SU586165A1 - Способ получени окситоцина и дезаминоокситоцина - Google Patents
Способ получени окситоцина и дезаминоокситоцинаInfo
- Publication number
- SU586165A1 SU586165A1 SU762386195A SU2386195A SU586165A1 SU 586165 A1 SU586165 A1 SU 586165A1 SU 762386195 A SU762386195 A SU 762386195A SU 2386195 A SU2386195 A SU 2386195A SU 586165 A1 SU586165 A1 SU 586165A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- oxytocin
- cysteinyl
- benzamidomethyl
- asparaginyl
- tyrosyl
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Изобретение относитс к улучшенному способу синтеза биологически активных гормонов - окситоцина и дезаминоокситоцина, нашедших широкое применение в медицине.
В литературе широко известен способ получени окситоцина, исход из S,S - дибензилзащиш ,енного нонапептида-амида W-карбобензокси - S - бензил - цистеинил тирозил - изолейцил - глутаминил - аспарагинил - S - бензил - цистеинил-пролил-лейцилглицина или амида N-бутилоксикарбонил - S - бензил - цистеипил - тирозил-изолейцил - глутаминил - аспарагинил - S - бензил - цистеинил - пролил - лейцилглицина отщеплением S - заш,итных групп.
Известный способ получени дезаминоокситоцина также состоит в отш,еплении заш,итных групп от S,S - дибензилзаш,ишенного нонапептида - амида S - бензил - (3 - меркаптопропионил - тирозил - изолейцил - глутаминил - аспарагинил - S - бензил - цистеинилпролил-лейцил-глицина .
Отщепление S - бензильных и .N-Сво-групп осуществл ют металлическим натрием в жидком аммиаке при температуре от -60 до -30°С с последующим окислительным замыканием цикла или кислородом воздуха, или феррицианидом кали . Выход окситоцина при 9ТОМ 18-33%, дезаминоокситоцина - 31-
38%, окситоцическа активность 70-130 и 684 МЕ/мг соответственно.
Недостаток способа состоит в применении дл отщеплени защитных групп металлического натри в жидком аммиаке, что снижает выход и качество целевого продукта.
Наиболее близким к предлагаемому вл етс способ отщеплени S - бензилзащитных грзпп от защищенного нонапептида - N - карбобензокси - S - бензил - цистеинил-тирозилизолейдил - глутаминил - аспарагинил-5-бензил - цистеинил - пролил - лейцил - глицина электролизом в жидком аммиаке при -60°С в течение 1,5 ч; замыкание дисульфидного
цикла с образованием окситоцина провод т
известным методом, например кислородом
воздуха. Выход окситоцина составл ет 28%,
окситоцическа активность - 107 МЕ/мг.
Недостатками известного способа вл юс :
низкий выход целевого продукта, св занный с образованием побочных продуктов на стадии отщеплени защитных групп в жидком аммиаке , недостаточно высока окситоцическа активность и сложность проведени процесса,
св занна с осуществлением синтеза в жидком аммиаке при температуре -60°С.
Цель изобретени - повышение выхода и качества целевого продукта и упрощение технологии процесса. Это достигаетс описываемым способом получени окситоцина и дезаминоокситоцина из S - защищепного нонапептида формулы NВОС - R - тирозил - изолейцил - глутаминиласпарагинил - цистеипил - пролил - лейцилглицина , где R - цистеинил, р-меркаптопропионил , отщеплением S - защитных групп электролизом с последующей окислительной циклизацией и выделением целевого продукта , заключающийс в том, что в качестве S-защитных групп используют S - бензамидометильную группу и отщепление последней провод т электролизом в среде диметилформамида при 20-30°С. Реакции электрохимического отщеплени S-защитных групп протекают за 40-50 мин. Последующее окислительное замыкание дисульфидного цикла провод т 0,0114 н. раствором феррицианида кали . После очистки продукта .методом гельфильтрации на Sephadex G-15 получают дезамипоокситоцин с выходом 67%, ВОС-окситоцин - 68-72%. Обработка последнего 90%-ной трифторуксусной кислотой приводит к образованию окситоцина с выходом 52-57%. Окситоцитоцическа активность полученных продуктов: 155- 174 МЕ/мг дл окситоцина и 680 МЕ/мг дл дезаминоокситоцина. Электрохимическое отщепление S - бензамидометильной группы проходит селективно, не затрагива пептидные св зи, это исключает образование побочных продуктов и обеспечивает увеличение выхода и чистоты целевого продукта. Пример 1. Окситоцин. 