и четырехходовой электропнев30The device for regulation includes sensors of the level of the culture fluid in the vessels, a commutation unit, and a four-way electrofluid 30
моклапан с исполнительным механизмом , подключенный к сосудам, при этом датчики уровн Нодсоединены ко входу блока коммутации, а ззыход этого блока подключен к исполнительному механизму четырехходового электропневмоклапана,an damper with an actuator connected to vessels, with level sensors Nod connected to the input of the switching unit, and the output of this unit is connected to the actuator of the four-way electropneumatic valve,
На фиг. 1 представлена схема описываемой установки.FIG. 1 shows the scheme of the installation.
Установка содержит два культивационных сосуда 1 со стекл нной насадкой 2 дл прикреплени клеток. Сосуды 1 в нижней части сообщены трубопроводом 3. Через трубопровод 4 производитс подача культуральной жидкости, а через вентиль 5 ее отвод.The apparatus contains two culture vessels 1 with a glass nozzle 2 for attaching cells. The vessels 1 in the lower part are communicated by pipeline 3. Through pipeline 4, the culture fluid is supplied, and through valve 5 it is discharged.
Установка также содержит четырехходовой электропневмоклапан б с испо;1нительным механизмом, блок 7 коммутации, датчик 8 уровн культуральной жидкости в сосудах.The installation also contains a four-way electropneumatic valve with an operating mechanism, a switching unit 7, a level 8 sensor of culture fluid in the vessels.
Влок 7 когЛмутации состоит из релейной схемы 9 и схемы 10 переключени ,Vlok 7 coagulation consists of a relay circuit 9 and switching circuit 10,
Чехырехходовой электропневмоклаган б, блок 7 когФ утации и датчики 8 уровн культуральной жидкости образуют устройство дл регулировани подачи и отвода газа в сосуды.The cherekhodovogo electropneumoclamper b, the utation cohf unit 7 and the culture fluid level sensors 8 form a device for regulating the supply and discharge of gas into the vessels.
Установка снабжена системой подачи и отвода газа в сосуды дл контактировани его с культуральной жидкостью в сосудах и перемещени жидкости из одного сосуда в другой Эта система включает подведенные к верхней части сосудов 1 трубопроводы 11 подачи и трубопроводы 12 отвода газов, соединенные с трубопроводом 13 нагнетани газовой смеси , и трубопровод 14 сброса.The installation is equipped with a system for supplying and venting gas to vessels for contacting it with the culture fluid in vessels and transferring liquid from one vessel to another. This system includes supply pipelines 11 to the top of vessels 1 and gas removal pipelines 12 connected to gas mixture injection pipe 13 , and pipeline 14 reset.
Трубопровод 13 нагнетани соединен с микрокомпрессором 15. К одному из культивационных сосудов 1 подсоединена емкость 16 с инокул том и питательной средой.) ,The injection pipeline 13 is connected to the microcompressor 15. A container 16 is connected to one of the cultivation vessels 1 with an inoculum and a nutrient medium.)
Дл термостатировани сосудов имеетс терморубашка 17. На трубопроводах 12 установлены хсхподильные элементы 18 дл конденсировани паров культуральной жидкости, попадающих в трубопровод вместе с отводимым газом, и возвращени сконденсированной жидкости обратно в сосуд 1, .For thermostatic control of vessels, there is a thermal bowl 17. On pipelines 12, xxpods 18 are installed to condense the culture liquid vapors entering the pipeline along with the exhaust gas and return the condensed liquid back to vessel 1.
Установка работает следующим образом .The installation works as follows.
