(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АРАХИДОНОВОЙ И ЭЙКОЗАТРНЕНОВОЙ КИСЛОТ 246 г смеси высших жирных кислот, содержащей, вес%; Арахидонова кислота7-8 Эйксхзатриенова кислота Насытде1ПШ е и олеинова кислоты57-58 Линолева кислота6-7 Неидентифнцированные соединени .30-31 ( Йодное число 1О2, кислотное числ 84, перекисиое число 0,04). 246 г смеси высших жирных кислот раствор ют в ацетоне (1:5) и перемешивают 2 ч при -10 С. Осадок отдел ют , фильтрат подвергают повторной низ1сотемпературной кристаллизации при -2О С в течение 2 ч. После удалени осадка и упаривани ацетона получают 42 г смеси высших жирных кислот, К этой смеси приливают 125 мл абсолют ного метилового спирта, насыщенного хлористым водородом, и перемешивают 3,5 ч при температуре бани 50 С. Ме тиловый спирт отгон ют в вакууме, остаток обрабатывают 20%-рым раствором бикарбоната натри до нейтральной реа ции и экстрагируют диэгаловым эфиром (45О мл). После удалени растворител получают ЗО г смеси метиловых эфиров высших хсирных кислот, содержа щих , вес. %; Арахидонова кослота24-26 Эйкозатриенова кислота 3-4 Линолева кислота8-9 Насыщешлле и олеинова кислоть(52-54 Неидентифицированные соединени 9-11 {Йодное число 175, кислотное число 2,7, перекисное число 0,006). ЗО г смеси метиловых эфиров высших жирных кислот подвергают вакуумной разгонке (остаточное давление Зм I .До 20О 10,7 ОО 10-13 1,5-2 И 200-220 2,1 JJI 220-235 8,4 37-38 5-6 Фрак1ш III содержит (вес.%) метилов эфиров жирных кислот арахидоновой 37-9, эйкозатриеновой 5-6, линолевой 6-7, насьпденных и олеиновой 22-3, неидентифнцнрованных соединений 25- 6. (Йодное число 222,5, кислошое число 2,5, перекисное число 0,047). Затем концентрат (фракци Щ) эйкозатриеновой и арахидоновой кислот хроматографируют на трех стекл нных колонках размером Зх9О см. Сорбент приготовл ют следующим образом; 4ОО г силикагел суспендируют в 800 мл водного раствора азотнокислого серебра (5О%К Смесь нагревают ЗО мин при 100 С при перемешивании, после охлаждени отфильтровьшают и сорбент высушившот 16 ч при 12О°С, Каждую коложу заполн ют 30 г сорбента в небольшом количестве нетролейного эфира, промывают последовательно 1ОО мл сухого диэтилового эфира и 100О мл сухого гептана (петролейного эфира) и нанос т по 2,8 г концентрата в небольшом количестве гептана (петролей- кого эфира). Разделение смеси метиловых эфиров жирных кислот провод т методом градиентного элюировани ; 0,5%-ным днэтиловым эфиром в гептане (3,15 л, фракции 1 - 21), 1%г-ным диэтиловым эфиром в гептане (1,65 л, фракции 22-32), 4О%-ным диэтиловым эфиром в гептане . (4,5 л, фракнии 33-62), диэтиловым эфиром в гептане (4,5 л, фракции 63-92), диэтиловым эфиром. Все растворители предварительно продувают азотом 1-2 мин. Фракции 53-62 объедин ют, oTroHHJgiT растворитель в вакууме при температуре не выше 40 С, и получают 285-ЗОО мг ме-галового эфнра эйкозаориеновой кислоты (чистота 92-98%, йодное число 245-251). Соединение сохран ют в бензоле в атмосфере азота в запа нных ампулах. Дл получени нростагландинов метиловый эфир эйкозатриеновой кислоты омыл ют и включают в биосинтез по известному методу. В результате получают соединение, соответствующее по биологической активности простагландину группы Е, поглощающее после щелочной обработки в УФ-области при 278 нм и по данным тонкослойной хроматографии отвечающее ПГЕ . После колоночной хроматографии смеси метиловых эфиров жирных кислот объедин ют фракции 63-85, удал ют раство итель. в вакууме при температуре не выше 40 С, и получают 1,651 ,80 г метилового эфира арахидоновой(54) METHOD OF OBTAINING ARAHIDONIC AND EYKOSATRIC ACID 246 g of a mixture of higher fatty acids, containing, weight%; Arachidonic acid 7-8 Exxatrienoic acid < Desc / Clms Page number 2 > 57-58 Linoleic acid6-7 Non-identified compounds .30-31 (Iodine number 1O2, acid number 84, peroxide value 0.04). 