SU584801A3 - Method of preparing ferment oxidizing cholesterin to hydrogen peroxide and cholestenone - Google Patents
Method of preparing ferment oxidizing cholesterin to hydrogen peroxide and cholestenoneInfo
- Publication number
- SU584801A3 SU584801A3 SU7301934663A SU1934663A SU584801A3 SU 584801 A3 SU584801 A3 SU 584801A3 SU 7301934663 A SU7301934663 A SU 7301934663A SU 1934663 A SU1934663 A SU 1934663A SU 584801 A3 SU584801 A3 SU 584801A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- enzyme
- buffer solution
- phosphate buffer
- culture
- atcc
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
1one
Изобретение относитс к области микробиологии.This invention relates to the field of microbiology.
Способ получени фермента, окисл ющего холестерин до перекис;и водорода и холестенона заключаетс в том, что биомассу микроорганизмов-продуцентов экстрагируют буфером, содержащим неионогенное поверхностно-активное вещество и выдел ют целевой прод кт из бесклеточного экстракта, кроме того в качестве продуцента используют культуру ProactijioJnvce eivthropotis штамм NBC 9158. или ЛТСС 17895,или АТСС 42 77,или культуру Bocardioi formica штамм АТСС 14811,The method of obtaining the enzyme that oxidizes cholesterol to peroxide, and hydrogen and cholestenone is that the biomass of producer microorganisms is extracted with buffer containing a non-ionic surfactant and the target product is isolated from the cell-free extract, in addition, ProactijioJnvce culture is used as a producer eivthropotis strain NBC 9158. or LTCC 17895, or ATCC 42 77, or culture of Bocardioi formica strain ATCC 14811,
Микроорганизмы разлагают, раствор ют и извлекают с помощью буферного раствора, содержащего неионогенное поверхностно-активнае средство.The microorganisms are decomposed, dissolved and removed using a buffer solution containing a non-ionic surfactant.
Предпочитаекыьда неионогенными поверхностно-активными средствами вл ютс ёьпкиларилэтиленг. и аддукты окисей полиэтилена и полипропилена, в особенностг: их сложные эфиры. Принципиальна концентраци пов ерхностно-активного средства в используемом дл разложени (растворени ) и дл экстрагировани в буферном растворе зависит от примен емого поверхностно-активного средства и может определ тьс с помощью предварительных испытаний. ПриPreferred non-ionic surfactants are sterile ethylene. and adducts of polyethylene and polypropylene oxides, in particular: their esters. The principal concentration of the surfactant used in decomposition (dissolution) and for extraction in a buffer solution depends on the surfactant used and can be determined by preliminary tests. With
годны концентрации 0,01-3%, преимущесвенно 0,1-1%. РН буферного раствора 5-9, предпочтительно 6-8.concentrations of 0.01–3%, mostly 0.1–1%, are suitable. The pH of the buffer solution is 5-9, preferably 6-8.
Ьсобенно хорошие результаты получаютс , если микроорганизм перед растворением и перед экстракцией в прису ствии поверхностно-активного средства промывают смесью бутанола и воды.Mostly good results are obtained if the microorganism is washed with a mixture of butanol and water before dissolving and before extraction in the presence of a surfactant.
Полученный экстракт, содержащий в растворе Фермент, очищают на ионообменнике .The resulting extract, containing the enzyme in solution, is purified on an ion exchanger.
В качестве ионообменника примен ют анионообменные смолы, в особенности слабобазисные сорта, предпочтительными ионообменниками вл ютс и те, которые несут диэтиламиноэтаноловую группу.Anion exchange resins, in particular low basic varieties, are used as the ion exchanger, and those that carry the diethylaminoethanol group are preferred ion exchangers.
Вымывание ионообменника осуществл ют 0,01-0,2 М буферным раствором с рН 5-9. Концентраци поверхностно-активного средства:преимущественно 0,052% .Leaching of the ion exchanger is carried out with 0.01-0.2 M buffer solution with a pH of 5-9. Concentration of the surfactant: advantageously 0.052%.
Предпочтительно применение 0,03- 0,1 М фосфатного буферного раствора с содержанием 0,2-0,7% поверхностноактивного неионогенного средства.Preferably the use of 0.03-0.1 M phosphate buffer solution with a content of 0.2-0.7% surfactant non-ionic agent.
