Claims (2)
при непрерывном освешевии при 280С на полной среде Тами следующего состава, г/л: К N О, 5j КНз РО4 l.SSjMgfSO 7 Н г О 2,5; Ре S Од 0,003; ЭДТА 0,О37; раствор микроэлементов Лрнона 4-1 мл. Состав раствора микроэлементов, мг/л: НзВ04 2,86; MnCCj 1.81; Z.-n S О 0,222; Си S 04 .5Н О 0,О79/ Дл опыта клетки отдел ют от среды центрифугированием (3000 ху, 5 мин), oiw мывают от среды суспендированием в 3050 мл О,О1%-ного раствора Nft С и центрифугированием (3000 ху, 5 мин). За гем клетки суспендируют в нескольких миллилитрах 1/5 среды Успенского. В предварительных опытах установлено, что минимал ной средой дл недельного роста водорослей вл етс 1/5 полной среды Успенского. Состав полной среды Успенксого (г/л): КНОзО,025; Mgrgo -7 НдО 0,025; CoiCNO), ОД; 0,О25; КНг РО. 0,О345, К.СОз При опенке степени токсичности различных веществ их добавл ют к 1/5 среды Успенског-о в трех концентраци х, отличаю-, шихс одна от другой на пор док, например, О,1; 0,О1 и О,001 мг/л. К100 мл этого раствора добавл ют суспензию водорослей в количестве, дающем концентраций клеток 40-60 мг/л по силикагелевому показателю (СП). СП равен массе суспензии тонкоизмельченного силикагел с такой же оптической плотностью при 578 нм, что и суспензи водорослей. Он измер етс на фотоэлектроколориметре с фильтром, выдел ющим указанную линию ртутной лампы. В кон троль (1/5 среды Успенского) добавл ют то же количество суспензии водорослей. Пробу природной или сточной воды пропускают через суперцентрифугу с проточным ротором при 2500О об/мин дл отделение от взвесей. К 1ОО мл испытуемой воды добавл ют все питательные элементы 1/5 сре ды Успенского и суспензию водорослей, как указано выше. Приготовленные опытные и контрольные суспенааи с одинаковым разливают по 2О мл в 1ОО мл широкогорлые колбы Эрленмейера, закрывают ватными пробками и став т в люминостат ( непрерывное освешение лк vIинecцeнтнымв лампами дневного света, 2 к к, температура комнатна ). После 5- ;уточной инкубации колбы озвучивают в ванне ультразвукового очистител мощностью 100 Вт в течение 10-.15 сек. чЯто превращает асе осевшие на дно и сте«ки колб клетки водорослей в суспензию без их повреждени . Определ ют СП контрол ( СП ) и опыта (СП, ) по оптической плотности при 578 нм. Расчеты провод т по формуле Хэйвуда (дл определени времени удвоени культуры водорослей), %: 100 е (СПк/СПо) 100 (СП5-/СПо) - процент изменени времени удвоени культуры. СП о - начальный силикагелевый показатель , СП„ - конечный силикагелевый пока- затель контрол , СПг - конечный силикагелевый показа. тель опыта. Хот в указанной формуле врем не фигурирует и, слеповательно, результат можно получить через одни или двое суток, дл несинхронной культуры рекомендуетс п ть суток, поскольку за это врем отмечена наибольша чувствительность. Ошибка опрепеле1Ш около 8%. Уменьшение или увеличение времени инкубации приводит к увеличению относительной ошибки определени или к снижению чувствительности. Увеличение обьема опытной суспензии увеличивает относительную ошибку определени . Положен тельный разультаг свидетельствует о токсическом эффекте, отрицательный - о стимулирукшем. Результаты р да определений приведены в таблвде. Таблица Из таблицы видно, что предлагаемый способ опенки токсичности сточных и прв родных вод не зависит от аремони года и прост в осуществлении, дл этого необхс « ДИМЫ только лк линостат, ФЗК и УЗ-очистителъ . Оценка качества воды только по результатам гидрохимических определений, прин та в системе контрол большинства стран, позвол ет судить о суммарной характеристике воды лишь косвенно. По предложенно му способу можно непосредственно оценить качество воды с точки зрени обеспечени жизни гидробионтов. Введевие этого показател в систему контрол поавол ет ограничитьс только теми гидрохимическими определени ми, которые имеют значение в определенном регионе. Формула изобретений 1. Способ оценки токсичности сточных и природных вод, включак лий инкубацию од ноклеточной зеленой водоросли ругепотЗобои определение разницы роста в опытной и контрольной пробах, отличающийс тем, что, с целью повышени чувствительности и точности оценки, в качестве водоросли берут несинхронную культуру мезофильного штамма Ct CoheE a pvfelioidoea 82(МГУ)вьгращенную на полной среде Тами , в начале инкубации культуру перенос т в минимализированную среду Успенского, подвергают седиментации и перед определением резуш татов оценки седи1ентированные клетки водоросли облучают ультразвуком. 2, Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и ц . : . , . -. . , 557OS8Уwith continuous refreshing at 280 ° C on a full Tamy medium of the following composition, g / l: K N O, 5j КНз РО4 l.SSjMgfSO 7 N g О 2,5; Re S Od 0,003; EDTA 0, O37; solution of trace elements lrnona 4-1 ml. The composition of the solution of trace elements, mg / l: NzB04 2,86; MnCCj 1.81; Z.