246 g of a mixture of higher fatty acids are dissolved in acetone (1: 5) and stirred for 2 hours at -10 ° C. The precipitate is separated, the filtrate is subjected to repeated low-temperature crystallization at -2 ° C for 2 hours. After removing the precipitate and evaporating the acetone, 42 are obtained. g of a mixture of higher fatty acids, 125 ml of absolute methyl alcohol saturated with hydrogen chloride are added to this mixture and stirred for 3.5 hours at a bath temperature of 50 ° C. Methyl alcohol is distilled off in vacuum, the residue is treated with 20% sodium bicarbonate until neutral and extracted with g egalovym ether (45o mL). After removal of the solvent, ZO g of a mixture of methyl esters of higher hydrochloric acids containing, by weight, is obtained. %; Arachidonic acid24-26 Eicocosatrienic acid 3-4 Linoleic acid8-9 Saturated bis and oleic acid (52-54 Unidentified compounds 9-11 {Iodine number 175, acid number 2.7, peroxide value 0.006). DL g of the mixture of methyl esters of higher fatty acids is subjected to vacuum distillation (residual pressure of 3 m I. Up to 20O 10.7 OO 10-13 1.5-2 AND 200-220 2.1 JJI 220-235 8.4 37-38 5- 6 Frak1III III contains (wt.%) Methyl esters of arachidonic fatty acids 37-9, eicosatrieno 5-6, linoleic 6-7, nasal and oleic 22-3, unidentified compounds 25-6. (Iodine value 222.5, acid value 2.5, the peroxide value is 0.047). Then the concentrate (fraction U) of eicosatrienoic and arachidonic acids is chromatographed on three glass columns of size 3x9O cm. Sorbent is prepared as follows: ; 4OO g of silica gel is suspended in 800 ml of an aqueous solution of silver nitrate (5O% K. The mixture is heated for 30 min at 100 ° C with stirring; after cooling, the filter is filtered and the sorbent is dried for 16 h at 12 ° C. 30 g of sorbent are filled in a small amount of non rolling oil ether, washed successively with 1OO ml of dry diethyl ether and 100 O ml of dry heptane (petroleum ether) and put 2.8 g of concentrate in a small amount of heptane (petroleum ether). Separation of the fatty acid methyl ester mixture is performed by gradient elution; 0.5% diethyl ether in heptane (3.15 l, fractions 1-21), 1% gn diethyl ether in heptane (1.65 l, fractions 22-32), 4O% diethyl ether in heptane. (4.5 l, fractions 33-62), diethyl ether in heptane (4.5 l, fractions 63-92), diethyl ether. All solvents are pre-purged with nitrogen for 1-2 minutes. Fractions 53-62 are combined, the oTroHHJgiT solvent is in a vacuum at a temperature not higher than 40 ° C, and 285-ZOO mg of megalopic eicosorienoic acid is obtained (purity 92-98%, iodine number 245-251). The compound is stored in benzene under a nitrogen atmosphere in sealed ampoules. To obtain nrostaglandins, eicosatrienoic acid methyl ester is saponified and incorporated into biosynthesis by a known method. The result is a compound corresponding to the biological activity of prostaglandin of group E, absorbing after alkaline treatment in the UV region at 278 nm and according to thin-layer chromatography corresponding to PGE. After column chromatography of the mixture of fatty acid methyl esters, fractions 63-85 are combined and the solvent is removed. in vacuum at a temperature not higher than 40 ° C, and get 1.651, 80 g of arachidonic methyl ester
кислоты (чистота 96-99%,йодное число 325-330).acids (purity 96-99%, iodine number 325-330).
Полученный метиловый эфир арахидоновой кислочы сохран ют в бензоле в атмосфере азота в запа нных ампулах. Дл получени простагландинов бензол упаривают , метиловый эфир арахидоновой кислоты омыл ют и включают в биосинтез по известному методу. Получают соединение , соответствующее по биологической актавности простагландину группы Е, имеющее после щелочной обработки поглощение в УФ 2-области при 278 им и по данным тех отвечающее nPEg.The arachidonic acid methyl ester obtained is stored in benzene under nitrogen in sealed ampoules. In order to produce prostaglandins, benzene is evaporated, arachidonic acid methyl ester is saponified and incorporated into biosynthesis by a known method. A compound corresponding to the biological activity of prostaglandin of group E is obtained, which after alkaline treatment has an absorption in the UV 2 region at 278 by them and according to those corresponding to nPEg.