100 мг (0,066 ммоль) амида N-BOC-S-бензамидометил - цистеинил - тирозил-изолейцилглутаминил - аспарагинил - S - бензамидометил - цистеинил - пролил - лейцил - глицина раствор ют в 8 мл безводного диметилформамида и электризуют на ртутном катоде на фоне 1%-ного BU4NC104 в безводном диметилформамида при напр жении от -2,0 до -2,2 В и температуре 20-23°С в течение 35 мин. Растворитель упаривают при пониженном давлении в атмосфере азота при 20°С, остаток раствор ют в 100 мл воды. рН полученного раствора довод т до 70,5 н. раствором аммиака. Продукт окисл ют 9,2 мл 0,0114 н. раствором феррицианида кали в течение 30 мин в атмосфере азота. Желтоватый раствор обрабатывают ионнообменной смолой Dowex 2X10 (Cl) в течение 15 мин до исчезновени желтой окраски, фильтруют. Фильтрат упаривают в вакууме при температуре 20-25°С. Полученный масл нистый остаток раствор ют в 3-5 мл 50%-ной уксусной кислоты, внос т в колонку (2,5X150) с Sephadex G-15 и элюируют 50%-ной уксусной кислотой. Элюат лиофилизуют. Получают 55 мг (68,8%) ВОС - окситоцина; т. пл. 167-169°С. alg -70° (с 0,1; этиловый спирт). Найдено, %: С 47,92; Н 6,72; N 13,61. C48H74Ni2Oi4S2-6n2O. Вычислено, %: С 47,44; Н 7,13; N 13,82, 50 мг ВОС - окситоцина обрабатывают 6мл 90%-ной трифторуксусной кислоты при 20°С в течение 30 мин, фильтруют, к фильтрату прибавл ют 40 мл воды и смесь упаривают в вакууме при 30°С. К остатку добавл ют еще 40 мл воды, лиофилизуют. Продукт сущат в вакууме, получают 34,4 мг (83,1%) окситоцина . Выход окситоцина 52%, счита на защищенный нонапептид. (с 0,1; 50%-на уксусна кислота ). Окситоцическа активность 155 МЕ/мг. Пример 2. Окситоцин. 200 мг (0,132 ммоль) амида N-BOC-S-бензамидометил - цистеинил - тирозил-изолейцилглутаминил - аспарагинил - S - бензамидометил - цистеинил - пролил - лейцил - глицина раствор ют в 20 мл безводного диметилформамида и электролизуют на ртутном катоде на фоне 1%-ного BU4NC1O4 в безводном диметилформамиде при напр жении от -2,0 до -2,2 В и температуре 25-30°С в течение 45 мин. Обработкой реакционной смеси, аналогично описанной в примере 1, получают 115 мг (71,9%) ВОС-окситоцина; т. пл. 168-170°С. -70,3° (с 0,2; этиловый спирт). Найдено, %: С 47,87; Н 6,84; N 13,60. C48H74Ni2Oi4S2-6H2O. Вычислено, %: С 47,44; Н 7,13; .N 13,82. Отщеплением ВОС-группы 90%-ой трифторуксусной кислотой получают 75,5 мг (79,2%) окситоцина. Выход 57%, счита на защищенный нонапептид . ,3° (с 0,1; 50%-на уксусна кислота). Окситоцическа активность 174 МЕ/мг. Пример 3. Дезаминоокситоцин. 68 мг (0,052 ммоль) амида S - бензамидометил - р - меркаптопропионил - тирозил-изолейцил - глутаминил - аспарагинил - S - бензамидометил - цистеинил - пролил - лейцилглицина раствор ют в 8 мл безводного диметилформамида и электролизуют на ртутном катоде на фоне 1%-ного BU4NC1O4 в диметилформамиде при температуре 20-25°С в течение 40 мин. Растворитель упаривают при пониженном давлении в атмосфере азота при 20°С, остаток раствор ют в 100 мл воды. рН раствора довод т до 7 добавлением 0,5 н. аммиака и продукт окисл ют 6,4 мл 0,0114 н. раствором феррицианида кали в течение 30 мин в атмосфере азота. Реакционную массу обрабатывают ионообменной смолой Dowex 2X10 (С1) в течение 15 мин до исчезновени желтой окраски, фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме при температуре 20-25°С. Остаток раствор ют в 3 мл 50%-ной уксусной кислоты , внос т в колонку (2,5X150 см) с Sephadex G-15, элюируют 50%-ной зксусной кислотой . Собранный элюат лиофилизуют, получают 33,3 мг (65%) дезаминоокситоцина.
,5° (с 0,5; 1 и. уксусна кислота ).
Окснтоцическа активность 650 МЕ/мг (по тесту сокращени матки).
Пример 4. Дезаминоокситоцин.
131,4 мг (0,1 ммоль) амида S - бензамидометил - р - меркаптопропионил - тирозил-изолейцил - глутаминил - аспарагинил - S - бензамидометил - цистеинил - пролил-лейцил-глицина раствор ют в 15 мл безводного диметилформамида и электризуют на ртутном катоде на фоне 1%-ного Bu4NC104 в диметилформамиде при напр жении от -2,0 до -2,2 В и при температуре 25-30°С в течение 45 мин.