Из полученного таким путем элюата фермент осаждают с помощью солей или органических растворителей, например сульфата аммокк , метанола и других.From the eluate obtained in this way, the enzyme is precipitated with the help of salts or organic solvents, for example ammok sulfate, methanol and others.
Дл повторного растворени , осажденного фермента примен ют.. буферный раствор, который содержит небольшое количество поверхностно-активного 1гредства.5To re-dissolve the precipitated enzyme, a buffer solution is used which contains a small amount of surfactant 1 agent. 5
Фермент, полученный после и нооб шнного вымывани можно использовать непосредетвенно дл количественного определени холестерина согласно уравнению «О колестёрин (НН) ( О,холестенон4-НаОйАктивность фермента и эффективность предла аемого способа определ ют благодар тому, ЧТО1 образукадуюс фракцию HgO замер ют по известным методам оп- , ределени The enzyme obtained after washing and washing can be used directly for the quantitative determination of cholesterol according to the equation "O colesterin (HH)" (O, cholestenone 4-NaOiE enzyme and the effectiveness of the proposed method is determined by THAT1 forming the fraction of HgO measured by known methods -, definition
Микроорганизмы выращивают на среде из минеральных солей, содержащих пептон; и как только достигают логариф;ьшчвской фазы роста, ;добавл ют водиую эмульсию, которую изготавливают путем мокрого размола водной суспеввчи холестерина и последующей стерилизацией при высокой температу зе.Microorganisms are grown on a medium of mineral salts containing peptone; and as soon as the logarithm of the growth phase is reached, water emulsion is added, which is made by wet grinding of an aqueous suspension of cholesterol and subsequent sterilization at high temperature.
Таким Ьбразом удаетс достичь 100% использовани холестерина в течение 25 односуточного выравнивани культуры (| шкроорганизма) при выходе L-2 г чисгой субстанции сухих клеток. Бульон с купьтуроП добавл ют в таком колидестве , что задают 1-20 г холестерина 30 йа каждый литр в период роста. Загруэку осуществл ют порци ми по мере микроорганизмов.In this way, it is possible to achieve 100% use of cholesterol during the 25 one-day leveling of the culture (microorganism) with the release of L-2 g of the dry cell substance. A broth with cuprope is added in such a quantity that 1-20 g of cholesterol 30 y are set per liter during the growth period. Zagrueku is carried out in portions as microorganisms are used.
Небольшое количество холестерина добавл ют в бульон с культурой ещё в ад начале роста, т.е. перед достижением логарифмической фазы роста.A small amount of cholesterol is added to the culture broth at the beginning of growth, i.e. before reaching the logarithmic growth phase.
В качестве питательной среде исполь- ауют водный.раствор, содержащий вес.%s 0,1-2 пептона, 0,01-0,2 , 0,05i , 0, гептагидрата суль ата магни , котора содержит следы хлорида железа и хлорида кальци , рН 6-9. Начсшьна загрузка холестерина составл ет 0,01-0,1%.An aqueous solution containing wt.% S 0.1-2 peptone, 0.01-0.2, 0.05i, 0, magnesium sulfate heptahydrate, which contains traces of ferric chloride and calcium chloride, is used as a nutrient medium. pH 6-9. The initial cholesterol loading is 0.01-0.1%.
Удельное содержание фермента до 7 V/r сухой массы бактерий и 1-3,5 г сухой массы бактерий на .каждый литр йигательной среды.The specific content of the enzyme is up to 7 V / r of the dry mass of bacteria and 1-3.5 g of the dry mass of bacteria per each liter of an inflammatory medium.
Удельное содержание микроорганизвж в в ферменте удаетс , увеличить благодар тому что лшкроорганизм сна«аала вЕзраашвают на ацетате и затем на холестерине в качестве единственного |йсточника углерода,.The specific content of microorganisms in the enzyme is improved by increasing the amount of sleep and alaborum on acetate and then on cholesterol as the only carbon source.