-nS O 0.222; Cu S 04.55 O 0, O79 / For the experiment, the cells are separated from the medium by centrifugation (3000 xy, 5 min), oiw washed from the medium by suspending 3050 ml of O, O1% Nft C solution and centrifuging (3000 xy, 5 min) For heme, cells are suspended in a few milliliters of 1/5 Ouspensky environment. In preliminary experiments, it was found that the minimum medium for weekly growth of algae is 1/5 of the complete Ouspensky medium. The composition of the complete environment Uspenkogo (g / l): KNO, 025; Mgrgo -7 NDO 0.025; CoiCNO), OD; 0, O25; KNG PO. 0, O345, K.Soz. When a degree of toxicity of various substances is detected, they are added to 1/5 of Uspensk-O environment in three concentrations, differing from each other by an order of magnitude, for example, O, 1; 0, O1 and O, 001 mg / l. To 100 ml of this solution, a suspension of algae is added in an amount that gives cell concentrations of 40-60 mg / l according to silica gel (SP). SP is equal to the mass of finely divided silica gel suspension with the same optical density at 578 nm as the algae suspension. It is measured on a photoelectric colorimeter with a filter separating the indicated line of the mercury lamp. The same amount of algae suspension is added to the control (1/5 of the Uspensky environment). A sample of natural or wastewater is passed through a supercentrifuge with a flow-through rotor at 2500O rpm for separation from the slurries. All nutrient elements 1/5 of Ouspensky medium and algae suspension, as described above, are added to 1OO ml of test water. Prepared test and control suspensions with the same poured into 2 O ml in 1 OO ml wide-necked Erlenmeyer flasks, covered with cotton plugs and placed in a luminostat (continuous lighting of lux v iincentrant fluorescent lamps, 2 k, room temperature). After 5-; weft incubation flasks are voiced in an ultrasonic cleaner bath with a capacity of 100 watts for 10-15 sec. Something turns the algae cells that have settled to the bottom and the height of the flasks into suspension without damaging them. The SP of the control (SP) and of the experiment (SP,) are determined from the optical density at 578 nm. The calculations are carried out using the Haywood formula (for determining the algae culture doubling time),%: 100 e (SPk / SPo) 100 (SP5- / SPo) is the percentage change in the doubling time of the culture. SP about - the initial silica gel indicator, SP „- the final silica gel indicator of the control, SPG - the final silica gel display. tel experience. Although time does not appear in this formula, and dazzlingly, the result can be obtained after one or two days, five days are recommended for an asynchronous culture, since during this time the greatest sensitivity is noted. The error is about 8%. A decrease or increase in incubation time leads to an increase in the relative error of determination or to a decrease in sensitivity. Increasing the volume of the test suspension increases the relative error of determination. Positive illumination indicates a toxic effect, a negative one indicates a stimulating effect. The results of the p and the definitions are given in the table. Table The table shows that the proposed method of toxicity of sewage and fresh water does not depend on the area of the year and is easy to implement, for this it is necessary to “DIMY only lk linostat, FZK and ultrasonic cleaner. The assessment of water quality only based on the results of hydrochemical determinations, adopted in the control system of most countries, makes it possible to judge the total characteristics of water only indirectly. According to the proposed method, it is possible to directly evaluate the quality of water from the point of view of ensuring the life of hydrobionts. The introduction of this indicator into the system of control is limited only to those hydrochemical definitions that are relevant in a particular region. Claims 1. Method for assessing the toxicity of waste and natural waters, including incubation of single-cell green algae, defining the difference in growth in the test and control samples, characterized in that, in order to increase the sensitivity and accuracy of the assessment, nonsynchronous culture of the mesophilic strain is taken as algae Ct CoheE a pvfelioidoea 82 (MGU) grown on Tami's full medium, at the beginning of incubation, the culture is transferred to Ouspensky's minimalized medium, subjected to sedimentation and before determination of the results of the test APIS sedi1entirovannye algae cells irradiated with ultrasound. 2, the method according to claim 1, of tl and h a y y and c. :. , -. . 557OS8У
. ..: --. т : -: , : -v , / . ..: -. t: -::: -v, /
с тем, что облучение ультразвуком про-L Авторское свидетельство по з-кеdue to the fact that ultrasonic irradiation of pro-L copyright certificate for s-ke
«звод г;-течёшь lO-lS сек при мошно- 2006759/15, кл. С 12 К 1/ОО, 1974."G zd; -thread lO-lS sec at moshno- 2006759/15, cl. From 12 To 1 / OO, 1974.
информации, прин тые во вни- information taken into account
2. Акцаптоваана за вка ФРГ мание при эксперт е:5 й 2145787.4. ш.. 30/2, 14. 1972.2. Accreditation of the Federal Republic of Germany application at expert e: 5 th 2145787.4. sh. 30/2, 14. 1972.