SU545648A1 - Способ иммобилизации ферментов - Google Patents

Способ иммобилизации ферментов

Info

Publication number
SU545648A1
SU545648A1 SU2113303A SU2113303A SU545648A1 SU 545648 A1 SU545648 A1 SU 545648A1 SU 2113303 A SU2113303 A SU 2113303A SU 2113303 A SU2113303 A SU 2113303A SU 545648 A1 SU545648 A1 SU 545648A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
enzyme
carried out
trypsin
enzymes
immobilization
Prior art date
Application number
SU2113303A
Other languages
English (en)
Inventor
Лев Иванович Валуев
Маатасим Ахмедович Аль-Нури
Нина Андреевна Баранова
Николай Сергеевич Егоров
Николай Альфредович Платэ
Original Assignee
Московский Ордена Ленина И Ордена Трудового Красного Знамени Государственный Университет Им.М.В.Ломоносова
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Московский Ордена Ленина И Ордена Трудового Красного Знамени Государственный Университет Им.М.В.Ломоносова filed Critical Московский Ордена Ленина И Ордена Трудового Красного Знамени Государственный Университет Им.М.В.Ломоносова
Priority to SU2113303A priority Critical patent/SU545648A1/ru
Application granted granted Critical
Publication of SU545648A1 publication Critical patent/SU545648A1/ru

Links

Landscapes

  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)

Description

Изобретение относитс  к способу получени  иммобилизованных ферментов, которые наход т широкое применение в тонком органическом синтезе, медицине, пищевой проьлышленности . Известны способы иммобилизации фермен тов на носител х, заключающиес  в механическом включении ферментов в полимерные гели { Известен также способ ковалентного св зывани  фермента с предварительной актива-; цкей носител  посредством обработки последнего цкангалогенидами в шелочной среде .2. Однако этот способ применим только дл  активации носителей полисахаридной природы ,- а используемые дл активации соединени  5ШЛЯЮТСЯ отравл ющими веществами. Недостаток известных способов - химичес ка  инертность многих полимерных материалов , преп тствующа  св зыванию, а также быстрое Бымьшание фермента в том случае, когда он находитс  в геле и химически с ни не св зан, По предлагаемому способу фермент предварительно ацилируют хлорангидридом ненасыщенной кислоты. Процесс иммобилизации провод т путем активации фермента ацилированием хлорапгидридом ненасыщенной кислоты и последующей совместной полимеризации ацилнрованного фермента с ненасьпденным полимеризуюшимс  мономером или с ненасьпденным полимеризуюшимс  мономером и сщиваюшим агентом . Стадию аиклировани  провод т при рН 6,0-9,0, предпочтительно 7,0-8,0, при температуре обычно О-40 и при мольном соотношении фермент/хлорангидрид ненасыщенной кислоты I.IO-IOOO. Реакцию сополимеризации ацилированного фермента с ненасыщенными мономерами провод т при О-бОХ под действием инициаторов радикального типа. В качестве хлоракгидрида ненасьцден:ной кислоты используют хлорангидриды акриловой , метакриловой и других мононенасышенных кислот, в качестве мономера примен ют акр ламид, метакриламид, N -винил- пирролкдон и т.п., в качестве сшивающего агента N, -метиленбнсакраламнд, диэфиры акриловой и N-ieTaKptOTOBpH кислот с двухатомными спиртами, а в качестве нниц ато ров полимериза аи - рибоф авин, перекись бензоила и др, П р и м е р 1. А и ирование трипсина провод т при 0 путем добавлени  к раствору 50 мг трипсина в ,$0 мл бикарбонатного буфера при рН 8,0, 0,05 мл хлорангидрида акрЕшовой хислоты. После добавленй52 всего количества хлорангидрй а раствор перемешивают- 15 мин. Затем к ацшшрованному трипсину добавл ют 50 мг акриламида к сополимернзад ю провод т в вакууме при 200С, используй в качестве жшцкатора полкмерйзации ри.бо.флавик, хонлектрадк  которо го 10 мг/л. Продукты сополимеркзадаи раздел ют гель-.рнльтрацкей ка Сефадексе Q -50 использу  колоьЕку 1,2x60 см Злюиик paci-воров провод т 0,01 М трис. ацетатным бу4-йром при рН 8,5. Продукты сополимерЕзаНИИ после разделени  идентифицируют сдек-трофотометрическк , гравиметрически после осаждени  ацетоном при С-)20°С и путем опрю делен   протеолитической активности в кагк- дои фракции. Сополимер ацилированного трипсина с акркламидэм выходит их хроматогра- фичоской колонки раньще других компонентов Г1ол л18ризую1дейс  системы, причем вьцсод сополимера увеличиваетс  с увеличением вре-о ленн сополимеризации. Сополимер ацилирован-иого трипсина с акриламидом  вл етс  линейным сополимером, представл ет собой твердое вещество, растворимое в воде. П р и м е р 2. Иммобилизацию трипсина ,35 провод т по примеру 1. Количестве добавл емого к раствору 50 мг адилированного трипсина в 5О мл бикарбонатного буфера при рН 8,0 al fJилaмидa равно 10О мг. П р   м е р 3. Иммобилизацию трипсина 40 проводит по примеру 1. В качестве сомокомероз испо..т,т смесь 95 мг акрнламида   5 мг Ыз --оасметиленакриламида. : П Р н М е р 4. Иммобилизацию -х.к- мотрнпснна провод т по примеру 1. Фермент КЗ гел  не вь& ьшаетс . П р и м е р 5.. Иммобнлизадию трипсина провод т по примеру 1. В качестве сомоно мера Еспольэукзт N -Бкнклпирролидон, а в качестве  кшшатора полимеризации N,/,,Л/ -те-граметалзтадекдкамин совместно с персульфатом аммона . Реакцию сопол мери- за йи проводах прк . П р к м е р б. Иммобилизацию фермента провод т ко гфимеру 3 В качестве сшиваю- шего агента кспользуют- диэфир зтилекглиФеомент из Ф о р м у . а 3 П б Р е т 8 н и   1, Cuot;o6 кммобклгюалин ферментов пуем ковалекткого скйзь вена  молекул фермента с полимерным носителем, отличающийс  тем, что, с целью повышени  стабильности фермента и его активность: , последний ирбдварнтельно ацилируют слорангидридом некасыщекной кислоты при Н 6,0-9,0 с последующей сополимарйзаций ацилнро.за:-1ного фермента с ненасыщенным полимеризуюшимс  мономером. 2,Способ по п. 1, о т л к ч а :ю ш и й- с   тем, что процесс сополим-ьриза- цка веду-- в присутствии сшивающего агенгга. 3.Способ по п„ 1, э т л и ч а. ю ш к и с   там, что процесс сополимеризаии  ведут tipK О-бО-С, Fic-ro4 jgKK информации, прин тые во вни мание при экспертизе: l. J.,.,3.B.A- 1970,212,362 2,Axen.,Po c;tt. j.,Ef-ntoac)( 5-. Naiur-e, 1967, 214, p. 1302 (прототип).
SU2113303A 1975-03-10 1975-03-10 Способ иммобилизации ферментов SU545648A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU2113303A SU545648A1 (ru) 1975-03-10 1975-03-10 Способ иммобилизации ферментов