Так, например при выращиваний-мик- роорганизмбв на среде из минеральных солей с указанным выше составом, но при замене пептона ацетатом вколичестве 0,5 вес,% до начала добавлени холестериновой эмульсии достига- Йй ют повышени удельной активности до 24 V/r сухой массы, одновременно увеличиваетс содержание сухой массы до б,5-г/л. Значительное повышение содержани сухой масйы и активности до- g$So, for example, when growing microorganisms on a medium of mineral salts with the composition indicated above, but when replacing peptone with acetate in a quantity of 0.5% by weight, prior to the addition of the cholesterol emulsion, the specific activity increases to 24 V / r. at the same time, the dry mass content increases to b, 5-g / l. Significant increase in the dry oil content and activity up to $ g
ртигают благодар тому, что к водной суспензии холестерина добавл ют в качестве эмульгатора небольшое количестйо 0,02-1, предпочтительно 0,05-0,3 вес.-% дрожжевого экстракта.It is fired because a small amount of 0.02-1, preferably 0.05-0.3% by weight of the yeast extract is added as an emulsifier to the aqueous cholesterol suspension.
Предпочтительна питательна среда состоит из водного раствора с содержанием 0,1-2 вес.% ацетата (ацетата чм мони ), 0,01-0,2 вес,% KgHPO,, 0,051 вес.% , 0,05-0,l вес.% сульфата магни в качестве гептагидрата, следовхлорида железа и хлорида кальци с величиной рН 6-9. При достижении логарифмической $азы роста ацетат эамен ют хо.естерином. Чтобы величина рН в период эьфащивани оставалась посто нной , ttenpeiX:iBHO или порци ми загружают кислоту. Во врем фаз роста с помощью ацетата в качестве источника углерода примен ют уксусную кислоту , как только переход т на холестерин , уксусную кислоту замен ют минеральной кислотой. В этой второй стадии роста npHMeansTt сол ную кислоту дл р«гулирован11Я величины рн. При этом достигают активность до 30V/r сухол ы&ссы,The preferred nutrient medium consists of an aqueous solution containing 0.1–2 wt.% Acetate (acetate monomer), 0.01–0.2 wt.% KgHPO, 0.051 wt.%, 0.05–0, l weight .% magnesium sulphate as heptahydrate, trace iron chloride and calcium chloride with a pH of 6-9. Upon reaching the logarithmic growth of acetate, the acetate is aamented with Ho-sterol. In order to keep the pH constant during the efastening, ttenpeiX: iBHO or acid is charged in portions. During the phases of growth using acetate, acetic acid is used as a carbon source, and as soon as it is converted to cholesterol, acetic acid is replaced with mineral acid. In this second stage of growth, npHMeansTt hydrochloric acid for p "guided pH value. At the same time reach an activity of up to 30V / r dry s & ssy,
; Пример 1.2л питательной среды, состо щей из вес.% казеинового пептона, 0,05 вес.% , 0,2 вес,% H KjPOv, 0,02 вес.% гепта-гидрата сульфата магни , следов хлорида железа и хлорида кальци в водопроводной водо и с помощью КОН регулируют величину рН 7,5, засевают в качающейс колбе с 200 мл хорошо вы рсшей предварительной культуры Р г OCSC i 1 по m у с е 5 er-vthropogig ЫВ(СГ Э15Жи сильно вентилируют иа магнитной мешалке. С началом логарифмической фазы роста, определ емой по возникающему увеличению помутнани , в период дальнейшего В1:фащивани периодически загружают приготовленную с помощью мокрого размола, стерилизованную холестериновую эмульсию,таким образом, что в течение 20 ч в колбу загружают 10 г холестерина. Через 5 ч после по- следней загрузки клеточную массу собирают nyteM центрифугировани . Получают 4 г сухой массы бактерий. После расщеплени с помощью ультразвука получают 3V/г фермента.; Example 1.2 l of a nutrient medium consisting of wt.% Casein peptone, 0.05 wt.%, 0.2 wt.% H KjPOv, 0.02 wt.% Magnesium sulfate heptahydrate, traces of ferric chloride and calcium chloride in tap water and using KOH regulate the pH value of 7.5, seeded in a rocking flask with 200 ml of a well-grown pre-culture P g OCSC i 1 by m y e e 5 er-vthropogig LB (SG E15Gi is ventilated with a magnetic stirrer. C the beginning of the logarithmic phase of growth, determined by the resulting increase in turbidity, in the period of further B1: fascations are periodically loaded at prepared by wet grinding, sterilized cholesterol emulsion, in such a way that 10 g of cholesterol is loaded into the flask for 20 h. 5 h after the last loading, the cell mass is collected by centrifugation 4 g of the dry mass of bacteria. ultrasound get 3V / g of enzyme.
