SU514891A1 - Способ получени винной кислоты - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности, а именно к способу получени  винной кислоты путем биосинтаза ее плесневыми грибами, используемой в пищевой прогуг ; шленности и в других от- расл х народного хоз йства.

Известны химические способы получени  винной кислоты из отходов винодельческой промь ш,т1енности, например получение винной кислоты из экстракта виноградных выжимок путем осаждени  винной кислоты хлористым кальцием с последующим получением виннокислой изрзести Cl.

Известные способы не дают достаточно высокий выход винной кислоты, требуют

значительной затраты таких реактивов, как серна  и сол на  кислоты.

Известен также микробиологический спо- соб получени  винной кислоты из сред, содержащих глюкозу 2 .

Целью изобретений  вл етс  увеличение выхода винной кислоты и удешевление процесса ее полу -1ени .

Это достигаетJ.I тем, что винную кислоту получают п;/тем вьфащивани  продуцента

ее гриба вида - spergiitas на питательной среде, содержащей виноградные выжимки в присутствии солей сернокислого аммони  и азотнокислого натри  в количестве 0,08-0,15% по азоту, при этом из вида Asfier illus используют штамм М-355.

Образование винной кислоты так же, как и кислот цикла Кребса, происходит из глк козы под действием микроорганизмов Гз. Причем винна  кислота, в отличие от други синтезируемых плесневым грибом кислот, в процессе культивировани  им не используетс , т. е. происходит только ее накопление .

Штамм AspergLlliLS получен из лаборатории микробных ферментов института микробиологии и вирусологии АН Казахской ССР, где его использовали в качестве продуцента нектолитических ферментов.

Штамм гриба выделен из почвы, засев производилс  на среде Чапека: Вода ,1ООО мл

Claims (4)

1. NaN033,0 г КН2РО4 (илиК2НРО4) 1,0 г fA SO40,5 г КС10,5 г FeSO4O Ol г СахарозаЗО,0 г Пектин ., 1,0 г рН среды3,5-4 г Выделение проводилось обычным методом разведени  (из плесневых налетов): иглой касаютс  налета, несущего сйоры, и обмывают ее в пробирке с несколькими мл воды, и затем несколько капель жидкости размазывают на агаризованную среду Чапека в пробирках или чашках Петри. Инкубаци  при 2О-25ОС. Первое наблюден через 3-4 дн . Выделенный штамм .s М-355 относитс  к группе impef fecti (Dejtterom re/ecej- несовершенные грибы, пор дка Hyphales, подгруппе Wacronemae к ро ду Aspef iltus , виду Asfier iUus Van Fi eg fie т . Морфологические и физиологические сво ства определ лись по Курсанову Л. И. Штамм гриба рода Xsperp-iWus nip-er имеет следуюшую характеристику; Спороносна  зона колоний черного цвета . Мицелий воздушный; колонии высокие, подушковидные с шерстистой поверхностью Конидиеносцы бесцветные, быстро растущие , не ветв щиес  в верхней части, на конце вздутые в виде пузыр , на поверхно сти которого тесным слоем расположены цилиндрические клетки - стеригмы, несуща  кажда  цепочку конидий. Головки черного цвета, радиальные, с двум  сло ми стеригм. Ножки конидиеносцев гладкие, бесцветные (200-400уи длины и 7-lOyii ширины). Конечный пузырь круглый, бесцветный или бурый (с возрастом:) 5О-70у2/ в диаметре. Стеригмы двур дные. Первичные нижние стеригмы 20-30/1 длины, вторичные 6-iOju . Окраска буровата . Конидии круглые, гладкие 2,5-4jIi в диаметре. Споровые головки до 5007OOJJL . Цепочки конидий расход щиес , ша ровидные. Штамм Asfierg-itlus nlcrerМ355 культивируют глубинным способом 4 В экстракт виноградной выжимки ввод т дополнительное питание в виде солей сернокислого аммони  и азотнокислого,  атри . На такой среде указанный штайм продуцирует винную кислоту которую извлекают и культуральной жидкости одним из известных способов. Наибольший выход винной кислоты (3,5 4 г/л) был  oлJчeн при применении питательной среды такого состава. Водный экстракт виноградной выжимки, содержащий от 3 до 5% сахара, при рН 2-3; соли сернокислого натри  из расчета по азо« ту 0,08-0,15%. В культуральной жидкости накапливаетс  при этом до 50% винной кис лоты по отношению к содержанию в среде. Пример 1т виноградных выжимок экстрагируетс  водой (гидромодуль 1:2) с откачкой сока, равной 200% к весу выжим ки . К соку (экстракту) добавл ют 3 кг азотнокислого аммони . Полученна  питательна  среда (около 2ООО л) содержит 5% сахара, 0,2% винной кислоты, при рН,2 (подкисление среды не требуетс ). В питательную среду внос т суспензию штамма Asi erpriUus nifferМ 355 в количестРазвитие гриба- в спокойном состо нии продолжаетс  4-5 суток при 28-30 С. После образовани  плотного сло  грибной пленки производ т замену среды декантацией свежим экстрактом и дальнейшее культивирование продолжают глубинным способом при пневматическом перемещении, что обеспечивает и аэрацию среды. Температура при культивировании поддерживаетс  28ЗО С. Воздух подаетс  через фильтр. При накоплении в среде 3,5-4 г/л винной кис лоты (обычно через 3 суток) производ т вновь смену питательной среды. Из полученной культуральной жидкости извлекают винную кислоту одним из известных способов . Одну и ту же культуру используют 2030 дней, после чего цикл посева и выращивани  повтор етс  Быход винной кислоты из 1 т выжимок при этом составл ет 8 кг, т. е. увеличиа - два раза по сравнению с обычным способом получени . Культуральна  жидкость прозрачна , не требует дополнительного отсто  и осветлени  . Возможно непрерывное получение культуральной жидкости, а следовательно, и винной кислоты в потоке. Предлагаемый способ обеспечивает более высокий выход винной кислоты, так как| помимо винной кислоты, содержащейс  в исходном сырье и не испо.чьзуемой плесневыми грибами при культивировании, синтезируетс  винна  кислота. Предлагаемый способ упрощает процесс так как освобождает от таких операций как фильтраци , требует меньше расходов вспЬмогательных материалов. 5 Формула изобретени  1.Способ получени  винной luicnoTbi выращивани  ее продудеитов на питательной среде, отличающийс 5 тем, что, с целью увеличени  выхода кислоты и упрощени  процесса, из микроорганизмов используют в р, Asfierg-tltu.s nlg-er , а в качестве питательной среды используют виноградные выжимки и соли сернокислого ю аммони  и азотнокислого натри  в количестве ,15% по азотуи 2.Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и й5 148 1 6 с  тем, что из вида Asper tltus используют штамм AsperfltltiS М-355, Источники информации, прин тые во при экспертизе: 1, Справочник по виноделию, 1973., стр. 187.
2. 2. Патент США № 35851О9, кл. 19547 .
3. 3. Стодола В. Т. Tirment tec/inotoft/ № 49, 1971г, с. 85-92.
4. 4. Авторское свидегтельство СССР № 212202, 1968г.