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU2113303A SU545648A1 (ru) 1975-03-10 1975-03-10 Способ иммобилизации ферментов

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU545648A1 true SU545648A1 (ru) 1977-02-05

Family

ID=20612665

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU2113303A SU545648A1 (ru) 1975-03-10 1975-03-10 Способ иммобилизации ферментов

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU545648A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5976527A (en) * 1981-08-05 1999-11-02 Siol, Werner Roehm Gmbh Chemishe Fabrik High surface area support having bound latex particles containing oxirane groups for immobilization of substances

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5976527A (en) * 1981-08-05 1999-11-02 Siol, Werner Roehm Gmbh Chemishe Fabrik High surface area support having bound latex particles containing oxirane groups for immobilization of substances

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU628674B2 (en) Polymer complexes of a sugar response type
KARADAĞ et al. Swelling of superabsorbent acrylamide/sodium acrylate hydrogels prepared using multifunctional crosslinkers
ATE29220T1 (de) Verfahren zur herstellung von unloeslichen, nur wenig quellbaren polymerisaten von basischen vinylheterocyclen und deren verwendung.
SU463268A3 (ru) Способ получени св занных носителем протеинов
KR870000424A (ko) 미생물의 고정화 방법
EP0238050A3 (en) Process for discontinually preparing fine particles of cured polymers
EP0335703B1 (en) Hydrophilic fine gel particles and process for production thereof
US3925267A (en) Polymeric carrier for a controlled synthesis of peptides
EP0023322B1 (en) Use of a crosslinked polyvinyl pyrrolidone gel as a gel chromatography material
Kurisawa et al. Modulated degradation of hydrogels with thermo‐responsive network in relation to their swelling behavior
Turková [6] Immobilization of enzymes on hydroxyalkyl methacrylate gel
SU545648A1 (ru) Способ иммобилизации ферментов
US3780006A (en) Removal of monomer from acrylamide polymers with sulfur dioxide
PT69880A (de) Verfahren zur herstellung von n-vinylamid-polymeren
GB1403883A (en) Polymeric morpholine derivatives for gel permeation chromato graphy
US4097470A (en) Preparation of biogically active substances bearing -NH2 groups in a form releasable by enzymatic cleavage
GB1265818A (ru)
US4081329A (en) Preparation of carrier-bound macromolecular compounds
GB1462331A (en) Process for producing water-soluble acrylamide polymers
JPS6426604A (en) Hydrophilic polymer and production thereof
GB2143243A (en) Bead-like polymer
US3794622A (en) Divinyl ether-maleic anhydride copolymer
EP0381122A3 (en) Two stage polymerization of vinyl acetate/ethylene emulsion copolymers containing incompatible monomers
Whitesides et al. [62] Covalent immobilization of adenylate kinase and acetate kinase in a polyacrylamide gel: Enzymes for ATP regeneration
JPH0222312A (ja) 架橋型カルボキシル基含有重合体の製造方法