Обработав реакционную массу в услови х.
описанных в примере 3, получают мг
(70%) дезаминоокситоцина.
-90° (с 0,5; 1 и. уксусна кислота). Окситоцическа активность 680 МЕ/мг (по тесту сокращени матки).
Claims (1)
- Формула изобретени Способ получени окситоцина и дезамипоокситоцина из S - защищенного нонапептидаформулы N - БОС - R - тирозил - изолейцилглутаминил - аспарагинил - цистеинил - пролил - лейцил - глицина, где R - цистеинил, р-меркаптопропионил, отщеплением S-защитных групп электролизом с последующей окислительной циклизацией и выделением целевого продукта, отличающийс тем, что, с целью увеличени выхода, повышени качества продукта и упрощени процесса, в качестве S - защитных групп используют S - бензамидометильную группу и провод т электролиз в среде диметилформамида при 20-30°С.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU762386195A SU586165A1 (ru) | 1976-07-14 | 1976-07-14 | Способ получени окситоцина и дезаминоокситоцина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU762386195A SU586165A1 (ru) | 1976-07-14 | 1976-07-14 | Способ получени окситоцина и дезаминоокситоцина |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU586165A1 true SU586165A1 (ru) | 1977-12-30 |
Family
ID=20670573
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU762386195A SU586165A1 (ru) | 1976-07-14 | 1976-07-14 | Способ получени окситоцина и дезаминоокситоцина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU586165A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002062826A1 (fr) * | 2001-02-07 | 2002-08-15 | Vadim Viktorovich Novikov | Procede de fabrication des peptides |
-
1976
- 1976-07-14 SU SU762386195A patent/SU586165A1/ru active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002062826A1 (fr) * | 2001-02-07 | 2002-08-15 | Vadim Viktorovich Novikov | Procede de fabrication des peptides |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Akabori et al. | A new method for the protection of the sulfhydryl group during peptide synthesis | |
| EP0000063B1 (en) | Dipeptide derivatives of 7-(n-alpha-substituted or non-substituted x-arginyl)-amino-4-methyl-coumarin | |
| Nicolaides et al. | Studies on the synthesis of polypeptides. Bradykinin | |
| JPH0196194A (ja) | グルタミン誘導体の製造方法 | |
| US4725645A (en) | Process for synthesising peptides | |
| Ciardelli et al. | Des-N-tetramethyltriostin A and bis-L-seryldes-N-tetramethyltriostin A, synthetic analogs of the quinoxaline antibiotics | |
| CN110642753A (zh) | 一种氨基酸衍生物 | |
| Nativ et al. | 2‐Azabicyclo [3.2. 0] Heptane‐3‐One | |
| Hemmi et al. | Total synthesis of FK-156 isolated from a Streptomyces as an immunostimulating peptide: application of a novel copper chelate amino protection | |
| SU586165A1 (ru) | Способ получени окситоцина и дезаминоокситоцина | |
| Bodanszky et al. | Side reactions in peptide synthesis. 8. On the phenacyl group in the protection of the. beta.-carboxyl function of aspartyl residues | |
| SE452318B (sv) | Aminosyror till anvendning som mellanprodukter vid framstellning av bestatiner | |
| Omenn et al. | Solid-phase peptide coupling | |
| JPS5811941B2 (ja) | ブラディキニン環状類似体 | |
| US3467667A (en) | Tetrahydropyranyl tyrosine n-carboxy (and thiocarboxy)anhydrides | |
| SU993816A3 (ru) | Способ получени октапептидов | |
| US3741948A (en) | Process for the preparation of n-protected - alpha - l-glutamyl - s -benzyl-l-cysteinylglysines | |
| Sato et al. | Studies of peptide antibiotics. XXXV. Synthesis of gramicidin S by a fragment solid-phase method. | |
| CN107098950A (zh) | 一种ghk或ahk三肽的合成方法 | |
| Veber et al. | Synthesis of peptides in aqueous medium. VI. Synthesis of an unsymmetrical cystine peptide fragment of insulin | |
| KOPPLE et al. | Synthesis and backbone conformations of cyclic hexapeptides cyclo‐(Xxx‐Pro‐D‐Gln) 2 | |
| CN112876502A (zh) | 一种n-三甲基硅乙氧羰基-n-甲基-l/d-亮氨酸的制备方法 | |
| Shimonishi | Studies of the Synthesis of Peptides Containing C-Terminal Glutamine. II The Synthesis and Use of α-p-Nitrobenzyl γ-Methyl L-Glutamate | |
| US3247178A (en) | Synthesis of peptides containing alpha, omega-diamino acids protected by phthalyl and t-butyloxycarbonyl groups | |
| Fridkin et al. | Use of Nim-t-Butyloxycarbonyl in the Synthesis of Poly-L-histidine |