Пример 2. в сосуде культивируют 15л описанной в примере 1среды вместе с 0,5л хорошо выращенной предварительной культурой PfoactinoTTtTces ervttirpogis АТСС 17895 при сильной аэрации.С самого начала загружают 0,05% холестерина .С началом логарифмического рос та непрерывно загружают cтepилизoвaнt ную холестериновую суспензию в течение дальнейшего выращивани , так что в ферментер загружают в целом 50 г холестерина за 15 ч выращивани . При этом получают бактериальн то массу в 40 г. Из бактериальной массы посредством расщеплени (разложени ) ультразвуком получают 7,1 V /г фермента.Example 2. 15l of the medium described in example 1 together with 0.5l of well-grown pre-culture PfoactinoTTtTces ervttirpogis ATCC 17895 with strong aeration is cultured in a vessel. From the very beginning, 0.05% of cholesterol is loaded. over the course of further cultivation, so that a total of 50 g of cholesterol is loaded into the fermenter for 15 hours of cultivation. A bacterial mass of 40 g is obtained. From the bacterial mass, 7.1 V / g of the enzyme is obtained by sonication (decomposition) with ultrasound.
Приме р 3. Как описано в примере 2, в рабочем объеме 60 л культивируют бактерии Prooctinomyces .erylhropofis (ВС 9158) . Приблизительно через 25 ч ввод т свежую питательную среду в сосуд дл выращивани бактерий и забирают раствор с вьфосшей культурой из этого сосуда. Example 3. As described in Example 2, bacteria Prooctinomyces .erylhropofis (BC 9158) are cultivated in a working volume of 60 l. Approximately 25 hours later, fresh nutrient medium is introduced into the vessel for growing bacteria, and the solution containing the grown culture is withdrawn from this vessel.
Одновременно в ферментатор ввод т холестериновую суспензию; за 1 ч загружают около 3 г холестерина. Таким образом при непрерывном выращивании получеиот 1,2-1,5 г/л бактериальной сухой массы с одинаковой удельной активностью .At the same time, a cholesterol suspension was introduced into the fermenter; for 1 h load about 3 g of cholesterol. Thus, with continuous cultivation, from 1.2 to 1.5 g / l of bacterial dry mass with the same specific activity.
Пример4. В ферментаторе емкостью 20 ПК 15 л питательной среды, состо щей из 0,5 вес.% ацетата аммони , 0,05 вес.% вторичного фосфата кали , 0,2 вес.% первичного фосфата аммони , 0,02 вес.% гептагидрата сульфата магни и следов хлориду железа и кальци в водопроводной воде, засеивают 0,5 л хорошо выращенной предварительной культуры бактерий Proactinomjce rythrofotiA ЫВС 9158 и культивир1тот пр сильной аэрации.Example4. In a fermenter with a capacity of 20 pcs, 15 liters of nutrient medium consisting of 0.5 wt.% Ammonium acetate, 0.05 wt.% Secondary potassium phosphate, 0.2 wt.% Primary ammonium phosphate, 0.02 wt.% Sulfate heptahydrate magnesium and traces of ferric chloride and calcium in tap water, sow 0.5 l of a well-grown pre-culture of bacteria YBC 9158 and aerated with strong aeration.
Величину рН культуры поддержива от посто нной посредством текущей,загруз ки 20%-ной уксусной кислоты до конценрации биомассы около 1,5 г/л. После достижени этого содержани стерилизованную суспензию непрерывно загружают в ходе дальнейшего выращивани таким образом, что в целом в ферментатор загружают 30 г холестерина в течение 20 ч выргшшвани культуры. Холестеринова суспензи содержит 0,1-0,2% дрожжевого экстракта. Зааем дл нейтрализации культуры вместо уксусной кислоты используют разбавленную сол ную кислоту.The culture pH is maintained constant by means of the current load of 20% acetic acid until the biomass concentration is about 1.5 g / l. After this content has been reached, the sterilized suspension is continuously loaded during further growth in such a way that, in general, 30 g of cholesterol is loaded into the fermenter during 20 hours of culture. Cholesterol suspension contains 0.1-0.2% yeast extract. A dilute hydrochloric acid is used to neutralize the culture in place of acetic acid.
После завершени культивировани биомассу с помс цыо центрифугировани отдел ют от раствора культуры.After completion of the cultivation, the biomass by centrifuging is separated from the culture solution.
