SU421254A1 - Способ получени белков модифицированных изотопами йода - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  к улучшенному способу получени  белков, модифицированных изотопами иода, которые наход т широкое применение в медицине.

Способ получени  белков, модифицирован ных изотопами иода путем иодировани  белков в электрохимической  чейке, известен в литературе. По известному способу процесс провод т в гальваностатичес- ком режиме при плотности тока ЗОмкА/см и начальном значении потенциала 550 ыв.

При проведении процесса нaбJlIoдaeтc  повышение анодного потенциала до 0,1- - 1,2 в, при котором уже возможно окисление функциональных групп белка, например сульфигидридных, фенольных, что приводит к структурным изменени м белковой молекулы и, следоваа-ельно, к изменению биологической специфичности белка. Сохранение иодированными белками биологической

специфичности в процессе введени  в нйх радиоизотопов иода  вл етс  главным тре- бозанием при  х использовании.

Эта цель достигаетс  при проведении иодировани  белков в элзхтрохимической  чей-

ке при контролируемых посто нных значени х потенциала Е 450-850 мв относительно нормального водородного электрода в течение всего процесса иодировани  при плотности тока не более 40 мкА/см .

Процесс провод т в буферной системе при , предпочтительно в фосфатном буферном растворе с рН 7±0,1 и ионной силой 0,1-О,3. Продукты выдел ют известн1: ли способами.

Посто нное значение анодного потенциала к силы тока задают и поддерживают с помощью потенциостата. Предпочтительно количество вносимого иодоносител  должно соответствовать соотношению йод:белок 1:1.

Предлагаемый способ позвол ет получать различные белки с высоким радиохимическим выходом с высокой степенью paBHLON.epности включени  иода в молекулу белка при максимальном сохранении исходных наттшны CBofiCTB белка.

Пример 1. 1ОО мг альбумина сыворотки кроаи че.г овека в растворе фосфатного буфера с рН 7,0 и ионной силой 0,2

помещают в электрохимическую  чейку с платиновым электродом {объем 10 мл). За™ тэм внос т 1,45 МП раствора иоцистого натри  и раствор радиоактивнохО Vtoaai (иод-125 или иод-131. Помешают в реакционную смесь катод, отгороженный от анода, непроницаемой дл  белка перех ородKDK . Иодирование провод т в течение 45l5 мин при анодном, потенциале ббОДЮОм относительно хлорсеребр ного электрода, приче.м плотность анодного тока не более 40 мкА/см. Выход 98 ±1%.

. р и м е р 2. Раствор гамма-глобулина {0,5%-3%) в фосфатном буфере с рН 7,0 и ионннэй силой 0,2 помещают в злекгрохимическую  чейку с платиновым электродом , добавл ют раствор NcsO или N Q J и 1,45 мл. раствора носител . В реакционную смесь помешают катод, отгороженный полупроницаемой перегородкой от анода. Процесс прово.д т при анодном потенциале Е 6501100 MB относительно хлорсеребр ного электрода и плотности тока не более 30 МК.А./СМ в течение 40-60 мин. Выход 85 i 3%.

Пример 3. Навеску лизоцима {10О мг) раствора ют в 5 мл фосфатного буферного раствора с рН 7,0 и ионной сиjiofi 0,2, затем прибавл ют раствор радиоактивного иода и требуемое количество но- сител , довод т общий объем до 10 мл. Реакционную смесь помещают з элек1р -;;::-п1-ческую . чейку с платиновым электродом а провод т иодирование при Н о50-730 л1ь отнг

45-75 мин. Вькод .. Посто нное значение анодного потенци.ал и силы тока за.аают к поддерживают с п.о-мошью потенциостата. По окончании иоди-ровак   растворы белков очищают от иодкд- -ионов известными приемами, например с помощью анионита.. регеперируьот- хромпиком йлй методом катодБО-анодной пол ризации rjDK потакциалах вы.аэленин кисларода и водорода.

Ф о р м у

о о р е т е п

л а

Claims (2)

1.Способ получени  белков, модифицированных изотопами йода путам иодировани  бел.ков п электрохимической  чейке, о т л и ч а ю щ к и с   тем, что, с целью улучшени  качестве целевого продукта, rtpoцесс ведут при посто нных контролируемьи

величинах потегщиада Е 450-850 мв и

плотности то.ка не выше 40 мкА/см з феркой системе.

2.Способ по п. 1, о т л и ч а ю :;ц и с   тем, что процесс зедут в буферном растворе при и ко ной силе 0,1-0,3