Сосуды 1, заполненные насадкой на 3/4 объема, заполн ют питательной средой с инокул том до уровн датчиков 8, выдерживают клетки в течение времени, необходимого.дл прикрегцтени их к насалке 2, после этого сливают среду из обоих сосудов до 1/2 их объема. После прикреплени клеток (врем прикреплени определ ют заранее любым известным способом, например на чашках Петри) в один из культивационных сосудов 1 подают газовую смесь при избыточном давлении, под действием которого столб жидкости опускаетс в одном из сосудов 1 и поднимаетс в даугом до уровн , определ емого датчиком 8 При выходе жидкости из сосуда 1 на насадке 2 остаетс пленка культуральной жидкости , котора покрывает клетки и обеспечивает интенсивный массообмен .The vessels 1 filled with the nozzle in 3/4 of the volume are filled with nutrient medium with inoculum up to the level of sensors 8, the cells are kept for the time required for attachment to the vessel 2, then the medium is drained from both vessels to 1/2 of them volume. After the cells are attached (the attachment time is determined in advance by any known method, for example, on Petri dishes), the gas mixture is supplied to one of the culture vessels 1 at an overpressure, under which the liquid column is lowered in one of the vessels 1 and rises sensor 8 When the liquid exits the vessel 1 on the nozzle 2, a film of culture liquid remains, which covers the cells and provides an intensive mass exchange.
Уровень жидкости поднимаетс во втором сосуде 1 до уровн датчика 8, который срабатывает и подает сигнал на блок 7 коммутации, который через исполнительный механизм четырехходового электропневмоклапана б обеспечивает его срабатывание .The liquid level rises in the second vessel 1 to the level of the sensor 8, which operates and sends a signal to the switching unit 7, which, through the actuator of the four-way electropneumatic valve b, ensures its operation.
После срабатывани клапана 6 жидкость опускаетс во втором сосуде 1 и поднимаетс в первом сосуде 1 до уробн датчика 8, который снова срабатывает, и цикл повтор етс After actuation of valve 6, the fluid is lowered in the second vessel 1 and rises in the first vessel 1 until the urob sensor 8, which is triggered again, and the cycle repeats
Пример. Два культивационны сосуда емкостью 500 мл заполн ют насадкой типа колец Рашига с размерами 5 4 б мм, выполненных из стекла марки С-52, стерилизуют и заполн ют средой в соотношении 1:1. Игла + 199 с 10%-ной нормальной бычьей сывороткой.Example. Two 500 ml culture vessels were filled with a Raschig type ring nozzle with the dimensions of 5 4 b mm, made of C-52 glass, sterilized and filled with medium in a 1: 1 ratio. Needle + 199 with 10% normal bovine serum.
В среду помещают клетки печени китайского хом чка с концентрацией 90-100 тыс. клеток на 1 мл среды. Предварительно в весь объем аппарата с помощью микрокомпрессора подают смесь воздуха и 5%-ный COj дл обеспечени стабильности рН в пре делах 7,2-7,4.Chinese hamster liver cells with a concentration of 90-100 thousand cells per 1 ml of medium are placed on the medium. A mixture of air and 5% COj is preliminarily introduced into the entire volume of the apparatus using a microcompressor to ensure pH stability in the range 7.2-7.4.
В.таких услови х инокул т выдерживают в течение 4-5 ч, необходимых дл прикреплени клеток, после чего сливают половину объема всей среды и включают в систему перекачивани . Врем цикла перекачивани (из одного сосуда в другой и обратно) составл ет 8-10 мин.B. These conditions are inoculated for 4-5 hours required for cell attachment, after which half of the volume of the whole medium is drained and included in the pumping system. The pumping cycle time (from one vessel to another and back) is 8-10 minutes.
В течение 72 ч завершаетс полный цикл роста клеток до образовани моносло , после чего производ т съем урожа , который составл ет 1-1,5 млн клеток на 1 мл среды.Within 72 hours, the complete cell growth cycle is completed before a monolayer is formed, after which a harvest is collected, which is 1-1.5 million cells per ml of medium.