Примерз. При двухступенчатом непрерывном способе выращивани комбинируют два ферментатора с рабочими объемами 15 л дл первой и 70 л дл второй ступени таким образом, что при часовом протоке 4 л, описанной в примере 1 питательной средаа получаетс дол протока 0,25-0,30 дл первой ступени и 0,055-0,065 дл второй. К началу культивировани вторую ступень засевают хорошо выращенной предварительной культурой бактерий Prvac-. tinomyces eirithropolis , ATGC 17895 В количестве 1,5 л и вторую ступень засевают такой же предварительной культурой в количестве 0,5 л при сильной; аэрации обеих ступеней, причем первую ступень нейтрализуют с помощью уксусной кислоты, а вторую ступень с по (ющыо сол ной кислоты.Froze With a two-step continuous growing method, two fermenters are combined with working volumes of 15 liters for the first and 70 liters for the second stage, so that when the flow rate is 4 liters, the nutrient medium described in Example 1 gives a flow ratio of 0.25-0.30 for the first stage and 0.055-0.065 for the second. By the beginning of the cultivation, the second stage is seeded with a well-grown Prvac-α pre-culture. tinomyces eirithropolis, ATGC 17895 In the amount of 1.5 liters and the second stage are inoculated with the same preliminary culture in the amount of 0.5 liters with a strong one; aeration of both steps, the first step being neutralized with acetic acid, and the second step with (hydrochloric acid).
Одновременно во вторую ступень включают систему притока (4 л питательной среды/чар). Величину рН выдерживают 7-7,5. Таким образом за 1 ч получают 4 л бульона с культурой при 7 г/л при активности 30 /г сухой массы. Раствор культуры собирают в охлажденном резервуаре и бактериальную массу выдел ют из него на непрерывно действующей центрифуге. Дл регулировани виличины рН в первой ступени на каждый час требуетс приблизительно 10 г :100%-ной уксусной киспоты .At the same time in the second stage include the inflow system (4 l nutrient medium / enchantment). The pH value is kept 7-7.5. So for 1 h get 4 l of broth with the culture at 7 g / l with an activity of 30 / g dry weight. The culture solution is collected in a cooled tank and the bacterial mass is isolated from it in a continuously operating centrifuge. Approximately 10 g is required per hour for adjusting the pH in the first stage: 100% acetic acid.
fipHMepS. 40 мл суспензии с бактери ми Hocapdia erythropofis (около 10 г сухой массы)примешивают к 40 мл 1г -бутанола и в течение нескольких минут перемешивают при комнатной температуре. Смесь центрифугируют и из нее удал ют бутанол и лишнюю водную фазу. Осадок снова примешивают к 40 мл воды и после изготовлени гомогенной суспензии клеток снова при-мешивают к 40 мл п -бутанола, несколко минут-перемешивают и. центрифугиру-t ют. Осадок суспендируют в 40 мл 0,01 ; буферного раствора фосфата (рН 7,0), к которому добавл ют 0,3% неионогенного поверхностно-активного средства (алкиларилполиэтиленгликоль) и перемешивают в течение 30 мик при комнат- ной температуре. Затем центрифугируют и оссщок извлекают. Экстракт содержит около 120 ед. фермента с уделаИой активностью 3 ед/м протеина.fipHMepS. 40 ml of the suspension with the bacteria Hocapdia erythropofis (about 10 g dry weight) are mixed into 40 ml of 1 g β-butanol and stirred for several minutes at room temperature. The mixture was centrifuged, and butanol and excess aqueous phase were removed. The precipitate is again mixed into 40 ml of water and, after making a homogeneous suspension of the cells, is again mixed with 40 ml of p-butanol, mixed for a few minutes and. centrifugal-t yut. The precipitate is suspended in 40 ml of 0.01; a phosphate buffer solution (pH 7.0), to which 0.3% non-ionic surfactant (alkylaryl polyethylene glycol) is added and stirred for 30 mic at room temperature. Then centrifuged and residual is removed. Extract contains about 120 units. enzyme with an activity of 3 u / m protein.