Предлагаемое изобретение увеличивает выход биомассы за счет создани м гких гидродинамических условий дл роста клеток, закрепившихс на неподвижной насадке, за счет увеличени активно используемой площади подложки, за счет дополнительного рабочего объекта устанЬвки в виде второго сосуда культивировани , улучшает услови маесообмена , исключает необходимость использовани специгшьного циркул ционного контура с перистальтическим насосом.The present invention increases the biomass yield by creating soft hydrodynamic conditions for the growth of cells fixed on the fixed attachment, by increasing the actively used area of the substrate, due to the additional working object of installation as a second culture vessel, eliminates the need for exchange, eliminates the need for using special circulations. circuit with a peristaltic pump.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU772556464A SU734281A1 (en) | 1977-12-19 | 1977-12-19 | Unit for cell culturing in monolayer |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU772556464A SU734281A1 (en) | 1977-12-19 | 1977-12-19 | Unit for cell culturing in monolayer |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU734281A1 true SU734281A1 (en) | 1980-05-15 |
Family
ID=20738651
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU772556464A SU734281A1 (en) | 1977-12-19 | 1977-12-19 | Unit for cell culturing in monolayer |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU734281A1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5316905A (en) * | 1986-09-29 | 1994-05-31 | Suzuki Shokan Co., Ltd. | Culture medium supplying method and culture system |
| US6794184B1 (en) * | 1998-01-19 | 2004-09-21 | Ulrich Mohr | Culturing device and method for culturing cells or tissue components |
| US7015038B2 (en) * | 2001-11-09 | 2006-03-21 | Industrial Technology Research Institute | Method and apparatus for preparing and culturing cells |
-
1977
- 1977-12-19 SU SU772556464A patent/SU734281A1/en active
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5316905A (en) * | 1986-09-29 | 1994-05-31 | Suzuki Shokan Co., Ltd. | Culture medium supplying method and culture system |
| US6794184B1 (en) * | 1998-01-19 | 2004-09-21 | Ulrich Mohr | Culturing device and method for culturing cells or tissue components |
| US7015038B2 (en) * | 2001-11-09 | 2006-03-21 | Industrial Technology Research Institute | Method and apparatus for preparing and culturing cells |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0197299B1 (en) | Method and apparatus for carrying out cell culture | |
| Tokashiki et al. | High density culture of hybridoma cells using a perfusion culture vessel with an external centrifuge | |
| CN1201826A (en) | Spirulina light illuminating tower-tray optic bio-reactor culturing system and its controlling method | |
| Weiss et al. | A multisurface tissue propagator for the mass‐scale growth of cell monolayers | |
| Kobayashi et al. | Berberine production by batch and semi-continuous cultures of immobilized Thalictrum cells in an improved bioreactor | |
| CN105087371A (en) | Photobioreactor for automatically culturing microalgae | |
| Davis | Autocatalytic growth of a mutant due to accumulation of an unstable phenylalanine precursor | |
| SU734281A1 (en) | Unit for cell culturing in monolayer | |
| CN1257262C (en) | Pouring type biologic reactor system in vitro constructure of dual active skin | |
| CN101402917B (en) | Bioreactor for producing tissue engineering products | |
| CN110437973A (en) | A kind of culture apparatus and cultural method of anaerobic bacteria | |
| RU117434U1 (en) | DEVICE FOR CULTIVATION OF CELLS AND POPULATION WITH THEIR TUBULAR TISSUE-ENGINEERED DESIGN | |
| SU1090711A1 (en) | Fermentation vnssel | |
| Schaefer III et al. | Leishmania tropica: chemostatic cultivation | |
| WO1986000636A1 (en) | Cell growth | |
| RU2090609C1 (en) | Flow-type biological reactor | |
| Li et al. | Mineral oil addition as a means of foam control for plant cell cultures in stirred tank fermenters | |
| US3965258A (en) | Process for production of vaccines | |
| JP2933941B2 (en) | Control method, control device, culture method, and culture device for culture conditions of animal cells | |
| JP2961107B1 (en) | Pneumatic pressure differential brewing bioreactor | |
| CN216674036U (en) | Plant incubator based on bioscience | |
| CN216155883U (en) | Stem cell culture device | |
| SU771158A1 (en) | Unit for tissue and cell culturing | |
| JPH11187868A (en) | Culture of virus of cell | |
| Omasa et al. | Enhancement of antibody production by growth factor addition in perfusion and hollow‐fiber culture systems |