Этот экстракт примешивают к твер- ; дому сульфату аммони до концентра ,ции 1,3 М в сульфате аммони при температуре О С, затем суспензию центрифугируют , осадок собирают на основе очевидной липофильной доли на поверхт ности раствора. Спеченный осадок фил$труют , рас-рвор ют с 0,01 М буферного раствора фосфата, рН 7 и при температуре О С подвергают диализу по отношению к тому же буферному раствору, Диализированный раствор пропускают через уравновешенную с помощью 0,01 М фосфатного буферного, раствора колонну товарного анионита с диэтилЬминоэтаноловыми группами на основе дэкстрана. При этом фермент адсорбируетс . После промывки колонны с помощью того же буферного раствора npoj извод т последовательно промывку растворами с 0,5%, 2% и 5% указанного вы-Ь ше поверхностно-активного средства в воде. При этом вымываютс большие количества загр знений.This extract is mixed into the solid; house ammonium sulfate to a concentration of 1.3 M in ammonium sulfate at a temperature of 0 ° C, then the suspension is centrifuged, the precipitate is collected on the basis of an obvious lipophilic fraction on the surface of the solution. The sintered sediment is filtered, dissolved with 0.01 M phosphate buffer solution, pH 7 and dialyzed at a temperature of 0 ° C with respect to the same buffer solution. The dialyzed solution is passed through equilibrated with 0.01 M phosphate buffer, solution of a column of commodity anion exchange resin with diethylminoethanol groups based on dextran. In this case, the enzyme is adsorbed. After washing the column with the same buffer solution npoj, washing with solutions with 0.5%, 2% and 5% of the specified above-surfactant in water is successively performed. In this case, large quantities of contaminants are washed out.
Claims (2)
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE2224133A DE2224133B2 (en) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Use of certain strains of microorganisms to obtain cholesterol oxidase, which oxidizes cholesterol with O low 2 to cholestenone + H low 2 O low 2 |
DE2224131A DE2224131B2 (en) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Process for obtaining the enzyme cholesterol oxidase, which oxidizes cholesterol with O deep 2 to cholestenone and H deep 2 O deep 2 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU584801A3 true SU584801A3 (en) | 1977-12-15 |
Family
ID=25763267
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU7301934663A SU584801A3 (en) | 1972-05-17 | 1973-05-17 | Method of preparing ferment oxidizing cholesterin to hydrogen peroxide and cholestenone |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
HU (1) | HU169971B (en) |
SU (1) | SU584801A3 (en) |
-
1973
- 1973-05-16 HU HUBO001437 patent/HU169971B/hu unknown
- 1973-05-17 SU SU7301934663A patent/SU584801A3/en active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HU169971B (en) | 1977-03-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4144129A (en) | Cholesteroloxidase and method for its production from microorganisms | |
US2576932A (en) | Fermentation process for production of vitamin b12 | |
CN110791462A (en) | Bacillus subtilis and application thereof in fermentation production of adenosine | |
US3776816A (en) | Process for producing steroid dehydrogenase | |
EP0082114B1 (en) | Microorganisms of the genus hyphomicrobium and method for the decomposition of compounds containing methyl groups in aqueous solutions | |
Lee et al. | Large-scale production of Azotobacter | |
Garrett et al. | Photosynthetic purification of the liquid phase of animal slurry | |
SU584801A3 (en) | Method of preparing ferment oxidizing cholesterin to hydrogen peroxide and cholestenone | |
CN105036330B (en) | Preparation method of crystalline L-arginine alpha-ketoglutarate (AAKG) | |
US2951017A (en) | Cobalamin producing fermentation process | |
JPS59151894A (en) | Production of yeast of high glutathione content | |
DE69520829T2 (en) | Production of L - ascorbic acid in microorganisms | |
US3986933A (en) | Method of preparing yeasts enriched in l-lysine and capable of excreting organic acids | |
MÄKINEN et al. | Effect of Xylitol on Some Food‐Spoilage Microorganisms | |
US2816856A (en) | Improvement in production of vitamin b12 products by propionibacterium freudenreichii | |
US5792646A (en) | Process for preparing S. cerevisiae containing organically bound germanium | |
DE1695598C3 (en) | ||
US2817624A (en) | Preparation of ergosterol containing yeast | |
JPS6279777A (en) | Production of superoxide dismutase | |
DE1922843A1 (en) | Microbiological oxidation process | |
CN117384770B (en) | Method for continuous flow production of single cell protein | |
US3616249A (en) | Process for growing yeast on hydrocarbons | |
SU506613A1 (en) | The method of obtaining biomass | |
SU507644A1 (en) | Nutrient medium for cultivation of lytic enzyme producers | |
CN117165642A (en) | Fermentation method for co-producing rhamnolipid and PHA and separation method thereof |